CN1166286C - 蝎尾蕉的组织培养繁殖方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及蝎尾蕉的组织培养繁殖方法和所使用的培养基。蝎尾蕉是一种新型的热带高档花卉，其株形美观，花序具有鲜艳的色彩和奇特的造型，可做园林绿化、盆栽或切花观赏，应用范围广。蝎尾蕉的繁殖常采用分株繁殖方法，繁殖系数低，不能满足要求。本发明利用特殊的外植体处理方法对外植体进行处理，该方法并利用独特的培养基进行包括不定芽的诱导、继代增殖、壮苗培养、生根培养和试管苗移栽等步骤，方法简单，适合进行工厂化生产，并能获得大量试管苗，为满足市场的需要，和进行推广提供一条有效的途径。
Description
技术领域
本发明涉及蝎尾蕉的组织培养繁殖方法和所使用的培养基。
技术背景
蝎尾蕉原属于旅人蕉科(Strelitziaceae)蝎尾蕉属(Heliconia)，现多数学者将其独立为蝎尾蕉科(Heliconiaceae)。蝎尾蕉为多年生草本植物，本属植物原生种有80多种，变种、园艺栽培种、杂交种等的数量400种以上，主要分布于美洲热带地区和太平洋诸岛，其中许多种类其花序具有鲜艳的色彩和奇特的造型，是观赏价值极高的花卉，是道路、公园、庭院的高档绿化树种，可丛植、列植，也可单株种植；较矮生的蝎尾蕉也可盆栽，一些种类由于它们有较强的耐阴性，又可在室内盆栽观赏；同时，由于蝎尾蕉的花色艳丽、保存时间长，又是不可多得的室内高档切花材料，适合于作花篮、壁瓶、挂篮等，可用来装饰宾馆、舞厅、酒店和商场橱窗等，也可用于家庭观赏。目前我国市场产品数量少，种苗奇缺。
蝎尾蕉的繁殖常采用分株繁殖方法，繁殖系数低，而进行组织培养时外植体去污难，不定芽诱导生长慢，增殖系数不高。本发明专利利用特殊的外植体处理方法对外植体进行处理，并利用独特的培养基进行不定芽的诱导和丛生芽增殖及壮苗生根等，能进行工厂化生产并获得大量试管苗，为满足市场的需要进行推广提供一条有效的途径。
目前国内外仅对少数蝎尾蕉品种进行了组织培养的初步实验研究，未有大规模生产和专利申请的报道。
发明内容
本发明对10多种蝎尾蕉属植物的组织培养和快速繁殖技术进行了系统研究。提供了蝎尾蕉属植物的组织培养繁殖方法和所使用的培养基。其外植体消毒方法、培养基成分独特且简单实惠，应用价值高。蝎尾蕉的组织培养繁殖方法，本发明所提供的蝎尾蕉的组织培养繁殖方法包括下述步骤：
1.材料：此发明已实验的材料有10种蝎尾蕉：垂序蝎蕉蕉(Heliconia rostrataRuiz & Pavon)、扇形蝎尾蕉(H.librata Griggs)、红黄蝎尾蕉(H.latispatha Benthamcv.Red-Yellow Gyro)、金火炬蝎尾蕉(H.psittacorum L.f.X H.spathocircinataAristeguieta cv. Golden Torch)、桔红蝎尾蕉(H.psittacorum X H.marginata)、火鸟蝎尾蕉(H.Stricta Huber cv.Fire Bird)、彩虹蝎尾蕉(H.psittacorum L.f.cv.Sassy)、圣温红蝎尾蕉(H.Psittacorum L.f.cv.St.Vincent Red)、多色蝎尾蕉(H.psittacorum L.f.cv.Andromeda)、火红蝎尾蕉(H.Densiflora Verlot cv.Fire Flash)10种材料均取自华南植物园蝎尾蕉园。
2.外植体诱导材料消毒的方法：从田间挖取生长旺盛的垂序蝎尾蕉根状茎，除去根与叶，
用自来水冲洗干净后，用0.1％的高锰酸钾溶液浸泡5分钟，取出毛巾将根状茎抹干，再放入0.1％的多菌灵溶液浸泡5分钟，带少量药剂用黑色的塑料袋包装好放在30℃左右的恒温箱中暗培养，在茎节处能形成4-6厘米的新芽，以此新芽做为初步灭菌的外植体。将外植体在超净工作台上用酒精浸泡30秒后，再用0.1％升汞浸泡10分钟，无菌水冲洗3次，用解剖刀剥除芽鳞片，每剥一层鳞片，用0.1％升汞浸泡1分钟，无菌水冲洗三次，直至剥至露出生长点为止。剥取的生长点越小，污染率越少，但出芽速度较慢。
3.不定芽诱导：切取5立方厘米左右的带生长点的组织块接种到启动培养基MS+6-苄基
嘌呤5-10毫克/升+萘乙酸0.5-1.0毫克/升+15％椰子水上诱导不定芽，30天左右有不定芽形成。培养基均含蔗糖30克/升，pH5.5-5.8，琼脂0.7％。培养温度(28±2)℃，光照度1500～2000lx，光照12小时/天。椰子水由新鲜上市的椰子中的汁水经过滤而来。加入椰子汁能明显提高不定芽的出芽速度和不定芽的生长速度。
4.继代增殖：培养40天左右将不定芽转移到MS+6-苄基嘌呤5-10毫克/升+萘乙
0.5-1.0毫克/升培养基上继代增殖，一般40天左右为一个继代周期。在增殖过程中去除椰子汁主要是为了降低成本.
5.壮苗培养：增殖到一定代数后接种到壮苗培养基MS+6-苄基嘌呤1-2毫克/升+萘乙酸0.1-0.2毫克/升上壮苗。
6.生根培养：壮苗后，当苗高2-3厘米高时可用于生根，在生根培养基MS+萘乙酸0.5毫克/升+吲哚丁酸2.0毫克/升+0.5％活性炭上能形成完成植株。加入活性炭根数增多，能防止部分切口褐变.
7.试管苗移栽：当试管苗能长至4-5厘米高时，转移到自然光下炼苗10天，当试管苗能长至5-6厘米高时，将其从玻璃瓶中取出，洗净根部的培养基，移入泥炭加河沙的混合基质中，保持适当通风和足够的湿度，1周左右试管苗可恢复生长，移栽的成活率均可达90％-100％。进行炼苗处理有利于试管苗角质层的形成和对环境的适应能力，移栽成活率增高。
本发明提供的蝎尾蕉的组织培养繁发明具有外植体去污成功率较高，出苗快，稳定性高，苗壮，种苗品质好、抗性强、生长良好等优势。
实施例1
1.取材：垂序蝎蕉蕉(Heliconia rostrata Ruiz & Pavon)根状茎。
2.外植体诱导材料消毒的方法：从田间挖取生长旺盛的垂序蝎尾蕉根状茎，除去根与叶，
用自来水冲洗干净后，用0.1％的高锰酸钾溶液浸泡5分钟，取出毛巾将根状茎抹干，再放入0.1％的多菌灵溶液浸泡5分钟，带少量药剂用黑色的塑料袋包装好放在30℃左右的恒温箱中暗培养，在茎节处能形成4-6厘米的新芽，以此新芽做为初步灭菌的外植体。将外植体在超净工作台上用酒精浸泡30秒后，再用0.1％升汞浸泡10分钟，无菌水冲洗3次，用解剖刀剥除芽鳞片，每剥一层鳞片，用0.1％升汞浸泡1分钟，无菌水冲洗三次，直至剥至露出生长点为止。
3.不定芽诱导：切取5立方厘米左右的带生长点的组织块接种到启动培养基MS+6-苄基
嘌呤10毫克/升+萘乙酸1.0毫克/升+15％椰子水上诱导不定芽，30天左右有不定芽形成。培养基均含蔗糖30克/升，pH5.5-5.8，琼脂0.7％。培养温度(28±2)℃，光照度1500～2000lx，光照12小时/天。椰子水由新鲜上市的椰子中的汁水经过滤而来。
4.继代增殖：培养40天左右将不定芽转移到MS+6-苄基嘌呤10毫克/升+萘乙酸1.0毫克/升培养基上继代增殖，一般40天左右为一个继代周期。
5.壮苗培养：增殖到一定代数后接种到壮苗培养基MS+6-苄基嘌呤2毫克/升+萘乙
酸0.2毫克/升上壮苗。
6.生根培养：壮苗后，当苗高2-3厘米高时可用于生根，在生根培养基MS+萘乙酸0.5毫克/升+吲哚丁酸2.0毫克/升+0.5％活性炭上能形成完成植株。
7.试管苗移栽：当试管苗能长至4-5厘米高时，转移到自然光下炼苗10天，当试管苗能长至5-6厘米高时，将其从玻璃瓶中取出，洗净根部的培养基，移入泥炭加河沙的混合基质中，保持适当通风和足够的湿度，1周左右试管苗可恢复生长，移栽的成活率均可达90％以上。
实施例2
取彩虹蝎尾蕉(H.psittacorum L.f.cv.Sassy)为外植体。基本操作方法同实施例1一致。但其不定芽诱导培养基为MS+6-苄基嘌呤5毫克/升+萘乙酸0.5毫克/升+15％椰子水；丛生芽增殖培养基为MS+6-苄基嘌呤5毫克/升+萘乙酸0.5毫克/升；壮苗培养基为MS+6-苄基嘌呤1毫克/升+萘乙酸0.1毫克/升。试管苗移栽的成活率可达100％。
Claims (2)
1、一种蝎尾蕉的组织培养繁殖方法，其特征在于该方法包括如下的步骤：
1)、外植体诱导材料消毒：从田间挖取生长旺盛的垂序蝎尾蕉根状茎，除去根与叶，用自来水冲洗干净后，用0.1％的高锰酸钾溶液浸泡5分钟，取出毛巾将根状茎抹干，再放入0.1％的多菌灵溶液浸泡5分钟，带药剂用黑色的塑料袋包装好放在30℃--35℃的恒温箱中暗培养，在茎节处能形成4-6厘米的新芽，以此新芽做为初步灭菌的外植体；将外植体在超净工作台上用酒精浸泡30秒后，再用0.1％升汞浸泡10分钟，无菌水冲洗3次，用解剖刀剥除芽鳞片，每剥一层鳞片，用0.1％升汞浸泡1分钟，无菌水冲洗三次，直至剥至露出生长点为止；
2)、不定芽诱导：切取5立方厘米左右的带生长点的组织块接种到启动培养基MS+6-苄基嘌呤5-10毫克/升+萘乙酸0.5-1.0毫克/升+15％椰子水上诱导不定芽，30天有不定芽形成，培养基含蔗糖30克/升，pH 5.5-5.8，琼脂0.7％；培养温度(28±2)℃，光照度1500～2000lx，光照12小时/天，椰子水由新鲜上市的椰子中的汁水经过滤而来，加入椰子汁能提高不定芽的出芽速度和不定芽的生长速度；
3)、继代增殖：培养40天将不定芽转移到MS+6-苄基嘌呤5-10毫克/升+萘乙0.5-1.0毫克/升培养基上继代增殖，一个周期；
4)、壮苗培养：增殖后接种到壮苗培养基MS+6-苄基嘌呤1-2毫克/升+萘乙酸0.1-0.2毫克/升上壮苗；
5)、生根培养：壮苗后，当苗高2-3厘米高时用于生根，在生根培养基MS+萘乙酸0.5毫克/升+吲哚丁酸2.0毫克/升+0.5％活性炭上能形成完成植株；
6)、试管苗移栽：当试管苗能长至4-5厘米高时，转移到自然光下炼苗10天，当试管苗能长至5-6厘米高时，将其从玻璃瓶中取出，洗净根部的培养基，移入泥炭加河沙的混合基质中，保持通风和湿度，1周后试管苗可恢复生长。
2、根据权利要求1中所述的蝎尾蕉的组织培养繁殖方法，其特征在于所述的材料蝎尾蕉是垂序蝎蕉蕉Heliconia rostrata Ruiz & Pavon、扇形蝎尾蕉H.librata Griggs、红黄蝎尾蕉H.latispatha Bentham cv.Red-Yellow Gyro、金火炬蝎尾蕉H.psittacorum L.f.X H.spathocircinata Aristeguieta cv.Golden Torch、桔红蝎尾蕉H.psittacorum X H.marginata、火鸟蝎尾蕉H.Stricta Huber cv.Fire Bird、彩虹蝎尾蕉H.psittacorum L.f.cv.Sassy、圣温红蝎尾蕉H.Psittacorum L.f.cv.St.Vincent Red、多色蝎尾蕉H.psittacorum L.f.cv.Andromeda、火红蝎尾蕉H.Densiflora Verlot cv.FireFlash。
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