CN117337827A - 一种抑制组织固定液中甲醛挥发的方法及应用 - Google Patents
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- G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
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Abstract
本发明公开一种抑制组织固定液中甲醛挥发的方法及应用。采用的技术方案包括:通过在组织固定液加入甲醛挥发抑制剂,甲醛挥发抑制剂经乳化铺展形成不溶性分子膜,用于阻隔组织固定液的液面直接裸露于空气中,以抑制甲醛气体分子的挥发。所述甲醛挥发抑制剂配制方法如下:按质量比为5:1的比例称取十二烷基二苯醚二磺酸钠、二甲基硅油,经混合后,用分散均质机乳化3‑10分钟。优点:甲醛挥发抑制剂能快速自发铺展形成不溶性分子膜,用于阻隔组织固定液的液面直接裸露于空气中,可使甲醛挥发速率明显降低,从而起到抑制甲醛气体分子的挥发的目的。
Description
技术领域
本发明属于医学领域,尤其涉及一种组织固定液。
背景技术
组织固定液用于新鲜组织样本的固定。样本的固定在组织病理学中是为了保护组织(或细胞)免受细菌污染,防止组织或细胞自溶,保存在细胞内物质,凝固或沉淀组织或细胞内的糖原,是组织或细胞基本保持与正常活动时一样的物质状态,并使其硬化便于切片,还需要保持组织或细胞的抗原性,对于组织样本的切片观察或保存前都必须进行固定。
传统组织固定液的成分主要由40%甲醛溶液(俗称福尔马林)、十二水磷酸氢二钠、二水磷酸二氢钠和纯化水组成,而甲醛溶液中的甲醛是一种易于挥发的有毒气体,使得在贮存和使用组织固定液的过程中甲醛会大量挥发,容易造成医护人员的中毒及组织样本固定效果的减弱。传统抑制甲醛挥发的方法主要靠控制环境温湿度和设计通排风系统,效果不理想。近年来,结合甲醛的化学特性研制出一些甲醛抑制剂,如甘氨酸钠(SG)溶液和亚硫酸氢钠(NaHSO3)溶液,可降低甲醛挥发,但抑制稳定性较差。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种抑制组织固定液中甲醛挥发的方法及应用。
为解决上述问题,本发明采用的技术方案包括:
通过在组织固定液加入甲醛挥发抑制剂,甲醛挥发抑制剂经乳化铺展形成不溶性分子膜,用于阻隔组织固定液的液面直接裸露于空气中,以抑制甲醛气体分子的挥发。
所述的抑制组织固定液中甲醛挥发的方法,其特征在于,所述甲醛挥发抑制剂配制方法如下:按质量比为5:1的比例称取十二烷基二苯醚二磺酸钠、二甲基硅油,经混合后,用分散均质机乳化3-10分钟。
所述的抑制组织固定液中甲醛挥发的方法,其特征在于:所述甲醛挥发抑制剂配制方法如下:按质量比为10:1:1的比例称取十二烷基二苯醚二磺酸钠、二甲基硅油、乙烯基硅油,经混合后,用分散均质机乳化3-10分钟。
一种甲醛挥发抑制剂,其特征在于:其采用上述所述甲醛挥发抑制剂配制方法制得。
一种组织固定液,其特征在于,它包括以下组份:35%至40%甲醛溶液100mL、十二水磷酸氢二钠5.5-7.5g、甲醛挥发抑制剂9-11g、二水磷酸二氢钠3-5g、纯化水900ml混合均匀后制成,其中所述甲醛挥发抑制剂采用上述所述甲醛挥发抑制剂配制方法制得。
所述的组织固定液,其特征在于,它包括以下组份:35%至40%甲醛溶液100mL、十二水磷酸氢二钠6.5g、甲醛挥发抑制剂10g、二水磷酸二氢钠4g、纯化水900ml混合均匀后制成,其中所述甲醛挥发抑制剂采用上述所述甲醛挥发抑制剂配制方法制得。
所述的组织固定液,其特征在于,其组份还含有:0.3%十六烷基二甲基溴化铵和0.4%聚氧乙烯月桂醚。
本发明的抑制组织固定液中甲醛挥发的方法优点:
一、通过在组织固定液中加入甲醛挥发抑制剂,甲醛挥发抑制剂由按质量比为5:1的十二烷基二苯醚二磺酸钠、二甲基硅油或按质量比为10:1:1的十二烷基二苯醚二磺酸钠、二甲基硅油、乙烯基硅油组成,经混合和乳化后,能快速自发铺展形成不溶性分子膜,用于阻隔组织固定液的液面直接裸露于空气中,可使甲醛挥发速率明显降低,从而起到抑制甲醛气体分子的挥发的目的。
二、本申请的甲醛挥发抑制剂,无毒性,对人体无害;有较强的化学稳定性,本身不与甲醛、蛋白质、脂肪等发生化学反应,同时也不易被氧化;均为液体,且表面张力低,能快速在甲醛溶液表层均匀地铺展成膜,达到液封的目的,能有效阻隔空气中氧气与甲醛接触,减少甲醛聚合反应;不易挥发和降解,可保证分子膜长期存在;本身无色透明,不影响对标本的观察。
三、本申请的组织固定液也可当作细胞保存液使用。
下面结合附图和具体实施方式对本发明作进一步详细的说明。
附图说明
图1本发明的试验1组织固定液甲醛挥发量试验对比图;
图2本发明的试验2组织固定液甲醛挥发量试验对比图;
图3本发明的组织固定液HE染色效果图;
图4本发明的组织固定液Syn免疫组化色效果图;
图5本发明的甲醛挥发性实验图。
具体实施方式
实施例1
本发明的一种抑制组织固定液中甲醛挥发的方法,其抑制方法如下:
通过在组织固定液加入甲醛挥发抑制剂,甲醛挥发抑制剂经乳化铺展形成不溶性分子膜,用于阻隔组织固定液的液面直接裸露于空气中,以抑制甲醛气体分子的挥发,所述甲醛挥发抑制剂配制方法如下:按质量比为5:1的比例称取十二烷基二苯醚二磺酸钠、二甲基硅油,经混合后,用分散均质机乳化3-10分钟,理想为乳化5分钟。所述十二烷基二苯醚二磺酸钠的化学式是C24H32O7S2Na2,作为表面活性剂使用。优点在于:1、其每分子皆含有两个负电荷,分散力较大,在溶液中溶解度较大,对强酸,强碱及盐溶液中均有较高稳定性;2、分子量大,具有较强的吸附能力,配制乳液时效率高,成本低,乳胶粒径大小分布窄而均匀;3、热稳定性强,在80-120℃温度条件下仍适合乳化聚合反应,而不失表面活性。所述二甲基硅油是指二甲基硅氧烷的线性聚合物,是由二氯二甲基硅烷与少量一氯三甲基硅烷经水解、缩聚而得,因聚合度不同而有不同黏度。
优选的,所述甲醛挥发抑制剂配制方法如下:按质量比为10:1:1的比例称取十二烷基二苯醚二磺酸钠、二甲基硅油、乙烯基硅油,经混合后,用分散均质机乳化5分钟,获得二甲基硅油-乙烯基硅油混合液。二甲基硅油-乙烯基硅油混合液的稳定性更优于二甲基硅油,可更有效的阻隔甲醛挥发,对于处理组织标本保存液具有更好的效果。
实施例2
本发明的一种甲醛挥发抑制剂,其采用实施例1所述甲醛挥发抑制剂配制方法制得,并将制备完成的甲醛挥发抑制剂装瓶,作为组织固定液的添加剂使用。当组织样本浸入组织固定液后,再通过滴入甲醛挥发抑制剂,使组织固定液的液面形成有一层不溶性分子膜。
实施例3
本发明的一种组织固定液,它包括以下组份:40%甲醛溶液100mL、十二水磷酸氢二钠6.5g、甲醛挥发抑制剂10g、二水磷酸二氢钠4g、纯化水900ml混合均匀后制成,其中所述甲醛挥发抑制剂采用实施例1所述甲醛挥发抑制剂配制方法制得。使得组织固定液的液面能自动形成有一层不溶性分子膜。
实施例4
本发明的一种组织固定液,它包括以下组份:40%甲醛溶液100mL、十二水磷酸氢二钠5.5g、甲醛挥发抑制剂9g、二水磷酸二氢钠3g、纯化水900ml混合均匀后制成,其中所述甲醛挥发抑制剂采用实施例1所述甲醛挥发抑制剂配制方法制得。
实施例5
本发明的一种组织固定液,它包括以下组份:40%甲醛溶液100mL、十二水磷酸氢二钠7.5g、甲醛挥发抑制剂11g、二水磷酸二氢钠5g、纯化水900ml混合均匀后制成,其中所述甲醛挥发抑制剂采用实施例1所述甲醛挥发抑制剂配制方法制得。
实施例6
本发明的一种组织固定液,其组份在实施例3-实施例5的基础上,还添加有:占总质量0.3%的十六烷基二甲基溴化铵(CTAB)和占总质量0.4%的聚氧乙烯月桂醚(Brij-30),以起到增强抑制甲醛挥发作用。具体的:通过添加0.3%十六烷基二甲基溴化铵(CTAB)和0.4%聚氧乙烯月桂醚(Brij-30),用于增多活性剂表面胶束,甲醛分子以不同的形式被胶束束缚(吸着于胶束/水界面或进入胶束),破坏了纯物质体系的内驱散力,增大了甲醛在液膜和液相中的浓度梯度,在无搅拌等动力介入时,液相中甲醛分子因受胶束的牵制,无法及时补充液膜中因挥发而减小的甲醛浓度,同时液膜中甲醛分子逃逸液面的能力也因胶束的包结而减弱,进而导致甲醛的挥发速率变小。
下面通过试验例进一步证明本发明的有益效果:
试验1:
如图1所示,在相同条件下,进行甲醛挥发量试验,本发明实施例3的组织固定液相比普通组织固定液甲醛挥发量降幅42-62%。注:发明实施例4-5的组织固定液相比普通组织固定液甲醛挥发量降幅也接近于42-62%,但略逊于本发明实施例3的组织固定液,在此不做展开试验。所述甲醛挥发量试验的具体方法:如图5所示,在相同温度下,在相同体积的密封塑料箱中,分别放入相同体积的新型和传统型组织固定液样品,在塑料箱中分别放入甲醛测试仪,可实时测定箱内挥发甲醛浓度。
试验2:
如图2所示,在相同条件下,进行甲醛挥发量试验(具体方法同试验1),本发明实施例6的组织固定液相比普通组织固定液甲醛挥发量降幅58-78%。
试验3:
如图3所示,使用本发明实施例1-6的组织固定液后,组织标本在不同的固定时间HE染色效果与传统固定液效果无差异。
试验4:
如图4所示,使用本发明实施例1-6的组织固定液后,组织标本在不同的固定时间免疫组化染色效果与传统固定液效果无差异。
以上所述仅为本发明的较佳实施例,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等,均包含在本发明的保护范围之内。
Claims (7)
1.一种抑制组织固定液中甲醛挥发的方法,其特征在于,抑制方法如下:
通过在组织固定液加入甲醛挥发抑制剂,甲醛挥发抑制剂经乳化铺展形成不溶性分子膜,用于阻隔组织固定液的液面直接裸露于空气中,以抑制甲醛气体分子的挥发。
2.根据权利要求1所述的抑制组织固定液中甲醛挥发的方法,其特征在于,所述甲醛挥发抑制剂配制方法如下:按质量比为5:1的比例称取十二烷基二苯醚二磺酸钠、二甲基硅油,经混合后,用分散均质机乳化3-10分钟。
3.根据权利要求1所述的抑制组织固定液中甲醛挥发的方法,其特征在于:所述甲醛挥发抑制剂配制方法如下:按质量比为10:1:1的比例称取十二烷基二苯醚二磺酸钠、二甲基硅油、乙烯基硅油,经混合后,用分散均质机乳化3-10分钟。
4.一种甲醛挥发抑制剂,其特征在于:其采用权利要求2或3所述甲醛挥发抑制剂配制方法制得。
5.一种组织固定液,其特征在于,它包括以下组份:35%至40%甲醛溶液100mL、十二水磷酸氢二钠5.5-7.5g、甲醛挥发抑制剂9-11g、二水磷酸二氢钠3-5g、纯化水900ml,经混合均匀后制成,其中所述甲醛挥发抑制剂采用权利要求2或3所述甲醛挥发抑制剂配制方法制得。
6.根据权利要求5所述的组织固定液,其特征在于,它包括以下组份:35%至40%甲醛溶液100mL、十二水磷酸氢二钠6.5g、甲醛挥发抑制剂10g、二水磷酸二氢钠4g、纯化水900ml,经混合均匀后制成,其中所述甲醛挥发抑制剂采用权利要求2或3所述甲醛挥发抑制剂配制方法制得。
7.根据权利要求6所述的组织固定液,其特征在于,其组份还含有:0.3%十六烷基二甲基溴化铵和0.4%聚氧乙烯月桂醚。
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