CN117625422B - 一株伯顿丝孢毕赤酵母l9-1及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及微生物技术领域，尤其涉及一株伯顿丝孢毕赤酵母L9‑1及其应用。本发明分离筛选到的酵母L9‑1被鉴定为Hyphopichia burtonii，保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No：64100。相应种子培养液，以以下方法制备：将所述伯顿丝孢毕赤酵母L9‑1接种至麦芽汁培养基中进行培养，培养温度为23～33℃，培养时间为20～64h，应用于发酵食品包括：酱油、发酵酱、复合调味料；采用伯顿丝孢毕赤酵母L9‑1发酵能显著提升食品中的4‑乙烯基愈创木酚、乙醇、正丁醇、异戊醇、2,3‑丁二醇、苯乙醇、异丁醇含量，具有较好的生产可操作性和经济效益。
Description
技术领域
本发明涉及微生物技术领域，尤其涉及一株伯顿丝孢毕赤酵母L9-1及其应用。
背景技术
发酵调味品是人们日常生活中必备的食品，对食物色香味的形成有不可或缺的作用。随着生活水平的提高，调味品的消费量日益增长，人们对其品质的要求也逐步提高。采用玻璃纤维大罐工艺极大地提高了各大调味品厂的产能，但是也在一定程度上降低了酱油、发酵酱、复合调味料等发酵调味品的品质，出现香气不足或者烹饪过程香气损失严重等问题。采用具有与风味化合物合成代谢能力的酵母菌接种至酱油、豆酱的发酵醪中进行发酵，能明显地提升产品中香气物质的含量并一定程度抑制不良风味的产生。近年来，不同种酵母在调味品发酵中被广泛应用研究，调味品的风味物质得到了定向强化，并为调味品风味多样性开发创造了条件。
公告号为CN113667612B的中国专利公布了一种酵母及其应用，适用于酱油发酵生产，并能显著提高酱油或酱中4-乙基愈创木酚、谷氨酸和/或beta-苯乙醇的含量。还涉及所述酵母菌在酱油或酱（例如，低盐可减盐的酱油或酱）生产中的用途。但酵母菌种资源的多样性决定了其代谢功能的多样性，不同酵母在调味品发酵体系中代谢产生的风味物质有明显差异。因此从发酵食品中分离筛选出具有独特代谢功能的酵母，并将其应用于调味品发酵，既可以达到提高目标风味化合物浓度目的，也可以为调味品多样化风味开发提供菌种基础和技术支撑。
发明内容
针对食品市场中对发酵食品风味多样性的需求，本发明提供一株伯顿丝孢毕赤酵母L9-1，能够在5-22%氯化钠环境下生长，并可代谢合成多种风味成分，如4-乙烯基愈创木酚、乙醇、正丁醇、异戊醇、2,3-丁二醇、苯乙醇、异丁醇，不产生不良风味；本发明还提供一株伯顿丝孢毕赤酵母L9-1在食品发酵中的应用，能显著提升食品多种风味成分，
如4-乙烯基愈创木酚、苯乙醇等化合物的含量，并明显改善调味品的香气和口感。
本发明以以下技术方案实现：
一株伯顿丝孢毕赤酵母L9-1，被鉴定为Hyphopichia burtonii，保藏于广东省微生物菌种保藏中心，地址为广东省广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，保藏编号为GDMCCNo：64100，保藏日期为2023年12月1日。
一种用于培养上述的一株伯顿丝孢毕赤酵母L9-1种子培养液，通过以下方法制备得到：将所述伯顿丝孢毕赤酵母L9-1接种至麦芽汁培养基中进行培养，培养温度为23～33℃，培养时间为20～64h。
优选的，所述麦芽汁培养基包括12%~22%氯化钠，2%~5%麦芽浸粉；0.2%~2.0%酵母抽提物，余量为水，pH为5~6；上述菌株可以在含5%~22%氯化钠麦芽汁培养基中正常生长。
优选的，麦芽汁培养基中氯化钠浓度为8%~12%。
优选的，氯化钠浓度为12%，采用发酵14天的酱油发酵醪液培养该株酵母，可得到高活力，菌体浓度2×107CFU/mL以上的菌种培养液。
本发明公开的伯顿丝孢毕赤酵母L9-1适宜在pH值5~6的范围生长，若不在此范围不利于其细胞生长和产物代谢，对所应用到的产品的品质也有一定影响。
根据上述的一株伯顿丝孢毕赤酵母L9-1在食品发酵中的应用。
优选的，采用伯顿丝孢毕赤酵母L9-1发酵所述食品包括：酱油、发酵酱、复合调味料；采用伯顿丝孢毕赤酵母L9-1发酵能显著提升食品中的物质包括4-乙烯基愈创木酚、乙醇的含量。
优选的，食品中提升的物质还包括正丁醇、异戊醇、2,3-丁二醇、苯乙醇、异丁醇含量。
一种包含上述的伯顿丝孢毕赤酵母L9-1的发酵菌剂，包括采用伯顿丝孢毕赤酵母L9-1与其它助剂任意复配得到的菌剂。
一种由上述的种子培养液或上述的发酵菌剂发酵得到的风味基料。
一种如上述的风味基料的发酵方法，包括以下步骤：
S1、制备酱油发酵液：以大豆和/或小麦为原料制曲，将得到的曲料加入盐水发酵，去除固体杂质，保留发酵醪下层液体，即得酱油发酵液，所述曲料与盐水的混合质量比为1:1.8～4.5，所述盐水质量浓度为14%～24%；
S2、制备风味基料：向酱油发酵液中加入阿魏酸、苯丙氨酸和所述的伯顿丝孢毕赤酵母L9-1种子培养液或所述发酵菌剂，阿魏酸、苯丙氨酸的加入量为酱油发酵液质量的0.2%~3.0%，伯顿丝孢毕赤酵母L9-1种子培养液的接种量为酱油发酵液质量的0.5%~10%。
一种使用上述的种子培养液发酵的酱醪。
根据上述的酱醪的发酵方法，包括以下步骤：
1）预发酵：将曲料和盐水混合进行预发酵，得到预发酵液；
2）发酵：向步骤1）预发酵液中加入所述的伯顿丝孢毕赤酵母L9-1种子培养液，发酵，即得酱醪。
根据上述的酱醪发酵方法，所述预发酵步骤中，当进行酱油发酵时，所述曲料的原料为大豆和/或小麦，与盐水的混合质量比为1:1.8～4.5，所述盐水质量浓度为14%～24%，所述预发酵时间为7~14天；当进行豆酱发酵时，所述曲料的原料为大豆和面粉，或者为大豆和小麦粉，所述预发酵时间为10~15天；所述发酵步骤中，所述伯顿丝孢毕赤酵母L9-1种子培养液的加入量为预发酵液质量的1%~5%；加入所述伯顿丝孢毕赤酵母L9-1种子液后7~21天内，每周复料1~2次，每次1~2h，控制发酵料品温为24~33℃，所述复料步骤具体为：将下层发酵液抽出均匀淋入上层发酵醪。
上述曲料中，大豆可以选择为原粒大豆或脱脂大豆，小麦可以选择为原粒小麦或小麦粉。脱脂大豆指原粒大豆经处理脱去油脂后的产品，小麦粉指原粒小麦直接粉碎后的产品，面粉指原粒小麦经研磨、去除或部分去除麸皮后的产品。
本发明公开的伯顿丝孢毕赤酵母L9-1易于培养，能耐受高盐高温环境，在发酵阶段应用能够显著提高酱醪中的4-乙烯基愈创木酚、苯乙醇等风味物质的含量，改善酱醪香气。
本发明有益效果：
（1）本发明公开的伯顿丝孢毕赤酵母L9-1，可提高酱油、发酵酱或复合调味料中多种风味成分，如4-乙烯基愈创木酚、乙醇、正丁醇、异戊醇、2,3-丁二醇、苯乙醇、异丁醇的含量。
（2）本发明不需要额外添加营养源，能够利用酱醪中本源的前体物质代谢合成多种挥发性风味物质。
（3）本发明可以通过制备风味基料，再添加酱油、发酵酱、复合调味料等食品以改善其风味品质。
（4）本发明的产品具有较好的生产可操作性和经济效益。
附图说明
图1为实施例1中伯顿丝孢毕赤酵母L9-1分离筛选流程示意图。
图2为实施例1中伯顿丝孢毕赤酵母L9-1发酵风味成分GC-MS分析图。
图3为实施例1中伯顿丝孢毕赤酵母L9-1菌落及菌体形态图；其中，a为菌落形态照片，b为菌体显微观察照片。
图4为实施例1中伯顿丝孢毕赤酵母L9-1耐盐性分析图。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明；应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明；实施例中，如无特别说明，所用手段均为本领域常规的手段；本文中所用的术语“包含”、“包括”或其任何其它变形，意在覆盖非排它性的包括；例如，包含所列要素的组合物、步骤、方法、制品或装置不必仅限于那些要素，而是可以包括未明确列出的其它要素或此种组合物、步骤、方法、制品或装置所固有的要素；此外，下面所描述的本发明各个实施方式中所涉及到的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互组合；本发明实施例和对比例中所用的实验原料均为市售产品。
菌种信息：
本发明提供的伯顿丝孢毕赤酵母L9-1，已于2023年12月1日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏地址为广东省广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，邮政编码：510075，保藏编号为GDMCC No：64100。
上述伯顿丝孢毕赤酵母L9-1，根据细胞形态，生理生化特征和18S ITS rDNA 测序等实验数据综合分析，该菌株被鉴定为Hyphopichia burtonii。该菌株的菌落和菌体形态如说明书附图3所示，其中a为菌落形态照片，b为菌体显微观察照片，生理生化试验结果如表1所示
表1 生理生化试验结果
注：“＋”为阳性；“－”为阴性； “w” 为弱；“s” 为慢；“nd”为未检测。
伯顿丝孢毕赤酵母L9-1是从龙牌食品股份有限公司发酵酱醪中筛选和分离鉴定获得，菌株的18S ITS rDNA序列如下：
GCCTGCGGAAGGATCATTAAAAATTTAATTGTTTACACGTTTACGTTTAACATATACAACTAACCAACTTAATTATGTCAACAACAACAACCAAAAATCAAAACTTTCAACAACGGATCTCTTGGTTCTCGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATAAGTAATATGAATTGCAGATTTTCGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCACATTGCACCTTGTGGTATTCCACAAGGTATGCCTGTTTGAGCGTCATTTCTCCCTCAACCCCCGCGGGTTGGCGTTGAATGGCACGAGCTCYTAGTCAGTCCATTCGAAAAGTATTTTTCTTGTGTTGTTATTTTCTAATTTAGTAGTGACAACCACACTAAAAACACATTTTCCTCAAATCAGGTAGGACTACCCGCTGAACTTAAGCATATCA
实施例1
伯顿丝孢毕赤酵母L9-1的筛选，如图1所示，包括以下筛选流程：
一、样品采集
取龙牌食品股份有限公司发酵30d的酱油发酵醪。
二、耐盐酵母分离
取上述酱油发酵醪，生理盐水梯度稀释10-2，10-3，10-4，10-5倍后涂布于酵母筛选平板，30℃静置培养72h，挑取单菌落进行进一步划线分离纯化。纯化后菌株接种麦芽汁培养基，30℃，150 r/min 振荡培养96 h。
上述酵母筛选平板选用酵母分离平板，包含：5% 麦芽浸粉，1% 酵母抽提物，18%氯化钠，2% 琼脂粉，pH 5~6。
上述麦芽汁培养基包含：5% 麦芽浸粉，1% 酵母抽提物，pH 5~6。
三、酵母产香性能初筛
取上述经纯化和培养后的菌株发酵液，进行香气鉴评。
香气鉴评方法：由10位在酱油风味鉴评方面具有丰富经验的技术人员，对各菌株得到的发酵液样品进行盲评，主要评价香气可接受度和香气类型。
将具有令人愉悦的独特香气发酵液对应的酵母菌株命名为L9-1，L9-2，L9-3，L9-4，L9-5，L9-6，L9-7，L9-8，L9-9，L9-10，L9-11，L9-12，L9-13，L9-14，L9-15，L9-16。
四、酵母风味成分复筛
1、制备种子培养液
分别挑取L9-1，L9-2，L9-3，L9-4，L9-5，L9-6，L9-7，L9-8，L9-9，L9-10，L9-11，L9-12，L9-13，L9-14，L9-15，L9-16共16个菌株的单菌落接种于麦芽汁培养基，
于30℃，200 r/min的条件下震荡培养48 h，得到上述菌株的种子培养液。
上述麦芽汁培养基包含：5% 麦芽浸粉，1% 酵母抽提物，pH 5~6。
2、发酵
将种子培养液分别按5%（w/w）接种到酱醪发酵液培养基，于30℃，100 r/min的条件下震荡培养14d（天）。
上述酱醪发酵液培养基的制备方法为，取发酵2周酱油发酵醪，200目纱网过滤，过滤清液5000 r/min离心 10 min，上清液即为酱醪发酵培养基。
3、顶空萃取-气相色谱-质谱（GC-MS）检测
（1）方法
上述发酵液顶空萃取样品进行气相色谱-质谱（GC-MS）分析方法如下：
取2 mL样品于4 mL样品瓶中，将萃取头插入到样品瓶的顶空部分，40 ℃保温萃取时间30 min。萃取结束后，立即进样，解析时间为2 min。色谱条件：色谱柱为DB-WA×U2毛细管柱 (30 m×0.32 mm, 0.25 μm)；升温程序：起始温度40℃，保持5 min，以2℃/min升温至150℃，再以5℃/min升温至240℃，保留10 min；进样口温度250℃；载气为He（99.999%）。质谱条件：电离能70eV，检测电压1510 V；离子源温度230℃，四极杆温度
150℃；扫描速率2.00 scans/s，质量扫描范围m/z 20～350。GC-MS得到挥发性风味物质总离子流图，手动积分计算与数据库标准物质相似度80%以上风味物质的峰面积，风味物质峰面积与总峰面积的比值为该物质的相对含量。
（2）结果
得到4-乙烯基愈创木酚（tr=59.254min）含量最高，香气成分种类最丰富的菌株L9-1，其香气成分GC-MS分析结果如附图2所示。
4、酵母分离平板培养
挑取L9-1单菌落接种于酵母分离平板（5% 麦芽浸粉，1% 酵母抽提物，18%氯化钠，2% 琼脂粉，pH 5~6），30℃培养48d，观察期菌落形态。挑取平板单菌落于光学显微镜观察期菌体形态，结果如附图3所示。
五、酵母耐盐性能分析
挑取L9-1单菌落接种于麦芽汁培养基30℃，200 r/min 震荡培养48h ，得到L9-1种子培养液。将种子培养液按5% 分别接种至含0%，5%，10%，14%，16%，18% 氯化钠的麦芽汁培养基中，于30℃，200 r/min 的条件下震荡培养，按一定时间间隔取培养液在 600 nm 处测定吸光值。
上述麦芽汁培养基包含：5% 麦芽浸粉，1% 酵母抽提物，pH 5~6。
结果如附图4所示，氯化钠浓度对L9-1生长曲线影响显著，在含0%~10%氯化钠的培养基中，L9-1生长速度较快，细胞浓度较高；随着氯化钠浓度的进一步升高，细胞生长受到抑制，细胞浓度相对降低。但是，L9-1 在含18% 氯化钠培养基中依然可以达到较高的细胞浓度，说明L9-1具有一定的耐盐性，可以在高含盐发酵食品（18% 氯化钠）中生长。
六、酵母鉴定
根据细胞形态，生理生化特征和18S ITS rDNA 测序等实验数据综合分析，该菌株被鉴定为Hyphopichia burtonii。该菌株的菌落和菌体形态如附图3所示，其中A为菌落形态照片，B为菌体显微观察照片，生理生化试验结果如上表1所示，菌株的18S ITS rDNA序列如上所示。
七、酵母保藏
菌株于2023年12月1日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏地址为广东省广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，邮政编码：510075，保藏编号为GDMCC No：64100。
实施例2
伯顿丝孢毕赤酵母L9-1 (Hyphopichia burtonii L9-1) 在酱油发酵中的应用。
1、材料与分析方法
（1）培养基
15% 氯化钠的麦芽汁培养基：5% 麦芽浸粉；1% 酵母抽提物，15% 氯化钠，pH 5~6。
（2）酱油或发酵酱常规理化指标检测方法
总酸测定方法参考：GB T 12456-2008食品中总酸的测定；
氨基酸态氮测定方法参考：GB 5009.235-2016 食品安全国家标准食品中氨基酸态氮的测定；
总氮测定方法参考：GB 5009.5-2016 食品安全国家标准食品中蛋白质的测定；
氯化钠测定方法参考：GB T 12457-2008 食品中氯化钠的测定。
（3）感官鉴评方法
由10位在酱油风味鉴评方面具有丰富经验的技术人员，对实施例样品进行盲评。香气方面分别从酸味、酱香、醇香、综合香气4个维度对样品进行评分；口感方面分别从咸味、鲜味、苦味、甜味、酸味、厚味、综合口感7个维度对样品进行评分。
分值为0~10分，分数越高，该项指标越好。结果取各鉴评人员评分的平均数。
（4）4-乙烯基愈创木酚、苯乙醇气相色谱-质谱（GC-MS）测定方法
取5 mL发酵样品，加入30 mL乙醚，萃取3 次；收集上层萃取液真空浓缩，并溶于无水乙醇，根据浓度合理稀释并用GC-MS进行定量分析。GC-MS具体操作方法如下：
气相色谱载气为氦气，流速1.0 mL/min，进样量1.0 μL，分流比10:1；升温程序：40℃保留1 min；以10℃/min升温到210℃，保留0 min；再以10℃/min升温到250℃，保留3min。质谱条件：采用电子电离方式，电离能70 eV，检测器电压1609 V，扫描范围m/z 30～200，扫描速率2.00 scans/s；进样口和离子源温度分别为250℃和230℃。4-乙烯基愈创木酚以m/z 51、77、107、150四个离子为定量离子进行分析，苯乙醇的定量离子为荷质比 (m/z) 91.1和122.0 两个离子。
2、操作方法
（1）制备种子培养液
采用含15% 氯化钠的麦芽汁培养基培养本发明所述的伯顿丝孢毕赤酵母L9-1，培养时间
48 h，培养温度30℃，得到菌体活性高，菌体密度大的种子培养液。
（2）酱油发酵
采用曲池制曲或者圆盘制曲设备制曲，使用原料为大豆和小麦粉。
曲料加入盐水发酵15d后，在发酵液复料过程中在线添加3% 伯顿丝孢毕赤酵母L9-1种子培养液；接种伯顿丝孢毕赤酵母L9-1之日起至发酵21d，每周复料2次，每次3h，控制发酵料品温为25~32℃；盐分管理、发酵周期管理按照常规方法进行。
3、结果
发酵完成后，检测酱油常规理化指标，采用GC-MS测定4-乙烯基愈创木酚、苯乙醇浓度，并对酱油风味进行鉴评，结果如表2所示。
表2 伯顿丝孢毕赤酵母L9-1添加酱油发酵实验结果
上述结果表明伯顿丝孢毕赤酵母L9-1应用于酱油发酵，不影响其主要理化指标，可显著提高4-乙烯基愈创木酚和苯乙醇含量，显著改善酱油酱香、豉香和综合香气，对口感咸味有一定遮蔽作用，并可提高酱油口感浓厚度。
实施例3
伯顿丝孢毕赤酵母L9-1在黄豆酱酿造中的应用
1、分析方法和材料
同实施例2。
2、操作方法
（1）制备种子培养液
采用含15% 氯化钠的麦芽汁培养基培养本发明所述的伯顿丝孢毕赤酵母L9-1，培养时间48h，培养温度30℃，得到菌体活性高，菌体密度大的种子培养液。
（2）黄豆酱发酵
采用曲池制曲或者圆盘制曲设备制曲，使用原料为大豆和面粉。
曲料加入盐水发酵10d后，在发酵液复料过程中在线添加3%伯顿丝孢毕赤酵母L9-1种子培养液；接种伯顿丝孢毕赤酵母L9-1之日起至发酵21d，每周复料2次，每次3h，控制发酵料品温为25~32℃；料水比控制、盐分管理、发酵周期管理按照常规方法进行。
3、结果
发酵完成后，检测黄豆酱常规理化指标，采用GC-MS测定4-乙烯基愈创木酚、苯乙醇浓度，并对黄豆酱风味进行鉴评，结果如表3所示。
表3 伯顿丝孢毕赤酵母L9-1添加黄豆酱发酵实验结果
上述结果表明伯顿丝孢毕赤酵母L9-1应用于黄豆酱发酵，对其理化指标影响不显著，可显著提高4-乙烯基愈创木酚、苯乙醇含量，所得黄豆酱胚酱香、醇香浓郁，综合香气改善，口感咸味减弱、厚味增强。
实施例4
伯顿丝孢毕赤酵母L9-1在风味基料制备中的应用。
1、分析方法和材料
同实施例2。
2、操作方法
（1）制备种子培养液
采用含15%氯化钠的麦芽汁培养基培养本发明所述的伯顿丝孢毕赤酵母L9-1，培养时间48h，培养温度30℃，得到菌体活性高，菌体密度大的种子培养液。
（2）制备酱油发酵液
采用曲池制曲或者圆盘制曲设备制曲，使用原料为大豆和小麦粉。曲料加入盐水发酵30 d后，取发酵醪下层液体，3000 rpm离心或者板框压滤或者膜过滤除去较大固体杂质，得到酱油发酵液。
（3）制备风味基料
按照上述酱油发酵液质量加入0.5%阿魏酸和0.5% 苯丙氨酸，再接种5%伯顿丝孢毕赤酵母L9-1种子培养液，于30℃，200 r/min的条件下震荡培养24 h，将转速降为120 r/min，继续培养45d，获得风味基料。
采用GC-MS测定风味基料4-乙烯基愈创木酚、苯乙醇浓度，结果如表4所示。
表4 伯顿丝孢毕赤酵母L9-1应用于风味基料制备实验结果
结果表明伯顿丝孢毕赤酵母L9-1可用于制备高浓度4-乙烯基愈创木酚和高浓度苯乙醇风味基料，可应用于酱油、发酵酱、复合调味料等产品中，以提升其香气。
实施例5
伯顿丝孢毕赤酵母L9-1制备风味基料在酱油、黄豆酱及火锅底料中的应用。
（1）感官鉴评方法
由10位在酱油风味鉴评方面具有丰富经验的技术人员，对实施例样品进行盲评。感官鉴评的评价指标包括酸味、醇香和浓厚感，分值为0~10分，分数越高，该项指标越好。结果取各维度评分的平均数。
（2）伯顿丝孢毕赤酵母L9-1制备风味基料在酱油、黄豆酱及火锅底料中的应用
在酱油、黄豆酱及火锅底料配方中加入实施例4制备的风味基料，在酱油中的应用方法为：按酱油重量份的5%添加风味基料，对应取代配方中5%重量份的水。黄豆酱和火锅基料中风味基料的添加方法与酱油相同，添加比例分别为2.5%，1.5%。配兑完成后以不添加风味基料的酱油、黄豆酱和火锅底料为对照进行感官鉴评，结果如表5所示。
表5风味基料应用感官鉴评
结果表明伯顿丝孢毕赤酵母L9-1制备的风味基料可以显著改善酱油、黄豆酱和火锅底料的酱香、醇香和浓厚感，一定程度改善酸味，对上述调味品的风味品质提升有重要作用。
对比例1
采用公告号为CN109370927B的中国发明专利公布的筛选方法，未筛选到本发明的伯顿丝孢毕赤酵母。
以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。
Claims (7)
1.一株伯顿丝孢毕赤酵母（Hyphopichia burtonii）L9-1，其保藏于广东省微生物菌种保藏中心，地址为广东省广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，保藏编号为GDMCC No：64100，保藏日期为2023年12月1日。
2.权利要求1所述伯顿丝孢毕赤酵母L9-1在食品发酵中的应用，其特征在于，所述食品包括：酱油、黄豆酱；采用伯顿丝孢毕赤酵母L9-1发酵能显著提升所述食品中的物质包括4-乙烯基愈创木酚、乙醇含量。
3.一种发酵菌剂，其特征在于，包含权利要求1所述的伯顿丝孢毕赤酵母L9-1。
4.一种风味基料的发酵方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、制备酱油发酵液：以大豆和小麦为原料制曲，将得到的曲料加入盐水发酵，去除固体杂质，保留发酵醪下层液体，即得酱油发酵液，所述曲料与盐水的混合质量比为1:1.8～4.5，所述盐水质量浓度为14%～24%；
S2、制备风味基料：向酱油发酵液中加入阿魏酸、苯丙氨酸和权利要求1所述的伯顿丝孢毕赤酵母L9-1种子培养液或所述发酵菌剂，阿魏酸、苯丙氨酸的加入量为酱油发酵液质量的0.2%~3.0%，伯顿丝孢毕赤酵母L9-1种子培养液的接种量为酱油发酵液质量的0.5%~10%。
5.一种伯顿丝孢毕赤酵母L9-1种子培养液，其特征在于，通过以下方法制备得到：将权利要求1所述伯顿丝孢毕赤酵母L9-1接种至麦芽汁培养基中进行培养，培养温度为23～33℃，培养时间为20～64h。
6.一种酱醪的发酵方法，其特征在于，包括以下步骤：
1）预发酵：将曲料和盐水混合进行预发酵，得到预发酵液；
2）发酵：向步骤1）预发酵液中加入权利要求1所述伯顿丝孢毕赤酵母L9-1的种子培养液，发酵，即得酱醪；
所述预发酵步骤中，当进行酱油发酵时，所述曲料的原料为大豆和小麦，与盐水的混合质量比为1:1.8～4.5，所述盐水质量浓度为14%～24%，所述预发酵时间为7~14天；当进行豆酱发酵时，所述曲料的原料为大豆和面粉，或者为大豆和小麦粉，所述预发酵时间为10~15天。
7.根据权利要求6所述的发酵方法，其特征在于，所述发酵步骤中，所述伯顿丝孢毕赤酵母L9-1种子培养液的加入量为预发酵液质量的1%~5%；加入所述伯顿丝孢毕赤酵母L9-1种子液后7~21天内，每周复料1~2次，每次1~2h，控制发酵料品温为24~33℃，所述复料步骤具体为：将下层发酵液抽出均匀淋入上层发酵醪。
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Citations (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102010305A (zh) * | 2010-09-02 | 2011-04-13 | 招远三联化工厂 | 2-甲氧基-4-乙烯基苯酚的制备方法 |
| CN102199163A (zh) * | 2011-04-01 | 2011-09-28 | 中国药科大学 | 2-羟基四氢噻吩并吡啶衍生物及其制备方法与在制药中的用途 |
| CN103255069A (zh) * | 2012-02-20 | 2013-08-21 | 宜宾学院 | 一株产愈创木酚的酵母 |
| CN105432343A (zh) * | 2015-11-11 | 2016-03-30 | 长江大学 | 一种提高银杏类黄酮含量的方法及金雀异黄素的应用 |
| CN106883992A (zh) * | 2015-07-31 | 2017-06-23 | 安徽瑞思威尔科技有限公司 | 一株高产4-乙烯基愈创木酚和乙酸乙酯的异常毕氏酵母菌及其应用 |
| CN107488591A (zh) * | 2017-01-13 | 2017-12-19 | 龙牌食品股份有限公司 | 一种高酶活、高耐盐的酱油菌株的选育方法及其应用方法 |
| CN109295017A (zh) * | 2018-07-24 | 2019-02-01 | 安徽大学 | 一种真菌漆酶突变体pie5及其表达菌株和应用 |
| CN109749945A (zh) * | 2019-02-03 | 2019-05-14 | 冯磊 | 一株丝孢毕赤氏酵母及其应用 |
| KR20220046931A (ko) * | 2020-10-08 | 2022-04-15 | 강원대학교산학협력단 | 염 내성이 우수하고 간장 발효시 향미 성분 함량을 증가시키는 자이고사카로마이세스 룩시 mby2174 균주 및 이의 용도 |
| KR20220048717A (ko) * | 2020-10-13 | 2022-04-20 | 샘표식품 주식회사 | 4-비닐구아야콜 생성능이 우수한 데바리오마이세스 균주를 포함하는 천연향미 조성물 |
| JP2022084483A (ja) * | 2020-11-26 | 2022-06-07 | 月桂冠株式会社 | ４－ビニルグアヤコール低生産酵母株の製造方法 |
| WO2023028616A1 (en) * | 2021-08-27 | 2023-03-02 | Compound Foods Inc. | Alternative coffee beverages |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106754438B (zh) * | 2016-11-30 | 2019-11-22 | 贵州大学 | 一种伯顿丝孢毕赤酵母及其用途 |
-
2024
- 2024-01-26 CN CN202410111951.XA patent/CN117625422B/zh active Active
Patent Citations (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102010305A (zh) * | 2010-09-02 | 2011-04-13 | 招远三联化工厂 | 2-甲氧基-4-乙烯基苯酚的制备方法 |
| CN102199163A (zh) * | 2011-04-01 | 2011-09-28 | 中国药科大学 | 2-羟基四氢噻吩并吡啶衍生物及其制备方法与在制药中的用途 |
| CN103255069A (zh) * | 2012-02-20 | 2013-08-21 | 宜宾学院 | 一株产愈创木酚的酵母 |
| CN106883992A (zh) * | 2015-07-31 | 2017-06-23 | 安徽瑞思威尔科技有限公司 | 一株高产4-乙烯基愈创木酚和乙酸乙酯的异常毕氏酵母菌及其应用 |
| CN105432343A (zh) * | 2015-11-11 | 2016-03-30 | 长江大学 | 一种提高银杏类黄酮含量的方法及金雀异黄素的应用 |
| CN107488591A (zh) * | 2017-01-13 | 2017-12-19 | 龙牌食品股份有限公司 | 一种高酶活、高耐盐的酱油菌株的选育方法及其应用方法 |
| CN109295017A (zh) * | 2018-07-24 | 2019-02-01 | 安徽大学 | 一种真菌漆酶突变体pie5及其表达菌株和应用 |
| CN109749945A (zh) * | 2019-02-03 | 2019-05-14 | 冯磊 | 一株丝孢毕赤氏酵母及其应用 |
| KR20220046931A (ko) * | 2020-10-08 | 2022-04-15 | 강원대학교산학협력단 | 염 내성이 우수하고 간장 발효시 향미 성분 함량을 증가시키는 자이고사카로마이세스 룩시 mby2174 균주 및 이의 용도 |
| KR20220048717A (ko) * | 2020-10-13 | 2022-04-20 | 샘표식품 주식회사 | 4-비닐구아야콜 생성능이 우수한 데바리오마이세스 균주를 포함하는 천연향미 조성물 |
| JP2022084483A (ja) * | 2020-11-26 | 2022-06-07 | 月桂冠株式会社 | ４－ビニルグアヤコール低生産酵母株の製造方法 |
| WO2023028616A1 (en) * | 2021-08-27 | 2023-03-02 | Compound Foods Inc. | Alternative coffee beverages |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 产4-乙基愈创木酚酵母的鉴定及其在酱油中的应用;邹谋勇等;《食品科学》;20210630;第42卷(第12期);138-144 * |
| 鲁氏酵母和球拟酵母不同接种方式对高盐稀态酿造酱油品质的影响;郭建等;《中国调味品》;20190410;第44卷(第2期);100-104 * |
Also Published As
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