CN116747255A - 火麻止痛凝胶及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了火麻止痛凝胶及其制备方法。所述火麻止痛凝胶由火麻叶醇提物、火麻叶水提物、羧甲基纤维素钠及甘油制成。本发明的火麻止痛凝胶具有缓解软组织疼痛的功效，且对大鼠一般生理情况和肝肾功能无明显影响，效果同阳性对照药布洛芬凝胶相似。火麻止痛凝胶对家兔完整皮肤和破损皮肤均无刺激性。与空白基质和火麻止痛凝胶相比，布洛芬凝胶对家兔完整皮肤和破损皮肤均有刺激性，刺激强度为轻度。

Description

火麻止痛凝胶及其制备方法
技术领域
本发明属于生物医药领域，具体涉及火麻止痛凝胶及其制备方法。
背景技术
疼痛是患者就医的最常见原因之一。按美国疼痛学会报告，慢性疼痛在美影响到其总人口的35.5％即1.05亿人，年疼痛相关直接医疗卫生费用支出和因工作时间丧失所致成本合计超过1000亿美元。
疼痛治疗现仍主要依赖早先的那些具有止痛性质的药物，特别是对乙酰氨基酚(acetaminophen)和阿司匹林(aspirin)等非麻醉性止痛药物、阿片类麻醉性止痛药物和非甾体抗炎药物。全球各类疼痛治疗药物中主要药物有OxyContin/控释羟考酮口服制剂(oxycodone)、Remoxya)/长效羟考酮口服制剂(oxycodone)、Embeda/吗啡-纳曲酮复合口服制剂(morphine-naltrexone)、Lidoderm/5％利多卡因贴膏、Duragesic/经皮芬太尼贴膏(fentanyl)、(Ofirmeva)/静脉输注用对乙酰氨基酚(acetaminophen)、Lyrica/普瑞巴林(pregabalin)、Cymbalta/度洛西汀(duloxetine)、Savella/米那普仑(milnacipran)。阿片类药物至今仍被认定是最有效的严重疼痛治疗药物，且在疼痛治疗市场上占有主要份额，其中强效阿片类药物29％，非甾体抗炎药物28％，抗惊厥药物13％，抗抑郁药物11％，弱效阿片类药物7％，选择性环氧化酶-2抑制剂7％，局部麻醉药物％5。
但阿片类药物有呼吸抑制等严重副反应，同时存在成瘾性、滥用、误用和被转用于娱乐目的等潜在问题。为此，美国FDA于2009年2月发布通告要求，强效阿片类药物的制造商应贯彻、执行“风险评估及减轻策略”，尽力解决这些安全性风险。
中国每年因跌打损伤及骨性关节炎、老年退行性病变等引起的肌肉伤痛、关节疼痛等发病超过2亿人次。而PDB统计2019年医院市场镇痛类外用制剂的销售超过130亿元，药店等院外销售渠道可能远超这个数字。常见外用制剂以中药贴膏制剂为主，占比超过80％；如云南白药膏、消通贴膏等品种年销售超过10亿元；这些外用制剂多为橡胶膏、黑膏药，存在黑、粗、过敏、污染、使用不便等缺点。因此临床医疗仍需要疗效明确、安全性好、使用方便的外用制剂。
发明内容
为了改善现有阿片类药物呼吸抑制副反应，成瘾性、滥用、误用和被转用于娱乐目的等潜在问题，同时，通过剂型的改善解决现有制剂存在的过敏、污染、使用不方便、患者顺应性差等问题，本发明提供了一种来源于天然植物的药物及其以水性基质为载体的新制剂，即火麻止痛凝胶，为疼痛的治疗提供新的解决方案。
本发明所提供的火麻止痛凝胶由火麻叶醇提物、火麻叶水提物、羧甲基纤维素钠及甘油制成；
本发明所提供的火麻止痛凝胶通过包括如下步骤的方法制备得到：
1)火麻叶醇提物、火麻叶水提物的制备
火麻仁叶用乙醇提取，收集醇提液，回收乙醇至无醇味，得到浓缩后醇提液；醇提后的火麻仁叶用水提取，收集水提液，浓缩，得到浓缩后水提液；将浓缩后醇提液与浓缩后水提液合并，浓缩得到流浸膏；
2)将羧甲基纤维素钠与甘油混合，加水，得到基质；将步骤1)制得的流浸膏加入所得基质中，即得火麻止痛凝胶。
上述方法步骤1)中，所述乙醇提取包括加入质量浓度55％-65％乙醇水溶液，回流提取，其中，乙醇水溶液的体积与火麻仁叶的质量比为8：1-10：1，具体可为8：1；
优选的，乙醇水溶液的浓度可为60％；本发明中，所述乙醇的浓度均指体积浓度；
所述回流提取可进行多次，具体可为2次，每次0.5h；
本发明中，但凡涉及到质量与体积的比时，均指单位质量的量与单位体积的量的比，质量的单位为g时，体积的单位为ml；质量的单位为Kg时，体积的单位为l；以此类推。
所述水提取包括将醇提后的火麻仁叶加水，回流提取；其中，水的体积与醇提后的火麻仁叶的质量比可为8：1-10：1，具体可为8：1；
所述回流提取可进行多次，具体可为2次，每次0.5h；
所得流浸膏的浓度为4g生药/g(指1g流浸膏相当于4g生药(火麻仁叶))；
步骤2)中，流浸膏与羧甲基纤维素钠、甘油及水的质量比可为：200g(4g生药/g)：75g：625g：3100g；
制得的火麻止痛凝胶的载药量为5％，以流浸膏计。
由上述方法制得的火麻止痛凝胶在制备治疗疼痛的药物(止痛药)中的应用也属于本发明的保护范围。
所述疼痛具体可为软组织疼痛。
本发明的火麻止痛凝胶具有缓解软组织疼痛的功效，且对大鼠一般生理情况和肝肾功能无明显影响，效果同阳性对照药布洛芬凝胶相似。火麻止痛凝胶对家兔完整皮肤和破损皮肤均无刺激性。与空白基质和火麻止痛凝胶相比，布洛芬凝胶对家兔完整皮肤和破损皮肤均有刺激性，刺激强度为轻度。
本发明中的药物来自于工业大麻叶。工业大麻是指四氢大麻酚含量低于0.3％的大麻，中国将工业大麻称为汉麻(hemp)，是大麻科(Cannabinaceae)大麻属(Cannabis)一年生草本植物，，国内外广泛应用的大麻为工业大麻。药物有工业大麻叶醇提物和水提物共同组成。
本发明中的剂型选择的外用的水性凝胶剂，具有凝胶剂具有生物相容性好、吸收起效快、生物利用度高、制备工艺简单、稳定性好、质地均匀、涂展性好、易于使用、不污染衣物、外形美观等特点。
附图说明
图1为本发明实施例2造模结束后受伤和取材部位。
图2为本发明实施例2大鼠软组织病理切片HE染色结果。
图3为火麻止痛凝胶对家兔完整皮肤单剂量给药刺激反应(左侧：火麻止痛凝胶；右侧：空白基质)。
图4为火麻止痛凝胶对家兔破损皮肤单剂量给药刺激反应(左侧：火麻止痛凝胶；右侧：空白基质)。
图5为布洛芬凝胶对家兔完整皮肤单剂量给药刺激反应(第1只：左侧布洛芬凝胶；右侧空白基质。第2、3只：左侧火麻止痛凝胶；右侧布洛芬凝胶。
图6为为布洛芬凝胶对家兔破损皮肤单剂量给药刺激反应(左侧：布洛芬凝胶；右侧：空白基质)。
图7为布洛芬凝胶对家兔完整和破损皮肤单剂量给药刺激反应(左侧：破损皮肤；右侧：完整皮肤)。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明进行进一步的详细描述，给出的实施例仅为了阐明本发明，而不是为了限制本发明的范围。以下提供的实施例可作为本技术领域普通技术人员进行进一步改进的指南，并不以任何方式构成对本发明的限制。
下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
实施例1、火麻止痛凝胶样品的制备
1.提取工艺
(1)火麻仁叶用8倍量60％(质量浓度)的乙醇提取2次，每次0.5h，合并两次醇提液，回收乙醇至无醇味，备用；(2)醇提后的火麻仁叶用8倍水提取2次，每次0.5小时，水浴浓缩，备用；(3)将(1)、(2)合并，水浴浓缩得流浸膏200g(4g生药/g)，即得。
2.成型工艺
将CMC-Na 75g与甘油625g混合均匀后，加入水3100g，制得基质部分；将提取工艺中得到的流浸膏加入制备的基质中搅拌均匀，制成载药5％(以流浸膏计)的凝胶，即得。
实施例2、火麻止痛凝胶对大鼠软组织疼痛的治疗效果
本实验受试药物有阳性对照药布洛芬凝胶、火麻止痛凝胶(实施例1制备)。实验分为四组：正常组、模型组、阳性对照药组(阳对组)和火麻止痛凝胶组。所采用的实验方法是在相关指南和文献的基础上根据本实验具体情况改进而来。整个实验过程遵循伦理要求，并保证实验数据的真实性和完整性。
一、一般情况
1.1给药前后大鼠的饮食和体重变化情况无明显差异。
1.2造模结束30min后的情况所有造模组总分无差异，表示造模成功。
1.3造模结束后受伤和取材部位(图1所示)
1.4最后一次涂药结束30min后的情况
结果显示阳对组和药物组总分无差异，初步表明火麻止痛凝胶具有止痛效果。
二、给药前后生理变化
2.1体温无差异
2.2给药结束后30min内大鼠的呼吸和肢端颜色
火麻止痛凝胶组和阳对组总分无差异，初步表明火麻止痛凝胶具有一定的止痛效果。
三、扭体反应
扭体反应判断标准：腹部内凹、伸展后肢、臀部抬高。
3.1造模结束30min内首次出现扭体反应的时间和次数所有造模组的大鼠在30min内出现扭体反应的次数无差异。
3.2最后一次涂药结束后出现扭体反应的时间和次数(30min内)
扭体抑制率＝(模型组扭体次数-给药组扭体次数)/模型组扭体次数*100％结
果显示，涂药结束后，阳对组和火麻止痛凝胶组大鼠相比模型组发生扭体次数明显减少，且阳对组和火麻止痛凝胶组之间无明显差异，初步表明火麻止痛凝胶可能具有缓解软组织疼痛的效果。
四、血常规和肝肾功能生化检测结果
4.1血常规检测结果
4.2肝肾功能生化检测结果
结果显示，各组间无明显差异，初步显示阳性对照药和火麻止痛凝胶对大鼠肝肾功能无影响。但由于此次实验大鼠数量较少，结果有待进一步验证。
五、大鼠软组织病理切片HE染色和评分
5.1大鼠软组织病理切片HE染色结果(图2)。
5.2大鼠软组织损伤病理切片染色结果评分
结果显示，阳对组和火麻止痛凝胶组的总分相比模型组均有差异，表明阳性对照药和火麻止痛凝胶均可有效缓解软组织损伤。同时阳对组和火麻止痛凝胶组的总分无明显差异，初步表明火麻止痛凝胶同阳性对照药疗效相似。
本次实验初步表明火麻止痛凝胶具有缓解软组织疼痛的功效，且对大鼠一般生理情况和肝肾功能无明显影响，效果同阳性对照药布洛芬凝胶相似。
实施例3、火麻止痛凝胶对家兔皮肤刺激性研究
一材料和方法
1.1材料
1.1.1实验动物
成年健康家兔15只，雌雄均有，体重2.5-3.0kg。
1.1.2实验受试物和试剂
火麻止痛凝胶(厂家提供、)空白基质(厂家提供、)布洛芬凝胶(轰克，湖北康正药业有限公司、)兽用麻醉药速眠新II
(敦化市圣达动物药品有限公司、)脱毛膏(法国薇婷、)无菌水等。
1.1.3实验器材
体重称、额温枪、1ml和10ml注射器、计时器、电动剃毛剪、无菌毛巾、无菌磨砂锉刀、直尺、无菌空白贴(直径规格
1.5cm、2cm、3cm、)弹性绷带、手术剪、Sigma离心机等。
1.2方法
根据国内外指南和相关文献所述方法加以改进后进行家兔皮肤刺激性实验。实验分为两部分，第一部分为火麻止痛凝胶对家兔皮肤刺激性实验，第二部分为布洛芬凝胶对家兔皮肤刺激性实验。
1.2.1火麻止痛凝胶对家兔皮肤刺激性实验
1.2.1.1单剂量给药正常皮肤刺激实验
取家兔5只(雌雄均有，)于给药前24小时背部两侧去毛(先用电动剃毛剪剪净，再用脱毛药脱毛，并用温水清洗干净，不能损伤皮肤，)每侧脱毛面积5cm×5cm。以空白基质为对照，采用同体积侧身对比法，一侧皮肤给予火麻止痛凝胶，另一侧皮肤作为对照给予空白基质，剂量均为每只家兔1.5g。受试物均用无菌空白贴覆盖(经过试用，最终选择直径3cm空白贴，)并用无刺激性弹性绷带固定在家兔躯体上。4小时后取走受试物，温水轻轻清洗受试皮肤，并轻轻擦干水分。1小时后，观察给药后1h、3h、24h、48h、72h受试部位出现红斑、水肿等的情况。
1.2.1.2单剂量给药破损皮肤刺激实验
家兔数量和处理方式同上述，但本组需要在给药前先用无菌磨砂锉刀在脱毛后的皮肤上摩擦出约1cm x 1cm块状擦痕，以刺激表皮、有轻度渗血为度。同样观察给药后72小时内各时间点受试部位出现红斑、水肿等的情况。
1.2.2布洛芬凝胶对家兔皮肤刺激性实验
本组实验设立了3个小组对布洛芬凝胶的皮肤刺激性进行初步研究，每组家兔的处理方式与上述相同。
1.2.2.1比较布洛芬凝胶和基质对完整皮肤的刺激性(选用3只家兔)
1.2.2.2比较布洛芬凝胶和基质对破损皮肤的刺激性(选用1只家兔)
1.2.2.3比较布洛芬凝胶对同体家兔完整和破损皮肤的刺激性(选用1只家兔)
1.2.3皮肤刺激性评价标准
单剂量给药皮肤刺激性试验对给药部位有无红斑、水肿和焦痂等情况按《皮肤刺激性反应评分标准》(表1)进行评分。根据皮肤刺激强度判定公式[1-6]，并按表2进行皮肤刺激强度评价。
皮肤刺激反应评分标准
|皮肤刺激强度评价分类
二结果
2.1火麻止痛凝胶对家兔皮肤刺激性实验结果
火麻止痛凝胶对家兔完整皮肤单剂量给药刺激反应评分(n＝5)
图3为火麻止痛凝胶对家兔完整皮肤单剂量给药刺激反应(左侧：火麻止痛凝胶；右侧：空白基质)
|火麻止痛凝胶对家兔破损皮肤单剂量给药刺激反应评分(n＝5)
图4为火麻止痛凝胶对家兔破损皮肤单剂量给药刺激反应(左侧：火麻止痛凝胶；右侧：空白基质)
2.2布洛芬凝胶对家兔皮肤刺激性实验结果
|布洛芬凝胶对家兔完整皮肤单剂量给药刺激反应评分(n＝3)
图5为布洛芬凝胶对家兔完整皮肤单剂量给药刺激反应(第1只：左侧布洛芬凝胶；右侧空白基质。第2、3只：左侧火麻止痛凝胶；右侧布洛芬凝胶。)
布洛芬凝胶对家兔破损皮肤单剂量给药刺激反应评分(n＝1)
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图6为布洛芬凝胶对家兔破损皮肤单剂量给药刺激反应(左侧：布洛芬凝胶；右侧：空白基质)
布洛芬凝胶对家兔皮肤单剂量给药刺激反应评分(n＝1)
图7为布洛芬凝胶对家兔完整和破损皮肤单剂量给药刺激反应(左侧：破损皮肤；右侧：完整皮肤)。
与空白基质相比，火麻止痛凝胶对家兔完整皮肤和破损皮肤均无刺激性。与空白基质和火麻止痛凝胶相比，布洛芬凝胶对家兔完整皮肤和破损皮肤均有刺激性，刺激强度为轻度。
以上对本发明进行了详述。对于本领域技术人员来说，在不脱离本发明的宗旨和范围，以及无需进行不必要的实验情况下，可在等同参数、浓度和条件下，在较宽范围内实施本发明。虽然本发明给出了特殊的实施例，应该理解为，可以对本发明作进一步的改进。总之，按本发明的原理，本申请欲包括任何变更、用途或对本发明的改进，包括脱离了本申请中已公开范围，而用本领域已知的常规技术进行的改变。

Claims (7)

1.一种火麻止痛凝胶，由火麻叶醇提物、火麻叶水提物、羧甲基纤维素钠及甘油制成。
2.制备权利要求1所述的火麻止痛凝胶的方法，包括如下步骤：
1)火麻叶醇提物、火麻叶水提物的制备
火麻仁叶用乙醇提取，收集醇提液，回收乙醇至无醇味，得到浓缩后醇提液；醇提后的火麻仁叶用水提取，收集水提液，浓缩，得到浓缩后水提液；将浓缩后醇提液与浓缩后水提液合并，浓缩得到流浸膏；
2)将羧甲基纤维素钠与甘油混合，加水，得到基质；将步骤1)制得的流浸膏加入所得基质中，即得火麻止痛凝胶。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：步骤1)中，所述乙醇提取包括加入质量浓度55％-65％乙醇水溶液，回流提取，
其中，乙醇水溶液的体积与火麻仁叶的质量比为8：1-10：1；
所述回流提取可进行多次，具体可为2次，每次0.5h。
4.根据权利要求2或3所述的方法，其特征在于：所述水提取包括将醇提后的火麻仁叶加水，回流提取；
其中，水的体积与醇提后的火麻仁叶的质量比可为8：1-10：1；
所述回流提取可进行多次，具体可为2次，每次0.5h；
所得流浸膏的浓度为4g生药/g。
5.根据权利要求2-4中任一项所述的方法，其特征在于：步骤2)中，流浸膏与羧甲基纤维素钠、甘油及水的质量比为：200g(4g生药/g)：75g：625g：1800g。
6.权利要求1所述的火麻止痛凝胶在制备治疗疼痛的药物中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于：所述疼痛为软组织疼痛。
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