CN117815459A - 一种可注射材料用于制备加速脂肪细胞去分化材料的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及生物医药领域，涉及一种可注射材料用于制备加速脂肪细胞去分化材料的应用。本发明材料为表面具备粗糙形貌的材料，通过生物矿化、激光烧蚀、物理打磨、化学侵蚀、物理沉积、化学沉积、离子沉积或者非生物活性物质修饰得到的；或者为模拟细胞或者组织表面拓扑结构的材料。将材料注射到动物脂肪富集部位，使得脂肪细胞的去分化，降低注射部位的脂肪体积，从而达到局部减肥的目的。本发明的材料具有显著降低脂肪组织总量，减少肥胖者体重的作用，并能提高对胰岛素的敏感性，对肥胖者注射部位的脂肪组织进行测序分析，发现肥胖相关基因Pprag、Fabp4、Lpl、Srebpl显著下调。

Description

一种可注射材料用于制备加速脂肪细胞去分化材料的应用
技术领域
本发明涉及生物医药领域，更具体地，涉及一种可注射材料用于制备加速脂肪细胞去分化材料的应用。
背景技术
随着人们生活质量水平的提高，人们对美的追求增加。肥胖不仅影响人们的身心健康，过度的肥胖会使脂肪堆积，身体形态改变，导致身体比例失调，从而影响身形美观，严重肥胖甚至引发自尊心低下、焦虑和抑郁的心理问题。
目前，有多种减肥方法，例如药物减肥、饮食控制、运动减肥或通过医学吸脂手术。市面上的减肥保健产品参差不齐，许多产品配方中成分不明，安全性差，靶向性差，对人体产生的副作用大。而减脂手术，虽然可以达到局部永久塑型的效果，但是手术创面大，可能会发生感染、出血或血肿、皮肤不平整等副作用，这种情况下消脂效果与健康往往不能兼得。此外饮食控制和运动减肥虽是公认的健康的减肥方式，但是需要耗时耗力，工作压力以及饮食习惯导致的状态难以在短时间改变。
针对以上背景，本发明提出一种加速脂肪细胞去分化的可注射材料制备方法和应用，本发明通过生物矿化的方法制备具有模拟乳腺肿瘤表面拓朴结构的材料，将材料通过皮下注射到动物脂肪富集区域，可以加速注射部位的脂肪细胞去分化，从而降低注射部位的体脂率，达到局部减肥的目的。本发明的材料已经在小鼠模型中研究表明，具有显著降低脂肪组织总量，减少肥胖小鼠体重的作用，并能增加小鼠对胰岛素的耐受，对肥胖小鼠注射部位的脂肪组织进行测序分析，发现肥胖相关基因Pprag、Fabp4、Lpl、Srebpl显著下调，且炎症相关因子的表达无差异，说明不是炎症引起的减重。
发明内容
针对传统的药物减肥和抽脂手术，安全性差，对人体产生的副作用大。而健康减肥周期长，且需要饮食和运动协同，不能短时间达到预期效果等问题。本发明提出一种可注射材料用于制备加速脂肪细胞去分化试剂的应用，所述可注射材料为表面具备粗糙形貌的材料，该材料注射到脂肪富集部位后，能够显著下调注射部位脂肪相关基因Pprag、Fabp4、Lpl、Srebpl的表达，并加速注射部位脂肪细胞去分化，达到局部减肥的目的同时，缓解糖尿病的胰岛素耐受。
根据本发明的目的，提供了一种可注射材料用于制备加速脂肪细胞去分化材料的应用，所述可注射材料为表面具备粗糙形貌的材料；所述可注射材料为高分子聚合物、金属材料、陶瓷材料或纳米材料，或者为模拟细胞或者组织表面拓扑结构的材料；所述可注射材料的表面粗糙度范围为0.001um≤Ra≤2um；
该可注射材料注射到脂肪富集部位后，能够下调注射部位脂肪相关基因Pprag、Fabp4、Lpl和Srebpl的表达，并加速注射部位脂肪细胞去分化。
优选地，所述表面具备粗糙形貌的材料通过生物矿化得到；或者通过激光烧蚀得到；或者通过物理打磨得到；或者通过化学侵蚀得到；或者通过物理沉积得到；或者通过化学沉积得到；或者通过离子沉积得到；或者通过非生物活性物质修饰得到。
优选地，所述高分子聚合物为聚乙二醇、聚乳酸、聚乙烯醇、聚丙烯、聚氨酯、硅氧烷、丙烯酸衍生物、聚多羟基酸、多肽、胶原蛋白或纤维蛋白。
优选地，所述陶瓷材料为氧化铝、氧化锆；所述金属材料为钛合金、镍钛形状记忆合金或钴基合金。
优选地，所述纳米材料为纳米金属材料、纳米非金属材料、纳米高分子材料和纳米复合材料。
优选地，所述模拟细胞或者组织表面拓扑形貌结构的材料采用以下方法制备得到：
(1)获取细胞或组织，使用固定剂进行固定，得到固定的细胞或者固定的组织；
(2)将步骤(1)得到的固定的细胞或者固定的组织加入到硅酸四乙酯溶液中，并在酸性条件下培养，硅酸四乙酯在酸性条件下水解产生二氧化硅沉积在细胞或组织表面，使细胞或者组织表面的形貌特征固定下来；
(3)吸出多余的硅酸四乙酯溶液，然后进行脱水处理；
(4)将步骤(3)得到的中间产物进行烧制，除去细胞或者组织的有机成分，得到能够反映细胞或组织形貌结构的二氧化硅沉积物，即制备具有模拟细胞或者组织表面拓扑形貌结构的材料。
优选地，步骤(1)中，所述细胞为肿瘤细胞；
优选地，所述肿瘤细胞为乳腺癌肿瘤细胞、肝癌肿瘤细胞、肺癌肿瘤细胞。
优选地，所述组织为肿瘤组织、神经组织或肌肉组织。
优选地，步骤(5)中，所述烧制的温度为400℃-800℃。
优选地，步骤(4)中，所述脱水处理为采用浓度由低到高的乙醇溶液逐级脱水处理。
总体而言，通过本发明所构思的以上技术方案与现有技术相比，主要具备以下的技术优点：
(1)将本发明中的材料直接注射到动物脂肪富集部位，可以加速注射部位的脂肪细胞的去分化，降低注射部位的脂肪体积，从而达到局部减肥的目的。本发明的材料已经在小鼠模型中研究表明，具有显著降低脂肪组织总量，减少肥胖小鼠体重的作用，并能提高小鼠对胰岛素的敏感性，对肥胖小鼠注射部位的脂肪组织进行测序分析，发现肥胖相关基因Pprag、Fabp4、Lpl、Srebpl显著下调。
(2)本发明与现有减肥药物相比较，成分清楚且无需服用，不会产生强烈的胃肠道的副作用，安全性高，靶向性好，对人体产生的副作用小。
(3)本发明与抽脂手术相比较，不需要进行大型手术，减少感染、出血或血肿等严重的副作用发生几率，且注射后病人恢复快。
(4)本发明使用可注射材料，推广后可以随时在正规诊所完成注射，方便，病人依从性高，此外通过材料的更新以及迭代，有机会发展成类似于糖尿病病人注射胰岛素的模式，病人可以充当自己的整容医生随时注射，实现对肥胖部位管理。
附图说明
图1为TMMs材料制备过程及实验流程图。
图2为小鼠脂肪重量图。
图3为小鼠CT结果图。
图4为小鼠脂肪组织的测序图。
图5为小鼠的体重检测图。
图6小鼠的ITT测试图。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。此外，下面所描述的本发明各个实施方式中所涉及到的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互组合。
本发明一种加速脂肪细胞去分化的可注射材料制备方法和应用，材料具备特定的形貌和硬度和尺寸结构，且生物相容性好，可以直接注射到脂肪富集部位，加速注射部位的脂肪细胞的去分化，达到局部减肥的目的。
一些实施例中，材料具备特定的形貌和硬度及尺寸结构，这种形貌和硬度结构包括但不限于使用生物矿化、物理打磨、化学侵蚀、物理沉积、化学沉积、离子沉积或非生物活性物质修饰等方法制备得到。
一些实施例中，使用如上的方法制备的材料包括但不限于使用聚乙二醇、聚丙烯、聚氨酯、硅氧烷、丙烯酸衍生物、多羟基酸、钛合金，不锈钢，钴基合金，镍钛形状记忆合金、聚醚醚酮、银纳米材料、镁纳米材料。
一些实施例中，材料具备特定的形貌和硬度和尺寸结构，包括但不限于模拟细胞或者组织的表面和整体的结构的材料。
一些实施例中，加速脂肪细胞去分化的可注射材料，模拟细胞或者组织表面拓扑结构的材料可以通过生物矿化制备，制备的具体步骤为：
(1)获取细胞和相应的组织，使用多聚甲醛固定；
(2)吸出多聚甲醛溶液，使用超纯水清洗三遍；
(3)用移液枪把细胞或者组织转移到玻璃瓶中，加入硅酸四乙酯溶液，在酸性条件下摇床培养，硅酸四乙酯在酸性条件下水解产生二氧化硅沉积在细胞和组织表面，使细胞或者组织表面的形貌特征固定；
(4)吸出多余的硅酸四乙酯溶液，超纯水清洗后，采用浓度由低到高的乙醇逐级脱水处理；脱水完成后，吸出多余的溶液并自然风干；
(5)将步骤(4)得到的中间产物进行高温烧制，除去细胞有机成分得到能够反映细胞和组织形貌结构的二氧化硅沉积物，即制备具有模拟细胞表面形貌结构的材料。
本发明加速脂肪细胞去分化的可注射材料制备方法和应用，制备的材料可以直接注射到动物脂肪富集区域，使注射部位的脂肪细胞去分化，达到局部减肥的目的。
本发明种加速脂肪细胞去分化的可注射材料制备方法和应用，可以应用于肥胖病人或者是需要进行身材管理的健康人。
本发明提出一种加速脂肪细胞去分化的可注射材料制备方法和应用，包括以下步骤：
(1)制备具备特定形貌的材料；
(2)将制备的材料通过皮下注射到小鼠脂肪富集区域；
(3)长时追踪观察注射区域脂肪细胞变化；
通过使用本方法可以直接将药物通过皮下注射的方式直接打到动物脂肪细胞富集位置，加速注射部位的脂肪细胞的去分化，达到局部减肥的目的同时，增加糖尿病胰岛素的耐受，适用于医疗美容及疾病的治疗。
下面通过具体的实施例对本发明一种加速脂肪细胞去分化的可注射材料制备方法和应用做进一步的解释说明。
实施例1：乳腺肿瘤细胞表面拓扑结构材料的制备
(1)将乳腺癌细胞(MDA-MB-231)接种到150mm的培养皿中，待细胞长满后使用4％的多聚甲醛固定20min；
(2)吸出多聚甲醛溶液，超纯水清洗两遍，用细胞刮刮下细胞，装入20mL的玻璃试剂瓶中；
(3)离心，吸出多余的超纯水，加入100mM的硅酸四乙酯TEOS(pH＝3.0)，40℃，放置恒温摇床中72h；正硅酸乙酯在酸性条件下水解产生二氧化硅沉积在细胞表面，可反应细胞表面的形貌特征；
(4)吸出TEOS溶液，用超纯水清洗两遍后，离心，吸出多余的超纯水，采用50％、80％和100％乙醇逐级脱水处理，每次处理15min；
(5)脱水完成后，离心吸出多余的溶液，室温放置，自然风干；
(6)使用马弗炉600℃，烧制4h后取出，模拟细胞表面拓朴结构的材料制作完成。粗糙度Ra为0.076um。
实施例2：肝癌细胞表面拓扑结构材料的制备
(1)将肝癌细胞(HepG2)接种到150mm的培养皿中，待细胞长满后使用4％的多聚甲醛固定20min；
(2)吸出多聚甲醛溶液，超纯水清洗两遍，用细胞刮刮下细胞，装入20mL的玻璃试剂瓶中；
(3)离心，吸出多余的超纯水，加入100mM的硅酸四乙酯TEOS(pH＝3.0)，40℃，放置摇床中72h；正硅酸乙酯在酸性条件下水解产生二氧化硅沉积在细胞表面，可反应细胞表面的形貌特征；
(4)吸出TEOS溶液，用超纯水清洗两遍后，离心，吸出多余的超纯水，采用50％、80％和100％乙醇逐级脱水处理，每次处理15min；
(5)脱水完成后，离心吸出多余的溶液，室温放置，自然风干；
(6)使用马弗炉600℃，烧制4h后取出，模拟细胞表面拓朴结构的材料制作完成。粗糙度Ra为0.065um。
实施例3
(1)将肿瘤组织取出，用剪刀剪碎，使用4％的多聚甲醛固定20min；
(2)吸出多聚甲醛溶液，超纯水清洗两遍，用细胞刮刮下细胞，装入20mL的玻璃试剂瓶中；
(3)离心，吸出多余的超纯水，加入100mM的硅酸四乙酯TEOS(pH＝3.0)，40℃，放置摇床中72h；正硅酸乙酯在酸性条件下水解产生二氧化硅沉积在细胞表面，可反应细胞表面的形貌特征；
(4)吸出TEOS溶液，用超纯水清洗两遍后，离心，吸出多余的超纯水，采用50％、80％和100％乙醇逐级脱水处理，每次处理15min；
(5)脱水完成后，离心吸出多余的溶液，室温放置，自然风干；
(6)使用马弗炉600℃，烧制4h后取出，模拟细胞表面拓朴结构的材料制作完成。粗糙度Ra为0.087um。
实施例4
(1)将肌肉组织取出，用剪刀剪碎，使用4％的多聚甲醛固定20min；
(2)吸出多聚甲醛溶液，超纯水清洗两遍，用细胞刮刮下细胞，装入20mL的玻璃试剂瓶中；
(3)离心，吸出多余的超纯水，加入100mM的硅酸四乙酯TEOS(pH＝3.0)，40℃，放置摇床中72h；正硅酸乙酯在酸性条件下水解产生二氧化硅沉积在细胞表面，可反应细胞表面的形貌特征；
(4)吸出TEOS溶液，用超纯水清洗两遍后，离心，吸出多余的超纯水，采用50％、80％和100％乙醇逐级脱水处理，每次处理15min；
(5)脱水完成后，离心吸出多余的溶液，室温放置，自然风干；
(6)使用马弗炉600℃，烧制4h后取出，模拟细胞表面拓朴结构的材料制作完成。粗糙度Ra为0.053um。
实施例5
(1)从硫酸法生产中经砖窑煅烧获得TiO2。
(2)在无机或有机分散剂的存在进行湿磨，获得粗糙度Ra为0.8um的颗粒以制备合适尺寸的TiO2颗粒。(分散剂可以根据需求选择)
(3)颗粒浸泡在50mM HAuCl4和0.5M HCl的溶液中，金微结构在特定电压下在50mMHAuCl4和0.5M HCl的溶液中沉积100s。用于形成100nm、500nm和2000nm结构的电压分别为600mv、300mv和0mv。
(4)具备不同结构的TiO2颗粒制备完成。
实施例6
(1)镀有5nm Cr和100nm Au的玻璃基板购自EMF Corp.
(2)用S1813正极光刻胶在2000rpm下旋转涂覆玻璃基板30s。
(3)涂覆的基板暴露在紫外线(UV)光源下10秒，并在MF321中进行反应，以选择性地对光刻胶进行图案化。
(4)通过蚀刻去除未被S1813覆盖的Cr和Au区域获得金电极。
(5)S1813的残留物由AZ300T剥离器完全去除。然后用DISCO切片锯将有图案的基板切成小块以制作多个芯片。
(6)纳米结构通过DCPA通过两步工艺被电沉积到芯片上。
(7)首先，金微结构在特定电压下在50mM HAuCl4和0.5M HCl的溶液中沉积100s。用于形成100nm、500nm和2000nm结构的电压分别为600mv、300mv和0mv。
(8)在20mM HAuCl4和0.5μm HClO4溶液中，在-0.4V下进行30s的二次沉积，以改善其纳米结构，结构的粗糙度Ra值0.08um。
(9)将制备的不同粗糙形貌的金纳米材料刮涂下来即制备完成。
实施例7
(1)0.15mm厚度的聚苯乙烯膜购自东莞诺加德工艺品厂，用AutoCAD 2019设计圆形图案。
(2)然后将CAD文件导入加工软件(Samlight)中，引导激光在聚苯乙烯膜上扫描。
(3)采用飞秒激光系统(Legend Elite-1 K-HE,Coherent,USA)的104fs,1kHz,800nm激光束进行烧蚀。
(4)在制造过程中，激光束通过配备焦距为63mm的远心f-theta透镜的动镜系统(SCANLAB，德国)引导到聚苯乙烯表面。激光功率调整为250mw，扫描速度为50mm/s。扫描时间由Samlight软件控制。
(5)加工完成后，用铁夹固定具有圆形阵列的聚苯乙烯膜的外围。
(6)最后，将样品放入烤箱，在115℃下加热。
(7)图案制备后，在制备好的GTF上进行原位离焦扫描。功率约为9mw，采用半波片和低色散偏振片组合调节，速度为15mm/s，扫描次数为1次。
(8)在室温下将氟硅烷(1H、1H、2H、2H-全氟癸基三乙氧基硅烷)与乙醇按1:85的质量比混合，充分搅拌。
(9)将三种不同的爪状微结构(无微结构、单线微结构和双线微结构)在氟硅烷溶液中浸泡12h，以提高其疏水性。
(10)然后将其固定在CA100C上，通过注射器挤出液滴(4和6uL)，然后在垂直方向缓慢接触爪状上表面，缓慢抬起。
(11)在将三维多尺度微/纳米折叠膜分别浸泡在HCl(1mol/L)、NaOH(1mol/L)溶液和水中4天。即制备出粗糙表面。
(12)将制备的粗糙的聚苯乙烯材料捣碎，即粗糙的颗粒制备完成。
实施例8
(1)购买20μm的纯钛颗粒，粗糙度Ra为0.9um。
(2)采用不同的水热合成参数处理后，在Ti颗粒表面原位获得了不同的纳米结构。水热参数：温度150，暴露时间15h，氢氧化钠浓度2.5mol/L
(3)所有水热制备的Ti颗粒样品进一步浸入0.1M HCl中2小时，并在450℃下退火2小时。表面采用真空等离子体喷涂制备。
(4)在乙醇和蒸馏水中超声波清洗后，对(3)中样品进行上述水热处理，获得微/纳米级表面的Ti颗粒。
实施例9
(1)柠檬酸盐包被超顺磁力氧化铁SPIONs首次采用共沉淀法合成。
(2)将RAW 264.7巨噬细胞与合成的SPIONs在37℃下孵育1天。
(3)孵育后，用PBS洗涤细胞3次，用细胞刮板移位，用4％多聚甲醛固定20分钟。然后用去离子水(DI)冲洗细胞3次，在TEOS溶液(100mm,pH＝3)中，在摇床上40℃下孵育8小时。
(4)将所得的Cell-SiO2配合物依次在乙醇增加系列(DI水、50％乙醇、80％乙醇和100％乙醇，各10min)中脱水，干燥，最后在600℃下以5℃/min的加热速率煅烧4h，得到具有所需磁性和形貌特性的仿生二氧化硅颗粒。
(5)在含2mg/mL盐酸多巴胺的Tris缓冲溶液(pH 8.5,10mM)中重悬搅拌8h，得到PDA@Cell-SiO2。
(6)接着，在50mL的试管中加入18mL去离子水、1.8mL KMnO4和1mL MES(pH＝6.0)，合成二氧化锰微粒。在13000rpm下离心5分钟，重复洗涤三次以获得二氧化锰微粒。
(7)将Cell-SiO2复合物与MnO2微粒孵育24h，离心收集，用去离子水洗涤3次，得到MnO2-PDA@Cell-SiO2。
(8)最后，使用热蒸发器在MnO2-PDA@Cell-SiO2上沉积20nm厚的金层。MnO2-PDA@Cell-SiO2的微颗粒通过简短的超声从硅片中释放到去离子水溶液中。粗糙的材料制备完成。
实施例10
(1)通过标准固相-肽合成程序合成和纯化三肽(D Leu-Phe-Phe)
(2)将肽(4.0mg)加入pH为11.8的0.1M磷酸钠溶液中(缓冲液A,0.3ml)，超声(5分钟)溶出。
(3)随后加入等体积的0.1M磷酸钠，pH为5.7(缓冲液B,0.3ml)，导致凝胶形成，最终pH为7.4。
(4)在加入肽之前，将环丙沙星(CIP)溶解在缓冲液A(2或4mg/ml)中，得到最终的凝胶，分别含有0.1％w/v或0.2％w/v的CIP。
(5)然后按照上述步骤使用所得溶液。凝胶化2小时后，任何可能存在的上清溶液残留物(<2％的总体积，含有<1％的总CIP)用移液管轻轻抽吸。
(6)具备纳米形貌结构的可注射水凝胶材料制备完成。
结果与分析
1、试验样品：实施例1中制备的模拟乳腺肿瘤细胞形貌的材料(TMMs)为实验组；细胞仿生SiO2球(CBSs)为对照组。
2、将1中的TMMs和CBSs使用无菌PBS配成5mg/mL。
3、将配置好的5mg/mL的TMMs和5mg/mL的CBSs分别皮下注射到同一只三周C57BL/6J小鼠左边和右边的皮下脂肪区域，注射量为200μL，示意图见图2中a图，总共注射6小鼠。
4、小鼠的两边区域的脂肪组织称重
小鼠麻醉后颈椎脱臼处死小鼠，用75％酒精对小鼠表面消毒后，解剖小鼠，获取小鼠皮下脂肪(SAT)，去掉小鼠脂肪中的淋巴结后，称重。结果图如图2中的b图。
5、小鼠的CT分析
小鼠麻醉后，用医用胶布将小鼠四肢固定在支撑板上，将支撑板固定到仪器上，将整个装置平稳的放置到扫描床后进行CT显影。对每只小鼠进行连续性扫描，共512层，每层间隔是0.023m，结果见图2中的c-d图。
6、小鼠的HE分析
(1)石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入环保型脱蜡液Ⅰ20min—环保型脱蜡液Ⅱ20min—无水乙醇Ⅰ5min—无水乙醇Ⅱ5min—5％酒精5min，自来水洗。
冰冻切片复温固定：将冰冻切片从-20℃冰箱取出恢复至室温，用组织固定液固定15min，流水冲洗。
(2)苏木素染色：切片入苏木素染液染3-5min，自来水洗，分化液分化，自来水洗，返蓝液返蓝，流水冲洗。
(3)伊红染色：切片依次入85％、95％的梯度酒精脱水各5min，入伊红染液中染色5min。
(4)脱水封片：切片依次放入无水乙醇I 5min—无水乙醇II 5min—无水乙醇Ⅲ5min—二甲苯Ⅰ5min—二甲苯Ⅱ5min透明，中性树胶封片。
(5)显微镜镜检，图像采集分析。
结果：如图3所示，与CBSs组相比较，TMMs治疗的小鼠脂肪细胞面积显著减少，小鼠的HE图片染色发现TMMs中脂肪细胞较少。
7、小鼠注射部位脂肪细胞的转录组测序
获取注射部位的小鼠皮下脂肪(SAT)，液氮冷冻保存，送检测序，结果见图4所示发现肥胖相关基因Pprag、Fabp4、Lpl、Srebpl显著下调，且炎症相关因子的表达无差异，说明不是炎症引起的减重。
8、将配置好的5mg/mL的TMMs和5mg/mL的CBSs分别皮下注射到C57BL/6J小鼠皮下脂肪区域，注射量为200μL，每组注射六只小鼠，如图5中a图所示。
9、对注射药物前后的小鼠进行体重追踪
小鼠药物注射的前三周开始称量体重，每周一次直至处死小鼠前。结果发现与对照组相比TMMs治疗后的小鼠体重降低，如图5中b图所示。
10、注射药物前后小鼠的ITT分析
小鼠轻轻抓起，按照标准的腹腔注射给小鼠注射胰岛素溶液。在15分钟，30分钟，60分钟，90分钟和120分钟测定每只小鼠各时间点的血糖值。结果如图6中的a和b所示显示，与对照组相比，TMMs治疗后血液中葡萄糖上升缓慢，且AUC值更低，说明胰岛素的利用率低，TMMs治疗后的肥胖小鼠体内胰岛素敏感度高。
本领域的技术人员容易理解，以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种可注射材料用于制备加速脂肪细胞去分化材料的应用，其特征在于，所述可注射材料为表面具备粗糙形貌的材料；所述可注射材料为高分子聚合物、金属材料、陶瓷材料或纳米材料，或者为模拟细胞或者组织表面拓扑结构的材料；所述可注射材料的表面粗糙度范围为0.001um≤Ra≤2um；
该可注射材料注射到脂肪富集部位后，能够下调注射部位脂肪相关基因Pprag、Fabp4、Lpl和Srebpl的表达，并加速注射部位脂肪细胞去分化。
2.如权利要求1所述的可注射材料用于制备加速脂肪细胞去分化材料的应用，其特征在于，所述表面具备粗糙形貌的材料通过生物矿化得到；或者通过激光烧蚀得到；或者通过物理打磨得到；或者通过化学侵蚀得到；或者通过物理沉积得到；或者通过化学沉积得到；或者通过离子沉积得到；或者通过非生物活性物质修饰得到。
3.如权利要求1所述的可注射材料用于制备加速脂肪细胞去分化材料的应用，其特征在于，所述高分子聚合物为聚乙二醇、聚乳酸、聚乙烯醇、聚丙烯、聚氨酯、硅氧烷、丙烯酸衍生物、聚多羟基酸、多肽、胶原蛋白或纤维蛋白。
4.如权利要求1所述的可注射材料用于制备加速脂肪细胞去分化材料的应用，其特征在于，所述陶瓷材料为氧化铝、氧化锆；所述金属材料为钛合金、镍钛形状记忆合金或钴基合金。
5.如权利要求1所述的可注射材料用于制备加速脂肪细胞去分化材料的应用，其特征在于，所述纳米材料为纳米金属材料、纳米非金属材料、纳米高分子材料和纳米复合材料。
6.如权利要求1所述的可注射材料用于制备加速脂肪细胞去分化材料的应用，其特征在于，所述模拟细胞或者组织表面拓扑形貌结构的材料采用以下方法制备得到：
(1)获取细胞或组织，使用固定剂进行固定，得到固定的细胞或者固定的组织；
(2)将步骤(1)得到的固定的细胞或者固定的组织加入到硅酸四乙酯溶液中，并在酸性条件下培养，硅酸四乙酯在酸性条件下水解产生二氧化硅沉积在细胞或组织表面，使细胞或者组织表面的形貌特征固定下来；
(3)吸出多余的硅酸四乙酯溶液，然后进行脱水处理；
(4)将步骤(3)得到的中间产物进行烧制，除去细胞或者组织的有机成分，得到能够反映细胞或组织形貌结构的二氧化硅沉积物，即制备具有模拟细胞或者组织表面拓扑形貌结构的材料。
7.如权利要求6所述的可注射材料用于制备加速脂肪细胞去分化材料的应用，其特征在于，步骤(1)中，所述细胞为肿瘤细胞；
优选地，所述肿瘤细胞为乳腺癌肿瘤细胞、肝癌肿瘤细胞、肺癌肿瘤细胞。
8.如权利要求6所述的可注射材料用于制备加速脂肪细胞去分化材料的应用，其特征在于，所述组织为肿瘤组织、神经组织或肌肉组织。
9.如权利要求6所述的可注射材料用于制备加速脂肪细胞去分化材料的应用，其特征在于，步骤(5)中，所述烧制的温度为400℃-800℃。
10.如权利要求6所述的可注射材料用于制备加速脂肪细胞去分化材料的应用，其特征在于，步骤(4)中，所述脱水处理为采用浓度由低到高的乙醇溶液逐级脱水处理。
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