CN1167262A - 马来酸酐—苯乙烯共聚物试管的活化方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了马来酸酐—苯乙烯共聚物试管的活化方法,属于生物化学领域。解决了以往活化方法中存在的共聚物与抗体结合能力弱,活化率低的问题。其特征是将制备好的马来酸酐—苯乙烯共聚物溶液涂布于聚苯乙烯试管上,在涂布后的试管内加入氢氧化钠溶液,室温条件下放置后,弃去管内的溶液,经洗涤、烘干,马来酸酐—苯乙烯共聚物试管即被活化。采用上述活化方法制得的马来酸酐—苯乙烯试管,活化率较活化前提高了30倍以上;并可应用于多种抗体及蛋白质的固相免疫分析,具有应用范围广的优点。
Description
本发明公开了马来酸酐——苯乙烯共聚物试管的活化方法,属于生物化学领域。
马来酸酐——苯乙烯共聚物试管主要应用于固相免疫分析中,它的活化是指把抗体或其它蛋白质、多肽类物质以共价结合方式,固定到聚苯乙烯试管(板)表面的技术;即在试管壁上引进活性基团,使蛋白质或抗体与其共价结合,达到固定抗体的目的。目前已知的方法主要是在试管壁植入一种氨基聚苯乙烯载体,通过双功能基团偶联剂使抗体与管壁共价结合,从而固定抗体;其不足是共聚物本身活性不高,与蛋白质、抗体结合能力较弱;已不能满足实际需要。
本发明的目的在于提供一种方法简便、经活化的试管与蛋白质、抗体结合能力强、应用范围广的马来酸酐——苯乙烯共聚物试管的活化方法。
本发明的目的是这样实现的:
本发明由以下步骤组成:(1)马来酸酐——苯乙烯共聚物溶液的制备;将马来酸酐和苯乙烯按2∶1分子比混合后,加入过氧化苯甲酰作催化剂,加入比例为马来酸酐重量的0.2%;置于75~80℃水浴中加热,待形成粘稠状物质并沸腾后立即转入冰水浴中,凝成淡黄色固体;冷却后加入相当于苯乙烯体积8倍的丁酮使之充分溶解,再加入乙腈溶液进行稀释,调至丁酮浓度达15~20%,即得共聚物溶液;
(2)涂布聚苯乙烯塑料试管:取共聚物溶液,注入聚苯乙烯试管中,静置10秒钟后吸出全部溶液,涂布后的试管管壁留有一层均匀的共聚物膜,室温条件下干燥;
(3)马来酸酐——苯乙烯共聚物试管的活化:在涂布后的试管内加入0.1~1.0mol/L氢氧化钠溶液,室温条件下放置6~24小时,弃去管内的溶液,用蒸馏水将试管清洗5次,在50℃条件下烘干,马来酸酐——苯乙烯共聚物试管即被活化。
使用上述活化方法制得的马来酸酐——苯乙烯共聚物试管,由于氢氧化钠溶液的加入,使共聚物由疏水性转变为亲水性,提高了与蛋白质、抗体结合的能力;活化后的共聚物试管结合蛋白质、抗体的能力由活化前的4.0ug/管提高到了131ug/管,使活化率提高了30倍以上;制得的试管在4℃条件下可保存3个月,-20℃条件下可存放3年;并可应用于多克隆、单克隆、亲合素等多种抗体及蛋白质的固相免疫分析,具有应用范围广的优点。
Claims (1)
1.一种马来酸酐——苯乙烯共聚物试管的活化方法,其特征在于由以下步骤组成:
(1)马来酸酐——苯乙烯共聚物溶液的制备:将马来酸酐和苯乙烯按2∶1分子比混合后,加入过氧化苯甲酰作催化剂,加入比例为马来酸酐重量的0.2%;置于75~80℃水浴中加热,待形成粘稠状物质并沸腾后立即转入冰水浴中,凝成淡黄色固体;冷却后加入相当于苯乙烯体积8倍的丁酮使之充分溶解,再加入乙腈溶液进行稀释,调至丁酮浓度达15~20%,即得共聚物溶液;
(2)涂布聚苯乙烯试管:取共聚物溶液,注入聚苯乙烯试管中,静置10秒钟后吸出全部溶液,涂布后的试管管壁留有一层均匀的共聚物膜,室温条件下干燥;
(3)马来酸酐——苯乙烯共聚物试管的活化:在涂布后的试管内加入0.1~1.0mol/L氢氧化钠溶液,室温条件下放置6~24小时,弃去管内的溶液,用蒸馏水将试管清洗5次,在50℃条件下烘干,马来酸酐——苯乙烯共聚物试管即被活化。
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CN101864408A (zh) * | 2010-05-25 | 2010-10-20 | 中国科学院过程工程研究所 | 一种纳米纤维固定化β-D-半乳糖苷酶的制备方法 |
CN103649325A (zh) * | 2011-05-09 | 2014-03-19 | 伯明翰大学 | 自细胞的提取 |
CN104558352A (zh) * | 2013-10-28 | 2015-04-29 | 中国石油化工股份有限公司 | 嵌段聚合物及其制备方法和在稠油水热催化降黏中的应用与稠油水热催化降黏的方法 |
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1997
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CN104558352B (zh) * | 2013-10-28 | 2018-02-23 | 中国石油化工股份有限公司 | 嵌段聚合物及其制备方法和在稠油水热催化降黏中的应用与稠油水热催化降黏的方法 |
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