CN1173181A - 作为在下丘脑功能中发生改变的神经化学引发剂的孕甾烷和胆甾烷 - Google Patents

Abstract

本发明涉及改变个体下丘脑功能的方法。该方法包括经鼻部给人施用犁骨外激素(vomeropherin)比如孕甾烷或胆甾烷类固醇,或者含有犁骨外激素的药物组合物,使其与特定的神经上皮受器相结合。该一种或几种类固醇最好以含有一种或多种药物可接受载体的药物组合物的形式来给药。本发明的其它实施方案包括含有类固醇的药物组合物。

Description

作为在下丘脑功能中发生改变的 神经化学引发剂的孕甾烷和胆甾烷

技术范围

本发明一般涉及在人类下丘脑功能中发生变化，从而改变某些由个体的下丘脑为传递介质的行为和生理的药物组合物及方法。更具体说，本发明涉及某些孕甾烷和胆甾烷等类固醇作为生理和行为的神经化学实现物的应用。

有关先有技术的叙述

本发明涉及某些化合物，即孕甾烷和胆甾烷等类固醇，也涉及使用这些化合物作为人类犁骨外激素(vomeropherins)的使用方法，用它来改变下丘脑功能，以此来改变某些必然引起的行为与生理效果，比如减少焦虑。孕烷甾族化合物的特征是具有四环甾族的结构，在13-位和10-位有甲基化作用，而在17-位有乙基化作用。孕甾烯是孕甾烷的一个亚组，具有至少一个双键。奥洛夫(Ohloff，G)等人在《天然立体化学学报》(Helv.Chim.Acta)(1983) 66：192-217中已表明，几种类固醇(雄甾烯类)具有随不同异构体、非对映立构体和对映立构体的形式而不同的气味(该文献在此引作参考)。已有报道说这类化合物中的某些物质在一些哺乳类物种中有外激素的作用，比如说猪体内的5α-雄甾-16-烯-3-酮和5α-雄甾-16-烯-3α-醇，见麦罗兹(Melrose，D.R)等在《英国科学家杂志》(Br.Vet.J.)(1971)127：497-502中的文章。由雄性的猪产生的这种16雄甾烯类，在发情期的母猪会诱发交配行为(见克劳斯(Claus)等人在《实验》(Experimentia)(1979) 35：1674-1675)。

胆甾烷类固醇的特征是有一个5碳侧链，即在类固醇核的C-17位置上有一个2-戊基。有些研究注意到，在某些种类的动物中，某些16雄甾烯的各种性能，如浓度、代谢性能和定位作用是具有性别二态性的，这些化合物可包括5α-雄甾-16-烯-3α-醇和5α-雄甾-16-烯-3-酮，参见布鲁斯般(Brooksbank)等人的《内分泌杂志》(J.Endocr.)(1972) 52：239-251；克劳斯(Claus)等人的《内分泌杂志》(1976) 68：483-484；克万(Kwan)等人的《医学科学研究》(Med.Soi.Re.)(1987) 15：1443-1444。比如已经发现，在男性和女性人的外周血液、唾液和腋分泌物中，有不同浓度的5α-雄甾-16-烯-3α-醇和5α-雄甾-16-烯-3-酮以及雄甾-4，16-二烯-3-酮，见克万(Kwan，T.K.)等人的《医学科学研究》(Med.Sci.Res.)(1987) 15：1443-1444，提出了它们作为人类外激素在一定程度上影响选择和判断的功能(见同上文献，也见戈尔(Gower)等人的《腋下气味中有气味类固醇的重要性》，在图书《香料》(Perfumery)pp 68-72；Van Toller and Dodds出版公司，Chapman and Hall，1988年版；科克斯密恩(Kirk-Smith，D.A.)等人的《普通心理学和精神病行为研究》(Res.Comm.Psychol.Psychiat.Behav.)(1978)3：379。雄烯醇(5α-雄甾-16-烯-3α-醇)已申请了专利，要求保护在男用科隆香水和女用香水(男用商标为Andron^TM，女用为Andron^TM，约万(Jovan)公司生产)商品中表现出类似外激素的活性。日本公开特许No 2295916指的就是含有雄烯醇和/或其类似物的香水组合物。在人类腋下分泌物中出鉴别出雄甾二烯-3β-醇)(以及可能的3α-醇)(见戈尔等上述文献p57～60)。在另一方面，在哺乳动物特别是人类的性行为或繁殖行为中是不是任何假想的外激素实际上起着任何作用，在文献中统一的看法则很少。见伯尚(Beauchamp，G.K.)等人“哺乳动物化学交流中的外激素概念：评论”，在1976年科学院出版社出版的《哺乳动物的嗅觉，生殖过程及行为》(多蒂(Doty)编著)一书中，也见戈尔等人的上述文献中p 68-73。

某些雌甾烯类固醇对于某些哺乳动物的外激素性质曾被叙述过。米歇尔(Michael，R.P.)等人在《自然》(1968) 218：746指的就是以雌激素(特别是雌甾二醇)作为雄性恒河猴的外激素吸引剂。帕罗特(Parrot，R.F)在《激素与行为》(Hormones and Behavior)(1976)7：207-215中报道了注射苯甲酸雌二醇酯在卵巢切除的鼠中会诱发交配行为；也报道了在恒河猴体内雌二醇在血液中含量对于性反应中的作用，见菲尼克斯(Phoenix，C.H)《生理学与行为》(Physiol.andBehavior)(1976) 16：305～310，还叙述了恒河猴的雌性性反应，见菲尼克斯《激素与行为》(1977) 8：356-362。另一方面，在哺乳动物的生殖行为和个体间交流方面外激素是否有什么作用这一点上，文献中则少有一致的意见，见伯尚等人(Beuchamp，G.K.，et al)“哺乳动物化学交流中的外激素概念：评论”，《哺乳动物的嗅觉，生殖过程及行为》，多蒂编著，科学院出版社出版，1976。

本发明的一个实施方案涉及到某些孕甾烷和胆甾烷类固醇的非系统经鼻腔给药，使得在人类受体中引起特定的行为和生理应答，比如降低对心情和性格特性等的负作用。特别是经鼻给药为神经化学受体与一种或多种类固醇，或者与含有类固醇的组合物提供了接触，这里的受体是以前很少了解的神经内分泌结构，一般认为是犁鼻骨器官(即VNO，也看作是雅科伯森(Jacobson′s)器官)。对于大多数较高等动物，从蛇到人，这个器官都可通过鼻孔而到达，而且在某些物种中，它还特别与接受外激素有关(一般见缪勒-施瓦尔茨(Muller-Schwarze)等著的《化学信号》(Chemical Signal，纽约，Plenum出版社1980年版)。位于上颚部的犁鼻骨器官的神经上皮细胞轴索形成了犁鼻骨神经，并与副嗅觉球有直接的突触联系，并从那里间接地输入到皮质中层扁桃状基底前脑和脑的下丘核部。末端神经神经元的远中轴索也可在VNO中起神经化学受体的作用，见斯腾萨斯(Stensaas，L.J.)等《类固醇生化和分子生物学杂志》(J.Steroid Biochem.and Molec.Biol.)(1991)39：553。此神经与下丘脑有直接的突触联系。

约翰逊(Johnson，A)等人在《耳鼻喉科学杂志》(J.Otolaryngology)(1985) 14：71-79中报道了在大多数成人中存在着犁鼻骨器官的证据，但他得出结论，该器官可能是没有功能的。结果相反的意见主张VNO是一个功能性化学感受受体，斯腾萨斯等在其上述文献中、以及莫罕等人(Moran，D.T.等.Garcia-Velasco.J.和M.Mondragon；Monti-Bloch，L和B.Grosser等)在《类固醇生化和分子生物学杂志》(J.Steroid Biochem.and Molec.Biol.)(1991)39都进行了报道。

明显的是，人们希望鉴别及合成出人类的犁骨外激素和外激素，并开发出药物组合物及用来影响下丘脑功能的方法。本发明涉及到一种意外的发现，即当经鼻部对人类容体给药时，某些神经化学配体，特别是孕甾烷和胆甾烷类固醇以及相关化合物，或者是含有这些孕甾烷、胆甾烷或相关化合物的药物组合物特异结合在某些鼻神经上皮细胞的化学受体上，而且这种结合产生一系列神经生理应答，导致个体下丘脑功能的改变。当适当地给药时，某些这类化合物对下丘脑的作用改变了自主神经系统的功能，使行为现象或生理现象多样化，这些现象包括但不限于以下这些：焦虑不安、经前紧张、恐惧、攻击行为、饥饿、血压和其它通常由下丘脑调节的行为及生理功能，请见奥托·阿本泽勒尔(OttoAppenzeller)的《自主神经系统，基本概念及临床概念导论》(1990)科诺尔(Komer，P.I)的《中枢神经对自主心血管功能的控制》以及列维等(Leay，N，M和Martin，P.J.)的《神经对心脏的控制》，这两篇文章都在《生理学手册》(Handbook of Physiology)第二章；“心血管系统-心脏”(第一卷，1979年华盛顿特区，美国生理学会，费合曼(Fishman，A.P.)等编。和同一书《生理学手册》的第三章：“呼吸系统”，第II卷，呼吸控制，米德兰州柏塞斯达市1986年版，美国生理学会。

在一些情况下，单一地给药孕甾烷或胆甾烷类固醇或相关化合物，在另一些情况下一起给药孕甾烷和/或胆甾烷类固醇和/或相关化合物，而在有些情况下，一种或多种孕甾烷或胆甾烷类固醇与一种或几种雌甾烷或雌甾烯类固醇、雄甾烷或雄甾烯类固醇或相关化合物一起给药。

发明概要

因此，本发明的目的是提供含有人类犁骨外激素或外激素，并适于在个体经鼻部给药的药物组合物。

本发明的另一个目的是提供这种组合物的使用方法，用来改变个体的下丘脑功能。

本发明的再一个目的是提供这类组合物的用法，用来改变个体的一般由下丘脑调节的生理及行为功能。

本发明最后一个目的是提供改变下丘脑功能的方法，它们有如下优点：1)直接在鼻道和犁鼻骨器中的化学接受器给药，不用药丸也不用针，即非侵害性给药；2)通过本发明系统而不通过循环系统的药物作用模式，也就是说可以不考虑血脑屏障来影响脑的功能；3)一种直接影响下丘脑的方法-在外激素受体和下丘脑之间有唯一的一个触突连接；以及4)提供高特异性的药物效果，因此大大降低了不希望的副作用的可能性，这是因为感觉神经位于大脑的特定位置。

本发明的其它目的、优点和新的特征部分将在如下的说明书中加以陈述，另外则部分地由本领域技术人员通过对下文的分析和实施本发明而显而易见。

提供一种适于对个体进行鼻部给药的药物组合物就达到了本发明的目标，该组合物含有药物可接受的载体，还含有如下式的孕甾烷类固醇式中P₁选自＝O基、α-(β-)羟基、α-(β-)乙酰氧基、α-(β-)丙酰氧基、α-(β-)甲氧基、α-(β-)低级酰氧基、α-(β-)低级烷氧基和α-(β-)苯甲酰氧基；P₂选自甲基、羟甲基、酰氧甲基、烷氧甲基、低级烷基、羟烷基、酰氧烷基和烷氧烷基；P₃选自氢、＝O基、卤素、羟基、烷氧基和酰氧基；P₄至P₁₂各可独立地是氢、卤素、甲基、或者是一卤代、二卤代或全卤代甲基，当P₂是甲基、P₃是β-羟基时，P₂和P₃可以联起来形成一个环醚；P₁₃是氢、甲基、亚甲基、卤代甲基、卤代亚甲基、乙基、乙烯基、乙炔基、甲基亚甲基、甲基次甲基；“a”、“b”、“c”、“d”、“e”、“h”、“i”和“j”对于任意的双键是供选择的位置，“j”或“k”也可以是三键。卤素取代基包括F、Br、Cl和I原子。

有一类优选的类固醇，其b为双键，特别是其中d或e也是双键。另一类优选化合物的a和c是双键，或者只有c为双键。还有一类优选的化合物含有h为双键，i和j都不存在(即都是单键，j是双键或者j是一个三键。在另一类中，h不存在，而j或i是双键，或者i和j不存在，或者j和i是双键，或者j是一个三键。

“低级烷基”、“低级烷氧基”等意味着包括1～6个碳原子，优选1～4个碳原子的碳链。

本发明还涉及如下式的新型孕甾烷和胆甾烷衍生物：

式中P₁选自＝O基、α-(β-)羟基、α-(β-)乙酰氧基、α-(β-)丙酰氧基、α-(β-)甲氧基、α-(β-)低级酰氧基、α-(β-)低级烷氧基和α-(β-)苯甲酰氧基；P₂选自甲基、羟甲基、酰氧甲基、烷氧甲基、低级烷基、羟烷基、酰氧烷基和烷氧烷基；P₃选自氢、＝O基、卤素、羟基、烷氧基和酰氧基；P₄至P₁₂各可独立地是氢、卤素、甲基、或者是一卤代、二卤代或全卤代甲基，P₁₃是氢、甲基、亚甲基、卤代甲基或卤代亚甲基、乙基、乙烯基、乙炔基、甲基亚甲基或甲基次甲基；而“a”、“b”、“c”、“d”、“e”、“h”、“i”、“j”和“k”是任意的双键的可供选择的位置，“j”或“k”也可以是三键；而且当P₂是甲基而P₃是β-羟基时，P₂和P₃可以连接起来形成一个环醚；但要求的条件是：

i)当P₁为＝O；b存在；e、a、c、d不存在；P₂为甲基；而P₃、P₄、P₇、P₉、P₁₀、P₁₁和P₁₃都是H时，如果h存在或不存在，P₆必须存在而且不能是氢；

ii)当P₁＝OH且c存在；e、a、b和d都不存在；P₂＝甲基；以及P₃、P₄、P₇、P₉、P₁₀、P₁₁、P₁₂和P₁₃部是H；那么

 (a)如果h存在，P₆必须存在且不是H；

 (b)如果h不存在，P₆存在，则P₆不能是H；

 (c)如果h不存在，P₆存在，则i、j都存在；

iii)当P₁＝β-OH、b存在；e、a、c、d不存在；P₂＝甲基；P₃、P₄、P₇、P₉、P₁₀、P₁₁和P₁₃都是H时；

 (a)若h存在，i和/或j必须存在或P₆不是H；

 (b)若h存在；j不能是三键；

iv)当P₁＝α-OH；b存在；e、a、c、d不存在；P₂为甲基；而P₃、P₄、P₇、P₉、P₁₀、P₁₁和P₁₃都是H时，

 (a)若h存在，i一定不存在且P₆不能是H；

 (b)若i和j都不存在，P₆不能是H；

v)当P₁为＝O；b和d存在；e、a和c不存在；P₂为甲基；P₃、P₄、P₇、P₉、P₁₁和P₁₃都是H时；若h不存在而i存在，P₆必须存在且不能是H；

vi)当P₁和P₃是＝O而b存在，h、e、a、c和d不存在；P₂为甲基；P₄、P₅、P₇、P₈、P₉、P₁₀、P₁₁和P₁₃都是H；那么

 (a)若P₆不存在，j不能是双键；

 (b)若P₆是H，i或j必须存在；

vii)当P₁为甲氧基，a和c都存在；P₂是甲基；e、b、d和h都不存在，而P₃、P₄、P₇、P₈、P₉、P₁₀、P₁₁和P₁₃都是H时；那么

 (a)若P₆是H，i或j必须存在；

 (b)若P₆不存在，i和j不能都是双键；

viii)当P₁为＝O，而a、b、c、d、e都不存在；P₂是甲基，而P₃、P₄、P₇、P₉、P₁₀、P₁₁、P₁₂和P₁₃都是H时，那么

 (a)若h不存在，j存在为双键；则P₆不能是H；

 (b)若h、i和j不存在，P₆不能是H；以及

 (c)若h存在，j不能是三键；

ix)当P₁＝OH，a、b、c、d、e和h都不存在；P₂为甲基，P₃、P₄、P₇、P₈、P₉、P₁₀、P₁₁、P₁₂和P₁₃都是H时；那么

 (a)若j为双键，i不存在；则P₆不是H；

 (b)若i为双键，j不存在，则P₆不是H；

 (c)i和j不能都是双键；

 (d)若i和j不存在，P₆不能是H；

x)当P₁是＝O，e和b存在，a、c、d不存在；P₂为甲基；且P₃、P₄、P₇、P₉、P₁₀、P₁₁和P₁₃都是氢时；那么

 (a)若h存在，j不能是三键；

 (b)若h不存在，i是双键，则P₆不是H；

 (c)若h不存在，i是双键，则P₆不是H；

 (d)若h不存在，i和j都不是双键，则P₆不是H；

xi)当P₁为＝O，P₃为OH，b存在，a、e、c、d、h、i、j都不存在，P₂为甲基，及P₄、P₇、P₉、P₁₀、P₁₁和P₁₃都是H时；则P₆不能是H；

xii)当P₁为＝O，b存在，a、e、c、d、h、i不存在，P₆和P₂是甲基，且P₃、P₄、P₅、P₇、P₈、P₉、P₁₀和P₁₁都是H；那么

 (a)若j是双键，P₁₃不能为乙烯基；

 (b)若j或k都不是双键或三键，则P₁₃不能是乙炔基；

xiii)当P₁＝OH，c存在，而a、b、e、d、h和i不存在，P₂和P₆是甲基，P₃、P₄、P₅、P₇、P₈、P₉、P₁₀、P₁₁和P₁₂都是H，那么

 (a)若j是双键，则P₁₃不是乙基；

 (b)若j不存在，k是双键，P₁₃不是甲基亚甲基；

 (c)若j和k不存在，P₁₃不是乙基；以及

 (d)若k是三键，则P₁₃不能是甲基次甲基。

通过提供一个改变个体的下丘脑功能和/或自主功能的方法就达到了本发明的其它目标。为显示在鼻神经上皮细胞表面上的化学受体提供了配体，其中该细胞是非嗅觉上皮组织的一部分，而且在个体的鼻通道中给予此配体，使得该配体特异地结合在化学受体上，导致该个体下丘脑功能改变。

本申请的所有实施方案都涉及并包括了在这些实施方案中公开的类固醇结构的功能等效物，也涉及显示所述功能等同效果的改性的类固醇，而不管这些改性的类固醇是否作为例子列举出过。

附图说明

图1是按照实施例16和17对男性试验化合物A1-P1的积分EVG、GSR和ST数据。

图2是女性人体中A1-P1、A2-P1、A4-P1、A3-P1、A1-P4、A2-P4化合物的积分EVG数据。

图3是女性人体中化合物A1-P1、A2-P1、A4-P1、A3-P1、A1-P4、A2-P4的ST测量数据。

图4是女性人体中化合物A1-P1、A2-P1、A4-P1、A3-P1、A1-P4、A2-P4的GSR测量数据。

图5是女性人体中化合物A1-P3的ST、GSR和EVG测量数据。

图6是女性人体中化合物A1-P3的RF和EKG测量数据。

图7是女性人体中化合物A1-P3的EEG测量数据。

图8是男性人体中化合物A1-P3的ST、GSR和EVG测量数据。

图9是男性人体中化合物A1-P3的RF和EKG测量数据。

图10是男性人体中化合物A1-P3的EEG测量数据。

图11和图12分别是在男性和女性人体中对于化合物A2-P3的ST、GSR和EVG测量数据。

图13和图14分别显示在男性和女性人体中对于化合物A2-P3的EEG测量数据。

图15和图16分别显示在男性和女性人体中对于化合物A2-P3的RF和EKG测量数据。

图17和图18分别显示在男性和女性人体中，对于化合物A8-P1的ST、GSR和EVG测量数据。

图19和图20分别显示在男性和女性人体中，对于化合物A8-P1的RF和EKG测量数据。

图21和图22分别显示在男性和女性人体中，对于化合物A8-P1的EEG测量数据。

图23和图24分别显示在男性和女性人体中，对于化合物A6-P1的ST、GSR和EVG测量数据。

图25和图26分别显示在男性和女性人体中，对于化合物A6-P1的RF和EKG的测量数据。

图27和图28分别显示在男性和女性人体中，对于化合物A6-P1的EEG测量数据。

图29、30和31显示在男性人体中的20，21-二甲基-孕甾-5，20-二烯-3β-醇的ST、GSR、EVG、RF、EKG和EEG测量数据。

图32、33和34显示在女性人体中的20，21-二甲基孕甾-5，20-二烯-3β-醇的ST、GSR、EVG、RF、KEG和EEG测量数据。

图35、36和37显示在男性人体中的20，21-二甲基孕甾-5，20-二烯-3-酮的ST、GSR、EVG、RF、KEG和EEG测量数据。

图38、39和40显示在女性人体中的20，21-二甲基孕甾-5，20-二烯-3-酮的ST、GSR、EVG、RF、EKG和EEG测量数据。

图41、42和43显示在男性人体中，化合物A14-P2的ST、GSR、EVG、RF、EKG和EEG测量数据。

图44、45和46显示在女性人体中化合物A14-P2的ST、GSR、EVG、RF、EKG和EEG测量数据。

图47、48和49显示在男性人体中，化合物A7-P2的ST、GSR、EVG、RF、EKG和EEG测量数据。

图50、51和52显示在女性人体中，化合物A7-P2的ST、GSR、EVG、RF、EKG和EEG测量数据。

图53和54显示在男性人体中，化合物A11-P1的ST、GSR、EVG、EEG测量数据。

图55显示在男性人体中，化合物A13-P1 EEG测量数据。

图56、57和58显示在女性人体中，化合物A13-P1的ST、GSR、EVG、RF、EKG和EEG测量数据。

图59显示在女性人体中，化合物A3/P1的EVG、EDA和BT测量数据。

图60显示在女性人体中，化合物A4/P1的EVG、EDA和BT测量数据。

图61和62分别显示在男性和女性人体中化合物A8/P1的测量数据。

图63和64分别显示在男性和女性人体中，化合物A13/P8的测量数据。

图65和66分别显示在男性和女性人体中，化合物A6/P1的测量数据。

图67和68分别显示在男性和女性人体中，化合物A6/P1的20甲基衍生物的测量数据。

图69和70分别显示在男性和女性人体中，化合物A1/P1的20，21-二甲基衍生物的测量数据。

图71和72分别显示在男性和女性人体中，化合物A6/P1的20，21-二甲基衍生物的测量数据。

图73和74分别显示在男性和女性人体中，化合物A14/P2的测量数据。

图75和76分别显示在男性和女性人体中，化合物A12/P1的测量数据。

图77-78分别显示在男性和女性人体中，化合物A7/P2的测量数据。

图79和80分别显示在男性和女性人体中，化合物A13/P₁的测量数据。

图81和82分别显示在男性和女性人体中，化合物A2/P7的测量数据。

图83和84分别显示在男性和女性人体中，化合物A3/P5的测量数据。

图85-96指的是第二结构式上的胆甾烷。图85和86分别显示在男性和女性人体中，化合物A8/C1的测量数据。

图87和88分别显示在男性和女性人体中，化合物A2/C1的测量数据。

图89和90分别显示在男性和女性人体中，化合物A2/C1的醋酸酯的测量数据。

图91和92分别显示在男性和女性人体中，化合物A1/C1的测量数据。

图93和94分别显示在男性和女性人体中，化合物A3/C1的测量数据。

图95和96分别显示在男性和女性人体中，化合物A13/C1的测量数据。

本发明的详细叙述

I.定义

“情感”是一个短暂的感觉状态。典型的负面的情感是感觉神经质、紧张、害羞、焦虑、烦燥、愤怒、暴怒等“情绪”是持续较长时间的感觉状态，比如内疚、悲伤、快乐、自卑、悔恨、悲痛、忧伤等、“性格特质”是一个个体的个性方面更为持续的特征。典型的消极性格特征是过敏、懊悔、自责、执拗、怨恨、怀恨、畏怯、懒惰等。

按照本发明的犁骨外激素，通过VNO可用于激发下丘脑的一种或多种激素的、行为的和自主的功能。由于下丘脑在许多种体内功能和在VNO与下丘脑之间的神经联系方面起着占优势的作用，按照本发明的犁骨外激素处于激发这样的功能的位置。如控制内分泌的排出量，比如控制加压素和催产素，以及许多其它肽类的垂体排出量。加压素是一种抗利尿激素，因为它在肾脏中的作用加强了水摄取作用，使尿变浓。此外，它在体内有通过其对动脉平滑肌的作用而调节血压的作用，有通过其增强肝脏中糖原向葡萄糖的转化而对代谢发生的作用。催产素的受体在子宫平滑肌和乳房平滑肌上可以找到，催产素通过乳房平滑肌收缩可引起泌乳，并在生产时引起子宫收缩。下丘脑也控制从前垂体腺释放激素，如促肾上腺皮质素(ACTH)、催乳激素、LH(黄体化激素)、GH(生长激素)、TSH(甲状腺激发激素)、FSH(卵泡激发激素)和β-内啡肽。因此，比如，控制黄体化激素分泌的能力可以导致控制女性的生育力或男性睾甾酮的产生。睾甾酮的产生可用来治疗一些疾病，如男子性欲低下，或治疗肌肉消瘦病或症状，如衰老、睾甾酮减少可用来治疗如前列腺癌之类的疾病。

使用按照本发明的犁骨外激素也能够控制下丘脑行为功能。众所周知，下丘脑控制这样的行为表现。如恐惧、盛怒、快乐和调节睡、醒的24小时节律。其它受下丘脑控制的功能包括食欲、渴感、交感功能，比如走神和争论、以及心血管控制、体温调节功能和内脏功能，比如控制内脏肌和消化用酸的分泌。因此，当有许多感觉输出从解剖学的各部分到达下丘脑时，据认为，本发明的犁骨外激素首次提出了一种藉经鼻腔吸入而与犁鼻器上皮细胞接触进行刺激的方法，这是如上所述的激发下丘脑功能的一种方法。

“孕甾烷类固醇”是一种脂肪族多环烃，其特征为在10-位和13-位上连有甲基，在17-位连有乙基(包括不饱和基团)的四环类固醇结构。孕甾烷是孕甾烷类的一个亚组，前者一般被理解为它具有至少一个双键。再有，所有具有上述结构特征的衍生物一般也指的是孕甾烷类固醇。

“胆甾烷类固醇”是一种脂肪族多环烃，其特征是在10-位和13-位有甲基，在17-位有2-戊基(包括不饱和基团)的四环甾族化合物结构。

“化学受体”是显示在“化学感受”神经上皮细胞表面上的受体分子，它以立体选择性的方式与特定的一种或数种配体结合。这种特异的结合引发了一种信号转导，信号转导又引发传入的神经脉冲。特别在味蕾。嗅觉上皮和犁鼻组织中都发现了化学受体。

“孕甾烯类固醇”在本文中使用时指的是一种具有四环甾结构的脂族多环烃，在其A环中至少有一个双键，在10位和13位连有甲基，在17-位连有乙基(包括不饱和基团)，而在3-位连有＝O基、羟基或羟基衍生物，如烷氧基、酯基、苯甲酸根、环戊丙酸根、硫酸根或葡糖醛酸根，含有这些结构特征的衍生物一般也认为是孕甾烯类固醇。

下面的结构显示对孕甾烷的孕甾烯通用的四环类固醇结构。在叙述基团和取代基位置时，将使用如下的数字系统：

“性别两形性的”指的是对于同一物种的雄性和雌性之间对药剂的效果或反应上的差异。

药物的“有效量”为当对需要这种药的个体给药时，达到预期生理和/或心理效果的数量和/或浓度范围。在本案中，需要给药的个体是具有一般受下丘脑调节生理或行为特质的个体，其中，希望能影响下丘脑的功能或特质。对给定药物的有效量，随着要影响的功能、希望的效果、给药途经等的不同而变化。例如，当类固醇作为涂在对象表面皮肤的溶液而给药时，有效浓度为1μg/ml～100μg/ml，优选10～50μg/ml，最优选20～30μg/ml。当类固醇直接导入到VNO时，有效量大约1pg～约1ng，更优选约10pg～约50pg。当类固醇通过软膏。油脂或气溶胶等形式经鼻道给药时，有效量为约100pg～约100mg，优选约1ng～约10mg。由此可见，一种药物当通过一些途经给药是有效的时，通过另一些途经给药时就不是有效的。

“下丘脑”是间脑的一部分，由下丘脑沟下面的第三脑室的前侧壁所构成，包括了形成脑室底的结构，这包括视交叉、灰结节。漏斗和乳头体。下丘脑调节自主神经系统，并控制几种生理和行为功能，比如所谓争斗和飞翔反应，性欲、水平衡、糖和脂肪代谢、饥饿、调节体温、内分泌等。下丘脑也是可调节血压的后叶加压素和诱发生产和泌乳的催产素的分泌源。所有的下丘脑功能都有可能受到本文中所述的犁骨外激素治疗法的调节。

在本文中使用的“配体”是一种分子，其功能是作为一种化学信号，通过与展现在受体细胞表面上的受体分子发生特异性结合，从而引发通过细胞表面发生信号的转导。配体与化学感受受体的结合是可测量的，化学感受组织，比如嗅觉神经上皮或犁鼻神经上皮，含有许多神经受体细胞，每个都展现出至少一个细胞表面受体。受体分子中许多都具有相同的配体特异性。所以，当该组织暴露于它具有特异性的配体时(比如，将VNO暴露于犁骨外激素)，能测量到在细胞表面受体电位中的累积变化。

在本文中使用的“低级烷基”意味着含有1至4个碳原子的分支或不分支的饱和烃链，例如甲基、乙基、正丙基、异丁基等。本文中使用的“烷氧基”一词是按其通常意义使用，意味着其中R为如前面所定义的-OR基。

“外激素”是在同一物种成员之间，通过分泌和外周化学感受进行联络而提供化学手段的物质。哺乳动物体内外激素一般由位于鼻部犁鼻器中的受体来检出。通常，外激素影响发展、再生和相关行为。“犁骨外激素”是一个更为一般的术语，它包括外激素，也描述了来自任何来源的一类物质，它们的功能是作为化学感受信使，和特定的犁鼻神经上皮受体结合并诱发生理和行为的效应。犁骨外激素的生理效应是通过犁鼻器介异的。

一个微微克(pg)等于0.001个毫微克(ng)，一个ng等于0.001微克(μg)而一个μg等于(0.001)毫克(mg)。

II.实施本发明的模式

A.在本发明中使用的孕甾烷

本发明涉及一组孕甾烷类固醇类化合物。

据认为在这一组中的孕甾烷亚组是新的化合物。对于如在表中所列的如下各化合物，在本文中叙述其合成方法：

图1包括了本发明所涉及的孕甾烷，但它并限于此范围。后面的合成示意图则叙述了为制备这些孕甾烷所用的中间体和基础合成方法。

                                   孕甾烷

基础合成方法

参照前面的表格，下面是对于给定行(从A1～A3)和给定列(从P1～P8)的中间体的示例性合成方法。

A类基础物质合成

A1：

贝帕西等(Percy L.Julian，Edwin W.Meyer和Helen C.Printy)在《美国化学学会志》(J.Amer.Chem.，Soc)1948，70，3，887。

还有一个商业上可得到的基础物质，比如17-α-乙炔基睾甾酮。

A2：

这是一种商业上可购得的基础物质，比如脱氢表雄甾酮、孕烯醇酮。

A3：

见卢海德等(David G.Loughhead)《有机化学杂志》(J.Org.Chem.，)1985，Vol.50.No.20 p 3931。

A4：

见卡博尔等(I.Z.Kabore，Q.Khuong-Huu和A.Pancrazi)《四面体》(Tetrahedron)，1978，Vol.34.P 2807。

A5：

见多里等(I.Dory，G.Szabo和P.Opoczky)《匈牙利化学报》(Acta.Chim.Hung.，)Vol 20 p 67(1959)。

克里格等人(Bernhard Krieger，Egbert Blanke和Emanuel Kaspar)德国专利1,297,603(1969)

A6：

见克鲁宾那等(Alan M.Krubiner.Norman Gottfried和Eugene P.Oliveto)《有机化学杂志》(J.Org.Chem)1969，34，11，3502。

希阿基等(Roberto Sciaky和Alberto Consonni)《意大利化学杂志》(Gazz.Chim.Ital.)1962，92，730。

A7：

A8：

见例子：

彼德洛夫等(Vladimir petrov，Yueh-Sha Wang，Leon Lack，AverySandberg，Nobuynki Kadohama和Keith Kendle)《类固醇生化杂志》(J.Steroid Biochem)1983，19，1491。

A9：

周等人(Steven R.Schow和Trevor C.McMorris)《类固醇》(Steroids)1977，Vol，30，No.3，P 389。

还有一种可从商业得到的基础物质，比如17-α-乙炔基二氢睾甾酮。

A10：

这是一种商业可获得的基础物质，比如孕甾醇酮、睾甾酮。

另外：

括利等人(J.M.Kohli，A.Zaman和A.R.Kidwai)《植物化学》(Phytochemistry)1971，Vol.10，P.442。

A11：

见例子：

布朗等人(Frederick Brown和Carl Djerassi)《美国化学学会志》(J.Amer.Chem.Soc.，)1980，102，2，807。

A12：

P类基础物质合成

P1：

伯色等(Ajay K.Bose和N.G.Steinberg)《合成》(Synthesis)1970，P.595

周等(Steven R.Show和Treror C，Mc Morris)《类固醇》(Steroids)1977，Vol 30，No.3，P 389。

P2：

布列斯洛夫等(Ronald Breslow和Louis Maresca)《四面体通讯》(Tetrahedron Ietters)1977，No.7，P 623。

哈兹拉等(Braja G.Hazra，Vandana S.pore，Padmakar L.Joshi)《化学学会志》(J.Chem.Soc.，)Perkin Trans I，1993，(15)，1819-22。

另外一种商业上可得到的基础物质，比如5α-孕甾-17(20)-烯-3β-醇(Steraloids)

P3：

这是一种商业可得到的基础物质，比如：孕甾-5，16-二烯-3β-醇(Steraloids)

当购买不到时，可如下式进行合成：

杜斯扎等(John P.Dusza和Werner Bergman)《有机化学杂志》(J.Org.Chem.，)1960，25，79。

P4：

肖皮等(C.W.Shoppee，Ruth E.Lack和B.C.Newman)《化学学会志》(J.Chem.Soc.，)1964，P 3388。

另一种商品化基础物质，比如5α-孕甾-3β-醇(Steraloids)：

P5：

克鲁宾那等(Alan M.Krubiner，Norman Gottfried和EugeneP.Oliveto)《有机化学杂志》(J.Org.Chem.，)1969，Vol.34，No.11，P.3502。

P6：

奥利维托等(Eugene P.Oliveto，Corrine Gerold和Lois Johnson)《美国化学学会志》1951，73，5073。

P7：

克拉布尔等(Pierre Crabble和Esperanza Velarde)美国专利3,681,410，1972。

P8：

见吉卢德等(Maya Dvolaitsky Anne M.Giroud和JeanJacques)《法国化学协会会报》(Bull.Soc.Chim.France)1963，62。

法国专利1,536,034，1968。

17α-孕甾烷

对于基础物质P1、P4和P5、在17-位的正常构形是β。然而，相应的17α类似物也可以用17α-孕甾醇酮作为起始物来制备。比如：

克鲁宾那等(Alan M.Krubiner，Norman Gottfried，和Engene P.Oliveto)《有机化学杂志》，1969，Vol 34，No.11，P.3502。

甲基孕甾烷

下面的方法可将甲基引入到无论哪种结构(即P₁、P₂、P₃、P₄和P₆)的20-位上：

琼斯等(J.Bryan Jones和Keith D-Gordon)《加拿大化学杂志》(Can.J.Chem.，)1972，Vol，50，p.2712。

杜兹札等(John P.Dusza和Werner Bergmann)《有机化学杂志》1960， 25，79。

卢海德(David G.Loughhead)《有机化学杂志》1985，50，3931。

美国专利3,681,410公开了6α-甲基类似物的制备方法：美国专利3,492,318公开了18-和21-甲基类似物的制备方法：某些甲基化的孕甾醇酮前体是商品化的，可得到6，16α(β)-甲基；

此外也容易得到 17α-甲基孕甾醇酮：法国专利1,363,191：

因此，使用适当的甲基孕甾醇酮前体也可以制备在6、16或17位带有甲基的由孕甾醇酮合成的化合物。

通过三种通用方法中的一种可以制备如所述的18，21-二甲基孕甾-4，16-二烯-20-炔-3-酮之类的二甲基化合物：

第一种方法将比如在6、16或17位甲基化的前体与在比如20位引入甲基的方法结合。

第二种方法使用了二甲基化的前体，比如商品化的6，16α-二甲基孕甾烯醇酮。

在下面的例子中叙述了其它二甲基化孕甾烯醇酮前体的合成方法：

                                                       7，7-二甲基孕甾烯醇酮

朱利亚等(Sylvestre Julia，Colette Neuville和Pierre Simon)《法国化学协会会报》1962，1495。

                                             16，16-二甲基孕甾烯醇酮醋酸酯

夏皮罗等(Elliot Shapiro，Theodore Legatt，Lois Weber，MerlSteinberg，A.Watnick，M.Eisler，Marilyn Gilmore.Hennessey，C.T.Coniglio，W.Charney和Eugene P.Oliveto《医药化学杂志》(J.Med.Pharm.Chem.)1962，5，975。

                                            16α，17α-二甲基二甲基孕甾烯醇酮

凯恩斯等(James Cairns，Colin L.Hewett，Robert T.Logan，George McGarry，Donald F.M.Stevenson和Gilbert F.Woods)《化学协会志》Perkin I，1976，1558

                        17α，21-二甲基二甲基孕甾烯醇酮

德更西等(R.Deghenghi和R.Gaudry)《美国化学学会志》1961，4668。

英国专利927,515：

                                               6，16B-二甲基孕甾烯醇酮

                                           6，17α-二甲基孕甾烯醇酮醋酸酯

德更西等(Romano Deghenghi和Roger Gaudry)《四面体通讯》1962，No.11.P489

                                                4，4-二甲基孕甾烯醇酮

亚当斯等(W.J.Adams，D.K.Patel，Vo Petrow，I.A.Stuart-Webb和B.Sturgeon)《化学学会志》1956，4490。

第三种方法由未甲基化的前体如孕甾烯醇酮开始，如下例使用引入两个甲基的方法：

                                     20，21-二甲基孕-5，20-二烯-3β-醇

20，21-二甲基孕甾烷也已知为24-失碳胆甾烷。24-失碳胆甾烷为可通过胆甾烷前体降解而制备，见下例：

见平野等人(Yutaka Hirano，Tadasi Eguchi，Masaji Ishigmo和Nobuo Ikekawa)《制药化学会刊》(Chem，Pharm.Bull.，)1983，31(2)，394。

卤代孕甾烷

美国专利3,681,410叙述了如下化合物的制法：

巴吞等人(Derek H.R.Barton，George Bashiardes和Jean-Louis Fourrey)《四面体通讯》1983，Vol 24，1605。

姜等人(Biao.Jiang和Yuanyao Xu)《四面体通讯》1992，Vol 33，511。

某些甲基化的孕甾烯醇酮前体是商业化的，可得到6，16α(β)甲基：

此外，17α-甲基孕甾烯醇酮是容易得到的：法国专利1,363,191：

因此，使用适当的甲基孕甾烯醇酮前体也可以由孕甾烯醇酮制备在6、16或17位常有甲基的合成的化合物。

表格II 胆甾烷

基础物质合成

参照前面表格，对于在给定的行(A1～A13)及列(C1～C7)的基础物质，下面是举例的合成方法。

A类基础物质的合成

A1：

见实施例

A2：

这是一种商品化基础物质，比如孕甾烯醇酮、豆甾醇、胆酸。

A3：

见实施例

A6：

见实施例

A8：

见实施例

A11：

巴吞等(D.H.R.Barton，J.Boivin，D.Crich和C.H.Hill)《化学学会志》Perkin Trans I，1986，p.1805。

A13：

见实施例

C类基础物质合成

C1：

施密特等(J.P.Schmit，M.Piraux和J.F.Pilette)《有机化学杂志》1975，Vol，40 No.11 p.1586。

C2：

伯格曼等(W.Bergmann和J.P.Dusza)《有机化学杂志》1958，Vol：23，p.1245。

C3：

里尔等(J.E.Van Lier和L.L.Smith)《有机化学杂志》1970，Vol.36，No.8，p.2631。

C4：

布戈尔等(A.Burger，F.Colohert，C.Hetru和B.Luu)《四面体》1988，Vol.44，No.4，p.1141。

C5：

图那(A.B.Turner)《化学和工业》(Chemistry and Industry)1979，p 385。

C6：斯多克(Gstoeck和H.Stein)，德国专利854,517,1952。

C7：

布戈尔等(A.Burger，J-P.Roussel，C.Hetru，J.A.Hoffmann和B.Luu)《四面体》1989，Vol.45，No.1，p 155。

24-降甾和24-甲基胆甾烷

使用类似的方法可以制备具有一个短侧链或在24位有一个碳原子的长侧链的结构。用类似方法也可得到23-甲基胆甾烷。见下文实施例。

     23-甲基                                                 24-甲基

施密特等(J.P.Schmit，M.Piraux和J.F.Pilette)《有机化学杂志》1975，Vol，40，No.11，p.1586

24-甲基

谢赫(Y.M.Sheikh和C.Djerassi)《类固醇》1975，Vol.26(1)，p.129。

    24-失碳                           23-甲基                               24-甲基

森崎等(M.Morisaki，M.Shibata，C.Duque，N.Imamura和N.Ikekawa)《化学制药会刊》(Chem.Pharm.Bull.)1980，Vol.28(2)，p 606。

                  24-失碳

巴吞等(D.H.R.Barton，J.Boivin，D.Crich和C.H.Hill)《化学学会志》Perkin Trans.I，1986，p.1805。

     24-失碳                                     24-甲基

伯戈尔等(A.Burger，F.Colobert，C.Hetru和B.Luu)《四面体》1988，Vol.44，No.4，p.1141。

24-失碳

特罗斯特等(B.M.Trost，R.J.Kulawiec和A.Hammes)《四面体通讯》Vol.34，No.4，p.587。

24-失碳

伯戈尔等(A.Burger，J-P.Roussel，C.Hetru，J.A.Moffmann，和B.Luu)《四面体》1989，Vol，45，No.1，p 155。

C.合成方法

1.制备3-、6-、19-、20-和21-位衍生物

在本发明方法中使用的化合物是在3-、6-、19-、20-和21-位被取代的孕甾烷类固醇。3-取代类固醇中许多是可来源于氧代类固醇的已知化合物。正如图1中所示，孕甾-4，20-二烯-3-酮(1)可转化为3，5，20-三烯醚(2)或1，4，20-三烯-3-酮(3)，它们分别是6-取代和3-取代羟基衍生物的原料。

通过与烷基化试剂如氟硼酸三甲基鎓盐、氟硼酸三乙基鎓盐或氟磺酸甲酯等在惰性氯碳烃溶剂如二氯甲烷中反应，从其相应的羟基类固醇制备烷氧基衍生物。另外，也可以在极性质子惰性溶剂如DMF、DMSO和六亚甲基磷酰胺中和烷基化试剂如NaH、KM或KOBut、氧化银或氧化钡反应。

合成类固醇的一般操作程序是本领域技术人员公知的。这时，必须确定反应时间和温度。这可由常规方法来确定。在加入所需的试剂后，在惰性气氛下搅拌混合物，每隔1小时取出一份反应物。用色谱分析这一份反应物以监测原料是否消失。当原料消失时开始加工操作。如果在24小时内原料还未消耗，则将混合物加热至回流，如前述地每小时取样分析，直至原料消失，在此情况下，让混合物冷却，然后开始加工操作。

用本领域熟练技术人员公知的色谱和/或结晶方法进行产物的纯化。

2.制备19-OH衍生物

合成19-羟基-孕甾-4，17-二烯-3-酮

在示意图3中提供了此化合物的合成方法

D.药物组合物和用法

本发明的一个实施方案是一种改变个体下丘脑功能的方法，另一个实施方案则是改变个体的自主功能。这些自主功能包括但不限于心率、呼吸频率、脑波样式(α皮质活性百分比)、体温等。另外一些实施方案包括但不限于减少副作用、降低个体的消极情绪和负面性格特质的方法。另一个实施方案是治疗妇女经前紧张的方法。所有这些实施方案都藉助于非系统地经鼻部给药方法，使用某些孕甾烷或胆甾烷类固醇，结合使用孕甾烷和胆甾烷类固醇，以及结合使用一种或几种孕甾烷或胆甾烷类固醇和一种或几种睾甾烷和/或雌甾烯类固醇来实现。

这种特定的给药方式与其它一些方式如口服或注射之间的区别有几个重要的方面，这是由于由鼻部给药类固醇配体能提供与犁鼻器的直接接触。在本发明的方法中，不用药丸或针剂，即不使用非侵入的方式，而直接向在鼻道中和犁鼻器上的化学感受器给入适当的配体。如在本文中所述的，药物通过配体和分布在鼻子中，特别在犁鼻器中的特异感受器结合而发挥其作用。而且药物的作用方式是通过神经系统而不是通过循环系统-因此，改变脑的功能而不用考虑血脑屏障。这些治疗方法提供了通过神经系统影响下丘脑的直接手段，因为在外激素受体和下丘脑之间只有一个突触连接。由于感受神经位于大脑中的特定位置，这个方法具有高度特异性药效，这就大大减少了不希望有的副作用的可能性。

犁鼻器的接触是重要的，因为犁鼻器与化学感受/外激素功能是相联系的。犁鼻器由一对在鼻中隔内缘能找到的盲管状息室组成。犁鼻器含有神经上皮，其轴突具有直接的突触到扁桃体，由那里再通经下丘脑。很多文献报导犁鼻器存在于大多数陆栖脊椎动物，包括人类胎儿体内，然而在成人体内一般认为是残留器官(见约翰森等如前面的文献)。

如本文中所叙述的配体物质或其硫酸酯、环戊丙酸酯、苯甲酸酯、丙酸酯或葡萄糖醛酸酯衍生物可直接给药，但最好以组合物形式给药。它们可以制备成液体制剂的形式，如液体、悬浮液等，最好以适合于精确剂量单独给药的单剂形式。可以以滴鼻剂或气溶胶的形式用液体剂型给药。另外，可以将活性化合物制备成油脂或药膏状组合物，局部涂于鼻腔内部。此外，犁骨外激素可以以含在通进鼻腔的空气中的蒸汽形式给药。作为另一种选择方式，可以以胶囊的方式，可以用合成聚合物(如聚硅氧烷)和天然聚合物(如明胶和纤维素)制成整体胶囊或微胶囊进行有控制的释放这些药剂来进行给药。通过适当地选择用来控制扩散速度的聚合体系可以控制释放速度〔见朗格等人(Langer R.S和Peppas，N.A)《生物材料(Biomaterials)》2，201，1981〕。天然聚合物如明胶和纤维素可在几分钟到几小时内缓慢溶解，而聚硅氧烷在几个月的时间内仍保持完整。药物组合物将包括常用的药物载体或赋形剂，式(I)的一种或几种活性孕甾烷或胆甾烷，组合物可以另包括或不包括一种或几种睾甾烷或雌甾烯类固醇。此外，组合物可以包括其它医药、药剂、载体、佐剂等。

信息化学配体的最适宜联系手段就是吸入在另外生物的皮肤上存在的天然存在的外激素。由于这些化合物是相对不挥发性的、据估计，在紧密接触过程中，人类客体将从另外人的皮肤上吸入微微克(pg)量的天然存在的类固醇。在此吸入量中，据估计只有大约1％达到犁鼻器的感受器。

当然，犁骨外激素的给药量将取决于被治疗的客体、疾病的严重程度、给药方式、给药频度以及医生处方的判断。然而，至少约10pg的单剂量直接给到犁鼻器的腔中在引发跳越的自主应答方面是有效的。当向鼻腔给药时，剂量是约100pg～约100μg，优选约1ng至约10μg，更优选约10ng至约1μg。给药频率希望在一小时一剂至一月一剂之间，优选8次/天至隔日一次，更优选每天1～3次。在载体中含有1种或几种活性化合物和任意的药物佐剂的油膏可用基料如石油凝胶、动物油或羊毛脂为基料来制备，载体有比如水、盐水、葡萄糖水溶液、甘油、乙醇等。

可液化给药的药物组合物可以比如将如上面所定义的活性化合物和任意的药物佐剂溶解、分散在载体中而制备，载体比如水、盐水、葡萄糖水溶液、甘油、乙醇等，由此形成溶液或悬浮液。如果需要，要给药的药物组合物也可含有少量无毒的助剂，如湿润剂、乳化剂、pH缓冲剂等，这比如醋酸钠、一月桂酸山梨糖醇酯、三乙醇胺醋酸钠、三乙醇胺油酸酯等。制备这些剂型的实际方法是已知的，或者对本领域熟练技术人员是显而易见的，比如请见《Remington制药科学》(Remington′sPharmacentic Sciences)，马克(Mack)出版公司，埃斯顿(Easton)，PA 1975年第15版。总之，将要给药的组合物或制剂将含有一定数量的一种或几种活性化合物，此数量能有效地减轻待治疗客体的症状。

为了进行气溶胶给药，最好将活性成分以细分散的形式与表面活性剂和抛射剂一起提供。活性组分的含量百分比一般为0.001～2％(wt)，优选0.004～0.10％。

当然，表面活性剂必须是无毒的，最好可溶于抛射剂当中。这种表面活性剂的代表是含有6～22个碳原子的脂肪酸，比如己酸、辛酸、月桂酸、棕榈酸，硬脂酸、亚油酸、油硬脂酸和油酸与脂肪多羟基醇或其环状酸酐，如乙二醇、甘油、赤藓糖醇、阿拉伯糖醇、甘露糖醇、山梨糖醇和由山梨糖醇得到的己糖醇酸酐(以Span的商品名出售的去水山梨糖醇酯)形成的酯或部分酯和这些酯的聚氧乙烯和聚氧丙烯衍生物。可以使用混合酯，如混合的或天然的甘油酯。优选的表面活性剂是油酸失水山梨糖醇酯，比如以商品名Arlacel C(倍半油酸缩水山梨糖醇酯)、“Span 80”(单油酸缩水山梨糖醇酯)和“Span 85”(三油酸缩水山梨糖醇酯)出售的化合物。表面活性剂可占组合物重量的0.1～20％，优选0.25～5％。

组合物的其它部分一般是抛射剂。液化的抛射剂在环境温度一般是气体，在压力下凝成液体。在适当的液化抛射剂当中有含有不多于5个碳原子的低级烷烃，如丁烷和丙烷；氟化或氟氯化的烷烃，如以Freon商品名出售的产品，也可使用上述这些的混合物。

在制造气溶胶时，用适当的抛射剂装满一个装有适当阀门的容器，其中含有细分散的活性成份和表面活性剂。这些成份就这样保持在高压下，直至打开阀门将其放出。

还有另一种给药方法是将挥发性液体组合物局部地涂在皮肤上，最好是个体的表皮上。组合物一般将含有醇类如乙醇或异丙醇。在组合物中也可包括令人愉快的芳香剂。

F.度量情感、情绪和性格特征

与情感、情绪和性格特质相联系的感觉状态一般是用问题调查单进行度量的。比如问题单包括几个指示感觉状态的形容词，这个单子可以提供给被测量人。测量人通过形容词和该感觉在数字标尺上的强度度量评价他(或她)的感觉状态。相关形容词的组合和每个形容词客体评价的统计分析为测量各种感觉状态提供了测量基础。

另外，可以用自主变化来度量感觉状态，比如在多图评价中使用的方法(流电皮肤反应、脉冲速率等)，可见卡巴那克(Cabanac，M.)《生理学年评》(Annual Review of Physiology)(1975)37：415；哈蒂(Hardy，J.D.) 《体温调节》(Body Temperature Regulation)59章pp 1417，载于《医疗生理学》(Medical Physiology)Vol II Ed：VB Mounccastle(1980)；沃尔夫拉姆·布塞因(Wolfram Bouscein)《电皮活性》(Electrodermol Activity)(Plenum出版社1992)。此外，也可以评价非言语暗示(如面部表情)和身体姿态。

III.实施例

下面各实施例意图说明而非限制本发明。

实施例中使用的缩写词如下：

aq＝水溶液；RT＝室温；PE＝石油醚(b.p.50～70℃)；DMF＝N，N-二甲基甲酰胺；DMSO＝二甲基亚砜；THF＝四氢呋喃。

方案1-9

                                方案1

                                   方案2

                                       方案3

                                       方案4

                             方案5  孕甾烷氧化

                                方案621-亚甲基-20(R)-甲基孕甾烷的合成

                               方案7  孕甾烷合成

                                方案8  胆甾三烯的合成

                                示意图9  胆甾烯的合成

实施例

实施例1

孕甾-4，20-二烯-3α(β-)醇

在-78℃和氩气下，向1M的三戊基硼氢化锂溶液(5.0ml，5.0mmol)中加入孕甾-4，20-二烯-3-酮(1.10g，3.70mmol)的无水THF(14ml)溶液，在搅拌下将混合物温热至室温。3小时后，将混合物冷却至-78℃，依次加入如下试剂：水(2ml)、乙醇(6ml)、12％ KOH水溶液(10ml)和3％双氧水(50ml)。在搅拌下让混合物温热至室温。2小时后，加入醋酸乙酯(200ml)并继续搅拌。分离有机层，用饱和NaHSO₃溶液、饱和NaHCO₃溶液和饱和NaCl溶液洗涤，用Na₂SO₄干燥并真空浓缩，得到2.1g粗产品。用闪色谱在210g硅胶上(230-400目)用EtOAC/CH₂Cl₂(5∶95→7∶93)洗脱将其提纯，得到3个级份。级份1(0.8g)含有不纯的3α-醇。级分2(0.1g)是3α-和3β-醇的混合物。级份3(0.25g)是纯的3β-醇(23％)。在80g硅胶(230-400目)上用EtOAc/己烷(10∶90→15∶85)洗脱用闪色谱再提纯级分1，得到0.15g纯的3α-醇(14％)。

实施例2

孕甾-3，5，20-三烯-3-基甲基醚，2。

参见示意图1，如下方法制备化合物2，3，4和5。

将孕甾-4，20-二烯-3-酮(1，1.00g，3.35mmol)在2，2-二甲氧基丙烷(5.0mL，41mmol)，DMF(5.0mL)和甲醇(0.2mL)中的溶液与催化剂-水合对甲苯磺酸(26.9mg，0.141mmol)回流2小时。冷却以后，加入NaHCO₃(153.6mg，1.828mmol)，在75mL己烷和50ml冰水之间分配反应混合物。用50mL一份的水将有机相洗涤两次，再用50mL盐水洗一次，然后通过高17mm，直径30mm的硅胶60柱进行过滤，再用100mL己烷进一步洗脱产品。将合并的洗脱液进行浓缩，再用丙酮/甲醇重结晶，得到有光泽的很浅黄色的小片状物(828.7mg，2.652mmol，79％)，m.p.111-114℃。

实施例3

孕甾-1，4，20-三烯-3-酮

在氩气下，将孕甾-4，20-二烯-3-酮(1，1.19g，3.99mmol)在40mL苯中与2，3-二氯-5，6-二氰基-1，4-苯醌(DDQ，2.72g，12.1mmol)一起回流。用乙醚稀释冷却的悬浮液，用2份100mL 5％(w/w)的NaOH、2份100mL水和1份100mL盐水洗涤。将100mL乙醚加到得到的乳液中，用Na₂SO₄干燥，然后通过Na₂SO₄柱(20g)过滤。用50mL一份的乙醚洗涤残余物2次以后，将合并的滤液在减压下浓缩，然后在硅胶上用25％的醋酸乙酯/己烷进行闪色谱提纯，得到浅黄色固体结晶(0.26g，0.88mmol，22％)。

实施例4

孕甾-1，4，20-三烯-3-醇，4.

在氩气下，用氢化锂铝(250.5mg，6.601mmol)还原在25mL无水乙醚中的孕甾-1，4，20-三烯-3-酮(3，0.26g，088mmol)2小时，然后用2.50g芒硝中止反应。将得到的悬浮液搅拌70分钟，过滤，并用每份50mL的乙醚洗涤2次。在减压下将合并的滤液浓缩以后，用制备薄层色谱(TLC)(35％醋酸乙酯/己烷在三氧化铝上)提纯残余物，得到白色针状物(26.1mg，87.4μmol，10％)，m.p.98-128℃。

实施例5

孕甾-4，20-二烯-6β-醇-3-酮，5.

在搅拌下在85分钟内将悬浮在30ml 1，2-二甲氧基乙烷(DME)、6mL水和2.4mL 5％(w/w)NaOH中的间氯过苯甲酸(MCPBA，77.4％，763.4mg，3.42mmol)加到孕甾-3，5，20-三烯-3-基甲基醚(2，400.3mg，1.281mmol)在20mL的DME+2mL水里的溶液中。反应持续5小时，然后倒入到50mL饱和NaHCO₃溶液中。用50mL乙醚萃取混合物3次，将合并的有机萃取液用50g 5％(w/w)五水硫代硫酸钠+3份各50mL的盐水洗涤，用MgSO₄干燥，通过硅藻土过滤。用10ml乙醚洗涤残渣后，真空浓缩合并的滤液。用35％醋酸乙酯/己烷在硅胶上进行闪色谱，再用35％醋酸乙酯/己烷在硅胶上进行制备薄层色谱，得到白色结晶的难分离混合物(95.5mg，0.304mmol，24％)。

实施例6

20，21-二甲基孕甾-5，20-二烯-3β-醇，6.

参见示意图2，如下制备化合物6、7、8和9。

在氩气下，在大约80℃的油浴中，搅拌乙基三苯基溴化鏻(25.99g，70.00mmol)和叔丁氧基钾(7.86g，70.0mmol)与80mL无水DMSO1小时，然后加入在80mL温热的无水DMSO中的孕甾-5-烯-3β-醇-20-酮(4.43g，14.0mmol)。将红色悬浮液搅拌1小时，停止加热，并倒入200mL冰盐水中。然后用100mL乙醚萃取混合物3次，用100mL盐水洗涤合并的有机萃取液，用Na₂SO₄干燥，通过硅藻土过滤。用50mL乙醚洗涤残渣后，将合并的滤液在减压下浓缩。将黄色残渣在加热下溶于95％乙醇，加入1g焦炭短时间煮沸，再通过硅藻土过滤。将残渣冷却和过滤后，用乙醇再重结晶两次，得到白色晶体(1.746g，5.314mmol，38％)m.p.140-145℃。

实施例7

20，21-二甲基孕甾-4，20-二烯-3，6-二酮，7。

将琼斯试剂(2.67M，2.0mL，5.3mmol)加到20，21-二甲基孕甾-5，20-二烯-3β-醇(6，460.1mg，1.400mmol)在50mL丙酮内的溶液中，搅拌反应物45分钟。用2-丙醇(1.0mL)终止反应后，将混合物倒入100mL水中，用50mL乙酸乙酯萃取3次。将合并的萃取液用50mL饱和NaHCO₃+50mL盐水洗涤，用MgSO₄干燥并通过硅藻土过滤。用25mL乙酸乙酯洗涤残余物，在减压下浓缩合并的滤液，将残渣进行快速色谱(25％乙酸乙酯/己烷，在硅胶上)，并重结晶(用95％乙醇)，得到黄色针状物(138.2mg，0.4059mmol，29％)，m.p.172-178℃。

实施例8

20，21-二甲基孕甾-4，20-二烯-3-酮，8。

用氯铬酸吡啶盐(525.4mg，2.437mmol)氧化在5mL二氯甲烷中的20，21-二甲基孕甾-5，20-二烯-3β-醇(6-，400.3mg，1.218mmol)42小时。加入乙醚(3.5mL)，通过直径5mm×高60mm的硅胶柱过滤该悬浮液。再将该柱用3.5mL乙醚洗涤，减压浓缩合并的滤液。用树脂进行快速色谱，再用乙醇水溶液重结晶，得到黄色结晶(43.6mg，0.134mmol，11％)，m.p.157-165℃。

实施例9

孕甾-4，20-二烯-3，6-二酮，9。

将孕甾-5，20-二烯-3β-醇(300.5mg，1.000mmol)在35mL丙酮中的溶液在冰浴中冷却，加入2.67M琼斯试剂(0.71mL，1.9mmol)。搅拌1.5hr后，再加入0.71mL琼斯试剂，继续反应45分钟，加入2-丙醇(1.0mL)，将混合物倒入100mL水中。然后用每份50mL乙酸乙酯萃取混合物2次，将合并的有机萃取液用50mL饱和NaHCO₃+50mL水+50mL盐水洗涤，通过直径21mm×高22mm的硅胶60柱过滤。再用25mL乙酸乙酯进一步洗脱柱子，减压浓缩合并的滤液。用95％的乙醇重结晶残余物，得到浅黄色粉末(104.6mg，0.3348mmol，33％)，m.p.114-120℃。

实施例10

孕甾-5，17，20-三烯-3β-醇，10。

在氩气下，将17α-乙炔基睾甾烯二醇(439.4mg，1.397mmol)在10mL无水THF中的溶液加到氢化锂铝(106.5mg，2.0mmol)和氯化铝(122.9mg，0.9220mmol)在10mL无水THF的悬浮液中。回流17小时后，与10mL+水硫酸钠(1.00g，3.10mmol)一起搅拌2小时使反应中止。过滤反应物，并用每份10mL THF洗涤残渣3次。减压浓缩合并的滤液，得到0.44g白色固体，将其用快速色谱(30％乙酸乙酯/己烷，在硅胶上)和用乙醇水溶液2次重结晶，得到有光泽的白色晶体(92.0mg，0.303mmol，22％)m.p.144-149℃。

实施例11

5α-氯-6β，19-环氧孕甾-17-烯-3β-醇，11。

参见示意图3，如下制备化合物11、12、13和14：

在氩气下，在76～86℃的浴中，让乙基三苯基溴化膦(3.05g，8.22mmol)和叔丁氧基钾(0.92g，8.2mmol)在无水DMSO(9.2mL)中反应1hr，然后加入在9.2mL温热无水DMSO中的5α-氯-6β，19-环氧睾甾-3β-醇-17-酮(555.9mg，1.640mmol)，再将混合物搅拌1hr。然后将反应物倒入25mL冰盐水中，用每份10mL的乙醚萃取3次。合并有机萃取液用盐水洗涤，用MgSO₄干燥再用硅藻土过滤。用每份5mL乙醚洗涤残渣2次，将合并的滤液在真空下干燥，用快速色谱(60％乙酸乙酯/己烷，在硅胶上)提纯黄色油状残液，得到白色糖浆状固体(0.34g，0.97mmol，59％)。

实施例12

5α-氯-6β，19-环氧孕甾-17-烯-3-酮，12。

5α-氯-6β，19-环氧孕甾-17-烯-3β-醇(11，0.34g，0.97mmol)在35mL丙酮中的溶液在冰-丙酮浴中冷却，加入0.47mL2.67M的琼斯试剂。搅拌40分钟后，加入0.5mL 2-丙醇终止反应。加入水(15mL)，减压除去挥发性化合物，用每份15mL二氯甲烷萃取混合物3次。合并有机萃取液，用15mL饱和NaHCO₃+15mL盐水洗涤，用MgSO₄干燥，通过硅藻土过滤。在用每份5mL二氯甲烷洗涤残渣2次以后，在真空下干燥合并的滤液。用30％的乙酸乙酯/己烷为洗脱液在硅胶上将残渣快速色谱提纯，得到白色固体结晶(0.34g，0.97mmol，定量反应)。

实施例13

6β，19-环氧孕甾-4，17-二烯-3-酮，13。

伴随着微微加热将5α-氯-6β，19-环氧孕甾-17-烯-3-酮(12，0.34g，0.97mmol)溶于10mL无水甲醇中，加入乙酸钾(0.60g，6.1mmol)，在室温下蒸出6.5mL溶剂。减压下浓缩残液，并溶于25mL水中，用每份10mL二氯甲烷萃取3次。合并有机萃取液用MgSO₄干燥并通过硅藻土过滤。用10mL二氯甲烷洗涤残渣，减压浓缩合并的滤液，得到白色固体结晶(290.0mg，0.9281mmol，96％)，在薄层色谱(60％乙酸乙酯/己烷，在硅胶上，R_f 0.61)上表现出是均一的物质。

实施例14

孕甾-4，17-二烯-19-醇-3-酮，14。

向6β，19-环氧孕甾-4，17-二烯-3-酮(290.0mg，0.9281mmol)在10mL冰醋酸中的溶液里加入锌粉(1.12g，17.1mg-原子)，锌粉与10％的盐酸一起搅拌2分钟活化，然后用水和丙酮洗涤。在99～102℃猛烈搅拌悬浮液10分钟，然后用硅藻土过滤。用每份10mL醋酸洗涤残渣4次，合并滤液在真空下浓缩。将残渣溶于50mL乙酸乙酯，用50mL水+50mL饱和NaHCO₃+50mL盐水洗涤，用MgSO₄干燥，并通过硅藻土过滤。用10mL乙酸乙酯洗涤残余物，将合并的滤液在真空下干燥。用乙酸乙酯将残渣重结晶，得到白色结晶(46.4mg，0.148mmol，16％)，m.p.192-195℃。

实施例15

孕甾-4-烯-3β-醇-20-炔，15。

将孕甾-4-烯-3-酮-20-炔(200.1mg，0.6750mmol)和三叔丁氧基氢化锂铝(343.8mg，1.352mmol)悬浮在3.6mL无水乙醚中，反应4小时后，再加入343.5mg(1.351mmol)氢化物，再让反应继续16hr，见示意图4。在用+水硫酸钠(3.41g)终止反应后，再搅拌反应混合物15分钟，然后通过硅藻土过滤。用每份10mL的乙醚萃取残渣5次，合并滤液在减压下浓缩。用快速色谱(25％乙酸乙酯/己烷，在硅胶上)提纯残渣，再用乙醇水溶液重结晶，得到白色粉末(85.0mg，0.285mmol，42％)，m.p.120.5-123.5℃。

实施例16

20，21-二甲基孕甾-4，20E-二烯-3，6-二酮，16。

向20，21-二甲基孕甾-5，20E-二烯-3β-醇(400.0mg，1.281mmol)在45mL丙酮中的溶液里加入琼斯试剂(2.67M，1.75mL，4.67mmol)。然后搅拌反应物30分钟，将反应混合物倒入85mL水中，用每份40mL的乙酸乙酯萃取3次。将合并的有机萃取液用40mL饱和NaHCO₃+40mL盐水洗涤，用MgSO₄干燥，再通过硅藻土过滤。用10mL乙酸乙酯洗涤残渣，减压浓缩合并的滤液。用快速色谱(20％乙酸乙酯/己烷，在硅胶上)提纯残渣，再用乙醇水溶液重结晶，得到浅黄色针状物(119.1mg，0.3497mmol，29％)，m.p.171-173℃，用薄层色谱(20％乙酸乙酯/己烷，在硅胶上)表明，主成分在R_f 0.17，而少量污染物在R_f 0.24。

实施例17

20-甲基孕甾-4，20-二烯-3，6-二酮，17。

向20-甲基孕甾-5，20-二烯-3β-醇(400.0mg，1.272mmol)在45mL丙酮的溶液里加入琼斯试剂(2.67M，1.83mL，4.89mmol)，将反应物搅拌20分钟。在用2-丙醇(0.91mL)终止反应后，将混合物倒入85mL水中，用每份40mL乙酸乙酯萃取3次。合并的有机萃取液用40mL饱和NaHCO₃+40mL盐水洗涤，用MgSO₄干燥，再通过硅藻土过滤。用25mL乙酸乙酯洗涤残渣，合并滤液减压浓缩。用乙醇水溶液将固体残渣重结晶，得到黄色晶体(235.0mg，0.7298mmol，57％)，m.p.148-150℃。薄层色谱(20％乙酸乙酯/己烷，在硅胶上)表明，主产物在R_f 0.24，少量杂质在初始处。

实施例18

孕甾-4，16-二烯-3，6-二酮，18。

向孕甾-5，16-二烯-3β-醇(45.5mg，0.151mmol)在5mL丙酮的溶液中加入琼斯试剂(2.67M，0.23mL，0.61mmol)，搅拌混合物20分钟。用2-丙醇(0.11mL)终止反应后，加入10mL水，用每份5mL的乙酸乙酯萃取混合物3次。将合并的有机萃取液用5mL饱和Na+5mL盐水洗涤，用MgSO₄干燥，通过硅藻土过滤。用5mL乙酸乙酯洗涤残渣，减压浓缩合并的滤液。用制备薄层色谱(25％乙酸乙酯/己烷，在硅胶上)提纯残渣，得到浅黄色固体(10.6mg，33.9μmol，22％)，对于薄层色谱(R_f 0.41，25％乙酸乙酯/己烷，在硅胶上，原料在R_f 0.30处)表现出是均匀的。

实施例19

孕甾-4，17，20-三烯-3，6-二酮，19

向孕甾-5，17，20-三烯-3β-醇(214.5mg，0.7187mmol)在25mL丙酮的溶液中加入琼斯试剂(2.67M，1.03mL，2.75mmol)，混合物搅拌20分钟。在用2-丙醇(0.52mL)终止反应后，将混合物倒入50mL水中，用25mL一份的乙酸乙酯萃取3次。合并有机萃取液用25mL饱和NaHCO₃+25mL盐水洗涤，用MgSO₄干燥，通过硅藻土过滤。用10mL乙酸乙酯洗涤残渣，减压浓缩合并的滤液。在乙醇水溶液中重结晶，同时用焦炭进行附随物处理，得到浅黄色针状物(67.7mg，0.218mmol，30％)，m.p.140-143℃。薄层色谱(25％乙酸乙酯/己烷，在硅胶上)表明产物在R_f 0.43处，少量污染物在R_f 0.86、0.14、0.08和0.00处(孕甾-5，17-二烯-3β-醇R_f 0.32)。

实施例20

21-亚甲基-20(R)-甲基孕甾-4-烯-3-酮，20

向21-亚甲基-20(R)-甲基孕甾-5-烯-3β-醇(208.2mg，0.6337mmol)在环己酮(3.6mL，35mmol)和18mL甲苯的溶液中加入在3.6mL热甲苯中的异丙氧基铝(0.39g，1.9mmol)，在与水分隔离的条件下回流混合物2hr。在冰中冷却后，加入0.92mL水和2.2mL 3.6N的硫酸，振摇混合物1分钟。再加入水(4.6mL)，再振摇混合物5分钟，然后弃去水相。共沸/蒸汽蒸馏除去挥发化合物，用每份5mL二氯甲烷将得到的水悬浮液萃取3次。合并有机萃取液，通过停在硅藻土床层上Na₂SO₄小柱进行过滤，上述过滤装置都装在一个巴斯德管中。用5mL二氯甲烷洗涤残渣，减压浓缩合并的滤液。将残留膜进行重结晶，得到白色针状物(152.7mg，0.4677mmol，74％)，m.p.138～139℃。薄层色谱(25％乙酸乙酯/己烷，在硅胶上)表明主产物在R_f 0.54，极少量污染物在R_f 0.71(原料R_f 0.36)。

实施例21

21-亚甲基-20(R)-甲基孕甾-4-烯-3β-醇，21。

在氩气下搅拌21-亚甲基-20(R)-甲基孕甾-4-烯-3-酮( 5，100.0mg，0.3063mmol)和三叔丁氧基氢化铝锂(319.4mg，1.256mmol)在5mL无水THF中的悬浮液6hr，然后加入水(48μL)、15％(w/w)的NaOH(48μL)和水(143μL)。通过硅藻土过滤混合物，用5mL一份THF萃取残渣4次。减压浓缩合并的滤液，用含水乙醇2次进行重结晶，得到白色片状物(42.6mg，0.130mmol，42％)，m.p.121-123℃。薄层色谱(25％乙酸乙酯/己烷，在硅胶上)表明主要产物在R_f 0.38，少量产物在R_f 0.43(原料R_f 0.50)。

实施例22

21-亚甲基-20(R)-甲基孕甾-4-烯-3，6-二酮，22

向21-亚甲基-20(R)-甲基孕甾-5-烯-3β-醇(149.8mg，0.4560mmol)在15mL丙酮的溶液中加入琼斯试剂(2.67M，0.68mL，1.8mmol)，搅拌反应物20分钟，用2-丙醇(0.34mL)终止反应后，将混合物倒入30mL水中，用15mL一份的乙酸乙酯萃取3次。合并有机萃取液用15mL饱和NaHCO₃+15LmL盐水洗涤，用MgSO₄干燥，通过硅藻土过滤。用10mL乙酸乙酯洗涤残渣，减压浓缩合并的滤液。用制备薄层色谱(25％乙酸乙酯/己烷，在硅胶GF，1000μ上)提纯残渣，得到黄色固体晶体(49.7mg，0.146mmol，32％)，对薄层色谱(25％乙酸乙酯/己烷；R_f 0.47，原料R_f 0.35)显示出是均匀的。

实施例23

孕甾-4-烯-3β-醇-20-炔，23

向悬浮于3.6mL无水乙醚中的孕甾-4-烯-3-酮-20-炔(200.1mg，0.6750mmol)中加入三叔丁氧基氢化铝锂(343.8mg，1.352mmol)，并搅拌混合物4hr。再加入氢化物(343.5mg，1.351mmol)，反应物再搅拌16hr。加入芒硝(3.41g)再将悬浮液搅拌15分钟。通过硅藻土过滤混合物，用每份10mL乙醚萃取残渣5次。减压浓缩合并的滤液，再接着进行快速色谱(25％乙酸乙酯/己烷，在硅胶上)并用含水乙醇重结晶，得到白色粉末(85.0mg，0.285mmol，42％)，m.p.120.5～123.5℃。薄层色谱(25％乙酸乙酯/己烷，在硅胶上)表明，产物(R_f 0.23)，含有极少量原料(R_f 0.29)为杂质。

实施例24

孕甾-4，16-二烯-6β-醇-3-酮-20-炔，24

向孕甾-3，5，16-三烯-20-炔-3-基甲基醚(471.0mg，1.527mmol)在1，2-二甲氧基乙烷(9.4mL)的悬浮液中加入3-氯过苯甲酸(290.0mg，1.680mmol)在9.4mL 1，2-二甲氧基乙烷+3.6mL水的溶液，反应物搅拌30分钟。将混合物倒入50mL饱和NaHCO₃中并用50mL乙酸乙酯萃取混合物3次。将合并的有机萃取液用50g 5％(w/w)的五水合硫代硫酸钠+3次每份50mL盐水洗涤，用MgSO₄干燥，通过硅藻土过滤。用25mL乙酸乙酯洗涤残渣，减压浓缩合并的滤液。快速色谱(50％乙酸乙酯/己烷，在硅胶上)提纯残余物，再用含水乙醇重结晶，得到浅黄色固体(145.9mg，0.4700mmol，31％)，m.p.＞300℃。

实施例25

胆甾-5，16，20(22)-三烯-3β-醇，25。

在氩气下将丙基三苯基溴化鏻(12.13g，31.48mmol)和叔丁氧基钾(3.54g，31.5mmol)在无水DMSO(35mL)中的悬浮液放置在油浴(72～87℃)中，然后搅拌1hr。加入孕甾-5，16-二烯-3β-醇-20-酮(1.9807g，6.298mmol)在35mL温热无水DMSO中的溶液，然后搅拌反应物90分钟。再将混合物倒入90mL冰盐水中，用每份45mL的乙醚萃取3次。用45mL盐水洗涤合并的有机萃取液，用Na₂SO₄干燥并过滤。用10mL乙醚洗涤残渣，减压浓缩合并的滤液。用快速色谱(20％乙酸乙酯/己烷，在硅胶上)提纯得到的油状物，得到一种琥珀色树脂(103.6mg，0.3042mmol，4.8％)。

实施例26

胆甾-4，20(22)E-二烯-4，6-二酮，26.

向胆甾-5，20(22)E-二烯-3β-醇(300.0mg，0.8758mmol)在30mL丙酮的溶液中加入琼斯试剂(2.67M，1.26mL，3.36mmol)，并搅拌反应物20分钟。用2-丙醇(0.63mL)终止反应后，将混合物倒入60mL水中并用每份30mL乙酸乙酯萃取3次。用30mL饱和NaHCO₃+30mL盐水洗涤合并的有机萃取液，用MgSO₄干燥，通过硅藻土过滤。用10mL乙酸乙酯洗涤残渣，减压浓缩合并的滤液。用含水乙醇重结晶，得到黄色固体(139.3mg，0.3929mmol，45％)，m.p.109～116℃、薄层色谱(25％乙酸乙酯/己烷，在硅胶上)表明了主要产物(R_f 0.45)含有杂质在R_f 0.24、0.1和0.08(胆甾-4，20(22)E-二烯-3-酮为R_f 0.49)。

实施例27

胆甾-4，20(22)E-二烯-3-酮，27.

将异丙氧基铝(2.82g，13.8mmol)在26mL热甲苯中的溶液加到胆甾-5，20(22)E-二烯-3β-醇(1.5777g，4.605mmol)在环己酮(26mL，0.25mol)+130mL甲苯的溶液中，隔离水份回流反应物4hr。冷却后加入水(6.7mL)和3.6N硫酸(16mL)，振摇混合物1分钟。再加入水(32mL)，将混合物振摇5分钟，弃去水层。通过共沸/水蒸汽蒸馏除去挥发性化合物，用每份20mL二氯甲烷萃取得到的水悬浮液3次。用MgSO₄干燥合并的有机萃取液，并通过硅藻土过滤。用10mL二氯甲烷洗涤残渣，并减压浓缩合并的过滤液。用含水乙醇重结晶并用炭进行附随物质处理，得到黄色晶体(1.3317g，3.9104mmol，85％)，m.p.133-135℃。薄层色谱(25％乙酸乙酯/己烷，在硅胶上)表明产物是均匀的(R_f 0.49；原料R_f 0.31)。

实施例28

胆甾-4，20(22)E-二烯-3β-醇，28

在氩气下将胆甾-4，20(22)E-二烯-3-酮( 3，400.0mg，1.175mmol)和三叔丁氧基氢化铝锂(1.2250g，4.8158mmol)在15mL无水乙醚中的悬浮液搅拌8hr。加入芒硝(6.07g)，搅拌混合物5分钟，再经过硅藻土过滤。用每份15mL乙醚萃取残渣5次，减压浓缩合并的滤液。用制备薄层色谱(5％乙酸乙酯/二氯甲烷，在硅胶，1000μ上)分离残渣，得到浅黄色固体(49.9mg，0.146mmol，12％)，对于薄层色谱(5％乙酸乙酯/二氯甲烷，在硅胶上，R_f 0.34；孕甾-5，20-二烯-3β-醇R_f 0.26)是均匀的。

实施例29

胆甾-3，5，20(22)E-三烯-3-基甲基醚，29

隔绝水分将胆甾-4，20(22)E-二烯-3-酮(808.6mg，2.374mmol)、2，2-二甲氧基丙烷(3.1mL，25mmol)、DMF(3.1mL)、甲醇(0.13mL)和一水合对甲苯磺酸(28.0mg，0.147mmol)的混合物回流4小时。冷却后，加入NaHCO₃(0.17g)，在30mL水和50mL乙醚之间分配混合物。用30mL盐水洗涤有机层，用MgSO₄干燥并通过硅藻土过滤。用10mL乙醚洗涤残渣，减压浓缩合并的过滤液。用丙酮将得到的固体重结晶，得到浅黄色的固体(453.8mg，1.280mmol，54％)，m.p.94～96℃。薄层色谱(10％乙酸乙酯/己烷，在硅胶上)表明产物在R_f 0.62，带有极少量原料(R_f 0.14)。

实施例30

胆甾-4，20(22)E-二烯-6β-醇-3-酮，30

在2.5分钟内将3-氯过苯甲酸(183.0mg，1.060mmol)在5.9mL1，2-二甲氧基乙烷+2.3mL水中的溶液加到胆甾-3，5，20(22)E-三烯-3-基甲基醚在5.9mL 1，2-二甲氧基乙烷的溶液中。在再搅拌反应物0.5hr以后，将其倒入30mL饱和NaHCO₃中，用每份30mL乙酸乙酯萃取3次。用30g 5％(w/w)的五水合 硫代硫酸钠+3份30mL的盐水洗涤合并的有机萃取液，用MgSO₄干燥，并通过硅藻土过滤。用10mL乙酸乙酯洗涤残渣，减压浓缩合并的滤液。将得到的固体进行快速色谱(60％乙酸乙酯/己烷，在硅胶上)提纯，然后进行制备薄层色谱(TLC)(50％乙酸乙酯/己烷，在硅胶上，1000μ)上分离，得到白色固体结晶(114.3mg，0.3206mmol，33％)，该结晶由薄层色谱(50％乙酸乙酯/己烷，在硅胶上)分成2个组分，主组分R_f 0.48，次组分R_f 0.41；胆甾-4，20(22)E-二烯-3-酮R_f 0.74)。

实施例31

对犁鼻器刺激自主反应的测量

当用实施例32中所述的操作方法给24个雌性和24个雄性客体给与以下化合物时，监测各种自主参数，还给出丙二醇作为对照。

A1-P3孕甾-4，16-二烯-3-酮

A2-P3孕甾-5，16-二烯-3β-醇

A8-P1 3-甲氧基-孕甾-3，5，20-三烯-

A6-P1 孕甾-4，20-二烯-3，6-二酮

      20，21-二甲基孕甾-5，20-二烯-3β-醇

      20，21-二甲基孕甾-5，20-二烯-3-酮

A14-P2 6β，19-环氧孕甾-4，17-二烯-3-酮

A7-P2 19-羟基孕甾-4，17(20)-二烯-3-酮

A13-P1孕甾-4，20-二烯-6β-醇-3-酮

A11-P1 孕甾-1，4，20-三烯-3-酮

A1-P1  孕甾-4，20-二烯-3-酮

A2-P1  孕甾-5，20-二烯-3β-醇

A4-P1  孕甾-4，20-3α-醇

A3-P1  孕甾-4，20-3β-醇

A1-P4  孕甾-4-烯-3-酮

A2-P4  孕甾-5-烯-3β-醇

当与丙二醇对照组比较时，测试化合物引起犁鼻器中累积感受器电位、流电皮肤反应(GSR)、皮肤温度(ST)、电脑电图(EEG)测量的皮质α波活性百分比、心电图(EKG)和呼吸频率(RF)明显变化。结果显示在图2～图58中。对其它孕甾烷衍生物进行了附加的测试，其结果显示在图59～84。对胆甾烷衍生物进行测试的结果显示在图85～96中。

实施例32

电生理学研究

对临床上是正常人的志愿者，两性都有，进行如下的电生理学研究，志愿者的年龄在20-45之间。不使用麻醉，如果女性志愿者怀孕则不进行测试。

刺激和记录系统由一个在别处叙述的“多功能徵型探子”组成，请见蒙提布洛赫和格罗色(Monti-Bloch，L和Grosser，B.I)1991年写的《公认的外激素对人类犁鼻器和嗅觉上皮电活性的影响》，见《类固醇生物化学分子生物学杂志》(J.Steroid Biochem.Molec.Biol)39：573-582。记录电极是一个0.3mm的银球，它连着一根细(0.1mm)银导线，该银导线用泰氟隆(Teflon^)绝缘，电极表面先进行处理，产生氯化银界面，然后覆盖上明胶。它装入直径5mm的小口径泰氟隆导管中，使得电极的尖部伸出大约2mm。泰氟隆导管长10cm，构成多通道传送系统的膨胀端，该系统连续地传送带有经慎重选择脉冲化学感受刺激物的空气流。该空气流先通过一个小室，并通过含有犁骨外激素或致嗅觉物在稀释剂中的溶液或只通过稀释剂进行鼓泡。使用一个线圈使空气流快速地从该小室改道到使小室走旁路的路线，这在空气流中产生一刺激物的小心的脉冲。第二根，直径2mm的泰氟隆外套管包在套管-电极组合的外面，其中心端连接一个抽气机，提供3ml/S的连续的吸力。外抽吸管的这种对中配置使得散发出的化学感受刺激物将被局限在我们称之为“微区域”(直径大约1mm的区域)。这避免物质扩散到预计要刺激的区以外或扩散到抽气系统中。整个刺激和记录组合可安置在犁鼻器中神经感受上皮，也可安置在嗅觉或呼吸上皮的表面。

电犁鼻图(EVG)：

在一个安静房间里对一个仰卧的试验者进行记录，开始时将多功能微电极用放在前庭上的犁鼻器稳定在鼻腔中。参考电极和接地电极都由直径8mm的银片组成，它们都放置在眉间。

通过首先扩张鼻孔和前庭来识别犁鼻器入口或犁鼻凹，然后用一个带有卤钨灯照明的双目6倍放大镜来引入泰氟隆套管尖和记录电极组合体到犁鼻器开口中，在那里它被稳定在位于犁鼻道中深1mm处。在对测试物反应而适度地去极化进行试验后，记录电极如放置位置最好就会发生信号。

从记录电极中发出的电信号被送到一个直流放大器中，在那之后它们被数字化，用计算机进行监测并加以储存。测量信号峰对峰振幅，对去极化波下的面积进行积分，同时在计算机屏幕上和在数字示波器上连续地监视信号。图1和图2显示的是对化合物A1-P1、A2-P1、A4-P1、A3-P1、A1-P4、A2-P4的积分EVG(参见图)由于呼吸作用产生的赝像可以通过训练测量对象进行腭咽闭合的口式呼吸而消除。在300毫秒至1秒的期间，在连续的空气流中送入浓度为25～800×10^-5mol的犁骨外激素试样。一般说来，3～5分钟的间隔将每系列短的测试脉冲分隔开。载有测试刺激物的线的所有组成部分由泰氟隆、玻璃或不锈钢制成，并在每次使用前仔细地清洗和灭菌。用放在国际10120系统C2-A1和T2-A1位置的标准脑电图来记录活动；接地电极放在乳突突起上。用放在右耳叶上的小热敏电阻(1.0mm)来记录皮肤温度(ST)。用放在下喉部周围的可调应变计来测量呼吸频数(RF)。所有电信号都经直流放大、数字化(MP-100 Biopac系统)并用计算机连续监测。

统计分析：

测量EVG、峰对峰改变和其它参数的频率变化并进行统计分析。使用对偶t检验或者用变量分析(ANOVA)来确定结果的有效位数。外刺激(Vomeropberins)的反射效应：

进行了研究以确定中枢神经系统(CNS)对犁鼻器犁骨外激素刺激的反射反应。由犁骨外激素诱发的性别二态性局部反应与男性及女性对象的自主反应成镜像。

在将含有200×10^-5mol的犁骨外激素的空气脉冲(300ms～1see)放到犁鼻器的过程中，在男性及女性对象的C2和T2记录下了皮质活性。也有初步的证据，证明EVG并不与三叉神经伤害感受器末稍有联系，因为对鼻中隔的呼吸上使用2％的利多卡因进行局麻既不阻断也不减弱EVG，(见蒙提布洛赫和格罗色的前述文献)对象也没有报告由于任何刺激操作而产生的痛觉。

Claims (33)

1.适于在个体中鼻部给药的药物组合物，所述组合物包括一种类固醇和药物可接受载体，其中所述类固醇具有如下通式

式中P₁选自＝O基、α-(β-)羟基、α-(β-)乙酰氧基、α-(β-)丙酰氧基、α-(β-)甲氧基、α-(β-)  低级酰氧基、α-(β-)低级烷氧基和α-(β-)苯甲酰氧基；P₂选自甲基、羟甲基、酰氧甲基、烷氧甲基、低级烷基、羟烷基、酰氧烷基和烷氧烷基；P₃选自氢、＝O基、卤素、羟基、烷氧基和酰氧基；P₄至P₁₂各可独立地是氢、卤素、甲基、或者是一卤代、二卤代或全卤代甲基，P₁₃是氢、甲基、亚甲基、卤代甲基或卤代亚甲基、乙基、乙烯基、乙炔基、甲基亚甲基或甲基次甲基；“a”、“b”、“c”、“d”、“e”、“h”、“i”、“j”和“k”对于任意的双键是供选择的位置，“j”或“k”也可以是三键；当P₂是甲基、P₃是β-羟基时，P₂和P₃可以联起来形成一个环醚。

2.按照权利要求1的组合物，其中“b”是双键。

3.按照权利要求2的组合物，其中“e”或“d”是双键。

4.按照权利要求1的组合物，其中“a”和“c”是双键。

5.按照权利要求1的组合物，其中“h”是任意的双键，“i”和“j”不存在。

6.按照权利要求1的组合物，其中“j”是双键。

7.按照权利要求1的组合物，其中j是三键。

8.按照权利要求1的组合物，其中P₁₃是H、甲基、亚甲基、卤代甲基或卤代亚甲基。

9.按照权利要求1的组合物，其中P₁₃是乙基、乙烯基、乙炔基、甲基亚甲基或甲基次甲基。

10.按照权利要求1至9中任意一项的药物组合物，其中所述类固醇溶于所述载体。

11.按照权利要求1至9中任意一项的药物组合物，其中所述组合物呈液态。

12.按照权利要求1至9中任意一项的药物组合物，其中所述组合物还含有药物可接受的油膏基料。

13.按照权利要求1至9中任意一项的药物组合物，它含有不多于一种的所述类固醇。

14.按照权利要求1至9中任意一项的药物组合物，它含有一种以上的所述类固醇。

15.改变个体下丘脑功能的方法，所述方法包括：在所述个体的鼻神经上皮细胞的表面上提供选自孕甾烷、胆甾烷及它们的衍生物的类固醇，其中所述细胞是非嗅觉上皮组织的一部分，以及

将所述类固醇送入所述个体的鼻道，使所述孕甾烷衍生物特异性地结合在所述受体上，并导致所述个体下丘脑功能的改变。

16.改变个体的自主功能的方法，所述方法包括：

为所述个体的鼻神经上皮细胞的化学感受器提供选自孕甾烷、胆甾烷和它们衍生物的类固醇，其中所述细胞为非嗅觉上皮组织的一部分；以及

将所述类固醇送入所述个体的鼻道中，使所述配体特异性地结合在所述受体上，并导致所述个体下丘脑功能的改变。

17.权利要求15或16的方法，其中所述神经上皮细胞位于所述个体的犁鼻器当中。

18.权利要求17的方法，其中所述孕甾烷具有如下通式：

式中P₁选自＝O基、α-(β-)羟基、α-(β-)乙酰氧基、α-(β-)丙酰氧基、α-(β-)甲氧基、α-(β-)低级酰氧基、α-(β-)低级烷氧基和α-(β-)苯甲酰氧基；P₂选自甲基、羟甲基、酰氧甲基、烷氧甲基、低级烷基、羟烷基、酰氧烷基和烷氧烷基；P₃选自氢、＝O基、卤素、羟基、烷氧基和酰氧基；P₄至P₁₂各可独立地是氢、卤素、甲基、或者是一卤代、二卤代或全卤代甲基，P₁₃是氢、甲基、亚甲基、卤代甲基或卤代亚甲基、乙基、乙烯基、乙炔基、甲基亚甲基或甲基次甲基；“a”、“b”、“c”、“d”、“e”、“h”、“i”、“j”和“k”对于任意的双键是供选择的位置，“j”或“k”也可以是三键；当P₂是甲基、P₃是β-羟基时，P₂和P₃可以联起来形成一个环醚。

19.按照权利要求18的方法，其中“b”是双键。

20.按照权利要求19的方法，其中“e”或“d”是双键。

21.按照权利要求18的方法，其中“a”或“c”是双键。

22.按照权利要求18的方法，其中“h”是任意的双键，“i”和“j”不存在。

23.按照权利要求18的方法，其中“j”是双键。

24.按照权利要求18的方法，其中j是三键。

25.按照权利要求17的方法，其中所施用的所述孕甾烷衍生物的量至少约100pg，但不多于约100μg。

26.按照权利要求25的方法，其中所给的所述孕甾烷衍生物的量至少约1ng，但不多于约10μg。

27.按照权利要求26的方法，其中所给的所述孕甾烷衍生物的量至少约10ng，但不多于约1μg。

28.按照权利要求15或16的方法，进一步包括一个步骤，就是制备溶于药物可接受的载体中的所述孕甾烷衍生物的药物组合物。

29.权利要求28的方法，其中所述药物组合物是油膏。

30.权利要求28的方法，其中所述药物组合物是液体。

31.权利要求28的方法，其中通过气溶胶来给药。

32.权利要求15或16的方法，其中给药多于一种类固醇。

33.如下式的化合物：

式中P₁选自＝O基、α-(β-)羟基、α-(β-)乙酰氧基、α-(β-)丙酰氧基、α-(β-)甲氧基、α-(β-)低级酰氧基、α-(β-)低级烷氧基和α-(β-)苯甲酰氧基；P₂选自甲基、羟甲基、酰氧甲基、烷氧甲基、低级烷基、羟烷基、酰氧烷基和烷氧烷基；P₃选自氢、＝O基、卤素、羟基、烷氧基和酰氧基；P₄至P₁₂各可独立地是氢、卤素、甲基、或者是一卤代、二卤代或全卤代甲基，P₁₃是氢、甲基、亚甲基、卤代甲基或卤代亚甲基、乙基、乙烯基、乙炔基、甲基亚甲基或甲基次甲基；“a”、“b”、“c”、“d”、“e”、“h”、“i”、“j”和“k”对于任意的双键是供选择的位置，“j”或“k”也可以是三键；当P₂是甲基、P₃是β-羟基时，P₂和P₃可以联起来形成一个环醚；但要求的条件是：

i)当P₁为＝O；b存在；e、a、c、d不存在；P₂为甲基；而P₃、P₄、P₇、P₉、P₁₀、P₁₁和P₁₃都是H时，如果h存在或不存在，P₆必须存在而且不能是氢；

ii)当P₁＝OH且c存在；e、a、b和d都不存在；P₂＝甲基；以及P₃、P₄、P₇、P₉、P₁₀、P₁₁、P₁₂和P₁₃都是H；那么

 (a)如果h存在，P₆必须存在且不是H；

 (b)如果h不存在，P₆存在，则P₆不能是H；

 (c)如果h不存在，P₆存在，则i、j都存在；

iii)当P₁＝β-OH、b存在；e、a、c、d不存在；P₂＝甲基；P₃、P₄、P₇、P₉、P₁₀、P₁₁和P₁₃都是H时；

 (a)若h存在，i和/或j必须存在或P₆不是H；

 (b)若h存在；j不能是三键；

iv)当P₁＝α-OH；b存在；e、a、c、d不存在；P₂为甲基；而P₃、P₄、P₇、P₉、P₁₀、P₁₁和P₁₃都是H时，

 (a)若h存在，i一定不存在且P₆不能是H；

 (b)若i和j都不存在，P₆不能是H；

v)当P₁为＝O；b和d存在；e、a和c不存在；P₂为甲基；P₃、P₄、P₇、P₉、P₁₁和P₁₃都是H时；若h不存在而i存在，P₆必须存在且不能是H；

vi)当P₁和P₃是＝O而b存在，h、e、a、c和d不存在；P₂为甲基；P₄、P₅、P₇、P₈、P₉、P₁₀、P₁₁和P₁₃都是H；那么

 (a)若P₆不存在，j不能是双键；

 (b)若P₆是H，i或j必须存在；

vii)当P₁为甲氧基，a和c都存在；P₂是甲基；e、b、d和h都不存在，而P₃、P₄、P₇、P₈、P₉、P₁₀、P₁₁和P₁₃都是H时；那么

 (a)若P₆是H，i或j必须存在；

 (b)若P₆不存在，i和j不能都是双键；

viii)当P₁为＝O，而a、b、c、d、e都不存在；P₂是甲基，而P₃、P₄、P₇、P₉、P₁₀、P₁₁、P₁₂和P₁₃都是H时，那么

 (a)若h不存在，j存在为双键；则P₆不能是H；

 (b)若h、i和j不存在，P₆不能是H；以及

 (c)若h存在，j不能是三键；

ix)当P₁＝OH，a、b、c、d、e和h都不存在；P₂为甲基，P₃、P₄、P₇、P₈、P₉、P₁₀、P₁₁、P₁₂和P₁₃都是H时；那么

 (a)若j为双键，i不存在；则P₆不是H；

 (b)若i为双键，j不存在，则P₆不是H；

 (c)i和j不能都是双键；

 (d)若i和j不存在，P₆不能是H；

x)当P₁是＝O，e和b存在，a、c、d不存在；P₂为甲基；且P₃、P₄、P₇、P₉、P₁₀、P₁₁和P₁₃都是氢时；那么

 (a)若h存在，j不能是三键；

 (b)若h不存在，i是双键，则P₆不是H；

 (c)若h不存在，i是双键，则P₆不是H；

 (d)若h不存在，i和j都不是双键，则P₆不是H；

xi)当P₁为＝O，P₂为OH，b存在，a、e、c、d、h、i、j都不存在，P₂为甲基，及P₄、P₇、P₉、P₁₀、P₁₁和P₁₃都是H时；则P₆不能是H；

xii)当P₁为＝O，b存在，a、e、c、d、h、i不存在，P₆和P₂是甲基，且P₃、P₄、P₅、P₇、P₈、P₉、P₁₀和P₁₁都是H；那么

 (a)若j是双键，P₁₃不能为乙烯基；

 (b)若j或k都不是双键或三键，则P₁₃不能是乙炔基；

xiii)当P₁＝OH，c存在，而a、b、e、d、h和i不存在，P₂和P₆是甲基，P₃、P₄、P₅、P₇、P₈、P₉、P₁₀、P₁₁和P₁₂都是H，那么

 (a)若j是双键，则P₁₃不是乙基；

 (b)若j不存在，k是双键，P₁₃不是甲基亚甲基；

 (c)若j和k不存在，P₁₃不是乙基；以及

 (d)若k是三键，则P₁₃不能是甲基次甲基。

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