CN117180192A - 一种pH响应星形聚合物胶束及其制备方法与应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及聚合物胶束技术领域，尤其涉及一种pH响应星形聚合物胶束及其制备方法与应用。所述pH响应星形聚合物胶束以季戊四醇为核心，其他嵌段结构包括聚乙二醇单甲醚、动态亚胺键、γ‑氨基‑ε‑己内酯以及ε‑己内酯。负载抗癌药物阿霉素后，聚合物胶束可在人体正常组织中性环境中稳定存在，而在肿瘤细胞的微酸性环境下控释药物。
Description
技术领域
本发明涉及聚合物胶束技术领域，尤其涉及一种pH响应星形聚合物胶束及其制备方法与应用。
背景技术
癌症严重威胁着人类的健康生活，并成为了人类死亡的主要原因之一。研究发现，肿瘤细胞与正常细胞内微环境条件明显不同，如肿瘤细胞中pH低于正常细胞pH，肿瘤细胞中pH为5.0～6.0，正常细胞中pH为7.4。此外，聚乙二醇具有无毒、无抗原性的优良特性，且生物相容性高。借助这两类特点，研究者在构建药物载体用于肿瘤治疗有了理论基础。
在负载抗癌药物上，胶束具有天然的优势。聚合物胶束由两亲性聚合物构成，在水环境中会自发组装成外部亲水内部疏水的壳-核结构。疏水嵌段用于包裹难溶性药物，在靶点部位释放药物；而亲水嵌段用于包裹疏水核心，降低载药胶束整体与血液循环环境的相互作用，提高药物的靶向性和体内利用度。借助两种嵌段的特点设计响应型的聚合物胶束，如引入pH响应嵌段或动态亚胺键等，可实现抗癌药物靶向递送的同时，使得载药胶束在血液中稳定存在，在肿瘤细胞处释放药物。尽管各种纳米聚合物胶束在抗癌药物的递送研究中已取得巨大进展，然而载药胶束在药物控释性能方面，仍存在后期药物释放缓慢不彻底的问题。
发明内容
本发明的目的之一在于避免现有技术中的不足之处而提供一种pH响应星形聚合物胶束，该pH响应星形聚合物胶束能够高效地控释抗癌药物。
本发明的目的之二在于提供一种pH响应星形聚合物胶束的制备方法。
本发明的目的之三在于提供一种pH响应星形聚合物胶束的应用。
为实现上述目的之一，本发明提供以下技术方案：
所述聚合物胶束中聚合物的结构式为：
其中，x＝5～30，y＝1～6，m＝1～2。
优选地，所述pH响应星形聚合物胶束的数均分子量为11500～35700g/mol。
本发明提供了一种pH响应星形聚合物胶束的有益效果：
本发明的一种pH响应星形聚合物胶束，pH响应星形聚合物胶束的结构中包括季戊四醇、聚乙二醇单甲醚、γ-氨基-ε-己内酯、ε-己内酯、动态亚胺键。其中，聚乙二醇单甲醚为亲水嵌段，具有良好的水溶性，能够延长胶束在正常血液环境中的循环时间；ε-己内酯为疏水嵌段，从而可改善胶束对疏水性药物的载药量；动态亚胺键和γ-氨基-ε-己内酯中的伯氨基作为pH响应基团，在肿瘤组织的微酸性条件下，亚胺键可水解断裂，使胶束逐步脱除聚乙二醇单甲醚亲水保护外壳，更容易进入肿瘤细胞内，并部分释放药物，同时与疏水内核共聚的γ-氨基-ε-己内酯中的伯氨基出现质子化作用，由完全疏水逐渐变为部分亲水，导致疏水内核溶胀，进一步释放出负载于疏水内核内部的药物，使得药物释放更完全。
本发明提供的pH响应星形聚合物胶束，在正常细胞内的微环境条件中可稳定存在，在肿瘤细胞中的酸性或微酸性环境下，可缓控释放药物且释放更完全，并且，聚乙二醇具有的优良特性，生物相容性高，无毒，不易引发免疫反应，有效提高了聚合物载药胶束的药物控释性能。
为实现上述目的之二，本发明提供以下技术方案：
提供一种pH响应星形聚合物胶束的制备方法，包括以下步骤：
将聚乙二醇单甲醚、4-羧基苯甲醛、脱水剂、溶剂以及第一催化剂混合后，抽气-充入氮气三次，室温下搅拌，进行酯化反应，得到醛基化的聚乙二醇；
在氩气氛围下，将季戊四醇、ε-己内酯和γ-(氨基甲酸叔丁酯)-ε-己内酯、溶剂以及第二催化剂混合后，进行开环聚合反应，得到星形聚合物分子；
将所述星形聚合物分子与三氟乙酸溶于二氯甲烷后搅拌反应，得到pH响应星形聚合物；
在氮气氛围下，将pH响应星形聚合物与步骤1所得的醛基化的聚乙二醇溶于二甲基甲酰胺，进行席夫碱反应，得到pH响应星形两亲性聚合物；
将所述pH响应星形两亲性聚合物，通过透析，得到pH响应星形聚合物胶束；
所述脱水剂为二环己基碳二亚胺，所述第一催化剂为二甲氨基吡啶，所述溶剂为二氯甲烷或二甲基甲酰胺，所述酯化反应的时间为24h；
制备星形两亲性聚合物时，所述溶剂为甲苯，所述第二催化剂为异辛酸亚锡，所述开环聚合反应的温度为130℃，时间为24h；
所述席夫碱反应的时间为48h。
优选地，所述步骤4中，席碱夫反应之后还包括：将反应溶液通过针式过滤器除去无水硫酸钠后逐滴加入无水乙醚中沉淀。
优选地，所述醛基化的聚乙二醇包括以下质量份原料：2～4质量份聚乙二醇单甲醚，0.55～1.22质量份4-羧基苯甲醛，0.22～0.41质量份二环己基碳二亚胺，0.15～0.27质量份二甲氨基吡啶。
优选地，得到醛基化的聚乙二醇之前，还包括：浓缩、沉淀、过滤、干燥，所述沉淀是将浓缩后的产物溶解于少量的二氯甲烷中，再将此溶液转入10倍体积量的冷乙醚中进行沉淀。
优选地，所述pH响应星形聚合物包括以下质量份原料：0.056～0.0681质量份季戊四醇，3.56～6.84质量份ε-己内酯，0.78～4.6质量份γ-(氨基甲酸叔丁酯)-ε-己内酯，0.00025～0.00087质量份异辛酸亚锡，6.55～7.68质量份三氟乙酸。
优选地，所述pH响应星形两亲性聚合物包括以下质量份原料：0.08～0.12质量份pH响应星形聚合物，0.03～0.16质量份醛基化的聚乙二醇。
得到星形聚合物分子之前，还包括：浓缩、沉淀、过滤、干燥；
所述沉淀是将浓缩后的产物溶解于少量的二氯甲烷中，再将此溶液转入10倍体积量的冷乙醚中进行沉淀。
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优选地，所述γ-(氨基甲酸叔丁酯)-ε-己内酯的制备方法包括以下步骤：将4-(叔丁基氧羰基氨基)环己酮和3-氯过氧苯甲酸溶于二氯甲烷中，在50℃反应15h，得到γ-(氨基甲酸叔丁酯)-ε-己内酯。
优选地，所述γ-(氨基甲酸叔丁酯)-ε-己内酯包括以下质量份原料：20.8～21.3质量份4-(叔丁基氧羰基氨基)环己酮，19.7～20.6质量份3-氯过氧苯甲酸。
本发明提供了一种pH响应星形聚合物胶束的制备方法的有益效果：
本发明的制备方法充分利用反应物的化学性能，有效地制备了pH响应星形聚合物胶束，操作重复性强，适合大规模生产应用。
为实现上述目的之三，本发明提供以下技术方案：
提供一种具有pH响应星形聚合物胶束在抗癌药物载体中的应用。
pH响应星形聚合物胶束在水溶液中自组装形成聚合物胶束，应用于包载抗癌药物，pH响应星形聚合物胶束制备简单，产率较高，且具有较低的临界胶束浓度。
优选地，所述抗癌药物为疏水性抗癌药物。
本发明提供的pH响应星形聚合物胶束中包括了疏水嵌段，适用于疏水药物的负载，可对疏水性抗癌药物起到增溶作用，提高聚合物胶束的载药能力。
优选地，所述抗癌药物载体的制备方法包括以下步骤：将pH响应星形聚合物胶束与疏水性抗癌药物以2:1的比例溶于有机溶剂中，搅拌4～12h后用去离子水透析48h，每隔4h更换一次去离子水，更换三次后每隔12h换一次去离子水，然后冷冻干燥。
需要说明的是，当pH响应星形聚合物与疏水性抗癌药物配比为2:1时，能获得粒径均匀分布的且能保持较高载药量的聚合物载药胶束。
具体实施方式
为使得本发明的发明目的、特征、优点能够更加的明显和易懂，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，下面所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而非全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其它的附图。
图1为γ-(氨基甲酸叔丁酯)-ε-己内酯的合成工艺路线图；
图2为pH响应星形聚合物胶束的合成工艺路线图；
图3为实施例2中醛基化聚乙二醇的核磁共振氢谱图；
图4为实施例3中星形聚合物分子的核磁共振氢谱图；
图5为实施例6中pH响应星形两亲性聚合物的核磁共振氢谱图；
图6为实施例6中pH响应星形聚合物合成过程中各阶段聚合物的FT-IR图谱；
图7为实施例6中pH响应星形聚合物的凝胶渗透色谱图；
图8为实施例6中pH响应星形聚合物的临界胶束浓度测定曲线图；
图9为实施例11中pH响应星形聚合物载药胶束的透射电镜图；
图10为实施例12中pH响应星形聚合物载药胶束的体外释放曲线图。
实施例1
本实施例1提供了γ-(氨基甲酸叔丁酯)-ε-己内酯的制备工艺，如图1所示，包括步骤：
将4-(叔丁基氧羰基氨基)环己酮(21.3g，0.1mol)和3-氯过氧苯甲酸(20.6g，0.12mol)溶解在无水二氯甲烷(100mL)中，并将混合物在50℃下冷凝回流反应15h，反应结束后旋转蒸发二氯甲烷，把浓缩后的产物滴加到体积为其十倍量的冷乙醚中沉淀，过滤，在30℃下真空干燥24h，得到γ-(氨基甲酸叔丁酯)-ε-己内酯。
实施例2
本实施例2提供了醛基化的聚乙二醇的制备工艺，包括步骤：
将聚乙二醇单甲醚(4g，2mmol)溶解在无水二氯甲烷(40mL)中，并在上述溶液中加入二环己基碳二亚胺(0.41g，2mmol)和二甲氨基吡啶(0.27g，2mmol)。将4-羧基苯甲醛(1.22g，10mmol)溶于二甲基甲酰胺(5mL)中，充分溶解后加入上述溶液，抽气-充入氮气循环三次后密封容器，在室温下搅拌48小时，旋转蒸发浓缩至10mL，低温保存，过滤，将滤液逐滴滴入500mL的乙醚溶液中。搅拌十五分钟，抽滤得到滤渣，用10mL二甲基甲酰胺溶解后倒入1000Da的透析袋中，透析三天。将透析完的液体冷冻干燥后得到产物。
实施例3
本实施例3提供了星形聚合物分子的制备工艺，包括步骤：
在氩气氛围下，将季戊四醇(0.0681g，1mmol)、ε-己内酯(4.55g，40mmol)和γ-(氨基甲酸叔丁酯)-ε-己内酯(0.92g，4mmol)加入瓶中。置于50℃油浴中，搅拌混合，抽真空2小时，用注射器加入1mL含有异辛酸亚锡(单体的0.1wt％)的甲苯。通过重复多次排气-充气以去除甲苯，真空密封，在130℃的油浴中磁搅拌24小时。将烧瓶快速冷却到室温以终止聚合。将共聚物溶解在10mL二氯甲烷中，逐滴加入500mL的冷乙醚中沉淀，抽滤，在真空干燥箱中干燥至恒重得到星形聚合物分子。
实施例4
本实施例4提供了星形聚合物分子的制备工艺，包括步骤：
在氩气氛围下，将季戊四醇(0.0681g，1mmol)、ε-己内酯(4.55g，40mmol)和γ-(氨基甲酸叔丁酯)-ε-己内酯(2.76g，12mmol)加入瓶中。置于50℃油浴中，搅拌混合，抽真空2小时，用注射器加入1mL含有异辛酸亚锡(单体的0.1wt％)的甲苯。通过重复多次排气-充气以去除甲苯，真空密封，在130℃的油浴中磁搅拌24小时。将烧瓶快速冷却到室温以终止聚合。将共聚物溶解在10mL二氯甲烷中，逐滴加入500mL的冷乙醚中沉淀，抽滤，在真空干燥箱中干燥至恒重得到星形聚合物分子。
实施例5
本实施例5提供了星形聚合物分子的制备工艺，包括步骤：
在氩气氛围下，将季戊四醇(0.0681g，1mmol)、ε-己内酯(6.84g，60mmol)和γ-(氨基甲酸叔丁酯)-ε-己内酯(4.6g，20mmol)加入瓶中。置于50℃油浴中，搅拌混合，抽真空2小时，用注射器加入1mL含有异辛酸亚锡(单体的0.1wt％)的甲苯。通过重复多次排气-充气以去除甲苯，真空密封，在130℃的油浴中磁搅拌24小时。将烧瓶快速冷却到室温以终止聚合。将共聚物溶解在10mL二氯甲烷中，逐滴加入500mL的冷乙醚中沉淀，抽滤，在真空干燥箱中干燥至恒重得到星形聚合物分子。
实施例6
本实施例6提供了pH响应星形聚合物胶束的制备工艺，如图2所示，包括步骤：
步骤1、将实施例3制备的星形聚合物溶于5mL二氯甲烷中，搅拌15分钟使其充分溶解。加入三氟乙酸(5mL)，在0℃中剧烈搅拌2h，观察无气泡生成即可终止反应。旋转蒸发除去溶剂后，加入二氯甲烷(5mL)和三乙胺(1mL)后剧烈搅拌1h，待溶液澄清后将混合溶液逐滴滴入冷乙醚中沉淀，抽滤，真空烘干24h后得到pH响应星形聚合物；
步骤2、将pH响应星形聚合物(0.12g)和实施例2制备的醛基化的聚乙二醇(0.08g)加入充满氮气的斯托克瓶中，加入5mL无水二甲基甲酰胺充分溶解，加入少量无水硫酸钠吸收反应生成的微量水，密封容器反应48h，通过针式过滤器除去无水硫酸钠后逐滴加入无水乙醚中沉淀，将沉淀产物真空干燥24h得到pH响应星形两亲性聚合物。采用凝胶渗透色谱表征聚合物的分子量Mn为18139。
由图3～图6表明能成功地制得pH响应星形聚合物胶束。
实施例7
本实施例7提供了pH响应星形聚合物胶束的制备工艺，包括步骤：
步骤1、将实施例4制备的星形聚合物溶于5mL二氯甲烷中，搅拌15分钟使其充分溶解。加入三氟乙酸(5mL)，在0℃中剧烈搅拌2h，观察无气泡生成即可终止反应。旋转蒸发除去溶剂后，加入二氯甲烷(5mL)和三乙胺(1mL)后剧烈搅拌1h，待溶液澄清后将混合溶液逐滴滴入冷乙醚中沉淀，抽滤，真空烘干24h后得到pH响应星形聚合物；
步骤2、将pH响应星形聚合物(0.12g)和实施例2制备的醛基化的聚乙二醇(0.08g)加入充满氮气的斯托克瓶中，加入5mL无水二甲基甲酰胺充分溶解，加入少量无水硫酸钠吸收反应生成的微量水，密封容器反应48h，通过针式过滤器除去无水硫酸钠后逐滴加入无水乙醚中沉淀，将沉淀产物真空干燥24h得到pH响应星形两亲性聚合物。采用凝胶渗透色谱表征聚合物的分子量Mn为20837。
实施例8
本实施例8提供了pH响应星形聚合物胶束的制备工艺，包括步骤：
步骤1、将实施例5制备的星形聚合物溶于5mL二氯甲烷中，搅拌15分钟使其充分溶解。加入三氟乙酸(5mL)，在0℃中剧烈搅拌2h，观察无气泡生成即可终止反应。旋转蒸发除去溶剂后，加入二氯甲烷(5mL)和三乙胺(1mL)后剧烈搅拌1h，待溶液澄清后将混合溶液逐滴滴入冷乙醚中沉淀，抽滤，真空烘干24h后得到pH响应星形聚合物；
步骤2、将pH响应星形聚合物(0.12g)和实施例2制备的醛基化的聚乙二醇(0.16g)加入充满氮气的斯托克瓶中，加入5mL无水二甲基甲酰胺充分溶解，加入少量无水硫酸钠吸收反应生成的微量水，密封容器反应48h，通过针式过滤器除去无水硫酸钠后逐滴加入无水乙醚中沉淀，将沉淀产物真空干燥24h得到pH响应星形两亲性聚合物。采用凝胶渗透色谱表征聚合物的分子量Mn为35700。
实施例9
本实施例9对实施例6步骤2制备得到的pH响应星形两亲性聚合物进行临界胶束浓度测试，测试方法为荧光探针法，测试步骤包括：
步骤1、配制芘溶液，将芘溶解在丙酮中，配置成6×10-5M的含芘丙酮溶液；
步骤2、准确称取10mg实施例6步骤2制备得到的pH响应星形两亲性聚合物溶于5mL丙酮，逐滴加入到100mL去离子水中，挥发丙酮后得到0.1mg/mL溶液，随后用去离子水稀释成一系列浓度(0.0001～0.1mg/mL)。取18支10mL棕色容量瓶，每支加入0.1mL芘溶液，然后分别加入上述不同浓度的聚合物溶液配成样品液。样品液中芘的浓度为6×10-7M；
步骤3、荧光光谱测试：以373nm作为发射波长，测试样品液在300-350nm范围内的激发光谱，取I337/I332比值对浓度对数logC作图(图8)，对所得曲线进行分段拟合，两条拟合趋势线的交点对应的横坐标即为临界胶束浓度值。测得其临界胶束浓度为1.04mg/L。
实施例10
本实施例10为对实施例6步骤2制备得到的pH响应星形两亲性聚合物在高于CMC时的自组装行为以及通过DLS测试不同pH下的空白胶束粒径。
其中，自组装行为包括：将30mg步骤2制备的pH响应星形两亲性聚合物溶于1mL二甲基亚砜中，超声10min使其完全溶解，以10秒/滴的速度缓慢滴入10mL蒸馏水中，此时溶液会出现乳光现象，再倒入20mL蒸馏水以稳定胶束，转入1.5kDa的透析袋中，用100倍体积的PBS溶液透析48h，每隔4h更换一次透析介质，更换三次后每隔12h换一次透析介质。透析完毕使用孔径为0.22μm的针式过滤器将溶液过滤后得到浓度1mg/mL为胶束溶液；
不同pH下的空白胶束粒径包括：把空白胶束溶液分为8份，分别把pH调节成从3到10，稳定一段时间后，利用动态光散射法测定各pH下的粒径。
实施例11
本实施例11为对实施例6、实施例7和实施例8制备得到的pH响应星形两亲性聚合物进行抗癌药物负载，并对实施例6负载抗癌药物的pH响应星形两亲性聚合物进行粒径分布及形貌表征。
抗癌药物负载包括：将15mg的盐酸阿霉素加至0.5mL二甲基亚砜中，随后加入0.1mL TEA避光搅拌1h，得到三管相同二甲基亚砜溶液。将30mg实施例6、实施例7和实施例8的pH响应星形两亲性聚合物分别加入至0.5mL二甲基亚砜中，完全溶解后与阿霉素溶液混合。避光搅拌12h后以10秒/滴的速度缓慢滴入10mL蒸馏水中，再倒入20mL蒸馏水以稳定胶束。随后混合溶液转入1.5kDa的透析袋中，用100倍体积的PBS溶液透析48h，每隔4h更换一次透析介质，更换三次后每隔12h换一次透析介质。透析完毕使用孔径为0.22μm的针式过滤器将溶液过滤，最终得到浓度约为1mg/mL的载药胶束溶液，冷冻干燥后得到三种不同的载药胶束粉末。
实施例6负载抗癌药物的pH响应星形两亲性聚合物的形貌表征如图9所示，采用动态光散射法测其粒径及粒径分布，激光光散射法得负载抗癌药物的pH响应聚合物胶束的平均粒径为90.4nm，粒径分布为0.277。采用TEM观察其形貌为球形。
实施例12
本实施例12为对实施例11制备得到的负载抗癌药物的pH响应星形聚合物胶束进行药物释放测试，测试包括步骤：
准确称取5mg实施例11制备得到的负载抗癌药物的pH响应星形聚合物胶束，每种载药胶束称取两份，三种载药胶束共称取六份，分别溶于5mL的pH 7.4和pH 5.0的缓冲溶液中。充分溶解后将溶液转移至3.5kDa的透析袋中，并浸泡于95mL对应的缓冲溶液中进行药物释放，设置温度和转速分别为37℃和100rpm的条件。在设置的时间间隔时(0.5，1，2，3，6，9，12，24，36，48，60，72，84，96，108，120h)，取出5mL烧杯里的溶液同时补充5mL对应的缓冲液。使用紫外分光光度法测定所取溶液在498nm下的吸光度，绘制体外释放曲线。
其结果参见图10，从图10可以看出在正常血液pH 7.4环境中，三种载药胶束药物释放速度缓慢，6h内累计释放量均低于10％，120h内累计释放量均低于30％，PT-P[(CL20-co-ACL2)MPEG)]4载药胶束的药物释放曲线和PT-P[(CL20-co-ACL6)MPEG]4载药胶束的药物释放曲线趋势相近，前者120h累计释放量为25.6％，后者最终累计释放量为26.8％，而P[(CL30-co-ACL10)MPEG2]4载药胶束的药物释放曲线始终处于较低水平，最终累计释放量为20.7％；在pH 5.0环境下，三种载药胶束药物释放速率迅速，12h累计释放量均达到30％，与P[(CL20-co-ACL2)MPEG]4相比，PT-P[(CL20-co-ACL6)MPEG)]4载药胶束的药物释放速率在48h内较快，且120h累计释放量高达95％，而P[(CL20-co-ACL2)MPEG]4载药胶束在120h内药物累计释放量仅有82.6％，在三种载药胶束的药物释放速率对比中，P[(CL30-co-ACL10)MPEG2]4载药胶束在48h内药物释放速率最快，在48h后释放速率有减缓的趋势，120h内药物累计释放量为90.4％。上述实验情况说明三种载药胶束具有良好pH响应性，均没有出现突释现象，满足了缓控释放的要求，而PT-P[(CL20-co-ACL6)MPEG)]4载药胶束的最终药物累计释放效果最好。
以上所述，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。
Claims (9)
1.一种pH响应星形聚合物胶束，其特征在于，所述聚合物胶束中聚合物的结构式为：
其中，x＝5～30，y＝1～6，m＝1～2。
2.根据权利要求1所述的一种pH响应星形聚合物胶束，其特征在于，所述pH响应星形聚合物的数均分子量为11500～35700g/mol。
3.一种权利要求1或2所述的pH响应星形聚合物胶束的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
将聚乙二醇单甲醚、4-羧基苯甲醛、脱水剂、溶剂以及第一催化剂混合后，抽气-充入氮气三次，室温下搅拌，进行酯化反应，得到醛基化的聚乙二醇；
在氩气氛围下，将季戊四醇、ε-己内酯和γ-(氨基甲酸叔丁酯)-ε-己内酯、溶剂以及第二催化剂混合后，进行开环聚合反应，得到星形聚合物分子；
将所述星形聚合物分子与三氟乙酸溶于二氯甲烷后搅拌反应，得到pH响应星形聚合物；
在氮气氛围下，将pH响应星形聚合物与步骤1所得的醛基化的聚乙二醇溶于二甲基甲酰胺，进行席夫碱反应，得到pH响应星形两亲性聚合物；
将所述pH响应星形两亲性聚合物，通过透析，得到pH响应星形聚合物胶束；
所述脱水剂为二环己基碳二亚胺，所述第一催化剂为二甲氨基吡啶，所述溶剂为二氯甲烷或二甲基甲酰胺，所述酯化反应的时间为24h；
制备星形两亲性聚合物时，所述溶剂为甲苯，所述第二催化剂为异辛酸亚锡，所述开环聚合反应的温度为130℃，时间为24h；
所述席夫碱反应的时间为48h。
4.根据权利要求3所述的一种pH响应星形聚合物胶束的制备方法，其特征在于，所述γ-(氨基甲酸叔丁酯)-ε-己内酯的制备方法包括以下步骤：将4-(叔丁基氧羰基氨基)环己酮和3-氯过氧苯甲酸溶于二氯甲烷中，在50℃下反应15h，得到γ-(氨基甲酸叔丁酯)-ε-己内酯。
5.根据权利要求3所述的一种pH响应星形聚合物胶束的制备方法，其特征在于，所述醛基化的聚乙二醇包括以下质量份原料：2～4质量份聚乙二醇单甲醚，0.55～1.22质量份4-羧基苯甲醛，0.22～0.41质量份二环己基碳二亚胺，0.15～0.27质量份二甲氨基吡啶。
6.根据权利要求3所述的一种pH响应星形聚合物胶束的制备方法，其特征在于，所述pH响应星形聚合物包括以下质量份原料：0.056～0.0681质量份季戊四醇，3.56～6.84质量份ε-己内酯，0.78～4.6质量份γ-(氨基甲酸叔丁酯)-ε-己内酯，0.00025～0.00087质量份异辛酸亚锡，6.55～7.68质量份三氟乙酸。
7.根据权利要求3所述的一种pH响应星形聚合物胶束的制备方法，其特征在于，所述pH响应星形两亲性聚合物包括以下质量份原料：0.08～0.12质量份pH响应星形聚合物，0.03～0.16质量份醛基化的聚乙二醇。
8.权利要求3-7任一项所述的制备方法制备所得的pH响应星形聚合物胶束在抗癌药物载体中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述抗癌药物载体的制备方法包括以下步骤：将pH响应星形聚合物胶束与疏水性抗癌药物以2:1的比例溶于有机溶剂中，搅拌4～12h后用去离子水透析48h，每隔4h更换一次去离子水，更换三次后每隔12h换一次去离子水，然后冷冻干燥。
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