CN117715642A - 杂环化合物和使用方法 - Google Patents

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CN117715642A
CN117715642A CN202280052307.9A CN202280052307A CN117715642A CN 117715642 A CN117715642 A CN 117715642A CN 202280052307 A CN202280052307 A CN 202280052307A CN 117715642 A CN117715642 A CN 117715642A
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A·M·莱文森
E·黄
井川秀幸
K·L·赫斯特
B·基姆
A·E·莱福勒
M·A·帕洛梅罗-巴斯克斯
E·塞里恩
X·黄
K·S·沃茨
S·阿尔巴尼斯
J·A·戈登
A·普拉切克
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Schrodinger & Co
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Schrodinger & Co
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Abstract

本申请涉及如本文所定义的式(I)的化合物及其药学上可接受的盐。本申请还描述了包含式(I)的化合物及其药学上可接受的盐的药物组合物和使用所述化合物和组合物抑制某些蛋白质‑蛋白质相互作用和治疗癌症的方法。

Description

杂环化合物和使用方法
技术领域
本申请涉及可用于治疗增殖性障碍例如癌症的杂环化合物。
背景
癌症的特征在于异常的细胞生长和增殖。Ras蛋白是负责控制细胞增殖、分化和存活的信号传导网状结构的关键成分。参见例如Fernandes-Medarde and Santos,GenesCancer,Vol.2,No.3,pp.344-358(2011)。Ras是一种GTP酶，其作为活性GTP结合状态与无活性GDP结合状态之间的分子开关起作用–GTP结合的Ras可以激活涉及细胞周期进程、存活和凋亡的几种下游信号传导途径。
鸟嘌呤核苷酸交换因子(GEF)，例如SOS1是通过促进GDP(无活性Ras)与GTP(活性Ras)的交换来激活Ras所必需的。SOS1本身通过变构相互作用被Ras激活，这强烈激活SOS1的GEF功能，从而在SOS1与Ras之间产生正反馈环。参见例如Bandaru等人,Cold SpringHarb.Perspect Med.,Vol.9,No.2,a031534(2019)。Ras中的突变发生在许多人体癌症中，但目前尚未批准靶向Ras蛋白的药物。参见Hillig等人，Proc.Nat.Acad.Sci.,Vol.117,No.7,pp.2551-2560(2019)。因此，仍然需要破坏Ras信号传导的新型治疗剂。
概述
目前已经发现，某些稠合化合物是SOS1活性的抑制剂，并且可用于治疗各种疾病和障碍，例如癌症。
因此，本文提供了式(I)的化合物：
或其药学上可接受的盐，其中R1、R2、R3、X和其他变量如本文所定义。
本文还提供了药物组合物，其包含式(I)的化合物或其药学上可接受的盐和至少一种药学上可接受的赋形剂。
本文还提供了在体外或体内抑制哺乳动物细胞增殖的方法，包含使细胞接触有效量的如本文所定义的式(I)化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物。
本文还提供了对有治疗需要的个体治疗癌症的方法，包含向该个体施用有效量的如本文所定义的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物。
本文还提供了对有需要治疗的个体治疗SOS1-相关癌症的方法，包含向所述个体施用有效量的如本文所定义的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物。
本文还提供了治疗个体的Ras途径-相关疾病或障碍的方法，包含向被鉴定或诊断为患有Ras途径-相关疾病或障碍的个体施用有效量的如本文所定义的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物。
本文还提供了治疗个体的Ras途径-相关癌症的方法，包含向被鉴定或诊断为患有Ras途径-相关癌症的个体施用有效量的如本文所定义的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物。
本文还提供了治疗个体的Ras-相关疾病或障碍的方法，包含向被鉴定或诊断为患有Ras途径-相关疾病或障碍的个体施用有效量的如本文所定义的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物。
本文还提供了治疗个体的Ras-相关癌症的方法，包含向被鉴定或诊断为患有Ras相关癌症的个体施用有效量的如本文所定义的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物。
本文还提供了治疗个体的SOS1-相关癌症的方法，包含向被鉴定或诊断为患有SOS1-相关癌症的个体施用有效量的如本文所定义的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物。
本文还提供了对有需要的个体治疗癌症的方法，包含：
(a)确定所述癌症与Ras途径基因、Ras途径蛋白或其任一种的表达或活性或水平的失调相关；和
(b)向所述个体施用有效量的如本文所定义的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物。
本文还提供了对有需要的个体治疗癌症的方法，包含向该个体施用有效量的如本文所定义的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物，所述个体被确定患有与Ras途径基因、Ras途径蛋白或其中任一种的表达或活性或水平失调相关的癌症。
本文还提供了对有需要的个体治疗癌症的方法，包含：
(a)确定所述癌症与Ras基因、Ras蛋白或其中任一种的表达或活性或水平失调相关；和
(b)向所述个体施用有效量的如本文所定义的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物。
本文还提供了对有需要的个体治疗癌症的方法，包含向该个体施用有效量的如本文所定义的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物，所述个体被确定患有与Ras基因、Ras蛋白或其中任一种的表达或活性或水平失调相关的癌症。
本文还提供了对有需要的个体治疗癌症的方法，包含向该个体施用有效量的如本文所定义的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物，所述个体被确定患有与SOS1基因、SOS1蛋白或其中任一种的表达或活性或水平失调相关的癌症。
本文还提供了对有需要的个体治疗癌症的方法，包含：
(a)确定所述癌症与SOS1基因、SOS1蛋白或其中任一种的表达或活性或水平失调相关；和
(b)向所述个体施用有效量的如本文所定义的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物。
本文还提供了用于抑制哺乳动物细胞增殖的方法，包含使该哺乳动物细胞接触式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
本文还提供了用于抑制哺乳动物细胞中Ras途径活性的方法，包含使该哺乳动物细胞接触式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
本文还提供了用于抑制哺乳动物细胞中SOS1活性的方法，包含使该哺乳动物细胞接触式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
本文还提供了用于抑制哺乳动物细胞中Ras活性的方法，包含使该哺乳动物细胞接触式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
本文还提供了用于抑制哺乳动物细胞中SOS1-Ras蛋白质-蛋白质相互作用的方法，包含使该哺乳动物细胞接触式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
本文还提供了用于抑制患有需要治疗的特定癌症的个体中转移的方法，包含向该个体施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或包含式(I)的化合物或其药学上可接受的盐的药物组合物。
本文还提供了如本文所定义的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物，用于治疗癌症。
本文还提供了如本文所定义的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物，用于治疗Ras途径-相关疾病或障碍。
本文还提供了如本文所定义的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物，用于治疗Ras途径-相关癌症。
本文还提供了如本文所定义的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物，用于治疗癌症和/或抑制与特定癌症相关的转移。
本文还提供了如本文所定义的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，其用于抑制哺乳动物细胞中SOS1-Ras蛋白质-蛋白质相互作用。
本文还提供了如本文所定义的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，其用于制备抑制哺乳动物细胞中SOS1-Ras蛋白质-蛋白质相互作用的药物。
本文还提供了如本文所定义的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，其用于制备治疗Ras途径-相关疾病或障碍的药物。
本文还提供了如本文所定义的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，其用于制备治疗Ras途径-相关癌症的药物。
本文还提供了用于制备式(I)的化合物或其药学上可接受的盐的方法。
本文还提供了式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，其通过如本文所定义的化合物的制备方法得到。
根据以下详细的说明书和附图以及权利要求书，本发明的其他特征和优点将显而易见。
详细说明
除非另有定义，否则本文使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域的普通技术人员通常理解的含义相同的含义。本文描述了用于本发明的方法和材料；也可以使用本领域已知的其他合适的方法和材料。材料、方法和实施例仅是示例性的而不是限制性的。本文举出的所有出版物、专利申请、专利、序列、数据库条目和其他参考文献通过引用整体并入。在冲突的情况下，以本说明书(包括定义)为准。
定义
本文所用的术语“化合物”意指包括所述结构的所有立体异构体、几何异构体、互变异构体和同位素富集的变体。除非另有说明，否则本文通过名称或结构鉴定为一种特定互变异构形式的化合物旨在包括其他互变异构形式。
如本文所用，术语“互变异构体”是指其结构在原子排列上显著不同但以容易且快速的平衡存在的化合物，并且应当理解，本文提供的化合物可以描绘为不同的互变异构体，并且当化合物具有互变异构形式时，所有互变异构形式都旨在在本发明的范围内，并且化合物的命名不排除任何互变异构体。互变异构形式的实例包括以下实例：
应当理解，本文提供的某些化合物可以包含一个或多个不对称中心，因此可以以异构体混合物如外消旋混合物或对映体纯的形式制备和分离。
术语“卤素”是指元素周期表第17族的卤素之一。特别地，该术语是指氟、氯、溴和碘。优选地，该术语是指氟或氯。
术语“C1-C6烷基”是指包含1、2、3、4、5或6个碳原子的直链或支链饱和烃链，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基和正己基。
术语“C1-C6卤代烷基”是指如本文所定义的C1-C6烷基，其被至少一个在每次出现时独立选择的卤原子取代，例如氟、氯、溴和碘。所述卤原子可以存在于烷基上的任何位置。例如，C1-C6卤代烷基可以指氯甲基、氟甲基、三氟甲基、氯乙基例如1-氯乙基和2-氯乙基、三氯乙基例如1,2,2-三氯乙基、2,2,2-三氯乙基、氟乙基例如1-氟甲基和2-氟乙基、三氟乙基例如1,2,2-三氟乙基和2,2,2-三氟乙基、氯丙基、三氯丙基、氟丙基、三氟丙基。
术语“C1-C6烷氧基”是指如本文所定义的C1-C6烷基，其通过氧与分子连接。这包括其中烷基部分可以是直链或支链的部分，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、正戊氧基和正己氧基。
术语“C1-C6卤代烷氧基”是指如本文所定义的C1-C6烷氧基，其被至少一个在每次出现时独立选择的卤原子取代，例如氟、氯、溴和碘。所述卤原子可以存在于烷基上的任何位置。例如，C1-C6卤代烷氧基可以指氟甲氧基(例如1-氟甲氧基、1,1-二氟甲氧基和1,1,1-三氟甲氧基)、氟乙氧基(例如2-氟乙氧基、1,2,2-三氟乙氧基和2,2,2-三氟乙氧基)或氯乙氧基(例如1-氯乙氧基和2-氯乙氧基、1,2,2-三氯乙氧基和2,2,2-三氯乙氧基)。
术语“C1-C6羟基烷基”是指如本文所定义的C1-C6烷基，其被一个或多个羟基取代。所述羟基可以存在于烃链上的任何位置。例如，C1-C6羟基烷基可以指羟基甲基、羟基乙基(例如1-羟基乙基或2-羟基乙基)和2-羟基异丙基。
术语“C1-C6烷氧基烷基”是指如本文所定义的C1-C6烷基，其被一个或多个C1-C6烷氧基取代，其中所述烷氧基通过氧与烷基连接。这包括其中C1-C6烷基或C1-C6烷氧基的烷基部分可以独立地为直链或支链的部分，例如甲氧基乙基、乙氧基乙基或1,3二甲氧基丙基。
如本文所用，术语“氰基”是指–CN基团。
如本文所用，术语“硝基”是指–NO2基团。
如本文所用，术语“羟基”是指–OH基团。
如本文所用，术语“氨基”是指-NH2基团。
如本文所用，术语“杂芳基”是指5–10元单环或双环基团，其中系统中至少一个环是芳族的；且其中系统中至少一个环上的一个或多个碳原子被独立地选自N、O和S的杂原子取代。杂芳基的非限制性实例包括呋喃、呋咱、噻吩、苯并噻吩、酞嗪、吡咯、噁唑、苯并噁唑、1,2,3-噁二唑、1,2,4-噁二唑、噻唑、1,2,3-噻二唑、1,2,4-噻二唑、苯并噻唑、咪唑、苯并咪唑、吲哚、吲唑、吡唑、苯并吡唑、异噁唑、苯并异噁唑、异噻唑、三唑、苯并三唑、噻二唑、四唑、吡啶、哒嗪、嘧啶、吡嗪、嘌呤、蝶啶、喹啉、异喹啉、喹唑啉、喹喔啉、噌啉和三嗪。
如本文所用，术语“环烷基”是指具有3-10个碳原子的饱和或部分不饱和的单环或双环碳基团，例如C3-C10环烷基和C3-C6环烷基。双环环烷基包括稠合、螺环和桥环系统。环烷基的非限制性实例包括苯基、2,3-二氢-1H-茚、环丙基、环己基、螺[2.3]己基和双环[1.1.1]戊基。
术语“杂环基”是指饱和或部分不饱和的烃单环或双环系统，其具有3-10个环原子，它们不是芳族的，在环内具有至少一个选自N、O和S的杂原子。双环杂环基包括稠合、螺和桥接的环系统。杂环基可以表示为例如“5至10元杂环基”，其为包含5、6、7、8、9或10个原子的环系，至少一个原子为杂原子。杂环基可以例如具有1、2、3或多个杂原子。在一些实施方案中，杂环基基团具有一个或两个独立选择的杂原子。杂环还可以包含一个或多个羰基或硫代羰基官能团，以便使该定义包括氧代体系和硫代体系，例如内酰胺、内酯、环状酰亚胺、环状硫代酰亚胺和环状氨基甲酸酯。杂环基可以是通过任何碳原子或通过杂原子如氮与分子的其余部分键合。示例性杂环基包括但不限于1,3-二氧戊环、1,4-二氧戊环、马来酰亚胺、琥珀酰亚胺、二氧代哌嗪、乙内酰脲、咪唑啉、咪唑烷、异噁唑啉、异噁唑烷、噁唑啉、噁唑烷、噁唑烷酮、噻唑啉、噻唑烷、吗啉、环氧乙烷、哌啶N-氧化物、哌啶、哌嗪、吡咯烷、吡咯烷酮、吡咯烷二酮、4-哌啶酮、吡唑啉、吡唑烷、2-氧代吡咯烷、四氢吡喃、4H-吡喃、氮杂环丁烷、氧杂环丁烷和2-氮杂螺[3.3]庚烷基。
如本文所用，当环被描述为“部分不饱和”时，其意指所述环具有一个或多个另外的不饱和度(除了归因于环本身的不饱和度之外，例如在组成环原子之间的一个或多个双键或三键)，条件是所述环不是芳族的。这类环的实例包括：环戊烯、环己烯、环庚烯、二氢吡啶、四氢吡啶、二氢吡咯、二氢呋喃、二氢噻吩等。
如本文所用，术语“氧代”是指连接至碳原子的“＝O”基团。
如本文所用，符号表示原子或部分与分子其余部分中指定原子或基团的连接点。
式(I)(例如式(Ia)或(Ib))的化合物包括其药学上可接受的盐。此外，式(I)的化合物还包括这类化合物的其他盐，其不一定是药学上可接受的盐，并且其可以用作制备和/或纯化式(I)的化合物和/或用于分离式(I)的化合物的对映异构体的中间体。
还应当理解，式(I)的化合物或其盐可以以溶剂化物的形式分离，因此任何这样的溶剂化物都包括在本发明的范围内。例如，具有式(I)的化合物及其盐可以以非溶剂化形式以及与药学上可接受的溶剂(如水、乙醇等)的溶剂化形式存在。
在一些实施方案中，所述式(I)的化合物包括实施例1-182的化合物及其立体异构体和药学上可接受的盐和溶剂化物。在一些实施方案中，实施例1-182的化合物为游离碱形式。在一些实施方案中，实施例1-182的化合物为药学上可接受的盐的形式。
术语“药学上可接受的盐”是指化合物的制剂，其不会对其所施用的生物体造成显著刺激，并且不会消除化合物的生物活性和性质。在一些实施方案中，药学上可接受的盐通过使本文所述的化合物与酸反应来获得，所述酸例如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸等。在一些实施方案中，药学上可接受的盐通过使本文所述的具有酸性基团的化合物与碱反应以形成盐或通过先前确定的其他方法来获得，所述盐例如铵盐、碱金属盐(例如钠盐或钾盐)、碱土金属盐(例如钙盐或镁盐)、有机碱(例如二环己胺、N-甲基-D-葡糖胺、三(羟甲基)甲胺)的盐以及与氨基酸(例如精氨酸、赖氨酸等)的盐。对药理学上可接受的盐没有特别限制，只要其可用于药物即可。本文所述的化合物含碱的盐的实例包括如下：含有无机碱如钠、钾、镁、钙和铝的盐；含有有机碱如甲胺、乙胺和乙醇胺的盐；含有碱性氨基酸如赖氨酸和鸟氨酸的盐；和铵盐。所述盐可以为酸加成盐，例如含有无机酸的加成盐，所述无机酸例如盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、硝酸和磷酸；含有有机酸的加成盐，所述有机酸例如甲酸、乙酸、丙酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、马来酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、甲磺酸和乙磺酸；酸性氨基酸如天冬氨酸和谷氨酸。
保护基可以是临时取代基，其保护潜在反应性官能团免于不期望的化学转化。所用的特定保护基团的选择完全在本领域普通技术人员的技能范围内。许多考虑因素可以决定保护基团的选择，包括但不限于被保护的官能团、分子中存在的其他官能团、合成顺序的每个步骤的反应条件、分子中存在的其他保护基团、官能团对除去保护基团所需的条件的耐受性以及本文提供的化合物的热分解的反应条件。已经综述了保护基化学领域(Greene,T.W.；Wuts,P.G.M.Protective Groups in Organic Synthesis,2.sup.nd ed.；Wiley:NewYork,1991)。
氮保护基可以是保护胺部分免于不期望的化学转化的任何临时取代基。当这类保护基团与胺键合时形成的部分的实例包括但不限于烯丙基胺、苄胺(例如，苄胺、对甲氧基苄胺、2,4-二甲氧基苄胺和三苯甲胺)、乙酰基酰胺、三氯乙酰胺、三氟乙酰胺、戊-4-烯酰胺、邻苯二甲酰亚胺、氨基甲酸酯(例如，氨基甲酸甲酯、氨基甲酸叔丁酯、氨基甲酸苄酯、氨基甲酸烯丙酯、氨基甲酸2,2,2-三氯乙酯和氨基甲酸9-芴基甲酯)、亚胺和磺酰胺(例如，苯磺酰胺、对甲苯磺酰胺和对硝基苯磺酰胺)。
氧保护基可以是保护羟基部分免于不期望的化学转化的任何临时取代基。当这类保护基团与羟基键合时形成的部分的实例包括但不限于酯(例如乙酰基、叔丁基羰基和苯甲酰基)、苄基(例如苄基、对甲氧基苄基和2,4-二甲氧基苄基和三苯甲基)、碳酸酯(例如碳酸甲酯、碳酸烯丙酯、碳酸2,2,2-三氯乙酯和碳酸苄酯)、缩酮和缩醛以及醚。
本文提供的化合物还可以在构成这些化合物的一个或多个原子上包含非天然比例的原子同位素。也就是说，原子，特别是当关于式(I)的化合物提及时，包含该原子的所有同位素和同位素混合物，其是天然存在的或合成产生的，具有天然丰度或呈同位素富集的形式。例如，当提及氢时，应理解为是指1H、2H、3H或其混合物；当提及碳时，应理解为是指11C、12C、13C、14C或其混合物；当提及氮时，应理解为是指13N、14N、15N或其混合物；当提及氧时，应理解为是指14O、15O、16O、17O、18O或其混合物；且当提及氟时，应理解为是指18F、19F或其混合物；另有明确注解的除外。例如，在氘代烷基和氘代烷氧基中，其中一个或多个氢原子具体地被氘(2H)取代。由于一些上述同位素是放射性的，因此本文提供的化合物还包含具有一个或多个原子的一种或多种同位素的化合物及其混合物，包括放射性化合物，其中一个或多个非放射性原子已被其放射性富集同位素之一替代。放射性化合物可用作治疗剂(例如癌症治疗剂)、研究试剂(例如测定试剂)和诊断剂(例如体内成像剂)。本文提供的化合物的所有同位素变体，无论是否具有放射性，都旨在包括在本发明的范围内。
测试化合物作为SOS1-Ras(例如KRas(例如KRas G 12C))相互作用的抑制剂的能力可以通过本文所述的生物学测定来证明。抑制SOS1-Ras相互作用的IC50值如表A中所示，且与SOS1结合的KD值如表B中所示。
在一些实施方案中，本文提供的化合物显示脑和/或中枢神经系统(CNS)外显率。这类化合物能够穿过血脑屏障并抑制脑和/或其他CNS结构中的SOS1活性。在一些实施方案中，本文提供的化合物能够以有效量穿过血脑屏障。例如，治疗患有癌症的个体(例如Ras途径-相关癌症(例如SOS1-相关癌症、Ras-相关癌症(例如KRas-相关癌症、HRas-相关癌症和/或NRas-相关癌症)、EGFR-相关癌症、ErbB2-相关癌症、ErbB3-相关癌症、ErbB4-相关癌症、NF1-相关癌症、PDGFR-A-相关癌症、PDGFR-B-相关癌症、FGFR1-相关癌症、FGFR2-相关癌症、FGFR3-相关癌症、IGF1 R-相关癌症、INSR-相关癌症、ALK-相关癌症、ROS-相关癌症、TrkA-相关癌症、TrkB-相关癌症、TrkC-相关癌症、RET-相关癌症、c-MET-相关癌症、VEGFR1-相关癌症、VEGFR2-相关癌症、VEGFR3-相关癌症、AXL-相关癌症、SHP2-相关癌症、RAF-相关癌症(例如BRAF-相关癌症)、PI3K-相关癌症、AKT-相关癌症、mTOR-相关癌症、MEK-相关癌症、ERK-相关癌症或其组合)，例如Ras途径-相关脑癌或CNS癌)可以包括向所述个体施用(例如，口服施用)所述化合物。在一些这样的实施方案中，本文提供的化合物可用于治疗原发性脑肿瘤或转移性脑肿瘤。例如，Ras途径-相关的原发性脑肿瘤或转移性脑肿瘤。
式(I)的化合物或其药学上可接受的盐可用于治疗可用SOS1抑制剂治疗的疾病和障碍，例如Ras途径-相关疾病或障碍(例如SOS1-相关疾病或障碍、Ras-相关疾病或障碍(例如KRas-相关疾病或障碍、HRas-相关疾病或障碍和/或NRas-相关疾病或障碍)、EGFR-相关疾病或障碍、ErbB2-相关疾病或障碍、ErbB3-相关疾病或障碍、ErbB4-相关疾病或障碍、NF1-相关疾病或障碍、PDGFR-A-相关疾病或障碍、PDGFR-B-相关疾病或障碍、FGFR1-相关疾病或障碍、FGFR2-相关疾病或障碍、FGFR3-相关疾病或障碍、IGF1 R-相关疾病或障碍、INSR-相关疾病或障碍、ALK-相关疾病或障碍、ROS-相关疾病或障碍、TrkA-相关疾病或障碍、TrkB-相关疾病或障碍、TrkC-相关疾病或障碍、RET-相关疾病或障碍、c-MET-相关疾病或障碍、VEGFR1-相关疾病或障碍、VEGFR2-相关疾病或障碍、VEGFR3-相关疾病或障碍、AXL-相关疾病或障碍、SHP2-相关疾病或障碍、RAF-相关疾病或障碍(例如BRAF-相关疾病或障碍)、PI3K-相关疾病或障碍、AKT-相关疾病或障碍、mTOR-相关疾病或障碍、MEK-相关疾病或障碍、ERK-相关疾病或障碍或其组合)，包括血液癌症、实体瘤、1型神经纤维瘤(NFL)、努南综合征(Noonan Syndrome,NS)、LEOPARD综合征、毛细血管畸形-动静脉畸形综合征(CM-AVM)、Costello综合征(CS)、心脏-面-皮肤综合征(CFC)、Legius综合征和遗传性牙龈纤维瘤病。
式(I)的化合物或其药学上可接受的盐可用于治疗可用SOS1抑制剂治疗的疾病和障碍，例如Ras途径-相关癌症(例如SOS1-相关癌症、Ras-相关癌症(例如KRas-相关癌症、HRas-相关癌症和/或NRas-相关癌症)、EGFR-相关癌症、ErbB2-相关癌症、ErbB3-相关癌症、ErbB4-相关癌症、NF1-相关癌症、PDGFR-A-相关癌症、PDGFR-B-相关癌症、FGFR1-相关癌症、FGFR2-相关癌症、FGFR3-相关癌症、IGF1 R-相关癌症、INSR-相关癌症、ALK-相关癌症、ROS-相关癌症、TrkA-相关癌症、TrkB-相关癌症、TrkC-相关癌症、RET-相关癌症、c-MET-相关癌症、VEGFR1-相关癌症、VEGFR2-相关癌症、VEGFR3-相关癌症、AXL-相关癌症、SHP2-相关癌症、RAF-相关癌症(例如BRAF-相关癌症)、PI3K-相关癌症、AKT-相关癌症、mTOR-相关癌症、MEK-相关癌症、ERK-相关癌症或其组合)，包括血液癌症和实体瘤。
在一些实施方案中，SOS1抑制剂可以表现出与SOS1蛋白的解离常数(KD)小于约1000nM、小于约500nM、小于约200nM、小于约100nM、小于约50nM、小于约25nM、小于约10nM或小于约1nM，如本文所述的测定法中所测定的。在一些实施方案中，SOS1抑制剂可以表现出与SOS1蛋白的解离常数(KD)小于约25nM、小于约10nM、小于约5nM或小于约1nM，如本文所提供的测定法中所测定的。在一些实施方案中，SOS1抑制剂可以表现出SOS1-KRas(例如KRas的G12C突变体)蛋白质-蛋白质相互作用的抑制活性(IC50)小于约1000nM、小于约500nM、小于约200nM、小于约100nM、小于约50nM、小于约25nM、小于约10nM或小于约1nM，如本文所述的测定法中所测定的。在一些实施方案中，SOS1抑制剂可以表现出SOS1-KRas(例如KRas的G12C突变体)蛋白质-蛋白质相互作用的抑制活性(IC50)小于约25nM、小于约10nM、小于约5nM或小于约1nM，如本文所提供的测定法中所测定的。
如本文所用，术语“治疗(treat)”或“治疗(treatment)”是指治疗性或姑息性措施。有益或期望的临床结果包括但不限于与疾病或障碍或病症相关的症状的全部或部分缓解、疾病程度的减轻、疾病状态的稳定(即，不恶化)、疾病进展的延迟或减缓、疾病状态(例如，疾病的一种或多种症状)的改善或缓和以及消退(无论是部分还是全部)，无论是可检测的还是不可检测的。“治疗(treatment)”还可以意指与如果不接受治疗的预期存活相比延长存活。
如本文所用，术语“个体(subject)”是指任何动物，包括哺乳动物，例如小鼠、大鼠、其它啮齿动物、家兔、狗、猫、猪、牛、绵羊、马、灵长类动物和人。在一些实施方案中，所述个体是人。在一些实施方案中，所述个体已经经历和/或表现出待治疗和/或预防的疾病或障碍的至少一种症状。
在一些实施方案中，所述个体已被鉴定或诊断为患有具有Ras途径基因(例如SOS1、Ras(例如KRas、HRas和/或NRas)、EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4、NF1、PDGFR-A、PDGFR-B、FGFR1、FGFR2、FGFR3、IGF1 R、INSR、ALK、ROS、TrkA、TrkB、TrkC、RET、c-MET、VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3、AXL、SHP2、RAF(例如BRAF)、PI3K、AKT、mTOR、MEK、ERK或其组合)、Ras途径蛋白(例如SOS1、Ras(例如KRas、HRas和/或NRas)、EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4、NF1、PDGFR-A、PDGFR-B、FGFR1、FGFR2、FGFR3、IGF1 R、INSR、ALK、ROS、TrkA、TrkB、TrkC、RET、c-MET、VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3、AXL、SHP2、RAF(例如BRAF)、PI3K、AKT、mTOR、MEK、ERK或其组合)或其中任一种的表达或活性或水平(Ras途径-相关癌症(例如SOS1-相关癌症、Ras-相关癌症(例如KRas-相关癌症、HRas-相关癌症和/或NRas-相关癌症、EGFR-相关癌症、ErbB2-相关癌症、ErbB3-相关癌症、ErbB4-相关癌症、NF1-相关癌症、PDGFR-A-相关癌症、PDGFR-B-相关癌症、FGFR1-相关癌症、FGFR2-相关癌症、FGFR3-相关癌症、IGF1 R-相关癌症、INSR-相关癌症、ALK-相关癌症、ROS-相关癌症、TrkA-相关癌症、TrkB-相关癌症、TrkC-相关癌症、RET-相关癌症、c-MET-相关癌症、VEGFR1-相关癌症、VEGFR2-相关癌症、VEGFR3-相关癌症、AXL-相关癌症、SHP2-相关癌症、RAF-相关癌症(例如BRAF-相关癌症)、PI3K-相关癌症、AKT-相关癌症、mTOR-相关癌症、MEK-相关癌症、ERK-相关癌症或其组合))(例如，如使用管理机构批准的、例如FDA批准的测定法或试剂盒所确定)。在一些实施方案中，所述个体具有对Ras途径基因、Ras途径蛋白、或其中任一种的表达或活性或水平的失调呈阳性的肿瘤(例如，如使用管理机构批准的测定法或试剂盒所确定)。所述个体可以是患有对Ras途径基因、Ras途径蛋白、或其中任一种的表达或活性或水平的失调呈阳性的肿瘤的个体(例如，使用管理机构批准的、例如FDA批准的测定法或试剂盒确定为阳性)。所述个体可以为其肿瘤具有Ras途径基因、Ras途径蛋白、或其表达或活性或水平失调的个体(例如，其中所述肿瘤是照此使用管理机构批准的、例如FDA批准的试剂盒或测定法所确定的)。在一些实施方案中，所述个体疑似患有Ras途径-相关癌症。在一些实施方案中，所述个体具有临床记录，其指示该个体具有Ras途径基因、Ras途径蛋白、或其中任一种的表达或活性或水平失调的肿瘤(并且任选地，所述临床记录指示所述个体应当用本文提供的任何组合物治疗)。在一些实施方案中，所述个体为儿科个体。在一些实施方案中，所述个体已被鉴定或诊断为患有癌症，基于组织学检查，所述癌症被确定为与Ras途径基因、Ras途径蛋白、或其任一种的表达或活性或水平的失调相关(Ras途径-相关癌症)。
在一些实施方案中，所述个体已被鉴定或诊断为患有具有Ras基因、Ras蛋白、或其任一种的表达或活性或水平失调的癌症(Ras-相关癌症)(例如，如使用管理机构批准的、例如FDA批准的测定法或试剂盒所确定)。在一些实施方案中，所述个体具有对Ras基因、Ras蛋白、或其中任一种的表达或活性或水平的失调呈阳性的肿瘤(例如，如使用管理机构批准的测定法或试剂盒所确定)。所述个体可以为患有对Ras基因、Ras蛋白、或其中任一种的表达或活性或水平的失调呈阳性的肿瘤的个体(例如，使用管理机构批准的、例如FDA批准的测定法或试剂盒确定为阳性)。所述个体可以是其肿瘤具有Ras基因、Ras蛋白、或其中任一种的表达或活性或水平失调的个体(例如，其中所述肿瘤是使用管理机构批准的、例如FDA批准的试剂盒或测定法所确定)。在一些实施方案中，所述个体疑似患有Ras-相关癌症。在一些实施方案中，所述个体具有临床记录，其指示该个体具有Ras基因、Ras蛋白、或其中任一种的表达或活性或水平失调的肿瘤(并且任选地，所述临床记录指示所述个体应当用本文提供的任何组合物治疗)。在一些实施方案中，所述个体为儿科个体。在一些实施方案中，所述个体已被鉴定或诊断为患有癌症，基于组织学检查，所述癌症被确定为与Ras基因、Ras蛋白、或其中任一种的表达或活性或水平的失调相关(Ras-相关癌症)。
在一些实施方案中，所述个体已被鉴定或诊断为患有具有KRas基因、KRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平失调的癌症(KRas-相关癌症)(例如，如使用管理机构批准的、例如FDA批准的测定法或试剂盒所确定)。在一些实施方案中，所述个体具有对KRas基因、KRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调呈阳性的肿瘤(例如，如使用管理机构批准的测定法或试剂盒所确定)。所述个体可以是患有对KRas基因、KRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平失调呈阳性(例如，使用管理机构批准的、例如FDA批准的测定法或试剂盒所确定)。所述个体可以是其肿瘤具有KRas基因、KRas蛋白或其表达或活性或水平失调的个体(例如，其中所述肿瘤是照此使用管理机构批准的、例如FDA批准的试剂盒或测定法所确定的)。在一些实施方案中，所述个体疑似患有KRas-相关癌症。在一些实施方案中，所述个体具有临床记录，其指示该个体具有KRas基因、KRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平失调的肿瘤(并且任选地，所述临床记录指示所述个体应当用本文提供的任何组合物治疗)。在一些实施方案中，所述个体为儿科个体。在一些实施方案中，所述个体已被鉴定或诊断为患有癌症，基于组织学检查，所述癌症被确定为与KRas基因、KRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调相关(KRas-相关癌症)。
在一些实施方案中，所述个体已被鉴定或诊断为患有具有HRas基因、HRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调的癌症(HRas-相关癌症)(例如，如使用管理机构批准的、例如FDA批准的测定法或试剂盒所确定)。在一些实施方案中，所述个体具有对HRas基因、HRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调呈阳性的肿瘤(例如，如使用管理机构批准的测定法或试剂盒所确定)。所述个体可以是具有对HRas基因、HRas蛋白或其任一种的表达或活性或水平的失调呈阳性的肿瘤的个体(例如，使用管理机构批准的、例如FDA批准的测定法或试剂盒确定为阳性)。所述个体可以是其肿瘤具有HRas基因、HRas蛋白或其表达或活性或水平失调的个体(例如，其中所述肿瘤是照此使用管理机构批准的、例如FDA批准的试剂盒或测定法所确定的)。在一些实施案中，所述个体疑似患有HRas-相关癌症。在一些实施方案中，所述个体具有临床记录，其指示该个体具有HRas基因、HRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平失调的肿瘤(并且任选地，所述临床记录指示所述个体应当用本文提供的任何组合物治疗)。在一些实施方案中，所述个体为儿科个体。在一些实施方案中，所述个体已被鉴定或诊断为患有癌症，基于组织学检查，所述癌症被确定为与HRas基因、HRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调相关(HRas-相关癌症)。
在一些实施方案中，所述个体已被鉴定或诊断为患有具有NRas基因、NRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平失调的癌症(NRas-相关癌症)(例如，如使用管理机构批准的、例如FDA批准的测定法或试剂盒所确定)。在一些实施方案中，所述个体具有对NRas基因、NRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调呈阳性的肿瘤(例如，如使用管理机构批准的测定法或试剂盒所确定)。所述个体可以是患有对NRas基因、NRas蛋白或其任一种的表达或活性或水平的失调呈阳性的肿瘤的个体(例如，使用管理机构批准的、例如FDA批准的测定法或试剂盒确定为阳性)。所述个体可以是其肿瘤具有NRas基因、NRas蛋白或其表达或活性或水平失调的个体(例如，其中所述肿瘤是照此使用管理机构批准的、例如FDA批准的试剂盒或测定法所确定的)。在一些实施方案中，所述个体疑似患有NRas-相关癌症。在一些实施方案中，所述个体具有临床记录，其指示该个体具有NRas基因、NRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平失调的肿瘤(并且任选地，所述临床记录指示所述个体应当用本文提供的任何组合物治疗)。在一些实施方案中，所述个体为儿科个体。在一些实施方案中，所述个体已被鉴定或诊断为患有癌症，基于组织学检查，所述癌症被确定为与NRas基因、NRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调相关(NRas-相关癌症)。
在一些实施方案中，所述个体已被鉴定或诊断为患有具有SOS1基因、SOS1蛋白、或其中任一种的表达或活性或水平失调的癌症(SOS1-相关癌症)(例如，如使用管理机构批准的、例如FDA批准的测定法或试剂盒所确定)。在一些实施方案中，所述个体患有对SOS1基因、SOS1蛋白或其任一种的表达或活性或水平失调呈阳性的肿瘤(例如，如使用管理机构批准的测定法或试剂盒所确定)。所述个体可以是患有对SOS1基因、SOS1蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调呈阳性的肿瘤的个体(例如，使用管理机构批准的、例如FDA批准的测定法或试剂盒确定为阳性)。所述个体可以是其肿瘤具有SOS1基因、SOS1蛋白或其表达或活性或水平的失调(例如，其中所述肿瘤是使用管理机构批准的、例如FDA批准的试剂盒或测定法所确定)。在一些实施方案中，所述个体疑似患有SOS1-相关癌症。在一些实施方案中，所述个体具有临床记录，其指示该个体患有SOS1基因、SOS1蛋白或其中任一种的表达或活性或水平失调的肿瘤(并且任选地，所述临床记录指示所述个体应当用本文提供的任何组合物治疗)。在一些实施方案中，所述个体为儿科个体。在一些实施方案中，所述个体已被鉴定或诊断为患有癌症，基于组织学检查，所述癌症被确定为与SOS1基因、SOS1蛋白或其任一种的表达或活性或水平的失调相关(SOS1-相关癌症)。
本文所用的术语“儿科个体”是指在诊断或治疗时年龄在21岁以下的个体。术语“儿科”可以进一步分为各种亚群，包括：新生儿(从出生到生命的第一个月)；婴儿(1个月至2岁)；儿童(2岁至12岁)；和青少年(12岁至21岁(最多但不包括二十二岁生日))。BerhmanRE,Kliegman R,Arvin AM,Nelson WE.Nelson Textbook of Pediatrics,第15版。Philadelphia:W.B.Saunders Company,1996；Rudolph AM等人,Rudolph’s Pediatrics,第21版。New York:McGraw-Hill,2002；和Avery MD,First LR.Pediatric Medicine,第2版.Baltimore:Williams&Wilkins；1994。在一些实施方案中，儿科个体是从出生至生命的前28天、29天至小于2岁、2岁至小于12岁或12岁至21岁(最多但不包括二十二岁生日)。在一些实施方案中，儿科个体从出生至生命的前28天、29天至小于1岁、1个月至小于4个月、3个月至小于7个月、6个月至小于1岁、1岁至小于2岁、2岁至小于3岁、2岁至小于7岁、3岁至小于5岁、5岁至小于10岁、6岁至小于13岁、10岁至小于15岁或15岁至小于22岁。
在某些实施方案中，式(I)的化合物或其药学上可接受的盐可用于预防如本文所定义的疾病和障碍(例如自身免疫疾病、炎性疾病和癌症)。如本文所用的术语“预防”是指全部或部分地预防如本文所述的疾病或病症或其症状的发作、复发或扩散。
在某些实施方案中，式(I)的化合物或其药学上可接受的盐可用于预防如本文所定义的疾病和障碍(例如，如本文所述的Ras途径-相关疾病或障碍(例如，自身免疫疾病、炎性疾病和癌症)。如本文所用的术语“预防”是指全部或部分地预防如本文所述的疾病或病症或其症状的发作、复发或扩散。
异常的细胞生长和增殖是癌症的标志。发生这种异常细胞生长的一种途径是通过Ras家族蛋白信号传导。人Ras蛋白(例如KRas(V-Ki-Ras2 Kirsten大鼠肉瘤2病毒癌基因同源物)、HRas(V-Ha-Ras Harvey大鼠肉瘤病毒癌基因同源物)和/或NRas(神经母细胞瘤RAS病毒(V-Ras)癌基因同源物)；有时也分别称作KRAS、HRAS和NRAS或K-Ras、H-Ras和N-Ras)是膜结合的鸟苷三磷酸(GTP)/鸟苷二磷酸(GDP)-结合(G)蛋白，其牵涉许多致癌信号传导级联。这些蛋白中的每一种的大小约为21kD。KRas具有称作KRas4A和KRas4B的两种常见同种型。
成熟Ras蛋白典型地通过翻译后修饰与细胞膜结合，例如异戊二烯化(例如“CAAX盒”的法呢基化，其中C代表半胱氨酸，A代表脂族氨基酸，X是甲硫氨酸、丝氨酸、亮氨酸或谷氨酰胺)。在无活性状态下，Ras蛋白与GDP结合。参见，例如Adjei,J.Nat’l.CancerInst.93.14(2001):1062-1074。
Ras蛋白的活化可以通过多种类型的细胞表面受体启动，所述细胞表面受体包括受体酪氨酸激酶(TKI)(例如EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4、PDGFR-A/B、FGFR1/2/3、IGF1 R、INSR、ALK、ROS、TrkA、TrkB、TrkC、RET、c-MET、VEGFR1/2/3、AXL)、T-细胞受体、B-细胞受体、单核细胞集落刺激因子受体、G-蛋白偶联受体(GPCR)和整联蛋白家族蛋白。这些类型的细胞表面受体之一的活化通常直接或间接地导致一种或多种鸟苷酸交换因子(GEF)的活化，其促进Ras蛋白释放GDP，允许GTP结合。GEF的非限制性实例包括SOS(Son of SevenlessHomolog)蛋白和RasGRF1(Ras蛋白特异性鸟苷酸释放因子1；有时也称作Cdc25)。例如，在EGFR的活化、二聚化和自磷酸化时，受体可以结合衔接蛋白生长因子受体结合蛋白2(GRB2)的SH2结构域，其然后可以结合SOS蛋白(例如，SOS1或SOS2，有时也分别称作SOS-1和SOS-2)，从而将SOS蛋白与Ras家族蛋白共定位在细胞膜上。参见，例如Xuehua等人,Proc.Nat.Acad.Sci.Nov.2017,114(47)E10092-E10101；Vetter和Wittinghofer,Science294.5545(2001):1299-1304；Downward,Nat.Rev.Cancer 3.1(2003):11-22；Pierre和Coumoul,Biochem.Pharmacol.82.9(2011):1049-1056。Kortum等人,Proc.Nat.Acad.Sci.108.30(2011):12407-12412；美国申请公布号2019/0358230和2019/0194192；和PCT公布号WO 2018/172250和WO 2019/201848。
一旦通过结合GTP被激活，Ras蛋白可以结合并激活许多下游效应物，包括RAF家族蛋白、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)和RAL家族蛋白。参见，例如Gurung和Bhattacharjee.Oncology&Hematology Review,2015；11(2):147–52(2015)。例如，通过RAS-RAF-MAPK途径的信号传导牵涉许多癌症，包括但不限于胰腺癌、甲状腺癌(例如乳头状甲状腺癌)、结肠癌、肺癌(例如非小细胞肺癌)、黑素瘤、胆道癌、小肠癌、子宫内膜癌、卵巢癌、宫颈癌、前列腺癌、软组织癌、腹膜癌、胃癌、肝癌、尿道癌、乳腺癌及其组合。参见，例如Kinsey等人,Nat.Medicine 25.4(2019):620-627；Roberts和Der.Oncogene 26.22(2007):3291-3310；Santarpia等人,Expert Opinion on Therapeutic Targets 16.1(2012):103-119。作为另一个实例，已经显示通过Ras-PI3K/AKT/哺乳动物雷帕霉素(mTOR)靶标途径的信号传导在许多癌症中起作用，包括但不限于黑素瘤、卵巢癌、宫颈癌、子宫内膜癌、乳腺癌、前列腺癌、脑癌(例如胶质母细胞瘤)、肺癌(例如非小细胞肺癌)、胰腺癌、膀胱癌、结肠癌、头颈癌、白血病、甲状腺癌、淋巴瘤、肠癌、胃癌及其组合。参见，例如Chappell等人,Oncotarget 2.3(2011):135；Vara等人,Cancer Treatment Reviews 30.2(2004):193-204；Hennessy等人,Nat.Rev.Drug Disc.4.12(2005):988-1004；Osaki等人,Apoptosis9.6(2004):667-676；Luo等人,Cancer Cell 4.4(2003):257-262。
尽管Ras蛋白具有内在的GTP酶活性，但它通常与生理学无关。相反，结合的GTP的水解通过GTP酶-激活蛋白(GAP)例如神经纤维瘤病1型(NF1)或p120GAP的结合而增强(例如，高达约5个数量级)。参见，例如Adjei,Journal of the National Cancer Institute93.14(2001):1062-1074；Downward,Nature Reviews Cancer 3.1(2003):11-22；Scheffzek等人,Science 277.5324(1997):333-339。
据估计，Ras家族蛋白中的活化突变(特别是例如在残基G12、G13和/或Q61处)存在于至多约30％的所有人体癌症中。通常，活化Ras家族蛋白中的突变使得Ras蛋白对GAP的活性不敏感。参见，例如Santarpia等人,Expert Opinion on Therapeutic Targets 16.1(2012):103-119。Ras突变的示例性非限制性实例如表1(KRas突变)、2(HRas突变)和3(NRas突变)中所示。
如本文所用，术语“Ras途径-相关疾病或障碍”是指与Ras途径中的基因、Ras途径中的蛋白、或其中任一种(例如，一种或多种)的表达或活性或水平的失调(例如，如本文所述的Ras途径中的基因、Ras途径中的蛋白、或其中任一种的表达或活性或水平的失调的任何类型)相关或具有这些失调的疾病或障碍。Ras途径-相关疾病或障碍的非限制性实例包括，例如，1型神经纤维瘤病(NF1)、努南综合征(NS)、LEOPARD综合征、毛细血管畸形-动静脉畸形综合征(CM-AVM)、Costello综合征(CS)、心脏-面-皮肤综合征(CFC)、Legius综合征、遗传性牙龈纤维瘤病和癌症。
在一些实施方案中，Ras途径-相关疾病或障碍为Ras途径-相关癌症，例如KRas-相关癌症、HRas-相关癌症、NRas-相关癌症、SOS1-相关癌症、EGFR-相关癌症、ErbB2-相关癌症、ErbB3-相关癌症、ErbB4-相关癌症、NF1-相关癌症、PDGFR-A-相关癌症、PDGFR-B-相关癌症、FGFR1-相关癌症、FGFR2-相关癌症、FGFR3-相关癌症、IGF1 R-相关癌症、INSR-相关癌症、ALK-相关癌症、ROS-相关癌症、TrkA-相关癌症、TrkB-相关癌症、TrkC-相关癌症、RET-相关癌症、c-MET-相关癌症、VEGFR1-相关癌症、VEGFR2-相关癌症、VEGFR3-相关癌症、AXL-相关癌症、SHP2-相关癌症、RAF-相关癌症(例如BRAF-相关癌症)、PI3K-相关癌症、AKT-相关癌症、mTOR-相关癌症、MEK-相关癌症、ERK-相关癌症或其组合。
如本文所用，术语“Ras途径-相关癌症”是指与Ras途径中的基因、Ras途径中的蛋白或其中任一种(例如，一种或多种)的表达或活性或水平失调(例如，如本文所述的Ras途径中的基因、Ras途径中的蛋白或其中任一种的表达或活性或水平失调的任何类型)相关或具有这些失调的癌症。Ras途径-相关癌症的非限制性实例如本文所述。在一些实施方案中，Ras途径-相关癌症可以为KRas-相关癌症、HRas-相关癌症、NRas-相关癌症、SOS1-相关癌症、EGFR-相关癌症、ErbB2-相关癌症、ErbB3-相关癌症、ErbB4-相关癌症、NF1-相关癌症、PDGFR-A-相关癌症、PDGFR-B-相关癌症、FGFR1-相关癌症、FGFR2-相关癌症、FGFR3-相关癌症、IGF1 R-相关癌症、INSR-相关癌症、ALK-相关癌症、ROS-相关癌症、TrkA-相关癌症、TrkB-相关癌症、TrkC-相关癌症、RET-相关癌症、c-MET-相关癌症、VEGFR1-相关癌症、VEGFR2-相关癌症、VEGFR3-相关癌症、AXL-相关癌症、SHP2-相关癌症、RAF-相关癌症(例如BRAF-相关癌症)、PI3K-相关癌症、AKT-相关癌症、mTOR-相关癌症、MEK-相关癌症、ERK-相关癌症或其组合。
如本文所用，术语“Ras-相关癌症”是指与Ras基因、Ras蛋白或其中任一种(例如一种或多种)的表达或活性或水平失调(例如本文所述的Ras基因、Ras蛋白或其中任一种的表达或活性或水平失调的任何类型)相关或具有这些失调的癌症。本文描述了Ras-相关癌症的非限制性实例。在一些实施方案中，Ras-相关癌症可以为KRas-相关癌症、HRas-相关癌症、NRas-相关癌症。
短语“Ras基因、Ras蛋白、或其中任一种的表达或活性或水平失调”是指导致融合蛋白表达的遗传突变(例如，Ras(例如KRas，NRas或NRas)基因易位、导致与野生型Ras蛋白相比包括至少一个氨基酸缺失的Ras蛋白表达的Ras基因突变、导致与野生型Ras蛋白相比具有一个或多个点突变的Ras蛋白表达的Ras基因突变、导致与野生型Ras蛋白相比具有至少一个插入的氨基酸的Ras蛋白表达的Ras基因突变、导致细胞中Ras蛋白水平增加的基因重复、或导致细胞中Ras蛋白水平增加的调节序列(例如，启动子和/或增强子)中的突变)，Ras mRNA的可变剪接形式(例如，导致与野生型Ras蛋白相比在Ras蛋白中具有至少一个氨基酸缺失的Ras蛋白或导致与野生型Ras蛋白相比在Ras蛋白中具有至少一个插入的氨基酸的Ras蛋白)，或由于异常的细胞信号传导和/或失调的自分泌/旁分泌信号传导(例如，与对照非癌细胞相比)，哺乳动物细胞中野生型Ras蛋白的表达增加(例如，水平增加)。作为另一个实例，Ras基因、Ras蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调可以是编码Ras蛋白的Ras基因中的突变，所述Ras蛋白与由不包括突变的Ras基因编码的蛋白相比具有组成型活性或具有增加的活性。在本文所述任一方法的一些实施方案中，Ras基因、Ras蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调可以选自G12突变、G13突变、Q61突变及其组合。
表1列出了一些非限制性示例性KRas突变。表1A列出了非限制性示例性KRas融合体。在本文所述任一方法的一些实施方案中，KRas基因、KRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调可以选自G12突变(例如G12I、G12A、G12C、G12D、G12E、G12F、G12L、G12N、G12R、G12S、G12T、G12V、G12W或G12Y)、G13突变(例如G13A、G13C、G13D、G13E、G13F、G13I、G13M、G13N、G13P、G13R、G13S、G13V或G13Y)、Q61突变(例如Q61D、Q61E、Q61H、Q61K、Q61L、Q61P、Q61R)及其组合。
表2列出了一些非限制性示例性HRas突变。在本文所述任一方法的一些实施方案中，HRas基因、HRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调可以选自G12突变(例如G12A、G12C、G12D、G12R、G12S、G12V)、G13突变(例如G13A、G13C、G13D、G13R、G13S、G13V)、Q61突变(例如Q61H、Q61K、Q61L、Q61P、Q61R、Q61*)及其组合。
表3列出了一些非限制性示例性HRas突变。在本文所述任一方法的一些实施方案中，HRas基因、HRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调可以选自G12突变(例如G12A、G12C、G12D、G12R、G12S、G12V、G12W、G12N)、G13突变(例如G13A、G13C、G13D、G13R、G13S、G13V)、Q61突变(例如Q61E、Q61H、Q61K、Q61L、Q61P、Q61R、Q61E、Q61N)及其组合。
表1.KRAS蛋白质氨基酸取代/插入/缺失A
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A所示的KRAS突变可以是活化突变和/或赋予KRAS对KRAS调节剂(例如，KRAS抑制剂)的抗性增加，例如，与野生型KRAS相比。
表示可能影响KRAS蛋白表达的同义突变。参见，例如Waters等人,PLOS One2016；11(9).doi:10.1371/journal.pone.0163272。
1美国专利号9,810,690
2美国公布号2014/0199405
3P.C.T.公布号WO 2012/016050
4美国专利号10,238,650
5P.C.T.公布号WO 2009/052467
6美国公布号2013/0317037
7P.C.T.公布号WO 2020/012068
8美国公布号2017/0130271
9美国公布号2017/0051356
10Abe等人,Biochemical和Biophysical Research Communications.2020:522(3):P.360-696。
11Prior等人,Cancer Res.2012May 15；72(10):2457–2467。
表1A.示例性KRAS融合蛋白和癌症
10.1158-2159-8274.CD-10-0022。
表2.HRAS蛋白质氨基酸取代/插入/缺失A
A所示的HRAS突变可以是活化突变和/或赋予HRAS对HRAS调节剂(例如，HRAS抑制剂)的抗性增加，例如，与野生型HRAS相比。
1Prior等人,Cancer Res.2012May 15；72(10):2457–2467。
2Koumaki、Dimitra等人,Oncology Reports 27(2012):1555-1560。
3Urano、Makoto等人,The American journal of surgical pathology 43.7(2019):984-994。
4美国专利号10,722,484
表3.NRAS蛋白质氨基酸取代/插入/缺失A
A所示的NRAS突变可以是活化突变和/或赋予NRAS对NRAS调节剂(例如，NRAS抑制剂)的抗性增加，例如，与野生型NRAS相比。
1Prior等人,Cancer Res.2012May 15；72(10):2457–2467。
2Tyner、Jeffrey W.等人,Blood、The Journal of the American Society ofHematology 113.8(2009):1749-1755。
3美国专利号10,668,063
4Payandeh等人,American Journal of Cancer Prevention 3.1(2015):19-22.
5Villahermosa等人,Journal of Clinical Oncology 2014 32:15_suppl、e22159-e22159
6Shen等人,PloS One 8.12(2013):e81628。
然而，Ras蛋白通常被认为是“不能成药的”，并且没有直接的Ras抑制剂被美国食品和药物管理局批准。因此，已经靶向Ras信号传导途径中的其他靶标以抑制通过这些途径的异常信号传导，包括Ras家族蛋白上游和下游的靶标。参见，例如Cox等人,Nat.Rev.DrugDisc.13.11(2014):828-851；Khan等人,Biochimica et Biophysica Acta(BBA)-Molecular Cell Research 1867.2(2020):118570；Kessler等人,Proc.Nat.Acad.Sci.116.32(2019):15823-15829；Dang等人,Nat.Rev.Cancer 17.8(2017):502；Baker和Der、Nature 497.7451(2013):577-578。
鸟苷酸交换因子，其促进GDP与Ras家族蛋白结合的GTP的交换，可以是减少通过Ras途径的信号传导的合适靶标。GEF的抑制可以促进Ras家族蛋白的无活性(GDP结合)状态，并因此减少通过该途径的信号传导。参见，例如Evelyn等人,Chemistry&Biology 21.12(2014):1618-1628；Hillig等人,Proc.Nat.Acad.Sci.116.7(2019):2551-2560；Patgiri等人,Nat.Chem.Bio.7.9(2011):585-587:Maurer等人,Proc.Nat.Acad.Sci.109.14(2012):5299-5304；Winter等人,J.Med.Chem.58.5(2015):2265-2274。
SOS1具有约500个残基的中心“催化”核(SOScat)，其对于Ras-活化活性是足够的。SOS1具有一级(有时也称作“催化”位点)Ras结合位点(例如，包括Cdc25同源结构域)，其可以结合并扭曲Ras蛋白的核苷酸结合位点，从而促进结合的核苷酸(例如，GDP)的释放，使得另一核苷酸(例如，GTP)得以释放。SOS1可以在三元复合物中结合两个Ras分子，其中Ras·GTP复合物与SOS1上的第二(有时也称作“变构”位点)位点的结合，进一步以正反馈型机制激活SOS1的催化活性。参见，例如Margarit等人,Cell 112.5(2003):685-695；Freedman等人,Proc.Nat.Acad.Sci.103.45(2006):16692-16697。此外，已经显示SOS1的小分子结合剂可以调节其GEF活性。参见，例如Burns等人,Proc.Nat.Acad.Sci.111.9(2014):3401-3406。在一些情况下，SOS1的小分子结合剂可以负调节其与Ras蛋白的GEF活性；这类分子在本文中也可以称作“SOS1抑制剂”，并称作抑制“SOS1活性”。一些SOS1抑制剂已显示结合在主RAS结合位点附近，例如，引起Tyr884侧链的移动并减少与KRas的Arg73的有利堆积相互作用。此外，已经证实了一些这样的SOS1抑制剂的抗增殖活性。参见例如Hillig等人,Proc.Nat.Acad.Sci.116.7(2019):2551-2560；美国专利申请公布号2019/0358230和2019/0194192；和PCT公布号WO 2018/172250和WO 2019/201848。
如本文所用，术语“SOS1-相关癌症”是指与SOS1基因、SOS1-GEF(在本文中也称作SOS1蛋白)或其中任一种(例如一种或多种)的表达、活性或水平失调(例如本文所述的SOS1基因、SOS1蛋白或其中任一种的表达、活性或水平失调的任何类型)相关或具有这些失调的癌症。本文描述了SOS1-相关癌症的非限制性实例。
短语“SOS1基因、SOS1蛋白或其中任一种的表达或活性或水平失调”是指遗传突变(例如，导致融合蛋白表达的SOS1基因易位、导致与野生型SOS1蛋白相比包括至少一个氨基酸缺失的SOS1蛋白表达的SOS1基因突变、导致与野生型SOS1蛋白相比具有一个或多个点突变的SOS1蛋白表达的SOS1基因突变、导致与野生型SOS1蛋白相比具有至少一个插入的氨基酸的SOS1蛋白表达的SOS1基因突变、导致细胞中SOS1蛋白水平升高的基因重复、或导致细胞中SOS1蛋白水平增加的调节序列(例如，启动子和/或增强子)中的突变)，SOS1MRNA的可变剪接形式(例如，导致与野生型SOS1蛋白相比在SOS1蛋白中至少一个氨基酸缺失的SOS1蛋白或导致与野生型SOS1蛋白相比在SOS1蛋白中至少一个氨基酸插入的SOS1蛋白)，或由于异常的细胞信号传导和/或失调的自分泌/旁分泌信号传导(例如，与对照非癌细胞相比)，哺乳动物细胞中野生型SOS1蛋白的表达增加(例如，水平增加)。作为另一个实例，SOS1基因、SOS1蛋白或其中任一种的表达或活性或水平失调可以是编码SOS1蛋白的SOS1基因中的突变，所述SOS1蛋白与由不包含突变的SOS1基因编码的蛋白质相比具有组成型活性或具有增加的活性。SOS1蛋白点突变/插入/缺失的非限制性实例如表4所示。表4A列出了非限制性示例性SOS1融合体。
表4.SOS1蛋白质氨基酸取代/插入/缺失A
A所示的SOS1突变可以是活化突变和/或赋予SOS1对SOS1调节剂(例如，SOS1抑制剂)的抗性增加，例如，与野生型SOS1相比。
表示同义突变，其可以影响，也可以不影响SOS1蛋白表达或SOS1调节或功能的其他方面。
1美国专利申请公布号2010/0227778
2Swanson等人,Genes、Chromosomes和Cancer 47.3(2008):253-259.doi:10.1002/gcc.20527
3Denayer等人,Genes、Chromosomes和Cancer 49.3(2010):242-252.doi:10.1002/gcc.20735
4Cai等人,Mol.Cancer Res、17.4(2019):1002-1012.doi:10.1158/1541-7786.MCR-18-0316
5Tanizaki等人International Journal of Hematology 88.4(2008):460-462。
表4A.示例性SOS1融合蛋白和癌症
非限制性示例性SOS1融合配偶体 非限制性示例性SOS1-相关癌症
ADCY31 肺腺癌1
1P.C.T.公布号WO 2013/113942
术语“野生型”描述了一种核酸(例如SOS1基因或mRNA)或蛋白质(例如SOS1蛋白)，其存在于不患有与该核酸或蛋白质相关的疾病或障碍(例如SOS1-相关疾病或障碍)的个体中，所述疾病或病症例如与该核酸或蛋白质相关的癌症(并且任选地也不具有发生与该核酸或蛋白质相关的疾病或障碍的增加的风险和/或不疑似患有与该核酸或蛋白质相关的疾病或障碍)，或在来自不患有与该核酸或蛋白质相关的疾病的个体的细胞或组织中发现，例如，与该核酸或蛋白质相关的癌症(并且任选地也不具有发生与该核酸或蛋白质相关的疾病或病障碍的增加的风险和/或不疑似患有与该核酸或蛋白质相关的疾病或障碍)。
术语“管理机构”是指一个国家的机构，用于批准该国家的药物制剂的医疗用途。例如，管理机构的非限制性实例是美国食品和药物管理局(FDA)。
化合物
本文提供了式(I)的化合物：
或其药学上可接受的盐，其中：
X为苯基、萘基、3-10元环烷基、3-10元杂环基或5-10元杂芳基，其各自任选地被1-3个独立选择的RA取代；
R1为C1-C6烷基、–(C1-C6烷基)-NRBRC、C1-C6羟基烷基或5-6元杂芳基；
R2为氢、卤素、氰基、羟基、-NRDRE、C1-C6烷基、任选地被3-10元环烷基或杂环基取代的C1-C6烷氧基、C(O)C1-C6烷基、任选地被1-3个氟取代的C1-C6羟基环烷基、任选地被1-3个氟取代的C1-C6羟基杂环基或任选地被氨基取代的3-10元杂环基；
R3为
(A)C3-C8环烷基，其任选地被如下基团取代：羟基、氰基、C1-C6烷基或1-3个氟、C3-C6环烷基、任选地被1-3个氟取代的5-10元杂芳基、被1-3个氟取代的3-10元–CH2-杂环基、C1-C6卤代烷基、C1-C6羟基烷基–C(O)NRFRG或C1-C6烷基，或
(B)3-10元杂环基，其任选独立地被一个或多个卤素、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、-C(O)C1-C6烷基、任选地被卤素、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基取代的-C(O)C1-C6环烷基，或–C(O)NRFRG；
RA各自独立地选自一个或多个卤素、氰基、硝基、–(C1-C6烷基)p-NRHRI；C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷氧基、任选地被1-3个氟取代的C1-C6羟基烷基、任选独立地被一个或多个1-3个氟或C1-C6烷基取代的C1-C6烷氧基烷基、任选地被3-10元杂环基取代的C1-C6卤代烷基、任选地被1-3个氟取代的–CH2C(O)NRFRG、被1-3个氟取代的5-6元–CH2-杂芳基和任选地被–(C1-C6烷基)p-NRJRK取代的3-10元环烷基；
RB、RC、RD、RE、RF、RG、RH、RI、RJ、RK各自独立地选自氢和C1-C6烷基或RB和RC与它们所键合的原子一起可以形成5-10元杂环基，其任选地被一个或多个卤素、C1-C6烷基和C1-C6烷氧基取代；且
p为0或1。
在一个实施方案中，为式(I)的化合物：
或其药学上可接受的盐，其中：
X为苯基、萘基、3-10元环烷基或5-10元杂芳基，其各自任选地被1-3个独立选择的RA取代；
R1为C1-C6烷基、–(C1-C6烷基)-NRBRC、C1-C6羟基烷基或5-6元杂芳基；
R2为氢、卤素、氰基、羟基、-NRDRE、C1-C6烷基、任选地被3-10元环烷基取代的C1-C6烷氧基、C(O)C1-C6烷基或任选地被氨基取代的3-10元杂环基；
R3为
(A)C3-C6环烷基，其任选地被羟基、氰基、5-10元杂芳基、C1-C6卤代烷基、–C(O)NRFRG或C1-C6烷基取代，或
(B)3-10元杂环基，其任选地被卤素、C1-C6烷基、-C(O)C1-C6烷基或–C(O)NRFRG取代；
RA各自独立地选自卤素、氰基、硝基、–(C1-C6烷基)p-NRHRI；C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷氧基、任选地被1-3个氟取代的C1-C6羟基烷基、任选地被1-3个氟取代的C1-C6烷氧基烷基、任选地被3-10元杂环基取代的C1-C6卤代烷基和任选地被–(C1-C6烷基)p-NRJRK取代的3-10元环烷基；
RB、RC、RD、RE、RF、RG、RH、RI、RJ、RK各自独立地选自氢和C1-C6烷基或RB和RC与它们所键合的原子一起可以形成5-10元杂环基，其任选地被一个或多个卤素、C1-C6烷基和C1-C6烷氧基取代；且
p为0或1。
在一些实施方案中，R1为C1-C6烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、戊基(直链或支链)或己基(直链或支链)。在一些实施方案中，R1为甲基或乙基。在一些实施方案中，R1为甲基。
在一些实施方案中，R1为–(C1-C6烷基)-NRBRC，例如甲基氨基、乙基氨基、二甲基氨基(乙基)等。
在一些实施方案中，RB和RC各自均为氢。在一些实施方案中，RB和RC各自独立地为C1-C6烷基。在一些实施方案中，RB和RC之一为氢，而RB和RC的另一个为C1-C6烷基。
在一些实施方案中，R1为5-6元杂芳基。在一些实施方案中，R1为5元杂芳基，例如，呋喃、噻吩、吡咯、咪唑、吡唑、噁唑、噻唑或三唑。在一些实施方案中，R1为5元杂芳基，例如吡啶、哒嗪、嘧啶、吡嗪。在一些实施方案中，R1为噁唑。
在一些实施方案中，R1为C1-C6羟基烷基。在一些实施方案中，R1为乙氧基。
在一些实施方案中，R2为卤素。在一些实施方案中，R2为氟。在一些实施方案中，R2为氯。在一些实施方案中，R2为溴。
在一些实施方案中，R2为氢。
在一些实施方案中，R2为氰基。
在一些实施方案中，R2为羟基。
在一些实施方案中，R2为-NRDRE。
在一些实施方案中，R2为任选地被3-10元环烷基取代的C1-C6烷氧基。在一些实施方案中，R2为甲氧基。在一些实施方案中，R2为环丙基甲氧基。在一些实施方案中，R2为C(O)C1-C6烷基。在一些实施方案中，R2为乙酰基。在一些实施方案中，R2为任选地被氨基取代的3-10元杂环基。
在一些实施方案中，RD和RE各自均为氢(例如R2为氨基)。在一些实施方案中，RD和RE各自独立地为C1-C6烷基。在一些实施方案中，RD和RE之一为氢，而RD和RE的另一个为C1-C6烷基。
在一些实施方案中，R2为C1-C6烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、戊基(直链或支链)或己基(直链或支链)。在一些实施方案中，R2为甲基。
在一些实施方案中，R2为C1-C6烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、仲丁氧基、异丁氧基、叔丁氧基、戊基(直链或支链)或己基(直链或支链)。在一些实施方案中，R2为甲氧基。
在一些实施方案中，R3为任选地被羟基、氰基、5-10元杂芳基、C1-C6卤代烷基、–C(O)NRFRG或C1-C6烷基取代的C3-C6环烷基。在一些实施方案中，R3为被羟基、氰基、5-10元杂芳基、C1-C6卤代烷基、–C(O)NRFRG或C1-C6烷基取代的C3-C6环烷基。在一些实施方案中，R3为被C1-C6烷基取代的C3-C6环烷基。在一些实施方案中，R3为被甲基取代的C3-C6环烷基。在一些实施方案中，R3为被羟基取代的C3-C6环烷基。在一些实施方案中，R3为未取代的C3-C6环烷基。在一些实施方案中，R3为环丙基、环丁基或双环戊基。在一些实施方案中，R3为环丙基。在一些实施方案中，R3为环丁基。在一些实施方案中，R3为双环戊基。
在一些实施方案中，R3为任选地被氰基取代的C3-C6环烷基。在一些实施方案中，R3为任选地被5-10元杂芳基取代的C3-C6环烷基。在一些实施方案中，R3为任选地被C1-C6卤代烷基取代的C3-C6环烷基。在一些实施方案中，R3为任选地被–C(O)NRFRG取代的C3-C6环烷基。
在一些实施方案中，R3选自：
在一些实施方案中，R3为任选地被卤素、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、-C(O)C1-C6烷基或–C(O)NRFRG取代的3-10元杂环基。在一些实施方案中，R3为被卤素、C1-C6烷基、-C(O)C1-C6烷基或–C(O)NRFRG取代的3-10元杂环基。在一些实施方案中，R3为被C1-C6烷基取代的3-10元杂环基。在一些实施方案中，R3为任选地被C1-C6卤代烷基或-C(O)C1-C6环烷基取代的3-6元杂环基，其中-C(O)C1-C6环烷基任选地被卤素、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基取代。
在一些实施方案中，R3为被C1-C6烷基取代的6-10元杂环基。在一些实施方案中，R3为被C1-C6卤代烷基取代的6-10元杂环基。在一些实施方案中，R3为被卤素取代的3-10元杂环基。在一些实施方案中，R3为被甲基取代的6-10元杂环基。在一些实施方案中，R3为被-C(O)C1-C6烷基取代的3-10元杂环基。在一些实施方案中，R3为被-C(O)C1-C6烷基取代的6-10元杂环基。在一些实施方案中，R3为被乙酰基取代的6-10元杂环基。在一些实施方案中，R3为任选地被-C(O)C1-C6环烷基取代的3-6元杂环基，所述-C(O)C1-C6环烷基任选地被卤素、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基取代。在一些实施方案中，R3为被–C(O)NRFRG取代的3-10元杂环基。在一些实施方案中，R3为被–C(O)NRFRG取代的6-10元杂环基。
在一些实施方案中，RF和RG各自均为氢。在一些实施方案中，RF和RG各自独立地为C1-C6烷基。在一些实施方案中，RF和RG之一为氢，而RF和RG的另一个为C1-C6烷基。
在一些实施方案中，R3为2-氧杂螺[3.3]庚烷、哌啶或四氢吡喃，其任选地被如本文所述的C1-C6烷基、-C(O)C1-C6烷基或–C(O)NRFRG取代。在一些实施方案中，R3为2-氧杂螺[3.3]庚烷、哌啶或四氢吡喃，其被如本文所述的C1-C6烷基、-C(O)C1-C6烷基或-C(O)NRFRG取代。在一些实施方案中，R3为未取代的2-氧杂螺[3.3]庚烷、哌啶或四氢吡喃。在一些实施方案中，R3为四氢吡喃。
在一些实施方案中，R3选自：/>
在一些实施方案中，R3为在一些实施方案中，R3为/>
在一些实施方案中，X为任选地被1-3个独立选择的RA取代的苯基。RA基团可以位于苯环中五个可利用位置中的任一处。
在一些实施方案中，X为被1个RA取代的苯基。相对于使X连接到分子的其余部分的键，一个RA基团可以处于邻位、间位或对位。在一些实施方案中，X为被2个独立选择的RA取代的苯基。两个独立选择的RA基团可以彼此处于邻位、间位或对位。在一些实施方案中，X为被3个独立选择的RA取代的苯基。三个独立选择的RA基团可以位于苯环上五个可利用位置的任意组合处。在一些实施方案中，X是未取代的苯基。
在一些实施方案中，X选自:
在一些实施方案中，X选自:
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在一些实施方案中，X为在一些实施方案中，X为/>在一些实施方案中，X为/>在一些实施方案中，X为/>
在一些实施方案中，X为
在一些实施方案中，X为任选地被1-3个独立选择的RA取代的萘基。在一些实施方案中，X为被1个RA取代的萘基。在一些实施方案中，X为任选地被2个独立选择的RA取代的萘基。在一些实施方案中，X为被3个独立选择的RA取代的萘基。RA基团可以在单个环(例如与化合物的其余部分具有键合的环或与化合物的其余部分无键合的环)或在两个环上。在一些实施方案中，萘基在萘基与稠合碳键合的位置处与–CH(CH3)NH-部分连接。
在一些实施方案中，X为未取代的萘基。在一些实施方案中，X为
在一些实施方案中，X为任选地被1-3个独立选择的RA取代的3-10元环烷基。在一些实施方案中，X为任选地被1个选择的RA取代的3-10元环烷基。在一些实施方案中，X为被2个独立选择的RA取代的3-10元环烷基。在一些实施方案中，X为被3个独立选择的RA取代的3-10元环烷基。在一些实施方案中，X为3、4、5、6、9或10元环烷基。
在一些实施方案中，X为
在一些实施方案中，X为任选地被1-3个独立选择的RA取代的5-10元杂芳基或3-10元杂环基。在一些实施方案中，X为任选地被1个选择的RA取代的5-10元杂芳基。在一些实施方案中，X为被2个独立选择的RA取代的5-10元杂芳基。在一些实施方案中，X为被3个独立选择的RA取代的5-10元杂芳基。在一些实施方案中，X为6、9或10元杂芳基。
在一些实施方案中，X为吡啶、吡嗪、嘧啶、吲哚、吲唑、苯并咪唑、噻吩或吡咯并嘧啶。在一些实施方案中，X为吡啶。
在一些实施方案中，RA各自独立地选自卤素、氰基、硝基、-(C1-C3烷基)p-NRHRI；C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、任选地被3-10元杂环基取代的C1-C3卤代烷基、C1-C3卤代烷氧基、任选地被1-3个氟取代的C1-C3羟基烷基、任选地被–(C1-C6烷基)p-NRJRK取代的3-10元环烷基和任选地被1-3个氟取代的C1-C3烷氧基烷基。
在一些实施方案中，RA各自独立地选自氰基、–(C1-C3烷基)p-NRHRI；C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、任选地被3-10元杂环基取代的C1-C3卤代烷基、C1-C3卤代烷氧基、任选地被1-3个氟取代的C1-C3羟基烷基和任选地被1-3个氟取代的C1-C3烷氧基烷基。
在一些实施方案中，RA各自独立地选自氰基、–(C1-C3烷基)p-NRHRI；C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、任选地被3-10元杂环基取代的C1-C3卤代烷基、C1-C3卤代烷氧基、被1-3个氟取代的C1-C3羟基烷基和被1-3个氟取代的C1-C3烷氧基烷基。
在一些实施方案中，RA各自独立地选自氰基、–(C1-C3烷基)p-NRHRI；C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、任选地被3-10元杂环基取代的C1-C3卤代烷基、C1-C3卤代烷氧基、C1-C3羟基烷基和C1-C3烷氧基烷基。
在一些实施方案中，p为0。在一些实施方案中，p为1。
在一些实施方案中，RH和RI各自均为氢。
在一些实施方案中，RH和RI各自独立地为C1-C6烷基。在一些实施方案中，RH和RI之一为氢，而RH和RI的另一个为C1-C6烷基。
在一些实施方案中，RA可以为氨基，其中RA为–(C1-C3烷基)p-NRHRI，p为0，且RD和RE均为氢。
在一些实施方案中，RA各自独立地选自氰基、C1-C3烷基和任选地被3-10元杂环基取代的C1-C3卤代烷基。
在一些实施方案中，RA各自独立地选自氰基、甲基、甲氧基、任选地被3-10元杂环基取代的C1-C3卤代烷基、C1-C3卤代烷氧基、C1-C3羟基烷基、任选地被–(C1-C6烷基)p-NRJRK取代的3-10元环烷基、被1-3个氟取代的5-6元–CH2-杂芳基和C1-C3烷氧基烷基。
在一些实施方案中，RA各自独立地选自氟、氯、氰基、硝基、–(C1-C3烷基)-NH2、–NH2(氨基)、–(C1-C3烷基)-NHMe、–NHMe、–(C1-C3烷基)-N(Me)2、–N(Me)2、甲基、甲氧基、三氟甲基、2,2,2-三氟乙基、三氟甲氧基、1-羟基乙基、2-羟基乙基、1-羟基乙基、2-羟基乙基、2,2,2-三氟乙-1-醇、1,1-二氟乙基-2-醇和甲氧基乙基。
在一些实施方案中，RA各自独立地选自氰基、–(C1-C3烷基)-NH2、–NH2、–(C1-C3烷基)-N(Me)2、–N(Me)2、甲基、甲氧基、三氟甲基、2,2,2-三氟乙基、三氟甲氧基、1-羟基乙基、2-羟基乙基、1-羟基乙基、2-羟基乙基、2,2,2-三氟乙-1-醇、1,1-二氟乙基-2-醇和甲氧基乙基。
在一些实施方案中，RA各自独立地选自氰基、氨基、甲基、甲氧基、任选地被3-10元杂环基取代的C1-C3卤代烷基、C1-C3卤代烷氧基、C1-C3羟基烷基、任选地被–(C1-C6烷基)p-NRJRK取代的3-10元环烷基和C1-C3烷氧基烷基。
在一些实施方案中，RA各自独立地选自氰基、甲基、氟、甲氧基、二氟甲基、三氟甲基、三氟甲氧基和羟基乙基。
在一些实施方案中，RA各自独立地选自氰基、甲基、二氟甲基和三氟甲基。
在一些实施方案中，RA各自独立地选自氰基和甲基。
在一些实施方案中，RA各自独立地选自氨基和甲基。
在一些实施方案中，RA各自独立地选自甲基和三氟甲基。
在一些实施方案中，至少一个RA为甲基。在一些实施方案中，至少一个RA为二氟甲基。在一些实施方案中，至少一个RA为三氟甲基。在一些实施方案中，至少一个RA为氨基。在一些实施方案中，一个RA为甲基。在一些实施方案中，一个RA为三氟甲基。在一些实施方案中，一个RA为氨基。
在一些实施方案中，一个RA为氨基，且一个RA为三氟甲基。在一些实施方案中，一个RA为甲基，且一个RA为三氟甲基。在一些实施方案中，一个RA为氟，且一个RA为二氟甲基。
在一些实施方案中，RB和RC与它们所键合的原子一起可以形成5-10元杂环基，其任选地被一个或多个卤素、C1-C6烷基和C1-C6烷氧基取代。在一些实施方案中，RB和RC与它们所键合的原子一起形成5-10元杂环基，其任选地被一个或多个卤素取代。在一些实施方案中，RB和RC与它们所键合的原子一起形成5-10元杂环基，其任选地被C1-C6烷基取代。在一些实施方案中，RB和RC与它们所键合的原子一起形成5-10元杂环基，其任选地被C1-C6烷氧基取代。
在一些实施方案中，X为
在一些实施方案中，X为
在一些实施方案中，X为
在一些实施方案中，X为
在一些实施方案中，X为未取代的苯基、未取代的萘基或未取代的5-10元杂芳基。
在一些实施方案中，化合物为式(Ia)的化合物：
或其药学上可接受的盐，其中：
R2为氢、甲基、甲氧基、氨基或卤素；
R3为任选地被羟基或C1-C6烷基取代的C3-C6环烷基、任选地被C1-C6烷基、-C(O)C1-C6烷基或–C(O)NRFRG取代的3-10元杂环基；
RA1各自独立地选自卤素、氰基、硝基、–(C1-C6烷基)p-NRHRI；C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基、C1-C6卤代烷氧基、任选地被1-3个氟取代的C1-C6羟基烷基和任选地被1-3个氟取代的C1-C6烷氧基烷基；或
两个相邻RA1，当存在时，与它们所连接的原子一起连接成5-6元杂芳基或苯基，其中所述5-6元杂芳基和苯基任选地被1-3个独立选择的RA2取代；
RA2各自独立地选自卤素、氰基、硝基、–(C1-C6烷基)o-NRJRK；C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基、C1-C6卤代烷氧基、任选地被1-3个氟取代的C1-C6羟基烷基和任选地被1-3个氟取代的C1-C6烷氧基烷基；
RF、RG、RH、RI、RJ和RK各自独立地选自氢和C1-C6烷基；
o为0或1；
p为0或1；
q为0、1或2。
在一些实施方案中，R2为氢。在一些实施方案中，R2为甲基。在一些实施方案中，R2为甲氧基。在一些实施方案中，R2为氨基。在一些实施方案中，R2为卤素，例如氟、氯或溴。在一些实施方案中，R2为氯。在一些实施方案中，R2为溴。
在一些实施方案中，R3、RB和RC如式(I)所示。
在一些实施方案中，所述化合物为式(Ib)的化合物：
或其药学上可接受的盐，其中：
A为价键、-C(R3A)(R3B)-或-CH2OCH2-；
R2为氢、甲基、甲氧基、氨基或卤素；
RA1各自独立地选自卤素、氰基、硝基、–(C1-C6烷基)p-NRHRI；C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基、C1-C6卤代烷氧基、任选地被1-3个氟取代的C1-C6羟基烷基和任选地被1-3个氟取代的C1-C6烷氧基烷基；或
两个相邻的RA1，当存在时，与它们所连接的原子一起连接成5-6元杂芳基或苯基，其中所述5-6元杂芳基和苯基任选地被1-3个独立选择的RA2取代；
RA2各自独立地选自卤素、氰基、硝基、–(C1-C6烷基)o-NRJRK；C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基、C1-C6卤代烷氧基、任选地被1-3个氟取代的C1-C6羟基烷基，和任选地被1-3个氟取代的C1-C6烷氧基烷基；
R3A和R3B独立地选自H和羟基；
R3C为H、C1-C6烷基或-C(O)C1-C6烷基；
RH、RI、RJ和RK各自独立地选自氢和C1-C6烷基；且
o为0或1；
p为0或1；
q为0、1或2。
在一些实施方案中，R2为氢。在一些实施方案中，R2为甲基。在一些实施方案中，R2为甲氧基。在一些实施方案中，R2为氨基。在一些实施方案中，R2为卤素，例如氟、氯或溴。在一些实施方案中，R2为氯。在一些实施方案中，R2为溴。
在一些实施方案中，A为价键。
在一些实施方案中，A为-C(R3A)(R3B)-。在一些实施方案中，R3A和R3B独立地选自氢和羟基。在一些实施方案中，R3A和R3B均为氢。在一些实施方案中，R3A和R3B之一为氢，而R3A和R3B的另一个为羟基。
在一些实施方案中，A为-CH2OCH2-。
在一些实施方案中，q为1。在一些实施方案中，q为2。
在一些实施方案中，选自:
在一些实施方案中，选自:
在一些实施方案中，选自:
在一些实施方案中，/>
在一些实施方案中，
在一些实施方案中，
在一些实施方案中，
在一些实施方案中，RA1各自独立地选自卤素、氰基、硝基、–(C1-C3烷基)p-NRHRI；C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、C1-C3卤代烷基、C1-C3卤代烷氧基、任选地被1-3个氟取代的C1-C3羟基烷基和任选地被1-3个氟取代的C1-C3烷氧基烷基。
在一些实施方案中，RA1各自独立地选自氰基、–(C1-C3烷基)p-NRHRI；C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、C1-C3卤代烷基、C1-C3卤代烷氧基、任选地被1-3个氟取代的C1-C3羟基烷基和任选地被1-3个氟取代的C1-C3烷氧基烷基。
在一些实施方案中，RA1各自独立地选自氰基、–(C1-C3烷基)p-NRHRI；C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、C1-C3卤代烷基、C1-C3卤代烷氧基、被1-3个氟取代的C1-C3羟基烷基和被1-3个氟取代的C1-C3烷氧基烷基。
在一些实施方案中，RA1各自独立地选自氰基、–(C1-C3烷基)p-NRHRI；C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、C1-C3卤代烷基、C1-C3卤代烷氧基、C1-C3羟基烷基和C1-C3烷氧基烷基。
在一些实施方案中，p为0。在一些实施方案中，p为1。
在一些实施方案中，RH和RI各自均为氢。在一些实施方案中，RH和RI各自独立地为C1-C6烷基。在一些实施方案中，RH和RI之一为氢，而RH和RI的另一个为C1-C6烷基。
在一些实施方案中，RA1各自独立地选自氰基、氨基、甲基、甲氧基、C1-C3卤代烷基、C1-C3卤代烷氧基、C1-C3羟基烷基和C1-C3烷氧基烷基。
在一些实施方案中，RA1各自独立地选自氰基、氨基、甲基、甲氧基、C1-C3卤代烷基、C1-C3卤代烷氧基、C1-C3羟基烷基和C1-C3烷氧基烷基。
在一些实施方案中，RA1各自独立地选自氰基、氨基、甲基、甲氧基、三氟甲基、三氟甲氧基和羟基乙基。
在一些实施方案中，RA1各自独立地选自氰基、氨基、甲基和三氟甲基。
在一些实施方案中，RA1各自独立地选自氰基和甲基。
在一些实施方案中，RA1各自独立地选自氨基和甲基。
在一些实施方案中，RA1各自独立地选自甲基和三氟甲基。
在一些实施方案中，至少一个RA1为甲基。在一些实施方案中，至少一个RA1为三氟甲基。在一些实施方案中，至少一个RA1为氨基。在一些实施方案中，一个RA1为甲基，且一个RA1为三氟甲基。
在一些实施方案中，两个相邻的RA1，当存在时，与它们所连接的原子一起连接成5-6元杂芳基或苯基，其中所述5-6元杂芳基和苯基任选地被1-3个独立选择的RA2取代。
在一些实施方案中，两个相邻的RA1，当存在时，与它们所连接的原子一起连接成5-6元杂芳基，其中所述5-6元杂芳基任选地被1-3个独立选择的RA2取代。
在一些实施方案中，所述5-6元杂芳基为被2个独立选择的RA2取代。
在一些实施方案中，所述5-6元杂芳基为吡唑基。在一些实施方案中，一个RA2连接至吡唑基的N1位置，而另一个RA2连接至吡唑基的C3位。
在一些实施方案中，两个相邻的RA1，当存在时，与它们所连接的原子一起连接成苯基，其中所述苯基任选地被1-3个独立选择的RA2取代。
在一些实施方案中，所述苯基未被取代(例如当q为0时)。
在一些实施方案中，RA2各自独立地选自卤素、氰基、硝基、–(C1-C3烷基)o-NRJRK；C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、C1-C3卤代烷基、C1-C3卤代烷氧基、任选地被1-3个氟取代的C1-C3羟基烷基和任选地被1-3个氟取代的C1-C3烷氧基烷基。
在一些实施方案中，RA2各自独立地选自氰基、–(C1-C3烷基)o-NRJRK；C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、C1-C3卤代烷基、C1-C3卤代烷氧基、任选地被1-3个氟取代的C1-C3羟基烷基和任选地被1-3个氟取代的C1-C3烷氧基烷基。
在一些实施方案中，RA2各自独立地选自氰基、–(C1-C3烷基)o-NRJRK；C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、C1-C3卤代烷基、C1-C3卤代烷氧基、被1-3个氟取代的C1-C3羟基烷基和被1-3个氟取代的C1-C3烷氧基烷基。
在一些实施方案中，RA2各自独立地选自氰基、–(C1-C3烷基)o-NRJRK；C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、C1-C3卤代烷基、C1-C3卤代烷氧基、C1-C3羟基烷基和C1-C3烷氧基烷基。
在一些实施方案中，o为0。在一些实施方案中，o为1。
在一些实施方案中，RJ和RK各自均为氢。在一些实施方案中，RJ和RK各自独立地为C1-C6烷基。在一些实施方案中，RJ和RK之一为氢，而RJ和RK的另一个为C1-C6烷基。
在一些实施方案中，RA2各自独立地选自氰基、氨基、甲基、甲氧基、C1-C3卤代烷基、C1-C3卤代烷氧基、C1-C3羟基烷基和C1-C3烷氧基烷基。
在一些实施方案中，RA2各自独立地选自氰基、氨基、甲基、甲氧基、C1-C3卤代烷基、C1-C3卤代烷氧基、C1-C3羟基烷基和C1-C3烷氧基烷基。
在一些实施方案中，RA2各自独立地选自氰基、氨基、甲基、甲氧基、三氟甲基、三氟甲氧基和羟基乙基。在一些实施方案中，RA2各自独立地选自氰基、氨基、甲基和三氟甲基。在一些实施方案中，RA2各自独立地选自氰基和甲基。在一些实施方案中，RA各自独立地选自氨基和甲基。在一些实施方案中，RA2各自独立地选自甲基和三氟甲基。
在一些实施方案中，至少一个RA2为甲基。在一些实施方案中，至少一个RA2为三氟甲基。在一些实施方案中，至少一个RA为氨基。在一些实施方案中，一个RA2为甲基，且一个RA2为三氟甲基。
在一些实施方案中，A为价键和/>
在一些实施方案中，A为价键和
在一些实施方案中，A为–CH2–和
在一些实施方案中，A为–CH2–和
在一些实施方案中，A为–CH2-O-CH2–和
在一些实施方案中，A为–CH2-O-CH2–和
在一些实施方案中，A为价键、–CH2–或–CH2-O-CH2–；且为
治疗方法
本文提供了对有治疗需要的个体治疗癌症的方法(例如Ras途径-相关癌症(例如SOS1-相关癌症、Ras-相关癌症(例如KRas-相关癌症、HRas-相关癌症和/或NRas-相关癌症)、EGFR-相关癌症、ErbB2-相关癌症、ErbB3-相关癌症、ErbB4-相关癌症、NF1-相关癌症、PDGFR-A-相关癌症、PDGFR-B-相关癌症、FGFR1-相关癌症、FGFR2-相关癌症、FGFR3-相关癌症、IGF1 R-相关癌症、INSR-相关癌症、ALK-相关癌症、ROS-相关癌症、TrkA-相关癌症、TrkB-相关癌症、TrkC-相关癌症、RET-相关癌症、c-MET-相关癌症、VEGFR1-相关癌症、VEGFR2-相关癌症、VEGFR3-相关癌症、AXL-相关癌症、SHP2-相关癌症、RAF-相关癌症(例如BRAF-相关癌症)、PI3K-相关癌症、AKT-相关癌症、mTOR-相关癌症、MEK-相关癌症、ERK-相关癌症或其组合))，该方法包含向所述个体施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物。在一些实施方案中，癌症为Ras途径-相关癌症。在一些实施方案中，癌症为Ras-相关癌症。在一些实施方案中，癌症为KRas-相关癌症。在一些实施方案中，癌症为HRas-相关癌症。在一些实施方案中，癌症为NRas-相关癌症。在一些实施方案中，癌症为SOS1-相关癌症。
例如，本文提供了对有治疗需要的个体治疗Ras途径-相关癌症的方法(例如SOS1-相关癌症、Ras-相关癌症(例如KRas-相关癌症、HRas-相关癌症和/或NRas-相关癌症)、EGFR-相关癌症、ErbB2-相关癌症、ErbB3-相关癌症、ErbB4-相关癌症、NF1-相关癌症、PDGFR-A-相关癌症、PDGFR-B-相关癌症、FGFR1-相关癌症、FGFR2-相关癌症、FGFR3-相关癌症、IGF1 R-相关癌症、INSR-相关癌症、ALK-相关癌症、ROS-相关癌症、TrkA-相关癌症、TrkB-相关癌症、TrkC-相关癌症、RET-相关癌症、c-MET-相关癌症、VEGFR1-相关癌症、VEGFR2-相关癌症、VEGFR3-相关癌症、AXL-相关癌症、SHP2-相关癌症、RAF-相关癌症(例如BRAF-相关癌症)、PI3K-相关癌症、AKT-相关癌症、mTOR-相关癌症、MEK-相关癌症、ERK-相关癌症或其组合)，该方法包含a)检测来自个体的样品中Ras途径基因(例如SOS1、Ras(例如KRas、HRas和/或NRas)、EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4、NF1、PDGFR-A、PDGFR-B、FGFR1、FGFR2、FGFR3、IGF1 R、INSR、ALK、ROS、TrkA、TrkB、TrkC、RET、c-MET、VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3、AXL、SHP2、RAF(例如BRAF)、PI3K、AKT、mTOR、MEK、ERK或其组合)、Ras途径蛋白(例如SOS1、Ras(例如KRas、HRas和/或NRas)、EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4、NF1、PDGFR-A、PDGFR-B、FGFR1、FGFR2、FGFR3、IGF1R、INSR、ALK、ROS、TrkA、TrkB、TrkC、RET、c-MET、VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3、AXL、SHP2、RAF(例如BRAF)、PI3K、AKT、mTOR、MEK、ERK或其组合)或其中任一种的表达或活性或水平的失调；和b)施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，Ras途径基因、Ras途径蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调包括一种或多种融合蛋白。
例如，本文提供了对需要治疗的个体治疗Ras-相关癌症的方法，该方法包含a)检测来自个体的样品中Ras基因、Ras蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调；和b)施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，Ras基因、Ras蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调包括一种或多种融合蛋白。
例如，本文提供了用于对需要治疗的个体治疗KRas-相关癌症的方法，该方法包含：a)检测来自个体的样品中KRas基因、KRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调；和b)施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，KRas基因、KRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平失调包括一种或多种融合蛋白。
例如，本文提供了用于对需要治疗的个体治疗HRas-相关癌症的方法，该方法包含a)检测来自个体的样品中HRas基因、HRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调；和b)施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，HRas基因、HRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平失调包括一种或多种融合蛋白。
例如，本文提供了对需要治疗的个体治疗NRas-相关癌症的方法，该方法包含a)检测来自个体的样品中NRas基因、NRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调；和b)施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，NRas基因、NRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平失调包括一种或多种融合蛋白。
例如，本文提供了用于对有治疗需要的个体治疗SOS1-相关癌症的方法，该方法包含a)检测来自个体的样品中SOS1基因、SOS1蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调；和b)施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，SOS1基因、SOS1蛋白或其中任一种的表达或活性或水平失调包括一种或多种融合蛋白。
还提供了对有需要的个体治疗癌症的方法，该方法包含：(a)检测个体中Ras途径-相关癌症(例如SOS1-相关癌症、Ras-相关癌症(例如KRas-相关癌症、HRas-相关癌症和/或NRas-相关癌症)、EGFR-相关癌症、ErbB2-相关癌症、ErbB3-相关癌症、ErbB4-相关癌症、NF1-相关癌症、PDGFR-A-相关癌症、PDGFR-B-相关癌症、FGFR1-相关癌症、FGFR2-相关癌症、FGFR3-相关癌症、IGF1 R-相关癌症、INSR-相关癌症、ALK-相关癌症、ROS-相关癌症、TrkA-相关癌症、TrkB-相关癌症、TrkC-相关癌症、RET-相关癌症、c-MET-相关癌症、VEGFR1-相关癌症、VEGFR2-相关癌症、VEGFR3-相关癌症、AXL-相关癌症、SHP2-相关癌症、RAF-相关癌症(例如BRAF-相关癌症)、PI3K-相关癌症、AKT-相关癌症、mTOR-相关癌症、MEK-相关癌症、ERK-相关癌症或其组合)；和(b)向该个体施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物。这些方法的一些实施方案还包括向该个体施用另一种抗癌剂(例如小分子或免疫疗法)。在一些实施方案中，所述个体先前用另一种抗癌治疗进行了治疗，例如，至少部分切除肿瘤或放疗。在一些实施方案中，通过使用管理机构批准的、例如FDA批准的测试或测定法或通过进行本文所述测定法的任一种非限制性实例确定个体患有Ras途径-相关癌症，所述测试或测定法用于鉴定个体或来自个体的活检样品中Ras途径基因(例如SOS1、Ras(例如KRas、HRas和/或NRas)、EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4、NF1、PDGFR-A、PDGFR-B、FGFR1、FGFR2、FGFR3、IGF1R、INSR、ALK、ROS、TrkA、TrkB、TrkC、RET、c-MET、VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3、AXL、SHP2、RAF(例如BRAF)、PI3K、AKT、mTOR、MEK、ERK或其组合)、Ras途径蛋白(例如SOS1、Ras(例如KRas、HRas和/或NRas)、EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4、NF1、PDGFR-A、PDGFR-B、FGFR1、FGFR2、FGFR3、IGF1 R、INSR、ALK、ROS、TrkA、TrkB、TrkC、RET、c-MET、VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3、AXL、SHP2、RAF(例如BRAF)、PI3K、AKT、mTOR、MEK、ERK或其组合)或其中任一种的表达或活性或水平的失调。在一些实施方案中，所述测试或测定法作为试剂盒提供。
还提供了对有需要的个体治疗癌症的方法，该方法包含：(a)检测个体的Ras-相关癌症；和(b)向该个体施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物。这些方法的一些实施方案还包括向该个体施用另一种抗癌剂(例如小分子或免疫疗法)。在一些实施方案中，所述个体先前用另一种抗癌治疗进行了治疗，例如，至少部分切除肿瘤或放疗。在一些实施方案中，通过使用管理机构批准的、例如FDA批准的用于鉴定个体或来自个体的活检样品中Ras基因、Ras蛋白、或其中任一种的表达或活性或水平失调的测试或测定法或通过进行本文所述测定法的任一种非限制性实例确定个体患有Ras-相关癌症。在一些实施方案中，所述测试或测定法作为试剂盒提供。
还提供了对有需要的个体治疗癌症的方法，该方法包含：(a)检测个体的KRas-相关癌症；和(b)向该个体施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物。这些方法的一些实施方案还包括向该个体施用另一种抗癌剂(例如小分子或免疫疗法)。在一些实施方案中，所述个体先前用另一种抗癌治疗进行了治疗，例如，至少部分切除肿瘤或放疗。在一些实施方案中，通过使用管理机构批准的、例如FDA批准的用于鉴定个体或来自个体的活检样品中KRas基因、KRas蛋白、或其中任一种的表达或活性或水平失调的测试或测定法或通过进行本文所述测定法的任一种非限制性实例确定个体患有KRas-相关癌症。在一些实施方案中，所述测试或测定法作为试剂盒提供。
还提供了对有需要的个体治疗癌症的方法，该方法包含：(a)检测个体的HRas-相关癌症；和(b)向该个体施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物。这些方法的一些实施方案还包括向该个体施用另一种抗癌剂(例如小分子或免疫疗法)。在一些实施方案中，所述个体先前用另一种抗癌治疗进行了治疗，例如，至少部分切除肿瘤或放疗。在一些实施方案中，通过使用管理机构批准的、例如FDA批准的用于鉴定个体或来自个体的活检样品中HRas基因、HRas蛋白、或其中任一种的表达或活性或水平失调的测试或测定法或通过进行本文所述测定法的任一种非限制性实例确定个体患有HRas-相关癌症。在一些实施方案中，所述测试或测定法作为试剂盒提供。
还提供了对有需要的个体治疗癌症的方法，该方法包含：(a)检测个体的NRas-相关癌症；和(b)向该个体施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物。这些方法的一些实施方案还包括向该个体施用另一种抗癌剂(例如小分子或免疫疗法)。在一些实施方案中，所述个体先前用另一种抗癌治疗进行了治疗，例如，至少部分切除肿瘤或放疗。在一些实施方案中，通过使用管理机构批准的、例如FDA批准的用于鉴定个体或来自个体的活检样品中NRas基因、NRas蛋白、或其中任一种的表达或活性或水平失调的测试或测定法或通过进行本文所述测定法的任一种非限制性实例确定个体患有NRas-相关癌症。在一些实施方案中，所述测试或测定法作为试剂盒提供。
还提供了对有需要的个体治疗癌症的方法，该方法包含：(a)检测个体的SOS1-相关癌症；和(b)向该个体施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物。这些方法的一些实施方案还包括向该个体施用另一种抗癌剂(例如小分子或免疫疗法)。在一些实施方案中，所述个体先前用另一种抗癌治疗进行了治疗，例如，至少部分切除肿瘤或放疗。在一些实施方案中，通过使用管理机构批准的、例如FDA批准的用于鉴定个体或来自个体的活检样品中SOS1基因、SOS1蛋白、或其中任一种的表达或活性或水平失调的测试或测定法或通过进行本文所述测定法的任一种非限制性实例确定个体患有SOS1-相关癌症。在一些实施方案中，所述测试或测定法作为试剂盒提供。
还提供了对有需要的个体治疗癌症的方法，该方法包含：向个体施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物，所述个体被确定患有与Ras途径基因(例如SOS1、Ras(例如KRas、HRas和/或NRas)、EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4、NF1、PDGFR-A、PDGFR-B、FGFR1、FGFR2、FGFR3、IGF1R、INSR、ALK、ROS、TrkA、TrkB、TrkC、RET、c-MET、VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3、AXL、SHP2、RAF(例如BRAF)、PI3K、AKT、mTOR、MEK、ERK或其组合)、Ras途径蛋白(例如SOS1、Ras(例如KRas、HRas和/或NRas)、EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4、NF1、PDGFR-A、PDGFR-B、FGFR1、FGFR2、FGFR3、IGF1 R、INSR、ALK、ROS、TrkA、TrkB、TrkC、RET、c-MET、VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3、AXL、SHP2、RAF(例如BRAF)、PI3K、AKT、mTOR、MEK、ERK或其组合)或其中任一种的表达或活性或水平的失调相关的癌症。这些方法的一些实施方案还包括向该个体施用另一种抗癌剂(例如小分子或免疫疗法)。在一些实施方案中，所述个体先前用另一种抗癌治疗进行了治疗，例如，至少部分切除肿瘤或放疗。在一些实施方案中，通过使用管理机构批准的、例如FDA批准的用于鉴定个体或来自个体的活检样品中Ras途径基因、Ras途径蛋白或其中任一种的表达或活性或水平失调的测试或测定法或通过进行本文所述测定法的任一种非限制性实例确定个体患有Ras途径-相关癌症(例如SOS1-相关癌症、Ras-相关癌症(例如KRas-相关癌症、HRas-相关癌症和/或NRas-相关癌症)、EGFR-相关癌症、ErbB2-相关癌症、ErbB3-相关癌症、ErbB4-相关癌症、NF1-相关癌症、PDGFR-A-相关癌症、PDGFR-B-相关癌症、FGFR1-相关癌症、FGFR2-相关癌症、FGFR3-相关癌症、IGF1 R-相关癌症、INSR-相关癌症、ALK-相关癌症、ROS-相关癌症、TrkA-相关癌症、TrkB-相关癌症、TrkC-相关癌症、RET-相关癌症、c-MET-相关癌症、VEGFR1-相关癌症、VEGFR2-相关癌症、VEGFR3-相关癌症、AXL-相关癌症、SHP2-相关癌症、RAF-相关癌症(例如BRAF-相关癌症)、PI3K-相关癌症、AKT-相关癌症、mTOR-相关癌症、MEK-相关癌症、ERK-相关癌症或其组合)。在一些实施方案中，所述测试或测定法作为试剂盒提供。
还提供了对有需要的个体治疗癌症的方法，该方法包含：向个体施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物，所述个体被确定为患有与Ras基因、Ras蛋白或其中任一种的表达或活性或水平失调相关的癌症。这些方法的一些实施方案还包括向该个体施用另一种抗癌剂(例如小分子或免疫疗法)。在一些实施方案中，所述个体先前用另一种抗癌治疗进行了治疗，例如，至少部分切除肿瘤或放疗。在一些实施方案中，通过使用管理机构批准的、例如FDA批准的用于鉴定个体或来自个体的活检样品中Ras基因、Ras蛋白、或其中任一种的表达或活性或水平失调的测试或测定法或通过进行本文所述测定法的任一种非限制性实例确定个体患有Ras-相关癌症。在一些实施方案中，所述测试或测定法作为试剂盒提供。
还提供了对有需要的个体治疗癌症的方法，该方法包含：向个体施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物，所述个体被确定为患有与KRas基因、KRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平失调相关的癌症。这些方法的一些实施方案还包括向该个体施用另一种抗癌剂(例如小分子或免疫疗法)。在一些实施方案中，所述个体先前用另一种抗癌治疗进行了治疗，例如，至少部分切除肿瘤或放疗。在一些实施方案中，通过使用管理机构批准的、例如FDA批准的用于鉴定个体或来自个体的活检样品中KRas基因、KRas蛋白、或其中任一种的表达或活性或水平失调的测试或测定法或通过进行本文所述测定法的任一种非限制性实例确定个体患有KRas-相关癌症。在一些实施方案中，所述测试或测定法作为试剂盒提供。
还提供了对有需要的个体治疗癌症的方法，该方法包含：向个体施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物，所述个体被确定患有与HRas基因、HRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平失调相关的癌症。这些方法的一些实施方案还包括向该个体施用另一种抗癌剂(例如小分子或免疫疗法)。在一些实施方案中，所述个体先前用另一种抗癌治疗进行了治疗，例如，至少部分切除肿瘤或放疗。在一些实施方案中，通过使用管理机构批准的、例如FDA批准的用于鉴定个体或来自个体的活检样品中HRas基因、HRas蛋白、或其中任一种的表达或活性或水平失调的测试或测定法或通过进行本文所述测定法的任一种非限制性实例确定个体患有HRas-相关癌症。在一些实施方案中，所述测试或测定法作为试剂盒提供。
还提供了对有需要的个体治疗癌症的方法，该方法包含：向个体施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物，所述个体被确定为患有与NRas基因、NRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平失调相关的癌症。这些方法的一些实施方案还包括向该个体施用另一种抗癌剂(例如小分子或免疫疗法)。在一些实施方案中，所述个体先前用另一种抗癌治疗进行了治疗，例如，至少部分切除肿瘤或放疗。在一些实施方案中，通过使用管理机构批准的、例如FDA批准的用于鉴定个体或来自个体的活检样品中NRas基因、NRas蛋白、或其中任一种的表达或活性或水平失调的测试或测定法或通过进行本文所述测定法的任一种非限制性实例确定个体患有NRas-相关癌症。在一些实施方案中，所述测试或测定法作为试剂盒提供。
还提供了对有需要的个体治疗癌症的方法，该方法包含：向个体施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物，所述个体被确定为患有与SOS1基因、SOS1蛋白或其中任一种的表达或活性或水平失调相关的癌症。这些方法的一些实施方案还包括向该个体施用另一种抗癌剂(例如小分子或免疫疗法)。在一些实施方案中，所述个体先前用另一种抗癌治疗进行了治疗，例如，至少部分切除肿瘤或放疗。在一些实施方案中，通过使用管理机构批准的、例如FDA批准的用于鉴定个体或来自个体的活检样品中SOS1基因、SOS1蛋白、或其中任一种的表达或活性或水平失调的测试或测定法或通过进行本文所述测定法的任一种非限制性实例确定个体患有SOS1-相关癌症。在一些实施方案中，所述测试或测定法作为试剂盒提供。
还提供了治疗个体的方法，包括对得自个体的样品进行测定，以确定该个体是否患有Ras途径基因(例如SOS1、Ras(例如KRas、HRas和/或NRas)、EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4、NF1、PDGFR-A、PDGFR-B、FGFR1、FGFR2、FGFR3、IGF1 R、INSR、ALK、ROS、TrkA、TrkB、TrkC、RET、c-MET、VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3、AXL、SHP2、RAF(例如BRAF)、PI3K、AKT、mTOR、MEK、ERK或其组合)、Ras途径蛋白(例如SOS1、Ras(例如KRas、HRas和/或NRas)、EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4、NF1、PDGFR-A、PDGFR-B、FGFR1、FGFR2、FGFR3、IGF1 R、INSR、ALK、ROS、TrkA、TrkB、TrkC、RET、c-MET、VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3、AXL、SHP2、RAF(例如BRAF)、PI3K、AKT、mTOR、MEK、ERK或其组合)、或其中任一种的表达或活性或水平的失调，并且向确定为患有Ras途径基因、Ras途径蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调的个体施用(例如特异性地或选择性地施用)有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物。这些方法的一些实施方案还包括向该个体施用另一种抗癌剂(例如小分子或免疫疗法)。在这些方法的一些实施方案中，所述个体先前用另一种抗癌治疗进行了治疗，例如至少部分切除肿瘤或放疗。在一些实施方案中，所述个体疑似患有Ras途径-相关癌症(例如SOS1-相关癌症、Ras-相关癌症(例如KRas-相关癌症、HRas-相关癌症和/或NRas-相关癌症)、EGFR-相关癌症、ErbB2-相关癌症、ErbB3-相关癌症、ErbB4-相关癌症、NF1-相关癌症、PDGFR-A-相关癌症、PDGFR-B-相关癌症、FGFR1-相关癌症、FGFR2-相关癌症、FGFR3-相关癌症、IGF1 R-相关癌症、INSR-相关癌症、ALK-相关癌症、ROS-相关癌症、TrkA-相关癌症、TrkB-相关癌症、TrkC-相关癌症、RET-相关癌症、c-MET-相关癌症、VEGFR1-相关癌症、VEGFR2-相关癌症、VEGFR3-相关癌症、AXL-相关癌症、SHP2-相关癌症、RAF-相关癌症(例如BRAF-相关癌症)、PI3K-相关癌症、AKT-相关癌症、mTOR-相关癌症、MEK-相关癌症、ERK-相关癌症或其组合)的个体、呈现一种或多种Ras-相关癌症的症状的个体、或具有发生Ras-相关癌症的升高风险的个体。在一些实施方案中，所述测定法利用二代测序(next generation sequencing)、焦磷酸测序、免疫组织化学或分裂FISH分析。在一些实施方案中，所述测定法是管理机构批准的测定法，例如FDA批准的试剂盒。在一些实施方案中，所述测定法为液体活组织检查。本文描述了可以在这些方法中使用的另外的、非限制性测定法。另外的测定法也是本领域已知的。
还提供了治疗个体的方法，包括对得自个体的样品进行测定，以便确定该个体是否患有Ras基因、Ras蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调，并且向确定为患有Ras基因、Ras蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调的个体施用(例如特异性地或选择性地施用)有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物。这些方法的一些实施方案还包括向该个体施用另一种抗癌剂(例如小分子或免疫疗法)。在这些方法的一些实施方案中，所述个体先前用另一种抗癌治疗进行了治疗，例如至少部分切除肿瘤或放疗。在一些实施方案中，所述个体为疑似患有Ras-相关癌症的个体、呈现一种或多种Ras-相关癌症的症状的个体、或具有发生Ras-相关癌症的升高风险的个体。在一些实施方案中，所述测定法利用二代测序、焦磷酸测序、免疫组织化学或分裂FISH分析。在一些实施方案中，所述测定法是管理机构批准的测定法，例如FDA批准的试剂盒。在一些实施方案中，所述测定法为液体活组织检查。本文描述了可以在这些方法中使用的另外的非限制性测定法。另外的测定法也是本领域已知的。
还提供了治疗个体的方法，包括对得自个体的样品进行测定，以便确定该个体是否患有KRas基因、KRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调，并且向确定为患有KRas基因、KRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调的个体施用(例如特异性地或选择性地施用)有效量的如本文所定义的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物。这些方法的一些实施方案还包括向该个体施用另一种抗癌剂(例如小分子或免疫疗法)。在这些方法的一些实施方案中，所述个体先前用另一种抗癌治疗进行了治疗，例如至少部分切除肿瘤或放疗。在一些实施方案中，所述个体为疑似患有KRas-相关癌症的个体、呈现一种或多种KRas-相关癌症的症状的个体、或具有发生KRas-相关癌症的升高风险的个体。在一些实施方案中，所述测定法利用二代测序、焦磷酸测序、免疫组织化学或分裂FISH分析。在一些实施方案中，所述测定法是管理机构批准的测定法，例如FDA批准的试剂盒。在一些实施方案中，所述测定法为液体活组织检查。本文描述了可以在这些方法中使用的另外的非限制性测定法。另外的测定法也是本领域已知的。
还提供了治疗个体的方法，包括对得自个体的样品进行测定，以便确定该个体是否患有HRas基因、HRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调，并且向确定为患有HRas基因、HRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调的个体施用(例如特异性地或选择性地施用)有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物。这些方法的一些实施方案还包括向该个体施用另一种抗癌剂(例如小分子或免疫疗法)。在这些方法的一些实施方案中，所述个体先前用另一种抗癌治疗进行了治疗，例如至少部分切除肿瘤或放疗。在一些实施方案中，所述个体为疑似患有HRas-相关癌症的个体、呈现HRas-相关癌症的一种或多种症状的个体、或具有发生HRas-相关癌症的升高风险的个体。在一些实施方案中，所述测定法利用二代测序、焦磷酸测序、免疫组织化学或分裂FISH分析。在一些实施方案中，所述测定法是管理机构批准的测定法，例如FDA批准的试剂盒。在一些实施方案中，所述测定法为液体活组织检查。本文描述了可以在这些方法中使用的另外的非限制性测定法。另外的测定法也是本领域已知的。
还提供了治疗个体的方法，包括对得自个体的样品进行测定，以便确定该个体是否患有NRas基因、NRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调，并且向确定为患有NRas基因、NRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调的个体施用(例如特异性地或选择性地施用)有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物。这些方法的一些实施方案还包括向该个体施用另一种抗癌剂(例如小分子或免疫疗法)。在这些方法的一些实施方案中，所述个体先前用另一种抗癌治疗进行了治疗，例如至少部分切除肿瘤或放疗。在一些实施方案中，所述个体为疑似患有NRas-相关癌症的个体、呈现NRas-相关癌症的一种或多种症状的个体、或具有发生NRas-相关癌症的升高风险的个体。在一些实施方案中，所述测定法利用二代测序、焦磷酸测序、免疫组织化学或分裂FISH分析。在一些实施方案中，所述测定法是管理机构批准的测定法，例如FDA批准的试剂盒。在一些实施方案中，所述测定法为液体活组织检查。本文描述了可以在这些方法中使用的另外的非限制性测定法。另外的测定法也是本领域已知的。
还提供了治疗个体的方法，包括对得自个体的样品进行测定，以便确定该个体是否患有SOS1基因、SOS1蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调，并且向确定为患有SOS1基因、SOS1蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调的个体施用(例如特异性地或选择性地施用)有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物。这些方法的一些实施方案还包括向该个体施用另一种抗癌剂(例如小分子或免疫疗法)。在这些方法的一些实施方案中，所述个体先前用另一种抗癌治疗进行了治疗，例如至少部分切除肿瘤或放疗。在一些实施方案中，所述个体为疑似患有SOS1-相关癌症的个体、呈现一种或多种SOS1-相关癌症的症状的个体、或具有发生SOS1-相关癌症的升高风险的个体。在一些实施方案中，所述测定法利用二代测序、焦磷酸测序、免疫组织化学或分裂FISH分析。在一些实施方案中，所述测定法是管理机构批准的测定法，例如FDA批准的试剂盒。在一些实施方案中，所述测定法为液体活组织检查。本文描述了可以在这些方法中使用的另外的非限制性测定法。另外的测定法也是本领域已知的。
还提供了如本文所定义的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物，用于治疗个体中Ras途径-相关癌症(例如SOS1-相关癌症、Ras-相关癌症(例如KRas-相关癌症、HRas-相关癌症和/或NRas-相关癌症)、EGFR-相关癌症、ErbB2-相关癌症、ErbB3-相关癌症、ErbB4-相关癌症、NF1-相关癌症、PDGFR-A-相关癌症、PDGFR-B-相关癌症、FGFR1-相关癌症、FGFR2-相关癌症、FGFR3-相关癌症、IGF1 R-相关癌症、INSR-相关癌症、ALK-相关癌症、ROS-相关癌症、TrkA-相关癌症、TrkB-相关癌症、TrkC-相关癌症、RET-相关癌症、c-MET-相关癌症、VEGFR1-相关癌症、VEGFR2-相关癌症、VEGFR3-相关癌症、AXL-相关癌症、SHP2-相关癌症、RAF-相关癌症(例如BRAF-相关癌症)、PI3K-相关癌症、AKT-相关癌症、mTOR-相关癌症、MEK-相关癌症、ERK-相关癌症或其组合)，通过对得自个体的样品进行测定(例如体外测定)的步骤，以便确定该个体是否患有Ras途径蛋白(例如SOS1、Ras(例如KRas、HRas和/或NRas)、EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4、NF1、PDGFR-A、PDGFR-B、FGFR1、FGFR2、FGFR3、IGF1R、INSR、ALK、ROS、TrkA、TrkB、TrkC、RET、c-MET、VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3、AXL、SHP2、RAF(例如BRAF)、PI3K、AKT、mTOR、MEK、ERK或其组合)、Ras途径蛋白(例如SOS1、Ras(例如KRas、HRas和/或NRas)、EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4、NF1、PDGFR-A、PDGFR-B、FGFR1、FGFR2、FGFR3、IGF1R、INSR、ALK、ROS、TrkA、TrkB、TrkC、RET、c-MET、VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3、AXL、SHP2、RAF(例如BRAF)、PI3K、AKT、mTOR、MEK、ERK或其组合)或其中任一种的表达或活性或水平的失调，将所述个体鉴定或诊断为患有Ras途径-相关癌症，其中存在Ras途径基因、Ras途径蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调，鉴定该个体患有Ras途径-相关癌症。还提供了式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗个体的Ras途径-相关癌症的药物中的用途，通过对得自个体的样品进行测定(例如体外测定)的步骤，以便确定该个体是否患有Ras途径基因、Ras途径蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调，将所述个体鉴定或诊断为患有Ras途径-相关癌症，其中存在Ras途径基因、Ras途径蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调，鉴定该个体患有Ras途径-相关癌症。本文所述的任何方法或用途的一些实施方案还包括在个体的临床记录(例如，计算机可读介质)中记录，通过进行测定，所述个体被确定患有Ras基因、Ras蛋白、或其中任一种的表达或活性或水平的失调，应当施用式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物。在一些实施方案中，所述测定法利用二代测序、焦磷酸测序、免疫组织化学或分裂FISH分析。在一些实施方案中，所述测定法是管理机构批准的测定法，例如FDA批准的试剂盒。在一些实施方案中，所述测定法是液体活组织检查。
还提供了式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物，用于治疗个体中Ras-相关癌症，通过对得自个体的样品进行测定(例如体外测定)的步骤，以便确定该个体是否患有Ras基因、Ras蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调，将所述个体鉴定或诊断为患有Ras-相关癌症，其中存在Ras基因、Ras蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调，鉴定该个体患有Ras-相关癌症。还提供了式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗个体的Ras-相关癌症的药物中的用途，通过对得自个体的样品进行测定的步骤，以便确定该个体是否患有Ras基因、Ras蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调，将所述个体鉴定或诊断为患有Ras-相关癌症，其中存在Ras基因、Ras蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调，鉴定该个体患有Ras-相关癌症。本文所述的任一方法或用途的一些实施方案还包括在个体的临床记录(例如，计算机可读介质)中记录，通过进行测定，将所述个体确定为患有Ras基因、Ras蛋白、或其中任一种的表达或活性或水平的失调，应当施用式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物。在一些实施方案中，所述测定法利用二代测序、焦磷酸测序、免疫组织化学或分裂FISH分析。在一些实施方案中，所述测定法是管理机构批准的测定法，例如FDA批准的试剂盒。在一些实施方案中，所述测定法是液体活组织检查。
还提供了式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物，用于治疗个体的KRas-相关癌症，通过对得自个体的样品进行测定(例如体外测定)的步骤，以便确定该个体是否患有KRas基因、KRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调，将所述个体鉴定或诊断为患有KRas-相关癌症，其中存在KRas基因、KRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调，鉴定该个体患有KRas-相关癌症。还提供了式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗个体的KRas-相关癌症的药物中的用途，通过对得自个体的样品进行测定的步骤，以便确定该个体是否患有KRas基因、KRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调，将所述个体鉴定或诊断为患有KRas-相关癌症，其中存在KRas基因、KRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调，鉴定该个体患有KRas-相关癌症。本文所述的任一方法或用途的一些实施方案还包括在个体的临床记录(例如，计算机可读介质)中记录，通过进行测定，将所述个体确定为患有KRas基因、KRas蛋白、或其中任一种的表达或活性或水平的失调，应当施用式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物。在一些实施方案中，所述测定法利用二代测序、焦磷酸测序、免疫组织化学或分裂FISH分析。在一些实施方案中，所述测定法是管理机构批准的测定法，例如FDA批准的试剂盒。在一些实施方案中，所述测定法是液体活组织检查。
还提供了式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物，用于治疗个体的HRas-相关癌症，通过对得自个体的样品进行测定(例如体外测定)的步骤，以便确定该个体是否患有HRas基因、HRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调，将所述个体鉴定或诊断为患有HRas-相关癌症，其中存在HRas基因、HRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调，鉴定该个体患有HRas-相关癌症。还提供了如本文所定义的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗个体的HRas-相关癌症的药物中的用途，通过对得自个体的样品进行测定的步骤，以便确定该个体是否患有HRas基因、HRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调，将所述个体鉴定或诊断为患有HRas-相关癌症，其中存在HRas基因、HRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调，鉴定该个体患有HRas-相关癌症。本文所述的任一方法或用途的一些实施方案还包括在个体的临床记录(例如，计算机可读介质)中记录，通过进行测定，将所述个体确定为患有HRas基因、HRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调，应当施用式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物。在一些实施方案中，所述测定法利用二代测序、焦磷酸测序、免疫组织化学或分裂FISH分析。在一些实施方案中，所述测定法是管理机构批准的测定法，例如FDA批准的试剂盒。在一些实施方案中，所述测定法是液体活组织检查。
还提供了式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物，用于治疗个体的NRas-相关癌症，通过对得自个体的样品进行测定(例如体外测定)的步骤，以便确定该个体是否患有NRas基因、NRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调，将所述个体鉴定或诊断为患有NRas-相关癌症，其中存在NRas基因、NRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调，鉴定该个体患有NRas-相关癌症。还提供了如本文所定义的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗个体的NRas-相关癌症的药物中的用途，通过对得自个体的样品进行测定的步骤，以便确定该个体是否患有NRas基因、NRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调，将所述个体鉴定或诊断为患有NRas-相关癌症，其中存在NRas基因、NRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调，鉴定该个体患有NRas-相关癌症。本文所述的任一方法或用途的一些实施方案还包括在个体的临床记录(例如，计算机可读介质)中记录，通过进行测定，将所述个体确定为患有NRas基因、NRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调，应当施用式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物。在一些实施方案中，所述测定法利用二代测序、焦磷酸测序、免疫组织化学或分裂FISH分析。在一些实施方案中，所述测定法是管理机构批准的测定法，例如FDA批准的试剂盒。在一些实施方案中，所述测定法是液体活组织检查。
还提供了式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物，用于治疗个体的SOS1-相关癌症，通过对得自个体的样品进行测定(例如体外测定)的步骤，以便确定该个体是否患有SOS1基因、SOS1蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调，将所述个体鉴定或诊断为患有SOS1-相关癌症，其中存在SOS1基因、SOS1蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调，鉴定该个体患有SOS1-相关癌症。还提供了式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗个体的SOS1-相关癌症的药物中的用途，通过对得自个体的样品进行测定的步骤，以便确定该个体是否患有SOS1基因、SOS1蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调，将所述个体鉴定或诊断为患有SOS1-相关癌症，其中存在SOS1基因、SOS1蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调，鉴定该个体患有SOS1-相关癌症。本文所述的任一方法或用途的一些实施方案还包括在个体的临床记录(例如，计算机可读介质)中记录，通过进行测定，将所述个体确定为患有SOS1基因、SOS1蛋白、或其中任一种的表达或活性或水平的失调，应当施用式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物。在一些实施方案中，所述测定法利用二代测序、焦磷酸测序、免疫组织化学或分裂FISH分析。在一些实施方案中，所述测定法是管理机构批准的测定法，例如FDA批准的试剂盒。在一些实施方案中，所述测定法是液体活组织检查。
在本文所述的任一方法或用途的一些实施方案中，所述个体已被鉴定或诊断为患有具有Ras途径基因、Ras途径蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调的癌症。在本文所述的任一方法或用途的一些实施方案中，所述个体患有对Ras途径基因(例如SOS1、Ras(例如KRas、HRas和/或NRas)、EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4、NF1、PDGFR-A、PDGFR-B、FGFR1、FGFR2、FGFR3、IGF1R、INSR、ALK、ROS、TrkA、TrkB、TrkC、RET、c-MET、VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3、AXL、SHP2、RAF(例如BRAF)、PI3K、AKT、mTOR、MEK、ERK或其组合)、Ras途径蛋白(例如SOS1、Ras(例如KRas、HRas和/或NRas)、EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4、NF1、PDGFR-A、PDGFR-B、FGFR1、FGFR2、FGFR3、IGF1 R、INSR、ALK、ROS、TrkA、TrkB、TrkC、RET、c-MET、VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3、AXL、SHP2、RAF(例如BRAF)、PI3K、AKT、mTOR、MEK、ERK或其组合)或其中任一种的表达或活性或水平的失调为阳性的肿瘤。在本文所述的任一方法或用途的一些实施方案中，所述个体可以为患有对Ras途径基因、Ras途径蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调为阳性的肿瘤的个体。在本文所述的任一方法或用途的一些实施方案中，所述个体可以为其肿瘤具有对Ras途径基因、Ras途径蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调为阳性的个体。在本文所述的任一方法或用途的一些实施方案中，所述个体疑似患有Ras途径-相关癌症(例如SOS1-相关癌症、Ras-相关癌症(例如KRas-相关癌症、HRas-相关癌症和/或NRas-相关癌症)、EGFR-相关癌症、ErbB2-相关癌症、ErbB3-相关癌症、ErbB4-相关癌症、NF1-相关癌症、PDGFR-A-相关癌症、PDGFR-B-相关癌症、FGFR1-相关癌症、FGFR2-相关癌症、FGFR3-相关癌症、IGF1 R-相关癌症、INSR-相关癌症、ALK-相关癌症、ROS-相关癌症、TrkA-相关癌症、TrkB-相关癌症、TrkC-相关癌症、RET-相关癌症、c-MET-相关癌症、VEGFR1-相关癌症、VEGFR2-相关癌症、VEGFR3-相关癌症、AXL-相关癌症、SHP2-相关癌症、RAF-相关癌症(例如BRAF-相关癌症)、PI3K-相关癌症、AKT-相关癌症、mTOR-相关癌症、MEK-相关癌症、ERK-相关癌症或其组合)。在一些实施方案中，本文提供了用于治疗有治疗需要的个体的Ras途径-相关癌症的方法，该方法包含：a)检测来自该个体的样品中Ras途径基因、Ras途径蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调；和b)施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，Ras途径基因、Ras途径蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调包括一个或多个Ras途径蛋白点突变/插入/缺失。
在本文所述的任一方法或用途的一些实施方案中，所述个体已被鉴定或诊断为患有具有Ras基因、Ras蛋白或其中任一种的表达或活性或水平失调的癌症。在本文所述的任一方法或用途的一些实施方案中，所述个体患有对Ras基因、Ras蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调为阳性的肿瘤。在本文所述的任一方法或用途的一些实施方案中，所述个体可以为患有对Ras基因、Ras蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调为阳性的肿瘤的个体。在本文所述的任一方法或用途的一些实施方案中，所述个体可以为其肿瘤具有对Ras基因、Ras蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调为阳性的个体。在本文所述的任一方法或用途的一些实施方案中，所述个体疑似患有Ras-相关癌症。在一些实施方案中，本文提供了用于治疗有治疗需要的个体的Ras-相关癌症的方法，该方法包含：a)检测来自该个体的样品中Ras基因、Ras蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调；和b)施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，Ras基因、Ras蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调包括一个或多个Ras蛋白点突变/插入/缺失。
在本文所述的任一方法或用途的一些实施方案中，所述个体已被鉴定或诊断为患有具有KRas基因、KRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调的癌症。在本文所述的任一方法或用途的一些实施方案中，所述个体患有对KRas基因、KRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调为阳性的肿瘤。在本文所述的任一方法或用途的一些实施方案中，所述个体可以为患有对KRas基因、KRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调为阳性的肿瘤的个体。在本文所述的任一方法或用途的一些实施方案中，所述个体可以为其肿瘤具有对KRas基因、KRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调为阳性的个体。在本文所述的任一方法或用途的一些实施方案中，所述个体疑似患有KRas-相关癌症。在一些实施方案中，本文提供了用于对需要治疗的个体治疗KRas-相关癌症的方法，该方法包含a)检测来自个体的样品中KRas基因、KRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调；和b)施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，KRas基因、KRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平失调包括一个或多个KRas蛋白点突变/插入/缺失。KRas蛋白点突变/插入/缺失的非限制性实例如表1所示。
在本文所述的任一方法或用途的一些实施方案中，所述个体已被鉴定或诊断为患有具有HRas基因、HRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调的癌症。在本文所述的任一方法或用途的一些实施方案中，所述个体患有对HRas基因、HRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调为阳性的肿瘤。在本文所述的任一方法或用途的一些实施方案中，所述个体可以为患有对HRas基因、HRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调为阳性的肿瘤的个体。在本文所述的任一方法或用途的一些实施方案中，所述个体可以为其肿瘤具有对HRas基因、HRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调为阳性的个体。在本文所述的任一方法或用途的一些实施方案中，所述个体疑似患有HRas-相关癌症。在一些实施方案中，本文提供了用于对需要治疗的个体治疗HRas-相关癌症的方法，该方法包含a)检测来自个体的样品中HRas基因、HRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调；和b)施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，HRas基因、HRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平失调包括一个或多个HRas蛋白点突变/插入/缺失。HRas蛋白点突变/插入/缺失的非限制性实例如表2所示。
在本文所述的任一方法或用途的一些实施方案中，所述个体已被鉴定或诊断为患有具有NRas基因、NRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调的癌症。在本文所述的任一方法或用途的一些实施方案中，所述个体患有对NRas基因、NRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调为阳性的肿瘤。在本文所述的任一方法或用途的一些实施方案中，所述个体可以为患有对NRas基因、NRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调为阳性的肿瘤的个体。在本文所述的任一方法或用途的一些实施方案中，所述个体可以为其肿瘤具有对NRas基因、NRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调为阳性的个体。在本文所述的任一方法或用途的一些实施方案中，所述个体疑似患有NRas-相关癌症。在一些实施方案中，本文提供了用于治疗有治疗需要的个体的NRas-相关癌症的方法，该方法包含a)检测来自该个体的样品中NRas基因、NRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调；和b)施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，NRas基因、NRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平失调包括一个或多个NRas蛋白点突变/插入/缺失。NRas蛋白点突变/插入/缺失的非限制性实例如表3所示。
在本文所述的任一方法或用途的一些实施方案中，所述个体已被鉴定或诊断为患有具有SOS1基因、SOS1蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调的癌症。在本文所述的任一方法或用途的一些实施方案中，所述个体患有对SOS1基因、SOS1蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调为阳性的肿瘤。在本文所述的任一方法或用途的一些实施方案中，所述个体可以为患有对SOS1基因、SOS1蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调为阳性的肿瘤的个体。在本文所述的任一方法或用途的一些实施方案中，所述个体可以为其肿瘤具有对SOS1基因、SOS1蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调为阳性的个体。在本文所述的任一方法或用途的一些实施方案中，所述个体疑似患有SOS1-相关癌症。在一些实施方案中，本文提供了用于对有治疗需要的个体治疗SOS1-相关癌症的方法，该方法包含a)检测来自个体的样品中SOS1基因、SOS1蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调；和b)施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，SOS1基因、SOS1蛋白或其中任一种的表达或活性或水平失调包括一个或多个SOS1蛋白点突变/插入/缺失。SOS1蛋白点突变/插入/缺失的非限制性实例如表4所示。
在一些实施方案中，具有Ras途径基因(例如SOS1、Ras(例如KRas、HRas和/或NRas)、EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4、NF1、PDGFR-A、PDGFR-B、FGFR1、FGFR2、FGFR3、IGF1 R、INSR、ALK、ROS、TrkA、TrkB、TrkC、RET、c-MET、VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3、AXL、SHP2、RAF(例如BRAF)、PI3K、AKT、mTOR、MEK、ERK或其组合)、Ras途径蛋白(例如SOS1、Ras(例如KRas、HRas和/或NRas)、EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4、NF1、PDGFR-A、PDGFR-B、FGFR1、FGFR2、FGFR3、IGF1R、INSR、ALK、ROS、TrkA、TrkB、TrkC、RET、c-MET、VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3、AXL、SHP2、RAF(例如BRAF)、PI3K、AKT、mTOR、MEK、ERK或其组合)或其中任一种的表达或活性或水平的失调的癌症使用管理机构批准的、例如FDA批准的测定法或试剂盒所确定。在一些实施方案中，具有Ras途径基因、Ras途径蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调的肿瘤是使用管理机构批准的、例如FDA批准的测定法或试剂盒所确定的。
在一些实施方案中，具有Ras基因、Ras蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调的癌症使用是管理机构批准的、例如FDA批准的测定法或试剂盒所确定的。在一些实施方案中，具有Ras基因、Ras蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调的肿瘤是使用管理机构批准的、例如FDA批准的测定法或试剂盒所确定的。
在一些实施方案中，具有KRas基因、KRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调的癌症是使用管理机构批准的、例如FDA批准的测定法或试剂盒所确定的。在一些实施方案中，具有KRas基因、KRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调的肿瘤是使用管理机构批准的、例如FDA批准的测定法或试剂盒所确定的。
在一些实施方案中，具有HRas基因、HRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调的癌症是使用管理机构批准的、例如FDA批准的测定法或试剂盒所确定的。在一些实施方案中，具有HRas基因、HRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调的肿瘤是使用管理机构批准的、例如FDA批准的测定法或试剂盒所确定的。
在一些实施方案中，具有NRas基因、NRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调的癌症是使用管理机构批准的、例如FDA批准的测定法或试剂盒所确定的。在一些实施方案中，具有NRas基因、NRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调的肿瘤是使用管理机构批准的、例如FDA批准的测定法或试剂盒所确定的。
在一些实施方案中，具有SOS1基因、SOS1蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调的癌症是使用管理机构批准的、例如FDA批准的测定法或试剂盒所确定的。在一些实施方案中，具有SOS1基因、SOS1蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调的肿瘤是使用管理机构批准的、例如FDA批准的测定法或试剂盒所确定的。
在本文所述的任一方法或用途的一些实施方案中，所述个体具有指示该个体具有Ras途径基因(例如SOS1、Ras(例如KRas、HRas和/或NRas)、EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4、NF1、PDGFR-A、PDGFR-B、FGFR1、FGFR2、FGFR3、IGF1 R、INSR、ALK、ROS、TrkA、TrkB、TrkC、RET、c-MET、VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3、AXL、SHP2、RAF(例如BRAF)、PI3K、AKT、mTOR、MEK、ERK或其组合)、Ras途径蛋白(例如SOS1、Ras(例如KRas、HRas和/或NRas)、EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4、NF1、PDGFR-A、PDGFR-B、FGFR1、FGFR2、FGFR3、IGF1 R、INSR、ALK、ROS、TrkA、TrkB、TrkC、RET、c-MET、VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3、AXL、SHP2、RAF(例如BRAF)、PI3K、AKT、mTOR、MEK、ERK或其组合)或其中任一种的表达或活性或水平的失调的肿瘤的临床记录。还提供了治疗个体的方法，包括向个体施用有效量的(I)的化合物或其药学上可接受的盐，所述个体具有指示该个体具有Ras途径基因、Ras途径蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调的临床记录。
在本文所述的任一方法或用途的一些实施方案中，所述个体具有临床记录，其指示该个体具有Ras基因、Ras蛋白或其中任一种的表达或活性或水平失调的肿瘤。还提供了治疗个体的方法，包括向个体施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，所述个体具有指示该受试者个体具有Ras基因、Ras蛋白或其中任一种的表达或活性或水平失调的临床记录。
在本文所述的任一方法或用途的一些实施方案中，所述个体具有临床记录，其指示该个体具有KRas基因、KRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平失调的肿瘤。还提供了治疗个体的方法，包括向个体施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，所述个体具有指示该个体具有KRas基因、KRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平失调的临床记录。
在本文所述的任一方法或用途的一些实施方案中，所述个体具有临床记录，其指示该个体具有HRas基因、HRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平失调的肿瘤。还提供了治疗个体的方法，包括向个体施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，所述个体具有指示该个体具有HRas基因、HRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平失调的临床记录。
在本文所述的任一方法或用途的一些实施方案中，所述个体具有临床记录，其指示该个体具有NRas基因、NRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平失调的肿瘤。还提供了治疗个体的方法，包括向个体施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，所述个体具有指示该个体具有NRas基因、NRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平失调的临床记录。
在本文所述的任一方法或用途的一些实施方案中，所述个体具有临床记录，其指示所述个体患有SOS1基因、SOS1蛋白或其中任一种的表达或活性或水平失调的肿瘤。还提供了治疗个体的方法，包括向个体施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，所述个体具有指示该个体患有SOS1基因、SOS1蛋白或其中任一种的表达或活性或水平失调的临床记录。
在一些实施方案中，本文提供的方法包括对得自个体的样品进行测定，以便确定该个体是否患有Ras途径基因(例如SOS1、Ras(例如KRas、HRas和/或NRas)、EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4、NF1、PDGFR-A、PDGFR-B、FGFR1、FGFR2、FGFR3、IGF1 R、INSR、ALK、ROS、TrkA、TrkB、TrkC、RET、c-MET、VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3、AXL、SHP2、RAF(例如BRAF)、PI3K、AKT、mTOR、MEK、ERK或其组合)、Ras途径蛋白(例如SOS1、Ras(例如KRas、HRas和/或NRas)、EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4、NF1、PDGFR-A、PDGFR-B、FGFR1、FGFR2、FGFR3、IGF1 R、INSR、ALK、ROS、TrkA、TrkB、TrkC、RET、c-MET、VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3、AXL、SHP2、RAF(例如BRAF)、PI3K、AKT、mTOR、MEK、ERK或其组合)或其中任一种的表达或水平的失调。在一些这样的实施方案中，所述方法还包括向被确定患有Ras途径基因、Ras途径蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调的个体施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，该方法包括通过对得自个体的样品进行测定来确定个体具有Ras途径基因、Ras途径蛋白、或其中任一种的表达或水平的失调。在这样的实施方案中，该方法还包括向个体施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，本文提供的方法包括对得自个体的样品进行测定，以便确定该个体是否具有Ras基因、Ras蛋白、或其中任一种的表达或水平的失调。在一些这样的实施方案中，所述方法还包括向被确定患有Ras基因、Ras蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调的个体施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，所述方法包括通过对得自个体的样品进行测定来确定个体具有Ras基因、Ras蛋白、或其中任一种的表达或水平的失调。在这样的实施方案中，所述方法还包括向个体施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，本文提供的方法包括对得自个体的样品进行测定，以变确定该个体是否具有KRas基因、KRas蛋白或其中任一种的表达或水平的失调。在一些这样的实施方案中，所述方法还包括向被确定患有KRas基因、KRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调的个体施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，所述方法包括通过对得自个体的样品进行测定来确定个体具有KRas基因、KRas蛋白或其中任一种的表达或水平的失调。在这样的实施方案中，所述方法还包括向个体施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，本文提供的方法包括对得自个体的样品进行测定，以便确定该个体是否具有HRas基因、HRas蛋白或其中任一种的表达或水平的失调。在一些这样的实施方案中，所述方法还包括向被确定患有HRas基因、HRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调的个体施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，所述方法包括通过对得自个体的样品进行测定来确定该个体具有HRas基因、HRas蛋白或其中任一种的表达或水平的失调。在这样的实施方案中，所述方法还包括向个体施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，本文提供的方法包括对得自个体的样品进行测定，以便确定该个体是否具有NRas基因、NRas蛋白或其中任一种的表达或水平的失调。在一些这样的实施方案中，所述方法还包括向被确定患有NRas基因、NRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调的个体施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，所述方法包括通过对得自个体的样品进行测定来确定个体具有NRas基因、NRas蛋白或其中任一种的表达或水平调节的失调。在这样的实施方案中，所述方法还包括向个体施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，本文提供的方法包括对得自个体的样品进行测定，以便确定该个体是否具有SOS1基因、SOS1蛋白或其中任一种的表达或水平失调。在一些这样的实施方案中，所述方法还包括向被确定患有SOS1基因、SOS1蛋白或其中任一种的表达或活性或水平失调的个体施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，该方法包括通过对得自个体的样品进行测定来确定个体具有SOS1基因、SOS1蛋白或其中任一种的表达或水平的失调。在这样的实施方案中，所述方法还包括向个体施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
在本文所述的任一方法或用途的一些实施方案中，所述癌症(例如Ras途径-相关癌症(例如SOS1-相关癌症、Ras-相关癌症(例如KRas-相关癌症、HRas-相关癌症和/或NRas-相关癌症)、EGFR-相关癌症、ErbB2-相关癌症、ErbB3-相关癌症、ErbB4-相关癌症、NF1-相关癌症、PDGFR-A-相关癌症、PDGFR-B-相关癌症、FGFR1-相关癌症、FGFR2-相关癌症、FGFR3-相关癌症、IGF1 R-相关癌症、INSR-相关癌症、ALK-相关癌症、ROS-相关癌症、TrkA-相关癌症、TrkB-相关癌症、TrkC-相关癌症、RET-相关癌症、c-MET-相关癌症、VEGFR1-相关癌症、VEGFR2-相关癌症、VEGFR3-相关癌症、AXL-相关癌症、SHP2-相关癌症、RAF-相关癌症(例如BRAF-相关癌症)、PI3K-相关癌症、AKT-相关癌症、mTOR-相关癌症、MEK-相关癌症、ERK-相关癌症或其组合))为血液癌症。血液癌症的实例(例如为Ras途径-相关癌症的血液癌症)包括，例如，白血病(例如急性骨髓性白血病、急性淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、慢性髓性白血病、特异性幼年型粒单核细胞白血病(juvenile myelomonocyticleukemia,JMML)和毛细胞白血病)和淋巴瘤(例如，非霍奇金淋巴瘤、霍奇金病皮肤T细胞淋巴瘤和伯基特淋巴瘤)。
在本文所述的任一方法或用途的一些实施方案中，所述癌症(例如Ras途径-相关癌症(例如SOS1-相关癌症、Ras-相关癌症(例如KRas-相关癌症、HRas-相关癌症和/或NRas-相关癌症)、EGFR-相关癌症、ErbB2-相关癌症、ErbB3-相关癌症、ErbB4-相关癌症、NF1-相关癌症、PDGFR-A-相关癌症、PDGFR-B-相关癌症、FGFR1-相关癌症、FGFR2-相关癌症、FGFR3-相关癌症、IGF1 R-相关癌症、INSR-相关癌症、ALK-相关癌症、ROS-相关癌症、TrkA-相关癌症、TrkB-相关癌症、TrkC-相关癌症、RET-相关癌症、c-MET-相关癌症、VEGFR1-相关癌症、VEGFR2-相关癌症、VEGFR3-相关癌症、AXL-相关癌症、SHP2-相关癌症、RAF-相关癌症(例如BRAF-相关癌症)、PI3K-相关癌症、AKT-相关癌症、mTOR-相关癌症、MEK-相关癌症、ERK-相关癌症或其组合))为实体瘤。实体瘤的实例(例如为Ras途径-相关癌症的实体瘤)包括，例如，甲状腺癌(例如，乳头状甲状腺癌、甲状腺髓样癌)、肺癌(例如，非小细胞肺癌、小细胞肺癌、支气管腺瘤和胸膜肺母细胞瘤)、胰腺癌、胰腺导管癌、胆道癌、乳腺癌(例如，浸润性导管癌、浸润性小叶癌、原位导管癌和原位小叶癌)、胃癌、小肠癌、结肠癌、结直肠癌、腹膜癌、卵巢癌、子宫癌、肝癌、子宫内膜癌、前列腺癌(包括良性前列腺增生)、睾丸癌、膀胱癌、尿道癌、宫颈癌、头颈癌、脑癌(例如，胶质母细胞瘤、脑干和下丘脑(hypophtalmic)神经胶质瘤、小脑和下丘脑星形细胞瘤、髓母细胞瘤和室管膜瘤)、鳞状细胞癌和黑素瘤。
在一些实施方案中，所述个体为人。
式(I)的化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物还用于治疗Ras途径-相关癌症(例如SOS1-相关癌症、Ras-相关癌症(例如KRas-相关癌症、HRas-相关癌症和/或NRas-相关癌症)、EGFR-相关癌症、ErbB2-相关癌症、ErbB3-相关癌症、ErbB4-相关癌症、NF1-相关癌症、PDGFR-A-相关癌症、PDGFR-B-相关癌症、FGFR1-相关癌症、FGFR2-相关癌症、FGFR3-相关癌症、IGF1 R-相关癌症、INSR-相关癌症、ALK-相关癌症、ROS-相关癌症、TrkA-相关癌症、TrkB-相关癌症、TrkC-相关癌症、RET-相关癌症、c-MET-相关癌症、VEGFR1-相关癌症、VEGFR2-相关癌症、VEGFR3-相关癌症、AXL-相关癌症、SHP2-相关癌症、RAF-相关癌症(例如BRAF-相关癌症)、PI3K-相关癌症、AKT-相关癌症、mTOR-相关癌症、MEK-相关癌症、ERK-相关癌症或其组合)。
因此，本文还提供了用于治疗诊断或鉴定为患有Ras途径-相关癌症、例如本文公开的示例性Ras途径-相关癌症的任一种的个体的方法，包含向所述个体施用有效量的如本文所定义的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物。在一些实施方案中，所示式(I)的化合物选自实施例1-85或其药学上可接受的盐。
因此，本文还提供了用于治疗诊断或鉴定为患有Ras途径-相关癌症、例如本文公开的示例性Ras途径-相关癌症的任一种的个体的方法，包含向所述个体施用有效量的如本文所定义的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物。在一些实施方案中，所述式(I)的化合物选自实施例1-182或其药学上可接受的盐。
式(I)的化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物还用于治疗Ras-相关癌症。
因此，本文还提供了用于治疗诊断或鉴定为患有Ras-相关癌症、例如本文公开的示例性Ras-相关癌症的任一种的个体的方法，包含向所述个体施用有效量的如本文所定义的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物。在一些实施方案中，所述式(I)的化合物选自实施例1-182或其药学上可接受的盐。
因此，本文还提供了用于治疗诊断或鉴定为患有Ras-相关癌症、例如本文公开的示例性Ras-相关癌症的任一种的个体的方法，包含向所述个体施用有效量的如本文所定义的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物。在一些实施方案中，所述式(I)的化合物选自实施例1-182或其药学上可接受的盐。
式(I)的化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物还用于治疗KRas-相关癌症。
因此，本文还提供了用于治疗诊断或鉴定为患有KRas-相关癌症、例如本文公开的示例性KRas-相关癌症的任一种的个体的方法，包含向所述个体施用有效量的如本文所定义的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物。在一些实施方案中，所述式(I)的化合物选自实施例1-182或其药学上可接受的盐。
因此，本文还提供了用于治疗诊断或鉴定为患有KRas-相关癌症、例如本文公开的示例性KRas-相关癌症的任一种的个体的方法，包含向所述个体施用有效量的如本文所定义的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物。在一些实施方案中，所述式(I)的化合物选自实施例1-182或其药学上可接受的盐。
式(I)的化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物还用于治疗HRas-相关癌症。
因此，本文还提供了用于治疗诊断或鉴定为患有HRas-相关癌症、例如本文公开的示例性HRas-相关癌症的任一种的个体的方法，包含向所述个体施用有效量的如本文所定义的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物。在一些实施方案中，所述式(I)的化合物选自实施例1-182或其药学上可接受的盐。
因此，本文还提供了用于治疗诊断或鉴定为患有HRas-相关癌症、例如本文公开的示例性HRas-相关癌症的任一种的个体的方法，包含向所述个体施用有效量的如本文所定义的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物。在一些实施方案中，所述式(I)的化合物选自实施例1-182或其药学上可接受的盐。
式(I)的化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物还用于治疗NRas-相关癌症。
因此，本文还提供了用于治疗诊断或鉴定为患有NRas-相关癌症、例如本文公开的示例性NRas-相关癌症的任一种的个体的方法，包含向所述个体施用有效量的如本文所定义的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物。在一些实施方案中，所述式(I)的化合物选自实施例1-182或其药学上可接受的盐。
因此，本文还提供了用于治疗诊断或鉴定为患有NRas-相关癌症、例如本文公开的示例性NRas-相关癌症的任一种的个体的方法，包含向所述个体施用有效量的如本文所定义的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物。在一些实施方案中，所述式(I)的化合物选自实施例1-182或其药学上可接受的盐。
式(I)的化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物还用于治疗SOS1-相关癌症。
因此，本文还提供了用于治疗诊断或鉴定为患有SOS1-相关癌症、例如本文公开的示例性SOS1-相关癌症的任一种的个体的方法，包含向所述个体施用有效量的如本文所定义的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物。在一些实施方案中，所述式(I)的化合物选自实施例1-182或其药学上可接受的盐。
Ras途径蛋白(例如SOS1、Ras(例如KRas、HRas和/或NRas)、EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4、NF1、PDGFR-A、PDGFR-B、FGFR1、FGFR2、FGFR3、IGF1R、INSR、ALK、ROS、TrkA、TrkB、TrkC、RET、c-MET、VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3、AXL、SHP2、RAF(例如BRAF)、PI3K、AKT、mTOR、MEK、ERK或其组合)、Ras途径基因(例如SOS1、Ras(例如KRas、HRas和/或NRas)、EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4、NF1、PDGFR-A、PDGFR-B、FGFR1、FGFR2、FGFR3、IGF1 R、INSR、ALK、ROS、TrkA、TrkB、TrkC、RET、c-MET、VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3、AXL、SHP2、RAF(例如BRAF)、PI3K、AKT、mTOR、MEK、ERK或其组合)或其中任一种(例如一种或多种)的表达或活性或水平的失调促成肿瘤发生。例如，与野生型Ras途径蛋白相比，融合蛋白可以具有增加的活性(例如，对于SOS1，通过更有利的结合和/或增加的GEF活性而增加的Ras活化)，由于异常的细胞信号传导和/或失调的自分泌/旁分泌信号传导而发生(例如，与对照非癌细胞相比)，哺乳动物细胞中野生型Ras途径蛋白的表达增加(例如，水平增加)，Ras途径mRNA剪接变体也可以导致Ras途径的失调。
在一些实施方案中，本文提供的化合物显示脑和/或中枢神经系统(CNS)外显率。这类化合物能够穿过血脑屏障并抑制脑和/或其他CNS结构中的Ras途径(例如SOS1、Ras(例如KRas、HRas和/或NRas)、EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4、NF1、PDGFR-A、PDGFR-B、FGFR1、FGFR2、FGFR3、IGF1 R、INSR、ALK、ROS、TrkA、TrkB、TrkC、RET、c-MET、VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3、AXL、SHP2、RAF(例如BRAF)、PI3K、AKT、mTOR、MEK、ERK或其组合))活性。在一些实施方案中，本文提供的化合物能够以有效量穿过血脑屏障。例如，患有癌症(例如，Ras途径-相关癌症，例如Ras途径相关脑癌或CNS癌)的个体的治疗可以包括向个体施用(例如，口服施用)所述化合物。在一些这样的实施方案中，本文提供的化合物可以用于治疗原发性脑瘤或转移性脑瘤。例如，所述化合物可以用于治疗一种或多种神经胶质瘤，例如成胶质母细胞瘤(也称作多形性成胶质母细胞瘤)、星形细胞瘤、少突神经胶质细胞瘤、室管膜细胞瘤和混合性神经胶质瘤、脑膜瘤、髓母细胞瘤、神经节神经胶质瘤、神经鞘瘤(神经鞘瘤)schwannomas(neurilemmomas)和颅咽管瘤(参见，例如，the tumors listed in Louis,D.N.等人.ActaNeuropathol 131(6),803-820(June 2016))。在一些实施方案中，所述脑瘤为原发性脑瘤。在一些实施方案中，所述个体先前已经用另一种抗癌剂治疗，例如另一种Ras途径抑制剂(例如，不为通式(I)化合物的化合物，或另一种Ras途径基因或蛋白质(例如Ras(例如KRas、HRas和/或NRas)、EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4、NF1、PDGFR-A、PDGFR-B、FGFR1、FGFR2、FGFR3、IGF1 R、INSR、ALK、ROS、TrkA、TrkB、TrkC、RET、c-MET、VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3、AXL、SHP2、RAF(例如BRAF)、PI3K、AKT、mTOR、MEK、ERK或其组合)或其组合)的抑制剂。在一些实施方案中，所述脑瘤为转移性脑瘤。在一些实施方案中，所述个体先前已经用另一种抗癌剂治疗，例如另一种Ras途径抑制剂(例如不为式(I)化合物的化合物，或另一种Ras途径基因或蛋白质(例如Ras(例如KRas、HRas和/或NRas)、EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4、NF1、PDGFR-A、PDGFR-B、FGFR1、FGFR2、FGFR3、IGF1 R、INSR、ALK、ROS、TrkA、TrkB、TrkC、RET、c-MET、VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3、AXL、SHP2、RAF(例如BRAF)、PI3K、AKT、mTOR、MEK、ERK或其组合)或其组合)的抑制剂。
本文所述的化合物穿过BBB的能力可以通过本领域已知的测定法来证明。这类测定法包括BBB模型，例如transwell系统、中空纤维(动态体外BBB)模型、其他微流体BBB系统、BBB球状体平台和其他基于细胞聚集体的BBB模型。参见，例如Cho等人,NatCommun.2017；8:15623；Bagchi等人,Drug Des Devel Ther.2019；13:3591–3605；Gastfriend等人,Curr Opin Biomed Eng.2018年3月；5:6–12；和Wang等人,BiotechnolBioeng.2017Jan；114(1):184–194。在一些实施方案中，本文所述的化合物是荧光标记的，并且可以使用显微镜(例如共聚焦显微镜)检测荧光标记物。在一些这样的实施方案中，化合物穿透模型的表面屏障的能力可以由表面下方指定深度处的荧光强度表示。在一些测定法中，例如基于钙黄绿素-AM的测定法，所述荧光标记是非荧光的，直到其渗透活细胞并被细胞内酯酶水解以产生保留在细胞中的荧光化合物，并且可以用分光光度计定量。可用于本文所述测定法的荧光标记的非限制性实例包括Cy5、罗丹明、红外CW-800(LICOR#929-71012)、远红/>650(LICOR#929-70020)、荧光素钠(Na-F)、荧光黄(LY)、5'羧基荧光素和钙黄绿素-乙酰氧基甲酯(钙黄绿素-AM)。在一些实施方案中，可以对BBB模型(例如，组织或细胞聚集体)进行切片，并且可以使用质谱法(例如MALDI-MSI分析)在一个或多个切片中检测本文所述的化合物。在一些实施方案中，本文所述的化合物通过跨细胞转运系统(例如受体介导的转运(RMT)、载体介导的转运(CMT)或主动外排转运(AET))穿过BBB的能力可通过本领域已知的测定法来证明。参见，例如Wang等人,DrugDeliv.2019；26(1):551–565。在一些实施方案中，确定化合物是否可以通过P-糖蛋白(Pgp)流出的测定法包括单层流出测定法，其中通过测量模型Pgp底物地高辛的移动来定量化合物通过Pgp的移动(参见，例如Doan等人,2002.J Pharmacol Exp Ther.303(3):1029-1037)。鉴定通过血脑屏障的化合物的替代性体内测定法包括基于噬菌体的系统(参见，例如Peng等人,2019.ChemRxiv.Preprint doi.org/10.26434/chemrxiv.8242871.v1)。在一些实施方案中，定量本文所述的化合物与脑组织的结合。例如，脑组织结合测定法可以使用平衡透析进行，并且未与脑组织结合的本文所述的化合物的馏分可以使用LC-MS/MS检测(Cyprotex:Brain Tissue Binding Assay www.cyprotex.com/admepk/protein_binding/ brain-tissue-binding/)。
在一些实施方案中，所述个体被鉴定或诊断为患有癌症，所述癌症具有Ras途径基因(例如SOS1、Ras(例如KRas、HRas和/或NRas)、EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4、NF1、PDGFR-A、PDGFR-B、FGFR1、FGFR2、FGFR3、IGF1 R、INSR、ALK、ROS、TrkA、TrkB、TrkC、RET、c-MET、VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3、AXL、SHP2、RAF(例如BRAF)、PI3K、AKT、mTOR、MEK、ERK或其组合)、Ras途径蛋白(例如SOS1、Ras(例如KRas、HRas和/或NRas)、EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4、NF1、PDGFR-A、PDGFR-B、FGFR1、FGFR2、FGFR3、IGF1R、INSR、ALK、ROS、TrkA、TrkB、TrkC、RET、c-MET、VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3、AXL、SHP2、RAF(例如BRAF)、PI3K、AKT、mTOR、MEK、ERK或其组合)或其中任一种的表达或活性或水平失调(Ras途径-相关癌症)(例如，使用管理机构批准的、例如FDA批准的测定法或试剂盒所确定)。在一些实施方案中，所述个体具有对Ras途径基因、Ras途径蛋白、或其中任一种的表达或活性或水平的失调呈阳性的肿瘤(例如，如使用管理机构批准的测定法或试剂盒所确定)。所述个体可以是患有对Ras途径基因、Ras途径蛋白、或其中任一种(例如Ras途径蛋白)的表达或活性或水平的失调呈阳性的肿瘤的个体(例如，使用管理机构批准的、例如FDA批准的测定法或试剂盒确定为阳性)。所述个体可以是其肿瘤具有Ras途径基因、Ras途径蛋白、或其表达或活性或水平失调的个体(例如，其中所述肿瘤是照此使用管理机构批准的、例如FDA批准的试剂盒或测定法所确定的)。在一些实施方案中，所述个体疑似患有Ras途径-相关癌症。在一些实施方案中，所述个体具有临床记录，其指示所述个体具有Ras途径基因、Ras途径蛋白或其中任一种的表达或活性或水平失调的肿瘤(并且任选地，所述临床记录指示所述个体应当用本文提供的任何组合物治疗)。
在一些实施方案中，所述个体已被鉴定或诊断为患有具有Ras基因、Ras蛋白、或其任一种的表达或活性或水平失调的癌症(Ras-相关癌症)(例如，使用管理机构批准的、例如FDA批准的测定法或试剂盒所确定)。在一些实施方案中，所述个体具有对Ras基因、Ras蛋白、或其中任一种的表达或活性或水平的失调呈阳性的肿瘤(例如，使用管理机构批准的测定法或试剂盒所确定)。所述个体可以是患有对Ras基因、Ras蛋白、或其中任一种的表达或活性、或水平的失调呈阳性的肿瘤的个体(例如，使用管理机构批准的、例如FDA批准的测定法或试剂盒确定为阳性)。所述个体可以是其肿瘤具有Ras基因、Ras蛋白、或其表达或活性或水平失调的个体(例如，其中所述肿瘤是照此使用管理机构批准的、例如FDA批准的试剂盒或测定法所确定的)。在一些实施方案中，所述个体疑似患有Ras-相关癌症。在一些实施方案中，所述个体具有临床记录，其指示该个体具有Ras基因、Ras蛋白、或其中任一种的表达或活性或水平失调的肿瘤(并且任选地，所述临床记录指示所述个体应当用本文提供的任何组合物治疗)。
在一些实施方案中，所述个体已被鉴定或诊断为患有具有KRas基因、KRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平失调的癌症(KRas-相关癌症)(例如，使用管理机构批准的、例如FDA批准的测定法或试剂盒所确定)。在一些实施方案中，所述个体具有对KRas基因、KRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调呈阳性的肿瘤(例如，如使用管理机构批准的测定法或试剂盒所确定)。例如，所述个体具有对表1中所述的突变呈阳性的肿瘤。所述个体可以是患有对KRas基因、KRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调呈阳性的肿瘤的个体(例如，使用管理机构批准的、例如FDA批准的测定法或试剂盒确定为阳性)。所述个体可以是其肿瘤具有KRas基因、KRas蛋白或其表达或活性或水平失调的个体(例如，其中所述肿瘤是照此使用管理机构批准的、例如FDA批准的试剂盒或测定法所确定的)。在一些实施方案中，所述个体疑似患有KRas-相关癌症。在一些实施方案中，所述个体具有临床记录，其指示所述个体具有KRas基因、KRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平失调的肿瘤(并且任选地，所述临床记录指示所述个体应当用本文提供的任何组合物治疗)。
在一些实施方案中，所述个体已被鉴定或诊断为患有具有HRas基因、HRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调的癌症(HRas-相关癌症)(例如，如使用管理机构批准的、例如FDA批准的测定法或试剂盒所确定)。在一些实施方案中，所述个体具有对HRas基因、HRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调呈阳性的肿瘤(例如，如使用管理机构批准的测定法或试剂盒所确定)。例如，所述个体具有对如表2中所述的突变呈阳性的肿瘤。所述个体可以是具有对HRas基因、HRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调呈阳性的肿瘤的个体(例如，使用管理机构批准的、例如FDA批准的测定法或试剂盒确定为阳性)。所述个体可以是其肿瘤具有HRas基因、HRas蛋白或其表达或活性或水平失调的个体(例如，其中所述肿瘤是照此使用管理机构批准的、例如FDA批准的试剂盒或测定法所确定)。在一些实施方案中，所述个体疑似患有HRas-相关癌症。在一些实施方案中，所述个体具有临床记录，其指示该个体具有HRas基因、HRas蛋白或其表达或活性或其中任一种的水平失调的肿瘤(并且任选地，所述临床记录指示所述个体应当用本文提供的任何组合物治疗)。
在一些实施方案中，所述个体已被鉴定或诊断为患有NRas基因，NRas蛋白，或其中任一种的表达或活性或水平失调的癌症(NRas-相关癌症)(例如，如使用管理机构批准的、例如FDA批准的测定法或试剂盒所确定)。在一些实施方案中，所述个体具有对NRas基因、NRas蛋白或其任一种的表达或活性或水平的失调呈阳性的肿瘤(例如，如使用管理机构批准的测定法或试剂盒所确定)。例如，所述个体具有对表3中所述的突变呈阳性的肿瘤。个体可以是患有对NRas基因，NRas蛋白，或其中任一种的表达或活性或水平的失调呈阳性的肿瘤的个体(例如，使用管理机构批准的、例如FDA批准的测定法或试剂盒确定为阳性)。所述个体可以是其肿瘤具有NRas基因、NRas蛋白或其表达或活性或水平失调的个体(例如，其中所述肿瘤是照此使用管理机构批准的、例如FDA批准的试剂盒或测定法所确定的)。在一些实施方案中，所述个体疑似患有NRas-相关癌症。在一些实施方案中，所述个体具有临床记录，其指示该个体具有NRas基因、NRas蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调的肿瘤(并且任选地，所述临床记录指示所述个体应当用本文提供的任何组合物治疗)。
在一些实施方案中，所述个体已被鉴定或诊断为患有SOS1基因、SOS1蛋白或其中任一种的表达或活性或水平失调的癌症(NRas-相关癌症)(例如，如使用管理机构批准的、例如FDA批准的测定法或试剂盒所确定)。在一些实施方案中，所述个体具有对SOS1基因、SOS1蛋白或其任一种的表达或活性或水平的失调呈阳性的肿瘤(例如，如使用管理机构批准的测定法或试剂盒所确定)。例如，所述个体具有对表4中所述的突变呈阳性的肿瘤。所述个体可以是患有对NRas基因、NRas蛋白、或其中任一种的表达或活性或水平的失调呈阳性的肿瘤的个体(例如，使用管理机构批准的、例如FDA批准的测定法或试剂盒确定为阳性)。所述个体可以是其肿瘤具有SOS1基因、SOS1蛋白或其表达或活性或水平失调的个体(例如，其中所述肿瘤是照此使用管理机构批准的、例如FDA批准的试剂盒或测定法所确定的)。在一些实施方案中，所述个体疑似患有SOS1相关癌症。在一些实施方案中，所述个体具有临床记录，其指示该个体具有SOS1基因、SOS1蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调的肿瘤(并且任选地，所述临床记录指示所述个体应当用本文提供的任何组合物治疗)。
在本文所述的任一方法或用途的一些实施方案中，使用来自个体的样品用于确定个体是否具有Ras途径基因(例如SOS1、Ras(例如KRas、HRas和/或NRas)、EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4、NF1、PDGFR-A、PDGFR-B、FGFR1、FGFR2、FGFR3、IGF1 R、INSR、ALK、ROS、TrkA、TrkB、TrkC、RET、c-MET、VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3、AXL、SHP2、RAF(例如BRAF)、PI3K、AKT、mTOR、MEK、ERK或其组合)或Ras途径蛋白(例如SOS1、Ras(例如KRas、HRas和/或NRas)、EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4、NF1、PDGFR-A、PDGFR-B、FGFR1、FGFR2、FGFR3、IGF1 R、INSR、ALK、ROS、TrkA、TrkB、TrkC、RET、c-MET、VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3、AXL、SHP2、RAF(例如BRAF)、PI3K、AKT、mTOR、MEK、ERK或其组合)或其中任一种的表达或活性或水平的失调可以包括，例如二代测序、免疫组织化学、荧光显微镜、分裂FISH分析、Southern印迹、蛋白质印迹、FACS分析、Northern印迹和基于PCR的扩增(例如，RT-PCR和定量实时RT-PCR)。如本领域众所周知的，典型地，例如用至少一种标记的核酸探针或至少一种标记的抗体或其抗原结合片段进行测定。测定法可以利用本领域已知的其他检测方法来检测Ras途径基因、Ras途径蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调。在一些实施方案中，样品是来自个体的生物样品或活检样品(例如石蜡包埋的活检样品)。在一些实施方案中，所述个体是疑似患有Ras途径-相关癌症的个体、患有Ras途径-相关癌症的一种或多种症状的个体和/或具有发生Ras途径-相关癌症的增加的风险的个体。
在一些实施方案中，Ras途径基因(例如SOS1、Ras(例如KRas、HRas和/或NRas)、EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4、NF1、PDGFR-A、PDGFR-B、FGFR1、FGFR2、FGFR3、IGF1 R、INSR、ALK、ROS、TrkA、TrkB、TrkC、RET、c-MET、VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3、AXL、SHP2、RAF(例如BRAF)、PI3K、AKT、mTOR、MEK、ERK或其组合)、Ras途径蛋白(例如SOS1、Ras(例如KRas、HRas和/或NRas)、EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4、NF1、PDGFR-A、PDGFR-B、FGFR1、FGFR2、FGFR3、IGF1 R、INSR、ALK、ROS、TrkA、TrkB、TrkC、RET、c-MET、VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3、AXL、SHP2、RAF(例如BRAF)、PI3K、AKT、mTOR、MEK、ERK或其组合)或其中任一种的表达或活性或水平的失调和/或可以使用液体活组织检查(不同地称作流体活组织检查或流体相活组织检查)来鉴定。参见，例如Karachialiou等人,“Real-time liquid biopsies become a reality in cancertreatment”,Ann.Transl.Med.,3(3):36,2016。液体活检方法可用于检测总肿瘤负荷和/或Ras途径基因、Ras途径蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调。液体活组织检查可以对相对容易地从个体获得的生物样品进行(例如，通过单纯抽血)，并且通常比用于检测肿瘤负荷和/或Ras途径基因、Ras途径蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调的传统方法侵入性更低。在一些实施方案中，液体活组织检查可用于在比传统方法更早的阶段检测Ras途径基因、Ras途径蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调的存在。在一些实施方案中，待用于液体活检的生物样品可包括血液、血浆、尿液、脑脊液、唾液、痰、支气管肺泡灌洗液、胆汁、淋巴液、囊肿液、粪便、腹水及其组合。在一些实施方案中，液体活组织检查可用于检测循环肿瘤细胞(CTC)。在一些实施方案中，液体活组织检查可用于检测无细胞DNA。在一些实施方案中，使用液体活检检测的无细胞DNA是衍生自肿瘤细胞的循环肿瘤DNA(ctDNA)。ctDNA的分析(例如，使用灵敏的检测技术，例如但不限于二代测序(NGS)、传统PCR、数字PCR或微阵列分析)可用于鉴定Ras途径基因、Ras途径蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调。
在一些实施方案中，液体活组织检查可以用于检测循环肿瘤细胞(CTC)。在一些实施方案中，液体活组织检查可以用于检测无细胞DNA。在一些实施方案中，使用液体活组织检查检测的无细胞DNA为衍生自肿瘤细胞的循环肿瘤DNA(ctDNA)。ctDNA的分析(例如，使用灵敏的检测技术，例如但不限于，二代测序(NGS)、传统PCR、数字PCR或微阵列分析)可以用于鉴定Ras途径基因(例如SOS1、Ras(例如KRas、HRas和/或NRas)、EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4、NF1、PDGFR-A、PDGFR-B、FGFR1、FGFR2、FGFR3、IGF1 R、INSR、ALK、ROS、TrkA、TrkB、TrkC、RET、c-MET、VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3、AXL、SHP2、RAF(例如BRAF)、PI3K、AKT、mTOR、MEK、ERK或其组合)、Ras途径蛋白(例如SOS1、Ras(例如KRas、HRas和/或NRas)、EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4、NF1、PDGFR-A、PDGFR-B、FGFR1、FGFR2、FGFR3、IGF1 R、INSR、ALK、ROS、TrkA、TrkB、TrkC、RET、c-MET、VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3、AXL、SHP2、RAF(例如BRAF)、PI3K、AKT、mTOR、MEK、ERK或其组合)或其中任一种的表达或活性或水平的失调。
在一些实施方案中，可以使用液体活组织检查来检测来自单个基因的ctDNA。在一些实施方案中，可以使用液体活组织检查检测衍生自多个基因(例如，2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100个或更多个，或这些数量之间的任何数量的基因)的ctDNA。在一些实施方案中，可以使用多种可商购获得的测试板(例如，设计用于检测Ras途径基因(例如SOS1、Ras(例如KRas、HRas和/或NRas)、EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4、NF1、PDGFR-A、PDGFR-B、FGFR1、FGFR2、FGFR3、IGF1 R、INSR、ALK、ROS、TrkA、TrkB、TrkC、RET、c-MET、VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3、AXL、SHP2、RAF(例如BRAF)、PI3K、AKT、mTOR、MEK、ERK或其组合)、Ras途径蛋白(例如SOS1、Ras(例如KRas、HRas和/或NRas)、EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4、NF1、PDGFR-A、PDGFR-B、FGFR1、FGFR2、FGFR3、IGF1 R、INSR、ALK、ROS、TrkA、TrkB、TrkC、RET、c-MET、VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3、AXL、SHP2、RAF(例如BRAF)、PI3K、AKT、mTOR、MEK、ERK或其组合)或其中任一种的表达或活性或水平)的失调的可商购获得的测试板)中的任一种来检测衍生自多个基因的ctDNA。液体活组织检查可用于检测Ras途径基因、Ras途径蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调，包括但不限于点突变或单核苷酸变体(SNV)、拷贝数变体(CNV)、遗传融合(例如易位或重排)、插入、缺失或其任意组合。在一些实施方案中，液体活组织检查可用于检测种系突变。在一些实施方案中，液体活组织检查可用于检测体细胞突变。在一些实施方案中，液体活检可用于检测原发性基因突变(例如，与疾病(例如癌症)的初始发展相关的原发性突变或原发性融合)。在一些实施方案中，使用液体活组织检查鉴定的Ras途径基因、Ras途径蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的失调也存在于个体中(例如，肿瘤中)的癌细胞中。在一些实施方案中，可以使用液体活检检测本文所述的Ras途径基因、Ras途径蛋白或其中任一种的表达或活性或水平的任何类型的失调。在一些实施方案中，通过液体活组织检查鉴定的遗传突变可用于将个体鉴定为特定治疗的候选者。例如，检测Ras途径基因、Ras途径蛋白、或者其中任一种在个体中的表达或活性或水平可指示该个体会对包括施用式(I)的化合物或其药学上可接受的盐的治疗有反应。
这些方法的一些实施方案还可以包括向个体在第一个与第二个时间点之间施用至少一个剂量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。例如，与在第一个时间点从个体获得的cfDNA中Ras途径基因失调的等位基因频率(AF)相比，在第二个时间点从个体获得的Ras途径基因(例如SOS1、Ras(例如KRas、HRas和/或NRas)、EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4、NF1、PDGFR-A、PDGFR-B、FGFR1、FGFR2、FGFR3、IGF1 R、INSR、ALK、ROS、TrkA、TrkB、TrkC、RET、c-MET、VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3、AXL、SHP2、RAF(例如BRAF)、PI3K、AKT、mTOR、MEK、ERK或其组合)失调的等位基因频率(AF)减少(例如1％至约99％减少、1％至约95％减少、1％至约90％减少、1％至约85％减少、1％至约80％减少、1％至约75％减少、1％减少至约70％减少、1％减少至约65％减少、1％减少至约60％减少、1％减少至约55％减少、1％减少至约50％减少、1％减少至约45％减少、1％减少至约40％减少、1％减少至约35％减少、1％减少至约30％减少、1％减少至约25％减少、1％减少至约20％减少、1％减少至约15％减少、1％减少至约10％减少、1％至约5％减少、约5％至约99％减少、约10％至约99％减少、约15％至约99％减少、约20％至约99％减少、约25％至约99％减少、约30％至约99％减少、约35％至约99％减少、约40％至约99％减少、约45％至约99％减少、约50％至约99％减少、约55％至约99％减少、约60％至约99％减少、约65％至约99％减少、约70％至约99％减少、约75％至约95％减少、约80％至约99％减少、约90％减少至约99％减少、约95％至约99％减少、约5％至约10％减少、约5％至约25％减少、约10％至约30％减少、约20％至约40％减少、约25％至约50％减少、约35％至约55％减少、约40％至约60％减少、约50％减少至约75％减少、约60％减少至约80％减少或约65％至约85％减少)，这表明式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在所述个体中有效。在一些实施方案中，降低AF，使得水平低于仪器的检测限。或者，与在第一个时间点从个体获得的cfDNA中Ras途径基因失调的等位基因频率(AF)相比，在第二个时间点从个体获得的cfDNA中Ras途径基因失调的等位基因频率(AF)增加表明式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在个体中无效。这些方法的一些实施方案还可以包括向其中式(I)化合物或其药学上可接受的盐被确定为有效的个体施用额外剂量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。这些方法的一些实施方案还可以包括向其中式(I)化合物或其药学上可接受的盐被确定为无效的个体施用不同的治疗(例如，不包括作为单一疗法施用式(I)化合物或其药学上可接受的盐的治疗)。
在这些方法的一些实例中，第一个时间点与第二个时间点之间的时间差可以约为1天至约1年、约1天至约11个月、约1天至约10个月、约1天至约9个月、约1天至约8个月、约1天至约7个月、约1天至约6个月、约1天至约5个月、约1天至约4个月、约1天至约3个月、约1天至约10周、约1天至约2个月、约1天至约6周、约1天至约1个月、约1天至约25天、约1天至约20天、约1天至约15天、约1天至约10天、约1天至约5天、约2天至约1年、约5天至约1年、约10天至约1年、约15天至约1年、约20天至约1年、约25天至约1年、约1个月至约1年、约6周至约1年、约2个月至约1年、约3个月至约1年、约4个月至约1年、约5个月至约1年、约6个月至约1年、约7个月至约1年、约8个月至约1年、约9个月至约1年、约10个月至约1年、约11个月至约1年、约1天至约7天、约1天至约14天、约5天至约10天、约5天至约20天、约10天至约20天、约15天至约1个月、约15天至约2个月、约1周至约1个月、约2周至约1个月、约1个月至约3个月、约3个月至约6个月、约4个月至约6个月、约5个月至约8个月或约7个月至约9个月。在这些方法的一些实施方案中，所述个体可以先前被鉴定为患有具有失调的Ras途径基因(例如，本文所述的失调的Ras途径基因的任何实例)的癌症。在这些方法的一些实施方案中，所述个体可以先前已被诊断为患有本文所述的任何类型的癌症。在这些方法的一些实施方案中，所述个体可以具有一种或多种转移(例如，一种或多种脑转移)。
在一些上述实施方案中，cfDNA包含ctDNA，例如Ras途径-相关((例如SOS1、Ras(例如KRas、HRas和/或NRas)、EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4、NF1、PDGFR-A、PDGFR-B、FGFR1、FGFR2、FGFR3、IGF1 R、INSR、ALK、ROS、TrkA、TrkB、TrkC、RET、c-MET、VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3、AXL、SHP2、RAF(例如BRAF)、PI3K、AKT、mTOR、MEK、ERK或其组合)-相关)ctDNA。例如，cfDNA为ctDNA，例如Ras途径-相关ctDNA。在一些实施方案中，cfDNA的至少一些部分被确定为Ras途径相关的ctDNA，例如，总cfDNA的测序和/或定量的量被确定为具有Ras途径融合和/或Ras途径的过表达。
组合
在医学肿瘤学领域中，使用不同形式的治疗的组合来治疗患有癌症的每个个体是正常的实践。在医学肿瘤学中，除了本文提供的组合物之外，这种联合治疗或疗法的其他要素可以为例如手术、放疗和化疗剂，例如其他RAS途径抑制剂(例如SOS1、Ras(例如KRas、HRas和/或NRas)、EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4、NF1、PDGFR-A、PDGFR-B、FGFR1、FGFR2、FGFR3、IGF1 R、INSR、ALK、ROS、TrkA、TrkB、TrkC、RET、c-MET、VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3、AXL、SHP2、RAF(例如BRAF)、PI3K、AKT、mTOR、MEK、ERK法抑制剂或其组合、激酶抑制剂、信号转导抑制剂和/或单克隆抗体。例如，手术可以是开放式手术或微创手术。因此，式(I)的化合物或其药学上可接受的盐也可用作癌症治疗的佐剂，即，它们可与一种或多种另外的疗法或治疗剂(例如通过相同或不同的作用机制起作用的化疗剂)组合使用。在一些实施方案中，如本文所定义的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐可以为在施用另外的治疗剂或另外的疗法之前使用。例如，可以向有需要的个体施用一个或多个剂量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐一段时间期限，然后进行肿瘤的至少部分切除。在一些实施方案中，在至少部分切除肿瘤之前，用一个或多个剂量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐的治疗减小了肿瘤的大小(例如，肿瘤负荷)。在一些实施方案中，可以在一段时间期限内和在一轮或多轮放射疗法下向有需要的个体施用一个或多个剂量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，用一个或多个剂量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐的治疗在一轮或多轮放疗之前减小肿瘤的大小(例如，肿瘤负荷)。
如本文所用，“Ras途径靶向治疗剂”包括显示Ras途径中任何蛋白质的失活活性(例如活性位点(例如竞争性)抑制、变构抑制、二聚化抑制、表达抑制、蛋白质-蛋白质相互作用抑制和降解诱导)的任何化合物。Ras途径中的蛋白质的非限制性实例包括Ras-RAF-MAPK途径或PI3K/AKT途径中的任何一种蛋白质，例如Ras(例如KRas、HRas和/或NRas)、EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4、NF1、PDGFR-A、PDGFR-B、FGFR1、FGFR2、FGFR3、IGF1R、INSR、ALK、ROS、TrkA、TrkB、TrkC、RET、c-MET、VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3、AXL、SHP2、RAF(例如BRAF)、PI3K、AKT、mTOR、MEK、ERK或其组合。在一些实施方案中，靶向Ras途径的治疗剂可以对Ras途径中的蛋白质具有选择性。例如，靶向Ras途径的治疗剂可以对Ras蛋白(例如，KRas、HRas和/或NRas或其任何突变形式)具有选择性；这种活性剂也可以称作“RAS调节剂”)。在一些实施方案中，Ras调节剂为共价抑制剂。在一些实施方案中，靶向Ras途径的治疗剂可以对特定Ras蛋白(例如，KRas、HRas或NRas)或其突变形式(例如，G12突变体、G13突变体或Q61突变体)具有选择性。KRAS靶向治疗剂(例如，KRAS抑制剂(例如KRAS G12C抑制剂))的非限制性实例包括AMG 510、ARS-3248、ARS1620、SML-8-73-1、ML-10-70-1、VSA9、AA12、MRTX-849、MRTX849、LY3499446、JNJ-74699157、ARS853、AZD4785和JNJ-74699157。
式(I)的化合物或其药学上可接受的盐可以与一种或多种其他疗法或治疗剂组合使用，例如，通过相同或不同作用机制起作用的化疗剂。在一些实施方案中，如本文所定义的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐以在施用另外的治疗剂或另外的疗法之前使用。例如，可以向有需要的个体施用一个或多个剂量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐一段时间期限，然后至少部分切除肿瘤。在一些实施方案中，用一个或多个剂量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐的治疗在至少部分切除肿瘤之前减小肿瘤的大小(例如，肿瘤负荷)。在一些实施方案中，可以在一段时间期限内和在一轮或多轮放射疗法下向有需要的个体施用一个或多个剂量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，用一个或多个剂量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐的治疗在一轮或多轮放疗之前减小肿瘤的大小(例如，肿瘤负荷)。
在一些实施方案中，一种或多种另外的疗法或治疗剂独立地选自：EGFR抑制剂(例如阿法替尼、埃罗替尼、吉非替尼、拉帕替尼、西妥昔单抗、帕尼单抗(panitumumab)、奥希替尼和奥莫替尼(olmutinib))、ErbB2/Her2抑制(例如，阿法替尼、拉帕替尼、曲妥珠单抗和帕妥珠单抗)、ALK抑制剂(例如，克唑替尼、阿来替尼(alectinib)、恩曲替尼(entrectinib)、布加替尼(brigatinib))、ROS1抑制剂(例如，克唑替尼、恩曲替尼、洛拉替尼、西立瑞替尼和美雷替尼)、MEK抑制剂(例如，曲美替尼、可比美替尼(cobimetinib)、比美替尼(binimetinib)、司美替尼(selumetinib)、瑞法替尼(refametinib))、RAS(KRas、HRas和/或NRas)抑制剂(例如MRTX849、LY3499446、JNJ-74699157、AMG 510和AZD4785)、Bcr-Abl抑制剂(例如伊马替尼、达沙替尼、尼洛替尼)、FGFR1、2或3抑制剂(例如尼达尼布)、MET抑制剂(例如卡马替尼(capmatinib))、AXL抑制剂(例如司曲替尼(sitravatinib))、RET抑制剂(例如舒尼替尼和塞尔帕替尼(selpercatinib))、ERK抑制剂(例如，优立替尼(ulixertinib))、Shp2抑制剂(例如，RLY-1971、RMC-4630、TN0155和JAB-3068)、Bcl-2抑制剂(例如，ABT-263、奥巴克拉(obatoclax)、ABT-737和维奈托克(navitoclax))、mTOR抑制剂(例如，依维莫司(everolimus)和他克莫司(tacrolimus))、Trk抑制剂(例如，拉罗替尼和恩曲替尼(entrectinib))、检查点抑制剂(例如，伊匹单抗(ipilimumab)、纳武单抗(nivolumab)、帕博利珠单抗(pembrolizumab)、阿替利珠单抗(atezolizumab)、阿维鲁单抗(avelumab)、度伐利尤单抗(durvalumab)和帕利珠单抗(pidilizumab))或其他免疫疗法(例如单克隆抗体)、PARP抑制剂(例如奥拉帕利(olaparib))、PI3K抑制剂(例如布帕尼西(buparlisib)))、BET抑制剂(例如GSK1210151A)、Raf抑制剂(例如康奈非尼encorafenib))、MCL-1抑制剂(例如AZD5991)、AKT抑制剂(例如米替福新(miltefosine))、PDK1抑制剂(例如，GSK 2334470)和其他化疗剂，例如紫杉烷(例如，紫杉醇和多西他赛)、基于铂的活性剂(例如，顺铂和卡铂)、细胞毒性剂(例如，5-氟尿嘧啶、卡培他滨、氟尿苷、阿糖胞苷和吉西他滨)、法呢基转移酶抑制剂、拓扑异构酶抑制剂(例如，拓扑替康(topotecan)和伊立替康)、DNA合成抑制剂(例如，卡培他滨和盐酸吉西他滨/>)、烷化剂(例如，替莫唑胺(和/>)、放线菌素D(也称作放线菌素-D、/>)、卡莫司汀苯达莫司汀/>和洛莫司汀/>)和细胞毒性剂(例如长春新碱、阿糖胞苷和培美曲塞)。
表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂，例如奥希替尼(AZD 9291、美雷克替尼(merelectinib)、)、厄洛替尼(erlotinib)/>吉非替尼西妥昔单抗/>奈昔木单抗(necitumumab)IMC-11F8)、来那替尼(neratinib)(HKI-272、/>)、拉帕替尼/>帕尼单抗(panitumumab)(ABX-EGF、/>)、凡德他尼(vandetanib)/>罗西替尼(rociletinib)(CO-1686)、奥卢替尼(olmutinib)(/>HM61713、BI-1482694)、纳可替尼(naquotinib)(ASP8273)、纳扎替尼(nazartinib)(EGF816、NVS-816)、PF-06747775、埃克替尼(icotinib)(BPI-2009H)、阿法替尼(BIBW 2992、/>)、达克替尼(dacomitinib)(PF-00299804、PF-804、PF-299、PF-299804)、阿维替尼(AC0010)、AC0010MA EAI045、马妥珠单抗(EMD-7200)、尼妥珠单抗(h-R3、BIOMAb/>)、沙鲁单抗(zalutumab,)、MDX447、迪妥昔珠单抗(depatuxizumab)(人源化mAb 806、ABT-806)、玛汀-迪妥昔珠单抗(depatuxizumabmafodotin)(ABT-414)、ABT-806、mAb 806、卡奈替尼(canertinib)(CI-1033)、紫草素、紫草素衍生物(例如，去氧紫草素、异丁酰紫草素、乙酰紫草素、β,β-二甲基丙烯酰紫草素和乙酰基紫草素(acetylalkannin))、波奇替尼(poziotinib)(NOV120101、HM781-36B)、AV-412、依鲁替尼(ibrutinib)、WZ4002、布加替尼(AP26113、/>)、培利替尼(pelitinib)(EKB-569)、洛沙替尼(tarloxotinib)(TH-4000、PR610)、BPI-15086、Hemay022、ZN-e4、泰西伐替尼(tesevatinib)(KD019、XL647)、YH25448、依吡替尼(epitinib)(HMPL-813)、CK-101、MM-151、AZD3759、ZD6474、PF-06459988、伐林替尼(varlintinib)(ASLAN001、ARRY-334543)、AP32788、HLX07、D-0316、AEE788、HS-10296、艾维替尼(avitinib)、GW572016、吡罗替尼(pyrotinib)(SHR1258)、SCT200、CpGJ602、Sym004、MAb-425、莫多昔单抗(Modotuximab)(TAB-H49)、福妥昔单抗(futuximab)(992DS)、扎鲁木单抗(zalutumumab)、KL-140、RO5083945、IMGN289、JNJ-61186372、LY3164530、Sym013、AMG 595、BDTX-189、阿伐替尼(avatinib)、破坏素(Disruptin)、CL-387785、EGFRBi-防御自体T细胞和EGFR CAR-T疗法。在一些实施方案中，EGFR靶向治疗剂选自奥希替尼、吉非替尼、埃罗替尼、阿法替尼、拉帕替尼、奈拉替尼、AZD-9291、CL-387785、CO-1686或WZ4002。
人表皮生长因子受体2(HER2受体)(也称作Neu、ErbB-2、CD340或p185)抑制剂，例如曲妥珠单抗(例如TRAZIMERATM、)、培妥珠单抗(例如/>)、恩美曲妥珠单抗(T-DM1或曲妥珠单抗-美坦新偶联物，例如/>)、拉帕替尼、KEI004、来那替尼(例如/>)、达克替尼(dacomitinib)(例如/>)、阿法替尼/>图卡替尼(tucatinib)(例如TUKYSATM)、厄洛替尼(例如)、吡罗替尼、波奇替尼、CP-724714、CUDC-101、沙普替尼(sapitinib)(AZD8931)、坦螺旋霉素(17-AAG)、IPI-504、PF299、培利替尼、S-22261 1和AEE-788。
在一些实施方案中，FGFR抑制剂选自英菲格拉替尼(infigratinib)、AZD 4547、厄达替尼(erdafitinib)(JNJ-42756493)、尼达尼布(nintedanib)、多韦替尼(dovitinib)、普纳替尼(ponatinib)和TAS120。
在一些实施方案中，ALK抑制剂选自阿来替尼、克唑替尼色瑞替尼(ceritinib)、AP26113、ASP3026、TSR-011、PF-06463922、X-396和CEP-37440。
在一些实施方案中，ROS1抑制剂选自克唑替尼色瑞替尼、洛拉替尼(lorlatinib)、布加替尼、卡博替尼(cabozantinib)和洛普替尼(repotrectinib)。
在一些实施方案中，mTOR抑制剂选自依维莫司、他克莫司、雷帕霉素、哌立福辛和坦西莫司(temsirolimus)。
在一些实施方案中，Trk抑制剂选自拉罗替尼、来他替尼和恩曲替尼。
在一些实施方案中，RET抑制剂选自舒尼替尼塞尔帕替尼凡德他尼(vandetanib)/>莫替沙尼(motesanib)(AMG 706)、索拉非尼(sorafenib)、瑞戈非尼(regorafenib)和达鲁舍替(danusertib)。
在一些实施方案中，MET抑制剂选自卡马替尼、特泊替尼(tepotinib)、赛沃替尼(savolitinib)、克唑替尼、卡博替尼、替万替尼(tivantinib)、伯瑞替尼(bozitinib)、美雷替尼(merestinib)、格列沙替尼(glesatinib)、司曲替尼(sitravatinib)、奥那妥组珠单抗(onartuzumab)和依米珠单抗(emibetuzumab)。
在一些实施方案中，AXL抑制剂选自司曲替尼、贝姆西尼布(bemcentinib)、杜伯马替尼(dubermatinib)、DS-1205、SLC-391、INCB081776、ONO-7475和BA3011。
在一些实施方案中，Shp2抑制剂选自TNO155、BBP-398、JAB-3068、RMC-4360和RLY-1971。
在一些实施方案中，RAF抑制剂为BRAF抑制剂，例如威罗菲尼(vemurafenib)达拉非尼(dabrafenib)/>康奈非尼(encorafenib)/>BMS-908662、索拉非尼、LGX 818、PLX 3603、RAF 265、R05185426、GSK2118436、ARQ 736、GDC-0879、PLX-4720、AZ 304、PLX-8394、HM 95573、R05126766和LXH254。
在一些实施方案中，PI3K抑制剂选自布帕尼西(buparlisib)(BKM120)、阿培利司(alpelisib)(BYL719)、WX-037、库潘尼西(copanlisib)(BAY80-6946)、达托利司(dactolisib)(NVP-BEZ235、BEZ-235)、塔塞利斯(taselisib)(GDC-0032、RG7604)、sonolisib(PX-866)、CUDC-907、PQR309、ZSTK474、SF1126、AZD8835、GDC-0077、ASN003、匹克利西布(pictilisib)(GDC-0941)、pilaralisib(XL147、SAR245408)、格他特利昔(PF-05212384、PKI-587)、色雷利塞(TAK-117、MLN1117、INK 1117)、BGT-226(NVP-BGT226)、PF-04691502、apitolisib(GDC-0980)、奥米利塞(omipalisib)(GSK2126458、GSK458)、优通利嗪(voxtalisib)(XL756、SAR245409)、AMG 511、CH5132799、GSK1059615、GDC-0084(RG7666)、VS-5584(SB2343)、PKI-402、渥曼青霉素(wortmannin)、LY294002、PI-103、瑞格色替(rigosertib)、XL-765、LY2023414、SAR260301、KIN-193(AZD-6428)、GS-9820、AMG319和GSK2636771。
在一些实施方案中，AKT抑制剂选自米替福新(miltefosine)渥曼青霉素、NL-71-101、H-89、GSK690693、CCT128930、AZD5363、帕他色替(ipatasertib)(GDC-0068、RG7440)、A-674563、A-443654、AT7867、AT13148、优普色替(uprosertib)、阿氟瑞色替(afuresertib)、DC120、MK-2206、依地福新(edelfosine)、米替福新(miltefosine,)、哌立福新(perifosine)、芥酸磷酸胆碱(erucylphophocholine)、伊立福辛(erufosine)、SR13668、OSU-A9、PH-316、PHT-427、PIT-1、DM-PIT-1、曲西立滨(triciribine)、API-1、ARQ092、BAY 1125976、3-oxo-tirucallic acid、乳醌霉素(lactoquinomycin)、GSK2141795、ONC201、曲西罗宾(tricirbine)、A674563和AT7867。
在一些实施方案中，MEK抑制剂选自曲美替尼可比美替尼比美替尼/>司美替尼(AZD 6244)、PD 0325901、MSC1936369B、SHR7390、TAK-733、R05126766、CS 3006、WX-554、PD 98059、CI 1040(PD 184352)和寄端霉素(hypothemycin)。
在一些实施方案中，ERK抑制剂选自FRI-20(ON-01060)、VTX-11e、25-OH-D3-3-BE(B3CD、溴乙酸钙化醇(bromoacetoxycalcidiol))、FR-180204、AEZ-131(AEZS-131)、AEZS-136、AZ-13767370、BL-EI-001、LY-3214996、LTT-462、KO-947、MK-8353(SCH900353)、SCH772984、优立替尼(ulixertinib)(BVD-523)、CC-90003、GDC-0994(RG-7482)、ASN007、FR148083、5-7-奥塘烯醇(Oxozeaenol)、5-碘杀结核菌素(iodotubercidin)、GDC0994和ONC201。
在一些实施方案中，PARP抑制剂包括奥拉帕利他拉唑帕尼(talazoparib)、卢卡帕尼(rucaparib)、尼拉帕尼(niraparib)、维利帕尼(veliparib)、BGB-290(帕米帕利(pamiparib))、CEP 9722、E7016、iniparib、IMP4297、NOV1401、2X-121、ABT-767、RBN-2397、BMN 673、KU-0059436(AZD2281)、BSI-201、PF-01367338、INO-1001和JPI-289。
在一些实施方案中，RAS抑制剂为MRTX849、LY3499446、JNJ-74699157、AMG 510、ARS3248、ARS853、ARS1620、AZD4785、JNJ-74699157、SML-8-73-1、SML-10-70-1、VSA9、AA12和MRTX-849。
在一些实施方案中，PDK-1抑制剂选自GSK 2334470、JX06、SNS-510和AR-12。
在一些实施方案中，BET抑制剂选自GSK1210151A、GSK525762、OTX-015、TEN-010、CPI-203、CPI-0610、奥利诺内(olinone)、RVX-208、ABBV-744、LY294002、AZD5153、MT-1和MS645。
在一些实施方案中，MCL-1抑制剂为AZD5991。
在一些实施方案中，Bcl-2蛋白家族抑制剂选自ABT-263、四癌菌素A(TetrocarcinA)、抗霉素、棉酚((-)BL-193)、奥巴拉克(obatoclax)、HA14-1、奥利默森(oblimersen)(-)-棉酚乙酸(AT-101)；ABT-737和维奈托克。
在一些实施方案中，Bcr/Abl激酶抑制剂选自伊马替尼inilotinib、尼洛替尼/>达沙替尼(BMS-345825)、波舒替尼(SKI-606)、泊那替尼(AP24534)、巴氟替尼(INNO 406)、达那色替(PHA-739358)、AT 9283、沙拉替尼(AZD0530)和PF-03814735。
在一些实施方案中，检查点抑制剂选自伊匹木单抗(ipilimumab)帕博利珠单抗(pembrolizumab)/>纳武单抗(nivolumab)/>西米普利单抗(cemiplimab)/>阿替利珠单抗(atezolizumab)阿维鲁单抗(avelumab)/>度伐鲁单抗(durvalumab)IMP 701(LAG 525)、CPI-444、MBG 453、依诺妥珠单抗(enoblituzumab)、JNJ-61610588和吲哚西莫德(indoximod)。参见，例如Marin-Acevedo等人、J HematolOncol.11:39(2018)。
在一些实施方案中，其他免疫疗法为抗体疗法(例如单克隆抗体)。在一些实施方案中，抗体疗法选自贝伐单抗(MvastiTM、)、曲妥珠单抗/>利妥昔单抗(MabTheraTM、/>)、依决洛单抗(edrecolomab)(Panorex)、达雷妥尤单抗(daratumuab)/>奥拉单抗(olaratumab)(LartruvoTM)、奥法木单抗(ofatumumab)/>阿仑单抗(alemtuzumab)/>西妥昔单抗(cetuximab)/>奥戈伏单抗(oregovomab)、达妥昔单抗(dinutiximab)奥滨尤妥珠单抗(obinutuzumab)/>曲美木单抗(tremelimumab)(CP-675,206)、雷莫芦单抗(ramucirumab)/>优布利妥昔单抗(ublituximab)(TG-1101)、帕尼单抗(panitumumab)/>埃罗妥珠单抗(elotuzumab)(EmplicitiTM)、奈昔木单抗(necitumumab)(PortrazzaTM)、西妥珠单抗(cirmtuzumab)(UC-961)、替伊莫单抗(ibritumomab)/>异阿昔单抗(isatuximab)(SAR650984)、尼妥珠单抗(nimotuzumab)、夫苏木单抗(fresolimumab)(GC1008)、利利单抗(lirilumab)(INN)、莫格利珠单抗(mogamulizumab)/>非拉妥组单抗(ficlatuzumab)(AV-299)、地诺单抗(denosumab)/>加尼妥单抗(ganitumab)、乌瑞芦单抗(urelumab)、匹利珠单抗(pidilizumab)和阿马单抗(amatuximab)。
在一些实施方案中，其他化疗剂蒽环类药物、烷化剂、紫杉烷、基于铂的药物、艾瑞布林(eribulin)(HALAVENTM)、法呢基转移酶抑制剂、拓扑异构酶抑制剂、DNA合成抑制剂和细胞毒性剂。
在一些实施方案中，紫杉烷选自紫杉醇、多西他赛、卡巴他赛、注射用紫杉醇和泰索帝(taxotere)。
在一些实施方案中，蒽环类选自柔红霉素、多柔比星、吡柔比星(epirubicin)、伊达比星(idarubicin)及其组合。
在一些实施方案中，基于铂的活性剂选自卡铂、顺铂、奥沙利铂、奈铂、四硝酸三铂(triplatin tetranitrate)、菲铂(phenanthriplatin)、吡铂(picoplatin)和沙铂(satraplatin)。
在一些实施方案中，法呢基转移酶抑制剂选自洛那法尼(lonafarnib)、替吡法尼(tipifarnib)、BMS-214662、L778123、L744832和FTI-277。
在一些实施方案中，拓扑异构酶抑制剂为拓扑异构酶I抑制剂(例如伊立替康拓扑替康/>和7-乙基-10-羟基喜树碱(SN 38))或拓扑异构酶II抑制剂(例如依托泊苷(/>和/>)、替尼泊苷(VM-26，)和他氟泊苷(tafluposide)。
在一些实施方案中，DNA合成抑制剂选自卡培他滨盐酸吉西他滨奈拉滨(/>和/>)和沙帕他滨(sapacitabine)。
在一些实施方案中，烷化剂选自替莫唑胺(和/>)、放线菌素D(也称作放线菌素-D，/>)、美法仑/>六甲蜜胺(altretamine)卡莫司汀/>苯达莫司汀/>白消安(/>和)、洛莫司汀/>苯丁酸氮芥(chlorambucil)/>环磷酰胺(和/>)、达卡巴嗪/>六甲蜜胺(altretamine)异环磷酰胺/>泼尼莫司汀(prednumustine)、丙卡巴肼(procarbazine)/>氮芥(mechlorethamine)/>链脲菌素(streptozocin)/>和塞替派(thiotepa)/>
在一些实施方案中，细胞毒性剂选自博来霉素、阿糖胞苷、达卡巴嗪、甲氨蝶呤、丝裂霉素C、培美曲塞和长春新碱。
本文还提供了(i)用于治疗有需要的个体的癌症的药物组合，其包含(a)式(I)化合物或其药学上可接受的盐，(b)至少一种另外的治疗剂(例如，本文所述或本领域已知的任何示例性另外的治疗剂)，和(c)任选的至少一种药学上可接受的载体，用于同时、单独或依次用于治疗，其中式(I)的化合物或其药学上可接受的盐和另外的治疗剂的量一起有效治疗所述癌症；(ii)包含这种组合的药物组合物；(iii)这种组合在制备用于治疗癌症的药物中的用途；和(iv)商业包装或产品，其包含这样的组合作为用于同时、单独或依次使用的组合制剂；以及治疗有需要的个体的癌症的方法。在一些实施方案中，所述癌症为Ras途径-相关癌症(例如SOS1-相关癌症、Ras-相关癌症(例如KRas-相关癌症、HRas-相关癌症和/或NRas-相关癌症)、EGFR-相关癌症、ErbB2-相关癌症、ErbB3-相关癌症、ErbB4-相关癌症、NF1-相关癌症、PDGFR-A-相关癌症、PDGFR-B-相关癌症、FGFR1-相关癌症、FGFR2-相关癌症、FGFR3-相关癌症、IGF1 R-相关癌症、INSR-相关癌症、ALK-相关癌症、ROS-相关癌症、TrkA-相关癌症、TrkB-相关癌症、TrkC-相关癌症、RET-相关癌症、c-MET-相关癌症、VEGFR1-相关癌症、VEGFR2-相关癌症、VEGFR3-相关癌症、AXL-相关癌症、SHP2-相关癌症、RAF-相关癌症(例如BRAF-相关癌症)、PI3K-相关癌症、AKT-相关癌症、mTOR-相关癌症、MEK-相关癌症、ERK-相关癌症或其组合)。
如本文所用，术语“药物组合”是指由多于一种活性成分的混合或组合产生的药物疗法，并且包括活性成分的固定和非固定组合。术语“固定组合”是指式(I)的化合物或其药学上可接受的盐和至少一种另外的治疗剂(例如化学治疗剂)以单一组合物或剂量的形式同时施用于个体。术语“非固定组合”是指将式(I)的化合物或其药学上可接受的盐和至少一种另外的治疗剂(例如化学治疗剂)配制成单独的组合物或剂量，使得它们可以同时、并行或以可变的间隔时间限制依次施用于有需要的个体，其中这种施用在个体体内提供有效水平的两种或多种化合物。这些也适用于鸡尾酒疗法，例如施用三种或多种活性成分。
因此，本文还提供了治疗癌症的方法，包括向有需要的个体施用用于治疗癌症的药物组合，所述药物组合包含(a)式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，和(b)另外的治疗剂，其中式(I)的化合物和另外的治疗剂同时、单独或依次施用，其中式(I)的化合物或其药学上可接受的盐和另外的治疗剂的量一起有效治疗癌症。在一些实施方案中，所述式(I)的化合物或其药学上可接受的盐和另外的治疗剂以单独的剂量同时施用。在一些实施方案中，所述式(I)的化合物或其药学上可接受的盐和另外的治疗剂作为单独剂量以任何顺序依次、以联合有效量(例如，以每日或间歇剂量)施用。在一些实施方案中，所述式(I)的化合物或其药学上可接受的盐和另外的治疗剂作为组合剂量同时施用。在一些实施方案中，所述癌症为Ras途径-相关癌症(例如SOS1-相关癌症、Ras-相关癌症(例如KRas-相关癌症、HRas-相关癌症和/或NRas-相关癌症)、EGFR-相关癌症、ErbB2-相关癌症、ErbB3-相关癌症、ErbB4-相关癌症、NF1-相关癌症、PDGFR-A-相关癌症、PDGFR-B-相关癌症、FGFR1-相关癌症、FGFR2-相关癌症、FGFR3-相关癌症、IGF1 R-相关癌症、INSR-相关癌症、ALK-相关癌症、ROS-相关癌症、TrkA-相关癌症、TrkB-相关癌症、TrkC-相关癌症、RET-相关癌症、c-MET-相关癌症、VEGFR1-相关癌症、VEGFR2-相关癌症、VEGFR3-相关癌症、AXL-相关癌症、SHP2-相关癌症、RAF-相关癌症(例如BRAF-相关癌症)、PI3K-相关癌症、AKT-相关癌症、mTOR-相关癌症、MEK-相关癌症、ERK-相关癌症或其组合)。
因此，本文还提供了在有需要的个体中抑制、预防、帮助预防或减轻癌症转移症状的方法，包含向该个体施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物。这类方法可以用于治疗本文所述的一种或多种癌症。参见，例如US公布号2013/0029925；国际公布号WO 2014/083567；和美国专利号8,568,998。参见，例如Hezam K等人,Rev Neurosci 2018Jan 26；29:93-98；Gao L等人,Pancreas 2015年1月；44:134-143；DingK等人,J Biol Chem 2014年6月6日；289:16057-71；和Amit M等人,Oncogene 2017年6月8日；36:3232-3239。在一些实施方案中，所述癌症为Ras途径-相关癌症(例如SOS1-相关癌症、Ras-相关癌症(例如KRas-相关癌症、HRas-相关癌症和/或NRas-相关癌症)、EGFR-相关癌症、ErbB2-相关癌症、ErbB3-相关癌症、ErbB4-相关癌症、NF1-相关癌症、PDGFR-A-相关癌症、PDGFR-B-相关癌症、FGFR1-相关癌症、FGFR2-相关癌症、FGFR3-相关癌症、IGF1 R-相关癌症、INSR-相关癌症、ALK-相关癌症、ROS-相关癌症、TrkA-相关癌症、TrkB-相关癌症、TrkC-相关癌症、RET-相关癌症、c-MET-相关癌症、VEGFR1-相关癌症、VEGFR2-相关癌症、VEGFR3-相关癌症、AXL-相关癌症、SHP2-相关癌症、RAF-相关癌症(例如BRAF-相关癌症)、PI3K-相关癌症、AKT-相关癌症、mTOR-相关癌症、MEK-相关癌症、ERK-相关癌症或其组合)。在一些实施方案中，将式(I)的化合物或其药学上可接受的盐与另外的疗法或另一种治疗剂(例如本文所述的那些)组合使用。
术语“转移”为本领域已知的术语，并且是指在个体中远离原发肿瘤的部位形成另外的肿瘤(例如实体瘤)，其中另外的肿瘤包括与原发肿瘤相同或相似的癌细胞。
还提供了降低个体发生转移或另外的转移的风险的方法，所述个体患有Ras途径-相关癌症(例如SOS1-相关癌症、Ras-相关癌症(例如KRas-相关癌症、HRas-相关癌症和/或NRas-相关癌症)、EGFR-相关癌症、ErbB2-相关癌症、ErbB3-相关癌症、ErbB4-相关癌症、NF1-相关癌症、PDGFR-A-相关癌症、PDGFR-B-相关癌症、FGFR1-相关癌症、FGFR2-相关癌症、FGFR3-相关癌症、IGF1 R-相关癌症、INSR-相关癌症、ALK-相关癌症、ROS-相关癌症、TrkA-相关癌症、TrkB-相关癌症、TrkC-相关癌症、RET-相关癌症、c-MET-相关癌症、VEGFR1-相关癌症、VEGFR2-相关癌症、VEGFR3-相关癌症、AXL-相关癌症、SHP2-相关癌症、RAF-相关癌症(例如BRAF-相关癌症)、PI3K-相关癌症、AKT-相关癌症、mTOR-相关癌症、MEK-相关癌症、ERK-相关癌症或其组合)，该方法包括：筛选、鉴定或诊断患有Ras途径-相关癌症的个体，并且向筛选、鉴定或诊断为患有Ras途径-相关癌症的个体施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。还提供了降低个体发生转移或另外的转移的风险的方法，所述个体患有Ras途径-相关癌症，该方法包括向患有Ras途径-相关癌症的个体施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。可以将在患有Ras途径-相关癌症的个体中发生转移或另外的转移的风险的降低与治疗前个体中发生转移或另外的转移的风险相比，或与患有不接受治疗或不同治疗的类似或相同Ras途径-相关癌症的个体或个体人群相比。在一些实施方案中，另外的治疗剂选自MRTX849、LY3499446、JNJ-74699157、AMG 510、ARS3248、ARS853、ARS1620、AZD4785、JNJ-74699157、SML-8-73-1、SML-10-70-1、VSA9、AA12和MRTX-849。在一些实施方案中，已经向所述个体施用一个或多个剂量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，然后施用所述药物组合物。
还提供了降低个体发生转移或另外的转移的风险的方法，所述个体患有Ras-相关癌症，该方法包括：筛选、鉴定或诊断为患有Ras-相关癌症的个体，并且向筛选、鉴定或诊断为患有Ras-相关癌症的个体施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。还提供了降低个体发生转移或另外的转移的风险的方法，所述个体患有Ras-相关癌症，该方法包括向患有Ras-相关癌症的个体施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。可以将在患有Ras-相关癌症的个体中发生转移或另外的转移的风险的降低与治疗前个体中发生转移或另外的转移的风险相比，或与患有不接受治疗或不同治疗的类似或相同Ras-相关癌症的个体或个体人群相比。在一些实施方案中，另外的治疗剂选自MRTX849、LY3499446、JNJ-74699157、AMG 510、ARS3248、ARS853、ARS1620、AZD4785、JNJ-74699157、SML-8-73-1、SML-10-70-1、VSA9、AA12和MRTX-849。在一些实施方案中，已经向所述个体施用一个或多个剂量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，然后施用所述药物组合物。
还提供了降低个体发生转移或另外的转移的风险的方法，所述个体患有KRas-相关癌症，该方法包括筛选、鉴定或诊断患有KRas-相关癌症的个体，并且向筛选、鉴定或诊断为患有KRas-相关癌症的个体施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。还提供了降低个体发生转移或另外的转移的风险的方法，所述个体患有KRas-相关癌症，该方法包括向患有KRas-相关癌症的个体施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。可以将在患有KRas-相关癌症的个体中发生转移或另外的转移的风险的降低与治疗前个体中发生转移或另外的转移的风险相比，或与患有不接受治疗或不同治疗的类似或相同KRas-相关癌症的个体或个体人群相比。在一些实施方案中，另外的治疗剂选自MRTX849、LY3499446、JNJ-74699157、AMG 510、ARS3248、ARS853、ARS1620、AZD4785、JNJ-74699157、SML-8-73-1、SML-10-70-1、VSA9、AA12和MRTX-849。在一些实施方案中，已经向所述个体施用一个或多个剂量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，然后施用所述药物组合物。
还提供了降低个体发生转移或另外的转移的风险的方法，所述个体患有HRas-相关癌症，该方法包括：筛选、鉴定或诊断患有HRas-相关癌症的个体，并且向筛选、鉴定或诊断为患有HRas-相关癌症的个体施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。还提供了降低个体发生转移或另外的转移的风险的方法，所述个体患有HRas-相关癌症，该方法包括向患有HRas-相关癌症的个体施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。可以将在患有HRas-相关癌症的个体中发生转移或另外的转移的风险的降低与治疗前个体中发生转移或另外的转移的风险相比，或与患有不接受治疗或不同治疗的类似或相同HRas-相关癌症的个体或个体人群相比。在一些实施方案中，另外的治疗剂选自MRTX849、LY3499446、JNJ-74699157、AMG 510、ARS3248、ARS853、ARS1620、AZD4785、JNJ-74699157、SML-8-73-1、SML-10-70-1、VSA9、AA12和MRTX-849。在一些实施方案中，已经向个体施用一个或多个剂量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，然后施用所述药物组合物。
还提供了降低个体发生转移或另外的转移的风险的方法，所述个体患有NRas-相关癌症，该方法包括：筛选、鉴定或诊断患有NRas-相关癌症的个体，并且向筛选、鉴定或诊断为患有NRas-相关癌症的个体施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。还提供了降低个体发生转移或另外的转移的风险的方法，所述个体患有NRas-相关癌症，该方法包括向患有NRas-相关癌症的个体施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。可以将在患有NRas-相关癌症的个体中发生转移或另外的转移的风险的降低与治疗前个体中发生转移或另外的转移的风险相比，或与患有不接受治疗或不同治疗的类似或相同NRas-相关癌症的个体或个体人群相比。在一些实施方案中，另外的治疗剂选自MRTX849、LY3499446、JNJ-74699157、AMG 510、ARS3248、ARS853、ARS1620、AZD4785、JNJ-74699157、SML-8-73-1、SML-10-70-1、VSA9、AA12和MRTX-849。在一些实施方案中，已经向所述个体施用一个或多个剂量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，然后施用所述药物组合物。
还提供了降低个体发生转移或另外的转移的风险的方法，所述个体患有SOS1-相关癌症，该方法包括筛选、鉴定或诊断患有SOS1-相关癌症的个体，并且向筛选、鉴定或诊断为患有SOS1-相关癌症的个体施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。还提供了降低个体发生转移或另外的转移的风险的方法，所述个体患有SOS1-相关癌症，该方法包括向患有SOS1-相关癌症的个体施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。可以将在患有SOS1-相关癌症的个体中发生转移或另外的转移的风险的降低与治疗前个体中发生转移或另外的转移的风险相比，或与患有不接受治疗或不同治疗的类似或相同SOS1-相关癌症的个体或个体人群相比。在一些实施方案中，另外的治疗剂选自MRTX849、LY3499446、JNJ-74699157、AMG 510、ARS3248、ARS853、ARS1620、AZD4785、JNJ-74699157、SML-8-73-1、SML-10-70-1、VSA9、AA12和MRTX-849。在一些实施方案中，已经向所述个体施用一个或多个剂量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，然后施用所述药物组合物。
短语“发生转移的风险”是指患有原发性肿瘤的个体在设定的时间期限内在远离个体中原发性肿瘤的部位发生另外的肿瘤(例如实体瘤)的风险，其中另外的肿瘤包括与原发性肿瘤相同或相似的癌细胞。本文描述了用于降低患有癌症的个体中发生转移的风险的方法。
短语“发生另外的转移的风险”是指具有原发性肿瘤和在远离原发性肿瘤的部位处的一个或多个另外的肿瘤(其中所述一个或多个另外的肿瘤包括与原发性肿瘤相同或相似的癌细胞)的个体将发生远离原发性肿瘤的一个或多个另外的肿瘤的风险，其中所述另外的肿瘤包括与原发性肿瘤相同或相似的癌细胞。本文描述了用于降低发生另外的转移的风险的方法。
用多激酶抑制剂(MKI)或靶标特异性激酶抑制剂(例如，BRAF抑制剂、EGFR抑制剂、MEK抑制剂、ALK抑制剂、ROS1抑制剂、MET抑制剂、芳香酶抑制剂、RAF抑制剂、RET抑制剂或RAS抑制剂)治疗患有癌症的个体可以导致癌症中Ras途径基因(例如SOS1、Ras(例如KRas、HRas和/或NRas)、EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4、NF1、PDGFR-A、PDGFR-B、FGFR1、FGFR2、FGFR3、IGF1R、INSR、ALK、ROS、TrkA、TrkB、TrkC、RET、c-MET、VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3、AXL、SHP2、RAF(例如BRAF)、PI3K、AKT、mTOR、MEK、ERK或其组合)、Ras途径蛋白(例如SOS1、Ras(例如KRas、HRas和/或NRas)、EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4、NF1、PDGFR-A、PDGFR-B、FGFR1、FGFR2、FGFR3、IGF1 R、INSR、ALK、ROS、TrkA、TrkB、TrkC、RET、c-MET、VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3、AXL、SHP2、RAF(例如BRAF)、PI3K、AKT、mTOR、MEK、ERK或其组合)或其表达或活性或水平失调。参见，例如Bhinge等人,Oncotarget 8:27155-27165,2017；Chang等人,Yonsei Med.J.58:9-18,2017；和Lopez-Delisle等人,doi:10.1038/s41388-017-0039-5,Oncogene 2018。
与用SOS1抑制剂作为单一疗法或用多激酶抑制剂或靶特异性激酶抑制剂作为单一疗法治疗相同个体或相似个体相比，用SOS1抑制剂与多激酶抑制剂或靶特异性激酶抑制剂(例如，BRAF抑制剂、EGFR抑制剂、MEK抑制剂、ALK抑制剂、ROS1抑制剂、MET抑制剂、芳香酶抑制剂、RAF抑制剂、RET抑制剂或RAS抑制剂)组合治疗患有癌症的个体可以具有增加的治疗功效。参见，例如Tang等人,doi:10.1038/modpathol.2017.109,Mod.Pathol.2017；Andreucci等人,Oncotarget 7:80543-80553,2017；Nelson-Taylor等人,Mol.CancerTher.16:1623-1633,2017；和Kato等人,Clin.Cancer Res.23:1988-1997,2017。
本文提供了用于治疗患有癌症(例如本文所述的任意癌症)和先前施用的多激酶抑制剂(MKI)或靶标特异性激酶抑制剂(例如Ras抑制剂、BRAF抑制剂、EGFR抑制剂、MEK抑制剂、ALK抑制剂、ROS1抑制剂、MET抑制剂、芳香酶抑制剂、RAF抑制剂、RET抑制剂或RAS抑制剂)(例如作为单一疗法)的个体的方法，包括：向该个体施用(i)有效剂量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐作为单一疗法；或(ii)有效剂量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐和有效剂量的先前施用的MKI或先前施用的靶标特异性激酶抑制剂。
还提供了用于抑制哺乳动物细胞中SOS1活性的方法，包含使该哺乳动物细胞接触式(I)的化合物。在一些实施方案中，所述接触为体外的。在一些实施方案中，所述接触为体内的。在一些实施方案中，所述接触为体内的，其中该方法包含向具有哺乳动物细胞的个体施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，所述哺乳动物细胞具有SOS1活性。在一些实施方案中，所述哺乳动物细胞为哺乳动物癌细胞。在一些实施方案中，所述哺乳动物癌细胞为如本文所述的任意癌症。在一些实施方案中，所述哺乳动物癌细胞为Ras途径-相关癌症(例如SOS1-相关癌症、Ras-相关癌症(例如KRas-相关癌症、HRas-相关癌症和/或NRas-相关癌症)、EGFR-相关癌症、ErbB2-相关癌症、ErbB3-相关癌症、ErbB4-相关癌症、NF1-相关癌症、PDGFR-A-相关癌症、PDGFR-B-相关癌症、FGFR1-相关癌症、FGFR2-相关癌症、FGFR3-相关癌症、IGF1 R-相关癌症、INSR-相关癌症、ALK-相关癌症、ROS-相关癌症、TrkA-相关癌症、TrkB-相关癌症、TrkC-相关癌症、RET-相关癌症、c-MET-相关癌症、VEGFR1-相关癌症、VEGFR2-相关癌症、VEGFR3-相关癌症、AXL-相关癌症、SHP2-相关癌症、RAF-相关癌症(例如BRAF-相关癌症)、PI3K-相关癌症、AKT-相关癌症、mTOR-相关癌症、MEK-相关癌症、ERK-相关癌症或其组合)细胞。
还提供了用于抑制哺乳动物细胞中Ras活性的方法，包含使该哺乳动物细胞接触式(I)的化合物(I)。在一些实施方案中，所述接触为体外的。在一些实施方案中，所述接触为体内的。在一些实施方案中，所述接触为体内的，其中该方法包含向具有哺乳动物细胞的个体施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，所述哺乳动物细胞具有Ras活性。在一些实施方案中，所述哺乳动物细胞为哺乳动物癌细胞。在一些实施方案中，所述哺乳动物癌细胞为如本文所述的任意癌症。在一些实施方案中，所述哺乳动物癌细胞为Ras途径-相关癌症(例如SOS1-相关癌症、Ras-相关癌症(例如KRas-相关癌症、HRas-相关癌症和/或NRas-相关癌症)、EGFR-相关癌症、ErbB2-相关癌症、ErbB3-相关癌症、ErbB4-相关癌症、NF1-相关癌症、PDGFR-A-相关癌症、PDGFR-B-相关癌症、FGFR1-相关癌症、FGFR2-相关癌症、FGFR3-相关癌症、IGF1 R-相关癌症、INSR-相关癌症、ALK-相关癌症、ROS-相关癌症、TrkA-相关癌症、TrkB-相关癌症、TrkC-相关癌症、RET-相关癌症、c-MET-相关癌症、VEGFR1-相关癌症、VEGFR2-相关癌症、VEGFR3-相关癌症、AXL-相关癌症、SHP2-相关癌症、RAF-相关癌症(例如BRAF-相关癌症)、PI3K-相关癌症、AKT-相关癌症、mTOR-相关癌症、MEK-相关癌症、ERK-相关癌症或其组合)细胞。
还提供了用于抑制哺乳动物细胞中SOS1-Ras(例如KRas、HRas和/或NRas)蛋白质-蛋白质相互作用的方法，包含使该哺乳动物细胞接触式(I)的化合物(I)。在一些实施方案中，所述接触为体外的。在一些实施方案中，所述接触为体内的。在一些实施方案中，所述接触为体内的，其中该方法包含向具有哺乳动物细胞的个体施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，所述哺乳动物细胞具有SOS1-Ras(例如KRas、HRas和/或NRas)蛋白质-蛋白质相互作用。在一些实施方案中，所述哺乳动物细胞为哺乳动物癌细胞。在一些实施方案中，所述哺乳动物癌细胞为如本文所述的任意癌症。在一些实施方案中，所述哺乳动物癌细胞为Ras途径-相关癌症(例如SOS1-相关癌症、Ras-相关癌症(例如KRas-相关癌症、HRas-相关癌症和/或NRas-相关癌症)、EGFR-相关癌症、ErbB2-相关癌症、ErbB3-相关癌症、ErbB4-相关癌症、NF1-相关癌症、PDGFR-A-相关癌症、PDGFR-B-相关癌症、FGFR1-相关癌症、FGFR2-相关癌症、FGFR3-相关癌症、IGF1 R-相关癌症、INSR-相关癌症、ALK-相关癌症、ROS-相关癌症、TrkA-相关癌症、TrkB-相关癌症、TrkC-相关癌症、RET-相关癌症、c-MET-相关癌症、VEGFR1-相关癌症、VEGFR2-相关癌症、VEGFR3-相关癌症、AXL-相关癌症、SHP2-相关癌症、RAF-相关癌症(例如BRAF-相关癌症)、PI3K-相关癌症、AKT-相关癌症、mTOR-相关癌症、MEK-相关癌症、ERK-相关癌症或其组合)细胞。
还提供了用于抑制哺乳动物细胞中Ras途径活性的方法，包含使该哺乳动物细胞接触式(I)的化合物。在一些实施方案中，所述接触为体外的。在一些实施方案中，所述接触为体内的。在一些实施方案中，所述接触为体内的，其中该方法包含向具有哺乳动物细胞的个体施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，所述哺乳动物细胞具有Ras途径活性。在一些实施方案中，所述哺乳动物细胞为哺乳动癌细胞。在一些实施方案中，所述哺乳动物癌细胞为如本文所述的任意癌症。在一些实施方案中，所述哺乳动物癌细胞为Ras途径-相关癌症(例如SOS1-相关癌症、Ras-相关癌症(例如KRas-相关癌症、HRas-相关癌症和/或NRas-相关癌症)、EGFR-相关癌症、ErbB2-相关癌症、ErbB3-相关癌症、ErbB4-相关癌症、NF1-相关癌症、PDGFR-A-相关癌症、PDGFR-B-相关癌症、FGFR1-相关癌症、FGFR2-相关癌症、FGFR3-相关癌症、IGF1 R-相关癌症、INSR-相关癌症、ALK-相关癌症、ROS-相关癌症、TrkA-相关癌症、TrkB-相关癌症、TrkC-相关癌症、RET-相关癌症、c-MET-相关癌症、VEGFR1-相关癌症、VEGFR2-相关癌症、VEGFR3-相关癌症、AXL-相关癌症、SHP2-相关癌症、RAF-相关癌症(例如BRAF-相关癌症)、PI3K-相关癌症、AKT-相关癌症、mTOR-相关癌症、MEK-相关癌症、ERK-相关癌症或其组合)细胞。
如本文所用，术语“接触”是指在体外系统或体内系统中将指定部分集合在一起。例如，SOS1蛋白与本文提供的化合物“接触”包括将本文提供的化合物施用于具有SOS1蛋白的个体(例如人)，以及例如将本文提供的化合物导入包含哺乳动物细胞的样品或包含SOS1蛋白的纯化制品中。
本文还提供了在体外或体内抑制哺乳动物细胞增殖的方法，该方法包含使哺乳动物细胞与有效量的如本文所定义的式(I)化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物接触。
短语“有效量”是指当施用于有这种治疗需要的个体时足以实现如下嘧啶的量：(i)治疗Ras途径-相关疾病或障碍(例如Ras途径-相关癌症(例如SOS1-相关癌症、Ras-相关癌症(例如KRas-相关癌症、HRas-相关癌症和/或NRas-相关癌症)、EGFR-相关癌症、ErbB2-相关癌症、ErbB3-相关癌症、ErbB4-相关癌症、NF1-相关癌症、PDGFR-A-相关癌症、PDGFR-B-相关癌症、FGFR1-相关癌症、FGFR2-相关癌症、FGFR3-相关癌症、IGF1 R-相关癌症、INSR-相关癌症、ALK-相关癌症、ROS-相关癌症、TrkA-相关癌症、TrkB-相关癌症、TrkC-相关癌症、RET-相关癌症、c-MET-相关癌症、VEGFR1-相关癌症、VEGFR2-相关癌症、VEGFR3-相关癌症、AXL-相关癌症、SHP2-相关癌症、RAF-相关癌症(例如BRAF-相关癌症)、PI3K-相关癌症、AKT-相关癌症、mTOR-相关癌症、MEK-相关癌症、ERK-相关癌症或其组合))；(ii)减轻、改善或消除本文所述的特定疾病、病症或障碍的一种或多种症状，或(iii)延迟本文所述的特定疾病、病症或障碍的一种或多种症状的发作。相当于该量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐的量将根据例如特定化合物、疾病状况及其严重程度、需要治疗的个体的身份(例如体重)等因素的不同而变化，但仍然可以由本领域技术人员通过常规方式确定。
药物组合物
当用作药物时，式(I)的化合物，包括其药学上可接受的盐，可以以药物组合物的形式施用。这些组合物可以以制药领域众所周知的方式制备，并且可以通过多种途径施用，这取决于是否需要局部或全身治疗以及待治疗的区域。施用可以是局部(包括透皮、表皮、眼部和粘膜，包括鼻内、阴道和直肠递送)、肺部(例如，通过吸入或吹入粉末或气雾剂，包括通过喷雾器、气管内或鼻内)、口服或肠胃外。口服施用可以包括配制用于每天一次或每天两次(BID)施用的剂型。肠胃外施用包括静脉内、动脉内、皮下、腹膜内、肌内或注射或输注；或颅内，例如鞘内或心室内施用。肠胃外施用可以为单次推注剂量的形式，或者可以是例如通过连续灌注泵。用于局部施用的药物组合物和制剂可以包括透皮贴剂、软膏、洗剂、乳膏、凝胶、滴剂、栓剂、喷雾剂、液体和粉末。常规的药用载体、水性、粉末或油性基质、增稠剂等可能是必需的或期望的。
本文还提供了药物组合物，其包含作为活性成分的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，以及一种或多种药学上可接受的赋形剂。例如，使用式(I)的化合物或其药学上可接受的盐制备的药物组合物。在一些实施方案中，所述组合物适于局部施用。在制备本文提供的组合物的过程中，典型地将活性成分与赋形剂混合，用赋形剂稀释或以例如胶囊、小袋、纸张或其他容器的形式包封在这种载体内。当赋形剂用作稀释剂时，它可以是固体、半固体或液体材料，其充当活性成分的媒介物、载体或介质。因此，所述组合物可以是片剂、丸剂、粉末、锭剂(lozenges)、小药囊(sachets)、扁囊剂(cachets)、酏剂(elixirs)、混悬液、乳液、溶液、糖浆、气雾剂(作为固体或在液体介质中)、包含例如至多10％重量活性化合物的软膏、软和硬明胶胶囊、栓剂、无菌可注射溶液和无菌包装粉末的形式。在一些实施方案中，将所述组合物配制用于口服施用。在一些实施方案中，所述组合物是固体口服制剂。在一些实施方案中，将所述组合物配制成片剂或胶囊。
本文还提供了包含式(I)的化合物或其药学上可接受的盐与药学上可接受的载体的药物组合物。包含式(I)的化合物或其药学上可接受的盐作为活性成分的药物组合物可以通过根据常规药物配混技术将式(I)化合物或其药学上可接受的盐与药物载体紧密混合来制备。根据期望的施用途径(例如，口服、肠胃外)的不同，载体可以采取多种形式。在一些实施方案中，所述组合物为固体口服组合物。
合适的药学上可接受的载体是本领域众所周知的。这些药学上可接受的载体中的一些的描述可以在the American Pharmaceutical Association和the PharmaceuticalSociety of Great Britain出版的The Handbook of Pharmaceutical Excipients中找到。
配制药物组合物的方法已经在许多出版物中描述，例如Pharmaceutical DosageForms:Tablets、Second Edition、Revised and Expanded,第1-3版,Lieberman等人编辑；Pharmaceutical Dosage Forms:Parenteral Medications,第1-2卷,Avis等人编辑；和Pharmaceutical Dosage Forms:Disperse Systems,第1-2卷,Lieberman等人编辑；MarcelDekker,Inc.出版。
在制备口服剂型的组合物时，可以使用任何常用的药用介质。因此，对于液体口服制剂例如混悬液、酏剂和溶液，合适的载体和添加剂包括水、二醇、油、醇、矫味剂、防腐剂、稳定剂、着色剂等；对于固体口服制剂，例如粉末、胶囊和片剂，合适的载体和添加剂包括淀粉、糖、稀释剂、造粒剂、润滑剂、粘合剂、崩解剂等。合适的粘合剂包括但不限于淀粉、明胶、天然糖例如葡萄糖或β-乳糖、玉米甜味剂、天然和合成树胶例如阿拉伯胶、黄蓍胶或油酸钠、硬脂酸钠、硬脂酸镁、苯甲酸钠、乙酸钠、氯化钠等。崩解剂包括但不限于淀粉、甲基纤维素、琼脂、膨润土、黄原胶等。固体口服制剂也可以用物质例如糖包衣或肠溶包衣以调节主要吸收位点。对于肠胃外施用，载体通常由无菌水组成，并且可以加入其他成分以增加溶解度或保存。还可以利用水性载体以及适当的添加剂来制备可注射混悬液或溶液。本文的药物组合物每剂量单位(例如片剂、胶囊、粉末、注射剂、茶匙(teaspoonful)等)包含递送如本文所述的有效剂量所必需的量的活性成分。
可以将包含式(I)的化合物或其药学上可接受的盐的组合物配制成单位剂型，每个剂量包含约5至约1,000mg(1g)，更通常约100mg至约500mg的活性成分。术语“单位剂型”是指适合作为用于人个体和其他个体的单位剂量的物理上离散的单位，每个单位包含经计算产生期望的治疗效果的预定量的活性物质(即，式(I)化合物或其药学上可接受的盐)以及合适的药用赋形剂。
在一些实施方案中，本文提供的组合物包含约5mg至约50mg的活性成分。本领域技术人员可以理解，这可以以化合物或组合物包含约5mg至约10mg、约10mg至约15mg、约15mg至约20mg、约20mg至约25mg、约25mg至约30mg、约30mg至约35mg、约35mg至约40mg、约40mg至约45mg或约45mg至约50mg的活性成分为示例。
在一些实施方案中，本文提供的组合物包含约50mg至约500mg的活性成分。本领域技术人员可以理解，这可以以化合物或组合物包含约50mg至约100mg、约100mg至约150mg、约150mg至约200mg、约200mg至约250mg、约250mg至约300mg、约350mg至约400mg或约450mg至约500mg的活性成分为示例。在一些实施方案中，本文提供的组合物包含约10mg、约20mg、约80mg或约160mg的活性成分。
在一些实施方案中，本文提供的组合物包含约500mg至约1,000mg的活性成分。本领域技术人员可以理解，这可以以化合物或组合物包含约500mg至约550mg、约550mg至约600mg、约600mg至约650mg、约650mg至约700mg、约700mg至约750mg、约750mg至约800mg、约800mg至约850mg、约850mg至约900mg、约900mg至约950mg或约950mg至约1,000mg的活性成分为示例。
式(I)的化合物或其药学上可接受的盐的每日剂量可以在1.0至10,000mg/成人/天或更高或其中的任意范围的宽范围内变化。对于口服施用，组合物优选以片剂形式提供，其包含0.01、0.05、0.1、0.5、1.0、2.5、5.0、10.0、15.0、25.0、50.0、100、150、160、200、250和500毫克活性成分，用于对待治疗的个体的剂量根据症状调节。药物的有效量通常以每天约0.1mg/kg至约1000mg/kg体重/天或其中的任意范围的提供。优选该范围约为0.5至约500mg/kg体重/天或其中的任意范围。更优选约1.0至约250mg/kg体重/天或其中的任意范围。更优选约0.1至约100mg/kg体重/天或其中的任意范围。在一个实例中，该范围可以约为0.1至约50.0mg/kg或在其中的任意量或范围。在另一个实例中，该范围可以约为0.1至约15.0mg/kg体重/天或其中的任意范围。在又一实例中，例如，该范围可以约为0.5至约7.5mg/kg或在其中的任意量至范围。包含式(I)的化合物或其药学上可接受的盐的药物组合物可以以每天1至4次的方案或以单一日剂量施用。
活性化合物可以在宽剂量范围内有效，并且通常以药学有效量施用。本领域技术人员可以容易地确定待施用的最佳剂量。因此，应当理解，实际施用的化合物的量通常由临床医师确定，并且将根据相关情况的不同而变化，包括施用模式、施用的实际化合物、制剂的强度、待治疗的病症和疾病病症的进展。此外，与所治疗的特定个体相关的因素，包括个体反应、年龄、体重、膳食、施用时间和个体症状的严重程度，会导致调整剂量的需求。
在一些实施方案中，本文提供的化合物可以以约1mg/kg至约100mg/kg的量施用。在一些实施方案中，本文提供的化合物可以以约1mg/kg至约20mg/kg、约5mg/kg至约50mg/kg、约10mg/kg至约40mg/kg、约15mg/kg至约45mg/kg、约20mg/kg至约60mg/kg或约40mg/kg至约70mg/kg的量施用。例如约5mg/kg、约10mg/kg、约15mg/kg、约20mg/kg、约25mg/kg、约30mg/kg、约35mg/kg、约40mg/kg、约45mg/kg、约50mg/kg、约55mg/kg、约60mg/kg、约65mg/kg、约70mg/kg、约75mg/kg、约80mg/kg、约85mg/kg、约90mg/kg、约95mg/kg或约100mg/kg的量施用。在一些实施方案中，这种施用可以是每天一次或每天两次(BID)施用。
本领域技术人员会认识到，使用合适的、已知的和普遍接受的细胞和/或动物模型的体内和体外试验均可预测测试化合物治疗或预防指定病症的能力。
本领域技术人员会进一步认识到，可以根据临床和医学领域众所周知的方法，在健康个体和/或患有指定病症的那些个体中完成人体临床试验，包括首次在人体中的剂量范围和功效试验。
本文提供了用于例如治疗Ras途径-相关疾病或障碍例如癌症的药物试剂盒，其包括一个或多个包含药物组合物的容器，所述药物组合物包含效量的本文提供的化合物。如果期望，则这样的试剂盒可以进一步包括各种常规药物试剂盒成分中的一种或多种，例如具有一种或多种药学上可接受的载体的容器、另外的容器等，这对于本领域技术人员而言是显而易见的。试剂盒中还可以包括作为插页或标签的说明书，其指示待施用的成分的量、施用指南和/或混合所述成分的指南。
实施例
材料和方法
本文提供的化合物，包括其盐，可以使用已知的有机合成技术制备，并且可以根据许多可能的合成途径中的任何一种合成。
用于制备本文提供的化合物的反应可以在有机合成领域的技术人员可以容易地选择的合适溶剂中进行。合适的溶剂可以在进行反应的温度下与起始材料(反应物)、中间体或产物基本上不反应，例如可以在溶剂的冷冻温度至溶剂的沸腾温度范围内的温度。给定的反应可以在一种溶剂或多于一种溶剂的混合物中进行。根据具体的反应步骤的不同，本领域技术人员可以选择用于具体反应步骤的合适溶剂。
本文提供的化合物的制备可以涉及各种化学基团的保护和脱保护。本领域技术人员可以容易地确定保护和脱保护的需要以及适当保护基团的选择。保护基团的化学可以在例如Protecting Group Chemistry,1st Ed.,Oxford University Press,2000；March’sAdvanced Organic Chemistry:Reactions,Mechanisms,and Structure,5th Ed.,Wiley-Interscience Publication,2001；and Peturssion,S.等人,“Protecting Groups inCarbohydrate Chemistry,”J.Chem.Educ.,74(11),1297(1997)中找到。
可以根据本领域已知的任何合适的方法监测反应。例如，产物形成可以通过光谱方式监测，例如核磁共振光谱法(例如1H或13C)、红外光谱法、分光光度法(例如UV-可见)、质谱法或通过色谱法例如高效液相色谱法(HPLC)、液相色谱-质谱法(LCMS)或薄层色谱法(TLC)。本领域技术人员可以通过各种方法纯化化合物，包括高效液相色谱法(HPLC)(“Preparative LC-MS Purification:Improved Compound Specific MethodOptimization”K.F.Blom等人,J.Combi.Chem.6(6),874(2004)、正向硅胶色谱法和超临界流体色谱法(SFC)。
除非另有说明，否则所有溶剂和试剂均得自商业来源，并且无需进一步纯化即可使用。购买无水溶剂并按供应原样使用。通过薄层色谱法(TLC)监测反应，用UV灯(254nm)和KMnO4染色可视化。在400MHz下操作的Bruker Neo 400M光谱仪上获得NMR光谱。化学位移以来自所示溶剂中的四甲基硅烷共振的百万分率(δ)报告。使用Agilent 1260-6125B单四极质谱仪，使用Welch Biomate柱(C18，2.7μm，4.6*50mm)或waters H-Class SQD2系统获取LC-Mass谱。通过DAD(254nm和210nm和280nm)进行检测。手性HPLC在Waters acquity UPC2系统上在含碱下在Daicel chiralpak AD-H(5μm，4.6*250mm)、Daicel chiralpak OD-H(5μm，4.6*250mm)、Daicel chiralpak IG-3(3μm，4.6*150mm)、Chiral Technologies EuropeAD-3(3μm，3.0*150mm)和Trefoil TM Technology Trefoil TM AMY1(2.5μm，3.0*150mm)上进行。通过DAD(254nm)进行检测。使用Welch XB-C18柱(5μm，21.2*150mm)在GilsonTrilution LC系统上进行制备型HPLC。使用Welch Welflash快速柱(40-63μm)在BiotageIsolera Prime系统上进行快速色谱。除非另有说明，否则合成的化合物均具有≥95％的纯度。
缩写
℃＝摄氏度
1H NMR＝质子核磁共振光谱
ACN＝乙腈
AcOH＝乙酸
BAST＝双(2-甲氧基乙基)氨基三氟化硫
DAST＝二乙基氨基三氟化硫
Boc＝叔丁氧基羰基
con.＝浓
d＝双峰
DCM＝二氯甲烷
DIPEA＝N,N-二异丙基乙胺
DMF＝N,N-二甲基甲酰胺
DMF-DMA＝二甲基甲酰胺二甲基缩醛
DMSO＝二甲亚砜
Et＝乙基
EtOAc(或EA)＝乙酸乙酯
EtOH＝乙醇
ESI＝电喷雾电离
g＝克
hr＝小时
HATU＝1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐
HPLC＝高效液相色谱法
IBX＝2-碘氧基苯甲酸
IPA＝2-丙醇
LCMS＝液相色谱–质谱
M＝质量
m/z＝质-荷比
Me＝甲基
MeCN＝乙腈
MeOH＝甲醇
MeONa＝甲醇钠
mg＝毫克
mL＝毫升
mmol＝毫摩尔
mol＝摩尔
MS＝质谱
NBS＝N-溴琥珀酰亚胺
obsd.＝测定值
Pd(OAc)2＝乙酸钯(II)
Pd(dppf)Cl2＝(1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁)二氯化钯
Pd2(dba)3＝三(二亚苄基丙酮)二钯(0)
PE＝石油醚
ppm＝百万分率
rt＝室温
RuPhos＝2-二环己基膦基-2',6'-二异丙氧基联苯
RuPhos-Pd-G3＝(2-二环己基膦基-2',6'-二异丙氧基-1,1'-联苯基)[2-(2'-氨基-1,1'-联苯基)]钯(II)甲磺酸酯
s＝单峰
T3P＝丙膦酸酐
t＝三重峰
TBAF＝氟化四丁基铵
tBu＝叔丁基
TEA＝三乙胺
Tf＝三氟甲磺酸酯
TFA＝三氟乙酸
THF＝四氢呋喃
TLC＝薄层色谱法
XantPhos＝(9,9-二甲基-9H-呫吨-4,5-二基)双(二苯基磷杂环丙烷)
XantPhos-Pd-G3＝[(4,5-双(二苯基膦基)-9,9-二甲基呫吨)-2-(2'-氨基-1,1'-联苯基)]钯(II)甲磺酸盐
中间体1:6-环丙基-2-甲基-2,3-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,4,7(6H)-三酮
步骤A:1-环丙基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3,4-二甲酸3-(叔丁基)酯4-甲酯
向环丙胺(4.53g，79.27mmol，5.49mL)在EtOH/H2O(450mL/4mL)中的溶液中加入丙-2-炔酸叔丁酯(10g，79.27mmol，10.88mL)。将该混合物在RT搅拌16hr，然后加入丁-2-炔二酸二甲酯(11.26g，79.27mmol，9.71mL)，将该混合物在85℃搅拌16hr。将该混合物冷却至RT，浓缩。通过快速柱色谱法纯化(0至25％在石油醚中的乙酸乙酯)，得到3-(叔丁基)4-甲基1-环丙基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3,4-二甲酸酯(9.12g，31.09mmol，39％收率)，为黄色液体。MS测定值(ESI+):294.2[(M+H)+]。
步骤B:5-(叔丁氧基羰基)-1-环丙基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-4-甲酸
将1-环丙基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3,4-二甲酸3-(叔丁基)酯4-甲酯(3.2g，10.90mmol，1.0当量)溶于MeOH/H2O(24mL/6mL)。在0℃向该溶液中加入LiOH(393mg，16.4mmol，1.5当量)。然后将该溶液在RT搅拌2hr，然后浓缩。向粗混合物中加入乙酸乙酯和水。通过添加2M HCl将该混合物调节至pH＝5～6，用乙酸乙酯(50mL*3)萃取，干燥合并的有机相并浓缩，得到5-(叔丁氧基羰基)-1-环丙基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-4-甲酸(2.8g，10.07mmol，98％)，为淡黄色固体。MS测定值(ESI+):280.2[(M+H)+]。
步骤C:4-(2-(叔丁氧基羰基)-1-甲基肼-1-羰基)-1-环丙基-6-氧代-1,6-二氢吡 啶-3-甲酸叔丁酯
将5-(叔丁氧基羰基)-1-环丙基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-4-甲酸(2.9g，10.38mmol)溶于THF(30mL)，然后添加DIPEA(1.61g，12.46mmol)、HATU(4.74g，12.46mmol，1.2当量)和2-甲基肼-1-甲酸叔丁酯(1.82g，12.46mmol)。将该溶液在RT搅拌2hr，然后浓缩并减少，使其分配在乙酸乙酯(150mL)与碳酸氢钠饱和溶液(50mL)之间。用盐水(30mL)洗涤有机相，干燥，浓缩，并通过快速柱色谱法纯化(10-100％在石油醚中的乙酸乙酯)，得到4-(2-(叔丁氧基羰基)-1-甲基肼-1-羰基)-1-环丙基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲酸叔丁酯(4.14g，10.16mmol，97％收率)，为白色固体。MS测定值(ESI+):408.4[(M+H)+]。
步骤D:6-环丙基-2-甲基-2,3-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,4,7(6H)-三酮
将4-(2-(叔丁氧基羰基)-1-甲基肼-1-羰基)-1-环丙基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲酸叔丁酯(4.01g，9.82mmol，1.0当量)和HCl(4M的1,4-二噁烷溶液，90mL)的混合物在RT搅拌30min。然后在100℃加热30min。将该混合物冷却至RT，过滤，用乙酸乙酯(10mL*3)洗涤滤饼，得到6-环丙基-2-甲基-2,3-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,4,7(6H)-三酮(1.66g，7.12mmol，73％收率)，为黄色固体。MS测定值(ESI+):234.4[(M+H)+]。
实施例1:(R)-6-环丙基-2-甲基-4-((1-(萘-1-基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
步骤A:6-环丙基-2-甲基-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基三 氟甲磺酸酯
在N2中将6-环丙基-2-甲基-2,3-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,4,7(6H)-三酮(100mg，0.43mmol)和吡啶(50.87mg，643.16μmol)在DCM(1.5mL)中的混合物冷却至0℃。加入三氟甲磺酸酐(181.46mg，643.16μmol)在DCM(1.5mL)中的溶液，并将该混合物在0℃搅拌1hr。用DCM(20mL)稀释该混合物，并用水(5mL)淬灭。干燥有机相，浓缩，并通过快速柱色谱法纯化(0-100％在环己烷中的乙酸乙酯)，得到6-环丙基-2-甲基-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基三氟甲磺酸酯(102mg，0.28mmol，65％收率)，为黄色固体。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.04(s,1H),7.35(s,1H),3.63(s,3H),3.59-3.54(m,1H),1.35-1.31(m,2H),1.01-0.95(m,2H)。
步骤B:(R)-6-环丙基-2-甲基-4-((1-(萘-1-基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3, 4-d]哒嗪-1,7-二酮
用N2给6-环丙基-2-甲基-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基三氟甲磺酸酯(30mg，0.082mmol)、(R)-1-(萘-1-基)乙-1-胺(16.88mg，0.098mmol)、Cs2CO3(53.5mg，0.16mmol)和Xantphos(4.75mg，0.008mmol)在1,4-二噁烷(1.0mL)中的混合物脱气5min，然后加入Pd2(dba)3(7.5mg，0.0081mmol)，并将该混合物加热至100℃ 20hr。浓缩该反应混合物，并将残余物溶于DMSO，且通过反相HPLC纯化，得到(R)-6-环丙基-2-甲基-4-((1-(萘-1-基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(3.1mg，0.008mmol，9％收率)，为黄色固体。MS测定值(ESI+):387.3[(M+H)+]。
实施例2:(R)-6-环丙基-2-甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
步骤A:6-环丙基-2-甲基-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基2, 4,6-三异丙基苯磺酸酯
在0℃、N2中将6-环丙基-2-甲基-2,3-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,4,7(6H)-三酮(400mg，1.7mmol，1.0当量)和N,N-二异丙基乙胺(658mg，5.1mmol，3.0当量)溶于DCM(20mL)，并加入2,4,6-三异丙基苯磺酰氯(566mg，1.87mmol，1.1当量)。将该混合物温热至RT，搅拌2hr。浓缩溶剂，用碳酸氢钠饱和溶液(50mL)洗涤该混合物，用DCM(150mL)萃取。用硫酸钠干燥有机相，浓缩，并通过快速柱色谱法纯化(10-20％乙酸乙酯和1％在石油醚中的DCM)，得到6-环丙基-2-甲基-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基2,4,6-三异丙基苯磺酸酯(560mg，1.12mmol，66％收率)，为黄色固体。MS测定值(ESI+):500.5[(M+H)+]。
步骤B:(R)-6-环丙基-2-甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)- 2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
在N2中将6-环丙基-2-甲基-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基2,4,6-三异丙基苯磺酸酯(50mg，0.10mmol，1.0当量)、(R)-1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙-1-胺(28mg，0.12mmol，1.2当量)、Xantphos Pd G3(9mg，0.01mmol，0.1当量)和Cs2CO3(98mg，0.3mmol，3.0当量)溶于1,4-二噁烷(2mL)。将该混合物在100℃搅拌16hr。冷却该混合物，过滤并浓缩。通过制备型TLC预纯化粗产物(3％在DCM中的MeOH)，得到不纯的产物残余物(20mg，黄色固体)。通过反相HPLC进一步纯化产物，得到(R)-6-环丙基-2-甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(15mg，0.036mmol，35％收率)，为黄色固体。MS测定值(ESI+):419.2[(M+H)+]。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)d ppm:8.74(s,1H),7.72(d,J＝7.6Hz,1H),7.52(d,J＝7.4Hz,1H),7.35(s,1H),7.23(d,J＝6.4Hz,1H),6.81(s,1H),5.33–5.07(m,1H),3.61–3.45(m,1H),3.24(s,3H),2.53(s,3H),1.46(d,J＝6.8Hz,3H),1.19–1.11(m,2H),1.08(m,2H)。
实施例3:(R)-8-溴-6-环丙基-2-甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
向(R)-6-环丙基-2-甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(300mg，0.71mmol，1.0当量)和乙酸钾(70mg，0.71mmol，1.0当量)在乙酸(10mL)中的溶液中加入溴(138mg，0.86mmol，1.2当量)。将该混合物加热至70℃，并搅拌2hr。用水(30mL)洗涤该混合物，并用乙酸乙酯萃取。干燥有机相，浓缩，并通过制备型-TLC纯化(3％在DCM中的MeOH)，得到不纯产物(120mg)。通过反相HPLC进一步纯化粗产物，得到(R)-8-溴-6-环丙基-2-甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(37mg，0.072mmol，10％收率)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO)δppm 8.68(s,1H),7.72(d,J＝7.8Hz,1H),7.52(d,J＝7.6Hz,1H),7.34(t,J＝7.8Hz,1H),7.16(d,J＝6.2Hz,1H),5.23–5.03(m,1H),3.67–3.49(m,1H),3.21(s,3H),2.53(s,3H),1.46(d,J＝6.8Hz,3H),1.19–1.05(m,4H)。MS测定值(ESI+):497.2/499.2(79Br/81Br)[(M+H)+]。
实施例4:(R)-2-甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-6-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
步骤A:6-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1,6-二氢吡啶-3,4-二甲酸3-(叔丁基) 酯4-甲酯
将四氢-2H-吡喃-4-胺(1g，9.88mmol，1.0当量)溶于乙醇/H2O(300mL，V/V＝500/1)，滴加丙酸叔丁酯(1.2g，9.88mmol，1.0当量)。将该混合物在RT搅拌24hr。此时，加入丁-2-炔二酸二甲酯(1.4g，9.88mmol，1.0当量)，并将该混合物加热至回流24hr。将该混合物冷却至RT，并加入甲醇钠(523mg，9.88mmol，1.0当量)，且在RT再搅拌8hr。浓缩该混合物，并直接通过快速柱色谱法(10-20％在石油醚中的乙酸乙酯)纯化，得到6-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1,6-二氢吡啶-3,4-二甲酸3-(叔丁基)酯4-甲酯(2.2g，6.53mmol，66％收率)，为淡黄色固体。MS测定值(ESI+):338.3[(M+H)+]。
步骤B:5-(叔丁氧基羰基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1,2-二氢吡啶-4-甲 酸
将6-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1,6-二氢吡啶-3,4-二甲酸3-(叔丁基)酯4-甲酯(1.1g，3.26mmol，1.0当量)溶于MeOH(20mL)，加入氢氧化锂(156mg，6.52mmol，2.0当量)。将该混合物在RT搅拌过夜，然后浓缩。使残余物分配在乙酸乙酯(50mL)与1M HCl溶液(5mL)之间。用硫酸钠干燥有机相，并浓缩，得到5-(叔丁氧基羰基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1,2-二氢吡啶-4-甲酸(860mg，2.66mmol，82％收率)，为淡黄色固体。MS测定值(ESI+):324.3[(M+H)+]。
步骤C:4-(2-(叔丁氧基羰基)-1-甲基肼-1-羰基)-6-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4- 基)-1,6-二氢吡啶-3-甲酸叔丁酯
用2-甲基肼-1-甲酸叔丁酯(380mg，2.6mmol，1.2当量)处理5-(叔丁氧基羰基)-2-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1,2-二氢吡啶-4-甲酸(700mg，2.17mmol，1.0当量)、HATU(988mg，2.60mmol，1.2当量)和N,N-二异丙基乙胺(336mg，2.6mmol，1.2当量)在THF(10mL)中的混合物，将该混合物在RT搅拌过夜，然后浓缩。使粗残余物分配在乙酸乙酯(150mL)与碳酸氢钠饱和溶液(50mL)之间。用盐水(20mL)洗涤有机相，用硫酸钠干燥，浓缩，并通过快速柱色谱法(1％在DCM中的MeOH)纯化，得到4-(2-(叔丁氧基羰基)-1-甲基肼-1-羰基)-6-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1,6-二氢吡啶-3-甲酸叔丁酯(760mg，1.68mmol，78％收率)，为淡黄色固体。MS测定值(ESI+):452.3[(M+H)+]。
步骤D:2-甲基-6-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2,3-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,4,7 (6H)-三酮
将4-(2-(叔丁氧基羰基)-1-甲基肼-1-羰基)-6-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1,6-二氢吡啶-3-甲酸酯(700mg，1.55mmol，1.0当量)溶于盐酸(15mL，4M的1,4-二噁烷溶液)。将该混合物在RT搅拌30min，然后加热至100℃，并搅拌30min。将该混合物冷却至RT，减压过滤得到的固体，得到2-甲基-6-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2,3-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,4,7(6H)-三酮(328mg，1.18mmol，76％收率)，为淡黄色固体。MS测定值(ESI+):278.1[(M+H)+]。
步骤E:2-甲基-1,7-二氧代-6-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4- d]哒嗪-4-基2,4,6-三异丙基苯磺酸酯
在0℃、N2中将2-甲基-6-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2,3-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,4,7(6H)-三酮(100mg，0.44mmol，1.0当量)和N,N-二异丙基乙胺(170mg，1.32mmol，3.0当量)溶于DCM(5mL)，并加入2,4,6-三异丙基苯磺酰氯(148mg，0.48mmol，1.1当量)。将该混合物温热至RT，搅拌2hr，并浓缩。使粗混合物分配在碳酸氢钠饱和溶液(50mL)与DCM(150mL)之间。干燥有机相，浓缩，并通过快速柱色谱法(10-20％乙酸乙酯和1％在石油醚中的DCM)纯化，得到2-甲基-1,7-二氧代-6-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基2,4,6-三异丙基苯磺酸酯(159mg，0.29mmol，66％收率)，为黄色固体。MS测定值(ESI+):544.5[(M+H)+]。
步骤F:(R)-2-甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-6-(四氢- 2H-吡喃-4-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
在N2中将2-甲基-1,7-二氧代-6-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基2,4,6-三异丙基苯磺酸酯(100mg，0.18mmol，1.0当量)、(R)-1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙-1-胺(43mg，0.216mmol，1.2当量)、Xantphos Pd G3(15.13mg，0.018mmol，0.1当量)和Cs2CO3(180mg，0.55mmol，2.0当量)溶于1,4-二噁烷(8mL)。将该混合物在100℃搅拌16hr。然后过滤该混合物，并浓缩。通过制备型TLC预纯化粗残余物(3％在DCM中的MeOH)，得到不纯产物(40mg，黄色固体)。通过反相HPLC进一步纯化产物，得到(R)-2-甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-6-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(25mg，0.054mmol，29％收率)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)d ppm:8.88(s,1H),7.71(d,J＝7.8Hz,1H),7.53(d,J＝7.8Hz,1H),7.38(d,J＝7.8Hz,1H),7.30(d,J＝6.4Hz,1H),6.86(s,1H),5.16(m,2H),4.19–4.03(m,2H),3.55(s,2H),3.24(s,3H),2.54(s,3H),2.10(m,2H),1.82(m,2H),1.48(d,J＝6.8Hz,3H)。MS测定值(ESI+):463.4[(M+H)+]。
实施例5:(R)-2-甲基-6-(四氢-2H-吡喃-4-基)-4-((1-(3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
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将(2-甲基-1,7-二氧代-6-四氢吡喃-4-基-吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基)2,4,6-三异丙基苯磺酸酯(150mg，0.28mmol，1.0当量)、Cs2CO3(269.83mg，0.83mmol，3.0当量)、Xantphos Pd G3(26.17mg，0.03mmol，0.1当量)和(1R)-1-[3-(三氟甲基)苯基]乙胺(78.29mg，0.41mmol，1.5当量)在1,4-二噁烷(5mL中的溶液在100℃搅拌16hr。然后将该混合物冷却至RT，通过硅藻土垫过滤，并浓缩，并通过制备型HPLC纯化，得到(R)-2-甲基-6-(四氢-2H-吡喃-4-基)-4-((1-(3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(34mg，0.07mmol，28％收率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.01(s,1H),7.66(s,1H),7.59(d,J＝7.4Hz,1H),7.52(d,J＝7.6Hz,1H),7.45(t,J＝7.6Hz,1H),7.37(s,1H),5.34(m,1H),5.03(m,1H),4.13(m,2H),3.62(m,2H),3.46(s,3H),1.96(s,3H),1.61(d,J＝6.6Hz,5H)。MS测定值(ESI+):449.5[(M+H)+]。
实施例6:(R)-6-环丙基-8-甲氧基-2-甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
步骤A:8-溴-6-环丙基-2-甲基-2,3-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,4,7(6H)-三酮
将6-环丙基-2-甲基-2,3-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,4,7(6H)-三酮(2g，8.6mmol，1.0当量)溶于乙酸(40mL)。向该反应体系中加入乙酸钾(706mg，8.6mmol，1.0当量)和溴(1.6g，10.3mmol，1.2当量)。将该溶液在70℃搅拌3hr。浓缩该溶液，将粗混合物混悬于乙酸乙酯(20mL)，并过滤，得到8-溴-6-环丙基-2-甲基-2,3-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,4,7(6H)-三酮(1.66g，2.11mmol，62％收率)，为黄色固体，其不经进一步纯化即可使用。MS测定值(ESI+):312.2/314.2(79Br/81Br)[(M+H)+]。
步骤B:6-环丙基-8-甲氧基-2-甲基-2,3-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,4,7(6H)-三 酮
将8-溴-6-环丙基-2-甲基-2,3-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,4,7(6H)-三酮(100mg，0.32mmol，1.0当量)溶于MeOH(5mL)，并加入甲醇钠(259.2mg，4.8mmol，15.0当量)。将该溶液在90℃搅拌15hr。然后过滤该混合物，浓缩有机相，并通过快速柱色谱法(10％在DCM中的MeOH)纯化，得到产物6-环丙基-8-甲氧基-2-甲基-2,3-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,4,7(6H)-三酮(70mg，0.27mmol，83％收率)，为黄色固体。MS测定值(ESI+):264.3[(M+H)+]。
步骤C:6-环丙基-8-甲氧基-2-甲基-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒 嗪-4-基2,4,6-三异丙基苯磺酸酯
在0℃、N2中将6-环丙基-8-甲氧基-2-甲基-2,3-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,4,7(6H)-三酮(1g，3.80mmol，1.0当量)和N,N-二异丙基乙胺(7.60mmol，982mg，2当量)溶于DCM(20mL)，并加入2,4,6-三异丙基苯磺酰氯(1.265g，4.18mmol，1.1当量)。将该混合物温热至RT，并搅拌2hr。浓缩该溶液，并用碳酸氢钠饱和溶液(50mL)洗涤粗混合物，并用DCM(150mL)萃取。干燥有机相，浓缩，并通过快速柱色谱法(10-20％乙酸乙酯和1％在石油醚中的DCM)纯化，得到6-环丙基-8-甲氧基-2-甲基-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基2,4,6-三异丙基苯磺酸酯(1.228g，2.32mmol，61％收率)，为黄色固体。MS测定值(ESI+):530.2[(M+H)+]。
步骤D:(R)-6-环丙基-8-甲氧基-2-甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙 基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
在N2中将6-环丙基-8-甲氧基-2-甲基-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基2,4,6-三异丙基苯磺酸酯(600mg，1.13mmol，1.0当量)、(R)-1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙-1-胺(276mg，1.36mmol，1.2当量)、Xantphos Pd G3(189mg，0.23mmol，0.2当量)和Cs2CO3(1.11g，3.40mmol，3.0当量)溶于1,4-二噁烷(25mL)。将该混合物在110℃搅拌16hr。过滤得到的混合物，并浓缩有机相。通过制备型-TLC(3％在DCM中的MeOH)预纯化粗产物，得到不纯产物残余物(110mg)。通过反相HPLC进一步纯化产物，得到(R)-6-环丙基-8-甲氧基-2-甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(59mg，0.13mmol，12％收率)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)d ppm:8.37(s,1H),7.71(d,J＝7.8Hz,1H),7.52(d,J＝7.4Hz,1H),7.34(t,J＝7.8Hz,1H),7.05(d,J＝6.4Hz,1H),5.22–5.03(m,1H),3.75(s,3H),3.60–3.45(m,1H),3.17(s,3H),2.52(s,3H),1.45(d,J＝6.8Hz,3H),1.18–1.10(m,2H),1.08(m,2H)。MS测定值(ESI+):449.2[(M+H)+]。
实施例7:(R)-6-环丙基-2,8-二甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
步骤A:1,6-环丙基-2,8-二甲基-2,3-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,4,7(6H)-三酮
在N2中将8-溴-6-环丙基-2-甲基-2,3-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,4,7-(6H)-三酮(200mg，0.64mmol，1.0当量)、2,4,6-三甲基-1,3,5,2,4,6-三氧杂硼杂环己烷(482.6mg，1.92mmol，3.0当量)、Pd(PPh3)4(74.1mg，0.06mmol，0.1当量)和Cs2CO3(626.3mg，1.92mmol，3.0当量)溶于无水1,4-二噁烷(5.5mL)。在N2中将该混合物在100℃搅拌16hr。将该混合物冷却至RT，用乙酸乙酯(20mL)稀释，依次用H2O(15mL*3)和盐水(15mL*3)洗涤。干燥有机相，浓缩，并通过快速柱色谱法(9％在DCM中的MeOH)纯化，得到6-环丙基-2,8-二甲基-2,3-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,4,7(6H)-三酮(80mg，0.32mmol，46％收率)，为黄色固体。MS测定值(ESI+):248.1[(M+H)+]。
步骤B:6-环丙基-2,8-二甲基-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-4- 基2,4,6-三异丙基苯磺酸酯
在0℃、N2中向6-环丙基-2,8-二甲基-2,3-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,4,7(6H)-三酮(90mg，0.36mmol，1.0当量)在DCM(4mL)中的混合物中加入DIPEA(141.13mg，1.09mmol，3.0当量)和2,4,6-三异丙基苯磺酰氯(110.24mg，0.36mmol，1.0当量)。将该混合物在RT搅拌2hr。用DCM(10mL)稀释该混合物，用H2O(8mL*3)、盐水(6mL*3)洗涤。干燥有机相，浓缩，并通过制备型-TLC纯化(25％在石油醚中的乙酸乙酯，Rf＝0.4)，得到6-环丙基-2,8-二甲基-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基2,4,6-三异丙基苯磺酸酯(110mg，0.21mmol，59％收率)，为黄色树胶状物。MS测定值(ESI+):514.4[(M+H)+]。
步骤C:(R)-6-环丙基-2,8-二甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨 基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
在N2中将6-环丙基-2,8-二甲基-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基2,4,6-三异丙基苯磺酸酯(60mg，0.12mmol，1.0当量)、(R)-1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙-1-胺盐酸盐(28.48mg，0.14mmol，1.2当量)、XantPhos-Pd-G3(11.23mg，0.01mmol，0.1当量)和Cs2CO3(114.18mg，0.35mmol，3.0当量)的混合物溶于干1,4-二噁烷(0.4mL)。将该混合物在100℃搅拌16hr。将该混合物冷却至RT，用乙酸乙酯(3mL)稀释，依次用H2O(3mL*3)和盐水(2mL*3)洗涤。干燥有机层，浓缩，通过制备型-TLC纯化(3％在DCM中的MeOH，Rf＝0.2)，随后通过反相HPLC纯化，得到(R)-6-环丙基-2,8-二甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(5mg，0.01mmol，10％收率)，为黄色固体。MS测定值(ESI+):433.3[(M+H)+]。
实施例8:(R)-6-环丙基-2-乙基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
步骤A:5-(叔丁氧基羰基)-1-环丙基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-4-甲酸锂
在RT向1-环丙基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3,4-二甲酸3-(叔丁基)酯4-甲酯(150mg，0.51mmol，1.0当量)在MeOH(5.0mL)和THF(5.0mL)中的溶液中加入氢氧化锂(37mg，1.53mmol，3.0当量)的水(5.0mL)溶液。将该混合物在RT搅拌16hr。浓缩该混合物，得到5-(叔丁氧基羰基)-1-环丙基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-4-甲酸锂(190mg，粗品)，为黄色固体。将残余物不经进一步纯化即可用于下一步。MS测定值(ESI+):280.3[(M+H)+]。
步骤B:4-(2-(叔丁氧基羰基)-1-乙基肼-1-羰基)-1-环丙基-6-氧代-1,6-二氢吡 啶-3-甲酸叔丁酯
向5-(叔丁氧基羰基)-1-环丙基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-4-甲酸锂(190mg，粗品)在N,N-二甲基甲酰胺(3.0mL)中的溶液中加入N-乙基-N-异丙基-丙-2-胺(264mg，2.04mmol，355.48uL)和HATU(390mg，1.02mmol)。将该混合物在RT搅拌15分钟，然后加入2-乙基肼-1-甲酸叔丁酯(142mg，0.89mmol)。将该混合物在RT搅拌16hr。加入水，用DCM(10mL×3)萃取该混合物。用水(10mL)、盐水(10mL)洗涤合并的有机相，然后用硫酸钠干燥。过滤有机相，浓缩，并通过快速柱色谱法纯化(0-70％在石油醚中的乙酸乙酯)，得到4-(2-(叔丁氧基羰基)-1-乙基肼-1-羰基)-1-环丙基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲酸叔丁酯(150mg，0.36mmol，52％收率)，为淡黄的固体。MS测定值(ESI+):422.4[(M+H)+]。
步骤C:6-环丙基-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,4,7(6H)-三酮
在RT向4-(2-(叔丁氧基羰基)-1-乙基肼-1-羰基)-1-环丙基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲酸叔丁酯(150mg，0.36mmol，1.0当量)在1,4-二噁烷(1.0mL)中的溶液中加入HCl(4M的1,4-二噁烷溶液，3.0mL)。将该混合物在RT搅拌1hr。使温度升至100℃，搅拌0.5hr。将该混合物冷却至RT，并过滤固体，得到6-环丙基-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,4,7(6H)-三酮(60mg，0.24mmol，68％收率)，为黄色固体。MS测定值(ESI+):248.4[(M+H)+]。
步骤D:6-环丙基-2-乙基-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基2, 4,6-三异丙基苯磺酸酯
向6-环丙基-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,4,7(6H)-三酮(60mg，0.24mmol，1.0当量)在DCM(12.0mL)中的溶液中加入N,N-二异丙基乙胺(125mg，0.97mmol，169.07uL，4.0当量)和2,4,6-三异丙基苯磺酰氯(81mg，0.27mmol，1.1当量)。将该混合物在RT搅拌3hr。浓缩该反应体系，并用DCM和水稀释。用DCM(10mL×3)萃取该混合物。用水(20mL)、盐水(20mL)洗涤合并的有机相，用硫酸钠干燥。过滤有机相，浓缩，并通过快速柱色谱法(0-40％在石油醚中的乙酸乙酯)纯化，得到6-环丙基-2-乙基-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基2,4,6-三异丙基苯磺酸酯(120mg，0.23mmol，96％收率)，为黄色固体。MS测定值(ESI+):514.6[(M+H)+]。
步骤E:(R)-6-环丙基-2-乙基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)- 2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
在N2中将6-环丙基-2-乙基-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基2,4,6-三异丙基苯磺酸酯(100mg，0.19mmol，1.0当量)、(1R)-1-[2-甲基-3-(三氟甲基)苯基]乙胺盐酸盐(119mg，0.58mmol，3.0当量)、Xantphos-Pd-G3(64mg，0.08mmol，0.4当量)和Cs2CO3(571mg，1.75mmol，9.0当量)的混合物溶于1,4-二噁烷(16.0mL)。将该混合物在110℃搅拌16hr。通过快速柱色谱法(0-15％在DCM中的MeOH)纯化该混合物，得到粗产物。通过反相HPLC进一步纯化粗产物，得到(R)-6-环丙基-2-乙基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(3.5mg，0.008mmol，4％收率)，为黄色固体。MS测定值(ESI+):433.3[(M+H)+]。
实施例9:(R)-6-(1-乙酰基哌啶-4-基)-2-甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
步骤A:1-(1-乙酰基哌啶-4-基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3,4-二甲酸3-(叔丁基) 酯4-甲酯
将1-(4-氨基-1-哌啶基)乙酮(1g，7.03mmol，1.21mL)和丙-2-炔酸叔丁酯(887.16mg，7.03mmol)在乙醇(40mL)和水(0.040mL)中的混合物在RT搅拌18hr。然后滴加丁-2-炔二酸二甲酯(999.37mg，7.03mmol)，将该混合物加热至85℃ 2天。将粗混合物冷却至RT，用甲醇钠(378.17mg，7.00mmol)处理。将得到的深色混悬液在RT搅拌15min，浓缩，并通过快速柱色谱法(0-100％在环己烷中的乙酸乙酯，随后0-10％在乙酸乙酯中的MeOH)纯化，得到1-(1-乙酰基哌啶-4-基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3,4-二甲酸3-(叔丁基)酯4-甲酯，为黄色泡沫(0.95g，74％纯度)，照此用于下一步，假设100％纯度。MS测定值(ESI+):323.2[(M-tBu)+]。步骤B:1-(1-乙酰基哌啶-4-基)-5-(叔丁氧基羰基)-2-氧代-1,2-二氢 吡啶-4-甲酸
将在MeOH(10mL)中的1-(1-乙酰基哌啶-4-基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3,4-二甲酸3-(叔丁基)酯4-甲酯(0.95g，74％纯度)和氢氧化锂(1M水溶液，5.02mL)在RT搅拌1hr。减压蒸发MeOH，用乙酸乙酯(20mL)和水(20mL)洗涤残余物。用1M HCl溶液(5mL)酸化水相，用乙酸乙酯(2×20mL)萃取。用硫酸钠干燥有机相，并浓缩，得到1-(1-乙酰基哌啶-4-基)-5-(叔丁氧基羰基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-4-甲酸，为淡黄色固体(540mg，1.48mmol，21％，2步)。MS测定值(ESI-):363.2[(M-H)-]。
步骤C:1-(1-乙酰基哌啶-4-基)-4-(2-(叔丁氧基羰基)-1-甲基肼-1-羰基)-6-氧 代-1,6-二氢吡啶-3-甲酸叔丁酯
用2-甲基肼-1-甲酸叔丁酯(259.97mg，1.78mmol)处理1-(1-乙酰基哌啶-4-基)-5-(叔丁氧基羰基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-4-甲酸(0.54g，1.48mmol)、N,N-二异丙基乙胺(229.83mg，1.78mmol，309.74uL)和HATU(676.16mg，1.78mmol)在2-Me-THF(10mL)中的混合物，将该混合物在RT搅拌2hr。浓缩该溶液，用乙酸乙酯(150mL)和碳酸氢钠饱和溶液(50mL)洗涤残余物。用盐水(20mL)洗涤有机相，干燥，浓缩，并通过快速柱色谱法(10-100％在环己烷中的乙酸乙酯)纯化，得到1-(1-乙酰基哌啶-4-基)-4-(2-(叔丁氧基羰基)-1-甲基肼-1-羰基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲酸叔丁酯，为淡黄色固体(360mg，0.73mmol，49％收率)。MS测定值(ESI-):491.4[(M-H)-]。
步骤D:6-(1-乙酰基哌啶-4-基)-2-甲基-2,3-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,4,7 (6H)-三酮
将1-(1-乙酰基哌啶-4-基)-4-(2-(叔丁氧基羰基)-1-甲基肼-1-羰基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲酸叔丁酯(360mg，0.73mmol)和氯化氢的1,4-二噁烷溶液(4M，14.6mmol，3.65mL)的混合物在RT搅拌15分钟，然后在100℃加热1hr。将该混合物冷却至RT，过滤，得到6-(1-乙酰基哌啶-4-基)-2-甲基-2,3-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,4,7(6H)-三酮(165mg，0.52mmol，71％收率)，为黄色固体。MS测定值(ESI+):319.2[(M+H)+]。
步骤E:6-(1-乙酰基哌啶-4-基)-2-甲基-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4- d]哒嗪-4-基三氟甲磺酸酯
在N2气氛中将6-(1-乙酰基哌啶-4-基)-2-甲基-2,3-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,4,7(6H)-三酮(80mg，0.25mmol)和吡啶(29.82mg，0.38mmol，30.49uL)在DCM(1.5mL)中的混合物冷却至0℃。加入三氟甲磺酸酐(106.36mg，0.38mmol，63.31uL)在DCM(1.5mL)中的溶液，将该混合物在0℃搅拌30min。此时，再加入吡啶(29.82mg，0.38mmol，30.49uL)和三氟甲磺酸酐(106.36mg，0.38mmol，63.31uL)，将该混合物在0℃再搅拌30min。用DCM(20mL)稀释该混合物，并用水(5mL)淬灭。干燥有机相，浓缩，并通过快速柱色谱法(0-100％在环己烷中的乙酸乙酯，然后0-10％在乙酸乙酯中的MeOH)纯化，得到6-(1-乙酰基哌啶-4-基)-2-甲基-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基三氟甲磺酸酯，为黄色固体(31mg，0.07mmol，27％)。MS测定值(ESI+):451.3[(M+H)+]。
步骤F:(R)-6-(1-乙酰基哌啶-4-基)-2-甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯 基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
用N2给三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(6.89mg，6.66μmol)、Cs2CO3(43.41mg，133.22μmol)和Xantphos(7.7mg)在1,4-二噁烷(1mL)中的混合物脱气5min，然后在100℃搅拌1hr，然后加入6-(1-乙酰基哌啶-4-基)-2-甲基-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基三氟甲磺酸酯(30mg，0.067mmol)和(R)-1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙-1-胺(16.24mg，0.080mmol)在1,4-二噁烷(1mL)中的混合物，将该混合物在100℃再搅拌19hr。将该混合物冷却至RT，浓缩并通过制备型HPLC纯化，得到(R)-6-(1-乙酰基哌啶-4-基)-2-甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮，为黄色固体(1.5mg，0.003mmol，4％)。MS测定值(ESI+)504.3[(M+H)+]。
实施例10:(R)-6-环丙基-2-甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-8-甲腈
将(R)-8-溴-6-环丙基-2-甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(20mg，40μmol，1当量)、1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁(22.2mg，40μmol，1当量)、三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(36.7mg，40μmol，1当量)和氰化锌(7mg，60μmol，1.2当量)在DMF(0.2mL)中的混合物在120℃在氮气中搅拌16小时。然后将该混合物冷却至室温，使其分配在水与乙酸乙酯之间。用硫酸钠干燥有机相，过滤并浓缩。将粗产物与来源于与35mg(R)-8-溴-6-环丙基-2-甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮相同反应原料的粗产物合并。通过制备型TLC(30:1DCM/MeOH)纯化合并的粗物质，并通过反相HPLC进一步纯化，得到(R)-6-环丙基-2-甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-8-甲腈(8mg，17.4μmol，16％收率)。MS测定值(ESI+)444.2[(M+H)+]。
实施例11:(R)-8-氯-6-环丙基-2-甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
将(R)-6-环丙基-2-甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(70mg，167μmol)和1-氯吡咯烷-2,5-二酮(24.57mg，184μmol)溶于CH3CN(5mL)。将该混合物加热至70℃，并搅拌1hr。减压浓缩该反应混合物，并通过反相HPLC纯化，得到(R)-8-氯-6-环丙基-2-甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例11，47mg，62％收率)。MS测定值(ESI+):453.2(M+H)+。
实施例12:(R)-8-氨基-6-环丙基-2-甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
将(R)-8-溴-6-环丙基-2-甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(30mg，60μmol)溶于NH3(7M的MeOH溶液，5mL)。将该混合物加热至110℃，搅拌16hr。减压除去溶剂，并通过反相HPLC纯化粗化合物，得到(R)-8-氨基-6-环丙基-2-甲基-4-((1-(2-甲基-3(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(5mg，19％收率)。MS测定值(ESI+):434.2(M+H)+。
实施例13:6-((1r,3r)-3-羟基环丁基)-2-甲基-4-(((R)-1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
步骤A:1-((1r,3r)-3-羟基环丁基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3,4-二甲酸3-(叔丁 基)酯4-甲酯
向反式-3-氨基环丁醇(2.00g，22.96mmol)在EtOH(50mL)中的溶液中加入丙-2-炔酸叔丁酯(3.04g，24.10mmol，3.31mL)和DIPEA(12.0mL，8.90g，68.87mmol)。将该混合物在室温搅拌16hr，并向该反应体系中加入丁-2-炔二酸二甲酯(3.59g，25.25mmol，3.09mL)。将该反应混合物在80℃再搅拌16hr。真空浓缩该反应混合物，并通过硅胶色谱法纯化残余物(用PE:EtOAc＝3:1，v/v洗脱)，得到1-((1r,3r)-3-羟基环丁基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3,4-二甲酸3-(叔丁基)酯4-甲酯(3.00g，34％收率，85％纯度)。MS测定值(ESI+):324.4(M+H)+。
步骤B:5-(叔丁氧基羰基)-1-((1r,3r)-3-羟基环丁基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶- 4-甲酸
向1-((1r,3r)-3-羟基环丁基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3,4-二甲酸3-(叔丁基)酯4-甲酯(2.5g，6.56mmol，85％纯度)在MeOH(20mL)、THF(20mL)和H2O(20mL)中的溶液中加入LiOH(555mg，23.20mmol)。将该混合物在20℃搅拌3hr。真空浓缩该混合物，得到5-(叔丁氧基羰基)-1-((1r,3r)-3-羟基环丁基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-4-甲酸(2.1g，粗品)，为黄色固体，其不经进一步纯化即可用于下一步。MS测定值(ESI+):310.4(M+H)+。
步骤C:4-(2-(叔丁氧基羰基)-1-甲基肼-1-羰基)-1-((1r,3r)-3-羟基环丁基)- 6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲酸叔丁酯
向5-(叔丁氧基羰基)-1-((1r,3r)-3-羟基环丁基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-4-甲酸(2.4g，粗品)在DMF(3mL)中的溶液中加入N-(甲基氨基)氨基甲酸叔丁酯(1.59g，10.86mmol)、DIPEA(3.00g，23.28mmol)和HATU(5.90g，15.52mmol)。将该混合物在室温搅拌16hr。用水(60mL)使该反应混合物淬灭，用EtOAc(80mL×3)萃取。用水(60mL×3)洗涤有机层，用Na2SO4干燥，并过滤。真空浓缩滤液，并通过快速柱纯化残余物(用PE:EtOAc＝100:0至50:50，v/v洗脱)，得到4-(2-(叔丁氧基羰基)-1-甲基肼-1-羰基)-1-((1r,3r)-3-羟基环丁基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲酸叔丁酯(2g，50％收率，85％纯度)。MS测定值(ESI+):438.5(M+H)+。
步骤D:1-((1r,3r)-3-羟基环丁基)-4-(1-甲基肼-1-羰基)-6-氧代-1,6-二氢吡 啶-3-甲酸叔丁酯盐酸盐
在0℃将4-(2-(叔丁氧基羰基)-1-甲基肼-1-羰基)-1-((1r,3r)-3-羟基环丁基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲酸叔丁酯(500mg，0.97mmol，85％纯度)溶于HCl/二噁烷(4M，20mL)。然后将该混合物在rt搅拌3hr。真空浓缩该反应混合物，得到1-((1r,3r)-3-羟基环丁基)-4-(1-甲基肼-1-羰基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲酸叔丁酯盐酸盐(385mg，粗品)，为黄色固体，其不经进一步纯化即可用于下一步。MS测定值(ESI+):338.4(M+H)+。
步骤E:6-((1r,3r)-3-羟基环丁基)-2-甲基-2,3-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,4,7 (6H)-三酮
在0℃将1-((1r,3r)-3-羟基环丁基)-4-(1-甲基肼-1-羰基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲酸叔丁酯盐酸盐(385mg，粗品)溶于NH3/MeOH(7M，20mL)。将该反应体系在20℃搅拌48hr。真空浓缩该反应混合物，得到残余物，通过快速柱纯化(用PE:EtOAc＝4:6，v/v洗脱)，得到6-((1r,3r)-3-羟基环丁基)-2-甲基-2,3-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,4,7(6H)-三酮(240mg，93％收率，2步)，为黄色固体。MS测定值(ESI+):264.3(M+H)+。
步骤F:6-((1r,3r)-3-羟基环丁基)-2-甲基-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并 [3,4-d]哒嗪-4-基2,4,6-三异丙基苯磺酸酯
在0℃向6-((1r,3r)-3-羟基环丁基)-2-甲基-2,3-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,4,7(6H)-三酮(100mg，380μmol，1.0当量)在DCM(5mL)中的溶液中加入DIPEA(147mg，1.14mmol)和2,4,6-三异丙基苯磺酰氯(138.0mg，456μmol)。将该反应体系在rt搅拌2hr。用水(10mL)使反应淬灭，并用DCM(15mL×3)萃取。用Na2SO4干燥有机层，并过滤。真空浓缩滤液，并通过快速柱色谱法纯化残余物(用PE:EtOAC＝1:2，v/v洗脱)，得到6-((1r,3r)-3-羟基环丁基)-2-甲基-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基2,4,6-三异丙基苯磺酸酯(150mg，283μmol，74％收率)。MS测定值(ESI+):530.6(M+H)+。
步骤G:(1r,3r)-3-(2-甲基-1,7-二氧代-4-(((2,4,6-三异丙基苯基)磺酰基)氧 基)-1,7-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-6(2H)-基)乙酸环丁酯
在0℃向6-((1r,3r)-3-羟基环丁基)-2-甲基-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基2,4,6-三异丙基苯磺酸酯(140mg，264μmol)在DCM中的溶液中加入DMAP(161mg，1.32mmol)和Ac2O(135mg，1.32mmol)。将该混合物在20℃搅拌2hr。真空浓缩该反应混合物，并通过快速柱色谱法纯化残余物(PE:EtOAC＝1:2，v/v)，得到(1r,3r)-3-(2-甲基-1,7-二氧代-4-(((2,4,6-三异丙基苯基)磺酰基)氧基)-1,7-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-6(2H)-基)乙酸环丁酯(120mg，79％收率)。MS测定值(ESI+):572.2(M+H)+。
步骤H:(1r,3r)-3-(2-甲基-4-(((R)-1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨 基)-1,7-二氧代-1,7-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-6(2H)-基)乙酸环丁酯
向(1r,3r)-3-(2-甲基-1,7-二氧代-4-(((2,4,6-三异丙基苯基)磺酰基)氧基)-1,7-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-6(2H)-基)乙酸环丁酯(64mg，113μmol，1.0当量)和(1R)-1-[2-甲基-3-(三氟甲基)苯基]乙胺(34.53mg，169μmol)在1,4-二噁烷(5mL)中的溶液中加入Cs2CO3(110.5mg，339μmol)和xantphos-Pd-G3(21.5mg，22μmol)。然后将该混合物在105℃、氮气中搅拌1hr。过滤该反应混合物。浓缩滤液，并通过快速柱色谱法(PE:EtOAC＝1:2-EtOAc，v/v)纯化，得到(1r,3r)-3-(2-甲基-4-(((R)-1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-1,7-二氧代-1,7-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-6(2H)-基)乙酸环丁酯(30mg，54％收率，84％纯度)。MS测定值(ESI+):491.5(M+H)+。
步骤I:6-((1r,3r)-3-羟基环丁基)-2-甲基-4-(((R)-1-(2-甲基-3-(三氟甲基) 苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例13)
向(1r,3r)-3-(2-甲基-4-(((R)-1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-1,7-二氧代-1,7-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-6(2H)-基)乙酸环丁酯(30mg，51μmol，84％纯度)在MeOH(3mL)中的溶液中加入K2CO3(17mg，122μmol)。将该混合物在20℃搅拌1hr。然后过滤该反应混合物。通过反相HPLC纯化滤液，得到6-((1r,3r)-3-羟基环丁基)-2-甲基-4-(((R)-1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例13，6.5mg，28％收率)。MS测定值(ESI+):449.2(M+H)+。
实施例14:6-((1s,3s)-3-羟基环丁基)-2-甲基-4-(((R)-1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
根据与实施例13基本上类似的路径制备。MS测定值(ESI+):449.3(M+H)+。
实施例15:(R)-2-甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-6-(1-甲基环丙基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
步骤A:1-(1-甲基环丙基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3,4-二甲酸3-(叔丁基)酯4-甲 酯
向1-甲基环丙胺盐酸盐(500mg，4.65mmol)在EtOH(30mL)中的溶液中加入乙醇钠(1.58g，4.65mmol，20wt％的乙醇溶液)。将该反应体系在rt搅拌5h。然后加入水(0.3mL)和丙-2-炔酸叔丁酯(586mg，4.65mmol)。将该反应体系在rt搅拌48h。然后加入丁-2-炔二酸二甲酯(1.30g，9.30mmol)，将该混合物加热至85℃16hr。真空除去溶剂，并通过快速柱色谱法纯化残余物(用0％-50％在PE中的EA洗脱)，得到1-(1-甲基环丙基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3,4-二甲酸3-(叔丁基)酯4-甲酯(565mg，40％收率，80％纯度)，其不经进一步纯化即可使用。MS测定值(ESI+):308.2(M+H)+。
步骤B:(R)-2-甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-6-(1-甲基 环丙基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例15)
根据与实施例2类似的路径制备。(R)-2-甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-6-(1-甲基环丙基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮。MS测定值(ESI+):433.3(M+H)+。
实施例16:(R)-6-(双环[1.1.1]戊-1-基)-2-甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
步骤A:(E)-3-(双环[1.1.1]戊-1-基氨基)丙烯酸叔丁酯
在0℃向双环[1.1.1]戊-1-胺HCl盐(1.22g，10.20mmol)在乙醇(10mL)中的溶液中加入乙醇钠(3.47g，10.20mmol，20wt％)，将该混合物在0℃搅拌2.5hr。然后加入丙-2-炔酸叔丁酯(1.29g，10.20mmol，1.40mL)，将该反应体系在rt搅拌36hr。完成时，浓缩该混合物，并通过快速柱色谱法(在PE中的EA＝40％)纯化，得到(E)-3-(双环[1.1.1]戊-1-基氨基)丙烯酸叔丁酯(621mg，29％收率)。MS测定值(ESI+):210.2(M+H)+。
步骤B:1-(双环[1.1.1]戊-1-基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3,4-二甲酸3-(叔丁基) 酯4-乙酯
在rt向(E)-3-(1-双环[1.1.1]戊基氨基)丙-2-烯酸叔丁酯(621mg，2.97mmol，1.0当量)在EtOH(30mL)中的溶液中加入丁-2-炔二酸二甲酯(421.67mg，2.97mmol，363.51uL，1.0当量)，将该混合物在90℃搅拌16hr。然后将该反应体系冷却至rt，并加入甲醇钠(160.29mg，2.97mmol，1当量)，在rt搅拌2hr。完成时，浓缩该混合物，并通过快速柱纯化(EA:PE＝1:4，V/V)，得到1-(双环[1.1.1]戊-1-基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3,4-二甲酸3-(叔丁基)酯4-乙酯(258mg，26％收率)。MS测定值(ESI+):334.2(M+H)+。
步骤C:(R)-6-(双环[1.1.1]戊-1-基)-2-甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯 基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例16)
根据如对实施例2所述类似的路径制备。MS测定值(ESI+):445.3(M+H)+。
实施例17:(R)-6-环丙基-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
根据如对实施例2所述类似的路径，使用(R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙-1-胺(按照WO/2018/115380中所述制备)制备。MS测定值(ESI+):405.3(M+H)+。
实施例18:(R)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
根据如对实施例4所述类似的路径制备。MS测定值(ESI+):449.5(M+H)+。
实施例19:(R)-6-环丙基-8-乙氧基-2-甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
步骤A:6-环丙基-8-乙氧基-2-甲基-2,3-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,4,7(6H)-三 酮
将8-溴-6-环丙基-2-甲基-2,3-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,4,7(6H)-三酮(100mg，0.32mmol)溶于EtOH(5mL)，随后添加乙醇钠(436mg，6.41mmol)。将完整混合物在90℃搅拌15hr。反应完成后，过滤该混合物，并减压除去溶剂，然后通过快速柱色谱法(MeOH:DCM＝1:5，V/V)纯化粗残余物，得到6-环丙基-8-乙氧基-2-甲基-2,3-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,4,7(6H)-三酮(63mg，67％收率)。MS测定值(ESI+):278.2(M+H)+。
步骤B:6-环丙基-8-乙氧基-2-甲基-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒 嗪-4-基2,4,6-三异丙基苯磺酸酯
在0℃将6-环丙基-8-乙氧基-2-甲基-2,3-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,4,7(6H)-三酮(290mg，0.63mmol)和N,N-二异丙基乙胺(1.26mmol，162mg)溶于DCM(10mL)，并加入2,4,6-三异丙基苯磺酰氯(209mg，0.69mmol)。将该反应体系温热至室温，并搅拌16hr。减压浓缩溶剂，并用饱和碳酸氢钠溶液(50mL)洗涤粗混合物，并用二氯甲烷(150mL)萃取。用无水硫酸钠干燥有机相，浓缩，并通过硅胶色谱法(PE:EtOAc＝10:1-0:100，v/v)纯化，得到6-环丙基-8-乙氧基-2-甲基-1,7-二氧代-吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基)2,4,6-三异丙基苯硫酸酯(120mg，34％收率)。MS测定值(ESI+):544.4(M+H)+。
步骤C:(R)-6-环丙基-8-乙氧基-2-甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙 基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例19)
将(6-环丙基-8-乙氧基-2-甲基-1,7-二氧代-吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基)2,4,6-三异丙基苯硫酸酯(30mg，0.055mmol)、(R)-1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙-1-胺(16.8mg，0.082mmol)、Xantphos-Pd-G3(5.2mg，5.52μmol，0.1当量)和碳酸二铯(54mg，165.54μmol)溶于1,4-二噁烷(5mL)。然后将该混合物在110℃搅拌16hr。过滤该混合物，减压除去溶剂。通过制备型TLC(3％在二氯甲烷中的甲醇)，再通过反相HPLC纯化粗残余物，得到(R)-6-环丙基-8-乙氧基-2-甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(0.3mg，1.2％收率)。MS测定值(ESI+):463.3(M+H)+。
实施例20:8-((R)-3-氨基吡咯烷-1-基)-6-环丙基-2-甲基-4-(((R)-1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
步骤A:((R)-1-(6-环丙基-2-甲基-4-(((R)-1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-8-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸叔丁酯
将N-[(3R)-吡咯烷-3-基]氨基甲酸叔丁酯(804μmol，149.8mg)和(R)-8-溴-6-环丙基-2-甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(20mg，40μmol)溶于二噁烷(1mL)，在室温搅拌1h。减压浓缩该反应混合物，得到粗((R)-1-(6-环丙基-2-甲基-4-(((R)-1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-8-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸叔丁酯(20mg，粗品)。MS测定值(ESI+):603.6(M+H)+。
步骤B:8-((R)-3-氨基吡咯烷-1-基)-6-环丙基-2-甲基-4-(((R)-1-(2-甲基-3- (三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例20)
将((R)-1-(6-环丙基-2-甲基-4-(((R)-1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-8-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸叔丁酯(20mg，粗品)溶于HCl(4M的1,4-二噁烷溶液，1.16mL，4.64mmol)。将该溶液在室温搅拌1小时。减压浓缩该反应混合物，通过反相HPLC纯化，得到8-((R)-3-氨基吡咯烷-1-基)-6-环丙基-2-甲基-4-(((R)-1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(5.5mg，18％收率，2步)。MS测定值(ESI+):503.5(M+H)+。
实施例21:8-((S)-3-氨基吡咯烷-1-基)-6-环丙基-2-甲基-4-(((R)-1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
根据与实施例20类似的路径制备。MS测定值(ESI+):503.2(M+H)+。
实施例22:(R)-2-甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-6-(哌啶-4-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
步骤A:1-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3,4-二甲酸3- (叔丁基)酯4-甲酯
向4-氨基哌啶-1-甲酸叔丁酯(3.0g，14.98mmol，1.0当量)和丙-2-炔酸叔丁酯(1.9g，14.98mmol，1.0当量)在EtOH(50mL)中的溶液中加入H2O(0.5mL)。将该反应体系在25℃搅拌24hr。然后加入丁-2-炔二酸二甲酯(2.1g，14.98mmol，1.0当量)，将该反应体系加热至85℃ 24hr。冷却至室温后，真空浓缩该反应体系，并将残余物溶于MeOH(50.0mL)。然后加入NH3(7M的MeOH溶液，5.0mL)，在25℃搅拌4hr。真空除去溶剂，并通过快速柱色谱法纯化残余物(用0-50％在PE中的EA洗脱)，得到1-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3,4-二甲酸3-(叔丁基)酯4-甲酯(2.0g，30％收率)。MS测定值(ESI+):381.3(M-tBu)+。
步骤B:5-(叔丁氧基羰基)-1-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)-2-氧代-1,2-二氢 吡啶-4-甲酸
向1-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3,4-二甲酸3-(叔丁基)酯4-甲酯(2.0g，4.49mmol)在THF(30mL)和MeOH(30mL)中的溶液中加入氢氧化锂(439mg，18.33mmol)。将该反应体系在25℃搅拌16hr。然后真空浓缩该混合物，得到5-(叔丁氧基羰基)-1-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-4-甲酸(1.94g，粗品)，其不经进一步纯化即可使用。MS测定值(ESI+):311.3(M-2tBu)+。
步骤C:4-(2-(叔丁氧基羰基)-1-甲基肼-1-羰基)-1-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4- 基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲酸叔丁酯
向5-叔丁氧基羰基-1-(1-叔丁氧基羰基-4-哌啶基)-2-氧代-吡啶-4-甲酸(1.94g，粗品，假设4.49mmol)和N-(甲基氨基)氨基甲酸叔丁酯(1.0g，6.89mmol)在DMF(15mL)中的溶液中加入HATU(3.5g，9.18mmol)和N-乙基-N-异丙基-丙-2-胺(2.4g，18.37mmol)。将该反应体系在25℃搅拌16hr。然后用H2O(30mL)使该混合物淬灭，并用EA(30mL×3)萃取。用MgSO4干燥合并的有机层，过滤，并真空浓缩。通过快速色谱法纯化残余物(用0-80％在PE中的EA洗脱)，得到4-(2-(叔丁氧基羰基)-1-甲基肼-1-羰基)-1-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲酸叔丁酯(806mg，31％收率)。MS测定值(ESI+):383.2(M-3tBu)+。
步骤D:2-甲基-6-(哌啶-4-基)-2,3-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,4,7(6H)-三酮
向4-(2-(叔丁氧基羰基)-1-甲基肼-1-羰基)-1-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲酸叔丁酯(804mg，1.50mmol)在1,4-二噁烷(1.0mL)中的溶液中加入HCl(4M的1,4-二噁烷溶液，10mL)。将该反应体系在25℃搅拌0.5h，然后加热至100℃for 2hr。真空浓缩该混合物，通过快速色谱法纯化(用0-20％在MeOH中的DCM洗脱)，得到2-甲基-6-(哌啶-4-基)-2,3-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,4,7(6H)-三酮(275mg，66％收率)。MS测定值(ESI+):277.4(M+H)+。
步骤E:4-(2-甲基-1,4,7-三氧代-1,3,4,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-6(2H)-基) 哌啶-1-甲酸叔丁酯
向2-甲基-6-(哌啶-4-基)-2,3-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,4,7(6H)-三酮(275mg，1.00mmol)在DCM(10mL)中的溶液中加入叔丁氧基羰基叔丁基碳酸酯(219mg，1.00mmol)和N,N-二乙基乙胺(507mg，5.01mmol)，将该反应体系在25℃搅拌2hr。真空浓缩该混合物，并通过快速色谱法纯化(用0-10％在DCM中的MeOH洗脱)，得到4-(2-甲基-1,4,7-三氧代-1,3,4,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-6(2H)-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(323mg，86％收率)。MS测定值(ESI+):321.3(M-tBu)+。
步骤F:4-(2-甲基-1,7-二氧代-4-(((2,4,6-三异丙基苯基)磺酰基)氧基)-1,7- 二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-6(2H)-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
向4-(2-甲基-1,4,7-三氧代-3H-吡啶并[3,4-d]哒嗪-6-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(323mg，0.86mmol)在DCM(10mL)中的溶液中加入N-乙基-N-异丙基-丙-2-胺(444mg，3.43mmol)和2,4,6-三异丙基苯磺酰氯(520mg，1.72mmol)，将该反应体系在25℃搅拌2hr。然后真空浓缩该混合物，通过快速色谱法纯化(用0-10％在DCM中的MeOH洗脱)，得到4-(2-甲基-1,7-二氧代-4-(((2,4,6-三异丙基苯基)磺酰基)氧基)-1,7-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-6(2H)-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(365mg，66％收率)。MS测定值(ESI+):587.4(M-tBu)+。
步骤G:(R)-4-(2-甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-1,7-二 氧代-1,7-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-6(2H)-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
向4-(2-甲基-1,7-二氧代-4-(((2,4,6-三异丙基苯基)磺酰基)氧基)-1,7-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-6(2H)-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(150mg，0.23mmol)和(1R)-1-[2-甲基-3-(三氟甲基)苯基]乙胺(119mg，0.58mmol)在1,4-二噁烷(4mL)中的溶液中加入碳酸铯(304mg，0.93mmol，4.0当量)和XantPhos-Pd-G3(72mg，0.08mmol)。将该反应体系在110℃搅拌16hr。然后真空浓缩该混合物，并通过硅胶色谱法纯化(用0-10％在DCM中的MeOH洗脱)，得到(R)-4-(2-甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-1,7-二氧代-1,7-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-6(2H)-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(65mg，50％收率，89％纯度)。MS测定值(ESI+):562.4(M+H)+。
步骤H:(R)-2-甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-6-(哌啶-4- 基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例22)
向4-[2-甲基-4-[[(1R)-1-[2-甲基-3-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-1,7-二氧代-吡啶并[3,4-d]哒嗪-6-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(65mg，0.11mmol，89％纯度)在1,4-二噁烷(1.0mL)中的溶液中加入盐酸(4M的1,4-二噁烷溶液，2.0mL)，并将该反应体系在25℃搅拌1hr。真空浓缩该混合物，并通过反相HPLC纯化残余物，得到(R)-2-甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-6-(哌啶-4-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(40mg，78％收率)。MS测定值(ESI+):462.5(M+H)+。
实施例23:(R)-2-甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-6-(1-甲基哌啶-4-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
向(R)-2-甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-6-(哌啶-4-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例22)(70mg，0.02mmol)在MeOH(8.0mL)中的溶液中加入聚甲醛(36mg，3.03mmol)和乙酸(2mg，0.03mmol)，将该反应体系在25℃搅拌1hr。然后加入氰基硼氢化钠(191mg，3.03mmol)，将该反应体系在25℃搅拌16hr。然后真空浓缩该混合物，通过反相HPLC纯化，得到(R)-2-甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-6-(1-甲基哌啶-4-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(22mg，30％收率)。MS测定值(ESI+):476.4(M+H)+。
实施例24:(R)-2-(2-氨基乙基)-6-环丙基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
步骤A:(2-氧代乙基)氨基甲酸苄酯
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在-20℃向N-(2-羟基乙基)氨基甲酸苄酯(4.0g，20.49mmol)和N-乙基-N-异丙基-丙-2-胺(5.3g，40.98mmol)在DCM(15.0mL)中的溶液中加入在DMSO(3.0mL)中的吡啶三氧化硫(6.5g，40.98mmol)。将该反应体系在-20℃搅拌4hr，然后温热至25℃，并用DCM稀释。用1.0M HCl、随后用盐水洗涤有机层，然后用MgSO4干燥，并真空浓缩。通过快速色谱法纯化残余物(用0-80％在PE中的EA洗脱)，得到(2-氧代乙基)氨基甲酸苄酯(1.4g，35％收率)，为无色油状物。MS测定值(ESI+):194.2(M+H)+。
步骤B:2-(2-(((苄氧基)羰基)氨基)乙基)肼-1-甲酸叔丁酯
向N-(2-氧代乙基)氨基甲酸苄酯(1.4g，9.06mmol)和N-氨基氨基甲酸叔丁酯(1.2g，9.06mmol)在MeOH(20.0mL)中的溶液中加入乙酸(105mg，1.75mmol)，将该反应体系在25℃搅拌30min。然后加入氰基硼氢化钠(1.7g，27.17mmol)，并将该混合物在25℃搅拌3hr。浓缩该混合物，并加入50mL DCM。用水、随后用盐水洗涤有机层，用MgSO4干燥，并真空浓缩。然后通过快速色谱法纯化残余物(用0-80％在PE中的EA洗脱)，得到2-(2-(((苄氧基)羰基)氨基)乙基)肼-1-甲酸叔丁酯(1.7g，76％收率)。MS测定值(ESI+):210.2(M-Boc)+。
步骤C:1-环丙基-4-((11,11-二甲基-3,9-二氧代-1-苯基-2,10-二氧杂-4,7,8- 三氮杂十二烷-7-基)羰基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲酸叔丁酯
在0℃向N-[2-(苄氧基羰基氨基)乙基氨基]氨基甲酸叔丁酯(1.7g，5.37mmol)和5-叔丁氧基羰基-1-环丙基-2-氧代-吡啶-4-甲酸(1.0g，3.58mmol)在DMF(6.0mL)中的溶液中加入N,N,N’,N’-四甲基-1-(3-氧化-2,3-二氢三唑并[4,5-b]吡啶-3-鎓-1-基)甲二胺；六氟磷酸盐(2.7g，7.16mmol)和N-乙基-N-异丙基-丙-2-胺(1.9g，14.32mmol)。将该反应体系在25℃搅拌16hr。然后用H2O(50mL)使该混合物淬灭，并用EA(30mL×3)萃取。然后用MgSO4干燥有机层，过滤，并真空浓缩。通过快速色谱法纯化残余物(用0-80％在PE中的EA洗脱)，得到1-环丙基-4-((11,11-二甲基-3,9-二氧代-1-苯基-2,10-二氧杂-4,7,8-三氮杂十二烷-7-基)羰基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲酸叔丁酯(548mg，27％收率)。MS测定值(ESI+):459.5(M-(2xtBu))+。
步骤D:(2-(6-环丙基-4-羟基-1,7-二氧代-6,7-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-2(1H)- 基)乙基)氨基甲酸苄酯
在25℃向1-环丙基-4-((11,11-二甲基-3,9-二氧代-1-苯基-2,10-二氧杂-4,7,8-三氮杂十二烷-7-基)羰基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲酸叔丁酯(548mg，0.96mmol)在DCM(4.0mL)中的溶液中加入2,2,2-三氟乙酸(3.0g，25.96mmol，2.0mL)和将该反应体系搅拌0.5h，然后加热至50℃ 2hr。真空浓缩该反应体系，得到(2-(6-环丙基-4-羟基-1,7-二氧代-6,7-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-2(1H)-基)乙基)氨基甲酸苄酯(415mg，粗品)，为棕色油状物。不经进一步纯化即可将粗产物用于下一步。MS测定值(ESI+):397.2(M+H)+。
步骤E:2-(2-(((苄氧基)羰基)氨基)乙基)-6-环丙基-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢 吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基2,4,6-三异丙基苯磺酸酯
向N-[2-(6-环丙基-4-羟基-1,7-二氧代-吡啶并[3,4-d]哒嗪-2-基)乙基]氨基甲酸苄酯(415mg，粗品，假设0.96mmol)在DCM(20.0mL)中的溶液中加入N-乙基-N-异丙基-丙-2-胺(677mg，5.23mmol)和2,4,6-三异丙基苯磺酰氯(476mg，1.57mmol)，将该反应体系在25℃搅拌2hr。真空浓缩该混合物，通过快速色谱法纯化(用0-80％在PE中的EA洗脱)，得到2-(2-(((苄氧基)羰基)氨基)乙基)-6-环丙基-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基2,4,6-三异丙基苯磺酸酯(430mg，68％收率，2步)。MS测定值(ESI+):663.5(M+H)+。
步骤F:(R)-(2-(6-环丙基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-1,7- 二氧代-6,7-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-2(1H)-基)乙基)氨基甲酸苄酯
向2-(2-(((苄氧基)羰基)氨基)乙基)-6-环丙基-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基2,4,6-三异丙基苯磺酸酯(170mg，0.26mmol)和(1R)-1-[2-甲基-3-(三氟甲基)苯基]乙胺(78mg，0.38mmol)在二噁烷(6.0mL)中的溶液中加入碳酸铯(334mg，1.03mmol)和XantPhos-Pd-G3(49mg，0.05mmol)。将该反应体系在110℃搅拌16hr。然后用H2O(30mL)使该混合物淬灭。用EA(20mL×3)萃取该混合物，用MgSO4干燥，过滤，并真空浓缩。通过快速色谱法纯化残余物(用0-10％在DCM中的MeOH洗脱)，得到(R)-(2-(6-环丙基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-1,7-二氧代-6,7-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-2(1H)-基)乙基)氨基甲酸苄酯(26mg，17％收率)。MS测定值(ESI+):582.3(M+H)+。
步骤G:(R)-2-(2-氨基乙基)-6-环丙基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙 基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例24)
在0℃向N-[2-[6-环丙基-4-[[(1R)-1-[2-甲基-3-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]-1,7-二氧代-吡啶并[3,4-d]哒嗪-2-基]乙基]氨基甲酸苄酯(30mg，0.05mmol)在EA(1.5mL)中的溶液中加入氢溴酸(33％的乙酸溶液，8.29mmol，1.50mL)，将该反应体系加热至50℃2h。然后真空浓缩该混合物，通过反相HPLC纯化，得到(R)-2-(2-氨基乙基)-6-环丙基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(6mg，26％收率)。MS测定值(ESI+):448.5(M+H)+。
实施例25和26:(R)-6-(1-((6-环丙基-2-甲基-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基)氨基)乙基)-1-甲基-1H-吲唑-3-甲腈(实施例25，任意指定立体化学)和(S)-6-(1-((6-环丙基-2-甲基-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基)氨基)乙基)-1-甲基-1H-吲唑-3-甲腈(实施例26，任意指定立体化学)
步骤A:6-溴-1-甲基-吲唑-3-甲腈
向6-溴-1H-吲唑-3-甲腈(2.3g，10.36mmol)和碳酸钾(4.29g，31.08mmol)在MeCN(30mL)中的溶液中加入碘甲烷(2.94g，20.72mmol，1.29mL)。将该混合物在RT搅拌18hr。然后用冰-水(50mL)使反应淬灭，用EtOAc(70mL×3)萃取该混合物。用硫酸镁干燥合并的有机层，并真空浓缩。通过快速柱色谱法纯化粗产物(用PE:EtOAc＝4:1，v/v洗脱)，得到6-溴-1-甲基-吲唑-3-甲腈(1.6g，64％收率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:7.71(d,J＝8.8Hz,2H),7.46(dd,J＝8.6,1.6Hz,1H),4.13(s,3H)。
步骤B:6-乙酰基-1-甲基-吲唑-3-甲腈
将6-溴-1-甲基-吲唑-3-甲腈(1.5g，6.35mmol)、三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡烷(3.44g，9.53mmol，3.21mL)、双(三苯膦)氯化钯(II)(669mg，9.53mmol)和三乙胺(1.29g，12.71mmol，1.77mL)在二噁烷(30mL)中的混合物加热至80℃ 16hr。加入冰-水(100mL)，用EtOAc(100mL×3)萃取该混合物。用硫酸镁干燥合并的有机层，并真空浓缩。通过快速柱纯化粗产物(用PE:EtOAc＝4:1洗脱)，得到6-乙酰基-1-甲基-吲唑-3-甲腈(830mg，62％收率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.17(s,1H),7.93(dd,J＝2.8,1.0Hz,2H),4.25(s,3H),2.74(s,3H)。
步骤C:N-(1-(3-氰基-1-甲基-1H-吲唑-6-基)亚乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺
将6-乙酰基-1-甲基-吲唑-3-甲腈(500mg，2.51mmol)、2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(456.31mg，3.76mmol)和乙醇钛(1.43g，6.27mmol，1.31mL)在THF(20mL)中的混合物加热至80℃ 16hr。用冰-水(100mL)使该反应体系淬灭，用乙酸乙酯(100mL×3)萃取该混合物。用硫酸镁干燥合并的有机层，并真空浓缩。通过快速柱纯化粗产物(用PE:EtOAc＝4:1-1洗脱:1)，得到N-(1-(3-氰基-1-甲基-1H-吲唑-6-基)亚乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(626mg，82％收率)。MS测定值(ESI+):303.4(M+H)+。
步骤D:N-(1-(3-氰基-1-甲基-1H-吲唑-6-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(立 体异构体混合物)
在0℃向N-(1-(3-氰基-1-甲基-1H-吲唑-6-基)亚乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(626mg，2.07mmol)在MeOH(15mL)中的溶液中加入硼氢化钠(234.96mg，6.21mmol)，将整个混合物在该温度下搅拌2hr。用冰-水(30mL)使该反应体系淬灭。用EA(70mL×3)萃取该混合物，用硫酸镁干燥合并的有机层，并真空浓缩。通过快速柱色谱法纯化粗产物(用PE:EtOAc＝4:1-1:2，v/v洗脱)，得到N-(1-(3-氰基-1-甲基-1H-吲唑-6-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(非对映异构体混合物)(570mg，85％收率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:7.88–7.82(m,2H),7.45(d,J＝8.0Hz,1H),5.83–5.49(m,1H),4.66–4.53(m,1H),4.18(s,3H),1.51(d,J＝8.0Hz,3H),1.12(s,9H)。
步骤E:5,6-(1-氨基乙基)-1-甲基-1H-吲唑-3-甲腈盐酸盐
在0℃向N-(1-(3-氰基-1-甲基-1H-吲唑-6-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(500mg，1.64mmol)在二噁烷(5mL)中的混合物中加入HCl(4M的1,4-二噁烷溶液，10mL，40mmol)。将该混合物在0℃搅拌2hr。然后真空浓缩该混合物。将粗产物混悬于MeCN(15mL)，过滤固体，得到6-(1-氨基乙基)-1-甲基-1H-吲唑-3-甲腈盐酸盐(326mg，82％收率)。1HNMR(400MHz,D2O)δ:7.68(d,J＝8.0Hz,2H),7.36(d,J＝8.8Hz,1H),4.65(m,1H),4.01(s,3H),1.67(d,J＝6.8Hz,3H)。
步骤F:(R)-6-(1-((6-环丙基-2-甲基-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d] 哒嗪-4-基)氨基)乙基)-1-甲基-1H-吲唑-3-甲腈(实施例25，任意指定立体化学)和(R)-6- (1-((6-环丙基-2-甲基-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基)氨基)乙 基)-1-甲基-1H-吲唑-3-甲腈(实施例26，任意指定立体化学)
根据对实施例2所述类似的方法，使用外消旋6-(1-氨基乙基)-1-甲基-1H-吲唑-3-甲腈盐酸盐制备。通过手性SFC分离异构体，得到(R)-6-(1-((6-环丙基-2-甲基-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基)氨基)乙基)-1-甲基-1H-吲唑-3-甲腈(实施例25)和(S)-6-(1-((6-环丙基-2-甲基-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基)氨基)乙基)-1-甲基-1H-吲唑-3-甲腈(实施例26)，实施例25:MS测定值(ESI+):416.3(M+H)+，实施例26:MS测定值(ESI+):416.3(M+H)+。
实施例27和28:(R)-6-(1-((6-环丙基-2-甲基-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基)氨基)乙基)-1,4-二甲基-1H-吲唑-3-甲腈(实施例27，任意指定立体化学)和(S)-6-(1-((6-环丙基-2-甲基-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基)氨基)乙基)-1,4-二甲基-1H-吲唑-3-甲腈(实施例28，任意指定立体化学)
步骤A:6-溴-1,4-二甲基-1H-吲唑
向6-溴-4-甲基-1H-吲唑(3g，14.21mmol)、碳酸钾(5.89g，42.64mmol)在DMF(50mL)中的混合物中加入碘甲烷(4.04g，28.43mmol，1.77mL)。将该混合物在RT搅拌2hr。用EtOAc(160mL)稀释该混合物，用H2O(80mL×3)和盐水(80mL×3)洗涤。用硫酸钠干燥有机层，过滤并浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物(PE:EA＝5:1)，得到6-溴-1,4-二甲基-吲唑(1.72g，52％收率)。MS测定值(ESI+):79/81Br 225.0/227.0(M+H)+。
步骤B:6-溴-3-碘-1,4-二甲基-1H-吲唑
向6-溴-1,4-二甲基-吲唑(1.72g，7.64mmol，1.0当量)在DMSO(30mL)中的溶液中加入N-碘琥珀酰亚胺(2.58g，11.46mmol，1.5当量)。将该混合物在90℃搅拌16hr。将该混合物冷却至rt，用EtOAc(20mL)稀释。用饱和Na2S2O3(10mL×2)、H2O(20mL×3)、盐水(15mL×3)洗涤有机层，用硫酸钠干燥，并浓缩。通过硅胶柱色谱法(PE:EA＝7:1)纯化残余物，得到标题化合物6-溴-3-碘-1,4-二甲基-吲唑(0.7g，26％收率)。MS测定值(ESI+):79/81Br 350.8/352.8(M+H)+。
步骤C:6-溴-1,4-二甲基-1H-吲唑-3-甲腈
将6-溴-3-碘-1,4-二甲基-吲唑(400mg，1.14mmol)、氰化亚铜(I)(112.28mg，1.25mmol，38.45uL)在DMSO(6mL)中的混合物在150℃搅拌2hr。浓缩该混合物，并通过硅胶柱色谱法(PE:EA＝4:1)纯化，得到标题化合物6-溴-1,4-二甲基-吲唑-3-甲腈(190mg，23％收率)。MS测定值(ESI+):79/81Br 250.2/252.2(M+H)+。
步骤D:(R)-6-(1-((6-环丙基-2-甲基-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d] 哒嗪-4-基)氨基)乙基)-1,4-二甲基-1H-吲唑-3-甲腈(实施例27)和(S)-6-(1-((6-环丙 基-2-甲基-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基)氨基)乙基)-1,4-二甲 基-1H-吲唑-3-甲腈(实施例28)
使用6-溴-1,4-二甲基-1H-吲唑-3-甲腈且根据与实施例25和26步骤(B-F)类似的方法制备标题化合物。实施例27(任意指定的立体化学):MS测定值(ESI+):430.2(M+H)+。实施例28(任意指定的立体化学):MS测定值(ESI+):430.2(M+H)+。
实施例29:6-((1r,3R)-3-(1H-咪唑-1-基)环丁基)-2-甲基-4-(((R)-1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
步骤A:(1s,3s)-3-氨基环丁-1-醇盐酸盐
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向((1s,3s)-3-羟基环丁基)氨基甲酸叔丁酯(6.0g，32.05mmol，1.0当量)在二噁烷(15.0mL)中的溶液中加入HCl(4.0M的1,4-二噁烷溶液，15.0mL)，将该混合物在25℃搅拌4h。然后浓缩该混合物，得到(1s,3s)-3-氨基环丁-1-醇盐酸盐(3.95g，32.05mmol，粗品)，其不经进一步纯化即可用于下一步。MS测定值(ESI+):88.1(M+H)+。
步骤B:1-((1s,3s)-3-羟基环丁基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3,4-二甲酸3-(叔丁 基)酯4-甲酯和1-((1s,3s)-3-羟基环丁基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3,4-二甲酸3-(叔丁 基)酯4-乙酯
向(1s,3s)-3-氨基环丁-1-醇盐酸盐(3g，24.28mmol)和丙酸叔丁酯(3.1g，24.28mmol)在EtOH(40.0mL)中的溶液中加入N-乙基-N-异丙基-丙-2-胺(12.6g，97.10mmol)和H2O(88mg，4.86mmol)。将该混合物在25℃搅拌16h。然后向该混合物中加入丁-2-炔二酸二甲酯(3.5g，24.28mmol)，并将该反应体系在85℃搅拌48h。浓缩该混合物，并直接通过快速柱色谱法纯化(用0-100％在PE中的EA洗脱)，得到1-((1s,3s)-3-羟基环丁基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3,4-二甲酸3-(叔丁基)酯4-甲酯和1-((1s,3s)-3-羟基环丁基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3,4-二甲酸3-(叔丁基)酯4-乙酯(2.0g，5.93mmol，24％收率，～78％纯度)，其不经进一步纯化即可使用。MS测定值(ESI+):324.4，338.4(M+H)+。
步骤C:6-氧代-1-((1s,3s)-3-(甲苯磺酰氧基)环丁基)-1,6-二氢吡啶-3,4-二甲 酸3-(叔丁基)酯4-甲酯和6-氧代-1-((1s,3s)-3-(甲苯磺酰氧基)环丁基)-1,6-二氢吡啶- 3,4-二甲酸3-(叔丁基)酯4-乙酯
向上述1-((1s,3s)-3-羟基环丁基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3,4-二甲酸3-(叔丁基)酯4-甲酯和1-((1s,3s)-3-羟基环丁基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3,4-二甲酸3-(叔丁基)酯4-乙酯(2.0g，4.8mmol，～78％纯度)在DCM(50)中的混合物中加入4-甲基苯磺酰氯(2.3g，11.86mmol)、N,N-二乙基乙胺(1.8g，17.78mmol)和DMAP(724mg，5.93mmol)。将该反应体系在50℃搅拌3h。然后浓缩该混合物，并通过快速色谱法纯化(用0-100％在PE中的EA洗脱)，得到6-氧代-1-((1s,3s)-3-(甲苯磺酰氧基)环丁基)-1,6-二氢吡啶-3,4-二甲酸3-(叔丁基)酯4-甲酯和6-氧代-1-((1s,3s)-3-(甲苯磺酰氧基)环丁基)-1,6-二氢吡啶-3,4-二甲酸3-(叔丁基)酯4-乙酯(1.6g，3.2mmol，66％收率)的混合物。MS测定值(ESI+):478.1，492.1(M+H)+。
步骤D:1-((1r,3r)-3-(1H-咪唑-1-基)环丁基)-5-(叔丁氧基羰基)-2-氧代-1,2- 二氢吡啶-4-甲酸
将6-氧代-1-((1s,3s)-3-(甲苯磺酰氧基)环丁基)-1,6-二氢吡啶-3,4-二甲酸3-(叔丁基)酯4-甲酯和6-氧代-1-((1s,3s)-3-(甲苯磺酰氧基)环丁基)-1,6-二氢吡啶-3,4-二甲酸3-(叔丁基)酯4-乙酯(1.0g，2.0mmol)和咪唑(3.3g，49.0mmol)的混合物在120℃搅拌20h。然后直接通过快速色谱法纯化该混合物(用0-60％在DCM中的MeOH洗脱)，得到1-((1r,3r)-3-(1H-咪唑-1-基)环丁基)-5-(叔丁氧基羰基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-4-甲酸(420.0mg，1.17mmol，57％收率)。MS测定值(ESI+):360.1(M+H)+。
步骤E:1-((1r,3r)-3-(1H-咪唑-1-基)环丁基)-4-(2-(叔丁氧基羰基)-1-甲基 肼-1-羰基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲酸叔丁酯
在0℃向1-((1r,3r)-3-(1H-咪唑-1-基)环丁基)-5-(叔丁氧基羰基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-4-甲酸(420mg，1.17mmol)在DMF(8.0mL)中的溶液中加入HATU(894mg，2.34mmol)、N-乙基-N-异丙基-丙-2-胺(755mg，5.84mmol，1.0mL)和N-(甲基氨基)氨基甲酸叔丁酯(342mg，2.34mmol)。将该混合物在25℃搅拌16h。然后用H2O(100mL)使该混合物淬灭，用乙酸乙酯(30mL×3)萃取，并用MgSO4干燥。浓缩合并的有机相，并通过快速色谱法纯化(用0-20％在DCM中的MeOH洗脱)，得到1-((1r,3r)-3-(1H-咪唑-1-基)环丁基)-4-(2-(叔丁氧基羰基)-1-甲基肼-1-羰基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲酸叔丁酯(498mg，1.0mmol，87％收率)。MS测定值(ESI+):488.3(M+H)+。
步骤F:6-((1r,3r)-3-(1H-咪唑-1-基)环丁基)-2-甲基-2,3-二氢吡啶并[3,4-d] 哒嗪-1,4,7(6H)-三酮
在0℃向1-((1r,3r)-3-(1H-咪唑-1-基)环丁基)-4-(2-(叔丁氧基羰基)-1-甲基肼-1-羰基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲酸叔丁酯(498mg，1.0mmol)在DCM(20.0mL)中的溶液中加入2,2,2-三氟乙酸(11.8g，103.84mmol，8.0mL)和将该反应体系搅拌16h在25℃。然后浓缩该混合物，通过快速色谱法纯化(用0-100％在DCM中的MeOH洗脱)，得到6-((1r,3r)-3-(1H-咪唑-1-基)环丁基)-2-甲基-2,3-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,4,7(6H)-三酮(290mg，0.93mmol，91％收率)。MS测定值(ESI+):314.1(M+H)+。
步骤G:6-((1r,3r)-3-(1H-咪唑-1-基)环丁基)-2-甲基-1,7-二氧代-1,2,6,7-四 氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基三氟甲磺酸酯
向6-((1r,3r)-3-(1H-咪唑-1-基)环丁基)-2-甲基-2,3-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,4,7(6H)-三酮(290mg，0.93mmol，1.0当量)在无水吡啶(4.0mL)中的溶液中加入1,1,1-三氟-N-苯基-N-(三氟甲基磺酰基)甲磺酰胺(992mg，2.78mmol，3.0当量)，将该反应体系在25℃搅拌48h。然后浓缩该混合物，并通过快速色谱法纯化(用0-15％在DCM中的MeOH洗脱)，得到6-((1r,3r)-3-(1H-咪唑-1-基)环丁基)-2-甲基-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基三氟甲磺酸酯(120mg，0.27mmol，29％收率)。MS测定值(ESI+):446.1(M+H)+。
步骤H:6-((1r,3R)-3-(1H-咪唑-1-基)环丁基)-2-甲基-4-(((R)-1-(2-甲基-3- (三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例29)
将6-((1r,3r)-3-(1H-咪唑-1-基)环丁基)-2-甲基-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基三氟甲磺酸酯(90mg，0.20mmol，1.0当量)和(1R)-1-[2-甲基-3-(三氟甲基)苯基]乙胺(493mg，2.42mmol)的纯净混合物在100℃在微波反应器中搅拌2h。然后通过快速色谱法纯化该混合物(用0-15％在DCM中的MeOH洗脱)，并通过制备型HPLC进一步纯化，得到6-((1r,3R)-3-(1H-咪唑-1-基)环丁基)-2-甲基-4-(((R)-1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(8mg，0.02mmol，8％收率)。MS测定值(ESI+):499.3(M+H)+。
实施例30和31:4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-((3R,4S)-3-氟四氢-2H-吡喃-4-基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例30，任意指定四氢吡喃处的立体化学)和4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-((3S,4R)-3-氟四氢-2H-吡喃-4-基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例31，任意指定四氢吡喃处的立体化学)
基本上按照与实施例4类似的方式，以外消旋反式-3-氟四氢-2H-吡喃-4-胺(根据WO/2013/020062的方法制备)制备。最终步骤中的手性分离得到两种未指定的四氢吡喃立体异构体。
异构体1:4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-((3R,4S)-3-氟四氢-2H-吡喃-4-基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例30，任意指定四氢吡喃处的立体化学)。MS测定值(ESI+):467.0(M+H)+。手性HPLC:(柱:(R,R)Whelk-O1，4.6*100mm 3.5μm，流速:3.0mL/min，洗脱液:MeOH(0.2％7M NH3的MeOH溶液)，温度40℃)保留时间＝3.42min。
异构体2:4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-((3S,4R)-3-氟四氢-2H-吡喃-4-基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例31，任意指定四氢吡喃处的立体化学)。MS测定值(ESI+):467.0(M+H)+。手性HPLC:(柱:(R,R)Whelk-O1，4.6*100mm 3.5μm，流速:3.0mL/min，洗脱液:MeOH(0.2％7M NH3的MeOH溶液)，温度40℃)保留时间＝3.05min。
实施例32和33:4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-((3R,4R)-3-氟四氢-2H-吡喃-4-基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例32，任意指定的四氢吡喃的绝对立体化学)和4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-((3S,4S)-3-氟四氢-2H-吡喃-4-基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例33，任意指定的四氢吡喃的绝对立体化学)
基本上按照与实施例4类似的方式，以外消旋顺式-3-氟四氢-2H-吡喃-4-胺(根据WO/2013/020062的方法制备)制备。最终步骤中的手性分离得到四氢吡喃立体异构体。
异构体1:4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-((3R,4R)-3-氟四氢-2H-吡喃-4-基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例32，任意指定的四氢吡喃的绝对立体化学)。MS测定值(ESI+):467.4(M+H)+。手性HPLC:(柱:IC-3，4.6*100mm 3μm，流速:3.0mL/min，洗脱液:EtOH(1％7M NH3的MeOH溶液)，温度40℃)保留时间＝2.48min。
异构体2:4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-((3S,4S)-3-氟四氢-2H-吡喃-4-基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例33，任意指定的四氢吡喃的绝对立体化学)。MS测定值(ESI+):467.4(M+H)+。手性HPLC:(柱:IC-3，4.6*100mm 3μm，流速:3.0mL/min，洗脱液:EtOH(1％7M NH3的MeOH溶液)，温度40℃)保留时间＝2.99min。
实施例34和35:6-环丙基-2-甲基-4-(((R)-1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-8-((S)-吡咯烷-2-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例34，任意定义的吡咯烷处的绝对立体化学)和6-环丙基-2-甲基-4-(((R)-1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-8-((R)-吡咯烷-2-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例35，任意定义的吡咯烷处的绝对立体化学)
步骤A:2-(6-环丙基-2-甲基-4-(((R)-1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨 基)-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-8-基)-2,5-二氢-1H-吡咯-1-甲酸叔 丁酯
在N2中向(R)-8-溴-6-环丙基-2-甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(230mg，462μmol)、2,3-二氢吡咯-1-甲酸叔丁酯(156mg，923μmol)、乙酸钯(II)(21mg，92μmol)、碳酸钾(192mg，1.39mmol)在1,4-二噁烷(10mL)中的混合物中加入三苯膦(49mg，185μmol)。将该混合物加热至60℃ 16h。然后浓缩该混合物，使其吸附在硅胶上，通过制备型TLC纯化(用10％在DCM中的MeOH洗脱)，得到2-(6-环丙基-2-甲基-4-(((R)-1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-8-基)-2,5-二氢-1H-吡咯-1-甲酸叔丁酯(220mg，～80％纯度，74％收率)。MS测定值(ESI+):586.5(M+H)+。
步骤B:2-(6-环丙基-2-甲基-4-(((R)-1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨 基)-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-8-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
向2-(6-环丙基-2-甲基-4-(((R)-1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-8-基)-2,5-二氢-1H-吡咯-1-甲酸叔丁酯(208mg，285μmol，80％纯度)在MeOH(11mL)中的溶液中加入Pd(OH)2(40mg，285μmol)。将该混合物在室温搅拌2小时。真空浓缩该混合物，得到粗产物。通过制备型HPLC纯化粗产物，洗脱，得到2-(6-环丙基-2-甲基-4-(((R)-1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-8-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(30mg，51μmol，17％收率)。MS测定值(ESI+):588.6(M+H)+。
步骤C:6-环丙基-2-甲基-4-(((R)-1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)- 8-(吡咯烷-2-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
在0℃向2-(6-环丙基-2-甲基-4-(((R)-1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-8-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(50mg，85μmol)在DCM(6mL)中的溶液中加入4M HCl的1,4-二噁烷溶液(4M的1,4-二噁烷溶液，2.13mL)。将该混合物在室温搅拌16小时。真空浓缩该混合物。通过制备型HPLC纯化粗产物，得到6-环丙基-2-甲基-4-(((R)-1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-8-(吡咯烷-2-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(13mg，27μmol，24％收率)。MS测定值(ESI+):488.2(M+H)+。
步骤D:6-环丙基-2-甲基-4-(((R)-1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)- 8-((S)-吡咯烷-2-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例34)和6-环丙基-2- 甲基-4-(((R)-1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-8-((R)-吡咯烷-2-基)-2,6-二 氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例35)
通过手性SFC分离6-环丙基-2-甲基-4-(((R)-1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-8-(吡咯烷-2-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮，得到:6-环丙基-2-甲基-4-(((R)-1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-8-((S)-吡咯烷-2-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例34，任意指定的吡咯烷立体化学)和6-环丙基-2-甲基-4-(((R)-1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-8-((R)-吡咯烷-2-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例35，任意指定的吡咯烷立体化学)
实施例34:MS测定值(ESI+):488.2(M+H)+。手性HPLC:(柱:Cellulose-SC，4.6*100mm 3.5μm，流速:3.0mL/min，洗脱液:MeOH(0.2％7M NH3的MeOH溶液)，温度40℃)保留时间＝2.07min。
实施例35:MS测定值(ESI+):488.2(M+H)+。手性HPLC:(柱:Cellulose-SC，4.6*100mm 3.5μm，流速:3.0mL/min，洗脱液:MeOH(0.2％7M NH3的MeOH溶液)，温度40℃)保留时间＝1.95min。
实施例36:(R)-4-((1-(3-(1,1-二氟乙基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
向2-甲基-1,7-二氧代-6-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基2,4,6-三异丙基苯磺酸酯(57mg，105)、(R)-1-(3-(1,1-二氟乙基)-2-氟苯基)乙-1-胺盐酸盐(26mg，126μmol，根据WO2019122129的方法制备)在二噁烷(0.5mL)中的混合物中加入碳酸铯(102mg，315μmol)和XantPhos-PdG3(10.0mg，10.5μmol)。将该混合物在110℃搅拌3hr。冷却至室温时，然后浓缩该溶液，并通过快速柱色谱法(在DCM中的MeOH＝2％)纯化得到的残余物。再用制备型HPLC纯化，得到(R)-4-((1-(3-(1,1-二氟乙基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(11.0mg，24μmol，23％收率)。MS测定值(ESI+):463.2(M+H)+。
实施例37:(R)-4-((1-(3-(1,1-二氟乙基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-8-甲氧基-2-甲基-6-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
步骤A:(8-溴-2-甲基-1,7-二氧代-6-四氢吡喃-4-基-吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基) 2,4,6-三异丙基苯磺酸酯
将2-甲基-1,7-二氧代-6-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基2,4,6-三异丙基苯磺酸酯(3.11g，5.72mmol)、乙酸钾(842mg，8.58mmol)和分子溴(1.37g，8.58mmol)在乙酸(55mL)中的混合物加热至90℃ 16小时。然后将该混合物冷却至室温，并减压浓缩。通过快速柱(PE:EA＝2:1)纯化残余物，得到(8-溴-2-甲基-1,7-二氧代-6-四氢吡喃-4-基-吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基)2,4,6-三异丙基苯磺酸酯(3.32g，4.5mmol，79％收率，85％纯度)。MS测定值(ESI+):79/81Br 622.4/624.4(M+H)+。
步骤C:(8-甲氧基-2-甲基-1,7-二氧代-6-四氢吡喃-4-基-吡啶并[3,4-d]哒嗪- 4-基)2,4,6-三异丙基苯磺酸酯
在N2气氛中向(8-溴-2-甲基-1,7-二氧代-6-四氢吡喃-4-基-吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基)2,4,6-三异丙基苯磺酸酯(400mg，546μmol，85％纯度)、MeOH(440mg，13.73mmol)在二噁烷(4mL)中的混合物中加入碳酸铯(520mg，1.60mmol)和Xantphos Pd G3(110mg，116.29μmol)。将该反应混合物在50℃搅拌4小时，冷却至室温，并真空浓缩。将得到的残余物溶于10ml DCM，加入360mg DIPEA和360mg 2,4,6-三异丙基苯磺酰氯，并在室温搅拌3小时。真空浓缩该混合物，并通过快速色谱法(DCM:MeOH＝25:1)纯化残余物，得到(8-甲氧基-2-甲基-1,7-二氧代-6-四氢吡喃-4-基-吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基)2,4,6-三异丙基苯磺酸酯(272mg，403μmol，73％收率)。MS测定值(ESI+):574.4(M+H)+。
步骤D:(R)-4-((1-(3-(1,1-二氟乙基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-8-甲氧基-2-甲 基-6-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例37)
向(8-甲氧基-2-甲基-1,7-二氧代-6-四氢吡喃-4-基-吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基)2,4,6-三异丙基苯磺酸酯(222mg，387μmol)、(1R)-1-[3-(1,1-二氟乙基)-2-氟-苯基]乙胺盐酸盐(94mg，460μmol)、XantphosPdG3(37mg，39μmol)在1,4-二噁烷(2.5mL)中的混合物中加入碳酸铯(378mg，1.16mmol)。将该混合物在110℃搅拌16hr，冷却至室温，并真空浓缩。通过快速色谱法(2％在DCM中的MeOH)纯化残余物，然后通过制备型HPLC纯化，得到(R)-4-((1-(3-(1,1-二氟乙基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-8-甲氧基-2-甲基-6-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(77.3mg，157μmol，41％收率)。MS测定值(ESI+):493.2(M+H)+。
实施例38和39:4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6-((S)-四氢-2H-吡喃-3-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例38，任意指定的四氢吡喃的绝对立体化学)和4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例39，任意指定的四氢吡喃的绝对立体化学)
按照与实施例4类似的方式，使用外消旋四氢吡喃-3-胺盐酸盐制备标题化合物。手性SFC得到(4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6-((S)-四氢-2H-吡喃-3-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例38，任意指定的四氢吡喃的绝对立体化学)。MS测定值(ESI+):449.4(M+H)+。手性HPLC:(柱:AD-3，4.6*100mm 3μm，流速:3.0mL/min，洗脱液:EtOH(1％7M NH3的MeOH溶液)，温度40℃)保留时间＝1.20min。4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例39，任意指定的四氢吡喃的绝对立体化学)。MS测定值(ESI+):449.4(M+H)+。手性HPLC:(柱:AD-3，4.6*100mm 3μm，流速:3.0mL/min，洗脱液:EtOH(1％7M NH3的MeOH溶液)，温度40℃)保留时间＝1.47min。
实施例40:(R)-4-((1-(3-(1,1-二氟-2-羟基-2-甲基丙基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
将(2-甲基-1,7-二氧代-6-四氢吡喃-4-基-吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基)2,4,6-三异丙基苯磺酸酯(70mg，129μmol)、(R)-1-(3-(1-氨基乙基)-2-氟苯基)-1,1-二氟-2-甲基丙-2-醇HCl(55mg，193μmol，根据WO2019122129中详述的方法制备)、XantPhos Pd G3(32mg，39μmol)和碳酸铯(126mg，386μmol)的混合物溶于1,4-二噁烷(2mL)，然后在100℃搅拌16hr。然后过滤该混合物，并用乙酸乙酯稀释粗滤液，并用NaHCO3(水溶液)洗涤。用硫酸钠干燥，并减压浓缩。通过制备型TLC(DCM/MeOH＝30:1)纯化粗残余物，然后通过制备型HPLC纯化，得到(R)-4-((1-(3-(1,1-二氟-2-羟基-2-甲基丙基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(24mg，47μmol，37％收率)。MS测定值(ESI+):507.4，[M+H]+。
实施例41:(R)-4-((1-(3-(1,1-二氟-2-羟基-2-甲基丙基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-8-甲氧基-2-甲基-6-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
按照与实施例37类似的方式制备(R)-4-((1-(3-(1,1-二氟-2-羟基-2-甲基丙基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-8-甲氧基-2-甲基-6-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例41)。MS测定值(ESI+):537.4[M+H]+。
实施例42:(R)-6-环丙基-4-((1-(3-(1,1-二氟-2-羟基-2-甲基丙基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
按照与实施例40类似的方式制备(R)-6-环丙基-4-((1-(3-(1,1-二氟-2-羟基-2-甲基丙基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例42)。MS测定值(ESI+):463.4，[M+H]+。
实施例43:(R)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(1-(二氟甲基)环丙基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
步骤A:2-((二甲基氨基)亚甲基)-3-氧代戊二酸二甲酯
向3-氧代戊二酸二甲酯(5.0g，28.71mmol)在MeOH(100mL)中的溶液中加入1,1-二甲氧基-N,N-二甲基-甲胺(4.1g，34.45mmol)。将该混合物在RT搅拌4h。将该反应混合物直接用于下一步。MS测定值(ESI+):230.2(M+H)+。
步骤B:1-(1-(二氟甲基)环丙基)-4-羟基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲酸甲酯
向2-((二甲基氨基)亚甲基)-3-氧代戊二酸二甲酯(1.3g，5.43mmol)在MeOH(25mL)中的粗溶液中加入1-(二氟甲基)环丙胺(640mg，5.98mmol)。将该混合物在RT搅拌6h，然后减压除去溶剂。向残余物中加入水(50mL)，并将该混悬液调节至pH＝11。用EA萃取该溶液。用饱和柠檬酸将水相酸化至pH 3。用DCM萃取水相。用无水Na2SO4干燥有机层，浓缩得到纯的1-(1-(二氟甲基)环丙基)-4-羟基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲酸甲酯(980mg，3.66mmol，67％收率)。MS测定值(ESI+):260.2(M+H)+。
步骤C:1-(1-(二氟甲基)环丙基)-6-氧代-4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-1,6-二 氢吡啶-3-甲酸甲酯
向1-(1-(二氟甲基)环丙基)-4-羟基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲酸甲酯(748mg，2.89mmol)和1,1,1-三氟-N-苯基-N-((三氟甲基)磺酰基)甲磺酰胺(1.6g，4.33mmol)在无水DMF(30mL)中的溶液中加入碳酸钾(1.2g，8.66mmol)。将该反应混合物在RT搅拌3.5hr，然后通过添加饱和氯化铵水溶液(50mL)淬灭。用三部分的50mL的乙酸乙酯萃取该反应混合物。用盐水洗涤合并的有机层，并用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过快速色谱法纯化残余物(用0-40％在PE中的EA洗脱)，得到1-(1-(二氟甲基)环丙基)-6-氧代-4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-1,6-二氢吡啶-3-甲酸甲酯(880mg，2.25mmol，78％收率)。MS测定值(ESI+):392.3(M+H)+。
步骤D:1-(1-(二氟甲基)环丙基)-5-(甲氧基羰基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-4-甲 酸
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向1-(1-(二氟甲基)环丙基)-6-氧代-4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-1,6-二氢吡啶-3-甲酸甲酯(835mg，2.13mmol)在DMF(50.0mL)和H2O(2.5mL)中的溶液中加入1’-双(二苯基膦基)二茂铁(354mg，640μmol)、三乙胺(647mg，6.40mmol)和乙酸钯(II)(95mg，427μmol)。将该反应体系在高压反应器中在90℃、一氧化碳气氛中(2.0MPa)搅拌6h。然后减压除去溶剂。向残余物中加入水(20mL)。将该混悬液调节至pH 11，用乙酸乙酯(20mL)萃取。分离水相，用饱和柠檬酸溶液酸化至pH 4，然后用乙酸乙酯(20mL)萃取。用无水Na2SO4干燥有机层，浓缩。将得到的物质与来自以0.29mmol规模进行的相同实验的产物合并，得到纯的1-(1-(二氟甲基)环丙基)-5-(甲氧基羰基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-4-甲酸(523mg，1.82mmol，76％收率)。MS测定值(ESI+):288.2(M+H)+。
步骤E:4-(2-(叔丁氧基羰基)-1-甲基肼-1-羰基)-1-(1-(二氟甲基)环丙基)-6- 氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲酸甲酯
将1-(1-(二氟甲基)环丙基)-5-(甲氧基羰基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-4-甲酸(180mg，627μmol)、1-N-Boc-2-甲基肼(122mg，836bμmol)、DIPEA(233mg，1.81mmol)和HATU(317mg，836μmol)在无水THF(5.0mL)中的溶液在RT搅拌2h。然后用水稀释该反应混合物，并用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤有机层，并用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将残余物与在相同条件下在1.01mmol规模反应中进行的另一个单独反应的物质合并，并通过硅胶柱快速色谱法纯化(用0-70％在PE中的EA洗脱)，得到4-(2-(叔丁氧基羰基)-1-甲基肼-1-羰基)-1-(1-(二氟甲基)环丙基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲酸甲酯(388mg，934μmol，57％收率)。MS测定值(ESI+):360.4(M+H-(Boc))+。
步骤F:6-(1-(二氟甲基)环丙基)-2-甲基-2,3-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,4,7 (6H)-三酮
将4-(2-(叔丁氧基羰基)-1-甲基肼-1-羰基)-1-(1-(二氟甲基)环丙基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲酸甲酯(388mg，934μmol)在HCl(4M的1,4-二噁烷溶液，10.0mL)中的溶液在100℃搅拌6h。过滤得到的混悬液，用乙酸乙酯洗涤，得到6-(1-(二氟甲基)环丙基)-2-甲基-2,3-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,4,7(6H)-三酮(151mg，534μmol，57％收率)。MS测定值(ESI+):284.3(M+H)+。
步骤G:6-(1-(二氟甲基)环丙基)-2-甲基-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3, 4-d]哒嗪-4-基2,4,6-三异丙基苯磺酸酯
将6-(1-(二氟甲基)环丙基)-2-甲基-2,3-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,4,7(6H)-三酮(45mg，160μmol)、DIPEA(68mg，530μmol)和2,4,6-三异丙基苯磺酰氯(80mg，260μmol)在DCM(1.0mL)中的溶液在RT搅拌2hr。浓缩该反应混合物，通过快速色谱法纯化，得到6-(1-(二氟甲基)环丙基)-2-甲基-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基2,4,6-三异丙基苯磺酸酯(77mg，140μmol，88％收率)。MS测定值(ESI+):550.7(M+H)+。
步骤H:(R)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(1-(二氟甲基)环丙 基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例43)
向6-(1-(二氟甲基)环丙基)-2-甲基-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基2,4,6-三异丙基苯磺酸酯(50mg，0.09mmol)在1,4-二噁烷(0.5mL)中的溶液中加入(R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙-1-胺盐酸盐(25mg，0.11mmol)、Cs2CO3(177mg，0.55mmol)和Xantphos-Pd-G3(35mg，0.04mmol)。将该反应体系在微波反应器中在110℃照射3h。然后浓缩该反应体系，并通过快速色谱法纯化(用3％在DCM中的MeOH洗脱)。通过反相HPLC进一步纯化，得到(R)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(1-(二氟甲基)环丙基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(8mg，17μmol，19％收率)。MS测定值(ESI+):455.1(M+H)+。
实施例44和45:4-(((S)-1-(3-(二氟((S)-四氢呋喃-2-基)甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例44，任意指定手性甲基处的立体化学)和4-(((R)-1-(3-(二氟((S)-四氢呋喃-2-基)甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例45，任意指定手性甲基处的立体化学)
步骤A:1-(3-(二氟((S)-四氢呋喃-2-基)甲基)-2-氟苯基)乙胺
根据WO/2019/122129中所述的方法，使用外消旋2-甲基-2-丙磺酰胺合成标题化合物1-(3-(二氟((S)-四氢呋喃-2-基)甲基)-2-氟苯基)乙胺。MS测定值(ESI+):260.2(M+H)+。
步骤B:4-(((S)-1-(3-(二氟((S)-四氢呋喃-2-基)甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)- 2-甲基-6-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H,6H)-二酮(实施例44)和4- (((R)-1-(3-(二氟((S)-四氢呋喃-2-基)甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6-(四氢- 2H-吡喃-4-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H,6H)-二酮(实施例45)
向1-(3-(二氟((S)-四氢呋喃-2-基)甲基)-2-氟苯基)乙胺(358mg，1.38mmol)在1,4-二噁烷(5.0mL)中的溶液中加入(2-甲基-1,7-二氧代-6-四氢吡喃-4-基-吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基)2,4,6-三异丙基苯磺酸酯(500mg，919μmol)、Cs2CO3(1.8g，5.52mmol)和Xantphos-Pd-G3(349mg，368μmol)。将该反应体系在微波反应器中在110℃照射3h。将该反应体系冷却至rt，然后真空除去溶剂。通过反相HPLC纯化粗产物，得到4-((1-(3-(二氟((S)-四氢呋喃-2-基)甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H,6H)-二酮(208mg，0.40mmol，44％收率)。然后对非对映异构体混合物进行手性分离，得到4-(((S)-1-(3-(二氟((S)-四氢呋喃-2-基)甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H,6H)-二酮(实施例44):MS测定值(ESI+):519.3[(M+H)+]。手性HPLC:(柱:AS-3，4.6*100mm 3μm，流速:3.0mL/min，洗脱液:MeOH(0.2％7M NH3的MeOH溶液)，温度40℃)保留时间＝1.76min。4-(((R)-1-(3-(二氟((S)-四氢呋喃-2-基)甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H,6H)-二酮(实施例45):MS测定值(ESI+):519.3[(M+H)+]。手性HPLC:(柱:IC-3，4.6*100mm 3μm，流速:3.0mL/min，洗脱液:EtOH(1％7M NH3的MeOH溶液)，温度40℃)保留时间＝2.17min。
实施例46:(R)-4-((1-(3-氟苯并呋喃-7-基)乙基)氨基)-2-甲基-6-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
基本上按照与实施例45类似的方式，以(R)-1-(3-氟苯并呋喃-7-基)乙-1-胺盐酸盐(根据WO/2019/122129的方法制备)为原料制备。MS测定值(ESI+):439.1(M+H)+。
实施例47:(R)-4-((1-(3,3-二氟-2,3-二氢苯并呋喃-7-基)乙基)氨基)-2-甲基-6-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
基本上按照与实施例45类似的方式，以(R)-1-(3,3-二氟-2,3-二氢苯并呋喃-7-基)乙-1-胺盐酸盐(根据WO/2019/122129的方法制备)为原料制备。MS测定值(ESI+):459.2(M+H)+。
实施例48:(R)-8-乙酰基-6-环丙基-2-甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
向(R)-8-溴-6-环丙基-2-甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例3，196mg，0.39mmol)在1,4-二噁烷(10mL)中的溶液中加入三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡烷(171mg，0.47mmol)、三乙胺(80mg，0.79mmol)和双(三苯膦)氯化钯(II)(55mg，0.08mmol)。将该混合物在100℃搅拌16hr，在rt用0.5mL HCl(4M的1,4-二噁烷溶液)处理2h。用饱和氟化钾水溶液使该反应体系淬灭。过滤该混合物，并用DCM(3*100mL)萃取滤液。用Na2SO4干燥有机层并浓缩。通过反相HPLC纯化，得到(R)-8-乙酰基-6-环丙基-2-甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(1.03mg，0.07mmol，0.5％收率)。MS测定值(ESI+):461.2(M+H)+。
实施例49:(R)-6-环己基-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-8-甲氧基-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
根据与实施例37类似的方法制备。MS测定值(ESI+):477.3(M+H)+。
实施例50:(R)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6-(3-吗啉代双环[1.1.1]戊-1-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
步骤A:4-溴-6-氯-5-甲基哒嗪-3(2H)-酮
将6-氯-5-甲基哒嗪-3(2H)-酮(440g，3.05mol)加入10L反应容器，随后加入水(4.4L)。向该混悬液中加入N-溴琥珀酰亚胺(649g，3.65mol)，将该混悬液在100℃搅拌16hr。将该混合物冷却至室温并过滤。用水(1.1L×2)洗涤滤饼，并在红外灯下干燥，得到4-溴-6-氯-5-甲基哒嗪-3(2H)-酮(644g，95％收率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:13.46(s,1H),2.38(s,3H)。
步骤B:4-溴-6-氯-2,5-二甲基哒嗪-3(2H)-酮
将4-溴-6-氯-5-甲基哒嗪-3(2H)-酮(700g，3.14mol)加入10L反应容器。向反应器中加入N,N-二甲基乙酰胺(3.5L)，随后加入碳酸钾(653g，4.72mol)。在室温滴加碘甲烷(493g，3.47mol)，历时1hr，将该混合物在室温搅拌16小时。此时，将该反应混合物倾入水(7L)中，并将得到的混悬液在0℃搅拌30分钟。过滤该混合物，并用水(1.75L×2)洗涤滤饼。在红外灯下干燥固体，得到4-溴-6-氯-2,5-二甲基哒嗪-3(2H)-酮(672g，2.82mol，91％收率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:3.45(s,3H),2.39(s,3H)。
步骤C:4-溴-5-(溴甲基)-6-氯-2-甲基哒嗪-3(2H)-酮
将4-溴-6-氯-2,5-二甲基哒嗪-3(2H)-酮(107g，450mmol)加入2L反应器。向烧瓶中加入四氯化碳(1.07L)、N-溴琥珀酰亚胺(160.5g，900mmol)和过氧化苯甲酰(22g，91mmol)。将该混合物在80℃搅拌16hr。此时，将该溶液冷却至室温并过滤。用水(1L)洗涤滤液，并用DCM(500mL)萃取。用硫酸钠干燥有机相，过滤并浓缩。然后将残余物在乙醚(1L)中搅拌成浆液，并过滤固体，真空干燥，得到4-溴-5-(溴甲基)-6-氯-2-甲基哒嗪-3(2H)-酮(56g，177mmol，40％收率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:4.54(s,2H),3.82(s,3H)。
步骤D:乙酸(5-溴-3-氯-1-甲基-6-氧代-1,6-二氢哒嗪-4-基)甲酯
向2L反应器中加入4-溴-5-(溴甲基)-6-氯-2-甲基哒嗪-3(2H)-酮(56g，177mmol)，随后加入DMF(840mL)。向该混合物中加入乙酸钠(29.2g，356mmol)。将该混合物在室温搅拌3hr，然后用水(1.68L)稀释。用乙酸乙酯(840mL×2)萃取水性混合物，并用水(840mL)、盐水(840mL)洗涤合并的有机相，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到乙酸(5-溴-3-氯-1-甲基-6-氧代-1,6-二氢哒嗪-4-基)甲酯(44g，149mmol，84％收率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:5.24(s,2H),3.85(s,3H),2.14(s,3H)。
步骤E:2-(5-(乙酰氧基甲基)-6-氯-2-甲基-3-氧代-2,3-二氢哒嗪-4-基)丙二酸 二甲酯
向包含乙酸(5-溴-3-氯-1-甲基-6-氧代-1,6-二氢哒嗪-4-基)甲酯(26.0g，88mmol)的1L烧瓶中加入THF(520mL)。向该混合物中加入丙二酸二甲酯(19.85g，150mmol)，并将该溶液冷却至0℃。向该混合物中逐滴加入NaH(60％的矿物油溶液，7.10g，177mmol)。将该反应体系在室温搅拌16小时，然后用冰水(520mL)稀释。将水性混合物萃取入乙酸乙酯(520mL×2)，并用盐水(520mL)洗涤合并的有机层，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到2-(5-(乙酰氧基甲基)-6-氯-2-甲基-3-氧代-2,3-二氢哒嗪-4-基)丙二酸二甲酯(31g，粗品)，其不经进一步纯化即可使用。MS测定值(ESI+):347.0(M+H)+。
步骤F:4-氯-2-甲基-7-亚甲基-5,6,7,8-四氢酞嗪-1(2H)-酮
向500mL烧瓶中加入2-(5-(乙酰氧基甲基)-6-氯-2-甲基-3-氧代-2,3-二氢哒嗪-4-基)丙二酸二甲酯(31g，粗品)，随后加入乙醇(310mL)。加入浓HCl(31mL)，并将该混合物在70℃搅拌16小时。将该混合物冷却至室温并浓缩。将残余物与PE/EtOAc(10/1，310mL)一起搅拌成浆液，并收集固体，得到4-氯-2-甲基-7-亚甲基-5,6,7,8-四氢酞嗪-1(2H)-酮(11g，52.2mmol，58％收率，2步)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:5.35(s,2H),3.67(s,3H),3.54(s,2H)。
步骤G:(3-吗啉代双环[1.1.1]戊-1-基)氨基甲酸叔丁酯
向(3-氨基双环[1.1.1]戊-1-基)氨基甲酸叔丁酯(3.0g，15.14mmol)和1-氯-2-(2-氯乙氧基)乙烷(2.6g，18.17mmol)在DMF(10.0mL)中的溶液中加入碳酸钾(4.2g，30.28mmol)和碘化钾(2.5g，15.14mmol)。然后将该反应体系在90℃搅拌5h。用H2O(200mL)使该混合物淬灭，用EA(300mL)萃取，并用MgSO4干燥。浓缩有机层，并通过快速色谱法纯化(用0-75％在PE中的EA洗脱)，得到(3-吗啉代双环[1.1.1]戊-1-基)氨基甲酸叔丁酯(4.0g，14.92mmol，98％收率)。MS测定值(ESI+):269.1(M+H)+。
步骤H:3-吗啉代双环[1.1.1]戊-1-胺盐酸盐
向(3-吗啉代双环[1.1.1]戊-1-基)氨基甲酸叔丁酯(2.7g，9.88mmol)在二噁烷(20.0mL)中的溶液中加入HCl(4.0M的1,4-二噁烷溶液，20mL)，将该混合物在25℃搅拌1h。浓缩该混合物，得到3-吗啉代双环[1.1.1]戊-1-胺盐酸盐(1.69g，粗品)，其不经进一步纯化即可用于下一步。MS测定值(ESI+):169.1(M+H)+。
步骤I:2-(6-氯-5-(羟基甲基)-2-甲基-3-氧代-2,3-二氢哒嗪-4-基)-N-(3-吗啉 代双环[1.1.1]戊-1-基)乙酰胺
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向3-吗啉代双环[1.1.1]戊-1-胺盐酸盐(376mg，1.83mmol)在EtOH(20.0mL)中的溶液中加入4-氯-2-甲基-5,8-二氢-2H-吡喃并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(480mg，2.24mmol)和N,N-二异丙基乙胺(866mg，6.70mmol)。将该反应体系在80℃搅拌4h。浓缩该混合物，并通过快速色谱法纯化(用0-15％在DCM中的MeOH洗脱)，得到2-(6-氯-5-(羟基甲基)-2-甲基-3-氧代-2,3-二氢哒嗪-4-基)-N-(3-吗啉代双环[1.1.1]戊-1-基)乙酰胺(300mg，0.79mmol，43％收率)。MS测定值(ESI+):383.2(M+H)+。
步骤J:4-氯-2-甲基-6-(3-吗啉代双环[1.1.1]戊-1-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4- d]哒嗪-1,7-二酮
向2-(6-氯-5-(羟基甲基)-2-甲基-3-氧代-2,3-二氢哒嗪-4-基)-N-(3-吗啉代双环[1.1.1]戊-1-基)乙酰胺(300mg，0.79mmol)在DCM(30.0mL)中的溶液中加入氯铬酸吡啶鎓(220mg，1.02mmol)，并将该混合物在25℃搅拌16h。浓缩该混合物，并通过快速色谱法纯化(用0-15％在DCM中的MeOH洗脱)，得到4-氯-2-甲基-6-(3-吗啉代双环[1.1.1]戊-1-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(112mg，0.31mmol，39％收率。MS测定值(ESI+):363.2(M+H)+。
步骤K:(R)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6-(3-吗啉代 双环[1.1.1]戊-1-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
向4-氯-2-甲基-6-(3-吗啉代双环[1.1.1]戊-1-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(80mg，0.22mmol)和(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟-苯基]乙胺(63mg，0.33mmol)在1,4-二噁烷(1.0mL)中的溶液中加入Xantphos-Pd-G3(42mg，0.04mmol)和碳酸铯(216mg，0.66mmol)。将该反应体系在120℃在微波反应器中搅拌9h。用水(10mL)使该混合物淬灭，用DCM(20mL)萃取，并用MgSO4干燥。浓缩有机层，并通过快速色谱法纯化(用0-15％在DCM中的MeOH洗脱)，随后通过反相HPLC纯化，得到(R)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6(3-吗啉代双环[1.1.1]戊-1-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例50，17mg，0.03mmol，15％收率)，为黄色固体。MS测定值(ESI+):516.3(M+H)+。
实施例51:(R)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6-(2-氧杂螺[3.3]庚-6-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H,6H)-二酮
按照与对实施例50[步骤I-K]所述类似的方式制备。MS测定值(ESI+):461.2(M+H)+。
实施例52和53:4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6-((S)-3-甲基四氢呋喃-3-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例52，任意指定四氢呋喃环处的绝对立体化学)和4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6-((R)-3-甲基四氢呋喃-3-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例53，任意指定四氢呋喃环处的绝对立体化学)
按照与实施例43类似的方式制备。实施例52:MS测定值(ESI+):449.3(M+H)+。手性HPLC:(柱:OJ-3，4.6*100mm 3μm，流速:3.0mL/min，洗脱液:MeOH(0.2％7M NH3的MeOH溶液)，温度40℃)保留时间＝1.23min。实施例53:MS测定值(ESI+):449.3(M+H)+。手性HPLC:(柱:OJ-3，4.6*100mm 3μm，流速:3.0mL/min，洗脱液:MeOH(0.2％7M NH3的MeOH溶液)，温度40℃)保留时间＝1.69min。
实施例54和55:2-甲基-4-(((R)-1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-6-((S)-3-甲基四氢呋喃-3-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例54，任意指定四氢呋喃环处的立体化学)和2-甲基-4-(((R)-1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-6-((R)-3-甲基四氢呋喃-3-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例55，任意指定四氢呋喃环处的立体化学)
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按照与实施例43类似的方式制备。实施例54:MS测定值(ESI+):463.5(M+H)+。手性HPLC:(柱:OJ-3，4.6*100mm 3μm，流速:3.0mL/min，洗脱液:MeOH(0.2％7M NH3的MeOH溶液)，温度40℃)保留时间＝1.06min。实施例55:MS测定值(ESI+):463.5(M+H)+。手性HPLC:(柱:OJ-3，4.6*100mm 3μm，流速:3.0mL/min，洗脱液:MeOH(0.2％7M NH3的MeOH溶液)，温度40℃)保留时间＝1.29min。
实施例56:(R)-4-((1-(4-溴噻吩-2-基)乙基)氨基)-6-环丙基-2-甲基-2,6-二氢 吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
步骤A:(R)-N-(1-(4-溴噻吩-2-基)亚乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺
向1-(4-溴-2-噻吩基)乙酮(4.7g，22.9mmol)在THF(50mL)中的溶液中加入(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(5.56g，46mmol)和四乙醇钛(15.68g，68.8mmol)。将该反应体系在80℃搅拌3h。用H2O(30mL)使该反应体系淬灭，并过滤该混合物。用DCM(5*50mL)萃取滤液，并用Na2SO4干燥合并的有机层，过滤并浓缩，得到(R)-N-(1-(4-溴噻吩-2-基)亚乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(7g，粗品)。将粗产物不经进一步纯化即可用于下一步。MS测定值(ESI+):79/81Br308.1/310.0[(M+H)+]。
步骤B:(R)-N-((R)-1-(4-溴噻吩-2-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺
向(R)-N-(1-(4-溴噻吩-2-基)亚乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(7g，22.71mmol)在THF(50mL)中的溶液中加入硼氢化钠(1.03g，27.3mmol)。将该反应体系在rt搅拌2hr。用H2O(20mL)使该反应体系淬灭，并用DCM(3*40mL)萃取该混合物。用Na2SO4干燥合并的有机层，并真空除去溶剂。通过快速柱色谱法纯化残余物(用0％-70％在PE中的EA洗脱)，得到(R)-N-((R)-1-(4-溴噻吩-2-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(6.7g，21.59mmol，95％收率)。MS测定值(ESI+):79/81Br 310.3，312.3[(M+H)+]。
步骤C:(R)-1-(4-溴噻吩-2-基)乙-1-胺盐酸盐
向((R)-N-((R)-1-(4-溴噻吩-2-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(6.7g，21.59mmol，1.0当量)在二噁烷(40mL)中的溶液中加入HCl(4M，20mL)。将该反应体系在rt搅拌2h。真空浓缩溶剂，并用乙醚使残余物重结晶。过滤该混合物，得到(R)-1-(4-溴噻吩-2-基)乙-1-胺盐酸盐(4.4g，18.14mmol，84％收率)。MS测定值(ESI+):79/81Br 188.9/190.9[(M-NH2)+]。
步骤D:(R)-4-((1-(4-溴噻吩-2-基)乙基)氨基)-6-环丙基-2-甲基-2,6-二氢吡 啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例56)
向(R)-1-(4-溴噻吩-2-基)乙-1-胺盐酸盐(1g，4.13mmol)在水(20mL)中的溶液中加入K2CO3，直至pH>12。将该混合物搅拌1h。然后用DCM(3*20mL)萃取该混合物，用Na2SO4干燥合并的有机层。真空除去溶剂，得到游离碱(R)-1-(4-溴噻吩-2-基)乙-1-胺(846mg，4.11mmol)，为淡黄色油状物。将粗产物不经进一步纯化即可用于下一步。
向(6-环丙基-2-甲基-1,7-二氧代-吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基)三氟甲磺酸酯(500mg，1.37mmol)在NMP(0.5mL)中的溶液中加入((R)-1-(4-溴噻吩-2-基)乙-1-胺(846mg，4.11mmol)。将该反应体系在95℃搅拌6h。将该混合物倾入饱和柠檬酸水溶液(10mL)，并搅拌10min。用DCM(4*30mL)萃取该混合物，用Na2SO4干燥合并的有机层。真空除去溶剂，并通过快速柱色谱法(用0％-7％在DCM中的MeOH洗脱)和反相HPLC纯化残余物，得到(R)-4-((1-(4-溴噻吩-2-基)乙基)氨基)-6-环丙基-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(340mg，0.81mmol，59％收率)。MS测定值(ESI+):79/81Br 421.1/423.1[(M+H)+]。
实施例57:(R)-6-环丙基-2-甲基-4-((1-(4-(2-((甲基氨基)甲基)苯基)噻吩-2-基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
向(R)-4-((1-(4-溴噻吩-2-基)乙基)氨基)-6-环丙基-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例56，100mg，0.24mmol)在二噁烷(5mL)和水(1mL)中的溶液中加入N-甲基-1-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)甲胺(117mg，0.48mmol)、碳酸钾(98mg，0.71mmol)和四(三苯膦)钯(55mg，0.05mmol)。将该反应体系在110℃在微波反应器中搅拌3hr。冷却该反应体系，用水稀释，并用DCM(4*30mL)萃取。用Na2SO4干燥合并的有机层，并真空除去溶剂。通过快速柱色谱法纯化残余物(用0％-7％在DCM中的MeOH洗脱)，随后通过制备型HPLC纯化，得到(R)-6-环丙基-2-甲基-4-((1-(4-(2-((甲基氨基)甲基)苯基)噻吩-2-基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例57，23.1mg，0.05mmol，20％收率)。MS测定值(ESI+):462.3[(M+H)+]。
实施例58和59:4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-((3R,4R)-3-氟四氢-2H-吡喃-4-基)-8-甲氧基-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例58，任意指定四氢吡喃处的绝对立体化学)&4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-((3S,4S)-3-氟四氢-2H-吡喃-4-基)-8-甲氧基-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例59，任意指定四氢吡喃处的绝对立体化学):
步骤A:8-溴-4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-((3R,4R)-3- 氟四氢-2H-吡喃-4-基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮和8-溴-4-(((R)- 1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-((3S,4S)-3-氟四氢-2H-吡喃-4-基)-2-甲基- 2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
向4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-((3R,4R)-3-氟四氢-2H-吡喃-4-基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例32)和4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-((3S,4S)-3-氟四氢-2H-吡喃-4-基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例33)(238mg，510.26μmol)在CH3COOH(2.03mL)中的非对映异构体混合物中加入乙酸钾(75mg，765μmol)和溴(46mg，561μmol)。将该混合物加热至25℃，并搅拌2hr。减压除去溶剂，并通过制备型TLC(DCM/MeOH＝30:1)纯化粗残余物，得到8-溴-4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-((3R,4R)-3-氟四氢-2H-吡喃-4-基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮和8-溴-4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-((3S,4S)-3-氟四氢-2H-吡喃-4-基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮的非对映异构体混合物(160mg，293μmol，58％收率)。MS测定值(ESI+):79/81Br 545.3/547.3[M+H]+。
步骤B:4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-((3R,4R)-3-氟四 氢-2H-吡喃-4-基)-8-甲氧基-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例 58)&4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-((3S,4S)-3-氟四氢-2H-吡喃- 4-基)-8-甲氧基-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例59):
将甲醇(94mg，2.93mmol，119μL)、Xantphos-PdG3(73mg，88μmol)、8-溴-4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-((3R,4R)-3-氟四氢-2H-吡喃-4-基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮和8-溴-4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-((3S,4S)-3-氟四氢-2H-吡喃-4-基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮的非对映异构体混合物(160mg，293μmol)和碳酸铯(287mg，880μmol)溶于1,4-二噁烷(4mL)。将该混合物在50℃搅拌16小时。然后过滤该混合物，并使滤液分配在NaHCO3(水溶液)与乙酸乙酯之间。合并有机层，并用硫酸钠干燥，并减压除去溶剂。通过制备型TLC(DCM/MeOH＝30:1)纯化粗残余物，随后通过反相HPLC纯化，得到非对映异构体混合物4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(顺式-3-氟四氢-2H-吡喃-4-基)-8-甲氧基-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(60mg，117μmol，40％收率)。通过手性SFC进一步分离非对映异构体，得到4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-((3R,4R)-3-氟四氢-2H-吡喃-4-基)-8-甲氧基-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例58，任意指定四氢吡喃处的绝对立体化学)和4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-((3S,4S)-3-氟四氢-2H-吡喃-4-基)-8-甲氧基-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例59，四氢吡喃处的绝对立体化学为任意的)。实施例58:MS测定值(ESI+):497.3，[M+H]+。手性HPLC:(柱:OD-3，4.6*100mm 3μm，流速:3.0mL/min，洗脱液:MeOH(0.2％7M NH3的MeOH溶液)，温度40℃)保留时间＝1.56min。实施例59:MS测定值(ESI+):497.3，[M+H]+。手性HPLC:(柱:OD-3，4.6*100mm 3μm，流速:3.0mL/min，洗脱液:MeOH(0.2％7M NH3的MeOH溶液)，温度40℃)保留时间＝2.22min。
实施例60和61:4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-((3R,4S)-3-氟四氢-2H-吡喃-4-基)-8-甲氧基-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例60，任意指定四氢吡喃处的绝对立体化学)4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-((3S,4R)-3-氟四氢-2H-吡喃-4-基)-8-甲氧基-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例61，任意指定四氢吡喃处的绝对立体化学):
按照与实施例58和59类似的方式，以实施例30和31的非对映异构体混合物为原料制备。实施例60:MS测定值(ESI+):497.0(M+H)+。手性HPLC:(柱:OZ-3，4.6*100mm 3μm，流速:3.0mL/min，洗脱液:MeOH(0.2％7M NH3的MeOH溶液)，温度40℃)保留时间＝1.36min。实施例61:MS测定值(ESI+):497.0(M+H)+。手性HPLC:(柱:OZ-3，4.6*100mm 3μm，流速:3.0mL/min，洗脱液:MeOH(0.2％7M NH3的MeOH溶液)，温度40℃)保留时间＝1.75min。
实施例62和63:(R)-4-((1-(苯并[b]噻吩-4-基)乙基)氨基)-2-甲基-6-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例62)和(S)-4-((1-(苯并[b]噻吩-4-基)乙基)氨基)-2-甲基-6-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例63):
按照与实施例4类似的方式，使用(R/S)-1-(苯并[b]噻吩-4-基)乙-1-胺(WO/2018/192250中所述的合成)制备。通过手性SFC分离各个对映异构体，得到(R)-4-((1-(苯并[b]噻吩-4-基)乙基)氨基)-2-甲基-6-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例62)和(S)-4-((1-(苯并[b]噻吩-4-基)乙基)氨基)-2-甲基-6-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例63)。实施例62:MS测定值(ESI+):437.2(M+H)+。手性HPLC:(柱:AS-3，4.6*100mm 3μm，流速:3.0mL/min，洗脱液:MeOH(0.2％7M NH3的MeOH溶液)，温度40℃)保留时间＝2.83min。实施例63:MS测定值(ESI+):437.2(M+H)+。手性HPLC:(柱:AS-3，4.6*100mm 3μm，流速:3.0mL/min，洗脱液:MeOH(0.2％7M NH3的MeOH溶液)，温度40℃)保留时间＝2.18min。
实施例64和65:(R)-4-((1-(苯并[b]噻吩-4-基)乙基)氨基)-6-环丙基-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例64)和(S)-4-((1-(苯并[b]噻吩-4-基)乙基)氨基)-6-环丙基-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例65):
按照与实施例4、62和63类似的方式制备。实施例64:MS测定值(ESI+):393.2(M+H)+，实施例65:MS测定值(ESI+):393.2(M+H)+。
实施例66:(R)-1-(4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-1,7-二氧代-1,7-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-6(2H)-基)环丙烷-1-甲腈
步骤A:4-(2-(叔丁氧基羰基)-1-甲基肼-1-羰基)-1-(1-氰基环丙基)-6-氧代-1, 6-二氢吡啶-3-甲酸甲酯
按照与实施例43[步骤A-E]类似的方式制备。LCMS:m/z 391.4(M+H)+。
步骤B:1-(1-氰基环丙基)-4-(1-甲基肼-1-羰基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲酸 甲酯
向4-(2-(叔丁氧基羰基)-1-甲基肼-1-羰基)-1-(1-氰基环丙基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲酸甲酯(20mg，51μmol)在1,1,1,3,3,3-六氟-2-丙醇(1mL)中的溶液中加入TsOH(5mg，25μmol)。将该反应体系在室温搅拌1h。将该反应体系浓缩至干，得到14mg粗产物。还完成了以250μmol规模进行的平行反应批次，得到74mg粗产物。合并两个批次，得到1-(1-氰基环丙基)-4-(1-甲基肼-1-羰基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲酸甲酯(88mg，粗品)。将粗物质不经进一步纯化即可用于下一步。MS测定值(ESI+):291.5(M+H)+。
步骤C:1-(2-甲基-1,4,7-三氧代-1,3,4,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-6(2H)-基) 环丙烷-1-甲腈
将上述1-(1-氰基环丙基)-4-(1-甲基肼-1-羰基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲酸甲酯(88mg，粗品)溶于NH3/MeOH(7M，3mL)。将该混合物搅拌1h。将该反应体系浓缩至干，得到1-(2-甲基-1,4,7-三氧代-1,3,4,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-6(2H)-基)环丙烷-1-甲腈(70mg，粗品)，其不经进一步纯化即可用于下一步。MS测定值(ESI+):259.3(M+H)+。
步骤D:6-(1-氰基环丙基)-2-甲基-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒 嗪-4-基2,4,6-三异丙基苯磺酸酯
将上述粗1-(2-甲基-1,4,7-三氧代-1,3,4,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-6(2H)-基)环丙烷-1-甲腈(70mg，粗品)溶于DCM(5mL)，随后添加DIPEA(70mg，542μmol)和2,4,6-三异丙基苯磺酰氯(90mg，298μmol)。将该溶液在RT搅拌1小时。通过快速柱色谱法(PE:EA＝3:1)纯化该混合物，得到6-(1-氰基环丙基)-2-甲基-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基2,4,6-三异丙基苯磺酸酯(85mg，0.16mmol，21％收率，3步)。MS测定值(ESI+):525.6(M+H)+。
步骤E:(R)-1-(4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-1,7-二氧 代-1,7-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-6(2H)-基)环丙烷-1-甲腈(实施例66)
将6-(1-氰基环丙基)-2-甲基-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基2,4,6-三异丙基苯磺酸酯(70mg，133μmol)、(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟-苯基]乙胺(38mg，200μmol)、Xantphos-PdG3(13mg，13μmol)、Cs2CO3(131mg，400μmol)在1,4-二噁烷(0.7mL)中的混合物在N2中在110℃搅拌1小时。过滤该反应混合物，通过制备型TLC、随后通过反相HPLC纯化该反应混合物，得到(R)-1-(4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-1,7-二氧代-1,7-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-6(2H)-基)环丙烷-1-甲腈(3.8mg，9μmol，7％收率)。MS测定值(ESI+):430.3(M+H)+。
实施例67和68:(R)-4-((1-(1,1-二氟-2,3-二氢-1H-茚-4-基)乙基)氨基)-2-甲基-6-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H,6H)-二酮(实施例67)和(S)-4-((1-(1,1-二氟-2,3-二氢-1H-茚-4-基)乙基)氨基)-2-甲基-6-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H,6H)-二酮(实施例68):
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按照与实施例44和45类似的方式，使用(R/S)-1-(1,1-二氟-2,3-二氢-1H-茚-4-基)乙胺盐酸盐(按照WO/2019/122129中所述制备)制备。实施例67:MS测定值(ESI+):457.2(M+H)+。手性HPLC:(柱:IG-3，4.6*100mm 3μm，流速:3.0mL/min，洗脱液:MeOH(0.2％7M NH3的MeOH溶液)，温度40℃)保留时间＝1.45min。实施例68:MS测定值(ESI+):457.2(M+H)+。手性HPLC:(柱:IG-3，4.6*100mm 3μm，流速:3.0mL/min，洗脱液:MeOH(0.2％7M NH3的MeOH溶液)，温度40℃)保留时间＝1.09min。
实施例69:(R)-3-(4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-1,7-二氧代-1,7-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-6(2H)-基)-N,N-二甲基双环[1.1.1]戊烷-1-甲酰胺
步骤A:(3-(二甲基氨基甲酰基)双环[1.1.1]戊-1-基)氨基甲酸叔丁酯:
向3-((叔丁氧基羰基)氨基)双环[1.1.1]戊烷-1-甲酸(4.0g，17.62mmol)在THF(60.0mL)中的溶液中加入二甲胺(2.0M的THF溶液，17.6mL，35.24mmol)和2-(7-氮杂-1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(20.1g，52.86mmol)，在25℃搅拌15min。然后在0℃向该混合物中加入N-乙基-N-异丙基-丙-2-胺(11.4g，88.10mmol)，并将该反应体系在25℃搅拌16h。浓缩该混合物，并通过快速色谱法纯化(用0-100％在PE中的EA洗脱)，得到(3-(二甲基氨基甲酰基)双环[1.1.1]戊-1-基)氨基甲酸叔丁酯(4.0g，15.73mmol，89％收率)。MS测定值(ESI+):255.4(M+H)+。
步骤B:3-氨基-N,N-二甲基双环[1.1.1]戊烷-1-甲酰胺盐酸盐
向(3-(二甲基氨基甲酰基)双环[1.1.1]戊-1-基)氨基甲酸叔丁酯(3.6g，14.17mmol)在1,4-二噁烷(20.0mL)中的溶液中加入HCl(4.0M的1,4-二噁烷溶液，20.0mL)，将该混合物在25℃搅拌1h。浓缩该混合物，得到3-氨基-N,N-二甲基双环[1.1.1]戊烷-1-甲酰胺盐酸盐(2.7g，粗品)，其不经进一步纯化即可用于下一步。MS测定值(ESI+):155.4(M+H)+。
步骤C:1-(3-(二甲基氨基甲酰基)双环[1.1.1]戊-1-基)-4-羟基-6-氧代-1,6-二 氢吡啶-3-甲酸甲酯:
向3-氧代戊二酸二甲酯(2.4g，13.90mmol)在MeOH(50mL)中的溶液中加入N,N-二甲基甲酰胺二甲基乙缩醛(1.8g，15.05mmol)，将该反应体系在25℃搅拌5h。向该混合物中加入3-氨基-N,N-二甲基双环[1.1.1]戊烷-1-甲酰胺盐酸盐(2.2g，11.58mmol)，并在25℃搅拌20h。然后向该混合物中加入甲醇钠(813mg，15.05mmol)，将该反应体系在25℃搅拌2h。浓缩该混合物，并通过快速色谱法纯化(用0-100％在PE中的EA洗脱)，得到1-(3-(二甲基氨基甲酰基)双环[1.1.1]戊-1-基)-4-羟基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲酸甲酯(2.1g，6.86mmol，59％收率)。MS测定值(ESI+):307.4(M+H)+。
步骤D:(R)-3-(4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-1,7-二氧 代-1,7-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-6(2H)-基)-N,N-二甲基双环[1.1.1]戊烷-1-甲酰胺(实 施例69)
按照与实施例43步骤[c-h]类似的方式，以1-(3-(二甲基氨基甲酰基)双环[1.1.1]戊-1-基)-4-羟基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲酸甲酯为原料合成。MS测定值(ESI+):502.3(M+H)+。
实施例70:(R)-4-((1-(3-(1,1-二氟-2-羟基-2-甲基丙基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(1-(二氟甲基)环丙基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
步骤A:2-(6-氯-5-(羟基甲基)-2-甲基-3-氧代-2,3-二氢哒嗪-4-基)-N-(1-(二 氟甲基)环丙基)乙酰胺
向搅拌的1-(二氟甲基)环丙胺；盐酸盐(501.72mg，3.49mmol)在甲苯(15mL)中的溶液中加入4-氯-2-甲基-5,8-二氢吡喃并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(500mg，2.33mmol)，随后加入三甲基铝(1.6M的甲苯溶液，4.37mL)。将得到的混合物在75℃搅拌16hr。然后将该反应混合物冷却至室温，并用乙酸乙酯(10mL)稀释。用水(3×5mL)、10％氯化钠溶液(5mL)洗涤有机层，用硫酸钠干燥，并减压浓缩。通过快速色谱法纯化粗产物，用0-5％在DCM中的MeOH洗脱，得到2-(6-氯-5-(羟基甲基)-2-甲基-3-氧代-2,3-二氢哒嗪-4-基)-N-(1-(二氟甲基)环丙基)乙酰胺(300mg，932μmol，40％收率)。MS测定值(ESI+):322.4(M+H)+。
步骤B:4-氯-6-(1-(二氟甲基)环丙基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1, 7-二酮
在0℃向2-(6-氯-5-(羟基甲基)-2-甲基-3-氧代-2,3-二氢哒嗪-4-基)-N-(1-(二氟甲基)环丙基)乙酰胺(300mg，932μmol)在氯仿(12mL)中的溶液中加入PCC(502mg，2.33mmol)，然后将该反应体系在rt搅拌16hr。真空浓缩该反应体系。通过快速色谱法纯化粗混合物，用(0-30％在PE中的EA)洗脱，得到4-氯-6-(1-(二氟甲基)环丙基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(55mg，182μmol，58％收率)。MS测定值(ESI+):302.3(M+H)+。
步骤C:(R)-4-((1-(3-(1,1-二氟-2-羟基-2-甲基丙基)-2-氟苯基)乙基)氨基)- 6-(1-(二氟甲基)环丙基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例70)
向4-氯-6-(1-(二氟甲基)环丙基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(53mg，176μmol)在1,4-二噁烷(0.5mL)中的溶液中加入1-[3-[(1R)-1-氨基乙基]-2-氟-苯基]-1,1-二氟-2-甲基-丙-2-醇(52mg，211μmol)、Xantphos-Pd-G3(33.3mg，35μmol)和Cs2CO3(171.3mg，527μmol)。将该反应体系在微波反应器中在130℃照射3hr。然后真空除去溶剂。通过反相HPLC纯化粗产物，得到(R)-4-((1-(3-(1,1-二氟-2-羟基-2-甲基丙基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(1-(二氟甲基)环丙基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(28mg，52μmol，30％收率)。MS测定值(ESI+):513.7(M+H)+。
实施例71:(R)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6-(1-(三氟甲基)环丙基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
通过与实施例70类似的路径制备。MS测定值(ESI+):473.2(M+H)+。
实施例72:(R)-8-溴-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(1-(二氟甲基)环丙基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
向(R)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(1-(二氟甲基)环丙基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(323mg，711μmol)在AcOH(15mL)中的溶液中加入乙酸钾(105mg，1.07mmol)。将该反应体系在rt搅拌1.5hr。浓缩该反应体系至干，并通过硅胶色谱法纯化残余物(用在PE中的EA洗脱)，得到(R)-8-溴-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(1-(二氟甲基)环丙基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(305mg，571μmol，80％收率)。MS测定值(ESI+):79/81Br 533.1/535.1(M+H)+。
实施例73:(R)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(1-(二氟甲基)环丙基)-8-甲氧基-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
在rt向(R)-8-溴-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(1-(二氟甲基)环丙基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例72，110mg，206μmol)在MeOH(11mL)中的溶液中加入MeONa(111mg，2.06mmol)。将该混合物在微波反应器中80℃加热2hr。用NH4Cl(水溶液)使该混合物淬灭，并用乙酸乙酯萃取。用硫酸钠干燥有机层，并真空浓缩。通过快速色谱法纯化残余物(用0-2％在DCM中的MeOH洗脱)，得到(R)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(1-(二氟甲基)环丙基)-8-甲氧基-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(30mg，61μmol，30％收率)。MS测定值(ESI+):485.2(M+H)+。
实施例74:(R)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(1-(二氟甲基)环丙基)-2,8-二甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
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在rt向(R)-8-溴-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(1-(二氟甲基)环丙基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例72，80mg，150μmol)在1,4-二噁烷(2mL)中的溶液中加入Pd(PPh4)3(17mg，15μmol)、Cs2CO3(146mg，450μmol)和2,4,6-三甲基-1,3,5,2,4,6-三氧杂硼杂环己烷(113mg，450μmol)。将该混合物在100℃搅拌16hr。用NH4Cl(水溶液)使该混合物淬灭，并用乙酸乙酯萃取。用硫酸钠干燥有机层并浓缩。通过快速色谱法纯化残余物(用0-250％在PE中的EA洗脱)，得到(R)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(1-(二氟甲基)环丙基)-2,8-二甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(40mg，85μmol，57％收率)。MS测定值(ESI+):469.1(M+H)+。
实施例75和76:(1S,3s)-3-(4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-1,7-二氧代-1,7-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-6(2H)-基)环丁烷-1-甲腈(实施例75，任意指定有关环丁基环的立体化学)和(1r,3s)-3-(4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-1,7-二氧代-1,7-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-6(2H)-基)环丁烷-1-甲腈(实施例76，任意指定有关环丁基环的立体化学)
根据如对实施例50[步骤I-K]所述类似的路径，以顺式/反式3-氨基环丁烷-1-甲腈盐酸盐为原料制备。任意指定环丁基环上的顺式/反式立体化学。实施例75:MS测定值(ESI+):444.3(M+H)+。手性HPLC:(柱:AS-3，4.6*100mm 3μm，流速:3.0mL/min，洗脱液:MeOH(0.2％7M NH3的MeOH溶液)，温度40℃)保留时间＝1.35min。实施例76:MS测定值(ESI+):444.3(M+H)+。手性HPLC:(柱:AS-3，4.6*100mm 3μm，流速:3.0mL/min，洗脱液:MeOH(0.2％7M NH3的MeOH溶液)，温度40℃)保留时间＝1.83min。
实施例77:(R)-6-环丙基-2-(2-羟基乙基)-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
步骤A:(R)-2-(2-(苄氧基)乙基)-6-环丙基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基) 乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
根据与实施例24[步骤A-F]类似的方法，以2-(苄氧基)乙醛为原料合成。MS测定值(ESI+):539.4(M+H)+。
步骤B:(R)-6-环丙基-2-(2-羟基乙基)-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙 基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
向((R)-2-(2-(苄氧基)乙基)-6-环丙基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮加入三氯化硼(1M的DCM溶液，0.62mL，0.62mmol)。将该混合物在rt搅拌0.5h。真空除去溶剂。作为化合物合成的中间体，该物质不经进一步纯化即可使用。为了进行生物学测试，通过反相HPLC纯化残余物，得到(R)-6-环丙基-2-(2-羟基乙基)-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(2.0mg，4.42μmol，4％收率)。MS测定值(ESI+):449.2(M+H)+。
实施例78:(R)-6-环丙基-2-(2-(3-甲氧基-3-甲基氮杂环丁烷-1-基)乙基)-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
步骤A:(R)-2-(2-氯乙基)-6-环丙基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基) 氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
向粗(R)-6-环丙基-2-(2-羟基乙基)-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例77，步骤b，100mg，假设0.22mmol)在DCM(10mL)中的溶液中加入对甲苯磺酰氯(64mg，0.33mmol)、DMAP(27.2mg，0.22mmol)和三乙胺(45mg，0.45mmol)。将该混合物在50℃搅拌2h。真空除去溶剂，并通过快速柱(用10％在DCM中的MeOH洗脱纯化残余物)，得到(R)-2-(2-氯乙基)-6-环丙基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(74mg，0.16mmol，72％收率)。MS测定值(ESI+):467.3(M+H)+。
步骤B:(R)-6-环丙基-2-(2-(3-甲氧基-3-甲基氮杂环丁烷-1-基)乙基)-4-((1- (2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例 78)
向3-甲氧基-3-甲基氮杂环丁烷；盐酸盐(42mg，0.3mmol)在CH3CN(5mL)中的溶液中加入(R)-2-(2-氯乙基)-6-环丙基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(47mg，0.1mmol)、碳酸钾(56mg，0.4mmol)和碘化钾(3mg，0.02mmol)。将该反应体系在80℃搅拌16h。真空除去溶剂，并通过反相HPLC纯化残余物，得到(R)-6-环丙基-2-(2-(3-甲氧基-3-甲基氮杂环丁烷-1-基)乙基)-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(12.6mg，0.02mmol，23％收率)。MS测定值(ESI+):532.2(M+H)+。
实施例79:(R)-6-环丙基-2-(2-(3-氟-3-甲基氮杂环丁烷-1-基)乙基)-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
根据与实施例78类似的路径合成。MS测定值(ESI+):520.2(M+H)+。
实施例80:(R)-6-环丙基-8-(二甲基氨基)-2-甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
(R)-8-溴-6-环丙基-2-甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(50mg，100μmol)溶于二甲胺(2M的四氢呋喃溶液，2mL)。将该反应混合物在25℃搅拌3hr。减压除去溶剂，并通过反相HPLC纯化粗产物，得到(R)-6-环丙基-8-(二甲基氨基)-2-甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(30mg，64μmol，64％收率)。MS测定值(ESI+):462.5(M+H)+。
实施例81:(R)-6-环丙基-8-异丙氧基-2-甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
在烧瓶中，将异丙醇(37mg，603μmol)、Xantphos-Pd-G3(12mg，12μmol)、(R)-8-溴-6-环丙基-2-甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(30mg，60μmol)和碳酸铯(59mg，181μmol)溶于1,4-二噁烷(1mL)。将该混合物在50℃搅拌16hr。过滤该混合物，并浓缩滤液。通过制备型TLC(MeOH/DCM＝1/30)纯化粗残余物，随后通过反相HPLC进一步纯化，得到(R)-6-环丙基-8-异丙氧基-2-甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(10.0mg，21μmol，34％收率)。MS测定值(ESI+):477.4[M+H]+。
实施例82:(R)-6-环丙基-8-(环丙基甲氧基)-2-甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
通过与实施例81类似的方法，使用环丙基甲醇替代2-丙醇制备。MS测定值(ESI+):489.5(M+H)+。
实施例83和84:4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-((S)-2,2-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例83，任意指定四氢吡喃处的立体化学)和4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-((R)-2,2-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例84，任意指定四氢吡喃处的立体化学)
根据与实施例4类似的路径，在步骤A中使用外消旋2,2-二甲基四氢吡喃-4-胺制备。实施例83:MS测定值(ESI+):477.3(M+H)+。手性HPLC:(柱:IG-3，4.6*100mm 3μm，流速:3.0mL/min，洗脱液:EtOH(1％7M NH3的MeOH溶液)，温度40℃)保留时间＝2.34min。实施例84:MS测定值(ESI+):477.3(M+H)+。手性HPLC:(柱:IG-3，4.6*100mm 3μm，流速:3.0mL/min，洗脱液:EtOH(1％7M NH3的MeOH溶液)，温度40℃)保留时间＝1.93min。
实施例85:(R)-6-环丙基-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-8-甲氧基-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
/>
通过与实施例6类似的路径制备。MS测定值(ESI+):435.2(M+H)+。
实施例86:(R)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(1-(二氟甲基)环丙基)-8-(2-(二甲基氨基)乙氧基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
步骤A:(R)-8-溴-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(1-(二氟甲 基)环丙基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
向(R)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(1-(二氟甲基)环丙基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例43)(323mg，0.71mmol)在AcOH(15.0mL)中的溶液中加入KOAc(105mg，1.07mmol)和Br2(171mg，1.07mmol)。用N2吹扫该反应体系，并在rt搅拌1hr。浓缩该反应体系至干，并通过硅胶色谱法纯化残余物(用0-40％在PE中的EA洗脱)，得到(R)-8-溴-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(1-(二氟甲基)环丙基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(305mg，80％收率)。MS测定值(ESI+):534.1(M+H)+。
步骤B:(R)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(1-(二氟甲基)环丙 基)-8-(2-(二甲基氨基)乙氧基)-2-甲基吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H,6H)-二酮(实施例 86)
在室温向(R)-8-溴-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(1-(二氟甲基)环丙基)-2-甲基吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H,6H)-二酮(100mg，187μmol)在二噁烷(4.0mL)中的溶液中加入2-(二甲基氨基)乙醇(84mg，937μmol)、Cs2CO3(122mg，375μmol)和Xantphos-Pd-G3(36mg，37μmol)。用N2吹扫该混合物，在微波照射中在50℃加热4h。真空浓缩该混合物。通过快速柱纯化残余物(用0-2％在DCM中的MeOH洗脱)，得到不纯的产物。将粗产物与来自先前反应的10mg期望的产物合并，再通过反相柱纯化，得到(R)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(1-(二氟甲基)环丙基)-8-(2-(二甲基氨基)乙氧基)-2-甲基吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H,6H)-二酮(33mg)。MS测定值(ESI+):542.2(M+H)+。
实施例87:(R)-8-(3,3-二氟环丁氧基)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(1-(二氟甲基)环丙基)-2-甲基吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H,6H)-二酮
在室温向(R)-8-溴-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(1-(二氟甲基)环丙基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(30mg，56μmol)在二噁烷(1.0mL)中的溶液中加入3,3-二氟环丁醇(30mg，281μmol)、Cs2CO3(37mg，112μmol)和Xantphos-Pd-G3(11mg，11μmol)。用N2吹扫该混合物，并在微波反应器中在50℃加热3h。浓缩该反应混合物，并通过快速色谱法纯化残余物(用2％在DCM中的MeOH洗脱)，得到粗产物，再通过反相柱(C18，MeCN/H2O)纯化，得到(R)-8-(3,3-二氟环丁氧基)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(1-(二氟甲基)环丙基)-2-甲基吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H,6H)-二酮(10mg，32％收率)。MS测定值(ESI+):561.2(M+H)+。
实施例88:(R)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(1-(二氟甲基)环丙基)-2-甲基-8-(氧杂环丁烷-3-基氧基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H,6H)-二酮
在室温向(R)-8-溴-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(1-(二氟甲基)环丙基)-2-甲基吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H,6H)-二酮(40mg，75μmol)在二噁烷(2.0mL)中的溶液中加入氧杂环丁烷-3-醇(23.8μL，375μmol)、Cs2CO3(49mg，150μmol)和Xantphos-Pd-G3(14mg，15μmol)。用N2吹扫该混合物，并在微波照射中在50℃加热4h。浓缩该混合物。通过快速柱纯化残余物(用0-2％在DCM中的MeOH洗脱)，再通过反相柱纯化，得到(R)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(1-(二氟甲基)环丙基)-2-甲基-8-(氧杂环丁烷-3-基氧基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H,6H)-二酮(15mg，25％收率)。MS测定值(ESI+):527.2(M+H)+。
实施例89:4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(1-(二氟甲基)环丙基)-8-((1r,3R)-3-氟环丁氧基)-2-甲基吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H,6H)-二酮
在室温向(R)-8-溴-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(1-(二氟甲基)环丙基)-2-甲基吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H,6H)-二酮(20mg，37μmol)在二噁烷(1.0mL)中的溶液中加入反式-3-氟环丁醇(17mg，188μmol)、Cs2CO3(24mg，75μmol)和Xantphos-Pd-G3(7mg，7μmol)。用N2吹扫该混合物，并在微波照射中在50℃加热3h。浓缩该反应混合物，并通过快速色谱法纯化残余物(用2％在DCM中的MeOH洗脱)，随后通过反相柱(C18，MeCN/H2O)纯化，得到标题化合物(9mg，32％收率)。MS测定值(ESI+):543.3(M+H)+。
实施例90:(R)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(1-(二氟甲基)环丙基)-2-甲基-8-(氧杂环丁烷-3-基甲氧基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
在rt向(R)-8-溴-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(1-(二氟甲基)环丙基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(40mg，0.08mmol)在二噁烷(2.0mL)中的溶液中加入氧杂环丁烷-3-基甲醇(33mg，0.38mmol)、Cs2CO3(49mg，0.15mmol)和Xantphos-Pd-G3(14mg，0.02mmol)。用N2吹扫该混合物，并在微波照射中在50℃加热4hr。此后，冷却该混合物并浓缩。通过快速柱色谱法纯化残余物(用0-10％在DCM中的MeOH洗脱)，得到不纯产物。将粗产物与来自类似方法的10mg标题化合物合并，再通过反相柱[ACN/H2O]纯化，得到标题化合物(14mg)。MS测定值(ESI+):541.2(M+H)+。
实施例91和92:6-[(1S,2R)-2-(5-氟-3-吡啶基)环丙基]-2-甲基-4-[[(1R)-1-[2-甲基-3-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例91，任意指定环丙基处的绝对立体化学)和6-[(1R,2S)-2-(5-氟-3-吡啶基)环丙基]-2-甲基-4-[[(1R)-1-[2-甲基-3-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例92，任意指定环丙基处的绝对立体化学)
步骤A:(E)-3-(5-氟-3-吡啶基)丙-2-烯酸叔丁酯
将3-溴-5-氟-吡啶(2.1g，11.93mmol)、碳酸钾(4.95g，35.80mmol)、三苯膦(939mg，3.58mmol)、乙酸钯(Ⅱ)(536mg，2.39mmol)在DMF(30mL)中的混合物在120℃搅拌1hr。将该反应混合物冷却至rt，真空浓缩。通过快速色谱法纯化残余物(用10％在PE中的EA洗脱)，得到标题化合物(1.77g，63％收率)。MS测定值(ESI+):224.3(M+H)+。
步骤B:2-(5-氟-3-吡啶基)环丙烷甲酸叔丁酯
将NaH(1.97g，49.27mmol，60％的矿物油溶液)和三甲基碘化亚砜(trimethylsulfoxonium iodide)(5.91g，26.88mmol)在DMSO(50mL)中的混合物在rt搅拌30min，然后向该混合物中加入(E)-3-(5-氟-3-吡啶基)丙-2-烯酸叔丁酯(5g，22.40mmol)，并在rt搅拌30min。向该反应体系中加入100mL冰水。用EtOAc萃取该混合物，用Na2SO4干燥有机层，过滤并减压浓缩。通过快速色谱法纯化残余物(用5％在PE中的EA洗脱)，得到标题化合物(1.83g，36％收率)。MS测定值(ESI+):224.3(M+H)+。
步骤C:2-(5-氟-3-吡啶基)环丙烷甲酸
将2-(5-氟-3-吡啶基)环丙烷甲酸叔丁酯(3.23g，14.7mmol)在三氟乙酸(24mL，312mmol)和DCM(100mL)的混合物在rt搅拌16hr。浓缩该反应体系，得到标题化合物(3.86g，87％收率)。MS测定值(ESI+):182.1(M+H)+。
步骤D:N-[(1S)-2-(5-氟-3-吡啶基)环丙基]氨基甲酸叔丁酯
将2-(5-氟-3-吡啶基)环丙烷甲酸(6.14g，33.89mmol)、DPPA(8.24g，33.89mmol)和TEA(13.72g，135.57mmol，18.90mL)在2-甲基-2-丙醇(60mL)中的混合物在N2气氛中在90℃搅拌16hr。浓缩该混合物，通过快速色谱法纯化(用30％在PE中的EA洗脱)，得到标题化合物(869mg，9.6％收率)。MS测定值(ESI+):252.3(M+H)+。
步骤E:(1R)-2-(5-氟-3-吡啶基)环丙胺盐酸盐
将N-[(1R)-2-(5-氟-3-吡啶基)环丙基]氨基甲酸叔丁酯(850mg，3.37mmol)在4NHCl在二噁烷(174mL)中的混合物在rt搅拌3h。浓缩该反应体系，得到标题化合物(800mg，粗品，HCl)。
步骤F:2-[6-氯-5-(羟基甲基)-2-甲基-3-氧代-哒嗪-4-基]-N-[2-(5-氟-3-吡啶 基)环丙基]乙酰胺
向2-(5-氟-3-吡啶基)环丙胺盐酸盐(650mg，4.2mmol)和4-氯-2-甲基-5,8-二氢吡喃并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(764mg，3.56mmol)在甲苯(26mL)中的混合物在N2气氛中加热三甲基铝(5.70mmol，2M的甲苯溶液)，并将该混合物在75℃搅拌4hr。用水使该混合物淬灭，并用EtOAc萃取。用Na2SO4洗涤有机层，过滤并浓缩。通过快速色谱法纯化(用50％在DCM中的MeOH洗脱)，得到标题化合物(297mg，23％收率)。MS测定值(ESI+):367.2(M+H)+。
步骤G:4-氯-6-[(反式)-2-(5-氟-3-吡啶基)环丙基]-2-甲基-吡啶并[3,4-d]哒 嗪-1,7-二酮(外消旋)
将2-[6-氯-5-(羟基甲基)-2-甲基-3-氧代-哒嗪-4-基]-N-[2-(5-氟-3-吡啶基)环丙基]乙酰胺(262mg，714μmol)、戴斯-马丁试剂(Dess-Martin Periodinane)(1.06g，2.50mmol)在CHCl3(4mL)中的混合物在N2气氛中在RT搅拌16h。用NaHCO3(水溶液)使反应淬灭，并萃取入EtOAc。用硫酸钠洗涤有机层，过滤并浓缩。通过制备型TLC(MeOH:DCM＝1:20)纯化残余物，得到4-氯-6-[(反式)-2-(5-氟-3-吡啶基)环丙基]-2-甲基-吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(70mg，28％收率)。MS测定值(ESI+):347.3(M+H)+。
步骤H:6-[(1S,2R)-2-(5-氟-3-吡啶基)环丙基]-2-甲基-4-[[(1R)-1-[2-甲基- 3-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例91，任意指定环丙基 处的绝对立体化学)和6-[(1R,2S)-2-(5-氟-3-吡啶基)环丙基]-2-甲基-4-[[(1R)-1-[2- 甲基-3-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例92，任意指定 环丙基处的绝对立体化学)
将4-氯-6-[(反式)-2-(5-氟-3-吡啶基)环丙基]-2-甲基-吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(70mg，202μmol)、(1R)-1-[2-甲基-3-(三氟甲基)苯基]乙胺(49mg，242μmol)、Xantphos Pd G3(19mg，20.2μmol)和Cs2CO3(197mg，605μmol)在二噁烷(0.7mL)中的外消旋混合物在N2气氛中在130℃在微波反应器中搅拌5hr。浓缩该混合物，通过制备型TLC(DCM:MeOH＝20:1)纯化，随后通过手性SFC纯化，得到6-[(1S,2R)-2-(5-氟-3-吡啶基)环丙基]-2-甲基-4-[[(1R)-1-[2-甲基-3-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例91，任意指定环丙基处的绝对立体化学)(11.5mg)和6-[(1R,2S)-2-(5-氟-3-吡啶基)环丙基]-2-甲基-4-[[(1R)-1-[2-甲基-3-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例92，任意指定环丙基处的绝对立体化学)(10.9mg)。手性HPLC:(柱:OD-3(4.6*100mm，3μm)，流速:3.0mL/min，洗脱液:MeOH(0.2％7M NH3的MeOH溶液)，温度40℃)。
实施例91:手性HPLC保留时间1.13min。MS测定值(ESI+):514.3(M+H)+。
实施例92:手性HPLC保留时间1.72min。MS测定值(ESI+):514.3(M+H)+。
实施例93和94:4-[[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟-苯基]乙基]氨基]-6-[(1S,2R)-2-(5-氟-3-吡啶基)环丙基]-2-甲基-吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(任意指定环丙基处的绝对立体化学)和4-[[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟-苯基]乙基]氨基]-6-[(1R,2S)-2-(5-氟-3-吡啶基)环丙基]-2-甲基-吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(任意指定环丙基处的绝对立体化学)
按照与实施例91/92步骤H类似的方式，以(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟-苯基]乙胺为原料制备。手性HPLC:(柱:OD-3(4.6*100mm，3μm)，流速:3.0mL/min，洗脱液:MeOH(0.2％7M NH3的MeOH溶液)，温度40℃)。
实施例93.手性HPLC保留时间＝1.09min。MS测定值(ESI+):500.3(M+H)+。
实施例94.手性HPLC保留时间＝1.66min。MS测定值(ESI+):500.3(M+H)+。
实施例95和96:4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6-((R)-3-(三氟甲基)吡咯烷-3-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例95，任意指定吡咯烷处的绝对立体化学)和4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6-((S)-3-(三氟甲基)吡咯烷-3-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例96，任意指定吡咯烷处的绝对立体化学)
步骤A:3-(2-(6-氯-5-(羟基甲基)-2-甲基-3-氧代-2,3-二氢哒嗪-4-基)乙酰氨 基)-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
向微波试管中加入3-氨基-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(889mg，3.49mmol)、4-氯-2-甲基-5,8-二氢吡喃并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(500mg，2.33mmol)和乙酸(210mg，3.49mmol，201μL)。封盖试管，并加热至120℃ 16hr。将该反应体系冷却至室温，并通过硅胶色谱法纯化残余物(用2％-5％在DCM中的MeOH洗脱)，得到3-[[2-[6-氯-5-(羟基甲基)-2-甲基-3-氧代-哒嗪-4-基]乙酰基]氨基]-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(182mg，21％收率)。MS测定值(ESI+):369.4，371.4(M-Boc)+。
步骤B:3-(2-(6-氯-5-甲酰基-2-甲基-3-氧代-2,3-二氢哒嗪-4-基)乙酰氨基)- 3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
向3-[[2-[6-氯-5-(羟基甲基)-2-甲基-3-氧代-哒嗪-4-基]乙酰基]氨基]-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(260mg，554μmol)在MeCN(10mL)中的溶液中加入IBX(311mg，1.11mmol)。将该反应混合物在80℃搅拌3hr。过滤该反应体系，并收集滤液，并真空浓缩，得到3-[[2-(6-氯-5-甲酰基-2-甲基-3-氧代-哒嗪-4-基)乙酰基]氨基]-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(260mg，粗品)。将粗产物不经进一步纯化即可用于下一步。
步骤C:3-(4-氯-2-甲基-1,7-二氧代-1,7-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-6(2H)-基)- 3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
将3-[[2-(6-氯-5-甲酰基-2-甲基-3-氧代-哒嗪-4-基)乙酰基]氨基]-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(260mg，粗品)在AcOH(10mL)中的混合物在70℃搅拌2hr。浓缩该反应体系至干，并通过硅胶色谱法纯化残余物(用20％-50％在PE中的EA洗脱)，得到标题化合物(125mg，50％收率，2步)。MS测定值(ESI+):393.3，395.3(M+tBu)+。
步骤D:3-(4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-1,7-二氧 代-1,7-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-6(2H)-基)-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
将(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟-苯基]乙胺(58mg，307μmol)、3-(4-氯-2-甲基-1,7-二氧代-吡啶并[3,4-d]哒嗪-6-基)-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(115mg，256μmol)，碳酸铯(251mg，767μmol)、BINAP(32mg，51μmol)和乙酸钯(12mg，51μmol)在甲苯(1.5mL)中的混合物加热至100℃ 16hr。浓缩该反应体系至干，并通过硅胶色谱法纯化残余物(用0％-4％在DCM中的MeOH洗脱)，得到标题化合物(62mg，40％收率)。MS测定值(ESI+):602.5(M+H)+。
步骤E:4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6-(3-(三氟甲 基)吡咯烷-3-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
向3-[4-[[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟-苯基]乙基]氨基]-2-甲基-1,7-二氧代-吡啶并[3,4-d]哒嗪-6-基]-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(62mg，103μmol)在DCM(3mL)中的溶液中加入TFA(0.5mL)。将该反应体系在rt搅拌2hr。真空浓缩该反应体系。将残余物溶于5mL NH3/MeOH(7M)，并搅拌10min。然后将该反应体系浓缩至干，并通过硅胶色谱法纯化(用2％-10％在DCM中的MeOH洗脱)，得到标题化合物(40mg，77％收率)。MS测定值(ESI+):502.3(M+H)+。
步骤F:4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6-((R)-3-(三 氟甲基)吡咯烷-3-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例95)和4-(((R)-1- (3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6-((S)-3-(三氟甲基)吡咯烷-3-基)-2,6- 二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例96)
通过手性SFC分离4-[[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟-苯基]乙基]氨基]-2-甲基-6-[3-(三氟甲基)吡咯烷-3-基]吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮的非对映异构体混合物(26mg，51.85μmol)：((R,R)Whelk-O1 4.6*100mm 3.5μm,CO2/IPA[1％NH3(7M的MeOH溶液)]＝55/45)，得到4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6-((R)-3-(三氟甲基)吡咯烷-3-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例95，任意指定吡咯烷处的绝对立体化学)(6.63mg，26％收率)和4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6-((S)-3-(三氟甲基)吡咯烷-3-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例96，任意指定吡咯烷处的绝对立体化学)(4.01mg，15％收率)。手性HPLC:(柱:(R,R)Whelk-O1(4.6*100mm，3.5μm)，流速:3.0mL/min，洗脱液:MeOH(1％7M NH3的MeOH溶液)，温度40℃)。
实施例95.手性HPLC保留时间＝3.0min。MS测定值(ESI+):502.5(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.53(1H),7.60(1H),7.49(1H),7.37–7.27(2H),7.16(1H),6.86(1H),5.28–5.15(1H),4.06(1H),3.49(1H),3.23(3H),3.00(2H),2.91(2H),2.59(1H),1.53(3H)。
实施例96.手性HPLC保留时间＝3.7min。MS测定值(ESI+):502.6(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.55(1H),7.61(1H),7.48(1H),7.29(2H),7.16(1H),6.87(1H),5.20(1H),4.08(1H),3.51(1H),3.23(3H),3.02(2H),2.96–2.86(1H),2.69–2.56(1H),1.54(3H)。
实施例97和98:4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6-((S)-1-甲基-3-(三氟甲基)吡咯烷-3-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例97，任意指定吡咯烷处的绝对立体化学)和4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6-((R)-1-甲基-3-(三氟甲基)吡咯烷-3-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例98，任意指定吡咯烷处的绝对立体化学)
步骤A:1-苄基-3-(三氟甲基)吡咯烷-3-甲酸
在0℃向2-(三氟甲基)丙-2-烯酸(6.0g，43mmol)在DCM(100mL)中的溶液中缓慢地加入(2-苄基-3-甲氧基-丙基)-三甲基-硅烷(10.0g，42.8mmol)。然后加入TFA(772mg，6.77mmol，521μL)，并将该反应体系温热至室温，并搅拌16hr。收集得到的沉淀，并用DCM洗涤，得到标题化合物(9.0g、77％收率)。MS测定值(ESI+):274.3(M+H)+。
步骤B:(1-苄基-3-(三氟甲基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸叔丁酯
向1-苄基-3-(三氟甲基)吡咯烷-3-甲酸(1g，3.66mmol)在叔丁醇(20mL)中的溶液中加入三乙胺(1.11g，11.0mmol)和DPPA(979mg，4.03mmol)。用N2吹扫该反应体系，加热至90℃ 1hr，然后加热至105℃ 16hr。将该反应体系冷却至室温。减压浓缩该反应体系至干。通过硅胶色谱法纯化残余物(用5％在PE中的EA洗脱)，得到标题化合物(500mg，1.45mmol，40％收率)。类似方法用于制备更大批量的标题化合物(3.5g，41％收率)。MS测定值(ESI+):245.2(M-Boc+H)+。
步骤C:1-苄基-3-(三氟甲基)吡咯烷-3-胺
向N-[1-苄基-3-(三氟甲基)吡咯烷-3-基]氨基甲酸叔丁酯(4.1g，11.9mmol)在二噁烷(10mL)中的溶液中加入HCl(4M二噁烷，20mL)。将该反应体系在rt搅拌2hr。浓缩该反应体系至干，将残余物溶于水(100mL)，并用DCM洗涤3次。向水相中加入NaOH(2M，50mL)，并再搅拌1h。然后用DCM萃取水层。用盐水洗涤合并的有机层，用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到标题化合物(2.7g，93％收率)。MS测定值(ESI+):245.3(M+H)+。
步骤D:N-(1-苄基-3-(三氟甲基)吡咯烷-3-基)-2-(6-氯-5-(羟基甲基)-2-甲基- 3-氧代-2,3-二氢哒嗪-4-基)乙酰胺
将1-苄基-3-(三氟甲基)吡咯烷-3-胺(1.09g，4.47mmol)、4-氯-2-甲基-5,8-二氢吡喃并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(800mg，3.73mmol)和乙酸(223.85mg，3.73mmol)的混合物加热至120℃ 1hr。将该反应体系冷却至室温，并浓缩。通过反相柱纯化残余物(C18，用10％-55％ MeCN的水溶液/0.1％NH4HCO3洗脱)，随后通过硅胶色谱法纯化(用0％-3％在DCM中的MeOH洗脱)，得到标题化合物(365mg，21％收率)。MS测定值(ESI+):459.5，461.5(M+H)+。
步骤E:6-(1-苄基-3-(三氟甲基)吡咯烷-3-基)-4-氯-2-甲基-2,6-二氢吡啶并 [3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
向N-[1-苄基-3-(三氟甲基)吡咯烷-3-基]-2-[6-氯-5-(羟基甲基)-2-甲基-3-氧代-哒嗪-4-基]乙酰胺(725mg，1.58mmol)在MeCN(15mL)中的溶液中加入IBX(885mg，3.16mmol)。将该反应体系加热至80℃ 5hr。过滤该反应体系，并浓缩滤液至干。通过硅胶色谱法纯化残余物(用0％-2％在DCM中的MeOH洗脱)，得到标题化合物(415mg，60％收率)。MS测定值(ESI+):439.4，441.4(M+H)+。
步骤F:4-氯-2-甲基-6-(3-(三氟甲基)吡咯烷-3-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒 嗪-1,7-二酮
向6-(1-苄基-3-(三氟甲基)吡咯烷-3-基)-4-氯-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(415mg，946μmol)在DCM(10mL)中的溶液中加入氯甲酸1-氯乙酯(10mL，92mmol)。将该反应体系在80℃搅拌5hr。然后减压浓缩该反应体系至干。将残余物溶于MeOH(10mL)，并加热至80℃ 1hr。浓缩该反应体系至干，加入20mL NH3/MeOH(7M)。浓缩该混合物至干，通过硅胶色谱法纯化得到的残余物(用2％-6％在DCM中的MeOH洗脱)，得到标题化合物(166mg，50％收率)。MS测定值(ESI+):349.4，351.4(M+H)+。
步骤G:4-氯-2-甲基-6-(1-甲基-3-(三氟甲基)吡咯烷-3-基)-2,6-二氢吡啶并 [3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
向4-氯-2-甲基-6-[3-(三氟甲基)吡咯烷-3-基]吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(85mg，244μmol)在MeOH(10mL)中的溶液中加入多聚甲醛(73mg，2.44mmol)。将该混合物在室温搅拌10min。然后加入氰基硼氢化钠(23mg，366μmol)，并搅拌1hr。用NH4Cl水溶液使反应淬灭，并用DCM萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用Na2SO4干燥，过滤，并浓缩至干。通过硅胶色谱法纯化残余物(用1％-3％在DCM中的MeOH洗脱)，得到标题化合物(29mg，33％收率)。MS测定值(ESI+):363.2，365.2(M+H)+。
步骤H:4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6-((S)-1-甲 基-3-(三氟甲基)吡咯烷-3-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例97，任意 指定吡咯烷处的绝对立体化学)和4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲 基-6-((R)-1-甲基-3-(三氟甲基)吡咯烷-3-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮 (实施例98，任意指定吡咯烷处的绝对立体化学)
用N2吹扫(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟-苯基]乙胺(23mg，120μmol)、4-氯-2-甲基-6-[1-甲基-3-(三氟甲基)吡咯烷-3-基]吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(29mg，78μmol)、碳酸铯(78mg，240μmol)和Xantphos Pd G3(15mg，16μmol)在1,4-二噁烷(1.5mL)中的混合物，然后在微波反应器中加热至120℃ 3hr。浓缩该反应体系至干，并通过硅胶色谱法纯化残余物(用0～4％在DCM中的MeOH洗脱)，随后通过制备型-TLC(MeOH/DCM＝1/20)纯化，得到4-[[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟-苯基]乙基]氨基]-2-甲基-6-[(3S)-1-甲基-3-(三氟甲基)吡咯烷-3-基]吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例97，任意指定吡咯烷处的绝对立体化学)(1.87mg，4.5％收率)和4-[[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟-苯基]乙基]氨基]-2-甲基-6-[(3R)-1-甲基-3-(三氟甲基)吡咯烷-3-基]吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例98，任意指定吡咯烷处的绝对立体化学)(1.53mg，3.7％收率)。分析型手性HPLC:(柱:Cellulose-SC(4.6*100mm，3.0μm)，流速:3.0mL/min，洗脱液:EtOH(1％7M NH3的MeOH溶液)，温度40℃)。
实施例97.手性HPLC保留时间＝2.4min。MS测定值(ESI+):516.4(M+H)+。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.57(1H)，7.63(1H)，7.48(1H)，7.27(3H)，6.87(1H)，5.19(1H)，3.90(1H)，3.23(3H)，3.07(1H)，2.94(1H)，2.81(2H)，2.42(1H)，2.32(3H)，1.54(3H)。
实施例98.手性HPLC保留时间＝2.7min。MS测定值(ESI+):516.4(M+H)+。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.56(1H)，7.60(1H)，7.48(1H)，7.41–7.05(3H)，6.87(1H)，5.26–5.11(1H)，3.89(1H)，3.23(3H)，3.09(1H)，2.93(1H)，2.87–2.73(2H)，2.42(1H)，2.33(3H)，1.54(3H)。
实施例99和100:6-((S)-1-乙酰基-3-(三氟甲基)吡咯烷-3-基)-4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例99，任意指定吡咯烷处的绝对立体化学)和6-((R)-1-乙酰基-3-(三氟甲基)吡咯烷-3-基)-4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例100，任意指定吡咯烷处的绝对立体化学)
步骤A:6-(1-乙酰基-3-(三氟甲基)吡咯烷-3-基)-4-氯-2-甲基-2,6-二氢吡啶并 [3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
向4-氯-2-甲基-6-[3-(三氟甲基)吡咯烷-3-基]吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例97/98步骤F，50mg，143μmol)在DCM(10mL)中的溶液中加入TEA(30μL，215μmol)。然后在0℃加入乙酰氯(13μL，215μmol)。将该反应体系温热至rt，搅拌1hr。浓缩该反应体系，通过硅胶色谱法纯化残余物(用1％-3％在DCM中的MeOH洗脱)，得到标题化合物(56mg，99％收率)。MS测定值(ESI+):391.0,393.0(M+H)+。
步骤B:6-((S)-1-乙酰基-3-(三氟甲基)吡咯烷-3-基)-4-(((R)-1-(3-(二氟甲 基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例99，任 意指定吡咯烷处的绝对立体化学)和6-((R)-1-乙酰基-3-(三氟甲基)吡咯烷-3-基)-4- (((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1, 7-二酮(实施例100，任意指定吡咯烷处的绝对立体化学)
基本上按照与实施例97/98步骤H类似的方式，以6-(1-乙酰基-3-(三氟甲基)吡咯烷-3-基)-4-氯-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮为原料制备。手性HPLC:(柱:OD-3(4.6*100mm，3μm)，流速:3.0mL/min，洗脱液:MeOH(0.2％7M NH3的MeOH溶液)，温度40℃)。
实施例99.手性HPLC保留时间＝1.33min。MS测定值(ESI+):544.4(M+H)+。
实施例100.手性HPLC保留时间＝1.93min。MS测定值(ESI+):544.4(M+H)+。
实施例101和102:(R)-6-环丙基-2-甲基-4-((1-(5,6,7,8-四氢萘-2-基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮和(S)-6-环丙基-2-甲基-4-((1-(5,6,7,8-四氢萘-2-基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
基本上按照与实施例2步骤B类似的方式，以1-(5,6,7,8-四氢萘-2-基)乙-1-胺为原料制备。使用手性HPLC分离外消旋混合物(柱名:AS-3 4.6*100mm 3μm，MeOH[0.2％NH3(7M的MeOH溶液)]，得到标题化合物。
实施例101.第一种洗脱的异构体。MS测定值(ESI+):391.2(M+H)+。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.70(1H)，7.12–7.04(2H)，6.95(2H)，6.83(1H)，4.89(1H)，3.53(1H)，2.71–2.64(4H)，1.71(4H)，1.45(3H)，1.12(2H)，1.08–0.98(2H)。
实施例102.第二种洗脱的异构体。MS测定值(ESI+):391.2(M+H)+。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.69(1H)，7.11–7.05(2H)，6.95(2H)，6.83(1H)，4.89(1H)，3.53(1H)，2.68(4H)，1.71(4H)，1.45(3H)，1.15–1.10(2H)，1.09–1.00(2H)。
实施例103和104:(S)-6-环丙基-4-((1-(3-(1,1-二氟-2-羟基乙基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮和(R)-6-环丙基-4-((1-(3-(1,1-二氟-2-羟基乙基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
按照与实施例40类似的方式，以1-(3-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-1,1-二氟乙基)-2-氟苯基)乙-1-胺(根据WO2022058344中所述的方法制备)为原料制备。手性HPLC:(柱名:AS-3 4.6*100mm 3μm,MeOH[0.2％ NH3(7M的MeOH溶液)]，3mL/min，40℃)。
实施例103:手性HPLC保留时间＝1.78min。MS测定值(ESI+):435.4(M+H)+。
实施例104:手性HPLC保留时间＝2.31min。MS测定值(ESI+):435.4(M+H)+。
实施例105和106:(S)-2-(3-(1-((6-环丙基-2-甲基-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基)氨基)乙基)-2-氟苯基)-2,2-二氟-N,N-二甲基乙酰胺和(R)-2-(3-(1-((6-环丙基-2-甲基-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基)氨基)乙基)-2-氟苯基)-2,2-二氟-N,N-二甲基乙酰胺
步骤A:2-(3-溴-2-氟苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯
将溴二氟乙酸乙酯(16.9g，83.1mmol)在DMSO(160mL)中的溶液在N2中在rt搅拌1h。然后加入1-溴-2-氟-3-碘-苯(10g，33.23mmol)，并将该混合物加热至70℃ 3h。向该混合物中加入冰-水(240mL)，并通过硅藻土垫过滤该混合物。用EtOAc(3×200mL)萃取水性混合物。真空浓缩合并的有机层，得到粗产物，并通过快速柱色谱法纯化(用0-6％在PE中的EA洗脱)，得到标题化合物(8.4g，83％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ:8.05–7.97(1H)，7.77–7.70(1H)，7.38(1H)，4.36(2H)，1.24(3H)。
步骤B:2-(3-溴-2-氟苯基)-2,2-二氟-N,N-二甲基乙酰胺
将2-(3-溴-2-氟-苯基)-2,2-二氟-乙酸乙酯(1.5g，5.1mmol)和二甲胺溶液(25mL，40wt％)加热至70℃ 18h。真空浓缩该混合物，得到粗产物，并通过快速柱色谱法纯化(用0-10％在PE中的EA洗脱)，得到标题化合物(1g，66％收率)。MS测定值(ESI+):296.2,298.2(M+H)+。
步骤C:2-(3-乙酰基-2-氟苯基)-2,2-二氟-N,N-二甲基乙酰胺
在N2中向2-(3-溴-2-氟-苯基)-2,2-二氟-N,N-二甲基-乙酰胺(3g，10.1mmol)、三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡烷(4.39g，12.1mmol)和TEA(2.05g，20.2mmol)在二噁烷(30mL)中的混合物中加入双(三苯膦)氯化钯(II)(711mg，1.01mmol)。将该混合物加热至90℃ 16h。然后加入冰-水(30mL)，用EA(100mL×3)萃取该混合物。真空浓缩合并的有机层，得到粗产物。通过快速柱色谱法纯化粗产物(用0％-25％在PE中的EA洗脱)，得到标题化合物(2.1g，78％收率)。MS测定值(ESI+):260.3(M+H)+。
步骤D:(R,E)-2-(3-(1-((叔丁基亚磺酰基)亚氨基)乙基)-2-氟苯基)-2,2-二氟- N,N-二甲基乙酰胺
向2-(3-乙酰基-2-氟-苯基)-2,2-二氟-N,N-二甲基-乙酰胺(2.1g，8.10mmol)、(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(1.47g，12.2mmol)在THF(21mL)中的混合物中加入乙醇钛(4.62g，20.3mmol)。将该混合物在N2中加热至65℃ 18h。加入冰-水(50mL)，并用EA(100mL×3)萃取该混合物。真空浓缩合并的有机层，得到粗产物。通过快速柱色谱法纯化粗产物(用0％-50％在PE中的EA洗脱)，得到标题化合物(2.4g，80％收率)。MS测定值(ESI+):363.4(M+H)+。
步骤E:2-(3-(1-(((R)-叔丁基亚磺酰基)氨基)乙基)-2-氟苯基)-2,2-二氟-N,N- 二甲基乙酰胺
将(R,E)-2-(3-(1-((叔丁基亚磺酰基)亚氨基)乙基)-2-氟苯基)-2,2-二氟-N,N-二甲基乙酰胺(1g，2.76mmol)在水(0.2mL)和THF(10mL)中的溶液冷却至-70℃。然后加入NaBH4(188mg，4.97mmol)，将该混合物搅拌2h。然后加入冰-水(40mL)，用EA(80mL×3)萃取该混合物。真空浓缩合并的有机层，得到粗产物。通过快速色谱法纯化粗产物(用0％-68％在PE中的EA洗脱)，得到标题化合物(1g，97％收率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)非对映异构体混合物(～2:1)δ7.73(1H),7.50(1H),7.39–7.32(1H),5.87(0.65H),5.55(0.37H),4.68(m,1H),2.98–2.94(m,6H),1.49(1H),1.41(2H),1.10(9H)。
步骤F:2-(3-(1-氨基乙基)-2-氟苯基)-2,2-二氟-N,N-二甲基乙酰胺盐酸盐
/>
向2-[3-[1-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]乙基]-2-氟-苯基]-2,2-二氟-N,N-二甲基-乙酰胺(1.00g，2.74mmol)在DCM(21mL)中的溶液中缓慢地加入4M HCl的1,4-二噁烷溶液(6.86mL)。将该混合物在rt搅拌2h，然后真空浓缩，得到粗产物。通过快速柱色谱法纯化粗产物(用0％-10％在DCM中的MeOH洗脱)，得到标题化合物(1.1g，76％收率)。MS测定值(ESI+):261.3(M+H)+。
步骤G:(S)-2-(3-(1-((6-环丙基-2-甲基-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3, 4-d]哒嗪-4-基)氨基)乙基)-2-氟苯基)-2,2-二氟-N,N-二甲基乙酰胺(实施例105)和(R)- 2-(3-(1-((6-环丙基-2-甲基-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基)氨基) 乙基)-2-氟苯基)-2,2-二氟-N,N-二甲基乙酰胺(实施例106)
向4-氯-6-环丙基-2-甲基-吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(150mg，596μmol)，2-[3-(1-氨基乙基)-2-氟-苯基]-2,2-二氟-N,N-二甲基-乙酰胺盐酸盐(186mg，715μmol)，Xantphos(69mg，119.11μmol，0.2当量)和碳酸钾(247mg，1.8mmol)在DMF(2mL)中的混合物中加入Pd2(dba)3(55mg，59μmol)。将该混合物加热至105℃ 2h。加入冰-水(10mL)，用EA(30mL×3)萃取该混合物。真空浓缩合并的有机层，得到粗产物。通过制备型HPLC(MeCN/水/0.1％ FA)、随后通过手性SFC纯化粗产物，得到(S)-2-(3-(1-((6-环丙基-2-甲基-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基)氨基)乙基)-2-氟苯基)-2,2-二氟-N,N-二甲基乙酰胺(实施例105)和(R)-2-(3-(1-((6-环丙基-2-甲基-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基)氨基)乙基)-2-氟苯基)-2,2-二氟-N,N-二甲基乙酰胺(实施例106)。手性HPLC:柱名:OJ-3 4.6*100mm 3μm，MeOH[0.2％ NH3(7M的MeOH溶液)]，流速:3mL/min，柱温:40℃。
实施例105.手性HPLC保留时间＝1.99min。MS测定值(ESI+):476.0(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.72(1H),7.65(1H),7.45(1H),7.29(1H),7.16(1H),6.82(1H),5.15(1H),3.58–3.52(1H),3.23(3H),2.96(6H),1.50(3H),1.17–1.05(4H)。
实施例106.手性HPLC保留时间＝2.90min。MS测定值(ESI+):476.0(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.72(1H),7.65(1H),7.45(1H),7.29(1H),7.16(1H),6.82(1H),5.15(1H),3.59–3.52(1H),3.23(3H),2.96(6H),1.50(3H),1.12(4H)。
实施例107和108:(R)-2-(3-(1-((6-环丙基-2-甲基-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基)氨基)乙基)-2-氟苯基)-2,2-二氟-N-甲基乙酰胺和(S)-2-(3-(1-((6-环丙基-2-甲基-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基)氨基)乙基)-2-氟苯基)-2,2-二氟-N-甲基乙酰胺
/>
步骤A:2-(3-溴-2-氟苯基)-2,2-二氟-N-甲基乙酰胺
向2-(3-溴-2-氟-苯基)-2,2-二氟-乙酸乙酯(1.5g，5.1mmol)在甲胺(15mL)中的溶液加热至70℃ 18h。真空浓缩该混合物，得到粗产物。通过快速柱色谱法纯化粗产物(用0％-50％在PE中的EA洗脱)，得到标题化合物(1.1g，76％收率)。
1H NMR(400MHz,DMSO)δ9.04(1H),7.95(1H),7.65(1H),7.34(1H),2.73(3H)。
步骤B:(R)-2-(3-(1-((6-环丙基-2-甲基-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3, 4-d]哒嗪-4-基)氨基)乙基)-2-氟苯基)-2,2-二氟-N-甲基乙酰胺(实施例107)和(S)-2- (3-(1-((6-环丙基-2-甲基-1,7-二氧代-1,2,6,7-四氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-基)氨基)乙 基)-2-氟苯基)-2,2-二氟-N-甲基乙酰胺(实施例108)
基本上按照与实施例105/6步骤C-G类似的方式，以2-(3-溴-2-氟苯基)-2,2-二氟-N-甲基乙酰胺为原料制备。手性HPLC:(柱名:OD-3 4.6*100mm 3μm,MeOH[0.2％ NH3(7M的MeOH溶液)]，流速:3.0mL/min，柱温:40℃)。
实施例107.手性HPLC保留时间＝1.24min。MS测定值(ESI+):462.2(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.95(1H),8.71(s,1H),7.64(1H),7.46(1H),7.28(1H),7.15(1H),6.81(1H),5.14(1H),3.59–3.51(1H),3.24(3H),2.73(3H),1.50(3H),1.10(4H)。
实施例108.手性HPLC保留时间＝1.53min。MS测定值(ESI+):462.0(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.95(1H),8.71(1H),7.64(1H),7.46(1H),7.28(1H),7.15(1H),6.81(1H),5.14(1H),3.59–3.51(1H),3.24(3H),2.73(3H),1.50(3H),1.10(4H)。
实施例109:(R)-6-环丙基-4-((1-(3-(1,1-二氟-2-甲氧基-2-甲基丙基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
步骤A:1-溴-3-(1,1-二氟-2-甲氧基-2-甲基丙基)-2-氟苯
向1-(3-溴-2-氟-苯基)-1,1-二氟-2-甲基-丙-2-醇(1.3g，4.59mmol，根据WO2019122129中详述的方法制备)在二噁烷(20mL)中的溶液中加入氢化钠(121mg，5.05mmol)。将该混合物搅拌30min，随后添加碘甲烷(430μL，6.89mmol)。将该混合物在25℃搅拌2hr。将该混合物倾入冰水，用EA萃取。用Na2SO4干燥合并的有机层，过滤并浓缩。通过快速色谱法纯化残余物(用3％-5％在PE中的EA洗脱)，得到标题化合物(860mg，63％收率)。MS测定值(ESI+):296.5，297.5，[M+H]+。
步骤B:(R)-1-(3-(1,1-二氟-2-甲氧基-2-甲基丙基)-2-氟苯基)乙-1-胺盐酸盐
根据WO2019122129中对(R)-1-(3-(1-氨基乙基)-2-氟苯基)-1,1-二氟-2-甲基丙-2-醇HCl详述的方法，以1-溴-3-(1,1-二氟-2-甲氧基-2-甲基丙基)-2-氟苯为原料制备标题化合物。MS测定值(ESI+):262.4。
步骤C:(R)-6-环丙基-4-((1-(3-(1,1-二氟-2-甲氧基-2-甲基丙基)-2-氟苯基) 乙基)氨基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例109)
将4-氯-6-环丙基-2-甲基-吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(60mg，238.41μmol)、(1R)-1-[3-(1,1-二氟-2-甲氧基-2-甲基-丙基)-2-氟-苯基]乙胺；盐酸盐(85mg，286.09μmol)、XantPhos(28mg，48μmol)、Pd2(dba)3(22mg，24μmol)和碳酸钾(99mg，0.72mmol)在DMF(500μL)中的溶液在100℃搅拌16hr。过滤该混合物，用NaHCO3(水溶液)稀释。用EA萃取该混合物，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩。通过制备型HPLC(CH3CN/0.1％ NH4HCO3-水＝45-60％)纯化，得到标题化合物(38mg，33％收率)。
MS测定值(ESI+):477.5(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.74(1H),7.57(1H),7.28(1H),7.21(1H),7.14(1H),6.82(1H),5.19(1H),3.62–3.49(1H),3.23(3H),3.19(3H),1.49(3H),1.26(6H),1.19–1.12(2H),1.11–1.04(2H)。
实施例110:(R)-4-((1-(3-(1,1-二氟-2-甲氧基-2-甲基丙基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(1-(二氟甲基)环丙基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
将4-氯-6-(1-(二氟甲基)环丙基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(20mg，66.3μmol)、(1R)-1-[3-(1,1-二氟-2-甲氧基-2-甲基-丙基)-2-氟-苯基]乙胺盐酸盐(24mg，79.6μmol)、RuPhos Pd G3(11mg，13.3μmol)、碳酸钾(9mg，66.3μmol)在二噁烷(0.4mL)中的溶液在100℃搅拌16hr。减压过滤该反应混合物，并用EA洗涤。浓缩该溶液，并用制备型-TLC(MeOH/DCM＝1/30)纯化，再通过制备型-HPLC(CH3CN/0.1％ NH4HCO3-水＝48-58％)纯化，得到标题化合物(7.12mg，20％收率)。MS测定值(ESI+):527.5(M+H)+。
实施例111和112.(S)-6-环丙基-4-((2,2-二氟-1-(3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2-甲基吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H,6H)-二酮(实施例111)和(R)-6-环丙基-4-((2,2-二氟-1-(3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2-甲基吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H,6H)-二酮(实施例112)
步骤A:(E)-2-甲基-N-(3-(三氟甲基)亚苄基)丙烷-2-亚磺酰胺
在室温向2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(209mg，1.72mmol)在THF(3.0mL)中的溶液中加入3-(三氟甲基)苯甲醛(154μL，1.15mmol)和四乙醇钛(722μL，3.45mmol)。将该混合物在80℃搅拌16h。用水使该混合物淬灭，并用DCM萃取。浓缩有机层，通过快速色谱法纯化残余物(用0-15％在PE中的EA洗脱)，得到标题化合物(275mg，86％收率)。MS测定值(ESI+):278.3(M+H)+。
步骤B:N-(2,2-二氟-1-(3-(三氟甲基)苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺
向-78℃(E)-2-甲基-N-(3-(三氟甲基)亚苄基)丙烷-2-亚磺酰胺(175mg，631μmol)在THF(2.0mL)中的溶液中加入二氟甲基(三甲基)硅烷(235mg，1.89mmol)。将t-BuOK(212mg，1.89mmol)在THF(1.5mL)中的溶液中加入到该混合物中，将其在-78℃搅拌1h。用NH4Cl(水溶液)使该混合物淬灭，用EA萃取。浓缩有机层，并通过快速色谱法纯化(用0-30％在PE中的EA洗脱)，得到标题化合物(150mg，72％收率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:7.66–7.61(3H),7.57–7.53(1H),6.15–6.87(1H),4.78–4.69(1H),1.25(9H)。
步骤C:2,2-二氟-1-(3-(三氟甲基)苯基)乙胺盐酸盐
将N-(2,2-二氟-1-(3-(三氟甲基)苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(150mg，455μmol)在HCl(4M的二噁烷溶液，5.0mL)中的溶液在室温搅拌2h。浓缩该混合物，混悬于乙醚。过滤该混合物，并用Et2O洗涤固体，并真空干燥，得到标题化合物(100mg，84％收率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:9.28(3H),8.03(1H),7.92–7.86(2H),7.77(1H),6.71(1H),5.14–5.07(1H)。
步骤D:(S)-6-环丙基-4-((2,2-二氟-1-(3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2-甲基 吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H,6H)-二酮(实施例111)和(R)-6-环丙基-4-((2,2-二氟-1-(3- (三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2-甲基吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H,6H)-二酮(实施例112)
在室温、N2气氛中向4-氯-6-环丙基-2-甲基-吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(80mg，318.53μmol)在二噁烷(1.5mL)中的溶液中加入[2,2-二氟-1-(3-(三氟甲基)苯基)乙胺盐酸盐(100mg，382.24μmol)、Xantphos-Pd-G3(60mg，63.71μmol)和Cs2CO3(311mg，955.59μmol)。将该混合物在微波照射下在130℃加热3h。用NH4Cl(水溶液)使该混合物淬灭，并用EA萃取。真空浓缩有机层，并通过快速色谱法纯化得到的残余物(用0-80％在PE中的EA洗脱)。通过手性SFC纯化外消旋混合物(Daicel OD-3(4.6*100mm，3μm)(CO2/MeOH(0.2％甲醇氨)。分析型手性HPLC:(柱名:OD-3 4.6*100mm 3μm，MeOH[0.2％ NH3(7M的MeOH溶液)]，流速:3mL/min，温度:40℃)。
实施例111.手性HPLC保留时间＝1.35min。MS测定值(ESI+):441.4(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.79(1H),7.92(1H),7.86(1H),7.73(1H),7.67(1H),7.50(1H),6.84(1H),6.61–6.33(1H),5.54–5.46(1H),3.58–3.52(1H),3.35(3H),1.16–1.12(2H),1.10–1.05(2H)。
实施例112.手性HPLC保留时间＝1.62min。MS测定值(ESI+):441.4(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.77(1H),7.90(1H),7.85(1H),7.71(1H),7.65(1H),7.47(1H),6.83(1H),6.59–6.31(1H),5.53–5.45(1H),3.56–3.50(1H),3.33(3H),1.16–1.10(2H),1.09–1.01(2H)。
实施例113和114:(S)-6-(1-(二氟甲基)环丙基)-4-((1-(吲嗪-5-基)乙基)氨基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例113)和(R)-6-(1-(二氟甲基)环丙基)-4-((1-(吲嗪-5-基)乙基)氨基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例114)
步骤A:5-溴吲嗪
将吲嗪(1.5g，12.80mmol)和N,N,N',N'-四甲基乙二胺(1.64g，14.08mmol，2mL)在THF(10mL)中的溶液冷却至-78℃。缓慢地加入正丁基锂的溶液(14mmol，2.5M的己烷溶液)，将该混合物在-78℃搅拌2小时。向该反应体系中加入1,2-二溴-1,1，2,2-四氟-乙烷(3.7g，14.1mmol)，并将该混合物在RT搅拌1hr。用NH4Cl(水溶液，10mL)使该混合物淬灭，并用EA(10mL×2)萃取。合并有机相，用Na2SO4干燥。过滤该混合物，浓缩，并通过快速柱纯化粗残余物(用PE洗脱)，得到标题化合物(1.1g，44％收率)。MS测定值(ESI+):196.1,197.1(M+H)+。
步骤B:1-(吲嗪-5-基)乙-1-酮
向5-溴吲嗪(1.0g，5.10mmol)在二噁烷(5mL)中的溶液中加入三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡烷(2mL，6.1mmol)，随后加入三乙胺(2mL，12.8mmol)。将该反应混合物在100℃搅拌16hr，然后过滤，用EtOAc稀释。用KF(20mL水溶液)、H2O(20mL)和NaCl(20mL水溶液)洗涤该混合物。减压浓缩有机层，然后溶于二噁烷(5mL)，用2mL HCl(2M水溶液)处理。将该反应体系在rt再搅拌2hr。真空除去溶剂，并通过快速柱色谱法纯化粗残余物(用3％-5％在PE中的EA洗脱)，得到标题化合物(400mg，49％收率)。MS测定值(ESI+):160.3(M+H)+。
步骤C:1-(吲嗪-5-基)乙-1-胺
在rt向1-(吲嗪-5-基)乙-1-酮(300mg，1.88mmol)在甲醇(10mL)中的溶液中加入NH4OAc(1.5g，18.85mmol)。将该混合物在50℃搅拌1hr。然后向该混合物中加入NaBH3CN(1.2g，18.85mmol)，并在50℃再搅拌48hr。用饱和NH4Cl水溶液使反应淬灭，并用EtOAc萃取。用无水Na2SO4洗涤有机层，过滤并浓缩。通过快速柱纯化残余物(用0-3％在DCM中的MeOH洗脱)，得到标题化合物(166mg，55％收率)。MS测定值(ESI+):161.3(M+H)+。
步骤D:(R)-6-(1-(二氟甲基)环丙基)-4-((1-(吲嗪-5-基)乙基)氨基)-2-甲基- 2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例113)&(S)-6-(1-(二氟甲基)环丙基)-4- ((1-(吲嗪-5-基)乙基)氨基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例 114)
将4-氯-6-[1-(二氟甲基)环丙基]-2-甲基-吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(100mg，331μmol)、1-(吲嗪-5-基)乙-1-胺(64mg，398μmol)、Xantphos-Pd-G3(94mg，99μmol)、碳酸铯(216mg，663μmol)和二噁烷(1mL)的混合物在100℃搅拌16hr。过滤该反应体系，用水稀释，并萃取入EtOAc。减压浓缩有机层，通过制备型TLC(MeOH/DCM＝1/30)、随后通过制备型-HPLC(CH3CN/0.1％ NH4HCO3-水＝45-60％)纯化粗产物，得到标题化合物的外消旋混合物。通过手性SFC与如下条件纯化该混合物((柱名:Daicel OD-3，4.6*100mm 3μm，CO2/MeOH(0.2％甲醇氨)＝80/20))，得到(R)-6-(1-(二氟甲基)环丙基)-4-((1-(吲嗪-5-基)乙基)氨基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例113)和(S)-6-(1-(二氟甲基)环丙基)-4-((1-(吲嗪-5-基)乙基)氨基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例114)。分析型手性HPLC:柱名:IG-3 4.6*100mm 3μm，MeOH[0.2％ NH3(7M的MeOH溶液)]，流速:3mL/min，温度:40℃。
实施例113.手性HPLC保留时间＝1.04min。MS测定值(ESI+):426.3(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.85(1H),7.50(1H),7.42(1H),7.17(1H),6.91(1H),6.83–6.80(1H),6.77(1H),6.70(1H),6.50–6.46(1H),6.28(1H),5.45–5.37(1H),3.33(3H),1.63(3H),1.46(2H),1.36(2H)。
实施例114.手性HPLC保留时间＝1.25min。MS测定值(ESI+):426.3(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.85(1H),7.50(1H),7.42(1H),7.17(1H),6.91(1H),6.81(1H),6.77(1H),6.70(1H),6.48(1H),6.26(1H),5.45–5.37(1H),3.33(3H),1.63(3H),1.46(2H),1.36(2H)。
实施例115和116:(S)-6-(1-(二氟甲基)环丙基)-2-甲基-4-((1-(吡唑并[1,5-a]吡啶-7-基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例115)&(R)-6-(1-(二氟甲基)环丙基)-2-甲基-4-((1-(吡唑并[1,5-a]吡啶-7-基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例116)
步骤A:1-(吡唑并[1,5-a]吡啶-7-基)乙-1-酮
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向7-溴吡唑并[1,5-a]吡啶(1.5g，7.61mmol)、三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡烷(3.30g，9.14mmol)和TEA(1.54g，15.23mmol)在二噁烷(15mL)中的混合物中加入双(三苯膦)氯化钯(II)(534mg，761μmol)。将该混合物加热至90℃ 16h。加热冰-水(30mL)，用EtOAc(50mL×3)萃取该混合物。用硫酸钠干燥合并的有机层，过滤并浓缩。通过快速柱色谱法纯化粗产物(用0％-10％在PE中的EA洗脱)，得到标题化合物(900mg，69％收率)。MS测定值(ESI+):161.1(M+H)+。
步骤B:2-甲基-N-(1-(吡唑并[1,5-a]吡啶-7-基)亚乙基)丙烷-2-亚磺酰胺
向1-吡唑并[1,5-a]吡啶-7-基乙酮(650mg，4.06mmol)、叔丁烷亚磺酰胺(738mg，6.09mmol)在THF(7mL)中的混合物中加入乙醇钛(2.31g，10.2mmol)。在N2中将该混合物加热至65℃ 18h。用冰-水(50mL)使反应淬灭，用EA(100mL×3)萃取该混合物，用硫酸钠干燥合并的有机层，过滤并浓缩。通过快速色谱法纯化粗产物(用0％-50％在PE中的EA洗脱)，得到标题化合物(800mg，75％收率)。MS测定值(ESI+):264.3(M+H)+。
步骤C:2-甲基-N-(1-(吡唑并[1,5-a]吡啶-7-基)乙基)丙烷-2-亚磺酰胺
将2-甲基-N-(1-(吡唑并[1,5-a]吡啶-7-基)亚乙基)丙烷-2-亚磺酰胺(800mg，3.04mmol)在THF(8mL)中的溶液冷却至-70℃。加入硼氢化钠(207mg，5.47mmol)，并将该混合物搅拌2hr。加入冰-水(20mL)，用EA(50mL×3)萃取该混合物。真空浓缩合并的有机层，得到粗产物。通过快速色谱法纯化粗产物，用0％-50％在PE中的EA洗脱，得到标题化合物(700mg，87％收率)。MS测定值(ESI+):266.3(M+H)+。
步骤D:1-(吡唑并[1,5-a]吡啶-7-基)乙-1-胺盐酸盐
将2-甲基-N-(1-吡唑并[1,5-a]吡啶-7-基乙基)丙烷-2-亚磺酰胺(700mg，2.64mmol)在DCM(10mL)中的溶液冷却至0℃。向该溶液中加入4M HCl的1,4-二噁烷溶液(4M，3.30mL)，并将该混合物搅拌2h。然后真空浓缩该混合物。将粗产物溶于10mL MeCN，并通过硅藻土垫过滤并浓缩，得到1-(吡唑并[1,5-a]吡啶-7-基)乙-1-胺盐酸盐(400mg，粗品)。
1H NMR(400MHz，D2O)δ7.94(1H)，7.64(1H)，7.17(1H)，6.92(1H)，6.63(1H)，5.04(1H)，1.71(3H)。
步骤E:(S)-6-(1-(二氟甲基)环丙基)-2-甲基-4-((1-(吡唑并[1,5-a]吡啶-7- 基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例115)&(R)-6-(1-(二氟甲 基)环丙基)-2-甲基-4-((1-(吡唑并[1,5-a]吡啶-7-基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3, 4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例116)
按照基本上与实施例113/114步骤D类似的方式，以1-(吡唑并[1,5-a]吡啶-7-基)乙-1-胺盐酸盐为原料制备。分析型手性HPLC:柱名:OJ-3 4.6*100mm 3μm,EtOH[1％ NH3(7M的MeOH溶液)]，流速:3mL/min，温度:40℃。
实施例115.保留时间＝1.33min。MS测定值(ESI+):427.4(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.99(1H),8.07(1H),7.65–7.57(1H),7.37(1H),7.21(1H),6.89(2H),6.67(1H),6.32(1H),5.79(1H),3.10(3H),1.65(3H),1.53(2H),1.45(2H)。
实施例116.保留时间＝1.72min。MS测定值(ESI+):427.4(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.99(1H),8.07(1H),7.61(1H),7.38(1H),7.21(1H),6.89(2H),6.67(1H),6.32(1H),5.79(1H),3.10(3H),1.65(3H),1.53(2H),1.45(2H)。
实施例117和118:6-环丙基-2-甲基-4-[[(1S)-1-[3-甲基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例117)和6-环丙基-2-甲基-4-[[(1R)-1-[3-甲基-5-(三氟甲基)苯基]乙基]氨基]吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例118)
按照基本上与实施例2步骤B类似的方式，以1-[3-甲基-5-(三氟甲基)苯基]乙胺盐酸盐(根据WO/2021/127429的方法制备)为原料制备。手性HPLC:柱名:AS-3 4.6*100mm 3μm,IPA[1％ NH3(7M的MeOH溶液)]，流速:3mL/min，温度:40℃。
实施例117.手性HPLC保留时间＝3.04。MS测定值(ESI+):419.3(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.69(1H),7.52(2H),7.38(1H),7.08(1H),6.82(1H),4.96(1H),3.59–3.49(1H),3.29(3H),2.38(3H),1.51(3H),1.17–0.97(4H)。
实施例118.手性HPLC保留时间＝5.01。MS测定值(ESI+):419.3(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.69(1H),7.52(2H),7.38(1H),7.07(1H),6.82(1H),4.96(1H),3.59–3.48(1H),3.29(3H),2.38(3H),1.51(3H),1.18–0.98(4H)。
实施例119、120:4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-((S)-3-(二氟甲基)四氢呋喃-3-基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例119，任意指定四氢呋喃环上的立体化学)和4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-((R)-3-(二氟甲基)四氢呋喃-3-基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例120，任意指定四氢呋喃环上的立体化学)
步骤A:N-(二氢呋喃-3(2H)-亚基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺
在N2气氛中在室温向载有THF(75mL)中的四氢呋喃-3-酮(10g，116mmol)的烧瓶中加入乙醇钛(48.7mL，232mmol)和2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(15.6g，127.8mmol)。将该反应混合物在60℃搅拌18h。在剧烈搅拌下用NaHCO3饱和水溶液使该反应混合物淬灭。过滤沉淀，并用EtOAc洗涤，并用EtOAc(100mL×3)萃取水性混合物。用硫酸钠干燥合并的有机层，过滤并浓缩。通过硅胶色谱法纯化粗产物(120g，15-60％在PE中的EA)，得到标题化合物(9.3g，42％收率)。MS测定值(ESI+):190.3(M+H)+。
步骤B:N-(3-(二氟(苯基磺酰基)甲基)四氢呋喃-3-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺
在-78℃、N2气氛中向N-(二氢呋喃-3(2H)-亚基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(7.1g，37.51mmol)和二氟甲基磺酰基苯(5.99mL，41.26mmol)在四氢呋喃(150mL)中的混合物中滴加LiHMDS(1.0M in THF，56.3mL)。将得到的混合物在该温度下搅拌5h。将该混合物倾入NH4Cl(饱和水溶液)，并用EtOAc(100mL×4)萃取。用硫酸钠干燥合并的有机层，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物(15-75％在PE中的EA)，得到标题化合物(6.5g，45％收率)。MS测定值(ESI+):382.4(M+H)+。
步骤C:N-(3-(二氟甲基)四氢呋喃-3-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺
在室温向N-(3-(二氟(苯基磺酰基)甲基)四氢呋喃-3-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(6.5g，17.0mmol)在NaOAc/HOAc(8M，21.3mL)和DMF(100mL)中的混合物中逐滴加入Mg(1.24g，51.1mmol)。将得到的混合物在该温度下搅拌3h。用水(800mL)稀释该混合物，并用EA(200mL×3)萃取。用盐水和H2O洗涤合并的有机层，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩。通过柱色谱法纯化残余物(15-80％在PE中的EA)，得到标题化合物(2.0g，49％收率)。MS测定值(ESI+):242.3(M+H)+。
步骤C:3-(二氟甲基)四氢呋喃-3-胺盐酸盐
将N-(3-(二氟甲基)四氢呋喃-3-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(2.0g，8.29mmol)溶于1,4-二噁烷(10mL)。然后在室温向得到的混合物中加入HCl/1,4-二噁烷(4M，10.36mL)。将得到的混合物在该温度下搅拌2h。真空浓缩该反应混合物。将残余物与乙醚(50mL×2)一起研磨。真空干燥残余物，得到标题化合物(1.4g，粗品)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.15(3H)，6.44(1H)，3.98(1H)，3.93(1H)，3.87–3.79(2H)，2.32–2.19(1H)，2.15–2.02(1H)。
步骤D:2-(6-氯-5-(羟基甲基)-2-甲基-3-氧代-2,3-二氢哒嗪-4-基)-N-(3-(二 氟甲基)四氢呋喃-3-基)乙酰胺
将3-(二氟甲基)四氢呋喃-3-胺(216mg，1.57mmol)、4-氯-2-甲基-5,8-二氢吡喃并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(0.26g，1.21mmol)和乙酸(69μL，1.21mmol)的混合物密封在微波试管中，在110℃搅拌1h。浓缩该混合物，并通过柱色谱法纯化(0-5％在DCM中的MeOH)，得到标题化合物(0.11g，26％收率)。MS测定值(ESI+):352.4(M+H)+。
步骤E:4-氯-6-(3-(二氟甲基)四氢呋喃-3-基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d] 哒嗪-1,7-二酮
向2-(6-氯-5-(羟基甲基)-2-甲基-3-氧代-2,3-二氢哒嗪-4-基)-N-(3-(二氟甲基)四氢呋喃-3-基)乙酰胺(0.11g，313μmol)在乙腈(60mL)中的混合物中加入2-碘氧基苯甲酸(175mg，625μmol)。将得到的混合物在80℃搅拌3hr。将该混合物冷却至室温，并过滤。真空浓缩滤液。通过柱色谱法纯化残余物(25g，0-4在DCM中的MeOH)，得到标题化合物(60mg，58％收率)。MS测定值(ESI+):332.2(M+H)+。
步骤E:4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(3-(二氟甲基)四氢 呋喃-3-基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
将4-氯-6-(3-(二氟甲基)四氢呋喃-3-基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(60mg，181μmol)、(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟-苯基]乙胺(51.3mg，271μmol)、Xantphos-Pd-G3(34mg，36μmol)和碳酸铯(177mg，543μmol)在1,4-二噁烷(1.0mL)中的混合物在100℃、N2气氛中搅拌16hr。过滤该反应混合物，并真空浓缩滤液。通过制备型TLC(5％在DCM中的MeOH)纯化残余物，得到标题化合物(17mg，18％收率)。MS测定值(ESI+):485.0(M+H)+。
步骤F:4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-((S)-3-(二氟甲基) 四氢呋喃-3-基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例119，任意指定四 氢呋喃立体化学)和4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-((R)-3-(二氟甲 基)四氢呋喃-3-基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例120，任意指 定四氢呋喃立体化学)
通过手性SFC(柱名:Daicel OG-3，4.6*100mm 3μm，CO2/MeOH(0.2％甲醇氨(7M的甲醇溶液))＝85/15)分离4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(3-(二氟甲基)四氢呋喃-3-基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(14.15mg，29.21μmol)，得到4-[[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟-苯基]乙基]氨基]-6-[(3S)-3-(二氟甲基)四氢呋喃-3-基]-2-甲基-吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例119，任意指定四氢呋喃立体化学)和4-[[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟-苯基]乙基]氨基]-6-[(3R)-3-(二氟甲基)四氢呋喃-3-基]-2-甲基-吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例120，任意指定四氢呋喃立体化学)。手性HPLC:柱名:OJ-3 4.6*100mm 3μm,MeOH[0.2％ NH3(7M的MeOH溶液)]，流速:3mL/min，温度:40℃。
实施例119.手性HPLC保留时间＝0.72min。MS测定值(ESI+):485.0(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.59(1H),7.61(1H),7.49(1H),7.38–7.06(3H),6.90(1H),6.56(1H),5.26–5.13(1H),4.66(1H),4.20–4.10(1H),3.99–3.85(2H),3.25(3H),2.88–2.71(2H),1.54(3H)。
实施例120.手性HPLC保留时间＝0.95min。MS测定值(ESI+):485.0(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.61(1H),7.63(1H),7.48(1H),7.36–7.09(3H),6.90(1H),6.56(1H),5.26–5.15(1H),4.66(1H),4.23–4.07(1H),3.93(2H),3.24(3H),2.88–2.73(2H),1.54(3H)。
实施例121和122:6-((S)-3,3-二氟环戊基)-4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H,6H)-二酮(实施例121，任意指定环戊基立体化学)和6-((R)-3,3-二氟环戊基)-4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H,6H)-二酮(实施例122，任意指定环戊基立体化学)
步骤A:2-(6-氯-5-(羟基甲基)-2-甲基-3-氧代-2,3-二氢哒嗪-4-基)-N-(3,3-二 氟环戊基)乙酰胺
在室温向4-氯-2-甲基-5,8-二氢吡喃并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(500mg，2.33mmol)在甲苯(5.0mL)中的溶液中加入(3,3-二氟环戊基)氯化铵(441mg，2.80mmol)和三乙胺(390μL，2.80mmol)。将该混合物在80℃搅拌56h。用EtOAc萃取该反应体系，并用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。通过快速色谱法纯化残余物(用5％在DCM中的MeOH洗脱)，得到标题化合物(543mg，69％收率)。MS测定值(ESI+):336.1(M+H)+。
步骤B:4-氯-6-(3,3-二氟环戊基)-2-甲基吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H,6H)-二酮
在室温向2-(6-氯-5-(羟基甲基)-2-甲基-3-氧代-2,3-二氢哒嗪-4-基)-N-(3,3-二氟环戊基)乙酰胺(543mg，1.62mmol)在MeCN(25mL)中的溶液中加入IBX(906mg，3.23mmol)。将该混合物在80℃搅拌3h。过滤该混合物，并真空浓缩滤液。通过快速色谱法纯化残余物(用10％在PE中的EA洗脱)，得到标题化合物(312mg，61％收率)。MS测定值(ESI+):316.0(M+H)+。
步骤C:6-(3,3-二氟环戊基)-4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)- 2-甲基吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H,6H)-二酮
向4-氯-6-(3,3-二氟环戊基)-2-甲基-吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(100mg，317μmol)在二噁烷(2.5mL)中的溶液中加入(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟-苯基]氯化乙胺(85mg，380μmol)、Xantphos-Pd-G3(60mg，63.4μmol)和Cs2CO3(309mg，950μmol)。将该混合物在微波反应器中在130℃加热3h。浓缩该反应混合物，并通过快速色谱法纯化残余物(用2％在DCM中的MeOH洗脱)，随后通过反相柱纯化(C18，MeCN/H2O)，得到标题化合物(53mg，36％收率)。MS测定值(ESI+):469.2(M+H)+。
步骤D:6-((S)-3,3-二氟环戊基)-4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨 基)-2-甲基吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H,6H)-二酮(实施例121，任意指定环戊基立体化学) 和6-((R)-3,3-二氟环戊基)-4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基吡 啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H,6H)-二酮(实施例122，任意指定环戊基立体化学)
6-(3,3-二氟环戊基)-4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H,6H)-二酮的非异构体混合物的手性SFC分离得到单个异构体。手性HPLC:柱名:AD-3 4.6*100mm 3μm,EtOH[1％NH3(7M的MeOH溶液)]，流速:3mL/min，温度:40℃。
实施例121.手性HPLC保留时间＝0.83min。MS测定值(ESI+):469.4(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm:8.80(1H),7.66(1H),7.50(1H),7.36-7.06(3H),6.87(1H),5.25-5.18(2H),3.25(3H),2.71-2.50(3H),2.33-2.26(3H),1.55(3H)。
实施例122.手性HPLC保留时间＝1.19。MS测定值(ESI+):469.4(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm:8.80(1H),7.66(1H),7.50(1H),7.36-7.07(3H),6.87(1H),5.25-5.17(2H),3.25(3H),2.72-2.51(3H),2.32-2.27(3H),1.54(3H)。
实施例123:(R)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(1-(羟基甲基)环丙基)-2-甲基吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H,6H)-二酮
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步骤A:1-((苄氧基)甲基)环丙胺
在0℃、Ar气氛中向2-(苄氧基)乙腈(3.7g，25.1mmol)在无水THF(70mL)中的溶液中加入异丙醇钛(7.9g，27.7mmol)和EtMgBr(1M in THF，50.3mL)。将该混合物在室温搅拌2hr。加入BF3·OEt2(6.0mL)，搅拌10min。加入10％ NaOH(12.0mL)，并用EtOAc萃取该混合物，用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，并通过快速色谱法纯化(用0-5％在DCM中的MeOH洗脱)，得到标题化合物(2.2g，45％收率)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm:7.37-7.28(5H)，4.58(2H)，3.39(2H)，0.74(2H)，0.52(2H)。
步骤B:N-(1-((苄氧基)甲基)环丙基)-2-(6-氯-5-(羟基甲基)-2-甲基-3-氧代- 2,3-二氢哒嗪-4-基)乙酰胺
在室温向4-氯-2-甲基-5,8-二氢-1H-吡喃并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H)-二酮(2.3g，10.7mmol)在甲苯(17mL)中的溶液中加入1-((苄氧基)甲基)环丙胺(1.7g，9.72mmol)和Et3N(1.2g，11.7mmol)。将该混合物在80℃搅拌16h。减压浓缩该反应混合物，并与来自使用3.1mmol规模的相同条件下进行的反应的粗物质合并。通过快速色谱法纯化合并的批次(用0-50％在PE中的EA洗脱)，得到标题化合物(2.5g，51％收率)。MS测定值(ESI+):392.5(M+H)+。
步骤C:6-(1-((苄氧基)甲基)环丙基)-4-氯-2-甲基吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H, 6H)-二酮
向N-(1-((苄氧基)甲基)环丙基)-2-(6-氯-5-(羟基甲基)-2-甲基-3-氧代-2,3-二氢哒嗪-4-基)乙酰胺(2.3g，5.87mmol)在MeCN(92mL)中的溶液中加入IBX(3.3g，11.74mmol)。将该混合物在80℃搅拌3h。过滤该反应混合物，浓缩，并与来自使用0.51mmol规模的相同条件下进行的单独反应的粗物质合并。通过快速色谱法纯化合并的批次(用0-30％在PE中的EA洗脱)，随后通过反相HPLC纯化(用0-60％MeCN的水溶液洗脱)，得到标题化合物(551mg)，MS测定值(ESI+):372.5(M+H)+。
步骤D:(R)-6-(1-((苄氧基)甲基)环丙基)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙 基)氨基)-2-甲基吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H,6H)-二酮
向6-(1-((苄氧基)甲基)环丙基)-4-氯-2-甲基吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H,6H)-二酮(138mg，0.37mmol)在二噁烷(1.6mL)中的溶液中加入(R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙胺盐酸盐(100mg，0.45mmol)、Xantphos-Pd-G3(70mg，0.07mmol)和Cs2CO3(363mg，1.11mmol)。将该反应混合物在微波照射下在130℃加热3hr。减压浓缩该反应混合物，并与来自使用1.11mmol规模的相同条件下进行的单独反应的粗物质合并。通过快速色谱法纯化合并的批次(用0-5％在DCM中的MeOH洗脱)，得到标题化合物(342mg)。MS测定值(ESI+):525.5(M+H)+。
步骤E:(R)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(1-(羟基甲基)环丙 基)-2-甲基吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H,6H)-二酮(实施例123)
在0℃将BBr3(1M的CH2Cl2溶液，0.02mL)加入到(R)-6-(1-((苄氧基)甲基)环丙基)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H,6H)-二酮(10mg，0.02mmol)在EA(1.0mL)中的溶液中，并在室温搅拌16hr。减压浓缩该反应化合物，并通过快速色谱法纯化(用0-5％在DCM中的MeOH洗脱)，随后通过HPLC纯化(用0-40％ MeCN水溶液洗脱)，得到标题化合物(6mg，70％收率)。MS测定值(ESI+):435.1(M+H)+。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm:8.15(1H)，7.53-7.43(2H)，7.23(1H)，7.20-7.16(1H)，6.91(1H)，5.20(1H)，3.99(1H)，3.72(1H)，3.41(3H)，1.62(3H)，1.31(2H)，1.19(2H)。
实施例124:(R)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(1-((3-氟氮杂环丁烷-1-基)甲基)环丙基)-2-甲基吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H,6H)-二酮
步骤A:(R)-苯磺酸(1-(4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-1, 7-二氧代-1,2-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-6(7H)-基)环丙基)甲基-4-甲酯
在0℃向(R)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(1-(羟基甲基)环丙基)-2-甲基吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H,6H)-二酮(20mg，0.05mmol)在DCM(0.5mL)中的溶液中加入4-甲苯磺酰氯(22mg，0.12mmol)、Et3N(14mg，0.14mmol)和4-二甲基氨基吡啶(6mg，0.05mmol)，并将该混合物在室温搅拌16hr。减压浓缩该反应化合物，并通过快速色谱法纯化，用0-5％在DCM中的MeOH洗脱，得到标题化合物(24mg，71％收率)。MS测定值(ESI+):589.2(M+H)+。
步骤B:(R)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(1-((3-氟氮杂环丁 烷-1-基)甲基)环丙基)-2-甲基吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H,6H)-二酮(实施例124)
在0℃向(R)-苯磺酸(1-(4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-1,7-二氧代-1,2-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-6(7H)-基)环丙基)甲基-4-甲酯(19mg，0.03mmol)和3-氟氮杂环丁烷盐酸盐(36mg，0.32mmol)在MeCN(0.4mL)中的溶液中加入DIPEA(83mg，0.65mmol)，将该混合物在60℃搅拌16hr。减压浓缩该反应化合物，并通过快速色谱法纯化(用0-5％在DCM中的MeOH洗脱)，随后通过制备型HPLC纯化(用0-50％MeCN的水溶液洗脱)，得到标题化合物(9mg，67％收率)。MS测定值(ESI+):492.6(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm:8.73(1H),7.62(1H),7.48(1H),7.38-7.04(3H),6.79(1H),5.30-4.97(2H),3.58(2H),3.31-3.27(2H),3.25(3H),3.21-3.10(2H),1.54(3H),1.22-0.96(4H)。
实施例125:(R)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(1-(氟甲基)环丙基)-2-甲基吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H,6H)-二酮
步骤A:2-(6-氯-5-(羟基甲基)-2-甲基-3-氧代-2,3-二氢哒嗪-4-基)-N-(1-(氟 甲基)环丙基)乙酰胺
在室温向4-氯-2-甲基-5,8-二氢-1H-吡喃并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H)-二酮(500mg，2.33mmol)在甲苯(5.0mL)中的溶液中加入1-(氟甲基)环丙胺盐酸盐(351mg，2.80mmol)和Et3N(283mg，2.80mmol)。将该混合物在80℃搅拌24h。浓缩该混合物，与来自使用0.23mmol规模的相同条件下进行的单独反应的粗物质合并。通过快速色谱法纯化合并的混合物，用0-5％在PE中的EA洗脱，得到标题化合物(612mg)。MS测定值(ESI+):304.4(M+H)+。
步骤B:4-氯-6-(1-(氟甲基)环丙基)-2-甲基吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H,6H)-二 酮
在室温向2-(6-氯-5-(羟基甲基)-2-甲基-3-氧代-2,3-二氢哒嗪-4-基)-N-(1-(氟甲基)环丙基)乙酰胺(602mg，1.98mmol)在MeCN(24.0mL)中的溶液中加入IBX(1.1g，3.96mmol)。将该混合物在80℃搅拌3h。过滤该反应化合物，浓缩，通过快速色谱法纯化(用0-10％在DCM中的MeOH洗脱)，得到标题化合物(354mg，62％收率)。MS测定值(ESI+):284.2(M+H)+。
步骤C:(R)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(1-(氟甲基)环丙 基)-2-甲基吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H,6H)-二酮(实施例125)
向4-氯-6-(1-(氟甲基)环丙基)-2-甲基吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H,6H)-二酮(50mg，0.18mmol)在二噁烷(0.6mL)中的溶液中加入((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙胺盐酸盐(48mg，0.21mmol)、Xantphos-Pd-G3(33mg，0.04mmol)和Cs2CO3(172mg，0.53mmol)。将该反应混合物在130℃在微波照射下搅拌3h。减压浓缩该反应化合物，并通过快速色谱法纯化(用0-10％在DCM中的MeOH洗脱)，随后通过制备型HPLC(0-40％ MeCN的水溶液)纯化，得到标题化合物(37mg，48％收率)。MS测定值(ESI+):437.5(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm:8.91(1H),7.62(1H),7.48(1H),7.38-7.06(3H),6.86(1H),5.19(1H),4.80-4.40(2H),3.24(3H),1.53(3H),1.40-1.27(4H)。
实施例126:(R)-6-(1-(1,1-二氟乙基)环丙基)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
步骤A:1-乙酰基环丙烷甲酸苄酯
向3-氧代丁酸苄酯(5.0g，26.01mmol)和K2CO3(9.0g，65.03mmol)在丙酮(10.0mL)中的溶液中加入1,2-二溴乙烷(9.8g，52.03mmol)。将该混合物在60℃搅拌16h。浓缩该反应混合物，通过快速色谱法纯化残余物(用2％在PE中的EA洗脱)，得到标题化合物(3.6g，63％收率)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm:7.40-7.31(5H)，5.17(2H)，2.45(3H)，1.53-1.47(4H)。
步骤B:1-(1,1-二氟乙基)环丙烷甲酸苄酯
在0℃向1-乙酰基环丙烷甲酸苄酯(2.0g，9.16mmol)在双(2-甲氧基乙基)氨基三氟化硫(20.0mL)中的溶液中加入EtOH(338mg，7.33mmol)。将该混合物在50℃搅拌16h。用Na2CO3水溶液(水溶液)使该混合物淬灭，并用DCM萃取。用无水Na2SO4洗涤有机层，过滤并浓缩。通过快速色谱法纯化残余物(用5％在PE中的EA洗脱)，得到标题化合物(1.4g，65％收率).1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm:7.38-7.31(5H)，5.14(2H)，1.93(3H)，1.34 -1.32(2H)，1.31-1.23(2H)。
步骤C:1-(1,1-二氟乙基)环丙烷-1-甲酸
在室温向1-(1,1-二氟乙基)环丙烷甲酸苄酯(1.4g，5.99mmol)在MeOH(20.0mL)中的溶液中加入10％ Pd/C(509mg)，然后将该反应混合物在50℃搅拌2h。过滤该混合物，并浓缩滤液，得到标题化合物(828mg，92％收率)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm:12.77(1H)，1.90(3H)，1.19-1.17(2H)，1.13-1.10(2H)。
步骤D:1-(1,1-二氟乙基)环丙烷甲酰胺
向1-(1,1-二氟乙基)环丙烷甲酸(2.0g，13.3mmol)在DMF(100mL)中的溶液中加入NH4Cl(10.7g，200mmol)、HOBT(1.8g，13.3mmol)、EDCI(5.1g，26.6mmol)和TEA(9.3mL，67mmol)，然后将该反应体系在室温搅拌16h。用NH4Cl(水溶液)使该混合物淬灭，并用EA萃取。用无水Na2SO4洗涤有机层，过滤并浓缩。通过快速色谱法纯化残余物(用10％在PE中的EA洗脱)，得到标题化合物(1.2g，60％收率)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm:6.21(1H)，5.62(1H)，1.82(3H)，1.30-1.24(2H)，1.10-1.07(2H)。
步骤E:(1-(1,1-二氟乙基)环丙基)氨基甲酸叔丁酯
向[苯基-(2,2,2-三氟乙酰基)氧基-茚满基]2,2,2-三氟乙酸酯(1.8g，4.18mmol)在t-BuOH(12.0mL)中的溶液中加入(1-(1,1-二氟乙基)环丙基)氨基甲酸叔丁酯(623mg，4.18mmol)。将该反应混合物在暗处在室温搅拌12h。浓缩该反应体系，通过快速色谱法纯化残余物(用10％在PE中的EA洗脱)，得到不纯的标题化合物(900mg)。将该物质不经进一步纯化即可使用。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm:1.72(3H)，1.49(9H)，1.1(2H)，0.94(2H)。步骤F:1- (1,1-二氟乙基)环丙胺盐酸盐
向N-[1-(1,1-二氟乙基)环丙基]氨基甲酸叔丁酯(900mg，粗品)中的溶液中加入HCl/二噁烷(4M，20mL)。将该反应体系在室温搅拌1h。真空浓缩该混合物，得到标题化合物(322mg，49％收率(历时2步))。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm:9.09(2H)，1.75(3H)，1.23-1.12(4H)。
步骤G:4-氯-6-(1-(1,1-二氟乙基)环丙基)-2-甲基吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H, 6H)-二酮
根据与实施例125步骤A和B类似的方式，以1-(1,1-二氟乙基)环丙胺盐酸盐为原料制备。MS测定值(ESI+):316.2[(M+H)+。
步骤E:(R)-6-(1-(1,1-二氟乙基)环丙基)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙 基)氨基)-2-甲基吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H,6H)-二酮(实施例126)
向4-氯-6-(1-(1,1-二氟乙基)环丙基)-2-甲基吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H,6H)-二酮(60mg，190μmol)在甲苯(0.5mL)中的溶液中加入(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟-苯基]乙胺(43mg，228μmol)、碳酸铯(185mg，0.57mmol)、Pd(OAc)2(9mg，38.01μmol)和BINAP(24mg，38μmol)。将该混合物在微波反应器中在100℃加热16h。浓缩该反应化合物，通过快速色谱法纯化残余物(用2％在DCM中的MeOH洗脱)，然后通过制备型HPLC(MeCN/H2O)纯化，得到标题化合物(21mg，24％收率)。MS测定值(ESI+):469.2[(M+H)+]。
实施例127:(R)-2-甲基-4-((1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-6-(1-甲基-2-氧杂双环[2.1.1]己-4-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
步骤A:2-(6-氯-5-(羟基甲基)-2-甲基-3-氧代-2,3-二氢哒嗪-4-基)-N-(1-甲 基-2-氧杂双环[2.1.1]己-4-基)乙酰胺
在0℃向4-氯-2-甲基-5,8-二氢吡喃并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(180mg，836μmol)在甲苯(5mL)中的溶液中加入1-甲基-2-氧杂双环[2.1.1]己-4-胺盐酸盐(150mg，1.00mmol)和三乙胺(140μL，1.00mmol)。将该反应混合物在80℃搅拌16hr。向该反应混合物中加入NaCl水溶液和DCM。浓缩有机层至干，并通过硅胶色谱法纯化残余物(用0％-5％在DCM中的MeOH洗脱)，得到标题化合物(190mg，69％收率)。MS测定值(ESI+):328.2[(M+H)+]。
步骤B:4-氯-2-甲基-6-(1-甲基-2-氧杂双环[2.1.1]己-4-基)-2,6-二氢吡啶并 [3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
向2-(6-氯-5-(羟基甲基)-2-甲基-3-氧代-2,3-二氢哒嗪-4-基)-N-(1-甲基-2-氧杂双环[2.1.1]己-4-基)乙酰胺(186mg，567μmol)在CH3CN(5mL)中的溶液中加入2-碘氧基苯甲酸(318mg，1.13mmol)。将该反应混合物在80℃搅拌3hr。浓缩该反应混合物，用DCM(20mL)稀释，通过硅藻土垫过滤。浓缩滤液，并通过硅胶柱色谱法纯化(用0％-5％在DCM中的MeOH洗脱)，得到标题化合物(110mg，63％收率)。MS测定值(ESI+):308.2[(M+H)+]。
步骤C:2-甲基-4-(((R)-1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-6-((1R, 4r)-1-甲基-2-氧杂双环[2.1.1]己-4-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施 例127)
向4-氯-2-甲基-6-(1-甲基-2-氧杂双环[2.1.1]己-4-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(40mg，130μmol)在二噁烷(1mL)中的溶液中加入(1R)-1-[2-甲基-3-(三氟甲基)苯基]乙胺(40mg，195μmol)、碳酸铯(127mg，390μmol)和Xantphos Pd G3(25mg，26.00μmol)。将该反应体系在100℃搅拌8hr。真空除去溶剂，并通过制备型TLC(DCM/MeOH＝20/1)、随后通过制备型HPLC(ACN/水/0.1％NH4HCO3)纯化残余物，得到标题化合物(8mg，13％收率)。MS测定值(ESI+):475.0[(M+H)+]。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.58(1H),7.73(1H),7.54(1H),7.36(1H),7.24(1H),6.81(1H),5.17(1H),3.91(2H),3.25(3H),2.54(3H),2.37(2H),2.20(2H),1.47(6H)。
实施例128和129:4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6-((R)-螺[2.2]戊-1-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例128，任意指定环丙基处的立体化学)和4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6-((S)-螺[2.2]戊-1-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例129，任意指定环丙基处的立体化学)
根据与实施例127类似的路径制备非对映异构体混合物。分离异构体，得到4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6-((R)-螺[2.2]戊-1-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例128，任意指定环丙基处的立体化学)和4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6-((S)-螺[2.2]戊-1-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例129，任意指定环丙基处的立体化学d)。手性HPLC:柱名:AS-3 4.6*100mm 3μm，MeOH[0.2％ NH3(7M的MeOH溶液)]，流速:3.0mL/min，温度:40℃。
实施例128:手性HPLC保留时间＝1.09min。MS测定值(ESI+):431.4(M+H)+。
实施例129:手性HPLC保留时间＝1.62min。MS测定值(ESI+):431.4(M+H)+。
实施例130和131:4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-((S)-6,6-二氟螺[2.5]辛-1-基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例130，任意指定环丙基处的立体化学)和4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-((R)-6,6-二氟螺[2.5]辛-1-基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例131，任意指定环丙基处的立体化学)
根据与实施例127基本上类似的路径制备非对映异构体混合物。通过手性SFC(柱:Regis(R,R)Whelk O1(4.6*100mm 3μm)，共溶剂:CO2/MeOH[0.2％NH3(7M的MeOH溶液)]＝60:40)分离异构体，得到4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-((S)-6,6-二氟螺[2.5]辛-1-基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例130，任意指定环丙基处的立体化学)和4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-((R)-6,6-二氟螺[2.5]辛-1-基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例131，任意指定环丙基处的立体化学)。手性HPLC:柱名:OJ-3 4.6*100mm 3.0μm，MeOH[0.2％ NH3(7M的MeOH溶液)]，流速:3.0mL/min，温度:40℃。
实施例130:手性HPLC保留时间＝1.63min。MS测定值(ESI+):509.5(M+H)+。
实施例131:手性HPLC保留时间＝1.80min。MS测定值(ESI+):509.5(M+H)+。
实施例132和133:4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-((R)-2,2-二甲基环丙基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例132，任意指定环丙基处的立体化学)和4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-((S)-2,2-二甲基环丙基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例133，任意指定环丙基处的立体化学):
根据与实施例127基本上类似的路径制备非对映异构体混合物。通过手性SFC(柱名:(R,R)Whelk-O1 4.6*100mm 3.5μm)分离异构体，得到4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)-乙基)氨基)-6-((R)-2,2-二甲基环丙基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例132，任意指定环丙基处的立体化学)和4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-((S)-2,2-二甲基环丙基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例133，任意指定环丙基处的立体化学)。手性HPLC:柱名:(R,R)Whelk-O1 4.6*100mm 3.0μm，MeOH[0.2％ NH3(7M的MeOH溶液)]，流速:3.0mL/min，温度:40℃。
实施例132:手性HPLC保留时间＝1.35min。MS测定值(ESI+):433.4(M+H)+。
实施例133:手性HPLC保留时间＝1.71min。MS测定值(ESI+):433.4(M+H)+。
实施例134:(R)-6-(3,3-二氟-1-甲基环丁基)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
根据与实施例127基本上类似的路径制备。MS测定值(ESI+):469.1(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.61(1H),7.66(1H),7.48(1H),7.37–7.09(3H),6.83(1H),5.23–5.16(1H),3.42–3.38(2H),3.25(3H),3.09–3.02(2H),1.68(3H),1.54(3H)。
实施例135和136:6-((1R,2S)-[1,1'-双)环丙烷)]-2-基)-4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例135，任意指定环丙基处的立体化学)和6-((1S,2R)-[1,1'-双)环丙烷)]-2-基)-4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例136，任意指定环丙基处的立体化学)
根据与实施例127基本上类似的路径，在步骤A中使用反式-2-环丙基环丙胺盐酸盐替代1-甲基-2-氧杂双环[2.1.1]己-4-胺盐酸盐制备非对映异构体混合物。通过手性SFC分离异构体(柱名:Daicel AS25*250mm 10μm)得到6-((1R,2S)-[1,1'-双)环丙烷)]-2-基)-4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例135，任意指定环丙基处的立体化学)和6-((1S,2R)-[1,1'-双)环丙烷)]-2-基)-4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例136，任意指定环丙基处的立体化学)。手性HPLC:柱名:AS-34.6*100mm 3.0μm，MeOH[0.2％NH3(7M的MeOH溶液)]，流速:3.0mL/min，温度:40℃。
实施例135:手性HPLC保留时间＝1.27min。MS测定值(ESI+):445.0(M+H)+。
实施例136:手性HPLC保留时间＝1.69min。MS测定值(ESI+):445.0(M+H)+。
实施例137和138:4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6-((1S,2S)-2-(三氟甲基)环丙基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例137，任意指定环丙基处的立体化学)和4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6-((1R,2R)-2-(三氟甲基)环丙基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例138，任意指定环丙基处的立体化学)
根据与实施例127基本上类似的路径，在步骤A中使用反式-2-(三氟甲基)环丙胺盐酸盐替代1-甲基-2-氧杂双环[2.1.1]己-4-胺盐酸盐制备非对映异构体混合物。通过手性SFC分离异构体(柱名:Daicel OZ-3，4.6*100mm 3μm，CO2/MeOH(0.2％甲醇氨)＝70/30)得到4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6-((1S,2S)-2-(三氟甲基)环丙基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例137，任意指定环丙基处的立体化学)和4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6-((1R,2R)-2-(三氟甲基)环丙基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例138，任意指定环丙基处的立体化学)。手性HPLC:柱名:OZ-34.6*100mm 3.0μm，MeOH[0.2％ NH3(7M的MeOH溶液)]，流速:3.0mL/min，温度:40℃。
实施例137:手性HPLC保留时间＝1.77min。MS测定值(ESI+):473.4(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.68(1H),7.62(1H),7.48(1H),7.23(3H),6.86(1H),5.20(1H),3.96–3.81(1H),3.25(3H),2.51(5H),1.99–1.88(1H),1.65(1H),1.53(3H)。
实施例138:手性HPLC保留时间＝2.41min。MS测定值(ESI+):473.4(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.68(1H),7.63(1H),7.49(1H),7.23(3H),6.85(1H),5.25–5.14(1H),3.94–3.81(1H),3.25(3H),1.99–1.88(1H),1.65(1H),1.53(3H)。
实施例139和140:6-((1S,5R)-3-乙酰基-3-氮杂双环[3.1.0]己-1-基)-4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例139，任意指定环丙基处的立体化学)和6-((1R,5S)-3-乙酰基-3-氮杂双环[3.1.0]己-1-基)-4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例140，任意指定环丙基处的立体化学):
步骤A:1-(4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-1,7-二-氧 代-1,7-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-6(2H)-基)-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-甲酸叔丁酯
根据基本上与实施例127类似的路径，在步骤A中使用1-氨基-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-甲酸叔丁酯替代1-甲基-2-氧杂双环[2.1.1]己-4-胺盐酸盐制备。MS测定值(ESI+):546.5(M+H)+。
步骤B:6-(3-氮杂双环[3.1.0]己-1-基)-4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基) 乙基)-氨基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
向1-(4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-1,7-二氧代-1,7-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-6(2H)-基)-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-甲酸叔丁酯(80mg，147μmol)在DCM(4mL)中的混合物中加入TFA(2mL)。将该混合物在RT搅拌2hr，然后浓缩。用NH3-MeOH(7M)将该混合物碱化至pH＝8，浓缩，得到粗标题化合物(65mg，粗品)。MS测定值(ESI+):446.4[(M+H)+]。
步骤C:6-(3-乙酰基-3-氮杂双环[3.1.0]己-1-基)-4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)- 2-氟-苯基)乙基)氨基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
向乙酸(16.7μL，292μmol)在DMF(2mL)中的混合物中加入HATU(83mg，219μmol)、TEA(61.0μL，438μmol)，随后加入6-(3-氮杂双环-[3.1.0]己-1-基)-4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(65mg，粗品)。将该混合物在rt搅拌2hr。用水稀释该混合物，萃取入EA(4mL*3)。用H2O(6mL*3)、盐水(6mL*3)洗涤合并的有机层，然后用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过制备型TLC(DCM:MeOH＝20:1)纯化残余物，得到标题化合物(37mg，52％收率)。MS测定值(ESI+):488.5[(M+H)+]。
步骤D:6-((1S,5R)-3-乙酰基-3-氮杂双环[3.1.0]己-1-基)-4-(((R)-1-(3-(二 氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例 139，任意指定环丙基处的立体化学)和6-((1R,5S)-3-乙酰基-3-氮杂双环[3.1.0]己-1- 基)-4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d] 哒嗪-1,7-二酮(实施例140，任意指定环丙基处的立体化学)
通过手性SFC分离6-(3-乙酰基-3-氮杂双环[3.1.0]己-1-基)-4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(37mg，75.9μmol)，得到标题化合物实施例139(9.0mg，19％收率)和实施例140(8.2mg，22％收率)。手性HPLC:柱名:(R,R)Whelk-O1 4.6*100mm 3.5μm，EtOH[1％NH3(7M的MeOH溶液)]，流速:3.0mL/min，温度:40℃。
实施例139:手性HPLC保留时间＝2.08min。MS测定值(ESI+):488.5[(M+H)+]。
实施例140:手性HPLC保留时间＝2.47min。MS测定值(ESI+):488.5[(M+H)+]。
实施例141和142:6-((1S,5R)-3-(环丙烷羰基)-3-氮杂双环[3.1.0]己-1-基)-4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例141，任意指定环丙烷处的立体化学)和6-((1R,5S)-3-(环丙烷羰基)-3-氮杂双环[3.1.0]己-1-基)-4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例142，任意指定环丙烷处的立体化学)
根据与实施例139/140基本上类似的路径，在步骤C中使用环丙烷甲酸替代乙酸制备，通过SFC Daicel OJ-3(4.6*100mm 3μm)EtOH[1％ NH3(7M的MeOH溶液)]对异构体进行手性分离，得到标题化合物实施例141(11mg，28％收率)和实施例142(12mg，29％收率).手性HPLC:柱名:OJ-3 4.6*100mm 3.0μm，EtOH[1％ NH3(7M的MeOH溶液)]，流速:3.0mL/min，温度:40℃。
实施例141:手性HPLC保留时间＝1.04min。MS测定值(ESI+):514.5[(M+H)+]。
实施例142:手性HPLC保留时间＝1.41min。MS测定值(ESI+):514.5[(M+H)+]。
实施例143和144:6-((R)-1-乙酰基-3-甲基吡咯烷-3-基)-4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例143，任意指定吡咯烷处的立体化学)和6-((S)-1-乙酰基-3-甲基吡咯烷-3-基)-4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例144，任意指定吡咯烷处的立体化学)
根据与实施例139/144基本上类似的路径，在步骤A中使用3-氨基-3-甲基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯替代使用1-氨基-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-甲酸叔丁酯制备。通过SFC(Daicel OD(25*250mm，10μm)，流动相:CO2/MeOH[0.2％ NH3(7M的MeOH溶液)]＝85/15)对异构体进行手性分离，得到实施例143(42mg，37％收率)和实施例144(41mg，36％收率)。手性HPLC:柱名:OD-3 4.6*100mm 3.0μm，MeOH[0.2％ NH3(7M的MeOH溶液)]，流速:3.0mL/min，温度:40℃。
实施例143:手性HPLC保留时间＝2.86min。MS测定值(ESI+):490.6[(M+H)+]。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.57(1H),7.64(1H),7.48(1H),7.39–7.08(3H),6.84(1H),5.20(1H),4.42(1H),3.76–3.56(2H),3.37(1H),3.24(3H),2.69(1H),2.46(1H),1.97(3H),1.56(6H)。
实施例144:手性HPLC保留时间＝3.90min。MS测定值(ESI+):490.6[(M+H)+]。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.57(1H),7.63(1H),7.49(1H),7.38–7.08(3H),6.83(1H),5.19(1H),4.42(1H),3.74–3.56(2H),3.46–3.33(1H),3.25(3H),2.69(1H),2.49–2.40(1H),1.98(3H),1.56(6H)。
实施例145:(R)-6-(2-氮杂双环[2.1.1]己-4-基)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
步骤A:4-(苄氧基羰基氨基)-2-氮杂双环[2.1.1]己烷-2-甲酸叔丁酯
向2-叔丁氧基羰基-2-氮杂双环[2.1.1]己烷-4-甲酸(800mg，3.52mmol)在甲苯(14.7mL)中的溶液中加入三乙胺(1.47mL，10.6mmol，1.47mL)，随后加入偶氮磷酸二苯酯(1.55g，5.63mmol)，并将该反应混合物加热至回流1h。然后将该反应混合物冷却至室温，加入苄醇(762mg，7.04mmol)。将得到的溶液加热至回流过夜。冷却至室温后，浓缩该反应混合物，并通过快速色谱法纯化(用0％-50％在PE中的EA洗脱)，得到标题化合物(917mg，78％收率)。MS测定值(ESI+):277.3[(M-tBu)+]。
步骤B:4-氨基-2-氮杂双环[2.1.1]己烷-2-甲酸叔丁酯
向4-(苄氧基羰基氨基)-2-氮杂双环[2.1.1]己烷-2-甲酸叔丁酯(917mg，3.17mmol)在甲醇(12mL)中的溶液中加入Pd/C(439mg，10wt％)，将该混合物在rt在氢气气氛中搅拌16h。过滤该混合物，并蒸发滤液，得到标题化合物(568mg，81％收率)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ:3.98(1H)，2.96(2H)，2.36(2H)，1.72–1.55(2H)，1.39(9H)。
步骤C:(R)-6-(2-氮杂双环[2.1.1]己-4-基)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基) 乙基)氨基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例145)
根据基本上与实施例139/140步骤A和B类似的路径，使用4-(苄氧基羰基氨基)-2-氮杂双环[2.1.1]己烷-2-甲酸叔丁酯替代1-氨基-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-甲酸叔丁酯制备。MS测定值(ESI+):446.5[(M+H)+]。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.57(1H),7.63(1H),7.48(1H),7.36(1H),7.29(1H),7.23(1H),7.17(1H),7.09(1H),6.79(1H),5.19(1H),3.61(1H),3.25(3H),3.04(2H),2.27–2.14(2H),2.04(2H),1.52(3H)。
实施例146:(R)-6-(2-乙酰基-2-氮杂双环[2.1.1]己-4-基)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
将乙酸(7mg，0.11mmol)、HATU(82mg，0.22mmol)和三乙胺(44mg，0.43mmol)在DMF(0.5mL)中的溶液搅拌15min，然后加入(R)-6-(2-氮杂双环[2.1.1]己-4-基)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例145，48mg，0.11mmol)，将该混合物搅拌16h。用DCM(60mL)稀释该混合物，并用水(50mL×2)洗涤。用Na2SO4洗涤有机层，过滤并浓缩，通过制备型HPLC(ACN/水/0.1％ NH4HCO3)纯化残余物，得到标题化合物(21mg，40％收率)。MS测定值(ESI+):488.5[(M+H)+]。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.55(1H),7.63(1H),7.49(1H),7.29(1H),7.23(1H),7.16(1H),6.84(1H),5.21(1H),4.64(1H),3.81–3.74(1H),3.63–3.55(1H),3.26(3H),2.43(1H),2.35(2H),2.28(1H),1.98(3H),1.53(3H)。
实施例147:(R)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(1-(二氟甲基)环丁基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
步骤A:2-(6-氯-5-(羟基甲基)-2-甲基-3-氧代-2,3-二氢哒嗪-4-基)-N-(1-(二 氟-甲基)环丁基)乙酰胺
向4-氯-2-甲基-5,8-二氢-2H-吡喃并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(200mg，932μmol)在甲苯(4.40mL)中的混合物中加入1-(二氟甲基)环丁烷-1-胺盐酸盐(147mg，931.94μmol)和三甲基铝(1M的甲苯溶液，1.40mL)。将该混合物在rt搅拌2hr，然后冷却至0℃，并用饱和NH4Cl淬灭。用EtOAc(4mL*3)萃取该混合物，随后用H2O(6mL*3)和盐水(6mL*3)洗涤合并的有机层，用硫酸钠干燥并浓缩。通过硅胶柱色谱法(用3％在DCM中的MeOH洗脱)，随后通过制备型TLC(DCM:MeOH＝20:1)纯化残余物，得到标题化合物(175mg，56％收率)。MS测定值(ESI+):336.3[(M+H)+]。
步骤B:(R)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(1-(二氟甲基)环丁 基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例147)
根据基本上与实施例127步骤B和C类似的路径，在步骤B中使用2-(6-氯-5-(羟基甲基)-2-甲基-3-氧代-2,3-二氢哒嗪-4-基)-N-(1-(二氟-甲基)环丁基)乙酰胺替代2-(6-氯-5-(羟基甲基)-2-甲基-3-氧代-2,3-二氢哒嗪-4-基)-N-(1-(氟甲基)环丙基)乙酰胺制备。MS测定值(ESI+):469.5[(M+H)+]。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.55(1H),7.61(1H),7.48(1H),7.40–7.06(3H),6.84(1H),6.46(1H),5.26–5.15(1H),3.25(3H),2.75(4H),2.06–1.81(2H),1.53(3H)。
实施例148:4-[[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟-苯基]乙基]氨基]-2-甲基-6-[(1S,5S)-3-氧杂双环[3.1.0]己-1-基]吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
根据基本上与实施例125类似的路径，在步骤A中使用(1S,5S)-3-氧杂双环[3.1.0]己-1-胺HCl替代1-(氟甲基)环丙胺盐酸盐制备。MS测定值(ESI+):447.0[(M+H)+]。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.91(1H),7.64(1H),7.48(1H),7.39–7.07(3H),6.84(1H),5.23–5.16(1H),4.10–4.08(1H),3.96–3.94(1H),3.84–3.80(2H),3.24(3H),2.26–2.22(1H),1.54–1.49(4H),1.20(1H)。
实施例149:(R)-6-(1-乙酰基-3-甲基氮杂环丁烷-3-基)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H,6H)-二酮
步骤A:3-(4-氯-2-甲基-1,7-二氧代-1,2-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-6(7H)-基)- 3-甲基氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯
根据基本上与实施例125步骤A和B类似的路径，在步骤A中使用3-氨基-3-甲基-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯替代1-(氟甲基)环丙胺盐酸盐制备。MS测定值(ESI+):381.5[(M+H)+]。
步骤B:4-氯-2-甲基-6-(3-甲基氮杂环丁烷-3-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H, 6H)-二酮2,2,2-三氟乙酸
在室温将3-(4-氯-2-甲基-1,7-二氧代-1,2-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-6(7H)-基)-3-甲基氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(125mg，328μmol)溶于TFA(1.5mL)。将该混合物在室温搅拌0.5h。真空浓缩该混合物，得到4-氯-2-甲基-6-(3-甲基氮杂环丁烷-3-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H,6H)-二酮2,2,2-三氟乙酸(92mg，粗品)。不经进一步纯化即可直接将残余物用于下一步。MS测定值(ESI+):281.1[(M+H)+]。
步骤C:6-(1-乙酰基-3-甲基氮杂环丁烷-3-基)-4-氯-2-甲基吡啶并[3,4-d]哒 嗪-1,7(2H,6H)-二酮
在室温向4-氯-2-甲基-6-(3-甲基氮杂环丁烷-3-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H,6H)-二酮2,2,2-三氟乙酸(74mg，263μmol)在DCM(4.0mL)中的溶液中加入乙酰氯(25mg，315μmol)。然后将三乙胺(106mg，1.05mmol)加入到该混合物中。将该混合物在室温搅拌1hr。用水使该反应混合物淬灭，并用DCM萃取。用硫酸钠干燥合并的有机层，过滤并浓缩。通过快速柱纯化残余物(用0-20％在DCM中的MeOH洗脱)，得到标题化合物(47mg，55％收率，2步)。MS测定值(ESI+):323.1[(M+H)+]。
步骤D:(R)-6-(1-乙酰基-3-甲基氮杂环丁烷-3-基)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟 苯基)乙基)氨基)-2-甲基吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H,6H)-二酮(实施例149)
在室温向(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟-苯基]乙胺(41mg，218μmol)在1,4-二噁烷(0.5mL)中的溶液中加入6-(1-乙酰基-3-甲基氮杂环丁烷-3-基)-4-氯-2-甲基吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H,6H)-二酮(47mg，146μmol)、Xantphos-Pd-G3(28mg，29μmol)和Cs2CO3(142mg，437μmol)。将该反应体系在120℃吹扫搅拌3h。浓缩该混合物。通过快速柱纯化残余物(用0-5％在DCM中的MeOH洗脱)，随后通过反相柱(C18，ACN/水)纯化，得到标题化合物(实施例149，32mg，46％收率)。MS测定值(ESI+):476.2[(M+H)+]。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.62(1H),7.64(1H),7.50(1H),7.36–7.06(3H),6.84(1H),5.21–5.18(1H),4.61–4.55(1H),4.49(1H),4.28–4.25(1H),4.02(1H),3.25(3H),1.83(3H),1.77(3H),1.55(3H)。
实施例150:(R)-6-(1-(环丙烷羰基)-3-甲基氮杂环丁烷-3-基)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
根据基本上与实施例149步骤C和D类似的路径，在步骤C中使用环丙烷羰基氯替代乙酰氯制备。MS测定值(ESI+):502.2[(M+H)+]。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.62(1H),7.65(1H),7.48(1H),7.36-7.06(3H),6.84(1H),5.23-5.16(1H),4.71-4.65(1H),4.52-4.41(2H),4.02(1H),3.25(3H),1.80(3H),1.63-1.58(1H),1.53(3H),0.78-0.67(4H)。
实施例151:(R)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(1-(1-甲氧基环丙烷-1-羰基)-3-甲基氮杂环丁烷-3-基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
步骤A:4-氯-6-(1-(1-甲氧基环丙烷-1-羰基)-3-甲基氮杂环丁烷-3-基)-2-甲 基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
将1-甲氧基环丙烷甲酸(9mg，74μmol)溶于无水DMF(0.5mL)，加入HATU(56mg，148μmol)、DIPEA(26μL，148μmol)。将该混合物在rt搅拌20min。然后加入4-氯-2-甲基-6-(3-甲基氮杂环丁烷-3-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮“实施例149/步骤B”(25mg，89μmol)，将该反应混合物在rt搅拌16hr。将该混合物溶于DCM，用水、盐水洗涤，用Na2SO4干燥，真空除去溶剂，通过制备型-TLC(CH3OH/DCM＝1:6)纯化残余物，得到标题化合物(20mg，71％收率)。MS测定值(ESI+):379.3[(M+H)+]。
步骤B:(R)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(1-(1-甲氧基环丙 烷-1-羰基)-3-甲基氮杂环丁烷-3-基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮 (实施例151)
将4-氯-6-(1-(1-甲氧基环丙烷-1-羰基)-3-甲基氮杂环丁烷-3-基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(20mg，52μmol)、(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟-苯基]乙胺；盐酸盐(17.87mg，79μmol)、Xantphos-Pd-G3(15mg，16μmol)和碳酸铯(51.6mg，158μmol)溶于二噁烷(2mL)。将该混合物在100℃搅拌2hr。过滤该混合物，用EA洗涤。减压浓缩该溶液，并通过快速柱纯化粗残余物(MeOH/DCM＝1/30)，得到标题化合物(3mg，10％收率)。MS测定值(ESI+):532.4[(M+H)+]。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.64(1H),7.65(1H),7.49(1H),7.37–7.09(3H),6.85(1H),5.26–5.11(1H),4.79(1H),4.52(1H),4.43(1H),4.07(1H),3.28(3H),3.25(3H),1.80(3H),1.54(3H),1.24(2H),0.99(2H)。
实施例152:(R)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6-(3-甲基氮杂环丁烷-3-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H,6H)-二酮
步骤A:(R)-叔丁基-3-(4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-1, 7-二氧代-1,2-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-6(7H)-基)-3-甲基氮杂环丁烷-1-甲酸酯
根据基本上与实施例125类似的路径，使用3-氨基-3-甲基氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯替代1-(氟甲基)环丙胺盐酸盐制备。MS测定值(ESI+):534.3[(M+H)+]。
步骤B:(R)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6-(3-甲基氮 杂环丁烷-3-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H,6H)-二酮(实施例152)
向(R)-3-(4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-1,7-二氧代-1,2-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-6(7H)-基)-3-甲基氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(105mg，0.20mmol)在二噁烷(2.5mL)中的溶液中加入HCl/二噁烷(4M，2.5mL)，将该混合物在室温搅拌2h。浓缩该反应混合物，并向残余物中加入NaHCO3(水溶液)，直至达到pH＝8-9。用乙酸乙酯萃取该溶液，用硫酸钠干燥有机层，过滤并浓缩。通过快速色谱法(用0-20％在DCM中的MeOH洗脱)，随后通过制备型HPLC(用0-60％ MeCN的水溶液洗脱)纯化残余物，得到标题化合物(实施例152，48mg，51％收率)。MS测定值(ESI+):434.7[(M+H)+]。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm:8.36(1H),7.59(1H),7.51-7.44(1H),7.37-7.04(2H),6.71(1H),6.51(1H),5.41(1H),5.18-5.08(1H),3.81(1H),3.57-3.50(2H),3.47-3.42(m,1H),3.15(3H),1.48(3H),1.44(3H)。
实施例153:(R)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(1-(1-氟环丙烷-1-羰基)-3-甲基氮杂环丁烷-3-基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
根据基本上与实施例146类似的路径，使用(R)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6-(3-甲基氮杂环丁烷-3-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮替代(R)-6-(2-氮杂双环[2.1.1]己-4-基)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮和1-氟环丙烷甲酸替代乙酸制备。MS测定值(ESI+):520.4[(M+H)+]。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.65(1H),7.65(1H),7.49(1H),7.38–7.05(3H),6.84(1H),5.27–5.14(1H),4.88(1H),4.57(1H),4.49(1H),4.12(1H),3.25(3H),1.81(3H),1.54(3H),1.32(2H),1.24(2H)。
实施例154:(R)-6-(1-乙酰基-3-(二氟甲基)氮杂环丁烷-3-基)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H,6H)-二酮
步骤A:1-乙酰基氮杂环丁烷-3-酮
在室温向氮杂环丁烷-3-酮盐酸盐(9.0g，83.69mmol)在DCM(225mL)中的溶液中加入Ac2O(17.1g，167mmol)。然后将三乙胺(21.2g，209mmol)加入到该混合物中。将该混合物在室温搅拌1h。浓缩该混合物。通过快速色谱法纯化残余物(用0-80％在PE中的EA洗脱)，得到标题化合物(8.0g，85％收率).1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:4.87(2H),4.77(2H),2.08(3H)。
步骤B:N-(1-乙酰基氮杂环丁烷-3-亚基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺
在室温向1-乙酰基氮杂环丁烷-3-酮(8.0g，70.72mmol)在THF(160mL)中的溶液中加入2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(10.3g，84.9mmol)和四乙醇钛(48.4g，212mmol)。将该混合物在80℃搅拌3hr。用NH4Cl(水溶液)使该混合物淬灭。过滤该反应混合物，用DCM萃取滤液。用硫酸钠干燥有机层，过滤并浓缩。通过快速色谱法纯化残余物(用0-5％在DCM中的MeOH洗脱)，得到标题化合物。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:5.35(1H),5.20–5.15(1H),4.94–4.83(2H),1.99(3H),1.28(9H)。
步骤C:N-(1-乙酰基-3-(二氟(苯基磺酰基)甲基)氮杂环丁烷-3-基)-2-甲基丙 烷-2-亚磺酰胺
在室温向N-(1-乙酰基氮杂环丁烷-3-亚基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(1.9g，8.78mmol)在THF(40mL)中的溶液中加入二氟甲基磺酰基苯(1.7g，8.78mmol)，然后在-78℃将LiHDMS(1M的THF溶液，10.5mL)加入到该混合物中。将该混合物在室温搅拌1h。用NH4Cl(水溶液)使该混合物淬灭，并用EA萃取。用硫酸钠干燥有机层，过滤并浓缩。通过快速色谱法纯化残余物(用0-5％在DCM中的MeOH洗脱)，得到标题化合物(700mg，20％收率)。MS测定值(ESI+):409.1[(M+H)+]。
步骤D:N-(1-乙酰基-3-(二氟甲基)氮杂环丁烷-3-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺
向N-(1-乙酰基-3-(二氟(苯基磺酰基)甲基)氮杂环丁烷-3-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(700mg，1.71mmol)在DMF(21mL)和NaOAc/HOAc(8M，2.1mL)中的混合物中一次性加入Mg(208mg，8.57mmol)。将得到的混合物在室温搅拌1h。用乙酸乙酯和NH4Cl(水溶液)稀释该混合物。分离有机相，并用乙酸乙酯萃取水相。用硫酸钠干燥合并的有机层，过滤并浓缩。通过快速色谱法纯化残余物(用0-5％在DCM中的MeOH洗脱)，得到标题化合物(289mg，63％收率)。MS测定值(ESI+):269.1[(M+H)+]。
步骤E:1-(3-氨基-3-(二氟甲基)氮杂环丁烷-1-基)乙酮
在室温向N-(1-乙酰基-3-(二氟甲基)氮杂环丁烷-3-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(289mg，1.08mmol)在1,4-二噁烷(2.0mL)中的混合物中加入HCl(4M的1,4-二噁烷溶液，2.2mL)。将得到的混合物搅拌3hr。浓缩该混合物，得到标题化合物HCl盐(216mg，粗品)。
在室温将残余物溶于DCM(5.0mL)，向其中加入NH3(7M的MeOH溶液，308μL)。将该混合物在室温搅拌1h。过滤该混合物，真空浓缩滤液，得到标题化合物(177mg，粗品)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ:5.95(1H)，4.28(1H)，4.15(1H)，3.87(1H)，3.75(1H)，1.90(3H)。
步骤F:N-(1-乙酰基-3-(二氟甲基)氮杂环丁烷-3-基)-2-(6-氯-5-(羟基甲基)- 2-甲基-3-氧代-2,3-二氢哒嗪-4-基)乙酰胺
在室温向4-氯-2-甲基-5,8-二氢吡喃并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(105mg，489.57μmol，1.0当量)在AcOH(35mg，587.48μmol，1.2当量)中的溶液中加入1-(3-氨基-3-(二氟甲基)氮杂环丁烷-1-基)乙酮(88mg，538.52μmol，1.1当量)。用N2吹扫该混合物，在110℃搅拌2h。真空浓缩该混合物。通过快速色谱法纯化残余物(用0-5％在DCM中的MeOH洗脱)，得到标题化合物(124mg，327.39μmol，67％收率，3步)。MS测定值(ESI+):379.2[(M+H)+]。
步骤G:(R)-6-(1-乙酰基-3-(二氟甲基)氮杂环丁烷-3-基)-4-((1-(3-(二氟甲 基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H,6H)-二酮(实施例154)
根据基本上与实施例127步骤B和C类似的路径，在步骤B中使用N-(1-乙酰基-3-(二氟甲基)氮杂环丁烷-3-基)-2-(6-氯-5-(羟基甲基)-2-甲基-3-氧代-2,3-二氢哒嗪-4-基)乙酰胺替代2-(6-氯-5-(羟基甲基)-2-甲基-3-氧代-2,3-二氢哒嗪-4-基)-N-(1-甲基-2-氧杂双环[2.1.1]己-4-基)乙酰胺制备。MS测定值(ESI+):512.2[(M+H)+]。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.63(1H),7.63(1H),7.51(1H),7.36–7.09(3H),6.92(1H),6.69(1H),5.24–5.17(1H),4.72–4.59(3H),4.32(1H),3.26(3H),1.85(3H),1.55(3H)。
实施例155:(R)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6-(3-(三氟甲基)双环[1.1.1]戊-1-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H,6H)-二酮
根据基本上与实施例127类似的路径，在步骤A中使用1-氨基-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-甲酸叔丁酯替代1-甲基-2-氧杂双环[2.1.1]己-4-胺盐酸盐制备。MS测定值(ESI+):499.2(M+H)+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.56(1H),7.65(1H),7.51(1H),7.36–7.09(3H),6.83(1H),5.24–5.18(1H),3.25(3H),3.71(6H),1.55(3H)。
实施例156:(R)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6-(3-(三氟甲基)氧杂环丁烷-3-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
步骤A:2-甲基-N-(氧杂环丁烷-3-亚基)丙烷-2-亚磺酰胺
向氧杂环丁烷-3-酮(10g，138.77mmol)在THF(30mL)中的溶液中加入2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(20.2g，167mmol)和四乙氧基钛(63.3g，278mmol)。将该反应体系在60℃搅拌24h。向该反应混合物中加入冰水(水溶液，500mL)，将该混合物搅拌20min。过滤该混合物，并用DCM(3*300mL)萃取滤液。用Na2SO4干燥合并的有机层。真空除去溶剂，并通过色谱法纯化残余物(用0％-70％在PE中的EA洗脱)，得到标题化合物(8.1g，33％收率)。MS测定值(ESI+):176.1(M+H)+。
步骤B:2-甲基-N-(3-(三氟甲基)氧杂环丁烷-3-基)丙烷-2-亚磺酰胺
在-30℃向2-甲基-N-(氧杂环丁烷-3-亚基)丙烷-2-亚磺酰胺(8g，45.65mmol)在THF(100mL)中的溶液中加入三甲基(三氟甲基)硅烷(10.4g，73.0mmol)和TBAF(1M，41.1mL)。将该反应体系在-30℃搅拌3h。用NH4Cl(水溶液，100mL)使反应淬灭，并用DCM(2*100mL)萃取该混合物。用Na2SO4干燥合并的有机层，并真空除去溶剂。通过快速柱色谱法纯化残余物(用30％-70％在PE中的EA洗脱)，得到标题化合物(1.1g，9.8％收率)。MS测定值(ESI+):246.2(M+H)+。
步骤C:3-(三氟甲基)氧杂环丁烷-3-胺盐酸盐
向2-甲基-N-(3-(三氟甲基)氧杂环丁烷-3-基)丙烷-2-亚磺酰胺(1.1g，4.5mmol)在二噁烷(15mL)中的溶液中加入HCl(4M，5.61mL)。将该反应体系在rt搅拌2h。真空除去溶剂，并将得到的固体与乙腈(2×10mL)一起研磨，得到标题化合物(710mg，89.2％收率)。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 9.57(3H)，4.90(2H)，4.75(2H)。
步骤D:3-(三氟甲基)氧杂环丁烷-3-胺
向3-(三氟甲基)氧杂环丁烷-3-胺盐酸盐(680mg，3.83mmol)在H2O(10mL)中的溶液中加入NaOH(1M，7.66mL)。将该反应体系在rt搅拌0.5h。用乙醚(3*20mL)萃取该混合物，并用Na2SO4干燥合并的有机层。真空除去溶剂，得到标题化合物(310mg，粗品)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 4.61(2H)，4.42(2H)，2.73(2H)。
步骤E:2-(6-氯-5-(羟基甲基)-2-甲基-3-氧代-2,3-二氢哒嗪-4-基)-N-(3-(三 氟甲基)氧杂环丁烷-3-基)乙酰胺
向3-(三氟甲基)氧杂环丁烷-3-胺(200mg，1.42mmol)中加入乙酸(79mg，1.31mmol)和4-氯-2-甲基-5,8-二氢吡喃并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(234mg，1.09mmol)。将该反应体系在110℃搅拌1h。浓缩该混合物，并通过快速柱色谱法纯化(用0％-5％在DCM中的MeOH洗脱)，得到标题化合物(174mg，45％收率)。MS测定值(ESI+):356.2(M+H)+。
步骤F:(R)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6-(3-(三氟甲 基)氧杂环丁烷-3-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例156)
按照与实施例127步骤B和C类似的方式制备标题化合物。MS测定值(ESI+):489.3[(M+H)+]。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.54(1H),7.60(1H),7.49(1H),7.36–7.09(3H),6.92(1H),5.36–5.13(3H),4.97(2H),3.25(3H),1.54(3H)。
实施例157和158:4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-8-甲氧基-2-甲基-6-((S)-3-(三氟甲基)四氢呋喃-3-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例157，任意指定四氢吡喃处的立体化学)和4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-8-甲氧基-2-甲基-6-((R)-3-(三氟甲基)四氢呋喃-3-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例158，任意指定四氢吡喃处的立体化学)
步骤A:8-溴-4-[[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟-苯基]乙基]氨基]-2-甲基-6-[3- (三氟甲基)四氢呋喃-3-基]吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
根据与实施例86步骤A类似的方法制备标题化合物。
步骤B:4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-8-甲氧基-2-甲基-6- ((S)-3-(三氟甲基)四氢呋喃-3-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例157， 任意指定四氢吡喃处的立体化学)和4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-8- 甲氧基-2-甲基-6-((R)-3-(三氟甲基)四氢呋喃-3-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1, 7-二酮(实施例158，任意指定四氢吡喃处的立体化学)
向8-溴-4-[[(1R)-1-[3-(二氟甲基)-2-氟-苯基]乙基]氨基]-2-甲基-6-[3-(三氟甲基)四氢呋喃-3-基]吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(400mg，0.68mmol)在MeOH(4mL)中的溶液中加入甲醇钠(222mg，4.13mmol)。将该反应体系在70℃在微波反应器中搅拌1h。用NH4Cl(水溶液)使反应淬灭，并用DCM(3*10mL)萃取该混合物。用Na2SO4干燥合并的有机层。真空除去溶剂，并通过制备型TLC(DCM/MeOH＝20/1)和手性-SFC(EtOH[1％NH3(7M的MeOH溶液)])纯化残余物，得到4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-8-甲氧基-2-甲基-6-((S)-3-(三氟甲基)四氢呋喃-3-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例157，任意指定四氢吡喃处的立体化学，25mg，14％收率)和4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-8-甲氧基-2-甲基-6-((R)-3-(三氟甲基)四氢呋喃-3-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例158，任意指定四氢吡喃处的立体化学，21.4mg，11％收率)。手性HPLC:柱名:OD-3 4.6*100mm 3.0μm，EtOH[1％NH3(7M的MeOH溶液)]，流速:3mL/min，温度:40℃。
实施例157:手性HPLC保留时间＝1.17min。MS测定值(ESI+):533.3[(M+H)+]。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:ppm 8.18(s,1H),7.60(t,J＝7.4Hz,1H),7.48(t,J＝6.8Hz,1H),7.37–7.08(m,3H),5.19(p,J＝6.8Hz,1H),4.99(d,J＝10.8Hz,1H),4.21–4.12(m,1H),4.02–3.98(m,1H),3.96–3.91(m,1H),3.75(s,3H),3.17(s,3H),3.10–3.01(m,1H),2.92–2.81(m,1H),1.53(d,J＝7.0Hz,3H)。
实施例158:手性HPLC保留时间＝2.60min。MS测定值(ESI+):533.3[(M+H)+]。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:ppm 8.16(s,1H),7.57(t,J＝7.2Hz,1H),7.48(t,J＝6.8Hz,1H),7.36–7.09(m,3H),5.17(p,J＝6.8Hz,1H),4.98(d,J＝10.8Hz,1H),4.26–4.13(m,1H),4.03–3.97(m,1H),3.93–3.90(m,1H),3.75(s,3H),3.18(s,3H),3.10–2.99(m,1H),2.91–2.79(m,1H),1.52(d,J＝7.0Hz,3H)。
实施例159:6-环丙基-4-((1-(3-氟-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2-甲基吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7(2H,6H)-二酮
按照与对实施例96/97步骤D所述类似的方式制备。MS测定值(ESI+):423.1[(M+H)+]。
实施例160:(R)-4-((1-(3,3-二氟-2,3-二氢苯并呋喃-7-基)乙基)氨基)-6-(1-(二氟甲基)环丙基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
按照基本上与实施例70步骤C类似的方式，以(R)-1-(3,3-二氟-2,3-二氢苯并呋喃-7-基)乙-1-胺盐酸盐(根据WO/2019/122129的方法制备)为原料制备。MS测定值(ESI+):465.0[(M+H)+]。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.90(1H),7.53(1H),7.48(1H),7.12(1H),7.09(1H),6.88(1H),6.30(1H),5.13(1H),4.85(2H),3.26(3H),1.51(3H),1.49–1.41(4H)。
实施例161和162:4-[[(1R)-1-[3-(1,1-二氟-2-甲氧基-乙基)-2-氟-苯基]乙基]氨基]-6-[1-(二氟甲基)环丙基]-2-甲基-吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例161)和4-[[(1S)-1-[3-(1,1-二氟-2-甲氧基-乙基)-2-氟-苯基]乙基]氨基]-6-[1-(二氟甲基)环丙基]-2-甲基-吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例162)
步骤A:2-(3-溴-2-氟苯基)-2,2-二氟乙-1-醇
在0℃向2-(3-溴-2-氟苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯(1.25g，4.21mmol)在THF(8mL)中的溶液中加入硼氢化锂(2M THF，3.16mL)。将该混合物加热至50℃，搅拌2hr。加热冷水，并用EtOAc萃取该混合物。用硫酸钠干燥有机层，过滤并浓缩。通过硅胶柱色谱法纯化残余物(用20％-30％在PE中的EA洗脱)，得到标题化合物(910mg，85％收率)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ:7.68(1H)，7.53(1H)，7.12(1H)，4.16–4.05(2H)，2.04(1H)。
步骤B:1-溴-3-(1,1-二氟-2-甲氧基乙基)-2-氟苯
在0℃向2-(3-溴-2-氟苯基)-2,2-二氟乙-1-醇(750mg，2.94mmol)在DMF(5mL)中的溶液中加入NaH(235mg，5.88mmol，60％的矿物油溶液)。将该反应体系在0℃搅拌30min。加入碘甲烷(626mg，4.41mmol，1.5当量)，然后将该混合物在rt搅拌30min。然后将该混合物冷却回0℃，并加入水，随后加入EA(10mL)。浓缩乙酸乙酯级分至干，并通过硅胶柱色谱法纯化残余物(用0％-5％在PE中的EA洗脱)，得到标题化合物。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ:7.66(1H)，7.52(1H)，7.11(1H)，3.95(2H)，3.43(3H)。
步骤C:1-(3-(1,1-二氟-2-甲氧基乙基)-2-氟苯基)乙-1-酮
向1-溴-3-(1,1-二氟-2-甲氧基乙基)-2-氟苯(800mg，2.97mmol)在二噁烷(5mL)中的溶液中加入三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡烷(1.29g，3.57mmol)、TEA(752mg，7.43mmol)和双(三苯膦)氯化钯(II)(418mg，595μmol)。将该反应体系在100℃搅拌16hr。向该混合物中加入KF(水溶液)，并将该反应体系在rt搅拌1hr。然后用4mL HCl(1M,二噁烷)处理该混合物。将该反应体系在rt搅拌1hr。用NaHCO3(水溶液)中和该混合物，并用DCM(3*10mL)萃取。用Na2SO4干燥合并的有机层。用硅胶柱色谱法纯化残余物(用5％-10％在PE中的EA洗脱)，得到标题化合物(400mg，粗品)。MS测定值(ESI+):233.2[(M+H)+]。
步骤D:N-(1-(3-(1,1-二氟-2-甲氧基乙基)-2-氟苯基)亚乙基)-2-甲基丙烷-2- 亚磺酰胺
将1-(3-(1,1-二氟-2-甲氧基乙基)-2-氟苯基)乙-1-酮(400mg，1.72mmol)、2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(313mg，2.58mmol)和乙醇钛(1.18g，5.17mmol)溶于THF(5mL)。将该混合物在80℃、N2气氛中搅拌16hr。将该混合物倾入冰水(5mL)，过滤，并用EtOAc(20mL)萃取。用Na2SO4干燥有机相，减压浓缩，然后通过硅胶柱色谱法纯化(用10％-20％在PE中的EA洗脱)，得到标题化合物(300mg，52％收率)。MS测定值(ESI+):336.3[(M+H)+]。
步骤E:N-(1-(3-(1,1-二氟-2-甲氧基乙基)-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚 磺酰胺
在0℃向N-(1-(3-(1,1-二氟-2-甲氧基乙基)-2-氟苯基)亚乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(300mg，894μmol)在MeOH(2mL)中的溶液中加入硼氢化钠(51mg，1.34mmol)，将该混合物在0℃搅拌30min。将冷水倾入该混合物，并用DCM萃取。用硫酸钠干燥有机相，过滤并浓缩。用硅胶柱色谱法纯化残余物(用70％-80％在PE中的EA洗脱)，得到标题化合物(200mg，66％收率)。MS测定值(ESI+):338.3[(M+H)+]。
步骤F:1-[3-(1,1-二氟-2-甲氧基-乙基)-2-氟-苯基]乙胺盐酸盐
将N-(1-(3-(1,1-二氟-2-甲氧基乙基)-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(200mg，592μmol)溶于HCl-二噁烷(4M，2mL)。将该溶液在RT搅拌1hr。除去溶剂，并将粗残余物混悬于乙腈。过滤该混合物，得到标题化合物(160mg，粗品)。MS测定值(ESI+):235.3[(M+H)+]。
步骤G:4-((1-(3-(1,1-二氟-2-甲氧基乙基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(1-(二氟 甲基)环丙基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
按照基本上与实施例70步骤C类似的方式，以1-[3-(1,1-二氟-2-甲氧基-乙基)-2-氟-苯基]乙胺盐酸盐(步骤F)为原料制备。MS测定值(ESI+):499.0[(M+H)+]。
步骤H:4-[[(1R)-1-[3-(1,1-二氟-2-甲氧基-乙基)-2-氟-苯基]乙基]氨基]-6- [1-(二氟甲基)环丙基]-2-甲基-吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例161)和4-[[(1S)- 1-[3-(1,1-二氟-2-甲氧基-乙基)-2-氟-苯基]乙基]氨基]-6-[1-(二氟甲基)环丙基]-2- 甲基-吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例162)
通过手性SFC(柱:Daicel OD(25*250mm，10μm)，CO2/MeOH[0.2％ NH3(7M的MeOH溶液)]＝80/20)分离外消旋混合物，得到4-[[(1R)-1-[3-(1,1-二氟-2-甲氧基-乙基)-2-氟-苯基]乙基]氨基]-6-[1-(二氟甲基)环丙基]-2-甲基-吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例161)和4-[[(1S)-1-[3-(1,1-二氟-2-甲氧基-乙基)-2-氟-苯基]乙基]氨基]-6-[1-(二氟甲基)环丙基]-2-甲基-吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例162)。Analytical手性HPLC:柱名:OD-3 4.6*100mm 3.0μm，MeOH[0.2％NH3(7M的MeOH溶液)]，流速:3mL/min，温度:40℃。
实施例161:保留时间＝1.05min。MS测定值(ESI+):499.0[(M+H)+]。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.88(s,1H),7.59(t,J＝7.2Hz,1H),7.41(t,J＝7.0Hz,1H),7.25(dd,J＝14.6,7.2Hz,2H),6.86(s,1H),6.30(t,J＝56.6Hz,1H),5.18(p,J＝6.8Hz,1H),3.98(t,J＝13.8Hz,2H),3.35(s,3H),3.23(s,3H),1.52(d,J＝6.8Hz,5H),1.41(s,2H)。
实施例162:保留时间＝1.43min。MS测定值(ESI+):499.0[(M+H)+]。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.88(s,1H),7.59(t,J＝7.2Hz,1H),7.41(t,J＝7.0Hz,1H),7.26(dd,J＝14.6,7.0Hz,2H),6.86(s,1H),6.30(t,J＝56.4Hz,1H),5.24–5.11(m,1H),3.98(t,J＝14.0Hz,2H),3.36(s,3H),3.23(s,3H),1.52(d,J＝6.8Hz,5H),1.41(s,2H)。
实施例163:(R)-6-(1-(二氟甲基)环丙基)-4-((1-(3-氟苯并呋喃-7-基)乙基)氨基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
按照基本上与实施例70步骤C类似的方式，以(R)-1-(3-氟苯并呋喃-7-基)乙-1-胺盐酸盐(根据WO/2019/122129的方法制备)为原料制备。MS测定值(ESI+):445.0[(M+H)+]。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.92(1H),8.29(1H),7.54(1H),7.42(1H),7.31(1H),7.24(1H),6.87(1H),6.30(1H),5.46(1H),3.19(3H),1.61(3H),1.51–1.41(4H)。
实施例164和165:4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6-((S)-3-(三氟甲基)四氢呋喃-3-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例164，任意指定四氢吡喃处的立体化学)和4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6-((R)-3-(三氟甲基)四氢呋喃-3-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例165，任意指定四氢吡喃处的立体化学)
步骤A:2-(6-氯-5-(羟基甲基)-2-甲基-3-氧代-2,3-二氢哒嗪-4-基)-N-(3-(三 氟甲基)四氢呋喃-3-基)乙酰胺
向3-(三氟甲基)四氢呋喃-3-胺(600mg，3.87mmol)中加入乙酸(186mg，3.09mmol)和4-氯-2-甲基-5,8-二氢吡喃并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(553mg，2.58mmol)。将该反应体系在110℃搅拌1h。然后浓缩该混合物，并通过快速柱色谱法纯化(用0％-3％在DCM中的MeOH洗脱)，得到标题化合物(280mg，29％)。MS测定值(ESI+):370.3[(M+H)+]。
步骤B:4-氯-2-甲基-6-(3-(三氟甲基)四氢呋喃-3-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d] 哒嗪-1,7-二酮
按照基本上与实施例125步骤B类似的方式制备标题化合物。MS测定值(ESI+):350.2[(M+H)+]。
步骤C:4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6-((S)-3-(三 氟甲基)四氢呋喃-3-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例164，任意指定四 氢吡喃处的立体化学)和4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6- ((R)-3-(三氟甲基)四氢呋喃-3-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例165， 任意指定四氢吡喃处的立体化学)
按照基本上与实施例127步骤C类似的方式制备非对映异构体混合物，通过手性SFC分离非对映异构体。手性SFC:(柱:Daicel OD-3(4.6*100mm，3μm)，流速:3.0mL/min，洗脱液:MeOH(0.2％7M NH3的MeOH溶液)，温度40℃)。手性HPLC条件:柱名:OD-3 4.6*100mm3.0μm，MeOH[0.2％ NH3(7M的MeOH溶液)]，流速:3mL/min，温度:40℃。
实施例164:手性HPLC保留时间＝1.24min。MS测定值(ESI+):503.5[(M+H)+]。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.59(1H),7.62(1H),7.49(1H),7.36–7.09(3H),6.89(1H),5.21(1H),4.99(1H),4.17–4.14(1H),4.01(1H),3.96–3.90(1H),3.24(3H),3.09–3.03(1H),2.93–2.86(1H),1.54(3H)。
实施例165:手性HPLC保留时间＝2.00min。MS测定值(ESI+):503.5[(M+H)+]。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.57(1H),7.60(1H),7.49(1H),7.36–7.09(3H),6.88(1H),5.19(1H),4.98(1H),4.19–4.16(1H),4.01(1H),3.96–3.90(1H),3.24(3H),3.11–3.01(1H),2.92–2.82(1H),1.54(3H)。
实施例166和167:4-(((R)-1-(3-氟苯并呋喃-7-基)乙基)氨基)-2-甲基-6-((S)-3-(三氟甲基)四氢呋喃-3-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例166，任意指定四氢吡喃处的立体化学)和4-(((R)-1-(3-氟苯并呋喃-7-基)乙基)氨基)-2-甲基-6-((R)-3-(三氟甲基)四氢呋喃-3-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(167，任意指定四氢吡喃处的立体化学)
按照基本上与实施例164/165步骤C类似的方式，以(R)-1-(3-氟苯并呋喃-7-基)乙-1-胺盐酸盐(根据WO/2019/122129的方法制备)为原料制备非对映异构体混合物。通过手性SFC分离非对映异构体。手性SFC:(柱:Daicel AD-3(4.6*100mm，3μm)，流速:3.0mL/min，洗脱液:CO2/MeOH[0.2％NH3(7M的MeOH溶液)]＝85/15，温度40℃)。手性HPLC:柱名:AD-3 4.6*100mm 3.0μm，MeOH[0.2％ NH3(7M的MeOH溶液)]，流速:3mL/min，温度:40℃。
实施例166:手性HPLC保留时间＝1.44min。MS测定值(ESI+):493.0[(M+H)+]。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.61(1H),8.30(1H),7.54(1H),7.43(1H),7.34(1H),7.30(1H),6.89(1H),5.49(1H),4.99(1H),4.16(1H),4.01(1H),3.96–3.91(1H),3.18(3H),3.10–3.01(1H),2.94–2.82(1H),1.62(3H)。
实施例167:手性HPLC保留时间＝2.19min。MS测定值(ESI+):493.0[(M+H)+]。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.59(1H),8.29(1H),7.54(1H),7.40(1H),7.34(1H),7.32(1H),6.89(1H),5.47(1H),4.99(1H),4.17(1H),4.00(1H),4.03–3.90(1H),3.19(3H),3.13–2.99(1H),2.93–2.80(1H),1.62(3H)。
实施例168和169:4-(((R)-1-(3,3-二氟-2,3-二氢苯并呋喃-7-基)乙基)氨基)-2-甲基-6-((S)-3-(三氟甲基)四氢呋喃-3-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例168，任意指定四氢吡喃处的立体化学)和4-(((R)-1-(3,3-二氟-2,3-二氢苯并呋喃-7-基)乙基)氨基)-2-甲基-6-((R)-3-(三氟甲基)四氢呋喃-3-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例169，任意指定四氢吡喃处的立体化学)
按照基本上与实施例164/165步骤C类似的方式，以(R)-1-(3,3-二氟-2,3-二氢苯并呋喃-7-基)乙-1-胺盐酸盐(根据WO/2019/122129的方法制备)为原料制备非对映异构体混合物。手性SFC:(柱:Daicel OD-3(4.6*100mm，3μm)，流速:3.0mL/min，洗脱液:(CO2/MeOH[0.2％NH3(7M的MeOH溶液)]＝75/25)，温度30℃)。手性HPLC:柱名:OD-3 4.6*100mm 3.0μm，MeOH[0.2％ NH3(7M的MeOH溶液)]，流速:3.0mL/min，温度:40℃。
实施例168:手性HPLC保留时间＝0.989min。MS测定值(ESI+):513.4[(M+H)+]。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.59(1H),7.54(1H),7.48(1H),7.22(1H),7.08(1H),6.90(1H),5.16(1H),4.99(1H),4.85(2H),4.16(1H),4.01(1H),3.97–3.89(1H),3.25(3H),3.09–3.03(1H),2.98–2.79(1H),1.52(3H)。
实施例169:手性HPLC保留时间＝2.13min。MS测定值(ESI+):513.4[(M+H)+]。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.57(1H),7.50(2H),7.22(1H),7.10(1H),6.89(1H),5.14(1H),4.99(1H),4.85(2H),4.17(1H),4.00(1H),3.96–3.90(1H),3.26(3H),3.12–3.01(1H),2.91–2.80(1H),1.52(3H)。
实施例170和171:6-((S)-1-乙酰基-3-(三氟甲基)吡咯烷-3-基)-4-(((R)-1-(3,3-二氟-2,3-二氢苯并呋喃-7-基)乙基)氨基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例170，任意指定吡咯烷处的立体化学)和6-((R)-1-乙酰基-3-(三氟甲基)吡咯烷-3-基)-4-(((R)-1-(3,3-二氟-2,3-二氢苯并呋喃-7-基)乙基)氨基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例171，任意指定吡咯烷处的立体化学)
根据与对实施例100/101步骤B所述类似的方式，以(R)-1-(3,3-二氟-2,3-二氢苯并呋喃-7-基)乙-1-胺盐酸盐(根据WO/2019/122129的方法制备)为原料制备标题化合物。手性HPLC:(柱:OD-3(4.6*100mm，3μm)，流速:3.0mL/min，洗脱液:MeOH(0.2％7M NH3的MeOH溶液)，温度40℃)。
实施例170:手性HPLC保留时间＝1.45min。MS测定值(ESI+):554.4[(M+H)+]。
实施例171:手性HPLC保留时间＝2.33min。MS测定值(ESI+):554.4[(M+H)+]。
实施例172和173:6-((S)-1-乙酰基-3-(三氟甲基)吡咯烷-3-基)-4-(((R)-1-(3-氟苯并呋喃-7-基)乙基)氨基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例172，任意指定吡咯烷处的立体化学)和6-((R)-1-乙酰基-3-(三氟甲基)吡咯烷-3-基)-4-(((R)-1-(3-氟苯并呋喃-7-基)乙基)氨基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例173，任意指定吡咯烷处的立体化学)
与对实施例100/101步骤B所述类似的方式，以(R)-1-(3-氟苯并呋喃-7-基)乙-1-胺盐酸盐(根据WO/2019/122129的方法制备)为原料制备。手性HPLC:(柱:OD-3(4.6*100mm，3μm)，流速:3.0mL/min，洗脱液:EtOH(1％7M NH3的MeOH溶液)，温度40℃)。
实施例172:手性HPLC保留时间＝1.47min。MS测定值(ESI+):534.4[(M+H)+]。
实施例173:手性HPLC保留时间＝2.48min。MS测定值(ESI+):534.4[(M+H)+]。
实施例174和175:(R)-4-((1-(3-(二氟(吡啶-4-基)甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(1-(二氟甲基)环丙基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮和(S)-4-((1-(3-(二氟(吡啶-4-基)甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(1-(二氟甲基)环丙基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
步骤A:N-甲氧基-N-甲基异烟酰胺
/>
在0℃向搅拌的异烟酸(30g，244mmol)和N,O-二甲基羟基胺盐酸盐(26.2g，268mmol)在DCM(500mL)中的溶液中滴加HATU(102g，268mmol)和DIEA(94.48g，731.06mmol)。将得到的混合物在室温搅拌过夜。用水(500mL)使反应淬灭。用CHCl3/i-PrOH(3/1，3×500mL)萃取得到的混合物。合并有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物(0-100％ EA/PE)，得到N-甲氧基-N-甲基异烟酰胺(30g，74％收率)。MS测定值(ESI+):167.10[(M+H)+]。
步骤B:(3-溴-2-氟苯基)(吡啶-4-基)甲酮
在-78℃向搅拌的1,3-二溴-2-氟-苯(38.2g，150mmol)在THF(1000mL)中的溶液中加入正丁基锂(60.2mL，150mmol，2.5M的THF溶液)。将得到的溶液在-78℃搅拌15min，然后在-78℃滴加少量THF中的N-甲氧基-N-甲基异琥珀酰亚胺(25g，150mmol)。将得到的溶液在-78℃搅拌30min。用水(500mL)使反应淬灭。用乙酸乙酯(3×1000mL)萃取得到的混合物。合并有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物(0-30％ EA/PE)，得到(3-溴-2-氟苯基)(吡啶-4-基)甲酮(25g，59％收率)。MS测定值(ESI+):279.85，281.85[(M+H)+]。
步骤C:4-((3-溴-2-氟苯基)二氟甲基)吡啶
在0℃、N2中向(3-溴-2-氟-苯基)-(4-吡啶基)甲酮(25g，89.3mmol)在DCM(100mL)中的溶液中加入DAST(122g，757mmol)。将得到的混合物在r.t.搅拌48h。将得到的混合物缓慢地倾入冰水(500mL)。用NaHCO3水溶液将该溶液的pH值调节至pH 6～7。用乙酸乙酯(3×1000mL)萃取得到的混合物。合并有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过硅胶色谱法纯化得到的残余物(0-30％ EA/PE)，得到4-((3-溴-2-氟苯基)二氟甲基)吡啶(16g，59％收率)。MS测定值(ESI+):301.85，303.85[(M+H)+]。
步骤D.1-(3-(二氟(吡啶-4-基)甲基)-2-氟苯基)乙-1-酮
在N2气氛中向4-((3-溴-2-氟苯基)二氟甲基)吡啶(4g，12.6mmol)和三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡烷(6.83g，18.9mmol)在二噁烷(50mL)中的混合物中加入Pd(PPh3)2Cl2(885mg，1.26mmol)和TEA(3.83g，37.8mmol)。将该混合物在100℃搅拌12h。冷却至室温后，将HCl(2M)滴加至pH～2，并将该混合物搅拌3h。过滤该混合物，用EtOAc(3×200Ml)萃取滤液。将合并的有机层倾入KF水溶液(50mL)，并搅拌20min。过滤该混合物，并用盐水洗涤有机层，并用Na2SO4干燥。减压除去溶剂，通过硅胶色谱法纯化残余物(0-30％ EA/PE)，得到1-(3-(二氟(吡啶-4-基)甲基)-2-氟苯基)乙-1-酮(2.5g，8.92mmol，70％收率)。MS测定值(ESI+):266.05[(M+H)+]。
步骤E.N-(1-(3-(二氟(吡啶-4-基)甲基)-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺 酰胺
将1-(3-(二氟(吡啶-4-基)甲基)-2-氟苯基)乙-1-酮(6g，22.6mmol)、2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(5.47g，45.2mmol)和Ti(OEt)4(20.6g，90.5mmol)在THF(100mL)中的溶液在80℃、N2气氛中搅拌2h。冷却至室温后，向该混合物中加入NaBH4(1.28g，33.9mmol)和MeOH(2mL)，在r.t.搅拌2h。用水稀释残余物，并过滤出固体。真空浓缩滤液，得到标题化合物(5g，13.50mmol，59％收率)。MS测定值(ESI+):371.05[(M+H)+]。
步骤F.1-(3-(二氟(吡啶-4-基)甲基)-2-氟苯基)乙-1-胺盐酸盐
向N-(1-(3-(二氟(吡啶-4-基)甲基)-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(5g，13.5mmol)在DCM(40mL)中的溶液中加入HCl(5mL，20.0mmol，4M的二噁烷溶液)。将得到的混合物在r.t.搅拌过夜。减压浓缩该混合物。通过制备型HPLC与如下条件纯化残余物(柱:Kinetex EVO C18，21.2*250mm，5mm；流动相A:水(0.05％HCl)，流动相B:ACN；流速:25mL/min；梯度:3％ B-27％ B，9min，27％ B；波长:254nm；RT1(min):8.72；运行数:0)，得到1-(3-(二氟(吡啶-4-基)甲基)-2-氟苯基)乙-1-胺盐酸盐(382mg，1.22mmol，9.03％收率)，为淡黄色固体。1H NMR(400MHz，DMSO-d6+D2O)δ8.77-8.75(2H)，7.83-7.77(2H)，7.61-7.58(2H)，7.51-7.47(1H)，4.62-4.55(1H)，2.61(3H)，1.48(3H)。MS测定值(ESI+):267.15[(M+H)+]。
步骤G:(R)-4-((1-(3-(二氟(吡啶-4-基)甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(1-(二 氟甲基)环丙基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例174)(S)-4-((1- (3-(二氟(吡啶-4-基)甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(1-(二氟甲基)环丙基)-2-甲基-2, 6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例175)
按照基本上与实施例70步骤C类似的方式，以1-(3-(二氟(吡啶-4-基)甲基)-2-氟苯基)乙-1-胺盐酸盐为原料制备。手性HPLC:(柱:OD-3(4.6*100mm，3μm)，流速:3.0mL/min，洗脱液:MeOH(0.2％7M NH3的MeOH溶液)，温度40℃)。
实施例174:手性HPLC保留时间＝1.14min。MS测定值(ESI+):532.3[(M+H)+]。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.84(1H),8.76(2H),7.63(1H),7.57(3H),7.34(1H),7.23(1H),6.84(1H),6.29(1H),5.06(1H),2.99(3H),1.51(2H),1.47(3H),1.40(2H)。
实施例175:手性HPLC保留时间＝1.52min。MS测定值(ESI+):532.4[(M+H)+]。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.84(1H),8.76(2H),7.63(1H),7.57(3H),7.34(1H),7.23(1H),6.84(1H),6.29(1H),5.06(1H),2.99(3H),1.51(2H),1.47(3H),1.40(2H)。
实施例176和177:(R)-4-((1-(3-(二氟(5-甲基吡嗪-2-基)甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(1-(二氟甲基)环丙基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮和(S)-4-((1-(3-(二氟(5-甲基吡嗪-2-基)甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(1-(二氟甲基)环丙基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
按照与对实施例174/175步骤A-G所述类似的方式，以5-甲基吡嗪-2-甲酸为原料制备。手性SFC:(柱:OD-3(4.6*100mm，3μm)，流速:3.0mL/min，洗脱液:CO2/MeOH[0.2％NH3(7M的MeOH溶液)]＝75/25，温度30℃)。手性HPLC:(柱:OD-3(4.6*100mm，3μm)，流速:3.0mL/min，洗脱液:MeOH(0.2％7M NH3的MeOH溶液)，温度40℃)。
实施例176:手性HPLC保留时间＝1.41min。MS测定值(ESI+):547.2[(M+H)+]。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:9.00(1H),8.84(1H),8.59(1H),7.65–7.55(2H),7.32(1H),7.20(1H),6.85(1H),6.29(1H),5.05(1H),3.07(3H),2.58(3H),1.51(2H),1.46(3H),1.40(2H)。
实施例177:手性HPLC保留时间＝2.23min。MS测定值(ESI+):547.2[(M+H)+]。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:9.01(1H),8.85(1H),8.60(1H),7.65–7.56(2H),7.33(1H),7.20(1H),6.86(1H),6.29(1H),5.05(1H),3.07(3H),2.59(3H),1.51(2H),1.46(3H),1.40(2H)。
实施例178:(R)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(1-(氟甲基)-2-氧杂双环[2.1.1]己-4-基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
步骤A.1-(氟甲基)-2-氧杂双环[2.1.1]己烷-4-甲腈
向1-(碘甲基)-2-氧杂双环[2.1.1]己烷-4-甲腈(4.0g，16.1mmol)在THF(30mL)中的溶液中加入TBAF(32.1mL，32.1mmol，1M的THF溶液)。将得到的混合物维持在氮气中，在80℃搅拌3h。冷却至rt后，用水(50mL)使反应淬灭。用乙酸乙酯(3×50mL)萃取得到的混合物。合并有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到1-(氟甲基)-2-氧杂双环[2.1.1]己烷-4-甲腈(2.2g，97％收率)。MS测定值(ESI+):142.1[M+H]+。
步骤B.1-(氟甲基)-2-氧杂双环[2.1.1]己烷-4-甲酸
向1-(氟甲基)-2-氧杂双环[2.1.1]己烷-4-甲腈(2.2g，15.6mmol)在THF(30mL)和H2O(10mL)中的溶液中加入LiOH(1.12g，46.8mmol)。将得到的混合物维持在氮气中，在80℃搅拌3h。冷却至rt后，用水(50mL)使反应淬灭。用5M HCl将该混合物酸化至pH＝4。用乙酸乙酯(3×250mL)萃取得到的混合物。合并有机层，无水硫酸钠用干燥，过滤并浓缩，得到标题化合物(1.8g，72％收率)。MS测定值(ESI+):160.1[(M+H)+]。
步骤C.(1-(氟甲基)-2-氧杂双环[2.1.1]己-4-基)氨基甲酸苄酯
向1-(氟甲基)-2-氧杂双环[2.1.1]己烷-4-甲酸(1.8g，11.2mmol)在甲苯(20mL)中的溶液中加入DPPA(4.10g，16.9mmol)、Et3N(2.27g，22.5mmol)和苄醇(4.86g，45.0mmol)。将得到的混合物维持在氮气中，在80℃搅拌过夜。冷却至rt后，用水(50mL)使反应淬灭，然后用碳酸氢钠调节至pH 6～7。然后用乙酸乙酯萃取该溶液，用水、盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，减压浓缩，得到粗产物。通过反相快速色谱法纯化粗产物(C18，CH3CN:H2O(0.05％ TFA)，得到标题化合物(2.4g，80％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.20(1H)，7.41-7.30(5H)，5.03(2H)，4.67-4.45(2H)，3.68(2H)，2.09-2.00(2H)，1.79-1.73(2H)。
步骤D:1-(氟甲基)-2-氧杂双环[2.1.1]己-4-胺氯化氢
向N-[1-(氟甲基)-2-氧杂双环[2.1.1]己-4-基]氨基甲酸苄酯(2400mg，9.05mmol)在EA(50mL)中的溶液中加入Pd/C(250mg，10wt％)。将烧瓶抽真空，用氮气吹扫3次，随后用氢气吹扫。将该混合物在30℃、H2气氛中搅拌6h。冷却至r.t后，通过硅藻土垫过滤该混合物，减压浓缩。将残余物溶于在二噁烷的4M HCl，并再次浓缩，得到标题化合物(1.40g，92％收率)。MS测定值(ESI+):132.20[(M-HCl+H)+]。19F NMR(400MHz，DMSO-d6)δ-73.884。
步骤E:(R)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-(1-(氟甲基)-2-氧 杂双环[2.1.1]己-4-基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮(实施例178)
根据与实施例127基本上类似的路径，以1-(氟甲基)-2-氧杂双环[2.1.1]己-4-胺盐酸盐为原料制备标题化合物。MS测定值(ESI+):479.2[(M+H)+]。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.58(1H),7.63(1H),7.49(1H),7.36–7.09(3H),6.84(1H),5.26–5.15(1H),4.81(1H),4.69(1H),3.98(2H),3.26(3H),2.46(2H),2.36–2.34(2H),1.53(3H)。
实施例179:(R)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6-(1-甲基-2-氧杂双环[2.1.1]己-4-基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
根据基本上与实施例127类似的路径制备。MS测定值(ESI+):461.0[(M+H)+]。
实施例180和181:(R)-4-((1-(4,4-二氟色满-8-基)乙基)氨基)-6-(1-(二氟甲基)环丙基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮和(S)-4-((1-(4,4-二氟色满-8-基)乙基)氨基)-6-(1-(二氟甲基)环丙基)-2-甲基-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
按照基本上与实施例95/96步骤D类似的方式，以1-(4,4-二氟色满-8-基)乙-1-胺盐酸盐(根据WO/2020/180770的方法制备)和4-氯-6-[1-(二氟甲基)环丙基]-2-甲基-吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮为原料制备。手性HPLC:柱:Cellulose-SC(4.6*100mm，3μm)，流速:3.0mL/min，洗脱液:MeOH(0.2％7M NH3的MeOH溶液)，温度40℃)。
实施例180:手性HPLC保留时间:2.69min。MS测定值(ESI+):479.4[(M+H)+]。
实施例181:手性HPLC保留时间:3.58min。MS测定值(ESI+):479.5[(M+H)+]。
实施例182:(R)-6-环丙基-2-甲基-4-((1-(萘-2-基)乙基)氨基)-2,6-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,7-二酮
根据如对实施例2所述类似的路径，使用(R)-1-(萘-2-基)乙-1-胺制备。MS测定值(ESI+):387.3(M+H)+。
生物学测定
SOS1-KRas(G12C)FRET测定
使用纯化的GST-标记的KRAS(res.1-169、G12C，基于Hillig等人，Proc Natl AcadSci USA(2019)；116(7):2551-2560纯化)和重组His10-SOS1(res.564-1049；基于Hillig等人纯化)测量SOS1:KRAS相互作用的抑制。在白色384方孔OptiPlate(PerkinElmer，目录号6007290)中，在PBS，0.1％ BSA，5mM MgCl2，0.0025％ Igepal，100mM KF，5mM DTT的缓冲液中，用0.5nM SOS1蛋白和2.5nM KRAS蛋白以20uL进行最终测定。用包含5nM GST-KRAS G12C和2nM抗-GST-Eu(K)(Cisbio，目录号61GSTKLA)的测定缓冲液中制备2x KRAS工作溶液，并在25℃下预孵育15分钟。将化合物在100％ DMSO中从2mM(阳性对照，化合物I-13，PCT公开号WO2018/115380)或20mM连续稀释，然后在测定缓冲液中按照1:20稀释，然后与SOS1蛋白溶液在25℃下孵育15分钟，所述SOS1蛋白与抗-6His-XL665 FRET供体(Cisbio，目录号61HisXL)以1:5混合，然后加入2x KRAS工作溶液。最终DMSO浓度为0.5％。将板在RT下孵育2hr，然后使用Envision以发射波长665nm和615nm测量FRET信号。使用以下等式将FRET信号转化为蛋白质-蛋白质相互作用的百分比：
％抑制＝100％-(C-N)/(P-N)*100％
C:化合物处理的信号
P:阳性对照(DMSO)的信号
N:阴性对照(未加入SOS1)的信号
使用Graph Pad Prism(Graph Pad Software，Inc，USA)与非线性回归分析获得IC50和Hill系数。
表A.SOS1和KRas(G12C)相互作用的抑制
/>
/>
/>
/>
/>
表面等离子体共振(SPR)SOS1结合测定
使用SPR测定法，用纯化的重组人SOS1底物(res.564-1049，具有N-末端Avi标记；基于Hillig等人，Proc Natl Acad Sci USA(2019)；116(7):2551-2560所述进行纯化和生物素化)测量与SOS1的结合。SPR测量使用Biacore 8K SPR仪器(GE Healthcare，Sweden)进行。在25℃使用预涂覆链霉亲和素的Series S SA传感器芯片(GE Healthcare，目录号BR100531)进行测定。使用补充有5％ DMSO的样品缓冲液作为运行缓冲液，将在样品缓冲液(20mM Tris HCl，150mM NaCl，1mM DTT，0.05％ TWEEN 20，1mM MgCl2，pH 8.0)中稀释的生物素化的SOS1捕获到芯片的一个流动池中至约3,000共振单位(RU)。将测定化合物在运行缓冲液中以100、50或0.5μM的连续稀释液以30μL/min的流速注射60s，并记录结合相。监测样品的解离600s。使用Biacore Insight软件(Biacore，GE Healthcare)进行数据处理。从在SOS1表面上记录的传感图中减去在没有捕获蛋白质的SA流动池上记录的传感图。运行缓冲液的空白注射用于双重参比，并将溶剂校正应用于所有样品传感图以校正缓冲液错配。在下，使用动力学或稳态(适用时)拟合模型估计KD，其描述了SOS1与化合物之间具有1:1结合的可逆平衡。
表B.选择的化合物对SOS1的结合亲和力
/>
/>
/>

Claims (20)

1.式(I)的化合物：
或其药学上可接受的盐，其中：
X为苯基、萘基、3-10元环烷基、3-10元杂环基或5-10元杂芳基，其各自任选地被1-3个独立选择的RA取代；
R1为C1-C6烷基、–(C1-C6烷基)-NRBRC、C1-C6羟基烷基或5-6元杂芳基；
R2为氢、卤素、氰基、羟基、-NRDRE、C1-C6烷基、任选地被3-10元环烷基或杂环基取代的C1-C6烷氧基、C(O)C1-C6烷基、任选地被1-3个氟取代的C1-C6羟基环烷基、任选地被1-3个氟取代的C1-C6羟基杂环基，或任选地被氨基取代的3-10元杂环基；
R3为
(A)C3-C8环烷基，其任选地被以下取代：羟基、氰基、C1-C6烷基或1-3个氟、C3-C6环烷基、任选地被1-3个氟取代的5-10元杂环基、被1-3个氟取代的3-10元–CH2-杂环基、C1-C6卤代烷基、C1-C6羟基烷基–C(O)NRFRG或C1-C6烷基，或
(B)3-10元杂环基，其任选独立地被一个或多个以下基团取代：卤素、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、-C(O)C1-C6烷基、任选地被卤素、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基取代的-C(O)C1-C6环烷基，或–C(O)NRFRG；
RA各自独立地选自一个或多个卤素、氰基、硝基、–(C1-C6烷基)p-NRHRI；C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷氧基、任选地被1-3个氟取代的C1-C6羟基烷基、任选独立地被一个或多个1-3个氟或C1-C6烷基取代的C1-C6烷氧基烷基、任选地被3-10元杂环基取代的C1-C6卤代烷基、任选地被1-3个氟取代的–CH2C(O)NRFRG、被1-3个氟取代的5-6元–CH2-杂芳基，和任选地被–(C1-C6烷基)p-NRJRK取代的3-10元环烷基；
RB、RC、RD、RE、RF、RG、RH、RI、RJ、RK各自独立地选自氢和C1-C6烷基，或RB和RC与它们所键合的原子一起可以形成5-10元杂环基，其任选地被一个或多个卤素、C1-C6烷基和C1-C6烷氧基取代；且
p为0或1。
2.权利要求1的化合物，其中R1为C1-C6烷基。
3.权利要求1的化合物，其中R1为甲基。
4.权利要求1的化合物，其中R2为氢。
5.权利要求1的化合物，其中R2为C1-C6烷氧基。
6.权利要求5的化合物，其中R2为甲氧基。
7.权利要求1的化合物，其中R3为任选地被羟基、氰基、5-10元杂芳基、C1-C6卤代烷基、–C(O)NRFRG或C1-C6烷基取代的C3-C6环烷基。
8.权利要求7的化合物，其中R3为任选地被羟基、氰基、5-10元杂芳基、C1-C6卤代烷基、–C(O)NRFRG或C1-C6烷基取代的环丙基。
9.权利要求1的化合物，其中R3为任选地被卤素、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、-C(O)C1-C6烷基或–C(O)NRFRG取代的3-10元杂环基。
10.权利要求9的化合物，其中R3为任选地被卤素、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、-C(O)C1-C6烷基或–C(O)NRFRG取代的四氢吡喃。
11.权利要求1的化合物，其中X为苯基、萘基、3-10元环烷基、3-10元杂环基或5-10元杂芳基，其各自任选地被1-3个独立选择的RA取代。
12.权利要求1的化合物，其中X选自:
13.权利要求1的化合物，其中RA各自独立地选自氰基、卤素、C1-C3烷基，和任选地被3-10元杂环基取代的C1-C3卤代烷基。
14.权利要求13的化合物，其中RA各自独立地选自氰基、甲基、氟、甲氧基、二氟甲基、三氟甲基、三氟甲氧基和羟基乙基。
15.权利要求14的化合物，其中至少一个RA为氟。
16.权利要求14的化合物，其中至少一个RA为二氟甲基。
17.化合物，选自实施例1-182中的化合物或其药学上可接受的盐。
18.药物组合物，包含权利要求1-17任一项的化合物或其药学上可接受的盐和至少一种药学上可接受的赋形剂。
19.对需要的个体治疗癌症的方法，包含向该个体施用有效量的权利要求1-17任一项的化合物。
20.权利要求19的方法，其中所述癌症为Ras途径-相关癌症。
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