CN117003867B - 一种抗猪、牛、羊红细胞膜的通用型单克隆抗体、制备方法及应用 - Google Patents
一种抗猪、牛、羊红细胞膜的通用型单克隆抗体、制备方法及应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明提出一种抗猪、牛、羊红细胞膜的通用型单克隆抗体、制备方法及应用，属于生物技术领域，能解决现有红细胞抗体只能针对单一物种红细胞，不具备通用性的问题。该抗猪、牛、羊红细胞膜的通用型单克隆抗体，其抗体亚型为IgM，五聚体形式，每个单体包含2条重链和2条轻链，重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，或者是该序列经一个或多个氨基酸添加、删除、替换、修饰的保守性突变而获得的保守性变异体；轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示，或者是该序列经一个或多个氨基酸添加、删除、替换、修饰的保守性突变而获得的保守性变异体。本发明能应用于多物种全血样本检测方面。
Description
技术领域
本发明属于生物技术领域，尤其涉及一种抗猪、牛、羊红细胞膜的通用型单克隆抗体、制备方法及应用。
背景技术
目前，快速检测技术广泛应用于动物疫病监测与诊断领域，具有方便快捷，成本低廉，无需使用复杂仪器等优势。主流的快速检测技术包括胶体金试纸条，乳胶微球试纸条，荧光微球试纸条等，目前已在猪，牛，羊养殖行业广泛应用。例如猪瘟抗体胶体金检测试剂，猪牛羊布鲁氏菌病抗体检测试剂等。此类检测试剂样本一般为血清，血浆，全血。血清血浆样本需要静置离心等操作，需要额外增加设备，会延长整个检测时间。全血样本无需额外操作，可即时检测。但全血所含红细胞层析进入到试纸条NC膜上会干扰显色及影响结果判读，目前行业主要采用滤血垫及在试纸条样品垫中添加凝集素或红细胞膜抗体来阻止红细胞上膜。但是滤血垫成本较高，且会改变样本层析速度，对试剂性能产生影响，实际效果并不理想。红细胞抗体能有效阻止红细胞上膜，且不影响样本层析，成本较低，在快速检测试剂开发领域有较大应用空间。
但是，目前市售红细胞抗体主要针对人红细胞，针对动物红细胞抗体较少，且只能针对单一物种红细胞。对于广谱性疫病检测，例如猪牛羊口蹄疫抗体检测，猪牛羊布鲁氏杆菌抗体检测，采用通用型红细胞抗体能节约试剂开发成本，增强试剂通用性。
因此，如何研发一种能够针对多个物种红细胞的通用型抗体，可同时拦截多物种红细胞，防止红细胞上膜是降低企业开发成本的有效途径。
发明内容
本发明针对现有红细胞抗体只能针对单一物种红细胞，不具备广谱性和通用性的技术问题，提出一种抗猪、牛、羊红细胞膜的通用型单克隆抗体、制备方法及应用，通过抗猪、牛、羊红细胞膜的通用型单克隆抗体可同时拦截猪、牛、羊红细胞，防止红细胞上膜，同时通用型红细胞抗体可节约企业试剂开发成本。
为了达到上述目的，本发明采用的技术方案为：
一种抗猪、牛、羊红细胞膜的通用型单克隆抗体，其抗体亚型为IgM，五聚体形式，每个单体包含2条重链和2条轻链；
所述重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，或者是该序列经一个或多个氨基酸添加、删除、替换、修饰的保守性突变而获得的保守性变异体；
所述轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示，或者是该序列经一个或多个氨基酸添加、删除、替换、修饰的保守性突变而获得的保守性变异体。
在一实施方式中，所述重链可变区的CDR1、CDR2和CDR3的氨基酸序列分别如SEQID NO:3-5所示，所述轻链可变区的CDR1、CDR2和CDR3的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:6-8所示。
在一实施方式中，编码所述通用型单克隆抗体重链可变区的基因序列如SEQ IDNO:9所示，编码所述通用型单克隆抗体轻链可变区的基因序列如SEQ ID NO:10所示。
在一实施方式中，编码所述重链可变区的CDR1、CDR2和CDR3的基因序列分别如SEQID NO:11-13所示，编码所述轻链可变区的CDR1、CDR2和CDR3的基因序列分别如SEQ ID NO:14-16所示。
在一实施方式中，所述重链的分子量为75KD，所述轻链的分子量为26KD。
在一实施方式中，所述重链的抗体亚型为μ型，所述轻链的抗体亚型为Kappa型。
在一实施方式中，所述抗猪、牛、羊红细胞膜的通用型单克隆抗体的小鼠腹水血凝效价为1：256K。
一种抗猪、牛、羊红细胞膜的通用型单克隆抗体的制备方法，通过以猪红细胞作为抗原对BALB/c小鼠进免疫，通过杂交瘤技术以及血凝实验筛选获得分泌特异性抗猪、牛、羊红细胞膜抗体的杂交瘤细胞株，然后制备腹水型抗体并进行纯化获得所述抗猪、牛、羊红细胞膜的通用型单克隆抗体。
一种检测猪、牛、羊全血试纸条，其样本垫中包含如上述任一实施方式所述的抗猪、牛、羊红细胞膜的通用型单克隆抗体，其使用浓度小于等于0.25mg/mL。
一种抗猪、牛、羊红细胞膜的通用型单克隆抗体在检测全血样本中的应用，通过在胶体金试纸条样本垫中添加抗猪、牛、羊红细胞膜的通用型单克隆抗体同时阻止猪、牛、羊红细胞上硝酸纤维素膜，进而检测全血样本，所述抗猪、牛、羊红细胞膜的通用型单克隆抗体的使用浓度小于等于0.25mg/mL。
与现有技术相比，本发明的优点和积极效果在于：
1、本发明提供的抗猪、牛、羊红细胞膜的通用型单克隆抗体可同时拦截猪、牛、羊红细胞，防止红细胞上膜，同时该通用型单克隆抗体可节约企业试剂研发成本，解决传统红细胞抗体只能针对单一物种红细胞，不具备广谱性和通用性的技术问题；
2、本发明提供的抗猪、牛、羊红细胞膜的通用型单克隆抗体具有通用性，能抗猪、牛、羊红细胞膜，其小鼠腹水血凝效价为1：256K，仅需0.25mg/mL即对血红细胞表现出良好的黏附效果；
3、本发明提供的抗猪、牛、羊红细胞膜的通用型单克隆抗体能应用于胶体金试纸条可检测猪、牛、羊全血样本；
4、本发明提供的抗猪、牛、羊红细胞膜的通用型单克隆抗体能应用于层析类试剂开发可有效节约试剂开发成本，提高试剂通用性。
附图说明
图1为本发明所提供的鼠源性单克隆抗体Z1H9筛选过程中细胞上清检测结果图；
图2为本发明所提供的鼠源性单克隆抗体Z1H9腹水检测猪红细胞的血凝效价结果图；
图3为本发明所提供的鼠源性单克隆抗体Z1H9腹水检测牛、羊红细胞的血凝效价结果图；
图4为本发明所提供的抗猪、牛、羊红细胞膜单克隆抗体（Z1H9）Ig亚类鉴定结果图；
图5为本发明所提供的抗猪、牛、羊红细胞膜单克隆抗体（Z1H9）电泳图；
图6为本发明所提供的抗猪、牛、羊红细胞膜的通用型单克隆抗体制备胶体金试纸条示意图；
图7为本发明所制备的Z1H9抗体在胶体金试纸条上检测猪、牛、羊全血样本。
以上各图中：
1、PVC底板；2、样品垫；3、硝酸纤维素膜（NC膜）；4、吸水滤纸；5、测试线（T线）；6、质控线（C线）。
具体实施方式
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
本发明实施例提供了一种抗猪、牛、羊红细胞膜的通用型单克隆抗体，其抗体亚型为IgM，五聚体形式，每个单体包含2条重链和2条轻链；
所述重链可变区的氨基酸序列为：KLQESGPELVKPGASVMMSCKASGSTLIAYVISWVKQKTGQGLERIGAIYPGTARTFYNEKFTGKATLTTDITSNTAYMQLSSLTSEDSAVYFCPTDYGRAQWTMDFWGQETTVTVSP（如SEQ ID NO:1所示），或者是该序列经一个或多个氨基酸添加、删除、替换、修饰的保守性突变而获得的保守性变异体；
所述轻链可变区的氨基酸序列为：IMTQSPASLAVSLGQRATISYRASQSVTTPIANRMHWNQQKPGQPPRLLIYRAINLESGVPARFSGSGSGTDFTLNIHPVEEEDAATYYCQYLRALIRSAERQRRK（如SEQ IDNO:2所示），或者是该序列经一个或多个氨基酸添加、删除、替换、修饰的保守性突变而获得的保守性变异体。
上述实施例提供了一种抗猪、牛、羊红细胞膜的通用型单克隆抗体，该抗体通过以下方法制备：以猪红细胞作为抗原对BALB/c小鼠进免疫，通过杂交瘤技术以及血凝实验筛选获得分泌特异性抗猪、牛、羊红细胞膜抗体的杂交瘤细胞株，然后制备腹水型抗体并进行纯化获得抗猪、牛、羊红细胞膜的通用型单克隆抗体，该抗体亚型为IgM，其小鼠腹水血凝效价为1：256K。
在一具体实施方式中，重链可变区的CDR1的氨基酸序列为：SGSTLIAY（如SEQ IDNO:3所示）；
重链可变区的CDR2的氨基酸序列为：AIYPGTAR（如SEQ ID NO:4所示）；
重链可变区的CDR3的氨基酸序列为：PTDYGRAQWTMDF（如SEQ ID NO:5所示）；
轻链可变区的CDR1的氨基酸序列为：QSVTTPIANR（如SEQ ID NO:6所示）；
轻链可变区的CDR2的氨基酸序列为：RAI（如SEQ ID NO:7所示）；
轻链可变区的CDR3的氨基酸序列为：GAYTFGGATTSEIK（如SEQ ID NO:8所示）。
在一具体实施方式中，编码所述通用型单克隆抗体重链可变区的基因序列为：TAGAAGCTGCAGGAGTCAGGACCTGAACTGGTGAAGCCTGGGGCTTCAGTGATGATGTCCTGCAAGGCTTCCGGAAGCACATTAATCGCCTATGTGATAAGTTGGGTGAAGCAGAAAACTGGACAGGGCCTTGAGCGGATTGGAGCGATATATCCAGGCACTGCTCGTACTTTCTATAATGAGAAGTTCACGGGCAAGGCCACACTGACTACAGACATAACCTCCAACACAGCCTACATGCAGCTCAGCAGCCTGACATCTGAGGACTCTGCGGTCTATTTCTGTCCAAGACCACAGTCACCGTTTCCCCA（如SEQ ID NO:9所示）；
编码所述通用型单克隆抗体轻链可变区的基因序列为：ATTATGACACAGTCTCCTGCTTCCTTAGCTGTATCTCTGGGGCAGAGGGCCACCATCTCATACAGGGCCAGCCAAAGCGTCACTACTCCAATCGCAAACCGTATGCACTGGAACCAACAGAAACCAGGACAGCCACCCAGACTCCTCATCTATCGTGCAATAAACCTAGAATCTGGGGTCCCTGCCAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCTGGGACAGACTTCACCCTCAACATCCATCCTGTGGAGGAGGAGGATGCTGGTCAATACCTTAGGGCGCTTATACGTTCGGCGGAGCGACAACGTCGGAAATAAAA（如SEQ ID NO:10所示）。
在一具体实施方式中，编码重链可变区的CDR1基因序列为：TCCGGAAGCACATTAATCGCCTAT（如SEQ ID NO:11所示）；
编码重链可变区的CDR2基因序列为：GCGATATATCCAGGCACTGCTCGT（如SEQ ID NO:12所示）；
编码重链可变区的CDR3基因序列为：CCAACCGACTATGGTCGTGCCCAGTGGACGATGGACTTC（如SEQ ID NO:13所示）；
编码轻链可变区的CDR1基因序列为：CAAAGCGTCACTACTCCAATCGCAAACCGT（如SEQID NO:14所示）；
编码轻链可变区的CDR2基因序列为：CGTGCAATA（如SEQ ID NO:15所示）；
编码轻链可变区的CDR3基因序列为：ATACCTTAGGGCGCTTATACGTTCGGCGGAGCGACAACGTCGGAAATAAAA（如SEQ ID NO:16所示）。
在一具体实施方式中，所述重链的分子量为75KD，所述轻链的分子量为26KD。
在一具体实施方式中，所述重链的抗体亚型为μ型，所述轻链的抗体亚型为Kappa型。
本发明提供一种检测猪、牛、羊全血试纸条，其样本垫中包含上述任一实施方式所述的抗猪、牛、羊红细胞膜的通用型单克隆抗体，其使用浓度小于等于0.25mg/mL。
本发明提供一种抗猪、牛、羊红细胞膜的通用型单克隆抗体在检测全血样本中的应用，通过在胶体金试纸条样本垫中添加抗猪、牛、羊红细胞膜的通用型单克隆抗体同时阻止猪、牛、羊红细胞上硝酸纤维素膜（NC膜），进而检测全血样本，所述抗猪、牛、羊红细胞膜的通用型单克隆抗体的使用浓度小于等于0.25mg/mL。
为了更清楚详细地介绍本发明实施例所提供的抗猪、牛、羊红细胞膜的通用型单克隆抗体、制备方法及应用，下面将结合具体实施例进行描述。
实施例1
本实施例提供一种抗猪、牛、羊红细胞膜的通用型单克隆抗体的制备方法，具体为：
（1）动物免疫：
选择6周龄雌性Balb/c小鼠（购于广东省医学实验动物中心）。
初次免疫：5%猪红细胞，腹腔注射，500ul/只；
二次免疫：2周后，5%猪红细胞，腹腔注射，500ul/只；
三次免疫：2周后，5%猪红细胞，腹腔注射，500ul/只（10天后采血测其血凝效价）；
四次免疫：2周后，5%猪红细胞，腹腔注射，500ul/只。10天后采血测其效价，血凝效价达到104则可进行融合。
加强免疫：融合前3天，5%猪红细胞，腹腔注射，500ul/只；
3天后取脾脏融合。
（2）细胞融合：
取对数生长的骨髓瘤细胞SP2/0（购于武汉普诺赛生命科技有限公司），用1×PBS洗涤，吹悬后计数；
取小鼠脾脏，用RPMI 1640基础培养基洗涤、碾磨，制备单个脾细胞悬液，计数；
将骨髓瘤细胞与脾细胞按个数比1：5的比例混合在一起，1000rpm离心7min；
弃上清，用滴管吸尽残余液体，在37℃水浴条件下1min内加入1mL 50%的聚乙二醇（PEG-1500），静置90秒，2-4min内加入15mL RPMI 1640基础培养基终止反应；
1000rpm离心7min，弃上清，用100mL 20%（v/v）胎牛血清HAT-RPMI 1640轻轻混悬；滴加于预先铺有饲养细胞的96孔板中，100µL/孔；37℃，5%（v/v）CO2培养箱内培养。
（3）融合细胞的筛选与克隆化
于细胞融合后第六天取细胞培养上清50ul，采用1%猪红细胞进行血凝实验，原始孔中阳性孔血凝结果如图1所示；
将筛选到的阳性孔杂交瘤细胞采用1%牛红细胞，1%羊红细胞进行复筛。
将筛选到的阳性孔杂交瘤细胞进行有限稀释法克隆化，经过三次亚克隆筛选得到稳定的杂交瘤细胞株（杂交瘤细胞Z1H9）。
（4）单克隆抗体的大量制备：
取9周龄雌性Balb/c小鼠（购于广东省南方医科大学动物中心），腹腔注射0.5mL弗氏不完全佐剂；
1周后于小鼠腹腔接种4*105个杂交瘤细胞，细胞接种7-10天后观察小鼠腹水生长情况；
待腹水尽可能多时抽取腹水；
间隔1-2天，待腹水再生积聚后，同法再抽，抽取后腹水2000rpm 离心10min，取上清冻存于-20℃。
（5）腹水效价测试：
取96孔V型血凝反应板，将腹水用1×PBS稀释2K倍，然后依次做2倍比稀释，用移液器吸取上述不同稀释比例的腹水50ul，从第一孔依次往后加，每孔50ul，最后一孔加50ulPBS作为空白对照孔。
吸取50ul 1%猪、牛、羊红细胞悬液从最后一孔倒加至第一孔且要悬加。
轻叩血凝板混匀，在室温（20-25℃）下静置60min。读数得到结果。
结果分析：如图2所示，Z1H9腹水测试猪红细胞血凝效价可达1：256K，个别能达1：512K；如图3所示，测试牛、羊红细胞血凝效价可达1：128K，个别能达1：256K。不同种属，不同个体区别不是很大。结果表明本实施例制备得到的Z1H9是一种抗猪、牛、羊红细胞膜通用型抗体。
（6）腹水纯化：采用辛酸-硫酸铵法对腹水进行纯化，具体步骤如下：
从-20℃冰箱中取出保存的腹水，置于4℃融化，待腹水融化后于离心机，12000rpm，4℃离心10min，弃掉腹水上部浮层；
取500ul腹水加入等体积0.015M，pH=7.4的PBS缓冲液进行稀释，加入适量的二氧化硅（0.1g/mL），震荡混匀，静置30min；
静置完成后于离心机，2000rpm，4℃离心25min，收集上清液，即为初始腹水，记录初始腹水体积；将初始腹水与醋酸盐缓冲液按1:2比例混合，用冰醋酸将溶液pH调为4.5，然后于冰上缓慢搅拌30min。边搅拌边加入辛酸，加入量为每毫升初始腹水加入40ul辛酸。于4℃静置2h，充分沉淀杂蛋白；
静置结束，将上液12000rpm，4℃离心30min，收集上清液，0.45um滤膜过滤，记录滤液体积，调pH至7.4；
取上歩收集液，置于冰上缓慢搅拌，边搅拌边加入4℃饱和硫酸铵溶液，加入体积与收集液相等。搅拌5min后置于4℃冰箱，过夜，充分沉淀蛋白质；
1000rpm，4℃离心30min，弃上清，用1.5ml，0.015M，pH=7.4的PBS缓冲液溶解沉淀，然后用0.22um滤膜过滤，除去不溶物。
采用紫外吸收法即A280法测得纯化抗体浓度3.47mg/ml；
（7）抗体亚型鉴定：
采购proteintech厂家的小鼠单克隆抗体亚型鉴定试剂盒，货号PK20003，参照试剂说明书对Z1H9抗体亚型进行鉴定，同时对Z1H9抗体进行SDS-PAGE电泳分析。
结果分析：抗体亚型结果如图4所示，抗猪、牛、羊红细胞膜抗体Z1H9为IgM亚型；SDS-PAGE电泳结果如图5所示，Z1H9抗体变性后分为1条重链，其分子量约为75KD，一条轻链，其分子量约为26KD。
（8）抗体测序：
抗体测序过程采用本领域共知流程测序即可。取对数生长期杂交瘤细胞Z1H9，反转录后获得cDNA，扩增获得其重链和轻链可变区序列，克隆至pMD18-T载体，测序。使用IMGT/V-QUEST进行序列分析。所得抗体（鼠源性单克隆抗体Z1H9）的可变区基因包括重链可变区基因和轻链可变区基因，其中：
编码重链可变区的基因序列如SEQ ID NO:9所示，轻链可变区的基因序列如SEQID NO：10所示，编码重链可变区CDR1,CDR2,CDR3的基因序列分别如SEQ ID NO:11, SEQ IDNO:12,SEQ ID NO:13所示。编码轻链可变区CDR1,CDR2,CDR3的基因序列分别如SEQ ID NO:14, SEQ ID NO:15,SEQ ID NO:16所示。具体序列见表1。
表1 抗猪、牛、羊红细胞膜的通用型单克隆抗体的编码基因序列信息
基于表1检测所得的基因序列，抗体（鼠源性单克隆抗体Z1H9）的重链可变区、轻链可变区、重链可变区CDR1,CDR2,CDR3以及轻链可变区CDR1,CDR2,CDR3的编码基因经过质谱分析，确认氨基酸序列依次如SEQIDNO:1-8所示。具体序列信息见表2。
表2 抗猪、牛、羊红细胞膜的通用型单克隆抗体的氨基酸序列信息
实施例2
本实施例将如实施例1所述的方法制备得到的抗猪、牛、羊红细胞膜的通用型单克隆抗体Z1H9应用于胶体金试纸条检测猪牛羊全血样本，具体为：
（1）试纸条组装：
将NC膜贴在PVC底板上，PVC板一端贴有样品垫，金结合垫。金结合垫压NC膜2mm，样品垫靠近外侧，压金结合垫2mm左右，在PVC底板另一端贴有吸水滤纸，压NC膜2mm左右。NC膜上划有检测线（靠近样品垫端）和质控线（靠近吸水纸端），试纸条组成图见图6。
（2）样本垫处理：
将抗猪、牛、羊红细胞膜的通用型单克隆抗体Z1H9采用pH=7.4，0.02M的PB样本垫缓冲液稀释至0.25mg/mL。样本垫缓冲液还含有0.5%BSA，0.1%吐温-20。将样本垫液按1ml/5×5cm2均匀涂布在玻纤上，在37℃±2℃鼓风干燥箱干燥12-18h。然后按照胶体金试纸条结构，与金结合垫，吸水纸，NC膜，PVC板一起组装成胶体金大板，用切条机切成3mm宽试纸条，装卡，放入铝箔袋封口备用。
（3）猪、牛、羊全血样本检测：
采购鸿泉生物新鲜肝素钠抗凝猪、牛、羊血各5份（不同个体），设置不含抗猪、牛、羊红细胞膜的通用型单克隆抗体的阴性对照组试纸条，分别取30ul全血样本加到样本垫上，然后滴加30ul的PBS缓冲液，室温反应15min，观察样本层析情况。
结果分析：从图7中结果可以看出，加有抗猪、牛、羊红细胞膜的通用型单克隆抗体试纸条全血不能上膜，膜背景清晰，不影响结果判读。不加抗猪、牛、羊红细胞膜的通用型单克隆抗体的阴性组，红细胞层析进入NC膜，膜面发红，无法观测到检测线，质控线位置，影响结果判读。
综上，本发明所提供的抗猪、牛、羊红细胞膜的通用型单克隆抗体可应用于胶体金试纸条上猪、牛、羊全血检测，能再提升试剂检测全血样本的通用性的同时，降低试剂开发成本，解决了传统红细胞抗体只能针对单一物种红细胞，不具备广谱性和通用性的技术问题。
Claims (9)
1.一种抗猪、牛、羊红细胞膜的通用型单克隆抗体，其特征在于，其抗体亚型为IgM，五聚体形式，每个单体包含2条重链和2条轻链；
所述重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示；
所述轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。
2.根据权利要求1所述的抗猪、牛、羊红细胞膜的通用型单克隆抗体，其特征在于，所述重链可变区的CDR1、CDR2和CDR3的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:3-5所示，所述轻链可变区的CDR1、CDR2和CDR3的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:6-8所示。
3.根据权利要求1所述的抗猪、牛、羊红细胞膜的通用型单克隆抗体，其特征在于，编码所述通用型单克隆抗体重链可变区的基因序列如SEQ ID NO:9所示，编码所述通用型单克隆抗体轻链可变区的基因序列如SEQ ID NO:10所示。
4.根据权利要求2所述的抗猪、牛、羊红细胞膜的通用型单克隆抗体，其特征在于，编码所述重链可变区的CDR1、CDR2和CDR3的基因序列分别如SEQ ID NO:11-13所示，编码所述轻链可变区的CDR1、CDR2和CDR3的基因序列分别如SEQ ID NO:14-16所示。
5.根据权利要求1所述的抗猪、牛、羊红细胞膜的通用型单克隆抗体，其特征在于，所述重链的分子量为75KD，所述轻链的分子量为26KD。
6.根据权利要求1所述的抗猪、牛、羊红细胞膜的通用型单克隆抗体，其特征在于，所述重链的抗体亚型为μ型，所述轻链的抗体亚型为Kappa型。
7.根据权利要求1所述的抗猪、牛、羊红细胞膜的通用型单克隆抗体，其特征在于，所述抗猪、牛、羊红细胞膜的通用型单克隆抗体的小鼠腹水血凝效价为1：256K。
8.一种检测猪、牛、羊全血试纸条，其特征在于，其样本垫中包含如权利要求1-7中任一项所述的抗猪、牛、羊红细胞膜的通用型单克隆抗体，其使用浓度小于等于0.25mg/mL。
9.一种如权利要求1-7中任一项所述的抗猪、牛、羊红细胞膜的通用型单克隆抗体在制备检测全血样本的试纸条中的应用，其特征在于，通过在胶体金试纸条样本垫中添加抗猪、牛、羊红细胞膜的通用型单克隆抗体同时阻止猪、牛、羊红细胞上硝酸纤维素膜，进而检测全血样本，所述抗猪、牛、羊红细胞膜的通用型单克隆抗体的使用浓度小于等于0.25mg/mL。
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Legal Events
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| PB01 | Publication | ||
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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| GR01 | Patent grant | ||
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