CN116761820A - 糖皮质激素受体激动剂的药物偶联物及其在医药上的应用 - Google Patents

糖皮质激素受体激动剂的药物偶联物及其在医药上的应用 Download PDF

Info

Publication number
CN116761820A
CN116761820A CN202280009295.1A CN202280009295A CN116761820A CN 116761820 A CN116761820 A CN 116761820A CN 202280009295 A CN202280009295 A CN 202280009295A CN 116761820 A CN116761820 A CN 116761820A
Authority
CN
China
Prior art keywords
alkyl
hydrogen
group
substituents
substituted
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202280009295.1A
Other languages
English (en)
Inventor
祝令建
洪敏�
唐满平
粟璐
邓梦蝶
张敬杨
任文明
林侃
黄建
廖成
张连山
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Jiangsu Hengrui Medicine Co Ltd
Shanghai Shengdi Pharmaceutical Co Ltd
Shanghai Senhui Medicine Co Ltd
Original Assignee
Jiangsu Hengrui Medicine Co Ltd
Shanghai Shengdi Pharmaceutical Co Ltd
Shanghai Senhui Medicine Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Jiangsu Hengrui Medicine Co Ltd, Shanghai Shengdi Pharmaceutical Co Ltd, Shanghai Senhui Medicine Co Ltd filed Critical Jiangsu Hengrui Medicine Co Ltd
Publication of CN116761820A publication Critical patent/CN116761820A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
    • A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
    • A61K47/554—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound the modifying agent being a steroid plant sterol, glycyrrhetic acid, enoxolone or bile acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6845—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a cytokine, e.g. growth factors, VEGF, TNF, a lymphokine or an interferon
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J71/00—Steroids in which the cyclopenta(a)hydrophenanthrene skeleton is condensed with a heterocyclic ring
    • C07J71/0005—Oxygen-containing hetero ring
    • C07J71/0026—Oxygen-containing hetero ring cyclic ketals
    • C07J71/0031—Oxygen-containing hetero ring cyclic ketals at positions 16, 17
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/24—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/24—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
    • C07K16/241—Tumor Necrosis Factors
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

糖皮质激素受体激动剂的药物偶联物及其在医药上的应用。具体而言，涉及一种式(I)所示的抗体‑药物偶联物：Ab‑(L‑D)k(I)，其中，Ab为抗体或其抗原结合片段，L为将Ab共价连接于D的连接子，k为1至20，且D如下式(II‑A)或(II‑B)所示。其中式中各基团如说明书中所定义。所述抗体‑药物偶联物可有效治疗免疫性疾病。

Description

糖皮质激素受体激动剂的药物偶联物及其在医药上的应用 技术领域
本公开属于医药领域，具体涉及一种糖皮质激素受体激动剂的药物偶联物及其在医药上的应用。
背景技术
类风湿关节炎(RA)是一种常见的关节炎，属于自身免疫疾病，在人群中的发病率为0.3-1％，如不及时治疗，可导致骨破坏和关节损伤。在RA发病中有多种促炎性细胞因子参与，如肿瘤坏死因子-α(TNFα)、白细胞介素如IL-1、IL-6、IL-8等。因此，抑制促炎性细胞因子的产生或阻断其生理作用，是目前RA研究领域的热点。近年来许多新研发的生物制剂可通过阻断或下调促炎性细胞因子的活性而控制病情的进展，如TNFα抑制剂、抗IL-6R抗体等目前认为，在诸多RA炎症反应的细胞因子中，TNFα是最重要的促炎性细胞因子之一，其在RA的病情发展、局部炎症反应和组织损伤中均起着重要作用。目前已被美国FDA批准的TNFα抑制剂包括：可溶性受体拮抗剂-依那西普(Etanercept)，人鼠嵌合抗体-英夫利昔单抗(Infliximab)，全人源单抗阿达木单抗(Adalimumab， )，全人源单抗戈利木单抗(Golimumab)和聚乙二醇人源化Fab’片段赛妥珠单抗(Certolizumab pegol)。尽管它们在临床上取得了成功，但TNFα抑制剂仍然受限于它们在患者中可以达到的最大功效，需要鉴定和开发更强力有效的治疗剂。用TNFα抑制剂治疗的患者也可能对治疗剂产生免疫原性应答，从而限制其有效性。
糖皮质激素受体激动剂也是治疗类风湿关节炎较为有效的药物。作为代表性的糖皮质激素受体激动剂，已知皮质醇、皮质酮等在生物体内制成的糖皮质激素受体激动剂以及地塞米松、泼尼松、泼尼松龙等合成糖皮质激素受体激动剂。这些糖皮质激素受体激动剂由于具有类固醇结构，因此总称为类固醇类，应用在各种疾病的治疗中。但是，这些类固醇类由于其使用，有时会表现出类固醇消化性溃疡、类固醇紫斑、类固醇胰炎、类固醇糖尿病、类固醇白内障、类固醇青光眼等副作用。
抗体药物偶联物(antibody drug conjugate，ADC)，是指单克隆抗体或者抗体片段通过稳定的化学接头化合物与具有生物活性的药物相连。临床前和临床开发中的大多数ADC都用于肿瘤适应症，其中细胞毒性有效载荷靶向表达抗原的癌细胞。但是，通过ADC介导的生物活性小分子的传递来调节病原性细胞活性对于非肿瘤学适应症也是有吸引力的，从而导致了该技术的广泛应用。
现有技术已经公开了一些糖皮质激素受体激动剂的药物偶联物，例如WO2017210471，WO2019106609等。
发明内容
本公开一方面提供了一种式(I)所示的抗体-药物偶联物(ADC)，
Ab-(L-D) k
(I)
其中，Ab为抗体或其抗原结合片段，
L为将Ab共价连接于D的连接子，且k为1至20(包括1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20或任意两数值之间任意数值)，
D如下式(II-A)或(II-B)所示：
其中，
表示单键或双键；
R 1a各自独立地选自氢、烷基和烷氧基，所述的烷基和烷氧基各自独立地任选被选自烷基、烷氧基、卤素、氘、氨基、氰基、硝基、羟基和羟烷基中的一个或多个取代基所取代；
环A为任选被一个或多个取代基Q 1所取代的芳基或杂芳基；
环B为任选被一个或多个取代基Q 1所取代的芳基或杂芳基；
X 1为-(CR 5aR 5b)m-和任选被一个或多个取代基Q 1所取代的芳基或杂芳基；
R 5a和R 5b各自独立地选自氢、卤素、羟基、巯基、氘、硝基、氰基和任选被一个或多个取代基Q 1所取代的下述基团：烷基、-NR iR j、-C(O)R k、-C(O)OR k、-S(O)R k、-S(O)OR k、-S(O)(O)R k、-S(O)(O)OR k、-C(S)R k、烷氧基、烷硫基、烯基和炔基，或者R 5a和R 5b一起形成氧代或硫代；
环C和环D各自独立地选自任选被一个或多个取代基Q 1所取代的芳基和杂芳基，且环C和环D中至少有一个选自任选被一个或多个取代基Q 1所取代的稠环芳基或稠杂芳基；；
X 2选自-(CR 6aR 6b)n-、任选被一个或多个取代基Q 1所取代的芳基或杂芳基、-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)(O)-、-NR 6c-、-CH 2S-、-CH 2O-、-NHCR 6dR 6e-、-CR 6f＝CR 6g-和-C≡C-，或者X 2不存在；
R 6a和R 6b各自独立地选自氢、卤素、羟基、巯基、氘、硝基、氰基或任选被一个或多个取代基Q 1所取代的下述基团：烷基、-NR iR j、-C(O)R k、-C(O)OR k、-S(O)R k、-S(O)OR k、-S(O)(O)R k、-S(O)(O)OR k、-C(S)R k、烷氧基、烷硫基、烯基和炔基， 或者R 6a、R 6b与其相连的碳原子一起形成3元至10元环烷基，或者R 6a和R 6b一起形成氧代或硫代；
R 6c、R 6d、R 6e、R 6f和R 6g各自独立地选自氢、C 1-C 6烷基、C 1-C 6卤代烷基和C 1-C 6烷氧基；
R 1各自独立地选自氢、烷基和烷氧基，其中所述的烷基和烷氧基各自独立地任选被选自烷基、烷氧基、卤素、氘、氨基、氰基、硝基、羟基和羟烷基中的一个或多个取代基所取代；
R 2各自独立地选自-CH 2OH、-CH 2SH、-CH 2Cl、-SCH 2Cl、-SCH 2F、-SCH 2CF 3、-OH、-OCH 2CN、-OCH 2Cl、-OCH 2F、-OCH 3、-OCH 2CH 3、-SCH 2CN、
R 2a各自独立地为氢或C 1-C 6烷基；
R 2b各自独立地为C 1-C 6烷基或C 1-C 6烷氧基；
R 2c各自独立地选自氢、C 1-C 6烷基、-CH 2OH和C 1-C 6烷氧基；
R 2d和R 2e各自独立地为氢或C 1-C 6烷基；
R 3各自独立地为氢或卤素；
R 4各自独立地选自氢、卤素和羟基；
m和n各自独立地为1至6的整数；
取代基团Q 1各自独立地选自C 1-C 6烷基、卤素、氘、羟基、巯基、-NR iR j、氧代、硫代、-C(O)R k、-C(O)OR k、-S(O)R k、-S(O)OR k、-S(O)(O)R k、-S(O)(O)OR k、-C(S)R k、硝基、氰基、C 1-C 6烷氧基、C 1-C 6烷硫基、C 2-C 6烯基、C 2-C 6炔基、3至10元环烷基、3至10元杂环基、6至10元芳基、5至10元杂芳基、8至12元稠环芳基和5至12元稠杂芳基；
R i和R j各自独立地选自氢原子、羟基、C 1-C 6烷基和C 1-C 6烷氧基；
R k独立地选自氢原子、C 1-C 6烷基、C 1-C 6卤代烷基、C 1-C 6烷氧基、羟基和-NR iR j，其中所述的烷基、烷氧基和卤代烷基各自独立地任选被选自C 1-C 6烷基、卤素、羟基、巯基、-NR iR j、氧代、硫代、羧基、硝基、氰基、C 1-C 6烷氧基、C 1-C 6烷硫基、C 2-C 6烯基、C 2-C 6炔基、3至10元环烷基、3至10元杂环基、6至10元芳基和5至10元杂芳基中的一个或多个取代基所取代；且
条件是当R 5a为氢或烷基时，R 5b不为氢或烷基。
在某些实施方案中，R 1a各自独立地选自氢、C 1-C 6烷基和C 1-C 6烷氧基，所述的烷基和烷氧基各自独立地任选被选自C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷氧基、卤素、氘、氨基、氰基和羟基中的一个或多个取代基所取代。
在某些实施方案中，R 1a各自独立地选自氢、C 1-C 6烷基和C 1-C 6烷氧基。
在某些实施方案中，环A为任选被一个或多个取代基Q 1所取代的6至10元芳基或5至10元杂芳基，所述杂芳基包含至少一个氮原子。
在某些实施方案中，环A为任选被一个或多个取代基Q 1所取代的
在某些实施方案中，环B为任选被一个或多个取代基Q 1所取代的6至10元芳基或5至10元杂芳基，所述杂芳基包含至少一个氮原子。
在某些实施方案中，环B为任选被一个或多个取代基Q 1所取代的
在某些实施方案中，X 1为-(CR 5aR 5b)m-或任选被一个或多个取代基Q 1所取代的6至10元芳基或5至10元杂芳基，所述杂芳基包含至少一个氮原子。
在某些实施方案中，R 5a和R 5b各自独立地选自氢、卤素、羟基、巯基、氘、硝基、氰基和任选被一个或多个取代基Q 1所取代的下述基团：C 1-C 6烷基、-NR iR j、-C(O)R k、-C(O)OR k、-S(O)R k、-S(O)OR k、-S(O)(O)R k、-S(O)(O)OR k、-C(S)R k、C 1-C 6烷氧基、C 1-C 6烷硫基、C 2-C 6烯基和C 2-C 6炔基，或者R 5a和R 5b一起形成氧代或硫代。
在某些实施方案中，R 5a和R 5b各自独立地选自氢、卤素、羟基、巯基、氘、氰基和任选被一个或多个取代基Q 1所取代的下述基团：C 1-C 6烷基、-NR iR j、-C(O)R k、-C(O)OR k、-S(O)R k、-S(O)OR k、-S(O)(O)R k、-S(O)(O)OR k、C 1-C 6烷氧基、C 1-C 6烷硫基、C 2-C 6烯基和C 2-C 6炔基，或者R 5a和R 5b一起形成氧代或硫代。
在某些实施方案中，R 5a和R 5b各自独立地选自氢、卤素、羟基、巯基、氘、氰基和任选被一个或多个取代基Q 1所取代的下述基团：C 1-C 6烷基、-NR iR j、-C(O)R k、-C(O)OR k、-S(O)R k、-S(O)(O)R k、C 1-C 6烷氧基、C 2-C 6烯基和C 2-C 6炔基，或者R 5a和R 5b一起形成氧代或硫代。
在某些实施方案中，R 5a和R 5b各自独立地选自氢、卤素、羟基、巯基、氘、氰基和任选被一个或多个取代基Q 1所取代的下述基团：C 1-C 6烷基、-NR iR j、-C(O)R k、-C(O)OR k和C 1-C 6烷氧基，或者R 5a和R 5b一起形成氧代或硫代。
在某些实施方案中，环C和环D各自独立地选自任选被一个或多个取代基Q 1 所取代的6至10元芳基、5至10元杂芳基、8至12元稠环芳基或5至12元稠杂芳基，所述杂芳基或稠杂芳基包含至少一个氮原子。
在某些实施方案中，环C和环D各自独立地选自任选被一个或多个取代基Q 1所取代的下述基团：
在某些实施方案中，环C选自任选被一个或多个取代基Q 1所取代的：
在某些实施方案中，环D为任选被一个或多个取代基Q 1所取代的6至10元芳基或5至10元杂芳基，所述杂芳基包含至少一个氮原子。
在某些实施方案中，环D为任选被一个或多个取代基Q 1所取代的
在某些实施方案中，X 2选自-(CR 6aR 6b)n-、-O-、-S-、-NR 6c-、-CH 2S-、-CH 2O-、-NHCR 6dR 6e-和任选被一个或多个取代基Q 1所取代的6至10元芳基或5至10元杂芳基，所述杂芳基包含至少一个氮原子。
在某些实施方案中，R 6a和R 6b各自独立地选自氢、卤素、羟基、巯基、氘、氰基和任选被一个或多个取代基Q 1所取代的下述基团：C 1-C 6烷基、-NR iR j、-C(O)R k、-C(O)OR k、-S(O)R k、-S(O)OR k、-S(O)(O)R k、-S(O)(O)OR k、C 1-C 6烷氧基、C 1-C 6 烷硫基、C 2-C 6烯基和C 2-C 6炔基，或者R 6a、R 6b与其相连的碳原子一起形成3元至10元环烷基，或者R 6a和R 6b一起形成氧代或硫代。
在某些实施方案中，R 6a和R 6b各自独立地选自氢、卤素、羟基、巯基、氘、氰基和任选被一个或多个取代基Q 1所取代的下述基团：C 1-C 6烷基、-NR iR j、-C(O)R k、-C(O)OR k、-S(O)R k、-S(O)(O)R k、C 1-C 6烷氧基、C 2-C 6烯基和C 2-C 6炔基，或者R 6a、R 6b与其相连的碳原子一起形成3元至10元环烷基，或者R 6a和R 6b一起形成氧代或硫代。
在某些实施方案中，R 6a和R 6b各自独立地选自氢、卤素、羟基、巯基、氘、氰基和任选被一个或多个取代基Q 1所取代的下述基团：C 1-C 6烷基、-NR iR j、-C(O)R k、-C(O)OR k和C 1-C 6烷氧基，或者R 6a和R 6b一起形成氧代或硫代。
在某些实施方案中，R 1各自独立地选自氢、C 1-C 6烷基和C 1-C 6烷氧基，优选氢。
在某些实施方案中，R 4各自独立地为氢。
在某些实施方案中，取代基团Q 1各自独立地选自卤素、羟基、巯基、氘、氧代、硫代、氰基、氨基、羧基、C 1-C 6烷基和C 1-C 6烷氧基。
在某些实施方案中，R k独立地选自氢原子、C 1-C 6烷基、C 1-C 6卤代烷基、C 1-C 6烷氧基、羟基和-NR iR j。
在某些实施方案中，D如下式(II-A’)或(II-B’)所示：
其中，
R 1a各自独立地选自氢、C 1-C 6烷基和C 1-C 6烷氧基；
环A为 所述环A任选被一个或多个取代基Q 1所取代；
环B为 所述环B任选被一个或多个取代基Q 1所取代；
X 1为-(CR 5aR 5b)m-或任选被一个或多个取代基Q 1所取代的6至10元芳基或5至10元杂芳基，所述杂芳基包含至少一个氮原子；
R 5a和R 5b各自独立地选自氢、卤素、羟基、巯基、氘、氰基和任选被一个或多个取代基Q 1所取代的下述基团：C 1-C 6烷基、-NR iR j、-C(O)R k、-C(O)OR k和C 1-C 6 烷氧基，或者R 5a和R 5b一起形成氧代或硫代；
环C选自 所述环C任选被一个或多个取代基Q 1所取代；
环D为 所述环D任选被一个或多个取代基Q 1所取代；
X 2选自-(CR 6aR 6b)n-、-O-、-S-、-NR 6c-、-CH 2S-、-CH 2O-、-NHCR 6dR 6e-和任选被一个或多个取代基Q 1所取代的6至10元芳基或5至10元杂芳基；
R 6a和R 6b各自独立地选自氢、卤素、羟基、巯基、氘、氰基和任选被一个或多个取代基Q 1所取代的下述基团：C 1-C 6烷基、-NR iR j、-C(O)R k、-C(O)OR k和C 1-C 6烷氧基，或者R 6a和R 6b一起形成氧代或硫代；
R 6c、R 6d和R 6e各自独立地选自氢、C 1-C 6烷基、C 1-C 6卤代烷基和C 1-C 6烷氧基；
R 2各自独立地选自-CH 2OH、-CH 2SH、-CH 2Cl、-SCH 2Cl、-SCH 2F、-SCH 2CF 3、-OH、-OCH 2CN、-OCH 2Cl、-OCH 2F、-OCH 3、-OCH 2CH 3、-SCH 2CN、
R 2a各自独立地为氢或C 1-C 6烷基；
R 2b各自独立地为C 1-C 6烷基或C 1-C 6烷氧基；
R 2c各自独立地选自氢、C 1-C 6烷基、-CH 2OH和C 1-C 6烷氧基；
R 2d和R 2e各自独立地为氢或C 1-C 6烷基；
R 3各自独立地为氢或卤素；
m和n各自独立地为1至6的整数；
取代基团Q 1各自独立地选自卤素、羟基、巯基、氘、氧代、硫代、氰基、氨基、羧基、C 1-C 6烷基和C 1-C 6烷氧基；
R i和R j各自独立地选自氢原子、羟基、C 1-C 6烷基和C 1-C 6烷氧基；
R k独立地选自氢原子、C 1-C 6烷基、C 1-C 6卤代烷基、C 1-C 6烷氧基、羟基和-NR iR j； 且
条件是当R 5a为氢或烷基时，R 5b不为氢或烷基。
在某些实施方案中，R 1a为氢。
在某些实施方案中，X 1选自-(CR 5aR 5b)m-、任选被一个或多个取代基Q 1所取代的：
在某些实施方案中，R 5a和R 5b均为氟。
在某些实施方案中，R 5a和R 5b一起形成氧代或硫代，优选氧代。
在某些实施方案中，X 2选自-(CR 6aR 6b)n-、任选被一个或多个取代基Q 1所取代的：
在某些实施方案中，R 6a和R 6b各自独立地选自氢、卤素、羟基、巯基、氘、氰基、C 1-C 6烷基、-NR iR j、-C(O)OR k和C 1-C 6烷氧基，或者R 6a和R 6b一起形成氧代或硫代。
在某些实施方案中，R 2各自独立地选自-CH 2OH、-CH 2SH、-OH和
在某些实施方案中，R 3为氢。
在某些实施方案中，R 3为氟。
在某些实施方案中，k为1-10之间的任意数值，优选2-5之间的任意数值。k可以为整数，也可以为小数。
在某些实施方案中，连接子在细胞外是稳定的，使得ADC在存在于细胞外环境中时保持完整，但在细胞中内化时能够裂解。在某些实施方案中，当ADC进入表达对ADC的抗体部分具有特异性的抗原的细胞时，糖皮质激素受体激动剂药物部分从抗体部分裂解，且裂解释放糖皮质激素受体激动剂的未修饰形式。
在某些实施方案中，连接子中的可裂解部分为可裂解肽部分。在某些实施方案中，相对于包含其他可裂解部分的ADC，包含可裂解肽部分的ADC显示较低的聚集水平，改善的抗体与药物比率。在某些实施方案中，相对于不可裂解的连接子，添加可裂解部分增加细胞毒性和/或效力。在某些实施方案中，可裂解肽部分能够由酶裂解，且连接子为酶能够裂解的连接子。在某些实施方案中，酶为组织蛋白酶，且连接子为组织蛋白酶能够裂解的连接子。在某些实施方案中，与其它分裂机制相比，酶能够裂解的连接子(例如组织蛋白酶能够裂解的连接子)显示上述改善特性中的一种或多种。
在某些实施方案中，连接子包含氨基酸单元L 1，所述氨基酸单元L 1优选包含由2至7个选自苯丙氨酸、甘氨酸、缬氨酸、赖氨酸、瓜氨酸、丝氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、高赖氨酸、n-甲基-缬氨酸、 (q为1-6的整数)的氨基酸构成的肽残基，示例性氨基酸单元包括但不限于缬氨酸-瓜氨酸(Val-Cit)、丙氨酸-苯丙氨酸(Ala-Phe)；苯丙氨酸-赖氨酸(Phe-Lys)、苯丙氨酸-高赖氨酸(Phe-Homolys)、n-甲基-缬氨酸-瓜氨酸(Me-Val-Cit)、丙氨酸-丙氨酸(Ala-Ala)、甘氨酸-谷氨酸(Gly-Glu)、谷氨酸-丙氨酸-丙氨酸(Glu-Ala-Ala)、甘氨酸-赖氨酸(Gly-Lys)、甘氨酸-缬氨酸-瓜氨酸(Glv-Val-Cit)和甘氨酸-甘氨酸-甘氨酸(Gly-Gly-Gly)和
在某些实施方案中，连接子包含拉伸单元，为一端通过碳原子与抗体共价连接而另一端与氨基酸单元、二硫化物部分、磺酰胺部分或非肽化学部分连接的化学结构片段。示例性拉伸单元包括但不限于
在某些实施方案中，所述拉伸单元选自
其中p各自独立地为1、2、3、4、5或6。
在某些实施方案中，连接子选自
在某些实施方案中，连接子选自
在某些实施方案中，所述的抗体-药物偶联物选自：
其中，Ab、D、k如前所定义，p各自独立地为1、2、3、4、5或6。
在某些实施方案中，所述的抗体-药物偶联物选自
k选自1至10，可以为整数，也可以为小数。
另一方面，本公开抗体-药物偶联物(ADC)中所述抗体或其抗原结合片段选自鼠源抗体、嵌合抗体、人源化抗体和全人源抗体或其抗原结合片段。
在某些实施方案中，抗体或其抗原结合片段选自抗TNFα抗体、抗IL-4R抗体、抗IL-6/IL-6R抗体、抗IL-13R抗体、抗IL-17/IL-17R抗体、抗IL-23/IL23R抗体、抗IL-36R抗体、抗CD20抗体、抗CD22抗体、抗CD28抗体、抗CD40抗体、抗TSLP抗体或其抗原结合片段。
在某些实施方案中，抗体或其抗原结合片段与人和/或小鼠TNFα结合。结合TNFα的抗体和抗原结合片段是本领域已知的。
在某些实施方案中，抗TNFα抗体或抗原结合片段不与TNF-β结合。
抗TNFα抗体及其抗原结合片段包括例如阿达木单抗、英利昔单抗、赛妥珠单抗(certolizumab pegol)、阿非莫单抗、奈瑞莫单抗(nerelimomab)、奥左拉珠单抗(ozoralizumab)、普拉库鲁单抗(placulumab)和戈利木单抗(golimumab)或其抗原结合片段。另外的抗TNFα抗体和抗原结合片段提供在例如WO 2013/087912、WO 2014/152247和WO 2015/073884中，将其各自通过引用以其整体并入本文。
抗TNFα抗体及其抗原结合片段还包括竞争性抑制阿达木单抗、英利昔单抗、赛妥珠单抗、阿非莫单抗、奈瑞莫单抗、奥左拉珠单抗、普拉库鲁单抗或戈利木单抗与TNFα的结合的抗体及其抗原结合片段。抗TNFα抗体及其抗原结合片段还包括与阿达木单抗、英利昔单抗、赛妥珠单抗、阿非莫单抗、奈瑞莫单抗、奥左拉珠单抗、普拉库鲁单抗或戈利木单抗结合相同TNFα表位的抗体和抗原结合片段。
在某些实施方案中，抗TNFα抗体或其抗原结合片段竞争性抑制阿达木单抗与TNFα的结合。在某些实施方案中，抗TNFα抗体或其抗原结合片段与阿达木单抗结合相同的TNFα表位。在某些实施方案中，抗TNFα抗体或其抗原结合片段是阿达木单抗或其抗原结合片段。在某些实施方案中，抗TNFα抗体或其抗原结合片段是阿达木单抗。
在某些实施方案中，抗TNFα抗体或其抗原结合片段包含阿达木单抗、英利昔单抗、赛妥珠单抗、阿非莫单抗、奈瑞莫单抗、奥左拉珠单抗、普拉库鲁单抗或戈利木单抗的序列，例如互补决定区(CDR)、可变重链结构域(VH)和/或可变轻链结构域(VL)。
本公开还提供了一种式(III-A)或(III-B)所示化合物或其可药用盐，
其中，
表示单键或双键；
环A为任选被一个或多个取代基Q 1所取代的芳基或杂芳基；
环B为任选被一个或多个取代基Q 1所取代的芳基或杂芳基；
X 1为-(CR 5aR 5b)m-或任选被一个或多个取代基Q 1所取代的芳基或杂芳基；
R 5a和R 5b各自独立地选自氢、卤素、羟基、巯基、氘、硝基、氰基和任选被一个或多个取代基Q 1所取代的下述基团：烷基、-NR iR j、-C(O)R k、-C(O)OR k、-S(O)R k、-S(O)OR k、-S(O)(O)R k、-S(O)(O)OR k、-C(S)R k、烷氧基、烷硫基、烯基和炔基，或者R 5a和R 5b一起形成氧代或硫代；
环C和环D各自独立地选自任选被一个或多个取代基Q 1所取代的芳基和杂芳基或稠杂芳基，且环C和环D中至少有一个选自任选被一个或多个取代基Q 1所取代的稠环芳基或稠杂芳基；
X 2选自-(CR 6aR 6b)n-、任选被一个或多个取代基Q 1所取代的芳基或杂芳基、-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)(O)-、-NR 6c-、-CH 2S-、-CH 2O-、-NHCR 6dR 6e-、-CR 6f＝CR 6g-和-C≡C-，或者X 2不存在；
R 6a和R 6b各自独立地选自氢、卤素、羟基、巯基、氘、硝基、氰基和任选被一个或多个取代基Q 1所取代的下述基团：烷基、-NR iR j、-C(O)R k、-C(O)OR k、-S(O)R k、-S(O)OR k、-S(O)(O)R k、-S(O)(O)OR k、-C(S)R k、烷氧基、烷硫基、烯基和炔基，或者R 6a、R 6b与其相连的碳原子一起形成3元至10元环烷基，或者R 6a和R 6b一起形成氧代或硫代；
R 6c、R 6d、R 6e、R 6f和R 6g各自独立地选自氢、C 1-C 6烷基、C 1-C 6卤代烷基和C 1-C 6烷氧基；
R 1各自独立地选自氢、烷基和烷氧基，其中所述的烷基和烷氧基各自独立地任选被选自烷基、烷氧基、卤素、氘、氨基、氰基、硝基、羟基和羟烷基中的一个或多个取代基所取代；
R 2各自独立地选自-CH 2OH、-CH 2SH、-CH 2Cl、-SCH 2Cl、-SCH 2F、-SCH 2CF 3、-OH、-OCH 2CN、-OCH 2Cl、-OCH 2F、-OCH 3、-OCH 2CH 3、-SCH 2CN、
R 2a各自独立地为氢或C 1-C 6烷基；
R 2b各自独立地为C 1-C 6烷基或C 1-C 6烷氧基；
R 2c各自独立地选自氢、C 1-C 6烷基、-CH 2OH和C 1-C 6烷氧基；
R 2d和R 2e各自独立地为氢或C 1-C 6烷基；
R 3各自独立地为氢或卤素；
R 4各自独立地选自氢、卤素和羟基；
m和n各自独立地选自1至6的整数；
取代基团Q 1各自独立地选自C 1-C 6烷基、卤素、氘、羟基、巯基、-NR iR j、氧代、硫代、-C(O)R k、-C(O)OR k、-S(O)R k、-S(O)OR k、-S(O)(O)R k、-S(O)(O)OR k、-C(S)R k、硝基、氰基、C 1-C 6烷氧基、C 1-C 6烷硫基、C 2-C 6烯基、C 2-C 6炔基、3至10元环烷基、3至10元杂环基、6至10元芳基、5至10元杂芳基、8至12元稠环芳基和5至12元稠杂芳基；
R i和R j各自独立地选自氢原子、羟基、C 1-C 6烷基和C 1-C 6烷氧基；
R k独立地选自氢原子、C 1-C 6烷基、C 1-C 6卤代烷基、C 1-C 6烷氧基、羟基和-NR iR j，其中所述的烷基、烷氧基和卤代烷基各自独立地任选被选自C 1-C 6烷基、卤素、羟基、巯基、-NR iR j、氧代、硫代、羧基、硝基、氰基、C 1-C 6烷氧基、C 1-C 6烷硫基、C 2-C 6烯基、C 2-C 6炔基、3至10元环烷基、3至10元杂环基、6至10元芳基和5至10元杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
R 1a各自独立地选自氢、烷基和烷氧基，所述的烷基和烷氧基各自独立地任选被选自烷基、烷氧基、卤素、氘、氨基、氰基、硝基、羟基和羟烷基中的一个或多个取代基所取代；
R 1b各自独立地选自氢、PG-、H-L 1-、PG-L 1-、 或者
R 1a和R 1b与其相连的氮原子一起形成： 或者R 1a和R 1b与其相连的氮原子一起形成硝基基团；
p各自独立地为1、2、3、4、5或6；
L 1是氨基酸单元，优选-甘氨酸-谷氨酸-或
X为卤素；
PG为氨基保护基；且
条件是当R 5a为氢或烷基时，R 5b不为氢或烷基。
在某些实施方案中，R 1a各自独立地选自氢、C 1-C 6烷基和C 1-C 6烷氧基，所述的烷基和烷氧基各自独立地任选被选自C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷氧基、卤素、氘、氨基、氰基和羟基中的一个或多个取代基所取代。
在某些实施方案中，R 1a各自独立地选自氢、C 1-C 6烷基和C 1-C 6烷氧基。
在某些实施方案中，L 1选自-甘氨酸-谷氨酸-或
在某些实施方案中，R 1b各自独立地选自氢、PG-、H-L 1-、PG-L 1-、
在某些实施方案中，PG为Boc或Cbz。
在某些实施方案中，环A为任选被一个或多个取代基Q 1所取代的6至10元芳基或5至10元杂芳基，所述杂芳基包含至少一个氮原子。
在某些实施方案中，环A为任选被一个或多个取代基Q 1所取代的
在某些实施方案中，环B为任选被一个或多个取代基Q 1所取代的6至10元芳基或5至10元杂芳基，所述杂芳基包含至少一个氮原子。
在某些实施方案中，环B为任选被一个或多个取代基Q 1所取代的
在某些实施方案中，X 1为-(CR 5aR 5b)m-或任选被一个或多个取代基Q 1所取代的6至10元芳基或5至10元杂芳基，所述杂芳基包含至少一个氮原子；
在某些实施方案中，R 5a和R 5b各自独立地选自氢、卤素、羟基、巯基、氘、硝基、氰基和任选被一个或多个取代基Q 1所取代的下述基团：C 1-C 6烷基、-NR iR j、-C(O)R k、-C(O)OR k、-S(O)R k、-S(O)OR k、-S(O)(O)R k、-S(O)(O)OR k、-C(S)R k、C 1-C 6烷氧基、C 1-C 6烷硫基、C 2-C 6烯基和C 2-C 6炔基，或者R 5a和R 5b一起形成氧代或硫代。
在某些实施方案中，R 5a和R 5b各自独立地选自氢、卤素、羟基、巯基、氘、氰基和任选被一个或多个取代基Q 1所取代的下述基团：C 1-C 6烷基、-NR iR j、-C(O)R k、-C(O)OR k、-S(O)R k、-S(O)OR k、-S(O)(O)R k、-S(O)(O)OR k、C 1-C 6烷氧基、C 1-C 6烷硫基、C 2-C 6烯基和C 2-C 6炔基，或者R 5a和R 5b一起形成氧代或硫代。
在某些实施方案中，R 5a和R 5b各自独立地选自氢、卤素、羟基、巯基、氘、氰基和任选被一个或多个取代基Q 1所取代的下述基团：C 1-C 6烷基、-NR iR j、-C(O)R k、-C(O)OR k、-S(O)R k、-S(O)(O)R k、C 1-C 6烷氧基、C 2-C 6烯基和C 2-C 6炔基，或者R 5a和R 5b一起形成氧代或硫代。
在某些实施方案中，R 5a和R 5b各自独立地选自氢、卤素、羟基、巯基、氘、氰基和任选被一个或多个取代基Q 1所取代的下述基团：C 1-C 6烷基、-NR iR j、-C(O)R k、-C(O)OR k和C 1-C 6烷氧基，或者R 5a和R 5b一起形成氧代或硫代。
在某些实施方案中，环C和环D各自独立地选自任选被一个或多个取代基Q 1所取代的6至10元芳基、5至10元杂芳基、8至12元稠环芳基和5至12元稠杂芳基，所述杂芳基或稠杂芳基包含至少一个氮原子。
在某些实施方案中，环C选自任选被一个或多个取代基Q 1所取代的下述基团：
在某些实施方案中，环C选自任选被一个或多个取代基Q 1所取代的：
在某些实施方案中，环D为任选被一个或多个取代基Q 1所取代的6至10元芳基或5至10元杂芳基，所述杂芳基包含至少一个氮原子。
在某些实施方案中，环D为任选被一个或多个取代基Q 1所取代的
在某些实施方案中，X 2为-(CR 6aR 6b)n-或任选被一个或多个取代基Q 1所取代的6至10元芳基或5至10元杂芳基，所述杂芳基包含至少一个氮原子。
在某些实施方案中，R 6a和R 6b各自独立地选自氢、卤素、羟基、巯基、氘、氰基和任选被一个或多个取代基Q 1所取代的下述基团：C 1-C 6烷基、-NR iR j、-C(O)R k、-C(O)OR k、-S(O)R k、-S(O)OR k、-S(O)(O)R k、-S(O)(O)OR k、C 1-C 6烷氧基、C 1-C 6烷硫基、C 2-C 6烯基和C 2-C 6炔基，或者R 6a、R 6b与其相连的碳原子一起形成3元至10元环烷基，或者R 6a和R 6b一起形成氧代或硫代。
在某些实施方案中，R 6a和R 6b各自独立地选自氢、卤素、羟基、巯基、氘、氰基和任选被一个或多个取代基Q 1所取代的下述基团：C 1-C 6烷基、-NR iR j、-C(O)R k、-C(O)OR k、-S(O)R k、-S(O)(O)R k、C 1-C 6烷氧基、C 2-C 6烯基和C 2-C 6炔基，或者 R 6a、R 6b与其相连的碳原子一起形成3元至10元环烷基，或者R 6a和R 6b一起形成氧代或硫代。
在某些实施方案中，R 6a和R 6b各自独立地选自氢、卤素、羟基、巯基、氘、氰基和任选被一个或多个取代基Q 1所取代的下述基团：C 1-C 6烷基、-NR iR j、-C(O)R k、-C(O)OR k和C 1-C 6烷氧基，或者R 6a和R 6b一起形成氧代或硫代。
在某些实施方案中，R 1各自独立地选自氢、C 1-C 6烷基和C 1-C 6烷氧基，优选氢。
在某些实施方案中，R 4各自独立地为氢。
在某些实施方案中，取代基团Q 1各自独立地选自卤素、羟基、巯基、氘、氰基、氨基、羧基、C 1-C 6烷基和C 1-C 6烷氧基。
在某些实施方案中，R k独立地选自氢原子、C 1-C 6烷基、C 1-C 6卤代烷基、C 1-C 6烷氧基、羟基和-NR iR j。
在某些实施方案中，所述式(III-A)或(III-B)化合物为下式(III-A’)或(III-B’)化合物
其中，
环A为 所述环A任选被一个或多个取代基Q 1所取代；
环B为 所述环B任选被一个或多个取代基Q 1所取代；
X 1选自-(CR 5aR 5b)m-或任选被一个或多个取代基Q 1所取代的6至10元芳基或5至10元杂芳基，所述杂芳基包含至少一个氮原子；
R 5a和R 5b各自独立地选自氢、卤素、羟基、巯基、氘、氰基和任选被一个或多个取代基Q 1所取代的下述基团：C 1-C 6烷基、-NR iR j、-C(O)R k、-C(O)OR k和C 1-C 6烷氧基，或者R 5a和R 5b一起形成氧代或硫代；
环C选自 所述环C任选被一个或多个取代基Q 1所取代；
环D为 所述环D任选被一个或多个取代基Q 1所取代；
X 2选自-(CR 6aR 6b)n-、-O-、-S-、-NR 6c-、-CH 2S-、-CH 2O-、-NHCR 6dR 6e-和任选被一个或多个取代基Q 1所取代的6至10元芳基或5至10元杂芳基；
R 6a和R 6b各自独立地选自氢、卤素、羟基、巯基、氘、氰基和任选被一个或多个取代基Q 1所取代的下述基团：C 1-C 6烷基、-NR iR j、-C(O)R k、-C(O)OR k和C 1-C 6烷氧基，或者R 6a和R 6b一起形成氧代或硫代；
R 6c、R 6d和R 6e各自独立地选自氢、C 1-C 6烷基、C 1-C 6卤代烷基和C 1-C 6烷氧基；
R 2各自独立地选自-CH 2OH、-CH 2SH、-CH 2Cl、-SCH 2Cl、-SCH 2F、-SCH 2CF 3、-OH、-OCH 2CN、-OCH 2Cl、-OCH 2F、-OCH 3、-OCH 2CH 3、-SCH 2CN、
R 2a各自独立地为氢或C 1-C 6烷基；
R 2b各自独立地为C 1-C 6烷基或C 1-C 6烷氧基；
R 2c各自独立地选自氢、C 1-C 6烷基、-CH 2OH和C 1-C 6烷氧基；
R 2d和R 2e各自独立地为氢或C 1-C 6烷基；
R 3各自独立地为氢或卤素；
m和n各自独立地为1至6的整数；
取代基团Q 1各自独立地选自卤素、羟基、巯基、氘、氧代、硫代、氰基、氨基、羧基、C 1-C 6烷基和C 1-C 6烷氧基；
R i和R j各自独立地选自氢原子、羟基、C 1-C 6烷基和C 1-C 6烷氧基；
R k独立地选自氢原子、C 1-C 6烷基、C 1-C 6卤代烷基、C 1-C 6烷氧基、羟基和-NR iR j；
R 1a各自独立地选自氢、C 1-C 6烷基和C 1-C 6烷氧基；
R 1b各自独立地选自氢、PG-、H-L 1-、PG-L 1-、
p各自独立地为1、2、3、4、5或6；
L 1是氨基酸单元，选自-甘氨酸-谷氨酸-或
X为卤素；
PG为氨基保护基；且
条件是当R 5a为氢或烷基时，R 5b不为氢或烷基。
在某些实施方案中，R 1a为氢。
在某些实施方案中，R 1b各自独立地选自氢、PG-、H-L 1-、PG-L 1-、 优选氢或
在某些实施方案中，R 1a和R 1b均为氢。
在某些实施方案中，X 1选自-(CR 5aR 5b)m-、任选被一个或多个取代基Q 1所取代的：
在某些实施方案中，R 5a和R 5b均为氟。
在某些实施方案中，R 5a和R 5b一起形成氧代或硫代，优选氧代。
在某些实施方案中，X 2选自-(CR 6aR 6b)n-、任选被一个或多个取代基Q 1所取代的：
在某些实施方案中，R 6a和R 6b各自独立地选自氢、卤素、羟基、巯基、氘、氰基、C 1-C 6烷基、-NR iR j、-C(O)OR k和C 1-C 6烷氧基，或者R 6a和R 6b一起形成氧代或硫代。
在某些实施方案中，R 2各自独立地选自-CH 2OH、-CH 2SH、-OH和
在某些实施方案中，R 3为氢。
在某些实施方案中，R 3为氟。
在某些实施方案中，p各自独立地为1或2，优选1。
在某些实施方案中，所述式(III-A)或(III-B)化合物选自
或其可药用盐。
在某些实施方案中，所述式(III-A)或(III-B)化合物选自
或其可药用盐，其中X为卤素，优选氯或溴，更优选溴。
本公开所述的结构中， 表示单键或双键。
本领域技术人员可以理解的，例如当R 5a和R 5b的其中一个选自氧代或硫代时，则另一个不存在。
本公开还提供了一种药物组合物，包括至少一种前述抗体-药物偶联物，以及药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。
在某些实施方案中，所述的药物组合物的单位剂量为0.001mg-1000mg。
在某些实施方案中，基于组合物的总重量，所述的药物组合物含有0.01％-99.99％的前述抗体-药物偶联物。在某些实施方案中，所述的药物组合物含有0.1％-99.9％的前述抗体-药物偶联物。在某些实施方案中，所述的药物组合物含有0.5％-99.5％的前述抗体-药物偶联物。在某些实施方案中，所述的药物组合物含有1％-99％的前述抗体-药物偶联物。在某些实施方案中，所述的药物组合物含有2％-98％的前述抗体-药物偶联物。
在某些实施方案中，基于组合物的总重量，所述的药物组合物含有0.01％-99.99％的药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。在某些实施方案中，所述的药物组合物含有0.1％-99.9％的药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。在某些实施方案中，所述的药物组合物含有0.5％-99.5％的药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。在某些实施方案中，所述的药物组合物含有1％-99％的药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。在某些实施方案中，所述的药物组合物含有2％-98％的药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。
本公开所述的抗体-药物偶联物和/或包含抗体-药物偶联物的药物组合物可用于裂解表达表面TNFα的细胞(体外或体内)和/或用于治疗以增加的TNFα(例如，滑液中增加的TNFα)为特征的疾病或病症。在某些实施方案中，抗体-药物偶联物和/或组合物可用于抑制细胞因子释放(体外或体内)和/或用于治疗自身免疫性或炎性疾病。在某些实施方案中，抗体-药物偶联物和/或组合物用于治疗克罗恩病。在某些实施方案中，抗体-药物偶联物和/或组合物用于治疗溃疡性结肠炎。在某些实施方案中，抗体-药物偶联物和/或组合物用于治疗类风湿性关节炎(RA)。在某些实施方案中，抗体-药物偶联物和/或组合物用于治疗幼年特发性关节炎(JA)。在某些实施方案中，抗体-药物偶联物和/或组合物用于治疗银屑病关节炎(PsA)。在某些实施方案中，抗体-药物偶联物和/或组合物用于治疗脊椎关节病，例如强直性脊柱炎(AS)或轴型脊椎关节炎(axSpA)。在某些实施方案中，抗体-药物偶联物和/或组合物用于治疗成人克罗恩病(CD)。在某些实施方案中，抗体-药物偶联物和/或组合物用于治疗小儿克罗恩病。在某些实施方案中，抗体-药物偶联物和/或组合物用于治疗溃疡性结肠炎(UC)。在某些实施方案中，抗体-药物偶联物和/或组合物用于治疗斑块型银屑病(Ps)。在某些实施方案中，抗体-药物偶联物和/或组合物用于治疗化脓性汗腺炎(HS)。在某些实施方案中，抗体-药物偶联物和/或组合物用于治疗葡萄膜炎。在某些实施方案中，抗体-药物偶联物和/或组合物用于治疗白塞斯病。在某些实施方案中，抗体-药物偶联物和/或组合物用于治疗银屑病，包括斑块型银屑病。
本公开还提供了一种向表达TNFα的细胞递送糖皮质激素受体激动剂的方法，包括使表达TNFα的细胞与本公开所述的抗体-药物偶联物接触的步骤。
本公开还提供了一种确定抗体-药物偶联物的抗炎活性的方法。此类方法可以包括使表达TNFα的细胞与如本文所描述的抗体-药物偶联物接触的步骤。一些实施例包含使表达TNFα的细胞与如本文所描述的抗体-药物偶联物接触，并确定与 对照细胞相比，促炎细胞因子从细胞中的减少的释放。一些实施例包含确定抗体-药物偶联物的抗炎活性的体外方法。
一些实施例包含筛选方法(例如体外方法)，其包括使细胞(例如，表达TNFα的细胞)直接地或间接地与抗体-药物偶联物接触，并且确定抗体-药物偶联物是否调节细胞的活性或功能，如例如通过细胞形态或生存力、标记物的表达、分化或去分化、细胞呼吸、线粒体活性、膜完整性、成熟、增殖、生存力、凋亡或细胞死亡的变化所反映的。直接相互作用的一个示例是物理相互作用，而间接相互作用包括例如组合物对中间分子的作用，所述中间分子反过来作用于参考实体(例如，细胞或细胞培养物)。
本公开还提供了一种药物组合物，包括至少一种前述的式(III-A)或(III-B)化合物或其可药用盐，以及药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。所述化合物或其可药用盐及其药物组合物可用于治疗免疫性疾病。
本公开进一步提供了一种试剂盒，其包含本公开所述的抗体-药物偶联物，或药物组合物。
术语定义
除非另有限定，本公开所用的所有技术和科学术语均与本公开所属领域普通技术人员的通常理解一致。虽然也可采用与本公开所述相似或等同的任何方法和材料实施或测试本公开，但本公开描述了优选的方法和材料。描述和要求保护本公开时，依据以下定义使用下列术语。
当本公开中使用商品名时，申请人旨在包括该商品名产品的制剂、该商品名产品的非专利药和活性药物部分。
除非有相反陈述，在说明书和权利要求书中使用的术语具有下述含义。
术语“连接子”、“连接单元”、“接头单元”、“接头”或“连接片段”是指一端与配体连接而另一端与药物相连的化学结构片段或键，也可以连接其他接头后再与药物相连。
接头可以包含一种或多种接头构件。例示性的接头构件包括6-马来酰亚氨基己酰基(MC)、马来酰亚氨基丙酰基(MP)、缬氨酸-瓜氨酸(Val-Cit或vc)、丙氨酸-苯丙氨酸(ala-phe)、对氨基苄氧羰基(PAB)，及那些源自与接头试剂的偶联的：N-琥珀酰亚氨基4-(2-吡啶基硫代)戊酸酯(SPP)、N-琥珀酰亚氨基4-(N-马来酰亚氨基甲基)环己烷-1-羧酸酯(SMCC，在本文中也称作MCC)和N-琥珀酰亚氨基(4-碘-乙酰基)氨基苯甲酸酯(SIAB)。接头可以包括拉伸单元、间隔单元、氨基酸单元和延伸单元。可以通过本领域已知方法合成，诸如US2005-0238649A1中所记载的。接头可以是便于在细胞中释放药物的“可切割接头”。例如，可使用酸不稳定接头(例如腙)、蛋白酶敏感(例如肽酶敏感)接头、光不稳定接头、二甲基接头、或含二硫化物接头(Chari等,Cancer Research 52:127-131(1992)；美国专利 No.5,208,020)。
术语“拉伸单元”指一端通过碳原子与抗体共价连接而另一端与氨基酸单元、二硫化物部分、磺酰胺部分或非肽化学部分连接的化学结构片段。
术语“间隔单元”是一种双功能化合结构片段，可用于偶联氨基酸单元和糖皮质激素最终形成抗体-药物偶联物，这种偶联方式可以将糖皮质激素选择性的连接到氨基酸单元上。
术语“氨基酸”是指分子结构中含有氨基和羧基，并且氨基和羧基都直接连接在-CH-结构上的有机化合物。通式是H 2NCHRCOOH，R为H、取代或未取代烷基等。根据氨基连结在羧酸中碳原子的位置，可分为α、β、γ、δ、ε……-氨基酸。在生物界中，构成天然蛋白质的氨基酸具有其特定的结构特点，即其氨基直接连接在α-碳原子上，即α-氨基酸，包括甘氨酸(Glycine)、丙氨酸(Alanine)、缬氨酸(Valine)、亮氨酸(Leucine)、异亮氨酸(Isoleucine)、苯丙氨酸(Phenylalanine)、色氨酸(Tryptophan)、酪氨酸(Tyrosine)、天冬氨酸(Aspartic acid)、组氨酸(Histidine)、天冬酰胺(Asparagine)、谷氨酸(Glutamic acid)、赖氨酸(Lysine)、谷氨酰胺(Glutamine)、甲硫氨酸(Methionine)、精氨酸(Arginine)、丝氨酸(Serine)、苏氨酸(Threonine)、半胱氨酸(Cysteine)、脯氨酸(Proline)等。非天然氨基酸如瓜氨酸。如本领域技术人员所公知的，非天然氨基酸并不构成天然蛋白质，因此也不参与本公开中抗体的合成。本公开所用氨基酸三字母代码和单字母代码如J.biol.chem,243,p3558(1968)中所述。
术语“抗体-药物偶联物”，指配体通过稳定的连接单元与具有生物活性的药物相连。在本公开中“抗体-药物偶联物”(antibody drug conjugate，ADC)，指把单克隆抗体或者抗体片段通过稳定的连接单元与具有生物活性的糖皮质激素相连。其中抗体或抗体片段可通过其中的特定基团(例如链间二硫键)与包含接头的糖皮质激素分子相结合。
术语“载药量”是指抗体-药物偶联物群体中，每个抗体-药物偶联物分子载有的药物平均数量，也可以表示为药物量和抗体量的比值。载药量的范围可以是每个抗体(Ab)连接1-20个，优选1-10个糖皮质激素(D)。在本公开的实施方案中，载药量表示为k，示例性的可以为1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20或任意两数值之间数值的均值。优选1-10，更优选 1-8，或2-8，或2-7，或3-8，或3-7，或3-6，或4-7，或4-6，或4-5的均值。可用常规方法如UV/可见光光谱法、质谱、ELISA试验、单抗分子大小变异体测定法(CE-SDS)和HPLC特征鉴定偶联反应后每个ADC分子的药物平均数量。
本公开单抗分子大小变异体测定法(CE-SDS)可采用十二烷基硫酸钠毛细管电泳(CE-SDS)紫外检测方法，在还原和非还原条件下，依据分子量大小，按毛电泳法(2015年版《中国药典》0542)，定量测定重组单克隆抗体产品的纯度。
本公开的一个实施方案中，糖皮质激素通过连接单元偶联在配体的N端氨基和/或赖氨酸残基的ε-氨基上，一般地，偶联反应中能与抗体偶联的药物分子数将小于理论上的最大值。
可以用以下非限制性方法控制抗体-药物偶联物的载量，包括：
(1)控制连接试剂和单抗的摩尔比，
(2)控制反应时间和温度，
(3)选择不同的反应试剂。
术语“抗体”指免疫球蛋白，是由两条相同的重链和两条相同的轻链通过链间二硫键连接而成的四肽链结构。免疫球蛋白重链恒定区的氨基酸组成和排列顺序不同，故其抗原性也不同。据此，可将免疫球蛋白分为五类，或称为免疫球蛋白的同种型，即IgM、IgD、IgG、IgA和IgE，其相应的重链分别为μ链、δ链、γ链、α链、和ε链。同一类Ig根据其铰链区氨基酸组成和重链二硫键的数目和位置的差别，又可分为不同的亚类，如IgG可分为IgG1、IgG2、IgG3、IgG4。轻链通过恒定区的不同分为κ链或λ链。五类Ig中每类Ig都可以有κ链或λ链。
抗体重链和轻链靠近N端的约110个氨基酸的序列变化很大，为可变区(Fv区)；靠近C端的其余氨基酸序列相对稳定，为恒定区。可变区包括3个高变区(HVR)和4个序列相对保守的骨架区(FR)。3个高变区决定抗体的特异性，又称为互补性决定区(CDR)。每条轻链可变区(LCVR)和重链可变区(HCVR)由3个CDR区4个FR区组成，从氨基端到羧基端依次排列的顺序为：FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4。轻链的3个CDR区指LCDR1、LCDR2和LCDR3；重链的3个CDR区指HCDR1、HCDR2和HCDR3。
本公开的抗体包括鼠源抗体、嵌合抗体、人源化抗体和全人源抗体，优选人源化抗体和全人源抗体。
术语“鼠源抗体”在本公开中为根据本领域知识和技能用鼠制备抗体。制备时用特定抗原注射试验对象，然后分离表达具有所需序列或功能特性的抗体的杂交瘤。
术语“嵌合抗体(chimeric antibody)”，是将鼠源性抗体的可变区与人抗体的恒定区融合而成的抗体，可以减轻鼠源性抗体诱发的免疫应答反应。建立嵌合抗体，要先建立分泌鼠源性特异性单抗的杂交瘤，然后从鼠杂交瘤细胞中克隆可变区基因，再根据需要克隆人抗体的恒定区基因，将鼠可变区基因与人恒定区基因 连接成嵌合基因后插入表达载体中，最后在真核系统或原核系统中表达嵌合抗体分子。
术语“人源化抗体(humanized antibody)”，也称为CDR移植抗体(CDR-grafted antibody)，是指将鼠的CDR序列移植到人的抗体可变区框架，即不同类型的人种系抗体框架序列中产生的抗体。可以克服嵌合抗体由于携带大量鼠蛋白成分，从而诱导的异源性反应。此类构架序列可以从包括种系抗体基因序列的公共DNA数据库或公开的参考文献获得。如人重链和轻链可变区基因的种系DNA序列可以在“VBase”人种系序列数据库，以及在Kabat，E.A.等人，1991 Sequences of Proteins of Immunological Interest，第5版中找到。为避免免疫原性下降的同时，引起的活性下降，可对所述的人抗体可变区框架序列进行最少反向突变或回复突变，以保持活性。本公开的人源化抗体也包括进一步由噬菌体展示对CDR进行亲和力成熟后的人源化抗体。进一步描述参与人源化可使用小鼠抗体的方法的文献包括，例如Queen等，Proc.，Natl.Acad.Sci.USA，88，2869，1991和Winter及其同事的方法[Jones等，Nature，321，522(1986)，Riechmann，等，Nature，332，323-327(1988)，Verhoeyen，等，Science，239，1534(1988)]。
术语“全人源抗体”、“全人抗体”或“完全人源抗体”，也称“全人源单克隆抗体”，其抗体的可变区和恒定区都是人源的，去除免疫原性和毒副作用。单克隆抗体的发展经历了四个阶段，分别为：鼠源性单克隆抗体、嵌合性单克隆抗体、人源化单克隆抗体和全人源单克隆抗体。本公开为全人源单克隆抗体。全人抗体制备的相关技术主要有：人杂交瘤技术、EBV转化B淋巴细胞技术、噬菌体显示技术(phage display)、转基因小鼠抗体制备技术(transgenic mouse)和单个B细胞抗体制备技术等。
术语“抗原结合片段”是指抗体的保持特异性结合抗原的能力的一个或多个片段。已显示可利用全长抗体的片段来进行抗体的抗原结合功能。“抗原结合片段”中包含的结合片段的实例包括(i)Fab片段，由VL、VH、CL和CH1结构域组成的单价片段；(ii)F(ab') 2片段，包含通过铰链区上的二硫桥连接的两个Fab片段的二价片段；(iii)由VH和CH1结构域组成的Fd片段；(iv)由抗体的单臂的VH和VL结构域组成的Fv片段；(v)单结构域或dAb片段(Ward等人,(1989)Nature 341：544-546)，其由VH结构域组成；和(vi)分离的互补决定区(CDR)或(vii)可任选地通过合成的接头连接的两个或更多个分离的CDR的组合。此外，虽然Fv片段的两个结构域VL和VH由分开的基因编码，但可使用重组方法，通过合成的接头连接它们，从而使得其能够产生为其中VL和VH区配对形成单价分子的单个蛋白质链(称为单链Fv(scFv)；参见，例如，Bird等人(1988)Science 242:423-426；和Huston等人(1988)Proc.Natl.Acad.Sci USA 85:5879-5883)。此类单链抗体也意欲包括在术语抗体的“抗原结合片段”中。使用本领域技术人员已知的常规技术获得此类抗体片段，并且以与对于完整抗体的方式相同的方式就功 用性筛选片段。可通过重组DNA技术或通过酶促或化学断裂完整免疫球蛋白来产生抗原结合部分。抗体可以是不同同种型的抗体，例如，IgG(例如，IgG1、IgG2、IgG3或IgG4亚型)、IgA1、IgA2、IgD、IgE或IgM抗体。
Fab是通过用蛋白酶木瓜蛋白酶(切割H链的224位的氨基酸残基)处理IgG抗体分子所获得的片段中的具有约50,000的分子量并具有抗原结合活性的抗体片段，其中H链N端侧的约一半和整个L链通过二硫键结合在一起。
F(ab')2是通过用酶胃蛋白酶消化IgG铰链区中两个二硫键的下方部分而获得的分子量为约100,000并具有抗原结合活性并包含在铰链位置相连的两个Fab区的抗体片段。
Fab'是通过切割上述F(ab')2的铰链区的二硫键而获得的分子量为约50,000并具有抗原结合活性的抗体片段。
此外，可以通过将编码抗体的Fab'片段的DNA插入到原核生物表达载体或真核生物表达载体中并将载体导入到原核生物或真核生物中以表达Fab'来生产所述Fab'。
术语“单链抗体”、“单链Fv”或“scFv”意指包含通过接头连接的抗体重链可变结构域(或区域；VH)和抗体轻链可变结构域(或区域；VL)的分子。此类scFv分子可具有一般结构：NH 2-VL-接头-VH-COOH或NH 2-VH-接头-VL-COOH。合适的现有技术接头由重复的GGGGS氨基酸序列或其变体组成，例如使用1-4个重复的变体(Holliger等人(1993)，Proc.Natl.Acad.Sci.USA90:6444-6448)。可用于本公开的其他接头由Alfthan等人(1995)，Protein Eng.8:725-731，Choi等人(2001)，Eur.J.Immunol.31:94-106，Hu等人(1996)，Cancer Res.56:3055-3061，Kipriyanov等人(1999)，J.Mol.Biol.293:41-56和Roovers等人(2001)，Cancer Immunol.描述。
术语“CDR”是指抗体的可变结构域内主要促成抗原结合的6个高变区之一。所述6个CDR的最常用的定义之一由Kabat E.A.等人，(1991)Sequences of proteins of immunological interest.NIH Publication91-3242)提供。如本文中使用的，CDR的Kabat定义只应用于轻链可变结构域的CDR1、CDR2和CDR3(CDR L1、CDR L2、CDR L3或L1、L2、L3)，以及重链可变结构域的CDR2和CDR3(CDR H2、CDR H3或H2、H3)。通常，每个重链可变区中存在三个CDR(HCDR1、HCDR2、HCDR3)，每个轻链可变区中存在三个CDR(LCDR1、LCDR2、LCDR3)。可以使用各种公知方案中的任何一种来确定CDR的氨基酸序列边界，包括“Kabat”编号规则(参见Kabat等(1991)，“Sequences of Proteins of Immunological Interest”，第5版，Public Health Service，National Institutes of Health，Bethesda，MD)、“Chothia”编号规则(参见Al-Lazikani等人，(1997)JMB 273：927-948)和ImMunoGenTics(IMGT)编号规则(参见Lefranc M.P.，Immunologist，7，132-136(1999)；Lefranc，M.P.等，Dev.Comp.Immunol.，27，55-77(2003))等。例如，对于经典格式，遵循Kabat规则，所述重链可变域(VH)中的CDR氨基酸 残基编号为31-35(HCDR1)、50-65(HCDR2)和95-102(HCDR3)；轻链可变域(VL)中的CDR氨基酸残基编号为24-34(LCDR1)、50-56(LCDR2)和89-97(LCDR3)。遵循Chothia规则，VH中的CDR氨基酸编号为26-32(HCDR1)、52-56(HCDR2)和95-102(HCDR3)；并且VL中的氨基酸残基编号为26-32(LCDR1)、50-52(LCDR2)和91-96(LCDR3)。通过组合Kabat和Chothia两者的CDR定义，CDR由人VH中的氨基酸残基26-35(HCDR1)、50-65(HCDR2)和95-102(HCDR3)和人VL中的氨基酸残基24-34(LCDR1)、50-56(LCDR2)和89-97(LCDR3)构成。遵循IMGT规则，VH中的CDR氨基酸残基编号大致为26-35(CDR1)、51-57(CDR2)和93-102(CDR3)，VL中的CDR氨基酸残基编号大致为27-32(CDR1)、50-52(CDR2)和89-97(CDR3)。遵循IMGT规则，抗体的CDR区可以使用程序IMGT/DomainGap Align确定。
术语“抗体框架”，是指可变结构域VL或VH的一部分，其用作该可变结构域的抗原结合环(CDR)的支架。从本质上讲，其是不具有CDR的可变结构域。
术语“表位”或“抗原决定簇”是指抗原上免疫球蛋白或抗体特异性结合的部位。表位通常以独特的空间构象包括至少3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14或15个连续或非连续的氨基酸(参见，例如，Epitope Mapping Protocols in Methods in Molecular B iology，第66卷，G.E.Morris，Ed.(1996))。
术语“特异性结合”、“选择性结合”、“选择性地结合”和“特异性地结合”是指抗体对预先确定的抗原上的表位的结合。通常，抗体以大约小于10 -7M，例如：大约小于10 -8M、10 -9M或10 -10M或更小的亲和力(KD)结合。
术语“核酸分子”是指DNA分子和RNA分子。核酸分子可以是单链或双链的，但优选是双链DNA。当将核酸与另一个核酸序列置于功能关系中时，核酸是“有效连接的”。例如，如果启动子或增强子影响编码序列的转录，那么启动子或增强子有效地连接至所述编码序列。
术语“载体”是指能够运输已与其连接的另一个核酸的核酸分子。在一个实施方案中，载体是“质粒”，其是指可将另外的DNA区段连接至其中的环状双链DNA环。在另一个实施方案中，载体是病毒载体，其中可将另外的DNA区段连接至病毒基因组中。本文中公开的载体能够在已引入它们的宿主细胞中自主复制(例如，具有细菌的复制起点的细菌载体和附加型哺乳动物载体)或可在引入宿主细胞后整合入宿主细胞的基因组，从而随宿主基因组一起复制(例如，非附加型哺乳动物载体)。
现有技术中熟知生产和纯化抗体和抗原结合片段的方法，如冷泉港的抗体实验技术指南，5-8章和15章。抗原结合片段同样可以用常规方法制备。发明所述的抗体或抗原结合片段用基因工程方法在非人源的CDR区加上一个或多个人源FR区。人FR种系序列可以通过比对IMGT人类抗体可变区种系基因数据库和MOE软件，从免疫球蛋白杂志，2001ISBN012441351上获得。
术语“宿主细胞”是指已向其中引入了表达载体的细胞。宿主细胞可包括细菌、微生物、植物或动物细胞。易于转化的细菌包括肠杆菌科(enterobacteriaceae)的成员，例如大肠杆菌(Escherichia coli)或沙门氏菌(Salmonella)的菌株；芽孢杆菌科(Bacillaceae)例如枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)；肺炎球菌(Pneumococcus)；链球菌(Streptococcus)和流感嗜血菌(Haemophilus influenzae)。适当的微生物包括酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)和毕赤酵母(Pichia pastoris)。适当的动物宿主细胞系包括CHO(中国仓鼠卵巢细胞系)和NS0细胞。
本公开工程化的抗体或抗原结合片段可用常规方法制备和纯化。比如，编码重链和轻链的cDNA序列，可以克隆并重组至GS表达载体。重组的免疫球蛋白表达载体可以稳定地转染CHO细胞。作为一种更推荐的现有技术，哺乳动物类表达系统会导致抗体的糖基化，特别是在Fc区的高度保守N端位点。阳性的克隆在生物反应器的无血清培养基中扩大培养以生产抗体。分泌了抗体的培养液可以用常规技术纯化。比如，用含调整过的缓冲液的A或G Sepharose FF柱进行纯化。洗去非特异性结合的组分。再用PH梯度法洗脱结合的抗体，用SDS-PAGE检测抗体片段，收集。抗体可用常规方法进行过滤浓缩。可溶的混合物和多聚体，也可以用常规方法去除，比如分子筛、离子交换。得到的产物需立即冷冻，如-70℃，或者冻干。
氨基酸序列“同一性”指在比对氨基酸序列及必要时引入间隙，以达成最大序列同一性百分比，且不将任何保守性取代视为序列同一性的一部分，第一序列中与第二序列中的氨基酸残基同一的氨基酸残基的百分比。为测定氨基酸序列同一性百分比的目的，比对可以通过属于本领域技术的范围内的多种方式来实现，例如使用公开可得到的计算机软件，诸如BLAST、BLAST-2、ALIGN、ALIGN-2或Megalign(DNASTAR)软件。本领域技术人员可确定适用于测量比对的参数，包括在所比较的序列全长上达成最大比对所需的任何算法。
术语“抗TNFα抗体”或“与TNFα结合的抗体”是指能够例如以足够的亲和力结合TNFα的抗体，使得该抗体可用作靶向TNFα的治疗剂。抗TNFα抗体与不相关的非TNFα蛋白的结合程度可以小于如，例如，通过放射免疫测定(RIA)所测量的抗体与TNFα的结合的约10％。在某些实施方案中，与TNFα结合的抗体具有≤1μM、≤100nM、≤10nM、≤1nM或≤0.1nM的解离常数(Kd)。
术语“肽”是指介于氨基酸和蛋白质之间的化合物片段，由2个或2个以上氨基酸分子通过肽键相互连接而成，是蛋白质的结构与功能片段，如激素、酶类等本质上都是肽。
术语“糖”是指由C、H、O三种元素组成的生物大分子，可分为单糖、二糖和多糖等。
术语“荧光探针”是指在紫外-可见-近红外区有特征荧光，并且其荧光性质(激发和发射波长、强度、寿命和偏振等)可随所处环境的性质，如极性、折射率、 粘度等改变而灵敏地改变的一类荧光性分子，其与核酸(DNA或RNA)、蛋白质或其他大分子结构非共价相互作用而使一种或几种荧光性质发生改变，可用于研究大分子物质的性质和行为。
术语“烷基”指饱和脂肪族烃基团，其为包含1至20个碳原子的直链或支链基团，优选含有1至12个碳原子的烷基。非限制性实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,3-二甲基丁基、正庚基、2-甲基己基、3-甲基己基、4-甲基己基、5-甲基己基、2,3-二甲基戊基、2,4-二甲基戊基、2,2-二甲基戊基、3,3-二甲基戊基、2-乙基戊基、3-乙基戊基、正辛基、2,3-二甲基己基、2,4-二甲基己基、2,5-二甲基己基、2,2-二甲基己基、3,3-二甲基己基、4,4-二甲基己基、2-乙基己基、3-乙基己基、4-乙基己基、2-甲基-2-乙基戊基、2-甲基-3-乙基戊基、正壬基、2-甲基-2-乙基己基、2-甲基-3-乙基己基、2,2-二乙基戊基、正癸基、3,3-二乙基己基、2,2-二乙基己基，及其各种支链异构体等。更优选的是含有1至6个碳原子的烷基，非限制性实施例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,3-二甲基丁基等。烷基可以是取代的或非取代的，当被取代时，取代基可以在任何可使用的连接点上被取代，所述取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、氧代基、羧基或羧酸酯基。
术语“亚烷基”指饱和的直链或支链脂肪族烃基，其具有2个从母体烷的相同碳原子或两个不同的碳原子上除去两个氢原子所衍生的残基，其为包含1至20个碳原子的直链或支链基团，优选含有1至12个碳原子，更优选含有1至6个碳原子的亚烷基。亚烷基的非限制性实例包括但不限于亚甲基(-CH 2-)、1,1-亚乙基(-CH(CH 3)-)、1,2-亚乙基(-CH 2CH 2)-、1,1-亚丙基(-CH(CH 2CH 3)-)、1,2-亚丙基(-CH 2CH(CH 3)-)、1,3-亚丙基(-CH 2CH 2CH 2-)、1,4-亚丁基(-CH 2CH 2CH 2CH 2-)等。亚烷基可以是取代的或非取代的，当被取代时，取代基可以在任何可使用的连接点上被取代。
术语“亚链烯基”指包含具有2至8个碳原子，优选地具有2至6个碳原子，更优选地具有2至4个碳原子并在任何位置具有至少一个双键的线性链烯基，包括例如亚乙烯基、亚烯丙基(allylene)、亚丙烯基、亚丁烯基、亚异戊二烯基 (prenylene)、亚丁二烯基(butadienylene)、亚戊烯基、亚戊二烯基、亚己烯基、亚己二烯基等。
术语“亚链炔基”包括具有2至8个碳原子，优选地具有2至6个碳原子，更优选地具有2至4个碳原子且在任何位置具有至少一个叁键的线性亚链炔基，包括例如亚乙炔基、亚丙炔基、亚丁炔基、亚戊炔基、亚己炔基等。
术语“环烷基”指饱和或部分不饱和单环或多环环状烃取代基，环烷基环包含3至20个碳原子，优选包含3至12个碳原子，更优选包含3至6个碳原子。单环环烷基的非限制性实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环己二烯基、环庚基、环庚三烯基、环辛基等；多环环烷基包括螺环、稠环和桥环的环烷基。“碳环”指的是环烷基中的环系。
术语“螺环烷基”指5至20元的单环之间共用一个碳原子(称螺原子)的多环基团，其可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。优选为6至14元，更优选为7至10元。根据环与环之间共用螺原子的数目将螺环烷基分为单螺环烷基、双螺环烷基或多螺环烷基，优选为单螺环烷基和双螺环烷基。更优选为4元/4元、4元/5元、4元/6元、5元/5元或5元/6元单螺环烷基。“螺碳环”指的是螺环烷基中的环系。螺环烷基的非限制性实例包括：
术语“稠环烷基”指5至20元，系统中的每个环与体系中的其他环共享毗邻的一对碳原子的全碳多环基团，其中一个或多个环可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。优选为6至14元，更优选为7至10元。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环稠环烷基，优选为双环或三环，更优选为5元/5元或5元/6元双环烷基。“稠碳环”指的是稠环烷基中的环系。稠环烷基的非限制性实例包括：
术语“桥环烷基”指5至20元，任意两个环共用两个不直接连接的碳原子的全碳多环基团，其可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。优选为6至14元，更优选为7至10元。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环桥环烷基，优选为双环、三环或四环，更有选为双环或三环。桥环烷基的非限制性实例包括：
所述环烷基环可以稠合于芳基、杂芳基或杂环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为环烷基，非限制性实例包括茚满基、四氢萘基、苯并环庚烷基等。环烷基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、氧代基、羧基或羧酸酯基。
术语“杂环基”指饱和或部分不饱和单环或多环环状烃取代基，其包含3至20个环原子，其中一个或多个环原子为选自氮、氧或S(O) m(其中m是整数0至2)的杂原子，但不包括-O-O-、-O-S-或-S-S-的环部分，其余环原子为碳。优选包含3至12个环原子，其中1～4个是杂原子；更优选包含3至6个环原子。单环杂环基的非限制性实例包括吡咯烷基、咪唑烷基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、二氢咪唑基、二氢呋喃基、二氢吡唑基、二氢吡咯基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、高哌嗪基等，优选哌啶基、吡咯烷基。多环杂环基包括螺环、稠环和桥环的杂环基。“杂环”指的是杂环基中的环系。
术语“螺杂环基”指5至20元的单环之间共用一个原子(称螺原子)的多环杂环基团，其中一个或多个环原子为选自氮、氧或S(O) m(其中m是整数0至2)的杂原子，其余环原子为碳。其可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。优选为6至14元，更优选为7至10元。根据环与环之间共用螺原子的数目将螺杂环基分为单螺杂环基、双螺杂环基或多螺杂环基，优选为单螺杂环基和双螺杂环基。更优选为4元/4元、4元/5元、4元/6元、5元/5元或5元/6元单螺杂环基。“螺杂环”指的是螺杂环基中的环系。螺杂环基的非限制性实例包括：
术语“稠杂环基”指5至20元，系统中的每个环与体系中的其他环共享毗邻的一对原子的多环杂环基团，一个或多个环可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统，其中一个或多个环原子为选自氮、氧或S(O) m(其中m是整数0至2)的杂原子，其余环原子为碳。优选为6至14元，更优选为7 至10元。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环稠杂环基，优选为双环或三环，更优选为5元/5元或5元/6元双环稠杂环基。“稠杂环”指的是稠杂环基中的环系。稠杂环基的非限制性实例包括：
术语“桥杂环基”指5至14元，任意两个环共用两个不直接连接的原子的多环杂环基团，其可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统，其中一个或多个环原子为选自氮、氧或S(O) m(其中m是整数0至2)的杂原子，其余环原子为碳。优选为6至14元，更优选为7至10元。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环桥杂环基，优选为双环、三环或四环，更有选为双环或三环。桥杂环基的非限制性实例包括：
所述杂环基环可以稠合于芳基、杂芳基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为杂环基，其非限制性实例包括：
等。
杂环基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、氧代基、羧基或羧酸酯基。
术语“芳基”指具有共轭的π电子体系的6至14元全碳单环或稠合多环(也就是共享毗邻碳原子对的环)基团，优选为6至10元，例如苯基和萘基。所述芳基环可以稠合于杂芳基、杂环基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为芳基环。“芳环”指的是芳基中的环系。芳基非限制性实例包括：
芳基可以是取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、羧基或羧酸酯基，优选苯基。
术语“稠环芳基”可以是含有8-14个环原子由两个或两个以上环状结构彼此共用两个相邻的原子连接起来形成的不饱和的具有芳香性的稠环结构，环原子优选8-12个。例如包括全部不饱和稠环芳基，例如萘、菲等，还包括部分饱和稠环芳基，例如苯并3-8元饱和单环环烷基、苯并3-8元部分饱和单环环烷基。“稠芳环”指的是稠环芳基中的环系。稠环芳基具体实例如2,3-二氢-1H-茚基、IH-茚基、1,2,3,4-四氢萘基、1,4-二氢萘基等。
术语“杂芳基”指包含1至4个杂原子、5至14个环原子的杂芳族体系，其中杂原子选自氧、硫和氮。杂芳基优选为5至12元，例如咪唑基、呋喃基、噻吩基、噻唑基、吡唑基、噁唑基、吡咯基、四唑基、吡啶基、嘧啶基、噻二唑、吡嗪基等，优选为咪唑基、吡唑基、嘧啶基或噻唑基；更优选为吡唑基或噻唑基。所述杂芳基环可以稠合于芳基、杂环基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为杂芳基环。“杂芳环”指的是杂芳基中的环系。杂芳基非限制性实例包括：
杂芳基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、羧基或羧酸酯基。
术语“稠杂芳基”可以是含有5-14个环原子(其中至少含有一个杂原子)由两个 或两个以上环状结构彼此共用两个相邻的原子连接起来形成的不饱和的具有芳香性的稠环结构，同时包括碳原子、氮原子和硫原子可以被氧代，优选"5-12元稠杂芳基"、"7-12元稠杂芳基"、"9-12元稠杂芳基"等，例如苯并呋喃基、苯并异呋喃基、苯并噻吩基、吲哚基、异吲哚、苯并噁唑基、苯并咪唑基、吲唑基、苯并三唑基、喹啉基、2-喹啉酮、4-喹啉酮、1-异喹啉酮、异喹啉基、吖啶基、菲啶基、苯并哒嗪基、酞嗪基、喹唑啉基、喹喔啉基、酚嗪基、喋啶基、嘌呤基、萘啶基、吩嗪、吩噻嗪等。“稠杂芳环”指的是稠杂芳基中的环系。
稠杂芳基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、羧基或羧酸酯基。
术语“烷氧基”指-O-(烷基)和-O-(非取代的环烷基)，其中烷基的定义如上所述。烷氧基的非限制性实例包括：甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、环丙氧基、环丁氧基、环戊氧基、环己氧基。烷氧基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、羧基或羧酸酯基。
术语“烷硫基”指-S-(烷基)和-S-(非取代的环烷基)，其中烷基的定义如上所述。烷硫基的非限制性实例包括：甲硫基、乙硫基、丙硫基、丁硫基、环丙硫基、环丁硫基、环戊硫基、环己硫基。烷硫基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基中的一个或多个取代基所取代。
术语“羟烷基”指被羟基取代的烷基，其中烷基如上所定义。
术语“卤代烷基”指被卤素取代的烷基，其中烷基如上所定义。
术语“氘代烷基”指被氘原子取代的烷基，其中烷基如上所定义。
术语“羟基”指-OH基团。
术语“氧代”指＝O基团。例如，碳原子与氧原子通过双键连接，其中形成酮或醛基。
术语“硫代”指＝S基团。例如，碳原子与硫原子通过双键连接，形成硫代羰基-C(S)-。
术语“卤素”指氟、氯、溴或碘。
术语“氨基”指-NH 2。
术语“氰基”指-CN。
术语“硝基”指-NO 2。
术语“羧基”指-C(O)OH。
术语“醛基”指-CHO。
术语“羧酸酯基”指-C(O)O(烷基)或-C(O)O(环烷基)，其中烷基、环烷基如上所定义。
术语“酰卤”指含有-C(O)-卤素的基团的化合物。
术语“磺酰基”指-S(O)(O)-。
术语“亚磺酰基”指-S(O)-。
“氨基保护基”是本领域已知的适当的用于氨基保护的基团，参见文献(“Protective Groups in Organic Synthesis”，5 Th.Ed.T.W.Greene&P.G.M.Wuts)中的氨基保护基团，优选地，所述的氨基保护基可以是(C 1-10烷基或芳香基)酰基，例如：甲酰基，乙酰基，苯甲酰基等；可以是(C 1-6烷基或C 6-10芳基)磺酰基；也可以是(C 1-6烷氧基或C 6-10芳基氧基)羰基，例如：Boc或Cbz；还可以是取代或非取代的烷基，例如：三苯甲基(Tr)、2,4-二甲氧基苄基(DMB)、对甲氧基苄基(PMB)或苄基(Bn)。
“任选”或“任选地”意味着随后所描述的事件或环境可以但不必发生，该说明包括该事件或环境发生或不发生地场合。例如，“任选被烷基取代的杂环烷基团”意味着烷基可以但不必须存在，该说明包括杂环烷基团被烷基取代的情形和杂环烷基团不被烷基取代的情形。
术语“药物组合物”表示含有一种或多种本文所述化合物或其生理学上/可药用的盐或前体药物与其他化学组分的混合物，以及其他组分例如生理学/可药用的载体和赋形剂。药物组合物的目的是促进对生物体的给药，利于活性成分的吸收进而发挥生物活性。
术语“药物载体”用于本公开的药物，是指能改变药物进入人体的方式和在体内的分布、控制药物的释放速度并将药物输送到靶向器官的体系。药物载体释放和靶向系统能够减少药物降解及损失，降低副作用，提高生物利用度。如可作为载体的高分子表面活性剂由于其独特的两亲性结构，可以进行自组装，形成各种形式的聚集体，优选的实例如胶束、微乳液、凝胶、液晶、囊泡等。这些聚集体具有包载药物分子的能力，同时又对膜有良好的渗透性，可以作为优良的药物载体。
术语“赋形剂”是在药物制剂中除主药以外的附加物，也可称为辅料。如片剂中的粘合剂、填充剂、崩解剂、润滑剂；半固体制剂软膏剂、霜剂中的基质部分；液体制剂中的防腐剂、抗氧剂、矫味剂、芳香剂、助溶剂、乳化剂、增溶剂、渗透压调节剂、着色剂等均可称为赋形剂。
术语“稀释剂”又称填充剂，其主要用途是增加片剂的重量和体积。稀释剂的加入不仅保证一定的体积大小，而且减少主要成分的剂量偏差，改善药物的压缩 成型性等。当片剂的药物含有油性组分时，需加入吸收剂吸收油性物，使保持“干燥”状态，以利于制成片剂。
本公开中化合物可以含有一个或多个不对称中心，因此可以产生对映异构体、非对映异构体，并且其可以根据绝对立体化学定义为(R)-或(S)-或用于氨基酸的(D)-或(L)-的其它立体异构形式。本公开包括所有可能异构体以及其外消旋和光学纯的形式。光学活性的(+)和(-)、(R)-和(S)-或(D)-和(L)-异构体可以使用手性合成子或手性试剂制备，或者可以使用常规方法例如色谱法和分级结晶制备。用于制备/分离各个对映体的常规方法包括从合适的的光学纯前体手性合成或使用例如手性高效液相色谱法(HPLC)的外消旋物(或盐或衍生物的外消旋物)拆分。当本文描述的化合物含有烯双键或其它几何不对称性中心，除非另有说明，否则其意味着所述化合物包括E和Z几何异构体。而且，所有的互变异构形式也意味着包括在内。
本公开所述化合物的化学结构中，键 表示未指定构型，即如果化学结构中存在手性异构体，键 可以为 或者同时包含 两种构型。本公开所述化合物的化学结构中，键 并未指定构型，即可以为Z构型或E构型，或者同时包含两种构型。
“立体异构体”指通过相同的键键合但具有不同的三维结构的相同原子组成的化合物，其不可互换。本公开中预期各种立体异构体及其混合物，并且包括“对映异构体”，其指其分子彼此为不能重叠的镜像的两种立体异构体。
“互变异构体”指质子从分子的一个原子转移到同一分子的另一个原子。本公开中包括任何所述化合物的互变异构体。
本公开所述化合物或其可药用盐、或其异构体的任何同位素标记的衍生物都被本公开所覆盖。能够被同位素标记的原子包括但不限于氢、碳、氮、氧、磷、氟、氯、碘等。它们可分别被同位素同位素 2H(D)、 3H、 11C、 13C、 14C、 15N、 18F、 31P、 32P、 35S、 36Cl和 125I等代替。除另有说明，当一个位置被特别地指定为氘(D)时，该位置应理解为具有大于氘的天然丰度(其为0.015％)至少3000倍的丰度的氘(即，至少45％的氘掺入)。
附图说明
图1：小分子类固醇在脂多糖刺激人PBMC分泌细胞因子实验中的抑炎活性
图2：抗TNF-ADC在膜结合型TNFα介导的GRE报告基因系统中的活性
图3：抗TNF-ADC在脂多糖刺激人单核细胞分泌细胞因子实验中的活性
图4：抗TNF-ADC(4nM)在LPS诱导的人单核细胞细胞因子释放实验中的活性
图5：测试例5的实验流程
图6：抗TNF-ADC在小鼠胶原抗体诱导的关节炎(CAIA)模型中的活性
图7：抗TNF-ADC在小鼠胶原抗体诱导的关节炎(CAIA)模型中不同时间点的活性
图8：测试例6的实验流程
图9：抗TNF-ADC在迟发型超敏反应(DTH)模型中的活性
具体实施方式
以下结合实施例进一步描述本公开所述的化合物、可药用盐的制备，但这些实施例并非限制本公开中的范围。
本公开中实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照原料或商品制造厂商所建议的条件。未注明具体来源的试剂，为市场购买的常规试剂。
NMR位移(δ)以10 -6(ppm)的单位给出。NMR的测定是用Bruker AVANCE-400核磁仪，测定溶剂为氘代二甲基亚砜(DMSO-d 6)，氘代氯仿(CDCl 3)，氘代甲醇(CD 3OD)，内标为四甲基硅烷(TMS)。
MS的测定用Shimadzu 2010 Mass Spectrometer或Agilent 6110A MSD质谱仪。
HPLC的测定使用Shimadzu LC-20A systems、Shimadzu LC-2010HT series或安捷伦Agilent 1200 LC高压液相色谱仪(Ultimate XB-C18 3.0*150mm色谱柱或Xtimate C18 2.1*30mm色谱柱)。
手性HPLC分析测定使用Chiralpak IC-3 100×4.6mm I.D.,3um、Chiralpak AD-3 150×4.6mm I.D.,3um、Chiralpak AD-3 50×4.6mm I.D.,3um、Chiralpak AS-3 150×4.6mm I.D.,3um、Chiralpak AS-3 100×4.6mm I.D.,3μm、ChiralCel OD-3 150×4.6mm I.D.,3um、Chiralcel OD-3 100×4.6mm I.D.,3μm、ChiralCel OJ-H 150×4.6mm I.D.,5um、Chiralcel OJ-3 150×4.6mm I.D.,3um色谱柱；薄层层析硅胶板使用烟台黄海HSGF254或青岛GF254硅胶板，薄层色谱法(TLC)使用的硅胶板采用的规格是0.15mm～0.2mm，薄层层析分离纯化产品采用的规格是0.4mm～0.5mm。
柱层析一般使用烟台黄海硅胶100～200目、200～300目或300～400目硅胶为载体。
手性制备柱使用DAICEL CHIRALPAK IC(250mm*30mm,10um)或Phenomenex-Amylose-1(250mm*30mm,5um)。
CombiFlash快速制备仪使用Combiflash Rf150(TELEDYNE ISCO)。
激酶平均抑制率及IC 50值的测定用NovoStar酶标仪(德国BMG公司)。
本公开的已知的起始原料可以采用或按照本领域已知的方法来合成，或可购买自ABCR GmbH&Co.KG，Acros Organics，Aldrich Chemical Company，韶远化学科技(Accela ChemBio Inc)、达瑞化学品等公司。
实施例中无特殊说明，反应能够均在氩气氛或氮气氛下进行。
氩气氛或氮气氛是指反应瓶连接一个约1L容积的氩气或氮气气球。
氢气氛是指反应瓶连接一个约1L容积的氢气气球。
加压氢化反应使用Parr 3916EKX型氢化仪和清蓝QL-500型氢气发生器或HC2-SS型氢化仪。
氢化反应通常抽真空，充入氢气，反复操作3次。
微波反应使用CEM Discover-S 908860型微波反应器。
实施例中无特殊说明，溶液是指水溶液。
实施例中无特殊说明，反应的温度为室温，为20℃～30℃。
实施例中的反应进程的监测采用薄层色谱法(TLC)，反应所使用的展开剂，纯化化合物采用的柱层析的洗脱剂的体系和薄层色谱法的展开剂体系包括：A：二氯甲烷/甲醇体系，B：正己烷/乙酸乙酯体系，C：石油醚/乙酸乙酯体系，D：石油醚/乙酸乙酯/甲醇，溶剂的体积比根据化合物的极性不同而进行调节，也可以加入少量的三乙胺和醋酸等碱性或酸性试剂进行调节。
1.0M Tris缓冲液pH＝8.30±0.1的配制：
50mL容量瓶中称取tris 6.0g，加入40mL纯化水，振荡溶解，滴加入浓盐酸1.2mL，调pH至8.30，再用纯化水定容。
A缓冲液的配制：
在2.0L的容器中，加入KH 2PO 4(8.50g)、K 2HPO 4(8.56g)、NaCl(5.86g)和EDTA(1.50g)，加入1.6L注射用水，搅拌半小时，完全溶解后再用注射用水定容至2.0L，测定pH为6.30±0.1。
下述实验中所用缩写代表的含义如下:
DAST:二乙胺基三氟化硫；THF：四氢呋喃；NMP:N-甲基吡咯烷酮；DCM:二氯甲烷；m-CPBA:间氯过氧苯甲酸；DIEA:N,N-二异丙基乙胺；TEA：三乙胺；Boc：叔丁氧羰基，MeOH:甲醇；Et 2O:乙醚。
实施例1
第一步
将化合物1-1(500mg，1.9mmol，1.0eq)，化合物1-2(730mg，2.3mmol，1.2eq)，Pd(PPh 3) 4(660mg，0.57mmol，0.3eq)，K 2CO 3(960mg，6.9mmol，3.6eq)及DMF(35mL，70V)加入到100mL单口瓶中，氮气保护下置换三次，80℃搅拌至反应结束。将EA(50mL)及H 2O(130mL)加入反应液中，分液，水相用EA(30mLx 2)萃取。合并有机相，依次用H 2O(50mL x 3)，饱和LiCl(50mL)及饱和NaCl溶液洗涤(30mL)，无水Na 2SO 4干燥，过滤后旋蒸除去溶剂。过柱得到粗品，用PE:EA＝2:1打浆，过滤得到化合物1-3(220mg，收率31％)。
Ms(ESI):m/z 318[M-55] +。
第二步
将化合物1-3(100mg，0.268mmol，1.1eq)，化合物1-4(92mg，0.243mmol，1.0eq)，无水MgSO 4(146mg，1.215mmol，5.0eq)，无水CH 3CN(5mL)加入50mL三口瓶中，氮气保护下于室温搅拌0.7h。冰浴降温至0℃，缓慢滴加CF 3SO 3H(182mg，1.215mmol，5.0eq)，滴完后，自然升温到室温反应，反应完全后，在冰浴下，加入EA和饱和碳酸氢钠溶液进行淬灭，并调到pH值大于8，然后再用EA萃取水相，合并有机相，再用饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，浓缩后粗品经过prep-HPLC，得到化合物1-A(64.5mg，收率42％)。
Ms(ESI):m/z 632.3[M+H] +。
1H NMR(400MHz,DMSO)δ7.73(dd,J＝8.3,2.5Hz,4H),7.64(d,J＝8.3Hz,2H),7.57(d,J＝8.2Hz,2H),7.33(d,J＝10.1Hz,1H),7.11(t,J＝7.8Hz,1H),6.89(s,1H),6.83(d,J＝7.8Hz,1H),6.57(d,J＝7.9Hz,1H),6.17(d,J＝10.1Hz,1H),5.95(s,1H),5.52(s,1H),5.17(s,2H),5.12(t,J＝5.9Hz,1H),4.97(d,J＝5.1Hz,1H),4.82(d,J＝2.8Hz,1H),4.56(dd,J＝19.6,6.4Hz,1H),4.32(s,1H),4.22(dd,J＝19.6,5.5Hz,1H),2.61-2.53(m,1H),2.34(d,J＝10.4Hz,1H),2.20-2.01(m,2H),1.90–1.60(m,5H),1.41(s,3H),1.10-1.01(m,2H),0.89(s,3H)。
实施例2
氮气氛下，在一个25mL反应瓶中加入化合物1-4(176mg，0.47mmol，1.0eq)和无水硫酸镁(282mg，2.34mmol，5.0eq)，加入无水乙腈(5mL)，室温下搅拌反应90分钟。再向上述混合物中加入化合物2-1(160mg，0.49mmol，1.05eq)，冰浴冷却至0～5℃，由注射器加入三氟甲磺酸(351mg，2.34mmol，5.0eq)，维持冰浴搅拌反应至结束)。将反应液过滤硅藻土，乙酸乙酯润洗，滤液中再加入乙酸乙酯和水，分液，有机相再用饱和食盐水洗涤一次，干燥，减压浓缩得粗品，通过制备-HPLC纯化得化合物2-A(88mg，收率32.2％)。
Ms(ESI):m/z 584.42[M+1] +。
实施例3
第一步
氮气保护下，将化合物3-1(10.0g，45.03mmol)，(Bpin) 2(联硼酸频那醇酯，18.3g，72.05mmol)，X-Phos(1.36g，2.70mmol)和KOAc(8.84g，90.06mmol)溶于1，4-二氧六环(150mL)中。加入Pd 2(dba) 3(1.65g，1.80mmol)，升至90℃反应。冷却至室温，过滤后将滤液浓缩，柱层析分离(PE/EA)，得到化合物3-2共13g。
MS-ESI:m/z 270.2[M+H] +。
第二步
将化合物3-2(13g，45.03mmol)溶于甲苯(100mL)中，加入Boc 2O(13.4mL，58.54mmol)，升至100℃反应。冷却至室温，浓缩后柱层析分离(PE/EA)，得到化合物3-3共16g，两步收率：96.2％。
MS-ESI:m/z 396.1[M+Na] +。
第三步
氮气保护下，将化合物3-3(2.0g，5.42mmol)，化合物3-4(2.16g，10.84mmol)和K 2CO 3(3.75g，27.10mmol)溶于四氢呋喃(50mL)中。加入Pd(dppf)Cl 2·DCM(441mg，0.54mmol)，升至80℃反应。冷却至室温，加水淬灭，用乙酸乙酯提取，浓缩后柱层析分离(PE/EA)，得到化合物3-5共1.33g，收率：67.9％。
MS-ESI:m/z 384.1[M+Na] +。
第四步
氮气保护下，将化合物1-4(123mg，0.327mmol)和MgSO 4(197mg，1.635mmol)溶于乙腈(10mL)中，室温反应1小时。加入化合物3-5(130mg，0.360mmol)的乙腈(10mL)溶液，冷却至0℃，缓慢滴加三氟甲磺酸(145μL，1.635mmol)，加料完毕后，自然升至室温反应。过滤后将滤液浓缩，使用制备HPLC分离(CH 3CN/H 2O)，得到化合物3-A共90mg，收率44.4％。
MS-ESI:m/z 620.3[M+H] +。
1H NMR(400MHz,DMSO)δ7.96(dd,J＝7.0,2.2Hz,1H),7.38–7.26(m,5H),7.20(d,J＝8.2Hz,3H),7.17–7.09(m,1H),6.67(d,J＝7.2Hz,1H),6.14(d,J＝10.1 Hz,1H),5.91(s,1H),5.36(s,1H),4.90(d,J＝4.9Hz,1H),4.75(brs,1H),4.47(d,J＝19.4Hz,1H),4.32(s,2H),4.27(brs,1H),4.15(d,J＝19.4Hz,1H),2.58–2.50(m,3H),2.34–2.23(m,1H),2.08(dd,J＝16.2,6.0Hz,1H),2.03–1.93(m,1H),1.81–1.53(m,5H),1.38(s,3H),1.23(s,1H),1.03(ddd,J＝27.9,11.3,2.6Hz,2H),0.84(s,3H)。
实施例4
第一步
在1000mL单口瓶中加入化合物4-1(48g，176.4mmol，1.0eq)，联硼酸频哪醇酯(71.7g，282.2mmol，1.6eq)，醋酸钾(34.6g，352.8mmol，2.0eq)，PdCl 2(dppf)(6.4g，8.82mmol，0.05eq)，二氧六环(500mL)，氮气保护下升温至95℃搅拌至反应完全，停止反应，反应液冷却，再加入化合物4-2(80.8g，352.8mmol，2.0eq)，碳酸钾(48.8g，352.8mmol，2.0eq)，PdCl 2(dppf)(6.4g，8.82mmol，0.05eq)，再加水(100mL)搅拌，氮气保护下加热到80度搅拌至反应完全。反应液冷却后加乙酸乙酯和水搅拌，分液，无水硫酸钠干燥，浓缩后粗品过柱，得到化合物4-3约54g收率90％。
Ms(ESI):m/z 342.1[M+1] +。
第二步
在500mL三口瓶中加入化合物4-3(7.0g，20.5mmol，1.0eq)，高锰酸钾(9.7g，61.6mmol，3.0eq)，四叔丁基溴化铵(20.0g，61.6mmol，3.0eq)，再加二氯乙烷(140mL)，氮气保护下室温搅拌至反应完全，停止反应，反应液冰水冷却，加入10％亚硫酸氢钠和醋酸搅拌，分液，有机层加无水硫酸钠干燥，抽滤，浓缩，粗品过柱，得到化合物4-4约6.2g，收率85％。
Ms(ESI):m/z 378.1[M+23] +。
第三步：
在500mL三口瓶中加入化合物4-4(20.0g，56.0mmol，1.0eq)，丙二硫醇(12.1g，112.0mmol，2.0eq)，三氟化硼乙醚(23.8g，168.0mmol，3.0eq)，再加氯仿(100mL)，氮气保护下加热回流搅拌至反应完全，停止反应，反应液冰水冷却，加入水搅拌，固体全溶，分液，有机层加无水硫酸钠干燥，抽滤，浓缩，粗品加石油醚搅拌，抽滤得到化合物4-5约22g，直接投入下一步。
Ms(ESI):m/z 346.0[M+1] +。
第四步：
在100mL三口瓶中加入化合物4-5(22.0g，以56.0mmol计，1.0eq)，二碳酸二叔丁酯(24.4g，112.0mmol，2.0eq)，再加乙醇(60mL)，氮气保护下加热50度搅拌至反应完全，停止反应，反应液浓缩，过柱，得到化合物4-6约18.5g，收率71％。
Ms(ESI):m/z 468.1[M+23] +。
第五步：
在100mL三口瓶中加入化合物4-6(4.7g，13.6mmol，1.0eq)，DAST(6.6g，40.9mmol，3.0eq)，再加二氯甲烷(50mL)，氮气保护下加热50℃搅拌至反应完全，停止反应，冰水冷却下加水淬灭，分液，有机层无水硫酸钠干燥，抽滤，浓缩，过柱，得到化合物4-7约3.9g，收率76％。
Ms(ESI):m/z 400.1[M+23] +。
第六步：
在100mL三口瓶中加入化合物4-7(2.0g，5.3mmol，1.0eq)，再加四氢呋喃(25mL)溶解，氮气保护下，冷却到0℃左右，缓慢滴加1.0M的氢化铝锂四氢呋喃溶液(8.0mL，8.0mmol，1.5eq)，保持0℃左右搅拌至反应完全，停止反应，冰水冷却下加水(0.8mL)淬灭，再加3.0M氢氧化钾水溶液(0.8mL)，再加水(1.6mL)搅拌15min，抽滤，滤液加无水硫酸钠干燥，抽滤，浓缩，得到化合物4-8约2.2g，直接投入下一步。
Ms(ESI):m/z 372.1[M+23] +。
第七步：
在100mL三口瓶中加入化合物4-8(2.2g，5.3mmol，1.0eq)，再加乙酸乙酯(25mL)溶解，氮气保护下，冷却到5℃左右，加入Dess-Martin氧化剂(6.7g， 15.9mmol，3.0eq)，保持10℃左右搅拌至反应完全，停止反应，抽滤，滤液浓缩，粗品过柱纯化，得到化合物4-9约1.5g，收率82％。
Ms(ESI):m/z 370.1[M+23] +。
第八步：
在100mL三口瓶中加入化合物1-4(1.2g，3.0mmol，1.0eq)，化合物4-9(1.1g，3.17mmol，1.05eq)，再加无水硫酸镁(1.8g，15.0mmol，5.0eq)，再加乙腈(25mL)搅拌，氮气保护下，冷却到0℃以下，加入三氟甲磺酸(2.3g，15.0mmol，5.0eq)，保持0℃左右搅拌至反应完全，停止反应，抽滤，滤液直接制备，得到化合物4-A约1.5g，收率70％。
Ms(ESI):m/z 606.3[M+1] +。
1H-NMR(400MHz,MeOD)δ7.53(m,4H),7.44(m,2H),7.28(m,3H),6.23(dd,1H),5.99(t,1H),5.52(s,1H),5.08(d,1H),4.63(d,1H),4.37(m,2H),2.65(td,1H),2.36(d,1H),2.25(m,1H),2.13(m,1H),1.95(dd,1H),1.80(m,4H),1.49(s,3H),1.11(dt,1H),1.10(m,4H)。
实施例5
将化合物5-1(85.3mg，0.262mmol，1.1eq)，化合物5-2(94mg，0.238mmol，1.0eq，麦克林/C10492138/P>98％)，无水MgSO 4(143mg，1.19mmol，5.0eq)，无水CH 3CN(4mL)加入25mL希莱克反应瓶中，氮气保护下于室温搅拌0.7h。冰浴降温至0℃，缓慢滴加CF 3SO 3H(179mg，1.19mmol，5.0eq)，滴完后自然升温反应至完全。在冰浴下，加入EA和饱和碳酸氢钠溶液进行淬灭，然后再用EA萃取水相，合并有机相，再用饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，浓缩后得到粗品，经prep-HPLC，得到化合物5-A(67.1mg，收率：42.6％)，
Ms(ESI):m/z 602.3[M+H] +。
1H NMR(400MHz,DMSO)δ7.71(d,J＝8.1Hz,2H),7.59(d,J＝8.2Hz,2H),7.29(d,J＝10.2Hz,1H),7.16(t,J＝7.7Hz,1H),6.92(s,1H),6.87–6.76(m,2H),6.22(d,J＝10.2Hz,1H),6.02(s,1H),5.59(s,1H),5.47(d,J＝2.9Hz,1H),5.39(s,2H),5.13(t,J＝5.9Hz,1H),5.00(d,J＝4.3Hz,1H),4.57(dd,J＝19.6,6.5Hz,1H),4.30-4.15(m,2H),2.71-2.56(m,2H),2.38-2.31(m,1H),2.20-2.12(m,1H),2.09-2.01(m,1H),1.90-1.80(m,1H),1.78–1.64(m,3H),1.50(s,3H),1.45-1.34(m,1H),0.89(s,3H)。
实施例6
第一步
氮气保护下，将化合物3-A(90.0mg，0.145mmol,1.0eq)，加入甲苯2mL，然后加入BOC酸酐(63.3mg，0.290mmol，2.0eq)，体系加热到100℃反应至完全，直接减压浓缩干，柱层析，得到48.0mg化合物3-A-1。
MS-ESI:m/z 742.3[M+Na] +。
第二步
氮气保护下，将化合物3-A-1(45.0mg，0.063mmol)和四氮唑(66.0mg，0.945mmol)溶于N，N-二甲基乙酰胺(1.5mL)中，加入N，N-二乙基亚磷酰胺二 叔丁酯(187.0mg，0.756mmol)，室温下反应2小时。冷却至0℃，缓慢加入H 2O 2(50.0mg，0.82mmol)，加完后在室温下搅拌至反应完全，加水2mL，过滤，滤饼烘干，得到约40.0mg化合物3-A-2，直接投入下步反应。
MS-ESI:m/z 943.3[M+Na] +。
第三步
氮气保护下，将化合物3-A-2(40.0mg，0.043mmol)溶于二氯甲烷(1.0mL)中，冷却至0℃，加入三氟乙酸(0.3mL)，室温下反应3小时。浓缩后使用制备HPLC分离(CH 3CN/H 2O，+0.1％三氟乙酸)，得到化合物3-B约12.0mg。
ESI:m/z 700.3[M+H] +。
实施例7
第一步
氮气保护下，将化合物4-A(45.0mg，0.074mmol,1.0eq)，加入甲苯2mL，然后加入BOC酸酐(32.0mg，0.158mmol，2.0eq)，体系加热到100℃反应至反应完全，直接减压浓缩，柱层析，得到45.2mg化合物4-A-1。
MS-ESI:m/z 728.2[M+Na] +。
第二步
氮气保护下，将化合物4-A-1(45.0mg，0.063mmol)和四氮唑(66.0mg，0.945mmol)溶于N，N-二甲基乙酰胺(1.0mL)中，加入N，N-二乙基亚磷酰胺二叔丁酯(249.0mg，0.756mmol)，室温下反应2小时。冷却至0℃，缓慢加入H 2O 2(50.0mg，0.82mmol)，加完后在室温下搅拌至反应完全，加水2mL，过滤，滤饼烘干，得到化合物4-A-2约43.0mg，直接投入下步反应。
MS-ESI:m/z 920.3[M+Na] +。
第三步
氮气保护下，将化合物4-A-2(40.0mg，0.042mmol)溶于二氯甲烷(1.0mL)中，冷却至0℃，加入三氟乙酸(0.3mL)，室温下反应3小时。浓缩后使用制备HPLC分离(CH 3CN/H 2O，+0.1％三氟乙酸)，得到化合物4-B约15.0mg。
ESI:m/z 686.2[M+H] +。
实施例8
第一步
氮气保护下，将化合物3-A(2.60g，4.20mmol)和3-6(2.03g，4.20mmol)溶于N，N-二甲基乙酰胺(30mL)中，加入三乙胺(1.27g，12.60mmol)，冷却 至0℃，缓慢加入T 3P(5.35g，8.40mmol，50％in DMF)，室温反应至完全。反应液直接用制备HPLC纯化，得产品3-7共965mg，收率：21.2％。
MS-ESI:m/z 1106.5[M+Na] +。
第二步
氮气保护下，将化合物3-7(805mg，0.778mmol)和四氮唑(818mg，11.670mmol)溶于N，N-二甲基乙酰胺(10mL)中，加入N，N-二乙基亚磷酰胺二叔丁酯(2.6mL，9.336mmol)，室温下反应2小时。冷却至0℃，缓慢加入H 2O 2(437μL，4.279mmol，30％in water)，加完后在室温下搅拌1小时。浓缩后柱层析分离(CH 3CN/H 2O)，得到化合物3-8共692mg，收率：73.1％。
第三步
氮气保护下，将化合物3-8(830mg，0.650mmol)溶于乙腈(20mL)中，加入哌啶(302μL，3.250mmol)，室温下反应。浓缩后用15mL石油醚打浆，重复三次，得到化合物3-9共645mg，直接用于下一步反应。
MS-ESI:m/z 1054.5[M+H] +。
第四步
氮气保护下，将2-溴乙酸(170mg，1.224mmol)和EEDQ(305mg，1.224mmol)溶于N，N-二甲基乙酰胺(5mL)中，室温下反应1小时。加入化合物3-9(645mg，0.612mmol)的N，N-二甲基乙酰胺溶液(5mL)，室温下反应。反应液用二氯甲烷(200mL)稀释，依次用1M氢溴酸水溶液，饱和碳酸氢钠溶液和饱和食盐水洗涤，有机相浓缩后得到化合物3-10共830mg，直接用于下一步反应。
MS-ESI:m/z 1196.4[M+Na] +。
第五步
氮气保护下，将化合物3-10(830mg，0.706mmol)溶于二氯甲烷(8mL)中，冷却至0℃，加入三氟乙酸(4mL)，室温下反应。浓缩后使用制备HPLC分离(CH 3CN/H 2O，+0.1％三氟乙酸)，得到化合物3-B00共220mg，三步收率：33.6％。
MS-ESI:m/z 1028.2[M+Na] +。
1H NMR(400MHz,DMSO)δ9.98(s,1H),8.55(t,J＝5.4Hz,1H),8.36(d,J＝7.4Hz,1H),7.97–7.81(m,2H),7.55–7.46(m,2H),7.45–7.38(m,2H),7.36–7.26(m,3H),7.23–7.16(m,2H),6.14(dd,J＝10.0,1.1Hz,1H),5.90(s,1H),5.44(s,1H),4.97–4.79(m,3H),4.65–4.50(m,2H),4.42(s,2H),4.27(brs,1H),3.94(s,2H),3.86(d,J＝5.5Hz,2H),2.41–2.22(m,4H),2.17–1.88(m,6H),1.81–1.56(m,6H),1.37(s,3H),1.06–0.92(m,2H),0.85(s,3H)。
实施例9
第一步
在25mL三口瓶中加入化合物4-A(0.329g，0.544mmol，1.05eq)，加化合物4-10(0.25g，0.52mmol，1.0eq)，三乙胺(0.25g，1.56mmol，3.0eq)，DMF(2mL)，加完后在冰浴下降温5-10min，使内温达到-5℃，然后缓慢加入T3P(50％DMF)(0.9mL,1.82mmol,3.5eq),加完后在自然升温条件下搅拌至反应完全，反应液直接经pre-HPLC纯化，得化合物4-11(223mg,收率40％。
Ms(ESI):m/z 1092.4[M+Na] +。
第二步
在50mL三口瓶中加入化合物4-11(0.22g，0.206mmol，1.0eq)，加原料四氮唑(0.20g，2.87mmol，14.0eq)，N,N-二乙基亚磷酰胺二叔丁酯(0.616g，2.47mmol，12.0eq)，DMF(2.6mL)，加完后在室温下反应2小时，冰浴下降温到0℃，然后缓慢加入H 2O 2(30％)(0.13g,0.57mmol,5.5eq)，加完后在室温下搅拌至反应完全，反应液直接经pre-HPLC纯化，得化合物4-12(184.1mg,收率70.8％。
Ms(ESI):m/z 1284.6[M+Na] +。
第三步
在25mL单口瓶中加入化合物4-12(0.285g，0.233mmol，1.0eq)，加原料piperidine(0.17g，1.96mmol，8.5eq)，乙腈(5mL)，加完后在室温条件下搅拌。减压浓缩，加入5mL石油醚打浆，在室温下搅拌，然后过滤，滤饼再用2mL石油醚洗涤两次，得化合物4-13(209mg,收率91％。
Ms(ESI):m/z 1004.4[M+H] +。
第四步
在25mL单口瓶中加入原料2-溴乙酸(0.074g，0.523mmol，2.6eq)，加原料EEDQ(0.13g，0.523mmol，2.6eq)，DMF(1mL)，加完后在室温下搅拌1小时，加入化合物4-13(0.21g，0.201mmol，1.0eq)的DMF(0.5mL)溶液，加完后在室温下搅拌至反应完全，先用二氯甲烷(40mL)稀释，再用1M HBr(10mL x 2)洗涤，然后饱和碳酸氢钠(20mL x 2)洗涤，最后用饱和食盐水洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，油泵减压浓缩，得化合物4-14(230mg,粗品。
Ms(ESI):m/z 1182.4[M+Na] +。
第五步
在25mL单口瓶中加入化合物4-14(0.240g，0.201mmol，1.0eq)，DCM(2mL)，加完后在冰浴下降温到0℃，然后缓慢加入三氟乙酸(1mL)，加完后在室温下搅拌至反应完全，反应液在冰浴下减压浓缩后经pre-HPLC纯化，冻干得化合物4-B00共78mg,收率39.2％。
Ms(ESI):m/z 1014.2[M+Na] +。
1H NMR(400MHz,DMSO)δ10.15(s,1H),8.53(t,J＝5.2Hz,1H),8.29(br,d,J＝7.5Hz,1H),7.83(s,1H),7.73(d,J＝7.8Hz,1H),7.68–7.58(m,2H),7.57–7.47(m,2H),7.43(t,J＝7.9Hz,1H),7.32(d,J＝9.9Hz,1H),7.20(d,J＝8.2Hz,1H),6.17(d,J＝10.1Hz,1H),5.92(s,1H),5.58(s,1H),4.95–4.80(m,3H),4.58(br,dd,J＝18.4,8.2Hz,1H),4.40–4.37(m,1H),4.33–4.27(m,1H),3.93(s,2H),3.82–3.78(m,2H),2.30–2.25(m,3H),2.16–2.07(m,1H),2.10–1.90(m,2H),1.88–1.59(m,6H),1.39(s,3H),1.18–1.05(m,2H),0.89(s,3H)。
实施例10
第一步
在25mL三口瓶中加入化合物4-A(0.260g，0.430mmol，1.05eq)，化合物4-C-1(0.193g，0.551mmol，1.32eq)，三乙胺(0.125g，1.23mmol，3.0eq)，DMF(2mL)，加完后在冰浴下降温到-5℃，然后缓慢加入T3P(50％DMF)(0.5mL,1.024mmol,2.5eq)，自然升温条件下搅拌至反应完全，反应液直接经pre-HPLC纯化(TFA(0.05％)水-乙腈)，得化合物4-C-2(140mg,收率35.1％。
Ms(ESI):m/z 949.3[M+Na] +。
第二步
在50mL三口瓶中加入化合物4-C-2(0.34g，0.366mmol，1.0eq)，加原料四氮唑(0.360g，5.13mmol，14.0eq)，N,N-二乙基亚磷酰胺二叔丁酯(1.099g， 4.40mmol，12.0eq)，DMF(5mL)，加完后在室温下反应2小时，冰浴下降温到0℃，然后缓慢加入H 2O 2(30％)(0.234g,2.02mmol,5.5eq),加完后在室温下搅拌至反应完全，反应液直接经中压boston反相柱纯化，得化合物4-C-3(304mg,收率64.1％。
Ms(ESI):m/z 1141.3[M+Na] +。
第三步
在25mL单口瓶中加入化合物4-C-3(0.304g，0.272mmol，1.0eq)，加原料piperidine(0.255g，1.63mmol，9.0eq)，乙腈(8mL)，加完后在室温条件下搅拌至反应完全。减压浓缩，加入4mL石油醚打浆，在35℃下搅拌2小时，然后过滤，滤饼再用2mL石油醚洗涤两次，得化合物4-C-4(243mg,收率99％。
Ms(ESI):m/z 897.6[M+H] +。
第四步
在25mL单口瓶中加入原料2-溴乙酸(0.112g，0.813mmol，3.0eq)，加原料EEDQ(0.201g，0.813mmol，3.0eq)，DMF(2mL)，加完后在室温下搅拌0.6小时，加入化合物4-C-4(0.243g，0.271mmol，1.0eq)的DMF(1mL)溶液，加完后在室温下搅拌至反应完全，先用二氯甲烷(50mL)稀释，再用1M HBr(15mL x 2)洗涤，然后饱和碳酸氢钠(15mL x 2)洗涤，最后用饱和食盐水洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，油泵减压旋干，再用氮气吹10分钟，得化合物4-C-5共275mg,粗品。
Ms(ESI):m/z 1039.1[M+Na] +和1041.1[M+Na+2] +。
第五步
在25mL单口瓶中加入原料4-C-5(0.275g，0.271mmol，1.0eq)，DCM(2.5mL)，加完后在冰浴下降温到0℃，然后缓慢加入三氟乙酸(1mL),加完后在室温下搅拌至反应完全，反应液在冰浴下减压浓缩后经pre-HPLC纯化，冻干得化合物4-C00共120mg,收率48.3％。
Ms(ESI):m/z 905.2[M+H] +。
实施例11
于37℃，向阿达木单抗的A缓冲液(pH＝6.3的0.05M缓冲水溶液；10.0mg/mL，6.0mL，405.11nmol)加入配制好的三(2-羧乙基)膦(TCEP)的水溶液(2.5mM，356.8μL，891.24nmol)，置于水浴振荡器，于37℃振荡反应3小时，停止反应。将反应液用水浴降温至25℃。
将1.0M Tris缓冲液(840μL)加入至上述反应液中，再将化合物3-B00(4.08mg，4051.10nmol)溶解于300μL DMSO中，加入到上述反应液中，置于水浴振荡器，于25℃振荡反应3小时，停止反应。将反应液用Sephadex G25凝胶柱脱盐纯化(洗脱相：A缓冲液)，并用超滤管浓缩得到抗体-药物偶联物Humira-3-B00的A缓冲液(2.55mg/mL，23.5mL)，于4℃冷冻储存。
实施例12
于37℃，向阿达木单抗的A缓冲液(pH＝6.3的0.05M缓冲水溶液；10.0mg/mL，6.0mL，405.11nmol)加入配制好的三(2-羧乙基)膦(TCEP)的水溶液(2.5mM，405.4μL，1012.77nmol)，置于水浴振荡器，于37℃振荡反应3小时，停止反应。将反应液用水浴降温至25℃。
将1.0M Tris缓冲液(840μL)加入至上述反应液中，再将将化合物4-B00(4.02mg，4051.10nmol)溶解于300μL DMSO中，加入到上述反应液中，置于水浴 振荡器，于25℃振荡反应3小时，停止反应。将反应液用Sephadex G25凝胶柱脱盐纯化(洗脱相：A缓冲液)，并用超滤管浓缩得到标题产物抗体-药物偶联物Humira-4-B00的A缓冲液(2.58mg/mL，23.25mL)，于4℃冷冻储存。
生物学评价
以下结合测试例进一步描述解释本公开中，但这些实施例并非意味着限制本公开中的范围。
测试例1：小分子类固醇的体外活性
1、待测样品
化合物1-A至5-A，化合物A-A(根据WO2017210471实例2制备)。
2、糖皮质激素受体结合测定
使用人糖皮质激素NHR结合(放射性标记的激动剂)实验测试小分子类固醇与糖皮质激素受体(GR)的结合活性(#232020，eurofins)。实验原理为将不同浓度的小分子类固醇和5nM[3H]地塞米松与人重组GR在4℃下孵育24小时。小分子类固醇与[3H]地塞米松竞争性地结合人GR。通过计数与受体特异性结合的[3H]地塞米松可计算出小分子类固醇与GR的结合活性。结果详见表1。
3、盐皮质激素受体激动剂活性测定
使用 NHR核易位实验测试小分子类固醇的盐皮质激素受体(MR)激动剂活性。将PathHunter NHR CHO-K1细胞在384孔白壁微孔板中铺板，加入待测小分子类固醇在37℃，5％CO 2条件下共孵育以诱导反应。用PathHunter检测试剂混合物生成测定信号，室温孵育一小时后检测化学发光信号。使用四参数曲线拟合分析数据以生成EC 50值。结果详见表1。
4、GRE报告基因实验
将A549细胞铺板(40000个细胞/96孔板)，用lipo3000转染pGL4.36(MMTV-Luc，100ng/孔)，过夜培养后与不同浓度的小分子类固醇进行孵育，24h后用Bright-Glo(promega)检测试剂检测报告基因系统中荧光酶的表达。
表1.小分子类固醇的体外活性
测试例2：小分子类固醇在脂多糖(LPS)刺激人PBMC分泌细胞因子实验中的抑炎活性
1、待测样品
化合物1-A至5-A，化合物A-A。
2、测试方法
用RPMI(2％FBS，1％青霉素-链霉素)重悬冻存原代人外周血单核细胞(PBMC)并铺板于96孔板。将PBMC与不同浓度的小分子类固醇在37℃，5％CO 2条件下共孵育4小时后，加入0.01ng/mL LPS刺激过夜。第二天收集培养基上清并用alpha LISA(Cisbio)检测IL-6的浓度。
3、测试结果
测试结果如图1所示，本公开所述的小分子类固醇化合物能够显著抑制LPS诱导的IL-6释放。
测试例3：抗TNF-ADC在膜结合型TNFα介导的GRE报告基因系统中的活性
1、待测样品
Humira-3-B00、Humira-4-B00、Humira-A-B00(根据WO2019106609实例7制备)。
2、测试方法
在Hela细胞中用慢病毒建立稳定转染MMLV-Luc的报告基因细胞系。将稳转Hela-MMTV-Luc细胞系铺板于96孔板中(30000个细胞/孔)，每孔用lipo3000转染空载质粒或人TNFα突变质粒(TNFα△12，去除TACE的酶切位点，50ng/孔)。过夜后与不同浓度的抗TNF-ADC孵育，24h后用Bright-Glo(promega)检测试剂检测报告基因系统中荧光酶的表达。
3、测试结果
测试结果如表2、图2所示。
表2抗TNF-ADC在膜结合型TNFα介导的GRE报告基因系统中的活性
hTNF△12 Humira-A-B00 Humira-3-B00 Humira-4-B00
EC 50(nM) 0.84 7.4 0.55
测试例4：抗TNF-ADC在脂多糖(LPS)刺激人单核细胞分泌细胞因子实验中的活性
使用EsaySep TM人CD14分选试剂盒从冻存原代人外周血PBMC中分选并富集单核细胞，铺板于96孔板。将单核细胞与不同浓度的抗TNF-ADC在37℃，5％CO 2条件下共孵育4小时后，用0.01ng/mL LPS刺激过夜。第二天收集培养基上清并用alpha LISA(cisbio)检测IL-6的浓度。
与阿达木单抗(Humira)相比，本公开的ADC在高浓度(4-100nM)时有效抑制LPS诱导的IL-6分泌(如图3所示)。另外，4nM的Humira-3-B00与Humira-4-B00的抗炎活性显著强于该浓度下的对照ADC分子Humira-A-B00(如图4所示)。
测试例5：小鼠胶原抗体诱导的关节炎(CAIA)模型
试验动物：
雄性balb/c小鼠，6w，购自上海市计划生育科学研究所实验动物经营部。饲养环境：SPF；生产许可证:SCXK(沪)2018-0006；Balb/c小鼠合格证编号：20180006023393。
待测样品：
Humira-3-B00、Humira-4-B00、Humira-A-B00。
试验方法：
试验动物到达后适应性饲养7天，随机分组。第0天，各组小鼠除对照组外，均腹腔注射II型胶原抗体混合物(购自Chondrex公司)1.5mg/只造模。第3天，各组小鼠除对照组外，腹腔注射LPS 50μg/只(100μL)以增强免疫反应。从第5天开始对各组小鼠进行给药处理，同时每1-3天进行四肢关节炎评分。具体实验流程如图5所示。通过以下给药方案给药小鼠，对各组小鼠每1-3天进行关节炎 病情严重程度半定量计分，进而评估抗TNF-ADC的抗炎活性。
表3：给药方案
试验结果：
Humira在CAIA模型中的抗炎活性较弱，Humira-4-B00的起效快(从第5天开始)，并能持久地降低关节炎炎症。对照ADC分子Humira-A-B00仅在关节炎进程后期(从第11天起)显示出对关节炎的缓解作用(如图6所示)。从关节炎造模后的第8天至第14天，Humira-4-B00相比模型组显著降低小鼠关节炎评分(*,p<0.05)，而对照ADC分子Humira-A-B00的抑炎活性相对模型组没有达到显著性差异(如图7所示)。
测试例6：迟发型超敏反应(DTH)模型
试验动物：
雄性ICR小鼠，6w，购自上海市计划生育科学研究所实验动物经营部。饲养环境：SPF；生产许可证:SCXK(沪)2018-0006，合格证编号：20180006023622。
待测样品：
Humira-3-B00、Humira-4-B00、Humira-A-B00、Humira-A-A00(根据WO2017210471实例2和WO2019106609实例7制备)。
测试方法：
动物到达后适应性饲养7天，随机分组。第0天，小鼠腹部去毛后涂抹1％DNFB(2，4二硝基氟苯)溶液50μL进行免疫，第5天时，在小鼠右耳内外侧分别涂抹0.5％的DNFB溶液10μL(共20μL)进行激发，第6天(24h后)处死小鼠，使用打孔器取下双侧直径8mm耳片称重。各组小鼠分别于第0天和第4天进行给药处理。具体实验流程如图8所示。通过以下给药方案给药小鼠，称重小鼠对照侧及造模侧耳片重量(提示肿胀度)，用于评估抗TNF-ADC的抗炎活性。
表4：给药方案
测试结果：
各组小鼠未经处理的左耳重量之间没有差异。Humira-4-B00与阳性对照Humira-A-B00在该模型中的抑炎活性相当，Humira-3-B00的抑炎活性稍弱，但仍然显著强于Humira单抗(如图9所示)。
测试例7：ADC样品在血浆中的稳定性
待测样品：
Humira-3-B00、Humira-4-B00、Humira-A-B00、Humira-A-A00。
试验血浆：
人、食蟹猴、大鼠、小鼠以及1％BSA
试验方法：
将受试分子以PBS配置成1mg/mL溶液，并0.22μm滤膜过滤除菌。将15μL 1mg/mL样品加入135μL反应基质中，使终浓度为100μg/mL。37℃避光孵育0天、7天、14天、21天，样品检测游离毒素。
数据见表5。
表5：血浆稳定性数据
在100μg/mL的浓度下，Humira-3-B00、Humira-4-B00在人、食蟹猴、小鼠、大鼠血浆以及1％BSA中显示出优秀的稳定性，游离毒素均小于检测下限；Humira-A-A00在大鼠血浆中有少许的游离毒素释放；Humira-A-B00在大鼠和小鼠血浆中有少许的游离毒素。

Claims (23)

  1. 式(I)所示的抗体-药物偶联物，
    Ab-(L-D) k
    (I)
    其中，Ab为抗体或其抗原结合片段，
    L为将Ab共价连接于D的连接子，且k为1至20，
    D如下式(II-A)或(II-B)所示：
    其中，
    表示单键或双键；
    R 1a各自独立地选自氢、烷基和烷氧基，所述的烷基和烷氧基各自独立地任选被选自烷基、烷氧基、卤素、氘、氨基、氰基、硝基、羟基和羟烷基中的一个或多个取代基所取代，优选R 1a各自独立地选自氢、C 1-C 6烷基和C 1-C 6烷氧基；
    环A为任选被一个或多个取代基Q 1所取代的芳基或杂芳基；
    环B为任选被一个或多个取代基Q 1所取代的芳基或杂芳基；
    X 1为-(CR 5aR 5b)m-或任选被一个或多个取代基Q 1所取代的芳基或杂芳基；
    R 5a和R 5b各自独立地选自氢、卤素、羟基、巯基、氘、硝基、氰基和任选被一个或多个取代基Q 1所取代的下述基团：烷基、-NR iR j、-C(O)R k、-C(O)OR k、-S(O)R k、-S(O)OR k、-S(O)(O)R k、-S(O)(O)OR k、-C(S)R k、烷氧基、烷硫基、烯基和炔基，或者R 5a和R 5b一起形成氧代或硫代；
    环C和环D各自独立地选自任选被一个或多个取代基Q 1所取代的芳基和杂芳基，且环C和环D中至少有一个为任选被一个或多个取代基Q 1所取代的稠环芳基或稠杂芳基；
    X 2选自-(CR 6aR 6b)n-、任选被一个或多个取代基Q 1所取代的芳基或杂芳基、-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)(O)-、-NR 6c-、-CH 2S-、-CH 2O-、-NHCR 6dR 6e-、-CR 6f＝CR 6g-和-C≡C-，或者X 2不存在；
    R 6a和R 6b各自独立地选自氢、卤素、羟基、巯基、氘、硝基、氰基和任选被一个或多个取代基Q 1所取代的下述基团：烷基、-NR iR j、-C(O)R k、-C(O)OR k、-S(O)R k、-S(O)OR k、-S(O)(O)R k、-S(O)(O)OR k、-C(S)R k、烷氧基、烷硫基、烯基和炔基，或者R 6a、R 6b与其相连的碳原子一起形成3元至10元环烷基，或者R 6a和R 6b一 起形成氧代或硫代；
    R 6c、R 6d、R 6e、R 6f和R 6g各自独立地选自氢、C 1-C 6烷基、C 1-C 6卤代烷基和C 1-C 6烷氧基；
    R 1各自独立地选自氢、烷基和烷氧基，其中所述的烷基和烷氧基各自独立地任选被选自烷基、烷氧基、卤素、氘、氨基、氰基、硝基、羟基和羟烷基中的一个或多个取代基所取代，优选R 1各自独立地选自氢、C 1-C 6烷基和C 1-C 6烷氧基，更优选氢；
    R 2各自独立地选自-CH 2OH、-CH 2SH、-CH 2Cl、-SCH 2Cl、-SCH 2F、-SCH 2CF 3、-OH、-OCH 2CN、-OCH 2Cl、-OCH 2F、-OCH 3、-OCH 2CH 3、-SCH 2CN、
    R 2a各自独立地为氢或C 1-C 6烷基；
    R 2b各自独立地为C 1-C 6烷基或C 1-C 6烷氧基；
    R 2c各自独立地选自氢、C 1-C 6烷基、-CH 2OH和C 1-C 6烷氧基；
    R 2d和R 2e各自独立地为氢或C 1-C 6烷基；
    R 3各自独立地为氢或卤素；
    R 4各自独立地选自氢、卤素和羟基，优选R 4各自独立地为氢；
    m和n各自独立地为1至6的整数；
    取代基团Q 1各自独立地选自C 1-C 6烷基、卤素、氘、羟基、巯基、-NR iR j、氧代、硫代、-C(O)R k、-C(O)OR k、-S(O)R k、-S(O)OR k、-S(O)(O)R k、-S(O)(O)OR k、-C(S)R k、硝基、氰基、C 1-C 6烷氧基、C 1-C 6烷硫基、C 2-C 6烯基、C 2-C 6炔基、3至10元环烷基、3至10元杂环基、6至10元芳基、5至10元杂芳基、8至12元稠环芳基和5至12元稠杂芳基，优选Q 1各自独立地选自卤素、羟基、巯基、氘、氧代、硫代、氰基、氨基、羧基、C 1-C 6烷基和C 1-C 6烷氧基；
    R i和R j各自独立地选自氢原子、羟基、C 1-C 6烷基和C 1-C 6烷氧基；
    R k各自独立地选自氢原子、C 1-C 6烷基、C 1-C 6卤代烷基、C 1-C 6烷氧基、羟基和-NR iR j，其中所述的烷基、烷氧基和卤代烷基各自独立地任选被选自C 1-C 6烷基、卤素、羟基、巯基、-NR iR j、氧代、硫代、羧基、硝基、氰基、C 1-C 6烷氧基、C 1-C 6烷硫基、C 2-C 6烯基、C 2-C 6炔基、3至10元环烷基、3至10元杂环基、6至10元芳基和5至10元杂芳基中的一个或多个取代基所取代，优选R k各自独立地选自氢原子、C 1-C 6烷基、C 1-C 6卤代烷基、C 1-C 6烷氧基、羟基和-NR iR j；且
    条件是当R 5a为氢或烷基时，R 5b不为氢或烷基。
  2. 根据权利要求1所述的抗体-药物偶联物，其中环A为任选被一个或多个取代基Q 1所取代的6至10元芳基或5至10元杂芳基，所述杂芳基包含至少一个氮原子，优选环A为任选被一个或多个取代基Q 1所取代的
  3. 根据权利要求1或2所述的抗体-药物偶联物，其中环B为任选被一个或多个取代基Q 1所取代的6至10元芳基或5至10元杂芳基，所述杂芳基包含至少一个氮原子，优选环B为任选被一个或多个取代基Q 1所取代的
  4. 根据权利要求1-3中任意一项所述的抗体-药物偶联物，其中X 1为-(CR 5aR 5b)m-或任选被一个或多个取代基Q 1所取代的6至10元芳基或5至10元杂芳基，所述杂芳基包含至少一个氮原子，优选R 5a和R 5b各自独立地选自氢、卤素、羟基、巯基、氘、氰基和任选被一个或多个取代基Q 1所取代的下述基团：C 1-C 6烷基、-NR iR j、-C(O)R k、-C(O)OR k、-S(O)R k、-S(O)OR k、-S(O)(O)R k、-S(O)(O)OR k、C 1-C 6烷氧基、C 1-C 6烷硫基、C 2-C 6烯基和C 2-C 6炔基，更优选R 5a和R 5b各自独立地选自氢、卤素、羟基、巯基、氘、氰基和任选被一个或多个取代基Q 1所取代的下述基团：C 1-C 6烷基、-NR iR j、-C(O)R k、-C(O)OR k、-S(O)R k、-S(O)(O)R k、C 1-C 6烷氧基、C 2-C 6烯基和C 2-C 6炔基，最优选R 5a和R 5b各自独立地选自氢、卤素、羟基、巯基、氘、氰基和任选被一个或多个取代基Q 1所取代的下述基团：C 1-C 6烷基、-NR iR j、-C(O)R k、-C(O)OR k和C 1-C 6烷氧基，或者R 5a和R 5b一起形成氧代或硫代。
  5. 根据权利要求1-4中任意一项所述的抗体-药物偶联物，其中环C和环D各自独立地选自任选被一个或多个取代基Q 1所取代的6至10元芳基、5至10元杂芳基、8至12元稠环芳基或5至12元稠杂芳基，所述杂芳基或稠杂芳基包含至少一个氮原子，优选环C和环D各自独立地选自任选被一个或多个取代基Q 1所取代的下述基团：
    更优选环C选自任选被一个或多个取代基Q 1所取代的： 且环D为任选被一个或多个取代基Q 1所取代的
  6. 根据权利要求1-5中任意一项所述的抗体-药物偶联物，其中X 2选自-(CR 6aR 6b)n-、-O-、-S-、-NR 6c-、-CH 2S-、-CH 2O-、-NHCR 6dR 6e-和任选被一个或多个取代基Q 1所取代的6至10元芳基或5至10元杂芳基，所述杂芳基包含至少一个氮原子，优选R 6a和R 6b各自独立地选自氢、卤素、羟基、巯基、氘、氰基和任选被一个或多个取代基Q 1所取代的下述基团：C 1-C 6烷基、-NR iR j、-C(O)R k、-C(O)OR k、-S(O)R k、-S(O)(O)R k、C 1-C 6烷氧基、C 2-C 6烯基和C 2-C 6炔基，或者R 6a、R 6b与其相连的碳原子一起形成3元至10元环烷基，更优选R 6a和R 6b各自独立地选自氢、卤素、羟基、巯基、氘、氰基和任选被一个或多个取代基Q 1所取代的下述基团：C 1-C 6烷基、-NR iR j、-C(O)R k、-C(O)OR k和C 1-C 6烷氧基。
  7. 根据权利要求1所述的抗体-药物偶联物，其中D如下式(II-A’)或(II-B’)所示：
    其中，
    R 1a各自独立地选自氢、C 1-C 6烷基和C 1-C 6烷氧基，优选氢；
    环A为 所述环A任选被一个或多个取代基Q 1所取代；
    环B为 所述环B任选被一个或多个取代基Q 1所取代；
    X 1为-(CR 5aR 5b)m-或任选被一个或多个取代基Q 1所取代的6至10元芳基或5至10元杂芳基，所述杂芳基包含至少一个氮原子；
    R 5a和R 5b各自独立地选自氢、卤素、羟基、巯基、氘、氰基和任选被一个或多个取代基Q 1所取代的下述基团：C 1-C 6烷基、-NR iR j、-C(O)R k、-C(O)OR k和C 1-C 6烷氧基，或者R 5a和R 5b一起形成氧代或硫代；
    环C选自 所述环C任选被一个或多个取代基Q 1所取代；
    环D为 所述环D任选被一个或多个取代基Q 1所取代；
    X 2选自-(CR 6aR 6b)n-、-O-、-S-、-NR 6c-、-CH 2S-、-CH 2O-、-NHCR 6dR 6e-和任选被一个或多个取代基Q 1所取代的6至10元芳基或5至10元杂芳基；
    R 6a和R 6b各自独立地选自氢、卤素、羟基、巯基、氘、氰基和任选被一个或多个取代基Q 1所取代的下述基团：C 1-C 6烷基、-NR iR j、-C(O)R k、-C(O)OR k和C 1-C 6烷氧基；
    R 6c、R 6d和R 6e各自独立地选自氢、C 1-C 6烷基、C 1-C 6卤代烷基和C 1-C 6烷氧基；
    R 2各自独立地选自-CH 2OH、-CH 2SH、-CH 2Cl、-SCH 2Cl、-SCH 2F、-SCH 2CF 3、-OH、-OCH 2CN、-OCH 2Cl、-OCH 2F、-OCH 3、-OCH 2CH 3、-SCH 2CN、
    R 2a各自独立地为氢或C 1-C 6烷基；
    R 2b各自独立地为C 1-C 6烷基或C 1-C 6烷氧基；
    R 2c各自独立地选自氢、C 1-C 6烷基、-CH 2OH和C 1-C 6烷氧基；
    R 2d和R 2e各自独立地为氢或C 1-C 6烷基，
    优选R 2各自独立地选自-CH 2OH、-CH 2SH、-OH和
    R 3各自独立地为氢或卤素，优选R 3各自独立地为氢或氟；
    m和n各自独立地为1至6的整数；
    取代基团Q 1各自独立地选自卤素、羟基、巯基、氘、氧代、硫代、氰基、氨基、羧基、C 1-C 6烷基和C 1-C 6烷氧基；
    R i和R j各自独立地选自氢原子、羟基、C 1-C 6烷基和C 1-C 6烷氧基；
    R k独立地选自氢原子、C 1-C 6烷基、C 1-C 6卤代烷基、C 1-C 6烷氧基、羟基和-NR iR j；且
    条件是当R 5a为氢或烷基时，R 5b不为氢或烷基。
  8. 根据权利要求1-7中任意一项所述的抗体-药物偶联物，其中X 1为-(CR 5aR 5b)m-，R 5a和R 5b均为氟，m为1、2或3，优选1；或
    X 1为-(CR 5aR 5b)m-，R 5a和R 5b一起形成氧代或硫代，优选氧代，m为1、2或3，优选1；或
    X 1选自任选被一个或多个取代基Q 1所取代的 优选
  9. 根据权利要求1-8中任意一项所述的抗体-药物偶联物，其中X 2选自 -(CR 6aR 6b)n-、任选被一个或多个取代基Q 1所取代的： 优选R 6a和R 6b各自独立地选自氢、卤素、羟基、巯基、氘、氰基、C 1-C 6烷基、-NR iR j、-C(O)OR k和C 1-C 6烷氧基。
  10. 根据权利要求1-9中任意一项所述的抗体-药物偶联物，其中k为1-10，优选2-5。
  11. 根据权利要求1-10中任意一项所述的抗体-药物偶联物，其中所述连接子包含氨基酸单元L 1，所述氨基酸单元L 1优选包含由2至7个选自苯丙氨酸、甘氨酸、缬氨酸、赖氨酸、瓜氨酸、丝氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、高赖氨酸、n-甲基-缬氨酸、 的氨基酸构成的肽残基，q为1-6的整数，更优选缬氨酸-瓜氨酸(Val-Cit)、丙氨酸-苯丙氨酸(Ala-Phe)；苯丙氨酸-赖氨酸(Phe-Lys)、苯丙氨酸-高赖氨酸(Phe-Homolys)、n-甲基-缬氨酸-瓜氨酸(Me-Val-Cit)、丙氨酸-丙氨酸(Ala-Ala)、甘氨酸-谷氨酸(Gly-Glu)、谷氨酸-丙氨酸-丙氨酸(Glu-Ala-Ala)和甘氨酸-赖氨酸(Gly-Lys)、甘氨酸-缬氨酸-瓜氨酸(Glv-Val-Cit)、甘氨酸-甘氨酸-甘氨酸(Gly-Gly-Gly)和 最优选甘氨酸-谷氨酸(Gly-Glu)、
  12. 根据权利要求1-11中任意一项所述的抗体-药物偶联物，其中所述连接子包含拉伸单元，优选所述拉伸单元选自
    其中p各自独立地为1、2、3、4、5或6。
  13. 根据权利要求1-12中任意一项所述的抗体-药物偶联物，其中所述连接子选自
  14. 根据权利要求1-13中任意一项所述的抗体-药物偶联物，其选自：
    其中，p各自独立地为1、2、3、4、5或6，Ab、D和k如权利要求1中所定义。
  15. 根据权利要求1所述的抗体-药物偶联物，其选自
    k为1至10，Ab如权利要求1中所定义。
  16. 根据权利要求1-15中任意一项所述的抗体-药物偶联物，其中所述抗体选自鼠源抗体、嵌合抗体、人源化抗体和全人源抗体。
  17. 根据权利要求1-16中任意一项所述的抗体-药物偶联物，其中抗体或其抗原结合片段选自抗TNFα抗体、抗IL-4R抗体、抗IL-6/IL-6R抗体、抗IL-13R抗体、抗IL-17/IL-17R抗体、抗IL-23/IL23R抗体、抗IL-36R抗体、抗CD20抗体、抗CD22抗体、抗CD28抗体、抗CD40抗体、抗TSLP抗体或其抗原结合片段，优选阿达木单抗、英利昔单抗、赛妥珠单抗、阿非莫单抗、奈瑞莫单抗、奥左拉珠单抗、普拉库鲁单抗、戈利木单抗或其抗原结合片段，更优选阿达木单抗。
  18. 一种式(III-A)或(III-B)所示化合物或其可药用盐，
    其中，
    表示单键或双键；
    环A为任选被一个或多个取代基Q 1所取代的芳基或杂芳基；
    环B为任选被一个或多个取代基Q 1所取代的芳基或杂芳基；
    X 1为-(CR 5aR 5b)m-或任选被一个或多个取代基Q 1所取代的芳基或杂芳基；
    R 5a和R 5b各自独立地选自氢、卤素、羟基、巯基、氘、硝基、氰基和任选被一个或多个取代基Q 1所取代的下述基团：烷基、-NR iR j、-C(O)R k、-C(O)OR k、-S(O)R k、-S(O)OR k、-S(O)(O)R k、-S(O)(O)OR k、-C(S)R k、烷氧基、烷硫基、烯基和炔基，或者R 5a和R 5b一起形成氧代或硫代；
    环C和环D各自独立地选自任选被一个或多个取代基Q 1所取代的芳基和杂芳基或稠杂芳基，且环C和环D中至少有一个为任选被一个或多个取代基Q 1所取代的稠环芳基或稠杂芳基；
    X 2选自-(CR 6aR 6b)n-、任选被一个或多个取代基Q 1所取代的芳基或杂芳基、-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)(O)-、-NR 6c-、-CH 2S-、-CH 2O-、-NHCR 6dR 6e-、-CR 6f＝CR 6g-和-C≡C-，或者X 2不存在；
    R 6a和R 6b各自独立地选自氢、卤素、羟基、巯基、氘、硝基、氰基和任选被一个或多个取代基Q 1所取代的下述基团：烷基、-NR iR j、-C(O)R k、-C(O)OR k、-S(O)R k、-S(O)OR k、-S(O)(O)R k、-S(O)(O)OR k、-C(S)R k、烷氧基、烷硫基、烯基和炔基，或者R 6a、R 6b与其相连的碳原子一起形成3元至10元环烷基；
    R 6c、R 6d、R 6e、R 6f和R 6g各自独立地选自氢、C 1-C 6烷基、C 1-C 6卤代烷基和C 1-C 6烷氧基；
    R 1各自独立地选自氢、烷基和烷氧基，其中所述的烷基和烷氧基各自独立地任选被选自烷基、烷氧基、卤素、氘、氨基、氰基、硝基、羟基和羟烷基中的一个或多个取代基所取代；
    R 2各自独立地选自-CH 2OH、-CH 2SH、-CH 2Cl、-SCH 2Cl、-SCH 2F、-SCH 2CF 3、-OH、-OCH 2CN、-OCH 2Cl、-OCH 2F、-OCH 3、-OCH 2CH 3、-SCH 2CN、
    R 2a各自独立地为氢或C 1-C 6烷基；
    R 2b各自独立地为C 1-C 6烷基或C 1-C 6烷氧基；
    R 2c各自独立地选自氢、C 1-C 6烷基、-CH 2OH和C 1-C 6烷氧基；
    R 2d和R 2e各自独立地为氢或C 1-C 6烷基；
    R 3各自独立地为氢或卤素；
    R 4各自独立地选自氢、卤素和羟基；
    m和n各自独立地选自1至6的整数；
    取代基团Q 1各自独立地选自C 1-C 6烷基、卤素、氘、羟基、巯基、-NR iR j、氧代、硫代、-C(O)R k、-C(O)OR k、-S(O)R k、-S(O)OR k、-S(O)(O)R k、-S(O)(O)OR k、-C(S)R k、硝基、氰基、C 1-C 6烷氧基、C 1-C 6烷硫基、C 2-C 6烯基、C 2-C 6炔基、3至10元环烷基、3至10元杂环基、6至10元芳基、5至10元杂芳基、8至12元稠环芳基和5至12元稠杂芳基；
    R i和R j各自独立地选自氢原子、羟基、C 1-C 6烷基和C 1-C 6烷氧基；
    R k独立地选自氢原子、C 1-C 6烷基、C 1-C 6卤代烷基、C 1-C 6烷氧基、羟基和-NR iR j，其中所述的烷基、烷氧基和卤代烷基各自独立地任选被选自C 1-C 6烷基、卤素、羟基、巯基、-NR iR j、氧代、硫代、羧基、硝基、氰基、C 1-C 6烷氧基、C 1-C 6烷硫基、C 2-C 6烯基、C 2-C 6炔基、3至10元环烷基、3至10元杂环基、6至10元芳基和5至10元杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
    R 1a各自独立地选自氢、烷基和烷氧基，所述的烷基和烷氧基各自独立地任选被选自烷基、烷氧基、卤素、氘、氨基、氰基、硝基、羟基和羟烷基中的一个或多个取代基所取代；
    R 1b各自独立地选自氢、PG-、H-L 1-、PG-L 1-、 或者
    R 1a和R 1b与其相连的氮原子一起形成： 或者R 1a和R 1b与其相连的氮原子一起形成硝基基团；
    p各自独立地为1、2、3、4、5或6；
    L 1是氨基酸单元，优选-甘氨酸-谷氨酸-或
    X为卤素；
    PG为氨基保护基；且
    条件是当R 5a为氢或烷基时，R 5b不为氢或烷基。
  19. 根据权利要求18所述的化合物或其可药用盐，其为式(III-A’)或(III-B’)所示化合物或其可药用盐：
    其中，
    环A为 所述环A任选被一个或多个取代基Q 1所取代；
    环B为 所述环B任选被一个或多个取代基Q 1所取代；
    X 1为-(CR 5aR 5b)m-或任选被一个或多个取代基Q 1所取代的6至10元芳基或5至10元杂芳基，所述杂芳基包含至少一个氮原子；
    R 5a和R 5b各自独立地选自氢、卤素、羟基、巯基、氘、氰基和任选被一个或多个取代基Q 1所取代的下述基团：C 1-C 6烷基、-NR iR j、-C(O)R k、-C(O)OR k和C 1-C 6烷氧基，或者R 5a和R 5b一起形成氧代或硫代；
    环C选自 所述环C任选被一个或多个取代基Q 1所取代；
    环D为 所述环D任选被一个或多个取代基Q 1所取代；
    X 2选自-(CR 6aR 6b)n-、-O-、-S-、-NR 6c-、-CH 2S-、-CH 2O-、-NHCR 6dR 6e-和任选被一个或多个取代基Q 1所取代的6至10元芳基或5至10元杂芳基；
    R 6a和R 6b各自独立地选自氢、卤素、羟基、巯基、氘、氰基和任选被一个或多个取代基Q 1所取代的下述基团：C 1-C 6烷基、-NR iR j、-C(O)R k、-C(O)OR k和C 1-C 6烷氧基；
    R 6c、R 6d和R 6e各自独立地选自氢、C 1-C 6烷基、C 1-C 6卤代烷基和C 1-C 6烷氧基；
    R 2各自独立地选自-CH 2OH、-CH 2SH、-CH 2Cl、-SCH 2Cl、-SCH 2F、-SCH 2CF 3、-OH、-OCH 2CN、-OCH 2Cl、-OCH 2F、-OCH 3、-OCH 2CH 3、-SCH 2CN、
    R 2a各自独立地为氢或C 1-C 6烷基；
    R 2b各自独立地为C 1-C 6烷基或C 1-C 6烷氧基；
    R 2c各自独立地选自氢、C 1-C 6烷基、-CH 2OH和C 1-C 6烷氧基；
    R 2d和R 2e各自独立地为氢或C 1-C 6烷基；
    R 3各自独立地为氢或卤素；
    m和n各自独立地为1至6的整数；
    取代基团Q 1各自独立地选自卤素、羟基、巯基、氘、氧代、硫代、氰基、氨基、羧基、C 1-C 6烷基和C 1-C 6烷氧基；
    R i和R j各自独立地选自氢原子、羟基、C 1-C 6烷基和C 1-C 6烷氧基；
    R k独立地选自氢原子、C 1-C 6烷基、C 1-C 6卤代烷基、C 1-C 6烷氧基、羟基和-NR iR j；
    R 1a各自独立地选自氢、C 1-C 6烷基和C 1-C 6烷氧基；
    R 1b各自独立地选自氢、PG-、H-L 1-、PG-L 1-、
    p各自独立地为1、2、3、4、5或6；
    L 1是氨基酸单元，优选-甘氨酸-谷氨酸-或
    X为卤素；
    PG为氨基保护基；且
    条件是当R 5a为氢或烷基时，R 5b不为氢或烷基。
  20. 根据权利要求18所述的化合物或其可药用盐，其选自
    或其可药用盐。
  21. 根据权利要求18所述的化合物或其可药用盐，其选自
    或其可药用盐，其中X为卤素，优选氯或溴，更优选溴。
  22. 一种药物组合物，其包含根据权利要求1-17中任意一项所述的抗体-药物偶联物或根据权利要求18-21中任意一项所述的化合物或其可药用盐以及药学上可接受的赋形剂。
  23. 根据权利要求1-17中任意一项所述的抗体-药物偶联物或根据权利要求22所述的药物组合物在制备用于治疗免疫性疾病的药物中的用途，所述免疫性疾病优选自类风湿性关节炎、幼年特发性关节炎、银屑病性关节炎、强直性脊柱炎、成人克罗恩病、小儿克罗恩病、溃疡性结肠炎、化脓性汗腺炎、葡萄膜炎、白塞病、脊柱关节病和银屑病。
CN202280009295.1A 2021-02-04 2022-01-28 糖皮质激素受体激动剂的药物偶联物及其在医药上的应用 Pending CN116761820A (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110166634 2021-02-04
CN2021101666344 2021-02-04
PCT/CN2022/074455 WO2022166779A1 (zh) 2021-02-04 2022-01-28 糖皮质激素受体激动剂的药物偶联物及其在医药上的应用

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN116761820A true CN116761820A (zh) 2023-09-15

Family

ID=82741941

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202280009295.1A Pending CN116761820A (zh) 2021-02-04 2022-01-28 糖皮质激素受体激动剂的药物偶联物及其在医药上的应用

Country Status (6)

Country Link
EP (1) EP4289857A1 (zh)
JP (1) JP2024506012A (zh)
CN (1) CN116761820A (zh)
CA (1) CA3207416A1 (zh)
TW (1) TW202245796A (zh)
WO (1) WO2022166779A1 (zh)

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2023025248A1 (zh) * 2021-08-26 2023-03-02 映恩生物制药（苏州）有限公司 一种甾体化合物及其缀合物
TW202327620A (zh) * 2021-09-14 2023-07-16 大陸商映恩生物製藥（蘇州）有限公司 一種抗炎症的化合物及其用途
TW202340252A (zh) * 2022-01-29 2023-10-16 大陸商上海盛迪醫藥有限公司 糖皮質激素的藥物偶聯物
WO2023235738A1 (en) * 2022-06-02 2023-12-07 Eli Lilly And Company Human interleukin-4 receptor alpha antibody glucocorticoid conjugates

Family Cites Families (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5208020A (en) 1989-10-25 1993-05-04 Immunogen Inc. Cytotoxic agents comprising maytansinoids and their therapeutic use
WO2005028495A1 (en) * 2003-09-24 2005-03-31 Glaxo Group Limited Anti-inflammatory glucocorticoids
DK1725249T3 (en) 2003-11-06 2014-03-17 Seattle Genetics Inc Monomethylvaline compounds capable of conjugating to ligands.
RU2010133722A (ru) * 2008-02-27 2012-04-10 Астразенека Аб (Se) 16-альфа, 17-альфа-ацетальглюкокортикостероидные производные и их применение
EP2791171A1 (en) 2011-12-16 2014-10-22 Synthon Biopharmaceuticals B.V. EXPRESSION OF SECRETORY IgA ANTIBODIES IN DUCKWEED
CA2898676A1 (en) 2013-03-15 2014-09-25 Abbvie, Inc. Improved tnf binding proteins
US20150139988A1 (en) 2013-11-15 2015-05-21 Abbvie, Inc. Glycoengineered binding protein compositions
CA3025377A1 (en) 2016-06-02 2017-12-07 Abbvie Inc. Glucocorticoid receptor agonist and immunoconjugates thereof
JP7330101B2 (ja) * 2016-11-08 2023-08-21 レゲネロン ファーマシューティカルス，インコーポレーテッド ステロイド及びそのタンパク質コンジュゲート
PE20201286A1 (es) * 2017-12-01 2020-11-24 Abbvie Inc Agonista del receptor de glucocorticoides e inmunoconjugados de este
CN111465399A (zh) * 2017-12-01 2020-07-28 艾伯维公司 抗cd40抗体药物结合物
CA3086926A1 (en) * 2018-01-08 2019-07-11 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Steroids and antibody-conjugates thereof

Also Published As

Publication number Publication date
JP2024506012A (ja) 2024-02-08
WO2022166779A1 (zh) 2022-08-11
CA3207416A1 (en) 2022-08-11
TW202245796A (zh) 2022-12-01
EP4289857A1 (en) 2023-12-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN112543771B (zh) 抗b7h3抗体-依喜替康类似物偶联物及其医药用途
WO2022166779A1 (zh) 糖皮质激素受体激动剂的药物偶联物及其在医药上的应用
WO2021147993A1 (zh) 抗trop-2抗体-依喜替康类似物偶联物及其医药用途
CN112125915A (zh) 一种喜树碱衍生物及其偶联物
AU2020288275A1 (en) Anti-B7-H4 antibody–drug conjugate and medicinal use thereof
TW201801749A (zh) 糖皮質素受體促效劑及其免疫結合物
AU2021317378A1 (en) Anti-CD79B antibody-drug conjugate, and preparation method therefor and pharmaceutical use thereof
WO2021115426A1 (zh) 抗密蛋白抗体药物偶联物及其医药用途
PT1248804E (pt) Anticorpos contra il-1b humana
CN110090306B (zh) 双醛连接臂的配体-药物偶联物、其制备方法及其应用
WO2021058027A1 (zh) 吡咯并杂芳基衍生物或其偶联物、其制备方法及其应用
CN113121639B (zh) 澳瑞他汀类似物及其偶联物、其制备方法及其应用
CN117500816A (zh) 一种甾体化合物及其缀合物
US20240189438A1 (en) Drug conjugate of glucocorticoid receptor agonist, and application thereof in medicine
CN114652853A (zh) 抗il-4r抗体-药物偶联物及医药用途
WO2023143351A1 (zh) 糖皮质激素的药物偶联物
CN113082224A (zh) 吡啶并嘧啶类衍生物偶联物、其制备方法及其在医药上的应用
WO2023001300A1 (zh) 艾日布林衍生物的药物偶联物
CN115845080A (zh) 艾日布林衍生物-抗叶酸受体抗体偶联物
CN117645608A (zh) 抗体药物偶联物及其应用
TW202404647A (zh) 抗體藥物偶聯物及其製備方法和用途
CN117015549A (zh) 一种喜树碱衍生物的制备方法
CN118103359A (zh) 一种艾日布林衍生物的制备方法
TW202327619A (zh) 一種甾體化合物及其綴合物
CN115998900A (zh) 抗trop-2抗体药物偶联物及其医药用途

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
REG Reference to a national code

Ref country code: HK

Ref legal event code: DE

Ref document number: 40100299

Country of ref document: HK