CN117164714A - 一种靶向bcma的抗体及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明属于生物技术领域、生物医药领域，具体涉及一种靶向BCMA的抗体及其应用。所述抗体或其抗原结合片段包含：SEQ ID NO.1所示轻链可变区CDR1，SEQ ID NO.2所示轻链可变区CDR2，SEQ ID NO.3所示轻链可变区CDR3，SEQ ID NO.4所示重链可变区CDR1，SEQ ID NO.5所示重链可变区CDR2，SEQ ID NO.6所示重链可变区CDR3。进一步制备CAR‑NK细胞，经细胞实验验证，该CAR‑NK细胞对多发性骨髓瘤细胞具有杀伤活性。
Description
技术领域
本发明属于生物技术领域、生物医药领域，具体涉及一种靶向BCMA的抗体及其应用。
背景技术
BCMA全称B细胞成熟抗原(B cell maturation antigen)，属于肿瘤坏死因子受体家族成员。BCMA主要在恶性增殖的B淋巴细胞(例如骨髓瘤细胞、白血病细胞)中高度表达，而在初始B细胞、CD34阳性造血干细胞和其他正常组织细胞中不表达，这一特性使得它成为MM治疗的理想靶点。
在临床应用中，CAR-NK细胞免疫疗法比CAR-T细胞免疫疗法更安全，而且NK细胞的安全性已在一些临床领域得到验证。例如，一些I/II期试验显示，同种异体NK细胞输注耐受性良好，不会引起GVHD(移植物抗宿主病)和明显的毒性。因此，NK细胞是一种适应性更强的CAR载体，且不仅仅局限于自体细胞。
除了通过单链抗体识别肿瘤表面抗原来抑制癌细胞外，NK细胞还可以通过多种受体识别各种配体来抑制癌细胞，例如自然细胞毒性受体(NKp46、NKp44和NKp30)、NKG2D和DNAM-1(CD226)。这些细胞受体通常识别在免疫细胞或长期治疗压力下肿瘤细胞上表达的应激诱导配体。此外，NK细胞通过FcγRIII(CD16)诱导抗体依赖性细胞毒性。因此，CAR-NK细胞可通过CAR依赖和NK细胞受体依赖性途径抑制癌细胞，从而消除肿瘤抗原阳性癌细胞或表达NK细胞受体配体的癌细胞。临床试验表明，CAR-T细胞不能消除高度异质性的癌细胞，但是CAR-NK细胞能够有效地杀死长期治疗后可能改变其表型的残留肿瘤细胞。
最后，NK细胞在临床样本中非常丰富，可以从外周血(PB)、脐带血(UCB)、人类胚胎干细胞(HESC)、诱导多能干细胞(IPSC)甚至NK-92细胞系中产生。NK-92细胞提供了一个均匀的细胞群，并且可以在适当的培养条件下很容易地扩大，以进行广泛的临床应用。
发明内容
本发明提供一种新的靶向BCMA的抗体，并进一步制备CAR-NK细胞，经细胞实验验证，该CAR-NK细胞对多发性骨髓瘤(MM)细胞具有杀伤活性。
具体地，本发明提供了以下技术方案：
第一方面，本发明提供了一种靶向BCMA的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包含：
SEQ ID NO.1所示轻链可变区CDR1，
SEQ ID NO.2所示轻链可变区CDR2，
SEQ ID NO.3所示轻链可变区CDR3，
SEQ ID NO.4所示重链可变区CDR1，
SEQ ID NO.5所示重链可变区CDR2，
SEQ ID NO.6所示重链可变区CDR3。
在本发明中，术语“BCMA”可与“CD269”、“TNFRSF17”互换使用，具体是指B细胞成熟抗原，B cell maturation antigen。在本发明中，术语“BCMA”还可包括完整BCMA蛋白的一部分，只要保留相关的生物活性即可。
优选地，所述抗体或其抗原结合片段包括Fab、Fab′、F(ab)2、Fv或scFv。
具体地，所述Fab(Fragment of antigen binding，抗原结合片段)是指含有轻链的可变区和恒定区、重链的可变区和恒定区经二硫键结合起来的抗体分子的一部分。所述Fab′指的是Fab′的二聚体。所述Fv指的是能结合完整的抗原结合位点的抗体的最小片段。一个Fv片段包括一条轻链的可变区结合到一条重链的可变区。所述scFv(Single-ChainFragment Variable，单链可变区片段，单链抗体)指的是由轻链可变区与重链可变区直接相连或通过一个肽链连接而成的工程抗体。
优选地，所述轻链可变区和重链可变区之间由linker(连接子)连接。所述linker的序列不受限制，凡能实现连接功能且不影响抗体靶向性功能的序列均包含于本发明对于linker的定义之内。
优选地，所述抗体的构成是轻链可变区-linker-重链可变区，也可以是重链可变区-linker-轻链可变区。
更优选地，所述抗体的完整序列如SEQ ID NO.7所示。具体地，SEQ ID NO.7中第1-108位为轻链可变区，第124-242位为重链可变区。
另一方面，本发明提供了一种靶向BCMA的融合蛋白，所述融合蛋白中包含前述抗体。
优选地，所述融合蛋白是嵌合抗原受体。
优选地，所述嵌合抗原受体还包含铰链区(Hinge area)、跨膜结构域(Transmembrane region)、共刺激信号结构域、胞内信号传导结构域中的一种或多种。
优选地，所述铰链区包括CD8α铰链区、CD28铰链区、CD4铰链区、CD5铰链区、CD134铰链区、CD137铰链区、ICOS铰链区中的一种或多种的组合。
优选地，所述跨膜结构域包括蛋白质的跨膜结构域，所述蛋白质包括：2B4基因表达的蛋白、T细胞受体的α、β或ζ链，CD28，CD3ε，CD45，CD4，CD5，CD8，CD9，CD16，CD22，CD33，CD37，CD64，CD80，CD86，CD123，CD134，CD137或CD154。
优选地，所述共刺激结构域包括2B4、CD3ζ、OX40、CD2、CD27、CD28、CDS、ICAM-1、LFA-1、ICOS或4-1BB的功能性信号传导结构域。
优选地，所述共刺激信号结构域有一个、两个、三个或更多个。
优选地，所述胞内信号传导结构域包括下列分子的胞内信号传导结构域：CD3ζ、CD3γ、CD3δ、CD3ε、FcRγ、FcRβ、TCRζ、CD4、CD5、CD8、CD21、CD22、CD79a、CD79b、CD278、FcεRI、DAP10、DAP12、CD66d。
优选地，所述融合蛋白还可以包含信号肽、自断裂肽、检测标签/辅助功能元件。
优选地，所述信号肽包括下列分子的信号肽：T细胞受体的α链及β链、CD3ζ、CD3ε、CD16、CD22、CD33、CD4、CD5、CD8、CD9、CD28、CD37、CD45、CD64、CD80、CD86、CD134、CD137、CD154、GITR、GM-CSF。
优选地，所述信号肽是CD8信号肽。
优选地，所述检测标签/辅助功能元件包括：tEGFR、tCD34、tCD19、tCD20、tCD22、免疫检查点抑制剂(CTLA-4、PD-1/PD-L1、LAG-3、TIM-3、TIGIT、CD226、CD155、CD47、B7-H3、B7-H4)纳米抗体、细胞因子及其受体(IL2、IL2受体、IL7、IL7受体、IL15、IL15受体)。
优选地，所述自断裂肽包括T2A、P2A、E2A、F2A。
优选地，所述铰链区选用CD8铰链区。
优选地，所述跨膜结构域选用CD8实施例。
优选地，所述共刺激结构域选用4-1BB共刺激结构域
优选地，所述胞内信号传导结构域的序列如SEQ ID NO.12所示。
最优选地，本发明具体实施例中对结构是前述抗体、CD8铰链区、CD8跨膜域胞、4-1BB共刺激结构域和CD3ζ胞内信号传导结构域依次连接的CAR(SEQ ID NO.13所示)进行了验证，在CAR前连接有CD8信号肽(SEQ ID NO.9所示)。
本发明的另一方面还提供了一种分离的核酸分子，所述核酸分子编码前述BCMA抗体或融合蛋白。
优选地，所述编码前述BCMA抗体的核酸分子如SEQ ID NO.8所示。
本发明的另一方面还提供了包含前述分离的核酸分子或表达前述抗体、融合蛋白的载体。
优选地，所述载体是表达载体或病毒载体。
更优选地，所述病毒来源的载体包括慢病毒载体、逆转录病毒载体、腺病毒载体、腺相关病毒载体、痘病毒载体、疱疹病毒载体。
在某些实施方案中，本发明对载体没有特别的限制，其选择取决于所期望的功能。载体的非限制性实例包括质粒载体、病毒来源的载体、噬菌体载体和其他常规用于例如遗传工程的载体。可基于本领域技术人员众所周知的方法构建各种质粒和载体。
本发明的另一方面还提供了一种宿主细胞，所述宿主细胞中表达本发明所述抗体和/或融合蛋白，或者，含有前述分离的核酸分子或载体。
优选地，所述宿主细胞包括真核细胞或原核细胞。
优选地，所述宿主细胞是动物细胞，哺乳动物细胞。
优选地，所述宿主细胞为免疫细胞。
优选地，所述免疫细胞包括T细胞、B细胞、NK细胞、iNKT细胞、CTL细胞、树突状细胞、髓样细胞、单核细胞、巨噬细胞、gdT细胞、iPS来源的任何免疫细胞或其任意组合。
最优选地，所述宿主细胞是NK细胞。
另一方面，本发明提供了一种药物组合物，所述药物组合物包含前述抗体、融合蛋白、分离的核酸分子、载体或宿主细胞中的一种或多种。
优选地，所述药物组合物中还可以包含其他治疗癌症的活性物质。
优选地，所述药物组合物还包括药学上可接受的赋形剂和/或添加剂。
优选地，所述赋形剂包括但不限于缓冲体系、增稠剂、稳定剂、中和试剂、保湿剂。
优选地，所述添加剂包括但不限于充填剂、结合剂、增湿剂、助流剂、稳定剂、防腐剂、乳化剂。
优选地，所述药物组合物的给药途径为肠道给药或非肠道给药，如口服、静脉注射、肌肉注射、皮下注射、鼻腔、口腔黏膜、眼、肺和呼吸道、皮肤、阴道、直肠等。
优选地，所述药物组合物的给药剂型是液体剂型、固体剂型或半固体剂型。
优选地，所述液体剂型可以是溶液剂(包括真溶液和胶体溶液)、乳剂(包括o/w型、w/o型和复乳)、混悬剂、注射剂(包括水针剂、粉针剂和输液)、滴眼剂、滴鼻剂、洗剂和搽剂等。
优选地，所述固体剂型可以是片剂(包括普通片、肠溶片、含片、分散片、咀嚼片、泡腾片、口腔崩解片)、胶囊剂(包括硬胶囊、软胶囊、肠溶胶囊)、颗粒剂、散剂、微丸、滴丸、栓剂、膜剂、贴片、气(粉)雾剂等。
优选地，所述半固体剂型可以是软膏剂、凝胶剂、糊剂等。
在一种具体地实施例中，用于口服给药的液体剂型包括药学上可接受的乳液、溶液、悬浮液、糖浆或酊剂。除了活性化合物外，液体剂型可包含本领域中常规采用的惰性稀释剂，如水或其它溶剂，增溶剂和乳化剂，具体例如，乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、丙二醇、1,3-丁二醇、二甲基甲酰胺以及油，特别是棉籽油、花生油、玉米胚油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油或这些物质的混合物。除了这些惰性稀释剂外，组合物也可包含助剂，如润湿剂、乳化剂和悬浮剂、甜味剂、矫味剂和香料。如悬浮液可包含悬浮剂，具体例如，乙氧基化异十八烷醇、聚氧乙烯山梨醇和脱水山梨醇酯、微晶纤维素、甲醇铝和琼脂或这些物质的混合物。
另一方面，本发明提供了一种治疗癌症的方法，所述方法包括向受试者施用前述抗体或其抗原结合片段、前述融合蛋白、核酸分子前述载体、前述宿主细胞或前述药物组合物。
最优选地，所述癌症是多发性骨髓瘤(MM)。
优选地，所述施用方式包括肠道给药或非肠道给药，如口服、静脉注射、肌肉注射、皮下注射、鼻腔、口腔黏膜、眼、肺和呼吸道、皮肤、阴道、直肠等。
本发明的另一方面还提供了一种缀合物，所述缀合物是具有可检测的部分标记的前述抗体。
优选地，所述可检测的部分包括但不限于酶、荧光材料、发光材料，生物发光材料、放射性材料以及非放射性顺磁性金属离子。
本发明另一方面提供了一种检测BCMA的方法，所述方法包括将前述抗体的缀合物与待检测样品接触的步骤。
优选地，所述检测是非诊断目的的。
优选地，所述待检测样品是疑似表达BCMA的样品。
优选地，所述样品可以是细胞，也可以是样本或培养物(包括微生物培养物)，甚至包括合成来源的样本。
本发明的另一方面提供了前述抗体、融合蛋白、分离的核酸分子、载体或宿主细胞中任意一种或多种在结合BCMA中的用途。
本发明的另一方面提供了前述抗体、融合蛋白、分离的核酸分子、载体或宿主细胞中任意一种或多种在制备癌症或由表达BCMA的免疫细胞介导的免疫病症的药物中的用途。
优选地，所述免疫细胞是B细胞。
优选地，所述免疫病症包括类风湿性关节炎、全身性红斑狼疮(SLE)、I型糖尿病、哮喘、异位性皮炎、过敏性鼻炎、血小板减少性紫癜、多发性硬化症、牛皮癣、修格兰氏综合症、桥本氏甲状腺炎、格雷夫氏病、原发性胆汁性硬化、韦格纳氏肉芽肿病、结核病以及移植物抗宿主疾病。
优选地，所述癌症包括浆细胞恶性肿瘤或B细胞恶性肿瘤。
优选地，所述癌症包括白血病、淋巴瘤或骨髓瘤。
优选地，所述癌症包括BCMA高表达相关的癌症。
最优选地，所述癌症包括多发性骨髓瘤(Multiple Myeloma，MM)、霍奇金淋巴瘤、白血病、胶质母细胞瘤、非霍奇金氏淋巴瘤(non-Hodgkin's lymphoma，NHL)、骨髓发育异常综合症(MDS)、骨髓增生综合症(MPS)、MGUS(意义未明的单克隆丙种球蛋白病，monoclonalgammopathy of undetermined significance)、孤立性浆细胞瘤(SolitaryPlasmacytoma)、Waldenstrom巨球蛋白血病( Macroglobulinemia)、原发性系统性淀粉样变性(AL Amyloidosis)、浆细胞白血病(Plasma Cell Leukemia)、伯基特氏淋巴瘤(Burkett'slymphoma)。
最优选地，所述癌症是多发性骨髓瘤(MM)。
附图说明
图1是鼠源抗体对BCMA的亲和力测试结果图，其中，A是H929空白，B是H929+PE，C是阴性对照，D是阳性对照，E是鼠源抗体。
图2是检测BCMA-CAR在NK细胞中的表达情况的结果图。
图3是检测CAR-NK细胞杀伤能力的阴性的检测结果图。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步的说明，以下所述，仅是对本发明的较佳实施例而已，并非对本发明做其他形式的限制，任何熟悉本专业的技术人员可能利用上述揭示的技术内容加以变更为同等变化的等效实施例。凡是未脱离本发明方案内容，依据本发明的技术实质对以下实施例所做的任何简单修改或等同变化，均落在本发明的保护范围内。
实施例一、鼠源抗体对骨髓瘤细胞亲和力的测定
制备抗体，所述抗体的氨基酸序列为：
DIVLTQSQKFMSTSVGDRVSVTCKASQNVGTNVAWYQQKPGQSPKALI YSASYRYSGVPDRFTGSGSGTDFTLTISNVQSEDLAEYFCQQYNSYYTFGGGT KLELKRT-GGGGSGGGGSGGGGS-EVQLQQSGPELVKPGASVKMSCKASGYTFTNYVMHWVKQKPGQGLEWIGYI LPYNDLTKYNEKFKGKATLSSDRSSSTAYMELSSLTSEDSAVYYCARHDYDG GVMDYWGQGTSVTVSS(SEQ ID NO.7，轻链可变区-linker-重链可变区)
实验方法
1、培养H929骨髓瘤细胞，进行细胞计数，然后取5×105个细胞置于1.5ml EP管中，1000rpm，5min离心，去上清；
2、加500μl PBS重悬细胞，然后1000rpm，5min离心，去上清；
3、将空白细胞培养上清与抗体生产上清分别重悬待测细胞，置于4℃，避光反应30min，然后1000rpm，5min离心，去上清；
4、加500μl PBS重悬细胞，然后1000rpm，5min离心，去上清；
5、加100μl二抗(PE anti-human IgG Fc Anti body，原液用PBS经过1:600稀释后使用)重悬细胞，置于4℃，避光反应30min，然后1000rpm，5min离心，去上清；
6、加500μl PBS重悬细胞，然后1000rpm，5min离心，去上清；
7、加400μl PBS重悬细胞，然后上机检测。
结果证明本发明提供的鼠源BCMA抗体对H929细胞有很好的亲和力，被PE荧光标记的阳性细胞率如表1统计，检测结果如图1所示。
表1、PE阳性率统计
| 分组 | PE阳性率 |
| H929空白 | 0.05％ |
| H929+PE | 0.01％ |
| 阴性对照 | 0.05％ |
| 阳性对照 | 98.09％ |
| BCMA-scFv候选 | 73.05％ |
实施例二、检测BCMA-CAR向NK细胞的转导率
在以上经验证的鼠源抗体前连接CD8信号肽，在鼠源抗体后依次连接CD8铰链区+跨膜域、4-1BB共刺激结构域、胞内信号传导结构域，构成CAR-BCMA。将如下序列的CAR-BCMA克隆进质粒，通过慢病毒向NK细胞转导，并验证转导效率：
MALPVTALLLPLALLLHAARP-DIVLTQSQKFMSTSVGDRVSVTCKASQN VGTNVAWYQQKPGQSPKALIYSASYRYSGVPDRFTGSGSGTDFTLTISNVQSEDLAEYFCQQYNSYYTFGGGTKLELKRTGGGGSGGGGSGGGGSEVQLQQSGPELVKPGASVKMSCKASGYTFTNYVMHWVKQKPGQGLEWIGYILPYNDLTKYNEKFKGKATLSSDRSSSTAYMELSSLTSEDSAVYYCARHDYDGGVMDYWGQGTSVTVSS-TTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFAC DIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYC-KRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCEL-RVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDK RRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQRDRMAEAYSEIGMKGERRRGKGHD GLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR(CD8信号肽-抗体-CD8铰链区+跨膜域-4 1BB共刺激结构域-胞内信号传导结构域)。
使用三代慢病毒包装系统共四质粒系统，包装三质粒pRSV-Rev，pMDLg/pRRE，pMD2.G，穿梭pLVX-puro，HEK293T细胞作为病毒生产细胞，混合比例pLenti-puro：pRSV-Rev：pMDLg/pRRE：pMD2.G2:1:1:1，转染试剂使用脂质体mirusTransIT-293(mir2700)，脂质体和DNA比例为3:1，转染后，三天收集上清，高速离心40000g6小时。
将病毒按照感染浓度为10MOI直接加入NK细胞的培养基，同时加入poly brene0.8μg/ml，孵育6小时候，去除含有病毒NK培养基，加入新鲜的NK培养基，继续培养，在不同时间点通过流式检测确认CAR阳性率。
在第2、4、6、8天对阴性对照的检测结果和在第2、4、6、8天对本发明所提供的CAR的检测结果如图2所示。
实施例三、细胞杀伤性实验
将各组BCMA-CAR-NK细胞扩增，培养，计数。
培养带有绿色荧光的靶细胞系：H929-GFP细胞，计数。
按效靶比1:1、1:2、1:4，将BCMA-CAR-NK细胞与H929-GFP细胞共培养。
不同的时间点(0小时，17小时)流式检测H929-GFP细胞在共培养体系中的比例。确定BCMA-CAR-NK细胞对靶细胞H929-GFP细胞的杀伤能力。
表2、BCMA-CAR-NK细胞系对H929-GFP靶细胞的杀伤
不同时间、效靶比下的靶细胞比例和杀伤百分比统计如表2，结果如图3所示，在histogram图上显示为右侧小的细胞峰越下，甚至消失，就意味着杀伤能力越强。
Claims (10)
1.一种靶向BCMA的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包含：
SEQ ID NO.1所示轻链可变区CDR1，
SEQ ID NO.2所示轻链可变区CDR2，
SEQ ID NO.3所示轻链可变区CDR3，
SEQ ID NO.4所示重链可变区CDR1，
SEQ ID NO.5所示重链可变区CDR2，
SEQ ID NO.6所示重链可变区CDR3；
优选地，所述轻链可变区和重链可变区之间由linker连接；
优选地，所述抗体的构成是轻链可变区-linker-重链可变区、或、重链可变区-linker-轻链可变区；
优选地，所述抗体的构成是轻链可变区-linker-重链可变区；
更优选地，所述抗体的完整序列如SEQ ID NO.7所示；
优选地，所述抗体是鼠源的。
2.一种靶向BCMA的融合蛋白，所述融合蛋白中包含权利要求1所述抗体或其抗原结合片段；
优选地，所述融合蛋白是嵌合抗原受体；
优选地，所述嵌合抗原受体还包含铰链区、跨膜结构域、共刺激信号结构域、胞内信号传导结构域中的一种或多种；
优选地，所述铰链区包括CD8α铰链区、CD28铰链区、CD4铰链区、CD5铰链区、CD134铰链区、CD137铰链区、ICOS铰链区中的一种或多种的组合；
优选地，所述跨膜结构域包括蛋白质的跨膜结构域，所述蛋白质包括：2B4基因表达的蛋白、T细胞受体的α、β或ζ链，CD28，CD3ε，CD45，CD4，CD5，CD8，CD9，CD16，CD22，CD33，CD37，CD64，CD80，CD86，CD123，CD134，CD137或CD154；
优选地，所述共刺激结构域包括2B4、CD3ζ、OX40、CD2、CD27、CD28、CDS、ICAM-1、LFA-1、ICOS或4-1BB的功能性信号传导结构域；
优选地，所述共刺激信号结构域有一个、两个、三个或更多个；
优选地，所述胞内信号传导结构域包括下列分子的胞内信号传导结构域：CD3ζ、CD3γ、CD3δ、CD3ε、FcRγ、FcRβ、TCRζ、CD4、CD5、CD8、CD21、CD22、CD79a、CD79b、CD278、FcεRI、DAP10、DAP12、CD66d；
优选地，所述融合蛋白还包含信号肽、自断裂肽、检测标签/辅助功能元件；
优选地，所述信号肽包括下列分子的信号肽：T细胞受体的α链及β链、CD3ζ、CD3ε、CD16、CD22、CD33、CD4、CD5、CD8、CD9、CD28、CD37、CD45、CD64、CD80、CD86、CD134、CD137、CD154、GITR、GM-CSF；
优选地，所述信号肽是CD8信号肽；
优选地，所述铰链区选用CD8铰链区；
优选地，所述跨膜结构域选用CD8实施例；
优选地，所述共刺激结构域选用4-1BB共刺激结构域
优选地，所述胞内信号传导结构域的序列如SEQ ID NO.12所示。
3.一种分离的核酸分子，所述核酸分子编码权利要求1所述抗体或其抗原结合片段，或，权利要求2所述融合蛋白；
优选地，所述编码权利要求1所述抗体或其抗原结合片段的核酸分子序列如SEQ IDNO.8所示。
4.一种载体，所述载体包含权利要求3所述分离的核酸分子，或，表达权利要求1所述抗体或其抗原结合片段，或，表达权利要求2所述融合蛋白；
优选地，所述载体是表达载体或病毒载体；
更优选地，所述病毒来源的载体包括慢病毒载体、逆转录病毒载体、腺病毒载体、腺相关病毒载体、痘病毒载体、疱疹病毒载体。
5.一种宿主细胞，所述宿主细胞表达权利要求1所述抗体或其抗原结合片段，或，权利要求2所述融合蛋白，或者，
所述宿主细胞中含有权利要求3所述分离的核酸分子或权利要求4所述载体；
优选地，所述宿主细胞包括真核细胞或原核细胞；
优选地，所述宿主细胞是动物细胞，哺乳动物细胞；
优选地，所述宿主细胞为免疫细胞；
优选地，所述免疫细胞包括T细胞、B细胞、NK细胞、iNKT细胞、CTL细胞、树突状细胞、髓样细胞、单核细胞、巨噬细胞、gdT细胞、iPS来源的任何免疫细胞或其任意组合；
最优选地，所述宿主细胞是NK细胞。
6.一种药物组合物，所述药物组合物包含权利要求1所述抗体或其抗原结合片段、权利要求2所述融合蛋白、权利要求3所述分离的核酸分子或权利要求4所述载体、权利要求5所述宿主细胞中的一种或多种；
优选地，所述药物组合物中还包含其他治疗癌症的活性物质；
优选地，所述药物组合物还包括药学上可接受的赋形剂和/或添加剂；
优选地，所述药物组合物的给药途径包括口服、静脉注射、肌肉注射、皮下注射、鼻腔、口腔黏膜、眼、肺和呼吸道、皮肤、阴道、直肠；
优选地，所述药物组合物的给药剂型包括液体剂型、固体剂型或半固体剂型。
7.一种缀合物，所述缀合物是具有可检测的部分标记的权利要求1所述抗体或其抗原结合片段；
优选地，所述可检测的部分包括但不限于酶、荧光材料、发光材料，生物发光材料、放射性材料以及非放射性顺磁性金属离子。
8.一种检测BCMA的方法，所述方法包括将权利要求7所述抗体的缀合物与待检测样品接触的步骤；
优选地，所述检测是非诊断目的的；
优选地，所述待检测样品是疑似表达BCMA的样品；
优选地，所述样品包括细胞或培养物。
9.权利要求1所述抗体或其抗原结合片段、权利要求2所述融合蛋白、权利要求3所述分离的核酸分子或权利要求4所述载体、权利要求5所述宿主细胞、权利要求6所述药物组合物中任意一种或多种在制备BCMA检测产品、结合BCMA中的用途。
10.权利要求1所述抗体或其抗原结合片段、权利要求2所述融合蛋白、权利要求3所述分离的核酸分子或权利要求4所述载体、权利要求5所述宿主细胞、权利要求6所述药物组合物中任意一种或多种在制备药物中的应用；
优选地，所述药物针对的疾病包括癌症或由表达BCMA的免疫细胞介导的免疫病症；
优选地，所述免疫细胞是B细胞；
优选地，所述免疫病症包括类风湿性关节炎、全身性红斑狼疮、I型糖尿病、哮喘、异位性皮炎、过敏性鼻炎、血小板减少性紫癜、多发性硬化症、牛皮癣、修格兰氏综合症、桥本氏甲状腺炎、格雷夫氏病、原发性胆汁性硬化、韦格纳氏肉芽肿病、结核病以及移植物抗宿主疾病；
优选地，所述癌症包括BCMA高表达相关的癌症；
优选地，所述癌症包括浆细胞恶性肿瘤或B细胞恶性肿瘤；
优选地，所述癌症包括白血病、淋巴瘤或骨髓瘤；
最优选地，所述癌症包括多发性骨髓瘤、霍奇金淋巴瘤、白血病、胶质母细胞瘤、非霍奇金氏淋巴瘤、骨髓发育异常综合症、骨髓增生综合症、MGUS、孤立性浆细胞瘤、Waldenstrom巨球蛋白血病、原发性系统性淀粉样变性、浆细胞白血病、伯基特氏淋巴瘤；
最优选地，所述癌症是多发性骨髓瘤。
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Legal Events
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| PB01 | Publication | ||
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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| GR01 | Patent grant | ||
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