CN117599095B - 一种白耙齿菌的应用 - Google Patents
一种白耙齿菌的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN117599095B CN117599095B CN202410074855.2A CN202410074855A CN117599095B CN 117599095 B CN117599095 B CN 117599095B CN 202410074855 A CN202410074855 A CN 202410074855A CN 117599095 B CN117599095 B CN 117599095B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- white
- harrow
- bacteria
- culture
- group
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 title claims abstract description 111
- 201000000596 systemic lupus erythematosus Diseases 0.000 claims abstract description 29
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 18
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims abstract description 10
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 10
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 69
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 25
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims description 22
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims description 22
- 239000000287 crude extract Substances 0.000 claims description 21
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 21
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 20
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 17
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 17
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 17
- 241000233866 Fungi Species 0.000 claims description 14
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 claims description 12
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 10
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 10
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 10
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 10
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 claims description 10
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 10
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 claims description 10
- 239000013049 sediment Substances 0.000 claims description 10
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 9
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 8
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims description 7
- 235000010627 Phaseolus vulgaris Nutrition 0.000 claims description 6
- 244000046052 Phaseolus vulgaris Species 0.000 claims description 6
- 235000015099 wheat brans Nutrition 0.000 claims description 6
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 5
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 claims description 5
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 claims description 5
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 claims description 5
- 230000004913 activation Effects 0.000 claims description 5
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 claims description 5
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 claims description 5
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 claims description 5
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M potassium dihydrogen phosphate Chemical compound [K+].OP(O)([O-])=O GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 5
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K potassium phosphate Substances [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 5
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 5
- 239000008107 starch Substances 0.000 claims description 5
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 claims description 5
- JZRWCGZRTZMZEH-UHFFFAOYSA-N thiamine Chemical compound CC1=C(CCO)SC=[N+]1CC1=CN=C(C)N=C1N JZRWCGZRTZMZEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 238000009423 ventilation Methods 0.000 claims description 5
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 claims description 5
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 claims description 4
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims description 4
- 238000012807 shake-flask culturing Methods 0.000 claims description 4
- 238000012546 transfer Methods 0.000 claims description 4
- 238000000643 oven drying Methods 0.000 claims description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 52
- 238000011160 research Methods 0.000 abstract description 12
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 abstract description 4
- 238000012827 research and development Methods 0.000 abstract description 4
- 244000005700 microbiome Species 0.000 abstract description 3
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 47
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 39
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 33
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 29
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 20
- 206010025135 lupus erythematosus Diseases 0.000 description 18
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 15
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 15
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 13
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 11
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 10
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 10
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 8
- 210000005084 renal tissue Anatomy 0.000 description 8
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 7
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 6
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 6
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 6
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- 206010015150 Erythema Diseases 0.000 description 5
- 230000006472 autoimmune response Effects 0.000 description 5
- 231100000321 erythema Toxicity 0.000 description 5
- 238000010166 immunofluorescence Methods 0.000 description 5
- XOJVVFBFDXDTEG-UHFFFAOYSA-N pristane Chemical compound CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C XOJVVFBFDXDTEG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 5
- 239000003124 biologic agent Substances 0.000 description 4
- 230000006870 function Effects 0.000 description 4
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- HAVJATCHLFRDHY-UHFFFAOYSA-N Harringtonine Natural products C1=C2CCN3CCCC43C=C(OC)C(OC(=O)C(O)(CCC(C)(C)O)CC(=O)OC)C4C2=CC2=C1OCO2 HAVJATCHLFRDHY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000005777 Lupus Nephritis Diseases 0.000 description 3
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 3
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 3
- 239000003430 antimalarial agent Substances 0.000 description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 239000003862 glucocorticoid Substances 0.000 description 3
- HAVJATCHLFRDHY-JZTSUELASA-N harringtonine Chemical compound C1=C2CCN3CCC[C@]43C=C(OC)[C@@H](OC(=O)[C@](O)(CCC(C)(C)O)CC(=O)OC)[C@@H]4C2=CC2=C1OCO2 HAVJATCHLFRDHY-JZTSUELASA-N 0.000 description 3
- HYFHYPWGAURHIV-UHFFFAOYSA-N homoharringtonine Natural products C1=C2CCN3CCCC43C=C(OC)C(OC(=O)C(O)(CCCC(C)(C)O)CC(=O)OC)C4C2=CC2=C1OCO2 HYFHYPWGAURHIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229960003444 immunosuppressant agent Drugs 0.000 description 3
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 description 3
- 229940021182 non-steroidal anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 3
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 3
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 3
- 229940037128 systemic glucocorticoids Drugs 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- GOZMBJCYMQQACI-UHFFFAOYSA-N 6,7-dimethyl-3-[[methyl-[2-[methyl-[[1-[3-(trifluoromethyl)phenyl]indol-3-yl]methyl]amino]ethyl]amino]methyl]chromen-4-one;dihydrochloride Chemical compound Cl.Cl.C=1OC2=CC(C)=C(C)C=C2C(=O)C=1CN(C)CCN(C)CC(C1=CC=CC=C11)=CN1C1=CC=CC(C(F)(F)F)=C1 GOZMBJCYMQQACI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 2
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 2
- 230000003907 kidney function Effects 0.000 description 2
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 2
- 230000003908 liver function Effects 0.000 description 2
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 238000000465 moulding Methods 0.000 description 2
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 2
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 2
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- WHTVZRBIWZFKQO-AWEZNQCLSA-N (S)-chloroquine Chemical compound ClC1=CC=C2C(N[C@@H](C)CCCN(CC)CC)=CC=NC2=C1 WHTVZRBIWZFKQO-AWEZNQCLSA-N 0.000 description 1
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010001580 Albuminuria Diseases 0.000 description 1
- 208000006820 Arthralgia Diseases 0.000 description 1
- BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N Aspirin Chemical compound CC(=O)OC1=CC=CC=C1C(O)=O BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010003671 Atrioventricular Block Diseases 0.000 description 1
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 1
- 238000009631 Broth culture Methods 0.000 description 1
- CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N Cyclophosphamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)NCCCO1 CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 208000010271 Heart Block Diseases 0.000 description 1
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 1
- HEFNNWSXXWATRW-UHFFFAOYSA-N Ibuprofen Chemical compound CC(C)CC1=CC=C(C(C)C(O)=O)C=C1 HEFNNWSXXWATRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 241000222344 Irpex lacteus Species 0.000 description 1
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 1
- 108700018351 Major Histocompatibility Complex Proteins 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 description 1
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 1
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 1
- 206010037211 Psychomotor hyperactivity Diseases 0.000 description 1
- 206010057430 Retinal injury Diseases 0.000 description 1
- 206010041660 Splenomegaly Diseases 0.000 description 1
- 208000025865 Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 206010000059 abdominal discomfort Diseases 0.000 description 1
- 229960001138 acetylsalicylic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 208000038016 acute inflammation Diseases 0.000 description 1
- 230000006022 acute inflammation Effects 0.000 description 1
- 229960002964 adalimumab Drugs 0.000 description 1
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000002924 anti-infective effect Effects 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 230000002917 arthritic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 1
- 230000005784 autoimmunity Effects 0.000 description 1
- NCNRHFGMJRPRSK-MDZDMXLPSA-N belinostat Chemical compound ONC(=O)\C=C\C1=CC=CC(S(=O)(=O)NC=2C=CC=CC=2)=C1 NCNRHFGMJRPRSK-MDZDMXLPSA-N 0.000 description 1
- 229960003094 belinostat Drugs 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 208000034158 bleeding Diseases 0.000 description 1
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 210000005252 bulbus oculi Anatomy 0.000 description 1
- 230000007969 cellular immunity Effects 0.000 description 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 229960003677 chloroquine Drugs 0.000 description 1
- WHTVZRBIWZFKQO-UHFFFAOYSA-N chloroquine Natural products ClC1=CC=C2C(NC(C)CCCN(CC)CC)=CC=NC2=C1 WHTVZRBIWZFKQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000037976 chronic inflammation Diseases 0.000 description 1
- 230000006020 chronic inflammation Effects 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 230000004154 complement system Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000012136 culture method Methods 0.000 description 1
- 229960004397 cyclophosphamide Drugs 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 229940011871 estrogen Drugs 0.000 description 1
- 239000000262 estrogen Substances 0.000 description 1
- 238000011066 ex-situ storage Methods 0.000 description 1
- 230000003090 exacerbative effect Effects 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004727 humoral immunity Effects 0.000 description 1
- XXSMGPRMXLTPCZ-UHFFFAOYSA-N hydroxychloroquine Chemical compound ClC1=CC=C2C(NC(C)CCCN(CCO)CC)=CC=NC2=C1 XXSMGPRMXLTPCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004171 hydroxychloroquine Drugs 0.000 description 1
- 230000003463 hyperproliferative effect Effects 0.000 description 1
- 229960001680 ibuprofen Drugs 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 238000003125 immunofluorescent labeling Methods 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 230000002262 irrigation Effects 0.000 description 1
- 238000003973 irrigation Methods 0.000 description 1
- 210000001503 joint Anatomy 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 1
- 238000009115 maintenance therapy Methods 0.000 description 1
- 238000000691 measurement method Methods 0.000 description 1
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 description 1
- 238000009629 microbiological culture Methods 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 1
- 201000008383 nephritis Diseases 0.000 description 1
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 1
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 1
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 229960004618 prednisone Drugs 0.000 description 1
- XOFYZVNMUHMLCC-ZPOLXVRWSA-N prednisone Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3C(=O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 XOFYZVNMUHMLCC-ZPOLXVRWSA-N 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 238000007789 sealing Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000003393 splenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 230000020382 suppression by virus of host antigen processing and presentation of peptide antigen via MHC class I Effects 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 210000004926 tubular epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000036269 ulceration Effects 0.000 description 1
- 230000002485 urinary effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/06—Fungi, e.g. yeasts
- A61K36/07—Basidiomycota, e.g. Cryptococcus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/645—Fungi ; Processes using fungi
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Mycology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Immunology (AREA)
- Botany (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Virology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
一种白耙齿菌的应用，它涉及微生物领域，本发明的白耙齿菌是在制备治疗系统性红斑狼疮的药物中的应用。本发明探究白耙齿菌的药理活性，并且旨在发掘其在药物应用方面的潜力，同时为白耙齿菌的活性研究提供了新的研究方向。研究结果表明，白耙齿菌在治疗系统性红斑狼疮方面具有显著的应用价值，为进一步深入研究和开发白耙齿菌提供了理论依据，有望基于此开发出新的改善或治疗系统性系统性红斑狼疮的产品。
Description
技术领域
本发明属于微生物领域，具体涉及一种白耙齿菌的应用。
背景技术
系统性红斑狼疮，(Systemic Lupus Erythematosus，SLE)是一种涉及许多系统和脏器的自身免疫性疾病，在遗传因素、环境因素、雌激素水平等各种因素相互作用下，导致T淋巴细胞减少、抑制巨噬细胞功能降低、B细胞过度增生，产生大量的自身抗体，并与体内相应的自身抗原结合形成相应的免疫复合物，沉积在皮肤、关节、小血管、肾小球等部位，在补体的参与下，引起急慢性炎症及组织坏死(如狼疮肾炎)。可累及皮肤、浆膜、关节、肾及中枢神经系统等，并以自身免疫为特征，患者体内存在多种自身抗体，不仅影响体液免疫，亦影响细胞免疫，补体系统亦有变化。
目前治疗系统性红斑狼疮有以下几类药物：
1非甾体抗炎药(NSAIDs):如布洛芬、阿司匹林等，用于缓解关节疼痛和发热等症状。这些药物通过抑制炎症介质的合成和释放来减轻疼痛和发热等症状。长期使用NSAIDs可能会导致胃肠道不适、溃疡和出血等副作用。
2糖皮质激素(如泼尼松):用于控制炎症反应和免疫系统的过度活跃。糖皮质激素可以抑制免疫细胞的活动，减轻自身免疫反应。长期使用糖皮质激素可能会导致骨质疏松、高血压、糖尿病等副作用。
3免疫抑制剂(如环磷酰胺、甲氨蝶呤等):用于抑制免疫系统的活动，减轻自身免疫反应。免疫抑制剂可以影响T细胞、B细胞和巨噬细胞等免疫细胞的功能，从而减轻自身免疫反应。免疫抑制剂可能会增加感染的风险，并对肝肾功能产生影响。
4抗疟药(如羟氯喹、氯喹等):用于控制皮肤病变和关节炎等症状。抗疟药可以调节免疫系统的功能，减轻自身免疫反应。长期使用抗疟药可能会导致视网膜损伤、心脏传导阻滞等副作用。
5生物制剂(如贝利司他、阿达木单抗等):用于调节免疫系统的功能，减轻自身免疫反应。生物制剂可以针对特定的免疫分子或细胞进行靶向治疗，从而减轻自身免疫反应。但是，生物制剂可能会增加感染的风险，并对肝肾功能产生影响。此外，生物制剂的价格较高，且需要长期维持治疗。
白耙齿菌作为一种食药用菌，既可以作为药物使用，也可以作为食品食用，经过长期服用，副作用较小，安全性较高。而且白耙齿菌有稳定的发酵工艺，生产过程对环境的影响较小，不会对土壤、水源等造成污染，是一种环保可持续的生产方式，发酵产物通常具有较高的纯度和稳定性，药效稳定。相较于化学合成药物，白耙齿菌发酵产物的成本较低。白耙齿菌作为药物的研究和开发还处于起步阶段，因此还需进一步深入研究其药理作用和临床应用价值。目前，并没有白耙齿菌治疗系统性红斑狼疮的报道。
发明内容
本发明的目的是为了提供一种可以治疗系统性红斑狼疮的白耙齿菌及其提取物。
本发明的一种白耙齿菌的应用，所述的白耙齿菌在制备治疗系统性红斑狼疮的药物中的应用。
进一步地，所述的白耙齿菌是制备成白耙齿菌提取物，并用于制备治疗系统性红斑狼疮的药物，所述的提取物为粗提物或醇沉物。
进一步地，所述的白耙齿菌制备成白耙齿菌粗提取物，所述的白耙齿菌粗提物的制备方法如下：
1)将白耙齿菌活化后，将活化的白耙齿菌菌液接入到发酵罐中，在温度为25～30℃、转速为150～250r/min、通气量为1～3L/min的条件下培养；其中，发酵培养的培养基按照质量百分含量计含有1～2％的淀粉、1～2％的葡萄糖、2～4％的麦麸、3～5％的豆饼、0.5～1.5％的蛋白胨、0.1～0.3％的磷酸二氢钾、0.1～0.2％的硫酸镁和0.1～0.3％的氯化钙；
2)将发酵后的菌丝滤过，加水提取，合并菌丝提取液和发酵液，浓缩，烘成干膏，得到白耙齿菌粗提物。
进一步地，步骤1)中所述的白耙齿菌活化是将白耙齿菌斜面菌种室温活化后，在无菌条件下转接到液体摇瓶培养基内，置于恒温振荡培养箱中，在温度为25～30℃、转速为150～200r/min的条件下震荡培养4～6天，得到液体培养菌种；液体培养菌种传代培养1～2次，每次培养3～4天，得到活化后的液体培养菌种。
进一步地，所述的摇瓶培养基是由质量百分含量为2～4％的葡萄糖溶液、1～3％酵母膏、0.1～0.3％磷酸二氢钾、0.1～0.2％硫酸镁和10mg维生素B1，上述组分按照等质量比加入到1000mL蒸馏水溶解得到摇瓶培养基。
进一步地，步骤2)中所述的加水提取是按照质量体积比为1mg：0.01～0.03mL的比例将菌丝与水混合后，进行2次提取，每次提取1h，将两次提取的提取液合并。
进一步地，所述的白耙齿菌制备成白耙齿菌粗醇沉物，所述的白耙齿菌醇沉物的制备方法如下：
1)将白耙齿菌活化后，将活化的白耙齿菌菌液接入到发酵罐中，在温度为25～30℃、转速为150～250r/min、通气量为1～3L/min的条件下培养；其中，发酵培养的培养基按照质量百分含量计含有1～2％的淀粉、1～2％的葡萄糖、2～4％的麦麸、3～5％的豆饼、0.5～1.5％的蛋白胨、0.1～0.3％的磷酸二氢钾、0.1～0.2％的硫酸镁和0.1～0.3％的氯化钙；
2)将发酵后的菌丝滤过，加水煎煮，得菌丝提取液；合并菌丝提取液和发酵液，浓缩，放冷后加入乙醇至混合液中乙醇浓度为70～80％，在4℃环境下静置48小时，抽滤，收集下层沉淀挥干，即得白耙齿菌醇沉物。
进一步地，步骤1)中所述的白耙齿菌活化是将白耙齿菌斜面菌种室温活化后，在无菌条件下转接到液体摇瓶培养基内，置于恒温振荡培养箱中，在温度为25～30℃、转速为150～200r/min的条件下震荡培养4～6天，得到液体培养菌种；传代培养1～2次，每次培养3～4天，得到活化后的液体培养菌种。
进一步地，所述的摇瓶培养基是由质量百分含量为2～4％的葡萄糖溶液、1～3％酵母膏、0.1～0.3％磷酸二氢钾、0.1～0.2％硫酸镁和10mg维生素B1，上述组分按照等质量比加入到1000mL蒸馏水溶解得到摇瓶培养基。
进一步地，步骤2)中所述的加水煎煮提取，提取2次，每次1小时，合并提取液。
本发明包含以下有益效果：
本发明发现白耙齿菌提取物具有治疗系统性系统性红斑狼疮的能力。白耙齿菌粗提物和醇沉物均具有较好的治疗效果，而醇沉白耙齿菌的疗效优于粗提白耙齿菌，对于治疗系统性系统性红斑狼疮具有更好的效果，能够促进免疫系统恢复到正常水平。通过免疫荧光检查发现，粗提白耙齿菌和醇沉白耙齿菌均可以改善脾脏和肾脏中IgG的沉积，而醇沉白耙齿菌的效果更佳。
本发明探究白耙齿菌的药理活性，并且发掘其在药物应用方面的潜力，同时为白耙齿菌的活性研究提供了新的研究方向。本发明研究结果表明，白耙齿菌在治疗系统性系统性红斑狼疮方面具有显著的应用价值，为进一步深入研究和开发白耙齿菌提供了理论依据，有望基于此开发出新的改善或治疗系统性系统性红斑狼疮的产品。
附图说明
图1为脾脏的对照IgG沉积图；
图2为脾脏模型IgG沉积图；
图3为脾脏狼疮丸IgG沉积图；
图4为脾脏醇高IgG沉积图；
图5为脾脏醇中IgG沉积图；
图6为脾脏醇低IgG沉积图；
图7为脾脏粗高IgG沉积图；
图8为脾脏粗中IgG沉积图；
图9为脾脏粗低IgG沉积图；
图10为脾脏IgG荧光强度图；其中，*表示与空白组相比显著性差异；*表示P＜0.05，**表示P＜0.01；#表示与模型组相比显著性差异；#表示P＜0.05，##表示P＜0.01；
图11为脾脏形态图；
图12为肾脏对照IgG沉积图；
图13为肾脏模型IgG沉积图；
图14为肾脏狼疮丸IgG沉积图；
图15为肾脏醇高IgG沉积图；
图16为肾脏醇中IgG沉积图；
图17为肾脏醇低IgG沉积图；
图18为肾脏粗高IgG沉积图；
图19为肾脏粗中IgG沉积图；
图20为肾脏粗低IgG沉积图；
图21为肾脏IgG荧光强度图；其中，*表示与空白组相比显著性差异；*表示P＜0.05，**表示P＜0.01；#表示与模型组相比显著性差异；#表示P＜0.05，##表示P＜0.01；
图22为小鼠皮肤形态图；
图23为肾脏切片染色图。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚明白，下面将详细叙述本发明所揭示内容的精神，任何所属技术领域技术人员在了解本发明内容的实施例后，当可由本发明内容所教示的技术，加以改变及修饰，其并不脱离本发明内容的精神与范围。
本发明的示意性实施例及其说明用于解释本发明，但并不作为对本发明的限定。
实施一、白耙齿菌提取物治疗系统性红斑狼疮的研究
一、白耙齿菌提取物的制备
供试菌株：白耙齿菌菌株本发明所述白耙齿菌Irpex lacteus(Fr.)，该菌种保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号是：CGMCC No.1016。
本实施例所采用的白耙齿菌仅是本发明选择的其中一株菌的实例，现有白耙齿菌同样适用于本发明的方案。
二、菌丝培养方法
白耙齿菌一级菌种制备：
1.1.按照以下方法制作摇瓶培养基：葡萄糖3％，酵母膏2％，磷酸二氢钾0.2％，0.15％硫酸镁，维生素B110mg，等比例加入1000mL蒸馏水溶解。将配好的培养基分装、封膜、121℃高压灭菌30分钟，待用。
1.2.将白耙齿菌斜面菌种置于室温活化4小时，在无菌条件下转接到液体摇瓶培养基内，置于恒温振荡培养箱中，28℃，180r·min-1震荡培养5天，得到液体培养菌种。传代培养1-2次，每次培养3-4天，得到稳定的液体培养菌种用于后续实验。
1.3.5L发酵罐培养基条件：淀粉1.5％、葡萄糖1.5％、麦麸3％、豆饼3-5％、蛋白胨1％、磷酸二氢钾0.2％、硫酸镁0.15％、氯化钙0.2％，最适温度28℃，最佳转速为200r/min，通气量2.0L/min。其中麦麸与豆饼加入等比例水，需要煮沸约15分钟，再将液体过滤到5L发酵罐培养基体系中。将发酵罐121℃高压灭菌60分钟，放置于三联离位灭菌磁力搅拌机上，安装冷却系统，待其至28℃时，将液体培养菌种接入。
1.4.将完成发酵的5L发酵罐取下，将菌丝滤过，菌丝加一定量体积的水提取，提取2次，每次1小时，合并菌丝提取液和发酵液，浓缩，烘成干膏，得到白耙齿菌粗提物。
1.5.将完成发酵的5L发酵罐取下，将菌丝滤过，将菌丝加一定量体积的水煎煮，提取2次，每次1小时，合并菌丝提取液和发酵液，浓缩，放冷后加入一定量乙醇至浓度为75％左右，4℃静置48小时，抽滤，收集下层沉淀挥干，即得白耙齿菌醇沉物。
实施二、系统性系统性红斑狼疮小鼠模型的建立
2.1.分组设置
筛选出90只SPF级(体重为18-20g)6-8周龄BALB/c雌性小鼠SPF(购买自辽宁长生生物技术股份有限公司)环境下适应性饲养7天后，随机分为9组，其中的一组10只为空白组，剩余随机分为模型组、狼疮丸组(阳性药组)(狼疮丸购买自长春海外制药集团有限公司灌胃给药)、高剂量粗提白耙齿菌组、中剂量粗提白耙齿菌组、低剂量粗提白耙齿菌组、高剂量醇沉白耙齿菌组、中剂量醇沉白耙齿菌组、低剂量醇沉白耙齿菌组，每组10只。
2.2.造模方式
除空白组外，其余各组小鼠给予一次性腹腔注射0.5mL降植烷，空白组一次性腹腔注射0.5mL生理盐水。
2.3给药方法
造模24h小时后开始给药，8组实验小鼠根据体重0.2mL/10g灌胃体积来灌胃蒸馏水或干预药物。其中，模型组小鼠灌胃蒸馏水，狼疮丸组给药剂量828mg/kg，给药方式：灌胃给药，低剂量组按照0.5g/kg(药材/小鼠体重)灌胃白耙齿菌粗提物、白耙齿菌醇沉物；中剂量组小鼠按照1g/kg(药材/小鼠体重)灌胃白耙齿菌粗提物、白耙齿菌醇沉物；高剂量组小鼠按照2g/kg(药材/小鼠体重)灌胃白耙齿菌粗提物、白耙齿菌醇沉物。连续给药24周。(剂量选择依据，在正式试验前，进行预实验来确定白耙齿菌粗提物，白耙齿菌醇沉物的最高使用剂量，该剂量不能产生明显毒性、不影响小鼠生理活动，之后进而确定中剂量、低剂量。)
2.4监测实验动物生理体征
整体实验周期6个月。腹腔注射降植烷后的1、2、3、4、5个月眼眶静脉丛采取小鼠外周血，第6个月使用眼球取血并给予脱颈至死。4周记录1次尿蛋白，4周检测ELISA相关指标。抗ds-DNA抗体、抗ANA抗体、IL-6、TNF-α每月测定一次，共测定6次。IgG抗体在处死小鼠后测定1次。
2.5取样
实验结束后，处理小鼠，收集血液，取脾、肾器官，其中一部分由组织固定液(4％多聚甲醛)进行组织固定，用于后期组织包埋切片，免疫荧光染色，剩余部分存放于-80℃冰箱中，用于后续进一步实验。
实施三、数据及结果分析
3.1小鼠尿蛋白测量方式及结果
在小鼠注射前及注射后每月1次采用尿蛋白试纸测定小鼠尿蛋白，根据试纸反应区显色程度判断尿蛋白含量(g/L)：(-)：0；(±)：0.15～0.30；(+)：0.30～1.00；(++)：1.00～3.00；(+++)：3.00～5.00；(++++)：≥5.00。
如表1所示，对照组尿蛋白量≤±，不随时间改变而增加。模型组注射降植烷后1个月开始出现蛋白尿，多为+或++，治疗组多为±或+。随时间推移，到第4个月时，治疗组尿蛋白含量为0.15～1g/L，模型组小鼠尿蛋白含量为1～3g/L，在6个月实验周期中含量最高。模型组与对照组尿蛋白出现率和检验比较具有显著性差异(P＜0.05)，治疗组与模型组尿蛋白出现率也具有显著性差异(P＜0.05)。在粗提白耙齿菌组别中，中剂量效果最优，在醇沉白耙齿菌组别中，中剂量效果最优，醇沉白耙齿菌整体效果要优于粗提白耙齿菌。醇沉白耙齿菌组效果接近于狼疮丸组。
表1小鼠尿蛋白跟踪监测数据
3.2抗ds-DNA抗体结果
由表2可知，与正常对照组相比，模型组小鼠抗ds-DNA抗体浓度显著高于对照组(P＜0.01)。与模型组比较，狼疮丸组可显著降低小鼠抗ds-DNA浓度(P＜0.05、0.01)。在醇沉白耙齿菌组别中，醇沉中剂量效果较优，可显著降低小鼠抗ds-DNA浓度(P＜0.01)。在粗提白耙齿菌中，粗提中剂量效果较优，可显著降低小鼠抗ds-DNA浓度(P＜0.05、0.01)。醇沉白耙齿菌效果要优于粗提白耙齿菌。在6个月实验周期中，小鼠抗ds-DNA抗体变化无明显规律。
表2抗ds-DNA抗体浓度(ng·L-1)
注：与对照组比较，*P<0.05，**P<0.01。与模型组相比，#P<0.05，##P<0.01。
3.3抗ANA抗体结果
由表3可知，对于抗ANA抗体，与正常对照组相比，模型组小鼠抗ANA抗体浓度显著高于对照组(P＜0.05、0.01)。与模型组比较，狼疮丸组可显著降低小鼠抗ANA浓度(P＜0.05、0.01)。在醇沉白耙齿菌组别中，醇沉中剂量效果较优，可显著降低小鼠抗ANA浓度(P＜0.05、P＜0.01)。在粗提白耙齿菌中，粗提中剂量效果较优，可显著降低小鼠抗ANA浓度(P＜0.05、0.01)。醇沉白耙齿菌效果要优于粗提白耙齿菌。在6个月实验周期内，小鼠抗ANA抗体浓度变化无明显规律。
表3抗ANA抗体浓度(ng·L-1)
注：与对照组比较，*P<0.05，**P<0.01。与模型组相比，#P<0.05，##P<0.01。
3.4TNF-α结果
由表4可知，与正常对照组相比，模型组小鼠TNF-α浓度显著高于对照组(P＜0.01)。与模型组比较，狼疮丸组可显著降低小鼠TNF-α浓度(P＜0.05、0.01)。在醇沉白耙齿菌组别中，醇沉中剂量效果较优，可显著降低小鼠TNF-α浓度(P＜0.05、P＜0.01)。在粗提白耙齿菌中，粗提中剂量效果较优，可显著降低小鼠TNF-α浓度(P＜0.05、0.01)。醇沉白耙齿菌效果要优于粗提白耙齿菌。
表4TNF-α浓度(ng·L-1)
注：与对照组比较，*P<0.05，**P<0.01。与模型组相比，#P<0.05，##P<0.01。
3.5IL-6结果
由表5可知，对于IL-6，与正常对照组相比，模型组小鼠IL-6浓度显著高于对照组(P＜0.05、P＜0.01)。与模型组比较，狼疮丸组可显著降低小鼠IL-6浓度(P＜0.05、0.01)。在醇沉白耙齿菌组别中，醇沉中剂量效果较优，可显著降低小鼠IL-6浓度(P＜0.05、P＜0.01)。在粗提白耙齿菌中，粗提中剂量效果较优，可显著降低小鼠IL-6浓度(P＜0.05、0.01)。醇沉白耙齿菌效果要优于粗提白耙齿菌。
表5IL-6浓度(ng·L-1)
注：与对照组比较，*P<0.05，**P<0.01。与模型组相比，#P<0.05，##P<0.01。
3.6IgG结果
由表6可知，对于IgG，与正常对照组相比，模型组小鼠IgG浓度显著高于对照组(P＜0.01)。与模型组比较，狼疮丸组可显著降低小鼠IgG浓度(P＜0.01)。在醇沉白耙齿菌组别中，醇沉中剂量效果较优，可显著降低小鼠IgG浓度(P＜0.01)。在粗提白耙齿菌中，粗提中剂量效果较优，可显著降低小鼠IgG浓度(P＜0.01)。醇沉白耙齿菌效果要优于粗提白耙齿菌。
表6IgG浓度(ng·mL-1)
注：与对照组比较，*P<0.05，**P<0.01。与模型组相比，#P<0.05，##P<0.01。
3.7免疫荧光结果
3.7.1脾脏免疫荧光
如图1至图9以及图10所示，与对照组相比，模型组小鼠脾组织中IgG荧光强度显著增加(P＜0.01)。与模型组相比，狼疮丸组可显著降低小鼠脾组织中的IgG荧光强度(P＜0.01)。在醇沉白耙齿菌组中，中剂量效果较优，可显著降低小鼠脾组织中的IgG荧光强度(P＜0.01)，醇沉高剂量和中剂量也可减少小鼠脾组织中的IgG荧光强度，但效果不如中剂量。在粗提白耙齿菌组中，中剂量效果较优，可显著降低小鼠脾组织中的IgG荧光强度(P＜0.01)，粗提高剂量和中剂量也可减少小鼠脾组织中的IgG荧光强度，但效果不如中剂量。表明白耙齿菌提取物对于降植烷诱导的SLE模型小鼠的脾脏具有一定的保护作用。
3.7.2脾脏形态
如图11所示，图中从左至右依次为对照组、模型组、狼疮丸组、醇沉中剂量组和粗提中剂量组的小鼠的脾脏形态。从图中可以看出，对照组小鼠的脾脏呈鲜红色，形态正常。模型组小鼠可见脾肿大并呈暗红色，狼疮丸组形态接近正常，醇沉中剂量形态接近正常，粗提中剂量脾脏较为肿大，但相较于模型组，有改善作用。综合来看，醇沉中剂量组与粗提中剂量组可有效改善小鼠生存状态，醇沉中剂量效果较优。
3.7.3肾脏免疫荧光
如图12至图20以及图21所示，与对照组相比，模型组小鼠肾组织中IgG荧光强度显著增加(P＜0.01)。与模型组相比，狼疮丸组可显著降低小鼠肾组织中的IgG荧光强度(P＜0.01)。在醇沉白耙齿菌组中，中剂量效果较优，可显著降低小鼠肾组织中的IgG荧光强度(P＜0.01)，醇沉高剂量和中剂量也可减少小鼠肾组织中的IgG荧光强度，但效果不如中剂量。在粗提白耙齿菌组中，中剂量效果较优，可显著降低小鼠肾组织中的IgG荧光强度(P＜0.01)，粗提高剂量和中剂量也可减少小鼠肾组织中的IgG荧光强度，但效果不如中剂量。表明白耙齿菌提取物对于降植烷诱导的SLE模型小鼠的肾脏具有一定的保护作用。
3.7.4肾脏切片
如图23所示，对照组肾脏组织未见明显异常。模型组可见肾小管上皮细胞变性，细胞肿胀，胞质疏松淡染。醇沉中剂量组织未见明显异常，粗提中剂量组织未见明显异常。
3.7.5小鼠生存状态
如图22所示，对照组小鼠皮肤形态正常，模型组小鼠面部出现大面积的红斑，在经过一段时间治疗后，醇沉中剂量与粗提中剂量均可改善小鼠的红斑状况。
结论
为了研究我国的药用真菌，本发明进行了初步的白耙齿菌研究，并发现其提取物具有治疗系统性系统性红斑狼疮的潜力。系统性系统性红斑狼疮常引起肾脏损害，尿蛋白是评估该疾病的重要指标之一。抗ds-DNA抗体和抗ANA抗体的存在可以预示系统性系统性红斑狼疮的病情活跃程度。异常表达的TNF-α和IL-6可能是系统性系统性红斑狼疮的重要致病因素，并且可以促进T淋巴细胞与机体细胞表达的主要组织相容性复合体抗原之间的免疫反应，加剧系统性系统性红斑狼疮的发展。IgG在脾脏和淋巴结中合成，并在血清中含量最高，是机体抗感染免疫过程中的重要成分，与系统性系统性红斑狼疮的病情发展密切相关。在为期6个月的实验中，白耙齿菌的粗提物和醇沉物均显示出促进尿蛋白、抗ds-DNA抗体、抗ANA抗体、TNF-α、IL-6和IgG水平恢复到正常的能力。在粗提物和醇沉物中，中剂量组的治疗效果较好，而醇沉白耙齿菌的疗效优于粗提白耙齿菌，对于治疗系统性系统性红斑狼疮具有更好的效果，能够促进免疫系统恢复到正常水平，治疗效果接近或优于狼疮丸组。通过免疫荧光检查发现，粗提白耙齿菌和醇沉白耙齿菌可以改善脾脏和肾脏中IgG的沉积，而醇沉白耙齿菌的效果更佳。其中，中剂量组的效果较为优越，疗效接近于狼疮丸。系统性红斑狼疮引起脾大、狼疮肾炎、红斑等症状。通过小鼠的脾脏形态和小鼠红斑考察，醇沉中剂量组与粗提中剂量组均可改善小鼠的脾脏形态和红斑状况。进一步通过白耙齿菌对小鼠狼疮肾炎的治疗效果考察，白耙齿菌的醇沉中剂量与粗提中剂量均可对肾脏组织具有显著的治疗效果，而无需辅助的肾炎治疗药物的参与。综上，本发明的白耙齿菌的粗提物和醇沉物能够实现改善或治疗系统性系统性红斑狼疮。
本发明旨在探究白耙齿菌的药理活性，并且旨在发掘其在药物应用方面的潜力，同时为白耙齿菌的活性研究提供了新的研究方向。研究结果表明，白耙齿菌在治疗系统性系统性红斑狼疮方面具有显著的应用价值，为进一步深入研究和开发白耙齿菌提供了理论依据，有望基于此开发出新的改善或治疗系统性系统性红斑狼疮的产品。
Claims (2)
1.一种白耙齿菌的应用，其特征在于所述的白耙齿菌在制备治疗系统性红斑狼疮的药物中的应用；所述的白耙齿菌为白耙齿菌粗提取物；
所述的白耙齿菌粗提物的制备方法如下：
1)将白耙齿菌活化后，将活化的白耙齿菌菌液接入到发酵罐中，在温度为25～30℃、转速为150～250r/min、通气量为1～3L/min的条件下培养；其中，发酵培养的培养基按照质量百分含量计含有1～2％的淀粉、1～2％的葡萄糖、2～4％的麦麸、3～5％的豆饼、0.5～1.5％的蛋白胨、0.1～0.3％的磷酸二氢钾、0.1～0.2％的硫酸镁和0.1～0.3％的氯化钙；
2)将发酵后的菌丝滤过，加水提取，合并菌丝提取液和发酵液，浓缩，烘成干膏，得到白耙齿菌粗提物；
步骤1)中所述的白耙齿菌活化是将白耙齿菌斜面菌种室温活化后，在无菌条件下转接到液体摇瓶培养基内，置于恒温振荡培养箱中，在温度为25～30℃、转速为150～200r/min的条件下震荡培养4～6天，得到液体培养菌种；液体培养菌种传代培养1～2次，每次培养3～4天，得到活化后的液体培养菌种；
步骤2)中所述的加水提取是按照质量体积比为1mg：0.01～0.03mL的比例将菌丝与水混合后，进行2次提取，每次提取1h，将两次提取的提取液合并；
所述的摇瓶培养基是由质量百分含量为2～4％的葡萄糖溶液、1～3％酵母膏、0.1～0.3％磷酸二氢钾、0.1～0.2％硫酸镁和10mg维生素B1，上述组分按照等质量比加入到1000mL蒸馏水溶解得到摇瓶培养基。
2.一种白耙齿菌的应用，其特征在于所述的白耙齿菌在制备治疗系统性红斑狼疮的药物中的应用；所述的白耙齿菌为白耙齿菌醇沉物；
所述的白耙齿菌醇沉物的制备方法如下：
1)将白耙齿菌活化后，将活化的白耙齿菌菌液接入到发酵罐中，在温度为25～30℃、转速为150～250r/min、通气量为1～3L/min的条件下培养；其中，发酵培养的培养基按照质量百分含量计含有1～2％的淀粉、1～2％的葡萄糖、2～4％的麦麸、3～5％的豆饼、0.5～1.5％的蛋白胨、0.1～0.3％的磷酸二氢钾、0.1～0.2％的硫酸镁和0.1～0.3％的氯化钙；
2)将发酵后的菌丝滤过，加水煎煮，得菌丝提取液；合并菌丝提取液和发酵液，浓缩，放冷后加入乙醇至混合液中乙醇浓度为70～80％，在4℃环境下静置48小时，抽滤，收集下层沉淀挥干，即得白耙齿菌醇沉物；
步骤1)中所述的白耙齿菌活化是将白耙齿菌斜面菌种室温活化后，在无菌条件下转接到液体摇瓶培养基内，置于恒温振荡培养箱中，在温度为25～30℃、转速为150～200r/min的条件下震荡培养4～6天，得到液体培养菌种；传代培养1～2次，每次培养3～4天，得到活化后的液体培养菌种；
步骤2)中所述的加水煎煮提取，提取2次，每次1小时，合并提取液；
所述的摇瓶培养基是由质量百分含量为2～4％的葡萄糖溶液、1～3％酵母膏、0.1～0.3％磷酸二氢钾、0.1～0.2％硫酸镁和10mg维生素B1，上述组分按照等质量比加入到1000mL蒸馏水溶解得到摇瓶培养基。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202410074855.2A CN117599095B (zh) | 2024-01-18 | 2024-01-18 | 一种白耙齿菌的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202410074855.2A CN117599095B (zh) | 2024-01-18 | 2024-01-18 | 一种白耙齿菌的应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN117599095A CN117599095A (zh) | 2024-02-27 |
| CN117599095B true CN117599095B (zh) | 2024-04-16 |
Family
ID=89958189
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202410074855.2A Active CN117599095B (zh) | 2024-01-18 | 2024-01-18 | 一种白耙齿菌的应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN117599095B (zh) |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104138396A (zh) * | 2014-07-11 | 2014-11-12 | 吉林大学 | 白囊耙齿菌在制备抗疲劳保健品中的用途 |
| CN112931044A (zh) * | 2021-01-22 | 2021-06-11 | 长春中医药大学 | 白囊耙齿菌的培养基及培养方法 |
-
2024
- 2024-01-18 CN CN202410074855.2A patent/CN117599095B/zh active Active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104138396A (zh) * | 2014-07-11 | 2014-11-12 | 吉林大学 | 白囊耙齿菌在制备抗疲劳保健品中的用途 |
| CN112931044A (zh) * | 2021-01-22 | 2021-06-11 | 长春中医药大学 | 白囊耙齿菌的培养基及培养方法 |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| 白耙齿菌发酵液及其不同组分免疫学活性的研究;李昂;袁文彬;张执刚;白忠秀;杜大军;王淑敏;;药学研究;20180215(02);全文 * |
| 白耙齿菌固体发酵物对庆大霉素所致大鼠急性肾衰竭的改善作用研究;李昂;黄静;刘旭;步洪石;刘馨晨;王淑敏;;中国药房;20180715(13);全文 * |
| 白耙齿菌固体发酵物对高尿酸血症及痛风性关节炎的治疗作用;黄静;李昂;刘宇光;张执刚;白忠秀;杜大军;王淑敏;;西北药学杂志;20180710(04);全文 * |
| 系统性红斑狼疮动物模型及其发病机制研究进展;吴岚;蔡同凯;张立超;姜远英;曹永兵;;药学实践杂志;20181125(第06期);全文 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN117599095A (zh) | 2024-02-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US3928135A (en) | Process for the production of glucose polymers | |
| US5759543A (en) | Application of a cell culture of a fusarium fungus strain producer for medical uses | |
| CN117599095B (zh) | 一种白耙齿菌的应用 | |
| CN116672338B (zh) | 蟛蜞菊内酯在制备治疗系统性红斑狼疮药物中的应用 | |
| CN101647813A (zh) | 一种动物药的仿生酶解产物及其用途 | |
| CN109022309B (zh) | 一种能够产游离脂肪酸的嗜麦芽寡养单胞菌及其应用 | |
| WO2020024594A1 (en) | Preparation method and application of recombinant mutant collagenase | |
| CN1291725C (zh) | 用于治疗宫颈糜烂的红色诺卡氏菌细胞壁骨架制剂及其制法 | |
| US20020114794A1 (en) | Staphylococcus aureus culture and preparation thereof | |
| JPH07284375A (ja) | イザリア型虫草を主成分とする免疫強化食品 | |
| RU2206337C1 (ru) | Лекарственный препарат для лечения мышечных дистоний и способ его получения | |
| CN104873971A (zh) | 一种猪瘟脾淋源活疫苗用稀释液 | |
| CN1517124A (zh) | 具有解热作用的中药组合物及其制备方法和质量控制方法 | |
| CN1283462A (zh) | 黄芪甲苷在制备药物组合物中的应用 | |
| CN101357142B (zh) | 酪酸梭菌在制备防治心脑血管疾病药物组合物中的应用 | |
| CN1331531C (zh) | 一种治疗慢性胃炎的药物 | |
| CN1176674C (zh) | 一种地黄提取物及其制备方法 | |
| CN101711790A (zh) | 一种用于治疗肝癌的野生核桃楸树皮水提取物 | |
| CN100475227C (zh) | 一种抗肿瘤的药物组合物及其制备方法 | |
| CN109745548A (zh) | 一种百日咳毒素在治疗脑梗死中的应用 | |
| JPH10245340A (ja) | 強壮強精組成物 | |
| CN108812051A (zh) | 一种蛹虫草培养方法 | |
| CN1224390C (zh) | 含吡咯并喹啉醌的治疗和预防脂肪肝的药物组合物 | |
| CN1231225C (zh) | 白沙蒿多糖在制备降血脂的药物和保健品中的应用 | |
| FR2485373A1 (fr) | Substance antivirale et procede pour sa fabrication |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |