CN117368391A - 一种漏芦配方颗粒质量检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种漏芦配方颗粒质量检测方法，包括对漏芦配方颗粒进行薄层鉴别、特征图谱构建和β‑蜕皮甾酮含量测定，将配方颗粒含量标准限定为每1g含β‑蜕皮甾酮为3.5～14.4mg，薄层鉴别采用照薄层色谱法进行鉴别，特征图谱构建及β‑蜕皮甾酮含量测定均采用液相色谱法。本发明的漏芦配方颗粒质量检测方法，通过薄层鉴别、特征图谱构建和β‑蜕皮甾酮含量测定的检测来评定漏芦配方颗粒的质量，能够全面反映配方颗粒的内在品质及更好的控制漏芦配方颗粒质量。
Description
技术领域
本发明涉及中药材质量控制技术领域，具体涉及一种漏芦配方颗粒质量检测方法。
背景技术
现代药物需要具有稳定均一、安全和有效的三大特性，对于中成药而言，需要采用多种手段进行检测，保证检测结果的可靠性和稳定性。中药配方颗粒是采用现代科学技术，仿照传统中药汤剂煎煮的方式，将中药饮片经浸提、浓缩、干燥等工艺精制而成的单味中药产品。产品保持了中药饮片的性味与功效，质量稳定，应用于中医临诊处方的调配，适应辨证施治、处方变化的需要，且有不需煎煮，服用方便、吸收快捷、剂量准确、安全清洁、携带便利等优点。单味药材经水提、浓缩、干燥、制粒等工序制得配方颗粒，与传统的药材相比，配方颗粒的形态特征发生明显改变，其产品真伪和质量无法用肉眼观察得到。因此，有必要建立中药配方颗粒质量评价体系，以此全面反映配方颗粒的内在品质。漏芦为菊科漏芦属植物祁州漏芦Rhaponticum uniforum(L.)DC.的干燥根，具有清热解毒，消痈散结，通经下乳，舒筋通脉的功效，主治乳痈肿痛，瘰疬疮毒，乳汁不下，湿痹拘挛。目前，关于漏芦的配方颗粒还未形成一个系统的质量检测方法，仅采用现有的检测手段来检测漏芦配方颗粒是不够全面的，不能反映出漏芦配方颗粒的整体内在质量，无法达到中药配方颗粒质量控制要求。因此，建立一种用于药材质量控制的漏芦配方颗粒质量检测方法十分必要。
发明内容
本发明的目的就是要解决现有技术的不足，提供一种全面反映配方颗粒的内在品质以及更好的控制配方颗粒质量的漏芦配方颗粒质量检测方法。
为达到上述目的，本发明的技术方案是这样实现的：
一种漏芦配方颗粒质量检测方法，包括：
对漏芦配方颗粒进行薄层鉴别、特征图谱构建和β-蜕皮甾酮含量测定，将配方颗粒含量标准限定为每1g含β-蜕皮甾酮为3.5～14.4mg，薄层鉴别采用照薄层色谱法进行鉴别，特征图谱构建及β-蜕皮甾酮含量测定均采用液相色谱法；
采用液相色谱法测定特征图谱包括：以漏芦对照药材制成的溶液作为对照药材参照物溶液a，以原儿茶酸、β-蜕皮甾酮对照品制成的溶液作为对照品参照物溶液a，以漏芦配方颗粒样品制成的溶液作为供试品溶液a，分别精密吸取对照药材参照物溶液a、对照品参照物溶液a和供试品溶液a，分别注入液相色谱仪，测定，即得；其中，采用的色谱条件为，色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，柱长为250mm，内径为4.6mm，粒径为5μm；流动相：以乙腈为流动相A，以0.1％磷酸溶液为流动相B，按表a的规定进行梯度洗脱；
表a梯度洗脱程序
| 时间(分钟) | 流动相A(％) | 流动相B(％) |
| 0～10 | 5→10 | 95→90 |
| 10～30 | 10→20 | 90→80 |
| 30～50 | 20→33 | 80→67 |
| 50～55 | 33→95 | 67→5 |
| 55～60 | 95→5 | 5→95 |
流速：0.8mL/min；柱温：35℃；进样量：10μL；检测波长：220nm。
在其中一实施例中，所述照薄层色谱法包括如下步骤：
(1)制备供试品溶液b：取漏芦配方颗粒样品0.5g，研细，加甲醇30ml，超声处理30min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1.5ml，使溶解，制得供试品溶液b；
(2)制备对照药材溶液b：称取漏芦对照药材1.0g，研细，加甲醇30ml，超声处理30min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1.5ml，使溶解，制得对照药材溶液b；
(3)制备对照品溶液b：称取β-蜕皮甾酮对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液b；
(4)进行薄层色谱分析：薄层色谱条件为，薄层板：硅胶GF254薄层板；点样量：供试品溶液b为10μl，对照药材溶液b、对照品溶液b各为3ul；展开剂：以体积比为1:8:1.5的甲苯-乙酸乙酯-乙醇溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇试液，105℃加热至斑点显色清晰，日光下检视。
在其中一实施例中，采用液相色谱法测定特征图谱还包括如下步骤：
(1)制备对照药材参照物溶液a：取漏芦对照药材1.0g，加水25ml，加热回流30min，放冷，滤过，蒸干，加70％甲醇5ml溶解，滤过，取续滤液，作为对照药材参照物溶液a；
(2)制备对照品参照物溶液a：取原儿茶酸、β-蜕皮甾酮对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml分别含原儿茶酸20ug、β-蜕皮甾酮150μg的混合溶液，作为对照品参照物溶液a；
(3)制备供试品溶液a：取漏芦配方颗粒适量，研细，取约0.25g，置具塞锥形瓶中，加入70％甲醇25ml，功率300W\频率40kHz的超声处理30min，放冷，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液a。
在其中一实施例中，液相色谱法测定的供试品色谱图中呈现6个特征峰，并与对照药材参照物色谱中的6个特征峰保留时间相对应；以原儿茶酸对照品色谱图中特征峰为参照峰S1，以β-蜕皮甾酮对照品色谱图中特征峰为参照峰S2，计算供试品色谱图中峰1、峰2、峰4与参照峰S1的相对保留时间，计算供试品色谱图中峰6与参照峰S2的相对保留时间，相对保留时间在规定值的±10％之内；规定值为：峰1相对保留时间0.49、峰2相对保留时间0.61、峰4相对保留时间1.56、峰6相对保留时间1.24。
在其中一实施例中，采用液相色谱法测定β-蜕皮甾酮含量包括：进行液相色谱仪分析，以β-蜕皮甾酮对照品制成的溶液作为对照品溶液c，以漏芦配方颗粒样品制成的溶液作为供试品溶液c，分别精密吸取对照品溶液c和供试品溶液c，分别注入液相色谱仪，测定，即得；其中，采用的色谱条件为，色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，柱长为250mm，内径为4.6mm，粒径为5μm；流动相：以体积比为31：69的甲醇-水为流动相；流速：0.8mL/min；柱温：30℃；进样量：10μL；检测波长：247nm。
在其中一实施例中，采用液相色谱法测定β-蜕皮甾酮含量还包括如下步骤：
(1)制备对照品溶液：取β-蜕皮甾酮对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含β-蜕皮甾酮40μg的溶液，作为对照品溶液c；
(2)制备供试品溶液：取漏芦配方颗粒适量，研细，取0.25g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70％甲醇25ml，密塞，称定重量，功率300W、频率40kHz的超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用70％甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液c。
在其中一实施例中，还包括：对漏芦配方颗粒进行性状鉴别、干浸膏出膏率检查、浸出物检查，浸出物检查采用热浸法测定。
在其中一实施例中，所述热浸法以乙醇为溶剂，采用醇溶性浸出物测定法项下的热浸法测定浸出物范围。
与现有技术相比，本发明提供的漏芦配方颗粒质量检测方法的有益效果是：通过对漏芦配方颗粒进行薄层鉴别、特征图谱构建及β-蜕皮甾酮含量测定等多方面测量，来评定漏芦配方颗粒的质量，为产品的质量稳定奠定坚实的基础，能够建立漏芦配方颗粒可行的质量标准，实现漏芦配方颗粒质量的有效控制，并且，采用本申请的色谱条件进行液相分析，可以得到分离度更好更清晰的特征图谱，方法稳定性较好，精密度高，重现性较好。漏芦饮片煎煮制得漏芦饮片配方颗粒，依据《中药配方颗粒质量控制与标准制定技术要求》，拟定了β-蜕皮甾酮含量范围为3.5～14.4mg/g。
附图说明
图1为漏芦标准汤剂的HPLC特征图谱；其中，峰2：没食子酸；峰3(S1)：原儿茶酸；峰5(S2)：β-蜕皮甾酮。
色谱柱；Shim-pack GIST C18-AQ，4.6mm×250mm，5μm
图2为本发明一实施例中漏芦饮片配方颗粒照薄层色谱法的3批生产样品薄层鉴别TLC图谱；其中，1组为阴性对照10μl、2组为对照品溶液3μl，3组为对照药材溶液3μl、4组为供试品溶液10μl、5组为供试品溶液10μl、6组为供试品溶液10μl。
图3为本发明一实施例的特征图谱测定提取方法考察中不同提取方法的HPLC特征图谱。
图4为本发明一实施例的特征图谱测定提取溶剂考察中不同提取溶剂的HPLC特征图谱。
图5为本发明一实施例的特征图谱测定样品量考察中不同样品量的HPLC特征图谱。
图6为本发明一实施例的特征图谱测定提取时间考察中不同提取时间的HPLC特征图谱。
图7为本发明一实施例的特征图谱测定专属性考察中不同溶液的HPLC特征图谱。
图8为本发明一实施例的特征图谱测定中重复性试验共有峰叠加图谱。
图9为本发明一实施例的特征图谱测定中精密度试验共有峰叠加图谱。
图10为本发明一实施例的特征图谱测定中稳定性试验共有峰叠加图谱。
图11为本发明一实施例中3批成品特征图谱叠加图。
图12为本发明一实施例中漏芦3批成品拟合图与对照品参照物、对照药材参照物特征图谱叠加图。
图13为本发明一实施例中漏芦成品与对照药材特征图谱拟合图；其中，峰2为没食子酸；峰3(S1)为原儿茶酸；峰5(S2)为诺米林；峰10为β-蜕皮甾酮；采用色谱柱为Shim-packGIST C18-AQ，4.6mm×250mm，5μm。
图14为本发明一实施例的含量测定专属性考察中麦芽糊精空白对比图。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚明白，以下结合具体实施例，并参照附图，对本发明进一步详细说明。
关于漏芦标准汤剂质量标准：
【来源】本品为菊科植物祁州漏芦Rhaponticum uniflorum(L.)DC.的干燥根经炮制并参照《医疗机构中药煎药室管理规范》制成的标准汤剂。
【制法】取漏芦饮片6500g，加水煎煮，滤过，滤液浓缩成清膏(干浸膏出膏率为8.0％～14.8％)，冷冻干燥，粉碎，即得。
【出膏率】取24批次漏芦饮片，按以上制法制得24批次标准汤剂干膏粉，以干膏粉计算干浸膏(出膏率)得率(见表Ⅰ)，并计算平均得率为11.40％，按照标准汤剂出膏率允许范围(均值70％～130％)计算，出膏率允许范围为7.98％～14.82％，拟定漏芦干浸膏出膏率允许范围为7.98％～14.82％。综合参考已发布的省标本品标准及后续的制剂工艺研究资料，拟定本品的出膏率范围为8.0％～14.8％。
表Ⅰ漏芦饮片标准汤剂出膏率
上述结果表明，24批次标准汤剂出膏率为8.3％～13.2％，其中24批均符合拟定限度范围8.0％～14.8％。
【性状】本品为黄色至棕色的粉末；气特异、味微苦。
【薄层鉴别】取本品0.5g，加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1.5ml使溶解，作为供试品溶液。另取漏芦对照药材1.0g，同法制成对照药材溶液。再取β-蜕皮甾酮对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2020年版四部通则0502)试验，吸取供试品溶液10μl、对照药材溶液及对照品溶液各3μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-乙醇(1:8:1.5)溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇试液，105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点。
【特征图谱】照高效液相色谱法(中国药典2020年版通则0512)测定。
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(柱长为250mm，内径为4.6mm，粒径为5μm)；以乙腈为流动相A，以0.1％磷酸溶液为流动相B，按表Ⅱ中的规定进行梯度洗脱；流速为每分钟0.8ml；柱温为35℃；检测波长为220nm。理论塔板数按原儿茶峰计算不得低于6000。
表Ⅱ：
| 时间(分钟) | 流动相A(％) | 流动相B(％) |
| 0～10 | 5→10 | 95→90 |
| 10～30 | 10→20 | 90→80 |
| 30～50 | 20→37 | 80→63 |
| 50～55 | 37→95 | 63→5 |
| 55～60 | 95→5 | 5→95 |
参照物溶液的制备：取漏芦(祁州漏芦)对照药材1.0g，加水25ml，加热回流30分钟，滤过，滤液蒸干，加70％甲醇5ml溶解，滤过，取续滤液，作为对照药材参照物溶液。另取原儿茶酸对照品、β-蜕皮甾酮对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含原儿茶酸20ug、β-蜕皮甾酮150μg的混合溶液，作为对照品参照物溶液。
供试品溶液的制备：取本品细粉约0.25g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70％甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理(功率300W，频率40kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用70％甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
测定法：分别精密吸取对照药材参照物溶液、对照品参照物溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
如图1所示，供试品色谱中应呈现6个特征峰，并应与对照药材参照物色谱中的6个特征峰保留时间相对应，其中峰3、峰5的保留时间应与原儿茶酸和β-蜕皮甾酮对照品参照物色谱峰的保留时间相对应。其中与原儿茶酸参照物峰相应的峰为S1峰，计算峰1、峰2、峰4与S1峰的相对保留时间，其相对保留时间应在规定值的±10％范围之内，规定值为：0.49(峰1)、0.61(峰2)、1.56(峰4)。与β-蜕皮甾酮参照物峰相应的峰为S2峰，计算峰6与S2峰的相对保留时间，其相对保留时间应在规定值的±10％范围之内，规定值为：1.24(峰6)。
【检查】水分不得过15.0％(中国药典2020年版通则0832第二法)。
【浸出物】照醇溶性浸出物测定法(中国药典2020年版通则2201)项下的热浸法测定，用乙醇作溶剂，不得少于22.8％。
【含量测定】照高效液相色谱法(中国药典2020年版通则0512)测定。
色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水(31:69)为流动相；检测波长为247nm。理论塔板数按β-蜕皮甾酮峰计算应不低于4000。
对照品溶液的制备：取β-蜕皮甾酮对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含100μg的溶液，即得。
供试品溶液的制备：取本品细粉约0.25g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70％甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理(功率300W，频率40kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用70％甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本标准汤剂的β-蜕皮甾酮(C27H44O7)含量允许范围为：6.8mg/g～15.0mg/g。
【贮藏】密封。
进一步的，本实施例提供一种漏芦配方颗粒质量检测方法，通过对漏芦配方颗粒的性状、干浸膏出膏率、薄层鉴别、特征图谱、浸出物及β-蜕皮甾酮含量测定，将配方颗粒含量标准限定为每1g含β-蜕皮甾酮为3.5～14.4mg，其中，薄层鉴别采用照薄层色谱法进行鉴别，特征图谱及β-蜕皮甾酮含量测定均采用液相色谱法，浸出物采用热浸法测定。
制备漏芦配方颗粒：本品来源采用《中国药典》2020年版一部漏芦中药材项下来源及药用部位按照“技术要求”制成的标准汤剂，包括药材植物的科名、中文名、拉丁文和药用部位，即：本品为菊科植物祁州漏芦Rhaponticum uniflorum(L.)DC.的干燥根经炮制并按标准汤剂的主要质量指标加工制成的配方颗粒。
具体制法是：取漏芦饮片6500g，加水煎煮，滤过，滤液浓缩成清膏(干浸膏出膏率为8.0％～14.8％)，加入辅料适量，干燥(或干燥，粉碎)，再加入辅料适量，混匀，制粒，制成1000g，即得。
根据23批标准汤剂的出膏率，并结合小试中试样品出膏率，以标准汤剂出膏率均值的70％～130％范围定为干浸膏出膏率，干浸膏出膏率为8.0％～14.8％。
漏芦配方颗粒方法学考察：
1.性状考察
性状：取漏芦配方颗粒三批规模生产样品各一份，观察记录样品的形态、颜色和气味，同时结合标汤样品颜色和气味。本品为颗粒剂，为黄色至棕色的颗粒；气特异、味微苦。
2.薄层鉴别
用漏芦对照药材作对照，建立了本品薄层鉴别方法，经方法学考察及24批次样品试验，供试品色谱斑点清晰，阴性对照样品无干扰，故将该法列入漏芦配方颗粒标准汤剂质量标准正文[鉴别]项。
具体的，漏芦配方颗粒的薄层鉴别方法为：
供试品溶液制备：称取本品0.5g，研细，加甲醇30ml，超声处理30min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1.5ml，使溶解，作为供试品溶液。
对照药材溶液制备：称取漏芦对照药材1.0g，同法制成对照药材溶液。
对照品溶液制备：称取β-蜕皮甾酮对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。
照薄层色谱法(《中国药典》2020年版四部通则0502)试验，吸取供试品溶液10μl、对照药材溶液3μl及对照品溶液3μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-乙醇(1:8:1.5)溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇试液，105℃加热至斑点显色清晰，日光下检视。日光下检视结果显示，在供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相同的位置上显示相同颜色的主斑点。
按上述检测方法，取3批生产样品供试品溶液、阴性样品(麦芽糊精)溶液及对照药材溶液、对照品溶液，点样，进行薄层鉴别。如图2所示，结果表明，三批规模生产样品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
3.特征图谱
3.1试剂与试药
3.1.1试剂乙醇(天津市致远化学试剂有限公司)、甲醇(天津市科密欧化学试剂有限公司)色谱纯；水为超纯水(实验室自制)、磷酸(天津市致远化学试剂有限公司)。
3.1.2对照品及对照药材原儿茶酸(批号：110809-201906，含量：97.07％,中国食品药品检定研究院)、β-蜕皮甾酮(批号：111638-201907，含量：98.03％,中国食品药品检定研究院)、没食子酸(批号：110831-201906，含量：91.50％，中国食品药品检定研究院)、漏芦(祁州漏芦)对照药材(批号：121036-202104，中国食品药品检定研究院)。
3.1.3样品信息样品批号详见表1。
表1漏芦成品样品批号
| 序号 | 批号 | 序号 | 批号 |
| 1 | ZS220601 | 4 | 220301 |
| 2 | ZS220602 | 5 | / |
| 3 | ZS220603 | 6 | / |
3.2特征图谱测定方法
3.2.1色谱条件与系统适用性实验
以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(岛津Shim-pack GIST C18-AQ(4.6mm×250mm，5μm))；以乙腈为流动相A，0.1％磷酸溶液为流动相B，按表2中的规定进行梯度洗脱；流速为每分钟0.8ml；柱温为35℃；检测波长为220nm。理论板数按原儿茶酸计算应不低于6000。
表2-梯度洗脱程序
3.2.2参照物溶液的制备
取漏芦(祁州漏芦)对照药材1.0g，加水25ml，加热回流30min，放冷，滤过，蒸干，加70％甲醇5ml溶解，滤过，取续滤液，作为对照药材参照物溶液。
另取原儿茶酸、β-蜕皮甾酮对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml分别含原儿茶酸20ug、β-蜕皮甾酮150μg的混合溶液，作为对照品参照物溶液。
3.2.3供试品溶液的制备
取本品适量，研细，取约0.25g，置具塞锥形瓶中，加入70％甲醇25ml，超声处理(功率300W，频率40kHz)30min，放冷，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
3.2.4测定法
分别精密吸取对照药材参照物溶液、对照品参照物溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
3.3特征图谱测定的方法学考察
对漏芦配方颗粒(批号：ZS220603)特征图谱的样品前处理方法进行考察，主要考察提取溶剂、提取方式、提取时间和提取溶剂用量(或取样量)对漏芦配方颗粒特征图谱的影响。
3.3.1提取方法的考察
分别以不同的提取方法制备供试品溶液，按上述“3.2”项下方法进行测定。如图3和表3所示，结果表明，不同提取方式的供试品溶液色谱主峰个数一致，峰形差别不明显，为方便操作，故选择超声提取为样品提取方式。
表3-提取方法的比较
3.3.2提取溶剂的考察
分别以不同提取溶剂制备供试品溶液，按上述“3.2”项下方法进行测定。如图4和表4所示，结果表明，不同提取溶剂提取的供试品溶液色谱主峰个数一致，不同提取时间峰形差别较大，但70％甲醇的提取效果要优于其他两组，故选择供试品提取溶剂为70％甲醇。
表4-提取溶剂的比较
3.3.3取样量的考察
分别以不同取样量制备供试品溶液，按上述“3.2”项下方法进行测定。如图5和表5所示，结果表明，不同取样量的供试品溶液色谱主峰个数一致，峰形差别较小，且提取效果相近，但取样量为1.25g时，其色谱峰的响应值较高，故选择供试品溶液制备的取样量为1.25g。
表5-取样量的比较
3.3.4提取时间考察
分别以不同时间制备供试品溶液，按上述“3.2”项下方法进行测定。如图6和表6所示，结果表明，不同提取时间的供试品溶液色谱主峰个数一致，峰形差别不大，且提取效果相近，为缩短检测时间，故选择供试品提取时间为30分钟。
表6-提取时间的比较
综上所述，确定供试品溶液制备方法如下：取本品适量，研细，取约1.25g，置具塞锥形瓶中，加入70％甲醇25mL，密塞，超声处理(功率300W，频率40kHz)30min，放冷，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
3.4特征图谱分析方法验证
3.4.1专属性考察
取供试品用麦芽糊精1.25g，制备麦芽糊精空白对照液，按上述“3.2”项下方法制备对照药材参照物溶液以及对照品参照物溶液，按“3.2”项下色谱条件进行测定。
结果表明：麦芽糊精空白溶剂无干扰，该方法专属性良好，详见图7。
3.4.2重复性试验
取漏芦配方颗粒(批号：ZS220603)样品约1.25g，共6份，按“3.2”项下方法进行测定。如图8所示，供试品溶液特征图谱峰形、峰数基本一致。特征图谱中有个6共有峰，以原儿茶酸峰(峰3)为参照峰S1，以β-蜕皮甾酮峰(峰5)为参照峰S2，计算峰1、峰2、峰4与S1峰的相对保留时间及相对峰面积，计算峰6与S2峰的相对保留时间及相对峰面积，并计算RSD值。计算结果显示，相对保留时间RSD％值，相对峰面积RSD％值，均在合格范围内，详见表7-8，试验表明该方法重复性良好。
表7-重复性试验HPLC特征图谱相对保留时间
| 峰号 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | RSD(％) |
| 1 | 0.486 | 0.487 | 0.487 | 0.487 | 0.487 | 0.487 | 0.09 |
| 2 | 0.612 | 0.611 | 0.611 | 0.611 | 0.611 | 0.611 | 0.06 |
| 3(S1) | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 0.00 |
| 4 | 1.562 | 1.564 | 1.566 | 1.567 | 1.567 | 1.566 | 0.13 |
| 5(S2) | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 0.00 |
| 6 | 1.236 | 1.236 | 1.236 | 1.235 | 1.235 | 1.236 | 0.01 |
表8-重复性试验HPLC特征图谱相对峰面积
| 峰号 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | RSD(％) |
| 1 | 0.619 | 0.608 | 0.601 | 0.611 | 0.623 | 0.603 | 1.43 |
| 2 | 0.636 | 0.628 | 0.625 | 0.630 | 0.638 | 0.625 | 0.87 |
| 3(S1) | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 0.00 |
| 4 | 0.303 | 0.302 | 0.301 | 0.302 | 0.302 | 0.306 | 0.58 |
| 5(S2) | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 0.00 |
| 6 | 0.203 | 0.207 | 0.207 | 0.208 | 0.206 | 0.206 | 0.84 |
3.3.3精密度试验
取漏芦配方颗粒(批号：ZS220603)样品约1.25g，按“3.2”项下试验方法，连续进样6针测定。测定结果显示，供试品溶液特征图谱峰形、峰数基本一致。特征图谱中有个6共有峰，以原儿茶酸峰(峰3)为参照峰S1，以β-蜕皮甾酮峰(峰5)为参照峰S2，计算峰1、峰2、峰4与S1峰的相对保留时间及相对峰面积，计算峰6与S2峰的相对保留时间及相对峰面积，并计算RSD值。计算结果显示，相对保留时间RSD％值,相对峰面积RSD％值，均在合格范围内，详见图9和表9-10，试验表明该方法精密度良好。
表9-精密度试验HPLC特征图谱相对保留时间
| 峰号 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | RSD(％) |
| 1 | 0.485 | 0.485 | 0.485 | 0.485 | 0.485 | 0.486 | 0.06 |
| 2 | 0.610 | 0.610 | 0.609 | 0.610 | 0.610 | 0.610 | 0.06 |
| 3(S1) | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 0.00 |
| 4 | 1.566 | 1.568 | 1.568 | 1.567 | 1.566 | 1.566 | 0.07 |
| 5(S2) | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 0.00 |
| 6 | 1.236 | 1.236 | 1.236 | 1.236 | 1.236 | 1.236 | 0.02 |
表10-精密度试验HPLC特征图谱相对峰面积
| 峰号 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | RSD(％) |
| 1 | 0.619 | 0.619 | 0.619 | 0.620 | 0.622 | 0.621 | 0.20 |
| 2 | 0.634 | 0.638 | 0.639 | 0.639 | 0.640 | 0.640 | 0.34 |
| 3(S1) | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 0.00 |
| 4 | 0.303 | 0.303 | 0.304 | 0.304 | 0.305 | 0.303 | 0.26 |
| 5(S2) | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 0.00 |
| 6 | 0.206 | 0.208 | 0.206 | 0.207 | 0.207 | 0.207 | 0.31 |
3.3.4稳定性试验
取漏芦配方颗粒(批号：ZS220603)样品约1.25g，按“3.2”项下试验方法，分别于0h、2h、4h、8h、12h、24h进样测定。测定结果显示，供试品特征图谱峰形、峰数基本一致(见图10)。特征图谱中有个6共有峰，以原儿茶酸峰(峰3)为参照峰S1，以β-蜕皮甾酮峰(峰5)为参照峰S2，计算峰1、峰2、峰4与S1峰的相对保留时间及相对峰面积，计算峰6与S2峰的相对保留时间及相对峰面积，并计算RSD值。计算结果显示，相对保留时间RSD％值,相对峰面积RSD％值，均在合格范围内，详见表11-12，试验表明供试品溶液在24小时内较稳定。
表11-稳定性试验特征图谱相对保留时间
| 峰号 | 0h | 2h | 4h | 8h | 12h | 24h | RSD(％) |
| 1 | 0.485 | 0.485 | 0.485 | 0.485 | 0.486 | 0.487 | 0.13 |
| 2 | 0.610 | 0.610 | 0.609 | 0.610 | 0.610 | 0.611 | 0.07 |
| 3(S1) | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 0.00 |
| 4 | 1.566 | 1.568 | 1.568 | 1.566 | 1.565 | 1.568 | 0.08 |
| 5(S2) | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 0.00 |
| 6 | 1.236 | 1.236 | 1.236 | 1.236 | 1.235 | 1.236 | 0.02 |
表12-稳定性试验特征图谱相对峰面积
| 峰号 | 0h | 2h | 4h | 8h | 12h | 24h | RSD(％) |
| 1 | 0.619 | 0.619 | 0.619 | 0.622 | 0.622 | 0.615 | 0.41 |
| 2 | 0.634 | 0.638 | 0.639 | 0.640 | 0.640 | 0.638 | 0.35 |
| 3(S1) | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 0.00 |
| 4 | 0.303 | 0.303 | 0.304 | 0.305 | 0.305 | 0.305 | 0.31 |
| 5(S2) | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 0.00 |
| 6 | 0.206 | 0.208 | 0.206 | 0.207 | 0.206 | 0.206 | 0.37 |
3.4小结
该特征图谱方法经专属性、重复性、精密度及稳定性考察，结果均符合要求，表明建立的方法能很好的用于漏芦配方颗粒的特征图谱测定。
3.5三批成品特征图谱表征分析
3.5.1 3批成品特征图谱测定
照上述拟定的特征图谱分析方法，测定3批成品特征图谱，通过原儿茶酸、β-蜕皮甾酮定位，结果显示，配方颗粒及其制备使用的中药饮片特征色谱图中有6个共有峰，并应与对照药材参照物色谱中的6个特征峰保留时间相对应，其中与原儿茶酸、β-蜕皮甾酮参照物相对应的峰为峰3、峰5，共有峰特征图谱，详见图11-13。
3.5.2 3批配方颗粒特征色谱图评价
按上述拟定的特征图谱分析方法，测定3批成品特征图谱。结果显示，特征图谱中有6个共有峰，以原儿茶酸为参照峰S1，以β-蜕皮甾酮为参照峰S2，计算峰1、峰2、峰4与S1峰的相对保留时间，计算峰6与S2峰的相对保留时间，详见表13。
表13-3批成品共有峰相对保留时间
| 峰号 | 成品1 | 成品2 | 成品3 | 均值 | 相对保留时间范围±10％ |
| 1 | 0.486 | 0.487 | 0.486 | 0.487 | 0.438～0.535 |
| 2 | 0.611 | 0.612 | 0.612 | 0.612 | 0.550～0.673 |
| 3(S1) | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 0.900～1.100 |
| 4 | 1.561 | 1.561 | 1.560 | 1.561 | 1.405～1.717 |
| 5(S2) | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 0.900～1.100 |
| 6 | 1.237 | 1.237 | 1.237 | 1.237 | 1.113～1.361 |
综上所述，采用高效液相色谱法建立的配方颗粒特征图谱测定方法，按照《中国药典》2020年版四部“分析方法验证指导原则(通则9101)”对建立的方法进行了稳定性考察，且符合要求。按上述拟定的特征图谱分析方法，对三批成品的特征图谱进行测定，结果分析，标定了6个共有特征峰，以原儿茶酸为参照峰S1，以β-蜕皮甾酮为参照峰S2，计算峰1、峰2、峰4与S1峰的相对保留时间，计算峰6与S2峰的相对保留时间，以3批次样品峰相对保留时间均值拟定为规定值分别为：0.49(峰1)、0.61(峰2)、1.56(峰4)、1.24(峰6)。考虑试验操作、仪器、试剂等多因素误差，其相对保留时间允许范围拟定为±10％。
4检查项目试验
4.1颗粒剂通则项检查按中国药典2020年版四部通则0104颗粒剂项下的有关要求，对规模生产样品(批号：ZS220601、ZS220602、ZS220603)进行粒度、水分、溶化性检查，以及微生物限度、装量差异检查，均符合《中国药典》2020年版四部通则0104颗粒剂项下的有关要求，见表14。
表14-漏芦配方颗粒规模生产样品检查
照中国药典2020年版通则0104颗粒剂项下测定，每个批号取供试品1袋，分别加热水200ml，搅拌5分钟，立即观察，结果为全部溶化，无焦屑，有轻微混浊，均符合溶化性有关要求。
4.2外源性有毒有害物质检查
药材及饮片收载于《中国药典》2020年版一部，标准中未进行相关有害物质的控制。质量部对药材开展了重金属及有害元素残留、农药残留、二氧化硫残留、黄曲霉毒素检测，结果未发现超标情况。故未将外源性有毒有害物质列为检查项目。
5浸出物
5.1试验方法
中药配方颗粒提取溶媒为制药用水，按照“技术要求”，以乙醇为溶剂，照醇溶性浸出物测定法(中国药典2020年版通则2201)项下的热浸法测定。
5.2浸出物的考察
取3批规模生产样品各约2.0g，依法测定，结果见表15。
表15-浸出物考察结果
三批规模生产样品浸出物均值为15.21％，根据本品规格(每1g配方颗粒相当于饮片6.5g)，参照23批次标准汤剂浸出物限度(22.8％)，及23批次标准汤剂出膏率实测范围8.0％～14.8％的下限，计算本品浸出物允许范围为8％×22.8％×6.5＝11.86％，取整，故拟定本品醇溶性浸出物不得少于11.8％。中试样品浸出物均大于11.8％，符合要求。
6含量测定
6.1含量待测成份选择依据
本品为菊科植物祁州漏芦Rhaponticum uniflorum(L.)DC.的干燥根。其药材分布于黑龙江、吉林、辽宁、河北、内蒙古、陕西、甘肃、青海、山西、河南、四川、山东等地。根及根状茎入药，性寒、味苦咸。清热、解毒、排脓、消肿和通乳。所含化学成分主要有蜕皮甾酮类、黄酮类、三萜皂甙、挥发油和有机酸等。在临床上用于治疗降血脂和抗氧化作用已取得了较好疗效。药理实验表明漏芦具有较好的抗动脉粥样硬化、抗脂质过氧化、免疫促进、改善脑功能、抗衰老等作用。根据《中国药典》2020版中漏芦含量测定项以β-蜕皮甾酮作为含量测定成分，故选择漏芦配方颗粒含量测定成份为β-蜕皮甾酮。
6.2β-蜕皮甾酮含量测定方法
照高效液相色谱法(中国药典2020年版通则0512)测定。
色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水(31:69)溶液为流动相，检测波长为247nm。理论塔板数按β-蜕皮甾酮峰计算应不低于4000。
对照品溶液的制备：取β-蜕皮甾酮对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含β-蜕皮甾酮40μg的溶液。
供试品溶液的制备：取本品细粉适量，取约0.25g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70％甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理(功率300W，频率40kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用70％甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
6.3漏芦含量测定方法学考察
对漏芦配方颗粒(批号：ZS220603)特征图谱的样品前处理方法进行考察，主要考察提取溶剂、提取方式、提取时间和取样量对漏芦标准汤剂特征图谱的影响。
6.3.1提取方法的考察
参照上述“6.2”项下方法，分别以不同方式提取样品制备供试品溶液，并依法进行测定。结果表明，超声提取优于回流提取，故选择样品提取方式为超声提取，详见表16。
表16-不同提取方法对比
6.3.2提取溶剂的考察
参照上述“6.2”项下方法，分别以不同的溶剂提取样品制备供试品溶液，并依法进行测定。结果表明，以70％甲醇为溶剂的提取效果较好，故选择70％甲醇作为制备供试品溶液的溶剂，详见表17。
表17-不同提取溶剂对比
6.3.3取样量考察
参照上述“6.2”项下方法，分别以不同取样量制备供试品溶液，并依法进行测定。结果表明无明显差别，0.25g提取相较于0.75g、1.25g较完全，故选择0.25g作为制备供试品溶液的取样量，详见表18。
表18-不同取样量对比
6.3.4提取时间的考察
参照上述“6.2”项下方法，分别以不同的提取时间提取样品制备供试品溶液，并依法进行测定。结果表明，超声提取30分钟即可基本提取完全，故确定样品提取时间为30分钟，详见表19。
表19-不同提取时间对比
综上所述，确定供试品溶液制备方法的主要参数如下：取本品细粉适量，取约0.25g,精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70％甲醇25mL，密塞，称定重量，超声处理(功率300W，频率40kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用70％甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
6.4含量测定分析方法验证
6.4.1专属性考察
取供试品用麦芽糊精1.25g，制备麦芽糊精空白对照液，按以上“6.2”项下色谱条件进行测定，试验表明：如图14所示，麦芽糊精空白无干扰。该方法专属性良好。
6.4.2线性关系试验
取β-蜕皮甾酮对照品溶液以浓度：2.4735μg/ml、24.7350μg/ml、49.4700μg/ml、98.9400μg/ml、197.8800μg/ml、395.7600μg/ml。按“6.2”项下色谱条件进行测定。以β-蜕皮甾酮浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，并进行线性回归，回归方程为：y＝1E+06x+32735，R2＝0.9998，可见β-蜕皮甾酮在2.4735μg/ml～395.7600μg/ml范围内与其峰面积具有良好的线性关系，详见表20。
表20β-蜕皮甾酮线性考察结果
| 编号 | 浓度μg/ml | 进样量μg | 峰面积 |
| 线性1 | 40169 | 0.0247 | 2.4735 |
| 线性2 | 384153 | 0.2474 | 24.7350 |
| 线性3 | 779625 | 0.4947 | 49.4700 |
| 线性4 | 1568385 | 0.9894 | 98.9400 |
| 线性5 | 2964877 | 1.9788 | 197.8800 |
| 线性6 | 5925002 | 3.9576 | 395.7600 |
6.4.3重复性试验取同批次配方颗粒样品(批号：ZS220603)约0.25g，共6份，按上述“6.2”试验方法进行测定，测得样品中β-蜕皮甾酮含量平均值分别为4.7064mg/g，RSD值为0.90％，试验表明该方法重复性良好，详见表21。
表21-重复性试验
6.4.4精密度试验
取同批次配方颗粒样品(批号：ZS220603)约0.25g，按照上述“6.2”连续进样6针，计算样品中β-蜕皮甾酮峰面积的RSD值为0.32％，试验表明仪器精密度良好，详见表22。
表22-精密度试验
6.4.5稳定性试验
取一批配方颗粒样品(批号：ZS220603)约0.25g，按上述“6.2”试验方法，分别于0h、2h、4h、8h、12h、24h进样，测定其峰面积，计算样品中β-蜕皮甾酮峰面积的RSD值为0.57％，试验表明供试品溶液在24小时内较稳定，详见表23。
表23-稳定性试验
6.4.6加样回收率试验
精密称取三组样品约0.1250g，共9份，分成3组，每组3份，各加入已知浓度的β-蜕皮甾酮对照品溶液(395.7600ug/ml)1.2ml、1.5ml、1.8ml，按“6.2”项下方法制备供试品溶液，并进行测定，计算β-蜕皮甾酮平均加样回收率为93.9304％，RSD为1.79％，详见表24。
表24-加样回收率试验结果
6.5小结
综上，整个分析方法经专属性、线性考察、精密度、重复性、稳定性、加样回收考察，结果均符合要求，表明建立的方法能很好的用于β-蜕皮甾酮的含量测定。
7含量限度范围拟定
7.1三批成品含量测定照上述拟定的含量分析方法，测定3批次成品β-蜕皮甾酮含量，结果见表25。
表25三批成品测定结果
根据漏芦配方颗粒的含量范围、出膏率及规格计算，漏芦配方颗粒标准汤剂β-蜕皮甾酮含量允许范围为6.8mg/g～15.0mg/g，配方颗粒出膏率允许范围为8.0％～14.8％。本品规格为每1g颗粒相当饮片6.5g，以此计算辅料用量范围：最大辅料用量：1-8.0％×6.5＝48％，最小辅料用量：1-14.8％×6.5＝3.8％，即辅料用量范围为3.8％～48％。因此计算配方颗粒的含量范围为：6.8×(1-48％)＝3.54mg/g，15.0×(1-3.8％)＝14.43mg/g，即β-蜕皮甾酮含量可接受范围为3.54mg/g～14.43mg/g，结合上述3批规模化生产样品，故拟定本品含量范围为，3.5mg/g～14.4mg/g。
8规格根据制法投料量与工艺研究制成量制定，即每1g配方颗粒相当于饮片6.5g。
9贮藏根据品种贮藏基本要求制定。
所述领域技术人员应当理解：以上任何实施例的讨论仅为示例性的，并非旨在暗示本发明的范围(包括权利要求)被限于这些例子；凡在本发明的精神和原则之内，所做的任何省略、修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (8)
1.一种漏芦配方颗粒质量检测方法，其特征在于，包括：
对漏芦配方颗粒进行薄层鉴别、特征图谱构建和β-蜕皮甾酮含量测定，将配方颗粒含量标准限定为每1g含β-蜕皮甾酮为3.5～14.4mg，薄层鉴别采用照薄层色谱法进行鉴别，特征图谱构建及β-蜕皮甾酮含量测定均采用液相色谱法；
采用液相色谱法测定特征图谱包括：以漏芦对照药材制成的溶液作为对照药材参照物溶液a，以原儿茶酸、β-蜕皮甾酮对照品制成的溶液作为对照品参照物溶液a，以漏芦配方颗粒样品制成的溶液作为供试品溶液a，分别精密吸取对照药材参照物溶液a、对照品参照物溶液a和供试品溶液a，分别注入液相色谱仪，测定，即得；其中，采用的色谱条件为，色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，柱长为250mm，内径为4.6mm，粒径为5μm；流动相：以乙腈为流动相A，以0.1％磷酸溶液为流动相B，按表a的规定进行梯度洗脱；
表a 梯度洗脱程序
流速：0.8mL/min；柱温：35℃；进样量：10μL；检测波长：220nm。
2.如权利要求1所述的漏芦配方颗粒质量检测方法，其特征在于，所述照薄层色谱法包括如下步骤：
(1)制备供试品溶液b：取漏芦配方颗粒样品0.5g，研细，加甲醇30ml，超声处理30min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1.5ml，使溶解，制得供试品溶液b；
(2)制备对照药材溶液b：称取漏芦对照药材1.0g，研细，加甲醇30ml，超声处理30min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1.5ml，使溶解，制得对照药材溶液b；
(3)制备对照品溶液b：称取β-蜕皮甾酮对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液b；
(4)进行薄层色谱分析：薄层色谱条件为，薄层板：硅胶GF254薄层板；点样量：供试品溶液b为10μl，对照药材溶液b、对照品溶液b各为3ul；展开剂：以体积比为1:8:1.5的甲苯-乙酸乙酯-乙醇溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇试液，105℃加热至斑点显色清晰，日光下检视。
3.如权利要求1所述的漏芦配方颗粒质量检测方法，其特征在于，采用液相色谱法测定特征图谱还包括如下步骤：
(1)制备对照药材参照物溶液a：取漏芦对照药材1.0g，加水25ml，加热回流30min，放冷，滤过，蒸干，加70％甲醇5ml溶解，滤过，取续滤液，作为对照药材参照物溶液a；
(2)制备对照品参照物溶液a：取原儿茶酸、β-蜕皮甾酮对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml分别含原儿茶酸20ug、β-蜕皮甾酮150μg的混合溶液，作为对照品参照物溶液a；
(3)制备供试品溶液a：取漏芦配方颗粒适量，研细，取0.25g，置具塞锥形瓶中，加入70％甲醇25ml，功率300W\频率40kHz的超声处理30min，放冷，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液a。
4.如权利要求1所述的漏芦配方颗粒质量检测方法，其特征在于，液相色谱法测定的供试品色谱图中呈现6个特征峰，并与对照药材参照物色谱中的6个特征峰保留时间相对应；以原儿茶酸对照品色谱图中特征峰为参照峰S1，以β-蜕皮甾酮对照品色谱图中特征峰为参照峰S2，计算供试品色谱图中峰1、峰2、峰4与参照峰S1的相对保留时间，计算供试品色谱图中峰6与参照峰S2的相对保留时间，相对保留时间在规定值的±10％之内；规定值为：峰1相对保留时间0.49、峰2相对保留时间0.61、峰4相对保留时间1.56、峰6相对保留时间1.24。
5.如权利要求1所述的漏芦配方颗粒质量检测方法，其特征在于，采用液相色谱法测定β-蜕皮甾酮含量包括：进行液相色谱仪分析，以β-蜕皮甾酮对照品制成的溶液作为对照品溶液c，以漏芦配方颗粒样品制成的溶液作为供试品溶液c，分别精密吸取对照品溶液c和供试品溶液c，分别注入液相色谱仪，测定，即得；其中，采用的色谱条件为，色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，柱长为250mm，内径为4.6mm，粒径为5μm；流动相：以体积比为31：69的甲醇-水为流动相；流速：0.8mL/min；柱温：30℃；进样量：10μL；检测波长：247nm。
6.如权利要求5所述的漏芦配方颗粒质量检测方法，其特征在于，采用液相色谱法测定β-蜕皮甾酮含量还包括如下步骤：
(1)制备对照品溶液：取β-蜕皮甾酮对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含β-蜕皮甾酮40μg的溶液，作为对照品溶液c；
(2)制备供试品溶液：取漏芦配方颗粒适量，研细，取0.25g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70％甲醇25ml，密塞，称定重量，功率300W、频率40kHz的超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用70％甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液c。
7.如权利要求1-6任一项所述的漏芦配方颗粒质量检测方法，其特征在于，还包括如下检测方法，
对漏芦配方颗粒进行性状鉴别、干浸膏出膏率检查、浸出物检查，浸出物检查采用热浸法测定。
8.如权利要求7所述的漏芦配方颗粒质量检测方法，其特征在于，所述热浸法以乙醇为溶剂，采用醇溶性浸出物测定法项下的热浸法测定浸出物范围。
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| CN202311352434.3A CN117368391A (zh) | 2023-10-18 | 2023-10-18 | 一种漏芦配方颗粒质量检测方法 |
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Family Applications (1)
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2023
- 2023-10-18 CN CN202311352434.3A patent/CN117368391A/zh active Pending
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