TW202229272A - 治療癌症之方法 - Google Patents

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班傑明 Ｃ 米爾格拉姆
萊恩 Ｄ 懷特
珍 大衛 二世 聖
佩雷斯 安傑爾 古茲曼
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美商史考皮恩治療有限公司
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Abstract

本發明提供抑制表皮生長因子受體(EGFR、ERBB1)及/或人類表皮生長因子受體2 (HER2、ERBB2)之化學實體(例如化合物或醫藥學上可接受之鹽及/或水合物及/或共晶體及/或該化合物之藥物組合)。此等化學實體適用於例如治療其中因EGFR及/或HER2活化增加(例如過量)而促使個體(例如人類)中之病況、疾病或病症(例如癌症)之病變及/或症狀及/或進展的病況、疾病或病症。本發明亦提供含有其之組合物以及使用及製備其之方法。

Description

治療癌症之方法
本發明提供抑制表皮生長因子受體(EGFR、ERBB1)及/或人類表皮生長因子受體2 (HER2、ERBB2)之化學實體(例如化合物或醫藥學上可接受之鹽及/或水合物及/或共晶體及/或該化合物之藥物組合)。此等化學實體適用於例如治療其中因EGFR及/或HER2活化增加(例如過量)而促使個體(例如人類)中之病況、疾病或病症(例如癌症)之病變及/或症狀及/或進展的病況、疾病或病症。本發明亦提供含有其之組合物以及使用及製備其之方法。
表皮生長因子受體(EGFR、ERBB1)及人類表皮生長因子受體2 (HER2、ERBB2)為調節涉及腫瘤生長之細胞過程(包括增殖及分化)之蛋白質家族之成員。若干研究者已證明EGFR及HER2在發育及癌症中之作用(Reviewed in Salomon等人，Crit. Rev. Oncol. Hematol. (1995) 19:183-232，Klapper等人，Adv. Cancer Res. (2000) 77, 25-79以及Hynes及Stern，Biochim. Biophys. Acta (1994) 1198:165-184)。EGFR過度表現存在於至少70%之人類癌症中，諸如非小細胞肺癌(NSCLC)、乳癌、神經膠質瘤及前列腺癌。所有乳癌中約30%發生HER2過度表現。其亦涉及其他人類癌症，包括結腸、卵巢、膀胱、胃、食道、肺、子宮及前列腺。HER2過度表現亦與人類癌症(包括癌轉移)中之不良預後及早期復發相關。
因此，EGFR及HER2廣泛公認為設計及研發可特異性結合及抑制癌細胞中之酪胺酸激酶活性及其信號轉導路徑的目標，且因此可充當診斷或治療劑。例如，EGFR酪胺酸激酶抑制劑(TKI)為針對EGFR突變晚期非小細胞肺癌(NSCLC)患者之有效臨床療法。然而，絕大部分患者在用EGFR TKI成功治療之後出現疾病進展。常見抗性機制包括獲得性、二級突變T790M、C797S及EGFR外顯子20插入突變。例如，NSCLC腫瘤可具有EGFR外顯子20插入突變，對當前EGFR TKI具固有抗性。
另一蛋白質BUB1 (苯并咪唑出芽抑制解除同源物蛋白1 (Budding uninhibited by benzimidazole，BUB1))激酶之過度表現常常與增殖性細胞(包括癌細胞及組織)相關(Bolanos-Garcia VM及Blundell TL, Trends Biochem. Sci. 36, 141 , 2010)。此蛋白質為形成有絲分裂檢查點之蛋白質之複雜網路的必需部分。未滿足之有絲分裂檢查點之主要功能為使後期促進錯合物/細胞週期體(APC/C)處於非活性狀態。檢查點一得到滿足，APC/C泛素連接酶就靶向細胞週期素B及緊固素(securin)以便蛋白水解降解，導致成對染色體分離且自有絲分裂退出。
不完全有絲分裂檢查點功能與非整倍性及致腫瘤性有關(參見Weaver BA及Cleveland DW, Cancer Res. 67, 10103, 2007; King RW, Biochim Biophys Acta 1786, 4, 2008)。相比之下，已公認完全抑制有絲分裂檢查點會導致嚴重染色體誤分離且誘導腫瘤細胞凋亡(參見Kops GJ等人，Nature Rev. Cancer 5, 773, 2005；Schmidt M及Medema RH, Cell Cycle 5, 159, 2006；Schmidt M及Bastians H, Drug Res. Updates 10, 162, 2007)。因此，經由抑制BUB1激酶之有絲分裂檢查點抑制代表著用於治療增生性病症之方法，該等增生性病症包括實體腫瘤，諸如癌瘤、肉瘤、白血病及淋巴惡性腫瘤或與失控細胞增殖相關之其他病症。
本發明提供抑制表皮生長因子受體(EGFR、ERBB1)及/或人類表皮生長因子受體2 (HER2、ERBB2)之化學實體(例如化合物或醫藥學上可接受之鹽及/或水合物及/或共晶體及/或該化合物之藥物組合)。此等化學實體適用於例如治療其中EGFR及/或HER2活化增加(例如過量)而促使個體(例如人類)中之病況、疾病或病症(例如癌症)之病變及/或症狀及/或進展的病況、疾病或病症。本發明亦提供含有其之組合物以及使用及製備其之方法。
在一個態樣中，本發明提供式 ( I )化合物：
Figure 02_image003
式 (I)或其醫藥學上可接受之鹽，其中 R 1c 、 R 2a 、 R 2b 、 R 3a 、 R 3b 、 環 A 、 R 4 、 X 1 、 R 7 及 n可如本文中任何地方所定義。
在一個態樣中，本發明提供式 ( I )化合物：
Figure 02_image005
式 (I)或其醫藥學上可接受之鹽，其中： X 1 係選自由以下組成之群： (a)-O- L 1-R 5 ；及 (b)
Figure 02_image007
； L 1 及 L 2 獨立地選自由以下組成之群：鍵及視情況經1至6個 R a 取代之C 1 - 10伸烷基； R 5 係選自由以下組成之群： ● 包括5至10個環原子之雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R c 取代； ● 視情況經1至4個 R c 取代之C 6 - 10芳基； ● C 3 - 10環烷基或C 3 - 10環烯基，其各視情況經1至4個各自獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代； ●
Figure 02_image009
，其中 環 D為包括3至10個環原子之伸雜環基或伸雜環烯基，其中0至2個環原子(除鍵結至 R X 之環氮原子以外)為雜原子，其各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該伸雜環基或伸雜環烯基視情況經1至4個各自獨立地選自由側氧基及- R c 組成之群的取代基取代； ● 視情況經1至6個 R a 取代之-S(O) 0 - 2(C 1 - 6烷基)； ● -R g2 - R W 或- R g2 - R Y; ● -L 5 - R g ；及 ● - L 5-R g2 - R W 或- L 5-R g2-R Y ；其限制條件為當 L 1 為鍵時，則 R 5 不為視情況經1至6個 R a 取代之-S(O) 0 - 2(C 1 - 6烷基)；- L 5 - R g ；- L 5 - R g2 - R W ；或- L 5 - R g2 - R Y ； R 6 係選自由以下組成之群： H；鹵基；-OH；-N R eR f ；- R g ；- L 6 - R g ；- R g2 - R W 或- R g2 - R Y ；- L 6 - R g2 - R W 或- L 6 - R g2 - R Y ；及-C 1 - 6烷氧基或-S(O) 0 - 2(C 1 - 6烷基)，各自視情況經1至6個 R a 取代； L 5 及 L 6 獨立地為-O-、-S(O) 0 - 2、-NH或-N( R d )-； R W 為- L W-W ，其中 L W 為C(=O)、S(O) 1 - 2、OC(=O)*、NHC(=O)*、N R d C(=O)*、NHS(O) 1 - 2*或N R d S(O) 1 - 2*，其中星號表示與 W之連接點，及 W為C 2 - 6烯基；C 2 - 6炔基；或C 3 - 10丙二烯基，其中之每一者視情況經1至3個 R a 取代且進一步視情況經 R g 取代，其中 W經由 sp 2 或 sp雜化碳原子連接至 L W ，由此提供α,β-不飽和系統；及 R X 為C(=O)(C 1 - 6烷基)或S(O) 2(C 1 - 6烷基)，其中之每一者視情況經1至6個 R a 取代； R Y 係選自由以下組成之群： R g 及- ( L g ) g- R g ； R 1c 、 R 2a 、 R 2b 、 R 3a 及 R 3b 中之每一者獨立地選自由以下組成之群：H；鹵基；-OH；-C(O)OH或-C(O)NH 2；-CN；- R b ；- L b - R b ；-C 1 - 6烷氧基或-C 1 - 6硫代烷氧基，各自視情況經1至6個 R a 取代；N R eR f ； R g ；及- ( L g ) g- R g ；其限制條件為 R 1c 不為鹵基、-CN或-C(O)OH；或 或變數 R 1c 、 R 2a 、 R 2b 、 R 3a 及 R 3b 中之兩者與各自連接之 環 B環原子一起形成具有3至12個環原子之稠合飽和或不飽和環； ● 其中該等環原子中之0至2個各自為獨立選擇之雜原子(當-N( R 1c )-形成該稠合飽和或不飽和環之一部分時，除-N( R 1c )-外)，其中該等獨立選擇之雜原子中之每一者係選自由N、NH、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群；且 ● 其中3至12個環原子之稠合飽和或不飽和環視情況經1至4個獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代； 環 A為 R g ； R 4 係選自由以下組成之群：H及 R d ； 各 R 7 係獨立選擇之 R c ； n係0、1、2或3； R a 在每次出現時獨立地選自由以下組成之群：-OH；-鹵基；-N R eR f ；C 1 - 4烷氧基；C 1 - 4鹵代烷氧基；-C(=O)O(C 1 - 4烷基)；-C(=O)(C 1 - 4烷基)；-C(=O)OH；-CON R ' R ''；-S(O) 1 - 2N R ' R ''；-S(O) 1 - 2(C 1 - 4烷基)；及氰基； R b 在每次出現時獨立地為C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基或C 2 - 6炔基，其中之每一者視情況經1至6個 R a 取代； L b 在每次出現時獨立地為C(=O)；C(=O)O；S(O) 1 - 2；C(=O)NH*；C(=O)N R d *；S(O) 1 - 2NH*；或S(O) 1 - 2N( R d )*，其中星號表示與 R b 之連接點； R c 在每次出現時獨立地選自由以下組成之群：鹵基；氰基；C 1 - 10烷基，其視情況經1至6個獨立選擇之 R a 取代；C 2 - 6烯基；C 2 - 6炔基；視情況經C 1 - 4烷氧基或C 1 - 4鹵代烷氧基取代之C 1 - 4烷氧基；C 1 - 4鹵代烷氧基；-S(O) 1 - 2(C 1 - 4烷基)；-S(O)(=NH)(C 1 - 4烷基)；-N R eR f ；-OH；-S(O) 1 - 2N R ' R ''；-C 1 - 4硫代烷氧基；-NO 2；-C(=O)(C 1 - 10烷基)；-C(=O)O(C 1 - 4烷基)；-C(=O)OH；-C(=O)N R ' R ''；及-SF 5； R d 在每次出現時獨立地選自由以下組成之群：C 1 - 6烷基，其視情況經1至3個獨立選擇之 R a 取代；-C(O)(C 1 - 4烷基)；-C(O)O(C 1 - 4烷基)；-CON R ' R ''；-S(O) 1 - 2N R ' R ''；- S(O) 1 - 2(C 1 - 4烷基)；-OH；及C 1 - 4烷氧基； R e 及 R f 在每次出現時獨立地選自由以下組成之群：H；C 1 - 6烷基，其視情況經1至3個各自獨立地選自由N R ' R ''、-OH、C 1 - 6烷氧基、C 1 - 6鹵代烷氧基及鹵基組成之群的取代基取代；-C(O)(C 1 - 4烷基)；-C(O)O(C 1 - 4烷基)；-CON R ' R ''；-S(O) 1 - 2N R ' R ''；- S(O) 1 - 2(C 1 - 4烷基)；-OH；及C 1 - 4烷氧基； R g 在每次出現時獨立地選自由以下組成之群： ●  C 3 - 10環烷基或C 3 - 10環烯基，其中之每一者視情況經1至4個獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代； ●  包括3至10個環原子之雜環基或雜環烯基，其中1至3個環原子為雜原子，其各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜環基或雜環烯基視情況經1至4個獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代； ●  包括5至10個環原子之雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R c 取代；及 ●  視情況經1至4個 R c 取代之C 6 - 10芳基； L g 在每次出現時獨立地選自由以下組成之群：-O-、-NH-、-N R d 、-S(O) 0 - 2、C(O)及視情況經1至3個 R a 取代之C 1 - 3伸烷基； 各 g獨立地為1、2或3； 各 R g2 為二價 R g 基團；及 R '及 R ''在每次出現時獨立地選自由以下組成之群：H；-OH；及C 1 - 4烷基。
在一些實施例中，其限制條件為當 R 2a 、 R 2b 、 R 3a 及 R 3b 各自為H； R 1c 為H或甲基； 環 A為視情況經1至2個F取代之苯基； X 1 為-O- L 1 - R 5 ；且- L 1 為CH 2時，則： R 5 不為未經取代之苯基或未經取代之環丙基；且 其進一步限制條件為該化合物不為：3-((3-氟-2-甲氧基苯基)胺基)-2-(3-((1-苯基丙烷-2-基)氧基)吡啶-4-基)-1,5,6,7-四氫-4H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮。
在一個態樣中，本發明提供式 ( I )化合物：
Figure 02_image011
式 (I)或其醫藥學上可接受之鹽，其中： X 1 係選自由以下組成之群： (a)-O- L 1-R 5 ；及 (b)
Figure 02_image013
； L 1 及 L 2 獨立地選自由以下組成之群：鍵及視情況經1至6個 R a 取代之C 1 - 10伸烷基； R 5 係選自由以下組成之群： ●  包括5至10個環原子之雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R c 取代； ●  視情況經1至4個 R c 取代之C 6 - 10芳基； ●  C 3 - 10環烷基或C 3 - 10環烯基，其各視情況經1至4個各自獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代； ●
Figure 02_image015
，其中 環 D為包括3至10個環原子之伸雜環基或伸雜環烯基，其中0至2個環原子(除鍵結至 R X 之環氮原子以外)為雜原子，其各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該伸雜環基或伸雜環烯基視情況經1至4個各自獨立地選自由側氧基及- R c 組成之群的取代基取代； ● 視情況經1至6個 R a 取代之-S(O) 0 - 2(C 1 - 6烷基)； ● - R W ● -R g2 - R W 或- R g2 - R Y ； ● -L 5 - R g ；及 ● - L 5-R g2 - R W 或- L 5-R g2-R Y ； 其限制條件為當 L 1 為鍵時，則 R 5 不為視情況經1至6個 R a 取代之-S(O) 0 - 2(C 1 - 6烷基)；- L 5 - R g ；- L 5 - R g2 - R W ；或- L 5 - R g2 - R Y ； R 6 係選自由以下組成之群： ● H； ● 鹵基； ● -OH； ● -N R eR f ； ● - R g ； ● -R w ● - L 6 - R g ； ● -R g2 - R W 或- R g2 - R Y; ● - L 6 - R g2-R W 或- L 6 - R g2-R Y ；及 ● -C 1 - 6烷氧基或-S(O) 0 - 2(C 1 - 6烷基)，各自視情況經1至6個 R a 取代； L 5 及 L 6 獨立地為-O-、-S(O) 0 - 2、-NH或-N( R d )-； R W 為- L W-W ， 其中 L W 為C(=O)、S(O) 1 - 2、OC(=O)*、NHC(=O)*、N R d C(=O)*、NHS(O) 1 - 2*或N R d S(O) 1 - 2*，其中星號表示與 W之連接點，及 W為C 2 - 6烯基；C 2 - 6炔基；或C 3 - 10丙二烯基，其中之每一者視情況經1至3個 R a 取代且進一步視情況經 R g 取代，其中 W經由 sp 2 或 sp雜化碳原子連接至 L W ，由此提供α,β-不飽和系統；及 R X 為C(=O)(C 1 - 6烷基)或S(O) 2(C 1 - 6烷基)，其中之每一者視情況經1至6個 R a 取代； R Y 係選自由以下組成之群：- R g 及- (L g) g- R g ； R 1c 、 R 2a 、 R 2b 、 R 3a 及 R 3b 中之每一者獨立地選自由以下組成之群：H；鹵基；-OH；-C(O)OH或-C(O)NH 2；-CN；- R b ；- L b - R b ；-C 1 - 6烷氧基或-C 1 - 6硫代烷氧基，各自視情況經1至6個 R a 取代；-N R eR f ；- R g ；及- ( L g ) g- R g ；其限制條件為 R 1c 不為鹵基、-CN或-C(O)OH；或 變數 R 1c 、 R 2a 、 R 2b 、 R 3a 及 R 3b 中之兩者與各自連接之 環 B環原子一起形成具有3至12個環原子之稠合飽和或不飽和環； ● 其中該等環原子中之0至2個各自為獨立選擇之雜原子(當-N( R 1c )-形成該稠合飽和或不飽和環之一部分時，除-N( R 1c )-外)，其中該等獨立選擇之雜原子中之每一者係選自由N、NH、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群；且 ● 其中3至12個環原子之稠合飽和或不飽和環視情況經1至4個獨立地選自由側氧基、 R c 及 R W 組成之群的取代基取代； 環 A為 R g ； R 4 係選自由以下組成之群：H及 R d ； 各 R 7 係獨立選擇之 R c ； n係0、1、2或3； R a 在每次出現時獨立地選自由以下組成之群：-OH；-鹵基；-N R eR f ；C 1 - 4烷氧基；C 1 - 4鹵代烷氧基；-C(=O)O(C 1 - 4烷基)；-C(=O)(C 1 - 4烷基)；-C(=O)OH；-CON R ' R ''；-S(O) 1 - 2N R ' R ''；-S(O) 1 - 2(C 1 - 4烷基)；及氰基； R b 在每次出現時獨立地為C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基或C 2 - 6炔基，其中之每一者視情況經1至6個 R a 取代； L b 在每次出現時獨立地為C(=O)；C(=O)O；S(O) 1 - 2；C(=O)NH*；C(=O)N R d *；S(O) 1 - 2NH*；或S(O) 1 - 2N( R d )*，其中星號表示與 R b 之連接點； R c 在每次出現時獨立地選自由以下組成之群：鹵基；氰基；C 1 - 10烷基，其視情況經1至6個獨立選擇之 R a 取代；C 3 - 5環烷基；C 2 - 6烯基；C 2 - 6炔基；視情況經C 1 - 4烷氧基或C 1 - 4鹵代烷氧基取代之C 1 - 4烷氧基；C 1 - 4鹵代烷氧基；-S(O) 1 - 2(C 1 - 4烷基)；-S(O)(=NH)(C 1 - 4烷基)；-N R eR f ；-OH；-S(O) 1 - 2N R ' R ''；-C 1 - 4硫代烷氧基；-NO 2；-C(=O)(C 1 - 10烷基)；-C(=O)O(C 1 - 4烷基)；-C(=O)OH；-C(=O)N R ' R ''；及-SF 5； R d 在每次出現時獨立地選自由以下組成之群：C 1 - 6烷基，其視情況經1至3個獨立選擇之 R a 取代；-C(O)(C 1 - 4烷基)；-C(O)O(C 1 - 4烷基)；-CON R ' R ''；-S(O) 1 - 2N R ' R ''；- S(O) 1 - 2(C 1 - 4烷基)；-OH；及C 1 - 4烷氧基； R e 及 R f 在每次出現時獨立地選自由以下組成之群：H；視情況經1至3個C 1 - 3烷基取代之C 3 - 5環烷基；包括3至6個環原子之雜環基，其中1至3個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，雜環基視情況經1至4個獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代；及C 1 - 6烷基，其視情況經1至3個各自獨立地選自由N R ' R ''、-OH、C 1 - 6烷氧基、C 1 - 6鹵代烷氧基及鹵基組成之群的取代基取代；-C(O)(C 1 - 4烷基)；-C(O)O(C 1 - 4烷基)；-CON R ' R ''；-S(O) 1 - 2N R ' R ''；- S(O) 1 - 2(C 1 - 4烷基)；-OH；C 1 - 4烷氧基； R g 在每次出現時獨立地選自由以下組成之群： ● C 3 - 10環烷基或C 3 - 10環烯基，其中之每一者視情況經1至4個獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代； ● 包括3至10個環原子之雜環基或雜環烯基，其中1至3個環原子為雜原子，其各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜環基或雜環烯基視情況經1至4個獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代； ● 包括5至10個環原子之雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R c 取代；及 ● 視情況經1至4個 R c 取代之C 6 - 10芳基； L g 在每次出現時獨立地選自由以下組成之群：-O-、-NH-、-N R d 、-S(O) 0 - 2、C(O)及視情況經1至3個 R a 取代之C 1 - 3伸烷基； 各 g獨立地為1、2或3； 各 R g2 為二價 R g 基團；及 R '及 R ''在每次出現時獨立地選自由以下組成之群：H；-OH；及C 1 - 4烷基；
在一些實施例中，當 R 2a 、 R 2b 、 R 3a 及 R 3b 各自為H； R 1c 為H或甲基； 環 A為視情況經1至2個F取代之苯基； X 1 為-O- L 1 - R 5 ；且- L 1 為CH 2時，則： R 5 不為未經取代之苯基或未經取代之環丙基；且 其進一步限制條件為該化合物不為：3-((3-氟-2-甲氧基苯基)胺基)-2-(3-((1-苯基丙烷-2-基)氧基)吡啶-4-基)-1,5,6,7-四氫-4H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮。
本文中亦提供包含式(I)化合物之醫藥組合物或其醫藥學上可接受之鹽，以及醫藥學上可接受之載劑。
本文提供一種用於治療有需要個體之癌症的方法，該方法包含向個體投與治療有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽或如本文所提供之醫藥組合物。
本文亦提供一種用於治療有需要之個體之癌症的方法，該方法包含(a)確定該癌症與 EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調相關；及(b)向該個體投與治療有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽或如本文所提供之醫藥組合物。
本文提供一種治療個體之EGFR相關疾病或病症的方法，該方法包含向經鑑別或診斷患有EGFR相關癌症的個體投與治療有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽或如本文所提供之醫藥組合物。
本發明亦提供一種治療個體之EGFR相關疾病或病症的方法，該方法包含：確定個體之癌症為EGFR相關疾病或病症；及向該個體投與治療有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽或如本文所提供之醫藥組合物。本文進一步提供一種治療個體之EGFR相關癌症的方法，該方法包含向經鑑別或診斷患有EGFR相關癌症之個體投與治療有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，或如本文所提供之醫藥組合物。
本發明亦提供一種治療個體之EGFR相關癌症的方法，該方法包含：確定個體之癌症為EGFR相關癌症；及向該個體投與治療有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽或如本文所提供之醫藥組合物。
本文提供一種治療個體之方法，該方法包含向具有臨床記錄之個體投與治療有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽或如本文所提供之醫藥組合物，該記錄指示該個體具有 EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調。
本文亦提供一種治療患有癌症之個體的方法，其中該方法包含： (a) 在一段時間內向該個體投與一或多個劑量之第一EGFR抑制劑； (b) 在(a)後，確定獲自該個體之樣品中之癌細胞是否具有至少一個EGFR抑制劑抗性突變，該突變賦予癌細胞或腫瘤增加之針對步驟(a)之該第一EGFR抑制劑治療的抗性；及 (c) 若該個體已確定具有含有至少一個EGFR抑制劑抗性突變的癌細胞，該突變賦予癌細胞或腫瘤增加之針對步驟(a)之該第一EGFR抑制劑治療的抗性，則以單一療法或以與另一種抗癌劑結合之形式向該個體投與治療有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽；或 (d) 若該個體尚未確定具有含有至少一個EGFR抑制劑抗性突變的癌細胞，該突變賦予癌細胞或腫瘤增加之針對步驟(a)之該第一EGFR抑制劑治療的抗性，則向該個體投與額外劑量之步驟(a)的該第一EGFR抑制劑。
本文進一步提供一種治療患有癌症之個體的方法，其中該方法包含： (a) 確定獲自患有癌症且先前投與一或多個劑量之第一EGFR抑制劑之個體之樣品中的癌細胞是否具有一或多個EGFR抑制劑抗性突變，該突變賦予癌細胞或腫瘤增加之針對先前向該個體投與之該第一EGFR抑制劑治療的抗性；及 (b) 若該個體已確定具有至少一個EGFR抑制劑抗性突變的癌細胞，該突變賦予癌細胞或腫瘤增加之針對先前向該個體投與之該第一EGFR抑制劑治療的抗性，則以單一療法或以與另一種抗癌劑結合之形式向該個體投與治療有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽；或 (c) 若該個體尚未確定具有含有至少一個EGFR抑制劑抗性突變的癌細胞，該突變賦予癌細胞或腫瘤增加之針對先前向該個體投與之該第一EGFR抑制劑治療的抗性，則向該個體投與額外劑量之該第一EGFR抑制劑。
本文亦提供一種治療患有癌症之個體的方法，其中該方法包含： (a) 確定獲自患有癌症且先前投與一或多個劑量之第一EGFR抑制劑之個體之樣品中的癌細胞具有一或多個EGFR抑制劑抗性突變，該突變賦予癌細胞或腫瘤增加之針對先前向該個體投與之該第一EGFR抑制劑治療的抗性；及 (b) 以單一療法或以與另一種抗癌劑結合之形式向該個體投與治療有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。
本文進一步提供一種治療患有癌症之個體的方法，其中該方法包含： (a) 確定獲自患有癌症且先前投與一或多個劑量之第一EGFR抑制劑之個體之樣品中的癌細胞不具有一或多個EGFR抑制劑抗性突變，該突變賦予癌細胞或腫瘤增加之針對先前向該個體投與之該第一EGFR抑制劑治療的抗性；及 (b) 向該個體投與額外劑量之該第一EGFR抑制劑。
本發明亦提供一種用於抑制哺乳動物細胞中之EGFR的方法，該方法包含使哺乳動物細胞與有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽接觸。
本文亦提供一種用於治療有需要之個體之癌症的方法，該方法包含(a)確定該癌症與 HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調相關；及(b)向該個體投與治療有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽或如本文所提供之醫藥組合物。
本文進一步提供一種治療個體之HER2相關癌症之方法，該方法包含向經鑑別或診斷患有HER2相關癌症之個體投與治療有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽或如本文所提供之醫藥組合物。
本發明亦提供一種治療個體之HER2相關癌症之方法，該方法包含：確定該個體之癌症為HER2相關癌症；及向該個體投與治療有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽或如本文所提供之醫藥組合物。
本文提供一種治療患有癌症之個體的方法，該方法包含向具有臨床記錄之個體投與治療有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽或如本文所提供之醫藥組合物，該記錄指示該個體具有 HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調。
本文亦提供一種治療患有癌症之個體的方法，其中該方法包含： (a) 在一段時間內向該個體投與一或多個劑量之第一HER2抑制劑； (b) 在(a)後，確定獲自該個體之樣品中之癌細胞是否具有至少一個HER2抑制劑抗性突變，該突變賦予癌細胞或腫瘤增加之針對步驟(a)之該第一HER2抑制劑治療的抗性；及 (c) 若該個體已確定具有含有至少一個HER2抑制劑抗性突變的癌細胞，該突變賦予癌細胞或腫瘤增加之針對步驟(a)之該第一HER2抑制劑治療的抗性，則以單一療法或以與另一種抗癌劑結合之形式向該個體投與治療有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽；或 (d) 若該個體尚未確定具有含有至少一個HER2抑制劑抗性突變的癌細胞，該突變賦予癌細胞或腫瘤增加之針對步驟(a)之該第一HER2抑制劑治療的抗性，則向該個體投與額外劑量之步驟(a)的該第一HER2抑制劑。
本文進一步提供一種治療患有癌症之個體的方法，其中該方法包含： (a) 確定獲自患有癌症且先前投與一或多個劑量之第一HER2抑制劑之個體之樣品中的癌細胞是否具有一或多個HER2抑制劑抗性突變，該突變賦予癌細胞或腫瘤增加之針對先前向該個體投與之該第一HER2抑制劑治療的抗性；及 (b) 若該個體已確定具有至少一個HER2抑制劑抗性突變的癌細胞，該突變賦予癌細胞或腫瘤增加之針對先前向該個體投與之該第一HER2抑制劑治療的抗性，則以單一療法或以與另一種抗癌劑結合之形式向該個體投與治療有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽；或 (c) 若該個體尚未確定具有含有至少一個HER2抑制劑抗性突變的癌細胞，該突變賦予癌細胞或腫瘤增加之針對先前向該個體投與之該第一HER2抑制劑治療的抗性，則向該個體投與額外劑量之該第一HER2抑制劑。
本文亦提供一種治療患有癌症之個體的方法，其中該方法包含： (a) 確定獲自患有癌症且先前投與一或多個劑量之第一HER2抑制劑之個體之樣品中的癌細胞具有一或多個HER2抑制劑抗性突變，該突變賦予癌細胞或腫瘤增加之針對先前向該個體投與之該第一HER2抑制劑治療的抗性；及 (b) 以單一療法或以與另一種抗癌劑結合之形式向該個體投與治療有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。
本文進一步提供一種治療患有癌症之個體的方法，其中該方法包含： (a) 確定獲自患有癌症且先前投與一或多個劑量之第一HER2抑制劑之個體之樣品中的癌細胞不具有一或多個HER2抑制劑抗性突變，該突變賦予癌細胞或腫瘤增加之針對先前向該個體投與之該第一HER2抑制劑治療的抗性；及 (b) 向該個體投與額外劑量之該第一HER2抑制劑。
本發明亦提供一種用於抑制哺乳動物細胞中之HER2的方法，該方法包含使哺乳動物細胞與有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽接觸。
本文亦提供一種用於治療有需要之個體之癌症的方法，該方法包含(a)確定該癌症與 EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調相關且該癌症與 HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調相關；及(b)向該個體投與治療有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽或如本文所提供之醫藥組合物。
本文進一步提供一種治療個體之EGFR相關癌症及HER2相關癌症的方法，該方法包含向經鑑別或診斷患有EGFR相關癌症及HER2相關癌症之個體投與治療有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，或如本文所提供之醫藥組合物。
本發明亦提供一種治療個體之EGFR相關癌症及HER2相關癌症的方法，該方法包含：確定該個體之癌症為EGFR相關癌症及HER2相關癌症；及向該個體投與治療有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽或如本文所提供之醫藥組合物。
本文提供一種治療個體之方法，該方法包含向具有臨床記錄之個體投與治療有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽或如本文所提供之醫藥組合物，該記錄指示該個體具有 EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調及 HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調。
本發明亦提供一種用於抑制哺乳動物細胞中之EGFR及HER2的方法，該方法包含使哺乳動物細胞與有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽接觸。
除以上之外，本文提供一種用於抑制BUB (budding uninhibited by benzimidazole，BUB1-3)激酶之方法。在一些實施例中，本文所提供之方法包括抑制BUB11之方法。例如，用於抑制哺乳動物細胞中之BUB1的方法，該方法包含使哺乳動物細胞與有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽接觸。
其他實施例包括實施方式及/或申請專利範圍中所描述之實施例。
額外定義為便於理解本文所闡述之揭示內容，下文定義許多額外術語。一般而言，本文所使用之命名法及本文所描述之有機化學、醫藥化學及藥理學中之實驗室程序係熟知的且常用於此項技術中。除非另外規定，否則本文所使用之所有技術及科學術語一般具有與本發明所屬領域之一般技術者通常所理解的相同之含義。在本說明書通篇及附件中提到之專利、申請案、公開之申請案以及其他出版物各自以全文引用的方式併入本文中。
如本文中所使用，關於調配物、組合物或成分之術語「可接受」意謂對正治療之個體的整體健康不具有持續有害作用。
「API」係指活性醫藥成分。
如本文所使用，術語「有效量」或「治療有效量」係指在一定程度上減輕所治療之疾病或病況之一或多種症狀的所投與之化學實體的足夠量。結果包括減輕及/或緩解疾病之徵象、症狀或病因、或生物系統之任何其他所要之改變。例如，用於治療用途之「有效量」為使疾病症狀臨床上顯著減少所需之包含如本文所揭示之化合物之組合物的量。可使用諸如劑量遞增研究之任何適合技術測定任何個別情況下之適當「有效」量。
術語「賦形劑」或「醫藥學上可接受之賦形劑」意謂醫藥學上可接受之物質、組合物或媒劑，諸如液體或固體填充劑、稀釋劑、載劑、溶劑或囊封材料。在一個實施例中，各組分在以下意義上為「醫藥學上可接受的」：與醫藥調配物之其他成分相容且適合用於與人類及動物之組織或器官接觸而無過度毒性、刺激、過敏反應、免疫原性或其他問題或併發症，與合理益處/風險比相稱。參見例如 Remington : The Science and Practice of Pharmacy, 第21版.；Lippincott Williams & Wilkins: Philadelphia, PA, 2005； Handbook of Pharmaceutical Excipients, 第6版；Rowe等人編；The Pharmaceutical Press and the American Pharmaceutical Association: 2009； Handbook of Pharmaceutical Additives, 第3版；Ash及Ash編；Gower Publishing Company: 2007； Pharmaceutical Preformulation and Formulation, 第2版；Gibson編; CRC Press LLC: Boca Raton, FL, 2009。
術語「醫藥學上可接受之鹽」係指這樣一種化合物調配物，該調配物不會對投與其之生物體產生顯著刺激且不會消除該化合物之生物活性及特性。在某些情況下，醫藥上可接受之鹽藉由使本文所描述之化合物與諸如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸、甲磺酸、乙磺酸、對甲苯磺酸、柳酸及其類似物之酸反應獲得。在一些情況下，醫藥學上可接受之鹽藉由使本文所描述之具有酸性基團之化合物與鹼反應以形成鹽或藉由預先確定之其他方法來獲得，該鹽諸如銨鹽；鹼金屬鹽，諸如鈉鹽或鉀鹽；鹼土金屬鹽，諸如鈣鹽或鎂鹽；有機鹼之鹽，諸如二環己胺； N -甲基-D-還原葡糖胺；參(羥基甲基)甲胺及與胺基酸諸如精胺酸、離胺酸的鹽及其類似物。藥理學上可接受之鹽不受特定限制，只要其可用於藥劑即可。本文所描述之化合物與鹼形成的鹽的實例包括以下：其與無機鹼，諸如鈉、鉀、鎂、鈣及鋁的鹽；其與有機鹼，諸如甲胺、乙胺及乙醇胺的鹽；其與基礎胺基酸，諸如離胺酸及鳥胺酸的鹽；及銨鹽。鹽可為酸加成鹽，其藉由使用以下之酸加成鹽來特定例示：礦物酸，諸如鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸、硝酸及磷酸；有機酸，諸如甲酸、乙酸、丙酸、草酸、丙二酸、丁二酸、反丁烯二酸、順丁烯二酸、乳酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、甲磺酸及乙磺酸；酸性胺基酸，諸如天冬胺酸及麩胺酸。
術語「醫藥組合物」係指本文所描述之化合物與其他化學組分(在本文中通稱為「賦形劑」)諸如載劑、穩定劑、稀釋劑、分散劑、懸浮劑及/或增稠劑之混合物。醫藥組合物有助於向生物體投與化合物。此項技術中存在多種投與化合物之技術，其包括但不限於：經直腸、口服、靜脈內、氣霧劑、非經腸、經眼、經肺及表面投與。
術語「個體」係指動物，包括(但不限於)靈長類動物(例如人類)、猴、牛、豬、綿羊、山羊、馬、狗、貓、兔、大鼠或小鼠。術語「個體」及「患者」在本文中關於例如哺乳動物個體(諸如人類)時可互換使用。
術語「鹵基」係指氟(F)、氯(Cl)、溴(Br)或碘(I)。
術語「側氧基」係指二價雙鍵鍵結之氧原子(亦即，「=O」)。如本文所用，側氧基連接至碳原子以形成羧基。
術語「烷基」係指含有指定數目個碳原子之飽和非環直鏈或分支鏈烴基。例如，C 1 - 10指示基團可在其中具有1至10個(包括端點)碳原子。烷基可未經取代或經一或多個取代基取代。非限制性實例包括甲基、乙基、異丙基、三級丁基、正己基。如在本文中使用之術語「飽和」意謂在組成碳原子與氫及/或如本文所定義之其他取代基所佔據的其他可用化合價之間僅存在單鍵。
術語「鹵烷基」係指一或多個氫原子經獨立選擇之鹵基替換之烷基。
術語「烷氧基」係指-O-烷基(例如，-OCH 3)。
術語「伸烷基」係指二價烷基(例如-CH 2-)。類似地，諸如「伸環烷基」及「伸雜環基」之術語分別係指二價環烷基及雜環基。為避免疑問，在「伸環烷基」及「伸雜環基」中，兩個基團可位於同一環碳原子上(例如成對雙基，諸如
Figure 02_image017
或
Figure 02_image019
)或不同環原子上(例如環碳及/或氮原子(例如鄰接環碳及/或氮原子)) (例如
Figure 02_image021
Figure 02_image023
)。
術語「烯基」係指可為具有一或多個碳-碳雙鍵之直鏈或分支鏈之非環烴鏈。烯基部分含有指定數目個碳原子。例如，C 2 - 6指示基團可在其中具有2至6個(包括端點)碳原子。烯基可未經取代或經一或多個取代基取代。烯基可為反式或順式的。
術語「炔基」係指可為具有一或多個碳-碳參鍵之直鏈或分支鏈之非環烴鏈。炔基部分含有指定數目個碳原子。例如，C 2 - 6指示基團可在其中具有2至6個(包括端點)碳原子。炔基可未經取代或經一或多個取代基取代。
術語「芳基」係指6-20個碳之單環、雙環、三環或多環基團，其中該系統中之至少一個環係芳族環(例如6個碳之單環、10個碳之雙環或14個碳之三環芳環系統)；且其中每個環之0、1、2、3或4個原子可經取代基取代。芳基之實例包括苯基、萘基、四氫萘基及其類似基團。
如本文所使用，術語「環烷基」係指具有例如3至20個環碳，較佳地具有3至16個環碳，且更佳地具有3至12個環碳或3-10個環碳或3-6個環碳之環狀飽和烴基，其中環烷基可視情況經取代。環烷基之實例包括但不限於環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環庚基及環辛基。環烷基可包括多個稠合及/或橋接環。稠合/橋連環烷基之非限制性實例包括：雙環[1.1.0]丁烷、雙環[2.1.0]戊烷、雙環[1.1.1]戊烷、雙環[3.1.0]己烷、雙環[2.1.1]己烷、雙環[3.2.0]庚烷、雙環[4.1.0]庚烷、雙環[2.2.1]庚烷、雙環[3.1.1]庚烷、雙環[4.2.0]辛烷、雙環[3.2.1]辛烷、雙環[2.2.2]辛烷及其類似物。環烷基亦包括螺環(例如螺環雙環，其中兩個環僅經由一個原子連接)。螺環環烷基之非限制性實例包括螺[2.2]戊烷、螺[2.5]辛烷、螺[3.5]壬烷、螺[3.5]壬烷、螺[3.5]壬烷、螺[4.4]壬烷、螺[2.6]壬烷、螺[4.5]癸烷、螺[3.6]癸烷、螺[5.5]十一烷及其類似物。如本文所使用，術語「飽和」意謂在組成碳原子之間僅存在單鍵。
如本文所使用，術語「環烯基」意謂具有3至20個環碳，較佳地具有3至16個環碳，且更佳地具有3至12個環碳或3-10個環碳或3-6個環碳之部分不飽和環狀烴基，其中環烯基可視情況經取代。環烯基之實例包括但不限於環戊烯基、環己烯基、環庚烯基及環辛烯基。作為部分不飽和環狀烴基，環烯基可具有任何不飽和度，其限制條件為環中存在一或多個雙鍵；環系統中之環均不為芳環；且環烯基總體上不完全飽和。環烯基可包括多個稠環及/或橋接環及/或螺環。
如本文所用，術語「雜芳基」意指具有5至20個環原子，或者5、6、9、10或14個環原子之單環、雙環、三環或多環基團；其中該系統中之至少一個環含有一或多個獨立地選自由N、O及S組成之群的雜原子，且該系統中之至少一個環為芳族的(但不必為含有雜原子之環，例如四氫異喹啉基，例如四氫喹啉基)。雜芳基可未經取代或經一或多個取代基取代。雜芳基之實例包括噻吩基、吡啶基、呋喃基、㗁唑基、㗁二唑基、吡咯基、咪唑基、三唑基、噻二唑基、吡唑基、異㗁唑基、噻二唑基、哌喃基、吡𠯤基、嘧啶基、嗒𠯤基、三𠯤基、噻唑基苯并噻吩基、苯并㗁二唑基、苯并呋喃基、苯并咪唑基、苯并三唑基、㖕啉基、吲唑基、吲哚基、異喹啉基、異噻唑基、㖠啶基、嘌呤基、噻吩并吡啶基、吡啶并[2,3- d]嘧啶基、吡咯并[2,3- b]吡啶基、喹唑啉基、喹啉基、噻吩并[2,3- c]吡啶基、吡唑并[3,4- b]吡啶基、吡唑并[3,4- c]吡啶基、吡唑并[4,3- c]吡啶、吡唑并[4,3- b]吡啶基、四唑基、𠳭烷、2,3-二氫苯并[ b][1,4]二氧雜環己烯、苯并[ d][1,3]間二氧雜環戊烯、2,3-二氫苯并呋喃、四氫喹啉、2,3-二氫苯并[ b][1,4]氧硫雜環己二烯、異吲哚啉及其他。在一些實施例中，雜芳基選自噻吩基、吡啶基、呋喃基、吡唑基、咪唑基、異吲哚啉基、哌喃基、吡𠯤基及嘧啶基。出於澄清之目的，雜芳基亦包括芳族內醯胺、芳族環狀脲或其乙烯基類似物，其中鄰近於羰基之各環氮為三級的(亦即全部三個價數由非氫取代基佔據)，諸如以下中之一或多者：吡啶酮(例如，
Figure 02_image025
Figure 02_image027
)、嘧啶酮(例如，
Figure 02_image029
)、嗒𠯤酮(例如，
Figure 02_image031
)、吡𠯤酮(例如，
Figure 02_image033
)及咪唑酮(例如，
Figure 02_image035
)，其中鄰近於羰基之各環氮為三級的(亦即，本文中之側氧基(亦即，「=O」)為雜芳基環之組成部分)。
術語「雜環基」係指具有3-16個環原子之單環、雙環、三環或多環飽和環系統(例如5-8員單環、8-12員雙環或11-14員三環環系統)，若為單環，則其具有1-3個雜原子；若為雙環，則其具有1-6個雜原子，或若為三環或多環，則其具有1-9個雜原子，該等雜原子選自O、N或S (例如碳原子，以及在單環、雙環或三環情況下分別具有1-3個、1-6個或1-9個N、O或S之雜原子)，其中每個環之0、1、2或3個原子可經取代基取代。雜環基之實例包括哌𠯤基、吡咯啶基、二㗁烷基、𠰌啉基、四氫呋喃基及其類似基團。雜環基可包括多個稠合及橋接環。稠合/橋接雜環基之非限制性實例包括：2-氮雜雙環[1.1.0]丁烷、2-氮雜雙環[2.1.0]戊烷、2-氮雜雙環[1.1.1]戊烷、3-氮雜雙環[3.1.0]己烷、5-氮雜雙環[2.1.1]己烷、3-氮雜雙環[3.2.0]庚烷、八氫環戊并[c]吡咯、3-氮雜雙環[4.1.0]庚烷、7-氮雜雙環[2.2.1]庚烷、6-氮雜雙環[3.1.1]庚烷、7-氮雜雙環[4.2.0]辛烷、2-氮雜雙環[2.2.2]辛烷、3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷、2-氧雜雙環[1.1.0]丁烷、2-氧雜雙環[2.1.0]戊烷、2-氧雜雙環[1.1.1]戊烷、3-氧雜雙環[3.1.0]己烷、5-氧雜雙環[2.1.1]己烷、3-氧雜雙環[3.2.0]庚烷、3-氧雜雙環[4.1.0]庚烷、7-氧雜雙環[2.2.1]庚烷、6-氧雜雙環[3.1.1]庚烷、7-氧雜雙環[4.2.0]辛烷、2-氧雜雙環[2.2.2]辛烷、3-氧雜雙環[3.2.1]辛烷及其類似物。雜環基亦包括螺環(例如螺環雙環，其中兩個環僅經由一個原子連接)。螺環雜環基之非限制性實例包括2-氮雜螺[2.2]戊烷、4-氮雜螺[2.5]辛烷、1-氮雜螺[3.5]壬烷、2-氮雜螺[3.5]壬烷、7-氮雜螺[3.5]壬烷、2-氮雜螺[4.4]壬烷、6-氮雜螺[2.6]壬烷、1,7-二氮雜螺[4.5]癸烷、7-氮雜螺[4.5]癸烷、2,5-二氮雜螺[3.6]癸烷、3-氮雜螺[5.5]十一烷、2-氧雜螺[2.2]戊烷、4-氧雜螺[2.5]辛烷、1-氧雜螺[3.5]壬烷、2-氧雜螺[3.5]壬烷、7-氧雜螺[3.5]壬烷、2-氧雜螺[4.4]壬烷、6-氧雜螺[2.6]壬烷、1,7-二氧雜螺[4.5]癸烷、2,5-二氧雜螺[3.6]癸烷、1-氧雜螺[5.5]十一烷、3-氧雜螺[5.5]十一烷、3-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一烷及其類似物。如此上下文中所使用之術語「飽和」意謂在組成環原子與氫及/或如本文所定義之其他取代基所佔據之其他可用化合價之間僅存在單鍵。
如本文所使用，術語「雜環烯基」意謂具有3-16個環原子之部分不飽和環系統(例如5-8員單環、8-12員雙環或11-14員三環環系統)，若為單環，則其具有1-3個雜原子；若為雙環，則其具有1-6個雜原子，或若為三環或多環，則其具有1-9個雜原子，該等雜原子選自O、N或S (例如碳原子，以及在單環、雙環或三環情況下分別具有1-3個、1-6個或1-9個N、O或S之雜原子)，其中每個環之0、1、2或3個原子可經取代基取代。雜環烯基之實例包括但不限於四氫吡啶基、二氫吡𠯤基、二氫吡啶基、二氫吡咯基、二氫呋喃基、二氫噻吩基。作為部分不飽和環狀基團，雜環烯基可具有任何不飽和度，其限制條件為環中存在一或多個雙鍵；環系統中之環均不為芳環；且雜環烯基總體上不完全飽和。雜環烯基可包括多個稠環及/或橋接環及/或螺環。
如本文所用，芳環之實例包括：苯、吡啶、嘧啶、吡𠯤、嗒𠯤、吡啶酮、吡咯、吡唑、㗁唑、噻唑、異㗁唑、異噻唑及其類似物。
如本文所使用，當將環描述為「部分不飽和」時，其意謂該環具有一或多個額外不飽和度(除不飽和度歸因於環自身之外；例如組成環原子之間的一或多個雙鍵)，其限制條件為該環不為芳族的。此類環之實例包括：環戊烯、環己烯、環庚烯、二氫吡啶、四氫吡啶、二氫吡咯、二氫呋喃、二氫噻吩及其類似者。
為避免疑問，且除非另有說明，否則對於含有足以形成雙環或更高級環系統(例如三環、多環系統)數量之環原子的環及環系統(例如本文所述之芳基、雜芳基、雜環基、雜環烯基、環烯基、環烷基及其類似基團)，應理解，此類環及環狀基團涵蓋具有稠環之環及環狀基團，包括其中稠合點位於以下各者上之環及環狀基團：(i)相鄰環原子(例如，[x.x.0]環系統，其中0代表零原子橋(例如
Figure 02_image037
))；(ii)單環原子(螺-稠環系統) (例如，
Figure 02_image039
Figure 02_image041
)，或(iii)環原子之連續陣列(所有橋長度均大於0的橋接環系統) (例如，
Figure 02_image043
)。
另外，構成本發明實施例之化合物之原子意欲包括此類原子之所有同位素形式。如本文所使用，同位素包括具有相同原子數、但不同質量數之彼等原子。藉助於一般實例而非限制，氫同位素包括氚及氘，且碳同位素包括 13C及 14C。
此外，本文一般或特定揭示之化合物意欲包括所有互變異構形式。因此，舉例而言，含有以下部分之化合物：
Figure 02_image045
涵蓋含有以下部分之互變異構形式：
Figure 02_image047
。類似地，描述為視情況經羥基取代之吡啶基或嘧啶基部分涵蓋吡啶酮或嘧啶酮互變異構形式。
本文所提供之化合物可涵蓋各種立體化學形式。化合物亦涵蓋非對映異構體以及光學異構體，例如包括外消旋混合物之對映異構體的混合物，以及由於某些化合物中之結構不對稱性而產生之個別對映異構體及非對映異構體。除非另外指示，否則當所揭示之化合物藉由未指定立體化學之結構命名或描繪且具有一或多個對掌性中心時，應理解為表示該化合物之所有可能的立體異構體。
本發明之一或多個實施例的詳情闡述於隨附圖式及以下實施方式中。本發明之其他特徵及優勢將自本說明書及附圖以及申請專利範圍顯而易知。
相關申請之交叉引用本申請案主張2020年9月23日申請之美國臨時申請案第63/082,324號；及2020年10月16日申請之美國臨時申請案第63/092,970號之權益；其中之每一者以全文引用之方式併入本文中。
本發明提供抑制表皮生長因子受體(EGFR、ERBB1)及/或人類表皮生長因子受體2 (HER2、ERBB2)之化學實體(例如化合物或醫藥學上可接受之鹽及/或水合物及/或共晶體及/或該化合物之藥物組合)。此等化學實體適用於例如治療其中EGFR及/或HER2活化增加(例如過量)而促使個體(例如人類)中之病況、疾病或病症(例如癌症)之病變及/或症狀及/或進展的病況、疾病或病症。在一些實施例中，本文提供之化學實體可抑制具有外顯子20突變(例如本文所述之外顯子20突變中之任一者)之EGFR激酶及/或HER2激酶。外顯子20突變可賦予EGFR及/或HER2抑制劑固有抗性，且當前僅存在有限靶向療法經批准用於具有此等突變之個體。本發明亦提供含有本文所提供之化學實體的組合物以及其使用及製造方法。
式 ( I ) 化合物在一個態樣中，本發明提供式 ( I )化合物：
Figure 02_image049
式 (I)或其醫藥學上可接受之鹽，其中： X 1 係選自由以下組成之群： (a)-O- L 1-R 5 ；及 (b)
Figure 02_image051
； L 1 及 L 2 獨立地選自由以下組成之群：鍵及視情況經1至6個 R a 取代之C 1 - 10伸烷基； R 5 係選自由以下組成之群： ● 包括5至10個環原子之雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R c 取代； ● 視情況經1至4個 R c 取代之C 6 - 10芳基； ● C 3 - 10環烷基或C 3 - 10環烯基，其各視情況經1至4個各自獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代； ●
Figure 02_image053
，其中 環 D為包括3至10個環原子之伸雜環基或伸雜環烯基，其中0至2個環原子(除鍵結至 R X 之環氮原子以外)為雜原子，其各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該伸雜環基或伸雜環烯基視情況經1至4個各自獨立地選自由側氧基及- R c 組成之群的取代基取代； ● 視情況經1至6個 R a 取代之-S(O) 0 - 2(C 1 - 6烷基)； ● -R g2 - R W 或- R g2 - R Y ；● -L 5 - R g ；及 ● - L 5-R g2 - R W 或- L 5-R g2-R Y ； 其限制條件為當 L 1 為鍵時，則 R 5 不為視情況經1至6個 R a 取代之-S(O) 0 - 2(C 1 - 6烷基)；- L 5 - R g ；- L 5 - R g2 - R W ；或- L 5 - R g2 - R Y ； R 6 係選自由以下組成之群： ● H； ● 鹵基； ● -OH； ● -N R eR f ； ● - R g ； ● - L 6 - R g ； ● -R g2 - R W 或- R g2 - R Y ； ● - L 6 - R g2-R W 或- L 6 - R g2-R Y ；及 ● -C 1 - 6烷氧基或-S(O) 0 - 2(C 1 - 6烷基)，各自視情況經1至6個 R a 取代； L 5 及 L 6 獨立地為-O-、-S(O) 0 - 2、-NH或-N( R d )-； R W 為- L W-W ， 其中 L W 為C(=O)、S(O) 1 - 2、OC(=O)*、NHC(=O)*、N R d C(=O)*、NHS(O) 1 - 2*或N R d S(O) 1 - 2*，其中星號表示與 W之連接點，及 W為C 2 - 6烯基；C 2 - 6炔基；或C 3 - 10丙二烯基，其中之每一者視情況經1至3個 R a 取代且進一步視情況經 R g 取代，其中 W經由 sp 2 或 sp雜化碳原子連接至 L W ，由此提供α,β-不飽和系統；及 R X 為C(=O)(C 1 - 6烷基)或S(O) 2(C 1 - 6烷基)，其中之每一者視情況經1至6個 R a 取代； R Y 係選自由以下組成之群：- R g 及- (L g) g- R g ； R 1c 、 R 2a 、 R 2b 、 R 3a 及 R 3b 中之每一者獨立地選自由以下組成之群：H；鹵基；-OH；-C(O)OH或-C(O)NH 2；-CN；- R b ；- L b - R b ；-C 1 - 6烷氧基或-C 1 - 6硫代烷氧基，各自視情況經1至6個 R a 取代；-N R eR f ；- R g ；及- ( L g ) g- R g ；其限制條件為 R 1c 不為鹵基、-CN或-C(O)OH；或 或變數 R 1c 、 R 2a 、 R 2b 、 R 3a 及 R 3b 中之兩者與各自連接之 環 B環原子一起形成具有3至12個環原子之稠合飽和或不飽和環； ● 其中該等環原子中之0至2個各自為獨立選擇之雜原子(當-N( R 1c )-形成該稠合飽和或不飽和環之一部分時，除-N( R 1c )-外)，其中該等獨立選擇之雜原子中之每一者係選自由N、NH、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群；且 ● 其中3至12個環原子之稠合飽和或不飽和環視情況經1至4個獨立地選自由側氧基、 R c 及 R W 組成之群的取代基取代； 環 A為 R g ； R 4 係選自由以下組成之群：H及 R d ； 各 R 7 係獨立選擇之 R c ； n係0、1、2或3； R a 在每次出現時獨立地選自由以下組成之群：-OH；-鹵基；-N R eR f ；C 1 - 4烷氧基；C 1 - 4鹵代烷氧基；-C(=O)O(C 1 - 4烷基)；-C(=O)(C 1 - 4烷基)；-C(=O)OH；-CON R ' R ''；-S(O) 1 - 2N R ' R ''；-S(O) 1 - 2(C 1 - 4烷基)；及氰基； R b 在每次出現時獨立地為C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基或C 2 - 6炔基，其中之每一者視情況經1至6個 R a 取代； L b 在每次出現時獨立地為C(=O)；C(=O)O；S(O) 1 - 2；C(=O)NH*；C(=O)N R d *；S(O) 1 - 2NH*；或S(O) 1 - 2N( R d )*，其中星號表示與 R b 之連接點； R c 在每次出現時獨立地選自由以下組成之群：鹵基；氰基；C 1 - 10烷基，其視情況經1至6個獨立選擇之 R a 取代；C 2 - 6烯基；C 2 - 6炔基；視情況經C 1 - 4烷氧基或C 1 - 4鹵代烷氧基取代之C 1 - 4烷氧基；C 1 - 4鹵代烷氧基；-S(O) 1 - 2(C 1 - 4烷基)；-S(O)(=NH)(C 1 - 4烷基)；-N R eR f ；-OH；-S(O) 1 - 2N R ' R ''；-C 1 - 4硫代烷氧基；-NO 2；-C(=O)(C 1 - 10烷基)；-C(=O)O(C 1 - 4烷基)；-C(=O)OH；-C(=O)N R ' R ''；及-SF 5； R d 在每次出現時獨立地選自由以下組成之群：C 1 - 6烷基，其視情況經1至3個獨立選擇之 R a 取代；-C(O)(C 1 - 4烷基)；-C(O)O(C 1 - 4烷基)；-CON R ' R ''；-S(O) 1 - 2N R ' R ''；- S(O) 1 - 2(C 1 - 4烷基)；-OH；及C 1 - 4烷氧基； R e 及 R f 在每次出現時獨立地選自由以下組成之群：H；C 1 - 6烷基，其視情況經1至3個各自獨立地選自由N R ' R ''、-OH、C 1 - 6烷氧基、C 1 - 6鹵代烷氧基及鹵基組成之群的取代基取代；-C(O)(C 1 - 4烷基)；-C(O)O(C 1 - 4烷基)；-CON R ' R ''；-S(O) 1 - 2N R ' R ''；- S(O) 1 - 2(C 1 - 4烷基)；-OH；及C 1 - 4烷氧基； R g 在每次出現時獨立地選自由以下組成之群： ● C 3 - 10環烷基或C 3 - 10環烯基，其中之每一者視情況經1至4個獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代； ● 包括3至10個環原子之雜環基或雜環烯基，其中1至3個環原子為雜原子，其各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜環基或雜環烯基視情況經1至4個獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代； ● 包括5至10個環原子之雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R c 取代；及 ● 視情況經1至4個 R c 取代之C 6 - 10芳基； L g 在每次出現時獨立地選自由以下組成之群：-O-、-NH-、-N R d 、-S(O) 0 - 2、C(O)及視情況經1至3個 R a 取代之C 1 - 3伸烷基； 各 g獨立地為1、2或3； 各 R g2 為二價 R g 基團；及 R '及 R ''在每次出現時獨立地選自由以下組成之群：H；-OH；及C 1 - 4烷基。
在一個態樣中，本發明提供式 ( I )化合物：
Figure 02_image055
式 (I)或其醫藥學上可接受之鹽，其中： X 1 係選自由以下組成之群： (a)-O- L 1-R 5 ；及 (b)
Figure 02_image057
； L 1 及 L 2 獨立地選自由以下組成之群：鍵及視情況經1至6個 R a 取代之C 1 - 10伸烷基； R 5 係選自由以下組成之群： ● 包括5至10個環原子之雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R c 取代； ● 視情況經1至4個 R c 取代之C 6 - 10芳基； ● C 3 - 10環烷基或C 3 - 10環烯基，其各視情況經1至4個獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：側氧基及 R c ； ●
Figure 02_image059
，其中 環 D為包括3至10個環原子之伸雜環基或伸雜環烯基，其中0至2個環原子(除鍵結至 R X 之環氮原子以外)為雜原子，其各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該伸雜環基或伸雜環烯基視情況經1至4個各自獨立地選自由側氧基及- R c 組成之群的取代基取代； ● 視情況經1至6個 R a 取代之-S(O) 0 - 2(C 1 - 6烷基)； ● -R g2 - R W 或- R g2 - R Y ；● -L 5 - R g ；及 ● - L 5-R g2 - R W 或- L 5-R g2-R Y ；其限制條件為當 L 1 為鍵時，則 R 5 不為視情況經1至6個 R a 取代之-S(O) 0 - 2(C 1 - 6烷基)；- L 5 - R g ；- L 5 - R g2 - R W ；或- L 5 - R g2 - R Y ； R 6 係選自由以下組成之群： ● H； ● 鹵基； ● -OH； ● -N R eR f ； ● - R g ； ● - L 6 - R g ； ● -R g2 - R W 或- R g2 - R Y ； ● - L 6 - R g2-R W 或- L 6 - R g2-R Y ；及 ● -C 1 - 6烷氧基或-S(O) 0 - 2(C 1 - 6烷基)，各自視情況經1至6個 R a 取代； L 5 及 L 6 獨立地為-O-、-S(O) 0 - 2、-NH或-N( R d )-； R W 為- L W-W ，其中 L W 為C(=O)、S(O) 1 - 2、OC(=O)*、NHC(=O)*、N R d C(=O)*、NHS(O) 1 - 2*或N R d S(O) 1 - 2*，其中星號表示與 W之連接點，及 W為C 2 - 6烯基；C 2 - 6炔基；或C 3 - 10丙二烯基，其中之每一者視情況經1至3個 R a 取代且進一步視情況經 R g 取代，其中 W經由 sp 2 或 sp雜化碳原子連接至 L W ，由此提供α,β-不飽和系統；及 R X 為C(=O)(C 1 - 6烷基)或S(O) 2(C 1 - 6烷基)，其中之每一者視情況經1至6個 R a 取代； R Y 係選自由以下組成之群： R g 及- (L g) g- R g ； R 1c 、 R 2a 、 R 2b 、 R 3a 及 R 3b 中之每一者獨立地選自由以下組成之群：H；鹵基；-OH；-C(O)OH或-C(O)NH 2；-CN；- R b ；- L b - R b ；-C 1 - 6烷氧基或-C 1 - 6硫代烷氧基，各自視情況經1至6個 R a 取代；N R eR f ；- R g ；及- ( L g ) g- R g ；其限制條件為 R 1c 不為鹵基、-CN或-C(O)OH；或 或變數 R 1c 、 R 2a 、 R 2b 、 R 3a 及 R 3b 中之兩者與各自連接之 環 B環原子一起形成具有3至12個環原子之稠合飽和或不飽和環； ●  其中該等環原子中之0至2個各自為獨立選擇之雜原子(當-N( R 1c )-形成該稠合飽和或不飽和環之一部分時，除-N( R 1c )-外)，其中該等獨立選擇之雜原子中之每一者係選自由N、NH、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群；且 ●  其中3至12個環原子之稠合飽和或不飽和環視情況經1至4個獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代； 環 A為 R g ； R 4 係選自由以下組成之群：H及 R d ； 各 R 7 係獨立選擇之 R c ； n係0、1、2或3； R a 在每次出現時獨立地選自由以下組成之群：-OH；-鹵基；-N R eR f ；C 1 - 4烷氧基；C 1 - 4鹵代烷氧基；-C(=O)O(C 1 - 4烷基)；-C(=O)(C 1 - 4烷基)；-C(=O)OH；-CON R ' R ''；-S(O) 1 - 2N R ' R ''；-S(O) 1 - 2(C 1 - 4烷基)；及氰基； R b 在每次出現時獨立地為C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基或C 2 - 6炔基，其中之每一者視情況經1至6個 R a 取代； L b 在每次出現時獨立地為C(=O)；C(=O)O；S(O) 1 - 2；C(=O)NH*；C(=O)N R d *；S(O) 1 - 2NH*；或S(O) 1 - 2N( R d )*，其中星號表示與 R b 之連接點； R c 在每次出現時獨立地選自由以下組成之群：鹵基；氰基；C 1 - 10烷基，其視情況經1至6個獨立選擇之 R a 取代；C 2 - 6烯基；C 2 - 6炔基；視情況經C 1 - 4烷氧基或C 1 - 4鹵代烷氧基取代之C 1 - 4烷氧基；C 1 - 4鹵代烷氧基；-S(O) 1 - 2(C 1 - 4烷基)；-S(O)(=NH)(C 1 - 4烷基)；-N R eR f ；-OH；-S(O) 1 - 2N R ' R ''；-C 1 - 4硫代烷氧基；-NO 2；-C(=O)(C 1 - 10烷基)；-C(=O)O(C 1 - 4烷基)；-C(=O)OH；-C(=O) NR ' R ''；及-SF 5； R d 在每次出現時獨立地選自由以下組成之群：C 1 - 6烷基，其視情況經1至3個獨立選擇之 R a 取代；-C(O)(C 1 - 4烷基)；-C(O)O(C 1 - 4烷基)；-CON R ' R ''；-S(O) 1 - 2N R ' R ''；- S(O) 1 - 2(C 1 - 4烷基)；-OH；及C 1 - 4烷氧基； R e 及 R f 在每次出現時獨立地選自由以下組成之群：H；C 1 - 6烷基，其視情況經1至3個各自獨立地選自由N R ' R ''、-OH、C 1 - 6烷氧基、C 1 - 6鹵代烷氧基及鹵基組成之群的取代基取代；-C(O)(C 1 - 4烷基)；-C(O)O(C 1 - 4烷基)；-CON R ' R ''；-S(O) 1 - 2N R ' R ''；- S(O) 1 - 2(C 1 - 4烷基)；-OH；及C 1 - 4烷氧基； R g 在每次出現時獨立地選自由以下組成之群： ●  C 3 - 10環烷基或C 3 - 10環烯基，其中之每一者視情況經1至4個獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代； ●  包括3至10個環原子之雜環基或雜環烯基，其中1至3個環原子為雜原子，其各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜環基或雜環烯基視情況經1至4個獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代； ●  包括5至10個環原子之雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R c 取代；及 ●  視情況經1至4個 R c 取代之C 6 - 10芳基； L g 在每次出現時獨立地選自由以下組成之群：-O-、-NH-、-N R d 、-S(O) 0 - 2、C(O)及視情況經1至3個 R a 取代之C 1 - 3伸烷基； 各 g獨立地為1、2或3； 各 R g2 為二價 R g 基團；及 R '及 R ''在每次出現時獨立地選自由以下組成之群：H；-OH；及C 1 - 4烷基；
在一些實施例中，其限制條件為當 R 2a 、 R 2b 、 R 3a 及 R 3b 各自為H； R 1c 為H或甲基； 環 A為視情況經1至2個F取代之苯基； X 1 為-O- L 1 - R 5 ；且- L 1 為CH 2時，則： R 5 不為未經取代之苯基或未經取代之環丙基；且 其進一步限制條件為該化合物不為：3-((3-氟-2-甲氧基苯基)胺基)-2-(3-((1-苯基丙烷-2-基)氧基)吡啶-4-基)-1,5,6,7-四氫-4H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮。
在一個態樣中，本發明提供式 ( I )化合物：
Figure 02_image061
式 (I)或其醫藥學上可接受之鹽，其中： X 1 係選自由以下組成之群： (a)-O- L 1-R 5 ；及 (b)
Figure 02_image063
； L 1 及 L 2 獨立地選自由以下組成之群：鍵及視情況經1至6個 R a 取代之C 1 - 10伸烷基； R 5 係選自由以下組成之群： ●  包括5至10個環原子之雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R c 取代； ●  視情況經1至4個 R c 取代之C 6 - 10芳基； ●  C 3 - 10環烷基或C 3 - 10環烯基，其各視情況經1至4個各自獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代； ●
Figure 02_image065
，其中 環 D為包括3至10個環原子之伸雜環基或伸雜環烯基，其中0至2個環原子(除鍵結至 R X 之環氮原子以外)為雜原子，其各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該伸雜環基或伸雜環烯基視情況經1至4個各自獨立地選自由側氧基及- R c 組成之群的取代基取代； ●  視情況經1至6個 R a 取代之-S(O) 0 - 2(C 1 - 6烷基)； ●  - R W ● -R g2 - R W 或- R g2 - R Y ； ● -L 5 - R g ；及 ●  - L 5-R g2 - R W 或- L 5-R g2-R Y ； 其限制條件為當 L 1 為鍵時，則 R 5 不為視情況經1至6個 R a 取代之-S(O) 0 - 2(C 1 - 6烷基)；- L 5 - R g ；- L 5 - R g2 - R W ；或- L 5 - R g2 - R Y ； R 6 係選自由以下組成之群： ●  H； ●  鹵基； ●  -OH； ●  -N R eR f ； ●  - R g ； ● -R w ●  - L 6 - R g ； ● -R g2 - R W 或- R g2 - R Y ； ●  - L 6 - R g2-R W 或- L 6 - R g2-R Y ；及 ●  -C 1 - 6烷氧基或-S(O) 0 - 2(C 1 - 6烷基)，各自視情況經1至6個 R a 取代； L 5 及 L 6 獨立地為-O-、-S(O) 0 - 2、-NH或-N( R d )-； R W 為- L W-W ， 其中 L W 為C(=O)、S(O) 1 - 2、OC(=O)*、NHC(=O)*、N R d C(=O)*、NHS(O) 1 - 2*或N R d S(O) 1 - 2*，其中星號表示與 W之連接點，及 W為C 2 - 6烯基；C 2 - 6炔基；或C 3 - 10丙二烯基，其中之每一者視情況經1至3個 R a 取代且進一步視情況經 R g 取代，其中 W經由 sp 2 或 sp雜化碳原子連接至 L W ，由此提供α,β-不飽和系統；及 R X 為C(=O)(C 1 - 6烷基)或S(O) 2(C 1 - 6烷基)，其中之每一者視情況經1至6個 R a 取代； R Y 係選自由以下組成之群：- R g 及- (L g) g- R g ； R 1c 、 R 2a 、 R 2b 、 R 3a 及 R 3b 中之每一者獨立地選自由以下組成之群：H；鹵基；-OH；-C(O)OH或-C(O)NH 2；-CN；- R b ；- L b - R b ；-C 1 - 6烷氧基或-C 1 - 6硫代烷氧基，各自視情況經1至6個 R a 取代；-N R eR f ；- R g ；及- ( L g ) g- R g ；其限制條件為 R 1c 不為鹵基、-CN或-C(O)OH；或 變數 R 1c 、 R 2a 、 R 2b 、 R 3a 及 R 3b 中之兩者與各自連接之 環 B環原子一起形成具有3至12個環原子之稠合飽和或不飽和環； ●  其中該等環原子中之0至2個各自為獨立選擇之雜原子(當-N( R 1c )-形成該稠合飽和或不飽和環之一部分時，除-N( R 1c )-外)，其中該等獨立選擇之雜原子中之每一者係選自由N、NH、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群；且 ●  其中3至12個環原子之稠合飽和或不飽和環視情況經1至4個獨立地選自由側氧基、 R c 及 R W 組成之群的取代基取代； 環 A為 R g ； R 4 係選自由以下組成之群：H及 R d ； 各 R 7 係獨立選擇之 R c ； n係0、1、2或3； R a 在每次出現時獨立地選自由以下組成之群：-OH；-鹵基；-N R eR f ；C 1 - 4烷氧基；C 1 - 4鹵代烷氧基；-C(=O)O(C 1 - 4烷基)；-C(=O)(C 1 - 4烷基)；-C(=O)OH；-CON R ' R ''；-S(O) 1 - 2N R ' R ''；-S(O) 1 - 2(C 1 - 4烷基)；及氰基； R b 在每次出現時獨立地為C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基或C 2 - 6炔基，其中之每一者視情況經1至6個 R a 取代； L b 在每次出現時獨立地為C(=O)；C(=O)O；S(O) 1 - 2；C(=O)NH*；C(=O)N R d *；S(O) 1 - 2NH*；或S(O) 1 - 2N( R d )*，其中星號表示與 R b 之連接點； R c 在每次出現時獨立地選自由以下組成之群：鹵基；氰基；C 1 - 10烷基，其視情況經1至6個獨立選擇之 R a 取代；C 3 - 5環烷基；C 2 - 6烯基；C 2 - 6炔基；視情況經C 1 - 4烷氧基或C 1 - 4鹵代烷氧基取代之C 1 - 4烷氧基；C 1 - 4鹵代烷氧基；-S(O) 1 - 2(C 1 - 4烷基)；-S(O)(=NH)(C 1 - 4烷基)；-N R eR f ；-OH；-S(O) 1 - 2N R ' R ''；-C 1 - 4硫代烷氧基；-NO 2；-C(=O)(C 1 - 10烷基)；-C(=O)O(C 1 - 4烷基)；-C(=O)OH；-C(=O)N R ' R ''；及-SF 5； R d 在每次出現時獨立地選自由以下組成之群：C 1 - 6烷基，其視情況經1至3個獨立選擇之 R a 取代；-C(O)(C 1 - 4烷基)；-C(O)O(C 1 - 4烷基)；-CON R ' R ''；-S(O) 1 - 2N R ' R ''；- S(O) 1 - 2(C 1 - 4烷基)；-OH；及C 1 - 4烷氧基； R e 及 R f 在每次出現時獨立地選自由以下組成之群：H；視情況經1至3個C 1 - 3烷基取代之C 3 - 5環烷基；包括3至6個環原子之雜環基，其中1至3個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，雜環基視情況經1至4個獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代；及C 1 - 6烷基，其視情況經1至3個各自獨立地選自由N R ' R ''、-OH、C 1 - 6烷氧基、C 1 - 6鹵代烷氧基及鹵基組成之群的取代基取代；-C(O)(C 1 - 4烷基)；-C(O)O(C 1 - 4烷基)；-CON R ' R ''；-S(O) 1 - 2N R ' R ''；- S(O) 1 - 2(C 1 - 4烷基)；-OH；C 1 - 4烷氧基； R g 在每次出現時獨立地選自由以下組成之群： ●  C 3 - 10環烷基或C 3 - 10環烯基，其中之每一者視情況經1至4個獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代； ●  包括3至10個環原子之雜環基或雜環烯基，其中1至3個環原子為雜原子，其各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜環基或雜環烯基視情況經1至4個獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代； ●  包括5至10個環原子之雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R c 取代；及 ●  視情況經1至4個 R c 取代之C 6 - 10芳基； L g 在每次出現時獨立地選自由以下組成之群：-O-、-NH-、-N R d 、-S(O) 0 - 2、C(O)及視情況經1至3個 R a 取代之C 1 - 3伸烷基； 各 g獨立地為1、2或3； 各 R g2 為二價 R g 基團；及 R '及 R ''在每次出現時獨立地選自由以下組成之群：H；-OH；及C 1 - 4烷基；
在一些實施例中，當 R 2a 、 R 2b 、 R 3a 及 R 3b 各自為H； R 1c 為H或甲基； 環 A為視情況經1至2個F取代之苯基； X 1 為-O- L 1 - R 5 ；且- L 1 為CH 2時，則： R 5 不為未經取代之苯基或未經取代之環丙基；且 其進一步限制條件為該化合物不為：3-((3-氟-2-甲氧基苯基)胺基)-2-(3-((1-苯基丙烷-2-基)氧基)吡啶-4-基)-1,5,6,7-四氫-4H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮。
在一些實施例中，當 R 5 或 R 6 為雜芳基時，雜芳基不為芳族內醯胺、芳族環狀脲或其乙烯基類似物，其中鄰近於羰基之各環氮為三級的(亦即全部三個價數由非氫取代基佔據)，諸如以下中之一或多者：吡啶酮(例如，
Figure 02_image067
Figure 02_image069
)、嘧啶酮(例如，
Figure 02_image071
)、嗒𠯤酮(例如，
Figure 02_image073
)、吡𠯤(例如，
Figure 02_image075
)及咪唑酮(例如，
Figure 02_image077
)，其中鄰近於羰基之各環氮為三級的(亦即，本文中之側氧基(亦即，「=O」)為雜芳基環之組成部分)。
在一些實施例中，當 R 5 或 R 6 為雜芳基時，該雜芳基未經-OH取代。
變數X 1 當 X 1 為 -O- L 1-R 5 之實施例
在一些實施例中， X 1 為-O- L 1 - R 5 。
在某些此等實施例中， R 5 為包括5至10個環原子之雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R cA 取代，其中各 R cA 為獨立選擇之 R c 。
在某些實施例中， R 5 為包括5至6個環原子之單環雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R cA 取代，其中各 R cA 為獨立選擇之 R c 。
在某些前述實施例中， R 5 為包括5個環原子之單環雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R cA 取代，其中各 R cA 為獨立選擇之 R c 。
在某些實施例中， R 5 係選自由呋喃基、噻吩基、㗁二唑基、噻二唑基、三唑基、四唑基、咪唑基、吡唑基、㗁唑基及噻唑基組成之群，其中之每一者視情況經1至2個 R cA 取代，且環氮視情況經 R d 取代，其中各 R cA 為獨立選擇之 R c 。
作為前述實施例之非限制性實例， R 5 可選自由以下組成之群：
Figure 02_image079
Figure 02_image081
，各自視情況經1至2個 R cA 取代，其中各 R cA 為獨立選擇之 R c 。
在某些實施例中， R 5 係選自由呋喃基、噻吩基、㗁二唑基、噻二唑基、四唑基、咪唑基、吡唑基、㗁唑基及噻唑基組成之群，其中之每一者視情況經1至2個 R cA 取代，且環氮視情況經 R d 取代，其中各 R cA 為獨立選擇之 R c 。
作為前述實施例之非限制性實例， R 5 可選自由以下組成之群：
Figure 02_image083
，各自視情況經1至2個 R cA 取代，其中各 R cA 為獨立選擇之 R c 。例如， R 5 可為
Figure 02_image085
。作為額外非限制性實例， R 5 可為
Figure 02_image087
；且 R d 視情況可為C 1 - 3烷基。
在某些實施例中， R 5 為包括6個環原子之單環雜芳基，其中1至4個環原子為環氮原子，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R cA 取代，其中各 R cA 為獨立選擇之 R c 。
在某些實施例中， R 5 係選自由吡啶基、吡啶酮基、嘧啶基、吡𠯤基及嗒𠯤基組成之群，各自視情況經1至3個 R cA 取代，其中各 R cA 為獨立選擇之 R c 。
作為前述實施例之非限制性實例， R 5 可選自由以下組成之群：
Figure 02_image089
，諸如
Figure 02_image091
，諸如
Figure 02_image093
，其中之每一者進一步視情況經 R cA 取代，其中各 R cA 為獨立選擇之 R c 。
在某些實施例中， R 5 係選自由吡啶基、嘧啶基、吡𠯤基及嗒𠯤基組成之群，各自視情況經1至3個 R cA 取代，其中各 R cA 為獨立選擇之 R c 。
作為前述實施例之非限制性實例， R 5 可選自由以下組成之群：
Figure 02_image095
(例如
Figure 02_image097
)；及
Figure 02_image099
(例如
Figure 02_image101
)，其中之每一者進一步視情況經 R cA 取代，其中各 R cA 為獨立選擇之 R c 。
作為其他非限制性實例， R 5 可選自由以下組成之群：
Figure 02_image103
(例如
Figure 02_image105
)，其中之每一者進一步視情況經 R cA 取代，其中各 R cA 為獨立選擇之 R c 。
在某些實施例中， R 5 為包括8至10個環原子之雙環雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R cA 取代，其中各 R cA 為獨立選擇之 R c 。
在某些實施例中， R 5 為包括8個環原子之雙環雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R cA 取代，其中各 R cA 為獨立選擇之 R c 。
作為前述實施例之非限制性實例， R 5 可選自由以下組成之群：
Figure 02_image107
Figure 02_image109
，其中之每一者進一步視情況經1至2個 R cA 取代，其中各 R cA 為獨立選擇之 R c 。
作為其他非限制性實例， R 5 可選自由以下組成之群：
Figure 02_image111
Figure 02_image113
，其中之每一者進一步視情況經1至2個 R cA 取代，其中各 R cA 為獨立選擇之 R c 。
在某些實施例中， R 5 為包括9個環原子之雙環雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R cA 取代，其中各 R cA 為獨立選擇之 R c 。
在某些此等實施例中， R 5 為咪唑并吡啶基、吡唑并吡啶基或苯并三唑基，其中之每一者視情況經1至2個 R cA 取代，其中各 R cA 為獨立選擇之 R c 。
作為前述實施例之非限制性實例， R 5 可為
Figure 02_image115
Figure 02_image117
，其中之每一者視情況經1至2個 R cA 取代，其中各 R cA 為獨立選擇之 R c 。
在某些實施例中， R 5 為雙環10員雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R cA 取代，其中各 R cA 為獨立選擇之 R c 。
在某些實施例中，各 R cA 獨立地選自由以下組成之群：鹵基；氰基；-OH；C 1 - 6烷基，其視情況經1至6個獨立選擇之 R a 取代；視情況經C 1 - 4烷氧基或C 1 - 4鹵代烷氧基取代之C 1 - 4烷氧基；C 1 - 4鹵代烷氧基；及-C(=O)N R ' R ''。
在某些實施例中， R cA 在一次出現時為獨立選擇之鹵基，諸如-F或-Cl。
在某些實施例中， R cA 在一次出現時為氰基。
在某些實施例中， R cA 在一次出現時為視情況經1至6個獨立選擇之 R a 取代的C 1 - 6烷基。
在某些實施例中， R cA 在一次出現時為C 1 - 6烷基，諸如C 1 - 3烷基。
在某些實施例中， R cA 在一次出現時為經-OH或-N R eR f 取代之C 1 - 6烷基。例如， R cA 在一次出現時可為經-OH或NH 2取代之C 1 - 3烷基。
在某些實施例中， R cA 在一次出現時為視情況經C 1 - 4烷氧基或C 1 - 4鹵代烷氧基取代之C 1 - 4烷氧基。例如， R cA 在一次出現可為C 1 - 4烷氧基(例如甲氧基或乙氧基)。
在某些實施例中， R cA 在一次出現時為C(=O)N R ' R ''(例如C(=O)NH 2)。
在某些實施例中， R 5 為
Figure 02_image119
，其中 環 D為包括3至10個環原子之伸雜環基或伸雜環烯基(例如伸雜環基)，其中0至2個環原子(除鍵結至 R X 之環氮原子以外)為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該伸雜環基或伸雜環烯基(例如伸雜環基)視情況經1至4個各自獨立地選自由側氧基及- R c 組成之群的取代基取代。
在某些此等實施例中， R 5 為
Figure 02_image121
，其視情況經1至2個 R c 取代，其中 x1及 x2各自獨立地為0、1或2。
在某些前述實施例中， x1=0，且 x2=0。
在某些實施例中， x1=0，且 x2=1。
在某些實施例中， x1=0，且 x2=2。
作為非限制性實例，當 R 5 為
Figure 02_image123
(例如
Figure 02_image125
)， R 5 可選自由以下組成之群：
Figure 02_image127
(例如
Figure 02_image129
或
Figure 02_image131
)；
Figure 02_image133
(例如
Figure 02_image135
或
Figure 02_image137
)；及
Figure 02_image139
(例如
Figure 02_image141
或
Figure 02_image143
)。
在某些實施例中， R X 為C(=O)(C 1 - 4烷基)或S(O) 2(C 1 - 4烷基)。
在某些此等實施例中， R X 為C(=O)(C 1 - 4烷基) (例如，C(=O)Me或C(=O)Et)。
在某些實施例中， R X 為S(O) 2(C 1 - 4烷基) (例如S(O) 2Me)。
在某些實施例中， R 5 為 - R g2 - R W 。
在某些此等實施例中， R 5 為 - R g2 - R W ；且存在於 - R g2 - R W 中之該- R g2 為包括3至10個環原子之伸雜環基或伸雜環烯基，其中1至3個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該伸雜環基或伸雜環烯基視情況經1至4個獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代。
在某些前述實施例中， - R 5 為
Figure 02_image145
，其中 環 D為包括3至10個環原子之伸雜環基，其中0至2個環原子(除鍵結至 R W 之環氮原子以外)為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該伸雜環基視情況經1至3個各自獨立地選自由側氧基及- R c 組成之群的取代基取代。
在某些此等實施例中， - R 5 為
Figure 02_image147
，視情況經1至2個 R c 取代，其中 x1及 x2各自獨立地為0、1或2。
在某些前述實施例中， x1=0，且 x2=0。
在某些實施例中， x1=0，且 x2=1。
在某些實施例中， x1=0，且 x2=2。
在某些實施例中， x1=0，且 x2=1；或 x1=0，且 x2=2。
作為非限制性實例，當 R 5 為
Figure 02_image149
(例如
Figure 02_image151
)， R 5 可選自由以下組成之群：
Figure 02_image153
(例如
Figure 02_image155
或
Figure 02_image157
)；
Figure 02_image159
(例如
Figure 02_image161
或
Figure 02_image163
)；及
Figure 02_image165
(例如
Figure 02_image167
或
Figure 02_image169
)。
作為非限制性實例，當 R 5 為
Figure 02_image171
(例如
Figure 02_image173
)， R 5 可選自由以下組成之群：
Figure 02_image175
，諸如
Figure 02_image177
或
Figure 02_image179
；
Figure 02_image181
，諸如
Figure 02_image183
或
Figure 02_image185
；
Figure 02_image187
，諸如
Figure 02_image189
或
Figure 02_image191
；
Figure 02_image193
，諸如
Figure 02_image195
或
Figure 02_image197
；及
Figure 02_image199
，諸如
Figure 02_image201
或
Figure 02_image203
。
在一些實施例中， R 5 為 R W 。
在某些實施例中， R W 為- L W - W；且 L W 為C(=O)。
在某些實施例中， R W 為- L W - W；且 L W 為C(=O)NHC(=O)*或NHS(O) 1 - 2*，其中星號表示與 W之連接點。
在某些此等實施例中， W為視情況經1至3個 R a 取代且進一步視情況經 R g 取代之C 2 - 6烯基，其中 W經由 sp 2 雜化碳原子連接至 L W 。
在某些此等實施例中， W為視情況經1至3個 R a 取代且進一步視情況經 R g 取代之C 2 - 6烯基或C 2 - 6炔基，其中 W經由 sp 2 或 sp雜化碳原子連接至 L W 。
在某些前述實施例中， W為視情況經1至3個 R a 取代且進一步視情況經 R g 取代之C 2 - 4烯基，其中 W經由 sp 2 雜化碳原子連接至 L W 。作為前述實施例之非限制性實例， W可為CH=CH 2。
在某些此等前述實施例中， W為視情況經1至3個 R a 取代且進一步視情況經 R g 取代之C 2 - 4烯基或C 2 - 4炔基，其中 W經由 sp 2 或 sp雜化碳原子連接至 L W 。作為前述實施例之非限制性實例， W可為CH=CH 2、CH=CHCH 2NMe 2或
Figure 02_image205
。
在某些實施例中，- L W - W為-C(=O)CH=CH 2。
作為非限制性實例，- L W - W可為-C(=O)CH=CH 2、-C(=O)CH=CHCH 2NMe 2或
Figure 02_image207
。
在某些實施例中， R 5 為- R g2 - R Y 。
在某些此等實施例中， R 5 為 - R g2 - R Y ；且存在於 - R g2 - R Y 中之該- R g2 為包括3至10個環原子之伸雜環基或伸雜環烯基，其中1至3個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該伸雜環基或伸雜環烯基視情況經1至3個獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代。
在某些實施例中(當 R 5 為- R g2 - R Y 時)，- R 5 為
Figure 02_image209
，其中 環 D為包括3至10個環原子之伸雜環基，其中0至2個環原子(除鍵結至 R Y 之環氮原子以外)為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該伸雜環基視情況經1至3個各自獨立地選自由側氧基及- R c 組成之群的取代基取代。
在某些前述實施例中， - R 5 為
Figure 02_image211
視情況經1至2個 R c 取代，其中 x1及 x2各自獨立地為0、1或2。
在某些此等實施例中， x1=0，且 x2=0。
在某些實施例中， x1=0，且 x2=1。
在某些實施例中， x1=0，且 x2=2。
作為非限制性實例，當 R 5 為
Figure 02_image213
(例如
Figure 02_image215
)， R 5 可選自由以下組成之群：
Figure 02_image217
(例如
Figure 02_image219
或
Figure 02_image221
)；
Figure 02_image223
(例如
Figure 02_image225
或
Figure 02_image227
；及
Figure 02_image229
，諸如
Figure 02_image231
或
Figure 02_image233
。
在某些實施例中， R 5 為- R g2 - R Y ；且存在於- R g2 - R Y 中之該- R g2 為包括5至6個環原子之單環伸雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S組成之群，且其中該伸雜芳基視情況經1至3個 R c 取代。
在某些此等實施例中， R 5 為- R g2 - R Y ；且存在於- R g2 - R Y 中之該- R g2 為包括5個環原子之單環伸雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S組成之群，且其中該伸雜芳基視情況經1至2個 R c 取代。
作為前述實施例之非限制性實例， R 5 可選自由以下組成之群：
Figure 02_image235
。
在某些實施例中(當 R 5 為- R g2 - R Y 時)，- R Y 為 - R g 。
在某些此等實施例中，- R Y 係選自由以下組成之群： ●  包括5至10個環原子之雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R c 取代；及 ●  視情況經1至4個 R c 取代之C 6 - 10芳基。
在某些前述實施例中，- R Y 為視情況經1至4個 R c 取代之C 6 - 10芳基。
作為前述實施例之非限制性實例，- R Y 可為視情況經1至3個 R c 取代之苯基。
在某些實施例中，- R Y 為包括5至10個環原子之雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R c 取代。
在某些此等實施例中，- R Y 為包括5至6個環原子之雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R c 取代。
作為前述實施例之非限制性實例，- R Y 可選自由吡啶基及吡唑基組成之群，其中之每一者視情況經1至2個 R c 取代。
在某些實施例中， R 5 為C 3 - 10環烷基或C 3 - 10環烯基，其各自視情況經1至4個各自獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代。
在某些此等實施例中， R 5 為經1至4個各自獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代之C 3 - 10環烷基。
在某些實施例中， R 5 為經C 1 - 4烷氧基或C 1 - 4鹵代烷氧基取代之C 3 - 6環烷基；且 R 5 進一步視情況經1至2個各自獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代。
在某些實施例中， R 5 為經C 1 - 4烷氧基或C 1 - 4鹵代烷氧基取代之環丙基。例如， R 5 可為
Figure 02_image237
(例如
Figure 02_image239
)。
在某些實施例中， R 5 為-S(O) 0 - 2(C 1 - 6烷基)，其視情況經1至6個 R a 取代。
在某些此等實施例中，R 5為-S(O) 2(C 1 - 6烷基)，其視情況經1至6個 R a 取代。
作為前述實施例之非限制性實例， R 5 可為-S(O) 2(C 1 - 6烷基) (例如，-S(O) 2(C 1 - 3烷基))。
在某些實施例中， R 5 係選自由以下組成之群：- L 5 - R g 、- L 5 - R g2 - R Y 及- L 5 - R g2 - R W 。
在某些此等實施例中， R 5 為- L 5 - R g 。在某些前述實施例中， R 5 為-O- R g 。
在某些實施例中， R 5 為-O- R g ；且存在於-O- R g 中之該 R g 為C 3 - 10環烷基或C 3 - 10環烯基，其各自視情況經1至4個各自獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代。
在某些實施例中， R 5 為-O-(C 3 - 6環烷基)，其中該C 3 - 6環烷基視情況經1至3個 R c 取代。例如， R 5 可為
Figure 02_image241
。
在一些實施例中， L 1 為視情況經1至6個 R a 取代之C 1 - 10伸烷基。
在某些此等實施例中， L 1 為視情況經1至6個 R a 取代之C 1 - 6伸烷基。在某些前述實施例中， L 1 為視情況經1至6個 R a 取代之C 1 - 3伸烷基。在某些實施例中， L 1 為C 1 - 3伸烷基。例如， L 1 可為-CH 2。作為另一非限制性實例， L 1 可為-CH 2CH 2-。
在某些此等實施例中， L 1 為視情況經1至6個 R a 取代之C 1 - 4伸烷基。在某些此等前述實施例中， L 1 為C 1 - 4伸烷基。作為前述實施例之非限制性實例， L 1 可為-CH2-或-CH 2CH 2-。作為前述實施例之另一非限制性實例， L 1 可為
Figure 02_image243
，其中星號表示與 R W 之連接點。
在一些實施例中， L 1 為鍵。
當 X 1 為
Figure 02_image245
之實施例
在一些實施例中， X 1 為
Figure 02_image247
。
在某些此等實施例中， R 6 為 R g 。
在某些實施例中， R 6 為包括3至10個環原子之雜環基或雜環烯基，其中1至3個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜環基或雜環烯基視情況經1至4個獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代。
在某些實施例中， R 6 為包括3至10個環原子之雜環基或雜環烯基，其中1至3個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜環基視情況經1至4個獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代。
在某些此等實施例中， R 6 為包括4至6個環原子之雜環基，其中1至3個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜環基視情況經1至2個獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代。
在某些實施例中， R 6 係選自由吡咯啶基、哌啶基、氧雜環丁烷基、四氫呋喃基及四氫哌喃基組成之群，其中之每一者視情況經1至2個獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代，其中該吡咯啶基或哌啶基之環氮視情況經 R d 取代，諸如其中 R 6 為
Figure 02_image249
(例如
Figure 02_image251
)、
Figure 02_image253
。
在某些前述實施例中， R 6 係選自由吡咯啶基、哌啶基、四氫呋喃基及四氫哌喃基組成之群，其中之每一者視情況經1至2個獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代，其中該吡咯啶基或哌啶基之環氮視情況經 R d 取代。作為前述實施例之非限制性實例， R 6 可為
Figure 02_image255
。作為另一非限制性實例， R 6 可為
Figure 02_image257
(例如
Figure 02_image259
)。
在某些實施例中(當 R 6 為 R g 時)， R 6 為C 3 - 8環烷基或C 3 - 8環烯基，其各自視情況經1至4個獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代。在某些此等實施例中， R 6 為視情況經1至2個 R c 取代之C 3 - 8環烷基，(例如
Figure 02_image261
，諸如
Figure 02_image263
)。
在某些實施例中(當 R 6 為 R g 時)， R 6 為包括5至10 (例如5至6)個環原子之雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R c 取代。在某些此等實施例中， R 6 為包括5個環原子之雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至2個 R c 取代。例如， R 6 可為
Figure 02_image265
，諸如
Figure 02_image267
。作為另一非限制性實例， R 6 可為
Figure 02_image269
。
在某些實施例中， R 6 為包括6個環原子之雜芳基，其中1至4個環原子為環氮原子，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R c 取代。例如， R 6 可為
Figure 02_image271
。
在某些實施例中， R 6 為- R g2 - R W 或- R g2 - R Y 。
在某些此等實施例中， R 6 為- R g2 - R W 。
在某些前述實施例中，- R 6 為
Figure 02_image273
，其中 環 D為包括3至10個環原子之伸雜環基，其中0至2個環原子(除鍵結至 R W 之環氮原子以外)為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該伸雜環基視情況經1至3個各自獨立地選自由側氧基及- R c 組成之群的取代基取代。
在某些前述實施例中，- R 6 為
Figure 02_image275
，其中 環 D為包括3至10個環原子之伸雜環基，其中0至2個環原子(除鍵結至 R W 之環氮原子以外)為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該伸雜環基視情況經1至3個各自獨立地選自由側氧基及- R c 組成之群的取代基取代；視情況其中 - R 6 為包括3至10個如上文所定義之環原子的單環伸雜環基環，其中氮原子鍵結至 R W (例如
Figure 02_image277
，諸如
Figure 02_image279
或
Figure 02_image281
；
Figure 02_image283
，諸如
Figure 02_image285
或
Figure 02_image287
)；視情況其中- R 6 為包括3至10個如上文所定義之環原子的雙環伸雜環基環，其中氮原子鍵結至 R W (例如
Figure 02_image289
；或
Figure 02_image291
，諸如
Figure 02_image293
、
Figure 02_image295
、
Figure 02_image297
或
Figure 02_image299
；或
Figure 02_image301
，諸如
Figure 02_image303
或
Figure 02_image305
；或
Figure 02_image307
，諸如
Figure 02_image309
或
Figure 02_image311
)。
在某些此等實施例中，- R 6 為
Figure 02_image313
，視情況經1至2個 R c 取代，其中 x1及 x2各自獨立地為0、1或2。
在某些實施例中， x1=0，且 x2=0。在某些實施例中， x1=0，且 x2=1。在某些實施例中， x1=0，且 x2=2。
在某些實施例中， x1=0，且 x2=0；或 x1=0，且 x2=1；或 x1=0，且 x2=2。
作為非限制性實例，當 R 6 為
Figure 02_image315
(例如
Figure 02_image317
)， R 6 可選自由以下組成之群：
Figure 02_image319
(例如
Figure 02_image321
)；
Figure 02_image323
(例如
Figure 02_image325
)；及
Figure 02_image327
(例如
Figure 02_image329
)。
作為非限制性實例，當 R 6 為
Figure 02_image331
(例如
Figure 02_image333
)， R 6 可選自由以下組成之群：
Figure 02_image335
，諸如
Figure 02_image337
；
Figure 02_image339
，諸如
Figure 02_image341
；
Figure 02_image343
，諸如
Figure 02_image345
；
Figure 02_image347
，諸如
Figure 02_image349
及
Figure 02_image351
，諸如
Figure 02_image353
。
在某些實施例中， R 6 為經 R W 取代之C 3-C 6環烷基(例如環丁基)；或經 R W 取代之氧雜環丁烷基；或經 R W 取代之四氫呋喃基。
在某些實施例中， R 6 為- R W 。
在某些實施例中(當 R 6 為 - R g2 - R W 時)，- R W 為- L W 至 W；且 L W 為C(=O)。
在某些實施例中(當 R 6 為- R g2 - R W 或當 R 6 為 R W 時)，- R W 為- L W - W；且 L W 為C(=O)NHC(=O)*、N R d C(=O)*(例如NMeC(=O)*)或NHS(O) 1 - 2*，其中星號表示與 W之連接點。
在某些此等實施例中， W為視情況經1至3個 R a 取代且進一步視情況經 R g 取代之C 2 - 6烯基，其中 W經由 sp 2 雜化碳原子連接至 L W 。
在某些此等實施例中， W為視情況經1至3個 R a 取代且進一步視情況經 R g 取代之C 2 - 6烯基或C 2 - 6炔基，其中 W經由 sp 2 或 sp雜化碳原子連接至 L W 。
在某些前述實施例中， W為視情況經1至3個 R a 取代且進一步視情況經 R g 取代之C 2 - 4烯基，其中 W經由 sp 2 雜化碳原子連接至 L W 。例如， W可為CH=CH 2。
在某些前述實施例中， W為C 2 - 4烯基(例如CH=CH 2)或C 2 - 4炔基(例如
Figure 02_image355
)視情況經1至3個 R a 取代且進一步視情況經 R g 取代，其中 W經由 sp 2 或 sp雜化碳原子連接至 L W 。
在某些實施例中，- L W - W為-C(=O)CH=CH 2。
在某些實施例中，- L W - W為-C(=O)CH=CH 2；-C(=O)NHCH=CH 2；C(=O)CH=CHCH 2NR eR f(例如C(=O)CH=CHCH 2N(HMe)、C(=O)CH=CHCH 2NMe 2、
Figure 02_image357
)；或
Figure 02_image359
。
在某些實施例中， R 6 為-C 1 - 6烷氧基或-S(O) 0 - 2(C 1 - 6烷基)，各自視情況經1至6個 R a 取代。
在某些此等實施例中， R 6 為C 1 - 6烷氧基。例如， R 6 可為-C 1 - 3烷氧基(例如甲氧基)。
在某些實施例中， L 2 為鍵。
在某些實施例中， L 2 為視情況經1至6個 R a 取代之C 1 - 10伸烷基。
在某些實施例中， L 2 為視情況經1至6個 R a 取代之C 1 - 10伸烷基，其中 R a 為-N R eR f (例如NMe 2)、鹵基(例如氟)、烷氧基(例如甲氧基)。
在某些此等實施例中， L 2 為視情況經1至6個 R a 取代之C 1 - 6伸烷基。在某些前述實施例中， L 2 為分支鏈C 3 - 6伸烷基。作為前述實施例之一非限制性實例， L 2 可為
Figure 02_image361
。
在某些實施例中， L 2 為視情況經1至6個 R a 取代之C 1 - 6伸烷基，其中 R a 為-N R eR f (例如NMe 2)、鹵基(例如氟)、烷氧基(例如甲氧基)。在某些此等前述實施例中， L 2 為視情況經1至6個 R a 取代之分支鏈C 3 - 6伸烷基，其中 R a 為-N R eR f (例如NMe 2)、鹵基(例如氟)、烷氧基(例如甲氧基)。
作為前述實施例之非限制性實例， L 2 可為
Figure 02_image363
、
Figure 02_image365
(例如
Figure 02_image367
)、
Figure 02_image369
(例如
Figure 02_image371
)、
Figure 02_image373
(例如
Figure 02_image375
)、
Figure 02_image377
(例如
Figure 02_image379
)、
Figure 02_image381
(例如
Figure 02_image383
Figure 02_image385
)或
Figure 02_image387
(例如
Figure 02_image389
)。
變數R 1c、R 2a、R 2b、R 3a及R 3b在一些實施例中， R 1c 為H。
在一些實施例中， R 2a 及 R 2b 為H。
在一些實施例中， R 2a 及 R 2b 中之1至2個(例如1個)為除H外之取代基。
在某些此等實施例中， R 2a 及 R 2b 中之一者為視情況經1至3個 R a 取代之C 1 - 3烷基(例如C 1 - 3烷基)；且 R 2a 及 R 2b 中之另一者為H。
在一些實施例中， R 3a 及 R 3b 為H。
在一些實施例中， R 3a 及 R 3b 中之1至2個(例如1個)為除H外之取代基。
在某些此等實施例中， R 3a 及 R 3b 中之一者為視情況經1至3個 R a 取代之C 1 - 3烷基(例如視情況經1至3個-F取代之C 1 - 3烷基)；且 R 2a 及 R 2b 中之另一者為H。
在一些實施例中， R 3a 及 R 3b 與其各自所連接之 環 B環原子一起形成具有3至12個環原子之稠合飽和或不飽和環； ●  其中環原子中之0至2個各自為獨立選擇之雜原子，其中該等獨立選擇之雜原子中之每一者係選自由N、NH、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群；且 ●  其中該3至12個環原子之稠合飽和或不飽和環視情況經1至4個獨立地選自由側氧基、 R c 及 R W 組成之群的取代基取代。
在某些實施例中， R 3a 及 R 3b 與其各自所連接之 環 B環原子一起形成具有4至8個環原子之稠合飽和環； ●  其中環原子中之0至2個各自為獨立選擇之雜原子，其中該等獨立選擇之雜原子中之每一者係選自由N、NH、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群；且 ●  其中該4至8個環原子之稠合飽和環視情況經1至4個獨立地選自由側氧基、 R c 及 R W 組成之群的取代基取代。
在某些此等實施例中， R 3a 及 R 3b 與其各自所連接之 環 B環原子一起形成：
Figure 02_image391
，其視情況經1至2個獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代，其中： p1及 p2獨立地為0、1或2； R Q 為H、 R d 、C(=O) - W或S(O) 2 W；且 cc 表示與C( R 2aR 2b )之連接點。
在某些此等實施例中， R Q 為H。在某些實施例中， R Q 為 R d 。在某些實施例中， R Q 為視情況經1至3個獨立選擇之 R a 取代之C 1 - 6烷基。在某些實施例中， R Q 為C(=O) - W或S(O) 2 W。在某些此等實施例中， W為C 2 - 4烯基。例如， R Q 可為C(=O)-CH 2=CH 2。
在某些此等實施例中， R 3a 及 R 3b 與其各自所連接之 環 B環原子一起形成
Figure 02_image393
，其中 R Q 為H、 R d 、C(=O)- W或S(O) 2 W；且 cc 表示與C( R 2aR 2b )之連接點。在某些此等實施例中， R Q 為H。在某些實施例中， R Q 為 R d 。在某些實施例中， R Q 為視情況經1至3個獨立選擇之 R a 取代之C 1 - 6烷基。在某些實施例中， R Q 為C(=O) - W或S(O) 2 W。在某些此等實施例中， W為C 2 - 4烯基。例如， R Q 可為C(=O)-CH 2=CH 2。
在某些實施例中， R 3a 及 R 3b 與其各自所連接之 環 B環原子一起形成選自由以下組成之群的稠環：
Figure 02_image395
諸如
Figure 02_image397
諸如
Figure 02_image399
諸如
Figure 02_image401
(例如
Figure 02_image403
)；
Figure 02_image405
諸如
Figure 02_image407
；
Figure 02_image409
諸如
Figure 02_image411
諸如
Figure 02_image413
諸如
Figure 02_image415
(例如
Figure 02_image417
)，其中 R Q 為H、 R d 、C(=O)- W或S(O) 2 W；且 cc 表示與C( R 2aR 2b )之連接點。在某些此等實施例中， R Q 為H。在某些實施例中， R Q 為 R d 。在某些實施例中， R Q 為視情況經1至3個獨立選擇之 R a 取代之C 1 - 6烷基。在某些實施例中， R Q 為C(=O) - W或S(O) 2 W。在某些此等實施例中， W為C 2 - 4烯基。例如， R Q 可為C(=O)-CH 2=CH 2。
變數環A  在一些實施例中， 環 A為
Figure 02_image419
，其中各 R cB 為獨立選擇之 R c ；且 m為0、1、2、3或4。
在某些此等實施例中，m為1、2或3。例如， m可為1或2 (例如2)。
在某些實施例中， 環 A為
Figure 02_image421
(例如
Figure 02_image423
)，其中各 R cB 為獨立選擇之 R c 。
在某些實施例中，各 R cB 獨立地選自由以下組成之群：-鹵基，諸如-Cl及-F；-CN；C 1 - 4烷氧基；C 1 - 4鹵代烷氧基；C 1 - 3烷基；及經1至6個獨立選擇之鹵基取代之C 1 - 3烷基。
在某些實施例中， 環 A為
Figure 02_image425
，其中 R cB1 為 R c ；且 R cB2 為H或 R c 。
在某些此等實施例中， R cB1 為鹵基(例如，-F或-Cl (例如-F))。
在某些實施例中， R cB2 為C 1 - 4烷氧基或C 1 - 4鹵代烷氧基(例如C 1 - 4烷氧基(例如甲氧基))。
作為前述實施例之非限制性實例， 環 A可為
Figure 02_image427
。
在某些實施例中， 環 A為包括5至10個環原子之雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R c 取代。
在某些此等實施例中， 環 A為包括9至10個環原子之雙環雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R c 取代。
作為前述實施例之非限制性實例， 環 A可為喹啉基、吲唑基、吡唑并吡啶基或異噻唑并吡啶基，其中之每一者視情況經1至2個 R c 取代，其中環氮視情況經 R d 取代。例如， 環 A可為：
Figure 02_image429
(例如
Figure 02_image431
)、
Figure 02_image433
(
Figure 02_image435
)、
Figure 02_image437
(例如
Figure 02_image439
)或
Figure 02_image441
(例如
Figure 02_image443
)，其中之每一者進一步視情況經 R c 取代。作為另一非限制性實例， 環 A可為
Figure 02_image445
，其進一步視情況經 R c 取代。
變數n、R 7及R 4在一些實施例中， n為0。在一些實施例中， n為1或2。在某些此等實施例中， n為1。在某些實施例中， R 7 在一次出現時為N R eR f (例如NH 2、NH(C 1 - 3烷基)或N(C 1 - 3烷基) 2)。在某些此等實施例中， R 7 在一次出現時為NH 2或NH(C 1 - 3烷基)。例如， R 7 在一次出現時可為NH 2。
在某些實施例中，
Figure 02_image447
部分為
Figure 02_image449
。在某些此等實施例中， R 7 在一次出現時為N R eR f (例如NH 2、NH(C 1 - 3烷基)或N(C 1 - 3烷基) 2)。在某些前述實施例中， R 7 在一次出現時為NH 2或NH(C 1 - 3烷基)。例如， R 7 在一次出現時可為NH 2。
在一些實施例中， R 4 為H。
非限制性組合  在某些實施例中，式 ( I )化合物為式 ( I - a )化合物
Figure 02_image451
式 (I-a) ，或其醫藥學上可接受之鹽， 其中 環 D1係選自由以下組成之群： ●  包括5至6個環原子之單環雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R cA 取代；及 ●  - R g2 - R Y ，其中存在於- R g2 - R Y 中之該 - R g2 為包括5至6個環原子之單環伸雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S組成之群，且其中該伸雜芳基視情況經1至3個 R cA 取代， 其中各 R cA 為獨立選擇之 R c ；及 L 1 為視情況經1至6個 R a 取代之鍵或C 1 - 3伸烷基。
在式 ( I - a )之某些實施例中， 環 D1為包括5個環原子之單環雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R cA 取代。
作為前述實施例之非限制性實例， 環 D1可選自由以下組成之群：
Figure 02_image453
Figure 02_image455
，各自視情況經1至2個 R cA 取代。
作為前述實施例之非限制性實例， 環 D1可選自由以下組成之群：
Figure 02_image457
Figure 02_image459
，各自視情況經1至2個 R cA 取代。
在式 ( I - a )之某些實施例中， 環 D1為包括6個環原子之單環雜芳基，其中1至4個環原子為環氮原子，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R cA 取代。
作為前述實施例之非限制性實例， 環 D1可選自由以下組成之群：
Figure 02_image461
，諸如
Figure 02_image463
，諸如
Figure 02_image465
Figure 02_image467
，諸如
Figure 02_image469
，其中之每一者進一步視情況經 R cA 取代。
作為前述實施例之非限制性實例， 環 D1可選自由以下組成之群：
Figure 02_image471
(例如
Figure 02_image473
)；
Figure 02_image475
(例如
Figure 02_image477
)；
Figure 02_image479
Figure 02_image481
(例如
Figure 02_image483
)，其中之每一者進一步視情況經 R cA 取代。
在式 ( I - a )之某些實施例中， 環 D1為- R g2 - R Y ；且存在於- R g2 - R Y 中之該- R g2 為包括5至6個環原子之單環伸雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S組成之群，且其中該伸雜芳基視情況經1至3個 R cA 取代。
在某些此等實施例中， 環 D1為- R g2 - R Y ；且存在於- R g2 - R Y 中之該- R g2 為包括5個環原子之單環伸雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S組成之群，且其中該伸雜芳基視情況經1至2個 R cA 取代。例如， 環 D1可為
Figure 02_image485
。
在式 ( I - a )之某些實施例中(當 環 D1為- R g2 - R Y 時)， R Y 係選自由以下組成之群： ●  視情況經1至3個 R c 取代之苯基；及 ●  包括5至6個環原子之單環雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R c 取代。
在式 ( I - a )之某些實施例中， n為0。
在式 ( I - a )之某些實施例中， n為1或2。例如， n可為1。
在式 ( I - a )之某些實施例中，
Figure 02_image487
為
Figure 02_image489
。
在式 ( I - a )之某些實施例中， R 7 為N R eR f ，諸如NH 2、NH(C 1 - 3烷基)或N(C 1 - 3烷基) 2，諸如其中 R 7 為NH 2。
在某些實施例中，式 ( I )化合物為式 ( I - b )化合物
Figure 02_image491
式 (I-b) ，或其醫藥學上可接受之鹽， 其中 環 D2為包括8至10個環原子之雙環雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R cA 取代，其中各 R cA 為獨立選擇之 R c ；及 L 1 為視情況經1至6個 R a 取代之鍵或C 1 - 3伸烷基。
在式 ( I - b )之某些實施例中， 環 D2為包括8個環原子之雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R cA 取代，其中各 R cA 為獨立選擇之 R c 。
作為前述實施例之非限制性實例， 環 D2可選自由以下組成之群：
Figure 02_image493
Figure 02_image495
，其中之每一者進一步視情況經1至2個 R cA 取代，其中各 R cA 為獨立選擇之 R c 。
作為其他非限制性實例， 環 D2可選自由以下組成之群：
Figure 02_image497
Figure 02_image499
，其中之每一者進一步視情況經1至2個 R cA 取代，其中各 R cA 為獨立選擇之 R c 。
在式 ( I - b )之某些實施例中， 環 D2為包括9個環原子之雙環雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R cA 取代，其中各 R cA 為獨立選擇之 R c 。
在某些此等實施例中， 環 D2為咪唑并吡啶基、吡唑并吡啶基或苯并三唑基，其中之每一者視情況經1至2個 R cA 取代，其中各 R cA 為獨立選擇之 R c 。
作為前述實施例之非限制性實例， 環 D2可為
Figure 02_image501
，其中之每一者視情況經1至2個 R cA 取代，其中各 R cA 為獨立選擇之 R c 。
在式 ( I - b )之某些實施例中， n為0。
在式 ( I - b )之某些實施例中， n為1或2。例如， n可為1。
在式 ( I - b )之某些實施例中，
Figure 02_image503
為
Figure 02_image505
。
在式 ( I - b )之某些實施例中， R 7 為N R eR f ，諸如NH 2、NH(C 1 - 3烷基)或N(C 1 - 3烷基) 2，諸如其中 R 7 為NH 2。
在式 ( I - a )或 ( I - b )之某些實施例中，各 R cA 獨立地選自由以下組成之群：鹵基；氰基；-OH；C 1 - 6烷基，其視情況經1至6個獨立選擇之 R a 取代；視情況經C 1 - 4烷氧基或C 1 - 4鹵代烷氧基取代之C 1 - 4烷氧基；C 1 - 4鹵代烷氧基；及-C(=O)N R ' R ''。
在某些實施例中， R cA 在一次出現時為獨立選擇之鹵基，諸如-F或-Cl。在某些實施例中， R cA 在一次出現時為氰基。在某些實施例中， R cA 在一次出現時為視情況經1至6個獨立選擇之 R a 取代的C 1 - 6烷基。在某些實施例中， R cA 在一次出現時為C 1 - 6烷基，諸如C 1 - 3烷基。在某些實施例中， R cA 在一次出現時為經-OH或-N R eR f 取代之C 1 - 6烷基。例如， R cA 在一次出現時可為經-OH或NH 2取代之C 1 - 3烷基。在某些實施例中， R cA 在一次出現時為視情況經C 1 - 4烷氧基或C 1 - 4鹵代烷氧基取代之C 1 - 4烷氧基。例如， R cA 在一次出現可為C 1 - 4烷氧基(例如甲氧基或乙氧基)。
在某些實施例中，式 ( I )化合物為式 ( I - c )化合物
Figure 02_image507
式 (I-c) ，或其醫藥學上可接受之鹽， 其中 環 D為包括3至10個環原子之伸雜環基，其中0至2個環原子(除鍵結至 R Z 之環氮原子以外)為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該伸雜環基視情況經1至3個各自獨立地選自由側氧基及- R c 組成之群的取代基取代； R Z 為 R X 或 R Y ；及 L 1 為視情況經1至6個 R a 取代之鍵或C 1 - 3伸烷基。
在式 ( I - c )之某些實施例中， R Z 為 R X 。
在某些此等實施例中， R Z 為C(=O)(C 1 - 4烷基)。
在某些實施例中， R Z 為S(O) 2(C 1 - 4烷基)。
在式 ( I - b )之某些實施例中， R Z 為 R Y 。
在某些此等實施例中， R Z 為 R g 。
在某些前述實施例中， R Z 係選自由以下組成之群： ●  視情況經1至3個 R c 取代之苯基；及 ●  包括5至6個環原子之單環雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R c 取代。
在式 ( I - c )之某些實施例中， n為0。
在式 ( I - c )之某些實施例中， n為1或2，諸如其中 n為1。
在式 ( I - c )之某些實施例中，
Figure 02_image509
為
Figure 02_image511
。
在式 ( I - c )之某些實施例中， R 7 為N R eR f ，諸如NH 2、NH(C 1 - 3烷基)或N(C 1 - 3烷基) 2，諸如其中 R 7 為NH 2。
在某些實施例中，式 ( I )化合物為式 ( I - d )化合物
Figure 02_image513
式 (I-d) ，或其醫藥學上可接受之鹽， 其中 環 D為包括3至10個環原子之伸雜環基，其中0至2個環原子(除鍵結至 R W 之環氮原子以外)為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該伸雜環基視情況經1至3個各自獨立地選自由側氧基及- R c 組成之群的取代基取代；及 L 1 為視情況經1至6個 R a 取代之鍵或C 1 - 3伸烷基。
在式 ( I - d )之某些實施例中， R W 為 - L W - W；且 L W 為C(=O)。
在某些此等實施例中， W為視情況經1至3個 R a 取代且進一步視情況經 R g 取代之C 2 - 6烯基，其中 W經由 sp 2 雜化碳原子連接至 L W 。例如， W可為CH=CH 2。
在某些此等實施例中， W為視情況經1至3個 R a 取代且進一步視情況經 R g 取代之C 2 - 6烯基或C 2 - 6炔基，其中 W經由 sp 2 或 sp雜化碳原子連接至 L W 。作為非限制性實例， W可為CH=CH 2、CH=CHCH 2NMe 2或
Figure 02_image515
。
在式 ( I - c )或 ( I - d )之某些實施例中， 環 D為
Figure 02_image517
，其視情況經1至2個 R c 取代，其中 x1及 x2各自獨立地為0、1或2。在某些此等實施例中， x1為0。
作為前述實施例之非限制性實例， 環 D可選自由以下組成之群：
Figure 02_image519
(例如
Figure 02_image521
)；
Figure 02_image523
(例如
Figure 02_image525
)；及
Figure 02_image527
(例如
Figure 02_image529
)。
作為前述實施例之其他非限制性實例， 環 D可選自由以下組成之群：
Figure 02_image531
，諸如
Figure 02_image533
；
Figure 02_image535
，諸如
Figure 02_image537
；
Figure 02_image539
，諸如
Figure 02_image541
；
Figure 02_image543
，諸如
Figure 02_image545
；及
Figure 02_image547
，諸如
Figure 02_image549
。
在式 ( I - d )之某些實施例中， n為0。
在式 ( I - d )之某些實施例中， n為1或2。例如， n可為1。
在式 ( I - d )之某些實施例中，
Figure 02_image551
為
Figure 02_image553
。
在式 ( I - d )之某些實施例中，
Figure 02_image555
為
Figure 02_image557
。
在式 ( I - d )之某些實施例中， R 7 為N R eR f ，諸如NH 2、NH(C 1 - 3烷基)或N(C 1 - 3烷基) 2，諸如其中 R 7 為NH 2。
在某些實施例中，式 ( I )化合物為式 ( I - e )化合物
Figure 02_image559
式 (I-e) ，或其醫藥學上可接受之鹽， 其中 R 5A 為視情況經1至6個 R a 取代之- L 5 - R g 或-S(O) 0 - 2(C 1 - 6烷基)；及 L 1 為視情況經1至6個 R a 取代之C 1 - 10伸烷基。
在式 ( I - e )之某些實施例中， R 5A 為- L 5 - R g 。在某些此等實施例中， R 5A 為-O- R g 。
在某些前述實施例中， R 5A 為-O- R g ；且存在於-O- R g 中之該 R g 為C 3 - 10環烷基或C 3 - 10環烯基，其各自視情況經1至4個各自獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代。
在某些實施例中， R 5A 為-O-(C 3 - 6環烷基)，其中該C 3 - 6環烷基視情況經1至3個 R c 取代。例如， R 5 可為
Figure 02_image561
。
在式 ( I - e )之某些實施例中， R 5A 為-S(O) 0 - 2(C 1 - 6烷基)，其視情況經1至6個 R a 取代。在某些此等實施例中， R 5A 為-S(O) 2(C 1 - 6烷基)，其視情況經1至6個 R a 取代。作為前述實施例之非限制性實例， R 5A 可為-S(O) 2(C 1 - 3烷基) (例如-S(O) 2Me)。
在式 ( I - e )之某些實施例中， n為0。
在式 ( I - e )之某些實施例中， n為1或2，諸如其中 n為1。
在式 ( I - e )之某些實施例中，
Figure 02_image563
為
Figure 02_image565
。
在式 ( I - e )之某些實施例中， R 7 為N R eR f ，諸如NH 2、NH(C 1 - 3烷基)或N(C 1 - 3烷基) 2，諸如其中 R 7 為NH 2。
在式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d )或 ( I - e )之某些實施例中， L 1 為視情況經1至6個 R a 取代之C 1 - 3伸烷基。
在某些此等實施例中， L 1 為C 1 - 3伸烷基。例如， L 1 可為-CH 2-。作為另一非限制性實例， L 1 可為-CH 2CH 2-。
在式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d )或 ( I - e )之某些實施例中， L 1 為鍵。
在某些實施例中，式 ( I )化合物為式 ( I - f )化合物
Figure 02_image567
式 (I-f) ，或其醫藥學上可接受之鹽， 其中 環 D3為經1至4個各自獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代之C 3 - 10環烷基。
在式 ( I - f )之某些實施例中， 環 D3為經C 1 - 4烷氧基或C 1 - 4鹵代烷氧基取代之C 3 - 6環烷基；且 R 5 進一步視情況經1至2個各自獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代。
在某些此等實施例中， R 5 為經C 1 - 4烷氧基或C 1 - 4鹵代烷氧基取代之環丙基。例如， R 5 可為：
Figure 02_image569
(例如
Figure 02_image571
)。
在式 ( I - f )之某些實施例中， n為0。
在式 ( I - f )之某些實施例中， n為1或2，諸如其中 n為1。
在式 ( I - f )之某些實施例中，
Figure 02_image573
為
Figure 02_image575
。
在式 ( I - f )之某些實施例中， R 7 為N R eR f ，諸如NH 2、NH(C 1 - 3烷基)或N(C 1 - 3烷基) 2，諸如其中 R 7 為NH 2。
在某些此等實施例中，式 ( I )化合物為式 ( I - g )化合物
Figure 02_image577
式 (I-g) ，或其醫藥學上可接受之鹽， 其中 L 2 為視情況經1至6個 R a 取代之C 1 - 6伸烷基；及 R 6A 係選自由以下組成之群：視情況經1至6個 R a 取代之-C 1 - 6烷氧基；N R eR f ；H；鹵基；及-OH。
在式 ( I - g )之某些實施例中， R 6A 為視情況經1至6個 R a 取代之-C 1 - 6烷氧基。
在某些此等實施例中， R 6A 為-C 1 - 3烷氧基(例如甲氧基)。
在某些實施例中， R 6A 為N R eR f 。
在某些實施例中， R 6A 為H、鹵基或-OH。
在式 ( I - g )之某些實施例中， L 2 為分支鏈C 3 - 6伸烷基。作為前述實施例之一非限制性實例， L 2 可為
Figure 02_image579
。
在式 ( I - g )之某些實施例中， L 2 為C 1 - 3伸烷基，諸如-CH 2-。
在式 ( I - g )之某些實施例中， n為0。
在式 ( I - g )之某些實施例中， n為1或2，諸如其中 n為1。
在式 ( I - g )之某些實施例中，
Figure 02_image581
為
Figure 02_image583
。
在式 ( I - g )之某些實施例中， R 7 為N R eR f ，諸如NH 2、NH(C 1 - 3烷基)或N(C 1 - 3烷基) 2，諸如其中 R 7 為NH 2。
在某些實施例中，式 ( I )化合物為式 ( I - h )化合物：
Figure 02_image585
式 (I-h) ，或其醫藥學上可接受之鹽， 其中 環 D4為 R g 。
在式 ( I - h )之某些實施例中， 環 D4係選自由以下組成之群： ●  C 3 - 10環烷基或C 3 - 10環烯基，其中之每一者視情況經1至4個獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代；及 ●  包括3至10個環原子之雜環基或雜環烯基，其中1至3個環原子為雜原子，其各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜環基或雜環烯基視情況經1至4個獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代。
在某些此等實施例中， 環 D4為包括4至6個環原子之雜環基，其中1至3個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜環基視情況經1至4個獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代。
在某些前述實施例中， 環 D4係選自由吡咯啶基、哌啶基、氧雜環丁烷基、四氫呋喃基及四氫哌喃基組成之群，其中之每一者視情況經1至2個獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代，其中該吡咯啶基或哌啶基之環氮視情況經 R d 取代。作為前述實施例之非限制性實例， 環 D4可為：
Figure 02_image587
(例如
Figure 02_image589
),
Figure 02_image591
。
在某些前述實施例中， 環 D4係選自由吡咯啶基、哌啶基、四氫呋喃基及四氫哌喃基組成之群，其中之每一者視情況經1至2個獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代，其中該吡咯啶基或哌啶基之環氮視情況經 R d 取代。作為前述實施例之非限制性實例， 環 D4可為：
Figure 02_image593
。
在式 ( I - h )之某些實施例中，環D4為包括5至6個環原子之雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R c 取代。例如， R 6 可為
Figure 02_image595
Figure 02_image597
。
在式 ( I - h )之某些實施例中， n為0。
在式 ( I - h )之某些實施例中， n為1或2，諸如其中 n為1。
在式 ( I - h )之某些實施例中，
Figure 02_image599
為
Figure 02_image601
。
在式 ( I - h )之某些實施例中， R 7 為N R eR f ，諸如NH 2、NH(C 1 - 3烷基)或N(C 1 - 3烷基) 2，諸如其中 R 7 為NH 2。
在某些實施例中，式 ( I )化合物為式 ( I - i )化合物
Figure 02_image603
式 (I-i) ，或其醫藥學上可接受之鹽， 其中 環 D為包括3至10個環原子之伸雜環基，其中0至2個環原子(除鍵結至 R W 之環氮原子以外)為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該伸雜環基視情況經1至3個各自獨立地選自由側氧基及- R c 組成之群的取代基取代。
在式 ( I - i )之某些實施例中， R W 為 - L W - W；且 L W 為C(=O)。
在式 ( I - i )之某些實施例中， W為視情況經1至3個 R a 取代且進一步視情況經 R g 取代之C 2 - 6烯基，其中 W經由 sp 2 雜化碳原子連接至 L W 。作為前述實施例之非限制性實例， W可為CH=CH 2。
在式 ( I - i )之某些實施例中， W為視情況經1至3個 R a 取代且進一步視情況經 R g 取代之C 2 - 6烯基或C 2 - 6炔基，其中 W經由 sp 2 或 sp雜化碳原子連接至 L W 。作為前述實施例之非限制性實例， W可為CH=CH 2、CH=CHCH 2NMe 2或
Figure 02_image605
。
在式 ( I - i )之某些實施例中，- L W - W為-C(=O)CH=CH 2；-C(=O)NHCH=CH 2；C(=O)CH=CHCH 2N R eR f (例如C(=O)CH=CHCH 2N(HMe)、C(=O)CH=CHCH 2NMe 2、
Figure 02_image607
)；或
Figure 02_image609
。
在式 ( I - i )之某些實施例中， 環 D為
Figure 02_image611
，其視情況經1至2個 R c 取代，其中 x1及 x2各自獨立地為0、1或2。
在某些此等實施例中， x1為0。
作為前述實施例之非限制性實例， 環 D可選自由以下組成之群：
Figure 02_image613
(例如
Figure 02_image615
)；
Figure 02_image617
(例如
Figure 02_image619
)；及
Figure 02_image621
(例如
Figure 02_image623
)。
作為前述實施例之其他非限制性實例， 環 D可選自由以下組成之群：
Figure 02_image625
，諸如
Figure 02_image627
；
Figure 02_image629
，諸如
Figure 02_image631
；
Figure 02_image633
，諸如
Figure 02_image635
；
Figure 02_image637
，諸如
Figure 02_image639
；及
Figure 02_image641
，諸如
Figure 02_image643
。
在式 ( I - i )之某些實施例中，
Figure 02_image645
為鍵結至 R W 且包括3至10個環原子之伸雜環基，其中0至2個環原子(除鍵結至 R W 之環氮原子以外)為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該伸雜環基視情況經1至3個各自獨立地選自由側氧基及- R c 組成之群的取代基取代；視情況其中
Figure 02_image647
為包括3至10個如上文所定義之環原子的單環伸雜環基環，其中氮原子鍵結至 R W (例如
Figure 02_image649
，諸如
Figure 02_image651
；
Figure 02_image653
，諸如
Figure 02_image655
)；視情況其中
Figure 02_image657
為包括3至10個如上文所定義之環原子的雙環伸雜環基環，其中氮原子鍵結至 R W (例如
Figure 02_image659
；或
Figure 02_image661
，諸如
Figure 02_image663
Figure 02_image665
；或
Figure 02_image667
，諸如
Figure 02_image669
；或
Figure 02_image671
，諸如
Figure 02_image673
)。
在式 ( I - i )之某些實施例中， n為0。
在式 ( I - i )之某些實施例中， n為1或2，諸如其中 n為1。
在式 ( I - i )之某些實施例中，
Figure 02_image675
為
Figure 02_image677
。
在式 ( I - i )之某些實施例中，
Figure 02_image679
為
Figure 02_image681
。
在式 ( I - i )之某些實施例中， R 7 為N R eR f ，諸如NH 2、NH(C 1 - 3烷基)或N(C 1 - 3烷基) 2，諸如其中 R 7 為NH 2。
在某些實施例中，式 ( I )化合物為式 ( I - j )化合物
Figure 02_image683
式 (I-j) ，或其醫藥學上可接受之鹽， 其中 L 2 為視情況經1至6個 R a 取代之C 1 - 6伸烷基；且 R 6B 為- R W 。
在式 ( I - j )之某些實施例中， R W 為- L W - W；且 L W 為C(=O)、NHC(=O)*或NHS(O) 1 - 2*，其中星號表示與 W之連接點。
在式 ( I - j )之某些實施例中， W為視情況經1至3個 R a 取代且進一步視情況經 R g 取代之C 2 - 6烯基或C 2 - 6炔基，其中 W經由 sp 2 或 sp雜化碳原子連接至 L W 。作為前述實施例之一非限制性實例， W可為CH=CH 2、CH=CHCH 2NMe 2或
Figure 02_image685
。
在式 ( I - j )之某些實施例中，- L W - W為-C(=O)CH=CH 2、-C(=O)CH=CHCH 2NMe 2或
Figure 02_image687
。
在式 ( I - j )之某些實施例中， L 2 為視情況經1至6個 R a 取代之C 1 - 3伸烷基，其中 R a 為-N R eR f (例如NMe 2)、鹵基(例如氟)、或烷氧基(例如甲氧基)。
作為式 ( I - j )之前述實施例之非限制性實例， L 2 可為
Figure 02_image689
(例如
Figure 02_image691
)、
Figure 02_image693
(例如
Figure 02_image695
)、
Figure 02_image697
(例如
Figure 02_image699
)、
Figure 02_image701
(例如
Figure 02_image703
)、
Figure 02_image705
(例如
Figure 02_image707
)或
Figure 02_image709
(例如
Figure 02_image711
)。
在式 ( I - j )之某些實施例中， n為0。
在式 ( I - j )之某些實施例中， n為1或2，諸如其中 n為1。
在式 ( I - j )之某些實施例中，
Figure 02_image713
為
Figure 02_image715
。
在式 ( I - j )之某些實施例中，
Figure 02_image717
為
Figure 02_image719
。
在式 ( I - j )之某些實施例中， R 7 為N R eR f ，諸如NH 2、NH(C 1 - 3烷基)或N(C 1 - 3烷基) 2，諸如其中 R 7 為NH 2。
在某些實施例中，式 ( I )化合物為式 ( I - k )化合物：
Figure 02_image721
式 (I-k) ，或其醫藥學上可接受之鹽， 其中 環 D5為 R g2 。
在式 ( I - k )之某些實施例中， 環 D5係選自由以下組成之群： ●  C 3 - 10伸環烷基或C 3 - 10伸環烯基，其中之每一者視情況經1至4個獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代；及 ●  包括3至10個環原子之伸雜環基或伸雜環烯基，其中1至3個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該伸雜環基或伸雜環烯基視情況經1至4個獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代。
在式 ( I - k )之某些實施例中， 環 D5為包括4至6個環原子之伸雜環基，其中1至3個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜環基視情況經1至4個獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代。
在式 ( I - k)之某些實施例中， 環 D5為C 3-C 6伸環烷基(例如伸環丁基)、伸氧雜環丁烷基或伸四氫呋喃基。
在式 ( I - k )之某些實施例中， R W 為- L W - W；且 L W 為C(=O)或NHC(=O)*、N R d C(=O)*、NHS(O) 1 - 2*，其中星號表示與 W之連接點。
在式 ( I - k )之某些實施例中， W為視情況經1至3個 R a 取代且進一步視情況經 R g 取代之C 2 - 6烯基或C 2 - 6炔基，其中 W經由 sp 2 或 sp雜化碳原子連接至 L W 。作為非限制性實例， W可為CH=CH 2、CH=CHCH 2NMe 2或
Figure 02_image723
。
在式 ( I - k )之某些實施例中，- L W - W為-C(=O)CH=CH 2、-C(=O)CH=CHCH 2NMe 2或
Figure 02_image725
。
在式 ( I - k )之某些實施例中， n為0。
在式 ( I - k )之某些實施例中，
Figure 02_image727
為
Figure 02_image729
。
在式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k )之某些實施例中， R 3a 及 R 3b 與其各自所連接之 環 B環原子一起形成具有4至8個環原子之稠合飽和環； ●  其中環原子中之0至2個各自為獨立選擇之雜原子，其中該等獨立選擇之雜原子中之每一者係選自由N、NH、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群；且 ●  其中該4至8個環原子之稠合飽和環視情況經1至4個獨立地選自由側氧基、 R c 及 R W 組成之群的取代基取代。
在式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k )之某些實施例中， R 3a 及 R 3b 與其各自所連接之 環 B環原子一起形成：
Figure 02_image731
，其視情況經1至2個獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代，其中： p1及 p2獨立地為0、1或2； R Q 為H、 R d 、C(=O) - W或S(O) 2 W；且 cc 表示與C( R 2aR 2b )之連接點。
在某些此等實施例中， R Q 為H。在某些實施例中， R Q 為 R d 。在某些實施例中， R Q 為視情況經1至3個獨立選擇之 R a 取代之C 1 - 6烷基。在某些實施例中， R Q 為C(=O) - W或S(O) 2 W。在某些此等實施例中， W為C 2 - 4烯基。例如， R Q 可為C(=O)-CH 2=CH 2。
在式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k )之某些實施例中， R 3a 及 R 3b 與其各自所連接之 環 B環原子一起形成
Figure 02_image733
，其中 R Q 為H、 R d 、C(=O)- W或S(O) 2 W；且 cc 表示與C( R 2aR 2b )之連接點。在某些此等實施例中， R Q 為H。在某些實施例中， R Q 為 R d 。在某些實施例中， R Q 為視情況經1至3個獨立選擇之 R a 取代之C 1 - 6烷基。在某些實施例中， R Q 為C(=O) - W或S(O) 2 W。在某些此等實施例中， W為C 2 - 4烯基。例如， R Q 可為C(=O)-CH 2=CH 2。
在式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k )之某些實施例中， R 3a 及 R 3b 與其各自所連接之 環 B環原子一起形成選自由以下組成之群的稠環：
Figure 02_image735
諸如
Figure 02_image737
；
Figure 02_image739
諸如
Figure 02_image741
；
Figure 02_image743
諸如
Figure 02_image745
(例如
Figure 02_image747
)；
Figure 02_image749
諸如
Figure 02_image751
；
Figure 02_image753
諸如
Figure 02_image755
；
Figure 02_image757
諸如
Figure 02_image759
；及
Figure 02_image761
諸如
Figure 02_image763
(例如
Figure 02_image765
)，其中 R Q 為H、 R d 、C(=O)- W或S(O) 2 W；且 cc 表示與C( R 2aR 2b )之連接點。在某些此等實施例中， R Q 為H。在某些實施例中， R Q 為 R d 。在某些實施例中， R Q 為視情況經1至3個獨立選擇之 R a 取代之C 1 - 6烷基。在某些實施例中， R Q 為C(=O) - W或S(O) 2 W。在某些此等實施例中， W為C 2 - 4烯基。例如， R Q 可為C(=O)-CH 2=CH 2。
在式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k )之某些實施例中， R 1c 為H。
在式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k )之某些實施例中， R 2a 及 R 2b 為H。
在式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k )之某些實施例中， R 3a 及 R 3b 為H。
在式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k )之某些實施例中， 環 A為
Figure 02_image767
，其中各 R cB 為獨立選擇之 R c ；且 m為1、2或3。在某些此等實施例中， m為1或2，諸如2。
在式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k )之某些實施例中， 環 A為
Figure 02_image769
，其中各 R cB 獨立地選自由以下組成之群：-鹵基，諸如-Cl及-F；-CN；C 1 - 4烷氧基；C 1 - 4鹵代烷氧基；C 1 - 3烷基；及經1至6個獨立選擇之鹵基取代之C 1 - 3烷基。
在式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k )之某些實施例中， 環 A為
Figure 02_image771
，其中 R cB1 為 R c ；且 R cB2 為H或 R c 。
在某些此等實施例中， R cB1 為鹵基，諸如-F或-Cl，諸如-F。
在某些實施例中， R cB2 為C 1 - 4烷氧基或C 1 - 4鹵代烷氧基，諸如C 1 - 4烷氧基，諸如甲氧基。
在式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k )之某些實施例中， 環 A為
Figure 02_image773
。
在式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k )之某些實施例中， 環 A為包括9至10個環原子之雙環雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R c 取代。
作為前述實施例之非限制性實例， 環 A可為喹啉基、吲唑基、吡唑并吡啶基或異噻唑并吡啶基，其中之每一者視情況經1至2個 R c 取代，其中環氮視情況經 R d 取代。例如， 環 A可為：
Figure 02_image775
、
Figure 02_image777
(例如
Figure 02_image779
)、
Figure 02_image781
(
Figure 02_image783
)、
Figure 02_image785
、
Figure 02_image787
(例如
Figure 02_image789
)或
Figure 02_image791
(例如
Figure 02_image793
)，其中之每一者進一步視情況經 R c 取代。
在式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k )之某些實施例中， n為0。
在式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k )之某些實施例中， R 4 為H。
化合物供應  在一些實施例中，化合物不為選自由以下表示之結構組成之群的化合物：
Figure 02_image795
在一些實施例中，該化合物不為揭示於WO 2019/081486、WO 2016/120196或美國專利10,428,063中之一或多種化合物，其中之每一者以全文引用之方式併入本文中。
在一些實施例中，其限制條件為當 R 2a 、 R 2b 、 R 3a 及 R 3b 各自為H； R 1c 為H或甲基； 環 A為視情況經1至2個F取代之苯基； X 1 為-O- L 1 - R 5 ；且- L 1 為CH 2時，則： R 5 不為未經取代之苯基或未經取代之環丙基；且 其進一步限制條件為該化合物不為：3-((3-氟-2-甲氧基苯基)胺基)-2-(3-((1-苯基丙烷-2-基)氧基)吡啶-4-基)-1,5,6,7-四氫-4H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮。
在一些實施例中， R 5 不為未經取代之苯基。在一些實施例中， R 5 不為未經取代之環丙基。
在一些實施例中， 環 A不為視情況經1至2個F取代之苯基。
非限制性例示性化合物  在某些實施例中，化合物係選自由 表 C1中之化合物組成之群或其醫藥學上可接受之鹽。
表 C1對於某些化合物，對掌性中心處之符號*表示此對掌性中心已解析(亦即為單一差向異構體)且該中心處之絕對立體化學尚未確定。
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醫藥組合物及投與 一般在一些實施例中，化學實體(例如抑制EGFR及/或HER2之化合物，或其醫藥學上可接受之鹽及/或水合物及/或共晶體及/或藥物組合)以包括化學實體及一或多種醫藥學上可接受之賦形劑，及視情況一或多種如本文所描述之額外治療劑的醫藥組合物形式投與。
在一些實施例中，化學實體可與一或多種習知醫藥賦形劑組合投與。醫藥學上可接受之賦形劑包括但不限於離子交換劑；氧化鋁；硬脂酸鋁；卵磷脂；自乳化藥物遞送系統(SEDDS)，諸如d-α-生育酚聚乙二醇1000琥珀酸酯；以醫藥劑型使用的界面活性劑，諸如Tweens、泊洛沙姆(poloxamer)或其他類似的聚合物遞送基質；血清蛋白，諸如人類血清白蛋白；緩衝物質，諸如磷酸鹽、tris、甘胺酸、山梨酸、山梨酸鉀；飽和植物脂肪酸之偏甘油酯混合物；水、鹽或電解質，諸如硫酸魚精蛋白、磷酸氫二鈉、磷酸氫鉀、氯化鈉；鋅鹽；膠態二氧化矽；三矽酸鎂；聚乙烯吡咯啶酮；纖維素類物質；聚乙二醇；羧甲基纖維素鈉；聚丙烯酸酯；蠟；聚乙烯-聚氧化丙烯嵌段共聚物；及羊毛脂。環糊精諸如α-環糊精、β-環糊精及γ環糊精，或化學改質衍生物諸如羥基烷基環糊精，包括2-羥丙基-β-環糊精及3-羥丙基-β-環糊精，或其他溶解衍生物亦可用於增強本文所描述之化合物之遞送。可製備含有在0.005%至100%範圍內之如本文所描述之化學實體且其餘部分由無毒賦形劑組成的劑型或組合物。所涵蓋組合物可含有0.001%-100%之本文所提供之化學實體，在一個實施例中，0.1-95%，在另一實施例中75-85%，在另一實施例中，20-80%。製備此類劑型的實際方法對熟習此項技術者為已知的或將為顯而易見的；例如，參見 Remington : The Science and Practice of Pharmacy, 第22版(Pharmaceutical Press, London, UK. 2012)。
投與途徑及組合物組分在一些實施例中，本文所描述之化學實體或其醫藥組合物可藉由任何可接受的投與途徑投與有需要個體。可接受之投與途徑包括但不限於頰內、皮膚、子宮頸內、竇道內(endosinusial)、氣管內、經腸、硬膜上、間隙、腹部內、動脈內、支氣管內、囊內、腦內、腦池內、冠狀動脈內、皮內、管內、十二指腸內、硬膜內、表皮內、食道內、胃內、齒齦內、迴腸內、淋巴管內、髓內、腦膜內、肌肉內、卵巢內、腹膜內、前列腺內、肺內、竇內(intrasinal)、脊柱內、滑膜內、睾丸內、鞘內、小管內、腫瘤內、子宮內、血管內、靜脈內、經鼻、鼻胃管、口服、非經腸、經皮、硬膜外(peridural)、經直腸、呼吸道(吸入)、皮下、舌下、黏膜下、局部、經皮、經黏膜、經氣管、輸尿管、尿道及陰道。在某些實施例中，較佳投與途徑為非經腸(例如，腫瘤內)。
組合物可經調配用於非經腸投與，例如，經調配用於經由靜脈內、肌肉內、皮下或甚至腹膜內途徑注射。通常，此類組合物可以可注射劑形式、以液體溶液或懸浮液形式製備；亦可製備在注射之前在添加液體時適用於製備溶液或懸浮液之固體形式；且製備亦可乳化。此類調配物之製備將根據本發明為熟習此項技術者所已知。
適用於可注射使用之醫藥形式包括無菌水溶液或分散液；調配物，包括芝麻油、花生油或水性丙二醇；及用於無菌可注射溶液或分散液之臨時製備的無菌粉末。在所有情況下，形式必須係無菌的且必須係流體，達到其可易於注射之程度。其亦應在製造及儲存條件下穩定且必須保存以防諸如細菌及真菌之微生物的污染作用。
載劑亦可為含有例如水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇及液體聚乙二醇及其類似物)、其適合混合物及植物油之溶劑或分散介質。例如，可藉由使用包衣諸如卵磷脂、藉由維持就分散液而言所需粒度及藉由使用界面活性劑來維持適當的流動性。微生物作用之預防可藉由各種抗菌劑及抗真菌劑，例如對羥基苯甲酸酯、氯丁醇、苯酚、山梨酸、硫柳汞及其類似物來實現。在多數情況下，將較佳包括等張劑，例如糖或氯化鈉。可注射組合物之延長吸收可藉由在組合物中使用延遲吸收劑例如單硬脂酸鋁及明膠來實現。
無菌可注射溶液係如下製備：將所要量之活性化合物視需要與上文列舉之各種其他成分一起併入適當溶劑中，隨後過濾滅菌。一般而言，分散液藉由將各種滅菌活性成分併入含有基本分散介質及來自上文所列舉之彼等成分之所需其他成分的無菌媒劑中來製備。在無菌粉末用於製備無菌可注射溶液之情況下，較佳製備方法係真空乾燥及冷凍乾燥技術，由其先前無菌過濾溶液產生活性成分加任何額外所需成分之粉末。
腫瘤內注射液論述於例如Lammers等人，「 Effect of Intratumoral Injection on the Biodistribution and the Therapeutic Potential of HPMA Copolymer - Based Drug Delivery Systems」 Neoplasia. 2006 , 10:788-795中。
可作為凝膠、乳膏、灌腸劑或直腸栓劑用於直腸組合物中的藥理學上可接受之賦形劑包括但不限於以下中之任一或多者：可可脂甘油酯、合成聚合物(諸如聚乙烯吡咯啶酮)、PEG(如PEG軟膏)、甘油、甘油明膠、氫化植物油、泊洛沙姆、各種分子量之聚乙二醇與聚乙二醇之脂肪酸酯的混合物凡士林、無水羊毛脂、鯊魚肝油、糖精鈉、薄荷醇、甜杏仁油、山梨糖醇、苯甲酸鈉、anoxid SBN、香草精油、氣霧劑、苯氧基乙醇中之對羥基苯甲酸酯、甲基對氧基苯甲酸鈉、丙基對氧基苯甲酸鈉、二乙胺、卡波姆(carbomer)、卡波莫(carbopol)、甲基氧基苯甲酸酯、聚乙二醇十六基十八基醚、辛醯基辛酸酯椰油醯酯(cocoyl caprylocaprate)、異丙醇、丙二醇、液體石蠟、三仙膠、羧基-偏亞硫酸氫鹽、乙二胺四乙酸鈉、苯甲酸鈉、偏亞硫酸氫鉀、葡萄柚種子提取物、甲基磺醯基甲烷(MSM)、乳酸、甘胺酸、維生素(諸如維生素A及E)以及乙酸鉀。
在某些實施例中，可藉由將本文所描述之化學實體與適合的非刺激賦形劑或載劑，諸如可可脂、聚乙二醇或栓劑蠟混合來製備栓劑，其在環境溫度下為固體但在體溫下為液體且因此在直腸中融化且釋放活性化合物。在其他實施例中，用於經直腸投與之組合物呈灌腸劑形式。
在其他實施例中，本文所描述之化合物或其醫藥組合物適用於藉助於經口投與(例如，固體或液體劑型)局部遞送至消化道或胃腸道。
用於經口投與之固體劑型包括膠囊、錠劑、丸劑、散劑及顆粒。在此類固體劑型中，化學實體係與一或多種醫藥學上可接受之賦形劑諸如檸檬酸鈉或磷酸二鈣及/或以下各者混合：a)填充劑或增量劑諸如澱粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露糖醇及矽酸，b)黏合劑諸如羧甲基纖維素、褐藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯啶酮、蔗糖及阿拉伯膠，c)保濕劑諸如甘油，d)崩解劑諸如瓊脂-瓊脂、碳酸鈣、馬鈴薯或木薯澱粉、褐藻酸、某些矽酸鹽及碳酸鈉，e)溶液阻滯劑諸如石蠟，f)吸收促進劑諸如四級銨化合物，g)濕潤劑諸如鯨蠟醇及甘油單硬脂酸酯，h)吸收劑諸如高嶺土及膨潤土，以及i)潤滑劑諸如滑石、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、固體聚乙二醇、月桂基硫酸鈉，以及其混合物。在膠囊、錠劑及丸劑之情況下，該劑型亦可包含緩衝劑。亦可使用相似類型之固體組合物作為軟填充及硬填充的明膠膠囊中之填充劑，該膠囊使用賦形劑，諸如乳糖(lactose/milk sugar)以及高分子量聚乙二醇及其類似物。
在一個實施例中，組合物將採取單位劑型諸如丸劑或錠劑的形式，且因此除了本文所提供之化學實體以外，組合物可含有稀釋劑諸如乳糖、蔗糖、磷酸二鈣或其類似物；潤滑劑諸如硬脂酸鎂或其類似物；及黏合劑諸如澱粉、阿拉伯膠、聚乙烯吡咯啶酮、明膠、纖維素、纖維素衍生物或其類似物。在另一固體劑型中，將粉末、球粒(marume)、溶液或懸浮液(例如在碳酸伸丙酯、植物油、PEG、泊洛沙姆124或三酸甘油酯中)囊封於膠囊(明膠或纖維素類膠囊)中。亦涵蓋本文提供之一或多種化學實體或額外活性劑物理上分離的單位劑型；例如具有各藥物之顆粒的膠囊(或膠囊中之錠劑)；二層錠劑；二室明膠膠囊等。亦涵蓋腸溶包衣或延遲釋放口服劑型。
其他生理學上可接受之化合物包括濕潤劑、乳化劑、分散劑或尤其適用於防止微生物生長或活動之防腐劑。各種防腐劑為熟知的且包括例如酚及抗壞血酸。
在某些實施例中，賦形劑係無菌的且一般不含非所要物質。此等組合物可藉由習知、熟知之滅菌技術來滅菌。對於各種口服劑型賦形劑，諸如錠劑及膠囊，不需要無菌。USP/NF標準通常係足夠的。
在某些實施例中，固體口服劑型可進一步包括化學上及/或結構上使組合物易於將化學實體遞送至胃或下部GI；例如升結腸及/或橫結腸及/或遠側結腸及/或小腸之一或多種組分。例示性調配技術描述於例如Filipski, K.J.等人, Current Topics in Medicinal Chemistry, 2013, 13, 776-802中，其以全文引用之方式併入本文中。
實例包括上部GI靶向技術，例如，Accordion Pill (Intec Pharma)、浮動膠囊及能夠黏附至黏膜壁之物質。
其他實例包括下部GI靶向技術。針對靶向腸道中之各個區域，數種腸溶/pH反應性包衣及賦形劑係可用的。基於所需藥物釋放之GI區域來選擇，此等物質通常係經設計以在特定pH範圍下溶解或腐蝕之聚合物。此等物質亦起作用以在活性成分可能刺激上部GI之情況下保護酸不穩定藥物免遭胃液或極限暴露破壞(例如，羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酯系列、Coateric (聚乙酸乙烯酯鄰苯二甲酸酯)、鄰苯二甲酸乙酸纖維素、乙酸羥丙基甲基纖維素丁二酸酯(hydroxypropyl methylcellulose acetate succinate)、Eudragit系列(甲基丙烯酸-甲基丙烯酸甲酯共聚物)及Marcoat)。其他技術包括對胃腸道中之局部菌群起反應之劑型、控壓式結腸遞送膠囊及脈衝塞囊(Pulsincap)。
眼部組合物可包括但不限於以下任一者中之一或多者：黏稠元(例如，羧甲基纖維素、甘油、聚乙烯吡咯啶酮、聚乙二醇)；穩定劑(例如，普洛尼克(Pluronic) (三嵌段共聚物)、環糊精)；防腐劑(例如，苯紮氯銨(Benzalkonium chloride)、ETDA、SofZia (硼酸、丙二醇、山梨糖醇及氯化鋅；Alcon Laboratories, Inc.)、Purite (穩定之氧氯錯合物；Allergan, Inc.))。
局部組合物可包括軟膏及乳膏。軟膏係通常基於石蠟脂或其他石油衍生物之半固體製劑。含有所選擇活性劑之乳膏通常係黏稠液體或半固體乳液，經常係水包油或油包水的。乳膏基質通常係水可洗的，且含有油相、乳化劑及水相。油相，有時亦稱作「內部」相，一般包含石蠟脂及脂肪醇諸如十六醇或十八醇；儘管不必需，但水相之體積通常超過油相，且一般含有保濕劑。乳膏調配物中之乳化劑一般係非離子、陰離子、陽離子或兩性界面活性劑。如同其他載劑或媒劑，軟膏基質應為惰性、穩定、無刺激性及不敏感的。
在前述實施例中之任一者中，本文所描述之醫藥組合物可包括以下中之一或多者：脂質、雙層間交聯多層囊泡、生物可降解聚(D,L-乳酸-共-乙醇酸)[PLGA]類或聚酐類奈米粒子或微米粒子，及奈米多孔粒子負載型脂質雙層。
劑量劑量可視患者需求、所治療病況之嚴重性及所採用之特定化合物而變化。針對特定情況之適當劑量可由熟習醫學技術者來確定。每日總劑量可劃分為多份且全天內數份投與或藉由提供連續遞送之手段投與。
在一些實施例中，本文所描述之化合物之投與劑量係約0.001 mg/Kg至約500 mg/Kg (例如，約0.001 mg/Kg至約200 mg/Kg；約0.01 mg/Kg至約200 mg/Kg；約0.01 mg/Kg至約150 mg/Kg；約0.01 mg/Kg至約100 mg/Kg；約0.01 mg/Kg至約50 mg/Kg；約0.01 mg/Kg至約10 mg/Kg；約0.01 mg/Kg至約5 mg/Kg；約0.01 mg/Kg至約1 mg/Kg；約0.01 mg/Kg至約0.5 mg/Kg；約0.01 mg/Kg至約0.1 mg/Kg；約0.1 mg/Kg至約200 mg/Kg；約0.1 mg/Kg至約150 mg/Kg；約0.1 mg/Kg至約100 mg/Kg；約0.1 mg/Kg至約50 mg/Kg；約0.1 mg/Kg至約10 mg/Kg；約0.1 mg/Kg至約5 mg/Kg；約0.1 mg/Kg至約1 mg/Kg；約0.1 mg/Kg至約0.5 mg/Kg)。
方案前述劑量可以每日劑量(例如，單次劑量或兩個或更多個分次劑量)或非每日劑量(例如，每隔一天、每兩天、每三天、每週一次、每週兩次、每兩週一次、每月一次)投與。
在一些實施例中，本文中所描述之化合物之投與時間段係1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天、10天、11天、12天、13天、14天、3週、4週、5週、6週、7週、8週、9週、10週、11週、12週、4個月、5個月、6個月、7個月、8個月、9個月、10個月、11個月、12個月或更長時間。在另一實施例中，在其期間停止投與之時間段係1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天、10天、11天、12天、13天、14天、3週、4週、5週、6週、7週、8週、9週、10週、11週、12週、4個月、5個月、6個月、7個月、8個月、9個月、10個月、11個月、12個月或更長時間。在一實施例中，在一時間段裏向個人投與治療性化合物，隨後為一獨立的時間段。在另一實施例中，在第一時段及第一時段後的第二時段裏投與治療性化合物，其中在第二時段期間投與停止，隨後為開始投與治療性化合物之第三時段，且接著在第三時段後為停止投與之第四時段。在此實施例之一態樣中，將繼之以停止投與之時段的治療性化合物投與時段重複經確定或未經確定之時間段。在另一實施例中，投與時段係持續1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天、10天、11天、12天、13天、14天、3週、4週、5週、6週、7週、8週、9週、10週、11週、12週、4個月、5個月、6個月、7個月、8個月、9個月、10個月、11個月、12個月或更長時間。在另一實施例中，在其期間停止投與之時間段係1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天、10天、11天、12天、13天、14天、3週、4週、5週、6週、7週、8週、9週、10週、11週、12週、4個月、5個月、6個月、7個月、8個月、9個月、10個月、11個月、12個月或更長時間。
治療之方法 適應症本文提供用於抑制表皮生長因子受體酪胺酸激酶(EGFR)及/或人類表皮生長因子受體2 (HER2)之方法。例如，本文提供適用於治療或預防與EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調相關之疾病或病症的EGFR抑制劑，該等疾病或病症諸如中樞神經系統疾病、肺部病症、心血管疾病、局部缺血、肝病、胃腸道病症、病毒或細菌感染、發炎性及/或自體免疫性疾病或癌症(例如EGFR相關癌症)。在一些實施例中，本文提供HER2抑制劑，其適用於治療或預防與HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調相關的疾病或病症，諸如癌症(例如HER2相關癌症)。在一些實施例中，本文提供EGFR及HER2之抑制劑。
如本文所用之「EGFR抑制劑」包括呈現EGFR失活活性(例如抑制或降低)之任何化合物。在一些實施例中，EGFR抑制劑可對具有一或多個突變之EGFR激酶具有選擇性。例如，EGFR抑制劑可結合至酪胺酸激酶域之三磷酸腺苷(ATP)結合位點。在一些實施例中，EGFR抑制劑為異位抑制劑。
本文所提供之化合物可抑制EGFR。在一些實施例中，化合物可結合至酪胺酸激酶域中之EGFR三磷酸腺苷(ATP)結合位點。
可藉由此項技術中已知之分析來證實測試化合物充當EGFR抑制劑之能力。作為EGFR抑制劑之本發明提供之化合物及組合物的活性可在活體外、活體內或在細胞株中分析。活體外分析包括測定激酶及/或ATP酶活性之抑制的分析。替代性活體外分析定量抑制劑結合至蛋白激酶之能力，且可藉由在結合之前放射性標記化合物、分離化合物/激酶錯合物且測定放射性標記結合之量，或藉由進行其中將新穎化合物與結合至已知放射性配位體之激酶一起培育的競爭實驗來量測。在一些情況下，EGFR抑制劑可藉由其對EGFR酪胺酸激酶催化肽磷酸化之初始速度的影響來評估(例如Yun等人, Cancer Cell. 2007;11(3):217-227)。在一些實施例中，EGFR抑制劑之結合常數可使用螢光動力學測定(例如Yun等人, Cancer Cell. 2007;11(3):217-227)。表面電漿子共振(SPR)結合分析之實例包括Li, Shiqing等人, Cancer cell 7.4 (2005): 301-311中所揭示之彼等。其他EGFR抑制劑分析可見於例如WO 2019/246541及WO 2019/165358 (其兩者均以全文引用之方式併入)。
分析可包括例如增殖抑制分析，諸如量測細胞生長抑制之分析，諸如MTS分析或藉由細胞效價Glo發光細胞存活率分析(Promega®)。為執行此類分析，在暴露於測試化合物持續不同持續時間之前，細胞接種且生長於細胞培養板中。隨後在此暴露之後進行細胞存活率之評定。資料相對於未經處理細胞進行歸一化且可以圖形方式呈現。可使用具有S形劑量反應之非線性回歸模型擬合生長曲線。作為另一實例，可使用西方墨點分析。在此類分析中，細胞接種且生長於培養板中，且接著第二天用測試化合物處理不同時間。細胞用PBS洗滌且溶解。SDS-PAGE凝膠用於分離轉移至硝化纖維膜之溶解物，且用適當抗體(例如磷酸-EGFR (Tyrl 068)(3777)、總EGFR (2232)、p-Akt (Ser473) (4060)、總Akt (9272)、p-ERK (Thr202/Tyr204)(4370)、總ERK (9102)及HSP90 (SC-7947))進行探測。
額外分析可包括例如基於ALPHALISA TECHNOLOGY®之分析(例如，參見來自Promega之ALPHALISA® EGF/EGFR結合套組)。此類分析使用發光氧通道化學法來偵測例如緩衝液、細胞培養基、血清及血漿中之相關分子。例如，生物素化之EGF結合於抗生蛋白鏈菌素塗佈之α供體珠粒，且EGFR-Fc係由抗人類IgG Fc特異性AlphaLISA受體珠粒捕捉。當EGF結合至EGFR時，供體珠粒及受體珠粒緊密接近，且供體珠粒之激勵引起單態氧分子之釋放，該等單態氧分子觸發受體珠粒中之一連串能量轉移。此導致在615 nm處出現尖銳的光發射峰。此類分析可用於例如競爭性結合實驗中。
分析之另外實例可包括基於Sox技術之分析(例如，參見來自ASSAYQUANT®之基於PHOSPHOSENS® Sox之均質、動力學或終點/紅色螢光之檢定)。此類分析利用螯合增強螢光(CHEF)，在肽或蛋白質底物中使用磺醯胺基-咢辛(Sox)發色團產生磷酸化之即時感測器。參見例如美國專利第8,586,570及6,906,194號。
如本文所提供之EGFR抑制劑之效力可藉由EC 50值來測定。如在基本上類似的條件下所測定，與具有較高EC 50值之化合物相比，具有較低EC 50值之化合物為更有效的抑制劑。在一些實施例中，基本上類似條件包含測定活體外或活體內EGFR依賴性磷酸化含量(例如在表現野生型EGFR、突變型EGFR或其任何片段之腫瘤細胞、A431細胞、Ba/F3細胞或3T3細胞中)。
如本文所提供之EGFR抑制劑之效力亦可藉由IC 50值來測定。如在基本上類似的條件下所測定，與具有較高IC 50值之化合物相比，具有較低IC 50值之化合物為更有效的抑制劑。在一些實施例中，基本上類似條件包含測定活體外或活體內EGFR依賴性磷酸化含量(例如在表現野生型EGFR、突變型EGFR或其任何片段之腫瘤細胞、A431細胞、Ba/F3細胞或3T3細胞中)。
如本文所描述之野生型EGFR與含有一或多個突變之EGFR之間的選擇性亦可使用細胞增殖分析量測，其中細胞增殖視激酶活性而定。例如，可使用用適合版本的野生型EGFR (諸如VIII；含有野生型EGFR激酶域)轉染之鼠Ba/F3細胞，或用L858R/T790M、Del/T790M/L718Q、L858R/T790M/L718Q、L858R/T790M/C797S、Del/T790M/C797S、L858R/T790M/I941R、外顯子19缺失/T790M或外顯子20插入，諸如V769_D770insX、D770_N771insX、N771_P772insX、P772_H773insX或H773_V774insX (例如A767_V769dupASV、V769_D770insASV、D770_N771insNPG、D770_N771insNPY、D770_N771insSVD、D770_N771insGL、N771_H773dupNPH、N771_P772insN、N771_P772insH、N771_P772insV、P772_H773insDNP、P772_H773insPNP、H773_V774insNPH、H773_V774insH、H773_V774insPH、H773_V774insAH或P772_H773insPNP)轉染之Ba/F3細胞。在一系列抑制劑濃度(例如10 µM、3 µM、1.1 µM、330 nM、110 nM、33 nM、11 nM、3 nM、1 nM)下進行增殖分析且計算EC 50。
量測對EGFR活性之作用的替代方法為分析EGFR磷酸化。野生型或突變型(L858R/T790M、Del/T790M、Del/T790M/L718Q、L858R/T790M/C797S、Del/T790M/C797S、L858R/T790M/I941R或L858R/T790M/L718Q) EGFR可經轉染至通常不表現內源性EGFR之細胞中，且可分析抑制劑(例如使用上述濃度)抑制EGFR磷酸化之能力。細胞暴露於增加濃度之抑制劑且用EGF刺激。藉由西方墨點法使用磷酸特異性EGFR抗體分析對EGFR磷酸化之影響。
在一些實施例中，本文所提供之化合物可展現有效及選擇性EGFR抑制。例如，本文所提供之化合物可結合至酪胺酸激酶域之EGFR三磷酸腺苷(ATP)結合位點。在一些實施例中，本文所提供之化合物可展現針對包括活化突變或EGFR抑制劑抗性突變之EGFR激酶的奈莫耳效力，且對相關激酶(例如野生型EGFR)活性最小，該突變包括例如 表 2a及 表 2b中之抗性突變(例如L747S、D761Y、T790M及T854A)。抑制野生型EGFR可以引起不合需要的副作用(例如腹瀉及皮膚皮疹)，其可以影響生活品質及依從性。在一些情況下，野生型EGFR之抑制劑可引起劑量限制性毒性。參見例如Morphy. J. Med. Chem. 2010, 53, 4, 1413-1437及Peters. J. Med. Chem. 2013, 56, 22, 8955-8971。
在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽可選擇性靶向EGFR激酶。例如，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽可選擇性地靶向EGFR激酶而非另一種激酶或非激酶標靶。
在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))之化合物或其醫藥學上可接受之鹽可展現出與野生型EGFR之抑制相比對含有如本文所描述之一或多個突變(例如如於 表 1a及 表 1b中描述之一或多個突變)之EGFR更大的抑制。在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽可展現出與野生型EGFR之抑制相比對含有如本文所描述之一或多個突變之EGFR至少2倍、3倍、5倍、10倍、25倍、50倍或100倍大的抑制。在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽可展現出與野生型EGFR之抑制相比對含有一或多個突變之EGFR至多1000倍大的抑制。在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽可展現出與野生型EGFR之抑制相比對具有突變組合之EGFR至多10000倍大的抑制。
在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽可展現出與野生型EGFR之抑制相比對含有如本文所描述之一或多個突變之EGFR約2倍至約10倍大的抑制。在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽可展現出與野生型EGFR之抑制相比對含有如本文所描述之一或多個突變之EGFR約10倍至約100倍大的抑制。在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽可展現出與野生型EGFR之抑制相比對含有如本文所描述之一或多個突變之EGFR約100倍至約1000倍大的抑制。在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽可展現出與野生型EGFR之抑制相比對含有如本文所描述之一或多個突變之EGFR約1000倍至約10000倍大的抑制。
在其他實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))之化合物或其醫藥學上可接受之鹽與第二EGFR抑制劑組合可展現出與野生型EGFR之抑制相比對含有如本文所描述之一或多個突變(例如如於 表 1a及 表 1b中描述之一或多個突變)之EGFR更大的抑制。在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽與第二EGFR抑制劑組合可展現出與野生型EGFR之抑制相比對含有如本文所描述之一或多個突變之EGFR至少2倍、3倍、5倍、10倍、25倍、50倍或100倍大的抑制。在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽與第二EGFR抑制劑組合可展現出與野生型EGFR之抑制相比對含有一或多個突變之EGFR至多1000倍大的抑制。在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽與第二EGFR抑制劑組合可展現出與野生型EGFR之抑制相比對含有一或多個突變之EGFR至多10000倍大的抑制。
在其他實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽與第二EGFR抑制劑組合可展現出與野生型EGFR之抑制相比對含有如本文所描述之一或多個突變之EGFR約2倍至約10倍大的抑制。在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽與第二EGFR抑制劑組合可展現出與野生型EGFR之抑制相比對含有如本文所描述之一或多個突變之EGFR約10倍至約100倍大的抑制。在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽與第二EGFR抑制劑組合可展現出與野生型EGFR之抑制相比對含有如本文所描述之一或多個突變之EGFR約100倍至約1000倍大的抑制。在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽與第二EGFR抑制劑組合可展現出與野生型EGFR之抑制相比對含有如本文所描述之一或多個突變之EGFR約1000倍至約10000倍大的抑制。
式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽或溶劑合物適用於治療可以用EGFR抑制劑治療之疾病或病症，諸如EGFR相關疾病及病症，例如中樞神經系統疾病(例如神經退化性疾病)、肺部病症、心血管疾病、局部缺血、肝病、胃腸道病症、病毒或細菌感染、發炎性及/或自體免疫性疾病(例如牛皮癬及異位性皮膚炎)及增殖性病症諸如癌症(包括血液癌)及實體腫瘤(例如晚期實體腫瘤)。
如本文所用之「HER2抑制劑」包括呈現HER2失活活性(例如抑制或降低)之任何化合物。在一些實施例中，HER2抑制劑可對具有一或多個突變之HER2激酶具有選擇性。在一些實施例中，HER2抑制劑可結合至酪胺酸激酶域中之HER2三磷酸腺苷(ATP)結合位點。
本文所提供之化合物可抑制HER2。例如，化合物可結合至酪胺酸激酶域之HER2三磷酸腺苷(ATP)結合位點。在一些實施例中，本文所提供之化合物可抑制野生型HER2。在一些實施例中，本文所提供之化合物可抑制具有如本文所描述之一或多個突變之HER2。
可藉由此項技術中已知之分析來證實測試化合物充當HER2抑制劑之能力。作為HER2抑制劑之本發明提供之化合物或組合物的活性可在活體外、活體內或在細胞株中分析。活體外分析包括測定激酶及/或ATP酶活性之抑制的分析。替代性活體外分析定量抑制劑結合至蛋白激酶之能力，且可藉由在結合之前放射性標記化合物、分離化合物/激酶錯合物且測定放射性標記結合之量，或藉由進行其中將新穎化合物與結合至已知放射性配位體之激酶一起培育的競爭實驗來量測。在一些情況下，HER2抑制劑可藉由其對HER2酪胺酸激酶催化肽磷酸化之初始速度的影響來評估(例如Yun等人, Cancer Cell. 2007;11(3):217-227)。例如，可使用間接量測由HER2激酶反應形成之ADP的分析(參見例如ATP/NADH偶合分析系統及發光激酶分析，諸如來自Promega之ADP-GLO TM激酶分析)。參見例如Hanker等人, Cancer Discov. 2017 Jun;7(6):575-585；Robichaux等人, Nat Med. 2018 May; 24(5): 638-646；及Yun等人, Proc Natl Acad Sci U S A. 2008 Feb 12;105(6):2070-5。在一些實施例中，可使用使用經標記之抗磷酸-酪胺酸抗體偵測底物磷酸化的分析(參見例如Rabindran等人, Cancer Res. 2004 Jun 1;64(11):3958-65)。在一些實施例中，HER2抑制劑之結合常數可使用螢光動力學測定(例如Yun等人, Cancer Cell. 2007;11(3):217-227)。SPR結合分析之實例包括Li, Shiqing等人, Cancer cell 7.4 (2005): 301-311中所揭示之彼等分析 在一些實施例中，HER2抑制劑與HER2之共價結合可使用質譜法偵測，參見例如Irie等人, Mol Cancer Ther. 2019 Apr;18(4):733-742。額外HER2抑制劑分析可見於例如美國專利第9,920,060、WO 2019/241715號及美國公開案第2017/0166598號中，其中之每一者以全文引用之方式併入本文中。
如本文所提供之HER2抑制劑之效力可藉由EC 50值來測定。如在基本上類似的條件下所測定，與具有較高EC 50值之化合物相比，具有較低EC 50值之化合物為更有效的抑制劑。在一些實施例中，基本上類似條件包含測定活體外或活體內HER2依賴性磷酸化含量(例如在表現野生型HER2、突變型HER2或其任何片段之腫瘤細胞或Ba/F3細胞中)。
如本文所提供之HER2抑制劑之效力亦可藉由IC 50值來測定。如在基本上類似的條件下所測定，與具有較高IC 50值之化合物相比，具有較低IC 50值之化合物為更有效的抑制劑。在一些實施例中，基本上類似條件包含測定活體外或活體內HER2依賴性磷酸化含量(例如在表現野生型HER2、突變型HER2或其任何片段之腫瘤細胞或Ba/F3細胞中)。
分析可包括例如增殖抑制分析，諸如量測細胞生長抑制之分析，諸如MTS分析或藉由細胞效價Glo發光細胞存活率分析(Promega®)。為執行此類分析，在暴露於測試化合物持續不同持續時間之前，細胞接種且生長於細胞培養板中。隨後在此暴露之後進行細胞存活率之評定。資料相對於未經處理細胞進行歸一化且可以圖形方式呈現。可使用具有S形劑量反應之非線性回歸模型擬合生長曲線。作為另一實例，可使用西方墨點分析。在此類分析中，細胞接種且生長於培養板中，且接著第二天用測試化合物處理不同時間。細胞用PBS洗滌且溶解。SDS-PAGE凝膠用於分離轉移至硝化纖維膜之溶解物，且用適當抗體(例如磷酸-HER2(Tyr1248)(2247)、磷酸-EGFR-Tyr1173 磷酸-HER2-Tyr877、磷酸-HER2-Tyr1221、總HER2、磷酸-AKT-Thr308、磷酸-AKT-Ser374、總AKT、磷酸-p44/42 MAPK-Thr202/Tyr204及p44/42 MAPK)進行探測。
如本文所描述之野生型HER2與含有一或多個突變之HER2之間的選擇性亦可使用細胞增殖分析量測，其中細胞增殖視激酶活性而定。例如，可使用用適合版本的野生型HER2轉染之鼠Ba/F3細胞，或用具有一或多個突變(諸如S310F、S310Y、R678Q、R678W、R678P、I767M、V773M、V777L、V842I、M774AYVM、M774del insWLV、A775_G776insYVMA、A775_G776insAVMA、A775_G776insSVMA、A775_G776insVAG、A775insV G776C、A775_G776insI、G776del insVC2、G776del insVV、G776del insLC、G776C V777insC、G776C V777insV、V777_G778insCG、G778_S779insCPG或P780_Y781insGSP)之HER2轉染之Ba/F3細胞。在一系列抑制劑濃度(例如10 µM、3 µM、1.1 µM、330 nM、110 nM、33 nM、11 nM、3 nM、1 nM)下進行增殖分析且計算EC 50。
量測對HER2活性之作用的替代方法為分析HER2磷酸化。野生型或突變型(S310F、S310Y、R678Q、R678W、R678P、I767M、V773M、V777L、V842I、M774AYVM、M774del insWLV、A775_G776insYVMA、A775_G776insAVMA、A775_G776insSVMA、A775_G776insVAG、A775insV G776C、A775_G776insI、G776del insVC2、G776del insVV、G776del insLC、G776C V777insC、G776C V777insV、V777_G778insCG、G778_S779insCPG或P780_Y781insGSP) HER2可經轉染至通常不表現內源性HER2之細胞中，且可分析抑制劑(例如使用上述濃度)抑制HER2磷酸化之能力。細胞暴露於增加濃度之抑制劑且用EGF刺激。藉由西方墨點法使用磷酸特異性HER2抗體分析對HER2磷酸化之影響。
在一些實施例中，本文所提供之化合物可展現有效及選擇性HER2抑制。例如，本文所提供之化合物可結合至酪胺酸激酶域之HER2三磷酸腺苷(ATP)結合位點。在一些實施例中，本文所提供之化合物可展現針對包括活化突變或HER2抑制劑抗性突變之HER2激酶的奈莫耳效力，且對相關激酶(例如野生型EGFR)活性最小，該突變包括例如 表 5中之外顯子20插入及/或抗性突變(例如L755S、L755P、T798I及T798M)。
在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽可選擇性靶向HER2激酶。例如，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽可選擇性地靶向HER2激酶而非另一種激酶(例如野生型EGFR)或非激酶標靶。由於可影響生活品質及依從性之不合需要的副作用(例如腹瀉及皮膚皮疹)，因此可希望選擇性地靶向HER2激酶而非野生型EGFR激酶。參見例如Morphy. J. Med. Chem. 2010, 53, 4, 1413-1437及Peters. J. Med. Chem. 2013, 56, 22, 8955-8971。
在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))之化合物或其醫藥學上可接受之鹽可展現出與另一種激酶(例如野生型EGFR)或非激酶標靶之抑制相比對野生型HER2或含有如本文所描述之一或多個突變(例如如於 表 3中描述之一或多個突變)之HER2更大的抑制。在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))之化合物或其醫藥學上可接受之鹽可展現出與另一種激酶(例如野生型EGFR)或非激酶標靶之抑制相比對野生型HER2或含有如本文所描述之一或多個突變之HER2至少2倍、3倍、5倍、10倍、25倍、50倍或100倍大的抑制。在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))之化合物或其醫藥學上可接受之鹽可展現出與另一種激酶(例如野生型EGFR)或非激酶標靶之抑制相比對野生型HER2或含有如本文所描述之一或多個突變之HER2至多1000倍大的抑制。在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))之化合物或其醫藥學上可接受之鹽可展現出與另一種激酶(例如野生型EGFR)或非激酶標靶之抑制相比對野生型HER2或含有如本文所描述之一或多個突變之HER2至多10000倍大的抑制。
在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))之化合物或其醫藥學上可接受之鹽可展現出與另一種激酶(例如野生型EGFR)或非激酶標靶之抑制相比對野生型HER2或含有如本文所描述之一或多個突變之HER2約2倍至約10倍大的抑制。在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))之化合物或其醫藥學上可接受之鹽可展現出與另一種激酶(例如野生型EGFR)或非激酶標靶之抑制相比對野生型HER2或含有如本文所描述之一或多個突變之HER2約10倍至約100倍大的抑制。在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))之化合物或其醫藥學上可接受之鹽可展現出與另一種激酶(例如野生型EGFR)或非激酶標靶之抑制相比對野生型HER2或含有如本文所描述之一或多個突變之HER2約100倍至約1000倍大的抑制。在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))之化合物或其醫藥學上可接受之鹽可展現出與另一種激酶(例如野生型EGFR)或非激酶標靶之抑制相比對野生型HER2或含有如本文所描述之一或多個突變之HER2約1000倍至約10000倍大的抑制。
在其他實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))之化合物或其醫藥學上可接受之鹽與第二EGFR抑制劑組合可展現出與另一種激酶(例如野生型EGFR)或非激酶標靶之抑制相比對野生型HER2或含有如本文所描述之一或多個突變(例如如於 表 3中描述之一或多個突變)之HER2更大的抑制。在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))之化合物或其醫藥學上可接受之鹽與第二HER2抑制劑組合可展現出與另一種激酶(例如野生型EGFR)或非激酶標靶之抑制相比對野生型HER2或含有如本文所描述之一或多個突變之HER2至少2倍、3倍、5倍、10倍、25倍、50倍或100倍大的抑制。在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))之化合物或其醫藥學上可接受之鹽與第二HER2抑制劑組合可展現出與另一種激酶(例如野生型EGFR)或非激酶標靶之抑制相比對野生型HER2或含有如本文所描述之一或多個突變之HER2至多1000倍大的抑制。在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))之化合物或其醫藥學上可接受之鹽與第二HER2抑制劑組合可展現出與另一種激酶(例如野生型EGFR)或非激酶標靶之抑制相比對野生型HER2或含有如本文所描述之一或多個突變之HER2至多10000倍大的抑制。
在其他實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))之化合物或其醫藥學上可接受之鹽與第二HER2抑制劑組合可展現出與另一種激酶(例如野生型EGFR)或非激酶標靶之抑制相比對野生型HER2或含有如本文所描述之一或多個突變之HER2約2倍至約10倍大的抑制。在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))之化合物或其醫藥學上可接受之鹽與第二HER2抑制劑組合可展現出與另一種激酶(例如野生型EGFR)或非激酶標靶之抑制相比對野生型HER2或含有如本文所描述之一或多個突變之HER2約10倍至約100倍大的抑制。在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))之化合物或其醫藥學上可接受之鹽與第二HER2抑制劑組合可展現出與另一種激酶(例如野生型EGFR)或非激酶標靶之抑制相比對野生型HER2或含有如本文所描述之一或多個突變之HER2約100倍至約1000倍大的抑制。在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))之化合物或其醫藥學上可接受之鹽與第二HER2抑制劑組合可展現出與另一種激酶(例如野生型EGFR)或非激酶標靶之抑制相比對野生型HER2或含有如本文所描述之一或多個突變之HER2約1000倍至約10000倍大的抑制。
式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽或溶劑合物適用於治療可以用HER2抑制劑治療之疾病或病症，諸如HER2相關疾病及病症，例如增殖性病症諸如癌症(例如HER2相關癌症) (包括血液癌)及實體腫瘤(例如晚期實體腫瘤)。
在一些實施例中，本文所提供之化合物亦可抑制如本文所描述之EGFR及HER2。
在一些實施例中，本文所提供之化合物可展現有效及選擇性EGFR及HER2抑制。在一些實施例中，本文所提供之化合物可展現針對具有一或多個突變(包括例如 表 1a 、 1b 、 2a及 2b中之一或多個突變)之EGFR激酶及具有一或多個突變(包括例如 表 3中之突變)之HER2激酶的奈莫耳效力，且對相關激酶(例如野生型EGFR)活性最小。
在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽可選擇性靶向EGFR及HER2激酶。例如，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽可選擇性地靶向EGFR激酶及HER2激酶而非另一種激酶或非激酶標靶。
在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))之化合物或其醫藥學上可接受之鹽可展現出與另一種激酶(例如野生型EGFR)或非激酶標靶之抑制相比對含有如本文所描述之一或多個突變之EGFR及野生型HER2或含有如本文所描述之一或多個突變(例如如於 表 3 - 5中描述之一或多個突變)之HER2更大的抑制。在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))之化合物或其醫藥學上可接受之鹽可展現出與另一種激酶(例如野生型EGFR)或非激酶標靶之抑制相比對含有如本文所描述之一或多個突變之EGFR及野生型HER2或含有如本文所描述之一或多個突變之HER2至少2倍、3倍、5倍、10倍、25倍、50倍或100倍大的抑制。在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))之化合物或其醫藥學上可接受之鹽可展現出與另一種激酶(例如野生型EGFR)或非激酶標靶之抑制相比對含有如本文所描述之一或多個突變之EGFR及野生型HER2或含有如本文所描述之一或多個突變之HER2至多1000倍大的抑制。在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))之化合物或其醫藥學上可接受之鹽可展現出與另一種激酶(例如野生型EGFR)或非激酶標靶之抑制相比對含有如本文所描述之一或多個突變之EGFR及野生型HER2或具有如本文所描述之一或多個突變之HER2至多10000倍大的抑制。
在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))之化合物或其醫藥學上可接受之鹽可展現出與另一種激酶(例如野生型EGFR)或非激酶標靶之抑制相比對含有如本文所描述之一或多個突變之EGFR及野生型HER2或含有如本文所描述之一或多個突變之HER2約2倍至約10倍大的抑制。在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))之化合物或其醫藥學上可接受之鹽可展現出與另一種激酶(例如野生型EGFR)或非激酶標靶之抑制相比對含有如本文所描述之一或多個突變之EGFR及野生型HER2或含有如本文所描述之一或多個突變之HER2約10倍至約100倍大的抑制。在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))之化合物或其醫藥學上可接受之鹽可展現出與另一種激酶(例如野生型EGFR)或非激酶標靶之抑制相比對含有如本文所描述之一或多個突變之EGFR及野生型HER2或含有如本文所描述之一或多個突變之HER2約100倍至約1000倍大的抑制。在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))之化合物或其醫藥學上可接受之鹽可展現出與另一種激酶(例如野生型EGFR)或非激酶標靶之抑制相比對含有如本文所描述之一或多個突變之EGFR及野生型HER2或含有如本文所描述之一或多個突變之HER2約1000倍至約10000倍大的抑制。
在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))之化合物或其醫藥學上可接受之鹽與第二EGFR及/或第二HER2抑制劑組合可展現出與另一種激酶(例如野生型EGFR)或非激酶標靶之抑制相比對含有如本文所描述之一或多個突變之EGFR及野生型HER2或含有如本文所描述之一或多個突變(例如如於 表 3中描述之一或多個突變)之HER2更大的抑制。在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))之化合物或其醫藥學上可接受之鹽與第二EGFR及/或第二HER2抑制劑組合可展現出與另一種激酶(例如野生型EGFR)或非激酶標靶之抑制相比對含有如本文所描述之一或多個突變之EGFR及野生型HER2或含有如本文所描述之一或多個突變之HER2至少2倍、3倍、5倍、10倍、25倍、50倍或100倍大的抑制。在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))之化合物或其醫藥學上可接受之鹽與第二EGFR及/或第二HER2抑制劑組合可展現出與另一種激酶(例如野生型EGFR)或非激酶標靶之抑制相比對含有如本文所描述之一或多個突變之EGFR及野生型HER2或含有如本文所描述之一或多個突變之HER2至多1000倍大的抑制。在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))之化合物或其醫藥學上可接受之鹽與第二EGFR及/或第二HER2抑制劑組合可展現出與另一種激酶(例如野生型EGFR)或非激酶標靶之抑制相比對含有如本文所描述之一或多個突變之EGFR及野生型HER2或含有如本文所描述之一或多個突變之HER2至多10000倍大的抑制。
在其他實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))之化合物或其醫藥學上可接受之鹽與第二EGFR及/或第二HER2抑制劑組合可展現出與另一種激酶(例如野生型EGFR)或非激酶標靶之抑制相比對含有如本文所描述之一或多個突變之EGFR及含有如本文所描述之一或多個突變之HER2約2倍至約10倍大的抑制。在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))之化合物或其醫藥學上可接受之鹽與第二EGFR及/或第二HER2抑制劑組合可展現出與另一種激酶(例如野生型EGFR)或非激酶標靶之抑制相比對含有如本文所描述之一或多個突變之EGFR及含有如本文所描述之一或多個突變之HER2約10倍至約100倍大的抑制。在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))之化合物或其醫藥學上可接受之鹽與第二EGFR及/或第二HER2抑制劑組合可展現出與另一種激酶(例如野生型EGFR)或非激酶標靶之抑制相比對含有如本文所描述之一或多個突變之EGFR及含有如本文所描述之一或多個突變之第二HER2約100倍至約1000倍大的抑制。在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))之化合物或其醫藥學上可接受之鹽與第二EGFR及/或第二HER2抑制劑組合可展現出與另一種激酶(例如野生型EGFR)或非激酶標靶之抑制相比對含有如本文所描述之一或多個突變之EGFR及含有如本文所描述之一或多個突變之HER2約1000倍至約10000倍大的抑制。
本文亦提供一種用於抑制BUB (budding uninhibited by benzimidazole，BUB1-3)激酶之方法。例如，本文提供BUB1激酶之抑制劑，其適用於治療或預防與不受控增殖性細胞過程相關之疾病或病症，諸如癌症、炎症、關節炎、病毒性疾病、心血管病或真菌性疾病。參見例如WO 2013/050438、WO 2013/092512、WO 2013/167698、WO 2014/147203、WO 2014/147204、WO 2014/202590、WO 2014/202588、WO 2014/202584、WO 2014/202583、WO 2015/063003、WO2015/193339、WO 2016/20275及WO 2017/021348。在一些實施例中，疾病或病症為癌症。
如本文所用之「BUB1抑制劑」包括呈現BUB1失活活性(例如抑制或降低)之任何化合物。在一些實施例中，BUB1抑制劑可對BUB1而非其他激酶(例如野生型EGFR)具有選擇性。
本文所提供之化合物可抑制Bub激酶。在一些實施例中，本文所提供之化合物可抑制BUB1激酶。
可藉由此項技術中已知之分析來證實測試化合物充當BUB1抑制劑之能力。作為BUB1抑制劑之本發明提供之化合物及組合物的活性可在活體外、活體內或在細胞株中分析。活體外分析包括測定激酶抑制之分析。例如，本文所提供之化合物對BUB1之抑制可使用時差式螢光能量轉移(TR-FRET)分析測定，該分析量測人類BUB1 (胺基酸704至 1085)之(重組)催化域之合成肽(例如生物素-AHX-VLLPKKSFAEPG (呈醯胺形式之C端))之磷酸化，在Hi5昆蟲細胞中與N端His6-標籤表現且藉由親和力-(Ni-NTA)及尺寸排阻層析法純化。參見例如WO 2017/021348。此外，BUB1活性可使用類似於上述方法之BUB1 TR-FRET高ATP激酶分析在高ATP濃度下測定。參見例如WO 2019/081486。
在一些實施例中，本文所提供之化合物展現中樞神經系統(CNS)通透性。例如，此類化合物可能夠穿越血腦障壁(BBB)且抑制腦及/或其他CNS結構中之EGFR及/或HER2激酶。在一些實施例中，本文所提供之化合物能夠以治療有效量穿越血腦障壁。例如，治療患有癌症(例如EGFR相關癌症或HER2相關癌症，諸如EGFR或HER2相關腦癌或CNS癌症、或已轉移至腦或CNS之EGFR相關癌症或HER2相關癌症)之患者可包括向患者投與(例如經口投與)化合物。
可藉由此項技術中已知之分析來證實本文所描述之化合物穿越BBB之能力。此類分析包括BBB模型，諸如transwell系統、中空纖維(動態活體外BBB)模型、其他微流BBB系統、BBB球狀體平台及其他基於細胞聚集物之BBB模型。參見例如Cho等人, Nat Commun. 2017; 8: 15623；Bagchi等人, Drug Des Devel Ther. 2019; 13: 3591-3605；Gastfriend等人, Curr Opin Biomed Eng. 2018 Mar; 5: 6-12；及Wang等人, Biotechnol Bioeng. 2017 Jan; 114(1): 184-194。在一些實施例中，本文所描述之化合物經螢光標記，且螢光標記可使用顯微術(例如共聚焦顯微術)偵測。在一些此類實施例中，化合物穿透模型表面障壁之能力可由表面以下給定深度之螢光強度表示。在一些分析，諸如基於鈣黃綠素AM之分析中，螢光標記為非螢光的直至其滲透活細胞且由胞內酯酶水解以產生保留在細胞中且可用分光光度計定量之螢光化合物。可用於本文所描述之分析中之螢光標記之非限制性實例包括Cy5、若丹明(rhodamine)、紅外IRDye® CW-800 (LICOR #929-71012)、遠紅IRDye® 650 (LICOR #929-70020)、螢光素鈉(Na-F)、螢光黃(LY)、5'羧基螢光素(5' carboxyfluorescein)及鈣黃綠素乙醯氧基甲基酯(calcein-AM)。在一些實施例中，可對BBB模型(例如組織或細胞聚集物)進行切片，且可使用質譜法(例如MALDI-MSI分析)在一或多個切片中偵測本文所描述之化合物。在一些實施例中，本文所描述之化合物通過諸如受體介導之轉運(RMT)、載劑介導之轉運(CMT)或主動外排轉運(AET)之跨細胞轉運系統跨越BBB之能力可藉由此項技術中已知之分析證明。參見例如Wang等人, Drug Deliv. 2019; 26(1): 551-565。在一些實施例中，確定化合物是否可藉由P-糖蛋白(Pgp)外排之分析包括單層外排分析，其中化合物經由Pgp之移動藉由量測地高辛(一宗模型Pgp底物)之移動來定量(參見例如Doan等人, 2002. J Pharmacol Exp Ther. 303(3):1029-1037)。用於鑑別穿過血腦障壁之化合物的替代性活體內分析包括基於噬菌體之系統 (參見例如Peng等人, 2019. ChemRxiv. Preprint doi.org/10.26434/chemrxiv.8242871.v1)。在一些實施例中，對本文所描述之化合物與腦組織之結合進行定量。例如，腦組織結合分析可使用平衡透析進行，且未與腦組織結合之本文所描述之化合物的部分可使用LC-MS/MS偵測(Cyprotex：腦組織結合分析www.cyprotex.com/admepk/protein_binding/brain-tissue-binding/)。
式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽或溶劑合物適用於治療可以用EGFR抑制劑、HER2抑制劑、EGFR及HER2雙重抑制劑及/或BUB1抑制劑治療之疾病或病症，諸如本文所描述之彼等疾病及病症，例如癌症。因此，本文提供一種治療有需要之個體之如本文所提供之疾病或病症的方法，該方法包含向該個體投與治療有效量之式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽或溶劑合物。在一些實施例中，疾病或病症為癌症。
如本文所用，術語「治療(treat)」或「治療(treatment)」係指治療性或姑息性措施。有益或所需臨床結果包括(但不限於)與疾病或病症或病狀相關之症狀的完全或部分緩解、疾病程度之減輕、疾病病況穩定(亦即不惡化)、疾病進展延遲或減緩、疾病病況(例如疾病之一或多種症狀)改善或緩和，以及緩解(無論部分或全部)，無論可偵測或不可偵測。「治療」亦可意謂與未接受治療時之預計存活期相比延長的存活期。
如本文所用，術語「個體(subject)」、「個體(individual)」或「患者」可互換使用，係指任何動物，包括哺乳動物，諸如小鼠、大鼠、其他嚙齒動物、兔、犬、貓、豬、牛、綿羊、馬、靈長類動物及人類。在一些實施例中，個體係人類。在一些實施例中，個體已經歷及/或展現所治療及/或預防之疾病或病症的至少一種症狀。
在一些實施例中，個體已經鑑別或診斷患有 EGFR基因、EGFR蛋白質或其中任一者之表現或活性或含量之失調的癌症(EGFR相關癌症) (例如如使用管制機構批准(例如FDA批准)的分析或套組所確定)。在一些實施例中，個體患有對 EGFR基因、EGFR蛋白質或其中任一者之表現或活性或含量之失調呈陽性的腫瘤(例如如使用管制機構批准的分析或套組所確定)。例如，個體患有對如 表 1a及 表 1b中所描述之突變呈陽性的腫瘤。個體可為患有腫瘤之個體，該腫瘤對 EGFR基因、EGFR蛋白質或其中任一者之表現或活性或含量之失調呈陽性(例如如使用管制機構批准(例如FDA批准)的分析或套組鑑別為陽性)。個體可為其腫瘤具有 EGFR基因、EGFR蛋白質或其表現或活性或含量之失調的個體(例如其中使用管制機構批准(例如FDA批准)的套組或分析鑑別該腫瘤如此)。在一些實施例中，個體疑似患有EGFR相關癌症。在一些實施例中，個體之臨床記錄表明，該個體患有具有 EGFR基因、EGFR蛋白質或其中任一者之表現或活性或含量之失調的腫瘤(且視情況，臨床記錄表明該個體應用本文提供之組合物中之任一者治療)。
在一些實施例中，個體已經鑑別或診斷患有具有 HER2基因、HER2蛋白質或其中任一者之表現或活性或含量之失調的癌症(HER2相關癌症) (例如如使用管制機構批准(例如FDA批准)的分析或套組所確定)。在一些實施例中，個體患有對 HER2基因、HER2蛋白質或其中任一者之表現或活性或含量之失調呈陽性的腫瘤(例如如使用管制機構批准的分析或套組所確定)。例如，個體患有對如 表 3中所描述之突變呈陽性的腫瘤。個體可為患有腫瘤之個體，該腫瘤對 HER2基因、HER2蛋白質或其中任一者之表現或活性或含量之失調呈陽性(例如如使用管制機構批准(例如FDA批准)的分析或套組鑑別為陽性)。個體可為其腫瘤具有 HER2基因、HER2蛋白質或其表現或活性或含量之失調的個體(例如其中使用管制機構批准(例如FDA批准)的套組或分析鑑別該腫瘤如此)。在一些實施例中，個體疑似患有HER2相關癌症。在一些實施例中，個體之臨床記錄表明，該個體患有具有 HER2基因、HER2蛋白質或其中任一者之表現或活性或含量之失調的腫瘤(且視情況，臨床記錄表明該個體應用本文提供之組合物中之任一者治療)。
在一些實施例中，個體為兒科個體。
如本文所用，術語「兒科個體」係指在診斷或治療時年齡在21歲以下的個體。術語「兒科」可進一步分成多個亞群，包括：新生兒(自出生至生命第一個月)；嬰兒(1個月直至兩歲)；兒童(兩歲直至12歲)；及青少年(12歲至21歲(直至但不包括第二十二個生日))。Berhman RE, Kliegman R, Arvin AM, Nelson WE. Nelson Textbook of Pediatrics, 15th Ed. Philadelphia: W.B. Saunders Company, 1996；Rudolph AM等人, Rudolph ' s Pediatrics, 21st Ed. New York: McGraw-Hill, 2002；及Avery MD, First LR. Pediatric Medicine, 2nd Ed. Baltimore: Williams & Wilkins; 1994。在一些實施例中，兒科個體為出生至生命的前28天、29日齡至小於兩歲、兩歲至小於12歲，或12歲至21歲(直至但不包括第二十二個生日)。在一些實施例中，兒科個體為出生至生命的前28天、29日齡至小於1歲、一月齡至小於四月齡、三月齡至小於七月齡、六月齡至小於1歲、1歲至小於2歲、2歲至小於3歲、2歲至小於七歲、3歲至小於5歲、5歲至小於10歲、6歲至小於13歲、10歲至小於15歲或15歲至小於22歲。
在某些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽或溶劑合物適用於預防如本文所定義之疾病或病症(例如自體免疫性疾病、發炎性疾病、肺部病症、心血管疾病、局部缺血、肝病、胃腸道病症、病毒或細菌感染、中樞神經系統疾病(例如神經退化性疾病)及癌症)。如本文所用，術語「預防」意謂延緩如本文所描述之疾病或病況或其症狀之全部或部分發作、復發或擴散。
如本文所用，術語「EGFR相關疾病或病症」係指與 EGFR基因、EGFR激酶(本文亦稱為EGFR激酶蛋白質)或其中任一者(例如一或多者)之表現或活性或含量之失調(例如本文所描述之 EGFR基因、EGFR激酶、EGFR激酶域或其中任一者之表現或活性或含量的任何類型之失調)相關或具有該失調的疾病或病症。EGFR相關疾病或病症之非限制性實例包括例如癌症、中樞神經系統疾病、肺部病症、心血管疾病、局部缺血、肝病、胃腸道病症、病毒或細菌感染及發炎性及/或自體免疫性疾病(例如牛皮癬、濕疹、異位性皮膚炎及動脈粥樣硬化)。
在本文所描述之方法或用途中之任一者之一些實施例中，發炎性及/或自體免疫性疾病係選自關節炎、全身性紅斑狼瘡、動脈粥樣硬化及皮膚相關病症，諸如牛皮癬、濕疹及異位性皮膚炎。參見例如Wang等人, Am J Transl Res. 2019; 11(2): 520-528；Starosyla等人, World J Pharmacol. Dec 9, 2014; 3(4): 162-173；Choi等人, Biomed Res Int. 2018 May 15;2018:9439182；及Wang等人, Sci Rep. 2017; 7: 45917。
在本文所描述之方法或用途中之任一者之一些實施例中，中樞神經系統疾病為神經退化性疾病。在一些實施例中，中樞神經系統疾病係選自阿茲海默氏病(Alzheimer's disease)、帕金森氏病(Parkinson's disease)、亨廷頓氏症(Huntington's disease)、肌肉萎縮性側索硬化、脊髓損傷、周邊神經病變、腦局部缺血及精神病症，諸如精神分裂症。參見例如Iwakura及Nawa. Front Cell Neurosci. . 2013 Feb 13;7:4；及Chen et al. Sci Rep. 2019 Feb 21;9(1):2516。
如本文所用，術語「EGFR相關癌症」係指與 EGFR基因、EGFR激酶(本文亦稱為EGFR激酶蛋白質)或其任一者之表現或活性或含量之失調相關或具有該失調的癌症。EGFR相關癌症之非限制性實例係描述於本文中。
片語「 EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調」係指基因突變(例如引起相較於野生型EGFR蛋白質包括至少一個胺基酸缺失之EGFR蛋白質表現的 EGFR基因突變；引起相較於野生型EGFR蛋白質具有一或多個點突變之蛋白質表現的 EGFR基因突變；引起相較於野生型EGFR蛋白質具有至少一個插入胺基酸之EGFR蛋白質表現的 EGFR基因突變；引起細胞中之EGFR蛋白質含量增加的基因複製；或引起細胞中之EGFR蛋白質含量增加的調控序列(例如啟動子及/或增強子)突變；EGFR mRNA之替代剪接形式，相較於野生型蛋白質，引起在EGFR蛋白質中具有至少一個胺基酸缺失的EGFR蛋白質)；或哺乳動物細胞中之野生型EGFR激酶表現增加(例如含量增加)，其歸因於異常的細胞信號傳導及/或自分泌/旁分泌信號傳導的失調(例如相較於對照非癌細胞)。作為另一實例， EGFR基因、EGFR蛋白質或其中任一者之表現或活性或含量之失調可為 EGFR基因中之突變，該 EGFR基因編碼具有組成型活性或相較於由不包括該突變之 EGFR基因編碼之蛋白質具有增加之活性之EGFR蛋白質。EGFR激酶蛋白質點突變/插入/缺失之非限制性實例描述於 表 1a及 表 1b中。EGFR激酶蛋白質突變(例如點突變)之其他實例為EGFR抑制劑抗性突變(例如EGFR抑制劑突變)。EGFR抑制劑抗性突變之非限制性實例描述於 表 2a及 表 2b中。例如，一或多個EGFR抑制劑抗性突變可包括在胺基酸位置718、747、761、790、797或854處之取代(例如L718Q、L747S、D761Y、T790M、C797S、T854A)。此類突變及過度表現與多種癌症之進展相關(Shan等人, Cell2012, 149(4) 860-870)。
在一些實施例中， EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調可由 EGFR基因之活化突變引起。在一些實施例中， EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調可由引起EGFR激酶表現的基因突變引起，該EGFR激酶相較於例如野生型EGFR激酶對EGFR抑制劑、酪胺酸激酶抑制劑(TKI)及/或多激酶抑制劑(MKI)具有增加之抗性(參見例如 表 2a及 表 2b中之胺基酸取代)。在一些實施例中， EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調可由引起改變之EGFR蛋白質表現的編碼改變之EGFR蛋白質(例如，具有突變(例如原發性突變)之EGFR蛋白質))的核酸中的突變引起，該EGFR蛋白質相較於例如野生型EGFR激酶對EGFR抑制劑、酪胺酸激酶抑制劑(TKI)及/或多激酶抑制劑(MKI)具有增加之抗性(參見例如 表 2a及 表 2b中之胺基酸取代)。 表 1a 、 1b 、 2a及 2b中所示之例示性EGFR激酶點突變、插入及缺失可由活化突變引起及/或可引起對EGFR抑制劑、酪胺酸激酶抑制劑(TKI)及/或多重激酶抑制劑(MKI)具有增強之抗性的EGFR激酶表現。
在一些實施例中，個體具有兩個或更多個增加癌症對第一EGFR抑制劑之抗性的EGFR抑制劑抗性突變。例如，個體可具有兩個EGFR抑制劑抗性突變。在一些實施例中，兩個突變存在於相同EGFR蛋白質中。在一些實施例中，兩個突變存在於單獨EGFR蛋白質中。在一些實施例中，個體可具有三個EGFR抑制劑抗性突變。在一些實施例中，三個突變存在於相同EGFR蛋白質中。在一些實施例中，三個突變存在於單獨EGFR蛋白質中。例如，個體具有兩個或更多個EGFR抑制劑抗性突變，其選自Del 19/L718Q、Del 19/T790M、Del 19/L844V、Del 19/T790M/L718Q、Del/T790M/C797S、Del 19/T790M/L844V、L858R/L718Q、L858R/L844V、L858R/T790M、L858R/T790M/L718Q、L858R/T790M/C797S及L858R/T790M/I941R或其任何組合；例如上述EGFR抑制劑抗性突變中之任何兩個。
術語「活化突變」描述 EGFR基因中之突變，該突變引起具有增強之激酶活性的EGFR激酶表現，例如相較於野生型EGFR激酶，例如在相同條件下分析時。例如，活化突變可為 EGFR基因之突變，該突變引起具有一或多個(例如兩個、三個、四個、五個、六個、七個、八個、九個或十個)胺基酸取代之EGFR激酶表現(例如本文所描述之任何胺基酸取代之任何組合)，該EGFR激酶相較於例如野生型EGFR激酶具有增加之激酶活性，例如在相同條件下分析時。在另一實例中，活化突變可為 EGFR基因之突變，該突變引起相較於例如野生型EGFR激酶具有一或多個(例如兩個、三個、四個、五個、六個、七個、八個、九個或十個)胺基酸缺失的EGFR激酶表現，例如在相同條件下分析時。在另一實例中，活化突變可為 EGFR基因之突變，該突變引起相較於例如野生型EGFR激酶(例如本文所描述之例示性野生型EGFR激酶)具有至少一個(例如至少2個、至少3個、至少4個、至少5個、至少6個、至少7個、至少8個、至少9個、至少10個、至少12個、至少14個、至少16個、至少18個或至少20個)胺基酸插入的EGFR激酶表現，例如在相同條件下分析時。活化突變之其他實例為此項技術中已知的。
術語「野生型(wild type)」或「野生型(wild-type)」描述一種核酸(例如 EGFR基因或EGFR mRNA)或蛋白質(例如EGFR蛋白質)序列，該序列通常發現在不患有與參考核酸或蛋白質相關的疾病或病症的個體中。
術語「野生型(wildtype)」或「野生型(wild-type)」描述一種核酸(例如 EGFR基因或EGFR mRNA)或蛋白質(例如EGFR蛋白質)，其發現在不患有EGFR相關疾病(例如EGFR相關癌症) (且視情況亦無出現EGFR相關疾病之增加風險及/或未懷疑患有EGFR相關疾病)的個體中，或發現在來自不患有EGFR相關疾病(例如EGFR相關癌症) (且視情況亦無出現EGFR相關疾病之增加風險及/或未懷疑患有EGFR相關疾病)之個體的細胞或組織中。
本文提供一種治療需要此類治療之個體之癌症(例如EGFR相關癌症)的方法，該方法包含向該個體投與治療有效量之式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽或其醫藥組合物。例如，本文提供一種用於治療需要此類治療之個體之EGFR相關癌症的方法，該方法包含a)偵測來自該個體之樣品中 EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調；及b)投與治療有效量之式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中， EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調包括一或多個EGFR激酶蛋白質點突變/插入。EGFR激酶蛋白質點突變/插入/缺失之非限制性實例描述於 表 1a及 1b中。在一些實施例中，EGFR激酶蛋白質點突變/插入/缺失係選自由以下組成之群：G719S、G719C、G719A、L747S、D761Y、T790M、T854A、L858R、L861Q、外顯子19中之缺失(例如L747_A750del)及外顯子20中之插入(例如V769_D770insX、D770_N771insX、N771_P772insX、P772_H773insX或H773_V774insX)。在一些實施例中，EGFR激酶蛋白質點突變/插入/缺失係選自由以下組成之群：L858R、外顯子19中之缺失(例如L747_A750del)、L747S、D761Y、T790M及T854A。在一些實施例中，EGFR激酶蛋白質插入為外顯子20插入。在一些實施例中，EGFR激酶蛋白質插入為選自由以下組成之群的外顯子20插入：V769_D770insX、D770_N771insX、N771_P772insX、P772_H773insX及H773_V774insX。例如，EGFR激酶蛋白質插入為選自以下組成之群的外顯子20插入：A767_V769dupASV、V769_D770insASV、D770_N771insNPG、D770_N771insNPY、D770_N771insSVD、D770_N771insGL、N771_H773dupNPH、N771_P772insN、N771_P772insH、N771_P772insV、P772_H773insDNP、P772_H773insPNP、H773_V774insNPH、H773_V774insH、H773_V774insPH、H773_V774insAH及P772_H773insPNP；或其任何組合；例如任何兩個或更多個獨立選擇之外顯子20插入；例如任何兩個獨立選擇之外顯子20插入(例如V769_D770insASV及D770_N771insSVD)。
在本文所描述之方法或用途中之任一者之一些實施例中，癌症(例如EGFR相關癌症)選自血液癌(例如急性淋巴球性癌、霍奇金淋巴瘤(Hodgkin lymphoma)、非霍奇金淋巴瘤及白血病，諸如急性骨髓性白血病(AML)、慢性骨髓性白血病(CML)、急性前髓細胞性白血病及急性淋巴球性白血病(ALL))、中樞或周邊神經系統組織癌、內分泌或神經內分泌癌(包括多種神經內分泌I型及II型腫瘤)、李-佛美尼腫瘤(Li-Fraumeni tumor)、肺泡橫紋肌肉瘤、骨癌、腦癌、乳癌、肛門癌、肛管癌或肛腸癌、眼癌、肝內膽管癌、關節癌、頸癌、膽囊癌或胸膜癌、鼻癌、鼻腔癌或中耳癌、口腔癌、口咽癌、鼻咽癌、呼吸道癌、泌尿生殖癌、外陰癌、大腸癌、食道癌、氣管癌、子宮頸癌、胃腸道類癌、下咽癌、腎癌、喉癌、肝癌、肺癌、惡性間皮瘤、黑色素瘤、多發性骨髓瘤、鼻咽癌、卵巢癌、胰臟癌包括胰島細胞癌、腹膜、腸網膜及腸系膜癌、咽癌、前列腺癌、直腸癌、腎癌(例如腎細胞癌(RCC))、小腸癌、軟組織癌、胃癌、睾丸癌、甲狀腺癌、副甲狀腺癌、垂體瘤、腎上腺瘤、尿管癌、膽癌及膀胱癌。在一些實施例中，癌症選自由以下組成之群：頭頸癌、卵巢癌、子宮頸癌、膀胱癌及食道癌、胰臟癌、胃腸癌、胃癌、乳癌、子宮內膜癌及大腸直腸癌、肝細胞癌、神經膠母細胞瘤、膀胱癌、肺癌，例如非小細胞肺癌(NSCLC)、細支氣管肺泡癌。在一些實施例中，癌症為胰臟癌、頭頸癌、黑色素瘤、大腸癌、腎癌、白血病、肺癌或乳癌。在一些情況下，癌症為黑色素瘤、大腸癌、腎癌、白血病或乳癌。
在一些此類實施例中，本文所提供之化合物適用於治療原發性腦腫瘤或轉移性腦腫瘤。例如，化合物可用於治療以下中之一或多者：神經膠質瘤，諸如神經膠母細胞瘤(亦稱為多形性膠質母細胞瘤)、星形細胞瘤、寡樹突神經膠質瘤、室管膜瘤及混合性神經膠質瘤、脊膜瘤、髓母細胞瘤、神經節膠質瘤、施萬細胞瘤(schwannomas)(神經鞘瘤)及顱咽管瘤(參見例如Liu等人, J Exp Clin Cancer Res. 2019 May 23;38(1):219)；及Ding等人, Cancer Res. 2003 Mar 1;63(5):1106-13)。在一些實施例中，腦腫瘤為原發性腦腫瘤。在一些實施例中，腦腫瘤為轉移性腦腫瘤，例如來自肺癌、黑色素瘤、乳癌、卵巢癌、大腸直腸癌、腎癌、膀胱癌或未分化性瘤之轉移性腦腫瘤。在一些實施例中，腦腫瘤為來自肺癌(例如非小細胞肺癌)之轉移性腦腫瘤。在一些實施例中，本文所提供之化合物展現腦部及/或中樞神經系統(CNS)通透性。在一些實施例中，患者先前已用另一種抗癌劑治療，例如另一種EGFR及/或HER2抑制劑(例如不為式I化合物之化合物)或多激酶抑制劑。
在一些實施例中，癌症為B細胞來源之癌症。在一些實施例中，癌症為譜系依賴性癌症。在一些實施例中，癌症為譜系依賴性癌症，其中EGFR或 EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調在癌症之起始及/或進展中起作用。
在一些實施例中，癌症為EGFR相關癌症。因此，本文亦提供一種用於治療診斷患有或鑑別患有EGFR相關癌症，例如本文所揭示之例示性EGFR相關癌症中之任一者的個體的方法，其包含向該個體投與治療有效量之式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽或其醫藥組合物，如本文所定義。
在一些實施例中， EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調包括EGFR激酶中之一或多個缺失(例如位置4處之胺基酸缺失)、插入或點突變。在一些實施例中， EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調包括EGFR基因中之至少一個缺失、插入或點突變，其引起產生具有 表 1a及 表 1b中之一或多個胺基酸取代、插入或缺失的EGFR激酶。在一些實施例中， EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調包括來自EGFR激酶之一或多個殘基的缺失，從而引起EGFR激酶域的組成型活性。
在一些實施例中， EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調包括 EGFR基因中之至少一個點突變，其引起產生相較於野生型EGFR激酶具有一或多個胺基酸取代、插入或缺失的EGFR激酶(參見例如表 1a及表 1b中之點突變)。在一些實施例中， EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調包括 EGFR基因中之至少一個點突變，其引起產生具有 表 1a及 表 1b中之一或多個胺基酸取代、插入或缺失的EGFR激酶。
在一些實施例中， EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調包括 EGFR基因之外顯子20中一或多個殘基之插入(例如 表 1a及 表 1b中所描述之外顯子20插入中之任一者)。EGFR之外顯子20具有兩個主要區域：c-螺旋(殘基762-766)及在c-螺旋之後的環(殘基767-774)。研究表明，對於一些外顯子20插入(例如在殘基764之後的插入)，穩定及脊活性構形誘導對第一代EGFR抑制劑之抗性。在一些實施例中， EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調包括外顯子20中之一或多個殘基之插入，該插入選自由以下組成之群：V769_D770insX、D770_N771insX、N771_P772insX、P772_H773insX及H773_V774insX。例如，EGFR激酶蛋白質插入為選自以下組成之群的外顯子20插入：A767_V769dupASV、V769_D770insASV、D770_N771insNPG、D770_N771insNPY、D770_N771insSVD、D770_N771insGL、N771_H773dupNPH、N771_P772insN、N771_P772insH、N771_P772insV、P772_H773insDNP、P772_H773insPNP、H773_V774insNPH、H773_V774insH、H773_V774insPH、H773_V774insAH及P772_H773insPNP；或其任何組合；例如任何兩個或更多個獨立選擇之外顯子20插入；例如任何兩個獨立選擇之外顯子20插入(例如V769_D770insASV及D770_N771insSVD)。
表 1a .EGFR蛋白質胺基酸取代/插入/缺失 A
胺基酸位置 非限制性例示性突變 非限制性例示性EGFR 相關癌症
62 L62R 11,B
108 R108K 11,B
216 A216T 11,B
222 R222C 11,B
252 R252C 11,B   
289 A289D、A289T、A289V 11,B   
292 V292L 11,B   
304 H304Y 11,B   
306 S306L 11,B   
492 S492R 11,B   
596 P596L 11,B   
598 G598V 11,B   
688 L688F 6 肺腺癌 6
689 V689L 6 肺腺癌 6
703 L703I, L703P 11,B   
706 I706T 6 肺腺癌 6
709 E709A、E709G、E709K、E709H、E709V 2,6,9 肺腺癌 2,6, NSCLC 9
709-710 (有時亦稱為外顯子18缺失或del_18) E709_T710delinsD 9 NSCLC 9
714 K714R 11,B   
718 L718Q 1,11,B
719 G719S、G719C、G719A、G719D 1,4 NSCLC 3
719及706 G719A/I706T 6 肺腺癌 6
719及709 G719S/E709K 6、G719S/E709A 11,B、G719C/E709A 11,B 肺腺癌 6
719及外顯子18缺失 G719X/del_18 9 NSCLC 9
720 S720F 11,B   
735 G735S 11,B   
741 P741L 11,B   
744 I744M 11,B   
747 L747S 11,B   
749 E749Q 6 肺腺癌 6
750 A750P 5,10 NSCLC 5, 肺腺癌 10
750及749 A750P/E749Q 6   
751 T751I 11,B   
752 S752F 10 肺腺癌 10
753 P753S 11,B   
765 V765A 3、V765M 11,B NSCLC 3
767 A767V 11,B   
768 S768I 2,9 肺腺癌 2, NSCLC 9
768及719 S768I/G719A 11,B、S768I/G719C 11,B、S768I/G719S 11,B   
769 V769M 3、V769L 11,B   
771 N771F 6 肺腺癌 6
773 H773Y 6、H773L 11,B、H773Y 11,B 肺腺癌 6
774 V774M, V774A 2,3 肺腺癌 2, NSCLC 3
774及773 V774M/H773L 10 NSCLC 10
776 R776H、R776C 6、R776G 11,B 肺腺癌 6
776及719 R776H/G719S 6 肺腺癌 6
779 G779S 11,B   
783 T783A 3 NSCLC 3
784 S784P 3   
785 T785I 6 肺腺癌 6
786 V786M 11,B   
790 T790M 3 NSCLC 3
790及719 T790M/G719A 11,B   
790及948 T790M/V948R 1   
797及790 C797S/T790M 11,B   
798 P798H 11,B   
802 V802I 11,B   
813 Y813H 6 肺腺癌 6
824 G824S 6 肺腺癌 6
824及688 G824S/L688F 6 肺腺癌 6
831 R831H、R831L 11,B   
833 L833V 2,8、L833F 11,B 肺腺癌 2, NSCLC 8
834 V834L、V834M 11,B   
835 H835L 11,B   
835、833及670 H835L/L833V/R670W 8 NSCLC 8
838 L838V 11,B   
843 V843I 3 NSCLC 3
844 L844V 1   
845 V845M 6 肺腺癌 6
848 P848L 11,B   
851 V851I 6 肺腺癌 6
854 T854A 11,B   
857 G857R 6 肺腺癌 6
857、851、845、813及785 G857R/V851I/V845M/Y813H/T785I 6 肺腺癌 6
858 L858R 1   
858及108 L858R/R108K 11,B   
858及289 L858R/A289T 11,B   
858及292 L858R/V292L 11,B   
858及306 L858R/S306L 11,B   
858及703 L858R/L703I 11,B   
858及709 L858R/E709A 11,B、L858R/E709G 11,B、L858R/E709K 11,B、L858R/E709V 11,B   
858及714 L858R/K714R 11,B   
858及718 L858R/L718Q 1   
858及720 L858R/S720F 11,B   
858及744 L858R/I744M 11,B   
858及768 L858R/S768I 11,B   
858及769 L858R/V769L 6 肺腺癌 6
858及776 L858R/R776H 6、L858R/R776C 11,B、L858R/R776G 11,B 肺腺癌 6
858及790 L858R/T790M 11,B   
858及833 L858R/L833V 6 肺腺癌 6
858及838 L858R/L838V 11,B   
858及843 L858R/V843I 11,B   
858及844 L858R/L844V 1   
858及外顯子18缺失 L858R/del_18 9 NSCLC 9
859 A859T 11,B   
860 K860R 11,B   
861 L861Q、L861R、L681G 1,5,6,7,9 肺腺癌 6, NSCLC 5,9
861及719 L861Q/G719X 10、L861Q/G719A 11,B、L861R/G719A 11,B 肺腺癌 10
861及858 L861Q/L858R 11,B   
861、768及719 L861Q/S768I/G719X 10 肺腺癌 10
864 A864T 11,B   
865 E865K 11,B   
870 H870R 6 肺腺癌 6
870及858 H870R/L858R   
871 A871E、A871G 3,6、A871T 11,B 肺腺癌 6
871及858 A871G/L858R 6 肺腺癌 6
873 G873E 11,B   
874 G874S 11,B   
941 I941R 1   
948 V948R 1   
1118 A1118T 11,B   
1153 S1153I 11,B   
外顯子19 插入 ( 有時亦稱為ins _19 )   
   V738_K739insKIPVAI 6 肺腺癌 6
   I744_K745insKIPVAI 9,10 NSCLC 9,10
   K745_E746insTPVAIK 9,10 NSCLC 9,10
   K745_E746insVPVAIK 10 NSCLC 10
   K745_E746insIPVAIK 9,10 NSCLC 9,10
外顯子19 缺失 ( 有時亦稱為del _19 ) 1 ,2   
   E746_A750del 1   
   E746_A750delinsP 1   
   E746_A750delinsIP 11,B   
   E746_A750del/T790M 11,B   
   E746_A750del/A1118T 11,B   
   E746_T751delinsV 11,B   
   E746_S752delinsV 2 肺腺癌 2
   E746_S752delinsV/A216T 11,B   
   L747_E749del 5 NSCLC 5
   L747_A750del 3 NSCLC 3
   L747_A750delinsP 2 肺腺癌 2
   L747_T751del 2 肺腺癌 2
   L747_T751delinsA 10 NSCLC 10
   L747_T751delinsP 10 NSCLC 10
   L747_T751delinsS 11,B   
   L747_T751delinsQ 2 肺腺癌 2
   L747_S752del 2 肺腺癌 2
   L747_P753del 10 NSCLC 10
   L747_P753delinsS 2 肺腺癌 2
   L747_P753delinsQ 11,B   
   L747_P753delinsVS 10 NSCLC 10
   T751_I759delinsN 11,B   
   S752_I759del 2,10 肺腺癌 2, NSCLC 10
外顯子19缺失及706 Del_19及I706T 6 肺腺癌 6
外顯子19缺失及718 Del_19及L718Q 1   
外顯子19缺失及844 Del_19及L844V 1   
外顯子19缺失及858 Del_19及L858R 6 肺腺癌 6
外顯子19缺失及外顯子18缺失 Del_19及del_18 9 NSCLC 9
外顯子20 插入 ( 有時亦稱為ins _20 ) 1   
   D761_E762insX 5，例如D761_E762insEAFQ 10 NSCLC 5
   A763_Y764insX 5，例如A763_Y764insFQEA 5,9,10 NSCLC 5,9,10
   Y764_V765insX 5，例如V764_V765insHH 13 NSCLC 5
   V765_M766insX 5 NSCLC 5
   M766_A767insASV 6 肺腺癌 6
   A767_S768insX 5；A767insASV 14 NSCLC 5
   A767_V769dupASV 5 NSCLC 5
   S768_V769insX 12；S768dupSVD 14 NSCLC
   V769_D770insX 5，例如V769_D770insASV 8,9,10 NSCLC 5,8,10
   D770delinsGY 5,10 NSCLC 5,10
   D770_N771insX 5，例如D770_N771insNPG 2,5,9、D770_N771insG+N771T 6、D770_N771insNPY 6、D770_N771insSVD 9,10、D770_N771insGL 13 NSCLC 3,5,10
   D770_N771insX及胺基酸位置773，例如 D770_N771insNPY/H773Y 6 肺腺癌 6
   N771_P772insX 5，例如N771_P772insN 10、N771_P772insH 13、N771_P772insV 13 NSCLC 5,10
   N771_H773dupNPH 5 NSCLC 5
   N771delinsGY 13；N771del insFH 14   
   P772_H773insX 5，例如P772_H773insDNP 9、P772_H773insPNP 9 NSCLC 5,9
   H773_V774insX 5，例如H773_V774insNPH 9、H773_V774insH 10、H773_V774insPH 10、H773_V774insAH 10、P772_H773insPNP 13 NSCLC 5,9,10
   H773_dupH 13   
   V774_C775insX 5，例如V774_C775insHV 10 NSCLC 5
   A775_G776insX，例如A775_G776insYVMA 13   
激酶域複製(KDD) 外顯子18-25、18-26、14-26或17-25 9之複製 NSCLC 9
A所示EGFR突變可為活化突變及/或向EGFR賦予增加之針對EGFR抑制劑及/或多激酶抑制劑(MKI)的抗性，例如相較於野生型EGFR。 B潛在致癌變異體。參見例如Kohsaka, Shinji等人, Science translational medicine 9.416 (2017): eaan6566。 1PCT專利申請公開案第WO2019/246541號。 2Grosse A, Grosse C, Rechsteiner M, Soltermann A. Diagn Pathol. 2019;14(1):18.於2019二月11日公開. doi:10.1186/s13000-019-0789-1. 3Stewart EL, Tan SZ, Liu G，Tsao MS. Transl Lung Cancer Res. 2015;4(1):67-81. doi:10.3978/j.issn.2218-6751.2014.11.06. 4Pines, Gur, Wolfgang J. Köstler及Yosef Yarden. FEBS letters 584.12 (2010): 2699-2706. 5Yasuda, Hiroyuki, Susumu Kobayashi及Daniel B. Costa. The Lancet Oncology 13.1 (2012): e23-e31. 6Kim EY, Cho EN, Park HS等人, Cancer Biol Ther. 2016;17(3):237-245. doi:10.1080/15384047.2016.1139235. 7Shah, Riyaz及Jason F. Lester. Clinical Lung Cancer (2019)。 8Aran, Veronica及Jasminka Omerovic. International journal of molecular sciences 20.22 (2019): 5701. doi: 10.3390/ijms20225701. 9Beau-Faller, Michele等人, (2012): 10507-10507. doi: 10.1016/j.semcancer.2019.09.015. 10Masood, Ashiq, Rama Krishna Kancha及Janakiraman Subramanian. Seminars in oncology. WB Saunders, 2019. doi: 10.1053/j.seminoncol.2019.08.004. 11Kohsaka, Shinji等人, Science translational medicine 9.416 (2017): eaan6566. 12Vyse及Huang等人, Signal Transduct Target Ther. 2019 Mar 8;4:5. doi: 10.1038/s41392-019-0038-9. 13PCT專利申請公開案第WO2019/046775號。 14PCT專利申請公開案第WO 2018/094225號。
表 1b .EGFR蛋白質胺基酸取代/插入/缺失 A
胺基酸位置 非限制性例示性突變 非限制性例示性EGFR 相關癌症
62 L62R 11,B
108 R108K 11,B
216 A216T 11,B
222 R222C 11,B
252 R252C 11,B   
289 A289D、A289T、A289V 11,B   
292 V292L 11,B   
304 H304Y 11,B   
306 S306L 11,B   
492 S492R 11,B   
596 P596L 11,B   
598 G598V 11,B   
688 L688F 6 肺腺癌 6
689 V689L 6 肺腺癌 6
703 L703I、L703P 11,B   
706 I706T 6 肺腺癌 6
709 E709A、E709G、E709K、E709H、E709V 2,6,9 肺腺癌 2,6, NSCLC 9
709-710 (有時亦稱為外顯子18缺失或del_18) E709_T710delinsD 9 NSCLC 9
714 K714R 11,B   
718 L718Q 1,11,B
719 G719S、G719C、G719A、G719D 1,4 NSCLC 3
719及706 G719A/I706T 6 肺腺癌 6
719及709 G719S/E709K 6、G719S/E709A 11,B、G719C/E709A 11,B 肺腺癌 6
719及外顯子18缺失 G719X/del_18 9 NSCLC 9
720 S720F 11,B   
735 G735S 11,B   
741 P741L 11,B   
744 I744M 11,B   
747 L747S 11,B   
749 E749Q 6 肺腺癌 6
750 A750P 5,10 NSCLC 5, 肺腺癌 10
750及749 A750P/E749Q 6   
751 T751I 11,B   
752 S752F 10 肺腺癌 10
753 P753S 11,B   
765 V765A 3、V765M 11,B NSCLC 3
767 A767V 11,B   
768 S768I 2,9 肺腺癌 2, NSCLC 9
768及719 S768I/G719A 11,B、S768I/G719C 11,B、S768I/G719S 11,B,   
769 V769M 3、V769L 11,B   
771 N771F 6 肺腺癌 6
773 H773Y 6、H773L 11,B、H773Y 11,B 肺腺癌 6
774 V774M、V774A 2,3 肺腺癌 2, NSCLC 3
774及773 V774M/H773L 10 NSCLC 10
776 R776H、R776C 6、R776G 11,B 肺腺癌 6
776及719 R776H/G719S 6 肺腺癌 6
779 G779S 11,B   
783 T783A 3 NSCLC 3
784 S784P 3   
785 T785I 6 肺腺癌 6
786 V786M 11,B   
790 T790M 3 NSCLC 3
790及719 T790M/G719A 11,B   
790及948 T790M/V948R 1   
797及790 C797S/T790M 11,B   
798 P798H 11,B   
802 V802I 11,B   
813 Y813H 6 肺腺癌 6
824 G824S 6 肺腺癌 6
824及688 G824S/L688F 6 肺腺癌 6
831 R831H、R831L 11,B   
833 L833V 2,8、L833F 11,B 肺腺癌 2, NSCLC 8
834 V834L、V834M 11,B   
835 H835L 11,B   
835, 833,及670 H835L/L833V/R670W 8 NSCLC 8
838 L838V 11,B   
843 V843I 3 NSCLC 3
844 L844V 1   
845 V845M 6 肺腺癌 6
848 P848L 11,B   
851 V851I 6 肺腺癌 6
854 T854A 11,B   
857 G857R 6 肺腺癌 6
857、851、845、813及785 G857R/V851I/V845M/Y813H/T785I 6 肺腺癌 6
858 L858R 1   
858及108 L858R/R108K 11,B   
858及289 L858R/A289T 11,B   
858及292 L858R/V292L 11,B   
858及306 L858R/S306L 11,B   
858及703 L858R/L703I 11,B   
858及709 L858R/E709A 11,B、L858R/E709G 11,B、L858R/E709K 11,B、L858R/E709V 11,B   
858及714 L858R/K714R 11,B   
858及718 L858R/L718Q 1   
858及720 L858R/S720F 11,B   
858及744 L858R/I744M 11,B   
858及768 L858R/S768I 11,B   
858及769 L858R/V769L 6 肺腺癌 6
858及776 L858R/R776H 6、L858R/R776C 11,B、L858R/R776G 11,B 肺腺癌 6
858及790 L858R/T790M 11,B   
858及833 L858R/L833V 6 肺腺癌 6
858及838 L858R/L838V 11,B   
858及843 L858R/V843I 11,B   
858及844 L858R/L844V 1   
858及外顯子18缺失 L858R/del_18 9 NSCLC 9
859 A859T 11,B   
860 K860R 11,B   
861 L861Q、L861R、L681G 1,5,6,7,9 肺腺癌 6, NSCLC 5,9
861及719 L861Q/G719X 10、L861Q/G719A 11,B、L861R/G719A 11,B 肺腺癌 10
861及858 L861Q/L858R 11,B   
861、768及719 L861Q/S768I/G719X 10 肺腺癌 10
864 A864T 11,B   
865 E865K 11,B   
870 H870R 6 肺腺癌 6
870及858 H870R/L858R   
871 A871E、A871G 3,6、A871T 11,B 肺腺癌 6
871及858 A871G/L858R 6 肺腺癌 6
873 G873E 11,B   
874 G874S 11,B   
941 I941R 1   
948 V948R 1   
1118 A1118T 11,B   
1153 S1153I 11,B   
外顯子19 插入 ( 有時亦稱為ins _19 )   
   V738_K739insKIPVAI 6 肺腺癌 6
   I744_K745insKIPVAI 9,10 NSCLC 9,10
   K745_E746insTPVAIK 9,10 NSCLC 9,10
   K745_E746insVPVAIK 10 NSCLC 10
   K745_E746insIPVAIK 9,10 NSCLC 9,10
外顯子19 缺失 ( 有時亦稱為del _19 ) 1 ,2   
   E746_A750del 1   
   E746_A750delinsP 1   
   E746_A750delinsIP 11,B   
   E746_A750del/T790M 11,B   
   E746_A750del/A1118T 11,B   
   E746_T751delinsV 11,B   
   E746_S752delinsV 2 肺腺癌 2
   E746_S752delinsV/A216T 11,B   
   L747_E749del 5 NSCLC 5
   L747_A750del 3 NSCLC 3
   L747_A750delinsP 2 肺腺癌 2
   L747_T751del 2 肺腺癌 2
   L747_T751delinsA 10 NSCLC 10
   L747_T751delinsP 10 NSCLC 10
   L747_T751delinsS 11,B   
   L747_T751delinsQ 2 肺腺癌 2
   L747_S752del 2 肺腺癌 2
   L747_P753del 10 NSCLC 10
   L747_P753delinsS 2 肺腺癌 2
   L747_P753delinsQ 11,B   
   L747_P753delinsVS 10 NSCLC 10
   T751_I759delinsN 11,B   
   S752_I759del 2,10 肺腺癌 2, NSCLC 10
外顯子19缺失及706 Del_19及I706T 6 肺腺癌 6
外顯子19缺失及718 Del_19及L718Q 1   
外顯子19缺失及844 Del_19及L844V 1   
外顯子19缺失及858 Del_19及L858R 6 肺腺癌 6
外顯子19缺失及外顯子18缺失 Del_19及del_18 9 NSCLC 9
外顯子20 插入 ( 有時亦稱為ins _20 ) 1   
   D761_E762insX 5，例如D761_E762insEAFQ 10 NSCLC 5
   A763_Y764insX 5，例如A763_Y764insFQEA 5,9,10 NSCLC 5,9,10
   Y764_V765insX 5，例如V764_V765insHH 13 NSCLC 5
   V765_M766insX 5 NSCLC 5
   M766_A767insASV 6 肺腺癌 6
   M766delinsMASVx2 15 兒科雙丘腦神經膠質瘤 15
   A767_S768insX 5；A767insASV 14 NSCLC 5
   A767_V769dupASV 5 NSCLC 5
   A767delinsASVDx3；A767delinsASVG 15 兒科雙丘腦神經膠質瘤 15
   S768_V769insX 12; S768dupSVD 14 、16 NSCLC 12, 14; 鼻竇鱗狀細胞癌 16
   V769_D770insX 5，例如V769_D770insASV 8,9,10 NSCLC 5,8,10
   D770delinsGY 5,10；D770delinsDN；D770delinsDNPH 15 NSCLC 5,10; 兒科雙丘腦神經膠質瘤 15
   D770_N771insX 5 、16，例如D770_N771insNPG 2,5,9、D770_N771insG+N771T 6、D770_N771insNPY 6、D770_N771insSVD 9,10、D770_N771insGL 13 NSCLC 3,5,10; 鼻竇鱗狀細胞癌 16
   D770_N771insX及胺基酸位置773，例如 D770_N771insNPY/H773Y 6 肺腺癌 6
   N771_P772insX 5 、16，例如N771_P772insN 10、N771_P772insH 13、N771_P772insV 13 NSCLC 5,10; 鼻竇鱗狀細胞癌 16
   N771_H773dupNPH 5 NSCLC 5
   N771delinsGY 13；N771del insFH 14；N771delinsNPH 15 NSCLC 13,14; 兒科雙丘腦神經膠質瘤 15
   N771_H773dup 16 鼻竇鱗狀細胞癌 16
   P772_H773insX 5，例如P772_H773insDNP 9、P772_H773insPNP 9 NSCLC 5,9
   H773_V774insX 5，例如H773_V774insNPH 9、H773_V774insH 10、H773_V774insPH 10、H773_V774insAH 10、P772_H773insPNP 13 NSCLC 5,9,10
   H773_dupH 13   
   V774_C775insX 5，例如V774_C775insHV 10 NSCLC 5
   A775_G776insX，例如A775_G776insYVMA 13   
激酶域複製(KDD) 外顯子18-25、18-26、14-26或17-25 9之複製 NSCLC 9
A所示EGFR突變可為活化突變及/或向EGFR賦予增加之針對EGFR抑制劑及/或多激酶抑制劑(MKI)的抗性，例如相較於野生型EGFR。 B潛在致癌變異體。參見例如Kohsaka, Shinji等人, Science translational medicine 9.416 (2017): eaan6566. 1PCT專利申請公開案第WO2019/246541號。 2Grosse A, Grosse C, Rechsteiner M, Soltermann A. Diagn Pathol. 2019;14(1):18.於2019二月11日公開. doi:10.1186/s13000-019-0789-1. 3Stewart EL, Tan SZ, Liu G，Tsao MS. Transl Lung Cancer Res. 2015;4(1):67-81. doi:10.3978/j.issn.2218-6751.2014.11.06. 4Pines, Gur, Wolfgang J. Köstler及Yosef Yarden. FEBS letters 584.12 (2010): 2699-2706. 5Yasuda, Hiroyuki, Susumu Kobayashi及Daniel B. Costa. The Lancet Oncology 13.1 (2012): e23-e31. 6Kim EY, Cho EN, Park HS等人, Cancer Biol Ther. 2016;17(3):237-245. doi:10.1080/15384047.2016.1139235. 7Shah, Riyaz及Jason F. Lester. Clinical Lung Cancer (2019)。 8Aran, Veronica及Jasminka Omerovic. International journal of molecular sciences 20.22 (2019): 5701. doi: 10.3390/ijms20225701. 9Beau-Faller, Michele等人, (2012): 10507-10507. doi: 10.1016/j.semcancer.2019.09.015. 10Masood, Ashiq, Rama Krishna Kancha及Janakiraman Subramanian. Seminars in oncology. WB Saunders, 2019. doi: 10.1053/j.seminoncol.2019.08.004. 11Kohsaka, Shinji等人, Science translational medicine 9.416 (2017): eaan6566. 12Vyse and Huang等人, Signal Transduct Target Ther. 2019 Mar 8;4:5. doi: 10.1038/s41392-019-0038-9. 13PCT專利申請公開案第WO2019/046775。 14PCT專利申請公開案第WO 2018/094225。 15Mondal, Gourish等人, Acta Neuropathol. 2020; 139(6): 1071-1088 16Udager, Aaron M.等人, Cancer Res, 2015; 75(13): 2600-2606
在一些實施例中， EGFR基因、EGFR激酶或其任一者之表現或活性或含量之失調包括EGFR mRNA中之剪接變異，該剪接變異引起具有至少一個殘基缺失(相較於野生型RET激酶)之EGFR之替代剪接變異體的蛋白質表現，從而產生EGFR激酶域之組成型活性。
在一些實施例中， EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調包括 EGFR基因中之至少一個點突變，其引起產生在 EGFR基因中具有一或多個胺基酸取代或插入或缺失之EGFR激酶，其引起產生與野生型EGFR激酶相比具有一或多個胺基酸插入或移除之EGFR激酶。在一些情況下，相較於野生型EGFR激酶或不包括相同突變之EGFR激酶，所得EGFR激酶對一或多種第一EGFR抑制劑的抑制(例如其信號傳導活性之抑制)更具抗性。此類突變視情況不降低具有EGFR激酶之癌細胞或腫瘤對式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽治療的敏感性(例如與不包括特定EGFR抑制劑抗性突變之癌細胞或腫瘤相比)。
在其他實施例中， EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調包括 EGFR基因中之至少一個點突變，其引起產生相較於野生型EGFR激酶具有一或多個胺基酸取代的EGFR激酶，且相較於野生型EGFR激酶或不包括相同突變之EGFR激酶，該EGFR激酶對式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽增加之抗性。在此等實施例中，EGFR抑制劑抗性突變可引起EGFR激酶在式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽之存在下具有增加之V max、減少之K m及減少之K D中之一或多種，相較於野生型EGFR激酶或不具有相同突變之EGFR激酶在相同式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽之存在下。
成熟人類EGFR蛋白質之例示性序列(UniProtKB entry P00533) (SEQ ID NO: 1)
Figure 02_image985
在一些實施例中， EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調包括EGFR基因中之至少一個EGFR抑制劑抗性突變，其引起產生具有 表 2a及 表 2b中之一或多個胺基酸取代、插入或缺失的EGFR激酶。在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物及其醫藥學上可接受之鹽及溶劑合物可用於治療患有EGFR抑制劑抗性突變(例如，導致對第一EGFR抑制劑之抗性增加，例如在位置718、747、761、790、797或854處胺基酸取代(例如L718Q、L747S、D761Y、T790M、C797S、T854A)及/或 表 2a及 表 2b中所列出之一或多個EGFR抑制劑抗性突變)之癌症的個體，藉由組合給藥或作為現有藥物治療(例如，EGFR之其他抑制劑；例如，第一及/或第二EGFR抑制劑)的連續或額外(例如後續)療法。
表 2a. EGFR蛋白質胺基酸抗性突變
胺基酸位置 非限制性例示性突變 非限制性例示性EGFR 相關癌症
747 L747S 2,4,6、L747P 6 NSCLC 2
761 D761Y 2,4 NSCLC 2
769 V769M 2 NSCLC 2
790 T790M 1,4 NSCLC 2
792 L792H 6 NSCLC 6
796 G796R 6 NSCLC 6
797 C797S 5 NSCLC 5
797及790 C797S/T790M 5 NSCLC 5
843 V843I 2,5 NSCLC 2
854 T854A 2,4 NSCLC 2
858及747 L858R/L747S 6 NSCLC 6
858及790 L858R/T790M 1   
858、797及790 L858R/C797S/T790M 1   
871 A871E 2 NSCLC 2
941、858及790 I941R/L858R/T790M 1   
外顯子19缺失及790 Del_19及T790M 1   
外顯子19缺失844及790 Del_19及T790M/L844V 1   
外顯子19缺失797及790 Del_19及C797S/T790M 1   
外顯子20 插入 ( 亦稱為ins _20 ) 2 ,3   
   A767_V769dupASV 5 NSCLC 5
   D770_N771insX 3，例如D770_N771insNPG 2,3,7 NSCLC 2,3
   N771_H771dupNPH 3 NSCLC 3
   P772_H773insX 3，例如P772_H773insDNP 7 NSCLC 3,7
   H773_V774insNPH 7 NSCLC 7
1PCT專利申請公開案第WO2019/246541號 2Stewart EL, Tan SZ, Liu G，Tsao MS. Transl Lung Cancer Res. 2015;4(1):67-81. doi:10.3978/j.issn.2218-6751.2014.11.06 3Yasuda, Hiroyuki, Susumu Kobayashi及Daniel B. Costa. The Lancet Oncology 13.1 (2012): e23-e31. 4Kim EY, Cho EN, Park HS等人, Cancer Biol Ther. 2016;17(3):237-245. doi:10.1080/15384047.2016.1139235 5Shah, Riyaz及Jason F. Lester. Clinical Lung Cancer (2019)。 6Aran, Veronica及Jasminka Omerovic. International journal of molecular sciences 20.22 (2019): 5701. doi: 10.3390/ijms20225701. 7Beau-Faller, Michele等人, (2012): 10507-10507. doi: 10.1016/j.semcancer.2019.09.015 8Masood, Ashiq, Rama Krishna Kancha及Janakiraman Subramanian. Seminars in oncology. WB Saunders, 2019. doi: 10.1053/j.seminoncol.2019.08.004
表 2b .EGFR蛋白質胺基酸抗性突變
胺基酸位置 非限制性例示性突變 非限制性例示性EGFR 相關癌症
747 L747S 2,4,6, L747P 6 NSCLC 2
761 D761Y 2,4 NSCLC 2
769 V769M 2 NSCLC 2
790 T790M 1,4 NSCLC 2
792 L792H 6 NSCLC 6
796 G796R 6 NSCLC 6
797 C797S 5 NSCLC 5
797及790 C797S/T790M 5 NSCLC 5
843 V843I 2,5 NSCLC 2
854 T854A 2,4 NSCLC 2
858及747 L858R/L747S 6 NSCLC 6
858及790 L858R/T790M 1   
858及797 L858R/C797S (或 C797G) 9 NSCLC 9
858、797及790 L858R/C797S/T790M 1   
871 A871E 2 NSCLC 2
941、858及790 I941R/L858R/T790M 1   
外顯子19缺失及790 Del_19及T790M 1   
外顯子19缺失及797 Del_19及C797S (或 C797G) 9 NSCLC 9
外顯子19缺失844及790 Del_19及T790M/L844V 1   
外顯子19缺失797及790 Del_19及C797S/T790M 1   
外顯子20 插入 ( 亦稱為ins _20 ) 2 ,3   
   A767_V769dupASV 5 NSCLC 5
   D770_N771insX 3，例如D770_N771insNPG 2,3,7 NSCLC 2,3
   N771_H771dupNPH 3 NSCLC 3
   P772_H773insX 3，例如P772_H773insDNP 7 NSCLC 3,7
   H773_V774insNPH 7 NSCLC 7
1PCT專利申請公開案第WO2019/246541號 2Stewart EL, Tan SZ, Liu G，Tsao MS. Transl Lung Cancer Res. 2015;4(1):67-81. doi:10.3978/j.issn.2218-6751.2014.11.06 3Yasuda, Hiroyuki, Susumu Kobayashi及Daniel B. Costa. The Lancet Oncology 13.1 (2012): e23-e31. 4Kim EY, Cho EN, Park HS等人, Cancer Biol Ther. 2016;17(3):237-245. doi:10.1080/15384047.2016.1139235 5Shah, Riyaz及Jason F. Lester. Clinical Lung Cancer (2019)。 6Aran, Veronica及Jasminka Omerovic. International journal of molecular sciences 20.22 (2019): 5701. doi: 10.3390/ijms20225701. 7Beau-Faller, Michele等人, (2012): 10507-10507. doi: 10.1016/j.semcancer.2019.09.015 8Masood, Ashiq, Rama Krishna Kancha及Janakiraman Subramanian. Seminars in oncology. WB Saunders, 2019. doi: 10.1053/j.seminoncol.2019.08.004 9Papadimitrakopoulou, V.A.等人, Annals of Oncology 2018; 29 Supplement 8 VIII741
在一些實施例中，EGFR蛋白質胺基酸取代/插入/缺失包括表1a、1b及/或表2a、2b中描繪之EGFR蛋白質胺基酸取代/插入/缺失中之任何一或多個，或任何兩個或更多個(例如，任何兩個)；例如，為以下獨立選擇之EGFR蛋白質胺基酸取代/插入/缺失中之任何一或多個，或任何兩個或更多個(例如，任何兩個)：V769L；V769M；M766delinsMASVx2；A767_V769dupASV；A767delinsASVDx3；A767delinsASVG；S768_V769insX；V769_D770insX；V769_D770insASV；D770delinsDN；D770delinsDNPH；D770_N771insSV；N771delinsNPH；N771_H773dup；L858R/C797S (或C797G)；或Del_19及C797S (或C797G)，或其任意組合。
如本文所用，「EGFR之第一抑制劑」或「第一EGFR抑制劑」係如本文所定義之EGFR抑制劑，但其不包括式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物及其醫藥學上可接受之鹽，如本文所定義。如本文所用，「EGFR之第二抑制劑」或「第二EGFR抑制劑」係如本文所定義之EGFR抑制劑，但其不包括式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物及其醫藥學上可接受之鹽，如本文所定義。當EGFR之第一及第二抑制劑均存在於本文所提供之方法中時，EGFR之第一及第二抑制劑不同。在一些實施例中，與式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物相比，EGFR之第一及/或第二抑制劑結合在不同位置。例如，在一些實施例中，EGFR之第一及/或第二抑制劑可抑制EGFR之二聚化，而式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物可抑制活性位點。在一些實施例中，第一及/或第二EGFR抑制劑可為EGFR之異位抑制劑，而式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物可抑制EGFR活性位點。
例示性EGFR之第一及第二抑制劑描述於本文中。在一些實施例中，EGFR之第一或第二抑制劑可選自由以下組成之群：奧希替尼、吉非替尼、埃羅替尼、阿法替尼、拉帕替尼、來那替尼、AZD-9291、CL-387785、CO-1686或WZ4002。
在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽或溶劑合物適用於治療已鑑別出具有一或多個EGFR抑制劑抗性突變之癌症(導致對EGFR之第一或第二抑制劑的抗性增加，例如於 表 2a及 表 2b中所描述之取代包括在胺基酸位置747、761、790、797或854之取代(例如L718Q、L747S、D761Y、T790M、C797S、T854A))。在一些實施例中，一或多個EGFR抑制劑抗性突變發生於編碼突變型EGFR蛋白質(例如，具有 表 2a及 表 2b中所描述之突變中之任一者的突變型EGFR蛋白質)之核酸序列中，產生展現EGFR抑制劑抗性之突變型EGFR蛋白質。
表皮生長因子受體(EGFR)屬於受體酪胺酸激酶(RTK)之ErbB家族且提供上皮細胞生理學中之重要功能(Schlessinger J (2014) Cold Spring Harb Perspect Biol6, a008912)。其在不同類型之人類癌症中頻繁突變及/或過度表現且為當前在臨床實踐中採用之多種癌症療法之標靶(Yarden Y及Pines G (2012) Nat Rev Cancer12, 553-563)。
相應地，本文提供治療經診斷患有(或經鑑別患有)癌症之個體的方法，其包括向該個體投與治療有效量之式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽。
本文亦提供用於治療經鑑別或經診斷患有EGFR相關癌症之個體的方法，其包括向該個體投與治療有效量之式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽，或其醫藥組合物。在一些實施例中，已經由使用管制機構批准(例如FDA批准)之用於鑑別個體中或來自個體之活檢樣品中之 EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調的測試或分析或藉由執行本文所描述之任一個非限制性分析實例鑑別或診斷出個體患有EGFR相關癌症。在一些實施例中，測試或分析法係以套組形式提供。在一些實施例中，癌症為EGFR相關癌症。例如，EGFR相關癌症可為包括一或多個EGFR抑制劑抗性突變之癌症。
術語「管理機構」係指國家批准藥劑之醫療用途的國家機構。例如，管制機構之非限制性實例為美國食品及藥物管理局(FDA)。
亦提供用於治療有需要個體之癌症的方法，該方法包含：(a)偵測個體之EGFR相關癌症；及(b)向該個體投與治療有效量之式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽，或其醫藥組合物。此等方法之一些實施例進一步包括向該個體投與另一種抗癌劑(例如第二EGFR抑制劑、第二式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽，或免疫療法)。在一些實施例中，個體先前用第一EGFR抑制劑治療或先前用另一種抗癌治療(例如至少部分切除腫瘤或輻射療法)來治療。在一些實施例中，已經由使用管制機構批准(例如FDA批准)之用於鑑別個體中或來自個體之活檢樣品中之EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調的測試或分析或藉由執行本文所描述之任一個非限制性分析實例來確定個體患有EGFR相關癌症。在一些實施例中，測試或分析法係以套組形式提供。在一些實施例中，癌症為EGFR相關癌症。例如，EGFR相關癌症可為包括一或多個EGFR抑制劑抗性突變之癌症。
亦提供治療個體之方法，其包括對獲自個體之樣品執行分析以確定該個體是否具有 EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調，及向確定具有 EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調的該個體投與(例如特定地或選擇性地投與)治療有效量之式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽，或其醫藥組合物。此等方法之一些實施例進一步包括向個體投與另一種抗癌劑(例如第二EGFR抑制劑、第二式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽，或免疫療法)。在此等方法之一些實施例中，個體先前用第一EGFR抑制劑治療或先前用另一種抗癌治療(例如至少部分切除腫瘤或輻射療法)來治療。在一些實施例中，個體為懷疑患有EGFR相關癌症之個體、呈現EGFR相關癌症之一或多種症狀的個體，或出現EGFR相關癌症之風險升高的個體。在一些實施例中，分析法使用次世代定序、焦磷酸定序、免疫組織化學或分離FISH分析。在一些實施例中，分析法為管理機構批准之分析法，例如FDA批准之套組。在一些實施例中，分析法為液體活檢。本文中所描述之此等方法中可使用其他非限制性分析法。此項技術中亦已知其他分析法。在一些實施例中， EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調包括一或多個EGFR抑制劑抗性突變。
亦提供式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽或其藥物組合物，其係用於治療經鑑別或診斷患有EGFR相關癌症之個體的EGFR相關癌症，此鑑別或診斷係經由對獲自個體之樣品執行分析(例如活體外分析)以確定該個體是否具有 EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調的步驟，其中 EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調的存在可鑑別該個體患有EGFR相關癌症。亦提供式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其係用於製造治療經鑑別或診斷患有EGFR相關癌症之個體的EGFR相關癌症的藥劑，此鑑別或診斷係經由對獲自個體之樣品執行分析以確定該個體是否具有 EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調的步驟，其中 EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調的存在可鑑別該個體患有EGFR相關癌症。本文所描述之方法或用途中之任一者的一些實施例進一步包括在個體之臨床記錄(例如計算機可讀媒質)中記錄該個體經由執行分析確定具有 EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調，應投與式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽，或其醫藥組合物。在一些實施例中，分析法使用次世代定序、焦磷酸定序、免疫組織化學或分離FISH分析。在一些實施例中，分析法為管理機構批准之分析法，例如FDA批准之套組。在一些實施例中，分析法為液體活檢。在一些實施例中， EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調包括一或多個EGFR抑制劑抗性突變。
亦提供式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其用於治療有需要之個體之癌症或治療經鑑別或診斷患有EGFR相關癌症之個體。亦提供式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其用於製造用於治療經鑑別或診斷患有EGFR相關癌症之個體中之癌症的藥劑。在一些實施例中，癌症為EGFR相關癌症，例如具有一或多個EGFR抑制劑抗性突變的EGFR相關癌症。在一些實施例中，經由使用管制機構批准(例如FDA批准)之用於鑑別個體中或來自個體之活檢樣品中之 EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調的套組，鑑別或診個體者患有EGFR相關癌症。如本文所提供，EGFR相關癌症包括本文所描述且此項技術中已知的彼等癌症。
在本文中所描述之方法或用途中之任一者之一些實施例中，個體已經鑑別或診斷為患有具有 EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調的癌症。在本文中所描述之方法或用途中之任一者之一些實施例中，個體患有對 EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調呈陽性的腫瘤。在本文中所描述之方法或用途中之任一者之一些實施例中，個體可為患有對 EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調呈陽性的腫瘤的個體。在本文中所描述之方法或用途中之任一者之一些實施例中，個體可為其腫瘤具有 EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調的個體。在本文中所描述之方法或用途中之任一者之一些實施例中，個體疑似患有EGFR相關癌症(例如具有一或多個EGFR抑制劑抗性突變之癌症)。在一些實施例中，本文提供治療需要此類治療之個體之EGFR相關癌症的方法，該方法包含a)偵測來自該個體之樣品中EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調；及b)投與治療有效量之式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中， EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調包括一或多個EGFR激酶蛋白質點突變/插入/缺失。EGFR激酶蛋白質點突變/插入/缺失之非限制性實例描述於 表 1a及 表 1b中。在一些實施例中，EGFR激酶蛋白質點突變/插入/缺失係選自由以下組成之群：G719S、G719C、G719A、L747S、D761Y、T790M、T854A、L858R、L861Q、外顯子19缺失(例如L747_A750del)及外顯子20中之插入。在一些實施例中，EGFR激酶蛋白質點突變/插入/缺失係選自由以下組成之群：L858R、外顯子19中之缺失(例如L747_A750del)、L747S、D761Y、T790M及T854A。在一些實施例中， EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調包括一或多個EGFR抑制劑抗性突變。EGFR抑制劑抗性突變之非限制性實例描述於 表 2a及 表 2b中。在一些實施例中，EGFR抑制劑抗性突變為在胺基酸位置718、747、761、790、797或854處之取代(例如L718Q、L747S、D761Y、T790M、C797S、T854A)。在一些實施例中， EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調包括外顯子20中之一或多個點突變/插入/缺失。EGFR外顯子20突變之非限制性實例描述於 表 1a 、 1b 、 2a及 2b中。在一些實施例中，EGFR外顯子20突變為外顯子20插入，諸如V769_D770insX、D770_N771insX、N771_P772insX、P772_H773insX及H773_V774insX。例如，EGFR激酶蛋白質插入為選自由以下組成之群的外顯子20插入：A767_V769dupASV、V769_D770insASV、D770_N771insNPG、D770_N771insNPY、D770_N771insSVD、D770_N771insGL、N771_H773dupNPH、N771_P772insN、N771_P772insH、N771_P772insV、P772_H773insDNP、P772_H773insPNP、H773_V774insNPH、H773_V774insH、H773_V774insPH、H773_V774insAH及P772_H773insPNP。在一些實施例中，使用管制機構批准(例如FDA批准)之分析或套組確定具有 EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調的癌症。在一些實施例中，對 EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調呈陽性的腫瘤為對一或多個EGFR抑制劑抗性突變呈陽性的腫瘤。在一些實施例中，使用管制機構批准(例如FDA批准)之分析或套組確定具有 EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調的腫瘤。
在本文中所描述之方法或用途中之任一者之一些實施例中，個體之臨床記錄表明該個體患有具有 EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調的腫瘤(例如具有一或多個EGFR抑制劑抗性突變的腫瘤)。亦提供治療個體之方法，其包括向具有臨床記錄之個體投與治療有效量之式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽，該記錄指示該個體具有 EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調。
在一些實施例中，本文所提供之方法包括對自個體獲得之樣品進行分析法以確定個體是否患有 EGFR基因、EGFR蛋白質或其中任一者之表現或含量之失調。在一些此類實施例中，該方法亦包括向經確定具有 EGFR基因、EGFR蛋白質或其中任一者之表現或活性或含量之失調的個體投與治療有效量之式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中，該方法包括經由對自個體獲得之樣品進行分析來確定該個體患有 EGFR基因、EGFR蛋白質或其中任一者之表現或含量之失調。在此類實施例中，該方法亦包括向個體投與治療有效量之式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中， EGFR基因、EGFR激酶蛋白質或其中任一者之表現或活性或含量之失調為 EGFR基因中之一或多個點突變(例如本文中所描述之一或多個EGFR點突變中之任一者)。 EGFR基因中之一或多個點突變可引起例如具有以下胺基酸取代、缺失及插入中之一或多者的EGFR蛋白質之轉譯：G719S、G719C、G719A、L747S、D761Y、T790M、T854A、L858R、L861Q、外顯子19中之缺失(例如L747_A750del)及外顯子20中之插入(例如V769_D770insX、D770_N771insX、N771_P772insX、P772_H773insX及H773_V774insX)。EGFR基因中之一或多個點突變可引起例如具有以下胺基酸取代或缺失中之一或多者的EGFR蛋白質之轉譯：L858R、外顯子19中之缺失(例如L747_A750del)、L747S、D761Y、T790M及T854A。在一些實施例中， EGFR基因、EGFR激酶蛋白質或其中任一者之表現或活性或含量之失調為一或多個EGFR抑制劑抗性突變(例如本文中所描述之一或多個EGFR抑制劑抗性突變之任何組合)。在一些實施例中， EGFR基因、EGFR激酶蛋白質或其中任一者之表現或活性或含量之失調為一或多個EGFR外顯子20插入(例如本文所描述之外顯子20插入中之任一者)。在一些實施例中，EGFR激酶蛋白質插入為選自由以下組成之群的外顯子20插入：V769_D770insX、D770_N771insX、N771_P772insX、P772_H773insX及H773_V774insX。在一些實施例中，EGFR激酶蛋白質插入為選自由以下組成之群的外顯子20插入：V769_D770insX、D770_N771insX、N771_P772insX、P772_H773insX及H773_V774insX。在一些實施例中，EGFR激酶蛋白質插入為選自由以下組成之群的外顯子20插入：A767_V769dupASV、V769_D770insASV、D770_N771insNPG、D770_N771insNPY、D770_N771insSVD、D770_N771insGL、N771_H773dupNPH、N771_P772insN、N771_P772insH、N771_P772insV、P772_H773insDNP、P772_H773insPNP、H773_V774insNPH、H773_V774insH、H773_V774insPH、H773_V774insAH及P772_H773insPNP。此等方法之一些實施例進一步包括向個體投與另一種抗癌劑(例如第二EGFR抑制劑、第二式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽，或免疫療法)。
在本文中所描述之方法或用途中之任一者之一些實施例中，使用來自患者之樣品確定患者是否具有 EGFR基因或EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調所用的分析可包括例如次世代定序、免疫組織化學、螢光顯微術、分離FISH分析、南方墨點法、西方墨點法、FACS分析、北方墨點法，及基於PCR之擴增(例如RT-PCR及定量即時RT-PCR)。如此項技術中所熟知，分析典型地使用例如至少一種經標記之核酸探針或至少一種經標記之抗體或其抗原結合片段進行。分析法可使用此項技術中已知之其他偵測方法以偵測 EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調(參見例如本文中所引用之參考文獻)。在一些實施例中， EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調包括一或多個EGFR抑制劑抗性突變。在一些實施例中，樣品為來自個體之生物樣品或活檢樣品(例如石蠟包埋之活檢樣品)。在一些實施例中，個體為懷疑患有EGFR相關癌症之個體、具有EGFR相關癌症之一或多種症狀的個體及/或出現EGFR相關癌症之風險增加的個體。
在一些實施例中， EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調可使用液體活檢(凡此種種稱為流體活檢或流體相活檢)鑑別。參見例如Karachialiou等人, 「Real-time liquid biopsies become a reality in cancer treatment」, Ann. Transl. Med., 3(3):36, 2016。液體活檢方法可用於偵測總腫瘤負荷及/或 EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調。液體活檢可對相對更易於自個體獲得(例如經由簡單的抽血)之生物樣品進行，且與用於偵測腫瘤負荷及/或 EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調的傳統方法相比通常侵襲性更低。在一些實施例中，液體活檢可用於在比傳統方法更早的階段偵測 EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調的存在。在一些實施例中，用於液體活檢之生物樣品可包括血液、血漿、尿液、腦脊髓液、唾液、痰液、支氣管肺泡灌洗物、膽汁、淋巴液、囊內液、糞便、腹水及其組合。在一些實施例中，液體活檢可用於偵測循環腫瘤細胞(CTC)。在一些實施例中，液體活檢可用於偵測無細胞DNA。在一些實施例中，使用液體活檢偵測之無細胞DNA為來源於腫瘤細胞之循環腫瘤DNA (ctDNA)。ctDNA之分析(例如使用敏感性偵測技術，諸如(但不限於)次世代定序(NGS)、傳統PCR、數位PCR或微陣列分析)可用於鑑別 EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調。
如本文所用，術語「HER2相關疾病或病症」係指與 HER2基因、HER2激酶或其中任一者(例如一或多者)之表現或活性或含量之失調(例如本文所描述之 HER2基因、HER2激酶、HER2激酶域或其中任一者之表現或活性或含量的任何類型之失調)相關或具有該失調的疾病或病症。HER2相關疾病或病症之非限制性實例包括例如癌症。
如本文所用，術語「HER2相關癌症」係指與 HER2基因、HER2激酶(本文亦稱為HER2蛋白質)或其任一者之表現或活性或含量之失調相關或具有該失調的癌症。HER2相關癌症之非限制性實例係描述於本文中。
在一些實施例中，EGFR相關癌症亦為HER2相關癌症。例如，EGFR相關癌症亦可具有 HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調。
片語「 HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調」係指基因突變(例如引起相較於野生型HER2蛋白質包括至少一個胺基酸缺失之HER2蛋白質表現的 HER2基因突變；引起相較於野生型HER2蛋白質具有一或多個點突變之HER2蛋白質表現的 HER2基因突變；引起相較於野生型HER2蛋白質具有至少一個插入胺基酸之HER2蛋白質表現的 HER2基因突變；引起細胞中之HER2蛋白質含量增加的基因複製；或引起細胞中之HER2蛋白質含量增加的調控序列(例如啟動子及/或增強子)突變；HER2 mRNA之替代剪接形式，相較於野生型HER2蛋白質，引起在HER2蛋白質中具有至少一個胺基酸缺失的HER2蛋白質)；或哺乳動物細胞中之野生型HER2激酶表現增加(例如含量增加)，其歸因於異常的細胞信號傳導及/或自分泌/旁分泌信號傳導的失調(例如相較於對照非癌細胞)。作為另一實例， HER2基因、HER2蛋白質或其中任一者之表現或活性或含量之失調可為 HER2基因中之突變，該 HER2基因編碼具有組成型活性或相較於由不包括該突變之 HER2基因編碼之蛋白質具有增加之活性之HER2蛋白質。HER2激酶蛋白質融合及點突變/插入/缺失之非限制性實例描述於 表 3 - 5中。此類突變及過度表現與多種癌症之進展相關(Moasser. Oncogene. 2007 Oct 4; 26(45): 6469-6487)。
式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽或溶劑合物適用於治療諸如HER2相關疾病及病症，例如增殖性病症諸如癌症(包括血液癌)及實體腫瘤(例如晚期實體腫瘤)。
在一些實施例中， HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調可由 HER2基因中之活化突變引起。 表 3 - 5中所示之例示性HER2激酶融合或點突變、插入及缺失可由活化突變引起。
關於HER2之術語「活化突變」描述 HER2基因中之突變，該突變引起具有增加之激酶活性的HER2激酶表現，例如相較於野生型HER2激酶，例如在相同條件下分析時。例如，活化突變可為 HER2基因之突變，該突變引起具有一或多個(例如兩個、三個、四個、五個、六個、七個、八個、九個或十個)胺基酸取代之HER2激酶表現(例如本文所描述之任何胺基酸取代之任何組合)，該HER2激酶相較於例如野生型HER2激酶具有增加之激酶活性，例如在相同條件下分析時。在另一實例中，活化突變可為 HER2基因之突變，該突變引起具有一或多個(例如兩個、三個、四個、五個、六個、七個、八個、九個或十個)胺基酸缺失的HER2激酶表現，例如相較於野生型HER2激酶，例如在相同條件下分析時。在另一實例中，活化突變可為 HER2基因之突變，該突變引起相較於例如野生型HER2激酶(例如本文所描述之例示性野生型HER2激酶)具有至少一個(例如至少2個、至少3個、至少4個、至少5個、至少6個、至少7個、至少8個、至少9個、至少10個、至少12個、至少14個、至少16個、至少18個或至少20個)胺基酸插入的HER2激酶表現，例如在相同條件下分析時。活化突變之其他實例為此項技術中已知的。
術語「野生型(wild type) HER2」或「野生型(wild-type) HER2激酶」描述一種HER2核酸(例如 HER2基因或HER2 mRNA)或蛋白質(例如HER2蛋白質)，其發現在不患有HER2相關疾病(例如HER2相關癌症)(且視情況亦無出現HER2相關疾病之增強風險及/或未懷疑患有HER2相關疾病)的個體中，或發現在來自不患有HER2相關疾病(例如HER2相關癌症)(且視情況亦無出現HER2相關疾病之增強風險及/或未懷疑患有HER2相關疾病)之個體的細胞或組織中。
本文提供一種治療需要此類治療之個體之HER2相關癌症的方法，該方法包含向該個體投與治療有效量之式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽或其醫藥組合物。例如，本文提供一種用於治療需要此類治療之個體之HER2相關癌症的方法，該方法包含a)偵測來自該個體之樣品中 HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調；及b)投與治療有效量之式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中， HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調包括一或多個HER2激酶蛋白質點突變/插入。HER2激酶蛋白質融合及點突變/插入/缺失之非限制性實例描述於 表 3 - 5中。在一些實施例中，HER2激酶蛋白質點突變/插入/缺失係選自由以下組成之群：S310F、S310Y、R678Q、R678W、R678P、I767M、V773M、V777L、V842I、Y772_A775dup、A775_G776insYVMA、G776delinsVC、G776delinsVV、V777_G778insGSP及P780_Y781insGSP。在一些實施例中，HER2激酶蛋白質點突變/插入/缺失係選自由以下組成之群的外顯子20點突變/插入/缺失：V773M、G776C、G776V、G776S、V777L、V777M、S779T、P780L、S783P、M774AYVM、M774delinsWLV、A775_G776insYVMA、A775_G776insAVMA、A775_G776insSVMA、A775_G776insVAG、A775insV、G776C、A775_G776insI、G776delinsVC2、G776delinsVV、G776delinsLC、G776C、V777insC、G776C、V777insV、V777_G778insCG、G778_S779insCPG及P780_Y781insGSP。在一些實施例中，HER2激酶蛋白質點突變/插入/缺失係選自由以下組成之群的外顯子20點突變/插入/缺失：Y772_A775dup、A775_G776insYVMA、G776delinsVC、G776delinsVV、V777_G778insGSP及P780_Y781insGSP。
在本文所描述之方法或用途中之任一者之一些實施例中，癌症(例如HER2相關癌症)選自血液癌(例如急性淋巴球性癌、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤及白血病，諸如急性骨髓性白血病(AML)、慢性骨髓性白血病(CML)、急性前髓細胞性白血病及急性淋巴球性白血病(ALL))、中樞或周邊神經系統組織癌、內分泌或神經內分泌癌(包括多種神經內分泌I型及II型腫瘤)、李-佛美尼腫瘤、肺泡橫紋肌肉瘤、骨癌、腦癌、乳癌、肛門癌、肛管癌或肛腸癌、眼癌、肝內膽管癌、關節癌、頸癌、膽囊癌或胸膜癌、鼻癌、鼻腔癌或中耳癌、口腔癌、口咽癌、鼻咽癌、呼吸道癌、泌尿生殖癌、外陰癌、大腸癌、食道癌、氣管癌、子宮頸癌、胃腸道類癌、下咽癌、腎癌、喉癌、肝癌、肺癌、惡性間皮瘤、黑色素瘤、多發性骨髓瘤、鼻咽癌、卵巢癌、胰臟癌包括胰島細胞癌、腹膜、腸網膜及腸系膜癌、咽癌、前列腺癌、直腸癌、腎癌(例如腎細胞癌(RCC))、小腸癌、軟組織癌、胃癌、睾丸癌、甲狀腺癌、副甲狀腺癌、垂體瘤、腎上腺瘤、尿管癌、膽癌及膀胱癌。在一些實施例中，癌症選自由以下組成之群：頭頸癌、卵巢癌、子宮頸癌、膀胱癌及食道癌、胰臟癌、胃腸癌、胃癌、乳癌、子宮內膜癌及大腸直腸癌、肝細胞癌、神經膠母細胞瘤、膀胱癌、肺癌，例如非小細胞肺癌(NSCLC)、細支氣管肺泡癌。在一些實施例中，癌症為胰臟癌、頭頸癌、黑色素瘤、大腸癌、腎癌、白血病、肺癌或乳癌。在一些情況下，癌症為黑色素瘤、大腸癌、腎癌、白血病或乳癌。
在一些此類實施例中，本文所提供之化合物適用於治療原發性腦腫瘤或轉移性腦腫瘤。例如，化合物可用於治療以下中之一或多者：神經膠質瘤，諸如神經膠母細胞瘤(亦稱為多形性膠質母細胞瘤)、星形細胞瘤、寡樹突神經膠質瘤、室管膜瘤及混合性神經膠質瘤、脊膜瘤、髓母細胞瘤、神經節膠質瘤、施萬細胞瘤(schwannomas)(神經鞘瘤)及顱咽管瘤(參見例如Liu等人, J Exp Clin Cancer Res. 2019 May 23;38(1):219)；及Ding等人, Cancer Res. 2003 Mar 1;63(5):1106-13)。在一些實施例中，腦腫瘤為原發性腦腫瘤。在一些實施例中，腦腫瘤為轉移性腦腫瘤，例如來自肺癌、黑色素瘤、乳癌、卵巢癌、大腸直腸癌、腎癌、膀胱癌或未分化性瘤之轉移性腦腫瘤。在一些實施例中，腦腫瘤為來自肺癌(例如非小細胞肺癌)之轉移性腦腫瘤。在一些實施例中，本文所提供之化合物展現腦部及/或中樞神經系統(CNS)通透性。在一些實施例中，患者先前已用另一種抗癌劑治療，例如另一種EGFR及/或HER2抑制劑(例如不為式I化合物之化合物)或多激酶抑制劑。
在一些實施例中，癌症為B細胞來源之癌症。在一些實施例中，癌症為譜系依賴性癌症。在一些實施例中，癌症為譜系依賴性癌症，其中HER2或 HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調在癌症之起始及/或進展中起作用。
本文亦提供一種用於治療診斷患有或鑑別患有HER2相關癌症，例如本文所揭示之例示性HER2相關癌症中之任一者的個體的方法，其包含向該個體投與治療有效量之式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽或其醫藥組合物，如本文所定義。
在一些實施例中， HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調包括HER2激酶中之一或多個缺失(例如位置12處之胺基酸缺失)、插入或點突變。在一些實施例中， HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調包括來自HER2激酶之一或多個殘基的缺失，從而引起HER2之信號傳導活性增加。
在一些實施例中， HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調包括 HER2基因中之至少一個點突變，其引起產生相較於野生型HER2激酶具有一或多個胺基酸取代、插入或缺失的HER2激酶(參見例如 表 3中之點突變)。在一些實施例中， HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調包括 HER2基因中之至少一個點突變，其引起產生具有 表 3中之一或多個胺基酸取代、插入或缺失的HER2激酶。
在一些實施例中， HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調包括 HER2基因之外顯子20中一或多個殘基插入(例如 表 1a及 表 1b中所描述之外顯子20插入中之任一者)。HER2之外顯子20具有兩個主要區域：c-螺旋(殘基770-774)及在c-螺旋之後的環(殘基775-783)。在一些實施例中， HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調包括外顯子20中之一或多個殘基之插入，該插入選自由以下組成之群：Y772_A775dup、A775_G776insYVMA、G776delinsVC、G776delinsVV、V777_G778insGSP及P780_Y781insGSP。
表 3 .HER2蛋白質胺基酸取代/插入/缺失 A
胺基酸位置 非限制性例示性突變 非限制性例示性HER2 相關癌症
122 P122L 11 轉移性大腸直腸癌
263 I263T 7 大腸直腸癌 7
265 E265K 11 轉移性大腸直腸癌
270 A270S 6 乳癌
292 G292R 11 轉移性大腸直腸癌
309 G309A 3、G309E 15 乳癌
310 S310F 7、S310Y 8 大腸直腸癌 7
311 C311R 8   
313 L313V 11 轉移性大腸直腸癌
429 S429R 15、S429H 15   
466 A466T 7 大腸直腸癌 7
648 A648V 10 泌尿癌
650 P650L 10、P650S 10 黑色素瘤、子宮癌
651 L651V 10 乳癌、子宮頸癌
652 T652M 10、T652R 10 肺癌、大腸直腸癌、肝癌、頭頸癌、子宮內膜癌、卵巢癌
653 S653C 10、S653P 10 乳癌 10、泌尿癌、乳癌、大腸直腸癌、肝癌、轉移性大腸直腸癌 11
654 I654T 10、I654M 10、I654L 10 下部胃腸癌、神經內分泌癌、乳癌、食道癌、軟組織癌
655 I655M 10、I655V 14 肺癌、大腸直腸癌、卵巢癌、泌尿癌
656 S656C 10 食道癌
657 A657V 10 前列腺癌、大腸直腸癌
659 V659E 10、V659D 10、V659L 10、V659F 10, 肺癌 10、膽癌、大腸直腸癌、乳癌、轉移性大腸直腸癌 11
659-661 V659_I661＞VVEGI 10 肺癌
659-660 V659_G660＞ER 10 肺癌
660 G660D 10 膽癌 10、肺癌、泌尿癌、大腸直腸癌、神經膠質瘤、下部胃腸癌、胃癌、肝癌、轉移性大腸直腸癌 11
661 I661V 10 大腸直腸癌
662 L662V 10 子宮頸癌、肺癌、乳癌
663 L663P 10 軟組織癌
664 V664F 10、V664I 10 肺癌、乳癌、胃癌
665 V665M 10 前列腺癌、大腸直腸癌
665-666 V665_V666del 10 乳癌
666 V666I 10 大腸直腸癌
667 L667* 10、L667S 10 乳癌、軟組織癌
668 G668E 10、G668R 10 神經膠質瘤、肺癌
669 V669A 10、V669L 10 膽癌、乳癌、神經膠質瘤
672 G672R 10 SSC其他、肺癌
673 I673F 10、I673M 10、I673V 10 大腸直腸癌、肺癌
674 L674V 10、L674I 10 大腸直腸癌、肺癌
675 I675M 10、I675T 10、I675L 10 肺癌、泌尿癌、甲狀腺癌,
676 K676M 10 肺癌
677 R677* 10、R677L 10、R677Q 10 肺癌、子宮內膜癌、胰臟癌、神經內分泌癌、大腸直腸癌、神經膠質瘤、骨髓瘤
678 R678Q 7、R678W 10、R678P 10 大腸直腸癌 7、胃癌 10、膽癌 10、泌尿癌 10、卵巢癌 10、子宮內膜癌 10、原發灶不明癌 10、肺癌 10、闌尾癌 10、胰臟癌 10、乳癌 10、神經內分泌癌 10、子宮頸癌 10、下部胃腸癌 10、前列腺癌 10、肝癌 10、中樞神經系統癌症(非神經膠質瘤) 10、黑色素瘤 10、唾液腺癌 10、轉移性大腸直腸癌 11
679 Q679E 10、Q679H 10 胰臟癌、大腸直腸癌
680 Q680del 10 子宮頸癌
681 K681N 10 肺癌
682 I682T 10、I682M 10 子宮內膜癌、大腸直腸癌
683 R683W 10、R683Q 10 乳癌、胰臟癌、子宮內膜癌、骨癌、大腸直腸癌,
684 K684N 10 大腸直腸癌
685 Y685H 10 大腸直腸癌、原發灶不明癌
686 T686M 10、T686A 10、T686R 10 大腸直腸癌、泌尿癌、卵巢癌、子宮內膜癌
688 R688L 10、R688W 10、R688Q 10 皮膚癌、大腸直腸癌、黑色素瘤
689 R689K 10、R689I 10 肺癌、子宮內膜癌
691 L691R 10 子宮內膜癌
693 E693K 10、E693G 10 卵巢癌、黑色素瘤、大腸直腸癌、乳癌、原發灶不明癌
694 T694M 10、T694S 10 原發灶不明癌、大腸直腸癌、胰臟癌
695 E695K 10 黑色素瘤、泌尿癌
697 V697L 10、V697M 10、V697del 10 乳癌、肺癌、卵巢癌、下部胃腸癌、大腸直腸癌、皮膚癌、胰臟癌、唾液腺癌、原發灶不明癌、子宮頸癌、子宮內膜癌、胃癌,
699 P699del 10、P699S 子宮內膜癌
701 T701I 10 卵巢癌
702 P702S 10、P702L 10 胃癌、下部胃腸癌、原發灶不明癌、子宮內膜癌、乳癌、卵巢癌、肝癌
704 G704E 10、G704R 10 神經膠質瘤、大腸直腸癌
705 A705V 10 大腸直腸癌、軟組織癌
706 M706V 10 乳癌
707 P707L 10 軟組織癌
709 Q709L 10、Q709K 10 神經膠質瘤、肺癌、下部胃腸癌
710 A710V 10 肺癌
711 Q711H 10 乳癌、肺癌
712 M712L 10 神經內分泌癌、食道癌
713 R713Q 10、R713W 10、R713L 10 前列腺癌、肺癌、子宮內膜癌
726 L726I 15、L726F 15   
733 733I 11 轉移性大腸直腸癌 11
755 L755S 2,7、L755W 3、L755P 8、L755F 14 肺腺癌 2、乳癌 3、來自乳癌之骨癌轉移 5、大腸直腸癌 7、轉移性大腸直腸癌 11
755-759 del. 755-759 3 乳癌 3
760 S760A 15   
767 I767M 11 轉移性大腸直腸癌 11
769 D769H 2、D769Y 3、D769N 11 肺腺癌 2、乳癌 3、轉移性大腸直腸癌 11
773 V773M 11 轉移性大腸直腸癌 11
776 G776C 2、G776V 8、G776S 11 肺腺癌、轉移性大腸直腸癌 11
777 V777L 2,7、V777M 2 肺腺癌 2、乳癌 3、來自乳癌之骨癌轉移 5、大腸直腸癌 7、轉移性大腸直腸癌 11
779 S779T 8 乳癌
780 P780ins 3、P780L 15 乳癌 3
783 S783P2 乳癌
784 R784G 12 轉移性大腸直腸癌 12
785 L785F 15 乳癌
798 T798I 4、T798M 15 乳癌
835 Y835F 15   
838 R838Q 15   
842 V842I 3,7 乳癌 3、大腸直腸癌 7、轉移性大腸直腸癌 11
862 T862A 11 轉移性大腸直腸癌 11
866 866M 7 大腸直腸癌 7
868 R868W 7 大腸直腸癌 7
869 L869R 4 乳癌
869 + 798 L869R + T798I 4 乳癌
878 H878Y 11 轉移性大腸直腸癌 11
887 M887I 15   
896 R896C 3、R896H 11 乳癌 3、轉移性大腸直腸癌 11
896 + 755 R896C + L755W 3 乳癌 3
1136 Q1136fs*5 11 轉移性大腸直腸癌 11
1170 P1170fs*88+ 11 轉移性大腸直腸癌 11
1189 G1189fs*9 11 轉移性大腸直腸癌 11
1201 G1201V 15   
1219 N1219S 7 大腸直腸癌 7
1232 A1232fs*25+ 11 轉移性大腸直腸癌 11
外顯子16 缺失 11 轉移性大腸直腸癌 11
外顯子 20 缺失及插入
   M774AYVM 13 非小細胞肺癌 13
   M774delinsWLV 9 非小細胞肺癌 9
   A775_G776insYVMA (c. 2324_2325ins12) 1 肺腺癌
   A775_G776insAVMA (c. 2324_2325ins12) 14 肺腺癌
   A775_G776insSVMA 9 非小細胞肺癌 9
   A775_G776insVAG 14 肺腺癌
   A775insV G776C 8   
   A775_G776insI 9 非小細胞肺癌 9
   G776delinsVC 2,8；G776del insVV 8；G776delinsLC 9 肺腺癌
   G776C V777insC 8；G776C V777insV 8   
   V777_G778insCG 2、V777_G778insGSP 16 肺腺癌 2、非小細胞肺癌 16
   G778_S779insCPG 9 非小細胞肺癌 9
   P780_Y781insGSP 2,8 肺腺癌
A所示HER2突變可為活化突變及/或向HER2賦予增加之針對HER2抑制劑及/或多激酶抑制劑(MKI)的抗性，例如相較於野生型HER2。 1Li等人, J Thorac Oncol. 2016 Mar;11(3):414-9. 2Arcila等人, Clin Cancer Res. 2012 Sep 15; 18(18): 10.1158/1078-0432.CCR-12-0912. 3Bose等人, Cancer Discov. 2013 Feb;3(2):224-37. 4Hanker等人, Cancer Discov. 2017 Jun;7(6):575-585. 5Christgen等人, Virchows Arch. 2018 Nov;473(5):577-582. 6Si等人, Cancer Biomark. 2018;23(2):165-171. 7Kavuri等人, Cancer Discov. 2015 Aug; 5(8): 832-841. 8Robichaux等人, Nat Med. 2018 May; 24(5): 638-646. 9Kosaka等人, Cancer Res. 2017 May 15; 77(10): 2712-2721. 10Pahuja等人, Cancer Cell. 2018 Nov 12; 34(5): 792-806.e5. 11Ross等人, Cancer. 2018 Apr 1;124(7):1358-1373. 12Gharib等人, J Cell Physiol. 2019 Aug;234(8):13137-13144. 13Krawczyk等人, Oncol Lett. 2013 Oct; 6(4): 1063-1067. 14Lai等人,  Eur J Cancer. 2019 Mar; 109: 28-35. 15Sun等人, J Cell Mol Med. 2015 Dec; 19(12): 2691-2701. 16Xu等人, Thorac Cancer. 2020 Mar;11(3):679-685.
在一些實施例中， HER2基因、HER2激酶或其任一者之表現或活性或含量之失調包括HER2 mRNA中之剪接變異，該剪接變異引起具有至少一個殘基缺失(相較於野生型HER2激酶)之HER2之替代剪接變異體的蛋白質表現，從而產生HER2激酶域之組成型活性。在一些實施例中，HER2之剪接變異體為Δ16HER -3或p95HER‐2。參見例如Sun等人, J Cell Mol Med. 2015 Dec; 19(12): 2691-2701。
在一些實施例中， HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調可由引起改變之HER2蛋白質表現的HER2 mRNA中之剪接變異引起，該蛋白質相較於例如野生型HER2激酶(例如本文所描述之HER2變異體)對HER2抑制劑、酪胺酸激酶抑制劑(TKI)及/或多激酶抑制劑(MKI)具有增加之抗性。參見例如Rexer及Arteaga. Crit Rev Oncog. 2012; 17(1): 1-16。
在一些實施例中， HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調包括一或多個分別產生 HER2基因融合之染色體易位或倒位。在一些實施例中， HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調為基因易位之結果，其中該表現蛋白質為含有來自非HER2配偶體蛋白質及HER2之殘基的融合蛋白質，且分別包括最少功能性HER2激酶域。
表 4 . 例示性 HER2 融合蛋白及癌症
非限制性例示性HER2 融合 非限制性例示性HER2 相關癌症
ZNF207_ex2/HER2_ex18 1 胃癌
MDK_ex4/HER2_ex11 1 胃癌
NOS2_ex2/HER2_ex2 1 胃癌
1Yu等人, J Transl Med. 2015; 13: 116.
在一些實施例中， HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調包括 HER2基因中之至少一個點突變，其引起產生在 HER2基因中具有一或多個胺基酸取代或插入或缺失之HER2激酶，其引起產生與野生型HER2激酶相比具有一或多個胺基酸插入或移除之HER2激酶。
在其他實施例中， HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調包括 HER2基因中之至少一個點突變，其引起產生相較於野生型HER2激酶具有一或多個胺基酸取代的HER2激酶，且相較於野生型HER2激酶或不包括相同突變之HER2激酶，該HER2激酶對式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽增加之抗性。
成熟人類HER2蛋白質之例示性序列(UniProtKB entry P04626) (SEQ ID NO: 2)
Figure 02_image987
Figure 02_image989
在一些實施例中， HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調包括 HER2基因中之至少一個HER2抑制劑抗性突變，其引起產生具有 表 5中之一或多個胺基酸取代、插入或缺失的HER2激酶。在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物及其醫藥學上可接受之鹽及溶劑合物可用於治療患有HER2抑制劑抗性突變(例如，導致對第一HER2抑制劑之抗性增加，例如在位置755或798處胺基酸取代(例如L755S、L755P、T798I及T798M)及/或 表 5中所列出之一或多個HER2抑制劑抗性突變)之癌症的個體，藉由組合給藥或作為現有藥物治療(例如，HER2之其他抑制劑；例如，第一及/或第二HER2抑制劑)的連續或額外(例如後續)療法。
表 5 .HER2蛋白質胺基酸抗性突變
胺基酸位置 非限制性例示性突變 非限制性例示性HER2 相關癌症
726 L726I, L726F 2 乳癌
755 L755S 2, L755P 2 乳癌
780 P780L 2 乳癌
783 S783P 2 乳癌
785 L785F 2 乳癌
798 T798I 1, T798M 2 乳癌
1Hanker等人, Cancer Discov. 2017 Jun;7(6):575-585. 2Sun等人, J Cell Mol Med. 2015 Dec; 19(12): 2691-2701.
如本文所用，「HER2之第一抑制劑」或「第一HER2抑制劑」係如本文所定義之HER2抑制劑，但其不包括式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物及其醫藥學上可接受之鹽，如本文所定義。如本文所用，「HER2之第二抑制劑」或「第二HER2抑制劑」係如本文所定義之HER2抑制劑，但其不包括式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物及其醫藥學上可接受之鹽，如本文所定義。當HER2之第一及第二抑制劑均存在於本文所提供之方法中時，HER2之第一及第二抑制劑不同。在一些實施例中，與式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物相比，HER2之第一及/或第二抑制劑結合在不同位置。例如，在一些實施例中，HER2之第一及/或第二抑制劑可抑制HER2之二聚化，而式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物可抑制活性位點。在一些實施例中，HER2之第一及/或第二抑制劑可為HER2之異位抑制劑，而式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物可抑制HER2活性位點。
例示性HER2之第一及第二抑制劑描述於本文中。在一些實施例中，HER2之第一或第二抑制劑可選自由以下組成之群：曲妥珠單抗(trastuzumab) (例如TRAZIMERA™、HERCEPTIN®)、帕妥珠單抗(pertuzumab) (例如PERJETA®)、曲妥珠單抗美坦新(trastuzumab emtansine) (T-DM1或曲妥珠單抗-美坦新偶聯物，例如KADCYLA®)、拉帕替尼、KU004、來那替尼(例如NERLYNX®)、達可替尼(dacomitinib) (例如VIZIMPRO®)、阿法替尼(GILOTRIF®)、圖卡替尼(tucatinib) (例如TUKYSA™)、埃羅替尼(例如TARCEVA®)、比咯替尼(pyrotinib)、波奇替尼(poziotinib)、CP-724714、CUDC-101、沙匹替尼(sapitinib) (AZD8931)、坦螺旋黴素(tanespimycin) (17-AAG)、IPI-504、PF299、培利替尼(pelitinib)、S-22261 1及AEE-788。
在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽或溶劑合物適用於治療已鑑別出具有一或多個HER2抑制劑抗性突變之癌症(導致對HER2之第一或第二抑制劑的抗性增加，例如於 表 5中所描述之取代包括在胺基酸位置755或798之取代(例如L755S、L755P、T798I及T798M))。在一些實施例中，一或多個HER2抑制劑抗性突變發生於編碼突變型HER2蛋白質(例如，具有 表 3中所描述之突變中之任一者的突變型HER2蛋白質)之核酸序列中，產生展現HER2抑制劑抗性之突變型HER2蛋白質。
如同EGFR，表皮生長因子受體2 (HER2)屬於受體酪胺酸激酶(RTK)之ErbB家族且提供上皮細胞生理學中之重要功能(Schlessinger J (2014) Cold Spring Harb Perspect Biol6, a008912；及Moasser. Oncogene. 2007 Oct 4; 26(45): 6469-6487)。其在不同類型之人類癌症中頻繁突變及/或過度表現且為當前在臨床實踐中採用之多種癌症療法之標靶(Moasser. Oncogene. 2007 Oct 4; 26(45): 6469-6487)。
相應地，本文提供治療經鑑別或經診斷患有HER2相關癌症之個體的方法，其包括向該個體投與治療有效量之式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽，或其醫藥組合物。在一些實施例中，已經由使用管制機構批准(例如FDA批准)之用於鑑別個體中或來自個體之活檢樣品中之 HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調的測試或分析或藉由執行本文所描述之任一個非限制性分析實例鑑別或診斷出個體患有HER2相關癌症。在一些實施例中，測試或分析法係以套組形式提供。在一些實施例中，癌症為HER2相關癌症。亦提供用於治療有需要個體之癌症的方法，該方法包含：(a)偵測個體之HER2相關癌症；及(b)向該個體投與治療有效量之式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽，或其醫藥組合物。此等方法之一些實施例進一步包括向該個體投與另一種抗癌劑(例如第二HER2抑制劑、第二式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽，或免疫療法)。在一些實施例中，個體先前用第一HER2抑制劑治療或先前用另一種抗癌治療(例如至少部分切除腫瘤或輻射療法)來治療。在一些實施例中，已經由使用管制機構批准(例如FDA批准)之用於鑑別個體中或來自個體之活檢樣品中之 HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調的測試或分析或藉由執行本文所描述之任一個非限制性分析實例來確定個體患有HER2相關癌症。在一些實施例中，測試或分析法係以套組形式提供。在一些實施例中，癌症為HER2相關癌症。
亦提供治療個體之方法，其包括對獲自個體之樣品執行分析以確定該個體是否具有 HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調，及向確定具有 HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調的該個體投與(例如特定地或選擇性地投與)治療有效量之式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽，或其醫藥組合物。此等方法之一些實施例進一步包括向個體投與另一種抗癌劑(例如第二HER2抑制劑、第二式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽，或免疫療法)。在此等方法之一些實施例中，個體先前用第一HER2抑制劑治療或先前用另一種抗癌治療(例如至少部分切除腫瘤或輻射療法)來治療。在一些實施例中，個體為懷疑患有HER2相關癌症之個體、呈現HER2相關癌症之一或多種症狀的個體，或出現HER2相關癌症之風險升高的個體。在一些實施例中，分析法使用次世代定序、焦磷酸定序、免疫組織化學或分離FISH分析。在一些實施例中，分析法為管理機構批准之分析法，例如FDA批准之套組。在一些實施例中，分析法為液體活檢。本文中所描述之此等方法中可使用其他非限制性分析法。此項技術中亦已知其他分析法。
如本文所用，「HER2之第一抑制劑」或「第一HER2抑制劑」係如本文所定義之HER2抑制劑，其不包括式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物及其醫藥學上可接受之鹽，如本文所定義。如本文所用，「HER2之第二抑制劑」或「第二HER2抑制劑」係如本文所定義之HER2之抑制劑，其不包括式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物及其醫藥學上可接受之鹽，如本文所定義。當第一及第二HER2抑制劑均存在於本文所提供之方法中時，第一及第二HER2抑制劑不同。
亦提供式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽或其藥物組合物，其係用於治療經鑑別或診斷患有HER2相關癌症之個體的HER2相關癌症，此鑑別或診斷係經由對獲自個體之樣品執行分析(例如活體外分析)以確定該個體是否具有 HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調的步驟，其中 HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調的存在可鑑別該個體患有HER2相關癌症。亦提供式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其係用於製造治療經鑑別或診斷患有HER2相關癌症之個體的HER2相關癌症的藥劑，此鑑別或診斷係經由對獲自個體之樣品執行分析以確定該個體是否具有 HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調的步驟，其中 HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調的存在可鑑別該個體患有HER2相關癌症。本文所描述之方法或用途中之任一者的一些實施例進一步包括在個體之臨床記錄(例如計算機可讀媒質)中記錄該個體經由執行分析確定具有 HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調，應投與式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽，或其醫藥組合物。在一些實施例中，分析法使用次世代定序、焦磷酸定序、免疫組織化學或分離FISH分析。在一些實施例中，分析法為管理機構批准之分析法，例如FDA批准之套組。在一些實施例中，分析法為液體活檢。
亦提供式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其用於治療有需要之個體之癌症或治療經鑑別或診斷患有HER2相關癌症之個體。亦提供式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其用於製造用於治療經鑑別或診斷患有HER2相關癌症之個體中之癌症的藥劑。在一些實施例中，經由使用管制機構批准(例如FDA批准)之用於鑑別個體中或來自個體之活檢樣品中之 HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調的套組，鑑別或診個體者患有HER2相關癌症。如本文所提供，HER2相關癌症包括本文所描述且此項技術中已知的彼等癌症。
在本文中所描述之方法或用途中之任一者之一些實施例中，個體已經鑑別或診斷為患有具有 HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調的癌症。在本文中所描述之方法或用途中之任一者之一些實施例中，個體患有對 HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調呈陽性的腫瘤。在本文中所描述之方法或用途中之任一者之一些實施例中，個體可為患有對 HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調呈陽性的腫瘤的個體。在本文中所描述之方法或用途中之任一者之一些實施例中，個體可為其腫瘤具有 HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調的個體。在本文中所描述之方法或用途中之任一者之一些實施例中，個體疑似患有HER2相關癌症。在一些實施例中，本文提供治療需要此類治療之個體之HER2相關癌症的方法，該方法包含a)偵測來自該個體之樣品中 HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調；及b)投與治療有效量之式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中， HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調包括一或多個HER2激酶蛋白質點突變/插入/缺失。HER2激酶蛋白質融合及點突變/插入/缺失之非限制性實例描述於 表 3 - 5中。在一些實施例中，HER2激酶蛋白質點突變/插入/缺失係選自由以下組成之群：胺基酸位置310、678、755、767、773、777或842處之點突變(例如S310F、S310Y、R678Q、R678W、R678P、I767M、V773M、V777L及V842I)及/或胺基酸位置772、775、776、777及780處之插入或缺失(例如Y772_A775dup、A775_G776insYVMA、G776delinsVC、G776delinsVV、V777_G778insGSP及P780_Y781insGSP)。在一些實施例中，HER2激酶蛋白質點突變/插入/缺失為外顯子20點突變/插入/缺失。在一些實施例中，HER2外顯子20點突變/插入/缺失為胺基酸位置773、776、777、779、780及783處之點突變(例如V773M、G776C、G776V、G776S、V777L、V777M、S779T、P780L及S783P)及/或外顯子20插入/缺失，諸如在胺基酸位置774、775、776、777、778及780處之插入/缺失。在一些實施例中，HER2激酶蛋白質插入係選自由以下組成之群的外顯子20插入：A775_G776insYVMA、A775_G776insAVMA、A775_G776insSVMA、A775_G776insVAG、A775insV G776C、A775_G776insI、G776del insVC2、G776del insVV、G776del insLC、G776C V777insC、G776C V777insV、V777_G778insCG、G778_S779insCPG及P780_Y781insGSP。在一些實施例中，HER2激酶蛋白質突變/插入/缺失為選自由以下組成之群的外顯子20插入/缺失：Y772_A775dup、A775_G776insYVMA、G776delinsVC、G776delinsVV、V777_G778insGSP或P780_Y781insGSP。在一些實施例中，使用管制機構批准(例如FDA批准)之分析或套組確定具有 HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調的癌症。在一些實施例中，對 HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調呈陽性的腫瘤為對一或多個HER2抑制劑抗性突變呈陽性的腫瘤。在一些實施例中，使用管制機構批准(例如FDA批准)之分析或套組確定具有 HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調的腫瘤。
在本文中所描述之方法或用途中之任一者之一些實施例中，個體之臨床記錄表明該個體患有具有 HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調的腫瘤。亦提供治療個體之方法，其包括向具有臨床記錄之個體投與治療有效量之式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽，該記錄指示該個體具有 HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調。
在一些實施例中，本文所提供之方法包括對自個體獲得之樣品進行分析法以確定個體是否患有 HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或含量之失調。在一些此類實施例中，該方法亦包括向經確定具有 HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調的個體投與治療有效量之式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中，該方法包括經由對自個體獲得之樣品進行分析來確定該個體患有 HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或含量之失調。在此類實施例中，該方法亦包括向個體投與治療有效量之式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中， HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調為 HER2基因中之一或多個點突變(例如本文中所描述之一或多個HER2點突變中之任一者)。 HER2基因中之一或多個點突變可引起例如具有以下胺基酸取代中之一或多者的HER2蛋白質之轉譯：S310F、S310Y、R678Q、R678W、R678P、I767M、V773M、V777L及V842I。 HER2基因中之一或多個點突變可引起例如具有以下外顯子20胺基酸取代中之一或多者的HER2蛋白質之轉譯：V773M、G776C、G776V、G776S、V777L、V777M、S779T、P780L及S783P。在一些實施例中， HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調為 HER2基因中之一或多個插入(例如本文中所描述之一或多個HER2插入中之任一者)。 HER2基因中之一或多個插入可引起例如具有以下外顯子20插入中之一或多者的HER2蛋白質之轉譯：M774AYVM、M774del insWLV、A775_G776insYVMA、A775_G776insAVMA、A775_G776insSVMA、A775_G776insVAG、A775insV G776C、A775_G776insI、G776del insVC2、G776del insVV、G776del insLC、G776C V777insC、G776C V777insV、V777_G778insCG、G778_S779insCPG及P780_Y781insGSP。在一些實施例中， HER2基因中之一或多個插入可引起例如具有以下外顯子20插入中之一或多者的HER2蛋白質之轉譯：Y772_A775dup、A775_G776insYVMA、G776delinsVC、G776delinsVV、V777_G778insGSP及P780_Y781insGSP。此等方法之一些實施例進一步包括向個體投與另一種抗癌劑(例如第二HER2抑制劑、第二式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽，或免疫療法)。
在本文中所描述之方法或用途中之任一者之一些實施例中，使用來自患者之樣品確定患者是否具有 HER2基因或HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調所用的分析可包括例如次世代定序、免疫組織化學、螢光顯微術、分離FISH分析、南方墨點法、西方墨點法、FACS分析、北方墨點法，及基於PCR之擴增(例如RT-PCR及定量即時RT-PCR)。如此項技術中所熟知，分析典型地使用例如至少一種經標記之核酸探針或至少一種經標記之抗體或其抗原結合片段進行。分析法可使用此項技術中已知之其他偵測方法以偵測 HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調(參見例如本文中所引用之參考文獻)。在一些實施例中，樣品為來自個體之生物樣品或活檢樣品(例如石蠟包埋之活檢樣品)。在一些實施例中，個體為懷疑患有HER2相關癌症之個體、具有HER2相關癌症之一或多種症狀的個體，及/或出現HER2相關癌症之風險增加的個體。
在一些實施例中， HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調可使用液體活檢(凡此種種稱為流體活檢或流體相活檢)鑑別。參見例如Karachialiou等人, 「Real-time liquid biopsies become a reality in cancer treatment」, Ann. Transl. Med., 3(3):36, 2016。液體活檢方法可用於偵測總腫瘤負荷及/或 HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調。液體活檢可對相對更易於自個體獲得(例如經由簡單的抽血)之生物樣品進行，且與用於偵測腫瘤負荷及/或 HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調的傳統方法相比通常侵襲性更低。在一些實施例中，液體活檢可用於在比傳統方法更早的階段偵測 HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調的存在。在一些實施例中，用於液體活檢之生物樣品可包括血液、血漿、尿液、腦脊髓液、唾液、痰液、支氣管肺泡灌洗物、膽汁、淋巴液、囊內液、糞便、腹水及其組合。在一些實施例中，液體活檢可用於偵測循環腫瘤細胞(CTC)。在一些實施例中，液體活檢可用於偵測無細胞DNA。在一些實施例中，使用液體活檢偵測之無細胞DNA為來源於腫瘤細胞之循環腫瘤DNA (ctDNA)。ctDNA之分析(例如使用敏感性偵測技術，諸如(但不限於)次世代定序(NGS)、傳統PCR、數位PCR或微陣列分析)可用於鑑別 HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調。
亦提供一種抑制細胞中EGFR活性之方法，其包含使該細胞與式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽接觸。亦提供一種抑制細胞中HER2活性之方法，其包含使該細胞與式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽接觸。進一步提供一種抑制細胞中EGFR及HER2活性之方法，其包含使該細胞與式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽接觸。在一些實施例中，該接觸為活體外的。在一些實施例中，該接觸為活體內的。在一些實施例中，接觸為活體內接觸，其中該方法包含向具有異常EGFR活性及/或HER2活性之細胞的個體投與有效量之式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中，細胞為癌細胞。在一些實施例中，癌細胞為如本文中所描述之任何癌症。在一些實施例中，癌細胞為EGFR相關癌細胞。在一些實施例中，癌細胞為HER2相關癌細胞。如本文所用，術語「接觸」係指將所指示之部分彙集於活體外系統或活體內系統中。例如，使EGFR激酶與本文中提供之化合物「接觸」包括將本文中提供之化合物投與具有EGFR激酶之個體(individual或subject)，諸如人類，以及例如將本文中提供之化合物引入含有細胞之樣品中或含有EGFR激酶之純化製劑中。
本文亦提供一種抑制活體外或活體內細胞增殖之方法，該方法包含使細胞與有效量之如本文所定義之式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽或其醫藥組合物接觸。
本文進一步提供一種增加活體外或活體內細胞死亡之方法，該方法包含使細胞與有效量之如本文所定義之式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽或其醫藥組合物接觸。本文亦提供一種增加個體之腫瘤細胞死亡的方法。該方法包含向個體投與有效增加腫瘤細胞死亡之量的有效式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽。
術語「治療有效量」意指當向需要此類治療之個體投與時，足以(i)治療EGFR激酶相關疾病或病症或HER2激酶相關疾病或病症，(ii)緩解、改善或消除特定疾病、病況或病症之一或多種症狀，或(iii)延遲本文所描述之特定疾病、病況或病症之一或多種症狀的發作的化合物之量。將對應於此量之式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽的量將視以下因素而變化：諸如特定化合物、疾病病況及其嚴重程度、需要治療之個體之身分標識(例如體重)，但仍然可常規地藉由熟習此項技術者來確定。
當用作藥物時，包括其醫藥學上可接受之鹽或溶劑合物的式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物可以如本文所描述之醫藥組合物的形式投與。
本文亦提供一種治療患有癌症之個體的方法，其中該方法包含： (a) 確定獲自患有癌症且先前投與一或多個劑量之第一EGFR抑制劑之個體之樣品中的癌細胞具有一或多個EGFR抑制劑抗性突變，該突變賦予癌細胞或腫瘤增加之針對先前向該個體投與之該第一EGFR抑制劑治療的抗性；及 (b) 以單一療法或以與另一種抗癌劑結合之形式向該個體投與治療有效量之式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽。
本文進一步提供一種治療患有癌症之個體的方法，其中該方法包含： (a) 確定獲自患有癌症且先前投與一或多個劑量之第一EGFR抑制劑之個體之樣品中的癌細胞不具有一或多個EGFR抑制劑抗性突變，該突變賦予癌細胞或腫瘤增加之針對先前向該個體投與之該第一EGFR抑制劑治療的抗性；及 (b) 向該個體投與額外劑量之該第一EGFR抑制劑。
組合在醫學腫瘤學領域中，常規操作為使用不同治療形式之組合來治療每一患有癌症之個體。在醫學腫瘤學中，此類聯合治療或療法中之除本文所提供組合物之外的其他組分可為例如外科手術、放射療法及化學治療劑，諸如其他激酶抑制劑、信號轉導抑制劑及/或單株抗體。例如，手術可為開放手術或最低限度侵入性手術。因此，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽或溶劑合物亦可適用作癌症治療之佐劑，亦即，其可與一或多種其他療法或治療劑組合使用，例如藉由相同或不同作用機制起作用之化學治療劑。在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽可在投與額外治療劑或額外療法之前使用。例如，可向有需要之個體投與一或多個劑量之式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽持續一段時間且接著進行至少部分腫瘤的切除。在一些實施例中，在對腫瘤進行至少部分切除術之前，用一或多個劑量之式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽治療使腫瘤尺寸(例如腫瘤負荷)減小。在一些實施例中，可向有需要之個體投與一或多個劑量之式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽持續一段時間且進行一或多輪輻射療法。在一些實施例中，在一或多輪輻射療法之前，用一或多個劑量之式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽治療使腫瘤尺寸(例如腫瘤負荷)減小。
在一些實施例中，個體患有癌症(例如局部晚期或轉移腫瘤)，該癌症對於標準療法(例如投與化學治療劑，諸如第一EGFR抑制劑、第一HER2抑制劑或多激酶抑制劑、免疫療法，或輻射(例如放射性碘))為難治性或不耐受的。在一些實施例中，個體患有癌症(例如局部晚期或轉移腫瘤)，該癌症對於先前療法(例如投與化學治療劑，諸如第一EGFR抑制劑、第一HER2抑制劑或多激酶抑制劑、免疫療法或輻射(例如放射性碘))為難治性或不耐受的。在一些實施例中，個體患有尚無標準療法之癌症(例如局部晚期或轉移性腫瘤)。在一些實施例中，個體未使用過EGFR抑制劑。例如，個體未用選擇性EGFR抑制劑進行治療。在一些實施例中，個體使用過EGFR抑制劑。在一些實施例中，個體未使用過HER2抑制劑。例如，個體未用選擇性HER2抑制劑進行治療。在一些實施例中，個體使用過HER2抑制劑。在一些實施例中，個體已經歷先前療法。例如，用多激酶抑制劑(MKI)、EGFR酪胺酸激酶抑制劑(TKI)、奧希替尼、吉非替尼、埃羅替尼、阿法替尼、拉帕替尼、來那替尼、AZD-9291、CL-387785、CO-1686或WZ4002治療。
在本文所描述之任何方法之一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物(或其醫藥學上可接受之鹽)係與治療有效量之至少一種額外治療劑組合投與，該額外治療劑選自一或多種額外療法或治療(例如化學治療)劑。
額外治療劑之非限制性實例包括：其他靶向EGFR之治療劑(亦即，第一或第二EGFR抑制劑)、其他靶向HER2之治療劑(亦即，第一或第二HER2抑制劑)、靶向RAS路徑之治療劑、PARP抑制劑、其他激酶抑制劑(例如，靶向受體酪胺酸激酶之治療劑(例如，Trk抑制劑或多激酶抑制劑)、法呢基轉移酶抑制劑、信號轉導路徑抑制劑、檢查點抑制劑、細胞凋亡路徑之調節劑(例如奧巴塔拉(obataclax))；細胞毒性化學治療劑、血管生成靶向療法、免疫靶向藥劑，包括免疫療法及放射療法。
在一些實施例中，其他靶向EGFR之治療劑為呈現EGFR抑制活性之多激酶抑制劑。在一些實施例中，其他靶向EGFR之治療抑制劑對EGFR激酶具有選擇性。
靶向EGFR之治療劑(例如，第一EGFR抑制劑或第二EGFR抑制劑)之非限制性實例包括EGFR選擇性抑制劑、泛HER抑制劑及抗EGFR抗體。在一些實施例中，EGFR抑制劑為共價抑制劑。在一些實施例中，靶向EGFR之治療劑為奧希替尼(AZD9291、默來替尼(merelectinib)、TAGRISSOTM)、埃羅替尼(TARCEVA®)、吉非替尼(IRESSA®)、西妥昔單抗(cetuximab) (ERBITUX®)、奈西妥木單抗(necitumumab) (PORTRAZZATM、IMC-11F8)、來那替尼(HKI-272、NERLYNX®)、拉帕替尼(TYKERB®)、帕尼單抗(panitumumab) (ABX-EGF、VECTIBIX®)、凡德他尼(vandetanib) (CAPRELSA®)、羅西替尼(rociletinib) (CO-1686)、奧莫替尼(olmutinib) (OLITATM、HM61713、BI-1482694)、納闊替尼(naquotinib) (ASP8273)、那紮替尼(nazartinib) (EGF816、NVS-816)、PF-06747775、埃克替尼(icotinib) (BPI-2009H)、阿法替尼(BIBW 2992、GILOTRIF®)、達可替尼(PF-00299804、PF-804、PF-299、PF-299804)、阿維替尼(avitinib) (AC0010)、AC0010MA EAI045、馬妥珠單抗(matuzumab) (EMD-7200)、尼妥珠單抗(nimotuzumab) (h-R3、BIOMAb EGFR®)、紮魯目單抗(zalutumab)、MDX447、德帕土西珠單抗(depatuxizumab) (人類化mAb 806、ABT-806)、瑪汀-迪妥昔珠單抗(depatuxizumab mafodotin) (ABT-414)、ABT-806、mAb 806、卡奈替尼(canertinib) (CI-1033)、紫草素(shikonin)、紫草素衍生物(例如去氧紫草素、異丁醯紫草素、乙醯紫草素、β,β-二甲基丙烯醯紫草素及乙醯阿卡寧(acetylalkannin))、波奇替尼(NOV120101、HM781-36B)、AV-412、依魯替尼(ibrutinib)、WZ4002、布加替尼(brigatinib) (AP26113、ALUNBRIG®)、培利替尼(EKB-569)、他索替尼(tarloxotinib) (TH-4000、PR610)、BPI-15086、Hemay022、ZN-e4、特伐替尼(tesevatinib) (KD019、XL647)、YH25448、依吡替尼(epitinib) (HMPL-813)、CK-101、MM-151、AZD3759、ZD6474、PF-06459988、伐林替尼(varlintinib) (ASLAN001、ARRY-334543)、AP32788、HLX07、D-0316、AEE788、HS-10296、阿維替尼、GW572016、比咯替尼(SHR1258)、SCT200、CPGJ602、Sym004、MAb-425、莫多妥昔單抗(Modotuximab) (TAB-H49)、弗妥昔單抗(futuximab) (992 DS)、紮魯姆單抗(zalutumumab)、KL-140、RO5083945、IMGN289、JNJ-61186372、LY3164530、Sym013、AMG 595、BDTX-189、阿瓦替尼(avatinib)、Disruptin、CL-387785、EGFRBi臂之自體T細胞及EGFR CAR-T療法。在一些實施例中，靶向EGFR之治療劑係選自奧希替尼、吉非替尼、埃羅替尼、阿法替尼、拉帕替尼、來那替尼、AZD-9291、CL-387785、CO-1686或WZ4002。
額外的靶向EGFR之治療劑(例如第一EGFR抑制劑或第二EGFR抑制劑)包括WO 2019/246541；WO 2019/165385；WO 2014/176475；及US 9,029,502中所揭示之彼等治療劑，其中之每一者以全文引用之方式併入本文中。
在一些實施例中，其他靶向HER2之治療劑為呈現HER2抑制活性之多激酶抑制劑。在一些實施例中，其他靶向HER2之治療抑制劑對HER2激酶具有選擇性。
靶向HER2之治療劑(例如，第一HER2抑制劑或第二HER2抑制劑)之非限制性實例包括HER2選擇性抑制劑、泛HER抑制劑及抗HER2抗體。例示性靶向HER2之治療劑包括曲妥珠單抗(例如TRAZIMERA™、HERCEPTIN®)、帕妥珠單抗(例如PERJETA®)、曲妥珠單抗美坦新(T-DM1或曲妥珠單抗-美坦新偶聯物，例如KADCYLA®)、拉帕替尼、KU004、來那替尼(例如NERLYNX®)、達可替尼(例如VIZIMPRO®)、阿法替尼(GILOTRIF®)、圖卡替尼(例如TUKYSA™)、埃羅替尼(例如TARCEVA®)、比咯替尼、波奇替尼、CP-724714、CUDC-101、沙匹替尼(AZD8931)、坦螺旋黴素(17-AAG)、IPI-504、PF299、培利替尼、S-22261 1及AEE-788。
額外的靶向HER2之治療劑(例如第一HER2抑制劑或第二HER2抑制劑)包括WO 2019/246541；WO 2019/165385；WO 2014/176475；及US 9,029,502中所揭示之彼等治療劑，其中之每一者以全文引用之方式併入本文中。
如本文所用之「靶向RAS路徑之治療劑」包括在RAS路徑中展現任何蛋白質之失活活性(例如激酶抑制、異位抑制、抑制二聚化及誘導降解)的任何化合物。RAS路徑中蛋白質之非限制性實例包括RAS-RAF-MAPK路徑或PI3K/AKT路徑中之蛋白質中之任一者，諸如RAS (例如KRAS、HRAS及NRAS)、RAF、BRAF、MEK、ERK、PI3K、AKT及mTOR。在一些實施例中，RAS路徑調節劑可在RAS路徑中對蛋白質具有選擇性，例如RAS路徑調節劑可對RAS (亦稱為RAS調節劑)具有選擇性。在一些實施例中，RAS調節劑為共價抑制劑。在一些實施例中，靶向RAS路徑之治療劑為「KRAS路徑調節劑」。KRAS路徑調節劑包括在KRAS路徑中展現任何蛋白質之失活活性(例如激酶抑制、異位抑制、抑制二聚化及誘導降解)的任何化合物。KRAS路徑中蛋白質之非限制性實例包括KRAS-RAF-MAPK路徑或PI3K/AKT路徑中之蛋白質中之任一者，諸如KRAS、RAF、BRAF、MEK、ERK、PI3K、AKT及mTOR。在一些實施例中，KRAS路徑調節劑可在RAS路徑中對蛋白質具有選擇性，例如KRAS路徑調節劑可對KRAS (亦稱為KRAS調節劑)具有選擇性。在一些實施例中，KRAS調節劑為共價抑制劑。KRAS靶向治療劑(例如KRAS抑制劑)之非限制性實例包括BI 1701963、AMG 510、ARS-3248、ARS1620、AZD4785、SML-8-73-1、SML-10-70-1、VSA9、AA12及MRTX-849。
靶向RAS之治療劑之其他非限制性實例包括BRAF抑制劑、MEK抑制劑、ERK抑制劑、PI3K抑制劑、AKT抑制劑及mTOR抑制劑。在一些實施例中，BRAF抑制劑為維羅非尼(vemurafenib) (ZELBORAF®)、達拉非尼(dabrafenib) (TAFINLAR®)及恩拉非尼(encorafenib) (BRAFTOVITM)、BMS-908662 (XL281)、索拉非尼(sorafenib)、LGX818、PLX3603、RAF265、RO5185426、GSK2118436、ARQ 736、GDC-0879、PLX-4720、AZ304、PLX-8394、HM95573、RO5126766、LXH254或其組合。
在一些實施例中，MEK抑制劑為曲美替尼(trametinib) (MEKINIST®、GSK1120212)、考比替尼(cobimetinib) (COTELLIC®)、貝美替尼(binimetinib) (MEKTOVI®、MEK162)、司美替尼(selumetinib) (AZD6244)、PD0325901、MSC1936369B、SHR7390、TAK-733、RO5126766、CS3006、WX-554、PD98059、CI1040 (PD184352)、寄端黴素(hypothemycin)或其組合。
在一些實施例中，ERK抑制劑為FRI-20 (ON-01060)、VTX-11e、25-OH-D3-3-BE (B3CD、溴乙醯氧基鈣二醇)、FR-180204、AEZ-131 (AEZS-131)、AEZS-136、AZ-13767370、BL-EI-001、LY-3214996、LTT-462、KO-947、KO-947、MK-8353 (SCH900353)、SCH772984、ulixertinib (BVD-523)、CC-90003、GDC-0994 (RG-7482)、ASN007、FR148083、5-7側氧基玉米赤黴醇(5-7-Oxozeaenol)、5-碘殺結核菌素(5-iodotubercidin)、GDC0994、ONC201或其組合。
在一些實施例中，PI3K抑制劑係選自布帕利塞(buparlisib) (BKM120)、阿吡利塞(alpelisib) (BYL719)、WX-037、考班昔布(copanlisib) (ALIQOPATM、BAY80-6946)、達托利塞(dactolisib) (NVP-BEZ235、BEZ-235)、他司利塞(taselisib) (GDC-0032、RG7604)、索諾昔布(sonolisib) (PX-866)、CUDC-907、PQR309、ZSTK474、SF1126、AZD8835、GDC-0077、ASN003、匹替利司(pictilisib) (GDC-0941)、皮拉昔布(pilaralisib) (XL147、SAR245408)、吉達力絲(gedatolisib) (PF-05212384、PKI-587)、塞雷利司(serabelisib) (TAK-117、MLN1117、INK 1117)、BGT-226 (NVP-BGT226)、PF-04691502、阿托昔布(apitolisib) (GDC-0980)、奧米力絲(omipalisib) (GSK2126458、GSK458)、伏他利塞(voxtalisib) (XL756、SAR245409)、AMG 511、CH5132799、GSK1059615、GDC-0084 (RG7666)、VS-5584 (SB2343)、PKI-402、渥曼青黴素(wortmannin)、LY294002、PI-103、利戈色替(rigosertib)、XL-765、LY2023414、SAR260301、KIN-193 (AZD-6428)、GS-9820、AMG319、GSK2636771或其組合。
在一些實施例中，AKT抑制劑係選自米替福新(miltefosine) (IMPADIVO®)、渥曼青黴素、NL-71-101、H-89、GSK690693、CCT128930、AZD5363、帕他色替(ipatasertib) (GDC-0068、RG7440)、A-674563、A-443654、AT7867、AT13148、阿瑟替布(uprosertib)、阿弗替布(afuresertib)、DC120、2-[4-(2-胺基丙-2-基)苯基]-3-苯基喹㗁啉、MK-2206、依地福新(edelfosine)、米替福新、哌立福新(perifosine)、erucylphophocholine、依羅福新(erufosine)、SR13668、OSU-A9、PH-316、PHT-427、PIT-1、DM-PIT-1、曲西立濱(triciribine) (曲西立濱磷酸酯單水合物)、API-1、N-(4-(5-(3-乙醯胺基苯基)-2-(2-胺基吡啶-3-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-3-基)苯甲基)-3-氟苯甲醯胺、ARQ092、BAY 1125976、3-側氧基-甘遂酸(3-oxo-tirucallic acid)、乳醌黴素(lactoquinomycin)、boc-Phe-乙烯基酮、哌立福新(D-21266)、TCN、TCN-P、GSK2141795、ONC201或其組合。
在一些實施例中，mTOR抑制劑選自MLN0128、AZD-2014、CC-223、AZD2014、CC-115、依維莫司(everolimus) (RAD001)、坦羅莫司(temsirolimus) (CCI-779)、地磷莫司(ridaforolimus) (AP-23573)、西羅莫司(sirolimus)雷帕黴素(rapamycin)或其組合。
法呢基轉移酶抑制劑之非限制性實例包括洛那法尼(lonafarnib)、替吡法尼(tipifarnib)、BMS-214662、L778123、L744832及FTI-277。
在一些實施例中，化學治療劑包括蒽環黴素(anthracycline)、環磷醯胺、紫杉烷、基於鉑之試劑、絲裂黴素(mitomycin)、吉西他濱(gemcitabine)、艾瑞布林(eribulin) (HALAVEN TM)或其組合。
紫杉烷之非限制性實例包括紫杉醇、多西他賽(docetaxel)、阿布拉生(abraxane)及克癌易(taxotere)。
在一些實施例中，蒽環黴素係選自道諾黴素(daunorubicin)、阿黴素(doxorubicin)、表柔比星(epirubicin)、艾達黴素(idarubicin)及其組合。
在一些實施例中，基於鉑之試劑係選自卡鉑(carboplatin)、順鉑(cisplatin)、奧沙利鉑(oxaliplatin)、奈達鉑(nedaplatin)、四硝酸三鉑、菲鉑(phenanthriplatin)、吡鉑(picoplatin)、賽特鉑(satraplatin)及其組合。
PARP抑制劑之非限制性實例包括奧拉帕尼(olaparib) (LYNPARZA®)、拉唑帕尼(talazoparib)、盧卡帕尼(rucaparib)、尼拉帕尼(niraparib)、維利帕尼(veliparib)、BGB-290 (帕米帕里pamiparib)、CEP 9722、E7016、依尼帕瑞(iniparib)、IMP4297、NOV1401、2X-121、ABT-767、RBN-2397、BMN 673、KU-0059436 (AZD2281)、BSI-201、PF-01367338、INO-1001及JPI-289。
免疫療法之非限制性實例包括免疫檢查點療法、阿特珠單抗(atezolizumab) (TECENTRIQ®)、白蛋白結合型紫杉醇。免疫檢查點療法之非限制性實例包括靶向CTLA-4、PD-1、PD-L1、BTLA、LAG-3、A2AR、TIM-3、B7-H3、VISTA、IDO及其組合之抑制劑。在一些實施例中，CTLA-4抑制劑為伊匹單抗(ipilimumab) (YERVOY®)。在一些實施例中，PD1抑制劑係選自帕博利珠單抗(pembrolizumab) (KEYTRUDA®)、納武單抗(nivolumab) (OPDIVO®)、西米普利單抗(cemiplimab) (LIBTAYO®)或其組合。在一些實施例中，PD-L1抑制劑係選自阿特珠單抗(atezolizumab) (TECENTRIQ®)、阿維魯單抗(avelumab) (BAVENCIO®)、度伐利尤單抗(durvalumab)(IMFINZI®)或其組合。在一些實施例中，LAG-3抑制劑為IMP701 (LAG525)。在一些實施例中，A2AR抑制劑為CPI-444。在一些實施例中，TIM3抑制劑為MBG453。在一些實施例中，B7-H3抑制劑為伊諾貝利圖珠單抗(enoblituzumab)。在一些實施例中，VISTA抑制劑為JNJ-61610588。在一些實施例中，IDO抑制劑為吲哚莫德(indoximod)。參見例如Marin-Acevedo等人, J Hematol Oncol. 11: 39 (2018)。
在一些實施例中，額外療法或治療劑為阿特珠單抗與白蛋白結合型紫杉醇之組合。
相應地，本文亦提供治療癌症之方法，其包含向有需要之個體投與用於治療癌症之醫藥組合，該醫藥組合包含同時、分開或依序使用之(a)式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽，(b)額外治療劑，及(c)視情況存在之至少一種醫藥學上可接受之載劑，以便治療癌症，其中式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽與額外治療劑的量在一起可有效治療該癌症。
在一些實施例中，額外治療劑包括作為癌症護理標準之上列療法或治療劑中之任一者，其中該癌症具有 EGFR基因、EGFR蛋白質或其中任一者之表現或活性或含量之失調。
在一些實施例中，額外治療劑包括作為癌症護理標準之上列療法或治療劑中之任一者，其中該癌症具有 HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調。
此等額外治療劑可與一或多個劑量之式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽或其醫藥組合物一起作為相同或各別劑型的一部分，經由相同或不同投與途徑及/或依相同或不同投與時程，根據熟習此項技術者已知的標準醫藥操作來投與。
本文亦提供(i)用於治療有需要之個體中之癌症的醫藥組合，其包含(a)式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽，(b)至少一種額外治療劑(例如本文中描述之或此項技術中已知的例示性其他治療劑中之任一者)及(c)視情況選用之至少一種醫藥學上可接受之載劑，其用於同時、分開或依序使用以治療癌症，其中式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽與額外治療劑的量在一起可有效治療該癌症；(ii)醫藥組合物，該醫藥組合物包含此類組合；(iii)此類組合之用途，其係用於製備用以治療癌症之藥劑；及(iv)市售封裝或產品，其包含此類組合作為同時、分開或依序使用之組合製劑；及治療有需要之個體中之癌症之方法。在一些實施例中，癌症為EGFR相關癌症。例如，EGFR相關癌症具有一或多個EGFR抑制劑抗性突變。在一些實施例中，癌症為HER2相關癌症。例如，HER2相關癌症具有一或多個HER2抑制劑抗性突變。
如本文所用之術語「醫藥組合」係指藉由混合或合併超過一種活性成分所得到的醫藥療法且包括活性成分之固定組合及非固定組合兩者。術語「固定組合」意謂式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽與至少一種額外治療劑(例如化學治療劑)，兩者均以單一組合物或劑量形式同時向個體投與。術語「非固定組合」意謂式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽與至少一種額外治療劑(例如化學治療劑)調配為個別組合物或劑型，使得其可在不同介入時間限制下同時、並行或依序投與有需要之個體，其中此類投與在個體體內提供兩種或更多種化合物之有效含量。此等組合亦適用於混合療法，例如投與三種或更多種活性成分。
相應地，本文亦提供治療癌症之方法，其包含向有需要之個體投與用於治療癌症之醫藥組合，該醫藥組合包含(a)式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽，及(b)額外治療劑，其中式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽與額外治療劑同時、分開或依序投與，其中式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽與額外治療劑的量在一起可有效治療該癌症。在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽與額外治療劑作為單獨劑量同時投與。在一個實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽與額外治療劑作為單獨劑型、以聯合治療有效量、以任何次序依序投與，例如每日給藥或間歇給藥。在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽與額外治療劑作為組合劑量同時投與。在一些實施例中，癌症為EGFR相關癌症。例如，EGFR相關癌症具有一或多個EGFR抑制劑抗性突變。在一些實施例中，癌症為HER2相關癌症。例如，HER2相關癌症具有一或多個HER2抑制劑抗性突變。
在一些實施例中，腫瘤中存在一或多個EGFR抑制劑抗性突變使得腫瘤對第一EGFR抑制劑治療之抗性更強。下文描述當EGFR抑制劑抗性突變使得腫瘤對第一EGFR抑制劑治療抗性更強時適用的方法。例如，本文提供治療患有癌症之個體的方法，其包括：鑑別具有含有一或多個EGFR抑制劑抗性突變之癌細胞的個體；及向經鑑別之個體投與式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽與第一EGFR抑制劑組合投與。亦提供治療經鑑別具有含有一或多個EGFR抑制劑抗性突變之癌細胞之個體的方法，其包括向該個體投與式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中，式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽與第一EGFR抑制劑組合投與。在一些實施例中，一或多個EGFR抑制劑抗性突變賦予癌細胞或腫瘤針對第一EGFR抑制劑治療之增加的抗性。在一些實施例中，一或多個EGFR抑制劑抗性突變包括 表 2a及 表 2b中所列舉之一或多個EGFR抑制劑抗性突變。例如，一或多種EGFR抑制劑抗性突變可包括在胺基酸位置718、747、761、790、797或854處之取代(例如L718Q、L747S、D761Y、T790M、C797S及T854A)。
例如，本文中提供用於治療需要此類治療之個體之EGFR相關癌症的方法，該方法包含(a)偵測來自該個體之樣品中 EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調；及(b)向該個體投與治療有效量之第一EGFR抑制劑，其中該第一EGFR抑制劑係選自由以下組成之群：奧希替尼、吉非替尼、埃羅替尼、阿法替尼、拉帕替尼、來那替尼、AZD-9291、CL-387785、CO-1686或WZ4002。在一些實施例中，該方法進一步包含(在(b)之後) (c)確定自個體獲得之樣品中之癌細胞是否具有至少一個EGFR抑制劑抗性突變；及(d)若該個體已確定具有含有至少一個EGFR抑制劑抗性突變的癌細胞，則以單一療法或以與另一種抗癌劑結合之形式向該個體投與治療有效量之式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽；或(e)若該個體尚未確定具有含有至少一個EGFR抑制劑抗性突變的癌細胞，則向該個體投與額外劑量之步驟(b)的該第一EGFR抑制劑。
當HER2活化突變存在於腫瘤中時適用的方法描述於本文中。例如，本文提供治療患有癌症之個體的方法，其包括：鑑別具有含有一或多個HER2活化突變之癌細胞的個體；及向經鑑別之個體投與式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽。亦提供治療經鑑別具有含有一或多個HER2活化突變之癌細胞之個體的方法，其包括向該個體投與式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中，一或多個HER2活化突變包括 表 3 - 5中所列之一或多個HER2活化突變。
當活化突變(例如HER2活化突變)存在於個體體內之腫瘤中時適用的方法描述於本文中。例如，本文提供治療患有癌症之個體的方法，其包括：鑑別具有含有一或多個HER2活化突變之癌細胞的個體；及向經鑑別之個體投與式 ( I )(例如，式 ( I - a ) 、 ( I - b ) 、 ( I - c ) 、 ( I - d ) 、 ( I - e ) 、 ( I - f ) 、 ( I - g ) 、 ( I - h ) 、 ( I - i ) 、 ( I - j )或 ( I - k ))化合物或其醫藥學上可接受之鹽。
化合物製備本文所揭示之化合物可以多種方式使用市售起始物質、文獻中已知的化合物或由容易製備之中間物，藉由採用熟習此項技術者已知之或按照本文的教示之標準合成方法及程序來製備。本文所揭示之化合物之合成可藉由以下流程1一般實現，其中對特定所需取代基進行修飾。
製備有機分子及官能基轉化及操作之標準合成方法及程序可自相關科學文獻或自該領域之標準教科書獲得。儘管不限於任一或若干個來源，但諸如R. Larock, Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers (1989)；L. Fieser及M. Fieser, Fieser and Fieser's Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1994)；Smith, M. B., March, J., March' s Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure, 5th edition, John Wiley & Sons: New York, 2001；及Greene, T.W., Wuts, P.G. M., Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd edition, John Wiley & Sons: New York, 1999，為熟習此項技術者已知之適用且公認的有機合成之參考教科書。合成方法之以下描述經設計以說明(但不限制)製備本發明化合物之通用程序。
本文所揭示之合成方法可容許多種官能基；因此，可使用各種經取代之起始材料。該等製程通常在整個過程結束或接近結束時提供所需最終化合物，但在某些情況下可能需要將化合物進一步轉化成其醫藥學上可接受之鹽。
化合物製備 實例 1 ：(S)-2-(3-((6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-5-基)甲氧基)吡啶-4-基)-3-((3-氟-2-甲氧基苯基)胺基)-1,5,6,7-四氫-4H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮( 化合物 133a)
Figure 02_image991
部分 1 ：合成 Int1B3-氟-2-甲氧基苯胺與CSCl 2反應，得到 Int1A。 Int1A與4-羥基-6-側氧基-3,6-二氫吡啶-1(2H)-甲酸三級丁酯之偶合提供 Int1B。 部分 2 ：合成 化合物 133a3-氯異菸鹼甲腈與苯甲醇(BnOH)在鹼性條件(例如NaH)下，於極性非質子性溶劑(諸如二甲基甲醯胺(DMF))中偶合得到3-(苯甲氧基)異菸鹼甲腈。在催化性鎳及氫氣(H 2)存在下腈還原3-(苯甲氧基)異菸鹼甲腈得到(3-(苯甲氧基)吡啶-4-基)甲胺。偶合 Int1B及(3-(苯甲氧基)吡啶-4-基)甲胺得到 Int1C。在氧化條件下(例如在H 2O 2存在下)環化 Int1C隨後得到 Int1D- Bn。在氫化條件(例如Pd/C及H 2)下進行苯甲基去除保護基得到 Int1D。 Int1D與( S)-(6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-5-基)甲醇之光延偶合(Mitsunobu coupling)，得到 化合物 133a。
實例 2 ：2-(3-((6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-a]咪唑-3-基)甲氧基)吡啶-4-基)-3-((3-氟-2-甲氧基苯基)胺基)-1,5,6,7-四氫-4H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮( 化合物 150)
Figure 02_image993
Int1D使用 實例 1中所描述之方法製備。 Int1D與(6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-a]咪唑-3-基)甲醇之光延偶合得到 化合物 150。
實例 3 ：2-(3-((6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-a]咪唑-5-基)甲氧基)吡啶-4-基)-3-((3-氟-2-甲氧基苯基)胺基)-1,5,6,7-四氫-4H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮( 化合物 128)
Figure 02_image995
Int1D使用 實例 1中所描述之方法製備。 Int1D與(6,7-二氫-5H-吡咯并[1,2-a]咪唑-5-基)甲醇之光延偶合得到 化合物 128。
實例 4 ：3-((3-氟-2-甲氧基苯基)胺基)-2-(3-((1,4,5,6-四氫環戊[c]吡唑-3-基)甲氧基)吡啶-4-基)-1,5,6,7-四氫-4H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮( 化合物 151)
Figure 02_image997
Int1D使用 實例 1中所描述之方法製備。 Int1D與(1,4,5,6-四氫環戊[c]吡唑-3-基)甲醇之光延偶合得到 化合物 151。
實例 5 ：合成(S)-3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基)-2-(3-((1-(甲磺醯基)吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶-4-基)-1,5,6,7-四氫-4H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮( 化合物 142a)
Figure 02_image999
(S)-2-(羥基甲基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯與3-氯異菸鹼甲腈在鹼性條件(例如NaH)下，於極性非質子性溶劑(諸如二甲基甲醯胺(DMF))中偶合得到(S)-2-(((4-氰基吡啶-3-基)氧基)甲基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯。腈還原(S)-2-(((4-氰基吡啶-3-基)氧基)甲基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(例如在雷尼鎳及氫氣存在下)隨後得到(S)-2-(((4-(胺基甲基)吡啶-3-基)氧基)甲基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯。偶合 Int2B 與(S)-2-(((4-(胺基甲基)吡啶-3-基)氧基)甲基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯隨後得到 ( S )- Int2C。在氧化條件下(例如在H 2O 2存在下)環化 ( S )- Int2C隨後得到 ( S )- Int2D。在酸(例如TFA等，例如在二氯甲烷(DCM)中)存在下，對 ( S )- Int2D進行BOC去除保護基得到 ( S )- Int1E。最後，在甲磺醯氯存在下對 ( S )- Int1E進行磺醯胺形成以得到 化合物 142a。
實例 6 ：(S)-3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基)-2-(3-((1-丙醯基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶-4-基)-1,5,6,7-四氫-4H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮( 化合物 139)
Figure 02_image1001
Int1E使用 實例 5中所描述之方法製備。在丙醯氯存在下對 Int1E進行醯胺化以得到 化合物 139。
實例 7 ：(S)-2-(3-((1-丙烯醯基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶-4-基)-3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基)-1,5,6,7-四氫-4H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮( 化合物 138b)
Figure 02_image1003
Int1E使用 實例 5中所描述之方法製備。在丙烯醯氯存在下對 Int1E進行醯胺化以得到 化合物 138b。
實例 8 ：合成(S)-2-(3-((1-乙醯基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶-4-基)-3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基)-1,5,6,7-四氫-4H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮( 化合物 141a)
Figure 02_image1005
Int1E使用 實例 5中所描述之方法製備。在乙醯氯存在下對 Int1E進行醯胺化以得到 化合物 141a。
實例 9 ：(R)-2-(3-((1-丙烯醯基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶-4-基)-3-((3-氟-2-甲基苯基)胺基)-1,5,6,7-四氫-4H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮( 化合物 140
Figure 02_image1007
(R)-2-(羥基甲基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯與3-氯異菸鹼甲腈在鹼性條件(例如NaH)下，於極性非質子性溶劑(諸如二甲基甲醯胺(DMF))中偶合得到(R)-2-(((4-氰基吡啶-3-基)氧基)甲基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯。腈還原(R)-2-(((4-氰基吡啶-3-基)氧基)甲基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(例如在雷尼鎳及氫氣存在下)隨後得到(R)-2-(((4-(胺基甲基)吡啶-3-基)氧基)甲基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯。偶合 Int1 ' B - H(參見以下製備方法)及(R)-2-(((4-(胺基甲基)吡啶-3-基)氧基)甲基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯隨後得到 ( R )- Int2C。在氧化條件下(例如在H 2O 2存在下)環化 ( R )- Int2C隨後得到 ( R )- Int2D。在酸(例如TFA等，例如在二氯甲烷(DCM)中)存在下，對 ( R )- Int2D進行BOC去除保護基得到 ( R )- Int1E。在甲磺醯氯存在下對 ( R )- Int1E進行醯胺化以得到 化合物 140。
製備 Int1 ' B-H:
Figure 02_image1009
2,4-二氧代哌啶-1-甲酸三級丁酯與1-氟-3-異硫氰基-2-甲基苯(例如，在鹼(諸如DBU)存在下在乙腈中)偶合得到 Int1 ' B - Boc。移除 Int1 ' B - Boc之Boc保護基隨後得到 Int1 ' B - H。
實例 10 ：(R)-2-(3-((1-丙烯醯基氮雜環丁烷-2-基)甲氧基)吡啶-4-基)-3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基)-1,5,6,7-四氫-4H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮( 化合物 145a)
Figure 02_image1011
(R)-2-(羥基甲基)氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯與3-氯異菸鹼甲腈在鹼性條件(例如NaH)下，於極性非質子性溶劑(諸如二甲基甲醯胺(DMF))中偶合得到(R)-2-(((4-氰基吡啶-3-基)氧基)甲基)氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯。腈還原(R)-2-(((4-氰基吡啶-3-基)氧基)甲基)氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(例如在雷尼鎳及氫氣存在下)隨後得到(R)-2-(((4-(胺基甲基)吡啶-3-基)氧基)甲基)氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯。偶合 Int2B - H與(R)-2-(((4-(胺基甲基)吡啶-3-基)氧基)甲基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯隨後得到 ( R )- Int3C。在氧化條件下(例如在H 2O 2存在下)環化 ( R )- Int3C隨後得到 ( R )- Int3D。在酸(例如TFA等)存在下在二氯甲烷(DCM)中，對 ( R )- Int3D進行BOC去除保護基得到 ( R )- Int2E。最後，在丙烯醯氯存在下對 ( R )- Int2E進行醯胺化以得到 化合物 145a。
實例 11 ：合成2-(3-(2-環丙氧基乙氧基)吡啶-4-基)-3-((3-氟-2-甲氧基苯基)胺基)-1,5,6,7-四氫-4H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮( 化合物 135)
Figure 02_image1013
部分 1 ：合成4-(胺基甲基)吡啶-3-醇 3-羥基異菸鹼醛與羥胺鹽酸鹽(NH 2OH∙HCl)反應，得到3-羥基異菸鹼醛肟。3-羥異菸鹼醛肟之亞胺(例如在鈀及H 2存在下)在甲醇中之氫化提供4-(胺基甲基)吡啶-3-醇。 部分 2 ：3-氟-2-甲氧基苯胺與CSCl 2反應，得到1-氟-3-異硫氰基-2-甲氧基苯。1-氟-3-異硫氰基-2-甲氧基苯與哌啶-2,4-二酮(例如在DBU存在下)在乙腈中之偶合提供 Int2B - H。 Int2B - H與4-(胺基甲基)吡啶-3-醇之偶合提供 Int2C - H。在氧化條件下(例如在H 2O 2存在下)環化 Int2C - H隨後得到 Int2D - H。 Int2D - H與2-環丙氧基乙烷-1-醇之光延偶合得到 化合物 135。
實例 12 ：合成3-((3-氟-2-甲氧基苯基)胺基)-2-(3-((1R,2S)-2-甲氧基環丙氧基)吡啶-4-基)-1,5,6,7-四氫-4H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮( 化合物 136b)
Figure 02_image1015
((乙烯基氧基)甲基)苯 與溴仿(CHBr 3)在鹼性條件(例如，在KOH及n-Bu 4NHSO4於DCM中存在下)下反應，得到((2,2-二溴環丙氧基)甲基)苯。((2,2-二溴環丙氧基)甲基)苯在還原條件(例如用鋅)下依序去溴，接著進行鹼性水解(例如在NaOH存在下)，得到(1R,2R)-2-(苯甲氧基)環丙烷-1-醇。對(1R,2R)-2-(苯甲氧基)環丙烷-1-醇(例如在NaH及MeI存在下)進行甲基化提供(((1R,2R)-2-甲氧基環丙氧基)甲基)苯。對(((1R,2R)-2-甲氧基環丙氧基)甲基)苯進行氫解隨後與 Int2D - H進行光延偶合得到 化合物 136b。
實例 13 ：合成(R)-2-(3-((1-丙烯醯基吡咯啶-2-基)乙炔基)吡啶-4-基)-3-((3-氟-2-甲氧基苯基)胺基)-1,5,6,7-四氫-4H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮( 化合物 147b)
Figure 02_image1017
部分 1 ：合成(3-溴吡啶-4-基)甲胺 3-溴異菸鹼甲腈在氫化條件(例如雷尼鎳及H 2)下在乙酸中還原得到(3-溴吡啶-4-基)甲胺。 部分 2 ：合成(R)-2-乙炔基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯 (R)-2-甲醯基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯進行反應(例如在貝斯特曼-大平試劑(Bestmann-Ohira reagent)及K 2CO 3存在下)，得到(R)-2-乙炔基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯。 部分 3 ：3-氟-2-甲氧基苯胺與CSCl 2在鹼性條件(例如NaHCO 3/DCM)下反應，得到1-氟-3-異硫氰基-2-甲氧基苯。1-氟-3-異硫氰基-2-甲氧基苯與哌啶-2,4-二酮之偶合得到N-(3-氟-2-甲氧基苯基)-4-羥基-2-側氧基-1,2,5,6-四氫吡啶-3-硫代甲醯胺。N-(3-氟-2-甲氧基苯基)-4-羥基-2-側氧基-1,2,5,6-四氫吡啶-3-硫代甲醯胺與(3-溴吡啶-4-基)甲胺於極性非質子性溶劑(例如DMA)中之反應得到 Int5C。在氧化條件下(例如在H 2O 2存在下)環化 Int5C隨後得到 Int4D。(R)-2-乙炔基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯與 Int4D偶合得到 ( R )- Int3E - BOC。 ( R )- Int3E - BOC進行BOC去除保護基得到 ( R )- Int3E，其進一步與丙烯醯氯反應得到 化合物 147b。
實例 14 ：合成(S)-2-(3-((1-丙烯醯基吡咯啶-2-基)乙炔基)吡啶-4-基)-3-((3-氟-2-甲氧基苯基)胺基)-1,5,6,7-四氫-4H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮( 化合物 147a)
Figure 02_image1019
(S)-2-甲醯基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯進行反應(例如在貝斯特曼-大平試劑及K 2CO 3存在下)，得到(S)-2-乙炔基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯。 Int4D與(S)-2-乙炔基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(例如在Pd(PPh 3) 4、CuI及TEA存在下)進行薗頭偶合得到 ( S )- Int3E - BOC。 ( R )- Int3E - BOC進行BOC去除保護基得到 ( R )- Int3E，且進一步與丙烯醯氯反應得到 化合物 147a。
實例 15 ：合成(S)-3-((3-氟-2-甲氧基苯基)胺基)-2-(3-((四氫呋喃-2-基)乙炔基)吡啶-4-基)-1,5,6,7-四氫-4H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮( 化合物 148a)及(R)-3-((3-氟-2-甲氧基苯基)胺基)-2-(3-((四氫呋喃-2-基)乙炔基)吡啶-4-基)-1,5,6,7-四氫-4H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮( 化合物 148b)
Figure 02_image1021
四氫呋喃-2-甲醛進行反應(例如在貝斯特曼-大平試劑(Bestmann-Ohira reagent)及K 2CO 3存在下)，得到2-乙炔基四氫呋喃。 Int4D與2-乙炔基四氫呋喃(例如在Pd(PPh 3) 4、CuI及TEA存在下)進行薗頭偶合得到包含 148a及 148b之對映異構混合物，其接著藉由對掌性超臨界流體層析法分離得到 化合物 148a及 化合物 148b。
實例 16 ：3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基)-2-(3-(3-甲氧基-3-甲基丁-1-炔-1-基)吡啶-4-基)-1,5,6,7-四氫-4H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 188)
Figure 02_image1023
氰基吡啶 Int1A在氫氣及催化劑(例如雷尼鎳)存在下於極性質子溶劑(例如MeOH，與弱酸，例如HOAc)中氫化，得到 Int1B。 Int1C在改良之肖滕-鮑曼反應(Schotten-Baumann)條件下，例如NaHCO 3在水/DCM存在下與硫光氣反應，得到相應的硫代異氰酸酯 Int1D。 Int1D與 Int1E在強鹼(例如DBU)存在下於極性非質子溶劑(例如ACN)中進行處理，得到 Int1F。 Int1F與 Int1B在加熱，例如120℃下在脫水劑(例如4Å分子篩)存在下於極性非質子溶劑(例如DMA)中冷凝，得到 Int1G。 Int1G在溫和氧化劑(例如H 2O 2)存在下於極性非質子溶劑(例如MeOH)中進行氧化環化，得到 Int1H。 Int1H與 Int1I在薗頭偶合條件，例如CuI、Pd(PPh 3) 4及TEA下反應得到標題化合物。
實例 17 ：合成(R)-217-(3-((1-丙烯醯基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶-4-基)-3-(苯并[d]噻唑-4-基胺基)-1,5,6,7-四氫-4H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 171)
Figure 02_image1025
胺基苯并噻唑 Int2A在改良之肖滕-鮑曼反應條件下，例如NaHCO 3在水/DCM存在下與與硫光氣反應，得到相應的硫代異氰酸酯，然後與 Int2B在強鹼(例如DBU)存在下於極性非質子溶劑(例如ACN)中反應，得到 Int2C。用例如TFA/DCM溶液之強酸實現 Int2C之去除保護基，隨後用NaHCO 3(水溶液)中和得到 Int2D。氯吡啶 Int2E與 Int2F在強鹼(例如NaH)存在下於極性非質子溶劑(例如DMF)中在室溫下反應產生 Int2G。 Int2G在極性質子溶劑(例如MeOH)中用氫氣及催化劑(例如雷尼鎳)實現氫化以得到 Int2H。 Int2H與 Int2D在加熱，例如120℃下在脫水劑(例如4Å分子篩)存在下於極性非質子溶劑(例如DMA)中冷凝，得到 Int2I。 Int2I在溫和氧化劑(例如H 2O 2)存在下於極性非質子溶劑(例如MeOH)中進行氧化環化，得到 Int2J。用強酸(例如TFA)使 Int2J去除保護基，隨後在輕度鹼性條件下用丙烯醯氯 Int2K處理，得到標題化合物。
實例 18.2-(3-[[(2R)-1-乙醯基吡咯啶-2-基]甲氧基]吡啶-4-基)-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 141b)
18.1. 合成氯 -3- 異硫氰基 -2- 甲氧基苯
Figure 02_image1027
在0℃下在氮氣氛圍下將3-氯-2-甲氧基苯胺(4.00 g，25.3 mmol，1.00當量)及硫光氣(3.21 g，27.9 mmol，1.10當量)於DCM (10.00 mL)及飽和NaHCO3 (10.00 mL)中之溶液攪拌1小時。所得混合物用CH2Cl2 (2 x 100 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(1x50 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。此產生呈淺黃色油狀物之1-氯-3-異硫氰基-2-甲氧基苯(3.5 g，69.07%)。 LC-MS: (M+H)+實驗值：200.0。
18.2. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基甲硫醯基 ]-4- 羥基 -2- 側氧基 -5,6- 二氫吡啶
Figure 02_image1029
在室溫下在氮氣氛圍下將1-氯-3-異硫氰基-2-甲氧基苯(3.50 g，17.5 mmol，1.00當量)及2,4-二氧代哌啶-1-甲酸三級丁酯(3.74 g，17.531 mmol，1.00當量)及DBU (4.00 g，26.296 mmol，1.50當量)於MeCN (50.00 mL)中之溶液攪拌2小時。在室溫下藉由添加水(100mL)淬滅反應。用濃HCl將混合物酸化至pH為7。藉由過濾收集所沈澱之固體且用水(1x10 mL)洗滌。此產生呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-4-羥基-2-側氧基-5,6-二氫吡啶-1-甲酸三級丁酯(6.9 g，95.33%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值413.3。
18.3. 合成 (2R)-2-[[(4- 氰基吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 ] 吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1031
向(2R)-2-(羥基甲基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(5.00 g，24.8 mmol，1.00當量)於DMF (50.00 mL)中之溶液中添加NaH (596 mg，24.8 mmol，1.00當量)，在0℃下攪拌0.5小時，且添加3-氯吡啶-4-甲腈(3.79 g，27.3 mmol，1.10當量)，在0℃下在氮氣氛圍下攪拌2小時。反應在室溫下用水淬滅。所得混合物用EtOAc (3 x 50mL)萃取。合併之有機層用鹽水(1x50 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EtOAc (5:1)溶離得到呈淺黃色油狀物之(2R)-2-[[(4-氰基吡啶-3-基)氧基]甲基]吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(3.2 g，42.46%)。 LC-MS: (M-56) +實驗值248.2。
18.4. 合成 (2R)-2-([[4-( 胺基甲基 ) 吡啶 -3- 基 ] 氧基 ] 甲基 ) 吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1033
在室溫下在氫氣氛圍下將(2R)-2-[[(4-氰基吡啶-3-基)氧基]甲基]吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(6.00 g，19.7 mmol，1.00當量)及雷尼鎳(2.54 g，29.6 mmol，1.50當量)及NH 3(30 mL，7M/MeOH)於MeOH (60.00 mL)中之溶液攪拌隔夜。過濾所得混合物，用MeOH (2x50 mL)洗滌濾餅。在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由逆相急驟在以下條件下純化(MeCN/H 2O=10%)，得到呈淺黃色油狀物之(2R)-2-([[4-(胺基甲基)吡啶-3-基]氧基]甲基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(5.0 g，82.24%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值308.2。
18.5. 合成 4-[[(3-[[(2R)-1-( 三級丁氧基羰基 ) 吡咯啶 -2- 基 ] 甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 ) 甲基 ] 胺基 ]-3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基甲硫醯基 ]-2- 側氧基 -5,6- 二氫吡啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1035
在110℃下在氮氣氛圍下將3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-4-羥基-2-側氧基-5,6-二氫吡啶-1-甲酸三級丁酯(1.50 g，3.6 mmol，1.00當量)及(2R)-2-([[4-(胺基甲基)吡啶-3-基]氧基]甲基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(1.11 g，3.6 mmol，1.00當量)、HOAc (218 mg，3.6 mmol，1.00當量)於甲苯(20.00 mL)中之溶液攪拌1小時。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由製備型TLC (PE/EtOAc 2:1)純化得到呈淡黃色固體狀之4-[[(3-[[(2R)-1-(三級丁氧基羰基)吡咯啶-2-基]甲氧基]吡啶-4-基)甲基]胺基]-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-2-側氧基-5,6-二氫吡啶-1-甲酸三級丁酯(1.4 g，54.87%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值702.2。
18.6. 合成 (2R)-2-[([4-[5-( 三級丁氧基羰基 )-3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ] 吡啶 -3- 基 ] 氧基 ) 甲基 ] 吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1037
在60℃下在氮氣氛圍下將4-[[(3-[[(2R)-1-(三級丁氧基羰基)吡咯啶-2-基]甲氧基]吡啶-4-基)甲基]胺基]-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-2-側氧基-5,6-二氫吡啶-1-甲酸三級丁酯(1.40 g，1.9 mmol，1.00當量)、TFA (454 mg，3.987 mmol，2.00當量)及H 2O 2(30%) (271 mg，7.9 mmol，4.00當量)於MeOH (20.00 mL)中之溶液攪拌1小時。將所得混合物在減壓下濃縮。此產生呈淡黃色固體狀之(2R)-2-[([4-[5-(三級丁氧基羰基)-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]吡啶-3-基]氧基)甲基]吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(880 mg，66.06%)。 LC-MS: (M-100) +實驗值568.2。
18.7. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-[3-[(2R)- 吡咯啶 -2- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1039
將(2R)-2-[([4-[5-(三級丁氧基羰基)-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]吡啶-3-基]氧基)甲基]吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(750 mg，1.1 mmol，1.00當量)及TMSCl (487 mg，4.490 mmol，4.00當量)、KI (745 mg，4.4 mmol，4.00當量)於MeCN (10.00 mL)中之溶液在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由製備型TLC (CH 2Cl 2/MeOH 5:1)純化得到呈淡黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-[3-[(2R)-吡咯啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(230 mg，43.79%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值468.1。
18.8. 合成 2-(3-[[(2R)-1- 乙醯基吡咯啶 -2- 基 ] 甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 )-3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1041
向3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-[3-[(2R)-吡咯啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(60 mg，0.1 mmol，1.00當量)及TEA (25 mg，0.2 mmol，2.00當量)於DCM (1.00 mL)中之溶液中添加乙醯氯(10 mg，0.1 mmol，1.00當量)，在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。將所得混合物在減壓下濃縮。粗產物藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep OBD C18管柱，30*150 mm，5μm；移動相A：水(10MMOL/L NH4HCO3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：25% B至45% B/8 min；波長：254 nm；RT1(min)：7.5)，得到呈黃色固體狀之2-(3-[[(2R)-1-乙醯基吡咯啶-2-基]甲氧基]吡啶-4-基)-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(7.0 mg，10.70%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值510.1。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 11.47 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 7.97 (d, J= 5.1 Hz, 1H), 7.42 (s, 1H), 7.33 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 7.11 (s, 1H), 6.66 (d, J= 5.2 Hz, 2H), 6.10 (q, J= 4.3, 3.7 Hz, 1H), 4.52 (s, 1H), 4.28 (dd, J= 9.8, 7.0 Hz, 1H), 4.12 (dd, J= 9.8, 4.3 Hz, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.81 (s, 3H), 3.48 (d, J= 7.9 Hz, 2H), 3.39 (d, J= 2.6 Hz, 4H), 2.93 (s, 2H), 2.02 (s, 2H), 1.96 (d, J= 38.6 Hz, 4H)。
實例 19.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-[[(2R)-1-甲磺醯基吡咯啶-2-基]甲氧基]吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮( 化合物 142b)
Figure 02_image1043
在0℃下在室溫下向3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-[3-[(2R)-吡咯啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(60 mg，0.1 mmol，1.00當量)及TEA (25 mg，0.2 mmol，2.00當量)於DCM (1.00 mL)中之溶液中添加甲磺醯氯(14 mg，0.1 mmol，1.00當量)，在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。將所得混合物在減壓下濃縮。粗產物藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep OBD C18管柱，30*150 mm，5μm；移動相A：水(0.1%FA)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：15% B至30% B/8 min；波長：254 nm；RT1(min)：6)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-[[(2R)-1-甲磺醯基吡咯啶-2-基]甲氧基]吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(9.5 mg，13.57%)。 LC-MS: (M+H)+實驗值：546.1。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.06 (s, 1H), 8.40 (s, 1H), 8.02 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.42 (s, 1H), 7.30 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 7.11 (s, 1H), 6.70 - 6.60 (m, 2H), 6.13 (dd, J = 7.0, 2.8 Hz, 1H), 4.24 - 4.09 (m, 3H), 3.60 - 3.35 (m, 4H), 2.97 (s, 3H), 2.84 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 2.01 - 1.87 (m, 4H)。
實例 20. 3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-[[(2R)-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]甲氧基]吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 138a)
20.1. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-[[(2R)-1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 吡咯啶 -2- 基 ] 甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1045
在0℃下將3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-[3-[(2R)-吡咯啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(50 mg，0.1 mmol，1.00當量)及TEA (21 mg，0.2 mmol，2.00當量)於DCM (1.00 mL)中之溶液添加丙烯醯氯(9 mg，0.1 mmol，1.00當量)，在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。將所得混合物在減壓下濃縮。粗產物藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep OBD C18管柱，30*150 mm，5μm；移動相A：水(10MMOL/L NH4HCO3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：25% B至45% B/8 min；波長：254 nm；RT1(min)：7.5；注入體積：1ml；運行次數：2)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-[[(2R)-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]甲氧基]吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(4.3 mg，7.71%)。 LC-MS: (M+H)+實驗值：522.1。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.52 (s, 1H), 8.40 (s, 1H), 7.97 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.42 -7.33 (m, 2H), 7.13 - 7.04 (m, 1H), 6.69 - 6.53 (m, 3H), 6.21 (dd, J = 16.7, 2.3 Hz, 1H), 6.15 - 5.98 (m, 1H), 5.73 (dd, J = 10.3, 2.3 Hz, 1H), 4.64 (s, 1H), 4.34 (dd, J = 9.8, 7.1 Hz, 1H), 4.11 (ddd, J = 30.2, 9.8, 5.1 Hz, 1H), 3.84 (d, J = 17.9 Hz, 3H), 3.62 (dd, J = 7.5, 4.5 Hz, 2H), 2.96 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 1.99 (dq, J = 13.7, 7.3 Hz, 2H), 1.95 - 1.83 (m, 4H)。
實例 21.3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-[5H,6H,7H-吡咯并[1,2-a]咪唑-7-基甲氧基]吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 124)
21.1. 合成 3-[5H,6H,7H- 吡咯并 [1,2-a] 咪唑 -7- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 甲腈
Figure 02_image1047
在0℃下向5H,6H,7H-吡咯并[1,2-a]咪唑-7-基甲醇(138 mg，1.0 mmol，1.00當量)於DMF (2 mL)中之混合物中添加NaH (48 mg，2.0 mmol，2.00當量)。將混合物在室溫下攪拌0.5小時且添加3-氯吡啶-4-甲腈(139 mg，1.0 mmol，1.00當量)。將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應在室溫下用水淬滅。所得混合物用EtOAc (3 x 10mL)萃取。合併之有機層用鹽水(1x10 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由製備型TLC (CH2Cl2/MeOH 15:1)純化，得到呈米白色固體狀之3-[5H,6H,7H-吡咯并[1,2-a]咪唑-7-基甲氧基]吡啶-4-甲腈(144 mg，59.74%)。 LC-MS: (M+H)+實驗值：181.6。
21.2. 合成 -[5H,6H,7H- 吡咯并 [1,2-a] 咪唑 -7- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 ) 甲胺
Figure 02_image1049
將3-[5H,6H,7H-吡咯并[1,2-a]咪唑-7-基甲氧基]吡啶-4-甲腈(140 mg，0.58 mmol，1.00當量)及雷尼鎳(199 mg，2.33 mmol，4.00當量)於NH3 (5 mL，7M/MeOH)及MeOH (5 mL)中之溶液在室溫下在氫氣氛圍下攪拌2小時。過濾所得混合物，用MeOH (1x10 mL)洗滌濾餅。在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由製備型TLC (CH2Cl2/MeOH 1:1)純化，得到呈黃色油狀物之1-(3-[5H,6H,7H-吡咯并[1,2-a]咪唑-7-基甲氧基]吡啶-4-基)甲胺(80 mg，56.20%)。 LC-MS: (M+H)+實驗值245.1。
21.3. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基甲硫醯基 ]-2- 側氧基 -4-[[(3-[5H,6H,7H- 吡咯并 [1,2-a] 咪唑 -7- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 ) 甲基 ] 胺基 ]-5,6- 二氫吡啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1051
將1-(3-[5H,6H,7H-吡咯并[1,2-a]咪唑-7-基甲氧基]吡啶-4-基)甲胺(80 mg，0.32 mmol，1.00當量)及3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-4-羥基-2-側氧基-5,6-二氫吡啶-1-甲酸三級丁酯(129 mg，0.32 mmol，1.00當量)、PyBOP (221 mg，0.42 mmol，1.30當量)、DIEA (126 mg，0.98 mmol，3.00當量)於DMF (2 mL)中之溶液在室溫下在氮氣氛圍下攪拌2小時。所得混合物用EtOAc (3 x 10mL)萃取。合併之有機層用鹽水(1x10 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由製備型TLC (PE/EtOAc 1:1)純化，得到呈黃色油狀物之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-2-側氧基-4-[[(3-[5H,6H,7H-吡咯并[1,2-a]咪唑-7-基甲氧基]吡啶-4-基)甲基]胺基]-5,6-二氫吡啶-1-甲酸三級丁酯(65 mg，31.88%)。 LC-MS: (M-56)+實驗值623.2。
21.4. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-[5H,6H,7H- 吡咯并 [1,2-a] 咪唑 -7- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1053
將3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-2-側氧基-4-[[(3-[5H,6H,7H-吡咯并[1,2-a]咪唑-7-基甲氧基]吡啶-4-基)甲基]胺基]-5,6-二氫吡啶-1-甲酸三級丁酯(65 mg，0.10 mmol，1.00當量)、TFA (0.03 mL，0.41 mmol，4.00當量)及H2O2(30%) (7 mg，0.20 mmol，2.00當量)於MeOH (1 mL)中之溶液在60℃下在氮氣氛圍下攪拌1小時。在室溫下藉由添加飽和Na2SO3 (水溶液) (1mL)淬滅反應。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由逆相急驟在以下條件下純化(MeCN/H2O-40%)，得到呈米白色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-[5H,6H,7H-吡咯并[1,2-a]咪唑-7-基甲氧基]吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(2.5 mg，4.90%)。 LC-MS: (M+H)+實驗值489.1。 1H NMR  (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.49 (s, 1H), 8.37 (m,2H), 7.96 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.34 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.23 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.17 - 7.07 (m, 2H), 6.66 (td, J = 8.2, 6.0 Hz, 1H), 6.51 (ddd, J = 10.0, 8.4, 1.4 Hz, 1H), 6.05 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 4.68 (dd, J = 8.9, 5.1 Hz, 1H), 4.13 (dt, J = 9.1, 5.3 Hz, 2H), 4.05 (dd, J = 12.0, 8.4 Hz, 3H), 3.94 (s, 2H), 3.75 (s, 2H), 3.12 - 3.00 (m, 3H)。
實例 22.3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-[咪唑并[2,1-b][1,3]噻唑-3-基甲氧基]吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 130)
22.1. 合成 3-[ 咪唑并 [2,1-b][1,3] 噻唑 -3- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 甲腈
Figure 02_image1055
向咪唑并[2,1-b][1,3]噻唑-3-基甲醇(155.80 mg，1.010 mmol，1.00當量)於DMF (2.00 mL)中之混合物中添加NaH(80.83 mg，2.020 mmol，2.00當量，60%)且在0℃下攪拌0.5小時。向混合物中添加3-氯吡啶-4-甲腈(140.00 mg，1.010 mmol，1.00當量)且在室溫下在氮氣氛圍下攪拌2小時。反應在室溫下用水淬滅。所得混合物用EtOAc (3 x 25mL)萃取。合併之有機層用鹽水(1x10 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由製備型TLC (CH2Cl2/MeOH 12:1)純化，得到呈淡黃色固體狀之3-[咪唑并[2,1-b][1,3]噻唑-3-基甲氧基]吡啶-4-甲腈(215 mg，83.02%)。 LC-MS: (M+H)+實驗值：257.15。
22.2. 合成 1-(3-[4H,5H,6H- 吡咯并 [1,2-b] 吡唑 -3- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 ) 甲胺
Figure 02_image1057
在氮氣氛圍下向3-[咪唑并[2,1-b][1,3]噻唑-3-基甲氧基]吡啶-4-甲腈(184.00 mg，0.718 mmol，1.00當量)於氨，7.0 M/MeOH溶液(5.00 mL)中之溶液中添加雷尼鎳(123.02 mg，1.436 mmol，2.00當量)。在室溫下將混合物使用氫氣球在氫氣氛圍下氫化4小時，通過矽藻塗墊過濾且在減壓下濃縮。所得混合物用CH2Cl2 (2mL)稀釋。殘留物藉由製備型TLC (CH2Cl2/MeOH 10:1)純化，得到呈淺黃色油狀物之1-(3-[4H,5H,6H-吡咯并[1,2-b]吡唑-3-基甲氧基]吡啶-4-基)甲胺(134 mg，48.25%)。 LC-MS: (M+H)+實驗值261。
22.3. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基甲硫醯基 ]-2- 側氧基 -4-[[(3-[4H,5H,6H- 吡咯并 [1,2-b] 吡唑 -3- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 ) 甲基 ] 胺基 ]-5,6- 二氫吡啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1059
在室溫下在氮氣氛圍下向3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-4-羥基-2-側氧基-5,6-二氫吡啶-1-甲酸三級丁酯(180.00 mg，0.454 mmol，1.00當量)、1-(3-[4H,5H,6H-吡咯并[1,2-b]吡唑-3-基甲氧基]吡啶-4-基)甲胺(122.02 mg，0.499 mmol，1.10當量)及PyBOP(354.43 mg，0.681 mmol，1.50當量)於DMF (5.00 mL)中之攪拌混合物中逐滴添加DIEA(117.37 mg，0.908 mmol，2.00當量)。將混合物在60℃下攪拌2小時。所得混合物用CH2Cl2 (3 x 30 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(2 x 20 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由製備型TLC (CH 2Cl 2/MeOH 10:1)純化，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-2-側氧基-4-[[(3-[4H,5H,6H-吡咯并[1,2-b]吡唑-3-基甲氧基]吡啶-4-基)甲基]胺基]-5,6-二氫吡啶-1-甲酸三級丁酯(300 mg，96.76%)。 LC-MS: (M+1)+實驗值639.1。
22.4. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-[ 咪唑并 [2,1-b][1,3] 噻唑 -3- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1061
將3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-4-[[(3-[咪唑并[2,1-b][1,3]噻唑-3-基甲氧基]吡啶-4-基)甲基]胺基]-2-側氧基-5,6-二氫吡啶-1-甲酸三級丁酯(130.00 mg，0.204 mmol，1.00當量)於MeOH (5.00 mL)中之溶液用H2O2(30%) (13.85 mg，0.408 mmol，2.00當量)在室溫下在氮氣氛圍下處理2分鐘，隨後在室溫下逐滴添加TFA(92.83 mg，0.816 mmol，4.00當量)。將所得混合物在60℃下在氮氣氛圍下攪拌3小時。所得混合物用CH2Cl2 (3 x 30 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(2 x 20 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。粗產物(30 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XSelect CSH Fluoro Phenyl，30*150 mm，5μm；移動相A：水(10MMOL/L NH4HCO3)，移動相B：MeOH；流動速率：60 mL/min；梯度：42% B至55% B/10 min；波長：254 nm；RT1(min)：9.08)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-[咪唑并[2,1-b][1,3]噻唑-3-基甲氧基]吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(3.5 mg，3.41%)。 LC-MS: (M+H)+實驗值505.05。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.18 (s, 1H), 8.63 (s, 1H), 8.03 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.73 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.45 - 7.35 (m, 2H), 7.28 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.22 (t, J = 1.3 Hz, 1H), 7.16 - 7.06 (m, 1H), 6.54 - 6.39 (m, 2H), 5.71 (m, J = 7.9, 1.5 Hz, 1H), 5.56 (s, 2H), 3.85 (d, J = 0.6 Hz, 3H), 3.41 (dd, J = 6.9, 2.5 Hz, 2H), 2.83 (t, J = 6.8 Hz, 2H)。
實例 23.3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-[5H,6H,7H-吡咯并[2,1-c][1,2,4]三唑-3-基甲氧基]吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 131)
Figure 02_image1063
在室溫下在氬氣氛圍下向3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-羥基吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(200.00 mg，0.5 mmol，1.00當量)及5H,6H,7H-吡咯并[2,1-c][1,2,4]三唑-3-基甲醇(113.33 mg，0.8 mmol，1.50當量)於甲苯(2.00 mL)中之攪拌混合物中添加CMBP (392.54 mg，1.6 mmol，3.00當量)。將所得混合物在90℃下在氬氣氛圍下攪拌2小時。在真空下濃縮所得混合物。將所得混合物在減壓下濃縮且粗產物(200 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Shield RP18 OBD管柱，30*150 mm，5μm；移動相A：水(10MMOL/L NH4HCO3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：18% B至30% B/8 min；波長：220 nm；RT1(min)：7.5)，得到呈白色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-[5H,6H,7H-吡咯并[2,1-c][1,2,4]三唑-3-基甲氧基]吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(5.8 mg，2.18%)。 LC-MS: (M+H)+實驗值490.35。 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11.71 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.07 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.32 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.13 (s, 1H), 6.61 (m, 1H), 6.47 (m, 1H), 5.96 (m, 1H), 5.50 (s, 2H), 3.92 - 3.82 (m, 5H), 3.42 (m,2H), 2.84 (m,4H), 2.61 (q, J = 7.3 Hz, 2H)。
實例 24.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-[[(2R)-1-丙醯基吡咯啶-2-基]甲氧基]吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 470)
Figure 02_image1065
向3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-[3-[(2R)-吡咯啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(50 mg，0.1 mmol，1.00當量)及TEA (21 mg，0.2 mmol，2.00當量)於DCM (1.00 mL)中之溶液中添加丙醯氯(9 mg，0.1mmol, 1.00當量)，在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。將所得混合物在減壓下濃縮。粗產物藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep C18 OBD管柱，19*150 mm，5μm；移動相A：水(10MMOL/L NH4HCO3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：41% B至45% B/8 min；波長：254 nm；RT1(min)：6)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-[[(2R)-1-丙醯基吡咯啶-2-基]甲氧基]吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(12.9 mg，23.04%)。 LC-MS: (M+H)+實驗值：524.1。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.53 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 7.97 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.33 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.12 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 6.71 - 6.61 (m, 2H), 6.16 - 6.07 (m, 1H), 4.58 - 4.52 (m, 1H), 4.29 (dd, J = 9.8, 7.2 Hz, 1H), 4.11 (dd, J = 9.8, 4.1 Hz, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.57 - 3.44 (m, 4H), 2.96 (td, J = 6.6, 2.1 Hz, 2H), 2.38 - 2.22 (m, 2H), 1.92 (ddd, J = 29.2, 14.0, 8.4 Hz, 4H), 0.98 (t, J = 7.3 Hz, 3H)。
實例 25.3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-[3-(吡啶-2-基甲氧基)吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 472)
25.1. 合成 1- 氟 -3- 異硫氰基 -2- 甲氧基苯
Figure 02_image1067
在0℃下在N 2氛圍下向3-氟-2-甲氧基苯胺(5.00 g，35.425 mmol，1.00當量)及飽和NaHCO3(50 mL)於DCM (50.00 mL)中之攪拌混合物中逐滴添加硫光氣(8.15 g，70.849 mmol，1.00當量)。將所得混合物在0℃下攪拌2小時。TLC (Et0Ac:己烷)顯示完全轉化。分離DCM層且用飽和NaHCO3及鹽水洗滌，通過疏水過濾器過濾且濃縮得到呈黃色油狀物之1-氟-3-異硫氰基-2-甲氧基苯(12 g，92.45%)。
25.2. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基甲硫醯基 ]-4- 羥基 -2- 側氧基 -5,6- 二氫吡啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1069
在0℃下向1-氟-3-異硫氰基-2-甲氧基苯(12.00 g，65.502 mmol，1.00當量)及4-羥基-2-側氧基-5,6-二氫吡啶-1-甲酸三級丁酯(13.97 g，65.502 mmol，1.00當量)於MeCN (100.00 mL)中之攪拌混合物中逐滴添加DBU (14.96 g，98.253 mmol，1.50當量)。將所得混合物在0℃下攪拌2小時。反應在0℃下用水淬滅。混合物用濃HCl酸化至pH為7。藉由過濾收集沈澱的固體，用水洗滌且在減壓下濃縮。此產生呈淡黃色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-4-羥基-2-側氧基-5,6-二氫吡啶-1-甲酸三級丁酯(19.5 g，75.10%)。
25.3. 合成 3-( 苯甲氧基 ) 吡啶 -4- 甲腈
Figure 02_image1071
在氮氣氛圍下在室溫下將苯甲醇(9.37 g，86.611 mmol，1.20當量)於DMF (70.00 mL)中之溶液用NaH (3.75 g，93.829 mmol，1.30當量，60%)處理5分鐘。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌30分鐘。在室溫下向上述混合物中分批添加3-氯吡啶-4-甲腈(10.00 g，72.176 mmol，1.00當量)持續5分鐘。將所得混合物在室溫下再攪拌隔夜。在室溫下藉由添加飽和NH 4Cl水溶液 (10 mL)淬滅反應。所得混合物用EtOAc (3 x 200 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(2 x 200 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。此產生呈黃色固體狀之3-(苯甲氧基)吡啶-4-甲腈(15 g，84.03%)。 LC-MS: M+H實驗值：211.1。
25.4. 合成 1-[3-( 苯甲氧基 ) 吡啶 -4- 基 ] 甲胺
Figure 02_image1073
在氮氣氛圍下向3-(苯甲氧基)吡啶-4-甲腈(15.00 g，71.348 mmol，1.00當量)於氨(7.0 M/乙醇溶液，150.00 mL)中之溶液中添加雷尼鎳(9.17 g，107.033 mmol，1.50當量)於250 mL圓底燒瓶中。將混合物使用氫氣球在氫氣氛圍下在室溫下氫化2小時，通過矽藻塗墊過濾且在減壓下濃縮。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化：管柱，C18矽膠；移動相，ACN/水，10%至30%梯度/30 min；偵測器，UV 254 nm。此產生呈無色油狀物之1-[3-(苯甲氧基)吡啶-4-基]甲胺(7 g，44.64%)。 LC-MS: M+H實驗值：215.20。
25.5. 合成 4-([[3-( 苯甲氧基 ) 吡啶 -4- 基 ] 甲基 ] 胺基 )-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基甲硫醯基 ]-2- 側氧基 -5,6- 二氫吡啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1075
在室溫下在氮氣氛圍下向3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-4-羥基-2-側氧基-5,6-二氫吡啶-1-甲酸三級丁酯(8.20 g，20.685 mmol，1.00當量)及PyBOP (11.84 g，22.754 mmol，1.10當量)於DMF (80.00 mL)中之攪拌混合物中添加DIEA (5.35 g，41.370 mmol，2.00當量)及1-[3-(苯甲氧基)吡啶-4-基]甲胺(4.88 g，22.753 mmol，1.10當量)。將所得混合物在室溫下攪拌隔夜。藉由LCMS監測反應。LCMS可偵測到所需產物。所得混合物用EtOAc (3 x 200mL)萃取。合併之有機層用二甲苯(3x500 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EtOAc (10:1)溶離得到呈橘色固體狀之4-([[3-(苯甲氧基)吡啶-4-基]甲基]胺基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-2-側氧基-5,6-二氫吡啶-1-甲酸三級丁酯(4.0 g，28.39%)。 LC-MS: M+H實驗值：593.15。
25.6. 合成 2-[3-( 苯甲氧基 ) 吡啶 -4- 基 ]-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1077
在室溫下在氮氣氛圍下向4-([[3-(苯甲氧基)吡啶-4-基]甲基]胺基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-2-側氧基-5,6-二氫吡啶-1-甲酸三級丁酯(3.80 g，6.411 mmol，1.00當量)及H 2O 2(2.18 g，19.227 mmol，3.00當量，30%)於MeOH (40.00 mL)中之攪拌混合物中添加TFA (1.10 g，9.617 mmol，1.50當量)。將所得混合物在80℃下攪拌1小時。藉由LCMS監測反應。LCMS可偵測到所需產物。反應在室溫下用飽和NaHSO3 (水溶液)淬滅。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化：管柱，C18矽膠；移動相，ACN/水，10%至50%梯度/10 min；偵測器，UV 254 nm。此產生呈橘色油狀物之2-[3-(苯甲氧基)吡啶-4-基]-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(1.3 g，32.73%)。 LC-MS: M+H實驗值：459.00。
25.7. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3- 羥基吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1079
在室溫下在氮氣氛圍下向2-[3-(苯甲氧基)吡啶-4-基]-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(600.00 mg，1.309 mmol，1.00當量)於MeOH/AcOH (6.00 mL/6.00 mL)中之攪拌混合物中添加Pd/C (278.53 mg，2.617 mmol，2.00當量)。將所得混合物在50℃下在氫氣氛圍下攪拌隔夜。藉由LCMS監測反應。LCMS可偵測到所需產物。過濾所得混合物，用MeOH (3x10 mL)洗滌濾餅。在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由製備型TLC (CH2Cl2/MeOH 10:1)純化，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-羥基吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(200 mg，36.80%)。 LC-MS: M+H實驗值：368.95。
25.8. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-[3-( 吡啶 -2- 基甲氧基 ) 吡啶 -4- 基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1081
將3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-羥基吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100.00 mg，0.271 mmol，1.00當量)及2-吡啶甲醇(59.25 mg，0.543 mmol，2.00當量)於甲苯(1.00 mL)中之溶液用2-(三丁基-λ5-亞膦基)乙腈 (131.04 mg，0.543 mmol，2.00當量)處理，在90℃下在氮氣氛圍下攪拌隔夜。將所得混合物在減壓下濃縮。所得混合物用2 ml DMF稀釋。粗產物(100 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：Xselect CSH F-Phenyl OBD管柱，19*250 mm，5μm；移動相A：水(0.05%FA)，移動相B：ACN；流動速率：25 mL/min；梯度：19% B至22% B/10 min；波長：254 nm；RT1(min)：7.27)，得到呈淺棕色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-[3-(吡啶-2-基甲氧基)吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(14.7 mg，11.79%)。 LC-MS: M+H實驗值：460.05。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.30 (s, 1H), 8.72 (dt, J = 4.7, 1.4 Hz, 1H), 8.45 (s, 1H), 8.03 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.91 (td, J = 7.7, 1.8 Hz, 1H), 7.59 - 7.49 (m, 2H), 7.44 (m, 1H), 7.37 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.19 (t, J = 2.6 Hz, 1H), 6.65 (td, J = 8.3, 6.0 Hz, 1H), 6.52 (m, 1H), 6.05 (dt, J = 8.2, 1.3 Hz, 1H), 5.55 (s, 2H), 3.91 (s, 3H), 3.47 (td, J = 6.8, 2.5 Hz, 2H), 2.98 (t, J = 6.8 Hz, 2H)。
實例 26. 3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-[3-(1,3-㗁唑-2-基甲氧基)吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 474)
Figure 02_image1083
將3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-羥基吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(300.00 mg，0.814 mmol，1.00當量)、2-(三丁基-λ5-亞膦基)乙腈(786.25 mg，3.256 mmol，4.00當量)及1,3-㗁唑-2-基甲醇(161.40 mg，1.628 mmol，2.00當量)於甲苯(5.00 mL)中之混合物在90℃下在氬氣氛圍下攪拌4小時。將所得混合物在減壓下濃縮。所得混合物用EtOAc (3 x 30 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(2 x 30 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。粗產物(30 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：Xselect  CSH C18 OBD管柱30*150mm 5μm；移動相A：水(0.1%FA)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：15% B至26% B/8 min；波長：254/220 nm；RT1(min)：7.65)，得到呈白色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-[3-(1,3-㗁唑-2-基甲氧基)吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(4.1 mg，1.09%)。 LC-MS: (M+H)+實驗值450.05。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.52 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 8.05 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.37 - 7.29 (m, 2H), 7.15 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 6.62 (td, J = 8.3, 6.0 Hz, 1H), 6.48 (m, 1H), 5.99 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 5.53 (s, 2H), 3.90 (s, 3H), 3.44 (s, 2H), 2.89 (t, J = 6.8 Hz, 2H)。
實例 27. 3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-[咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基甲氧基]吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 475)
27.1. 合成 3-[ 咪唑并 [1,2-a] 吡啶 -8- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 甲腈
Figure 02_image1085
在0℃下向咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基甲醇(149 mg，1.01 mmol，1.00當量)於DMF (2 mL)中之混合物中添加NaH (48 mg，2.0 mmol，2.00當量)且在室溫下攪拌0.5小時。向混合物中添加3-氯吡啶-4-甲腈(140 mg，1.01 mmol，1.00當量)且在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。所得混合物用EtOAc (3 x 15mL)萃取。合併之有機層用鹽水(1x10 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由製備型TLC (CH2Cl2/MeOH 15:1)純化，得到呈淡黃色固體狀之3-[咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基甲氧基]吡啶-4-甲腈(210 mg，83.04%)。 LC-MS: (M+H)+實驗值：251.2。
27.2. 合成 1-(3-[ 咪唑并 [1,2-a] 吡啶 -8- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 ) 甲胺
Figure 02_image1087
將3-[咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基甲氧基]吡啶-4-甲腈(210 mg，0.83 mmol，1.00當量)及雷尼鎳(143 mg，1.67 mmol，2.00當量)於NH3 (5 mL，7M/MeOH)及MeOH(5 mL)中之溶液在室溫下在氫氣氛圍下攪拌2小時。過濾所得混合物，用MeOH (1x10 mL)洗滌濾餅。在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由製備型TLC (CH2Cl2/MeOH 1:1)純化，得到呈淡黃色固體狀之1-(3-[咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基甲氧基]吡啶-4-基)甲胺(90 mg，42.18%)。 LC-MS: (M+H)+實驗值255.2。
27.3. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基甲硫醯基 ]-4-[[(3-[ 咪唑并 [1,2-a] 吡啶 -8- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 ) 甲基 ] 胺基 ]-2- 側氧基 -5,6- 二氫吡啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1089
將1-(3-[咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基甲氧基]吡啶-4-基)甲胺(46 mg，0.18 mmol，1.00當量)及3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-4-羥基-2-側氧基-5,6-二氫吡啶-1-甲酸三級丁酯(71 mg，0.18 mmol，1.00當量)、PyBOP (113 mg，0.21 mmol，1.20當量)、DIEA (47 mg，0.36 mmol，2.00當量)於DMF (1 mL)中之溶液在室溫下在氮氣氛圍下攪拌隔夜。所得混合物用EtOAc (2 x 10mL)萃取。合併之有機層用鹽水(1x10 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由製備型TLC (PE/EtOAc 1:1)純化，得到呈淺黃色油狀物之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-4-[[(3-[咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基甲氧基]吡啶-4-基)甲基]胺基]-2-側氧基-5,6-二氫吡啶-1-甲酸三級丁酯(25 mg，21.84%)。 LC-MS: (M+H)+實驗值633.2。
27.4. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-[ 咪唑并 [1,2-a] 吡啶 -8- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1091
將3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-4-[[(3-[咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基甲氧基]吡啶-4-基)甲基]胺基]-2-側氧基-5,6-二氫吡啶-1-甲酸三級丁酯(80 mg，0.12 mmol，1.00當量)、TFA (57 mg，0.50 mmol，4.00當量)及H2O2 (30%) (8 mg，0.25 mmol，2.00當量)於MeOH (1 mL)中之溶液在60℃下在氮氣氛圍下攪拌1小時。在室溫下藉由添加飽和NaHSO3 (水溶液) (1mL)淬滅反應。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由逆相急驟在以下條件下純化(MeCN/H2O=40%)，得到呈米白色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-[咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基甲氧基]吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(5.5 mg，8.73%)。 LC-MS: (M+H)+實驗值499.0。 1H NMR   (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.41 (s, 1H), 8.69 - 8.56 (m, 2H), 8.11 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 7.96 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.80 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 7.58 (d, J = 7.3 Hz, 2H), 7.26 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.15 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.02 (t, J = 6.8 Hz, 1H), 6.63 (td, J = 8.3, 6.0 Hz, 1H), 6.49 (ddd, J = 10.0, 8.4, 1.5 Hz, 1H), 6.01 (dt, J = 8.2, 1.3 Hz, 1H), 5.70 (s, 2H), 3.91 (s, 3H), 3.41 (td, J = 6.8, 2.5 Hz, 2H), 2.89 (t, J = 6.8 Hz, 2H)。
實例 28 .3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-[3-[(3-甲氧基吡啶-2-基)甲氧基]吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 476)
Figure 02_image1093
將3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-羥基吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100.00 mg，0.271 mmol，1.00當量)及(3-甲氧基吡啶-2-基)甲醇(75.55 mg，0.542 mmol，2.00當量)於甲苯(1.00 mL)中之溶液用2-(三丁基-λ5-亞膦基)乙腈(131.04 mg，0.542 mmol，2.00當量)處理。將混合物在90℃下在氮氣氛圍下攪拌隔夜。將所得混合物在減壓下濃縮。所得混合物用2 ml DMF稀釋。粗產物(100 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep OBD C18管柱，30*150 mm, 5μm；移動相A：水(10MMOL/L NH4HCO3)，移動相B：ACN；流動速率：50 mL/min；梯度：35% B至50% B/8 min；波長：254 nm；RT1(min)：7.6)，得到呈白色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-[3-[(3-甲氧基吡啶-2-基)甲氧基]吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(6.6 mg，4.90%)。 LC-MS: (M+H)+實驗值489.95。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.80 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.34 (dd, J = 4.8, 1.2 Hz, 1H), 8.01 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.62 (dd, J = 8.5, 1.2 Hz, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.50 (dd, J = 8.3, 4.8 Hz, 1H), 7.39 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.20 (t, J = 2.5 Hz, 1H), 6.69 (td, J = 8.3, 6.0 Hz, 1H), 6.55 m, 1H), 6.05 (dt, J = 8.1, 1.2 Hz, 1H), 5.60 (s, 2H), 3.98 - 3.92 (m, 6H), 3.48 (td, J = 6.8, 2.5 Hz, 2H), 3.03 (t, J = 6.8 Hz, 2H)。
實例 29 .3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-[3-[(5-甲基嘧啶-2-基)甲氧基]吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 477)
Figure 02_image1095
將3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-羥基吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(150.00 mg，0.407 mmol，1.00當量)、2-(三丁基-λ5-亞膦基)乙腈(786.25 mg，3.256 mmol，8.00當量)及(5-甲基嘧啶-2-基)甲醇(202.20 mg，1.628 mmol，4.00當量)於甲苯(5.00 mL)中之混合物在90℃下在氬氣氛圍下攪拌4小時。將所得混合物在減壓下濃縮。所得混合物用EtOAc (3 x 30 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(2 x 30 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。所得混合物用DMF (2 mL)稀釋。粗產物(30 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep OBD C18管柱，30*150 mm, 5μm；移動相A：水(10MMOL/L NH4HCO3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：32% B至42% B/8 min；波長：254 nm；RT1(min)：6)，得到呈淺棕色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-[3-[(5-甲基嘧啶-2-基)甲氧基]吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(12.2 mg，6.26%)。 LC-MS: (M+H)+實驗值475.35。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.51 (s, 1H), 8.85 (s, 2H), 8.51 (s, 1H), 8.02 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.39 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 7.21 (t, J = 2.6 Hz, 1H), 6.69 (td, J = 8.3, 5.9 Hz, 1H), 6.60 - 6.51 (m, 1H), 6.05 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 5.64 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.48 (m, 2H), 3.03 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 2.36 (s, 3H)。
實例 30 .3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-[3-(嘧啶-4-基甲氧基)吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 478)
Figure 02_image1097
將3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-羥基吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(290.00 mg，0.787 mmol，1.00當量)、2-(三丁基-λ5-亞膦基)乙腈(380.02 mg，1.575 mmol，2當量)及嘧啶-4-基甲醇(173.38 mg，1.575 mmol，2.00當量)於甲苯(2.00 mL)中之混合物在90℃下在氬氣氛圍下攪拌隔夜。將所得混合物在減壓下濃縮。所得混合物用EtOAc (3 x 30 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(2 x 30 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。粗產物(30 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Shield RP18 OBD管柱，30*150 mm，5μm；移動相A：水(0.1%FA)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：15% B至30% B/8 min；波長：254 nm；RT1(min)：6.2)，得到呈淡黃色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-[3-(嘧啶-4-基甲氧基)吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(2.7 mg，0.74%)。 LC-MS: (M+H)+實驗值461.30。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.88 (s, 1H), 9.30 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 8.88 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.06 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.62 - 7.53 (m, 2H), 7.37 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.19 - 7.13 (m, 1H), 6.64 (m, J = 8.3, 6.0 Hz, 1H), 6.50 (m, J = 10.9, 8.3, 1.5 Hz, 1H), 6.03 (m, J = 8.2, 1.3 Hz, 1H), 5.53 (s, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.46 (m, 2H), 2.96 (t, J = 6.8 Hz, 2H)。
實例 31 .2-[3-(1,2,3-苯并三唑-1-基甲氧基)吡啶-4-基]-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 479)
31.1. 合成 1-( 氯甲基 )-1,2,3- 苯并三唑
Figure 02_image1099
在室溫下在氮氣氛圍下向1,2,3-苯并三唑-1-基甲醇(150.00 mg，1.006 mmol，1.00當量)於亞硫醯氯(2.00 mL)中之攪拌混合物中添加一滴DMF。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌30分鐘。將所得混合物在50℃下在氮氣氛圍下攪拌隔夜。將所得混合物在減壓下濃縮。 LC-MS: (M+H)+實驗值168.00。
31.2. 合成 2-[3-(1,2,3- 苯并三唑 -1- 基甲氧基 ) 吡啶 -4- 基 ]-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1101
將3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-羥基吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(200.00 mg，0.543 mmol，1.00當量)、1-(氯甲基)-1,2,3-苯并三唑(136.49 mg，0.815 mmol，1.50當量)及Na 2CO 3(115.09 mg，1.086 mmol，2.00當量)於DMF (5.00 mL)中之混合物在室溫下在氬氣氛圍下攪拌2小時。所得混合物用EtOAc (3 x 30 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(2 x 30 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。所得混合物用DMF (2 mL)稀釋。粗產物(30 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Shield RP18 OBD管柱，30*150 mm，5μm；移動相A：水(0.1%FA)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：15% B至30% B/8 min；波長：254 nm；RT1(min)：6.2)，得到呈淡黃色固體狀之2-[3-(1,2,3-苯并三唑-1-基甲氧基)吡啶-4-基]-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(15.4 mg，5.68%)。 LC-MS: (M+H)+實驗值500.10。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.16 (s, 1H), 8.68 (s, 1H), 8.05 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.99 (dt, J = 8.5, 0.9 Hz, 1H), 7.90 (dt, J = 8.3, 1.0 Hz, 1H), 7.53 (m, 1H), 7.38 (m, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.19 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.11 - 7.06 (m, 1H), 6.85 (s, 2H), 6.49 - 6.39 (m, 2H), 5.33 - 5.24 (m, 1H), 3.86 (d, J = 0.8 Hz, 3H), 3.38 - 3.30 (m, 2H), 2.78 (t, J = 6.8 Hz, 2H)。
實例 32 .3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-[3-[(2-甲基吡唑-3-基)甲氧基]吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 480)
Figure 02_image1103
將3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-羥基吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(150.00 mg，0.407 mmol，1.00當量)、2-(三丁基-λ5-亞膦基)乙腈 (393.13 mg，1.628 mmol，4.00當量)及(2-甲基吡唑-3-基)甲醇(365.28 mg，3.256 mmol，8.00當量)於甲苯(5.00 mL)中之混合物在90℃下在氬氣氛圍下攪拌4小時。將所得混合物在減壓下濃縮。所得混合物用EtOAc (3 x 30 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(2 x 30 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。所得混合物用DMF (2 mL)稀釋。粗產物(30 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XSelect CSH Fluoro Phenyl，30*150 mm，5μm；移動相A：水(0.05%FA)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：17% B至20% B/10 min；波長：254 nm；RT1(min)：7.62)，得到呈淡黃色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-[3-[(2-甲基吡唑-3-基)甲氧基]吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(14.8 mg，4.52%)。 LC-MS: M+H實驗值：463.10。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.25 (s, 1H), 8.54 (s, 1H), 8.05 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.39 - 7.34 (m, 2H), 7.28 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.10 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 6.55 (td, J = 8.2, 6.0 Hz, 1H), 6.44 (m, J = 10.9, 8.3, 1.5 Hz, 1H), 6.33 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 5.87 (m, J = 8.2, 1.3 Hz, 1H), 5.41 (s, 2H), 3.84 (s, 3H), 3.75 (s, 3H), 3.50 - 3.35 (m, 2H), 2.83 (t, J = 6.8 Hz, 2H)。
實例 33 .3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-[咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 481)
Figure 02_image1105
將雙(3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-羥基吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮) (220.00 mg，0.299 mmol，1.00當量)、2-(三丁基-λ5-亞膦基)乙腈(288.29 mg，1.196 mmol，4.00當量)及咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基甲醇(88.49 mg，0.598 mmol，2.00當量)於甲苯(5.00 mL)中之混合物在90℃下在氬氣氛圍下攪拌隔夜。將所得混合物在減壓下濃縮。所得混合物用EtOAc (3 x 30 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(2 x 30 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。粗產物(30 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XSelect CSH Fluoro Phenyl，30*150 mm，5μm；移動相A：水(0.05%FA)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：17% B至20% B/10 min；波長：254 nm；RT1(min)：7.62)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-[咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(13.7 mg，9.09%)。 LC-MS: (M+H)+實驗值499.10。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.15 (s, 1H), 8.60 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 8.07 - 7.98 (m, 2H), 7.64 (dd, J = 35.9, 9.1 Hz, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.33 (dd, J = 8.3, 5.4 Hz, 2H), 7.15 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 6.96 (td, J = 6.8, 1.2 Hz, 1H), 6.62 (td, J = 8.3, 6.0 Hz, 1H), 6.49 (m, J = 10.0, 8.4, 1.5 Hz, 1H), 6.04 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 5.57 (s, 2H), 3.91 (s, 3H), 3.46 (m, 2H), 3.00 (t, J = 6.8 Hz, 2H)。
實例 34 .3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-[3-[(1-甲基咪唑-2-基)甲氧基]吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 482)
Figure 02_image1107
將3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-羥基吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(300.00 mg，0.814 mmol，1.00當量)、2-(三丁基-λ5-亞膦基)乙腈(393.13 mg，1.629 mmol，2.00當量)及(1-甲基咪唑-2-基)甲醇(182.64 mg，1.629 mmol，2.00當量)於甲苯(5.00 mL)中之混合物在90℃下在氬氣氛圍下攪拌隔夜。將所得混合物在減壓下濃縮。所得混合物用EtOAc (3 x 30 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(2 x 30 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由製備型TLC (DCM/MeOH 10:1)純化，得到呈黑色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-[3-[(1-甲基咪唑-2-基)甲氧基]吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(30 mg，7.71%)。所得混合物用DMF (2 mL)稀釋。粗產物(30 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：Xcelect CSH F-pheny OBD管柱，19*250 mm，5μm；移動相A：水(0.05%FA)，移動相B：ACN；流動速率：25 mL/min；梯度：2% B至18% B/9 min；波長：254 nm；RT1(min)：8.77)，得到呈淡黃色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-[3-[(1-甲基咪唑-2-基)甲氧基]吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(5 mg，1.29%)。 LC-MS: (M+Na)+實驗值485.20。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.60 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.03 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.32 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.22 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.16 - 7.11 (m, 1H), 7.00 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 6.64 (m, 1H), 6.50 (m, 1H), 6.00 (dt, J = 8.2, 1.2 Hz, 1H), 5.53 (s, 2H), 3.91 (d, J = 0.7 Hz, 3H), 3.66 (s, 3H), 3.44 (td, J = 6.9, 2.5 Hz, 2H), 2.92 (t, J = 6.8 Hz, 2H)。
實例 35 .3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-[3-[2-(呋喃-2-基)乙氧基]吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 483)
35.1. 合成 3-[2-( 呋喃 -2- 基 ) 乙氧基 ] 吡啶 -4- 甲腈
Figure 02_image1109
在0℃下向2-(呋喃-2-基)乙醇(112 mg，1.00 mmol，1.00當量)於DMF (2 mL)中之混合物中添加NaH (48 mg，2.00 mmol，2.00當量)且攪拌0.5小時。向混合物中添加3-氯吡啶-4-甲腈(139 mg，1.00 mmol，1.00當量)且在室溫下在氮氣氛圍下攪拌2小時。反應在室溫下用水淬滅。所得混合物用EtOAc (3 x 15mL)萃取。合併之有機層用鹽水(1x10 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由製備型TLC (DCM /MeOH 20:1)純化，得到呈淡黃色固體狀之3-[2-(呋喃-2-基)乙氧基]吡啶-4-甲腈(172 mg，80.03%)。 LC-MS: (M+H)+實驗值：215.2。
35.2. 合成 1-[3-[2-( 呋喃 -2- 基 ) 乙氧基 ] 吡啶 -4- 基 ] 甲胺
Figure 02_image1111
將3-[2-(呋喃-2-基)乙氧基]吡啶-4-甲腈(172 mg，0.80 mmol，1.00當量)及雷尼鎳(275 mg，3.21 mmol，4.00當量)於NH 3(5 mL，7M/MEOH)及MeOH (5 mL)中之溶液在室溫下在氫氣氛圍下攪拌2小時。過濾所得混合物，用MeOH (1x10 mL)洗滌濾餅。在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由製備型TLC (DCM/MeOH 1:1)純化，得到呈淺黃色油狀物之1-[3-[2-(呋喃-2-基)乙氧基]吡啶-4-基]甲胺(130 mg，74.19%)。 LC-MS: (M+H)+實驗值219.1。
35.3. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基甲硫醯基 ]-4-[([3-[2-( 呋喃 -2- 基 ) 乙氧基 ] 吡啶 -4- 基 ] 甲基 ) 胺基 ]-2- 側氧基 -5,6- 二氫吡啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1113
將1-[3-[2-(呋喃-2-基)乙氧基]吡啶-4-基]甲胺(120 mg，0.55 mmol，1.00當量)及3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-4-羥基-2-側氧基-5,6-二氫吡啶-1-甲酸三級丁酯(217 mg，0.55 mmol，1.00當量)、PyBOP (371 mg，0.71 mmol，1.30當量)、DIEA (213 mg，1.65 mmol，3.00當量)於DMF (5 mL)中之溶液在室溫下在氮氣氛圍下攪拌隔夜。所得混合物用EtOAc (3 x 20mL)萃取。合併之有機層用鹽水(1x10 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由製備型TLC (PE/EtOAc 1:1)純化，得到呈黃色油狀物之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-4-[([3-[2-(呋喃-2-基)乙氧基]吡啶-4-基]甲基)胺基]-2-側氧基-5,6-二氫吡啶-1-甲酸三級丁酯(75 mg，22.86%)。 LC-MS: (M+H)+實驗值597.2。
35.4. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-[3-[2-( 呋喃 -2- 基 ) 乙氧基 ] 吡啶 -4- 基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1115
將3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-4-[([3-[2-(呋喃-2-基)乙氧基]吡啶-4-基]甲基)胺基]-2-側氧基-5,6-二氫吡啶-1-甲酸三級丁酯(75 mg，0.12 mmol，1.00當量)及H 2O 2(30%) (8 mg，0.25 mmol，2.00當量)、TFA (57 mg，0.50 mmol，4.00當量)中之溶液在60℃下在氮氣氛圍下攪拌2小時。反應在室溫下用飽和NaHSO3 (水溶液)淬滅。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由逆相急驟在以下條件下純化(MeCN/H2O=45%)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-[3-[2-(呋喃-2-基)乙氧基]吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(7.7 mg，13.25%)。 LC-MS: (M+H)+實驗值463.1。 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 10.91 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.04 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.58 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.31 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.13 (s, 1H), 6.61 (td, J = 8.3, 6.0 Hz, 1H), 6.53 - 6.42 (m, 1H), 6.40 (dd, J = 3.2, 1.9 Hz, 1H), 6.26 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 5.96 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 4.39 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 3.90 (s, 3H), 3.42 (dt, J = 6.5, 4.0 Hz, 2H), 3.21 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 2.86 (t, J = 6.8 Hz, 2H)。
實例36. 3-[(3-氟-2-甲基苯基)胺基]-2-(3-[[(2S)-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]甲氧基]吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 467)
36.1. 合成 (2S)-2-[[(4- 氰基吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 ] 吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1117
在0℃下在N 2氛圍下向(2S)-2-(羥基甲基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(5.00 g，24.843 mmol，1.00當量)於DMF (43.03 mL，588.651 mmol，22.38當量)中之攪拌溶液/混合物中逐滴/分批添加NaH (1.19 g，29.811 mmol，1.20當量，60%)。將所得混合物在0℃下再攪拌0.5小時。隨後將3-氯吡啶-4-甲腈(4.13 g，29.811 mmol，1.20當量)添加至混合物中。將混合物在25℃下攪拌10小時。在0℃下藉由添加H 2O (100 mL)淬滅反應。所得混合物用EA (50 mL x 3)萃取。合併之有機層用紅酒(30 mL x 3)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE: EA (2:1 ~ 1:1)溶離得到呈黃色油狀物之(2S)-2-[[(4-氰基吡啶-3-基)氧基]甲基]吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(3.4 mg，0.04%)。 LC-MS: M-56+H實驗值：248。
36.2. 合成 (2S)-2-([[4-( 胺基甲基 ) 吡啶 -3- 基 ] 氧基 ] 甲基 ) 吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1119
將(2S)-2-[[(4-氰基吡啶-3-基)氧基]甲基]吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(3.00 g，9.889 mmol，1.00當量)於NH3 (g)於MeOH (50.00 mL)中之溶液添加雷尼鎳(0.08 g，0.989 mmol，0.1當量)。混合物用H2處理。將混合物在25℃下攪拌10小時。過濾所得混合物，用MeOH (20 mL x 3)洗滌濾餅。在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用DCM: MeOH (10:1 ~ 3:1)溶離得到呈黃色油狀物之(2S)-2-([[4-(胺基甲基)吡啶-3-基]氧基]甲基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(1.9 g，62.50%)。 LC-MS: (M+H)+實驗值：308.0。
36.3. 合成 (2S)-2-[([4-[([3-[(3- 氟 -2- 甲基苯基 ) 胺基甲硫醯基 ]-2- 側氧基 -5,6- 二氫 -1H- 吡啶 -4- 基 ] 氧基 ) 甲基 ] 吡啶 -3- 基 ] 氧基 ) 甲基 ] 吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1121
將N-(3-氟-2-甲基苯基)-4-羥基-2-側氧基-5,6-二氫-1H-吡啶-3-硫代甲醯胺(600.00 mg，2.140 mmol，1.00當量)及(2S)-2-([[4-(胺基甲基)吡啶-3-基]氧基]甲基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(986.92 mg，3.211 mmol，1.50當量)於DMA (2.40 mL，27.549 mmol，12.06當量)中之攪拌溶液/混合物在120℃下攪拌3小時。所得混合物用EA (30 mL x 3)萃取。合併之有機層用紅酒(30 mL x 3)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用DCM: MeOH (20:1 ~ 10:1)溶離得到呈黃色固體狀之(2S)-2-[([4-[([3-[(3-氟-2-甲基苯基)胺基甲硫醯基]-2-側氧基-5,6-二氫-1H-吡啶-4-基]氧基)甲基]吡啶-3-基]氧基)甲基]吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(400 mg，32.75%)。 LC-MS: (M+H)+實驗值570。
36.4. 合成 (2S)-2-[[(4-[3-[(3- 氟 -2- 甲基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ] 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 ] 吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1123
向(2S)-2-[([4-[([3-[(3-氟-2-甲基苯基)胺基甲硫醯基]-2-側氧基-5,6-二氫-1H-吡啶-4-基]胺基)甲基]吡啶-3-基]氧基)甲基]吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(400.00 mg，0.702 mmol，1.00當量)於MeOH (20.00 mL，624.184 mmol，703.55當量)中之攪拌溶液/混合物中逐滴添加H2O2(30%) (398.04 mg，3.510 mmol，5.00當量，30%)及TFA (200.15 mg，1.755 mmol，2.50當量)。將混合物在80℃下攪拌3小時。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用DCM: MeOH (30:1 ~ 10:1)溶離得到呈黃色固體狀之(2S)-2-[[(4-[3-[(3-氟-2-甲基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]吡啶-3-基)氧基]甲基]吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(100 mg，26.59%)。 LC-MS: (M+H)+實驗值536。
36.5. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲基苯基 ) 胺基 ]-2-[3-[(2S)- 吡咯啶 -2- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1125
在25℃下向(2S)-2-[[(4-[3-[(3-氟-2-甲基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]吡啶-3-基)氧基]甲基]吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(100 mg，1當量)於DCM (6 mL)中之攪拌溶液/混合物中逐滴添加TFA (2 mL)。將混合物在25℃下攪拌2小時。在真空下濃縮所得混合物。混合物/殘餘物用NaHCO 3(20 mL)酸化至pH為8-10。水層用EA (30 mL x 3)萃取。合併之有機物在真空下濃縮得到呈黃色固體狀之3-[(3-氟-2-甲基苯基)胺基]-2-[3-[(2S)-吡咯啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(70 mg，86.09%)。 LC-MS: (M+H)+實驗值436。
36.6. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-[[(2S)-1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 吡咯啶 -2- 基 ] 甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1127
在0℃下向3-[(3-氟-2-甲基苯基)胺基]-2-[3-[(2S)-吡咯啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100.00 mg，0.230 mmol，1.00當量)於THF (5.00 mL，61.715 mmol，109.44當量)及NaHCO 3(5 mL)中之混合物中逐滴添加丙烯醯氯(41.57 mg，0.459 mmol，2當量)。將混合物在0℃下攪拌1小時。所得混合物用EA (30ml x 3)萃取。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由製備型TLC (PE: EA = 10:1)純化，得到粗產物。粗產物藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：Xselect CSH OBD管柱 30*150mm 5 um, n；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：15 B至35 B/8 min；波長：254/220 nm)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氟-2-甲基苯基)胺基]-2-(3-[[(2S)-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]甲氧基]吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(14.8 mg，12.51%)。 LC-MS: (M+H)+實驗值490。 H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.29 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.29 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 7.18 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 6.73 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.63 (dd, J = 16.7, 10.4 Hz, 1H), 6.44 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 6.20 (d, J = 17.2 Hz, 1H), 6.11 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 5.70 (s, 1H), 4.65 (s, 1H), 4.34 (s, 1H), 4.18 (s, 1H), 3.64 (s, 2H), 3.49 - 3.44 (m, 2H), 2.98 (s, 2H), 2.21 (s, 3H), 2.03 (m, 2H), 1.93 (m, 3H)。
實例37 . 3-[(3- 氟 -2- 甲基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-[[(2R)-1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 哌啶 -2- 基 ] 甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮 ( 化合物 468)
37.1. 合成 (2R)-2-[[(4- 氰基吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 ] 哌啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1129
在0℃下向3-氯吡啶-4-甲腈(2.00 g，14.435 mmol，1.00當量)，(2R)-2-(羥基甲基)哌啶-1-甲酸三級丁酯(3.73 g，17.322 mmol，1.2當量)於DMF (40.00 mL)中之溶液中添加NaH (692.82 mg，17.322 mmol，1.2當量，60%)。將混合物在室溫下攪拌12小時。反應混合物用水(100 mL)淬滅且用EA (3*100 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(2*30 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE:EA (1:1)溶離得到呈棕色油狀物之(2R)-2-[[(4-氰基吡啶-3-基)氧基]甲基]哌啶-1-甲酸三級丁酯(2.5 g，54.57%)。 LC-MS: M+H實驗值：318。
37.2. 合成 (2R)-2-([[4-( 胺基甲基 ) 吡啶 -3- 基 ] 氧基 ] 甲基 ) 哌啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1131
在氮氣氛圍下向(2R)-2-[[(4-氰基吡啶-3-基)氧基]甲基]哌啶-1-甲酸三級丁酯(2.50 g，7.877 mmol，1.00當量)於NH3(g)/MeOH (50.00 mL)中之溶液中添加雷尼鎳(0.92 g，15.754 mmol，2.00當量)。將混合物在室溫下使用氫氣球在氫氣氛圍下氫化12小時，通過矽藻土墊過濾且在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用DCM:MeOH(8:1)溶離得到呈黃色固體狀之(2R)-2-([[4-(胺基甲基)吡啶-3-基]氧基]甲基)哌啶-1-甲酸三級丁酯(1.2 g，47.40%)。 LC-MS: M+H實驗值：322。
37.3. 合成 (2R)-2-[([4-[([3-[(3- 氟 -2- 甲基苯基 ) 胺基甲硫醯基 ]-2- 側氧基 -5,6- 二氫 -1H- 吡啶 -4- 基 ] 氧基 ) 甲基 ] 吡啶 -3- 基 ] 氧基 ) 甲基 ] 哌啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1133
將(2R)-2-([[4-(胺基甲基)吡啶-3-基]氧基]甲基)哌啶-1-甲酸三級丁酯(800.00 mg，2.489 mmol，1.00當量)及N-(3-氟-2-甲基苯基)-4-羥基-2-側氧基-5,6-二氫-1H-吡啶-3-硫代甲醯胺(558.16 mg，1.991 mmol，0.80當量)於DMA(5.00 mL)中之溶液在80℃下攪拌2小時。反應用水(50 mL)淬滅，用EA (3 x 30 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(2x10mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由製備型TLC (DCM:MeOH=20:1)純化，得到呈黃色油狀物之(2R)-2-[([4-[([3-[(3-氟-2-甲基苯基)胺基甲硫醯基]-2-側氧基-5,6-二氫-1H-吡啶-4-基]氧基)甲基]吡啶-3-基]氧基)甲基]哌啶-1-甲酸三級丁酯(580 mg，32.88%)。 LC-MS: M+H實驗值：585。
37.4. 合成 (2R)-2-[[(4-[3-[(3- 氟 -2- 甲基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ] 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 ] 哌啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1135
在室溫下向(2R)-2-[([4-[([3-[(3-氟-2-甲基苯基)胺基甲硫醯基]-2-側氧基-5,6-二氫-1H-吡啶-4-基]氧基)甲基]吡啶-3-基]氧基)甲基]哌啶-1-甲酸三級丁酯(580.00 mg，0.992 mmol，1.00當量)於MeOH (6.00 mL)，H 2O 2(30%) (57.36 mg，1.686 mmol，1.70當量)中之攪拌溶液中添加TFA (113.10 mg，0.992 mmol，1當量)。將所得混合物在80℃下攪拌2小時。混合物藉由製備型TLC (DCM:MeOH=20:1)純化，得到呈黃色固體狀之(2R)-2-[[(4-[3-[(3-氟-2-甲基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]吡啶-3-基)氧基]甲基]哌啶-1-甲酸三級丁酯(130 mg，23.84%)。 LC-MS: M+H實驗值：550。
37.5. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲基苯基 ) 胺基 ]-2-[3-[(2R)- 哌啶 -2- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1137
將(2R)-2-[[(4-[3-[(3-氟-2-甲基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]吡啶-3-基)氧基]甲基]哌啶-1-甲酸三級丁酯(240.00 mg)於DCM (6.00 mL)中之溶液添加TFA (2.00 mL)且在室溫下攪拌2小時。將所得混合物在減壓下濃縮得到呈棕色半固體狀之3-[(3-氟-2-甲基苯基)胺基]-2-[3-[(2R)-哌啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(180 mg，粗品)。 LC-MS: M+H實驗值：450
37.6. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-[[(2R)-1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 哌啶 -2- 基 ] 甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1139
在0℃下向3-[(3-氟-2-甲基苯基)胺基]-2-[3-[(2R)-哌啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(70.00 mg，0.156 mmol，1.00當量)於THF (4.00 mL)中之溶液中添加NaHCO3 (2.00 mL)。將混合物攪拌5分鐘。添加丙烯醯氯(42.28 mg，0.467 mmol，3.00當量)且使混合物升溫至室溫且攪拌1小時。反應混合物用水(25mL)淬滅且用EA (3*25 mL)萃取。殘留物藉由製備型TLC (DCM:MeOH 10:1)純化，得到粗產物。粗產物藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：YMC-Actus Triart C18 ExRS, 30*150 mm, 5μm；移動相A：水(10MMOL/L NH4HCO3+0.1%NH3.H2O)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：28% B至61% B/7 min；波長：254 nm；RT1(min)：6.88;)，得到呈淡黃色固體狀之3-[(3-氟-2-甲基苯基)胺基]-2-(3-[[(2R)-1-(丙-2-烯醯基)哌啶-2-基]甲氧基]吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(10.1 mg，12.78%)。 LC-MS: M+H實驗值：504 1H NMR  (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.82 (s, 1H), 8.44 (s, 1H), 7.98 - 7.93 (m, 1H), 7.30 (d, J = 12.9 Hz, 2H), 6.99 (s, 1H), 6.75 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.46 (t, J = 8.7 Hz, 1H), 6.06 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 5.72-5.56 (m, , 1H), 5.39-5.11 (m, , 1H),4.72 (m, 1H), 4.79-4.65 (m, 2H), 3.44 (dt, J = 7.4, 4.3 Hz, 2H), 3.05-2.90 (m, 3H), 2.21 (s, 3H), 1.89-1.78 (m, 1H), 1.78 - 1.55 (m, 4H), 1.52-1.37 (m, 1H)。
實例 38.3-[(3-氟-2-甲基苯基)胺基]-2-[3-[(2S)-哌啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 469)
38.1. 合成 (2S)-2-[[(4- 氰基吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 ] 哌啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1141
在0℃下向3-氯吡啶-4-甲腈(1.23 g，8.878 mmol，1.00當量)及(2S)-2-(羥基甲基)哌啶-1-甲酸三級丁酯(2.29 g，10.653 mmol，1.2當量)於DMF (30.00 mL)中之溶液中添加NaH (426.09 mg，10.653 mmol，1.2當量，60%)。在室溫下攪拌隔夜後。水層用EA (3x50mL)萃取。所得混合物用2x30 mL飽和鹽水洗滌。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE:EA (1:1)溶離得到呈淺橘色油狀物之(2S)-2-[[(4-氰基吡啶-3-基)氧基]甲基]哌啶-1-甲酸三級丁酯(2.3 g，81.63%)。 LC-MS: M+H實驗值：318.10
38.2. 合成 (2S)-2-([[4-( 胺基甲基 ) 吡啶 -3- 基 ] 氧基 ] 甲基 ) 哌啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1143
在氮氣氛圍下向雷尼鎳(7.40 g，126.028 mmol，10.00當量)於NH3(g)/MeOH (100.00 mL)中之溶液中添加(2S)-2-[[(4-氰基吡啶-3-基)氧基]甲基]哌啶-1-甲酸三級丁酯(4.00 g，12.603 mmol，1.00當量)。將混合物在室溫下使用氫氣球在氫氣氛圍下氫化隔夜。藉由過濾收集所沈澱之固體。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用DCM:MeOH (7:1)溶離得到呈淡黃色固體狀之(2S)-2-([[4-(胺基甲基)吡啶-3-基]氧基]甲基)哌啶-1-甲酸三級丁酯(2.04 g，50.36%)。 LC-MS: M+H實驗值：322
38.3. 合成 (2S)-2-[([4-[([3-[(3- 氟 -2- 甲基苯基 ) 胺基甲硫醯基 ]-2- 側氧基 -5,6- 二氫 -1H- 吡啶 -4- 基 ] 氧基 ) 甲基 ] 吡啶 -3- 基 ] 氧基 ) 甲基 ] 哌啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1145
將(2S)-2-([[4-(胺基甲基)吡啶-3-基]氧基]甲基)哌啶-1-甲酸三級丁酯(997.56 mg，3.104 mmol，1.50當量)及N-(3-氟-2-甲基苯基)-4-羥基-2-側氧基-5,6-二氫-1H-吡啶-3-硫代甲醯胺(580.00 mg，2.069 mmol，1.00當量)於DMA (6.00 mL)中之溶液在120℃下攪拌2小時。水層用EA (3x50mL)萃取。殘留物用飽和鹽水(2x50mL)洗滌。殘留物藉由製備型TLC (DCM:MeOH 20:1)純化，得到呈黃色固體狀之(2S)-2-[([4-[([3-[(3-氟-2-甲基苯基)胺基甲硫醯基]-2-側氧基-5,6-二氫-1H-吡啶-4-基]氧基)甲基]吡啶-3-基]氧基)甲基]哌啶-1-甲酸三級丁酯(570 mg，47.12%)。 LC-MS: M+H實驗值：585
38.4. 合成 (2S)-2-[[(4-[3-[(3- 氟 -2- 甲基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ] 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 ] 哌啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1147
將(2S)-2-[([4-[([3-[(3-氟-2-甲基苯基)胺基甲硫醯基]-2-側氧基-5,6-二氫-1H-吡啶-4-基]氧基)甲基]吡啶-3-基]氧基)甲基]哌啶-1-甲酸三級丁酯(500.00 mg，0.855 mmol，1.00當量)及H 2O 2(164.83 mg，1.454 mmol，1.7當量，30%)、TFA (97.50 mg，0.855 mmol，1當量)於MeOH (6.00 mL)中之溶液在80℃下攪拌2小時。殘留物藉由製備型TLC (DMC:MeOH 15:1)純化，得到呈橘色固體狀之(2S)-2-[[(4-[3-[(3-氟-2-甲基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]吡啶-3-基)氧基]甲基]哌啶-1-甲酸三級丁酯(150 mg，31.91%)。 LC-MS: M+H實驗值：550
38.5. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-[[(2S)-1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 哌啶 -2- 基 ] 甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1149
將3-[(3-氟-2-甲基苯基)胺基]-2-[3-[(2S)-哌啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(150.00 mg)於TFA (1.00 mL)及DCM (3.00 mL)中之溶液在室溫下攪拌2小時。所得固體在氮氣氛圍下乾燥。此產生呈橘色固體狀之3-[(3-氟-2-甲基苯基)胺基]-2-(3-[[(2S)-1-(丙-2-烯醯基)哌啶-2-基]甲氧基]吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100 mg)。 LC-MS: M+H實驗值：450.10。
38.6. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲基苯基 ) 胺基 ]-2-[3-[(2S)- 哌啶 -2- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1151
在0℃下向(2S)-2-[[(4-[3-[(3-氟-2-甲基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]吡啶-3-基)氧基]甲基]哌啶-1-甲酸三級丁酯(60.00 mg，0.109 mmol，1.00當量)於THF (4.00 mL)中之溶液中添加NaHCO 3(2.00 mL，0.024 mmol，0.22當量)。將混合物攪拌5分鐘，添加丙烯醯氯(29.64 mg，0.327 mmol，3.00當量)且使混合物升溫至室溫且攪拌1小時。用水(25mL)淬滅反應混合物且用EA (3*25 mL)萃取。殘留物藉由製備型TLC (DCM:MeOH 10:1)純化，得到粗產物。粗產物藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：YMC-Actus Triart C18 ExRS，30*150 mm, 5μm；移動相A：水(10MMOL/L NH4HCO3+0.1%NH3.H2O)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：28% B至61% B/7 min；波長：254 nm；RT1(min)：6.88;)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氟-2-甲基苯基)胺基]-2-[3-[(2S)-哌啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(4.7 mg，9.58%)。 LC-MS: (M+H)+實驗值504.25 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.76 (s, 1H), 8.43 (s, 1H), 7.95 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.30 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.22 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 6.75 (q, J = 10.0, 8.4 Hz, 2H), 6.45 (t, J = 8.9 Hz, 1H), 6.08 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.04 (d, J = 16.7 Hz, 1H), 5.62 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 4.25-4.90 (m, 1H), 4.66 (s, 1H), 4.18-4.01 (m, 2H), 3.49-3.42 (m, 3H), 3.05-2.99 (m, 2H), 2.21 (s, 3H), 1.89-1.80 (m, 1H), 1.71-1.61 (m, 4H),1.48-1.42 (m, 1H)。
實例 39.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-[[(2S)-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基]吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 145b)
39.1. 合成 (2S)-2-{[(4- 氰基吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 } 氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1153
在0℃下在氮氣氛圍下向(2S)-2-(羥基甲基)氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(2.70 g，14.436 mmol，1當量)於DMF中之攪拌溶液中分批添加NaH (415.69 mg，17.323 mmol，1.2當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌0.5小時。在0℃下向上述混合物中分批添加3-氯吡啶-4-甲腈(1.80 g，12.992 mmol，0.9當量)。將所得混合物在室溫下再攪拌16小時。反應在室溫下用水/冰淬滅。所得混合物用DCM (4 x 20 mL)萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EtOAc (1:1)溶離得到呈黃色油狀物之(2S)-2-{[(4-氰基吡啶-3-基)氧基]甲基}氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(3.3 g，79.01%)。 LC-MS: M+H實驗值：290
39.2. 合成 (2S)-2-({[4-( 胺基甲基 ) 吡啶 -3- 基 ] 氧基 } 甲基 ) 氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1155
在室溫下在氫氣氛圍下向(2S)-2-{[(4-氰基吡啶-3-基)氧基]甲基}氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(3.3 g，11.405 mmol，1.00當量) 於NH3(g)/MeOH (50.00 mL)中之攪拌溶液中添加雷尼鎳(9.77 g，114.050 mmol，10當量)。將所得混合物在室溫下在氫氣氛圍下攪拌隔夜。過濾所得混合物，用MeOH洗滌濾餅。在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由製備型TLC (DCM/MeOH 10:1)純化，得到呈黃色油狀物之(2S)-2-({[4-(胺基甲基)吡啶-3-基]氧基}甲基)氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(2.7 g，80.69%)。 LC-MS: M+H實驗值：294
39.3. 合成 (2S)-2-[({4-[({3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基甲硫醯基 ]-2- 側氧基 -5,6- 二氫 -1H- 吡啶 -4- 基 } 胺基 ) 甲基 ] 吡啶 -3- 基 } 氧基 ) 甲基 ] 氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1157
向8 mL圓底燒瓶中添加於DMA (3 mL，32.266 mmol，11.21當量)中之(2S)-2-({[4-(胺基甲基)吡啶-3-基]氧基}甲基)氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(1013.00 mg，3.454 mmol，1.2當量)及N-(3-氯-2-甲氧基苯基)-4-羥基-2-側氧基-5,6-二氫-1H-吡啶-3-硫代甲醯胺(900 mg，2.878 mmol，1.00當量)。將所得混合物在120℃下在氮氣氛圍下攪拌2小時。所得混合物用CH2Cl2萃取且藉由製備型TLC (DCM/MeOH 10:1)純化，得到呈黃色固體狀之(2S)-2-[({4-[({3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-2-側氧基-5,6-二氫-1H-吡啶-4-基}胺基)甲基]吡啶-3-基}氧基)甲基]氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(550 mg，32.50%)。 LC-MS: M+H實驗值：588
39.4. 合成 (2S)-2-{[(4-{3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 } 氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1159
在室溫下在氮氣氛圍下向(2S)-2-[({4-[({3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-2-側氧基-5,6-二氫-1H-吡啶-4-基}胺基)甲基]吡啶-3-基}氧基)甲基]氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(300 mg，0.510 mmol，1當量)於MeOH中之攪拌溶液中添加過氧化氫(35%) (26.03 mg，0.765 mmol，1.5當量)。將所得混合物在80℃下在氮氣氛圍下攪拌2小時。所得混合物用CH2Cl2 (3 x 10mL)萃取。合併之有機層在減壓下濃縮。殘留物藉由製備型TLC (CH2Cl2/MeOH 10:1)純化，得到呈黃色固體狀之(2S)-2-{[(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(120 mg，42.46%)。 LC-MS: M+H實驗值：554
39.5. 合成 2-{3-[(2S)- 氮雜環丁烷 -2- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 }-3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1161
向(2S)-2-{[(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(110 mg，0.199 mmol，1當量)於DCM (1 mL)中之攪拌溶液中添加TFA (0.50 mL)。將所得混合物在室溫下在空氣氛圍下攪拌2小時。在真空下濃縮所得混合物。殘留物藉由製備型TLC (DCM/MeOH 5:1)純化，得到呈黃色油狀物之2-{3-[(2S)-氮雜環丁烷-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(85 mg，94.31%)。 LC-MS: M+H實驗值：454。
39.6. 合成 [(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-[[(2S)-1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 氮雜環丁烷 -2- 基 ] 甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1163
在室溫下向2-[3-[(2S)-氮雜環丁烷-2-基甲氧基]吡啶-4-基]-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100.00 mg，0.220 mmol，1.00當量)於THF (1.00 mL)中之攪拌混合物中分批添加飽和NaHCO3 (1 mL)及丙烯醯氯(29.91 mg，0.330 mmol，1.50當量)持續10分鐘。所得混合物用EA (3 x 10ml)萃取。合併之有機層用EA (3x5ml)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。粗產物藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：Poroshell HPH C18 3.0*50 mm, 2.7um；移動相A:Water/ 6.5 mM NH 4HCO 3(PH=10)；移動相B: ACN；流動速率：1.2 mL/min；梯度:10%B至95%B/1.1min, 保持0.6 min; 254nm)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-[[(2S)-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基]吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(24.8 mg，22.16%)。 LC-MS: M+H實驗值：508 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.60 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 7.98 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.34 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.78 (s, 1H), 6.71 - 6.58 (m, 2H), 6.33 (dd, J = 16.9, 10.3 Hz, 1H), 6.17 (dd, J = 6.8, 2.8 Hz, 2H), 5.68 (s, 1H), 4.84 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 4.56 - 4.45 (m, 1H), 4.42 (dd, J = 10.7, 2.9 Hz, 1H), 4.15 (s, 2H), 3.91 (s, 3H), 3.44 (td, J = 6.9, 2.5 Hz, 2H), 2.94 (s, 2H), 2.52 (m, 1H), 2.15 (m, 1H)。
實例 40.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-[3-(2-甲磺醯基乙氧基)吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 137)
40.1. 合成 3-[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 吡啶 -4- 甲腈
Figure 02_image1165
在0℃下向2-(三甲基矽基)乙醇(6.83 g，57.741 mmol，2.00當量)於THF (100.00 mL)中之溶液中添加NaH (2.31 g，57.741 mmol，2.00當量，60%)。將混合物攪拌1小時。添加3-氯吡啶-4-甲腈(4.00 g，28.870 mmol，1.00當量)且使混合物升溫至50℃下且攪拌16小時。反應混合物用水(100 mL)淬滅且用EA (3*100 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(1x50 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE:EA (2:1)溶離得到呈黃色油狀物之3-[2-(三甲基矽基)乙氧基]吡啶-4-甲腈(4.3 g，67.59%)。 LC-MS: M+H實驗值：221
40.2. 合成 3- 羥基吡啶 -4- 甲腈
Figure 02_image1167
在0℃下向3-[2-(三甲基矽基)乙氧基]吡啶-4-甲腈(4.30 g，19.515 mmol，1.00當量)於THF (50.00 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加TBAF (10.20 g，39.029 mmol，2當量)。將反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應混合物用H 2O (100 mL)稀釋。所得混合物用EA (3 x 100 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(1x50 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用DCM:MeOH (10:1)溶離得到呈白色固體狀之3-羥基吡啶-4-甲腈(2 g，85.33%)。 LC-MS: M+H實驗值：121。
40.3. 合成 4-( 胺基甲基 ) 吡啶 -3- 醇
Figure 02_image1169
在氮氣氛圍下向雷尼鎳(1.03 g，17.484 mmol，1.00當量)於NH3(g)/MeOH (100.00 mL)中之溶液中添加3-羥基吡啶-4-甲腈(2.10 g，17.484 mmol，1.00當量)。將混合物在室溫下使用氫氣球在氫氣氛圍下氫化16小時，通過矽藻塗墊過濾且在減壓下濃縮得到呈灰色固體狀之4-(胺基甲基)吡啶-3-醇(1.8 g，82.93%)。 LC-MS: M+H實驗值：125。
40.4. 合成 N-(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 )-4-[[(3- 羥基吡啶 -4- 基 ) 甲基 ] 胺基 ]-2- 側氧基 -5,6- 二氫 -1H- 吡啶 -3- 硫代甲醯胺
Figure 02_image1171
在室溫下向N-(3-氯-2-甲氧基苯基)-4-羥基-2-側氧基-5,6-二氫-1H-吡啶-3-硫代甲醯胺(0.80 g，2.558 mmol，1.00當量)及4-(胺基甲基)吡啶-3-醇(0.63 g，5.090 mmol，1.99當量)於DMA (10.00 mL)中之攪拌溶液中。將所得混合物在120℃下攪拌2小時。反應混合物用H 2O (100 mL)稀釋。所得混合物用EA (3 x 100 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(1x50 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由製備型TLC (DCM:MeOH=15:1)純化，得到呈棕色油狀物之N-(3-氯-2-甲氧基苯基)-4-[[(3-羥基吡啶-4-基)甲基]胺基]-2-側氧基-5,6-二氫-1H-吡啶-3-硫代甲醯胺(600 mg，56.00%)。 LC-MS: M+H實驗值：419
40.5. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3- 羥基吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1173
在室溫下向N-(3-氯-2-甲氧基苯基)-4-[[(3-羥基吡啶-4-基)甲基]胺基]-2-側氧基-5,6-二氫-1H-吡啶-3-硫代甲醯胺(600.00 mg，1.432 mmol，1.00當量)於MeOH (8.00 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加H 2O 2(82.82 mg，2.435 mmol，1.7當量)及TFA (163.32 mg，1.432 mmol，1當量)。將所得混合物在80℃下攪拌2小時。反應混合物用H2O (100 mL)稀釋。所得混合物用EA (3 x 100 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(1x50 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由製備型TLC (DCM:MeOH=10:1)純化，得到呈棕色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-羥基吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(300 mg，54.43%)。 LC-MS: M+H實驗值：385
40.6. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-[3-(2- 甲磺醯基乙氧基 ) 吡啶 -4- 基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1175
在室溫下在N2氛圍下向3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-羥基吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100.00 mg，0.260 mmol，1.00當量)及2-甲磺醯基乙醇(64.52 mg，0.520 mmol，2.00當量)於甲苯(2.00 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加2-(三丁基-λ5-亞膦基)乙腈(125.44 mg，0.520 mmol，2當量)。將所得混合物在N2氛圍下在100℃下攪拌兩天。反應混合物用H 2O (30 mL)稀釋。所得混合物用EA (3 x 50 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(1x30 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由製備型TLC (DCM:MeOH=5:1)純化，得到粗產物。粗產物(30 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：YMC-Actus Triart C18, 30*150 mm, 5μm；移動相A：水(10MMOL/L NH4HCO3+0.1%NH3.H2O)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：25% B至35% B/8 min；波長：254 nm；RT1(min)：8.05)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-[3-(2-甲磺醯基乙氧基)吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(8.4 mg，6.54%)。 LC-MS: M+H實驗值：491 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 14.06 (s, 1H), 7.68 (s, 2H), 7.49 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 7.26 - 7.07 (m, 2H), 6.96 - 6.70 (m, 2H), 6.19 (dd, J = 7.3, 2.4 Hz, 1H), 4.55 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 3.92 (s, 3H), 3.85 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 3.39 (t,J = 6.9 Hz, 2H), 3.02 (s, 3H), 2.91 (t, J = 6.9 Hz, 2H)。
實例 41. 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-[3-( 呋喃 -2- 基甲氧基 ) 吡啶 -4- 基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮 ( 化合物 471)
Figure 02_image1177
在室溫下在N2氛圍下向3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-羥基吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100.00 mg，0.260 mmol，1.00當量)及糠醇(50.99 mg，0.520 mmol，2.00當量)於甲苯(2.00 mL，18.798 mmol，72.34當量)中之攪拌溶液中逐滴添加2-(三丁基-λ5-亞膦基)乙腈(125.44 mg，0.520 mmol，2當量)。將所得混合物在N2氛圍下在100℃下攪拌兩天。反應混合物用H 2O (30 mL)稀釋。所得混合物用EA (3 x 50 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(1x30 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由製備型TLC (DCM:MeOH=10:1)純化，得到粗產物。粗產物(60 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Shield RP18 OBD管柱，30*150 mm, 5μm；移動相A：水(10MMOL/L NH4HCO3+0.1%NH3.H2O)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：31% B至41% B/8 min；波長：254 nm；RT1(min)：7.13)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-[3-(呋喃-2-基甲氧基)吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(14.3 mg，11.60%)。LC-MS: M+H實驗值：465 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 14.04 (s, 1H), 7.71 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.56 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.51 - 7.41 (m, 1H), 7.21 - 7.09 (m, 2H), 6.86 - 6.73 (m, 2H), 6.68 (d, J = 3.3 Hz, 1H), 6.53 - 6.46 (m, 1H), 6.19 (dd, J = 7.6, 2.1 Hz, 1H), 5.39 (s, 2H), 3.92 (s, 3H), 3.48 - 3.39 (t, 2H), 2.90 (t, J = 6.8 Hz, 2H)。
實例 42.3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-[3-[(1-甲基吡唑-4-基)氧基]吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 484)
42.1. 合成 2-[(3- 溴吡啶 -4- 基 ) 甲基 ] 異吲哚 -1,3- 二酮
Figure 02_image1179
在室溫下在N2氛圍下向(3-溴吡啶-4-基)甲醇(2000 mg，10.637 mmol，1.00當量)及鄰苯二甲醯亞胺(2347.57 mg，15.956 mmol，1.5當量)於THF (15 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加PPh 3(6974.79 mg，26.593 mmol，2.5當量)及DIAD (3226.31 mg，15.955 mmol，1.50當量)持續5小時。在0℃下藉由添加H2O (15ml)淬滅反應。所得混合物用EA (3x 50ml)萃取。合併之有機層用NaCl (3x2 30ml)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 18:1)純化，得到呈米白色固體狀之2-[(3-溴吡啶-4-基)甲基]異吲哚-1,3-二酮(1.5 g，84.47%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：318.90。
42.2. 合成 1-(3- 碘吡啶 -4- 基 ) 甲胺
Figure 02_image1181
在50℃下在N2氛圍下向2-[(3-碘吡啶-4-基)甲基]異吲哚-1,3-二酮(1500 mg，4.119 mmol，1.00當量)於CH 3OH (15 mL)中之攪拌溶液中分批添加CH 3ONa (778.88 mg，14.416 mmol，3.5當量)。所得混合物用EA (3 x 100ml)萃取。合併之有機層用NaCl (3x1 20ml)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由製備型TLC (DCM: MeOH= 10: 1)純化，得到呈白色固體狀之1-(3-碘吡啶-4-基) 甲胺(500 mg，61.86%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：187.62。
42.3. 合成 4-{[(3- 溴吡啶 -4- 基 ) 甲基 ] 胺基 }-N-(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 )-2- 側氧基 -5,6- 二氫 -1H- 吡啶 -3- 硫代甲醯胺
Figure 02_image1183
在110℃下在N 2氛圍下向N-(3-氟-2-甲氧基苯基)-4-羥基-2-側氧基-5,6-二氫-1H-吡啶-3-硫代甲醯胺(400 mg，1.350 mmol，1.00當量)及1-(3-溴吡啶-4-基)甲胺(302.98 mg，1.620 mmol，1.20當量)於DMA (2 mL)中之攪拌溶液中。所得混合物用EA (3 x 20ml)萃取。合併之有機層用NaCl (3x2 30ml)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由製備型TLC (DCM: MeOH=15: 1)純化，得到呈棕色固體狀之4-{[(3-溴吡啶-4-基)甲基]胺基}-N-(3-氟-2-甲氧基苯基)-2-側氧基-5,6-二氫-1H-吡啶-3-硫代甲醯胺(200 mg，70.84%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：467.20。
42.4. 合成 2-(3- 溴吡啶 -4- 基 )-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1185
在50℃下在N 2氛圍下向4-{[(3-溴吡啶-4-基)甲基]胺基}-N-(3-氟-2-甲氧基苯基)-2-側氧基-5,6-二氫-1H-吡啶-3-硫代甲醯胺(500 mg，1.074 mmol，1.00當量)於甲醇(8 mL，1.074 mmol，1.00當量)中之攪拌溶液中逐滴添加H2O2 (7.31 mg，0.215 mmol，0.2當量)持續8小時。殘留物藉由製備型TLC (DCM: MeOH=15:1)純化，得到呈米白色固體狀之2-(3-溴吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(150 mg，50.57%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：432.95。
42.5. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-[3-[(1- 甲基吡唑 -4- 基 ) 氧基 ] 吡啶 -4- 基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1187
在80℃下在N 2氛圍下向2-(3-溴吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100.00 mg，0.23 mmol，1.00當量)及1-甲基吡唑-4-醇(25.0 mg，0.25 mmol，1.10當量)於DMF (3.5 mL)中之攪拌溶液中分批添加2,2,6,6-四甲基庚烷-3,5-二酮(8.5 mg，0.005 mmol，0.20當量)、CuI (8.8 mg，0.005 mmol，0.20當量)及Cs 2CO 3(377.7 mg，0.116 mmol，5.00當量)持續2小時。所得混合物用EA (3 x 10ml)萃取。合併之有機層用NaCl (3x2 5ml)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。粗產物藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：YMC-Actus Triart C18, 30*150 mm, 5μm；移動相A：水(10mmol/L NH4HCO3+0.1%NH3.H2O)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：20% B至45% B/10 min, 45% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：9.82；運行次數：0)，得到呈白色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-[3-[(1-甲基吡唑-4-基)氧基]吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(8.6 mg，97.80%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：449.1。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.41 (s, 1H), 8.67 - 7.94 (m, 2H), 7.64 (s, 1H), 7.53 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 7.41 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.14 (s, 2H), 7.11 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 6.62 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 6.50 (s, 1H), 6.21 - 5.89 (m, 1H), 3.79 (d, J = 1.5 Hz, 6H), 3.41 (dt, J = 6.7, 3.4 Hz, 2H), 2.86 (t, J = 6.8 Hz, 2H)。
實例 43.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(3R)-4-(丙-2-烯醯基)𠰌啉-3-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 522)
43.1. 合成 (3R)-3-{[(4- 氰基吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 } 𠰌 啉 -4- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1189
在室溫下在氬氣氛圍下向(3S)-3-(羥基甲基)𠰌啉-4-甲酸三級丁酯(3.56 g，16.38 mmol，1.00當量)及3-氟吡啶-4-甲腈(2.00 g，16.38 mmol，1.00當量)於DMF (10 mL)中之攪拌溶液中分批添加Cs 2CO 3(16.06 g，49.29 mmol，3.0當量)。將所得混合物在60℃下在氬氣氛圍下攪拌隔夜。使混合物冷卻至室溫。所得混合物用EtOAc (3 x 100 mL)萃取。合併之有機層用水(3 x 100 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EtOAc (1:1)溶離得到呈黃色固體狀之(3R)-3-{[(4-氰基吡啶-3-基)氧基]甲基}𠰌啉-4-甲酸三級丁酯(4.2 g，80.29%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：320.05
43.2. 合成 (3R)-3-({[4-( 胺基甲基 ) 吡啶 -3- 基 ] 氧基 } 甲基 ) 𠰌 啉 -4- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1191
將(3R)-3-{[(4-氰基吡啶-3-基)氧基]甲基}𠰌啉-4-甲酸三級丁酯(4.20 g，13.15 mmol，1.00當量)及氨(7.0 M/MeOH溶液，20 mL，140.00 mmol)於MeOH (40 mL)及雷尼鎳(2.25 g，54 w/w%)中之攪拌混合物在室溫下在氫氣氛圍下攪拌隔夜。過濾所得混合物，用甲醇(3 x 30 mL)洗滌濾餅。在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (10:1)溶離得到呈黃色油狀物之(3R)-3-({[4-(胺基甲基)吡啶-3-基]氧基}甲基)𠰌啉-4-甲酸三級丁酯(4.20 g，98.75%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值324.05。
43.3. 合成 (3R)-3-({[4-({[1-( 三級丁氧基羰基 )-3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基甲硫醯基 ]-2- 側氧基 -5,6- 二氫吡啶 -4- 基 ] 胺基 } 甲基 ) 吡啶 -3- 基 ] 氧基 } 甲基 ) 𠰌 啉 -4- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1193
在室溫下在氬氣氛圍下向3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-4-羥基-2-側氧基-5,6-二氫吡啶-1-甲酸三級丁酯(5.36 g，12.99 mmol，1.00當量)及(3R)-3-({[4-(胺基甲基)吡啶-3-基]氧基}甲基)𠰌啉-4-甲酸三級丁酯(4.20 g，12.99 mmol，1.00當量)於DMF (40 mL)中之攪拌混合物中添加DIEA (5.04 g，38.96 mmol，3.00當量)及PyBOP (10.14 g，19.48 mmol，1.50當量)。將所得混合物在室溫下在氬氣氛圍下攪拌隔夜。反應混合物用水(100 mL)稀釋。所得混合物用EtOAc (3 x 100 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(3 x 100 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EtOAc(1:2)溶離得到呈橘色固體狀之(3R)-3-({[4-({[1-(三級丁氧基羰基)-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-2-側氧基-5,6-二氫吡啶-4-基]胺基}甲基)吡啶-3-基]氧基}甲基)𠰌啉-4-甲酸三級丁酯(6.50 g，69.68%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值718.0。
43.4. 合成 (3R)-3-[({4-[5-( 三級丁氧基羰基 )-3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ] 吡啶 -3- 基 } 氧基 ) 甲基 ] 𠰌 啉 -4- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1195
在室溫下在氬氣氛圍下向(3R)-3-({[4-({[1-(三級丁氧基羰基)-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-2-側氧基-5,6-二氫吡啶-4-基]胺基}甲基)吡啶-3-基]氧基}甲基)𠰌啉-4-甲酸三級丁酯(500 mg，0.70 mmol，1.00當量)於甲醇(5 mL)中之攪拌混合物中添加過氧化氫(30 w/w%, 103 mg，0.91 mmol，1.30當量)。將所得混合物在80℃下在氬氣氛圍下攪拌4小時。使混合物冷卻至室溫。在室溫下藉由添加飽和Na 2SO 3(水溶液) (0.1 mL)淬滅反應。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由製備型TLC (CH 2Cl 2/MeOH 10:1)純化，得到呈黃色固體狀之(3R)-3-[({4-[5-(三級丁氧基羰基)-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]吡啶-3-基}氧基)甲基]𠰌啉-4-甲酸三級丁酯(200 mg，41.99%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：684.1。
43.5. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-{3-[(3R)- 𠰌 啉 -3- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 }-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1197
在0℃下在氬氣氛圍下向(3R)-3-[({4-[5-(三級丁氧基羰基)-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]吡啶-3-基}氧基)甲基]𠰌啉-4-甲酸三級丁酯(140 mg，0.20 mmol，1.00當量)於DCM (5 mL)中之攪拌混合物中添加TFA (1 mL)。將所得混合物在室溫下在氬氣氛圍下攪拌12小時。將所得混合物在減壓下濃縮。此產生呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[(3R)-𠰌啉-3-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(120 mg，粗品)。粗產物不經進一步純化直接用於下一步。 LC-MS: (M+H) +實驗值：484.05。
43.6. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{[(3R)-4-( 丙 -2- 烯醯基 ) 𠰌 啉 -3- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1199
在氬氣氛圍下在-30℃下，向3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[(3R)-𠰌啉-3-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(110 mg，0.23 mmol，1.00當量)於CH 2Cl 2(4 mL)中之攪拌混合物中添加三乙胺(93 mg，0.92 mmol，5.00當量)。在-30℃下向上述混合物中分批添加丙烯醯氯(14.98 mg，0.17 mmol，0.90當量)。所得混合物在室溫下再攪拌1小時。粗產物(100 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Shield RP18 OBD管柱，30*150 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：38% B至50% B/10 min, 50% B；波長：220/254 nm；RT1(min)：7.43；運行次數：0)，得到呈白色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(3R)-4-(丙-2-烯醯基)𠰌啉-3-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(19.8 mg，16.21%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：537.95。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ10.93 (s, 1H), 8.47 (s, 1H), 8.14 - 7.94 (m, 1H), 7.60 - 7.43 (m, 1H), 7.42 - 7.25 (m, 1H), 7.17 (t, 1H), 6.96 - 6.79 (m, 1H), 6.76 - 6.58 (m, 2H), 6.26 - 5.96 (m, 2H), 5.83 - 5.47 (m, 1H), 5.06 - 4.66 (m, 1H), 4.54 - 4.14 (m, 2H), 4.11 - 3.79 (m, 6H), 3.72 - 3.37 (m, 5H), 3.07 - 2.78 (m, 2H)。
實例 44.2-(3-{[(2S)-4-乙醯基𠰌啉-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 195)
44.1. 合成 (2S)-2-{[(4- 氰基吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 } 𠰌 啉 -4- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1201
在0℃下在氬氣氛圍下向(2S)-2-(羥基甲基)𠰌啉-4-甲酸三級丁酯(1.96 g，9.01 mmol，1.10當量)於DMF (20.00 mL)中之攪拌混合物中分批添加NaH (0.49 g，12.29 mmol，1.50當量，60%/油)。將所得混合物在0℃下在氬氣氛圍下攪拌30分鐘。在0℃下向上述混合物中分批添加3-氟吡啶-4-甲腈(1.00 g，8.19 mmol，1.00當量)持續5分鐘。所得混合物在室溫下再攪拌2小時。藉由LCMS監測反應。LCMS可偵測到所需產物。反應在0℃下用水淬滅。所得混合物用EtOAc (3 x 50 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(3x50 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EA (4:1)溶離得到呈無色油狀物之(2S)-2-{[(4-氰基吡啶-3-基)氧基]甲基}𠰌啉-4-甲酸三級丁酯(1.20 g，45.42%)。 LC-MS: M+Na實驗值：341.95。
44.2. 合成 (2S)-2-({[4-( 胺基甲基 ) 吡啶 -3- 基 ] 氧基 } 甲基 ) 𠰌 啉 -4- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1203
在室溫下在氮氣氛圍下向(2S)-2-{[(4-氰基吡啶-3-基)氧基]甲基}𠰌啉-4-甲酸三級丁酯(1.00 g，3.13 mmol，1.00當量)及氨(7.0 M/MeOH溶液，12.50 mL，87.50 mmol)於MeOH (25.00 mL)中之攪拌混合物中分批添加雷尼鎳(1.00 g，100 w/w%)。將所得混合物在室溫下在氫氣氛圍下攪拌隔夜。藉由LCMS監測反應。LCMS可偵測到所需產物。過濾所得混合物，用MeOH (3x150 mL)洗滌濾餅。在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (20:1)溶離得到呈淺黃色油狀物之(2S)-2-({[4-(胺基甲基)吡啶-3-基]氧基}甲基)𠰌啉-4-甲酸三級丁酯(1.00 g，95.79%)。 LC-MS: M+H實驗值：324.05。
44.3. 合成得到 (2S)-2-[({4-[({3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基甲硫醯基 ]-2- 側氧基 -5,6- 二氫 -1H- 吡啶 -4- 基 } 胺基 ) 甲基 ] 吡啶 -3- 基 } 氧基 ) 甲基 ] 𠰌 啉 -4- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1205
在0℃下在氮氣氛圍下向(2S)-2-({[4-(胺基甲基)吡啶-3-基]氧基}甲基)𠰌啉-4-甲酸三級丁酯(1.10 g，3.40 mmol，1.00當量)及N-(3-氯-2-甲氧基苯基)-4-羥基-2-側氧基-5,6-二氫-1H-吡啶-3-硫代甲醯胺(1.06 g，3.40 mmol，1.00當量)於DMF (12.00 mL)中之攪拌混合物中分批添加PyBOP (2.66 g，5.10 mmol，1.50當量)及DIEA (1.32 g，10.20 mmol，3.00當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌隔夜。藉由LCMS監測反應。LCMS可偵測到所需產物。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EA (5:1)溶離得到呈黃色固體狀之(2S)-2-[({4-[({3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-2-側氧基-5,6-二氫-1H-吡啶-4-基}胺基)甲基]吡啶-3-基}氧基)甲基]𠰌啉-4-甲酸三級丁酯(800 mg，34.62%)。 LC-MS: M+H實驗值：618.10。
44.4. 合成 (2S)-2-{[(4-{3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 } 𠰌 啉 -4- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1207
將(2S)-2-[({4-[({3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-2-側氧基-5,6-二氫-1H-吡啶-4-基}胺基)甲基]吡啶-3-基}氧基)甲基]𠰌啉-4-甲酸三級丁酯(800 mg，1.29 mmol，1.00當量)及H 2O 2(30w/w%，190 mg，1.68 mmol，1.30當量)於MeOH (8.00 mL)中之混合物在80℃下在氮氣氛圍下攪拌4小時。藉由LCMS監測反應。LCMS可偵測到所需產物。反應在室溫下用飽和硫代硫酸鈉(水溶液)淬滅。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化：管柱，C18球狀管柱；移動相，MeCN/水，10%至50%梯度/30 min；偵測器，UV 254 nm，得到呈淡黃色固體狀之(2S)-2-{[(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}𠰌啉-4-甲酸三級丁酯(300 mg，35.72%)。 LC-MS: M+H實驗值：584.20。
44.5. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-{3-[(2S)- 𠰌 啉 -2- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 }-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1209
在室溫下在空氣氛圍下向(2S)-2-{[(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}𠰌啉-4-甲酸三級丁酯(250 mg，0.43 mmol，1.00當量)及DCM (5.00 mL)中之攪拌混合物中分批添加TFA (1.00 mL)。將所得混合物在室溫下在空氣氛圍下攪拌1小時。LCMS可偵測到所需產物。藉由LCMS監測反應。將所得混合物在減壓下濃縮。用飽和NaHCO 3(水溶液)將混合物中和至pH為7。水層用CH 2Cl 2(3x10 mL)萃取。有機相在減壓下濃縮得到呈淡黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[(2S)-𠰌啉-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(220 mg，84.96%)。 LC-MS: M+H實驗值：484.10。
44.6. 合成 2-(3-{[(2S)-4- 乙醯基 𠰌 啉 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1211
在-30℃下在氬氣氛圍下向3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[(2S)-𠰌啉-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(65 mg，0.13 mmol，1.00當量)於DCM (1.00 mL)中之攪拌混合物中分批添加Et 3N (54 mg，0.52 mmol，4.00當量)及乙酸酐(14 mg，0.13 mmol，1.00當量)。將所得混合物在0℃下在氬氣氛圍下攪拌1小時。藉由LCMS監測反應。LCMS可偵測到所需產物。反應在0℃下用MeOH淬滅。將所得混合物在減壓下濃縮。粗產物(65 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep OBD C18管柱，30*150 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：20% B至50% B/7 min；波長：254 nm；RT1(min)：6.5；運行次數：0)，得到呈米白色固體狀之2-(3-{[(2S)-4-乙醯基𠰌啉-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(34.6 mg，48.29%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值525.95。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ11.06 (s, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.06 - 8.02 (m, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.31 - 7.27 (m, 1H), 7.16 (s, 1H), 6.70 - 6.68 (m, 2H), 6.20 - 5.97 (m, 1H), 4.43 - 4.15 (m, 3H), 4.00 - 3.96 (m, 1H), 3.88 (s, 4H), 3.80 - 3.48 (m, 2H), 3.42 - 3.99 (m, 2H), 3.29 - 3.04 (m, 1H), 2.90 - 2.83 (m, 2H), 2.79 - 2.57 (m, 1H), 2.03 (s, 3H)。
實例 45. 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{[(2S)-4- 甲磺醯基 𠰌 啉 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮 ( 化合物 193)
Figure 02_image1213
在-30℃下在氬氣氛圍下向3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[(2S)-𠰌啉-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100 mg，0.21 mmol，1.00當量)於DCM (1.50 mL)中之攪拌混合物中分批添加Et 3N (84 mg，0.84 mmol，4.00當量)及甲磺醯氯(24 mg，0.21 mmol，1.00當量)。將所得混合物在0℃下在氬氣氛圍下攪拌1小時。藉由LCMS監測反應。LCMS可偵測到所需產物。反應在0℃下用MeOH淬滅。將所得混合物在減壓下濃縮。粗產物(100 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep C18 OBD管柱，30*100 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：23% B至43% B/10 min, 43% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：9.67；運行次數：0)，得到呈米白色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2S)-4-甲磺醯基𠰌啉-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(41.3 mg，34.49%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：561.90。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ11.05 (s, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.05 (d, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.28 (d, 1H), 7.16 (t, J= 2.5 Hz, 1H), 6.76 - 6.63 (m, 2H), 6.21 - 6.09 (m, 1H), 4.37 - 4.32 (m, 1H), 4.29 - 4.24 (m, 1H), 4.13 - 4.00 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.80 - 3.61 (m, 2H), 3.48 - 3.38 (m, 3H), 2.94 - 2.76 (m, 7H)。
實例 46.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(3R)-4-[(2E)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯醯基]𠰌啉-3-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮；三氟乙酸鹽 ( 化合物 197)
46.1. 合成 (E)-4-( 二甲基胺基 ) 丁 -2- 烯醯氯
Figure 02_image1215
在0℃下在氬氣氛圍下向(2E)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯酸(70 mg，0.54 mmol，1.00當量)於THF (6 mL)中之攪拌混合物中逐滴添加(COCl) 2(76 mg，0.60 mmol，1.10當量)。將所得混合物在室溫下在氬氣氛圍下攪拌30分鐘。藉由TLC (CH 2Cl 2/ MeOH = 5:1)監測反應。所得混合物無需進一步純化即可直接用於下一步。
46.2. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{[(3R)-4-[(2E)-4-( 二甲基胺基 ) 丁 -2- 烯醯基 ] 𠰌 啉 -3- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮；三氟乙酸鹽
Figure 02_image1217
在0℃下在氮氣氛圍下向(2E)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯醯氯(21 mg，0.14 mmol，1.0當量)於THF (0.5 mL)中之攪拌混合物中逐滴添加3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[(3R)-𠰌啉-3-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(70 mg，0.14 mmol，1.00當量)於NMP (0.5 mL)中之溶液。將所得混合物在室溫下攪拌1.5小時。藉由TLC監測反應。將所得混合物在減壓下濃縮。粗產物(100 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：Xcelect CSH F-pheny OBD管柱，19*250 mm, 5μm；移動相A：水(0.05%TFA )，移動相B：ACN；流動速率：25 mL/min；梯度：14% B至21% B/10 min, 21% B；波長：254 nm；RT1(min)：7.68；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(3R)-4-[(2E)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯醯基]𠰌啉-3-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮；三氟乙酸(14.4 mg，14.04%)。 LC-MS: (M+Na) +實驗值：617.05 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 11.16 (s, 1H), 9.98 (s, 1H), 8.63 (s, 1H), 8.21 (d, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.55 - 7.30 (m, 2H), 7.02 - 6.87 (m, 1H), 6.85 - 6.70 (m, 2H), 6.67 - 6.49 (m, 1H), 6.20 - 6.10 (m, 1H), 5.04 - 4.85 (m, 1H), 4.85 (t, 1H), 4.65 - 4.45 (m, 1H), 4.23 - 4.20 (m, 1H), 4.11 - 3.79 (m, 7H), 3.77 - 3.59 (m, 2H), 3.57 - 3.36 (m, 3H), 3.25 - 3.04 (m, 1H), 2.97 - 2.64 (m, 6H)。
實例 47.3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(3R)-4-(丙-2-烯醯基)𠰌啉-3-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 189)
47.1. 合成 (3R)-3-{[(4- 氰基吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 } 𠰌 啉 -4- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1219
將3-氟吡啶-4-甲腈(1.95 g，15.97 mmol，1.00當量)及(3S)-3-(羥基甲基)𠰌啉-4-甲酸三級丁酯(3.47 g，15.97 mmol，1.00當量)及Cs 2CO 3(15.61 g，47.91 mmol，3.00當量)於DMF (8 mL)中之溶液在80℃下在氮氣氛圍下攪拌2小時。藉由LCMS監測反應。反應混合物用水(10 mL)稀釋。所得混合物用EtOAc (3 x 20 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(3x5 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EA (2:1)溶離得到呈黃色固體狀之(3R)-3-{[(4-氰基吡啶-3-基)氧基]甲基}𠰌啉-4-甲酸三級丁酯(5 g，98.03%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值320.05。
47.2. 合成 (3R)-3-({[4-( 胺基甲基 ) 吡啶 -3- 基 ] 氧基 } 甲基 ) 𠰌 啉 -4- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1221
在氮氣氛圍下向(3R)-3-{[(4-氰基吡啶-3-基)氧基]甲基}𠰌啉-4-甲酸三級丁酯(500 mg，1.57 mmol，1.00當量)於MeOH (5.00 mL)及氨(7.0 M/MeOH溶液，5.00 mL，35 mmol)中之溶液中添加雷尼鎳(500 mg，100w/w%)於50 mL圓底燒瓶中。將混合物使用氫氣球在氫氣氛圍下在室溫下氫化隔夜，通過矽藻塗墊過濾且在減壓下濃縮。藉由LCMS監測反應。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (20:1)溶離得到呈黃色油狀物之(3R)-3-({[4-(胺基甲基)吡啶-3-基]氧基}甲基)𠰌啉-4-甲酸三級丁酯(490 mg，96.78%)。 LC-MS: M+H實驗值324.00。
47.3. 合成 (3R)-3-({[4-({[1-( 三級丁氧基羰基 )-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基甲硫醯基 ]-2- 側氧基 -5,6- 二氫吡啶 -4- 基 ] 胺基 } 甲基 ) 吡啶 -3- 基 ] 氧基 } 甲基 ) 𠰌 啉 -4- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1223
在室溫下向50 mL圓底燒瓶中添加(3R)-3-({[4-(胺基甲基)吡啶-3-基]氧基}甲基)𠰌啉-4-甲酸三級丁酯(490 mg，1.50 mmol，1.00當量)及3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-4-羥基-2-側氧基-5,6-二氫吡啶-1-甲酸三級丁酯(600 mg，1.50 mmol，1.00當量)及PyBOP (1.18 g，2.30 mmol，1.50當量)及DIEA (587 mg，4.50 mmol，3.00當量)及DMF (15 mL)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌5小時。藉由LCMS監測反應。反應混合物用水(20 mL)稀釋。所得混合物用EtOAc (3 x 50 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(3x10 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EA (1:1)溶離得到呈黃色固體狀之(3R)-3-({[4-({[1-(三級丁氧基羰基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-2-側氧基-5,6-二氫吡啶-4-基]胺基}甲基)吡啶-3-基]氧基}甲基)𠰌啉-4-甲酸三級丁酯(970 mg，91.22%)。 LC-MS: M+H實驗值702.2。
47.4. 合成 (3R)-3-[({4-[5-( 三級丁氧基羰基 )-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ] 吡啶 -3- 基 } 氧基 ) 甲基 ] 𠰌 啉 -4- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1225
將(3R)-3-({[4-({[1-(三級丁氧基羰基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-2-側氧基-5,6-二氫吡啶-4-基]胺基}甲基)吡啶-3-基]氧基}甲基)𠰌啉-4-甲酸三級丁酯(970 mg，1.38 mmol，1.00當量)及H 2O 2(30w/w%，204 mg，1.80 mmol，1.30當量)於MeOH (15 mL)中之溶液在80℃下在空氣氛圍下攪拌4小時。藉由LCMS監測反應。在0℃下藉由添加飽和Na 2SO 3(飽和) (0.1 mL)淬滅反應。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (50:1)溶離得到呈黃色固體狀之(3R)-3-[({4-[5-(三級丁氧基羰基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]吡啶-3-基}氧基)甲基]𠰌啉-4-甲酸三級丁酯(600 mg，39.01%)。 LC-MS : M+H實驗值668.2。
47.5. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-{3-[(3R)- 𠰌 啉 -3- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 }-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1227
將(3R)-3-[({4-[5-(三級丁氧基羰基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]吡啶-3-基}氧基)甲基]𠰌啉-4-甲酸三級丁酯(300 mg，0.45 mmol，1.00當量)於TFA (1.5 mL)及DCM (4.5 mL)中之溶液在室溫下在氮氣氛圍下攪拌20分鐘。藉由LCMS監測反應。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由製備型TLC (CH 2Cl 2/MeOH 10:1)純化，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[(3R)-𠰌啉-3-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(150 mg，49.28%)。 LC-MS : M+H +實驗值468.1。
47.6. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{[(3R)-4-( 丙 -2- 烯醯基 ) 𠰌 啉 -3- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1229
在0℃下向8 mL小瓶中添加3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[(3R)-𠰌啉-3-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(70 mg，0.15 mmol，1.00當量)及丙烯醯氯(12 mg，0.14 mmol，0.90當量)及TEA (45 mg，0.45 mmol，3.00當量)及DCM (1.5 mL)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。藉由LCMS監測反應。在真空下濃縮所得混合物。粗產物(80 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep C18 OBD管柱，30*100 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：18% B至33% B/11 min, 33% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：10.38；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(3R)-4-(丙-2-烯醯基)𠰌啉-3-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(16.3 mg，20.29%)。 LC-MS: M+H +實驗值：522.00。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ10.91 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 8.11 - 7.91 (m, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.44 - 7.21 (m, 1H), 7.12 (s, 1H), 7.00 - 6.34 (m, 3H), 6.26 - 5.87 (m, 2H), 5.76 (s, 1H), 5.14 - 4.61 (m, 1H), 4.55 - 4.12 (m, 2H), 4.11 - 3.79 (m, 6H), 3.62-3.59 (m, 2H), 3.48-3.40 (m, 3H), 3.24 - 2.70 (m, 2H)。
實例 48.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2R)-4-(丙-2-烯醯基)𠰌啉-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 201)
48.1. 合成 (3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-{3-[(2R)- 𠰌 啉 -2- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 }-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1231
將(2R)-2-[({4-[5-(三級丁氧基羰基)-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]吡啶-3-基}氧基)甲基]𠰌啉-4-甲酸三級丁酯(100 mg，0.15 mmol，1.00當量)於DCM (1.5 mL)及TFA (0.5 mL)中之溶液在室溫下在氮氣氛圍下攪拌20分鐘。將所得混合物在減壓下濃縮得到呈棕色油狀物之(3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[(2R)-𠰌啉-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(65 mg，91.89%)，其不經進一步純化直接用於下一步。 LC-MS: M+H +實驗值484.05。
48.2. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{[(2R)-4-( 丙 -2- 烯醯基 ) 𠰌 啉 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1233
在0℃下在氮氣氛圍下向3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[(2R)-𠰌啉-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(50 mg，0.10 mmol，1.00當量)及DIEA (80 mg，0.62 mmol，6.00當量)於DCM (1 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加丙烯醯氯(8 mg，0.09 mmol，0.9當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌10分鐘。在0℃下藉由添加MeOH (0.5 mL)淬滅反應。將所得混合物在減壓下濃縮得到粗產物。粗產物(60 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：Xselect  CSH C18 OBD管柱 30*150mm 5μm, n；移動相A：水(0.1%FA)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：8% B至38% B/7 min, 38% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：6.53；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2R)-4-(丙-2-烯醯基)𠰌啉-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(14.2 mg，24.45%)。 LC-MS: M+H +實驗值：537.95。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ11.12 (s, 1H), 8.48 (s, 1H), 8.13 (d, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.40 (d, 1H), 7.23 (t, 1H), 6.88 - 6.66 (m, 3H), 6.25 - 6.08 (m, 2H), 5.75 - 5.71 (m, 1H), 4.54 - 4.38 (m, 1H), 4.36 - 4.23 (m, 2H), 4.18 - 3.93 (m, 3H), 3.90 (s, 3H), 3.51 (s, 1H), 3.45 (t, 2H), 3.35 - 3.07 (m, 1H), 2.98 - 2.74 (m, 3H)。
實例 49.(6S)-6-{[(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}𠰌啉-3-酮 ( 化合物 194)
49.1. 合成 3-{[(2S)-5- 側氧基 𠰌 啉 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 甲腈
Figure 02_image1235
將3-氟吡啶-4-甲腈(126 mg，1.03 mmol，1.00當量)及(6S)-6-(羥基甲基)𠰌啉-3-酮(788 mg，1.24 mmol，1.20當量)及Cs 2CO 3(588 mg，3.10 mmol，3.00當量)於DMF (3.00 mL)中之溶液在60℃下在N 2氛圍下攪拌1小時。使混合物冷卻至室溫。將殘留物溶解於EA (20.00 ml)。所得混合物用飽和鹽溶液洗滌。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化(DCM/MeOH=10/1)，得到呈白色固體狀之3-{[(2S)-5-側氧基𠰌啉-2-基]甲氧基}吡啶-4-甲腈(150 mg，61.98%)。 LC-MS: M+H實驗值：233.90。
49.2. 合成 (S)-6-(((4-( 胺基甲基 ) 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ) 甲基 ) 𠰌 啉 -3- 酮
Figure 02_image1237
將3-{[(2S)-5-側氧基𠰌啉-2-基]甲氧基}吡啶-4-甲腈(1.02 g，4.38 mmol，1.00當量)及雷尼鎳(1.02 g，100 w/w%)於氨(7.0 M/MeOH溶液，5.00 mL，35.00 mmol)/MeOH (10.00 mL)溶液中之溶液在室溫下在H 2氛圍下攪拌1小時。藉由LCMS監測反應。粗產物(1.00 g)不經進一步純化直接用於下一步。 LC-MS: M+H實驗值：238.27。
49.3. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基甲硫醯基 ]-2- 側氧基 -4-{[(3-{[(2S)-5- 側氧基 𠰌 啉 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 ) 甲基 ] 胺基 }-5,6- 二氫吡啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1239
在室溫下在N 2氛圍下向(6S)-6-({[4-(胺基甲基)吡啶-3-基]氧基}甲基)𠰌啉-3-酮(400 mg，1.68 mmol，1.00當量)及3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-4-羥基-2-側氧基-5,6-二氫吡啶-1-甲酸三級丁酯(696 mg，1.68 mmol，1.00當量)於DMF (16.00 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加DIEA (654 mg，5.06 mmol，3.00當量)及PyBOP (1.31 g，2.53 mmol，1.50當量)。將所得混合物在室溫下在N 2氛圍下攪拌2小時。藉由LCMS監測反應。所得混合物用EA (10.00 mL)萃取。合併之有機層用飽和鹽溶液(10.00 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用MeOH/DCM (10%)溶離得到呈暗黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-2-側氧基-4-{[(3-{[(2S)-5-側氧基𠰌啉-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)甲基]胺基}-5,6-二氫吡啶-1-甲酸三級丁酯(450 mg，38.00%)。 LC-MS: M+H實驗值：633.14。
49.4. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -2-(3-{[(2S)-5- 側氧基 𠰌 啉 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -5- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1241
在室溫下向MeOH (10.00 mL)中添加3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-2-側氧基-4-{[(3-{[(2S)-5-側氧基𠰌啉-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)甲基]胺基}-5,6-二氫吡啶-1-甲酸三級丁酯(400 mg，0.63 mmol，1.00當量)及H 2O 2溶液(30w/w%，70 mg，0.63 mmol，1.00當量)。將所得混合物在80℃下攪拌1小時。藉由LCMS監測反應。在減壓下濃縮殘留物。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用MeOH/DCM (10%)溶離得到呈黃色油狀物之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-2-(3-{[(2S)-5-側氧基𠰌啉-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-5-甲酸三級丁酯(120 mg，28.54%)。 LC-MS: M+H實驗值：599.06。
49.5. 合成 (6S)-6-{[(4-{3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 } 𠰌 啉 -3- 酮
Figure 02_image1243
在室溫下向3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-2-(3-{[(2S)-5-側氧基𠰌啉-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-5-甲酸三級丁酯(120 mg，0.20 mmol，1.00當量)於DCM (1.00 mL)中之攪拌溶液中添加TFA (1.00 mL)。將所得混合物在室溫下攪拌1小時。藉由LCMS監測反應。粗產物藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：Xselect CSH F-Phenyl OBD管柱，19*250 mm, 5μm；移動相A：水(0.05%TFA )，移動相B：ACN；流動速率：25 mL/min；梯度：21% B至32% B/10 min, 32% B；波長：254 nm；RT1(min)：8.75；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之(6S)-6-{[(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}𠰌啉-3-酮(19.0 mg，18.35%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值497.90。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d6) δ11.29 (s, 1H), 8.53 (s, 1H), 8.22 (d, 1H), 8.12 (d, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.48 (d, 1H), 7.32 (s, 1H), 6.83 - 6.71 (m, 2H), 6.16 (d, 1H), 4.52 - 4.41(m, 1H), 4.38 - 4.25(m, 2H), 4.18(s, 2H), 3.39(s, 3H), 3.29 - 3.26(m, 4H), 2.96 - 2.88(m, 2H)。
實例 50.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2R)-1-甲磺醯基氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 191)
50.1. 合成 (2R)-2-{[(4- 氰基吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 } 氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1245
在0℃下向(2R)-2-(羥基甲基)氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(0.74 g，3.93 mmol，1.00當量)於THF (7.00 mL)中之攪拌溶液中添加NaH (0.24 g，5.90 mmol，1.50當量，60%)且攪拌20分鐘。在0℃下向上述混合物中逐滴添加3-氟吡啶-4-甲腈(0.48 g，3.93 mmol，1.00當量)於THF (7.00 mL)中之溶液。將所得混合物在0℃下再攪拌0.5小時。所得混合物用水淬滅且在真空下濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EA=3:1溶離得到呈無色油狀物之(2R)-2-{[(4-氰基吡啶-3-基)氧基]甲基}氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(1.09 g，95.83%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：290.2。
50.2. 合成 (2R)-2-([[4-( 胺基甲基 ) 吡啶 -3- 基 ] 氧基 ] 甲基 ) 氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1247
在室溫下向(2R)-2-[[(4-氰基吡啶-3-基)氧基]甲基]氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(1.39 g，4.81 mmol，1.00當量)於7 M NH 3(g)/MeOH (2.00 mL)中之溶液中添加雷尼鎳(618 mg，44 w/w%)。將所得混合物在室溫下在氫氣氛圍下攪拌隔夜。過濾所得混合物，用MeOH洗滌濾餅，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由製備型TLC (CH 2Cl 2/MeOH 10:1)純化，得到呈黃色油狀物之(2R)-2-([[4-(胺基甲基)吡啶-3-基]氧基]甲基)氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(1.40 g，90%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值294.2。
50.3. 合成 4-{[(3-{[(2R)-1-( 三級丁氧基羰基 ) 氮雜環丁烷 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 ) 甲基 ] 胺基 }-3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基甲硫醯基 ]-2- 側氧基 -5,6- 二氫吡啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1249
在室溫下在Ar氛圍下向(2R)-2-({[4-(胺基甲基)吡啶-3-基]氧基}甲基)氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(630 mg，2.15 mmol，1.00當量)及3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-4-羥基-2-側氧基-5,6-二氫吡啶-1-甲酸三級丁酯(975 mg，2.36 mmol，1.10當量)及PyBOP (1676 mg，3.22 mmol，1.50當量)於DMF (15.00 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加DIEA (833 mg，6.44 mmol，3.00當量)於DMF (15.00 mL)中之溶液持續2小時。在真空下濃縮所得混合物。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用DCM/MeOH=100/1溶離得到呈黃色油狀物之4-{[(3-{[(2R)-1-(三級丁氧基羰基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)甲基]胺基}-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-2-側氧基-5,6-二氫吡啶-1-甲酸三級丁酯(1.494 g，101.08%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值688.2
50.4. 合成 (2R)-2-[({4-[5-( 三級丁氧基羰基 )-3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ] 吡啶 -3- 基 } 氧基 ) 甲基 ] 氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1251
將4-{[(3-{[(2R)-1-(三級丁氧基羰基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)甲基]胺基}-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-2-側氧基-5,6-二氫吡啶-1-甲酸三級丁酯(500 mg，0.73 mmol，1.00當量)及H 2O 2(82 mg，0.73 mmol，1.00當量，30%)於MeOH (10.00 mL)中之溶液在80℃下在N 2氛圍下攪拌1小時。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化：管柱，C18矽膠；移動相A.H 2O (0.05% NH 4HCO 3). 移動相B.CH 3CN；流動速率：60 mL/min；梯度：40 B至55 B/8 min；254 nm；RT: 6。得到呈黃色固體狀之(2R)-2-[({4-[5-(三級丁氧基羰基)-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]吡啶-3-基}氧基)甲基]氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(200 mg，42.08%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值654.3
50.5. 合成 2-{3-[(2R)- 氮雜環丁烷 -2- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 }-3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1253
將(2R)-2-[({4-[5-(三級丁氧基羰基)-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]吡啶-3-基}氧基)甲基]氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(200 mg，0.31 mmol，1.00當量)及TFA (0.45 mL)於DCM (3.00 mL)中之溶液在室溫下攪拌1小時。將所得混合物在減壓下濃縮。此產生粗產物，呈無色油狀物之2-{3-[(2R)-氮雜環丁烷-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(120 mg)。 LC-MS: (M+H) +實驗值454.0
50.6. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{[(2R)-1- 甲磺醯基氮雜環丁烷 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1255
將(2R)-2-{[(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(120 mg，0.22 mmol，1.00當量)及MsCl (25 mg，0.22 mmol，1.00當量)及TEA (109 mg，1.10 mmol，5.00當量)於DCM (3.00 mL)中之溶液在室溫下在N 2氛圍下攪拌1小時。LCMS可偵測到所需產物。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由製備型HPLC在以下條件下純化：(管柱：XBridge Prep C18 OBD管柱，30*100 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：30% B至60% B/10 min, 60% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：9.67；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2R)-1-甲磺醯基氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(20.8 mg，17.89%)。 LC-MS: (M) +實驗值531.90 1H NMR (400 MHz, DMSO- d6) δ10.98 (s, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.04 (d, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.33 (d, 1H), 7.16 (s, 1H), 6.74-6.65 (m, 2H), 6.20-6.12 (m, 1H), 4.86-4.75 (m, 1H), 4.54-4.44 (m, 1H), 4.32-4.23 (m, 1H), 4.09-3.98 (m, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.76-3.66 (m, 1H), 3.45-3.36 (m, 2H), 3.12 (s, 3H), 2.88 (t, 2H), 2.43-2.20 (m, 2H)。
實例 51.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2S)-4-(丙-2-烯醯基)𠰌啉-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 200)
51.1. 合成 (S)-3-((3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 )-2-(3-( 𠰌 啉 -2- 基甲氧基 ) 吡啶 -4- 基 )-1,5,6,7- 四氫 -4H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1257
在0℃下在氮氣氛圍下向(2S)-2-{[(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}𠰌啉-4-甲酸三級丁酯(50 mg，0.09 mmol，1.00當量)於DCM (0.9 mL)中之攪拌混合物中逐滴添加TFA (0.4 mL)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。LCMS可偵測到所需產物。將所得混合物在減壓下濃縮。粗產物不經進一步純化直接用於下一步。 LC-MS: (M+H) +實驗值484.05。
51.2. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{[(2S)-4-( 丙 -2- 烯醯基 ) 𠰌 啉 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1259
在0℃下在氬氣氛圍下向3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[(2S)-𠰌啉-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(50 mg，0.10 mmol，1.00當量)及Et 3N (52 mg，0.50 mmol，5.00當量)於DCM (1.00 mL)中之攪拌混合物中逐滴添加丙烯醯氯(2 mg，0.02 mmol，0.15當量)。將所得混合物在0℃下在氬氣氛圍下攪拌10分鐘。LCMS可偵測到所需產物。將所得混合物在減壓下濃縮。粗產物(80 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：Xselect Peptide CSH C18 19*150mm 5μm, 1；移動相A：水(0.05%FA)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：15% B至45% B/7 min；波長：254 nm；RT1(min)：6.5；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2S)-4-(丙-2-烯醯基)𠰌啉-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(8.7 mg，15.17%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值538.30。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d6) δ11.06 (s, 1H), 8.43 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.52 (d, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.15 (s, 1H), 6.75-6.90 (m, 1H), 6.68 (d, 2H), 6.20-6.09 (m, 2H), 5.80-5.70 (m, 1H), 4.50-4.35 (m, 1H), 4.35-4.20 (m, 2H), 4.20-3.95 (m, 2H), 3.90-3.75 (m, 4H), 3.65-3.50 (m, 1H), 3.50-3.40 (m, 2H), 3.20-3.05 (m, 1H), 2.96-2.71 (m, 3H)。
實例 52.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2S)-1-甲磺醯基氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 192)
52.1. 合成得到 (2S)-2-{[(4- 氰基吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 } 氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1261
在0℃下在氮氣氛圍下向(2S)-2-(羥基甲基)氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(1533 mg，8.19 mmol，1.00當量)及NaH (60%於油中，491 mg，12.29 mmol，1.50當量)於THF (14.00 mL)中之攪拌混合物中分批添加。將所得混合物在0℃下在氮氣氛圍下攪拌30分鐘。在0℃下向上述混合物中分批添加3-氟吡啶-4-甲腈(1000 mg，8.19 mmol，1.00當量)持續1分鐘。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌隔夜。LCMS可偵測到所需產物。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EA (1:1)溶離得到呈白色固體狀之(2S)-2-{[(4-氰基吡啶-3-基)氧基]甲基}氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(1800 mg，75.96%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值290.15
52.2. 合成 (2S)-2-({[4-( 胺基甲基 ) 吡啶 -3- 基 ] 氧基 } 甲基 ) 氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1263
在室溫下在氬氣氛圍下向(2S)-2-{[(4-氰基吡啶-3-基)氧基]甲基}氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(1.00 g，3.46 mmol，1.00當量) 於NH 3(g)/甲醇(7M/甲醇，20 mL，140.00 mmol)中之攪拌混合物中分批添加雷尼鎳(0.60 g，60 w/w%)。將所得混合物在室溫下在氫氣氛圍下攪拌2.5小時。LCMS可偵測到所需產物。過濾所得混合物；濾餅用甲醇(3x100 mL)洗滌。在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (15:1)溶離得到呈澄清油狀物之(2S)-2-({[4-(胺基甲基)吡啶-3-基]氧基}甲基)氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(1.1 g，90.41%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值294.20
52.3. 合成 2-[({4-[({3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基甲硫醯基 ]-2- 側氧基 -5,6- 二氫 -1H- 吡啶 -4- 基 } 胺基 ) 甲基 ] 吡啶 -3- 基 } 氧基 ) 甲基 ] 氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1265
在室溫下在氮氣氛圍下向(2S)-2-({[4-(胺基甲基)吡啶-3-基]氧基}甲基)氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(1.00 g，3.41 mmol，1.00當量)及3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-4-羥基-2-側氧基-5,6-二氫吡啶-1-甲酸三級丁酯(1.40 g，3.41 mmol，1.00當量)及PyBOP (2.66 g，5.11 mmol，1.50當量)於DMF (20.00 mL)中之攪拌混合物中分批添加DIEA (1.32 g，10.23 mmol，3.00當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌隔夜。LCMS可偵測到所需產物。過濾所得混合物；濾餅用乙酸乙酯(3x40 mL)洗滌。在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化：管柱，矽膠；移動相，MeCN/水，10%至50%梯度/10 min；偵測器，UV 254 nm。此產生呈黃色固體狀之2-[({4-[({3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-2-側氧基-5,6-二氫-1H-吡啶-4-基}胺基)甲基]吡啶-3-基}氧基)甲基]氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(1.1 g，54.87%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值688.20
52.4. 合成 (2S)-2-[({4-[5-( 三級丁氧基羰基 )-3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ] 吡啶 -3- 基 } 氧基 ) 甲基 ] 氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1267
在室溫下在氮氣氛圍下向4-{[(3-{[1-(三級丁氧基羰基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)甲基]胺基}-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-2-側氧基-5,6-二氫吡啶-1-甲酸三級丁酯(1.60 g，2.32 mmol，1.00當量)及過氧化氫(30 w/w%，0.34 g，3.00 mmol，1.30當量)於MeOH (30.0 mL)中之攪拌混合物中分批。將所得混合物在80℃下在氮氣氛圍下攪拌2小時。LCMS可偵測到所需產物。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化：管柱，矽膠；移動相，MeCN/水，10%至50%梯度/10 min；偵測器，UV 254 nm。此產生呈黃色固體狀之(2S)-2-[({4-[5-(三級丁氧基羰基)-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]吡啶-3-基}氧基)甲基]氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(0.56 g，36.82%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值688.2
52.5. 合成 (S)-2-(3-( 氮雜環丁烷 -2- 基甲氧基 ) 吡啶 -4- 基 )-3-((3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 )-1,5,6,7- 四氫 -4H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1269
在0℃下在氮氣氛圍下向(2S)-2-[({4-[5-(三級丁氧基羰基)-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]吡啶-3-基}氧基)甲基]氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(50 mg，0.08 mmol，1.00當量)及DCM (1.40 mL)中之攪拌混合物中分批添加TFA (1.40 mL)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。LCMS可偵測到所需產物。將所得混合物在減壓下濃縮。粗產物不經進一步純化直接用於下一步。 LC-MS: (M+H) +實驗值454.1
52.6. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{[(2S)-1- 甲磺醯基氮雜環丁烷 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1271
在0℃下在氬氣氛圍下向2-{3-[(2S)-氮雜環丁烷-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(135 mg，0.30 mmol，1.00當量)及Et 3N (150 mg，1.50 mmol，5.00當量)於DCM (2.90 mL)中之攪拌混合物中分批添加MsCl (34 mg，0.30 mmol，1.00當量)。將所得混合物在0℃下在氬氣氛圍下攪拌10分鐘。LCMS可偵測到所需產物。將所得混合物在減壓下濃縮。粗產物(200 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep C18 OBD管柱，30*100 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：20% B至50% B/10 min, 50% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：6.32；運行次數：0)，得到呈白色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2S)-1-甲磺醯基氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(27.7 mg，17.33%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值531.9。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d6) δ10.99 (s, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.04 (d, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.34 (d, 1H), 7.18 (d, 1H), 6.75-6.62 (m, 2H), 6.21-6.08 (m, 1H), 4.79 (d, 1H), 4.51-4.39 (m, 1H), 4.30-4.17 (m, 1H), 4.07-3.90 (m, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.79-3.60 (m, 1H), 3.49-3.32 (m, 2H), 3.13 (s, 3H), 2.90-2.68 (m, 2H), 2.39-2.21 (m, 2H)。
實例 53.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(3S)-4-(丙-2-烯醯基)𠰌啉-3-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 521)
53.1. 合成 (3S)-3-{[(4- 氰基吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 } 𠰌 啉 -4- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1273
在室溫下在氮氣氛圍下向3-氟吡啶-4-甲腈(5.87 g，27.05 mmol，1.10當量)及(3R)-3-(羥基甲基)𠰌啉-4-甲酸三級丁酯(3.00 g，24.59 mmol，1.00當量)於DMF (6 mL)中之攪拌溶液中分批添加Cs 2CO 3(5.40 g，16.57 mmol，1.20當量)。將所得混合物在60℃下在氮氣氛圍下攪拌2小時。可在LC-MS中偵測到所需產物。在室溫下用水(20 mL)稀釋反應。水層用EtOAc (3x30 mL)萃取且在真空下濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EA (1:1)溶離得到呈米白色固體狀之(3S)-3-{[(4-氰基吡啶-3-基)氧基]甲基}𠰌啉-4-甲酸三級丁酯(8.5 g，粗品)。 LC-MS: (M+H)+實驗值：320.00。
53.2. 合成 (3S)-3-({[4-( 胺基甲基 ) 吡啶 -3- 基 ] 氧基 } 甲基 ) 𠰌 啉 -4- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1275
在室溫下在氮氣氛圍下向(3S)-3-{[(4-氰基吡啶-3-基)氧基]甲基}𠰌啉-4-甲酸三級丁酯(8.40 g，26.30 mmol，1.00當量)及雷尼鎳(4.2 g，50 w/w% )於MeOH (30 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加氨(7.0 M/MeOH溶液，15.00 mL，105.00 mmol)。將所得混合物在室溫下在氫氣氛圍下攪拌3小時。藉由LCMS偵測所需產物。過濾所得混合物；濾餅用MeOH (3x30 mL)洗滌。在減壓下濃縮濾液得到呈棕色油狀物之(3S)-3-({[4-(胺基甲基)吡啶-3-基]氧基}甲基)𠰌啉-4-甲酸三級丁酯(7.6 g，66.12%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：324.05。
53.3. 合成 (3S)-3-({[4-({[1-( 三級丁氧基羰基 )-3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基甲硫醯基 ]-2- 側氧基 -5,6- 二氫吡啶 -4- 基 ] 胺基 } 甲基 ) 吡啶 -3- 基 ] 氧基 } 甲基 ) 𠰌 啉 -4- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1277
在室溫下在氬氣氛圍下向(3S)-3-({[4-(胺基甲基)吡啶-3-基]氧基}甲基)𠰌啉-4-甲酸三級丁酯(7.50 g，23.19 mmol，1.00當量)及3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-4-羥基-2-側氧基-5,6-二氫吡啶-1-甲酸三級丁酯(11.49 g，27.83 mmol，1.20當量)於DMF (70 mL)中之攪拌溶液中分批添加DIEA (8.99 g，69.58 mmol，3.00當量)及PyBOP (14.48 g，27.83 mmol，1.20當量)。將所得混合物在室溫下在氬氣氛圍下攪拌3小時。LCMS可偵測到所需產物。在真空下濃縮所得混合物。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (20:1)溶離得到呈黃綠色油狀物之(3S)-3-({[4-({[1-(三級丁氧基羰基)-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-2-側氧基-5,6-二氫吡啶-4-基]胺基}甲基)吡啶-3-基]氧基}甲基)𠰌啉-4-甲酸三級丁酯(9.60 g，43.22%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：718.2。
53.4. 合成 (3S)-3-[({4-[5-( 三級丁氧基羰基 )-3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ] 吡啶 -3- 基 } 氧基 ) 甲基 ] 𠰌 啉 -4- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1279
在室溫下在氮氣氛圍下向(3S)-3-({[4-({[1-(三級丁氧基羰基)-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基) 胺基甲硫醯基] -2-側氧基-5,6-二氫吡啶-4-基]胺基}甲基)吡啶-3-基]氧基}甲基)𠰌啉-4-甲酸三級丁酯(9.00 g，12.55 mmol，1.00當量)於MeOH (90 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加H 2O 2(30%) (2.13 g，18.80 mmol，1.50當量)。將所得混合物在80℃下在氮氣氛圍下攪拌2小時。LCMS可偵測到所需產物。在真空下濃縮所得混合物。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (10:1)溶離得到呈棕黃色油狀物之(3S)-3-[({4-[5-(三級丁氧基羰基)-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]吡啶-3-基}氧基)甲基]𠰌啉-4-甲酸三級丁酯(8.00 g，55.99%)。 LC-MS: (M+H)+實驗值 684.1。
53.5. 合成 (S)-3-((3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 )-2-(3-( 𠰌 啉 -3- 基甲氧基 ) 吡啶 -4- 基 )-1,5,6,7- 四氫 -4H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1281
在室溫下向(3S)-3-{[(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}𠰌啉-4-甲酸三級丁酯(100 mg，0.17 mmol，1.00當量)於DCM (3 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加TFA (2 mL)。將所得混合物在室溫下攪拌1小時。LCMS可偵測到所需產物。在真空下濃縮所得混合物。殘留物不經任何進一步純化直接用於下一步。 LC-MS: (M+H) +實驗值：484.05。
53.6. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{[(3S)-4-( 丙 -2- 烯醯基 ) 𠰌 啉 -3- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1283
在0℃下向3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[(3S)-𠰌啉-3-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H, 6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100 mg，0.21 mmol，1.00當量)於DCM (3.00 mL)中之溶液中逐滴添加TEA (209 mg，2.07 mmol，10.00當量)及丙烯醯氯(13 mg，0.15 mmol，0.70當量)。將所得混合物在0℃下在氮氣氛圍下攪拌1小時。反應在0℃下用MeOH淬滅。在真空下濃縮所得混合物。粗產物(150 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep OBD C18管柱，30*150 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：22% B至55% B/7 min；波長：254 nm；RT1(min)：6.5；運行次數：0)，得到呈白色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(3S)-4-(丙-2-烯醯基)𠰌啉-3-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(9.0 mg，7.89%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值537.95。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d6) δ11.01 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 8.11-7.93 (m, 1H), 7.61-7.04 (m, 3H), 6.85 (m, 1H), 6.75 -6.56 (m, 2H), 6.26-5.94 (m, 2H), 5.82-5.39 (m, 1H), 5.10-4.70 (m, 1H), 4.55-4.11 (m, 2H), 4.08-3.72 (m, 6H), 3.71-3.33 (m, 5H), 3.11-2.72 (m, 2H)。
實例 54.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2R)-1-[(2E)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯醯基]氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 199)
54.1. 合成 (E)-4-( 二甲基胺基 ) 丁 -2- 烯醯氯
Figure 02_image1285
在0℃下在氮氣氛圍下向(2E)-4-(二甲基胺基) 丁-2-烯酸(100 mg，0.78 mmol，1.00當量)於THF (4 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加草醯氯(108 mg，0.85 mmol，1.10當量)及DMF (3 mg，0.04 mmol，0.05當量)。將所得混合物在0℃下在氮氣氛圍下攪拌1小時。TLC可偵測到所需產物。反應直接用於下一步而無需後處理。
54.2. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{[(2R)-1-[(2E)-4-( 二甲基胺基 ) 丁 -2- 烯醯基 ] 氮雜環丁烷 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1287
在0℃下在氬氣氛圍下向2-{3-[(2R)-氮雜環丁烷-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(80 mg，0.18 mmol，1.00當量)於NMP (4 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加(2E)-4-(二甲基胺基) 丁-2-烯醯氯(78 mg，0.53 mmol，3.00當量)。將所得混合物在0℃下在氬氣氛圍下攪拌1小時。可在LC-MS中偵測到所需產物。在0℃下藉由添加MeOH (5 mL)淬滅反應。在真空下濃縮所得混合物。粗產物(40 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep OBD C18管柱，30*150 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：21% B至51% B/7 min；波長：254 nm；RT1(min)：6.5；運行次數：0)，得到呈米白色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2R)-1-[(2E)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯醯基]氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(8.3 mg，8.33%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值565.35 1H NMR (400 MHz, DMSO- d6) δ11.89 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 7.98 (d, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.36 (d, 1H), 7.15 (t, 1H), 6.77-6.63 (m, 3H), 6.19-6.08 (m, 2H), 4.85 (q, 1H), 4.56-4.51 (m, 1H), 4.41-4.38 (m, 1H), 4.23-4.17 (m, 2H), 3.91 (s, 3H), 3.45-3.41 (m, 2H), 3.12-2.90 (m, 4H), 3.33-2.96 (m, 3H), 2.52-1.94 (m, 5H)。
實例 55.3-[(3-氟-2-甲基苯基)胺基]-2-(3-{[(2S)-1-(2-氟丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 218)
55.1. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲基苯基 ) 胺基 ]-2-{3-[(2S)- 吡咯啶 -2- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 }-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1289
在室溫下在氮氣氛圍下向(2S)-2-{[(4-{3-[(3-氟-2-甲基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(40 mg，0.075 mmol，1當量)於DCM (1 mL)中之攪拌溶液中添加TFA (0.3 mL)。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮得到呈紅棕黃色油狀物之3-[(3-氟-2-甲基苯基)胺基]-2-{3-[(2S)-吡咯啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(32 mg，粗品)。 LC-MS: (M+H) +實驗值436.0
55.2. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{[(2S)-1-(2- 氟丙 -2- 烯醯基 ) 吡咯啶 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1291
將3-[(3-氟-2-甲基苯基)胺基]-2-{3-[(2S)-吡咯啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(32 mg，0.073 mmol，1當量)於THF (3 mL)中之攪拌溶液用DIEA鹼化至pH為8。在0℃下在氮氣氛圍下向上述混合物中添加2-氟丙-2-烯酸(9.9 mg，0.109 mmol，1.5當量)隨後逐滴添加T 3P (46.8 mg，0.145 mmol，2.0當量，50%/EA)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。在0℃下將飽和水溶液NaHCO 3(10 mL)添加至反應混合物中且用EtOAc (3 x 10 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。在減壓下濃縮濾液得到粗產物(40 mg)，藉由製備型HPLC在以下條件下純化(YMC-Actus Triart C18 ExRS, 30*150 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：30% B至54% B/9 min, 54% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8.85；運行次數：0)，得到呈淡黃色固體狀之3-[(3-氟-2-甲基苯基)胺基]-2-(3-{[(2S)-1-(2-氟丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(10.3 mg，27.6%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值508.15 1H NMR (400 MHz, 氯仿- d) δ11.16 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.91 (d, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.31 (d, 1H), 6.76-6.71 (m, 1H), 6.50 (t, 1H), 6.17 (d, 1H), 5.57-5.44 (m, 1H), 5.33-5.18 (m, 2H), 5.06 (s, 1H), 4.27 (t, 1H), 4.17-4.14 (m, 1H), 3.92-3.77 (m, 2H), 3.75-3.55 (m, 2H), 3.14 (t, 2H), 2.34 (s, 3H), 2.29-2.01 (m, 3H), 1.85-1.78 (m, 1H)。
實例 56.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R)-1-[(2E)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯醯基]吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 523)
56.1. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[(2R)- 吡咯啶 -2- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1293
在室溫下在氮氣氛圍下向(2R)-2-[2-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基] 吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(100 mg，0.178 mmol，1當量)於DCM (2 mL)中之溶液中添加TFA (0.7 mL)。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮得到呈紅色油狀物之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R)-吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100 mg，粗品)。 LCMS: (M+H) +實驗值462。
56.2. 合成 (2E)-4-( 二甲基胺基 ) 丁 -2- 烯醯氯
Figure 02_image1295
在0℃下在氮氣氛圍下向(2E)-4-(二甲基胺基) 丁-2-烯酸(100 mg，0.774 mmol，1當量)於THF (6 mL)中之攪拌溶液中添加(COCl) 2(108 mg，0.851 mmol，1.1當量)及DMF (0.1 mL)。將所得混合物在0℃下在氮氣氛圍下攪拌1小時。TLC (PE/EA=2:1)顯示偵測到新斑點。將所得混合物在減壓下濃縮得到呈棕色油狀物之(2E)-4-(二甲基胺基) 丁-2-烯醯氯(80 mg，粗品)。
56.3. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[(2R)-1-[(2E)-4-( 二甲基胺基 ) 丁 -2- 烯醯基 ] 吡咯啶 -2- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1297
將3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R)-吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100 mg，0.216 mmol，1.00當量)於NMP (2 mL)中之混合物用DIEA鹼化至pH為8。在0℃下在氬氣氛圍下向上述混合物中逐滴添加(2E)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯醯氯(47.9 mg，0.324 mmol，1.5當量)。將所得混合物在0℃下攪拌30分鐘。將所得混合物在減壓下濃縮且藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：Xselect  CSH C18 OBD管柱 30*150mm 5μm, n；移動相A：水(0.1%FA)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：9% B至25% B/10 min, 25% B；波長：254/220 nm)，得到呈淺棕色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R)-1-[(2E)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯醯基]吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(31.7 mg，25.3%)。 LCMS: (M+H) +實驗值573.35。 1H NMR (300 MHz, 氯仿- d) δ11.09 (s, 1H), 8.54 (s, 1H), 8.19-8.10 (m, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.42 (d, 1H), 6.93-6.73 (m, 1H), 6.71-6.65 (m, 1H), 6.60 (t, 1H), 6.51-6.42 (m, 1H), 6.25-6.12 (m, 1H), 5.58 (s, 1H), 4.89 (t, 1H), 4.06 (s, 3H), 3.88-3.74 (m, 1H), 3.72-3.31 (m, 5H), 3.29-3.20 (m, 2H), 2.49 (s, 6H), 2.39-2.21 (m, 3H), 2.15-2.05 (m, 1H)。
實例 57.2-(3-{2-[1-(二氟甲基)環丙基]乙炔基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 558)
57.1. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3- 碘吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1299
向2-(3-溴吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(500 mg，1.16 mmol，1.00當量)、CuI (22 mg，0.116 mmol，0.10當量)及NaI (347 mg，2.32 mmol，2.00當量)於二㗁烷(5 mL)中之攪拌混合物中逐滴添加DMEDA (51 mg，0.580 mmol，0.50當量)。將所得混合物在110℃下在氬氣氛圍下攪拌隔夜。LCMS可偵測到所需產物。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (20:1)溶離得到呈黃色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(320 mg，57.71%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值478.95。
57.2. 合成 2-(3-{2-[1-( 二氟甲基 ) 環丙基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1301
在氬氣氛圍下向3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(80 mg，0.162 mmol，1.00當量)、CuI (4 mg，0.02 mmol，0.10當量)、Pd(dppf)Cl 2.CH 2Cl 2(17 mg，0.02 mmol，0.10當量)及DIEA (108 mg，0.836 mmol，4.00當量)於DMF (1 mL)中之攪拌混合物中添加1-(二氟甲基)-1-乙炔基環丙烷(48 mg，0.418 mmol，2當量)。將所得混合物在50℃下在氬氣氛圍下攪拌4小時。LCMS可偵測到所需產物。將所得混合物在減壓下濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：Xselect CSH OBD管柱 30*150mm 5um, n；移動相A：水(0.1%FA)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：28% B至47% B/8 min, 47% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之2-(3-{2-[1-(二氟甲基)環丙基]乙炔基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(42.9 mg，43.33%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值466.95。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ11.40 (s, 1H), 8.86-8.21 (m, 2H), 7.42-7.29 (m, 2H), 7.13 (t, 1H), 6.61-6.54 (m, 1H), 6.46-6.39 (m, 1H), 5.98-5.67 (m, 2H), 3.87 (s, 3H), 3.47-3.41 (m, 2H), 2.82 (t, 2H), 1.32-1.18 (m, 4H)。
實例 58.2-(3-{2-[1-(二氟甲基)環丙基]乙炔基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 557)
58.1. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲基苯基 ) 胺基 ]-2-(3- 碘吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1303
向2-(3-溴吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(500 mg，1.20 mmol，1.00當量)、CuI (23 mg，0.12 mmol，0.10當量)及NaI (361 mg，2.40 mmol，2.00當量)於二㗁烷(5 mL)中之攪拌混合物中逐滴添加DMEDA (53 mg，0.602 mmol，0.50當量)。將所得混合物在110℃下在氬氣氛圍下攪拌隔夜。LCMS確認反應完成且觀察到所需產物。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (20:1)溶離得到呈黃色固體狀之3-[(3-氟-2-甲基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(300 mg，53.90%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值463.0。
58.2. 合成 2-(3-{2-[1-( 二氟甲基 ) 環丙基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-3-[(3- 氟 -2- 甲基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1305
在氬氣氛圍下向3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(80 mg，0.162 mmol，1.00當量)、CuI (3 mg，0.02 mmol，0.10當量)、Pd(dppf)Cl 2.CH 2Cl 2(14 mg，0.02 mmol，0.10當量)及DIEA (89 mg，0.692 mmol，4.0當量)於DMF (1 mL)中之攪拌混合物中添加1-(二氟甲基)-1-乙炔基環丙烷(40 mg，0.346 mmol，2.0當量)。將所得混合物在50℃下在氬氣氛圍下攪拌4小時。LCMS可偵測到所需產物。將所得混合物在減壓下濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：Xselect  CSH OBD管柱 30*150mm 5um, n；移動相A：水(0.1%FA)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：28% B至47% B/8 min, 47% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之2-(3-{2-[1-(二氟甲基)環丙基]乙炔基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(14.7 mg，18.67%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值451.00。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ11.32 (s, 1H), 8.53 (s, 1H), 8.31 (d, 1H), 7.23 (d, 1H), 7.20-7.14 (m, 2H), 6.74-6.67 (m, 1H), 6.40 (t, 1H), 6.02 (d, 1H), 5.98-5.65 (m, 1H), 3.47-3.40 (m, 2H), 2.83 (t, 2H), 2.14 (s, 3H), 1.29-1.17 (m, 4H)。
實例 59.2-(3-{[(2S)-1-[(2E)-4-(二甲基胺基) 丁-2-烯醯基] 吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 217)
59.1. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲基苯基 ) 胺基 ]-2-{3-[(2S)- 吡咯啶 -2- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 }-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1307
在室溫下在氮氣氛圍下向(2S)-2-{[(4-{3-[(3-氟-2-甲基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基} 吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(40 mg，0.075 mmol，1當量)於DCM (1 mL)中之溶液中添加TFA (0.3 mL)。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮得到呈淡黃色固體狀之3-[(3-氟-2-甲基苯基)胺基]-2-{3-[(2S)-吡咯啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(32 mg，粗品)。 LC-MS: (M+H) +實驗值436.0
59.2. 合成 2-(3-{[(2S)-1-[(2E)-4-( 二甲基胺基 ) 丁 -2- 烯醯基 ] 吡咯啶 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-3-[(3- 氟 -2- 甲基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1309
將3-[(3-氟-2-甲基苯基)胺基]-2-{3-[(2S)-吡咯啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(32 mg，0.073 mmol，1當量)於THF (1 mL)中之攪拌溶液用DIEA鹼化至pH為8。在0℃下在氮氣氛圍下向上述混合物中添加(2E)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯酸(14.2 mg，0.11 mmol，1.50當量)，隨後逐滴添加T 3P (46.7 mg，0.146 mmol，2.00當量，50%/EA)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。在0℃下將飽和水溶液NaHCO 3(10 mL)添加至反應混合物中且用EtOAc (3 x 10 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。在減壓下濃縮濾液得到粗產物(60 mg)，藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：Xselect CSH C18 OBD Column 30*150mm 5μm, n；移動相A：水(0.1%FA)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：9% B至19% B/7 min, 19% B；波長：254/220 nm)，得到呈黃色固體狀之2-(3-{[(2S)-1-[(2E)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯醯基] 吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(10.9 mg，26.8%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值547.15 1H NMR (300 MHz, 氯仿- d) δ11.49 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.91 (d, 1H), 7.38-7.31 (m, 2H), 6.94-6.80 (m, 1H), 6.78-6.63 (m, 1H), 6.55-6.42 (m, 2H), 6.17 (d, 1H), 5.47 (s, 1H), 5.11-4.93 (m, 1H), 4.26 (t, 1H), 4.09-3.85 (m, 1H), 3.76 (t, 2H), 3.69-3.54 (m, 2H), 3.37-3.26 (m, 2H), 3.24-3.16 (m, 2H), 2.42 (s, 6H), 2.34 (s, 3H), 2.21-2.05 (m, 3H), 1.96-1.84 (m, 1H)。
實例 60.3-[(3-氯-2-乙基苯基)胺基]-2-(3-{[(2S)-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 216)
60.1. 合成 (2S)-2-{[(4-{3-[(3- 氯 -2- 乙基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 } 吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1311
在室溫下在氬氣氛圍下向(2S)-2-{[(4-{3-碘-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基} 吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(90 mg，0.167 mmol，1當量)及Cs 2CO 3(108 mg，0.334 mmol，2當量)於DMF (1 mL)中之攪拌溶液中添加EPhos Pd G4 (15.3 mg，0.017 mmol，0.1當量)及3-氯-2-乙基苯胺(26 mg，0.167 mmol，1當量)。將所得混合物在50℃下在氬氣氛圍下攪拌2小時。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (10:1)溶離得到呈黃色固體狀之(2S)-2-{[(4-{3-[(3-氯-2-乙基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基} 吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(90 mg，95.1%)。 LC-MS: M+H實驗值：566.0。
60.2. 合成 3-[(2- 乙基苯基 ) 胺基 ]-2-{3-[(2S)- 吡咯啶 -2- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 }-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1313
在室溫下在氮氣氛圍下向(2S)-2-{[(4-{3-[(3-氯-2-乙基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基} 吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(90 mg，0.159 mmol，1當量)於DCM (0.9 mL)中之攪拌溶液中添加TFA (0.3 mL)。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮得到呈紅色油狀物之3-[(2-乙基苯基)胺基]-2-{3-[(2S)-吡咯啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(130 mg，粗品)。 LC-MS: M+H實驗值：466.0。
60.3. 合成 3-[(3- 氯 -2- 乙基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{[(2S)-1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 吡咯啶 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1315
將3-[(2-乙基苯基)胺基]-2-{3-[(2S)-吡咯啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(130 mg，0.181 mmol，1當量)於THF (2 mL)中之攪拌溶液用NaHCO 3鹼化至pH為8。在0℃下在氮氣氛圍下向上述混合物中添加丙烯醯氯(18.8 mg，0.208 mmol，1.15當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。用CH 2Cl 2(3x3 mL)萃取混合物。合併之有機層用飽和NaCl (水溶液) (10 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。粗產物(100 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep C18 OBD管柱，30*100 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：33% B至50% B/9 min, 50% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8.85；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-乙基苯基)胺基]-2-(3-{[(2S)-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(5.9 mg，6.18%)。 LC-MS: M+H實驗值：520.00。 1H NMR (300 MHz, 氯仿- d) δ11.60 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.83 (d, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.23 (s, 1H), 6.84 (d, 1H), 6.69 (t, 1H), 6.56-6.45 (m, 1H), 6.42 (d, 1H), 6.38-6.31 (m, 1H), 5.83-5.79 (m, 1H), 5.23 (s, 1H), 5.13-4.96 (m, 1H), 4.24 (t, 1H), 4.15-4.08 (m, 1H), 3.76 (t, 2H), 3.68-3.54 (m, 2H), 3.32-3.18 (m, 2H), 3.07-2.91 (m, 2H), 2.25-2.06 (m, 4H), 1.37 (t, 3H)。
實例 61.3-[(2-乙基-3-氟苯基)胺基]-2-(3-{[(2S)-1-(丙-2-烯醯基) 吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 211)
61.1. 合成 (2S)-2-{[(4-{3-[(2- 乙基 -3- 氟苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 } 吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1317
在室溫下在氬氣氛圍下向(2S)-2-{[(4-{3-碘-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(90 mg，0.167 mmol，1當量)及Cs 2CO 3(109 mg，0.334 mmol，2當量)於DMF (1 mL)中之攪拌溶液中添加EPhos Pd G4 (15.4 mg，0.017 mmol，0.1當量)及2-乙基-3-氟苯胺(27.9 mg，0.200 mmol，1.2當量)。所得懸浮液用氬氣回填三次且在50℃下攪拌2小時。LCMS確認反應完成且觀察到所需產物。所得混合物藉由矽膠墊過濾，且濾餅用DCM (2x10 mL)洗滌。在減壓下濃縮濾液，藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (10:1)溶離得到呈黃色固體狀之(2S)-2-{[(4-{3-[(2-乙基-3-氟苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基} 吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(90 mg，97.95%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：550.30。 61.2. 合成 3-[(2- 乙基 -3- 氟苯基 ) 胺基 ]-2-{3-[(2S)- 吡咯啶 -2- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 }-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1319
在室溫下在氮氣氛圍下向(2S)-2-{[(4-{3-[(2-乙基-3-氟苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基} 吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(90 mg，0.164 mmol，1當量)於DCM (0.9 mL)中之攪拌溶液中添加TFA (0.3 mL)。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮得到呈紅色油狀物之3-[(2-乙基-3-氟苯基)胺基]-2-{3-[(2S)-吡咯啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(90 mg，粗品)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：450.20。
61.3. 合成 3-[(2- 乙基 -3- 氟苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{[(2S)-1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 吡咯啶 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1321
將3-[(2-乙基-3-氟苯基)胺基]-2-{3-[(2S)-吡咯啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(90 mg，0.160 mmol，1當量)於THF (0.5 mL)中之攪拌溶液用NaHCO 3(水溶液)鹼化至pH為8。在0℃下在氮氣氛圍下向上述混合物中添加丙烯醯氯(16.6 mg，0.184 mmol，1.15當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。用CH 2Cl 2(3x3 mL)萃取混合物。合併之有機層用飽和NaCl (水溶液) (10 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。粗產物(100 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep OBD C18管柱，30*150 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：30% B至60% B/7 min；波長：254 nm；RT1(min)：6.5；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之3-[(2-乙基-3-氟苯基)胺基]-2-(3-{[(2S)-1-(丙-2-烯醯基) 吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(11.6 mg，13.96%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：504.15。 1H NMR (300 MHz, 氯仿- d) δ11.53 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.86 (d, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.29 (d, 1H), 6.76-6.33 (m, 4H), 6.21 (d, 1H), 5.85-5.79 (m, 1H), 5.22 (s, 1H), 5.14-4.98 (m, 1H), 4.24 (t, 1H), 4.16-4.10 (m, 1H), 3.76 (t, 2H), 3.67-3.50 (m, 2H), 3.23 (t, 2H), 2.95-2.78 (m, 2H), 2.25-2.05 (m, 4H), 1.45-1.31 (m, 3H)。
實例 62.2-(3-{[(2R)-1-(丁-2-炔醯基) 氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 227)
62.1. 合成 2-{3-[(2R)- 氮雜環丁烷 -2- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 }-3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1323
在室溫下在氮氣氛圍下向(2S)-2-[({4-[5-(三級丁氧基羰基)-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]吡啶-3-基}氧基)甲基]氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(670 mg，1.02 mmol，1當量)於DCM (6 mL)中之攪拌溶液中添加TFA (2 mL)。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮得到呈紅色油狀物之2-{3-[(2R)-氮雜環丁烷-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(1.2 g，粗品)。 LC-MS: M+H實驗值：454.1。
62.2. 合成 2-(3-{[(2R)-1-( 丁 -2- 炔醯基 ) 氮雜環丁烷 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1325
將2-{3-[(2R)-氮雜環丁烷-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(230 mg，0.220 mmol，1當量)於THF (1 mL)中之混合物用DIEA鹼化至pH為8。在0℃下在氮氣氛圍下向上述混合物中添加2-丁炔酸(27.7 mg，0.330 mmol，1.5當量)，隨後逐滴添加T 3P (209 mg，0.330 mmol，1.5當量，50%/EA)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。在0℃下將飽和水溶液NaHCO 3(10 mL)添加至反應混合物中且用EtOAc (3 x 10 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。在減壓下濃縮濾液得到粗產物(100 mg)，藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep OBD C18管柱，30*150 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：27% B至57% B/7 min, 57% B；波長：254 nm；RT1(min)：5.57；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之2-(3-{[(2R)-1-(丁-2-炔醯基) 氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(16.3 mg，14.0%)。 LC-MS: M+H實驗值：519.95。 1H NMR (400 MHz, 氯仿- d) δ11.40 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.98 (d, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.44 (d, 1H), 6.80-6.70 (m, 1H), 6.60 (t, 1H), 6.20-6.18 (m, 1H), 5.19 (s, 1H), 5.01-4.87 (m, 1H), 4.49 (t, 1H), 4.31-4.19 (m, 3H), 4.07 (s, 3H), 3.64-3.51 (m, 2H), 3.11-3.00 (m, 2H), 2.72-2.49 (m, 1H), 2.20-2.10 (m, 1H), 2.03 (s, 3H)。
實例 63.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2R)-1-(2-氟丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 226)
Figure 02_image1327
向2-{3-[(2R)-氮雜環丁烷-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(230 mg，0.220 mmol，1當量)於THF (1 mL)中之攪拌溶液中用DIEA鹼化至pH為8。在0℃下在氮氣氛圍下向上述混合物中添加2-氟丙-2-烯酸(29.7 mg，0.330 mmol，1.5當量)，隨後逐滴添加T 3P (210 mg，0.330 mmol，1.5當量，50%/EA)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。在0℃下將飽和水溶液NaHCO 3(10 mL)添加至反應混合物中且用EtOAc (3 x 10 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。在減壓下濃縮濾液得到粗產物(100 mg)，藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：YMC-Actus Triart C18 ExRS, 30*150 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：28% B至52% B/9 min, 52% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：7.53；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2R)-1-(2-氟丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(25.2 mg，21.55%)。 LC-MS: M+H實驗值：525.90。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ11.53 (s, 1H), 8.40 (s, 1H), 8.01 (d, 1H), 7.49 (s, 1H), 7.35 (d, 1H), 7.12 (s, 1H), 6.75-6.57 (m, 2H), 6.19-6.04 (m, 1H), 5.65-5.26 (m, 2H), 4.98-4.72 (m, 1H), 4.64-4.40 (m, 2H), 4.32 (s, 2H), 3.89 (s, 3H), 3.45-3.39 (m, 2H), 2.99-2.81 (m, 2H), 2.62-2.52 (m, 1H), 2.26-2.02 (m, 1H)。
實例 64.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2S,5S)-5-甲基-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 240)
64.1. 合成 (2S,5S)-2-( 羥基甲基 )-5- 甲基吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1329
在0℃下在N 2氛圍下向(2S,5S)-1-(三級丁氧基羰基)-5-甲基吡咯啶-2-甲酸(3.00 g，13.1 mmol，1當量)於THF (30 mL)中之攪拌溶液中添加BH 3-THF (1.35 g，15.7 mmol，1.20當量)。將所得混合物在25℃下攪拌1小時。藉由添加MeOH (100 mL)淬滅所得溶液。在真空下濃縮混合物得到呈白色油狀物之(2S,5S)-2-(羥基甲基)-5-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(3 g，粗品)。
64.2. 合成 (2S,5S)-2- 甲醯基 -5- 甲基吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1331
在0℃下在N 2氛圍下向(2S,5S)-2-(羥基甲基)-5-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(3 g，13.9 mmol，1當量)於DCM (30 mL)中之攪拌溶液中添加Dess-Martin (8.88 g，20.9 mmol，1.5當量)。將所得混合物在25℃下攪拌1小時。藉由添加Na 2SO 3(5 mL)淬滅所得溶液。用Na 2CO 3將混合物中和至pH為7。混合物用DCM (3 x 20 mL)萃取。合併之有機層用NaCl (3 x 50 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥且在真空下濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EA (20/1)溶離得到呈白色油狀物之(2S,5S)-2-甲醯基-5-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(2.33 g，80.5%)。
64.3. 合成(2S,5S)-2-乙炔基-5-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯
Figure 02_image1333
在0℃下在N 2氛圍下向(2S,5S)-2-甲醯基-5-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(2 g，9.37 mmol，1.00當量)及K 2CO 3(2.59 g，18.7 mmol，2.00當量)於MeOH (30 mL)中之攪拌溶液中添加貝斯特曼-大平試劑(2.16 g，11.2 mmol，1.20當量)。將所得混合物在25℃下攪拌2小時。在0℃下用飽和酒石酸鉀鈉(水溶液) (5 mL)淬滅所得溶液。混合物用EA (3 x 20 mL)萃取。合併之有機層用NaCl (水溶液) (3 x 50 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥且在真空下濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EA (20/1)溶離得到呈白色油狀物之(2S,5S)-2-乙炔基-5-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(1.5 g，68.79%)。
64.4. 合成 (2S,5S)-2-[2-(4-{3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ]-5- 甲基吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1335
在室溫下在氬氣氛圍下向3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(200 mg，0.404 mmol，1.00當量)、(2S,5S)-2-乙炔基-5-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(254 mg，1.21 mmol，3當量)、CuI (38.5 mg，0.202 mmol，0.5當量)、DIEA (261 mg，2.02 mmol，5當量)及Pd(dppf)Cl 2CH 2Cl 2(82.3 mg，0.101 mmol，0.25當量)於DMF (5 mL)中之攪拌溶液中。將所得混合物在50℃下在氬氣氛圍下攪拌隔夜。在真空下濃縮所得混合物。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (25:1)溶離得到呈黃色固體狀之(2S,5S)-2-[2-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-5-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(120 mg，51.53%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值576.25
64.5. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[(2S,5S)-5- 甲基吡咯啶 -2- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1337
在室溫下在氮氣氛圍下向(2S,5S)-2-[2-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-5-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(100 mg，0.174 mmol，1當量)於DCM (3 mL)中之攪拌溶液中添加TFA (1 mL)。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮得到呈黃色油狀物之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2S,5S)-5-甲基吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(120 mg，粗品)。 LC-MS: (M+H) +實驗值476.20
64.6. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[(2S,5S)-5- 甲基 -1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 吡咯啶 -2- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1339
將3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2S,5S)-5-甲基吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100 mg，0.210 mmol，1當量)於THF (3 mL)中之攪拌溶液用飽和NaHCO 3(水溶液)鹼化至pH為8。在0℃下向上述混合物中逐滴添加丙烯醯氯(38 mg，0.420 mmol，2當量)。將所得混合物在室溫下攪拌30分鐘。在0℃下反應用MeOH (0.5 mL)淬滅。用CH 2Cl 2/MeOH (10/1) (2x10 mL)萃取混合物，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。在減壓下濃縮濾液得到粗產物(100 mg)，藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep OBD C18管柱，30*150 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：34% B至53% B/8 min, 53% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2S,5S)-5-甲基-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(34.9 mg，31.18%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值530.10。 1H NMR (400 MHz, 氯仿- d) δ11.25 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.12 (d, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.42 (d, 1H), 6.73-6.71 (m, 1H), 6.62-6.57 (m, 1H), 6.54-6.50 (m, 1H), 6.45-6.40 (m, 1H), 6.23-6.21 (m, 1H), 5.79-5.76 (m, 1H), 5.25 (s, 1H), 4.89-4.80 (m, 1H), 4.38-4.25 (m, 1H), 4.07 (s, 3H), 3.68-3.52 (m, 2H), 3.32-3.21 (m, 2H), 2.49-2.30 (m, 2H), 2.22-2.10 (m, 1H), 1.98-1.90 (m, 1H), 1.42 (d, 3H)。
實例 65.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2S,5R)-5-甲基-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 239)
65.1. 合成 (2S,5R)-2-( 羥基甲基 )-5- 甲基吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1341
在0℃下在氮氣氛圍下向(2S,5R)-1-(三級丁氧基羰基)-5-甲基吡咯啶-2-甲酸(900 mg，3.925 mmol，1當量)於THF (9 mL)中之攪拌溶液中添加BH 3-THF (506 mg，5.89 mmol，1.5當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。藉由添加MeOH (20 mL)淬滅所得溶液。在真空下濃縮混合物得到呈黃色油狀物之(2S,5R)-2-(羥基甲基)-5-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(850 mg，粗品)。 LC-MS: M+H實驗值：216.0。
65.2. 合成 (2S,5R)-2- 甲醯基 -5- 甲基吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1343
在0℃下在氮氣氛圍下向(2S,5R)-2-(羥基甲基)-5-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(870 mg，4.04 mmol，1當量)於二氯甲烷(9 mL)中之攪拌溶液中分批添加Dess-Martin (2.06 g，4.85 mmol，1.2當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。在0℃下反應用飽和NaHCO 3(水溶液)淬滅。用CH 2Cl 2(3x10 mL)萃取混合物。合併之有機層用飽和NaCl (水溶液) (20 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥且在真空下濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EA (30:1)溶離得到呈白色油狀物之(2S,5R)-2-甲醯基-5-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(700 mg，81.22%)。 LC-MS: M+H實驗值：214.0。
65.3. 合成 (2S,5R)-2- 乙炔基 -5- 甲基吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1345
在0℃下在氮氣氛圍下向(2S,5R)-2-甲醯基-5-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(650 mg，3.05 mmol，1當量)及K 2CO 3(842 mg，6.10 mmol，2當量)於MeOH (10 mL)中之攪拌溶液中分批添加(1-重氮基-2-側氧基丙基)膦酸二甲酯(878 mg，4.57 mmol，1.5當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。在0℃下用飽和酒石酸鉀鈉(水溶液) (10 mL)淬滅所得溶液。混合物用EA (3 x 20 mL)萃取。合併之有機層用飽和NaCl (水溶液) (20 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥且在真空下濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EA (30:1)溶離得到呈白色油狀物之(2S,5R)-2-乙炔基-5-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(450 mg，70.55%)。 LC-MS: M+H實驗值：210.0。
65.4. 合成 -[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[(2S,5R)-5- 甲基 -1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 吡咯啶 -2- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1347
在室溫下在氬氣氛圍下向3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(200 mg，0.404 mmol，1.00當量)及CuI (38.5 mg，0.202 mmol，0.5當量)於DMF (3 mL)中之攪拌溶液中添加Pd(dppf)Cl 2.CH 2Cl 2(164 mg，0.202 mmol，0.5當量)及DIEA (157 mg，1.21 mmol，3當量)及(2S,5R)-2-乙炔基-5-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(211 mg，1.01 mmol，2.50當量)。將所得混合物在50℃下在氬氣氛圍下攪拌2小時。在真空下濃縮所得混合物。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化：管柱，矽膠；移動相，MeCN/水，10%至50%梯度/10 min；偵測器，UV 254 nm，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2S,5R)-5-甲基-1-(丙-2-烯醯基) 吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(150 mg，70.00%)。 LC-MS: M+H實驗值：576.0。
65.5. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[(2S,5R)-5- 甲基吡咯啶 -2- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1349
在室溫下在氮氣氛圍下向3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2S,5R)-5-甲基-1-(丙-2-烯醯基) 吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(140 mg，0.264 mmol，1當量)於DCM (1.5 mL)中之攪拌溶液中添加TFA (0.5 mL)。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮得到呈紅色油狀物之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2S,5R)-5-甲基吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(180 mg，粗品)。 LC-MS: M+H實驗值：476.0。
65.6. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[(2S,5R)-5- 甲基 -1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 吡咯啶 -2- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1351
將3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2S,5R)-5-甲基吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(180 mg，0.265 mmol，1當量)於THF (2 mL)中之攪拌溶液用飽和NaHCO 3(水溶液)鹼化至pH為8。在0℃下在氮氣氛圍下向上述混合物中添加丙烯醯氯(27.5 mg，0.305 mmol，1.15當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。在0℃下將MeOH (1 mL)添加至反應混合物中且用CH 2Cl 2(3x5 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。在減壓下濃縮濾液得到粗產物(130 mg)，藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep OBD C18管柱，30*150 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：38% B至54% B/8 min, 54% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2S,5R)-5-甲基-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(14.2 mg，10.05%)。 LC-MS: M+H實驗值：530.10。 1H NMR (300 MHz, 氯仿- d) δ11.06 (s, 1H), 8.53 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 6.78-6.71 (m, 1H), 6.65-6.38 (m, 3H), 6.27-6.12 (m, 1H), 5.83-5.67 (m, 1H), 5.26 (s, 1H), 5.01 (d, 1H), 4.46-4.28 (m, 1H), 4.07 (s, 3H), 3.77-3.49 (m, 2H), 3.38-3.14 (m, 2H), 2.58-2.22 (m, 3H), 1.95-1.86 (m, 1H), 1.30 (d, 3H)。
實例 66.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R,5R)-5-甲基-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 238)
66.1. 合成 (2R,5R)-2-( 羥基甲基 )-5- 甲基吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1353
在0℃下在氮氣氛圍下，向(2R,5R)-1-(三級丁氧基羰基)-5-甲基吡咯啶-2-甲酸(1 g，4.36 mmol，1當量)於THF (10 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加BH 3-THF (6.6 mL，1.5當量)。將所得混合物在75℃下在氮氣氛圍下攪拌1小時。反應在0℃下用MeOH (5 mL)淬滅。在真空下濃縮混合物得到呈無色油狀物之(2R,5R)-2-(羥基甲基)-5-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(900 mg，粗品)。
66.2. 合成 (2R,5R)-2- 甲醯基 -5- 甲基吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1355
在0℃下在氮氣氛圍下向(2R,5R)-2-(羥基甲基)-5-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(900 mg，4.18 mmol，1當量)於DCM (20 mL)中之攪拌溶液中分批添加Dess-Martin (1.95 g，4.60 mmol，1.1當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。反應在0℃下用飽和亞硫酸鈉(水溶液) (5 mL)淬滅。用CH 2Cl 2(2x20 mL)萃取混合物。在真空下濃縮有機層。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EA (30:1)溶離得到呈無色油狀物之(2R,5R)-2-甲醯基-5-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(790 mg，88.6%)。
66.3. 合成 (2R,5R)-2- 乙炔基 -5- 甲基吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1357
在0℃下在氮氣氛圍下向(2R,5R)-2-甲醯基-5-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(790 mg，3.70 mmol，1當量)及K 2CO 3(1.02 g，7.41 mmol，2當量)於MeOH (30 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加貝斯特曼-大平試劑(854 mg，4.45 mmol，1.2當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。反應在0℃下用飽和酒石酸鉀鈉(水溶液) (5 mL)淬滅。用EtOAc (2x30 mL)萃取混合物。在真空下濃縮有機層。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EA (20:1)溶離得到呈無色油狀物之(2R,5R)-2-乙炔基-5-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(610 mg，78.7%)。
66.4. 合成 (2R,5R)-2-[2-(4-{3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ]-5- 甲基吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1359
在室溫下在氬氣氛圍下將3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100 mg，0.202 mmol，1.00當量)、CuI (19.3 mg，0.101 mmol，0.5當量)、DIEA (131 mg，1.01 mmol，5當量)、Pd(dppf)Cl 2CH 2Cl 2(91 mg，0.11 mmol，0.25當量)及(2R,5R)-2-乙炔基-5-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(84.6 mg，0.404 mmol，2當量)於DMF (3 mL)中之混合物。將所得混合物在50℃下在氬氣氛圍下攪拌4小時。在真空下濃縮混合物。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化：管柱，C18矽膠；移動相，MeCN/水，10%至80%梯度/10 min；偵測器，UV 254 nm。此產生呈黃色油狀物之(2R,5R)-2-[2-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-5-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(100 mg，85.8%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值576.10
66.5. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[(2R,5R)-5- 甲基吡咯啶 -2- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1361
在室溫下在氮氣氛圍下向(2R,5R)-2-[2-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-5-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(90.0 mg，0.156 mmol，1當量)於DCM (3 mL)中之攪拌溶液中添加TFA (1 mL)。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮得到呈黃色油狀物之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R,5R)-5-甲基吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(120 mg，粗品)。 LC-MS: (M+H) +實驗值476.0
66.6. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[(2R,5R)-5- 甲基 -1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 吡咯啶 -2- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1363
將3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R,5R)-5-甲基吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(120 mg，0.252 mmol，1當量)於THF (2 mL)中之混合物用飽和NaHCO 3(水溶液)鹼化至pH為8。在0℃下向上述混合物中逐滴添加丙烯醯氯(41.1 mg，0.454 mmol，1.8當量)。將所得混合物在室溫下攪拌30分鐘。反應在0℃下用MeOH (0.5 mL)淬滅。用CH 2Cl 2/MeOH (10/1) (2x10 mL)萃取混合物，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。在減壓下濃縮濾液得到粗產物(100 mg)，藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep OBD C18管柱，30*150 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：33% B至49% B/8 min, 49% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8;)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R,5R)-5-甲基-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(28.7 mg，21.1%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值 530.10 1H NMR (400 MHz, 氯仿- d) δ11.25 (s, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 6.76-6.69 (m, 1H), 6.61 (t, 1H), 6.49-6.57 (m, 1H), 6.47-6.39 (m, 1H), 6.22 (d, 1H), 5.82-5.75 (m, 1H), 5.22 (s, 1H), 4.83 (t, 1H), 4.33-4.21 (m, 1H), 4.07 (s, 3H), 3.66-3.56 (m, 2H), 3.34-3.19 (m, 2H), 2.52-2.29 (m, 2H), 2.23-2.09 (m, 1H), 1.97-1.88 (m, 1H), 1.42 (d, 3H)。
實例 67.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(1S,3R,4R)-2-(丙-2-烯醯基)-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-3-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 236)
67.1. 合成 (1S,3R,4R)-3-( 羥基甲基 )-2- 氮雜雙環 [2.2.1] 庚烷 -2- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1365
在0℃下在N 2氛圍下向(1S,3R,4R)-2-(三級丁氧基羰基)-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-3-甲酸(1 g，4.14 mmol，1當量)於THF (10 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加BH 3-THF (0.43 g，4.97 mmol，1.2當量)。將所得混合物在室溫下在N 2氛圍下攪拌2小時。在0℃下藉由添加飽和NaHCO 3水溶液淬滅反應且用EA (50 mL)萃取。有機層用飽和NaCl水溶液(50 mL)洗滌且在減壓下濃縮。此產生呈無色油狀物之(1S,3R,4R)-3-(羥基甲基)-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸三級丁酯(0.94 g，粗品)。
67.2. 合成 (1S,3R,4R)-3- 甲醯基 -2- 氮雜雙環 [2.2.1] 庚烷 -2- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1367
在0℃下在N 2氛圍下向(1S,3R,4R)-3-(羥基甲基)-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸三級丁酯(0.94 g，4.13 mmol，1當量)於二氯甲烷(10 mL)中之攪拌溶液中添加Dess-Martin (1.93 g，4.54 mmol，1.1當量)。將所得混合物在室溫下在N 2氛圍下攪拌2小時。在0℃下藉由添加飽和NaHCO 3水溶液淬滅反應且用DCM (10 mL)萃取。有機層用飽和NaCl水溶液(20 mL)洗滌且在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EA=8:1溶離得到呈無色油狀物之(1S,3R,4R)-3-甲醯基-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸三級丁酯(879 mg，94.3%)。
67.3. 合成 (1S,3R,4R)-3- 乙炔基 -2- 氮雜雙環 [2.2.1] 庚烷 -2- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1369
在0℃下在N 2氛圍下向(1S,3R,4R)-3-甲醯基-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸三級丁酯(800 mg，3.55 mmol，1當量)及K 2CO 3(981 mg，7.10 mmol，2當量)於MeOH (20 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加(1-重氮基-2-側氧基丙基)膦酸二甲酯(818 mg，4.26 mmol，1.2當量)。將所得混合物在室溫下在N 2氛圍下攪拌1小時。藉由添加酒石酸鉀鈉及飽和NaHCO 3水溶液(2 mL)淬滅反應。用EA (20 mL)萃取混合物且在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EA=2:1溶離得到呈白色固體狀之(1S,3R,4R)-3-乙炔基-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸三級丁酯(625 mg，79.5%)。
67.4. 合成 (1S,3R,4R)-3-[2-(4-{3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ]-2- 氮雜雙環 [2.2.1] 庚烷 -2- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1371
在氬氣氛圍下向(1S,3R,4R)-3-乙炔基-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸三級丁酯(134 mg，0.606 mmol，3當量)及3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100 mg，0.202 mmol，1.00當量)及CuI (19 mg，0.101 mmol，0.5當量)及1,1'-雙(二苯基膦)二茂鐵-二氯化鈀(II)二氯甲烷錯合物(41 mg，0.051 mmol，0.25當量)於DMF (2.5 mL)中之攪拌溶液中添加DIEA (130 mg，1.01 mmol，5當量)。所得懸浮液用氬氣回填三次且在50℃下攪拌2小時。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化(管柱，C18矽膠；移動相，MeCN/水，60%至70%梯度/10 min；偵測器，UV 254 nm)。此產生呈黃色固體狀之(1S,3R,4R)-3-[2-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸三級丁酯(101 mg，84.9%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值588。
67.5. 合成 2-(3-{2-[(1S,3R,4R)-2- 氮雜雙環 [2.2.1] 庚烷 -3- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1373
在室溫下在氮氣氛圍下向(1S,3R,4R)-3-[2-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸三級丁酯(100 mg，0.170 mmol，1當量)於DCM (2 mL)中之攪拌溶液中添加TFA (0.7 mL)。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮得到呈紅色油狀物之2-(3-{2-[(1S,3R,4R)-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-3-基]乙炔基}吡啶-4-基)-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(50 mg，粗品)。 LC-MS: (M+H) +實驗值488。
67.6. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[(1S,3R,4R)-2-( 丙 -2- 烯醯基 )-2- 氮雜雙環 [2.2.1] 庚烷 -3- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1375
將2-(3-{2-[(1S,3R,4R)-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-3-基]乙炔基}吡啶-4-基)-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(50 mg，0.102 mmol，1當量)於THF (2 mL)中之混合物用飽和NaHCO 3水溶液鹼化至pH為8。在0℃下向上述混合物中逐滴添加丙烯醯氯(8.35 mg，0.092 mmol，0.9當量)。將所得混合物在室溫下攪拌2小時。在0℃下將MeOH (1 mL)添加至反應混合物中且用CH 2Cl 2(3x5 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。在減壓下濃縮濾液得到粗產物(130 mg)，藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：Aeris PEPTIDE  5um XB-C18 Axia, 21.2 mm X 250 mm, 5 μm；移動相A：THF--HPLC，移動相B：Hex--HPLC；流動速率：25 mL/min；梯度：32% B至62% B/10 min, 62% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：9.32；運行次數：0)。此產生呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(1S,3R,4R)-2-(丙-2-烯醯基)-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-3-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(25 mg，43.7%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值542.40。 1H NMR (400 MHz, 氯仿- d) δ11.02 (s, 1H), 8.53 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.41 (s, 1H), 6.79-6.71 (m, 1H), 6.62 (t, 1H), 6.57-6.48 (m, 1H), 6.43-6.34 (m, 1H), 6.24-6.15 (m, 1H), 5.81-5.72 (m, 1H), 5.63-5.52 (m, 1H), 5.28 (s, 1H), 4.48 (s, 1H), 4.43 (s, 1H), 4.07 (s, 3H), 4.00-3.91 (m, 2H), 3.70-3.56 (m, 2H), 3.37-3.23 (m, 2H), 2.87 (s, 1H), 2.31-2.22 (m, 1H), 2.10-1.50 (m, 2H)。
實例 68.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R)-4,4-二甲基-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 235)
68.1. 合成 (2R)-2-( 羥基甲基 )-4,4- 二甲基吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1377
在0℃下在N 2氛圍下向(2R)-1-(三級丁氧基羰基)-4,4-二甲基吡咯啶-2-甲酸(1.00 g，4.11 mmol，1.00當量)於THF (10.0 ml)中之攪拌溶液中添加BH 3-THF (423 mg，4.93 mmol，1.02當量)。將所得混合物在25℃下攪拌1小時。藉由添加MeOH (10 mL)淬滅所得溶液。在真空下濃縮混合物得到呈無色油狀物之(2R)-2-(羥基甲基)-4,4-二甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(1.01 g，粗品)。 LC-MS: M+H-56實驗值：174.00。
68.2. 合成 (2R)-2- 甲醯基 -4,4- 二甲基吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1379
在0℃下在N 2氛圍下向(2R)-2-(羥基甲基)-4,4-二甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(700 mg，3.05 mmol，1.00當量)於DCM (7.00 mL)中之攪拌溶液中添加Dess-Martin (1.94 g，4.57 mmol，1.50當量)。將所得混合物在25℃下攪拌1小時。藉由添加Na 2SO 3淬滅所得溶液。混合物用Na 2CO 3中和至pH為7且用DCM (3x20 mL)萃取。合併之有機層用NaCl (3 x 50 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥且在真空下濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EA (20/1)溶離得到無色油狀物之(2R)-2-甲醯基-4,4-二甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(600 mg，86.5%)。
68.3. 合成 (2R)-2- 乙炔基 -4,4- 二甲基吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1381
在0℃下在N 2氛圍下向(2R)-2-甲醯基-4,4-二甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(540 mg，2.37 mmol，1.00當量)及K 2CO 3(656 mg，4.75 mmol，2.00當量)於MeOH (2 mL)中之攪拌溶液中添加貝斯特曼-大平試劑(547 mg，2.85 mmol，1.20當量)。將所得混合物在25℃下攪拌2小時。藉由添加羅氏鹽淬滅所得溶液。混合物用EA (3 x 20 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(3 x 50 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥且在真空下濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EA (50/1)溶離得到呈無色油狀物之(2R)-2-乙炔基-4,4-二甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(440 mg，74.64%)。
68.4. 合成 (2R)-2-[2-(4-{3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ]-4,4- 二甲基吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1383
在氬氣氛圍下向3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(200 mg，0.40 mmol，1.00當量)、CuI (38 mg，0.20 mmol，0.5當量)及Pd(dppf)Cl 2CH 2Cl 2(91 mg，0.11 mmol，0.25當量)於DMF (4 mL)中之攪拌混合物中添加(2R)-2-乙炔基-4,4-二甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(90 mg，0.40 mmol，1.00當量)及DIEA (261 mg，2.020 mmol，5當量)。所得懸浮液用氬氣回填三次且在50℃下攪拌2小時。LCMS可偵測到所需產物。藉由過濾收集所沈澱之固體且用H 2O (3x10 mL)洗滌。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EA (1/1)溶離得到呈黃色固體狀之(2R)-2-[2-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-4,4-二甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(130 mg，53.95%)。 LC-MS: M+H實驗值：590.15。
68.5. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[(2R)-4,4- 二甲基吡咯啶 -2- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1385
在室溫下在氮氣氛圍下向(2S)-2-[2-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(60 mg，0.10 mmol，1.00當量)於DCM (1.5 mL)中之溶液中添加TFA (0.5 mL)。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮得到呈紅色油狀物之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R)-4,4-二甲基吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(70 mg，粗品)。 LC-MS: M+H實驗值：490.20。
68.6. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[(2R)-4,4- 二甲基 -1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 吡咯啶 -2- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1387
將3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R)-4,4-二甲基吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(70 mg，0.14 mmol，1.00當量)於THF (3 mL)中之攪拌溶液用飽和NaHCO 3(水溶液)鹼化至pH為8。在0℃下在氮氣氛圍下向上述混合物中逐滴添加丙烯醯氯(14 mg，0.15 mmol，1.10當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌2小時。在0℃下將MeOH (1 mL)添加至反應混合物中且用CH 2Cl 2(3x5 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。在減壓下濃縮濾液得到粗產物(50 mg)，藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：Xselect  CSH C18 OBD管柱 30*150mm 5μm, n；移動相A：水(0.1%FA)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：33% B至56% B/8 min, 56% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R)-4,4-二甲基-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(22.3 mg，28.41%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值544.50。 1H NMR (400 MHz, 氯仿- d) δ11.21 (s, 1H), 8.54 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.47-7.36 (m, 1H), 6.71-6.61 (m, 1H), 6.60 (t, 1H), 6.51-6.36 (m, 2H), 6.22-6.10 (m, 1H), 5.76-5.65 (m, 1H), 5.34 (s, 1H), 4.93 (t, 1H), 4.07 (s, 3H), 3.67-3.56 (m, 2H), 3.55-3.41 (m, 2H), 3.40-3.21 (m, 2H), 2.25-2.18 (m, 1H), 2.12-2.06 (m, 1H), 1.33 (s, 3H), 1.15 (s, 3H)。
實例 69.3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R,5R)-5-甲基-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 256)
69.1. 合成 (2R,5R)-2-[2-(4-{3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ]-5- 甲基吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1389
在室溫下在氬氣氛圍下將2-(3-溴吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100 mg，0.232 mmol，1當量)，(2R,5R)-2-乙炔基-5-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(97.1 mg，0.464 mmol，2當量)、Pd(dppf)Cl 2.CH 2Cl 2(47.2 mg，0.058 mmol，0.25當量)、CuI (22.1 mg，0.116 mmol，0.5當量)及DIEA (149 mg，1.160 mmol，5當量)於DMF (2 mL)中之混合物。將所得混合物在50℃下在氬氣氛圍下攪拌隔夜。在真空下濃縮所得混合物。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化：管柱，C18矽膠；移動相，MeCN/水，10%至80%梯度/20 min；偵測器，UV 254 nm。此產生呈黃色固體狀之(2R,5R)-2-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-5-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(100 mg，77.0%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值560.35
69.2. 合成 (3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[(2R,5R)-5- 甲基吡咯啶 -2- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1391
在室溫下在氮氣氛圍下向(2R,5R)-2-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-5-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(100 mg，0.179 mmol，1當量)於DCM (3 mL)中之攪拌溶液中添加TFA (1 mL)。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮得到呈黃色油狀物之(3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R,5R)-5-甲基吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100 mg，粗品)。 LC-MS: (M+H) +實驗值460.1
69.3. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[(2R,5R)-5- 甲基 -1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 吡咯啶 -2- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1393
將3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R,5R)-5-甲基吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100 mg，0.218 mmol，1當量)於THF (2 mL)中之混合物用NaHCO 3(水溶液)鹼化至pH為8。在0℃下向上述混合物中逐滴添加丙烯醯氯(29.5 mg，0.327 mmol，1.5當量)。將所得混合物在0℃下攪拌30分鐘。反應在0℃下用MeOH (0.5 mL)淬滅。用CH 2Cl 2/MeOH 10:1 (2x10 mL)萃取混合物，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。在減壓下濃縮濾液得到粗產物(110 mg)，藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep OBD C18管柱，30*150 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：28% B至58% B/7 min；波長：254 nm；RT1(min)：6.5;)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R,5R)-5-甲基-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(31.5 mg，28.1%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值 514.15。 1H NMR (400 MHz, 氯仿- d) δ11.26 (s, 1H), 8.54 (s, 1H), 8.11 (d, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.47 (d, 1H), 6.63-6.38 (m, 4H), 6.09-6.07 (m,1H), 5.80-5.77 (m, 1H), 5.22 (s, 1H), 4.84-4.80 (m, 1H), 4.26-4.25 (m, 1H), 4.10 (d, 3H), 3.62-3.58 (m, 2H), 3.33-3.24 (m, 2H), 2.53-2.41 (m, 1H), 2.41-2.30 (m,1H), 2.16 (t, 1H), 1.95-1.93 (m, 1H), 1.42 (d, 3H)。
實例 70.3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2S,5S)-5-甲基-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 255)
70.1. 合成 -(3-(((2S,5S)-1- 丙烯醯基 -5- 甲基吡咯啶 -2- 基 ) 乙炔基 ) 吡啶 -4- 基 )-3-((3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 )-1,5,6,7- 四氫 -4H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1395
在氬氣氛圍下向2-(3-溴吡啶-4-基)-3-((3-氟-2-甲氧基苯基)胺基)-1,5,6,7-四氫-4H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(200 mg，0.47 mmol，1.00當量)及Pd(dppf)Cl 2CH 2Cl 2(95 mg，0.11 mmol，0.25當量)於DMF (4 mL)中之攪拌混合物中添加(2S,5S)-2-乙炔基-5-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(486 mg，2.25 mmol，5.00當量)、CuI (44 mg，0.23 mmol，0.50當量)及DIEA (300 mg，2.25 mmol，5.00當量)。所得懸浮液用氬氣回填三次且在50℃下攪拌隔夜。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化：管柱，矽膠；移動相，MeCN/水，20%至100%梯度/10 min；偵測器，UV 254 nm，得到呈黃色固體狀之2-(3-(((2S,5S)-1-丙烯醯基-5-甲基吡咯啶-2-基)乙炔基)吡啶-4-基)-3-((3-氟-2-甲氧基苯基)胺基)-1,5,6,7-四氫-4H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(260 mg，86%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值560.50。
70.2. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[(2S,5S)-5- 甲基吡咯啶 -2- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1397
在室溫下在氮氣氛圍下向(2S,5S)-2-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-5-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(23 mg，0.041 mmol，1當量)於DCM (0.9 mL)中之攪拌溶液中添加TFA (0.3 mL)。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮得到呈紅色油狀物之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2S,5S)-5-甲基吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(80 mg，粗品)。 LC-MS: (M+H) +實驗值460.10。
70.3. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[(2S,5S)-5- 甲基 -1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 吡咯啶 -2- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1399
將3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2S,5S)-5-甲基吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(82 mg，0.178 mmol，1當量)於THF (2 mL)中之攪拌溶液用飽和NaHCO 3(水溶液)鹼化至pH為8。向上述混合物中添加丙烯醯氯(16.2 mg，0.178 mmol，1.00當量)，將其緩慢添加至溶液中。將所得混合物在0℃下攪拌0.5小時。在0℃下將MeOH (1 mL)添加至反應混合物中且用CH 2Cl 2(3x5 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。在減壓下濃縮濾液得到粗產物(120 mg)，藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：X Bridge Prep C18 OBD管柱，30*100 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：38% B至52% B/10 min, 52% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8.85；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2S,5S)-5-甲基-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(36.6 mg，39.62%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值514.15。 1H NMR (400 MHz, 氯仿- d) δ11.12 (s, 1H), 8.60-7.9 (m, 2H), 7.64 (s, 1H), 7.58-7.34 (m, 1H), 6.58-6.26 (m, 4H), 6.02 (d, 1H), 5.78-5.65 (m, 1H), 5.19 (s, 1H), 4.77 (t, 1H), 4.34-4.11 (m, 1H), 4.03 (s, 3H), 3.65-3.42 (m, 2H), 3.33-3.06 (m, 2H), 2.52-2.20 (m, 2H), 2.18-1.99 (m, 1H), 1.92-1.79 (m,1H), 1.35 (d, 3H)。
實例 71.3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(1S,3R,4R)-2-(丙-2-烯醯基)-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-3-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 252)
71.1. 合成 (1S,3R,4R)-3-[2-(4-{3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ]-2- 氮雜雙環 [2.2.1] 庚烷 -2- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1401
在氬氣氛圍下向(1S,3R,4R)-3-乙炔基-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸三級丁酯(154 mg，0.696 mmol，3當量)及2-(3-溴吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100 mg，0.232 mmol，1.00當量)及Pd(dppf)Cl 2.CH 2Cl 2(47.2 mg，0.058 mmol，0.25當量)及CuI (22.1 mg，0.116 mmol，0.5當量)於DMF (1 mL)中之攪拌溶液中添加DIEA (149 mg，1.16 mmol，5當量)。所得懸浮液用氬氣回填三次且在50℃下攪拌隔夜。在真空下濃縮所得混合物。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化：(管柱，C18矽膠；移動相，MeCN/水，60% to 70%梯度/10 min；偵測器，UV 254 nm)。此產生呈黃色固體狀之(1S,3R,4R)-3-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸三級丁酯(80 mg，60.35%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值572。
71.2. 合成 2-(3-{2-[(1S,3R,4R)-2- 氮雜雙環 [2.2.1] 庚烷 -3- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1403
在室溫下在氮氣氛圍下向(1S,3R,4R)-3-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸三級丁酯(80 mg，0.140 mmol，1當量)於DCM (2 mL)中之攪拌溶液中添加TFA (0.7 mL)。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮得到呈紅色油狀物之2-(3-{2-[(1S,3R,4R)-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-3-基]乙炔基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(80 mg，粗品)。 LC-MS: (M+H) +實驗值472。
71.3. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[(1S,3R,4R)-2-( 丙 -2- 烯醯基 )-2- 氮雜雙環 [2.2.1] 庚烷 -3- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1405
將2-(3-{2-[(1S,3R,4R)-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-3-基]乙炔基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(80 mg，0.170 mmol，1當量)於THF (2 mL)中之混合物用飽和NaHCO 3溶液鹼化至pH為8。在0℃下向上述混合物中逐滴添加丙烯醯氯(13.82 mg，0.153 mmol，0.9當量)。將所得混合物在室溫下攪拌2小時。在0℃下將MeOH (1 mL)添加至反應混合物中且用CH 2Cl 2(3x5 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。在減壓下濃縮濾液得到粗產物(80 mg)，藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：Xselect  CSH C18 OBD管柱 30*150mm 5μm,n；移動相A：水(0.1%FA)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：24% B至47% B/8 min,47% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8；運行次數：0)。此產生呈黃色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(1S,3R,4R)-2-(丙-2-烯醯基)-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-3-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(42 mg，46.6%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值526.45。 1H NMR (300 MHz, 氯仿- d) δ11.00 (s, 1H), 8.53 (s, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 6.63 -6.28 (m, 5H), 6.07 (d, 1H), 5.81-5.69 (m, 1H), 5.28 (s, 1H), 4.47 (s, 1H), 4.42 (s, 1H), 4.10 (s, 3H), 3.68-3.55 (m, 2H), 3.353.24 (m, 2H), 2.87 (s, 1H), 2.32-2.21 (m, 1H), 1.97-1.50 (m, 4H)。
實例 72.N-{3-[2-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]氧雜環丁烷-3-基}丙-2-烯醯胺 ( 化合物 264)
72.1. 合成 N-{3-[2-(4-{3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ] 氧雜環丁烷 -3- 基 } 丙 -2- 烯醯胺
Figure 02_image1407
在氬氣氛圍下向3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(120 mg，0.24 mmol，1.00當量)及Pd(dppf)Cl 2.CH 2Cl 2(49 mg，0.061 mmol，0.25當量)及CuI (23 mg，0.12 mmol，0.50當量)於DMF (2 mL)中之攪拌溶液中添加N-(3-乙炔基氧雜環丁烷-3-基)胺基甲酸三級丁酯(239 mg，1.21 mmol，5.00當量)及DIEA (156 mg，1.21 mmol，5.00當量)。所得懸浮液用氬氣回填三次且在50℃下攪拌2小時。在真空下濃縮所得混合物。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化：(管柱，C18矽膠；移動相，MeCN/水，60% to 70%梯度/10 min；偵測器，UV 254 nm)，得到呈黃色固體狀之(6R)-6-[2-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-5-氮雜螺[2.4]庚烷-5-甲酸三級丁酯(150 mg，84.12%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：564.10。
72.2. 合成 2-{3-[2-(3- 胺基氧雜環丁烷 -3- 基 ) 乙炔基 ] 吡啶 -4- 基 }-3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1409
在室溫下在氮氣氛圍下向N-{3-[2-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]氧雜環丁烷-3-基}胺基甲酸三級丁酯(100 mg，0.17 mmol，1.00當量)於DCM (3 mL)中之攪拌溶液中添加TFA (1 mL)。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮得到呈紅色油狀物之2-{3-[2-(3-胺基氧雜環丁烷-3-基)乙炔基]吡啶-4-基}-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100 mg，粗品)。 LC-MS: (M+Na) +實驗值：486.15。
72.3. 合成 N-{3-[2-(4-{3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ] 氧雜環丁烷 -3- 基 } 丙 -2- 烯醯胺
Figure 02_image1411
向2-{3-[2-(3-胺基氧雜環丁烷-3-基)乙炔基]吡啶-4-基}-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100 mg，0.21 mmol，1.00當量)於THF (1.5 mL)中之攪拌溶液中用NaHCO 3(水溶液)鹼化至pH為8。在0℃下向上述混合物中逐滴添加丙烯醯氯(23 mg，0.25 mmol，1.20當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1.5小時。在0℃下將MeOH (1 mL)添加至反應混合物中且用CH 2Cl 2(3x5 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。在減壓下濃縮濾液得到粗產物(130 mg)，藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：YMC-Actus Triart C18 ExRS, 30*150 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：23% B至38% B/10 min, 38% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：10.38；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之N-{3-[2-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]氧雜環丁烷-3-基}丙-2-烯醯胺(9.9 mg，8.87%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：518.10。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d6) δ11.30 (s, 1H,), 9.45 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.32 (d, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.35 (d, 1H), 7.16 (s, 1H), 6.72-6.63 (m, 2H), 6.36-6.17 (m, 2H), 6.14-6.12 (m, 1H), 5.76-5.72 (m, 1H), 4.90 (d, 2H,), 4.74 (d, 2H), 3.86 (s, 3H), 3.47-3.38 (m, 2H,), 2.93 (t, 2H)。
實例 73.N-{1-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]環丁基}丙-2-烯醯胺 ( 化合物 262)
73.1. 合成 2-{3-[2-(1- 胺基環丁基 ) 乙炔基 ] 吡啶 -4- 基 }-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1413
將2-(3-溴吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100 mg，0.232 mmol，1當量)、1-乙炔基環丁-1-胺(55 mg，0.580 mmol，2.5當量)、Pd(dppf)Cl 2(84.8 mg，0.116 mmol，0.5當量)、CuI (22 mg，0.116 mmol，0.5當量)及DIEA (89.9 mg，0.696 mmol，3當量)於DMF (2 mL)中之混合物。將所得混合物在50℃下在氬氣氛圍下攪拌1小時。反應混合物用水稀釋且用CH 2Cl 2萃取，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。濾液在減壓下濃縮得到呈淺棕色油狀物之2-{3-[2-(1-胺基環丁基)乙炔基]吡啶-4-基}-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100 mg，粗品)。 LC-MS: (M+H) +實驗值446.0
73.2. 合成 N-{1-[2-(4-{3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ] 環丁基 } 丙 -2- 烯醯胺
Figure 02_image1415
將2-{3-[2-(1-胺基環丁基)乙炔基]吡啶-4-基}-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100 mg，0.224 mmol，1當量)於THF (2 mL)中之溶液用飽和NaHCO 3(水溶液)鹼化至pH為8。在0℃下向上述混合物中添加丙烯醯氯(23.3 mg，0.258 mmol，1.15當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌30分鐘。在0℃下將MeOH (1 mL)添加至反應混合物中且用CH 2Cl 2(3x5 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。在減壓下濃縮濾液得到粗產物(50 mg)，藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep C18 OBD管柱，30*100 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：28% B至48% B/10 min, 48% B；波長：254/220 nm)，得到呈淺棕色固體狀之N-{1-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]環丁基}丙-2-烯醯胺(8.4 mg，7.23%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值500.15 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ11.44 (s, 1H), 9.11 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.29-8.21 (m, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.37 (d, 1H), 7.20 (s, 1H), 6.69-6.61 (m, 1H), 6.52 (t, 1H), 6.35-6.17 (m, 2H), 6.02 (d, 1H), 5.74-5.65 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.48-3.39 (m, 2H), 2.98 (t, 2H), 2.62-2.53 (m, 2H), 2.45-2.38 (m, 2H), 2.11-1.96 (m, 2H)。
實例 74.N-{1-[2-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]環丁基} 丙-2-烯醯胺 ( 化合物 261)
74.1. 合成 2-{3-[2-(1- 胺基環丁基 ) 乙炔基 ] 吡啶 -4- 基 }-3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1417
在室溫下在氬氣氛圍下向3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(200 mg，0.404 mmol，1當量)及1-乙炔基環丁-1-胺(96.2 mg，1.010 mmol，2.5當量)於DMF (2 mL)中之攪拌溶液中添加CuI (38.50 mg，0.202 mmol，0.5當量)及Pd(dppf)Cl 2CH 2Cl 2(165 mg，0.202 mmol，0.5當量)及DIEA (156 mg，1.21 mmol，3當量)。所得懸浮液用氬氣回填三次且在50℃下攪拌1小時。反應混合物用水稀釋且用CH 2Cl 2萃取。有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液得到呈黃色油狀物之2-{3-[2-(1-胺基環丁基)乙炔基]吡啶-4-基}-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100 mg，粗品)。 LC-MS: M+H實驗值：462.0。
74.2. 合成 N-{1-[2-(4-{3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ] 環丁基 } 丙 -2- 烯醯胺
Figure 02_image1419
向2-{3-[2-(1-胺基環丁基)乙炔基]吡啶-4-基}-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100 mg，0.216 mmol，1當量)於THF (2 mL)中之溶液中用飽和NaHCO 3(水溶液)鹼化至pH為8。在0℃下在氮氣氛圍下向上述混合物中添加丙烯醯氯(22.5 mg，0.248 mmol，1.15當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。在0℃下將MeOH (1 mL)添加至反應混合物中且用CH 2Cl 2(3x5 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。在減壓下濃縮濾液得到粗產物(60 mg)，藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Shield RP18 OBD管柱，30*150 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：28% B至58% B/10 min, 58% B；波長：220/254 nm；RT1(min)：10.37；運行次數：0)，得到呈白色固體狀之N-{1-[2-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]環丁基} 丙-2-烯醯胺(9.4 mg，8.36%)。 LC-MS: M+H實驗值：516.10。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ11.46 (s, 1H), 9.10 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.27 (d, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.36 (d, 1H), 7.19 (d, 1H), 6.82-6.59 (m, 2H), 6.36-6.07 (m, 3H), 5.79-5.60 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.48-3.42 (m, 2H), 2.97 (t, 2H), 2.63-2.54 (m, 2H), 2.46-2.35 (m, 2H), 2.04-1.86 (m, 2H)。
實例 75.2-(3-{[(3R)-4-(丁-2-炔醯基)𠰌啉-3-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 293)
75.1. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-{3-[(3R)- 𠰌 啉 -3- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 }-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1421
在室溫下在氮氣氛圍下向(3R)-3-[({4-[5-(三級丁氧基羰基)-4-側氧基-1H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]吡啶-3-基}氧基)甲基] 𠰌啉-4-甲酸三級丁酯(75 mg，0.142 mmol，1當量)於DCM (1 mL)中之攪拌溶液中添加TFA (0.3 mL)。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮得到呈紅色油狀物之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[(3R)-𠰌啉-3-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(90 mg，粗品)。 LC-MS: M+H實驗值：468.0。
75.2. 合成 2-(3-{[(3R)-4-( 丁 -2- 炔醯基 ) 𠰌 啉 -3- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1423
向3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[(3R)-𠰌啉-3-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(75 mg，0.160 mmol，1當量)於THF (1 mL)中之攪拌溶液中用DIEA鹼化至pH為8。在0℃下在氮氣氛圍下向上述混合物中添加2-丁炔酸(20.2 mg，0.240 mmol，1.5當量)，隨後逐滴添加T 3P (102 mg，0.320 mmol，2.0當量，50%/EA)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。在0℃下將飽和水溶液NaHCO 3(10 mL)添加至反應混合物中且用EtOAc (3 x 10 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。在減壓下濃縮濾液得到粗產物(100 mg)，藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep OBD C18管柱，30*150 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：23% B至39% B/8 min, 39% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之2-(3-{[(3R)-4-(丁-2-炔醯基)𠰌啉-3-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(27.8 mg，32.19%)。 LC-MS: M+H實驗值：534.10。 1H NMR (400 MHz, 氯仿- d) δ10.30 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 8.01 (d, 1H), 7.72-7.42 (m, 2H),6.62-6.58 (m, 1H), 6.52-6.47 (m, 1H), 6.06-6.02 (m, 1H), 5.28-5.01 (m, 2H), 4.80 (t, 1H), 4.35-4.18 (m, 2H), 4.16-3.93 (m, 5H), 3.76-3.72 (m, 1H), 3.70-3.48 (m, 4H), 3.39-3.03 (m, 2H), 2.03 (s, 3H)。
實例 76.3-[(3-氟-2-甲基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R)-2-甲基-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 304)
76.1. 合成 1- 氟 -3- 異硫氰基 -2- 甲基苯
Figure 02_image1425
在0℃下向3-氟-2-甲基-苯胺(10 g，79.9 mmol，1.00當量)於NaHCO 3(60 mL)及DCM (60 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加硫光氣(9.2 g，79.9 mmol，1.00當量)。將所得混合物在室溫下攪拌2小時。所得混合物用DCM (3 x 60 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(180 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE溶離得到呈黃色油狀物之1-氟-3-異硫氰基-2-甲基苯 (11.3 g，84.58%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值168.00。
76.2. 合成 N-(3- 氟 -2- 甲基苯基 )-4- 羥基 -2- 側氧基 -5,6- 二氫 -1H- 吡啶 -3- 硫代甲醯胺
Figure 02_image1427
在0℃下向1-氟-3-異硫氰基-2-甲基苯 (11.3 g，67.5 mmol，1.00當量)及哌啶-2,4-二酮(7.6 g，67.5 mmol，1.00當量)於ACN (100 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加DBU (15.1 mL，101 mmol，1.50當量)。將所得混合物在室溫下攪拌隔夜。LCMS可偵測到所需產物。用1N HCl將混合物酸化至pH為3。藉由過濾收集所沈澱之固體且用MeCN (3 x 15 mL)洗滌。在真空下乾燥所得固體得到呈黃色固體狀之N-(3-氟-2-甲基苯基)-4-羥基-2-側氧基-5,6-二氫-1H-吡啶-3-硫代甲醯胺(17.1 g，粗品)。 LC-MS: (M+H) +實驗值280.95。
76.3. 合成 4-{[(3- 溴吡啶 -4- 基 ) 甲基 ] 胺基 }-N-(3- 氟 -2- 甲基苯基 )-2- 側氧基 -5,6- 二氫 -1H- 吡啶 -3- 硫代甲醯胺
Figure 02_image1429
在0℃下向N-(3-氟-2-甲基苯基)-4-羥基-2-側氧基-5,6-二氫-1H-吡啶-3-硫代甲醯胺(17.1 g，61.0 mmol，1.00當量)及1-(3-溴吡啶-4-基) 甲胺(12.5 g，67.1 mmol，1.10當量)於DMF (171 mL)中之攪拌溶液中分批添加DIEA (23.6 g，183 mmol，3.00當量)及PyBOP (47.6 g，91.5 mmol，1.50當量)。將所得混合物在室溫下攪拌隔夜。LCMS可偵測到所需產物。反應混合物用水(400 mL)稀釋。藉由過濾收集所沈澱之固體且用水(3x20 mL)及MeOH (3x20 mL)。在真空下乾燥所得固體得到呈米白色固體狀之4-{[(3-溴吡啶-4-基)甲基]胺基}-N-(3-氟-2-甲基苯基)-2-側氧基-5,6-二氫-1H-吡啶-3-硫代甲醯胺(15 g，粗品)。 LC-MS: (M+H) +實驗值448.85。
76.4. 合成 2-(3- 溴吡啶 -4- 基 )-3-[(3- 氟 -2- 甲基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1431
將4-{[(3-溴吡啶-4-基)甲基]胺基}-N-(3-氟-2-甲基苯基)-2-側氧基-5,6-二氫-1H-吡啶-3-硫代甲醯胺(15.0 g，33.3 mmol，1.00當量)及H 2O 2(30%) (2.59 mL，33.3 mmol，1.00當量，30%)於MeOH (150 mL)中之混合物。將所得混合物在80℃下在氮氣氛圍下攪拌隔夜。LCMS可偵測到所需產物。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化：管柱，C18；移動相，MeCN/水，40%至45%梯度/10 min；偵測器，UV 254 nm。得到呈黃色固體狀之2-(3-溴吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(2.5 g，18.03%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值414.85。
76.5. 合成 (2R)-2- 甲醯基 -2- 甲基吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1433
在0℃下向(2R)-2-(羥基甲基)-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(0.74 g，3.43 mmol，1.00當量)於DCM (10 mL)中之攪拌溶液中分批添加Dess-Martin (2.19 g，5.16 mmol，1.50當量)。將所得混合物在室溫下攪拌2小時。在0℃下藉由添加飽和Na 2SO 3(水溶液) (10 mL)淬滅反應。混合物用EtOAc (3 x 20 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(60 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。濾液在減壓下濃縮且藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EA (8:1)溶離得到呈無色油狀物之(2R)-2-甲醯基-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(640 mg，87.30%)。
76.6. 合成 (2R)-2- 乙炔基 -2- 甲基吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1435
在0℃下向(2R)-2-甲醯基-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(640 mg，3.00 mmol，1.00當量)及K 2CO 3(829 mg，6.00 mmol，2.00當量)於MeOH (10 mL)中之攪拌混合物中逐滴添加貝斯特曼-大平試劑(691 mg，3.60 mmol，1.20當量)。將所得混合物在室溫下攪拌2小時。在0℃下反應用水淬滅且用EtOAc (3 x 10 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。濾液在減壓下濃縮且藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EA (8:1)溶離得到呈無色油狀物之(2R)-2-乙炔基-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(450 mg，71.65%)。
76.7. 合成 (2R)-2-[2-(4-{3-[(3- 氟 -2- 甲基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ]-2- 甲基吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1437
在氬氣氛圍下向(2R)-2-乙炔基-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(226 mg，1.08 mmol，3.00當量)、CuI (6 mg，0.036 mmol，0.10當量)、DIEA (186 mg，1.44 mmol，4.00當量)及2-(3-溴吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(150 mg，0.36 mmol，1.00當量)於DMF (2.5 mL)中之攪拌混合物中添加Pd(dppf)Cl 2.CH 2Cl 2(29 mg，0.036 mmol，0.10當量)。將所得混合物在50℃下在氬氣氛圍下攪拌隔夜。LCMS確認反應完成且觀察到所需產物。反應混合物用水(12.5 mL)稀釋。藉由過濾收集所沈澱之固體且用水(3 x 5 mL)洗滌。粗產物藉由Et 2O (10 mL)濕磨來純化得到呈黃色固體狀之(2R)-2-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(80 mg，粗品)。 LC-MS: (M+H) +實驗值544.15。
76.8. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[(2R)-2- 甲基吡咯啶 -2- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1439
在室溫下在氮氣氛圍下向(2R)-2-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(80 mg，0.15 mmol，1.00當量)於DCM (1 mL)中之攪拌混合物中添加TFA (0.3 mL)。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮得到呈紅色油狀物之3-[(3-氟-2-甲基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R)-2-甲基吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(160 mg，粗品)。 LC-MS: (M+H) +實驗值444.10。
76.9. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[(2R)-2- 甲基 -1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 吡咯啶 -2- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1441
向3-[(3-氟-2-甲基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R)-2-甲基吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(80 mg，0.180 mmol，1.00當量)於THF (1 mL)中之攪拌混合物中用NaHCO 3(水溶液)鹼化至pH為8。在0℃下在氮氣氛圍下向上述混合物中逐滴添加丙烯醯氯(16 mg，0.18 mmol，1.00當量)。將所得混合物在0℃下在氮氣氛圍下攪拌30分鐘。在0℃下將MeOH (1 mL)添加至反應混合物中且用CH 2Cl 2(3x5 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。在減壓下濃縮濾液得到粗產物(50 mg)，藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep C18 OBD管柱，30*100 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：38% B至52% B/10 min, 52% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8.85；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氟-2-甲基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R)-2-甲基-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(5.3 mg，5.87%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值498.20。 1H NMR (300 MHz, 氯仿- d) δ11.39 (s, 1H), 8.67-7.80 (m, 2H), 7.44 (s, 1H), 7.20-7.10 (m, 1H), 6.71-6.59 (m, 1H), 6.47-6.25 (m, 3H), 6.16 (d, 1H), 5.71-5.63 (m, 1H), 5.15 (s, 1H), 3.78-3.61 (m, 2H), 3.59-3.45 (m, 2H), 3.27-3.10 (m, 2H), 2.54-2.37 (m, 1H), 2.26 (s, 3H), 2.17-1.94 (m, 3H), 1.71 (s, 3H)。
實例 77.2-(3-{2-[(2R)-1-[(2E)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯醯基]吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 303)
77.1. 合成 (2R)-2-[2-(4-{3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ] 吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1443
在室溫下在氬氣氛圍下將2-(3-溴吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(150 mg，0.348 mmol，1當量)、(2R)-2-乙炔基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(135.83 mg，0.696 mmol，2當量)、Pd(dppf)Cl 2CH 2Cl 2(70.8 mg，0.087 mmol，0.25當量)、CuI (33.1 mg，0.174 mmol，0.5當量)及DIEA (225 mg，1.74 mmol，5當量)於DMF (5 mL)中之混合物。將所得混合物在50℃下在氬氣氛圍下攪拌隔夜。在真空下濃縮所得混合物。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化：管柱，C18矽膠；移動相，MeCN/水，10%至70%梯度/40 min；偵測器，UV 254 nm。此產生呈黃色油狀物之(2R)-2-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(120 mg，63.23%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值546.30。
77.2. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[(2R)- 吡咯啶 -2- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1445
在室溫下在氮氣氛圍下向(2 R)-2-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(100 mg，0.183 mmol，1當量)於DCM (3 mL)添加TFA (1 mL)中之攪拌溶液中。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮得到呈黃色油狀物之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R)-吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(120 mg，粗品)。 LC-MS: (M+H) +實驗值446.05。
77.3. 合成 2-(3-{2-[(2R)-1-[(2E)-4-( 二甲基胺基 ) 丁 -2- 烯醯基 ] 吡咯啶 -2- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1447
向3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R)-吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(110 mg，0.247 mmol，1當量)於THF (2 mL)中之攪拌溶液中用DIEA鹼化至pH為8。在0℃下在氮氣氛圍下向上述混合物中添加(2E)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯酸(47.9 mg，0.371 mmol，1.5當量)，隨後逐滴添加T 3P (157 mg，0.494 mmol，2.0當量，50%/EA)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。在0℃下將飽和水溶液NaHCO 3(10 mL)添加至反應混合物中且用EtOAc (3 x 10 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。在減壓下濃縮濾液得到粗產物(100 mg)，藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：Xselect  CSH C18 OBD管柱 30*150mm 5μm, n；移動相A：水(0.1%FA)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：10% B至24% B/8 min, 24% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8;)，得到呈黃色固體狀之2-(3-{2-[(2R)-1-[(2E)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯醯基]吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(44 mg，31.9%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值 557.6。 1H NMR (400 MHz, 氯仿- d) δ11.05 (s, 1H), 8.53 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 6.94-6.88 (m, 1H), 6.59-6.53 (m, 2H), 6.48-6.43 (m, 1H), 6.09-6.07 (m, 1H), 5.30 (s, 1H), 4.89 (t, 1H), 4.09 (s, 3H), 3.85-3.75 (m, 1H), 3.71-3.64 (m, 1H), 3.56-3.64(m, 2H), 3.54-3.49(m, 2H), 3.23 (t, 2H), 2.60 (s, 6H), 2.35-2.31 (m, 1H), 2.29-2.12 (m, 2H), 2.10-2.09 (m, 1H)。
實例 78.3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[(1S)-1-[(2R)-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]乙氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 310)
78.1. 合成 (2S)-2-[ 甲氧基 ( 甲基 ) 胺基甲醯基 ] 氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1449
在0℃下在氮氣氛圍下向(2S)-1-(三級丁氧基羰基)氮雜環丁烷-2-甲酸(10 g，49.7 mmol，1當量)及甲氧基(甲基)胺鹽酸鹽(5.82 g，59.6 mmol，1.2當量)於DMF (200 mL)中之攪拌溶液中添加N-甲基𠰌啉 (6.03 g，59.6 mmol，1.2當量)、HOBT (8.06 g，59.6 mmol，1.2當量)及EDCI (11.4 g，59.6 mmol，1.2當量)。將所得混合物在0℃下在氮氣氛圍下攪拌2小時。隨後在室溫下在氮氣氛圍下攪拌隔夜。反應混合物用乙酸乙酯(500 mL)稀釋。用1 N HCl (2x100 mL)及2 N NaOH (2x200 mL)及鹽水(3x100 mL)洗滌混合物。在真空下濃縮有機層得到呈無色油狀物之(2S)-2-[甲氧基(甲基)胺基甲醯基]氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(7.9 g，粗品)。 LC-MS: (M+H) +實驗值245.2
78.2. 合成 (2S)-2- 乙醯基氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1451
在-78℃下在氮氣氛圍下向(2S)-2-[甲氧基(甲基)胺基甲醯基]氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(7.4 g，30.3 mmol，1當量)於THF (150 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加1 M CH 3MgBr/THF (60 mL，2當量)。將所得混合物在-78℃下在氮氣氛圍下攪拌2小時。反應在0℃下用飽和NH 4Cl (水溶液) (300 mL)淬滅。混合物用EtOAc (3x100 mL)萃取且在真空下濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EA (30:1)溶離得到呈米白色油狀物之(2S)-2-乙醯基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(5 g，82.84%)。 LC-MS: (M-H) -實驗值198.0
78.3. 合成 (2S)-2-[(1R)-1- 羥基乙基 ] 氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1453
在0℃下在氮氣氛圍下向(2S)-2-乙醯基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(4.5 g，22.6 mmol，1當量)於MeOH (80 mL)中之攪拌溶液中分批添加NaBH 4(1.03 g，27.1 mmol，1.2當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌30分鐘。在0℃下藉由添加飽和NH 4Cl (水溶液) (80 mL)淬滅反應。混合物用EtOAc (3x50 mL)萃取。有機層用鹽水(50 mL)洗滌且在真空下濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EA (30:1)溶離得到呈無色油狀物之(2S)-2-[(1R)-1-羥基乙基]氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(2.5 g，55.0%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值 202.0。
78.4. 合成 2-[(1S)-1-[(4- 溴吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 乙基 ] 氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1455
在0℃下在氮氣氛圍下向(2S)-2-[(1R)-1-羥基乙基]氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(1 g，4.97 mmol，1當量)、4-溴吡啶-3-醇(0.86 g，4.97 mmol，1當量)及PPh 3(1.95 g，7.454 mmol，1.5當量)於THF (15 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加DEAD (1.30 g，7.46 mmol，1.50當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌隔夜。在真空下濃縮所得混合物。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化：管柱，C18矽膠；移動相，MeCN/水，10%至50%梯度/20 min；偵測器，UV 254 nm。此產生呈無色油狀物之2-[(1S)-1-[(4-溴吡啶-3-基)氧基]乙基]氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(1.2 g，67.6%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值 357.0。
78.5. 合成 (2R)-2-[(1S)-1-[(4-{4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 乙基 ] 氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1457
在室溫下在氮氣氛圍下將2-[(1S)-1-[(4-溴吡啶-3-基)氧基]乙基]氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(500 mg，1.40 mmol，1當量)、2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(734 mg，2.80 mmol，2當量)、Na 2CO 3(445 mg，4.20 mmol，3當量)及第二代XPhos預催化劑(110 mg，0.140 mmol，0.1當量)於二㗁烷(10 mL)及H 2O (1 mL)中之混合物。將所得混合物在80℃下在氮氣氛圍下攪拌5小時。在真空下濃縮所得混合物。殘留物藉由製備型TLC純化(CH 2Cl 2/MeOH 15:1)，得到呈黃色油狀物之(2R)-2-[(1S)-1-[(4-{4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]乙基]氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(450 mg，77.9%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值 413.10。
78.6. 合成 (2R)-2-[(1S)-1-[(4-{3- 碘 -4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 乙基 ] 氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1459
在0℃下在氮氣氛圍下向(2R)-2-[(1S)-1-[(4-{4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]乙基]氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(410 mg，0.994 mmol，1當量)於DMF (5 mL)中之攪拌溶液中分批添加NIS (268 mg，1.19 mmol，1.2當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。反應在0℃下用飽和亞硫酸鈉(水溶液) (1 mL)淬滅。在真空下濃縮混合物。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (10:1)溶離得到呈黃色固體狀之(2R)-2-[(1S)-1-[(4-{3-碘-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]乙基]氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(520 mg，97.1%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值 539.05。
78.7. 合成 (2R)-2-[(1S)-1-[(4-{3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 乙基 ] 氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1461
在氬氣氛圍下向(2R)-2-[(1S)-1-[(4-{3-碘-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]乙基]氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(470 mg，0.873 mmol，1當量)及3-氟-2-甲氧基苯胺(246 mg，1.74 mmol，2當量)於DMF (8 mL)中之攪拌混合物中添加Cs 2CO 3(568 mg，1.74 mmol，2當量)及EPhos Pd G4 (80.2 mg，0.087 mmol，0.1當量)。所得懸浮液用氬氣回填三次且在50℃下攪拌2小時。LCMS確認反應完成且觀察到所需產物。所得混合物藉由矽膠墊過濾，且濾餅用DCM (2x10 mL)洗滌。在減壓下濃縮濾液，藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (20:1)溶離得到呈黃色固體狀之(2R)-2-[(1S)-1-[(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]乙基]氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(480 mg，99.6%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值 552.20。
78.8. 合成 2-{3-[(1S)-1-[(2R)- 氮雜環丁烷 -2- 基 ] 乙氧基 ] 吡啶 -4- 基 }-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1463
在室溫下在氮氣氛圍下向(2R)-2-[(1S)-1-[(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]乙基]氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(100 mg，0.181 mmol，1當量)於DCM (3 mL)中之攪拌溶液中添加TFA (1 mL)。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮得到呈黃色油狀物之2-{3-[(1S)-1-[(2R)-氮雜環丁烷-2-基]乙氧基]吡啶-4-基}-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(120 mg，粗品)。 LC-MS: (M+H) +實驗值 452.20。
78.9. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-{3-[(1S)-1-[(2R)-1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 氮雜環丁烷 -2- 基 ] 乙氧基 ] 吡啶 -4- 基 }-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1465
將2-{3-[(1S)-1-[(2R)-氮雜環丁烷-2-基]乙氧基]吡啶-4-基}-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(150 mg，0.332 mmol，1當量)於THF (3 mL)中之混合物用NaHCO 3(水溶液)鹼化至pH為8。在0℃下向上述混合物中逐滴添加丙烯醯氯(45.1 mg，0.498 mmol，1.5當量)。將所得混合物在室溫下攪拌30分鐘。反應在0℃下用MeOH (2 mL)淬滅且用CH 2Cl 2/MeOH (10/1) (2x10 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。在減壓下濃縮濾液得到粗產物(120 mg)，藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep C18 OBD管柱，30*100 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：22% B至42% B/9 min, 42% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：7.53;)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[(1S)-1-[(2R)-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]乙氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(22.3 mg，13.2%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值506.15。 1H NMR (400 MHz, 氯仿- d) δ11.80 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.94 (d, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.57 (d, 1H), 6.65-6.56 (m, 1H), 6.50-6.28 (m, 3H), 6.12-6.07 (m, 1H), 5.85-5.78 (m, 1H), 5.22 (s, 1H), 5.02-4.98 (m, 1H), 4.78-4.69 (m, 1H), 4.30-4.18 (m, 2H), 4.13 (d, 3H), 3.64-3.52 (m, 2H), 3.24-3.07 (m, 2H), 2.65-2.54 (m, 1H), 2.19-2.07 (m, 1H), 1.60 (d, 3H)。
實例 79.2-{3-[(1S)-1-[(2R)-1-(丁-2-炔醯基)氮雜環丁烷-2-基]乙氧基]吡啶-4-基}-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 313)
79.1. 合成 2-{3-[(1S)-1-[(2R)- 氮雜環丁烷 -2- 基 ] 乙氧基 ] 吡啶 -4- 基 }-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1467
在室溫下在氮氣氛圍下向(2R)-2-[(1S)-1-[(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]乙基]氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(100 mg，0.181 mmol，1當量)於DCM (3 mL)中之攪拌溶液中添加TFA (1 mL)。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮得到呈黃色油狀物之2-{3-[(1S)-1-[(2R)-氮雜環丁烷-2-基]乙氧基]吡啶-4-基}-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(120 mg，粗品)。 LC-MS: (M+H) +實驗值 452.20。
79.2. 合成 2-{3-[(1S)-1-[(2R)-1-( 丁 -2- 炔醯基 ) 氮雜環丁烷 -2- 基 ] 乙氧基 ] 吡啶 -4- 基 }-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1469
向2-{3-[(1S)-1-[(2R)-氮雜環丁烷-2-基]乙氧基]吡啶-4-基}-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100 mg，0.221 mmol，1當量)於THF (3 mL)中之攪拌溶液中用DIEA鹼化至pH為8。向上述混合物中添加2-丁炔酸(27.9 mg，0.332 mmol，1.5當量)，隨後逐滴添加T 3P (282 mg，0.442 mmol，3當量，50%/EA)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。在0℃下將飽和水溶液NaHCO 3(10 mL)添加至反應混合物中且用EtOAc (3 x 10 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。在減壓下濃縮濾液得到粗產物(120 mg)，藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Shield RP18 OBD管柱，30*150 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：20% B至50% B/8 min, 50% B；波長：220/254 nm；RT1(min)：8.00; )，得到呈黃色固體狀之2-{3-[(1S)-1-[(2R)-1-(丁-2-炔醯基)氮雜環丁烷-2-基]乙氧基]吡啶-4-基}-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(31.4 mg，27.09%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值518.15。 1H NMR (400 MHz, 氯仿- d) δ11.47 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.93 (d, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.54 (d, 1H), 6.62-6.58 (m, 1H), 6.56-6.46 (m, 1H), 6.06-6.04 (m, 1H), 5.23 (s, 1H), 4.95-4.91 (m, 1H), 4.74-4.69 (m, 1H), 4.27-4.21 (m, 1H), 4.19-4.09 (m, 4H), 3.59-3.53 (m, 2H), 3.17-3.04 (m, 2H), 2.62-2.51 (m, 1H), 2.09-2.02 (m, 4H), 1.59 (d, 3H)。
實例 80.2-(3-{[(2S)-4,4-二甲基-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 327)
80.1. 合成 (2S)-2-{[(4-{3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 }-4,4- 二甲基吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1471
在氬氣氛圍下向(2S)-2-{[(4-{3-碘-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}-4,4-二甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(170 mg，0.300 mmol，1當量)及Cs 2CO 3(196 mg，0.600 mmol，2當量)於DMF (2 mL)中之攪拌溶液中添加EPhos Pd G4 (27.6 mg，0.030 mmol，0.1當量)及3-氟-2-甲氧基苯胺(50.8 mg，0.360 mmol，1.2當量)。所得懸浮液用氬氣回填三次且在50℃下攪拌2小時。LCMS確認反應完成且觀察到所需產物。所得混合物藉由矽膠墊過濾，且濾餅用DCM (2x10 mL)洗滌。在減壓下濃縮濾液，藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (20:1)溶離得到呈黃色固體狀之(2S)-2-{[(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}-4,4-二甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(150 mg，86.22%)。 LC-MS: M+H實驗值：580.0。
80.2. 合成 2-(3-{[(2S)-4,4- 二甲基吡咯啶 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1473
在室溫下在氮氣氛圍下向(2S)-2-{[(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}-4,4-二甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(120 mg，0.207 mmol，1當量)於DCM (1 mL)中之攪拌溶液中添加TFA (0.3 mL)。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮得到呈紅色油狀物之2-(3-{[(2S)-4,4-二甲基吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(150 mg，粗品)。 LC-MS: M+H實驗值：480。
80.3. 合成 2-(3-{[(2S)-4,4- 二甲基 -1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 吡咯啶 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1475
將2-(3-{[(2S)-4,4-二甲基吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(150 mg，0.250 mmol，1當量)於THF (1.5 mL)中之攪拌溶液用飽和NaHCO 3(水溶液)鹼化至pH為8。在0℃下在氮氣氛圍下向上述混合物中添加丙烯醯氯(26.1 mg，0.287 mmol，1.15當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。在0℃下將MeOH (1 mL)添加至反應混合物中且用CH 2Cl 2(3x5 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。在減壓下濃縮濾液得到粗產物(130 mg)，將其藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Shield RP18 OBD管柱，30*150 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：28% B至58% B/10 min, 58% B；波長：220/254 nm；RT1(min)：10.37；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之2-(3-{[(2S)-4,4-二甲基-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(25.1 mg，18.67%)。 LC-MS: M+H實驗值：534.15。 1H NMR (400 MHz, 氯仿- d) δ11.67 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.72-7.47 (m, 2H), 6.70-6.44 (m, 3H), 6.38-4.35 (m, 1H), 6.11-6.08(m, 1H), 5.78-5.72 (m, 1H), 5.28 (s, 1H), 5.07-4.98 (m, 1H), 4.26 (t, 1H), 4.26-4.03 (m, 4H), 3.78-3.47 (m, 3H), 3.35 (d, 1H), 3.30-3.12 (m, 2H), 2.31-1.92 (m, 1H), 1.62-1.39 (m,1H), 1.25 (s, 3H), 1.07 (s, 3H)。
實例 81.2-(3-{2-[(2R)-1-[(2E)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯醯基]-4,4-二甲基吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 344)
81.1. 合成 2-(3-{2-[(2R)-4,4- 二甲基吡咯啶 -2- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1477
在室溫下在氮氣氛圍下向(2R)-2-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-4,4-二甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(70 mg，0.122 mmol，1.0當量)於DCM (1 mL)中之攪拌溶液中添加TFA (0.3 mL)。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮得到呈紅色油狀物之2-(3-{2-[(2R)-4,4-二甲基吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(70 mg，粗品)。 LC-MS: (M+H) +實驗值474.10。
81.2. 合成 2-(3-{2-[(2R)-1-[(2E)-4-( 二甲基胺基 ) 丁 -2- 烯醯基 ]-4,4- 二甲基吡咯啶 -2- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1479
向2-(3-{2-[(2R)-4,4-二甲基吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(70 mg，0.148 mmol，1.00當量)於THF (1 mL)中之攪拌溶液中用DIEA鹼化至pH為8。向上述混合物中逐滴添加(2E)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯酸(28.5 mg，0.222 mmol，1.50當量)及T 3P (93.3 mg，0.296 mmol，2.00當量，50%/EA)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。在0℃下將飽和水溶液NaHCO 3(10 mL)添加至反應混合物中且用EtOAc (3 x 10 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。在減壓下濃縮濾液得到粗產物(60 mg)，藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：Xselect  CSH C18 OBD管柱 30*150mm 5μm, n；移動相A：水(0.1%FA)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：17% B至34% B/7 min, 34% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：7；運行次數：0)，得到呈米白色固體狀之2-(3-{2-[(2R)-1-[(2E)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯醯基]-4,4-二甲基吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(46.1 mg，52.64%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值585.15。 1H NMR (400 MHz, 氯仿- d) δ11.18 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.13 (d, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.46 (d, 1H), 6.98-6.85 (m, 1H), 6.58-6.32 (m, 3H), 6.11-6.03 (m, 1H), 5.33 (s, 1H), 4.90 (t, 1H), 4.07 (s, 3H), 3.66-3.37 (m, 4H), 3.27-3.14 (m, 4H), 2.35 (s, 6H), 2.21-2.15 (m, 1H), 2.09-2.03 (m, 1H), 1.32 (s, 3H), 1.13 (s, 3H)。
實例 82.2-(3-{[(2R)-1-(丁-2-炔醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3,4-二氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 351)
82.1. 合成 (2R)-2-{[(4-{3-[(3,4- 二氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 } 氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1481
在氬氣氛圍下向(2S)-2-{[(4-{3-碘-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(240 mg，0.46 mmol，1.00當量)及3,4-二氟-2-甲氧基苯胺(87 mg，0.55 mmol，1.20當量)於DMF (4 mL)中之攪拌混合物中添加Ephos Pd G4 (42 mg，0.046 mmol，0.10當量)及Cs 2CO 3(300 mg，0.92 mmol，2.00當量)。將所得混合物在50℃下在氬氣氛圍下攪拌2小時。LCMS確認反應完成且觀察到所需產物。所得混合物藉由矽膠墊過濾，且濾餅用DCM (2x10 mL)洗滌。在減壓下濃縮濾液，藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (20:1)溶離得到呈黃色固體狀之(2R)-2-{[(4-{3-[(3,4-二氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基} 氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(200 mg，75.86%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值556.55。
82.2. 合成 2-{3-[(2R)- 氮雜環丁烷 -2- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 }-3-[(3,4- 二氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1483
在室溫下在氮氣氛圍下向(2R)-2-{[(4-{3-[(3,4-二氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基} 氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(90 mg，0.162 mmol，1.00當量)於DCM (1 mL)中之攪拌溶液中添加TFA (0.3 mL)。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮得到呈紅色油狀物之2-{3-[(2R)-氮雜環丁烷-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-3-[(3,4-二氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(180 mg，粗品)。 LC-MS: (M+H) +實驗值456.05。
82.3. 合成 2-(3-{[(2R)-1-( 丁 -2- 炔醯基 ) 氮雜環丁烷 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-3-[(3,4- 二氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1485
向2-{3-[(2R)-氮雜環丁烷-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-3-[(3,4-二氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(90 mg，0.198 mmol，1.00當量)於THF (2 mL)中之攪拌混合物中用DIEA鹼化至pH為8。在0℃下在氮氣氛圍下向上述混合物中添加2-丁炔酸(24.8 mg，0.297 mmol，1.50當量)，隨後逐滴添加T 3P (125 mg，0.396 mmol，2.0當量，50%/EA)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。在0℃下將飽和水溶液NaHCO 3(10 mL)添加至反應混合物中且用EtOAc (3 x 10 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。在減壓下濃縮濾液得到粗產物(60 mg)，藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep C18 OBD管柱，30*100 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：37% B至65% B/8 min, 65% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：5.78；運行次數：0)，得到呈米白色固體狀之2-(3-{[(2R)-1-(丁-2-炔醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3,4-二氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(30.3 mg，29.28%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值522.10。 1H NMR (400 MHz, 氯仿- d) δ11.31 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.94 (d, 1H), 7.41 (d, 1H), 7.29 (s, 1H), 6.46-6.33 (m, 1H), 5.93-5.84 (m, 1H), 5.14 (s, 1H), 4.92-4.79 (m, 1H), 4.42 (t, 1H), 4.26-4.13 (m, 3H), 4.06 (s, 3H), 3.53-3.46 (m, 2H), 3.16-2.94 (m, 2H), 2.60-2.50 (m, 1H), 2.11-2.01 (m, 1H), 1.96 (s, 3H)。
實例 83.2-(3-{2-[(1S,3S,5S)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-基]乙炔基}吡啶-4-基)-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 516)
83.1. 合成 (1S,3S,5S)-3-( 羥基甲基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -2- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1487
將(1S,3S,5S)-2-(三級丁氧基羰基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲酸(0.5 g，2.20 mmol，1當量)及BH 3-THF (4.40 mL，4.400 mmol，2當量)於THF (5 mL)中之混合物在0℃下在氮氣氛圍下攪拌1小時。TLC可偵測到所需產物。所得混合物用CH 2Cl 2(2 x 100 mL)萃取。合併之有機層用水(50 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EA (10:1)溶離得到呈無色油狀物之(1S,3S,5S)-3-(羥基甲基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸三級丁酯(0.45 g，95.9%)。
83.2. 合成 (1S,3S,5S)-3- 甲醯基 -2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -2- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1489
將(1S,3S,5S)-3-(羥基甲基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸三級丁酯(0.45 g，2.11 mmol，1當量)及Dess-Martin (0.94 g，2.21 mmol，1.05當量)於DCM (10 mL)中之混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌2小時。TLC可偵測到所需產物。所得混合物用CH 2Cl 2(2 x 100 mL)萃取。合併之有機層用水(50 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EA (10:1)溶離得到呈無色油狀物之(1S,3S,5S)-3-甲醯基-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸三級丁酯(390 mg，87.49%)。
83.3. 合成 (1S,3S,5S)-3- 乙炔基 -2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -2- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1491
在0℃下在氮氣氛圍下向(1S,3S,5S)-3-甲醯基-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸三級丁酯(390 mg，1.84 mmol，1當量)及K 2CO 3(510 mg，3.69 mmol，2當量)於MeOH (4 mL)中之攪拌混合物中分批添加(1-重氮基-2-側氧基丙基)膦酸二甲酯(425 mg，2.21 mmol，1.2當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌隔夜。TLC可偵測到所需產物。反應在室溫下用飽和酒石酸鉀鈉(水溶液)淬滅。所得混合物用EtOAc (2 x 200 mL)萃取。合併之有機層用水(100 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EA (10:1)溶離得到呈淺黃色油狀物之(1S,3S,5S)-3-乙炔基-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸三級丁酯(300 mg，78.4%)。
83.4. 合成 (1S,3S,5S)-3-[2-(4-{3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ]-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -2- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1493
在室溫下在氬氣氛圍下向3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(130 mg，0.26 mmol，1當量)、(1S,3S,5S)-3-乙炔基-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸三級丁酯(163 mg，0.78 mmol，3當量)及DIEA (169 mg，1.31 mmol，5當量)於DMF (2 mL)中之攪拌混合物中分批添加CuI (25 mg，0.13 mmol，0.5當量)及Pd(dppf)Cl 2.CH 2Cl 2(32 mg，0.039 mmol，0.15當量)。將所得混合物在50℃下在氬氣氛圍下攪拌2小時。LCMS可偵測到所需產物。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (20:1)溶離得到呈黃色固體狀之(1S,3S,5S)-3-[2-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸三級丁酯(110 mg，72.92%)。 LC-MS: [M+H]+實驗值574.00。
83.5. 合成 2-(3-{2-[(1S,3S,5S)-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1495
將(1S,3S,5S)-3-[2-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸三級丁酯(110 mg，0.19 mmol，1當量)於TFA (1 mL)及DCM (1 mL)中之混合物在室溫下在空氣氛圍下攪拌1小時。LCMS可偵測到所需產物。將所得混合物在減壓下濃縮。此產生呈黃色油狀物之2-(3-{2-[(1S,3S,5S)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-基]乙炔基}吡啶-4-基)-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(80 mg，88.09%)。 LC-MS: [M+H] +實驗值474.00。
83.6. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[(1S,3S,5S)-2-( 丙 -2- 烯醯基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1497
將2-(3-{2-[(1S,3S,5S)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-基]乙炔基}吡啶-4-基)-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(70 mg，0.14 mmol，1當量)及丙烯醯氯(12 mg，0.13 mmol，0.9當量)於THF (1 mL)及飽和NaHCO 3(水溶液) (1 mL)中之混合物在0℃下在空氣氛圍下攪拌1小時。LCMS可偵測到所需產物。將所得混合物在減壓下濃縮。粗產物藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：Xselect CSH F-Phenyl OBD管柱，30*250 mm, 5μm；移動相A：水(0.1%FA)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：19% B至49% B/7 min；波長：254 nm；RT1(min)：6.5；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(1S,3S,5S)-2-(丙-2-烯醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(24.4 mg，31.20%)。 LC-MS: [M+H] +實驗值454.93。 1H NMR (300 MHz, 氯仿- d) δ11.08 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.08 (d, J= 5.9 Hz, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.39 (d, J= 5.9 Hz, 1H), 6.80 - 6.70 (m, 2H), 6.62 (t, J= 8.1 Hz, 1H), 6.43 - 6.37 (m, 1H), 6.20-6.17 (m, 1H), 5.82 - 5.78 (m, 1H), 5.29 - 5.23 (m, 2H), 4.07 (s, 3H), 3.64 - 3.55 (m, 3H), 3.29 (t, J= 6.7 Hz, 2H), 2.78 - 2.68 (m, 1H), 2.39-2.33 (m, 1H), 1.99 - 1.68 (m, 1H), 1.12 - 1.06 (m, 2H)。
實例 84.2-(3-{[(3R)-4-[(2E)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯醯基]𠰌啉-3-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮) ( 化合物 196)
Figure 02_image1499
在0℃下在氬氣氛圍下向3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[(3R)-𠰌啉-3-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100 mg，0.21 mmol，1.00當量)於NMP (3.00 mL)中之攪拌混合物中分批添加(2E)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯醯氯(95 mg，0.63 mmol，3.00當量)。將所得混合物在0℃下在氬氣氛圍下攪拌1小時。LCMS可偵測到所需產物。在0℃下藉由添加MeOH (3 mL)淬滅反應。將所得混合物在減壓下濃縮。粗產物(80 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：Xselect CSH F-Phenyl OBD管柱，19*250 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：25 mL/min；梯度：55% B至58% B/11 min, 58% B；波長：254 nm；RT1(min)：9.85；運行次數：0)，得到呈白色固體狀之2-(3-{[(3R)-4-[(2E)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯醯基]𠰌啉-3-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮) (7.6 mg，6.12%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值579.40。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d6) δ10.93 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 8.11-7.90 (m, 1H), 7.53 (d, 1H), 7.41-7.25 (m, 1H), 7.14 (d, 1H), 6.80-6.30 (m, 4H), 5.98 (d, 1H), 5.10-4.65 (m, 1H), 4.57-4.16 (m, 2H), 4.17-3.82 (m, 6H), 3.71-3.52 (m, 2H), 3.52-3.37 (m, 3H), 3.01 (d, 3H), 2.93-2.71 (m, 1H), 2.05 (d, 6H)。
實例 85.3-[(3-氯-5-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2S)-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 213)
85.1. 合成 (2S)-2-{[(4-{3-[(3- 氯 -5- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 } 吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1501
在室溫下在氬氣氛圍下向(2S)-2-{[(4-{3-碘-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(90 mg，0.16 mmol，1當量)及3-氯-5-氟-2-甲氧基苯胺(29 mg，0.16 mmol，1.0當量)於DMF (1.5 mL)中之攪拌混合物中分批添加EPhos Pd G4 (15 mg，0.017 mmol，0.1當量)及Cs 2CO 3(163 mg，0.50 mmol，3當量)。將所得混合物在50℃下在氬氣氛圍下攪拌2小時。藉由LCMS監測反應。在真空下濃縮所得混合物。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (10:1)溶離得到呈黃色固體狀之(2S)-2-{[(4-{3-[(3-氯-5-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(90 mg，91.87%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值586.0
85.2. 合成 (S)-3-((3- 氯 -5- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 )-2-(3-( 吡咯啶 -2- 基甲氧基 ) 吡啶 -4- 基 )-1,5,6,7- 四氫 -4H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1503
在0℃下在空氣氛圍下向(2S)-2-{[(4-{3-[(3-氯-5-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(90 mg，0.15 mmol，1當量)於DCM (1.5 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加TFA (0.3 mL)。藉由LCMS監測反應。將所得混合物在減壓下濃縮。粗產物不經進一步純化直接用於下一步。 LC-MS: (M+H) +實驗值486.2
85.3. 合成 3-[(3- 氯 -5- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{[(2S)-1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 吡咯啶 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1505
在0℃下在氬氣氛圍下向3-[(3-氯-5-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[(2S)-吡咯啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(粗品)於THF及飽和NaHCO 3(水溶液) (3 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加丙烯醯氯(27 mg，0.30 mmol，2當量)。藉由LCMS監測反應。在真空下濃縮所得混合物。粗產物(100 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep C18 OBD管柱，30*100 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH4HCO3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：26% B至54% B/8 min, 54% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：7.53；運行次數：0)，得到呈淡黃色固體狀之3-[(3-氯-5-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2S)-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(6.5 mg，7.79%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值540.0 1H NMR (400 MHz, 氯仿- d) δ11.55 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 8.02 (d, 1H), 7.58 - 7.40 (m, 2H), 7.25 (s, 1H), 6.63 - 6.48 (m, 1H), 6.46 - 6.28 (m, 2H), 6.05 - 5.96 (m, 1H), 5.82 - 5.70 (m, 1H), 5.27 (s, 1H), 5.03 (s, 1H), 4.25 - 4.10 (m, 1H), 4.17 - 3.81 (m, 4H), 3.90 - 3.66 (m, 2H), 3.65 - 3.55 (m, 2H), 3.29 - 3.15 (m, 2H), 2.30 - 2.04 (m, 3H), 1.87 (s, 2H)。
實例 86.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2R,5R)-5-甲基-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 267)
86.1. 合成 (2R,5R)-2-( 羥基甲基 )-5- 甲基吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1507
在0℃下在氬氣氛圍下向(2R,5R)-1-(三級丁氧基羰基)-5-甲基吡咯啶-2-甲酸(1.0 g，4.36 mmol，1當量)於THF (10 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加BH3-THF (6.50 mL，67.92 mmol，15.57當量)。將所得混合物在60℃下在氬氣氛圍下攪拌1小時。TLC可偵測到所需產物。使混合物冷卻至室溫。在0℃下藉由添加MeOH (5mL)淬滅反應。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EA (2:1)溶離得到呈黃色油狀物之(2R,5R)-2-(羥基甲基)-5-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(900 mg，95.85%)。TLC可偵測到所需產物。
86.2. 合成 (2R,5R)-2-{[(4- 溴吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 }-5- 甲基吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1509
在0℃下在氬氣氛圍下向(2R,5R)-2-(羥基甲基)-5-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(890.88 mg，4.138 mmol，1.2當量)及4-溴吡啶-3-醇(600 mg，3.44 mmol，1.00當量)於THF中之攪拌溶液中逐滴添加DEAD (900 mg，5.17 mmol，1.5當量)。將所得混合物在室溫下在氬氣氛圍下攪拌4小時。藉由LCMS監測反應。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (10:1)溶離得到呈無色油狀物之(2R,5R)-2-{[(4-溴吡啶-3-基)氧基]甲基}-5-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(1.2 g，93.73%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值 372.90
86.3. 合成 (2R,5R)-2- 甲基 -5-{[(4-{4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 } 吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1511
在室溫下在氬氣氛圍下向(2R,5R)-2-{[(4-溴吡啶-3-基)氧基]甲基}-5-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(1 g，2.69 mmol，1當量)及2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(0.85 g，3.23 mmol，1.2當量)於THF/H2O中之攪拌混合物中添加Xphos Pd G2 (0.21 g，0.27 mmol，0.1當量)。將所得混合物在50℃下在氬氣氛圍下攪拌隔夜。藉由LCMS監測反應。所得混合物用EtOAc (5 x 30 mL)萃取。合併之有機層用水(3 x 10 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (10:1)溶離得到呈淡黃色固體狀之(2R,5R)-2-甲基-5-{[(4-{4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(730 mg，63.55%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值427.3。
86.4. 合成 (2R,5R)-2-{[(4-{3- 碘 -4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 }-5- 甲基吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1513
在0℃下在氬氣氛圍下向(2R,5R)-2-甲基-5-{[(4-{4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(300 mg，1當量)於DMF中之攪拌混合物中分批添加NIS (189 mg，0.84 mmol，1.2當量)。將所得混合物在室溫下在氬氣氛圍下攪拌1小時。藉由LCMS監測反應。在0℃下藉由添加飽和亞硫酸鈉(水溶液) (50 mL)淬滅反應。藉由過濾收集所沈澱之固體且用水(3 x 10 mL)洗滌。在真空下濃縮所得混合物。此產生呈淡黃色固體狀之(2R,5R)-2-{[(4-{3-碘-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}-5-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(700 mg，74.04%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值552.95。
86.5. 合成 (2R,5R)-2-{[(4-{3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 }-5- 甲基吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1515
在室溫下在氬氣氛圍下向(2R,5R)-2-{[(4-{3-碘-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}-5-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(300 mg，0.54 mmol，1當量)及3-氯-2-甲氧基苯胺(85 mg，0.54 mmol，1當量)於DMF中之攪拌混合物中添加EPhos Pd G4 (49 mg，0.054 mmol，0.1當量)及Cs 2CO 3(530 mg，1.62 mmol，3當量)。藉由LCMS監測反應。在真空下濃縮所得混合物。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (10:1)溶離得到呈淡黃色固體狀之(2R,5R)-2-{[(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}-5-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(300 mg，94.90%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值582.25。
86.6. 合成 3-((3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 )-2-(3-(((2R,5R)-5- 甲基吡咯啶 -2- 基 ) 甲氧基 ) 吡啶 -4- 基 )-1,5,6,7- 四氫 -4H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1517
在0℃下在氬氣氛圍下向(2R,5R)-2-{[(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}-5-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(150 mg，0.25 mmol，1當量)於DCM中之攪拌溶液中逐滴添加TFA (0.5 mL)。藉由LCMS監測反應。將所得混合物在減壓下濃縮。所得混合物無需進一步純化即可直接用於下一步。 LC-MS: (M+H) +實驗值482.25。
86.7. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{[(2R,5R)-5- 甲基 -1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 吡咯啶 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1519
在0℃下在氬氣氛圍下向3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2R,5R)-5-甲基吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(125 mg，0.25 mmol，1當量)於THF及飽和NaHCO 3(水溶液) (3 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加丙烯醯氯(23 mg，0.25 mmol，1當量)。在真空下濃縮所得混合物。粗產物(150 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep OBD C18管柱，30*150 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：36% B至66% B/7 min；波長：254 nm；RT1(min)：6.5；運行次數：0)，得到呈淡黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2R,5R)-5-甲基-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(29.4 mg，21.06%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值536.1 1H NMR (400 MHz, 氯仿- d) δ11.67 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 8.00 (d, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.51 (d, 1H), 6.77-6.71 (m, 1H), 6.69 - 6.54 (m, 2H), 6.47 - 6.41 (m, 1H), 6.27 - 6.21 (m, 1H), 5.85 - 5.80 (m, 1H), 5.26 (s, 1H), 5.07 - 4.94 (m, 1H), 4.35 - 4.20 (m, 3H), 4.11 (s, 3H), 3.69 - 3.57 (m, 2H), 3.23 (m, 2H), 2.38 - 2.18 (m, 2H), 1.98 - 1.90 (m, 2H), 1.44 (d, 3H)。
實例 87.3-[(2-甲氧基-3-甲基苯基)胺基]-2-(3-{[(2S)-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 277)
87.1. 合成 (2S)-2-{[(4-{3-[(2- 甲氧基 -3- 甲基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 } 吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1521
在室溫下在氬氣氛圍下向(2S)-2-{[(4-{3-碘-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(100 mg，0.18 mmol，1當量)及2-甲氧基-3-甲基苯胺(50 mg，0.37 mmol，2當量)於DMF (1 mL)中之攪拌混合物中分批添加Cs 2CO 3(121 mg，0.37 mmol，2當量)及Ephos Pd G4 (17 mg，0.019 mmol，0.1當量)。將所得混合物在50℃下在氬氣氛圍下攪拌2小時。LCMS可偵測到所需產物。在真空下濃縮所得混合物。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (15:1)溶離得到呈黃色固體狀之(2S)-2-{[(4-{3-[(2-甲氧基-3-甲基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(80 mg，78.65%)。 LC-MS: [M+H]-實驗值548.00。
87.2. 合成 3-[(2- 甲氧基 -3- 甲基苯基 ) 胺基 ]-2-{3-[(2S)- 吡咯啶 -2- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 }-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1523
將(2S)-2-{[(4-{3-[(2-甲氧基-3-甲基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(80 mg，0.14 mmol，1當量)於TFA (1 mL)及DCM (3 mL)中之混合物在室溫下在空氣氛圍下攪拌1小時。LCMS可偵測到所需產物。在真空下濃縮所得混合物。此產生呈黃色油狀物之3-[(2-甲氧基-3-甲基苯基)胺基]-2-{3-[(2S)-吡咯啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(65 mg，99.43%)。 LC-MS: [M+H] +實驗值448.00。
87.3. 合成 3-[(2- 甲氧基 -3- 甲基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{[(2S)-1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 吡咯啶 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1525
將3-[(2-甲氧基-3-甲基苯基)胺基]-2-{3-[(2S)-吡咯啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(80 mg，0.17 mmol，1當量)及丙烯醯氯(17 mg，0.19 mmol，1.1當量)於THF (1 mL)及飽和NaHCO 3(水溶液) (1 mL)中之混合物在0℃下在空氣氛圍下攪拌1小時。LCMS可偵測到所需產物。將所得混合物在減壓下濃縮。粗產物藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：YMC-Actus Triart C18 ExRS, 30*150 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：24% B至45% B/9 min, 45% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8.85；運行次數：0)，得到呈淡黃色固體狀之3-[(2-甲氧基-3-甲基苯基)胺基]-2-(3-{[(2S)-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(9.8 mg，10.83%)。 LC-MS: [M+H] +實驗值502.00。 1H NMR (300 MHz, 氯仿- d) δ11.44 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.94 (d, J= 4.8 Hz, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.48 (d, J= 5.4 Hz, 1H), 6.63 - 6.50 (m, 3H), 6.42 - 6.36 (m, 1H), 6.17 - 6.14 (m, 1H), 5.79 - 5.75 (m, 1H), 5.20 (s, 1H), 5.04 (s, 1H), 4.26 (t, J= 9.6 Hz, 1H), 4.12 - 4.08 (m, 1H), 3.97 (s, 3H), 3.75 (t, J= 6.5 Hz, 2H), 3.66 - 3.53 (m, 2H), 3.21 (t, J= 6.5 Hz, 2H), 2.32 (s, 3H), 2.16 (s, 3H), 1.87 (s, 1H)。
實例 88.2-(3-{[(2R)-1-(丁-2-炔醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 289)
88.1. 合成 (2R)-2-{[(4- 溴吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 } 氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1527
在0℃下在氮氣氛圍下向4-溴吡啶-3-醇(5 g，28.73 mmol，1當量)及(2R)-2-(羥基甲基)氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(6.44 mg，34.47 mmol，1.2當量)於8 mL THF中之攪拌溶液/混合物中分批添加PPh 3(11.31 g，43.10 mmol，1.5當量)。在相同溫度下攪拌30分鐘且添加DEAD (7.51 g，43.10 mmol，1.5當量)，攪拌隔夜。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化：管柱，C18矽膠；移動相，ACN/水，10%至100%梯度/30 min；偵測器，UV 254 nm。獲得呈淺灰色油狀物之(2R)-2-{[(4-溴吡啶-3-基)氧基]甲基}氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(7.5 g，76.04%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：344.85
88.2. 合成 (2R)-2-{[(4-{4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 } 氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1529
在室溫下向15 mL密封管中添加(2R)-2-{[(4-溴吡啶-3-基)氧基]甲基}氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(500 mg，1.45 mmol，1當量)、2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-1,5,6,7-四氫-4H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(216 mg，1.60 mmol，1.1當量)、Na 2CO 3(463 mg，4.37 mmol，3.0當量)、XPhos鈀(II)聯苯-2-胺氯化物(114 mg，0.14 mmol，0.1當量)、二㗁烷(5 mL)、MeOH (1.5 mL)及H 2O (1 mL)，在Ar氛圍下在50℃下攪拌2.5小時。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化：管柱，C18矽膠；移動相，ACN/水，0%至100%梯度/30 min；偵測器，UV 254 nm。此產生呈淺棕色固體狀之(2R)-2-{[(4-{4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(400 mg，68.91%)。 LC-MS: (M+H)+實驗值：399.10
88.3. 合成 (2R)-2-{[(4-{3- 碘 -4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 } 氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1531
在室溫下向(2R)-2-{[(4-{4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(5.5 g，13.80 mmol，1當量)於DMF (15 mL)中之攪拌溶液中分批添加NIS (3.42 g，15.18 mmol，1.1當量)。攪拌1小時，隨後藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化：管柱，C18矽膠；移動相，ACN/水，0%至100%梯度/30 min；偵測器，UV 254 nm。得到呈棕黃色固體狀之(2R)-2-{[(4-{3-碘-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(6.1 g，84.28%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：525.15
88.4. 合成 (2R)-2-{[(4-{3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 } 氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1533
在室溫下向10 mL密封管中添加(2R)-2-{[(4-{3-碘-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(500 mg，0.95 mmol，1當量)、3-氟-2-甲氧基苯胺(201 mg，1.43 mmol，1.5當量)、Cs 2CO 3(932 mg，2.86 mmol，3.0當量)、EPhos Pd G4 (87 mg，0.095 mmol，0.1當量)及DMF (2 mL)，隨後在Ar氛圍下攪拌2小時。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (9:1)溶離得到呈棕黃色固體狀之(2R)-2-{[(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(505 mg，98.51%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：538.15。
88.5. 合成 2-{3-[(2R)- 氮雜環丁烷 -2- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 }-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1535
向50 mL圓底燒瓶中添加(2R)-2-{[(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(400 mg，0.74 mmol，1當量)，隨後在0℃下添加三氟乙醛(10 mL)及DCM (30 mL)。在室溫下攪拌2小時。將所得混合物在減壓下濃縮得到呈棕黃色固體狀之2-{3-[(2R)-氮雜環丁烷-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(320 mg，98.31%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：438.05
88.6. 合成 2-(3-{[(2R)-1-( 丁 -2- 炔醯基 ) 氮雜環丁烷 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1537
在室溫下向2-{3-[(2R)-氮雜環丁烷-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(330 mg，0.75 mmol，1當量)及2-丁炔酸(190 mg，2.26 mmol，3當量)於四氫呋喃(10 mL)中之攪拌溶液中添加T 3P (480 mg，1.50 mmol，2.0當量)。在室溫下攪拌2小時。所得混合物用EtOAc (2 x 50 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。粗產物(500 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep OBD C18管柱，30*150 mm, 5 μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：28% B至58% B/7 min；波長：254 nm；RT1(min)：6.5；運行次數：0)，得到呈棕黃色固體狀之2-(3-{[(2R)-1-(丁-2-炔醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(150 mg，39.49%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：504.10 1H NMR (300 MHz, 氯仿- d) δ11.37 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.52 (d, J= 6.8 Hz, 2H), 6.57 (td, J= 8.2, 5.9 Hz, 1H), 6.45 (ddd, J= 10.9, 8.3, 1.5 Hz, 1H), 6.07 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 5.21 (s, 1H), 4.94 (q, J= 8.6 Hz, 1H), 4.49 (t, J= 9.8 Hz, 1H), 4.25 (ddd, J= 10.9, 5.7, 2.4 Hz, 3H), 4.10 (d, J= 1.2 Hz, 3H), 3.57 (td, J= 6.8, 2.5 Hz, 2H), 3.25 - 2.95 (m, 2H), 2.71 - 2.53 (m, 1H), 2.20 - 2.06 (m, 1H), 2.03 (s, 3H)。
實例 89.3-[(2-乙基-3-氟苯基)胺基]-2-(3-{[(2R)-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 294)
89.1. 合成 (2R)-2-{[(4-{3-[(2- 乙基 -3- 氟苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 } 吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1539
在室溫下在氬氣氛圍下向(2R)-2-{[(4-{3-碘-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(200 mg，0.37 mmol，1當量)及2-乙基-3-氟苯胺(62 mg，0.44 mmol，1.2當量)於DMF (2 mL)中之攪拌混合物中分批添加Cs 2CO 3(242 mg，0.74 mmol，2當量)及Ephos Pd G4 (34 mg，0.037 mmol，0.1當量)。將所得混合物在50℃下在氬氣氛圍下攪拌2小時。LCMS可偵測到所需產物。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (20:1)溶離得到呈黃色固體狀之(2R)-2-{[(4-{3-[(2-乙基-3-氟苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(182 mg，89.14%)。 LC-MS: [M+H]-實驗值550.00。
89.2. 合成 3-[(2- 乙基 -3- 氟苯基 ) 胺基 ]-2-{3-[(2R)- 吡咯啶 -2- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 }-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1541
將(2R)-2-{[(4-{3-[(2-乙基-3-氟苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(170 mg，0.30 mmol，1當量)於TFA (3 mL)及DCM (3 mL)中之混合物在室溫下在空氣氛圍下攪拌1小時。LCMS可偵測到所需產物。將所得混合物在減壓下濃縮。此產生呈黃色油狀物之3-[(2-乙基-3-氟苯基)胺基]-2-{3-[(2R)-吡咯啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(130 mg，93.50%)。 LC-MS: [M+H] +實驗值450.00。
89.3. 合成 3-[(2- 乙基 -3- 氟苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{[(2R)-1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 吡咯啶 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1543
將3-[(2-乙基-3-氟苯基)胺基]-2-{3-[(2R)-吡咯啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(110 mg，0.24 mmol，1當量)及丙烯醯氯(26 mg，0.29 mmol，1.2當量)於THF (2 mL)及飽和NaHCO 3(水溶液) (2 mL)中之混合物在0℃下在空氣氛圍下攪拌1小時。LCMS可偵測到所需產物。將所得混合物在減壓下濃縮。粗產物藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep C18 OBD管柱，30*100 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：26% B至50% B/9 min, 50% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8.85；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之3-[(2-乙基-3-氟苯基)胺基]-2-(3-{[(2R)-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(10.5 mg，8.50%)。 LC-MS: [M+H] +實驗值504.00。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d6) δ11.50 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 7.91 (d, J= 5.1 Hz, 1H), 7.36 (s, 1H), 7.24 (d, J= 12.9 Hz, 1H), 7.15 (s, 1H), 6.78 - 6.62 (m, 2H), 6.48 - 6.32 (m, 1H), 6.27 - 6.21 (m, 1H), 6.07 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 5.77 - 5.73 (m, 1H), 4.68 (s, 1H), 4.32 (t, J= 8.7 Hz, 1H), 4.17 - 4.13 (m, 1H), 3.65 (s, 2H), 3.45 (s, 2H), 2.99 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 2.70 (d, J= 7.8 Hz, 2H), 2.09 - 1.87 (m, 4H), 1.25 - 1.16 (m, 3H)。
實例 90.2-(3-{[(2R)-1-[(2E)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯醯基]吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 298)
90.1. 合成 (2R)-2-{[(4-{3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 } 吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1545
在室溫下在氬氣氛圍下向(2R)-2-{[(4-{3-碘-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(200 mg，0.37 mmol，1當量)及3-氟-2-甲氧基苯胺(104 mg，0.74 mmol，2當量)於DMF (2 mL)中之攪拌混合物中分批添加Ephos Pd G4 (34 mg，0.037 mmol，0.1當量)及Cs 2CO 3(242 mg，0.74 mmol，2當量)。將所得混合物在50℃下在氬氣氛圍下攪拌1小時。LCMS可偵測到所需產物。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (20:1)溶離得到呈黃色固體狀之(2R)-2-{[(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(160 mg，78.08%)。 LC-MS: [M+H]-實驗值552.00。
90.2. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-{3-[(2R)- 吡咯啶 -2- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 }-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1547
將(2R)-2-{[(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(80 mg，0.14 mmol，1當量)於TFA (1 mL)及DCM (1 mL)中之混合物在室溫下在空氣氛圍下攪拌1小時。LCMS可偵測到所需產物。在真空下濃縮所得混合物。所得混合物用CH 2Cl 2(2 x 30 mL)萃取。合併之有機層用飽和NaHCO 3(水溶液) (2 x 30 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。此產生呈黃色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[(2R)-吡咯啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(60 mg，91.63%)。 LC-MS: [M+H] +實驗值452.00。
90.3. 合成 2-(3-{[(2R)-1-[(2E)-4-( 二甲基胺基 ) 丁 -2- 烯醯基 ] 吡咯啶 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1549
在0℃下在空氣氛圍下向3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[(2R)-吡咯啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(60 mg，0.13 mmol，1當量)及(2E)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯酸(25 mg，0.20 mmol，1.5當量)於THF (2 mL)中之攪拌混合物中分批添加DIEA (171 mg，1.33 mmol，10當量)及T 3P (126 mg，0.39 mmol，3當量)。將所得混合物在室溫下在空氣氛圍下攪拌1小時。LCMS可偵測到所需產物。水層用CH 2Cl 2(2 x 20 mL)萃取。將所得混合物在減壓下濃縮。粗產物藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep C18 OBD管柱，30*100 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：18% B至43% B/9 min, 43% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8.85；運行次數：0)，得到呈淡黃色固體狀之2-(3-{[(2R)-1-[(2E)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯醯基]吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(16.6 mg，21.54%)。 LC-MS: [M+H] +實驗值563.00。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d6) δ11.53 (s, 1H), 8.41 (s, 1H), 7.98 (d, J= 5.1 Hz, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.36 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.13 (s, 1H), 6.80-6.54 (m, 2H), 6.52 - 6.38 (m, 2H), 5.98 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 4.67 (s, 1H), 4.38 - 4.32 (m, 1H), 4.18 - 4.13 (m, 1H), 3.91 (s, 3H), 3.63 (d, J= 5.9 Hz, 2H), 3.42 (d, J= 2.4 Hz, 3H), 3.08 - 2.92 (m, 3H), 2.13 (s, 5H), 2.08 - 1.84 (m, 5H)
實例 91.2-(3-{[(2R)-1-(丁-2-炔醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-{[3-(三氟甲基)苯基]胺基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 349)
91.1. 合成 (2R)-2-({[4-(4- 側氧基 -3-{[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ] 胺基 }-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 吡啶 -3- 基 ] 氧基 } 甲基 ) 氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1551
在室溫下在氬氣氛圍下向(2R)-2-{[(4-{3-碘-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(200 mg，0.38 mmol，1當量)及3-(三氟甲基)苯胺(122 mg，0.76 mmol，2當量)於DMF (2 mL)中之攪拌混合物中分批添加Ephos Pd G4 (35 mg，0.038 mmol，0.1當量)及Cs 2CO 3(248 mg，0.76 mmol，2當量)。將所得混合物在50℃下在氬氣氛圍下攪拌1小時。LCMS可偵測到所需產物。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (20:1)溶離得到呈黃色固體狀之(2R)-2-({[4-(4-側氧基-3-{[3-(三氟甲基)苯基]胺基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)吡啶-3-基]氧基}甲基)氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(267 mg，125.55%)。 LC-MS: [M+H]-實驗值558.00。
91.2. 合成 2-{3-[(2R)- 氮雜環丁烷 -2- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 }-3-{[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ] 胺基 }-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1553
將(2R)-2-({[4-(4-側氧基-3-{[3-(三氟甲基)苯基]胺基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)吡啶-3-基]氧基}甲基)氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(90 mg，0.16 mmol，1當量)於TFA (3 mL)及DCM (3 mL)中之混合物在室溫下在空氣氛圍下攪拌1小時。LCMS可偵測到所需產物。在真空下濃縮所得混合物。此產生呈黃色油狀物之2-{3-[(2R)-氮雜環丁烷-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-3-{[3-(三氟甲基)苯基]胺基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(70 mg，94.80%)。 LC-MS: [M+H] +實驗值458.00。
91.3. 合成 2-(3-{[(2R)-1-( 丁 -2- 炔醯基 ) 氮雜環丁烷 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-3-{[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ] 胺基 }-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1555
在0℃下在空氣氛圍下向2-{3-[(2R)-氮雜環丁烷-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-3-{[3-(三氟甲基)苯基]胺基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(70 mg，0.15 mmol，1當量)及2-丁炔酸(19 mg，0.22 mmol，1.5當量)於THF (3 mL)中之攪拌混合物中分批添加DIEA (197 mg，1.53 mmol，10當量)及T 3P (146 mg，0.45 mmol，3當量)。將所得混合物在室溫下在空氣氛圍下攪拌1小時。LCMS可偵測到所需產物。水層用CH 2Cl 2(2 x 20 mL)萃取。將所得混合物在減壓下濃縮。粗產物藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep C18 OBD管柱，30*100 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：24% B至49% B/9 min, 49% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8.85；運行次數：0)，得到呈淡黃色固體狀之2-(3-{[(2R)-1-(丁-2-炔醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-{[3-(三氟甲基)苯基]胺基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(28.3 mg，35.19%)。 LC-MS: [M+H] +實驗值524.00。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d6) δ11.48 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 8.00 (d, J= 5.0 Hz, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.41 (d, J= 5.1 Hz, 1H), 7.27 - 7.04 (m, 2H), 6.86 - 6.74 (m, 3H), 4.82 - 4.71 (m, 1H), 4.51 - 4.29 (m, 2H), 4.16 - 4.02 (m, 2H), 3.41 - 3.34 (m, 2H), 2.96 - 2.80 (m, 2H), 2.15 - 20.2 (m, 4H)。
實例 92.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2R)-1-[(2E)-4-(3-甲氧基氮雜環丁烷-1-基)丁-2-烯醯基]氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 225)
92.1. 合成 (2E)-4- 溴丁 -2- 烯醯氯
Figure 02_image1557
在0℃下向4-溴-反式-巴豆酸(200 mg，1.21 mmol，1.00當量)及1滴DMF於DCM (5 mL)中之攪拌混合物中逐滴添加SOCl 2(288 mg，2.42 mmol，2.00當量)。將所得混合物在25℃下攪拌2小時。TLC (PE:EA=2:1)顯示偵測到新斑點。將所得混合物在減壓下濃縮得到呈棕色油狀物之(2E)-4-溴丁-2-烯醯氯(180 mg，80.95%)。
92.2. 合成 (R,E)-2-(3-((1-(4- 溴丁 -2- 烯醯基 ) 氮雜環丁烷 -2- 基 ) 甲氧基 ) 吡啶 -4- 基 )-3-((3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 )-1,5,6,7- 四氫 -4H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1559
在0℃下向2-{3-[(2R)-氮雜環丁烷-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100 mg，0.22 mmol，1.00當量)及DIEA (85 mg，0.66 mmol，3.00當量)於DCM (2 mL)中之攪拌混合物中逐滴添加(2E)-4-溴丁-2-烯醯氯(48 mg，0.26 mmol，1.20當量)。將所得混合物在25℃下攪拌2小時。所得混合物無需進一步純化即可直接用於下一步。 LC-MS: (M+H) +實驗值：600。
92.3. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{[(2R)-1-[(2E)-4-(3- 甲氧基氮雜環丁烷 -1- 基 ) 丁 -2- 烯醯基 ] 氮雜環丁烷 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1561
向3-甲氧基氮雜環丁烷鹽酸鹽(32 mg，0.26 mmol，1.20當量)於DMF (0.5 mL)中之溶液中添加K 2CO 3(90 mg，0.65 mmol，3.00當量)且將混合物攪拌30分鐘。隨後將混合物添加至2-(3-{[(2R)-1-[(2E)-4-溴丁-2-烯醯基] 氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(130 mg，0.22 mmol，1.00當量)於2 mL DCM中之溶液中且在室溫下攪拌24小時。LCMS可偵測到所需產物。反應混合物用水淬滅且用DCM (3*10 mL)萃取。將所得混合物在減壓下濃縮。粗產物藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XSelect CSH Fluoro Phenyl, 30*150 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：39% B至55% B/8 min, 55% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2R)-1-[(2E)-4-(3-甲氧基氮雜環丁烷-1-基)丁-2-烯醯基]氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(28.3 mg，21.55%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：607.15。 1H NMR (300 MHz, 氯仿- d) δ 11.77 (s, 1H), 8.22 (s, 1H), 7.99 (d, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.45 (d, 1H), 6.90 - 6.76 (m, 1H), 6.74 - 6.66 (m, 1H), 6.60 (t, 1H), 6.28 - 6.17 (m, 1H), 6.15 - 6.04 (m, 1H), 5.17 (t, 1H), 5.07 - 4.93 (m, 1H), 4.50 (t, 1H), 4.35 - 4.20 (m, 3H), 4.16 - 4.02 (m, 4H), 3.79 - 3.52 (m, 4H), 3.27 (s, 5H), 3.19 - 2.98 (m, 4H), 2.67 - 2.55 (m, 1H), 2.13 (m, 1H)。
實例 93.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2R)-1-[(2E)-4-(吡咯啶-1-基)丁-2-烯醯基]氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 224)
93.1. 合成 (2R)-2-{[(4- 氰基吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 } 氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1563
在室溫下在氬氣氛圍下向(2R)-2-(羥基甲基)氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(6.50 g，34.71 mmol，1.00當量)及3-氟吡啶-4-甲腈(4.24 g，34.71 mmol，1.00當量)於DMF (150 mL)中之攪拌溶液中分批添加Cs 2CO 3(33.93 g，104.14 mmol，3.00當量)。將所得混合物在80℃下在氬氣氛圍下攪拌4小時。使混合物冷卻至室溫。所得混合物用EtOAc (3x100 mL)萃取。合併之有機層用水(3x60 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EA (1:1)溶離得到呈黃色固體狀之(2R)-2-{[(4-氰基吡啶-3-基)氧基]甲基}氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(10.00 g，99.56%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：290.2
93.2. 合成 (2R)-2-([[4-( 胺基甲基 ) 吡啶 -3- 基 ] 氧基 ] 甲基 ) 氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1565
在室溫下在氫氣氛圍下向(2R)-2-[[(4-氰基吡啶-3-基)氧基]甲基]氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(10.50 g，36.29 mmol，1.00當量)於MeOH (100 mL)中之攪拌溶液中添加氨(7.0 M/MeOH溶液，100 mL，700.00 mmol)及雷尼鎳(4.66 g，44 w/w%)。將所得混合物在室溫下在氫氣氛圍下攪拌隔夜。過濾所得混合物，用MeOH洗滌濾餅，濾液在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (10:1)溶離得到呈黃色固體狀之(2R)-2-([[4-(胺基甲基)吡啶-3-基]氧基]甲基)氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(10.00 g，93.93%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值294.2。
93.3. 合成 4-{[(3-{[(2R)-1-( 三級丁氧基羰基 ) 氮雜環丁烷 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 ) 甲基 ] 胺基 }-3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基甲硫醯基 ]-2- 側氧基 -5,6- 二氫吡啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1567
向(2R)-2-({[4-(胺基甲基)吡啶-3-基]氧基}甲基)氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(10.00 g，34.09 mmol，1.00當量)及3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-4-羥基-2-側氧基-5,6-二氫吡啶-1-甲酸三級丁酯(14.07 g，34.09 mmol，1.00當量)及DIEA (13.22 g，102.26 mmol，3.00當量)於DMF (150 mL)中之攪拌溶液中分批添加PyBOP (26.61 g，51.13 mmol，1.50當量)。將所得混合物在室溫下在氬氣氛圍下攪拌隔夜。反應混合物用水(100 mL)稀釋。所得混合物用EtOAc (3x100 mL)萃取。合併之有機層用水(3x100 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EA (1:2)溶離得到呈黃色固體狀之4-{[(3-{[(2R)-1-(三級丁氧基羰基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)甲基]胺基}-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-2-側氧基-5,6-二氫吡啶-1-甲酸三級丁酯(17.00 g，72.46%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值688.1。
93.4. 合成 (2R)-2-[({4-[5-( 三級丁氧基羰基 )-3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ] 吡啶 -3- 基 } 氧基 ) 甲基 ] 氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1569
將4-{[(3-{[(2R)-1-(三級丁氧基羰基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)甲基]胺基}-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-2-側氧基-5,6-二氫吡啶-1-甲酸三級丁酯(8.00 g，10.461 mmol，1.00當量，90%)及H 2O 2(30 w/w%，1.54 g，13.60 mmol，1.30當量)於MeOH (100 mL)中之溶液在80℃下在N 2氛圍下攪拌1小時。LCMS可偵測到所需產物。使混合物冷卻至室溫。反應混合物用水(100 mL)稀釋。所得混合物用CH 2Cl 2(3x100 mL)萃取。合併之有機層用水(3x50mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。粗產物不經進一步純化直接用於下一步。此產生呈黃色固體狀之(2R)-2-[({4-[5-(三級丁氧基羰基)-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]吡啶-3-基}氧基)甲基]氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(6.3 g，58.00%)。
93.5. 合成 2-{3-[(2R)- 氮雜環丁烷 -2- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 }-3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1571
在0℃下在氬氣氛圍下向(2R)-2-[({4-[5-(三級丁氧基羰基)-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]吡啶-3-基}氧基)甲基]氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(6.30 g，9.63 mmol，1.00當量)於CH 2Cl 2(60 mL)中之攪拌溶液中分批添加TFA (12 mL)。將所得混合物在室溫下在氬氣氛圍下攪拌6小時。LCMS可偵測到所需產物。混合物用飽和NaHCO 3(水溶液)鹼化至pH為8。所得混合物用CH 2Cl 2(3x100 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(3x30 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (10:1)溶離得到呈黃色固體狀之2-{3-[(2R)-氮雜環丁烷-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(2.8 g，64.05%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：454.05。
93.6. 合成 (R,E)-2-(3-((1-(4- 溴丁 -2- 烯醯基 ) 氮雜環丁烷 -2- 基 ) 甲氧基 ) 吡啶 -4- 基 )-3-((3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 )-1,5,6,7- 四氫 -4H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1573
在0℃下在氮氣氛圍下向2-{3-[(2R)-氮雜環丁烷-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(60 mg，0.13 mmol，1.00當量)及DIEA (51 mg，0.39 mmol，3當量)於DCM (3 mL)中之攪拌溶液中添加(2E)-4-溴丁-2-烯醯氯(29 mg，0.15 mmol，1.2當量)。將所得混合物在0℃下在氮氣氛圍下攪拌0.5小時。所得混合物無需進一步純化即可直接用於下一步。
93.7. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{[(2R)-1-[(2E)-4-( 吡咯啶 -1- 基 ) 丁 -2- 烯醯基 ] 氮雜環丁烷 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1575
在0℃下向最後一步產生之混合物中逐滴添加吡咯啶(24 mg，0.33 mmol，3.00當量)。將所得混合物在室溫下再攪拌隔夜。LCMS可偵測到所需產物。所得混合物用CH 2Cl 2:MeOH (3 x 50 mL)萃取。合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液且溶解於DMSO。粗產物(100 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：Xselect CSH C18 OBD管柱 30*150mm 5μm, n；移動相A：水(0.1%FA)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：11% B至22% B/7 min, 22% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：6.5；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2R)-1-[(2E)-4-(吡咯啶-1-基)丁-2-烯醯基]氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(22.6 mg，34.71%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值591.00。 1H NMR (400 MHz, 氯仿- d) δ 11.77 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.97 (d, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.46 (d, 1H), 6.96 - 6.91 (m, 1H), 6.71 - 6.93 (m, 1H), 6.61 (t, 1H), 6.32 - 6.12 (m, 2H), 5.51 (t, 1H), 5.01 (q, 1H), 4.50 (t, 1H), 4.38 - 4.17 (m, 3H), 4.08 (s, 3H), 3.68 - 3.47 (m, 4H), 3.21 - 3.01 (m, 2H), 2.89 (q, 4H), 2.63 - 2.60 (m, 1H), 2.15 - 2.13 (m, 1H), 1.96 - 1.95 (m, 4H)。
實例 94.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2R)-1-[(2E)-4-[(3R)-3-甲氧基吡咯啶-1-基]丁-2-烯醯基]氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 223)
Figure 02_image1577
向(3R)-3-甲氧基吡咯啶鹽酸鹽(36 mg，0.26 mmol，1.20當量)於DMF (1 mL)中之溶液中添加K 2CO 3(90 mg，0.65 mmol，3.00當量)且將混合物攪拌30分鐘。隨後將混合物添加至2-(3-{[(2R)-1-[(2E)-4-溴丁-2-烯醯基]氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(130 mg，0.22 mmol，1.00當量)於2 mL DCM中之溶液中且在室溫下攪拌4小時。LCMS可偵測到所需產物。反應混合物用水淬滅且用DCM (3*10 mL)萃取。將所得混合物在減壓下濃縮。粗產物藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep C18 OBD管柱，30*100 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：18% B至40% B/9 min, 40% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：9.67；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2R)-1-[(2E)-4-[(3R)-3-甲氧基吡咯啶-1-基]丁-2-烯醯基]氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(19.7 mg，14.60%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：621.20。 1H NMR (400 MHz, 氯仿- d) δ 11.69 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.92 (d, 1H), 7.52 - 7.33 (m, 2H), 6.97 - 6.83 (m, 1H), 6.67 - 6.48 (m, 2H), 6.22 - 5.98 (m, 2H), 5.11 (s, 1H), 5.00 - 4.88 (m, 1H), 4.43 (t, 1H), 4.29 - 4.10 (m, 3H), 4.02 (s, 3H), 3.87 (d, 1H), 3.52 (m, 2H), 3.27 (s, 2H), 3.22 (s, 3H), 3.15 - 2.99 (m, 2H), 2.83 - 2.43 (m, 5H), 2.12 - 1.97 (m, 2H), 1.88 - 1.78
實例 95.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2R)-1-[(2E)-4-(3,3-二氟吡咯啶-1-基)丁-2-烯醯基]氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 221)
Figure 02_image1579
在0℃下向3,3-二氟吡咯啶鹽酸鹽(28 mg，0.20 mmol，1.20當量)於DMF (0.5 mL)中之溶液中添加K 2CO 3(69 mg，0.49 mmol，3.00當量)且將混合物攪拌30分鐘。隨後在0℃下逐滴添加至最後一步產生之混合物中。將所得混合物在室溫下再攪拌48小時。所得混合物用CH 2Cl 2:MeOH (3 x 50 mL)萃取。合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液且溶解於DMSO。粗產物(100 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Shield RP18 OBD管柱，30*150 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：22% B至52% B/10 min, 52% B；波長：220/254 nm；RT1(min)：10.55；運行次數：0)，得到呈淡黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2R)-1-[(2E)-4-(3,3-二氟吡咯啶-1-基)丁-2-烯醯基]氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(36.8 mg，26.64%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值627.15。 1H NMR (400 MHz, 氯仿- d) δ 11.78 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 8.01 (d, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.47 (d, 1H), 6.92 - 6.86 (m, 1H), 6.72 - 6.69 (m, 1H), 6.63 (t, 1H), 6.24 - 6.21 (m, 1H), 6.15 - 6.11 (m, 1H), 5.21 (d, 1H), 5.04 (q, 1H), 4.53 (t, 1H), 4.45 - 4.18 (m, 3H), 4.11 (s, 3H), 3.62 - 3.57 (m, 2H), 3.32 - 3.12 (m, 2H), 3.25 - 3.07 (m, 2H), 2.94 - 2.88 (m, 2H), 2.81 (t, 2H), 2.65 - 2.61 (m, 1H), 2.34 - 2.26 (m, 2H), 2.17 - 2.15 (m, 1H)。
實例 96.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2R)-1-[(2E)-4-(3-氟氮雜環丁烷-1-基)丁-2-烯醯基]氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 219)
Figure 02_image1581
向3-氟氮雜環丁烷鹽酸鹽(28.96 mg，0.259 mmol，1.2當量)於DMF (1 mL)中之溶液中添加K 2CO 3(90 mg，0.65 mmol，3.00當量)且將混合物攪拌30分鐘。隨後將混合物添加至2-(3-{[(2R)-1-[(2E)-4-溴丁-2-烯醯基]氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(130 mg，0.22 mmol，1.00當量)於2 mL DCM中之溶液中且在室溫下攪拌24小時。LCMS可偵測到所需產物。反應混合物用水淬滅且用DCM (3*10 mL)萃取。將所得混合物在減壓下濃縮。粗產物藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep C18 OBD管柱，30*100 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：22% B至46% B/9 min, 46% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8.85；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2R)-1-[(2E)-4-(3-氟氮雜環丁烷-1-基)丁-2-烯醯基]氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(13.6 mg，10.50%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：595.15。 1H NMR (300 MHz, 氯仿- d) δ 11.79 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.97 (d, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.44 (d, 1H), 6.91 - 6.75 (m, 1H), 6.75 - 6.65 (m, 1H), 6.60 (t, 1H), 6.27 - 6.14 (m, 1H), 6.13 - 5.99 (m, 1H), 5.33 - 4.92 (m, 3H), 4.50 (t, 1H), 4.38 - 4.17 (m, 3H), 4.08 (s, 3H), 3.81 - 3.63 (m, 2H), 3.64 - 3.51 (m, 2H), 3.38 - 3.06 (m, 6H), 2.71 - 2.49 (m, 1H), 2.21 - 2.05 (m, 1H)。
實例 97.rel-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R)-2-甲基-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 244)
97.1. 合成 2- 甲醯基 -2- 甲基氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1583
在-78℃下在氮氣氛圍下向(COCl) 2(757 mg，5.96 mmol，1.20當量)於DCM (50 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加DMSO (0.9 mL，12.42 mmol，2.50當量)。將所得混合物在-78℃下在氮氣氛圍下攪拌30分鐘。在-78℃下向上述混合物中逐滴添加2-(羥基甲基)-2-甲基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(1 g，4.97 mmol，1.00當量)。將所得混合物在-78℃下再攪拌30分鐘。TLC可偵測到所需產物。在-78℃下向上述混合物中添加TEA (3.5 mL，24.85 mmol，5.00當量)。將所得混合物在0℃下再攪拌30分鐘。所得混合物用CH 2Cl 2(3 x 50 mL)萃取。合併之有機層用水(3x50 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。粗產物2-甲醯基-2-甲基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(1 g)不經進一步純化直接用於下一步。
97.2. 合成 2- 乙炔基 -2- 甲基氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1585
在0℃下在氮氣氛圍下向2-甲醯基-2-甲基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(1 g，5.02 mmol，1.00當量)於MeOH (10 mL)中之攪拌溶液中添加K 2CO 3(1.4 g，10.04 mmol，2.00當量)及賽費特-吉爾伯特增碳反應(seyferth-gilbert homologation) (1.15 mg，6.02 mmol，1.2當量)。將所得混合物在0℃下在氮氣氛圍下攪拌1小時。TLC可偵測到所需產物。在0℃下藉由添加酒石酸鉀鈉(水溶液) (5 mL)淬滅反應。所得混合物用EtOAc (3 x 30 mL)萃取。合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EA (10:1)溶離得到呈無色油狀物之2-乙炔基-2-甲基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(700 mg，71.43%)。
97.3. 合成 2-[2-(4-{3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ]-2- 甲基氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1587
在氮氣氛圍下向3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(500 mg，1.05 mmol，1.00當量)及2-乙炔基-2-甲基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(408 mg，2.09 mmol，2.00當量)於DMF (5 mL)中之攪拌溶液中添加Pd(dppf)Cl 2CH 2Cl 2(426 mg，0.52 mmol，0.50當量)及DIEA (676 mg，5.23 mmol，5.00當量)。將所得混合物在50℃下在氮氣氛圍下攪拌4小時。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化：管柱，C18球形管柱；移動相，ACN/水，0%至100%梯度/20 min；偵測器，UV 254 nm,得到呈黃色固體狀之2-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-2-甲基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(280 mg，49.09%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：546.20
97.4. 合成 2-{3-[2-( 氮雜環丁烷 -2- 基 ) 乙炔基 ] 吡啶 -4- 基 }-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1589
在室溫下在氮氣氛圍下向2-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-2-甲基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(350 mg，0.64 mmol，1.00當量)於DCM (3 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加TFA (1 mL)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌隔夜。在真空下濃縮所得混合物得到粗產物，呈黃色油狀物之2-{3-[2-(氮雜環丁烷-2-基)乙炔基]吡啶-4-基}-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(500 mg)。 LC-MS: M+H實驗值：446.10。
97.5. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[2- 甲基 -1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 氮雜環丁烷 -2- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1591
在0℃下在氮氣氛圍下向3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[2-(2-甲基氮雜環丁烷-2-基)乙炔基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(250 mg，0.56 mmol，1.00當量)於THF (3 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加NaHCO 3水溶液(0.5 mL)及丙烯醯氯(46 mg，0.51 mmol，0.90當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。所得混合物用CH 2Cl 2:MeOH (3 x 20 mL)萃取。合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (10:1)溶離得到粗產物。粗產物在真空下濃縮且溶解於DMSO。粗產物(100 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：YMC-Actus Triart C18 ExRS, 30*150 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：18% B至35% B/11 min, 35% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：10.38；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[2-甲基-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(43 mg，15.34%)。 LC-MS: M+H實驗值：500.10
97.6. 合成 rel-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[(2R)-2- 甲基 -1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 氮雜環丁烷 -2- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1593
3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[2-甲基-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(43 mg，0.086 mmol，1.00當量)，藉由對掌性HPLC在以下條件下純化(管柱：CHIRALPAK ID-3, 4.6*50mm, 3μm；移動相A：(Hex: DCM=3: 1)( 0.1%DEA ): IPA=90: 10；流動速率：1 mL/min；梯度：0% B至0% B；注入體積：5ul mL)，得到呈黃色固體狀之rel-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R)-2-甲基-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(15.1 mg，35.12%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值500.10。 1H NMR (400 MHz, 氯仿- d) δ 9.52 (brs, 1H), 8.80 (s, 1H), 8.27 - 8.21 (m, 2H), 7.21 (d, J= 5.9 Hz, 1H), 6.77 - 6.73 (m, 1H), 6.58 - 6.55 (m, 1H), 6.27 (t, J= 6.1 Hz, 1H), 6.15 - 6.11 (m, 1H), 5.94 - 5.88 (m, 1H), 5.57 - 5.55 (m, 1H), 5.42 (s, 1H), 3.99 (d, J= 1.3 Hz, 3H), 3.63 - 3.40 (m, 3H), 3.15 - 2.82 (m, 3H), 2.25 - 2.17 (m, 1H), 2.01 - 1.95 (m, 1H), 1.82 (s, 3H)。
實例 98.rel-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R)-2-甲基-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 243)
Figure 02_image1595
3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[2-甲基-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(43 mg，0.09 mmol，1.00當量)，藉由對掌性HPLC在以下條件下純化(管柱：CHIRALPAK ID-3, 4.6*50mm, 3μm；移動相A：(Hex: DCM=3: 1)( 0.1%DEA ): IPA=90: 10；流動速率：1 mL/min；梯度：0% B至0% B；注入體積：5ul mL)，得到呈黃色固體狀之rel-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R)-2-甲基-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(14.3 mg，33.26%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值500.10。 1H NMR (400 MHz, 氯仿- d) δ 9.42 (s, 1H), 8.73 (s, 1H), 8.40 - 8.19 (m, 2H), 7.15 (d, 1H), 6.78 - 6.74 (m, 1H), 6.57 - 6.52 (m, 1H), 6.28 (t, 1H), 6.15 - 6.10 (m, 1H), 5.95 - 5.88 (m, 1H), 5.56 - 5.52 (m, 1H), 5.43 (s, 1H), 3.98 (d, 3H), 3.61 - 3.38 (m, 3H), 3.12 - 2.79 (m, 3H), 2.23 - 2.16 (m, 1H), 2.04 - 1.95 (m, 1H), 1.81 (s, 3H)。
實例 99.3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2S)-1-(2-氟丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 287)
99.1. 合成 (2S)-2-{[(4-{3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 } 吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1597
在氬氣氛圍下向(2S)-2-{[(4-{3-碘-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(400 mg，0.74 mmol，1.00當量)及3-氟-2-甲氧基苯胺(210 mg，1.49 mmol，2.00當量)於DMF (5 mL)中之攪拌混合物中添加EPhos Pd G4 (68 mg，0.07 mmol，0.10當量)及Cs 2CO 3(484 mg，1.49 mmol，2.00當量)。將所得混合物在50℃下在氬氣氛圍下攪拌2小時。過濾所得混合物，用DCM (2x10 mL)洗滌濾餅。在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (20:1)溶離得到呈棕色固體狀之(2S)-2-{[(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(310 mg，75.64%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：552.20
99.2. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-{3-[(2S)- 吡咯啶 -2- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 }-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1599
將(2S)-2-{[(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(290 mg，0.53 mmol，1.00當量)及TFA (1 mL)於DCM (3 mL)中之混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。將所得混合物在減壓下濃縮得到呈紅色油狀物之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[(2S)-吡咯啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(540 mg，粗品)。 LC-MS: (M+H) +實驗值452.20
99.3. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{[(2S)-1-(2- 氟丙 -2- 烯醯基 ) 吡咯啶 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1601
將3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[(2S)-吡咯啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(60 mg，0.13 mmol，1.00當量)於THF (1.5 mL)中之溶液。混合物用DIEA鹼化至pH為8，在0℃下在氮氣氛圍下添加2-氟丙-2-烯酸(18 mg，0.20 mmol，1.50當量)，隨後在0℃下逐滴添加T3P (169 mg，0.26 mmol，2.00當量，50%/EA)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。所得混合物用EtOAc (3 x 10mL)萃取。合併之有機層用鹽水(1x10 mL)洗滌。所得混合物用1x10 mL NaHCO 3(水溶液)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。粗產物(60mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep OBD C18管柱，30*150 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：23% B至53% B/10 min；波長：254 nm；RT1(min)：9.5；運行次數：0)，得到呈米白色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2S)-1-(2-氟丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(27.6 mg，39.55%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值524.10。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 11.25 (s, 1H), 8.41 (s, 1H), 8.02 (d, 1H), 7.40 (s, 1H), 7.33 (d, 1H), 7.10 (s, 1H), 6.61 - 6.49 (m, 1H), 6.47 (t, 1H), 5.99 (d, 1H), 5.45 - 5.31 (m, 2H), 4.63 (s, 1H), 4.37 - 4.34 (m, 1H), 4.25 - 4.21 (m, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.69 (s, 1H), 3.59 (s, 1H), 3.41 - 3.39 (m, 2H), 2.89 (t, 2H), 2.07 - 1.82 (m, 4H)。
實例 100.2-(3-{[(2S)-1-(丁-2-炔醯基)吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 282)
Figure 02_image1603
將3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[(2S)-吡咯啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(60 mg，0.13 mmol，1.00當量)於THF (1.5 mL)中之溶液。混合物用DIEA鹼化至pH為8，在0℃下在氮氣氛圍下添加2-丁炔酸(17 mg，0.20 mmol，1.50當量)持續2分鐘，隨後在0℃下逐滴添加T3P (169 mg，0.27 mmol，2.00當量，50%/EA)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。所得混合物用EtOAc (3 x 10mL)萃取。合併之有機層用鹽水(1x10 mL)洗滌。殘留物用NaHCO 3(水溶液) (1x10 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。粗產物(60 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XSelect CSH Fluoro Phenyl, 30*150 mm, 5μm；移動相A：水(0.1%FA)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：12% B至42% B/7 min, 42% B；波長：254 nm；RT1(min)：5.83；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之2-(3-{[(2S)-1-(丁-2-炔醯基)吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(29.1 mg，42.10%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值518.5。 1H NMR (300 MHz, 氯仿- d) δ 11.37 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.90 (d, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.53 (d, 1H), 6.67 - 6.45 (m, 2H), 6.02 - 5.99 (m, 1H), 5.59 (s, 1H), 4.91 - 4.90 (m, 1H), 4.26 - 4.20 (m, 1H), 4.16 - 4.07 (m, 4H), 4.03 - 4.01 (m, 1H), 3.74 - 3.70 (m, 1H), 3.64 - 3.61 (m, 2H), 3.24 - 3.15 (m, 2H), 2.32 - 1.99 (m, 2H), 2.04 (s, 3H), 1.95(s, 1H), 1.92 - 1.80 (m, 1H)。
實例 101.3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2S)-1-[(2E)-4-(𠰌啉-4-基)丁-2-烯醯基]氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 297)
101.1. 合成 2-{3-[(2S)- 氮雜環丁烷 -2- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 }-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1605
在室溫下在氮氣氛圍下向2-{[(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(150 mg，0.28 mmol，1.00當量)於DCM (2 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加TFA (1 mL)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。在真空下濃縮所得混合物。將殘留物溶解於CH 2Cl 2(5 mL)。混合物用飽和NaHCO 3(水溶液)酸化至pH為7。所得混合物用CH 2Cl 2:MeOH (3 x 10 mL)萃取。合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (10:1)溶離得到呈淡黃色固體狀之2-{3-[(2S)-氮雜環丁烷-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100 mg，81.92%)。LC-MS: (M+H) +實驗值：438.10
101.2. 合成 (S,E)-2-(3-((1-(4- 溴丁 -2- 烯醯基 ) 氮雜環丁烷 -2- 基 ) 甲氧基 ) 吡啶 -4- 基 )-3-((3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 )-1,5,6,7- 四氫 -4H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1607
在0℃下在氮氣氛圍下向2-{3-[(2S)-氮雜環丁烷-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(90 mg，0.21 mmol，1.00當量)及DIEA (80 mg，0.62 mmol，3.00當量)於DCM (5 mL)中之攪拌溶液中添加(2E)-4-溴丁-2-烯醯氯(46 mg，0.25 mmol，1.20當量)。將所得混合物在0℃下在氮氣氛圍下攪拌0.5小時。所得混合物無需進一步純化即可直接用於下一步。 LC-MS: (M+H) +實驗值：584
101.3. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{[(2S)-1-[(2E)-4-( 𠰌 啉 -4- 基 ) 丁 -2- 烯醯基 ] 氮雜環丁烷 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1609
在0℃下向最後一步產生之混合物中逐滴添加𠰌啉 (54 mg，0.62 mmol，3.00當量)。將所得混合物在室溫下再攪拌48小時。所得混合物用CH 2Cl 2:MeOH (3 x 10 mL)萃取。合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液且溶解於DMSO。粗產物(100 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep C18 OBD管柱，30*100 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：18% B至38% B/10 min, 38% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8.85；運行次數：0)，得到呈米白色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2S)-1-[(2E)-4-(𠰌啉-4-基)丁-2-烯醯基]氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(53.2 mg，43.78%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值591.15。 1H NMR (400 MHz, 氯仿- d) δ 11.79 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 8.01 (d, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.53 (d, 1H), 6.94 - 6.87 (m, 1H), 6.60 - 6.55 (m, 1H), 6.48 - 6.43 (m, 1H), 6.19 - 6.04 (m, 2H), 5.22 (s, 1H), 5.04 (q, 1H), 4.53 (t, 1H), 4.42 - 4.19 (m, 3H), 4.13 (d, 3H), 3.76 (t, 4H), 3.62 - 3.57 (m, 2H), 3.26 - 3.05 (m, 4H), 2.70 - 2.61 (m, 1H), 2.51 - 2.49 (m, 4H), 2.21 - 2.13 (m, 1H)。
實例 102.3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2S)-1-[(2E)-4-(𠰌啉-4-基)丁-2-烯醯基]吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 300)
102.1. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-{3-[(2S)- 吡咯啶 -2- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 }-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1611
在室溫下在氮氣氛圍下向(2S)-2-{[(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(150 mg，0.27 mmol，1.00當量)於DCM (2 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加TFA (1 mL)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。在真空下濃縮所得混合物。將殘留物溶解於CH 2Cl 2(5 mL)。混合物用飽和NaHCO 3(水溶液)酸化至pH為7。所得混合物用CH 2Cl 2:MeOH (3 x 10 mL)萃取。合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (10:1)溶離得到呈淡黃色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[(2S)-吡咯啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100 mg，81.45%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值452.10
102.2. 合成 (S,E)-2-(3-((1-(4- 溴丁 -2- 烯醯基 ) 吡咯啶 -2- 基 ) 甲氧基 ) 吡啶 -4- 基 )-3-((3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 )-1,5,6,7- 四氫 -4H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1613
在0℃下在氮氣氛圍下向3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[(2S)-吡咯啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100 mg，0.22 mmol，1.00當量)及DIEA (86 mg，0.66 mmol，3.00當量)於DCM (5 mL)中之攪拌溶液中添加(2E)-4-溴丁-2-烯醯氯(49 mg，0.26 mmol，1.20當量)。將所得混合物在0℃下在氮氣氛圍下攪拌0.5小時。所得混合物無需進一步純化即可直接用於下一步。 LC-MS: (M+H) +實驗值：554.10
102.3. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{[(2S)-1-[(2E)-4-( 𠰌 啉 -4- 基 ) 丁 -2- 烯醯基 ] 吡咯啶 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1615
在0℃下向最後一步產生之混合物中逐滴添加𠰌啉 (58 mg，0.66 mmol，3.00當量)。將所得混合物在室溫下再攪拌36小時。所得混合物用CH 2Cl 2:MeOH (3 x 20 mL)萃取。合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液且溶解於DMSO。粗產物(100 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep C18 OBD管柱，30*100 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：24% B至39% B/10 min, 39% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：7.53；運行次數：0)，得到呈米白色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2S)-1-[(2E)-4-(𠰌啉-4-基)丁-2-烯醯基]吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(40.4 mg，30.17%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值605.15。 1H NMR (400 MHz, 氯仿- d) δ 11.56 (s, 1H), 8.20 (brs, 1H), 7.96 (brs, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.56 (brs, 1H), 6.96 - 6.89 (m, 1H), 6.62 - 6.56 (m, 1H), 6.50 - 6.40 (m, 2H), 6.06 - 6.04 (m, 1H), 5.21 (s, 1H), 5.03 (t, 1H), 4.28 (t, 1H), 4.21 - 4.06 (m, 4H), 3.77 - 3.72 (m, 6H), 3.64 - 3.57 (m, 2H), 3.29 - 3.14 (m, 4H), 2.49 (t, 4H), 2.24 - 2.09 (m, 3H), 1.88 - 1.85 (m, 1H)。
實例 103.3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2R)-1-[(2E)-4-(𠰌啉-4-基)丁-2-烯醯基]吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 299)
103.1. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-{3-[(2R)- 吡咯啶 -2- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 }-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1617
在室溫下在氮氣氛圍下向(2R)-2-{[(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(150 mg，0.27 mmol，1.00當量)於DCM (2 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加TFA (1 mL)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。在真空下濃縮所得混合物。將殘留物溶解於CH 2Cl 2(5 mL)。混合物用飽和NaHCO 3(水溶液)酸化至pH為7。所得混合物用CH 2Cl 2:MeOH (3 x 10 mL)萃取。合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (10:1)溶離得到呈淡黃色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[(2R)-吡咯啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100 mg，81.45%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值452.10
103.2. 合成 (R,E)-2-(3-((1-(4- 溴丁 -2- 烯醯基 ) 吡咯啶 -2- 基 ) 甲氧基 ) 吡啶 -4- 基 )-3-((3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 )-1,5,6,7- 四氫 -4H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1619
在0℃下在氮氣氛圍下向3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[(2R)-吡咯啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(90 mg，0.20 mmol，1.00當量)及DIEA (78 mg，0.60 mmol，3.00當量)於DCM (5 mL)中之攪拌溶液中添加(2E)-4-溴丁-2-烯醯氯(44 mg，0.24 mmol，1.20當量)。將所得混合物在0℃下在氮氣氛圍下攪拌0.5小時。所得混合物無需進一步純化即可直接用於下一步。 LC-MS: (M+H) +實驗值554.10
103.3. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{[(2R)-1-[(2E)-4-( 𠰌 啉 -4- 基 ) 丁 -2- 烯醯基 ] 吡咯啶 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1621
在0℃下向最後一步產生之混合物中逐滴添加𠰌啉 (52 mg，0.59 mmol，3當量)。將所得混合物在室溫下再攪拌48小時。所得混合物用CH 2Cl 2:MeOH (3 x 50 mL)萃取。合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液且溶解於DMSO。粗產物(100 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep C18 OBD管柱，30*100 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：20% B至40% B/9 min, 40% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8.85；運行次數：0)，得到呈米白色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2R)-1-[(2E)-4-(𠰌啉-4-基)丁-2-烯醯基]吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(51.2 mg，42.48%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值605.15。 1H NMR (400 MHz, 氯仿- d) δ 11.54 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 8.00 (d, 1H), 7.63 - 7.49 (m, 2H), 6.94 - 6.88 (m, 1H), 6.61 - 6.55 (m, 1H), 6.49 - 6.39 (m, 2H), 6.12 - 6.05 (m, 1H), 5.23 (s, 1H), 5.06 (t, 1H), 4.28 (t, 1H), 4.19 - 4.05 (m, 4H), 3.76 - 3.71 (m, 6H), 3.67 - 3.54 (m, 2H), 3.27 - 3.07 (m, 4H), 2.50 (t, 4H), 2.21 - 2.16 (m, 3H), 1.92 - 1.83 (m, 1H)。
實例 104.2-(3-{[(2R)-1-[4-(二甲基胺基)丁-2-炔醯基]氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 326)
104.1. 合成 (R)-2-(3-( 氮雜環丁烷 -2- 基甲氧基 ) 吡啶 -4- 基 )-3-((3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 )-1,5,6,7- 四氫 -4H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1623
向(2R)-2-{[(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(200 mg，0.19 mmol，1.00當量)於DCM (1 mL)中之攪拌溶液中添加TFA (0.2 mL)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌3小時。將所得混合物在減壓下濃縮。粗產物不經進一步純化直接用於下一步。 LC-MS: (M+H) +實驗值：438.05
104.2. 合成 2-(3-{[(2R)-1-[4-( 二甲基胺基 ) 丁 -2- 炔醯基 ] 氮雜環丁烷 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1625
在0℃下在氮氣氛圍下向2-{3-[(2R)-氮雜環丁烷-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(110 mg，0.251 mmol，1當量)及4-(二甲基胺基)丁-2-炔酸(95.91 mg，0.753 mmol，3當量)於THF (3 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加DIEA (162.49 mg，1.255 mmol，5當量)。在0℃下向上述混合物中逐滴添加T3P (480.03 mg，0.753 mmol，3當量，50%/EA)。所得混合物在室溫下再攪拌2小時。反應在0℃下用飽和NaHCO3 (水溶液)淬滅。所得混合物用EtOAc (3 x 10 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(1x10 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。粗產物(90 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XSelect CSH Fluoro Phenyl, 30*150 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：30% B至60% B/7 min；波長：254 nm；RT1(min)：6.5；運行次數：0)，得到呈淡黃色固體狀之2-(3-{[(2R)-1-[4-(二甲基胺基)丁-2-炔醯基]氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(12.2 mg，8.83%)。LC-MS: (M+H) +實驗值：547.15。 1H NMR (400 MHz, 氯仿- d) δ 11.43 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.96 (d, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.49 (d, 1H), 6.61 - 6.55 (m, 1H), 6.51 - 6.46 (m, 1H), 6.10 - 5.99 (m, 1H), 5.26 (s, 1H), 4.98 (q, 1H), 4.53 (t, 1H), 4.38 - 4.23 (m, 3H), 4.10 (d, 3H), 3.61 - 3.57 (m, 2H), 3.51 (s, 2H), 3.24 - 3.12 (m, 1H), 3.10 - 3.03 (m, 1H), 2.71 - 2.61 (m, 1H), 2.19 - 2.15 (m, 1H)。
實例 105.2-(3-{[(2R)-1-(丁-2-炔醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(4-氯苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 353)
105.1. 合成 (2R)-2-{[(4-{3-[(4- 氯苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 } 氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1627
向(2S)-2-{[(4-{3-碘-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(300 mg，0.57 mmol，1.00當量)及4-氯苯胺(73 mg，0.57 mmol，1.00當量)於DMF (5 mL)中之攪拌溶液中添加Cs 2CO 3(559 mg，1.71 mmol，3.00當量)及Ephos Pd G4 (78.83 mg，0.08 mmol，0.15當量)。將所得混合物在50℃下在氬氣氛圍下攪拌3小時。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (10:1)溶離得到呈黃色固體狀之(2R)-2-{[(4-{3-[(4-氯苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(180 mg，60.04%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：524.10
105.2. 合成 (R)-2-(3-( 氮雜環丁烷 -2- 基甲氧基 ) 吡啶 -4- 基 )-3-((4- 氯苯基 ) 胺基 )-1,5,6,7- 四氫 -4H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1629
向(2R)-2-{[(4-{3-[(4-氯苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(100 mg，0.19 mmol，1.00當量)於DCM (2 mL)中之攪拌溶液中添加TFA (0.4 mL)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌3小時。將所得混合物在減壓下濃縮。粗產物不經進一步純化直接用於下一步。 LC-MS: (M+H) +實驗值：424.00
105.3. 合成 2-(3-{[(2R)-1-( 丁 -2- 炔醯基 ) 氮雜環丁烷 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-3-[(4- 氯苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1631
在0℃下向2-{3-[(2R)-氮雜環丁烷-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-3-[(4-氯苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(90 mg，0.21 mmol，1.00當量)及2-丁炔酸(27 mg，0.32 mmol，1.50當量)於THF (2 mL)中之攪拌溶液中添加DIEA (137 mg，1.06 mmol，5.00當量)將PH調節至8。在0℃下向上述混合物中逐滴添加T3P (270 mg，0.42 mmol，2.00當量，50%/EA)。所得混合物在室溫下再攪拌2小時。反應在0℃下用飽和NaHCO 3(水溶液)淬滅。所得混合物用EtOAc (3 x 10 mL)萃取。合併之有機層用NaHCO 3(飽和) (2x10 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。粗產物(90 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep C18 OBD管柱，30*100 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：25% B至48% B/9 min, 48% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：7.53；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之2-(3-{[(2R)-1-(丁-2-炔醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(4-氯苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(24 mg，23.00%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：490.05。 1H NMR (400 MHz, 氯仿- d) δ 11.42 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.92 (d, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.38 (d, 1H), 7.07 - 6.96 (m, 2H), 6.68 - 6.53 (m, 2H), 5.26 (s, 1H), 4.95 (q, 1H), 4.50 (t, 1H), 4.26 - 4.25 (m, 3H), 3.59 - 3.57 (m, 2H), 3.26 - 3.00 (m, 2H), 2.69 - 2.58 (m, 1H), 2.17 - 2.11 (m, 1H), 2.04 (s, 3H)。
實例 106.2-(3-{[(2R)-1-(丁-2-炔醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3-氯-2-乙基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 348)
106.1. 合成 (2R)-2-{[(4-{3-[(3- 氯 -2- 乙基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 } 氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1633
在室溫下在氬氣氛圍下向(2R)-2-{[(4-{7-碘-1-側氧基-2H,3H,4H,5H-環戊[c]吡啶-6-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(300 mg，0.57 mmol，1.00當量)及3-氯-2-乙基苯胺(89 mg，0.57 mmol，1.00當量)於DMF (3 mL)中之攪拌溶液中分批添加EPhos Pd G4 (53 mg，0.06 mmol，0.10當量)及Cs 2CO 3(561 mg，1.72 mmol，3.00當量)。將所得混合物在50℃下在氬氣氛圍下攪拌6小時。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (97:3)溶離得到呈黃色固體狀之(2R)-2-{[(4-{3-[(3-氯-2-乙基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(210 mg，66.36%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：552.15
106.2. 合成 2-{3-[(2R)- 氮雜環丁烷 -2- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 }-3-[(3- 氯 -2- 乙基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1635
在室溫下在氮氣氛圍下向(2R)-2-{[(4-{3-[(3-氯-2-乙基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(100 mg，0.18 mmol，1.00當量)於DCM (2 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加TFA (1 mL)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。將所得混合物在減壓下濃縮。粗產物2-{3-[(2R)-氮雜環丁烷-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-3-[(3-氯-2-乙基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(150 mg)不經進一步純化直接用於下一步。 LC-MS: (M+H) +實驗值：452.00
106.3. 合成 2-(3-{[(2R)-1-( 丁 -2- 炔醯基 ) 氮雜環丁烷 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-3-[(3- 氯 -2- 乙基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1637
向2-{3-[(2R)-氮雜環丁烷-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-3-[(3-氯-2-乙基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100 mg，0.22 mmol，1.00當量)於THF (4 mL)中之攪拌溶液中添加DIEA (143 mg，1.11 mmol，5.00當量)以鹼化混合物。向上述混合物中逐滴添加2-丁炔酸(28 mg，0.33 mmol，1.50當量)及T3P (282 mg，0.44 mmol，2.00當量，50%/EA)。所得混合物在室溫下再攪拌1小時。所得混合物用CH 2Cl 2:MeOH (3 x 20 mL)萃取。合併之有機層用NaHCO 3(飽和) (2x20 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液且溶解於DMSO。粗產物(100 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep C18 OBD管柱，30*100 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：37% B至60% B/9 min, 60% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8.85；運行次數：0)，得到呈橘色固體狀之2-(3-{[(2R)-1-(丁-2-炔醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3-氯-2-乙基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(23.5 mg，20.50%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值518.10。 1H NMR (400 MHz, 氯仿- d) δ 11.41 (s, 1H), 8.22 (s, 1H), 7.91 (d, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.24 (d, 1H), 6.80 - 6.78 (m, 1H), 6.69 (t, 1H), 6.36 - 6.32 (m, 1H), 5.26 (t, 1H), 4.97 (q, 1H), 4.51 (t, 1H), 4.28 - 4.23 (m, 3H), 3.60 - 3.57 (m, 2H), 3.26 - 2.91 (m, 4H), 2.70 - 2.58 (m, 1H), 2.14 - 2.11 (m, 1H), 2.06 (s, 3H), 1.39 (t, 3H)。
實例 107.3-[(2-乙基-3-氟苯基)胺基]-2-(3-{[(2R)-1-(2-氟丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 364)
107.1. 合成 2-{3-[(2R)- 氮雜環丁烷 -2- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 }-3-[(2- 乙基 -3- 氟苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1639
將(2S)-2-{[(4-{3-[(2-乙基-3-氟苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(100 mg，0.18 mmol，1.00當量)及TFA (0.2 mL)於DCM (1 mL)中之混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。將所得混合物在減壓下濃縮得到呈紅色油狀物之2-{3-[(2R)-氮雜環丁烷-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-3-[(2-乙基-3-氟苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(200 mg，粗品)。 LC-MS: (M+H) +實驗值436.20
107.2. 合成 3-[(2- 乙基 -3- 氟苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{[(2R)-1-(2- 氟丙 -2- 烯醯基 ) 氮雜環丁烷 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1641
向2-{3-[(2R)-氮雜環丁烷-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-3-[(2-乙基-3-氟苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(60 mg，0.14 mmol，1.00當量)於THF (2 mL)中之攪拌混合物中，混合物用DIEA鹼化至pH為8，在0℃下在氮氣氛圍下逐滴添加2-氟丙-2-烯酸(25 mg，0.28 mmol，2.00當量)及T3P (175 mg，0.28 mmol，2.00當量，50%/EA)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌3小時。所得混合物用EtOAc (3 x 10mL)萃取。合併之有機層用NaHCO 3(水溶液) (1x10 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。粗產物(60mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：Xselect  CSH C18 OBD管柱 30*150mm 5μm, n；移動相A：水(0.1%FA)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：17% B至47% B/7 min；波長：254 nm；RT1(min)：6.5；運行次數：0)，得到呈淡黃色固體狀之3-[(2-乙基-3-氟苯基)胺基]-2-(3-{[(2R)-1-(2-氟丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(25.6 mg，35.18%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值508.2 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 11.48 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.93 (d, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.29 (d, 1H), 6.72 - 6.69 (m, 1H), 6.50 (t, 1H), 6.25 (d, 1H), 5.71 -5.59(m, 1H), 5.34 (s, 1H), 5.22 (d, 1H), 5.11 (q, 1H), 4.62 - 4.40 (m, 3H), 4.30 (d, 1H), 3.62 - 3.58 (m, 2H), 3.13 (t, 2H), 2.97 - 2.77 (m, 2H), 2.70 - 2.66 (m, 1H), 2.26 - 2.15 (m, 1H), 1.38 (t, 3H)。
實例 108.2-(3-{2-[(2R)-1-[(2E)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯醯基]-2-甲基吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 335)
108.1. 合成 (2R)-2-[2-(4-{3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ]-2- 甲基吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1643
在室溫下在氬氣氛圍下向3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(150 mg，0.31 mmol，1.00當量)及Pd(dppf)Cl 2CH 2Cl 2(63 mg，0.08 mmol，0.25當量)於DMF (2 mL)中之攪拌混合物中添加DIEA (202 mg，1.58 mmol，5.00當量)及(2R)-2-乙炔基-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(196 mg，0.94 mmol，3.00當量)。將所得混合物在50℃下在氬氣氛圍下攪拌2小時。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化：移動相，MeCN/水，10%至70%梯度/20 min；偵測器，UV 254 nm。此產生呈黃色固體狀之(2R)-2-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(150 mg，85.46%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：560.1
108.2. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[(2R)-2- 甲基吡咯啶 -2- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1645
在室溫下在氮氣氛圍下向(2R)-2-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(120 mg，0.21 mmol，1.00當量)於DCM (3 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加TFA (1 mL)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。所得油在氮氣下乾燥得到呈黃色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R)-2-甲基吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(90 mg，91.34%)。粗產物不經進一步純化直接用於下一步。 LC-MS: (M+H) +實驗值：460.05
108.3. 合成 2-(3-{2-[(2R)-1-[(2E)-4-( 二甲基胺基 ) 丁 -2- 烯醯基 ]-2- 甲基吡咯啶 -2- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1647
在0℃下在氮氣氛圍下將3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R)-2-甲基吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(60 mg，0.13 mmol，1.00當量)於THF (2 mL)中之溶液用DIEA (50 mg，0.39 mmol，3.00當量)處理10分鐘，隨後在0℃下逐滴添加(2E)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯酸鹽酸鹽(33 mg，0.26 mmol，2.00當量)及T3P (165 mg，0.26 mmol，2.00當量，50%/EA)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。在室溫下藉由添加飽和NaHCO 3(水溶液) (2 mL)淬滅反應。所得混合物用EtOAc (3 x 10 mL)萃取。合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。粗產物(100 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep OBD C18管柱，30*150 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：48% B至78% B/7 min；波長：254 nm；RT1(min)：6.5；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之2-(3-{2-[(2R)-1-[(2E)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯醯基]-2-甲基吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(29.9 mg，39.93%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：571.20 1H NMR (400 MHz, 氯仿- d) δ 11.52 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.17 (d, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.51 - 7.45 (m, 1H), 6.99 - 6.88 (m, 1H), 6.65 - 6.55 (m, 1H), 6.53 - 6.44 (m, 1H), 6.44 - 6.36 (m, 1H), 6.16 - 6.09 (m, 1H), 5.23 (s, 1H), 4.12 (d, 3H), 3.88 - 3.71 (m, 2H), 3.69 - 3.59 (m, 2H), 3.37 - 3.25 (m, 1H), 3.25 - 3.15 (m, 3H), 2.35 (s, 6H), 2.25 - 2.05 (m, 4H), 1.79 (s, 3H)。
實例 109.N-{1-[(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]-2-甲基丙烷-2-基}丁-2-炔醯胺；三氟乙酸 ( 化合物 340)
109.1. 合成 2-[3-(2- 胺基 -2- 甲基丙氧基 ) 吡啶 -4- 基 ]-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1649
在0℃下向N-{1-[(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]-2-甲基丙烷-2-基}胺基甲酸三級丁酯(710 mg，1.32 mmol，1.00當量)於DCM (6.00 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加TFA (2.00 mL)。將混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。藉由LCMS監測反應。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化：管柱，C18球形管柱；移動相，MeCN/水，10%至60%梯度/15 min；偵測器，UV 254 nm。得到呈黃色固體狀之2-[3-(2-胺基-2-甲基丙氧基)吡啶-4-基]-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(460 mg，79.55%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：440.15。
109.2. 合成 N-{1-[(4-{3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ]-2- 甲基丙烷 -2- 基 } 丁 -2- 炔醯胺；三氟乙酸
Figure 02_image1651
在0℃下在氮氣氛圍下向2-[3-(2-胺基-2-甲基丙氧基)吡啶-4-基]-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(60 mg，0.14 mmol，1.00當量)於THF (2.00 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加DIEA (53 mg，0.41 mmol，3.00當量)及丁-2-炔醯氯(14 mg，0.14 mmol，1.00當量)。藉由LCMS監測反應。將所得混合物在減壓下濃縮。所得混合物用CH 2Cl 2: MeOH (10:1) (2 x 5 mL)萃取。合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。粗產物(80 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：Xselect CSH C18 OBD管柱 30*150mm 5μm, n；移動相A：水(0.05%TFA )，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：11% B至41% B/7 min；波長：254 nm；RT1(min)：6.5；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之N-{1-[(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]-2-甲基丙烷-2-基}丁-2-炔醯胺；三氟乙酸(36.2 mg，42.41%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：506.2。 1H NMR (300 MHz, 氯仿- d): δ 11.72 (s, 1H), 8.48 (brs, 1H), 8.01 (brs, 1H), 7.90 (d, 1H), 7.49 (d, 1H), 6.67 - 6.55 (m, 2H), 6.43 (brs, 1H), 6.23 (s, 1H), 5.95 (d, 1H), 4.22 (brs, 2H), 4.11 (s, 3H), 3.67 (t, 2H), 3.20 (t, 2H), 1.92 (s, 3H), 1.61 (s, 6H)
實例 110.N-{1-[(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]-2-甲基丙烷-2-基}丙-2-烯醯胺 ( 化合物 339)
110.1. 合成 N-{1-[(4- 溴吡啶 -3- 基 ) 氧基 ]-2- 甲基丙烷 -2- 基 } 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image1653
在室溫下向4-溴吡啶-3-醇(2.1 g，12.14 mmol，1.00當量)於DMF (20.00 mL)中之攪拌溶液中添加4,4-二甲基-2,2-二側氧基-1,2λ6,3-氧雜噻唑啶-3-甲酸三級丁酯(3.35 g，13.35 mmol，1.10當量)及K 2CO 3(5.03 g，36.42 mmol，3.00當量)。將混合物在80℃下在氮氣氛圍下攪拌2小時。藉由LCMS監測反應。使混合物冷卻至室溫。所得混合物用EtOAc (3 x 100 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(3x100 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EA (4:1)溶離得到呈淡黃色固體狀之N-{1-[(4-溴吡啶-3-基)氧基]-2-甲基丙烷-2-基}胺基甲酸三級丁酯(4.0 g，95.78%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：344.85。
110.2. 合成 N-{2- 甲基 -1-[(4-{4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 丙烷 -2- 基 } 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image1655
在室溫下向N-{1-[(4-溴吡啶-3-基)氧基]-2-甲基丙烷-2-基}胺基甲酸三級丁酯(500 mg，1.45 mmol，1.00當量)於1,4-二㗁烷(10 mL)中之攪拌溶液中添加2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(418 mg，1.59 mmol，1.10當量)、Pd(dtbpf)Cl 2(95 mg，0.15 mmol，0.10當量)及Na 2CO 3(461 mg，4.34 mmol，3.00當量)於1,4-二㗁烷(10 mL)及H 2O (2.50 mL)中。將混合物在50℃下在氬氣氛圍下攪拌2小時。藉由LCMS監測反應。過濾所得混合物，用1,4-二㗁烷(3x8 mL)洗滌濾餅。在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化：管柱，C18球形管柱；移動相，MeCN/水，10%至50%梯度/20 min；偵測器，UV 254 nm。得到呈黃色固體狀之N-{2-甲基-1-[(4-{4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]丙烷-2-基}胺基甲酸三級丁酯(490 mg，84.48%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：401.2。
110.3. 合成 N-{1-[(4-{3- 碘 -4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ]-2- 甲基丙烷 -2- 基 } 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image1657
在0℃下向N-{2-甲基-1-[(4-{4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]丙烷-2-基}胺基甲酸三級丁酯(440 mg，1.10 mmol，1.00當量)於DMF (5.00 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加NIS (247 mg，1.10 mmol，1.00當量)。將混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。藉由LCMS監測反應。反應在0℃下用飽和Na 2SO 3(水溶液)淬滅。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化：管柱，C18球形管柱；移動相，MeCN/水，10%至70%梯度/20 min；偵測器，UV 254 nm。得到呈黃綠色固體狀之N-{1-[(4-{3-碘-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]-2-甲基丙烷-2-基}胺基甲酸三級丁酯(380 mg，65.71%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：527.15。
110.4. 合成 N-{1-[(4-{3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ]-2- 甲基丙烷 -2- 基 } 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image1659
在室溫下向N-{1-[(4-{3-碘-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]-2-甲基丙烷-2-基}胺基甲酸三級丁酯(350 mg，0.66 mmol，1.00當量)於DMF (3.00 mL)中之攪拌溶液中添加EPhos Pd G4 (57 mg，0.07 mmol，0.10當量)、Cs 2CO 3(650 mg，1.99 mmol，3.00當量)及3-氟-2-甲氧基苯胺(280 mg，1.99 mmol，3.00當量)。將混合物在50℃下在氬氣氛圍下攪拌2小時。藉由LCMS監測反應。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (93:7)溶離得到呈黃色固體狀之N-{1-[(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]-2-甲基丙烷-2-基}胺基甲酸三級丁酯(330 mg，91.79%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：540.35。
110.5. 合成 2-[3-(2- 胺基 -2- 甲基丙氧基 ) 吡啶 -4- 基 ]-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1661
在0℃下向N-{1-[(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]-2-甲基丙烷-2-基}胺基甲酸三級丁酯(290 mg，0.54 mmol，1.00當量)於DCM (4.00 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加TFA (1.00 mL)。將混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。藉由LCMS監測反應。將所得混合物在氮氣氛圍下濃縮。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化：C18球形管柱；移動相，MeCN/水，10%至60%梯度/15 min；偵測器，UV 254 nm。得到呈黃色固體狀之2-[3-(2-胺基-2-甲基丙氧基)吡啶-4-基]-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(140 mg，59.27%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：440.10。
110.6. 合成 N-{1-[(4-{3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ]-2- 甲基丙烷 -2- 基 } 丙 -2- 烯醯胺
Figure 02_image1663
在0℃下向2-[3-(2-胺基-2-甲基丙氧基)吡啶-4-基]-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(120 mg，0.27 mmol，1.00當量)於THF (3.00 mL)中之攪拌溶液中添加DIEA (106 mg，0.82 mmol，3.00當量)。在0℃下逐滴添加丙烯醯氯(24 mg，0.27 mmol，1.00當量)。將混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。藉由LCMS監測反應。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (93:7)溶離得到粗產物。粗產物(80 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：YMC-Actus Triart C18 ExRS, 30*150 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：18% B至43% B/9 min, 43% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8.85；運行次數：0)，得到呈淡黃色固體狀之N-{1-[(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]-2-甲基丙烷-2-基}丙-2-烯醯胺(14.4 mg，10.59%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：494.10。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6 ): δ 11.22 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.02 - 7.99 (m, 2H), 7.42 (s, 1H), 7.30 (d, J= 4.8 Hz, 1H), 7.12 (s, 1H), 6.66 - 6.59 (m, 1H), 6.51 - 6.44 (m, 1H), 6.37 - 6.28 (m, 1H), 6.11 - 6.00 (m, 2H), 5.58 - 5.54 (m, 1H), 4.30 (s, 2H), 3.90 (s, 3H), 3.43 - 3.40 (m, 2H), 2.87 (t, J= 6.6 Hz, 2H), 1.42 (s, 6H)。
實例 111.2-(3-{2-[(6R)-5-[(2E)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯醯基]-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-基]乙炔基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 343)
111.1. 合成 (6R)-6-[2-(4-{3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ]-5- 氮雜螺 [2.4] 庚烷 -5- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1665
在室溫下在Ar氛圍下向3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(130 mg，0.27 mmol，1.00當量)及Pd(dppf)Cl 2CH 2Cl 2(55 mg，0.07 mmol，0.25當量)、CuI (25 mg，0.13 mmol，0.50當量)於DMF (1.5 mL)中之攪拌溶液中添加(6R)-6-乙炔基-5-氮雜螺[2.4]庚烷-5-甲酸三級丁酯(300 mg，1.36 mmol，5.00當量)及DIEA (175 mg，1.36 mmol，5.00當量)。將所得混合物在50℃下在Ar氛圍下於密封管中攪拌2小時。殘留物藉由逆相急驟純化得到呈黃色固體狀之(6R)-6-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-5-氮雜螺[2.4]庚烷-5-甲酸三級丁酯(80 mg，51.49%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：572.20。
111.2. 合成 (R)-2-(3-((5- 氮雜螺 [2.4] 庚烷 -6- 基 ) 乙炔基 ) 吡啶 -4- 基 )-3-((3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 )-1,5,6,7- 四氫 -4H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1667
在0℃下向(6R)-6-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-5-氮雜螺[2.4]庚烷-5-甲酸三級丁酯(80 mg，0.14 mmol，1.00當量)於DCM (2.00 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加TFA (0.80 mL)。將所得混合物在室溫下攪拌2小時。使用氮氣使混合物乾燥。粗產物不經進一步純化直接用於下一步。 LC-MS: (M+H) +實驗值：472.20。
111.3. 合成 2-(3-{2-[(6R)-5-[(2E)-4-( 二甲基胺基 ) 丁 -2- 烯醯基 ]-5- 氮雜螺 [2.4] 庚烷 -6- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1669
在0℃下向2-(3-{2-[(6R)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-基]乙炔基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(60 mg，0.12 mmol，1.00當量)及(2E)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯酸鹽酸鹽(42 mg，0.25 mmol，2.00當量)於THF中之攪拌溶液中逐滴添加T3P (202 mg，0.31 mmol，2.50當量，50%/EA)及DIEA (0.8 mL)。所得混合物用EtOAc (3 x 5 mL)萃取。合併之有機層用NaHCO 3(水溶液) (1 x 10 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。粗產物藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：Xselect  CSH C18 OBD管柱 30*150mm 5μm, n；移動相A：水(0.1%FA)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：11% B至27% B/8 min, 27% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之2-(3-{2-[(6R)-5-[(2E)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯醯基]-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-基]乙炔基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(30 mg)。產物(30 mg)隨後藉由製備型對掌性HPLC在以下條件下分離(管柱：CHIRAL ART Cellulose-SC, 2*25 cm, 5 μm；移動相A：Hex: DCM=3: 1(0.5% 2M NH 3-MeOH)--HPLC，移動相B：EtOH--HPLC；流動速率：20 mL/min；梯度：30% B至30% B/11 min；波長：220/254 nm；RT1(min)：8.59；RT2(min)：9.39；樣品溶劑：ETOH: DCM=1: 1；注入體積：0.5 mL；運行次數：7)，得到呈黃色固體狀之2-(3-{2-[(6R)-5-[(2E)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯醯基]-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-基]乙炔基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(23.1 mg，33.07%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：583.3。 1H NMR (400 MHz, 氯仿- d) δ 11.09 (s, 1H), 8.53 (s, 1H), 8.16 (d, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.47 (d, 1H), 6.99 - 6.95 (m, 1H), 6.58 - 6.43 (m, 3H), 6.09 (d, 1H), 5.20 (s, 1H), 5.03 -5.00 (m, 1H), 4.10 (s, 3H), 3.70 - 3.61 (m, 4H), 3.39 - 3.37 (m, 2H), 3.27 (t, 2H), 2.66 (s, 1H), 2.52 (s, 5H), 2.33 - 2.27 (m, 1H), 2.18 - 2.14 (m, 1H), 0.90 - 0.81 (m, 2H), 0.71 (t, 2H)。
實例 112.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2S)-1-(2-氟丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 363)
Figure 02_image1671
在室溫下向50 mL圓底燒瓶中添加2-{3-[(2S)-氮雜環丁烷-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(60 mg，0.13 mmol，1.00當量)及THF (2 mL)。上述混合物在0℃下用DIEA (52 mg，0.39 mmol，3.00當量)鹼化至pH為8。隨後，在0℃下向上述混合物中添加2-氟丙-2-烯酸(18 mg，0.20 mmol，1.50當量)及T3P (169 mg，0.26 mmol，2.00當量，50%/EA)。將所得混合物在室溫下再攪拌1小時。藉由LCMS監測反應。所得混合物用DCM: MeOH=10:1 (4 x 20mL)萃取。合併之有機層用NaHCO 3(水溶液) (1 x 20 mL)洗滌且用無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。粗產物(178mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep C18 OBD管柱，30*100 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：26% B至51% B/9 min, 51% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8.85；運行次數：0)，得到呈淡黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2S)-1-(2-氟丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(10.2 mg，14.67%)。 LC-MS: M+H實驗值：526.05。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 11.67 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.95 (d, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.46 (d, 1H), 6.79 - 6.75 (m, 1H), 6.66 (t, 1H), 6.19 - 6.15 (m, 1H), 5.68 - 5.56 (m, 1H), 5.30 - 5.24 (m, 2H), 5.15- 5.05 (m, 1H), 4.65 - 4.42 (m, 3H), 4.33 (d, 1H), 4.11 (s, 3H), 3.68 - 3.60 (m, 2H), 3.20 - 3.12 (m, 2H), 2.80 - 2.66 (m, 1H), 2.15 - 2.25 (m, 1H)
實例 113.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R)-1-[(2E)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯醯基]-2-甲基吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 362)
113.1. 合成 (2R)-2-[2-(4-{3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ]-2- 甲基吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1673
在室溫下在氬氣氛圍下向2-(3-溴吡啶-4-基)-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(300 mg，0.67 mmol，1.00當量)及CuI (63 mg，0.33 mmol，0.50當量)及Pd(dppf)Cl 2.CH 2Cl 2(136 mg，0.17 mmol，0.25當量)於DMF (5 mL)中之攪拌混合物中逐滴添加(2R)-2-乙炔基-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(28 mg，0.14 mmol，3.00當量)及DIEA (259 mg，2.01 mmol，3.00當量)。將所得混合物在50℃下在氬氣氛圍下攪拌隔夜。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化：管柱，C18球形管柱；移動相，MeCN/水，10%至70%梯度/30 min；偵測器，UV 254 nm。得到呈黃色固體狀之(2R)-2-[2-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(290 mg，75.13%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：576.15。
113.2. 合成 (R)-3-((3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 )-2-(3-((2- 甲基吡咯啶 -2- 基 ) 乙炔基 ) 吡啶 -4- 基 )-1,5,6,7- 四氫 -4H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1675
在室溫下在氮氣氛圍下向(2R)-2-[2-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(80 mg，0.13 mmol，1. 00當量)於DCM (2 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加TFA (0.5 mL)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。所得油在氮氣下乾燥。粗產物不經進一步純化直接用於下一步。 LC-MS: (M+H) +實驗值：476.10
113.3. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[(2R)-1-[(2E)-4-( 二甲基胺基 ) 丁 -2- 烯醯基 ]-2- 甲基吡咯啶 -2- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1677
在0℃下在氮氣氛圍下向3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R)-2-甲基吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(82 mg，0.17 mmol，1.00當量)及(2E)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯酸鹽酸鹽(56 mg，0.34 mmol，2.00當量)於THF (4 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加DIEA (44 mg，0.34 mmol，2.00當量)及T3P (216 mg，0.34 mmol，2.00當量，50%/EA)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌4小時。用3x10 mL之NaHCO 3(水溶液)洗滌所得混合物。所得混合物用EtOAc (3 x 20 mL)萃取。合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。粗產物(100 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：Xselect CSH C18 OBD管柱 30*150mm 5μm, n；移動相A：水(0.1%FA)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：8% B至30% B/10 min, 30% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：9；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R)-1-[(2E)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯醯基]-2-甲基吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(27.1 mg，26.50%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：587.2 1H NMR (300 MHz, 氯仿- d) δ 11.49 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.14 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.40 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 7.04 - 6.83 (m, 1H), 6.78 - 6.66 (m, 1H), 6.61 (t, J = 8.1 Hz, 1H), 6.46 - 6.41 (m, 1H), 6.26 - 6.18 (m, 1H), 5.34 (s, 1H), 4.07 (s, 3H), 3.88 - 3.70 (m, 2H), 3.63 - 3.59 (m, 2H), 3.35 - 3.10 (m, 4H), 2.41 (s, 6H), 2.24 - 2.03 (m, 4H), 1.76 (s, 3H)。
實例 114.3-[(3-氯-5-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2R)-1-(2-氟丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 366)
114.1. 合成 (2R)-2-{[(4-{3-[(3- 氯 -5- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 } 氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1679
在室溫下向(2R)-2-{[(4-{3-碘-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(320 mg，0.61 mmol，1.00當量)及3-氯-5-氟-2-甲氧基苯胺(118 mg，0.67 mmol，1.10當量)於DMF (4 mL)中之攪拌溶液中添加Ephos Pd G4 (56 mg，0.06 mmol，0.10當量)及Cs 2CO 3(597 mg，1.83 mmol，3.00當量)。將所得混合物在50℃下在氬氣氛圍下攪拌2小時。藉由LCMS監測反應。所得混合物用DCM:MeOH (10:1,4 x 20mL)萃取。合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用DCM:MeOH (10:1)溶離得到呈黃色固體狀之(2R)-2-{[(4-{3-[(3-氯-5-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(222 mg，63.74%)。 LC-MS: M+H實驗值：572.15。
114.2. 合成 2-{3-[(2R)- 氮雜環丁烷 -2- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 }-3-[(3- 氯 -5- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1681
在室溫下向25 mL圓底燒瓶中添加(2R)-2-{[(4-{3-[(3-氯-5-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(260 mg，0.45 mmol，1.00當量)及DCM (3 mL)。在0℃下向上述混合物中逐滴添加TFA (2 mL)持續0.5分鐘。將所得混合物在室溫下再攪拌1小時。藉由LCMS監測反應。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化(管柱，C18球形管柱；移動相，MeCN/水，10%至50%梯度/30 min；偵測器，UV 254 nm)，得到呈棕色固體狀之2-{3-[(2R)-氮雜環丁烷-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-3-[(3-氯-5-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(146 mg，68.20%)。 LC-MS: (M+H)+實驗值472.00。
114.3. 合成 3-[(3- 氯 -5- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{[(2R)-1-(2- 氟丙 -2- 烯醯基 ) 氮雜環丁烷 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1683
在室溫下向8 mL小瓶中添加2-{3-[(2R)-氮雜環丁烷-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-3-[(3-氯-5-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(75 mg，0.16 mmol，1.00當量)及THF (1.5 mL)。混合物在0℃下用DIEA(123 mg，0.95 mmol，6.00當量)鹼化至pH為9。在0℃下向上述混合物中添加2-氟丙-2-烯酸(43 mg，0.48 mmol，3.00當量)及T3P (405 mg，0.64 mmol，4.00當量，50%/EA)。將所得混合物在室溫下再攪拌1小時。藉由LCMS監測反應。所得混合物用CH 2Cl 2:MeOH (10:1,4 x 20mL)萃取。合併之有機層用NaHCO 3(水溶液) (1 x 20 mL)洗滌且經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。粗產物(112 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep C18 OBD管柱，30*100 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：29% B至48% B/10 min, 48% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：9.67；運行次數：0)，得到呈牡蠣白色固體狀之3-[(3-氯-5-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2R)-1-(2-氟丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(18.0 mg，20.54%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值544.1 1H NMR (400 MHz, 氯仿- d) δ 11.61 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 8.03 (d, 1H), 7.56 - 7.46 (m, 2H), 6.46 - 6.43 (m, 1H), 5.97 - 5.94 (m, 1H), 5.68 - 5.56 (m, 1H), 5.26 - 5.16 (m, 3H), 4.64 - 4.39 (m, 3H), 4.32 - 4.29 (m,1H), 4.05 (s, 3H), 3.63 - 3.59 (m,2H), 3.13 - 3.10 (m,2H), 2.77 - 2.63 (m, 1H), 2.22 - 2.17 (m, 1H)。
實例 115.N-[(2R)-4-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)丁-3-炔-2-基]丙-2-烯醯胺 ( 化合物 377)
115.1. 合成 N-[(2R)-4-(4-{3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 丁 -3- 炔 -2- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image1685
在0℃下在Ar氛圍下向2-(3-溴吡啶-4-基)-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(250 mg，0.56 mmol，1.00當量)及N-[(2R)-丁-3-炔-2-基]胺基甲酸三級丁酯(236 mg，1.40 mmol，2.50當量)於DMF (3.00 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加DIEA (180 mg，1.40 mmol，2.50當量)、CuI (53 mg，0.28 mmol，0.50當量)及Pd(dppf)Cl 2CH 2Cl 2(114 mg，0.14 mmol，0.25當量)。將所得混合物在50℃下在Ar氛圍下攪拌1小時。藉由LCMS監測反應。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化：管柱，C18球形管柱；移動相，ACN/水，0%至100%梯度/30 min；偵測器，UV 254 nm，隨後殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用MeOH/DCM (3%)溶離得到呈黃色固體狀之N-[(2R)-4-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)丁-3-炔-2-基]胺基甲酸三級丁酯(190 mg，60.31%)。 LC-MS: (M+H)+實驗值:536.20。
115.2. 合成 2-{3-[(3R)-3- 胺基丁 -1- 炔 -1- 基 ] 吡啶 -4- 基 }-3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ] -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1687
在0℃下向DCM (3.00 mL)中添加N-[(2R)-4-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)丁-3-炔-2-基]胺基甲酸三級丁酯(250 mg，0.47 mmol，1.00當量)及TFA (1.00 mL)。將所得混合物在25℃下攪拌1小時。藉由LCMS監測反應。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化：管柱，C18球形管柱；移動相，ACN/水，0%至100%梯度/30 min；偵測器，UV 254 nm。得到呈黃色固體狀之2-{3-[(3R)-3-胺基丁-1-炔-1-基]吡啶-4-基}-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基] -1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(150 mg，70.09%)。 LC-MS: (M+H)+實驗值:436.00。
115.3. 合成 N-[(2R)-4-(4-{3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 丁 -3- 炔 -2- 基 ] 丙 -2- 烯醯胺
Figure 02_image1689
在-40℃下將2-{3-[(3R)-3-胺基丁-1-炔-1-基]吡啶-4-基}-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100 mg，0.23 mmol，1.00當量)及DIEA (148 mg，1.15 mmol，5.00當量)於DCM (1.50 mL)中之溶液添加丙-2-烯酸丙-2-烯醯基酯(58 mg，0.46 mmol，2.00當量)。將所得混合物在-40℃下攪拌1小時。藉由LCMS監測反應。在-40℃下藉由添加NaHCO 3(水溶液) (1.00 mL)淬滅反應。在真空下濃縮所得混合物。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用MeOH/DCM (3%)溶離得到粗產物。粗產物藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep C18 OBD管柱，30*100 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：22% B至46% B/9 min, 46% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8.85；運行次數：0)，得到呈白色固體狀之N-[(2R)-4-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)丁-3-炔-2-基]丙-2-烯醯胺(32.7 mg，28.92%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：490.05。 1H NMR (400 MHz, 氯仿- d) δ 10.90 (s, 1H), 8.53 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.39 (d, 1H), 6.72(d, 1H), 6.61 (t, 1H), 6.36 - 6.14 (m, 4H), 5.74 (d, 1H), 5.25 (s, 1H), 4.82 -  4.76 (m, 1H), 4.07 (s, 3H), 3.62 - 3.61 (m, 2H), 3.30 - 3.18 (m, 2H), 1.66 (d, 3H)。
實例 116.N-[(2S)-4-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)丁-3-炔-2-基]丙-2-烯醯胺 ( 化合物 376)
116.1. 合成 N-[(2S)-4-(4-{3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 丁 -3- 炔 -2- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image1691
在室溫下向3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(300 mg，0.61 mmol，1.00當量)於DMF (5.00 mL)中之攪拌溶液中添加CuI (58 mg，0.30 mmol，0.50當量)、Pd(dppf)Cl 2CH 2Cl 2(124 mg，0.15 mmol，0.25當量)、N-[(2S)-丁-3-炔-2-基]胺基甲酸三級丁酯(205 mg，1.21 mmol，2.00當量)及DIEA (236 mg，1.82 mmol，3.00當量)。將混合物在50℃下在氬氣氛圍下攪拌1小時。藉由LCMS監測反應。過濾所得混合物，用CH 2Cl 2:MeOH (3x5 mL)洗滌濾餅。在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化：管柱，C18球形管柱；移動相，ACN/水，10%至70%梯度/25 min；偵測器，UV 254 nm。得到粗產物。粗品藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (97:3)溶離得到呈黃色固體狀之N-[(2S)-4-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)丁-3-炔-2-基]胺基甲酸三級丁酯(110 mg，33.84%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：536.10。
116.2. 合成 2-{3-[(3S)-3- 胺基丁 -1- 炔 -1- 基 ] 吡啶 -4- 基 }-3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1693
在0℃下向N-[(2S)-4-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)丁-3-炔-2-基]胺基甲酸三級丁酯(110 mg，0.19 mmol，1.00當量)於DCM (3.00 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加TFA (1.00 mL)。將混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。藉由LCMS監測反應。所得混合物在減少之氮氣氛圍下濃縮。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化：管柱，C18球形管柱；移動相，ACN/水，10%至60%梯度/25 min；偵測器，UV 254 nm。得到呈黃色固體狀之2-{3-[(3S)-3-胺基丁-1-炔-1-基]吡啶-4-基}-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(85 mg，95.12%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：435.95。
116.3. 合成 N-[(2S)-4-(4-{3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 丁 -3- 炔 -2- 基 ] 丙 -2- 烯醯胺
Figure 02_image1695
在室溫下向2-{3-[(3S)-3-胺基丁-1-炔-1-基]吡啶-4-基}-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(80 mg，0.18 mmol，1.00當量)於DCM (2.00 mL)中之攪拌溶液中添加DIEA (119 mg，0.92 mmol，5.00當量)。在-40℃下逐滴添加丙-2-烯酸丙-2-烯醯基酯(46 mg，0.37 mmol，2.00當量)。將混合物在-40℃下在氮氣氛圍下攪拌0.5小時。藉由LCMS監測反應。所得混合物用CH 2Cl 2:MeOH (3 x 20 mL)萃取。合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。粗產物(90 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep OBD C18管柱，30*150 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：28% B至42% B/10 min, 42% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：9；運行次數：0)，得到呈淡黃色固體狀之N-[(2S)-4-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)丁-3-炔-2-基]丙-2-烯醯胺(35.6 mg，39.27%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：490.05。 1H NMR (400 MHz, 氯仿- d): δ 10.94 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.12 (d, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.38 (d, 1H), 6.72 (d, 1H), 6.61 (t, 1H), 6.37 - 6.14 (m, 4H), 5.76 (d, 1H), 5.25 (s, 1H), 4.82 - 4.76 (m, 1H), 4.07 (s, 3H), 3.65 - 3.59 (m, 2H), 3.30 - 3.23 (m, 2H), 1.66 (d, 3H)。
實例 117.N-[(2S)-4-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)丁-3-炔-2-基]丙-2-烯醯胺 ( 化合物 375)
117.1. 合成 N-[(2S)-4-(4-{3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 丁 -3- 炔 -2- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image1697
在室溫下在Ar氛圍下向3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(250 mg，0.52 mmol，1.00當量)及Pd(dppf)Cl 2 .CH 2Cl 2(106 mg，0.13 mmol，0.25當量)及CuI (49 mg，0.26 mmol，0.50當量)於DMF (3 mL)中之攪拌溶液中添加N-[(2S)-丁-3-炔-2-基]胺基甲酸三級丁酯(221 mg，1.30 mmol，2.50當量)及DIEA (337 mg，2.61 mmol，5.00當量)。將所得混合物在50℃下在Ar氛圍下於密封管中攪拌2小時。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化(管柱，C18球形管柱；移動相，MeCN/水，10%至60%梯度/30 min；偵測器，UV 254 nm)，得到呈黃色固體狀之N-[(2S)-4-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)丁-3-炔-2-基]胺基甲酸三級丁酯(195 mg，71.80%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：520.20。
117.2. 合成 2-{3-[(3S)-3- 胺基丁 -1- 炔 -1- 基 ] 吡啶 -4- 基 }-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1699
在0℃下向N-[(2S)-4-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)丁-3-炔-2-基]胺基甲酸三級丁酯(170 mg，0.32 mmol，1.00當量)於DCM (2.00 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加TFA (2.00 mL)。將所得混合物在室溫下攪拌2小時。對所得混合物進行處理且用氮氣乾燥。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化(管柱，C18球形管柱；移動相，MeOH/水，10%至50%梯度/20 min；偵測器，UV 254 nm)，得到呈黃色固體狀之2-{3-[(3S)-3-胺基丁-1-炔-1-基]吡啶-4-基}-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(75 mg，54.65%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：420.05。
117.3. 合成 N-[(2S)-4-(4-{3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 丁 -3- 炔 -2- 基 ] 丙 -2- 烯醯胺
Figure 02_image1701
在0℃下向2-{3-[(3S)-3-胺基丁-1-炔-1-基]吡啶-4-基}-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(75 mg，0.17 mmol，1.00當量)及DIEA (115 mg，0.89 mmol，5.00當量)於THF中之攪拌溶液中逐滴添加丙-2-烯酸丙-2-烯醯基酯(33 mg，0.26 mmol，1.50當量)。將所得混合物在室溫下攪拌2小時。所得混合物用EtOAc (3 x 5 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(1x5 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (10:1)溶離得到呈黃色油狀物之N-[(2S)-4-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)丁-3-炔-2-基]丙-2-烯醯胺(80 mg)。粗產物(80 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep C18 OBD管柱，30*100 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：19% B至44% B/9 min, 44% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8.85；運行次數：0)，得到呈橘色固體狀之N-[(2S)-4-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)丁-3-炔-2-基]丙-2-烯醯胺(22.5 mg，26.23%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：474.2 1H NMR (300 MHz, 氯仿- d) δ 10.85 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 6.61 - 6.43 (m, 2H), 6.37 - 6.31 (m, 1H), 6.20 - 6.06 (m, 3H), 5.76 - 5.72 (m, 1H), 5.21 (s, 1H), 4.81 - 4.77 (m, 1H), 4.10 (s, 3H), 3.61 - 3.59 (m, 2H), 3.25 - 3.20 (m, 2H), 1.66 (d, 3H)
實例 118.N-[4-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)-2-甲基丁-3-炔-2-基]丙-2-烯醯胺 ( 化合物 492)
118.1. 合成 N-[4-(4-{3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 )-2- 甲基丁 -3- 炔 -2- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image1703
在室溫下在氮氣氛圍下向3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(150 mg，0.30 mmol，1.00當量)及N-(2-甲基丁-3-炔-2-基)胺基甲酸三級丁酯(111 mg，0.60 mmol，2.00當量)於DMF (3.00 mL)中之攪拌混合物中添加Pd(dppf)Cl 2CH 2Cl 2(123 mg，0.15 mmol，0.50當量)及CuI (28 mg，0.15 mmol，0.50當量)及DIEA (235 mg，1.81mmol, 6.00當量)。所得懸浮液用氬氣回填三次且在50℃下攪拌2小時。LCMS確認反應完成且觀察到所需產物。所得混合物藉由矽膠墊過濾，且濾餅用DCM (2x10 mL)洗滌。濾液在減壓下濃縮，其藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化：管柱，矽膠；移動相，MeCN/水，0%至100%梯度/50 min；偵測器，UV 254 nm。得到黃色固體狀之N-[4-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)-2-甲基丁-3-炔-2-基]胺基甲酸三級丁酯(190 mg，96.0%)。 LC-MS: (M+H)+實驗值550.1。
118.2. 合成 2-[3-(3- 胺基 -3- 甲基丁 -1- 炔 -1- 基 ) 吡啶 -4- 基 ]-3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1705
在室溫下在氮氣氛圍下向N-[4-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)-2-甲基丁-3-炔-2-基]胺基甲酸三級丁酯(150 mg，0.27 mmol，1.00當量)於DCM (3 mL)中之攪拌混合物中添加TFA (1 mL)。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮得到呈紅色油狀物之2-[3-(3-胺基-3-甲基丁-1-炔-1-基)吡啶-4-基]-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(250 mg，粗品)。 LC-MS: (M+H)+實驗值450。
118.3. 合成 N-[4-(4-{3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 )-2- 甲基丁 -3- 炔 -2- 基 ] 丙 -2- 烯醯胺
Figure 02_image1707
在0℃下在氮氣氛圍下向2-[3-(3-胺基-3-甲基丁-1-炔-1-基)吡啶-4-基]-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(80 mg，0.17 mmol，1.00當量)於THF (1.50 mL)及NaHCO 3(飽和)(1.50 mL)中之攪拌溶液中添加丙烯醯氯(18 mg，0.20 mmol，1.15當量)。將所得混合物在0℃下在氮氣氛圍下攪拌1小時。藉由LCMS監測反應。LCMS顯示反應完成。所得混合物用EtOAc (3 x 15 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。將所得混合物在減壓下濃縮。粗產物藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：YMC-Actus Triart C18 ExRS, 30*150 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：32% B至46% B/9 min, 46% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：9.78；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之N-[4-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)-2-甲基丁-3-炔-2-基]丙-2-烯醯胺(13.70 mg，15.21%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值503.95。 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11.65 (s, 1H), 8.75 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.23 (d, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.35 (d, , 1H), 7.21 (s, 1H), 6.70 (d, 2H), 6.34-6.32 (m, 1H), 6.29-6.24 (m, 1H), 6.14 (t, 1H), 5.71-5.67 (m, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.45-3.42 (m, 2.4 Hz, 2H), 3.02 (t, 2H), 1.64 (s, 6H)。
實例 119.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(1S,3R,5S)-2-(丙-2-烯醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 517)
119.1. 合成 (1S,3R,5S)-3-( 羥基甲基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -2- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1709
在0℃下在氮氣氛圍下向(1S,3R,5S)-2-(三級丁氧基羰基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲酸(1 g，4.40 mmol，1.00當量)於THF (10 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加BH 3(1M/THF, 8.80 mL，8.80 mmol，2.00當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌2小時。在0℃下藉由添加MeOH (5 mL)淬滅反應。將所得混合物在減壓下濃縮得到呈無色油狀物之(1S,3R,5S)-3-(羥基甲基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸三級丁酯(1.1 g粗品)。 LC-MS: (M+H-56) +實驗值：157.95
119.2. 合成 (1S,3R,5S)-3- 甲醯基 -2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -2- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1711
在0℃下在氮氣氛圍下向(1S,3R,5S)-3-(羥基甲基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸三級丁酯(0.97 g，4.54 mmol，1.00當量)於DCM (20 mL)中之攪拌混合物中逐滴添加Dess-Martin (2.31 g，5.45 mmol，1.20當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌2小時。在室溫下藉由添加飽和Na 2SO 3(水溶液) (5 mL)淬滅反應。向反應中添加Na 2CO 3(飽和)以將PH調節至7~8。所得混合物用CH 2Cl 2(3 x 20 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EA (5:1)溶離得到呈無色油狀物之(1S,3R,5S)-3-甲醯基-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸三級丁酯。 1H-NMR (300 MHz, 氯仿- d) δ 9.50 (s, 1H), 4.01 - 3.21 (m, 2H), 2.34 - 2.01 (m, 2H), 1.59- 1.52(m, 1H), 1.46 (s, 9H), 0.80-0.70 (m, 1H), 0.54 (s, 1H)。
119.3. 合成 (1S,3R,5S)-3- 乙炔基 -2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -2- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1713
在0℃下在氮氣氛圍下向(1S,3R,5S)-3-甲醯基-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸三級丁酯(520 mg，2.46 mmol，1.00當量)及K 2CO 3(680 mg，4.92 mmol，2.00當量)於甲醇(10.00 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加貝斯特曼-大平試劑(567 mg，2.95 mmol，1.20當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌2小時。在室溫下藉由添加酒石酸鉀鈉(飽和) (5 mL)淬滅反應。所得混合物用EtOAc (3 x 20 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(3x20 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EA (5:1)溶離得到呈白色油狀物之(1S,3R,5S)-3-乙炔基-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸三級丁酯(470 mg，92.12%)。 1H-NMR (400 MHz, 氯仿- d) δ 4.24 (t, 1H), 3.27 (s, 1H), 2.38 - 2.12 (m, 3H), 1.67 - 1.49 (m, 1H), 1.42 (s, 9H), 0.84 - 0.70 (m, 1H), 0.42 - 0.26 (m, 1H)。
119.4. 合成 (1R,3S,5R)-3-[2-(4-{3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ]-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -2- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1715
在室溫下在氬氣氛圍下向3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(150 mg，0.30 mmol，1.00當量)及Pd(dppf)Cl 2CH 2Cl 2(61 mg，0.07 mmol，0.25當量)於DMF (2 mL)中之攪拌混合物中逐滴添加(1R,3S,5R)-3-乙炔基-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸三級丁酯(25 mg，0.12 mmol，3.00當量)及DIEA (195 mg，1.52 mmol，5.00當量)。將所得混合物在50℃下在氬氣氛圍下攪拌2小時。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化：管柱，矽膠；移動相，MeCN/水，10%至70%梯度/20 min；偵測器，UV 254 nm。此產生呈黃色固體狀之(1R,3S,5R)-3-[2-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸三級丁酯(170 mg，97.67%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：574.05。
119.5. 合成 2-(3-{2-[(1S,3R,5S)-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1717
在室溫下在氮氣氛圍下向(1S,3R,5S)-3-[2-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸三級丁酯(120 mg，0.04 mmol，1.00當量)於DCM (3.00 mL)中之攪拌混合物中添加TFA (1.00 mL)。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮得到呈紅色油狀物之2-(3-{2-[(1S,3R,5S)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-基]乙炔基}吡啶-4-基)-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(160 mg，粗品)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：474.05
119.6. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[(1S,3R,5S)-2-( 丙 -2- 烯醯基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1719
在室溫下在氮氣氛圍下向2-(3-{2-[(1S,3R,5S)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-基]乙炔基}吡啶-4-基)-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100 mg，0.21 mmol，1.00當量)及NaHCO 3(飽和) (1.00 mL)於THF (1.00 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加丙烯醯氯(19 mg，0.21 mmol，1.00當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。所得混合物用CH 2Cl 2/MeOH(10/1) (3 x 10 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(3x10 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。粗產物(100mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep C18 OBD管柱，30*100 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：28% B至50% B/9 min, 50% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8.85；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(1S,3R,5S)-2-(丙-2-烯醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(10.8 mg，9.55%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：527.90 1H NMR (400 MHz, 氯仿- d) δ 11.00 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 6.84 - 6.65 (m, 2H), 6.60 (t, 1H), 6.48 - 6.33 (m, 1H), 6.24 - 6.14 (m, 1H), 5.88 - 5.69 (m, 1H), 5.22 (s, 1H), 4.89 - 4.73 (m, 1H), 4.07 (s, 3H), 3.67 - 3.52 (m, 3H), 3.30 - 3.20 (m, 2H), 2.66 - 2.45 (m, 2H), 2.06 - 1.95 (m, 1H), 1.13 - 1.01 (m, 1H), 0.70 - 0.60 (m, 1H)。
實例 120.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(1R,3R,5R)-2-(丙-2-烯醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 518)
120.1. 合成 (1R,3R,5R)-3-( 羥基甲基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -2- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1721
在0℃下在氮氣氛圍下向(1R,3R,5R)-2-(三級丁氧基羰基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲酸(1.0 g，4.40 mmol，1.00當量)於THF (20.00 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加BH 3(1M/THF，6.6 mL，6.60 mmol，1.50當量)。將混合物在70℃下在氮氣氛圍下攪拌1小時。藉由LCMS監測反應。LCMS可偵測到所需產物。在0℃下藉由添加MeOH (3 mL)淬滅反應。將所得混合物在減壓下濃縮得到呈無色油狀物之(1R,3R,5R)-3-(羥基甲基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸三級丁酯(1.2 g，粗品)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：157.95。
120.2. 合成 (1R,3R,5R)-3- 甲醯基 -2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -2- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1723
在0℃下向(1R,3R,5R)-3-(羥基甲基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸三級丁酯(900 mg，4.22 mmol，1.00當量)於DCM (20.00 mL)中之攪拌溶液中添加Dess-Martin (2.15 g，5.06 mmol，1.2當量)。將混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌2小時。藉由LCMS監測反應。在室溫下藉由添加飽和Na 2SO 3(水溶液) (2 mL)淬滅反應。用飽和NaHCO 3(水溶液)將混合物中和至pH為7。所得混合物用EtOAc (3 x20 mL)萃取。合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EA (10:1)溶離得到呈無色油狀物之(1R,3R,5R)-3-甲醯基-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸三級丁酯(620 mg，69.55%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：155.95。
120.3. 合成 (1R,3R,5R)-3- 乙炔基 -2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -2- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1725
在0℃下向(1R,3R,5R)-3-甲醯基-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸三級丁酯(500 mg，2.37 mmol，1.00當量)於MeOH (5.00 mL)中之攪拌溶液中添加K 2CO 3(981 mg，7.10 mmol，3.00當量)及貝斯特曼-大平試劑(682 mg，3.55 mmol，1.50當量)。將混合物在0℃下在氮氣氛圍下攪拌2小時。在室溫下藉由添加酒石酸鉀鈉(飽和) (5 mL)淬滅反應。所得混合物用EtOAc (3 x 20 mL)萃取。合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EA (10:1)溶離得到呈無色油狀物之(1R,3R,5R)-3-乙炔基-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸三級丁酯(420 mg，85.62%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：152.3。
120.4. 合成 (1R,3R,5R)-3-[2-(4-{3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ]-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -2- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1727
在室溫下向3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100 mg，0.20 mmol，1.00當量)於DMF (2.00 mL)中之攪拌溶液中添加(1R,3R,5R)-3-乙炔基-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸三級丁酯(105 mg，0.51 mmol，2.50當量)、CuI (19 mg，0.10 mmol，0.50當量)、Pd(dppf)Cl 2.CH 2Cl 2(82 mg，0.10 mmol，0.50當量)及DIAD (123 mg，0.61 mmol，3.00當量)。將混合物在50℃下在氬氣氛圍下攪拌2小時。藉由LCMS監測反應。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化：管柱，C18矽膠；移動相，MeCN/水，10%至50%梯度/10 min；偵測器，UV 254 nm。此產生呈黃色固體狀之(1R,3R,5R)-3-[2-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸三級丁酯(100 mg，86.18%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：574.15。
120.5. 合成 2-(3-{2-[(1R,3R,5R)-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1729
在室溫下在氮氣氛圍下向(1R,3R,5R)-3-[2-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸三級丁酯(90 mg，0.16 mmol，1.00當量)於DCM (3.00 mL)中之攪拌混合物中添加TFA (1.00 mL)。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮得到呈紅色油狀物之2-(3-{2-[(1R,3R,5R)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-基]乙炔基}吡啶-4-基)-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(150 mg，粗品)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：474.15。
120.6. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[(1R,3R,5R)-2-( 丙 -2- 烯醯基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1731
在0℃下向2-(3-{2-[(1R,3R,5R)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-基]乙炔基}吡啶-4-基)-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(90 mg，0.19 mmol，1.00當量)於THF (1.50 mL)中之攪拌溶液中添加NaHCO 3(水溶液)(1.50 mL)以將PH調節至9。在0℃下逐滴添加丙烯醯氯(17 mg，0.19 mmol，1.00當量)。將混合物在0℃下在氮氣氛圍下攪拌0.5小時。藉由LCMS監測反應。所得混合物用CH 2Cl 2: MeOH (10:1)(3 x10 mL)萃取。合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (97:3)溶離得到粗產物。粗產物(30 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：Xselect CSH F-Phenyl OBD管柱，30*250 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：19% B至49% B/7 min；波長：254 nm；RT1(min)：6.5；運行次數：0)，得到呈淡黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(1R,3R,5R)-2-(丙-2-烯醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(8.2 mg，8.16%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：528.10。 1H NMR (400 MHz, 氯仿- d): δ11.09 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.07 (d, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.39 (d, 1H), 6.79 - 6.76 (m, 2H), 6.62 (t, 1H), 6.46-6.38 (m, 1H), 6.18 (d, 1H), 5.79 (d, 1H), 5.28 - 5.24 (m, 2H), 4.07 (s, 3H), 3.65 - 3.56 (m, 3H), 3.31 - 3.28 (m, 2H), 2.75 - 2.71 (m, 1H), 2.39 - 2.35 (m, 1H), 1.94 - 1.86 (m, 1H), 1.12 - 1.09 (m, 2H)。
實例 121.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-[2-[(2R)-4,4-二氟-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]乙炔基]吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 519)
121.1. 合成 (2R)-4,4- 二氟 -2- 甲醯基吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1733
在0℃下在氮氣氛圍下向(2R)-4,4-二氟-2-(羥基甲基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(100.00 mg，0.42 mmol，1.00當量)於DCM (10.00 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加Dess-Martin (214 mg，0.50 mmol，1.20當量)。將所得混合物在0℃下在氮氣氛圍下攪拌3小時。在室溫下藉由添加飽和Na 2SO 3(水溶液) (2 mL)淬滅反應。向反應中添加Na 2CO 3(飽和)以將PH調節至7~8。所得混合物用CH 2Cl 2(3 x 10 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EtOAc (5:1)溶離得到呈無色油狀物之(2R)-4,4-二氟-2-甲醯基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(46 mg，46.39%)。 LC-MS: (M+H-56) +實驗值：180。
121.2. 合成 (2R)-2- 乙炔基 -4,4- 二氟吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1735
在0℃下向(2R)-4,4-二氟-2-甲醯基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(100 mg，0.43 mmol，1.00當量)於MeOH (5 mL)中之攪拌混合物中逐滴添加K 2CO 3(117 mg，0.85 mmol，2.00當量)及貝斯特曼-大平試劑(98 mg，0.51 mmol，1.20當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌3小時。在室溫下藉由添加酒石酸鉀鈉(飽和) (5 mL)淬滅反應。所得混合物用EtOAc (3 x 20 mL)萃取。合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EA (5:1)溶離得到呈黃色油狀物之(2R)-2-乙炔基-4,4-二氟吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(75 mg，76.29%)。
121.3. 合成 (2R)-2-[2-(4-[3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ] 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ]-4,4- 二氟吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1737
在室溫下向3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(150 mg，0.41 mmol，1.00當量)及(2R)-2-乙炔基-4,4-二氟吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(282 mg，1.22 mmol，3.00當量)於DMF (3.00 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加Pd(dppf)Cl 2.DCM (148 mg，0.20 mmol，0.50當量)、DIEA (157 mg，1.22 mmol，3.00當量)及CuI (38 mg，0.20 mmol，0.50當量)。所得懸浮液用氬氣回填三次且在50℃下攪拌2小時。LCMS確認反應完成且觀察到所需產物。所得混合物藉由矽膠墊過濾，且濾餅用DCM (2x10 mL)洗滌。在減壓下濃縮濾液，藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (20:1)溶離得到呈黃色固體狀之(2R)-2-[2-(4-[3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]吡啶-3-基)乙炔基]-4,4-二氟吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(90 mg，37.00%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：598.15。
121.4. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-[2-[(2R)-4,4- 二氟吡咯啶 -2- 基 ] 乙炔基 ] 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1739
在室溫下在氮氣氛圍下向(2R)-2-[2-(4-[3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]吡啶-3-基)乙炔基]-4,4-二氟吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(200 mg，0.33 mmol，1.00當量)於DCM (3 mL)中之攪拌混合物中添加TFA (1 mL)。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮得到呈紅色油狀物之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-[2-[(2R)-4,4-二氟吡咯啶-2-基]乙炔基]吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(300 mg，粗品)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：498.05。
121.5. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-[2-[(2R)-4,4- 二氟 -1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 吡咯啶 -2- 基 ] 乙炔基 ] 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1741
在0℃下向3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-[2-[(2R)-4,4-二氟吡咯啶-2-基]乙炔基]吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(167 mg，0.34 mmol，1.00當量)於THF (2.00 mL)及NaHCO 3(2 mL)中之攪拌混合物中逐滴添加丙烯醯氯(28 mg，0.32 mmol，0.95當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌2小時。所得混合物用EtOAc (3 x 10 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(3 x 10 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由製備型TLC純化(CH 2Cl 2/MeOH=20:1)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-[2-[(2R)-4,4-二氟-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]乙炔基]吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(37.8 mg，19.99%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值552.00。 1H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 11.12 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.28 (d, 1H), 7.30 (d, 2H), 6.84 (s, 1H), 6.58 (d, 3H), 6.29 - 5.97 (m, 2H), 5.70 (d, 1H), 5.27 (s, 1H), 4.03 (m, 2H), 3.85 (s, 3H), 3.53 - 3.35 (m, 2H), 2.88 (s, 2H), 2.78 - 2.56 (m, 2H)。
實例 122.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-[2-[1-(三氟甲基)環丙基]乙炔基]吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 528)
Figure 02_image1743
在室溫下向3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100 mg，0.20 mmol，1.00當量)於DMF (2 mL)中之攪拌混合物中分批添加Pd(dppf)Cl 2CH 2Cl 2(82 mg，0.10 mmol，0.50當量)、CuI (19 mg，0.10 mmol，0.50當量)、DIEA (78 mg，0.60 mmol，3.00當量)及1-乙炔基-1-(三氟甲基)環丙烷(108 mg，0.81 mmol，4.00當量)。所得懸浮液用氬氣回填三次且在50℃下攪拌2小時。LCMS確認反應完成且觀察到所需產物。所得混合物藉由矽膠墊過濾，且濾餅用DCM (2x10 mL)洗滌。在減壓下濃縮濾液，藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (20:1)溶離得到粗產物。粗產物(90 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep OBD C18管柱，30*150 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：28% B至58% B/7 min；波長：254 nm；RT1(min)：6.5；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-[2-[1-(三氟甲基)環丙基]乙炔基]吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(47.2 mg，45.22%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值501.00。 1H NMR (400 MHz, 甲醇-d4) δ 8.54 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.39 (s, 1H), 6.63-6.54 (m, 2H), 6.19-6.13 (m, 1H), 3.91 (s, 3H), 3.58 (t, 2H), 2.93 (t, 2H), 1.50 - 1.35 (m, 4H)。
實例 123.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-[2-[2-(丙-2-烯醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-基]乙炔基]吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 560)
123.1. 合成 3-( 甲氧基 ( 甲基 ) 胺甲醯基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -2- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1745
在0℃下向2-(三級丁氧基羰基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲酸(2.5 g，11.01 mmol，1.00當量)於無水DMF中之攪拌溶液中添加N,O-二甲基羥基胺鹽酸鹽(1.3 g，13.21 mmol，1.20當量)。After stirring for 15 minutes在0℃下攪拌15分鐘後，在同一溫度下添加NMM (1.33 g，13.21 mmol，1.20當量)、HOBT (1.78 g，13.21 mmol，1.20當量)及EDCI (2.55 g，13.21 mmol，1.20當量)。將反應混合物在室溫下攪拌隔夜且進行稀釋HCl水溶液處理。在真空下濃縮所得混合物。在使用1:1 PE/EA作為溶離劑之短墊矽膠進行急驟層析法，得到呈白色固體狀之3-(甲氧基(甲基)胺甲醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸三級丁酯(2.9 g，97%)。 LC-MS: (M+H-56) +實驗值215。
123.2. 合成 3- 乙炔基 -2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -2- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1747
在-78℃下在氬氣氛圍下向3-(甲氧基(甲基)胺甲醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸三級丁酯(2.6 g，9.63 mmol，1.00當量)於無水二氯甲烷(20 mL)中之溶液中逐滴添加DIBAL-H (12 mL，11.56 mmol，1.20當量，1.0 M/二氯甲烷)。將反應在此溫度下再攪拌2小時(TLC 監測完成)，殘留物DIBAL-H藉由逐滴添加無水MeOH來淬滅。過濾所得混合物，用MeOH洗滌濾餅。在減壓下濃縮濾液。隨後使反應升溫至0℃，添加K 2CO 3(2.66 g，19.26 mmol，2.00當量)、貝斯特曼-大平試劑(2.22 g，11.56 mmol，1.20當量)及無水MeOH (30 mL)。將反應混合物在室溫下攪拌隔夜，隨後添加飽和賽格涅特鹽(30 mL)及乙醚(50 mL)，且將混合物劇烈攪拌1小時。分離有機層且用乙醚(3x 40 mL)萃取，用鹽水洗滌，且經Na 2SO 4乾燥。在旋轉蒸發器中移除溶劑。殘留物在使用10:1 PE/EA作為溶離劑之短墊矽膠進行急驟層析法得到呈白色固體狀之3-乙炔基-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸三級丁酯(1.5 g，80%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿- d) δ 4.31 (t, 1H), 3.34 (s, 1H), 2.50-2.21 (m, 3H), 1.73 - 1.57 (m, 1H), 1.49 (s, 9H), 0.89-0.81 (m, 1H), 0.41 (s, 1H)。
123.3. 合成 3-[2-(4-[3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ] 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ]-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -2- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1749
將3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(200 mg，0.40 mmol，1.00當量)及3-乙炔基-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸三級丁酯(335 mg，1.61 mmol，4.00當量)及CuI (38 mg，0.20 mmol，0.50當量)及DIEA (781 mg，6.06 mmol，15當量)及Pd(dppf)Cl 2CH 2Cl 2(33 mg，0.04 mmol，0.10當量)於DMF (5.00 mL)中之溶液在50℃下在氬氣氛圍下攪拌72小時。使混合物冷卻至室溫。在室溫下藉由添加反應水(5 mL)淬滅。所得混合物用EtOAc (2 x 30 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(2x20 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化：管柱，C18矽膠；移動相，MeCN/水(NH 4HCO 3)，20%至80%梯度/30 min；偵測器，UV 254 nm。此產生呈黃色固體狀之3-[2-(4-[3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]吡啶-3-基)乙炔基]-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸三級丁酯(180 mg，77.6%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：574.10
123.4. 合成 2-[3-(2-[2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 基 ] 乙炔基 ) 吡啶 -4- 基 ]-3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1751
將3-[2-(4-[3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]吡啶-3-基)乙炔基]-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸三級丁酯(160 mg，0.28 mmol，1.00當量)及TFA (5.00 mL)於DCM (5.00ml)中之溶液在室溫下在氮氣氛圍下攪拌隔夜。將所得混合物在減壓下濃縮。此產生呈棕色固體狀之2-[3-(2-[2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-基]乙炔基)吡啶-4-基]-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(140 mg，粗品)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：474.20
123.5. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-[2-[2-( 丙 -2- 烯醯基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 基 ] 乙炔基 ] 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1753
將2-[3-(2-[2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-基]乙炔基)吡啶-4-基]-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(140 mg，0.29 mmol，1.00當量)於THF (1.00 mL)及飽和NaHCO 3(水溶液) (1.00 mL)中之溶液在0℃下在氮氣氛圍下攪拌30分鐘。在0℃下向上述混合物中逐滴添加丙烯醯氯(27 mg，0.29 mmol，1.00當量)持續1分鐘。將所得混合物在室溫下再攪拌2小時。反應在0℃下用水/冰淬滅。所得混合物用EtOAc (2 x 50 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(1x120 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化：管柱：XBridge Prep C18 OBD管柱，30*100 mm, 5 μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3+0.1%NH 3.H 2O)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：23% B至53% B/10 min, 53% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：7.53；運行次數：0。此產生呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-[2-[2-(丙-2-烯醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-基]乙炔基]吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(12.3 mg，7.93%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值528.00。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 11.36 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.28 (d, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.35 (d, 1H), 7.19 (s, 1H), 6.95-6.84 (m, 1H), 6.67 (d, 2H), 6.33-6.23 (m, 1H), 6.12 (t, 1H), 5.86-5.75 (m, 1H), 4.89 (t, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.73 (s, 1H), 3.49-3.37(m, 2H), 2.98 (t, 2H), 2.41-2.33 (m, 2H), 1.95-1.85(m, 1H), 1.01-0.91(m, 1H), 0.69-0.62 (s, 1H)。
實例 124.N-{1-[2-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]環丙基}丙-2-烯醯胺 ( 化合物 207)
124.1. 合成 N-{1-[2-(4-{3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ] 環丙基 } 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image1755
向3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100 mg，0.20 mmol，1.00當量)及N-(1-乙炔基環丙基)胺基甲酸三級丁酯(73 mg，0.40 mmol，2.00當量)於DMF (2.00 mL)及DIEA (78 mg，0.61 mmol，3.00當量)中之溶液中添加CuI (19 mg，0.10 mmol，0.50當量)及Pd(dppf)Cl 2CH 2Cl 2(8 mg，0.01 mmol，0.25當量)。所得懸浮液用氬氣回填三次且在50℃下攪拌2小時。LCMS確認反應完成且觀察到所需產物。在真空下濃縮所得混合物。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用MeOH/DCM (3%)溶離得到呈黃色固體狀之N-{1-[2-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]環丙基}胺基甲酸三級丁酯(60 mg，51.45%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：548.10。
124.2. 合成 2-(3-((1- 胺基環丙基 ) 乙炔基 ) 吡啶 -4- 基 )-3-((3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 )-1,5,6,7- 四氫 -4H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1757
在0℃下向N-{1-[2-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]環丙基}胺基甲酸三級丁酯(50 mg，0.09 mmol，1.00當量)中添加TFA (0.30 mL)及DCM (0.60 mL)。將所得混合物在室溫下攪拌1小時。藉由LCMS監測反應。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮得到呈紅色油狀物之2-(3-((1-胺基環丙基)乙炔基)吡啶-4-基)-3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基)-1,5,6,7-四氫-4H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(80 mg，粗品)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：448.05。
124.3. 合成 N-{1-[2-(4-{3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ] 環丙基 } 丙 -2- 烯醯胺
Figure 02_image1759
在0℃下在氬氣氛圍下向2-{3-[2-(1-胺基環丙基)乙炔基]吡啶-4-基}-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(50 mg，0.11 mmol，1.00當量)及飽和NaHCO 3(水溶液) (0.60 mL)於四氫呋喃(0.60 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加丙烯醯氯(10 mg，0.11 mmol，1.00當量)。將所得混合物在室溫下在氬氣氛圍下攪拌1小時。藉由LCMS監測反應。所得混合物用CH 2Cl 2/MeOH (10/1) (3 x 20 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(3x20 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。粗產物(80 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep C18 OBD管柱，30*100 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：22% B至47% B/9 min, 47% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8.85；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之N-{1-[2-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]環丙基}丙-2-烯醯胺(9.5 mg，16.9%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：502.30 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6 ) δ 11.37 (s, 1H), 8.94 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.26 (d, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.31 (d, 1H), 7.16 (s, 1H), 6.66 (d, 2H), 6.17 (d, 2H), 6.10 (t, 1H), 5.66 (t, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.47 - 3.42 (m, 2H), 2.97 (t, 2H), 1.35 - 1.31 (m, 2H), 1.17 - 1.13 (m, 2H)。
實例 125.N-{1-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]環丙基}丙-2-烯醯胺 ( 化合物 206)
125.1. 合成 N-{1-[2-(4-{3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ] 環丙基 } 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image1761
在室溫下在氬氣氛圍下向2-(3-溴吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(800 mg，1.86 mmol，1.00當量)及N-(1-乙炔基環丙基)胺基甲酸三級丁酯(1.01 g，5.57mmol，3.00當量)於DMF (15 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加DIEA (599 mg，4.64 mmol，2.50當量)、CuI (177 mg，0.93 mmol，0.50當量)及Pd(dppf)Cl 2CH 2Cl 2(378 mg，0.46 mmol，0.25當量)。所得懸浮液用氬氣回填三次且在50℃下攪拌2小時。LCMS確認反應完成且觀察到所需產物。所得混合物藉由矽膠墊過濾，且濾餅用DCM (2x10 mL)洗滌。濾液在減壓下濃縮，其藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化：管柱，C18矽膠；移動相，ACN/水，0%至100%梯度/10 min；偵測器，UV 254 nm。得到粗產物。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用MeOH/DCM (3%)溶離得到呈黃色固體狀之N-{1-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]環丙基}胺基甲酸三級丁酯(500 mg，48.17%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值:532.10。
125.2. 合成 2-{3-[2-(1- 胺基環丙基 ) 乙炔基 ] 吡啶 -4- 基 }-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1763
在0℃下向DCM (4.50 mL)中添加N-{1-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]環丙基}胺基甲酸三級丁酯(200 mg，0.38 mmol，1.00當量)及TFA (1.50 mL)。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化：管柱，矽膠；移動相，MeCN/水，0%至100%梯度/10 min；偵測器，UV 254 nm。得到呈黃色固體狀之2-{3-[2-(1-胺基環丙基)乙炔基]吡啶-4-基}-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(120 mg，70.23%)。 LC-MS: (M+H)+實驗值:432.05。
125.3. 合成 N-{1-[2-(4-{3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ] 環丙基 } 丙 -2- 烯醯胺
Figure 02_image1765
在0℃下向2-{3-[2-(1-胺基環丙基)乙炔基]吡啶-4-基}-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(200 mg，0.46 mmol，1.00當量)  and DIEA (180 mg，1.39 mmol，3.00當量)於四氫呋喃(2.00 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加丙烯醯氯(38 mg，0.04 mmol，0.90當量)。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用MeOH/DCM (3%)溶離得到N-{1-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]環丙基}丙-2-烯醯胺(160 mg粗品)。粗產物(160 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep C18 OBD管柱，30*100 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH4HCO3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：20% B至45% B/9 min, 45% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8.65；運行次數：0)，得到呈米白色固體狀之N-{1-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]環丙基}丙-2-烯醯胺(100 mg，44.39%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值:486.10。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 11.36 (s, 1H), 8.97 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.26 (d, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.19 (s, 1H), 6.64 - 6.61 (m, 1H), 6.50 - 6.45 (m, 1H), 6.18 (d, 2H), 5.95 (d, 1H), 5.67 (t, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.45 - 3.42 (m, 2H), 2.97 (t, 2H), 1.35 - 1.32 (m, 2H), 1.17 - 1.14 (m, 2H)。
實例 126.3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(1S,5R)-2-(丙-2-烯醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-1-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 205)
126.1. 合成 1-[2-(4-{3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ]-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -2- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1767
在室溫下向3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(200 mg，0.42 mmol，1.00當量)、CuI (20 mg，0.10 mmol，0.50當量)及Pd(dppf)Cl 2.CH 2Cl 2(170 mg，0.21 mmol，0.50當量)於DMF (2.00 mL)中之攪拌混合物中逐滴添加1-乙炔基-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸三級丁酯(260 mg，1.25 mmol，3.00當量)及DIEA (270 mg，2.09 mmol，5.00當量)。最終反應混合物在50℃下在氬氣氛圍下攪拌2小時。在減壓下濃縮混合物。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化：管柱，C18矽膠；移動相，ACN/水，10%至60%梯度/25 min；偵測器，UV 254 nm。此產生呈黃色固體狀之1-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸三級丁酯(250 mg，76.12%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：558.15。
126.2. 合成 2-(3-((2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -1- 基 ) 乙炔基 ) 吡啶 -4- 基 )-3-((3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 )-1,5,6,7- 四氫 -4H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1769
在室溫下在氮氣氛圍下向1-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸三級丁酯(220 mg，0.39 mmol，1.00當量)於DCM (6.00 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加TFA (2.00 mL)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。將所得混合物在減壓下濃縮。粗產物不經進一步純化直接用於下一步。 LC-MS: (M+H) +實驗值：458.1。
126.3. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[2-( 丙 -2- 烯醯基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -1- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1771
在0℃下在氮氣氛圍下向2-[3-(2-{2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-1-基}乙炔基)吡啶-4-基]-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(180 mg，0.39 mmol，1.00當量)於THF (6.00 mL)及NaHCO 3(飽和) (6.00 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加丙烯醯氯(32 mg，0.35 mmol，0.9當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用DCM/MeOH (10:1)溶離得到呈黃色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[2-(丙-2-烯醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-1-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(30 mg，14.86 %)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：512.1。
126.4. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[(1S,5R)-2-( 丙 -2- 烯醯基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -1- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1773
粗產物(30 mg)藉由製備型對掌性HPLC在以下條件純化(管柱：CHIRALPAK IG, 2*25 cm, 5 μm；移動相A：Hex: DCM=3: 1(0.5% 2M NH 3-MeOH)--HPLC，移動相B：EtOH--HPLC；流動速率：20 mL/min；梯度：20% B至20% B/20 min；波長：220/254 nm；RT1(min)：10.98；RT2(min)：17.32；樣品溶劑：ETOH: DCM=1: 1；注入體積：0.8 mL；運行次數：5)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(1S,5R)-2-(丙-2-烯醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-1-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(8.8 mg，29.16%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：512.00。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 11.55 (s, 1H), 8.43 (s, 1H), 8.27 (d, 1H), 7.40 (d, 1H), 6.91 (s, 1H), 6.71 - 6.59 (m, 4H), 6.47 (t, 1H), 6.16-6.10 (m, 1H), 5.66 - 5.39 (m, 1H), 4.09-3.93 (m, 2H), 3.46-3.42 (m, 2H), 3.31(s, 1H), 2.92-2.87 (m, 3H), 2.40-2.28 (m, 1H), 2.20-2.10 (m, 1H), 1.78-1.64 (m, 1H), 0.92 (s, 1H)。
實例 127.3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(1S,5R)-2-(丙-2-烯醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-1-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 204)
Figure 02_image1775
粗產物(30 mg)藉由製備型對掌性HPLC在以下條件純化(管柱：CHIRALPAK IG, 2*25 cm, 5 μm；移動相A：Hex: DCM=3: 1(0.5% 2M NH 3-MeOH)-HPLC，移動相B：EtOH--HPLC；流動速率：20 mL/min；梯度：20% B至20% B/20 min；波長：220/254 nm；RT1(min)：10.98；RT2(min)：17.32；樣品溶劑：ETOH: DCM=1: 1；注入體積：0.8 mL；運行次數：5)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(1S,5R)-2-(丙-2-烯醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-1-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(8.8 mg，29.16%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：512.00 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 11.55 (s, 1H), 8.43 (s, 1H), 8.28 (d, 1H), 7.40 (d, 1H), 7.05 - 6.60 (m, 5H), 6.53 - 6.42 (m, 1H), 6.18 - 6.03 (m, 1H), 5.56 (d, 1H), 4.09 - 3.77 (m, 2H), 3.49 - 3.40 (m, 2H), 3.30 (s, 3H), 2.93 - 2.84 (m, 3H), 2.36-2.25 (m, 1H), 2.18 - 2.07 (m, 1H), 1.73 - 1.62 (m, 1H), 0.94 (s, 1H)。
實例 128.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(1R,5S)-2-(丙-2-烯醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-1-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 203)
128.1. 合成 1-( 羥基甲基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -2- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1777
在0℃下在氮氣氛圍下向2-(三級丁氧基羰基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-1-甲酸(1.5 g，6.60 mmol，1.00當量)於THF (30 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加BH 3(1 M/THF，7.26 mL，7.26 mmol，1.10當量)。將所得混合物在80℃下在氮氣氛圍下攪拌1小時。在0℃下藉由添加MeOH (10 mL)淬滅反應。將所得混合物在減壓下濃縮。粗產物不經進一步純化直接用於下一步。 LC-MS: (M+H-56) +實驗值：157.85。
128.2. 合成 1- 甲醯基 -2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -2- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1779
在0℃下在氮氣氛圍下向1-(羥基甲基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸三級丁酯(1.71 g，8.02 mmol，1.00當量)於DCM (30 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加Dess-Martin (4.08 g，9.62 mmol，1.20當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌2小時。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EA (5:1)溶離得到呈黃色油狀物之1-甲醯基-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸三級丁酯(1.38 g，81.47%)。 LC-MS: (M+H-56) +實驗值：155.85。
128.3. 合成 1- 乙炔基 -2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -2- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1781
在0℃下在氮氣氛圍下向1-甲醯基-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸三級丁酯(1.38 g，6.53 mmol，1.00當量)及K 2CO 3(2.71 g，19.59 mmol，3.00當量)於MeOH (30 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加(1-重氮基-2-側氧基丙基)膦酸二甲酯(1.51 g，7.84 mmol，1.20當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌2小時。在室溫下藉由添加酒石酸鉀鈉(飽和) (10 mL)淬滅反應。將混合物攪拌30分鐘。所得混合物用EtOAc (3 x 30 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(3 x 30 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EA (5:1)溶離得到呈黃色油狀物之1-乙炔基-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸三級丁酯(1.18 g，87.15%)。 LC-MS: (M+H-56) +實驗值：151.90。
128.4. 合成 1-[2-(4-{3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ]-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -2- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1783
在室溫下在氬氣氛圍下向3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(200 mg，0.40 mmol，1.00當量)及1-乙炔基-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸三級丁酯(251 mg，1.21 mmol，3.00當量)於DMF (2.00 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加Pd(dppf)Cl 2CH 2Cl 2(82 mg，0.10 mmol，0.25當量)及DIEA (261 mg，2.02 mmol，5.00當量)。將所得混合物在50℃下在氬氣氛圍下攪拌2小時。在減壓下濃縮混合物。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化：管柱，矽膠；移動相，MeCN/水，10%至70%梯度/30 min；偵測器，UV 254 nm。此產生呈黃色固體狀之1-[2-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸三級丁酯(210 mg，90.48%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：574.1。
128.5. 合成 2-(3-((2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -1- 基 ) 乙炔基 ) 吡啶 -4- 基 )-3-((3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 )-1,5,6,7- 四氫 -4H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1785
在室溫下在氮氣氛圍下向1-[2-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸三級丁酯(260 mg，0.45 mmol，1.00當量)於DCM (6.00 mL)中之攪拌混合物中逐滴添加TFA (2.00 mL)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。將所得混合物在減壓下濃縮。粗產物不經進一步純化直接用於下一步。 LC-MS: (M+H) +實驗值：474.15。
128.6. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[2-( 丙 -2- 烯醯基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -1- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1787
在0℃下在氮氣氛圍下向2-[3-(2-{2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-1-基}乙炔基)吡啶-4-基]-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(215 mg，0.45 mmol，1.00當量)及NaHCO 3(5.00 mL)於THF (5.00 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加丙烯醯氯(36 mg，0.41 mmol，0.90當量)。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (15:1)溶離得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[2-(丙-2-烯醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-1-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(50 mg，20.88%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：528.20。
128.7. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[(1R,5S)-2-( 丙 -2- 烯醯基 )-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -1- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1789
粗產物(50 mg)藉由製備型對掌性HPLC在以下條件純化(管柱：CHIRAL ART Amylose-SA, 2*25 cm, 5 μm；移動相A：Hex(0.5% 2M NH3-MeOH)--HPLC，移動相B：EtOH--HPLC；流動速率：20 mL/min；梯度：30% B至30% B/17 min；波長：220/254 nm；RT1(min)：8.301；RT2(min)：12.494；樣品溶劑：EtOH--HPLC；注入體積：0.3 mL；運行次數：10)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(1R,5S)-2-(丙-2-烯醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-1-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(12 mg，23.71%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：528.30。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.55 (s, 1H), 8.43 (s, 1H), 8.27 (d, 1H), 7.39 (d, 1H), 6.73 - 6.59 (m, 5H), 6.15-6.09 (m, 1H), 5.66 - 5.49 (m, 1H), 4.10-3.85 (m, 2H), 3.46-3.42 (m, 2H), 3.25 (s, 3H), 2.90-2.87 (m, 3H), 2.40-2.28 (m, 1H), 2.15-2.04 (m, 1H), 1.78-1.62 (m, 1H), 0.93 (t, 1H)。
實例 129.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(1S,5R)-2-(丙-2-烯醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-1-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 202)
Figure 02_image1791
粗產物(50 mg)藉由製備型對掌性HPLC在以下條件純化(管柱：CHIRAL ART Amylose-SA, 2*25 cm, 5 μm；移動相A：Hex(0.5% 2M NH 3-MeOH)--HPLC，移動相B：EtOH--HPLC；流動速率：20 mL/min；梯度：30% B至30% B/17 min；波長：220/254 nm；RT1(min)：8.301；RT2(min)：12.494；樣品溶劑：EtOH--HPLC；注入體積：0.3 mL；運行次數：10)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(1S,5R)-2-(丙-2-烯醯基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-1-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(11.5 mg，22.42%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：528.30。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 11.54 (s, 1H), 8.43 (s, 1H), 8.25 (d, 1H), 7.35 (d, 1H), 6.73 - 6.59 (m, 5H), 6.16-6.10 (m, 1H), 5.66 - 5.39 (m, 1H), 4.09-3.84 (m, 2H), 3.46-3.42 (m, 2H), 3.25 (s, 3H), 2.90-2.87 (m, 3H), 2.40-2.28 (m, 1H), 2.15-2.04 (m, 1H), 1.68-1.66 (m, 1H), 0.93 (t, 1H)。
實例 130.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R)-2-甲基-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 210)
130.1. 合成 (R)-2-( 羥基甲基 )-2- 甲基吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1793
在0℃下在氮氣氛圍下向(2R)-1-(三級丁氧基羰基)-2-甲基吡咯啶-2-甲酸(1 g，4.36 mmol，1.00當量)於THF (10.00 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加BH 3(1M/THF) (8.72 mL，8.724 mmol，2當量)。將所得混合物在75℃下在氮氣氛圍下攪拌1小時。在0℃下藉由添加MeOH (5.00 mL)淬滅反應。將所得混合物在減壓下濃縮。粗產物不經進一步純化直接用於下一步。 LC-MS: (M+H-56) +實驗值：160.3
130.2. 合成 (2R)-2- 甲醯基 -2- 甲基吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1795
在0℃下在氮氣氛圍下向(2R)-2-(羥基甲基)-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(1.1 g，5.1 mmol，1.00當量)於DCM (20.00 mL)中之攪拌混合物中逐滴添加Dess-Martin (2.60 g，6.13 mmol，1.20當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌2小時。在室溫下藉由添加Na 2SO 4(飽和) (5.00 mL)淬滅反應。所得混合物用CH 2Cl 2(3 x 20 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EA (5:1)溶離得到呈無色油狀物之(2R)-2-甲醯基-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(750 mg，68.83%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿- d) δ 9.38 (d, 1H), 3.70 - 3.40 (m, 2H), 2.05 - 1.87 (m, 3H), 1.78 - 1.57 (m, 1H), 1.46 (s, 3H), 1.40 (d, J = 12.8 Hz, 9H)。
130.3. 合成 (2R)-2- 乙炔基 -2- 甲基吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1797
在0℃下在氮氣氛圍下向(2R)-2-甲醯基-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(700 mg，3.28 mmol，1.00當量)及K 2CO 3(907 mg，6.56 mmol，2.00當量)於甲醇(10.00 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加貝斯特曼-大平試劑(756 mg，3.94 mmol，1.20當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌2小時。在室溫下藉由添加酒石酸鉀鈉(飽和) (2 mL)淬滅反應。所得混合物用EtOAc (3 x 20 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(3x20 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EA (5:1)溶離得到呈白色油狀物之(2R)-2-乙炔基-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(600 mg，87.35%)。 1H-NMR (300 MHz, 氯仿- d) δ 3.63 - 3.28 (m, 2H), 2.34-2.24 (m, 2H), 2.08 - 1.72 (m, 3H), 1.70 (s, 3H), 1.49 (s, 9H)。
130.4. 合成 (2R)-2-[2-(4-{3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ]-2- 甲基吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1799
在室溫下在氬氣氛圍下向3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(150 mg，0.30 mmol，1.00當量)、CuI (28 mg，0.15 mmol，0.50當量)及Pd(dppf)Cl 2CH 2Cl 2(61 mg，0.076 mmol，0.25當量)於DMF (2.00 mL)中之攪拌混合物中逐滴添加(2R)-2-乙炔基-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(25 mg，0.12 mmol，3.00當量)及DIEA (195 mg，1.51 mmol，5.00當量)。將所得混合物在50℃下在氬氣氛圍下攪拌2小時。在減壓下濃縮混合物。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化：管柱，C18矽膠；移動相，MeCN/水，10%至70%梯度/20 min；偵測器，UV 254 nm。此產生呈黃色固體狀之(2R)-2-[2-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(160 mg，91.6%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：576.05。
130.5. 合成 (R)-3-((3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 )-2-(3-((2- 甲基吡咯啶 -2- 基 ) 乙炔基 ) 吡啶 -4- 基 )-1,5,6,7- 四氫 -4H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1801
在室溫下在氮氣氛圍下向(2R)-2-[2-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(140 mg，0.035 mmol，1.00當量)於DCM (1.00 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加TFA (3.00 mL)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。在減壓下濃縮混合物。粗產物不經進一步純化直接用於下一步。 LC-MS: (M+H) +實驗值：476.1
130.6. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[(2R)-2- 甲基 -1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 吡咯啶 -2- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1803
在0℃下在氮氣氛圍下向3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R)-2-甲基吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100 mg，0.21 mmol，1.00當量)及NaHCO 3(飽和) (3.00 mL)於THF (3.00 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加丙烯醯氯(19 mg，0.21 mmol，1.00當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。所得混合物用CH 2Cl 2/MeOH(10/1) (3 x 20 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(3x20 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。粗產物(120 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep C18 OBD管柱，30*100 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：35% B至55% B/10 min, 55% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：9.67；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R)-2-甲基-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(17 mg，15.00%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：530.30 1HTEM-NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 11.35 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.20 (d, 2H), 7.46 - 7.29 (m, 2H), 6.82 - 6.54 (m, 4H), 6.22 - 6.10 (m, 2H), 5.65 (d, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.68 (d, 2H), 3.47 - 3.40 (m, 2H), 3.10-3.02 (m, 2H), 2.44 - 2.35 (m, 1H), 2.19 - 2.09 (m, 1H), 2.05 -1.93 (m, 2H), 1.69 (s, 3H)。
實例 131.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2S)-2-甲基-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮) ( 化合物 209)
131.1. 合成 (S)-2-( 羥基甲基 )-2- 甲基吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1805
在室溫下向(2S)-1-(三級丁氧基羰基)-2-甲基吡咯啶-2-甲酸(1 g，4.36 mmol，1.00當量)於THF (8.00 mL)中之攪拌溶液中添加BH 3(1M/THF，8.7 mL，8.7 mmol，2.0當量)。將所得混合物在75℃下在N 2氛圍下攪拌1小時。藉由LCMS監測反應。在0℃下藉由添加MeOH (2.00 mL)淬滅反應。在真空下濃縮所得混合物。粗產物不經進一步純化直接用於下一步。 LC-MS: (M+H-56) +實驗值:160.15。
131.2. 合成 (2S)-2- 甲醯基 -2- 甲基吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1807
在0℃下向(2S)-2-(羥基甲基)-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(938 mg，4.36 mmol，1.00當量)於DCM (10.00 mL)中之攪拌溶液中添加Dess-Martin (2.22 g，5.23 mmol，1.20當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌2小時。藉由TLC監測反應。在真空下濃縮所得混合物。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用EA/PE (20%)溶離得到呈無色油狀物之(2S)-2-甲醯基-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(640 mg，68.88%)。
131.3. 合成 (2S)-2- 乙炔基 -2- 甲基吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1809
在0℃下在氮氣氛圍下向(2S)-2-甲醯基-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(600 mg，2.81 mmol，1.00當量)於MeOH (6.00 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加K 2CO 3(778 mg，5.63 mmol，2當量)、(1-重氮基-2-側氧基丙基)膦酸二甲酯(648 mg，3.38 mmol，1.20當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌2小時。在0℃下藉由添加酒石酸鉀鈉(飽和) (5.00 mL)淬滅反應。將所得混合物在室溫下攪拌0.5小時。藉由TLC及H-NMR監測反應。所得混合物用乙酸乙酯(3 x 20 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(3 x 20 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用EA/PE (5%)溶離，得到呈無色油狀物之(2S)-2-乙炔基-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(640 mg，68.88%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿- d) δ 3.55 (s, 1H), 3.41-3.35 (m, 1H), 2.30-2.27 (m, 2H), 1.99 - 1.90 (m, 2H), 1.83 - 1.77 (m, 1H), 1.63 (s, 3H), 1.49 (s, 9H)。
131.4. 合成 (2S)-2-[2-(4-{3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ]-2- 甲基吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1811
向3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(150 mg，0.30 mmol，1.00當量)及(2S)-2-乙炔基-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(127 mg，0.61 mmol，2.00當量)於DMF (2.00 mL)中之溶液中添加DIEA (98 mg，0.76 mmol，2.50當量)、CuI (29 mg，0.15 mmol，0.50當量)、Pd(dppf)Cl 2.CH 2Cl 2(62 mg，0.08 mmol，0.25當量)。將混合物在50℃下在氮氣氛圍下攪拌2小時。將所得混合物在減壓下濃縮。LCMS可偵測到所需產物。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化：管柱，C18矽膠；移動相，ACN/水，0%至100%梯度/30 min；偵測器，UV 254 nm。得到呈黃色固體狀之(2S)-2-[2-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(155 mg，84.30%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值: 576.10。
131.5. 合成 (S)-3-((3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 )-2-(3-((2- 甲基吡咯啶 -2- 基 ) 乙炔基 ) 吡啶 -4- 基 )-1,5,6,7- 四氫 -4H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1813
在室溫下向(2S)-2-[2-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(60 mg，0.10 mmol，1.00當量)於DCM (1.00 mL)中之溶液中添加TFA (1.00 mL)。將所得混合物在室溫下攪拌0.5小時。藉由LCMS監測反應。在真空下濃縮所得混合物。粗產物不經進一步純化直接用於下一步。 LC-MS: (M+H) +實驗值:476.10。
131.6. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[(2S)-2- 甲基 -1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 吡咯啶 -2- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮 )
Figure 02_image1815
在0℃下在氮氣氛圍下向3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2S)-2-甲基吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(60 mg，0.17 mmol，1.00當量)於THF (2.00 mL)及NaHCO 3(飽和) (2.00 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加丙烯醯氯(10 mg，0.11 mmol，0.9當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。藉由LCMS監測反應。LCMS可偵測到所需產物。在真空下濃縮所得混合物。粗產物藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep C18 OBD管柱，30*100 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：35% B至58% B/9 min, 58% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8.85；運行次數：0)，得到呈米白色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2S)-2-甲基-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮) (8.1 mg，11.81%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值:530.00 1HTEM NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 11.36 (s, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.22 -8.20 (m, 1H), 7.35 - 7.34 (m, 2H), 6.77 (s, 1H), 6.67 - 6.61 (m, 3H), 6.27 - 6.00 (m, 2H), 5.67 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.75 -3.60(m, 2H), 3.46 -3.43 (m, 2H), 3.08 -2.98 (m, 2H), 2.49 -2.47 (m, 1H), 2.18 -2.07(m, 1H), 2.03 - 1.94 (m, 2H), 1.71 (s, 3H)。
實例 132.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(6R)-5-(丙-2-烯醯基)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 234)
132.1. 合成 (R)-6-( 羥基甲基 )-5- 氮雜螺 [2.4] 庚烷 -5- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1817
在0℃下向(6S)-5-(三級丁氧基羰基)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-甲酸(2.40 g，9.95 mmol，1.00當量)於THF中之溶液中逐滴添加BH 3(15.00 mL，15.00 mmol，1.5當量，1M/THF)。將所得混合物在室溫下攪拌2小時。在0℃下藉由添加MeOH (15.00 mL)淬滅反應。將所得混合物在減壓下濃縮得到呈無色油狀物之(R)-6-(羥基甲基)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-5-甲酸三級丁酯(2.6 g，粗品)。
132.2. 合成 (6R)-6- 甲醯基 -5- 氮雜螺 [2.4] 庚烷 -5- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1819
在0℃下向(6R)-6-(羥基甲基)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-5-甲酸三級丁酯(2.30 g，10.11 mmol，1.00當量)於DCM (25.00 mL)中之溶液中分批添加Dess-Martin試劑(5.15 g，12.14 mmol，1.20當量)。將所得混合物在室溫下攪拌2.5小時。在0℃下藉由添加飽和Na 2S 2O 3(水溶液) (15 mL)淬滅反應。所得混合物用CH 2Cl 2(3 x 10 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(1x10 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EA (5:1)溶離得到呈淺黃色油狀物之(6R)-6-甲醯基-5-氮雜螺[2.4]庚烷-5-甲酸三級丁酯(1.99 g，87.30%)。 LC-MS: (M+H-56) +實驗值：169.95。 1H NMR (300 MHz, 氯仿- d) δ 9.66 - 9.58 (m, 1H), 4.36 - 4.17 (m, 1H), 3.48 - 3.41 (m, 1H), 3.37 - 3.22 (m, 1H), 2.15 -2.08 (m, 1H), 1.88 - 1.82 (m, 1H), 1.48 -1.45 (m, 9H), 0.66 - 0.49 (m, 4H)。
132.3. 合成 (6R)-6- 乙炔基 -5- 氮雜螺 [2.4] 庚烷 -5- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1821
在0℃下向(6R)-6-甲醯基-5-氮雜螺[2.4]庚烷-5-甲酸三級丁酯(1.2 g，5.327 mmol，1當量)及K 2CO 3(1.47 g，10.65 mmol，2.0當量)於MeOH (8.00 mL)中之攪拌混合物中逐滴添加(1-重氮基-2-側氧基丙基)膦酸二甲酯(1.23 g，6.392 mmol，1.2當量)。將所得混合物在室溫下攪拌隔夜。在室溫下藉由添加酒石酸鉀鈉四水合物溶液(水溶液，20 mL)淬滅反應。所得混合物用EtOAc (3 x 15 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(1 x 30 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠用PE/EA (5:1)純化。此產生呈黃色油狀物之(6R)-6-乙炔基-5-氮雜螺[2.4]庚烷-5-甲酸三級丁酯(900 mg，76.35%)。 LC-MS: (M+H-56) +實驗值：166.3。 1H-NMR (400 MHz, 氯仿- d) δ 4.61 - 4.52 (m, 1H), 3.40 (d, 1H), 3.19 (s, 1H), 2.32 - 2.24 (m, 2H), 1.74 - 1.71 (m, 1H), 1.48 (s, 9H), 0.71 -0.67 (m, 2H), 0.58 - 0.54 (m, 2H)。
132.4. 合成 (6R)-6-[2-(4-{3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ]-5- 氮雜螺 [2.4] 庚烷 -5- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1823
在室溫下在氬氣氛圍下向3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(150 mg，0.30 mmol，1.00當量)及Pd(dppf)Cl 2CH 2Cl 2(61 mg，0.076 mmol，0.25當量)及CuI (28 mg，0.15 mmol，0.50當量)於DMF中之攪拌溶液中添加(6R)-6-乙炔基-5-氮雜螺[2.4]庚烷-5-甲酸三級丁酯(335 mg，1.51 mmol，5.00當量)及DIEA (195 mg，1.51 mmol，5.00當量)。所得懸浮液用氬氣回填三次且在50℃下攪拌2小時。LCMS確認反應完成且觀察到所需產物。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由逆相急驟純化得到呈黃色固體狀之(6R)-6-[2-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-5-氮雜螺[2.4]庚烷-5-甲酸三級丁酯(150 mg，84.12%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：588.15。
132.5. 合成 2-(3-{2-[(6R)-5- 氮雜螺 [2.4] 庚烷 -6- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1825
在室溫下在氮氣氛圍下向(2S)-2-{[(4-{3-[(2-氯-3-氟苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(140 mg，0.252 mmol，1當量)於DCM (3 mL)中之攪拌混合物中添加TFA (1 mL)。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮得到呈紅色油狀物之2-(3-{2-[(6R)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-基]乙炔基}吡啶-4-基)-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(200 mg，粗品)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：488.1
132.6. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[(6R)-5-( 丙 -2- 烯醯基 )-5- 氮雜螺 [2.4] 庚烷 -6- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1827
在0℃下向2-(3-{2-[(6R)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-基]乙炔基}吡啶-4-基)-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(110 mg，0.22 mmol，1當量)及飽和NaHCO 3(水溶液) (1.50 mL)於THF (1.50 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加丙烯醯氯(22 mg，0.22 mmol，1.00當量)。將所得混合物在室溫下攪拌1.5小時。所得混合物用EtOAc (3 x 5 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(1x30 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。粗產物(130 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：Xselect  CSH C18 OBD管柱 30*150mm 5μm, n；移動相A：水(0.1%FA)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：28% B至49% B/8 min, 49% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(6R)-5-(丙-2-烯醯基)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(33.6 mg，26.66%)。 LC-MS: (M+H)+實驗值：542.10。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 11.15 (s, 1H), 8.53 (s, 1H), 8.13 (d, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.42 (d, 1H), 6.73 - 6.71 (m, 1H), 6.60 (t, 1H), 6.41 (d, 2H), 6.24 - 6.21 (m, 1H), 5.77 (t, 1H), 5.27 (s, 1H), 5.04 - 5.01 (m, 1H), 4.07 (s, 3H), 3.67 - 3.50 (m, 4H), 3.31- 3.27 (m, 2H), 2.34 - 2.29 (m, 1H), 2.19 -2.14 (m, 1H), 0.89 -0.81 (m, 2H), 0.74 -0.70 (m, 2H)。
實例 133.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2S)-3,3-二甲基-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 233)
133.1. 合成 2- 乙炔基 -3,3- 二甲基氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1829
在0℃下在氮氣氛圍下向2-甲醯基-3,3-二甲基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(200 mg，0.94 mmol，1.00當量)於甲醇(10 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加K 2CO 3(259 mg，1.88 mmol，2.00當量)及(1-重氮基-2-側氧基丙基)膦酸二甲酯(216 mg，1.13 mmol，1.20當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌2小時。在室溫下藉由添加飽和酒石酸鉀鈉(5.00 mL)淬滅反應。所得混合物用EtOAc (3 x 20 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(3x10 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EA (5:1)溶離得到呈白色油狀物之2-乙炔基-3,3-二甲基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(160 mg，81.52%)。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 4.37 (d, 1H), 3.54 (s, 2H), 2.53 (d, 1H), 1.48 (s, 9H), 1.31 (s, 3H), 1.27(s, 3H)。
133.2. 合成 2-[2-(4-{3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ]-3,3- 二甲基氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1831
在室溫下在氬氣氛圍下向3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(400 mg，0.81 mmol，1.00當量)、CuI (76 mg，0.40 mmol，0.50當量)及Pd(dppf)Cl 2CH 2Cl 2(164 mg，0.20 mmol，0.25當量)於DMF (3.00 mL)中之攪拌混合物中逐滴添加2-乙炔基-3,3-二甲基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(507 mg，2.42 mmol，3.00當量)及DIEA (522 mg，4.04 mmol，5.00當量)。將所得混合物在50℃下在氬氣氛圍下攪拌2小時。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化：管柱，矽膠；移動相，MeCN/水，10%至70%梯度/20 min；偵測器，UV 254 nm。此產生黃色固體狀之2-[2-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-3,3-二甲基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(270 mg，57.97%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：576.20。
133.3. 合成 3-((3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 )-2-(3-((3,3- 二甲基氮雜環丁烷 -2- 基 ) 乙炔基 ) 吡啶 -4- 基 )-1,5,6,7- 四氫 -4H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1833
在室溫下在氮氣氛圍下向2-[2-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-3,3-二甲基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(270 mg，0.47 mmol，1.00當量)於DCM ( 6.00 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加TFA (2.00 mL)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。將所得混合物在減壓下濃縮。粗產物不經進一步純化直接用於下一步。 LC-MS: (M+H) +實驗值：476.2。
133.4. 合成 3- [(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[3,3- 二甲基 -1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 氮雜環丁烷 -2- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1835
在0℃下在氮氣氛圍下向3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[2-(3,3-二甲基氮雜環丁烷-2-基)乙炔基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(200 mg，0.42 mmol，1.00當量)於THF (6 mL)及NaHCO 3(6 mL)中之攪拌混合物中逐滴添加丙烯醯氯(38 mg，0.42 mmol，1.00當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (20:1)溶離得到粗產物，粗產物(100 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep C18 OBD管柱，30*100 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：28% B至52% B/9 min, 52% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8.85；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[3,3-二甲基-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(60 mg，26.94%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：530.35
133.5. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[(2S)-3,3- 二甲基 -1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 氮雜環丁烷 -2- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1837
粗產物(60 mg)藉由製備型對掌性HPLC在以下條件純化(管柱：CHIRAL ART Amylose-SA, 2*25 cm, 5 μm；移動相A：Hex(0.5% 2M NH3-MeOH)--HPLC，移動相B：EtOH--HPLC；流動速率：20 mL/min；梯度：25% B至25% B/27 min；波長：220/254 nm；RT1(min)：15.594；RT2(min)：22.091；樣品溶劑：EtOH--HPLC；注入體積：1.25 mL；運行次數：2)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2S)-3,3-二甲基-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(22.8 mg，45.42%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：530.10 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 10.97 (s, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.12 (d, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.41 (d, 1H), 6.78 - 6.69 (m, 1H), 6.61 (t, 1H), 6.43 - 6.31 (m, 1H), 6.28 - 6.13 (m, 2H), 5.82 - 5.72 (m, 1H), 5.26 (s, 1H), 4.86 (s, 1H), 4.07 (s, 3H), 3.98 (d, 2H), 3.64 - 3.52 (m, 2H), 3.30 - 3.19 (m, 2H), 1.54 (s, 3H), 1.45 (s, 3H)。
實例 134.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R)-3,3-二甲基-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 232)
Figure 02_image1839
粗產物(60 mg)藉由製備型對掌性HPLC在以下條件純化(管柱：CHIRAL ART Amylose-SA, 2*25 cm, 5 μm；移動相A：Hex(0.5% 2M NH3-MeOH)--HPLC，移動相B：EtOH--HPLC；流動速率：20 mL/min；梯度：25% B至25% B/27 min；波長：220/254 nm；RT1(min)：15.594；RT2(min)：22.091；樣品溶劑：EtOH--HPLC；注入體積：1.25 mL；運行次數：2)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R)-3,3-二甲基-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(22.7 mg，45.31%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：530.10 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 10.96 (s, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.13 (d, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.41 (d, 1H), 6.78 - 6.69 (m, 1H), 6.61 (t, 1H), 6.43 - 6.31 (m, 1H), 6.28 - 6.13 (m, 2H), 5.81 - 5.71 (m, 1H), 5.26 (s, 1H), 4.86 (s, 1H), 4.07 (s, 3H), 3.98 (d, 2H), 3.67 - 3.54 (m, 2H), 3.29 - 3.19 (m, 2H), 1.54 (s, 3H), 1.45 (s, 3H)。
實例 135.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R)-1-(丙-2-烯醯基)哌啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 231)
135.1. 合成 2-[2-(4-{3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ] 哌啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1841
在室溫下向3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(300 mg，0.61 mmol，1.00當量)及2-乙炔基哌啶-1-甲酸三級丁酯(317 mg，1.51 mmol，2.50當量)於DMF (5 mL)中之攪拌混合物中逐滴添加Pd(dppf)Cl 2CH 2Cl 2(124 mg，0.15 mmol，0.25當量)及CuI (57 mg，0.30 mmol，0.50當量)。向上述混合物中添加DIEA (235 mg，1.82 mmol，3.00當量)。所得懸浮液用氬氣回填三次且在50℃下攪拌2小時。LCMS確認反應完成且觀察到所需產物。所得混合物藉由矽膠墊過濾，且濾餅用DCM (2x10 mL)洗滌。濾液在減壓下濃縮 that 藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化: 管柱，矽膠；移動相，MeCN/水，10%至50%梯度/10 min；偵測器，UV 254 nm。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物繼續藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (10:1)溶離得到呈淡黃色固體狀之2-[2-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]哌啶-1-甲酸三級丁酯(227 mg，64.98%)。 LC-MS: M+H實驗值：576.2。
135.2. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-{3-[2-( 哌啶 -2- 基 ) 乙炔基 ] 吡啶 -4- 基 }-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1843
在室溫下在氮氣氛圍下向2-[2-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]哌啶-1-甲酸三級丁酯(185 mg，0.32 mmol，1.00當量)於DCM (3 mL)中之攪拌混合物中添加TFA (1 mL)。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮得到呈紅色油狀物之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[2-(哌啶-2-基)乙炔基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(230 mg，粗品)。 LC-MS: (M+H) +實驗值476.2。
135.3. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 哌啶 -2- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1845
在室溫下向50 mL圓底燒瓶中添加3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[2-(哌啶-2-基)乙炔基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(153 mg，0.32 mmol，1.00當量)及THF (6 mL)。混合物用飽和NaHCO 3(水溶液)鹼化至pH為8。在0℃下向上述混合物中逐滴添加丙烯醯氯(38 mg，0.41 mmol，1.30當量)。將所得混合物在室溫下再攪拌2小時。藉由LCMS監測反應。LCMS可偵測到所需產物。所得混合物用CH 2Cl 2:MeOH(10:1)(3 x 40mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (10:1)溶離得到呈紅色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[1-(丙-2-烯醯基)哌啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(60 mg，37.01%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值530.15。
135.4. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[(2R)-1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 哌啶 -2- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1847
粗產物(60 mg)藉由製備型對掌性HPLC在以下條件純化(管柱：CHIRALPAK IH-3, 4.6*50mm, 3μm；移動相A：Hex(0.1% DEA): EtOH=60: 40；流動速率：1 mL/min；梯度：0% B至0% B；注入體積：5ul mL)，得到呈淡黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R)-1-(丙-2-烯醯基)哌啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(4.5 mg，6.52%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值530.4。 1H-NMR (400 MHz, 氯仿- d) δ 10.54 (s, 1H), 8.60 (s, 1H), 8.11 (d, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.36 (d, 1H), 6.78 (d, 1H), 6.69-6.53 (m, 2H), 6.36-6.29 (m, 1H), 6.22-6.13(m, 1H), 5.82-5.76 (m, 1H), 5.63 (s, 1H), 5.30 (s, 1H), 4.09 (s, 3H), 3.95-3.87 (s, 1H), 3.71-3.56 (m, 2H), 3.42-3.30 (m, 1H), 3.29-3.12 (m, 2H), 2.11-2.05 (m, 1H), 1.90 (d, 5H)。
實例 136.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2S)-1-(丙-2-烯醯基)哌啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 230)
Figure 02_image1849
粗產物(69 mg)藉由製備型對掌性HPLC在以下條件純化(管柱：CHIRALPAK IH-3, 4.6*50mm, 3μm；移動相A：Hex(0.1%DEA): EtOH=60: 40；流動速率：1 mL/min；梯度：0% B至0% B；注入體積：5ul mL)，得到呈淡黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2S)-1-(丙-2-烯醯基)哌啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(6.8 mg，10.37%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值530.40。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 10.49 (s, 1H), 8.60 (s, 1H), 8.13 (d, 1H), 7.87 (s,1H), 7.37 (d, 1H), 6.78 (d, 1H), 6.68 - 6.58 (m, 2H), 6.34-6.28 (m, 1H), 6.21-6.17 (m, 1H), 5.80-5.73 (m, 1H), 5.66 (s, 1H), 5.29 (s, 1H), 4.09 (s, 3H), 3.99-3.89 (m,1H), 3.69-3.55 (m, 2H), 3.42-3.09 (m, 3H), 2.12-2.02 (m, 1H), 1.92 (d, 5H)。
實例 137.2-(3-{2-[(2R)-4,4-二甲基-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 253)
137.1. 合成 (2R)-2-[2-(4-{3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ]-4,4- 二甲基吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1851
在室溫下在氬氣氛圍下向2-(3-溴吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(200 mg，0.46 mmol，1.00當量)及CuI (44 mg，0.23 mmol，0.50當量)及Pd(dppf)Cl 2CH 2Cl 2(94 mg，0.11 mmol，0.25當量)於DMF (4 mL)中之攪拌混合物中逐滴添加(2R)-2-乙炔基-4,4-二甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(207 mg，0.92 mmol，2.00當量)及DIEA (299 mg，2.32 mmol，5.00當量)。所得懸浮液用氬氣回填三次且在50℃下攪拌2小時。LCMS確認反應完成且觀察到所需產物。在真空下濃縮所得混合物。殘餘物藉由製備型HPLC在以下條件下純化(0.1% NH 4HCO 3/水及ACN (33% ACN至多90%/20 min)，得到呈黃色固體狀之(2R)-2-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-4,4-二甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(180 mg，66.9%)。 LC-MS:(M+H) +實驗值：574.15。
137.2. 合成 2-(3-{2-[(2R)-4,4- 二甲基吡咯啶 -2- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1853
在室溫下在氮氣氛圍下向(2R)-2-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-4,4-二甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(80 mg，0.13 mmol，1.00當量)於DCM (3 mL)中之攪拌混合物中添加TFA (1 mL)。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮得到呈紅色油狀物之2-(3-{2-[(2R)-4,4-二甲基吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(110 mg，粗品)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：474.25。
137.3. 合成 2-(3-{2-[(2R)-4,4- 二甲基 -1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 吡咯啶 -2- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1855
在0℃下在氮氣氛圍下向2-(3-{2-[(2R)-4,4-二甲基吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(80 mg，0.17 mmol，1.00當量)及飽和NaHCO 3(水溶液) (3.00 mL)於THF (3.00 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加丙烯醯氯(15 mg，0.17 mmol，1.00當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。所得混合物用CH 2Cl 2/MeOH (10/1) (3 x 30 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(3 x 30 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由製備型HPLC在以下條件下純化：(管柱：Xselect  CSH C18 OBD管柱 30*150mm 5μm, n；移動相A：水(0.1%FA)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：32% B至50% B/8 min, 50% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之2-(3-{2-[(2R)-4,4-二甲基-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(38.5 mg，42.3%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值528.50。 1H-NMR (400 MHz, 氯仿- d) δ 11.14 (s, 1H), 8.47 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.43 (s, 1H), 6.56 - 6.27 (m, 4H), 6.02 (d, 1H), 5.71 - 5.67 (m, 1H), 5.24 (s, 1H), 4.87 (t, 1H), 4.03 (d, 3H), 3.60 - 3.43 (m, 3H), 3.39 - 3.32 (m, 1H), 3.25 - 3.14 (m, 2H), 2.19 - 2.11 (m, 1H), 2.06 - 1.98 (m, 1H), 1.27 (s, 3H), 1.08 (s, 3H)。
實例 138.(2E)-4-(二甲基胺基)-N-[4-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)-2-甲基丁-3-炔-2-基]丁-2-烯醯胺 ( 化合物 334)
Figure 02_image1857
在0℃下在氬氣氛圍下向2-[3-(3-胺基-3-甲基丁-1-炔-1-基)吡啶-4-基]-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(80 mg，0.18 mmol，1.00當量)及DIEA (119 mg，0.93 mmol，5.00當量)於THF (2.00 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加(2E)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯醯氯(29 mg，0.20 mmol，1.10當量)。將所得混合物在0℃下在氬氣氛圍下攪拌1小時。反應在0℃下用水淬滅。所得混合物用EtOAc (3 x 5 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(1x 10mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。粗產物藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XSelect CSH Fluoro Phenyl, 30*150 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：43% B至73% B/7 min, 73% B；波長：254 nm；RT1(min)：6.55；運行次數：0)，得到呈米白色固體狀之(2E)-4-(二甲基胺基)-N-[4-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)-2-甲基丁-3-炔-2-基]丁-2-烯醯胺(30.4 mg，30.09%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值:545.20 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 11.40 (s, 1H), 8.53 (s, 1H), 8.15 (d, 1H), 7.45 (d, 1H), 6.90-6.80 (m, 1H), 6.63-6.55 (m, 1H), 6.50-6.42 (m, 1H), 6.14-5.98(m, 2H), 5.23 (s, 1H), 4.09 (d, 3H), 3.65-3.58 (m, 2H), 3.25-3.12 (m, 4H), 2.35 (s, 6H), 1.73(s, 6H)。
實例 139.3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(6R)-5-(丙-2-烯醯基)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 251)
139.1. 合成 (6R)-6-[2-(4-{3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ]-5- 氮雜螺 [2.4] 庚烷 -5- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1859
在室溫下在氬氣氛圍下向3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(80 mg，0.16 mmol，1.00當量)及(6R)-6-乙炔基-5-氮雜螺[2.4]庚烷-5-甲酸三級丁酯(46 mg，0.21 mmol，5.00當量)於二甲基甲醯胺(1.00 mL)中之攪拌混合物中添加碘化亞銅(I)(15 mg，0.08 mmol，0.50當量)、Pd(dppf)Cl 2 .DCM (34 mg，0.04 mmol，0.25當量)及DIEA (108 mg，0.83 mmol，5.00當量)。所得懸浮液用氬氣回填三次且在50℃下攪拌2小時。LCMS確認反應完成且觀察到所需產物。所得混合物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化：管柱，C18矽膠；移動相，MeCN/水，10%至50%梯度/10 min；偵測器，UV 254 nm。此產生呈黃色固體狀之(6R)-6-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-5-氮雜螺[2.4]庚烷-5-甲酸三級丁酯(80 mg，83.66%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值572.30。
139.2. 合成 2-(3-{2-[(6R)-5- 氮雜螺 [2.4] 庚烷 -6- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1861
在0℃下向(6R)-6-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-5-氮雜螺[2.4]庚烷-5-甲酸三級丁酯(70 mg，0.12 mmol，1.00當量)於DCM (6.00 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加TFA (2.00 mL)。將所得混合物在室溫下攪拌2小時且用氮氣乾燥得到呈紅色油狀物之2-(3-{2-[(6R)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-基]乙炔基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(57 mg，粗品)。 LC-MS: (M+H) +實驗值472.10。
139.3. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[(6R)-5-( 丙 -2- 烯醯基 )-5- 氮雜螺 [2.4] 庚烷 -6- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1863
將2-(3-{2-[(6R)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-基]乙炔基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(57 mg，0.12 mmol，1.00當量)於THF (0.40 mL)中之溶液用NaHCO 3(水溶液)鹼化至pH為8 (0.40 mL)。在0℃下在氮氣氛圍下向上述混合物中逐滴添加丙烯醯氯(12 mg，0.13 mmol，1.10當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。在0℃下將飽和NaHCO 3水溶液 (5 mL)添加至反應混合物中且用EtOAc (3 x 5 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。在減壓下濃縮濾液得到粗產物，其藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：Xselect CSH F-Phenyl OBD管柱，19*250 mm, 5μm；移動相A：水(0.1%FA)，移動相B：製備型MeOH；流動速率：25 mL/min；梯度：47% B至77% B/7 min, 77% B；波長：254 nm；RT1(min)：6.67；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(6R)-5-(丙-2-烯醯基)-5-氮雜螺[2.4]庚烷-6-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(7.0 mg，11.01%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值526.45。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 11.25 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.06 - 7.99 (m, 2H), 7.46 (d, 1H), 6.59 - 6.51 (m, 2H), 6.41 - 6.39 (m, 2H), 6.07 - 6.05(m, 1H), 5.79 - 5.76 (m, 1H), 5.26 (s, 1H), 5.03 - 5.00 (m, 1H), 4.10 (d, 3H), 3.67 - 3.56 (m, 4H), 3.33 - 3.29 (m, 2H), 2.34 - 2.29 (m, 1H), 2.18 - 2.14 (m, 1H), 0.90 - 0.80 (m, 2H), 0.74 - 0.68 (m, 2H)。
實例 140.rel-2-(3-{2-[(2R)-3,3-二甲基-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 250)
140.1. 合成 2-[2-(4-{3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ]-3,3- 二甲基氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1865
在室溫下在Ar氛圍下向2-(3-溴吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(350 mg，0.81 mmol，1.00當量)及Pd(dppf)Cl 2 .CH 2Cl 2(165 mg，0.20 mmol，0.25當量)及CuI (77 mg，0.40 mmol，0.50當量)於DMF (3.00 mL)中之攪拌溶液中添加2-乙炔基-3,3-二甲基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(509 mg，2.43 mmol，3.00當量)及DIEA (524 mg，4.06 mmol，5.00當量)。所得懸浮液用氬氣回填三次且在50℃下攪拌2小時。LCMS確認反應完成且觀察到所需產物。所得混合物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化(管柱，C18矽膠；移動相，MeCN/水，10%至80%梯度/30 min；偵測器，UV 254 nm)，得到呈黃色固體狀之2-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-3,3-二甲基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(310 mg)。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (10:1)溶離得到呈黃色固體狀之2-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-3,3-二甲基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(300 mg，66.05%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：560.2。
140.2. 合成 2-{3-[2-(3,3- 二甲基氮雜環丁烷 -2- 基 ) 乙炔基 ] 吡啶 -4- 基 }-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1867
在0℃下向2-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-3,3-二甲基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(180 mg，0.32 mmol，1.00當量)於DCM (4.00 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加TFA (2.00 mL)。將所得混合物在室溫下攪拌2小時且用氮氣乾燥得到呈紅色油狀物之2-{3-[2-(3,3-二甲基氮雜環丁烷-2-基)乙炔基]吡啶-4-基}-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(160 mg，粗品)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：460.2。
140.3. 合成 2-(3-{2-[3,3- 二甲基 -1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 氮雜環丁烷 -2- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1869
將2-{3-[2-(3,3-二甲基氮雜環丁烷-2-基)乙炔基]吡啶-4-基}-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(160 mg，0.34 mmol，1.00當量)於THF (1.50 mL)中之溶液用NaHCO 3水溶液(1.5 mL)鹼化至pH為8。在0℃下在氮氣氛圍下向上述混合物中逐滴添加丙烯醯氯(37 mg，0.41 mmol，1.20當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。在0℃下將飽和NaHCO 3水溶液 (5 mL)添加至反應混合物中且用EtOAc (3 x 5 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。在減壓下濃縮濾液得到粗產物，其藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep OBD C18管柱，30*150 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：26% B至56% B/7 min；波長：254 nm；RT1(min)：6.5；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之2-(3-{2-[3,3-二甲基-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(90 mg，50.33%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：514.20。
140.4. 合成 rel-2-(3-{2-[(2R)-3,3- 二甲基 -1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 氮雜環丁烷 -2- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1871
2-(3-{2-[3,3-二甲基-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(90 mg)，其藉由對掌性HPLC在以下條件下分離(管柱：CHIRALPAK IG, 2*25 cm, 5 μm；移動相A：Hex: DCM=3: 1(0.5% 2M NH 3-MeOH)--HPLC，移動相B：EtOH--HPLC；流動速率：20 mL/min；梯度：10% B至10% B/22 min；波長：220/254 nm；RT1(min)：17.99；RT2(min)：21.96；樣品溶劑：ETOH: DCM=1: 1；注入體積：1 mL；運行次數：3)，得到呈黃色固體狀之rel-2-(3-{2-[(2R)-3,3-二甲基-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(31.0 mg，34.44%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：514.10。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 10.94 (s, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.13 (d, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.46 (d, 1H), 6.61 - 6.45 (m, 2H), 6.40 - 6.34 (m, 1H), 6.25 - 6.16 (m, 1H), 6.08 (d, 1H), 5.78 - 5.74 (m, 1H), 5.21 (s, 1H), 4.86 (s, 1H), 4.10 (s, 3H), 3.97 (s, 2H), 3.59 (d, 2H), 3.24 (t, 2H), 1.54 (s, 3H), 1.45 (s, 3H)。
實例 141.rel-2-(3-{2-[(2R)-3,3-二甲基-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 249)
Figure 02_image1873
2-(3-{2-[3,3-二甲基-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(90 mg)，其藉由對掌性HPLC在以下條件下分離(管柱：CHIRALPAK IG-3, 4.6*50 mm, 3 um；移動相A：(Hex: DCM=3: 1)( 0.1%DEA ): EtOH=90: 10；流動速率：1 mL/min；梯度：0% B至0% B；注入體積：5ul mL)，得到呈黃色固體狀之rel-2-(3-{2-[(2R)-3,3-二甲基-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(31.7 mg，35.22%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：514.15。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 10.94 (s, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.13 (d, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.46 (d, 1H), 6.61 - 6.45 (m, 2H), 6.40 - 6.34 (m, 1H), 6.25 - 6.16 (m, 1H), 6.08 (d, 1H), 5.78 - 5.74 (m, 1H), 5.23 (s, 1H), 4.86 (s, 1H), 4.10 (s, 3H), 3.97 (s, 2H), 3.59 (d, 2H), 3.24 (t, 2H), 1.54 (s, 3H), 1.45 (s, 3H)。
實例 142.3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R)-1-(丙-2-烯醯基)哌啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 248)
142.1. 合成 2-[2-(4-{3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ] 哌啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1875
在室溫下在氬氣氛圍下向2-(3-溴吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(300 mg，0.70 mmol，1.00當量)於DMF (3.00 mL)中之攪拌混合物中添加2-乙炔基哌啶-1-甲酸三級丁酯(436 mg，2.08 mmol，3.00當量)、Pd(dppf)Cl 2CH 2Cl 2(141 mg，0.17 mmol，0.25當量)、CuI (66 mg，0.34 mmol，0.50當量)及DIEA (449 mg，3.48 mmol，5.00當量)。所得懸浮液用氬氣回填三次且在50℃下攪拌2小時。LCMS確認反應完成且觀察到所需產物。所得混合物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化(管柱，C 18 gel；移動相，MeCN/水，10%至60%梯度/10 min；偵測器，UV 254 nm)，得到呈黃色固體狀之2-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]哌啶-1-甲酸三級丁酯(220 mg，56.51%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：560.20。
142.2. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-{3-[2-( 哌啶 -2- 基 ) 乙炔基 ] 吡啶 -4- 基 }-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1877
在室溫下在氮氣氛圍下向2-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]哌啶-1-甲酸三級丁酯(200 mg，0.36 mmol)於DCM (6.00 mL)中之攪拌混合物中添加TFA (2.00 mL)。將所得混合物攪拌1小時且用氮氣乾燥得到呈紅色油狀物之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[2-(哌啶-2-基)乙炔基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(120 mg，粗品)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：460.10。
142.3. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 哌啶 -2- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1879
將3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[2-(哌啶-2-基)乙炔基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(120 mg，0.26 mmol，1.00當量)於THF (3.00 mL)中之溶液用NaHCO 3水溶液(3.00 mL)鹼化至pH為8。在0℃下在氮氣氛圍下向上述混合物中逐滴添加丙烯醯氯(23 mg，0.26 mmol，1.00當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。在0℃下將飽和水溶液NaHCO 3(5 mL)添加至反應混合物中且用EtOAc (3 x 5 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。在減壓下濃縮濾液得到粗產物，其藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (20:1)溶離得到呈黃色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[1-(丙-2-烯醯基)哌啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(50 mg，27.96%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：514.40。
142.4. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[(2R)-1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 哌啶 -2- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1881
外消旋產物(50 mg)藉由製備型對掌性HPLC在以下條件純化(管柱：CHIRAL ART Cellulose-SB, 2*25 cm, 5 μm；移動相A：MtBE(0.5% 2M NH 3-MeOH)-HPLC，移動相B：MeOH: DCM=1: 1(0.1% 2M NH3-MEOH)；流動速率：20 mL/min；梯度：10% B至10% B/21 min；波長：220/254 nm；RT1(min)：15.613；RT2(min)：17.482；樣品溶劑：EtOH--HPLC；注入體積：0.3 mL；運行次數：12)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R)-1-(丙-2-烯醯基)哌啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(10.2 mg，20.32%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：514.10。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 10.47 (s, 1H), 8.60 (s, 1H), 8.15 (d, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.42 (d, 1H), 6.67 -6.46 (m, 3H), 6.36 - 6.27 (m, 1H), 6.09 - 6.02 (m, 1H), 5.81 - 5.73 (m, 1H), 5.64 (s, 1H), 5.30 (s, 1H), 4.10 (d, 3H), 3.92 (s, 1H), 3.68 - 3.56 (m, 2H), 3.36 (s, 1H), 3.19 (s, 2H), 2.08 (s, 1H), 1.91 - 1.82 (m, 4H), 1.61 (s, 1H)。
實例 143.3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R)-1-(丙-2-烯醯基)哌啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 247)
Figure 02_image1883
外消旋產物(50 mg)藉由製備型對掌性HPLC在以下條件純化(管柱：CHIRAL ART Cellulose-SB, 2*25 cm, 5 μm；移動相A：MtBE(0.5% 2M NH 3-MeOH)--HPLC，移動相B：MeOH: DCM=1: 1(0.1% 2M NH 3-MEOH)；流動速率：20 mL/min；梯度：10% B至10% B/21 min；波長：220/254 nm；RT1(min)：15.613；RT2(min)：17.482；樣品溶劑：EtOH--HPLC；注入體積：0.3 mL；運行次數：12)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R)-1-(丙-2-烯醯基)哌啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(10.2 mg，20.32%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：514.15。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 10.48 (s, 1H), 8.60 (s, 1H), 8.14 (d, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.42 (d, 1H), 6.67 - 6.55 (m, 2H), 6.55 - 6.46 (m, 1H), 6.36 - 6.27 (m, 1H), 6.09 - 6.02 (m, 1H), 5.81 - 5.73 (m, 1H), 5.64 (s, 1H), 5.30 (s, 1H), 4.10 (d, 3H), 3.99-3.93 (m, 1H), 3.68 - 3.54 (m, 2H), 3.42 - 3.33 (m, 1H), 3.20 (s, 2H), 2.10 - 2.08 (m, 1H), 1.91 - 1.83 (m, 4H),1.62 (s, 1H)。
實例 144.3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2S)-2-甲基-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 246)
144.1. 合成 (2S)-2-[2-(4-{3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ]-2- 甲基吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1885
向3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(130 mg，0.27 mmol，1.00當量)及(2S)-2-乙炔基-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(114 mg，0.54 mmol，2.00當量)於DMF (2.00 mL)中之溶液中添加CuI (26 mg，0.14 mmol，0.50當量)、Pd(dppf)Cl 2CH 2Cl 2(55 mg，0.07 mmol，0.25當量)及DIEA (88 mg，0.68 mmol，2.50當量)。所得懸浮液用氬氣回填三次且在50℃下攪拌2小時。LCMS確認反應完成且觀察到所需產物。所得混合物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化(管柱，C18矽膠；移動相，ACN/水，10%至100%梯度/10 min；偵測器，UV 254 nm)，得到呈黃色固體狀之(2S)-2-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(100 mg，62.45%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：560.20。
144.2. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[(2S)-2- 甲基吡咯啶 -2- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1887
在室溫下在氮氣氛圍下向(2S)-2-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(80 mg，0.14 mmol)於DCM (1.00 mL)中之攪拌混合物中添加TFA (1.00 mL)。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮得到呈紅色油狀物之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2S)-2-甲基吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(80 mg，粗品) LC-MS: (M+H) +實驗值:460.45。
144.3. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[(2S)-2- 甲基 -1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 吡咯啶 -2- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1889
將3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2S)-2-甲基吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(80 mg，0.17 mmol，1.00當量)於THF (1.00 mL)中之溶液用NaHCO 3(水溶液)鹼化至pH為8 (1.00 mL)。在0℃下在氮氣氛圍下向上述混合物中逐滴添加丙烯醯氯(14 mg，0.18 mmol，0.90當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。在0℃下將飽和NaHCO 3水溶液(5 mL)添加至反應混合物中且用EtOAc (3 x 5 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。在減壓下濃縮濾液得到粗產物(60 mg)，藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：Xselect CSH F-Phenyl OBD管柱，30*250 mm, 5μm；移動相A：水(0.1%FA)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：32% B至62% B/7 min；波長：254 nm；RT1(min)：6.5；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2S)-2-甲基-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(9.9 mg，10.63%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值:460.45。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 11.49 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.14 (d, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.46 (d, 1H), 6.59 - 6.56 (m, 1H), 6.52 - 6.44 (m, 2H), 6.39 - 6.35 (m, 1H), 6.12 - 6.10 (m, 1H), 5.75 -5.72(m, 1H), 5.24 (s, 1H), 4.10 (s, 3H), 3.80 - 3.74 (m, 2H), 3.63 - 3.60 (m, 2H), 3.29 - 3.22 (m, 2H), 2.19 - 2.14 (m, 4H), 1.78 (s, 3H)。
實例 145.3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R)-2-甲基-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 245)
145.1. 合成 (2R)-2-[2-(4-{3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ]-2- 甲基吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1891
在室溫下在氬氣氛圍下向3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(150 mg，0.31 mmol，1.00當量)及Pd(dppf)Cl 2 .CH 2Cl 2(63 mg，0.08 mmol，0.25當量)於DMF (2.00 mL)中之攪拌混合物中添加DIEA (202 mg，1.58 mmol，5.00當量)及(2R)-2-乙炔基-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(196 mg，0.94 mmol，3.00當量)。所得懸浮液用氬氣回填三次且在50℃下攪拌2小時。LCMS確認反應完成且觀察到所需產物。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化：管柱，C18矽膠；移動相，MeCN/水，10%至70%梯度/20 min；偵測器，UV 254 nm。此產生(2R)-2-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(150 mg，85.46%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：560.1
145.2. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[(2R)-2- 甲基吡咯啶 -2- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1893
在室溫下在氮氣氛圍下向(2R)-2-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(120 mg，0.21 mmol)於DCM (3.00 mL)中之攪拌混合物中添加TFA (1.00 mL)。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮得到呈紅色油狀物之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R)-2-甲基吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(98 mg，粗品)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：460.1
145.3. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[(2R)-2- 甲基 -1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 吡咯啶 -2- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1895
將3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R)-2-甲基吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(98 mg，0.21 mmol，1.00當量)於THF (3.00 mL)中之溶液用NaHCO 3水溶液(3.00 mL)鹼化至pH為8。在0℃下在氮氣氛圍下向上述混合物中逐滴添加丙烯醯氯(19 mg，0.21 mmol，1.00當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。在0℃下將飽和NaHCO 3水溶液(5 mL)添加至反應混合物中且用EtOAc (3 x 5 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。在減壓下濃縮濾液得到粗產物(120 mg)，藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：Xcelect CSH F-pheny OBD管柱，19*250 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：25 mL/min；梯度：40% B至60% B/10 min, 60% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8.32；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R)-2-甲基-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(16.5 mg，13.91%) LC-MS: (M+H) +實驗值：514.10 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 11.49 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 6.64 - 6.52 (m, 1H), 6.51 - 6.32 (m, 3H), 6.10 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 5.78 - 5.70 (m, 1H), 5.19 (s, 1H), 4.10 (s 3H), 3.85 - 3.68 (m, 2H), 3.64 - 3.60 (m, 2H), 3.37 - 3.13 (m, 2H), 2.58 - 2.43 (m, 1H), 2.23 - 2.03 (m, 3H), 1.78 (s, 3H)。
實例 146.rel-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(3R)-4-(丙-2-烯醯基)𠰌啉-3-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 242)
146.1. 合成 3-[2-(4-{3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ] 𠰌 啉 -4- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1897
在室溫下向2-(3-溴吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(320 mg，0.74 mmol，1.00當量)及3-乙炔基𠰌啉-4-甲酸三級丁酯(470 mg，2.22 mmol，3.00當量)於DMF (7.00 mL)中之攪拌溶液/混合物中添加CuI (71 mg，0.371 mmol，0.50當量)、Pd(dppf)Cl 2 .CH 2Cl 2(302 mg，0.37 mmol，0.50當量)及DIEA (288 mg，2.22 mmol，3.00當量)。所得懸浮液用氬氣回填三次且在50℃下攪拌1.5小時。LCMS確認反應完成且觀察到所需產物。所得混合物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化(管柱，矽膠；移動相，MeCN/水，10%至50%梯度/10 min；偵測器，UV 254 nm)，得到呈黃色固體狀之3-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]𠰌啉-4-甲酸三級丁酯(230 mg，55.19%)。 LC-MS: M+H實驗值：562.3。
146.2. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-{3-[2-( 𠰌 啉 -3- 基 ) 乙炔基 ] 吡啶 -4- 基 }-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1899
在室溫下在氮氣氛圍下向3-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]𠰌啉-4-甲酸三級丁酯(200 mg，0.356 mmol)於DCM (4.00 mL)中之攪拌混合物中添加TFA (2.00 mL)。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮得到呈紅色油狀物之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[2-(𠰌啉-3-基)乙炔基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(164 mg，粗品)。 LC-MS: (M+H) +實驗值462.1。
146.3. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[4-( 丙 -2- 烯醯基 ) 𠰌 啉 -3- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1901
將3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[2-(𠰌啉-3-基)乙炔基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(164 mg，0.35 mmol，1.00當量)於THF (3.00 mL)中之溶液用NaHCO 3水溶液(2.00 mL)鹼化至pH為8。在0℃下在氮氣氛圍下向上述混合物中逐滴添加丙烯醯氯(51 mg，0.57 mmol，1.60當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。在0℃下將飽和NaHCO 3水溶液(5 mL)添加至反應混合物中且用EtOAc (3 x 5 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。在減壓下濃縮濾液得到粗產物(60 mg)，藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep OBD C18管柱，30*150 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：24% B至54% B/7 min；波長：254 nm；RT1(min)：6.5；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[4-(丙-2-烯醯基)𠰌啉-3-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(50 mg，27.66%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值530.15。
146.4. 合成 rel-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[(3R)-4-( 丙 -2- 烯醯基 ) 𠰌 啉 -3- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1903
粗產物(50 mg)藉由對掌性HPLC在以下條件下分離(管柱：CHIRALPAK IG-3, 4.6*50mm, 3μm；移動相A：(Hex: DCM=3: 1)( 0.1%DEA ): EtOH=80: 20；流動速率：1 mL/min；梯度：0% B至0% B；注入體積：5ul mL)，得到呈淡黃色固體狀之rel-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(3R)-4-(丙-2-烯醯基)𠰌啉-3-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(11.4 mg，21.88%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值516.10。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 10.54 (s, 1H), 8.64 (s, 1H), 8.17 (d, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.45 (d, 1H), 6.63 - 6.40 (m, 4H), 6.08 (d, 1H), 5.88 (d, 1H), 5.53 (s, 1H), 5.28 (s, 1H), 4.24 (m, 1H), 4.13 (m, 4H),3.75 - 3.60 (m, 6H), 3.15 (s, 2H)。
實例 147.rel-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(3R)-4-(丙-2-烯醯基)𠰌啉-3-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 241)
Figure 02_image1905
粗產物(50 mg)藉由對掌性HPLC在以下條件下分離(管柱：CHIRALPAK IG-3, 4.6*50mm, 3μm；移動相A：(Hex: DCM=3: 1)( 0.1%DEA ): EtOH=80: 20；流動速率：1 mL/min；梯度：0% B至0% B；注入體積：5ul mL)，得到呈淡黃色固體狀之rel-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(3R)-4-(丙-2-烯醯基)𠰌啉-3-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(13.1 mg，25.48%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值516.10。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 10.78 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 7.98 (d, 1H), 7.40 (d, 1H), 6.67 - 6.55 (m, 3H), 6.45 (m,1H), 6.07 - 6.00 (m, 1H), 5.91 (d, 1H), 5.38 (s, 2H), 4.24 (d, 1H), 4.15 (d, 3H), 4.10 - 4.07 (m, 1H),3.87 - 3.83 (m,1H), 3.77 - 3.66 (m 5H), 3.24 (s, 2H)。
實例 148.N-[4-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)-2-甲基丁-3-炔-2-基]-N-甲基丙-2-烯醯胺 ( 化合物 260)
148.1. 合成 N- 甲基 -N-(2- 甲基丁 -3- 炔 -2- 基 ) 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image1907
在0℃下向N-(2-甲基丁-3-炔-2-基)胺基甲酸三級丁酯(310 mg，1.69 mmol，1.00當量)於DMF (5.00 mL)中之攪拌混合物中添加NaH (81 mg，3.38 mmol，2.00當量)。將所得混合物在0℃下攪拌0.5小時。在0℃下向上述混合物中逐滴添加碘甲烷(480 mg，3.38 mmol，2.00當量)。將所得混合物在0℃下再攪拌2小時。在0℃下藉由添加H 2O (2 mL)淬滅反應。所得混合物用EA (3 x 10 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(3 x 10 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EA (5/1)溶離得到呈無色油狀物之N-甲基-N-(2-甲基丁-3-炔-2-基)胺基甲酸三級丁酯(187 mg，53.23%)。 LC-MS: (M+H-56) +實驗值: 142.1。
148.2. 合成 N-[4-(4-{3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 )-2- 甲基丁 -3- 炔 -2- 基 ]-N- 甲基胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image1909
向3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100 mg，0.20 mmol，1.00當量)及N-甲基-N-(2-甲基丁-3-炔-2-基)胺基甲酸三級丁酯(80 mg，0.40 mmol，2.00當量)於DMF (2.00 mL)中之溶液中添加DIEA (65 mg，0.50 mmol，2.50當量)、CuI (19 mg，0.10 mmol，0.50當量)及Pd(dppf)Cl 2CH 2Cl 2(41 mg，0.05 mmol，0.25當量)。所得懸浮液用氬氣回填三次且在50℃下攪拌2小時。LCMS確認反應完成且觀察到所需產物。在真空下濃縮所得混合物。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化(管柱，C18矽膠；移動相，ACN/水，10%至100%梯度/10 min；偵測器，UV 254 nm)，得到呈黃色固體狀之N-[4-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)-2-甲基丁-3-炔-2-基]-N-甲基胺基甲酸三級丁酯(70 mg，58.32%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值:564.10。
148.3. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-{3-[3- 甲基 -3-( 甲基胺基 ) 丁 -1- 炔 -1- 基 ] 吡啶 -4- 基 }-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1911
在室溫下向8 mL容器中添加N-[4-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)-2-甲基丁-3-炔-2-基]-N-甲基胺基甲酸三級丁酯(80 mg，0.14 mmol)及TFA (2.00 mL)。將所得混合物攪拌15小時且用氮氣乾燥得到呈紅色油狀物之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[3-甲基-3-(甲基胺基)丁-1-炔-1-基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(80 mg，粗品) LC-MS: (M+H) +實驗值:464.45
148.4. 合成 N-[4-(4-{3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 )-2- 甲基丁 -3- 炔 -2- 基 ]-N- 甲基丙 -2- 烯醯胺
Figure 02_image1913
在0℃下向3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[3-甲基-3-(甲基胺基)丁-1-炔-1-基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(80 mg，0.17 mmol，1.00當量)於THF (1.00 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加NaHCO 3aq. (1.00 mL)及丙烯醯氯(14 mg，0.15 mmol，0.90 當量)。.將所得混合物在室溫下攪拌1小時。粗產物藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep C18 OBD管柱，30*100 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：37% B至58% B/9 min, 58% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8.85；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之N-[4-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)-2-甲基丁-3-炔-2-基]-N-甲基丙-2-烯醯胺(4.3 mg，4.66%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值:517.19。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.75 (s, 1H), 8.53 (s, 1H), 8.25 (d, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.36 (d, 1H), 7.21 (s, 1H), 6.84-6.77 (m, 1H), 6.72 (d, 2H), 6.20 - 6.13 (m, 2H), 5.74-5.71 (m, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.51-3.42 (m, 2H), 3.09 (s, 3H), 3.01-2.91 (m, 2H), 1.72 (s, 6H)。
實例 149.N-[4-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)-2-甲基丁-3-炔-2-基]-N-甲基丙-2-烯醯胺 ( 化合物 259)
149.1. 合成 N-[4-(4-{3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 )-2- 甲基丁 -3- 炔 -2- 基 ]-N- 甲基胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image1915
在氬氣氛圍下向2-(3-溴吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(250 mg，0.58 mmol，1.00當量)及N-甲基-N-(2-甲基丁-3-炔-2-基)胺基甲酸三級丁酯(229 mg，1.16 mmol，2.00當量)於DMF (2.00 mL)中之攪拌混合物中添加DIEA (187 mg，1.45 mmol，2.50當量)、CuI (55 mg，0.29 mmol，0.50當量)及Pd(dppf)Cl 2 .CH 2Cl 2(118 mg，0.15 mmol，0.25當量)。所得懸浮液用氬氣回填三次且在50℃下攪拌2小時。LCMS確認反應完成且觀察到所需產物。混合物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化(管柱，C18矽膠；移動相，MeCN/水，10%至50%梯度/10 min；偵測器，UV 254 nm)，得到呈黃色固體狀之N-[4-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)-2-甲基丁-3-炔-2-基]-N-甲基胺基甲酸三級丁酯(170 mg，48.20%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值:548.25。
149.2. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-{3-[3- 甲基 -3-( 甲基胺基 ) 丁 -1- 炔 -1- 基 ] 吡啶 -4- 基 }-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1917
在0℃下向2,6-二甲吡啶(685 mg，6.40 mmol，25.00當量)及N-[4-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)-2-甲基丁-3-炔-2-基]-N-甲基胺基甲酸三級丁酯(140 mg，0.26 mmol，1.00當量)於DCM (5.00 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加TMSOTf (0.50 mL，1.30 mmol，5.00當量)。將所得混合物在0℃下攪拌10分鐘，隨後在25℃下攪拌60分鐘。藉由LCMS監測反應。在真空下濃縮所得混合物。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化(管柱，C18矽膠；移動相，ACN/水，10%至50%梯度/10 min；偵測器，UV 254 nm)，得到呈淡黃色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[3-甲基-3-(甲基胺基)丁-1-炔-1-基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(80 mg，62.93%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值:448.10。
149.3. 合成 N-[4-(4-{3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 )-2- 甲基丁 -3- 炔 -2- 基 ]-N- 甲基丙 -2- 烯醯胺
Figure 02_image1919
在0℃下向3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[3-甲基-3-(甲基胺基)丁-1-炔-1-基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(70 mg，0.16 mmol，1.00當量)及DIEA (61 mg，0.47 mmol，3.00當量)於四氫呋喃(1.00 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加丙烯醯氯(13 mg，0.14 mmol，0.90當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。在0℃下將飽和水溶液NaHCO 3(5 mL)添加至反應混合物中且用EtOAc (3 x 5 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。在減壓下濃縮濾液得到粗產物，其藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep C18 OBD管柱，30*100 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：32% B至57% B/9 min, 57% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8.85；運行次數：0)，得到呈米白色固體狀之N-[4-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)-2-甲基丁-3-炔-2-基]-N-甲基丙-2-烯醯胺(14.9 mg，17.43%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值:502.10。 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11.74 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.24 (d, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.36 (d, 1H), 7.22 (s, 1H), 6.85 - 6.76 (m, 1H),6.70 - 6.65 (m, 1H)，6.63 - 6.42 (m, 1H), 6.20 - 6.15 (m, 1H), 6.14 - 5.98 (m, 1H), 5.74 - 5.70 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.45 - 3.41 (m, 2H), 3.09 (s, 3H), 3.09 - 2.87 (m, 2H), 1.72 (s, 6H)。
實例 150.N-[4-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)-2-甲基丁-3-炔-2-基]丙-2-烯醯胺 ( 化合物 258)
150.1. 合成 N-[4-(4-{3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 )-2- 甲基丁 -3- 炔 -2- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image1921
在室溫下在氬氣氛圍下向3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(130 mg，0.27 mmol，1.00當量)及N-(2-甲基丁-3-炔-2-基)胺基甲酸三級丁酯(99 mg，0.54 mmol，2.00當量)於DMF (3.00 mL)中之攪拌混合物中添加Pd(dppf)Cl 2CH 2Cl 2(110 mg，0.13 mmol，0.50當量)及CuI (25 mg，0.13 mmol，0.50當量)及DIEA (210 mg，1.63 mmol，6.00當量)。所得懸浮液用氬氣回填三次且在50℃下攪拌2小時。LCMS確認反應完成且觀察到所需產物。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化(管柱，C18矽膠；移動相，MeCN/水，0%至100%梯度/50 min；偵測器，UV 254 nm)，得到呈米白色固體狀之N-[4-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)-2-甲基丁-3-炔-2-基]胺基甲酸三級丁酯(120 mg，82.73%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值534.1。
150.2. 合成 2-[3-(3- 胺基 -3- 甲基丁 -1- 炔 -1- 基 ) 吡啶 -4- 基 ]-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1923
在0℃下在氮氣氛圍下向N-[4-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)-2-甲基丁-3-炔-2-基]胺基甲酸三級丁酯(90 mg，0.16 mmol，1.00當量)於DCM (1.00 mL)中之攪拌混合物中添加TFA (1.00 mL)。將所得混合物攪拌1小時且用氮氣乾燥得到呈紅色油狀物之2-[3-(3-胺基-3-甲基丁-1-炔-1-基)吡啶-4-基]-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(90 mg，粗品)。 LC-MS: (M+H) +實驗值434.1。
150.3. 合成 N-[4-(4-{3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 )-2- 甲基丁 -3- 炔 -2- 基 ] 丙 -2- 烯醯胺
Figure 02_image1925
將2-[3-(3-胺基-3-甲基丁-1-炔-1-基)吡啶-4-基]-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(90 mg，0.20 mmol，1.00當量)於THF (1.00 mL)中之溶液用NaHCO 3(飽和) (1.00 mL)鹼化至pH為8。在0℃下在氮氣氛圍下向上述混合物中添加丙烯醯氯(21 mg，0.23 mmol，1.15當量)，隨後逐滴添加T 3P (169 mg，0.27 mmol，2.00當量，50%/EA)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。在0℃下將飽和水溶液NaHCO 3(5 mL)添加至反應混合物中且用EtOAc (3 x 5 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。在減壓下濃縮濾液得到粗產物，其藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep C18 OBD管柱，30*100 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：26% B至50% B/9 min, 50% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8.85；運行次數：0)，得到呈米白色固體狀之N-[4-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)-2-甲基丁-3-炔-2-基]丙-2-烯醯胺(5.0 mg，4.88%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值488.00。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.63 (s, 1H), 8.75 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.23 - 8.21 (m, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.36 (d, 1H), 7.21 (s, 1H), 6.67 - 6.66 (m, 1H), 6.55 - 6.52 (m, 1H), 6.32 - 6.19 (m, 2H), 5.99 (d, 1H), 5.70-5.67 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.44 (t, 2H), 3.02 (t, 2H), 1.64 (s, 6H)。
實例 151.N-{3-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]氧雜環丁烷-3-基}丙-2-烯醯胺 ( 化合物 263)
151.1. 合成 N-{3-[2-(4-{3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ] 氧雜環丁烷 -3- 基 } 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image1927
在室溫下在氬氣氛圍下向3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100 mg，0.21 mmol，1.00當量)及N-(3-乙炔基氧雜環丁烷-3-基)胺基甲酸三級丁酯(206 mg，1.05 mmol，5.00當量)於二甲基甲醯胺(2.00 mL)中之攪拌混合物中添加碘化亞銅(I) (19 mg，0.10 mmol，0.50當量)、DIEA (13 mg，0.10 mmol，0.50當量)及Pd(dppf)Cl 2 .CH 2Cl 2(42 mg，0.05 mmol，0.25當量)。所得懸浮液用氬氣回填三次且在50℃下攪拌2小時。LCMS確認反應完成且觀察到所需產物。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化：管柱，C18矽膠；移動相，MeCN/水，10%至70%梯度/20 min；偵測器，UV 254 nm。此產生呈黃色固體狀之N-{3-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]氧雜環丁烷-3-基}胺基甲酸三級丁酯(110 mg，95.9%)。 LC-MS: [M+H] +實驗值548.25。
151.2. 合成 2-{3-[2-(3- 胺基氧雜環丁烷 -3- 基 ) 乙炔基 ] 吡啶 -4- 基 }-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1929
在室溫下在氬氣氛圍下向N-{3-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]氧雜環丁烷-3-基}胺基甲酸三級丁酯(90 mg，0.16 mmol，1.00當量)於DCM (2.00 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加TFA (1.00 mL)。將所得混合物在室溫下攪拌2小時且用氮氣乾燥得到呈紅色油狀物之2-{3-[2-(3-胺基氧雜環丁烷-3-基)乙炔基]吡啶-4-基}-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(73 mg，粗品)。 LC-MS: [M+H] +實驗值448.15。
151.3. 合成 N-{3-[2-(4-{3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ] 氧雜環丁烷 -3- 基 } 丙 -2- 烯醯胺
Figure 02_image1931
將2-{3-[2-(3-胺基氧雜環丁烷-3-基)乙炔基]吡啶-4-基}-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(73 mg，0.16 mmol，1.00當量)於THF (2.00 mL)中之溶液用NaHCO 3(水溶液)鹼化至pH為8 (2.00 mL)。在0℃下在氮氣氛圍下向上述混合物中逐滴添加丙烯醯氯(16 mg，0.18 mmol，1.10當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。在0℃下將飽和水溶液NaHCO 3(5 mL)添加至反應混合物中且用EtOAc (3 x 5 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。在減壓下濃縮濾液得到粗產物，其藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep C18 OBD管柱，30*100 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：18% B至38% B/9 min, 38% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：9.28；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之N-{3-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]氧雜環丁烷-3-基}丙-2-烯醯胺(9.8 mg，11.8%)。 LC-MS: [M+H] +實驗值502.35。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.27 (s, 1H), 9.45 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.30 (d, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.35 (d, 1H), 7.17 (s, 1H), 6.65 - 6.60 (m, 1H), 6.48 - 6.45 (m, 1H), 6.32- 6.18 (m, 2H), 5.99 - 5.97 (m, 1H), 5.76 - 5.73 (m, 1H), 4.90 (d, 2H), 4.73 (d, 2H), 3.89 (s, 3H), 3.43 - 3.39 (m, 2H), 3.02-2.92 (m, 2H)。
實例 152.3-{[2-(二氟甲氧基)-3-氟苯基]胺基}-2-(3-{[(2S)-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 280)
152.1. 合成 (2S)-2-({[4-(3-{[2-( 二氟甲氧基 )-3- 氟苯基 ] 胺基 }-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 吡啶 -3- 基 ] 氧基 } 甲基 ) 吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1933
在氬氣氛圍下向(2S)-2-{[(4-{3-碘-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(100 mg，0.19 mmol，1.00當量)及2-(二氟甲氧基)-3-氟苯胺(49 mg，0.28 mmol，1.50當量)於DMF (5.00 mL)中之攪拌混合物中添加EPhos Pd G4 (17 mg，0.02 mmol，0.10當量)及Cs 2CO 3(121 mg，0.37 mmol，2.00當量)。所得懸浮液用氬氣回填三次且在50℃下攪拌2小時。LCMS確認反應完成且觀察到所需產物。所得混合物藉由矽膠墊過濾，且濾餅用DCM (2 x 10 mL)洗滌。在減壓下濃縮濾液，藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (20:1)溶離得到呈黃色固體狀之(2S)-2-({[4-(3-{[2-(二氟甲氧基)-3-氟苯基]胺基}-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)吡啶-3-基]氧基}甲基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(80 mg，73.30%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：588.1。
152.2. 合成 3-{[2-( 二氟甲氧基 )-3- 氟苯基 ] 胺基 }-2-{3-[(2S)- 吡咯啶 -2- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 }-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1935
在室溫下在氮氣氛圍下向(2S)-2-({[4-(3-{[2-(二氟甲氧基)-3-氟苯基]胺基}-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)吡啶-3-基]氧基}甲基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(60 mg，0.04 mmol)於DCM (3.00 mL)中之攪拌混合物中添加TFA (1.00 mL)。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮得到呈紅色油狀物之3-{[2-(二氟甲氧基)-3-氟苯基]胺基}-2-{3-[(2S)-吡咯啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(48 mg，粗品)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：488.2
152.3. 合成 3-{[2-( 二氟甲氧基 )-3- 氟苯基 ] 胺基 }-2-(3-{[(2S)-1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 吡咯啶 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1937
將3-{[2-(二氟甲氧基)-3-氟苯基]胺基}-2-{3-[(2S)-吡咯啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(48 mg，0.10 mmol，1.00當量)於THF (1.5 mL)中之溶液用NaHCO 3水溶液(2.00 mL)鹼化至pH為8。在0℃下在氮氣氛圍下向上述混合物中添加丙烯醯氯(9 mg，0.09 mmol，1.00當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (20:1)溶離得到粗產物(40 mg)。粗產物(40 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep OBD C18管柱，30*150 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：24% B至48% B/8 min, 48% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之3-{[2-(二氟甲氧基)-3-氟苯基]胺基}-2-(3-{[(2S)-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(19.7 mg，36.69%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：542.1。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 11.58 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 8.00 (d, 1H), 7.59 (d, 1H), 7.31 (s, 1H), 7.01 - 6.73 (m, 2H), 6.64 - 6.37 (m, 3H), 6.26 - 6.19 (m, 1H), 5.85 - 5.78 (m, 1H), 5.28 (s, 1H), 5.12 - 5.00 (m, 1H), 4.28 (t, 1H), 4.15 - 4.08 (m, 1H), 3.78 (t, 2H), 3.71 - 3.56 (m, 2H), 3.28 - 3.18 (m, 2H), 2.26 - 2.10 (m, 3H), 1.93 - 1.90 (m, 1H)。
實例 153.3-[(3-氯-2-氟苯基)胺基]-2-(3-{[(2S)-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 279)
153.1. 合成 (2S)-2-{[(4-{3-[(3- 氯 -2- 氟苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 } 吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1939
在氬氣氛圍下向(2S)-2-{[(4-{3-碘-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(100 mg，0.19 mmol，1.00當量)及3-氯-2-氟苯胺(27 mg，0.19 mmol，1.00當量)於DMF (2.00 mL)中之攪拌混合物中添加EPhos Pd G4 (17 mg，0.02 mmol，0.10當量)及Cs 2CO 3(182 mg，0.56 mmol，3.00當量)。所得懸浮液用氬氣回填三次且在50℃下攪拌2小時。LCMS確認反應完成且觀察到所需產物。所得混合物藉由矽膠墊過濾，且濾餅用DCM (2 x 10 mL)洗滌。在減壓下濃縮濾液，藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (20:1)溶離得到呈黃色固體狀之(2S)-2-{[(4-{3-[(3-氯-2-氟苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(73 mg，70.68%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：556.2。
153.2. 合成 3-[(3- 氯 -2- 氟苯基 ) 胺基 ]-2-{3-[(2S)- 吡咯啶 -2- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 }-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1941
在0℃下在氮氣氛圍下向(2S)-2-{[(4-{3-[(3-氯-2-氟苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(73 mg，0.13 mmol)於DCM (3.00 mL)中之攪拌混合物中添加TFA (1.50 mL)。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮得到呈紅色油狀物之3-[(3-氯-2-氟苯基)胺基]-2-{3-[(2S)-吡咯啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(59 mg，粗品)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：456.10。
153.3. 合成 3-[(3- 氯 -2- 氟苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{[(2S)-1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 吡咯啶 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1943
將3-[(3-氯-2-氟苯基)胺基]-2-{3-[(2S)-吡咯啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(59 mg，0.13 mmol，1.00當量)於THF (1.50 mL)中之溶液用NaHCO 3(水溶液)鹼化至pH為8 (1.5 mL)。在0℃下逐滴添加丙烯醯氯(12 mg，0.13 mmol，1.00當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。在0℃下將飽和水溶液NaHCO 3(5 mL)添加至反應混合物中且用EtOAc (3 x 5 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。在減壓下濃縮濾液得到粗產物(70 mg)，藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep C18 OBD管柱，30*100 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：25% B至43% B/9 min, 43% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：9.67；運行次數：0)，得到呈淡黃色固體狀之3-[(3-氯-2-氟苯基)胺基]-2-(3-{[(2S)-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(14.2 mg，20.98%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：510.10。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d): δ 11.63 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.93 (d, 1H), 7.52 - 7.47 (m, 2H), 6.78(t, 1H), 6.65 - 6.54 (m, 2H), 6.42 - 6.37(m, 1H), 6.28 - 6.24 (m, 1H), 5.81 - 5.78 (m, 1H), 5.32 (s, 1H), 5.09 - 5.04 (m, 1H), 4.27 (t, 1H), 4.12 - 4.09 (m, 1H), 3.78 - 3.74 (m, 2H), 3.64 - 3.61 (m, 2H), 3.25 - 3.21 (m, 2H), 2.17 - 2.13 (m, 3H), 1.95 - 1.83 (m, 1H)。
實例 154.3-[(2-氯-3-氟苯基)胺基]-2-(3-{[(2S)-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 278)
154.1. 合成 (2S)-2-{[(4-{3-[(2- 氯 -3- 氟苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 } 吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1945
向(2S)-2-{[(4-{3-碘-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(150 mg，0.27 mmol，1.00當量)及2-氯-3-氟苯胺(40 mg，0.27 mmol，1.00當量)於DMF (1.50 mL)中之攪拌溶液中添加EPhos Pd G4 (51 mg，0.056 mmol，0.20當量)及Cs 2CO 3(181 mg，0.55 mmol，2.00當量)。所得懸浮液用氬氣回填三次且在50℃下攪拌2小時。LCMS確認反應完成且觀察到所需產物。所得混合物藉由矽膠墊過濾，且濾餅用DCM (2 x 10 mL)洗滌。在減壓下濃縮濾液，藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (10:1)溶離得到呈黃色油狀物之(2S)-2-{[(4-{3-[(2-氯-3-氟苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(75 mg，48.41%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：556.10。
154.2. 合成 3-[(2- 氯 -3- 氟苯基 ) 胺基 ]-2-{3-[(2S)- 吡咯啶 -2- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 }-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1947
在0℃下向(2S)-2-{[(4-{3-[(2-氯-3-氟苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(55 mg，0.10 mmol)於DCM (3.00 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加TFA (1.50 mL)。將所得混合物攪拌2小時且在減壓下濃縮得到呈紅色油狀物之3-[(2-氯-3-氟苯基)胺基]-2-{3-[(2S)-吡咯啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(45 mg，粗品)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：456.00。
154.3. 合成 3-[(2- 氯 -3- 氟苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{[(2S)-1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 吡咯啶 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1949
在0℃下向3-[(2-氯-3-氟苯基)胺基]-2-{3-[(2S)-吡咯啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(45 mg，0.10mmol, 1.00當量)及NaHCO 3(飽和) (1.00 mL)於THF (1.00 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加丙烯醯氯(10 mg，0.11 mmol，1.20當量)。所得混合物用EtOAc (3 x 5 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(1 x10 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。粗產物(50 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep C18 OBD管柱，30*100 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：20% B至45% B/9 min, 45% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：9.67；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之3-[(2-氯-3-氟苯基)胺基]-2-(3-{[(2S)-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(9.1 mg，17.90%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：510.10。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 11.60 (s, 1H), 8.22 (s, 1H), 7.94 (d, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.42 (d, 1H), 6.82 - 6.75 (m, 1H), 6.60- 6.51 (m, 2H), 6.43 -6.36 (m, 1H), 6.21 -6.17 (m, 1H), 5.81 - 5.77 (m, 1H), 5.26 (s, 1H), 5.04 (t, 1H), 4.26 (t, 1H), 4.13 - 4.09 (m, 1H), 3.76 - 3.74 (m, 2H), 3.63 - 3.60 (m, 2H), 3.25 - 3.20 (m, 2H), 2.19 -2.12 (m, 3H), 2.09 - 1.87 (m, 1H)。
實例 155.3-[(3-氯-2-甲基苯基)胺基]-2-(3-{[(2S)-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 276)
155.1. 合成 (2S)-2-{[(4-{3-[(3- 氯 -2- 甲基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 } 吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1951
在氬氣氛圍下向(2S)-2-{[(4-{3-碘-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(100 mg，0.18 mmol，1.00當量)及2-甲基-3-氯苯胺(26 mg，0.18 mmol，1.00當量)於DMF (2.00 mL)中之攪拌混合物中添加Cs 2CO 3(182 mg，0.55 mmol，3.00當量)及Ephos Pd G4 (17 mg，0.02 mmol，0.10當量)。所得懸浮液用氬氣回填三次且在50℃下攪拌2小時。LCMS確認反應完成且觀察到所需產物。所得混合物藉由矽膠墊過濾，且濾餅用DCM (2x10 mL)洗滌。在減壓下濃縮濾液，藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (10:1)溶離得到呈黃色固體狀之(2S)-2-{[(4-{3-[(3-氯-2-甲基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(75 mg，73.14%)。 LC-MS: [M+H] +實驗值552.07。
155.2. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲基苯基 ) 胺基 ]-2-{3-[(2S)- 吡咯啶 -2- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 }-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1953
在室溫下在氮氣氛圍下向(2S)-2-{[(4-{3-[(3-氯-2-甲基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(20 mg，0.04 mmol)於DCM (2.00 mL)中之攪拌混合物中添加TFA (1.00 mL)。將所得混合物攪拌3小時且在減壓下濃縮得到呈紅色油狀物之3-[(3-氯-2-甲基苯基)胺基]-2-{3-[(2S)-吡咯啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(49 mg，粗品)。 LC-MS: [M+H] +實驗值452.2。
155.3. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{[(2S)-1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 吡咯啶 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1955
在0℃下在空氣氛圍下向3-[(3-氯-2-甲基苯基)胺基]-2-{3-[(2S)-吡咯啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(49 mg，0.11 mmol，1.00當量)於四氫呋喃(2.00 mL)及NaHCO 3(水溶液) (2.00 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加丙烯醯氯(10 mg，0.12 mmol，1.10當量)。將所得混合物在室溫下攪拌2小時。所得混合物用DCM (3 x 10 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。粗產物藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep C18 OBD管柱，30*100 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：33% B至55% B/8 min, 55% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：6.32；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲基苯基)胺基]-2-(3-{[(2S)-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(12.8 mg，22.31%)。 LC-MS: [M+H] +實驗值506.10。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 11.46 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.93 (d, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.31 (d, 1H), 6.81 - 6.79 (m, 1H), 6.70 (t, 1H), 6.58 - 6.51 (m, 1H), 6.42 - 6.37 (m, 1H), 6.31-6.29 (d, 1H), 5.79 - 5.76 (m, 1H), 5.22 (s, 1H), 5.04 (t, 1H), 4.25 (t, 1H), 4.11 - 4.08 (m, 1H), 3.75 (t, 2H), 3.62 - 3.58 (m, 2H), 3.23 - 3.19 (m, 2H), 2.51 (s, 3H), 2.17 - 2.12 (m, 3H), 1.87 -1.81 (m, 1H)。
實例 156.2-(3-{2-[(2R)-1-(丁-2-炔醯基)-2-甲基吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 291)
156.1. 合成 (2R)-2-[2-(4-{3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ]-2- 甲基吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1957
在室溫下在氬氣氛圍下向2-(3-溴吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(300 mg，0.69 mmol，1.00當量)及(2R)-2-乙炔基-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(509 mg，2.43 mmol，3.50當量)於DMF (5.00 mL)中之攪拌混合物中添加Pd(dppf)Cl 2DCM (142 mg，0.17 mmol，0.25當量)及CuI (66 mg，0.35 mmol，0.50當量)。將所得混合物在50℃下在氬氣氛圍下攪拌隔夜。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化(管柱，矽膠；移動相，MeCN/水，10%至80%梯度/10 min；偵測器，UV 254 nm)，得到(2R)-2-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(270 mg，粗品)。隨後殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用DCM/MeOH (10:1)溶離得到呈黃色固體狀之(2R)-2-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(250 mg，64.22%)。 LC-MS: [M+H] +實驗值560.20。
156.2. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[(2R)-2- 甲基吡咯啶 -2- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1959
在室溫下在氮氣氛圍下向(2R)-2-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(80 mg，0.14 mmol，1.00當量)於DCM (1.50 mL)中之攪拌混合物中添加TFA (0.50 mL)。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮得到呈紅色油狀物之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R)-2-甲基吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(80 mg，粗品)。 LC-MS: [M+H] +實驗值460.10。
156.3. 合成 2-(3-{2-[(2R)-1-( 丁 -2- 炔醯基 )-2- 甲基吡咯啶 -2- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1961
將3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R)-2-甲基吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(65 mg，0.14 mmol，1.00當量)於THF (1.00 mL)中之溶液用DIEA鹼化至pH為8。在0℃下在氮氣氛圍下向上述混合物中添加2-丁炔酸(18 mg，0.21 mmol，1.50當量)，隨後逐滴添加T 3P (90 mg，0.28 mmol，2.00當量，50%/EA)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。在0℃下將飽和水溶液NaHCO 3(5 mL)添加至反應混合物中且用EtOAc (3 x 5 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。在減壓下濃縮濾液得到粗產物(80 mg)，藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：Xselect  CSH C18 OBD管柱 30*150mm 5μm, n；移動相A：水(0.05%TFA )，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：21% B至47% B/8 min, 47% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之2-(3-{2-[(2R)-1-(丁-2-炔醯基)-2-甲基吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(27.8 mg，37.06%)。 LC-MS: [M+H] +實驗值526.10。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 11.48 (s, 1H), 8.70 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.97 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 6.66 - 6.57 (m, 2H), 6.24 (s, 1H), 6.02 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 4.10 (d, J = 1.6 Hz, 3H), 3.94 - 3.79 (m, 2H), 3.66 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 3.43 - 3.35 (m, 1H), 3.22 - 3.15 (m, 1H), 2.58 - 2.52 (m, 1H), 2.24 - 2.07 (m, 3H), 2.04 (s, 3H), 1.74 (s, 3H)。
實例 157.2-(3-{[(2S)-1-(丁-2-炔醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 290)
157.1. 合成 (2S)-2-{[(4- 溴吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 } 氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1963
在0℃下向4-溴吡啶-3-醇(1.5 g，8.621 mmol，1當量)於THF (50 mL)添加PPh3 (3.39 g，12.93 mmol，1.50當量)及(2S)-2-(羥基甲基)氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(1.78 g，9.48 mmol，1.10當量)中之攪拌溶液中，將混合物在0℃下在氮氣氛圍下攪拌10分鐘。在0℃下逐滴添加DEAD (2.25 g，12.93 mmol，1.50當量)。將混合物在0℃下在氮氣氛圍下攪拌1.5小時。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化(管柱，C18矽膠；移動相，MeCN/水，10%至60%梯度/20 min；偵測器，UV 254 nm)，得到呈黃色油狀物之(2S)-2-{[(4-溴吡啶-3-基)氧基]甲基}氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(2.57 g，86.86%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：344.95。
157.2. 合成 (2S)-2-{[(4-{4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 } 氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1965
在室溫下向(2S)-2-{[(4-溴吡啶-3-基)氧基]甲基}氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(500 mg，1.46 mmol，1.00當量)於1,4-二㗁烷(10.00 mL)中之攪拌溶液中添加XPhos Pd G2 (115 mg，0.15 mmol，0.10當量)、2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(458 mg，1.74 mmol，1.20當量)及Na 2CO 3(464 mg，4.37 mmol，3.00當量)於H 2O (2.00 mL)中。將混合物在50℃下在氬氣氛圍下攪拌2小時。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化(管柱，C18矽膠；移動相，MeCN/水，10%至60%梯度/15 min；偵測器，UV 254 nm)，得到呈棕黃色固體狀之(2S)-2-{[(4-{4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(0.56 g，96.22%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：399.05。
157.3. 合成 (2S)-2-{[(4-{3- 碘 -4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 } 氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1967
在0℃下向(2S)-2-{[(4-{4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(560 mg，1.41 mmol，1.00當量)於DMF (7.00 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加NIS (316 mg，1.41 mmol，1.00當量)。將混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。反應在0℃下用1 mL飽和Na 2SO 3(水溶液)淬滅。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化(管柱，C18矽膠；移動相，MeCN/水，10%至60%梯度/15 min；偵測器，UV 254 nm)，得到呈黃色固體狀之(2S)-2-{[(4-{3-碘-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(550 mg，74.52%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：524.95。
157.4. 合成 (2S)-2-{[(4-{3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 } 氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1969
在室溫下向(2S)-2-{[(4-{3-碘-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(500 mg，0.954 mmol，1.00當量)於DMF (5.00 mL)中之攪拌溶液中添加EPhos Pd G4 (87.59 mg，0.095 mmol，0.10當量)、Cs 2CO 3(932 mg，2.86 mmol，3.00當量)及3-氟-2-甲氧基苯胺(403 mg，2.86 mmol，3.00當量)。將混合物在50℃下在氬氣氛圍下攪拌2小時。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (96:4)溶離得到呈黃色固體狀之(2S)-2-{[(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(500 mg，97.66%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：538.30。
157.5. 合成 2-{3-[(2S)- 氮雜環丁烷 -2- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 }-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1971
在0℃下在氮氣氛圍下向(2S)-2-{[(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(180 mg，0.33 mmol)於DCM (4.00 mL)中之攪拌混合物中添加TFA (2.00 mL)。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮得到呈紅色油狀物之2-{3-[(2S)-氮雜環丁烷-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(260 mg，粗品)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：438.05。
157.6. 合成 2-(3-{[(2S)-1-( 丁 -2- 炔醯基 ) 氮雜環丁烷 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1973
將2-{3-[(2S)-氮雜環丁烷-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(260 mg，0.59 mmol，1.00當量)於THF (5.00 mL)中之溶液用DIEA鹼化至pH為8。在0℃下在氮氣氛圍下向上述混合物中添加2-丁炔酸(75 mg，0.89 mmol，1.50當量)，隨後逐滴添加T 3P (756 mg，1.19 mmol，2.00當量，50%/EA)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。在0℃下將飽和水溶液NaHCO 3(5 mL)添加至反應混合物中且用EtOAc (3 x 5 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。在減壓下濃縮濾液得到粗產物(280 mg)，藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep C18 OBD管柱，30*100 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：20% B至45% B/10 min, 45% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8.85；運行次數：0)，得到呈淡黃色固體狀之2-(3-{[(2S)-1-(丁-2-炔醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(28.0 mg，9.34%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：504.10。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3): δ 11.46 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.96 (d, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.49(d, 1H), 6.59 - 6.51 (m, 1H), 6.49 - 6.46 (m, 1H), 6.04 (d, 1H), 5.20 (s, 1H), 4.98 - 4.88 (m, 1H), 4.50 (t, 1H), 4.28 - 4.24 (m, 3H), 4.10 (s, 3H), 3.60 - 3.56 (m, 2H), 3.21 - 3.17 (m, 1H), 3.09 - 3.05 (m, 1H), 2.69 - 2.57 (m, 1H), 2.14 - 2.12 (m, 1H), 2.04 (s, 3H)。
實例 158.2-(3-{[(2S)-1-(丁-2-炔醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 288)
158.1. 合成 (2S)-2-{[(4-{3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 } 氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1975
在氬氣氛圍下向(2S)-2-{[(4-{3-碘-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(300 mg，0.57 mmol，1.00當量)及3-氯-2-甲氧基苯胺(90 mg，0.57 mmol，1.00當量)於DMF (5.00 mL)中之攪拌混合物中添加EPhos Pd G4 (52 mg，0.05 mmol，0.10當量)及Cs 2CO 3(372 mg，1.14 mmol，2.00當量)。所得懸浮液用氬氣回填三次且在50℃下攪拌2小時。LCMS確認反應完成且觀察到所需產物。所得混合物藉由矽膠墊過濾，且濾餅用DCM (2 x 10 mL)洗滌。在減壓下濃縮濾液，藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (10:1)溶離得到呈米白色固體狀之(2S)-2-{[(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(300 mg，75.71%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值554.1。
158.2. 合成 2-{3-[(2S)- 氮雜環丁烷 -2- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 }-3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1977
在室溫下在氮氣氛圍下向(2S)-2-{[(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(260 mg，0.46 mmol)於DCM (2.00 mL)中之攪拌混合物中添加TFA (2.00 mL)。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮。殘留產物藉由逆相急驟在以下條件下純化(移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：30% B至100% B/45 min;)，得到呈米白色固體狀之2-{3-[(2S)-氮雜環丁烷-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(110 mg，51.64%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值454.15。
158.3. 合成 2-(3-{[(2S)-1-( 丁 -2- 炔醯基 ) 氮雜環丁烷 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1979
在0℃下在氮氣氛圍下向2-{3-[(2S)-氮雜環丁烷-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(50 mg，0.11 mmol，1.00當量)於THF (0.50 mL)中之攪拌溶液中添加DIEA (0.50 mL)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌10分鐘。在0℃下向上述混合物中添加2-丁炔酸(13 mg，0.16 mmol，1.50當量)及T 3P (140 mg，0.22 mmol，2.00當量，50%/EA)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。在0℃下將飽和水溶液NaHCO 3(5 mL)添加至反應混合物中且用EtOAc (3 x 5 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。在減壓下濃縮濾液得到粗產物(70 mg)，藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep OBD C18管柱，30*150 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：32% B至62% B/7 min；波長：254 nm；RT1(min)：6.5；運行次數：0)，得到呈米白色固體狀之2-(3-{[(2S)-1-(丁-2-炔醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(28.9 mg，50.36%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值520.05。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 11.44 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.96 (d, J = 3.00 Hz, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.43 (d, J = 3.00 Hz, 1H), 6.73-6.70 (m, 1H), 6.60 (t, J = 6.00 Hz, 1H), 6.19-6.16 (m, 1H), 5.33 (s, 1H), 4.94 (d, J = 6.00 Hz, 1H), 4.50 (t, J = 9 Hz, 1H), 4.29 - 4.22 (m, 3H), 4.07 (s, 3H), 3.60-3.55 (m, 2H), 3.21 - 3.03 (m, 2H), 2.65 - 2.54 (m, 1H), 2.16 - 2.11 (m, 1H), 2.03 (s, 3H)。
實例 159.2-(3-{[(2R)-1-(丁-2-炔醯基)吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮2,2,2-三氟乙酸鹽 ( 化合物 286)
159.1. 合成 (2R)-2-{[(4-{3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 } 吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1981
在氬氣氛圍下向(2R)-2-{[(4-{3-碘-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(200 mg，0.37 mmol，1.00當量)及3-氟-2-甲氧基苯胺(105 mg，0.74 mmol，2.00當量)於DMF (5.00 mL)中之攪拌混合物中添加Ephos Pd G4 (34 mg，0.04 mmol，0.10當量)及Cs 2CO 3(242 mg，0.74 mmol，2.00當量)。所得懸浮液用氬氣回填三次且在50℃下攪拌2小時。LCMS確認反應完成且觀察到所需產物。所得混合物藉由矽膠墊過濾，且濾餅用DCM (2 x 10 mL)洗滌。在減壓下濃縮濾液，藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (20:1)溶離得到呈黃色固體狀之(2R)-2-{[(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(200 mg，97.60%)。 LC-MS: [M+H] +實驗值552.30。
159.2. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-{3-[(2R)- 吡咯啶 -2- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 }-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1983
在室溫下在氮氣氛圍下向(2R)-2-{[(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(200 mg，0.036 mmol)於DCM (1.00 mL)中之攪拌混合物中添加TFA (0.50 mL)。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮得到呈紅色油狀物之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[(2R)-吡咯啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(120 mg，粗品)。 LC-MS: [M+H] +實驗值452.05。
159.3. 合成 2-(3-{[(2R)-1-( 丁 -2- 炔醯基 ) 吡咯啶 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮 2,2,2- 三氟乙酸鹽
Figure 02_image1985
將3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[(2R)-吡咯啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(77 mg，0.17 mmol，1.00當量)於THF (2.00 mL)中之溶液用DIEA鹼化至pH為8。在0℃下在氮氣氛圍下向上述混合物中添加2-丁炔酸(22 mg，0.26 mmol，1.50當量)，隨後逐滴添加T 3P (108 mg，0.34 mmol，2.00當量，50%/EA)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。在0℃下將飽和水溶液NaHCO 3(5 mL)添加至反應混合物中且用EtOAc (3 x 5 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。在減壓下濃縮濾液得到粗產物(100 mg)，藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：Xselect  CSH C18 OBD管柱 30*150mm 5μm, n；移動相A：水(0.05%TFA )，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：16% B至36% B/8 min, 36% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之2-(3-{[(2R)-1-(丁-2-炔醯基)吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮2,2,2-三氟乙酸鹽(45.6 mg，51.61%)。 LC-MS: [M+H] +實驗值518.45。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 11.71 (s, 1H), 8.56 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.85 (d, 1H), 7.58 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 6.64 - 6.56 (m, 2H), 6.36 (s, 1H), 5.97 - 5.95 (m, 1H), 4.92 (t, 1H), 4.27 (t, J = 10 Hz, 1H), 4.16 - 4.14 (m, 1H), 4.11 (d, 3H), 4.05 - 3.99 (m, 1H), 3.72 - 3.63 (m, 3H), 3.33 - 3.17 (m, 2H), 2.25 - 2.22 (m, 2H), 2.12 - 2.08 (m, 1H), 2.05 (s, 3H), 1.91- 1.88 (m, 1H)。
實例 160.2-(3-{[(2S)-1-(丁-2-炔醯基)吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 285)
160.1. 合成 (2S)-2-{[(4-{3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 } 吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1987
在室溫下在氬氣氛圍下向(2S)-2-{[(4-{3-碘-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(150 mg，0.28 mmol，1.00當量)  and 3-氯-2-甲氧基苯胺(40 mg，0.25 mmol，0.90當量)於DMF (2.00 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加Cs 2CO 3(182 mg，0.56 mmol，2.00當量)及EPhos Pd G4 (26 mg，0.03 mmol，0.10當量)。所得懸浮液用氬氣回填三次且在50℃下攪拌2小時。LCMS確認反應完成且觀察到所需產物。在真空下濃縮所得混合物。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用MeOH/DCM (97:3)溶離得到呈黃綠色固體狀之(2S)-2-{[(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基} 吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(107 mg，64.23%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：567.90。
160.2. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-{3-[(2S)- 吡咯啶 -2- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 }-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1989
在室溫下在氮氣氛圍下向(2S)-2-{[(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(100 mg，0.18 mmol，1.00當量)於DCM (1.00 mL)中之攪拌混合物中添加TFA (0.50 mL)。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮得到呈紅色油狀物之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[(2S)-吡咯啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100 mg，粗品)。 LC-MS: (M+H) +實驗值:468.10。
160.3. 合成 2-(3-{[(2S)-1-( 丁 -2- 炔醯基 ) 吡咯啶 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1991
將3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[(2S)-吡咯啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100 mg，0.21 mmol，1.00當量)於THF (1.5 mL)中之溶液用DIEA鹼化至pH為8。在0℃下在氮氣氛圍下向上述混合物中添加2-丁炔酸(27 mg，0.32 mmol，1.50當量)，隨後逐滴添加T 3P (136 mg，0.43 mmol，2.00當量，50%/EA)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。在0℃下將飽和NaHCO 3水溶液(3.00 mL)添加至反應混合物中且用EtOAc (3 x 5.00 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。在減壓下濃縮濾液得到粗產物(100 mg)，其藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XSelect CSH Fluoro Phenyl, 30*150 mm, 5μm；移動相A：水(0.05%TFA )，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：14% B至44% B/7 min；波長：254 nm；RT1(min)：6.5；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之2-(3-{[(2S)-1-(丁-2-炔醯基)吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(44 mg，38.48%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值:534.10。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 11.66 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.84 (d, 1H), 7.52 (d, 1H), 6.85 - 6.82 (m, 1H), 6.67 (t, 1H), 6.12 - 6.10 (m, 1H), 5.78 (s, 1H), 4.93 (t, 1H), 4.29 - 4.24 (m, 1H), 4.17 - 4.15 (m, 1H), 4.08 - 3.99 (m, 4H), 3.72 - 3.63 (m, 3H), 3.34 - 3.26 (m, 1H), 3.23 - 3.15 (m, 1H), 2.28 - 2.23 (m, 1H), 2.14 - 2.01 (m, 5H), 1.88 (s, 1H)
實例 161.2-(3-{[(2S)-1-(丁-2-炔醯基)吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(2-乙基-3-氟苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 284)
161.1. 合成 (2S)-2-{[(4-{3-[(2- 乙基 -3- 氟苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 } 吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1993
在氬氣氛圍下向(2S)-2-{[(4-{3-碘-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(150 mg，0.28 mmol，1.00當量)及2-乙基-3-氟苯胺(116 mg，0.84 mmol，3.00當量)於DMF (1.00 mL)中之攪拌混合物中添加EPhos Pd G4  (26 mg，0.03 mmol，0.10當量)及Cs 2CO 3(182 mg，0.56 mmol，2.00當量)。所得懸浮液用氬氣回填三次且在50℃下攪拌2小時。LCMS確認反應完成且觀察到所需產物。所得混合物藉由矽膠墊過濾，且濾餅用DCM (2 x 10 mL)洗滌。在減壓下濃縮濾液，藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (15:1)溶離得到呈黃色固體狀之(2S)-2-{[(4-{3-[(2-乙基-3-氟苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基} 吡咯啶 -1-甲酸三級丁酯(150 mg，97.95%)。 LC-MS: [M+H] +實驗值550.00。
161.2. 合成 3-[(2- 乙基 -3- 氟苯基 ) 胺基 ]-2-{3-[(2S)- 吡咯啶 -2- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 }-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1995
在室溫下在氮氣氛圍下向(2S)-2-{[(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(100 mg，0.18 mmol，1.00當量)於DCM (1.00 mL)中之攪拌混合物中添加TFA (0.50 mL)。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮得到呈紅色油狀物之3-[(2-乙基-3-氟苯基)胺基]-2-{3-[(2S)-吡咯啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100 mg，粗品)。 LC-MS: (M+H) +實驗值:450.20。
161.3. 合成 2-(3-{[(2S)-1-( 丁 -2- 炔醯基 ) 吡咯啶 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-3-[(2- 乙基 -3- 氟苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1997
將3-[(2-乙基-3-氟苯基)胺基]-2-{3-[(2S)-吡咯啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100 mg，0.22 mmol，1.00當量)於THF (3.00 mL)中之溶液用DIEA鹼化至pH為8。在0℃下在氮氣氛圍下向上述混合物中添加 2-丁炔酸(28 mg，0.33 mmol，1.50當量)，隨後逐滴添加T 3P (142 mg，0.44 mmol，2.00當量，50%/EA)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。在0℃下將飽和NaHCO 3水溶液(10 mL)添加至反應混合物中且用EtOAc (3 x 10 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。在減壓下濃縮濾液得到粗產物(60 mg)，藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：Xselect  CSH C18 OBD管柱 30*150mm 5μm, n；移動相A：水(0.05%TFA )，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：19% B至43% B/8 min, 43% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之2-(3-{[(2S)-1-(丁-2-炔醯基)吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(2-乙基-3-氟苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(51.2 mg，44.51%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值:516.50。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 11.64 (s, 1H), 8.48 (s, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.74 (d, 1H), 7.28 (d, 1H), 6.72-6.62 (m, 1H), 6.60 (t, 1H), 6.19 (d, 1H), 6.07 (s, 1H), 4.92 (t, 1H), 4.25 (t, 1H), 4.13 (d, 1H), 4.12-4.01 (m, 1H), 3.70 - 3.65 (m, 3H), 3.33 - 3.19 (m, 2H), 2.88-2.80 (m, 2H), 2.35-2.18 (m, 1H), 2.18-2.08 (m,5H),  1.94-1.82 (m, 1H),  1.35 (t, 3H)。
實例 162.3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2R)-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 281)
162.1. 合成 (2R)-2-{[(4-{3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 } 吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1999
在氬氣氛圍下向(2R)-2-{[(4-{3-碘-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(560 mg，1.04 mmol，1.00當量)及3-氟-2-甲氧基苯胺(293 mg，2.08 mmol，2.00當量)於DMF (10.00 mL)中之攪拌混合物中添加Ephos Pd G4 (95 mg，0.10 mmol，0.10當量)及Cs 2CO 3(677 mg，2.08 mmol，2.00當量)。將所得混合物在50℃下在氬氣氛圍下攪拌2小時。所得懸浮液用氬氣回填三次且在50℃下攪拌2小時。LCMS確認反應完成且觀察到所需產物。所得混合物藉由矽膠墊過濾，且濾餅用DCM (2 x 10 mL)洗滌。在減壓下濃縮濾液，藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (10:1)溶離得到呈黃色固體狀之(2R)-2-{[(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(550 mg，95.86%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：552.30。
162.2. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-{3-[(2R)- 吡咯啶 -2- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 }-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2001
在室溫下在氮氣氛圍下向(2R)-2-{[(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(155 mg，0.28 mmol，1.00當量)於DCM (4.00 mL)中之攪拌混合物中添加TFA (2.00 mL)。將所得混合物攪拌2小時且用氮氣乾燥得到呈紅色油狀物之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[(2R)-吡咯啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100 mg，粗品)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：452.20。
162.3. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{[(2R)-1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 吡咯啶 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2003
在0℃下向3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[(2R)-吡咯啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100 mg，0.22 mmol，1.00當量)及NaHCO 3水溶液(2.00 mL)於THF中之攪拌溶液中逐滴添加丙烯醯氯(24 mg，0.26 mmol，1.20當量)。將所得混合物在室溫下攪拌1.5小時。所得混合物用EtOAc (3 x 5 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(1 x 10 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。粗產物(130 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep OBD C18管柱，30*150 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：20% B至43% B/9 min, 43% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8.85；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2R)-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(22.8 mg，20.36%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：506.10。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 11.62 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.93 (d, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.53 (d, 1H), 6.61 - 6.47 (m, 3H), 6.42 - 6.36 (m, 1H), 6.04 (d, 1H), 5.81 - 5.77 (m, 1H), 5.21 (s, 1H), 5.08 - 5.05 (m, 1H), 4.26 (t, 1H), 4.13 - 4.09 (m, 4H), 3.76 (t, 2H), 3.64 - 3.60 (m, 2H), 3.23 (t, 2H), 2.17 - 2.11 (m, 3H), 1.89 - 1.86 (m, 1H)。
實例 163.3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2S)-1-(2-氟丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 296)
163.1. 合成 2-{3-[(2S)- 氮雜環丁烷 -2- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 }-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2005
在0℃下在氮氣氛圍下向(2S)-2-{[(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(120 mg，0.18 mmol)於DCM (4.00 mL)中之攪拌混合物中添加TFA (2.00 mL)。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮得到呈紅色油狀物之2-{3-[(2S)-氮雜環丁烷-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(97 mg，粗品)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：438.05。
163.2. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{[(2S)-1-(2- 氟丙 -2- 烯醯基 ) 氮雜環丁烷 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2007
將2-{3-[(2S)-氮雜環丁烷-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(97 mg，0.223 mmol，1當量)於THF (2.00 mL)中之溶液用DIEA鹼化至pH為8。在0℃下在氮氣氛圍下向上述混合物中添加2-氟丙-2-烯酸(30 mg，0.335 mmol，1.5當量)，隨後逐滴添加T 3P (284 mg，0.89 mmol，4.00當量，50%/EA)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。在0℃下將飽和水溶液NaHCO 3(5 mL)添加至反應混合物中且用EtOAc (3 x 5 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。在減壓下濃縮濾液得到粗產物，藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep OBD C18管柱，30*150 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：32% B至62% B/7 min；波長：254 nm；RT1(min)：6.5；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2S)-1-(2-氟丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(37.6 mg，32.85%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值510.10。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 11.53 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.98 (d, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.51 (d, 1H), 6.75-6.35 (m, 2H), 6.11 - 6.02 (m, 1H), 5.71 - 5.55 (m, 1H), 5.23 - 5.08 (m, 3H), 4.61 - 4.42 (m, 3H), 4.31 - 4.28 (m, 1H), 4.11 (s, 3H), 3.60 (t, 2H), 3.11 (t, 2H), 2.78 - 2.60 (m, 1H), 2.30 - 2.10 (m, 1H)。
實例 164.2-(3-{[(2S)-1-[(2E)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯醯基]氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 2,2,2-三氟乙酸鹽 ( 化合物 295)
164.1. 合成 2-{3-[(2S)- 氮雜環丁烷 -2- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 }-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2009
在0℃下向(2S)-2-{[(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(80 mg，0.15 mmol，1.00當量)於DCM (2.00 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加TFA (1.00 mL)。將混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。藉由LCMS監測反應。LCMS可偵測到所需產物。在氮氣氛圍下濃縮所得混合物得到呈紅色油狀物之2-{3-[(2S)-氮雜環丁烷-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(80 mg，粗品)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：438.05。
164.2. 合成 2-(3-{[(2S)-1-[(2E)-4-( 二甲基胺基 ) 丁 -2- 烯醯基 ] 氮雜環丁烷 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮 2,2,2- 三氟乙酸鹽
Figure 02_image2011
將2-{3-[(2S)-氮雜環丁烷-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(80 mg，0.18 mmol，1.00當量)於THF (2.00 mL)中之溶液用DIEA鹼化至pH為8。在0℃下在氮氣氛圍下向上述混合物中添加(2E)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯酸(47 mg，0.37 mmol，2.00當量)，隨後逐滴添加T 3P (233 mg，0.37 mmol，2.00當量，50%/EA)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌隔夜。在0℃下將飽和水溶液NaHCO 3(5 mL)添加至反應混合物中且用EtOAc (3 x 5 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。在減壓下濃縮濾液得到粗產物(80 mg)，藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：Xselect  CSH C18 OBD管柱 30*150mm 5μm, n；移動相A：水(0.1% TFA)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：8% B至28% B/8 min, 28% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之2-(3-{[(2S)-1-[(2E)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯醯基]氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 2,2,2-三氟乙酸鹽(42.1 mg，34.71%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：549.5。 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 12.08 (s, 1H), 9.97 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.19 (d, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.52 (d, 1H), 7.39 (s, 1H), 6.75 - 6.70 (m, 3H), 6.46 (d, 1H), 6.02 (d, 1H), 4.94 -4.92 (m, 1H), 4.61 (t, 1H), 4.47 (d, 1H), 4.20 (t, 2H), 4.04 (s, 3H), 3.90 (d, 2H), 3.45 (t, 2H), 3.05 (t, 2H), 2.64 (s, 6H), 2.51 - 2.49 (m, 1H), 2.14 - 2.07 (m, 1H)。
實例 165.3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R)-1-(2-氟丙-2-烯醯基)-2-甲基吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 306)
165.1. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[(2R)-2- 甲基吡咯啶 -2- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2013
在0℃下向3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R)-2-甲基吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(80 mg，0.17 mmol，1.00當量)於DCM (1.00 mL)中之攪拌混合物中添加TFA (0.30 mL)。將所得混合物攪拌1小時且用氮氣乾燥得到呈紅色油狀物之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R)-2-甲基吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(80 mg，粗品)。 LC-MS: (M+H) +實驗值:460.20
165.2. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[(2R)-1-(2- 氟丙 -2- 烯醯基 )-2- 甲基吡咯啶 -2- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2015
將3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R)-2-甲基吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(80 mg，0.17 mmol，1.00當量)於THF (1.00 mL)中之溶液用DIEA鹼化至pH為8。在0℃下在氮氣氛圍下向上述混合物中添加2-氟丙-2-烯酸(23 mg，0.26 mmol，1.50當量)，隨後逐滴添加T 3P (111 mg，0.35 mmol，2.00當量，50%/EA)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。在0℃下將飽和水溶液NaHCO 3(5 mL)添加至反應混合物中且用EtOAc (3 x 5 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。濾液在減壓下濃縮得到粗產物。粗產物藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：Xselect  CSH C18 OBD管柱 30*150mm 5μm, n；移動相A：水(0.05%TFA )，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：26% B至44% B/8 min, 44% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8；運行次數：0)，得到呈橘色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R)-1-(2-氟丙-2-烯醯基)-2-甲基吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(24.5 mg，26.45%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值:534.10 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 11.53 (s, 1H), 8.66 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 7.99 (d, 1H), 7.48 (d, 1H), 6.70 - 6.59 (m, 2H), 6.07 (d, 1H), 5.60 - 5.57 (m, 1H), 5.43 - 5.22 (m, 2H), 4.14 (s, 3H), 3.92 - 3.83 (m, 2H), 3.82 - 3.66 (m, 2H), 3.39 - 3.20 (m, 2H), 2.56 - 2.52 (m, 1H), 2.18 - 2.14 (m, 3H), 1.83 (s, 3H)。
實例 166.N-[4-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)-2-甲基丁-3-炔-2-基]丁-2-炔醯胺 ( 化合物 302)
Figure 02_image2017
在室溫下向8 mL小瓶中添加2-[3-(3-胺基-3-甲基丁-1-炔-1-基)吡啶-4-基]-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(75 mg，0.17 mmol，1.00當量)及THF (2.50 mL)。在0℃下向上述混合物中添加DIEA (90 mg，0.69 mmol，4.00當量)及丁-2-炔醯氯(18 mg，0.17 mmol，1.00當量)。所得混合物在室溫下再攪拌1小時。藉由LCMS監測反應。LCMS可偵測到所需產物。所得混合物用CH 2Cl 2/MeOH (10:1,4 x 20mL)萃取。合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。粗產物(102 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep C18 OBD管柱，30*100 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：28% B至48% B/10 min, 48% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：9.67；運行次數：0)，得到呈紅棕色固體狀之N-[4-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)-2-甲基丁-3-炔-2-基]丁-2-炔醯胺(20.8 mg，24.02%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值500.10 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 11.08 (s, 1H), 8.54 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.43 (s, 1H), 6.62 - 6.47 (m, 2H), 6.14 - 6.06 (m, 2H), 5.23 (s, 1H), 4.10 (s, 3H), 3.63 -3.59 (m, 2H), 3.20 (t, 2H), 1.98 (s, 3H), 1.73 (s, 6H)。
實例 167.3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[(1R)-1-[(2R)-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]乙氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 311)
Figure 02_image2019
在-40℃下在氮氣氛圍下向2-{3-[(1R)-1-[(2R)-氮雜環丁烷-2-基]乙氧基]吡啶-4-基}-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(40 mg，0.08 mmol，1.00當量)於DCM (1.00 mL)中之攪拌溶液中添加DIEA (57 mg，0.44 mmol，5.00當量)及丙-2-烯酸丙-2-烯醯基酯(16 mg，0.13 mmol，1.50當量)。將所得混合物在-40℃下在氮氣氛圍下攪拌1小時。在-40℃下藉由添加NaHCO 3水溶液(1 mL)淬滅反應。所得混合物用EtOAc (3 x 5mL)萃取。合併之有機層用鹽水(2 x 10 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。粗產物(50 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep OBD C18管柱，30*150 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：27% B至43% B/9 min, 43% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：9；運行次數：0)，得到呈米白色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[(1R)-1-[(2R)-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]乙氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(11 mg，24.44%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值506.1。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 11.85 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 6.59-6.53 (m, 1H), 6.46 (t, 1H), 6.39 - 6.35 (m, 1H), 6.27-6.20 (m, 1H), 6.04 (d, 1H), 5.76 (d, 1H), 5.18 (s, 1H), 4.96 - 4.94 (m, 1H), 4.75 - 4.69 (m, 1H), 4.36 - 4.32 (m, 1H), 4.22 - 4.16 (m, 1H), 4.09 (s, 3H), 3.62 - 3.60 (m, 2H), 3.18 - 3.06 (m, 2H), 2.71 - 2.67 (m, 1H), 2.11 (s, 1H), 1.35 (d, 3H)。
實例 168.2-{3-[(1R)-1-[(2R)-1-(丁-2-炔醯基)氮雜環丁烷-2-基]乙氧基]吡啶-4-基}-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 312)
168.1. 合成 2-[(1R)-1-[(4- 溴吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 乙基 ] 氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2021
在0℃下在氮氣氛圍下向(2S)-2-[(1S)-1-羥基乙基]氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(730 mg，3.62 mmol，1.00當量)及4-溴吡啶-3-醇(631 mg，3.62 mmol，1.00當量)於THF (7.00 mL)中之攪拌混合物中添加PPh 3(1.43 g，5.44 mmol，1.50當量)。將所得混合物在0℃下在氮氣氛圍下攪拌5分鐘。在0℃下向上述混合物中逐滴添加DEAD (947 mg，5.44 mmol，1.50當量)。將所得混合物在0℃下再攪拌3小時。藉由LCMS監測反應。LCMS顯示反應完成。將所得混合物在減壓下濃縮。粗產物藉由逆相急驟在以下條件下純化(移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；梯度：0% B至100% B/50 min)，得到呈無色油狀物之2-[(1R)-1-[(4-溴吡啶-3-基)氧基]乙基]氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(250 mg，19.29%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值359.1。
168.2. 合成 (2R)-2-[(1R)-1-[(4-{4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 乙基 ] 氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2023
在室溫下在氮氣氛圍下向2-[(1R)-1-[(4-溴吡啶-3-基)氧基]乙基]氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(250 mg，0.70 mmol，1.00當量)及2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(220 mg，0.84 mmol，1.20當量)於1,4-二㗁烷(3.00 mL)及H 2O (0.60 mL)中之攪拌混合物中添加Pd(DtBPF)Cl 2(45 mg，0.07 mmol，0.10當量)及Na 2CO 3(222 mg，2.10 mmol，3.00當量)。將所得混合物在50℃下再攪拌2小時。藉由LCMS監測反應。LCMS顯示反應完成。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (10:1)溶離得到呈黃色固體狀之(2R)-2-[(1R)-1-[(4-{4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]乙基]氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(270 mg，93.54%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值413.05。
168.3. 合成 (2R)-2-[(1R)-1-[(4-{3- 碘 -4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 乙基 ] 氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2025
在0℃下在氮氣氛圍下向(2R)-2-[(1R)-1-[(4-{4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]乙基]氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(270 mg，0.65 mmol，1.00當量)於DMF (5.00 mL)中之攪拌溶液中分批添加N-碘琥珀醯亞胺(161 mg，0.72 mmol，1.10當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1.5小時。藉由LCMS監測反應。LCMS顯示反應完成。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/ MeOH (10:1)溶離得到呈黃色固體狀之(2R)-2-[(1R)-1-[(4-{3-碘-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]乙基]氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(310 mg，87.97%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值539.00。
168.4. 合成 (2R)-2-[(1R)-1-[(4-{3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 乙基 ] 氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2027
在室溫下在氬氣氛圍下向(2R)-2-[(1R)-1-[(4-{3-碘-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]乙基]氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(310 mg，0.57 mmol，1.00當量)及3-氟-2-甲氧基苯胺(243 mg，1.72 mmol，3.00當量)於DMF (6.00 mL)中之攪拌混合物中添加EPhos Pd G4 (52 mg，0.05 mmol，0.10當量)及Cs 2CO 3(375 mg，1.15 mmol，2.00當量)。所得懸浮液用氬氣回填三次且在50℃下攪拌2小時。LCMS確認反應完成且觀察到所需產物。所得混合物藉由矽膠墊過濾，且濾餅用DMF (2 x 0.50 mL)洗滌。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (10:1)溶離得到呈棕色固體狀之(2R)-2-[(1R)-1-[(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]乙基]氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(250 mg，78.71%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值552.15。
168.5. 合成 2-{3-[(1R)-1-[(2R)- 氮雜環丁烷 -2- 基 ] 乙氧基 ] 吡啶 -4- 基 }-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2029
在0℃下在氮氣氛圍下向(2R)-2-[(1R)-1-[(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]乙基]氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(250 mg，0.45 mmol，1.00當量)於DCM (3.00 mL)中之攪拌溶液中添加TFA (1.00 mL)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。將所得混合物在減壓下濃縮。粗產物藉由逆相急驟在以下條件下純化(移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；梯度：0% B至100% B/50 min)，得到呈米白色固體狀之2-{3-[(1R)-1-[(2R)-氮雜環丁烷-2-基]乙氧基]吡啶-4-基}-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(120 mg，58.64%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值452.05。
168.6. 合成 2-{3-[(1R)-1-[(2R)-1-( 丁 -2- 炔醯基 ) 氮雜環丁烷 -2- 基 ] 乙氧基 ] 吡啶 -4- 基 }-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2031
在0℃下在氮氣氛圍下向2-{3-[(1R)-1-[(2R)-氮雜環丁烷-2-基]乙氧基]吡啶-4-基}-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(80 mg，0.17 mmol，1.00當量)於THF (0.50 mL)中之攪拌溶液中添加DIEA (0.50 mL)。將所得混合物在0℃下在氮氣氛圍下攪拌10分鐘。在0℃下向上述混合物中逐滴添加2-丁炔酸(22 mg，0.26 mmol，1.50當量)及T 3P (563 mg，0.88 mmol，5.00當量，50%/EA)。所得混合物在室溫下再攪拌1小時。在0℃下將飽和NaHCO 3水溶液(10 mL)添加至反應混合物中且用EtOAc (3 x 10 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。粗產物(100 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：YMC-Actus Triart C18 ExRS, 30*150 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：25% B至49% B/9 min, 49% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8.85；運行次數：0)，得到呈米白色固體狀之2-{3-[(1R)-1-[(2R)-1-(丁-2-炔醯基)氮雜環丁烷-2-基]乙氧基]吡啶-4-基}-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(27 mg，29.18%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值518.15。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 11.47 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.51-7.46 (m, 2H), 6.56 - 6.43 (m, 2H), 6.02 (d, 1H), 5.21 (s, 1H), 4.96 - 4.92 (m, 1H), 4.63-4.61 (m, 1H), 4.23 (t, 2H), 4.09 (d, 3H), 3.60-3.56 (m, 2H), 3.18-3.14 (m, 1H), 3.04-2.98 (m, 1H), 2.70-2.66 (m, 1H), 2.12-2.07 (m, 1H), 2.02 (s, 3H), 1.32 (d, 3H)。
實例 169.rel-N-[(3R)-3-[2-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]氧雜環戊烷-3-基]丙-2-烯醯胺 ( 化合物 323)
169.1. 合成 N-{3-[2-(4-{3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ] 氧雜環戊烷 -3- 基 } 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2033
在室溫下在Ar氛圍下向3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(350 mg，0.70 mmol，1.00當量)及Pd(dppf)Cl 2 .CH 2Cl 2(144 mg，0.17 mmol，0.25當量)及CuI (67 mg，0.35 mmol，0.50當量)於DMF (3.00 mL)中之攪拌溶液中添加N-(3-乙炔基氧雜環戊烷-3-基)胺基甲酸三級丁酯(373 mg，1.76 mmol，2.50當量)及DIEA (457 mg，3.53 mmol，5.00當量)。將所得混合物在50℃下在Ar氛圍下於密封管中攪拌2小時。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化(管柱，C18矽膠；移動相，MeCN/水，10%至80%梯度/30 min；偵測器，UV 254 nm)，得到呈黃色固體狀之N-{3-[2-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]氧雜環戊烷-3-基}胺基甲酸三級丁酯(270 mg，66.02%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：578.15。
169.2. 合成 2-{3-[2-(3- 胺基氧雜環戊烷 -3- 基 ) 乙炔基 ] 吡啶 -4- 基 }-3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2035
在0℃下向N-{3-[2-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]氧雜環戊烷-3-基}胺基甲酸三級丁酯(240 mg，0.41 mmol，1當量)於DCM (2.00 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加TFA (2.00 mL)。將所得混合物在室溫下攪拌2小時。對所得混合物進行處理且用氮氣乾燥。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化(管柱，C18矽膠；移動相，MeOH/水，10%至60%梯度/10 min；偵測器，UV 254 nm)，得到呈黃色固體狀之2-{3-[2-(3-胺基氧雜環戊烷-3-基)乙炔基]吡啶-4-基}-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(130 mg，65.51%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：478.05。
169.3. 合成 N-{3-[2-(4-{3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ] 氧雜環戊烷 -3- 基 } 丙 -2- 烯醯胺
Figure 02_image2037
在0℃下向2-{3-[2-(3-胺基氧雜環戊烷-3-基)乙炔基]吡啶-4-基}-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(125 mg，0.26 mmol，1.00當量)及DIEA (169 mg，1.31 mmol，5.00當量)於THF (2.50 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加丙烯醯氯(35 mg，0.39 mmol，1.50當量)於THF (0.50 mL)中。水層用EtOAc (3 x 5 mL)萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物隨後藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：Xselect CSH C18 OBD管柱 30*150mm 5μm, n；移動相A：水(0.05% TFA)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：16% B至36% B/10 min, 36% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：9；運行次數：0)，得到呈橘色固體狀之N-{3-[2-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]氧雜環戊烷-3-基}丙-2-烯醯胺(40 mg，28.75%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：532.1。
169.4. 合成 rel-N-[(3R)-3-[2-(4-{3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ] 氧雜環戊烷 -3- 基 ] 丙 -2- 烯醯胺
Figure 02_image2039
外消旋產物(40 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：CHIRALPAK IF, 2*25 cm, 5 μm；流動速率：20 mL/min；梯度：15% B至15% B/27 min；波長：220/254 nm；RT1(min)：23.53；RT2(min)：29.97；注入體積：0.875 mL；運行次數：4)，得到呈橘色固體狀之rel-N-[(3R)-3-[2-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]氧雜環戊烷-3-基]丙-2-烯醯胺(6.8 mg，16.91%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：532.05。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 11.37 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.10 - 7.99 (m, 2H), 7.40 (d, 1H), 6.82 - 6.79 (m, 1H), 6.67 - 6.60 (m, 2H), 6.37 - 6.32 (m, 1H), 6.25 - 6.18 (m, 2H), 5.78 - 5.76 (m, 1H), 5.38 (s, 1H), 4.20 (d, 1H), 4.21 - 4.07 (m, 6H), 3.68 - 3.64 (m, 2H), 3.28 (t, 2H), 2.64 - 2.57 (m, 2H)。
實例 170.rel-N-[(3R)-3-[2-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]氧雜環戊烷-3-基]丙-2-烯醯胺 ( 化合物 322)
Figure 02_image2041
外消旋產物(40 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：CHIRALPAK IF, 2*25 cm, 5 μm；流動速率：20 mL/min；梯度：15% B至15% B/27 min；波長：220/254 nm；RT1(min)：23.53；RT2(min)：29.97；注入體積：0.875 mL；運行次數：4)，得到呈橘色固體狀之rel-N-[(3R)-3-[2-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]氧雜環戊烷-3-基]丙-2-烯醯胺(9.3 mg，23.13%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：532.05。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 11.46 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.96 (d, 1H), 7.37 (d, 1H), 6.85 - 6.83 (m, 2H), 6.67 (t, 1H), 6.33 - 6.19 (m, 3H), 5.77 (d, 1H), 5.33 (s, 1H), 4.20 (d, 1H), 4.11 - 4.08 (m, 6H), 3.68 - 3.65 (m, 2H), 3.31 (t, 2H), 2.62 (t, 2H)。
實例 171.rel-N-[(3R)-3-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]氧雜環戊烷-3-基]丙-2-烯醯胺 ( 化合物 321)
171.1. 合成 N-{3-[2-(4-{3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ] 氧雜環戊烷 -3- 基 } 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2043
在室溫下在Ar氛圍下向3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(330 mg，0.69 mmol，1.00當量)及Pd(dppf)Cl 2 .CH 2Cl 2(140 mg，0.17 mmol，0.25當量)及CuI (65 mg，0.34 mmol，0.50當量)於DMF (3.00 mL)中之攪拌溶液中添加N-(3-乙炔基氧雜環戊烷-3-基)胺基甲酸三級丁酯(349 mg，1.65 mmol，2.40當量)及DIEA (445 mg，3.45 mmol，5.00當量)。將所得混合物在50℃下在Ar氛圍下於密封管中攪拌2小時。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化(管柱，C18矽膠；移動相，MeCN/水，10%至80%梯度/30 min；偵測器，UV 254 nm)，得到呈黃色固體狀之N-{3-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]氧雜環戊烷-3-基}胺基甲酸三級丁酯(320 mg，82.58%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：562.20。
171.2. 合成 2-{3-[2-(3- 胺基氧雜環戊烷 -3- 基 ) 乙炔基 ] 吡啶 -4- 基 }-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2045
在0℃下向N-{3-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]氧雜環戊烷-3-基}胺基甲酸三級丁酯(310 mg，0.55 mmol，1.00當量)於DCM (3.00 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加TFA (3.00 mL)。將所得混合物在室溫下攪拌2小時。對所得混合物進行處理且用氮氣乾燥。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化(管柱，C18矽膠；移動相，MeOH/水，10%至60%梯度/10 min；偵測器，UV 254 nm)，得到呈黃色固體狀之2-{3-[2-(3-胺基氧雜環戊烷-3-基)乙炔基]吡啶-4-基}-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(190 mg，74.59%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：462.10。
171.3. 合成 N-{3-[2-(4-{3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ] 氧雜環戊烷 -3- 基 } 丙 -2- 烯醯胺
Figure 02_image2047
在0℃下向2-{3-[2-(3-胺基氧雜環戊烷-3-基)乙炔基]吡啶-4-基}-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(170 mg，0.36 mmol，1.00當量)及DIEA (238 mg，1.84 mmol，5.00當量)於THF (2.50 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加丙烯醯氯(66 mg，0.73 mmol，2.00當量)/THF (0.50 mL)。水層用EtOAc (3 x 5 mL)萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (10:1)溶離得到呈黃色固體狀之N-{3-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]氧雜環戊烷-3-基}丙-2-烯醯胺(120 mg)。產物(120 mg)隨後藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XSelect CSH Fluoro Phenyl, 30*150 mm, 5μm；移動相A：水(0.1%FA)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：12% B至32% B/13 min, 32% B；波長：254 nm；RT1(min)：12.4；運行次數：0)，得到呈橘色固體狀之N-{3-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]氧雜環戊烷-3-基}丙-2-烯醯胺(80 mg，42.13%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：516.2。
171.4. 合成 rel-N-[(3R)-3-[2-(4-{3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ] 氧雜環戊烷 -3- 基 ] 丙 -2- 烯醯胺
Figure 02_image2049
外消旋產物(80 mg)藉由對掌性製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：CHIRALPAK IF, 2*25 cm, 5 μm；流動速率：20 mL/min；梯度：15% B至15% B/27 min；波長：220/254 nm；RT1(min)：23.53；RT2(min)：29.97；注入體積：0.875 mL；運行次數：4)，得到呈黃色固體狀之rel-N-[(3R)-3-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]氧雜環戊烷-3-基]丙-2-烯醯胺(20.8 mg，26.00%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：516.10。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 11.22 (s, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.13 (d, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.46 (d, 1H), 6.60 - 6.56 (m, 1H), 6.53 - 6.46 (m, 1H), 6.42 - 6.32 (m, 2H), 6.22 - 6.08 (m, 2H), 5.78 - 5.74 (m, 1H), 5.31 (s, 1H), 4.20 (d, 1H), 4.10 - 4.04 (m, 6H), 3.65 -3.61 (m, 2H), 3.24 (t, 2H), 2.63 - 2.55 (m, 2H)。
實例 172.rel-N-[(3R)-3-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]氧雜環戊烷-3-基]丙-2-烯醯胺 ( 化合物 320)
Figure 02_image2051
外消旋產物(80 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：CHIRALPAK IF, 2*25 cm, 5 μm；流動速率：20 mL/min；梯度：15% B至15% B/27 min；波長：220/254 nm；RT1(min)：23.53；RT2(min)：29.97；注入體積：0.875 mL；運行次數：4)，得到呈黃色固體狀之rel-N-[(3R)-3-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]氧雜環戊烷-3-基]丙-2-烯醯胺(23.3 mg，29.13%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：516.10。 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 11.39 (s, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 8.02 (d, 1H), 7.44 (d, 1H), 6.70 - 6.53 (m, 3H), 6.37 - 6.19 (m, 2H), 6.07 (d, 1H), 5.77 (d, 1H), 5.35 (s, 1H), 4.20 (d, 1H), 4.12 - 4.06 (m, 6H), 3.66 (t, 2H), 3.29 (t, 2H), 2.61 (t, 2H)。
實例 173.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[2-(丙-2-烯醯基)-2-氮雜雙環[2.1.1]己烷-1-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 319)
173.1. 合成 1-[2-(4-{3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ]-2- 氮雜雙環 [2.1.1] 己烷 -2- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2053
在室溫下在氬氣氛圍下向3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(240 mg，0.49 mmol，1.00當量)及1-乙炔基-2-氮雜雙環[2.1.1]己烷-2-甲酸三級丁酯(201 mg，0.97 mmol，2.00當量)於DMF (4.00 mL)中之攪拌混合物中添加Pd(dppf)Cl 2 .CH 2Cl 2(99 mg，0.12 mmol，0.25當量)、DIEA (188 mg，1.46 mmol，3.00當量)及CuI (46 mg，0.24 mmol，0.50當量)。所得懸浮液用氬氣回填三次且在50℃下攪拌2小時。LCMS確認反應完成且觀察到所需產物。所得混合物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化：管柱，C18矽膠；移動相，MeCN/水，10%至60%梯度/10 min；偵測器，UV 254 nm。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (20:1)溶離得到呈黃色固體狀之1-[2-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-2-氮雜雙環[2.1.1]己烷-2-甲酸三級丁酯(190 mg，68.22%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：574.15。
173.2. 合成 2-[3-(2-{2- 氮雜雙環 [2.1.1] 己烷 -1- 基 } 乙炔基 ) 吡啶 -4- 基 ]-3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2055
在0℃下在氮氣氛圍下向1-[2-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-2-氮雜雙環[2.1.1]己烷-2-甲酸三級丁酯(170 mg，0.29 mmol，1.00當量)及2,6-二甲吡啶(793 mg，7.40 mmol，25.00當量)於DCM (5.00 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加TMSOTf (2.90 mL，1.48 mmol，5.00當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌3小時。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化：管柱，C18矽膠；移動相，MeCN/水，10%至50%梯度/10 min；偵測器，UV 254 nm。此產生呈黃色固體狀之2-[3-(2-{2-氮雜雙環[2.1.1]己烷-1-基}乙炔基)吡啶-4-基]-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(130 mg，92.62%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：474.00
173.3. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[2-( 丙 -2- 烯醯基 )-2- 氮雜雙環 [2.1.1] 己烷 -1- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2057
在0℃下在氮氣氛圍下向2-[3-(2-{2-氮雜雙環[2.1.1]己烷-1-基}乙炔基)吡啶-4-基]-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(110 mg，0.23 mmol，1.00當量)及DIEA (150 mg，1.16 mmol，5.00當量)於DCM (5.00 mL)中之攪拌混合物中逐滴添加丙-2-烯酸丙-2-烯醯基酯(59 mg，0.46 mmol，2.00當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (20:1)溶離得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[2-(丙-2-烯醯基)-2-氮雜雙環[2.1.1]己烷-1-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(30 mg，粗品)。殘留物藉由乙腈 (5 mL)濕磨來純化得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[2-(丙-2-烯醯基)-2-氮雜雙環[2.1.1]己烷-1-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(25.1 mg，19.99%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：528.05 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 11.53 (s, 1H), 8.61 (s, 1H), 8.14 (d, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.42 (d, 1H), 6.76 - 6.67 (m, 1H), 6.65 - 6.53 (m, 1H), 6.53 - 6.37 (m, 2H), 6.29 - 6.18 (m, 1H), 5.86 - 5.75 (m, 1H), 5.24 (s, 1H), 4.07 (s, 3H), 3.68 (s, 2H), 3.62 - 3.51 (m, 2H), 3.07 (t, 2H), 2.96 (t, 1H), 2.46 - 2.32 (m, 2H), 2.00 - 1.92 (m, 2H)。
實例 174.3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[2-(丙-2-烯醯基)-2-氮雜雙環[2.1.1]己烷-1-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 318)
174.1. 合成 1-[2-(4-{3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ]-2- 氮雜雙環 [2.1.1] 己烷 -2- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2059
在室溫下在氮氣氛圍下向3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(200 mg，0.42 mmol，1.00當量)及CuI (39 mg，0.21 mmol，0.50當量)、Pd(dppf)Cl 2 .CH 2Cl 2(85 mg，0.10 mmol，0.25當量)於DMF (2.00 mL)中之攪拌混合物中添加1-乙炔基-2-氮雜雙環[2.1.1]己烷-2-甲酸三級丁酯(173 mg，0.84 mmol，2.00當量)及DIEA (162 mg，1.25 mmol，3.00當量)。所得懸浮液用氬氣回填三次且在50℃下攪拌2小時。LCMS確認反應完成且觀察到所需產物。所得混合物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化(管柱，C18矽膠；移動相，MeCN/水，10%至50%梯度/10 min；偵測器，UV 254 nm)，得到呈黃色固體狀之1-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-2-氮雜雙環[2.1.1]己烷-2-甲酸三級丁酯(150 mg，64.33%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：558.15。
174.2. 合成 2-[3-(2-{2- 氮雜雙環 [2.1.1] 己烷 -1- 基 } 乙炔基 ) 吡啶 -4- 基 ]-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2061
在0℃下在氮氣氛圍下向2,6-二甲基吡啶(480 mg，4.47 mmol，25.00當量)及1-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-2-氮雜雙環[2.1.1]己烷-2-甲酸三級丁酯(100 mg，0.18 mmol，1.00當量)於DCM (4.00 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加TMSOTf (0.20 mL，0.90 mmol，5.00當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌4小時。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (10:1)溶離得到呈黃色固體狀之2-[3-(2-{2-氮雜雙環[2.1.1]己烷-1-基}乙炔基)吡啶-4-基]-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(80 mg，97.51%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：458.05
174.3. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[2-( 丙 -2- 烯醯基 )-2- 氮雜雙環 [2.1.1] 己烷 -1- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2063
在0℃下在氮氣氛圍下向2-[3-(2-{2-氮雜雙環[2.1.1]己烷-1-基}乙炔基)吡啶-4-基]-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(70 mg，0.15 mmol，1.00當量)於THF (0.50 mL)及DIEA (39 mg，0.30 mmol，2.00當量)中之攪拌混合物中逐滴添加丙烯醯氯(13 mg，0.15 mmol，1.00當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌2小時。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (20:1)溶離得到粗產物。粗產物(100 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep C18 OBD管柱，30*100 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：34% B至58% B/10 min, 58% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：7.53；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[2-(丙-2-烯醯基)-2-氮雜雙環[2.1.1]己烷-1-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(6.1 mg，7.72%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：512.05 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 11.55 (s, 1H), 8.61 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 6.61 - 6.57 (m, 1H), 6.55 - 6.40 (m, 3H), 6.10 (d, 1H), 5.86 - 5.76 (m, 1H), 5.20 (s, 1H), 4.10 (s, 3H), 3.68 (s, 2H), 3.61 - 3.42 (m, 2H), 3.08 (t, 2H), 2.96 (d, 1H), 2.39 (d, 2H), 2.00 - 1.91 (m, 2H)。
實例 175.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-[3-(3-氟-3-甲基丁-1-炔-1-基)吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 489)
175.1. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-[3-(3- 羥基 -3- 甲基丁 -1- 炔 -1- 基 ) 吡啶 -4- 基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2065
在室溫下在氬氣氛圍下向3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100.00 mg，0.20 mmol，1.00當量)及2-甲基-3-丁炔-2-醇(85.02 mg，1.01 mmol，5.00當量)於DMF (2 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加Pd(dppf)Cl 2·CH 2Cl 2(82.33 mg，0.10 mmol，0.50當量)及DIEA (0.50 mL，2.87 mmol，14.35當量)。將所得混合物在50℃下在氬氣氛圍下攪拌2小時。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化(管柱：C18矽膠；移動相，ACN/水，10%至50%梯度/10 min；偵測器，UV 254 nm)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-[3-(3-羥基-3-甲基丁-1-炔-1-基)吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(85.00 mg，94.44%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值451.0。
175.2. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-[3-(3- 氟 -3- 甲基丁 -1- 炔 -1- 基 ) 吡啶 -4- 基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2067
在0℃下在N 2氛圍下向3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-[3-(3-羥基-3-甲基丁-1-炔-1-基)吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(66.00 mg，0.15 mmol，1.00當量)於DCM (5.00 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加BAST (64.76 mg，0.29 mmol，2.00當量)。將所得混合物在0℃下在N 2氛圍下攪拌1小時。在真空下濃縮所得混合物且溶解於DMF中。粗產物(60.00 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：Xselect CSH F-Phenyl OBD管柱，19*250 mm, 5 μm；移動相A：水(0.05%FA)，移動相B：ACN；流動速率：25 mL/min；梯度：35% B至43% B/8 min, 43% B；波長：254 nm；RT1(min)：7.83；運行次數：0)，得到呈橘色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-[3-(3-氟-3-甲基丁-1-炔-1-基)吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(12.10 mg，17.85%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值453.0。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ11.60 (s, 1H), 8.69 (s, 1H), 8.46 (d, J= 5.5 Hz, 1H), 7.58 - 7.30 (m, 2H), 7.17 (s, 1H), 6.64 (d, J= 4.9 Hz, 2H), 6.08 (h, J= 4.2 Hz, 1H), 4.2 (s, 3H), 3.44 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 2.85 (t, J= 6.7 Hz, 2H), 1.70 (d, J= 20.6 Hz, 6H)。
實例 176.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-[2-[(3R)-4-甲基𠰌啉-3-基]乙炔基]吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 493)
176.1. 合成 3-[2-(4-[3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ] 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ] 𠰌 啉 -4- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2069
向40 mL密封管中放置3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(200.00 mg，0.40 mmol，1.00當量)、DMF (5 mL)、CuI (39.00 mg，0.20 mmol，0.50當量)、Pd(dppf)Cl 2(148.00 mg，0.20mmol, 0.50當量)、DIEA (1 mL)、3-乙炔基𠰌啉-4-甲酸三級丁酯(427.00 mg，2.02 mmol，5.00當量)。將所得溶液在50℃下攪拌3小時。藉由LCMS監測反應。過濾所得混合物，用DMF (2x1 mL)洗滌濾餅。在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化(管柱：C18矽膠；移動相，MeOH/水，10%至50%梯度/10 min；偵測器，UV 254 nm)，得到呈黃色固體狀之3-[2-(4-[3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]吡啶-3-基)乙炔基]𠰌啉 -4-甲酸三級丁酯(200.00 mg，70.18%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值578.0。
176.2. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-[3-[2-( 𠰌 啉 -3- 基 ) 乙炔基 ] 吡啶 -4- 基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2071
在室溫下在氮氣氛圍下向3-[2-(4-[3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]吡啶-3-基)乙炔基]𠰌啉-4-甲酸三級丁酯(300.00 mg，0.52 mmol，1.00當量)於DCM (5 mL)中之攪拌混合物中添加TFA (5 mL)。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮得到呈橘色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-[3-[2-(𠰌啉-3-基)乙炔基]吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(220.00 mg，70.96%)。粗產物不經進一步純化直接用於下一步。 LC-MS: (M+H) +實驗值478.0。
176.3. 合成得到 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-[3-[2-(4- 甲基 𠰌 啉 -3- 基 ) 乙炔基 ] 吡啶 -4- 基 ]-1H,5H,6H, 7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2073
向20 mL小瓶中放置3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-[3-[2-(𠰌啉-3-基)乙炔基]吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(125.00 mg，0.26 mmol，1.00當量)、MeOH (4 mL)、HCHO (16.00 mg，0.52 mmol，2.00當量)。將所得溶液攪拌30分鐘。此隨後添加NaBH(AcO) 3(111.00 mg，0.52 mmol，2.00當量)。使所得溶液在室溫下在攪拌下再反應2小時。藉由LCMS監測反應。將所得混合物在減壓下濃縮。粗產物(100.00 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep Amide OBD管柱，19*150 mm, 5 μm 13nm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：25 mL/min；梯度：32% B至33% B/12 min, 33% B；波長：254 nm；RT1(min)：11.48；運行次數：0)，得到呈淡黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-[3-[2-(4-甲基𠰌啉-3-基)乙炔基]吡啶-4-基]-1H,5H,6H, 7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(45.00 mg，34.90%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值492.0。
176.4. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-[2-[(3R)-4- 甲基 𠰌 啉 -3- 基 ] 乙炔基 ] 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2075
粗產物(45.00 mg)藉由製備型對掌性HPLC在以下條件純化(管柱：CHIRALPAK IG, 2*25 cm, 5 μm；移動相A：Hex(0.5% 2M NH 3- MeOH)--HPLC，移動相B：EtOH--HPLC；流動速率：20 mL/min；梯度：50% B至50% B/27 min；波長：254/220 nm；RT1(min)：18.4；RT2(min)：22.98；樣品溶劑：EtOH--HPLC；注入體積：0.4 mL；運行次數：20)，得到呈淡黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-[2-[(3R)-4-甲基𠰌啉-3-基]乙炔基]吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(13.70 mg，30.38%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值492.0。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ11.45 (s, 1H), 8.61 (s, 1H), 8.38 (d, J= 5.3 Hz, 1H), 7.36 (d, J= 5.3 Hz, 1H), 7.27 (s, 1H), 7.10 (t, J= 2.6 Hz, 1H), 6.68 - 6.57 (m, 2H), 6.16 (dd, J= 7.4, 2.3 Hz, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.74 (d, J= 3.6 Hz, 2H), 3.69 - 3.53 (m, 3H), 3.50 (s, 1H), 3.40 (td, J= 6.9, 2.6 Hz, 2H), 2.82 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 2.31 - 2.23 (m, 1H), 2.24 (s, 3H)。
實例 177.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-[2-[(3S)-4-甲基𠰌啉-3-基]乙炔基]吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 494)
Figure 02_image2077
粗產物(45.00 mg)藉由製備型對掌性HPLC在以下條件純化(管柱：CHIRALPAK IG, 2*25 cm, 5 μm；移動相A：Hex(0.5% 2M NH 3-MeOH)--HPLC，移動相B：EtOH--HPLC；流動速率：20 mL/min；梯度：50% B至50% B/27 min；波長：254/220 nm；RT1(min)：18.4；RT2(min)：22.98；樣品溶劑：EtOH--HPLC；注入體積：0.4 mL；運行次數：20)，得到呈淡黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-[2-[(3S)-4-甲基𠰌啉-3-基]乙炔基]吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(15.00 mg，33.17%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值492.0。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ11.44 (s, 1H), 8.61 (s, 1H), 8.38 (d, J= 5.3 Hz, 1H), 7.36 (d, J= 5.3 Hz, 1H), 7.27 (s, 1H), 7.10 (d, J= 2.7 Hz, 1H), 6.68 - 6.57 (m, 2H), 6.16 (dd, J= 7.4, 2.3 Hz, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.74 (d, J= 3.6 Hz, 2H), 3.69 - 3.52 (m, 3H), 3.50 (s, 1H), 3.40 (td, J= 7.0, 2.6 Hz, 2H), 2.82 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 2.31 - 2.19 (m, 1H), 2.24 (s, 3H)。
實例 178.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(3R)-4-(丙-2-烯醯基)𠰌啉-3-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 514)
178.1. 合成 3- 乙炔基 𠰌 啉 -4- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2079
在0℃下在氮氣氛圍下向3-甲醯基𠰌啉-4-甲酸三級丁酯(1.10 g，5.11 mmol，1.00當量)於MeOH (12 mL)中之攪拌溶液中分批添加K 2CO 3(1.42 g，10.22 mmol，2.00當量)。在0℃下向上述混合物中逐滴添加(1-重氮基-2-側氧基丙基)膦酸二甲酯(1.18 g，6.13 mmol，1.20當量)。所得混合物在室溫下再攪拌1小時。TLC可偵測到所需產物。在真空下濃縮所得混合物。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EA (10:1)溶離得到呈無色油狀物之3-乙炔基𠰌啉-4-甲酸三級丁酯(900.00 mg，83.36%)。
178.2. 合成 3-[2-(4-{3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ] 𠰌 啉 -4- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2081
向3-乙炔基𠰌啉-4-甲酸三級丁酯(281 mg，1.33 mmol，3.00當量)及3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(220.00 mg，0.44 mmol，1.00當量)於DMF (3 mL)中之攪拌溶液中添加Pd(dppf)Cl 2·CH 2Cl 2(181.00 mg，0.22 mmol，0.50當量)及CuI (42.00 mg，0.22 mmol，0.50當量)。將所得混合物在50℃下在氮氣氛圍下攪拌1.5小時。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化(管柱：C18矽膠；移動相，ACN/水，10%至50%梯度/30 min；偵測器，UV 254 nm)，得到呈黃色固體狀之3-[2-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]𠰌啉-4-甲酸三級丁酯(130.00s mg，50.57%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值578.1。
178.3. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-{3-[2-( 𠰌 啉 -3- 基 ) 乙炔基 ] 吡啶 -4- 基 }-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2083
在0℃下在氮氣氛圍下向3-[2-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]𠰌啉-4-甲酸三級丁酯(130.00 mg，0.23 mmol，1.00當量)於DCM (2 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加TFA (1 mL)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。將所得混合物在減壓下濃縮。得到粗產物3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[2-(𠰌啉-3-基)乙炔基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(119.00 mg，99.64%)且不經進一步純化直接用於下一步。 LC-MS: (M+H) +實驗值478.0。
178.4. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[4-( 丙 -2- 烯醯基 ) 𠰌 啉 -3- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2085
在0℃下在氮氣氛圍下向3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[2-(𠰌啉-3-基)乙炔基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(120.00 mg，0.19 mmol，1.00當量)於THF (2 mL)中之攪拌溶液中一次性添加NaHCO 3水溶液(2 mL)以鹼化混合物。在0℃下向上述混合物中逐滴添加丙烯醯氯(15.00 mg，0.17 mmol，0.90當量)。將所得混合物在0℃下再攪拌1小時。所得混合物用CH 2Cl 2: MeOH = 10:1 (3 x 20 mL)萃取。合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥。在真空下濃縮所得混合物且溶解於DMSO。粗產物(100.00 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep C18 OBD管柱，19*150 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：20% B至42% B/10 min, 42% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：9.67；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[4-(丙-2-烯醯基)𠰌啉-3-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(50.00 mg，37.43%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值531.9。
178.5. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[(3R)-4-( 丙 -2- 烯醯基 ) 𠰌 啉 -3- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2087
3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[4-(丙-2-烯醯基)𠰌啉-3-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(50.00 mg)藉由對掌性HPLC在以下條件下純化(管柱：CHIRALPAK IG-3, 4.6*50 mm, 3 um；移動相A：Hex(0.1%DEA): EtOH=50: 50；流動速率：1 mL/min；梯度：0% B至0% B；注入體積：5ul mL)，得到呈淡黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(3R)-4-(丙-2-烯醯基)𠰌啉-3-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(19.20 mg，38.40%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值532.0。 1H NMR (400 MHz, 氯仿- d) δ10.53 (s, 1H), 8.82 - 7.99 (m, 2H), 6.79 (d, J= 7.9 Hz, 1H), 6.61 (m, 2H), 6.45 - 6.40 (m, 1H), 6.18 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 5.86 (d, J= 10.4 Hz, 1H), 5.50 (s, 1H), 5.29 (s, 1H), 4.22 (d, J= 11.6 Hz, 1H), 4.07 (s, 4H), 3.99 - 3.19 (m, 8H), 3.13 (brs, 2H)。
實例 179.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(3S)-4-(丙-2-烯醯基)𠰌啉-3-基]乙炔基} 吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 515)
Figure 02_image2089
3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[4-(丙-2-烯醯基)𠰌啉-3-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(50.00 mg，0.09 mmol，1.00當量)，藉由對掌性HPLC在以下條件下純化(管柱：CHIRALPAK IG-3, 4.6*50 mm, 3 um；移動相A：Hex(0.1%DEA): EtOH=50: 50；流動速率：1 mL/min；梯度：0% B至0% B；注入體積：5ul mL)，得到呈淡黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(3S)-4-(丙-2-烯醯基)𠰌啉-3-基]乙炔基} 吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(16.90 mg，33.80%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值532.0。 1H NMR (400 MHz, 氯仿- d) δ10.50 (s, 1H), 8.62 - 7.90 (m, 2H), 6.77 (d, J= 7.9 Hz, 1H), 6.70 - 6.50 (m, 2H), 6.44 - 6.39 (m, 1H), 6.19 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 5.86 (d, J= 10.3 Hz, 1H), 5.52 (s, 1H), 5.28 (s, 1H), 4.22 (d, J= 11.6 Hz, 1H), 4.07 (s, 4H), 3.87 - 3.14 (m, 8H), 3.11 (brs, 2H)。
實例 180.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[2-(1-氟環丙基)乙炔基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 545)
180.1. 合成 3-((3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 )-2-(3-((1- 羥基環丙基 ) 乙炔基 ) 吡啶 -4- 基 )-1,5,6,7- 四氫 -4H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2091
在室溫下於密封管中添加3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100.00 mg，0.20 mmol，1.00當量)、CuI (19.00 mg，0.10 mmol，0.50當量)、CsF (61.00 mg，0.40 mmol，2.00當量)、Pd(dppf)Cl 2 .CH 2Cl 2(82.00 mg，0.10 mmol，0.50當量)、DMF (5 mL)、1-((三甲基矽基)乙炔基)環丙烷-1-醇(154.00 mg，1.00 mmol，5.00當量)及DIEA (0.5 mL)。在氬氣氛圍下在50℃下攪拌2小時後。藉由LCMS監測反應。過濾所得混合物。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (10:1)溶離得到呈棕色固體狀之3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基)-2-(3-((1-羥基環丙基)乙炔基) 吡啶-4-基)-1,5,6,7-四氫-4H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(67.00 mg，74.8%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值449.0。
180.2. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-{3-[2-(1- 氟環丙基 ) 乙炔基 ] 吡啶 -4- 基 }-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2093
在0℃下在氮氣氛圍下向3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[2-(1-羥基環丙基)乙炔基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮) (60.00 mg，0.13 mmol，1.00當量)於CH2Cl2 (10 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加BAST (59.00 mg，0.26 mmol，2.00當量)。將所得混合物在0℃下在氮氣氛圍下攪拌0.5小時。藉由LCMS監測反應。反應在0℃下用飽和硫代硫酸鈉(水溶液)淬滅。所得混合物用CH 2Cl 2(3 x 30 mL)萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (10:1)溶離得到呈紅色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[2-(1-氟環丙基)乙炔基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(6.20 mg，10.29%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值451.0。 1H NMR (400 MHz, 甲醇- d 4) δ8.72 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.60 (d, J= 5.9 Hz, 1H), 6.75 (dd, J= 8.0, 1.5 Hz, 1H), 6.66 (t, J= 8.1 Hz, 1H), 6.22 (dd, J= 8.2, 1.5 Hz, 1H), 3.97 (s, 3H), 3.64 (t, J= 6.9 Hz, 2H), 3.01 (t, J= 6.9 Hz, 2H), 1.57 - 1.44 (m, 2H), 1.28 (dt, J= 9.1, 6.2 Hz, 2H)。
實例 181.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-[3-(丙-1-炔-1-基)吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 547)
Figure 02_image2095
在室溫下向密封管中添加3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100.00 mg，0.20 mmol，1.00當量)、CuI (19.00 mg，0.101 mmol，0.50當量)、CsF (61.00 mg，0.40 mmol，2.00當量)、Pd(dppf)Cl 2 .CH 2Cl 2(83.00 mg，0.10 mmol，0.50當量)、DMF (2 mL)、三甲基(丙-1-炔-1-基)矽烷(113.00 mg，1.00 mmol，5.00當量)及DIEA (0.50 mL)。在50℃下在氬氣氛圍下攪拌2小時後。藉由LCMS監測反應。過濾所得混合物。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (10:1)溶離得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-[3-(丙-1-炔-1-基)吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(2.30 mg，2.71%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值407.0。 1H NMR (300 MHz, 甲醇- d 4) δ8.52 (s, 1H), 8.22 (s, 1H), 7.40 (s, 1H), 6.69 - 6.53 (m, 2H), 6.23 (dd, J = 7.4, 2.4 Hz, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.62 (t, J= 6.9 Hz, 2H), 2.98 (t, J= 7.0 Hz, 2H), 2.15 (s, 3H)。
實例 182.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-[3-[2-(1-甲基環丙基)乙炔基]吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 527)
Figure 02_image2097
在室溫下向密封管中添加3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H -吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100.00 mg，0.20 mmol，1.00當量)、CuI (19.00 mg，0.10 mmol，0.50當量)、CsF (61.00 mg，0.40 mmol，2.00當量)、Pd(dppf)Cl 2.CH 2Cl 2(82.00 mg，0.10 mmol，0.50當量)、DMF (5 mL), 三甲基[2-(1-甲基環丙基)乙炔基]矽烷(154.00 mg，1.00 mmol，5.00當量)及DIEA (0.50 mL，2.87 mmol，14.20當量)。在50℃下在氬氣氛圍下攪拌2小時後，藉由LCMS監測反應。將所得混合物濃縮且殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (10:1)溶離得到粗產物。粗產物藉由製備型HPLC純化得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-[3-[2-(1-甲基環丙基)乙炔基]吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(10.20 mg，11.72%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值447.0。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6): δ11.45 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.32 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 7.28 -7.27(m, 2H), 7.09 (s, 1H), 6.65 - 6.59 (m, 2H), 6.09 (dd, J= 7.6, 2.4 Hz, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.43 (td, J= 6.8, 2.4 Hz, 2H), 2.84 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 1.31 (s, 3H), 0.99 - 0.97 (m, 2H), 0.77 - 0.75 (m, 2H)。
實例 183.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R)-2-甲基-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 551)
183.1. 合成 2- 甲醯基 -2- 甲基氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2099
在-78℃下在氮氣氛圍下向(COCl) 2(560.00 mg，4.41 mmol，1.20當量)於DCM (40 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加DMSO (0.65 mL，9.19 mmol，2.50當量)。將所得混合物在-78℃下在氮氣氛圍下攪拌30分鐘。在-78℃下向上述混合物中逐滴添加2-(羥基甲基)-2-甲基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(740.00 mg，3.68 mmol，1.00當量)。將所得混合物在-78℃下再攪拌30分鐘。TLC可偵測到所需產物。在-78℃下向上述混合物中添加TEA (2.56 mL，18.39 mmol，5.00當量)。將所得混合物在0℃下再攪拌30分鐘。所得混合物用CH 2Cl 2(3 x 40 mL)萃取。合併之有機層用水(3x50 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。粗產物2-甲醯基-2-甲基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(750.00 mg，102.38%)不經進一步純化直接用於下一步。
183.2. 合成 2- 乙炔基 -2- 甲基氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2101
在0℃下在氮氣氛圍下向2-甲醯基-2-甲基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(750.00 mg，3.76 mmol，1.00當量)於MeOH (10 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加K 2CO 3(1.04 g ，7.53 mmol，2.00當量)及賽費特-吉爾伯特增碳反應(868.00 mg，4.52 mmol，1.20當量)。將所得混合物在0℃下在氮氣氛圍下攪拌1小時。TLC可偵測到所需產物。在0℃下藉由添加酒石酸鉀鈉(水溶液) (5 mL)淬滅反應。所得混合物用EtOAc (3 x 30 mL)萃取。合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EA (10:1)溶離得到呈無色油狀物之2-乙炔基-2-甲基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(440.00 mg，59.86%)。
183.3. 合成 2-[2-(4-[3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ] 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ]-2- 甲基氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2103
在室溫下向20 mL密封管中添加3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(540.00 mg，1.09 mmol，1.00當量)及Pd(dppf)Cl 2CH 2Cl 2(178.00 mg，0.22 mmol，0.20當量)及CuI (83.00 mg，0.44 mmol，0.40當量)及DIEA (846.00 mg，6.55 mmol，6.00當量)及DMF(5 0mL)。在室溫下向上述混合物中逐滴添加2-乙炔基-2-甲基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(640.00 mg，3.28 mmol，3.00當量)。將所得混合物在50℃下在氬氣氛圍下攪拌4小時。藉由LCMS監測反應。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化(管柱：C18矽膠；移動相，ACN/水，40%至60%梯度/10 min；偵測器，UV 254 nm)，得到呈黃色固體狀之2-[2-(4-[3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]吡啶-3-基)乙炔基]-2-甲基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(640.00 mg，99.10%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值562.1。
183.4. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-{3-[2-(2- 甲基氮雜環丁烷 -2- 基 ) 乙炔基 ] 吡啶 -4- 基 }-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2105
在室溫下在氮氣氛圍下向2-[2-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-2-甲基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(400.00 mg，0.71 mmol，1.00當量)於DCM (12 mL)中之攪拌混合物中添加TFA (4 mL)。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮得到呈紅色油狀物之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[2-(2-甲基氮雜環丁烷-2-基)乙炔基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(296.00 mg，90.04%)。粗產物不經進一步純化直接用於下一步。 LC-MS: (M+H) +實驗值462.0。
183.5. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-[2-[2- 甲基 -1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 氮雜環丁烷 -2- 基 ] 乙炔基 ] 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2 -c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2107
在0℃下在氮氣氛圍下向3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-[3-[2-(2-甲基氮雜環丁烷-2-基)乙炔基]吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(300.00 mg，0.65 mmol，1.00當量)於NaHCO 3(飽和) (6 mL)及THF (6 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加丙烯醯氯(59.00 mg，0.65 mmol，1.00當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。LCMS可偵測到所需產物。在室溫下藉由添加MeOH (0.50 mL)淬滅反應。反應混合物用水(10 mL)稀釋。水層用CH 2Cl 2(3x10 mL)萃取。合併之有機層在減壓下濃縮。粗產物藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：YMC-Actus Triart C18 ExRS, 30*250 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：21% B至37% B/10 min, 37% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：9.67；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-[2-[2-甲基-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]乙炔基]吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2 -c]吡啶-4-酮(37.00 mg，11.04%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值516.2。
183.6. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[(2R)-2- 甲基 -1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 氮雜環丁烷 -2- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2109
3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[2-甲基-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(37.00 mg)，藉由製備型對掌性HPLC在以下條件純化(管柱：CHIRAL ART Amylose-SA, 2*25 cm, 5 μm；移動相A：Hex(0.5% 2M NH 3-MeOH)--HPLC，移動相B：EtOH--HPLC；流動速率：20 mL/min；梯度：20% B至20% B/20 min；波長：220/254 nm；RT1(min)：12.176；RT2(min)：16.377；樣品溶劑：EtOH--HPLC；注入體積：1 mL；運行次數：2)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R)-2-甲基-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(18.80 mg，49.69%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值516.2。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ11.14 (s, 1H), 8.76 (s, 1H), 8.40 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 8.34 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.16 (d, J= 6.3 Hz, 2H), 6.88 (d, J= 8.3 Hz, 1H), 6.77 (d, J= 8.3 Hz, 1H), 6.20 - 5.94 (m, 2H), 5.53 (d, J=3.1 Hz, 1H), 3.73 (s, 3H), 3.36 (s, 2H), 3.11 (s, 2H), 2.83 - 2.66 (m, 2H), 2.08 (s, 3H), 1.69 (s, 3H)。
實例 184.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2S)-2-甲基-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 550)
Figure 02_image2111
3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[2-甲基-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(37.00 mg)，藉由製備型對掌性HPLC在以下條件純化(管柱：CHIRAL ART Amylose-SA, 2*25 cm, 5 μm；移動相A：Hex(0.5% 2M NH 3-MeOH)--HPLC，移動相B：EtOH--HPLC；流動速率：20 mL/min；梯度：20% B至20% B/20 min；波長：220/254 nm；RT1(min)：12.176；RT2(min)：16.377；樣品溶劑：EtOH--HPLC；注入體積：1 mL；運行次數：2)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2S)-2-甲基-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(18.10 mg，47.89%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值516.1。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ11.14 (s, 1H), 8.76 (s, 1H), 8.40 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 8.34 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.16 (d, J= 6.3 Hz, 2H), 6.88 (d, J= 8.3 Hz, 1H), 6.77 (d, J= 8.3 Hz, 1H), 6.20 - 5.94 (m, 2H), 5.53 (d, J=3.1 Hz, 1H), 3.73 (s, 3H), 3.36 (s, 2H), 3.11 (s, 2H), 2.83 - 2.66 (m, 2H), 2.08 (s, 2H), 1.69 (s, 3H)。
實例 185.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[2-(氧雜環丁烷-3-基)乙炔基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 555)
Figure 02_image2113
將3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100.00 mg，0.20 mmol，1.00當量)及3-乙炔基氧雜環丁烷(83.00 mg，1.01 mmol，5.00當量)及Pd(dppf)Cl 2·CH 2Cl 2(16.00 mg，0.02 mmol，0.10當量)及CuI (8.00 mg，0.04 mmol，0.20當量)及TEA (61.00 mg，0.61 mmol，3.00當量)於DMF (1 mL)中之溶液在50℃下在氮氣氛圍下攪拌2小時。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (10:1)溶離得到粗產物。粗產物藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：Xselect CSH C18 OBD Column 30*150mm 5μm, n；移動相A：水(0.1%FA)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：18% B至38% B/8 min, 38% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：7.6；運行次數：0)，得到呈暗黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[2-(氧雜環丁烷-3-基)乙炔基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(16.10 mg，17.62%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值449.0。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ11.58 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.38 (d, J= 5.3 Hz, 1H), 7.40 (s, 1H), 7.33 (d, J= 5.3 Hz, 1H), 7.13 (t, J= 2.5 Hz, 1H), 6.68 - 6.58 (m, 2H), 6.15 - 6.06 (m, 1H), 4.81 - 4.77 (m, 2H), 4.64 - 4.61 (m, 2H), 4.18 - 4.11 (m, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.46 - 3.41 (m, 2H), 2.85 (t, J= 6.8 Hz, 2H)。
實例 186.3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-[3-[2-(3-甲基氧雜環丁烷-3-基)乙炔基]吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 554)
Figure 02_image2115
在室溫下向25 mL Schlenk管中添加3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100.00 mg，0.21 mmol，1.00當量)及Pd(dppf)Cl 2·CH 2Cl 2(85.00 mg，0.11 mmol，0.50當量)及CuI (20.00 mg，0.11 mmol，0.50當量)及DIEA (81.00 mg，0.63 mmol，3.00當量)及DMF (2 mL)。在室溫下向上述混合物中逐滴添加3-乙炔基-3-甲基氧雜環丁烷(100.50 mg，1.05 mmol，5.00當量)。將所得混合物在50℃下在氬氣氛圍下攪拌2小時。藉由LCMS監測反應。混合物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (9:1)溶離得到粗產物。粗產物(150.00 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：Xselect CSH OBD Column 30*150mm 5um, n；移動相A：水(0.1%FA)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：17% B至37% B/8 min, 37% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-[3-[2-(3-甲基氧雜環丁烷-3-基)乙炔基]吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(26.50 mg，28.33%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值447.0。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ11.50 (s, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.38 (d, J= 5.3 Hz, 1H), 7.42 (s, 1H), 7.33 (d, J= 5.3 Hz, 1H), 7.13 (t, J= 2.6 Hz, 1H), 6.57 (td, J= 8.3, 6.0 Hz, 1H), 6.43 (ddd, J= 11.0, 8.4, 1.5 Hz, 1H), 5.93 (dt, J= 8.2, 1.3 Hz, 1H), 4.75 (d, J= 5.4 Hz, 2H), 4.42 (d, J= 5.4 Hz, 2H), 3.91 - 3.82 (m, 3H), 3.43 (td, J= 6.9, 2.5 Hz, 2H), 2.84 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 1.63 (s, 3H)
實例 187.3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-[3-[2-(3-甲氧基氧雜環丁烷-3-基)乙炔基]吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 553)
Figure 02_image2117
在室溫下向25 mL Schlenk管中添加3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100.00 mg，0.21 mmol，1.00當量)及Pd(dppf)Cl 2·CH 2Cl 2(85.00 mg，0.11 mmol，0.50當量)及CuI (20.00 mg，0.11 mmol，0.50當量)及DIEA (81.00 mg，0.63 mmol，3.00當量)及DMF (2 mL)。在室溫下向上述混合物中逐滴添加3-乙炔基-3-甲氧基氧雜環丁烷(117.22 mg，1.05 mmol，5.00當量)。將所得混合物在50℃下在氬氣氛圍下攪拌2小時。藉由LCMS監測反應。混合物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (9:1)溶離得到粗產物。粗產物(150.00 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：Xselect CSH OBD Column 30*150mm 5um, n；移動相A：水(0.1%FA)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：20% B至41% B/8 min, 41% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：7.33；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-[3-[2-(3-甲氧基氧雜環丁烷-3-基)乙炔基]吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(46.30 mg，47.59%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值463.0。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ11.59 (s, 1H), 8.68 (s, 1H), 8.44 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 7.40 (s, 1H), 7.37 (d, J= 5.3 Hz, 1H), 7.14 (d, J= 2.6 Hz, 1H), 6.57 (td, J= 8.3, 6.1 Hz, 1H), 6.42 (ddd, J= 11.0, 8.4, 1.5 Hz, 1H), 5.94 (dt, J= 8.3, 1.2 Hz, 1H), 4.76 (d, J= 6.9 Hz, 2H), 4.64 (d, J= 6.8 Hz, 2H), 3.86 (s, 3H), 3.42 (td, J= 6.9, 2.5 Hz, 2H), 3.27 (s, 3H), 2.82 (t, J= 6.8 Hz, 2H)。
實例 188.3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-[3-[2-(氧雜環丁烷-3-基)乙炔基]吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 552)
Figure 02_image2119
在室溫下向25 mL Schlenk管中添加3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100.00 mg，0.21 mmol，1.00當量)及Pd(dppf)Cl 2·CH 2Cl 2(85.00 mg，0.11 mmol，0.50當量)及CuI (20.00 mg，0.11 mmol，0.50當量)及DIEA (81.00 mg，0.63 mmol，3.00當量)及DMF (2 mL)。在室溫下向上述混合物中逐滴添加3-乙炔基氧雜環丁烷(86.00 mg，1.05 mmol，5.00當量)。將所得混合物在50℃下在氬氣氛圍下攪拌2小時。藉由LCMS監測反應。混合物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (9:1)溶離得到粗產物。粗產物(150.00 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：Xselect CSH OBD Column 30*150mm 5um, n；移動相A：水(0.1%FA)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：17% B至37% B/8 min, 37% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-[3-[2-(氧雜環丁烷-3-基)乙炔基]吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(49.60 mg，54.58%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值432.0。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ11.53 (s, 1H), 8.52 (d, J= 84.7 Hz, 2H), 7.45 (s, 1H), 7.36 (d, J= 4.3 Hz, 1H), 7.15 (d, J= 2.5 Hz, 1H), 6.57 (td, J= 8.3, 6.1 Hz, 1H), 6.44 (ddd, J= 10.9, 8.3, 1.5 Hz, 1H), 5.95 (dt, J= 8.3, 1.3 Hz, 1H), 4.79 (dd, J= 8.5, 5.4 Hz, 2H), 4.63 (dd, J= 7.1, 5.4 Hz, 2H), 4.16 (tt, J= 8.6, 7.1 Hz, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.43 (td, J= 6.9, 2.5 Hz, 2H), 2.85 (t, J= 6.8 Hz, 2H)。
實例 189.3-[(3-氯-2-甲基苯基)胺基]-2-(3-{2-[1-(二氟甲基)環丙基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 556)
189.1. 合成 1- 氯 -3- 異硫氰基 -2- 甲基苯
Figure 02_image2121
在0℃下在氮氣氛圍下將2-甲基-3-氯苯胺(20.00 g，141.24 mmol，1.00當量)於DCM (100 mL)及NaHCO 3(100 mL水溶液)中之溶液逐滴添加硫光氣(16.24 g，141.24 mmol，1.00當量)。將混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌2小時。藉由TLC監測反應。所得混合物用DCM (3 x 100 mL)萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE溶離得到呈黃色油狀物之1-氯-3-異硫氰基-2-甲基苯 (21.00 g，80.96%)。
189.2. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲基苯基 ) 胺基甲硫醯基 ]-4- 羥基 -2- 側氧基 -5,6- 二氫吡啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2123
將2,4-二氧代哌啶-1-甲酸三級丁酯(21.40 g，100.36 mmol，1.00當量)及1-氯-3-異硫氰基-2-甲基苯 (20.27 g，110.40 mmol，1.10當量)於ACN (200 mL)中之溶液添加DBU (22.92 g，150.54 mmol，1.50當量)切碎後在室溫下攪拌2小時。HCl用HCl (水溶液)將混合物酸化至pH為6。藉由過濾收集所沈澱之固體且用水(3 x 10 mL)洗滌得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲基苯基)胺基甲硫醯基]-4-羥基-2-側氧基-5,6-二氫吡啶-1-甲酸三級丁酯(32.20 g，80.84%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值397.0。
189.3. 合成 4-[[(3- 溴吡啶 -4- 基 ) 甲基 ] 胺基 ]-3-[(3- 氯 -2- 甲基苯基 ) 胺基甲硫醯基 ]-2- 側氧基 -5,6- 二氫吡啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2125
在0℃下在氮氣氛圍下向3-[(3-氯-2-甲基苯基)胺基甲硫醯基]-4-羥基-2-側氧基-5,6-二氫吡啶-1-甲酸三級丁酯(21.00 g，52.91 mmol，1.00當量)及1-(3-溴吡啶-4-基)甲胺(9.90 g，52.91 mmol，1.00當量)於DMF (400 mL)中之攪拌混合物中添加PyBop (41.30 g，79.37 mmol，1.50當量)及DIEA (13.68 g，105.82 mmol，2.00當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌2小時。反應用水淬滅。所得混合物用EA (3 x 300 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(3x200 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用EA/PE (0%至100%梯度/40 min)溶離得到呈黃色固體狀之4-[[(3-溴吡啶-4-基)甲基]胺基]-3-[(3-氯-2-甲基苯基)胺基甲硫醯基]-2-側氧基-5,6-二氫吡啶-1-甲酸三級丁酯(26.20 g，87.50%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值565.0。
189.4. 合成 2-(3- 溴吡啶 -4- 基 )-3-[(3- 氯 -2- 甲基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2127
在室溫下向4-[[(3-溴吡啶-4-基)甲基]胺基]-3-[(3-氯-2-甲基苯基)胺基甲硫醯基]-2-側氧基-5,6-二氫吡啶-1-甲酸三級丁酯(26.00 g，45.94 mmol，1.00當量)於MeOH (300 mL)中之攪拌混合物中添加H 2O 2(6.77 g，59.73 mmol，1.30當量，30w/w%)。將所得混合物在80℃下攪拌隔夜。藉由添加飽和Na 2SO 3(水溶液)淬滅反應。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化(管柱：C18矽膠；移動相，ACN/水，0%至60%梯度/30 min；偵測器，UV 254 nm)，得到呈黃色固體狀之2-(3-溴吡啶-4-基)-3-[(3-氯-2-甲基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(8.50 g，42.85%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值431.0。
189.5. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[1-( 二氟甲基 ) 環丙基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2129
向2-(3-溴吡啶-4-基)-3-[(3-氯-2-甲基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100.00 mg，0.23 mmol，1.00當量)及1-(二氟甲基)-1-乙炔基環丙烷(54.00 mg，0.46 mmol，2.00當量)於DMF (2.5 mL)中之攪拌溶液中添加Pd(dppf)Cl 2·CH 2Cl 2(94.00 mg，0.12 mmol，0.50當量)及CuI (22.00 mg，0.12 mmol，0.50當量)及DIEA (90.00 mg，0.69 mmol，3.00當量)，隨後在50℃下在氬氣氛圍下攪拌隔夜。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (10:1)溶離得到粗產物。粗產物藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Shield RP18 OBD管柱，30*150 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：40% B至52% B/10 min, 52% B；波長：220/254 nm；RT1(min)：9.25；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲基苯基)胺基]-2-(3-{2-[1-(二氟甲基)環丙基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(27.70 mg，25.36%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值417.0。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ11.34 (s, 1H), 8.54 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 7.31 - 7.10 (m, 3H), 6.74 - 6.66 (m, 2H), 6.17 (d, J= 7.8 Hz, 1H), 5.81 (t, J= 55.7 Hz, 1H), 3.46 - 3.41 (m, 2H), 2.83 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 2.30 (s, 3H), 1.28 - 1.19 (m, 4H)。
實例 190.3-((3-氟-2-甲氧基苯基)胺基)-2-(3-((1-(三氟甲基)環丙基)乙炔基)吡啶-4-基)-1,5,6,7-四氫-4H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 559)
Figure 02_image2131
在室溫下向25 mL Schlenk管中添加3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100.00 mg，0.21 mmol，1.00當量)及Pd(dppf)Cl 2·CH 2Cl 2(85.00 mg，0.11 mmol，0.50當量)及CuI (20.00 mg，0.11 mmol，0.50當量)及DIEA (81.00 mg，0.63 mmol，3.00當量)及DMF (2 mL)。在室溫下向上述混合物中逐滴添加1-乙炔基-1-(三氟甲基)環丙烷(56.00 mg，0.42 mmol，2.00當量)。將所得混合物在50℃下在氬氣氛圍下攪拌2小時。藉由LCMS監測反應。混合物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (9:1)溶離得到粗產物。粗產物(80.00 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep OBD C18管柱，30*150 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：34% B至64% B/7 min；波長：254 nm；RT1(min)：6.5；運行次數：0)，得到呈淡黃色固體狀之3-((3-氟-2-甲氧基苯基)胺基)-2-(3-((1-(三氟甲基)環丙基)乙炔基)吡啶-4-基)-1,5,6,7-四氫-4H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 (49.60 mg，54.58%)。 LC-MS: (M+H ) + 實驗值485.0。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ11.45 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.40 (d, J= 5.3 Hz, 1H), 7.36 (s, 1H), 7.33 (d, J= 5.3 Hz, 1H), 7.12 (d, J= 2.6 Hz, 1H), 6.56 (td, J= 8.3, 6.0 Hz, 1H), 6.42 (ddd, J= 10.1, 8.4, 1.5 Hz, 1H), 5.91 (d, J= 8.3 Hz, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.43 (td, J= 6.9, 2.5 Hz, 2H), 2.82 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 1.47 (td, J= 6.4, 2.5 Hz, 2H), 1.43-1.28 (m, 2H)。
實例 191.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[1-(氟甲基)環丙基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 561)
Figure 02_image2133
在室溫下向20 mL密封管中添加3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100.00 mg，0.20 mmol，1.00當量)、CuI (19 mg，0.10 mmol，0.5當量)、Pd(dppf)Cl 2 .CH 2Cl 2(82 mg，0.10 mmol，0.50當量)、DMF (2 mL), 1-乙炔基-1-(氟甲基)環丙烷(99.00 mg，1.01 mmol，5.00當量)及DIEA (0.50 mL，2.86 mmol，14.3當量)。將所得混合物在50℃下在氬氣氛圍下攪拌2小時。藉由LCMS監測反應。過濾所得混合物，用CH 2Cl 2(3x10 mL)洗滌濾餅。在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (10:1)溶離得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[1-(氟甲基)環丙基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(8.10 mg，8.62%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值465.0。 1H NMR (300 MHz, 甲醇- d 4) δ8.50 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.66 - 7.47 (m, 1H), 7.39 (d, J= 5.3 Hz, 1H), 6.69 - 6.56 (m, 1H), 6.21 (dd, J= 7.6, 2.0 Hz, 1H), 4.49 (s, 1H), 4.33 (s, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.61 (t, J= 6.9 Hz, 2H), 2.97 (t, J= 6.9 Hz, 2H), 1.27 - 1.18 (m, 2H), 1.09 (t, J= 3.5 Hz, 2H)。
實例 192.2-[3-(2-環丙基乙炔基)吡啶-4-基]-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 563)
Figure 02_image2135
將3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100.00 mg，0.21 mmol，1.00當量)及乙炔基環丙烷(69.00 mg，1.05 mmol，5.00當量)及Pd(dppf)Cl 2·CH 2Cl 2(17.00 mg，0.02 mmol，0.10當量)及CuI (8.00 mg，0.04 mmol，0.20當量)及TEA (63.00 mg，0.63 mmol，3.00當量)於DMF (1 mL)中之溶液在50℃下在氮氣氛圍下攪拌2小時。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (10:1)溶離得到粗產物。粗產物藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep C18 OBD管柱，30*100 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：26% B至50% B/9 min, 50% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8.85；運行次數：0)，得到呈暗黃色固體狀之2-[3-(2-環丙基乙炔基)吡啶-4-基]-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(19.10 mg，21.85%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值417.0。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ11.43 (s, 1H), 8.53 (s, 1H), 8.33 (d, J= 5.1 Hz, 1H), 7.42 - 7.22 (m, 2H), 7.12 (s, 1H), 6.58 (q, J= 7.4 Hz, 1H), 6.42 (t, J= 9.7 Hz, 1H), 5.95 (d, J= 8.3 Hz, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.44 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 2.85 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 1.61 - 1.54 (m, 1H), 0.92 - 0.79 (m, 4H)。
實例 193.3-[(3-氯-2-甲基苯基)胺基]-2-[3-(2-環丙基乙炔基)吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 562)
Figure 02_image2137
在室溫下向25 mL Schlenk管中添加2-(3-溴吡啶-4-基)-3-[(3-氯-2-甲基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100.00 mg，0.23 mmol，1.00當量)及Pd(dppf)Cl 2·CH 2Cl 2(94.00 mg，0.12 mmol，0.50當量)及CuI (44.00 mg，0.23 mmol，1.00當量)及DIEA(180.00 mg，1.39 mmol，6.00當量)及DMF (2 mL)。在室溫下向上述混合物中逐滴添加乙炔基環丙烷(46.00 mg，0.70 mmol，3.00當量)。將所得混合物在65℃下在氬氣氛圍下攪拌2小時。藉由LCMS監測反應。混合物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (9:1)溶離得到粗產物。粗產物(80.00 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep OBD C18管柱，30*150 mm, 5μm；移動相A：水(0.05%FA)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：22% B至52% B/7 min；波長：254 nm；RT1(min)：6.5；運行次數：0)，得到呈淡黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲基苯基)胺基]-2-[3-(2-環丙基乙炔基)吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(5.20 mg，5.12%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值417.0。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ11.37 (s, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.28 (d, J= 5.3 Hz, 1H), 7.23 (t, J= 4.5 Hz, 2H), 7.14 (s, 1H), 6.69 (d, J= 7.6 Hz, 2H), 6.17 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 3.44 (s, 2H), 2.85 (s, 2H), 2.32 (s, 3H), 1.57 (s, 1H), 0.91 (dt, J= 6.0, 3.0 Hz, 2H), 0.77 (dd, J= 5.1, 2.7 Hz, 2H)。
實例 194.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-[3-[2-(1-羥基環丙基)乙炔基]吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 564)
194.1. 合成 1- 乙氧基環丙烷 -1- 醇
Figure 02_image2139
向50 mL圓底燒瓶中添加(1-乙氧基環丙氧基)三甲基矽烷(2.00 g，11.47 mmol，1.00當量)於甲醇(10.00 mL)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌8小時。將所得混合物在減壓下濃縮得到呈淺黃色油狀物之1-乙氧基環丙烷-1-醇(1.00 g，85.34%)。 1H NMR (400 MHz, 氯仿- d) δ3.77 (q, J= 7.1 Hz, 2H), 3.52 (brs, 1H), 1.22 (t, J= 7.1 Hz, 3H), 0.94 (dt, J= 8.0, 2.1 Hz, 4H)。
194.2. 合成 1-[2-( 三甲基矽基 ) 乙炔基 ] 環丙烷 -1- 醇
Figure 02_image2141
在0℃下在氮氣氛圍下向1-乙氧基環丙烷-1-醇(1.00 g，9.79 mmol，1.00當量)於THF (7.50 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加MeMgBr (4.24 mL，12.73 mmol，1.30當量)。將反應攪拌1小時。在-78℃下在氮氣氛圍下向三甲基矽基乙炔(1.06 g，10.79 mmol，1.10當量)於THF (7.50 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加n-BuLi (4.50 mL，11.26 mmol，1.15當量)。在0℃下將所得[(三甲基矽基)乙炔基]鋰添加至1-乙氧基環丙醇溴化鎂溶液中。使混合物升溫至室溫持續16小時。反應在0℃下用飽和NH 4Cl (水溶液)淬滅。所得混合物用EtOAc (3 x 20 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(2 x 20 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液得到呈黃色油狀物之1-[2-(三甲基矽基)乙炔基]環丙烷-1-醇(600.00 mg，39.72%)。 GC-MS: (M+H) +實驗值154.0。
194.3. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-[3-[2-(1- 羥基環丙基 ) 乙炔基 ] 吡啶 -4- 基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2143
在室溫下向25 mL Schlenk管中添加3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(200.00 mg，0.40 mmol，1.00當量)及Pd(dppf)Cl 2(147.90 mg，0.20 mmol，0.50當量)及CuI (38.50 mg，0.20 mmol，0.50當量)及DIEA (156.75 mg，1.21 mmol，3.00當量)及DMF (4.00 mL)。在室溫下向上述混合物中逐滴添加1-[2-(三甲基矽基)乙炔基]環丙烷-1-醇(149.69 mg，0.97 mmol，2.40當量)。將所得混合物在50℃下在氬氣氛圍下攪拌2小時。藉由LCMS監測反應。混合物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (9:1)溶離得到粗產物。粗產物(350.00 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：Xselect CSH OBDColumn 30*150mm 5um, n；移動相A：水(0.1%FA)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：19% B至37% B/7 min, 37% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：7；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-[3-[2-(1-羥基環丙基)乙炔基]吡啶-4-基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(14.20 mg，7.79%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值449.0。 1H NMR (400 MHz, 甲醇- d 4) δ8.54 (s, 1H), 8.23 (d, J= 5.5 Hz, 1H), 7.42 (d, J= 5.4 Hz, 1H), 6.65 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 6.60 (t, J= 8.0 Hz, 1H), 6.20 (dd, J= 7.9, 1.7 Hz, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.61 (t, J= 6.9 Hz, 2H), 2.98 (t, J= 6.9 Hz, 2H), 1.15 (s, 4H)。
實例 195.2-(3-{2-[(2R)-1-(丁-2-炔醯基)吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 208)
195.1. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-{3-[2-( 吡咯啶 -2- 基 ) 乙炔基 ] 吡啶 -4- 基 }-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2145
在室溫下在氮氣氛圍下向2-[2-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(100.00 mg，0.18 mmol，1.00當量)於DCM (1.5 mL)中之攪拌混合物中添加TFA (0.5 mL)。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮得到呈紅色油狀物之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[2-(吡咯啶-2-基)乙炔基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(220.00 mg，91.01%)。粗產物不經進一步純化直接用於下一步。 LC-MS: (M+H) +實驗值462.1。
195.2. 合成 2-(3-{2-[1-( 丁 -2- 炔醯基 ) 吡咯啶 -2- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2147
將3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[2-(吡咯啶-2-基)乙炔基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(200.00 mg，0.15 mmol，1.00當量)於THF (5 mL)中之溶液用DIEA鹼化至pH為8。在0℃下在氮氣氛圍下向上述混合物中添加2-丁炔酸(25.00 mg，0.29 mmol，2.00當量)，隨後逐滴添加T 3P (140.00 mg，0.22 mmol，1.50當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。在0℃下將飽和水溶液NaHCO 3(10 mL)添加至反應混合物中且用EtOAc (3 x 10 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。在減壓下濃縮濾液得到粗產物(60 mg)，藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：Xselect CSH C18 OBD管柱 30*150mm 5μm, n；移動相A：水(0.05%TFA )，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：13% B至43% B/7 min, 43% B；波長：254 nm；RT1(min)：6.07；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之2-(3-{2-[1-(丁-2-炔醯基)吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(56.00 mg，72.05%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值528.2。
195.3. 合成 2-(3-{2-[(2R)-1-( 丁 -2- 炔醯基 ) 吡咯啶 -2- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2149
2-(3-{2-[1-(丁-2-炔醯基)吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(56.00 mg，0.11 mmol，1.00當量)，藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：CHIRAL ART Amylose-SA, 2*25 cm, 5 μm；移動相A：MTBE (0.5% 2M NH 3-MeOH)--HPLC，移動相B：IPA--HPLC；流動速率：20 mL/min；梯度：30% B至30% B/15 min；波長：220/254 nm；RT1(min)：9.646；RT2(min)：13.616；樣品溶劑：EtOH--HPLC；注入體積：0.67 mL；運行次數：6)，得到呈黃色固體狀之2-(3-{2-[(2R)-1-(丁-2-炔醯基)吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(18.20 mg，32.34%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值528.0。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ10.96 (s, 1H), 8.49 (d, J= 11.2 Hz, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.28 (q, J= 5.6 Hz, 2H), 6.61 (d, J= 22.5 Hz, 3H), 6.14 (m, 1H), 4.85 (s, 1H), 3.85 (d, J= 12.3 Hz, 3H), 3.64 (s, 1H), 3.44 (q, J= 7.1 Hz, 3H), 2.78 (s, 2H), 2.26 (d, J= 26.0 Hz, 1H), 2.13 - 2.00 (m, 2H), 1.95 (s, 4H)。
實例 196.3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2S)-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 212)
196.1. 合成 (2S)-2-{[(4- 溴吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 } 吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2151
在0℃下在N 2氛圍下向(2S)-2-(羥基甲基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(1.39 g，6.90 mmol，1.20當量)及4-溴吡啶-3-醇(1.00 g，5.75 mmol，1.00當量)於THF中之攪拌混合物中添加PPh 3(2.26 g，8.62 mmol，1.50當量)，且攪拌30分鐘，隨後在0℃下在氮氣氛圍下分批添加DEAD (1.50 g，8.62 mmol，1.50當量)且攪拌隔夜。在減壓下濃縮。粗產物藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：C18；移動相，ACN/水，10%至70%梯度/30 min；偵測器，UV 254 nm)，得到呈棕黃色油狀物之( 2S)-2-{[(4-溴吡啶-3-基)氧基]甲基}吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(1.70 g，82.80%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值357.0。
196.2. 合成 (2S)-2-{[(4-{4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 } 吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2153
在50℃下向100 mL圓底燒瓶中添加( 2S)-2-{[(4-溴吡啶-3-基)氧基]甲基}吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(500.00 mg，1.40 mmol，1.00當量)，2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(477.00 mg，1.82 mmol，1.30當量)、Cs 2CO 3(1.37 g，4.20 mmol，3.00當量)、XPhos 鈀(II)聯苯-2-胺氯化物(110.00 mg，0.14 mmol，0.10當量)、二㗁烷(5 mL)及H 2O (1 mL)。隨後濃縮，且殘留物藉由逆相急驟在以下條件下純化(管柱：C18；移動相，ACN/水，10%至80%梯度/30 min；偵測器，UV 254 nm)，得到呈棕色固體狀之( 2S)-2-{[(4-{4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(400.00 mg，69.29%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值413.2。
196.3. 合成 (2S)-2-{[(4-{3- 碘 -4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 } 吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2155
將( 2S)-2-{[(4-{4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(510.00 mg，1.24 mmol，1.00當量)及NIS (278.17 mg，1.24 mmol，1.00當量)於DMF (5 mL)中之溶液在室溫下在氮氣氛圍下攪拌隔夜。藉由LCMS監測反應。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化(管柱：C18矽膠；移動相，ACN/水，10%至50%梯度/10 min；偵測器，UV 254 nm)，得到呈黃色固體狀之( 2S)-2-{[(4-{3-碘-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(500.00 mg，75.11%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值539.0。
196.4. 合成 (2S)-2-{[(4-{3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 } 吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2157
在氬氣氛圍下向( 2S)-2-{[(4-{3-碘-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(100.00 mg，0.19 mmol，1.00當量)及3-氟-2-甲氧基苯胺(39.00 mg，0.28 mmol，1.50當量)於DMF (1 mL)中之攪拌混合物中添加Ephos Pd G4 (17.00 mg，0.02 mmol，0.10當量)及Cs 2CO 3(121.00 mg，0.37 mmol，2.00當量)。所得懸浮液用氬氣回填三次且在50℃下攪拌2小時。LCMS確認反應完成且觀察到所需產物。所得混合物藉由矽膠墊過濾，且濾餅用DCM (2x10 mL)洗滌。在減壓下濃縮濾液，藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (20:1)溶離得到呈黃色固體狀之( 2S)-2-{[(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(100.00 mg，97.60%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值552.1。
196.5. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-{3-[(2S)- 吡咯啶 -2- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 }-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2159
在室溫下在氮氣氛圍下向( 2S)-2-{[(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(100.00 mg，0.18 mmol，1.00當量)於DCM (3 mL)中之攪拌混合物中添加TFA (1 mL)。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮得到呈棕色油狀物之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[(2S)-吡咯啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(210.00 mg，粗品)。 LC-MS: (M+H) +實驗值452.1。
196.6. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{[(2S)-1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 吡咯啶 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2161
在0℃下在氮氣氛圍下向3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[(2S)-吡咯啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(180.00 mg，0.15 mmol，1.00當量)於NaHCO 3(飽和) (1.50 mL)及THF (1.50 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加丙烯醯氯(12.34 mg，0.14 mmol，0.90當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。藉由LCMS監測反應。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (20:1)溶離得到粗產物(70.00 mg)。粗產物(70.00 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep C18 OBD管柱，30*100 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：19% B至42% B/9 min, 42% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：9.67；運行次數：0)，得到呈淡黃色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2S)-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(12.30 mg，15.63%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值506.0。 1H NMR (400 MHz, 氯仿- d) δ11.49 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.97 (d, J= 5.3 Hz, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.55 (d, J= 5.3 Hz, 1H), 6.62 - 6.37 (m, 4H), 6.07 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 5.78 (d, J= 10.3 Hz, 1H), 5.20 (s, 1H), 5.11 - 4.97 (m, 1H), 4.26 (t, J= 9.6 Hz, 1H), 4.14 - 4.08 (m, 4H), 3.76 (t, J= 6.7 Hz, 2H), 3.66 - 3.54 (m, 2H), 3.21 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 2.25 - 1.95 (m, 4H)。
實例 197.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R)-1-[(2E)-4-(吡咯啶-1-基)丁-2-烯醯基] 吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 229)
197.1. 合成 (R,E)-2-(3-((1-(4- 溴丁 -2- 烯醯基 ) 吡咯啶 -2- 基 ) 乙炔基 ) 吡啶 -4- 基 )-3-((3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 )-1,5,6,7- 四氫 -4H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2163
在0℃下在氮氣氛圍下向3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R)-吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(40.00 mg，0.08 mmol，1.00當量)及DIEA (34.00 mg，0.26 mmol，3.00當量)於DCM (2.50 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加(2E)-4-溴丁-2-烯醯氯(19.00 mg，0.10 mmol，1.2當量)。將所得混合物在0℃下在氮氣氛圍下攪拌0.5小時。所得混合物無需進一步純化即可直接用於下一步。 LCMS: (M+H) +實驗值608.0及564.0。
197.2. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[(2R)-1-[(2E)-4-( 吡咯啶 -1- 基 ) 丁 -2- 烯醯基 ] 吡咯啶 -2- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2165
在0℃下向最後一步產生之混合物中逐滴添加吡咯啶(19.00 mg，0.26 mmol，3.00當量)。將所得混合物在室溫下再攪拌48小時。所得混合物用CH 2Cl 2: MeOH (3 x 50 mL)萃取。合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液且溶解於DMSO。粗產物(100.00 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：Xselect CSH C18 OBD管柱，30*150mm 5μm, n；移動相A：水(0.1%FA)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：10% B至28% B/8 min, 28% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R)-1-[(2E)-4-(吡咯啶-1-基)丁-2-烯醯基] 吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(12.60 mg，24.29%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值599.6。 1H NMR (400 MHz, 氯仿- d) δ11.12 (s, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.17 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.44 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 6.97 (m, J= 15.2, 6.4 Hz, 1H), 6.73 (m, J= 8.0, 1.5 Hz, 1H), 6.62 (t, J= 8.1 Hz, 1H), 6.52 (m, J= 15.0, 1.5 Hz, 1H), 6.24 (m, J= 8.2, 1.5 Hz, 1H), 5.52 (s, 1H), 4.91 (m, J= 7.3, 4.6 Hz, 1H), 4.09 (s, 3H), 3.82 (m, J= 10.0, 6.4 Hz, 1H), 3.73 - 3.54 (m, 5H), 3.27 (t, J= 6.5 Hz, 2H), 2.91 (d, J= 6.4 Hz, 4H), 2.40 - 2.21 (m, 3H), 2.17 - 2.05 (m, 1H), 1.97 (p, J= 3.7 Hz, 4H)。
實例 198.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R)-1-[(2E)-4-(𠰌啉-4-基)丁-2-烯醯基]吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 228)
198.1. 合成 (R,E)-2-(3-((1-(4- 溴丁 -2- 烯醯基 ) 吡咯啶 -2- 基 ) 乙炔基 ) 吡啶 -4- 基 )-3-((3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 )-1,5,6,7- 四氫 -4H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2167
在0℃下在氮氣氛圍下向3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R)-吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(40.00 mg，0.08 mmol，1.00當量)及DIEA (34.00 mg，0.26 mmol，3.00當量)於DCM (2.5 0mL)中之攪拌溶液中逐滴添加(2E)-4-溴丁-2-烯醯氯(19.00 mg，0.10 mmol，1.20當量)。將所得混合物在0℃下在氮氣氛圍下攪拌0.5小時。所得混合物無需進一步純化即可直接用於下一步。 LCMS: (M+H) +實驗值608.0及564.0。
198.2. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[(2R)-1-[(2E)-4-( 𠰌 啉 -4- 基 ) 丁 -2- 烯醯基 ] 吡咯啶 -2- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2169
在0℃下向最後一步產生之混合物中逐滴添加𠰌啉 (23.00 mg，0.26 mmol，3.00當量)。將所得混合物在室溫下再攪拌48小時。所得混合物用CH 2Cl 2:MeOH (3 x 50 mL)萃取。合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液且溶解於DMSO。粗產物(100.00 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：Xselect CSH C18 OBD管柱，30*150mm 5μm, n；移動相A：水(0.1%FA)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：10% B至27% B/8 min, 27% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(2R)-1-[(2E)-4-(𠰌啉-4-基)丁-2-烯醯基]吡咯啶-2-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(16.40 mg，30.79%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值615.2。 1H NMR (400 MHz, 氯仿- d) δ11.14 (s, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.22 - 8.13 (m, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.44 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 6.95 (m, J= 15.1, 6.3 Hz, 1H), 6.73 (m, J= 8.1, 1.5 Hz, 1H), 6.62 (t, J= 8.1 Hz, 1H), 6.40 (d, J= 15.1 Hz, 1H), 6.23 (m, J= 8.1, 1.5 Hz, 1H), 5.64 (t, J= 2.5 Hz, 1H), 4.92 (m, J= 7.2, 4.6 Hz, 1H), 4.09 (s, 3H), 3.89 - 3.52 (m, 9H), 3.34 - 3.17 (m, 4H), 2.55 (d, J= 4.8 Hz, 3H), 2.44 - 2.21 (m, 3H), 2.20 - 2.04 (m, 1H)。
實例 199.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2R)-1-[(2E)-4-[(3S)-3-甲氧基吡咯啶-1-基]丁-2-烯醯基]氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 222)
199.1. 合成 (R,E)-2-(3-((1-(4- 溴丁 -2- 烯醯基 ) 氮雜環丁烷 -2- 基 ) 甲氧基 ) 吡啶 -4- 基 )-3-((3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 )-1,5,6,7- 四氫 -4H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2171
在0℃下向2-{3-[(2R)-氮雜環丁烷-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100.00 mg，0.22 mmol，1.00當量)及DIEA (85.00 mg，0.66 mmol，3.00當量)於DCM (2 mL)中之攪拌混合物中逐滴添加(2E)-4-溴丁-2-烯醯氯(48.00 mg，0.26 mmol，1.20當量)。將所得混合物在25℃下攪拌2小時。LCMS可偵測到所需產物。所得混合物無需進一步純化即可直接用於下一步。 LC-MS: (M+H) +實驗值600.0。
199.2. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{[(2R)-1-[(2E)-4-[(3S)-3- 甲氧基吡咯啶 -1- 基 ] 丁 -2- 烯醯基 ] 氮雜環丁烷 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2173
向(3S)-3-甲氧基吡咯啶鹽酸鹽(36.00 mg，0.26 mmol，1.20當量)於DMF (1 mL)中之溶液中添加K 2CO 3(90.00 mg，0.65 mmol，3.00當量)且將混合物攪拌30分鐘。隨後將混合物添加至2-(3-{[(2R)-1-[(2E)-4-溴丁-2-烯醯基]氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(130.00 mg，0.22 mmol，1.00當量) 於2 mL DCM中之溶液中且在室溫下攪拌4小時。LCMS可偵測到所需產物。反應混合物用水淬滅且用DCM (3*10 mL)萃取。將所得混合物在減壓下濃縮。粗產物藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Shield RP18 OBD管柱，30*150 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：23% B至53% B/8 min, 53% B；波長：220/254 nm；RT1(min)：7.25；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2R)-1-[(2E)-4-[(3S)-3-甲氧基吡咯啶-1-基]丁-2-烯醯基]氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(29.50 mg，21.78%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值621.2。 1H NMR (300 MHz, 氯仿- d) δ11.77 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.92 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.38 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 7.01 - 6.81 (m, 1H), 6.68 - 6.47 (m, 2H), 6.22 - 5.98 (m, 2H), 5.22 (s, 1H), 5.02 - 4.86 (m, 1H), 4.42 (t, J= 9.8 Hz, 1H), 4.29 - 4.10 (m, 3H), 4.01 (s, 3H), 3.93 - 3.81 (m, 1H), 3.58 - 3.46 (m, 2H), 3.34 - 3.16 (m, 5H), 3.14 - 2.95 (m, 2H), 2.79 - 2.39 (m, 5H), 2.10 - 1.96 (m, 2H), 1.88 - 1.72 (m, 1H)。
實例 200.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2R)-1-[(2E)-4-(𠰌啉-4-基)丁-2-烯醯基]氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 220)
200.1. 合成 (R,E)-2-(3-((1-(4- 溴丁 -2- 烯醯基 ) 氮雜環丁烷 -2- 基 ) 甲氧基 ) 吡啶 -4- 基 )-3-((3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 )-1,5,6,7- 四氫 -4H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2175
在0℃下在氮氣氛圍下向2-{3-[(2R)-氮雜環丁烷-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基] -1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(60.00 mg，0.13 mmol，1.00當量)及DIEA (51.00 mg，0.39 mmol，3.00當量)於DCM (3 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加(2E)-4-溴丁-2-烯醯氯(29.00 mg，0.15 mmol，1.20當量)。將所得混合物在0℃下在氮氣氛圍下攪拌0.5小時。所得混合物無需進一步純化即可直接用於下一步。 LCMS: (M+H) +實驗值600.0及556.0。
200.2. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{[(2R)-1-[(2E)-4-( 𠰌 啉 -4- 基 ) 丁 -2- 烯醯基 ] 氮雜環丁烷 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2177
在0℃下向最後一步產生之混合物中逐滴添加𠰌啉 (35.00 mg，0.39 mmol，3.00當量。將所得混合物在室溫下再攪拌隔夜。LCMS可偵測到所需產物。所得混合物用CH 2Cl 2:MeOH (3 x 50 mL)萃取。合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液且溶解於DMSO。粗產物(100.00 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep OBD C18管柱，30*150 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：24% B至54% B/7 min；波長：254 nm；RT1(min)：6.5；運行次數：0)，得到呈米白色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2R)-1-[(2E)-4-(𠰌啉-4-基)丁-2-烯醯基]氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(27.10 mg，33.77%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值607.2。 1H NMR (400 MHz, 氯仿- d) δ11.82 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.99 (d, J= 5.3 Hz, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.47 (d, J= 5.3 Hz, 1H), 6.94 (m, J= 15.3, 6.3 Hz, 1H), 6.74 (m, J= 8.1, 1.5 Hz, 1H), 6.63 (t, J= 8.1 Hz, 1H), 6.28 - 6.07 (m, 2H), 5.26 (d, J= 2.6 Hz, 1H), 5.04 (q, J= 8.5 Hz, 1H), 4.53 (t, J= 9.8 Hz, 1H), 4.41 - 4.18 (m, 3H), 4.11 (s, 3H), 3.76 (t, J= 4.6 Hz, 4H), 3.63 (m, J= 7.0, 6.3, 2.2 Hz, 2H), 3.33 - 3.04 (m, 4H), 2.65 (m, J= 12.0, 9.4, 6.0 Hz, 1H), 2.52 (t, J= 4.7 Hz, 4H), 2.19 - 2.11 (m, 1H)。
實例 201.rel-2-(3-{[(2R)-1-[(2E)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯醯基]吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基] -1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 283)
201.1. 合成 (2S)-2-{[(4-{3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 } 吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2179
在氬氣氛圍下向(2S)-2-{[(4-{3-碘-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(400.00 mg，0.74 mmol，1.00當量)及3-氟-2-甲氧基苯胺(210.00 mg，1.49 mmol，2.00當量)於DMF (5 mL)中之攪拌混合物中添加EPhos Pd G4 (68.00 mg，0.07 mmol，0.10當量)及Cs 2CO 3(484.00 mg，1.49 mmol，2.00當量)。所得懸浮液用氬氣回填三次且在50℃下攪拌2小時。LCMS確認反應完成且觀察到所需產物。所得混合物藉由矽膠墊過濾，且濾餅用DCM (2 x 10 mL)洗滌。在減壓下濃縮濾液，藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (20:1)溶離得到呈棕色固體狀之( 2S)-2-{[(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(310.00 mg，75.64%)。 LC-MS: (M+H) + 實驗值552.0。
201.2. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-{3-[(2S)- 吡咯啶 -2- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 }-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2181
在室溫下在氮氣氛圍下向(2S)-2-{[(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(290.00 mg，0.53 mmol，1.00當量)於DCM (3 mL)中之攪拌混合物中添加TFA (1 mL)。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮得到呈紅色油狀物之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[(2S)-吡咯啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(540.00 mg，粗品)。 LC-MS: (M+H) +實驗值452.0。
201.3. 合成 rel-2-(3-{[(2R)-1-[(2E)-4-( 二甲基胺基 ) 丁 -2- 烯醯基 ] 吡咯啶 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ] -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2183
將rel-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[(2R)-吡咯啶-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(60.00 mg，0.13 mmol，1.00當量)於THF (2 mL)中之溶液用DIEA鹼化至pH為8。在0℃下在氮氣氛圍下向上述混合物中添加(2E)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯酸(26.00 mg，0.20 mmol，1.50當量)，隨後逐滴添加T 3P (85.00 mg，0.27 mmol，2.00當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。在0℃下將飽和NaHCO 3水溶液(10 mL)添加至反應混合物中且用EtOAc (3 x 10 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。在減壓下濃縮濾液得到粗產物(50.00 mg)，藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：YMC-ActusTriArt C18 ExRS, 30*150 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH4HCO3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：20% B至42% B/10 min, 42% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8.85；運行次數：0)，得到呈白色固體狀之rel-2-(3-{[(2R)-1-[(2E)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯醯基]吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基] -1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(7.50 mg，9.96%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值563.2。 1H NMR (300 MHz, 氯仿- d) δ11.51 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 8.01 (d, J= 5.3 Hz, 1H), 7.56 (d, J= 3.9 Hz, 2H), 6.97 (d, J= 6.2 Hz, 1H), 6.68 - 6.42 (m, 3H), 6.09 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 5.20 (s, 1H), 5.05 (s, 1H), 4.29 (t, J= 9.5 Hz, 1H), 4.13 (d, J= 1.2 Hz, 4H), 3.80 (t, J= 6.6 Hz, 2H), 3.63 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 3.30 (d, J= 6.2 Hz, 2H), 3.22 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 2.43 (s, 6H), 2.15 (d, J= 8.6 Hz, 3H), 1.89 (s, 1H)。
實例 202.3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2S)-2-甲基-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 329)
202.1. 合成 (2S)-2-( 羥基甲基 )-2- 甲基吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2185
在0℃下在氮氣氛圍下向(2S)-1-(三級丁氧基羰基)-2-甲基吡咯啶-2-甲酸(2.00 g，8.72 mmol，1.00當量)於THF (20 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加BH 3-THF (13.10 mL，13.09 mmol，1.50當量)。將所得混合物在75℃下在氮氣氛圍下攪拌1小時。TLC可偵測到所需產物。反應在0℃下用MeOH淬滅。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EA (20:1)溶離得到呈淺黃色油狀物之( 2S)-2-(羥基甲基)-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(1.60 g，85.20%)。
202.2. 合成得到 ( 2S)-2-{[(4- 氰基吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 }-2- 甲基吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2187
在室溫下在氮氣氛圍下向(2S)-2-(羥基甲基)-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(1.20 g，5.57 mmol，1.00當量)及3-氟吡啶-4-甲腈(681.00 mg，5.57 mmol，1.00當量)於DMF (12 mL)中之攪拌混合物中分批添加Cs 2CO 3(5.45 g，16.72 mmol，3.00當量)。將所得混合物在80℃下在氮氣氛圍下攪拌2小時。LCMS可偵測到所需產物。所得混合物用EtOAc (3 x 50 mL)萃取。合併之有機層用NaCl水溶液(3x100 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EA (5:1)溶離得到呈無色油狀物之(2S)-2-{[(4-氰基吡啶-3-基)氧基]甲基}-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(1.60 g，90.44%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值318.0。
202.3. 合成 (2S)-2-({[4-( 胺基甲基 ) 吡啶 -3- 基 ] 氧基 } 甲基 )-2- 甲基吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2189
在室溫下在氬氣氛圍下向(2S)-2-{[(4-氰基吡啶-3-基)氧基]甲基}-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(1.00 g，3.15 mmol，1.00當量)及NH 3(g)/MeOH (10 mL)於MeOH (20 mL)中之攪拌溶液中分批添加雷尼鎳(200.00 mg，1.86 mmol，0.59當量，80%)。將所得混合物在室溫下在氫氣氛圍下攪拌2小時。LCMS可偵測到所需產物。過濾所得混合物，用MeOH (3 x 50 mL)洗滌濾餅。在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (10:1)溶離得到呈黃色油狀物之( 2S)-2-({[4-(胺基甲基)吡啶-3-基]氧基}甲基)-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(1.00 g，98.75%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值322.0。
202.4. 合成 (2S)-2-[({4-[({3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基甲硫醯基 ]-2- 側氧基 -5,6- 二氫 -1H- 吡啶 -4- 基 } 胺基 ) 甲基 ] 吡啶 -3- 基 } 氧基 ) 甲基 ]-2- 甲基吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2191
在室溫下在氮氣氛圍下向(2S)-2-({[4-(胺基甲基)吡啶-3-基]氧基}甲基)-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(960.00 mg，2.99 mmol，1.00當量)及N-(3-氟-2-甲氧基苯基)-4-羥基-2-側氧基-5,6-二氫-1H-吡啶-3-硫代甲醯胺(885.00 mg，2.99 mmol，1.00當量)於DMF (10 mL)中之攪拌溶液中一次性添加DIEA (1.16 g，8.96 mmol，3.00當量)及PyBOP (2.33 g，4.48 mmol，1.50當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌隔夜。LCMS可偵測到所需產物。所得混合物用EtOAc (3 x 30mL)萃取。合併之有機層用NaCl水溶液(3x50 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EA (1:1)溶離得到呈黃色固體狀之( 2S)-2-[({4-[({3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-2-側氧基-5,6-二氫-1H-吡啶-4-基}胺基)甲基]吡啶-3-基}氧基)甲基]-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(1.00 g，55.83%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值600.0。
202.5. 合成 (2S)-2-{[(4-{3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 }-2- 甲基吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2193
在室溫下在氮氣氛圍下向(2S)-2-[({4-[({3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-2-側氧基-5,6-二氫-1H-吡啶-4-基}胺基)甲基]吡啶-3-基}氧基)甲基]-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(950.00 mg，1.58 mmol，1.00當量)於MeOH (10 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加H 2O 2(234.00 mg，2.06 mmol，1.30當量，30%)。將所得混合物在80℃下在氮氣氛圍下攪拌隔夜。LCMS可偵測到所需產物。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化(管柱：C18管柱；移動相，ACN/水，0%至60%梯度/10 min；偵測器，UV 254 nm)，得到呈黃色固體狀之( 2S)-2-{[(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(240.00 mg，26.78%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值566.0。
202.6. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{[(2S)-2- 甲基吡咯啶 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2195
在室溫下在氮氣氛圍下向(2S)-2-{[(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(100.00 mg，0.18 mmol，1.00當量)於DCM (1 mL)中之攪拌混合物中添加TFA (0.5 mL)。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮得到呈黃色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2S)-2-甲基吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(70.00 mg，85.05%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值466.1。
202.7. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{[(2S)-2- 甲基 -1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 吡咯啶 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2197
在0℃下在氮氣氛圍下向3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2S)-2-甲基吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(60.00 mg，0.13 mmol，1.00當量)於DCM (3 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加DIEA (50.00 mg，0.39 mmol，3.00當量)及丙烯醯氯(12.00 mg，0.13 mmol，1.00當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。LCMS可偵測到所需產物。所得混合物用CH 2Cl 2: MeOH (3 x 10 mL)萃取。合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。在真空下濃縮所得混合物且溶解於DMSO。粗產物(100.00 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep C18 OBD管柱，30*100 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH4HCO3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：20% B至45% B/9 min, 45% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8.85；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2S)-2-甲基-1-(丙-2-烯醯基)吡咯啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(9.70 mg，14.48%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值520.1。 1H NMR (400 MHz, 氯仿- d) δ11.71 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.95 (d, J= 5.5 Hz, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.47 (d, J= 5.5 Hz, 1H), 6.68 - 6.41 (m, 3H), 6.35 (m, J= 16.6, 2.1 Hz, 1H), 6.07 (m, J= 8.2, 1.4 Hz, 1H), 5.73 (m, J= 10.2, 2.1 Hz, 1H), 5.22 (s, 1H), 4.41 - 4.20 (m, 2H), 4.11 (d, J= 1.3 Hz, 3H), 3.91 - 3.68 (m, 2H), 3.68 - 3.50 (m, 2H), 3.12 (m, J= 7.6, 6.0 Hz, 2H), 2.16 - 2.02 (m, 3H), 2.00 - 1.95 (m, 1H), 1.72 (s, 3H)。
實例 203.2-(3-{[(2R)-1-(丁-2-炔醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(2-乙氧基-3-氟苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 352)
203.1. 合成 (2R)-2-{[(4-{3-[(2- 乙氧基 -3- 氟苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 } 氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2199
在氬氣氛圍下向(2R)-2-{[(4-{3-碘-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(20.00 mg，0.04 mmol，1.00當量)及2-乙氧基-3-氟苯胺(9.00 mg，0.06 mmol，1.50當量)於DMF (0.3 mL)中之攪拌混合物中添加Ephos Pd G4 (4.00 mg，0.01 mmol，0.10當量)及Cs 2CO 3(25.00 mg，0.08 mmol，2.00當量)。所得懸浮液用氬氣回填三次且在50℃下攪拌2小時。LCMS確認反應完成且觀察到所需產物。所得混合物藉由矽膠墊過濾，且濾餅用DCM (2x10 mL)洗滌。在減壓下濃縮濾液，藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (20:1)溶離得到呈黃色固體狀之( 2R)-2-{[(4-{3-[(2-乙氧基-3-氟苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(200.00 mg，950.58%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值552.2。
203.2. 合成 2-{3-[(2R)- 氮雜環丁烷 -2- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 }-3-[(2- 乙氧基 -3- 氟苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2201
在室溫下在氮氣氛圍下向(2R)-2-{[(4-{3-[(2-乙氧基-3-氟苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(80.00 mg，0.15 mmol，1.00當量)於DCM (2 mL)中之攪拌混合物中添加TFA (1 mL)。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮得到呈紅色油狀物之2-{3-[(2R)-氮雜環丁烷-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-3-[(2-乙氧基-3-氟苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(160.00 mg，粗品)。 LC-MS: (M+H) +實驗值452.1。
203.3. 合成 2-(3-{[(2R)-1-( 丁 -2- 炔醯基 ) 氮雜環丁烷 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-3-[(2- 乙氧基 -3- 氟苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2203
將2-{3-[(2R)-氮雜環丁烷-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-3-[(2-乙氧基-3-氟苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(65.00 mg，0.14 mmol，1.00當量)於THF (4 mL)中之溶液用DIEA鹼化至pH為8。在0℃下在氮氣氛圍下向上述混合物中添加2-丁炔酸(24.00 mg，0.29 mmol，2.00當量)，隨後逐滴添加T 3P (69.00 mg，0.22 mmol，1.50當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。在0℃下將飽和水溶液NaHCO 3(10 mL)添加至反應混合物中且用EtOAc (3 x 10 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。在減壓下濃縮濾液得到粗產物(60 mg)，藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep C18 OBD管柱，30*100 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：31% B至61% B/9 min, 61% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：8.85；運行次數：0)，得到呈白色固體狀之2-(3-{[(2R)-1-(丁-2-炔醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(2-乙氧基-3-氟苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(24.70 mg，33.02%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值518.1。 1H NMR (300 MHz, 氯仿- d) δ11.42 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.94 (d, J= 5.4 Hz, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.43 (d, J= 5.4 Hz, 1H), 6.62 - 6.40 (m, 2H), 6.05 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 5.27 (s, 1H), 5.05 - 4.87 (m, 1H), 4.50 (t, J= 9.8 Hz, 1H), 4.40 - 4.18 (m, 5H), 3.64 - 3.53 (m, 2H), 3.25 - 3.00 (m, 2H), 2.62 (d, J= 2.3 Hz, 1H), 2.12 (d, J= 7.0 Hz, 1H), 2.04 (t, J= 7.0 Hz, 3H), 1.63 - 1.47 (m, 3H)。
實例 204.3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2R)-1-(2-氟丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 361)
204.1. 合成 2-{3-[(2R)- 氮雜環丁烷 -2- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 }-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2205
在室溫下在氮氣氛圍下向(2R)-2-{[(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(100.00 mg，0.19 mmol，1.00當量)於DCM (2 mL)中之攪拌混合物中添加TFA (1 mL)。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮得到呈紅色油狀物之2-{3-[(2R)-氮雜環丁烷-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(247.00 mg，粗品)。 LC-MS: (M+H) +實驗值438.2。
204.2. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{[(2R)-1-(2- 氟丙 -2- 烯醯基 ) 氮雜環丁烷 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2207
將2-{3-[(2R)-氮雜環丁烷-2-基甲氧基]吡啶-4-基}-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(81.00 mg，0.19 mmol，1.00當量)於THF (4 mL)中之溶液用DIEA鹼化至pH為8。在0℃下在氮氣氛圍下向上述混合物中添加2-氟丙-2-烯酸(33.00 mg，0.37 mmol，2.00當量)，隨後逐滴添加T 3P (88.00 mg，0.28 mmol，1.50當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。在0℃下將飽和NaHCO 3水溶液 (10 mL)添加至反應混合物中且用EtOAc (3 x 10 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。在減壓下濃縮濾液得到粗產物(60.00 mg)，藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep C18 OBD管柱，30*100 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：26% B至52% B/8 min, 52% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：6.32；運行次數：0)，得到呈白色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2R)-1-(2-氟丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(19.20 mg，20.23%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值510.2。 1H NMR (400 MHz, 氯仿- d) δ11.59 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.95 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.79 (s, 1H), 7.49 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 6.69 - 6.54 (m, 1H), 6.52 (d, J= 9.4 Hz, 1H), 6.04 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 5.62 (dd, J= 45.7, 3.2 Hz, 1H), 5.28 - 5.15 (m, 2H), 5.10 (q, J= 8.7 Hz, 1H), 4.66 - 4.38 (m, 3H), 4.32 (d, J= 9.6 Hz, 1H), 4.11 (s, 3H), 3.70 - 3.52 (m, 2H), 3.17 - 3.08 (m, 2H), 2.77 - 2.63 (m, 1H), 2.23 - 2.14 (m, 1H)。
實例 205.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(1S,3R,4R)-2-(丙-2-烯醯基)-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-3-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 274)
205.1. 合成 (1S,3R,4R)-3-( 羥基甲基 )-2- 氮雜雙環 [2.2.1] 庚烷 -2- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2209
在0℃下在N2氛圍下向(1S,3R,4R)-2-(三級丁氧基羰基)-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-3-甲酸(5 g，20.72 mmol，1當量)於THF (50 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加BH3-THF (2.15 g，24.865 mmol，1.2當量)。將所得混合物在室溫下在N2氛圍下攪拌2小時。藉由TLC監測反應。在0℃下藉由添加飽和NaHCO3水溶液淬滅反應。水層用EA 500 ml萃取。所得混合物用飽和NaCl水溶液500ml洗滌。所得混合物用Na2SO4乾燥。將所得混合物在減壓下濃縮。此產生呈無色油狀物之(1S,3R,4R)-3-(羥基甲基)-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸三級丁酯(3.5 g，99.78%)。 LC-MS: M+H實驗值：228。
205.2. 合成 (1S,3R,4R)-3-{[(4- 氯吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 }-2- 氮雜雙環 [2.2.1] 庚烷 -2- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2211
將4-氯-3-氟吡啶(1300 mg，10.559 mmol，1當量)及NaH (760.14 mg，31.677 mmol，3當量)於DMF (20 mL)中之混合物在0℃下在氮氣氛圍下攪拌20分鐘。向上述混合物中分批添加4-氯-3-氟吡啶(1388.77 mg，10.559 mmol，1當量)。將所得混合物在室溫下再攪拌隔夜。反應在0℃下用水淬滅。所得混合物用EtOAc (3 x 50 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(1x200 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EA (2:1)溶離得到呈無色固體狀之(1S,3R,4R)-3-{[(4-氯吡啶-3-基)氧基]甲基}-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸三級丁酯(1000 mg，40.25%)。 LC-MS: M+H實驗值：339。
205.3. 合成 (1S,3R,4R)-3-{[(4-{4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 }-2- 氮雜雙環 [2.2.1] 庚烷 -2- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2213
在50℃下在氮氣氛圍下向(1S,3R,4R)-3-{[(4-氯吡啶-3-基)氧基]甲基}-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸三級丁酯(1000 mg，0.0295 mmol，1當量)、2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(696.245 mg，2.656 mmol，1當量)及Na2CO3 (563.055 mg，5.312 mmol，2當量)於THF (10 mL)及H 2O (5 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加XPhos Pd G3 (250.00 mg，0.003 mmol，0.1當量)。所得混合物用EtOAc (3 x50 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(2x100 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (10:1)溶離得到呈無色固體狀之(1S,3R,4R)-3-{[(4-{4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸三級丁酯(1000 mg，85.85%)。 LC-MS: M+H實驗值：439。
205.4. 合成 (1S,3R,4R)-3-((4-(3- 碘 -4- 側氧基 -4,5,6,7- 四氫 -1H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 ) 吡啶 -3- 基氧基 ) 甲基 )-2- 氮雜 - 雙環 [2.2.1] 庚烷 -2- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2215
在50℃下在氮氣氛圍下將(1S,3R,4R)-3-{[(4-{4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸三級丁酯(900 mg，0.38 mmol，1當量)及NIS (102.6 mg，0.457 mmol，1.2當量)於DMF (10 mL，8.615 mmol，226.66當量)中之溶液攪拌。所得混合物用EtOAc (3 x50 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(2x50 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (10:1)溶離得到呈無色固體狀之(1S,3R,4R)-3-((4-(3-碘-4-側氧基-4,5,6,7-四氫-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)吡啶-3-基氧基)甲基)-2-氮雜-雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸三級丁酯(800 mg，80.85%)。 LC-MS: M+H實驗值：565。
205.5. 合成 (1S,3R,4R)-3-{[(4-{3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 }-2- 氮雜雙環 [2.2.1] 庚烷 -2- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2217
將(1S,3R,4R)-3-{[(4-{3-碘-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸三級丁酯(200 mg，0.354 mmol，1當量)、3-氟-2-甲氧基苯胺(75.02 mg，0.531 mmol，1.5當量)、EPhos Pd G4 (32.55 mg，0.035 mmol，0.1當量)、EPhos (37.90 mg，0.071 mmol，0.2當量)及Cs 2CO 3(346.36 mg，1.062 mmol，3當量)於DMF (4 mL)中之混合物在50℃下在氮氣氛圍下攪拌2小時。所得混合物用水稀釋。所得混合物用EtOAc萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (20:1)溶離得到呈黃色固體狀之(1S,3R,4R)-3-{[(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸三級丁酯(100 mg，48.85%)。 LC-MS: M+H實驗值：594。
205.6. 合成 2-{3-[(1S,3R,4R)-2- 氮雜雙環 [2.2.1] 庚烷 -3- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 }-3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2219
將(1S,3R,4R)-3-{[(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸三級丁酯(100 mg，0.16.8 mmol，1當量)及TFA (191.923 mg，1.6830 mmol，10當量)於DCM (5 mL)中之溶液在室溫下在氮氣氛圍下攪拌2小時。反應在室溫下用IPA淬滅。在真空下濃縮所得混合物。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (10:1)溶離得到呈棕色固體狀之2-{3-[(1S,3R,4R)-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-3-基甲氧基]吡啶-4-基}-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(70 mg，84.19%)。 LC-MS: M+H實驗值：494。
205.7. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{[(1S,3R,4R)-2-( 丙 -2- 烯醯基 )-2- 氮雜雙環 [2.2.1] 庚烷 -3- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2221
在0℃下向2-{3-[(1S,3R,4R)-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-3-基甲氧基]吡啶-4-基}-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(60 mg，0.121 mmol，1.0當量)及TEA (24.58 mg，0.243 mmol，2.0當量)於CH2Cl2 (5 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加丙烯醯氯(10.98 mg，0.121 mmol，1.0當量)。將所得混合物在室溫下攪拌1小時。反應完成後，用水稀釋混合物，用EA萃取，用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥得到粗產物。殘留物藉由製備型TLC純化(管柱：Sunfire prep C18管柱，30*150 mm, 5μm；移動相A：水(0.1%FA)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：15% B至45% B/7 min, 45% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：6.9；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(1S,3R,4R)-2-(丙-2-烯醯基)-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-3-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(48.4 mg，70.634%)。 LC-MS: M+H實驗值：494。 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11.73 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 8.00 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.34 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.13 (s, 1H), 6.84 - 6.57 (m, 3H), 6.26 (dd, J = 16.6, 2.3 Hz, 1H), 6.14 (q, J = 4.4 Hz, 1H), 5.75 (dd, J = 10.3, 2.3 Hz, 1H), 4.61 (s, 1H), 4.34 (dd, J = 10.2, 6.6 Hz, 1H), 4.18 (dd, J = 10.2, 4.6 Hz, 1H), 4.05 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.34 (s, 2H), 2.96 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 2.57 (s, 1H), 2.00 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 1.72 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 1.44 (t, J = 9.4 Hz, 3H)。
實例 206.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2S)-3,3-二甲基-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 512)
206.1. 合成 2-{[(4- 氯吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 }-3,3- 二甲基氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2223
在0℃下向(2S)-2-(羥基甲基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(2 g，9.937 mmol，1當量)於THF中之溶液中添加氫化鈉(60%/油，NaH (0.60 g，14.905 mmol，1.5當量，60%))。將混合物攪拌15分鐘。4-氯-3-氟吡啶(1.31 g，9.937 mmol，1當量)添加且使混合物升溫至室溫且攪拌20小時。反應混合物用水淬滅且用DCM (3*25 mL)萃取。得到呈黃色油狀物之2-{[(4-氯吡啶-3-基)氧基]甲基}-3,3-二甲基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(1268 mg，41.76%)。 LC-MS: M+H實驗值：327.35。
206.2. 合成 3,3- 二甲基 -2-{[(4-{4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 } 氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2225
向2-{[(4-氯吡啶-3-基)氧基]甲基}-3,3-二甲基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(1168 mg，3.574 mmol，1當量)及2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(1405.16 mg，5.361 mmol，1.5當量)於THF (12 mL)及H2O (3 mL)中之溶液中添加Na 2CO 3(757.57 mg，7.148 mmol，2當量)及XPhos Pd G3 (302.51 mg，0.357 mmol，0.1當量)。在50℃下在氮氣氛圍下攪拌2小時後，將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用DCM及MeOH (92:8)溶離得到呈黃色固體狀之3,3-二甲基-2-{[(4-{4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(1200 mg，78.72%)。 LC-MS: M+H實驗值：427.15。
206.3. 合成 2-{[(4-{3- 碘 -4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 }-3,3- 二甲基氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2227
在室溫下向3,3-二甲基-2-{[(4-{4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(1200 mg，2.813 mmol，1當量)於DMF (12 mL)中之攪拌溶液中分批添加NIS (949.49 mg，4.220 mmol，1.5當量)。將所得混合物在室溫下攪拌1小時。所得混合物用EA (3 x 50 mL)萃取。合併之有機層在減壓下濃縮。殘留物藉由製備型TLC純化(DCM及MeOH 15:1)，得到呈黃色固體狀之2-{[(4-{3-碘-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}-3,3-二甲基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(1450 mg，93.30%)。 LC-MS: M+H實驗值：553.1。
206.4. 合成 2-{[(4-{3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 }-3,3- 二甲基氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2229
在室溫下在N2氛圍下向2-{[(4-{3-碘-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}-3,3-二甲基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(1400 mg，2.534 mmol，1當量)及3-氯-2-甲氧基苯胺(1198.23 mg，7.602 mmol，3當量)於DMF (15 mL)中之攪拌混合物中分批添加Cs2CO3 (2477.21 mg，7.602 mmol，3當量)及Ephos Pd G4 (232.79 mg，0.253 mmol，0.1當量)。將所得混合物在50℃下在N2氛圍下攪拌2小時。過濾所得混合物，隨後用EA (1x1 100 mL)洗滌濾餅。在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由製備型TLC純化(DCM及MeOH 20:1)，得到呈淡黃色固體狀之2-{[(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}-3,3-二甲基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(1.4 g，94.90%)。
206.5. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-{3-[(3,3- 二甲基氮雜環丁烷 -2- 基 ) 甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 }-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2231
在室溫下向2-{[(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}-3,3-二甲基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(1.5 g，2.577 mmol，1當量)於DCM (15 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加TFA (7 mL，94.241 mmol，36.57當量)。將所得混合物在室溫下攪拌1.5小時。水層用DCM及H 2O (3x1 150 mL)萃取。得到呈淡黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[(3,3-二甲基氮雜環丁烷-2-基)甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(1.1 g，88.57%)。 LC-MS: M+H實驗值：482.45。
206.6. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{[3,3- 二甲基 -1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 氮雜環丁烷 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2233
在0℃下向3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[(3,3-二甲基氮雜環丁烷-2-基)甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(700 mg，1.452 mmol，1當量)於THF (10 mL)及NaHCO3水溶液(366.02 mg，4.356 mmol，3當量)中之混合物中逐滴添加丙烯醯氯(131.45 mg，1.452 mmol，1當量)。將混合物在0℃下攪拌1小時。LCMS可偵測到所需產物。所得混合物用EA (3 x 300ml)萃取。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由製備型TLC (PE : EA = 10:1)純化，得到粗產物。粗產物藉由製備型HPLC純化得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[3,3-二甲基-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(404 mg，51.89%)。 LC-MS: M+H實驗值：536.15。
206.7. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{[(2S)-3,3- 二甲基 -1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 氮雜環丁烷 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2235
粗產物3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[3,3-二甲基-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(170 mg，0.317 mmol，1當量)，藉由製備型對掌性HPLC在以下條件下純化(管柱：CHIRAL ART Amylose-SA, 2*25 cm, 5 μm；移動相A：Hex(0.5% 2M NH3-MeOH)--HPLC，移動相B：EtOH--HPLC；流動速率：20 mL/min；梯度：50% B至50% B/18 min；波長：220/254 nm；RT1(min)：6.51；RT2(min)：14.92；樣品溶劑：EtOH--HPLC；注入體積：3 mL；運行次數：2)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2S)-3,3-二甲基-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(55.5 mg，32.48%)。 LC-MS: (M+H)+實驗值536.15。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 11.72 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 7.96 (d, J= 5.1 Hz, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.32 (d, J= 5.0 Hz, 1H), 6.81 (s, 1H), 6.68 - 6.57 (m, 2H), 6.35 (dd, J= 17.0, 10.2 Hz, 1H), 6.22 - 6.11 (m, 2H), 5.69 (s, 1H), 4.56 (t, J= 9.0 Hz, 1H), 4.45 - 4.35 (m, 2H), 3.89 (s, 4H), 3.84 (s, 1H), 3.41 (td, J= 6.9, 2.4 Hz, 2H), 2.92 (s, 3H), 1.24 (d, J= 21.7 Hz, 6H)
實例 207.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2R)-3,3-二甲基-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 513)
Figure 02_image2237
粗產物3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[3,3-二甲基-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(170 mg，0.317 mmol，1當量)，藉由製備型對掌性HPLC在以下條件下純化(管柱：CHIRAL ART Amylose-SA, 2*25 cm, 5 μm；移動相A：Hex(0.5% 2M NH3-MeOH)--HPLC，移動相B：EtOH--HPLC；流動速率：20 mL/min；梯度：50% B至50% B/18 min；波長：220/254 nm；RT1(min)：6.51；RT2(min)：14.92；樣品溶劑：EtOH--HPLC；注入體積：3 mL；運行次數：2)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2R)-3,3-二甲基-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(50.5 mg，29.59%)。 LC-MS: (M+H)+實驗值536.15。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.72 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 7.96 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.32 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.81 (s, 1H), 6.68 - 6.57 (m, 2H), 6.35 (dd, J = 17.0, 10.2 Hz, 1H), 6.22 - 6.11 (m, 2H), 5.69 (s, 1H), 4.56 (t, J = 9.0 Hz, 1H), 4.45 - 4.35 (m, 2H), 3.89 (s, 4H), 3.84 (s, 1H), 3.41 (td, J = 6.9, 2.4 Hz, 2H), 2.92 (s, 3H), 1.24 (d, J = 21.7 Hz, 6H)。
實例 208.rel-2-(3-{[(2R)-3,3-二甲基-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 356)
208.1. 合成 2-{[(4-{3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 }-3,3- 二甲基氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2239
在室溫下在N2氛圍下向2-{[(4-{3-碘-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}-3,3-二甲基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(650 mg，1.177 mmol，1當量)及3-氟-2-甲氧基苯胺(498.24 mg，3.531 mmol，3當量)於DMF (6 mL)中之攪拌混合物中分批添加Cs 2CO 3(1150.13 mg，3.531 mmol，3當量)及Ephos Pd G4 (108.08 mg，0.118 mmol，0.1當量)。將所得混合物在50℃下在N2氛圍下攪拌2小時。過濾所得混合物，隨後用EA (1x1 30 mL)洗滌濾餅。在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由製備型TLC (DCM及MeOH 20:1)純化，得到呈淡黃色固體狀之2-{[(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}-3,3-二甲基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(650 mg，97.66%)。 LC-MS: (M+H)+實驗值566.2。
208.2. 合成 2-{3-[(3,3- 二甲基氮雜環丁烷 -2- 基 ) 甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 }-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2241
在室溫下向2-{[(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}-3,3-二甲基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(1000 mg，1.768 mmol，1當量)於DCM (10 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加TFA (5 mL，67.315 mmol，38.08當量)。將所得混合物在室溫下攪拌1.5小時。水層用DCM及H2O (3x1 150 mL)萃取。得到呈淡黃色固體狀之2-{3-[(3,3-二甲基氮雜環丁烷-2-基)甲氧基]吡啶-4-基}-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(540 mg，65.61%)。 LC-MS: (M+H)+實驗值466.1。
208.3. 合成 2-(3-{[(2S)-3,3- 二甲基 -1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 氮雜環丁烷 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2243
在-30℃下在N 2氛圍下向2-{3-[(3,3-二甲基氮雜環丁烷-2-基)甲氧基]吡啶-4-基}-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100 mg，0.215 mmol，1當量)及TEA (108.68 mg，1.075 mmol，5當量)於DCM (2 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加丙烯醯氯(19.44 mg，0.215 mmol，1當量)。將所得混合物在-30℃下攪拌0.5小時。粗產物藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：YMC-Actus Triart C18, 30*150 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH4HCO3+0.1%NH 3.H 2O)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：45% B至55% B/8 min, 55% B；波長：254; 220 nm；RT1(min)：7.55；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之2-(3-{[(2S)-3,3-二甲基-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(24 mg，21.50%)。 LC-MS: (M+H)+實驗值520.25。
208.4. 合成 rel-2-(3-{[(2R)-3,3- 二甲基 -1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 氮雜環丁烷 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2245
粗產物2-(3-{[3,3-二甲基-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(40 mg，0.077 mmol，1當量)，藉由製備型對掌性HPLC在以下條件下純化(管柱：CHIRALPAK IG, 2*25 cm, 5 μm；移動相A：Hex: DCM=3: 1(0.5% 2M NH 3-MeOH)--HPLC，移動相B：EtOH--HPLC；流動速率：20 mL/min；梯度：20% B至20% B/20 min；波長：220/254 nm；RT1(min)：13.70；RT2(min)：19.36；樣品溶劑：ETOH: DCM=1: 1；注入體積：2 mL；運行次數：2)，得到呈米白色固體狀之rel-2-(3-{[(2R)-3,3-二甲基-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(12.7 mg，31.59%)。 LC-MS: (M+H)+實驗值520.1。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.38 (s, 1H), 7.95 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.32 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 6.79 (s, 1H), 6.57 (q, J = 7.7 Hz, 1H), 6.43 (ddd, J = 10.0, 8.4, 1.5 Hz, 1H), 6.34 (dd, J = 17.0, 10.2 Hz, 1H), 6.22 - 6.13 (m, 1H), 6.00 (dt, J = 8.2, 1.4 Hz, 1H), 4.59 - 4.50 (m, 1H), 4.45 - 4.35 (m, 2H), 3.91 (d, J = 1.0 Hz, 5H), 3.40 (td, J = 6.9, 2.6 Hz, 2H), 2.92 (q, J = 4.7, 3.1 Hz, 2H), 1.27 (s, 3H), 1.22 (d, J = 4.1 Hz, 3H)。
實例 209.rel-2-(3-{[(2R)-1-(丁-2-炔醯基)-3,3-二甲基氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 355)
Figure 02_image2247
粗產物2-(3-{[1-(丁-2-炔醯基)-3,3-二甲基氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(20 mg，0.038 mmol，1當量)，藉由製備型對掌性HPLC在以下條件下純化(管柱：CHIRALPAK IA-3, 4.6*50mm 3um；移動相A：Hex(0.1%DEA): EtOH=50: 50；流動速率：1 mL/min；梯度：0% B至0% B；注入體積：5ul mL)，得到呈淡黃色固體狀之rel-2-(3-{[(2R)-1-(丁-2-炔醯基)-3,3-二甲基氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(5 mg，24.88%)。 LC-MS: (M+H)+實驗值532.15。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.38 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.36 (s, 1H), 7.31 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 6.80 (s, 1H), 6.56 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 6.43 (t, J = 9.7 Hz, 1H), 5.99 (dt, J = 8.3, 1.4 Hz, 1H), 4.56 (dd, J = 10.2, 7.4 Hz, 1H), 4.40 (dd, J = 10.2, 4.5 Hz, 1H), 4.33 (dd, J = 7.4, 4.4 Hz, 1H), 3.91 (s, 5H), 3.39 (td, J = 6.9, 2.6 Hz, 2H), 2.86 (s, 2H), 1.98 (s, 3H), 1.26 (s, 3H), 1.19 (s, 3H)。
實例 210.rel-2-(3-{[(2R)-1-(丁-2-炔醯基)-3,3-二甲基氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 325)
210.1. 合成 2-(3-{[1-( 丁 -2- 炔醯基 )-3,3- 二甲基氮雜環丁烷 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2249
在0℃下向2-{3-[(3,3-二甲基氮雜環丁烷-2-基)甲氧基]吡啶-4-基}-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(100 mg，0.215 mmol，1當量)及T3P (0.5 mL，1.571 mmol，7.32當量)於吡啶(0.5 mL)及THF (1 mL)中之攪拌混合物中逐滴添加2-丁炔酸(21.67 mg，0.258 mmol，1.2當量)。將所得混合物在室溫下攪拌3小時。用NaHCO3將混合物中和至pH為7。所得混合物用EA (3 x 15 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(1x1 30 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由製備型TLC (DCM : MeOH 20)純化，得到呈淡黃色固體狀之2-(3-{[1-(丁-2-炔醯基)-3,3-二甲基氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(40 mg，35.03%)。 LC-MS: (M+H)+實驗值532.25。
210.2. 合成 rel-2-(3-{[(2R)-1-( 丁 -2- 炔醯基 )-3,3- 二甲基氮雜環丁烷 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2251
粗產物2-(3-{[1-(丁-2-炔醯基)-3,3-二甲基氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(20 mg，0.038 mmol，1當量)，藉由製備型對掌性HPLC在以下條件下純化(管柱：CHIRALPAK IA-3, 4.6*50mm 3um；移動相A：Hex(0.1%DEA): EtOH=50: 50；流動速率：1 mL/min；梯度：0% B至0% B；注入體積：5ul mL)，得到呈淺黃色固體狀之rel-2-(3-{[(2R)-1-(丁-2-炔醯基)-3,3-二甲基氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(5 mg，24.78%)。 LC-MS: (M+H)+實驗值532.15。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.38 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.36 (s, 1H), 7.31 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 6.80 (s, 1H), 6.56 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 6.43 (t, J = 9.7 Hz, 1H), 5.99 (dt, J = 8.3, 1.4 Hz, 1H), 4.56 (dd, J = 10.2, 7.4 Hz, 1H), 4.40 (dd, J = 10.2, 4.5 Hz, 1H), 4.33 (dd, J = 7.4, 4.4 Hz, 1H), 3.91 (s, 5H), 3.39 (td, J = 6.9, 2.6 Hz, 2H), 2.86 (s, 2H), 1.98 (s, 3H), 1.26 (s, 3H), 1.19 (s, 3H)。
實例 211.2-(3-{[(2R)-3,3-二甲基-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 324)
Figure 02_image2253
粗產物2-(3-{[3,3-二甲基-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(40 mg，0.077 mmol，1當量)，藉由製備型對掌性HPLC在以下條件下純化(管柱：CHIRALPAK IG, 2*25 cm, 5 μm；移動相A：Hex: DCM=3: 1(0.5% 2M NH 3-MeOH)--HPLC，移動相B：EtOH--HPLC；流動速率：20 mL/min；梯度：20% B至20% B/20 min；波長：220/254 nm；RT1(min)：13.70；RT2(min)：19.36；樣品溶劑：ETOH: DCM=1: 1；注入體積：2 mL；運行次數：2)，得到呈米白色固體狀之2-(3-{[(2R)-3,3-二甲基-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(11.5 mg，28.61%)。 LC-MS: (M+H)+實驗值520.1。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.38 (s, 1H), 7.95 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.32 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 6.79 (s, 1H), 6.57 (q, J = 7.7 Hz, 1H), 6.43 (ddd, J = 10.0, 8.4, 1.5 Hz, 1H), 6.34 (dd, J = 17.0, 10.2 Hz, 1H), 6.22 - 6.13 (m, 1H), 6.00 (dt, J = 8.2, 1.4 Hz, 1H), 4.59 - 4.50 (m, 1H), 4.45 - 4.35 (m, 2H), 3.91 (d, J = 1.0 Hz, 5H), 3.40 (td, J = 6.9, 2.6 Hz, 2H), 2.92 (q, J = 4.7, 3.1 Hz, 2H), 1.27 (s, 3H), 1.22 (d, J = 4.1 Hz, 3H)。
實例 212.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2S)-2-甲基氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 510)
212.1. 合成 2-{[(4- 溴吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 }-2- 甲基氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2255
在0℃下向2-(羥基甲基)-2-甲基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(600 mg，2.981 mmol，1當量)於THF (3.0 mL)中之溶液中添加氫化鈉(60%/油，107.31 mg，4.471 mmol，1.5當量)。將混合物攪拌15分鐘。添加4-溴-3-氟吡啶(629.57 mg，3.577 mmol，1.20當量)且使混合物升溫至室溫且攪拌2小時。反應混合物用水淬滅且用DCM (3*25 mL)萃取。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用DCM: MeOH (15:1)溶離得到呈白色固體狀之2-{[(4-溴吡啶-3-基)氧基]甲基}-2-甲基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(500 mg，51.23%)。
212.2. 合成 2- 甲基 -2-{[(4-{4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 } 氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2257
向2-{[(4-溴吡啶-3-基)氧基]甲基}-2-甲基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(50 mg，0.140 mmol，1當量)及2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(55.03 mg，0.210 mmol，1.5當量)於二㗁烷(1.5 mL)中之攪拌溶液中添加K 2CO 3(48.36 mg，0.350 mmol，2.5當量)及Pd(dppf)Cl 2(15.36 mg，0.021 mmol，0.15當量)。在80℃下在氮氣氛圍下攪拌3小時後，將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由製備型TLC/矽膠管柱層析法純化，用DCM: MeOH (25:1)溶離得到呈黃色固體狀之2-甲基-2-{[(4-{4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(29 mg，41.23%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值426.05。
212.3. 合成 2-{[(4-{3- 碘 -4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 }-2- 甲基氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2259
在室溫下在N 2氛圍下向2-甲基-2-{[(4-{4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(1000 mg，2.424 mmol，1當量)於DMF (15 mL)中之攪拌溶液中分批添加NIS (654.52 mg，2.909 mmol，1.2當量)。在0℃下藉由添加Na 2SO 3(50ml 1mol/L)淬滅反應。藉由過濾收集所沈澱之固體且用THF (2x2 10ml)洗滌。殘留物藉由EA (15ml)濕磨來純化得到呈淡黃色固體狀之2-{[(4-{3-碘-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基} 吡啶-3-基)氧基]甲基}-2-甲基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(1300 mg，99.60%)。 LC-MS: (M-H) -實驗值450.05。
212.4. 合成 2-{[(4-{3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 }-2- 甲基氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2261
向2-{[(4-{3-碘-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}-2-甲基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(150 mg，0.279 mmol，1當量)  and 3-氯-2-甲氧基苯胺(87.82 mg，0.558 mmol，2當量)於DMF (3.5 mL)中之溶液中添加Cs 2CO 3(226.94 mg，0.698 mmol，2.5當量)及EPhos Pd G 4(51.18 mg，0.056 mmol，0.2當量)及EPhos (29.80 mg，0.056 mmol，0.2當量)。在50℃下在氮氣氛圍下攪拌2小時後，將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由製備型TLC/矽膠管柱層析法純化，用DCM:MeOH (20:1)溶離得到呈淡黃色固體狀之2-{[(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}-2-甲基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(75 mg，37.91%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值541.10。
212.5. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-{3-[(2- 甲基氮雜環丁烷 -2- 基 ) 甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 }-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2263
在室溫下在N 2氛圍下向2-{[(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}-2-甲基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(75 mg，0.132 mmol，1當量)於DCM (2.5 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加TFA (1.5 mL)。混合物用NaHCO 3鹼化至pH為8.5。混合物用EA (2 x 30ml)萃取。合併之有機層用鹽水(2x2 10ml)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液得到呈淡黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[(2-甲基氮雜環丁烷-2-基)甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 (500 mg，51.23%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值441.10。
212.5. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{[2- 甲基 -1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 氮雜環丁烷 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2265
在室溫下在N 2氛圍下將3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[(2-甲基氮雜環丁烷-2-基)甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(45 mg，0.096 mmol，1當量)及NaHCO 3(20.20 mg，0.240 mmol，2.5當量)於THF (2 mL)及H 2O (2 mL)中之溶液逐滴添加丙烯醯氯(7.83 mg，0.086 mmol，0.9當量)。所得混合物用EA (2 x 20ml)萃取。合併之有機層用鹽水(2x2 20ml)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液且藉由製備型TLC(DCM/MeOH= 15:1)純化得到呈淺黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[2-甲基-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(30 mg，60%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值501.10。
212.5. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{[(2S)-2- 甲基氮雜環丁烷 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2267
粗產物(50 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：CHIRALPAK IG-3, 4.6*50 mm, 3 um；移動相A：(Hex: DCM=3: 1)( 0.1%DEA ): EtOH=80: 20；流動速率：1 mL/min；梯度：0% B至0% B；注入體積：5ul mL)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2S)-2-甲基氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(4.6 mg，10.22%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值501.10。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 11.93 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.00 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.34 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.12 (s, 1H), 6.76 - 6.63 (m, 2H), 6.34 - 6.07 (m, 3H), 5.69 (dd, J = 9.9, 2.5 Hz, 1H), 4.55 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 4.31 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 4.23 - 4.03 (m, 2H), 3.89 (s, 3H), 3.42 (s, 3H), 3.05 - 2.76 (m, 2H), 2.41 - 2.29 (m, 1H), 2.12 (q, J = 10.0 Hz, 1H), 1.67 (s, 3H), 1.57 (s, 1H)。
實例 213.3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2R)-2-甲基氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 511)
Figure 02_image2269
粗產物(50 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：CHIRALPAK IG-3, 4.6*50 mm, 3 um；移動相A：(Hex: DCM=3: 1)( 0.1%DEA ): EtOH=80: 20；流動速率：1 mL/min；梯度：0% B至0% B；注入體積：5ul mL)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2R)-2-甲基氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(5.6 mg，11.86%)。 LC-MS: (M+H)+實驗值522.50。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.93 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.00 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.34 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.12 (s, 1H), 6.76 - 6.63 (m, 2H), 6.34 - 6.07 (m, 3H), 5.69 (dd, J = 9.9, 2.5 Hz, 1H), 4.55 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 4.31 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 4.23 - 4.03 (m, 2H), 3.89 (s, 3H), 3.42 (s, 3H), 3.05 - 2.76 (m, 2H), 2.41 - 2.29 (m, 1H), 2.12 (q, J = 10.0 Hz, 1H), 1.67 (s, 3H), 1.57 (s, 1H)。
實例 214.rel-3-[(2-乙基-3-氟苯基)胺基]-2-(3-{[(2R)-2-甲基-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 359)
Figure 02_image2271
3-[(2-乙基-3-氟苯基)胺基]-2-(3-{[2-甲基-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(15 mg，0.030 mmol，1當量)，藉由以下管柱純化：CHIRALPAK IG-3, 4.6*50mm; 3um；移動相A：(Hex: DCM=3: 1)( 0.1%DEA ): EtOH=70: 30；流動速率：1 mL/min；梯度：0% B至0% B；注入體積：5ul mL，得到呈黃色固體狀之rel-3-[(2-乙基-3-氟苯基)胺基]-2-(3-{[(2R)-2-甲基-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(1.2 mg，7.90%)。 LC-MS: M實驗值504.35。 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.01 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 7.99 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.29 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 7.19 (t, J = 2.6 Hz, 1H), 6.78 (td, J = 8.2, 6.7 Hz, 1H), 6.49 (t, J = 8.9 Hz, 1H), 6.30 (dd, J = 16.9, 9.8 Hz, 1H), 6.23 - 6.01 (m, 2H), 5.71 (dd, J = 9.7, 2.7 Hz, 1H), 4.58 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 4.31 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 4.16 (dtd, J = 24.4, 8.9, 6.1 Hz, 2H), 3.44 (d, J = 2.5 Hz, 2H), 3.04 - 2.87 (m, 2H), 2.72 (q, J = 7.4, 6.8 Hz, 2H), 2.38 - 2.25 (m, 1H), 2.21 - 2.04 (m, 1H), 1.69 (s, 3H), 1.29 - 1.12 (m, 3H)。
實例 215.rel-3-[(2-乙基-3-氟苯基)胺基]-2-(3-{[(2R)-2-甲基-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 309)
215.1. 合成 2- 乙烯基 -1- 氟 -3- 硝基苯
Figure 02_image2273
在室溫下在N2氛圍下向2-溴-1-氟-3-硝基苯(2 g，9.091 mmol，1當量)及2-乙烯基-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷(2.10 g，13.636 mmol，1.5當量)於二㗁烷(20 mL)中之攪拌溶液中添加Pd(dppf)Cl2 (0.67 g，0.909 mmol，0.1當量)及K2CO3 (2.51 g，18.182 mmol，2當量)。隨後將溶液在80℃下攪拌3小時。將所得混合物在減壓下濃縮且藉由矽膠管柱層析法純化，用PE/EA (100/1)溶離得到呈無色油狀物之2-乙烯基-1-氟-3-硝基苯(400 mg，26.33%)。 GC-MS: M+1 實驗值：167.9。
215.2. 合成 2- 乙基 -3- 氟苯胺
Figure 02_image2275
在室溫下向2-乙烯基-1-氟-3-硝基苯(400 mg，2.393 mmol，1當量)於MeOH (20 mL)中之攪拌溶液中添加Pd/C (80 mg)。隨後用H2回填溶液且將溶液在室溫下攪拌1小時。過濾所得混合物且濾液在減壓下濃縮得到呈無色油狀物之2-乙基-3-氟苯胺(90 mg，27.02%)。 GC-MS: M實驗值：139.0。
215.3. 合成 2-{[(4-{3-[(2- 乙基 -3- 氟苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 }-2- 甲基氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯 )
Figure 02_image2277
在室溫下在N2氛圍下向2-{[(4-{3-碘-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}-2-甲基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(250 mg，0.464 mmol，1當量)及2-乙基-3-氟苯胺(129.25 mg，0.928 mmol，2當量)於DMF (3.5 mL)中之攪拌溶液中添加EPhos Pd G4 (63.98 mg，0.070 mmol，0.15當量)及EPhos (37.25 mg，0.070 mmol，0.15當量)。隨後將溶液在50℃下攪拌3小時。水層用EA (3x20mL)萃取且萃取物在減壓下濃縮得到呈黃色油狀物之2-{[(4-{3-[(2-乙基-3-氟苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}-2-甲基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯) (113 mg，44.3%)。 LC-MS: M+H實驗值：550.0。
215.4. 合成 3-[(2- 乙基 -3- 氟苯基 ) 胺基 ]-2-{3-[(2- 甲基氮雜環丁烷 -2- 基 ) 甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 }-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2279
在0℃下在N2氛圍下向2-{[(4-{3-[(2-乙基-3-氟苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}-2-甲基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(113 mg，0.206 mmol，1當量)於DCM (3 mL)中之攪拌溶液中添加TFA (1.5 mL)。隨後將溶液在0℃下攪拌2小時。將所得混合物在減壓下濃縮得到粗品，呈黃色油狀物之3-[(2-乙基-3-氟苯基)胺基]-2-{3-[(2-甲基氮雜環丁烷-2-基)甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(92 mg，99.55%)。 LC-MS: M+H實驗值：450.2。
215.5. 合成 3 -[(2- 乙基 -3- 氟苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{[2- 甲基 -1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 氮雜環丁烷 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2281
在0℃下在N2氛圍下向3-[(2-乙基-3-氟苯基)胺基]-2-{3-[(2-甲基氮雜環丁烷-2-基)甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(113 mg，0.251 mmol，1當量)於THF (3 mL)中之攪拌溶液中添加NaHCO3 (2 mL)及丙烯醯氯(22.75 mg，0.251 mmol，1當量)。隨後將溶液在0℃下攪拌30分鐘。水層用EA (3x10mL)萃取且在減壓下濃縮萃取物。殘留物藉由製備型TLC (DCM: MeOH=15:1)純化，得到呈黃色固體狀之3-[(2-乙基-3-氟苯基)胺基]-2-(3-{[2-甲基-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(41 mg，32.39%)。 LC-MS: M+H實驗值：504.25。
215.6. 合成 rel-3-[(2- 乙基 -3- 氟苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{[(2R)-2- 甲基 -1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 氮雜環丁烷 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2283
3-[(2-乙基-3-氟苯基)胺基]-2-(3-{[2-甲基-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(15 mg，0.030 mmol，1當量)，藉由以下管柱純化：CHIRALPAK IG-3, 4.6*50mm; 3um；移動相A：(Hex: DCM=3: 1)( 0.1%DEA ): EtOH=70: 30；流動速率：1 mL/min；梯度：0% B至0% B；注入體積：5ul mL得到呈黃色固體狀之rel-3-[(2-乙基-3-氟苯基)胺基]-2-(3-{[(2R)-2-甲基-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(2.7 mg，17.84%)。 LC-MS: M+H實驗值504.35。 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.03 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 7.99 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.30 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 7.20 (q, J = 2.4 Hz, 1H), 6.78 (td, J = 8.2, 6.7 Hz, 1H), 6.50 (t, J = 8.9 Hz, 1H), 6.44 - 6.01 (m, 3H), 5.71 (dd, J = 9.7, 2.7 Hz, 1H), 4.58 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 4.31 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 4.16 (dtd, J = 24.4, 8.9, 6.0 Hz, 2H), 3.44 (d, J = 2.6 Hz, 2H), 2.97 (dt, J = 8.7, 6.8 Hz, 2H), 2.72 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 2.38 - 2.26 (m, 1H), 2.14 (ddd, J = 11.3, 9.4, 6.2 Hz, 1H), 1.69 (s, 3H), 1.30 - 1.12 (m, 3H)。
實例 216.3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2R*,4R**)-4-甲基-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 333)
216.1. 合成 2-( 羥基甲基 )-4- 甲基氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2285
在0℃下在氮氣氛圍下向1-(三級丁氧基羰基)-4-甲基氮雜環丁烷-2-甲酸(1.9 g，8.827 mmol，1當量)於THF (19 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加BH 3-THF (17.8 mL，185.993 mmol，21.07當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌隔夜。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化：管柱，矽膠；移動相，MeCN/水，10%至50%梯度/10 min；偵測器，UV 254 nm。得到呈米白色液體狀之2-(羥基甲基)-4-甲基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(1.27 g，71.49%)。 LCMS: [M+H] +實驗值202。
216.2. 合成得到 2-{[(4- 溴吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 }-4- 甲基氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2287
在0℃下在氮氣氛圍下向2-(羥基甲基)-4-甲基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(1.27 g，6.310 mmol，1當量)及4-溴吡啶-3-醇(1.10 g，6.310 mmol，1當量)於THF (13 mL)中之攪拌混合物中逐滴添加PPh3 (3.31 g，12.620 mmol，2當量)及DEAD (2.20 g，12.620 mmol，2當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化：管柱，矽膠；移動相，MeCN/水，10%至50%梯度/10 min；偵測器，UV 254 nm。得到呈棕色液體狀之2-{[(4-溴吡啶-3-基)氧基]甲基}-4-甲基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(915 mg，40.59%)。 LCMS: [M+H] +實驗值357。
216.3. 合成 2- 甲基 -4-{[(4-{4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 } 氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2289
在室溫下在氮氣氛圍下向2-{[(4-溴吡啶-3-基)氧基]甲基}-4-甲基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(915 mg，2.561 mmol，1當量)及2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(1.01 g，3.841 mmol，1.5當量)於二㗁烷(10 mL)及H2O (2 mL)中之攪拌混合物中分批添加Na2CO3 (814.39 mg，7.683 mmol，3當量)及RuPhos Palladacycle Gen.3 (428.43 mg，0.512 mmol，0.2當量)。將所得混合物在80℃下在氮氣氛圍下攪拌隔夜。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化：管柱，矽膠；移動相，MeCN/水，10%至50%梯度/10 min；偵測器，UV 254 nm。得到呈黃色油狀物之2-甲基-4-{[(4-{4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(800 mg，75.72%)。 LCMS: [M+H] +實驗值414。
216.4. 合成 2-{[(4-{3- 碘 -4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 }-4- 甲基氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2291
在0℃下在氮氣氛圍下向2-甲基-4-{[(4-{4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(800 mg，1.939 mmol，1當量)於DMF (8 mL)中之攪拌溶液中分批添加NIS (523.61 mg，2.327 mmol，1.2當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌4小時。反應在室溫下用水淬滅。藉由過濾收集所沈澱之固體且用水(3x50 mL)洗滌。得到呈黃色固體狀之2-{[(4-{3-碘-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}-4-甲基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(900 mg，86.19%)。 LCMS: [M+H] +實驗值539。
216.5. 合成 2-{[(4-{3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 }-4- 甲基氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2293
在室溫下在氮氣氛圍下向2-{[(4-{3-碘-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}-4-甲基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(900 mg，1.672 mmol，1當量)及3-氟-2-甲氧基苯胺(353.92 mg，2.508 mmol，1.5當量)於二㗁烷(9 mL)中之攪拌混合物中分批添加Cs2CO3 (1089.32 mg，3.344 mmol，2當量)及Ephos Pd G4 (307.11 mg，0.334 mmol，0.2當量)。將所得混合物在50℃下在氮氣氛圍下攪拌隔夜。水層用EtOAc (3x50 mL)萃取。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用CH 2Cl 2/MeOH (20:1)溶離得到呈棕色固體狀之2-{[(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}-4-甲基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(530 mg，57.48%)。 LCMS: [M+H] +實驗值552。
216.6. 合成 3-((3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 )-2-(3-((4- 甲基氮雜環丁烷 -2- 基 ) 甲氧基 ) 吡啶 -4- 基 )-1,5,6,7- 四氫 -4H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2295
在室溫下在氮氣氛圍下向2-{[(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}-4-甲基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(530 mg，0.961 mmol，1當量)於DCM (20 mL，0.135 mmol，0.14當量)中之攪拌溶液中逐滴添加TFA (4 mL)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌隔夜。混合物用飽和NaHCO3 (水溶液)鹼化至pH為9。水層用DCM (3x50 mL)萃取。所得粗混合物不經進一步純化直接用於下一步。 LCMS: [M+H] +實驗值452。
216.7. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{[4- 甲基 -1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 氮雜環丁烷 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2297
在0℃下在氮氣氛圍下向3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-{3-[(4-甲基氮雜環丁烷-2-基)甲氧基]吡啶-4-基}-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(400 mg，0.886 mmol，1當量)及Et3N (268.95 mg，2.658 mmol，3當量)於DCM (4 mL)中之攪拌混合物中逐滴添加丙烯醯氯(80.19 mg，0.886 mmol，1當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌10分鐘。水層用EtOAc (3x50 mL)萃取。粗產物(500 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：Xselect  CSH C18 OBD管柱 30*150mm 5μm, n；移動相A：水(0.1%FA)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：14% B至30% B/10 min, 30% B；波長：254/220 nm；RT1(min)：10；運行次數：0)，得到呈黃色油狀物之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[4-甲基-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(160 mg，35.72%)。 LCMS: [M+H] +實驗值506。
216.8. 合成 3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{[(2R*,4R**)-4- 甲基 -1-( 丙 -2- 烯醯基 ) 氮雜環丁烷 -2- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2299
粗產物(160 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：CHIRAL ART Amylose-SA, 2*25 cm, 5 μm；移動相A：MtBE(0.5% 2M NH3-MeOH)--HPLC，移動相B：EtOH--HPLC；流動速率：20 mL/min；梯度：30% B至30% B/17 min；波長：220/254 nm；RT1(min)：8.569；RT2(min)：14.522；樣品溶劑：EtOH--HPLC；注入體積：2 mL；運行次數：3)，得到呈白色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2R*,4R**)-4-甲基-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(6.7 mg，峰1)。 LCMS: [M+H] +實驗值506。 1H NMR (300 MHz, 氯仿- d) δ 11.98 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.99 - 7.82 (m, 2H), 7.50 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 6.69 - 6.37 (m, 3H), 6.34 - 6.20 (m, 1H), 6.03 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 5.91 - 5.77 (m, 1H), 5.28 (s, 1H), 4.88 (d, J= 7.4 Hz, 1H), 4.57 (d, J= 7.9 Hz, 1H), 4.43 (d, J= 9.7 Hz, 1H), 4.30 (d, J= 9.4 Hz, 1H), 4.12 (d, J= 1.4 Hz, 3H), 3.68 - 3.53 (m, 2H), 3.34 - 3.12 (m, 2H), 2.91 - 2.77 (m, 1H), 1.78 - 1.72 (m, 1H), 1.64 (d, J= 6.4 Hz, 3H)。
實例 217.3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2R*,4R**)-4-甲基-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 332)
Figure 02_image2301
粗產物(160 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：CHIRAL ART Amylose-SA, 2*25 cm, 5 μm；移動相A：MtBE(0.5% 2M NH3-MeOH)--HPLC，移動相B：EtOH--HPLC；流動速率：20 mL/min；梯度：30% B至30% B/17 min；波長：220/254 nm；RT1(min)：8.569；RT2(min)：14.522；樣品溶劑：EtOH--HPLC；注入體積：2 mL；運行次數：3)，得到呈白色固體狀之3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(2R*,4R**)-4-甲基-1-(丙-2-烯醯基)氮雜環丁烷-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(22.3 mg，峰2)。 LCMS: [M+H] +實驗值506。 1H NMR (300 MHz, 氯仿- d) δ 11.88 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.99 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 7.58 - 7.41 (m, 2H), 6.65 - 6.52 (m, 1H), 6.49 - 6.33 (m, 2H), 6.29 - 6.17 (m, 1H), 6.14 - 6.02 (m, 1H), 5.81 - 5.69 (m, 1H), 5.24 (s, 1H), 5.11 - 4.93 (m, 1H), 4.75 - 4.57 (m, 1H), 4.44 (t, J= 9.7 Hz, 1H), 4.34 - 4.22 (m, 1H), 4.10 (d, J= 1.2 Hz, 3H), 3.68 - 3.46 (m, 2H), 3.23 - 3.00 (m, 2H), 2.39 - 2.24 (m, 1H), 2.21 - 2.06 (m, 1H), 1.58 (d, J= 6.3 Hz, 3H)。
實例 218.rel-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(1R)-2-(丙-2-烯醯基)-2-氮雜螺[3.3]庚烷-1-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 269)
218.1. 合成 1-{[(4-{3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 氧基 ] 甲基 }-2- 氮雜螺 [3.3] 庚烷 -2- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2303
在室溫下在氮氣氛圍下向1-{[(4-{3-碘-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-甲酸三級丁酯(380 mg，0.673 mmol，1當量)及3-氯-2-甲氧基苯胺(212.21 mg，1.346 mmol，2當量)於DMF (10 mL)中之攪拌溶液中分批添加Cs 2CO 3(658.08 mg，2.019 mmol，3當量)及Ephos Pd G4 (123.68 mg，0.135 mmol，0.2當量)。將所得混合物在50℃下在氮氣氛圍下攪拌隔夜。藉由LCMS監測反應。所得混合物用EtOAc (3 x 20 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(2 x 20 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由製備型TLC (PE/EtOAc 1:1)純化，得到呈淡黃色固體狀之1-{[(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-甲酸三級丁酯(120 mg，30.00%)。 LC-MS: (M+H)+實驗值：594.60。
218. 2. 合成 rac-2-{3-[(1R)-2- 氮雜螺 [3.3] 庚烷 -1- 基甲氧基 ] 吡啶 -4- 基 }-3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2305
在室溫下在氮氣氛圍下向rac-(1R)-1-{[(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)氧基]甲基}-2-氮雜螺[3.3]庚烷-2-甲酸三級丁酯(120 mg，0.202 mmol，1當量)於DCM (1 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加TFA (3 mL，40.389 mmol，199.96當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。藉由LCMS監測反應。混合物用飽和NaHCO 3(水溶液)鹼化至pH為10。所得混合物用CH2Cl2 (3 x 20 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。此產生呈棕色油狀物之rac-2-{3-[(1R)-2-氮雜螺[3.3]庚烷-1-基甲氧基]吡啶-4-基}-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(120 mg，120.27%)。粗產物不經進一步純化直接用於下一步。 LC-MS: (M+H)+實驗值494.50。
218.3. 合成 rac-3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{[(1R)-2-( 丙 -2- 烯醯基 )-2- 氮雜螺 [3.3] 庚烷 -1- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2307
在0℃下在氮氣氛圍下向rac-2-{3-[(1R)-2-氮雜螺[3.3]庚烷-1-基甲氧基]吡啶-4-基}-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(120 mg，0.243 mmol，1當量)及Et 3N (73.74 mg，0.729 mmol，3當量)於DCM (1 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加丙烯醯氯(17.59 mg，0.194 mmol，0.8當量)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。藉由LCMS監測反應。所得混合物用EtOAc (3 x 5 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(2 x 5 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。粗產物(120 mg)藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XBridge Prep OBD C18管柱，19*250 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH 4HCO 3)，移動相B：ACN；流動速率：25 mL/min；梯度：40% B至70% B/7 min, 70% B；波長：254 nm；RT1(min)：6.93；運行次數：0)，得到呈淡黃色固體狀之rac-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(1R)-2-(丙-2-烯醯基)-2-氮雜螺[3.3]庚烷-1-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(120 mg，90.14%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值548.50。
218.4. 合成 rel-3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{[(1R)-2-( 丙 -2- 烯醯基 )-2- 氮雜螺 [3.3] 庚烷 -1- 基 ] 甲氧基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2309
產物(50 mg)藉由對掌性HPLC在以下條件下純化(管柱：CHIRALPAK IA-3, 4.6*50mm 3um；移動相A：Hex(0.1%DEA): EtOH=50: 50；流動速率：1 mL/min；梯度：0% B至0% B；注入體積：5ul mL)，得到呈淡黃色固體狀之rel-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(1R)-2-(丙-2-烯醯基)-2-氮雜螺[3.3]庚烷-1-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(2 mg，4.00%，峰1)。 LC-MS: (M+H) +實驗值548.50。 1H NMR (300 MHz, 氯仿- d) δ 11.85 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 6.72 (dd, J= 8.0, 1.6 Hz, 1H), 6.62 (t, 1H), 6.39 (dd, J= 16.8, 2.2 Hz, 1H), 6.32 - 6.17 (m, 2H), 5.78 (dd, J= 10.0, 2.2 Hz, 1H), 5.33 (s, 1H), 4.82 - 4.71 (m, 1H), 4.43 (d, J= 7.5 Hz, 2H), 4.36 (d, J= 8.5 Hz, 1H), 4.25 (d, J= 8.5 Hz, 1H), 4.08 (s, 3H), 3.65 - 3.55 (m, 2H), 3.26 - 3.06 (m, 2H), 2.44 - 2.22 (m, 3H), 2.17 - 2.07 (m, 1H), 2.01 - 1.94 (m, 2H)。
實例 219.rel-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(1R)-2-(丙-2-烯醯基)-2-氮雜螺[3.3]庚烷-1-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 268)
Figure 02_image2311
產物(50 mg)藉由對掌性HPLC在以下條件下純化(管柱：CHIRALPAK IA-3, 4.6*50mm 3um；移動相A：Hex(0.1%DEA): EtOH=50: 50；流動速率：1 mL/min；梯度：0% B至0% B；注入體積：5ul mL)，得到呈淡黃色固體狀之rel-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{[(1R)-2-(丙-2-烯醯基)-2-氮雜螺[3.3]庚烷-1-基]甲氧基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(2.1 mg，4.20%，峰2)。 LC-MS: (M+H) +實驗值548.20。 1H NMR (300 MHz, 氯仿- d) δ 11.86 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 6.73 (dd, J= 8.1, 1.6 Hz, 1H), 6.62 (t, 1H), 6.39 (dd, J= 16.8, 2.2 Hz, 1H), 6.31 - 6.19 (m, 2H), 5.78 (dd, J= 9.9, 2.2 Hz, 1H), 5.31 (s, 1H), 4.82 - 4.69 (m, 1H), 4.43 (d, J= 7.6 Hz, 2H), 4.36 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 4.25 (d, J= 8.6 Hz, 1H), 4.08 (s, 3H), 3.65 - 3.55 (m, 2H), 3.22 - 3.10 (m, 2H), 2.45 - 2.26 (m, 3H), 2.18 - 2.06 (m, 1H), 2.01 - 1.94 (m, 2H)。
實例 220.3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基)-2-(3-(2-(吡啶-2-基)乙氧基)吡啶-4-基)-1,5,6,7-四氫- 4H-吡咯并[3,2- c]吡啶-4-酮 ( 化合物 473)
Figure 02_image2313
220- 步驟 1在0℃下向2-(吡啶-2-基)乙烷-1-醇(1 g，8.1 mmol)、3-羥基異菸鹼甲腈(972 mg，8.1 mmol)及PPh 3(2.55 g，9.72 mmol)於THF (20 mL)中之攪拌混合物中添加DIAD (1.96 g，9.72 mmol)。將反應混合物在N 2下在0℃下攪拌2小時。完成後，反應用水(50 mL)淬滅，用EtOAc(50 mL x 3)萃取。合併之有機層用鹽水(40 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾且在真空中濃縮，得到粗品，其藉由矽膠管柱層析法(溶離劑：PE/EtOAc，0至40%)純化，得到呈黃色固體狀之3-(2-(吡啶-2-基)乙氧基)異菸鹼甲腈(200 mg，產率：11%)。 MS (ESI)：C 13H 11N 3O之質量計算值, 225.09, m/z實驗值226.1 [M+H] +。
220- 步驟 2將3-(2-(吡啶-2-基)乙氧基)異菸鹼甲腈(200 mg，0.89 mmol)及雷尼鎳(50 mg)於MeOH (20 mL)/AcOH (5 mL)中之混合物在室溫下在氫氣氛圍下攪拌1小時。完成後，將混合物過濾，用MeOH (40 mL)洗滌。濾液在減壓下濃縮得到粗品，其藉由製備型TLC (溶離劑：DCM/MeOH/NH4OH = 10/1/0.1)純化，得到呈黃色固體狀之(3-(2-(吡啶-2-基)乙氧基)吡啶-4-基)甲胺(150 mg，74%)。 MS (ESI)：C 13H 15N 3O之質量計算值, 229.12, m/z實驗值230.2 [M+H] +。
220- 步驟 3將(3-(2-(吡啶-2-基)乙氧基)吡啶-4-基)甲胺(140 mg，0.61 mmol)、5-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基)-4-羥基-6-側氧基-3,6-二氫吡啶-1( 2H)-甲酸三級丁酯(252 mg，0.61 mmol)、PyBOP (380 mg，0.73 mmol)及DIPEA (236 mg，1.83 mmol)於DMF (10 mL)中之混合物在室溫下攪拌3小時。完成後，反應混合物用水(30 mL)稀釋，用EtOAc (30 mL x 3)萃取。合併之有機層用鹽水(30 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由製備型TLC (DCM/MeOH =15:1)純化，得到呈黃色固體狀之5-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基)-6-側氧基-4-(((3-(2-(吡啶-2-基)乙氧基)吡啶-4-基)甲基)胺基)-3,6-二氫吡啶-1( 2H)-甲酸三級丁酯(140 mg，37%)。 MS (ESI)：C 31H 34ClN 5O 5S之質量計算值, 623.20, m/z實驗值624.2 [M+H] +。
220- 步驟 4向5-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基)-6-側氧基-4-(((3-(2-(吡啶-2-基)乙氧基)吡啶-4-基)甲基)胺基)-3,6-二氫吡啶-1( 2H)-甲酸三級丁酯(140 mg，0.22 mmol)於1,4-二㗁烷(5 mL)中之溶液中添加TFA(75 mg，0.66 mmol)及H 2O 2(74.8 mg，0.66 mmol，30%/H 2O溶液)。所得混合物在80℃下攪拌3小時。濃縮反應混合物得到粗產物，其藉由製備型TLC (DCM/MeOH =15/1)純化，得到呈黃色固體狀之3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基)-2-(3-(2-(吡啶-2-基)乙氧基)吡啶-4-基)-1,5,6,7-四氫- 4H-吡咯并[3,2- c]吡啶-4-酮(20 mg，產率：18.5%)。 MS (ESI)：C 26H 24ClN 5O 3之質量計算值, 489.16, m/z實驗值490.0 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.86 (s, 1H), 8.57 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.98 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.81 - 7.77 (m, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.44 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.32 - 7.29 (m, 2H), 7.15 (s, 1H), 6.68 - 6.64 (m, 2H), 6.09 (dd, J = 5.9, 3.8 Hz, 1H), 4.52 - 4.49 (m, 2H), 3.89 (s, 3H), 3.46 - 3.42 (m, 2H), 3.31 - 3.28 (m, 2H), 2.93 (t, J = 6.8 Hz, 2H)。
實例 221.3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基)-2-(3-((6-氟吡啶-2-基)甲氧基)吡啶-4-基)-1,5,6,7-四氫- 4H-吡咯并[3,2- c]吡啶-4-酮 ( 化合物 529)
Figure 02_image2315
221- 步驟 1在0℃下向3-羥基異菸鹼甲腈(354 mg，2.95 mmol)、(6-氟吡啶-2-基)甲醇(340 mg，2.68 mmol)及PPh 3(844 mg，3.22 mmol)於THF (35 mL)中之混合物中添加DIAD (651 mg，3.22 mmol)。反應混合物在N 2下在0℃下攪拌2小時。完成後，將反應用H 2O (50 mL) 淬滅，用EtOAc (50 mL x 3)萃取。合併之有機層用鹽水(40 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥在真空中濃縮得到粗品，其藉由製備型TLC (PE/EA = 2/1)純化，得到呈黃色固體狀之3-((6-氟吡啶-2-基)甲氧基)異菸鹼甲腈(300 mg，產率：49%)。 MS (ESI)：C 12H 8FN 3O之質量計算值, 229.07, m/z實驗值230.0 [M+H] +。
221- 步驟 2將3-((6-氟吡啶-2-基)甲氧基)異菸鹼甲腈(300 mg，1.31 mmol)及雷尼鎳(500 mg)於MeOH (20 mL)及AcOH (5 mL)中之混合物在室溫下在氫氣氛圍下攪拌1小時。過濾反應混合物，用MeOH (30 mL)洗滌。濾液在減壓下濃縮得到粗品，其藉由製備型TLC (溶離劑：DCM/MeOH/NH 4OH = 10/1/0.5)純化，得到呈黃色固體狀之(3-((6-氟吡啶-2-基)甲氧基)吡啶-4-基)甲胺(150 mg，49%)。 MS (ESI)：C 12H 12FN 3O之質量計算值, 233.10, m/z實驗值234.1 [M+H] +。
221- 步驟 3將5-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基)-4-羥基-6-側氧基-3,6-二氫吡啶-1( 2H)-甲酸三級丁酯(264 mg，0.64 mmol)、(3-((6-氟吡啶-2-基)甲氧基)吡啶-4-基)甲胺(150 mg，0.64 mmol)、PyBOP(400 mg，0.77 mmol)及DIEA (248 mg，1.92 mmol)於DMF (10 mL)中之混合物在室溫下攪拌3小時。反應混合物用水(100 mL)稀釋，用EtOAc (30 mL x 3)萃取。合併之有機層用鹽水(30 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由製備型TLC (DCM/MeOH =15:1)純化，得到呈黃色固體狀之5-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基)-4-(((3-((6-氟吡啶-2-基)甲氧基)吡啶-4-基)甲基)胺基)-6-側氧基-3,6-二氫吡啶-1( 2H)-甲酸三級丁酯(100 mg，25%)。 MS (ESI)：C 30H 31ClFN 5O 5S之質量計算值, 627.17, m/z實驗值628.1 [M+H] +。
221- 步驟 4向5-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基)-4-(((3-((6-氟吡啶-2-基)甲氧基)吡啶-4-基)甲基)胺基)-6-側氧基-3,6-二氫吡啶-1( 2H)-甲酸三級丁酯(100 mg 0.16mmol )於二㗁烷(5 mL)中之溶液中添加H 2O 2(30%/H 2O，0.2 mL)。反應在80℃下攪拌1小時。反應在真空中濃縮得到粗品，其藉由製備型TLC (DCM/MeOH = 15/1)純化，得到呈黃色固體狀之3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基)-2-(3-((6-氟吡啶-2-基)甲氧基)吡啶-4-基)-4-側氧基-1,4,6,7-四氫- 5H-吡咯并[3,2- c]吡啶-5-甲酸三級丁酯(50 mg，產率：52.6%)。 MS (ESI)：C 30H 29ClFN 5O 5之質量計算值, 593.18, m/z實驗值594.2 [M+H] +。
221- 步驟 5向3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基)-2-(3-((6-氟吡啶-2-基)甲氧基)吡啶-4-基)-4-側氧基-1,4,6,7-四氫- 5H-吡咯并[3,2- c]吡啶-5-甲酸三級丁酯(50 mg，0.084 mmol)於DCM (5 mL)中之溶液中添加HCl (4M/二㗁烷溶液，0.5 mL)。將反應混合物在室溫下攪拌1小時。濃縮反應混合物得到粗產物，其藉由製備型TLC (DCM/MeOH =15/1)純化，得到呈黃色固體狀之3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基)-2-(3-((6-氟吡啶-2-基)甲氧基)吡啶-4-基)-1,5,6,7-四氫- 4H-吡咯并[3,2- c]吡啶-4-酮(25 mg，產率：61%)。 MS (ESI)：C 25H 21ClFN 5O 3之質量計算值, 493.13, m/z實驗值494.2 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 11.54 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.13 - 8.00 (m, 2H), 7.53 (s, 1H), 7.41 (dd, J = 7.4, 2.0 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.23 - 7.11 (m, 2H), 6.71 - 6.62 (m, 2H), 6.16 (dd, J = 6.8, 2.8 Hz, 1H), 5.45 (s, 2H), 3.85 (s, 3H), 3.53 - 3.37 (m, 2H), 2.92 (t, J = 6.8 Hz, 2H)。
實例 222.3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基)-2-(3-((3-氟吡啶-2-基)甲氧基)吡啶-4-基)-1,5,6,7-四氫- 4H-吡咯并[3,2- c]吡啶-4-酮 ( 化合物 530)
Figure 02_image2317
222- 步驟 1在0℃下向3-羥基異菸鹼甲腈(600 mg，5.0 mmol)、(3-氟吡啶-2-基)甲醇(635 mg，5.0 mmol)及PPh 3(2.63 g，10.0 mmol)於THF (25 mL)中之混合物中添加DIAD (2.02 g，10.0 mmol)。將所得反應混合物在N 2下在0℃下攪拌2小時。完成後，將反應用H 2O (40 mL)淬滅，用EtOAc (40 mL x 3)萃取。合併之有機層用鹽水(30 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾且在真空中濃縮得到粗品，其藉由矽膠管柱層析法 (DCM/MeOH = 1/20)純化，得到呈黃色固體狀之3-((3-氟吡啶-2-基)甲氧基)異菸鹼甲腈(420 mg，產率：36.7%)。 MS (ESI)：C 12H 8FN 3O之質量計算值, 229.07, m/z實驗值230.1 [M+H] +。
222- 步驟 2將3-((3-氟吡啶-2-基)甲氧基)異菸鹼甲腈(420 mg，1.83 mmol)及雷尼鎳(100 mg)於MeOH (20 mL)及AcOH (5 mL)中之混合物在室溫下在氫氣氛圍下攪拌1小時。完成後，反應混合物通過矽藻土過濾，且濾餅用MeOH (20 mL)洗滌。在真空中濃縮濾液得到粗品，其藉由製備型TLC (溶離劑：DCM/MeOH/NH 4OH = 10/1/0.1)純化，得到呈黃色固體狀之(3-((3-氟吡啶-2-基)甲氧基)吡啶-4-基)甲胺(310 mg，產率：72.7%)。 MS (ESI)：C 12H 12FN 3O之質量計算值, 233.10, m/z實驗值234.2 [M+H] +。
222- 步驟 3在N 2下將5-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基)-4-羥基-6-側氧基-3,6-二氫吡啶-1( 2H)-甲酸三級丁酯(354 mg，0.86 mmol)、(3-((3-氟吡啶-2-基)甲氧基)吡啶-4-基)甲胺(240 mg，1.03 mmol)、PyBOP(536 mg，1.03 mmol)及DIPEA (333 mg，2.58 mmol)於DMF (15 mL)中之混合物在室溫下攪拌3小時。反應混合物用水(50 mL)稀釋且用EtOAc (50 mL x 3)萃取。合併之有機層用鹽水(30 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在真空中濃縮得到粗品，其藉由製備型TLC (DCM/MeOH = 30/ 1)純化，得到呈黃色固體狀之5-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基)-4-(((3-((3-氟吡啶-2-基)甲氧基)吡啶-4-基)甲基)胺基)-6-側氧基-3,6-二氫吡啶-1( 2H)-甲酸三級丁酯(120 mg，產率：22%)。 MS (ESI)：C 30H 31ClFN 5O 5S之質量計算值, 627.17, m/z實驗值628.2 [M+H] +。
222- 步驟 4向5-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基)-4-(((3-((3-氟吡啶-2-基)甲氧基)吡啶-4-基)甲基)胺基)-6-側氧基-3,6-二氫吡啶-1( 2H)-甲酸三級丁酯(120 mg，0.19 mmol)於1,4-二㗁烷(5 mL)中之溶液中添加H 2O 2(30%/H 2O溶液，64.5 mg，0.57 mmol)。所得反應在80℃下攪拌1小時。反應在真空中濃縮得到粗品，其藉由製備型TLC (DCM/MeOH = 20/1)純化，得到呈黃色固體狀之3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基)-2-(3-((3-氟吡啶-2-基)甲氧基)吡啶-4-基)-4-側氧基-1,4,6,7-四氫-5H-吡咯并[3,2-c]吡啶-5-甲酸三級丁酯(60 mg，產率：53%)。 MS (ESI)：C 30H 29ClFN 5O 5之質量計算值, 593.18, m/z實驗值594.2 [M+H] +。
222- 步驟 5向3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基)-2-(3-((3-氟吡啶-2-基)甲氧基)吡啶-4-基)-4-側氧基-1,4,6,7-四氫- 5H-吡咯并[3,2-c]吡啶-5-甲酸三級丁酯(60 mg，0.10 mmol)於MeOH (5 mL)中之溶液中添加HCl (4M/1,4-二㗁烷溶液，0.5 mL)。將反應混合物在室溫下攪拌1小時。濃縮反應混合物得到粗產物，其藉由製備型TLC (DCM/MeOH =15/1)純化，得到呈黃色固體狀之3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基)-2-(3-((3-氟吡啶-2-基)甲氧基)吡啶-4-基)-1,5,6,7-四氫- 4H-吡咯并[3,2- c]吡啶-4-酮(35 mg，產率：71%)。 MS (ESI)：C 25H 21ClFN 5O 3之質量計算值, 493.13, m/z實驗值494.1 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.28 (s, 1H), 8.60 (d, J= 4.7 Hz, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.04 (d, J= 5.1 Hz, 1H), 7.89 (t, J= 9.3 Hz, 1H), 7.61-7.57 (m, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.36 (d, J= 5.1 Hz, 1H), 7.18 (s, 1H), 6.71 - 6.67 (m, 2H), 6.16 (dd, J= 6.8, 2.8 Hz, 1H), 5.69 (s, 2H), 3.90 (s, 3H), 3.47-3.43 (m, 2H), 2.98 (t, J= 6.8 Hz, 2H)。
實例 223.3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基)-2-(3-((5-氟吡啶-2-基)甲氧基)吡啶-4-基)-1,5,6,7-四氫-4H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 531)
Figure 02_image2319
223- 步驟 1在0℃下向(5-氟吡啶-2-基)甲醇(700 mg，5.5 mmol), 3-羥基異菸鹼甲腈(660 mg，5.5 mmol)及PPh 3(1.74 g，6.6 mmol)於THF (30 mL)中之混合物中添加DIAD (1.33 g，6.6 mmol)。將所得反應混合物在N 2下在0℃下攪拌2小時。完成後，反應用H 2O (30 mL) 淬滅，用EtOAc (50 mL x 3)萃取。合併之有機層用鹽水(40 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，在真空中濃縮得到粗品，其藉由製備型TLC (PE/EA = 2/1)純化，得到呈黃色固體狀之3-((5-氟吡啶-2-基)甲氧基)異菸鹼甲腈(480 mg，產率：38%)。 MS (ESI)：C 12H 8FN 3O之質量計算值, 229.07, m/z實驗值230.0 [M+H] +。
223- 步驟 2將3-((5-氟吡啶-2-基)甲氧基)異菸鹼甲腈(480 mg，2.10 mmol)及雷尼鎳(50 mg)於MeOH (20 mL)及AcOH (4 mL)中之混合物在室溫下在氫氣氛圍下攪拌1小時。反應混合物通過矽藻土過濾，且濾餅用MeOH (20 mL)洗滌。在真空中濃縮濾液得到粗品，其藉由製備型TLC (溶離劑：DCM/MeOH/NH 4OH = 10/1/0.1)純化，得到呈黃色固體狀之(3-((5-氟吡啶-2-基)甲氧基)吡啶-4-基)甲胺(410 mg，產率：84%)。 MS (ESI)：C 12H 12FN 3O之質量計算值, 233.10, m/z實驗值234.1 [M+H] +。
223- 步驟 3將(3-((5-氟吡啶-2-基)甲氧基)吡啶-4-基)甲胺(410 mg，1.76 mmol)、5-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基)-4-羥基-6-側氧基-3,6-二氫吡啶-1( 2H)-甲酸三級丁酯(723 mg，1.76 mmol)、PyBOP (1.1 g，2.1 mmol)及DIPEA (677 mg，5.25 mmol)於DMF (15 mL)中之混合物在30℃下攪拌3小時。完成後，反應用水(40 mL)稀釋且用EtOAc (40 mL x 3)萃取。合併之有機層用鹽水(40 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在真空中濃縮得到粗品，其藉由矽膠管柱層析法(溶離劑：DCM/MeOH = 1/20)純化，得到呈黃色固體狀之5-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基)-4-(((3-((5-氟吡啶-2-基)甲氧基)吡啶-4-基)甲基)胺基)-6-側氧基-3,6-二氫吡啶-1( 2H)-甲酸三級丁酯(330 mg，產率：30%)。 MS (ESI)：C 30H 31ClFN 5O 5S之質量計算值, 627.17, m/z實驗值628.2 [M+H] +。
223- 步驟 4向5-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基)-4-(((3-((5-氟吡啶-2-基)甲氧基)吡啶-4-基)甲基)胺基)-6-側氧基-3,6-二氫吡啶-1( 2H)-甲酸三級丁酯(145 mg，0.23 mmol)於1,4-二㗁烷(5 mL)中之溶液中添加TFA (79 mg，0.69 mmol)及H 2O 2(30%/H 2O溶液，0.2 mL，0.69 mmol)。將所得混合物在80℃下攪拌3小時。濃縮反應混合物得到粗產物，其藉由製備型TLC (DCM/MeOH =15/1)純化，得到呈黃色固體狀之3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基)-2-(3-((5-氟吡啶-2-基)甲氧基)吡啶-4-基)-1,5,6,7-四氫-4H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(29 mg，產率：25.6%)。 MS (ESI)：C 25H 21ClFN 5O 3之質量計算值, 493.13, m/z實驗值494.7 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 11.87 (s, 1H), 8.69 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.04 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.87 - 7.82 (m, 1H), 7.59 (dd, J = 8.7, 4.5 Hz, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.33 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.15 (s, 1H), 6.68 - 6.65 (m, 2H), 6.16 (dd, J = 6.4, 3.3 Hz, 1H), 5.50 (s, 2H), 3.86 (s, 3H), 3.46 - 3.43(m, 2H), 2.95 (t, J = 6.8 Hz,  2H)。
實例 224.(S)-3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基)-2-(3-(1-(吡啶-2-基)乙氧基)吡啶-4-基)-1, 5, 6, 7-四氫-4H-吡咯并[3, 2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 532)
Figure 02_image2321
224- 步驟 1在-10℃下在N 2下向NaH (702 mg，17.539 mmol)於無水DMF (50 mL)添加(1S)-1-(吡啶-2-基)乙醇(950 mg，7.714 mmol)於DMF (5 mL)中之攪拌懸浮液中。攪拌0.5小時後，在0℃下將3-氯吡啶-4-甲腈(972 mg，7.012 mmol)於DMF (5 mL)添加至溶液中。將反應混合物在0℃下攪拌1小時。完成後，反應混合物用飽和NH 4Cl淬滅，用EA萃取。有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。收集濾液且濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法(PE/EA，0 ~ 70%)純化，得到呈無色油狀物之(S)-3-(1-(吡啶-2-基)乙氧基) 異菸鹼甲腈(1 g，63%)。 MS (ESI)：C 13H 11N 3O之質量計算值, 225.1, m/z實驗值226.1 [M+H] +。
224- 步驟 2在N 2下向(S)-3-(1-(吡啶-2-基)乙氧基) 異菸鹼甲腈(0.97 g，4.306 mmol)於MeOH (50 mL)及NH 3 .H 2O (5 mL)中之攪拌溶液中添加雷尼鎳(200 mg)。將反應混合物在室溫下在H 2下攪拌5小時。過濾後，收集濾液且在減壓下濃縮且抽空。殘留物藉由急驟矽膠管柱層析法(DCM/MeOH，0 ~ 10%)純化，得到呈橘紅色油狀物之(S)-(3-(1-(吡啶-2-基)乙氧基) 吡啶-4-基) 甲胺(800 mg，81%)。 MS (ESI)：C 13H 15N 3O之質量計算值, 229.1, m/z實驗值230.1 [M+H] +。
224- 步驟 3向(S)-(3-(1-(吡啶-2-基)乙氧基) 吡啶-4-基) 甲胺(500 mg，2.181 mmol)於DMF (40 mL)中之攪拌溶液中添加5-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基)-4-羥基-6-側氧基-3, 6-二氫吡啶-1(2H)-甲酸三級丁酯(900 mg，2.181 mmol)、PyBOP (1.702 g，3.272 mmol)、DIEA (846 mg，6.543 mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌16小時。完成後，用水淬滅反應混合物，用EA萃取。有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。收集濾液且濃縮。殘留物藉由急驟矽膠管柱層析法(DCM/MeOH，0 ~ 10%)純化，得到呈淡黃色油狀物之(S)-5-((3-氯-2-甲氧基苯基) 胺基甲硫醯基) -6-側氧基-4-(((3-(1-(吡啶-2-基)乙氧基)吡啶-4-基)甲基)胺基)-3, 6-二氫吡啶-1(2H)-甲酸三級丁酯(1.3 g，80%純度)。 MS (ESI)：C 31H 34ClN 5O 5S之質量計算值, 623.2, m/z實驗值624.2 [M+H] +。
224- 步驟 4在0℃下向(S)-5-((3-氯-2-甲氧基苯基) 胺基甲硫醯基) -6-側氧基-4-(((3-(1-(吡啶-2-基)乙氧基)吡啶-4-基)甲基)胺基)-3, 6-二氫吡啶-1(2H)-甲酸三級丁酯(500 mg，0.8 mmol)於MeOH (15 mL)中之攪拌溶液中添加H 2O 2(31%, 182 mg，1.6 mmol)、TFA (183 mg，1.6 mmol)。隨後將反應混合物在80℃下攪拌3小時。完成後，將反應混合物冷卻至室溫且在減壓下濃縮。殘留物用EA稀釋，且有機相用水、鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。收集濾液且濃縮。殘留物藉由製備型HPLC在以下條件下純化：管柱：Welch 10u C18 250 x 21.2 mm；移動相A：H 2O (0.1% NH 3)，移動相B：ACN--HPLC；流動速率：25 mL/min；梯度：45% B至55% B/9.5 min; 214 nm; Rt：8.28 min，得到呈黃色固體狀之(S)-3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基)-2-(3-(1-(吡啶-2-基)乙氧基)吡啶-4-基)-1, 5, 6, 7-四氫-4H-吡咯并[3, 2-c]吡啶-4-酮(46 mg，12%)。 MS (ESI)：C 26H 24ClN 5O 3之質量計算值, 489.2, m/z實驗值490.2 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.20 (s, 1H), 8.65 (d, J= 4.3 Hz, 1H), 8.38 (s, 1H), 7.96 (d, J= 5.0 Hz, 1H), 7.85 (t, J= 7.7, 1.5 Hz, 1H), 7.53 - 7.48 (m, 2H), 7.39 (dd, J= 7.0, 5.3 Hz, 1H), 7.27 (d, J= 5.0 Hz, 1H), 7.15 (s, 1H), 6.68 - 6.63 (m, 2H), 6.16 (dd, J= 6.8, 2.8 Hz, 1H), 5.90 (q, J= 6.3 Hz, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.47 - 3.45 (m, 2H), 3.02 - 2.93 (m, 2H), 1.66 (d, J= 6.3 Hz, 3H)。
實例 225.(R)-3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基)-2-(3-(1-(吡啶-2-基)乙氧基)吡啶-4-基)-1, 5, 6, 7-四氫-4H-吡咯并[3, 2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 533)
Figure 02_image2323
225- 步驟 1在0℃下在N 2下將(1R)-1-(吡啶-2-基)乙醇(770 mg，6.252 mmol)於無水DMF (5 mL)中之溶液添加至(568 mg，14.207 mmol)於無水DMF (20 mL)中之混合物。攪拌0.5小時後，將3-氯吡啶-4-甲腈(787 mg，5.683 mmol)於無水DMF (5 mL)添加至上述混合物中。將反應混合物在0℃下在攪拌1小時。完成後，反應混合物用冰飽和NH 4Cl水溶液淬滅，用EA萃取。有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。收集濾液且濃縮。殘留物藉由急驟矽膠管柱層析法(PE/EA，0 ~ 65%)純化，得到呈無色油狀物之(R)-3-(1-(吡啶-2-基)乙氧基) 異菸鹼甲腈(1 g，78%)。 MS (ESI)：C 13H 11N 3O之質量計算值, 225.1, m/z實驗值226.1 [M+H] +。
225- 步驟 2在N 2下向(R)-3-(1-(吡啶-2-基)乙氧基) 異菸鹼甲腈(900 mg，3.996 mmol)於MeOH (50 mL)及NH 3.H 2O (5 mL)中之攪拌溶液中添加雷尼鎳(200 mg)。將反應混合物在室溫下在H 2下攪拌5小時。完成後，收集溶劑且在減壓下濃縮且抽空。殘留物藉由急驟矽膠管柱層析法(DCM/MeOH，0 ~ 10%)純化，得到呈黃色油狀物之(R)-(3-(1-(吡啶-2-基)乙氧基) 吡啶-4-基) 甲胺(760 mg，82%)。 MS (ESI)：C 13H 15N 3O之質量計算值, 229.1, m/z實驗值230.1 [M+H] +。
225- 步驟 3向(R)-(3-(1-(吡啶-2-基)乙氧基) 吡啶-4-基) 甲胺(500 mg，2.181 mmol)於DMF (40 mL)中之攪拌溶液中添加5-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基)-4-羥基-6-側氧基-3, 6-二氫吡啶-1(2H)-甲酸三級丁酯(900 mg，2.181 mmol)、PyBOP (1.702 g，3.272 mmol)、DIEA (846 mg，6.543 mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌16小時。完成後，反應混合物用水淬滅，用EA萃取。有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。收集濾液且濃縮。殘留物藉由急驟矽膠管柱層析法(DCM/MeOH，0 ~ 10%)純化，得到呈暗黃色油狀物之(R)-5-((3-氯-2-甲氧基苯基) 胺基甲硫醯基) -6-側氧基-4-(((3-(1-(吡啶-2-基)乙氧基)吡啶-4-基)甲基)胺基)-3, 6-二氫吡啶-1(2H)-甲酸三級丁酯(1.3 g，80%純度)。 MS (ESI)：C 31H 34ClN 5O 5S之質量計算值, 623.2, m/z實驗值624.2 [M+H] +。
225- 步驟 4在0℃下向(R)-5-((3-氯-2-甲氧基苯基) 胺基甲硫醯基) -6-側氧基-4-(((3-(1-(吡啶-2-基)乙氧基)吡啶-4-基)甲基)胺基)-3, 6-二氫吡啶-1(2H)-甲酸三級丁酯(500 mg，0.8 mmol)於MeOH (15 mL)中之攪拌溶液中添加H 2O 2(31%, 182 mg，1.6 mmol)、TFA (183 mg，1.6 mmol)。隨後將反應混合物在80℃下攪拌3小時。完成後，將反應混合物冷卻至室溫且在減壓下濃縮。殘留物用EA稀釋，且有機相用水、鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。收集濾液且濃縮。殘留物藉由製備型HPLC在以下條件下純化：管柱：Xbridge 5u C18 150 x 30 mm；移動相A：H 2O (0.1% FA)，移動相B：ACN--HPLC；流動速率：30 mL/min；梯度：32% B至45% B/9 min; 214 nm; Rt: 8 min，得到呈黃色固體狀之(R)-3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基)-2-(3-(1-(吡啶-2-基)乙氧基)吡啶-4-基)-1, 5, 6, 7-四氫-4H-吡咯并[3, 2-c]吡啶-4-酮(121 mg，30%)。 MS (ESI)：C 26H 24ClN 5O 3之質量計算值, 489.2, m/z實驗值490.2 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.29 (s, 1H), 8.66 (d, J= 4.4 Hz, 1H), 8.43 (s, 1H), 8.02 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 7.87 (t, J= 7.7, 1.6 Hz, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.51 (d, J= 7.9 Hz, 1H), 7.40 (dd, J= 6.9, 5.1 Hz, 1H), 7.33 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 7.18 (s, 1H), 6.72 - 6.65 (m, 2H), 6.17 (dd, J= 7.5, 2.0 Hz, 1H), 5.93 (q, J= 6.3 Hz, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.48 (t, J= 6.1 Hz, 2H), 3.00 (dd, J= 6.8, 4.8 Hz, 2H), 1.68 (d, J= 6.4 Hz, 3H)。
實例 226.( R)-3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基)-2-(3-(2-(吡啶-2-基)丙氧基)吡啶-4-基)-1,5,6,7-四氫- 4H-吡咯并[3,2- c]吡啶-4-酮/( S)-3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基)-2-(3-(2-(吡啶-2-基)丙氧基)吡啶-4-基)-1,5,6,7-四氫- 4H-吡咯并[3,2- c]吡啶-4-酮 ( 化合物 534/535)
Figure 02_image2325
226- 步驟 1將2-(吡啶-2-基)乙酸甲酯(5 g，33.11 mmol)及 t-BuONa (3.34 g，34.77 mmol)於THF (175 mL)中之溶液在0℃下在氮氣下攪拌30分鐘。隨後在0℃下向其中添加MeI (9.4 g，66.23 mmol)於THF (20 mL)中之溶液，且將反應混合物在室溫下攪拌1小時。完成後，反應用飽和水溶液NH 4Cl (100 mL)淬滅且用EtOAc (200 mL x 3)萃取。合併之有機層用鹽水(100 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥且在真空中濃縮得到粗品，其藉由矽膠管柱層析法(溶離劑：PE/EtOAc  = 2/1)純化，得到呈黃色油狀物之2-(吡啶-2-基)丙酸甲酯(4.5 g，產率：82%)。 MS (ESI)：C 9H 11NO 2之質量計算值, 165.08, m/z實驗值166.2 [M+H] +。
226- 步驟 2在0℃下在氮氣下向2-(吡啶-2-基)丙酸甲酯(4.5 g，27.3 mmol)於THF (150 mL)中之溶液中逐滴添加LiAlH 4(1M/THF溶液，35.4 mL，35.4 mmol)。在室溫下攪拌混合物1小時。完成後，反應混合物用Na 2SO 4·10H 2O淬滅，通過矽藻土過濾且用MeOH (20 mL)洗滌濾餅。在真空中濃縮濾液得到粗品，其藉由矽膠管柱層析法(溶離劑：PE/EtOAc = 2/1)純化，得到呈黃色油狀物之2-(吡啶-2-基)丙烷-1-醇(2.8 g，產率：75%)。 MS (ESI)：之質量計算值C 8H 11NO, 137.08, m/z實驗值138.2 [M+H] +。
226- 步驟 3在0℃下向2-(吡啶-2-基)丙烷-1-醇(1.5 g，10.95 mmol)於DMF (75 mL)中之溶液中添加NaH (60%分散於礦物油中，438 mg，10.95 mmol)且在N 2下攪拌1小時。隨後向其中添加3-氯異菸鹼甲腈(1.51 g，10.95 mmol)於DMF (15 mL)中之溶液添加且在0℃下在N 2下攪拌1小時。完成後，反應用飽和NH 4Cl (100 mL)水溶液淬滅且用EtOAc (100 mL x 3)萃取。合併之有機層用鹽水(80 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥且在真空中濃縮得到粗品，其藉由矽膠管柱層析法(溶離劑：PE/EtOAc = 2/1)純化，得到呈黃色油狀物之3-(2-(吡啶-2-基)丙氧基)異菸鹼甲腈(1.6 g，產率：61%)。 MS (ESI)：C 14H 13N 3O之質量計算值, 239.11, m/z實驗值240.1 [M+H] +。
226- 步驟 4將3-(2-(吡啶-2-基)丙氧基)異菸鹼甲腈(1.6 g，6.69 mmol)及雷尼鎳(1.0 g)於MeOH (60 mL)及AcOH (15 mL)中之混合物在室溫下在氫氣氛圍下攪拌2小時。完成後，混合物通過矽藻土過濾且用MeOH (50 mL)洗滌濾餅。在真空中濃縮濾液得到粗品，其藉由矽膠管柱層析法(溶離劑：DCM/MeOH/NH 4OH = 10/1/0.1)純化，得到呈黃色油狀物之(3-(2-(吡啶-2-基)丙氧基)吡啶-4-基)甲胺(1.1 g，產率：68%)。 MS (ESI)：C 14H 17N 3O之質量計算值, 243.14, m/z實驗值244.2 [M+H] +。
226- 步驟 5將5-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基)-4-羥基-6-側氧基-3,6-二氫吡啶-1( 2H)-甲酸三級丁酯(678 mg，1.65 mmol)、(3-(2-(吡啶-2-基)丙氧基)吡啶-4-基)甲胺(400 mg，1.65 mmol)、PyBOP (1.11 g，2.14 mmol)及DIPEA (1.07 g，8.23 mmol)於DMF (25 mL)中之溶液在室溫下攪拌3小時。完成後，反應混合物用水(50 mL)稀釋且用EtOAc (50 mL x 3)萃取。合併之有機層用鹽水(50 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在真空中濃縮得到粗品，其藉由矽膠管柱層析法(DCM/MeOH = 20/1)純化，得到呈黃色固體狀之5-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基)-6-側氧基-4-(((3-(2-(吡啶-2-基)丙氧基)吡啶-4-基)甲基)胺基)-3,6-二氫吡啶-1( 2H)-甲酸三級丁酯(660 mg，產率：63%)。 MS (ESI)：C 32H 36ClN 5O 5S之質量計算值, 637.21, m/z實驗值638.2 [M+H] +。
226- 步驟 6向5-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基)-6-側氧基-4-(((3-(2-(吡啶-2-基)丙氧基)吡啶-4-基)甲基)胺基)-3,6-二氫吡啶-1( 2H)-甲酸三級丁酯(350 mg 0.55 mmol)於1,4-二㗁烷(20 mL)中之溶液中添加H 2O 2(30%/H 2O溶液，0.5 mL，1.65 mL)。將反應在80℃下攪拌1小時。完成後，在減壓下濃縮反應得到粗品，其藉由製備型TLC (溶離劑：DCM/MeOH = 15/1)純化，得到呈黃色固體狀之3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基)-4-側氧基-2-(3-(2-(吡啶-2-基)丙氧基)吡啶-4-基)-1,4,6,7-四氫- 5H-吡咯并[3,2- c]吡啶-5-甲酸三級丁酯(155 mg，產率：47%)。 MS (ESI)：C 32H 34ClN 5O 5之質量計算值, 603.22, m/z實驗值604.2 [M+H] +。
226- 步驟 7向3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基)-4-側氧基-2-(3-(2-(吡啶-2-基)丙氧基)吡啶-4-基)-1,4,6,7-四氫- 5H-吡咯并[3,2- c]吡啶-5-甲酸三級丁酯(155 mg，0.26 mmol)於1,4-二㗁烷(10 mL)中之溶液中添加HCl (4M/1,4-二㗁烷溶液，2 mL)。所得混合物在0℃下攪拌1小時。濃縮反應混合物得到粗產物，其藉由製備型TLC (溶離劑：DCM/MeOH =15/1)純化，得到呈黃色固體狀之3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基)-2-(3-(2-(吡啶-2-基)丙氧基)吡啶-4-基)-1,5,6,7-四氫- 4H-吡咯并[3,2- c]吡啶-4-酮(110 mg，產率：84%)。 MS (ESI)：C 27H 26ClN 5O 3之質量計算值, 503.17, m/z實驗值504.2 [M+H] +。
226- 步驟 83-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基)-2-(3-(2-(吡啶-2-基)丙氧基)吡啶-4-基)-1,5,6,7-四氫- 4H-吡咯并[3,2- c]吡啶-4-酮(110 mg，0.22 mmol)藉由SFC分離(Daicel CHIRALPAK OD-H, 20x250 mm, 5 µm 70/30 CO2/MeOH [0.2%NH3(7M/MeOH溶液)], 50 g/min, 120欄, 35℃)，得到兩種對映異構物：呈白色固體狀之( R)-3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基)-2-(3-(2-(吡啶-2-基)丙氧基)吡啶-4-基)-1,5,6,7-四氫- 4H-吡咯并[3,2- c]吡啶-4-酮(33 mg，產率：30%)及呈白色固體狀之( S)-3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基)-2-(3-(2-(吡啶-2-基)丙氧基)吡啶-4-基)-1,5,6,7-四氫- 4H-吡咯并[3,2- c]吡啶-4-酮(36 mg，產率：33%)。 P1: MS (ESI)：C 27H 26ClN 5O 3之質量計算值, 503.17, m/z實驗值504.2 [M+H] +。 P1: 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 11.66 (s, 1H), 8.56 (d, J = 3.9 Hz, 1H), 8.33 (s, 1H), 7.97 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.82 - 7.72 (m, 1H), 7.48 - 7.39 (m, 2H), 7.27 (m, 2H), 7.13 (s, 1H), 6.71 - 6.62 (m, 2H), 6.04 (m, 1H), 4.44 - 4.35 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.53 (m, 1H), 3.43 (m, 2H), 3.00 - 2.83 (m, 2H), 1.40 (d, J = 7.1 Hz, 3H)。 P2: MS (ESI)：之質量計算值C 27H 26ClN 5O 3, 503.17, m/z實驗值504.2 [M+H] +。 P2: 1H H NMR (400 MHz, DMSO) δ 11.66 (s, 1H), 8.56 (d, J = 3.9 Hz, 1H), 8.33 (s, 1H), 7.97 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.76 (m, 1H), 7.48 - 7.37 (m, 2H), 7.28 (m, 2H), 7.13 (s, 1H), 6.71 - 6.62 (m, 2H), 6.04 (m, 1H), 4.44 - 4.34 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.53 (m, 1H), 3.44 (m, 2H), 2.99 - 2.84 (m, 2H), 1.40 (d, J = 7.1 Hz, 3H)。
實例 227.3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基)-2-(3-(2-甲基-2-(吡啶-2-基)丙氧基)吡啶-4-基)-1,5,6,7-四氫-4H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 536)
Figure 02_image2327
227- 步驟 1在0℃下向2-異丙基吡啶(9.5 g，0.0784 mol)於THF (100 mL)中之溶液中添加n-BuLi (43.1 mL，0.0862 mol，2 M/己烷)。將反應混合物在室溫下攪拌0.5小時，在-40℃下添加多聚甲醛(4.7 g，0.1568 mol)。將反應混合物-40℃下攪拌0.5小時且在室溫下攪拌1.5小時。添加3N NaOH飽和水溶液。混合物用EA (200 mL x 3)萃取。有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮得到粗產物。殘留物藉由急驟層析法純化得到呈黃色固體狀之2-甲基-2-(吡啶-2-基)丙烷-1-醇(3 g，24%)。 MS (ESI)：C 9H 13NO之質量計算值, 151.10, m/z實驗值152.1 [M+H] +。
227- 步驟 2在0℃下向2-甲基-2-(吡啶-2-基)丙烷-1-醇(3 g，0.0198 mol)於DMF (40 mL)中之溶液中添加氫化鈉(0.95 g，0.0396 mol)。將反應混合物在0℃下攪拌0.5小時，在0℃下添加3-氯吡啶-4-甲腈(2.74 g，0.0198 mol)。將反應在室溫下攪拌1小時。混合物用水稀釋且用EA (100 mL x 3)萃取。有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮得到粗產物。殘留物藉由急驟層析法純化得到呈黃色固體狀之3-(2-甲基-2-(吡啶-2-基)丙氧基)異菸鹼甲腈(4 g，67%)。 MS (ESI)：C 15H 15N 3O之質量計算值, 253.12, m/z實驗值254.1 [M+H] +。
227- 步驟 3在H 2下向3-[2-甲基-2-(吡啶-2-基)丙氧基]吡啶-4-甲腈(1 g，0.0039 mol)於MeOH (20 mL)中之溶液中添加雷尼鎳(0.23 g，0.0039 mol)。將反應混合物在H 2下在35℃下攪拌2.5小時。過濾溶液，收集濾液且在真空中濃縮得到粗產物。殘留物藉由急驟層析法純化得到呈黃色固體狀之(3-(2-甲基-2-(吡啶-2-基)丙氧基)吡啶-4-基)甲胺(0.9 g，85%)。 MS (ESI)：C 15H 19N 3O之質量計算值, 257.15, m/z實驗值258.1 [M+H] +。
227- 步驟 4向{3-[2-甲基-2-(吡啶-2-基)丙氧基]吡啶-4-基}甲胺(900 mg，3.4974 mmol)、{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-4-羥基-2-側氧基-5,6-二氫吡啶-1-基}甲酸三級丁酯(1516.27 mg，3.6722 mmol)於DMF (20 mL)中之溶液中添加N,N-二異丙基乙胺(1356.01 mg，10.4922 mmol)及PyBOP (2730.02 mg，5.2461 mmol)。將反應在室溫下攪拌4小時。混合物用水稀釋且用EA (50 mL x 3)萃取。有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮得到粗產物。殘留物藉由急驟層析法純化得到呈黃色固體狀之5-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基)-4-(((3-(2-甲基-2-(吡啶-2-基)丙氧基)吡啶-4-基)甲基)胺基)-6-側氧基-3,6-二氫吡啶-1(2H)-甲酸三級丁酯(700 mg，29%)。 MS (ESI)：C 33H 38ClN 5O 5S之質量計算值, 651.23, m/z實驗值652.0/654.0 [M+H] +。
227- 步驟 5在0℃下向{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-4-[({3-[2-甲基-2-(吡啶-2-基)丙氧基]吡啶-4-基}甲基)胺基]-2-側氧基-5,6-二氫吡啶-1-基}甲酸三級丁酯(300 mg，0.46 mmol)於MeOH (10 mL)中之溶液中添加三氟乙酸(104.9 mg，0.92 mol)及過氧化氫(31.29 mg，0.92 mol)。將反應在80℃下攪拌3小時。添加飽和水溶液Na 2SO 3。混合物用EA (30 mL x 3)萃取。有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮得到粗產物。殘留物藉由製備型HPLC純化得到呈黃色固體狀之3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基)-2-(3-(2-甲基-2-(吡啶-2-基)丙氧基)吡啶-4-基)-1,5,6,7-四氫-4H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(54.7 mg，23%)。 MS (ESI)：C 28H 28ClN 5O 3之質量計算值, 517.19, m/z實驗值518.0 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 11.85 (s, 1H), 8.58 (dd, J= 4.0, 8.0 Hz, 1H), 8.37 (s, 1H), 8.04 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.84-7.80 (m, 1H), 7.57 - 7.55 (m, 2H), 7.34 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.31 - 7.28 (m, 1H), 7.22 (s, 1H), 6.72 - 6.66 (m, 2H), 6.05 (dd, J= 4.0, 8.0 Hz, 1H), 4.32 (s, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.47-3.43 (m, 2H), 2.91 (t, J= 8.0 Hz, 2H), 1.52 (s, 6H)。
實例 228.3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基)-2-(3-((6-甲氧基吡啶-2-基)甲氧基)吡啶-4-基)-1, 5, 6, 7-四氫-4H-吡咯并[3, 2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 537)
Figure 02_image2329
228- 步驟 1在-10℃下在N 2下向NaH (60%, 377 mg，9.42 mmol)於DMF (50 mL)中之攪拌懸浮液中添加於DMF (5 mL)中之(6-甲氧基吡啶-2-基)甲醇(1.42 g，10.2 mmol)。攪拌0.5小時後，在-10℃下將3-氯吡啶-4-甲腈(1.1 g，7.85 mmol)於DMF (5 mL)添加至溶液中。將反應混合物在-10℃下攪拌1小時。完成後，反應混合物用飽和NH 4Cl水溶液淬滅，用EA萃取。有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。收集濾液且濃縮。殘留物藉由急驟矽膠管柱層析法(EA/PE，0 ~ 40%)純化，得到呈白色固體狀之3-((6-甲氧基吡啶-2-基)甲氧基) 異菸鹼甲腈(1.3 g，68%)。 MS (ESI)：C 13H 11N 3O 2之質量計算值, 241.1, m/z實驗值242.1 [M+H] +。
228- 步驟 2在N 2下向3-[(6-甲氧基吡啶-2-基)甲氧基] 吡啶-4-甲腈(250 mg，1.036 mmol)於MeOH (25 mL)及NH 3.H 2O (2.5 mL)中之攪拌溶液中添加雷尼鎳(100 mg)。將反應混合物在室溫下在H 2下攪拌5小時。完成後，收集溶劑且在減壓下濃縮且抽空。殘留物藉由急驟矽膠管柱層析法(MeOH/DCM，0 ~ 10%)純化，得到呈白色固體狀之(3-((6-甲氧基吡啶-2-基)甲氧基) 吡啶-4-基) 甲胺(220 mg，86%)。 MS (ESI)：C 13H 15N 3O 2之質量計算值, 245.1, m/z實驗值246.1 [M+H] +。
228- 步驟 3向(3-((6-甲氧基吡啶-2-基)甲氧基) 吡啶-4-基) 甲胺(220 mg，0.897 mmol)於DMF (10 mL)中之攪拌溶液中添加5-((3-氯-2-甲氧基苯基) 胺基甲硫醯基)-4-羥基-6-側氧基-3, 6-二氫吡啶-1(2H)-甲酸三級丁酯(371 mg，0.897 mmol)、PyBOP (701 mg，1.346 mmol)、DIEA (348 mg，2.691 mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌16小時。完成後，反應混合物用水淬滅，用EA萃取。有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。收集濾液且濃縮。殘留物藉由急驟矽膠管柱層析法(MeOH/DCM，0 ~ 10%)純化，得到呈黃色油狀物之5-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基)-4-(((3-((6-甲氧基吡啶-2-基)甲氧基)吡啶-4-基)甲基)胺基)-6-側氧基-3 ,6-二氫吡啶-1(2H)-甲酸三級丁酯(270 mg，80%純度)。 MS (ESI)：C 31H 34ClN 5O 6S之質量計算值, 639.2, m/z實驗值640.2 [M+H] +。
228- 步驟 4在0℃下向5-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基)-4-(((3-((6-甲氧基吡啶-2-基)甲氧基)吡啶-4-基)甲基)胺基)-6-側氧基-3, 6-二氫吡啶-1(2H)-甲酸三級丁酯(220 mg，0.344 mmol)於MeOH (10 mL)中之攪拌溶液中添加H 2O 2(31%, 78 mg，0.688 mmol)、TFA (79 mg，0.688 mmol)。隨後將反應混合物在80℃下攪拌3小時。完成後，將反應混合物冷卻至室溫且在減壓下濃縮。殘留物用EA稀釋，且有機相用水、鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。收集濾液且濃縮。殘留物藉由製備型HPLC在以下條件下純化：管柱：Welch 10u C18 250 x 21.2 mm；移動相A：H 2O (0.1% FA)，移動相B：ACN--HPLC；流動速率：30 mL/min；梯度：32% B至45% B/9 min; 214 nm; Rt: 8 min，得到呈黃色固體狀之3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基)-2-(3-((6-甲氧基吡啶-2-基)甲氧基)吡啶-4-基)-1, 5, 6, 7-四氫-4H-吡咯并[3, 2-c]吡啶-4-酮(72 mg，41%)。 MS (ESI)：C 26H 24ClN 5O 4之質量計算值, 505.2, m/z實驗值506.2 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 11.40 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 8.03 (d, J= 5.0 Hz, 1H), 7.73 (t, J= 7.8 Hz, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.31 (d, J= 5.0 Hz, 1H), 7.10 (s, 1H), 7.01 (d, J= 7.3 Hz, 1H), 6.78 (d, J= 8.3 Hz, 1H), 6.66 - 6.60 (m, 2H), 6.14 (dd, J= 7.2, 2.3 Hz, 1H), 5.35 (s, 2H), 3.82 (d, J= 6.4 Hz, 6H), 3.44 - 3.41 (m, 2H), 2.87 (t, J= 6.8 Hz, 2H)。
實例 229.2-[3-(苯甲氧基)吡啶-4-基]-3-[(3-氟-2-甲基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 538)
Figure 02_image2331
229- 步驟 1在0℃下向3-羥基吡啶-4-甲腈(450 mg，3.75 mmol), 嗒𠯤-3-基甲醇(495 mg，4.49 mmol)及PPh 3(1.20 g，4.49 mmol)於DCM (20 mL)中之溶液中逐滴添加DIAD (909 mg，4.49 mmol)。將反應混合物在0℃下攪拌1小時。濃縮混合物得到粗產物。粗品藉由急驟層析法(PE/EA，0 ~ 40%)純化，得到產物，呈黃色油狀物之3-(嗒𠯤-3-基甲氧基)吡啶-4-甲腈(260 mg，33%產率)。 MS (ESI)：C 11H 8N 4O之質量計算值, 212.1, m/z實驗值213.1 [M+H] +。
229- 步驟 2在N 2下向3-(嗒𠯤-3-基甲氧基)吡啶-4-甲腈(260 mg，1.22 mmol)於NH 3-MeOH (7 M/甲醇，5 mL)及MeOH (20 mL)中之溶液中添加雷尼鎳(260 mg)。將反應在20℃下在H 2下攪拌16小時。完成後，收集溶劑且在減壓下濃縮。殘留物藉由急驟矽膠管柱層析法(DCM/MeOH，0 ~ 10%)純化，得到呈黃色油狀物之[3-(嗒𠯤-3-基甲氧基)吡啶-4-基]甲胺(250 mg，94%產率)。 MS (ESI)：C 11H 12N 4O之質量計算值, 216.1, m/z實驗值217.1 [M+H] +。
229- 步驟 3向[3-(嗒𠯤-3-基甲氧基)吡啶-4-基]甲胺(250 mg，1.16 mmol)、{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-4-羥基-2-側氧基-5,6-二氫吡啶-1-基}甲酸三級丁酯(526 mg，1.27 mmol)及PyBOP (1.2 g，2.3 mmol)於DMA (10 mL)中之溶液中添加DIPEA (750 mg，5.8 mmol)。將反應混合物在20℃下攪拌4小時。完成後，反應混合物用水淬滅，用EA萃取。有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。收集濾液且濃縮。殘留物藉由急驟矽膠管柱層析法(DCM/MeOH，0 ~ 10%)純化，得到呈黃色固體狀之{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-4-{[(3-{[6-(二氟甲基)吡啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)甲基]胺基}-2-側氧基-5,6-二氫吡啶-1-基}甲酸三級丁酯(280 mg，48%)。
229- 步驟 4向{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-2-側氧基-4-({[3-(嗒𠯤-3-基甲氧基)吡啶-4-基]甲基}胺基)-5,6-二氫吡啶-1-基}甲酸三級丁酯(160 mg，0.26 mmol)於1,4-二㗁烷(5.0 mL)中之溶液中添加TFA (60 mg，0.53 mmol)及H 2O 2(30%, 89 mg，0.78 mmol)。將反應在90℃下攪拌1小時。完成後，將反應混合物冷卻至室溫且在減壓下濃縮。殘留物用EA稀釋，且有機相用水、鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。收集濾液且濃縮。殘留物藉由製備型HPLC在以下條件下純化：管柱：Xbridge 5u C18 150 x 19 mm；移動相A：H 2O (0.1% FA)，移動相B：ACN--HPLC；流動速率：20 mL/min；梯度：15% B至45% B/8 min; 214 nm; Rt: 5.7 min，得到呈黃色固體狀之2-[3-(苯甲氧基)吡啶-4-基]-3-[(3-氟-2-甲基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(43 mg，29%)。 MS (ESI)：C 24H 21ClN 6O 3之質量計算值, 476.2, m/z實驗值477.2 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.27 (s, 1H), 9.28 (dd, J= 4.0, 2.4 Hz, 1H), 8.47 (s, 1H), 8.05 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 7.85 - 7.79 (m, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.35 (d, J= 4.8 Hz, 1H), 7.15 (s, 1H), 6.69 (s, 1H), 6.68 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 6.17 (dd, J= 5.6, 4.4 Hz, 1H), 5.73 (s, 2H), 3.87 (s, 3H), 3.46-3.44 (m, 2H), 2.98 (t, J= 6.8 Hz, 2H)。
實例 230.3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基)-2-(3-((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲氧基)吡啶-4-基)-6,7-二氫-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4(5H)-酮 ( 化合物 539)
Figure 02_image2333
230- 步驟 1在0℃下向2,6-二甲基吡啶-2,6-二甲酸酯(5.0 g，0.022 mol)於MeOH (50 mL)中之溶液中分批添加硼氫化鈉(3.3 g，0.088 mol)。將反應在20℃下攪拌16小時。完成後，用飽和Na 2CO 3(10mL水溶液)淬滅反應混合物，且將溶劑濃縮成殘留物。隨後添加DCM/MeOH (10/1，200 mL)且過濾。濾液經Na 2SO 4乾燥且過濾。濃縮濾液得到呈白色固體狀之吡啶-2,6-二基二甲醇(3.0 g，96%)。 MS (ESI)：C 7H 9NO 2之質量計算值, 139.1, m/z實驗值140.2 [M+H] +。
230- 步驟 2在0℃下在N 2下向NaH (1.0 g，60%/礦物油，0.025 mol))於THF (25 mL)中之攪拌懸浮液中添加吡啶-2,6-二基二甲醇(3.0 g，0.023 mol)。攪拌0.5小時後，在0℃下將於DMF (25 mL)中之TBS-Cl (3.8 g，0.025 mol)添加至溶液中。隨後將反應混合物在20℃下攪拌6小時。完成後，反應混合物用冰飽和NH 4Cl水溶液淬滅。且用EA萃取。有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。收集濾液且濃縮。殘留物藉由急驟矽膠管柱層析法(MeOH/DCM，0 ~ 10%)純化，得到呈白色固體狀之(6-(((三級丁基二甲基矽基)氧基)甲基)吡啶-2-基)甲醇(3.2 g，53%)。 MS (ESI)：C 13H 23NO 2Si之質量計算值, 253.2, m/z實驗值254.2 [M+H] +。
230- 步驟 3向(6-(((三級丁基二甲基矽基)氧基)甲基)吡啶-2-基)甲醇( 3.2 g，0.0126 mol)於DCM (30 mL)中之溶液中添加Dess-Martin高碘酸(2.9 g，0.0189 mol)。將反應在20℃下攪拌2小時。完成後，濃縮溶劑。殘留物藉由急驟矽膠管柱層析法(PE/EA，0 ~ 50%)純化，得到呈白色油狀物之6-{[(三級丁基二甲基矽基)氧基]甲基}吡啶-2-甲醛(3.0 g , 94%)。 MS (ESI)：C 13H 21NO 2Si之質量計算值, 251.1, m/z實驗值252.1 [M+H] +。
230- 步驟 4在0℃下向6-{[(三級丁基二甲基矽基)氧基]甲基}吡啶-2-甲醛(3.0 g，0.0119 mol)於DCM (30 mL)中之溶液中添加Et 2NSF 3(2.9 g，0.0178 mol)。隨後將反應混合物在0℃下攪拌6小時。完成後，用水淬滅反應混合物，用飽和NaHCO 3水溶液鹼化且用DCM萃取。有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。收集濾液且濃縮。殘留物藉由急驟矽膠管柱層析法(PE/EA，0 ~ 10%)純化，得到呈白色油狀物之2-(((三級丁基二甲基矽基)氧基)甲基)-6-(二氟甲基)吡啶(1.5 g，60%純度)。 MS (ESI)：C 13H 21F 2NOSi之質量計算值, 273.1, m/z實驗值274.2 [M+H] +。
230- 步驟 5向2-(((三級丁基二甲基矽基)氧基)甲基)-6-(二氟甲基)吡啶( 1.5 g，0.0055 mol)於THF (15 mL)中之溶液中添加TBAF (1.58 g，0.006 mol)。將反應在20℃下攪拌2小時。濃縮溶劑。粗品藉由急驟矽膠管柱層析法(DCM/MeOH，0 ~ 10%)純化，得到呈白色油狀物之[6-(二氟甲基)吡啶-2-基]甲醇(0.6 g，32%兩步驟)。 MS (ESI)：C 7H 7F 2NO之質量計算值, 159.1, m/z實驗值160.1 [M+H] +。
230- 步驟 6在0℃下向[6-(二氟甲基)吡啶-2-基]甲醇(500 mg，3.14 mmol)、3-羥基吡啶-4-甲腈(453 mg，3.77 mmol)及PPh 3(989 mg，3.77 mmol)於DCM (25 mL)中之溶液中逐滴添加DIAD (762 mg，3.77 mmol)。將反應混合物在0℃下攪拌1小時。完成後，收集溶劑且在減壓下濃縮且抽空。殘留物藉由急驟矽膠管柱層析法(PE/EA，0 ~ 20%)純化，得到呈白色固體狀之3-{[6-(二氟甲基)吡啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-甲腈(380 mg，46%產率)。 MS (ESI)：C 13H 9F 2N 3O之質量計算值, 261.1, m/z實驗值262.2 [M+H] +。
230- 步驟 7在N 2下向3-{[6-(二氟甲基)吡啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-甲腈(380 mg，1.45 mmol)於NH 3-MeOH (7M, 5 mL)及MeOH (20 mL)中之溶液中添加雷尼鎳(380 mg)。將反應在20℃下在H 2下攪拌16小時。完成後，收集溶劑且在減壓下濃縮且抽空。殘留物藉由急驟矽膠管柱層析法(DCM/MeOH，0 ~ 10%)純化，得到呈白色固體狀之(3-{[6-(二氟甲基)吡啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)甲胺(360 mg，93%產率)。 MS (ESI)：C 13H 13F 2N 3O之質量計算值, 265.1, m/z實驗值266.1 [M+H] +。
230- 步驟 8向(3-{[6-(二氟甲基)吡啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)甲胺(260 mg，0.98 mmol)、{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-4-羥基-2-側氧基-5,6-二氫吡啶-1-基}甲酸三級丁酯(527 mg，1.27 mmol)及PyBOP (2.0 g，3.92 mmol)於DMA (10 mL)中之溶液中添加DIPEA (1000 mg，7.84 mmol)。將反應混合物在20℃下攪拌4小時。完成後，反應混合物用水淬滅，用EA萃取。有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。收集濾液且濃縮。殘留物藉由急驟矽膠管柱層析法(DCM/MeOH，0 ~ 10%)純化，得到呈黃色固體狀之{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-4-{[(3-{[6-(二氟甲基)吡啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)甲基]胺基}-2-側氧基-5,6-二氫吡啶-1-基}甲酸三級丁酯(280 mg，48%)。
230- 步驟 9向{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-4-{[(3-{[6-(二氟甲基)吡啶-2-基]甲氧基}吡啶-4-基)甲基]胺基}-2-側氧基-5,6-二氫吡啶-1-基}甲酸三級丁酯(280 mg，0.42 mmol)於1,4-二㗁烷(5.0 mL)中之溶液中添加TFA (97 mg，0.85 mmol)及H 2O 2(30%, 144 mg，1.27 mmol)。將反應在90℃下攪拌1小時。完成後，將反應混合物冷卻至室溫且在減壓下濃縮。殘留物用EA稀釋，且有機相用水、鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。收集濾液且濃縮。殘留物藉由製備型HPLC在以下條件下純化：管柱；Xbridge 5u C18 150 x 19 mm；移動相A：H 2O (0.1% FA)，移動相B：ACN--HPLC；流動速率：20 mL/min；梯度：27% B至37% B/8 min; 214 nm; Rt: 5.63 min，得到呈黃色固體狀之3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基)-2-(3-((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲氧基)吡啶-4-基)-6,7-二氫-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4(5H)-酮(28 mg，13%)。 MS (ESI)：C 26H 22ClF 2N 5O 3之質量計算值, 525.1, m/z實驗值526.1 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 11.35 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 8.09 - 8.02 (m, 2H), 7.68 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.61 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.32 (d, J= 4.8 Hz, 1H), 7.13 (s, 0.25H), 7.11 (s, 1H), 7.00 (s, 0.5H), 6.86 (s, 0.25H), 6.67 - 6.61 (m, 2H), 6.16 (dd, J= 5.6, 3.6 Hz, 1H), 5.49 (s, 2H), 3.80 (s, 3H), 3.43 (dt, J= 6.8, 2.0 Hz, 2H), 2.87 (t, J= 6.8 Hz, 2H)。
實例 231.3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基)-2-(3-((3-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲氧基)吡啶-4-基)-1,5,6,7-四氫-4H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 540)
Figure 02_image2335
231- 步驟 1在0℃下向3-羥基異菸鹼甲腈(416 mg，3.46 mmol), (3-(三氟甲基) 吡啶-2-基)甲醇(614 mg，3.46 mmol)及三苯基膦(999 mg，3.81 mmol)於DCM (10 mL)中之溶液中逐滴添加DIAD (771 mg，3.81 mmol)。混合物在氮氣下在25℃下攪拌1小時。完成後，反應混合物用冰飽和NH 4Cl水溶液淬滅，用DCM萃取。有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。收集濾液且濃縮。殘留物藉由急驟矽膠管柱層析法(EA/PE，20% ~ 50%)純化，得到呈白色固體狀之3-((3-(三氟甲基) 吡啶-2-基)甲氧基) 異菸鹼甲腈(320 mg，33%)。 MS (ESI)：C 13H 8F 3N 3O之質量計算值, 279.1, m/z實驗值280.1 [M+H] +。
231- 步驟 2在N 2下向3-((3-(三氟甲基) 吡啶-2-基)甲氧基) 吡啶-4-甲腈(320 mg，1.15 mmol)於MeOH (10 mL)中之攪拌溶液中添加雷尼鎳(50 mg)及NH 3.H 2O (1 mL)。將反應混合物在室溫下在H 2下攪拌16小時。完成後，收集溶劑且在減壓下濃縮。殘留物藉由急驟矽膠管柱層析法(MeOH/DCM，0 ~ 10%)純化，得到呈白色固體狀之(3-((3-(三氟甲基) 吡啶-2-基)甲氧基)吡啶-4-基) 甲胺(230 mg，70%)。 MS (ESI)：C 13H 12F 3N 3O之質量計算值, 283.1, m/z實驗值284.1 [M+H] +。
231- 步驟 3向(3-((3-(三氟甲基) 吡啶-2-基)甲氧基) 吡啶-4-基) 甲胺(230 mg，0.81 mmol)、(3-((3-氯-2-甲氧基苯基) 胺基甲硫醯基)-4-羥基-2-側氧基-5,6-二氫吡啶-1-基)甲酸三級丁酯(403 mg，0.97 mmol)、PyBOP (845 mg，1.62 mmol)於DMF (10 mL)中之溶液中添加N,N-二異丙基乙胺(105 mg，0.81 mmol)。將反應在氮氣下在20℃下攪拌2小時。完成後，反應混合物用水淬滅，用EA萃取。有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。收集濾液且濃縮。殘留物藉由急驟矽膠管柱層析法(DCM/MeOH，0 ~ 10%)純化，得到呈黃色油狀物之5-((3-氯-2-甲氧基苯基) 胺基甲硫醯基)-6-側氧基-4-(((3-((3-(三氟甲基) 吡啶-2-基)甲氧基) 吡啶-4-基)甲基)胺基)-3,6-二氫吡啶-1(2H)-甲酸三級丁酯(220 mg，39%)。 MS (ESI)：C 31H 31ClF 3N 5O5S之質量計算值, 677.2, m/z實驗值678.2 [M+H] +。
231- 步驟 4將(3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基)-2-側氧基-4-(((3-((3-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲氧基)吡啶-4-基)甲基)胺基)-5,6-二氫吡啶-1-基)甲酸三級丁酯(220 mg，0.32 mmol)、過氧化氫(30%, 73 mg，2.14 mmol)及三氟乙酸(148 mg，1.29 mmol)於二㗁烷(10 mL)中之溶液在90℃下攪拌1小時。完成後，將反應混合物冷卻至室溫且用Na 2SO 3水溶液淬滅。混合物用EA萃取，且有機相用水、鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。收集濾液且濃縮。殘留物藉由製備型HPLC在以下條件下純化：管柱；Welch 5u C18 150 x 19 mm；移動相A：H 2O (0.1% FA)，移動相B：ACN--HPLC；流動速率：25 mL/min；梯度：32% B至42% B/9 min; 214 nm; Rt: 8 min，得到呈黃色固體狀之3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基)-2-(3-((3-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲氧基)吡啶-4-基)-1,5,6,7-四氫-4H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(5.5 mg，3%)。 MS (ESI)：C 26H 21ClF 3N 5O 3之質量計算值, 543.1, m/z實驗值544.1 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 9.06 (d, J= 4.8 Hz, 1H), 8.60 (s, 1H), 8.33 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 8.10 (d, J= 6.0 Hz, 1H), 7.80 - 7.58 (m, 2H), 6.82 (dd, J= 8.0, 1.2 Hz, 1H), 6.72 (t, J= 8.0 Hz, 1H), 6.30 (dd, J= 8.4, 1.2 Hz, 1H), 5.88 (s, 2H), 4.02 (s, 3H), 3.67 (t, J= 7.2 Hz, 2H), 3.20 (t, J= 6.8 Hz, 2H)
實例 232.3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基)-2-[3-(吡𠯤2-基甲氧基)吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并(3,2-c)吡啶-4-酮 ( 化合物 541)
Figure 02_image2337
232- 步驟 1在氮氣攪拌下向3-氯吡啶-4-甲腈(10.0 g，0.072 mol)於無水THF (30 mL)中之溶液中逐滴添加於無水THF (30 mL)中之甲醇鈉(17.6 g，0.32 mol)。將反應混合物在氮氣下在80℃下攪拌1小時。完成後，反應混合物用檸檬酸(水溶液)淬滅，用EA萃取。有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。收集濾液且濃縮得到呈白色固體狀之3-甲氧基吡啶-4-甲腈(11.0 g，97%)。粗品不經進一步純化直接用於下一步。 MS (ESI)：C 7H 6N 2O之質量計算值, 134.1, m/z實驗值135.1 [M+H] +。
232- 步驟 2向裝有3-甲氧基吡啶-4-甲腈(6.0 g，0.0447 mol)及吡啶鹽酸鹽(18.1 g，0.16 mol)混合物之圓底燒瓶置於油浴中且在氮氣下加熱至160℃持續5分鐘。完成後，反應混合物用檸檬酸(水溶液)淬滅，用EA萃取。有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。收集濾液且濃縮得到呈灰色固體狀之3-羥基吡啶-4-甲腈(4.6 g，81%)。 MS (ESI)：C 6H 4N 2O之質量計算值, 120.1, m/z實驗值121.1 [M+H] +。
232- 步驟 3在0℃下在氮氣下向3-羥基吡啶-4-甲腈(1.0 g，0.0082 mol)、吡𠯤2-基甲醇(1.0 g，0.0090 mol)及Ph 3P (2.4 g，0.0090 mol)於DCM (20 mL)中之溶液中逐滴添加DIAD (1.82 g，0.0090 mol)。將反應混合物在0℃下在氮氣下攪拌1小時。完成後，混合物用HCl (1.0 M水溶液)洗滌。水相用NaHCO 3(水溶液)中和，用EA萃取。有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。收集濾液且濃縮。粗品藉由急驟層析法(DCM/MeOH，0~10%)純化，得到呈灰色固體狀之3-(吡𠯤2-基甲氧基) 吡啶-4-甲腈(1.9 g，81%)。 MS (ESI)：C 11H 8N 4O之質量計算值, 212.1, m/z實驗值213.1 [M+H] +。
232- 步驟 4向3-(吡𠯤2-基甲氧基) 吡啶-4-甲腈(1.0 g，0.0047 mol)、氨(7.0 M/MeOH，15 mL)於MeOH (30 mL)中之溶液中添加雷尼鎳(0.8 g)。將混合物在室溫下在氫氣下攪拌16小時。完成後，收集溶劑且在減壓下濃縮且抽空。殘留物藉由急驟矽膠管柱層析法(DCM/MeOH，0 ~ 10%)純化，得到呈黃色固體狀之(3-(吡𠯤2-基甲氧基) 吡啶-4-基) 甲胺(0.9 g，79%)。 MS (ESI)：C 11H 12N 4O之質量計算值, 216.2, m/z實驗值217.2 [M+H] +。
232- 步驟 5向(3-(吡𠯤2-基甲氧基)吡啶-4-基]甲胺(223 mg，1.03 mmol)、(3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基)-4-羥基-2-側氧基-5,6-二氫吡啶-1-基)甲酸三級丁酯(640 mg，1.546 mmol)及DIEA (1.07 mg，8.25 mmol)於DMA (5 mL)中之溶液中添加PyBOP (2.15 g，4.12 mmol)。將反應混合物在室溫下在氮氣下攪拌16小時。完成後，反應混合物用水淬滅，用EA萃取。有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。收集濾液且濃縮。殘留物藉由急驟矽膠管柱層析法(DCM/MeOH，0 ~ 10%)純化，得到呈黃色油狀物之(3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基)-2-側氧基-4-(((3-(吡𠯤2-基甲氧基)吡啶-4-基)甲基)胺基)-5,6-二氫吡啶-1-基)甲酸三級丁酯(950 mg，45 %)。 MS (ESI)：C 29H 31ClN 6O 5S之質量計算值, 610.1, m/z實驗值511.1 [M -100+H] +。
232- 步驟 6在室溫下在 氮氣氛圍下向(3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基)-2-側氧基-4-(((3-(吡𠯤2-基甲氧基)吡啶-4-基)甲基)胺基)-5,6-二氫吡啶-1-基)甲酸三級丁酯(950 mg，0.0016 mol)於1,4-二㗁烷(15 mL)中之溶液中逐滴添加H 2O 2(30%, 730 mg，0.0064 mol)及三氟乙酸(730 mg，0.0064 mol)。將反應混合物 在90℃下在氮氣氛圍下攪拌1小時。完成後，將反應混合物冷卻至室溫且在減壓下濃縮。殘留物用EA稀釋，且有機相用水、鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。收集濾液且濃縮。殘留物藉由製備型HPLC在以下條件下純化：管柱；Welch 10u C18 250 x 21.2 mm；移動相A：水(0.1% NH 3)，移動相B：ACN；流動速率：25 mL/min；梯度：35% B至45% B/9 min; 214  nm; Rt: 8 min，得到呈白色固體狀之3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基)-2-[3-(吡𠯤2-基甲氧基)吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并(3,2-c)吡啶-4-酮(25 mg，6%)。 MS (ESI)：C 24H 21ClN 6O 3之質量計算值, 476.1, m/z實驗值477.1 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 11.70 (s, 1H), 8.80 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 8.74 - 8.73 (m, 1H), 8.68 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 8.46 (s, 1H), 8.06 (d, J= 4.8 Hz, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.34 (d, J= 5.2 Hz, 1H),  7.14 (s, 1H), 6.68 - 6.63 (m, 2H), 6.16 - 6.14 (m, 1H), 5.56 (s, 2H), 3.84 (s, 3H), 3.45 - 3.42 (m, 2H), 2.91 (t, J= 6.8 Hz, 2H)。
實例 233.3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基)-2-(3-(2-(吡𠯤2-基)乙氧基)吡啶-4-基)-1,5,6,7-四氫-4H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 542)
Figure 02_image2339
233- 步驟 1在0℃下向3-羥基異菸鹼甲腈(0.8 g，6.66 mmol), 2-(吡𠯤2-基)乙烷-1-醇(0.8 g，6.66 mmol)及三苯基膦(1.9 g，7.33 mmol)於DCM (10 mL)中之溶液中逐滴添加DIAD (1.5 g，7.33 mmol)。將混合物在0℃下在氮氣下攪拌 2 小時。完成後，反應混合物冰飽和NH 4Cl水溶液淬滅，用DCM萃取。有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。收集濾液且濃縮。殘留物藉由急驟矽膠管柱層析法(EA/PE，20% ~ 50%)純化，得到呈白色固體狀之3-(2-(吡𠯤2-基)乙氧基)異菸鹼甲腈(1.1 g，72%)。 MS (ESI)：C 12H 10N 4O之質量計算值, 226.1, m/z實驗值227.1 [M+H] +。
233- 步驟 2在N 2下向3-(2-(吡𠯤2-基)乙氧基)異菸鹼甲腈(1.1 g，4.82 mmol)於MeOH (100 mL)中之攪拌溶液中添加雷尼鎳(500 mg)及NH 3.H 2O (10 mL)。將反應混合物在室溫下在H 2下攪拌16小時。完成後，收集溶劑且在減壓下濃縮且抽空。殘留物藉由急驟矽膠管柱層析法(MeOH/DCM，0 ~ 10%)純化，得到呈白色固體狀之(3-(2-(吡𠯤2-基)乙氧基)吡啶-4-基)甲胺(850 mg，76%)。 MS (ESI)：C 14H 14N 4O之質量計算值, 230.1, m/z實驗值231.1 [M+H] +。
233- 步驟 3將(3-(2-(吡𠯤2-基)乙氧基)吡啶-4-基)甲胺(850 mg，3.69 mmol)、(3-((3-氯-2-甲氧基苯基) 胺基甲硫醯基)-4-羥基-2-側氧基-5,6-二氫吡啶-1-基)甲酸三級丁酯(1.8 g，4.43 mmol)、PyBOP (3.8 g，7.38 mmol)及N,N-二異丙基乙胺(1.0 g，7.38 mmol)於DMF (15 mL)中之溶液在20℃下攪拌3小時。完成後，反應混合物用水淬滅，用EA萃取。有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。收集濾液且濃縮。殘留物藉由急驟矽膠管柱層析法(DCM/MeOH，0 ~ 10%)純化，得到呈黃色固體狀之5-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基)-6-側氧基-4-(((3-(2-(吡𠯤2-基)乙氧基)吡啶-4-基)甲基)胺基)-3,6-二氫吡啶-1(2H)-甲酸三級丁酯(1.1 g，48%純度)。 MS (ESI)：C 30H 33ClN 6O 5S之質量計算值, 624.2, m/z實驗值625.2 [M+H] +。
233- 步驟 4將5-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基)-6-側氧基-4-(((3-(2-(吡𠯤2-基)乙氧基)吡啶-4-基)甲基)胺基)-3,6-二氫吡啶-1(2H)-甲酸三級丁酯(800 mg，1.28 mmol)、過氧化氫(30%, 290 mg，2.56 mmol)及三氟乙酸(730 mg，6.4 mmol)於二㗁烷(30 mL)中之溶液在90℃下攪拌1小時。完成後，將反應混合物冷卻至室溫且用Na 2SO 3水溶液淬滅。混合物用EA萃取，且有機相用水、鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。收集濾液且濃縮。殘留物藉由製備型HPLC在以下條件下純化：管柱；Welch 5u C18 150 x 19 mm；移動相A：H 2O (0.1% FA)，移動相B：ACN--HPLC；流動速率：25 mL/min；梯度：15% B至35% B/9.5 min; 214 nm; Rt: 8 min，得到呈黃色固體狀之3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基)-2-(3-(2-(吡𠯤2-基)乙氧基)吡啶-4-基)-1,5,6,7-四氫-4H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(21 mg，3%)。 MS (ESI)：C 25H 23ClN 6O 3之質量計算值, 490.2, m/z實驗值491.2 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 11.33 (s, 1H), 8.67 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 8.60 - 8.59 (m, 1H), 8.52 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 8.38 (s, 1H), 8.00 (d, J= 4.8 Hz, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.29 (d, J= 4.8 Hz, 1H), 7.13 (s, 1H), 6.71 - 6.61 (m, 2H), 6.04 - 6.01 (m, 1H), 4.55 (t, J= 6.0 Hz, 2H), 3.87 (s, 3H), 3.45 - 3.40 (m, 2H), 3.38 - 3.35 (m, 2H), 2.90 (t, J= 6.8 Hz, 2H)。
實例 234.3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基)-2-(3-((6-乙烯基吡𠯤2-基)甲氧基)吡啶-4-基)-1,5,6,7-四氫-4H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 543)
Figure 02_image2341
234- 步驟 1將3-羥基異菸鹼甲腈(1 g，8.3 mmol)及Pd/C (1 g)於MeOH (60 mL)/HCl (6 mL)中之混合物在室溫下在氫氣氛圍下攪拌2小時。完成後，過濾混合物，用MeOH (50 mL)洗滌。在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由急驟層析法(DCM/MeOH，0至10%，0.1% NH 3OH作為添加劑)純化，得到呈黃色油狀物之4-(胺基甲基)吡啶-3-醇(800 mg，產率：77.7%)。 MS (ESI)：C 6H 8N 2O之質量計算值, 124.06, m/z實驗值125.2 [M+H] +。
234- 步驟 2在0℃下向4-(胺基甲基)吡啶-3-醇(700 mg，5.6 mmol)於DCM (35 mL)中之溶液中添加(Boc) 2O (1.8 g，8.4 mmol)且在室溫下在N 2下攪拌6小時。完成後，反應用H 2O (50 mL)淬滅，用DCM (50 mL x 3)萃取。合併之有機層用鹽水(80 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，在真空中濃縮得到粗品，其藉由急驟層析法(PE/EtOAc，0至60%)純化，得到呈黃色油狀物之((3-((三級丁氧基羰基)氧基)吡啶-4-基)甲基)胺基甲酸三級丁酯(1.2 g，66%)。 MS (ESI)：C 16H 24N 2O 5之質量計算值, 324.17, m/z實驗值325.2 [M+H] +。
234- 步驟 3將((3-((三級丁氧基羰基)氧基)吡啶-4-基)甲基)胺基甲酸三級丁酯(1.2 g，3.7 mmol)及LiOH-H 2O (466 mg，11.1 mmol)於MeOH (15 mL)/THF (15 mL)/H 2O (5 mL)中之混合物在室溫下在N 2下攪拌2小時。完成後，過濾混合物，用DCM (50 mL)洗滌。在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由急驟層析法(DCM/MeOH，0至10%)純化，得到呈黃色油狀物之((3-羥基吡啶-4-基)甲基)胺基甲酸三級丁酯(800 mg，產率：96%)。 MS (ESI)：C 11H 16N 2O 3之質量計算值, 224.12, m/z實驗值225.2 [M+H] +。
234- 步驟 4在0℃下向((3-羥基吡啶-4-基)甲基)胺基甲酸三級丁酯(600 mg，2.68 mmol)、(6-溴吡𠯤2-基)甲醇(607 mg，3.2 mmol)及PPh 3(840 mg，3.2 mmol)於THF (20 mL)中之攪拌混合物中添加DIAD (645 mg，3.2 mmol)。將反應混合物在0℃下在N 2下攪拌1小時。完成後，反應用H 2O (30 mL)淬滅，用EtOAc (50 mL x 3)萃取。合併之有機層用鹽水(40 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾且在真空中濃縮得到粗品，其藉由矽膠管柱層析法(溶離劑：PE/EtOAc，0至40%)純化，得到呈黃色固體狀之((3-((6-溴吡𠯤2-基)甲氧基)吡啶-4-基)甲基)胺基甲酸三級丁酯(120 mg，產率：11%)。 MS (ESI)：C 16H 19BrN 4O 3之質量計算值, 394.06, m/z實驗值395.2 [M+H] +。
234- 步驟 5在0℃下向((3-((6-溴吡𠯤2-基)甲氧基)吡啶-4-基)甲基)胺基甲酸三級丁酯(120 mg，0.3 mmol)於1,4-二㗁烷(5 mL)中之溶液中添加HCl (0.7 mL，2.8 mmol，4M/1,4-二㗁烷溶液)。將所得反應混合物在0℃下攪拌1小時。完成後，將反應混合物濃縮得到殘留物，其用NH 3(10 mL，7M/MeOH溶液)中和且濃縮。粗產物藉由製備型TLC (溶離劑：DCM/MeOH =10/1)純化，得到呈黃色固體狀之(3-((6-溴吡𠯤2-基)甲氧基)吡啶-4-基)甲胺(75 mg，產率：85%)。 MS (ESI)：C 11H 11BrN 4O之質量計算值, 294.01, m/z實驗值295.2 [M+H] +。
234- 步驟 6將(3-((6-溴吡𠯤2-基)甲氧基)吡啶-4-基)甲胺(75 mg，0.25 mmol)、5-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基)-4-羥基-6-側氧基-3,6-二氫吡啶-1(2H)-甲酸三級丁酯(80 mg，0.33 mmol)、PyBOP(520 mg，0.48 mmol)及DIPEA (124 mg，0.96 mmol)於DMF (5 mL)中之溶液在室溫下攪拌3小時。完成後，反應混合物用水(40 mL)稀釋，用EtOAc (40 mL x 3)萃取。合併之有機層用鹽水(50 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，在減壓下濃縮濾液。殘留物藉由急驟層析法(DCM/MeOH，1至5%)純化，得到呈黃色固體狀之5-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基)-6-側氧基-4-(((3-(2-(吡啶-2-基)丙氧基)吡啶-4-基)甲基)胺基)-3,6-二氫吡啶-1(2H)-甲酸三級丁酯(115 mg，產率：66%)。 MS (ESI)：C 29H 30BrClN 6O 5S之質量計算值, 688.09, m/z實驗值689.1 [M+H] +。
234- 步驟 7向4-(((3-((6-溴吡𠯤2-基)甲氧基)吡啶-4-基)甲基)胺基)-5-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基)-6-側氧基-3,6-二氫吡啶-1(2H)-甲酸三級丁酯(100 mg，0.14 mmol)於1,4-二㗁烷(5 mL)中之溶液中添加H 2O 2(74.8 mg，0.66 mmol，30%/H 2O溶液)。將所得混合物在80℃下攪拌3小時。濃縮反應混合物得到粗產物，其藉由製備型TLC (DCM/MeOH =15/1)純化，得到呈黃色固體狀之2-(3-((6-溴吡𠯤2-基)甲氧基)吡啶-4-基)-3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基)-4-側氧基-1,4,6,7-四氫-5H-吡咯并[3,2-c]吡啶-5-甲酸三級丁酯(50 mg，產率：54%)。 MS (ESI)：C 29H 28BrClN 6O 5之質量計算值, 654.10, m/z實驗值657.0 [M+H] +。
234- 步驟 8將2-(3-((6-溴吡𠯤2-基)甲氧基)吡啶-4-基)-3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基)-4-側氧基-1,4,6,7-四氫-5H-吡咯并[3,2-c]吡啶-5-甲酸三級丁酯(50 mg，0.076 mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-乙烯基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷(23.4 mg，0.152 mmol)及Pd(dppf)Cl 2(11.1 mg，0.015 mmol)及K 2CO 3(32.5 mg，0.228mol)於1,4-二㗁烷/H 2O (5 mL/1 mL)中之溶液在70℃下攪拌1小時。完成後，反應混合物用水(40 mL)稀釋，用EtOAc (40 mL x 3)萃取。合併之有機層用鹽水(50 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，濃縮濾液得到粗產物，其藉由製備型TLC (DCM/MeOH =15/1)純化，得到呈黃色固體狀之3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基)-4-側氧基-2-(3-((6-乙烯基吡𠯤2-基)甲氧基)吡啶-4-基)-1,4,6,7-四氫-5H-吡咯并[3,2-c]吡啶-5-甲酸三級丁酯(35 mg，產率：76%)。 MS (ESI)：C 31H 31ClN 6O 5之質量計算值, 602.20, m/z實驗值603.3 [M+H] +。
234- 步驟 9將3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基)-4-側氧基-2-(3-((6-乙烯基吡𠯤2-基)甲氧基)吡啶-4-基)-1,4,6,7-四氫-5H-吡咯并[3,2-c]吡啶-5-甲酸三級丁酯(15 mg，0.025 mmol)、HCl (0.2 mL，0.8 mmol，4 M/1,4-二㗁烷溶液)中之溶液在室溫下攪拌1小時。濃縮反應混合物得到粗產物，將其再溶解於MeOH (4 mL)中，隨後在-30℃下向其中添加tBuOK (2.8 mg，0.025 mmol)持續1小時。完成後，反應混合物用水(20 mL)稀釋，用EtOAc (30 mL x 3)萃取。合併之有機層用鹽水(30 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，濃縮濾液得到粗產物，其藉由製備型TLC (DCM/MeOH =15/1)純化，得到呈黃色固體狀之3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基)-2-(3-((6-乙烯基吡𠯤2-基)甲氧基)吡啶-4-基)-1,5,6,7-四氫-4H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(3.1 mg，產率：60%)。 MS (ESI)：C 26H 23ClN 6O 3之質量計算值, 502.15, m/z實驗值503.1 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.64 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 7.99 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 7.45 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 6.96 - 6.88 (m, 1H), 6.65 - 6.63 (m, 1H), 6.58 (t, J = 8.1 Hz, 1H), 6.41 (dd, J = 17.5, 1.1 Hz, 1H), 6.17 (dd, J = 8.1, 1.5 Hz, 1H), 5.67 (dd, J = 10.9, 1.1 Hz, 1H), 5.49 (s, 2H), 3.91 (s, 3H), 3.57 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 2.94 (t, J = 6.9 Hz, 2H)。
實例 235.3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基)-2-(3-((6-甲基吡𠯤-2-基)甲氧基)吡啶-4-基)-1,5,6,7-四氫-4H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 549)
Figure 02_image2343
235- 步驟 1在0℃下向6-甲基吡𠯤-2-甲酸(2 g，0.0145 mol)於MeOH (20 mL)中之溶液中添加二氯亞碸(3.45 g，0.029 mol)。將反應混合物在80℃下攪拌6小時。添加飽和水溶液NaHCO 3(100 mL)且用EA (50 mL x 3)萃取。有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮得到粗產物。殘留物藉由急驟層析法純化得到呈黃色固體狀之6-甲基吡𠯤-2-甲酸甲酯(1.5 g，65%)。 MS (ESI)：C 7H 8N 2O 2之質量計算值, 152.06, m/z實驗值153.1 [M+H] +。
235- 步驟 2在-70℃下向6-甲基吡𠯤-2-甲酸甲酯(1.5 g，0.0099 mol)於THF (20 mL)中之溶液中添加LiAlH 4(0.41 g，0.0108 mol)。將反應混合物在-70℃下攪拌1小時。添加Na 2SO 4·10H 2O。過濾溶液。濾液經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮得到粗產物。殘留物藉由急驟層析法純化得到呈黃色固體狀之(6-甲基吡𠯤-2-基)甲醇(0.6 g，46%)。 MS (ESI)：C 6H 8N 2O之質量計算值, 124.6, m/z實驗值125.1 [M+H] +。
235- 步驟 3在氮氣下在0℃攪拌下向(6-甲基吡𠯤-2-基)甲醇(500 mg，4.0277 mmol)、3-羥基吡啶-4-甲腈(507.95 mg，4.229 mmol)、PPh 3(1267.71 mg，4.8332 mmol)於THF (10 mL)中之溶液中添加DIAD (977.33 mg，4.8332 mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌3小時。混合物用水稀釋且用EA (50 mL x 3)萃取。有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮得到粗產物。殘留物藉由急驟層析法純化得到呈黃色固體狀之3-((6-甲基吡𠯤-2-基)甲氧基)異菸鹼甲腈(400 mg，35%)。 MS (ESI)：C 12H 10N 4O之質量計算值, 226.09, m/z實驗值227.0 [M+H] +。
235- 步驟 4在H 2下向3-[(6-甲基吡𠯤-2-基)甲氧基]吡啶-4-甲腈(400 mg，1.7681 mmol)於MeOH (10 mL)中之溶液中添加雷尼鎳(103.77 mg，1.7681 mmol)。將反應混合物在室溫下在H 2下攪拌6小時。過濾溶液，收集濾液且在真空中濃縮得到粗產物。殘留物藉由急驟層析法純化得到呈黃色固體狀之(3-((6-甲基吡𠯤-2-基)甲氧基)吡啶-4-基)甲胺(200 mg，39%)。 MS (ESI)：C 12H 14N 4O之質量計算值, 230.12, m/z實驗值231.1 [M+H] +。
235- 步驟 5向{3-[(6-甲基吡𠯤-2-基)甲氧基]吡啶-4-基}甲胺(200 mg，0.8686 mmol)、{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-4-羥基-2-側氧基-5,6-二氫吡啶-1-基}甲酸三級丁酯(359.51 mg，0.8686 mmol)於DMF (10 mL)中之溶液中添加N,N-二異丙基乙胺(336.77 mg，2.6058 mmol)及PyBOP (678.02 mg，1.3029 mmol)。將反應在室溫下攪拌3小時。混合物用水稀釋且用EA (30 mL x 3)萃取。有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮得到粗產物。殘留物藉由急驟層析法純化得到呈黃色固體狀之5-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基)-4-(((3-((6-甲基吡𠯤-2-基)甲氧基)吡啶-4-基)甲基)胺基)-6-側氧基-3,6-二氫吡啶-1(2H)-甲酸三級丁酯(260 mg，42%)。 MS (ESI)：C 30H 33ClN 6O 5S之質量計算值, 624.19, m/z實驗值625.0/627.0 [M+H] +。
235- 步驟 6在0℃下向{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基甲硫醯基]-4-[({3-[(6-甲基吡𠯤-2-基)甲氧基]吡啶-4-基}甲基)胺基]-2-側氧基-5,6-二氫吡啶-1-基}甲酸三級丁酯(260 mg，0.4152 mmol)於MeOH (10 mL)中之溶液中添加三氟乙酸(94.68 mg，0.8304 mol)及過氧化氫(28.25 mg，0.8304 mol)。將反應在80℃下攪拌3小時。添加飽和水溶液Na 2SO 3。混合物用EA (30 mL x 3)萃取。有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾且在減壓下濃縮得到粗產物。殘留物製備型HPLC純化得到呈黃色固體狀之3-((3-氯-2-甲氧基苯基)胺基)-2-(3-((6-甲基吡𠯤-2-基)甲氧基)吡啶-4-基)-1,5,6,7-四氫-4H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(22.3 mg，11%)。 MS (ESI)：C 25H 23ClN 6O 3之質量計算值, 490.15, m/z實驗值491.1/493.1 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.38 (s, 1H), 8.54 (d, J= 4.0 Hz, 2H), 8.44 (s, 1H), 8.06 (d, J= 4.0 Hz, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.32 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.12 (s, 1H), 6.66 - 6.61 (m, 2H), 6.14 (dd, J= 4.0, 8.0 Hz, 1H), 5.46 (s, 2H), 3.81 (s, 3H), 3.45-3.41 (m, 2H), 2.88 (t, J= 8.0 Hz, 2H), 2.54 (s, 3H)。
實例 236.2-(3-{2-[(1S,3R,5S)-2-[(2E)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯醯基]-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-基]乙炔基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 345)
236.1. 合成 (1S,3R,5S)-3-[2-(4-{3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ]-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -2- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2345
在室溫下在氬氣氛圍下向3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(600 mg，1.25 mmol，1.00當量)  CuI (119 mg，0.62 mmol，0.50當量)及Pd(dppf)Cl 2CH 2Cl 2(255 mg，0.31 mmol，0.25當量)於DMF (6 mL)中之攪拌混合物中逐滴添加(1S,3R,5S)-3-乙炔基-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸三級丁酯(650 mg，3.13 mmol，2.50當量)及DIEA (486 mg，3.76 mmol，3當量)。將所得混合物在50℃下在氬氣氛圍下攪拌2小時。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化：管柱，矽膠；移動相，MeCN/水，10%至50%梯度/10 min；偵測器，UV 254 nm。將所得混合物在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠管柱層析法純化，用DCM/MeOH (20:1)溶離得到呈黃色固體狀之(1S,3R,5S)-3-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸三級丁酯(460 mg，65.76%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：558.20。
236.2 合成 2-(3-{2-[(1S,3R,5S)-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2347
在室溫下在氮氣氛圍下向(1S,3R,5S)-3-[2-(4-{3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸三級丁酯(100 mg，0.18 mmol，1.00當量)於DCM (3 mL)中之攪拌混合物中添加TFA (1 mL)。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮得到呈紅色油狀物之2-(3-{2-[(1S,3R,5S)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-基]乙炔基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(60 mg，粗品)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：458.10
236.3. 合成 3-{2-[(1S,3R,5S)-2-[(2E)-4-( 二甲基胺基 ) 丁 -2- 烯醯基 ]-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-3-[(3- 氟 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2349
將2-(3-{2-[(1S,3R,5S)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-基]乙炔基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(60 mg，0.13 mmol，1.00當量)於THF (3 mL)中之溶液。用DIEA鹼化至pH為8。在0℃下在氮氣氛圍下向上述混合物中添加(2E)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯酸(33 mg，0.26 mmol，2.00當量)，隨後逐滴添加T3P (83 mg，0.26 mmol，2.00當量，50%/EA)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。在0℃下將飽和水溶液NaHCO 3(10 mL)添加至反應混合物中且用EtOAc (3 x 10 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。在減壓下濃縮濾液得到粗產物(80 mg)，藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：Xselect CSH F-Phenyl OBD管柱，19*250 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH4HCO3)，移動相B：ACN；流動速率：25 mL/min；梯度：53% B至83% B/7 min, 83% B；波長：254 nm；RT1(min)：6.53；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之2-(3-{2-[(1S,3R,5S)-2-[(2E)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯醯基]-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-基]乙炔基}吡啶-4-基)-3-[(3-氟-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(25.7 mg，33.08%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：569.15 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 10.97 (s, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.16 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.50 - 7.44 (m, 1H), 7.03 - 6.92 (m, 1H), 6.74 (d, J = 15.3 Hz, 1H), 6.61 - 6.51 (m, 1H), 6.50 - 6.40 (m, 1H), 6.11 - 6.04 (m, 1H), 5.21 (s, 1H), 4.83 - 4.75 (m, 1H), 4.09 (d, J = 1.3 Hz, 3H), 3.65 - 3.57 (m, 3H), 3.32 (s, 2H), 3.24 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 2.66 - 2.56 (m, 1H), 2.56 - 2.46 (m, 1H), 2.44 (s, 6H), 2.00 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 1.14 - 1.04 (m, 1H), 0.68 - 0.61 (m, 1H)。
實例 237. 合成3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(1S,3R,5S)-2-[(2E)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯醯基]-2-氮雜雙環[3.1.0] 己烷-3-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮 ( 化合物 466)
237.1. 合成 (1S,3R,5S)-3-[2-(4-{3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-4- 側氧基 -1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -2- 基 } 吡啶 -3- 基 ) 乙炔基 ]-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -2- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2351
在室溫下在氬氣氛圍下向3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-碘吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(20 mg，0.040 mmol，1當量)及Pd(dppf)Cl2CH2Cl2 (109.17 mg，0.134 mmol，0.25當量)、CuI (51.05 mg，0.268 mmol，0.5當量)於DMF (2.5 mL)中之攪拌混合物中逐滴添加(1S,3R,5S)-3-乙炔基-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸三級丁酯(16.76 mg，0.080 mmol，2當量)及DIEA (207.85 mg，1.608 mmol，3當量)。將所得混合物在50℃下在氬氣氛圍下攪拌2小時。殘留物藉由逆相急驟層析法在以下條件下純化：管柱，矽膠；移動相，MeCN/水，10%至50%梯度/10 min；偵測器，UV 254 nm。此產生呈黃色固體狀之(1S,3R,5S)-3-[2-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸三級丁酯。 LC-MS: (M+H) +實驗值：574.10。
237.2. 合成 2-(3-{2-[(1S,3R,5S)-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2353
在室溫下在氮氣氛圍下向(1S,3R,5S)-3-[2-(4-{3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-4-側氧基-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基}吡啶-3-基)乙炔基]-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸三級丁酯(100 mg，0.14 mmol，1.00當量)於DCM (3 mL)中之攪拌混合物中添加TFA (1 mL)。將所得混合物攪拌1小時且在減壓下濃縮得到呈紅色油狀物之2-(3-{2-[(1S,3R,5S)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-基]乙炔基}吡啶-4-基)-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(80 mg，粗品)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：474.00
237.3. 合成 3-[(3- 氯 -2- 甲氧基苯基 ) 胺基 ]-2-(3-{2-[(1S,3R,5S)-2-[(2E)-4-( 二甲基胺基 ) 丁 -2- 烯醯基 ]-2- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 基 ] 乙炔基 } 吡啶 -4- 基 )-1H,5H,6H,7H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image2355
將2-(3-{2-[(1S,3R,5S)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-基]乙炔基}吡啶-4-基)-3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(80 mg，0.17 mmol，1.00當量)於THF (3 mL)中之溶液用DIEA鹼化至pH為8。在0℃下在氮氣氛圍下向上述混合物中添加(2E)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯酸鹽酸鹽(55 mg，0.34 mmol，2.00當量)，隨後逐滴添加T3P (322 mg，0.51 mmol，3當量，50%/EA)。將所得混合物在室溫下在氮氣氛圍下攪拌1小時。在0℃下將飽和水溶液NaHCO 3(10 mL)添加至反應混合物中且用EtOAc (3 x 10 mL)萃取，經無水Na 2SO 4乾燥且過濾。在減壓下濃縮濾液得到粗產物(140 mg)，藉由製備型HPLC在以下條件下純化(管柱：XSelect CSH Fluoro Phenyl, 30*150 mm, 5μm；移動相A：水(10 mmol/L NH4HCO3)，移動相B：ACN；流動速率：60 mL/min；梯度：44% B至74% B/7 min；波長：254 nm；RT1(min)：6.5；運行次數：0)，得到呈黃色固體狀之3-[(3-氯-2-甲氧基苯基)胺基]-2-(3-{2-[(1S,3R,5S)-2-[(2E)-4-(二甲基胺基)丁-2-烯醯基]-2-氮雜雙環[3.1.0] 己烷-3-基]乙炔基}吡啶-4-基)-1H,5H,6H,7H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(29.1 mg，23.55%)。 LC-MS: (M+H) +實驗值：585.05 1H NMR (300 MHz, 氯仿-d) δ 10.99 (s, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.15 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.41 (d, J= 5.5 Hz, 1H), 7.08 - 6.85 (m, 1H), 6.80 - 6.49 (m, 3H), 6.31 - 6.05 (m, 1H), 5.22 (s, 1H), 4.89 - 4.71 (m, 1H), 4.07 (s, 3H), 3.59 (d, J= 7.0 Hz, 3H), 3.24 (t, J= 6.7 Hz, 4H), 2.69 - 2.23 (m, 8H), 2.06 - 1.93 (m, 1H), 1.14 - 1.02 (m, 1H), 0.69 - 0.60 (m, 1H)。
生物活性 實例 A.EGFR活性 藉由用含有具有EGFR WT、EGFR外顯子20 NPG Ins D770_N771、EGFR外顯子20 ASV Ins V769_D770、EGFR外顯子20 SVD Ins D770_N771或EGFR外顯子20 FQEA Ins A763_V764基因及嘌呤黴素選擇標記物之載體的反轉錄病毒轉導Ba/F3細胞來產生細胞株。經轉導細胞用嘌呤黴素選擇7天且隨後轉移至不含介白素3 (IL3)之培養基中。EGFR WT細胞用補充之EGF維持。藉由西方墨點法確認存活細胞表現EGFR且作為池進行維持。IC50資料包括於 表 6中。
研究設計 1 細胞接種1.1 將細胞自燒瓶收集至細胞培養基中且計數細胞數目。 1.2 細胞用培養基稀釋至所需密度且將40 μL細胞懸浮液添加至384孔細胞培養板之各孔中且接種密度為600個細胞/孔。
2 化合物製備及處理2.1 測試化合物在DMSO儲備溶液中溶解至10 mM。將45 μL儲備溶液轉移至384聚丙烯板(pp板)中。經由使用TECAN (EVO200)液體處理器將15 µL化合物轉移至30 μL DMSO中來進行3倍、10點稀釋。 2.2 在室溫下在1,000 RPM下旋轉板1分鐘。 2.3 將120 nL經稀釋之化合物自化合物源板轉移至細胞板中。 2.4 化合物處理72小時之後，如「偵測」部分中所描述對化合物處理板進行CTG偵測。
3 偵測3.1 將板自培育箱移除且在室溫下平衡15分鐘。 3.2 解凍CellTiter Glo試劑且允許在實驗之前平衡至室溫。 3.3 將40 μL CellTiter-Glo試劑添加至各孔中(以1:1添加至培養基)。接著將板在室溫下置放30分鐘，接著在EnVision上讀取。
4 資料分析4.1 抑制活性根據下式計算： 抑制%= 100 x (LumHC - LumSample)/(LumHC -LumLC) 其中HC僅自用0.1% DMSO處理之細胞獲得；且LC僅自培養基獲得。 4.2 2. 藉由使用Xlfit (v5.3.1.3)、方程式201擬合曲線來計算IC 50： Y = 底部+ (頂部– 底部)/(1 + 10^((LogIC 50- X)*希爾斜率)) IC50日期包括於表4中。
實例 B.EGFR磷酸化(pEGFR)之抑制劑活性 藉由用含有表現EGFR外顯子20 NPG Ins D770_N771、EGFR外顯子20 ASV Ins V769_D770或EGFR外顯子20 SVD Ins D770_N771以及嘌呤黴素選擇標記物之載體的反轉錄病毒轉導來產生EGFR突變型Ba/F3細胞。經轉導細胞用嘌呤黴素選擇7天且隨後轉移至不含介白素3 (IL3)之培養基中。藉由西方墨點法確認存活細胞表現EGFR且作為池進行維持。CUTO14細胞自科羅拉多大學的Dr. Robert C. Doebele獲得。IC50資料包括於 表 6中。
研究設計 1 細胞接種1.1 將細胞自燒瓶收集至細胞培養基中且計數細胞數目。 1.2 細胞用培養基稀釋至所需密度且將40 μL細胞懸浮液添加至384孔細胞培養盤之各孔中且接種密度為50K個細胞/孔(Ba/F3)或12.5K個細胞/孔(CUTO14)。
2 化合物製備及處理2.1 測試化合物在DMSO儲備溶液中溶解至10 mM。將45 μL儲備溶液轉移至384聚丙烯板(pp板)中。經由使用TECAN (EVO200)液體處理器將15 µL化合物轉移至30 μL DMSO中來進行3倍、10點稀釋。 2.2 在室溫下在1,000 RPM下旋轉板1分鐘。 2.3 將5 nL經稀釋之化合物自化合物源板轉移至細胞板中。 2.4 化合物處理2小時之後，如「偵測」部分中所描述藉由AlphaLISA對化合物處理板進行pEGFR偵測。
3 藉由 pEGFR AlphaLISA ( Perkin - Elmer ) 偵測3.1 將板自培育箱移除且在室溫下平衡10分鐘，且移除培養基。 3.2 添加10 μL裂解緩衝液且在600 rpm下振盪板1小時。 3.3 恰好在使用之前製備受體混合物，且將5 μL受體混合物分配至所有孔。在暗處在350 rpm下振盪1小時。 3.4 在使用之前在低光條件下製備供體混合物。將5 μL供體混合物分配至所有孔中。在振盪器上充分混合、密封及包覆於鋁箔中且在室溫下在暗處培育1.5小時。 3.5 將18.5 μL混合物轉移至OptiPlate 384，且使用Envision讀取。
表 6 . EGFR 活性及抑制劑活性對 EGFR 磷酸化 ( pEGFR ) 之 IC50 資料 1
化合物編號 BaF3 ASV IC50 BaF3 SVD IC50 BaF3 NPG IC50 BaF3 FQEA IC50 BaF3 WT IC50 ASV IC50 (pEGFR) SVD IC50 (pEGFR) NPG IC50 (pEGFR) CUTO14 IC50 (pEGFR)
124 ++ ++ + + + ++ NA +++ NA
128 NA NA + NA + NA NA + NA
130 + + + + + + NA NA NA
131 NA NA + NA + NA NA + NA
133 NA NA ++ NA + NA NA +++ NA
135 NA NA + NA + NA NA NA NA
137 NA NA + NA + NA NA ++ NA
139 + + + + + NA NA ++ NA
140 +++ +++ +++ +++ ++ +++ +++ +++ +++
149 NA NA ++ NA + NA NA NA NA
150 ++ ++ + ++ + +++ NA NA NA
188 ++ ++ +++ ++ +++ NA NA +++ NA
189 ++ ++ NA ++ + NA NA NA NA
190 +++ +++ +++ NA ++ NA NA NA +++
191 ++ ++ NA ++ + NA NA NA NA
192 +++ +++ +++ ++ ++ NA NA +++ NA
193 + ++ NA + + NA NA NA NA
194 + + NA + + NA NA NA NA
195 ++ ++ ++ ++ + NA NA +++ NA
196 + + NA + + NA NA NA NA
197 + + NA + + NA NA NA NA
199 +++ ++ NA +++ ++ NA NA NA NA
200 +++ +++ NA +++ ++ NA NA NA NA
201 +++ +++ NA +++ ++ NA NA NA NA
202 + + ++ NA + NA NA NA NA
203 + + + NA + NA NA NA NA
204 + + + NA + NA NA NA NA
205 + + + NA + NA NA NA NA
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208 ++ ++ +++ NA + NA NA +++ NA
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366 +++ +++ +++ NA ++ NA NA NA NA
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373 +++ +++ +++ NA +++ NA NA NA +++
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390 +++ +++ +++ NA ++ NA NA NA +++
391 ++ ++ ++ NA + NA NA NA ++
392 +++ +++ +++ NA ++ NA NA NA +++
393 +++ +++ +++ NA ++ NA NA NA +++
394 ++ ++ ++ NA + NA NA NA ++
395 ++ ++ ++ NA + NA NA NA ++
400 +++ +++ +++ NA ++ NA NA NA +++
401 +++ +++ +++ NA ++ NA NA NA +++
402 ++ ++ ++ NA + NA NA NA NA
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468 ++ ++ ++ ++ ++ NA NA +++ NA
469 NA NA +++ NA +++ NA NA +++ NA
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471 NA NA + NA + NA NA + NA
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474 ++ +++ + ++ ++ +++ NA NA NA
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498 ++ ++ NA ++ + NA NA NA NA
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500 ++ ++ NA ++ + NA NA NA NA
501 +++ +++ NA +++ ++ NA NA NA NA
502 ++ ++ NA + + NA NA NA NA
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550 + + + + + NA NA NA +
551 + + + + + NA NA NA +
552 ++ ++ NA ++ + NA NA NA NA
553 +++ ++ NA ++ + NA NA NA NA
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556 +++ +++ NA +++ ++ NA NA NA NA
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567 ++ +++ +++ NA ++ NA NA NA +++
568 +++ +++ +++ NA ++ NA NA NA +++
569 +++ +++ +++ NA ++ NA NA NA +++
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575 +++ +++ +++ NA +++ NA NA NA NA
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595 ++ ++ +++ NA + NA NA NA NA
603 ++ ++ ++ NA + NA NA NA NA
630 +++ +++ +++ NA + NA NA NA NA
631 +++ +++ +++ NA ++ NA NA NA NA
632 +++ +++ +++ NA ++ NA NA NA NA
634 +++ +++ +++ NA ++ NA NA NA NA
138a +++ +++ +++ +++ ++ NA NA +++ NA
138b +++ +++ +++ ++ ++ NA NA +++ NA
141a NA NA + NA + NA NA ++ NA
141b NA NA + NA + NA NA +++ NA
142a NA NA ++ NA ++ NA NA NA NA
142b +++ +++ +++ ++ ++ NA NA +++ NA
145a +++ +++ +++ +++ ++ +++ +++ +++ +++
145b +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++
147a +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++
147b +++ +++ +++ +++ ++ +++ +++ +++ +++
148a ++ ++ NA ++ + NA NA NA NA
148b ++ ++ NA ++ + NA NA NA NA
1「+++」指示IC50＜100 nM； 「++」指示100 nM ＜= IC50 ＜ 1000 nM； 「+」指示IC50 ＞= 1000 nM。 「NA」指示IC50資料不適用於此化合物。 

          <![CDATA[<110>  美商史考皮恩治療有限公司(Scorpion Therapeutics, Inc.)]]>
          <![CDATA[<120>  治療癌症之方法]]>
          <![CDATA[<130>  50006-0049WO1]]>
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          <![CDATA[<151>  2020-09-23]]>
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          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  成熟人類EGFR]]>
          <![CDATA[<400>  1]]>
          Met Arg Pro Ser Gly Thr Ala Gly Ala Ala Leu Leu Ala Leu Leu Ala 
          1               5                   10                  15      
          Ala Leu Cys Pro Ala Ser Arg Ala Leu Glu Glu Lys Lys Val Cys Gln 
                      20                  25                  30          
          Gly Thr Ser Asn Lys Leu Thr Gln Leu Gly Thr Phe Glu Asp His Phe 
                  35                  40                  45              
          Leu Ser Leu Gln Arg Met Phe Asn Asn Cys Glu Val Val Leu Gly Asn 
              50                  55                  60                  
          Leu Glu Ile Thr Tyr Val Gln Arg Asn Tyr Asp Leu Ser Phe Leu Lys 
          65                  70                  75                  80  
          Thr Ile Gln Glu Val Ala Gly Tyr Val Leu Ile Ala Leu Asn Thr Val 
                          85                  90                  95      
          Glu Arg Ile Pro Leu Glu Asn Leu Gln Ile Ile Arg Gly Asn Met Tyr 
                      100                 105                 110         
          Tyr Glu Asn Ser Tyr Ala Leu Ala Val Leu Ser Asn Tyr Asp Ala Asn 
                  115                 120                 125             
          Lys Thr Gly Leu Lys Glu Leu Pro Met Arg Asn Leu Gln Glu Ile Leu 
              130                 135                 140                 
          His Gly Ala Val Arg Phe Ser Asn Asn Pro Ala Leu Cys Asn Val Glu 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Ile Gln Trp Arg Asp Ile Val Ser Ser Asp Phe Leu Ser Asn Met 
                          165                 170                 175     
          Ser Met Asp Phe Gln Asn His Leu Gly Ser Cys Gln Lys Cys Asp Pro 
                      180                 185                 190         
          Ser Cys Pro Asn Gly Ser Cys Trp Gly Ala Gly Glu Glu Asn Cys Gln 
                  195                 200                 205             
          Lys Leu Thr Lys Ile Ile Cys Ala Gln Gln Cys Ser Gly Arg Cys Arg 
              210                 215                 220                 
          Gly Lys Ser Pro Ser Asp Cys Cys His Asn Gln Cys Ala Ala Gly Cys 
          225                 230                 235                 240 
          Thr Gly Pro Arg Glu Ser Asp Cys Leu Val Cys Arg Lys Phe Arg Asp 
                          245                 250                 255     
          Glu Ala Thr Cys Lys Asp Thr Cys Pro Pro Leu Met Leu Tyr Asn Pro 
                      260                 265                 270         
          Thr Thr Tyr Gln Met Asp Val Asn Pro Glu Gly Lys Tyr Ser Phe Gly 
                  275                 280                 285             
          Ala Thr Cys Val Lys Lys Cys Pro Arg Asn Tyr Val Val Thr Asp His 
              290                 295                 300                 
          Gly Ser Cys Val Arg Ala Cys Gly Ala Asp Ser Tyr Glu Met Glu Glu 
          305                 310                 315                 320 
          Asp Gly Val Arg Lys Cys Lys Lys Cys Glu Gly Pro Cys Arg Lys Val 
                          325                 330                 335     
          Cys Asn Gly Ile Gly Ile Gly Glu Phe Lys Asp Ser Leu Ser Ile Asn 
                      340                 345                 350         
          Ala Thr Asn Ile Lys His Phe Lys Asn Cys Thr Ser Ile Ser Gly Asp 
                  355                 360                 365             
          Leu His Ile Leu Pro Val Ala Phe Arg Gly Asp Ser Phe Thr His Thr 
              370                 375                 380                 
          Pro Pro Leu Asp Pro Gln Glu Leu Asp Ile Leu Lys Thr Val Lys Glu 
          385                 390                 395                 400 
          Ile Thr Gly Phe Leu Leu Ile Gln Ala Trp Pro Glu Asn Arg Thr Asp 
                          405                 410                 415     
          Leu His Ala Phe Glu Asn Leu Glu Ile Ile Arg Gly Arg Thr Lys Gln 
                      420                 425                 430         
          His Gly Gln Phe Ser Leu Ala Val Val Ser Leu Asn Ile Thr Ser Leu 
                  435                 440                 445             
          Gly Leu Arg Ser Leu Lys Glu Ile Ser Asp Gly Asp Val Ile Ile Ser 
              450                 455                 460                 
          Gly Asn Lys Asn Leu Cys Tyr Ala Asn Thr Ile Asn Trp Lys Lys Leu 
          465                 470                 475                 480 
          Phe Gly Thr Ser Gly Gln Lys Thr Lys Ile Ile Ser Asn Arg Gly Glu 
                          485                 490                 495     
          Asn Ser Cys Lys Ala Thr Gly Gln Val Cys His Ala Leu Cys Ser Pro 
                      500                 505                 510         
          Glu Gly Cys Trp Gly Pro Glu Pro Arg Asp Cys Val Ser Cys Arg Asn 
                  515                 520                 525             
          Val Ser Arg Gly Arg Glu Cys Val Asp Lys Cys Asn Leu Leu Glu Gly 
              530                 535                 540                 
          Glu Pro Arg Glu Phe Val Glu Asn Ser Glu Cys Ile Gln Cys His Pro 
          545                 550                 555                 560 
          Glu Cys Leu Pro Gln Ala Met Asn Ile Thr Cys Thr Gly Arg Gly Pro 
                          565                 570                 575     
          Asp Asn Cys Ile Gln Cys Ala His Tyr Ile Asp Gly Pro His Cys Val 
                      580                 585                 590         
          Lys Thr Cys Pro Ala Gly Val Met Gly Glu Asn Asn Thr Leu Val Trp 
                  595                 600                 605             
          Lys Tyr Ala Asp Ala Gly His Val Cys His Leu Cys His Pro Asn Cys 
              610                 615                 620                 
          Thr Tyr Gly Cys Thr Gly Pro Gly Leu Glu Gly Cys Pro Thr Asn Gly 
          625                 630                 635                 640 
          Pro Lys Ile Pro Ser Ile Ala Thr Gly Met Val Gly Ala Leu Leu Leu 
                          645                 650                 655     
          Leu Leu Val Val Ala Leu Gly Ile Gly Leu Phe Met Arg Arg Arg His 
                      660                 665                 670         
          Ile Val Arg Lys Arg Thr Leu Arg Arg Leu Leu Gln Glu Arg Glu Leu 
                  675                 680                 685             
          Val Glu Pro Leu Thr Pro Ser Gly Glu Ala Pro Asn Gln Ala Leu Leu 
              690                 695                 700                 
          Arg Ile Leu Lys Glu Thr Glu Phe Lys Lys Ile Lys Val Leu Gly Ser 
          705                 710                 715                 720 
          Gly Ala Phe Gly Thr Val Tyr Lys Gly Leu Trp Ile Pro Glu Gly Glu 
                          725                 730                 735     
          Lys Val Lys Ile Pro Val Ala Ile Lys Glu Leu Arg Glu Ala Thr Ser 
                      740                 745                 750         
          Pro Lys Ala Asn Lys Glu Ile Leu Asp Glu Ala Tyr Val Met Ala Ser 
                  755                 760                 765             
          Val Asp Asn Pro His Val Cys Arg Leu Leu Gly Ile Cys Leu Thr Ser 
              770                 775                 780                 
          Thr Val Gln Leu Ile Thr Gln Leu Met Pro Phe Gly Cys Leu Leu Asp 
          785                 790                 795                 800 
          Tyr Val Arg Glu His Lys Asp Asn Ile Gly Ser Gln Tyr Leu Leu Asn 
                          805                 810                 815     
          Trp Cys Val Gln Ile Ala Lys Gly Met Asn Tyr Leu Glu Asp Arg Arg 
                      820                 825                 830         
          Leu Val His Arg Asp Leu Ala Ala Arg Asn Val Leu Val Lys Thr Pro 
                  835                 840                 845             
          Gln His Val Lys Ile Thr Asp Phe Gly Leu Ala Lys Leu Leu Gly Ala 
              850                 855                 860                 
          Glu Glu Lys Glu Tyr His Ala Glu Gly Gly Lys Val Pro Ile Lys Trp 
          865                 870                 875                 880 
          Met Ala Leu Glu Ser Ile Leu His Arg Ile Tyr Thr His Gln Ser Asp 
                          885                 890                 895     
          Val Trp Ser Tyr Gly Val Thr Val Trp Glu Leu Met Thr Phe Gly Ser 
                      900                 905                 910         
          Lys Pro Tyr Asp Gly Ile Pro Ala Ser Glu Ile Ser Ser Ile Leu Glu 
                  915                 920                 925             
          Lys Gly Glu Arg Leu Pro Gln Pro Pro Ile Cys Thr Ile Asp Val Tyr 
              930                 935                 940                 
          Met Ile Met Val Lys Cys Trp Met Ile Asp Ala Asp Ser Arg Pro Lys 
          945                 950                 955                 960 
          Phe Arg Glu Leu Ile Ile Glu Phe Ser Lys Met Ala Arg Asp Pro Gln 
                          965                 970                 975     
          Arg Tyr Leu Val Ile Gln Gly Asp Glu Arg Met His Leu Pro Ser Pro 
                      980                 985                 990         
          Thr Asp Ser Asn Phe Tyr Arg Ala  Leu Met Asp Glu Glu  Asp Met Asp 
                  995                 1000                 1005             
          Asp Val  Val Asp Ala Asp Glu  Tyr Leu Ile Pro Gln  Gln Gly Phe 
              1010                 1015                 1020             
          Phe Ser  Ser Pro Ser Thr Ser  Arg Thr Pro Leu Leu  Ser Ser Leu 
              1025                 1030                 1035             
          Ser Ala  Thr Ser Asn Asn Ser  Thr Val Ala Cys Ile  Asp Arg Asn 
              1040                 1045                 1050             
          Gly Leu  Gln Ser Cys Pro Ile  Lys Glu Asp Ser Phe  Leu Gln Arg 
              1055                 1060                 1065             
          Tyr Ser  Ser Asp Pro Thr Gly  Ala Leu Thr Glu Asp  Ser Ile Asp 
              1070                 1075                 1080             
          Asp Thr  Phe Leu Pro Val Pro  Glu Tyr Ile Asn Gln  Ser Val Pro 
              1085                 1090                 1095             
          Lys Arg  Pro Ala Gly Ser Val  Gln Asn Pro Val Tyr  His Asn Gln 
              1100                 1105                 1110             
          Pro Leu  Asn Pro Ala Pro Ser  Arg Asp Pro His Tyr  Gln Asp Pro 
              1115                 1120                 1125             
          His Ser  Thr Ala Val Gly Asn  Pro Glu Tyr Leu Asn  Thr Val Gln 
              1130                 1135                 1140             
          Pro Thr  Cys Val Asn Ser Thr  Phe Asp Ser Pro Ala  His Trp Ala 
              1145                 1150                 1155             
          Gln Lys  Gly Ser His Gln Ile  Ser Leu Asp Asn Pro  Asp Tyr Gln 
              1160                 1165                 1170             
          Gln Asp  Phe Phe Pro Lys Glu  Ala Lys Pro Asn Gly  Ile Phe Lys 
              1175                 1180                 1185             
          Gly Ser  Thr Ala Glu Asn Ala  Glu Tyr Leu Arg Val  Ala Pro Gln 
              1190                 1195                 1200             
          Ser Ser  Glu Phe Ile Gly Ala  
              1205                 1210 
          <![CDATA[<210>  2]]>
          <![CDATA[<211>  1255]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  成熟人類HER2]]>
          <![CDATA[<400>  2]]>
          Met Glu Leu Ala Ala Leu Cys Arg Trp Gly Leu Leu Leu Ala Leu Leu 
          1               5                   10                  15      
          Pro Pro Gly Ala Ala Ser Thr Gln Val Cys Thr Gly Thr Asp Met Lys 
                      20                  25                  30          
          Leu Arg Leu Pro Ala Ser Pro Glu Thr His Leu Asp Met Leu Arg His 
                  35                  40                  45              
          Leu Tyr Gln Gly Cys Gln Val Val Gln Gly Asn Leu Glu Leu Thr Tyr 
              50                  55                  60                  
          Leu Pro Thr Asn Ala Ser Leu Ser Phe Leu Gln Asp Ile Gln Glu Val 
          65                  70                  75                  80  
          Gln Gly Tyr Val Leu Ile Ala His Asn Gln Val Arg Gln Val Pro Leu 
                          85                  90                  95      
          Gln Arg Leu Arg Ile Val Arg Gly Thr Gln Leu Phe Glu Asp Asn Tyr 
                      100                 105                 110         
          Ala Leu Ala Val Leu Asp Asn Gly Asp Pro Leu Asn Asn Thr Thr Pro 
                  115                 120                 125             
          Val Thr Gly Ala Ser Pro Gly Gly Leu Arg Glu Leu Gln Leu Arg Ser 
              130                 135                 140                 
          Leu Thr Glu Ile Leu Lys Gly Gly Val Leu Ile Gln Arg Asn Pro Gln 
          145                 150                 155                 160 
          Leu Cys Tyr Gln Asp Thr Ile Leu Trp Lys Asp Ile Phe His Lys Asn 
                          165                 170                 175     
          Asn Gln Leu Ala Leu Thr Leu Ile Asp Thr Asn Arg Ser Arg Ala Cys 
                      180                 185                 190         
          His Pro Cys Ser Pro Met Cys Lys Gly Ser Arg Cys Trp Gly Glu Ser 
                  195                 200                 205             
          Ser Glu Asp Cys Gln Ser Leu Thr Arg Thr Val Cys Ala Gly Gly Cys 
              210                 215                 220                 
          Ala Arg Cys Lys Gly Pro Leu Pro Thr Asp Cys Cys His Glu Gln Cys 
          225                 230                 235                 240 
          Ala Ala Gly Cys Thr Gly Pro Lys His Ser Asp Cys Leu Ala Cys Leu 
                          245                 250                 255     
          His Phe Asn His Ser Gly Ile Cys Glu Leu His Cys Pro Ala Leu Val 
                      260                 265                 270         
          Thr Tyr Asn Thr Asp Thr Phe Glu Ser Met Pro Asn Pro Glu Gly Arg 
                  275                 280                 285             
          Tyr Thr Phe Gly Ala Ser Cys Val Thr Ala Cys Pro Tyr Asn Tyr Leu 
              290                 295                 300                 
          Ser Thr Asp Val Gly Ser Cys Thr Leu Val Cys Pro Leu His Asn Gln 
          305                 310                 315                 320 
          Glu Val Thr Ala Glu Asp Gly Thr Gln Arg Cys Glu Lys Cys Ser Lys 
                          325                 330                 335     
          Pro Cys Ala Arg Val Cys Tyr Gly Leu Gly Met Glu His Leu Arg Glu 
                      340                 345                 350         
          Val Arg Ala Val Thr Ser Ala Asn Ile Gln Glu Phe Ala Gly Cys Lys 
                  355                 360                 365             
          Lys Ile Phe Gly Ser Leu Ala Phe Leu Pro Glu Ser Phe Asp Gly Asp 
              370                 375                 380                 
          Pro Ala Ser Asn Thr Ala Pro Leu Gln Pro Glu Gln Leu Gln Val Phe 
          385                 390                 395                 400 
          Glu Thr Leu Glu Glu Ile Thr Gly Tyr Leu Tyr Ile Ser Ala Trp Pro 
                          405                 410                 415     
          Asp Ser Leu Pro Asp Leu Ser Val Phe Gln Asn Leu Gln Val Ile Arg 
                      420                 425                 430         
          Gly Arg Ile Leu His Asn Gly Ala Tyr Ser Leu Thr Leu Gln Gly Leu 
                  435                 440                 445             
          Gly Ile Ser Trp Leu Gly Leu Arg Ser Leu Arg Glu Leu Gly Ser Gly 
              450                 455                 460                 
          Leu Ala Leu Ile His His Asn Thr His Leu Cys Phe Val His Thr Val 
          465                 470                 475                 480 
          Pro Trp Asp Gln Leu Phe Arg Asn Pro His Gln Ala Leu Leu His Thr 
                          485                 490                 495     
          Ala Asn Arg Pro Glu Asp Glu Cys Val Gly Glu Gly Leu Ala Cys His 
                      500                 505                 510         
          Gln Leu Cys Ala Arg Gly His Cys Trp Gly Pro Gly Pro Thr Gln Cys 
                  515                 520                 525             
          Val Asn Cys Ser Gln Phe Leu Arg Gly Gln Glu Cys Val Glu Glu Cys 
              530                 535                 540                 
          Arg Val Leu Gln Gly Leu Pro Arg Glu Tyr Val Asn Ala Arg His Cys 
          545                 550                 555                 560 
          Leu Pro Cys His Pro Glu Cys Gln Pro Gln Asn Gly Ser Val Thr Cys 
                          565                 570                 575     
          Phe Gly Pro Glu Ala Asp Gln Cys Val Ala Cys Ala His Tyr Lys Asp 
                      580                 585                 590         
          Pro Pro Phe Cys Val Ala Arg Cys Pro Ser Gly Val Lys Pro Asp Leu 
                  595                 600                 605             
          Ser Tyr Met Pro Ile Trp Lys Phe Pro Asp Glu Glu Gly Ala Cys Gln 
              610                 615                 620                 
          Pro Cys Pro Ile Asn Cys Thr His Ser Cys Val Asp Leu Asp Asp Lys 
          625                 630                 635                 640 
          Gly Cys Pro Ala Glu Gln Arg Ala Ser Pro Leu Thr Ser Ile Ile Ser 
                          645                 650                 655     
          Ala Val Val Gly Ile Leu Leu Val Val Val Leu Gly Val Val Phe Gly 
                      660                 665                 670         
          Ile Leu Ile Lys Arg Arg Gln Gln Lys Ile Arg Lys Tyr Thr Met Arg 
                  675                 680                 685             
          Arg Leu Leu Gln Glu Thr Glu Leu Val Glu Pro Leu Thr Pro Ser Gly 
              690                 695                 700                 
          Ala Met Pro Asn Gln Ala Gln Met Arg Ile Leu Lys Glu Thr Glu Leu 
          705                 710                 715                 720 
          Arg Lys Val Lys Val Leu Gly Ser Gly Ala Phe Gly Thr Val Tyr Lys 
                          725                 730                 735     
          Gly Ile Trp Ile Pro Asp Gly Glu Asn Val Lys Ile Pro Val Ala Ile 
                      740                 745                 750         
          Lys Val Leu Arg Glu Asn Thr Ser Pro Lys Ala Asn Lys Glu Ile Leu 
                  755                 760                 765             
          Asp Glu Ala Tyr Val Met Ala Gly Val Gly Ser Pro Tyr Val Ser Arg 
              770                 775                 780                 
          Leu Leu Gly Ile Cys Leu Thr Ser Thr Val Gln Leu Val Thr Gln Leu 
          785                 790                 795                 800 
          Met Pro Tyr Gly Cys Leu Leu Asp His Val Arg Glu Asn Arg Gly Arg 
                          805                 810                 815     
          Leu Gly Ser Gln Asp Leu Leu Asn Trp Cys Met Gln Ile Ala Lys Gly 
                      820                 825                 830         
          Met Ser Tyr Leu Glu Asp Val Arg Leu Val His Arg Asp Leu Ala Ala 
                  835                 840                 845             
          Arg Asn Val Leu Val Lys Ser Pro Asn His Val Lys Ile Thr Asp Phe 
              850                 855                 860                 
          Gly Leu Ala Arg Leu Leu Asp Ile Asp Glu Thr Glu Tyr His Ala Asp 
          865                 870                 875                 880 
          Gly Gly Lys Val Pro Ile Lys Trp Met Ala Leu Glu Ser Ile Leu Arg 
                          885                 890                 895     
          Arg Arg Phe Thr His Gln Ser Asp Val Trp Ser Tyr Gly Val Thr Val 
                      900                 905                 910         
          Trp Glu Leu Met Thr Phe Gly Ala Lys Pro Tyr Asp Gly Ile Pro Ala 
                  915                 920                 925             
          Arg Glu Ile Pro Asp Leu Leu Glu Lys Gly Glu Arg Leu Pro Gln Pro 
              930                 935                 940                 
          Pro Ile Cys Thr Ile Asp Val Tyr Met Ile Met Val Lys Cys Trp Met 
          945                 950                 955                 960 
          Ile Asp Ser Glu Cys Arg Pro Arg Phe Arg Glu Leu Val Ser Glu Phe 
                          965                 970                 975     
          Ser Arg Met Ala Arg Asp Pro Gln Arg Phe Val Val Ile Gln Asn Glu 
                      980                 985                 990         
          Asp Leu Gly Pro Ala Ser Pro Leu  Asp Ser Thr Phe Tyr  Arg Ser Leu 
                  995                 1000                 1005             
          Leu Glu  Asp Asp Asp Met Gly  Asp Leu Val Asp Ala  Glu Glu Tyr 
              1010                 1015                 1020             
          Leu Val  Pro Gln Gln Gly Phe  Phe Cys Pro Asp Pro  Ala Pro Gly 
              1025                 1030                 1035             
          Ala Gly  Gly Met Val His His  Arg His Arg Ser Ser  Ser Thr Arg 
              1040                 1045                 1050             
          Ser Gly  Gly Gly Asp Leu Thr  Leu Gly Leu Glu Pro  Ser Glu Glu 
              1055                 1060                 1065             
          Glu Ala  Pro Arg Ser Pro Leu  Ala Pro Ser Glu Gly  Ala Gly Ser 
              1070                 1075                 1080             
          Asp Val  Phe Asp Gly Asp Leu  Gly Met Gly Ala Ala  Lys Gly Leu 
              1085                 1090                 1095             
          Gln Ser  Leu Pro Thr His Asp  Pro Ser Pro Leu Gln  Arg Tyr Ser 
              1100                 1105                 1110             
          Glu Asp  Pro Thr Val Pro Leu  Pro Ser Glu Thr Asp  Gly Tyr Val 
              1115                 1120                 1125             
          Ala Pro  Leu Thr Cys Ser Pro  Gln Pro Glu Tyr Val  Asn Gln Pro 
              1130                 1135                 1140             
          Asp Val  Arg Pro Gln Pro Pro  Ser Pro Arg Glu Gly  Pro Leu Pro 
              1145                 1150                 1155             
          Ala Ala  Arg Pro Ala Gly Ala  Thr Leu Glu Arg Pro  Lys Thr Leu 
              1160                 1165                 1170             
          Ser Pro  Gly Lys Asn Gly Val  Val Lys Asp Val Phe  Ala Phe Gly 
              1175                 1180                 1185             
          Gly Ala  Val Glu Asn Pro Glu  Tyr Leu Thr Pro Gln  Gly Gly Ala 
              1190                 1195                 1200             
          Ala Pro  Gln Pro His Pro Pro  Pro Ala Phe Ser Pro  Ala Phe Asp 
              1205                 1210                 1215             
          Asn Leu  Tyr Tyr Trp Asp Gln  Asp Pro Pro Glu Arg  Gly Ala Pro 
              1220                 1225                 1230             
          Pro Ser  Thr Phe Lys Gly Thr  Pro Thr Ala Glu Asn  Pro Glu Tyr 
              1235                 1240                 1245             
          Leu Gly  Leu Asp Val Pro Val  
              1250                 1255
Figure 12_A0101_SEQ_0001
Figure 12_A0101_SEQ_0002
Figure 12_A0101_SEQ_0003
Figure 12_A0101_SEQ_0004
Figure 12_A0101_SEQ_0005
Figure 12_A0101_SEQ_0006
Figure 12_A0101_SEQ_0007
Figure 12_A0101_SEQ_0008
Figure 12_A0101_SEQ_0009
Figure 12_A0101_SEQ_0010
Figure 12_A0101_SEQ_0011
Figure 12_A0101_SEQ_0012
Figure 12_A0101_SEQ_0013
Figure 12_A0101_SEQ_0014
Figure 110135434-A0101-11-0002-1

Claims (402)

  1. 一種式 ( I )化合物：
    Figure 03_image001
    式 (I)或其醫藥學上可接受之鹽，其中： X 1 係選自由以下組成之群： (a)-O- L 1-R 5 ；及 (b)
    Figure 03_image2358
    ； L 1 及 L 2 獨立地選自由以下組成之群：鍵及視情況經1至6個 R a 取代之C 1 - 10伸烷基； R 5 係選自由以下組成之群： 包括5至10個環原子之雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R c 取代； 視情況經1至4個 R c 取代之C 6 - 10芳基； C 3 - 10環烷基或C 3 - 10環烯基，其各視情況經1至4個各自獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代；
    Figure 03_image2360
    ，其中 環 D為包括3至10個環原子之伸雜環基或伸雜環烯基，其中0至2個環原子(除鍵結至 R X 之環氮原子以外)為雜原子，其各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該伸雜環基或伸雜環烯基視情況經1至4個各自獨立地選自由側氧基及- R c 組成之群的取代基取代； 視情況經1至6個 R a 取代之-S(O) 0 - 2(C 1 - 6烷基)； - R W -R g2 - R W 或- R g2 - R Y ； -L 5 - R g ；及 - L 5-R g2 - R W 或- L 5-R g2-R Y ； 其限制條件為當 L 1 為鍵時，則 R 5 不為視情況經1至6個 R a 取代之-S(O) 0 - 2(C 1 - 6烷基)； - L 5 - R g ； - L 5 - R g2 - R W ；或 - L 5 - R g2 - R Y ； R 6 係選自由以下組成之群： H； 鹵基； -OH； -N R eR f ； - R g ； -R w - L 6 - R g ； -R g2 - R W 或- R g2 - R Y ； - L 6 - R g2-R W 或- L 6 - R g2-R Y ；及 -C 1 - 6烷氧基或-S(O) 0 - 2(C 1 - 6烷基)，各自視情況經1至6個 R a 取代； L 5 及 L 6 獨立地為-O-、-S(O) 0 - 2、-NH或-N( R d )-； R W 為- L W-W ， 其中 L W 為C(=O)、S(O) 1 - 2、OC(=O)*、NHC(=O)*、N R d C(=O)*、NHS(O) 1 - 2*或N R d S(O) 1 - 2*，其中星號表示與 W之連接點，及 W為C 2 - 6烯基；C 2 - 6炔基；或C 3 - 10丙二烯基，其中之每一者視情況經1至3個 R a 取代且進一步視情況經 R g 取代，其中 W經由 sp 2 或 sp雜化碳原子連接至 L W ，由此提供α,β-不飽和系統；及 R X 為C(=O)(C 1 - 6烷基)或S(O) 2(C 1 - 6烷基)，其中之每一者視情況經1至6個 R a 取代； R Y 係選自由以下組成之群： - R g 及 -( L g ) g - R g ； R 1c 、 R 2a 、 R 2b 、 R 3a 及 R 3b 中之每一者獨立地選自由以下組成之群：H；鹵基；-OH；-C(O)OH或-C(O)NH 2；-CN；- R b ；- L b - R b ；-C 1 - 6烷氧基或-C 1 - 6硫代烷氧基，各自視情況經1至6個 R a 取代；-N R eR f ；- R g ；及- ( L g ) g- R g ；其限制條件為 R 1c 不為鹵基、-CN或-C(O)OH；或 變數 R 1c 、 R 2a 、 R 2b 、 R 3a 及 R 3b 中之兩者與各自連接之 環 B環原子一起形成具有3至12個環原子之稠合飽和或不飽和環； 其中該等環原子中之0至2個各自為獨立選擇之雜原子(當-N( R 1c )-形成該稠合飽和或不飽和環之一部分時，除-N( R 1c )-外)，其中該等獨立選擇之雜原子中之每一者係選自由N、NH、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群；且 其中3至12個環原子之稠合飽和或不飽和環視情況經1至4個獨立地選自由側氧基、 R c 及 R W 組成之群的取代基取代； 環 A為 R g ； R 4 係選自由以下組成之群：H及 R d ； 各 R 7 係獨立選擇之 R c ； n係0、1、2或3； R a 在每次出現時獨立地選自由以下組成之群：-OH；-鹵基；-N R eR f ；C 1 - 4烷氧基；C 1 - 4鹵代烷氧基；-C(=O)O(C 1 - 4烷基)；-C(=O)(C 1 - 4烷基)；-C(=O)OH；-CON R ' R ''；-S(O) 1 - 2N R ' R ''；-S(O) 1 - 2(C 1 - 4烷基)；及氰基； R b 在每次出現時獨立地為C 1 - 6烷基、C 2 - 6烯基或C 2 - 6炔基，其中之每一者視情況經1至6個 R a 取代； L b 在每次出現時獨立地為C(=O)；C(=O)O；S(O) 1 - 2；C(=O)NH*；C(=O)N R d *；S(O) 1 - 2NH*；或S(O) 1 - 2N( R d )*，其中星號表示與 R b 之連接點； R c 在每次出現時獨立地選自由以下組成之群：鹵基；氰基；C 1 - 10烷基，其視情況經1至6個獨立選擇之 R a 取代；C 3 - 5環烷基；C 2 - 6烯基；C 2 - 6炔基；視情況經C 1 - 4烷氧基或C 1 - 4鹵代烷氧基取代之C 1 - 4烷氧基；C 1 - 4鹵代烷氧基；-S(O) 1 - 2(C 1 - 4烷基)；-S(O)(=NH)(C 1 - 4烷基)；-N R eR f ；-OH；-S(O) 1 - 2N R ' R ''；-C 1 - 4硫代烷氧基；-NO 2；-C(=O)(C 1 - 10烷基)；-C(=O)O(C 1 - 4烷基)；-C(=O)OH；-C(=O)N R ' R ''；及-SF 5； R d 在每次出現時獨立地選自由以下組成之群：C 1 - 6烷基，其視情況經1至3個獨立選擇之 R a 取代；-C(O)(C 1 - 4烷基)；-C(O)O(C 1 - 4烷基)；-CON R ' R ''；-S(O) 1 - 2N R ' R ''；-S(O) 1 - 2(C 1 - 4烷基)；-OH；及C 1 - 4烷氧基； R e 及 R f 在每次出現時獨立地選自由以下組成之群：H；視情況經1至3個C 1 - 3烷基取代之C 3 - 5環烷基；包括3至6個環原子之雜環基，其中1至3個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，雜環基視情況經1至4個獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代；C 1 - 6烷基，其視情況經1至3個各自獨立地選自由N R ' R ''、-OH、C 1 - 6烷氧基、C 1 - 6鹵代烷氧基及鹵基組成之群的取代基取代；-C(O)(C 1 - 4烷基)；-C(O)O(C 1 - 4烷基)；-CON R ' R ''；-S(O) 1 - 2N R ' R ''；- S(O) 1 - 2(C 1 - 4烷基)；-OH；及C 1 - 4烷氧基； R g 在每次出現時獨立地選自由以下組成之群： C 3 - 10環烷基或C 3 - 10環烯基，其中之每一者視情況經1至4個獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代； 包括3至10個環原子之雜環基或雜環烯基，其中1至3個環原子為雜原子，其各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜環基或雜環烯基視情況經1至4個獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代； 包括5至10個環原子之雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R c 取代；及 視情況經1至4個 R c 取代之C 6 - 10芳基； L g 在每次出現時獨立地選自由以下組成之群：-O-、-NH-、-N R d 、-S(O) 0 - 2、C(O)及視情況經1至3個 R a 取代之C 1 - 3伸烷基； 各 g獨立地為1、2或3； 各 R g2 為二價 R g 基團；及 R '及 R ''在每次出現時獨立地選自由以下組成之群：H；-OH；及C 1 - 4烷基； 其限制條件為當 R 2a 、 R 2b 、 R 3a 及 R 3b 各為H； R 1c 為H或甲基； 環 A為視情況經1至2個F取代之苯基； X 1 為-O- L 1 - R 5 ；且- L 1 為CH 2時，則： R 5 不為未經取代之苯基或未經取代之環丙基；且 其進一步限制條件為該化合物不為：3-((3-氟-2-甲氧基苯基)胺基)-2-(3-((1-苯基丙烷-2-基)氧基)吡啶-4-基)-1,5,6,7-四氫-4H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮。
  2. 如請求項1之化合物，其中 X 1 為-O- L 1 - R 5 。
  3. 如請求項1或2之化合物，其中 R 5 為包括5至10個環原子之雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R cA 取代，其中各 R cA 為獨立選擇之 R c 。
  4. 如請求項1至3中任一項之化合物，其中 R 5 為包括5至6個環原子之單環雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R cA 取代，其中各 R cA 為獨立選擇之 R c 。
  5. 如請求項1至4中任一項之化合物，其中 R 5 為包括5個環原子之單環雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R cA 取代，其中各 R cA 為獨立選擇之 R c 。
  6. 如請求項1至5中任一項之化合物，其中 R 5 係選自由呋喃基、噻吩基、㗁二唑基、噻二唑基、三唑基、四唑基、咪唑基、吡唑基、㗁唑基及噻唑基組成之群，其中之每一者視情況經1至2個 R cA 取代，且環氮視情況經 R d 取代，其中各 R cA 為獨立選擇之 R c 。
  7. 如請求項1至6中任一項之化合物，其中 R 5 係選自由以下組成之群：
    Figure 03_image2362
    Figure 03_image2364
    ，各自視情況經1至2個 R cA 取代，其中各 R cA 為獨立選擇之 R c 。
  8. 如請求項1至4中任一項之化合物，其中 R 5 為包括6個環原子之單環雜芳基，其中1至4個環原子為環氮原子，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R cA 取代，其中各 R cA 為獨立選擇之 R c 。
  9. 如請求項1至4或8中任一項之化合物，其中 R 5 係選自由吡啶基、吡啶酮基、嘧啶基、吡𠯤基及嗒𠯤基組成之群，各自視情況經1至3個 R cA 取代，其中各 R cA 為獨立選擇之 R c 。
  10. 如請求項1至4或8至9中任一項之化合物，其中 R 5 係選自由以下組成之群：
    Figure 03_image2366
    ，諸如
    Figure 03_image2368
    ，諸如
    Figure 03_image2370
    ，其中之每一者進一步視情況經 R cA 取代，其中各 R cA 為獨立選擇之 R c 。
  11. 如請求項1至4或8至9中任一項之化合物，其中 R 5 係選自由以下組成之群：
    Figure 03_image2372
    ，諸如
    Figure 03_image2374
    ，其中之每一者進一步視情況經 R cA 取代，其中各 R cA 為獨立選擇之 R c 。
  12. 如請求項1至3中任一項之化合物，其中 R 5 為包括8至10個環原子之雙環雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R cA 取代，其中各 R cA 為獨立選擇之 R c 。
  13. 如請求項1至3或12中任一項之化合物，其中 R 5 為包括8個環原子之雙環雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R cA 取代，其中各 R cA 為獨立選擇之 R c 。
  14. 如請求項1至3或12至13中任一項之化合物，其中 R 5 係選自由以下組成之群：
    Figure 03_image2376
    Figure 03_image2378
    ，其中之每一者進一步視情況經1至2個 R cA 取代，其中各 R cA 為獨立選擇之 R c 。
  15. 如請求項1至2或12至13中任一項之化合物，其中 R 5 係選自由以下組成之群：
    Figure 03_image2380
    Figure 03_image2382
    ，其中之每一者進一步視情況經1至2個 R cA 取代，其中各 R cA 為獨立選擇之 R c 。
  16. 如請求項1至3或12中任一項之化合物，其中 R 5 為包括9個環原子之雙環雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R cA 取代，其中各 R cA 為獨立選擇之 R c 。
  17. 如請求項1至3、12或16中任一項之化合物，其中 R 5 為咪唑并吡啶基、吡唑并吡啶基或苯并三唑基，其中之每一者視情況經1至2個 R cA 取代，其中各 R cA 為獨立選擇之 R c 。
  18. 如請求項1至3、12或16至17中任一項之化合物，其中 R 5 為
    Figure 03_image2384
    ，其中之每一者視情況經1至2個 R cA 取代，其中各 R cA 為獨立選擇之 R c 。
  19. 如請求項1至3中任一項之化合物，其中 R 5 為雙環10員雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R cA 取代，其中各 R cA 為獨立選擇之 R c 。
  20. 如請求項3至19中任一項之化合物，其中各 R cA 獨立地選自由以下組成之群：鹵基；氰基；-OH；C 1 - 6烷基，其視情況經1至6個獨立選擇之 R a 取代；視情況經C 1 - 4烷氧基或C 1 - 4鹵代烷氧基取代之C 1 - 4烷氧基；C 1 - 4鹵代烷氧基；及-C(=O)N R ' R ''。
  21. 如請求項3至20中任一項之化合物，其中 R cA 在一次出現時為獨立選擇之鹵基，諸如-F或-Cl。
  22. 如請求項3至21中任一項之化合物，其中 R cA 在一次出現時為氰基。
  23. 如請求項3至22中任一項之化合物，其中 R cA 在一次出現時為視情況經1至6個獨立選擇之 R a 取代的C 1 - 6烷基。
  24. 如請求項3至23中任一項之化合物，其中 R cA 在一次出現時為C 1 - 6烷基，諸如C 1 - 3烷基。
  25. 如請求項3至23中任一項之化合物，其中 R cA 在一次出現時為經-OH或-N R eR f 取代之C 1 - 6烷基，諸如經-OH或NH 2取代之C 1 - 3烷基。
  26. 如請求項3至25中任一項之化合物，其中 R cA 在一次出現時為視情況經C 1 - 4烷氧基或C 1 - 4鹵代烷氧基取代之C 1 - 4烷氧基，諸如其中 R cA 在一次出現時為C 1 - 4烷氧基，諸如甲氧基或乙氧基。
  27. 如請求項3至26中任一項之化合物，其中 R cA 在一次出現時為C(=O) NR ' R ''，諸如C(=O)NH 2。
  28. 如請求項1或2之化合物，其中 R 5 為
    Figure 03_image2386
    ，其中 環 D為包括3至10個環原子之伸雜環基或伸雜環烯基，其中0至2個環原子(除鍵結至 R X 之環氮原子以外)為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該伸雜環基或伸雜環烯基視情況經1至4個各自獨立地選自由側氧基及- R c 組成之群的取代基取代。
  29. 如請求項1至2或28中任一項之化合物，其中 R 5 為
    Figure 03_image2388
    ，其視情況經1至2個 R c 取代，其中 x1及 x2各自獨立地為0、1或2。
  30. 如請求項29之化合物，其中 x1=0，且 x2=0。
  31. 如請求項29之化合物，其中 x1=0，且 x2=1。
  32. 如請求項29之化合物，其中 x1=0，且 x2=2。
  33. 如請求項1至2或28至29中任一項之化合物，其中 R 5 係選自由以下組成之群：
    Figure 03_image2390
    ，諸如
    Figure 03_image2392
    ；
    Figure 03_image2394
    ，諸如
    Figure 03_image2396
    ；及
    Figure 03_image2398
    ，諸如
    Figure 03_image2400
    。
  34. 如請求項28至33中任一項之化合物，其中 R X 為C(=O)(C 1 - 4烷基)或S(O) 2(C 1 - 4烷基)。
  35. 如請求項28至34中任一項之化合物，其中 R X 為C(=O)(C 1 - 4烷基)，諸如C(=O)Me或C(=O)Et。
  36. 如請求項28至34中任一項之化合物，其中 R X 為S(O) 2(C 1 - 4烷基)，諸如S(O) 2Me。
  37. 如請求項1或2之化合物，其中 R 5 為 - R g2 - R W 。
  38. 如請求項1至2或37中任一項之化合物，其中 R 5 為 - R g2 - R W ；且存在於 - R g2 - R W 中之該- R g2 為包括3至10個環原子之伸雜環基或伸雜環烯基，其中1至3個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該伸雜環基或伸雜環烯基視情況經1至4個獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代。
  39. 如請求項1至2或37至38中任一項之化合物，其中 - R 5 為
    Figure 03_image2402
    ，其中 環 D為包括3至10個環原子之伸雜環基，其中0至2個環原子(除鍵結至 R W 之環氮原子以外)為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該伸雜環基視情況經1至3個各自獨立地選自由側氧基及- R c 組成之群的取代基取代。
  40. 如請求項1至2或37至39中任一項之化合物，其中 - R 5 為
    Figure 03_image2404
    ，視情況經1至2個 R c 取代，其中 x1及 x2各自獨立地為0、1或2。
  41. 如請求項40之化合物，其中 x1=0，且 x2=0。
  42. 如請求項40之化合物，其中 x1=0，且 x2=1；或 x1=0，且 x2=2。
  43. 如請求項1至2或37至42中任一項之化合物，其中 R 5 係選自由以下組成之群：
    Figure 03_image2406
    ，諸如
    Figure 03_image2408
    ；
    Figure 03_image2410
    ，諸如
    Figure 03_image2412
    ；
    Figure 03_image2414
    ，諸如
    Figure 03_image2416
    ；
    Figure 03_image2418
    ，諸如
    Figure 03_image2420
    ，及
    Figure 03_image2422
    ，諸如
    Figure 03_image2424
    。
  44. 如請求項1或2中任一項之化合物，其中 R 5 為 R W 。
  45. 如請求項37至44中任一項之化合物，其中 R W 為- L W - W；且 L W 為C(=O)NHC(=O)*或NHS(O) 1 - 2*，其中星號表示與 W之連接點。
  46. 如請求項37至45中任一項之化合物，其中 W為視情況經1至3個 R a 取代且進一步視情況經 R g 取代之C 2 - 6烯基或C 2 - 6炔基，其中 W經由 sp 2 或 sp雜化碳原子連接至 L W 。
  47. 如請求項37至46之化合物，其中 W為視情況經1至3個 R a 取代且進一步視情況經 R g 取代之C 2 - 4烯基或C 2 - 4炔基，其中 W經由 sp 2 或 sp雜化碳原子連接至 L W 。
  48. 如請求項37至47之化合物，其中 W為CH=CH 2、CH=CHCH 2NMe 2或
    Figure 03_image2426
    。
  49. 如請求項37至48中任一項之化合物，其中- L W - W為 -C(=O)CH=CH 2、-C(=O)CH=CHCH 2NMe 2或
    Figure 03_image2428
    。
  50. 如請求項1或2之化合物，其中 R 5 為- R g2 - R Y 。
  51. 如請求項1至2或50中任一項之化合物，其中 R 5 為- R g2 - R Y ；且存在於- R g2 - R Y 中之該- R g2 為包括3至10個環原子之伸雜環基或伸雜環烯基，其中1至3個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該伸雜環基或伸雜環烯基視情況經1至3個獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代。
  52. 如請求項1至2或50至51中任一項之化合物，其中- R 5 為
    Figure 03_image2430
    ，其中 環 D為包括3至10個環原子之伸雜環基，其中0至2個環原子(除鍵結至 R Y 之環氮原子以外)為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該伸雜環基視情況經1至3個各自獨立地選自由側氧基及- R c 組成之群的取代基取代。
  53. 如請求項1至2或50至52中任一項之化合物，其中 - R 5 為
    Figure 03_image2432
    ，視情況經1至2個 R c 取代，其中 x1及 x2各自獨立地為0、1或2。
  54. 如請求項53之化合物，其中 x1=0，且 x2=0。
  55. 如請求項53之化合物，其中 x1=0，且 x2=1。
  56. 如請求項53之化合物，其中 x1=0，且 x2=2。
  57. 如請求項1至2或50至53中任一項之化合物，其中 R 5 係選自由以下組成之群：
    Figure 03_image2434
    ，諸如
    Figure 03_image2436
    ；
    Figure 03_image2438
    ，諸如
    Figure 03_image2440
    ；及
    Figure 03_image2442
    ，諸如
    Figure 03_image2444
    。
  58. 如請求項1至2或50中任一項之化合物，其中 R 5 為- R g2 - R Y ；且存在於- R g2 - R Y 中之該- R g2 為包括5至6個環原子之單環伸雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S組成之群，且其中該伸雜芳基視情況經1至3個 R c 取代。
  59. 如請求項1至2、50或58中任一項之化合物，其中 R 5 為- R g2 - R Y ；且存在於- R g2 - R Y 中之該- R g2 為包括5個環原子之單環伸雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S組成之群，且其中該伸雜芳基視情況經1至2個 R c 取代。
  60. 如請求項1至2、50或58至59中任一項之化合物，其中 R 5 係選自由以下組成之群：
    Figure 03_image2446
    Figure 03_image2448
    。
  61. 如請求項50至60中任一項之化合物，其中- R Y 為- R g 。
  62. 如請求項50至61中任一項之化合物，其中 - R Y 選自由以下組成之群： 包括5至10個環原子之雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R c 取代；及 視情況經1至4個 R c 取代之C 6 - 10芳基。
  63. 如請求項50至62中任一項之化合物，其中- R Y 為視情況經1至4個 R c 取代之C 6 - 10芳基。
  64. 如請求項50至63中任一項之化合物，其中- R Y 為視情況經1至3個 R c 取代之苯基。
  65. 如請求項50至62中任一項之化合物，其中 - R Y 為包括5至10個環原子之雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R c 取代。
  66. 如請求項50至62或65中任一項之化合物，其中- R Y 為包括5至6個環原子之單環雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R c 取代。
  67. 如請求項50至62或65至66中任一項之化合物，其中- R Y 選自由吡啶基及吡唑基組成之群，其中之每一者視情況經1至2個 R c 取代。
  68. 如請求項1或2之化合物，其中 R 5 為C 3 - 10環烷基或C 3 - 10環烯基，其各視情況經1至4個各自獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代。
  69. 如請求項1至2或68中任一項之化合物，其中 R 5 為經1至4個各自獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代的C 3 - 10環烷基。
  70. 如請求項1至2或68至69中任一項之化合物，其中 R 5 為經C 1 - 4烷氧基或C 1 - 4鹵代烷氧基取代之C 3 - 6環烷基；且 R 5 進一步視情況經1至2個各自獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代。
  71. 如請求項1至2或68至70中任一項之化合物，其中 R 5 為經C 1 - 4烷氧基或C 1 - 4鹵代烷氧基取代之環丙基，諸如：
    Figure 03_image2450
    ，諸如
    Figure 03_image2452
    。
  72. 如請求項1或2之化合物，其中 R 5 為視情況經1至6個 R a 取代之-S(O) 0 - 2(C 1 - 6烷基)。
  73. 如請求項1至2或72中任一項之化合物，其中 R 5 為視情況經1至6個 R a 取代之-S(O) 2(C 1 - 6烷基)。
  74. 如請求項1至2或72至73中任一項之化合物，其中 R 5 為-S(O) 2(C 1 - 6烷基)，諸如-S(O) 2(C 1 - 3烷基)。
  75. 如請求項1或2之化合物，其中 R 5 選自- L 5 - R g 、- L 5 - R g2 - R Y 及- L 5 - R g2 - R W 。
  76. 如請求項1至2或75中任一項之化合物，其中 R 5 為- L 5 - R g 。
  77. 如請求項1至2或75至76中任一項之化合物，其中 R 5 為-O- R g 。
  78. 如請求項1至2或75至77中任一項之化合物，其中 R 5 為-O- R g ；且存在於-O- R g 中之該 R g 為C 3 - 10環烷基或C 3 - 10環烯基，各自視情況經1至4個各自獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代。
  79. 如請求項1至2或75至78中任一項之化合物，其中 R 5 為-O-(C 3 - 6環烷基)，其中該C 3 - 6環烷基視情況經1至3個 R c 取代。
  80. 如請求項1至2或75至79中任一項之化合物，其中 R 5 為
    Figure 03_image2454
    。
  81. 如請求項1至80中任一項之化合物，其中 L 1 為視情況經1至6個 R a 取代之C 1 - 10伸烷基。
  82. 如請求項1至81中任一項之化合物，其中 L 1 為視情況經1至6個 R a 取代之C 1 - 6伸烷基。
  83. 如請求項1至82中任一項之化合物，其中 L 1 為視情況經1至6個 R a 取代之C 1 - 4伸烷基。
  84. 如請求項1至83中任一項之化合物，其中 L 1 為C 1 - 4伸烷基。
  85. 如請求項1至84中任一項之化合物，其中 L 1 為-CH 2-或-CH 2CH 2-。
  86. 如請求項1至84中任一項之化合物，其中 L 1 為
    Figure 03_image2456
    ，其中星號表示與 R W 之連接點。
  87. 如請求項1至80中任一項之化合物，其中 L 1 為鍵。
  88. 如請求項1之化合物，其中 X 1 為
    Figure 03_image2458
    。
  89. 如請求項1或88之化合物，其中 R 6 為 R g 。
  90. 如請求項1或88至89中任一項之化合物，其中 R 6 為包括3至10個環原子之雜環基或雜環烯基，其中1至3個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜環基或雜環烯基視情況經1至4個獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代。
  91. 如請求項1或88至90中任一項之化合物，其中 R 6 為包括3至10個環原子之雜環基，其中1至3個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜環基視情況經1至4個獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代，諸如：其中 R 6 為包括4至6個環原子之雜環基，其中1至3個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜環基視情況經1至2個獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代。
  92. 如請求項1或88至91中任一項之化合物，其中 R 6 係選自由吡咯啶基、哌啶基、氧雜環丁烷基、四氫呋喃基及四氫哌喃基組成之群，其中之每一者視情況經1至2個獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代，其中該吡咯啶基或哌啶基之環氮視情況經 R d 取代，諸如其中 R 6 為
    Figure 03_image2460
    (例如
    Figure 03_image2462
    )、
    Figure 03_image2464
    Figure 03_image2466
    。
  93. 如請求項1或88至89中任一項之化合物，其中 R 6 為包括5至10個環原子之雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R c 取代，諸如： 其中 R 6 為包括5至6個環原子之雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R c 取代，諸如：其中 R 6 為
    Figure 03_image2468
    。
  94. 如請求項1或88之化合物，其中 R 6 為- R g2 - R W 或- R g2 - R Y 。
  95. 如請求項1、88或94中任一項之化合物，其中 R 6 為- R g2 - R W 。
  96. 如請求項1、88或94至95中任一項之化合物，其中- R 6 為
    Figure 03_image2470
    ，其中 環 D為包括3至10個環原子之伸雜環基，其中0至2個環原子(除鍵結至 R W 之環氮原子以外)為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該伸雜環基視情況經1至3個各自獨立地選自由側氧基及- R c 組成之群的取代基取代；視情況其中 - R 6 為包括3至10個如上文所定義之環原子的單環伸雜環基環，其中氮原子鍵結至 R W (例如
    Figure 03_image2472
    ，諸如
    Figure 03_image2474
    ；
    Figure 03_image2476
    ，諸如
    Figure 03_image2478
    )；視情況其中- R 6 為包括3至10個如上文所定義之環原子的雙環伸雜環基環，其中氮原子鍵結至 R W (例如
    Figure 03_image2480
    ，諸如
    Figure 03_image2482
    ；或
    Figure 03_image2484
    ，諸如
    Figure 03_image2486
    ；或
    Figure 03_image2488
    ，諸如
    Figure 03_image2490
    Figure 03_image2492
    )。
  97. 如請求項1、88或94至96中任一項之化合物，其中- R 6 為
    Figure 03_image2494
    ，視情況經1至2個 R c 取代，其中 x1及 x2各自獨立地為0、1或2。
  98. 如請求項97之化合物，其中 x1=0，且 x2=0；或 x1=0，且 x2=1；或 x1=0，且 x2=2。
  99. 如請求項1、88或94至98中任一項之化合物，其中 R 6 係選自由以下組成之群：
    Figure 03_image2496
    ，諸如
    Figure 03_image2498
    ；
    Figure 03_image2500
    ，諸如
    Figure 03_image2502
    ；
    Figure 03_image2504
    ，諸如
    Figure 03_image2506
    ；
    Figure 03_image2508
    ，諸如
    Figure 03_image2510
    ，及
    Figure 03_image2512
    ，諸如
    Figure 03_image2514
    。
  100. 如請求項1、88、94至95中任一項之化合物，其中 R 6 為經 R W 取代之C 3-C 6環烷基(例如環丁基)；或經 R W 取代之氧雜環丁烷基；或經 R W 取代之四氫呋喃基。
  101. 如請求項1或88中任一項之化合物，其中 R 6 為- R W 。
  102. 如請求項94至101中任一項之化合物，其中- R W 為- L W - W；且 L W 為C(=O)NHC(=O)*、NR dC(=O)*(例如NMeC(=O)*)或NHS(O) 1 - 2*，其中星號表示與 W之連接點。
  103. 如請求項94至102中任一項之化合物，其中 W為視情況經1至3個 R a 取代且進一步視情況經 R g 取代之C 2 - 6烯基或C 2 - 6炔基，其中 W經由 sp 2 或 sp雜化碳原子連接至 L W 。
  104. 如請求項94至103中任一項之化合物，其中 W為視情況經1至3個 R a 取代且進一步視情況經 R g 取代之C 2 - 4烯基(例如CH=CH 2)或C 2 - 4炔基(例如
    Figure 03_image2516
    )，其中 W經由 sp 2 或 sp雜化碳原子連接至 L W 。
  105. 如請求項94至104中任一項之化合物，其中- L W - W為-C(=O)CH=CH 2；-C(=O)NHCH=CH 2；C(=O)CH=CHCH 2NR eR f(例如C(=O)CH=CHCH 2N(HMe)、C(=O)CH=CHCH 2NMe 2、
    Figure 03_image2518
    Figure 03_image2520
    )；或
    Figure 03_image2522
    。
  106. 如請求項1或88之化合物，其中 R 6 為-C 1 - 6烷氧基或-S(O) 0 - 2(C 1 - 6烷基)，各自視情況經1至6個 R a 取代。
  107. 如請求項1、88或106中任一項之化合物，其中 R 6 為-C 1 - 6烷氧基，諸如-C 1 - 3烷氧基，諸如甲氧基。
  108. 如請求項1或88至107中任一項之化合物，其中 L 2 為鍵。
  109. 如請求項1或88至107中任一項之化合物，其中 L 2 為視情況經1至6個 R a 取代之C 1 - 10伸烷基，其中 R a 為-N R eR f (例如NMe 2)、鹵基(例如氟)、烷氧基(例如甲氧基)。
  110. 如請求項1、88至107或109中任一項之化合物，其中 L 2 為視情況經1至6個 R a 取代之C 1 - 6伸烷基，其中 R a 為-N R eR f (例如NMe 2)、鹵基(例如氟)、烷氧基(例如甲氧基)。
  111. 如請求項1、88至107或109至110中任一項之化合物，其中 L 2 為視情況經1至6個 R a 取代之分支鏈C 3 - 6伸烷基，其中 R a 為-N R eR f (例如NMe 2)、鹵基(例如氟)、烷氧基(例如甲氧基)。
  112. 如請求項1、88至107或109至111中任一項之化合物，其中 L 2 為
    Figure 03_image2524
    (例如
    Figure 03_image2526
    )、
    Figure 03_image2528
    (例如
    Figure 03_image2530
    )、
    Figure 03_image2532
    (例如
    Figure 03_image2534
    )、
    Figure 03_image2536
    (例如
    Figure 03_image2538
    )、
    Figure 03_image2540
    (例如
    Figure 03_image2542
    )或
    Figure 03_image2544
    (例如
    Figure 03_image2546
    )。
  113. 如請求項1至112中任一項之化合物，其中 n為0。
  114. 如請求項1至112中任一項之化合物，其中 n為1或2。
  115. 如請求項1至112或114中任一項之化合物，其中 n為1。
  116. 如請求項1至112或114至115中任一項之化合物，其中該
    Figure 03_image2548
    部分為
    Figure 03_image2550
    。
  117. 如請求項1至112或114至116中任一項之化合物，其中 R 7 在一次出現時為N R eR f ，諸如：NH 2、NH(C 1 - 3烷基)或N(C 1 - 3烷基) 2。
  118. 如請求項1至112或114至117中任一項之化合物，其中 R 7 在一次出現時為NH 2或NH(C 1 - 3烷基)，諸如其中 R 7 在一次出現時為NH 2。
  119. 如請求項1至112中任一項之化合物，其中該
    Figure 03_image2552
    部分為
    Figure 03_image2554
    ；且 R 7 為N R eR f 。
  120. 如請求項119之化合物，其中 R 7 為NH 2或NH(C 1 - 3烷基)，諸如其中 R 7 為NH 2。
  121. 如請求項1至120中任一項之化合物，其中 R 1c 為H。
  122. 如請求項1至121中任一項之化合物，其中 R 2a 及 R 2b 為H。
  123. 如請求項1至121中任一項之化合物，其中 R 2a 及 R 2b 中之1至2個為除H以外之取代基。
  124. 如請求項123之化合物，其中 R 2a 及 R 2b 中之一者為視情況經1至3個 R a 取代之C 1 - 3烷基，諸如C 1 - 3烷基；且 R 2a 及 R 2b 中之另一者為H。
  125. 如請求項1至124中任一項之化合物，其中 R 3a 及 R 3b 為H。
  126. 如請求項1至124中任一項之化合物，其中 R 3a 及 R 3b 中之1至2個為除H以外之取代基。
  127. 如請求項126之化合物，其中 R 3a 及 R 3b 中之一者為視情況經1至3個 R a 取代之C 1 - 3烷基，諸如視情況經1至3個-F取代之C 1 - 3烷基；且 R 2a 及 R 2b 中之另一者為H。
  128. 如請求項1至124中任一項之化合物，其中 R 3a 及 R 3b 與其各自所連接之 環 B環原子一起形成具有3至12個環原子之稠合飽和或不飽和環； 其中環原子中之0至2個各自為獨立選擇之雜原子，其中該等獨立選擇之雜原子中之每一者係選自由N、NH、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群；且 其中該3至12個環原子之稠合飽和或不飽和環視情況經1至4個獨立地選自由側氧基、 R c 及 R W 組成之群的取代基取代。
  129. 如請求項1至124或128中任一項之化合物，其中 R 3a 及 R 3b 與其各自所連接之 環 B環原子一起形成具有4至8個環原子之稠合飽和環； 其中環原子中之0至2個各自為獨立選擇之雜原子，其中該等獨立選擇之雜原子中之每一者係選自由N、NH、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群；且 其中該4至8個環原子之稠合飽和環視情況經1至4個獨立地選自由側氧基、 R c 及 R W 組成之群的取代基取代。
  130. 如請求項1至124或128至129中任一項之化合物，其中 R 3a 及 R 3b 與其各自所連接之 環 B環原子一起形成：
    Figure 03_image2556
    ，其視情況經1至2個獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代，其中： p1及 p2獨立地為0、1或2； R Q 為H、 R d 、C(=O) - W或S(O) 2 W；且 cc 表示與C( R 2aR 2b )之連接點。
  131. 如請求項1至124或128至130中任一項之化合物，其中 R 3a 及 R 3b 與其各自所連接之 環 B環原子一起形成
    Figure 03_image2558
    或
    Figure 03_image2560
    ，其中 R Q 為H、 R d 、C(=O)- W或S(O) 2 W；且 cc 表示與C( R 2aR 2b )之連接點。
  132. 如請求項1至124或128至130中任一項之化合物，其中 R 3a 及 R 3b 與其各自所連接之 環 B環原子一起形成選自由以下組成之群的稠環：
    Figure 03_image2562
    諸如
    Figure 03_image2564
    ；
    Figure 03_image2566
    諸如
    Figure 03_image2568
    ；
    Figure 03_image2570
    諸如
    Figure 03_image2572
    (例如
    Figure 03_image2574
    )；
    Figure 03_image2576
    諸如
    Figure 03_image2578
    或
    Figure 03_image2580
    ；
    Figure 03_image2582
    諸如
    Figure 03_image2584
    ；
    Figure 03_image2586
    諸如
    Figure 03_image2588
    ；及
    Figure 03_image2590
    諸如
    Figure 03_image2592
    (例如
    Figure 03_image2594
    )，其中 R Q 為H、 R d 、C(=O)- W或S(O) 2 W；且 cc 表示與C( R 2aR 2b )之連接點。
  133. 如請求項130至132中任一項之化合物，其中 R Q 為H。
  134. 如請求項130至132中任一項之化合物，其中 R Q 為 R d 。
  135. 如請求項130至132或134中任一項之化合物，其中 R Q 為視情況經1至3個獨立選擇之 R a 取代之C 1 - 6烷基。
  136. 如請求項130至132中任一項之化合物，其中 R Q 為C(=O) - W或S(O) 2 W。
  137. 如請求項130至132或136中任一項之化合物，其中 W為C 2 - 4烯基。
  138. 如請求項130至132或136至137中任一項之化合物，其中 R Q 為C(=O)-CH 2=CH 2。
  139. 如請求項1至138中任一項之化合物，其中 環 A為
    Figure 03_image2596
    ，其中各 R cB 為獨立選擇之 R c ；且 m為0、1、2、3或4。
  140. 如請求項139之化合物，其中 m為1、2或3。
  141. 如請求項139或140之化合物，其中 m為1或2，諸如2。
  142. 如請求項1至141中任一項之化合物，其中 環 A為
    Figure 03_image2598
    (例如
    Figure 03_image2600
    )，其中各 R cB 為獨立選擇之 R c 。
  143. 如請求項139至142中任一項之化合物，其中各 R cB 獨立地選自由以下組成之群：-鹵基，諸如-Cl及-F；-CN；C 1 - 4烷氧基；C 1 - 4鹵代烷氧基；C 1 - 3烷基；及經1至6個獨立選擇之鹵基取代之C 1 - 3烷基。
  144. 如請求項1至143中任一項之化合物，其中 環 A為
    Figure 03_image2602
    ，其中 R cB1 為 R c ；且 R cB2 為H或 R c 。
  145. 如請求項144之化合物，其中 R cB1 為鹵基，諸如-F或-Cl，諸如-F。
  146. 如請求項144或145之化合物，其中 R cB2 為C 1 - 4烷氧基或C 1 - 4鹵代烷氧基，諸如C 1 - 4烷氧基，諸如甲氧基。
  147. 如請求項1至146中任一項之化合物，其中 環 A為
    Figure 03_image2604
    或
    Figure 03_image2606
    。
  148. 如請求項1至138中任一項之化合物，其中 環 A為包括5至10個環原子之雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R c 取代，諸如： 其中 環 A為包括9至10個環原子之雙環雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R c 取代，諸如： 其中 環 A係選自由以下組成之群：
    Figure 03_image2608
    ；
    Figure 03_image2610
    諸如
    Figure 03_image2612
    ；
    Figure 03_image2614
    諸如
    Figure 03_image2616
    ；
    Figure 03_image2618
    ；
    Figure 03_image2620
    ；
    Figure 03_image2622
    諸如
    Figure 03_image2624
    ；及
    Figure 03_image2626
    諸如
    Figure 03_image2628
    ，其中之每一者進一步視情況經 R c 取代。
  149. 如請求項1之化合物，其中該式 ( I )化合物為式 ( I - a )化合物
    Figure 03_image2630
    式 (I-a) ，或其醫藥學上可接受之鹽， 其中 環 D1係選自由以下組成之群： 包括5至6個環原子之單環雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R cA 取代；及 - R g2 - R Y ，其中存在於- R g2 - R Y 中之該 - R g2 為包括5至6個環原子之單環伸雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S組成之群，且其中該伸雜芳基視情況經1至3個 R cA 取代， 其中各 R cA 為獨立選擇之 R c ；及 L 1 為鍵或視情況經1至6個 R a 取代之C 1 - 3伸烷基。
  150. 如請求項149之化合物，其中 環 D1為包括5個環原子之單環雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R cA 取代。
  151. 如請求項149或150之化合物，其中 環 D1係選自由以下組成之群：
    Figure 03_image2632
    Figure 03_image2634
    ，各自視情況經1至2個 R cA 取代。
  152. 如請求項149之化合物，其中 環 D1為包括6個環原子之單環雜芳基，其中1至4個環原子為環氮原子，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R cA 取代。
  153. 如請求項149或152之化合物，其中 環 D1係選自由以下組成之群：
    Figure 03_image2636
    ，諸如
    Figure 03_image2638
    ，諸如
    Figure 03_image2640
    Figure 03_image2642
    ，諸如
    Figure 03_image2644
    ，其中之每一者進一步視情況經 R cA 取代。
  154. 如請求項149之化合物，其中 環 D1為- R g2 - R Y ；且存在於- R g2 - R Y 中之該- R g2 為包括5至6個環原子之單環伸雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S組成之群，且其中該伸雜芳基視情況經1至3個 R cA 取代。
  155. 如請求項149或154之化合物，其中 環 D1為- R g2 - R Y ；且存在於- R g2 - R Y 中之該- R g2 為包括5個環原子之單環伸雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S組成之群，且其中該伸雜芳基視情況經1至2個 R cA 取代。
  156. 如請求項149至155中任一項之化合物，其中 R Y 係選自由以下組成之群： 視情況經1至3個 R c 取代之苯基；及 包括5至6個環原子之單環雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R c 取代。
  157. 如請求項149至156中任一項之化合物，其中 n為0。
  158. 如請求項149至156中任一項之化合物，其中 n為1或2，諸如 n為1。
  159. 如請求項149至156或158中任一項之化合物，其中
    Figure 03_image2646
    為
    Figure 03_image2648
    。
  160. 如請求項149至156或158至159中任一項之化合物，其中 R 7 為N R eR f ，諸如NH 2、NH(C 1 - 3烷基)或N(C 1 - 3烷基) 2，諸如其中 R 7 為NH 2。
  161. 如請求項1之化合物，其中該式 ( I )化合物為式 ( I - b )化合物
    Figure 03_image2650
    式 (I-b) ，或其醫藥學上可接受之鹽， 其中 環 D2為包括8至10個環原子之雙環雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R cA 取代，其中各 R cA 為獨立選擇之R c；及 L 1 為鍵或視情況經1至6個 R a 取代之C 1 - 3伸烷基。
  162. 如請求項161之化合物，其中 環 D2為包括8個環原子之雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R cA 取代，其中各 R cA 為獨立選擇之 R c 。
  163. 如請求項161或162之化合物，其中 環 D2係選自由以下組成之群：
    Figure 03_image2652
    Figure 03_image2654
    ，其中之每一者進一步視情況經1至2個 R cA 取代，其中各 R cA 為獨立選擇之 R c 。
  164. 如請求項161或162之化合物，其中 環 D2係選自由以下組成之群：
    Figure 03_image2656
    Figure 03_image2658
    ，其中之每一者進一步視情況經1至2個 R cA 取代，其中各 R cA 為獨立選擇之 R c 。
  165. 如請求項161之化合物，其中 環 D2為包括9個環原子之雙環雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R cA 取代，其中各 R cA 為獨立選擇之 R c 。
  166. 如請求項161或165之化合物，其中 環 D2為咪唑并吡啶基、吡唑并吡啶基或苯并三唑基，其中之每一者視情況經1至2個 R cA 取代，其中各 R cA 為獨立選擇之 R c 。
  167. 如請求項161或165至166中任一項之化合物，其中 環 D2為
    Figure 03_image2660
    ，其中之每一者視情況經1至2個 R cA 取代，其中各 R cA 為獨立選擇之 R c 。
  168. 如請求項161至167中任一項之化合物，其中 n為0。
  169. 如請求項161至167中任一項之化合物，其中 n為1或2，諸如 n為1。
  170. 如請求項161至167或169中任一項之化合物，其中
    Figure 03_image2662
    為
    Figure 03_image2664
    。
  171. 如請求項161至167或169至170中任一項之化合物，其中 R 7 為N R eR f ，諸如NH 2、NH(C 1 - 3烷基)或N(C 1 - 3烷基) 2，諸如其中 R 7 為NH 2。
  172. 如請求項149至171中任一項之化合物，其中各 R cA 獨立地選自由以下組成之群：鹵基；氰基；-OH；C 1 - 6烷基，其視情況經1至6個獨立選擇之 R a 取代；視情況經C 1 - 4烷氧基或C 1 - 4鹵代烷氧基取代之C 1 - 4烷氧基；C 1 - 4鹵代烷氧基；及-C(=O)N R ' R ''。
  173. 如請求項1之化合物，其中該式 ( I )化合物為式 ( I - c )化合物
    Figure 03_image2666
    式 (I-c) ，或其醫藥學上可接受之鹽， 其中 環 D為包括3至10個環原子之伸雜環基，其中0至2個環原子(除鍵結至 R Z 之環氮原子以外)為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該伸雜環基視情況經1至3個各自獨立地選自由側氧基及- R c 組成之群的取代基取代； R Z 為 R X 或 R Y ；及 L 1 為鍵或視情況經1至6個 R a 取代之C 1 - 3伸烷基。
  174. 如請求項173之化合物，其中 R Z 為 R X 。
  175. 如請求項173或174之化合物，其中 R Z 為C(=O)(C 1 - 4烷基)。
  176. 如請求項173或174之化合物，其中 R Z 為S(O) 2(C 1 - 4烷基)。
  177. 如請求項173之化合物，其中 R Z 為 R Y 。
  178. 如請求項173或177之化合物，其中 R Z 為 R g 。
  179. 如請求項173或177至178中任一項之化合物，其中 R Z 係選自由以下組成之群： 視情況經1至3個 R c 取代之苯基；及 包括5至6個環原子之單環雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R c 取代。
  180. 如請求項173至179中任一項之化合物，其中 n為0。
  181. 如請求項173至179中任一項之化合物，其中 n為1或2，諸如其中 n為1。
  182. 如請求項173至179或181中任一項之化合物，其中
    Figure 03_image2668
    為
    Figure 03_image2670
    。
  183. 如請求項173至179或181至182中任一項之化合物，其中 R 7 為N R eR f ，諸如NH 2、NH(C 1 - 3烷基)或N(C 1 - 3烷基) 2，諸如其中 R 7 為NH 2。
  184. 如請求項1之化合物，其中該式 ( I )化合物為式 ( I - d )化合物
    Figure 03_image2672
    式 (I-d) ，或其醫藥學上可接受之鹽， 其中 環 D為包括3至10個環原子之伸雜環基，其中0至2個環原子(除鍵結至 R W 之環氮原子以外)為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該伸雜環基視情況經1至3個各自獨立地選自由側氧基及- R c 組成之群的取代基取代；及 L 1 為鍵或視情況經1至6個 R a 取代之C 1 - 3伸烷基。
  185. 如請求項184之化合物，其中 R W 為 - L W - W；且 L W 為C(=O)。
  186. 如請求項184或185之化合物，其中 W為視情況經1至3個 R a 取代且進一步視情況經 R g 取代之C 2 - 6烯基或C 2 - 6炔基，其中 W經由 sp 2 或 sp雜化碳原子連接至 L W 。
  187. 如請求項184至186中任一項之化合物，其中 W為CH=CH 2、CH=CHCH 2NMe 2或
    Figure 03_image2674
    。
  188. 如請求項184至187中任一項之化合物，其中 n為0。
  189. 如請求項184至187中任一項之化合物，其中 n為1或2，諸如其中 n為1。
  190. 如請求項184至187或189中任一項之化合物，其中
    Figure 03_image2676
    為
    Figure 03_image2678
    。
  191. 如請求項184至187或189至190中任一項之化合物，其中 R 7 為N R eR f ，諸如NH 2、NH(C 1 - 3烷基)或N(C 1 - 3烷基) 2，諸如其中 R 7 為NH 2。
  192. 如請求項173至191中任一項之化合物，其中 環 D為
    Figure 03_image2680
    ，其視情況經1至2個 R c 取代，其中 x1及 x2各自獨立地為0、1或2。
  193. 如請求項192之化合物，其中 x1為0。
  194. 如請求項173至193中任一項之化合物，其中 環 D係選自由以下組成之群：
    Figure 03_image2682
    ，諸如
    Figure 03_image2684
    ；
    Figure 03_image2686
    ，諸如
    Figure 03_image2688
    ；
    Figure 03_image2690
    ，諸如
    Figure 03_image2692
    ；
    Figure 03_image2694
    ，諸如
    Figure 03_image2696
    Figure 03_image2698
    ；及
    Figure 03_image2700
    ，諸如
    Figure 03_image2702
    。
  195. 如請求項1之化合物，其中該式 ( I )化合物為式 ( I - e )化合物：
    Figure 03_image2704
    式 (I-e) ，或其醫藥學上可接受之鹽， 其中 R 5A 為視情況經1至6個 R a 取代之- L 5 - R g 或-S(O) 0 - 2(C 1 - 6烷基)；及 L 1 為視情況經1至6個 R a 取代之C 1 - 10伸烷基。
  196. 如請求項195之化合物，其中 R 5A 為- L 5 - R g 。
  197. 如請求項195或196之化合物，其中 R 5A 為-O- R g 。
  198. 如請求項195至197中任一項之化合物，其中 R 5A 為-O- R g ；且存在於-O- R g 中之該 R g 為C 3 - 10環烷基或C 3 - 10環烯基，各自視情況經1至4個各自獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代。
  199. 如請求項195至198中任一項之化合物，其中 R 5A 為-O-(C 3 - 6環烷基)，其中該C 3 - 6環烷基視情況經1至3個 R c 取代，諸如其中 R 5 為
    Figure 03_image2706
    。
  200. 如請求項195之化合物，其中 R 5A 為視情況經1至6個 R a 取代之-S(O) 0 - 2(C 1 - 6烷基)。
  201. 如請求項195或200之化合物，其中 R 5A 為視情況經1至6個 R a 取代之-S(O) 2(C 1 - 6烷基)。
  202. 如請求項195或200至201中任一項之化合物，其中 R 5A 為-S(O) 2(C 1 - 3烷基)，諸如-S(O) 2Me。
  203. 如請求項195至202中任一項之化合物，其中 n為0。
  204. 如請求項195至202中任一項之化合物，其中 n為1或2，諸如其中 n為1。
  205. 如請求項195至202或204中任一項之化合物，其中
    Figure 03_image2708
    為
    Figure 03_image2710
    。
  206. 如請求項195至202或204至205中任一項之化合物，其中 R 7 為N R eR f ，諸如NH 2、NH(C 1 - 3烷基)或N(C 1 - 3烷基) 2，諸如其中 R 7 為NH 2。
  207. 如請求項149至206中任一項之化合物，其中 L 1 為視情況經1至6個 R a 取代之C 1 - 3伸烷基。
  208. 如請求項149至207中任一項之化合物，其中 L 1 為C 1 - 3伸烷基。
  209. 如請求項149至208中任一項之化合物，其中 L 1 為-CH 2-。
  210. 如請求項149至208中任一項之化合物，其中 L 1 為-CH 2CH 2-。
  211. 如請求項149至194中任一項之化合物，其中 L 1 為鍵。
  212. 如請求項1之化合物，其中該式 ( I )化合物為式 ( I - f )化合物：
    Figure 03_image2712
    式 (I-f) ，或其醫藥學上可接受之鹽， 其中 環 D3為經1至4個各自獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代之C 3 - 10環烷基。
  213. 如請求項212之化合物，其中 環 D3為經C 1 - 4烷氧基或C 1 - 4鹵代烷氧基取代之C 3 - 6環烷基；且 R 5 進一步視情況經1至2個各自獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代。
  214. 如請求項212或213之化合物，其中 R 5 為經C 1 - 4烷氧基或C 1 - 4鹵代烷氧基取代之環丙基，諸如：
    Figure 03_image2714
    ，諸如
    Figure 03_image2716
    或
    Figure 03_image2718
    。
  215. 如請求項212至214中任一項之化合物，其中 n為0。
  216. 如請求項212至214中任一項之化合物，其中 n為1或2，諸如其中 n為1。
  217. 如請求項212至214或216中任一項之化合物，其中
    Figure 03_image2720
    為
    Figure 03_image2722
    。
  218. 如請求項212至214或216至217中任一項之化合物，其中 R 7 為N R eR f ，諸如NH 2、NH(C 1 - 3烷基)或N(C 1 - 3烷基) 2，諸如其中 R 7 為NH 2。
  219. 如請求項1之化合物，其中該式 ( I )化合物為式 ( I - g )化合物：
    Figure 03_image2724
    式 (I-g) ，或其醫藥學上可接受之鹽， 其中 L 2 為視情況經1至6個 R a 取代之C 1 - 6伸烷基；及 R 6A 係選自由以下組成之群：視情況經1至6個 R a 取代之-C 1 - 6烷氧基；N R eR f ；H；鹵基；及-OH。
  220. 如請求項219之化合物，其中 R 6A 為視情況經1至6個 R a 取代之-C 1 - 6烷氧基。
  221. 如請求項219或220之化合物，其中 R 6A 為-C 1 - 3烷氧基。
  222. 如請求項219之化合物，其中 R 6A 為N R eR f 。
  223. 如請求項219之化合物，其中 R 6A 為H、鹵基或-OH。
  224. 如請求項219至223中任一項之化合物，其中 L 2 為分支鏈C 3 - 6伸烷基。
  225. 如請求項219至224中任一項之化合物，其中 L 2 為
    Figure 03_image2726
    。
  226. 如請求項219至223中任一項之化合物，其中 L 2 為C 1 - 3伸烷基，諸如-CH 2-。
  227. 如請求項219至226中任一項之化合物，其中 n為0。
  228. 如請求項219至226中任一項之化合物，其中 n為1或2，諸如其中 n為1。
  229. 如請求項219至226或228中任一項之化合物，其中
    Figure 03_image2728
    為
    Figure 03_image2730
    。
  230. 如請求項219至226或228至229中任一項之化合物，其中 R 7 為N R eR f ，諸如NH 2、NH(C 1 - 3烷基)或N(C 1 - 3烷基) 2，諸如其中 R 7 為NH 2。
  231. 如請求項1之化合物，其中該式 ( I )化合物為式 ( I - h )化合物：
    Figure 03_image2732
    式 (I-h) ，或其醫藥學上可接受之鹽， 其中 環 D4為 R g 。
  232. 如請求項231之化合物，其中 環 D4係選自由以下組成之群： C 3 - 10環烷基或C 3 - 10環烯基，其中之每一者視情況經1至4個獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代；及 包括3至10個環原子之雜環基或雜環烯基，其中1至3個環原子為雜原子，其各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜環基或雜環烯基視情況經1至4個獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代。
  233. 如請求項231或232之化合物，其中 環 D4為包括4至6個環原子之雜環基，其中1至3個環原子為雜原子，其各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜環基視情況經1至4個獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代。
  234. 如請求項231至233中任一項之化合物，其中 環 D4係選自由吡咯啶基、哌啶基、氧雜環丁烷基、四氫呋喃基及四氫哌喃基組成之群，其中之每一者視情況經1至2個獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代，其中該吡咯啶基或哌啶基之環氮視情況經 R d 取代，諸如其中 環 D4為：
    Figure 03_image2734
    (例如
    Figure 03_image2736
    )、
    Figure 03_image2738
    Figure 03_image2740
    。
  235. 如請求項231之化合物，其中 環 D4為包括5至6個環原子之雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R c 取代，諸如：其中 R 6 為
    Figure 03_image2742
    Figure 03_image2744
    。
  236. 如請求項231至235中任一項之化合物，其中 n為0。
  237. 如請求項231至235中任一項之化合物，其中 n為1或2，諸如其中 n為1。
  238. 如請求項231至235或237中任一項之化合物，其中
    Figure 03_image2746
    為
    Figure 03_image2748
    。
  239. 如請求項231至235或237至238中任一項之化合物，其中 R 7 為N R eR f ，諸如NH 2、NH(C 1 - 3烷基)或N(C 1 - 3烷基) 2，諸如其中 R 7 為NH 2。
  240. 如請求項1之化合物，其中該式 ( I )化合物為式 ( I - i )化合物：
    Figure 03_image2750
    式 (I-i)， 或其醫藥學上可接受之鹽， 其中 環 D為包括3至10個環原子之伸雜環基，其中0至2個環原子(除鍵結至 R W 之環氮原子以外)為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該伸雜環基視情況經1至3個各自獨立地選自由側氧基及- R c 組成之群的取代基取代。
  241. 如請求項240之化合物，其中 R W 為 - L W - W；且 L W 為C(=O)。
  242. 如請求項240或241之化合物，其中 W為視情況經1至3個 R a 取代且進一步視情況經 R g 取代之C 2 - 6烯基或C 2 - 6炔基，其中 W經由 sp 2 或 sp雜化碳原子連接至 L W 。
  243. 如請求項240至242中任一項之化合物，其中 W為CH=CH 2、CH=CHCH 2NMe 2或
    Figure 03_image2752
    。
  244. 如請求項240至243中任一項之化合物，其中 環 D為
    Figure 03_image2754
    ，其視情況經1至2個 R c 取代，其中 x1及 x2各自獨立地為0、1或2。
  245. 如請求項244之化合物，其中 x1為0。
  246. 如請求項240至245中任一項之化合物，其中 環 D係選自由以下組成之群：
    Figure 03_image2756
    ，諸如
    Figure 03_image2758
    ；
    Figure 03_image2760
    ，諸如
    Figure 03_image2762
    ；
    Figure 03_image2764
    ，諸如
    Figure 03_image2766
    ；
    Figure 03_image2768
    ，諸如
    Figure 03_image2770
    Figure 03_image2772
    ；及
    Figure 03_image2774
    ，諸如
    Figure 03_image2776
    。
  247. 如請求項240至246中任一項之化合物，其中 n為0。
  248. 如請求項240至246中任一項之化合物，其中 n為1或2，諸如其中 n為1。
  249. 如請求項240至246或248中任一項之化合物，其中
    Figure 03_image2778
    為
    Figure 03_image2780
    。
  250. 如請求項240至246或248中任一項之化合物，其中 R 7 為N R eR f ，諸如NH 2、NH(C 1-3烷基)或N(C 1-3烷基) 2，諸如其中 R 7 為NH 2。
  251. 如請求項1之化合物，其中該式 ( I )化合物為式 ( I - j )化合物
    Figure 03_image2782
    式 (I-j) ，或其醫藥學上可接受之鹽， 其中 L 2 為視情況經1至6個 R a 取代之C 1 - 6伸烷基；且 R 6B 為- R W 。
  252. 如請求項251之化合物，其中 R W 為- L W - W；且 L W 為C(=O)、NHC(=O)*或NHS(O) 1 - 2*，其中星號表示與 W之連接點。
  253. 如請求項251至252中任一項之化合物，其中 W為視情況經1至3個 R a 取代且進一步視情況經 R g 取代之C 2 - 6烯基或C 2 - 6炔基，其中 W經由 sp 2 或 sp雜化碳原子連接至 L W 。
  254. 如請求項251至253中任一項之化合物，其中 W可為CH=CH 2、CH=CHCH 2NMe 2或
    Figure 03_image2784
    。
  255. 如請求項251至254中任一項之化合物，其中- L W - W為-C(=O)CH=CH 2、-NHSO 2CH=CH 2、-C(=O)CH=CHCH 2NMe 2或
    Figure 03_image2786
    。
  256. 如請求項251至255中任一項之化合物，其中 L 2 為視情況經1至6個 R a 取代之C 1 - 3伸烷基，其中 R a 為-N R eR f (例如NMe 2)、鹵基(例如氟)、或烷氧基(例如甲氧基)。
  257. 如請求項251至256中任一項之化合物，其中 L 2 為
    Figure 03_image2788
    Figure 03_image2790
    (例如
    Figure 03_image2792
    )、
    Figure 03_image2794
    (例如
    Figure 03_image2796
    )、
    Figure 03_image2798
    (例如
    Figure 03_image2800
    )、
    Figure 03_image2802
    (例如
    Figure 03_image2804
    )、
    Figure 03_image2806
    (例如
    Figure 03_image2808
    Figure 03_image2810
    )或
    Figure 03_image2812
    (例如
    Figure 03_image2814
    )。
  258. 如請求項251至257中任一項之化合物，其中 n為0。
  259. 如請求項251至257中任一項之化合物，其中 n為1或2，諸如其中 n為1。
  260. 如請求項251至258中任一項之化合物，其中
    Figure 03_image2816
    為
    Figure 03_image2818
    。
  261. 如請求項1之化合物，其中該式 ( I )化合物為式 ( I - k )化合物：
    Figure 03_image2820
    式 (I-k)， 或其醫藥學上可接受之鹽， 其中 環 D5為 R g2 。
  262. 如請求項261之化合物，其中 環 D5係選自由以下組成之群： C 3 - 10伸環烷基或C 3 - 10伸環烯基，其中之每一者視情況經1至4個獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代；及 包括3至10個環原子之伸雜環基或伸雜環烯基，其中1至3個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該伸雜環基或伸雜環烯基視情況經1至4個獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代。
  263. 如請求項261或262之化合物，其中 環 D5為包括4至6個環原子之伸雜環基，其中1至3個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜環基視情況經1至4個獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代。
  264. 如請求項261或262之化合物，其中 環 D5為C 3-C 6伸環烷基(例如伸環丁基)、伸氧雜環丁烷基或伸四氫呋喃基。
  265. 如請求項261至264中任一項之化合物，其中 R W 為- L W - W；且 L W 為C(=O)或NHC(=O)*、N R d C(=O)*、NHS(O) 1 - 2*，其中星號表示與 W之連接點。
  266. 如請求項261或265之化合物，其中 W為視情況經1至3個 R a 取代且進一步視情況經 R g 取代之C 2 - 6烯基或C 2 - 6炔基，其中 W經由 sp 2 或 sp雜化碳原子連接至 L W 。
  267. 如請求項261至266中任一項之化合物，其中 W為CH=CH 2、CH=CHCH 2NMe 2或
    Figure 03_image2822
    。
  268. 如請求項261至267中任一項之化合物，其中- L W - W為-C(=O)CH=CH 2、-C(=O)CH=CHCH 2NMe 2或
    Figure 03_image2824
    。
  269. 如請求項184至187中任一項之化合物，其中 n為0。
  270. 如請求項184至187或189中任一項之化合物，其中
    Figure 03_image2826
    為
    Figure 03_image2828
    。
  271. 如請求項149至270中任一項之化合物，其中 R 1c 為H。
  272. 如請求項149至271中任一項之化合物，其中 R 2a 及 R 2b 為H。
  273. 如請求項149至272中任一項之化合物，其中 R 3a 及 R 3b 為H。
  274. 如請求項149至272中任一項之化合物，其中 R 3a 及 R 3b 與其各自所連接之 環 B環原子一起形成具有4至8個環原子之稠合飽和環； 其中環原子中之0至2個各自為獨立選擇之雜原子，其中該等獨立選擇之雜原子中之每一者係選自由N、NH、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群；且 其中該4至8個環原子之稠合飽和環視情況經1至4個獨立地選自由側氧基、 R c 及 R W 組成之群的取代基取代。
  275. 如請求項149至272或274中任一項之化合物，其中 R 3a 及 R 3b 與其各自所連接之 環 B環原子一起形成：
    Figure 03_image2830
    ，其視情況經1至2個獨立地選自由側氧基及 R c 組成之群的取代基取代，其中： p1及 p2獨立地為0、1或2； R Q 為H、 R d 、C(=O) - W或S(O) 2 W；且 cc 表示與C( R 2aR 2b )之連接點。
  276. 如請求項149至272或274至275中任一項之化合物，其中 R 3a 及 R 3b 與其各自所連接之 環 B環原子一起形成
    Figure 03_image2832
    或
    Figure 03_image2834
    ，其中 R Q 為H、 R d 、C(=O)- W或S(O) 2 W；且 cc 表示與C( R 2aR 2b )之連接點。
  277. 如請求項149至272或274至275中任一項之化合物，其中 R 3a 及 R 3b 與其各自所連接之 環 B環原子一起形成選自由以下組成之群的稠環：
    Figure 03_image2836
    諸如
    Figure 03_image2838
    ；
    Figure 03_image2840
    諸如
    Figure 03_image2842
    ；
    Figure 03_image2844
    諸如
    Figure 03_image2846
    (例如
    Figure 03_image2848
    )；
    Figure 03_image2850
    諸如
    Figure 03_image2852
    或
    Figure 03_image2854
    ；
    Figure 03_image2856
    諸如
    Figure 03_image2858
    ；
    Figure 03_image2860
    諸如
    Figure 03_image2862
    ；及
    Figure 03_image2864
    諸如
    Figure 03_image2866
    (例如
    Figure 03_image2868
    )，其中 R Q 為H、 R d 、C(=O)- W或S(O) 2 W；且 cc 表示與C( R 2aR 2b )之連接點。
  278. 如請求項275至277中任一項之化合物，其中 R Q 為H。
  279. 如請求項275至277中任一項之化合物，其中 R Q 為視情況經1至3個獨立選擇之 R a 取代之C 1 - 6烷基。
  280. 如請求項275至277中任一項之化合物，其中 R Q 為C(=O)- W或S(O) 2 W，視情況其中 W為C 2 - 4烯基。
  281. 如請求項275至277或280中任一項之化合物，其中 R Q 為C(=O)-CH 2=CH 2。
  282. 如請求項149至281中任一項之化合物，其中 環 A為
    Figure 03_image2870
    ，其中各 R cB 為獨立選擇之 R c ；且 m為1、2或3。
  283. 如請求項282之化合物，其中 m為1或2，諸如2。
  284. 如請求項149至283中任一項之化合物，其中 環 A為
    Figure 03_image2872
    (例如
    Figure 03_image2874
    )，其中各 R cB 獨立地選自由以下組成之群：-鹵基，諸如-Cl及-F；-CN；C 1 - 4烷氧基；C 1 - 4鹵代烷氧基；C 1 - 3烷基；及經1至6個獨立選擇之鹵基取代之C 1 - 3烷基。
  285. 如請求項149至284中任一項之化合物，其中 環 A為
    Figure 03_image2876
    ，其中 R cB1 為 R c ；且 R cB2 為H或 R c 。
  286. 如請求項285之化合物，其中 R cB1 為鹵基，諸如-F或-Cl，諸如-F。
  287. 如請求項285或286之化合物，其中 R cB2 為C 1 - 4烷氧基或C 1 - 4鹵代烷氧基，諸如C 1 - 4烷氧基，諸如甲氧基。
  288. 如請求項149至287中任一項之化合物，其中 環 A為
    Figure 03_image2878
    。
  289. 如請求項149至281中任一項之化合物，其中 環 A為包括5至10個環原子之雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R c 取代。
  290. 如請求項149至281或289中任一項之化合物，其中 環 A為包括9至10個環原子之雙環雜芳基，其中1至4個環原子為雜原子，該(等)雜原子各自獨立地選自由N、N(H)、N( R d )、O及S(O) 0 - 2組成之群，且其中該雜芳基視情況經1至4個 R c 取代。
  291. 如請求項149至281或289至290中任一項之化合物，其中 環 A係選自由以下組成之群：
    Figure 03_image2880
    諸如
    Figure 03_image2882
    諸如
    Figure 03_image2884
    Figure 03_image2886
    諸如
    Figure 03_image2888
    諸如
    Figure 03_image2890
    ，其中之每一者進一步視情況經 R c 取代。
  292. 如請求項1至291中任一項之化合物，其中 R 4 為H。
  293. 如請求項1之化合物，其中該化合物係選自由 表 C1中之化合物組成之群或其醫藥學上可接受之鹽。
  294. 一種醫藥組合物，其包含如請求項1至293中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽以及醫藥學上可接受之稀釋劑或載劑。
  295. 一種用於治療有需要之個體之癌症的方法，該方法包含向該個體投與治療有效量之如請求項1至293中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，或如請求項294之醫藥組合物。
  296. 一種用於治療有需要之個體之癌症的方法，該方法包含(a)確定該癌症與 EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調相關；及(b)向該個體投與治療有效量之如請求項1至293中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，或如請求項294之醫藥組合物。
  297. 一種治療個體之EGFR相關癌症的方法，該方法包含向經鑑別或診斷患有EGFR相關癌症的個體投與治療有效量之如請求項1至293中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，或如請求項294之醫藥組合物。
  298. 一種治療個體之EGFR相關癌症的方法，該方法包含： (a)    確定該個體之該癌症為EGFR相關癌症；及 (b)    向該個體投與治療有效量之如請求項1至293中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，或如請求項294之醫藥組合物。
  299. 一種治療個體之方法，該方法包含向具有臨床記錄之個體投與治療有效量之如請求項1至293中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽或如請求項294之醫藥組合物，該記錄指示該個體具有 EGFR基因、EGFR激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調。
  300. 如請求項296及298中任一項之方法，其中確定該個體中之該癌症為EGFR相關癌症的步驟包括進行分析以偵測來自該個體之樣品中 EGFR基因、EGFR激酶蛋白質或其中任一者之表現或活性或含量之失調。
  301. 如請求項300之方法，其進一步包含自該個體獲得樣品。
  302. 如請求項301之方法，其中該樣品為活檢樣品。
  303. 如請求項300至302中任一項之方法，其中該分析係選自由定序、免疫組織化學、酶聯免疫吸附分析及螢光原位雜交(FISH)組成之群。
  304. 如請求項303之方法，其中該FISH為分離FISH分析。
  305. 如請求項303之方法，其中該定序為焦磷酸定序或次世代定序。
  306. 如請求項296、299及300中任一項之方法，其中 EGFR基因、EGFR激酶蛋白質或其中任一者之表現或活性或含量的該失調為該 EGFR基因中之一或多個點突變。
  307. 如請求項306之方法，其中 EGFR基因中之該一或多個點突變引起在 表 1a及 表 1b中所例示之以下胺基酸位置中之一或多者處具有一或多個胺基酸取代之EGFR蛋白質的轉譯。
  308. 如請求項307之方法，其中該一或多個點突變係選自 表 1a及 表 1b中之突變(例如L858R、G719S、G719C、G719A、L861Q、外顯子19中之缺失及/或外顯子20中之插入)。
  309. 如請求項307之方法，其中該一或多個點突變為EGFR抑制劑抗性突變(例如L718Q、L747S、D761Y、T790M、C797S、T854A)。
  310. 如請求項307之方法，其中 EGFR基因中之該一或多個點突變包括人類 EGFR基因之外顯子19的缺失。
  311. 如請求項307之方法，其中該一或多個突變為人類 EGFR基因之外顯子20中之EGFR插入。
  312. 如請求項311之方法，其中人類EGFR基因之外顯子20中的該插入係選自：V769_D770insX、D770_N771insX、N771_P772insX、P772_H773insX及H773_V774insX。
  313. 如請求項311或312之方法，其中人類 EGFR基因之外顯子20中的該插入係選自：Y772_A775dup、A775_G776insYVMA、G776delinsVC、G776delinsVV、V777_G778insGSP及P780_Y781insGSP。
  314. 如請求項297、298及300至313中任一項之方法，其中該EGFR相關癌症係選自由以下組成之群：口腔癌、口咽癌、鼻咽癌、呼吸道癌、泌尿生殖癌、胃腸癌、中樞或周邊神經系統組織癌、內分泌或神經內分泌癌、造血癌、神經膠質瘤、肉瘤、癌瘤、淋巴瘤、黑色素瘤、纖維瘤、脊膜瘤、腦癌、口咽癌、鼻咽癌、腎癌、膽癌、嗜鉻細胞瘤(pheochromocytoma)、李-佛美尼腫瘤(Li-Fraumeni tumor)、甲狀腺癌、副甲狀腺癌、垂體瘤、腎上腺瘤、骨原性肉瘤、乳癌、肺癌、頭頸癌、前列腺癌、食道癌、氣管癌、肝癌、膀胱癌、胃癌、胰臟癌、卵巢癌、子宮癌、子宮頸癌、睪丸癌、大腸癌、直腸癌及皮膚癌。
  315. 如請求項297、298及300至314中任一項之方法，其中該EGFR相關癌症係選自由以下組成之群：肺癌、胰臟癌、頭頸癌、黑色素瘤、大腸癌、腎癌、白血病、神經膠母細胞瘤或乳癌。
  316. 如請求項314或315之方法，其中該肺癌為非小細胞肺癌。
  317. 如請求項295至316中任一項之方法，其中該癌症為HER2相關癌症。
  318. 如請求項317之方法，其中該HER2相關癌症與 HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調相關。
  319. 如請求項317及318中任一項之方法，其中確定該個體之該癌症為HER2相關癌症包括進行分析以偵測來自該個體之樣品中 HER2基因、HER2激酶蛋白質或其中任一者之表現或活性或含量之失調。
  320. 如請求項319之方法，其進一步包含自該個體獲得樣品。
  321. 如請求項320之方法，其中該樣品為活檢樣品。
  322. 如請求項319至321中任一項之方法，其中該分析係選自由定序、免疫組織化學、酶聯免疫吸附分析及螢光原位雜交(FISH)組成之群。
  323. 如請求項322之方法，其中該定序為焦磷酸定序或次世代定序。
  324. 如請求項318至323中任一項之方法，其中 HER2基因、HER2激酶蛋白質或其中任一者之表現或活性或含量的該失調為該 HER2基因中之一或多個點突變。
  325. 如請求項324之方法，其中 HER2基因中之該一或多個點突變引起在 表 3中所例示之以下胺基酸位置中之一或多者處具有一或多個胺基酸取代之HER2蛋白質的轉譯。
  326. 如請求項325之方法，其中該一或多個點突變係選自 表 3中之突變(例如S310F、S310Y、R678Q、R678W、R678P、I767M、V773M、V777L及V842I)。
  327. 如請求項295至326中任一項之方法，其中該癌症係選自由以下組成之群：非小細胞肺癌、胰臟癌及大腸直腸癌。
  328. 如請求項295至327中任一項之方法，其進一步包含向該個體投與額外療法或治療劑。
  329. 如請求項328之方法，其中該額外療法或治療劑係選自放射療法、細胞毒性化學治療劑、靶向激酶之治療劑、細胞凋亡調節劑、信號轉導抑制劑、靶向免疫之療法及靶向血管生成之療法。
  330. 如請求項329之方法，其中該額外治療劑係選自一或多種靶向激酶之治療劑。
  331. 如請求項330之方法，其中該額外治療劑為酪胺酸激酶抑制劑。
  332. 如請求項331之方法，其中該額外治療劑為第二EGFR抑制劑。
  333. 如請求項328之方法，其中該額外治療劑係選自奧希替尼(osimertinib)、吉非替尼(gefitinib)、埃羅替尼(erlotinib)、阿法替尼(afatinib)、拉帕替尼(lapatinib)、來那替尼(neratinib)、AZD-9291、CL-387785、CO-1686、WZ4002及其組合。
  334. 如請求項328之方法，其中該額外治療劑為如請求項1至293中任一項之第二化合物或其醫藥學上可接受之鹽，或如請求項294之醫藥組合物。
  335. 如請求項328或329之方法，其中該額外治療劑為HER2抑制劑。
  336. 如請求項335之方法，其中該HER2抑制劑係選自曲妥珠單抗(trastuzumab)、帕妥珠單抗(pertuzumab)、曲妥珠單抗美坦新(trastuzumab emtansine)、拉帕替尼、KU004、來那替尼、達可替尼(dacomitinib)、阿法替尼、圖卡替尼(tucatinib)、埃羅替尼、比咯替尼(pyrotinib)、波奇替尼(poziotinib)、CP-724714、CUDC-101、沙匹替尼(sapitinib) (AZD8931)、坦螺旋黴素(tanespimycin) (17-AAG)、IPI-504、PF299、培利替尼(pelitinib)、S-22261 1及AEE-788。
  337. 如請求項328至336中任一項之方法，其中如請求項1至293中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，或如請求項274之醫藥組合物與該額外治療劑以單獨劑量同時投與。
  338. 如請求項328或336中任一項之方法，其中如請求項1至293中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，或如請求項274之醫藥組合物與該額外治療劑以單獨劑量按任何次序依序投與。
  339. 一種治療患有癌症之個體之方法，其中該方法包含： (a)    在一段時間內向該個體投與一或多個劑量之第一EGFR抑制劑； (b)    在(a)後，確定獲自該個體之樣品中之癌細胞是否具有至少一個EGFR抑制劑抗性突變，該突變賦予癌細胞或腫瘤增加之針對步驟(a)之該第一EGFR抑制劑治療的抗性；及 (c)    若該個體已確定具有含有至少一個EGFR抑制劑抗性突變的癌細胞，該突變賦予癌細胞或腫瘤增加之針對步驟(a)之該第一EGFR抑制劑治療的抗性，則以單一療法或以與另一種抗癌劑結合之形式向該個體投與如請求項1至293中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽；或 (d)    若該個體尚未確定具有含有至少一個EGFR抑制劑抗性突變的癌細胞，該突變賦予癌細胞或腫瘤增加之針對步驟(a)之該第一EGFR抑制劑治療的抗性，則向該個體投與額外劑量之步驟(a)的該第一EGFR抑制劑。
  340. 如請求項339之方法，其中步驟(c)中之該抗癌劑為第二EGFR抑制劑、免疫療法、HER2抑制劑或其組合。
  341. 如請求項339之方法，其中步驟(c)中之該抗癌劑為在步驟(a)中投與之該第一EGFR抑制劑。
  342. 如請求項339之方法，其中向該個體投與額外劑量之步驟(a)的該第一EGFR抑制劑，且該方法進一步包含(e)向該個體投與另一種抗癌劑。
  343. 如請求項342之方法，其中步驟(e)之該抗癌劑為第二EGFR抑制劑、免疫療法或其組合。
  344. 如請求項342之方法，其中步驟(e)中之該抗癌劑為如請求項1至313中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。
  345. 如請求項339至344中任一項之方法，其中該EGFR抑制劑抗性突變為在胺基酸位置718、747、761、790、797或854處之取代(例如L718Q、L747S、D761Y、T790M、C797S、T854A)。
  346. 一種治療個體之EGFR相關癌症的方法，該方法包含向經鑑別或診斷患有具有一或多個EGFR抑制劑抗性突變之EGFR相關癌症的個體投與治療有效量之如請求項1至313中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，或如請求項294之醫藥組合物。
  347. 一種治療個體之EGFR相關癌症的方法，該方法包含： (a)    確定該個體之該癌症具有一或多個EGFR抑制劑抗性突變；及 (b)    向該個體投與治療有效量之如請求項1至293中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，或如請求項294之醫藥組合物。
  348. 一種治療患有癌症之個體之方法，其中該方法包含： (a)    確定獲自患有癌症且先前投與一或多個劑量之第一EGFR抑制劑之個體之樣品中的癌細胞是否具有一或多個EGFR抑制劑抗性突變，該突變賦予癌細胞或腫瘤增加之針對先前向該個體投與之該第一EGFR抑制劑治療的抗性；及 (b)    若該個體已確定具有至少一個EGFR抑制劑抗性突變的癌細胞，該突變賦予癌細胞或腫瘤增加之針對先前向該個體投與之該第一EGFR抑制劑治療的抗性，則以單一療法或以與另一種抗癌劑結合之形式向該個體投與如請求項1至293中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽；或 (c)    若該個體尚未確定具有含有至少一個EGFR抗性突變的癌細胞，該突變賦予癌細胞或腫瘤增加之針對先前向該個體投與之該第一EGFR抑制劑治療的抗性，則向該個體投與額外劑量之該第一EGFR抑制劑。
  349. 如請求項348之方法，其中步驟(b)之該抗癌劑為第二EGFR抑制劑、免疫療法、HER2抑制劑或其組合。
  350. 如請求項348之方法，其中步驟(b)之該抗癌劑為先前向該個體投與之該第一EGFR抑制劑。
  351. 如請求項348之方法，其中向該個體投與額外劑量之先前投與該個體的該第一EGFR抑制劑，且該方法進一步包含(d)向該個體投與另一種抗癌劑。
  352. 如請求項351之方法，其中步驟(d)之該抗癌劑為第二EGFR抑制劑、免疫療法或其組合。
  353. 如請求項351之方法，其中步驟(d)中之該抗癌劑為如請求項1至293中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。
  354. 如請求項353之方法，其中該第二EGFR抑制劑係選自奧希替尼、吉非替尼、埃羅替尼、阿法替尼、拉帕替尼、來那替尼、AZD-9291、CL-387785、CO-1686、WZ4002及其組合。
  355. 如請求項346至354中任一項之方法，其中該癌症係選自由以下組成之群：非小細胞肺癌、胰臟癌及大腸直腸癌。
  356. 如請求項346至355中任一項之方法，其中該癌症與 HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調相關。
  357. 如請求項356之方法，其中 HER2基因、HER2激酶蛋白質或其中任一者之表現或活性或含量的該失調為該 HER2基因中之一或多個點突變。
  358. 如請求項357之方法，其中 HER2基因中之該一或多個點突變引起在表3中所例示之以下胺基酸位置中之一或多者處具有一或多個胺基酸取代之HER2蛋白質的轉譯。
  359. 如請求項358之方法，其中該一或多個點突變係選自表3中之突變(例如S310F、S310Y、R678Q、R678W、R678P、I767M、V773M、V777L及V842I)。
  360. 一種用於調節哺乳動物細胞中之EGFR的方法，該方法包含使該哺乳動物細胞與有效量之如請求項1至293中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽接觸。
  361. 如請求項360之方法，其中該接觸在活體內發生。
  362. 如請求項360之方法，其中該接觸在活體外發生。
  363. 如請求項360至362中任一項之方法，其中該哺乳動物細胞為哺乳動物癌細胞。
  364. 如請求項363之方法，其中該哺乳動物癌細胞為哺乳動物EGFR相關癌細胞。
  365. 如請求項360至363中任一項之方法，其中該細胞具有 EGFR基因、EGFR激酶蛋白質或其中任一者之表現或活性或含量之失調。
  366. 如請求項365之方法，其中 EGFR基因、EGFR激酶蛋白質或其中任一者之表現或活性或含量的該失調為該 EGFR基因中之一或多個點突變。
  367. 如請求項366之方法，其中 EGFR基因中之該一或多個點突變引起在 表 1a及 表 1b中所例示之以下胺基酸位置中之一或多者處具有一或多個胺基酸取代之EGFR蛋白質的轉譯。
  368. 如請求項366之方法，其中該一或多個點突變係選自 表 1a及 表 1b中之突變(例如L858R、G719S、G719C、G719A、L861Q、外顯子19中之缺失及/或外顯子20中之插入)。
  369. 如請求項366之方法，其中該一或多個點突變為EGFR抑制劑抗性突變(例如L718Q、L747S、D761Y、T790M、C797S、T854A)。
  370. 如請求項366之方法，其中 EGFR基因中之該一或多個點突變包括人類 EGFR基因之外顯子19的缺失。
  371. 如請求項366之方法，其中該一或多個突變為人類 EGFR基因之外顯子20中之EGFR插入。
  372. 如請求項371之方法，其中人類 EGFR基因之外顯子20中的該插入係選自：A767_V769insX、V769_D770insX、D770_N771insX、N771_P772insX、P772_H773insX及H773_V774insX。
  373. 如請求項372之方法，其中人類 EGFR基因之外顯子20中的該插入係選自：A767_V769dupASV、V769_D770insASV、D770_N771insNPG、D770_N771insNPY、D770_N771insSVD、D770_N771insGL、N771_H773dupNPH、N771_P772insN、N771_P772insH、N771_P772insV、P772_H773insDNP、P772_H773insPNP、H773_V774insNPH、H773_V774insH、H773_V774insPH、H773_V774insAH及P772_H773insPNP。
  374. 一種用於治療有需要之個體之癌症的方法，該方法包含(a)確定該癌症與 HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調相關；及(b)向該個體投與治療有效量之如請求項1至293中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，或如請求項294之醫藥組合物。
  375. 一種治療個體之HER2相關癌症之方法，該方法包含向經鑑別或診斷患有HER2相關癌症之個體投與治療有效量之如請求項1至293中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，或如請求項294之醫藥組合物。
  376. 一種治療個體之HER2相關癌症之方法，該方法包含： (a)    確定該個體之該癌症為HER2相關癌症；及 (b)    向該個體投與治療有效量之如請求項1至293中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，或如請求項294之醫藥組合物。
  377. 一種治療個體之方法，該方法包含向具有臨床記錄之個體投與治療有效量之如請求項1至293中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽或如請求項294之醫藥組合物，該記錄指示該個體具有 HER2基因、HER2激酶或其中任一者之表現或活性或含量之失調。
  378. 如請求項374及376中任一項之方法，其中確定該個體之該癌症為HER2相關癌症的步驟包括進行分析以偵測來自該個體之樣品中 HER2基因、HER2激酶蛋白質或其中任一者之表現或活性或含量之失調。
  379. 如請求項378之方法，其進一步包含自該個體獲得樣品。
  380. 如請求項379之方法，其中該樣品為活檢樣品。
  381. 如請求項374至380中任一項之方法，其中該分析係選自由定序、免疫組織化學、酶聯免疫吸附分析及螢光原位雜交(FISH)組成之群。
  382. 如請求項381之方法，其中該FISH為分離FISH分析。
  383. 如請求項381之方法，其中該定序為焦磷酸定序或次世代定序。
  384. 如請求項374、377及378中任一項之方法，其中 HER2基因、HER2激酶蛋白質或其中任一者之表現或活性或含量的該失調為該 HER2基因中之一或多個點突變。
  385. 如請求項384之方法，其中 HER2基因中之該一或多個點突變引起在 表 3中所例示之以下胺基酸位置中之一或多者處具有一或多個胺基酸取代之HER2蛋白質的轉譯。
  386. 如請求項384之方法，其中該一或多個點突變係選自 表 3中之突變(例如S310F、S310Y、R678Q、R678W、R678P、I767M、V773M、V777L及V842I)。
  387. 如請求項373、376及377中任一項之方法，其中 HER2基因、HER2激酶蛋白質或其中任一者之表現或活性或含量的該失調為該人類 HER2基因之外顯子20中的插入。
  388. 如請求項387之方法，其中該人類 HER2基因之外顯子20中的該插入為在選自以下之胺基酸位置處的缺失：774、775、776、777、778及780。
  389. 如請求項388之方法，其中人類 HER2基因之外顯子20中的該插入係選自：774AYVM、M774del insWLV、A775_G776insYVMA、A775_G776insAVMA、A775_G776insSVMA、A775_G776insVAG、A775insV G776C、A775_G776insI、G776del insVC2、G776del insVV、G776del insLC、G776C V777insC、G776C V777insV、V777_G778insCG、G778_S779insCPG及P780_Y781insGSP。
  390. 如請求項375、376及378中任一項之方法，其中該HER2相關癌症係選自由以下組成之群：大腸癌、肺癌或乳癌。
  391. 如請求項390之方法，其中該肺癌為非小細胞肺癌。
  392. 如請求項377至391中任一項之方法，其進一步包含向該個體投與額外療法或治療劑。
  393. 如請求項392之方法，其中該額外療法或治療劑係選自放射療法、細胞毒性化學治療劑、靶向激酶之治療劑、細胞凋亡調節劑、信號轉導抑制劑、靶向免疫之療法及靶向血管生成之療法。
  394. 如請求項392之方法，其中該額外治療劑為如請求項1至293中任一項之第二化合物或其醫藥學上可接受之鹽，或如請求項274之醫藥組合物。
  395. 如請求項392之方法，其中該額外治療劑係選自一或多種靶向激酶之治療劑。
  396. 如請求項392之方法，其中該額外治療劑為酪胺酸激酶抑制劑。
  397. 如請求項392之方法，其中該額外治療劑為EGFR抑制劑。
  398. 如請求項392之方法，其中該額外治療劑係選自奧希替尼、吉非替尼、埃羅替尼、阿法替尼、拉帕替尼、來那替尼、AZD-9291、CL-387785、CO-1686、WZ4002及其組合。
  399. 如請求項392之方法，其中該額外治療劑為HER2抑制劑。
  400. 如請求項399之方法，其中該HER2抑制劑係選自曲妥珠單抗、帕妥珠單抗、曲妥珠單抗美坦新、拉帕替尼、KU004、來那替尼、達可替尼、阿法替尼、圖卡替尼、埃羅替尼、比咯替尼、波奇替尼、CP-724714、CUDC-101、沙匹替尼(AZD8931)、坦螺旋黴素(17-AAG)、IPI-504、PF299、培利替尼、S-22261 1及AEE-788。
  401. 如請求項395至400中任一項之方法，其中如請求項1至293中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，或如請求項274之醫藥組合物與該額外治療劑以單獨劑量同時投與。
  402. 如請求項395或400中任一項之方法，其中如請求項1至293中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，或如請求項274之醫藥組合物與該額外治療劑以單獨劑量按任何次序依序投與。
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Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2023173083A1 (en) * 2022-03-11 2023-09-14 Scorpion Therapeutics, Inc. Tetrahydroindole derivatives as egfr and/or her2 inhibtors useful for the treatment of cancer
WO2023183601A1 (en) 2022-03-24 2023-09-28 Scorpion Therapeutics, Inc. Methods of synthesizing egfr inhibitors
WO2023205595A2 (en) * 2022-04-20 2023-10-26 Celyn Therapeutics, Inc Egfr inhibitors in cancer treatment

Family Cites Families (30)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6906194B2 (en) 2003-10-08 2005-06-14 Massachusetts Instititue Of Technology Fluorescence assay for kinase activity
US7964729B2 (en) 2006-08-28 2011-06-21 Massachusetts Institute Of Technology Sox-based kinase sensor
EP2655401B1 (en) 2010-12-20 2016-03-09 The Regents of the University of Michigan Inhibitors of the epidermal growth factor receptor-heat shock protein 90 binding interaction
UA111754C2 (uk) 2011-10-06 2016-06-10 Байєр Фарма Акцієнгезелльшафт Заміщені бензиліндазоли для застосування як інгібіторів bub1-кінази для лікування гіперпроліферативних захворювань
ES2638144T3 (es) 2011-12-21 2017-10-18 Bayer Intellectual Property Gmbh Bencilpirazoles sustituidos
WO2013167698A1 (en) 2012-05-11 2013-11-14 Bayer Pharma Aktiengesellschaft Substituted cycloalkenopyrazoles as bub1 inhibitors for the treatment of cancer
CN105209455A (zh) 2013-03-21 2015-12-30 拜耳制药股份公司 3-杂芳基取代的吲唑
EP2976335A1 (en) 2013-03-21 2016-01-27 Bayer Pharma Aktiengesellschaft Heteroaryl substituted indazoles
WO2014176475A2 (en) 2013-04-26 2014-10-30 The Regents Of The University Of Michigan Egfr inhibitors and uses thereof
CN105452242A (zh) 2013-06-21 2016-03-30 拜耳制药股份公司 杂芳基取代的吡唑
ES2652305T3 (es) 2013-06-21 2018-02-01 Bayer Pharma Aktiengesellschaft Pirazoles heteroaril sustituidos
WO2014202583A1 (en) 2013-06-21 2014-12-24 Bayer Pharma Aktiengesellschaft Substituted benzylpyrazoles
EP3010904A1 (en) 2013-06-21 2016-04-27 Bayer Pharma Aktiengesellschaft Substituted benzylpyrazoles
US9682974B2 (en) 2013-10-30 2017-06-20 Bayer Pharma Aktiengesellschaft Heteroaryl substituted pyrazoles
WO2015175632A1 (en) 2014-05-13 2015-11-19 Ariad Pharmaceuticals, Inc. Heteroaryl compounds for kinase inhibition
AR100886A1 (es) 2014-06-17 2016-11-09 Bayer Pharma AG 3-amino-1,5,6,7-tetrahidro-4h-indol-4-onas
UA122221C2 (uk) 2015-01-28 2020-10-12 Байєр Фарма Акцієнгезелльшафт 4Н-ПІРОЛО[3,2-c]ПІРИДИН-4-ОНОВІ ПОХІДНІ
EP3310775B1 (en) 2015-06-17 2020-04-01 Bayer Pharma Aktiengesellschaft 3-amino-1,5,6,7-tetrahydro-4h-indol-4-ones
CN107921286A (zh) 2015-08-05 2018-04-17 拜耳制药股份公司 1h‑吡咯‑3‑胺类化合物
KR102075886B1 (ko) 2015-09-01 2020-02-11 다이호야쿠힌고교 가부시키가이샤 신규한 피라졸로[3,4-d]피리미딘 화합물 또는 그 염
AU2017363199B2 (en) 2016-11-17 2023-08-17 Board Of Regents, The University Of Texas System Compounds with anti-tumor activity against cancer cells bearing EGFR or HER2 exon 20 mutations
AU2018325442B2 (en) 2017-08-31 2023-04-13 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Inhibitors of EGFR and/or HER2 and methods of use
US11339157B1 (en) 2017-10-24 2022-05-24 Bayer Aktiengesellschaft 4H-pyrrolo[3,2-c]pyridin-4-one derivatives
WO2019165385A1 (en) 2018-02-23 2019-08-29 Fulton Group N.A., Inc. Inward-firing premix fuel combustion burner
MX2020008767A (es) 2018-02-23 2021-01-08 Univ Michigan Regents Disruptores del dímero egfr y uso de estos.
CA3096304A1 (en) 2018-06-14 2019-12-19 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Cyano quinoline amide compounds as her2 inhibitors and methods of use
WO2019246541A1 (en) 2018-06-21 2019-12-26 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Inhibitors of egfr and methods of use thereof
WO2020216773A1 (en) * 2019-04-24 2020-10-29 Bayer Aktiengesellschaft 4h-pyrrolo[3,2-c]pyridin-4-one compounds
EP3958865A1 (en) * 2019-04-24 2022-03-02 Bayer Aktiengesellschaft 4h-pyrrolo[3,2-c]pyridin-4-one derivatives
KR20220004103A (ko) * 2019-04-24 2022-01-11 바이엘 악티엔게젤샤프트 4H-피롤로[3,2-c]피리딘-4-온 화합물

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