CN116625778A - 一种阴道分泌物染色液及其制备方法与染色方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及细胞染色技术领域，尤其涉及一种阴道分泌物染色液及其制备方法与染色方法。本发明提供的阴道分泌物染色液，采用碱性品红和亚基蓝作为染色剂，能将上皮细胞、白细胞进行染色，滴虫和霉菌无法染色，通过颜色差，可以明显区分白细胞和滴虫，降低了由于白细胞和滴虫相似而导致的人员误判。本发明提供的阴道分泌物染色液操作步骤简单，周期短，染色快。本发明还提供了一种阴道分泌物染色液的制备方法和染色方法。
Description
技术领域
本发明涉及细胞染色技术领域，尤其涉及一种阴道分泌物染色液及其制备方法与染色方法。
背景技术
细菌性阴道病是一类细菌学上表现为生殖道正常菌群(产过氧化氢的乳酸杆菌)数量减少、代之以一组厌氧菌群数量增加，阴道内的生态环境发生混乱的临床综合征。细菌性阴道病在临床上的表现为阴道分泌物增多，10％患者分泌物呈泡沫状，伴有异味，少数患者可有轻度外阴瘙痒及烧灼感，阴道黏膜无炎症表现，检测阴道分泌物常规显示细菌、霉菌、滴虫与细菌性阴道病混合感染率达54.42％，检测阴道分泌物常规异常与细菌性阴道病混合感染密切相关，是引起输卵管炎、盆腔炎、宫外孕、不孕症、泌尿系统感染、术后感染及妇科肿瘤的危险因素，必须高度重视。
阴道分泌物的常规检测方法有干化学酶法、湿片镜检法、核酸杂交法和染色法等。其中，湿片镜检法的优点为成本低、易于操作，且具有较好的特异度，适合大多数实验室开展；缺点为易受检测操作者个人影响。染色法的优点为准确性高；缺点为操作复杂、周期长，不适于作为常规检测方法。将湿片镜检法和染色法相结合，就可以开创一种成本低廉、操作简单、准确性高的阴道分泌物检测法。
CN201510484688.X公开了一种阴道分泌物染色液及其制备方法与染色方法，其染色后的图像清晰，易于辨认，能够清晰识别表层鳞状上皮细胞、中层上皮细胞、底层上皮细胞、线索细胞、白细胞、红细胞、白色念珠菌、滴虫等成分，适用于大量样本的临床筛查。但这种染色方法对上述成分都进行了染色，患者的阴道分泌物中通常会混合多种微生物，白细胞和滴虫染色后形貌相似难以区分，在临床诊断中很容易导致误判。
发明内容
为了解决现有染色方法容易导致白细胞和滴虫误判的问题，本发明提供了一种阴道分泌物染色液。本发明的阴道分泌物染色液，采用碱性品红和亚基蓝作为染色剂，能将上皮细胞、白细胞进行染色，滴虫和霉菌无法染色，通过颜色差，可以明显区分白细胞和滴虫，避免了由于白细胞和滴虫相似而导致的人员误判。
本发明的具体技术方案为：
第一方面，本发明提供了一种阴道分泌物染色液，包括染色剂和染色溶剂、稳定剂，以及缓冲盐；
所述染色剂为碱性品红、亚基蓝。
与其他检测样本相比，阴道分泌物的组成较为复杂。正常阴道分泌物中，包括大量阴道杆菌、无杂菌，存在上皮细胞和白细胞，也就是说未病变的样本，基本为上皮细胞和白细胞，乳酸杆菌。而病变阴道分泌物中，包括上皮细胞，白细胞，线索细胞，霉菌、滴虫，较多杂菌，支原体，衣原体。病变的样本中会有滴虫、白细胞、霉菌、上皮细胞，线索细胞，细菌等。上皮细胞和白细胞在显微镜下形貌明显。本申请的染色剂复配后能将上皮细胞、白细胞进行染色，滴虫和霉菌无法染色，通过颜色差，可以明显区分白细胞和滴虫，降低了由于白细胞和滴虫相似而导致的人员误判。
作为优选，阴道分泌物染色液中，所述碱性染料品红的含量为10～15g/L，亚基蓝的含量为1～1.5g/L。
本发明采用碱性品红和亚基蓝作为染色剂，其中，碱性品红可将细胞核染成深紫色，将细胞质染成紫色；亚基蓝作为细胞核染料，可将细胞核染成蓝色。本发明团队基于实验和理论研究发现，阴道分泌物染色液中，碱性染料品红的含量最好控制在10～15g/L之间，亚基蓝的含量最好控制在1～1.5g/L之间，现染料比例，染色结果为橙红色，优于两个染料为细胞核染色剂，细胞核染色深于细胞质。如果碱性品红含量过低，亚基蓝的作用就会增加，细胞质的染色程度会下降，只能看到明显清晰的细胞核，且染色的细胞偏蓝色。如果碱性品红含量增加，亚基蓝作用减小，细胞核和细胞质染色程度相差不大，且都为紫色，不好区分。
作为优选，所述稳定剂包括细胞膜保护剂和蛋白活性保护剂、血清白蛋白，以及抗氧化剂。
作为优选，阴道分泌物染色液中，所述细胞膜保护剂的含量为7～9g/L，蛋白活性保护剂的含量为1～2g/L，血清白蛋白的含量为0.4～0.6g/L，抗氧化剂的含量为2～4g/L。
作为优选，所述细胞膜保护剂为海藻糖、蔗糖、甘露醇、甘氨酸中的一种或多种。
更优选地，所述细胞膜保护剂为蔗糖。
作为优选，所述蛋白活性保护剂为硫酸铵。
硫酸铵为惰性物质，不和生物活性物质发生反应，能够保护蛋白活性。
作为优选，所述血清白蛋白为BSA。
血清白蛋白具有维持渗透压、pH缓冲的作用。
作为优选，所述抗氧化剂为柠檬酸。
柠檬酸是天然防腐剂，使有害微生物增值和毒素产生受到抑制，和防腐剂联合防腐。
作为优选，所述染料溶剂为无水乙醇、甲醇、乙二醇中的一种或几种。
作为优选，阴道分泌物染色液中，所述染料溶剂的含量为90-110ml/L。
作为优选，所述缓冲盐的浓度为2～500mmol/L，缓冲盐pH为5.0～7.8。
作为优选，所述缓冲盐为MES、硼酸盐、磷酸盐、Tris-HCl、Bistris-HCl、HEPES、PIPES中的一种或多种。
更优选地，所述缓冲盐为磷酸盐。
进一步地，所述磷酸盐为Na2HPO4.12H2O、NaH2PO4.2H2O。
NaH2PO4.2H2O极易溶于水，水溶液呈酸性反应，常用于酸性缓冲剂等。Na2HPO4.12H2O易溶于水，其水溶液呈弱碱性，1％水溶液的PH值为8.8～9.2；3.5％的水溶液Ph值为9.0～9.4，不溶于醇。
作为优选，阴道分泌物染色液中，还包括表面活性剂和/或防腐剂。
作为优选，所述表面活性剂为十二烷基硫酸钠。
本发明采用十二烷基硫酸钠作为表面活性剂，十二烷基硫酸钠可增加细胞膜通透性，与膜蛋白疏水部分结合并使其与膜分离，大大提升染色剂的染色效果。十二烷基硫酸钠不但可以提升染料的性能，还能作为增溶剂，增加各溶质的溶解度。
作为优选，阴道分泌物染色液中，所述表面活性剂的含量为0.01～0.02g/L。
作为优选，所述为防腐剂Proclin300。
作为优选，阴道分泌物染色液中，所述防腐剂的含量为1～3ml/L。
第二方面，本申请提供了一种阴道分泌物染色液的制备方法，包括如下步骤：
(S1)用染色溶剂溶解碱性品红和亚基蓝，得到染色溶液；
(S2)在上述染色溶液中加入稳定剂，用缓冲盐调节pH至中性，得到缓冲溶液，
(S3)将上述缓冲溶液避光静置，得到阴道分泌物染色液。
第三方面，本申请提供了一种阴道分泌物染色液的染色方法，采用湿片染色法对阴道分泌物进行染色，所述湿片染色法为：将经洗脱液洗脱的阴道分泌物滴加到载玻片上或样本管中，之后将上述阴道分泌物染色液与阴道分泌物混合均匀，使所述染色液对阴道分泌物进行染色。
本发明提供的阴道分泌物染色液的染色方法能够将染色时间缩短至20s。
与现有技术对比，本发明的有益效果是：
(1)本发明的阴道分泌物染色液克服了现有染色方法容易导致白细胞和滴虫误判的问题。本申请采用碱性品红和亚基蓝作为染色剂，能将上皮细胞、白细胞进行染色，滴虫和霉菌无法染色，通过颜色差，可以明显区分白细胞和滴虫。
(2)克服了传统染色法操作复杂和周期长的缺陷，本发明提供的阴道分泌物染色液进行染色，一步法操作步骤简单，周期短，染色快，可以作为常规检测方法。
(3)本发明还提供了一种阴道分泌物染色液的制备方法，简便快捷，极大地提高了染色法的效率。
附图说明
图1为实施例1滴虫-白细胞的染色结果。
图2为实施例1霉菌-白细胞的染色结果。
图3为实施例1霉菌-菌丝-白细胞的染色结果。
图4为实施例1白细胞的染色结果。
图5为实施例1小圆上皮细胞的染色结果。
图6为实施例1上皮细胞的染色结果。
图7为实施例1线索细胞的染色结果。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步的描述。
总实施例
一种阴道分泌物染色液，包括染色剂和染色溶剂、稳定剂，以及缓冲盐；
所述染色剂为碱性品红、亚基蓝。
作为优选，阴道分泌物染色液中，所述碱性染料品红的含量为10～15g/L，亚基蓝的含量为1～1.5g/L。
作为优选，所述稳定剂包括细胞膜保护剂和蛋白活性保护剂、血清白蛋白，以及抗氧化剂。
作为优选，阴道分泌物染色液中，所述细胞膜保护剂的含量为7～9g/L，蛋白活性保护剂的含量为1～2g/L，血清白蛋白的含量为0.4～0.6g/L，抗氧化剂的含量为2～4g/L。
作为优选，所述细胞膜保护剂为海藻糖、蔗糖、甘露醇、甘氨酸中的一种或多种。
更优选地，所述细胞膜保护剂为蔗糖。
作为优选，所述蛋白活性保护剂为硫酸铵。
作为优选，所述血清白蛋白为BSA。
作为优选，所述抗氧化剂为柠檬酸。
作为优选，所述染料溶剂为无水乙醇、甲醇、乙二醇中的一种或几种。
作为优选，阴道分泌物染色液中，所述染料溶剂的含量为90-110ml/L。
作为优选，所述缓冲盐的浓度为2～500mmol/L，缓冲盐pH为5.0～7.8。
作为优选，所述缓冲盐为MES、硼酸盐、磷酸盐、Tris-HCl、Bistris-HCl、HEPES、PIPES中的一种或多种。
更优选地，所述缓冲盐为磷酸盐。
进一步地，所述磷酸盐为Na2HPO4.12H2O、NaH2PO4.2H2O。
作为优选，阴道分泌物染色液中，还包括表面活性剂和/或防腐剂。
作为优选，所述表面活性剂为十二烷基硫酸钠。
作为优选，阴道分泌物染色液中，所述表面活性剂的含量为0.01～0.02g/L。
作为优选，所述为防腐剂Proclin300。
作为优选，阴道分泌物染色液中，所述防腐剂的含量为1～3ml/L。
一种阴道分泌物染色液的制备方法，包括如下步骤：
(S1)用染色溶剂溶解碱性品红和亚基蓝，得到染色溶液；
(S2)在上述染色溶液中加入稳定剂，用缓冲盐调节pH至中性，得到缓冲溶液，
(S3)将上述缓冲溶液避光静置，得到阴道分泌物染色液。
一种阴道分泌物染色液的染色方法，采用湿片染色法对阴道分泌物进行染色，所述湿片染色法为：将经洗脱液洗脱的阴道分泌物滴加到载玻片上或样本管中，之后将上述阴道分泌物染色液与阴道分泌物混合均匀，使所述染色液对阴道分泌物进行染色。
实施例1
(1)配制阴道分泌物染色液：
电子天平称取碱性品红1.0g，亚基蓝0.1g于碾钵中，充分碾磨后全部置于烧杯中，加入10mL无水乙醇，搅拌，令染料充分溶解。再依次加入蔗糖0.8g，硫酸铵0.15g，BSA0.05g，柠檬酸0.3g，搅拌使稳定剂充分溶解，用0.537g Na2HPO4.12H2O和0.078g NaH2PO4.2H2O调节混合液pH至7.4，再加入90ml去离子水、0.001g十二烷基硫酸钠和0.2ml Proclin300搅拌均匀，制成溶液。将上述混合液避光静置24h，过滤后得到阴道分泌物染色液。
(2)阴道分泌物染色液染色方法如下：
用2ml生理盐水将一次性棉签上的阴道分泌物洗脱至软胶管中，滴2-3滴本染色液，捏软胶管一分钟，使阴道分泌物充分染色，再取一滴样本液到载玻片上，使用显微镜进行阴道分泌物观察。滴虫-白细胞的染色结果如图1所示，霉菌-白细胞的染色结果如图2所示，霉菌-菌丝-白细胞的染色结果如图3所示，白细胞的染色结果如图4所示，小圆上皮细胞的染色结果如图5所示，上皮细胞的染色结果如图6所示，线索细胞的染色结果如图7所示。
使用实施例1制得的阴道分泌物染色液进行染色，能看到滴虫和霉菌无法染色，白细胞和上皮细胞正常染色。
实施例2
(1)配制阴道分泌物染色液：
电子天平称取碱性品红1.5g，亚基蓝0.15g于碾钵中，充分碾磨后全部置于烧杯中，加入11mL甲醇，搅拌，令染料充分溶解。再依次加入海藻糖0.5g，甘氨酸0.4g，硫酸铵0.2g，BSA0.06g，柠檬酸0.4g，搅拌使稳定剂充分溶解，用0.537g Na2HPO4.12H2O和0.078gNaH2PO4.2H2O调节混合液pH，再加入90ml去离子水、0.001g十二烷基硫酸钠和0.1mlProclin300搅拌均匀，制成溶液。将上述混合液避光静置24h，过滤后得到阴道分泌物染色液。
(2)阴道分泌物染色液染色方法如下：
用2ml生理盐水将一次性棉签上的阴道分泌物洗脱至软胶管中，滴2-3滴本染色液，捏软胶管一分钟，使阴道分泌物充分染色，再取一滴样本液到载玻片上，使用显微镜进行阴道分泌物观察。结果发现使用实施例2制得的阴道分泌物染色液进行染色，能看到滴虫和霉菌无法染色，白细胞和上皮细胞正常染色。
实施例3
(1)配制阴道分泌物染色液：
电子天平称取碱性品红1.0g，亚基蓝0.1g于碾钵中，充分碾磨后全部置于烧杯中，加入9mL乙二醇，搅拌，令染料充分溶解。再依次加入甘露醇0.7g，硫酸铵0.1g，BSA0.04g，柠檬酸0.2g，搅拌使稳定剂充分溶解，用0.537g Na2HPO4.12H2O和0.078g NaH2PO4.2H2O调节混合液pH，再加入91ml去离子水、0.002g十二烷基硫酸钠和0.3ml Proclin300搅拌均匀，制成溶液。将上述混合液避光静置24h，过滤后得到阴道分泌物染色液。
(2)阴道分泌物染色液染色方法如下：
用2ml生理盐水将一次性棉签上的阴道分泌物洗脱至软胶管中，滴2-3滴本染色液，捏软胶管一分钟，使阴道分泌物充分染色，再取一滴样本液到载玻片上，使用显微镜进行阴道分泌物观察。结果发现使用实施例3制得的阴道分泌物染色液进行染色，能看到滴虫和霉菌无法染色，白细胞和上皮细胞正常染色。
实施例4
(1)配制阴道分泌物染色液：
电子天平称取碱性品红2.0g，亚基蓝0.15g于碾钵中，充分碾磨后全部置于烧杯中，加入11mL甲醇，搅拌，令染料充分溶解。再依次加入海藻糖0.5g，甘氨酸0.4g，硫酸铵0.2g，BSA0.06g，柠檬酸0.4g，搅拌使稳定剂充分溶解，用0.537g Na2HPO4.12H2O和0.078gNaH2PO4.2H2O调节混合液pH，再加入90ml去离子水、0.001g十二烷基硫酸钠和0.1mlProclin300搅拌均匀，制成溶液。将上述混合液避光静置24h，过滤后得到阴道分泌物染色液。
(2)阴道分泌物染色液染色方法如下：
用2ml生理盐水将一次性棉签上的阴道分泌物洗脱至软胶管中，滴2-3滴本染色液，捏软胶管一分钟，使阴道分泌物充分染色，再取一滴样本液到载玻片上，使用显微镜进行阴道分泌物观察。
对比实施例2，发现使用实施例4制得的阴道分泌物染色液进行染色，亚基蓝作用减小，细胞核和细胞质染色程度相差不大，且都为紫色，不好区分。本发明团队基于实验和理论研究发现，阴道分泌物染色液中，碱性染料品红的含量最好控制在10～15g/L之间，亚基蓝的含量最好控制在1～1.5g/L之间，现染料比例，染色结果为橙红色，优于两个染料为细胞核染色剂，细胞核染色深于细胞质。
实施例5
(1)配制阴道分泌物染色液：
电子天平称取碱性品红0.5g，亚基蓝0.1g于碾钵中，充分碾磨后全部置于烧杯中，加入9mL乙二醇，搅拌，令染料充分溶解。再依次加入甘露醇0.7g，硫酸铵0.1g，BSA0.04g，柠檬酸0.2g，搅拌使稳定剂充分溶解，用0.537g Na2HPO4.12H2O和0.078g NaH2PO4.2H2O调节混合液pH，再加入91ml去离子水、0.002g十二烷基硫酸钠和0.3ml Proclin300搅拌均匀，制成溶液。将上述混合液避光静置24h，过滤后得到阴道分泌物染色液。
(2)阴道分泌物染色液染色方法如下：
用2ml生理盐水将一次性棉签上的阴道分泌物洗脱至软胶管中，滴2-3滴本染色液，捏软胶管一分钟，使阴道分泌物充分染色，再取一滴样本液到载玻片上，使用显微镜进行阴道分泌物观察。
对比实施例3，发现使用实施例5制得的阴道分泌物染色液进行染色，亚基蓝的作用增大，细胞质的染色程度会下降，只能看到明显清晰的细胞核，且染色的细胞偏蓝色。本发明团队基于实验和理论研究发现，阴道分泌物染色液中，碱性染料品红的含量最好控制在10～15g/L之间，亚基蓝的含量最好控制在1～1.5g/L之间，现染料比例，染色结果为橙红色，优于两个染料为细胞核染色剂，细胞核染色深于细胞质。
实施例6
(1)配制阴道分泌物染色液：
电子天平称取碱性品红1.0g，亚基蓝0.1g于碾钵中，充分碾磨后全部置于烧杯中，加入10mL无水乙醇，搅拌，令染料充分溶解。再依次加入蔗糖0.8g，硫酸铵0.15g，BSA0.05g，柠檬酸0.3g，搅拌使稳定剂充分溶解，用0.537g Na2HPO4.12H2O和0.078g NaH2PO4.2H2O调节混合液pH至7.4，再加入90ml去离子水、0.001g蔗糖酯和0.2ml Proclin300搅拌均匀，制成溶液。将上述混合液避光静置24h，过滤后得到阴道分泌物染色液。
(2)阴道分泌物染色液染色方法如下：
用2ml生理盐水将一次性棉签上的阴道分泌物洗脱至软胶管中，滴2-3滴本染色液，捏软胶管一分钟，使阴道分泌物充分染色，再取一滴样本液到载玻片上，使用显微镜进行阴道分泌物观察。
实施例6采用蔗糖酯作为表面活性剂。对比实施例1，使用实施例6制得的阴道分泌物染色液进行染色，能看到滴虫和霉菌无法染色，白细胞和上皮细胞正常染色，但染色效果不佳。本发明团队基于实验和理论研究发现，十二烷基硫酸钠不但可以提升染料的性能，还能作为增溶剂，增加各溶质的溶解度。采用十二烷基硫酸钠作为表面活性剂，十二烷基硫酸钠可增加细胞膜通透性，与膜蛋白疏水部分结合并使其与膜分离，大大提升染色剂的染色效果。
对比例1
(1)配制阴道分泌物染色液：
电子天平称取甲基红1g，甲苯胺蓝0.1g于碾钵中，充分碾磨后全部置于烧杯中，加入10mL无水乙醇，搅拌，令染料充分溶解。再依次加入蔗糖0.8g，硫酸铵0.15g，BSA0.05g，柠檬酸0.3g，搅拌使稳定剂充分溶解，用0.537g Na2HPO4.12H2O和0.078g NaH2PO4.2H2O调节混合液pH至7.4，再加入90ml去离子水、0.001g十二烷基硫酸钠和0.2ml Proclin300搅拌均匀，制成溶液。将上述混合液避光静置24h，过滤后得到阴道分泌物染色液。
(2)阴道分泌物染色液染色方法如下：
用2ml生理盐水将一次性棉签上的阴道分泌物洗脱至软胶管中，滴2-3滴本染色液，捏软胶管一分钟，使阴道分泌物充分染色，再取一滴样本液到载玻片上，使用显微镜进行阴道分泌物观察。结果发现使用对比例1制得的阴道分泌物染色液进行染色，能看到滴虫和霉菌、白细胞和上皮细胞均能正常染色。
对比例2
(1)配制阴道分泌物染色液：
电子天平称取碱性品红1g，甲苯胺蓝0.1g于碾钵中，充分碾磨后全部置于烧杯中，加入10mL无水乙醇，搅拌，令染料充分溶解。再依次加入蔗糖0.8g，硫酸铵0.15g，BSA0.05g，柠檬酸0.3g，搅拌使稳定剂充分溶解，用0.537g Na2HPO4.12H2O和0.078g NaH2PO4.2H2O调节混合液pH至7.4，再加入90ml去离子水、0.001g十二烷基硫酸钠和0.2ml Proclin300搅拌均匀，制成溶液。将上述混合液避光静置24h，过滤后得到阴道分泌物染色液。
(2)阴道分泌物染色液染色方法如下：
用2ml生理盐水将一次性棉签上的阴道分泌物洗脱至软胶管中，滴2-3滴本染色液，捏软胶管一分钟，使阴道分泌物充分染色，再取一滴样本液到载玻片上，使用显微镜进行阴道分泌物观察。结果发现使用对比例2制得的阴道分泌物染色液进行染色，能看到滴虫和霉菌、白细胞和上皮细胞均能正常染色。
对比例3
(1)配制阴道分泌物染色液：
电子天平称取甲基红1g，亚基蓝0.1g于碾钵中，充分碾磨后全部置于烧杯中，加入10mL无水乙醇，搅拌，令染料充分溶解。再依次加入蔗糖0.8g，硫酸铵0.15g，BSA0.05g，柠檬酸0.3g，搅拌使稳定剂充分溶解，用0.537g Na2HPO4.12H2O和0.078g NaH2PO4.2H2O调节混合液pH至7.4，再加入90ml去离子水、0.001g十二烷基硫酸钠和0.2ml Proclin300搅拌均匀，制成溶液。将上述混合液避光静置24h，过滤后得到阴道分泌物染色液。
(2)阴道分泌物染色液染色方法如下：
用2ml生理盐水将一次性棉签上的阴道分泌物洗脱至软胶管中，滴2-3滴本染色液，捏软胶管一分钟，使阴道分泌物充分染色，再取一滴样本液到载玻片上，使用显微镜进行阴道分泌物观察。结果发现使用对比例3制得的阴道分泌物染色液进行染色，能看到滴虫和霉菌、白细胞和上皮细胞均能正常染色。
本发明中所用原料、设备，若无特别说明，均为本领域的常用原料、设备；本发明中所用方法，若无特别说明，均为本领域的常规方法。
以上所述，仅是本发明的较佳实施例，并非对本发明作任何限制，凡是根据本发明技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、变更以及等效变换，均仍属于本发明技术方案的保护范围。
Claims (10)
1.一种阴道分泌物染色液，其特征是，包括染色剂和染色溶剂、稳定剂，以及缓冲盐；
所述染色剂为碱性品红、亚基蓝。
2.根据权利要求1所述阴道分泌物染色液，其特征是，阴道分泌物染色液中，所述碱性染料品红的含量为10～15g/L，亚基蓝的含量为1～1.5g/L。
3.根据权利要求1或2所述阴道分泌物染色液，其特征是，所述稳定剂包括细胞膜保护剂和蛋白活性保护剂、血清白蛋白，以及抗氧化剂。
4.根据权利要求3所述阴道分泌物染色液，其特征是，阴道分泌物染色液中，所述细胞膜保护剂的含量为7～9g/L，蛋白活性保护剂的含量为1～2g/L，血清白蛋白的含量为0.4～0.6g/L，抗氧化剂的含量为2～4g/L。
5.根据权利要求1或2所述阴道分泌物染色液，其特征是，所述染料溶剂为无水乙醇、甲醇、乙二醇中的一种或几种。
6.根据权利要求1或2所述阴道分泌物染色液，其特征是，阴道分泌物染色液中，所述染料溶剂的含量为90～110ml/L。
7.根据权利要求1或2所述阴道分泌物染色液，其特征是，所述缓冲盐为MES、硼酸盐、磷酸盐、Tris-HCl、Bistris-HCl、HEPES、PIPES中的一种或多种。
8.根据权利要求7所述阴道分泌物染色液，其特征是，所述缓冲盐为磷酸盐，所述磷酸盐为Na2HPO4.12H2O、NaH2PO4.2H2O。
9.如权利要求1-8任一所述阴道分泌物染色液的制备方法，其特征是，包括如下步骤：
(S1)用染色溶剂溶解碱性品红和亚基蓝，得到染色溶液；
(S2)在上述染色溶液中加入稳定剂，用缓冲盐调节pH至中性，得到缓冲溶液，
(S3)将上述缓冲溶液避光静置，得到阴道分泌物染色液。
10.一种阴道分泌物染色液的染色方法，其特征是，采用湿片染色法对阴道分泌物进行染色，所述湿片染色法为：将经洗脱液洗脱的阴道分泌物滴加到载玻片上或样本管中，之后将如权利要求1-8任一所述阴道分泌物染色液与阴道分泌物混合均匀，使所述染色液对阴道分泌物进行染色。
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