CN116568677A - 可用于治疗mtap缺乏和/或mta累积癌症的哌啶-1-基-n-吡啶-3-基-2-氧代乙酰胺衍生物 - Google Patents

可用于治疗mtap缺乏和/或mta累积癌症的哌啶-1-基-n-吡啶-3-基-2-氧代乙酰胺衍生物 Download PDF

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Abstract

提供根据式(I)的化合物及其药学上可接受的盐以及其药物组合物；其中R1、R2、R3、R4、R6、R7、R8和n如本文所定义。预期本发明的化合物可用于预防和治疗多种病状。

Description

可用于治疗MTAP缺乏和/或MTA累积癌症的哌啶-1-基-N-吡 啶-3-基-2-氧代乙酰胺衍生物
背景技术
癌症治疗剂可以大体上分成两个类别，细胞毒性疗法和靶向疗法。尽管细胞毒性疗法与广泛毒性相关，但靶向疗法具有依赖于其基质活性而选择性靶向肿瘤细胞的优点。已分别以BCR/ABL和EGFR抑制剂治疗CML和非小细胞肺癌证实了靶向疗法的临床功效。这些计划的成功促进了特异性靶向扩增或突变活化的致癌基因的其他疗法的开发。更大的挑战为开发出靶向那些具有功能丧失型突变或肿瘤抑制基因缺失的肿瘤的选择性疗法，所述基因的损失排除了分子靶向治疗剂的传统策略。
由如癌症基因组图谱(Cancer Genome Atlas，TCGA)的组引导的表征癌症基因组的工作在阐明通过引起肿瘤抑制基因的损失促进肿瘤生长的缺失事件的大小和频率方面取得了极大进步。然而，这些事件通常为区域性的且引起其预期靶标附近基因的共同缺失。尽管不知道这些意外事件(passenger event)是否引起适应优势，但其可引起附带缺陷，所述附带缺陷可在治疗上进行平衡。一个实例为通过甲硫腺苷磷酸化酶(MTAP)的损失赋予的PRMT5抑制的附带缺陷，所述酶频繁与经充分描述的肿瘤抑制基因CDKN2A共同缺失(Kruykov等人,2016；Marjon等人,2016和Markarov等人,2016)。
在所有人类癌症中约10-15％发生CDKN2A的损失，且在组织学中十分频繁，诸如恶性外周神经鞘瘤、神经胶质母细胞瘤、间皮瘤、膀胱尿路上皮癌、食道鳞状细胞癌、胰腺腺癌、黑色素瘤、非小细胞肺癌、头颈癌和胆管肉瘤(cholangiosarcoma)(Gao等人Sci.Signal.2013；Cerami等人Cancer Discov.2012；和Marjon等人Cell Reports2016)。由于与染色体9p21上的CDKN2A相邻，所以MTAP频繁包括在缺失中。MTAP为甲硫氨酸再利用途径的关键酶，甲硫氨酸再利用途径为从多胺合成产物甲基硫腺苷(MTA)再循环甲硫氨酸的六步过程。MTAP的损失引起其基质MTA累积，所述基质已由多个组证实了起SAM竞争性PRMT5抑制剂的作用(Kruykov等人,2016；Marjon等人,2016；和Markarov等人,2016)。
PRMT5为通过使参与转录和信号传导的蛋白质对称二甲基化来调控必需细胞功能的II型精氨酸甲基转移酶，所述功能包括调控细胞周期进展、细胞凋亡和DNA损害反应(Koh,Bezzi和Guccione Curr Mol Bio Rep 2015以及Wu等人Nat Rev Drug Discovery2021)。然而，使用shRNA自全基因组遗传扰动筛选得到的数据揭示了在MTAP缺失癌细胞系中对PRMT5活性的选择性要求(Kruykov等人,2016；Marjon等人,2016；和Markarov等人,2016)。在这些细胞系中由MTAP缺失引起的MTA累积部分抑制PRMT5，从而使那些细胞对额外PRMT5抑制选择性敏感。
已开发了PRMT5抑制剂，但它们并未证实对MTAP缺失癌细胞系的选择性。此选择性缺乏可通过抑制剂的作用机制来解释，因为它们为SAM无竞争性或SAM竞争性抑制剂，且因此为MTAP不可知的(MTAP-agnostic)(Kruykov等人,2016；Marjon等人,2016和Markarov等人,2016)。然而，如果开发了通过以MTA无竞争性、非竞争性或混合模式方式或者以MTA协作结合方式进行结合来对MTA累积加杠杆的PRMT5抑制剂，则其可证实对MTAP缺失肿瘤细胞的选择性。
发明内容
在本发明的一个方面中，提供了一种式(I)化合物或其药学上可接受的盐；
其中：
每个R1独立地选自H、-D、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C9环烷基、3-10元杂环基、杂环基烷基、杂芳基烷基、芳基烷基、环烷基烷基、-ORa1、-N(Ra1)2、-C(＝O)Ra1、-C(＝O)ORa1、-NRa1C(＝O)Ra1、-NRa1C(＝O)ORa1、-C(＝O)N(Ra1)2、-OC(＝O)N(Ra1)2、-S(＝O)Ra1、-S(＝O)2Ra1、-SRa1、-S(＝O)(＝NRa1)Ra1、-NRa1S(＝O)2Ra1和-S(＝O)2N(Ra1)2；
每个R2独立地选自卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C1-C6卤烷氧基、-C3-C9环烷基、3-10元杂环基、杂环基烷基、杂芳基烷基、芳基烷基、环烷基烷基、-ORa2、-N(Ra2)2、-C(＝O)Ra2、-C(＝O)ORa2、-NRa2C(＝O)Ra2、-NRa2C(＝O)ORa2、-C(＝O)N(Ra2)2、-C(＝O)N(ORa2)(Ra2)、-OC(＝O)N(Ra2)2、-S(＝O)Ra2、-S(＝O)2Ra2、-SRa2、-S(＝O)(＝NRa2)Ra2、-NRa2S(＝O)2Ra2和-S(＝O)2N(Ra2)2；
每个R3独立地选自H、-D、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C9环烷基、3-10元杂环基、杂环基烷基、杂芳基烷基、芳基烷基、环烷基烷基、-ORa3、-N(Ra3)2、-C(＝O)Ra3、-C(＝O)ORa3、-NRa3C(＝O)Ra3、-NRa3C(＝O)ORa3、-C(＝O)N(Ra3)2、-OC(＝O)N(Ra3)2、-S(＝O)Ra3、-S(＝O)2Ra3、-SRa3、-S(＝O)(＝NRa3)Ra3、-NRa3S(＝O)2Ra3和-S(＝O)2N(Ra3)2；
每个R4独立地选自H、-D、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C9环烷基、3-10元杂环基、杂环基烷基、杂芳基烷基、芳基烷基、环烷基烷基、-ORa4、-N(Ra4)2、-C(＝O)Ra4、-C(＝O)ORa4、-NRa4C(＝O)Ra4、-NRa4C(＝O)ORa4、-C(＝O)N(Ra4)2、-OC(＝O)N(Ra4)2、-S(＝O)Ra4、-S(＝O)2Ra4、-SRa4、-S(＝O)(＝NRa4)Ra4、-NRa4S(＝O)2Ra4和-S(＝O)2N(Ra4)2；
每个R6独立地不存在或选自H、-D、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C10碳环基、3-10元杂环基、杂环基烷基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基、杂芳基烷基、芳基烷基、环烷基烷基、-ORa6、-N(Ra6)2、-C(＝O)Ra6、-C(＝O)ORa6、-NRa6C(＝O)Ra6、-NRa6C(＝O)ORa6、-C(＝O)N(Ra6)2、-OC(＝O)N(Ra6)2、-S(＝O)Ra6、-S(＝O)2Ra6、-SRa6、-S(＝O)(＝NRa6)Ra6、-NRa6S(＝O)2Ra6和-S(＝O)2N(Ra6)2，其中每个烷基、碳环基、杂环基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷基任选地在任一可用位置被取代；
每个R7独立地不存在或选自H、-D、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6羟基烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C9环烷基、3-10元杂环基、5-6元单环杂芳基、杂环基烷基、杂芳基烷基、芳基烷基、环烷基烷基、-ORa7、-N(Ra7)2、-C(＝O)Ra7、-C(＝O)ORa7、-NRa7C(＝O)Ra7、-NRa7C(＝O)ORa7、-C(＝O)N(Ra7)2、-OC(＝O)N(Ra7)2、-S(＝O)Ra7、-S(＝O)2Ra7、-SRa7、-S(＝O)(＝NRa7)Ra7、-NRa7S(＝O)2Ra7和-S(＝O)2N(Ra7)2；
每个R8独立地选自H、-D、＝O、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C9环烷基、3-10元杂环基、杂环基烷基、杂芳基烷基、芳基烷基、环烷基烷基、-ORa8、-N(Ra8)2、-C(＝O)Ra8、-C(＝O)ORa8、-NRa8C(＝O)Ra8、-NRa8C(＝O)ORa8、-CH2C(＝O)N(Ra8)2、-C(＝O)N(Ra8)2、-OC(＝O)N(Ra8)2、-CH2C(＝O)N(Ra8)2、-S(＝O)Ra8、-S(＝O)2Ra8、-SRa8、-S(＝O)(＝NRa8)Ra8、-NRa8S(＝O)2Ra8和-S(＝O)2N(Ra8)2，其中R8的两个实例连同它们所附接至的原子可一起形成3-10元环烷基或杂环基环(例如，连同结构I的哌啶环可以形成桥接、稠合或螺双环杂环的环)
每个Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地选自H、C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、C3-C9环烷基、3-7元杂环基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基、5-6元杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷基，其中每个烷基、环烷基、杂环基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷基任选地在任一可用位置被取代(例如，被R9的0、1、2或3个实例取代，其中每个R9独立地选自＝O、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C9环烷基、3-10元杂环基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基烷基、杂芳基烷基、-ORb、-N(Rb)2、-C(＝O)Rb、-C(＝O)ORb、-NRbC(＝O)Rb、-NRbC(＝O)ORb、-C(＝O)N(Rb)2、-OC(＝O)N(Rb)2、-S(＝O)Rb、-S(＝O)2Rb、-SRb、-S(＝O)(＝NRb)Rb、-NRbS(＝O)2Rb和-S(＝O)2N(Rb)2，其中每个Rb独立地选自H、-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-nBu、-tBu、-sec-Bu、-iso-Bu)和C3-C9环烷基(例如，环丙基、环丁基、环戊基、环己基)；且
n为0、1、2或3
前提条件为：
(i)当R1为H时，R2不为卤基、-OPr、-N(CH3)2或-CF3；
(ii)当R1为ORa1时，R2不为-ORa2；
(iii)当R1为H且R2为-CH3时，R8基团不可一起形成环且R6并非不存在或为H，且不为噻唑基、呋喃基或吡咯基；
(iv)当R2为Me时，R1不为任选地被取代的哌啶
(v)所述化合物不为：
(A)5-(2-(5-甲基-2-(对甲苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺或其对映异构体或非对映异构体中的任一者；
(B)2-(2-(4-(2H-四唑-5-基)苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-N-(5,6-二甲基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺或其对映异构体或非对映异构体中的任一者；
(C)2-氰基-5-(2-(5-甲基-2-苯基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺或其对映异构体或非对映异构体中的任一者。
在某些实施方案中，R6和R7不为H且呈反式相对构型。在一些实施方案中，R6和R7不为H且呈顺式相对构型。
在式(I)的一些实施方案中，表示为的部分选自：
在式(I)的一些实施方案中，表示为的部分选自：
在式(I)的其他实施方案中，表示为的部分选自：
在一些实施方案中，化合物具有式(Ia)
在其他实施方案中，化合物具有式(Ib)
在一些实施方案中，化合物具有式(Ic)
在其他实施方案中，化合物具有式(Id)
在式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)的一些实施方案中，每个R8独立地选自H、-D、＝O、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C9环烷基、3-10元杂环基、杂环基烷基、杂芳基烷基、芳基烷基、环烷基烷基、-ORa8、-N(Ra8)2、-C(＝O)Ra8、-C(＝O)ORa8、-NRa8C(＝O)Ra8、-NRa8C(＝O)ORa8、-CH2C(＝O)N(Ra8)2-C(＝O)N(Ra8)2、-OC(＝O)N(Ra8)2、-CH2C(＝O)N(Ra8)2、-S(＝O)Ra8、-S(＝O)2Ra8、-SRa8、-S(＝O)(＝NRa8)Ra8、-NRa8S(＝O)2Ra8和-S(＝O)2N(Ra8)2。
在式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)的一些实施方案中，R1选自H、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C9环烷基、3-10元杂环基、-ORa1、-N(Ra1)2、-C(＝O)Ra1、-C(＝O)ORa1、-NRa1C(＝O)Ra1、-NRa1C(＝O)ORa1、-C(＝O)N(Ra1)2和-OC(＝O)N(Ra1)2。在一些实施方案中，R1选自H、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6卤烷基、-ORa1和-N(Ra1)2。在一些实施方案中，R1选自H、-C1-C6烷基、-C1-C6卤烷基、-ORa1和-N(Ra1)2。在其他实施方案中，每个Ra1独立地选自H、-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-nBu、-tBu、-sec-Bu、-iso-Bu)和-C1-C6卤烷基(例如，-CHF2、-CF3)。
在式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)的某些实施方案中，R1选自H、-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-nBu、-tBu、-sec-Bu、-iso-Bu)、-C1-C6烷基(例如，-CF3、-CHF2)、-OH、-O-(C1-C6烷基)(例如，-OMe、-OEt)、-O-(C1-C6卤烷基)(例如，-OCF3、-OCHF2)、-NH2、-NH-(C1-C6烷基)(例如，-NHMe)和-N-(C1-C6烷基)2(例如，NMe2)。在一些实施方案中，R1选自H、-Me、-Et、-CHF2、-OMe、-OEt、-OCHF2、-OCF3、-OH和-NH2。在其他实施方案中，R1选自H、-Et、-OMe、-OEt、-OCHF2、-OCF3和-OH。在某些实施方案中，R1选自H和-OMe。在一些实施方案中，R1为H。在其他实施方案中，R1为-OMe。
在某些实施方案中，R1选自H、-Me、-CHF2和-NH2。在其他实施方案中，R1选自-Me和-NH2。在某些实施方案中，R1为-Me。在其他实施方案中，R1为-NH2。
在式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)的一些实施方案中，R2选自卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C1-C6卤烷氧基、-C3-C9环烷基(例如，环丙基)、3-10元杂环基(例如，氧杂环丁烷基、四氢呋喃基)、-ORa2、-N(Ra2)2、-C(＝O)Ra2、-C(＝O)ORa2、-NRa2C(＝O)Ra2、-NRa2C(＝O)ORa2、-C(＝O)N(Ra2)2、-C(＝O)N(ORa2)(Ra2)和-OC(＝O)N(Ra2)2。在其他实施方案中，R2选自卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6卤烷基、-C1-C6卤烷氧基、-C3-C9环烷基(例如，环丙基)、3-6元杂环基(例如，氧杂环丁烷基、四氢呋喃基)、-ORa2、-N(Ra2)2、-C(＝O)N(ORa2)(Ra2)、-C(＝O)Ra2和-C(＝O)N(Ra2)2。在某些实施方案中，R2选自卤基、-C1-C6烷基、-C1-C6卤烷基、-C1-C6卤烷氧基、-C3-C9环烷基(例如，环丙基)、3-6元杂环基(例如，氧杂环丁烷基、四氢呋喃基)、-ORa2、-C(＝O)Ra2和-C(＝O)N(Ra2)2。在一些实施方案中，R2选自卤基、-C1-C6烷基、-C3-C9环烷基(例如，环丙基)、3-6元杂环基(例如，氧杂环丁烷基、四氢呋喃基)、-C1-C6卤烷基、-C1-C6卤烷氧基、-ORa2和-C(＝O)N(Ra2)2。在其他实施方案中，每个Ra2独立地选自H和-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-nBu、-tBu、-sec-Bu、-iso-Bu)。在某些实施方案中，R2选自卤基(例如，-Cl)、-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-nBu、-tBu、-sec-Bu、-iso-Bu)、-C1-C6卤烷基(例如，-CF3、CHF2)、-C3-C9环烷基(例如，环丙基)、3-6元杂环基(例如，氧杂环丁烷基、四氢呋喃基)、-C1-C6卤烷氧基(例如，-OCF3、-OCHF2)、-OMe、-C(＝O)H、-C(＝O)NHOH和-C(＝O)NH2。在其他实施方案中，R2选自-Cl、-Me、-Et、-iPr、-CF3、CHF2、-OCHF2、-OCF3、环丙基、-C(＝O)NHOH、-C(＝O)H和-C(＝O)NH2。在某些实施方案中，R2选自-C(＝O)NH2和-C(＝O)H。在一些实施方案中，R2为-C(＝O)NH2。在某些实施方案中，R2选自-Cl、-Me、-Et、-iPr、-CF3、-CHF2、-OCHF2、-OCF3、氧杂环丁烷-3-基、四氢呋喃-3-基和环丙基。在其他实施方案中，R2选自环丙基、-Me和-Et。
在一些实施方案中，R1选自H、-OMe、-OEt、-OCF3、-OCHF2、-CHF2、-Me、-Et、-OH和-NH2，且R2选自-Cl、-Me、-Et、-iPr、-CF3、-CHF2、-OCHF2、-OCF3、环丙基、-C(＝O)NH2和-C(＝O)H，前提条件为当R2为-Me时，R1为NH2。
在一些实施方案中，R1选自H、-CHF2、-Me和-NH2，且R2选自-Cl、-Me、-Et、-CF3、-CHF2、-OCHF2和环丙基，前提条件为当R2为-Me时，R1为NH2。在某些实施方案中，R1选自-NH2和-Me，且R2选自-Me和-Et。在其他实施方案中，R1为-NH2，且R2选自环丙基、-Me和-Et。
在一些实施方案中，R1选自H、-OMe、-OEt、-OCF3、-OCHF2、-Et和-OH，且R2选自-C(＝O)NH2和-C(＝O)H。在其他实施方案中，R1选自H和-OMe且R2为-C(＝O)NH2。
在式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)的一些实施方案中，R3选自H、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C9环烷基、3-10元杂环基、-ORa3、-N(Ra3)2、-C(＝O)Ra3、-C(＝O)ORa3、-NRa3C(＝O)Ra3、-NRa3C(＝O)ORa3、-C(＝O)N(Ra3)2和-OC(＝O)N(Ra3)2。在一些实施方案中，R3选自H、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6卤烷基和-N(Ra3)2。在其他实施方案中，Ra3选自H和C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-nBu、-tBu、-sec-Bu、-iso-Bu)。在某些实施方案中，R3选自-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-nBu、-tBu、-sec-Bu、-iso-Bu)、-OH、-O-(C1-C6烷基)(例如，-OMe)、-NH2、-NH-(C1-C6烷基)(例如，-NHMe)和-N-(C1-C6烷基)2(例如，NMe2)。在其他实施方案中，R3选自H、-Me和-NH2。在某些实施方案中，R3选自H和-Me。在其他实施方案中，R3为-Me。
在式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)的一些实施方案中，R4选自H、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C9环烷基、3-10元杂环基、-ORa4、-N(Ra4)2、-C(＝O)Ra4、-C(＝O)ORa4、-NRa4C(＝O)Ra4、-NRa4C(＝O)ORa4、-C(＝O)N(Ra4)2和-OC(＝O)N(Ra4)2。在一些实施方案中，R4选自H、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6卤烷基和-N(Ra4)2。在其他实施方案中，每个Ra4独立地选自H和-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-nBu、-tBu、-sec-Bu、-iso-Bu)。在某些实施方案中，R4选自-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-nBu、-tBu、-sec-Bu、-iso-Bu)、-OH、-O-(C1-C6烷基)(例如，-OMe)、-NH2、-NH-(C1-C6烷基)(例如，-NHMe)和-N-(C1-C6烷基)2(例如，NMe2)。在其他实施方案中，R4为H。
在式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)的一些实施方案中，每个R6独立地选自H、-D、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C10碳环基、3-10元杂环基、杂环基烷基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基、杂芳基烷基、芳基烷基、环烷基烷基、-ORa6、-N(Ra6)2、-C(＝O)Ra6、-C(＝O)ORa6、-NRa6C(＝O)Ra6、-NRa6C(＝O)ORa6、-C(＝O)N(Ra6)2、-OC(＝O)N(Ra6)2、-S(＝O)Ra6、-S(＝O)2Ra6、-SRa6、-S(＝O)(＝NRa6)Ra6、-NRa6S(＝O)2Ra6和-S(＝O)2N(Ra6)2，其中每个烷基、碳环基、杂环基、芳基、杂芳基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基烷基和杂芳基烷基在任一可用位置被R10的0、1、2或3个实例取代，其中：
每个R10独立地选自-D、＝O、-CN、卤基、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C9环烷基、3-10元杂环基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基烷氧基、-ORb10、-N(Rb10)2、-C(＝O)Rb10、-C(＝O)ORb10、-NRb10C(＝O)Rb10、-NRb10C(＝O)ORb10、-C(＝O)N(Rb10)2、-OC(＝O)Rb10、-OC(＝O)N(Rb10)2、-S(＝O)Rb10、-S(＝O)2Rb10、-SRb10、-S(＝O)(＝NRb10)Rb10、-NRb10S(＝O)2Rb10和-S(＝O)2N(Rb10)2，其中R10的每个烷基、环烷基、杂烷基、杂环基、芳基、杂芳基、环烷基烷基、杂环基烷基、杂环基烷氧基、芳基烷基和杂芳基烷基任选地被取代(例如，被-Me、-OH、C(＝O)Me、-C(＝O)NHMe、-NH2、-NHC(＝O)Me或其组合的0、1、2或3个实例取代)；
每个Rb10独立地为H；-C1-C6烷基；-C1-C6卤烷基；被＝O的0或1个实例取代的-C1-C6杂烷基；C3-C9环烷基；或被＝O、-Me或其组合的0或1个实例取代的3-10元杂环基。
在式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)的一些实施方案中，每个R6独立地选自-D、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C10碳环基、3-10元杂环基、杂环基烷基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基、杂芳基烷基、芳基烷基、环烷基烷基、-ORa6、-N(Ra6)2、-C(＝O)Ra6、-C(＝O)ORa6、-NRa6C(＝O)Ra6、-NRa6C(＝O)ORa6、-C(＝O)N(Ra6)2、-OC(＝O)N(Ra6)2、-S(＝O)Ra6、-S(＝O)2Ra6、-SRa6、-S(＝O)(＝NRa6)Ra6、-NRa6S(＝O)2Ra6和-S(＝O)2N(Ra6)2，其中每个烷基、碳环基、杂环基、芳基、杂芳基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基烷基和杂芳基烷基在任一可用位置被R10的0、1、2或3个实例取代，其中：
每个R10独立地选自-D、＝O、-CN、卤基、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C9环烷基、3-10元杂环基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基烷氧基、-ORb10、-N(Rb10)2、-C(＝O)Rb10、-C(＝O)ORb10、-NRb10C(＝O)Rb10、-NRb10C(＝O)ORb10、-C(＝O)N(Rb10)2、-OC(＝O)Rb10、-OC(＝O)N(Rb10)2、-S(＝O)Rb10、-S(＝O)2Rb10、-SRb10、-S(＝O)(＝NRb10)Rb10、-NRb10S(＝O)2Rb10和-S(＝O)2N(Rb10)2，其中R10的每个烷基、环烷基、杂烷基、杂环基、芳基、杂芳基、环烷基烷基、杂环基烷基、杂环基烷氧基、芳基烷基和杂芳基烷基任选地被取代(例如，被-Me、-OH、C(＝O)Me、-C(＝O)NHMe、-NH2、-NHC(＝O)Me或其组合的0、1、2或3个实例取代)；
每个Rb10独立地为H；-C1-C6烷基；-C1-C6卤烷基；被＝O的0或1个实例取代的-C1-C6杂烷基；C3-C9环烷基；或被＝O、-Me或其组合的0或1个实例取代的3-10元杂环基。
在式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)的一些实施方案中，每个R6独立地选自H、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C10碳环基、3-10元杂环基、杂环基烷基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基、杂芳基烷基、芳基烷基、环烷基烷基、-ORa6、-N(Ra6)2、-C(＝O)Ra6、-C(＝O)ORa6、-NRa6C(＝O)Ra6、-NRa6C(＝O)ORa6、-C(＝O)N(Ra6)2、-OC(＝O)N(Ra6)2、-S(＝O)Ra6、-S(＝O)2Ra6、-SRa6、-S(＝O)(＝NRa6)Ra6、-NRa6S(＝O)2Ra6和-S(＝O)2N(Ra6)2，其中每个烷基、碳环基、杂环基、芳基、杂芳基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基烷基和杂芳基烷基在任一可用位置被R10的0、1、2或3个实例取代，其中：
每个R10独立地选自-D、＝O、-CN、卤基、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C9环烷基、3-10元杂环基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基烷氧基、-ORb10、-N(Rb10)2、-C(＝O)Rb10、-C(＝O)ORb10、-NRb10C(＝O)Rb10、-NRb10C(＝O)ORb10、-C(＝O)N(Rb10)2、-OC(＝O)Rb10、-OC(＝O)N(Rb10)2、-S(＝O)Rb10、-S(＝O)2Rb10、-SRb10、-S(＝O)(＝NRb10)Rb10、-NRb10S(＝O)2Rb10和-S(＝O)2N(Rb10)2，其中R10的每个烷基、环烷基、杂烷基、杂环基、芳基、杂芳基、环烷基烷基、杂环基烷基、杂环基烷氧基、芳基烷基和杂芳基烷基任选地被取代(例如，被-Me、-OH、C(＝O)Me、-C(＝O)NHMe、-NH2、-NHC(＝O)Me或其组合的0、1、2或3个实例取代)；
每个Rb10独立地为H；-C1-C6烷基；-C1-C6卤烷基；被＝O的0或1个实例取代的-C1-C6杂烷基；C3-C9环烷基；或被＝O、-Me或其组合的0或1个实例取代的3-10元杂环基。
在一些实施方案中，每个Ra6独立地选自H和-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-nBu、-tBu、-sec-Bu、-iso-Bu)。
在式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)的一些实施方案中，每个R6独立地选自H、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C10碳环基、3-10元杂环基、杂环基烷基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基、杂芳基烷基、芳基烷基和环烷基烷基，其中每个烷基、环烷基、杂环基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷基任选地在任一可用位置被取代。
在一些实施方案中，每个R6独立地选自-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C10碳环基、3-10元杂环基、杂环基烷基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基、杂芳基烷基、芳基烷基和环烷基烷基，其中每个烷基、环烷基、杂环基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷基任选地在任一可用位置被取代。
在一些实施方案中，每个R6独立地选自H、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C10碳环基、3-10元杂环基、杂环基烷基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基、杂芳基烷基、芳基烷基和环烷基烷基，其中每个烷基、环烷基、杂环基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷基在任一可用位置被R10的0、1、2或3个实例取代，其中：
每个R10独立地选自-D、＝O、-CN、卤基、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C9环烷基、3-10元杂环基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基、环烷基烷基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基烷氧基、杂环基烷基、-ORb10、-N(Rb10)2、-C(＝O)Rb10、-C(＝O)ORb10、-NRb10C(＝O)Rb10、-NRb10C(＝O)ORb10、-C(＝O)N(Rb10)2、-OC(＝O)Rb10、-OC(＝O)N(Rb10)2、-S(＝O)Rb10、-S(＝O)2Rb10、-SRb10、-S(＝O)(＝NRb10)Rb10、-NRb10S(＝O)2Rb10和-S(＝O)2N(Rb10)2，其中R10的每个烷基、环烷基、杂烷基、杂环基、芳基、杂芳基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基烷基和杂芳基烷基任选地被取代(例如，被-Me、-Et、-iPr、环丙基、氧杂环丁烷-3-基、-OH、＝O、-F、-OMe、-CH2CH2F、-CH2CHF2、-CH2CH2CF3、-C(＝O)Me、-N(Me)2、-CH2N(CH3)2、-CH2N(CH3)CH2CH3、-N(iPr)(Et)、-N(iPr)(Me)、-N(Et)2、-N(CH3)(Et)、-NHC(＝O)Me或其组合的0、1、2、3、4或5个实例取代)；且
每个Rb10独立地选自H；-C1-C6烷基；-C1-C6卤烷基；被＝O的0或1个实例取代的-C1-C6杂烷基；C3-C9环烷基；和被＝O、-Me或其组合的0或1个实例取代的3-10元杂环基。
在式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)的一些实施方案中，每个R6独立地选自H、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C10碳环基、3-10元杂环基、杂环基烷基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基、杂芳基烷基、芳基烷基和环烷基烷基，其中每个烷基、环烷基、杂环基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷基任选地在任一可用位置被取代。在某些实施方案中，每个R6独立地选自H、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C10碳环基、3-10元杂环基、杂环基烷基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基、杂芳基烷基、芳基烷基和环烷基烷基，其中每个烷基、环烷基、杂环基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷基在任一可用位置被R10的0、1、2或3个实例取代，其中：
每个R10独立地选自-D、＝O、-CN、卤基、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C9环烷基、3-10元杂环基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基、环烷基烷基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基烷氧基、杂环基烷基、-ORb10、-N(Rb10)2、-C(＝O)Rb10、-C(＝O)ORb10、-NRb10C(＝O)Rb10、-NRb10C(＝O)ORb10、-C(＝O)N(Rb10)2、-OC(＝O)Rb10、-OC(＝O)N(Rb10)2、-S(＝O)Rb10 、-S(＝O)2Rb10、-SRb10、-S(＝O)(＝NRb10)Rb10、-NRb10S(＝O)2Rb10和-S(＝O)2N(Rb10)2，其中R10的每个烷基、环烷基、杂烷基、杂环基、芳基、杂芳基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基烷基和杂芳基烷基任选地被取代(例如，被-Me、-Et、-iPr、环丙基、氧杂环丁烷-3-基、-OH、＝O、-F、-OMe、-CH2CH2F、-CH2CHF2、-CH2CH2CF3、-C(＝O)Me、-N(Me)2、-CH2N(CH3)2、-CH2N(CH3)CH2CH3、-N(iPr)(Et)、-N(iPr)(Me)、-N(Et)2、-N(CH3)(Et)、-NHC(＝O)Me或其组合的0、1、2、3、4或5个实例取代)；且
每个Rb10独立地选自H；-C1-C6烷基；-C1-C6卤烷基；被＝O的0或1个实例取代的-C1-C6杂烷基；C3-C9环烷基；和被＝O、-Me或其组合的0或1个实例取代的3-10元杂环基。
在一些实施方案中，每个R6独立地选自H、-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-iBu、sec-Bu、-tBu)、-C3-C10单环或双环碳环基(例如，环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、双环[1.1.1]戊-基、4,5,6,7-四氢-1H-吲唑基、螺[3.3]庚基)、3-10元单环或双环杂环基(例如，氧杂环丁烷基、氮杂环庚烷基(azepanyl)、哌啶基、吡咯烷基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、1,2-二氢吡啶基、吗啉基、异吲哚啉基)、C6-C10单环或双环芳基(例如，苯基、萘基、1,2,3,4-四氢萘基、2,3-二氢-1H-茚基、1,2,3,4-四氢喹啉基、1,2-二氢喹啉基、1,2-二氢异喹啉基、1,2,3,4-四氢异喹啉基、色原烷基、吲哚啉基、3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噁嗪基、2,3-二氢苯并呋喃基、苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基、2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑基)、5-6元单环杂芳基(例如，噻吩基、噻唑基、吡唑基、咪唑基、噁唑基、吡啶基、嘧啶基)、8-10元双环杂芳基(例如，苯并[d]异噻唑基、吲哚基、苯并呋喃基、1H-吲唑基、2H-吲唑基、苯并[b]噻吩基、喹啉基、1,5-萘啶基、1,2-二氢-1,5-萘啶基、1,2,3,4-四氢-1,8-萘啶基、异喹啉基、苯并[d]咪唑基、苯并[d]噻唑基、苯并[d]噁唑基、[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶基、咪唑并[1,2-a]吡啶基、咪唑并[1,5-a]吡啶基、1H-吡唑并[4,3-b]吡啶基)、1H-吡唑并[3,4-b]吡啶基、1H-噻吩并[2,3-c]吡唑基、1H-噻吩并[3,2-c]吡唑基、噻唑并[5,4-b]吡啶基)，其中每个烷基、碳环基、杂环基、芳基和杂芳基任选地被取代(例如，被R10的0、1、2或3个实例取代)。在一些实施方案中，每个R6独立地选自-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-iBu、sec-Bu、-tBu)、-C3-C10单环或双环碳环基(例如，环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、双环[1.1.1]戊-基、4,5,6,7-四氢-1H-吲唑基、螺[3.3]庚基)、3-10元单环或双环杂环基(例如，氧杂环丁烷基、氮杂环庚烷基、哌啶基、吡咯烷基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、1,2-二氢吡啶基、吗啉基、异吲哚啉基)、C6-C10单环或双环芳基(例如，苯基、萘基、1,2,3,4-四氢萘基、2,3-二氢-1H-茚基、1,2,3,4-四氢喹啉基、1,2-二氢喹啉基、1,2-二氢异喹啉基、1,2,3,4-四氢异喹啉基、色原烷基、吲哚啉基、异吲哚啉基、3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噁嗪基、2,3-二氢苯并呋喃基、苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基(dioxolyl)、2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑基)、5-6元单环杂芳基(例如，噻吩基、噻唑基、吡唑基、咪唑基、噁唑基、吡啶基、嘧啶基)、8-10元双环杂芳基(例如，苯并[d]异噻唑基、吲哚基、苯并呋喃基、1H-吲唑基、2H-吲唑基、苯并[b]噻吩基、喹啉基、1,5-萘啶基、1,2-二氢-1,5-萘啶基、1,2,3,4-四氢-1,8-萘啶基、异喹啉基、苯并[d]咪唑基、苯并[d]噻唑基、苯并[d]噁唑基、[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶基、咪唑并[1,2-a]吡啶基、咪唑并[1,5-a]吡啶基、1H-吡唑并[4,3-b]吡啶基)、1H-吡唑并[3,4-b]吡啶基、1H-噻吩并[2,3-c]吡唑基、1H-噻吩并[3,2-c]吡唑基、噻唑并[5,4-b]吡啶基)，其中每个烷基、碳环基、杂环基、芳基和杂芳基任选地被取代(例如，被R10的0、1、2或3个实例取代)。
在某些实施方案中，每个R6为8-10元双环杂芳基(例如，吲哚基、苯并呋喃基、1H-吲唑基、2H-吲唑基、苯并[b]噻吩基、喹啉基、1,5-萘啶基、1,2-二氢-1,5-萘啶基、1,2,3,4-四氢-1,8-萘啶基、咪唑并[1,2-a]吡啶基、咪唑并[1,5-a]吡啶基、异喹啉基、苯并[d]咪唑基、苯并[d]噻唑基、苯并[d]异噻唑基、苯并[d]噁唑基、[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶基、咪唑并[1,2-a]吡啶基、1H-吡唑并[4,3-b]吡啶基)、1H-吡唑并[3,4-b]吡啶基、1H-噻吩并[2,3-c]吡唑基、1H-噻吩并[3,2-c]吡唑基、噻唑并[5,4-b]吡啶基、1,2,3,4-四氢-1,8-萘啶基)，其中双环杂芳基任选地被取代(例如，被R10的0、1、2或3个实例取代)。在一些实施方案中，每个R6独立地选自H、-Me、-iPr、-iBu、sec-Bu、环丁基、环戊基、环己基、双环[1.1.1]戊烷-1-基、螺[3.3]庚-2-基、4,5,6,7-四氢-1H-吲唑-6-基、哌啶-4-基、哌啶-3-基、吡咯烷-3-基、1,2-二氢吡啶-4-基、苯基、萘-2-基、1,2,3,4-四氢喹啉-6-基、1,2,3,4-四氢萘-6-基、色原烷-6-基、1,5-萘啶-6-基、1,2,3,4-四氢-1,8-萘啶-6-基、2,3-二氢-1H-茚-5-基、吲哚啉-5-基、吲哚啉-4-基、2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基、2,3-二氢苯并呋喃-5-基、2,3-二氢苯并呋喃-6-基、苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基]、异吲哚啉-5-基、异吲哚啉-6-基、3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-7-基、1,2-二氢喹啉-6-基、1,2-二氢异喹啉-7-基、噻吩-2-基、噻吩-3-基、噻唑-2-基、噻唑-4-基、噻唑-5-基、吡唑-1-基、吡唑-5-基、吡唑-3-基、吡唑-4-基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基、嘧啶-5-基、吲哚-4-基、吲哚-5-基、苯并呋喃-5-基、苯并呋喃-6-基、1H吲唑-5-基、1H吲唑-4-基、2H-吲唑-6-基、2H-吲唑-5-基、苯并[b]噻吩-3-基、苯并[b]噻吩-5-基、喹啉-6-基、喹啉-3-基、异喹啉-6-基、苯并[d]咪唑-5-基、1H-苯并[d]咪唑-4-基、苯并[d]噻唑-5-基、苯并[d]噻唑-6-基、苯并[d]噻唑-4-基、苯并[d]异噻唑-5-基、苯并[d]噁唑-4-基、苯并[d]噁唑-5-基、[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-6-基、咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基、咪唑并[1,2-a]吡啶-7-基、咪唑并[1,5-a]吡啶-6-基、吡唑并[4,3-b]吡啶-6-基、1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-基、1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-基、1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-5-基、1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-6-基、1H-噻吩并[2,3-c]吡唑-5-基、1H-噻吩并[3,2-c]吡唑-5-基、噻唑并[5,4-b]吡啶-6-基)，其各自任选地被取代(例如，被R10的0、1、2或3个实例取代)。
在一些实施方案中，每个R6独立地选自-Me、-iPr、-iBu、sec-Bu、环丁基、环戊基、环己基、双环[1.1.1]戊烷-1-基、螺[3.3]庚-2-基、4,5,6,7-四氢-1H-吲唑-6-基、哌啶-4-基、哌啶-3-基、吡咯烷-3-基、1,2-二氢吡啶-4-基、苯基、萘-2-基、1,2,3,4-四氢喹啉-6-基、1,2,3,4-四氢萘-6-基、色原烷-6-基、1,5-萘啶-6-基、1,2,3,4-四氢-1,8-萘啶-6-基、2,3-二氢-1H-茚-5-基、吲哚啉-5-基、吲哚啉-4-基、2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基、2,3-二氢苯并呋喃-5-基、2,3-二氢苯并呋喃-6-基、苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基]、异吲哚啉-5-基、异吲哚啉-6-基、3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-7-基、1,2-二氢喹啉-6-基、1,2-二氢异喹啉-7-基、噻吩-2-基、噻吩-3-基、噻唑-2-基、噻唑-4-基、噻唑-5-基、吡唑-1-基、吡唑-5-基、吡唑-3-基、吡唑-4-基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基、嘧啶-5-基、吲哚-4-基、吲哚-5-基、苯并呋喃-5-基、苯并呋喃-6-基、1H吲唑-5-基、1H-吲唑-4-基、2H-吲唑-6-基、2H-吲唑-5-基、苯并[b]噻吩-3-基、苯并[b]噻吩-5-基、喹啉-6-基、喹啉-3-基、异喹啉-6-基、苯并[d]咪唑-5-基、1H-苯并[d]咪唑-4-基、苯并[d]噻唑-5-基、苯并[d]噻唑-6-基、苯并[d]噻唑-4-基、苯并[d]异噻唑-5-基、苯并[d]噁唑-4-基、苯并[d]噁唑-5-基、[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-6-基、咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基、咪唑并[1,2-a]吡啶-7-基、咪唑并[1,5-a]吡啶-6-基、吡唑并[4,3-b]吡啶-6-基、1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-基、1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-基、1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-5-基、1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-6-基、1H-噻吩并[2,3-c]吡唑-5-基、1H-噻吩并[3,2-c]吡唑-5-基、噻唑并[5,4-b]吡啶-6-基)，其各自任选地被取代(例如，被R10的0、1、2或3个实例取代)。
在一些实施方案中，R6选自任选地被取代的苯基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基和嘧啶-5-基(例如，被R10的0、1、2或3个实例取代)。在一些实施方案中，R6选自苯基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基、嘧啶-5-基和被R10的一个实例取代的苯基。
在一些实施方案中，R6选自：
在其他实施方案中，R6为
在一些实施方案中，R6为任选地被取代的苯基(例如，被R10的0、1、2或3个实例取代)。在某些实施方案中，R6为
在一些实施方案中，R6选自任选地被取代的双环杂芳基(例如，被R10的0、1、2或3个实例取代)。在其他实施方案中，R6选自任选地被取代的1H-吲唑-5-基、2H-吲唑-5-基、苯并[d]异噻唑-5-基、苯并[d]噻唑-5-基、苯并[b]噻吩-5-基、苯并[d]噁唑-4-基、苯并[d]噁唑-5-基、喹啉-7-基、1H-噻吩并[2,3-c]吡唑-5-基、咪唑并[1,2-a]吡啶-7-基和咪唑并[1,5-a]吡啶-6-基(例如，被R10的0、1、2或3个实例取代)。
在一些实施方案中，R6为 在其他实施方案中，
在本发明的某些实施方案中，R10独立地选自-D、＝O、卤基(例如，F、Cl、Br)、-CN、-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-sec-Bu、-tBu、CH2(CH3)(iPr))、-C1-C6杂烷基(例如，-CH(CH3)(NMe2)、-CH2CH2N(Me)(氧杂环丁烷-3-基))、-CH2CH(CH3)(NMe2)、-CH2OH、-CH(OH)(CH3)、-C(OH)(CH3)2、-CH2NH2)、-C1-C6卤烷基(例如，-CHF2、-CH2CF3、-CF3)、-C3-C9环烷基(例如，环丙基、环丁基、环戊基、环己基)、3-10元杂环基(例如，四氢呋喃基、四氢吡喃基、氧杂环丁烷基、吗啉基、吡咯烷基、哌啶基、哌啶-2-酮基、哌嗪基、哌嗪-2-酮基、氮杂环丁烷基、十氢-1,6-萘啶基、2-氮杂螺[3.3]庚基、5-氧杂-2,8-二氮杂螺[3.5]壬基、8-氮杂双环[3.2.1]辛基、2-氮杂双环[2.2.2]辛基、3-氮杂双环[3.2.0]庚基、3-氮杂双环[3.1.1]庚基、3-氮杂双环[3.1.0]己基、2-氮杂双环[2.1.1]己基、1-氮杂双环[2.2.1]庚基、3-氮杂双环[3.2.0]庚基、2,9-二氮杂螺[5.5]十一烷基、双环[1.1.1]戊基、八氢环戊[c]吡咯基、十氢-1,6-萘啶基、八氢-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶基、十氢-2,7-萘啶基、2,9-二氮杂螺[5.5]十一烷基)、5-10元杂芳基(例如，吡啶基、咪唑并[1,2-a]吡啶基、咪唑基、吡唑基、噻唑基、噻吩基)、环烷基烷基(例如-CH2-环丙基)、杂环基烷基(例如，-CH2-吗啉基、-(CH2)2-吡咯烷基、-(Ch2)2-吡咯烷基、-CH2-咪唑基、-CH2-吡唑基、-CH2-1,2,4-三唑基、-CH2-吗啉基、-(CH2)2-吗啉基)、杂环基烷氧基(例如，-O-(CH2)2-吡咯烷基、-O-CH2-哌啶基、-O-CH2-氧杂环丁烷基、-O-CH2-四氢呋喃基、-O-CH2-四氢吡喃基)、杂芳基烷基(例如，-CH2-三唑基、-CH2-咪唑基、-CH2-吡唑基)、-ORb10(例如，-OH、-OMe、OEt、-O-四氢呋喃基、-O-四氢吡喃-4-基、-OCF3、-OCHF2)、-N(Rb10)2、(例如，-NH2、-NHRb10、-NHMe、-NMe2、-NHCH2CF3、-NH-氧杂环丁烷-3-基、-NH-(N-Me-2-氧代-吡咯烷-3-基)、-NRb10C(＝O)Rb10(例如，-NHC(＝O)Me)、-C(＝O)N(Rb10)2、(例如，-C(＝O)NH2、C(＝O)NHMe)、-OC(＝O)Rb10(例如，-OC(＝O)Me)、-S(＝O)Rb10(例如，-SO2Me)、-NRb10S(＝O)2Rb10(例如，NHSO2Me)和-S(＝O)2N(Rb10)2(例如，SO2NH2、SO2NHMe)，其中每个烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基烷基和杂芳基烷基任选地被取代(例如，被-Me、-Et、-iPr、环丙基、氧杂环丁烷-3-基、-OH、＝O、-F、-OMe、-CH2CH2F、-CH2CHF2、-CH2CH2CF3、-C(＝O)Me、-N(Me)2、-CH2N(CH3)2、-CH2N(CH3)CH2CH3、-N(iPr)(Et)、-N(iPr)(Me)、-N(Et)2、-N(CH3)(Et)、-NHC(＝O)Me或其组合的0、1、2、3、4或5个实例取代)；且其中：
每个Rb10独立地选自H、-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-sec-Bu、-tBu)、-C1-C6卤烷基(例如，-CF3、-CHF2、-CH2CF3)、被＝O的0或1个实例取代的-C1-C6杂烷基(例如，-CH2CH2NMe2、-CH2C(＝O)NMe2、-CH(CH3)CH2NMe2、-CH(CH3)C(＝O)NMe2)、C3-C9环烷基和被＝O、-Me或其组合的0或1个实例取代的3-10元杂环基(例如四氢呋喃-3-基、四氢吡喃-4-基、氧杂环丁烷-3-基、N-Me-2-氧代-吡咯烷-3-基、哌啶-4-基)。
在某些实施方案中，每个Rb10独立地选自H、-Me、-Et、-Pr、-iPr、-sec-Bu、-tBu、-CF3、-CHF2、-CH2CF3、-CH2CH2NMe2、-CH2C(＝O)NMe2、-CH(CH3)CH2NMe2、-CH(CH3)C(＝O)NMe2)、四氢呋喃-3-基、四氢吡喃-4-基、氧杂环丁烷-4-基和N-Me-2-氧代-吡咯烷-3-基。
在一些实施方案中，每个R10独立地选自由以下组成的组：-D、＝O、-OH、-F、-Cl、-Br、-CN、-Me、-Et、-Pr、-iPr、-sec-Bu、-tBu、-OMe、-OEt、-CHF2、-CH2CF3、-CF3、-OCF3、-OCHF2、-CH2OH、-CH(OH)(CH3)、-CH2OMe、-C(OH)(CH3)2、-CH2NH2、-CH(CH3)(NMe2)、-CH2CH(CH3)(NMe2)、-CH2(CH3)(iPr)、-NH2、-NHMe、-NHCH2CF3、-NMe2、环丙基、环丁基、环戊基、环己基、噻唑-2-基、噻唑-5-基、噻吩-2-基、四氢呋喃-3-基、四氢吡喃-4-基、氧杂环丁烷-3-基、吗啉-2-基、-CH2-吗啉-4-基、-(CH2)2-吗啉-4-基、咪唑-2-基、1H-吡唑-5-基、1H-咪唑-4-基、咪唑并[1,2-a]吡啶-7-基、吡咯烷-1-基、吡咯烷-3-基、哌啶-4-基、哌啶-3-基、哌啶-2-酮-4-基、哌嗪-4-基、哌嗪-4-基、哌嗪-2-酮-5-基、吡啶-4-基、吡啶-3-基、吡唑-1-基、吡唑-3-基、吡唑-4-基、吡唑-5-基、1H-吡唑-5-基、氮杂环丁烷-3-基、-(CH2)2-吡咯烷-1-基、-(CH2)2-吡咯烷-2-基、-CH2-咪唑-1-基、-CH2-吡唑-1-基、-CH2-1,2,4-三唑-1-基、-CH2-环丙基、-O(CH2)2NMe2、-O-四氢呋喃-3-基、-O-四氢吡喃-4-基、-O-(N-Me-2-氧代-吡咯烷-3-基)、-O-(CH2)2-吡咯烷-2-基、-O-CH2-哌啶-4-基、-O-CH2-氧杂环丁烷-3-基、-NCH3-哌啶-4-基、-NH-氧杂环丁烷-3-基、-NH-(N-Me-2-氧代-吡咯烷-3-基)、十氢-1,6-萘啶-6-基、2-氮杂螺[3.3]庚-6-基、5-氧杂-2,8-二氮杂螺[3.5]壬-8-基、8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、2-氮杂双环[2.2.2]辛-4-基、3-氮杂双环[3.2.0]庚-6-基、3-氮杂双环[3.1.1]庚-1-基、3-氮杂双环[3.1.0]己-6-基、1-氮杂双环[2.2.1]庚-4-基、3-氮杂双环[3.2.0]庚-6-基、2-氮杂双环[2.1.1]己-4-基、2,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基、双环[1.1.1]戊烷-2-基、八氢环戊[c]吡咯-5-基、十氢-1,6-萘啶-6-基、八氢-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-5-基、十氢-2,7-萘啶-2-基、2,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-2-基、-NHC(＝O)Me、-NHCH2C(＝O)NMe2、-NHCH(CH3)C(＝O)NMe2、-C(＝O)NH2、C(＝O)NHMe、-OC(＝O)Me、-SO2Me、-NHSO2Me、-SO2NH2和-SO2NHMe，其中每个-OMe、-OEt、-Me、-Et、-Pr、-iPr、环丙基、环丁基、环戊基、环己基、四氢呋喃-3-基、氧杂环丁烷-3-基、吡咯烷-1-基、吡咯烷-3-基、哌啶-4-基、哌啶-3-基、哌啶-2-酮-4-基、哌嗪-4-基、吡唑-1-基、吡唑-3-基、吡唑-4-基、吡唑-5-基、噻唑-2-基、噻吩-2-基、-CH2-环丙基、-CH2-吗啉-4-基、-(CH2)2-吗啉-4-基、-吗啉-2-基、-(CH2)2-吡咯烷-1-基、-CH2-1,2,4-三唑-1-基、-CH2-咪唑-1-基、咪唑-2-基、-CH2-吡唑-1-基、-OCH2-哌啶-4-基、氮杂环丁烷-3-基、2-氮杂螺[3.3]庚-6-基、2-甲基-5-氧杂-2,8-二氮杂螺[3.5]壬-8-基、8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基和十氢-1,6-萘啶-6-基；且其中
每个R10可独立地被-Me、-Et、-iPr、环丙基、氧杂环丁烷-3-基、-OH、＝O、-F、-OMe、-CH2CH2F、-CH2CHF2、-CH2CH2CF3、-C(＝O)Me、-N(Me)2、-CH2N(CH3)2、-CH2N(CH3)CH2CH3、-N(iPr)(Et)、-N(iPr)(Me)、-N(Et)2、-N(CH3)(Et)、-NHC(＝O)Me或其组合的0、1、2、3、4或5个实例取代。
在一些实施方案中，R10为任选地被取代的3-6元单环杂环基或任选地被取代的6-10元双环杂环基。在其他实施方案中，R10为-D、-Cl、-F、-Me、-CH2-OH、
在式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)的一些实施方案中，每个R7独立地选自H、卤基(例如，F、Cl)、-CN、-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-sec-Bu、-tBu)、5元杂芳基(例如，吡唑基)、-C1-C6卤烷基(例如，-CF3、-CHF2、-CH2CF3)、-C1-C6羟基烷基(例如，-CH2OH)、-C3-C9环烷基(例如，环丙基、环丁基、环戊基、环己基)、-ORa7(例如，-OH、-OMe、-OCHF2)、-N(Ra7)2和-C(＝O)N(Ra7)2(例如，-C(＝O)NH2、-C(＝O)NHMe)。在其他实施方案中，每个Ra7独立地选自H和-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-nBu、-tBu、-sec-Bu、-iso-Bu)。在一些实施方案中，每个R7独立地选自H和甲基。在某些实施方案中，每个R7为H。在其他实施方案中，每个R7为甲基。
在式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)的一些实施方案中，每个R8独立地选自H、-D、卤基(例如，-F、-Cl)、-CN、-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-sec-Bu、-tBu)、芳基烷基(例如，苯甲基)、-C(＝O)Ra8(例如，-C(＝O)Me、-C(＝O)Et、-C(＝O)Pr、-C(＝O)iPr)、-N(Ra8)2(例如，-NHMe、NH2、NMe2)、-NRa8C(＝O)Ra8(例如，-NHC(＝O)Me)、-CH2C(＝O)N(Ra8)2(例如，-CH2C(＝O)NH2)和-ORa8(例如，-OH、-OMe、-OiPr、-OCF3)。在其他实施方案中，每个Ra8独立地选自H、-CF3和-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-nBu、-tBu、-sec-Bu、-iso-Bu)。在一些实施方案中，每个R8独立地选自H、-D、-F、-Me、-Et、-CN、-OMe、-OiPr、-OFC3、苯甲基、-NHC(＝O)Me、-NMe2、-CH2C(＝O)NH2、-C(＝O)iPr和-OH。在某些实施方案中，每个R8独立地选自H、-D、-F、-Me、-Et和-CN。在其他实施方案中，每个R8独立地选自H、-D、-F和-Me。
在式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)的一些实施方案中，n为0。在其他实施方案中，n为1。在某些实施方案中，n为2。在其他实施方案中，n为3。
在式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)的一些实施方案中，表示为的部分选自：
在式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)的一些实施方案中，表示为的部分选自：
在以上实施方案中的一些中，其中哌啶为大环的一部分，n为2。在一些实施方案中，每个R6和R7独立地选自H和-CH3。在其他实施方案中，R6为H。在其他实施方案中，R6为-CH3。在某些实施方案中，R7为H。在某些实施方案中，R7为-CH3。
在一些实施方案中，式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物选自表1。
在一个方面中，提供了一种药物组合物，其包含如本文所定义的式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物和药学上可接受的载剂。在一些实施方案中，药物组合物还包含第二治疗剂。
在一个方面中，提供了一种治疗有需要的受试者的MTAP缺乏和/或MTA累积疾病的方法，其通过向所述受试者施用治疗有效量的c或其药学上可接受的组合物来进行。在一些实施方案中，化合物或组合物与第二治疗剂组合施用。
在一些实施方案中，疾病为增殖性疾病。在一个实施方案中，疾病为MTAP缺乏和/或MTA累积癌症。在某些实施方案中，癌症为神经胶质母细胞瘤、恶性外周神经鞘瘤(MPNST)、食道癌(例如，食道鳞状细胞癌或食道腺癌)、膀胱癌(例如，膀胱尿路上皮癌)、胰腺癌(例如，胰腺腺癌)、间皮瘤、黑色素瘤、非小细胞肺癌(NSCLC；例如，肺鳞状或肺腺癌)、星形细胞瘤、未分化多形性肉瘤(undifferentiated pleiomorphic sarcoma)、弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、白血病、头颈癌、胃腺癌、黏液性纤维肉瘤、胆管肉瘤、脑癌、胃癌、肾癌、乳腺癌、子宫内膜癌、尿路癌、肝癌、软组织癌、胸膜癌和大肠癌或肉瘤。
在一个方面中，提供了一种治疗有需要的受试者的癌症的方法，其包括以下步骤：
a)评估自所述受试者获得的测试样品中MTAP和/或MTA的水平，其中所述MTA水平可直接(例如，通过ELISA或LC-MS/MS)或间接(例如，通过SDMA修饰的蛋白质ELISA或IHC或通过RNA剪接)评估；
b)将测试样品与参考进行比较，其中所述测试样品中与参考相比的MTAP缺乏和/或MTA累积表明所述受试者的癌症将对使用PRMT5抑制剂的治疗性治疗有反应；和
c)向步骤b)中鉴别的受试者施用治疗有效量的如本文所定义的式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或其药物组合物。
附图说明
图1.根据癌症基因组图谱(TCGA)在表示示例性癌症的细胞系中MTAP纯合性缺失的频率。
图2.在MTAP-无效SW1573癌细胞系中的7日活力测定中MAT2A抑制剂AG-270与示例MTAP无效选择性PRMT5抑制剂的组合证明细胞活力缺乏增强。
图3.根据HSA模型，MAT2A抑制剂AG-270的组合的作用为协同的，其中协同得分量化了过量最高单一化合物反应。
图4.在MTAP-无效SW1573癌细胞系中的7日活力测定中KRASG12C抑制剂AMG-510与示例MTAP无效选择性PRMT5抑制剂的组合证明细胞活力缺乏增强。
图5.在MTAP-无效SW1573癌细胞系中的在7日活力测定中MAPK1/MAPK3抑制剂(由乌里替尼(ulixertinib)和SCH772984例示)与示例MTAP无效选择性PRMT5抑制剂的组合证明细胞活力缺乏增强。
图6.在MTAP-无效SW1573癌细胞系中的7日活力测定中MEK抑制剂(由曲美替尼(trametinib)例示)与示例MTAP无效选择性PRMT5抑制剂的组合证明细胞活力缺乏增强。
图7.在MTAP-无效A101D癌细胞系中的7日活力测定中CDK4/6抑制剂(由帕博西尼(palbociclib)和玻玛西尼(abemaciclib)例示)与示例性MTAP无效选择性PRMT5抑制剂的组合证明细胞活力缺乏增强。
定义
MTAP
如本文所用的“MTAP”是指甲基硫腺苷酸磷酸化酶，其为甲硫氨酸再利用途径中的酶，也称为S-甲基-5'-硫腺苷酸磷酸化酶；也称为BDMF、DMSFH、DMSMFH、LGMBF、MSAP和c86fus。外部ID：OMIM：156540MGI：1914152HomoloGene：1838chEMBL：4941GeneCards：MTAP基因；Entrez 4507；RefSeq(mRNA)：NM_002451；位置：Chr 9：21.8-21.93Mb。“野生型”MTAP意指其由NM_002451编码或具有相同氨基酸序列(NP_002442)。(Schmid等人Oncogene2000,19,第5747-54页)。
如本文所用，术语“MTAP缺乏的”、“MTAP缺乏”、“MTAP无效”等是指MTAP的翻译后修饰、产生、表达、水平、稳定性和/或活性相对于对照(例如，参考或正常或非癌细胞)中显著减少的细胞(包括但不限于癌细胞、细胞系、组织、组织类型、肿瘤等)。减少可为至少约20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％或90％。在一些实施方案中，减少为至少20％。在一些实施方案中，减少为至少50％。关于细胞等的术语“MTAP缺乏和/或MTA累积(MTAP-deficient and/or MTA accumulating，MTAP-deficient and/or MTA-accumulating”、“MTAP缺乏和/或MTA上调”等表明细胞等缺乏MTAP且/或过度产生或累积MTA。MTAP缺乏的细胞包括其中MTAP基因已突变、缺失或转录沉默的细胞。作为非限制性实例，MTAP缺乏的细胞可具有纯合性缺失。MTAP敲落并不致命。在一些实施方案中，MTAP缺乏的细胞也是CDKN2A缺乏的。MTAP缺乏可使用本领域中已知的任何试剂或技术进行检测，例如：利用针对MTAP的抗体的免疫组织化学；和/或基因组测序；和/或核酸杂交；和/或利用至少一种包含具有MTAP序列的至少12个连续核苷酸(nt)的序列的探针或引物的扩增，其中引物不长于约30nt。
“MTAP缺乏相关”或“MTAP缺乏”或“MTAP缺乏的”疾病(例如，增殖性疾病，例如癌症)、或“与MTAP缺乏相关的”疾病(例如，增殖性疾病，例如癌症)、或“特征在于MTAP缺乏”的疾病(例如，增殖性疾病，例如癌症)等是指其中大量细胞为MTAP缺乏的的轻症(例如，增殖性疾病，例如癌症)。例如，在MTAP缺乏相关疾病中，一个或多个患病细胞的MTAP的翻译后修饰、产生、表达、水平、稳定性和/或活性可显著减少。MTAP缺乏相关疾病的实例包括但不限于癌症，包括但不限于：神经胶质母细胞瘤、恶性外周神经鞘瘤(MPNST)、食道癌(例如，食道鳞状细胞癌或食道腺癌)、膀胱癌(例如，膀胱尿路上皮癌)、胰腺癌(例如，胰腺腺癌)、间皮瘤、黑色素瘤、非小细胞肺癌(NSCLC；例如，肺鳞状或肺腺癌)、星形细胞瘤、未分化多形性肉瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、白血病、头颈癌、胃腺癌、黏液性纤维肉瘤、胆管肉瘤、脑癌、胃癌、肾癌、乳腺癌、子宫内膜癌、尿路癌、肝癌、软组织癌、胸膜癌和大肠癌或肉瘤(参见图1)。在罹患MTAP缺乏相关疾病的患者中，有可能一些患病细胞(例如，癌细胞)可为MTAP缺乏的，而其他细胞则不是。类似地，一些患病细胞可为MTA累积，而其他细胞则不是。
因此，本公开涵盖涉及这些组织或任何其他组织的疾病的治疗方法，其中MTAP缺乏的和/或MTA累积细胞的增殖可通过施用PRMT5抑制剂来抑制。
一些MTAP缺乏的癌细胞也缺乏CDKN2A；CDKN2A基因或其产物的翻译后修饰、产生、表达、水平、稳定性和/或活性在这些细胞中降低。MTAP和CDKN2A的基因在染色体9p21上紧邻；MTAP位于距CDKN2A的端粒端大约100kb处。许多癌细胞类型具有CDKN2A/MTAP损失(两种基因的损失)。因此，在一些实施方案中，MTAP缺乏细胞也缺乏CDKN2A。
MTA和MTA累积
“MTA”意指PRMT5抑制剂，也称为甲基-硫腺苷、S-甲基-5'-硫腺苷、[5'脱氧-5'-(甲基硫)-fl-D-呋喃核糖基]腺嘌呤、5'-甲基-硫腺苷、5'-脱氧,5'-甲基硫腺苷等。MTA选择性抑制PRMT5甲基转移酶活性。MTA为MTAP的唯一已知分解代谢基质。术语“MTA累积”、“MTA过度产生”、“MTA上调”等是指MTA的产生、水平和/或稳定性显著增加的细胞(包括但不限于癌细胞、细胞系、组织、组织类型、肿瘤等)。MTA累积细胞包括这样的细胞，其中细胞包含与在正常或非癌细胞中相比高至少约20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％或大于100％的MTA的产生、水平和/或稳定性。在一些实施方案中，MTA累积细胞包括这样的细胞，其中细胞包含与在正常或非癌细胞中相比高至少20％的MTA的产生、水平和/或稳定性。在一些实施方案中，MTA累积细胞包括这样的细胞，其中细胞包含与在正常或非癌细胞中相比高至少50％的MTA的产生、水平和/或稳定性。测试样品(例如，正测试MTA累积的细胞，诸如癌细胞)和参考样品和其他细胞、组织、样品等中MTA累积的确定可使用本领域中已知的任何方法来进行。此类用于检测MTA的方法包括(作为非限制性实例)液相色谱-电喷雾电离-串联式质谱法(LC-ESI-MS/MS)，如Stevens等人J.Chromatogr.A.2010,1217,第3282-3288页；和Kirovski等人Am.J.Pathol.2011,178,第1145-1152页；和本文引用的参考文献中所述。MTAP损失与MTA累积相关(Williams-Ashman等人Biochem.Pharm.1982,31,第277-288页；和Limm等人Eur.J.Cancer.2013,49,第6期。
“MTA累积相关”、“MTA累积(MTA-accumulation，MTA-accumulating)”、“MTA过度产生”、“MTA上调”疾病(例如，增殖性疾病，例如癌症)、或“与MTA累积相关”的疾病(例如，增殖性疾病，例如癌症)、或“特征在于MTA累积”的疾病(例如，增殖性疾病，例如癌症)等是指其中大量细胞为MTA累积的轻症(例如，增殖性疾病，例如癌症)。MTA累积疾病的实例包括但不限于癌症，包括但不限于：神经胶质母细胞瘤、恶性外周神经鞘瘤(MPNST)、食道癌(例如，食道鳞状细胞癌或食道腺癌)、膀胱癌(例如，膀胱尿路上皮癌)、胰腺癌(例如，胰腺腺癌)、间皮瘤、黑色素瘤、非小细胞肺癌(NSCLC；例如，肺鳞状或肺腺癌)、星形细胞瘤、未分化多形性肉瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、白血病、头颈癌、胃腺癌、黏液性纤维肉瘤、胆管肉瘤、脑癌、胃癌、肾癌、乳腺癌、子宫内膜癌、尿路癌、肝癌、软组织癌、胸膜癌和大肠癌或肉瘤(参见图1)。在罹患MTAP缺乏相关疾病的患者中，有可能一些患病细胞(例如，癌细胞)可为MTAP缺乏的，而其他细胞则不是。
在患有或已诊断为患有MTA累积疾病的患者中，一些细胞可为MTA累积，而其他细胞不是。
正常细胞与MTAP缺失/MTA累积细胞之间的治疗窗口的增加可通过使用与MTA无竞争地结合PRMT5的抑制剂来达成。如本文所用，“无竞争性结合”、和“无竞争性抑制”、和“协同结合”、和“协同抑制”(例如，MTA无竞争性结合、MTA无竞争性抑制、MTA协同结合、MTA协同抑制)是指抑制剂与蛋白质(例如，PRMT5)的结合在存在辅助因子(例如，MTA)的情况下相对于同一抑制剂在不存在辅助因子的情况下的结合有所增加。本领域中已知的PRMT5抑制剂通常为SAM(S-腺苷甲硫氨酸)无竞争的或SAM竞争的。由于在野生型和MTAP无效细胞中的SAM浓度类似，所以这些抑制剂预期以类似效力结合至两种细胞类型。相比之下，MTA协同(和SAM竞争性或显示出相对于SAM与MTA协同增强)抑制剂将在存在高浓度MTA的情况下以明显更大的效力结合，且因此将导致在MTA累积细胞中的PRMT5抑制相对于正常细胞优先。
如本文进一步描述，癌细胞、癌症类型或患有癌症的受试者为“PRMT5抑制剂敏感的”，“对使用PRMT5抑制剂的治疗敏感”，“对PRMT5治疗性抑制敏感”或如果其易于用PRMT5抑制剂治疗(例如，由于其MTAP缺乏和/或MTA累积特性)则以类似术语描述。
PRMT5
如本文所用的“PRMT5”为基因或蛋白质蛋白精氨酸甲基转移酶5，也称为HRMT1L5、IBP72、JBP1、SKB1或SKB1H。外部ID：OMIM：604045，MGI：1351645，HomoloGene：4454，ChEMBL：1795116，GeneCards：PRMT5 Gene；EC编号2.1.1.125.Ensembl ENSG00000100462；UniProtO14744；Entrez Gene ID：10419；RefSeq(mRNA)：NM_001039619。小鼠同源物为NM_013768。甲基转移酶诸如PRMT5催化一至三个甲基自辅助因子S-腺苷甲硫氨酸(也称为SAM或AdoMet)向组蛋白的赖氨酸或精氨酸的转移。精氨酸甲基化通过人的9种不同的蛋白质精氨酸甲基转移酶(PRMT)来进行。存在三种类型的甲基精氨酸物质：(1)单甲基精氨酸(MMA)；(2)不对称二甲基精氨酸(ADMA)，其通过I型甲基转移酶(PRMT1、PRMT2、PRMT3、CARM1、PRMT6和PRMT8)产生；和(3)对称二甲基精氨酸(SDMA)，其通过II型甲基转移酶(PRMT5和PRMT7)产生。PRMT1和PRMT5分别为主要的不对称和对称精氨酸甲基转移酶。PRMT5促进在组蛋白的H3R8和H4R3处的对称二甲基化(H4R3me2)。H4R3的对称甲基化与转录抑制相关且可用作DNMT3A的结合位点。PRMT5损失导致DNMT3A结合和基因活化减少。肿瘤抑制基因ST7和趋化因子RNATES、IP10、CXCL11被PRMT5靶向并沉默。WO 2011/079236。
额外基质包括E2F1、p53、EGFR和CRAF。PRMT5在G1/S转换期间为包含共调节因子WDR77(也称为MEP50，为CDK4基质)的多蛋白复合物的一部分。磷酸化增加PRMT5/WDR77活性。WDR77为复合物的非催化组分且介导与结合配偶体(partner)和基质的相互作用。PRMT5也可以相互排斥的方式与pICIn或RioK1衔接蛋白相互作用以调节复合物组成和基质特异性。
PRMT5当与许多复合物相互作用时通过精氨酸甲基化而对其基质具有阳性或阴性作用且参与多种细胞过程，包括RNA加工、信号转导、转录调节和生殖细胞发育。PRMT5为调节eIF4E表达和p53翻译的主要促存活因子。PRMT5诱发p53依赖性细胞凋亡且使各种癌细胞对肿瘤坏死因子(TNF)相关细胞凋亡诱导性配体(TRAIL)敏感而不影响非转化细胞中的TRAIL抗性。
术语“PRMT5抑制剂”是指能够抑制PRMT5的产生、水平、活性、表达或存在的任何化合物。这些化合物包括(作为非限制性实例)抑制基因的转录、RNA的成熟、mRNA的翻译、蛋白质的翻译后修饰、蛋白质的酶促活性、其与基质的相互作用等的任何化合物。所述术语也指代通过活性位点的ATP竞争性抑制、蛋白质结构的变构调节、蛋白质-蛋白质相互作用的破坏或通过抑制PRMT5蛋白的转录、翻译、翻译后修饰或稳定性来抑制PRMT5蛋白的细胞功能的任何剂。
在一些实施方案中，PRMT5抑制剂与同PRMT5相互作用的另一种化合物、蛋白质或其他分子竞争且为PRMT5功能所必需的。
作为非限制性实例，PRMT5抑制剂可与辅助因子S-腺苷甲硫氨酸(也称为SAM或AdoMet)竞争。
在一些实施方案中，PRMT5抑制剂与MTA无竞争。在其他实施方案中，PRMT5抑制剂与MTA无竞争且与SAM有竞争。
在一些实施方案中，PRMT5抑制剂与MTA无竞争且与SAM无竞争，但对于MTA复合物以相对于SAM复合物更高的效力程度结合。
化学定义
特定官能团和化学术语的定义在下文中更详细地描述。化学元素根据元素周期表,CAS版,Handbook of Chemistry and Physics,第75版,内封面来鉴定，且特定官能团通常如本文所描述地定义。另外，有机化学的一般理论以及特定官能部分和反应性描述于Thomas Sorrell,Organic Chemistry,University Science Books,Sausalito,1999；Smith和March,March's Advanced Organic Chemistry,第5版,John Wiley&Sons,Inc.,New York,2001；Larock,Comprehensive Organic Transformations,VCH Publishers,Inc.,New York,1989；和Carruthers,Some Modern Methods of Organic Synthesis,第3版,Cambridge University Press,Cambridge,1987中。
本文所述的化合物可包含一个或多个不对称中心，且因此可以各种异构形式存在，例如对映异构体和/或非对映异构体。例如，本文所述的化合物可以呈个别对映异构体、非对映异构体或几何异构体的形式，或可以呈立体异构体的混合物(包括外消旋混合物和富含一种或多种立体异构体的混合物)的形式。异构体可通过本领域技术人员已知的方法自混合物中分离，所述方法包括手性高压液相色谱(HPLC)和手性盐的形成和结晶；或优选的异构体可通过不对称合成来制备。参见例如Jacques等人,Enantiomers,Racemates andResolutions(Wiley Interscience,New York,1981)；Wilen等人,Tetrahedron 33:2725(1977)；Eliel,Stereochemistry of Carbon Compounds(McGraw-Hill,NY,1962)；和Wilen,Tables of Resolving Agents and Optical Resolutions第268页(E.L.Eliel编,Univ.of Notre Dame Press,Notre Dame,IN 1972)。本发明另外涵盖在本文中描述为实质上不含其他异构体的个别异构体和替代地描述为各种异构体的混合物的化合物。
如本文所用的组合物的“对映异构体过量”(“e.e.”)或“％对映异构体过量”(“％e.e.”)是指存在于组合物中的一种对映异构体相对于另一种对映异构体的过量。例如，组合物可含有90％的一种对映异构体(例如，S对映异构体)和10％的另一种对映异构体(即，R对映异构体)。
e.e.＝(90-10)/100＝80％。
因此，含有90％的一种对映异构体和10％的另一种对映异构体的组合物被称为对映异构体过量为80％。
如本文所用的组合物的“非对映异构体过量”(“d.e.”)或“％非对映异构体过量”(“％d.e.”)是指存在于组合物中的一种非对映异构体相对于一种或多种不同的非对映异构体的过量。例如，组合物可含有90％的一种非对映异构体和10％的一种或多种不同的非对映异构体。
d.e.＝(90-10)/100＝80％。
因此，含有90％的一种非对映异构体和10％的一种或多种不同的非对映异构体的组合物被称为非对映异构体过量为80％。
在一个替代性实施方案中，本文所述的化合物也可包含一个或多个同位素取代。例如，氢可为2H(D或氘)或3H(T或氚)；碳可为例如13C或14C；氧可为例如18O；氮可为例如15N等。在其他实施方案中，特定同位素(例如，3H、13C、14C、18O或15N)可表示占据化合物的特定位点的元素的总同位素丰度的至少1％、至少5％、至少10％、至少15％、至少20％、至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少99％或至少99.9％。
在一式中，为单键，其中与其直接附接的部分的立体化学未被指定。
当列出值的范围时，意欲涵盖所述范围内的每个值和子范围。例如，“C1-6烷基”意欲涵盖C1、C2、C3、C4、C5、C6、C1-6、C1-5、C1-4、C1-3、C1-2、C2-6、C2-5、C2-4、C2-3、C3-6、C3-5、C3-4、C4-6、C4-5和C5-6烷基。
以下术语意欲具有下文中与其一起呈现的含义且可用于理解本发明的描述和预期范围。当描述可包括化合物、含有此类化合物的药物组合物和使用此类化合物和组合物的方法的发明时，除非另外指示，否则以下术语(如果存在的话)具有以下含义。也应理解，当在本文中描述时，下文所定义的部分中任一者均可被多个取代基取代且相应定义意欲在其如下文所阐述的范围内包括此类被取代的部分。除非另外说明，否则术语“被取代”如下文所阐述定义。应进一步理解，术语“基(group)”和“基团(radical)”当在本文中使用时可被认为是可互换的。冠词“一个/种(a/an)”可在本文中用于指代冠词的一个或多于一个(即，至少一个)语法对象。举例而言，“一类似物”意指一种类似物或多于一种类似物。
术语“不饱和键”是指双键或三键。
术语“不饱和”或“部分不饱和”是指包括至少一个双键或三键的部分。
术语“饱和”是指不含有双键或三键的部分，即所述部分仅含有单键。
将后缀“-亚(-ene)”附加至基团指示所述基团为二价部分，例如，亚烷基为烷基的二价部分，亚烯基为烯基的二价部分，亚炔基为炔基的二价部分，亚杂烷基为杂烷基的二价部分，亚杂烯基为杂烯基的二价部分，亚杂炔基为杂炔基的二价部分，亚碳环基为碳环基的二价部分，亚杂环基为杂环基的二价部分，亚芳基为芳基的二价部分，且亚杂芳基为杂芳基的二价部分。
术语“叠氮基”是指基团-N3。
“脂族”是指如本文所定义的烷基、烯基、炔基或碳环基。
“环烷基烷基”是指以下烷基基团，其中烷基被环烷基取代。典型环烷基烷基包括但不限于环丙基甲基、环丁基甲基、环戊基甲基、环己基甲基、环庚基甲基、环辛基甲基、环丙基乙基、环丁基乙基、环戊基乙基、环己基乙基、环庚基乙基和环辛基乙基等。
“杂环基烷基”是指以下烷基基团，其中烷基被杂环基取代。典型杂环基烷基包括但不限于吡咯烷基甲基、哌啶基甲基、哌嗪基甲基、吗啉基甲基、吡咯烷基乙基、哌啶基乙基、哌嗪基乙基、吗啉基乙基等。
“芳烷基”或“芳基烷基”为如本文所定义的烷基和芳基的子集，且是指通过任选地被取代的芳基取代的任选地被取代的烷基。
“烷基”是指具有1至20个碳原子的直链或支链饱和烃基(“C1-20烷基”)。在一些实施方案中，烷基具有1至12个碳原子(“C1-12烷基”)。在一些实施方案中，烷基具有1至10个碳原子(“C1-10烷基”)。在一些实施方案中，烷基具有1至9个碳原子(“C1-9烷基”)。在一些实施方案中，烷基具有1至8个碳原子(“C1-8烷基”)。在一些实施方案中，烷基具有1至7个碳原子(“C1-7烷基”)。在一些实施方案中，烷基具有1至6个碳原子(“C1-6烷基”，在本文中也称为“低级烷基”)。在一些实施方案中，烷基具有1至5个碳原子(“C1-5烷基”)。在一些实施方案中，烷基具有1至4个碳原子(“C1-4烷基”)。在一些实施方案中，烷基具有1至3个碳原子(“C1-3烷基”)。在一些实施方案中，烷基具有1至2个碳原子(“C1-2烷基”)。在一些实施方案中，烷基具有1个碳原子(“C1烷基”)。在一些实施方案中，烷基具有2至6个碳原子(“C2-6烷基”)。C1-6烷基的实例包括甲基(C1)、乙基(C2)、正丙基(C3)、异丙基(C3)、正丁基(C4)、叔丁基(C4)、仲丁基(C4)、异丁基(C4)、正戊基(C5)、3-戊基(C5)、戊基(C5)、新戊基(C5)、3-甲基-2-丁基(C5)、叔戊基(C5)和正己基(C6)。烷基的额外实例包括正庚基(C7)、正辛基(C8)等。除非另外指定，否则烷基的每个实例独立地任选地被取代，即未被取代(“未被取代的烷基”)或被一个或多个取代基(例如像，1至5个取代基、1至3个取代基或1个取代基)取代(“被取代的烷基”)。在某些实施方案中，烷基为未被取代的C1-10烷基(例如，-CH3)。在某些实施方案中，烷基为被取代的C1-10烷基。常见烷基缩写包括Me(-CH3)、Et(-CH2CH3)、iPr(-CH(CH3)2)、nPr(-CH2CH2CH3)、nBu(-CH2CH2CH2CH3)或iBu(-CH2CH(CH3)2)。
“亚烷基”是指其中两个氢被移除以提供二价基团且其可被取代或未被取代的烷基。未被取代的亚烷基包括但不限于亚甲基(-CH2-)、亚乙基(-CH2CH2-)、亚丙基(-CH2CH2CH2-)、亚丁基(-CH2CH2CH2CH2-)、亚戊基(-CH2CH2CH2CH2CH2-)、亚己基(-CH2CH2CH2CH2CH2CH2-)等。示例性被取代的亚烷基(例如，被一个或多个烷基(甲基)取代)包括但不限于被取代的亚甲基(-CH(CH3)-、(-C(CH3)2-)、被取代的亚乙基(-CH(CH3)CH2-、-CH2CH(CH3)-、-C(CH3)2CH2-、-CH2C(CH3)2-)、被取代的亚丙基(-CH(CH3)CH2CH2-、-CH2CH(CH3)CH2-、-CH2CH2CH(CH3)-、-C(CH3)2CH2CH2-、-CH2C(CH3)2CH2-、-CH2CH2C(CH3)2-)等。当提供特定亚烷基的碳的范围或数目时，应理解所述范围或数目是指线性碳二价链中碳的范围或数目。亚烷基可被一个或多个如本文所述的取代基取代或未被取代。
“烯基”是指具有2至20个碳原子、一个或多个碳-碳双键(例如，1、2、3或4个碳-碳双键)和任选地一个或多个碳-碳三键(例如，1、2、3或4个碳-碳三键)的直链或支链烃基(“C2-20烯基”)。在某些实施方案中，烯基不含有任何三键。在一些实施方案中，烯基具有2至10个碳原子(“C2-10烯基”)。在一些实施方案中，烯基具有2至9个碳原子(“C2-9烯基”)。在一些实施方案中，烯基具有2至8个碳原子(“C2-8烯基”)。在一些实施方案中，烯基具有2至7个碳原子(“C2-7烯基”)。在一些实施方案中，烯基具有2至6个碳原子(“C2-6烯基”)。在一些实施方案中，烯基具有2至5个碳原子(“C2-5烯基”)。在一些实施方案中，烯基具有2至4个碳原子(“C2-4烯基”)。在一些实施方案中，烯基具有2至3个碳原子(“C2-3烯基”)。在一些实施方案中，烯基具有2个碳原子(“C2烯基”)。一个或多个碳-碳双键可在内部(诸如在2-丁烯基中)或末端(诸如在1-丁烯基中)。C2-4烯基的实例包括乙烯基(C2)、1-丙烯基(C3)、2-丙烯基(C3)、1-丁烯基(C4)、2-丁烯基(C4)、丁二烯基(C4)等。C2-6烯基的实例包括前述C2-4烯基以及戊烯基(C5)、戊二烯基(C5)、己烯基(C6)等。烯基的额外实例包括庚烯基(C7)、辛烯基(C8)、辛三烯基(C8)等。除非另外指定，否则烯基的每个实例独立地任选地被取代，即未被取代(“未被取代的烯基”)或被一个或多个取代基(例如像，1至5个取代基、1至3个取代基或1个取代基)取代(“被取代的烯基”)。在某些实施方案中，烯基为未被取代的C2-10烯基。在某些实施方案中，烯基为被取代的C2-10烯基。
“炔基”是指具有2至20个碳原子、一个或多个碳-碳三键(例如，1、2、3或4个碳-碳三键)和任选地一个或多个碳-碳双键(例如，1、2、3或4个碳-碳双键)的直链或支链烃基(“C2-20炔基”)。在某些实施方案中，炔基不含有任何双键。在一些实施方案中，炔基具有2至10个碳原子(“C2-10炔基”)。在一些实施方案中，炔基具有2至9个碳原子(“C2-9炔基”)。在一些实施方案中，炔基具有2至8个碳原子(“C2-8炔基”)。在一些实施方案中，炔基具有2至7个碳原子(“C2-7炔基”)。在一些实施方案中，炔基具有2至6个碳原子(“C2-6炔基”)。在一些实施方案中，炔基具有2至5个碳原子(“C2-5炔基”)。在一些实施方案中，炔基具有2至4个碳原子(“C2-4炔基”)。在一些实施方案中，炔基具有2至3个碳原子(“C2-3炔基”)。在一些实施方案中，炔基具有2个碳原子(“C2炔基”)。一个或多个碳-碳三键可在内部(诸如在2-丁炔基中)或末端(诸如在1-丁炔基中)。C2-4炔基的实例包括但不限于乙炔基(C2)、1-丙炔基(C3)、2-丙炔基(C3)、1-丁炔基(C4)、2-丁炔基(C4)等。C2-6烯基的实例包括前述C2-4炔基以及戊炔基(C5)、己炔基(C6)等。炔基的额外实例包括庚炔基(C7)、辛炔基(C8)等。除非另外指定，否则炔基的每个实例独立地任选地被取代，即未被取代(“未被取代的炔基”)或被一个或多个取代基(例如像，1至5个取代基、1至3个取代基或1个取代基)取代(“被取代的炔基”)。在某些实施方案中，炔基为未被取代的C2-10炔基。在某些实施方案中，炔基为被取代的C2-10炔基。
如本文所用，术语“杂烷基”是指如本文所定义的烷基，其进一步在母链内包含1个或多个(例如，1、2、3或4个)杂原子(例如，氧、硫、氮、硼、硅、磷)，其中所述一个或多个杂原子插入在母体碳链内的相邻碳原子之间，且/或一个或多个杂原子插入在碳原子与母体分子之间，即附接点之间。在某些实施方案中，杂烷基是指具有1至10个碳原子和1、2、3或4个杂原子的饱和基团(“杂C1-10烷基”)。在一些实施方案中，杂烷基为具有1至9个碳原子和1、2、3或4个杂原子的饱和基团(“杂C1-9烷基”)。在一些实施方案中，杂烷基为具有1至8个碳原子和1、2、3或4个杂原子的饱和基团(“杂C1-8烷基”)。在一些实施方案中，杂烷基为具有1至7个碳原子和1、2、3或4个杂原子的饱和基团(“杂C1-7烷基”)。在一些实施方案中，杂烷基为具有1至6个碳原子和1、2或3个杂原子的基团(“杂C1-6烷基”)。在一些实施方案中，杂烷基为具有1至5个碳原子和1或2个杂原子的饱和基团(“杂C1-5烷基”)。在一些实施方案中，杂烷基为具有1至4个碳原子和1或2个杂原子的饱和基团(“杂C1-4烷基”)。在一些实施方案中，杂烷基为具有1至3个碳原子和1个杂原子的饱和基团(“杂C1-3烷基”)。在一些实施方案中，杂烷基为具有1至2个碳原子和1个杂原子的饱和基团(“杂C1-2烷基”)。在一些实施方案中，杂烷基为具有1个碳原子和1个杂原子的饱和基团(“杂C1烷基”)。在一些实施方案中，杂烷基为具有2至6个碳原子和1或2个杂原子的饱和基团(“杂C2-6烷基”)。除非另外指定，否则杂烷基的每个实例独立地未被取代(“未被取代的杂烷基”)或被一个或多个取代基取代(“被取代的杂烷基”)。在某些实施方案中，杂烷基为未被取代的杂C1-10烷基。在某些实施方案中，杂烷基为被取代的杂C1-10烷基。示例性杂烷基包括：-CH2OH、-CH2OCH3、-CH2NH2、-CH2NH(CH3)、-CH2N(CH3)2、-CH2CH2OH、-CH2CH2OCH3、-CH2CH2NH2、-CH2CH2NH(CH3)、-CH2CH2N(CH3)2。
“芳基”是指具有在芳族环系统中提供的6-14个环碳原子和零个杂原子的单环或多环(例如，双环或三环)4n+2芳族环系统(例如，具有在环状阵列中共享的6、10或14个π电子)(“C6-14芳基”)。在一些实施方案中，芳基具有六个环碳原子(“C6芳基”；例如，苯基)。在一些实施方案中，芳基具有十个环碳原子(“C10芳基”；例如，萘基，诸如1-萘基和2-萘基)。在一些实施方案中，芳基具有十四个环碳原子(“C14芳基”；例如，蒽基)。“芳基”也包括这样的环系统，其中如上文所定义的芳基环与一个或多个碳环基或杂环基稠合，其中附接基团或附接点为在芳基环上，并且在此类情况下，碳原子的数目继续指示芳基环系统中碳原子的数目。具体而言，芳基包括苯基、萘基、茚基和四氢萘基。除非另外指定，否则芳基的每个实例独立地任选地被取代，即未被取代(“未被取代的芳基”)或被一个或多个取代基取代(“被取代的芳基”)。在某些实施方案中，芳基为未被取代的C6-14芳基。在某些实施方案中，芳基为被取代的C6-14芳基。
在某些实施方案中，芳基被一个或多个选自以下的基团取代：卤基、C1-C8烷基、C1-C8卤烷基、氰基、羟基、C1-C8烷氧基和氨基。
代表性被取代的芳基的实例包括以下
其中R56和R57中的一者可为氢，且R56和R57中的至少一者各自独立地选自C1-C8烷基、C1-C8卤烷基、4-10元杂环基、烷酰基、C1-C8烷氧基、杂芳基氧基、烷基氨基、芳基氨基、杂芳基氨基、NR58COR59、NR58SOR59 NR58SO2R59、COO烷基、COO芳基、CONR58R59、CONR58OR59、NR58R59、SO2NR58R59、S-烷基、SO烷基、SO2烷基、S芳基、SO芳基、SO2芳基；或者R56和R57可接合以形成5至8个原子的任选地含有一个或多个选自组N、O或S的杂原子的环状环(饱和或不饱和)。R60和R61独立地为氢、C1-C8烷基、C1-C4卤烷基、C3-C10环烷基、4-10元杂环基、C6-C10芳基、被取代的C6-C10芳基、5-10元杂芳基或被取代的5-10元杂芳基。
“稠合芳基”是指这样的芳基，其与第二芳基或杂芳基环或与碳环基或杂环基环共同具有两个环碳。
“杂芳基”是指具有在芳族环系统中提供的环碳原子和1-4个环杂原子的5-10元单环或双环4n+2芳族环系统(例如，具有在环状阵列中共享的6或10个π电子)，其中每个杂原子独立地选自氮、氧和硫(“5-10元杂芳基”)。在含有一个或多个氮原子的杂芳基中，当化合价允许时，附接点可为碳或氮原子。杂芳基双环环系统可在一个或两个环中包括一个或多个杂原子。“杂芳基”包括这样的环系统，其中如上文所定义的杂芳基环与一个或多个碳环基或杂环基稠合，其中附接点为在杂芳基环上，并且在此类情况下，环成员的数目继续指示杂芳基环系统中环成员的数目。“杂芳基”也包括这样的环系统，其中如上文所定义的杂芳基环与一个或多个芳基稠合，其中附接点为在芳基或杂芳基环上，并且在此类情况下，环成员的数目指示稠合(芳基/杂芳基)环系统中环成员的数目。双环杂芳基，其中一个环不含有杂原子(例如，吲哚基、喹啉基、咔唑基等)，附接点可在任一环上，即在携带杂原子的环(例如，2-吲哚基)或不含有杂原子的环(例如，5-吲哚基)上。
在一些实施方案中，杂芳基为具有芳族环系统中提供的环碳原子和1-4个环杂原子的5-10元芳族环系统，其中每个杂原子独立地选自氮、氧和硫(“5-10元杂芳基”)。在一些实施方案中，杂芳基为具有芳族环系统中提供的环碳原子和1-4个环杂原子的5-8元芳族环系统，其中每个杂原子独立地选自氮、氧和硫(“5-8元杂芳基”)。在一些实施方案中，杂芳基为具有芳族环系统中提供的环碳原子和1-4个环杂原子的5-6元芳族环系统，其中每个杂原子独立地选自氮、氧和硫(“5-6元杂芳基”)。在一些实施方案中，5-6元杂芳基具有1-3个选自氮、氧和硫的环杂原子。在一些实施方案中，5-6元杂芳基具有1-2个选自氮、氧和硫的环杂原子。在一些实施方案中，5-6元杂芳基具有1个选自氮、氧和硫的环杂原子。除非另外指定，否则杂芳基的每个实例独立地任选地被取代，即未被取代(“未被取代的杂芳基”)或被一个或多个取代基取代(“被取代的杂芳基”)。在某些实施方案中，杂芳基为未被取代的5-14元杂芳基。在某些实施方案中，杂芳基为被取代的5-14元杂芳基。在一些实施方案中，杂芳基为具有芳族环系统中提供的环碳原子和1-6个环杂原子的8-12元双环芳族环系统，其中每个杂原子独立地选自氮、氧和硫(“8-12元双环杂芳基”)。在一些实施方案中，杂芳基为具有芳族环系统中提供的环碳原子和1-6个环杂原子的8-10元双环芳族环系统，其中每个杂原子独立地选自氮、氧和硫(“8-10元双环杂芳基”)。在一些实施方案中，杂芳基为具有芳族环系统中提供的环碳原子和1-6个环杂原子的9-10元双环芳族环系统，其中每个杂原子独立地选自氮、氧和硫(“9-10元双环杂芳基”)。除非另外指定，否则杂芳基的每个实例独立地未被取代(“未被取代的杂芳基”)或被一个或多个取代基取代(“被取代的杂芳基”)。在某些实施方案中，杂芳基为未被取代的5-14元杂芳基。在某些实施方案中，杂芳基为被取代的5-14元杂芳基。
含有一个杂原子的示例性5元杂芳基包括但不限于吡咯基、呋喃基和噻吩基。含有两个杂原子的示例性5元杂芳基包括但不限于咪唑基、吡唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基和异噻唑基。含有三个杂原子的示例性5元杂芳基包括但不限于三唑基、噁二唑基和噻二唑基。含有四个杂原子的示例性5元杂芳基包括但不限于四唑基。含有一个杂原子的示例性6元杂芳基包括但不限于吡啶基。含有两个杂原子的示例性6元杂芳基包括但不限于哒嗪基、嘧啶基和吡嗪基。含有三个或四个杂原子的示例性6元杂芳基分别包括但不限于三嗪基和四嗪基。含有一个杂原子的示例性7元杂芳基包括但不限于吖庚因基(azepinyl)、噁庚因基(oxepinyl)和噻庚烷基(thiepinyl)。示例性5,6-双环杂芳基包括但不限于吲哚基、异吲哚基、吲唑基、苯并三唑基、苯并噻吩基、异苯并噻吩基、苯并呋喃基、苯并异呋喃基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并异噁唑基、苯并噁二唑基、苯并噻唑基、苯并异噻唑基、苯并噻二唑基、吲哚嗪基和嘌呤基。示例性6,6-双环杂芳基包括但不限于萘啶基、喋啶基、喹啉基、异喹啉基、噌啉基、喹噁啉基、酞嗪基和喹唑啉基。
代表性杂芳基的实例包括以下:
其中每个Z选自羰基、N、NR65、O和S；且R65独立地为氢、C1-C8烷基、C3-C10环烷基、4-10元杂环基、C6-C10芳基和5-10元杂芳基。
在本文所述的结构中，以跨越两个或更多个环的键附接至多环(例如，双环或三环)环烷基、杂环基、芳基或杂芳基的取代基应理解为意指取代基可附接于每个环中的任一位置。
“杂芳烷基”或“杂芳基烷基”为“烷基”的子集且是指被杂芳基取代的烷基，其中附接点为在烷基部分上。
术语“碳环基”或“碳环”是指在非芳族环系统中具有3至14个环碳原子(“C3-14碳环基”)和零个杂原子的非芳族单环、双环或三环或多环烃环系统的基团。碳环基包括完全饱和的环系统(例如，环烷基)和部分饱和的环系统。在一些实施方案中，碳环基具有3至10个环碳原子(“C3-10碳环基”)。在一些实施方案中，碳环基具有3至8个环碳原子(“C3-8碳环基”)。在一些实施方案中，碳环基具有3至7个环碳原子(“C3-7碳环基”)。在一些实施方案中，碳环基具有3至6个环碳原子(“C3-6碳环基”)。在一些实施方案中，碳环基具有4至6个环碳原子(“C4-6碳环基”)。在一些实施方案中，碳环基具有5至6个环碳原子(“C5-6碳环基”)。在一些实施方案中，碳环基具有5至10个环碳原子(“C5-10碳环基”)。示例性C3-6碳环基包括但不限于环丙基(C3)、环丙烯基(C3)、环丁基(C4)、环丁烯基(C4)、环戊基(C5)、环戊烯基(C5)、环己基(C6)、环己烯基(C6)、环己二烯基(C6)等。示例性C3-8碳环基包括但不限于前述C3-6碳环基以及环庚基(C7)、环庚烯基(C7)、环庚二烯基(C7)、环庚四烯基(C7)、环辛基(C8)、环辛烯基(C8)、双环[2.2.1]庚基(C7)、双环[2.2.2]辛基(C8)等。示例性C3-10碳环基包括但不限于前述C3-8碳环基以及环壬基(C9)、环壬烯基(C9)、环癸基(C10)、环癸烯(C10)、八氢-1H-茚基(C9)、十氢萘基(C10)、螺[4.5]癸基(C10)等。
如前述实例所说明，在某些实施方案中，碳环基为单环(“单环碳环基”)或多环(例如，含有稠合、桥接或螺环系统，诸如双环系统(“双环碳环基”)或三环系统(“三环碳环基”))并且可为饱和的或可含有一个或多个碳-碳双键或三键。“碳环基”也包括这样的环系统，其中如上文所定义的碳环基环与一个或多个芳基或杂芳基稠合，其中附接点在碳环基环上，并且在此类情况下，碳的数目继续指示碳环环系统中碳的数目。除非另外指定，否则碳环基的每个实例独立地未被取代(“未被取代的碳环基”)或被一个或多个取代基取代(“被取代的碳环基”)。在某些实施方案中，碳环基为未被取代的C3-14碳环基。在某些实施方案中，碳环基为被取代的C3-14碳环基。
如本文所用的术语“环烷基”包括具有3至14个碳、含有指定数目的环和碳原子的饱和环状、双环、三环或多环烃基(例如C3-C14单环、C4-C14双环、C5-C14三环或C6-C14多环环烷基)。在一些实施方案中，“环烷基”为单环环烷基。在一些实施方案中，单环环烷基具有3-14个环碳原子(“C3-14单环环烷基”)。在一些实施方案中，单环环烷基具有3至10个环碳原子(“C3-10单环环烷基”)。在一些实施方案中，单环环烷基具有3至8个环碳原子(“C3-8单环环烷基”)。在一些实施方案中，单环环烷基具有3至6个环碳原子(“C3-6单环环烷基”)。在一些实施方案中，单环环烷基具有4至6个环碳原子(“C4-6单环环烷基”)。在一些实施方案中，单环环烷基具有5至6个环碳原子(“C5-6单环环烷基”)。在一些实施方案中，单环环烷基具有5至10个环碳原子(“C5-10单环环烷基”)。单环C5-6环烷基的实例包括环戊基(C5)和环己基(C5)。C3-6环烷基的实例包括前述C5-6环烷基以及环丙基(C3)和环丁基(C4)。C3-8环烷基的实例包括前述C3-6环烷基以及环庚基(C7)和环辛基(C8)。
在一些实施方案中，“环烷基”为双环环烷基。在一些实施方案中，双环环烷基具有4-14个环碳原子(“C4-14双环环烷基”)。在一些实施方案中，双环环烷基具有4至12个环碳原子(“C4-12双环环烷基”)。在一些实施方案中，双环环烷基具有4至10个环碳原子(“C4-10双环环烷基”)。在一些实施方案中，双环环烷基具有5至10个环碳原子(“C5-10双环环烷基”)。在一些实施方案中，双环环烷基具有6至10个环碳原子(“C6-10双环环烷基”)。在一些实施方案中，双环环烷基具有8至10个环碳原子(“C8-10双环环烷基”)。在一些实施方案中，双环环烷基具有7至9个环碳原子(“C7-9双环环烷基”)。双环环烷基的实例包括双环[1.1.0]丁烷(C4)、双环[1.1.1]戊烷(C5)、螺[2.2]戊烷(C5)、双环[2.1.0]戊烷(C5)、双环[2.1.1]己烷(C6)、双环[3.1.0]己烷(C6)、螺[2.3]己烷(C6)、双环[2.2.1]庚烷(降莰烷)(C7)、双环[3.2.0]庚烷(C7)、双环[3.1.1]庚烷(C7)、双环[3.1.1]庚烷(C7)、双环[4.1.0]庚烷(C7)、螺[2.4]庚烷(C7)、螺[3.3]庚烷(C7)、双环[2.2.2]辛烷(C8)、双环[4.1.1]辛烷(C8)、八氢戊搭烯(C8)、双环[3.2.1]辛烷(C8)、双环[4.2.0]辛烷(C8)、螺[2.5]辛烷(C8)、螺[3.4]辛烷(C8)、双环[3.3.1]壬烷(C9)、八氢-1H-茚(C9)、双环[4.2.1]壬烷(C9)、螺[3.5]壬烷(C9)、螺[4.4]壬烷(C9)、双环[3.3.2]癸烷(C10)、双环[4.3.1]癸烷(C10)、螺[4.5]癸烷(C10)、双环[3.3.3]十一烷(C11)、十氢萘(C10)、双环[4.3.2]十一烷(C11)、螺[5.5]十一烷(C11)和双环[4.3.3]十二烷(C12)。
在一些实施方案中，“环烷基”为三环环烷基。在一些实施方案中，三环环烷基具有6-14个环碳原子(“C6-14三环环烷基”)。在一些实施方案中，三环环烷基具有8至12个环碳原子(“C8-12三环环烷基”)。在一些实施方案中，三环环烷基具有10至12个环碳原子(“C10-12三环环烷基”)。三环环烷基的实例包括金刚硼(C12)。
除非另外指定，否则环烷基的每个实例独立地未被取代(“未被取代的环烷基”)或被一个或多个取代基取代(“被取代的环烷基”)。在某些实施方案中，环烷基为未被取代的C3-14环烷基。在某些实施方案中，环烷基为被取代的C3-14环烷基。
“杂环基”或“杂环”是指具有环碳原子和1至4个环杂原子的3至10元非芳族环系统的基团，其中每个杂原子独立地选自氮、氧、硫、硼、磷和硅(“3-10元杂环基”)。在含有一个或多个氮原子的杂环基中，当化合价允许时，附接点可为碳或氮原子。杂环基可为单环(“单环杂环基”)或稠合、桥接或螺环系统，诸如双环系统(“双环杂环基”)，且可为饱和的或可为部分不饱和的。杂环基双环环系统可包括一个或两个环中的一个或多个杂原子。“杂环基”也包括：其中如上文所定义的杂环基环与一个或多个碳环基稠合的环系统，其中附接点在碳环基或杂环基环上；或其中如上文所定义的杂环基环与一个或多个芳基或杂芳基稠合的环系统，其中附接点在杂环基环上，并且在此类情况下，环成员的数目继续指示杂环基环系统中环成员的数目。除非另外指定，否则杂环基的每个实例独立地任选地被取代，即未被取代(“未被取代的杂环基”)或被一个或多个取代基取代(“被取代的杂环基”)。在某些实施方案中，杂环基为未被取代的3-10元杂环基。在某些实施方案中，杂环基为被取代的3-10元杂环基。
在一些实施方案中，杂环基为具有环碳原子和1-4个环杂原子的5-10元非芳族环系统，其中每个杂原子独立地选自氮、氧、硫、硼、磷和硅(“5-10元杂环基”)。在一些实施方案中，杂环基为具有环碳原子和1-4个环杂原子的5-8元非芳族环系统，其中每个杂原子独立地选自氮、氧和硫(“5-8元杂环基”)。在一些实施方案中，杂环基为具有环碳原子和1-4个环杂原子的5-6元非芳族环系统，其中每个杂原子独立地选自氮、氧和硫(“5-6元杂环基”)。在一些实施方案中，5-6元杂环基具有1-3个选自氮、氧和硫的环杂原子。在一些实施方案中，5-6元杂环基具有1-2个选自氮、氧和硫的环杂原子。在一些实施方案中，5-6元杂环基具有一个选自氮、氧和硫的环杂原子。
含有一个杂原子的示例性3元杂环基包括但不限于氮丙啶基、环氧乙烷基、硫杂环丙烷基。含有一个杂原子的示例性4元杂环基包括但不限于氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基和硫杂环丁烷基。含有一个杂原子的示例性5元杂环基包括但不限于四氢呋喃基、二氢呋喃基、四氢噻吩基、二氢噻吩基、吡咯烷基、二氢吡咯基和吡咯基-2,5-二酮。含有两个杂原子的示例性5元杂环基包括但不限于二氧戊环基、氧硫杂环戊烷基(oxasulfuranyl)、二硫烷基和噁唑烷-2-酮。含有三个杂原子的示例性5元杂环基包括但不限于三唑啉基、噁二唑啉基和噻二唑啉基。含有一个杂原子的示例性6元杂环基包括但不限于哌啶基、四氢吡喃基、二氢吡啶基和噻烷基(thianyl)。含有两个杂原子的示例性6元杂环基包括但不限于哌嗪基、吗啉基、二噻烷基、二噁烷基。含有两个杂原子的示例性6元杂环基包括但不限于三嗪烷基(triazinanyl)。含有一个杂原子的示例性7元杂环基包括但不限于氮杂环庚烷基、氧杂环庚烷基(oxepanyl)和硫杂环庚烷基(thiepanyl)。含有一个杂原子的示例性8元杂环基包括但不限于氮杂环辛烷基(azocanyl)、氧杂环辛烷基(oxecanyl)和硫杂环辛烷基(thiocanyl)。与C6芳基环稠合的示例性5元杂环基(在本文中也称为5,6-双环杂环)包括但不限于吲哚啉基、异吲哚啉基、二氢苯并呋喃基、二氢苯并噻吩基、苯并噁唑啉酮基等。示例性双环杂环基包括但不限于吲哚啉基、异吲哚啉基、二氢苯并呋喃基、二氢苯并噻吩基、四氢苯并噻吩基、四氢苯并呋喃基、四氢吲哚基、四氢喹啉基、四氢异喹啉基、十氢喹啉基、十氢异喹啉基、八氢色原烯基、八氢异色原烯基、十氢萘啶基、十氢-1,8-萘啶基、八氢吡咯并[3,2-b]吡咯、吲哚啉基、邻苯二甲酰亚胺基、萘二甲酰亚胺基、色原烷基、色原烯基、1H-苯并[e][1,4]二吖庚因基、1,4,5,7-四氢吡喃并[3,4-b]吡咯基、5,6-二氢-4H-呋喃并[3,2-b]吡咯基、6,7-二氢-5H-呋喃并[3,2-b]吡喃基、5,7-二氢-4H-噻吩并[2,3-c]吡喃基、2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶基、2,3-二氢呋喃并[2,3-b]吡啶基、4,5,6,7-四氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶基、4,5,6,7-四氢呋喃并[3,2-c]吡啶基、4,5,6,7-四氢噻吩并[3,2-b]吡啶基、1,2,3,4-四氢-1,6-萘啶基等。与芳基环稠合的示例性6元杂环基(在本文中也称为6,6-双环杂环)包括但不限于四氢喹啉基、四氢异喹啉基等。
“含氮杂环基”意指含有至少一个氮原子的4至7元非芳族环状基团，例如但不限于吗啉、哌啶(例如，2-哌啶基、3-哌啶基和4-哌啶基)、吡咯烷(例如，2-吡咯烷基和3-吡咯烷基)、氮杂环丁烷、吡咯烷酮、咪唑啉、咪唑烷酮、2-吡唑啉、吡唑烷、哌嗪和N-烷基哌嗪诸如N-甲基哌嗪。特定实例包括氮杂环丁烷、哌啶酮和哌嗪酮。
“杂”当用于描述化合物或呈现于化合物上的基团时意指化合物或基团中的一个或多个碳原子已由氮、氧或硫杂原子置换。杂可适用于上文所述的具有1至5个且特别地1至3个杂原子的任一烃基，诸如烷基(例如杂烷基)、环烷基(例如杂环基)、芳基(例如杂芳基)、环烯基(例如环杂烯基)等。
“酰基”是指基团-C(＝O)R20，其中R20为氢、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的烯基、被取代或未被取代的炔基、被取代或未被取代的碳环基、被取代或未被取代的杂环基、被取代或未被取代的芳基或者被取代或未被取代的杂芳基，如本文所定义。“烷酰基”为这样的酰基，其中R20为除氢外的基团。代表性酰基包括但不限于甲酰基(-CHO)、乙酰基(-C(＝O)CH3)、环己基羰基、环己基甲基羰基、苯甲酰基(-C(＝O)Ph)、苯甲基羰基(-C(＝O)CH2Ph)、-C(＝O)-C1-C8烷基、-C(＝O)-(CH2)t(C6-C10芳基)、-C(＝O)-(CH2)t(5-10元杂芳基)、-C(＝O)-(CH2)t(C3-C10环烷基)和-C(＝O)-(CH2)t(4-10元杂环基)，其中t为0至4的整数。在某些实施方案中，R21为C1-C8烷基，其被卤基或羟基取代；或C3-C10环烷基、4-10元杂环基、C6-C10芳基、芳基烷基、5-10元杂芳基或杂芳基烷基，其各自被未被取代的C1-C4烷基、卤基、未被取代的C1-C4烷氧基、未被取代的C1-C4卤烷基、未被取代的C1-C4羟基烷基或未被取代的C1-C4卤烷氧基或羟基取代。
术语氨基烷基是指这样的被取代的烷基，其中氢原子中的一者或多者独立地被-NH2基团置换。
术语羟基烷基是指这样的被取代的烷基，其中氢原子中的一者或多者独立地被-OH基团置换。
术语“烷基氨基”和“二烷基氨基”分别是指-NH(烷基)和-N(烷基)2基团。在一些实施方案中，烷基氨基为-NH(C1-C4烷基)。在一些实施方案中，烷基氨基为甲基氨基、乙基氨基、丙基氨基、异丙基氨基、正丁基氨基、异丁基氨基、仲丁基氨基或叔丁基氨基。在一些实施方案中，二烷基氨基为-N(C1-C6烷基)2。在一些实施方案中，二烷基氨基为二甲基氨基、甲基乙基氨基、二乙基氨基、甲基丙基氨基、甲基异丙基氨基、甲基丁基氨基、甲基异丁基氨基或甲基叔丁基氨基。
术语“芳基氧基”是指-O-芳基。在一些实施方案中，芳基氧基为苯氧基。
术语“卤烷氧基”是指被一个或多个卤基或其组合取代的烷氧基结构。例如，术语“氟烷氧基”包括卤基为氟的卤烷氧基。在一些实施方案中，卤烷氧基为二氟甲氧基和三氟甲氧基。
“烷氧基”是指基团-OR29，其中R29为被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的烯基、被取代或未被取代的炔基、被取代或未被取代的碳环基、被取代或未被取代的杂环基、被取代或未被取代的芳基或被取代或未被取代的杂芳基。特定烷氧基为甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、叔丁氧基、仲丁氧基、正戊氧基、正己氧基和1,2-二甲基丁氧基。特定烷氧基为低级烷氧基，即具有1至6个碳原子。另外的特定烷氧基具有1至4个碳原子。
在某些实施方案中，R29为具有1个或多个取代基，例如1至5个取代基且特别地1至3个取代基，具体地1个取代基的基团，所述取代基选自由以下组成的组：氨基、被取代的氨基、C6-C10芳基、芳基氧基、羰基、氰基、C3-C10环烷基、4-10元杂环基、卤素、5-10元杂芳基、羟基、硝基、硫代烷氧基、硫代芳基氧基、硫醇、烷基-S(O)-、芳基-S(O)-、烷基-S(O)2-和芳基-S(O)2-。示例性‘被取代的烷氧基’基团包括但不限于-O-(CH2)t(C6-C10芳基)、-O-(CH2)t(5-10元杂芳基)、-O-(CH2)t(C3-C10环烷基)和-O-(CH2)t(4-10元杂环基)，其中t为0至4的整数且存在的任何芳基、杂芳基、环烷基或杂环基本身可被未被取代的C1-C4烷基、卤基、未被取代的C1-C4烷氧基、未被取代的C1-C4卤烷基、未被取代的C1-C4羟基烷基或未被取代的C1-C4卤烷氧基或羟基取代。具体示例性‘被取代的烷氧基’基团为-OCF3、-OCH2CF3、-OCH2Ph、-OCH2-环丙基、-OCH2CH2OH和-OCH2CH2NMe2。
“氨基”是指基团-NH2。
“氧代”是指-C(＝O)-。
“被取代的氨基”是指式-N(R38)2氨基，其中R38为氢、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的烯基、被取代或未被取代的炔基、被取代或未被取代的碳环基、被取代或未被取代的杂环基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的杂芳基或氨基保护基，其中R38中的至少一者不为氢。在某些实施方案中，每个R38独立地选自氢、C1-C8烷基、C3-C8烯基、C3-C8炔基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基、4-10元杂环基或C3-C10环烷基；或C1-C8烷基，其被卤基或羟基取代；C3-C8烯基，其被卤基或羟基取代；C3-C8炔基，其被卤基或羟基取代；或-(CH2)t(C6-C10芳基)、-(CH2)t(5-10元杂芳基)、-(CH2)t(C3-C10环烷基)或-(CH2)t(4-10元杂环基)，其中t为0至8的整数，其各自被未被取代的C1-C4烷基、卤基、未被取代的C1-C4烷氧基、未被取代的C1-C4卤烷基、未被取代的C1-C4羟基烷基或未被取代的C1-C4卤烷氧基或羟基取代；或两个R38基团接合以形成亚烷基。
示例性“被取代的氨基”包括但不限于-NR39-C1-C8烷基、-NR39-(CH2)t(C6-C10芳基)、-NR39-(CH2)t(5-10元杂芳基)、-NR39-(CH2)t(C3-C10环烷基)和-NR39-(CH2)t(4-10元杂环基)，其中t为0至4的整数，例如1或2，每个R39独立地表示H或C1-C8烷基；且存在的任何烷基本身可被卤基、被取代或未被取代的氨基或羟基取代；且存在的任何芳基、杂芳基、环烷基或杂环基本身可被未被取代的C1-C4烷基、卤基、未被取代的C1-C4烷氧基、未被取代的C1-C4卤烷基、未被取代的C1-C4羟基烷基或未被取代的C1-C4卤烷氧基或羟基取代。为了避免存疑，术语‘被取代的氨基’包括如下文所定义的烷基氨基、被取代的烷基氨基、烷基芳基氨基、被取代的烷基芳基氨基、芳基氨基、被取代的芳基氨基、二烷基氨基和被取代的二烷基氨基。被取代的氨基涵盖被单取代的氨基和被二取代的氨基。
在某些实施方案中，存在于氮原子上的取代基为氮保护基(在本文中也称为“氨基保护基”)。氮保护基包括但不限于-OH、-ORaa、-N(Rcc)2、-C(＝O)Raa、-C(＝O)N(Rcc)2、-CO2Raa、-SO2Raa、-C(＝NRcc)Raa、-C(＝NRcc)ORaa、-C(＝NRcc)N(Rcc)2、-SO2N(Rcc)2、-SO2Rcc、-SO2ORcc、-SORaa、-C(＝S)N(Rcc)2、-C(＝O)SRcc、-C(＝S)SRcc、-C1-10烷基(例如，芳烷基、杂芳烷基)、-C2-10烯基、-C2-10炔基、杂C1-10烷基、杂C2-10烯基、杂C2-10炔基、C3-10碳环基、3-14元杂环基、C6-14芳基和5-14元杂芳基，其中每个烷基、烯基、炔基、杂烷基、杂烯基、杂炔基、碳环基、杂环基、芳烷基、芳基和杂芳基独立地被0、1、2、3、4或5个Rdd基团取代，且其中Raa、Rbb、Rcc和Rdd如本文所定义。氮保护基为本领域中熟知的且包括Protecting Groups in OrganicSynthesis,T.W.Greene和P.G.M.Wuts,第3版,John Wiley&Sons,1999中详述的那些，所述文献以引用的方式并入本文。
Raa的每个实例独立地选自-C1-10烷基、-C1-10全卤基烷基、-C2-10烯基、-C2-10炔基、杂C1-10烷基、杂C2-10烯基、杂C2-10炔基、C3-10碳环基、3-14元杂环基、C6-14芳基和5-14元杂芳基，或两个Raa基团接合以形成3-14元杂环基或5-14元杂芳基环，其中每个烷基、烯基、炔基、杂烷基、杂烯基、杂炔基、碳环基、杂环基、芳基和杂芳基独立地被0、1、2、3、4或5个Rdd基团取代；
Rbb的每个实例独立地选自氢、-OH、-ORaa、-N(Rcc)2、-CN、-C(＝O)Raa、-C(＝O)N(Rcc)2、-CO2Raa、-SO2Raa、-C(＝NRcc)ORaa、-C(＝NRcc)N(Rcc)2、-SO2N(Rcc)2、-SO2Rcc、-SO2ORcc、-SORaa、-C(＝S)N(Rcc)2、-C(＝O)SRcc、-C(＝S)SRcc、-P(＝O)(Raa)2、-P(＝O)(ORcc)2、-P(＝O)(N(Rcc)2)2、-C1-10烷基、-C1-10全卤基烷基、-C2-10烯基、-C2-10炔基、杂C1-10烷基、杂C2-10烯基、杂C2-10炔基、C3-10碳环基、3-14元杂环基、C6-14芳基和5-14元杂芳基，或两个Rbb基团接合以形成3-14元杂环基或5-14元杂芳基环，其中每个烷基、烯基、炔基、杂烷基、杂烯基、杂炔基、碳环基、杂环基、芳基和杂芳基独立地被0、1、2、3、4或5个Rdd基团取代；其中X-为平衡离子。
Rcc的每个实例独立地选自氢、-C1-10烷基、-C1-10全卤基烷基、-C2-10烯基、-C2-10炔基、杂C1-10烷基、杂C2-10烯基、杂C2-10炔基、C3-10碳环基、3-14元杂环基、C6-14芳基和5-14元杂芳基，或两个Rcc基团接合以形成3-14元杂环基或5-14元杂芳基环，其中每个烷基、烯基、炔基、杂烷基、杂烯基、杂炔基、碳环基、杂环基、芳基和杂芳基独立地被0、1、2、3、4或5个Rdd基团取代；
Rdd的每个实例独立地选自卤素、-CN、-NO2、-N3、-SO2H、-SO3H、-OH、-ORee、-ON(Rff)2、-N(Rff)2、-N(Rff)3 +X-、-N(ORee)Rff、-SH、-SRee、-SSRee、-C(＝O)Ree、-CO2H、-CO2Ree、-OC(＝O)Ree、-OCO2Ree、-C(＝O)N(Rff)2、-OC(＝O)N(Rff)2、-NRffC(＝O)Ree、-NRffCO2Ree、-NRffC(＝O)N(Rff)2、-C(＝NRff)ORee、-OC(＝NRff)Ree、-OC(＝NRff)ORee、-C(＝NRff)N(Rff)2、-OC(＝NRff)N(Rff)2、-NRffC(＝NRff)N(Rff)2、-NRffSO2Ree、-SO2N(Rff)2、-SO2Ree、-SO2ORee、-OSO2Ree、-S(＝O)Ree、-Si(Ree)3、-OSi(Ree)3、-C(＝S)N(Rff)2、-C(＝O)SRee、-C(＝S)SRee、-SC(＝S)SRee、-P(＝O)(ORee)2、-P(＝O)(Ree)2、-OP(＝O)(Ree)2、-OP(＝O)(ORee)2、-C1-6烷基、-C1-6全卤基烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、杂C1-6烷基、杂C2-6烯基、杂C2-6炔基、C3-10碳环基、3-10元杂环基、C6-10芳基、5-10元杂芳基，其中每个烷基、烯基、炔基、杂烷基、杂烯基、杂炔基、碳环基、杂环基、芳基和杂芳基独立地被0、1、2、3、4或5个Rgg基团取代，或两个偕Rdd取代基可接合以形成＝O或＝S；其中X-为平衡离子；
Ree的每个实例独立地选自-C1-6烷基、-C1-6全卤基烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、杂C1-6烷基、杂C2-6烯基、杂C2-6炔基、C3-10碳环基、C6-10芳基、3-10元杂环基和3-10元杂芳基，其中每个烷基、烯基、炔基、杂烷基、杂烯基、杂炔基、碳环基、杂环基、芳基和杂芳基独立地被0、1、2、3、4或5个Rgg基团取代；
Rff的每个实例独立地选自氢、-C1-6烷基、-C1-6全卤基烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、杂C1-6烷基、杂C2-6烯基、杂C2-6炔基、C3-10碳环基、3-10元杂环基、C6-10芳基和5-10元杂芳基，或两个Rff基团接合以形成3-10元杂环基或5-10元杂芳基环，其中每个烷基、烯基、炔基、杂烷基、杂烯基、杂炔基、碳环基、杂环基、芳基和杂芳基独立地被0、1、2、3、4或5个Rgg基团取代；且
Rgg的每个实例独立地为卤素、-CN、-NO2、-N3、-SO2H、-SO3H、-OH、-OC1-6烷基、-ON(C1-6烷基)2、-N(C1-6烷基)2、-N(C1-6烷基)3 +X-、-NH(C1-6烷基)2 +X-、-NH2(C1-6烷基)+X-、-NH3 +X-、-N(OC1-6烷基)(C1-6烷基)、-N(OH)(C1-6烷基)、-NH(OH)、-SH、-SC1-6烷基、-SS(C1-6烷基)、-C(＝O)(C1-6烷基)、-CO2H、-CO2(C1-6烷基)、-OC(＝O)(C1-6烷基)、-OCO2(C1-6烷基)、-C(＝O)NH2、-C(＝O)N(C1-6烷基)2、-OC(＝O)NH(C1-6烷基)、-NHC(＝O)(C1-6烷基)、-N(C1-6烷基)C(＝O)(C1-6烷基)、-NHCO2(C1-6烷基)、-NHC(＝O)N(C1-6烷基)2、-NHC(＝O)NH(C1-6烷基)、-NHC(＝O)NH2、-C(＝NH)O(C1-6烷基)、-OC(＝NH)(C1-6烷基)、-OC(＝NH)OC1-6烷基、-C(＝NH)N(C1-6烷基)2、-C(＝NH)NH(C1-6烷基)、-C(＝NH)NH2、-OC(＝NH)N(C1-6烷基)2、-OC(NH)NH(C1-6烷基)、-OC(NH)NH2、-NHC(NH)N(C1-6烷基)2、-NHC(＝NH)NH2、-NHSO2(C1-6烷基)、-SO2N(C1-6烷基)2、-SO2NH(C1-6烷基)、-SO2NH2、-SO2C1-6烷基、-SO2OC1-6烷基、-OSO2C1-6烷基、-SOC1-6烷基、-Si(C1-6烷基)3、-OSi(C1-6烷基)3、-C(＝S)N(C1-6烷基)2、-C(＝S)NH(C1-6烷基)、-C(＝S)NH2、-C(＝O)S(C1-6烷基)、-C(＝S)SC1-6烷基、-SC(＝S)SC1-6烷基、-P(＝O)(OC1-6烷基)2、-P(＝O)(C1-6烷基)2、-OP(＝O)(C1-6烷基)2、-OP(＝O)(OC1-6烷基)2、-C1-6烷基、-C1-6全卤基烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、杂C1-6烷基、杂C2-6烯基、杂C2-6炔基、C3-10碳环基、C6-10芳基、3-10元杂环基、5-10元杂芳基；或两个偕Rgg取代基可以接合以形成＝O或＝S；其中X-为平衡离子。
例如，氮保护基诸如酰胺基团(例如，-C(＝O)Raa)包括但不限于甲酰胺、乙酰胺、氯乙酰胺、三氯乙酰胺、三氟乙酰胺、苯基乙酰胺、3-苯基丙酰胺、吡啶酰胺、3-吡啶基甲酰胺、N-苯甲酰基苯基丙氨酰基衍生物、苯甲酰胺、对苯基苯甲酰胺、邻硝基苯基乙酰胺、邻硝基苯氧基乙酰胺、乙酰乙酰胺、(N'-二硫苯甲基氧基酰基氨基)乙酰胺、3-(对羟基苯基)丙酰胺、3-(邻硝基苯基)丙酰胺、2-甲基-2-(邻硝基苯氧基)丙酰胺、2-甲基-2-(邻苯基氮杂苯氧基)丙酰胺、4-氯丁酰胺、3-甲基-3-硝基丁酰胺、邻硝基桂皮酰胺、N-乙酰基甲硫氨酸衍生物、邻硝基苯甲酰胺和邻(苯甲酰基氧基甲基)苯甲酰胺。
氮保护基诸如氨基甲酸酯基团(例如，-C(＝O)ORaa)包括但不限于氨基甲酸甲酯、氨基甲酸乙酯、9-芴基甲基氨基甲酸酯(Fmoc)、9-(2-磺酸基)芴基甲基氨基甲酸酯、9-(2,7-二溴)芴基甲基氨基甲酸酯、2,7-二-叔丁基-[9-(10,10-二氧代-10,10,10,10-四氢噻吨基)]甲基氨基甲酸酯(DBD-Tmoc)、4-甲氧基苯酰基氨基甲酸酯(Phenoc)、2,2,2-三氯乙基氨基甲酸酯(Troc)、2-三甲基甲硅烷基乙基氨基甲酸酯(Teoc)、2-苯基乙基氨基甲酸酯(hZ)、1-(1-金刚烷基)-1-甲基乙基氨基甲酸酯(Adpoc)、1,1-二甲基-2-卤基乙基氨基甲酸酯、1,1-二甲基-2,2-二溴乙基氨基甲酸酯(DB-t-BOC)、1,1-二甲基-2,2,2-三氯乙基氨基甲酸酯(TCBOC)、1-甲基-1-(4-联苯基)乙基氨基甲酸酯(Bpoc)、1-(3,5-二-叔丁基苯基)-1-甲基乙基氨基甲酸酯(t-Bumeoc)、2-(2'-和4'-吡啶基)乙基氨基甲酸酯(Pyoc)、2-(N,N-二环己基甲酰胺基)乙基氨基甲酸酯、叔丁基氨基甲酸酯(BOC或Boc)、1-金刚烷基氨基甲酸酯(Adoc)、乙烯基氨基甲酸酯(Voc)、烯丙基氨基甲酸酯(Alloc)、1-异丙基烯丙基氨基甲酸酯(Ipaoc)、桂酰基氨基甲酸酯(Coc)、4-硝基桂酰基氨基甲酸酯(Noc)、8-喹啉基氨基甲酸酯、N-羟基哌啶基氨基甲酸酯、烷基二硫基氨基甲酸酯、苯甲基氨基甲酸酯(Cbz)、对甲氧基苯甲基氨基甲酸酯(Moz)、对硝基苯甲基氨基甲酸酯、对溴苯甲基氨基甲酸酯、对氯苯甲基氨基甲酸酯、2,4-二氯苯甲基氨基甲酸酯、4-甲基亚磺酰基苯甲基氨基甲酸酯(Msz)、9-蒽基甲基氨基甲酸酯、联苯基甲基氨基甲酸酯、2-甲基硫乙基氨基甲酸酯、2-甲基磺酰基乙基氨基甲酸酯、2-(对甲苯磺酰基)乙基氨基甲酸酯、[2-(1,3-二噻烷基)]甲基氨基甲酸酯(Dmoc)、4-甲基噻吩基氨基甲酸酯(Mtpc)、2,4-二甲基噻吩基氨基甲酸酯(Bmpc)、2-膦基乙基氨基甲酸酯(Peoc)、2-三苯基膦基异丙基氨基甲酸酯(Ppoc)、1,1-二甲基-2-氰基乙基氨基甲酸酯、间氯对酰氧基苯甲基氨基甲酸酯、对(二羟基硼基)苯甲基氨基甲酸酯、5-苯并异噁唑基甲基氨基甲酸酯、2-(三氟甲基)-6-色原酮基甲基氨基甲酸酯(Tcroc)、间硝基苯基氨基甲酸酯、3,5-二甲氧基苯甲基氨基甲酸酯、邻硝基苯甲基氨基甲酸酯、3,4-二甲氧基-6-硝基苯甲基氨基甲酸酯、苯基(邻硝基苯基)甲基氨基甲酸酯、叔戊基氨基甲酸酯、S-苯甲基硫代氨基甲酸酯、对氰基苯甲基氨基甲酸酯、环丁基氨基甲酸酯、环己基氨基甲酸酯、环戊基氨基甲酸酯、环丙基甲基氨基甲酸酯、对癸基氧基苯甲基氨基甲酸酯、2,2-二甲氧基酰基乙烯基氨基甲酸酯、邻(N,N-二甲基甲酰胺基)苯甲基氨基甲酸酯、1,1-二甲基-3-(N,N-二甲基甲酰胺基)丙基氨基甲酸酯、1,1-二甲基丙炔基氨基甲酸酯、二(2-吡啶基)甲基氨基甲酸酯、2-呋喃基甲基氨基甲酸酯、2-碘乙基氨基甲酸酯、异冰片基氨基甲酸酯、异丁基氨基甲酸酯、异烟基氨基甲酸酯、对(对'甲氧基苯基偶氮基)苯甲基氨基甲酸酯、1-甲基环丁基氨基甲酸酯、1-甲基环己基氨基甲酸酯、1-甲基-1-环丙基甲基氨基甲酸酯、1-甲基-1-(3,5-二甲氧基苯基)乙基氨基甲酸酯、1-甲基-1-(对苯基氮杂苯基)乙基氨基甲酸酯、1-甲基-1-苯基乙基氨基甲酸酯、1-甲基-1-(4-吡啶基)乙基氨基甲酸酯、苯基氨基甲酸酯、对(苯基氮杂)苯甲基氨基甲酸酯、2,4,6-三-叔丁基苯基氨基甲酸酯、4-(三甲基铵)苯甲基氨基甲酸酯和2,4,6-三甲基苯甲基氨基甲酸酯。
氮保护基诸如磺酰胺基团(例如，-S(＝O)2Raa)包括但不限于对甲苯磺酰胺(Ts)、苯磺酰胺、2,3,6-三甲基-4-甲氧基苯磺酰胺(Mtr)、2,4,6-三甲氧基苯磺酰胺(Mtb)、2,6-二甲基-4-甲氧基苯磺酰胺(Pme)、2,3,5,6-四甲基-4-甲氧基苯磺酰胺(Mte)、4-甲氧基苯磺酰胺(Mbs)、2,4,6-三甲基苯磺酰胺(Mts)、2,6-二甲氧基-4-甲基苯磺酰胺(iMds)、2,2,5,7,8-五甲基色原烷-6-磺酰胺(Pmc)、甲磺酰胺(Ms)、β-三甲基甲硅烷基乙磺酰胺(SES)、9-蒽磺酰胺、4-(4',8'-二甲氧基萘基甲基)苯磺酰胺(DNMBS)、苯甲基磺酰胺、三氟甲基磺酰胺和苯酰基磺酰胺。
其他氮保护基包括但不限于吩噻嗪基-(10)-酰基衍生物、N'-对甲苯磺酰基氨基酰基衍生物、N'-苯基氨基硫酰基衍生物、N-苯甲酰基苯基丙氨酰基衍生物、N-乙酰基甲硫氨酸衍生物、4,5-联苯基-3-噁唑啉-2-酮、N-邻苯二甲酰亚胺、N-二硫杂琥珀酰亚胺(Dts)、N-2,3-联苯基顺丁烯二酰亚胺、N-2,5-二甲基吡咯、N-1,1,4,4-四甲基二甲硅烷基氮杂环戊烷加合物(STABASE)、5-取代的1,3-二甲基-1,3,5-三氮杂环己-2-酮、5-取代的1,3-二苯甲基-1,3,5-三氮杂环己-2-酮、1-取代的3,5-二硝基-4-吡啶酮、N-甲胺、N-烯丙胺、N-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲胺(SEM)、N-3-乙酰氧基丙胺、N-(1-异丙基-4-硝基-2-氧代-3-吡咯啉-3-基)胺、季铵盐、N-苯甲胺、N-二(4-甲氧基苯基)甲胺、N-5-二苯并环庚胺、N-三苯基甲胺(Tr)、N-[(4-甲氧基苯基)联苯基甲基]胺(MMTr)、N-9-苯基芴胺(PhF)、N-2,7-二氯-9-芴基亚甲胺、N-二茂铁基甲基氨基(Fcm)、N-2-甲基吡啶氨基N'-氧化物、N-1,1-二甲基硫亚甲胺、N-亚苯甲胺、N-对甲氧基苯亚甲胺、N-联苯基亚甲胺、N-[(2-吡啶基)均三甲苯基]亚甲胺、N-(N',N'-二甲基氨基亚甲基)胺、N,N'-亚异丙二胺、N-对硝基亚苯甲胺、N-亚水杨基胺、N-5-氯亚水杨基胺、N-(5-氯-2-羟基苯基)苯基亚甲胺、N-亚环己胺、N-(5,5-二甲基-3-氧代-1-环己烯基)胺、N-硼烷衍生物、N-联苯基硼酸衍生物、N-[苯基(五酰基铬或钨)酰基]胺、N-铜螯合物、N-锌螯合物、N-硝胺、N-亚硝胺、胺N-氧化物、联苯基膦酰胺(Dpp)、二甲基硫代膦酰胺(Mpt)、联苯基硫膦酰胺(Ppt)、二烷基磷酰胺、二苯甲基磷酰胺、联苯基磷酰胺、苯亚磺酰胺、邻硝基苯亚磺酰胺(Nps)、2,4-二硝基苯亚磺酰胺、五氯苯亚磺酰胺、2-硝基-4-甲氧基苯亚磺酰胺、三苯基甲基亚磺酰胺和3-硝基吡啶亚磺酰胺(Npys)。
在某些实施方案中，存在于氧原子上的取代基为氧保护基(在本文中也称为“羟基保护基”)。氧保护基包括但不限于-Raa、-N(Rbb)2、-C(＝O)SRaa、-C(＝O)Raa、-CO2Raa、-C(＝O)N(Rbb)2、-C(＝NRbb)Raa、-C(＝NRbb)ORaa、-C(＝NRbb)N(Rbb)2、-S(＝O)Raa、-SO2Raa、-Si(Raa)3、-P(Rcc)2、-P(Rcc)3 +X-、-P(ORcc)2、-P(ORcc)3 +X-、-P(＝O)(Raa)2、-P(＝O)(ORcc)2和-P(＝O)(N(Rbb)2)2，其中Raa、Rbb和Rcc如本文所定义。氧保护基为本领域中熟知的且包括ProtectingGroups in Organic Synthesis,T.W.Greene和P.G.M.Wuts,第3版,John Wiley&Sons,1999中详述的那些，所述文献以引用的方式并入本文。
示例性氧保护基包括但不限于甲基、甲氧基甲基(MOM)、甲基硫甲基(MTM)、叔丁基硫甲基、(苯基二甲基甲硅烷基)甲氧基甲基(SMOM)、苯甲基氧基甲基(BOM)、对甲氧基苯甲基氧基甲基(PMBM)、(4-甲氧基苯氧基)甲基(p-AOM)、愈创木酚甲基(GUM)、叔丁氧基甲基、4-戊烯基氧基甲基(POM)、甲硅烷氧基甲基、2-甲氧基乙氧基甲基(MEM)、2,2,2-三氯乙氧基甲基、双(2-氯乙氧基)甲基、2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基(SEMOR)、四氢吡喃基(THP)、3-溴四氢吡喃基、四氢硫代吡喃基、1-甲氧基环己基、4-甲氧基四氢吡喃基(MTHP)、4-甲氧基四氢硫代吡喃基、4-甲氧基四氢硫代吡喃基S,S-二氧化物、1-[(2-氯-4-甲基)苯基]-4-甲氧基哌啶-4-基(CTMP)、1,4-二噁烷-2-基、四氢呋喃基、四氢硫呋喃基、2,3,3a,4,5,6,7,7a-八氢-7,8,8-三甲基-4,7-甲桥苯并呋喃-2-基、1-乙氧基乙基、1-(2-氯乙氧基)乙基、1-甲基-1-甲氧基乙基、1-甲基-1-苯甲基氧基乙基、1-甲基-1-苯甲基氧基-2-氟乙基、2,2,2-三氯乙基、2-三甲基甲硅烷基乙基、2-(苯基氧硒基)乙基、叔丁基、烯丙基、对氯苯基、对甲氧基苯基、2,4-二硝基苯基、苯甲基(Bn)、对甲氧基苯甲基、3,4-二甲氧基苯甲基、邻硝基苯甲基、对硝基苯甲基、对卤基苯甲基、2,6-二氯苯甲基、对氰基苯甲基、对苯基苯甲基、2-甲基吡啶、4-甲基吡啶、3-甲基-2-甲基吡啶N-氧化物、联苯基甲基、对,对'-二硝基二苯甲基、5-二苯并环庚基、三苯基甲基、α-萘基联苯基甲基、对甲氧基苯基联苯基甲基、二(对甲氧基苯基)苯基甲基、三(对甲氧基苯基)甲基、4-(4'-溴苯酰基氧基苯基)联苯基甲基、4,4',4"-三(4,5-二氯邻苯二甲酰亚胺基苯基)甲基、4,4',4"-三(乙酰丙酰基氧基苯基)甲基、4,4',4"-三(苯甲酰基氧基苯基)甲基、3-(咪唑-1-基)双(4',4"-二甲氧基苯基)甲基、1,1-双(4-甲氧基苯基)-1'-芘基甲基、9-蒽基、9-(9-苯基)氧杂蒽基、9-(9-苯基-10-氧代)蒽基、1,3-苯并二硫环戊-2-基、苯并异噻唑基S,S-二氧化物、三甲基甲硅烷基(TMS)、三乙基甲硅烷基(TES)、三异丙基甲硅烷基(TIPS)、二甲基异丙基甲硅烷基(IPDMS)、二乙基异丙基甲硅烷基(DEIPS)、二甲基新己基甲硅烷基(dimethylthexylsilyl)、叔丁基二甲基甲硅烷基(TBDMS)、叔丁基联苯基甲硅烷基(TBDPS)、三苯甲基甲硅烷基、三-对二甲苯基甲硅烷基、三苯基甲硅烷基、联苯基甲基甲硅烷基(DPMS)、叔丁基甲氧基苯基甲硅烷基(TBMPS)、甲酸酯、苯甲酰基甲酸酯、乙酸酯、氯乙酸酯、二氯乙酸酯、三氯乙酸酯、三氟乙酸酯、甲氧基乙酸酯、三苯基甲氧基乙酸酯、苯氧基乙酸酯、对氯苯氧基乙酸酯、3-苯基丙酸酯、4-氧代戊酸酯(乙酰丙酸酯)、4,4-(亚乙基二硫)戊酸酯(乙酰丙酰基二硫缩醛)、新戊酸酯(pivaloate)、金刚烷酸酯、巴豆酸酯、4-甲氧基巴豆酸酯、苯甲酸酯、对苯基苯甲酸酯、2,4,6-三甲基苯甲酸酯(莱酸酯(mesitoate))、碳酸甲酯、9-芴基甲基碳酸酯(Fmoc)、碳酸乙酯、2,2,2-三氯乙基碳酸酯(Troc)、2-(三甲基甲硅烷基)乙基碳酸酯(TMSEC)、2-(苯基磺酰基)乙基碳酸酯(Psec)、2-(三苯基膦基)乙基碳酸酯(Peoc)、碳酸异丁酯、碳酸乙烯酯、碳酸烯丙酯、碳酸叔丁酯(BOC或Boc)、碳酸对硝基苯酯、碳酸苯甲酯、碳酸对甲氧基苯甲酯、碳酸3,4-二甲氧基苯甲酯、碳酸邻硝基苯甲酯、碳酸对硝基苯甲酯、硫碳酸S-苯甲酯、碳酸4-乙氧基-1-萘酯、二硫碳酸甲酯、2-碘苯甲酸酯、4-叠氮基丁酸酯、4-硝基-4-甲基戊酸酯、邻(二溴甲基)苯甲酸酯、2-甲酰基苯磺酸酯、2-(甲基硫代甲氧基)乙基、4-(甲基硫甲氧基)丁酸酯、2-(甲基硫甲氧基甲基)苯甲酸酯、2,6-二氯-4-甲基苯氧基乙酸酯、2,6-二氯-4-(1,1,3,3-四甲基丁基)苯氧基乙酸酯、2,4-双(1,1-二甲基丙基)苯氧基乙酸酯、氯联苯基乙酸酯、异丁酸酯、单琥珀酸酯、(E)-2-甲基-2-丁酸酯、邻(甲氧基酰基)苯甲酸酯、α-萘甲酸酯、硝酸酯、N,N,N',N'-四甲基磷酸二酰胺烷基酯、N-苯基氨基甲酸烷基酯、硼酸酯、二甲基硫膦基、2,4-二硝基苯基次磺酸烷基酯、硫酸酯、甲磺酸酯(methanesulfonate/mesylate)、磺酸苯甲酯和甲苯磺酸酯(Ts)。
在某些实施方案中，存在于硫原子上的取代基为硫保护基(在本文中也称为“硫醇保护基”)。硫保护基包括但不限于-Raa、-N(Rbb)2、-C(＝O)SRaa、-C(＝O)Raa、-CO2Raa、-C(＝O)N(Rbb)2、-C(＝NRbb)Raa、-C(＝NRbb)ORaa、-C(＝NRbb)N(Rbb)2、-S(＝O)Raa、-SO2Raa、-Si(Raa)3、-P(Rcc)2、-P(Rcc)3 +X-、-P(ORcc)2、-P(ORcc)3 +X-、-P(＝O)(Raa)2、-P(＝O)(ORcc)2和-P(＝O)(N(Rbb)2)2，其中Raa、Rbb和Rcc如本文所定义。硫保护基为本领域中熟知的且包括ProtectingGroups in Organic Synthesis,T.W.Greene和P.G.M.Wuts,第3版,John Wiley&Sons,1999中详述的那些，所述文献以引用的方式并入本文。
术语“离去基团”在合成有机化学领域中被给予其普通含义且是指能够被亲核剂置换的原子或基团。合适的离去基团的实例包括但不限于卤素(诸如F、Cl、Br、或I(碘))、烷氧基羰基氧基、芳基氧基羰基氧基、烷磺酰基氧基、芳磺酰基氧基、烷基-羰基氧基(例如，乙酰氧基)、芳基羰基氧基、芳基氧基、甲氧基、N,O-二甲基羟基氨基、咕吨基(pixyl)和卤基甲酸酯。在某些实施方案中，离去基团为卤素、烷磺酰基氧基、芳磺酰基氧基、重氮、烷基二氮烯、芳基二氮烯、烷基三氮烯、芳基三氮烯、硝基、硝酸烷基酯、硝酸芳基酯、磷酸烷基酯、磷酸芳基酯、烷基羰基氧基、芳基羰基氧基、烷氧基羰基氧基、芳氧基羰基氧基氨、烷基胺、芳基胺、羟基、烷基氧基或芳基氧基。在一些情况下，离去基团为磺酸酯，诸如甲苯磺酸酯(甲苯磺酸酯(tosylate)，-OT)、甲磺酸酯(甲磺酸酯(mesylate)，-OM)、对溴苯磺酰基氧基(对溴苯磺酸酯(brosylate)，-OB)、-OS(＝O)2(CF2)3CF3(全氟丁磺酸酯(nonaflate)，-ONf)或三氟甲磺酸酯(三氟甲磺酸酯(triflate)，-OTf)。在一些情况下，离去基团为对溴苯磺酸酯，诸如对溴苯磺酰基氧基。在一些情况下，离去基团为间硝基苯磺酸酯(nosylate)，诸如2-硝基苯磺酰基氧基。在一些实施方案中，离去基团为含有磺酸酯的基团。在一些实施方案中，离去基团为甲苯磺酸酯基。离去基团还可为氧化膦(例如，在光延反应(Mitsunobureaction)期间形成)或内部离去基团诸如环氧化物或环状硫酸酯。离去基团的其他非限制性实例为水、氨、醇、醚部分、硫醚部分、锌卤化物、镁部分、重氮盐和铜部分。
“羧基”是指基团-C(＝O)OH。
“氰基”是指基团-CN。
“卤基”或“卤素”是指氟(F)、氯(Cl)、溴(Br)和碘(I)。在某些实施方案中，卤基为氟或氯。
“卤烷基”是指这样的烷基基团，其中烷基被一个或多个卤素取代。典型卤烷基包括但不限于三氟甲基(-CF3)、二氟甲基(-CHF2)、氟甲基(-CH2F)、氯甲基(-CH2Cl)、二氯甲基(-CHCl2)、三溴甲基(-CH2Br)等。
“羟基”是指基团-OH。
“硝基”是指基团-NO2。
“硫代酮基”是指基团＝S。
如本文所定义的烷基、烯基、炔基、碳环基、杂环基、芳基和杂芳基任选地被取代(例如，“被取代”或“未被取代”的烷基、“被取代”或“未被取代”的烯基、“被取代”或“未被取代”的炔基、“被取代”或“未被取代”的碳环基、“被取代”或“未被取代”的杂环基、“被取代”或“未被取代”的芳基或者“被取代”或“未被取代”的杂芳基)。一般而言，术语“被取代”，无论前面是否有术语“任选地”，均意指存在于基团(例如，碳或氮原子)上的至少一个氢被可允许取代基置换，例如，在取代之后产生稳定化合物(例如，不自发经历转化(诸如通过重排、环化、消除或其他反应)的化合物)的取代基。除非另外指示，否则“被取代”的基团在所述基团的一个或多个可取代位置处具有取代基，且当任何给定结构中的多于一个位置被取代时，每个位置处的取代基为相同或不同的。预期术语“被取代”包括被有机化合物的所有可允许取代基、导致形成稳定化合物的任一本文所述的取代基进行取代。本发明考虑了达成稳定化合物的任何和所有此类组合。出于本发明的目的，诸如氮的杂原子可具有如本文所述的氢取代基和/或任何合适的取代基，其满足杂原子的化合价且导致形成稳定部分。
示例性碳原子取代基包括但不限于卤素、-CN、-NO2、-N3、-SO 2H、-SO3H、-OH、-ORaa、-ON(Rbb)2、-N(Rbb)2、-N(Rbb)3 +X-、-N(ORc c)Rbb、-SH、-SRaa、-SSRcc、-C(＝O)Raa、-CO2H、-CHO、-C(ORcc)2、-CO2Raa、-OC(＝O)Raa、-OCO2Raa、-C(＝O)N(Rbb)2、-OC(＝O)N(Rbb)2、-NRbbC(＝O)Raa、-NRbbCO2Raa、-NRbbC(＝O)N(Rbb)2、-C(＝NRbb)Raa、-C(＝NRbb)ORaa、-OC(＝NRbb)Raa、-OC(＝NRbb)ORaa、-C(＝NRbb)N(Rbb)2、-OC(＝NRbb)N(Rbb)2、-NRbbC(＝NRbb)N(Rbb)2、-C(＝O)NRbbSO2Raa、-NR bbSO2Raa、-SO2N(Rbb)2、-SO2Raa、-SO2ORaa、-OSO2Raa、-S(＝O)Raa、-S(＝O)(＝NRbb)Raa、-OS(＝O)Raa、-Si(Raa)3、-OSi(Raa)3-C(＝S)N(Rbb)2、-C(＝O)SRaa、-C(＝S)SRaa、-SC(＝S)SRaa、-SC(＝O)SRaa、-OC(＝O)SRaa、-SC(＝O)ORaa、-SC(＝O)Raa、-P(＝O)2Raa、-OP(＝O)2Raa、-P(＝O)(Raa)2、-OP(＝O)(Raa)2、-OP(＝O)(ORcc)2、-P(＝O)2N(Rbb)2、-OP(＝O)2N(Rbb)2、-P(＝O)(NRbb)2、-OP(＝O)(NRbb)2、-NRbbP(＝O)(ORcc)2、-NRbbP(＝O)(NRb b)2、-P(Rcc)2、-P(Rcc)3、-OP(Rcc)2、-OP(Rcc)3、-B(Raa)2、-B(ORcc)2、-BRaa(ORcc)、C1-10烷基、C1-10卤烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、C3-10碳环基、3-14元杂环基、C6-14芳基和5-14元杂芳基，其中每个烷基、烯基、炔基、碳环基、杂环基、芳基和杂芳基独立地被0、1、2、3、4或5个Rdd基团取代；或碳原子上的两个偕氢被基团＝O、＝S、＝NN(Rbb)2、＝NNRbbC(＝O)Raa、＝NNRbbC(＝O)ORaa、＝NNRbbS(＝O)2Raa、＝NRbb或＝NORcc置换；
Raa的每个实例独立地选自C1-10烷基、C1-10卤烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、C3-10碳环基、3-14元杂环基、C6-14芳基和5-14元杂芳基，或两个Raa基团接合以形成3-14元杂环基或5-14元杂芳基环，其中每个烷基、烯基、炔基、碳环基、杂环基、芳基和杂芳基独立地被0、1、2、3、4或5个Rdd基团取代；
Rbb的每个实例独立地选自氢、-OH、-ORaa、-N(Rcc)2、-CN、-C(＝O)Raa、-C(＝O)N(Rcc)2、-CO2Raa、-SO2Raa、-C(＝NRcc)ORaa、-C(＝NRcc)N(Rcc)2、-SO2N(Rcc)2、-SO2Rcc、-SO2ORcc、-SORaa、-C(＝S)N(Rcc)2、-C(＝O)SRcc、-C(＝S)SRcc、-P(＝O)2Raa、-P(＝O)(Raa)2、-P(＝O)2N(Rcc)2、-P(＝O)(NRcc)2、C1-10烷基、C1-10卤烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、C3-10碳环基、3-14元杂环基、C6-14芳基和5-14元杂芳基，或两个Rbb基团接合以形成3-14元杂环基或5-14元杂芳基环，其中每个烷基、烯基、炔基、碳环基、杂环基、芳基和杂芳基独立地被0、1、2、3、4或5个Rdd基团取代；
Rcc的每个实例独立地选自氢、C1-10烷基、C1-10卤烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、C3-10碳环基、3-14元杂环基、C6-14芳基和5-14元杂芳基，或两个Rcc基团接合以形成3-14元杂环基或5-14元杂芳基环，其中每个烷基、烯基、炔基、碳环基、杂环基、芳基和杂芳基独立地被0、1、2、3、4或5个Rdd基团取代；
Rdd的每个实例独立地选自卤素、-CN、-NO2、-N3、-SO2H、-SO3H、-OH、-ORee、-ON(Rff)2、-N(Rff)2、-N(Rff)3 +X-、-N(ORee)Rff、-SH、-SRee、-SSRee、-C(＝O)Ree、-CO2H、-CO2Ree、-OC(＝O)Ree、-OCO2Ree、-C(＝O)N(Rff)2、-OC(＝O)N(Rff)2、-NRffC(＝O)Ree、-NRffCO2Ree、-NRffC(＝O)N(Rff)2、-C(＝NRff)ORee、-OC(＝NRff)Ree、-OC(＝NRff)ORee、-C(＝NRff)N(Rff)2、-OC(＝NRff)N(Rff)2、-NRffC(＝NRff)N(Rff)2、-NRffSO2Ree、-SO2N(Rff)2、-SO2Ree、-SO2ORee、-OSO2Ree、-S(＝O)Ree、-Si(Ree)3、-OSi(Ree)3、-C(＝S)N(Rff)2、-C(＝O)SRee、-C(＝S)SRee、-SC(＝S)SRee、-P(＝O)2Ree、-P(＝O)(Ree)2、-OP(＝O)(Ree)2、-OP(＝O)(ORee)2、C1-6烷基、C1-6卤烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-10碳环基、3-10元杂环基、C6-10芳基、5-10元杂芳基，其中每个烷基、烯基、炔基、碳环基、杂环基、芳基和杂芳基独立地被0、1、2、3、4或5个Rgg基团取代，或两个偕Rdd取代基可接合以形成＝O或＝S；
Ree的每个实例独立地选自C1-6烷基、C1-6卤烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-10碳环基、C6-10芳基、3-10元杂环基和3-10元杂芳基，其中每个烷基、烯基、炔基、碳环基、杂环基、芳基和杂芳基独立地被0、1、2、3、4或5个Rgg基团取代；
Rff的每个实例独立地选自氢、C1-6烷基、C1-6卤烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-10碳环基、3-10元杂环基、C6-10芳基和5-10元杂芳基，或两个Rff基团接合以形成3-14元杂环基或5-14元杂芳基环，其中每个烷基、烯基、炔基、碳环基、杂环基、芳基和杂芳基独立地被0、1、2、3、4或5个Rgg基团取代；且
Rgg的每个实例独立地为卤素、-CN、-NO2、-N3、-SO2H、-SO3H、-OH、-OC1-6烷基、-ON(C1-6烷基)2、-N(C1-6烷基)2、-N(C1-6烷基)3 +X-、-NH(C1-6烷基)2 +X-、-NH2(C1-6烷基)+X-、-NH3 +X-、-N(OC1-6烷基)(C1-6烷基)、-N(OH)(C1-6烷基)、-NH(OH)、-SH、-SC1-6烷基、-SS(C1-6烷基)、-C(＝O)(C1-6烷基)、-CO2H、-CO2(C1-6烷基)、-OC(＝O)(C1-6烷基)、-OCO2(C1-6烷基)、-C(＝O)NH2、-C(＝O)N(C1-6烷基)2、-OC(＝O)NH(C1-6烷基)、-NHC(＝O)(C1-6烷基)、-N(C1-6烷基)C(＝O)(C1-6烷基)、-NHCO2(C1-6烷基)、-NHC(＝O)N(C1-6烷基)2、-NHC(＝O)NH(C1-6烷基)、-NHC(＝O)NH2、-C(＝NH)O(C1-6烷基)、-OC(＝NH)(C1-6烷基)、-OC(＝NH)OC1-6烷基、-C(＝NH)N(C1-6烷基)2、-C(＝NH)NH(C1-6烷基)、-C(＝NH)NH2、-OC(＝NH)N(C1-6烷基)2、-OC(NH)NH(C1-6烷基)、-OC(NH)NH2、-NHC(NH)N(C1-6烷基)2、-NHC(＝NH)NH2、-NHSO2(C1-6烷基)、-SO2N(C1-6烷基)2、-SO2NH(C1-6烷基)、-SO2NH2、-SO2C1-6烷基、-SO2OC1-6烷基、-OSO2C1-6烷基、-SOC1-6烷基、-Si(C1-6烷基)3、-OSi(C1-6烷基)3-C(＝S)N(C1-6烷基)2、C(＝S)NH(C1-6烷基)、C(＝S)NH2、-C(＝O)S(C1-6烷基)、-C(＝S)SC1-6烷基、-SC(＝S)SC1-6烷基、-P(＝O)2(C1-6烷基)、-P(＝O)(C1-6烷基)2、-OP(＝O)(C1-6烷基)2、-OP(＝O)(OC1-6烷基)2、C1-6烷基、C1-6卤烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-10碳环基、C6-10芳基、3-10元杂环基、5-10元杂芳基；或两个偕Rgg取代基可接合以形成＝O或＝S；其中X-为平衡离子。
“平衡离子”或“阴离子平衡离子”为与阳离子季氨基缔合以便保持电荷中性的带负电荷基团。示例性平衡离子包括卤化物离子(例如，F-、Cl-、Br-、I-)、NO3 -、ClO4 -、OH-、H2PO4 -、HSO4 -、SO4 -2磺酸根离子(例如，甲磺酸根、三氟甲磺酸根、对甲苯磺酸根、苯磺酸根、10-樟脑磺酸根、萘-2-磺酸根、萘-1-磺酸-5-磺酸根、乙-1-磺酸-2-磺酸根等)和羧酸根离子(例如，乙酸根(acetate)、乙酸根(ethanoate)、丙酸根、苯甲酸根、甘油酸根、乳酸根、酒石酸根、甘醇酸根等)。
氮原子可被取代或未被取代，只要化合价允许，且包括伯、仲、叔或季氮原子。示例性氮原子取代基包括但不限于氢、-OH、-ORaa、-N(Rcc)2、-CN、-C(＝O)Raa、-C(＝O)N(Rcc)2、-CO2Raa、-SO2Raa、-C(＝NRbb)Raa、-C(＝NRcc)ORaa、-C(＝NRcc)N(Rcc)2、-SO2N(Rcc)2、-SO2Rcc、-SO2ORcc、-SORaa、-C(＝S)N(Rcc)2、-C(＝O)SRcc、-C(＝S)SRcc、-P(＝O)2Raa、-P(＝O)(Raa)2、-P(＝O)2N(Rcc)2、-P(＝O)(NRcc)2、C1-10烷基、C1-10卤烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、C3-10碳环基、3-14元杂环基、C6-14芳基和5-14元杂芳基，或附接至氮原子的两个Rcc基团接合以形成3-14元杂环基或5-14元杂芳基环，其中每个烷基、烯基、炔基、碳环基、杂环基、芳基和杂芳基独立地被0、1、2、3、4或5个Rdd基团取代，且其中Raa、Rbb、Rcc和Rdd如上文所定义。
这些和其他示例性取代基在具体实施方式、实施例和权利要求书中进行了更详细地描述。本发明不意欲以任何方式通过取代基的以上示例性列表来进行限制。
其他定义
如本文所用，术语“盐”是指任何和所有盐且涵盖药学上可接受的盐。
术语“药学上可接受的盐”是指这样的那些盐，在合理医学判断的范围内，其适用于与人和低级动物的组织接触，而无异常毒性、刺激性、过敏反应等，且与合理的效益/风险比率相称。药学上可接受的盐为本领域中熟知的。例如，Berge等人在J.PharmaceuticalSciences(1977)66:1-19中详细描述了药学上可接受的盐。本发明的化合物的药学上可接受的盐包括衍生自合适无机和有机酸和碱的盐。药学上可接受的无毒酸加成盐的实例为氨基与无机酸或有机酸形成的盐或通过使用本领域中所用的其他方法诸如离子交换形成的盐，所述无机酸诸如盐酸、氢溴酸、磷酸、硫酸和过氯酸，所述有机酸诸如乙酸、草酸、马来酸、酒石酸、柠檬酸、琥珀酸或丙二酸。其他药学上可接受的盐包括己二酸盐、海藻酸盐、抗坏血酸盐、天冬氨酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、硫酸氢盐、硼酸盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、环戊烷丙酸盐、二葡萄糖酸盐、十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、甲酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、甘油磷酸盐、葡萄糖酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、氢碘酸盐、2-羟基-乙磺酸盐、乳糖酸盐、乳酸盐、月桂酸盐、月桂基硫酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、油酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、双羟萘酸盐(pamoate)、果胶酸盐(pectinate)、过硫酸盐、3-苯基丙酸酯、磷酸盐、苦味酸盐、新戊酸盐、丙酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、对甲苯磺酸盐、十一烷酸盐、戊酸盐等。衍生自适当碱的药学上可接受的盐包括碱金属盐、碱土金属盐、铵盐和N+(C1-4烷基)4盐。代表性碱金属盐或碱土金属盐包括钠盐、锂盐、钾盐、钙盐、镁盐等。其他药学上可接受的盐在适当时包括使用平衡离子形成的无毒铵、季铵和胺阳离子，所述平衡离子诸如卤素离子、氢氧根、羧酸根、硫酸根、磷酸根、硝酸根、低级烷基磺酸根和芳基磺酸根。
考虑施用的“受试者”包括但不限于人(即，任何年龄组的男性或女性，例如，小儿受试者(例如，婴儿、儿童、青少年)或成人受试者(例如，年轻成人、中年成人或老年成人))和/或非人动物，例如，哺乳动物，诸如灵长类动物(例如，食蟹猕猴、恒河猴)、牛、猪、马、绵羊、山羊、啮齿动物、猫和/或狗。在某些实施方案中，受试者为人。在某些实施方案中，受试者为非人动物。术语“人”、“患者”和“受试者”在本文中可互换使用。
疾病、病症和病状在本文中可互换使用。
如本文所用且除非另外指定，否则术语“治疗(treat/treating/treatment)”考虑在受试者罹患指定疾病、病症或病状时进行的动作，其降低疾病、病症或病状的严重性，或者延缓或延迟疾病、病症或病状的进展(“治疗性治疗”)；且也考虑在受试者开始罹患指定疾病、病症或病状之前进行的动作(“预防性治疗”)。
一般而言，化合物的“有效量”是指足以引发所需生物反应的量。如本领域普通技术人员将了解的，本发明的化合物的有效量可根据诸如以下的因素而改变：所需生物终点、化合物的药物动力学、在治疗的疾病、施用方式以及受试者年龄、健康和状况。有效量涵盖治疗性和预防性治疗。
如本文所用且除非另外指定，否则化合物的“治疗有效量”为足以在治疗疾病、病症或病状中提供治疗益处或足以延迟或最小化与疾病、病症或病状相关的一种或多种症状的量。化合物的治疗有效量意指在治疗疾病、病症或病状中提供治疗益处的治疗剂(单独或与其他疗法组合)的量。术语“治疗有效量”可涵盖改进总体疗法、减少或避免疾病或病状的症状或原因或者增强另一种治疗剂的治疗功效的量。
如本文所用且除非另外指定，否则化合物的“预防有效量”为足以预防疾病、病症或病状或者与疾病、病症或病状相关的一种或多种症状，或预防其复发的量。化合物的预防有效量意指在预防疾病、病症或病状中提供预防益处的治疗剂(单独或与其他剂组合)的量。术语“预防有效量”可涵盖改进总体预防或增强另一种预防剂的预防功效的量。
具体实施方式
如本文通常所述，本发明提供了化合物(例如，式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物或其药学上可接受的盐)，其为可用于治疗与MTAP缺乏和/或MTA累积相关的增殖性病症(例如，癌症)的MTA无竞争性PRMT5抑制剂。
在一些实施方案中，本发明提供了化合物(例如，式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物或其药学上可接受的盐)，其为可用于治疗与MTAP缺乏和/或MTA累积相关的增殖性病症(例如，癌症)的MTA无竞争性、非竞争性或混合模式PRMT5抑制剂或MTA协同结合剂。
化合物
在一个方面中，本文提供了根据式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
每个R1独立地选自H、-D、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C9环烷基、3-10元杂环基、杂环基烷基、杂芳基烷基、芳基烷基、环烷基烷基、-ORa1、-N(Ra1)2、-C(＝O)Ra1、-C(＝O)ORa1、-NRa1C(＝O)Ra1、-NRa1C(＝O)ORa1、-C(＝O)N(Ra1)2、-OC(＝O)N(Ra1)2、-S(＝O)Ra1、-S(＝O)2Ra1、-SRa1、-S(＝O)(＝NRa1)Ra1、-NRa1S(＝O)2Ra1和-S(＝O)2N(Ra1)2；
每个R2独立地选自卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C1-C6卤烷氧基、-C3-C9环烷基、3-10元杂环基、杂环基烷基、杂芳基烷基、芳基烷基、环烷基烷基、-ORa2、-N(Ra2)2、-C(＝O)Ra2、-C(＝O)ORa2、-NRa2C(＝O)Ra2、-NRa2C(＝O)ORa2、-C(＝O)N(Ra2)2、-C(＝O)N(ORa2)(Ra2)、-OC(＝O)N(Ra2)2、-S(＝O)Ra2、-S(＝O)2Ra2、-SRa2、-S(＝O)(＝NRa2)Ra2、-NRa2S(＝O)2Ra2和-S(＝O)2N(Ra2)2；
每个R3独立地选自H、-D、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C9环烷基、3-10元杂环基、杂环基烷基、杂芳基烷基、芳基烷基、环烷基烷基、-ORa3、-N(Ra3)2、-C(＝O)Ra3、-C(＝O)ORa3、-NRa3C(＝O)Ra3、-NRa3C(＝O)ORa3、-C(＝O)N(Ra3)2、-OC(＝O)N(Ra3)2、-S(＝O)Ra3、-S(＝O)2Ra3、-SRa3、-S(＝O)(＝NRa3)Ra3、-NRa3S(＝O)2Ra3和-S(＝O)2N(Ra3)2；
每个R4独立地选自H、-D、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C9环烷基、3-10元杂环基、杂环基烷基、杂芳基烷基、芳基烷基、环烷基烷基、-ORa4、-N(Ra4)2、-C(＝O)Ra4、-C(＝O)ORa4、-NRa4C(＝O)Ra4、-NRa4C(＝O)ORa4、-C(＝O)N(Ra4)2、-OC(＝O)N(Ra4)2、-S(＝O)Ra4、-S(＝O)2Ra4、-SRa4、-S(＝O)(＝NRa4)Ra4、-NRa4S(＝O)2Ra4和-S(＝O)2N(Ra4)2；
每个R6独立地不存在或选自H、-D、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C10碳环基、3-10元杂环基、杂环基烷基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基、杂芳基烷基、芳基烷基、环烷基烷基、-ORa6、-N(Ra6)2、-C(＝O)Ra6、-C(＝O)ORa6、-NRa6C(＝O)Ra6、-NRa6C(＝O)ORa6、-C(＝O)N(Ra6)2、-OC(＝O)N(Ra6)2、-S(＝O)Ra6、-S(＝O)2Ra6、-SRa6、-S(＝O)(＝NRa6)Ra6、-NRa6S(＝O)2Ra6和-S(＝O)2N(Ra6)2，其中每个烷基、碳环基、杂环基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷基任选地在任一可用位置被取代；
每个R7独立地不存在或选自H、-D、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6羟基烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C9环烷基、3-10元杂环基、5-6元单环杂芳基、杂环基烷基、杂芳基烷基、芳基烷基、环烷基烷基、-ORa7、-N(Ra7)2、-C(＝O)Ra7、-C(＝O)ORa7、-NRa7C(＝O)Ra7、-NRa7C(＝O)ORa7、-C(＝O)N(Ra7)2、-OC(＝O)N(Ra7)2、-S(＝O)Ra7、-S(＝O)2Ra7、-SRa7、-S(＝O)(＝NRa7)Ra7、-NRa7S(＝O)2Ra7和-S(＝O)2N(Ra7)2；
每个R8独立地选自H、-D、＝O、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C9环烷基、3-10元杂环基、杂环基烷基、杂芳基烷基、芳基烷基、环烷基烷基、-ORa8、-N(Ra8)2、-C(＝O)Ra8、-C(＝O)ORa8、-NRa8C(＝O)Ra8、-NRa8C(＝O)ORa8、-CH2C(＝O)N(Ra8)2、-C(＝O)N(Ra8)2、-OC(＝O)N(Ra8)2、-CH2C(＝O)N(Ra8)2、-S(＝O)Ra8、-S(＝O)2Ra8、-SRa8、-S(＝O)(＝NRa8)Ra8、-NRa8S(＝O)2Ra8和-S(＝O)2N(Ra8)2，其中R8的两个实例连同它们所附接至的原子可一起形成3-10元环烷基或杂环基环(例如，连同结构I的哌啶环可以形成桥接、稠合或螺双环杂环的环)
每个Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地选自H、C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、C3-C9环烷基、3-7元杂环基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基、5-6元杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷基，其中每个烷基、环烷基、杂环基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷基任选地在任一可用位置被取代(例如，被R9的0、1、2或3个实例取代，其中每个R9独立地选自＝O、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C9环烷基、3-10元杂环基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基烷基、杂芳基烷基、-ORb、-N(Rb)2、-C(＝O)Rb、-C(＝O)ORb、-NRbC(＝O)Rb、-NRbC(＝O)ORb、-C(＝O)N(Rb)2、-OC(＝O)N(Rb)2、-S(＝O)Rb、-S(＝O)2Rb、-SRb、-S(＝O)(＝NRb)Rb、-NRbS(＝O)2Rb和-S(＝O)2N(Rb)2，其中每个Rb独立地选自H、-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-nBu、-tBu、-sec-Bu、-iso-Bu)和C3-C9环烷基(例如，环丙基、环丁基、环戊基、环己基)；且
n为0、1、2或3
前提条件为：
当R1为H时，R2不为卤基、-OPr、-N(CH3)2或-CF3；
当R1为ORa1时，R2不为-ORa2；
当R1为H且R2为-CH3时，R8基团不可一起形成环且R6并非不存在或为H，且不为噻唑基、呋喃基或吡咯基；
当R2为Me时，R1不为任选地被取代的哌啶
所述化合物不为：
5-(2-(5-甲基-2-(对甲苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺或其对映异构体或非对映异构体中的任一者
2-(2-(4-(2H-四唑-5-基)苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-N-(5,6-二甲基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺
2-氰基-5-(2-(5-甲基-2-苯基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺。
在一些实施方案中，R6不存在(例如，如果通过两个R8基团形成的螺环附接至原本携带R6的原子)。
在一些实施方案中，R7不存在(例如，如果通过两个R8基团形成的螺环附接至原本携带R7的原子)。
在某些实施方案中，R6和R7不为H且呈反式相对构型。在其他实施方案中，R6和R7不为H且呈顺式相对构型。
在一些实施方案中，表示为式(I)中的的部分选自：
其中R6、R7、R8和n如本文所述。
在某些实施方案中，表示为的部分选自：
在其他实施方案中，表示为的部分选自：
在本发明的一些实施方案中，式(I)化合物具有式(Ia)
其中R1、R2、R3、R4、R6、R7、R8和n如本文所述。在本发明的一些实施方案中，式(I)化合物具有式(Ib)
其中R1、R2、R3、R4、R6、R7、R8和n如本文所述。在本发明的一些实施方案中，式(I)化合物具有式(Ic)
其中R1、R2、R3、R4、R6、R7、R8和n如本文所述。
在本发明的一些实施方案中，式(I)化合物具有式(Id)
其中R1、R2、R3、R4、R6、R7、R8和n如本文所述。
在式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)的一些实施方案中，当R2为Me时，R1不为H。
如本文通常所定义，每个R1独立地选自H、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C9环烷基、3-10元杂环基、杂环基烷基、杂芳基烷基、芳基烷基、环烷基烷基、-ORa1、-N(Ra1)2、-C(＝O)Ra1、-C(＝O)ORa1、-NRa1C(＝O)Ra1、-NRa1C(＝O)ORa1、-C(＝O)N(Ra1)2、-OC(＝O)N(Ra1)2、-S(＝O)Ra1、-S(＝O)2Ra1、-SRa1、-S(＝O)(＝NRa1)Ra1、-NRa1S(＝O)2Ra1和-S(＝O)2N(Ra1)2，其中Ra1如本文所定义。
在一些实施方案中，R1选自H、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C9环烷基、3-10元杂环基、-ORa1、-N(Ra1)2、-C(＝O)Ra1、-C(＝O)ORa1、-NRa1C(＝O)Ra1、-NRa1C(＝O)ORa1、-C(＝O)N(Ra1)2和-OC(＝O)N(Ra1)2。在其他实施方案中，R1选自H、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6卤烷基、-ORa1和-N(Ra1)2。
在某些实施方案中，R1选自H、-C1-C6烷基、-C1-C6卤烷基、-ORa1和-N(Ra1)2，其中Ra1如本文所定义。在其他实施方案中，每个Ra1独立地选自H、-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-nBu、-tBu、-sec-Bu、-iso-Bu)和-C1-C6卤烷基(例如，-CHF2、-CF3)。
在一些实施方案中，R1选自H、-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-nBu、-tBu、-sec-Bu、-iso-Bu)、-C1-C6卤烷基(例如，-CF3、-CHF2)、-OH、-O-(C1-C6烷基)(例如，-OMe、-OEt)、-O-(C1-C6卤烷基)(例如，-OCF3、-OCHF2)、-NH2、-NH-(C1-C6烷基)(例如，-NHMe)和-N-(C1-C6烷基)2(例如，NMe2)。在某些实施方案中，R1选自H、-Me、-Et、-CHF2、-OMe、-OEt、-OCHF2、-OCF3、-OH和-NH2。在其他实施方案中，R1选自H、-Et、-OMe、-OEt、-OCHF2、-OCF3和-OH。
在一些实施方案中，R1选自H和-OMe。
在其他实施方案中，R1选自H、-Me、-CHF2和-NH2。在其他实施方案中，R1选自-Me和-NH2。
在一些实施方案中，R1为H。在一些实施方案中，R1为-D。
在某些实施方案中，R1为卤基(例如，氟、氯、溴、碘)。在其他实施方案中，R1为-Cl。在一些实施方案中，R1为-F。在一些实施方案中，R1为-Br。在一些实施方案中，R1为-I。
在一些实施方案中，R1为-CN。
在某些实施方案中，R1为-C1-C6烷基。在其他实施方案中，R1为-Me。在一些实施方案中，R1为-Et。在一些实施方案中，R1为-Pr或-iPr。
在一些实施方案中，R1为-C1-C6杂烷基。在其他实施方案中，R1为甲氧基甲基(-CH2OCH3)。在一些实施方案中，R1为羟基甲基(-CH2OH)。在一些实施方案中，R1为氨基甲基(例如，-CH2NH2、-CH2NHCH3、-CH2N(CH3)2。
在一些实施方案中，R1为-C1-C6卤烷基。在其他实施方案中，R1为三氟甲基(-CF3)。在其他实施方案中，R1为二氟甲基(-CHF2)。
在一些实施方案中，R1为-C3-C9碳环基(例如，环丙基、环丁基、环戊基、环己基)。在一些实施方案中，R1为环丙基。在一些实施方案中，R1为环丁基。在一些实施方案中，R1为环戊基。在一些实施方案中，R1为环己基。
在一些实施方案中，R1为3-10元杂环基(例如，氧杂环丁烷基、四氢吡喃基、四氢呋喃基、氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、氮杂环庚烷基)。在一些实施方案中，R1为氧杂环丁烷基。在一些实施方案中，R1为四氢吡喃基。在一些实施方案中，R1为四氢呋喃基。在一些实施方案中，R1为氮杂环丁烷基。在一些实施方案中，R1为吡咯烷基。在一些实施方案中，R1为哌啶基。在一些实施方案中，R1为哌嗪基。在一些实施方案中，R1为吗啉基。在一些实施方案中，R1为氮杂环庚烷基。
在一些实施方案中，R1为环烷基烷基(例如，环丙基甲基、环丁基甲基、环戊基甲基、环己基甲基、环庚基甲基)。在一些实施方案中，R1为杂环基烷基(例如，氧杂环丁烷基甲基、氮丙啶基甲基、四氢呋喃基甲基、吡咯烷基甲基、四氢吡喃基甲基、哌啶基甲基、哌嗪基甲基、吗啉基甲基、氮杂环庚烷基甲基)。
在一些实施方案中，R1为芳基烷基。在一些实施方案中，R1为苯甲基。在一些实施方案中，R1为杂芳基烷基(例如，吡啶基甲基、噻唑基甲基、三唑基甲基、吡唑基甲基)。
在一些实施方案中，R1为-ORa1(例如，羟基(-OH)、甲氧基、二氟甲氧基(-OCHF2)、三氟甲氧基(-OCF3)、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、环丙基氧基、环丁基氧基)。在一些实施方案中，R1为羟基。在一些实施方案中，R1为甲氧基。在一些实施方案中，R1为乙氧基。在一些实施方案中，R1为丙氧基。在一些实施方案中，R1为异丙氧基。在一些实施方案中，R1为二氟甲氧基(-OCHF2)。在一些实施方案中，R1为三氟甲氧基(-OCF3)。
在一些实施方案中，R1为-N(Ra1)2(例如，-NH2、-NHRa1、-N(CH3)Ra1)。在一些实施方案中，R1为-NH2。在一些实施方案中，R1为-NHRa1(例如，-NHMe、-NHEt、-NHPr、-NHiPr、-NH环丙基、-NH环丁基)。在一些实施方案中，R1为-N(CH3)Ra1(例如，-NMe2、-N(CH3)Et、-N(CH3)Pr、-N(CH3)iPr、-N(CH3)环丙基、-N(CH3)环丁基)。
在一些实施方案中，R1为-C(＝O)Ra1或-C(＝O)ORa1。在一些实施方案中，R1为-C(＝O)Ra1，其中Ra1如本文所述。在一些实施方案中，R1为-C(＝O)烷基。在一些实施方案中，R1为-C(O)CH3、-C(O)环丙基、-C(O)环丁基、-C(O)tBu、-C(O)iPr、-C(O)Pr、-C(O)iBu或-C(＝O)OMe。在一些实施方案中，R1为乙酰基(-C(＝O)Me)。在一些实施方案中，R1为-C(＝O)ORa1。在一些实施方案中，R1为-COOH。在一些实施方案中，R1为COOMe。
在一些实施方案中，R1为-NRa1C(＝O)Ra1。在某些实施方案中，R1为-NHC(＝O)Ra1(例如，NHC(＝O)Me、NHC(＝O)Et、NHC(＝O)Pr、NHC(＝O)iPr、NHC(＝O)Bu、NHC(＝O)tBu、NHC(＝O)环丙基、NHC(＝O)环丁基)。在一些实施方案中，R1为-N(CH3)C(＝O)Ra1(例如，N(CH3)C(＝O)Me、N(CH3)C(＝O)Et、N(CH3)C(＝O)Pr、N(CH3)C(＝O)iPr、N(CH3)C(＝O)Bu、N(CH3)C(＝O)tBu、N(CH3)C(＝O)环丙基、N(CH3)C(＝O)环丁基)。
在一些实施方案中，R1为-NRa1C(＝O)ORa1。在某些实施方案中，R1为-NHC(＝O)ORa1(例如，NHC(＝O)OMe、NHC(＝O)OEt、NHC(＝O)OPr、NHC(＝O)OiPr、NHC(＝O)OBu、NHC(＝O)OtBu、NHC(＝O)O环丙基、NHC(＝O)O环丁基)。在一些实施方案中，R1为-N(CH3)C(＝O)ORa1(例如，N(CH3)C(＝O)OMe、N(CH3)C(＝O)OEt、N(CH3)C(＝O)OPr、N(CH3)C(＝O)OiPr、N(CH3)C(＝O)OBu、N(CH3)C(＝O)OtBu、N(CH3)C(＝O)O环丙基、N(CH3)C(＝O)O环丁基)。
在一些实施方案中，R1为-C(＝O)N(Ra1)2(例如，-C(＝O)NH2、-C(＝O)NHRa1、-C(＝O)N(CH3)Ra1)。在一些实施方案中，R1为-C(＝O)NH2。在某些实施方案中，R1为-C(＝O)NHRa1(例如，-C(＝O)NHMe、-C(＝O)NHEt、-C(＝O)NHPr、-C(＝O)NHiPr、-C(＝O)NHBu、-C(＝O)NHtBu、-C(＝O)NH环丙基、-C(＝O)NH环丁基)。在某些实施方案中，R1为-C(＝O)N(CH3)Ra1(例如，-C(＝O)NMe2、-C(＝O)N(CH3)Et、-C(＝O)N(CH3)Pr、-C(＝O)N(CH3)iPr、-C(＝O)N(CH3)Bu、-C(＝O)N(CH3)tBu、-C(＝O)N(CH3)环丙基、-C(＝O)N(CH3)环丁基)。
在一些实施方案中，R1为-OC(＝O)N(Ra1)2。在某些实施方案中，R1为-OC(＝O)NHRa1(例如，-OC(＝O)NHMe、-OC(＝O)NHEt、-OC(＝O)NHPr、-OC(＝O)NHiPr、-OC(＝O)NHBu、-OC(＝O)NHtBu、-OC(＝O)NH环丙基、-OC(＝O)NH环丁基)。在某些实施方案中，R1为-OC(＝O)N(CH3)Ra1(例如，-OC(＝O)NMe2、-OC(＝O)N(CH3)Et、-OC(＝O)N(CH3)Pr、-OC(＝O)N(CH3)iPr、-OC(＝O)N(CH3)Bu、-OC(＝O)N(CH3)tBu、-OC(＝O)N(CH3)环丙基、-OC(＝O)N(CH3)环丁基)。
在一些实施方案中，R1为-S(＝O)Ra1。在某些实施方案中，R1为-S(＝O)烷基(例如，-S(＝O)Me、-S(＝O)Et、-S(＝O)Pr、-S(＝O)iPr)。在某些实施方案中，R1为-S(＝O)环烷基(例如，-S(＝O)环丙基、-S(＝O)环丁基、-S(＝O)环戊基、-S(＝O)环己基)。
在一些实施方案中，R1为-S(＝O)2Ra1。在某些实施方案中，R1为-S(＝O)2烷基(例如，-S(＝O)2Me、-S(＝O)2Et、-S(＝O)2Pr、-S(＝O)2 iPr)。在某些实施方案中，R1为-S(＝O)2环烷基(例如，-S(＝O)2环丙基、-S(＝O)2环丁基、-S(＝O)2环戊基、-S(＝O)2环己基)。在一些实施方案中，R1为S(＝O)2芳基(例如，S(＝O)2苯基)。
在一些实施方案中，R1为-SRa1。在某些实施方案中，R1为-S烷基(例如，-SMe、-SEt、-SPr、-SiPr)。在某些实施方案中，R1为-S环烷基(例如，-S环丙基、-S环丁基、-S环戊基、-S环己基)。在某些实施方案中，R1为-S芳基(例如，S苯基)。
在一些实施方案中，R1为-S(＝O)(＝NRa1)Ra1。在某些实施方案中，R1为-S(＝O)(＝NH)Ra1(例如，-S(＝O)(＝NH)Me、-S(＝O)(＝NH)Et、-S(＝O)(＝NH)Pr、-S(＝O)(＝NH)iPr、-S(＝O)(＝NH)Bu、-S(＝O)(＝NH)tBu、-S(＝O)(＝NH)环丙基、-S(＝O)(＝NH)环丁基)。在一些实施方案中，R1为-S(＝O)(＝NCH3)Ra1(例如，-S(＝O)(＝NCH3)Me、-S(＝O)(＝NCH3)Et、-S(＝O)(＝NCH3)Pr、-S(＝O)(＝NCH3)iPr、-S(＝O)(＝NCH3)Bu、-S(＝O)(＝NCH3)tBu、-S(＝O)(＝NCH3)环丙基、-S(＝O)(＝NCH3)环丁基)。
在一些实施方案中，R1为-NRa1S(＝O)2Ra1。在某些实施方案中，R1为-NHS(＝O)2烷基(例如，-NHS(＝O)2Me、-NHS(＝O)2Et、-NHS(＝O)2Pr、-NHS(＝O)2 iPr)。在某些实施方案中，R1为-NHS(＝O)2环烷基(例如，-NHS(＝O)2环丙基、-NHS(＝O)2环丁基、-NHS(＝O)2环戊基、-NHS(＝O)2环己基)。在某些实施方案中，R1为-N(CH3)S(＝O)2烷基(例如，-N(CH3)S(＝O)2Me、-N(CH3)S(＝O)2Et、-N(CH3)S(＝O)2Pr、-N(CH3)S(＝O)2 iPr)。在某些实施方案中，R1为-N(CH3)S(＝O)2环烷基(例如，-N(CH3)S(＝O)2环丙基、-N(CH3)S(＝O)2环丁基、-N(CH3)S(＝O)2环戊基、-N(CH3)S(＝O)2环己基)。
在一些实施方案中，R1为-S(＝O)2N(Ra1)2(例如，-S(＝O)2NH2、-S(＝O)2NHRa1、-S(＝O)2N(CH3)Ra1)。在一些实施方案中，R1为-S(＝O)2NH2。在一些实施方案中，R1为-S(＝O)2NHRa1(例如，-S(＝O)2NHMe、-S(＝O)2NHEt、-S(＝O)2NHPr、-S(＝O)2NHiPr、-S(＝O)2NH环丙基、-S(＝O)2NH环丁基)。在一些实施方案中，R1为-S(＝O)2N(CH3)Ra1(例如，-S(＝O)2NMe2、-S(＝O)2N(CH3)Et、-S(＝O)2N(CH3)Pr、-S(＝O)2N(CH3)iPr、-S(＝O)2N(CH3)环丙基、-S(＝O)2N(CH3)环丁基)。
如本文通常所定义，每个R2独立地选自卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C1-C6卤烷氧基、-C3-C9环烷基、3-6元杂环基、杂环基烷基、杂芳基烷基、芳基烷基、环烷基烷基、-ORa2、-N(Ra2)2、-C(＝O)Ra2、-C(＝O)ORa2、-NRa2C(＝O)Ra2、-NRa2C(＝O)ORa2、-C(＝O)N(Ra2)2、-C(＝O)N(ORa2)(Ra2)、-OC(＝O)N(Ra2)2、-S(＝O)Ra2、-S(＝O)2Ra2、-SRa2、-S(＝O)(＝NRa2)Ra2、-NRa2S(＝O)2Ra2和-S(＝O)2N(Ra2)2，其中Ra2如本文所定义。
在一些实施方案中，R2选自卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C1-C6卤烷氧基、-C3-C9环烷基(例如，环丙基)、3-6元杂环基(例如，氧杂环丁烷基、四氢呋喃基)、-ORa2、-N(Ra2)2、-C(＝O)Ra2、-C(＝O)ORa2、-NRa2C(＝O)Ra2、-NRa2C(＝O)ORa2、-C(＝O)N(Ra2)2、-C(＝O)N(ORa2)(Ra2)、-OC(＝O)N(Ra2)2。
在某些实施方案中，R2选自卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6卤烷基、-C1-C6卤烷氧基、-C3-C9环烷基(例如，环丙基)、3-6元杂环基(例如，氧杂环丁烷基、四氢呋喃基)、-ORa2、-N(Ra2)2、-C(＝O)N(ORa2)(Ra2)、-C(＝O)Ra2和-C(＝O)N(Ra2)2。
在一些实施方案中，R2选自卤基、-C1-C6烷基、-C1-C6卤烷基、-C1-C6卤烷氧基、-C3-C9环烷基(例如，环丙基)、3-6元杂环基(例如，氧杂环丁烷基、四氢呋喃基)、-ORa2、-C(＝O)Ra2和-C(＝O)N(Ra2)2。
在一些实施方案中，R2选自卤基、-C1-C6烷基、-C1-C6卤烷基、-C1-C6卤烷氧基、-C3-C9环烷基(例如，环丙基)、3-6元杂环基(例如，氧杂环丁烷基、四氢呋喃基)、-ORa2和-C(＝O)N(Ra2)2，其中每个Ra2如本文所述。在其他实施方案中，每个Ra2独立地选自H和-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-nBu、-tBu、-sec-Bu、-iso-Bu)。
在某些实施方案中，R2选自卤基(例如，-Cl)、-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-nBu、-tBu、-sec-Bu、-iso-Bu)、-C1-C6卤烷基(例如，-CF3、CHF2)、-C1-C6卤烷氧基(例如，-OCF3、-OCHF2)、-C3-C9环烷基(例如，环丙基)、3-6元杂环基(例如，氧杂环丁烷基、四氢呋喃基)、-ORa2(例如，-OMe)、-C(＝O)NHOH、-C(＝O)H和-C(＝O)NH2。在其他实施方案中，R2选自-Cl、-Me、-Et、-iPr、-CF3、-CHF2、-OCHF2、-OCF3、环丙基、-OMe、氧杂环丁烷-3-基、四氢呋喃-3-基、-C(＝O)NHOH、-C(＝O)H和-C(＝O)NH2。
在一些实施方案中，R2选自-C(＝O)NH2和-C(＝O)H。
在一些实施方案中，R2选自-Cl、-Me、-Et、-iPr、-CF3、CHF2、-OCHF2、-OCF3和环丙基。在其他实施方案中，R2选自环丙基、-Me和-Et。
在某些实施方案中，R2为卤基(例如，氟、氯、溴、碘)。在其他实施方案中，R2为-Cl。在一些实施方案中，R2为-F。在一些实施方案中，R2为-Br。在一些实施方案中，R2为-I。
在一些实施方案中，R2为-CN。
在某些实施方案中，R2为-C1-C6烷基。在其他实施方案中，R2为-Me。在一些实施方案中，R2为-Et。在一些实施方案中，R2为-Pr或-iPr。
在一些实施方案中，R2为-C1-C6杂烷基。在其他实施方案中，R2为甲氧基甲基(-CH2OCH3)。在一些实施方案中，R2为羟基甲基(-CH2OH)。在一些实施方案中，R2为氨基甲基(例如，-CH2NH2、-CH2NHCH3、-CH2N(CH3)2。
在一些实施方案中，R2为-C1-C6卤烷基。在其他实施方案中，R2为三氟甲基(-CF3)。在其他实施方案中，R2为二氟甲基(-CHF2)。
在一些实施方案中，R2为-C1-C6卤烷氧基。在其他实施方案中，R2为三氟甲氧基(-OCF3)。在其他实施方案中，R2为二氟甲氧基(-OCHF2)。
在一些实施方案中，R2为-C3-C9碳环基(例如，环丙基、环丁基、环戊基、环己基)。在一些实施方案中，R2为环丙基。在一些实施方案中，R2为环丁基。在一些实施方案中，R2为环戊基。在一些实施方案中，R2为环己基。
在一些实施方案中，R2为3-6元杂环基(例如，氧杂环丁烷基、四氢吡喃基、四氢呋喃基、氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、氮杂环庚烷基)。在一些实施方案中，R2为氧杂环丁烷基。在一些实施方案中，R2为四氢吡喃基。在一些实施方案中，R2为四氢呋喃基。在一些实施方案中，R2为氮杂环丁烷基。在一些实施方案中，R2为吡咯烷基。在一些实施方案中，R2为哌啶基。在一些实施方案中，R2为哌嗪基。在一些实施方案中，R2为吗啉基。在一些实施方案中，R2为氮杂环庚烷基。
在一些实施方案中，R2为环烷基烷基(例如，环丙基甲基、环丁基甲基、环戊基甲基、环己基甲基、环庚基甲基)。在一些实施方案中，R2为杂环基烷基(例如，氧杂环丁烷基甲基、氮丙啶基甲基、四氢呋喃基甲基、吡咯烷基甲基、四氢吡喃基甲基、哌啶基甲基、哌嗪基甲基、吗啉基甲基、氮杂环庚烷基甲基)。
在一些实施方案中，R2为芳基烷基。在一些实施方案中，R2为苯甲基。
在一些实施方案中，R2为杂芳基烷基(例如，吡啶基甲基、噻唑基甲基、三唑基甲基、吡唑基甲基)。
在一些实施方案中，R2为-ORa2(例如，羟基(-OH)、甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、环丙基氧基、环丁基氧基)。在一些实施方案中，R2为羟基。在一些实施方案中，R2为甲氧基。在一些实施方案中，R2为乙氧基。在一些实施方案中，R2为丙氧基。在一些实施方案中，R2为异丙氧基。
在一些实施方案中，R2为-N(Ra2)2(例如，-NH2、-NHRa2、-N(CH3)Ra2)。在一些实施方案中，R2为-NH2。在一些实施方案中，R2为-NHRa2(例如，-NHMe、-NHEt、-NHPr、-NHiPr、-NH环丙基、-NH环丁基)。在一些实施方案中，R2为-N(CH3)Ra2(例如，-NMe2、-N(CH3)Et、-N(CH3)Pr、-N(CH3)iPr、-N(CH3)环丙基、-N(CH3)环丁基)。
在一些实施方案中，R2为-C(＝O)Ra2或-C(＝O)ORa2。在一些实施方案中，R2为-C(＝O)Ra2，其中Ra2如本文所述。在一些实施方案中，R2为-C(＝O)烷基。在一些实施方案中，R2为-C(O)CH3、-C(O)环丙基、-C(O)环丁基、-C(O)tBu、-C(O)iPr、-C(O)Pr、-C(O)iBu或-C(＝O)OMe。在一些实施方案中，R2为乙酰基(-C(＝O)Me)。在一些实施方案中，R2为-C(＝O)ORa2。在一些实施方案中，R2为-COOH。在一些实施方案中，R2为COOMe。
在一些实施方案中，R2为-NRa2C(＝O)Ra2。在某些实施方案中，R2为-NHC(＝O)Ra2(例如，NHC(＝O)Me、NHC(＝O)Et、NHC(＝O)Pr、NHC(＝O)iPr、NHC(＝O)Bu、NHC(＝O)tBu、NHC(＝O)环丙基、NHC(＝O)环丁基)。在一些实施方案中，R2为-N(CH3)C(＝O)Ra2(例如，N(CH3)C(＝O)Me、N(CH3)C(＝O)Et、N(CH3)C(＝O)Pr、N(CH3)C(＝O)iPr、N(CH3)C(＝O)Bu、N(CH3)C(＝O)tBu、N(CH3)C(＝O)环丙基、N(CH3)C(＝O)环丁基)。
在一些实施方案中，R2为-NRa2C(＝O)ORa2。在某些实施方案中，R2为-NHC(＝O)ORa2(例如，NHC(＝O)OMe、NHC(＝O)OEt、NHC(＝O)OPr、NHC(＝O)OiPr、NHC(＝O)OBu、NHC(＝O)OtBu、NHC(＝O)O环丙基、NHC(＝O)O环丁基)。在一些实施方案中，R2为-N(CH3)C(＝O)ORa2(例如，N(CH3)C(＝O)OMe、N(CH3)C(＝O)OEt、N(CH3)C(＝O)OPr、N(CH3)C(＝O)OiPr、N(CH3)C(＝O)OBu、N(CH3)C(＝O)OtBu、N(CH3)C(＝O)O环丙基、N(CH3)C(＝O)O环丁基)。
在一些实施方案中，R2为-C(＝O)N(Ra2)2(例如，-C(＝O)NH2、-C(＝O)NHRa2、-C(＝O)N(CH3)Ra2)。在一些实施方案中，R2为-C(＝O)NH2。在某些实施方案中，R2为-C(＝O)NHRa2(例如，-C(＝O)NHMe、-C(＝O)NHEt、-C(＝O)NHPr、-C(＝O)NHiPr、-C(＝O)NHBu、-C(＝O)NHtBu、-C(＝O)NH环丙基、-C(＝O)NH环丁基)。在某些实施方案中，R2为-C(＝O)N(CH3)Ra2(例如，-C(＝O)NMe2、-C(＝O)N(CH3)Et、-C(＝O)N(CH 3)Pr、-C(＝O)N(CH3)iPr、-C(＝O)N(CH3)Bu、-C(＝O)N(CH3)tBu、-C(＝O)N(CH3)环丙基、-C(＝O)N(CH3)环丁基)。
在一些实施方案中，R2为-C(＝O)N(ORa2)(Ra2)。在某些实施方案中，R2为-C(＝O)NH(ORa2)(例如，-C(＝O)NHOH、-C(＝O)NHOMe)。在一些实施方案中，R2为-C(＝O)NHOH。
在一些实施方案中，R2为-OC(＝O)N(Ra2)2。在某些实施方案中，R2为-OC(＝O)NHRa2(例如，-OC(＝O)NHMe、-OC(＝O)NHEt、-OC(＝O)NHPr、-OC(＝O)NHiPr、-OC(＝O)NHBu、-OC(＝O)NHtBu、-OC(＝O)NH环丙基、-OC(＝O)NH环丁基)。在某些实施方案中，R2为-OC(＝O)N(CH3)Ra2(例如，-OC(＝O)NMe2、-OC(＝O)N(CH3)Et、-OC(＝O)N(CH3)Pr、-OC(＝O)N(CH3)iPr、-OC(＝O)N(CH3)Bu、-OC(＝O)N(CH3)tBu、-OC(＝O)N(CH3)环丙基、-OC(＝O)N(CH3)环丁基)。
在一些实施方案中，R2为-S(＝O)Ra2。在某些实施方案中，R2为-S(＝O)烷基(例如，-S(＝O)Me、-S(＝O)Et、-S(＝O)Pr、-S(＝O)iPr)。在某些实施方案中，R2为-S(＝O)环烷基(例如，-S(＝O)环丙基、-S(＝O)环丁基、-S(＝O)环戊基、-S(＝O)环己基)。
在一些实施方案中，R2为-S(＝O)2Ra2。在某些实施方案中，R2为-S(＝O)2烷基(例如，-S(＝O)2Me、-S(＝O)2Et、-S(＝O)2Pr、-S(＝O)2 iPr)。在某些实施方案中，R2为-S(＝O)2环烷基(例如，-S(＝O)2环丙基、-S(＝O)2环丁基、-S(＝O)2环戊基、-S(＝O)2环己基)。在一些实施方案中，R2为S(＝O)2芳基(例如，S(＝O)2苯基)。
在一些实施方案中，R2为-SRa2。在某些实施方案中，R2为-S烷基(例如，-SMe、-SEt、-SPr、-SiPr)。在某些实施方案中，R2为-S环烷基(例如，-S环丙基、-S环丁基、-S环戊基、-S环己基)。在某些实施方案中，R2为-S芳基(例如，S苯基)。
在一些实施方案中，R2为-S(＝O)(＝NRa2)Ra2。在某些实施方案中，R2为-S(＝O)(＝NH)Ra2(例如，-S(＝O)(＝NH)Me、-S(＝O)(＝NH)Et、-S(＝O)(＝NH)Pr、-S(＝O)(＝NH)iPr、-S(＝O)(＝NH)Bu、-S(＝O)(＝NH)tBu、-S(＝O)(＝NH)环丙基、-S(＝O)(＝NH)环丁基)。在一些实施方案中，R2为-S(＝O)(＝NCH3)Ra2(例如，-S(＝O)(＝NCH3)Me、-S(＝O)(＝NCH3)Et、-S(＝O)(＝NCH3)Pr、-S(＝O)(＝NCH3)iPr、-S(＝O)(＝NCH3)Bu、-S(＝O)(＝NCH3)tBu、-S(＝O)(＝NCH3)环丙基、-S(＝O)(＝NCH3)环丁基)。
在一些实施方案中，R2为-NRa2S(＝O)2Ra2。在某些实施方案中，R2为-NHS(＝O)2烷基(例如，-NHS(＝O)2Me、-NHS(＝O)2Et、-NHS(＝O)2Pr、-NHS(＝O)2 iPr)。在某些实施方案中，R2为-NHS(＝O)2环烷基(例如，-NHS(＝O)2环丙基、-NHS(＝O)2环丁基、-NHS(＝O)2环戊基、-NHS(＝O)2环己基)。在某些实施方案中，R2为-N(CH3)S(＝O)2烷基(例如，-N(CH3)S(＝O)2Me、-N(CH3)S(＝O)2Et、-N(CH3)S(＝O)2Pr、-N(CH3)S(＝O)2 iPr)。在某些实施方案中，R2为-N(CH3)S(＝O)2环烷基(例如，-N(CH3)S(＝O)2环丙基、-N(CH3)S(＝O)2环丁基、-N(CH3)S(＝O)2环戊基、-N(CH3)S(＝O)2环己基)。
在一些实施方案中，R2为-S(＝O)2N(Ra2)2(例如，-S(＝O)2NH2、-S(＝O)2NHRa2、-S(＝O)2N(CH3)Ra2)。在一些实施方案中，R2为-S(＝O)2NH2。在一些实施方案中，R2为-S(＝O)2NHRa2(例如，-S(＝O)2NHMe、-S(＝O)2NHEt、-S(＝O)2NHPr、-S(＝O)2NHiPr、-S(＝O)2NH环丙基、-S(＝O)2NH环丁基)。在一些实施方案中，R2为-S(＝O)2N(CH3)Ra2(例如，-S(＝O)2NMe2、-S(＝O)2N(CH3)Et、-S(＝O)2N(CH3)Pr、-S(＝O)2N(CH3)iPr、-S(＝O)2N(CH3)环丙基、-S(＝O)2N(CH3)环丁基)。
式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)的一些实施方案以R1和R2的某些组合为特征。在一个实施方案中，R1选自H、-OMe、-OEt、-OCF3、-OCHF2、-CHF2、-Me、-Et、-OH和-NH2，且R2选自-Cl、-Me、-Et、-iPr、-CF3、-CHF2、-OCHF2、环丙基、-C(＝O)NH2和-C(＝O)H，前提条件为当R2为-Me时，R1为NH2。在一个实施方案中，R1选自H、-CHF2、-Me和-NH2，且R2选自-Cl、-Me、-Et、-CF3、-CHF2、-OCHF2和环丙基，前提条件为当R2为-Me时，R1为NH2。在另一个实施方案中，R1选自-NH2和-Me，且R2选自-Me和-Et。在一个实施方案中，R1为-NH2，且R2选自-Me或-Et。在另一个实施方案中，R1选自H、–OMe、–OEt、–OCF3、–OCHF2、–Et和–OH，且R2选自–C(＝O)NH2和–C(＝O)H。在另一个实施方案中，R1选自H和–OMe，且R2为–C(＝O)NH2。
如本文通常所述，每个R3独立地选自H、-D、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C9环烷基、3-10元杂环基、杂环基烷基、杂芳基烷基、芳基烷基、环烷基烷基、-ORa3、-N(Ra3)2、-C(＝O)Ra3、-C(＝O)ORa3、-NRa3C(＝O)Ra3、-NRa3C(＝O)ORa3、-C(＝O)N(Ra3)2、-OC(＝O)N(Ra3)2、-S(＝O)Ra3、-S(＝O)2Ra3、-SRa3、-S(＝O)(＝NRa3)Ra3、-NRa3S(＝O)2Ra3和-S(＝O)2N(Ra3)2，其中Ra3如本文所述。
在一些实施方案中，R3选自H、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C9环烷基、3-10元杂环基、-ORa3、-N(Ra3)2、-C(＝O)Ra3、-C(＝O)ORa3、-NRa3C(＝O)Ra3、-NRa3C(＝O)ORa3、-C(＝O)N(Ra3)2和-OC(＝O)N(Ra3)2。
在某些实施方案中，R3选自H、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6卤烷基和-N(Ra3)2，其中Ra3如本文所述。在其他实施方案中，Ra3选自H和C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-nBu、-tBu、-sec-Bu、-iso-Bu)。在一些实施方案中，R3选自-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-nBu、-tBu、-sec-Bu、-iso-Bu)、-OH、-O-(C1-C6烷基)(例如，-OMe)、-NH2、-NH-(C1-C6烷基)(例如，-NHMe)和-N-(C1-C6烷基)2(例如，NMe2)。在其他实施方案中，R3选自H、-Me和-NH2。在某些实施方案中，R3选自H和-Me。
在一些实施方案中，R3为H。在一些实施方案中，R3为-D。
在某些实施方案中，R3为卤基(例如，氟、氯、溴、碘)。在其他实施方案中，R3为-Cl。在一些实施方案中，R3为-F。在一些实施方案中，R3为-Br。在一些实施方案中，R3为-I。
在一些实施方案中，R3为-CN。
在某些实施方案中，R3为-C1-C6烷基。在其他实施方案中，R3为-Me。在一些实施方案中，R3为-Et。在一些实施方案中，R3为-Pr或-iPr。
在一些实施方案中，R3为-C1-C6杂烷基。在其他实施方案中，R3为甲氧基甲基(-CH2OCH3)。在一些实施方案中，R3为羟基甲基(-CH2OH)。在一些实施方案中，R3为氨基甲基(例如，-CH2NH2、-CH2NHCH3、-CH2N(CH3)2。
在一些实施方案中，R3为-C1-C6卤烷基。在其他实施方案中，R3为三氟甲基(-CF3)。在其他实施方案中，R3为二氟甲基(-CHF2)。
在一些实施方案中，R3为-C3-C9碳环基(例如，环丙基、环丁基、环戊基、环己基)。在一些实施方案中，R3为环丙基。在一些实施方案中，R3为环丁基。在一些实施方案中，R3为环戊基。在一些实施方案中，R3为环己基。
在一些实施方案中，R3为3-10元杂环基(例如，氧杂环丁烷基、四氢吡喃基、四氢呋喃基、氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、氮杂环庚烷基)。在一些实施方案中，R3为氧杂环丁烷基。在一些实施方案中，R3为四氢吡喃基。在一些实施方案中，R3为四氢呋喃基。在一些实施方案中，R3为氮杂环丁烷基。在一些实施方案中，R3为吡咯烷基。在一些实施方案中，R3为哌啶基。在一些实施方案中，R3为哌嗪基。在一些实施方案中，R3为吗啉基。在一些实施方案中，R3为氮杂环庚烷基。
在一些实施方案中，R3为环烷基烷基(例如，环丙基甲基、环丁基甲基、环戊基甲基、环己基甲基、环庚基甲基)。在一些实施方案中，R3为杂环基烷基(例如，氧杂环丁烷基甲基、氮丙啶基甲基、四氢呋喃基甲基、吡咯烷基甲基、四氢吡喃基甲基、哌啶基甲基、哌嗪基甲基、吗啉基甲基、氮杂环庚烷基甲基)。
在一些实施方案中，R3为芳基烷基。在一些实施方案中，R3为苯甲基。
在一些实施方案中，R3为杂芳基烷基(例如，吡啶基甲基、噻唑基甲基、三唑基甲基、吡唑基甲基)。
在一些实施方案中，R3为-ORa3(例如，羟基(-OH)、甲氧基、二氟甲氧基(-OCHF2)、三氟甲氧基(-OCF3)、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、环丙基氧基、环丁基氧基)。在一些实施方案中，R3为羟基。在一些实施方案中，R3为甲氧基。在一些实施方案中，R3为乙氧基。在一些实施方案中，R3为丙氧基。在一些实施方案中，R3为异丙氧基。在一些实施方案中，R3为二氟甲氧基(-OCHF2)。在一些实施方案中，R3为三氟甲氧基(-OCF3)。
在一些实施方案中，R3为-N(Ra3)2(例如，-NH2、-NHRa3、-N(CH3)Ra3)。在一些实施方案中，R3为-NH2。在一些实施方案中，R3为-NHRa3(例如，-NHMe、-NHEt、-NHPr、-NHiPr、-NH环丙基、-NH环丁基)。在一些实施方案中，R3为-N(CH3)Ra3(例如，-NMe2、-N(CH3)Et、-N(CH3)Pr、-N(CH3)iPr、-N(CH3)环丙基、-N(CH3)环丁基)。
在一些实施方案中，R3为-C(＝O)Ra3或-C(＝O)ORa3。在一些实施方案中，R3为-C(＝O)Ra3，其中Ra3如本文所述。在一些实施方案中，R3为-C(＝O)烷基。在一些实施方案中，R3为-C(O)CH3、-C(O)环丙基、-C(O)环丁基、-C(O)tBu、-C(O)iPr、-C(O)Pr、-C(O)iBu或-C(＝O)OMe。在一些实施方案中，R3为乙酰基(-C(＝O)Me)。在一些实施方案中，R3为-C(＝O)ORa3。在一些实施方案中，R3为-COOH。在一些实施方案中，R3为COOMe。
在一些实施方案中，R3为-NRa3C(＝O)Ra3。在某些实施方案中，R3为-NHC(＝O)Ra3(例如，NHC(＝O)Me、NHC(＝O)Et、NHC(＝O)Pr、NHC(＝O)iPr、NHC(＝O)Bu、NHC(＝O)tBu、NHC(＝O)环丙基、NHC(＝O)环丁基)。在一些实施方案中，R3为-N(CH3)C(＝O)Ra3(例如，N(CH3)C(＝O)Me、N(CH3)C(＝O)Et、N(CH3)C(＝O)Pr、N(CH3)C(＝O)iPr、N(CH3)C(＝O)Bu、N(CH3)C(＝O)tBu、N(CH3)C(＝O)环丙基、N(CH3)C(＝O)环丁基)。
在一些实施方案中，R3为-NRa3C(＝O)ORa3。在某些实施方案中，R3为-NHC(＝O)ORa3(例如，NHC(＝O)OMe、NHC(＝O)OEt、NHC(＝O)OPr、NHC(＝O)OiPr、NHC(＝O)OBu、NHC(＝O)OtBu、NHC(＝O)O环丙基、NHC(＝O)O环丁基)。在一些实施方案中，R3为-N(CH3)C(＝O)ORa3(例如，N(CH3)C(＝O)OMe、N(CH3)C(＝O)OEt、N(CH3)C(＝O)OPr、N(CH3)C(＝O)OiPr、N(CH3)C(＝O)OBu、N(CH3)C(＝O)OtBu、N(CH3)C(＝O)O环丙基、N(CH3)C(＝O)O环丁基)。
在一些实施方案中，R3为-C(＝O)N(Ra3)2(例如，-C(＝O)NH2、-C(＝O)NHRa3、-C(＝O)N(CH3)Ra3)。在一些实施方案中，R3为-C(＝O)NH2。在某些实施方案中，R3为-C(＝O)NHRa3(例如，-C(＝O)NHMe、-C(＝O)NHEt、-C(＝O)NHPr、-C(＝O)NHiPr、-C(＝O)NHBu、-C(＝O)NHtBu、-C(＝O)NH环丙基、-C(＝O)NH环丁基)。在某些实施方案中，R3为-C(＝O)N(CH3)Ra3(例如，-C(＝O)NMe2、-C(＝O)N(CH3)Et、-C(＝O)N(CH3)Pr、-C(＝O)N(CH3)iPr、-C(＝O)N(CH3)Bu、-C(＝O)N(CH3)tBu、-C(＝O)N(CH3)环丙基、-C(＝O)N(CH3)环丁基)。
在一些实施方案中，R3为-OC(＝O)N(Ra3)2。在某些实施方案中，R3为-OC(＝O)NHRa3(例如，-OC(＝O)NHMe、-OC(＝O)NHEt、-OC(＝O)NHPr、-OC(＝O)NHiPr、-OC(＝O)NHBu、-OC(＝O)NHtBu、-OC(＝O)NH环丙基、-OC(＝O)NH环丁基)。在某些实施方案中，R3为-OC(＝O)N(CH3)Ra3(例如，-OC(＝O)NMe2、-OC(＝O)N(CH3)Et、-OC(＝O)N(CH3)Pr、-OC(＝O)N(CH3)iPr、-OC(＝O)N(CH3)Bu、-OC(＝O)N(CH3)tBu、-OC(＝O)N(CH3)环丙基、-OC(＝O)N(CH3)环丁基)。
在一些实施方案中，R3为-S(＝O)Ra3。在某些实施方案中，R3为-S(＝O)烷基(例如，-S(＝O)Me、-S(＝O)Et、-S(＝O)Pr、-S(＝O)iPr)。在某些实施方案中，R3为-S(＝O)环烷基(例如，-S(＝O)环丙基、-S(＝O)环丁基、-S(＝O)环戊基、-S(＝O)环己基)。
在一些实施方案中，R3为-S(＝O)2Ra3。在某些实施方案中，R3为-S(＝O)2烷基(例如，-S(＝O)2Me、-S(＝O)2Et、-S(＝O)2Pr、-S(＝O)2 iPr)。在某些实施方案中，R3为-S(＝O)2环烷基(例如，-S(＝O)2环丙基、-S(＝O)2环丁基、-S(＝O)2环戊基、-S(＝O)2环己基)。在一些实施方案中，R3为S(＝O)2芳基(例如，S(＝O)2苯基)。
在一些实施方案中，R3为-SRa3。在某些实施方案中，R3为-S烷基(例如，-SMe、-SEt、-SPr、-SiPr)。在某些实施方案中，R3为-S环烷基(例如，-S环丙基、-S环丁基、-S环戊基、-S环己基)。在某些实施方案中，R3为-S芳基(例如，S苯基)。
在一些实施方案中，R3为-S(＝O)(＝NRa3)Ra3。在某些实施方案中，R3为-S(＝O)(＝NH)Ra3(例如，-S(＝O)(＝NH)Me、-S(＝O)(＝NH)Et、-S(＝O)(＝NH)Pr、-S(＝O)(＝NH)iPr、-S(＝O)(＝NH)Bu、-S(＝O)(＝NH)tBu、-S(＝O)(＝NH)环丙基、-S(＝O)(＝NH)环丁基)。在一些实施方案中，R3为-S(＝O)(＝NCH3)Ra3(例如，-S(＝O)(＝NCH3)Me、-S(＝O)(＝NCH3)Et、-S(＝O)(＝NCH3)Pr、-S(＝O)(＝NCH3)iPr、-S(＝O)(＝NCH3)Bu、-S(＝O)(＝NCH3)tBu、-S(＝O)(＝NCH3)环丙基、-S(＝O)(＝NCH3)环丁基)。
在一些实施方案中，R3为-NRa3S(＝O)2Ra3。在某些实施方案中，R3为-NHS(＝O)2烷基(例如，-NHS(＝O)2Me、-NHS(＝O)2Et、-NHS(＝O)2Pr、-NHS(＝O)2 iPr)。在某些实施方案中，R3为-NHS(＝O)2环烷基(例如，-NHS(＝O)2环丙基、-NHS(＝O)2环丁基、-NHS(＝O)2环戊基、-NHS(＝O)2环己基)。在某些实施方案中，R3为-N(CH3)S(＝O)2烷基(例如，-N(CH3)S(＝O)2Me、-N(CH3)S(＝O)2Et、-N(CH3)S(＝O)2Pr、-N(CH3)S(＝O)2 iPr)。在某些实施方案中，R3为-N(CH3)S(＝O)2环烷基(例如，-N(CH3)S(＝O)2环丙基、-N(CH3)S(＝O)2环丁基、-N(CH3)S(＝O)2环戊基、-N(CH3)S(＝O)2环己基)。
在一些实施方案中，R3为-S(＝O)2N(Ra3)2(例如，-S(＝O)2NH2、-S(＝O)2NHRa3、-S(＝O)2N(CH3)Ra3)。在一些实施方案中，R3为-S(＝O)2NH2。在一些实施方案中，R3为-S(＝O)2NHRa3(例如，-S(＝O)2NHMe、-S(＝O)2NHEt、-S(＝O)2NHPr、-S(＝O)2NHiPr、-S(＝O)2NH环丙基、-S(＝O)2NH环丁基)。在一些实施方案中，R3为-S(＝O)2N(CH3)Ra3(例如，-S(＝O)2NMe2、-S(＝O)2N(CH3)Et、-S(＝O)2N(CH3)Pr、-S(＝O)2N(CH3)iPr、-S(＝O)2N(CH3)环丙基、-S(＝O)2N(CH3)环丁基)。
如本文通常所述，每个R4独立地选自H、-D、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C9环烷基、3-10元杂环基、杂环基烷基、杂芳基烷基、芳基烷基、环烷基烷基、-ORa4、-N(Ra4)2、-C(＝O)Ra4、-C(＝O)ORa4、-NRa4C(＝O)Ra4、-NRa4C(＝O)ORa4、-C(＝O)N(Ra4)2、-OC(＝O)N(Ra4)2、-S(＝O)Ra4、-S(＝O)2Ra4、-SRa4、-S(＝O)(＝NRa4)Ra4、-NRa4S(＝O)2Ra4和-S(＝O)2N(Ra4)2，其中每个Ra4如本文所述。
在某些实施方案中，R4选自H、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C9环烷基、3-10元杂环基、-ORa4、-N(Ra4)2、-C(＝O)Ra4、-C(＝O)ORa4、-NRa4C(＝O)Ra4、-NRa4C(＝O)ORa4、-C(＝O)N(Ra4)2和-OC(＝O)N(Ra4)2。
在一些实施方案中，R4选自H、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6卤烷基和-N(Ra4)2，其中每个Ra4如本文所述。在其他实施方案中，每个Ra4独立地选自H和–C1–C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-nBu、-tBu、-sec-Bu、-iso-Bu)。在一些实施方案中，R4选自-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-nBu、-tBu、-sec-Bu、-iso-Bu)、-OH、-O-(C1-C6烷基)(例如，-OMe)、-NH2、-NH-(C1-C6烷基)(例如，-NHMe)和-N-(C1-C6烷基)2(例如，NMe2)。
在一些实施方案中，R4为H。在一些实施方案中，R4为-D。
在某些实施方案中，R4为卤基(例如，氟、氯、溴、碘)。在其他实施方案中，R4为-Cl。在一些实施方案中，R4为-F。在一些实施方案中，R4为-Br。在一些实施方案中，R4为-I。
在一些实施方案中，R4为-CN。
在某些实施方案中，R4为-C1-C6烷基。在其他实施方案中，R4为-Me。在一些实施方案中，R4为-Et。在一些实施方案中，R4为-Pr或-iPr。
在一些实施方案中，R4为-C1-C6杂烷基。在其他实施方案中，R4为甲氧基甲基(-CH2OCH3)。在一些实施方案中，R4为羟基甲基(-CH2OH)。在一些实施方案中，R4为氨基甲基(例如，-CH2NH2、-CH2NHCH3、-CH2N(CH3)2。
在一些实施方案中，R4为-C1-C6卤烷基。在其他实施方案中，R4为三氟甲基(-CF3)。在其他实施方案中，R4为二氟甲基(-CHF2)。
在一些实施方案中，R4为-C3-C9碳环基(例如，环丙基、环丁基、环戊基、环己基)。在一些实施方案中，R4为环丙基。在一些实施方案中，R4为环丁基。在一些实施方案中，R4为环戊基。在一些实施方案中，R4为环己基。
在一些实施方案中，R4为3-10元杂环基(例如，氧杂环丁烷基、四氢吡喃基、四氢呋喃基、氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、氮杂环庚烷基)。在一些实施方案中，R4为氧杂环丁烷基。在一些实施方案中，R4为四氢吡喃基。在一些实施方案中，R4为四氢呋喃基。在一些实施方案中，R4为氮杂环丁烷基。在一些实施方案中，R4为吡咯烷基。在一些实施方案中，R4为哌啶基。在一些实施方案中，R4为哌嗪基。在一些实施方案中，R4为吗啉基。在一些实施方案中，R4为氮杂环庚烷基。
在一些实施方案中，R4为环烷基烷基(例如，环丙基甲基、环丁基甲基、环戊基甲基、环己基甲基、环庚基甲基)。在一些实施方案中，R4为杂环基烷基(例如，氧杂环丁烷基甲基、氮丙啶基甲基、四氢呋喃基甲基、吡咯烷基甲基、四氢吡喃基甲基、哌啶基甲基、哌嗪基甲基、吗啉基甲基、氮杂环庚烷基甲基)。
在一些实施方案中，R4为芳基烷基。在一些实施方案中，R4为苯甲基。
在一些实施方案中，R4为杂芳基烷基(例如，吡啶基甲基、噻唑基甲基、三唑基甲基、吡唑基甲基)。
在一些实施方案中，R4为-ORa4(例如，羟基(-OH)、甲氧基、二氟甲氧基(-OCHF2)、三氟甲氧基(-OCF3)、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、环丙基氧基、环丁基氧基)。在一些实施方案中，R4为羟基。在一些实施方案中，R4为甲氧基。在一些实施方案中，R4为乙氧基。在一些实施方案中，R4为丙氧基。在一些实施方案中，R4为异丙氧基。在一些实施方案中，R4为二氟甲氧基(-OCHF2)。在一些实施方案中，R4为三氟甲氧基(-OCF3)。
在一些实施方案中，R4为-N(Ra4)2(例如，-NH2、-NHRa4、-N(CH3)Ra4)。在一些实施方案中，R4为-NH2。在一些实施方案中，R4为-NHRa4(例如，-NHMe、-NHEt、-NHPr、-NHiPr、-NH环丙基、-NH环丁基)。在一些实施方案中，R4为-N(CH3)Ra4(例如，-NMe2、-N(CH3)Et、-N(CH3)Pr、-N(CH3)iPr、-N(CH3)环丙基、-N(CH3)环丁基)。
在一些实施方案中，R4为-C(＝O)Ra4或-C(＝O)ORa4。在一些实施方案中，R4为-C(＝O)Ra4，其中Ra4如本文所述。在一些实施方案中，R4为-C(＝O)烷基。在一些实施方案中，R4为-C(O)CH3、-C(O)环丙基、-C(O)环丁基、-C(O)tBu、-C(O)iPr、-C(O)Pr、-C(O)iBu或-C(＝O)OMe。在一些实施方案中，R4为乙酰基(-C(＝O)Me)。在一些实施方案中，R4为-C(＝O)ORa4。在一些实施方案中，R4为-COOH。在一些实施方案中，R4为COOMe。
在一些实施方案中，R4为-NRa4C(＝O)Ra4。在某些实施方案中，R4为-NHC(＝O)Ra4(例如，NHC(＝O)Me、NHC(＝O)Et、NHC(＝O)Pr、NHC(＝O)iPr、NHC(＝O)Bu、NHC(＝O)tBu、NHC(＝O)环丙基、NHC(＝O)环丁基)。在一些实施方案中，R4为-N(CH3)C(＝O)Ra4(例如，N(CH3)C(＝O)Me、N(CH3)C(＝O)Et、N(CH3)C(＝O)Pr、N(CH3)C(＝O)iPr、N(CH3)C(＝O)Bu、N(CH3)C(＝O)tBu、N(CH3)C(＝O)环丙基、N(CH3)C(＝O)环丁基)。
在一些实施方案中，R4为-NRa4C(＝O)ORa4。在某些实施方案中，R4为-NHC(＝O)ORa4(例如，NHC(＝O)OMe、NHC(＝O)OEt、NHC(＝O)OPr、NHC(＝O)OiPr、NHC(＝O)OBu、NHC(＝O)OtBu、NHC(＝O)O环丙基、NHC(＝O)O环丁基)。在一些实施方案中，R4为-N(CH3)C(＝O)ORa4(例如，N(CH3)C(＝O)OMe、N(CH3)C(＝O)OEt、N(CH3)C(＝O)OPr、N(CH3)C(＝O)OiPr、N(CH3)C(＝O)OBu、N(CH3)C(＝O)OtBu、N(CH3)C(＝O)O环丙基、N(CH3)C(＝O)O环丁基)。
在一些实施方案中，R4为-C(＝O)N(Ra4)2(例如，-C(＝O)NH2、-C(＝O)NHRa4、-C(＝O)N(CH3)Ra4)。在一些实施方案中，R4为-C(＝O)NH2。在某些实施方案中，R4为-C(＝O)NHRa4(例如，-C(＝O)NHMe、-C(＝O)NHEt、-C(＝O)NHPr、-C(＝O)NHiPr、-C(＝O)NHBu、-C(＝O)NHtBu、-C(＝O)NH环丙基、-C(＝O)NH环丁基)。在某些实施方案中，R4为-C(＝O)N(CH3)Ra4(例如，-C(＝O)NMe2、-C(＝O)N(CH3)Et、-C(＝O)N(CH3)Pr、-C(＝O)N(CH3)iPr、-C(＝O)N(CH3)Bu、-C(＝O)N(CH3)tBu、-C(＝O)N(CH3)环丙基、-C(＝O)N(CH3)环丁基)。
在一些实施方案中，R4为-OC(＝O)N(Ra4)2。在某些实施方案中，R4为-OC(＝O)NHRa4(例如，-OC(＝O)NHMe、-OC(＝O)NHEt、-OC(＝O)NHPr、-OC(＝O)NHiPr、-OC(＝O)NHBu、-OC(＝O)NHtBu、-OC(＝O)NH环丙基、-OC(＝O)NH环丁基)。在某些实施方案中，R4为-OC(＝O)N(CH3)Ra4(例如，-OC(＝O)NMe2、-OC(＝O)N(CH3)Et、-OC(＝O)N(CH3)Pr、-OC(＝O)N(CH3)iPr、-OC(＝O)N(CH3)Bu、-OC(＝O)N(CH3)tBu、-OC(＝O)N(CH3)环丙基、-OC(＝O)N(CH3)环丁基)。
在一些实施方案中，R4为-S(＝O)Ra4。在某些实施方案中，R4为-S(＝O)烷基(例如，-S(＝O)Me、-S(＝O)Et、-S(＝O)Pr、-S(＝O)iPr)。在某些实施方案中，R4为-S(＝O)环烷基(例如，-S(＝O)环丙基、-S(＝O)环丁基、-S(＝O)环戊基、-S(＝O)环己基)。
在一些实施方案中，R4为-S(＝O)2Ra4。在某些实施方案中，R4为-S(＝O)2烷基(例如，-S(＝O)2Me、-S(＝O)2Et、-S(＝O)2Pr、-S(＝O)2 iPr)。在某些实施方案中，R4为-S(＝O)2环烷基(例如，-S(＝O)2环丙基、-S(＝O)2环丁基、-S(＝O)2环戊基、-S(＝O)2环己基)。在一些实施方案中，R4为S(＝O)2芳基(例如，S(＝O)2苯基)。
在一些实施方案中，R4为-SRa4。在某些实施方案中，R4为-S烷基(例如，-SMe、-SEt、-SPr、-SiPr)。在某些实施方案中，R4为-S环烷基(例如，-S环丙基、-S环丁基、-S环戊基、-S环己基)。在某些实施方案中，R4为-S芳基(例如，S苯基)。
在一些实施方案中，R4为-S(＝O)(＝NRa4)Ra4。在某些实施方案中，R4为-S(＝O)(＝NH)Ra4(例如，-S(＝O)(＝NH)Me、-S(＝O)(＝NH)Et、-S(＝O)(＝NH)Pr、-S(＝O)(＝NH)iPr、-S(＝O)(＝NH)Bu、-S(＝O)(＝NH)tBu、-S(＝O)(＝NH)环丙基、-S(＝O)(＝NH)环丁基)。在一些实施方案中，R4为-S(＝O)(＝NCH3)Ra4(例如，-S(＝O)(＝NCH3)Me、-S(＝O)(＝NCH3)Et、-S(＝O)(＝NCH3)Pr、-S(＝O)(＝NCH3)iPr、-S(＝O)(＝NCH3)Bu、-S(＝O)(＝NCH3)tBu、-S(＝O)(＝NCH3)环丙基、-S(＝O)(＝NCH3)环丁基)。
在一些实施方案中，R4为-NRa4S(＝O)2Ra4。在某些实施方案中，R4为-NHS(＝O)2烷基(例如，-NHS(＝O)2Me、-NHS(＝O)2Et、-NHS(＝O)2Pr、-NHS(＝O)2 iPr)。在某些实施方案中，R4为-NHS(＝O)2环烷基(例如，-NHS(＝O)2环丙基、-NHS(＝O)2环丁基、-NHS(＝O)2环戊基、-NHS(＝O)2环己基)。在某些实施方案中，R4为-N(CH3)S(＝O)2烷基(例如，-N(CH3)S(＝O)2Me、-N(CH3)S(＝O)2Et、-N(CH3)S(＝O)2Pr、-N(CH3)S(＝O)2 iPr)。在某些实施方案中，R4为-N(CH3)S(＝O)2环烷基(例如，-N(CH3)S(＝O)2环丙基、-N(CH3)S(＝O)2环丁基、-N(CH3)S(＝O)2环戊基、-N(CH3)S(＝O)2环己基)。
在一些实施方案中，R4为-S(＝O)2N(Ra4)2(例如，-S(＝O)2NH2、-S(＝O)2NHRa4、-S(＝O)2N(CH3)Ra4)。在一些实施方案中，R4为-S(＝O)2NH2。在一些实施方案中，R4为-S(＝O)2NHRa4(例如，-S(＝O)2NHMe、-S(＝O)2NHEt、-S(＝O)2NHPr、-S(＝O)2NHiPr、-S(＝O)2NH环丙基、-S(＝O)2NH环丁基)。在一些实施方案中，R4为-S(＝O)2N(CH3)Ra4(例如，-S(＝O)2NMe2、-S(＝O)2N(CH3)Et、-S(＝O)2N(CH3)Pr、-S(＝O)2N(CH3)iPr、-S(＝O)2N(CH3)环丙基、-S(＝O)2N(CH3)环丁基)。
如本文通常所述，每个R6独立地不存在或选自H、-D、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C10碳环基、3-10元杂环基、杂环基烷基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基、杂芳基烷基、芳基烷基、环烷基烷基、-ORa6、-N(Ra6)2、-C(＝O)Ra6、-C(＝O)ORa6、-NRa6C(＝O)Ra6、-NRa6C(＝O)ORa6、-C(＝O)N(Ra6)2、-OC(＝O)N(Ra6)2、-S(＝O)Ra6、-S(＝O)2Ra6、-SRa6、-S(＝O)(＝NRa6)Ra6、-NRa6S(＝O)2Ra6和-S(＝O)2N(Ra6)2，其中每个烷基、碳环基、杂环基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷基任选地在任一可用位置被取代，其中每个Ra6如本文所述。在一些实施方案中，每个R6独立地选自卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C10碳环基、3-10元杂环基、杂环基烷基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基、杂芳基烷基、芳基烷基、环烷基烷基、-ORa6、-N(Ra6)2、-C(＝O)Ra6、-C(＝O)ORa6、-NRa6C(＝O)Ra6、-NRa6C(＝O)ORa6、-C(＝O)N(Ra6)2、-OC(＝O)N(Ra6)2、-S(＝O)Ra6、-S(＝O)2Ra6、-SRa6、-S(＝O)(＝NRa6)Ra6、-NRa6S(＝O)2Ra6和-S(＝O)2N(Ra6)2，其中每个烷基、碳环基、杂环基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷基任选地在任一可用位置被取代，其中每个Ra6如本文所述。在一些实施方案中，每个Ra6独立地选自H和-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-nBu、-tBu、-sec-Bu、-iso-Bu)。
在一些实施方案中，R6的每个烷基、碳环基、杂环基、芳基、杂芳基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基烷基和杂芳基烷基在任一可用位置被R10的0、1、2或3个实例取代，其中每个R10如本文所述。
在一些实施方案中，每个R6独立地选自H、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C10碳环基、3-10元杂环基、杂环基烷基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基、杂芳基烷基、芳基烷基和环烷基烷基，其中每个烷基、碳环基、杂环基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷基任选地在任一可用位置被取代(例如，在任一可用位置被R10的0、1、2或3个实例取代，其中每个R10如本文所述)。在一些实施方案中，每个R6独立地选自-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C10碳环基、3-10元杂环基、杂环基烷基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基、杂芳基烷基、芳基烷基和环烷基烷基，其中每个烷基、碳环基、杂环基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷基任选地在任一可用位置被取代(例如，在任一可用位置被R10的0、1、2或3个实例取代，其中每个R10如本文所述)。
在一些实施方案中，R6独立地选自H、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C10碳环基、3-10元杂环基、杂环基烷基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基、杂芳基烷基、芳基烷基和环烷基烷基，其中每个烷基、碳环基、杂环基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷基在任一可用位置被R10的0、1、2或3个实例取代，其中R10如本文所述。在一些实施方案中，R6独立地选自-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C10碳环基、3-10元杂环基、杂环基烷基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基、杂芳基烷基、芳基烷基和环烷基烷基，其中每个烷基、碳环基、杂环基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷基在任一可用位置被R10的0、1、2或3个实例取代，其中R10如本文所述。在一些实施方案中，每个R6未被取代。在一些实施方案中，每个R6被R10的1个实例取代。在一些实施方案中，每个R6被R10的2个实例取代。在一些实施方案中，每个R6被R10的3个实例取代。
在一些实施方案中，R6独立地选自H、-C1-C6烷基、-C3-C10单环或双环碳环基(例如，-C3-C10单环或双环环烷基、部分不饱和的-C3-C10单环或双环碳环基、与苯基稠合的-C3-C7单环碳环基或含有1-3个独立地选自N、O、S或其氧化形式的原子的5-6元杂环基或杂芳基环)、3-10元单环或双环杂环基(例如，含有1-3个选自N、O和S或其氧化形式的杂原子的3-8元单环杂环基、含有1-3个独立地选自N、O和S或其氧化形式的杂原子的4-10元双环杂环基)、-C6-C10单环或双环芳基(例如，苯基、完全芳族9-10元双环芳基、含有与C5-C6碳环稠合的苯环的双环芳基、含有与含有1-3个独立地选自N、O和S或其氧化形式的杂原子的5-6元杂环稠合的苯环的双环芳基)、5-6元单环杂芳基(例如，含有1-4个独立地选自N、O和S的杂原子)、8-10元双环杂芳基(例如，含有1-4个独立地选自N、O和S的杂原子)，其中每个烷基、碳环基、杂环基、芳基和杂芳基任选地被取代(例如，被R10的0、1、2或3个实例取代，其中R10如本文所述)。在一些实施方案中，R6独立地选自-C1-C6烷基、-C3-C10单环或双环碳环基(例如，-C3-C10单环或双环环烷基、部分不饱和的-C3-C10单环或双环碳环基、与苯基稠合的-C3-C7单环碳环基或含有1-3个独立地选自N、O、S或其氧化形式的原子的5-6元杂环基或杂芳基环)、3-10元单环或双环杂环基(例如，含有1-3个选自N、O和S或其氧化形式的杂原子的3-8元单环杂环基、含有1-3个独立地选自N、O和S或其氧化形式的杂原子的4-10元双环杂环基)、-C6-C10单环或双环芳基(例如，苯基、完全芳族9-10元双环芳基、含有与C5-C6碳环稠合的苯环的双环芳基、含有与含有1-3个独立地选自N、O和S或其氧化形式的杂原子的5-6元杂环稠合的苯环的双环芳基)、5-6元单环杂芳基(例如，含有1-4个独立地选自N、O和S的杂原子)、8-10元双环杂芳基(例如，含有1-4个独立地选自N、O和S的杂原子)，其中每个烷基、碳环基、杂环基、芳基和杂芳基任选地被取代(例如，被R10的0、1、2或3个实例取代，其中R10如本文所述)。
在一些实施方案中，每个R6独立地选自H、-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-iBu、sec-Bu、-tBu)、-C3-C10单环或双环碳环基(例如，环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、双环[1.1.1]戊基、4,5,6,7-四氢-1H-吲唑基、螺[3.3]庚基)、3-10元单环或双环杂环基(例如，氧杂环丁烷基、氮杂环庚烷基、哌啶基、吡咯烷基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、1,2-二氢吡啶基、吗啉基)、C6-C10单环或双环芳基(例如，苯基、萘基、1,2,3,4-四氢萘基、2,3-二氢-1H-茚基、1,2,3,4-四氢喹啉基、1,2-二氢喹啉基、1,2-二氢异喹啉基、1,2,3,4-四氢异喹啉基、色原烷基、吲哚啉基、异吲哚啉基、3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噁嗪基、2,3-二氢苯并呋喃基、苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基、2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑基)、5-6元单环杂芳基(例如，噻吩基、噻唑基、吡唑基、咪唑基、噁唑基、吡啶基、嘧啶基)、8-10元双环杂芳基(例如，苯并[d]异噻唑基、吲哚基、苯并呋喃基、1H-吲唑基、2-H-吲唑基、苯并[b]噻吩基、喹啉基、1,5-萘啶基、1,2-二氢-1,5-萘啶基、1,2,3,4-四氢-1,8-萘啶基、异喹啉基、苯并[d]咪唑基、苯并[d]噻唑基、苯并[d]噁唑基、[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶基、咪唑并[1,2-a]吡啶基、咪唑并[1,5-a]吡啶基、1H-吡唑并[4,3-b]吡啶基)、1H-吡唑并[3,4-b]吡啶基、1H-噻吩并[2,3-c]吡唑基、1H-噻吩并[3,2-c]吡唑基、噻唑并[5,4-b]吡啶基)，其中每个烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基任选地被取代(例如，被R10的0、1、2或3个实例取代，其中R10如本文所述)。在一些实施方案中，每个R6独立地选自-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-iBu、sec-Bu、-tBu)、-C3-C10单环或双环碳环基(例如，环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、双环[1.1.1]戊基、4,5,6,7-四氢-1H-吲唑基、螺[3.3]庚基)、3-10元单环或双环杂环基(例如，氧杂环丁烷基、氮杂环庚烷基、哌啶基、吡咯烷基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、1,2-二氢吡啶基、吗啉基)、C6-C10单环或双环芳基(例如，苯基、萘基、1,2,3,4-四氢萘基、2,3-二氢-1H-茚基、1,2,3,4-四氢喹啉基、1,2-二氢喹啉基、1,2-二氢异喹啉基、1,2,3,4-四氢异喹啉基、色原烷基、吲哚啉基、异吲哚啉基、3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噁嗪基、2,3-二氢苯并呋喃基、苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基、2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑基)、5-6元单环杂芳基(例如，噻吩基、噻唑基、吡唑基、咪唑基、噁唑基、吡啶基、嘧啶基)、8-10元双环杂芳基(例如，苯并[d]异噻唑基、吲哚基、苯并呋喃基、1H-吲唑基、2-H-吲唑基、苯并[b]噻吩基、喹啉基、1,5-萘啶基、1,2-二氢-1,5-萘啶基、1,2,3,4-四氢-1,8-萘啶基、异喹啉基、苯并[d]咪唑基、苯并[d]噻唑基、苯并[d]噁唑基、[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶基、咪唑并[1,2-a]吡啶基、咪唑并[1,5-a]吡啶基、1H-吡唑并[4,3-b]吡啶基)、1H-吡唑并[3,4-b]吡啶基、1H-噻吩并[2,3-c]吡唑基、1H-噻吩并[3,2-c]吡唑基、噻唑并[5,4-b]吡啶基)，其中每个烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基任选地被取代(例如，被R10的0、1、2或3个实例取代，其中R10如本文所述)。
在一些实施方案中，每个R6独立地选自H、-Me、-iPr、-iBu、sec-Bu、环丁基、环戊基、环己基、双环[1.1.1]戊烷-1-基、螺[3.3]庚-2-基、4,5,6,7-四氢-1H-吲唑-6-基、哌啶-4-基、哌啶-3-基、吡咯烷-3-基、1,2-二氢吡啶-4-基、苯基、萘-2-基、1,2,3,4-四氢喹啉-6-基、1,2,3,4-四氢萘-6-基、色原烷-6-基、1,5-萘啶-6-基、1,2,3,4-四氢-1,8-萘啶-6-基、2,3-二氢-1H-茚-5-基、吲哚啉-5-基、吲哚啉-4-基、2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基、2,3-二氢苯并呋喃-5-基、2,3-二氢苯并呋喃-6-基、苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基]、异吲哚啉-5-基、3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-7-基、1,2-二氢喹啉-6-基、1,2-二氢异喹啉-7-基、噻吩-2-基、噻吩-3-基、噻唑-2-基、噻唑-4-基、噻唑-5-基、吡唑-1-基、吡唑-5-基、吡唑-3-基、吡唑-4-基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基、嘧啶-5-基、吲哚-4-基、吲哚-5-基、苯并呋喃-5-基、苯并呋喃-6-基、1H-吲唑-5-基、1H-吲唑-4-基、2H-吲唑-6-基、2H-吲唑-5-基、异吲哚啉-6-基、苯并[d]异噻唑-5-基、咪唑并[1,2-a]吡啶-7-基、咪唑并[1,5-a]吡啶-6-基、苯并[b]噻吩-3-基、苯并[b]噻吩-5-基、喹啉-6-基、喹啉-3-基、异喹啉-6-基、苯并[d]咪唑-5-基、1H-苯并[d]咪唑-4-基、苯并[d]噻唑-5-基、苯并[d]噻唑-6-基、苯并[d]噻唑-4-基、苯并[d]噁唑-4-基、苯并[d]噁唑-5-基、[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-6-基、咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基、吡唑并[4,3-b]吡啶-6-基、1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-基、1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-基、1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-5-基、1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-6-基、1H-噻吩并[2,3-c]吡唑-5-基、1H-噻吩并[3,2-c]吡唑-5-基、噻唑并[5,4-b]吡啶-6-基)，其各自任选地被取代(例如，被R10的0、1、2或3个实例取代，其中R10如本文所述)。在一些实施方案中，每个R6独立地选自-Me、-iPr、-iBu、sec-Bu、环丁基、环戊基、环己基、双环[1.1.1]戊烷-1-基、螺[3.3]庚-2-基、4,5,6,7-四氢-1H-吲唑-6-基、哌啶-4-基、哌啶-3-基、吡咯烷-3-基、1,2-二氢吡啶-4-基、苯基、萘-2-基、1,2,3,4-四氢喹啉-6-基、1,2,3,4-四氢萘-6-基、色原烷-6-基、1,5-萘啶-6-基、1,2,3,4-四氢-1,8-萘啶-6-基、2,3-二氢-1H-茚-5-基、吲哚啉-5-基、吲哚啉-4-基、2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基、2,3-二氢苯并呋喃-5-基、2,3-二氢苯并呋喃-6-基、苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基]、异吲哚啉-5-基、3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-7-基、1,2-二氢喹啉-6-基、1,2-二氢异喹啉-7-基、噻吩-2-基、噻吩-3-基、噻唑-2-基、噻唑-4-基、噻唑-5-基、吡唑-1-基、吡唑-5-基、吡唑-3-基、吡唑-4-基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基、嘧啶-5-基、吲哚-4-基、吲哚-5-基、苯并呋喃-5-基、苯并呋喃-6-基、1H-吲唑-5-基、1H-吲唑-4-基、2H-吲唑-6-基、2H-吲唑-5-基、异吲哚啉-6-基、苯并[d]异噻唑-5-基、咪唑并[1,2-a]吡啶-7-基、咪唑并[1,5-a]吡啶-6-基、苯并[b]噻吩-3-基、苯并[b]噻吩-5-基、喹啉-6-基、喹啉-3-基、异喹啉-6-基、苯并[d]咪唑-5-基、1H-苯并[d]咪唑-4-基、苯并[d]噻唑-5-基、苯并[d]噻唑-6-基、苯并[d]噻唑-4-基、苯并[d]噁唑-4-基、苯并[d]噁唑-5-基、[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-6-基、咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基、吡唑并[4,3-b]吡啶-6-基、1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-基、1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-基、1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-5-基、1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-6-基、1H-噻吩并[2,3-c]吡唑-5-基、1H-噻吩并[3,2-c]吡唑-5-基、噻唑并[5,4-b]吡啶-6-基)，其各自任选地被取代(例如，被R10的0、1、2或3个实例取代，其中R10如本文所述)。
在一些实施方案中，R6为H。在一些实施方案中，R6为-D。
在某些实施方案中，R6为卤基(例如，氟、氯、溴、碘)。在其他实施方案中，R6为-Cl。在一些实施方案中，R6为-F。在一些实施方案中，R6为-Br。在一些实施方案中，R6为-I。
在一些实施方案中，R6为-CN。
在某些实施方案中，R6为-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-iBu、sec-Bu、-tBu)。在其他实施方案中，R6为-Me。在一些实施方案中，R6为-Et。在一些实施方案中，R6为丙基。在一些实施方案中，R6为异丙基。在一些实施方案中，R6为sec-Bu。在一些实施方案中，R6为-tBu。
在一些实施方案中，R6为-C1-C6杂烷基。在其他实施方案中，R6为甲氧基甲基(-CH2OCH3)。在一些实施方案中，R6为羟基甲基(-CH2OH)。在一些实施方案中，R6为氨基甲基(例如，-CH2NH2、-CH2NHCH3、-CH2N(CH3)2。
在一些实施方案中，R6为-C1-C6卤烷基。在其他实施方案中，R6为三氟甲基(-CF3)。在其他实施方案中，R6为二氟甲基(-CHF2)。
在一些实施方案中，R6为-C3-C10碳环基。在一些实施方案中，碳环基未被进一步取代。在一些实施方案中，碳环基被R10的0、1、2或3个实例取代，其中R10如本文所述。在一些实施方案中，碳环基被卤基(例如，-F、-Cl)、-Me、-Et、-iPr、-OH、＝O或-CN中的1或2个实例取代。在其他实施方案中，碳环基为-C3-C10单环或双环环烷基(例如，单环环烷基、稠合双环环烷基、螺环烷基或桥接环烷基)。在一些实施方案中，碳环基为-C3-C7单环环烷基(例如，环丙基、环丁基、环戊基、环己基)。在一些实施方案中，R6为环丙基。在一些实施方案中，R6为环丁基。在一些实施方案中，R6为环戊基。在一些实施方案中，R6为环己基。在一些实施方案中，碳环基为-C4-C10双环环烷基。在一些实施方案中，R6为-C4-C10稠合环烷基(例如，十氢萘基、八氢茚基)。在一些实施方案中，R6为-C4-C10螺环烷基(例如，螺[4.5]癸基、螺[4.4]壬基、螺[3.3]庚基、螺[3.4]辛基)。在其他实施方案中，R6为螺[3.3]庚基。在一些实施方案中，R6为桥接双环环烷基(例如，双环[1.1.1]戊基、双环[2.2.1]庚基、双环[3.3.1]庚基、双环[2.1.1]己基、双环[3.2.1]辛基、双环[3.3.1]壬基。在一些实施方案中，R6为双环[1.1.1]戊基。
在一些实施方案中，碳环基为与苯基稠合的-C3-C7单环碳环基(例如，1,2,3,4-四氢萘基、2,3-二氢-1H-茚基，其中附接点在饱和环上)。在一些实施方案中，R6为与含有1-3个独立地选自N、O、S或其氧化形式的原子的5-6元杂环基环稠合的-C3-C7单环碳环基(例如，八氢色原烯基、十氢异喹啉基、十氢喹啉基、八氢吲哚基、八氢异吲哚基六氢色原烷、六氢异喹啉、六氢喹啉、八氢苯并呋喃，其中附接点在碳环上)。在一些实施方案中，R6为与含有1-3个独立地选自N、O、S或其氧化形式的原子的5-6元杂芳基环稠合的-C3-C7单环碳环基(例如，4,5,6,7-四氢-1H-吲唑基)。在一个实施方案中，R6为4,5,6,7-四氢-1H-吲唑-6-基。
在某些实施方案中，R6选自：
在一些实施方案中，R6为3-10元单环或双环杂环基。在一些实施方案中，R6为含有1-3个选自N、O和S或其氧化形式的杂原子的3-8元单环杂环基(例如，氧杂环丁烷基、四氢吡喃基、四氢呋喃基、氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、氮杂环庚烷基、四氢吡啶基)。在一些实施方案中，R6为氧杂环丁烷基。在一些实施方案中，R6为四氢吡喃基。在一些实施方案中，R6为四氢呋喃基。在一些实施方案中，R6为氮杂环丁烷基。在一些实施方案中，R6为吡咯烷基。在一些实施方案中，R6为哌啶基。在一些实施方案中，R6为哌嗪基。在一些实施方案中，R6为吗啉基。在一些实施方案中，R6为氮杂环庚烷基。在一些实施方案中，R6为四氢吡啶基。在一些实施方案中，R6为含有1-3个独立地选自N、O和S或其氧化形式的杂原子的4-10元双环杂环基。在一些实施方案中，单环或双环杂环基未被进一步取代。在一些实施方案中，杂环基被卤基(例如，-F、-Cl)、-Me、-Et、-iPr、-OH、＝O或-CN中的1或2个实例取代。在一些情况下，杂环基被＝O取代(例如，2-氧代-1,2-二氢吡啶-4-基)。
在一些实施方案中，R6为任选地被取代的6-10元单环或双环芳基。在一些实施方案中，R6被R10的0、1、2或3个实例取代，其中R10如本文所述。
在一些实施方案中，R6为任选地被取代的苯基。在一些实施方案中，R6为被R10的0、1、2或3个实例取代的苯基，其中每个R10独立地如本文所述。在一些实施方案中，苯基未被取代。在一些实施方案中，苯基被R10的一个实例取代。在一些实施方案中，苯基在与哌啶的附接点的对位被R10的1个实例取代。
在一些实施方案中，R6为在一些实施方案中，苯基被R10的2个实例取代。在一些实施方案中，苯基被R10的3个实例取代。在一些实施方案中，R6为被卤基(例如，氟、氯、溴)取代的苯基。
在一些实施方案中，R6为任选地被取代的9-10元双环芳基(例如，萘基)。在一些实施方案中，R6为含有与C5-C6碳环稠合的苯环的任选地被取代的双环芳基(例如，四氢萘基、二氢茚基)。在一些实施方案中，R6为1,2,3,4-四氢萘基。在一些实施方案中，R6为2,3-二氢-1H-茚基。在一些实施方案中，R6为含有与含有1-3个独立地选自N、O和S或其氧化形式的杂原子的5-6元杂环稠合的苯环的任选地被取代的双环芳基(例如，四氢萘基、二氢茚基、1,2,3,4四氢喹啉基、1,2二氢喹啉基、1,2-二氢异喹啉基、四氢异喹啉基、色原烷基、吲哚啉基、异吲哚啉基、二氢苯并噁嗪基、二氢苯并呋喃基、苯并二氧杂环戊烯基、二氢苯并咪唑基。在一些实施方案中，R6为1,2,3,4-四氢喹啉基。在一些实施方案中，R6为1,2-二氢喹啉基。在一些实施方案中，R6为1,2-二氢异喹啉基。在一些实施方案中，R6为1,2,3,4-四氢异喹啉基。在一些实施方案中，R6为色原烷基。在一些实施方案中，R6为吲哚啉基。在一些实施方案中，R6为异吲哚啉基。在一些实施方案中，R6为3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噁嗪基。在一些实施方案中，R6为2,3-二氢苯并呋喃基。在一些实施方案中，R6为苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基。在一些实施方案中，R6为2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑基。在一些实施方案中，R6选自：
在一些实施方案中，双环芳基未被取代。在一些实施方案中，双环芳基被R10的0、1、2或3个实例取代，其中每个R10如本文所述。在一些实施方案中，双环芳基被R10的1个实例取代。在其他实施方案中，双环芳基被R10的一个实例取代，其中R10选自卤基(例如，F、Cl、Br)、-Me、＝O。在一些实施方案中，R10为＝O且R6选自：
在一些实施方案中，R6为任选地被取代的5-6元单环杂芳基(例如，含有1-3个独立地选自O、N和S的杂原子的5元单环杂芳基；含有1-3个N杂原子的6元单环杂芳基)。
在一些实施方案中，5-6元单环杂芳基未被取代。在一些实施方案中，5-6元单环杂芳基被R10的0、1、2或3个实例取代，其中每个R10如本文所述。在一些实施方案中，5-6元单环杂芳基被R10的1个实例取代。在一些实施方案中，5-6元单环杂芳基被R10的2个实例取代。在一些实施方案中，5-6元单环杂芳基被R10的2个实例取代。在一些实施方案中，5-6元单环杂芳基被R10的3个实例取代。
在一些实施方案中，R6为5元单环杂芳基(例如，吡唑基、吡咯基、噻吩基、呋喃基、噻唑基、异噻唑基、噁唑基、异噁唑基、咪唑基、三唑基、噻二唑基、噁二唑基)。在一些实施方案中，R6为噻吩基(例如，噻吩-2-基、噻吩-3-基)。在一些实施方案中，R6为吡唑基(例如吡唑-1-基、吡唑-3-基、吡唑-5-基)。在一些实施方案中，R6为噻唑基(例如，噻唑-2-基、噻唑-4-基、噻唑-5-基)。在一些实施方案中，R6选自：
在一些实施方案中，R6为6元单环杂芳基(例如，吡啶基、嘧啶基、三嗪基、吡嗪基、哒嗪基)。在一些实施方案中，6元单环杂芳基未被取代。在一些实施方案中，6元单环杂芳基被R10的0、1、2或3个实例取代。在一些实施方案中，6元单环杂芳基被R10的1个实例取代。在一些实施方案中，6元单环杂芳基在与哌啶的附接点的对位被R10的1个实例取代。在一些实施方案中，6元单环杂芳基被R10的2个实例取代。在一些实施方案中，6元单环杂芳基被R10的3个实例取代。在一些实施方案中，R6为吡啶基(例如，吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基)。在一些实施方案中，R6为嘧啶基(例如，嘧啶-2-基、嘧啶-4-基、嘧啶-5-基)。在一些实施方案中，R6选自：
在一些实施方案中，R6选自：
在其他实施方案中，R6为
在一些实施方案中，R6为8-10元双环杂芳基(例如，5,5-双环杂芳基(例如1H-噻吩并[2,3-c]吡唑基、1H-噻吩并[3,2-c]吡唑基)、5,6-双环杂芳基(例如，吲哚基、苯并呋喃基、1H-吲唑基、2H-吲唑基、苯并[b]噻吩基、苯并[d]咪唑基、苯并[d]噻唑基、苯并[d]噁唑基、[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶基、苯并[d]异噻唑基、咪唑并[1,2-a]吡啶基、咪唑并[1,2-a]吡啶基、1H-吡唑并[4,3-b]吡啶基)、1H-吡唑并[3,4-b]吡啶基、噻唑并[5,4-b]吡啶基)或6,6双环杂芳基(例如，喹啉基、1,5-萘啶基、1,2-二氢-1,5-萘啶基、1,2,3,4-四氢-1,8-萘啶基、异喹啉基)，其中每个双环杂芳基含有1-3个独立地选自O、N和S的杂原子)。
在一些实施方案中，R6选自吲哚基、苯并呋喃基、1H-吲唑基、2H-吲唑基、苯并[b]噻吩基、喹啉基、1,5-萘啶基、1,2-二氢-1,5-萘啶基、1,2,3,4-四氢-1,8-萘啶基、异喹啉基、苯并[d]咪唑基、苯并[d]噻唑基、苯并[d]噁唑基、[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶基、咪唑并[1,2-a]吡啶基、苯并[d]异噻唑基、咪唑并[1,2-a]吡啶基、1H-吡唑并[4,3-b]吡啶基)、1H-吡唑并[3,4-b]吡啶基、1H-噻吩并[2,3-c]吡唑基、1H-噻吩并[3,2-c]吡唑基、噻唑并[5,4-b]吡啶基、1,2,3,4-四氢-1,8-萘啶基)，其中双环杂芳基任选地被取代(例如，被R10的0、1、2或3个实例取代)。
在一些实施方案中，R6为选自以下的8-10元双环杂芳基：
在一些实施方案中，8-10元双环杂芳基未被取代。在一些实施方案中，8-10元双环杂芳基被R10的0、1、2或3个实例取代，其中每个R10如本文所述。在一些实施方案中，8-10元双环杂芳基被R10的1个实例取代。在其他实施方案中，8-10元双环杂芳基被R10的一个实例取代，其中R10选自卤基(例如，F、Cl、Br)、-Me、＝O。在一些实施方案中，R10为＝O且R6选自：
在一些实施方案中，R6为环烷基烷基(例如，环丙基甲基、环丁基甲基、环戊基甲基、环己基甲基、环庚基甲基)。在一些实施方案中，R6为杂环基烷基(例如，氧杂环丁烷基甲基、氮丙啶基甲基、四氢呋喃基甲基、吡咯烷基甲基、四氢吡喃基甲基、哌啶基甲基、哌嗪基甲基、吗啉基甲基、氮杂环庚烷基甲基)。
在一些实施方案中，R6为芳基烷基。在一些实施方案中，R6为苯甲基。
在一些实施方案中，R6为杂芳基烷基(例如，吡啶基甲基、噻唑基甲基、三唑基甲基、吡唑基甲基)。
在一些实施方案中，R6为-ORa6(例如，羟基(-OH)、甲氧基、二氟甲氧基(-OCHF2)、三氟甲氧基(-OCF3)、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、环丙基氧基、环丁基氧基)。在一些实施方案中，R6为羟基。在一些实施方案中，R6为甲氧基。在一些实施方案中，R6为乙氧基。在一些实施方案中，R6为丙氧基。在一些实施方案中，R6为异丙氧基。在一些实施方案中，R6为二氟甲氧基(-OCHF2)。在一些实施方案中，R6为三氟甲氧基(-OCF3)。
在一些实施方案中，R6为-N(Ra6)2(例如，-NH2、-NHRa6、-N(CH3)Ra6)。在一些实施方案中，R6为-NH2。在一些实施方案中，R6为-NHRa6(例如，-NHMe、-NHEt、-NHPr、-NHiPr、-NH环丙基、-NH环丁基)。在一些实施方案中，R6为-N(CH3)Ra6(例如，-NMe2、-N(CH3)Et、-N(CH3)Pr、-N(CH3)iPr、-N(CH3)环丙基、-N(CH3)环丁基)。
在一些实施方案中，R6为-C(＝O)Ra6或-C(＝O)ORa6。在一些实施方案中，R6为-C(＝O)Ra6，其中Ra6如本文所述。在一些实施方案中，R6为-C(＝O)烷基。在一些实施方案中，R6为-C(O)CH3、-C(O)环丙基、-C(O)环丁基、-C(O)tBu、-C(O)iPr、-C(O)Pr、-C(O)iBu或-C(＝O)OMe。在一些实施方案中，R6为乙酰基(-C(＝O)Me)。在一些实施方案中，R6为-C(＝O)ORa6。在一些实施方案中，R6为-COOH。在一些实施方案中，R6为COOMe。
在一些实施方案中，R6为-NRa6C(＝O)Ra6。在某些实施方案中，R6为-NHC(＝O)Ra6(例如，NHC(＝O)Me、NHC(＝O)Et、NHC(＝O)Pr、NHC(＝O)iPr、NHC(＝O)Bu、NHC(＝O)tBu、NHC(＝O)环丙基、NHC(＝O)环丁基)。在一些实施方案中，R6为-N(CH3)C(＝O)Ra6(例如，N(CH3)C(＝O)Me、N(CH3)C(＝O)Et、N(CH3)C(＝O)Pr、N(CH3)C(＝O)iPr、N(CH3)C(＝O)Bu、N(CH3)C(＝O)tBu、N(CH3)C(＝O)环丙基、N(CH3)C(＝O)环丁基)。
在一些实施方案中，R6为-NRa6C(＝O)ORa6。在某些实施方案中，R6为-NHC(＝O)ORa6(例如，NHC(＝O)OMe、NHC(＝O)OEt、NHC(＝O)OPr、NHC(＝O)OiPr、NHC(＝O)OBu、NHC(＝O)OtBu、NHC(＝O)O环丙基、NHC(＝O)O环丁基)。在一些实施方案中，R6为-N(CH3)C(＝O)ORa6(例如，N(CH3)C(＝O)OMe、N(CH3)C(＝O)OEt、N(CH3)C(＝O)OPr、N(CH3)C(＝O)OiPr、N(CH3)C(＝O)OBu、N(CH3)C(＝O)OtBu、N(CH3)C(＝O)O环丙基、N(CH3)C(＝O)O环丁基)。
在一些实施方案中，R6为-C(＝O)N(Ra6)2(例如，-C(＝O)NH2、-C(＝O)NHRa6、-C(＝O)N(CH3)Ra6)。在一些实施方案中，R6为-C(＝O)NH2。在某些实施方案中，R6为-C(＝O)NHRa6(例如，-C(＝O)NHMe、-C(＝O)NHEt、-C(＝O)NHPr、-C(＝O)NHiPr、-C(＝O)NHBu、-C(＝O)NHtBu、-C(＝O)NH环丙基、-C(＝O)NH环丁基)。在某些实施方案中，R6为-C(＝O)N(CH3)Ra6(例如，-C(＝O)NMe2、-C(＝O)N(CH3)Et、-C(＝O)N(CH3)Pr、-C(＝O)N(CH3)iPr、-C(＝O)N(CH3)Bu、-C(＝O)N(CH3)tBu、-C(＝O)N(CH3)环丙基、-C(＝O)N(CH3)环丁基)。
在一些实施方案中，R6为-OC(＝O)N(Ra6)2。在某些实施方案中，R6为-OC(＝O)NHRa6(例如，-OC(＝O)NHMe、-OC(＝O)NHEt、-OC(＝O)NHPr、-OC(＝O)NHiPr、-OC(＝O)NHBu、-OC(＝O)NHtBu、-OC(＝O)NH环丙基、-OC(＝O)NH环丁基)。在某些实施方案中，R6为-OC(＝O)N(CH3)Ra6(例如，-OC(＝O)NMe2、-OC(＝O)N(CH3)Et、-OC(＝O)N(CH3)Pr、-OC(＝O)N(CH3)iPr、-OC(＝O)N(CH3)Bu、-OC(＝O)N(CH3)tBu、-OC(＝O)N(CH3)环丙基、-OC(＝O)N(CH3)环丁基)。
在一些实施方案中，R6为-S(＝O)Ra6。在某些实施方案中，R6为-S(＝O)烷基(例如，-S(＝O)Me、-S(＝O)Et、-S(＝O)Pr、-S(＝O)iPr)。在某些实施方案中，R6为-S(＝O)环烷基(例如，-S(＝O)环丙基、-S(＝O)环丁基、-S(＝O)环戊基、-S(＝O)环己基)。
在一些实施方案中，R6为-S(＝O)2Ra6。在某些实施方案中，R6为-S(＝O)2烷基(例如，-S(＝O)2Me、-S(＝O)2Et、-S(＝O)2Pr、-S(＝O)2 iPr)。在某些实施方案中，R6为-S(＝O)2环烷基(例如，-S(＝O)2环丙基、-S(＝O)2环丁基、-S(＝O)2环戊基、-S(＝O)2环己基)。在一些实施方案中，R6为S(＝O)2芳基(例如，S(＝O)2苯基)。
在一些实施方案中，R6为-SRa6。在某些实施方案中，R6为-S烷基(例如，-SMe、-SEt、-SPr、-SiPr)。在某些实施方案中，R6为-S环烷基(例如，-S环丙基、-S环丁基、-S环戊基、-S环己基)。在某些实施方案中，R6为-S芳基(例如，S苯基)。
在一些实施方案中，R6为-S(＝O)(＝NRa6)Ra6。在某些实施方案中，R6为-S(＝O)(＝NH)Ra6(例如，-S(＝O)(＝NH)Me、-S(＝O)(＝NH)Et、-S(＝O)(＝NH)Pr、-S(＝O)(＝NH)iPr、-S(＝O)(＝NH)Bu、-S(＝O)(＝NH)tBu、-S(＝O)(＝NH)环丙基、-S(＝O)(＝NH)环丁基)。在一些实施方案中，R6为-S(＝O)(＝NCH3)Ra6(例如，-S(＝O)(＝NCH3)Me、-S(＝O)(＝NCH3)Et、-S(＝O)(＝NCH3)Pr、-S(＝O)(＝NCH3)iPr、-S(＝O)(＝NCH3)Bu、-S(＝O)(＝NCH3)tBu、-S(＝O)(＝NCH3)环丙基、-S(＝O)(＝NCH3)环丁基)。
在一些实施方案中，R6为-NRa6S(＝O)2Ra6。在某些实施方案中，R6为-NHS(＝O)2烷基(例如，-NHS(＝O)2Me、-NHS(＝O)2Et、-NHS(＝O)2Pr、-NHS(＝O)2 iPr)。在某些实施方案中，R6为-NHS(＝O)2环烷基(例如，-NHS(＝O)2环丙基、-NHS(＝O)2环丁基、-NHS(＝O)2环戊基、-NHS(＝O)2环己基)。在某些实施方案中，R6为-N(CH3)S(＝O)2烷基(例如，-N(CH3)S(＝O)2Me、-N(CH3)S(＝O)2Et、-N(CH3)S(＝O)2Pr、-N(CH3)S(＝O)2 iPr)。在某些实施方案中，R6为-N(CH3)S(＝O)2环烷基(例如，-N(CH3)S(＝O)2环丙基、-N(CH3)S(＝O)2环丁基、-N(CH3)S(＝O)2环戊基、-N(CH3)S(＝O)2环己基)。
在一些实施方案中，R6为-S(＝O)2N(Ra6)2(例如，-S(＝O)2NH2、-S(＝O)2NHRa6、-S(＝O)2N(CH3)Ra6)。在一些实施方案中，R6为-S(＝O)2NH2。在一些实施方案中，R6为-S(＝O)2NHRa6(例如，-S(＝O)2NHMe、-S(＝O)2NHEt、-S(＝O)2NHPr、-S(＝O)2NHiPr、-S(＝O)2NH环丙基、-S(＝O)2NH环丁基)。在一些实施方案中，R6为-S(＝O)2N(CH3)Ra6(例如，-S(＝O)2NMe2、-S(＝O)2N(CH3)Et、-S(＝O)2N(CH3)Pr、-S(＝O)2N(CH3)iPr、-S(＝O)2N(CH3)环丙基、-S(＝O)2N(CH3)环丁基)。
如本文通常所定义，每个R7独立地不存在或选自H、-D、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6羟基烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C9环烷基、3-10元杂环基、5-6元单环杂芳基、杂环基烷基、杂芳基烷基、芳基烷基、环烷基烷基、-ORa7、-N(Ra7)2、-C(＝O)Ra7、-C(＝O)ORa7、-NRa7C(＝O)Ra7、-NRa7C(＝O)ORa7、-C(＝O)N(Ra7)2、-OC(＝O)N(Ra7)2,-S(＝O)Ra7、-S(＝O)2Ra7、-SRa7、-S(＝O)(＝NRa7)Ra7、-NRa7S(＝O)2Ra7和-S(＝O)2N(Ra7)2，其中Ra7如本文所定义。
在一些实施方案中，每个R7独立地选自H、卤基(例如，F、Cl)、-CN、-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-sec-Bu、-tBu)、5元杂芳基(例如，吡唑基)、-C1-C6卤烷基(例如，-CF3、-CHF2、-CH2CF3)、-C1-C6羟基烷基(例如，-CH2OH)、-C3-C9环烷基(例如，环丙基、环丁基、环戊基、环己基)、-ORa7(例如，-OH、-OMe、-OCHF2)、-N(Ra7)2和-C(＝O)N(Ra7)2(例如，-C(＝O)NH2、-C(＝O)NHMe)，其中每个Ra7如本文所定义。在其他实施方案中，每个Ra7独立地选自H和-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-nBu、-tBu、-sec-Bu、-iso-Bu)。
在某些实施方案中，每个R7独立地选自H和甲基。
在一些实施方案中，R7为H。在一些实施方案中，R7为-D。
在某些实施方案中，R7为卤基(例如，氟、氯、溴、碘)。在其他实施方案中，R7为-Cl。在一些实施方案中，R7为-F。在一些实施方案中，R7为-Br。在一些实施方案中，R7为-I。
在一些实施方案中，R7为-CN。
在某些实施方案中，R7为-C1-C6烷基。在其他实施方案中，R7为-Me。在一些实施方案中，R7为-Et。在一些实施方案中，R7为-Pr或-iPr。
在一些实施方案中，R7为-C1-C6杂烷基。在其他实施方案中，R7为甲氧基甲基(-CH2OCH3)。在一些实施方案中，R7为羟基甲基(-CH2OH)。在一些实施方案中，R7为氨基甲基(例如，-CH2NH2、-CH2NHCH3、-CH2N(CH3)2。
在一些实施方案中，R7为-C1-C6卤烷基。在其他实施方案中，R7为三氟甲基(-CF3)。在其他实施方案中，R7为二氟甲基(-CHF2)。
在一些实施方案中，R7为-C3-C9碳环基(例如，环丙基、环丁基、环戊基、环己基)。在一些实施方案中，R7为环丙基。在一些实施方案中，R7为环丁基。在一些实施方案中，R7为环戊基。在一些实施方案中，R7为环己基。
在一些实施方案中，R7为3-10元杂环基(例如，氧杂环丁烷基、四氢吡喃基、四氢呋喃基、氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、氮杂环庚烷基)。在一些实施方案中，R7为氧杂环丁烷基。在一些实施方案中，R7为四氢吡喃基。在一些实施方案中，R7为四氢呋喃基。在一些实施方案中，R7为氮杂环丁烷基。在一些实施方案中，R7为吡咯烷基。在一些实施方案中，R7为哌啶基。在一些实施方案中，R7为哌嗪基。在一些实施方案中，R7为吗啉基。在一些实施方案中，R7为氮杂环庚烷基。
在一些实施方案中，R7为5-6元单环杂芳基(例如，含有1-3个独立地选自O、N和S的杂原子的5元单环杂芳基；含有1-3个N杂原子的6元单环杂芳基)。在一些实施方案中，R7为5元单环杂芳基(例如，吡唑基、吡咯基、噻吩基、呋喃基、噻唑基、异噻唑基、噁唑基、异噁唑基、咪唑基、三唑基、噻二唑基、噁二唑基)。在一些实施方案中，R7为噻吩基(例如，噻吩-2-基、噻吩-3-基)。在一些实施方案中，R7为吡唑基(例如吡唑-1-基、吡唑-3-基、吡唑-5-基)。在一些实施方案中，R7为噻唑基(例如，噻唑-2-基、噻唑-4-基、噻唑-5-基)。在一些实施方案中，R7为6元单环杂芳基(例如，吡啶基、嘧啶基、三嗪基、吡嗪基、哒嗪基)。在一些实施方案中，R7为吡啶基(例如，吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基)。在一些实施方案中，R7为嘧啶基(例如，嘧啶-2-基、嘧啶-4-基、嘧啶-5-基)。
在一些实施方案中，R7为环烷基烷基(例如，环丙基甲基、环丁基甲基、环戊基甲基、环己基甲基、环庚基甲基)。在一些实施方案中，R7为杂环基烷基(例如，氧杂环丁烷基甲基、氮丙啶基甲基、四氢呋喃基甲基、吡咯烷基甲基、四氢吡喃基甲基、哌啶基甲基、哌嗪基甲基、吗啉基甲基、氮杂环庚烷基甲基)。
在一些实施方案中，R7为芳基烷基。在一些实施方案中，R7为苯甲基。
在一些实施方案中，R7为杂芳基烷基(例如，吡啶基甲基、噻唑基甲基、三唑基甲基、吡唑基甲基)。
在一些实施方案中，R7为-ORa7(例如，羟基(-OH)、甲氧基、二氟甲氧基(-OCHF2)、三氟甲氧基(-OCF3)、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、环丙基氧基、环丁基氧基)。在一些实施方案中，R7为羟基。在一些实施方案中，R7为甲氧基。在一些实施方案中，R7为乙氧基。在一些实施方案中，R7为丙氧基。在一些实施方案中，R7为异丙氧基。在一些实施方案中，R7为二氟甲氧基(-OCHF2)。在一些实施方案中，R7为三氟甲氧基(-OCF3)。
在一些实施方案中，R7为-N(Ra7)2(例如，-NH2、-NHRa7、-N(CH3)Ra7)。在一些实施方案中，R7为-NH2。在一些实施方案中，R7为-NHRa7(例如，-NHMe、-NHEt、-NHPr、-NHiPr、-NH环丙基、-NH环丁基)。在一些实施方案中，R7为-N(CH3)Ra7(例如，-NMe2、-N(CH3)Et、-N(CH3)Pr、-N(CH3)iPr、-N(CH3)环丙基、-N(CH3)环丁基)。
在一些实施方案中，R7为-C(＝O)Ra7或-C(＝O)ORa7。在一些实施方案中，R7为-C(＝O)Ra7，其中Ra7如本文所述。在一些实施方案中，R7为-C(＝O)烷基。在一些实施方案中，R7为-C(O)CH3、-C(O)环丙基、-C(O)环丁基、-C(O)tBu、-C(O)iPr、-C(O)Pr、-C(O)iBu或-C(＝O)OMe。在一些实施方案中，R7为乙酰基(-C(＝O)Me)。在一些实施方案中，R7为-C(＝O)ORa7。在一些实施方案中，R7为-COOH。在一些实施方案中，R7为COOMe。
在一些实施方案中，R7为-NRa7C(＝O)Ra7。在某些实施方案中，R7为-NHC(＝O)Ra7(例如，NHC(＝O)Me、NHC(＝O)Et、NHC(＝O)Pr、NHC(＝O)iPr、NHC(＝O)Bu、NHC(＝O)tBu、NHC(＝O)环丙基、NHC(＝O)环丁基)。在一些实施方案中，R7为-N(CH3)C(＝O)Ra7(例如，N(CH3)C(＝O)Me、N(CH3)C(＝O)Et、N(CH3)C(＝O)Pr、N(CH3)C(＝O)iPr、N(CH3)C(＝O)Bu、N(CH3)C(＝O)tBu、N(CH3)C(＝O)环丙基、N(CH3)C(＝O)环丁基)。
在一些实施方案中，R7为-NRa7C(＝O)ORa7。在某些实施方案中，R7为-NHC(＝O)ORa7(例如，NHC(＝O)OMe、NHC(＝O)OEt、NHC(＝O)OPr、NHC(＝O)OiPr、NHC(＝O)OBu、NHC(＝O)OtBu、NHC(＝O)O环丙基、NHC(＝O)O环丁基)。在一些实施方案中，R7为-N(CH3)C(＝O)ORa7(例如，N(CH3)C(＝O)OMe、N(CH3)C(＝O)OEt、N(CH3)C(＝O)OPr、N(CH3)C(＝O)OiPr、N(CH3)C(＝O)OBu、N(CH3)C(＝O)OtBu、N(CH3)C(＝O)O环丙基、N(CH3)C(＝O)O环丁基)。
在一些实施方案中，R7为-C(＝O)N(Ra7)2(例如，-C(＝O)NH2、-C(＝O)NHRa7、-C(＝O)N(CH3)Ra7)。在一些实施方案中，R7为-C(＝O)NH2。在某些实施方案中，R7为-C(＝O)NHRa7(例如，-C(＝O)NHMe、-C(＝O)NHEt、-C(＝O)NHPr、-C(＝O)NHiPr、-C(＝O)NHBu、-C(＝O)NHtBu、-C(＝O)NH环丙基、-C(＝O)NH环丁基)。在某些实施方案中，R7为-C(＝O)N(CH3)Ra7(例如，-C(＝O)NMe2、-C(＝O)N(CH3)Et、-C(＝O)N(CH3)Pr、-C(＝O)N(CH3)iPr、-C(＝O)N(CH3)Bu、-C(＝O)N(CH3)tBu、-C(＝O)N(CH3)环丙基、-C(＝O)N(CH3)环丁基)。
在一些实施方案中，R7为-OC(＝O)N(Ra7)2。在某些实施方案中，R7为-OC(＝O)NHRa7(例如，-OC(＝O)NHMe、-OC(＝O)NHEt、-OC(＝O)NHPr、-OC(＝O)NHiPr、-OC(＝O)NHBu、-OC(＝O)NHtBu、-OC(＝O)NH环丙基、-OC(＝O)NH环丁基)。在某些实施方案中，R7为-OC(＝O)N(CH3)Ra7(例如，-OC(＝O)NMe2、-OC(＝O)N(CH3)Et、-OC(＝O)N(CH3)Pr、-OC(＝O)N(CH3)iPr、-OC(＝O)N(CH3)Bu、-OC(＝O)N(CH3)tBu、-OC(＝O)N(CH3)环丙基、-OC(＝O)N(CH3)环丁基)。
在一些实施方案中，R7为-S(＝O)Ra7。在某些实施方案中，R7为-S(＝O)烷基(例如，-S(＝O)Me、-S(＝O)Et、-S(＝O)Pr、-S(＝O)iPr)。在某些实施方案中，R7为-S(＝O)环烷基(例如，-S(＝O)环丙基、-S(＝O)环丁基、-S(＝O)环戊基、-S(＝O)环己基)。
在一些实施方案中，R7为-S(＝O)2Ra7。在某些实施方案中，R7为-S(＝O)2烷基(例如，-S(＝O)2Me、-S(＝O)2Et、-S(＝O)2Pr、-S(＝O)2 iPr)。在某些实施方案中，R7为-S(＝O)2环烷基(例如，-S(＝O)2环丙基、-S(＝O)2环丁基、-S(＝O)2环戊基、-S(＝O)2环己基)。在一些实施方案中，R7为S(＝O)2芳基(例如，S(＝O)2苯基)。
在一些实施方案中，R7为-SRa7。在某些实施方案中，R7为-S烷基(例如，-SMe、-SEt、-SPr、-SiPr)。在某些实施方案中，R7为-S环烷基(例如，-S环丙基、-S环丁基、-S环戊基、-S环己基)。在某些实施方案中，R7为-S芳基(例如，S苯基)。
在一些实施方案中，R7为-S(＝O)(＝NRa7)Ra7。在某些实施方案中，R7为-S(＝O)(＝NH)Ra7(例如，-S(＝O)(＝NH)Me、-S(＝O)(＝NH)Et、-S(＝O)(＝NH)Pr、-S(＝O)(＝NH)iPr、-S(＝O)(＝NH)Bu、-S(＝O)(＝NH)tBu、-S(＝O)(＝NH)环丙基、-S(＝O)(＝NH)环丁基)。在一些实施方案中，R7为-S(＝O)(＝NCH3)Ra7(例如，-S(＝O)(＝NCH3)Me、-S(＝O)(＝NCH3)Et、-S(＝O)(＝NCH3)Pr、-S(＝O)(＝NCH3)iPr、-S(＝O)(＝NCH3)Bu、-S(＝O)(＝NCH3)tBu、-S(＝O)(＝NCH3)环丙基、-S(＝O)(＝NCH3)环丁基)。
在一些实施方案中，R7为-NRa7S(＝O)2Ra7。在某些实施方案中，R7为-NHS(＝O)2烷基(例如，-NHS(＝O)2Me、-NHS(＝O)2Et、-NHS(＝O)2Pr、-NHS(＝O)2 iPr)。在某些实施方案中，R7为-NHS(＝O)2环烷基(例如，-NHS(＝O)2环丙基、-NHS(＝O)2环丁基、-NHS(＝O)2环戊基、-NHS(＝O)2环己基)。在某些实施方案中，R7为-N(CH3)S(＝O)2烷基(例如，-N(CH3)S(＝O)2Me、-N(CH3)S(＝O)2Et、-N(CH3)S(＝O)2Pr、-N(CH3)S(＝O)2 iPr)。在某些实施方案中，R7为-N(CH3)S(＝O)2环烷基(例如，-N(CH3)S(＝O)2环丙基、-N(CH3)S(＝O)2环丁基、-N(CH3)S(＝O)2环戊基、-N(CH3)S(＝O)2环己基)。
在一些实施方案中，R7为-S(＝O)2N(Ra7)2(例如，-S(＝O)2NH2、-S(＝O)2NHRa7、-S(＝O)2N(CH3)Ra7)。在一些实施方案中，R7为-S(＝O)2NH2。在一些实施方案中，R7为-S(＝O)2NHRa7(例如，-S(＝O)2NHMe、-S(＝O)2NHEt、-S(＝O)2NHPr、-S(＝O)2NHiPr、-S(＝O)2NH环丙基、-S(＝O)2NH环丁基)。在一些实施方案中，R7为-S(＝O)2N(CH3)Ra7(例如，-S(＝O)2NMe2、-S(＝O)2N(CH3)Et、-S(＝O)2N(CH3)Pr、-S(＝O)2N(CH3)iPr、-S(＝O)2N(CH3)环丙基、-S(＝O)2N(CH3)环丁基)。
如本文通常所定义，每个R8独立地选自H、-D、＝O、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C9环烷基、3-10元杂环基、杂环基烷基、杂芳基烷基、芳基烷基、环烷基烷基、-ORa8、-N(Ra8)2、-C(＝O)Ra8、-C(＝O)ORa8、-NRa8C(＝O)Ra8、-NRa8C(＝O)ORa8、-CH2C(＝O)N(Ra8)2、-C(＝O)N(Ra8)2、-OC(＝O)N(Ra8)2、-CH2C(＝O)N(Ra8)2、-S(＝O)Ra8、-S(＝O)2Ra8、-SRa8、-S(＝O)(＝NRa8)Ra8、-NRa8S(＝O)2Ra8和-S(＝O)2N(Ra8)2，其中R8的两个实例连同它们所附接至的原子可一起形成3-10元碳环基(例如，环烷基)或杂环基环(例如，连同结构I的哌啶环可以形成桥接、稠合或螺双环杂环的环)，其中Ra8如本文所定义。
在式(I)的一些实施方案中，两个R8基团连同它们所附接至的原子一起形成3-10元螺环烷基(例如，环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基)或螺杂环基环(例如，氧杂环丁烷基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、氮杂环庚烷基、四氢硫代吡喃基、硫代吗啉基)。
在式(I)的一些实施方案中，两个R8基团连同它们所附接至的相邻原子一起形成3-10元稠合环烷基(例如，环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基)或稠合杂环基环(例如，氧杂环丁烷基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、氮杂环庚烷基、四氢硫代吡喃基、硫代吗啉基)。
在一些实施方案中，两个R8基团连同它们所附接至的原子一起形成含有桥接哌啶的碳环基或杂环基环(例如，2-氮杂双环[2.2.1]庚烷、2-氮杂双环[2.2.2]辛烷、3-氮杂双环[3.2.1]辛烷)。
在某些实施方案中，表示为式(I)中的的部分选自：
其中R6、R7、R8和n如本文所定义。
在其他实施方案中，表示为式(I)中的的部分选自：
其中R6、R7、R8和n如本文所定义。
在上文所述的双环和多环部分的某些实施方案中，n为2(即，所述环不携带任何R8取代基)。在上文所述的双环和多环部分的一些实施方案中，每个R6和R7独立地选自H和-CH3。在一些实施方案中，R6为H。在一些实施方案中，R6为-CH3。在某些实施方案中，R7为H。在其他实施方案中，R7为-CH3。在某些实施方案中，R6和R7均为H。
在其他实施方案中，R8基团不一起形成环烷基或杂环基环(即，每个R8独立地选自H、-D、＝O、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C9环烷基、3-10元杂环基、杂环基烷基、杂芳基烷基、芳基烷基、环烷基烷基、-ORa8、-N(Ra8)2、-C(＝O)Ra8、-C(＝O)ORa8、-NRa8C(＝O)Ra8、-NRa8C(＝O)ORa8、-CH2C(＝O)N(Ra8)2、-C(＝O)N(Ra8)2、-OC(＝O)N(Ra8)2、-CH2C(＝O)N(Ra8)2、-S(＝O)Ra8、-S(＝O)2Ra8、-SRa8、-S(＝O)(＝NRa8)Ra8、-NRa8S(＝O)2Ra8和-S(＝O)2N(Ra8)2)，其中Ra8如本文所定义。
在一些实施方案中，每个R8独立地选自H、-D、卤基(例如，-F、-Cl)、-CN、-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-sec-Bu、-tBu)、芳基烷基(例如，苯甲基)、-C(＝O)Ra8(例如，-C(＝O)Me、-C(＝O)Et、-C(＝O)Pr、-C(＝O)iPr)、-N(Ra8)2(例如，-NHMe、NH2、NMe2)、-NRa8C(＝O)Ra8(例如，-NHC(＝O)Me)、-CH2C(＝O)N(Ra8)2(例如，-CH2C(＝O)NH2)和-ORa8(例如，-OH、-OMe、-OiPr、-OCF3)，其中每个Ra8如本文所定义。在其他实施方案中，每个Ra8独立地选自H、-CF3和-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-nBu、-tBu、-sec-Bu、-iso-Bu)。
在一些实施方案中，每个R8独立地选自H、-D、-F、-Me、-Et、-CN、苯甲基、-OMe、-OiPr、-OCF3、-NHC(＝O)Me、-NMe2、-CH2C(＝O)NH2、-C(＝O)iPr和-OH。在一些实施方案中，R8选自H、-D、-F、-Me、-Et和-CN。在一些实施方案中，R8选自H、-D、-F和-Me。
在一些实施方案中，R8为H。
在一些实施方案中，R8为-D。
在某些实施方案中，R8为＝O。
在某些实施方案中，R8为卤基(例如，氟、氯、溴、碘)。在其他实施方案中，R8为-Cl。在一些实施方案中，R8为-F。在一些实施方案中，R8为-Br。在一些实施方案中，R8为-I。
在一些实施方案中，R8为-CN。
在某些实施方案中，R8为-C1-C6烷基。在其他实施方案中，R8为-Me。在一些实施方案中，R8为-Et。在一些实施方案中，R8为-Pr或-iPr。
在一些实施方案中，R8为-C1-C6杂烷基。在其他实施方案中，R8为甲氧基甲基(-CH2OCH3)。在一些实施方案中，R8为羟甲基(-CH2OH)。在一些实施方案中，R8为氨基甲基(例如，-CH2NH2、-CH2NHCH3、-CH2N(CH3)2。
在一些实施方案中，R8为-C1-C6卤烷基。在其他实施方案中，R8为三氟甲基(-CF3)。
在一些实施方案中，R8为-C3-C9碳环基(例如，环丙基、环丁基、环戊基、环己基)。在一些实施方案中，R8为环丙基。在一些实施方案中，R8为环丁基。在一些实施方案中，R8为环戊基。在一些实施方案中，R8为环己基。
在一些实施方案中，R8为3-10元杂环基(例如，氧杂环丁烷基、四氢吡喃基、四氢呋喃基、氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、氮杂环庚烷基)。在一些实施方案中，R8为氧杂环丁烷基。在一些实施方案中，R8为四氢吡喃基。在一些实施方案中，R8为四氢呋喃基。在一些实施方案中，R8为氮杂环丁烷基。在一些实施方案中，R8为吡咯烷基。在一些实施方案中，R8为哌啶基。在一些实施方案中，R8为哌嗪基。在一些实施方案中，R8为吗啉基。在一些实施方案中，R8为氮杂环庚烷基。
在一些实施方案中，R8为环烷基烷基(例如，环丙基甲基、环丁基甲基、环戊基甲基、环己基甲基、环庚基甲基)。在一些实施方案中，R8为杂环基烷基(例如，氧杂环丁烷基甲基、氮丙啶基甲基、四氢呋喃基甲基、吡咯烷基甲基、四氢吡喃基甲基、哌啶基甲基、哌嗪基甲基、吗啉基甲基、氮杂环庚烷基甲基)。在一些实施方案中，R8为芳基烷基(例如苯甲基)。在一些实施方案中，R8为杂芳基烷基(例如，吡啶基甲基、噻唑基甲基、三唑基甲基、吡唑基甲基)。
在一些实施方案中，R8为-CH2C(＝O)N(Ra8)2(例如，-CH2C(＝O)N(Ra8)2)。
在一些实施方案中，R8为-ORa8(例如，-OH、甲氧基、异丙氧基、二氟甲氧基(-OCHF2)、三氟甲氧基(-OCF3)、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、环丙基氧基、环丁基氧基)。在一些实施方案中，R8为-OH。在一些实施方案中，R8为甲氧基。在一些实施方案中，R8为乙氧基。在一些实施方案中，R8为丙氧基。在一些实施方案中，R8为异丙氧基。在一些实施方案中，R8为二氟甲氧基(-OCHF2)。在一些实施方案中，R8为三氟甲氧基(-OCF3)。
在一些实施方案中，R8为-N(Ra8)2(例如，-NH2、-NHRa8、-N(CH3)Ra8)。在一些实施方案中，R8为-NH2。在一些实施方案中，R8为-NHRa8(例如，-NHMe、-NHEt、-NHPr、-NHiPr、-NH环丙基、-NH环丁基)。在一些实施方案中，R8为-N(CH3)Ra8(例如，-NMe2、-N(CH3)Et、-N(CH3)Pr、-N(CH3)iPr、-N(CH3)环丙基、-N(CH3)环丁基)。
在一些实施方案中，R8为-C(＝O)Ra8，其中Ra8如本文所述。在一些实施方案中，R8为-C(＝O)Ra8，其中Ra8为C1-C6烷基、C3-C9碳环基或3-10元杂环基(例如-C(＝O)Me、-C(＝O)Et、-C(O)tBu、-C(O)iPr、-C(O)Pr、-C(O)iBu、-C(＝O)环丙基、-C(＝O)环丁基、-C(＝O)氧杂环丁烷基、-C(＝O)四氢吡喃基)。在一些实施方案中，R8为-C(＝O)Me、-C(＝O)Et、-C(O)tBu、-C(O)iPr、-C(O)Pr或-C(O)iBu。在一些实施方案中，R8为-C(＝O)iPr。
在一些实施方案中，R8为-NRa8C(＝O)Ra8。在某些实施方案中，R8为-NHC(＝O)Ra8(例如，NHC(＝O)Me、NHC(＝O)Et、NHC(＝O)Pr、NHC(＝O)iPr、NHC(＝O)Bu、NHC(＝O)tBu、NHC(＝O)环丙基、NHC(＝O)环丁基)。在某些实施方案中，R8为NHC(＝O)Me。在一些实施方案中，R8为-N(CH3)C(＝O)Ra8(例如，N(CH3)C(＝O)Me、N(CH3)C(＝O)Et、N(CH3)C(＝O)Pr、N(CH3)C(＝O)iPr、N(CH3)C(＝O)Bu、N(CH3)C(＝O)tBu、N(CH3)C(＝O)环丙基、N(CH3)C(＝O)环丁基)。
在一些实施方案中，R8为-NRa8C(＝O)ORa8。在某些实施方案中，R8为-NHC(＝O)ORa8(例如，NHC(＝O)OMe、NHC(＝O)OEt、NHC(＝O)OPr、NHC(＝O)OiPr、NHC(＝O)OBu、NHC(＝O)OtBu、NHC(＝O)O环丙基、NHC(＝O)O环丁基)。在一些实施方案中，R8为-N(CH3)C(＝O)ORa8(例如，N(CH3)C(＝O)OMe、N(CH3)C(＝O)OEt、N(CH3)C(＝O)OPr、N(CH3)C(＝O)OiPr、N(CH3)C(＝O)OBu、N(CH3)C(＝O)OtBu、N(CH3)C(＝O)O环丙基、N(CH3)C(＝O)O环丁基)。
在一些实施方案中，R8为-C(＝O)N(Ra8)2(例如，-C(＝O)NH2、-C(＝O)NHRa8、-C(＝O)N(CH3)Ra8)。在一些实施方案中，R8为-C(＝O)NH2。在某些实施方案中，R8为-C(＝O)NHRa8(例如，-C(＝O)NHMe、-C(＝O)NHEt、-C(＝O)NHPr、-C(＝O)NHiPr、-C(＝O)NHBu、-C(＝O)NHtBu、-C(＝O)NH环丙基、-C(＝O)NH环丁基)。在某些实施方案中，R8为-C(＝O)N(CH3)Ra8(例如，-C(＝O)NMe2、-C(＝O)N(CH3)Et、-C(＝O)N(CH3)Pr、-C(＝O)N(CH3)iPr、-C(＝O)N(CH3)Bu、-C(＝O)N(CH3)tBu、-C(＝O)N(CH3)环丙基、-C(＝O)N(CH3)环丁基)。
在一些实施方案中，R8为-OC(＝O)N(Ra8)2。在某些实施方案中，R8为-OC(＝O)NHRa8(例如，-OC(＝O)NHMe、-OC(＝O)NHEt、-OC(＝O)NHPr、-OC(＝O)NHiPr、-OC(＝O)NHBu、-OC(＝O)NHtBu、-OC(＝O)NH环丙基、-OC(＝O)NH环丁基)。在某些实施方案中，R8为-OC(＝O)N(CH3)Ra8(例如，-OC(＝O)NMe2、-OC(＝O)N(CH3)Et、-OC(＝O)N(CH3)Pr、-OC(＝O)N(CH3)iPr、-OC(＝O)N(CH3)Bu、-OC(＝O)N(CH3)tBu、-OC(＝O)N(CH3)环丙基、-OC(＝O)N(CH3)环丁基)。
在一些实施方案中，R8为-S(＝O)Ra8。在某些实施方案中，R8为-S(＝O)烷基(例如，-S(＝O)Me、-S(＝O)Et、-S(＝O)Pr、-S(＝O)iPr)。在某些实施方案中，R8为-S(＝O)环烷基(例如，-S(＝O)环丙基、-S(＝O)环丁基、-S(＝O)环戊基、-S(＝O)环己基)。
在一些实施方案中，R8为-S(＝O)2Ra8。在某些实施方案中，R8为-S(＝O)2烷基(例如，-S(＝O)2Me、-S(＝O)2Et、-S(＝O)2Pr、-S(＝O)2 iPr)。在某些实施方案中，R8为-S(＝O)2环烷基(例如，-S(＝O)2环丙基、-S(＝O)2环丁基、-S(＝O)2环戊基、-S(＝O)2环己基)。在一些实施方案中，R8为S(＝O)2芳基(例如，S(＝O)2苯基)。
在一些实施方案中，R8为-SRa8。在某些实施方案中，R8为-S烷基(例如，-SMe、-SEt、-SPr、-SiPr)。在某些实施方案中，R8为-S环烷基(例如，-S环丙基、-S环丁基、-S环戊基、-S环己基)。在某些实施方案中，R8为-S芳基(例如，S苯基)。
在一些实施方案中，R8为-S(＝O)(＝NRa8)Ra8。在某些实施方案中，R8为-S(＝O)(＝NH)Ra8(例如，-S(＝O)(＝NH)Me、-S(＝O)(＝NH)Et、-S(＝O)(＝NH)Pr、-S(＝O)(＝NH)iPr、-S(＝O)(＝NH)Bu、-S(＝O)(＝NH)tBu、-S(＝O)(＝NH)环丙基、-S(＝O)(＝NH)环丁基)。在一些实施方案中，R8为-S(＝O)(＝NCH3)Ra8(例如，-S(＝O)(＝NCH3)Me、-S(＝O)(＝NCH3)Et、-S(＝O)(＝NCH3)Pr、-S(＝O)(＝NCH3)iPr、-S(＝O)(＝NCH3)Bu、-S(＝O)(＝NCH3)tBu、-S(＝O)(＝NCH3)环丙基、-S(＝O)(＝NCH3)环丁基)。
在一些实施方案中，R8为-NRa8S(＝O)2Ra8。在某些实施方案中，R8为-NHS(＝O)2烷基(例如，-NHS(＝O)2Me、-NHS(＝O)2Et、-NHS(＝O)2Pr、-NHS(＝O)2 iPr)。在某些实施方案中，R8为-NHS(＝O)2环烷基(例如，-NHS(＝O)2环丙基、-NHS(＝O)2环丁基、-NHS(＝O)2环戊基、-NHS(＝O)2环己基)。在某些实施方案中，R8为-N(CH3)S(＝O)2烷基(例如，-N(CH3)S(＝O)2Me、-N(CH3)S(＝O)2Et、-N(CH3)S(＝O)2Pr、-N(CH3)S(＝O)2 iPr)。在某些实施方案中，R8为-N(CH3)S(＝O)2环烷基(例如，-N(CH3)S(＝O)2环丙基、-N(CH3)S(＝O)2环丁基、-N(CH3)S(＝O)2环戊基、-N(CH3)S(＝O)2环己基)。
在一些实施方案中，R8为-S(＝O)2N(Ra8)2(例如，-S(＝O)2NH2、-S(＝O)2NHRa8、-S(＝O)2N(CH3)Ra8)。在一些实施方案中，R8为-S(＝O)2NH2。在一些实施方案中，R8为-S(＝O)2NHRa8(例如，-S(＝O)2NHMe、-S(＝O)2NHEt、-S(＝O)2NHPr、-S(＝O)2NHiPr、-S(＝O)2NH环丙基、-S(＝O)2NH环丁基)。在一些实施方案中，R8为-S(＝O)2N(CH3)Ra8(例如，-S(＝O)2NMe2、-S(＝O)2N(CH3)Et、-S(＝O)2N(CH3)Pr、-S(＝O)2N(CH3)iPr、-S(＝O)2N(CH3)环丙基、-S(＝O)2N(CH3)环丁基)。
如本文通常所述，每个R10独立地选自-D、＝O、-CN、卤基、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C9环烷基、3-10元杂环基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基烷氧基、-ORb10、-N(Rb10)2、-C(＝O)Rb10、-C(＝O)ORb10、-NRb10C(＝O)Rb10、-NRb10C(＝O)ORb10、-C(＝O)N(Rb10)2、-OC(＝O)Rb10、-OC(＝O)N(Rb10)2、-S(＝O)Rb10、-S(＝O)2Rb10、-SRb10、-S(＝O)(＝NRb10)Rb10、-NRb10S(＝O)2Rb10和-S(＝O)2N(Rb10)2，其中R10的每个烷基、环烷基、杂烷基、杂环基、芳基、杂芳基、环烷基烷基、杂环基烷基、杂环基烷氧基、芳基烷基和杂芳基烷基任选地被取代(例如，被-Me、-Et、-iPr、环丙基、氧杂环丁烷-3-基、-OH、＝O、-F、-OMe、-CH2CH2F、-CH2CHF2、-CH2CH2CF3、-C(＝O)Me、-N(Me)2、-CH2N(CH3)2、-CH2N(CH3)CH2CH3、-N(iPr)(Et)、-N(iPr)(Me)、-N(Et)2、-N(CH3)(Et)、-NHC(＝O)Me或其组合的0、1、2、3、4或5个实例取代)。
在一些实施方案中，R10的每个烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基烷基和杂芳基烷基未被取代。在一些实施方案中，R10的每个烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基烷基和杂芳基烷基独立地被-Me、-Et、-iPr、环丙基、氧杂环丁烷-3-基、-OH、＝O、-F、-OMe、-CH2CH2F、-CH2CHF2、-CH2CH2CF3、-C(＝O)Me、-N(Me)2、-CH2N(CH3)2、-CH2N(CH3)CH2CH3、-N(iPr)(Et)、-N(iPr)(Me)、-N(Et)2、-N(CH3)(Et)、-NHC(＝O)Me或其组合的1个实例取代。在一些实施方案中，R10的每个烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基烷基和杂芳基烷基独立地被-Me、-Et、-iPr、环丙基、氧杂环丁烷-3-基、-OH、＝O、-F、-OMe、-CH2CH2F、-CH2CHF2、-CH2CH2CF3、-C(＝O)Me、-N(Me)2、-CH2N(CH3)2、-CH2N(CH3)CH2CH3、-N(iPr)(Et)、-N(iPr)(Me)、-N(Et)2、-N(CH3)(Et)、-NHC(＝O)Me或其组合的2个实例取代。在一些实施方案中，R10的每个烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基烷基和杂芳基烷基独立地被-Me、-Et、-iPr、环丙基、氧杂环丁烷-3-基、-OH、＝O、-F、-OMe、-CH2CH2F、-CH2CHF2、-CH2CH2CF3、-C(＝O)Me、-N(Me)2、-CH2N(CH3)2、-CH2N(CH3)CH2CH3、-N(iPr)(Et)、-N(iPr)(Me)、-N(Et)2、-N(CH3)(Et)、-NHC(＝O)Me或其组合的3个实例取代。在一些实施方案中，R10的每个烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基烷基和杂芳基烷基独立地被-Me、-Et、-iPr、环丙基、氧杂环丁烷-3-基、-OH、＝O、-F、-OMe、-CH2CH2F、-CH2CHF2、-CH2CH2CF3、-C(＝O)Me、-N(Me)2、-CH2N(CH3)2、-CH2N(CH3)CH2CH3、-N(iPr)(Et)、-N(iPr)(Me)、-N(Et)2、-N(CH3)(Et)、-NHC(＝O)Me或其组合的4个实例取代。
在一些实施方案中，R10的每个烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基烷基和杂芳基烷基独立地被-Me、-Et、-iPr、环丙基、氧杂环丁烷-3-基、-OH、＝O、-F、-OMe、-CH2CH2F、-CH2CHF2、-CH2CH2CF3、-C(＝O)Me、-N(Me)2、-CH2N(CH3)2、-CH2N(CH3)CH2CH3、-N(iPr)(Et)、-N(iPr)(Me)、-N(Et)2、-N(CH3)(Et)、-NHC(＝O)Me或其组合的5个实例取代。
在一些实施方案中，每个R10独立地选自-D、＝O、卤基(例如，F、Cl、Br)、-CN、-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-sec-Bu、-tBu、CH2(CH3)(iPr))、-C1-C6杂烷基(例如，-CH(CH3)(NMe2)、-CH2CH2N(Me)(氧杂环丁烷-3-基))、-CH2CH(CH3)(NMe2)、-CH2OH、-CH(OH)(CH3)、-C(OH)(CH3)2、-CH2NH2)、-C1-C6卤烷基(例如，-CHF2、-CH2CF3、-CF3)、-C3-C9环烷基(例如，环丙基、环丁基、环戊基、环己基)、3-10元杂环基(例如，四氢呋喃基、四氢吡喃基、氧杂环丁烷基、吗啉基、吡咯烷基、哌啶基、哌啶-2-酮基、哌嗪基、哌嗪-2-酮基、氮杂环丁烷基、十氢-1,6-萘啶基、2-氮杂螺[3.3]庚基、5-氧杂-2,8-二氮杂螺[3.5]壬基、8-氮杂双环[3.2.1]辛基、2-氮杂双环[2.2.2]辛基、3-氮杂双环[3.2.0]庚基、3-氮杂双环[3.1.1]庚基、3-氮杂双环[3.1.0]己基、2-氮杂双环[2.1.1]己基、1-氮杂双环[2.2.1]庚基、3-氮杂双环[3.2.0]庚基、2,9-二氮杂螺[5.5]十一烷基、双环[1.1.1]戊基、八氢环戊[c]吡咯基、十氢-1,6-萘啶基、八氢-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶基、十氢-2,7-萘啶基、2,9-二氮杂螺[5.5]十一烷基)、5-10元杂芳基(例如，吡啶基、咪唑并[1,2-a]吡啶基、咪唑基、吡唑基、噻唑基、噻吩基)、环烷基烷基(例如-CH2-环丙基)、杂环基烷基(例如，-CH2-吗啉基、-(CH2)2-吡咯烷基-(CH2)2-吡咯烷基-CH2-咪唑基、-CH2-吡唑基、-CH2-1,2,4-三唑基、-CH2-吗啉基、-(CH2)2-吗啉基)、杂环基烷氧基(例如，-O-(CH2)2-吡咯烷基、-O-CH2-哌啶基、-O-CH2-氧杂环丁烷基、-O-CH2-四氢呋喃基、-O-CH2-四氢吡喃基)、杂芳基烷基(例如，-CH2-三唑基、-CH2-咪唑基、-CH2-吡唑基)、-ORb10(例如，-OH、-OMe、OEt、-O-四氢呋喃基、-O-四氢吡喃-4-基、-OCF3、-OCHF2)、-N(Rb10)2、(例如，-NH2、-NHRb10、-NHMe、-NMe2、-NHCH2CF3、-NH-氧杂环丁烷-3-基、-NH-(N-Me-2-氧代-吡咯烷-3-基)、-NRb10C(＝O)Rb10(例如，-NHC(＝O)Me)、-C(＝O)N(Rb10)2(例如，-C(＝O)NH2、C(＝O)NHMe)、-OC(＝O)Rb10(例如，-OC(＝O)Me)、-S(＝O)Rb10(例如，-SO2Me)、-NRb10S(＝O)2Rb10(例如，NHSO2Me)和-S(＝O)2N(Rb10)2(例如，SO2NH2、SO2NHMe)，其中每个烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基烷基和杂芳基烷基任选地被取代(例如，被-Me、-Et、-iPr、环丙基、氧杂环丁烷-3-基、-OH、＝O、-F、-OMe、-CH2CH2F、-CH2CHF2、-CH2CH2CF3、-C(＝O)Me、-N(Me)2、-CH2N(CH3)2、-CH2N(CH3)CH2CH3、-N(iPr)(Et)、-N(iPr)(Me)、-N(Et)2、-N(CH3)(Et)、-NHC(＝O)Me或其组合的0、1、2、3、4或5个实例取代)，且其中：
每个Rb10独立地选自H、-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-sec-Bu、-tBu)、-C1-C6卤烷基(例如，-CF3、-CHF2、-CH2CF3)、被＝O的0或1个实例取代的-C1-C6杂烷基(例如，-CH2CH2NMe2、-CH2C(＝O)NMe2、-CH(CH3)CH2NMe2、-CH(CH3)C(＝O)NMe2)、C3-C9环烷基和被＝O、-Me或其组合的0或1个实例取代的3-10元杂环基(例如四氢呋喃-3-基、四氢吡喃-4-基、氧杂环丁烷-3-基、N-Me-2-氧代-吡咯烷-3-基、哌啶-4-基)。
如本文通常所定义，每个Rb10独立地为H；-C1-C6烷基；-C1-C6卤烷基；被＝O的0或1个实例取代的-C1-C6杂烷基(例如，未被取代或被＝O的一个实例取代)；C3-C9环烷基；或被＝O、-Me或其组合的0或1个实例取代的3-10元杂环基(例如，未被取代、被＝O的一个实例取代、被-Me的一个实例取代或被＝O的一个实例和-Me的一个实例取代)。在R10的某些实施方案中，每个Rb10独立地选自H、-Me、-Et、-Pr、-iPr、-sec-Bu、-tBu、-CF3、-CHF2、-CH2CF3、-CH2CH2NMe2、-CH2C(＝O)NMe2、-CH(CH3)CH2NMe2、-CH(CH3)C(＝O)NMe2)、四氢呋喃-3-基、四氢吡喃-4-基、氧杂环丁烷-4-基和N-Me-2-氧代-吡咯烷-3-基。
在一些实施方案中，R10独立地选自-D、＝O、-OH、-F、-Cl、-Br、-CN、-Me、-Et、-Pr、-iPr、-sec-Bu、-tBu、-OMe、-OEt、-CHF2、-CH2CF3、-CF3、-OCF3、-OCHF2、-CH2OH、-CH(OH)(CH3)、-CH2OMe、-C(OH)(CH3)2、-CH2NH2、-CH(CH3)(NMe2)、-CH2CH(CH3)(NMe2)、-CH2(CH3)(iPr)、-NH2、-NHMe、-NHCH2CF3、-NMe2、环丙基、环丁基、环戊基、环己基、噻唑-2-基、噻唑-5-基、噻吩-2-基、四氢呋喃-3-基、四氢吡喃-4-基、氧杂环丁烷-3-基、吗啉-2-基、-CH2-吗啉-4-基、-(CH2)2-吗啉-4-基、咪唑-2-基、1H-吡唑-5-基、1H-咪唑-4-基、咪唑并[1,2-a]吡啶-7-基、吡咯烷-1-基、吡咯烷-3-基、哌啶-4-基、哌啶-3-基、哌啶-2-酮-4-基、哌嗪-4-基、哌嗪-4-基、哌嗪-2-酮-5-基、吡啶-4-基、吡啶-3-基、吡唑-1-基、吡唑-3-基、吡唑-4-基、吡唑-5-基、1H-吡唑-5-基、氮杂环丁烷-3-基、-(CH2)2-吡咯烷-1-基、-(CH2)2-吡咯烷-2-基、-CH2-咪唑-1-基、-CH2-吡唑-1-基、-CH2-1,2,4-三唑-1-基、-CH2-环丙基、-O(CH2)2NMe2、-O-四氢呋喃-3-基、-O-四氢吡喃-4-基、-O-(N-Me-2-氧代-吡咯烷-3-基)、-O-(CH2)2-吡咯烷-2-基、-O-CH2-哌啶-4-基、-O-CH2-氧杂环丁烷-3-基、-NCH3-哌啶-4-基、-NH-氧杂环丁烷-3-基、-NH-(N-Me-2-氧代-吡咯烷-3-基)、十氢-1,6-萘啶-6-基、2-氮杂螺[3.3]庚-6-基、5-氧杂-2,8-二氮杂螺[3.5]壬-8-基、8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、2-氮杂双环[2.2.2]辛-4-基、3-氮杂双环[3.2.0]庚-6-基、3-氮杂双环[3.1.1]庚-1-基、3-氮杂双环[3.1.0]己-6-基、1-氮杂双环[2.2.1]庚-4-基、3-氮杂双环[3.2.0]庚-6-基、2-氮杂双环[2.1.1]己-4-基、2,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基、双环[1.1.1]戊烷-2-基、八氢环戊[c]吡咯-5-基、十氢-1,6-萘啶-6-基、八氢-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-5-基、十氢-2,7-萘啶-2-基、2,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-2-基、-NHC(＝O)Me、-NHCH2C(＝O)NMe2、-NHCH(CH3)C(＝O)NMe2、-C(＝O)NH2、C(＝O)NHMe、-OC(＝O)Me、-SO2Me、-NHSO2Me、-SO2NH2和-SO2NHMe，其中每个-OMe、-OEt、-Me、-Et、-Pr、-iPr、环丙基、环丁基、环戊基、环己基、四氢呋喃-3-基、氧杂环丁烷-3-基、吡咯烷-1-基、吡咯烷-3-基、哌啶-4-基、哌啶-3-基、哌啶-2-酮-4-基、哌嗪-4-基、吡唑-1-基、吡唑-3-基、吡唑-4-基、吡唑-5-基、噻唑-2-基、噻吩-2-基、-CH2-环丙基、-CH2-吗啉-4-基、-(CH2)2-吗啉-4-基、-吗啉-2-基、-(CH2)2-吡咯烷-1-基、-CH2-1,2,4-三唑-1-基、-CH2-咪唑-1-基、咪唑-2-基、-CH2-吡唑-1-基、-OCH2-哌啶-4-基、氮杂环丁烷-3-基、2-氮杂螺[3.3]庚-6-基、2-甲基-5-氧杂-2,8-二氮杂螺[3.5]壬-8-基、8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基和十氢-1,6-萘啶-6-基，其中每个R10可独立地被-Me、-Et、-iPr、环丙基、氧杂环丁烷-3-基、-OH、＝O、-F、-OMe、-CH2CH2F、-CH2CHF2、-CH2CH2CF3、-C(＝O)Me、-N(Me)2、-CH2N(CH3)2、-CH2N(CH3)CH2CH3、-N(iPr)(Et)、-N(iPr)(Me)、-N(Et)2、-N(CH3)(Et)、-NHC(＝O)Me或其组合的0、1、2、3、4或5个实例取代。
在一些实施方案中，R10为H。在一些实施方案中，R10为-D。
在某些实施方案中，R10为卤基(例如，氟、氯、溴、碘)。在其他实施方案中，R10为-Cl。在一些实施方案中，R10为-F。在一些实施方案中，R10为-Br。在一些实施方案中，R10为-I。
在一些实施方案中，R10为-CN。
在某些实施方案中，R10为-C1-C6烷基。在其他实施方案中，R10为-Me。在一些实施方案中，R10为-Et。在一些实施方案中，R10为-Pr或-iPr。在一些实施方案中，R10为-tBu或-sec-Bu。在一些实施方案中，R10为-CH2(CH3)(iPr)。
在一些实施方案中，R10为-C1-C6杂烷基。在其他实施方案中，R10为甲氧基甲基(-CH2OCH3)。在一些实施方案中，R10为羟基甲基(-CH2OH)。在一些实施方案中，R10为-CH(OH)CH3、C(OH)(CH3)2。在一些实施方案中，R10为氨基甲基(例如，-CH2NH2、-CH2NHCH3、-CH2NHCH2CH3、-CH2N(CH3)2、-CH(CH3)(NMe2)、-CH2CH2N(Me)(氧杂环丁烷-3-基)、-CH2CH(CH3)(NMe2)。在一些实施方案中，杂烷基进一步被＝O取代(例如，-CH2NHC(＝O)CH3)。在一些实施方案中，R10为-C1-C6卤烷基。在其他实施方案中，R10为三氟甲基(-CF3)。在其他实施方案中，R10为二氟甲基(-CHF2)。在一些实施方案中，R10为三氟乙基(-CH2CF3)
在一些实施方案中，R10为-C3-C9碳环基(例如，环丙基、环丁基、环戊基、环己基)。在一些实施方案中，R10为环丙基。在一些实施方案中，R10为环丁基。在一些实施方案中，R10为环戊基。在一些实施方案中，R10为环己基。在一些实施方案中，碳环基被-OH取代(例如，羟基环丁基)。
在一些实施方案中，R10为3-10元杂环基(例如，氧杂环丁烷基、四氢吡喃基、四氢呋喃基、氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、氮杂环庚烷基、哌啶-2-酮基、哌嗪-2-酮基、十氢-1,6-萘啶基、2-氮杂螺[3.3]庚基、5-氧杂-2,8-二氮杂螺[3.5]壬基、8-氮杂双环[3.2.1]辛基、2-氮杂双环[2.2.2]辛基、3-氮杂双环[3.2.0]庚基、3-氮杂双环[3.1.1]庚基、3-氮杂双环[3.1.0]己基、2-氮杂双环[2.1.1]己基、1-氮杂双环[2.2.1]庚基、3-氮杂双环[3.2.0]庚基、2,9-二氮杂螺[5.5]十一烷基、双环[1.1.1]戊基、八氢环戊[c]吡咯基、十氢-1,6-萘啶基、八氢-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶基、十氢-2,7-萘啶基、2,9-二氮杂螺[5.5]十一烷基)。
在一些实施方案中，R10为氧杂环丁烷基。在一些实施方案中，R10为四氢吡喃基。在一些实施方案中，R10为四氢呋喃基。在一些实施方案中，R10为氮杂环丁烷基。在一些实施方案中，R10为吡咯烷基。在一些实施方案中，R10为哌啶基。在一些实施方案中，R10为哌嗪基。在一些实施方案中，R10为吗啉基。在一些实施方案中，R10为氮杂环庚烷基。在一些实施方案中，R10为哌啶酮基。
在一些实施方案中，R10为哌啶-2-酮基。在一些实施方案中，R10为哌嗪-2-酮基。在一些实施方案中，R10为十氢-1,6-萘啶基。在一些实施方案中，R10为2-氮杂螺[3.3]庚基。在一些实施方案中，R10为5-氧杂-2,8-二氮杂螺[3.5]壬基。在一些实施方案中，R10为8-氮杂双环[3.2.1]辛基。在一些实施方案中，R10为2-氮杂双环[2.2.2]辛基。在一些实施方案中，R10为3-氮杂双环[3.2.0]庚基。在一些实施方案中，R10为3-氮杂双环[3.1.1]庚基。在一些实施方案中，R10为3-氮杂双环[3.1.0]己基。在一些实施方案中，R10为2-氮杂双环[2.1.1]己基。在一些实施方案中，R10为1-氮杂双环[2.2.1]庚基。在一些实施方案中，R10为3-氮杂双环[3.2.0]庚基。在一些实施方案中，R10为2,9-二氮杂螺[5.5]十一烷基。在一些实施方案中，R10为双环[1.1.1]戊基。在一些实施方案中，R10为八氢环戊[c]吡咯基。在一些实施方案中，R10为十氢-1,6-萘啶基。在一些实施方案中，R10为八氢-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶基。在一些实施方案中，R10为十氢-2,7-萘啶基。在一些实施方案中，R10为2,9-二氮杂螺[5.5]十一烷基)。在一些实施方案中，杂环基被-D、＝O、-Me、-C(＝O)Me或-C(＝O)NHCH3的0、1、2或3个实例取代。
在一些实施方案中，R10为5-10元杂芳基(例如，含有1-3个独立地选自N、O和S的杂原子的5-6元单环杂芳基或8-10元双环杂芳基)。
在一些实施方案中，R10为5-6元单环杂芳基(例如，含有1-3个独立地选自O、N和S的杂原子的5元单环杂芳基；含有1-3个N杂原子的6元单环杂芳基)。
在一些实施方案中，R10为5元单环杂芳基(例如，吡唑基、吡咯基、噻吩基、呋喃基、噻唑基、异噻唑基、噁唑基、异噁唑基、咪唑基、三唑基、噻二唑基、噁二唑基)。
在一些实施方案中，R10为噻吩基(例如，噻吩-2-基、噻吩-3-基)。在一些实施方案中，R10为吡唑基(例如吡唑-1-基、吡唑-3-基、吡唑-5-基)。在一些实施方案中，R10为噻唑基(例如，噻唑-2-基、噻唑-4-基、噻唑-5-基)。
在一些实施方案中，R10为6元单环杂芳基(例如，吡啶基、嘧啶基、三嗪基、吡嗪基、哒嗪基)。
在一些实施方案中，R10为吡啶基(例如，吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基)。在一些实施方案中，R10为嘧啶基(例如，嘧啶-2-基、嘧啶-4-基、嘧啶-5-基)。在一些实施方案中，杂芳基被-Me的0、1或2个实例取代。
在一些实施方案中，R10为单环杂环基。在一些实施方案中，R10为单环杂芳基。在一些实施方案中，R10为四氢呋喃-3-基。在一些实施方案中，R10为四氢吡喃-4-基。在一些实施方案中，R10为氧杂环丁烷-3-基。在一些实施方案中，R10为吗啉-2-基。在一些实施方案中，R10为-咪唑-2-基。在一些实施方案中，R10为1H-吡唑-5-基。在一些实施方案中，R10为1H-咪唑-4-基。在一些实施方案中，R10为咪唑并[1,2-a]吡啶-7-基。在一些实施方案中，R10为吡咯烷-1-基。在一些实施方案中，R10为吡咯烷-3-基。在一些实施方案中，R10为哌啶-4-基。在一些实施方案中，R10为哌啶-3-基。在一些实施方案中，R10为哌啶-2-酮-4-基。在一些实施方案中，R10为哌嗪-4-基。在一些实施方案中，R10为哌嗪-4-基。在一些实施方案中，R10为哌嗪-2-酮-5-基。在一些实施方案中，R10为吡啶-4-基。在一些实施方案中，R10为吡啶-3-基。在一些实施方案中，R10为吡唑-1-基。在一些实施方案中，R10为吡唑-3-基。在一些实施方案中，R10为吡唑-4-基。在一些实施方案中，R10为吡唑-5-基。在一些实施方案中，R10为1H-吡唑-5-基。在一些实施方案中，R10为氮杂环丁烷-3-基。
在一些实施方案中，R10为杂环基烷氧基。在一些实施方案中，R10为-O(CH2)2NMe2。在一些实施方案中，R10为-O-四氢呋喃-3-基。在一些实施方案中，R10为-O-四氢吡喃-4-基。在一些实施方案中，R10为-O-(N-Me-2-氧代-吡咯烷-3-基)。在一些实施方案中，R10为-O-(CH2)2-吡咯烷-2-基。在一些实施方案中，R10为-O-CH2-哌啶-4-基。在一些实施方案中，R10为-O-CH2-氧杂环丁烷-3-基。
在一些实施方案中，R10为单环杂环基烷基(例如，氧杂环丁烷基甲基、氮丙啶基甲基、四氢呋喃基甲基、吡咯烷基甲基、四氢吡喃基甲基、哌啶基甲基、哌嗪基甲基、吗啉基甲基、氮杂环庚烷基甲基)。在一些实施方案中，R10为-CH2-吗啉-4-基。在一些实施方案中，R10为-(CH2)2-吗啉-4-基。在一些实施方案中，R10为-(CH2)2-吡咯烷-1-基。在一些实施方案中，R10为-(CH2)2-吡咯烷-2-基。
在一些实施方案中，R10为双环3-10元杂环基。在一些实施方案中，R10为十氢-1,6-萘啶-6-基。在一些实施方案中，R10为2-氮杂螺[3.3]庚-6-基。在一些实施方案中，R10为5-氧杂-2,8-二氮杂螺[3.5]壬-8-基。在一些实施方案中，R10为8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基。在一些实施方案中，R10为2-氮杂双环[2.2.2]辛-4-基。在一些实施方案中，R10为3-氮杂双环[3.2.0]庚-6-基。在一些实施方案中，R10为3-氮杂双环[3.1.1]庚-1-基。在一些实施方案中，R10为3-氮杂双环[3.1.0]己-6-基。在一些实施方案中，R10为1-氮杂双环[2.2.1]庚-4-基。在一些实施方案中，R10为3-氮杂双环[3.2.0]庚-6-基。在一些实施方案中，R10为2-氮杂双环[2.1.1]己-4-基。在一些实施方案中，R10为2,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基。在一些实施方案中，R10为双环[1.1.1]戊烷-2-基。在一些实施方案中，R10为八氢环戊[c]吡咯-5-基。在一些实施方案中，R10为十氢-1,6-萘啶-6-基。在一些实施方案中，R10为八氢-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-5-基。在一些实施方案中，R10为十氢-2,7-萘啶-2-基、2,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-2-基。
在一些实施方案中，R10为环烷基烷基(例如，环丙基甲基、环丁基甲基、环戊基甲基、环己基甲基、环庚基甲基)。在一些实施方案中，R10为环丙基甲基。
在一些实施方案中，R10为芳基烷基。在一些实施方案中，R10为苯甲基。
在一些实施方案中，R10为杂芳基烷基(例如，-CH2-咪唑、-CH2-吡唑、-CH2-吡啶基)。在一些实施方案中，R10为吡啶基甲基(例如，吡啶基-4-甲基)。在一些实施方案中，R10为-CH2-1,2,4-三唑-1-基。在一些实施方案中，R10为-CH2-咪唑-1-基。在一些实施方案中，R10为-CH2-吡唑-1-基。
在一些实施方案中，R10为-ORb10(例如，羟基(-OH)、甲氧基、二氟甲氧基(-OCHF2)、三氟甲氧基(-OCF3)、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、环丙基氧基、环丁基氧基)。在一些实施方案中，R10为羟基。在一些实施方案中，R10为甲氧基。在一些实施方案中，R10为乙氧基。在一些实施方案中，R10为丙氧基。在一些实施方案中，R10为异丙氧基。在一些实施方案中，R10为二氟甲氧基(-OCHF2)。在一些实施方案中，R10为三氟甲氧基(-OCF3)。
在一些实施方案中，R10为-N(Rb10)2(例如，-NH2、-NHRb10、-N(CH3)Rb10)。在一些实施方案中，R10为-NH2。在一些实施方案中，R10为-NHRb10(例如，-NHMe、-NHEt、-NHPr、-NHCH2CF3、-NHiPr、-NH环丙基、-NH环丁基)。在一些实施方案中，R10为NHCH2CF3。在一些实施方案中，R10为-N(CH3)Rb10(例如，-NMe2、-N(CH3)Et、-N(CH3)Pr、-N(CH3)iPr、-N(CH3)环丙基、-N(CH3)环丁基)。
在一些实施方案中，R10为-C(＝O)Rb10或-C(＝O)ORb10。在一些实施方案中，R10为-C(＝O)Rb10，其中Rb10如本文所述。在一些实施方案中，R10为-C(＝O)烷基。在一些实施方案中，R10为-C(O)CH3、-C(O)环丙基、-C(O)环丁基、-C(O)tBu、-C(O)iPr、-C(O)Pr、-C(O)iBu或-C(＝O)OMe。在一些实施方案中，R10为乙酰基(-C(＝O)Me)。在一些实施方案中，R10为-C(＝O)ORb10。在一些实施方案中，R10为-COOH。在一些实施方案中，R10为COOMe。
在一些实施方案中，R10为-NRb10C(＝O)Rb10。在某些实施方案中，R10为-NHC(＝O)Rb10(例如，-NHC(＝O)Me、-NHC(＝O)Et、-NHC(＝O)Pr、-NHC(＝O)iPr、-NHC(＝O)Bu、-NHC(＝O)tBu、-NHC(＝O)环丙基、-NHC(＝O)环丁基)。在一些实施方案中，R10为-NHC(＝O)Me。在一些实施方案中，R10为-N(CH3)C(＝O)Rb10(例如，N(CH3)C(＝O)Me、N(CH3)C(＝O)Et、N(CH3)C(＝O)Pr、N(CH3)C(＝O)iPr、N(CH3)C(＝O)Bu、N(CH3)C(＝O)tBu、N(CH3)C(＝O)环丙基、N(CH3)C(＝O)环丁基)。
在一些实施方案中，R10为-NRb10C(＝O)ORb10。在某些实施方案中，R10为-NHC(＝O)ORb10(例如，NHC(＝O)OMe、NHC(＝O)OEt、NHC(＝O)OPr、NHC(＝O)OiPr、NHC(＝O)OBu、NHC(＝O)OtBu、NHC(＝O)O环丙基、NHC(＝O)O环丁基)。在一些实施方案中，R10为-N(CH3)C(＝O)ORb10(例如，N(CH3)C(＝O)OMe、N(CH3)C(＝O)OEt、N(CH3)C(＝O)OPr、N(CH3)C(＝O)OiPr、N(CH3)C(＝O)OBu、N(CH3)C(＝O)OtBu、N(CH3)C(＝O)O环丙基、N(CH3)C(＝O)O环丁基)。
在一些实施方案中，R10为-C(＝O)N(Rb10)2(例如，-C(＝O)NH2、-C(＝O)NHRb10、-C(＝O)N(CH3)Rb10)。在一些实施方案中，R10为-C(＝O)NH2。在某些实施方案中，R10为-C(＝O)NHRb10(例如，-C(＝O)NHMe、-C(＝O)NHEt、-C(＝O)NHPr、-C(＝O)NHiPr、-C(＝O)NHBu、-C(＝O)NHtBu、-C(＝O)NH环丙基、-C(＝O)NH环丁基)。在一些实施方案中，R10为-C(＝O)NHMe。在某些实施方案中，R10为-C(＝O)N(CH3)Rb10(例如，-C(＝O)NMe2、-C(＝O)N(CH3)Et、-C(＝O)N(CH3)Pr、-C(＝O)N(CH3)iPr、-C(＝O)N(CH3)Bu、-C(＝O)N(CH3)tBu、-C(＝O)N(CH3)环丙基、-C(＝O)N(CH3)环丁基)。
在一些实施方案中，R10为-OC(＝O)N(Rb10)2。在某些实施方案中，R10为-OC(＝O)NHRb10(例如，-OC(＝O)NHMe、-OC(＝O)NHEt、-OC(＝O)NHPr、-OC(＝O)NHiPr、-OC(＝O)NHBu、-OC(＝O)NHtBu、-OC(＝O)NH环丙基、-OC(＝O)NH环丁基)。在某些实施方案中，R10为-OC(＝O)N(CH3)Rb10(例如，-OC(＝O)NMe2、-OC(＝O)N(CH3)Et、-OC(＝O)N(CH3)Pr、-OC(＝O)N(CH3)iPr、-OC(＝O)N(CH3)Bu、-OC(＝O)N(CH3)tBu、-OC(＝O)N(CH3)环丙基、-OC(＝O)N(CH3)环丁基)。
在一些实施方案中，R10为-OC(＝O)Rb10(例如，-OC(＝O)Me、-OC(＝O)Et、-OC(＝O)Pr、-OC(＝O)Pr、-OC(＝O)Bu、-OC(＝O)Bu、-OC(＝O)环丙基、-OC(＝O)环丁基)。在一些实施方案中，R10为-OC(＝O)Me。
在一些实施方案中，R10为-S(＝O)Rb10。在某些实施方案中，R10为-S(＝O)烷基(例如，-S(＝O)Me、-S(＝O)Et、-S(＝O)Pr、-S(＝O)iPr)。在一些实施方案中，R10为-S(＝O)Me。在某些实施方案中，R10为-S(＝O)环烷基(例如，-S(＝O)环丙基、-S(＝O)环丁基、-S(＝O)环戊基、-S(＝O)环己基)。
在一些实施方案中，R10为-S(＝O)2Rb10。在某些实施方案中，R10为-S(＝O)2烷基(例如，-S(＝O)2Me、-S(＝O)2Et、-S(＝O)2Pr、-S(＝O)2 iPr)。在一些实施方案中，R10为-S(＝O)2Me。在某些实施方案中，R10为-S(＝O)2环烷基(例如，-S(＝O)2环丙基、-S(＝O)2环丁基、-S(＝O)2环戊基、-S(＝O)2环己基)。在一些实施方案中，R10为S(＝O)2芳基(例如，S(＝O)2苯基)。
在一些实施方案中，R10为-SRb10。在某些实施方案中，R10为-S烷基(例如，-SMe、-SEt、-SPr、-SiPr)。在某些实施方案中，R10为-S环烷基(例如，-S环丙基、-S环丁基、-S环戊基、-S环己基)。在某些实施方案中，R10为-S芳基(例如，S苯基)。
在一些实施方案中，R10为-S(＝O)(＝NRb10)Rb10。在某些实施方案中，R10为-S(＝O)(＝NH)Rb10(例如，-S(＝O)(＝NH)Me、-S(＝O)(＝NH)Et、-S(＝O)(＝NH)Pr、-S(＝O)(＝NH)iPr、-S(＝O)(＝NH)Bu、-S(＝O)(＝NH)tBu、-S(＝O)(＝NH)环丙基、-S(＝O)(＝NH)环丁基)。在一些实施方案中，R10为-S(＝O)(＝NCH3)Rb10(例如，-S(＝O)(＝NCH3)Me、-S(＝O)(＝NCH3)Et、-S(＝O)(＝NCH3)Pr、-S(＝O)(＝NCH3)iPr、-S(＝O)(＝NCH3)Bu、-S(＝O)(＝NCH3)tBu、-S(＝O)(＝NCH3)环丙基、-S(＝O)(＝NCH3)环丁基)。
在一些实施方案中，R10为-NRb10S(＝O)2Rb10。在某些实施方案中，R10为-NHS(＝O)2烷基(例如，-NHS(＝O)2Me、-NHS(＝O)2Et、-NHS(＝O)2Pr、-NHS(＝O)2 iPr)。在某些实施方案中，R10为-NHS(＝O)2环烷基(例如，-NHS(＝O)2环丙基、-NHS(＝O)2环丁基、-NHS(＝O)2环戊基、-NHS(＝O)2环己基)。在某些实施方案中，R10为-N(CH3)S(＝O)2烷基(例如，-N(CH3)S(＝O)2Me、-N(CH3)S(＝O)2Et、-N(CH3)S(＝O)2Pr、-N(CH3)S(＝O)2 iPr)。在某些实施方案中，R10为-N(CH3)S(＝O)2环烷基(例如，-N(CH3)S(＝O)2环丙基、-N(CH3)S(＝O)2环丁基、-N(CH3)S(＝O)2环戊基、-N(CH3)S(＝O)2环己基)。
在一些实施方案中，R10为-S(＝O)2N(Rb10)2(例如，-S(＝O)2NH2、-S(＝O)2NHRb10、-S(＝O)2N(CH3)Rb10)。在一些实施方案中，R10为-S(＝O)2NH2。在一些实施方案中，R10为-S(＝O)2NHRb10(例如，-S(＝O)2NHMe、-S(＝O)2NHEt、-S(＝O)2NHPr、-S(＝O)2NHiPr、-S(＝O)2NH环丙基、-S(＝O)2NH环丁基)。在一些实施方案中，R10为-S(＝O)2N(CH3)Rb10(例如，-S(＝O)2NMe2、-S(＝O)2N(CH3)Et、-S(＝O)2N(CH3)Pr、-S(＝O)2N(CH3)iPr、-S(＝O)2N(CH3)环丙基、-S(＝O)2N(CH3)环丁基)。
如本文通常所定义，每个Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地选自H、C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、C3-C9环烷基、3-7元杂环基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基、5-6元杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷基，其中每个烷基、环烷基、杂环基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷基任选地在任一可用位置被取代(例如，被R9的0、1、2或3个实例取代，其中每个R9独立地选自＝O、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C9环烷基、3-10元杂环基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基烷基、杂芳基烷基、-ORb、-N(Rb)2、-C(＝O)Rb、-C(＝O)ORb、-NRbC(＝O)Rb、-NRbC(＝O)ORb、-C(＝O)N(Rb)2、-OC(＝O)N(Rb)2、-S(＝O)Rb、-S(＝O)2Rb、-SRb、-S(＝O)(＝NRb)Rb、-NRbS(＝O)2Rb和-S(＝O)2N(Rb)2，其中每个Rb独立地选自H、-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-nBu、-tBu、-sec-Bu、-iso-Bu)和C3-C9环烷基(例如，环丙基、环丁基、环戊基、环己基)。
在一些实施方案中，每个Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地未被取代。在一些实施方案中，每个Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地被R9的1个实例取代。在一些实施方案中，每个Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地被R9的2个实例取代。在一些实施方案中，每个Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地被R9的3个实例取代。
在一些实施方案中，每个Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地选自H、-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-nBu、-tBu、-sec-Bu、-iso-Bu)和-C1-C6卤烷基(例如，-CHF2、-CF3)。在一些实施方案中，每个Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地选自H和-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-nBu、-tBu、-sec-Bu、-iso-Bu)。
在一些实施方案中，每个Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地为H。
在一些实施方案中，每个Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地为-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-nBu、-tBu、-sec-Bu、-iso-Bu)。在一些实施方案中，每个Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地为-Me。在一些实施方案中，每个Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地为-Et。在一些实施方案中，每个Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地为-Pr或-iPr。
在一些实施方案中，每个Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地为-C1-C6杂烷基。在其他实施方案中，每个Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地为甲氧基甲基(-CH2OCH3)。在一些实施方案中，每个Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地为羟基甲基(-CH2OH)。在一些实施方案中，每个Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地为氨基甲基(例如，-CH2NH2、-CH2NHCH3、-CH2N(CH3)2)。
在一些实施方案中，每个Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地为-C1-C6卤烷基。在其他实施方案中，每个Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地为三氟甲基(-CF3)。在其他实施方案中，每个Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地为二氟甲基(-CHF2)。
在一些实施方案中，每个Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地为-C3-C9碳环基(例如，环丙基、环丁基、环戊基、环己基)。在一些实施方案中，每个Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地为环丙基。在一些实施方案中，每个Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地为环丁基。在一些实施方案中，每个Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地为环戊基。在一些实施方案中，每个Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地为环己基。
在一些实施方案中，每个Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地为3-10元杂环基(例如，氧杂环丁烷基、四氢吡喃基、四氢呋喃基、氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、氮杂环庚烷基)。在一些实施方案中，每个Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地为氧杂环丁烷基。在一些实施方案中，每个Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地为四氢吡喃基。在一些实施方案中，每个Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地为四氢呋喃基。在一些实施方案中，每个Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地为氮杂环丁烷基。在一些实施方案中，每个Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地为吡咯烷基。在一些实施方案中，每个Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地为哌啶基。在一些实施方案中，每个Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地为哌嗪基。在一些实施方案中，每个Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地为吗啉基。在一些实施方案中，每个Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地为氮杂环庚烷基。
在一些实施方案中，Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地为杂芳基。在一些实施方案中，Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地为5-10元杂芳基(例如，含有1-3个独立地选自N、O和S的杂原子的5-6元单环杂芳基或8-10元双环杂芳基)。在一些实施方案中，Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地为5-6元单环杂芳基(例如，含有1-3个独立地选自O、N和S的杂原子的5元单环杂芳基；含有1-3个N杂原子的6元单环杂芳基)。在一些实施方案中，Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地为5元单环杂芳基(例如，吡唑基、吡咯基、噻吩基、呋喃基、噻唑基、异噻唑基、噁唑基、异噁唑基、咪唑基、三唑基、噻二唑基、噁二唑基)。在一些实施方案中，Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地为噻吩基(例如，噻吩-2-基、噻吩-3-基)。在一些实施方案中，Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地为吡唑基(例如吡唑-1-基、吡唑-3-基、吡唑-5-基)。在一些实施方案中，Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地为噻唑基(例如，噻唑-2-基、噻唑-4-基、噻唑-5-基)。在一些实施方案中，Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地为6元单环杂芳基(例如，吡啶基、嘧啶基、三嗪基、吡嗪基、哒嗪基)。在一些实施方案中，Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地为吡啶基(例如，吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基)。在一些实施方案中，Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地为嘧啶基(例如，嘧啶-2-基、嘧啶-4-基、嘧啶-5-基)。
在一些实施方案中，Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地为芳基。在一些实施方案中，Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地为6-10元单环或双环芳基。在一些实施方案中，Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地为苯基。在一些实施方案中，苯基被如本文所定义的R9的0、1、2或3个实例取代。
在一些实施方案中，每个Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地为环烷基烷基(例如，环丙基甲基、环丁基甲基、环戊基甲基、环己基甲基、环庚基甲基)。在一些实施方案中，每个Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地为杂环基烷基(例如，氧杂环丁烷基甲基、氮丙啶基甲基、四氢呋喃基甲基、吡咯烷基甲基、四氢吡喃基甲基、哌啶基甲基、哌嗪基甲基、吗啉基甲基、氮杂环庚烷基甲基)。
在一些实施方案中，每个Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地为芳基烷基。在一些实施方案中，每个Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地为苯甲基。
在一些实施方案中，每个Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地为杂芳基烷基(例如，吡啶基甲基、噻唑基甲基、三唑基甲基、吡唑基甲基)。
如本文通常所定义，每个R9独立地选自＝O、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C9环烷基、3-10元杂环基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基烷基、杂芳基烷基、-ORb、-N(Rb)2、-C(＝O)Rb、-C(＝O)ORb、-NRbC(＝O)Rb、-NRbC(＝O)ORb、-C(＝O)N(Rb)2、-OC(＝O)N(Rb)2、-S(＝O)Rb、-S(＝O)2Rb、-SRb、-S(＝O)(＝NRb)Rb、-NRbS(＝O)2Rb和-S(＝O)2N(Rb)2，其中每个Rb独立地选自H、-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-nBu、-tBu、-sec-Bu、-iso-Bu)和C3-C9环烷基(例如，环丙基、环丁基、环戊基、环己基)。
在一些实施方案中，每个R9独立地选自＝O、卤基、-CN、-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-nBu、-tBu、-sec-Bu、-iso-Bu)、-C1-C6卤烷基(例如，-CF3、-CHF2)、-C3-C9环烷基(例如，环丙基、环丁基、环戊基、环己基)、3-10元杂环基(例如，氧杂环丁烷基、四氢吡喃基、四氢呋喃基、氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、氮杂环庚烷基)、C6-C10芳基(例如，苯基)、5-10元杂芳基(例如，吡唑基、吡咯基、噻吩基、呋喃基、噻唑基、异噻唑基、噁唑基、异噁唑基、咪唑基、三唑基、噻二唑基、噁二唑基)、环烷基烷基(例如，环丙基甲基、环丁基甲基、环戊基甲基、环己基甲基、环庚基甲基)、杂环基烷基(例如，氧杂环丁烷基甲基、氮丙啶基甲基、四氢呋喃基甲基、吡咯烷基甲基、四氢吡喃基甲基、哌啶基甲基、哌嗪基甲基、吗啉基甲基、氮杂环庚烷基甲基)、芳基烷基(例如，苯甲基)、杂芳基烷基(例如，吡啶基甲基、噻唑基甲基、三唑基甲基、吡唑基甲基)、-ORb、-N(Rb)2、-C(＝O)Rb、-C(＝O)ORb、-NRbC(＝O)Rb、-NRbC(＝O)ORb、-C(＝O)N(Rb)2、-OC(＝O)N(Rb)2、-S(＝O)Rb、-S(＝O)2Rb、-SRb、-S(＝O)(＝NRb)Rb、-NRbS(＝O)2Rb和-S(＝O)2N(Rb)2，其中每个Rb如本文所定义。在其他实施方案中，每个Rb为H或-Me。
在一个实施方案中，本发明提供了一种选自表1的化合物的化合物或其药学上可接受的盐。
本文所述的化合物(例如，式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物，或其药学上可接受的盐)可用作PRMT5的抑制剂(例如，MTA无竞争性PRMT5抑制剂)。
表1指示分别在存在SAM作为辅助因子的情况下、在无辅助因子的情况下和在MTA作为辅助因子的情况下示例性化合物针对PRMT5的IC50值(μM)(第4-6列)。对于表1，“a”、“aa”和“aaa”分别指示在测定中在SAM、无辅助因子和MTA的情况下小于50nM的IC50；“b”、“bb”和“bbb”分别指示在测定中在SAM、无辅助因子和MTA的情况下50nM至小于500nM的IC50；“c”、“cc”和“ccc”分别指示在测定中在SAM、无辅助因子和MTA的情况下大于或等于500nM的IC50。Ki值可如实施例部分所述由IC50值计算。如实施例部分详述的，对于在存在SAM的情况下进行的测定，IC50＝Ki×1.5(Ki＝IC50/1.5)。对于在存在MTA的情况下进行的测定，IC50＝Ki×13.5(Ki＝IC50/13.5)。
表1还指示在SDMA细胞内西方测定(in-cell western assay)中示例性化合物在MTAP同基因型细胞系对中的IC50值(第7-8列)。HAP1MTAP完整为表达内源性水平的MTAP的细胞系，且HAP1 MTAP缺失为MTAP无效细胞系。对于表1，在HAP1 MTAP完整和HAP1MTAP缺失测定中，分别地，“a*”和“aa*”指示<100nM的IC50，“b*”和“bb*”指示等于或大于100nM但小于1μM的IC50，且“c*”和“cc*”指示大于或等于1μM的IC50。在第9列，“A”指示HAP1 MTAP完整细胞系和HAP1 MTAP缺失细胞系的IC50之间大于或等于10倍的IC50比率；“B”指示HAP1 MTAP完整细胞系和HAP1 MTAP缺失细胞系的IC50之间大于或等于3倍但低于10倍的IC50比率；“C”指示HAP1 MTAP完整细胞系和HAP1 MTAP缺失细胞系的IC50之间小于3倍的IC50比率。SDMA细胞内西方测定中比率等于或大于3倍的化合物被认为具有MTAP选择性。
表1另外指示在MTAP缺失细胞系的活力测定中的IC50值(第10列)，指示使用化合物的治疗对细胞存活的作用。在第10列，A*的值指示小于1μM的IC50，B*的值指示等于或大于1μM但小于10μM的IC50，且C*的值指示大于或等于10μM的IC50。
除非另外指示，否则所有手性原子的绝对立体化学如所描绘。用(或)或(rel)标记的化合物为单一对映异构体，其中任意分配绝对立体化学(例如，基于如实施例部分中所述的手性SFC洗脱)。用(和)或(外消旋)标记的化合物为对映异构体的混合物，其中相对立体化学如所示。用(abs)标记的化合物为单一对映异构体，其中绝对立体化学如所指示。
表1.本发明的示例性化合物和生物数据
在一些实施方案中，本文所述的式(I)和(Ia)化合物可使用方案1中所述的方法制备。
方案1.
如方案1中所示，式(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物可自式(I)化合物的混合物分离，其中R1、R2、R3、R4、R6、R7、R8和n如本文所述，R1a选自R1和-NH-PG，且R2a选自R2和-NH-PG，其中PG为如本文所定义的氮保护基(例如，-Boc)。在某些实施方案中(例如，当R1a为NH-PG且R1为-NH2，或R2a为NH-PG且R2为-NH2时)，采用脱保护步骤将R1a转化成R1或将R2a转化成R2。脱保护步骤可在分离步骤之前或之后进行。用于移除保护基-PG(例如，-Boc)的条件可采用例如酸性条件(例如，水/二噁烷、于质子性溶剂(例如，甲醇)中的盐酸、于非质子性溶剂(例如，二噁烷)中的盐酸、于非质子性溶剂(例如，二氯甲烷、氯仿等)中的TFA)。
式(I)化合物可通过使式I-6化合物经历酰胺键偶联条件来制备。在一些实施方案中，式(I)化合物通过式I-6化合物与式I-7化合物的酰胺键偶联来制备。已知由式I-6和式I-7化合物生成式I化合物的条件的实例包括但不限于：添加偶联剂(诸如CDI、HATU、HOBT、HBTU或PyBOP)、碱(诸如氢化物碱(例如NaH或KH)、胺碱(诸如DBU、NEt3和NEt(iPr)2)或碳酸盐碱(例如，Na2CO3、K2CO3或Cs2CO3))；以及在一个实施方案中在0℃至室温下或在另一个实施方案中在70℃或更高温度下(例如在70℃至110℃范围内或在70℃至80℃范围内的温度下、或在80℃下)搅拌反应物。可在诸如但不限于DMF和MTBE的溶剂中进行反应。在一些实施方案中，式(I)化合物通过式I-6化合物与式I-8化合物的酰胺键偶联来制备。已知由式I-6和式I-8化合物生成式I化合物的条件的实例包括但不限于：添加碱，诸如有机锂碱(例如，n-BuLi、t-BuLi、二异丙基酰胺锂(LDA)、双(三甲基甲硅烷基)酰胺锂(LiHMDS))、氢化物碱(例如，NaH或KH)、胺碱(诸如DBU、NEt3和NEt(iPr)2)或碳酸盐碱(例如，Na2CO3、K2CO3或Cs2CO3)；以及在一个实施方案中在0℃至室温下或在另一个实施方案中在70℃或更高温度下(例如在70℃至110℃范围内或在70℃至80℃范围内的温度下、或在80℃下)搅拌反应物。可在诸如但不限于THF、Et2O、TMEDA、DME和MTBE或其混合物的溶剂中进行反应。
在一些实施方案中，式I-5化合物经历脱保护、环化和还原的序列以制备式I-6化合物。用于移除保护基(PG)(例如，MoM或Boc)的条件为本领域普通技术人员已知的。例如，Boc脱保护可包括用酸处理。示例性酸包括TFA和HCl，且示例性溶剂包括质子性溶剂(诸如甲醇)、卤化溶剂(诸如DCM和六氟异丙醇)或醚溶剂(诸如二噁烷和二甲醚)。在一些实施方案中，在将式I-5化合物脱保护时可经历自发环化以形成环状亚胺。环状亚胺的还原可使用还原剂诸如氢化物还原剂(例如，NaBH4或LiAlH4)、硅还原剂(例如，Cl3SiH)或在存在催化剂(例如Ir催化剂、Ru催化剂、Pd催化剂(例如，Pd/C、Pd(OAc)2))的情况下的H2还原来完成。
式I-5化合物可通过对式I-4化合物的亲核加成来制备。亲核加成可使用格任亚试剂(Grignard reagent)(例如R6MgBr)来完成。亲核加成反应可在诸如但不限于THF、Et2O、TMEDA、DME和MTBE或其混合物的溶剂中进行。
替代地，式I-6化合物可经由式I-3化合物的还原来制备。式I-3化合物的还原可使用还原剂诸如氢化物还原剂(例如，NaBH4或LiAlH4)、硅还原剂(例如，Cl3SiH)或在存在催化剂(例如Ir催化剂、Ru催化剂、Pd催化剂(例如，Pd/C、Pd(OAc)2))的情况下的H2还原来完成。
在一些实施方案中，式I-2化合物可经历脱保护/双键迁移以得到式I-3化合物。用于移除保护基(PG)(例如，MoM或Boc)的条件为本领域普通技术人员已知的。例如，Boc脱保护可包括用酸处理。示例性酸包括TFA和HCl，且示例性溶剂包括质子性溶剂(诸如甲醇)、卤化溶剂(诸如DCM和六氟异丙醇)或醚溶剂(诸如二噁烷和二甲醚)。
在一些实施方案中，I-2化合物可通过式I-1化合物(其中X为离去基团，例如，卤素或-OSO2CF3)与合适的交叉偶联配偶体的交叉偶联来制备。在一些实施方案中，合适的交叉偶联配偶体包括但不限于含硼交叉偶联配偶体，例如R6B(OH)2或R6Bpin。
替代性实施方案
在一个替代性实施方案中，本文所述的化合物还可包含一个或多个同位素取代。例如，氢可为2H(D或氘)或3H(T或氚)；碳可为例如13C或14C；氧可为例如18O；氮可为例如15N等。在其他实施方案中，特定同位素(例如，3H、13C、14C、18O或15N)可表示占据化合物的特定位点的元素的总同位素丰度的至少1％、至少5％、至少10％、至少15％、至少20％、至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少99％或至少99.9％。
药物组合物
在另一个方面中，本发明提供了一种药物组合物，其包含药学上可接受的载剂和有效量的本文所述的化合物(例如，式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物)或其药学上可接受的盐。
术语“药学上可接受的载剂或佐剂”是指可连同本文所提供的化合物一起向患者施用，且不会破坏其药理学活性并在以足以递送治疗量的化合物的剂量施用时无毒的载剂或佐剂。
可用于本文所提供的药物组合物的药学上可接受的载剂、佐剂和媒介物包括但不限于离子交换剂、氧化铝、硬脂酸铝、卵磷脂、自乳化药物递送系统(SEDDS)(诸如d-α-生育酚聚乙二醇1000琥珀酸酯)、药物剂型中所用的表面活性剂(诸如Tween或其他类似聚合物递送基质)、血清蛋白(诸如人血清白蛋白)、缓冲物质(诸如磷酸盐)、甘氨酸、山梨酸、山梨酸钾、饱和植物脂肪酸的部分甘油酯混合物、水、盐或电解质，诸如硫酸鱼精蛋白、磷酸氢二钠、磷酸氢钾、氯化钠、锌盐、胶体二氧化硅、三硅酸镁、聚乙烯基吡咯烷酮、基于纤维素的物质、聚乙二醇、羧甲基纤维素钠、聚丙烯酸酯、蜡、聚乙烯聚氧丙烯嵌段聚合物、聚乙二醇和羊毛脂。环糊精(诸如α-环糊精、β-环糊精和γ-环糊精)或经化学修饰的衍生物(诸如羟基烷基环糊精，包括2-羟基丙基-β-环糊精和3-羟基丙基-β-环糊精)或其他溶解的衍生物也可有利地用于增强本文所述的各式化合物的递送。
当用作药物时，本文所提供的化合物通常以药物组合物的形式施用。此类组合物可以药物领域中熟知的方式制备且包含至少一种活性化合物。
在一个实施方案中，关于药物组合物，载剂为肠胃外载剂、经口或局部载剂。
本发明还涉及一种本文所述的化合物(例如，式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物或其药学上可接受的盐)(或其药物组合物)，其用作药物或药剂(例如，用于治疗有需要的受试者的MTAP缺乏和/或MTA累积疾病的药剂)。在一个实施方案中，疾病为增殖性疾病。在另一个实施方案中，疾病为MTAP缺乏和/或MTA累积癌症。在一个实施方案中，癌症为神经胶质母细胞瘤、恶性外周神经鞘瘤(MPNST)、食道癌(例如，食道鳞状细胞癌或食道腺癌)、膀胱癌(例如，膀胱尿路上皮癌)、胰腺癌(例如，胰腺腺癌)、间皮瘤、黑色素瘤、非小细胞肺癌(NSCLC；例如，肺鳞状或肺腺癌)、星形细胞瘤、未分化多形性肉瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、白血病、头颈癌、胃腺癌、黏液性纤维肉瘤、胆管肉瘤、脑癌、胃癌、肾癌、乳腺癌、子宫内膜癌、尿路癌、肝癌、软组织癌、胸膜癌和大肠癌或肉瘤。
本发明还涉及一种本文所述的化合物(例如，式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物或其药学上可接受的盐)(或其药物组合物)，其用于治疗有需要的受试者的MTAP缺乏和/或MTA累积疾病。在一个实施方案中，疾病为增殖性疾病。在另一个实施方案中，疾病为MTAP缺乏和/或MTA累积癌症。在一个实施方案中，癌症为神经胶质母细胞瘤、恶性外周神经鞘瘤(MPNST)、食道癌(例如，食道鳞状细胞癌或食道腺癌)、膀胱癌(例如，膀胱尿路上皮癌)、胰腺癌(例如，胰腺腺癌)、间皮瘤、黑色素瘤、非小细胞肺癌(NSCLC；例如，肺鳞状或肺腺癌)、星形细胞瘤、未分化多形性肉瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、白血病、头颈癌、胃腺癌、黏液性纤维肉瘤、胆管肉瘤、脑癌、胃癌、肾癌、乳腺癌、子宫内膜癌、尿路癌、肝癌、软组织癌、胸膜癌和大肠癌或肉瘤。
本发明还涉及一种本文所述的化合物(例如，式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物或其药学上可接受的盐)(或其药物组合物)，其用于制造药剂(例如，用于治疗有需要的受试者的MTAP缺乏和/或MTA累积疾病的药剂)。在一个实施方案中，疾病为增殖性疾病。在另一个实施方案中，疾病为MTAP缺乏和/或MTA累积癌症。在一个实施方案中，癌症为神经胶质母细胞瘤、恶性外周神经鞘瘤(MPNST)、食道癌(例如，食道鳞状细胞癌或食道腺癌)、膀胱癌(例如，膀胱尿路上皮癌)、胰腺癌(例如，胰腺腺癌)、间皮瘤、黑色素瘤、非小细胞肺癌(NSCLC；例如，肺鳞状或肺腺癌)、星形细胞瘤、未分化多形性肉瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、白血病、头颈癌、胃腺癌、黏液性纤维肉瘤、胆管肉瘤、脑癌、胃癌、肾癌、乳腺癌、子宫内膜癌、尿路癌、肝癌、软组织癌、胸膜癌和大肠癌或肉瘤。
一般而言，本文所提供的化合物以治疗有效量施用。实际施用的化合物的量通常将由临床医师根据相关情形来确定，所述相关情形包括待治疗的病状、所选施用途径、所施用的实际化合物、个别患者的年龄、体重和反应、患者症状的严重性等。
本文所提供的药物组合物可经口、肠胃外、通过吸入喷雾、局部、经直肠、经鼻、经颊、经阴道或经由植入储集囊(implanted reservoir)、优选通过经口施用或通过注射施用来施用。本文所提供的药物组合物可含有任何常规无毒的药学上可接受的载剂、佐剂或媒介物。在一些情况下，制剂的pH可利用药学上可接受的酸、碱或缓冲液调节以增强配制的化合物或其递送形式的稳定性。如本文所用的术语肠胃外包括皮下、皮内、静脉内、肌肉内、关节内、动脉内、滑膜内、胸骨内、鞘内、病灶内和颅内注射或输注技术。
用于经口施用的组合物可采用散装液体溶液或悬浮液或者散装粉末的形式。然而，更通常，组合物以单位剂型呈现以有助于精确给药。术语“单位剂型”是指作为整体剂量适用于人受试者和其他哺乳动物的物理上离散的单位，每个单位含有经计算以产生所需治疗效果的预定量的活性物质以及合适的药物赋形剂。典型的单位剂型包括液体组合物的经预填充、预测量的安瓿或注射器或者在固体组合物的情况下的丸剂、片剂、胶囊等。在此类组合物中，化合物通常为微量组分(约0.1重量％至约50重量％或优选约1重量％至约40重量％)，其余部分为有助于形成所需给药形式的各种媒介物或载剂和加工助剂。
适用于经口施用的液体形式可包括具有缓冲液、悬浮剂和分散剂、着色剂、调味剂等的合适水性或非水性媒介物。固体形式可包括例如任何以下成分或具有类似性质的化合物：粘合剂，诸如微晶纤维素、黄蓍胶或明胶；赋形剂，诸如淀粉或乳糖；崩解剂，诸如海藻酸、Primogel或玉米淀粉；润滑剂，诸如硬脂酸镁；助滑剂，诸如胶体二氧化硅；甜味剂，诸如蔗糖或糖精；或调味剂，诸如薄荷、水杨酸甲酯或橙调味剂。
可注射组合物通常基于可注射无菌盐水或磷酸盐缓冲盐水或本领域中已知的其他可注射载剂。与先前一样，此类组合物中的活性化合物通常为微量组分，通常为约0.05重量％至10重量％，其余部分为可注射载剂等。药物组合物可呈无菌可注射制备剂形式，例如呈无菌可注射水性或油性悬浮液形式。此悬浮液可根据本领域中已知的技术使用合适分散剂或润湿剂(例如像Tween 80)和悬浮剂配制。无菌可注射制备剂也可为于无毒肠胃外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液或悬浮液，例如呈于1,3-丁二醇中的溶液。可采用的可接受的媒介物和溶剂为甘露醇、水、林格氏溶液和等渗氯化钠溶液。此外，惯例上采用无菌不挥发油作为溶剂或悬浮介质。出于此目的，可采用任何品牌的不挥发油，包括合成单甘油酯或双甘油酯。脂肪酸(诸如油酸及其甘油酯衍生物)可用于制备可注射剂，天然的药学上可接受的油(诸如橄榄油或蓖麻油，尤其是其聚氧乙烯化版本)也一样。这些油溶液或悬浮液也可含有长链醇稀释剂或分散剂或者羧甲基纤维素或类似分散剂，其常用于配制药学上可接受的剂型，诸如乳液和或悬浮液。其他常用表面活性剂(诸如Tween或Span)和/或常用于制造药学上可接受的固体、液体或其他剂型的其他类似乳化剂或生物利用度增强剂也可用于配制目的。
经皮组合物通常配制为含有活性成分的局部软膏或乳膏，活性成分的量的范围通常为约0.01重量％至约20重量％，优选约0.1重量％至约20重量％，优选约0.1重量％至约10重量％，且更优选约0.5重量％至约15重量％。当配制为软膏时，通常将活性成分与石蜡或水混溶性软膏基底组合。替代地，可用例如水包油乳膏基底以乳膏的形式配制活性成分。此类经皮制剂为本领域中熟知的且通常包括增强活性成分或制剂的皮肤渗透或稳定性的额外成分。所有此类已知经皮制剂和成分均包括在本文所提供的范围内。
本文所提供的化合物也可通过经皮装置来施用。因此，经皮施用可使用一片储集囊或多孔膜类型或一片固体基质种类来完成。
本文所提供的药物组合物还可以用于经直肠施用的栓剂形式施用。这些组合物可通过将本文所提供的化合物与合适的非刺激性赋形剂混合来制备，所述赋形剂在室温下为固体但在直肠温度下为液体且因此将在直肠内融化以释放活性组分。此类材料包括但不限于可可脂、蜜蜡和聚乙二醇。
本文所提供的药物组合物可通过经鼻气溶胶或吸入来施用。此类组合物根据药物配制领域中熟知的技术来制备且可采用苯甲醇或其他合适的防腐剂、增强生物利用度的吸收促进剂、氟碳化合物和/或本领域中已知的其他增溶剂或分散剂制备成于盐水中的溶液。
用于可经口施用、可注射或可局部施用、可经直肠施用和可经鼻施用组合物的上述组分仅为代表性的。其他材料以及加工技术等阐述于Remington's PharmaceuticalSciences,第17版,1985,Mack Publishing Company,Easton,Pennsylvania的第8部分中，所述文献以引用的方式并入本文。
本发明的化合物也可以持续释放形式或自持续释放药物递送系统施用。代表性持续释放材料的描述可见于Remington'sPharmaceutical Sciences。
当本文所提供的组合物包含本文所述的各式化合物与一种或多种额外治疗剂或预防剂的组合时，化合物和额外剂存在的剂量水平应在单一疗法方案中通常施用的剂量的约1％至100％之间且更优选约5％至95％之间。额外剂可作为多剂量方案的一部分与本文所提供的化合物分开施用。替代地，那些剂可为单一剂型的一部分，与本文所提供的化合物一起混合在单一组合物中。
本发明还涉及本文所述的化合物(例如，式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物)的药学上可接受的酸加成盐。
可用于制备药学上可接受的盐的酸为形成无毒酸加成盐的酸，即含有药理学上可接受的阴离子的盐，所述阴离子诸如盐酸根、氢碘酸根、氢溴酸根、硝酸根、硫酸根、硫酸氢根、磷酸根、乙酸根、乳酸根、柠檬酸根、酒石酸根、琥珀酸根、马来酸根、富马酸根、苯甲酸根、对甲苯磺酸根等。
本文所述的化合物可以例如通过静脉内、动脉内、表皮下、腹膜内、肌肉内或皮下注射；或经口、经颊、经鼻、经黏膜、局部、以眼用制备剂或通过吸入来施用，其剂量范围为约0.5mg/kg体重至约100mg/kg体重，替代地剂量为1mg/剂量与1000mg/剂量之间，每4至120小时施用一次或根据特定药物的要求。本文中的方法考虑施用有效量的化合物或化合物组合物以达成所需或所述效果。通常，本文所提供的药物组合物将每天施用约1至约6次，或替代地作为连续输注施用。此种施用可用作长期或短期疗法。可与载剂材料组合以产生单一剂型的活性成分的量将根据所治疗的宿主和特定施用方式而改变。典型的制备剂将含有约5％至约95％的活性化合物(重量/重量)。替代地，此类制备剂含有约20％至约80％的活性化合物。
可能需要低于或高于上述剂量的剂量。用于任何特定患者的特定剂量和治疗方案将取决于多种因素，包括所采用的特定化合物的活性、年龄、体重、一般健康状态、性别、饮食、施用时间、排泄速率、药物组合、疾病的严重性和病程、病状或症状、患者易患疾病、病状或症状的倾向和治疗医师的判断。
在患者的病状改善后，必要时，可施用本文所提供的化合物、组合物或组合的维持剂量。随后，可以根据症状减少施用剂量或频率或二者至当症状已缓解至所需水平时保留改善的病状的水平。然而，患者可能在疾病症状的任何复发后长期需要间歇性治疗。
治疗方法和用途
MTAP缺乏和/或MTA累积增殖性病症的治疗
在一个实施方案中，本发明提供了治疗患有或已诊断为患有MTAP缺乏相关和/或MTA累积增殖性病症(例如，癌症)的人或动物受试者的方法，其包括向有需要的受试者施用治疗有效量的本发明的化合物(例如，式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物)或其药学上可接受的盐。
在一个实施方案中，本发明提供了治疗有需要的受试者的MTAP缺乏相关和/或MTA累积增殖性病症(例如，癌症)的方法，其包括向受试者施用治疗有效量的本发明的化合物(例如，式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物)或其药学上可接受的盐。
在一个实施方案中，本发明提供了治疗患有或已诊断为患有MTAP缺乏相关和/或MTA累积增殖性病症(例如，癌症)的人或动物受试者的方法，其包括向有需要的受试者施用治疗有效量的本发明的药物组合物(例如，包含式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物或其药学上可接受的盐和药学上可接受的载剂的组合物)。在一个实施方案中，化合物或组合物与第二治疗剂组合施用。
在一个实施方案中，本发明提供了治疗有需要的受试者的MTAP缺乏相关和/或MTA累积增殖性病症(例如，癌症)的方法，其包括向受试者施用治疗有效量的本发明的药物组合物(例如，包含式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物或其药学上可接受的盐和药学上可接受的载剂的组合物)。在一个实施方案中，化合物或组合物与第二治疗剂组合施用。
在某些实施方案中，疾病为MTAP缺乏和/或MTA累积癌症。
在一个实施方案中，癌症为神经胶质母细胞瘤、恶性外周神经鞘瘤(MPNST)、食道癌(例如，食道鳞状细胞癌或食道腺癌)、膀胱癌(例如，膀胱尿路上皮癌)、胰腺癌(例如，胰腺腺癌)、间皮瘤、黑色素瘤、非小细胞肺癌(NSCLC；例如，肺鳞状或肺腺癌)、星形细胞瘤、未分化多形性肉瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、白血病、头颈癌、胃腺癌、黏液性纤维肉瘤、胆管肉瘤、脑癌、胃癌、肾癌、乳腺癌、子宫内膜癌、尿路癌、肝癌、软组织癌、胸膜癌和大肠癌或肉瘤。
在一个实施方案中，癌症为MTAP缺乏和/或MTA累积神经胶质母细胞瘤、恶性外周神经鞘瘤(MPNST)、食道癌(例如，食道鳞状细胞癌或食道腺癌)、膀胱癌(例如，膀胱尿路上皮癌)、胰腺癌(例如，胰腺腺癌)、间皮瘤、黑色素瘤、非小细胞肺癌(NSCLC；例如，肺鳞状或肺腺癌)、星形细胞瘤、未分化多形性肉瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、白血病、头颈癌、胃腺癌、黏液性纤维肉瘤、胆管肉瘤、脑癌、胃癌、肾癌、乳腺癌、子宫内膜癌、尿路癌、肝癌、软组织癌、胸膜癌和大肠癌或肉瘤。
本文所述的PRMT5抑制剂(例如，MTA无竞争性、非竞争性或混合模式PRMT5抑制剂或MTA协同结合剂，例如式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物或其药学上可接受的盐)可用于抑制有需要的受试者的MTAP缺乏细胞的增殖的方法中，所述方法包括以有效抑制MTAP缺乏细胞的增殖的量向受试者施用PRMT5抑制剂(例如，MTA无竞争性、非竞争性或混合模式PRMT5抑制剂或MTA协同结合剂，例如，式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物或其药学上可接受的盐)。在一个实施方案中，有需要的受试者罹患选自以下的癌症：神经胶质母细胞瘤、恶性外周神经鞘瘤(MPNST)、食道癌(例如，食道鳞状细胞癌或食道腺癌)、膀胱癌(例如，膀胱尿路上皮癌)、胰腺癌(例如，胰腺腺癌)、间皮瘤、黑色素瘤、非小细胞肺癌(NSCLC；例如，肺鳞状或肺腺癌)、星形细胞瘤、未分化多形性肉瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、白血病、头颈癌、胃腺癌、黏液性纤维肉瘤、胆管肉瘤、脑癌、胃癌、肾癌、乳腺癌、子宫内膜癌、尿路癌、肝癌、软组织癌、胸膜癌和大肠癌或肉瘤。
本文所述的PRMT5抑制剂(例如，MTA无竞争性、非竞争性或混合模式PRMT5抑制剂或MTA协同结合剂，例如式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物或其药学上可接受的盐)可用于抑制有需要的受试者的MTA累积细胞的增殖的方法中，所述方法包括以有效抑制MTA累积细胞的增殖的量向受试者施用PRMT5抑制剂(例如，MTA无竞争性、非竞争性或混合模式PRMT5抑制剂或MTA协同结合剂，例如，式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物或其药学上可接受的盐)。在一个实施方案中，有需要的受试者罹患选自以下的癌症：神经胶质母细胞瘤、恶性外周神经鞘瘤(MPNST)、食道癌(例如，食道鳞状细胞癌或食道腺癌)、膀胱癌(例如，膀胱尿路上皮癌)、胰腺癌(例如，胰腺腺癌)、间皮瘤、黑色素瘤、非小细胞肺癌(NSCLC；例如，肺鳞状或肺腺癌)、星形细胞瘤、未分化多形性肉瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、白血病、头颈癌、胃腺癌、黏液性纤维肉瘤、胆管肉瘤、脑癌、胃癌、肾癌、乳腺癌、子宫内膜癌、尿路癌、肝癌、软组织癌、胸膜癌和大肠癌或肉瘤。
本文所述的PRMT5抑制剂(例如，MTA无竞争性、非竞争性或混合模式PRMT5抑制剂或MTA协同结合剂，例如式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物或其药学上可接受的盐)可用于抑制有需要的受试者的MTAP缺乏和/或MTA累积细胞的增殖的方法中，所述方法包括以有效抑制MTAP缺乏和/或MTA累积细胞的增殖的量向受试者施用PRMT5抑制剂(例如，MTA无竞争性、非竞争性或混合模式PRMT5抑制剂或MTA协同结合剂，例如，式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物或其药学上可接受的盐)。在一个实施方案中，有需要的受试者罹患选自以下的癌症：神经胶质母细胞瘤、恶性外周神经鞘瘤(MPNST)、食道癌(例如，食道鳞状细胞癌或食道腺癌)、膀胱癌(例如，膀胱尿路上皮癌)、胰腺癌(例如，胰腺腺癌)、间皮瘤、黑色素瘤、非小细胞肺癌(NSCLC；例如，肺鳞状或肺腺癌)、星形细胞瘤、未分化多形性肉瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、白血病、头颈癌、胃腺癌、黏液性纤维肉瘤、胆管肉瘤、脑癌、胃癌、肾癌、乳腺癌、子宫内膜癌、尿路癌、肝癌、软组织癌、胸膜癌和大肠癌或肉瘤。
组合疗法
本发明提供了用PRMT5抑制剂(例如，MTA无竞争性、非竞争性或混合模式PRMT5抑制剂或MTA协同结合剂，例如式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物或其药学上可接受的盐)与第二治疗剂的组合治疗MTAP缺乏和/或MTA累积增殖性病症(例如，癌症)的方法。
术语“组合”是指一个剂量单位形式的固定组合或组合施用，在所述组合施用中可以独立地同时或在时间间隔内单独施用本发明的化合物(例如，式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物或其药学上可接受的盐)和组合配偶体(例如，如下文所解释的另一种药物，也称为“治疗剂”或“共剂”)，尤其其中这些时间间隔允许所述组合配偶体显示协同例如协同效应。单一组分可包装在药盒中或单独包装。一种或两种组分(例如，粉剂或液体)可在施用之前复溶或稀释至所需剂量。如本文所用的术语“共同施用”或“组合施用”等意在涵盖向有需要的单一受试者(例如，患者)施用所选组合配偶体且意欲包括治疗方案，其中所述剂不必通过相同施用途径施用或同时施用。如本文所用的术语“药物组合”意指将多于一种治疗剂混合或组合所得的产品且包括治疗剂的固定和非固定组合。术语“固定组合”意指同时以单一实体或剂量的形式向患者施用治疗剂，例如本发明的化合物(例如，式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物或其药学上可接受的盐)和组合配偶体。术语“非固定组合”意指作为单独实体同时、并行或依次(无特定时间限制)向患者施用治疗剂，例如本发明的化合物(例如，式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物或其药学上可接受的盐)和组合配偶体，其中此类施用在患者体内提供两种化合物的治疗有效水平。后者也适用于鸡尾酒疗法，例如施用三种或更多种治疗剂。
术语“组合疗法”是指施用两种或更多种治疗剂以治疗本公开中所述的治疗性病状或病症。此种施用涵盖以实质上同时的方式，诸如以具有固定比率的活性成分的单一胶囊共同施用这些治疗剂。替代地，此种施用涵盖针对各活性成分以多个或单独容器(例如，片剂、胶囊、粉剂或液体)共同施用。粉剂和/或液体可在施用之前复溶或稀释至所需剂量。此外，此种施用也涵盖以连续方式大约同时或在不同时间使用各类型的治疗剂。
在某些实施方案中，本发明的化合物与其他治疗剂组合，所述其他治疗剂包括但不限于其他抗癌剂、抗过敏剂、抗吐剂(或止吐剂)、镇痛药、细胞保护剂及其组合。
认为用于组合疗法中的一般化学治疗剂包括阿纳托唑(anastrozole)比卡鲁胺(bicalutamide)硫酸博莱霉素布他卡因布他卡因注射液卡倍他滨N4-戊氧基羰基-5-脱氧-5-氟胞苷、卡铂双氯乙基亚硝脲氯芥苯丁酸顺铂克拉利宾环磷酰胺或阿糖胞苷、胞嘧啶阿拉伯醣阿糖胞苷脂质体注射液甲嗪咪唑胺放线菌素(放线菌素D、Cosmegan)、盐酸道诺霉素柠檬酸道诺霉素脂质体注射液地塞米松、多烯紫杉醇盐酸多柔比星依托泊苷磷酸氟达拉滨5-氟尿嘧啶 氟化酰胺替扎他滨(tezacitibine)、吉西他滨(二氟脱氧胞二磷胆碱)、羟基脲依达比星(Idarubicin)依弗酰胺伊立替康L-天冬酰胺酸酶亚叶酸钙、霉法兰6-巯基嘌呤胺甲喋呤米托蒽醌米罗他(mylotarg)、紫杉醇白蛋白结合型紫杉醇(nab-paclitaxel)phoenix(Yttrium90/MX-DTPA)、喷司他丁、具有双氯乙基亚硝脲植入物的聚苯丙生20柠檬酸他莫西芬替尼泊苷6-硫代鸟嘌呤、噻替派、替拉扎明注射用盐酸拓扑替康长春碱长春新碱和长春瑞滨
用于与本发明的化合物组合的特别感兴趣的其他化合物包括：EGFR抑制剂，诸如西妥昔单抗(cetuximab)、帕尼单抗(panitumimab)、厄罗替尼(erlotinib)、吉非替尼(gefitinib)和EGFRi NOS；MAPK途径抑制剂，诸如BRAFi、panRAFi、MEKi、ERKi；PI3K-mTOR途径抑制剂，诸如α特异性PI3Ki、泛I类PI3Ki和mTOR/PI3Ki，特别地，依维莫司(everolimus)及其衍生物。
经由特定机制起作用的特定化合物和化合物类别可特别有效地与PRMT5抑制剂(例如，MTA无竞争性、非竞争性或混合模式PRMT5抑制剂或MTA协同结合剂，例如式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物或其药学上可接受的盐)结合。例如，已知PRMT5与SWI/SNF染色质重建复合物连同其他共阻遏蛋白分子(如HDAC2)缔合。当赖氨酸残基由HDAC酶去乙酰化时，PRMT5对靶标H4R3和H3R8的活性得到增强。因此，当与PRMT5抑制剂结合使用时，HDAC抑制剂可为有效的(例如，协同)(WO 011/079236)。
因此，本公开的PRMT5抑制剂可与例如以下的其他化合物组合使用：HDAC抑制剂或DNA甲基转移酶抑制剂。在一些实施方案中，HDAC抑制剂为曲古霉素A。在一些实施方案中，DNA甲基转移酶抑制剂为5-氮杂胞苷。
PRMT5抑制剂(例如，MTA无竞争性、非竞争性或混合模式PRMT5抑制剂或MTA协同结合剂，例如式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物或其药学上可接受的盐)也可与MAT2A抑制剂一起施用或以任何次序共同施用。
PRMT5抑制剂(例如，MTA无竞争性、非竞争性或混合模式PRMT5抑制剂或MTA协同结合剂，例如式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物或其药学上可接受的盐)也可与和PRMT5功能相互作用或为其所需要的蛋白质的抑制剂(包括但不限于pICIN、WDR77或RIOK1)一起施用或以任何次序共同施用。
PRMT5抑制剂(例如，MTA无竞争性、非竞争性或混合模式PRMT5抑制剂或MTA协同结合剂，例如式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物或其药学上可接受的盐)可与HDM2抑制剂和/或5-FU组合施用。由于CDKN2A缺失引起了HDM2活化，所以观测到野生型p53的损失。这与MTAP缺失细胞不能自内源性甲基-硫腺苷(MTA)再利用ATP和甲硫氨酸有关。因此，肿瘤细胞针对5-FU和其他嘌呤类似物(例如，6-硫鸟嘌呤、6-巯基嘌呤)具有不同敏感性。
考虑到CDKN2A/MTAP损失也导致p16/CDK4/6途径失调，PRMT5抑制剂(例如，MTA无竞争性、非竞争性或混合模式PRMT5抑制剂或MTA协同结合剂，例如式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物或其药学上可接受的盐)可与CDK4抑制剂组合施用，所述CDK4抑制剂包括但不限于LEE011或CDK 4/6抑制剂(例如，帕博西尼瑞博西尼(ribociclib)和玻玛西尼
PRMT5抑制剂(例如，MTA无竞争性、非竞争性或混合模式PRMT5抑制剂或MTA协同结合剂，例如式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物或其药学上可接受的盐)可与取决于个别靶肿瘤对相关途径的依赖性的靶向治疗组合施用，如通过合适预测标记所确定，所述标记包括但不限于：HDM2i、PI3K/mTOR-I、MAPKi、RTKi、EGFRi、FGFRi、METi、IGFiRi、JAKi和WNTi的抑制剂。
PRMT5抑制剂(例如，MTA无竞争性PRMT5抑制剂，例如式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物或其药学上可接受的盐)可与免疫疗法组合施用。
在一些实施方案中，本文所述的化合物与癌症免疫疗法(例如，检查点封闭抗体)一起用于治疗例如患有本文所述的疾病或病症(例如，本文所述的癌症))的受试者(例如，人受试者)。
在一些实施方案中，免疫治疗剂为抗CTLA-4抗体(例如，伊匹单抗(ipilimumab)、曲美单抗(tremelimumab))。
在一些实施方案中，免疫治疗剂为抗PD-1配体(例如，PD-LI(例如，B7-HI或CD274)；或PD-L2(例如，B7-DC或CD273))。在一些实施方案中，免疫治疗剂为抗PD-1抗体(例如，抗PD-1或抗PD-L1，例如纳武单抗(nivolumab)(即MDX-1106、BMS-936558、ONO-4538)；CT-011；AMP-224；派姆单抗(pembrolizumab)；皮立珠单抗(pidilizumab)；或MK-3475)。在一些实施方案中，免疫治疗剂为抗PD-L1抗体(例如，BMS936559(即，MDX-1105)；MEDI4736；MSB0010718C(阿维鲁单抗(avelumab))；或MPDL-3280A)。
在一些实施方案中，免疫治疗剂为检查点封闭抗体(例如，抗TIM3、抗LAG3、抗TIGIT包括IMP321和MGA271)。
在一些实施方案中，免疫治疗剂为基于细胞的疗法。在一些实施方案中，基于细胞的疗法为CAR-T疗法。
在一些实施方案中，免疫治疗剂为共刺激抗体(例如，抗4-1BB、抗OX40、抗GITR、抗CD27、抗CD40)。
在一些实施方案中，免疫治疗剂为癌症疫苗，诸如新抗原。这些疫苗可使用肽或RNA(例如，)来开发。
在一些实施方案中，免疫治疗剂为溶瘤病毒。
在一些实施方案中，免疫治疗剂为STING途径激动剂。示例性STING激动剂包括MK-1454和ADU-S100。
PRMT5抑制剂(例如，MTA无竞争性、非竞争性或混合模式PRMT5抑制剂或MTA协同结合剂，例如式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物或其药学上可接受的盐)可与疾病特异性huMAB(例如抗HER3 huMAB)组合施用。
PRMT5抑制剂(例如，MTA无竞争性、非竞争性或混合模式PRMT5抑制剂或MTA协同结合剂，例如式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物或其药学上可接受的盐)可与依赖于相关表面靶标在感兴趣的靶肿瘤上的表达的ADC/ADCC组合施用。
一些患者可能在施用期间或之后经历对本发明的化合物和/或其他抗癌剂的过敏反应；因此，通常施用抗过敏剂以使过敏反应的风险最小化。合适抗过敏剂包括皮质类固醇，包括但不限于地塞米松(例如，)、氯地米松(例如，)、氢皮质酮(也称为皮质酮、氢皮质酮琥珀酸钠、氢皮质酮硫酸钠，且以商品名磷酸、Hydrocort和销售)、普赖苏浓(以商品名和销售)、普赖苏(以商品名和销售)、甲基普赖苏秾(也称为6-甲基普赖苏秾、甲基普赖苏秾乙酸酯、甲基普赖苏秾琥珀酸钠，以商品名 和销售)；抗组胺剂，诸如苯海拉明(例如，)、羟嗪和塞浦西他啶；和支气管扩张剂，诸如β-肾上腺素受体激动剂、阿布叔醇(albuterol)(例如，)和叔丁喘宁(terbutaline)
一些患者可能在施用本发明的化合物和/或其他抗癌剂期间和之后经历干呕；因此，在预防干呕(上胃)和呕吐时使用止吐剂。合适止吐剂包括阿瑞吡坦奥丹西隆(ondansetron)格拉息冲HCl劳拉西泮地塞米松普鲁氯嗪卡索匹坦(casopitant)(和)及其组合。
通常开具缓解在治疗期期间经历的疼痛的药剂的处方以使患者更舒适。通常使用常用非处方止痛剂，诸如然而，类鸦片止痛剂也可用于中度或重度疼痛，其包括但不限于氢可酮/乙酰胺苯酚或氢可酮/乙酰胺苯酚(例如，)、吗啡(例如，或)、羟考酮(例如，或)、盐酸氧化吗啡酮和酚太尼(例如，)。
为了保护正常细胞免于治疗毒性且限制器官毒性，可使用细胞保护剂(诸如神经保护剂、自由基清除剂、心脏保护剂、蒽环外渗中和剂、营养素等)作为辅助疗法。合适细胞保护剂包括阿咪福汀麸酰胺、地美司(dimesna)美司纳(mesna)地拉佐生(dexrazoxane)(或)、扎利罗登(xaliproden)和菊白叶酸(也称为菊白叶酸钙、嗜橙菌因子和醛叶酸)。
通过编码、通用名或商品名识别的活性化合物的结构可自实际版本的标准纲要“The Merck Index”或数据库(例如，Patents International(例如，IMS WorldPublications))获得。
可与本发明的化合物组合使用的上述化合物可如本领域中所述(包括但不限于上文引用的文献)来制备和施用。
在一个实施方案中，本发明提供了药物组合物，其包含本发明的至少一种化合物(例如，PRMT5抑制剂，例如式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物)或其药学上可接受的盐连同药学上可接受的载剂，所述药物组合物适用于单独或连同其他抗癌剂一起施用于人或动物受试者。
在一个实施方案中，本发明提供了治疗患有或已诊断为患有MTAP缺乏和/或MTA累积增殖性病症(例如，癌症)的人或动物受试者的方法，其包括向有需要的受试者施用治疗有效量的本发明的化合物(例如，式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物)或其药学上可接受的盐与第二治疗剂的组合。
在一个实施方案中，本发明提供了治疗有需要的受试者的MTAP缺乏和/或MTA累积增殖性病症(例如，癌症)的方法，其包括向受试者施用治疗有效量的本发明的化合物(例如，式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物)或其药学上可接受的盐与第二治疗剂的组合。
具体而言，组合物将一起被配制为组合治疗剂或单独施用。
在组合疗法中，本发明的化合物和其他抗癌剂可同时、并行或依次(无特定时间限制)施用，其中此种施用在患者体内提供两种化合物的治疗有效水平。
在一优选实施方案中，本发明的化合物(例如，式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物或其药学上可接受的盐)和其他抗癌剂通常通过输注或经口以任何次序依次施用。给药方案可根据疾病的状态、患者的身体健康、个别药物的安全性概况和个别药物的耐受性以及主治医师和施用所述组合的开业医生熟知的其他标准而改变。本发明的化合物和其他抗癌剂可根据用于治疗的特定周期在彼此间隔数分钟、数小时、数天或甚至数周施用。此外，周期可包括在治疗周期期间且在每次药物施用的不同剂量下一种药物比另一种药物更频繁施用。
在本发明的另一方面中，提供了药盒，其包括本发明的一种或多种化合物(例如，式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物或其药学上可接受的盐)和如本文所公开的第二治疗剂。代表性药盒包括：(a)本发明的化合物或其药学上可接受的盐(例如，式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物或其药学上可接受的盐)；(b)至少一种其他治疗剂，例如，如上文所指示，由此此种药盒可包括包装插页或其他标签，包括施用指导。
本发明的化合物(例如，式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物或其药学上可接受的盐)也可与已知治疗过程(例如，激素或尤其辐射的施用)组合使用。本发明的化合物可特别用作辐射增敏剂，尤其用于治疗对辐射疗法表现出较差敏感性的肿瘤。
在某些情况下，本发明的化合物与其他治疗剂组合，所述其他治疗剂包括但不限于其他抗癌剂、抗过敏剂、抗吐剂(或止吐剂)、镇痛药、细胞保护剂及其组合。
PRMT5抑制剂(例如，MTA无竞争性、非竞争性或混合模式PRMT5抑制剂或MTA协同结合剂，例如式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物或其药学上可接受的盐)也可与一种或多种DNA损伤途径抑制剂一起施用或以任何次序共同施用。在一些实施方案中，DNA损伤途径抑制剂选自由以下组成的组：博来霉素、ATM抑制剂(例如，AZD1390)、USP1抑制剂、WEE1抑制剂(例如，AZD1775)和Chk1抑制剂(例如，AZD7762)。在一些实施方案中，DNA损伤途径抑制剂为DNA烷基化剂。
在一个实施方案中，本发明提供了药物组合物，其包含本发明的至少一种化合物(例如，PRMT5抑制剂，例如式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物)或其药学上可接受的盐连同药学上可接受的载剂，所述药物组合物适用于单独或连同PARP抑制剂一起施用于人或动物受试者。在一些实施方案中，PARP抑制剂选自由以下组成的组：奥拉帕尼(olaprib)、卢卡帕尼(rucaparib)、尼拉帕尼(niraparib)、他拉唑帕尼(talazoparib)、维利帕尼(veliparib)、帕米帕尼(pamiparib)、CEP 9722、E7016、伊尼帕利卜(iniparib)和3-氨基苯甲酰胺。
患者选择和监测
在一个方面中，本发明提供了一种确定患有或已诊断为患有癌症的受试者(例如，癌症患者)是否将对使用PRMT5抑制剂(例如，MTA-无竞争性PRMT5抑制剂，例如，式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物或其药学上可接受的盐)的治疗性治疗有反应的方法，其包括以下步骤：
a)使自所述受试者获得的测试样品与能够检测具有MTAP缺乏和/或MTA累积的人癌细胞的试剂接触；和
b)比较测试样品与参考(例如，取自非癌或正常对照受试者的参考样品)，
其中所述测试样品中存在MTAP缺乏和/或MTA累积指示受试者将对使用PRMT5抑制剂(例如，MTA-无竞争性、非竞争性或混合模式PRMT5抑制剂或MTA协同结合剂，例如式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物或其药学上可接受的盐)的治疗性治疗有反应。
在一个方面中，本发明提供了一种确定癌症是否将对使用PRMT5抑制剂(例如，MTA无竞争性、非竞争性或混合模式PRMT5抑制剂或MTA协同结合剂，例如式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物或其药学上可接受的盐)的治疗性治疗有反应的方法，其包括以下步骤：
a)使自患有或已诊断为患有所述癌症的受试者获得的测试样品与能够检测具有MTAP缺乏和/或MTA累积的人癌细胞的试剂接触；和
b)比较测试样品与参考(例如，取自非癌或正常对照受试者的参考样品)，
其中所述测试样品中存在MTAP缺乏和/或MTA累积指示癌症将对使用PRMT5抑制剂(例如，MTA-无竞争性、非竞争性或混合模式PRMT5抑制剂或MTA协同结合剂，例如式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物或其药学上可接受的盐)的治疗性治疗有反应。在一些实施方案中，癌症为神经胶质母细胞瘤、恶性外周神经鞘瘤(MPNST)、食道癌(例如，食道鳞状细胞癌或食道腺癌)、膀胱癌(例如，膀胱尿路上皮癌)、胰腺癌(例如，胰腺腺癌)、间皮瘤、黑色素瘤、非小细胞肺癌(NSCLC；例如，肺鳞状或肺腺癌)、星形细胞瘤、未分化多形性肉瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、白血病、头颈癌、胃腺癌、黏液性纤维肉瘤、胆管肉瘤、脑癌、胃癌、肾癌、乳腺癌、子宫内膜癌、尿路癌、肝癌、软组织癌、胸膜癌和大肠癌或肉瘤。在一些实施方案中，所述方法还包括确定癌细胞中PRMT5的水平的步骤。当确定PRMT5抑制剂的治疗有效剂量时，可考虑PRMT5表达水平。
在一个方面中，本发明提供了一种确定癌细胞对PRMT5抑制(例如，使用MTA无竞争性PRMT5抑制剂，例如，式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物或其药学上可接受的盐进行抑制)的敏感性的方法，其包括以下步骤：
a)测定所述癌细胞中MTAP的产生、水平、活性、表达或存在；
b)比较癌细胞中MTAP的产生、水平、活性、表达或存在与分别非癌或正常对照细胞中MTAP的产生、水平、活性、表达或存在，
其中癌细胞中水平、活性或表达降低指示MTAP缺乏，且其中MTAP缺乏指示所述癌细胞对PRMT5抑制剂敏感。
在一些实施方案中，癌症为神经胶质母细胞瘤、恶性外周神经鞘瘤(MPNST)、食道癌(例如，食道鳞状细胞癌或食道腺癌)、膀胱癌(例如，膀胱尿路上皮癌)、胰腺癌(例如，胰腺腺癌)、间皮瘤、黑色素瘤、非小细胞肺癌(NSCLC；例如，肺鳞状或肺腺癌)、星形细胞瘤、未分化多形性肉瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、白血病、头颈癌、胃腺癌、黏液性纤维肉瘤、胆管肉瘤、脑癌、胃癌、肾癌、乳腺癌、子宫内膜癌、尿路癌、肝癌、软组织癌、胸膜癌和大肠癌或肉瘤。
在一个实施方案中，本发明提供了一种确定癌细胞对PRMT5抑制剂(例如，MTA无竞争性、非竞争性或混合模式PRMT5抑制剂或MTA协同结合剂，例如式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物或其药学上可接受的盐)的敏感性的方法，其包括以下步骤：
a)测定癌细胞和正常对照细胞中MTAP基因或其基因产物的水平、活性或表达，其中癌细胞中水平、活性或表达降低指示MTAP缺乏；b)测定所述癌细胞中的PRMT5表达；c)比较癌细胞和正常对照细胞中的PRMT5表达与PRMT5表达；其中PRMT5表达的相似性和所述癌细胞中所述MTAP缺乏的存在指示所述细胞对PRMT5抑制剂敏感。
在一些实施方案中，癌症为神经胶质母细胞瘤、恶性外周神经鞘瘤(MPNST)、食道癌(例如，食道鳞状细胞癌或食道腺癌)、膀胱癌(例如，膀胱尿路上皮癌)、胰腺癌(例如，胰腺腺癌)、间皮瘤、黑色素瘤、非小细胞肺癌(NSCLC；例如，肺鳞状或肺腺癌)、星形细胞瘤、未分化多形性肉瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、白血病、头颈癌、胃腺癌、黏液性纤维肉瘤、胆管肉瘤、脑癌、胃癌、肾癌、乳腺癌、子宫内膜癌、尿路癌、肝癌、软组织癌、胸膜癌和大肠癌或肉瘤。
在一个方面中，本发明提供了一种治疗患有或已诊断为患有癌症(例如，与MTAP缺乏和/或MTA累积相关的癌症)的受试者的治疗性方法，其包括以下步骤：
a)评估自所述受试者获得的测试样品中MTAP和/或MTA的水平(例如，通过使样品与能够检测自所述受试者获得的测试样品中的人MTAP缺乏和/或MTA累积癌细胞的试剂接触)，其中MTA水平可直接(例如，通过ELISA或LC-MS/MS)或间接(例如，通过SDMA修饰的蛋白ELISA或IHC或通过RNA剪接)评估；
b)比较测试样品与参考(例如，取自非癌或正常对照受试者的参考样品)，其中所述测试样品中的MTAP缺乏和/或MTA累积指示所述受试者将对使用PRMT5抑制剂的治疗性治疗有反应；和
c)向步骤b)中鉴别的受试者施用治疗有效量的PRMT5抑制剂(例如，MTA无竞争性、非竞争性或混合模式PRMT5抑制剂或MTA协同结合剂，例如式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物或其药学上可接受的盐)。
在一个方面中，本发明提供了一种治疗有需要的受试者的癌症(例如，与MTAP缺乏和/或MTA累积相关的癌症)的治疗性方法，其包括以下步骤：
a)评估自所述受试者获得的测试样品中MTAP和/或MTA的水平(例如，通过使样品与能够检测人MTAP缺乏和/或MTA累积癌细胞的试剂接触)，其中MTA水平可直接(例如，通过ELISA或LC-MS/MS)或间接(例如，通过SDMA修饰的蛋白ELISA或IHC或通过RNA剪接)评估；
b)比较测试样品与参考(例如，取自非癌或正常对照受试者的参考样品)，其中所述测试样品中的MTAP缺乏和/或MTA累积指示所述癌症将对使用PRMT5抑制剂(例如MTA无竞争性、非竞争性或混合模式PRMT5抑制剂或MTA协同结合剂)的治疗性治疗有反应；和
c)向步骤b)中鉴别的受试者施用治疗有效量的PRMT5抑制剂(例如，MTA无竞争性、非竞争性或混合模式PRMT5抑制剂或MTA协同结合剂，例如式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物或其药学上可接受的盐)。
在一些实施方案中，癌症为神经胶质母细胞瘤、恶性外周神经鞘瘤(MPNST)、食道癌(例如，食道鳞状细胞癌或食道腺癌)、膀胱癌(例如，膀胱尿路上皮癌)、胰腺癌(例如，胰腺腺癌)、间皮瘤、黑色素瘤、非小细胞肺癌(NSCLC；例如，肺鳞状或肺腺癌)、星形细胞瘤、未分化多形性肉瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、白血病、头颈癌、胃腺癌、黏液性纤维肉瘤、胆管肉瘤、脑癌、胃癌、肾癌、乳腺癌、子宫内膜癌、尿路癌、肝癌、软组织癌、胸膜癌和大肠癌或肉瘤。
在一些实施方案中，所述方法还包括确定癌细胞中PRMT5的水平的步骤。
在一个方面中，本发明提供了一种治疗患有或已诊断为患有与MTAP缺乏和/或MTA累积相关的癌症的受试者的治疗性方法，其包括以下步骤：
a)评估自所述受试者获得的测试样品中MTAP和/或MTA的水平(例如，通过使样品与能够检测人MTAP缺乏和/或MTA累积癌细胞的试剂接触)，其中MTA水平可直接(例如，通过ELISA或LC-MS/MS)或间接(例如，通过SDMA修饰的蛋白ELISA或IHC或通过RNA剪接)评估；
b)比较测试样品与参考样品(例如，取自非癌或正常对照受试者的参考样品)，其中所述测试样品中的MTAP缺乏和/或MTA累积指示所述癌症将对使用PRMT5样品抑制剂(例如MTA无竞争性、非竞争性或混合模式PRMT5抑制剂或MTA协同结合剂)的治疗性治疗有反应；和
c)向步骤b)中鉴别的受试者施用治疗有效量的组合物，其包含PRMT5抑制剂(例如，MTA无竞争性、非竞争性或混合模式PRMT5抑制剂或MTA协同结合剂，例如式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物或其药学上可接受的盐)。
在一个方面中，本发明提供了一种治疗有需要的受试者的与MTAP缺乏和/或MTA累积相关的癌症的治疗性方法，其包括以下步骤：
a)评估自所述受试者获得的测试样品中MTAP和/或MTA的水平(例如，通过使样品与能够检测人MTAP缺乏和/或MTA累积癌细胞的试剂接触)，其中MTA水平可直接(例如，通过ELISA或LC-MS/MS)或间接(例如，通过SDMA修饰的蛋白ELISA或IHC或通过RNA剪接)评估；
b)比较测试样品与参考样品(例如，取自非癌或正常对照受试者的参考样品)，其中所述测试样品中的MTAP缺乏和/或MTA累积指示所述癌症将对使用PRMT5样品抑制剂(例如MTA无竞争性、非竞争性或混合模式PRMT5抑制剂或MTA协同结合剂)的治疗性治疗有反应；和
c)向步骤b)中鉴别的受试者施用治疗有效量的组合物，其包含PRMT5抑制剂(例如，MTA无竞争性PRMT5抑制剂，例如式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物或其药学上可接受的盐)。
在一些实施方案中，癌症为神经胶质母细胞瘤、恶性外周神经鞘瘤(MPNST)、食道癌(例如，食道鳞状细胞癌或食道腺癌)、膀胱癌(例如，膀胱尿路上皮癌)、胰腺癌(例如，胰腺腺癌)、间皮瘤、黑色素瘤、非小细胞肺癌(NSCLC；例如，肺鳞状或肺腺癌)、星形细胞瘤、未分化多形性肉瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、白血病、头颈癌、胃腺癌、黏液性纤维肉瘤、胆管肉瘤、脑癌、胃癌、肾癌、乳腺癌、子宫内膜癌、尿路癌、肝癌、软组织癌、胸膜癌和大肠癌或肉瘤。
在一些实施方案中，所述方法还包括确定癌细胞中PRMT5的水平的步骤。
在一个方面中，本发明提供了一种确定患有或已诊断为患有与MTAP缺乏和/或MTA累积相关的癌症的受试者是否将对使用PRMT5抑制剂(例如，MTA无竞争性、非竞争性或混合模式PRMT5抑制剂或MTA协同结合剂，例如式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物或其药学上可接受的盐)的治疗有反应的方法，其包括以下步骤：
a)评估自所述受试者获得的测试样品中MTAP和/或MTA的水平(例如，通过使样品与能够检测人MTAP缺乏和/或MTA累积癌细胞的试剂接触)，其中MTA水平可直接(例如，通过ELISA或LC-MS/MS)或间接(例如，通过SDMA修饰的蛋白ELISA或IHC或通过RNA剪接)评估；
b)比较测试样品与参考(例如，取自非癌或正常对照受试者的参考样品)，其中所述测试样品中的MTAP缺乏和/或MTA累积指示所述受试者将对使用PRMT5抑制剂(例如MTA无竞争性、非竞争性或混合模式PRMT5抑制剂或MTA协同结合剂)的治疗性治疗有反应。
在一个方面中，本发明提供了一种确定与MTAP缺乏和/或MTA累积相关的癌症是否将对使用PRMT5抑制剂(例如，MTA无竞争性PRMT5抑制剂，例如，式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物或其药学上可接受的盐)的治疗有反应的方法，其包括以下步骤：
a)评估自患有或已诊断为患有所述癌症的受试者获得的测试样品中MTAP和/或MTA的水平(例如，通过使样品与能够检测人MTAP缺乏和/或MTA累积癌细胞的试剂接触)，其中MTA水平可直接(例如，通过ELISA或LC-MS/MS)或间接(例如，通过SDMA修饰的蛋白ELISA或IHC或通过RNA剪接)评估；
b)比较测试样品与参考(例如，取自非癌或正常对照受试者的参考样品)，其中所述测试样品中的MTAP缺乏和/或MTA累积指示所述癌症将对使用PRMT5抑制剂(例如MTA无竞争性、非竞争性或混合模式PRMT5抑制剂或MTA协同结合剂)的治疗性治疗有反应。
在一些实施方案中，癌症为神经胶质母细胞瘤、恶性外周神经鞘瘤(MPNST)、食道癌(例如，食道鳞状细胞癌或食道腺癌)、膀胱癌(例如，膀胱尿路上皮癌)、胰腺癌(例如，胰腺腺癌)、间皮瘤、黑色素瘤、非小细胞肺癌(NSCLC；例如，肺鳞状或肺腺癌)、星形细胞瘤、未分化多形性肉瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、白血病、头颈癌、胃腺癌、黏液性纤维肉瘤、胆管肉瘤、脑癌、胃癌、肾癌、乳腺癌、子宫内膜癌、尿路癌、肝癌、软组织癌、胸膜癌和大肠癌或肉瘤。
在一些实施方案中，所述方法还包括确定癌细胞中PRMT5的水平的步骤。
样品制备
本发明还提供了用于检测MTAP缺乏和/或MTA累积的测定。所述测定可包括检测例如体液诸如血液(例如，血清或血浆)、骨髓、脑脊髓液、腹膜液/胸膜液、淋巴液、腹水、浆液、痰、泪液、粪便和尿或在诸如肿瘤组织的组织中涉及MTAP缺乏和/或MTA累积的突变。肿瘤组织可为新鲜组织或保存组织(例如，福马林固定组织，例如，石蜡包埋组织)。
体液样品可使用本领域中已知的任何方法自受试者获得。用于自体液样品提取细胞DNA的方法为本领域中熟知的。通常，用清洁剂裂解细胞。在细胞裂解后，使用各种蛋白酶自DNA移除蛋白质。然后用苯酚提取DNA，使其在醇中沉淀，且将其溶解于水性溶液中。用于自体液样品提取非细胞DNA的方法也为本领域中已知的。通常，将体液样品中的细胞DNA自细胞分离，在醇中沉淀，且溶解于水性溶液中。
PRMT5选择性的检测
一旦制备了样品，即可针对MTAP缺乏和/或MTA累积进行测试，其任一者或二者指示样品对使用PRMT5抑制剂的治疗敏感。可通过本领域中已知的技术确定细胞为MTA累积的；用于检测MTA的方法包括(作为非限制性实例)液相色谱-电喷雾电离-串联式质谱法(LC-ESI-MS/MS)，如Stevens等人2010.J.Chromatogr.A.1217:3282-3288；和Kirovski等人2011Am.J.Pathol.178:1145-1152和本文引用的参考文献中所述。MTAP缺乏的检测可通过任何多种方式进行，例如：DNA测序、基于PCR的方法(包括RT-PCR)、微阵列分析、Southern印迹、Northern印迹、下一代测序和试纸条分析(dip stick analysis)。在一些实施方案中，可通过本领域中已知的任何技术评估MTAP缺乏，所述技术例如利用抗MTAP抗体或其衍生物的免疫组织化学、和/或基因组测序、或核酸杂交、或利用至少一种包含MTAP序列的至少12个连续核苷酸(nt)的序列的探针或引物的扩增，其中引物不长于约30nt。
聚合酶链反应(PCR)可用于由自肿瘤组织提取的基因组DNA或RNA进行扩增并鉴别MTAP缺乏。PCR为本领域中熟知的且详细描述于Saiki等人,Science 1988,239:487中。
提供了通过杂交检测MTAP缺乏的方法。所述方法包括通过其不能与MTAP核酸杂交来鉴别样品中的MTAP缺乏。核酸探针用标记诸如放射性同位素、荧光剂或显色剂可检测地标记。放射性同位素可包括但不限于3H、32P、33P和35S等。荧光剂可包括但不限于：FITC、德克萨斯红、玫瑰红等。
用于检测且能够与MTAP核酸杂交的探针可为约8个核苷酸至约100个核苷酸、约10个核苷酸至约75个核苷酸、约15个核苷酸至约50个核苷酸或约20至约30个核苷酸。药盒还可提供用于分析患者癌症样品的说明书，其中MTAP缺乏的存在或不存在指示受试者对使用PRMT5抑制剂的治疗敏感或不敏感。
单链构象多态性(SSCP)也可用于检测MTAP缺乏。此技术充分描述于Orita等人,PNAS 1989,86:2766-2770中。
基因表达的测量
可使用本领域中已知的任何方法或试剂进行MTAP缺乏的评估和MTAP基因表达的测量以及PRMT5基因表达的测量。
基因表达的检测可通过任何适当方法进行，所述方法包括例如检测自基因转录的mRNA的量、或由自基因转录的mRNA的逆转录所产生的cDNA的量、或由基因编码的多肽或蛋白质的量。这些方法可通过抽样基础(sample basis)对样品进行或被修改以用于高通量分析。例如，使用AffymetrixTM U133微阵列晶片。
在一个方面中，检测基因表达且通过与同针对所述生物标志物的适当探针特异性杂交的探针杂交来量化。也可使用本领域中已知的方法将探针附接至固体支持物以用于高通量筛选测定。
在一个方面中，通过将核酸样品暴露于探针修饰的晶片来确定基因的表达水平。优选在扩增步骤期间，例如用荧光标签标记所提取的核酸。
在适当严格性水平下进行标记的样品的杂交。使用检测装置定量地测量探针-核酸杂交程度。
替代地，可使用已知技术确定基因拷贝数、转录或翻译中的任一者。例如，扩增方法诸如PCR可为有用的。PCR的一般程序教示于MacPherson等人,PCR:A PracticalApproach,(IRL Press at Oxford University Press(1991))中。然而，各应用反应的PCR条件为凭经验确定的。许多参数影响反应的成功。所述参数为退火温度和时间、延伸时间、Mg2+和/或ATP浓度、pH以及引物、模板和脱氧核糖核苷酸的相对浓度。扩增之后，可通过琼脂糖凝胶电泳，接着用溴化乙锭染色和紫外线照明进行可视化来检测所得DNA片段。在一个实施方案中，通过检测附接至样品核酸的一种或多种标记来检测杂交的核酸。标记可通过本领域技术人员熟知的多种手段中的任一者来并入。然而，在一个方面中，标记在制备样品核酸的扩增步骤期间同时并入。因此，例如，使用标记的引物或标记的核苷酸的聚合酶链反应(PCR)将提供标记的扩增产物。在一单独实施方案中，使用标记的核苷酸(例如，荧光素标记的UTP和/或CTP)进行的如上文所述的转录扩增将标记并入转录的核酸中。
替代地，标记可直接添加至初始核酸样品(例如，mRNA、polyA、mRNA、cDNA等)中或在扩增完成之后添加至扩增产物中。将标记附接至核酸的手段为本领域技术人员熟知的且包括例如通过将核酸进行激酶化且随后将接合样品核酸的核酸接头附接(attachment/ligation)至标记(例如荧光团)来进行切口移位(nick translation)或末端标记(例如，使用标记的RNA)。
在一个实例中，可通过原位杂交方案测量基因表达，所述原位杂交方案可检测含有组织切片或细胞的载玻片上的RNA分子(例如，通过)。
适用于本发明中的可检测标记包括可通过分光、光化学、生物化学、免疫化学、电学、光学或化学手段检测的任何组合物。本发明中的有用标记包括用于用标记的卵白素缀合物进行染色的生物素、磁性珠粒(例如DynabeadsTM)、荧光染料(例如荧光素、德克萨斯红、玫瑰红、绿色荧光素蛋白等)、放射性标记(例如，3H、125I、35S、14C或32P)、酶(例如辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶和ELISA中常用的其他酶)和热量标记诸如胶态金或有色玻璃或塑胶(例如，聚苯乙烯、聚丙烯、乳胶等)珠粒。
标记的检测为本领域技术人员熟知的。因此，例如，放射性标记可使用照相胶片或闪烁计数器进行检测，荧光标志物可使用检测发射光的光检测器进行检测。酶标记通常通过为酶提供基质且检测由酶对基质的作用所产生的反应产物来检测，且热量标记通过简单可视化有色标记来检测。可检测标记可在杂交之前或之后添加至靶(样品)核酸，诸如WO97/10365中所述。这些可检测标记在杂交之前直接附接或并入至靶(样品)核酸。相比之下，“间接标记”在杂交之后接合至杂交双链体。一般而言，间接标记附接至在杂交之前已附接至靶核酸的结合部分。例如，靶核酸可在杂交之前被生物素化。在杂交之后，抗生物素蛋白缀合的荧光团将结合携带生物素的杂交双链体，从而提供易于检测的标记。对于标记核酸和检测标记的杂交核酸的方法的详细综述，参见Laboratory Techniques inBiochemistry and Molecular Biology,第24卷:Hybridization with Nucleic AcidProbes,P.Tijssen编Elsevier,N.Y.(1993)。
多肽的检测
可通过检查蛋白质表达或蛋白质产物来确定MTAP的蛋白质水平。确定蛋白质水平涉及测量在选择性识别且结合自受试者获得的样品中生物标志物的多肽的抗体之间发生的任何免疫特异性结合的量，以及比较此量与对照样品中的至少一种生物标志物的免疫特异性结合的量。
在本领域中多种技术可用于蛋白质分析。所述技术包括但不限于放射性免疫测定、ELISA(酶联免疫吸附测定)、“三明治”免疫测定、免疫放射量测定、原位免疫测定(使用例如胶态金、酶或放射性同位素标记)、Western印迹分析、免疫沉淀测定、免疫荧光测定、流式细胞术、免疫组织化学、HPLC、质谱、共轭焦显微镜、酶测定、表面等离子共振和PAGE-SDS。
相邻生物标志物
若干其他生物标志物在染色体9上在MTAP附近或与其相邻。CDKN2A常常(如果不是总是)连同MTAP一起缺失。此区域中的额外基因或假基因包括：C9orf53、ERVFRD-3、TUBB8P1、KHSRPP1、MIR31和MIR31HG。
在所述方法的一些实施方案中，MTAP缺乏的细胞也缺乏CDKN2A。在一些实施方案中，MTAP缺乏的细胞也缺乏以下中的一者或多者：CDKN2A、C9orf53、ERVFRD-3、TUBB8P1、KHSRPP1、MIR31和MIR31HG。
因此，在涉及评估细胞的MTAP缺乏或确定细胞是否为MTAP缺乏的步骤的各种方法中，此步骤可包括确定细胞是否缺乏这些标志物中的一者或多者的步骤：CDKN2A、C9orf53、ERVFRD-3、TUBB8P1、KHSRPP1、MIR31和MIR31HG。
因此，在一些实施方案中，本公开涵盖：一种确定患有或已诊断为患有癌症的受试者是否将对使用PRMT5抑制剂(例如，MTA无竞争性、非竞争性或混合模式PRMT5抑制剂或MTA协同结合剂)的治疗性治疗有反应的方法，其包括以下步骤：
a)评估自所述受试者获得的测试样品的MTAP缺乏且评估来自非癌或正常对照受试者的参考样品的MTAP缺乏，其中测试样品中相对于参考样品的MTAP缺乏指示受试者将对使用PRMT5抑制剂(例如，MTA无竞争性PRMT5抑制剂，例如，式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物或其药学上可接受的盐)的治疗性治疗有反应；其中通过评估以下生物标志物中的一者或多者的缺乏来评估MTAP缺乏：CDKN2A、C9orf53、ERVFRD-3、TUBB8P1、KHSRPP1、MIR31和MIR31HG，且其中所述方法还可包括以下步骤：
b)确定受试者的MTAP的水平，其中步骤a)和步骤b)可以任何次序进行；
c)向受试者施用治疗有效量的PRMT5抑制剂(例如，MTA无竞争性、非竞争性或混合模式PRMT5抑制剂或MTA协同结合剂，例如式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物或其药学上可接受的盐)；和
d)在步骤c)后确定受试者的PRMT5活性水平，其中PRMT5活性水平降低与癌症增殖的抑制相关，且其中步骤c)和步骤d)在步骤a)和步骤b)后进行。
在一些实施方案中，本公开涵盖：一种确定癌症是否将对使用PRMT5抑制剂(例如，MTA无竞争性、非竞争性或混合模式PRMT5抑制剂或MTA协同结合剂)的治疗性治疗有反应的方法，其包括以下步骤：
a)评估自患有或已诊断为患有癌症的受试者获得的测试样品的MTAP缺乏且评估来自非癌或正常对照受试者的参考样品的MTAP缺乏，其中测试样品中相对于参考样品的MTAP缺乏指示癌症将对使用PRMT5抑制剂(例如，MTA无竞争性、非竞争性或混合模式PRMT5抑制剂或MTA协同结合剂，例如式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物或其药学上可接受的盐)的治疗性治疗有反应；其中通过评估以下生物标志物中的一者或多者的缺乏来评估MTAP缺乏：CDKN2A、C9orf53、ERVFRD-3、TUBB8P1、KHSRPP1、MIR31和MIR31HG，且其中所述方法还可包括以下步骤：
b)确定受试者的MTAP的水平，其中步骤a)和步骤b)可以任何次序进行；
c)向受试者施用治疗有效量的PRMT5抑制剂(例如，MTA无竞争性PRMT5抑制剂，例如式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物或其药学上可接受的盐)；和
d)在步骤c)后确定受试者的PRMT5活性水平，其中PRMT5活性水平降低与癌症增殖的抑制相关，且其中步骤c)和步骤d)在步骤a)和步骤b)后进行。
测定生物标志物和PRMT5抑制剂治疗
许多患者分层策略可用于找到可能对使用MTA无竞争性、非竞争性或混合模式PRMT5抑制剂或MTA协同结合剂(例如，本发明的PRMT5抑制剂，例如式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物或其药学上可接受的盐)的PRMT5抑制敏感的患者，包括但不限于测试MTAP缺乏和/或MTA累积。
一旦已测定了患者的MTAP缺乏和/或MTA累积且预测对使用PRMT5抑制剂的治疗敏感，向患者施用任何PRMT5抑制剂(例如，MTA无竞争性、非竞争性或混合模式PRMT5抑制剂或MTA协同结合剂，例如式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物或表1的化合物或其药学上可接受的盐)可在整个治疗过程中以一个剂量连续或间歇地实现。确定最有效的施用手段和剂量的方法为本领域技术人员熟知的且将根据用于疗法的组合物、疗法的目的、待治疗的靶细胞和正治疗的受试者而变化。单次或多次施用可以由治疗医师选择的剂量水平和模式进行。可凭经验调节施用所述剂的合适剂量制剂和方法。
药盒
在一些实施方案中，提供了与本发明的方法相关的药盒。
在一个实施方案中，提供了一种用于预测患有或已诊断为患有MTAP缺乏相关癌症的受试者对使用PRMT5抑制剂的治疗的敏感性的方法。所述药盒包括：i)能够检测人MTAP缺乏和/或MTA累积癌细胞的试剂；和ii)关于如何使用所述药盒的说明书。
实施例
为了使本文所述的本发明可得到更完整理解，阐述以下实施例。提供了本申请中描述的合成和生物学实施例以说明本文所提供的化合物、药物组合物和方法且不应以任何方式解释为限制其范围。在以下合成实施例中，以数字次序列出反应序列内实验程序的描述。
缩写
总则
ADDP 1,1'-(氮杂二羰基)二哌啶
anhy.无水
aq.水性
satd.饱和
min(s)分钟
hr(s)小时
mL 毫升
mmol 毫摩耳
mol 摩耳
MS 质谱
NMR 核磁共振
TLC 薄层色谱
HPLC 高效液相色谱
Me 甲基
i-Pr 异丙基
t-Bu 叔丁基
tBuXPhos 2-二-叔丁基膦基-2',4',6'-三异丙基联苯
Ph 苯基
Et 乙基
Bz 苯甲酰基
RuPhos 2-二环己基膦基-2',6'-二异丙氧基联苯光谱
Hz 赫兹
δ 化学位移
J 耦合常数
s 单峰
d 双峰
t 三重峰
q 四重峰
m 多重峰
br 宽峰
qd 双峰的四重峰
dquin 四重峰的双峰
dd 双峰的双峰
dt 三重峰的双峰
溶剂和试剂
DAST 二乙基氨基硫三氟化物
CHCl3 氯仿
DCM 二氯甲烷
DMF 二甲基甲酰胺
Et2O 乙醚
EtOH 乙醇
EtOAc 乙酸乙酯
MeOH 甲醇
MeCN乙腈
PE 石油醚
THF 四氢呋喃
DMSO 二甲亚砜
t-BuOK 叔丁醇钾
9-BBN 9-硼杂双环[3.3.1]壬烷
AcOH 乙酸
HCl 盐酸
H2SO4硫酸
NH4Cl 氯化铵
KOH 氢氧化钾
NaOH 氢氧化钠
K2CO3碳酸钾
Na2CO3碳酸钠
TFA三氟乙酸
Na2SO4硫酸钠
NaBH4 硼氢化钠
NaHCO3 碳酸氢钠
LiHMDS六甲基二甲硅烷基酰胺化锂
NaBH4 硼氢化钠
Et3N 三乙胺
Py 吡啶
PCC 氯铬酸吡啶
DMAP 4-(二甲基氨基)吡啶
DIPEA N,N-二异丙基乙胺
BINAP 2,2'-双(二苯基磷烷基)-1,1'-联萘
dppf 1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁
PEP磷(烯醇)丙酮酸
LDH乳酸去氢酶
DTT DL-二硫苏糖醇
BSA牛血清白蛋白
NADH还原的β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸
Pd(t-Bu3P)2双(叔丁基膦)钯(0)
AcCl乙酰氯
i-PrMgCl异丙基氯化镁
TBSCl叔丁基(氯)二甲基硅烷
(i-PrO)4Ti四异丙醇钛
BHT 2,6-二-叔丁基-4-甲基苯氧化物
BzCl 苯甲酰氯
CsF 氟化铯
DCC 二环己基碳二亚胺
DMP戴斯-马丁高碘烷(Dess-Martin periodinane)
EtMgBr乙基溴化镁
EtOAc 乙酸乙酯
TEA 三乙胺
AlaOH 丙氨酸
TBAF 四正丁基氟化铵
TBS 叔丁基二甲基甲硅烷基
TMS 三甲基甲硅烷基
TMSCF3(三氟甲基)三甲基硅烷
Ts 对甲苯磺酰基
Bu 丁基
Ti(OiPr)4四异丙氧基钛
LAH 氢化锂铝
LDA 二异丙基酰胺化锂
LiOH.H2O氢氧化锂水合物
MAD双(2,6-二-叔丁基-4-甲基苯氧化物)甲基铝
NBS N-溴琥珀酰亚胺
Na2SO4硫酸钠
Na2S2O3硫代硫酸钠
PE石油醚
MeCN乙腈
Boc 叔丁氧基羰基
MTBE 甲基叔丁基醚
DIAD 氮杂二甲酸二异丙酯
一般实验说明：
在以下实施例中，化学试剂购自商业来源(诸如Alfa、Acros、Sigma Aldrich、TCI和Shanghai Chemical Reagent Company)，且不经进一步纯化即使用。
在一些实施例中，使用HPLC(H2O-MeOH；装备有DAD和质量检测器的Agilent1260Infinity系统，Waters Sunfire C18 OBD制备型柱，5μm，19mm X 100mm和SunFire C18制备型保护筒，10μm，19mm X 10mm)进行中间体和最终化合物的纯化。将材料溶解于0.7mL DMSO中。流速：30mL/min。经由分析型LCMS检查所获得级分的纯度。当以溶液形式在色谱之后直接获得各级分后，记录其光谱。加热至80℃之后，在N2流动下蒸发溶剂。基于色谱后LCMS分析，将级分联合。将固体级分溶解于0.5mL MeOH中且将其转移至预称量的标记小瓶中。加热至80℃之后，在N2流动下再次蒸发所获得的溶液。干燥之后，使产物经历使用乙腈-水混合物的冻干且最终通过LCMS和1H NMR表征。
使用Brucker AVANCE DRX 500、Bruker 400分光计或Varian UNITYplus 400记录核磁共振(NMR)光谱。使用溶剂残留峰(CHCl3：7.27ppm)(甲醇-d4：3.31ppm)(DMSO-d6：2.50ppm)或四甲基硅烷(0.00ppm)作为内标来将质子的化学位移报告为δ标度的百万分之一。在δ标度上自CDCl3的中央峰(77.00ppm)(甲醇-d4：49.15ppm)(DMSO-d6：39.51ppm)以ppm为单位报告13C NMR光谱的化学位移。如下表示数据：化学位移、多重性(s＝单峰，d＝双峰，t＝三重峰，q＝四重峰，qn＝五重峰，sx＝六重峰，sp＝七重峰，m＝多重峰，br＝宽峰)、耦合常数(J,Hz)和积分。
在某些实施例中，在具有DAD\ELSD和Agilent LC\MSD VL(G1956A)、SL(G1956B)质谱仪的Agilent 1100系列LC/MSD系统或具有DAD\ELSD和Agilent LC\MSD SL(G6130A)、SL(G6140A)质谱仪的Agilent 1200系列LC/MSD系统上记录质谱。
使用阳性/阴性模式交换获得所有LC/MS数据。
柱Zorbax SB-C18 1.8μm 4.6x15mm快速解析筒(PN 821975-932)
流动相А-乙腈、0.1％甲酸
В-水(0.1％甲酸)
流速3ml/min
梯度0min-100％ B
0.01min-100％ B
1.5min-0％ B
1.8min-0％ B
1.81min-100％ B
注入体积1μl
离子化模式大气压化学离子化(APCI)
扫描范围m/z 80-1000。
其他示例性分析型LC/MS仪器和条件描述于下文中：
仪器：Agilent LC1100-MS6100系列G1956B；柱：Xbridge Shield RP-18，50*2.1mm*5μm；流动相A：具有0.05％ NH3-H2O(v％)的H2O；流动相B：MeCN；流速：1.0mL/min；波长：UV 220nm、254nm；柱温：30℃；MS离子化：ESI。
0-30CD：梯度：在2分钟内0％～30％ B且在30％下保持0.48分钟；
0-60CD：梯度：在2分钟内0％～60％ B且在60％下保持0.48分钟；
10-80CD：梯度：在2分钟内10％～80％ B且在80％下保持0.48分钟；
30-90CD：梯度：在2分钟内30％～90％ B且在90％下保持0.48分钟；
50-100CD：梯度：在2分钟内50％～100％ B且在100％下保持0.48分钟。
仪器：Agilent LC1100-MS6100系列G1956B；柱：Xtimate C18，30*2.1mm*3μm；流动相A：具有0.0375％ TFA(v％)的H2O；流动相B：具有0.01875％ TFA(v％)的MeCN；流速：0.8mL/min；波长：UV 220nm、254nm；柱温：50℃；MS离子化：ESI。
0-30AB：梯度：在3分钟内0％～30％ B且在30％下保持0.5分钟；
0-60AB：梯度：在3分钟内0％～60％ B且在30％下保持0.5分钟；
10-80AB：梯度：在3分钟内10％～80％ B且在30％下保持0.5分钟；
30-90AB：梯度：在3分钟内0％～30％ B且在30％下保持0.5分钟；
50-100AB：梯度：在3分钟内50％～100％ B且在100％下保持0.5分钟。
仪器：Shimadzu LC20-MS2010；柱：Agilent Pursit 5C18 20*2.0mm；流动相A：具有0.0375％ TFA(v％)的H2O；流动相B：具有0.01875％ TFA(v％)的MeCN；梯度：在0.7分钟内5～95％ B且在95％下保持0.4分钟；流速：1.5mL/min；波长：UV 220nm、254nm、215nm；柱温：50℃；MS离子化：ESI。
仪器：Shimadzu LC20-MS2020；柱：Agilent Pursit 5C18 20*2.0mm；流动相A：具有0.0375％ TFA(v％)的H2O；流动相B：具有0.01875％ TFA(v％)的MeCN；梯度：在0.7分钟内5～95％ B且在95％下保持0.4分钟；流速：1.5mL/min；波长：UV 220nm、254nm；柱温：50℃；MS离子化：ESI。
示例性HPLC仪器和条件
仪器：Shimadzu LC20；柱：YMC-Pack ODS-A 150*4.6mm；流动相A：具有0.06875％TFA(v％)的H2O；流动相B：具有0.0625％TFA(v％)的MeCN：流速：1.5mL/min；波长：UV220nm、215nm、254nm；柱温：40℃。
0-30：梯度：在10分钟内0～30％ B且在30％下保持5分钟；
0～60：梯度：在10分钟内0～60％ B且在60％下保持5分钟；
0-95：梯度：在10分钟内0～95％ B且在95％下保持5分钟；
10-80：梯度：在10分钟内10～80％ B且在80％下保持5分钟；
30-90：梯度：在10分钟内30～90％ B且在90％下保持5分钟；
50-100：梯度：在10分钟内50～100％ B且在100％下保持5分钟。
仪器：Shimadzu LC20；柱：Xbridge Shield RP-18 50*2.1mm，5μm；流动相A：具有0.01％ NH3-H2O的H2O；流动相B：MeCN；流速：1.2mL/min；波长：UV 220nm、215nm、254nm；柱温：40℃。
0-30CD：梯度：在6分钟内0～30％ B且在30％下保持2分钟；
0-60CD：梯度：在6分钟内0～60％ B且在60％下保持2分钟；
10-80CD：梯度：在6分钟内10～80％ B且在80％下保持2分钟；
30-90CD：梯度：在6分钟内30～90％ B且在90％下保持2分钟；
50-100CD：梯度：在6分钟内10～80％ B且在100％下保持2分钟。
仪器：Shimadzu LC20；柱：Ultimate C18 50*3mm，3μm；流动相A：具有0.06875％TFA(v％)的H2O；流动相B：具有0.0625％ TFA(v％)的MeCN：流速：1.2mL/min；波长：UV220nm、215nm、254nm；柱温：40℃。
0-30AB：梯度：在2.5分钟内0～30％ B且在30％下保持0.75分钟；
0-60AB：梯度：在2.5分钟内0～60％ B且在60％下保持0.75分钟；
5-95AB：梯度：在2.5分钟内5～95％ B且在95％下保持0.75分钟。
仪器：Shimadzu LC20；柱：Ultimate C18 50*3mm，3μm；流动相A：具有0.06875％TFA(v％)的H2O；流动相B：具有0.0625％ TFA(v％)的MeCN：流速：1.2mL/min；波长：UV220nm、215nm、254nm；柱温：40℃。
10-80AB：梯度：在4分钟内10～80％ B且在80％下保持2分钟。
示例性TLC、浓度和正相色谱。
使用硅胶60F254铝板进行分析型薄层色谱(TLC)。在UV灯(254nm)下且通过碘或浸渍在乙醇磷钼酸(PMA)或过锰酸钾(KMnO4)、接着使用热风枪加热来进行可视化。通过在20～40℃下旋转蒸发来浓缩有机溶液。通常通过使用230-400目硅胶或Agela快速二氧化硅柱的快速柱色谱来进行反应产物的纯化。
示例性手性SFC分析方法
柱：Chiralpak AD-3 150×4.6mm I.D.，3μm；流动相：A：超临界CO2；流动相B：EtOH(0.05％ DEA)；梯度：在5min内5％至40％B且在40％下保持2.5min，然后5％ B达2.5min；流速：2.5mL/min；柱温：35℃；ABPR：1500psi。
柱：Chiralpak AD-3 100×4.6mm I.D.，3μm；流动相：A：超临界CO2；流动相B：EtOH(0.1％乙醇胺)；梯度：在4.5min内5％至40％ B且在40％下保持2.5min，然后5％ B达1min；流速：2.8mL/min；柱温：40℃。
示例性制备型HPLC分离方法
碱性条件(NH3-H2O)：仪器：Gilson GX-281Liquid Handler，Gilson322泵，Gilson156UV检测器；柱：Waters Xbridge 150×25mm×5μm；流动相A：具有0.05％ NH3-H2O(v％)的H2O；流动相B：MeCN；梯度：在9.5min内22％至52％ B，保持100％ B达1min；流速：25mL/min；柱温：30℃；波长：220nm，254nm。
酸性条件(HCOOH)：仪器：Gilson GX-281Liquid Handler，Gilson322泵，Gilson156UV检测器；柱：Agela Durashell C18 150*25mm5μm；流动相A：H2O(0.0225％ HCOOH)；流动相B：MeCN；梯度：在9min内7％至37％ B，保持100％ B达0min；流速：25mL/min；柱温：30℃；波长：220nm，254nm。
酸性条件(HCl)：Gilson GX-281Liquid Handler，Gilson 322泵，Gilson 156UV检测器；柱：Xtimate C18150*25mm*5μm；流动相A：具有0.05％ HCl(v％)的H2O；流动相B：MeCN；梯度：在6.5min内0％至30％ B，保持100％ B达2.5min；流速：25mL/min；柱温：30℃；波长：220nm，254nm)。
中性条件(NH4HCO3)：(仪器：Gilson GX-281Liquid Handler，Gilson 322泵，Gilson 156UV检测器；柱：Waters Xbridge 150×25mm×5μm；流动相A：具有10mmol NH4HCO3的H2O；流动相B：MeCN；梯度：在10min内39％至69％ B，保持100％ B达2.5min；流速：25mL/min；柱温：30℃；波长：220nm，254nm)。
示例性大规模分离
碱性条件：仪器：Shimadzu LC-8A泵，Shimadzu SCL-10A VP系统控制器，ShimadzuSPD-20AV UV/VIS检测器；柱：Phenomenex Gemini C18 250*50mm*10μm；流动相A：水(0.04％ NH3-H2O+10mM NH4HCO3)；流动相B：MeCN；梯度：在26min内65％至95％ B，保持100％ B达3min；流速：110mL/min；柱温：30℃；波长：220nm，254nm。
酸性条件(TFA)：仪器：Shimadzu LC-20AP泵，Shimadzu CBM-20A系统控制器，Shimadzu SPD-20AV UV/VIS检测器；柱：Phenomenex luna C18 250×50mm×10μm；流动相A：具有0.1％ TFA(v％)的H2O；流动相B：MeCN；梯度：在15min内0％至25％ B，保持100％ B达4min；流速：120mL/min；柱温：30℃；波长：220nm，254nm。
示例性制备型手性SFC方法：
可用于分离/纯化本文所提供的对映异构体/非对映异构体的示例性手性柱包括但不限于AD-10、OB、OB-H、OD、OD-H、OF、OG、OJ和OK。
在某些实施例中，在以下条件下进行手性分离：仪器：Thar 80；柱：DaicelChiralpak AD。250×30mm I.D.10μm；流动相：超临界CO2/MeOH(0.1％ NH3-H2O，v％)＝60/40；流速：70mL/min；柱温：38℃；喷嘴压力：100巴；喷嘴温度：60℃；蒸发器温度：20℃；修整器温度(Trimmer Temperature)：25℃；波长：220nm。
材料和方法
可使用以下一般方法和程序由容易获得的起始材料制备本文所提供的化合物。应了解，除非另外说明，否则在给定典型或优选工艺条件(即反应温度、时间、反应物的摩耳比、溶剂、压力等)的情况下，也可使用其他工艺条件。最佳的反应条件可随所使用的特定反应物或溶剂而变，但所述条件可由本领域技术人员通过常规最佳化来确定。
另外，如对本领域技术人员而言将显而易见，常规保护基可能是必要的，以防止某些官能团经历不希望的反应。特定官能团的合适保护基的选择以及针对保护和脱保护的合适条件为本领域中熟知的。例如，许多保护基和它们的引入和移除描述于T.W.Greene和P.G.M.Wuts,Protecting Groups in Organic Synthesis,第2版,Wiley,New York,1991和在其中引用的参考文献中。
本文所提供的化合物可通过已知标准程序分离和纯化。此类程序包括(但不限于)重结晶、柱色谱、HPLC或超临界流体色谱(SFC)。详细呈现了关于制备本文中已列出的代表性吡唑的以下方案。本文所提供的化合物可由有机合成领域技术人员由已知或商业可获得的起始材料和试剂制备。
制备型HPLC的示例性一般方法：柱：Waters RBridge制备型10μm C18，19*250mm。流动相：乙腈、水(NH4HCO3)(30L水、24gNH4HCO3、30mL NH3.H2O)。流速：25mL/min
分析型HPLC的示例性一般方法：流动相：A：水(10mM NH4HCO3)，B：乙腈；梯度：在1.6或2min内5％-95％ B；流速：1.8或2mL/min；柱：XBridge C18，4.6*50mm，3.5μm，在45℃下。
1.常见中间体的合成
1A.(S)-5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
步骤1：4-甲基-5-氧代戊酸甲酯的合成
向99％哌啶(293.22g，3.44mol，340.16mL)和碳酸钾颗粒(95.19g，688.72mmol，41.57mL)的搅拌混合物中逐滴添加丙醛(100g，1.72mol，123.46mL)。将反应混合物在室温下搅拌18小时。18小时后，通过Na2SO4垫过滤反应混合物，且用MTBE(1000mL)洗涤。将滤液经Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩。将所获得的粗品烯胺溶解于MeCN(1000mL)中且在室温下将丙-2-烯酸甲酯(296.46g，3.44mol，310.10mL)逐滴添加到溶液中。将所得反应混合物回流16小时。16小时后，(小心)添加乙酸(206.79g，3.44mol，196.94mL)，接着添加水(1000mL)，且将所得溶液在回流下再加热16小时。然后，将混合物冷却至室温，用NaCl饱和且用MTBE(2x1000 mL)萃取。将合并的有机相经Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩，以获得粗产物4-甲基-5-氧代-戊酸甲酯(264g，粗品)。粗产物不经任何进一步纯化即用于下一步骤。
1H NMR(CDCl3,500MHz):δ1.09(d,3H),1.60-1.72(m,1H),1.94-2.00(m,1H),2.29-2.42(m,3H),3.64(s,3H),9.59(s,1H)。
步骤2：(3R,8S,8aR)-8-甲基-3-苯基四氢-2H-噁唑并[3,2-a]吡啶-5(3H)-酮的合成
将4-甲基-5-氧代-戊酸甲酯(67.8g，470.28mmol)、(2R)-2-氨基-2-苯基-乙醇(64.51g，470.28mmol)和无水硫酸钠(66.80g，470.28mmol)于DCM(800mL)和乙醚(200mL)中的混合物在0℃下搅拌5小时。5小时之后，过滤所得悬浮液，且在减压下浓缩滤液。通过柱色谱(Interchim；800g SiO2；氯仿/乙腈，其中乙腈为0至15％，流速＝120ml/min，Rv＝4-10cv.)纯化残余物，以得到呈淡黄色胶状物的产物(3R,8S,8aR)-8-甲基-3-苯基四氢-2H-噁唑并[3,2-a]吡啶-5(3H)-酮(59.8g，258.55mmol，54.98％产率)。
1H NMR(CDCl3,500MHz):δ1.20(d,J＝6.3Hz,3H),1.42-1.56(m,1H),1.86-2.00(m,2H),2.22-2.44(m,2H),4.00(dd,J＝8.8,1.2Hz,1H),4.07-4.17(m,1H),4.42(dd,J＝8.9,3.2Hz,1H),4.87-4.95(m,1H),7.17-7.32(m,5H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值231.1；实测值232.2；Rt＝1.12min。
步骤3：(S)-1-((R)-2-羟基-1-苯基乙基)-5-甲基哌啶-2-酮的合成
将三乙基硅烷(1.51g，12.97mmol，2.07mL)和四氯化钛(3.69g，19.46mmol)添加到(3R,8S,8aR)-8-甲基-3-苯基四氢-2H-噁唑并[3,2-a]吡啶-5(3H)-酮(1g，4.32mmol)于无水DCM(25mL)中的溶液中且将混合物在40℃下搅拌24小时。然后，添加额外的四氯化钛(3.69g，19.46mmol，764.36μL)和三乙基硅烷(1.51g，12.97mmol，2.07mL)，且在50℃下继续搅拌24小时。将混合物倒入饱和NaHCO3(100mL)水溶液中。经硅藻土过滤水相并用CH2Cl2萃取。将合并的有机萃取物经Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩，以得到残余物，其通过柱色谱(Companion Combiflash；40g SiO2；MTBE/甲醇，其中甲醇为0至8％，流速＝40mL/min，Rv＝9-11cv.)进行纯化，以得到呈无色油状物的产物(S)-1-((R)-2-羟基-1-苯基乙基)-5-甲基哌啶-2-酮(0.51g，2.19mmol，50.56％产率)。
1H NMR(CDCl3,400MHz):δ0.93(d,J＝6.4Hz,3H),1.44-1.54(m,1H),1.77-1.86(m,2H),2.40-2.62(m,2H),2.83(t,J＝11.0Hz,1H),2.92-2.99(m,1H),4.04-4.21(m,2H),5.71-5.79(m,2H),7.17-7.37(m,5H)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值233.1；实测值234.2；Rt＝0.98min。
步骤4：(S)-5-甲基哌啶-2-酮的合成
在-78℃下，向装备有冷指冷凝器且装入干冰-丙酮的1000mL三颈圆底烧瓶中冷凝氨(500mL)。添加(S)-1-((R)-2-羟基-1-苯基乙基)-5-甲基哌啶-2-酮(17.2g，73.72mmol)于无水THF(100mL)中的溶液，且将温度升温至-33℃。小批量添加钠(5.08g，221.17mmol)，直到蓝色持续存在，且将混合物在-33℃下搅拌3分钟。通过添加固体NH4Cl淬灭反应物，直至蓝色消失，然后在室温下将混合物搅拌5小时。添加CH2Cl2，过滤固体，且在减压下移除溶剂，以得到呈淡黄色油状物的(S)-5-甲基哌啶-2-酮(15g，粗品)。残余物不经任何进一步纯化即用于下一步骤。
1H NMR(DMSO-d6,400MHz):δ1.01(d,J＝6.6Hz,3H,CH3),1.45-1.51(m,1H,H-4),1.83-1.99(m,2H,H-4,H-5),2.34(ddd,J＝17.8,10.8,6.4Hz,1H,H-3),2.43(ddd,J＝17.8,6.4,3.5Hz,1H,H-3),2.92(t,J＝10.8Hz,1H,H-6),3.26-3.33(m,1H,H-6),6.10(br.s,1H,NH)
步骤5：(S)-5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
在21℃下，向(S)-5-甲基哌啶-2-酮(15g，79.54mmol，粗品)和DMAP(971.67mg，7.95mmol)于DCM(500mL)中的溶液中逐滴添加二碳酸二-叔丁酯(17.36g，79.54mmol，18.25mL)。在同一温度下将所得反应混合物搅拌1小时。1小时之后，所得溶液用10％水性HCl和盐水稀释，经Na2SO4干燥且在减压下浓缩，以获得粗产物，其通过柱色谱(CompanionCombiflash，330g SiO2，石油醚/MTBE，其中MTBE为10～25％，流速＝100mL/min，Rv＝6CV)进行纯化，以获得呈黄色固体的产物(S)-5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(9g，42.20mmol，53.06％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.96(d,J＝6.6Hz,3H),1.42(s,9H),),1.74-1.86(m,1H),1.87-1.97(m,1H),2.30-2.39(m,2H),2.98-3.11(m,1H),3.12(s,1H),3.60-3.68(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值213.2；实测值158.2；Rt＝1.24min(t-Bu断裂)
1B.3-甲基-6-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的 合成
步骤1：5-甲基哌啶-2-酮的合成
在高压釜中，在50℃、100atm氢气压力下，在存在5％氢氧化钯/碳(15g，106.81mmol)的情况下，将5-甲基-1H-吡啶-2-酮(102g，934.70mmol)于MeOH(1000mL)中的溶液氢化12h。使反应混合物冷却，过滤掉催化剂，在真空中蒸发滤液，以得到呈白色固体的5-甲基哌啶-2-酮(105g，927.91mmol，99.27％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.94(d,3H),1.38(m,1H),1.77(m,2H),2.12(d,2H),2.74(m,1H),3.12(m,1H),7.37(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值113.2；实测值114.2；Rt＝0.701min。
步骤2：5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
在25℃下，将二碳酸二-叔丁酯(212.64g，974.31mmol，223.60mL)添加到5-甲基哌啶-2-酮(105g，927.91mmol)和N,N-二甲基吡啶-4-胺(11.34g，92.79mmol)于THF(1000mL)中的搅拌混合物中。将反应混合物在25℃下搅拌24h，然后在真空中蒸发。将残余物溶解于二氯甲烷(1500ml)中且用5％硫酸氢钠水溶液(400ml)和水(400ml)连续洗涤。将有机层分离，经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到呈淡黄色油状物的粗品5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(199g，粗品)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)1.03(d,3H),1.48(m,1H),1.58(s,9H),1.92(m,2H),2.56(m,2H),3.11(t,1H),3.80(d,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值113.2；实测值114.2；Rt＝1.275min。
步骤3：3-甲基-6-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
在氩气下，将LiHMDS(588.42g，703.32mmol，653.80mL，20％纯度)(1.08M于THF/乙苯中)逐滴添加到冷却至-78℃的5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(100g，468.88mmol)于THF(1000mL)中的溶液中。将所得溶液在-78℃下搅拌1.5h，然后一次性添加1,1,1-三氟-N-苯基-N-(三氟甲基磺酰基)甲磺酰胺(209.39g，586.10mmol)。使反应混合物升温至25℃且搅拌12h，然后用水(300ml)和MTBE(1500ml)稀释。将有机层分离，另外用MTBE(300ml)萃取水层。将合并的有机萃取物用10％氢氧化钠水溶液(3*500ml)洗涤，经碳酸钾干燥，且在真空中蒸发。残余物用己烷/MTBE混合物(4/1，1500mL，重复三次)稀释且搅拌0.5h。将所得混浊溶液自油状残余物倾析，通过短硅胶垫过滤且在真空中蒸发，以得到呈淡黄色油状物的3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(147g，425.67mmol，90.78％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)1.01(d,3H),1.49(s,9H),1.87(m,2H),2.38(d,1H),3.01(d,1H),3.89(d,1H),5.26(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值245.3；实测值246.2；Rt＝1.719min。
2.常见氧代乙酸吡啶酯中间体的合成
2A.2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯和2-((5-氨 基甲酰基吡啶-3-基)氨基)-2-氧代乙酸锂盐的合成
步骤1：5-氨基吡啶-3-甲酰胺的合成
将5-氨基吡啶-3-甲酸甲酯(盐酸盐)(5g，32.86mmol)溶解于25％NH3(水溶液)(50mL)中且将所得反应混合物在室温下搅拌18小时。18小时之后，在减压下浓缩反应混合物且将所得残余物用水(20mL)洗涤，在70℃下干燥10小时，以获得呈白色粉末的5-氨基吡啶-3-甲酰胺(2.8g，20.42mmol，62.13％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,400MHz):δ(ppm)5.49(brs,2H),7.30(t,1H),7.36(brs,1H),7.93(brs,1H),8.02(d,1H),8.18(s,1H)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值137.1；实测值138.2；Rt＝0.139min。
步骤2：2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯的合成
在0℃下，向5-氨基吡啶-3-甲酰胺(0.65g，4.74mmol)和DIPEA(918.84mg，7.11mmol，1.24mL)于无水THF(15mL)中的搅拌溶液中逐滴添加2-氯-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(993.23mg，5.21mmol)。将反应混合物在室温下搅拌12小时，然后过滤。在真空下浓缩滤液，以获得2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(1.7g，粗品)。粗产物不经任何进一步纯化即用于下一步反应。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值291.0；实测值292.2；Rt＝0.815min。
步骤3：2-((5-氨基甲酰基吡啶-3-基)氨基)-2-氧代乙酸锂盐的合成
将2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(1.1g，3.78mmol)和98％氢氧化锂单水合物(174.38mg，4.16mmol)一起混合在THF(10mL)和H2O(2.5mL)中。将所得混合物搅拌过夜。将所得混合物用10mL THF稀释。过滤出沉淀且将其风干，以得到呈白色粉末的2-((5-氨基甲酰基吡啶-3-基)氨基)-2-氧代乙酸锂盐(0.74g，3.44mmol，91.07％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.56(s,1H),8.12(s,1H),8.66(m,2H),8.98(s,1H),10.58(m,1H)。
2B.2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸2,2,2-三 氟乙酯和2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸的合成
步骤1：N-(3-甲基-5-硝基-2-吡啶基)氨基甲酸叔丁酯的合成
在0℃下，向3-甲基-5-硝基-吡啶-2-胺(60g，391.80mmol)于DMF(525mL)中的溶液中分批添加于矿物油中的氢化钠(油分散体)60％分散物(16.51g，412.88mmol，60％纯度)。将所得混合物搅拌0.5h(直至气体逸出结束)且逐滴添加二碳酸二-叔丁酯(89.79g，411.39mmol，94.41mL)于DMF(75mL)中的溶液。将所得混合物在25℃下搅拌18h。将混合物用水(1000mL)淬灭，过滤出所形成的沉淀且在真空中干燥以获得粗产物(100g)。通过硅胶梯度色谱(以CHCl3-MTBE作为洗脱液)纯化此材料，以获得N-(3-甲基-5-硝基-2-吡啶基)氨基甲酸叔丁酯(46g，181.64mmol，46.36％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,400MHz):δ1.49(s,9H),2.32(s,3H),8.37(s,1H),8.97(s,1H),9.59(s,1H)
LCMS(ESI)：[M-CH2C(CH3)+H]+m/z：计算值253.26；实测值198.2；Rt＝1.272min。
步骤2：N-(5-氨基-3-甲基-2-吡啶基)氨基甲酸叔丁酯的合成
向N-(3-甲基-5-硝基-2-吡啶基)氨基甲酸叔丁酯(46g，181.64mmol)于MeOH(600mL)中的溶液中添加10％钯/活性碳(4.60g，43.22mmol)。在氢气气氛下搅拌所得混合物24h。过滤催化剂且在真空中蒸发溶剂，将残余物溶解于DCM(500ml)中，经Na2SO4干燥且在真空中蒸发，以获得N-(5-氨基-3-甲基-2-吡啶基)氨基甲酸叔丁酯(38g，170.20mmol，93.70％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,400MHz):δ1.40(s,9H),2.03(s,3H),3.30(brs,2H),6.80(s,1H),7.54(s,1H),8.52(s,1H)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值223.2；实测值224.2；Rt＝0.67min。
步骤3：2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯的合成
在0℃、氩气下，向N-(5-氨基-3-甲基-2-吡啶基)氨基甲酸叔丁酯(17.6g，78.83mmol)和DIPEA(15.28g，118.24mmol，20.60mL)于ACN(250mL)中的溶液中逐滴添加2-氯-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(17.27g，90.65mmol)。然后在室温下将反应混合物搅拌24h，然后在真空中蒸发，将残余物用水(575mL)稀释。过滤出所形成的沉淀，用水洗涤且在真空中干燥，以得到产物2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(30g，粗品)。
1H NMR(DMSO-d6,400MHz):δ1.42(s,9H),2.15(s,3H),4.96(q,2H),7.93(s,1H),8.49(s,1H),9.03(s,1H),11.06(s,1H)
LCMS(ESI)：[M-CH2C(CH3)+H]+m/z：计算值377.32；实测值322.0；Rt＝1.274min。
步骤4：2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸的合成
在5℃下，以TLC对照(DCM-MeOH 5:1作为洗脱液)，搅拌2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(30g，79.51mmol)和氢氧化锂单水合物(6.67g，159.02mmol，4.42mL)于THF(120mL)-甲醇(120mL)-水(120mL)中的混合物。起始材料完全消耗(2h)之后，旋转蒸发挥发性有机溶剂。将残余物用硫酸氢钠单水合物(21.96g，159.02mmol)酸化至pH 5，且过滤出所形成的沉淀，用水洗涤且在真空中干燥，以得到产物2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(23g，77.89mmol，97.96％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,400MHz):δ1.44(s,9H),2.16(s,3H),7.97(s,1H),8.51(s,1H),8.98(s,1H),10.70(s,1H)
LCMS(ESI)：[M-CH2C(CH3)+H]+m/z：计算值295.29；实测值240.0；Rt＝0.829min。
2C.2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯 和2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸的合成
步骤1：2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯的合成
在0℃下，向5-氨基-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(10.06g，60.18mmol)和三乙胺(6.09g，60.18mmol，8.39mL)于无水THF(250mL)中的溶液中添加于50ml无水THF中的2-氯-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(12.04g，63.19mmol)。在室温下搅拌12h之后，将所得混合物蒸发至干，以得到呈淡粉色固体的2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(29g，粗品)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ1.47(s,9H),3.3(s,2H),8.81(s,1H),9.15(s,1H),9.88(s,1H)
1H NMR(DMSO-d6,400MHz):δ3.97(s,3H),5.00(q,2H),7.75(brs,2H),8.55(s,1H),8.63(s,1H),11.21(s,1H)
步骤2：2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸的合成
向2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(15g，46.70mmol)于MeOH(400mL)中的溶液中添加98％氢氧化锂单水合物(3.92g，93.40mmol，2.60mL)，且将所得混合物在室温下搅拌1h。然后将所得混合物蒸发至干，溶解于水中。用盐酸水溶液将水酸化至pH＝1，且过滤沉淀。将沉淀悬浮于MeOH中且添加三乙胺(9.45g，93.40mmol，13.02mL)，直到溶液变得澄清。将所得混合物蒸发至干，以得到呈米色固体的2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(10.35g，30.41mmol，65.12％产率，Et3N)。
1H NMR(DMSO-d6,400MHz):δ1.17(s,12H),3.06(q,6H),3.92(s,3H),7.70(d,2H),8.60(s,1H),10.34(s,1H),10.34(brs,1H)
2D.2-[(5-氯-6-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸的合成
步骤1：2-[(5-氯-6-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸甲酯的合成
将5-氯-6-甲基-吡啶-3-胺(3g，21.04mmol)和TEA(2.13g，21.04mmol，2.93mL)溶解于DCM(50mL)中且冷却至0℃，随后逐滴添加2-氯-2-氧代乙酸甲酯(2.84g，23.14mmol，2.13mL)。反应完成之后，将混合物用DCM(50mL)稀释，用H2O(40mL)和盐水(50mL)洗涤。将有机层经Na2SO4干燥且在减压下蒸发，以得到2-[(5-氯-6-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸甲酯(3.5g，15.31mmol，72.76％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ2.52(s,3H),3.86(s,3H),8.24(s,1H),8.79(s,1H),11.14(s,1H)。
步骤2：2-[(5-氯-6-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸的合成
将2-[(5-氯-6-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸甲酯(3.49g，15.26mmol)溶解于THF(50mL)中，随后添加98％氢氧化锂单水合物(768.26mg，18.31mmol，508.78μL)且再搅拌过夜。反应完成之后，过滤混合物；将所获得的固体风干且用CCl4(200mL)再蒸发至干，以得到2-[(5-氯-6-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(2.5g，11.28mmol，73.96％产率，Li+)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ2.43(s,3H),8.28(s,1H),8.73(s,1H),10.47(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值214.0；实测值215.0；Rt＝0.751min
2E.2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-乙基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸2,2,2-三 氟乙酯和2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸的合成
步骤1：N-(3-溴-5-硝基-2-吡啶基)氨基甲酸叔丁酯的合成
在0℃下，向3-溴-5-硝基-吡啶-2-胺(30g，137.61mmol)于DMF(200mL)中的溶液中分批添加于矿物油中的氢化钠(油分散体)60％分散物(5.54g，138.42mmol，60％纯度)。将所得混合物搅拌0.5h(直至气体逸出结束)且逐滴添加二碳酸二-叔丁酯(31.53g，144.49mmol，33.16mL)于DMF(50mL)中的溶液。将所得混合物在25℃下搅拌12h。将混合物用水(1000ml)淬灭，过滤沉淀且将其溶解于EtOAc(900ml)+THF(100ml)中，用盐水(2*300ml)洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中蒸发，以获得白色晶体沉淀。过滤此沉淀，用EtOAc(30ml)、MTBE(2*50ml)洗涤且干燥，以获得N-(3-溴-5-硝基-2-吡啶基)氨基甲酸叔丁酯(32g，100.59mmol，73.10％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ1.47(s,9H),3.3(s,2H),8.81(s,1H),9.15(s,1H),9.88(s,1H)
LCMS(ESI)：[M-CH2C(CH3)+H]+m/z：计算值318.1；实测值264.0；Rt＝1.152min。
步骤2：N-(5-硝基-3-乙烯基-2-吡啶基)氨基甲酸叔丁酯的合成
将N-(3-溴-5-硝基-2-吡啶基)氨基甲酸叔丁酯(27g，84.87mmol)、乙烯基三氟硼酸钾(13.64g，101.85mmol)和碳酸钾(58.65g，424.36mmol，25.61mL)于二噁烷(400mL)和水(100mL)中的溶液抽真空且用氩气再填充三次。向此溶液中添加[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)与二氯甲烷的络合物(3.47g，4.24mmol)且将所得混合物在80℃下搅拌2h。将所得混合物冷却，过滤，移除溶剂。将残余物用水(350ml)溶解且用EtOAc-THF 9:1(3*300ml)萃取。将有机层经Na2SO4干燥。移除90％溶剂且过滤所形成的沉淀，用MTBE洗涤且干燥，以得到N-(5-硝基-3-乙烯基-2-吡啶基)氨基甲酸叔丁酯(13.5g，50.89mmol，59.96％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,400MHz):δ1.45(s,9H),3.3(s,2H),5.54(d,1H),6.06(d,1H),6.75(dd,1H),8.07(s,1H),9.08(s,1H),9.93(s,1H)
LCMS(ESI)：[M-CH2C(CH3)+H]+m/z：计算值265.1；实测值210.0；Rt＝1.311min。
步骤3：N-(5-氨基-3-乙基-2-吡啶基)氨基甲酸叔丁酯的合成
向N-(5-硝基-3-乙烯基-2-吡啶基)氨基甲酸叔丁酯(13g，49.01mmol)于甲醇(400mL)中的溶液中添加钯(10％于碳上)(52.15g，49.01mmol，10％纯度)。在氢气气氛、25℃下搅拌所得混合物24h。过滤催化剂且在真空中蒸发溶剂，将残余物溶解于ACN(150ml)中且在真空中蒸发，以获得N-(5-氨基-3-乙基-2-吡啶基)氨基甲酸叔丁酯(11g，46.36mmol，94.59％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,400MHz):δ1.03(t,3H),1.36(s,9H),2.37(q,2H),3.3(s,2H),6.76(s,1H),7.52(s,1H),8.40(s,1H)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值237.3；实测值238.2；Rt＝0.901min。
步骤4：2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-乙基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯的合成
在0℃、氩气下，向N-(5-氨基-3-乙基-2-吡啶基)氨基甲酸叔丁酯(11g，46.36mmol)和DIPEA(8.99g，69.53mmol，12.11mL)于ACN(350mL)中的溶液中逐滴添加2-氯-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(10.16g，53.31mmol)。然后在室温下将反应混合物搅拌24h，然后在真空中蒸发，将残余物用水(575mL)稀释。将沉淀研磨24h，过滤出所形成的沉淀，用水、EtOAc洗涤且在真空中干燥，以得到产物2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-乙基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(13g，粗品)。
LCMS光谱显示所需产物和Boc脱保护的产物的混合物。
此产物不经纯化即用于下一步骤。
步骤4：2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸的合成根据LCMS，起始材料部分为Boc脱保护的。
向2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-乙基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(13g，33.22mmol)于甲醇(100mL)和THF(100mL)中的溶液中添加氢氧化锂单水合物(2.79g，66.44mmol，1.85mL)于水(200mL)中的溶液。将所得混合物在0℃下搅拌3h，移除有机溶剂，用硫酸氢钠单水合物(9.63g，69.76mmol)于水(50mL)中的溶液酸化水溶液。过滤所形成的沉淀且干燥，以获得2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(8.7g，粗品)。
在添加Et3N的情况下，取得作为溶剂的CD3OD中的NMR光谱。此化合物不经纯化即用于下一步骤。
1H NMR(CD3OD,400MHz):δ1.22(t,3H),2.47(q,2H),7.65(s,1H),8.19(s,1H)
2F.2-[[6-甲基-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸的合成
步骤1：2-[5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]丙二酸二乙酯的合成
在-10℃下，向丙二酸二乙酯(1.41g，8.83mmol，1.33mL)于THF(50mL)中的搅拌溶液中添加叔丁醇钾(2.97g，26.49mmol)，且将混合物在同一温度下搅拌10min，随后在室温下搅拌30min。在0℃下，将2-氯-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶(2g，8.83mmol)缓慢添加到混合物中，且将所得混合物在室温下搅拌4h。将混合物用氯化铵水溶液淬灭且用乙酸乙酯萃取两次。将合并的有机层用水洗涤，随后用盐水洗涤，且经无水硫酸钠干燥。将溶液过滤，浓缩，以得到2-[5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]丙二酸二乙酯(2.3g，6.57mmol，74.38％产率)。粗品胺原样用于下一步骤。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ1.15(m,6H),4.18(m,4H),5.37(s,1H),8.87(s,1H),9.63(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值350.1；实测值351.0；Rt＝1.379min。
步骤2：2-甲基-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶的合成
将2-[5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]丙二酸二乙酯(2.3g，6.57mmol)于水(23mL)和H2SO4(23mL)中的溶液在90℃下加热2-3h。将混合物冷却至0℃且用3N NaOH溶液碱化。用DCM萃取水溶液两次。将合并的有机层用盐水洗涤且经无水硫酸钠干燥。将溶液过滤，浓缩，以得到2-甲基-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶(0.6g，2.91mmol，44.33％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ2.77(s,3H),8.71(s,1H),9.48(s,1H)。
GCMS(EI)：[M+H]+m/z：计算值206.0；实测值206.0；Rt＝5.223min。
步骤3：6-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-3-胺的合成
在50℃下，向2-甲基-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶(0.6g，2.91mmol)于HCl(0.1mL)、水(1mL)和EtOH(10mL)中的溶液中分批添加铁(1.30g，23.29mmol，165.45μL)。此后，将所得混合物搅拌过夜。将溶液通过硅胶来过滤且蒸发，以得到6-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-3-胺(0.5g，2.84mmol，97.52％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ2.37(s,3H),5.52(s,2H),7.15(s,1H),7.99(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值176.1；实测值177.2；Rt＝0.711min。
步骤4：2-[[6-甲基-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸乙酯的合成
向6-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-3-胺(0.5g，2.84mmol)于DCM(10mL)中的溶液中添加TEA(344.69mg，3.41mmol，474.79μL)。此后，将溶液冷却至0℃且逐滴添加2-氯-2-氧代乙酸乙酯(465.09mg，3.41mmol，381.22μL)。在室温下将所得混合物搅拌3h。将反应混合物用水和盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥。将溶液过滤，浓缩，以得到2-[[6-甲基-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸乙酯(0.68g，2.46mmol，86.73％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ1.30(t,3H),2.58(s,3H),4.32(q,2H),8.46(s,1H),9.04(s,1H),11.23(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值276.1；实测值277.2；Rt＝1.045min。
步骤5：2-[[6-甲基-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸的合成
将2-[[6-甲基-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸乙酯(0.68g，2.46mmol)于水(5mL)和THF(5mL)中的溶液冷却。在0℃下，添加氢氧化锂单水合物(123.97mg，2.95mmol，82.10μL)。然后将反应混合物在室温下搅拌过夜。旋转蒸发有机溶剂。将残余物用HCl酸化至pH 2且过滤，以得到2-[[6-甲基-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(2.5g，10.72mmol，56.01％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ2.58(s,3H),8.51(s,1H),9.06(s,1H),11.14(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值248.0；实测值249.2；Rt＝0.729min。
2G.2-[[5-甲基-6-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸的合成
步骤1：2-[[5-甲基-6-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸甲酯的合成
将5-甲基-6-(三氟甲基)吡啶-3-胺(3.00g，17.03mmol)和TEA(1.72g，17.03mmol，2.37mL)溶解于DCM(50mL)中且冷却至0℃，随后逐滴添加2-氯-2-氧代乙酸甲酯(2.30g，18.74mmol，1.73mL)。反应完成之后，将混合物用DCM(50mL)稀释，用H2O(40mL)和盐水(50mL)洗涤。将有机层经Na2SO4干燥且在减压下蒸发，以得到2-[[5-甲基-6-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸甲酯(4g，15.26mmol，89.57％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ2.49(s,3H),3.87(s,3H),8.28(s,1H),8.86(s,1H),11.20(s,1H)。
步骤2：2-[[5-甲基-6-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸的合成
将2-[[5-甲基-6-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸甲酯(4g，15.26mmol)溶解于THF(50mL)中，随后添加98％氢氧化锂单水合物(768.26mg，18.31mmol，508.78μL)且再搅拌过夜。反应完成之后，过滤混合物，将所获得的固体风干且用CCl4(200mL)再蒸发至干，以得到2-[[5-甲基-6-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(3.4g，13.33mmol，87.36％产率，Li+)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ2.38(s,3H),8.25(s,1H),8.82(s,1H),10.56(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值248.0；实测值249.0；Rt＝0.948min。
2H.2-[[6-(二氟甲基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸的合成
步骤1：2-[[6-(二氟甲基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸甲酯的合成
将6-(二氟甲基)-5-甲基吡啶-3-胺(3g，18.97mmol)和TEA(1.92g，18.97mmol，2.64mL)溶解于DCM(50mL)中且冷却至0℃，随后逐滴添加2-氯-2-氧代乙酸甲酯(2.56g，20.87mmol，1.92mL)。反应完成之后，将混合物用DCM(50mL)稀释，用H2O(40mL)和盐水(50mL)洗涤。将有机层经Na2SO4干燥且在减压下蒸发，以得到2-[[6-(二氟甲基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸甲酯(3.3g，13.51mmol，71.24％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ2.43(s,3H),3.87(s,3H),6.98(t,1H),8.16(s,1H),8.80(s,1H),11.19(s,1H)。
步骤2：2-[[6-(二氟甲基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸的合成
将2-[[6-(二氟甲基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸甲酯(3.3g，13.51mmol)溶解于THF(50mL)中，随后添加98％氢氧化锂单水合物(680.45mg，16.22mmol，450.63μL)且再搅拌过夜。反应完成之后，过滤混合物，将所获得的固体风干且用CCl4(200mL)再蒸发至干，以得到2-[[6-(二氟甲基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(2.2g，9.28mmol，68.66％产率，Li+)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ2.28(s,3H),6.75(t,1H),8.02(s,1H),8.34(s,1H),未观察到NH和OH。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值230.0；实测值231.0；Rt＝0.807min。
2I.2-[[5-(二氟甲基)-6-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸的合成
步骤1：5-溴-2-甲基吡啶-3-甲酸甲酯的合成
将5-溴-2-甲基吡啶-3-甲酸(4g，18.52mmol)溶解于MeOH(100mL)中且逐滴添加亚硫酰氯(6.61g，55.55mmol，4mL)，将反应混合物回流过夜。在真空下浓缩反应混合物，将所获得的残余物溶解于DCM中，且用Na2CO3(水溶液)、水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且在真空下蒸发，以得到5-溴-2-甲基吡啶-3-甲酸甲酯(3.54g，15.39mmol，83.10％产率)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ2.78(s,3H),3.92(s,3H),8.32(s,1H),8.66(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值229.0；实测值230.0；Rt＝1.231min。
步骤2：(5-溴-2-甲基-3-吡啶基)甲醇的合成
将5-溴-2-甲基吡啶-3-甲酸甲酯(3.54g，15.39mmol)溶解于MeOH(60mL)中且在用冰水冷却下分批添加硼氢化钠(1.75g，46.16mmol，1.63mL)。将反应混合物加热至室温且搅拌12h。添加NH4Cl(水溶液)且蒸发甲醇，将水层用DCM(3*30ml)萃取且将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且在45℃下在真空下蒸发，以得到(5-溴-2-甲基-3-吡啶基)甲醇(2.5g，12.37mmol，80.41％产率)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ2.41(s,3H),4.72(s,2H),7.86(s,1H),8.32(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值202.0；实测值204.0；Rt＝0.678min。
步骤3：5-溴-2-甲基吡啶-3-甲醛的合成
将戴斯-马丁高碘烷(8.79g，20.71mmol)于DCM(15mL)中的浆液用tBuOH(2mL)处理，且将混合物在室温下搅拌15min，然后在5min内添加(5-溴-2-甲基-3-吡啶基)甲醇(3.1g，15.34mmol)于DCM(15mL)中的溶液。将混合物在室温下搅拌2h，然后用乙酸乙酯和1NNaOH溶液稀释，且搅拌10min。分离各层且将有机层用水、盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且浓缩，以得到5-溴-2-甲基吡啶-3-甲醛(3.1g，粗品)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ2.83(s,3H),8.17(s,1H),8.72(s,1H),10.27(s,1H)。
步骤4：5-溴-3-(二氟甲基)-2-甲基吡啶的合成
在室温下，向5-溴-2-甲基吡啶-3-甲醛(3.1g，15.50mmol)于DCM(120mL)中的溶液中添加二乙基氨基三氟化硫(19.98g，123.98mmol，16.38mL)。将所得反应混合物在室温下搅拌过夜，然后浓缩，以得到5-溴-3-(二氟甲基)-2-甲基吡啶(1.90g，8.57mmol，55.28％产率)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ2.55(s,3H),6.71(t,1H),7.91(s,1H),8.77(s,1H)。
步骤5：N-[5-(二氟甲基)-6-甲基-3-吡啶基]-1,1-二苯基甲亚胺的合成
通过将氩气鼓泡到5-溴-3-(二氟甲基)-2-甲基吡啶(1.55g，6.98mmol)、二苯基甲亚胺(1.39g，7.68mmol，1.29mL)、Xantphos(1.21g，2.09mmol)、Pd2(dba)3(319.64mg，349.05μmol)和碳酸铯(6.82g，20.94mmol)于二噁烷(100mL)中的混合物中若干分钟来对混合物进行脱气。在90℃、Ar气氛下，将反应混合物搅拌12h。将反应混合物冷却至室温且过滤。在真空中浓缩滤液且用水稀释残余物。将混合物用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层用水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且浓缩，以得到N-[5-(二氟甲基)-6-甲基-3-吡啶基]-1,1-二苯基甲亚胺(3.8g，粗品)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ2.52(s,3H),6.64(t,1H),6.75(s,1H),7.36(m,10H),7.98(s,1H)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值322.1；实测值323.2；Rt＝1.358min。
步骤6：5-(二氟甲基)-6-甲基吡啶-3-胺的合成
将N-[5-(二氟甲基)-6-甲基-3-吡啶基]-1,1-二苯基甲亚胺(3.8g，11.79mmol)溶解于DCM(20mL)和HCl(1M)(20mL)中且在40℃下搅拌12h。分离DCM层，用额外DCM洗涤水，将水层用Na2CO3碱化且用DCM萃取两次，将碱化后合并的DCM经Na2SO4干燥，过滤且蒸发，以得到5-(二氟甲基)-6-甲基吡啶-3-胺(0.715g，4.52mmol，38.35％产率)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ2.48(s,3H),3.65(s,2H),6.69(t,1H),7.11(s,1H),8.06(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值158.1；实测值159.0；Rt＝0.346min。
步骤7：2-[[5-(二氟甲基)-6-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸甲酯的合成
将5-(二氟甲基)-6-甲基吡啶-3-胺(0.79g，5.00mmol)和TEA(505.48mg，5.00mmol，696.25μL)溶解于DCM(15mL)中且冷却至20℃，随后逐滴添加2-氯-2-氧代乙酸甲酯(673.16mg，5.49mmol)，且将反应混合物在20℃下搅拌12h。将混合物用DCM稀释，用水和盐水(50mL)洗涤。将有机层经Na2SO4干燥且在减压下蒸发，以得到2-[[5-(二氟甲基)-6-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸甲酯(1.22g，5.00mmol，100.00％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ2.66(s,3H),3.99(s,3H),6.79(t,1H),8.30(s,1H),8.78(s,1H),9.09(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值244.1；实测值245.0；Rt＝0.777min。
步骤8：2-[[5-(二氟甲基)-6-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸的合成
将2-[[5-(二氟甲基)-6-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸甲酯(1.22g，5.00mmol)溶解于THF(20mL)中，随后添加98％氢氧化锂单水合物(251.56mg，6.00mmol，166.60μL)且将反应混合物在20℃下搅拌12h。过滤反应混合物，将所获得的固体风干且用CCl4再蒸发至干，以得到2-[[5-(二氟甲基)-6-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(1.09g，4.60mmol，92.01％产率，Li)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值230.0；实测值231.0；Rt＝0.558min。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值456.2；实测值457.2；Rt＝1.022min。
2J.5-碘-3-(氧杂环丁烷-3-基)吡啶-2-胺的合成
步骤1：3-(氧杂环丁烷-3-基)吡啶-2-胺的合成：
将反式-2-氨基环己醇(198.13mg，1.72mmol)和碘化镍(II)(537.58mg，1.72mmol)添加到(2-氨基-3-吡啶基)硼酸(5g，28.67mmol，HCl)于异丙醇(50mL)中的溶液中。然后，逐滴添加双(三甲基甲硅烷基)酰胺化钠(40％于THF中)(39.43g，86.01mmol，44.11mL，40％纯度)，接着添加3-碘氧杂环丁烷(7.91g，43.01mmol，3.70mL)。将反应烧瓶用氩气吹扫且将所得混合物在75℃下搅拌8h。在减压下移除挥发物且通过梯度柱色谱纯化残余物。Companioncombiflash；80g SiO2，CHCl3-MeOH 0～100％，流速＝60mL/min，cv＝5
获得呈黄色油状物的3-(氧杂环丁烷-3-基)吡啶-2-胺(1g，6.66mmol，23.22％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ4.12(q,1H),4.62(dd,2H),4.90(dd,2H),5.69(s,2H),6.62(dd,1H),7.45(s,1H),7.83(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值150.2；实测值151.0；Rt＝0.166min。
步骤2：5-碘-3-(氧杂环丁烷-3-基)吡啶-2-胺的合成：
将3-(氧杂环丁烷-3-基)吡啶-2-胺(0.8g，5.33mmol)溶解于DMFA(15mL)中，接着分批添加1-碘吡咯烷-2,5-二酮(1.60g，7.11mmol)。将反应混合物搅拌过夜且在减压下浓缩。将残余物溶解于DCM中且将有机层用Na2S2O3水溶液和水洗涤多次。分离DCM层，将其经Na2SO4干燥且在减压下浓缩。获得呈黄色固体的纯5-碘-3-(氧杂环丁烷-3-基)吡啶-2-胺(0.6g，2.17mmol，40.80％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ4.15(q,1H),4.56(dd,2H),4.87(dd,2H),5.87(s,1H),7.66(s,1H),7.98(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值277.0；实测值277.0；Rt＝0.563min。
2K.2-[(5-氨基甲酰基-6-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸的合成
步骤1.2-苯甲氧基-5-溴-吡啶的合成
在0℃下，向5-氨基-2-甲基吡啶-3-甲酰胺(975mg，6.45mmol)和三乙胺(652.66mg，6.45mmol，898.99μL)于THF(25mL)中的溶液中添加2-氯-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(1.23g，6.45mmol)。在20℃下搅拌18h之后，将所得混合物蒸发至干，以得到呈黄色固体的2-[(5-氨基甲酰基-6-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(2.21g，粗品)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值305.2；实测值306.0；Rt＝0.714min。
步骤2.2-[(5-氨基甲酰基-6-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸的合成
向2-[(5-氨基甲酰基-6-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(440mg，1.44mmol)于MeOH(10mL)中的溶液中添加98％氢氧化锂单水合物(120.98mg，2.88mmol，80.12μL)且将所得混合物在室温下搅拌1h。然后将所得混合物蒸发至干，溶解于水中，用DCM洗涤三次。将水酸化至pH＝1且过滤沉淀且用水(2*10ml)、EA(25ml)冲洗，且风干，以获得2-[(5-氨基甲酰基-6-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(96mg，粗品)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)7.56(s,1H),7.99(s,1H),8.12(s,1H),8.83(s,1H),10.97(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值223.2；实测值224.0；Rt＝0.174min。
2L.2-[[5-氨基甲酰基-6-(三氟甲氧基)-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸的合成
2-[[5-氨基甲酰基-6-(三氟甲氧基)-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸的合成
步骤1-2.2-苯甲氧基-5-溴-吡啶的合成
在-78℃下，将丁基锂(1.20g，18.75mmol，7.51mL)逐滴添加到6-(三氟甲氧基)吡啶-3-胺(1.67g，9.38mmol)于THF(20mL)中的溶液中，接着在1min后添加氯三甲基硅烷(2.14g，19.69mmol，2.50mL)。使反应混合物达到25℃达2h，之后过滤到硅藻土垫上。移除溶剂且在真空(101-103 0C/1毫巴)下蒸馏粗品油状物，以得到6-(三氟甲氧基)-N,N-双(三甲基甲硅烷基)吡啶-3-胺(2.93g，粗品)。在0℃下，将丁基锂(1.18g，18.43mmol，7.38mL)逐滴添加到二异丙胺(1.95g，19.31mmol，2.72mL)于THF(56mL)中的溶液中。在-78 0℃下，逐滴添加6-(三氟甲氧基)-N,N-双(三甲基甲硅烷基)吡啶-3-胺(2.83g，8.78mmol)于THF(2mL)中的溶液且将反应混合物在此温度下搅拌1h。然后通过具有硫酸的干燥容器将CO2喷入溶液中达15min。在-78℃下30min之后，使溶液达到室温。蒸发溶剂。通过柱色谱(MTBE/甲醇)纯化所得粗材料，以获得5-氨基-2-(三氟甲氧基)吡啶-3-甲酸(0.1g，450.20umol，5.13％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)5.20-5.30(brs,2H),7.35(s,1H),7.65(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值222.0；实测值223.0；Rt＝0.641min。
步骤2.5-氨基-2-(三氟甲氧基)吡啶-3-甲酰胺的合成
将5-氨基-2-(三氟甲氧基)吡啶-3-甲酸(90mg，405.18umol)、碳酸铵(116.80mg，1.22mmol)、三乙胺(205.00mg，2.03mmol，282.37uL)混合到DMF(2mL)中，然后添加HATU(231.09mg，607.78umol)。将所得混合物在25℃下搅拌13h。将溶剂蒸发，以获得粗产物，其通过HPLC(35-55％(甲醇)-2-10min，流速：30ml/min)进行纯化，以获得5-氨基-2-(三氟甲氧基)吡啶-3-甲酰胺(18.9mg，85.47umol，21.09％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)5.19(d,1H),5.37(s,2H),5.65(d,1H),6.63(m,1H),6.78(d,1H),7.24-7.63(m,5),7.71(d,1H),8.19(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值221.0；实测值222.0；Rt＝0.727min。
步骤3.2-[[5-氨基甲酰基-6-(三氟甲氧基)-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯
将5-氨基-2-(三氟甲氧基)吡啶-3-甲酰胺(318mg，1.44mmol)和三乙胺(145.51mg，1.44mmol，200.43μL)溶解于THF(7mL)中且将所得溶液在冰/甲醇浴中冷却至0℃。在0℃下，逐滴添加2-氯-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(273.95mg，1.44mmol)于THF(0.5mL)中的溶液。添加完成之后，使反应混合物升温至室温且搅拌过夜。将反应混合物在真空中浓缩。将残余物转移至过滤器且用水(2*25ml)、DCM(25ml)冲洗且风干，以获得2-[[5-氨基甲酰基-6-(三氟甲氧基)-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(355mg，946.21μmol，65.80％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)4.97(q,2H),7.74(s,1H),7.92(s,1H),8.42(s,1H),8.72(s,1H),11.36(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值375.2；实测值376.2；Rt＝1.054min。
步骤4.2-[[5-氨基甲酰基-6-(三氟甲氧基)-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸
将2-[[5-氨基甲酰基-6-(三氟甲氧基)-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(473.7mg，1.26mmol)溶解于MeOH(15mL)中且向其中添加98％氢氧化锂单水合物(105.97mg，2.53mmol，70.18μL)。搅拌所得混合物1h。在真空中浓缩反应混合物，且将残余物溶解于水(10ml)中。将所得混合物用HCl酸化且过滤沉淀，用水(10ml)冲洗，且风干，以获得2-[[5-氨基甲酰基-6-(三氟甲氧基)-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(232mg，791.39μmol，62.68％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)7.80(s,1H),7.99(s,1H),8.44(s,1H),8.72(s,1H),11.19(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值293.2；实测值294.2；Rt＝0.728min。
3.杂项哌啶中间体合成
3A.5-甲基-2-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)哌啶的合成
步骤1：(2-甲基-5-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-氧代戊基)氨基甲酸叔丁酯的合成
在-75℃下，将正丁基锂(10.19g，36.57mmol，14.98mL，23％纯度)(2.5M于己烷中)逐滴添加到1-甲基吡唑(3.00g，36.57mmol，3.04mL)于THF(60mL)中的搅拌溶液中。将所得重悬浮液在-75℃下搅拌1h，然后在-75℃下逐滴添加5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(7.8g，36.57mmol)，且使反应混合物升温至0℃且将其搅拌1h。将所得悬浮液用水(50ml)和MTBE(100ml)稀释，转移至分液漏斗，且分离上部有机层。另外用MTBE(50ml)萃取水层。将合并的有机萃取物用水(20ml)洗涤，经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到呈黄色油状物的N-[2-甲基-5-(2-甲基吡唑-3-基)-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯(9g，30.47mmol，83.31％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)0.95(d,3H),1.44(s,9H),1.78(m,2H),2.88(m,2H),3.05(m,2H),3.98(m,1H),4.15(s,3H),4.68(m,1H),6.85(d,1H),7.45(d,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值195.3；实测值196.2；Rt＝1.351min。
步骤2：3-甲基-6-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2,3,4,5-四氢吡啶的合成
将N-[2-甲基-5-(2-甲基吡唑-3-基)-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯(3g，10.16mmol)于三氟乙酸(23.16g，203.13mmol，15.65mL)中的溶液在25℃下搅拌1h，然后在真空中蒸发。将碎冰(20g)添加到残余物中且用10％氢氧化钠水溶液将pH调节至10。将所得混合物用二氯甲烷(2*30ml)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到呈黄色油状物的3-甲基-6-(2-甲基吡唑-3-基)-2,3,4,5-四氢吡啶(1.7g，9.59mmol，94.43％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.14(d,3H),1.38(m,1H),1.68(m,1H),1.88(m,1H),2.49(m,1H),2.67(m,1H),3.25(m,1H),3.97(m,1H),4.13(s,3H),6.44(d,1H),7.41(d,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]m/z：计算值177.2；实测值178.2；Rt＝0.624min。
步骤3：5-甲基-2-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)哌啶的合成
在0℃下，将硼氢化钠(725.67mg，19.18mmol，678.20μL)一次性添加到3-甲基-6-(2-甲基吡唑-3-基)-2,3,4,5-四氢吡啶(1.7g，9.59mmol)于甲醇(20mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在0℃下搅拌1h，然后在真空中蒸发。将残余物用水(20ml)稀释且用二氯甲烷(2*40ml)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到呈黄色油状物的5-甲基-2-(2-甲基吡唑-3-基)哌啶(1.3g，7.25mmol，75.61％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)0.89(d,3H),1.15(m,2H),1.58(m,2H),1.88(m,2H),2.37(m,1H),3.11(m,1H),3.64(m,1H),3.88(s,3H),6.14(d,1H),7.37(d,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]m/z：计算值179.2；实测值180.2；Rt＝0.749min
3B.5-甲基-2-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)哌啶的合成
步骤1：2-(甲氧基(甲基)氨基甲酰基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
在25℃下，将CDI(8.80g，54.25mmol)一次性添加到1-叔丁氧基羰基-5-甲基-哌啶-2-甲酸(11g，45.21mmol)于THF(200mL)中的搅拌溶液中。在25℃下搅拌所得混合物，直到二氧化碳逸出完成，然后添加甲氧基(甲基)胺盐酸盐(8.82g，90.42mmol)和三乙胺(9.15g，90.42mmol，12.60mL)。将反应混合物在50℃下搅拌12h，然后冷却且在真空中蒸发。将残余物用5％硫酸氢钠水溶液(200ml)稀释且用二氯甲烷(2*100ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(100ml)洗涤，经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到呈白色固体的2-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(11.2g，39.11mmol，86.51％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.88(d,3H),1.17(m,2H),1.46(s,9H),1.74(m,2H),2.03(m,1H),3.09(m,1H),3.18(s,3H),3.84(s,3H),3.99(m,1H),5.03(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值186.3；实测值187.2；Rt＝1.443min。
步骤2：5-甲基-2-丙炔酰基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
在-40℃下，将2-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(11.2g，39.11mmol)于THF(200mL)中的溶液逐滴添加到乙炔基溴化镁(25.08g，195.55mmol，400mL)的搅拌溶液中。使所得混合物升温至25℃且在此温度下搅拌12h，然后倒入硫酸氢钠(46.96g，391.11mmol)水溶液(500g)中。将所得混合物搅拌0.5h，然后转移到分液漏斗中。分离上部有机层，另外用乙酸乙酯(2*200ml)萃取水层。将合并的有机萃取物用盐水(2*200ml)洗涤，经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到呈红色油状物的5-甲基-2-丙-2-炔酰基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(9.6g，38.20mmol，97.67％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.88(d,3H),1.07(m,2H),1.46(s,9H),1.62(m,2H),2.51(m,2H),3.30(d,1H),4.07(m,1H),4.91(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值151.3；实测值152.2；Rt＝1.501min。
步骤3：(E)-2-(3-(二乙基氨基)丙烯酰基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将5-甲基-2-丙-2-炔酰基哌啶-1-甲酸叔丁酯(9.6g，38.20mmol)用二乙胺(4.47g，61.12mmol，6.33mL)于乙醇(100mL)中的溶液稀释。将所得溶液在25℃下搅拌1h，然后在真空中蒸发，以得到呈红色胶状物的2-[(E)-3-(二乙基氨基)丙-2-烯酰基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(12.2g，37.60mmol，98.44％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.88(d,3H),1.22(m,8H),1.48(s,9H),2.11(m,1H),2.52(m,2H),3.27(m,5H),4.07(m,1H),4.59(m,1H),5.21(d,1H),7.67(d,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]m/z：计算值324.4；实测值325.2；Rt＝1.506min。
步骤4：5-甲基-2-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将甲基肼(795.18mg，17.26mmol)添加到2-[(E)-3-(二乙基氨基)丙-2-烯酰基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(3.5g，10.79mmol)和乙酸(1.04g，17.26mmol，987.12μL)于乙醇(50mL)中的搅拌溶液中。将反应混合物在80℃下用回流冷凝器搅拌12h，然后冷却且在真空中蒸发。将残余物用水(30ml)稀释且用MTBE(2*30ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(30ml)洗涤，经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到呈红色油状物的粗品5-甲基-2-(2-甲基吡唑-3-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.7g，9.66mmol，89.59％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.88(d,3H),1.22(m,2H),1.44(s,9H),1.56(m,2H),1.74(m,1H),1.92(m,1H),2.08(m,1H),2.26(m,1H),3.86(s,3H),6.24(d,1H),7.39(d,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]m/z：计算值279.3；实测值280.2；Rt＝1.378min。
步骤5：5-甲基-2-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)哌啶的合成
将于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(42.00g，160.12mmol，40mL，13.9％纯度)添加到5-甲基-2-(2-甲基吡唑-3-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.7g，9.66mmol)于二氯甲烷(30mL)中的搅拌溶液中。将反应混合物在25℃下搅拌2h，然后在真空中蒸发。将残余物用氯仿(30ml)稀释且搅拌1h。过滤沉淀，用氯仿(5ml)洗涤且在真空中干燥，以得到呈白色固体的5-甲基-2-(2-甲基吡唑-3-基)哌啶(1.9g，7.53mmol，77.96％产率，2HCl)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.13(d,3H),1.22(m,1H),1.96(m,3H),2.05(m,1H),2.91(m,1H),3.17(m,1H),3.91(s,3H),4.55(m,1H),6.63(d,1H),8.97(d,1H),10.13(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]m/z：计算值179.2；实测值180.2；Rt＝0.654min。
3C.N-[5-(5-甲基-2-哌啶基)-2-噻吩基]乙酰胺的合成
步骤1：5-溴噻吩-2-羰基氯的合成
将5-溴噻吩-2-甲酸(8g，38.64mmol)和二甲基甲酰胺(282.41mg，3.86mmol，299.17μL)悬浮于二氯甲烷(100mL)中且在0℃下逐滴添加于二氯甲烷(100mL)中的草酰氯(9.81g，77.28mmol，6.72mL)。将所得混合物在0℃下搅拌8h。当气体逸出停止时，在减压下浓缩所得澄清溶液。将残余物再溶解于己烷(150ml)中，过滤且在真空中蒸发，以得到产物5-溴噻吩-2-羰基氯(7.8g，34.59mmol，89.52％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.1(d,1H),7.74(d,1H)。
步骤2：3-(5-溴噻吩-2-羰基)-5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
在-78℃下，将用己烷稳定的双(三甲基甲硅烷基)酰胺化锂(12.73g，76.10mmol，33mL)逐滴添加到5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(7.38g，34.59mmol)于THF(100mL)中的预冷却溶液中。添加完成之后，将其在同一温度下搅拌1h。此后，一次性添加5-溴噻吩-2-羰基氯(7.8g，34.59mmol)且移除冷却浴。将所得混合物缓慢升温至0℃且在此温度下搅拌2h。然后，将其用15％ NaHSO4水溶液(250ml)淬灭且用乙酸乙酯(300ml)萃取。将有机层用20％ NaCl水溶液(2*250ml)洗涤，经Na2SO4干燥且在减压下蒸发，以得到3-(5-溴噻吩-2-羰基)-5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(9.8g，24.36mmol，70.42％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ1.20(m,4H),1.56(s,9H),2.04(m,2H),3.23(m,1H),3.88(m,1H),4.27(m,1H),7.13(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值302.2；实测值304.0；Rt＝1.429min。
步骤3：6-(5-溴-2-噻吩基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶的合成
将CH3COOH(100mL)和ACS级36-38％盐酸(80.00g，2.19mol，100mL)悬浮且将所得混合物在110℃下搅拌且逐滴添加3-(5-溴噻吩-2-羰基)-5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(8.6g，21.38mmol)。将所得混合物在110℃下搅拌14h。然后，在减压下移除溶剂且将残余物分配于1N HCl(50ml)与DCM(2*40ml)之间。分离有机层且丢弃。将水层用10％ NaOH碱化至pH≈10且用DCM(2*50ml)萃取。分离DCM溶液，经K2CO3干燥且在减压下蒸发，以得到6-(5-溴-2-噻吩基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶(4.5g，17.43mmol，81.54％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ0.98(d,3H),1.37(m,1H),1.71(m,2H),2.71(m,2H),3.19(m,1H),3.88(m,1H),6.99(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值258.2；实测值260.0；Rt＝0.835min。
步骤4：2-(5-溴-2-噻吩基)-5-甲基哌啶的合成
在15分钟内，将硼氢化钠(989.06mg，26.14mmol，924.35μL)分批添加到6-(5-溴-2-噻吩基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶(4.5g，17.43mmol)于甲醇(100mL)中的溶液中。将所得溶液在0℃下搅拌14h。然后，在减压下移除溶剂且将残余物分配于水(40ml)与DCM(80ml)之间。分离有机层，经Na2SO4干燥且在真空中蒸发，得到2-(5-溴-2-噻吩基)-5-甲基哌啶(3.1g，11.91mmol，68.36％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.97(d,3H),1.16(m,2H),1.56(m,2H),1.85(m,2H),2.35(t,1H),3.08(m,1H),3.74(m,1H),6.65(d,1H),6.84(d,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值259.2；实测值260.0；Rt＝0.911min。
步骤5：2-(5-溴-2-噻吩基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
在0℃下，将二碳酸二-叔丁酯(1.37g，6.27mmol，1.44mL)逐滴添加到2-(5-溴-2-噻吩基)-5-甲基哌啶(1.6g，6.15mmol)和TEA(684.47mg，6.76mmol，942.80μL)于DCM(20mL)中的搅拌悬浮液中。将所得混合物在室温下搅拌6h，然后在真空中蒸发，倒入水(100ml)中且用DCM(2*50ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(2*30ml)洗涤，经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到产物2-(5-溴-2-噻吩基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.8g，5.00mmol，81.24％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.99(m,2H),1.46(m,2H),1.50(d,9H),1.84(m,3H),2.32(m,1H),2.99(m,1H),3.71(m,1H),5.47(m,1H),6.58(d,1H),6.87(d,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值259.2；实测值260.0；Rt＝1.660min。
步骤6：2-(5-乙酰胺基-2-噻吩基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将2-(5-溴-2-噻吩基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.8g，7.77mmol)、乙酰胺(918.03mg，15.54mmol)、Cu(246.91mg，3.89mmol)、CuI(148.00mg，777.11μmol，26.33μL)、碳酸钾(2.15g，15.54mmol，938.03μL)和(1R,2R)-N1,N2-二甲基环己-1,2-二胺(110.54mg，777.11μmol)混合在用Ar吹扫15分钟的28％氢氧化铵溶液(40mL)中，然后在密封管中在110℃下加热16h。将反应混合物在真空中蒸发且倒入水(40ml)中且用EtOAc(2*10ml)萃取。将合并的有机萃取物用28％氢氧化铵溶液(40mL)洗涤，经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到产物2-(5-乙酰胺基-2-噻吩基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.2g，6.50mmol，83.64％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.00(d,3H),1.45(s,9H),1.83(m,3H),2.13(m,2H),3.07(m,2H),3.70(m,2H),5.49(m,2H),6.48(d,1H),6.53(d,1H),8.12(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值238.2；实测值239.0；Rt＝1.366min。
步骤7：N-[5-(5-甲基-2-哌啶基)-2-噻吩基]乙酰胺的合成
将于DCM(10mL)中的2-(5-乙酰胺基-2-噻吩基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.05g，3.10mmol)添加到99％三氟乙酸(10g，87.70mmol，6.76mL)中。将反应混合物在20℃下搅拌8h，然后在真空中蒸发，以得到N-[5-(5-甲基-2-哌啶基)-2-噻吩基]乙酰胺(1.4g，粗品，CF3COOH)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值238.2；实测值239.0；Rt＝0.708min。
3D.外消旋-5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)噻吩-2-甲酰胺的合成
步骤1：外消旋-(2R,5S)-2-(5-氨基甲酰基噻吩-2-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将(2R,5S)-2-(5-溴-2-噻吩基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(800mg，2.22mmol)(如上文所制备)溶解于在MeOH中的2M氨(15.74g，39.74mmol，20mL，4.3％纯度)中且添加Pd(dppf)Cl2*DCM(90.66mg，111.02μmol)。将所得混合物在130℃、CO(30巴)气氛下搅拌48h。在减压下移除溶剂且将残余物溶解于乙酸乙酯(40ml)中。通过短硅胶垫过滤出不溶性固体且在减压下浓缩滤液。将所获得的混合物(大约50/50酰胺/甲酯)再溶解于MeOH(30mL)中，在0-5℃下用无水氨饱和且在高压釜中在130℃下搅拌24h。然后，将其在真空中浓缩，得到(2R,5S)-2-(5-氨基甲酰基-2-噻吩基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(800mg，粗品)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.91(d,3H),1.31(m,1H),1.38(s,9H),1.49(m,1H),1.91(m,3H),2.91(m,1H),3.31(m,1H),5.38(m,1H),6.86(d,1H),7.59(m,2H),7.91(d,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值224.2；实测值225.2；Rt＝1.400min。
步骤2：外消旋-5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)噻吩-2-甲酰胺的合成
将于99％1,4-二噁烷中的4M氯化氢(10.10g，27.70mmol，12.62mL，10％纯度)添加到(2R,5S)-2-(5-氨基甲酰基-2-噻吩基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(800mg，2.47mmol)于DCM(15mL)中的溶液中且将所得混合物在20℃下搅拌5h。然后，在减压下移除溶剂且将残余物再溶解于水(20ml)中。通过脱脂棉塞过滤出不溶性焦油。将滤液用固体K2CO3碱化至pH≈10且用乙酸乙酯(2x15 ml)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥且在减压下浓缩，得到5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]噻吩-2-甲酰胺(370mg，1.65mmol，66.89％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)0.82(d,3H),1.11(m,1H),1.34(m,1H),1.48(m,1H),1.78(d,1H),1.86(d,1H),2.23(t,1H),2.95(m,1H),3.70(d,1H),6.94(d,1H),7.54(d,1H),7.70(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值224.2；实测值225.2；Rt＝0.523min。
3E.外消旋-N-甲基-5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)噻吩-2-甲酰胺的合成
步骤1：外消旋-5-((2R,5S)-1-(叔丁氧基羰基)-5-甲基哌啶-2-基)噻吩-2-甲酸的合成
在氩气气氛下，向-75℃的(2R,5S)-2-(5-溴-2-噻吩基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(5g，13.88mmol)(如上文所述制备)于THF(50mL)中的搅拌溶液中逐滴添加于己烷中的23％正丁基锂(2.5M)(4.25g，15.26mmol，6.13mL，23％纯度)。将所得溶液在同一温度下搅拌15分钟。15分钟之后，将填充有二氧化碳(3.66g，83.26mmol)的气球附接至反应容器且用CO2吹出残余氩气。此后，关闭反应烧瓶且将所得溶液在-75℃下搅拌40min。然后，使其升温至室温且将其分配于10％ NaHSO4水溶液(100ml)与MTBE(100ml)之间。将有机层用盐水(50ml)洗涤，经Na2SO4干燥且在减压下浓缩，得到5-[(2R,5S)-1-叔丁氧基羰基-5-甲基-2-哌啶基]噻吩-2-甲酸(4.6g，粗品)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.79(m,1H),0.96(d,3H),1.39(s,9H),1.69(m,1H),1.82(m,1H),1.96(m,1H),2.07(m,1H),2.92(d,1H),3.65(d,1H),5.44(m,1H),6.95(d,1H),7.61(d,1H),12.96(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值225.2；实测值226.2；Rt＝1.487min。
步骤2：外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-(5-(甲基氨基甲酰基)噻吩-2-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将羰基二咪唑(934.26mg，5.76mmol)添加到5-[(2R,5S)-1-叔丁氧基羰基-5-甲基-2-哌啶基]噻吩-2-甲酸(1.5g，4.61mmol)于THF(20mL)中的溶液中。将所得溶液简单加热至50℃达10分钟。然后，使其冷却至室温且添加于THF中的2M甲胺(19.88g，46.09mmol，23.09mL，7.2％纯度)中。将所得混合物在20℃下搅拌4h。此后，在减压下移除溶剂且将残余物再溶解于乙酸乙酯(30ml)中且用10％ NaHSO4水溶液(2x10 ml)洗涤。将EA溶液经Na2SO4干燥且在真空中浓缩，得到(2R,5S)-5-甲基-2-[5-(甲基氨基甲酰基)-2-噻吩基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.4g，4.14mmol，89.74％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.96(d,3H),1.32(m,1H),1.42(s,9H),1.70(m,1H),1.82(m,1H),1.98(m,1H),2.05(m,1H),2.72(d,3H),2.93(d,1H),3.61(d,1H),5.43(m,1H),6.91(d,1H),7.55(d,1H),8.37(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值238.2；实测值239.2；Rt＝1.279min。
步骤3：外消旋-N-甲基-5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)噻吩-2-甲酰胺的合成
将于99％1,4-二噁烷中的4M氯化氢(15.15g，41.55mmol，18.94mL，10％纯度)添加到(2R,5S)-5-甲基-2-[5-(甲基氨基甲酰基)-2-噻吩基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.4g，4.14mmol)于DCM(20mL)中的溶液中。将所得混合物在20℃下搅拌15h。然后，在减压下移除挥发物且将残余物分配于20％ K2CO3水溶液(20ml)与乙酸乙酯(40ml)之间。分离有机层，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩，得到N-甲基-5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]噻吩-2-甲酰胺(760mg，3.19mmol，77.09％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.80(d,3H),0.88(m,1H),1.05(m,1H),1.32(m,1H),1.48(m,1H),1.73(m,1H),1.84(m,1H),2.21(t,1H),2.71(d,3H),2.93(d,1H),3.70(d,1H),6.92(d,1H),7.47(d,1H),8.26(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值238.2；实测值239.2；Rt＝0.569min。
3F.2-环己基-5-甲基哌啶的合成
步骤1：2-(环己烯-1-基)-5-甲基吡啶的合成
将2-溴-5-甲基吡啶(2.86g，16.63mmol)和2-(环己烯-1-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(4.15g，19.95mmol，4.32mL)溶解于THF(50mL)中。添加碳酸铯(13.54g，41.56mmol)于水(5mL)中的溶液。然后，添加PdCl2*dppf*CH2Cl2(83.13μmol)且将反应烧瓶快速抽真空且用氩气再填充。将所得混合物在80℃下搅拌16h。此后，使其冷却且蒸发。将残余物分配于EtOAc与水之间。将有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥且蒸发。使残余物经历柱色谱(SiO2(80g)柱，Hex-MTBE作为流动相)，以获得2-(环己烯-1-基)-5-甲基吡啶(2g，11.54mmol，69.43％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ(ppm)1.59(m,2H),1.68(m,2H),2.18(t,2H),2.25(s,3H),2.41(t,2H),6.62(s,1H),7.38(d,1H),7.51(d,1H),8.32(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值173.2；实测值174.2；Rt＝0.899min。
步骤2：2-环己基-5-甲基哌啶的合成
将干燥的487型钯(10％于碳上)(24.57mg，230.88μmol)添加到2-(环己烯-1-基)-5-甲基吡啶(2g，11.54mmol)于MeOH(50mL)中的溶液中且将所得混合物在50atm.压力和50℃下氢化48h。在起始材料(HNMR对照)消耗之后，使所得混合物冷却至室温且过滤。将滤液蒸发至干。使残余物经历HPLC(装备有DAD和质量检测器的Agilent1260Infinity系统；Waters SunFire C18 OBD制备型柱，100A，5mkm，19*100mm with SunFire C18制备型保护筒，100A，10mkm，19*100mm；1-30％1.5-5min；水-乙腈作为流动相；流速30mL/min；(装载泵4mL/min水)；目标质量181)，以获得2-环己基-5-甲基哌啶(1.5g，6.89mmol，59.67％产率，HCl)。
1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ(ppm)0.95(s,3H),1.12(m,6H),1.51(m,4H),1.84(m,6H),2.77(m,2H),3.09(m,2H),8.88(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值181.2；实测值182.4；Rt＝2.315min。
3G.外消旋-N-甲基-4-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]苯胺的合成
步骤1：外消旋-(2S,5R)-2-[4-(叔丁氧基羰基氨基)苯基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将外消旋-4-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]苯胺(1g，3.80mmol，2HCl)溶解于DCM(30mL)中。将所得混合物在室温下搅拌5min且添加TEA(1.54g，15.20mmol，2.12mL)。将反应混合物用冰水浴冷却，随后逐滴添加碳酸叔丁氧基羰基叔丁酯(3.32g，15.20mmol，3.49mL)。在SiO2上用MTBE-Hex(50/50％)冲涮粗品化合物，得到外消旋-(2S,5R)-2-[4-(叔丁氧基羰基氨基)苯基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.1g，2.82mmol，74.14％产率)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值290.2；实测值291.2；Rt＝1.615min。
步骤2：外消旋-(2S,5R)-2-[4-[叔丁氧基羰基(甲基)氨基]苯基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将外消旋-(2S,5R)-2-[4-(叔丁氧基羰基氨基)苯基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.1g，2.82mmol)溶解于THF(30mL)中。用Ar吹扫烧瓶且小心少量添加NaH(129.52mg，3.38mmol，60％纯度)。在剧烈搅拌1h之后，经由注射器逐滴添加MeI(439.79mg，3.10mmol)，然后搅拌过夜。将最终混合物用1mL水淬灭，然后浓缩。将粗产物用水处理且用MTBE萃取，经Na2SO4干燥且在真空中蒸发，以得到(2S,5R)-2-[4-[叔丁氧基羰基(甲基)氨基]苯基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.3g，粗品)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.01(d,3H),1.43(s,18H),1.60(m,3H),2.01(m,2H),2.96(m,1H),3.23(s,3H),3.70(m,1H),5.28(m,1H),7.16(m,4H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值304.2；实测值305.2；Rt＝1.784min。
步骤3：外消旋-N-甲基-4-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]苯胺的合成
将外消旋-(2S,5R)-2-[4-[叔丁氧基羰基(甲基)氨基]苯基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.3g，3.21mmol)溶解于10mL甲醇中，然后添加10mL于二噁烷中的HCl(4.0M溶液)。将混合物搅拌过夜，然后在真空中浓缩。将粗产物用MTBE处理且过滤出来。将所获得的沉淀风干，以得到外消旋-N-甲基-4-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]苯胺(0.65g，2.34mmol，72.96％产率，2HCl)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值204.1；实测值205.2；Rt＝0.608min。
3H.外消旋-(2R,5R)-2-(3,4-二氟苯基)-4,4-二氟-5-甲基哌啶的合成
步骤1：(E)-1-(3,4-二氟苯基)戊-1-烯-3-酮的合成
在Ar气氛下，向1,2-二氟-4-碘苯(20g，83.34mmol)和TEA(12.23g，120.84mmol，16.84mL)的混合物中添加戊-1-烯-3-酮(14.02g，166.67mmol)，随后添加乙酸钯(II)(935.49mg，4.17mmol)和MeCN(100mL)。将混合物回流12h。移除溶剂且将残余物溶解于水(150ml)中且用MTBE(3*100ml)萃取。将有机层用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤且在真空中浓缩，以得到(E)-1-(3,4-二氟苯基)戊-1-烯-3-酮(18g，粗品)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.18(t,3H),2.69(m,2H),6.65(d,1H),7.18(d,1H),7.27(s,1H),7.36(d,1H),7.45(d,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值196.2；实测值197.2；Rt＝1.449min。
步骤2：(E)-1-(3,4-二氟苯基)-5-(二甲基氨基)-4-甲基戊-1-烯-3-酮的合成
将(E)-1-(3,4-二氟苯基)戊-1-烯-3-酮(18g，91.75mmol)、1,3,5-三噁烷(5.51g，183.49mmol，4.71mL，300％纯度)、二甲胺盐酸盐(7.48g，91.75mmol)和36％重量/重量盐酸水溶液(9.16g，91.75mmol，11.46mL，36.5％纯度)于EtOH(150mL)中的溶液在80℃下搅拌12h。在真空中移除溶剂，以得到(E)-1-(3,4-二氟苯基)-5-(二甲基氨基)-4-甲基-戊-1-烯-3-酮(30g，粗品，HCl)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.17(d,3H),2.68(s,6H),3.45(m,1H),4.47(m,2H),6.85(d,1H),7.10(d,1H),7.62(s,1H),7.83(d,1H),7.92(d,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值253.2；实测值254.2；Rt＝0.795min。
步骤3：外消旋-(2R,5R)-2-(3,4-二氟苯基)-5-甲基哌啶-4-酮的合成
将(E)-1-(3,4-二氟苯基)-5-(二甲基氨基)-4-甲基-戊-1-烯-3-酮(30g，118.44mmol)溶解于水(150mL)和NH3水溶液(150mL)中，然后将反应混合物在80℃下搅拌12h。将反应混合物用1N HCl酸化，用MTBE(2*150ml)萃取，然后将水层用1N NaOH碱化且用DCM(3*100ml)萃取。将DCM层经Na2SO4干燥，过滤且在真空下蒸发，以得到(2S,5S)-2-(3,4-二氟苯基)-5-甲基哌啶-4-酮(5.5g，粗品)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.03(d,3H),1.26(m,1H),2.48(m,2H),2.65(m,2H),3.45(m,1H),3.88(d,1H),7.07(m,2H),7.24(d,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值225.2；实测值226.2；Rt＝0.570min。
步骤4：外消旋-(2R,5R)-1-苯甲基-2-(3,4-二氟苯基)-5-甲基哌啶-4-酮的合成
将(2S,5S)-2-(3,4-二氟苯基)-5-甲基哌啶-4-酮(5.5g，24.42mmol)、99％无水碳酸钾(10.12g，73.26mmol，4.42mL)和溴甲基苯(4.59g，26.86mmol，3.19mL)溶解于DMF(25mL)中且在60℃下搅拌12h。将反应混合物溶解于水(150ml)中且用MTBE(3*50ml)萃取。将有机相用盐水(3*50ml)洗涤。将有机相经Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩，以得到粗产物(7g)，其通过快速柱色谱(己烷-MTBE)进行纯化，以得到(2S,5S)-1-苯甲基-2-(3,4-二氟苯基)-5-甲基哌啶-4-酮(2.0g，6.34mmol，25.97％产率)。通过2D-NMR实验证明标题化合物的结构。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.94(d,3H),2.02(m,1H),2.48(m,1H),2.62(m,1H),2.75(m,1H),2.90(m,1H),3.17(m,1H),3.53(m,1H),3.79(m,1H),7.17(m,1H),7.32(m,7H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值315.2；实测值316.2；Rt＝1.428min。
步骤5：外消旋-(2R,5R)-1-苯甲基-2-(3,4-二氟苯基)-4,4-二氟-5-甲基哌啶的合成
将(2S,5S)-1-苯甲基-2-(3,4-二氟苯基)-5-甲基哌啶-4-酮(2g，6.34mmol)、HF(1.27g，63.42mmol)和SF4(1.37g，12.68mmol)在不锈钢高压釜中在70℃下加热12h。反应完成之后，排出气体产物，将反应混合物倒在冰上且用10％ K2CO3水溶液中和。将产物用MTBE(3×100mL)萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，且在减压下浓缩，以得到(2S,5S)-1-苯甲基-2-(3,4-二氟苯基)-4,4-二氟-5-甲基哌啶(2g，5.93mmol，93.48％产率)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.97(d,3H),2.02(m,2H),2.22(m,2H),2.85(d,2H),3.45(d,1H),3.72(d,1H),7.14(m,2H),7.25(m,3H),7.31(m,3H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值337.2；实测值338.2；Rt＝1.718min。
步骤6：外消旋-(2R,5R)-2-(3,4-二氟苯基)-4,4-二氟-5-甲基哌啶的合成
在存在活性催化剂于H2O中的雷氏镍2800浆液(507.92mg，5.93mmol)的情况下，将(2S,5S)-1-苯甲基-2-(3,4-二氟苯基)-4,4-二氟-5-甲基哌啶(2g，5.93mmol)于MeOH(60mL)中的溶液回流4h且通过SiO2薄层过滤。向溶液中添加干燥的487型钯(10％于碳上)(630.91mg，5.93mmol)且在室温下用H2(40atm)氢化48h。通过硅藻土过滤反应混合物且在真空中浓缩滤液，以得到(2S,5S)-2-(3,4-二氟苯基)-4,4-二氟-5-甲基哌啶(0.9g，3.64mmol，61.40％产率)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.90(d,3H),1.72(m,1H),1.97(m,1H),2.16(m,1H),2.39(t,1H),2.69(bds,1H),2.98(d,1H),3.71(d,1H),7.21(s,1H),7.35(d,1H),7.45(d,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值247.2；实测值248.2；Rt＝0.981min。
3I.外消旋-4,4-二氟-5-甲基-2-苯基哌啶的合成
步骤1：(E)-1-苯基戊-1-烯-3-酮的合成
在室温下，向碘苯(30g，147.05mmol，16.39mL)和TEA(21.58g，213.23mmol，29.72mL)的混合物中添加戊-1-烯-3-酮(24.74g，294.11mmol)，随后添加乙酸钯(II)(1.65g，7.35mmol)和MeCN(150mL)。将混合物回流12h，然后添加乙酸乙酯(30mL)和水(30mL)。将有机层用水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤且在真空中浓缩，以得到(E)-1-苯基戊-1-烯-3-酮(27.66g，粗品)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
LCMS(ESI)：[M-tBu]+m/z：计算值160.2；实测值161.4；Rt＝3.422min。
步骤2：(E)-5-(二甲基氨基)-4-甲基-1-苯基-戊-1-烯-3-酮的合成
将(E)-1-苯基戊-1-烯-3-酮(27g，168.53mmol)、N-甲基甲胺(13.74g，168.53mmol，17.73mL，HCl)和用7-8％甲醇稳定的37％重量/重量甲醛水溶液(10.63g，353.91mmol，9.84mL)在乙醇(300mL)+HCl(水溶液)(30mL)中回流加热4小时。
将反应混合物在真空中浓缩，以得到(E)-5-(二甲基氨基)-4-甲基-1-苯基-戊-1-烯-3-酮(41g，粗品)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值217.1；实测值218.4；Rt＝2.136min。
步骤3：5-甲基-2-苯基哌啶-4-酮的合成
将(E)-5-(二甲基氨基)-4-甲基-1-苯基-戊-1-烯-3-酮(46g，181.27mmol，HCl)溶解于水(150mL)和NH3(水溶液)(150mL)中，然后将反应混合物在80℃下搅拌20h。将反应混合物用1N HCl酸化，用MTBE(2*20ml)萃取，然后将水层用1N NaOH碱化且用DCM(2*20ml)萃取。将DCM层经Na2SO4干燥，过滤且在真空下蒸发，以得到5-甲基-2-苯基哌啶-4-酮(8.15g，43.06mmol，23.76％产率)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值190,2；实测值190,4；Rt＝1.152min
步骤4：1-苯甲基-5-甲基-2-苯基哌啶-4-酮的合成
将5-甲基-2-苯基哌啶-4-酮(1.15g，6.08mmol)、99％苯甲基溴(1.14g，6.68mmol，793.88μL)和99％无水碳酸钾(2.52g，18.23mmol，1.10mL)溶解于DMF(3mL)中且在60℃下搅拌12h。添加乙酸乙酯且将有机相用盐水洗涤三次。将有机相经Na2SO4干燥，过滤且在45℃下在真空中浓缩，以得到粗产物，其通过快速柱色谱进行纯化，以得到1-苯甲基-5-甲基-2-苯基哌啶-4-酮(0.52g，1.86mmol，30.63％产率)。
1H NMR(CDCl3,400MHz):δ(ppm)0.93(m,3H),1.53(s,1H),2.00(t,1H),2.51(d,1H),2.71(m,1H),2.84(m,1H),3.17(m,1H),3.51(d,1H),3.79(d,1H),7.23-7.45(m,10H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值279.2；实测值280.4；Rt＝2.905min
步骤5：1-苯甲基-4,4-二氟-5-甲基-2-苯基哌啶的合成
将1-苯甲基-5-甲基-2-苯基哌啶-4-酮(0.52g，1.86mmol)、HF(372.38mg，18.61mmol)和SF4(402.41mg，3.72mmol)在不锈钢高压釜中在70℃下加热12h。反应完成之后，排出气体产物，将反应混合物倒在冰上且用10％ K2CO3水溶液中和。将产物用MTBE(3×100mL)萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，且在减压下浓缩，以得到1-苯甲基-4,4-二氟-5-甲基-2-苯基哌啶(0.4g，1.33mmol，71.31％产率)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.96(m,3H),1.99(m,1H),2.10(m,2H),2.23(m,1H),2.83(m,2H),3.46(d,1H),3.76(d,1H),7.23-7.46(m,10H)
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值301.4；实测值302.2；Rt＝1.356min
步骤6：4,4-二氟-5-甲基-2-苯基哌啶的合成
将1-苯甲基-4,4-二氟-5-甲基-2-苯基哌啶(0.4g，1.33mmol)溶解于MeOH(10mL)中且添加10％ Pd/C(0.1g，53.09μmol)且在室温下用H2(30atm)氢化60h。通过硅藻土过滤反应混合物且在45℃下在真空中浓缩滤液，以得到4,4-二氟-5-甲基-2-苯基哌啶(0.2g，946.75μmol，71.33％产率)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ1.06(m,3H),1.83-2.30(m,3H),2.71(t,1H),3.13(m,1H),3.92(d,2H),7.23-7.46(m,5H)
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值211.2；实测值212.2；Rt＝0.714min
3J.(2R,5R)-5-甲基-2-苯基哌啶-4-醇的合成
步骤1：(2R,5R)-5-甲基-4-氧代-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将5-甲基-2-苯基哌啶-4-酮(2.8g，14.80mmol)(如上文所述制备)和TEA(2.25g，22.19mmol，3.09mL)溶解于DCM(40mL)中且逐滴添加二碳酸二-叔丁酯(3.23g，14.80mmol，3.40mL)，然后将反应混合物在室温下搅拌12h。将反应混合物用NaHSO4(水溶液)洗涤，将有机层经Na2SO4干燥，过滤且在真空下浓缩，以得到粗产物，其通过HPLC(2-10min 10-50％MeCN+NH3，30ml/min(装载泵4ml MeCN)柱：TRIART C18 100*20mm)进行纯化，以得到(2R,5R)-5-甲基-4-氧代-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.317g，1.10mmol，7.40％产率)。
LCMS(ESI)：[M-tBu+1]+m/z：计算值289.2；实测值234.2；Rt＝3.784min
步骤2：(2R,5R)-4-羟基-5-甲基-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将(2R,5R)-5-甲基-4-氧代-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.31g，1.07mmol)溶解于MeOH(7mL)中。将反应混合物用冷水冷却且添加硼氢化钠(60.79mg，1.61mmol，56.82μL)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。在真空下移除溶剂。将残余物用NH4Cl(水溶液)稀释且用DCM(2x20ml)萃取，将DCM经Na2SO4干燥，过滤且在真空下浓缩，以得到呈DM的(2R,5R)-4-羟基-5-甲基-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.244g，837.38μmol，78.17％产率)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.50(m,3H),1.35(m,9H),1.71-2.50(m,4H),3.50(m,1H),3.67(m,1H),3.87(m,1H),5.12-5.55(m,1H),7.31(m,5H)。
LCMS(ESI)：[M+Na]+m/z：计算值314.2；实测值291.2；Rt＝3.635min
步骤3：(2R,5R)-5-甲基-2-苯基哌啶-4-醇的合成
将(2R,5R)-4-羟基-5-甲基-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.244g，837.38μmol)溶解于二噁烷/HCl(7mL)中且搅拌4h。将反应混合物在真空下浓缩，以得到呈DM的(2R,5R)-5-甲基-2-苯基哌啶-4-醇(0.19g，834.32μmol，99.63％产率，HCl)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
1H NMR(500MHz,DMSO)δ0.91-1.02(m,3H),1.83-2.30(m,3H),2.73(q,1H),2.97-3.21(m,2H),4.39(m,1H),7.40-7.50(m,5H),9.13-9.47(m,2H)
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值191.2；实测值192.4；Rt＝1.023min
3K.外消旋-(2R,5R)-5-氟-5-甲基-2-苯基哌啶的合成
上文给出1-苯甲基-5-甲基-2-苯基哌啶-4-酮的制备。
步骤1：外消旋-(2R,5R)-1-苯甲基-5-甲基-2-苯基哌啶-4-醇的合成
将(2R,5R)-1-苯甲基-5-甲基-2-苯基哌啶-4-酮(350.00mg，1.25mmol)溶解于MeOH(7mL)中。将反应混合物用冷水冷却且添加硼氢化钠(71.09mg，1.88mmol，66.44μL)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。在真空下移除溶剂。将残余物用NH4Cl(水溶液)稀释且用DCM(2x20ml)萃取，将DCM经Na2SO4干燥，过滤且在真空下浓缩，以得到呈DM的(2R,5R)-1-苯甲基-5-甲基-2-苯基哌啶-4-醇(0.28g，995.06μmol，79.43％产率)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.94(d,3H),1.47(m,1H),1.70(m,2H),1.96(m,1H),2.09(m,1H),2.76(m,1H),2.88(m,1H),3.24(m,1H),3.76(m,1H),7.25(m,10H),7.45(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值281.2；实测值282.2；Rt＝1.327min。
步骤2：外消旋-(2R,5R)-1-苯甲基-5-氟-5-甲基-2-苯基哌啶的合成
将(2R,5R)-1-苯甲基-5-甲基-2-苯基哌啶-4-醇(0.28g，995.06μmol)、HF(199.07mg，9.95mmol)和SF4(215.13mg，1.99mmol)在不锈钢高压釜中在70℃下加热12h。反应完成之后，排出气体产物，将反应混合物倒在冰上且用10％ K2CO3水溶液中和。将产物用MTBE(3×100mL)萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经Na2SO4干燥且在减压下浓缩，以得到粗产物，其通过HPLC(2-10min 50-60％MeOH/H2O 30ml/min(装载泵4ml MeOH)柱：SunFire 100*19mm，5微米)进行纯化，以得到(2R,4S,5R)-1-苯甲基-4-氟-5-甲基-2-苯基哌啶(0.065g，229.37μmol，23.05％产率)和(2R,5R)-1-苯甲基-5-氟-5-甲基-2-苯基哌啶(0.044g，155.27μmol，15.60％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.23(d,3H),1.68(m,2H),1.78(m,2H),2.12(m,1H),2.88(m,2H),3.18(m,1H),3.68(m,1H),7.23(m,6H),7.36(m,2H),7.48(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值283.2；实测值284.2；Rt＝1.011min。
步骤3：外消旋-(2R,5R)-5-氟-5-甲基-2-苯基哌啶的合成
将(2R,5R)-1-苯甲基-5-氟-5-甲基-2-苯基哌啶(0.044g，155.27μmol)溶解于MeOH(4mL)中且添加10％ Pd/C(0.006g，155.27μmol)且在室温下用H2(1atm)氢化36h。通过硅藻土过滤反应混合物且在真空中在45℃下浓缩滤液，以得到(2R,5R)-5-氟-5-甲基-2-苯基哌啶(0.014g，72.44μmol，46.66％产率)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.29(d,3H),1.98(m,4H),2.86(m,1H),3.18(m,1H),3.66(m,1H),7.35(m,5H)。LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值193.2；实测值194.2；Rt＝1.143min。
3L.外消旋-(2R,5S)-2-(3-氯-4,5-二氟苯基)-5-甲基哌啶的合成
步骤1：3-氯-4,5-二氟苯甲酰氯的合成
将草酰氯(1.98g，15.58mmol，1.35mL)逐滴添加到3-氯-4,5-二氟苯甲酸(2g，10.39mmol)于DCM(20mL)中的搅拌悬浮液中。然后，向其中添加DMF(94.40mg，1.29mmol，0.1mL)且将所得混合物在20℃下搅拌3h。在减压下移除挥发物。将残余物再溶解于己烷(40mL)中，过滤且在真空中浓缩，得到3-氯-4,5-二氟苯甲酰氯(2.1g，9.95mmol，95.82％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)7.88(s,1H),8.02(s,1H)。
GCMS：计算值210.2；实测值210.2；Rt＝5.122min。
步骤2：3-(3-氯-4,5-二氟苯甲酰基)-5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
在-78℃下，将双(三甲基甲硅烷基)酰胺化钠(40％于THF中)(9.58g，20.90mmol，10.72mL，40％纯度)逐滴添加到5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.12g，9.95mmol)于THF(30mL)中的预冷却溶液中。添加完成之后，将其在同一温度下搅拌1h。此后，逐滴添加于己烷(8mL)中的3-氯-4,5-二氟苯甲酰氯(2.1g，9.95mmol)溶液，且移除冷却浴。将所得混合物缓慢升温至20℃且在此温度下搅拌1h。然后，将其用15％ NaHSO4水溶液(40ml)淬灭且用乙酸乙酯(40ml)萃取。将有机层用20％ NaCl水溶液(2x30 ml)洗涤，经Na2SO4干燥且在减压下蒸发，得到3-(3-氯-4,5-二氟苯甲酰基)-5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(3.8g，9.80mmol，98.45％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.96(d,3H),1.56(s,9H),2.22(m,4H),3.17(m,1H),3.86(m,1H),7.57(s,1H),7.85(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值287.2；实测值288.2；Rt＝1.596min。
步骤3：6-(3-氯-4,5-二氟苯基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶的合成
将3-(3-氯-4,5-二氟苯甲酰基)-5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(3.8g，9.80mmol)溶解于乙酸(20mL)中且分批添加30％盐酸水溶液(23.00g，189.24mmol，20mL，30％纯度)。添加完成之后，将所得混合物在100℃下搅拌5h。然后，在减压下移除溶剂且将残余物分配于1N HCl(50ml)与EA(20ml)之间。分离有机层且丢弃。将水层用10％ NaOH碱化至ph≈10且用DCM(2x30 ml)萃取。分离DCM溶液，经K2CO3干燥且在减压下蒸发，得到6-(3-氯-4,5-二氟苯基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶(1.5g，6.16mmol，62.82％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)0.96(d,3H),1.36(m,1H),1.68(m,1H),1.91(m,1H),2.48(m,1H),2.68(m,1H),3.26(m,1H),3.99(m,1H),7.54(s,1H),7.61(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值243.2；实测值244.2；Rt＝1.026min。
步骤4：外消旋-(2R,5S)-2-(3-氯-4,5-二氟苯基)-5-甲基哌啶的合成
在15分钟内，将硼氢化钠(349.30mg，9.23mmol，326.45μL)分批添加到6-(3-氯-4,5-二氟苯基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶(1.5g，6.16mmol)于MeOH(30mL)中的溶液中。将所得溶液在20℃下搅拌2h。然后，在减压下移除溶剂且将残余物分配于水(30ml)与DCM(30ml)之间。分离有机层，经K2CO3干燥且在真空中蒸发，得到(2R,5S)-2-(3-氯-4,5-二氟苯基)-5-甲基哌啶(1.48g，6.02mmol，97.86％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)0.86(d,3H),1.12(m,1H),1.41(m,1H),1.82(m,4H),2.36(t,1H),3.11(d,1H),3.56(d,1H),7.08(s,1H),7.19(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值245.2；实测值246.2；Rt＝0.921min。
3M.外消旋-2-甲基-5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯酚的合成
步骤1：3-(3-甲氧基-4-甲基苯甲酰基)-5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
向5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(19g，89.09mmol)于THF(350mL)中的预冷却(-78℃)溶液中逐滴添加LiHMDS(189mmol，178mL)。将所得混合物在-78℃下搅拌1h。一次性添加3-甲氧基-4-甲基-苯甲酰氯(16.45g，89.09mmol)的溶液。使反应混合物升温至室温且在所述温度下搅拌4h。将反应混合物用NaHSO4(45g；10％溶液)淬灭且用DCM(3*150ml)萃取。将有机层用水洗涤，经Na2SO4干燥。将DCM蒸发，以得到3-(3-甲氧基-4-甲基苯甲酰基)-5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(38g，粗品)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)0.96(d,3H),1.18(m,1H),1.49(s,9H),1.98(m,2H),2.24(s,3H),2.56(m,1H),3.23(m,1H),3.86(s,3H),4.54(m,1H),7.24(m,2H),7.44(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值261.4；实测值262.2；Rt＝1.443min。
步骤2：2-甲基-5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯酚的合成
将3-(3-甲氧基-4-甲基苯甲酰基)-5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(2g，5.53mmol)溶解于乙酸(20mL)中且分批添加溴化氢水溶液(48重量％)(20mL)。添加完成之后，将所得混合物在100℃下搅拌14h。然后，在减压下移除溶剂且将残余物分配于1N HCl(5ml)与DCM(20ml)之间。分离有机层且丢弃。将水层用10％ NaOH碱化至ph≈10且用EtOAc(3x30 ml)萃取。分离EtOAc溶液，经Na2SO4干燥且在减压下蒸发，得到2-甲基-5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯酚(400mg，1.97mmol，35.56％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)0.96(d,3H),1.38(m,2H),1.69(m,1H),1.86(m,1H),2.24(s,3H),2.51(m,1H),2.70(m,1H),3.19(m,1H),3.94(m,1H),7.02(m,2H),7.33(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值203.4；实测值204.2；Rt＝0.893min。
步骤3：外消旋-2-甲基-5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯酚的合成
在25℃下，向2-甲基-5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯酚(400mg，1.97mmol)于MeOH(20mL)中的溶液中分批添加硼氢化钠(74.44mg，1.97mmol，69.57μL)。将所得混合物在25℃下搅拌2h且在真空中蒸发。将残余物用氯化氢二噁烷溶液处理。然后蒸发二噁烷。将沉淀用THF洗涤，在真空中干燥，以得到2-甲基-5-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]苯酚(450mg，1.86mmol，94.60％产率，HCl)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.96(d,3H),1.22(m,1H),1.86(m,4H),2.14(s,3H),2.48(m,1H),2.56(m,1H),3.14(m,1H),5.74(m,1H),6.81(m,1H),7.01(m,1H),7.18(m,1H),9.01(bds,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值205.4；实测值206.2；Rt＝0.895min。
3N.4-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]-N-(2,2,2-三氟乙基)苯胺的合成
步骤1：4-溴苯甲酰氯的合成
将4-溴苯甲酸(20g，99.49mmol)和草酰氯(18.94g，149.24mmol，12.97mL)悬浮于二氯甲烷(200mL)中。然后，分3批向其中添加二甲基甲酰胺(94.40mg，1.29mmol，0.1mL)。将所得混合物在25℃下搅拌2h。当气体逸出停止时，在减压下浓缩所得澄清溶液。将残余物再溶解于己烷(150mL)中，过滤且在真空中蒸发，得到4-溴苯甲酰氯(21.5g，97.97mmol，98.46％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.66(d,2H),7.97(d,2H)。
GCMS：[M+H]+m/z：计算值219.2；实测值219.9；Rt＝5.646min。
步骤2：3-(4-溴苯甲酰基)-5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
在-78℃下，将LiHMDS(20％于THF/乙苯中)(172.12g，205.73mmol，194.05mL，20％纯度)逐滴添加到5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(20.89g，97.97mmol)于四氢呋喃(150mL)中的预冷却溶液中。添加完成之后，将其在同一温度下搅拌1h。此后，一次性添加4-溴苯甲酰氯(21.5g，97.97mmol)且移除冷却浴。将所得混合物缓慢升温至20℃且在此温度下搅拌1h。然后，将其用15％ NaHSO4水溶液(250mL)淬灭且用乙酸乙酯(300mL)萃取。将有机层用20％ NaCl水溶液(2*250mL)洗涤，经Na2SO4干燥且在减压下蒸发，得到3-(4-溴苯甲酰基)-5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(41.7g，粗品)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.12(m,3H),1.62(s,9H),1.87(m,3H),3.14(m,1H),3.82(m,1H),4.46(m,1H),7.18(d,1H),7.54(d,1H),7.66(d,1H),7.82(d,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值395.1；实测值396.0；Rt＝1.363min。
步骤3：6-(4-溴苯基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶的合成
将3-(4-溴苯甲酰基)-5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(40.4g，101.95mmol)溶解于乙酸(300mL)中且分批添加30％重量/重量盐酸水溶液(345.00g，2.84mol，300mL，30％纯度)(小心！会形成泡沫)。添加完成之后，将所得混合物在100℃下搅拌15h。然后，在减压下移除溶剂且将残余物分配于1N HCl(500mL)与DCM(400mL)之间。分离有机层且丢弃。将水层用10％ NaOH碱化至pH 10且用DCM(2*200mL)萃取。分离DCM溶液，经K2CO3干燥且在减压下蒸发，得到6-(4-溴苯基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶(17.2g，68.21mmol，66.91％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.97(m,3H),1.35(m,1H),1.69(m,1H),1.89(m,1H),2.52(m,1H),2.70(m,1H),3.22(m,1H),3.96(m,1H),7.48(d,2H),7.62(d,2H)。
LCMS(ESI)：[M+3H]+m/z：计算值251.1；实测值254.0；Rt＝0.864min。
步骤4：外消旋-(2R,5S)-2-(4-溴苯基)-5-甲基哌啶的合成
在15分钟内，将硼氢化钠(2.58g，68.21mmol，2.41mL)分批添加到6-(4-溴苯基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶(17.2g，68.21mmol)于甲醇(250mL)中的溶液中。将所得溶液在20℃下搅拌2h。然后，在减压下移除溶剂且将残余物分配于水(100mL)与DCM(200mL)之间。分离有机层，经Na2SO4干燥且在真空中蒸发，得到外消旋-(2R,5S)-2-(4-溴苯基)-5-甲基哌啶(17.3g，68.07mmol，99.78％产率)。其含有12％顺式-杂质。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ0.90(m,3H),1.15(m,2H),1.48(m,1H),1.59(m,1H),1.65(m,1H),1.86(m,1H),2.41(t,1H),3.13(m,1H),3.51(m,1H),7.24(m,2H),7.43(d,2H)。
LCMS(ESI)：[M+3H]+m/z：计算值253.1；实测值256.0；Rt＝0.821min。
步骤5：(2R,5S)-2-(4-溴苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将(2R,5S)-2-(4-溴苯基)-5-甲基哌啶(17.3g，68.07mmol)溶解于二氯甲烷(250mL)中且逐滴添加二碳酸二-叔丁酯(15.15g，69.43mmol，15.93mL)(剧烈气体逸出！)。将所得混合物在25℃下搅拌4h。然后，在减压下移除挥发物，得到(2R,5S)-2-(4-溴苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(24.3g，粗品)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ1.05(d,3H),1.29(m,1H),1.45(s,9H),1.58(m,1H),1.83(m,1H),1.97(m,1H),2.12(m,1H),2.97(d,1H),3.72(d,1H),5.26(m,1H),7.12(d,2H),7.45(d,2H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值253.2；实测值256.0；Rt＝1.691min。
步骤6：(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(2,2,2-三氟乙基氨基)苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将(2S,5R)-2-(4-溴苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.6g，4.52mmol)、2,2,2-三氟乙胺(1.57g，15.81mmol，1.25mL)和叔丁醇钠(651.01mg，6.77mmol)一起混合在甲苯(15mL)中。将反应烧瓶简单抽真空且用氩气再填充且在氩气流下添加PdG3XPhos(191.14mg，225.81μmol)和XPhos(107.65mg，225.81μmol)。将所得混合物在100℃下在密封容器中搅拌16h。然后，将其冷却至室温且倒入10％NH4Cl水溶液(10ml)中。将所获得的混合物用乙酸乙酯(20ml)萃取。将有机层分离且用Pd-清除剂(0.5g)处理3h。经Na2SO4干燥之后，在减压下移除溶剂，得到(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(2,2,2-三氟乙基氨基)苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.85g，粗品)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.75(m,1H),1.01(d,3H),1.26(m,2H),1.44(s,9H),1.76(m,2H),2.04(m,2H),2.90(m,1H),3.72(m,2H),5.25(m,1H),6.64(d,2H),7.04(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值272.2；实测值273.2；Rt＝1.621min。
步骤7：4-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]-N-(2,2,2-三氟乙基)苯胺的合成
将(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(2,2,2-三氟乙基氨基)苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.85g，4.97mmol)溶解于二氯甲烷(20mL)中且添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(18.11g，49.67mmol，17.93mL，10％纯度)。将所得混合物在25℃下搅拌15h，且在减压下浓缩。将残余物用乙酸乙酯(25ml)研磨。将所获得的灰色沉淀过滤且干燥，得到4-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]-N-(2,2,2-三氟乙基)苯胺(1.2g，3.48mmol，69.97％产率，2HCl)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.87(m,1H),1.05(d,3H),1.49(m,1H),1.75(m,2H),1.97(m,2H),2.83(m,1H),3.09(m,1H),3.88(m,2H),4.04(m,1H),5.74(s,1H),6.71(d,2H),7.26(d,2H),8.53(m,1H),9.43(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值272.2；实测值273.2；Rt＝0.967min。
3O.N,N-二甲基-2-[4-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]苯胺基]乙酰胺的合成
步骤1：(2S,5R)-2-[4-[[2-(二甲基氨基)-2-氧代乙基]氨基]苯基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将(2S,5R)-2-(4-溴苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.5g，4.23mmol)(如上文所示制备)、2-氨基-N,N-二甲基乙酰胺(475.68mg，4.66mmol，HCl)和叔丁醇钠(1.02g，10.58mmol)一起混合在甲苯(20mL)中。将反应烧瓶抽真空且用氩气再填充3次且在氩气流下添加PdG3XPhos(179.19mg，211.70μmol)和XPhos(100.92mg，211.70μmol)。将所得混合物在100℃下搅拌16h。然后，将其冷却至室温且倒入10％ NH4Cl水溶液(15ml)中。将所获得的混合物用乙酸乙酯(25ml)萃取。将有机层分离且用Pd-清除剂(0.5g)处理3h。经Na2SO4干燥之后，在减压下移除溶剂，得到(2S,5R)-2-[4-[[2-(二甲基氨基)-2-氧代乙基]氨基]苯基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.58g，4.21mmol，99.38％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.01(m,4H),1.28(m,3H),1.44(s,9H),1.77(m,3H),2.35(m,1H),2.95(m,2H),3.01(s,3H),3.67(m,1H),3.84(m,2H),5.26(m,1H),6.62(d,1H),7.03(m,1H),7.14(m,1H),7.22(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值275.2；实测值276.2；Rt＝1.392min。
步骤2：N,N-二甲基-2-[4-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]苯胺基]乙酰胺的合成
将(2S,5R)-2-[4-[[2-(二甲基氨基)-2-氧代乙基]氨基]苯基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.58g，4.21mmol)溶解于二氯甲烷(15mL)中且添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(15.34g，42.08mmol，15.19mL，10％纯度)。将所得混合物在25℃下搅拌15h，且在减压下浓缩。将残余物用乙酸乙酯(20ml)研磨。将所获得的灰色沉淀过滤且干燥，得到N,N-二甲基-2-[4-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]苯胺基]乙酰胺(1.2g，3.45mmol，81.88％产率，2HCl)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.93(d,3H),1.17(m,2H),1.98(m,2H),2.65(m,1H),2.87(s,3H),3.14(s,3H),3.98(m,2H),4.52(m,1H),6.82(d,2H),7.35(d,2H),7.71(m,1H),9.13(m,1H),9.35(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值275.2；实测值276.2；Rt＝0.842min。
3P.1-甲基-3-[4-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]苯胺基]吡咯烷-2-酮的合成
步骤1：(2S,5R)-5-甲基-2-[4-[(1-甲基-2-氧代-吡咯烷-3-基)氨基]苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将(2S,5R)-2-(4-溴苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.5g，4.23mmol)(如上文所述制备)、3-氨基-1-甲基-吡咯烷-2-酮(531.61mg，4.66mmol，HCl)和叔丁醇钠(1.02g，10.58mmol)一起混合在甲苯(20mL)中。将反应烧瓶抽真空且用氩气再填充3次且在氩气流下添加PdG3XPhos(179.19mg，211.70μmol)和XPhos(100.92mg，211.70μmol)。将所得混合物在100℃下搅拌16h。然后，将其冷却至室温且倒入10％ NH4Cl水溶液(15ml)中。将所获得的混合物用乙酸乙酯(25ml)萃取。将有机层分离且用Pd-清除剂(0.5g)处理3h。经Na2SO4干燥之后，在减压下移除溶剂，得到(2S,5R)-5-甲基-2-[4-[(1-甲基-2-氧代-吡咯烷-3-基)氨基]苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.66g，粗品)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.01(m,4H),1.28(m,4H),1.44(s,9H),2.02(m,4H),2.66(m,1H),2.92(s,3H),3.39(m,1H),3.69(m,1H),3.90(m,1H),5.22(m,1H),6.64(d,1H),7.05(m,2H),7.15(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值287.2；实测值288.2；Rt＝1.381min。
步骤2：1-甲基-3-[4-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]苯胺基]吡咯烷-2-酮的合成
将(2S,5R)-5-甲基-2-[4-[(1-甲基-2-氧代-吡咯烷-3-基)氨基]苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.66g，4.28mmol)溶解于二氯甲烷(20mL)中且添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(15.62g，42.84mmol，15.46mL，10％纯度)。将所得混合物在25℃下搅拌15h，且在减压下浓缩。将残余物用乙酸乙酯(25ml)研磨。将所获得的灰色沉淀过滤且干燥，得到1-甲基-3-[4-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]苯胺基]吡咯烷-2-酮(1.24g，3.44mmol，80.34％产率，2HCl)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.87(d,3H),1.07(m,2H),1.94(m,2H),2.56(m,2H),2.73(s,3H),3.09(m,2H),3.27(m,2H),3.52(s,2H),4.08(m,1H),5.62(m,1H),6.72(d,2H),7.39(d,2H),9.10(m,1H),9.38(m,1H),9.78(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值287.2；实测值288.2；Rt＝0.847min。
3Q.N,N-二甲基-2-[4-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]苯胺基]丙酰胺的合成
步骤1：(2S,5R)-2-[4-[[2-(二甲基氨基)-1-甲基-2-氧代乙基]氨基]苯基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将(2S,5R)-2-(4-溴苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(820mg，2.31mmol)(如上文所述制备)、(2S)-2-氨基-N,N-二甲基丙酰胺(388.58mg，2.55mmol，HCl)和叔丁醇钠(556.07mg，5.79mmol)一起混合在甲苯(15mL)中。将反应烧瓶抽真空且用氩气再填充3次且在氩气流下添加PdG3XPhos(97.96mg，115.73μmol)和XPhos(55.17mg，115.73μmol)。将所得混合物在100℃下搅拌16h。然后，将其冷却至室温且倒入10％ NH4Cl水溶液(10ml)中。将所获得的混合物用乙酸乙酯(20ml)萃取。将有机层分离且用Pd-清除剂(0.5g)处理3h。经Na2SO4干燥之后，在减压下移除溶剂，得到(2S,5R)-2-[4-[[2-(二甲基氨基)-1-甲基-2-氧代乙基]氨基]苯基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(940mg，粗品)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.00(d,3H),1.27(m,2H),1.35(m,3H),1.43(s,9H),1.75(m,2H),1.97(m,2H),2.96(m,3H),3.08(s,3H),3.65(m,1H),4.40(m,1H),5.24(m,1H),6.63(d,2H),7.02(d,2H),7.24(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M-tBu]+m/z：计算值333.2；实测值334.2；Rt＝1.477min。
步骤2：N,N-二甲基-2-[4-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]苯胺基]丙酰胺的合成
将(2S,5R)-2-[4-[[2-(二甲基氨基)-1-甲基-2-氧代乙基]氨基]苯基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.94g，2.41mmol)溶解于二氯甲烷(10mL)中且添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(8.80g，24.13mmol，8.71mL，10％纯度)。将所得混合物在25℃下搅拌15h，且在减压下浓缩。将残余物用乙酸乙酯(10ml)研磨。将所获得的灰色沉淀过滤且干燥，得到N,N-二甲基-2-[4-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]苯胺基]丙酰胺(0.69g，1.90mmol，78.91％产率，2HCl)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.91(d,3H),1.10(m,1H),1.25(m,4H),1.82(m,3H),2.01(m,2H),2.65(m,1H),2.82(s,3H),3.07(s,3H),3.17(m,1H),3.56(m,1H),4.55(m,1H),6.78(d,2H),7.34(d,2H),9.05(m,1H),9.28(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值289.2；实测值290.2；Rt＝0.765min。
3R.5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(1H-吡唑-5-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙 酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
步骤1：(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(2-四氢吡喃-2-基吡唑-3-基)苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将(2S,5R)-2-(4-溴苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.5g，4.23mmol)(如上文所述制备)、1-四氢吡喃-2-基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡唑(1.30g，4.66mmol)、碳酸钠(1.35g，12.70mmol，532.11μL)于二噁烷(30mL)和水(5mL)中的悬浮液脱气且用Ar再填充三次。向此溶液中添加[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)与二氯甲烷的络合物(172.88mg，211.70μmol)。将所得混合物脱气，用Ar再填充且在90℃下搅拌12h。过滤出沉淀，用二噁烷(50ml)洗涤。在真空中蒸发溶剂且将残余物溶解于50ml水中且用EtOAc(2*50ml)萃取。将合并的有机层用盐水(50ml)洗涤，经Na2SO4干燥且蒸发，以获得粗产物(2.5g)。通过梯度色谱(己烷-MTBE)纯化粗产物，以获得(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(2-四氢吡喃-2-基吡唑-3-基)苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.4g，939.93μmol，22.20％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,500MHz):0.91(d,3H),1.31(s,9H),1.47(m,4H),1.72(m,2H),1.99(m,4H),2.31(m,1H),2.90(m,1H),3.47(m,2H),3.90(m,1H),5.07(m,1H),5.13(m,1H),6.24(d,1H),7.21(m,2H),7.38(m,3H),
LCMS(ESI)：[M+Na]+m/z：计算值425.3；实测值448.2；Rt＝1.736min。
步骤2：(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(1H-吡唑-5-基)苯基]哌啶的合成
向(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(2-四氢吡喃-2-基吡唑-3-基)苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.4g，939.93μmol)于DCM(10mL)中的溶液中添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(8.00g，219.41mmol，10mL)。将所得混合物在25℃下搅拌24h，且在减压下蒸发。将残余物用1:1EtOH和MTBE(3ml)研磨且过滤沉淀，以得到(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(1H-吡唑-5-基)苯基]哌啶(0.25g，795.54μmol，84.64％产率，2HCl)。
1H NMR(DMSO-d6,400MHz):0.91(d,3H),1.32(m,2H),1.90(m,3H),2.01(m,2H),2.67(m,1H),3.22(m,1H),4.13(m,2H),6.73(d,1H),7.56(d,1H),7.71(d,1H),7.84(d,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值241.2；实测值242.2；Rt＝0.919min。
3S.外消旋-(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(1H-吡唑-4-基)苯基]哌啶的合成
步骤1：(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(1-四氢吡喃-2-基吡唑-4-基)苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将(2S,5R)-2-(4-溴苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1g，2.82mmol)(如上文所述制备)、1-四氢吡喃-2-基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡唑(785.13mg，2.82mmol)和碳酸钠(448.75mg，4.23mmol，177.37μL)一起混合在二噁烷(8mL)和水(2mL)中。将反应烧瓶抽真空且用氩气再填充3次且在氩气流下添加PdCl2*dppf*DCM(92.20mg，112.90μmol)。将所得混合物在90℃下搅拌20h。然后，在减压下移除溶剂且将残余物再溶解于MTBE(30ml)中。通过短硅胶垫过滤此溶液且在真空中蒸发残余物，得到(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(1-四氢吡喃-2-基吡唑-4-基)苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.49g，粗品)。
1H NMR(CDCl3,400MHz):1.02(d,3H),1.04(m,1H),1.17(s,9H),1.43(m,2H),1.61(m,2H),1.69(m,2H),1.81(m,1H),2.03(m,4H),2.99(m,1H),3.71(m,2H),4.06(m,1H),5.40(m,1H),7.22(m,2H),7.43(m,2H),7.79(s,1H),7.82(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+Na]+m/z：计算值425.3；实测值448.2；Rt＝1.679min。
步骤2：(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(1H-吡唑-4-基)苯基]哌啶)的合成
将于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(12.75g，34.97mmol，12.62mL，10％纯度)添加到(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(1-四氢吡喃-2-基吡唑-4-基)苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.49g，3.50mmol)于甲醇(15mL)中的溶液中。将所得混合物在20℃下搅拌15h，且在减压下浓缩。将残余物用乙酸乙酯(25ml)研磨。过滤所得沉淀，用冰冷的乙醇(15ml)冲洗且干燥，得到(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(1H-吡唑-4-基)苯基]哌啶(580mg，1.85mmol，52.78％产率，2HCl)。
1H NMR(DMSO-d6,400MHz):0.91(d,3H),1.08(m,1H),1.29(m,1H),1.89(m,3H),2.02(m,2H),2.63(m,1H),3.18(m,1H),4.17(m,2H),7.52(d,1H),7.62(d,1H),8.08(s,2H),9.23(s,1H),9.42(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+Н]+m/z：计算值241.19实测值242.2；Rt＝0.819min。
3T.外消旋-4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯甲酸甲酯的合成
步骤1：(2R,5S)-2-(4-甲氧基羰基苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将(2R,5S)-2-(4-溴苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.00g，2.82mmol)溶解于甲醇(30mL)中。向其中添加三乙胺(285.62mg，2.82mmol，393.42μL)和PdCl2*dppf*dcm(141.13μmol)。将所得混合物在135℃、CO(30巴)气氛下搅拌16h。然后，在减压下蒸发溶剂。将残余物用MTBE(50ml)稀释且通过短硅胶垫过滤。在真空中浓缩滤液，得到(2R,5S)-2-(4-甲氧基羰基苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯。
1H NMR(DMSO-d6,500MHz):0.97(d,3H),1.15(m,1H),1.37(s,9H),1.53(m,1H),1.81(m,1H),2.07(m,2H),2.98(m,1H),3.62(m,1H),3.84(s,3H),5.18(m,1H),7.37(m,2H),7.95(m,2H)。
步骤2：4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯甲酸甲酯的合成
将(2R,5S)-2-(4-甲氧基羰基苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(800.00mg，2.40mmol)于二噁烷/HCl(10mL)中的溶液在20℃下搅拌12h。将所得混合物蒸发至干。将残余物用碳酸钾稀释且用DCM(2*20ml)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且蒸发，以获得粗品4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯甲酸甲酯，其不经纯化即用于下一步骤。
步骤3：4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯甲酸甲酯的合成
在0℃下，将铝酸锂(lithium alumanuide)(97.61mg，2.57mmol)添加到4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯甲酸甲酯(300.00mg，1.29mmol)于无水THF中的搅拌溶液中且使其升温至室温，然后搅拌12h。将反应混合物用饱和硫酸钠溶液淬灭且搅拌30min。通过硅藻土过滤反应混合物，分离有机层且在真空中浓缩，以获得[4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]甲醇(0.1g，487.10μmol，37.88％产率)。
1H NMR(CDCl3,400MHz):0.89(d,3H),1.06(m,2H),1.62(m,2H),1.82(m,2H),2.49(t,1H),3.13(m,1H),3.52(m,1H),3.75(m,1H),4.52(s,2H),7.37(m,2H),7.42(m,2H)。
3U.2-氧代-2-(2-苯基-1-哌啶基)乙酸的合成
步骤1：2-(5-甲基-2-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯的合成
在-10℃下，将2-氯-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(5.43g，28.53mmol)逐滴添加到5-甲基-2-苯基哌啶(5g，28.53mmol)和三乙胺(2.89g，28.53mmol，3.98mL)于THF(50mL)中的溶液中。将所得混合物升温至室温且搅拌12h。过滤出所得沉淀。将滤液蒸发，以获得2-(5-甲基-2-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(9g，27.33mmol，95.80％产率)，其不经纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.19(m,3H),1.33(m,1H),1.91(m,4H),3.10(m,2H),5.10(m,3H),7.19(d,1H),7.21(d,1H),7.40(m,3H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值329.1；实测值330.1；Rt＝1.496min。
步骤2：2-(5-甲基-2-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酸的合成
将氢氧化锂(654.50mg，27.33mmol)添加到2-(5-甲基-2-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(9g，27.33mmol)于THF(100mL)和水(10mL)中的溶液中。将所得混合物在20℃下搅拌12h。然后，将混合物蒸发至干，以获得2-(5-甲基-2-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酸(5g，19.67mmol，71.96％产率，Li+)，其不经纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.13(m,3H),1.30(m,1H),1.63(m,2H),2.01(m,2H),3.56(m,2H),5.04(m,1H),7.16(m,3H),7.32(m,2H)。
LCMS(ESI)：酸[M+H]+m/z：计算值247.1.1；实测值248.2；Rt＝1.133min。
3V.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(6-氧代-5H-1,5-萘 啶-2-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲 基-2-(6-氧代-5H-1,5-萘啶-2-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
步骤1：3-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
向3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(5g，14.5mmol)于二噁烷(30mL)中的混合物中添加B2pin2(5.5g，21.7mmol)、PdCl2(PPh3)2(305mg，0.435mmol)、PPh3(228mg，0.869mmol)和K2CO3(3g，21.7mmol)。在85℃、氮气下将所得混合物搅拌12小时。将反应混合物用H2O(50mL)稀释，用EtOAc(50mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL*2)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩，以得到粗产物，其通过快速色谱(80g二氧化硅快速柱，石油醚/EtOAc，其中EtOAc为0～10％，流速＝45mL/min，I2)进行纯化，以得到呈无色油状物的3-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(4.6g，98.3％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值324.2，实测值324.1。
步骤2：6-溴-1H-1,5-萘啶-2-酮的合成
向3-(3-氨基-6-溴-2-吡啶基)丙-2-烯酸乙酯(2.2g，8.11mmol)于EtOH(20mL)中的溶液中添加DBU(6.1mL，40.9mmol)。然后在100℃、氮气下将混合物搅拌16小时。在减压下浓缩混合物，以得到粗产物，其通过快速色谱(40g二氧化硅快速柱，DCM/MeOH，其中MeOH为0～0.5％，流速＝50mL/min，254nm)进行纯化，以得到呈棕色固体的6-溴-1H-1,5-萘啶-2-酮(3.5g，粗品)。LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值227.0，实测值227.0。
步骤3：6-溴-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-1,5-萘啶-2-酮的合成
在0℃下，向6-溴-1H-1,5-萘啶-2-酮(3.5g，15.6mmol)于THF(30mL)中的溶液中添加NaH(1.3g，32.5mmol，60重量％于矿物油中)。将混合物在20℃下搅拌0.5小时。添加SEMCl(3.3mL，18.7mmol)，且将混合物在20℃下搅拌12小时。在LCMS上，反应物未完全转化。在0℃下，添加NaH(1.3g，32.5mmol，60重量％于矿物油中)且将混合物在20℃下搅拌30分钟。添加SEMCl(3.3mL，18.7mmol)，且将混合物在20℃下搅拌14小时。添加SEMCl(3.3mL，18.7mmol)，且将混合物在20℃下搅拌5小时。所得混合物通过添加水(50mL)来淬灭且用EtOAc(50mL*3)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩，以得到粗产物，其通过快速色谱(24g二氧化硅快速柱，石油醚/EtOAc，其中EtOAc为0～13％，35mL/min，254nm)进行纯化，以得到呈白色固体的6-溴-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-1,5-萘啶-2-酮(1.92g，34.8％产率)。1HNMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.97(d,J＝8.4Hz,1H),7.91(d,J＝9.8Hz,1H),7.74(d,J＝8.9Hz,1H),6.92(d,J＝9.8Hz,1H),5.76(s,2H),3.65-3.68(m,2H),0.90-0.93(m,2H),0.02(s,9H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值357.0，实测值356.9。
步骤4：3-甲基-6-[6-氧代-5-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-1,5-萘啶-2-基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将3-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(2.3g，7.12mmol)、6-溴-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-1,5-萘啶-2-酮(1.9g，5.35mmol)、Pd(OAc)2(240mg，1.07mmol)、PPh3(561mg，2.14mmol)、Cs2CO3(3.5g，10.7mmol)、二噁烷(20mL)和H2O(2mL)的混合物在100℃下搅拌12小时。所得混合物通过添加水(50mL)来淬灭且用EtOAc(50mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL*2)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩，以得到粗产物，其通过快速色谱(80g二氧化硅快速柱，石油醚/EtOAc，其中EtOAc为0～45％，45mL/min，254nm)进行纯化，以得到呈黄色油状物的3-甲基-6-[6-氧代-5-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-1,5-萘啶-2-基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(600mg，23.8％产率)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.95-8.09(m,2H),7.60(d,J＝8.8Hz,1H),6.91(d,J＝9.8Hz,1H),5.81(s,2H),5.75(s,1H),3.99(d,J＝9.5Hz,1H),3.71-3.77(m,1H),3.63-3.70(m,2H),2.46-2.57(m,1H),2.02-2.11(m,1H),1.91-2.00(m,1H),1.20(s,9H),1.06(d,J＝6.8Hz,3H),0.87-0.92(m,2H),-0.04(s,9H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值472.3，实测值472.4。
步骤5：6-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-1,5-萘啶-2-酮的合成
向3-甲基-6-[6-氧代-5-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-1,5-萘啶-2-基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(580mg，1.23mmol)于DCM(30mL)中的溶液中添加ZnBr2(554mg，2.46mmol)。在20℃、氮气下将混合物搅拌12小时。所得混合物通过添加水(30mL)来淬灭且用DCM(30mL*3)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩，以得到呈黄色固体的6-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-1,5-萘啶-2-酮(650mg，粗品)，其不经进一步纯化即直接使用。LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值372.2，实测值372.2。
步骤6：6-(5-甲基-2-哌啶基)-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-1,5-萘啶-2-酮的合成
在0℃下，向6-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-1,5-萘啶-2-酮(600mg，1.61mmol)于MeOH(10mL)中的溶液中添加NaBH4(92mg，2.43mmol)。将混合物在0℃下搅拌30分钟。将所得混合物在减压下浓缩，以得到呈棕色固体的6-(5-甲基-2-哌啶基)-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-1,5-萘啶-2-酮(800mg，粗品)，其不经进一步纯化即直接使用。LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值374.2，实测值374.2。
3W.2-环戊基-5-甲基哌啶的合成
步骤1：5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将二碳酸二-叔丁酯(21.22g，97.21mmol，22.31mL)逐滴添加到5-甲基哌啶-2-酮(10g，88.37mmol)和4-二甲基氨基吡啶(539.82mg，4.42mmol)于MeCN(100mL)中的溶液中。将所得溶液在25℃下搅拌12h。然后蒸发溶剂且将所得粗材料用DCM(50ml)稀释且用饱和碳酸氢钠溶液(2x100 ml)洗涤。将有机相经硫酸钠干燥且在减压下蒸发，以获得5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(16.5g，77.37mmol，87.54％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)0.99(d,3H),1.39(m,1H),1.49(s,9H),1.89(m,2H),2.48(m,2H),3.09(t,1H),3.75(d,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值113.2；实测值114.2；Rt＝1.223min。
步骤2：(4-环戊基-2-甲基-4-氧代丁基)氨基甲酸叔丁酯的合成
向镁(2.26g，92.84mmol，1.30mL)于THF(100mL)中的悬浮液中添加溴环戊烷(14.99g，100.58mmol，10.78mL)。将反应混合物搅拌45min，以得到灰色溶液。将此溶液逐滴转移至5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(16.5g，77.37mmol)于THF(200mL)中的冷(-78℃)悬浮液中。将反应混合物在-78℃下搅拌1h，之后使其升温至室温且搅拌12h。将反应物用MTBE(500ml)稀释且用100mL饱和氯化铵水溶液缓慢淬灭。将有机相用饱和碳酸氢钠水溶液(2x200 ml)洗涤。将合并的水性级分用MTBE反萃取两次。将合并的有机级分经硫酸钠干燥，且通过旋转蒸发来浓缩，以获得粗材料，其通过柱色谱(120g SiO2，己烷/MTBE，其中MTBE为0～15％，流速＝80mL/min)进行纯化，以获得N-(4-环戊基-2-甲基-4-氧代-丁基)氨基甲酸叔丁酯(3.55g，13.18mmol，17.03％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)0.86(s,3H),1.41(s,9H),1.63(m,9H),2.45(m,2H),2.84(m,1H),2.98(m,2H),4.64(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值183.4；实测值184.2；Rt＝1.457min。
步骤3：6-环戊基-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶的合成
将N-(4-环戊基-2-甲基-4-氧代丁基)氨基甲酸叔丁酯(3.55g，13.18mmol)于TFA(20mL)和DCM(20mL)中的溶液在25℃下搅拌11h。将饱和硫酸钠水溶液添加到所述溶液(50ml)中，然后用DCM(2x50ml)萃取。将有机相经硫酸钠干燥，过滤且蒸发，以获得6-环戊基-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶(1.6g，9.68mmol，73.46％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.91(s,3H),1.22(m,1H),1.60(m,7H),1.81(m,3H),2.14(m,1H),2.24(m,1H),2.55(m,1H),2.99(m,1H),3.69(m,1H)。
步骤4：2-环戊基-5-甲基哌啶的合成
将硼氢化钠(732.50mg，19.36mmol，684.58μL)分批添加到6-环戊基-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶(1.6g，9.68mmol)于MeOH(20mL)中的溶液中。将混合物在室温下搅拌12h。添加水(50ml)且将所得混合物用EtOAc(2x50 ml)萃取。将有机相经硫酸钠干燥，过滤且蒸发，以获得2-环戊基-5-甲基哌啶(1.55g，粗品)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)0.78(s,3H),1.03(m,4H),1.62(m,11H),2.16(m,2H),2.96(m,1H)。
GCMS：[M]+m/z：计算值167.4；实测值168.2；Rt＝6.657min。
3X.(2S,4R)-2-苯基哌啶-4-甲腈的合成
步骤1：(2S,4R)-4-氨基甲酰基-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
向(2S,4R)-1-叔丁氧基羰基-2-苯基哌啶-4-甲酸(1g，3.27mmol)于CH3CN(100mL)中的搅拌溶液中添加羰基二咪唑(690.29mg，4.26mmol)。然后将反应混合物搅拌1小时。1小时之后，分批添加碳酸铵(1.43g，8.19mmol)且将所得反应混合物在室温下搅拌过夜。然后将反应混合物在真空中蒸发，添加水且用DCM(2x 40mL)萃取。将合并的有机相经Na2SO4干燥且在减压下浓缩，以得到呈黄色油状物的(2S,4R)-4-氨基甲酰基-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.7g，2.30mmol，70.23％产率)。
LCMS(ESI)：[M+Boc]+m/z：计算值304.2；实测值249.2(t-Bu裂解的产物质量)；Rt＝1.313min。
步骤2：(2S,4R)-4-氰基-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
向(2S,4R)-4-氨基甲酰基-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.7g，2.30mmol)于DCM(10mL)中的搅拌溶液中添加Et3N(1.05g，10.35mmol，1.44mL)且将所得黄色溶液冷却至0℃。在5分钟内将三氟乙酸酐(724.52mg，3.45mmol，486.26μL)逐滴添加到反应混合物中且将所得反应混合物搅拌30分钟。30分钟之后，将粗反应混合物用饱和碳酸氢钠溶液和二氯甲烷稀释。分离两层。将水层用二氯甲烷萃取且将合并的有机相用饱和碳酸氢钠溶液、盐水洗涤，经Na2SO4干燥且在减压下浓缩，以得到呈黄色油状物的(2S,4R)-4-氰基-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.6g，2.10mmol，91.11％产率)。
LCMS(ESI)：[M+Boc]+m/z：计算值286.2；实测值231.2(t-Bu裂解的产物质量)；Rt＝1.411min。
步骤3：(2S,4R)-2-苯基哌啶-4-甲腈的合成
向(2S,4R)-4-氰基-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.6g，2.10mmol)于MeOH(10mL)中的搅拌溶液中添加于二噁烷中的HCl(2.10mmol，5mL)。将所得反应混合物在室温下搅拌过夜。然后在真空中蒸发反应物，以得到(2S,4R)-2-苯基哌啶-4-甲腈(0.36g，1.93mmol，92.25％产率)。粗产物不经任何进一步纯化即用于下一步反应。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值186.1；实测值187.1；Rt＝0.558min。
3Y.外消旋-(2R,5S)-2-(3-溴苯基)-5-甲基哌啶的合成
步骤1：3-(3-溴苯甲酰基)-5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
向5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(13g，60.95mmol)于THF(250mL)中的预冷却(-78℃)溶液中逐滴添加LiHMDS(115mL)。将所得混合物在-78℃下搅拌1h。一次性添加3-溴苯甲酰氯(13.38g，60.95mmol，8.06mL)的溶液。使反应混合物升温至室温且在所述温度下搅拌5h。将反应混合物用NaHSO4(35g；10％溶液)淬灭且用DCM(3*150ml)萃取。将有机层用水洗涤，经Na2SO4干燥。将DCM蒸发，以得到3-(3-溴苯甲酰基)-5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(29g，粗品)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.08(d,3H),1.28(m,1H),1.48(s,9H),1.98(m,2H),2.14(m,1H),2.41(m,1H),4.51(m,1H),7.31(m,3H),7.65(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值296.4；实测值297.2；Rt＝1.563min。
步骤2：6-(3-溴-4-甲基苯基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶的合成
将3-(3-溴苯甲酰基)-5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(29g，73.18mmol)溶解于乙酸(150mL)中且分批添加氯化氢水溶液(250mL，30％纯度)。添加完成之后，将所得混合物在100℃下搅拌15h。然后，在减压下移除溶剂且将残余物分配于1N HCl(150ml)与DCM(100ml)之间。分离有机层且丢弃。将水层用10％ NaOH碱化至ph≈10且用EtOAc(3x150 ml)萃取。分离EtOAc溶液，经Na2SO4干燥且在减压下蒸发，得到6-(3-溴苯基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶(10g，39.66mmol，54.19％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.98(d,3H),1.38(m,1H),1.69(m,1H),1.93(m,1H),2.55(m,1H),2.73(m,1H),3.27(m,1H),4.01(m,1H),7.22(t,1H),7.49(d,1H),7.65(d,1H),7.93(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值252.4；实测值253.2；Rt＝0.886min。
步骤3：外消旋-(2R,5S)-2-(3-溴苯基)-5-甲基哌啶的合成
在0℃下，向6-(3-溴苯基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶(10g，39.66mmol)于MeOH(100mL)中的溶液中分批添加硼氢化钠(1.73g，45.61mmol，1.61mL)。将所得混合物在25℃下搅拌2h且在真空中蒸发。将残余物溶解于MeOH(50mL)中且用于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(14.46g，396.59mmol，18.08mL)处理且将反应混合物搅拌15min。蒸发溶剂。将沉淀用THF洗涤，在真空中干燥，以得到(2S,5R)-2-(3-溴苯基)-5-甲基哌啶(10g，34.41mmol，86.76％产率，HCl)。产物含有2.78g(约30％)NaCl。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.96(d,3H),1.22(m,1H),1.95(m,3H),2.16(m,1H),2.63(m,1H),3.19(m,1H),4.15(m,1H),7.37(t,1H),7.57(d,1H),7.67(d,1H),7.91(s,1H),9.69(bds,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值253.4；实测值254.2；Rt＝0.815min。
3Z.外消旋-6-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)螺[3.3]庚-2-醇的合成
步骤1：3-(6-(苯甲氧基)螺[3.3]庚烷-2-羰基)-5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
向5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(8.65g，40.56mmol)于THF(200mL)中的预冷却(-78℃)溶液中逐滴添加LiHMDS(80.4mL)。将所得混合物在-78℃下搅拌1h。一次性添加2-苯甲氧基螺[3.3]庚烷-6-羰基氯(10.74g，40.56mmol，8.06mL)的溶液。使反应混合物升温至室温且在所述温度下搅拌5h。将反应混合物用NaHSO4(30g；10％溶液)淬灭且用DCM(3*150ml)萃取。将有机层用水洗涤，经Na2SO4干燥。将DCM蒸发，以得到3-(2-苯甲氧基螺[3.3]庚烷-6-羰基)-5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(33g，粗品)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)1.05(d,3H),1.53(s,9H),2.11(m,10H),2.65(m,2H),3.12(m,2H),3.76(m,1H),3.96(m,1H),4.38(s,2H),7.31(m,5H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值341.2；实测值342.2；Rt＝1.625min。
步骤2：6-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)螺[3.3]庚-2-醇的合成
将3-(2-苯甲氧基螺[3.3]庚烷-6-羰基)-5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(33g，74.74mmol)溶解于乙酸(150mL)中且分批添加氯化氢水溶液(250mL，30％纯度)。添加完成之后，将所得混合物在100℃下搅拌15h。然后，在减压下移除溶剂且将残余物分配于1NHCl(150ml)与DCM(100ml)之间。分离有机层且丢弃。将水层用10％ NaOH碱化至ph≈10且用EtOAc(3x150 ml)萃取。分离EtOAc溶液，经Na2SO4干燥且在减压下蒸发，得到6-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)螺[3.3]庚-2-醇(4.5g，21.71mmol，29.04％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.86(d,3H),1.23(m,2H),1.54(m,1H),1.70(m,1H),1.80(m,1H),1.92(m,1H),2.02(m,5H),2.22(m,1H),2.48(m,1H),2.95(m,2H),3.67(m,1H),4.15(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值207.2；实测值208.2；Rt＝0.628min。
步骤3：外消旋-6-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)螺[3.3]庚-2-醇的合成
在0℃下，向6-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)螺[3.3]庚-2-醇(4.5g，21.71mmol)于MeOH(50mL)中的溶液中分批添加硼氢化钠(944.33mg，24.96mmol，882.55μL)。将所得混合物在25℃下搅拌2h且在真空中蒸发。将残余物用水(100ml)稀释且将产物用EtOAc(3*30ml)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥。将EtOAc蒸发，以得到6-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]螺[3.3]庚-2-醇(3.5g，16.72mmol，77.03％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)0.81(d,3H),0.95(m,2H),1.22(m,1H),1.52(m,3H),1.95(m,7H),2.21(m,3H),2.44(m,2H),2.95(m,1H),4.22(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值209.2；实测值210.2；Rt＝0.600min。
3AA.(2R,4S)-N-苯甲基-2-苯基哌啶-4-胺的合成
步骤1：(2R,4S)-4-(苯甲基氨基)-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将4-氧代-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯(3g，10.90mmol)和苯基甲胺(1.17g，10.90mmol)混合于DCM(30mL)中。向其中添加4A分子筛(10g)且在不搅拌的情况下使所得混合物在20℃下反应。12h之后，HNMR显示形成亚胺。过滤所得混合物。在真空中移除所有挥发物。将残余物溶解于无水MeOH(30mL)中。在剧烈搅拌下分批添加硼氢化钠(412.21mg，10.90mmol，385.24μL)且将所得混合物在20℃下搅拌3小时。蒸发所得混合物。将残余物分配于EtOAc(30ml)与水(30ml)之间。将水层用DCM(2x20 ml)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且蒸发，以获得(2R,4S)-4-(苯甲基氨基)-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.5g，粗品)，其不经纯化即用于下一步骤。
1H NMR(DMSO-d6,400MHz):1.20(s,9H),1.29(m,2H),1.49(m,1H),1.89(m,1H),2.12(m,1H),2.81(m,1H),3.35(m,1H),3.57(s,2H),3.85(m,1H),4.82(m,1H),7.16(m,10H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值366.3；实测值367.2；Rt＝1.148min。
步骤2：(2R,4S)-N-苯甲基-2-苯基哌啶-4-胺的合成
将(2R,4S)-4-(苯甲基氨基)-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.5g，12.28mmol)于二噁烷/HCl(25mL)中的溶液在20℃下搅拌12h。将所得混合物蒸发至干，以获得粗品(2R,4S)-N-苯甲基-2-苯基哌啶-4-胺(3.7g，10.90mmol，88.81％产率，2HCl)，其不经纯化即用于下一步骤。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值266.22；实测值267.2；Rt＝0.703min。
3BB.4-(5-甲基-2-哌啶基)苯磺酰胺的合成
步骤1：4-(1-叔丁氧基羰基-5-甲基-2-哌啶基)苯亚磺酸盐的合成
将于己烷中的23％正丁基锂(2.5M)(1.73g，6.21mmol，2.50mL，23％纯度)逐滴添加到冷却至-75℃的2-(4-溴苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(2g，5.65mmol)于四氢呋喃(30mL)中的溶液中。添加完成之后，将混合物在-75℃下搅拌30分钟。然后将二氧化硫(1.81g，28.23mmol)鼓泡到溶液中且将所得溶液在-60℃下搅拌1h。此后，在减压下移除挥发物，留下4-(1-叔丁氧基羰基-5-甲基-2-哌啶基)苯亚磺酸盐(1.9g，5.50mmol，97.45％产率，Li+)。
LCMS(ESI)：[M+H-Boc]+m/z：计算值339.2；实测值239.2；Rt＝1.248min。
步骤2：2-(4-氯磺酰基苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将N-氯琥珀酰亚胺(771.32mg，5.78mmol，467.46μL)分批添加到4-(1-叔丁氧基羰基-5-甲基-2-哌啶基)苯亚磺酸盐(1.9g，5.50mmol，Li+)于水(30mL)和二氯甲烷(30mL)中的冰冷溶液中。添加完成之后，将所得混合物在5℃下搅拌1h。然后，分离DCM层，经Na2SO4干燥且在减压下浓缩，得到2-(4-氯磺酰基苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(2g，5.35mmol，97.24％产率)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值373.1；实测值272.0；Rt＝1.206min。
步骤3：5-甲基-2-(4-氨磺酰基苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将于THF溶液中的氨(0.5M)(13.66g，8.02mmol，16.08mL，1％纯度)逐滴添加到2-(4-氯磺酰基苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1g，2.67mmol)于四氢呋喃(20mL)中的溶液中。添加完成之后，将所得混合物在20℃下搅拌1h。然后，通过短硅胶垫过滤所述混合物且在减压下浓缩滤液，得到5-甲基-2-(4-氨磺酰基苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.87g，2.45mmol，91.77％产率)。
LCMS(ESI)：[M+Na]+m/z：计算值354.2；实测值377.0；Rt＝1.319min。
步骤4：4-(5-甲基-2-哌啶基)苯磺酰胺的合成
将于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(10.10g，27.70mmol，10mL，10％纯度)添加到5-甲基-2-(4-氨磺酰基苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(870mg，2.45mmol)于二氯甲烷(20mL)中的溶液中。将所得混合物在20℃下搅拌4h。然后，在减压下移除溶剂，留下4-(5-甲基-2-哌啶基)苯磺酰胺(700mg，2.41mmol，98.07％产率，HCl)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值254.1；实测值255.2；Rt＝0754min。
3CC.N-甲基-4-(5-甲基-2-哌啶基)苯磺酰胺的合成
步骤1：5-甲基-2-[4-(甲基氨磺酰基)苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将于THF中的2M甲胺(5.77g，13.37mmol，6.70mL，7.2％纯度)逐滴添加到2-(4-氯磺酰基苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1g，2.67mmol)(如上文所述制备)于四氢呋喃(20mL)中的溶液中。添加完成之后，将所得混合物在20℃下搅拌1h。然后，通过短硅胶垫过滤所述混合物且在减压下浓缩滤液，得到5-甲基-2-[4-(甲基氨磺酰基)苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.92g，2.50mmol，93.35％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H-Boc]+m/z：计算值368.2；实测值269.0；Rt＝1.411min。
步骤2：N-甲基-4-(5-甲基-2-哌啶基)苯磺酰胺的合成
将于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(10.10g，27.70mmol，10mL，10％纯度)添加到5-甲基-2-[4-(甲基氨磺酰基)苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(920mg，2.50mmol)于二氯甲烷(20mL)中的溶液中。将所得混合物在20℃下搅拌4h。然后，在减压下移除溶剂，留下N-甲基-4-(5-甲基-2-哌啶基)苯磺酰胺(740mg，2.43mmol，97.23％产率，HCl)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值268.2；实测值269.1；Rt＝0.774min
3DD.(2S,5S)-3,3-二氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶的合成
步骤1：4-氰基-2,2-二氟戊酸乙酯的合成
在20℃下，向铜(9.47g，149.06mmol)、2-甲基丙-2-烯腈(5g，74.53mmol)和2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(27.23g，134.15mmol，17.23mL)于THF(64mL)中的搅拌混合物中依次添加TMEDA(4.33g，37.26mmol，5.59mL)和乙酸(4.48g，74.53mmol，4.26mL)。将混合物在室温下搅拌1小时，然后使用Et2O作为洗脱液经硅藻土过滤。将饱和氯化铵溶液添加到混合物中且将产物用Et2O(50ml)萃取。将有机相用饱和氯化铵和碳酸氢盐水溶液洗涤若干次，以移除最后痕量的铜盐。然后蒸发有机层且用CC(ОК.Interchim,330g SiO2，石油醚/MtBE，其中MtBE为5～35％，流速＝130mL/min，Rv＝6CV)纯化粗残余物，以获得4-氰基-2,2-二氟戊酸乙酯(10g，52.31mmol，70.19％产率)。
1H NMR(CDCl3,500MHz):1.32(d,3H),1.45(t,3H),2.28(q,1H),2.54(q,1H),2.98(m,1H),4.37(q,2H)。
步骤2：4,4-二氟-5-(4-氟苯基)-2-甲基-5-氧代戊腈的合成
在-10℃下，向1-溴-4-氟苯(8.70g，49.69mmol，5.47mL)于Et2O(50mL)和THF(50mL)中的溶液中逐滴添加于己烷中的2.5M正丁基锂(2.5M，19.88mL)。有机锂物质形成后接着进行1H-NMR。在-10℃下，向所得溶液中逐滴添加于Et2O(50mL)中的化合物4-氰基-2,2-二氟戊酸乙酯(9.5g，49.69mmol)。将混合物在-10℃下搅拌2h。将反应物用饱和氯化铵水溶液淬灭，添加EtOAc且分离各相。用EtOAc(2x 5mL)进一步萃取水相。将合并的有机相经MgSO4干燥，过滤，在真空中浓缩，以得到4,4-二氟-5-(4-氟苯基)-2-甲基-5-氧代戊腈(8.5g，35.24mmol，70.91％产率)，其不经纯化即用于下一步骤。
1H NMR(CDCl3,400MHz):1.52(d,3H),2.42(m,1H),2.61(m,1H),3.18(m,1H),7.19(m,2H),8.20(m,2H)。
步骤3：N-[4,4-二氟-5-(4-氟苯基)-5-羟基-2-甲基戊基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将4,4-二氟-5-(4-氟苯基)-2-甲基-5-氧代戊腈(8.5g，35.24mmol)和碳酸叔丁氧基羰基叔丁酯(23.07g，105.72mmol，24.26mL)溶解于MeOH(20mL)中且冷却至-10℃，接着分多批添加98％氯化镍(II)六水合物(2.00g，7.05mmol，1.04mL)和硼氢化钠(13.33g，352.39mmol，12.46mL)，保持温度低于-5℃。在气体逸出停止后，过滤出混合物且在减压下蒸发。在减压下蒸发合并的有机溶剂；将粗产物溶解于MTBE(20mL)中且用饱和NH4Cl水溶液洗涤，经Na2SO4干燥且在减压下蒸发，以得到N-[4,4-二氟-5-(4-氟苯基)-5-羟基-2-甲基戊基]氨基甲酸叔丁酯(6.5g，18.71mmol，53.10％产率)，其不经纯化即用于下一步骤。
LCMS(ESI)：[M+Na]+m/z：计算值347.2；实测值370.2；Rt＝1.291min。
步骤4：N-[4,4-二氟-5-(4-氟苯基)-2-甲基-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将N-[4,4-二氟-5-(4-氟苯基)-5-羟基-2-甲基戊基]氨基甲酸叔丁酯(6.5g，18.71mmol)溶解于DCM(20mL)中，随后添加戴斯-马丁高碘烷(9.52g，22.45mmol)。反应完成之后，过滤出混合物且在减压下蒸发。用CC(己烷/EtOAc 9:1)纯化粗混合物，以得到N-[4,4-二氟-5-(4-氟苯基)-2-甲基-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯(1.2g，3.47mmol，18.57％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)1.12(d,3H),1.48(s,9H),2.08(m,2H),2.31(m,1H),3.12(m,2H),4.89(m,1H),7.18(m,2H),8.16(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M+Na]+m/z：计算值345.2；实测值368.2；Rt＝1.437min。
步骤5：5,5-二氟-6-(4-氟苯基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶的合成
将N-[4,4-二氟-5-(4-氟苯基)-2-甲基-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯(1.1g，3.19mmol)溶解于DCM(20mL)中，随后添加TFA(1.82g，15.93mmol，1.23mL)。在反应完成(气体逸出停止)之后，将混合物用10％ K2CO3水溶液碱化至pH 10，经Na2SO4干燥且在减压下蒸发，以得到5,5-二氟-6-(4-氟苯基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶(0.8g，粗品)其不经纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,CDCl3)1.02(d,3H),1.67(m,1H),2.10(m,1H),2.42(m,1H),3.24(m,1H),4.17(m,1H),7.08(m,2H),7.89(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值227.1；实测值228.2；Rt＝1.269min。
步骤6：(2S,5S)-3,3-二氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶的合成
将5,5-二氟-6-(4-氟苯基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶(0.8g，3.52mmol)溶解于MeOH(20mL)中且冷却至0℃，随后分几批添加硼氢化钠(399.60mg，10.56mmol，373.45μL)。反应完成之后，将反应混合物用10％ HCl水溶液酸化至pH＝2且在减压下蒸发有机溶剂。将粗混合物溶解于H2O(10mL)中，用MTBE(10mL)洗涤，用10％ K2CO3水溶液碱化至pH＝10且用DCM(20mL)萃取3次。蒸发有机溶剂，得到(2S,5S)-3,3-二氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶，其不经纯化即用于下一步骤。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值229.1；实测值230.0；Rt＝0.733min。
3EE.(2S,5S)-3-氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶的合成
步骤1：3-氟-5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(5g，23.44mmol)溶解于THF(5mL)中且冷却至-78℃，接着逐滴添加六甲基二硅氮化锂(1.1M，23.44mL)。10min之后，一次性添加N-(苯磺酰基)-N-氟苯磺酰胺(7.39g，23.44mmol)且使反应混合物升温至-10℃。反应完成之后，将混合物倒入饱和NH4Cl水溶液，且用EtOAc(10mL)萃取。蒸发溶剂，得到粗产物。用CC(Companion combiflash,220g SiO2，石油醚/MtBE，其中MtBE为10～35％，流速＝100mL/min，Rv＝7CV)纯化，得到3-氟-5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.5g，6.49mmol，27.67％产率)。
1H NMR(CDCl3,500MHz):1.02(d,3H),1.41(s,9H),1.79(m,1H),2.22(m,2H),3.22(m,1H),3.75(m,1H),4.91(m,1H)。
步骤2：N-[4-氟-5-(4-氟苯基)-2-甲基-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯的合成
在存在催化量的I2的情况下，将1-溴-4-氟苯(1.36g，7.78mmol)和镁(315.35mg，12.97mmol，181.24μL)于THF(20mL)中回流2h。将所获得的深色溶液冷却至室温且转移至滴液漏斗。
将3-氟-5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.5g，6.49mmol)溶解于THF(20mL)中且在Ar下冷却至-78℃。在同一温度下缓慢添加所获得的格任亚试剂。反应完成之后，将混合物用饱和NH4Cl水溶液淬灭且用EtOAc(3*100mL)萃取。将合并的有机层用盐水(3*30mL)洗涤，经Na2SO4干燥且在减压下浓缩，以得到粗产物，其通过CC(Ok.Companion combiflash；40g SiO2；石油醚/MtBE，其中MtBE为0至38％，流速＝40ml/min，Rv＝11-12cv.)进行纯化，以得到N-[4-氟-5-(4-氟苯基)-2-甲基-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯(1.1g，3.36mmol，51.81％产率)。
LCMS(ESI)：[M+Na]+m/z：计算值327.2；实测值350.2；Rt＝1.322min。
步骤3：5-氟-6-(4-氟苯基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶的合成
将N-[4-氟-5-(4-氟苯基)-2-甲基-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯(1.1g，3.36mmol)溶解于DCM(20mL)中，随后添加TFA(1.92g，16.80mmol，1.29mL)。反应完成(气体逸出停止)之后，将混合物用10％K2CO3水溶液碱化至pH＝10，经Na2SO4干燥且在减压下蒸发，以得到5-氟-6-(4-氟苯基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶，其不经纯化即用于下一步骤。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值209.1；实测值210.2；Rt＝0.728min。
步骤4：(2S,5S)-3-氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶的合成
将5-氟-6-(4-氟苯基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶(736.66mg，3.52mmol)溶解于MeOH(20mL)中且冷却至0℃，随后分几批添加硼氢化钠(399.60mg，10.56mmol，373.45μL)。反应完成之后，将反应混合物用10％ HCl水溶液酸化至pH＝2且在减压下蒸发有机溶剂。将粗混合物溶解于H2O(10mL)中，用MTBE(10mL)洗涤，用10％ K2CO3水溶液酸化至pH＝10且用DCM(20mL)萃取3次。蒸发有机溶剂，得到(2S,5S)-3-氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶(0.5g，2.37mmol，67.23％产率)，其不经纯化即用于下一步骤。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值211.2；实测值212.0；Rt＝0.726min。
3FF.410min。叔丁基(2R,5S)-5-甲基-2-[1-(1H-吡唑-3-基)吡唑-4-基]哌啶和 (2R,5S)-5-甲基-2-(1H-吡唑-4-基)哌啶的合成
步骤1.6-二苯氧基磷酰氧基-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯
在氩气下，将双(三甲基甲硅烷基)酰胺化锂(49.04g，58.61mmol，54.48mL，20％纯度)(1.08M于THF/乙苯中)逐滴添加到冷却至-78℃的5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(10g，46.89mmol)于THF(100mL)中的溶液中。将所得溶液在-78℃下搅拌1.5h，然后逐滴添加[氯(苯氧基)磷酰基]氧基苯(12.60g，46.89mmol，9.69mL)，保持温度低于-70℃。使反应混合物升温(移除冷却浴)至0℃，然后用水(20ml)和MTBE(100ml)稀释。将有机层分离，另外用MTBE(50ml)萃取水层。将合并的有机萃取物用10％氢氧化钠水溶液(2*100ml)洗涤，经碳酸钾干燥，且在真空中浓缩。将残余物溶解于己烷/MTBE混合物(1/1，400ml)中且通过短硅胶垫过滤所得混浊溶液，且在真空中蒸发，以得到呈淡黄色油状物的粗品6-二苯氧基磷酰氧基-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(21g，粗品)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.95(d,3H),1.41(s,9H),1.69(m,1H),1.87(m,1H),2.25(m,1H),2.97(dd,1H),5.05(t,1H),7.17-7.33(m,10H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值445.4；实测值346.2；Rt＝1.517min。
步骤2.6-(1-苯甲基吡唑-4-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯
将6-二苯氧基磷酰氧基-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(17g，38.16mmol)、1-苯甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡唑(11.93g，41.98mmol)和碳酸钠(12.14g，114.49mmol，4.80mL)添加到1,4-二噁烷(150mL)和水(50mL)的混合物中。将所得混合物抽真空然后用氩气回填，将此操作重复三次，然后在氩气下添加Pd(dppf)Cl2·DCM(1.56g，1.91mmol)。将反应混合物在氩气、80℃下搅拌18h，然后冷却且过滤。将滤饼用二噁烷(2*50ml)洗涤且丢弃。在真空中蒸发滤液，且通过硅胶柱色谱，使用己烷/MTBE梯度(0-35％MTBE)纯化残余物，以得到呈淡黄色胶状物的6-(1-苯甲基吡唑-4-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(9.6g，27.16mmol，71.17％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.95(d,3H),1.04(s,9H),1.72(m,1H),1.84(m,1H),2.22(m,1H),2.85(dd,1H),3.78(d,1H),5.19(brs,2H),7.23-7.26(m,5H),7.51(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值353.4；实测值354.4；Rt＝1.428min。
步骤3.6-(1-苯甲基吡唑-4-基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶
将6-(1-苯甲基吡唑-4-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(9.6g，27.16mmol)于三氟乙酸(111.00g，973.51mmol，75mL)中的溶液在25℃下搅拌1h。1小时之后，在减压下浓缩反应混合物。将所获得的残余物用冰冷水(100mL)稀释且用10％ NaOH水溶液中和，直至pH＝10。用二氯甲烷(2x 100mL)萃取所得混合物。将合并的有机相经硫酸钠干燥且在减压下浓缩，以得到呈淡黄色胶状物的6-(1-苯甲基吡唑-4-基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶(6.3g，24.87mmol，91.56％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)1.05(s,3H),1.30(m,1H),1.60(m,1H),1.84(m,1H),2.45(m,1H),2.65(dd,1H),3.15(m,1H),3.95(d,1H),5.32(s,2H),7.23-7.34(m,5H),7.68(s,1H),7.79(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值253.3；实测值254.2；Rt＝0.715min。
步骤4.(2R,5S)-2-(1-苯甲基吡唑-4-基)-5-甲基哌啶
将6-(1-苯甲基吡唑-4-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(9.6g，27.16mmol)于三氟乙酸(111.00g，973.51mmol，75mL)中的溶液在25℃下搅拌1h。1小时之后，在减压下浓缩反应混合物。将所获得的残余物用冰冷水(100mL)稀释且用10％ NaOH水溶液中和，直至pH＝10。用二氯甲烷(2x 100mL)萃取所得混合物。将合并的有机相经硫酸钠干燥且在减压下浓缩，以得到呈淡黄色胶状物的6-(1-苯甲基吡唑-4-基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶(6.3g，24.87mmol，91.56％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.75(s,3H),1.10(dd,1H),1.40(m,1H),1.50-1.70(brs,1H),1.87(t,2H),2.33(t,1H),3.03(d,1H),3.59(d,1H),5.25(s,2H),7.20(s,1H),7.29-7.32(m,5H),7.46(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值255.3；实测值256.2；Rt＝0.733min。
步骤5.(2R,5S)-2-(1-苯甲基吡唑-4-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯
在25℃下，将二碳酸二-叔丁酯(5.47g，25.08mmol，5.76mL)一次性添加到(2R,5S)-2-(1-苯甲基吡唑-4-基)-5-甲基哌啶(6.1g，23.89mmol)于二氯甲烷(100mL)中的搅拌溶液中。将反应混合物在25℃下搅拌1h，然后在真空中浓缩，以得到呈淡黄色胶状物的粗品(2R,5S)-2-(1-苯甲基吡唑-4-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(8.4g，23.63mmol，98.92％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.95(s,3H),1.10-1.40(m,12H),1.40-1.80(m,4H),2.10(t,1H),2.95(d,1H),3.75(d,1H),5.20(s,2H),5.40(s,1H),7.20-7.38(m,7H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值355.5；实测值356.2；Rt＝1.567min。
步骤6.(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-吡唑-4-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
向(2R,5S)-2-(1-苯甲基吡唑-4-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(8.4g，23.63mmol)于甲醇(150mL)中的溶液中添加湿润的10％钯/碳(2.51g，23.63mmol)和乙酸(2.13g，35.45mmol，2.03mL)。将所得混合物抽真空，然后用氢气回填。将反应混合物在氢气气氛(气球压力)、55℃下搅拌96h。等分试样的HNMR显示50％转化。将10％ Pd/碳A402028-10批号C-14557(1.5g，23.63mmol)添加到反应混合物中，且将其再次抽真空，然后用氢气回填；然后在氢气(气球压力)、55℃下搅拌48h。等分试样的HNMR显示反应完成。过滤出催化剂，在真空中浓缩滤液。将残余物溶解于二氯甲烷(100ml)中且用碳酸氢钠(3g)于水(50ml)中的溶液洗涤。将有机层分离，经硫酸钠干燥且在真空中浓缩，以得到呈淡黄色胶状物的(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-吡唑-4-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(6g，22.61mmol，95.69％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)1.03(d,3H),1.37(m,1H),1.48(s,9H),1.82(m,3H),2.13(m,1H),2.98(d,1H),3.72(d,1H),5.42(d,1H),7.43(s,2H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值265.2；实测值266.2；Rt＝1.315min。
步骤7.(2R,5S)-5-甲基-2-[1-(1-四氢吡喃-2-基吡唑-3-基)吡唑-4-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯
将(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-吡唑-4-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(3g，11.31mmol)、3-碘-1-四氢吡喃-2-基-吡唑(4.3g，15.46mmol)、碘化铜(I)(1.50g，7.88mmol，266.90μL)、99％无水碳酸钾(3.8g，27.49mmol，1.66mL)、N1,N2-二甲基环己-1,2-二胺(959.99mg，6.75mmol)、铜(400mg，6.29mmol)和甲苯(100mL)于100ml装备有回流冷凝器和玻璃塞的单颈圆底烧瓶中的混合物抽真空，然后用氩气回填。然后将反应混合物在氩气、110℃下搅拌20h。将反应混合物冷却，且添加50ml 25％氨水。将所得混合物搅拌10min，然后通过短硅酸镁垫过滤。将滤饼另外用乙酸乙酯(2*50ml)洗涤且丢弃。将滤液转移至分液漏斗，分离各层，将有机层另外用水(50ml)洗涤，经硫酸钠干燥，且在真空中浓缩，以得到呈淡黄色胶状物的粗品(2R,5S)-5-甲基-2-[1-(1-四氢吡喃-2-基吡唑-3-基)吡唑-4-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.9g，粗品)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)1.02(d,3H),1.47(s,9H),1.50-1.70(m,6H),1.70-1.90(m,3H),1.95-2.40(m,6H),3.00(d,1H),3.60-3.72(m,2.5H),4.10(m,1.50),5.28(d,1H),5.42(d,1H),6.54(s,1H),7.43(m,1H),7.40(s,1H),7.50(s,1H),7.90(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值415.2；实测值416.2；Rt＝1.554min。
步骤8.叔丁基(2R,5S)-5-甲基-2-[1-(1H-吡唑-3-基)吡唑-4-基]哌啶
在25℃下，将于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(26.25g，100.08mmol，25mL，13.9％纯度)添加到(2R,5S)-5-甲基-2-[1-(1-四氢吡喃-2-基吡唑-3-基)吡唑-4-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.1g，2.65mmol)于甲醇(25mL)中的搅拌溶液中。将反应混合物在25℃下搅拌12h，然后在真空中浓缩，以得到呈淡黄色泡沫的粗品(2R,5S)-5-甲基-2-[1-(1H-吡唑-3-基)吡唑-4-基]哌啶(1.1g，粗品，3HCl)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(500MHz,DMSO)δ(ppm)0.87(d,3H),1.22(m,1H),1.26(m,1H),1.91(m,3H),2.60(m,2H),3.12(m,1H),4.13(t,1H),6.14(s,2H),7.79-7.87(m,2H),8.40(s,1H),9.49(m,3H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值232.2；实测值231.2；Rt＝0.672min。
步骤9.(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-吡唑-4-基)哌啶的合成
3GG.叔丁基6-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶-3-胺的合成
步骤1.(2S,5R)-1-叔丁氧基羰基-5-甲基哌啶-2-甲酸的合成
将(2S,5R)-5-甲基哌啶-2-甲酸(14g，77.93mmol，HCl)溶解于水(150mL)中且向其中添加碳酸氢钠(19.64g，233.80mmol，9.09mL)。将所得混合物用THF(150mL)稀释且将二碳酸二-叔丁酯(20.41g，93.52mmol，21.46mL)逐滴添加到先前的混合物中。在室温下搅拌所得混合物18h。在减压下浓缩反应混合物且将残余物再溶解于水(50ml)中。将所得混合物用MTBE(3*50ml)萃取且将水层用NaHSO4酸化。将所得混合物用DCM(2*50ml)萃取且将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且蒸发，以获得呈白色固体的(2S,5R)-1-叔丁氧基羰基-5-甲基哌啶-2-甲酸(14g，57.54mmol，73.84％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.88(d,3H),1.32(s,9H),1.31-1.42(m,2H),1.79(m,3H),3.04(m,1H),3.28(m,1H),3.47(d,1H),4.50(m,1H),12.65(brs,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值243.3；实测值144.0；Rt＝1.140min。
步骤2.(2S,5R)-2-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
在25℃下，将羰基二咪唑(8.00g，49.32mmol)一次性添加到(2S,5R)-1-叔丁氧基羰基-5-甲基哌啶-2-甲酸(10g，41.10mmol)于THF(200mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在25℃下搅拌，直到二氧化碳逸出完成，然后添加甲氧基(甲基)胺盐酸盐(8.02g，82.20mmol)和TEA(8.32g，82.20mmol，11.46mL)。将反应混合物在50℃下搅拌12h，然后冷却且在真空中蒸发。将残余物用5％硫酸氢钠水溶液(200ml)稀释且用二氯甲烷(2*100ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(100ml)洗涤，经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到呈白色固体的(2S,5R)-2-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(9g，31.43mmol，76.46％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.87(d,3H),1.33(s,9H),1.56(m,3H),1.72(m,1H),1.84(m,1H),3.05(s,3H),3.39(m,2H),3.65(s,3H),4.71(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值286.4；实测值187.2；Rt＝1.380min。
步骤4.(2S,5R)-5-甲基-2-(5-硝基-2-吡啶基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将(2S,5R)-2-乙酰基-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(3.1g，12.85mmol)和1-甲基-3,5-二硝基-吡啶-2-酮(3.84g，19.27mmol)溶解于MeOH/NH3(50mL)中。将反应混合物在90℃、高压力下搅拌过夜。然后将其冷却且在真空中蒸发，以得到粗品(2S,5R)-5-甲基-2-(5-硝基-2-吡啶基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(4g，12.45mmol，96.89％产率)，其不经纯化即用于下一步骤。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值321.2；实测值222.2；Rt＝1.328min。
步骤5.(2S,5R)-2-(5-氨基-2-吡啶基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将(2S,5R)-5-甲基-2-(5-硝基-2-吡啶基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(4g，12.45mmol)溶解于MeOH(50mL)中且添加10％钯/碳(662.29mg，622.33μmol，10％纯度)。然后将反应混合物在25℃下搅拌24h。过滤催化剂。在真空中蒸发溶液，以得到粗品(2S,5R)-2-(5-氨基-2-吡啶基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(3.6g，12.35mmol，99.26％产率)，其不经纯化即用于下一步骤。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值291.2；实测值292.2；Rt＝0.908min。
步骤6.叔丁基6-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶-3-胺的合成
将(2S,5R)-2-(5-氨基-2-吡啶基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.9g，6.52mmol)溶解于二噁烷/HCl(15mL)中且在室温下搅拌过夜。然后在减压下浓缩反应混合物。使所获得的固体经历HPLC(Waters Sunfire C18 20*100 5mkm柱以及具有NH3的H2O-MeOH作为洗脱液混合物)，以获得纯的6-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶-3-胺(0.5g，2.61mmol，40.09％产率)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值191.2；实测值192.2；Rt＝0.707min。
3HH.2-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶的合成
步骤1.5-甲基-2-(2-吡啶基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将r[dF(CF3)ppy]2(dtbbpy)PF6(101.45mg，90.42μmol)、NiCl2甘醇二甲醚(198.68mg，904.24μmol)和dtbbpy(242.69mg，904.24μmol)一起混合在DMF(110mL)中。将1-叔丁氧基羰基-5-甲基哌啶-2-甲酸(2.2g，9.04mmol)、2-叔丁基-1,1,3,3-四甲基胍(1.55g，9.04mmol，1.82mL)和2-溴吡啶(1.43g，9.04mmol，876.48μL)添加到先前混合物中且通过用氩气吹扫来将所得混合物脱气15min。将小瓶密封，用石蜡膜包裹且置于蓝色LED光反应器中。将反应混合物在25℃下搅拌36h。在真空中浓缩反应混合物且将水(50ml)添加到残余物中。将所得混合物用EtOAc(2*50ml)萃取。将合并的有机层用水(3*50ml)、盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且蒸发。通过柱色谱纯化残余物，以获得呈顺式和反式异构体(约1:1)的混合物形式的5-甲基-2-(2-吡啶基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.45g，5.25mmol，58.02％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)0.77(d，对于1异构体1.5H)和1.04(d，对于2异构体1.5H),1.40(s,9H),1.40-1.60(m,2H),1.60(m,1H),1.83(m,1H),2.13(m，对于1异构体0.5H),2.34(m,1H),2.68(m，对于1异构体0.5H),3.12(m，对于2异构体0.5H),3.66(m，对于2异构体0.5H),5.29(m,1H),7.15(m,2H),7.65(m,1H),8.88(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值276.2；实测值277.0；Rt(异构体1)＝1.277min,Rt(异构体2)＝1.406min。
步骤2.2-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶的合成
向5-甲基-2-(2-吡啶基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.4g，5.07mmol)于MeOH(10mL)中的溶液中添加1,4-二噁烷HCl(7mL)且将混合物在室温下搅拌过夜。将溶剂蒸发，以获得2-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶(1.2g，粗品)
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值176.2；实测值177.2；Rt(异构体1)＝0.737min,Rt(异构体2)＝0.767min。
3II.外消旋-(2R,5R)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶的合成
步骤1：(E)-1-(4-氟苯基)戊-1-烯-3-酮的合成
向1-氟-4-碘苯(40g，180.18mmol，20.73mL)和TEA(18.23g，180.18mmol，25.11mL)的混合物中添加戊-1-烯-3-酮(30.31g，360.36mmol)，随后在室温下添加Pd(dppf)Cl2·DCM(7.36g，9.01mmol)和MeCN(200mL)。将混合物回流12h。在真空下浓缩反应混合物。将所获得的残余物用MTBE和水稀释，分离有机层且将水层用额外MTBE洗涤，将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，过滤且在真空中浓缩。(E)-1-(4-氟苯基)戊-1-烯-3-酮(25.1g，140.85mmol，78.17％产率)不经进一步纯化即用于下一步骤。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.18(t,3H),2.69(m,2H),6.65(d,1H),7.18(d,1H),7.27(s,1H),7.36(d,1H),7.45(d,1H)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.17(d,3H),2.68(s,2H),6.69(d,1H),7.08(m,2H),7.54(m,3H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值178.2；实测值179.0；Rt＝1.330min。
步骤2：(E)-5-(二甲基氨基)-1-(4-氟苯基)-4-甲基戊-1-烯-3-酮的合成
(E)-1-(4-氟苯基)戊-1-烯-3-酮(41.7g，234.00mmol)、N-甲基甲胺(19.08g，234.00mmol，24.62mL，HCl)和用7-8％甲醇稳定的37％重量/重量甲醛水溶液(14.76g，491.41mmol，13.66mL)在乙醇(500mL)和HCl(水溶液)(50mL)的混合物中，然后将其在80℃下搅拌12h。将反应混合物在真空中浓缩。(E)-5-(二甲基氨基)-1-(4-氟苯基)-4-甲基戊-1-烯-3-酮(72.67g，粗品，HCl)不经进一步纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.21(d,3H),2.68(s,6H),3.06(m,1H),3.44-3.55(m,1H),7.04(d,1H),7.26(m,1H),7.74(d,1H),7.84(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值235.2；实测值236.2；Rt＝0.876min。
步骤3：外消旋-(2R,5R)-2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶-4-酮的合成
将(E)-5-(二甲基氨基)-1-(4-氟苯基)-4-甲基戊-1-烯-3-酮(72.67g，267.41mmol，HCl)溶解于水(250mL)和NH3(水溶液)(250mL)，然后将反应混合物在80℃下搅拌12h。将反应混合物用1N HCl酸化，用MTBE萃取，然后将水层用1N NaOH碱化且用DCM萃取。将DCM层经Na2SO4干燥，过滤且在真空下蒸发，以得到(2R,5R)-2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶-4-酮(22.9g，110.50mmol，41.32％产率)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.03(d,3H),1.26(m,1H),2.17(m,1H),2.51(m,2H),2.64(m,2H),3.44(m,1H),3.88(d,1H),7.07(m,2H),7.33(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值207.2；实测值208.4；Rt＝0.591min。
步骤4：外消旋-(2R,5R)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将(2R,5R)-2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶-4-酮(22.9g，110.50mmol)和TEA(16.77g，165.75mmol，23.10mL)溶解于DCM(330mL)中，然后在冰/水冷却下逐滴添加二碳酸二-叔丁酯(27.73g，127.07mmol，29.16mL)，此后将反应混合物在20℃下搅拌12h。将反应混合物用NaHSO4(水溶液)洗涤三次，将DCM层经Na2SO4干燥，过滤且在真空下浓缩。通过FCC(Companion combiflash；120g SiO2，Hex-MTBE 0～100％，流速＝60mL/min，cv＝12)纯化粗产物。获得呈棕色胶状物的所需产物((2R,5R)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(13g，42.30mmol，38.28％产率))。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.01(d,3H),1.31(s,9H),2.35(m,1H),2.81(d,1H),2.81(d,1H),3.69(m,2H),5.28(m,1H),7.05(m,2H),7.23(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M+Na]+m/z：计算值307.2；实测值330.2；Rt＝1.346min。
步骤5：外消旋-(2R,5R)-2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶-4-酮的合成
将(2R,5R)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.7g，5.53mmol)溶解于DCM(17mL)中且一次性添加TFA(17mL)。将反应混合物在20℃下搅拌1h。在真空下浓缩反应混合物。所获得的产物不经进一步纯化即用于下一步骤中。获得呈棕色胶状物的所需产物((2R,5R)-2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶-4-酮(2.6g，粗品，CF3COOH))。
1H NMR(400MHz,DMSO)δ(ppm)0.99(d,3H),2.59(m,1H),2.91(m,2H),3.12(m,2H),3.62(m,1H),4.80(m,1H),7.14(m,2H),7.25(m,3H),7.31(m,3H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值207.2；实测值208.2；Rt＝0.689min。
步骤6：外消旋-(2R,5R)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶的合成
将(2R,5R)-2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶-4-酮(2.6g，8.09mmol，CF3COOH)、HF(1.62g，80.93mmol)和SF4(1.75g，16.19mmol)在不锈钢高压釜中在70℃下加热12h。反应完成之后，排出气体产物，将反应混合物倒在冰上且用10％ K2CO3水溶液中和。将产物用MTBE萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，且在减压下浓缩，以得到(2R,5R)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶(1.2g，5.23mmol，64.68％产率)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.02(d,3H),1.80(m,2H),1.86(m,1H),2.01(m,1H),2.67(dd,1H),3.06(m,1H),3.86(d,1H),7.00(m,1H),7.32(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值229.2；实测值230.2；Rt＝0.863min。
3JJ.5-(5-甲基-2-哌啶基)-1H-吡唑并[4,3-b]吡啶的合成
步骤1.5-溴-1-四氢吡喃-2-基-吡唑并[4,3-b]吡啶的合成
将5-溴-1H-吡唑并[4,3-b]吡啶(10g，50.50mmol)和3,4-二氢-2H-吡喃(12.74g，151.50mmol，13.76mL)溶解于CH3CN(200mL)中且向其中添加对甲苯磺酸单水合物(1.92g，10.10mmol，1.55mL)。将反应混合物搅拌12h。在真空中蒸发所得混合物，将其倒入NaHCO3(浓)水溶液(150ml)中且用EtOAc(2x100 ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(2*40ml)萃取，经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，留下25g粗产物，25g粗产物通过硅胶柱色谱，使用己烷/MTBE梯度(10-100％ MTBE)进行纯化，以得到5-溴-1-四氢吡喃-2-基吡唑并[4,3-b]吡啶(6.4g，22.68mmol，44.92％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)1.66(m,4H),1.75(m,2H),2.43(m,1H),3.69(m,1H),3.95(m,1H),5.71(d,1H),7.38(d,1H),7.58(d,1H),8.13(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值282.0；实测值282.0；Rt＝1.218min。
步骤2.3-甲基-6-(1-四氢吡喃-2-基吡唑并[4,3-b]吡啶-5-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将3-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(10.79g，33.39mmol)和5-溴-1-四氢吡喃-2-基吡唑并[4,3-b]吡啶(4.71g，16.69mmol)一起混合在t-BuOH(80mL)中。将所得混合物抽真空，然后用氩气回填，将此操作重复三次，然后在氩气下添加于t-BuOH(80mL)中的乙酸钯(II)(187.40mg，834.70μmol)和CM-Phos(673.67mg，1.67mmol)。将反应混合物在氩气、115℃下搅拌17h，然后冷却且在真空中蒸发，将其倒入水(150ml)中且用EtOAc(2x80 ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(2*30ml)洗涤，经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，留下10.5g粗产物，10.5g粗产物通过硅胶柱色谱，使用己烷/MTBE梯度(10-100％ MTBE)进行纯化，以得到产物3-甲基-6-(1-四氢吡喃-2-基吡唑并[4,3-b]吡啶-5-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(0.6g，1.51mmol，9.02％产率)。
LCMS(ESI)：[M-tBu]+m/z：计算值398.0；实测值399.2；Rt＝1.405min。
步骤3.5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1H-吡唑并[4,3-b]吡啶的合成
将3-甲基-6-(1-四氢吡喃-2-基吡唑并[4,3-b]吡啶-5-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(0.6g，1.51mmol)于MeOH(20mL)和于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(800.00mg，21.94mmol，1mL)中的溶液在115℃下搅拌17h，然后蒸发且向残余物中添加水(20ml)，且将pH用10％碳酸氢钠水溶液调节至8。将所得混合物用EtOAc(2*20mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1H-吡唑并[4,3-b]吡啶(0.32g，1.49mmol，99.19％产率)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值214.1；实测值215.2；Rt＝0.743min。
步骤4.5-(5-甲基-2-哌啶基)-1H-吡唑并[4,3-b]吡啶的合成
在0℃下，将硼氢化钠(113.00mg，2.99mmol，105.61μL)一次性添加到5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1H-吡唑并[4,3-b]吡啶(0.32g，1.49mmol)于MeOH(15mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在0℃下搅拌5h，然后在真空中蒸发。将残余物用水(20mL)稀释且用二氯甲烷(2*30mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到5-(5-甲基-2-哌啶基)-1H-吡唑并[4,3-b]吡啶(0.24g，1.11mmol，74.30％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值216.2；实测值217.2；Rt＝0.578min。
3KK.外消旋-N-甲基-3-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]哌啶-1-甲酰胺、外消旋-1- [3-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1-哌啶基]乙酮和外消旋-1-甲基-3-[(2R,5S)-5-甲基- 2-哌啶基]哌啶的合成
步骤1：5-甲基-5,6-二氢-[2,3'-联吡啶]-1(4H)-甲酸叔丁酯的合成
将3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(19g，55.02mmol)、3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(10.26g，50.02mmol)、碳酸钠(15.90g，150.05mmol，6.29mL)于二噁烷(100mL)和水(50mL)中的溶液抽真空且用Ar再填充三次。向此混合物中添加[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)与DCM的络合物(2.04g，2.50mmol)且将所得混合物在95℃下搅拌12h，冷却，过滤且蒸发。将残余物溶解于水(200ml)中且用MTBE(3*200ml)萃取。将有机层用盐水(150ml)洗涤，经Na2SO4干燥，通过SiO2薄层过滤且在真空中蒸发，以得到3-甲基-6-(3-吡啶基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(10g，36.45mmol，72.87％产率)。此化合物不经进一步纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.01(s,12H),1.86(m,1H),2.00(m,1H),2.41(m,1H),2.98(t,1H),4.06(d,1H),5.32(m,1H),7.20(m,1H),7.55(m,1H),8.45(m,1H),8.53(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值274.2；实测值275.2；Rt＝1.121min。
步骤2：5-甲基-3,4,5,6-四氢-2,3'-联吡啶的合成
将3-甲基-6-(3-吡啶基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(10g，36.45mmol)于TFA(60g，526.21mmol，40.54mL)中的溶液在25℃下搅拌2h。移除溶剂，冷却残余物，将其溶解于100ml 10％ NaOH溶液中且用DCM(3*100ml)萃取。将有机层用盐水(100ml)洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中蒸发，以得到3-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)吡啶(6.2g，35.58mmol，97.62％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)0.98(d,3H),1.36(m,1H),1.70(m,1H),1.91(m,1H),2.57(m,1H),2.77(m,1H),3.22(m,1H),4.00(m,1H),7.26(t,1H),8.07(d,1H),8.57(d,1H),8.93(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值174.2；实测值175.2；Rt＝0.388min。
步骤3：外消旋-3-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)吡啶)的合成
在0℃下，将硼氢化钠(1.35g，35.58mmol，1.26mL)分批添加到3-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)吡啶(6.2g，35.58mmol)于MeOH(70mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物搅拌2h，然后在真空中蒸发。将残余物用水(80ml)稀释且用二氯甲烷(2*80ml)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以获得3-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]吡啶(6.2g，35.18mmol，98.86％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.90(d,3H),1.12(m,1H),1.51(m,1H),1.65(m,1H),1.86(m,3H),2.41(m,1H),3.14(m,1H),3.58(m,1H),7.26(t,1H),7.69(d,1H),8.47(d,1H),8.57(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值176.2；实测值177.2；Rt＝0.331min。
步骤4：外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-(吡啶-3-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
向3-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]吡啶(6.20g，35.18mmol)于DCM(70mL)中的溶液中添加二碳酸二-叔丁酯(7.68g，35.18mmol，8.07mL)。将所得混合物在25℃下搅拌12h，移除溶剂且通过梯度色谱(己烷-EtOAc)纯化粗产物(12g)，以获得(2R,5S)-5-甲基-2-(3-吡啶基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(6g，21.71mmol，61.72％产率)。也获得具有顺式异构体杂质的第二级分(2g)。对于下一步骤仅用纯级分。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.07(d,3H),1.37(m,1H),1.46(s,9H),1.68(m,1H),1.72(m,1H),2.04(m,1H),2.18(m,1H),3.02(m,1H),3.75(m,1H),5.36(m,1H),7.26(m,1H),7.57(d,1H),8.49(d,1H),8.54(s,1H)。
步骤5：外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-(3-哌啶基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
向(2R,5S)-5-甲基-2-(3-吡啶基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(6g，21.71mmol)于MeOH(100mL)中的溶液中添加干燥的487型钯(10％于碳上)(0.8g，7.52mmol)。将所得混合物在高压釜中在氢气气氛(100atm)、45℃下搅拌96h。通过NMR监测反应进展。在获得完全转化时，过滤催化剂，在真空中移除溶剂。将残余物溶解于DCM(50ml)中，经Na2SO4干燥且移除溶剂，以获得(2R,5S)-5-甲基-2-(3-哌啶基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(5.7g，20.18mmol，92.97％产率)。通过2D-NMR证明产物的结构为反式。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.86(d,3H),0.94(m,1H),1.18(m,1H),1.34(s,9H),1.49(m,1H),1.58(m,2H),1.77(m,2H),1.91(m,1H),2.19(m,1H),2.41(m,1H),2.90(m,3H),3.59(m,5H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值282.2；实测值283.2；Rt＝0.932min。
步骤6：外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[1-(甲基氨基甲酰基)-3-哌啶基]哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
在0℃下，向(2R,5S)-5-甲基-2-(3-哌啶基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.85g，3.01mmol)和TEA(456.83mg，4.51mmol，629.24μL)于DCM(50mL)中的溶液中分批添加N-甲基胺甲酰氯(337.73mg，3.61mmol)。将所得混合物搅拌3h，用盐水(3*40ml)洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中移除溶剂，以获得(2R,5S)-5-甲基-2-[1-(甲基氨基甲酰基)-3-哌啶基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.9g，2.65mmol，88.09％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)0.95(d,3H),1.09(m,3H),1.25(m,1H),1.41(s,9H),1.66(m,4H),1.78(m,1H),2.47(m,1H),2.66(m,1H),2.75(s,3H),2.84(m,1H),3.12(m,1H),3.57(m,1H),3.71(m,1H),3.86(m,1H),3.99(m,1H),4.45(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值339.2；实测值340.2；Rt＝1.213min。
步骤7：外消旋-N-甲基-3-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]哌啶-1-甲酰胺的合成
将(2R,5S)-5-甲基-2-[1-(甲基氨基甲酰基)-3-哌啶基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.95g，2.80mmol)和于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(5g，137.13mmol，6.25mL)于DCM(20mL)中的溶液在25℃下搅拌12h。在真空中移除溶剂，以获得N-甲基-3-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]哌啶-1-甲酰胺(0.75g，粗品，HCl)。此产物不经进一步纯化即用于下一步骤。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.85(d,3H),1.09(m,1H),1.18(m,2H),1.28(m,2H),1.42(m,1H),1.61(m,2H),1.81(m,3H),2.49(s,3H),2.78(m,2H),3.11(m,2H),3.82(m,1H),4.11(m,1H),6.33(m,1H),8.97(m,1H)。
步骤8：外消旋-(2R,5S)-2-(1-乙酰基-3-哌啶基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
在0℃下，向(2R,5S)-5-甲基-2-(3-哌啶基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.8g，2.83mmol)和TEA(429.95mg，4.25mmol，592.22μL)于DCM(30mL)中的溶液中添加乙酰氯(266.83mg，3.40mmol，206.84μL)。将所得混合物搅拌2h，用水(3*20ml)洗涤，经Na2SO4干燥且移除溶剂，以获得(2R,5S)-2-(1-乙酰基-3-哌啶基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.9g，2.77mmol，97.92％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.87(d,3H),1.18(m,2H),1.34(s,9H),1.58(m,4H),1.75(m,2H),1.94(s,3H),2.22(m,1H),2.82(m,2H),3.32(m,2H),3.58(m,3H),4.01(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值324.2；实测值325.2；Rt＝1.263min。
步骤9：外消旋-1-[3-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1-哌啶基]乙酮的合成
(2R,5S)-2-(1-乙酰基-3-哌啶基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.9g，2.77mmol)和于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(4.00g，109.71mmol，5mL)于DCM(10mL)中的溶液。将所得混合物在25℃下搅拌4h。在真空中蒸发溶剂，以得到呈淡黄色固体的1-[3-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1-哌啶基]乙酮(0.7g，2.68mmol，96.76％产率，HCl)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.86(d,3H),1.08(m,2H),1.36(m,2H),1.76(m,6H),1.99(s,3H),2.82(m,2H),2.98(m,1H),3.11(m,1H),3.66(m,1H),4.28(m,1H),4.75(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值224.2；实测值225.2；Rt＝0.547min。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值239.2；实测值240.2；Rt＝0.634min。
步骤10：外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-(1-甲基-3-哌啶基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
向(2R,5S)-5-甲基-2-(3-哌啶基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.8g，2.83mmol)和碳酸钾(1.17g，8.50mmol，512.87μL)于ACN(30mL)中的混合物中添加碘甲烷(442.27mg，3.12mmol，193.98μL)。将所得混合物在25℃下搅拌8h，过滤出沉淀且移除溶剂。将残余物溶解于DCM(30ml)中，过滤沉淀且在真空中移除溶剂，以得到(2R,5S)-5-甲基-2-(1-甲基-3-哌啶基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.8g，2.70mmol，95.27％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)0.96(d,3H),1.26(m,2H),1.42(s,9H),1.81(m,9H),2.26(s,3H),2.86(m,2H),3.50(m,3H),3.56(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值296.2；实测值297.2；Rt＝1.008min。
步骤11：外消旋-1-甲基-3-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]哌啶的合成
将(2R,5S)-5-甲基-2-(1-甲基-3-哌啶基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.8g，2.70mmol)和于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(5g，137.13mmol，6.25mL)于DCM(15mL)中的溶液在25℃下搅拌5h。在真空中移除溶剂，以获得1-甲基-3-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]哌啶(0.7g，粗品，2HCl)。此产物不经进一步纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.84(d,3H),1.09(m,3H),1.85(m,6H),2.65(s,3H),2.86(m,2H),3.11(m,3H),3.36(m,2H),4.28(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值196.2；实测值197.2；Rt＝0.159min。
3LL.外消旋-5-[(2R,5R)-4,4-二氟-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑的合成
步骤1.2-(2-甲基-1,3-二氧环戊烷-2-基)丙酸乙酯的合成
将2-甲基-3-氧代-丁酸乙酯(24.72g，171.47mmol，24.24mL)溶解于甲苯(250mL)中且向其中添加乙二醇(11.71g，188.61mmol，10.55mL)，随后添加对甲苯磺酸单水合物(3.26g，17.15mmol，2.63mL)。将所得混合物回流3h。将反应混合物用NaHCO3水溶液(2*100ml)洗涤且将有机层分离，经Na2SO4干燥，过滤且蒸发。通过分馏(bp＝60℃，1mm Hg)纯化残余物，以获得2-(2-甲基-1,3-二氧环戊烷-2-基)丙酸乙酯(13.45g，71.44mmol，41.67％产率)。
1H NMR(CDCl3,400MHz):δ(ppm)1.20(d,3H),1.25(t,3H),1.38(s,3H),2.72(m,1H),3.90-3.97(m,4H),4.14(q,2H)。
步骤2.2-(2-甲基-1,3-二氧环戊烷-2-基)丙-1-醇的合成
将氢化锂铝(5.42g，142.89mmol)悬浮于THF(150mL)中且逐滴添加2-(2-甲基-1,3-二氧环戊烷-2-基)丙酸乙酯(13.45g，71.44mmol)于THF(20mL)中的溶液。将反应混合物搅拌1h。将水(5.4ml)小心添加到反应混合物中，随后添加20％ KOH水溶液(5.4ml)和水(10.8ml)。过滤所得悬浮液且在真空中蒸发滤液。通过快速色谱(己烷-EtOAc 2:1)纯化残余物，以获得2-(2-甲基-1,3-二氧环戊烷-2-基)丙-1-醇(6.79g，46.43mmol，65.00％产率)。
1H NMR(CDCl3,400MHz):δ(ppm)0.95(d,3H),1.27(s,3H),2.00(m,1H),2.90(s,1H),3.45(dd,1H),3.70(dd,1H),3.90-3.97(m,4H),
步骤3.甲磺酸2-(2-甲基-1,3-二氧环戊烷-2-基)丙酯的合成
将2-(2-甲基-1,3-二氧环戊烷-2-基)丙-1-醇(6.79g，46.45mmol)溶解于DCM(60mL)中且向其中添加三乙胺(5.17g，51.09mmol，7.12mL)。将所得溶液在冰浴中冷却至-5℃且逐滴添加甲磺酰氯(5.59g，48.77mmol，3.77mL)于DCM(10mL)中的溶液。使所得混合物升温至室温且搅拌过夜。将水(25ml)添加到反应混合物中且将所得混合物转移至分液漏斗中且分离有机层。将有机层用NaHSO4水溶液(25ml)、水(25ml)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且蒸发，以获得甲磺酸2-(2-甲基-1,3-二氧环戊烷-2-基)丙酯(10.36g，46.18mmol，99.41％产率)。
1H NMR(CDCl3,500MHz):δ(ppm)1.10(d,3H),1.27(s,3H),2.17(m,1H),3.00(s,3H),3.90-3.97(m,4H),4.04(dd,1H),4.41(dd,1H)。
步骤4.2-(2-叠氮基-1-甲基乙基)-2-甲基-1,3-二氧环戊烷的合成
将甲磺酸2-(2-甲基-1,3-二氧环戊烷-2-基)丙酯(10.36g，46.18mmol)溶解于DMF(100mL)中且向其中添加叠氮化钠(9.01g，138.53mmol，4.87mL)。将所得混合物在75℃下加热24h。将反应混合物倒入水(150ml)中且将所得混合物用MTBE(2*100ml)萃取。将合并的有机层用水(3*75ml)、盐水(75ml)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且蒸发，以获得2-(2-叠氮基-1-甲基乙基)-2-甲基-1,3-二氧环戊烷(6.59g，38.51mmol，83.40％产率)。
1H NMR(CDCl3,500MHz):δ(ppm)1.07(d,3H),1.26(s,3H),1.97(m,1H),3.07(dd,1H),3.58(dd,1H),3.90-3.97(m,4H)。
步骤5.2-(2-甲基-1,3-二氧环戊烷-2-基)丙-1-胺的合成
将2-(2-叠氮基-1-甲基乙基)-2-甲基-1,3-二氧环戊烷(6.59g，38.51mmol)溶解于THF(100mL)中且分批添加三苯基膦(10.61g，40.44mmol)。将所得混合物搅拌1小时且将水(10.6mL)添加到先前混合物中。将所得混合物搅拌过夜。在真空中浓缩反应混合物，且将残余物溶解于DCM(100ml)中。将所得溶液用NaHSO4水溶液(2*75ml)萃取且将合并的水层用DCM(2*75ml)洗涤。将水层用NaOH碱化且将所得混合物用MTBE(2*75ml)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且蒸发，以获得2-(2-甲基-1,3-二氧环戊烷-2-基)丙-1-胺(4.89g，33.65mmol，87.38％产率)。
1H NMR(CDCl3,600MHz):δ(ppm)0.97(d,3H),1.22(s,3H),1.42(brs,2H),1.72(m,1H),2.49(dd,1H),2.87(dd,1H),3.89-3.91(m,4H)。
步骤6.9-(1,3-苯并噻唑-5-基)-6-甲基-1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷的合成
将2-(2-甲基-1,3-二氧环戊烷-2-基)丙-1-胺(2.14g，14.71mmol)溶解于苯(30mL)中且向其中添加1,3-苯并噻唑-5-甲醛(2.4g，14.71mmol)，随后添加对甲苯磺酸单水合物(8.39g，44.12mmol，6.77mL)。将所得混合物加热至回流且以迪安-斯塔克分离器(Dean-Stark trap)回流过夜。将反应混合物冷却且添加K2CO3水溶液(15ml)。将所得混合物转移至分液漏斗且分离有机层。用EtOAc(35ml)萃取水层，且将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且蒸发。将残余物溶解于CHCl3(25ml)中且将所得混合物用NaHSO4水溶液(1g于10ml水中，2*10ml)萃取。将合并的水层用CHCl3(2*30ml)洗涤，然后用K2CO3(6g)碱化。将所得混合物用CHCl3(2*40ml)萃取且将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且蒸发，以获得9-(1,3-苯并噻唑-5-基)-6-甲基-1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷(1.7g，粗品)。
1H NMR(CDCl3,400MHz):δ(ppm)0.89(d,3H),1.73(dd,1H),1.99(m,2H),2.80(t,1H),3.07(dd,1H),3.75(m,1H),3.96(m,5H),7.48(d,1H),7.88(d,1H),8.09(s,1H),8.97(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值290.1；实测值291.0；Rt＝0.783min。
步骤7.外消旋-(2R,5R)-2-(苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-4-酮的合成
将9-(1,3-苯并噻唑-5-基)-6-甲基-1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷(1.65g，5.68mmol)溶解于6N HCl(30mL)中且将所得混合物在80℃下(于油浴中)加热过夜。将反应混合物冷却且用K2CO3碱化。将所得混合物用CHCl3(2*50ml)萃取且将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且蒸发。将残余物溶解于MTBE中且向其中添加TFA(0.1ml)。过滤所得悬浮液，将滤饼用MTBE冲洗且在真空中干燥，以获得呈TFA盐形式的外消旋-(2R,5R)-2-(苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-4-酮(1.1g，3.05mmol，53.72％产率,CF3COOH)。
1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)1.04(d,3H),2.68(d,1H),2.98(m,1H),3.23(m,4H),3.75(m,1H),4.98(m,1H),7.61(m,1H),9.63(brs,2H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值246.1；实测值247.0；Rt＝0.717min。
步骤8.外消旋-5-[(2R,5R)-4,4-二氟-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑的合成
将2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-4-酮(1.1g，4.47mmol)溶解于HF(无水)(3.3mL)中且将所得混合物密封在不锈钢容器中，在液态N2中冷却，且向其中添加SF4(3.3mL)。使所得混合物升温至室温且在室温下搅拌过夜。反应完成之后，将反应混合物倒在冰上且用NaHCO3中和。将所得混合物用EtOAc(2*75ml)萃取且将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且蒸发，以获得5-[(2R,5R)-4,4-二氟-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑(480mg，粗品)。
1H NMR(CDCl3,400MHz):δ(ppm)1.06(d,3H),2.03-2.20(m,3H),2.30(m,1H),2.72(t,1H),3.12(m,1H),4.04(d,1H),7.46(d,1H),7.89(d,1H),8.12(s,1H),8.97(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值268.1；实测值269.0；Rt＝0.837min。
3MM.外消旋-(2R,5R)-2-(3-氯苯基)-4,4-二氟-5-甲基哌啶的合成
步骤1：9-(3-氯苯基)-6-甲基-1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷的合成
将2-(2-甲基-1,3-二氧环戊烷-2-基)丙-1-胺(2.76g，18.99mmol)(如上文所制备)溶解于苯(60mL)中且向其中添加3-氯苯甲醛(2.67g，18.99mmol，2.15mL)，随后添加对甲苯磺酸单水合物(10.84g，56.98mmol，8.74mL)。将所得混合物加热至回流且以迪安-斯塔克分离器回流过夜。将反应混合物冷却且添加K2CO3水溶液(15ml)。将所得混合物转移至分液漏斗且分离有机层。用EtOAc(35ml)萃取水层，且将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且蒸发。将残余物溶解于CHCl3(25ml)中且将所得混合物用NaHSO4水溶液(1g于10ml水中，2*10ml)萃取。将合并的水层用CHCl3(2*30ml)洗涤，然后用K2CO3(6g)碱化。将所得混合物用CHCl3(2*40ml)萃取且将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且蒸发，以获得9-(3-氯苯基)-6-甲基-1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷(1.51g，粗品)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)1.08(d,3H),1.26(m,2H),1.64(m,1H),2.54(m,2H),2.67(m,2H),3.07(m,1H),3.48(m,1H),3.92(m,2H),7.26(m,4H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值267.2；实测值268.2；Rt＝0.915min。
步骤2：2-(3-氯苯基)-5-甲基哌啶-4-酮的合成
将9-(3-氯苯基)-6-甲基-1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷(1.51g，5.64mmol)溶解于6N HCl(30mL)中且将所得混合物在80℃下(于油浴中)加热过夜。将反应混合物冷却且用K2CO3碱化。将所得混合物用CHCl3(2*50ml)萃取且将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且蒸发。将残余物溶解于MTBE中且向其中添加TFA(0.1ml)。将所得悬浮液过滤，将滤饼用MTBE冲洗且在真空中干燥，以获得2-(3-氯苯基)-5-甲基哌啶-4-酮(1.3g，3.85mmol，68.26％产率，CF3COOH)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.01(d,3H),2.62(m,2H),2.89(m,1H),3.02(m,1H),3.67(m,1H),4.78(m,1H),7.52(m,3H),7.63(m,1H),9.56(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值223.2；实测值224.2；Rt＝0.729min。
步骤3：外消旋-(2R,5R)-2-(3-氯苯基)-4,4-二氟-5-甲基哌啶的合成
将2-(3-氯苯基)-5-甲基哌啶-4-酮(1.3g，3.85mmol，CF3COOH)溶解于HF(无水)(3.9mL)中且将所得混合物密封在不锈钢容器中，在液态N2中冷却且向其中添加SF4(3.9mL)。使所得混合物升温至室温且搅拌过夜。反应完成之后，将反应混合物倒在冰上且用NaHCO3中和。将所得混合物用EtOAc(2*75ml)萃取且将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且蒸发，以获得(2R,5R)-2-(3-氯苯基)-4,4-二氟-5-甲基哌啶(0.79g，3.22mmol，83.53％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.05(d,3H),2.03(m,3H),2.69(m,1H),3.05(m,1H),3.84(m,1H),7.28(m,5H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值245.2；实测值246.2；Rt＝0.933min。
3NN.(2R,5S)-5-乙基-2-(1H-吡唑-4-基)哌啶的合成
步骤1.2-苯甲氧基-5-溴-吡啶的合成
将于矿物油中的氢化钠(油分散体)60％分散物(11.48g，286.95mmol，60％纯度)小批量添加到5-溴-2-氯-吡啶(50.2g，260.86mmol)和苯基甲醇(31.03g，286.95mmol，29.55mL)于二甲基甲酰胺(500mL)中的溶液中。H2逸出停止之后，将所得混合物在20℃下搅拌18h。然后，将其倒入冰冷的水(2000ml)中且用MTBE(2x800 ml)萃取。将合并的有机层连续用水(2x300 ml)、盐水(300ml)洗涤，经Na2SO4干燥且在减压下浓缩，得到2-苯甲氧基-5-溴-吡啶(72.1g，粗品)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)5.33(s,2H),6.71(d,1H),7.36-7.42(m,5H),7.65(d,1H),8.19(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值263.0；实测值264.2；Rt＝1.498min。
步骤2.2-苯甲氧基-5-乙烯基-吡啶的合成
将三乙胺(49.72g，491.37mmol，68.49mL)添加到2-苯甲氧基-5-溴-吡啶(72.1g，245.69mmol)和三氟(乙烯基)硼氢化物(30.29g，319.39mmol)于乙醇(700mL)中的溶液中。将反应烧瓶抽真空且用氩气再填充3次。然后，在氩气流下添加PdCl2*dppf*dcm(2.01g，2.46mmol)。在78℃、惰性气氛下将所得混合物搅拌20h。然后，将其在减压下浓缩且将残余物用己烷/MTBE 1:1混合物(700ml)萃取。通过短硅胶垫过滤所获得的溶液且在减压下蒸发。在-30℃下，将粗产物自己烷(350ml)结晶且过滤(产物在室温下为液体)，得到2-苯甲氧基-5-乙烯基吡啶(27.8g，131.59mmol，53.56％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)5.19(d,1H),5.37(s,2H),5.65(d,1H),6.63(m,1H),6.78(d,1H),7.24-7.63(m,5),7.71(d,1H),8.19(s,1H)。
步骤3.5-乙基哌啶-2-酮的合成
将钯(10％于碳上)(2g，1.88mmol，10％纯度)添加到2-苯甲氧基-5-乙烯基吡啶(27.8g，131.59mmol)于甲醇(350mL)中的溶液中。将所得混合物在氢气气氛、20℃和气球压力下搅拌18小时，然后在70℃和40巴下再搅拌18小时。此后，过滤出催化剂且在减压下浓缩滤液。将残余物再溶解于于乙酸乙酯(300ml)中且用20％ K2CO3水溶液(50ml)洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中蒸发，得到5-乙基哌啶-2-酮(15.3g，120.30mmol，91.42％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.87(m,3H),1.27(m,3H),1.53(m,1H),1.76(m,1H),2.12(m,2H),2.74(m,1H),3.13(m,1H),7.37(s,1H)。
GCMS(EI)：[M-Boc]+m/z：计算值127.2；实测值127；Rt＝7.4min。
步骤4.5-乙基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将二碳酸二-叔丁酯(36.76g，168.42mmol，38.65mL)逐滴添加到5-乙基哌啶-2-酮(15.3g，120.30mmol)和4-二甲基氨基吡啶(1.47g，12.03mmol)于四氢呋喃(200mL)中的溶液中。将所得溶液在40℃下搅拌15h。然后，添加水(30ml)且将混合物搅拌20分钟。当CO2逸出停止时，其分配于5％ NaHSO4水溶液(150ml)与MTBE(250ml)之间。将有机层分离，经Na2SO4干燥且在减压下浓缩。将残余物在1毫巴和90℃下干燥，得到5-乙基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(18.2g，80.07mmol，66.56％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.97(m,3H),1.35-1.45(m,3H),1.53(s,9H),1.73(m,1H),1.93(m,1H),2.47-2.55(m,2H),3.18(m,1H),3.85(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值227.3；实测值228.2；Rt＝1.299min。
步骤5.6-二苯氧基磷酰氧基-3-乙基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
在氩气下，将双(三甲基甲硅烷基)酰胺化锂(20％于THF/乙苯中)(80.39g，96.08mmol，89.32mL，20％纯度)逐滴添加到冷却至-78℃的5-乙基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(18.2g，80.07mmol)于四氢呋喃(150mL)中的溶液中。将所得溶液在-70℃下搅拌1h，然后逐滴添加[氯(苯氧基)磷酰基]氧基苯(22.59g，84.07mmol，17.37mL)，保持温度低于-70℃。使反应混合物升温(移除冷却浴)至0℃，然后用水(100ml)和MTBE(200ml)稀释。将有机层分离，另外用MTBE(100ml)萃取水层。将合并的有机萃取物用10％ K2CO3水溶液(2*100ml)洗涤，经碳酸钾干燥，且在真空中浓缩。将残余物溶解于己烷中且通过短硅胶垫过滤所得混浊溶液。在真空中蒸发滤液，以得到呈淡黄色油状物的粗品6-二苯氧基磷酰氧基-3-乙基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(33.4g，72.69mmol，90.79％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.94(s,3H),1.24(m,1H),1.25(m,1H),1.43(s,9H),1.73(m,1H),1.76(m,1H),2.31(m,1H),2.94(dd,1H),3.95(dd,1H),5.07(s,1H),7.18-7.33(m,10H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值459.2；实测值460.2；Rt＝1.723min。
步骤6.6-(1-苯甲基吡唑-4-基)-3-乙基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将碳酸钾(2.92g，21.11mmol，1.27mL)添加到6-二苯氧基磷酰氧基-3-乙基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(5.09g，11.09mmol)和1-苯甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡唑(3g，10.56mmol)于二噁烷(40mL)和水(15mL)中的溶液中。将反应烧瓶抽真空且用氩气再填充3次。然后，在氩气流下添加PdCl2*dppf*dcm(344.86mg，422.30μmol)。在90℃、惰性气氛下将所得混合物搅拌18h。然后，将其在减压下浓缩且将残余物用MTBE(60ml)萃取。通过短硅胶垫过滤所获得的溶液且在减压下蒸发，得到6-(1-苯甲基吡唑-4-基)-3-乙基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(4.68g，粗品)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.96(m,3H),1.17(s,9H),1.39(m,1H),1.74(m,2H),2.09(m,2H),2.36(m,1H),2.90(dd,1H),4.06(d,1H),5.25(s,2H),7.26-7.32(m,6H),7.47(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值367.2；实测值368.3；Rt＝1.657min。
步骤7.6-(1-苯甲基吡唑-4-基)-3-乙基-2,3,4,5-四氢吡啶的合成
将30％重量/重量盐酸水溶液(17.25g，141.93mmol，15mL，30％纯度)添加到6-(1-苯甲基吡唑-4-基)-3-乙基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(4.68g，12.74mmol)于二噁烷(20mL)中的溶液中。将所得混合物在40℃下搅拌15h。然后，在减压下移除挥发物且将残余物分配于水(50ml)与乙酸乙酯(35ml)之间。分离有机层且丢弃。将水层用固体K2CO3碱化且用DCM(3x20 ml)萃取。将合并的有机层经K2CO3干燥且在真空中浓缩，得到6-(1-苯甲基吡唑-4-基)-3-乙基-2,3,4,5-四氢吡啶(2.13g，7.97mmol，62.56％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)0.92(m,3H),1.21-1.32(m,3H),1.45(m,1H),1.88(m,1H),2.43(m,1H),2.60(dd,1H),3.17(dd,1H),3.87(dd,1H),5.26(s,2H),7.20-7.32(m,5H),7.69(s,1H),7.77(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值267.2；实测值268.2；Rt＝0.863min。
步骤8.(2R,5S)-2-(1-苯甲基吡唑-4-基)-5-乙基哌啶的合成
向6-(1-苯甲基吡唑-4-基)-3-乙基-2,3,4,5-四氢吡啶(2.13g，7.97mmol)于甲醇(40mL)中的搅拌溶液中分批添加硼氢化钠(452.09mg，11.95mmol，422.52μL)。将所得混合物在20℃下搅拌2h。然后，在减压下移除溶剂且将残余物分配于水(20ml)与乙酸乙酯(30ml)之间。将有机层分离，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩，得到(2R,5S)-2-(1-苯甲基吡唑-4-基)-5-乙基-哌啶(1.98g，7.35mmol，92.26％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO)δ(ppm)0.88(m,3H),1.19(m,1H),1.36(m,2H),1.36(m,1H),1.57(m,1H),1.90(m,3H),2.34(dd,1H),3.15(d,1H),3.56(d,1H),5.24(s,2H),7.20-7.32(m,6H),7.48(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值269.2；实测值270.1；Rt＝0.944min。
步骤9.(2R,5S)-2-(1-苯甲基吡唑-4-基)-5-乙基哌啶的合成
将二碳酸二-叔丁酯(1.76g，8.09mmol，1.86mL)添加到(2R,5S)-2-(1-苯甲基吡唑-4-基)-5-乙基哌啶(1.98g，7.35mmol)于二氯甲烷(30mL)中的溶液中。将所得混合物在20℃下搅拌4h。然后，在减压下移除挥发物，且通过梯度柱色谱(Hex-MTBE)纯化残余物，得到(2R,5S)-2-(1-苯甲基吡唑-4-基)-5-乙基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.2g，5.95mmol，81.01％产率)。
1H NMR(dmso,600MHz):δ(ppm)0.87-0.90(m,4H),1.31(m,1H),1.44(m,10H),1.74(m,3H),1.98(m,1Н),2.90(d,1H),3.83(d,1H),5.26(s,2H),5.33(s,1H),7.18(m,2H),7.33-7.38(m,5H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值369.2；实测值370.2；Rt＝1.687min。
步骤10.(2R,5S)-2-(1-苯甲基吡唑-4-基)-5-乙基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
向(2R,5S)-2-(1-苯甲基吡唑-4-基)-5-乙基哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.2g，5.95mmol)于甲醇(40mL)中的溶液中添加10％ Pd/碳A402028-10批号C-14557(0.5g，469.84μmol，10％纯度)和乙酸(5.05g，84.11mmol，4.81mL)。将所得混合物抽真空，然后用氢气回填。将反应混合物在氢气气氛(气球压力)、55℃下搅拌18h。然后，过滤出催化剂且在真空中浓缩滤液，得到(2R,5S)-5-乙基-2-(1H-吡唑-4-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.75g，粗品)。
1H NMR(dmso,400MHz):δ(ppm)0.93(m,3H),1.34(m,1H),1.48(m,12H),1.77(m,2H),2.04(m,1Н),2.90(d,1H),3.85(d,1H),5.39(s,1H),7.26(m,2H),7.44(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值279.2；实测值280.2；Rt＝1.278min。
步骤11.(2R,5S)-5-乙基-2-(1H-吡唑-4-基)哌啶的合成
将于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(15.15g，41.55mmol，15mL，10％纯度)添加到(2R,5S)-5-乙基-2-(1H-吡唑-4-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.6g，5.73mmol)于甲醇(10mL)中的溶液中。将所得混合物在25℃下搅拌16h。然后，在减压下移除挥发物，得到(2R,5S)-5-乙基-2-(1H-吡唑-4-基)哌啶(1.44g，5.71mmol，100.00％产率，2HCl)。
1H NMR(dmso,400MHz):δ(ppm)0.84(m,3H),1.19(m,3H),1.70(m,1H),1.86(m,1H),1.96(m,1Н),2.60(dd,1H),3.12(m,1H),4.07(t,1H),5.93(brs,2H),7.88(s,2H),9.47(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值279.2；实测值280.2；Rt＝1.278min。
3OO.7-氟-5-(5-甲基-2-哌啶基)-1H-吲唑的合成
步骤1：(Z)-1-(5-溴-2,3-二氟苯基)-N-甲氧基甲亚胺的合成
将碳酸钾(7.50g，54.30mmol，3.28mL)添加到5-溴-2,3-二氟苯甲醛(10g，45.25mmol)基O-甲基羟基胺(4.16g，49.77mmol，HCl)于DME(115mL)中的溶液中，且使反应物在45℃下反应过夜。冷却至室温之后，将其过滤，用乙酸乙酯洗涤，且蒸发。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ3.99(s,3H),7.30(m,1H),7.73(s,1H),8.18(s,1H)。
步骤2：5-溴-7-氟-1H-吲唑的合成
将(Z)-1-(5-溴-2,3-二氟苯基)-N-甲氧基甲亚胺(10.7g，42.79mmol)、水合肼溶液(45mL)于THF(45mL)中的溶液加热至90℃达120h。蒸发溶剂且将所得混合物用EtOAc稀释，用水洗涤，经Na2SO4干燥且在真空下浓缩，以得到粗产物。经由快速柱色谱纯化残余物，以得到1.95g。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.30(s,1H),7.76(s,1H),8.06(s,1H),13.72(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值215.0；实测值217.0；Rt＝0.959min。
步骤3：5-溴-7-氟-1-四氢吡喃-2-基-吲唑的合成向5-溴-7-氟-1H-吲唑(1.95g，9.07mmol)和3,4-二氢-2H-吡喃(915.40mg，10.88mmol，988.56μL)于CH2Cl2(40mL)中的溶液中添加对甲苯磺酸单水合物(172.51mg，906.88μmol，139.12μL)。在室温下将混合物搅拌过夜。将混合物用DCM(250mL)稀释且用水(3x 80mL)洗涤。将有机层干燥(Na2SO4)，过滤且在减压下浓缩。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.71(m,2H),3.29(m,2H),3.71(m,2H),3.81(m,1H),4.50(m,1H),5.71(m,1H),7.50(d,1H),7.89(s,1H),8.36(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值；实测值；Rt＝min。
步骤4：7-氟-1-四氢吡喃-2-基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吲唑的合成
将5-溴-7-氟-1-四氢吡喃-2-基吲唑(2.7g，9.03mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(2.29g，9.03mmol)和乙酸钾(1.77g，18.05mmol，1.13mL)混合于二噁烷(60mL)中，且将所得混合物抽真空且用氩气回填三次。向其中添加[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)与二氯甲烷的络合物(368.54mg，451.30μmol)且将反应混合物在100℃下加热20h。冷却反应混合物且过滤。在真空中浓缩滤液且通过柱色谱纯化，以获得7-氟-1-四氢吡喃-2-基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吲唑(1.87g，5.40mmol，59.84％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.20(m,2H),1.42(s,12H),1.70(m,2H),2.12(m,2H),2.60(m,1H),3.72(m,1H),5.91(m,1H),7.49(d,1H),8.08(s,1H),8.19(s,1H)。
步骤5：6-(7-氟-1-四氢吡喃-2-基吲唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.70g，4.91mmol)、7-氟-1-四氢吡喃-2-基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吲唑(1.87g，5.40mmol)和碳酸钠(1.04g，9.82mmol，411.43μL)一起混合于二噁烷(15mL)和水(5mL)的混合物中。将所得混合物抽真空且用氩气回填三次，且向其中添加[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)与二氯甲烷的络合物(200.50mg，245.52μmol)。将反应混合物在90℃下加热18h。冷却反应混合物且将其倒入水(50ml)中。将所得混合物用EtOAc(2*50ml)萃取且将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且蒸发。
LCMS(ESI)：[M-THP]+m/z：计算值331.2；实测值332.2；Rt＝1.407min。
步骤6：7-氟-5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1-四氢吡喃-2-基吲唑的合成
将三氟乙酸(3.02g，26.47mmol，2.04mL)添加到于CH2Cl2(2mL)中的6-(7-氟-1-四氢吡喃-2-基-吲唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(2.2g，5.29mmol)中。将反应混合物在25℃下搅拌18h，然后在真空中蒸发且倒入水(80ml)和碳酸氢钠(4.45g，52.95mmol，2.06mL)中且用EtOAc(2x30 ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(2*20ml)洗涤，经硫酸钠干燥且在真空中蒸发。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值315.2；实测值316.2；Rt＝0.867min。
步骤7：7-氟-5-(5-甲基-2-哌啶基)-1-四氢吡喃-2-基吲唑的合成
将7-氟-5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1-四氢吡喃-2-基吲唑(1.45g，4.60mmol)溶解于MeOH(20mL)中且分批添加硼氢化钠(521.78mg，13.79mmol，487.64μL)。将反应混合物搅拌18h。将反应混合物蒸发至干。将残余物溶解于DCM(50ml)中且将所得混合物用NaHSO4水溶液(2*50ml)萃取。将合并的水层用DCM(3*50ml)洗涤，然后用K2CO3碱化。将所得混合物用DCM(2*100ml)萃取且将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且蒸发。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值317.2；实测值318.2；Rt＝0.757min。
步骤8：7-氟-5-(5-甲基-2-哌啶基)-1H-吲唑的合成
将7-氟-5-(5-甲基-2-哌啶基)-1-四氢吡喃-2-基-吲唑(0.74g，2.33mmol)溶解于于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(1.70g，2.13mL)中且将溶液搅拌12h。将反应混合物蒸发至干。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值233.2；实测值234.2；Rt＝0.619min。
3PP.5-甲基-2-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶的合成
步骤1：2-(1-苯甲基-5-甲基-2-吡啶基)-5-甲基溴化吡啶的合成
将5-甲基-2-(5-甲基-2-吡啶基)吡啶(1g，5.43mmol)和苯甲基溴(2.48g，14.48mmol，1.72mL)于乙腈(10mL)中的混合物在密封管中在85℃下加热18小时。18小时之后，在减压下浓缩反应混合物。将所获得的粗产物用MTBE研磨，将沉淀过滤，用MTBE洗涤且在真空下干燥，以得到呈淡粉色粉末的2-(1-苯甲基-5-甲基-2-吡啶基)-5-甲基溴化吡啶(1.95g，粗品)。
1H NMR(CDCl3,400MHz):δ(ppm)2.44(s,3H),2.63(s,3H),6.24(s,2H),7.21(m,5H),7.59(d,1H),7.66(d,1H),7.91(d,1H),8.34(m,1H),8.60(s,1H),9.75(s,1H)。
步骤2：2-(1-苯甲基-5-甲基-2-哌啶基)-5-甲基吡啶的合成
在高压釜中，将2-(1-苯甲基-5-甲基-2-吡啶基)-5-甲基-溴化吡啶(1.9g，4.92mmol)和TEA(0.5g，4.94mmol，688.71μL)于甲醇(50mL)中的溶液在20atm H2压力、40℃下经PtO2(0.05g，220.19μmol)氢化18小时。完成之后，通过硅藻土垫过滤反应混合物且在减压下浓缩滤液。将所获得的粗产物用MTBE研磨。过滤沉淀且在减压下浓缩滤液，以获得呈非对映异构体(约1:3)的混合物形式的2-(1-苯甲基-5-甲基-2-哌啶基)-5-甲基吡啶(1.3g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值280.2；实测值281.2；Rt＝1.010min。
步骤3：5-甲基-2-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶的合成
在高压釜中，将2-(1-苯甲基-5-甲基-2-哌啶基)-5-甲基吡啶(0.5g，1.78mmol)于甲醇(80mL)中的溶液在10atm H2压力、100℃下经10％Pd/C(1.78mmol)氢化12小时。完成之后，通过硅藻土垫过滤反应混合物且在真空中浓缩滤液，以获得5-甲基-2-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶(0.33g，粗品)。将粗产物用于下一步骤反应中。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值190.2；实测值191.2；Rt＝0.806-1.099min。
3QQ.外消旋-5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)-1H-噻吩并[3,2-c]吡唑的合成
步骤1：5-溴-1H-噻吩并[3,2-c]吡唑的合成
将1-(5-溴噻吩并[3,2-c]吡唑-1-基)乙酮(10g，40.80mmol)溶解于二噁烷(50mL)中且与于H2O(10mL)中的碳酸钾(8.46g，61.20mmol，8.46mL)混合。将反应混合物加热至70℃且搅拌48h(通过H-NMR控制反应完成)。反应完成之后，在减压下蒸发溶剂；将油状残余物用H2O(100mL)研磨且过滤。将所获得的固体风干，以得到5-溴-1H-噻吩并[3,2-c]吡唑(7.5g，36.93mmol，90.53％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)7.43(s,1H),7.83(s,1H),13.11(bds,1H)。
步骤2：5-溴-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-噻吩并[3,2-c]吡唑的合成
将5-溴-1H-噻吩并[3,2-c]吡唑(7.5g，36.93mmol)悬浮于3,4-二氢-2H-吡喃(31.07g，369.35mmol，33.55mL)中，随后添加甲苯磺酸(636.02mg，3.69mmol)(小心！观察到放热)。反应完成之后，将混合物蒸发至干且使其经历CC(OОК.Interchim,330g SiO2，石油醚/MTBE，其中MTBE为5～15％，流速＝135mL/min，Rv＝6-10CV)，以得到5-溴-1-四氢吡喃-2-基-噻吩并[3,2-c]吡唑(6g，20.89mmol，56.57％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.65(m,4H),2.15(m,2H),3.71(m,1H),4.07(m,1H),5.48(m,1H),7.13(s,1H),7.68(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值287.2；实测值288.2；Rt＝1.239min。
步骤3：(2-甲基-5-氧代-5-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-噻吩并[3,2-c]吡唑-5-基)戊基)氨基甲酸叔丁酯的合成
将5-溴-1-四氢吡喃-2-基-噻吩并[3,2-c]吡唑(6g，20.89mmol)溶解于THF(30mL)中且在Ar下冷却至-78℃。逐滴添加丁基锂(2.5M，9.19mL)，将温度保持在同一点下。再搅拌10min之后，添加5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(6.68g，31.34mmol)于THF(20mL)中的溶液。再搅拌10min之后，将反应物升温至-10℃且用饱和NH4Cl水溶液(30mL)萃取。将粗反应混合物分配于EtOAc(50mL)与H2O(30mL)之间，将有机层经Na2SO4干燥，蒸发至干且用CC(ОК.Companion combiflash；330g SiO2，氯仿/MeCN，其中MeCN为0～10％，流速＝100mL/min，Rv＝6.5CV)纯化，以得到N-[2-甲基-5-氧代-5-(1-四氢吡喃-2-基噻吩并[3,2-c]吡唑-5-基)戊基]氨基甲酸叔丁酯(1.5g，3.56mmol，17.03％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)0.92(d,3H),1.42(s,9H),1.78(m,7H),2.13(m,2H),2.31(m,1H),3.07(m,3H),3.75(m,1H),4.02(m,1H),4.66(m,1H),5.61(m,1H),7.69(s,1H),7.75(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值421.2；实测值422.2；Rt＝1.525min。
步骤4：5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)-1H-噻吩并[3,2-c]吡唑的合成
将N-[2-甲基-5-氧代-5-(1-四氢吡喃-2-基噻吩并[3,2-c]吡唑-5-基)戊基]氨基甲酸叔丁酯(1.5g，3.56mmol)溶解于DCM(10mL)中，随后添加TFA(2.03g，17.79mmol，1.37mL)且搅拌过夜。反应完成之后，将混合物用10％ NaOH水溶液洗涤，且将有机溶剂蒸发，以得到5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1H-噻吩并[3,2-c]吡唑(0.8g，粗品)，其不经纯化即用于下一步骤。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ(ppm)1.02(d,3H),1.56(m,1H),1.76(m,1H),1.95(m,1H),2.56(m,1H),2.86(m,1H),3.26(m,1H),3.96(m,1H),4.36(m,1H),7.28(s,1H),7.76(s,1H)。
步骤5：外消旋-5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)-1H-噻吩并[3,2-c]吡唑的合成
将5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1H-噻吩并[3,2-c]吡唑(0.8g，3.65mmol)溶解于MeOH(5mL)中且冷却至0℃。将硼氢化钠(138.01mg，3.65mmol，128.98μL)分批添加到所获得的混合物中且再搅拌过夜。反应完成之后，将反应混合物用10％ HCl水溶液酸化至pH＝2，用MTBE洗涤(2*10mL)，用10％ NaOH水溶液碱化至pH＝10且用DCM(10mL)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥且蒸发，以得到5-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]-1H-噻吩并[3,2-c]吡唑(0.9g，粗品)，其不经纯化即用于下一步骤。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ(ppm)0.98(d,3H),1.65(m,4H),1.95(m,2H),2.38(m,1H),3.16(m,1H),3.82(m,1H),6.82(s,1H),7.71(s,1H)。
3RR.外消旋-5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)-1H-噻吩并[2,3-c]吡唑的合成
步骤1：1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-噻吩并[2,3-c]吡唑-5-甲酸的合成
将1H-噻吩并[2,3-c]吡唑-5-甲酸(5g，29.73mmol)悬浮于3,4-二氢-2H-吡喃(25.01g，297.31mmol，27.01mL)中，随后添加甲苯磺酸(255.99mg，1.49mmol)。剧烈搅拌0.5h之后，溶解所有固体，将澄清溶液蒸发至干且将粗残余物溶解于50％ KOH水溶液中。将所获得的乳状悬浮液用DCM(30mL)洗涤五次且用MTBE(30mL)洗涤2次。将澄清淡黄色溶液用10％ NaHSO4水溶液酸化至pH＝2且用DCM(30mL)萃取2次。蒸发合并的有机溶剂，得到呈区域异构体的混合物形式的1-四氢吡喃-2-基噻吩并[2,3-c]吡唑-5-甲酸(7.2g，28.54mmol，95.99％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.95(m,6H),3.86(m,2H),5.56(m,1H),7.68(s,1H),8.28(s,1H),13.25(bds,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值252.2；实测值253.2；Rt＝1.089min。
步骤2：(1H-咪唑-1-基)(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-噻吩并[2,3-c]吡唑-5-基)甲酮的合成
将1-四氢吡喃-2-基噻吩并[2,3-c]吡唑-5-甲酸(7.2g，28.54mmol)溶解于DCM(100mL)中，随后一次性添加CDI(6.94g，42.81mmol)。反应完成之后(通过气态副产物的最终逸出且通过H-NMR推测)，将混合物用DCM(100mL)稀释且用0.1M HCl水溶液洗涤(三次)。在减压下蒸发有机溶剂，得到咪唑-1-基-(1-四氢吡喃-2-基噻吩并[2,3-c]吡唑-5-基)甲酮(5.8g，19.18mmol，67.22％产率)，其立即用于下一步骤。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.95(m,6H),3.82(m,1H),4.08(m,1H),5.62(m,1H),7.19(s,1H),7.69(s,1H),7.82(s,1H),8.12(s,1H),8.32(s,1H)。
步骤3：5-甲基-2-氧代-3-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-噻吩并[2,3-c]吡唑-5-羰基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.50g，21.10mmol)溶解于THF(40mL)中且在Ar下冷却至-78℃，随后逐滴添加六甲基二硅氮化锂(1.03M，22.35mL)。再搅拌10min之后，添加咪唑-1-基-(1-四氢吡喃-2-基噻吩并[2,3-c]吡唑-5-基)甲酮(5.8g，19.18mmol)于THF(40mL)中的溶液且将反应混合物升温至室温。反应完成之后，将混合物倒入饱和NH4Cl水溶液中且用EtOAc(100mL)萃取三次。蒸发有机溶剂且用CC(ОК.Interchim；220gSiO2，石油醚/乙酸乙酯，其中乙酸乙酯为10～75％，流速＝100mL/min，Rv＝7.7CV)纯化，产生呈异构体的混合物形式的5-甲基-2-氧代-3-(1-四氢吡喃-2-基噻吩并[2,3-c]吡唑-5-羰基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.5g，10.05mmol，52.42％产率)。将单独级分合并且用于下一步骤。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)1.08(d,3H),1.53(s,9H),1.62(m,4H),2.15(m,6H),3.23(m,1H),3.85(m,2H),4.39(m,1H),5.55(m,1H),7.86(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值347.2；实测值348.2；Rt＝1.384min。
步骤4：5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)-1H-噻吩并[2,3-c]吡唑的合成
将5-甲基-2-氧代-3-(1-四氢吡喃-2-基噻吩并[2,3-c]吡唑-5-羰基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.5g，10.05mmol)溶解于乙酸(50mL)中且加热至回流。逐滴添加HCl(10M，10.05mL)(小心！观察到剧烈泡沫形成！)。气体逸出停止之后，将混合物蒸发至干，溶解于H2O(50mL)中且用10％ K2CO3水溶液碱化至pH＝10；将所获得的不透明溶液用DCM(150mL)萃取，将其经Na2SO4干燥且在减压下蒸发，以得到5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1H-噻吩并[2,3-c]吡唑(1.6g，7.30mmol，72.56％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.02(d,3H),1.86(m,1H),1.95(m,2H),2.48(m,1H),2.86(m,1H),3.26(m,1H),4.02(m,1H),7.42(m,1H),7.82(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值219.2；实测值220.2；Rt＝0.802min。
步骤5：外消旋-5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)-1H-噻吩并[2,3-c]吡唑的合成
将5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1H-噻吩并[2,3-c]吡唑(1.6g，7.30mmol)溶解于MeOH(20mL)中且冷却至0℃。将硼氢化钠(552.00mg，14.59mmol，515.89μL)分批添加到所获得的混合物中且再搅拌过夜。反应完成之后，将反应混合物用10％ HCl水溶液酸化至pH＝2，用MTBE洗涤(2*10mL)，用10％ NaOH水溶液碱化至pH＝10且用DCM(50mL)萃取。蒸发溶剂，得到纯的5-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]-2H-噻吩并[2,3-c]吡唑(1.3g，5.87mmol，80.51％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.98(d,3H),1.56(m,2H),1.68(m,2H),1.92(m,1H),2.02(m,1H),2.44(m,1H),3.20(m,1H),3.86(m,1H),6.83(s,1H),7.61(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值221.2；实测值222.2；Rt＝0.711min。
3SS.外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-吡唑-3-基)哌啶的合成
步骤1：外消旋-(2R,5S)-2-(甲氧基(甲基)氨基甲酰基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
在25℃下，将CDI(14.08g，86.81mmol)一次性添加到(2R,5S)-1-叔丁氧基羰基-5-甲基哌啶-2-甲酸(17.6g，72.34mmol)于THF(200mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在45℃下搅拌，直到二氧化碳逸出完成，然后添加甲氧基(甲基)胺盐酸盐(14.11g，144.68mmol)和TEA(14.64g，144.68mmol，20.17mL)。将反应混合物在50℃下搅拌12h，然后冷却且在真空中蒸发。将残余物用5％硫酸氢钠水溶液(200ml)稀释且用DCM(2*100ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(100ml)洗涤，经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到呈无色胶状物的(2R,5S)-2-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(18g，62.86mmol，86.89％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)1.02(d,3H),1.36(m,1H),1.49(s,9H),1.72(m,1H),1.80(m,1H),1.97(m,2H),3.17(s,3H),3.66(m,2H),3.73(s,3H),4.91(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值186.2；实测值187.2；Rt＝1.381min。
步骤2：外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-丙炔酰基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
在-40℃下，将(2R,5S)-2-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(18g，62.86mmol)于THF(200mL)中的溶液逐滴添加于乙炔基溴化镁(587.50g，314.85mmol，625mL，6.872％纯度)(0.5M于THF溶液中)的搅拌溶液中。使所得混合物升温至25℃且在此温度下搅拌12h，然后倒入于水(675mL)中的硫酸氢钠(75.47g，628.57mmol)中。将所得混合物搅拌30min，然后转移至分液漏斗中。分离上部有机层；另外用乙酸乙酯(2*300ml)萃取水层。将合并的有机萃取物用盐水(2*200ml)洗涤，经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到呈红色油状物的(2R,5S)-5-甲基-2-丙-2-炔酰基哌啶-1-甲酸叔丁酯(15g，59.68mmol，94.95％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.88(m,1H),0.96(d,3H),1.36(m,1H),1.49(s,9H),1.57(m,1H),1.95(m,2H),2.08(m,1H),3.24(m,1H),3.52(m,1H),4.58(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值151.2；实测值152.2；Rt＝1.467min。
步骤3：外消旋-(2R,5S)-2-((E)-3-(二乙基氨基)丙烯酰基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将(2R,5S)-5-甲基-2-丙-2-炔酰基哌啶-1-甲酸叔丁酯(15.00g，59.68mmol)用二乙胺(6.98g，95.50mmol，9.89mL)于乙醇(200mL)中的溶液稀释。将所得溶液在25℃下搅拌1h，然后在真空中蒸发，以得到呈红色胶状物的(2R,5S)-2-[(E)-3-(二乙基氨基)丙-2-烯酰基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(19.8g，粗品)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.98(d,3H),1.15(m,6H),1.36(m,1H),1.45(s,9H),1.56(m,1H),1.80(m,2H),2.10(m,1H),3.09(m,1H),3.25(m,4H),3.69(m,1H),4.57(m,1H),5.20(d,1H),7.65(d,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值324.2；实测值325.2；Rt＝1.372min。
步骤4：外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-吡唑-3-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将单水合肼(6.89g，88.15mmol，6.69mL)添加到(2R,5S)-2-[(E)-3-(二乙基氨基)丙-2-烯酰基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(14.3g，44.07mmol)和乙酸(5.29g，88.15mmol，5.04mL)于乙醇(300mL)中的搅拌溶液中。将反应混合物在80℃下用回流冷凝器搅拌36h，然后冷却且在真空中蒸发。将残余物用水(100ml)稀释且用MTBE(2*100ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(50ml)洗涤，经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到呈红色胶状物的粗品(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-吡唑-3-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(10g，37.69mmol，85.51％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)1.03(d,3H),1.47(s,9H),1.83(m,2H),2.00(m,1H),2.12(m,2H),2.91(m,1H),3.71(m,1H),5.42(m,1H),6.18(d,1H),7.51(d,1H),8.89(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值165.2；实测值166.2；Rt＝1.293min。
步骤5：外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-吡唑-3-基)哌啶的合成
在25℃下，将于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(7.35g，28.02mmol，7.00mL，13.9％纯度)添加到(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-吡唑-3-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(700mg，2.64mmol)于MeOH(30mL)中的搅拌溶液中。将反应混合物在25℃下搅拌3h，然后在真空中浓缩，以得到呈米色固体的(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-吡唑-3-基)哌啶(530mg，2.63mmol，99.61％产率，HCl)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.96(d,3H),1.36(m,1H),1.95(m,4H),2.67(m,1H),3.13(m,1H),4.19(m,1H),6.49(d,1H),7.74(d,1H),9.43(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值165.2；实测值166.2；Rt＝0.653min。
3TT.外消旋-3-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)-1'H-1,3'-联吡唑的合成
步骤1：外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-(1'-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1'H-[1,3'-联吡唑]-3-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-吡唑-3-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(3.7g，13.94mmol)、3-碘-1-四氢吡喃-2-基吡唑(4.74g，17.03mmol)、碘化铜(I)(1.85g，9.71mmol，329.18μL)、99％无水碳酸钾(4.44g，32.13mmol，1.94mL)、N1,N2-二甲基环己-1,2-二胺(1.18g，8.32mmol)、铜(444.00mg，6.99mmol)和甲苯(100mL)于100ml装备有回流冷凝器和玻璃塞的单颈圆底烧瓶中的混合物抽真空，然后用氩气回填。然后将反应混合物在氩气、110℃下搅拌72h。等分试样的LCMS显示25.67％目标化合物。将反应混合物冷却，且添加50ml 25％氨水。将所得混合物搅拌0.5h，然后通过短硅酸镁垫过滤。将滤饼另外用乙酸乙酯(2*25ml)洗涤且丢弃。将滤液转移至分液漏斗，将有机层分离，经硫酸钠干燥且在真空中蒸发。通过硅胶柱色谱，使用己烷/乙酸乙酯梯度(0-100％乙酸乙酯)纯化残余物，以得到呈淡黄色油状物的粗品(2R,5S)-5-甲基-2-[1-(1-四氢吡喃-2-基吡唑-3-基)吡唑-3-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(3.5g，8.42mmol，60.41％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.02(d,3H),1.36(m,1H),1.49(s,9H),1.96(m,5H),2.22(m,6H),3.72(m,2H),4.09(m,2H),5.42(m,1H),6.18(d,1H),6.32(d,1H),6.55(d,1H),8.04(d,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值415.2；实测值416.2；Rt＝1.696min。
步骤2：外消旋-3-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)-1'H-1,3'-联吡唑的合成
在25℃下，将于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(52.50g，200.15mmol，50mL，13.9％纯度)添加到(2R,5S)-5-甲基-2-[1-(1-四氢吡喃-2-基吡唑-3-基)吡唑-3-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.5g，6.02mmol)于MeOH(50mL)中的搅拌溶液中。将反应混合物在25℃下搅拌48h，然后在真空中浓缩。将残余物与DCM(50ml)一起蒸发，以得到呈淡黄色胶状物的粗品(2R,5S)-5-甲基-2-[1-(1H-吡唑-3-基)吡唑-3-基]哌啶(2g，5.87mmol，97.58％产率，3HCl)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.96(d,3H),1.36(m,1H),2.07(m,4H),2.36(m,1H),2.59(m,1H),4.16(m,1H),6.44(d,1H),6.79(d,1H),7.82(d,1H),8.26(d,1H),9.58(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值231.2；实测值232.2；Rt＝0.629min。
3UU.外消旋-5-[(2S,5S)-4,4-二氟-5-甲基-2-哌啶基]-2-甲基吡啶的合成
步骤1：(E)-1-(6-甲基吡啶-3-基)戊-1-烯-3-酮的合成
在氩气气氛下，向5-碘-2-甲基吡啶(15g，68.49mmol)和三乙胺(10.05g，99.30mmol，13.84mL)的混合物中添加戊-1-烯-3-酮(11.52g，136.97mmol，13.54mL)，随后添加乙酸钯(II)(768.79mg，3.42mmol)和MeCN(300mL)。将混合物回流12h。移除溶剂且将残余物溶解于水(150mL)中且用MTBE(3*100mL)萃取。将有机层用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤且在真空中浓缩，以得到(E)-1-(6-甲基-3-吡啶基)戊-1-烯-3-酮(12g，68.48mmol，100.00％产率)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.14(t,3H),2.47(s,3H),2.66(q,2H),6.71(m,1H),7.16(m,1H),7.47(m,1H),7.72(m,1H),8.80(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值175.2；实测值176.2；Rt＝0.721min。
步骤2：(E)-5-(二甲基氨基)-4-甲基-1-(6-甲基-3-吡啶基)戊-1-烯-3-酮的合成
将(E)-1-(6-甲基-3-吡啶基)戊-1-烯-3-酮(12g，68.48mmol)、98％1,3,5-三噁烷(4.11g，136.97mmol，3.51mL，300％纯度)、二甲胺盐酸盐(5.58g，68.48mmol)和36％重量/重量盐酸水溶液(6.94g，68.48mmol，5.78mL，36％纯度)于乙醇(120mL)中的溶液在80℃下搅拌12h。在真空中移除溶剂，以得到(E)-5-(二甲基氨基)-4-甲基-1-(6-甲基-3-吡啶基)戊-1-烯-3-酮(22g，粗品，2HCl)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值232.2；实测值233.2；Rt＝0.164min。
步骤3：外消旋-(2S,5S)-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)哌啶-4-酮的合成
将(E)-5-(二甲基氨基)-4-甲基-1-(6-甲基-3-吡啶基)戊-1-烯-3-酮(22g，94.70mmol)溶解于水(120mL)和NH3(水溶液)(120mL)中，然后将反应混合物在80℃下搅拌12h。将反应混合物用1N HCl酸化，用MTBE(3*150mL)萃取，然后将水层用1N NaOH碱化且用DCM(3*100ml)萃取。将DCM层经Na2SO4干燥，过滤且在真空下蒸发，以得到(2S,5S)-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)哌啶-4-酮(14g，粗品)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值204.2；实测值205.2；Rt＝0.196min。
步骤4：外消旋-(2S,5S)-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将(2S,5S)-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)哌啶-4-酮(14g，68.54mmol)和二碳酸二-叔丁酯(14.96g，68.54mmol，15.73mL)于DCM(150mL)中的溶液在25℃下搅拌12h。在真空中移除溶剂且通过梯度色谱(DCM-MeCN)纯化残余物(20g)且再纯化(MTBE-MeCN)，以获得(2S,5S)-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.9g，6.24mmol，9.11％产率)和级分0.5g 70％纯度。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.16(m,3H),1.42(s,9H),2.52(m,1H),2.55(s,3H),2.80(m,1H),2.99(m,1H),3.56(m,1H),3.77(m,1H),5.57(m,1H),7.10(d,1H),7.42(d,1H),8.39(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值304.2；实测值305.2；Rt＝0.935min。
步骤5：外消旋-(2S,5S)-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)哌啶-4-酮的合成
将(2S,5S)-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.9g，6.24mmol)和三氟乙酸(15g，131.55mmol，10.14mL)于DCM(10mL)中的溶液在25℃下搅拌3h，以得到(2S,5S)-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)哌啶-4-酮(3g，粗品，2TFA)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ1.01(d,3H),2.63(s,3H),2.92(m,1H),3.19(m,2H),3.71(m,1H),4.92(m,1H),7.73(d,1H),8.24(d,1H),8.74(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值204.2；实测值205.2；Rt＝0.311min。
步骤6：外消旋-5-[(2S,5S)-4,4-二氟-5-甲基-2-哌啶基]-2-甲基吡啶的合成
将外消旋-(2S,5S)-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)哌啶-4-酮(3g，6.97mmol，2TFA)、HF(1.39g，69.72mmol)和四氟化硫(1.51g，13.94mmol)在不锈钢高压釜中在70℃下加热12h。反应完成之后，排出气体产物，将反应混合物倒在冰上且用10％ K2CO3水溶液中和。将产物用MTBE(3×100mL)萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，且在减压下浓缩，以得到5-[(2S,5S)-4,4-二氟-5-甲基-2-哌啶基]-2-甲基吡啶(1.5g，6.63mmol，95.09％产率)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
通过2D NMR确认结构。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.02(d,3H),1.79(m,1H),1.88(m,2H),2.52(s,3H),2.67(t,1H),3.07(m,1H),3.86(m,1H),7.11(d,1H),7.58(d,1H),8.45(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值226.2；实测值227.0；Rt＝0.540min。
3VV.6-(4-氟苯基)-5-氮杂螺[2.5]辛烷的合成
步骤1：(1-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)环丙基)甲醇的合成
在0℃下，将叔丁基二甲基甲硅烷基氯(15.50g，102.81mmol)添加到化合物1(10.00g，97.92mmol)和咪唑(10.00g，146.90mmol)于CH2Cl2(816mL)中的搅拌溶液中。在室温下搅拌混合物(16小时)。通过添加饱和NaHCO3水溶液(250mL)来淬灭反应混合物。使用EtOAc(3x)萃取混合物，将其经MgSO4干燥，过滤，然后浓缩。通过硅胶柱色谱(EtOAc/己烷，1:5)纯化残余物，以得到呈无色油状物的化合物3(11.00g，52％)。
1H NMR(CDCl3,400MHz)δ3.61(s,2H),3.56(d,J＝5.3Hz,2H),2.75(t,J＝5.3Hz,1H),0.90(s,9H),0.51-044(m,4H),0.05(s,6H)。
步骤2：1-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)环丙烷-1-甲醛的合成
将戴斯-马丁高碘烷(13.80g，32.5mmol)添加到(1-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)环丙基)甲醇(2)(6.40g，29.60mmol)于CH2Cl2(296mL)中的冰冷溶液中。将反应混合物在室温下搅拌1h，用混合饱和Na2S2O3水溶液(200mL)和饱和NaHCO3水溶液(200mL)稀释，然后用乙醚(3x 200mL)萃取。将合并的有机相用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤且在减压下浓缩。残余物不经进一步纯化即使用。
步骤3：(E)-3-(1-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)环丙基)丙烯酸乙酯的合成
向氢化钠(1.54mg，38.50mmol，60％于油中)于四氢呋喃(75mL)中的溶液中逐滴添加三乙基磷酸乙酯(7.96g，35.50mmol)，且将混合物升温至室温达20min。将1-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)环丙烷-1-甲醛(3)(6.35g，29.60mmol)于四氢呋喃(39mL)中的溶液逐滴添加先前溶液中。添加完成之后，在室温下进行反应达2小时。将水(150mL)添加到反应混合物中，且蒸发挥发物。使用CH2Cl2(3x)萃取混合物，将其经MgSO4干燥，过滤，然后浓缩。通过硅胶柱色谱(EtOAc/己烷，0/1至1:3)纯化残余物，以得到呈无色油状物的(E)-3-(1-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)环丙基)丙烯酸乙酯(4)(6.700g，80％)。
1H NMR(CDCl3,400MHz)δ6.66(d,J＝15.9Hz,1H),5.82(d,J＝15.9Hz,1H),4.17(q,J＝7.2Hz,CH3CH2O),3.66(s,2H),1.28(t,J＝7.2Hz,CH3CH2O),0.97-0.93(m,2H),0.88(s,9H),0.80-0.76(m,2H),0.05(s,3H)。
步骤4：(E)-3-(1-(羟甲基)环丙基)丙烯酸乙酯的合成
将1M HCl水溶液(1.18mL，1.18mmol)添加到(E)-3-(1-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)环丙基)丙烯酸乙酯(4)(6.70g，23.55mmol)的乙醇(62mL，1M)溶液中。将溶液在室温下搅拌(4h)。蒸发挥发物且通过硅胶柱色谱(EtOAc/己烷，0/1至5/5)纯化残余物，以得到呈无色油状物的(E)-3-(1-(羟甲基)环丙基)丙烯酸乙酯(5)(6.700g，80％)。
1H NMR(CDCl3,400MHz)δ6.62(d,J＝15.9Hz,1H),5.96(d,J＝15.9Hz,1H),4.17(q,J＝7.1Hz,CH3CH2O),3.66(s,2H),1.28(t,J＝7.1Hz,CH3CH2O),0.97-0.92(m,2H),0.91-0.87(m,2H)。
步骤5：(E)-3-(1-(((甲基磺酰基)氧基)甲基)环丙基)丙烯酸乙酯的合成
在0℃下，将甲磺酰氯(1.81mL，23.30mmol)逐滴添加到DMAP(237mg，1.94mmol)、三乙胺(7.57mL，54.30mmol)和(E)-3-(1-(羟甲基)环丙基)丙烯酸乙酯(5)(3.30g，19.40mmol)的CH2Cl2(39mL，0.5M)溶液中。在室温下搅拌反应物(2h)。添加饱和NaHCO3水溶液(30mL)。分离各层，且用CH2Cl2(x2)洗涤水层。将有机层合并，干燥(Na2SO4)且在真空下浓缩。残余物不经进一步纯化即用于下一步骤中。
步骤6：(E)-3-(1-(叠氮基甲基)环丙基)丙烯酸乙酯的合成
将前一步骤中获得的粗品(E)-3-(l-(甲基磺酰基氧基甲基)环丙基)丙-2-烯酸酯(6)(4.54g，19.4mmol)添加到反应容器中，添加二甲基甲酰胺(16.2mL)和叠氮化钠(2.52g，38.8mmol)。将混合物在室温下搅拌(过夜)。将DMF在真空下浓缩且添加乙酸乙酯和水。分离各层且用乙酸乙酯(2x)洗涤水层。将有机层合并，干燥(Na2SO4)且在真空下浓缩。通过硅胶柱色谱(EtOAc/环己烷)纯化残余物，以得到(E)-3-(1-(叠氮基甲基)环丙基)丙烯酸乙酯(7)黄色油状物(18.0g，产率92.3％)。
1H NMR(CDCl3,400MHz)δ6.56(d,J＝15.9Hz,1H),5.90(d,J＝15.9Hz,1H),4.19(q,J＝7.1Hz,CH3CH2O,2H),3.36(s,2H),1.29(t,J＝7.1Hz,CH3CH2O),1.03-1.00(m,2H),0.97-0.94(m,2H)。
步骤7：5-氮杂螺[2.5]辛-6-酮的合成
向(E)-3-(1-(叠氮基甲基)环丙基)丙-2-烯酸乙酯(7)(2.6g，14.0mmol)的乙醇(48mL)溶液中添加Pd/c(260mg)。在H2气氛(气球)下搅拌反应混合物(16h)。通过针筒过滤器过滤反应混合物且在真空下浓缩滤液。获得呈蜡状白色固体的5-氮杂螺[2.5]辛-6-酮(8)(1.60g，89％)。
1H NMR(CDCl3,400MHz)δ6.69-6.57(br s,1H),3.09(d J＝1.9Hz,2H),2.43(t,J＝6.6Hz,2H),1.61(t,J＝6.6Hz,2H),0.49(s,4H)。
步骤8：6-氧代-5-氮杂螺[2.5]辛烷-5-甲酸苯甲酯的合成
将5-氮杂螺[2.5]辛-6-酮(8)(1.0g，8.0mmol)溶解于THF(100mL)中且在78℃下添加LiHMDS(10.4mL于THF中的1M溶液，10.4mmol)。搅拌30min之后，添加Cbz-OSu(2.6g,10.4mmol)且将所得混合物在室温下搅拌过夜。将反应物用水(30mL)和CH2Cl2(30mL)淬灭。分离各层，且用CH2Cl2(2*30mL)洗涤水层。将合并的有机层干燥(Na2SO4)，过滤，且在真空中浓缩。通过硅胶柱色谱(10/0环己烷/乙酸乙酯至6/4)纯化残余物，以得到呈无色油状物的6-氧代-5-氮杂螺[2.5]辛烷-5-甲酸苯甲酯(9)(400mg，20％)。
1H NMR(CDCl3,400MHz)δ7.46-7.29(m,5H),5.27(s,2H),3.51(s,2H),2.65(t,J＝6.9Hz,2H),1.69(t,J＝6.9Hz,2H),0.62-0.57(m,2H),0.55-0.51(m,2H)。
步骤9：6-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-5-氮杂螺[2.5]辛-6-烯-5-甲酸苯甲酯的合成
将6-氧代-5-氮杂螺[2.5]辛烷-5-甲酸苯甲酯(9)(200mg，0.83mmol)于无水THF(4.8mL)中的溶液冷却至-78℃。在5min内添加1MLiHMDS溶液(1.04mL于THF中的1M溶液，1.04mmol)，且将混合物搅拌70min。添加经蒸馏的HMPA(288μL，1.66mmol)，且将溶液再搅拌30min，然后添加PhNTf2(370mg，1.04mmol)于无水THF(0.5mL)中的溶液，且使混合物升温至室温且使其反应15h。添加水(10mL)和醚(10mL)，且分离各层。用醚(2*30mL)洗涤水层。将合并的有机层干燥(Na2SO4)，过滤，且在真空中浓缩。通过硅胶柱色谱(10/0环己烷/乙酸乙酯至6/4)纯化残余物，以得到呈无色油状物的6-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-5-氮杂螺[2.5]辛-6-烯-5-甲酸苯甲酯(10)。
1H NMR(CDCl3,400MHz)δ7.40-7.32(m,5H),5.38(d,J＝3.8Hz,1H),5.22(s,2H),3.47(s,2H),2.16(d,J＝3.8Hz,2H),0.62-0.56(m,2H),0.44-0.40(m,2H)。
步骤10：6-(4-氟苯基)-5-氮杂螺[2.5]辛-6-烯-5-甲酸苯甲酯的合成
在氮气气氛下，向-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-5-氮杂螺[2.5]辛-6-烯-5-甲酸酯(140mg，0.36mmol)于THF(6mL)中的溶液中添加(Ph3P)2PdCl2(13mg，17.9μmol)、(4-氟苯基)硼酸(65mg，0.46mmol)和2M Na2CO3水溶液(3.58mL)。在40℃下，将混合物搅拌16h。然后添加水(10mL)且将混合物用乙醚萃取且干燥(Na2SO4)。通过硅胶柱色谱(10/0环己烷/乙酸乙酯至1/9)纯化残余物，以得到呈无色油状物的6-(4-氟苯基)-5-氮杂螺[2.5]辛-6-烯-5-甲酸苯甲酯(11)(60mg，50％)。
1H NMR(CDCl3,400MHz)δ7.47-7.15(m,7H),6.93(d,J＝8.6Hz,2H),5.40(d,J＝3.7Hz,1H),4.94(s,2H),3.57(s,2H),2.19(d,J＝3.7Hz,2H),0.66-0.59(m,2H),0.45-0.40(m,2H)。
步骤11：6-(4-氟苯基)-5-氮杂螺[2.5]辛烷的合成
将于碳上的Pd(OH)2(10％，6mg)添加到6-(4-氟苯基)-5-氮杂螺[2.5]辛-6-烯-5-甲酸酯(11)(60mg，0.18mmol)的(2,2,2)-三氟乙醇(1.2mL)溶液中。将溶液在室温、H2 atm(1atm)下搅拌(16h)。通过针筒过滤器过滤反应混合物。将滤液用(2,2,2)-三氟乙醇洗涤。蒸发挥发物，以得到呈无色油状物的6-(4-氟苯基)-5-氮杂螺[2.5]辛烷(35mg，96％)。
1H NMR(CDCl3,400MHz)δ7.34(dd,J＝5.6,8.7Hz,7H),7.00(d,J＝8.7Hz,2H),3.64(dd,J＝2.6,11.3Hz,1H),3.24(dd,J＝1.1 12.3Hz,1H),2.25(dd,J＝2.1,12.3Hz,1H),2.05-1.98(m,1H),1.89-1.81(m,1H),1.75-1.64(m,1H),1.12-1.03(m,1H),0.53-0.45(m,1H),0.40-0.30(m,3H)。
3WW.1-甲基-6-(5-甲基-2-哌啶基)-3,4-二氢喹啉-2-酮
步骤1：1-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,4-二氢喹啉-2-酮的合成
将6-溴-1-甲基-3,4-二氢喹啉-2-酮(5.18g，21.57mmol)、双(频哪醇)二硼(6.57g，25.89mmol)和乙酸钾(6.35g，64.72mmol，4.05mL)于二噁烷(50mL)中的混合物用氩气脱气10min。接着添加Pd(dppf)Cl2*DCM(880.93mg，1.08mmol)且将反应混合物在90℃下搅拌12h。将反应混合物冷却至室温且过滤，然后蒸发。将粗产物用己烷:mtbe(8:2)的混合物处理，且使其经历快速柱色谱(洗脱液氯仿)。获得1-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,4-二氢喹啉-2-酮(4.6g，16.02mmol，74.25％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值288.2；实测值288.2；Rt＝1.321min。
步骤2：3-甲基-6-(1-甲基-2-氧代-3,4-二氢喹啉-6-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将1-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,4-二氢喹啉-2-酮(4.2g，14.63mmol)、3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(7.07g，20.48mmol)、碳酸钠(4.65g，43.88mmol，1.84mL)和Pd(dppf)Cl2*DCM(1.19g，1.46mmol)混合于H2O(20mL)和二噁烷(60mL)中，且用氩气吹扫且在75℃下搅拌12h。将反应混合物用水稀释且将所需产物用DCM萃取，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩。获得3-甲基-6-(1-甲基-2-氧代-3,4-二氢喹啉-6-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(8g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值357.2；实测值357.4；Rt＝1.437min。
步骤3：1-甲基-6-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-3,4-二氢喹啉-2-酮的合成
将3-甲基-6-(1-甲基-2-氧代-3,4-二氢喹啉-6-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(8g，11.22mmol)溶解于CF3COOH(10g，11.22mmol)中且在20℃下搅拌1h。然后，将反应混合物浓缩，用NaHCO3水溶液处理且用DCM萃取，然后蒸发，以得到1-甲基-6-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-3,4-二氢喹啉-2-酮(4g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值257.2；实测值257.2；Rt＝0.674min。
步骤4：1-甲基-6-(5-甲基-2-哌啶基)-3,4-二氢喹啉-2-酮的合成
将1-甲基-6-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-3,4-二氢喹啉-2-酮(4g，7.33mmol)溶解于甲醇(40mL)中且添加硼氢化钠(554.92mg，14.67mmol，518.62uL)。1h之后，将反应混合物浓缩，用NaHCO3水溶液处理且用DCM萃取。将有机相蒸发，以得到1-甲基-6-(5-甲基-2-哌啶基)-3,4-二氢喹啉-2-酮(2.9g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值259.2；实测值259.2；Rt＝0.717min。
3XX.外消旋-6-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)咪唑并[1,5-a]吡啶
步骤1：6-(咪唑并[1,5-a]吡啶-6-基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
将3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(100mg，289.57umol)、6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)咪唑并[1,5-a]吡啶(70.68mg，289.57umol)和碳酸钠(92.08mg，868.72umol，36.39uL)添加到1,4-二噁烷(3mL)和水(1mL)的混合物中。将所得混合物抽真空，然后用氩气回填，然后在氩气下添加Pd(dppf)Cl2*DCM(11.81mg，14.48umol)。将反应混合物在80℃下搅拌16h，然后用水处理且将所需产物用DCM萃取，然后蒸发。获得6-咪唑并[1,5-a]吡啶-6-基-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(150mg，粗品)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值313.2；实测值314.2；Rt＝1.044min。
步骤2：6-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)咪唑并[1,5-a]吡啶的合成
将6-咪唑并[1,5-a]吡啶-6-基-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(3g，9.57mmol)溶解于TFA(20mL)中且在25℃下搅拌1h。在真空中浓缩反应混合物，将粗产物溶解于NaHCO3水溶液中且用DCM(50ml)萃取。将有机相用水洗涤，经Na2SO4干燥且蒸发，以得到6-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)咪唑并[1,5-a]吡啶(3g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值213.2；实测值214.2；Rt＝0.520min。
步骤3：外消旋-6-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)咪唑并[1,5-a]吡啶的合成
将来自前一阶段的粗品6-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)咪唑并[1,5-a]吡啶(3g，14.07mmol)溶解于甲醇(40mL)中，然后添加硼氢化钠(800.00mg，21.15mmol，747.66uL)。将反应混合物搅拌过夜然后蒸发。将粗产物溶解于DCM(100ml)中，用水洗涤两次，经Na2SO4干燥，然后在真空中浓缩，以得到6-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]咪唑并[1,5-a]吡啶(2.25g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值215.2；实测值216.2；Rt＝0.465min。
3YY.外消旋-5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)-1H-噻吩并[2,3-c]吡唑
步骤1：1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-噻吩并[2,3-c]吡唑-5-甲酸的合成
将1H-噻吩并[2,3-c]吡唑-5-甲酸(5g，29.73mmol)悬浮于3,4-二氢-2H-吡喃(25.01g，297.31mmol，27.01mL)中，随后添加甲苯磺酸(255.99mg，1.49mmol)。剧烈搅拌0.5h之后，溶解所有固体，将澄清溶液蒸发至干且将粗残余物溶解于50％ KOH水溶液中。将所获得的乳状悬浮液用DCM(30mL)洗涤五次且用MTBE(30mL)洗涤2次。将澄清淡黄色溶液用10％ NaHSO4水溶液酸化至pH＝2且用DCM(30mL)萃取2次。蒸发合并的有机溶剂，得到呈区域异构体的混合物形式的1-四氢吡喃-2-基噻吩并[2,3-c]吡唑-5-甲酸(7.2g，28.54mmol，95.99％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.95(m,6H),3.86(m,2H),5.56(m,1H),7.68(s,1H),8.28(s,1H),13.25(bds,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值252.2；实测值253.2；Rt＝1.089min。
步骤2：(1H-咪唑-1-基)(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-噻吩并[2,3-c]吡唑-5-基)甲酮的合成
将1-四氢吡喃-2-基噻吩并[2,3-c]吡唑-5-甲酸(7.2g，28.54mmol)溶解于DCM(100mL)中，随后一次性添加CDI(6.94g，42.81mmol)。反应完成之后(通过气态副产物的最终逸出且通过H-NMR推测)，将混合物用DCM(100mL)稀释且用0.1M HCl水溶液洗涤(三次)。在减压下蒸发有机溶剂，得到咪唑-1-基-(1-四氢吡喃-2-基噻吩并[2,3-c]吡唑-5-基)甲酮(5.8g，19.18mmol，67.22％产率)，其立即用于下一步骤。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.95(m,6H),3.82(m,1H),4.08(m,1H),5.62(m,1H),7.19(s,1H),7.69(s,1H),7.82(s,1H),8.12(s,1H),8.32(s,1H)。
步骤3：5-甲基-2-氧代-3-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-噻吩并[2,3-c]吡唑-5-羰基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.50g，21.10mmol)溶解于THF(40mL)中且在Ar下冷却至-78℃，随后逐滴添加六甲基二硅氮化锂(1.03M，22.35mL)。再搅拌10min之后，添加咪唑-1-基-(1-四氢吡喃-2-基噻吩并[2,3-c]吡唑-5-基)甲酮(5.8g，19.18mmol)于THF(40mL)中的溶液且将反应混合物升温至室温。反应完成之后，将混合物倒入饱和NH4Cl水溶液中且用EtOAc(100mL)萃取三次。蒸发有机溶剂且用CC(ОК.Interchim；220gSiO2，石油醚/乙酸乙酯，其中乙酸乙酯为10～75％，流速＝100mL/min，Rv＝7.7CV)纯化，产生呈异构体的混合物形式的5-甲基-2-氧代-3-(1-四氢吡喃-2-基噻吩并[2,3-c]吡唑-5-羰基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.5g，10.05mmol，52.42％产率)。将单独级分合并且用于下一步骤。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)1.08(d,3H),1.53(s,9H),1.62(m,4H),2.15(m,6H),3.23(m,1H),3.85(m,2H),4.39(m,1H),5.55(m,1H),7.86(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值347.2；实测值348.2；Rt＝1.384min。
步骤4：5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)-1H-噻吩并[2,3-c]吡唑的合成
将5-甲基-2-氧代-3-(1-四氢吡喃-2-基噻吩并[2,3-c]吡唑-5-羰基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.5g，10.05mmol)溶解于乙酸(50mL)中且加热至回流。逐滴添加HCl(10M，10.05mL)(小心！观察到剧烈泡沫形成！)。气体逸出停止之后，将混合物蒸发至干，溶解于H2O(50mL)中且用10％ K2CO3水溶液碱化至pH＝10；将所获得的不透明溶液用DCM(150mL)萃取，将其经Na2SO4干燥且在减压下蒸发，以得到5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1H-噻吩并[2,3-c]吡唑(1.6g，7.30mmol，72.56％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.02(d,3H),1.86(m,1H),1.95(m,2H),2.48(m,1H),2.86(m,1H),3.26(m,1H),4.02(m,1H),7.42(m,1H),7.82(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值219.2；实测值220.2；Rt＝0.802min。
步骤5：外消旋-5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)-1H-噻吩并[2,3-c]吡唑的合成
将5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1H-噻吩并[2,3-c]吡唑(1.6g，7.30mmol)溶解于MeOH(20mL)中且冷却至0℃。将硼氢化钠(552.00mg，14.59mmol，515.89uL)分批添加到所获得的混合物中且再搅拌过夜。反应完成之后，将反应混合物用10％ HCl水溶液酸化至pH＝2，用MTBE洗涤(2*10mL)，用10％ NaOH水溶液碱化至pH＝10且用DCM(50mL)萃取。蒸发溶剂，得到纯的5-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]-2H-噻吩并[2,3-c]吡唑(1.3g，5.87mmol，80.51％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.98(d,3H),1.56(m,2H),1.68(m,2H),1.92(m,1H),2.02(m,1H),2.44(m,1H),3.20(m,1H),3.86(m,1H),6.83(s,1H),7.61(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值221.2；实测值222.2；Rt＝0.711min。
3ZZ.N,N-二甲基-2-(3-((5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯氧基)乙胺
步骤1：(S)-6-(3-(2-(二甲基氨基)乙氧基)苯基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
将(3S)-3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(8g，23.17mmol)、N,N-二甲基-2-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯氧基]乙胺(5.62g，19.30mmol)和碳酸钠(4.09g，38.61mmol，1.62mL)混合于二噁烷(45mL)和水(15mL)的混合物中。将所得混合物抽真空且用氩气回填三次。将Pd(dppf)Cl2*DCM(788.26mg，965.25μmol)添加到先前混合物中且将所得混合物在90℃下加热过夜。冷却所得混合物且用水(100ml)稀释。将所得混合物用EtOAc(2*100ml)萃取且将合并的有机层用盐水(60ml)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩。将残余物(10.8g粗产物)与残余物(200mg粗产物)合并且通过柱色谱纯化，以获得(3S)-6-[3-[2-(二甲基氨基)乙氧基]苯基]-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(4.5g，12.48mmol，64.66％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值360.2；实测值361.2；Rt＝1.077min。
步骤2：(S)-N,N-二甲基-2-(3-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯氧基)乙胺的合成
将(3S)-6-[3-[2-(二甲基氨基)乙氧基]苯基]-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(4.5g，12.48mmol)溶解于DCM(18mL)中且向其中添加TFA(18mL)。搅拌所得混合物1h。将反应混合物小心倒入NaHCO3水溶液(20g于100ml水中)且将所得混合物用DCM(2*50ml)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤，且在真空中浓缩，以获得N,N-二甲基-2-[3-[(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]苯氧基]乙胺(2.36g，9.04mmol，72.46％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值260.2；实测值261.2；Rt＝0.245min。
步骤3：N,N-二甲基-2-(3-((5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯氧基)乙胺的合成
将N,N-二甲基-2-[3-[(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]苯氧基]乙胺(2.36g，9.06mmol)溶解于MeOH(45mL)中且分批添加硼氢化钠(685.82mg，18.13mmol，638.57μL)。将所得混合物搅拌过夜。将水(20ml)添加到反应混合物中且在真空中浓缩所得混合物。将残余物用水(30ml)稀释且将所得混合物用DCM(2*50ml)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤，且在真空中浓缩，以获得N,N-二甲基-2-[3-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯氧基]乙胺(2.02g，7.70mmol，84.94％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值262.2；实测值263.2；Rt＝0.498min。
3AAA.5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)-2-(2-(吡咯烷-1-基)乙基)苯并[d]噻唑
步骤1：5-氯-2-(2-(吡咯烷-1-基)乙基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案J步骤1A制备。产率：4.3g(51.46％)。
CC条件：通过硅胶使用MTBE/MeOH作为洗脱液混合物来纯化粗产物。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值266.2；实测值267.2；Rt＝1.014min。
步骤2：2-(2-(吡咯烷-1-基)乙基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑的合成
将乙酸钾(3.16g，32.23mmol，2.01mL)添加到5-氯-2-(2-吡咯烷-1-基乙基)-1,3-苯并噻唑(4.30g，16.12mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(4.50g，17.73mmol)于二噁烷(50mL)中的溶液中。将反应烧瓶抽真空且用氩气再填充3次。然后在氩气流下添加三(二苯亚甲基丙酮)二钯(0)(737.96mg，805.88umol)和XPhos(1.54g，3.22mmol)。在90℃、惰性气氛下将所得混合物搅拌18h。然后添加40％吡咯烷水溶液(0.5当量)且将反应混合物在60℃下再搅拌12h。然后，将其冷却，用EtOAc(200mL)稀释且用Na2CO3(50mL，饱和水溶液)洗涤。将有机层经Na2SO4干燥，在减压下浓缩且通过硅胶快速色谱，以0至100％ CHCl3-MeCN-MeOH梯度洗脱来纯化残余物，以得到产物2-(2-吡咯烷-1-基乙基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噻唑(2.2g，6.14mmol，38.10％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值358.2；实测值359.2；Rt＝1.001min。
步骤3：(S)-3-甲基-6-(2-(2-(吡咯烷-1-基)乙基)苯并[d]噻唑-5-基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案J步骤3制备。产率：3g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值427.2；实测值428.2；Rt＝1.251min。
步骤4：(S)-5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)-2-(2-(吡咯烷-1-基)乙基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案J步骤4制备。产率：1.2g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值327.2；实测值328.2；Rt＝0.681min。
步骤5：5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)-2-(2-(吡咯烷-1-基)乙基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案J步骤5制备。产率：1g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值329.2；实测值330.2；Rt＝0.720min。
3BBB.((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(1-甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1- 基)-2-氧代乙酰胺
步骤1：5-溴-2-(1-甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案J步骤1A制备。产率：14g(92.88％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值311.2；实测值312.2；Rt＝0.742min。
步骤2：2-(1-甲基哌啶-4-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案J步骤2制备。产率：8.5g(92.29％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值358.2；实测值359.2；Rt＝0.978min。
步骤3：(S)-3-甲基-6-(2-(1-甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案J步骤3制备。产率：15g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值427.2；实测值428.2；Rt＝1.274min。
步骤4：(S)-5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)-2-(1-甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案J步骤4制备。产率：6g(94.96％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值327.2；实测值328.2；Rt＝0.670min。
步骤5：5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)-2-(1-甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案J步骤5制备。产率：4g(66.26％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值329.2；实测值330.2；Rt＝0.703min。
步骤6：2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(1-甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺的合成
在25℃下，将2-氯-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(1.04g，5.46mmol)缓慢添加到2-(1-甲基-4-哌啶基)-5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑(1.5g，4.55mmol)和TEA(921.30mg，9.10mmol，1.27mL)于无水THF(50mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在25℃下搅拌0.5h，然后在25℃下将气态氨鼓泡通过反应混合物达0.5h。过滤所得氯化铵沉淀且丢弃，在真空中浓缩滤液，以得到呈黄色固体的粗品2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(1.6g，3.99mmol，87.75％产率)，其直接用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值400.2；实测值401.2；Rt＝0.867min。
2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(1-甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺
步骤1：5-溴-2-(1-甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑)的合成
通过一般程序方案J步骤1A制备。产率：14g(92.88％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值311.2；实测值312.2；Rt＝0.742min。
步骤2：2-(1-甲基哌啶-4-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案J步骤2制备。产率：8.5g(92.29％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值358.2；实测值359.2；Rt＝0.978min。
步骤3：(S)-3-甲基-6-(2-(1-甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案J步骤3制备。产率：15g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值427.2；实测值428.2；Rt＝1.274min。
步骤4：(S)-5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)-2-(1-甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案J步骤4制备。产率：6g(94.96％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值327.2；实测值328.2；Rt＝0.670min。
步骤5：5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)-2-(1-甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案J步骤5制备。产率：4g(66.26％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值329.2；实测值330.2；Rt＝0.703min。
步骤6：2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(1-甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺的合成
1-甲基-4-(3-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯基)哌嗪
步骤1：(2R,5S)-5-甲基-2-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将(2R,5S)-2-(3-溴苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.03g，2.91mmol)、1-甲基哌嗪(291.20mg，2.91mmol，322.48μL)、4,5-双(二苯基膦基)-9,9-二甲基二苯并吡喃(168.22mg，290.73μmol)和叔丁醇钠(419.09mg，4.36mmol)一起混合于二噁烷(15mL)中，且将所得混合物抽真空且用氩气回填三次。将三(二苯亚甲基丙酮)二钯(0)(133.11mg，145.36μmol)添加到先前的混合物中，且将所得混合物在100℃下(油浴)加热过夜。冷却反应混合物且用水(50ml)稀释。将所得混合物用EtOAc(3*50ml)萃取。将合并的有机层用盐水(2*50ml)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且蒸发，以获得(2R,5S)-5-甲基-2-[3-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.1g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值373.2；实测值374.2；Rt＝0.991min。
步骤2：1-甲基-4-(3-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯基)哌嗪的合成
将(2R,5S)-5-甲基-2-[3-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.1g，2.94mmol)溶解于DCM(15mL)中，然后添加二噁烷/HCl(2.94mmol，5mL)且将其在室温下搅拌16h。通过过滤收集不溶性材料，将滤饼用额外量的MTBE洗涤且风干，以得到1-甲基-4-[3-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]哌嗪(750mg，2.42mmol，82.19％产率，HCl)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值273.2；实测值274.2；Rt＝0.675min。
4.经由用亲核剂对哌啶酮进行开环来合成
在一些实施方案中，可通过亲核加成到2-哌啶酮来制备仲胺。亲核加成/开环可使用格任亚试剂(例如R6MgBr)来完成。亲核加成反应可在诸如但不限于THF、Et2O、TMEDA、DME和MTBE或其混合物的溶剂中进行。在一些实施方案中，通过包含R6Br、Mg.I2和THF的条件完成亲核加成。
在一些实施方案中，仲胺经历脱保护、环化和还原的序列，以制备被取代的哌啶。用于移除保护基(PG)(例如，MoM或Boc)的条件为本领域普通技术人员已知的。用于移除保护基-PG(例如，-Boc)的条件可采用例如酸性条件(例如，水/二噁烷、于质子性溶剂(例如，甲醇)中的盐酸、于非质子性溶剂(例如，二噁烷)中的盐酸、于非质子性溶剂(例如，二氯甲烷、氯仿等)中的TFA)。在一些实施方案中，脱保护步骤采用于二噁烷中的HCl(4.0M)。在一些实施方案中，脱保护步骤采用于DCM中的HCl(4.0M)。
在一些实施方案中，在将式I-5化合物脱保护时可经历自发环化以形成环状亚胺。环状亚胺的还原可使用还原剂诸如氢化物还原剂(例如，NaBH4或LiAlH4)、硅还原剂(例如，Cl3SiH)或在存在催化剂(例如Ir催化剂、Ru催化剂、Pd催化剂(例如，Pd/C、Pd(OAc)2))的情况下的H2还原来完成。在一些实施方案中，可使用包含于MeOH中的NaBH4的条件完成还原。在一些实施方案中，可使用包含于MeOH和H2O中的NaBH4的条件完成还原。在一些实施方案中，脱保护、环化和还原发生于单一合成步骤中。在一些实施方案中，可使用包含NaBH4、TFA、MeOH和H2O的条件完成脱保护/环化/还原。
4A.(2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶的合成
步骤1：N-[(2S)-5-(4-氟苯基)-2-甲基-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯的合成
在氩气气氛下，向装备有磁性搅拌棒的干燥的2颈圆底烧瓶中装入镁(1.44g，59.08mmol)。添加无水THF(125mL)和1-溴-4-氟苯(10.34g，59.08mmol，6.50mL)。将碘(107.11mg，421.99μmol)添加到搅拌溶液中，且轻微加热所得反应混合物，直到其保持自身回流。当回流平息时，施加外部加热以再保持回流1小时。向装备有温度计和磁性搅拌棒的单独干燥的3颈圆底烧瓶中装入(S)-5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(9g，42.20mmol)。在氩气气氛下添加无水THF(125mL)且将溶液冷却至-78℃。在1小时期间将新鲜制备的格任亚试剂逐滴添加到所得混合物中，使内部温度保持低于-70℃。使所得反应混合物升温至室温，用饱和NH4Cl溶液淬灭且用DCM(3x 50mL)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩，以获得呈淡黄色油状物的产物N-[(2S)-5-(4-氟苯基)-2-甲基-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯(13.2g，粗品)，其不经任何进一步纯化即用于下一步反应。
LCMS(ESI)：[M+Boc]+m/z：计算值309.2；实测值210.2；Rt＝1.386min。
1H NMR(CDCl3,400MHz):δ(ppm)0.93(m,3H),1.42(s,9H),1.54-1.79(m,4H),2.90-3.10(m,3H),4.66(brs,1H),7.08(m,2H),7.97(m,2H)。
步骤2：(2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶的合成
将N-[(2S)-5-(4-氟苯基)-2-甲基-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯(13.2g，42.67mmol)溶解于三氟乙酸(19.46g，170.67mmol，13.15mL)中且将所得反应混合物搅拌1小时。1小时之后，将50％ NaOH水溶液添加到反应混合物中，直到pH＝13-14。将所得混合物用DCM(4x20mL)萃取。将合并的有机相经MgSO4干燥且在减压下浓缩。将所获得的残余物溶解于甲醇(125mL)和水(25mL)中。向其中分批添加硼氢化钠(1.61g，42.67mmol)。将所得反应混合物在氩气气氛、21℃下搅拌16小时。16小时之后，将反应混合物用1-2M HCl酸化，直到pH为1-3且搅拌30分钟。然后，添加50％ NaOH水溶液，直到pH＝13-14。将所得混合物用DCM(4x 100mL)萃取。将合并的有机相经Na2SO4干燥且在减压下浓缩，以获得呈淡黄色固体的(2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶(6.6g，34.15mmol，80.04％产率)。粗产物不经任何进一步纯化即用于下一步反应。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值193.2；实测值194.2；Rt＝0.704min。
1H NMR(CDCl3,500MHz):δ(ppm)0.88(m,3H),1.14(m,1H),1.51(m,1H),1.64(m,2H),1.764(m,1H),1.87(m,1H),2.41(t,0.9H),2.87(d,0.1H,顺式杂质),2.97(d,0.1H,顺式杂质)3.14(d,0.9H),3.52(d,0.9H),3.60(m,0.1H,顺式杂质),6.99(m,2H),7.32(m,2H)。
4B.2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶的合成
步骤1：(5-(4-氟苯基)-2-甲基-5-氧代戊基)氨基甲酸叔丁酯的合成
在搅拌的情况下，在Ar下，向干燥的2颈烧瓶中添加镁(1.04g，42.86mmol，598.65μL)、无水THF(50mL)和1-溴-4-氟苯(5g，28.57mmol，3.14mL)。添加碘(72.52mg，285.72μmol)且轻微加热混合物，直到其自身保持回流。当回流平息时，施加外部加热以使回流再保持1小时。将5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(6.09g，28.57mmol)添加到具有温度计的干燥的3颈圆底烧瓶中。在搅拌的情况下，在Ar下，添加无水THF(50mL)且将溶液冷却至-78℃。在1小时内将格任亚试剂添加到t-boc-内酰胺中，使内部温度保持低于-70℃。使溶液升温至室温且添加饱和NH4Cl。将水层用DCM萃取3x50 mL且将有机层合并，经Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩。获得呈淡黄色油状物的N-[5-(4-氟苯基)-2-甲基-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯(6.7g，粗品)且其不经进一步纯化即用于下一步骤。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.95(d,3H),1.44(s,9H),1.82(m,3H),3.05(m,4H),4.71(bds,1H),7.13(d,2H),7.99(d,2H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值209.2；实测值210.2；Rt＝1.508min。
步骤2：2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶的合成
将N-[5-(4-氟苯基)-2-甲基-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯(6.7g，21.66mmol)于三氟乙酸(12.35g，108.28mmol，8.34mL)中搅拌1h。使用TLC检查反应进展。将50％重量/体积NaOH溶液添加到混合物中，直到pH为13-14。将产物用DCM萃取4x 20mL且将有机层合并，以MgSO4干燥且蒸发。将产物溶解于甲醇(50mL)/水(10mL)混合物中且添加到烧瓶中，随后添加硼氢化钠(819.32mg，21.66mmol，765.72μL)。将混合物在Ar下搅拌过夜。将混合物用1-2M HCl酸化，直到pH为1-3且静置30分钟。然后添加NaOH溶液，直到pH为13-14且将产物用DCM(4x 100mL)萃取，将有机层合并，以Na2SO4干燥，过滤且蒸发，以得到呈无色油状物的2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶(1.4g，7.24mmol，33.45％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)0.86(d,3H),1.13(m,1H),1.50(m,1H),1.62(m,1H),1.82(m,3H),2.38(t,1H),3.09(d,1H),3.51(d,1H),6.96(d,2H),7.30(d,2H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值193.3；实测值194.2；Rt＝1.985min。
4C.5-甲基-2-(间甲苯基)哌啶的合成
步骤1：5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
向5-甲基哌啶-2-酮(1g，8.84mmol)和4-二甲基氨基吡啶(10.80mg，88.37μmol)于CH3CN(20mL)中的搅拌溶液中添加二碳酸二-叔丁酯(1.93g，8.84mmol，2.03mL)。将所得反应混合物在室温下搅拌12小时。完成之后，将反应混合物在减压下浓缩，以获得5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.5g，7.03mmol，79.59％产率)。粗产物不经任何进一步纯化即用于下一步反应。
1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)0.93(d,3H),1.43(m,10H),1.83(m,2H),2.38(m,2H),3.08(m,1H),3.66(m,1H)
步骤2：N-[2-甲基-5-(间甲苯基)-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯的合成
在氩气气氛下，向装备有磁性搅拌棒的干燥的2颈圆底烧瓶(100mL)中装入镁(170.94mg，7.03mmol)。添加无水THF(20mL)和1-溴-3-甲基-苯(1.20g，7.03mmol)。将碘(7.85mg，70.33μmol)添加到搅拌溶液中，且轻微加热所得反应混合物，直到其保持自身回流。当回流平息时，施加外部加热以再保持回流1小时。向装备有温度计和磁性搅拌棒的单独干燥的3颈圆底烧瓶(100mL)中装入5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.14g，7.03mmol)。在氩气气氛下添加无水THF(20mL)且将溶液冷却至-78℃。在30分钟期间将新鲜制备的格任亚试剂逐滴添加到所得混合物中，使内部温度保持低于-70℃。使所得反应混合物升温至室温且在同一温度下搅拌1小时。1小时之后，将反应混合物用饱和NH4Cl溶液淬灭且用EtOAc(2*40mL)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩，以获得产物N-[2-甲基-5-(间甲苯基)-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯(1.5g，粗品)，其不经任何进一步纯化即用于下一步反应。
LCMS(ESI)：[M+Boc]+m/z：计算值305.2；实测值206.2；Rt＝1.517min。
步骤3：5-甲基-2-(间甲苯基)哌啶的合成
将N-[2-甲基-5-(间甲苯基)-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯(3.19g，4.91mmol)溶解于三氟乙酸(5.60g，49.11mmol，3.78mL)中且将所得反应混合物搅拌1小时。1小时之后，将50％ NaOH水溶液添加到反应混合物中，直到pH＝11-12。将所得混合物用DCM(4x 20mL)萃取。将合并的有机相经Na2SO4干燥且在减压下浓缩。将所获得的残余物溶解于甲醇(20mL)中且在0℃下分批添加硼氢化钠(185.81mg，4.91mmol)。将所得反应混合物在20℃下搅拌1小时。1小时之后，将反应混合物在减压下浓缩且将所获得的残余物用50％ NaOH水溶液稀释。将所得混合物用DCM(4x 20mL)萃取。将合并的有机相经Na2SO4干燥且在减压下浓缩，以获得5-甲基-2-(间甲苯基)哌啶(0.2g，1.06mmol，21.51％产率)。粗产物不经任何进一步纯化即用于下一步反应。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值189.2；实测值190.2；Rt＝0.838min。
4D.2-(3-氯苯基)-5-甲基哌啶的合成
步骤1：5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
在21℃下，向5-甲基哌啶-2-酮(5g，44.19mmol)、三乙胺(4.47g，44.19mmol，6.16mL)和DMAP(539.83mg，4.42mmol)于DCM中的溶液中分批添加碳酸叔丁氧基羰基叔丁酯(9.64g，44.19mmol，10.14mL)。将所得溶液用10％ HCl水溶液和盐水洗涤，经Na2SO4干燥且蒸发至干，以得到呈橙色油状物的5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(7.7g，36.10mmol，81.71％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.94(d,3H),1.42(s,10H),1.76(m,1H),1.92(m,1H),2.38(m,2H),3.07(t,1H),3.65(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值213.1；实测值214.2；Rt＝1.227min。
步骤2：N-[5-(3-氯苯基)-2-甲基-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯的合成
在搅拌的情况下，在Ar下，向干燥的2颈烧瓶中添加镁(253.90mg，10.45mmol，145.92μL)、无水THF(25mL)和5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.23g，10.45mmol)，添加碘(13.36mg，104.46μmol)。轻微加热混合物，直到其自身保持回流。当回流平息时，施加外部加热以使回流再保持1小时。将1-溴-3-氯苯(2g，10.45mmol，1.23mL)添加到具有温度计的干燥的3颈圆底烧瓶中。在搅拌的情况下，在Ar下，添加无水THF(25mL)且将溶液冷却至-78℃。在1小时内将格任亚试剂添加到t-Boc-内酰胺中，使内部温度保持低于-70℃。使溶液升温至室温且添加饱和NH4Cl。将水层用DCM萃取3*50mL，且将有机层合并，经Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩。获得呈淡黄色油状物的N-[5-(3-氯苯基)-2-甲基-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯(3.3g，粗品)且其不经进一步纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.01(d,3H),1.49(m,10H),2.43(m,2H),3.07(m,2H),3.77(m,3H),7.27(m,4H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值325.2；实测值326.2；Rt＝1.24min。
步骤3：6-(3-氯苯基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶的合成
将N-[5-(3-氯苯基)-2-甲基-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯(3.3g，10.13mmol)于三氟乙酸(1.15g，10.13mmol，780.29μL)中搅拌1h。使用TLC检查反应进展。将50％重量/体积NaOH溶液添加到混合物中，直到pH为13-14。将产物用DCM萃取4*20mL且将有机层合并，以MgSO4干燥且蒸发。获得呈淡黄色油状物的6-(3-氯苯基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶(1.5g，粗品)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.21(d,3H),1.79(m,3H),2.84(m,2H),3.23(m,2H),7.25(s,1H),7.27(m,3H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值207.2；实测值208.2；Rt＝0.858min。
步骤4：2-(3-氯苯基)-5-甲基哌啶的合成
将6-(3-氯苯基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶(1.5g，7.22mmol)溶解于MeOH(25mL)/水(5mL)的混合物中且添加到烧瓶中，随后添加硼氢化钠(273.23mg，7.22mmol，255.35μL)。将混合物在Ar下搅拌过夜。将反应混合物用1-2M HCl酸化，直到pH为1-3且静置30分钟。然后添加NaOH水溶液，直到pH为13-14且将产物用DCM(4*100mL)萃取，将有机层合并，以Na2SO4干燥，过滤且蒸发，以得到呈淡黄色油状物的2-(3-氯苯基)-5-甲基哌啶(0.9g，粗品)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.02(d,3H),1.89(m,4H),2.91(t,2H),3.27(m,2H),3.68(m,1H),7.25(m,3H),7.27(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值209.2；实测值210.2；Rt＝0.869min。
4E.2-甲基-4-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶的合成
步骤1：N-[2-甲基-5-(2-甲基-4-吡啶基)-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯的合成
在-78℃、氩气气氛下，向4-溴-2-甲基吡啶(2g，11.63mmol，1.38mL)于THF(20mL)中的搅拌溶液中添加正丁基锂(2.5M于己烷中，819.21mg，12.79mmol，5.11mL)。将所得溶液在同一温度下搅拌30分钟。30分钟之后，在-78℃下将所得溶液添加到5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.48g，11.63mmol)于THF(20mL)中的搅拌溶液中。使所得反应混合物升温至室温且在同一温度下搅拌12小时。12小时之后，将反应混合物用饱和NH4Cl水溶液淬灭且用EtOAc(2x 100mL)萃取。将合并的有机相用盐水洗涤，经Na2SO4干燥且在减压下浓缩，以获得N-[2-甲基-5-(2-甲基-4-吡啶基)-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯(5g，粗品)。粗产物不经任何进一步纯化即用于下一步反应。
LCMS(ESI)：[M+Boc]+m/z：计算值306.2；实测值251.2(t-Bu裂解的产物质量)；Rt＝1.215min。
步骤2：2-甲基-4-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶的合成
将N-[2-甲基-5-(2-甲基-4-吡啶基)-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯(5g，16.32mmol)溶解于三氟乙酸(18.61g，163.19mmol，12.57mL)中且在室温下将所得反应混合物搅拌1小时。1小时之后，将50％ NaOH水溶液添加到反应混合物中，直到pH＝11-12。将所得混合物用DCM(4x 40mL)萃取。将合并的有机相经Na2SO4干燥且蒸发至干。将所获得的残余物溶解于MeOH(100mL)中且分批添加硼氢化钠(617.37mg，16.32mmol)。将所得混合物在20℃下搅拌12小时。12小时之后，将反应混合物浓缩且将所获得的残余物用50％ NaOH水溶液稀释。将所得混合物用DCM(4x 40mL)萃取。将合并的有机相经Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩。通过HPLC纯化所获得的残余物，以获得2-甲基-4-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶(0.187g，982.74μmol，6.02％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值190.2；实测值191.2；Rt＝0.756min。
4F.5-甲基-2-(对甲苯基)哌啶的合成
步骤1：N-[2-甲基-5-氧代-5-(对甲苯基)戊基]氨基甲酸叔丁酯的合成
在氩气气氛下，向装备有磁性搅拌棒的干燥的2颈圆底烧瓶(100mL)中装入镁(284.21mg，11.69mmol)。添加无水THF(25mL)和1-溴-4-甲基-苯(2g，11.69mmol，1.42mL)。将碘(29.68mg，116.94μmol)添加到搅拌溶液中，且轻微加热所得反应混合物，直到其保持自身回流。当回流平息时，施加外部加热以再保持回流1小时。向装备有温度计和磁性搅拌棒的单独干燥的3颈圆底烧瓶(100mL)中装入5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.49g，11.69mmol)。在氩气气氛下添加无水THF(25mL)且将溶液冷却至-78℃。在1小时期间将新鲜制备的格任亚试剂逐滴添加到所得混合物中，使内部温度保持低于-70℃。使所得反应混合物升温至室温且将反应混合物用饱和NH4Cl溶液淬灭且用DCM(3x 50mL)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩，以获得呈浅黄色油状物的产物N-[2-甲基-5-氧代-5-(对甲苯基)戊基]氨基甲酸叔丁酯(3.2g，粗品)，其不经任何进一步纯化即用于下一步反应
LCMS(ESI)：[M+Boc]+m/z：计算值305.2；实测值206.2；Rt＝1.345min。
步骤2：3-甲基-6-(对甲苯基)-2,3,4,5-四氢吡啶的合成
将N-[2-甲基-5-氧代-5-(对甲苯基)戊基]氨基甲酸叔丁酯(3.2g，10.48mmol)溶解于三氟乙酸(7.40g，64.90mmol，5mL)中。将所得反应混合物搅拌1小时。在完成之后，将50％ NaOH水溶液添加到反应混合物中，直到pH＝13-14。将所得混合物用DCM(4x 20mL)萃取。将合并的有机相经MgSO4干燥且在减压下浓缩，以获得呈淡黄色油状物的3-甲基-6-(对甲苯基)-2,3,4,5-四氢吡啶(1.5g，粗品)。粗产物不经任何进一步纯化即用于下一步反应。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值187.2；实测值188.2；Rt＝0.867min。
步骤3：5-甲基-2-(对甲苯基)哌啶的合成
将3-甲基-6-(对甲苯基)-2,3,4,5-四氢吡啶(1.5g，8.01mmol)溶解于MeOH(25mL)和水(5mL)中。在0℃下分批添加硼氢化钠(303.04mg，8.01mmol)。将所得反应混合物在氩气气氛下搅拌过夜。完成之后，将反应混合物用1-2M HCl酸化，直到pH＝1-3且将其搅拌30分钟。30分钟之后，将50％ NaOH水溶液添加到所得混合物中，直到pH＝13-14且用DCM(4x100mL)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且在减压下蒸发，以获得呈淡黄色油状物的5-甲基-2-(对甲苯基)哌啶(1g，粗品)。粗产物不经任何进一步纯化即用于下一步反应。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值189.2；实测值190.2；Rt＝0.919min。
4G.2-(3-氟苯基)-5-甲基哌啶的合成
步骤1：N-[5-(3-氟苯基)-2-甲基-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯的合成
在搅拌的情况下，在Ar下，向干燥的2颈烧瓶中添加镁(854.71mg，35.17mmol，491.22μL)、无水THF(25mL)和1-溴-3-氟苯(6.15g，35.17mmol，3.92mL)，添加碘(297.52mg，1.17mmol)且轻微加热混合物，直到其本身保持回流。当回流平息时，施加外部加热以再保持回流1小时。将5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(5g，23.44mmol)添加到具有温度计的干燥的3颈圆底烧瓶中。在搅拌的情况下，在Ar下，添加无水THF(25mL)且将溶液冷却至-78℃。在1小时内将格任亚试剂添加到t-Boc-内酰胺中，使内部温度保持低于-70℃。使溶液升温至室温且添加饱和NH4Cl。将水层用DCM萃取3x 50mL且将有机层合并，经Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩。获得呈淡黄色油状物的N-[5-(3-氟苯基)-2-甲基-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯(8.5g，粗品)且其不经进一步纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.94(d,3H),1.41(s,9H),1.72(m,3H),3.01(m,4H),7.24(m,2H),7.42(m,1H),7.60(d,1H),7.71(d,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值209.2；实测值210.2；Rt＝1.467min。
步骤2：2-(3-氟苯基)-5-甲基哌啶的合成
将N-[5-(3-氟苯基)-2-甲基-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯(8.5g，27.47mmol)于三氟乙酸(15.66g，137.37mmol，10.58mL)中搅拌1h。使用TLC检查反应进展。将50％重量/体积NaOH溶液添加到混合物中，直到pH为13-14。将产物用DCM萃取4x 20mL且将有机层合并，以MgSO4干燥且蒸发。将产物溶解于MeOH(40mL)/水(10mL)混合物中且添加到烧瓶中，随后添加硼氢化钠(1.04g，27.47mmol，971.44μL)。将混合物在Ar下搅拌过夜。将混合物用1-2MHCl酸化，直到pH为1-3且静置30分钟。然后添加NaOH溶液，直到pH为13-14且将产物用DCM(4x 100mL)萃取，将有机层合并，以Na2SO4干燥，过滤且蒸发，以得到呈淡黄色油状物的2-(3-氟苯基)-5-甲基哌啶(2.3g，11.90mmol，43.32％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ0.90(d,3H),1.49(m,1H),1.65(m,1H),1.87(m,4H),3.16(m,1H),3.54(m,1H),6.93(m,1H),7.13(m,2H),7.27(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值193.2；实测值194.2；Rt＝0.878min。
4H.5-甲基-2-(噻吩-2-基)哌啶的合成
步骤1：(2-甲基-5-氧代-5-(噻吩-2-基)戊基)氨基甲酸叔丁酯的合成
在搅拌的情况下，在Ar下，向干燥的2颈烧瓶中添加镁(854.72mg，35.17mmol，491.22μL)、无水THF(50mL)和2-溴噻吩(5.73g，35.17mmol，3.41mL)。添加碘(29.99mg，234.44μmol)且轻微加热混合物，直到其自身保持回流。当回流平息时，施加外部加热以使回流再保持1小时。将5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(5g，23.44mmol)添加到具有温度计的干燥的3颈圆底烧瓶中。在搅拌的情况下，在Ar下，添加无水THF(50mL)且将溶液冷却至-78℃。在1小时内将格任亚试剂添加到boc-内酰胺中，使内部温度保持低于-70℃。使溶液升温至室温且添加饱和NH4Cl。将水层用DCM萃取3x50 mL且将有机层合并，经Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩。获得呈淡黄色油状物的N-[2-甲基-5-氧代-5-(2-噻吩基)戊基]氨基甲酸叔丁酯(5.1g，粗品)且其不经进一步纯化即用于下一步骤。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.94(d,3H),1.43(s,9H),1.56(m,1H),1.69(m,1H),1.81(m,1H),2.94(m,2H),3.06(m,2H),4.69(m,1H),7.12(t,1H),7.62(d,1H),7.74(d,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值197.4；实测值198.2；Rt＝1.421min。
步骤2：5-甲基-2-(噻吩-2-基)哌啶的合成
将N-[2-甲基-5-氧代-5-(2-噻吩基)戊基]氨基甲酸叔丁酯(5.1g，17.15mmol)于三氟乙酸(9.78g，85.74mmol，6.61mL)中搅拌1h。使用TLC检查反应进展。将50％重量/体积NaOH溶液添加到混合物中，直到pH为13-14。将产物用DCM萃取4x20 mL且将有机层合并，以MgSO4干燥且蒸发。将产物溶解于MeOH(40mL)/水(10mL)混合物中且添加到烧瓶中，随后添加硼氢化钠(648.75mg，17.15mmol，606.31μL)。将混合物在Ar下搅拌过夜。将混合物用1-2MHCl酸化，直到pH为1-3且静置30分钟。然后添加NaOH溶液，直到pH为13-14且将产物用DCM(4x100 mL)萃取，将有机层合并，用Na2SO4干燥，过滤且蒸发，以得到呈淡黄色油状物的5-甲基-2-(2-噻吩基)哌啶(2.24g，12.36mmol，72.05％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)0.85(d,3H),1.16(m,1H),1.62(m,3H),1.84(d,1H),1.94(d,1H),2.39(t,1H),3.09(d,1H),3.85(d,1H),6.91(m,2H),7.16(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值181.3；实测值182.2；Rt＝1.579min。
4I.外消旋-(1S,4S,5R)-4-(2-噻吩基)-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷的合成
步骤1：4-氧代-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-甲酸叔丁酯的合成
向3-氮杂双环[3.2.1]辛-4-酮(2.00g，15.98mmol)于CH3CN(50mL)中的搅拌溶液中添加二碳酸二-叔丁酯(3.84g，17.58mmol，4.03mL)和DMAP(97.60mg，798.93μmol)。将所得反应混合物在25℃下搅拌12小时。12小时之后，在减压下浓缩反应混合物。将水(50mL)添加到残余物中且用DCM(2*40mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中蒸发，以获得呈黄色固体的4-氧代-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-甲酸叔丁酯(3.45g，15.31mmol，95.84％产率)。
1H NMR(CDCl3,500MHz):δ(ppm)1.51(s,9H),1.63(m,2H),1.91(m,3H),2.00(m,1H),2.56(s,1H),2.85(s,1H),3.39(d,1H),3.55(d,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值225.2；实测值170.2(t-Bu裂解的产物质量)；Rt＝1.053min。
步骤2：N-[[3-(噻吩-2-羰基)环戊基]甲基]氨基甲酸叔丁酯的合成
在氩气气氛下，向装备有磁性搅拌棒的干燥的2颈圆底烧瓶(100mL)中装入镁(372.21mg，15.31mmol)。添加无水THF(50mL)和2-溴噻吩(2.50g，15.31mmol，1.49mL)。将碘(19.59mg，153.14μmol)添加到搅拌溶液中，且轻微加热所得反应混合物，直到其保持自身回流。当回流平息时，施加外部加热以再保持回流1小时。向装备有温度计和磁性搅拌棒的单独干燥的3颈圆底烧瓶(250mL)中装入4-氧代-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-甲酸叔丁酯(3.45g，15.31mmol)。在氩气气氛下添加无水THF(50mL)且将溶液冷却至-78℃。在30分钟期间将新鲜制备的格任亚试剂逐滴添加到所得混合物中，使内部温度保持低于-70℃。使所得反应混合物升温至室温且在同一温度下搅拌1小时。1小时之后，将反应混合物用饱和NH4Cl溶液淬灭且用DCM(2*50mL)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩，以获得呈浅黄色油状物的产物N-[[3-(噻吩-2-羰基)环戊基]甲基]氨基甲酸叔丁酯(4.2g，13.57mmol，88.64％产率)，其不经任何进一步纯化即用于下一步反应。
LCMS(ESI)：[M+Boc]+m/z：计算值309.2；实测值210.2；Rt＝1.454min。
步骤3：4-(2-噻吩基)-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-烯的合成
将N-[[3-(噻吩-2-羰基)环戊基]甲基]氨基甲酸叔丁酯(4.20g，13.57mmol)溶解于三氟乙酸(15g，131.55mmol，10.14mL)中。将所得反应混合物在25℃下搅拌12小时。12小时之后，将反应混合物在减压下浓缩且将所获得的残余物溶解于冰冷水中。添加5N NaOH溶液水溶液，直到pH＝9且用DCM(3*50mL)萃取。将有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中蒸发，以获得呈红色油状物的4-(2-噻吩基)-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-烯(2.3g，12.02mmol，88.58％产率)。粗产物不经任何进一步纯化即用于下一步反应。
1H NMR(CDCl3,400MHz):δ(ppm)1.62(s,2H),1.88(m,4H),2.29(s,1H),3.18(s,1H),3.65(d,1H),3.92(d,1H),7.01(t,1H),7.32(m,2H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值191.1；实测值192.0；Rt＝0.724min。
步骤4：外消旋-(1S,4S,5R)-4-(2-噻吩基)-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷的合成
在0℃下，向4-(2-噻吩基)-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-烯(2.30g，12.02mmol)于MeOH(50mL)中的搅拌溶液中分批添加硼氢化钠(909.76mg，24.05mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌2小时。2小时之后，在减压下浓缩反应混合物。将所获得的残余物用水(50mL)稀释且用DCM(2*50mL)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中蒸发，以获得粗产物。将MTBE(30mL)添加到粗产物中且过滤悬浮液。在真空中蒸发滤液，以获得呈红色油状物的外消旋-(1S,4S,5R)-4-(2-噻吩基)-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷(1.9g，9.83mmol，81.75％产率)。
1H NMR(CDCl3,500MHz):δ(ppm)1.49(m,1H),1.68(m,5H),2.14(s,1H),2.31(s,1H),2.82(dd,1H),2.95(d,1H),4.13(s,1H),6.91(d,1H),6.97(m,1H),7.18(d,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值193.1；实测值194.2；Rt＝0.780min。
4J.外消旋-(1R,4R,5S)-4-苯基-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷的合成
步骤1在中间体4I的合成中给出的4-氧代-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-甲酸叔丁酯的制备。
步骤2：N-[(3-苯甲酰基环戊基)甲基]氨基甲酸叔丁酯的合成
向装备有温度计和磁性搅拌棒的干燥的3颈圆底烧瓶(250mL)中装入4-氧代-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-甲酸叔丁酯(4.5g，19.97mmol)。在氩气气氛下添加无水THF(80mL)且将所得溶液冷却至-78℃。逐滴添加格任亚试剂苯基溴化镁(1M于THF中，20.12g，19.97mmol，20.12mL)，使内部温度保持低于-70℃。使所得反应混合物升温至室温且在同一温度下搅拌1小时。1小时之后，将反应混合物用饱和NH4Cl溶液淬灭且用DCM(2*50mL)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩，以得到呈浅黄色油状物的N-[(3-苯甲酰基环戊基)甲基]氨基甲酸叔丁酯(5.5g，18.13mmol，90.76％产率)。粗产物不经任何进一步纯化即用于下一步骤。
LCMS(ESI)：[M+Boc]+m/z：计算值303.2；实测值204.2；Rt＝1.388min。
步骤3：4-苯基-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-烯的合成
将N-[(3-苯甲酰基环戊基)甲基]氨基甲酸叔丁酯(5.5g，18.13mmol)溶解于三氟乙酸(2.07g，18.13mmol，1.40mL)中。将所得混合物在25℃下搅拌2小时。2小时之后，将反应混合物在减压下浓缩且将所获得的残余物溶解于冰冷水中。将pH用5N NaOH水溶液调节至9且用DCM(3*50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中蒸发，以获得呈黄色油状物的4-苯基-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-烯(2.5g，13.49mmol，74.44％产率)。此产物不经任何进一步纯化即用于下一步骤反应。
1H NMR(CDCl3,500MHz):δ(ppm)1.67(m,2H),1.84(d,1H),1.98(m,3H),2.33(m,1H),3.24(m,1H),3.74(d,1H),3.99(dd,1H),7.39(m,3H),7.77(m,2H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值185.1；实测值186.2；Rt＝0.709min。
步骤4：外消旋-(1R,4R,5S)-4-苯基-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷的合成
在0℃下，向4-苯基-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-烯(2.5g，13.49mmol)于MeOH(40mL)中的搅拌溶液中分批添加硼氢化钠(1.02g，26.99mmol)。将所得反应混合物在25℃下搅拌2小时。2小时之后，将反应混合物在减压下浓缩。将所获得的残余物用水(50mL)稀释且用DCM(2*50mL)萃取。将合并的有机相用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且在真空中蒸发，以获得粗产物。将MTBE(30mL)添加到粗产物中且过滤悬浮液。在真空中蒸发滤液，以获得呈淡黄色固体的外消旋-(1R,4R,5S)-4-苯基-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷(2.1g，11.21mmol，83.10％产率)。通过2D NMR确认结构。
1H NMR(CDCl3,500MHz):δ(ppm)1.32(m,2H),1.66(m,3H),1.73(m,2H),2.17(s,1H),2.21(t,1H),2.89(dd,1H),2.96(d,1H),3.91(s,1H),7.23(t,1H),7.33(t,2H),7.40(d,2H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值187.2；实测值188.2；Rt＝0.832min。
4K.(2R,6R)-2-甲基-6-苯基哌啶和2-[(2R,6R)-2-甲基-6-苯基-1-哌啶基]-2-氧 代乙酸甲酯的合成
步骤1：2-甲基-6-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
在21℃下，向6-甲基哌啶-2-酮(7.3g，64.51mmol)和DMAP(394.07mg，3.23mmol)于DCM(150mL)中的混合物中分批添加二碳酸二-叔丁酯(14.78g，67.74mmol，15.55mL)。将所获得的混合物搅拌1h。然后，将所得溶液用10％ HCl水溶液和盐水洗涤，经Na2SO4干燥且蒸发至干，以得到呈黄色油状物的2-甲基-6-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(13g，粗品，94.47％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.25(d,3H),1.50(s,9H),1.65(m,2H),1.89(m,2H),2.46(m,2H),4.26(m,1H)。LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值113.1；实测值114.2；Rt＝0.765min。
步骤2：N-(1-甲基-5-氧代-5-苯基戊基)氨基甲酸叔丁酯的合成
在1小时内，在-78℃下，将苯基溴化镁(132.62g，109.72mmol，135.33mL)分批添加到2-甲基-6-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(13g，60.95mmol)于THF(20mL)中的溶液中，使内部温度保持低于-70℃。将所得溶液升温至室温且添加饱和NH4Cl。将水层用DCM萃取3*50mL且将有机层合并，经Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩。获得呈淡黄色油状物的N-(1-甲基-5-氧代-5-苯基戊基)氨基甲酸叔丁酯(16.2g，55.60mmol，91.21％产率)且其不经进一步纯化即用于下一步骤。1HNMR(500MHz,CDCl3)δ1.14(d,3H),1.53(s,9H),1.80(m,4H),3.01(m,2H),3.70(m,2H),7.45(m,2H),7.56(m,1H),7.96(d,2H)。LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值191.2；实测值192.2；Rt＝1.492min。
步骤3：(2R,6R)-2-甲基-6-苯基哌啶的合成
将N-(1-甲基-5-氧代-5-苯基戊基)氨基甲酸叔丁酯(16.2g，55.60mmol)于三氟乙酸(31.70g，277.98mmol，21.42mL)中搅拌1h。使用TLC检查反应进展。将50％重量/体积NaOH溶液添加到混合物中，直到pH为13-14。将产物用DCM萃取4*20mL且将有机层合并，以MgSO4干燥且蒸发。将产物溶解于水(10mL)/MeOH(50mL)混合物中且添加到烧瓶中，随后添加硼氢化钠(2.10g，55.60mmol，1.97mL)。将混合物在Ar下搅拌过夜。将混合物用1-2M HCl酸化，直到pH为1-3且静置30分钟。然后添加NaOH溶液，直到pH为13-14且将产物用DCM(4*100mL)萃取，将有机层合并，以Na2SO4干燥，过滤且蒸发。通过CC(Companion combiflash；120g SiO2；氯仿/乙腈，其中乙腈为0至18％，流速＝85mL/min，Rv＝5-8cv.)纯化残余物，以得到呈淡黄色油状物的(2R,6R)-2-甲基-6-苯基哌啶(2.4g，13.69mmol，24.63％产率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ1.11(d,3H),1.12(m,1H),1.50(m,2H),1.64(m,2H),1.76(m,1H),1.88(m,1H),2.82(m,1H),3.66(m,1H),7.23(m,2H),7.31(m,1H),7.39(m,2H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值175.1；实测值176.2；Rt＝0.660min。
步骤4：2-[(2R,6R)-2-甲基-6-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酸甲酯的合成
在0℃下，向(2R,6R)-2-甲基-6-苯基哌啶(0.5g，2.85mmol)和三乙胺(346.40mg，3.42mmol，477.14μL)于DCM(25mL)中的溶液中添加2-氯-2-氧代乙酸甲酯(384.43mg，3.14mmol)。在室温下搅拌1h之后，将所得混合物过滤且蒸发至干，以得到呈黄色固体的2-[(2R,6R)-2-甲基-6-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酸甲酯(0.74g，2.83mmol，99.27％产率)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ0.83(m,3H),1.62(m,2H),1.88(m,2H),2.56(m,1H),3.86(m,1H),3.92(s,3H),4.87(m,1H),5.90(m,1H),7.37(m,5H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值261.1；实测值262.2；Rt＝1.374min。
4L.N,N-二甲基-3-(哌啶-2-基)苯胺的合成
步骤1：3-溴-N,N-二甲基苯胺的合成
将碘甲烷(3.63g，25.58mmol，1.59mL)添加到3-溴苯胺(2g，11.63mmol，1.27mL)、碳酸钾颗粒(3.54g，25.58mmol，1.54mL)和DMF(10mL)的混合物中且将所得混合物在75℃下加热12h。将混合物倒入NaHCO3水溶液且用乙酸乙酯萃取。将有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥且在真空中浓缩，以获得3-溴-N,N-二甲基苯胺(2g，10.00mmol，85.98％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)2.96(s,6H),6.60(d,1H),6.79(d,1H),6.81(s,1H),7.06(t,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值200.1；实测值201.2；Rt＝1.486min。
步骤2：(5-(3-(二甲基氨基)苯基)-5-氧代戊基)氨基甲酸叔丁酯的合成
在氩气气氛下，将3-溴-N,N-二甲基苯胺(2g，10.00mmol)添加到THF(20mL)和Mg(242.96mg，10.00mmol，139.63μL)的混合物中。向其中添加碘(2.54mg，10.00μmol)且将所得混合物加热至回流达1h。在-78℃下，将所得混合物冷却至室温且逐滴添加2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.99g，10.00mmol)于THF(20mL)中的溶液中。使所得混合物升温至室温，然后倒入NH4Cl水溶液中。将所得混合物用EtOAc(2x40 ml)萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经Na2SO4干燥且蒸发，以获得N-[5-[3-(二甲基氨基)苯基]-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯(1.8g，粗品)，其不经纯化即用于下一步骤。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.19(m,2H),1.42(s,9H),1.97(m,2H),2.92(s,6H),2.98(m,4H),6.68(m,2H),7.21(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值320.4；实测值321.2；Rt＝1.470min。
步骤3：N,N-二甲基-3-(哌啶-2-基)苯胺的合成
将N-[5-[3-(二甲基氨基)苯基]-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯(1.8g，5.62mmol)溶解于三氟乙酸(12.81g，112.35mmol，8.66mL)中且将所得混合物搅拌1h。向其中添加50％NaOH水溶液，直到pH 11-12。将所得混合物用DCM(4x40 ml)萃取，将合并的有机层蒸发至干。将残余物再溶解于MeOH(15mL)中且添加硼氢化钠(212.53mg，5.62mmol，198.62μL)。将所得混合物在20℃下搅拌12h且蒸发。将50％NaOH水溶液添加到残余物中。将所得混合物用DCM(4x40 ml)萃取，将合并的有机层蒸发至干，以获得N,N-二甲基-3-(2-哌啶基)苯胺(0.4g，粗品)，其不经纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.32(m,3H),1.53(m,1H),1.66(m,1H),1.78(m,1H),2.67(m,1H),2.86(s,6H),3.04(m,1H),3.44(m,1H),6.68(m,2H),7.21(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值204.3；实测值205.2；Rt＝0.744min。
4M.5,5-二甲基-2-苯基哌啶的合成
步骤1：5,5-二甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
向5,5-二甲基哌啶-2-酮(1g，7.86mmol)和4-二甲基氨基吡啶(9.61mg，78.63μmol)于CH3CN(20mL)中的搅拌溶液中添加二碳酸二-叔丁酯(1.89g，8.65mmol，1.98mL)。将所得反应混合物在20℃下搅拌12小时。12小时之后，将反应混合物在减压下浓缩，以获得5,5-二甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.5g，6.60mmol，83.93％产率)。粗产物不经任何进一步纯化即用于下一步反应。
1H NMR(CDCl3,400MHz):δ(ppm)1.03(s,6H),1.50(s,9H),1.57(t,2H),2.46(t,2H),3.35(s,2H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值227.2；实测值172.2(t-Bu裂解的产物质量)；Rt＝1.314min。
步骤2：N-(2,2-二甲基-5-氧代-5-苯基戊基)氨基甲酸叔丁酯的合成
在-78℃，氩气气氛下向5,5-二甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.5g，6.60mmol)于THF(20mL)中的搅拌溶液中逐滴添加苯基溴化镁(1M于THF中，1.20g，6.60mmol，6.6mL)。使所得反应混合物升温至室温且在同一温度下搅拌12小时。12小时之后，将反应混合物用饱和NH4Cl水溶液淬灭且用EtOAc(2x 50mL)萃取。将合并的有机相经Na2SO4干燥，过滤且在真空中蒸发，以获得N-(2,2-二甲基-5-氧代-5-苯基戊基)氨基甲酸叔丁酯(1.3g，4.26mmol，64.50％产率)。粗产物不经任何进一步纯化即用于下一步反应。
1H NMR(DMSO-d6,400MHz):δ(ppm)0.82(s,6H),1.35(s,9H),1.47(m,2H),2.81(d,2H),2.97(t,2H),3.30(brs,1H),7.51(t,2H),7.62(m,1H),7.96(d,2H)。LCMS(ESI)：[M+Boc]+m/z：计算值305.2；实测值206.2；Rt＝1.541min。
步骤3：5,5-二甲基-2-苯基哌啶的合成
将N-(2,2-二甲基-5-氧代-5-苯基戊基)氨基甲酸叔丁酯(1.3g，4.26mmol)溶解于三氟乙酸(4.85g，42.57mmol，3.28mL)中且将所得反应混合物在室温下搅拌1小时。1小时之后，将50％ NaOH水溶液添加到反应混合物中，直到pH＝11-12。将所得混合物用DCM(4x20mL)萃取。将合并的有机相经Na2SO4干燥且蒸发至干。将所获得的残余物溶解于MeOH(20mL)中且分批添加硼氢化钠(161.04mg，4.26mmol)。将所得混合物在20℃下搅拌1小时。1小时之后，将反应混合物浓缩且将所获得的残余物用50％ NaOH水溶液稀释。将所得混合物用DCM(4x 20mL)萃取。将合并的有机相经Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩，以获得5,5-二甲基-2-苯基哌啶(0.1g，528.27μmol，12.41％产率)。粗产物不经任何进一步纯化即用于下一步反应。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值189.2；实测值190.2；Rt＝0.817min。
4N.3,5-二甲基-6-苯基-2,3,4,5-四氢吡啶的合成
步骤1：3,5-二甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将二碳酸二-叔丁酯(20.59g，94.35mmol，21.65mL)添加到3,5-二甲基哌啶-2-酮(10g，78.63mmol)和4-二甲基氨基吡啶(480.29mg，3.93mmol)于THF(100mL)中的溶液中。将所得混合物在40℃下搅拌3h。然后，添加水(10ml)。当CO2逸出停止时，将混合物用MTBE(100ml)稀释且用2％ NaHSO4(80ml)和盐水(100ml)连续洗涤。然后，将其经Na2SO4干燥且在减压下蒸发，得到3,5-二甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(17.15g，75.45mmol，95.96％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)1.01(d,3H),1.20(d,3H),1.52(s,9H),1.64(m,1H),1.98(m,1H),2.04(m,1H),2.48(m,1H),3.18(m,1H),3.85(m,1H)。GCMS：[M]:计算值227.2；实测值227.2；Rt＝7.992min。
步骤2：(2,4-二甲基-5-氧代-5-苯基戊基)氨基甲酸叔丁酯的合成
在氩气下，将溴(苯基)镁(100.32g，83.00mmol，102.37mL)逐滴添加到冷却至-75℃的3,5-二甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(17.15g，75.45mmol)于THF(150mL)中的溶液中。添加完成之后，移除冷却浴且将混合物缓慢升温至20℃。然后，添加饱和NH4Cl(60ml)和MTBE(150ml)。将有机层分离且用水(100ml)和盐水(100ml)连续洗涤，经Na2SO4干燥且在减压下浓缩，得到N-(2,4-二甲基-5-氧代-5-苯基戊基)氨基甲酸叔丁酯(20.7g，67.78mmol，89.83％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.87(d,3H),0.95(m,1H),1.22(d,3H),1.49(s,9H),1.61(m,1H),1.77(m,1H),1.96(m,1H),3.02(m,1H),3.53(m,1H),4.64(m,1H),7.48(t,2H),7.57(t,1H),7.97(d,2H)。L CMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值205.2；实测值206.2；Rt＝1.479min。
步骤3：3,5-二甲基-6-苯基-2,3,4,5-四氢吡啶的合成
将三氟乙酸(77.28g，677.78mmol，52.22mL)添加到N-(2,4-二甲基-5-氧代-5-苯基戊基)氨基甲酸叔丁酯(20.7g，67.78mmol)于DCM(50mL)中的溶液中。将所得混合物在20℃下搅拌2h。然后，在减压下移除溶剂且将残余物分配于5％ NaOH水溶液(150ml)与DCM(250ml)之间。将DCM层分离，经Na2SO4干燥且在真空中蒸发，得到3,5-二甲基-6-苯基-2,3,4,5-四氢吡啶(12.1g，64.61mmol，95.33％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.94(d,3H),1.11(d,3H),1.59(m,1H),1.74(m,1H),1.94(m,1H),3.12(m,1H),3.25(m,1H),3.99(m,1H),7.37(t,2H),7.52(t,1H),7.87(d,2H)。LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值187.2；实测值188.2；Rt＝0.863min。
步骤4：3,5-二甲基-2-苯基哌啶的合成
在15分钟期间将硼氢化钠(4.89g，129.22mmol，4.57mL)分批添加到3,5-二甲基-6-苯基-2,3,4,5-四氢吡啶(12.1g，64.61mmol)于甲醇(150mL)中的溶液中。将所得溶液在20℃下搅拌1h。然后，在减压下移除溶剂且将残余物分配于水(100ml)与MTBE(200ml)之间。将有机层分离，经Na2SO4干燥且在真空中蒸发，得到3,5-二甲基-2-苯基哌啶(11.2g，59.17mmol，91.58％产率)。所获得的材料不经纯化即用于下面的步骤。通过柱色谱(80gSiO2，己烷-MTBE)纯化残余物(10.5g)，得到1.9g 85％具有经验证的构型的单一异构体级分。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.76(d,3H),0.87(d,3H),1.25(m,1H),1.45(m,1H),1.75(m,1H),1.88(m,1H),2.03(m,1H),2.39(t,1H),3.18(d,1H),3.86(m,1H),7.30(m,5H)。LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值189.3；实测值190.2；Rt＝0.913min。
4O.2-(苯并噻吩-3-基)哌啶的合成
步骤1：6-(苯并噻吩-3-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(9g，27.17mmol)、苯并噻吩-3-基硼酸(4.84g，27.17mmol)和碳酸钠(8.64g，81.50mmol，3.41mL)于二噁烷(100mL)和水(20mL)中的悬浮液脱气且用Ar再填充三次。向此溶液中添加[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)与二氯甲烷的络合物(1.11g，1.36mmol)。将所得混合物脱气，用Ar再填充且在60℃下搅拌12h。过滤出沉淀，用二噁烷(50ml)洗涤。在真空中蒸发溶剂且将残余物溶解于150ml水中且用EtOAc(2*100ml)萃取。将合并的有机层用盐水(100ml)洗涤，经Na2SO4干燥且蒸发，以获得粗产物(9g)。通过梯度色谱(SiO2，己烷-MTBE)纯化粗产物，以获得6-(苯并噻吩-3-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(5.0g，15.85mmol，58.35％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ077(s,9H),1.90(m,2H),2.30(m,2H),3.76(m,2H),5.35(m,1H),7.32(m,3H),7.69(d,1H),7.85(d,1H)。
LCMS(ESI)：[M-tBu]+m/z：计算值259.0；实测值260.0；Rt＝1.711min。
步骤2：6-(苯并噻吩-3-基)-2,3,4,5-四氢吡啶的合成
将6-(苯并噻吩-3-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(5g，15.85mmol)溶解于三氟乙酸(18.07g，158.51mmol，12.21mL)中。将所得混合物在25℃下搅拌2h(直至气体逸出结束)。将溶液的pH用10％NaOH溶液调节至8且用DCM(3*70ml)萃取。将合并的有机层用盐水(50ml)洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中蒸发，以获得6-(苯并噻吩-3-基)-2,3,4,5-四氢吡啶(3g，13.93mmol，87.90％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.60(m,2H),1.76(m,2H),2.66(m,2H),3.79(m,2H),7.36(m,2H),7.95(m,1H),8.15(s,1H),8.82(d,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值215.1；实测值216.0；Rt＝0.866min。
步骤3：2-(苯并噻吩-3-基)哌啶的合成
在0℃下，向6-(苯并噻吩-3-基)-2,3,4,5-四氢吡啶(3g，13.93mmol)于MeOH(60mL)中的溶液中分批添加硼氢化钠(1.05g，27.87mmol，985.29μL)。将所得混合物在环境温度下搅拌2h且蒸发。将残余物溶解于水(50ml)中且用DCM(3*50ml)萃取。将合并的有机层用盐水(2*40ml)洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中蒸发，以获得2-(苯并噻吩-3-基)哌啶(2.8g，12.88mmol，92.47％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.45(m,4H),1.85(m,2H),2.33(m,1H),2.71(m,1H),3.06(m,1H),3.95(m,1H),7.35(m,2H),7.50(s,1H),7.95(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值217.1；实测值218.2；Rt＝0.854min。
4P.5-甲基-2-(萘-2-基)哌啶的合成
步骤1：(2-甲基-5-(萘-2-基)-5-氧代戊基)氨基甲酸叔丁酯的合成
在氩气气氛下，将5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(3g，14.07mmol)添加到THF(50mL)和镁(341.89mg，14.07mmol，196.49μL)的混合物中。向其中添加碘(17.85mg，70.33μmol)且将所得混合物加热至回流达1h。在-78℃下，将所得混合物冷却至室温且逐滴添加到2-溴萘(2.91g，14.07mmol)于THF(50mL)中的溶液中。使所得混合物升温至室温且倒入NH4Cl水溶液中。将所得混合物用EtOAc(2x40ml)萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经Na2SO4干燥且蒸发，以获得N-[2-甲基-5-(2-萘基)-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯(5g，粗品)，其不经纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.86(d,3H),1.44(s,9H),1.78(m,3H),2.89(m,2H),3.15(m,3H),7.51(m,2H),7.89(m,2H),7.99(m,2H),8.69(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值241.2；实测值242.2；Rt＝1.524min。
步骤2：5-甲基-2-(萘-2-基)哌啶的合成将N-[2-甲基-5-(2-萘基)-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯(5g，14.64mmol)溶解于三氟乙酸(16.70g，146.44mmol，11.28mL)中且将所得混合物搅拌1h。向其中添加50％NaOH水溶液，直至pH 11-12。将所得混合物用DCM(4x40ml)萃取。将合并的有机层蒸发至干。将残余物再溶解于MeOH(50mL)中且添加硼氢化钠(554.01mg，14.64mmol，517.77μL)。将所得混合物在20℃下搅拌12h且蒸发。将50％ NaOH水溶液添加到残余物中。将所得混合物用DCM(4x40 ml)萃取，将合并的有机层蒸发至干，以获得5-甲基-2-(2-萘基)哌啶(0.5g，2.22mmol，15.15％产率)，其不经纯化即用于下一步骤。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.86(d,3H),1.15(m,1H),1.41(m,1H),1.62(m,1H),1.75(m,2H),2.31(t,1H),2.40(m,1H),3.05(d,1H),3.62(d,1H),7.51(m,3H),7.91(m,4H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值225.3；实测值226.2；Rt＝1.473min。
4Q.外消旋-2-[(2R,3R,6S)-2,3-二甲基-6-苯基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶 基)-2-氧代乙酰胺和外消旋-2-[(2S,3R,6S)-2,3-二甲基-6-苯基-1-哌啶基]-N-(5-甲基- 3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺的合成
步骤1：2,3-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
向2,3-二甲基哌啶(5g，44.17mmol)于CH2Cl2(50mL)中的搅拌溶液中逐滴添加二碳酸二-叔丁酯(10.12g，46.38mmol，10.64mL)。将所得反应混合物在20℃下搅拌12小时。12小时之后，将所得反应混合物在减压下浓缩，以获得2,3-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(9.2g，43.13mmol，97.64％产率)。
1H NMR(CDCl3,400MHz):δ(ppm)0.81(dd,1H),0.96(m,3H),1.13(dd,2H),1.27(m,2H),1.41(s,9H),1.66(m,3H),2.75(m,1H),3.93(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M+Boc]+m/z：计算值213.2；实测值158.2(t-Bu裂解的产物质量)；Rt＝1.509min。
步骤2：2,3-二甲基-6-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将2,3-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(8.2g，38.44mmol)于EtOAc(80mL)中的溶液添加到过碘酸钠(32.89g，153.76mmol)于水(80mL)中的搅拌溶液中。将氯化钌(III)单水合物(43.33mg，192.20μmol)添加到反应混合物中且将所得双相混合物在20℃下搅拌12小时。12小时之后，过滤反应混合物。将滤饼用EtOAc(2x 15mL)洗涤。将滤液用盐水洗涤，经Na2SO4干燥且在减压下蒸发，以获得2,3-二甲基-6-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(8.25g，粗品)。粗产物不经任何进一步纯化即用于下一步反应。
1H NMR(DMSO-d6,400MHz):δ(ppm)0.93(d,1.4H),1.00(d,1.6H),1.06(d,1.4H),1.19(d,1.6H),1.43(m,9H),1.60(m,1H),1.85(m,2H),2.35(m,2H),3.70(m,0.5H),4.00(m,0.5H)。
LCMS(ESI)：[M+Boc]+m/z：计算值227.2；实测值172.2(t-Bu裂解的产物质量)；Rt＝1.312min。
步骤3：N-(1,2-二甲基-5-氧代-5-苯基戊基)氨基甲酸叔丁酯的合成
在-78℃、氩气气氛下，向2,3-二甲基-6-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(9g，39.60mmol)于THF(100mL)中的搅拌溶液中逐滴添加苯基溴化镁(1M于THF中，7.18g，39.60mmol，39.6mL)。使所得反应混合物升温至室温且在同一温度下搅拌12小时。12小时之后，将反应混合物用饱和NH4Cl水溶液淬灭且用EtOAc(2x 150mL)萃取。将合并的有机相用盐水洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中蒸发，以获得N-(1,2-二甲基-5-氧代-5-苯基戊基)氨基甲酸叔丁酯(10g，32.74mmol，82.69％产率)。粗产物不经任何进一步纯化即用于下一步反应。
LCMS(ESI)：[M+Boc]+m/z：计算值305.2；实测值206.2；Rt＝1.542min。
步骤4：2,3-二甲基-6-苯基哌啶的合成
将N-(1,2-二甲基-5-氧代-5-苯基戊基)氨基甲酸叔丁酯(10g，32.74mmol)溶解于三氟乙酸(18.67g，163.71mmol，12.61mL)中且将所得反应混合物搅拌1小时。1小时之后，将50％ NaOH水溶液添加到反应混合物中，直到pH＝11-12。将所得混合物用DCM(4x 40mL)萃取。将合并的有机相经Na2SO4干燥且在减压下浓缩。将所获得的残余物溶解于MeOH(100mL)中在0℃下分批添加硼氢化钠(1.24g，32.74mmol)。将所得混合物在20℃下搅拌1小时。1小时之后，将反应混合物在减压下浓缩且将所获得的残余物用50％ NaOH水溶液稀释。将所得混合物用DCM(4x 40mL)萃取。将合并的有机相经Na2SO4干燥且在减压下浓缩，以获得2,3-二甲基-6-苯基哌啶(3g，15.85mmol，48.40％产率)。粗产物不经任何进一步纯化即用于下一步反应。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值189.2；实测值190.2；Rt＝0.854min。
4R.3-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶的合成
步骤1：N-[2-甲基-5-氧代-5-(3-吡啶基)戊基]氨基甲酸叔丁酯的合成
在-78℃、氩气气氛下，向3-溴吡啶(10g，63.29mmol，6.17mL)于Et2O(100mL)中的搅拌溶液中逐滴添加正丁基锂(2.5M于己烷中，24.05g，63.29mmol，25.3mL)。将所得混合物搅拌1小时(溶液1)。在氩气气氛下，向装备有磁性搅拌棒和温度计的单独干燥的3颈圆底烧瓶装入5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(11.25g，52.74mmol)和无水Et2O(100mL)。将溶液冷却至-78℃且在1小时期间逐滴添加溶液1，将内部温度保持低于-70℃。使所得反应混合物升温至室温且用饱和NH4Cl溶液淬灭。将水层用DCM(3x 50mL)萃取且将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩，以获得呈淡黄色油状物的N-[2-甲基-5-氧代-5-(3-吡啶基)戊基]氨基甲酸叔丁酯(12.5g，42.75mmol，81.06％产率)。粗产物不经任何进一步纯化即用于下一步反应。
LCMS(ESI)：[M+Boc]+m/z：计算值292.2；实测值237.2(t-Bu裂解的产物质量)；Rt＝1.174min。
步骤2：3-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶的合成
将N-[2-甲基-5-氧代-5-(3-吡啶基)戊基]氨基甲酸叔丁酯(12.5g，42.75mmol)于三氟乙酸(24.37g，213.77mmol，16.47mL)搅拌1小时。通过TLC确认反应完成。将50％重量/体积NaOH溶液添加到混合物，直到pH为13-14。将所得混合物用DCM(4x 20mL)萃取。将合并的有机层经MgSO4干燥且在减压下浓缩。将所获得的粗产物溶解于MeOH(125mL)中且在0℃下分批添加硼氢化钠(1.62g，42.75mmol)。将所得反应混合物搅拌过夜。然后将反应混合物用1-2M HCl酸化，直到pH为1-3且再搅拌30分钟。30分钟之后，添加NaOH溶液，直到pH为13-14且将所得混合物用DCM(4x 100mL)萃取。将合并的有机层经由Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩。通过柱色谱(Combiflash；120g SiO2，洗脱液：于MTBE中的0-30％甲醇+2％TEA；流速＝85mL/min，Rv＝7.8CV)纯化所获得的残余物，以得到呈淡黄色油状物的3-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶(1.5g，8.51mmol，19.91％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值176.2；实测值177.2；Rt＝0.537min。
4S.2-(3-氯苯基)-5-甲基哌啶的合成
步骤1：N-[5-(3-氯苯基)-2-甲基-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯的合成
在搅拌的情况下，在Ar下，向干燥的2颈烧瓶中添加镁(1.27g，52.23mmol，729.75μL)、无水THF(25mL)和5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(7.43g，34.82mmol)。添加碘(88.38mg，348.21μmol)且轻微加热混合物，直到其本身保持回流。当回流平息时，施加外部加热以使回流再保持1小时。将1-溴-3-氯苯(10g，52.23mmol，6.13mL)添加到具有温度计的干燥的3颈圆底烧瓶中。在搅拌的情况下，在Ar下，添加无水THF(25mL)且将溶液冷却至-78℃。在1小时内将格任亚试剂添加到t-Boc-内酰胺中，使内部温度保持低于-70℃。使溶液升温至室温且添加饱和NH4Cl。将水层用DCM萃取3x 50mL且将有机层合并，经Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩。获得呈淡黄色油状物的N-[5-(3-氯苯基)-2-甲基-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯(10.9g，粗品)且其不经进一步纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.93(d,3H),1.42(m,9H),1.50-1.60(m,1H),1.65-1.77(m,2H),2.97-3.05(m,4H),4.66(brs,1H),7.38(t,1H),7.50(d,1H),7.79(d,1H),7.90(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值325.2；实测值326.2；Rt＝1.601min。
步骤2：2-(3-氯苯基)-5-甲基哌啶的合成
将N-[5-(3-氯苯基)-2-甲基-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯(10.9g，33.45mmol)于三氟乙酸(13.35g，117.09mmol，9.02mL)中搅拌1h。使用TLC检查反应进展。将50％重量/体积NaOH溶液添加到混合物中，直到pH为13-14。将产物用DCM萃取4x 20mL且将有机层合并，以MgSO4干燥且蒸发。将产物溶解于水(15mL)/MeOH(150mL)混合物中且添加到烧瓶中，随后添加硼氢化钠(1.27g，33.45mmol，1.18mL)。将混合物在Ar下搅拌过夜。将混合物用1-2MHCl酸化，直到pH为1-3且静置30分钟。然后添加NaOH溶液，直到pH为13-14且将产物用DCM(4x 100mL)萃取，将有机层合并，以Na2SO4干燥，过滤且蒸发，以得到呈淡黄色油状物的2-(3-氯苯基)-5-甲基哌啶(6.05g，28.85mmol，86.24％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.88-1.12(m,3H),1.12(m,1H),1.48-1.83(m,5H),2.37(t,1H),3.10(d,1H),3.60(d,1H),7.20(brs,3H),7.35(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值209.1；实测值210.2；Rt＝0.590min。
4T.4,5-二甲基-2-苯基哌啶的合成
步骤1：4,5-二甲基-1H-吡啶-2-酮的合成
向硫酸(2.41g，24.56mmol)于水(8mL)中的搅拌溶液中添加4,5-二甲基吡啶-2-胺(1g，8.19mmol)。将所得溶液冷却至0℃且在0℃下使用加料漏斗逐滴添加亚硝酸钠(1.69g，24.56mmol，780.78μL)于水(7mL)中的溶液。将反应混合物升温至室温且在室温下再搅拌30min。然后，将所得混合物用DCM(2*30ml)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤出，且蒸发，以得到4,5-二甲基-1H-吡啶-2-酮(0.561g，4.56mmol，55.65％产率)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.91(s,3H),2.05(s,3H),6.13(s,1H),7.05(s,1H),11.14(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值123.2；实测值124.2；Rt＝1.688min。
步骤2：4,5-二甲基哌啶-2-酮的合成
将4,5-二甲基-1H-吡啶-2-酮(0.561g，4.56mmol)溶解于MeOH(5mL)和AcOH(1mL)中且添加Pd/C JM A402028-10(0.06g，4.56mmol)。将所得混合物在50℃下用H2(50atm)氢化60h。通过硅藻土过滤反应混合物且在45℃下在真空中浓缩滤液。将残余物溶解于DCM(25ml)中且用NaHCO3水溶液洗涤。将有机层经Na2SO4干燥，过滤出，且在40℃下在真空中浓缩，以得到4,5-二甲基哌啶-2-酮(0.45g，3.54mmol，77.67％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ0.96(s,6H),1.59(m,1H),2.16(m,2H),2.43(m,1H),2.95(m,1H),3.30(m,1H),6.00(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值127.2；实测值129.2；Rt＝0.467min。
步骤3：4,5-二甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将4,5-二甲基哌啶-2-酮(0.45g，3.54mmol)、二碳酸二-叔丁酯(888.03mg，4.07mmol，933.78μL)和DMAP(43.23mg，353.82μmol)溶解于MeCN(10mL)中。将反应混合物在80℃下搅拌12h。将所得混合物在真空中浓缩。将残余物溶解于DCM中且用NaHSO4水溶液洗涤。将有机相经Na2SO4干燥，过滤出，且在真空中蒸发，以得到4,5-二甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.656g，2.89mmol，81.57％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.92(m,6H),1.50(m,9H),1.60(m,1H),2.12(m,2H),2.53(m,1H),3.10(m,1H),3.75(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M-tBu]+m/z：计算值171.2；实测值172.2；Rt＝3.31min。
步骤4：N-(2,3-二甲基-5-氧代-5-苯基戊基)氨基甲酸叔丁酯的合成(
在-40℃、氩气气氛下，将溴(苯基)镁(601.77mg，3.32mmol)逐滴添加到4,5-二甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.656g，2.89mmol)于THF(15mL)中的溶液中。添加完成之后，将所得混合物在-40℃下搅拌30min，然后使其升温至室温且搅拌12h。将饱和氯化铵水溶液添加到反应混合物中且将所得混合物搅拌15min。将有机层分离且将水层用EtOAc(3*30ml)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤出，且蒸发，以得到N-(2,3-二甲基-5-氧代-5-苯基戊基)氨基甲酸叔丁酯(648mg，2.12mmol，73.52％产率)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ0.96(m,6H),1.44(s,9H),1.71(m,1H),2.33(m,1H),2.85(m,1H),3.13(m,3H),4.74(m,1H),7.46(m,2H),7.56(dd,1H),7.97(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值205.2；实测值206.4；Rt＝4.039min。
步骤5：3,4-二甲基-6-苯基-2,3,4,5-四氢吡啶的合成
将N-(2,3-二甲基-5-氧代-5-苯基戊基)氨基甲酸叔丁酯(0.648g，2.12mmol)溶解于DCM(6mL)中且逐滴添加TFA(6mL)。将反应混合物在20℃下搅拌过夜。然后，小心添加饱和碳酸钾水溶液且将混合物搅拌30min。将混合物用DCM稀释。将水层用DCM(2*25ml)洗涤，将有机相经Na2SO4干燥，过滤出，且在40℃下在真空中浓缩，以得到3,4-二甲基-6-苯基-2,3,4,5-四氢吡啶(0.388g，2.07mmol，97.64％产率)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ0.90(d,3H),0.94(m,3H),0.98(m,1H),1.06(m,1H),1.87(m,1H),2.84(m,1H),3.31(m,1H),4.03(m,1H),7.37(s,3H),7.77(s,2H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值187.2；实测值188.2；Rt＝1.490min。
步骤6：4,5-二甲基-2-苯基哌啶的合成
将3,4-二甲基-6-苯基-2,3,4,5-四氢吡啶(0.388g，2.07mmol)溶解于MeOH(5mL)中且在用冷水冷却的情况下分批添加硼氢化钠(627.04mg，16.57mmol，586.02μL)。将反应混合物加热至室温且搅拌12h。然后，添加NH4Cl(水溶液)且将甲醇蒸发，将水层用DCM(3*30ml)萃取且将合并的有机层经Na2SO4干燥。过滤出悬浮液且在45℃下在真空下蒸发，以得到4,5-二甲基-2-苯基哌啶(0.23g，1.22mmol，58.65％产率)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。4,5-二甲基-2-苯基哌啶(0.23g，1.22mmol，58.65％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.89(m,6H),1.24(m,2H),1.76(m,2H),2.43(m,1H),2.98(m,1H),3.10(m,1H),3.61(m,1H),7.31(m,5H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值189.2；实测值190.4；Rt＝2.024min。
4U.2-[4-(二氟甲基)苯基]-5-甲基哌啶的合成
步骤1：N-[5-[4-(二氟甲基)苯基]-2-甲基-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯的合成
在-78℃下，在30min时段内，向1-溴-4-(二氟甲基)苯(4.6g，22.22mmol)于THF(25mL)中的溶液中逐滴添加正丁基锂(6.19g，22.22mmol，8.93mL，23％纯度)。将反应物质在-78℃下搅拌1h且在同一温度下添加5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.74g，22.22mmol)且将反应物在-78℃下再搅拌1h。完成之后，使反应混合物升温至0℃且用饱和氯化铵溶液处理并用乙酸乙酯萃取。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤且在减压下浓缩，以得到N-[5-[4-(二氟甲基)苯基]-2-甲基-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯(7.2g，21.09mmol，94.91％产率)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ0.94(m,3H),1.43(m,9H),1.69(m,2H),2.35(m,2H),3.04(m,2H),4.71(m,2H),7.50(m,2H),7.59(m,2H),8.04(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值241.2；实测值242.2；Rt＝1.564min。
步骤2：2-[4-(二氟甲基)苯基]-5-甲基哌啶的合成
将N-[5-[4-(二氟甲基)苯基]-2-甲基-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯(8.8g，25.78mmol)于三氟乙酸(14.70g，128.88mmol，9.93mL)中搅拌1h。使用TLC检查反应进展。将50％重量/体积NaOH溶液添加到混合物中，直到pH为13-14。将产物用DCM萃取4x 20mL且将有机层合并，以MgSO4干燥且蒸发。将产物溶解于MeOH(50mL)/水(50mL)混合物中且添加到烧瓶中，随后添加硼氢化钠(975.20mg，25.78mmol，911.40μL)。将混合物在Ar下搅拌过夜。将混合物用1-2M HCl酸化，直到pH为1-3且静置30分钟。然后添加NaOH溶液，直到pH为13-14且将产物用DCM(4x 100mL)萃取，将有机层合并，以Na2SO4干燥，过滤且蒸发。通过CC(Companion combiflash，120gSiO2，乙腈/甲醇，其中甲醇为0～5％，流速＝85mL/min，Rv＝4CV)纯化残余物，以得到呈淡黄色油状物的2-[4-(二氟甲基)苯基]-5-甲基哌啶(0.63g，2.80mmol，10.85％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ0.92(d,3H),1.17(m,1H),1.84(m,5H),2.43(m,1H),3.16(m,1H),3.62(m,1H),7.47(s,4H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值225.2；实测值226.2；Rt＝0.890min。
4V.5-甲基-2-苯基哌啶的合成
步骤1：(2-甲基-5-氧代-5-苯基戊基)氨基甲酸叔丁酯的合成
在搅拌的情况下，向干燥的2颈烧瓶中添加THF(300mL)和5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(30g，140.66mmol)且将溶液冷却至-78℃。在1小时内将苯基溴化镁(255.04g，211.00mmol，260.25mL)试剂添加到t-boc-内酰胺中，将内部温度保持低于-70℃。将溶液升温至室温且添加饱和NH4Cl。将水层用DCM萃取3x 50mL且将有机层合并，经Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩。获得呈淡黄色油状物的N-(2-甲基-5-氧代-5-苯基戊基)氨基甲酸叔丁酯(41g，粗品)且其不经进一步纯化即用于下一步骤。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.96(d,3H),1.45(s,9H),1.68(m,1H),1.72(m,1H),1.85(m,1H),3.05(m,4H),4.71(m,1H),7.45(t,2H),7.55(t,1H),7.96(d,2H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值191.2；实测值192.2；Rt＝1.486min。
步骤2：5-甲基-2-苯基哌啶的合成
将N-(2-甲基-5-氧代-5-苯基戊基)氨基甲酸叔丁酯(41g，140.71mmol)于三氟乙酸(80.22g，703.54mmol，54.20mL)中搅拌1h。使用TLC检查反应进展。将50％重量/体积NaOH溶液添加到混合物中，直到pH为13-14。将产物用DCM萃取4x 20mL且将有机层合并，以MgSO4干燥且蒸发。将产物溶解于MeOH(500mL)/水(100mL)混合物中且添加到烧瓶中，随后添加硼氢化钠(5.32g，140.71mmol，4.98mL)。将混合物在Ar下搅拌过夜。将混合物用1-2M HCl酸化，直到pH为1-3且静置30分钟。然后添加NaOH溶液，直到pH为13-14且将产物用DCM(4x100mL)萃取，将有机层合并，用Na2SO4干燥，过滤且蒸发，以得到呈淡黄色油状物的5-甲基-2-苯基哌啶(21.2g，粗品)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)0.87(d,3H),1.14(m,1H),1.56(m,2H),1.81(m,3H),2.40(t,1H),3.11(d,1H),3.53(d,1H),7.29(m,5H)。
LCMS(ESI)：[M+1]m/z：计算值175.2；实测值176.2；Rt＝0.779min。
4W.2-(5-甲基-2-(4-(三氟甲基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酸的合成
步骤1：(2-甲基-5-氧代-5-(4-(三氟甲基)苯基)戊基)氨基甲酸叔丁酯的合成
在搅拌的情况下，在Ar下，向干燥的2颈烧瓶中添加镁(1.08g，44.44mmol，620.80μL)、无水THF(50mL)和1-溴-4-(三氟甲基)苯(10g，44.44mmol，6.21mL)。添加碘(433.85mg，1.71mmol)且轻微加热混合物，直到其自身保持回流。当回流平息时，施加外部加热以再保持回流1h。将5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(7.29g，34.19mmol)添加到具有温度计的干燥的3颈圆底烧瓶中。在搅拌的情况下，在Ar下，添加无水THF(50mL)且将溶液冷却至-78℃。在1h内将格任亚试剂添加到t-boc-内酰胺中，使内部温度保持低于-70℃。使溶液升温至室温且添加饱和NH4Cl。将水层用DCM萃取3x50 mL且将有机层合并，经Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩。获得呈淡黄色油状物的N-[2-甲基-5-氧代-5-[4-(三氟甲基)苯基]戊基]氨基甲酸叔丁酯(13g，粗品)且其不经进一步纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)0.93(d,3H),1.43(s,9H),1.80(m,3H),3.05(m,3H),4.12(m,1H),5.12(m,1H),7.71(m,2H),8.05(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值259.2；实测值260.2；Rt＝1.605min。
步骤2：5-甲基-2-(4-(三氟甲基)苯基)哌啶的合成
将N-[2-甲基-5-氧代-5-[4-(三氟甲基)苯基]戊基]氨基甲酸叔丁酯(13g，36.17mmol)于三氟乙酸(20.62g，180.87mmol，13.93mL)中搅拌1h。使用TLC检查反应进展。将50％重量/体积NaOH溶液添加到混合物中，直到pH为13-14。将产物用DCM萃取4x 20mL且将有机层合并，以MgSO4干燥且蒸发。将产物溶解于水(50mL)/MeOH(125mL)混合物中且添加到烧瓶中，随后添加硼氢化钠(1.37g，36.17mmol，1.28mL)。将混合物在Ar下搅拌过夜。将混合物用1-2M HCl酸化，直到pH为1-3且静置30分钟。然后添加NaOH溶液，直到pH为13-14且将产物用DCM(4x 100mL)萃取，将有机层合并，以Na2SO4干燥，过滤且蒸发。通过CC(Interchim，120g SiO2，己烷/MTBE，其中MTBE为15～55％，流速＝85ml/min，RV＝5,5CV.)纯化残余物，以得到呈淡黄色油状物的5-甲基-2-[4-(三氟甲基)苯基]哌啶(3.4g，13.98mmol，38.64％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.91(d,3H),1.16(m,1H),1.79(m,5H),2.43(m,1H),3.15(m,1H),3.70(m,1H),7.48(m,2H),7.58(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值243.2；实测值244.2；Rt＝1.082min。
步骤3：2-(5-甲基-2-(4-(三氟甲基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯的合成
在-10℃下，将2-氯-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(783.11mg，4.11mmol)逐滴添加到5-甲基-2-[4-(三氟甲基)苯基]哌啶(1g，4.11mmol)和TEA(415.96mg，4.11mmol，572.95μL)于THF(20mL)中的溶液中。将所得混合物升温至室温且搅拌12h。过滤出所得沉淀。蒸发滤液，以获得2-[5-甲基-2-[4-(三氟甲基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(1.3g，3.27mmol，79.60％产率)，其不经纯化即用于下一步骤。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.96(d,3H),1.48(m,1H),1.56(m,2H),1.98(m,1H),2.12(m,2H),3.21(m,1H),3.98(m,1H),5.12(s,2H),7.48(m,2H),7.78(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值397.2；实测值398.2；Rt＝1.600min。
步骤4：2-(5-甲基-2-(4-(三氟甲基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酸的合成
将98％氢氧化锂单水合物(137.30mg，3.27mmol，90.93μL)添加到2-[5-甲基-2-[4-(三氟甲基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(1.3g，3.27mmol)于THF(20mL)和水(2mL)中的溶液中，且将所得混合物在20℃下搅拌12h。将所得混合物蒸发至干，以获得2-[5-甲基-2-[4-(三氟甲基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酸(0.9g，2.79mmol，85.36％产率，Li+)，其不经纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.96(d,3H),1.36(m,1H),1.52(m,1H),1.86(m,1H),2.12(m,2H),2.38(m,1H),2.98(m,1H),3.76(m,1H),5.36(m,1H),7.48(m,1H),7.68(m,3H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值315.2；实测值316.2；Rt＝1.384min。
4X.2-(5-甲基-2-(3-(三氟甲基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酸的合成
步骤1：(2-甲基-5-氧代-5-(3-(三氟甲基)苯基)戊基)氨基甲酸叔丁酯的合成
在氩气气氛下，将1-溴-3-(三氟甲基)苯(10g，44.44mmol，6.21mL)添加到THF(100mL)和Mg(1.19g，48.89mmol，682.88μL)的混合物中。向其中添加碘(112.80mg，444.43μmol)且将所得混合物加热至回流达1h。在-78℃下，将所得混合物冷却至室温且逐滴添加到5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(9.48g，44.44mmol)于THF(100mL)中的溶液中。使所得混合物升温至室温然后倒入NH4Cl水溶液中。将所得混合物用EtOAc(2x40 ml)萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经Na2SO4干燥且蒸发，以获得N-[2-甲基-5-氧代-5-[3-(三氟甲基)苯基]戊基]氨基甲酸叔丁酯(10g，27.83mmol，62.61％产率)，其不经纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.86(d,3H),1.42(s,9H),1.62(m,1H),1.78(m,1H),2.06(m,1H),2.82(m,1H),3.12(m,2H),3.78(m,1H),5.55(m,1H),7.57(m,4H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值259.2；实测值260.2；Rt＝1.585min。
步骤2：5-甲基-2-(3-(三氟甲基)苯基)哌啶的合成
将N-[2-甲基-5-氧代-5-[3-(三氟甲基)苯基]戊基]氨基甲酸叔丁酯(10g，27.83mmol)溶解于TFA(31.73g，278.26mmol，21.44mL)中且将所得混合物搅拌1h。向其中添加50％ NaOH水溶液，直至pH11-12。将所得混合物用DCM(4x40 l)萃取，将合并的有机层蒸发至干。将残余物溶解于MeOH(50mL)中且添加硼氢化钠(1.05g，27.83mmol，983.84μL)。将所得混合物在20℃下搅拌12h且蒸发。将50％NaOH水溶液添加到残余物中。将所得混合物用DCM(4x40 ml)萃取，将合并的有机层蒸发至干，以获得5-甲基-2-[3-(三氟甲基)苯基]哌啶(2g，8.22mmol，29.55％产率)，其不经纯化即用于下一步骤。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.86(d,3H),1.12(m,1H),1.26(m,1H),1.52(m,1H),1.78(m,2H),2.24(t,1H),2.98(d,1H),3.56(d,1H),7.53(m,2H),7.68(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值243.2；实测值244.2；Rt＝0.969min。
步骤3：2-(5-甲基-2-(3-(三氟甲基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯的合成
在-10℃下，将2-氯-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(783.11mg，4.11mmol)逐滴添加到5-甲基-2-[3-(三氟甲基)苯基]哌啶(1g，4.11mmol)和TEA(415.96mg，4.11mmol，572.95μL)于THF(20mL)中的溶液中。将所得混合物升温至室温且搅拌12h。过滤出所得沉淀。蒸发滤液，以获得2-[5-甲基-2-[3-(三氟甲基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(1.3g，3.27mmol，79.60％产率)，其不经纯化即用于下一步骤。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.96(d,3H),1.48(m,1H),1.68(m,1H),1.98(m,1H),2.12(m,2H),3.36(m,3H),5.52(s,2H),7.68(m,4H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值397.2；实测值398.2；Rt＝1.502min。
步骤4：2-(5-甲基-2-(3-(三氟甲基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酸的合成
将98％氢氧化锂单水合物(137.30mg，3.27mmol，90.93μL)添加到2-[5-甲基-2-[3-(三氟甲基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(1.3,3.27mmol)于水(2mL)和THF(20mL)中的溶液中且将所得混合物在20℃下搅拌12h。将所得混合物蒸发至干，以获得2-[5-甲基-2-[3-(三氟甲基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酸(0.9，2.79mmol，85.36％产率，Li+)，其不经纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.96(d,3H),1.48(m,2H),2.12(m,2H),2.48(m,1H),3.02(m,1H),3.36(m,2H),5.25(m,1H),7.56(m,4H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值315.2；实测值316.2；Rt＝1.165min。
4Y.2-异丙基-5-甲基哌啶的合成
步骤1：N-(2,5-二甲基-4-氧代己基)氨基甲酸叔丁酯的合成
向镁(2.56g，105.22mmol，1.47mL)于THF(100mL)中的悬浮液中添加2-溴丙烷(12.94g，105.22mmol)。将反应混合物搅拌45分钟，以得到灰色溶液。在-78℃下，将新鲜制备的格任亚试剂逐滴添加到5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(20.4g，95.65mmol)于THF(200mL)中的预冷却悬浮液中。将反应混合物在-78℃下搅拌1小时。1小时之后，使反应混合物升温至室温且搅拌12小时。12小时之后，将反应物用MTBE(500mL)稀释且用100mL饱和氯化铵水溶液缓慢淬灭。将有机相用饱和碳酸氢钠溶液(2x 200mL)洗涤。将合并的水性级分用MTBE反萃取。将合并的有机相经Na2SO4干燥且在减压下浓缩。通过柱色谱纯化粗产物，以获得呈淡黄色液体的N-(2,5-二甲基-4-氧代己基)氨基甲酸叔丁酯(6.79g，27.91mmol，29.18％产率)。
1H NMR(CDCl3,400MHz):δ(ppm)0.88(m,3H),1.07(m,6H),1.42(m,10H),1.62(m,3H),2.46(m,2H),2.58(m,1H),2.97(m,2H),4.63(brs,1H)。
步骤2：6-异丙基-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶的合成
将N-(2,5-二甲基-4-氧代己基)氨基甲酸叔丁酯(6.79g，27.91mmol)于TFA(30mL)和DCM(30mL)的溶液在25℃下搅拌12小时。12小时之后，添加饱和硫酸钠水溶液(50mL)，然后将其用DCM(2x50mL)萃取。将合并的有机相经Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩，以获得呈淡黄色油状物的6-异丙基-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶(3.6g，25.86mmol，92.65％产率)。粗产物不经任何进一步纯化即用于下一步反应。
1H NMR(CDCl3,400MHz):δ(ppm)0.88(m,3H),1.19(m,6H),1.40(m,1H),1.53(m,1H),1.72(m,1H),2.07(m,2H),2.21(m,1H),2.98(m,1H),3.65(d,1H)。
步骤3：2-异丙基-5-甲基哌啶的合成
将硼氢化钠(1.96g，51.71mmol)分批添加到6-异丙基-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶(3.6g，25.86mmol)于甲醇(72mL)中的溶液中。将混合物在室温下搅拌12小时。12小时之后，添加水(50mL)且将所得混合物用EtOAc(2x 50mL)萃取。将合并的有机相经硫酸钠干燥，过滤。添加于二噁烷中的HCl(50mL)且将所得溶液在减压下浓缩，以获得呈黄色油状物的2-异丙基-5-甲基哌啶(4g，粗品，盐酸盐)。粗产物不经任何进一步纯化即用于下一步反应。
1H NMR(DMSO-d6,400MHz):δ(ppm)0.93(m,9H),1.08(m,1H),1.34(m,1H),1.84(m,4H),2.45(m,1H),2.68(m,1H),3.07(m,1H),8.90(brs,2H)。
4Z.2-(4-叔丁基环己基)-5-甲基哌啶的合成
步骤1：6-(4-叔丁基环己烯-1-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(7.19g，20.82mmol)、2-(4-叔丁基环己烯-1-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(5g，18.92mmol))和碳酸钠(6.02g，56.77mmol)于1,4-二噁烷(90mL)和水(30mL)中的搅拌溶液用氩气吹扫。然后，在氩气下添加Pd(dppf)Cl2(772.71mg，946.22μmol)。将反应混合物在氩气、80℃下搅拌14小时。14小时之后，将反应混合物冷却且过滤。将滤饼用1.4-二噁烷(2x20mL)洗涤且丢弃。在真空中蒸发滤液且通过柱色谱纯化残余物，以得到呈无色油状物的6-(4-叔丁基环己烯-1-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(3.10g，9.30mmol，49.12％产率)。
LCMS(ESI)：[M+Boc]+m/z：计算值333.3；实测值278.2(t-Bu裂解的产物质量)；Rt＝1.903min。
步骤2：6-(4-叔丁基环己烯-1-基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶的合成
将6-(4-叔丁基环己烯-1-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(3.1g，9.30mmol)溶解于三氟乙酸(30g，263.10mmol，20.27mL)中。将所得反应混合物在25℃下搅拌3小时。3小时之后，将反应混合物冷却至0℃且逐滴添加20％ NaOH水溶液。将所得悬浮液用二氯甲烷(2x 100mL)萃取。将合并的有机相用水(100mL)洗涤，经Na2SO4干燥且在减压下蒸发，以得到呈无色油状物的6-(4-叔丁基环己烯-1-基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶(2.1g，9.00mmol，96.80％产率)。粗产物不经任何进一步纯化即用于下一步反应。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值233.2；实测值234.2；Rt＝1.045min。
步骤3：2-(4-叔丁基环己烯-1-基)-5-甲基哌啶的合成
在0℃下，向6-(4-叔丁基环己烯-1-基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶(2.1g，9.00mmol)于MeOH(30mL)中的搅拌溶液中分批添加硼氢化钠(1.02g，26.99mmol，954.42μL)。将所得反应混合物在25℃下搅拌4小时。4小时之后，在减压下浓缩反应混合物。将所获得的残余物用水(80mL)稀释且用DCM(2x 100mL)萃取。将合并的有机相用盐水洗涤，经Na2SO4干燥且在减压下浓缩，以得到呈无色油状物的2-(4-叔丁基环己烯-1-基)-5-甲基哌啶(2g，8.50mmol，94.42％产率)。粗产物不经任何进一步纯化即用于下一步反应。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值235.2；实测值236.2；Rt＝1.222min。
步骤4：2-(4-叔丁基环己基)-5-甲基哌啶的合成
将2-(4-叔丁基环己烯-1-基)-5-甲基哌啶(2g，8.50mmol)于甲醇(50mL)中的溶液在钯(10％于碳上)(0.2g)上在氢气气氛、25℃下氢化72小时。完成之后，将反应混合物过滤，将滤饼用甲醇洗涤且在减压下浓缩滤液，以得到呈淡黄色胶状物的2-(4-叔丁基环己基)-5-甲基哌啶(1.5g，6.32mmol，74.36％产率)。粗产物不经任何进一步纯化即用于下一步反应。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值237.3；实测值238.2；Rt＝1.267min。
4AA.2-环丁基-5-甲基哌啶的合成
步骤1：N-(4-环丁基-2-甲基-4-氧代丁基)氨基甲酸叔丁酯的合成
向镁(3.13g，128.94mmol，1.80mL)于THF(200mL)中的悬浮液中添加环丁基溴(17.41g，128.94mmol)。将反应混合物搅拌45分钟，以得到灰色溶液。在-78℃下，将新鲜制备的格任亚试剂逐滴添加到5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(25g，117.22mmol)于THF(100mL)中的预冷却悬浮液中。将反应混合物在-78℃下搅拌1小时。1小时之后，使反应混合物升温至室温且搅拌12小时。12小时之后，将反应物用MTBE(500mL)稀释且用100mL饱和氯化铵水溶液缓慢淬灭。将有机相用饱和碳酸氢钠溶液(2x 200mL)洗涤。将合并的水性级分用MTBE反萃取。将合并的有机相经Na2SO4干燥且在减压下浓缩。通过柱色谱纯化粗产物，以获得呈无色液体的N-(4-环丁基-2-甲基-4-氧代丁基)氨基甲酸叔丁酯(3.9g，15.27mmol，13.03％产率)。
1H NMR(CDCl3,400MHz):δ(ppm)0.85(m,3H),1.42(m,10H),1.59(m,3H),1.86(m,2H),2.16(m,4H),2.34(m,2H),2.98(m,2H),3.23(m,1H),4.61(brs,1H)。
步骤2：6-环丁基-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶的合成
将N-(4-环丁基-2-甲基-4-氧代丁基)氨基甲酸叔丁酯(3.9g，15.27mmol)于TFA(20mL)和DCM(20mL)中的溶液在25℃下搅拌12小时。12小时之后，添加饱和硫酸钠水溶液(50mL)，然后将其用DCM(2x 50mL)萃取。将合并的有机相经Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩，以获得呈淡黄色油状物的6-环丁基-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶(2.6g，粗品)。粗产物不经任何进一步纯化即用于下一步反应。
1H NMR(CDCl3,400MHz):δ(ppm)0.89(m,3H),1.19(m,1H),1.54(m,1H),1.72(m,2H),1.88(m,1H),2.09(m,6H),2.96(m,2H),3.72(d,1H)。
步骤3：2-环丁基-5-甲基哌啶的合成
将硼氢化钠(1.30g，34.38mmol，1.22mL)分批添加到6-环丁基-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶(2.6g，17.19mmol)于甲醇(30mL)中的溶液中。将混合物在室温下搅拌12小时。12小时之后，添加水(50mL)且将所得混合物用EtOAc(2x 50mL)萃取。将合并的有机相经硫酸钠干燥，过滤且在减压下浓缩，以获得呈淡黄色液体的2-环丁基-5-甲基哌啶(1.56g，粗品)。粗产物不经任何进一步纯化即用于下一步反应。
1H NMR(CDCl3,400MHz):δ(ppm)0.81(m,3H),0.92(m,2H),1.43(m,2H),1.68(m,7H),1.92(m,4H),2.17(m,4H),2.98(d,1H)。
4BB.外消旋-3-氯-5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)吡啶的合成
步骤1：(5-(5-氯吡啶-3-基)-2-甲基-5-氧代戊基)氨基甲酸叔丁酯的合成
将3-溴-5-氯吡啶(5g，25.98mmol)溶解于THF(30mL)中且在Ar下冷却至-78℃。逐滴添加异丙基氯化镁氯化锂(1.3M，9.70mL)，保持温度接近-78℃。在添加试剂之后，使反应混合物升温至室温且在同一温度下搅拌3h，随后缓慢添加5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(5.54g，25.98mmol)于EtOAc(50mL)中的溶液且使反应混合物缓慢升温至室温。反应完成之后，将混合物倒入10％ NH4Cl水溶液中且用EtOAc(30mL)萃取三次。蒸发合并的有机溶剂且通过CC(ОК.Interchim，330g SiO2，石油醚/MTBE，其中MTBE为10～100％，流速＝135mL/min，Rv＝11-12CV)纯化，得到N-[5-(5-氯-3-吡啶基)-2-甲基-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯(4.5g，13.77mmol，52.99％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)0.98(d,3H),1.42(s,9H),1.77(m,3H),3.02(m,4H),4.67(m,1H),8.17(s,1H),8.71(s,1H),9.00(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值226.2；实测值227.2；Rt＝1.316min。
步骤2：5'-氯-5-甲基-3,4,5,6-四氢-2,3'-联吡啶的合成
将N-[5-(5-氯-3-吡啶基)-2-甲基-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯(4.5g，13.77mmol)溶解于DCM(40mL)中，随后添加TFA(3.14g，27.54mmol，2.12mL)且搅拌3h。反应完成(气体逸出停止)之后，将混合物用50％ NaOH水溶液碱化至pH＝14。分离各层，且另外用DCM(3*20mL)萃取上层。将合并的有机层经Na2SO4干燥且在减压下蒸发，以得到3-氯-5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)吡啶(2.5g，11.98mmol，87.00％产率)，其不经纯化即用于下一步骤。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值208.2；实测值209.2；Rt＝0.493min。
步骤3：外消旋-3-氯-5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)吡啶的合成
将3-氯-5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)吡啶(2.5g，11.98mmol)溶解于MeOH(5mL)中且冷却至0℃。将硼氢化钠(906.44mg，23.96mmol，847.14μL)分批添加到所获得的混合物中且再搅拌过夜。反应完成之后，将反应混合物用10％ HCl水溶液酸化至pH＝2，用MTBE洗涤(2*10mL)，用10％ NaOH水溶液碱化至pH＝10且用DCM(20mL)萃取。蒸发溶剂，得到纯的3-氯-5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]吡啶(2.2g，10.44mmol，87.16％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.96(d,3H),1.12(m,1H),1.78(m,5H),2.42(m,1H),3.12(m,1H),3.61(m,1H),7.72(s,1H),8.48(s,2H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值210.2；实测值211.2；Rt＝0.631min。
4CC.2-(3,5-二氯苯基)-5-甲基哌啶的合成
步骤1.N-[5-(3,5-二氯苯基)-2-甲基-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(241.77mg，1.16mmol)和5-(5-甲基-2-哌啶基)-1H-吡唑并[4,3-b]吡啶(0.25g，1.16mmol)混合于DMF(20mL)中。将反应悬浮液冷却至0℃且添加HATU(439.51mg，1.16mmol)，随后添加TEA(116.97mg，1.16mmol，161.11μL)，且在环境温度下搅拌12h。在真空中蒸发反应混合物且通过制备型(25-45％1-6min水-甲醇(NH3 0.1％)，流速30ml/min)纯化所获得的0.48g粗产物，以得到产物5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.14g，343.62μmol，29.73％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.92(m,3H),1.42(s,13H),1.67-1.82(m,2H),2.95(m,2H),4.68(m,1H),7.21(m,1H),7.82(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值360.0；实测值360.2；Rt＝1.683min。
步骤2.2-(3,5-二氯苯基)-5-甲基哌啶的合成
将N-[5-(3,5-二氯苯基)-2-甲基-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯(12g，33.31mmol)于三氟乙酸(18.99g，166.54mmol，12.83mL)中搅拌1h。使用TLC检查反应进展。将50％重量/体积NaOH溶液添加到混合物中，直到pH为13-14。将产物用DCM萃取4x 20mL且将有机层合并，以MgSO4干燥且蒸发。将产物溶解于水(25mL)/MeOH(150mL)混合物中且添加到烧瓶中，随后添加硼氢化钠(1.26g，33.31mmol，1.18mL)。将混合物在Ar下搅拌过夜。将混合物用1-2M HCl酸化，直到pH为1-3且静置30分钟。然后添加NaOH溶液，直到pH为13-14且将产物用DCM(4x 100mL)萃取，将有机层合并，以Na2SO4干燥，过滤且蒸发。通过CC(Interchim，120gSiO2，己烷/MTBE，其中MTBE为0～100％，流速＝85ml/min，RV＝6,9CV.)纯化残余物，以得到呈淡黄色油状物的2-(3,5-二氯苯基)-5-甲基哌啶(2.9g，11.88mmol，35.66％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.88(d,3H),1.13(m,1H),1.45(dd,1H),1.63(m,2H),1.77(d,1H),1.85(d,1H),2.38(dd,1H),3.11(d,1H),3.60(d,1H),7.21(s,1H),7.26(s,2H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值243.0；实测值244.2；Rt＝0.978min。
4DD.2-甲基-5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]吡啶的合成
步骤1：N-[2-甲基-5-(6-甲基-3-吡啶基)-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将5-溴-2-甲基吡啶(3g，17.44mmol)溶解于THF(30mL)中且在Ar下冷却至-78℃。逐滴添加丁基锂(2.5M，7.67mL)，保持温度为约-78℃。添加试剂之后，将反应混合物在同一温度下搅拌0.5h，随后缓慢添加5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(3.72g，17.44mmol)于THF(10mL)中的溶液且使反应混合物缓慢升温至室温。反应完成之后，将混合物倒入10％NH4Cl水溶液中且用EtOAc(50mL)萃取三次。蒸发合并的有机溶剂，得到粗品N-[2-甲基-5-(6-甲基-3-吡啶基)-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯(7g，粗品)，其不经纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.02(m,3H),1.24(s,9H),1.46(m,2H),1.86(m,2H),2.59(m,3H),2.67(m,3H),4.72(m,1H),7.24(s,1H),8.09(s,1H),9.02(s,1H)。
步骤2：2-甲基-5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)吡啶的合成
将N-[2-甲基-5-(6-甲基-3-吡啶基)-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯(7g，22.85mmol)溶解于DCM(30mL)中，随后添加TFA(5.21g，45.69mmol，3.52mL)且搅拌3h。反应完成(气体逸出停止)之后，将混合物用50％ NaOH水溶液碱化至pH 14。分离各层，且另外用DCM(3*20mL)萃取上层。将合并的有机层经Na2SO4干燥且在减压下蒸发，以得到2-甲基-5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)吡啶(3.5g，粗品)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.04(m,3H),1.21(m,2H),1.91(m,2H),3.71(m,3H),3.21(m,2H),4.01(m,1H),7.12(s,1H),7.98(s,1H),8.78(s,1H)。
步骤3：2-甲基-5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]吡啶的合成
将2-甲基-5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)吡啶(2.92g，15.51mmol)溶解于甲醇(20mL)中且冷却至0℃。将硼氢化钠(1.17g，31.02mmol，1.10mL)分批添加到所获得的混合物且再搅拌过夜。反应完成之后，将反应混合物用10％ HCl水溶液酸化至pH 2，用MTBE洗涤(2*10mL)，用10％ NaOH水溶液碱化至pH 10且用DCM(40mL)萃取。蒸发溶剂且通过硅胶柱色谱(Companion；120g SiO2；MtBE/甲醇，其中甲醇为0至20％，流速＝85ml/min，Rv＝10-11cv.)纯化，产生纯的2-甲基-5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]吡啶(0.7g，3.68mmol，23.72％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ0.94(m,3H),1.07(m,1H),1.72(m,5H),2.41(m,1H),2.55(s,3H),3.05(m,1H),3.55(m,1H),7.03(s,1H),7.56(s,1H),8.41(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值190.2；实测值191.2；Rt＝0.458min。
4EE.外消旋-(2S,4R)-4-乙基-2-苯基哌啶的合成
步骤1：4-乙基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
向4-乙基哌啶-2-酮(5g，39.31mmol)于DCM(1000mL)中的搅拌溶液中添加DMAP(48.03mg，393.13μmol)。将所得反应混合物加热至回流。在48小时内逐滴添加二碳酸二-叔丁酯(17.16g，78.63mmol，18.04mL)。完成之后，将反应混合物在减压下浓缩，以得到4-乙基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(10g，粗品)。粗产物不经任何进一步纯化即用于下一步反应。
步骤2：N-[6-氧代-6-(2-噻吩基)己基]氨基甲酸叔丁酯的合成
在-78℃、氩气气氛下，向4-乙基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(5g，22.00mmol)于THF(50mL)中的搅拌溶液中逐滴添加苯基氯化镁(1M于THF中，3.99g，22.00mmol，22mL)。使反应混合物缓慢升温至室温。完成之后，将反应混合物用饱和NH4Cl水溶液淬灭且用EtOAc(3x 100mL)萃取。将合并的有机相用盐水(3x 30mL)洗涤，经Na2SO4干燥且在减压下蒸发，以得到N-(3-乙基-5-氧代-5-苯基戊基)氨基甲酸叔丁酯(2.5g，8.19mmol，37.21％产率)。粗产物不经任何进一步纯化即用于下一步反应。
步骤3：4-乙基-6-苯基-2,3,4,5-四氢吡啶的合成
向N-(3-乙基-5-氧代-5-苯基戊基)氨基甲酸叔丁酯(2.5g，8.19mmol)于DCM(20mL)中的搅拌溶液中添加TFA(1.87g，16.37mmol，1.26mL)。将所得反应混合物在室温下搅拌3小时。完成之后，将反应混合物用50％ NaOH水溶液碱化至pH＝14。将所得悬浮液用DCM(3x 20mL)萃取。将合并的有机相经Na2SO4干燥且在减压下浓缩，以得到4-乙基-6-苯基-2,3,4,5-四氢吡啶(1.4g，7.48mmol，91.32％产率)。粗产物不经任何进一步纯化即用于下一步反应。
步骤4：外消旋-(2S,4R)-4-乙基-2-苯基哌啶的合成
在0℃下，将硼氢化钠(282.80mg，7.48mmol，264.30μL)分批添加到4-乙基-6-苯基-2,3,4,5-四氢吡啶(1.4g，7.48mmol)于MeOH和H2O中的搅拌溶液中。将所得反应混合物在室温下搅拌过夜。完成之后，将反应混合物用10％ HCl水溶液酸化至pH＝2，用MTBE(2x10mL)洗涤。将水层用10％ NaOH水溶液碱化至pH＝10且用DCM萃取。将有机层经Na2SO4干燥且在减压下浓缩，以获得外消旋-(2S,4R)-4-乙基-2-苯基哌啶(0.8g，4.23mmol，56.53％产率)。
5.由吡啶合成
5A.2-(3,4-二甲基苯基)-5-甲基哌啶的合成
步骤1：2-(3,4-二甲基苯基)-5-甲基吡啶的合成
向2-溴-5-甲基吡啶(1g，5.81mmol)和(3,4-二甲基苯基)硼酸(1.05g，6.98mmol)于二噁烷(20mL)中的搅拌溶液中添加碳酸铯(7.58g，23.25mmol)。将所得悬浮液用氩气脱气。添加99.8％(基于金属)四(三苯基膦)钯(0)(335.87mg，290.66μmol)。将反应混合物在65℃下搅拌过夜。完成之后，过滤反应混合物且在真空中蒸发滤液，以得到油状残余物。通过反相HPLC(49％，水-乙腈，0.5-8.5min；流速：30mL/min；装载泵：4mL/min，乙腈；柱：SunFire 100*19mm，5um)纯化残余物，以得到2-(3,4-二甲基苯基)-5-甲基吡啶(0.78g，3.95mmol，68.02％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,400MHz):δ(ppm)2.25(s,3H),2.29(s,3H),2.30(s,3H),7.21(d,1H),7.64(dd,1H),7.77(m,2H),7.85(s,1H),8.46(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值197.2；实测值198.2；Rt＝2.588min。
步骤2：2-(3,4-二甲基苯基)-5-甲基哌啶的合成
将2-(3,4-二甲基苯基)-5-甲基吡啶(0.78g，3.95mmol)于MeOH(20mL)中的溶液在5％ Pd(OH)2/C(488.01mg，3.95mmol)上在100atm H2压力、50℃下氢化18小时。完成之后，过滤反应混合物，将残余物用MeOH(10mL)洗涤且在减压下浓缩滤液，以获得2-(3,4-二甲基苯基)-5-甲基哌啶(0.7g，3.44mmol，87.07％产率)。粗产物不经任何进一步纯化即用于下一步反应。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值203.2；实测值204.2；Rt＝0.901min
5B.1-(4-(3-(哌啶-2-基)苯基)哌啶-1-基)乙酮的合成
步骤1：1-(4-(3-溴苯基)哌啶-1-基)乙酮的合成
在0℃下，向4-(3-溴苯基)哌啶(20g，72.31mmol，HCl)和三乙胺(18.29g，180.77mmol，25.20mL)于DCM(250mL)中的溶液中逐滴添加乙酰氯(6.81g，86.77mmol，5.28mL)。将所得混合物在25℃下搅拌12h且用水(70ml)稀释。将有机层分离，用盐水(3*50ml)洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中蒸发，以获得1-[4-(3-溴苯基)-1-哌啶基]乙酮(19.3g，68.40mmol，94.59％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)1.59(m,2H),1.88(m,2H),2.13(s,3H),2.59(t,1H),2.71(t,1H),3.15(t,1H),3.92(d,1H),4.78(d,1H),7.12(d,1H),7.18(t,1H),7.34(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值282.2；实测值283.2；Rt＝1.277min。
步骤2：1-(4-(3-(吡啶-2-基)苯基)哌啶-1-基)乙酮的合成
将1-[4-(3-溴苯基)-1-哌啶基]乙酮(8g，28.35mmol)、三丁基(2-吡啶基)甲锡烷(11.48g，31.19mmol，10.07mL)和99.8％(基于金属)四(三苯基膦)钯(0)(Pd 9％min)(1.64g，1.42mmol)于甲苯(150mL)中的溶液在在Ar气氛、100℃下加热18h。在真空中蒸发溶剂且通过梯度色谱(DCM-ACN)纯化残余物，以获得1-[4-[3-(2-吡啶基)苯基]-1-哌啶基]乙酮(7.3g，26.04mmol，91.84％产率)
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.51(m,1H),1.67(m,1H),1.83(m,2H),2.03(s,3H),2.62(t,1H),2.86(t,1H),3.14(t,1H),3.92(d,1H),4.55(d,1H),7.32(m,2H),7.41(m,1H),7.86(m,2H),7.95(m,2H),8.65(d,1H)。LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值280.4；实测值281.2；Rt＝0.949min。
步骤3：1-(4-(3-(哌啶-2-基)苯基)哌啶-1-基)乙酮的合成
将1-[4-[3-(2-吡啶基)苯基]-1-哌啶基]乙酮(7.3g，26.04mmol)溶解于MeOH(350mL)中且添加无水5％铂/碳(1.02g，5.21mmol)。将反应混合物在100℃下在高压容器中在50atm H2压力下加热96h。过滤出催化剂，用MeOH洗涤且蒸发溶剂，将残余物干燥，以得到1-[4-[3-(2-哌啶基)苯基]-1-哌啶基]乙酮(6g，20.95mmol，80.46％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.47(m,1H),1.62(m,2H),1.83(m,6H),2.02(s,3H),2.61(t,1H),2.74(t,1H),2.98(t,1H),3.15(t,1H),3.26(d,1H),3.91(d,1H),4.15(bds,1H),4.52(d,1H),7.24(m,1H),7.32(m,2H),7.41(m,1H),7.52(s,1H),9.41(bds,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值286.4；实测值287.2；Rt＝0.786min。
5C.3-(5-甲基-2-哌啶基)苯胺的合成
步骤1：5-甲基-2-(3-硝基苯基)吡啶的合成
将(3-硝基苯基)硼酸(10.19g，61.04mmol)和2-溴-5-甲基吡啶(10g，58.13mmol)溶解于二噁烷(50mL)和H2O(1mL)中，随后添加碳酸钠(24.65g，232.53mmol，9.74mL)。将所得悬浮液彻底脱气且添加99.8％(基于金属)四(三苯基膦)钯(0)(Pd 9％min)(1.34g，1.16mmol)。将反应混合物在75℃下搅拌过夜。反应完成(如通过LCMS显示)之后，过滤反应混合物且在真空中浓缩，以得到油状残余物，其通过快速色谱(OK.第1次运行：Companioncombiflash，330g SiO2，石油醚/乙酸乙酯，其中乙酸乙酯为0～25％，流速100mL/min，Rv＝8CV；第2次运行：Companion combiflash，120g SiO2，氯仿/乙腈，其中乙腈为0～5％，流速85mL/min，Rv＝5CV)进行纯化，以得到5-甲基-2-(3-硝基苯基)吡啶(3.8g，17.74mmol，30.51％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ2.31(s,3H),7.62(m,2H),7.91(m,1H),8.12(m,1H),8.32(m,1H),8.45(d,1H),9.82(t,1H)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值214.1；实测值215.0；Rt＝1.416min。
步骤2：3-(5-甲基-2-哌啶基)苯胺的合成
将5-甲基-2-(3-硝基苯基)吡啶(2.1g，9.80mmol)添加到5％氢氧化钯/碳(1.21g)于EtOH(20mL)中的悬浮液中。将混合物在高压釜中在80℃(100atm)下氢化168h。反应完成之后，过滤固体且将有机溶剂蒸发。通过HPLC(1-20％0.5-6.5min；水-乙腈+TFA；流速30mL/min；(装载泵4mL/min-水)；目标质量190；柱SunFire 100*19mm5um)纯化所获得的粗残余物，以得到3-(5-甲基-2-哌啶基)苯胺(1.2g，5.29mmol，53.99％产率，HCl)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.95(m,3H),1.38(m,1H),1.81(m,4H),2.08(m,1H),2.71(m,1H),3.20(m,1H),4.01(m,1H),6.78(m,3H),7.18(dd,1H),8.87(m,1H),9.08(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值190.1；实测值191.4；Rt＝1.497min。
5D.2-(3-甲氧基苯基)-5-甲基哌啶的合成
步骤1：2-(3-甲氧基苯基)-5-甲基吡啶的合成
将2-溴-5-甲基吡啶(3g，17.44mmol)和(3-甲氧基苯基)硼酸(3.18g，20.93mmol)溶解于二噁烷(40mL)和水(4mL)中。向其中添加碳酸铯(14.21g，43.60mmol)。然后，添加四(三苯基磷烷)钯(0)(87.20μmol)且将反应烧瓶快速抽真空且用氩气再填充。将所得混合物在65℃下搅拌12h。此后，将其冷却且蒸发。将残余物分配于EtOAc(100ml)与水(100ml)之间。收集有机相，将其经Na2SO4干燥且蒸发。使残余物经历柱色谱以获得2-(3-甲氧基苯基)-5-甲基吡啶(2g，10.04mmol，57.56％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)3.32(s,3H),3.82(s,3H),6.96(m,1H),7.37(m,1H),7.61(m,2H),7.66(m,1H),7.87(m,1H),8.49(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值199.2；实测值200.2；Rt＝1.024min。
步骤2：2-(3-甲氧基苯基)-5-甲基哌啶的合成
将干燥的487型钯(10％于碳上)(106.82mg，1.00mmol)添加到2-(3-甲氧基苯基)-5-甲基吡啶(2g，10.04mmol)于MeOH(20mL)中的溶液中且将所得混合物在50atm压力和80℃下氢化72h。在起始材料消耗(H-NMR对照)之后，将所得混合物冷却至室温，过滤。将滤液蒸发至干，以获得2-(3-甲氧基苯基)-5-甲基哌啶(1.3g，6.33mmol，63.09％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.82(d,3H),1.12(m,1H),1.36(m,1H),1.51(m,1H),1.72(m,2H),2.23(t,1H),2.96(d,1H),3.22(m,1H),3.41(d,1H),3.72(s,3H),6.76(d,1H),6.89(m,2H),7.19(t,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值205.3；实测值206.2；Rt＝0.833min。
5E.N-甲基-6-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶-3-胺的合成
步骤1A.3-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(3.5g，10.14mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(3.86g，15.20mmol)和99％无水碳酸钾(2.80g，20.27mmol，1.22mL)一起混合于二噁烷(60mL)中。将所得混合物抽真空，然后用氩气回填，将此操作重复三次，然后在氩气下添加双(三苯基膦)氯化钯(II)(355.69mg，506.76μmol)和三苯基膦(265.83mg，1.01mmol)。将反应混合物在氩气、90℃下搅拌12h，然后冷却且在真空中蒸发，将其倒入水(150ml)中且用EtOAc(2x80 ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(2*40ml)洗涤，经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，留下4.3g粗产物，4.3g粗产物通过硅胶柱色谱使用己烷/MTBE梯度(10-100％ EtOAc)进行纯化，以得到产物3-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(2.2g，6.81mmol，67.15％产率)
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.90(d,3H),1.25(s,12H),1.50(s,9H),1.50-1.75(m,2H),2.15(m,1H),2.75(t,1H),3.56(d,1H),5.22(s,1H)。
步骤1.N-(6-溴-3-吡啶基)-N-甲基-氨基甲酸叔丁酯的合成
将6-溴-N-甲基吡啶-3-胺(8g，42.77mmol)和DMAP(104.51mg，855.45μmol)溶解于THF(40mL)中且逐滴添加二碳酸二-叔丁酯(28.00g，128.32mmol，29.45mL)。将反应混合物在80℃下搅拌48h。在真空中蒸发所得混合物，将其倒入NaHCO3(浓)水溶液(50ml)中且用EtOAc(2x30 ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(2*40ml)洗涤，经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到N-(6-溴-3-吡啶基)-N-甲基-氨基甲酸叔丁酯(10g，34.82mmol，81.42％产率)
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)1.46(s,9H),3.27(s,3H),7.25(s,1H),7.41(d,1H),7.49(m,1H),8.29(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值287.2；实测值289.0；Rt＝1.276min。
步骤2.6-[5-[叔丁氧基羰基(甲基)氨基]-2-吡啶基]-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将3-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(4.37g，13.52mmol)和N-(6-溴-3-吡啶基)-N-甲基-氨基甲酸叔丁酯(2.59g，9.01mmol)一起混合于t-BuOH(100mL)中。将所得混合物抽真空，然后用氩气回填，将此操作重复三次，然后在氩气下添加于t-BuOH(100mL)中的乙酸钯(II)(202.35mg，901.31μmol)和CM-Phos(727.42mg，1.80mmol)。将反应混合物在氩气、115℃下搅拌17h，然后冷却且在真空中蒸发，将其倒入水(150ml)中且用EtOAc(2x50 ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(2*10ml)洗涤，经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，留下3.6g粗产物，3.6g粗产物通过硅胶柱色谱使用己烷/MTBE梯度(10-100％ MTBE)进行纯化且通过制备型(70-70-80％0-1-6min H2O/MeOH/0.1％NH4OH，流速：30ml/min目标质量)纯化1.1g所获得的粗产物，以得到产物6-[5-[叔丁氧基羰基(甲基)氨基]-2-吡啶基]-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(0.022g，54.52μmol，6.05e-1％产率)和粗级分17mg，通过LCMS为66.23％。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值403.3；实测值404.4；Rt＝3.854min。
步骤4.N-甲基-6-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)吡啶-3-胺的合成
将6-[5-[叔丁氧基羰基(甲基)氨基]-2-吡啶基]-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(0.017g，42.13μmol)于DCM(2mL)和三氟乙酸(2g，17.54mmol，1.35mL)中的溶液在0℃下搅拌5h，然后在真空中蒸发。将碎冰(10g)添加到残余物中且用10％碳酸氢钠水溶液将pH调节至8。将所得混合物用乙酸乙酯(2*10mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到N-甲基-6-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)吡啶-3-胺(0.011g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值203.3；实测值204.1；Rt＝0.853min。
步骤5.N-甲基-6-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶-3-胺的合成
在0℃下，将硼氢化钠(4.09mg，108.22μmol，3.83μL)一次性添加到N-甲基-6-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)吡啶-3-胺(0.011g，54.11μmol)于MeOH中的搅拌溶液中。将所得混合物在0℃下搅拌5h，然后在真空中蒸发。将残余物用水(10mL)稀释且用二氯甲烷(2*10mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到N-甲基-6-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶-3-胺(0.009g，43.84μmol，81.01％产率)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值205.3；实测值206.2；Rt＝0.527min。
5F.4-甲基-2-苯基哌啶的合成
步骤1：4-甲基-2-苯基吡啶的合成
将2-溴-4-甲基吡啶(5g，29.07mmol，3.23mL)和苯基硼酸(4.25g，34.88mmol)于THF(100mL)和水(10mL)中的搅拌悬浮液用氩气吹扫10分钟。10分钟之后，在氩气下添加Pd(PPh3)4(1.68g，1.45mmol)和Cs2CO3(23.68g，72.66mmol)。将反应混合物在氩气、65℃下搅拌12小时。12小时之后，将反应混合物冷却至室温且浓缩。将所获得的残余物分配于EtOAc(100mL)与水(100mL)之间。将有机层经Na2SO4干燥且在减压下浓缩。通过柱色谱纯化粗产物，以获得4-甲基-2-苯基吡啶(1.5g，8.86mmol，30.50％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值169.1；实测值170.2；Rt＝0.675min。
步骤2：4-甲基-2-苯基哌啶的合成
将4-甲基-2-苯基吡啶于AcOH(30mL)中的溶液在Noblyst P2058，5％ Pt上在50atm压力、50℃下氢化48小时。完成之后，过滤反应混合物且将滤液在减压下蒸发，以获得4-甲基-2-苯基哌啶(0.8g，4.56mmol)。粗产物不经任何进一步纯化即用于下一步反应。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值175.2；实测值176.2；Rt＝0.702min。
6.硼酸酯与哌啶三氟甲烷磺酸乙烯酯的偶联
在一些实施方案中，可通过碱性烯醇盐形成、随后用三氟甲烷磺酸酯来源淬灭来制备三氟甲烷磺酸乙烯酯。在一些实施方案中，可通过使用强碱(例如，有机锂碱，例如n-BuLi、t-BuLi、二异丙基酰胺化锂(LDA)、双(三甲基甲硅烷基)酰胺化锂(LiHMDS)；氢化物碱，例如NaH或KH)来进行三氟甲烷磺酸化。在一些实施方案中，三氟甲烷磺酸酯来源为N-苯基三氟甲磺酰胺或Tf2O。在一些实施方案中，可通过使哌啶酮暴露于在THF中的LiHMDS，随后用苯基三氟甲磺酰胺淬灭来完成三氟甲烷磺酸化。
在一些实施方案中，可通过使三氟甲烷磺酸乙烯酯与合适交叉偶联配偶体交叉偶联来制备被取代的四氢吡啶。在一些实施方案中，合适的交叉偶联配偶体包括但不限于含硼交叉偶联配偶体，例如R6B(OH)2、R6Bpin。在一些实施方案中，交叉偶联可通过金属催化剂(例如Pd催化剂)来促成。在一些实施方案中，Pd催化剂为Pd(dppf)2·DCM、Pd(PPh3)4、Pd(dppf)Cl2·DCM、PdCl2(PPh3)2或Pd(OAc)2。在一些实施方案中，交叉偶联反应可通过利用包含Pd(dppf)Cl2·DCM、Na2CO3、二噁烷和水的条件来完成。在一些实施方案中，交叉偶联反应可通过利用包含PdCl2(PPh3)2、Na2CO3、二噁烷和水的条件来完成。
用于移除保护基(PG)(例如，MoM或Boc)的条件为本领域普通技术人员已知的。用于移除保护基-PG(例如，-Boc)的条件可采用例如酸性条件(例如，水/二噁烷、于质子性溶剂(例如，甲醇)中的盐酸、于非质子性溶剂(例如，二噁烷)中的盐酸、于非质子性溶剂(例如，二氯甲烷、氯仿等)中的TFA)。在一些实施方案中，脱保护步骤采用于二噁烷中的HCl(4.0M)。在一些实施方案中，脱保护步骤采用于DCM中的HCl(4.0M)。在一些实施方案中，脱保护步骤采用于DCM中的TFA。
环状亚胺的还原可使用还原剂诸如氢化物还原剂(例如，NaBH4或LiAlH4)、硅还原剂(例如，Cl3SiH)或在存在催化剂(例如Ir催化剂、Ru催化剂、Pd催化剂(例如，Pd/C、Pd(OAc)2))的情况下的H2还原来完成。在一些实施方案中，可使用包含于MeOH中的NaBH4的条件完成还原。在一些实施方案中，可使用包含于MeOH和H2O中的NaBH4的条件完成还原。在一些实施方案中，脱保护、环化和还原发生于单一合成步骤中。在一些实施方案中，可使用包含NaBH4、TFA、MeOH和H2O的条件完成脱保护/环化/还原。
6A.1-(4-(3-(5-甲基哌啶-2-基)苯基)哌啶-1-基)乙酮的合成
步骤1：1-(4-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)哌啶-1-基)乙酮的合成
在Ar气氛下，向1-[4-(3-溴苯基)-1-哌啶基]乙酮(9.1g，32.25mmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-联-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(9.01g，35.47mmol)和乙酸钾(7.91g，80.62mmol，5.04mL)于二噁烷(100mL)中的溶液中添加[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)与二氯甲烷的络合物(1.32g，1.61mmol)。将所得混合物在80℃下加热12h且冷却至室温。过滤沉淀且在真空中蒸发溶剂。将残余物溶解于DCM(100ml)中，将所得溶液用盐水(2*50ml)洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中蒸发溶剂以获得粗产物(17g)。通过梯度色谱(CHCl3-CH3CN)纯化粗产物，以得到1-[4-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]-1-哌啶基]乙酮(10.2g，30.98mmol，96.06％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.32(s,12H),1.65(m,2H),1.88(m,2H),2.11(s,3H),2.59(t,1H),2.73(t,1H),3.13(t,1H),3.91(d,1H),4.76(d,1H),7.29(m,2H),7.62(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值329.2；实测值330.2；Rt＝1.553min。
步骤2：6-(3-(1-乙酰基哌啶-4-基)苯基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
将1-[4-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]-1-哌啶基]乙酮(6g，18.22mmol)、3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(6.29g，18.22mmol)和碳酸钠(5.79g，54.67mmol，2.29mL)于二噁烷(30mL)和水(120mL)中的悬浮液脱气且用Ar再填充三次。向此溶液中添加[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)与二氯甲烷的络合物(744.11mg，911.19μmol)。将所得混合物脱气，用Ar再填充且在80℃下搅拌24h。过滤出沉淀，用二噁烷(50ml)洗涤。在真空中蒸发溶剂且将残余物溶解于水150ml中且用DCM(2*100ml)萃取。将合并的有机层用盐水(100ml)洗涤，经Na2SO4干燥且蒸发，以获得粗产物(10g)。通过梯度色谱(CHCl3-ACN)纯化粗产物，以获得6-[3-(1-乙酰基-4-哌啶基)苯基]-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(3.8g，9.53mmol，52.32％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.03(m,11H),1.61(m,3H),1.85(m,3H),1.98(m,1H),2.12(s,3H),2.38(m,1H),2.59(t,1H),2.69(t,1H),2.96(t,1H),3.13(t,1H),3.90(d,1H),4.05(d,1H),4.76(d,1H),5.25(m,1H),7.02(d,1H),7.10(m,2H),7.21(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值298.4；实测值299.2；Rt＝1.624min。
步骤3：1-(4-(3-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯基)哌啶-1-基)乙酮的合成
将6-[3-(1-乙酰基-4-哌啶基)苯基]-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(3.8g，9.53mmol)溶解于三氟乙酸(22.20g，194.70mmol，15mL)中。将所得混合物在25℃下搅拌1h(直至气体逸出结束)且在真空中移除溶剂。将所获得的残余物用水稀释。将溶液的pH用10％NaOH溶液调节至8且用DCM(3*70ml)萃取。将合并的有机层用盐水(50ml)洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中蒸发，以获得1-[4-[3-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯基]-1-哌啶基]乙酮(2.8g，9.38mmol，98.40％产率)。此化合物不经纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)0.97(d,3H),1.37(m,1H),1.64(m,3H),1.88(m,3H),2.11(s,3H),2.58(m,2H),2.74(m,2H),3.13(m,1H),3.24(m,1H),3.95(m,2H),4.75(d,1H),7.18(m,1H),7.30(m,1H),7.54(m,1H),7.65(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值298.2；实测值299.2；Rt＝0.812min。
步骤4：1-(4-(3-(5-甲基哌啶-2-基)苯基)哌啶-1-基)乙酮的合成
在0℃下，向1-[4-[3-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯基]-1-哌啶基]乙酮(2.8g，9.38mmol)于MeOH(50mL)中的溶液中分批添加硼氢化钠(532.46mg，14.07mmol，497.62μL)。将所得混合物在25℃下搅拌1h且在真空中蒸发溶剂，将残余物溶解于水(50ml)且用DCM(3*50ml)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(2*50ml)洗涤，经Na2SO4干燥且蒸发，以得到1-[4-[3-(5-甲基-2-哌啶基)苯基]-1-哌啶基]乙酮(2.3g，粗品)。此化合物不经纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.82(d,3H),1.08(m,1H),1.42(m,3H),1.58(m,2H),1.74(m,3H),2.02(s,3H),2.24(t,1H),2.59(t,1H),2.72(t,1H),2.99(d,1H),3.10(t,1H),3.43(m,2H),3.91(d,1H),4.51(d,1H),7.01(d,1H),7.20(m,3H)。LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值300.2；实测值301.2；Rt＝0.975min。
6B.N-甲基-3-(2-哌啶基)苯胺的合成
步骤1：6-[3-(甲基氨基)苯基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(5g，15.09mmol)和N-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯胺(4.07g，15.09mmol，HCl)溶解于二噁烷(50mL)中。将反应混合物彻底脱气，随后后续添加碳酸铯(4.92g，15.09mmol)、H2O(5mL)和四(三苯基膦)钯(0)(17.44g，15.09mmol)。然后，将所得反应混合物在回流下搅拌过夜。在反应完成(通过反应混合物的LCMS推断)之后，将有机溶剂蒸发且将粗混合物分配于EtOAc(50mL)与H2O(15mL)之间。将有机层经Na2SO4干燥且在减压下蒸发，以得到粗品6-[3-(甲基氨基)苯基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(5.5g，粗品)。所获得的产物无需纯化即用于下一步骤。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ1.11(s,9H),1.85(m,2H),2.25(m,2H),2.81(s,3H),3.69(m,2H),5.33(m,1H),6.49(d,1H),6.54(s,1H),6.65(d,1H),7.08(dd,1H),未观察到NH。
LCMS(ESI)：[M-t-Bu]+m/z：计算值232.1；实测值233.2；Rt＝1.297min。
步骤2：N-甲基-3-(2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯胺的合成
将6-[3-(甲基氨基)苯基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(2g，4.85mmol)溶解于DCM，随后添加TFA(1.11g，9.71mmol，748.03μL)。将反应混合物搅拌过夜。反应完成之后，将混合物用10％ NaOH水溶液洗涤，且将有机溶剂蒸发，以得到N-甲基-3-(2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯胺(1.2g，粗品)，其不经纯化即用于下一步骤。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ1.65(m,2H),1.84(m,2H),2.61(m,1H),2.79(s,3H),3.43(m,2H),3.87(m,2H),6.59(m,1H),7.18(m,2H),7.21(m,1H)。
步骤3：N-甲基-3-(2-哌啶基)苯胺的合成
将N-甲基-3-(2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯胺(1.2g，6.37mmol)和N-甲基-3-(2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯胺(1.2g，6.37mmol)溶解于MeOH(20mL)和H2O(20mL)中。将所得混合物冷却至25℃且一次性添加硼氢化钠(482.28mg，12.75mmol，450.73μL)。然后，将反应混合物再搅拌过夜。反应完成之后，将混合物用10％ HCl水溶液酸化至pH 2。将所获得的混合物用MTBE(2*10mL)洗涤，用10％ NaOH水溶液碱化至pH 10且用DCM(50mL)萃取。蒸发溶剂，得到纯的N-甲基-3-(2-哌啶基)苯胺(0.9g，4.73mmol，74.21％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.74(m,8H),2.82(m,4H),3.12(m,1H),3.51(m,1H),6.47(d,1H),6.65(s,1H),6.68(d,1H),7.11(dd,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值190.1；实测值191.2；Rt＝0.539min。
6C.N,N-二甲基-3-(2-哌啶基)苯胺的合成
步骤1与中间体6B相同。
步骤2：6-[3-(二甲基氨基)苯基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将6-[3-(甲基氨基)苯基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.5g，5.20mmol)溶解于DMF(10mL)中。将所得混合物冷却至0℃且添加于矿物油中的60％氢化钠(油分散体)分散物(119.58mg，5.20mmol)，随后添加碘甲烷(738.28mg，5.20mmol，323.81μL)。搅拌18h之后，将混合物倒入浓NH4Cl水溶液(30mL)且用EtOAc(50mL)萃取。蒸发有机溶剂得到粗品6-[3-(二甲基氨基)苯基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.1g，3.64mmol，69.93％产率)，其不经纯化即用于下一步骤。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值302.1；实测值303.2；Rt＝1.256min。
步骤3：N,N-二甲基-3-(2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯胺的合成
将6-[3-(二甲基氨基)苯基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.1g，3.64mmol)溶解于DCM(10mL)，随后添加TFA(2.07g，18.19mmol，1.40mL)且搅拌过夜。反应完成之后，将混合物用10％ NaOH水溶液洗涤，且将有机溶剂蒸发，以得到N,N-二甲基-3-(2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯胺(0.7g，3.46mmol，95.13％产率)，其不经纯化即用于下一步骤。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ1.80(m,2H),1.84(m,2H),2.62(m,2H),2.98(s,6H),3.83(m,2H),7.07(s,1H),7.20(m,3H)
步骤4：N,N-二甲基-3-(2-哌啶基)苯胺的合成
将N,N-二甲基-3-(2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯胺(0.7g，3.46mmol)溶解于MeOH(10mL)和H2O(2mL)且冷却至0℃。将硼氢化钠(392.74mg，10.38mmol，367.04μL)分批添加到所获得的混合物中且再搅拌过夜。反应完成之后，将反应混合物用10％ HCl水溶液酸化至pH 2，用MTBE(2*10mL)洗涤，用10％ NaOH水溶液碱化至pH 10且用DCM(20mL)萃取。蒸发溶剂，得到纯的N,N-二甲基-3-(2-哌啶基)苯胺(0.5g，2.45mmol，70.72％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ1.82(m,4H),2.61(m,2H),2.2.90(s,6H),3.42(m,2H),3.61(m,1H),3.84(m,1H),6.69(m,1H),6.72(m,1H),6.81(m,1H),7.30(m,1H)。
6D.N-甲基-3-(5-甲基-2-哌啶基)苯胺的合成
步骤1：3-甲基-6-[3-(甲基氨基)苯基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(5，14.48mmol)和N-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯胺(3.38g，12.52mmol，HCl)溶解于二噁烷(50mL)中且将反应混合物彻底脱气，随后后续添加碳酸铯(4.72g，14.48mmol)、H2O(5mL)和四(三苯基膦)钯(0)(16.73g，14.48mmol)。将所获得的反应混合物在回流下搅拌过夜。在反应完成(通过反应混合物的LCMS推测)之后，将有机溶剂蒸发且将粗混合物分配于EtOAc(50mL)与H2O(30mL)之间。将有机层经Na2SO4干燥且在减压下蒸发，以得到粗品3-甲基-6-[3-(甲基氨基)苯基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(5.5g，粗品)，其不经纯化即用于下一步骤。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ0.98(d,3H),1.15(s,9H),1.79(m,1H),1.97(m,2H),2.38(m,1H),2.84(s,3H),2.96(m,1H),4.06(m,1H),5.30(m,1H),6.49(d,1H),6.54(s,1H),6.66(d,1H),7.08(dd,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值302.2；实测值303.2；Rt＝1.406min。
步骤2：N-甲基-3-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯胺的合成
将3-甲基-6-[3-(甲基氨基)苯基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(2，6.61mmol)溶解于DCM(30mL)中，随后添加TFA(500.41mg，4.39mmol，338.12μL)且搅拌过夜。反应完成之后，将混合物用10％NaOH水溶液洗涤，且将有机溶剂蒸发，以得到N-甲基-3-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯胺(1.5g，粗品)，其不经纯化即用于下一步骤。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ1.02(m,3H),1.42(m,1H),1.73(m,1H),1.87(m,1H),2.52(m,1H),2.73(m,1H),2.89(s,3H),3.20(m,1H),4.01(m,1H),6.64(d,1H),7.05(d,1H),7.08(s,1H),7.19(dd,1H)。
步骤3：N-甲基-3-(5-甲基-2-哌啶基)苯胺的合成
将N-甲基-3-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯胺(1.34g，6.61mmol)溶解于MeOH(25.00mL)和H2O(5.00mL)且冷却至0℃。将硼氢化钠(500.15mg，13.22mmol，467.43μL)分批添加到所获得的混合物且再搅拌过夜。反应完成之后，将反应混合物用10％ HCl水溶液酸化至pH 2，用水稀释，用MTBE(2*10mL)洗涤，用10％ NaOH水溶液碱化至pH 10且用DCM(30.00mL)萃取。蒸发溶剂，得到纯的N-甲基-3-(5-甲基-2-哌啶基)苯胺(0.92g，4.50mmol，68.12％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.89(m,3H),1.52(m,6H),2.41(m,1H),2.81(s,3H),3.10(m,1H),3.48(m,1H),3.71(m,1H),6.47(d,1H),6.68(m,2H),7.11(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值204.2；实测值205.2；Rt＝0.579min。
6E.N,N-二甲基-3-(5-甲基-2-哌啶基)苯胺的合成
步骤1与中间体6D相同。
步骤2：6-[3-(二甲基氨基)苯基]-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将3-甲基-6-[3-(甲基氨基)苯基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.5g，4.96mmol)溶解于dmf(10mL)中且冷却至0℃，随后添加于矿物油中的60％氢化钠(油分散体)分散物(114.03mg，4.96mmol)和碘甲烷(704.04mg，4.96mmol，308.79μL)。搅拌18h之后，将混合物倒入浓NH4Cl水溶液(30mL)且用EtOAc(20mL)萃取。蒸发有机溶剂，得到粗品6-[3-(二甲基氨基)苯基]-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.3g，4.11mmol，82.83％产率)，其不经纯化即用于下一步骤。
LCMS(ESI)：[M-t-Bu]+m/z：计算值260.2；实测值260.2；Rt＝1.572min。
步骤3：N,N-二甲基-3-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯胺的合成
将6-[3-(二甲基氨基)苯基]-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.3g，4.11mmol)溶解于DCM(10mL)，随后添加TFA(468.43mg，4.11mmol，316.51μL)且搅拌过夜。反应完成之后，将混合物用10％NaOH水溶液洗涤，且将有机溶剂蒸发，以得到N,N-二甲基-3-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯胺(0.75g，3.47mmol，84.39％产率)，其不经纯化即用于下一步骤。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ1.08(d,3H),1.74(m,2H),1.88(m,1H),2.62(m,1H),2.98(m,6H),3.21(m,1H),4.01(m,1H),7.07(s,1H),7.20(m,3H)。
步骤4：N,N-二甲基-3-(5-甲基-2-哌啶基)苯胺的合成
将N,N-二甲基-3-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯胺(0.75g，3.47mmol)溶解于MeOH(10mL)和H2O(2mL)中且冷却至0℃。将硼氢化钠(131.17mg，3.47mmol，122.59μL)分批添加到所获得的混合物且再搅拌过夜。反应完成之后，将反应混合物用10％ HCl水溶液酸化至pH 2，用MTBE(2*10mL)洗涤，用10％ NaOH水溶液碱化至pH 10且用DCM(20mL)萃取。蒸发溶剂，得到纯的N,N-二甲基-3-(5-甲基-2-哌啶基)苯胺(0.55g，2.52mmol，72.66％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ0.91(m,3H),1.62(m,2H),1.82(m,2H),2.38(m,1H),2.85(s,6H),3.14(m,1H),3.52(m,1H),6.63(m,1H),6.71(m,1H),6.78(s,1H),7.18(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值218.2；实测值219.2；Rt＝0.823min。
6F.4-(5-甲基-2-哌啶基)苯胺的合成
步骤1：3-甲基-6-(4-硝基苯基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(10.3g，29.83mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-(4-硝基苯基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(7.43g，29.83mmol)溶解于二噁烷(50mL)中。将反应混合物彻底脱气，随后添加碳酸铯(48.59g，149.13mmol，1.01mL)、H2O(10mL)和Pd(PPh3)4(3.45g，2.98mmol)。将所获得的反应混合物在回流下搅拌过夜。在反应完成(通过反应混合物的HNMR推断)之后，将有机溶剂蒸发且将粗混合物分配于EtOAc(250mL)与H2O(200mL)之间。将有机层经Na2SO4干燥且在减压下蒸发，以得到3-甲基-6-(4-硝基苯基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(10g，粗品)，其不经纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.37(m,11H),2.03(m,3H),2.45(m,1H),3.00(m,1H),4.04(m,1H),5.45(s,1H),7.43(m,2H),8.14(m,2H)。
步骤2：3-甲基-6-(4-硝基苯基)-2,3,4,5-四氢吡啶的合成
将3-甲基-6-(4-硝基苯基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(10g，25.13mmol)溶解于DCM(30mL)中。将所得混合物搅拌5min，随后添加TFA(14.33g，125.64mmol，9.68mL)。然后，将反应混合物搅拌过夜。反应完成之后，将混合物用10％ NaOH水溶液洗涤，且将有机溶剂蒸发，以得到3-甲基-6-(4-硝基苯基)-2,3,4,5-四氢吡啶(7g，粗品)，其不经纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.01(d,3H),1.31(m,1H),1.62(m,1H),1.92(m,1H),2.52(m,1H),2.78(m,1H),3.25(m,1H),4.04(m,1H),7.94(m,2H),8.20(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值218.1；实测值219.2；Rt＝0.789min
步骤3：4-(5-甲基-2-哌啶基)苯胺的合成
将3-甲基-6-(4-硝基苯基)-2,3,4,5-四氢吡啶(7g，25.66mmol)溶解于MeOH(20mL)和H2O(5mL)的混合物中。将所得混合物冷却至0℃，随后分批添加硼氢化钠(3.88g，102.63mmol，3.63mL)。将反应混合物搅拌过夜。反应完成之后，将混合物用10％ HCl水溶液酸化至pH 2，用水稀释，用MTBE(2*10mL)洗涤，用10％ NaOH水溶液碱化至pH 10且用DCM(50mL)萃取。将有机层在减压下蒸发，以得到纯的4-(5-甲基-2-哌啶基)苯胺(5.1g，粗品)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.75(d,3H),1.05(m,1H),1.23(m,2H),1.42(m,1H),1.73(m,1H),1.94(m,1H),2.38(m,1H),3.07(m,1H),3.40(m,1H),3.57(m,2H),6.61(d,2H),7.12(d,2H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值190.1；实测值191.2；Rt＝0.413min。
6G.-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯酚的合成
步骤1：6-(3-羟基苯基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
将3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(7g，20.27mmol)、(3-羟基苯基)硼酸(3.63g，26.35mmol)和碳酸钠(6.45g，60.81mmol，2.55mL)添加到1,4-二噁烷(90mL)和水(30mL)的混合物中。将所得混合物抽真空然后用氩气回填，将此操作重复三次，然后在氩气下添加Pd(dppf)Cl2 DCM(661.62mg，810.81μmol)。将反应混合物在氩气、70℃下搅拌12h，然后冷却且过滤。将滤饼用1,4-二噁烷(2*20ml)洗涤且丢弃。在真空中蒸发滤液，且通过硅胶柱色谱，使用己烷/MTBE梯度(0-100％ MTBE)纯化残余物，以得到呈白色固体的6-(3-羟基苯基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(2.7g，9.33mmol，46.03％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)1.00(d,3H),1.12(s,9H),1.87(m,1H),2.02(m,1H),2.41(m,1H),2.98(t,1H),4.03(d,1H),5.33(m,1H),5.78(bds,1H),6.75(m,2H),6.88(d,1H),7.15(t,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值189.2；实测值190.2；Rt＝1.473min。
步骤2：3-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯酚的合成
将6-(3-羟基苯基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(0.5g，1.73mmol)溶解于三氟乙酸(3.75g，32.89mmol，2.53mL)中。将所得溶液在25℃下搅拌1h，然后在真空中蒸发，以得到呈黄色胶状物的粗品3-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯酚(1.1g，粗品)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)1.18(d,3H),1.68(m,1H),2.12(m,2H),3.15(m,1H),3.38(m,2H),4.01(m,1H),7.25(m,2H),7.41(m,2H),12.45(bds,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值189.2；实测值190.2；Rt＝0.788min。
步骤3：3-(5-甲基哌啶-2-基)苯酚的合成
在0℃下，在1h内，将硼氢化钠(1.76g，46.50mmol，1.64mL)分批添加到3-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯酚(1.1g，5.81mmol)于甲醇(30mL)中的搅拌溶液中。使所得混合物升温且在25℃下搅拌12h，然后在真空中蒸发。将残余物用氯仿(50ml)稀释，搅拌0.1h且过滤。将滤饼另外用氯仿(2*10ml)洗涤且丢弃。将合并的滤液在真空中蒸发，以得到呈黄色固体的粗品3-(5-甲基-2-哌啶基)苯酚(0.47g，2.46mmol，42.28％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)0.98(d,3H),1.05(m,1H),1.69(m,3H),2.34(m,1H),3.30(m,2H),3.44(m,3H),6.64(m,3H),7.07(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值191.2；实测值192.2；Rt＝0.708min。
6H.4-(5-甲基哌啶-2-基)苯酚和乙酸外消旋-4-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯 酯的合成
步骤1：6-(4-羟基苯基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
将3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(32g，92.66mmol)、(4-羟基苯基)硼酸(15.98g，115.83mmol)和碳酸钠(29.46g，277.99mmol，11.65mL)添加到1,4-二噁烷(360mL)和水(120mL)的混合物中。将所得混合物抽真空然后用氩气回填，将此操作重复三次，然后在氩气下添加Pd(dppf)Cl2 DCM(3.02g，3.71mmol)。将反应混合物在氩气、90℃下搅拌18h，然后冷却且过滤。将滤饼用1,4-二噁烷(2*20ml)洗涤且丢弃。在真空中蒸发滤液，且通过硅胶柱色谱，使用己烷/乙酸乙酯梯度(0-100％乙酸乙酯)纯化残余物，以得到呈白色固体的6-(4-羟基苯基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(12g，41.47mmol，44.75％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.99(d,3H),1.12(s,9H),1.99(m,1H),2.00(m,1H),2.36(d,1H),2.96(t,1H),4.06(d,1H),5.22(m,1H),6.77(m,2H),7.15(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值189.2；实测值190.2；Rt＝1.395min
步骤2：4-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯酚的合成
将6-(4-羟基苯基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(12g，41.47mmol)溶解于三氟乙酸(141.85g，1.24mol，95.85mL)中。将所得溶液在25℃下搅拌1h，然后在真空中蒸发。将碎冰(100g)添加到残余物中且用10％碳酸钠水溶液将pH调节至9。将所得混合物用二氯甲烷(2*300ml)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到呈米色固体的4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯酚(8.5g，粗品)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)0.98(d,3H),1.32(m,1H),1.67(m,1H),1.83(m,1H),2.56(m,1H),2.74(m,1H),3.11(m,1H),3.80(m,1H),6.50(m,2H),7.42(m,2H),10.89(bds,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值189.2；实测值190.2；Rt＝0.730min。
步骤3：4-(5-甲基哌啶-2-基)苯酚的合成
在0℃下，将硼氢化钠(2g，52.87mmol，1.87mL)一次性添加到4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯酚(8.5g，44.91mmol)于甲醇(100mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在0℃下搅拌1h，然后在真空中蒸发。将残余物溶解于甲醇(150ml)中且添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(117.81g，449.13mmol，112.20mL，13.9％纯度)。在真空中蒸发所得混浊溶液，将残余物用THF(150ml)稀释且搅拌0.5h。过滤沉淀，用THF(2*50ml)洗涤且在真空中干燥，以得到呈淡黄色固体的被氯化钠(大约3g)污染的70％纯度粗品4-(5-甲基-2-哌啶基)苯酚(10.5g，粗品，HCl)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.92(d,3H),1.28(m,1H),1.95(m,3H),2.11(m,1H),2.65(m,1H),3.12(m,1H),3.99(m,1H),6.81(m,2H),7.40(m,2H),9.30(m,1H),9.70(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值191.2；实测值192.2；Rt＝0.732min。
步骤4：外消旋-(2R,5S)-2-(4-羟基苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将4-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]苯酚(2g，10.46mmol)和TEA(3.17g，31.37mmol，4.37mL)溶解于THF(30mL)中。将溶液搅拌15min，之后逐滴添加二碳酸二-叔丁酯(2.51g，11.50mmol，2.64mL)。此后，将反应混合物在室温下搅拌过夜，然后将其用EtOAc稀释，用NaHSO4(水溶液)、盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且在真空下蒸发，以得到(2S,5R)-2-(4-羟基苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.86g，9.82mmol，93.87％产率)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.00(d,3H),1.28(m,2H),1.49(s,9H),1.78(m,2H),2.07(m,2H),2.97(m,1H),3.71(m,1H),5.24(m,1H),6.78(d,2H),7.05(d,2H)。
步骤5：外消旋-(2R,5S)-2-(4-乙酰氧基苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将(2S,5R)-2-(4-羟基苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.86g，9.82mmol)和乙酰氯(847.54mg，10.80mmol，657.01μL)TEA(2.98g，29.45mmol，4.10mL)溶解于无水DCM(36mL)中且冷却至0℃。逐滴添加乙酰氯(847.54mg，10.80mmol，657.01μL)，然后使反应混合物升温至室温且搅拌过夜，然后用NaHSO4(水溶液)、NaHCO3(水溶液)和盐水洗涤。将有机相经Na2SO4干燥，过滤且在真空下蒸发，以得到(2S,5R)-2-(4-乙酰氧基苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(3.11g，9.33mmol，95.03％产率)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。(2S,5R)-2-(4-乙酰氧基苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(3.11g，9.33mmol，95.03％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)1.04(d,3H),1.31(m,1H),1.53(s,9H),1.80(m,2H),2.12(m,2H),2.29(s,3H),2.99(m,1H),3.73(m,1H),5.31(m,1H),7.05(d,2H),7.23(d,2H)
步骤6：乙酸外消旋-4-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯酯的合成
将(2S,5R)-2-(4-乙酰氧基苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(3.11g，9.33mmol)溶解于于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(6.80g，186.55mmol，8.50mL)中且在20℃下搅拌3h。在真空下浓缩反应混合物，以得到乙酸[4-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]苯]酯(2.38g，8.82mmol，94.51％产率，HCl)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.90(d,3H),1.27(m,1H),2.05(m,3H),2.22(s,3H),2.63(m,2H),3.17(m,1H),3.96(m,1H),7.16(d,2H),7.62(d,2H),9.26(m,1H)。
6I.5-(5-甲基哌啶-2-基)-1H-吲哚的合成
步骤1：5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吲哚的合成
将乙酸钾(15.02g，153.03mmol，9.57mL)添加到5-溴-1H-吲哚(15g，76.51mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(22.34g，87.99mmol)于二噁烷(400mL)中的溶液中。将反应烧瓶抽真空且用氩气再填充3次。然后在氩气流下添加Pd(dppf)Cl2*DCM(3.12g，3.83mmol)。在90℃、惰性气氛下将所得混合物搅拌28h。然后，将其冷却，用MTBE(700mL)稀释且过滤。在减压下浓缩滤液且通过硅胶快速色谱以0至100％MTBE-己烷梯度洗脱来纯化残余物，以得到5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吲哚(7.2g，29.62mmol，38.71％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.35(s,12H),6.55(d,1H),7.17(s,1H),7.36(d,1H),7.63(d,1H),8.17(m,2H)。
GCMS：计算值243.2；实测值243.2；Rt＝11.341min。
步骤2：6-(1H-吲哚-5-基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
在80℃、氩气气氛下，将3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(4.73g，13.70mmol)、5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吲哚(4.16g，17.12mmol)、环戊基(二苯基)磷烷；二氯甲烷；二氯钯；铁(559.27mg，684.84μmol)和碳酸钠(4.36g，41.09mmol，1.72mL)于二噁烷(75mL)和水(25mL)中的混合物搅拌28h。冷却至室温之后，过滤出反应混合物。将滤饼用二噁烷(100mL)洗涤且丢弃。在减压下浓缩滤液且通过硅胶快速色谱以0至100％ MTBE-己烷梯度洗脱来纯化残余物，以得到6-(1H-吲哚-5-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.2g，3.84mmol，28.04％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.87(s,9H),0.97(m,2H),1.24(m,2H),1.85(m,2H),2.38(m,1H),3.02(m,1H),3.92(d,1H),5.20(m,1H),6.37(m,1H),6.99(d,1H),7.29(d,1H),7.38(m,1H),10.97(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值212.2；实测值213.2；Rt＝1.591min。
步骤3：5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)-1H-吲哚的合成
将6-(1H-吲哚-5-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.2g，3.84mmol)于TFA(7.01g，61.46mmol，4.73mL)中的溶液在20℃下搅拌1h，然后在真空中蒸发。将碎冰(10g)添加到残余物中且用10％氢氧化钠水溶液将pH调节至8。将所得混合物用乙酸乙酯(2*30mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到呈黄色固体的5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1H-吲哚(0.8g，粗品)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.96(m,3H),1.17(m,2H),1.98(m,2H),3.04(m,1H),3.22(m,2H),3.87(m,1H),6.58(m,1H),7.32(m,1H),7.46(m,1H),8.24(m,1H),11.05(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值212.2；实测值213.2；Rt＝0.940min
步骤4：5-(5-甲基哌啶-2-基)-1H-吲哚的合成
在0℃下，将硼氢化钠(285.12mg，7.54mmol，266.47μL)一次性添加到5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1H-吲哚(0.8g，3.77mmol)于MeOH(20mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在0℃下搅拌1h，然后在真空中蒸发。将残余物用水(10mL)稀释且用二氯甲烷(2*20mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到呈黄色固体的5-(5-甲基-2-哌啶基)-1H-吲哚(0.8g，粗品)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.79(d,3H),1.06(m,1H),1.34(m,2H),1.74(m,2H),2.25(m,1H),2.98(m,1H),3.29(m,1H),5.28(m,1H),6.30(m,1H),7.23(m,4H),10.90(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值214.2；实测值215.2；Rt＝0.950min。
6J.5-(5-甲基哌啶-2-基)-1H-苯并[d]咪唑的合成
步骤1：6-(1H-苯并[d]咪唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
将3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(4g，11.58mmol)、5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-苯并咪唑(4.06g，14.48mmol，HCl)、Pd(dppf)Cl2*DCM(472.95mg，579.15μmol)和碳酸钠(4.91g，46.33mmol，1.94mL)于二噁烷(75mL)和水(25mL)中的混合物在80℃、氩气气氛下搅拌48h。冷却至室温之后，过滤出反应混合物。将滤饼用二噁烷(100mL)洗涤且丢弃。在减压下浓缩滤液且通过硅胶快速色谱以0至100％ MeCN-CHCl3梯度洗脱来纯化残余物，以得到6-(1H-苯并咪唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.5g，4.79mmol，41.32％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)1.03(d,3H),1.25(s,9H),1.86(m,1H),2.04(m,1H),2.44(d,1H),3.06(t,1H),4.11(d,1H),5.35(s,1H),7.25(m,1H),7.58(m,3H),8.01(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值313.2；实测值314.2；Rt＝1.015min。
步骤2：5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)-1H-苯并[d]咪唑的合成
将6-(1H-苯并咪唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.50g，4.79mmol)于TFA(8.73g，76.58mmol，5.90mL)中的溶液在20℃下搅拌1h，然后在真空中蒸发。将碎冰(10g)添加到残余物中且用10％氢氧化钠水溶液将pH调节至8。将所得混合物用EtOAc(2*30mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到呈棕色胶状物的5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1H-苯并咪唑(1g，粗品)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.96(d,3H),1.37(m,1H),1.71(m,1H),1.88(m,1H),2.75(m,1H),2.99(m,1H),3.23(m,1H),3.93(m,1H),7.55(m,1H),7.77(m,1H),8.05(m,1H),8.28(m,1H),12.56(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值213.2；实测值214.2；Rt＝0.693min。
步骤3：5-(5-甲基哌啶-2-基)-1H-苯并[d]咪唑的合成
在0℃下，将硼氢化钠(266.08mg，7.03mmol，248.67μL)一次性添加到5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1H-苯并咪唑(1.00g，4.69mmol)于MeOH(20mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在0℃下搅拌1h，然后在真空中蒸发。将残余物用水(10mL)稀释且用二氯甲烷(2*20mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到呈棕色固体的5-(5-甲基-2-哌啶基)-1H-苯并咪唑(0.82g，粗品)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.84(m,3H),1.11(m,1H),1.53(m,2H),1.79(m,2H),2.31(m,1H),3.02(m,1H),3.56(m,1H),7.17(m,1H),7.49(m,3H),8.13(m,1H),12.36(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值215.2；实测值216.2；Rt＝0.627min。
6K.5-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]-1H-吲唑的合成
步骤1：6-(1H-吲唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吲唑(3g，12.29mmol)、3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(4.24g，12.29mmol)、碳酸钠(5.21g，49.16mmol，2.06mL)和四丁基溴化铵(198.10mg，614.51μmol)于二噁烷(60mL)和水(12mL)中的混合物脱气且用Ar再填充三次。向此溶液中添加Pd(dppf)Cl2*DCM(501.83mg，614.51μmol)。将所得混合物脱气，用Ar再填充且在95℃下搅拌72h。过滤出沉淀，用二噁烷(50ml)洗涤。在真空中蒸发溶剂且将残余物溶解于150ml水中且用EtOAc(2*100ml)萃取。将合并的有机层用盐水(100ml)洗涤，经Na2SO4干燥且蒸发，以获得粗产物(7g)。通过梯度色谱(SiO2，CHCl3-MeOH)纯化粗产物，以获得6-(1H-吲唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.5g，4.79mmol，38.94％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ(ppm)0.96(s,9H),0.97(d,3H),1.85(m,2H),2.40(m,1H),3.02(m,1H),3.91(m,1H),5.29(s,1H),7.24(d,1H),7.44(d,1H),7.58(s,1H),8.01(s,1H),未观察到NH。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值313.2；实测值314.2；Rt＝1.321min。
步骤2：5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1H-吲唑的合成
将6-(1H-吲唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.5g，4.79mmol)溶解于三氟乙酸(14.80g，129.80mmol，10mL)中。将所得混合物在25℃下搅拌2h(直至气体逸出结束)且在真空中蒸发溶剂。将溶液的pH用10％ NaHCO3水溶液调节至8且用DCM(3*70ml)萃取。将合并的有机层用盐水(50ml)洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中蒸发，以获得5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1H-吲唑(0.8g，3.75mmol，78.37％产率)。此化合物不经纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ(ppm)1.00(d,3H),1.42(m,1H),1.74(m,1H),1.95(m,1H),2.67(m,1H),2.86(m,1H),3.29(m,1H),4.05(m,1H),7.40(d,1H),7.96(d,1H),8.08(s,2H),10.73(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值213.2；实测值214.2；Rt＝0.727min。
步骤3：5-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]-1H-吲唑的合成
在0℃下，向5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1H-吲唑(0.8g，3.75mmol)于MeOH(20mL)中的溶液中分批添加硼氢化钠(283.82mg，7.50mmol，265.25μL)。将所得混合物在25℃下搅拌3h且在真空中蒸发溶剂，将残余物溶解于水(30ml)中且用EtOAc(3*30ml)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(2*50ml)洗涤，经Na2SO4干燥且蒸发，以得到5-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]-1H-吲唑(0.73g，3.39mmol，90.40％产率)。此化合物不经纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ(ppm)0.80(d,3H),1.07(m,2H),1.35(m,1H),1.49(m,1H),1.73(m,2H),2.25(m,1H),2.96(m,1H),3.50(m,1H),7.31(d,1H),7.39(d,1H),7.64(s,1H),7.95(s,1H),12.89(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值215.1；实测值216.2；Rt＝0.645min。
6L.5-(2-哌啶基)-1H-吲唑的合成
步骤1：5-溴吲唑-1-甲酸叔丁酯的合成
在0℃下，向5-溴-1H-吲唑(20.5g，104.04mmol)于乙腈(300mL)中的搅拌溶液中添加三乙胺(10.53g，104.04mmol，14.50mL)、二碳酸二-叔丁酯(34.06g，156.07mmol，35.82mL)和DMAP(1.27g，10.40mmol)。将所得反应混合物在25℃下搅拌16h。16小时之后，将反应混合物在减压下浓缩，以获得呈深橙色胶状物的粗产物。通过柱色谱(0-100％于己烷中的MTBE)纯化粗产物，以获得呈淡橙色液体的产物5-溴吲唑-1-甲酸叔丁酯(30.0g，100.96mmol，97.04％产率)。
1H NMR(CDCl3,400MHz):δ1.69(s,9H),7.60(d,1H),7.85(s,1H),8.08(m,2H)。
步骤2：5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吲唑-1-甲酸叔丁酯的合成
向5-溴吲唑-1-甲酸叔丁酯(30g，100.96mmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-联-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(28.20g，111.06mmol)和乙酸钾(19.82g，201.92mmol，12.62mL)于二噁烷(700mL)中的悬浮液脱气且用Ar再填充三次。向此溶液中添加[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)与二氯甲烷的络合物(4.12g，5.05mmol)，将所得混合物在90℃下搅拌48h，冷却，过滤，在真空中蒸发。通过梯度色谱(己烷-EA)纯化残余物(50g)，以得到5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吲唑-1-甲酸叔丁酯(29g，84.25mmol，83.45％产率)。
1H NMR(CDCl3,400MHz):δ1.35(m,12H),1.71(s,9H),7.92(d,1H),8.14(m,1H),8.21(s,1H)。
步骤3：5-(1-叔丁氧基羰基-3,4-二氢-2H-吡啶-6-基)吲唑-1-甲酸叔丁酯的合成
在氮气、室温下，向6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(2.00g，5.55mmol)、5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吲唑-1-甲酸叔丁酯(2.12g，5.55mmol)和碳酸钠(1.77g，16.66mmol，697.99μL)于二噁烷(24mL)和水(8mL)中的搅拌溶液中添加Pd(dppf)Cl2·DCM(226.77mg，277.69μmol)。在90℃、氮气下将所得反应混合物搅拌16h。16小时之后，使反应混合物冷却至室温且通过硅胶垫过滤。用乙酸乙酯(100mL)洗涤硅胶垫。在减压下浓缩滤液以获得深棕色粗产物。通过硅胶柱色谱(0-100％于己烷中的MTBE)纯化粗产物，以得到呈灰白色固体的产物5-(1-叔丁氧基羰基-3,4-二氢-2H-吡啶-6-基)吲唑-1-甲酸叔丁酯(550mg，1.38mmol，24.79％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ0.99(s,9H),1.22(s,9H),1.87(m,2H),2.27(m,2H),5.33(s,1H),7.35(s,1H),7.40(s,1H),7.66(s,1H),8.04(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc+H]+m/z：计算值300.0；实测值300；Rt＝1.369min。
步骤4：5-(2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1H-吲唑的合成
将于三氟乙酸(3.03g，26.53mmol，2.04mL)中的5-(1-叔丁氧基羰基-3,4-二氢-2H-吡啶-6-基)吲唑-1-甲酸叔丁酯(0.53g，1.33mmol)在25℃下搅拌1h。1小时之后，在减压下浓缩反应混合物，以获得淡橙色胶状粗产物。将水(10mL)添加到粗产物中且将水相用10％NaOH溶液碱化，直至pH＝10。将所获得的悬浮液用二氯甲烷(3x 20mL)萃取。将合并的有机相用水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤且在减压下浓缩，以获得呈灰白色固体的粗产物5-(2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1H-吲唑(300mg，粗品)。将粗产物用于下一步骤反应中。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ1.69(m,2H),1.87(m,2H),2.74(m,2H),3.88(m,2H),7.42(d,1H),7.99(d,1H),8.10(s,2H),10.71(brs,1H)。
LCMS(ESI)：[M+Н]+m/z：计算值199.1；实测值200.2；Rt＝0.644min。
步骤5：5-(2-哌啶基)-1H-吲唑的合成
在25℃下向5-(2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1H-吲唑(300mg，1.51mmol)于甲醇(8mL)中的搅拌溶液中添加硼氢化钠(85.44mg，2.26mmol，79.85μL)。将所得反应混合物在同一温度下搅拌1h。1小时之后，将反应混合物在减压下浓缩且将粗产物用水(20mL)淬灭。将所获得的混合物用二氯甲烷(3x 30mL)萃取，用水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤且在减压下浓缩，以获得呈灰白色固体的粗产物5-(2-哌啶基)-1H-吲唑(200mg，粗品)。将粗产物用于下一步骤反应中。
1H NMR(DMSO,400MHz):δ1.33-1.43(m,3H),1.55(m,1H),1.68(m,1H),1.71(m,1H),2.27(m,1H),2.64(m,1H),3.04(m,1H),3.60(m,1H),7.34(d,1H),7.43(d,1H),7.67(s,1H),7.98(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+Н]+m/z：计算值201.2；实测值202.2；Rt＝0.668min。
6M.2-甲基-4-(5-甲基-2-哌啶基)苯酚的合成
步骤1：2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯酚的合成
将4-溴-2-甲基-苯酚(18.8g，100.52mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(30.63g，120.62mmol)和KOAc(29.59g，301.55mmol，18.85mL)于1,4-二噁烷(400mL)中的搅拌溶液用氩气吹扫10分钟。10分钟之后，在氩气下添加Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2(1.5g，1.84mmol)。将反应混合物在氩气、100℃下搅拌16小时。然后将反应混合物冷却至室温，过滤且在减压下浓缩滤液。通过快速色谱(SiO2，洗脱液：CHCl3:乙腈)纯化所获得的粗产物，以得到呈白色固体的2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯酚(11.4g，48.70mmol，48.45％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值234.2；实测值235.4；Rt＝1.386min
步骤2：6-(4-羟基-3-甲基苯基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(3.54g，10.25mmol)、2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯酚(3g，12.82mmol)和碳酸钠(3.26g，30.76mmol，1.29mL)于1,4-二噁烷(15mL)和水(5mL)中的搅拌溶液用氩气吹扫。然后，在氩气下添加Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2(418.29mg，512.60μmol)。将反应混合物在氩气、75℃下搅拌16小时。16小时之后，使反应混合物冷却至室温且过滤。将滤饼用1,4-二噁烷(10mL)洗涤且丢弃。将滤液用水洗涤且用DCM萃取。将合并的有机相经Na2SO4干燥且在减压下浓缩。通过柱色谱(SiO2；洗脱液：于己烷中的MTBE)纯化所获得的粗产物，以得到6-(4-羟基-3-甲基苯基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(2g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值303.2；实测值304.2；Rt＝1.498min。
步骤3：2-甲基-4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯酚的合成
将6-(4-羟基-3-甲基苯基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(2g，粗品)溶解于三氟乙酸(29.60g，259.60mmol，20mL)中且在室温下搅拌16小时。16小时之后，将反应混合物在减压下浓缩，以得到深棕色油状物。将所获得的粗产物用MTBE处理，用水洗涤且在真空中浓缩，以得到2-甲基-4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯酚(2.4g，粗品)。粗产物不经任何进一步纯化即用于下一步反应。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值203.2；实测值204.2；Rt＝0.680min。
步骤4：2-甲基-4-(5-甲基-2-哌啶基)苯酚的合成
在0℃下，将硼氢化钠(446.66mg，11.81mmol)分批添加到2-甲基-4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯酚(2.4g，11.81mmol)于甲醇(20mL)中的搅拌溶液中。将反应混合物在室温下搅拌1小时。1小时之后，将反应混合物在减压下浓缩，将残余物用水稀释且用DCM(2x 25mL)萃取。将合并的有机相经Na2SO4干燥且在真空中蒸发。通过反相HPLC(洗脱液：40-70％ CH3CN+甲酸/H2O；流速：30mL/min；装载泵：4mL，CH3CN；柱：SunFire 100x 19mm，5μM)纯化粗产物，以获得2-甲基-4-(5-甲基-2-哌啶基)苯酚(0.21g，1.02mmol，8.66％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值205.2；实测值206.4；Rt＝1.881min。
6N.5-(5-甲基-2-哌啶基)吲哚啉-2-酮的合成
步骤1：3-甲基-6-(2-氧代吲哚啉-5-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(10g，28.96mmol)、5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吲哚啉-2-酮(8.25g，31.85mmol)和碳酸钠(6.14g，57.91mmol)于1,4-二噁烷(90mL)和水(30mL)中的搅拌悬浮液用氩气吹扫。然后，在氩气下添加Pd(dppf)Cl2(1.18g，1.45mmol)。将反应混合物在氩气、75℃下搅拌18小时。18小时之后，将反应混合物冷却且过滤。在真空中蒸发滤液且将残余物用水(100mL)和MTBE(150mL)稀释。分离两层。将水层用MTBE(100mL)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩。将残余物用MTBE(3x 50mL)洗涤且在真空下干燥，以获得呈棕色固体的3-甲基-6-(2-氧代吲哚啉-5-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(7.84g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值328.2；实测值329.2；Rt＝1.336min。
步骤2：5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)吲哚啉-2-酮的合成
在0℃下，向3-甲基-6-(2-氧代吲哚啉-5-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(7.84g，23.86mmol)于DCM(40mL)中的搅拌溶液中逐滴添加CF3CO2H(20mL)。将所得反应混合物在0℃下搅拌1小时。1小时之后，将反应混合物小心倒入K2CO3溶液中且用DCM(2x 75mL)萃取。将合并的有机相经Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩，以获得5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)吲哚啉-2-酮(5.54g，粗品)。粗产物不经任何进一步纯化即用于下一步反应。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值228.2；实测值229.2；Rt＝0.727min。
步骤3：5-(5-甲基-2-哌啶基)吲哚啉-2-酮的合成
在0℃下，将硼氢化钠(2.75g，72.80mmol)分批添加5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)吲哚啉-2-酮(5.54g，24.27mmol)于MeOH(120mL)中的搅拌溶液中。将反应混合物在20℃下搅拌18小时。18小时之后，在减压下浓缩反应混合物。将所获得的残余物用水(100mL)稀释。将所得混合物用DCM(3x 50mL)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩。将所获得的残余物溶解于DCM(50mL)中且用NaHSO4水溶液萃取。将水层用DCM(3x 50mL)洗涤，然后用K2CO3碱化。将所得混合物再一次用DCM(3x 50mL)萃取。将合并的有机相经Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩，以获得5-(5-甲基-2-哌啶基)吲哚啉-2-酮(2.5g，10.86mmol，44.73％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值230.1；实测值231.2；Rt＝0.664min。
6O.6-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,2,3,4-四氢喹啉的合成
步骤1：6-(1-叔丁氧基羰基-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-6-基)-3,4-二氢-2H-喹啉-1-甲酸叔丁酯的合成
将6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,4-二氢-2H-喹啉-1-甲酸叔丁酯(2.24g，6.23mmol)、3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.79g，5.20mmol)、碳酸钠(1.65g，15.59mmol，653.00μL)和Pd(dppf)Cl2 DCM(169.74mg，207.83μmol)添加到1,4-二噁烷(15mL)和水(5mL)的混合物中。在惰性气氛、75℃下，将反应混合物搅拌12h，然后冷却至室温且过滤。将滤饼用二噁烷洗涤且丢弃。在真空中蒸发滤液且通过柱色谱纯化残余物，以得到6-(1-叔丁氧基羰基-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-6-基)-3,4-二氢-2H-喹啉-1-甲酸叔丁酯(0.9g，2.10mmol，40.42％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值428.2；实测值429.2；Rt＝1.835min。
步骤2：6-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1,2,3,4-四氢喹啉的合成
将6-(1-叔丁氧基羰基-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-6-基)-3,4-二氢-2H-喹啉-1-甲酸叔丁酯(0.9g，2.10mmol)溶解于TFA(2.96g，25.96mmol，2mL)和DCM(2mL)的混合物中且将其在24℃下搅拌0.5h。反应完成之后，在真空中蒸发反应混合物。将残余物溶解于DCM(5mL)中且用水(3*5mL)洗涤。将有机层经Na2SO4干燥且在真空中蒸发，以得到6-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1,2,3,4-四氢喹啉(0.38g，1.66mmol，79.25％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值228.2；实测值229.2；Rt＝0.878min。
步骤3：6-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,2,3,4-四氢喹啉的合成
将6-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1,2,3,4-四氢喹啉(0.38g，1.66mmol)溶解于甲醇(2mL)中且在搅拌的情况下一次性添加硼氢化钠(75.56mg，2.00mmol，70.61μL)。12h之后，将反应混合物蒸发。将残余物溶解于DCM(5mL)中且用水(2*5mL)洗涤。将有机层经Na2SO4干燥且在减压下蒸发，以得到6-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,2,3,4-四氢喹啉(0.2g，粗品)，其不经纯化即用于下一步骤。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值230.2；实测值231.2；Rt＝0.73min。
6P.6-(5-甲基-2-哌啶基)-3,4-二氢-1H-喹啉-2-酮的合成
步骤1：3-甲基-6-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,4-二氢-1H-喹啉-2-酮(2.5g，9.15mmol)、3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(2.63g，7.63mmol)、碳酸钠(2.43g，22.88mmol，958.62μL)和Pd(dppf)Cl2 DCM(249.18mg，305.10μmol)添加到1,4-二噁烷(15mL)和水(5mL)的混合物中。在惰性气氛、75℃下，将反应混合物搅拌12h，然后冷却至室温且过滤。将滤饼用二噁烷洗涤且丢弃。在真空中蒸发滤液且通过柱色谱纯化残余物，以得到3-甲基-6-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1g，2.92mmol，38.29％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值342.2；实测值343.2；Rt＝1.405min。
步骤2：6-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-3,4-二氢-1H-喹啉-2-酮的合成
将3-甲基-6-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1g，2.92mmol)溶解于TFA(4.12g，36.10mmol，2.78mL)和DCM(2mL)的混合物中且在24℃下搅拌0.5h。反应完成之后，在真空中蒸发反应混合物。将残余物溶解于DCM(25mL)中且用水(3*5mL)洗涤。将有机层经Na2SO4干燥且在真空中蒸发，以得到6-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-3,4-二氢-1H-喹啉-2-酮(0.67g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值242.2；实测值243.2；Rt＝0.751min。
步骤3：6-(5-甲基-2-哌啶基)-3,4-二氢-1H-喹啉-2-酮的合成
将6-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-3,4-二氢-1H-喹啉-2-酮(0.7g，2.89mmol)溶解于甲醇(8mL)中且在搅拌的情况下一次性添加硼氢化钠(131.14mg，3.47mmol，122.56μL)。12h之后，将反应混合物蒸发。将残余物溶解于HCl/二噁烷溶液中且蒸发，以得到6-(5-甲基-2-哌啶基)-3,4-二氢-1H-喹啉-2-酮(0.9g，粗品，HCl)，其不经纯化即用于下一步骤。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值230.2；实测值231.2；Rt＝0.730min。
6Q.5-(5-甲基哌啶-2-基)吡啶-2-胺
步骤1：6-(6-氨基-3-吡啶基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(4g，11.58mmol)、5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺(2.55g，11.58mmol)和碳酸钠(2.46g，23.17mmol，970.50μL)一起混合于二噁烷(48mL)和水(16mL)的混合物中。将所得混合物抽真空且用氩气回填三次，且向其中添加[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)与二氯甲烷的络合物(945.91mg，1.16mmol)。将反应混合物在90℃下加热18h。将反应混合物冷却至室温且用水(100mL)稀释。将所得混合物用EtOAc(3*150mL)萃取且将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且蒸发。通过柱色谱(SiO2，以己烷-MTBE-MeOH为流动相)纯化残余物，以获得6-(6-氨基-3-吡啶基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.98g，6.83mmol，58.95％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ1.02(d,3H),1.18(s,9H),1.81(m,1H),1.86(m,1H),2.36(m,1H),2.97(t,1H),4.07(m,1H),4.47(m,2H),5.21(s,1H),6.46(d,1H),7.37(d,1H),8.02(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值289.2；实测值290.2；Rt＝0.957min。
步骤2：5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)吡啶-2-胺的合成
将6-(6-氨基-3-吡啶基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.98g，6.84mmol)溶解于DCM(10mL)中且添加CF3COOH(10mL)。搅拌所得混合物1h。将反应混合物小心倒入K2CO3(20g)水溶液中且将所得混合物用DCM(2*50mL)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤出且蒸发，以获得5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)吡啶-2-胺(1.28g，6.75mmol，98.69％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ1.00(d,3H),1.37(m,1H),1.71(m,1H),1.92(m,1H),2.55(m,1H),2.72(m,1H),3.22(m,1H),3.93(m,1H),4.60(s,2H),6.49(d,1H),7.98(d,1H),8.44(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值189.2；实测值190.2；Rt＝0.669min。
步骤3：5-(5-甲基哌啶-2-基)吡啶-2-胺的合成
将5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)吡啶-2-胺(1.28g，6.76mmol)溶解于MeOH(25mL)中且分批添加硼氢化钠(767.62mg，20.29mmol，717.40μL)。搅拌所得混合物18h。将反应混合物在减压下浓缩且添加水(20mL)。将所得浆液用DCM(2*50mL)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤出且蒸发，以获得C11H17N3(1.23g，6.43mmol，95.08％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.86(d,3H),1.09(m,1H),1.61(m,5H),2.36(t,1H),3.07(m,1H),3.40(m,1H),4.33(s,2H),6.46(d,1H),7.44(d,1H),7.99(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值191.2；实测值192.2；Rt＝0.299min。
6R.N-甲基-5-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶-2-胺的合成
步骤1：3-甲基-6-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.95g，5.64mmol)、N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺(1.68g，6.21mmol，HCl)和碳酸钠(1.79g，16.93mmol，709.44μL)一起混合于二噁烷(24mL)和水(8mL)的混合物中。将所得混合物抽真空且用氩气回填三次，且向其中添加[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)与二氯甲烷的络合物(460.97mg，564.48μmol)。将反应混合物在90℃下加热18h。
将反应混合物冷却至室温且用水(50mL)稀释。将所得混合物用EtOAc(3*100mL)萃取且将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且蒸发。通过柱色谱(SiO2，以己烷-MTBE为流动相)纯化残余物，以获得3-甲基-6-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.28g，4.22mmol，74.68％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ1.02(d,3H),1.18(s,9H),1.82(m,1H),2.01(m,1H),2.37(m,1H),2.93(d,3H),2.97(m,1H),4.07(m,1H),4.62(m,1H),5.20(m,1H),6.37(d,1H),7.41(d,1H),8.05(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值303.2；实测值304.2；Rt＝0.988min。
步骤2：N-甲基-5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)吡啶-2-胺的合成
将3-甲基-6-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.28g，4.22mmol)溶解于DCM(6.5mL)中且添加CF3COOH(6.5mL)。搅拌所得混合物1h。将反应混合物倒入K2CO3(12g)水溶液中且将所得混合物用DCM(2*50mL)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤出且蒸发，以获得N-甲基-5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)吡啶-2-胺(0.883g，粗品)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ0.99(d,3H),1.38(m,1H),1.72(m,1H),1.92(m,2H),2.53(m,1H),2.73(m,1H),2.97(d,3H),3.21(m,1H),4.76(m,1H),6.39(d,1H),8.00(d,1H),8.46(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值203.2；实测值204.2；Rt＝0.785min。
步骤3：N-甲基-5-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶-2-胺的合成
将N-甲基-5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)吡啶-2-胺(0.883g，4.34mmol)溶解于MeOH(15mL)中且分批添加硼氢化钠(493.00mg，13.03mmol，460.75μL)。搅拌所得混合物18h。将反应混合物在减压下浓缩且将水(10mL)添加到残余物中。将所得浆液用DCM(2*40mL)萃取且将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且蒸发，以获得N-甲基-5-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶-2-胺(0.957g，粗品)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.86(d,3H),1.10(m,1H),1.62(m,4H),2.38(m,1H),2.88(m,4H),3.07(m,1H),3.39(m,1H),4.44(m,1H),6.33(d,1H),7.49(d,1H),8.00(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值205.2；实测值206.2；Rt＝0.448min。
6S.(2S,5R)-2-(苯并噻吩-5-基)-5-甲基哌啶的合成
步骤1：6-(苯并噻吩-5-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将2-(苯并噻吩-5-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(5.3g，20.37mmol)、3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(7.74g，22.41mmol)和碳酸钠(6.48g，61.12mmol，2.56mL)于二噁烷(60mL)和水(20mL)中的悬浮液脱气且用Ar再填充三次。向此溶液中添加[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)与二氯甲烷的络合物(831.83mg，1.02mmol)。将所得混合物脱气，用Ar再填充且在65℃下搅拌12h。过滤出沉淀，将其用二噁烷(50ml)洗涤。在真空中蒸发溶剂且将残余物溶解于150ml水中且用EtOAc(2*100ml)萃取。将合并的有机层用盐水(100ml)洗涤，经Na2SO4干燥且蒸发，以获得粗产物(7.5g)。通过梯度色谱(己烷-MTBE)纯化粗产物，以获得6-(苯并噻吩-5-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(4.1g，12.44mmol，61.09％产率)。
1H NMR(CDCl3,400MHz):δ0.885(s,9H),0.929(m,3H),1.838(m,2H),2.33(m,1H),3.00(m,1H),3.86(d,1H),5.34(m,1H),7.21(m,1H),7.38(m,1H),7.68(m,2H),7.88(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc+1]+m/z：计算值329.2；实测值231.0；Rt＝1.774min。
步骤2：6-(苯并噻吩-5-基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶的合成
将6-(苯并噻吩-5-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(4.1g，12.44mmol)溶解于三氟乙酸(29.60g，259.60mmol，20mL)中。将所得混合物在25℃下搅拌1h(直至气体逸出结束)。将溶液的pH用10％ NaOH溶液调节至8且用DCM(3*70ml)萃取。将合并的有机层用盐水(50ml)洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中蒸发，以获得6-(苯并噻吩-5-基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶(2.5g，10.90mmol，87.59％产率)。
1H NMR(CDCl3,500MHz):δ1.03(d,3H),1.44(m,1H),1.75(m,1H),1.96(m,1H),2.67(m,1H),2.88(dd,1H),3.29(dd,1H),4.03(d,1H),7.36(d,1H)m 7.45(d,1H),7.86(m,2H),8.21(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值229.2；实测值230.0；Rt＝0.923min。
步骤3：(2S,5R)-2-(苯并噻吩-5-基)-5-甲基哌啶的合成
在0℃下，向6-(苯并噻吩-5-基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶(2.5g，10.90mmol)于MeOH(50mL)中的溶液中分批添加硼氢化钠(824.81mg，21.80mmol，770.85μL)。将所得混合物在25℃下搅拌2h在真空中蒸发溶剂，将残余物溶解于水(30ml)中且用DCM(3*30ml)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(2*50ml)洗涤，经Na2SO4干燥且蒸发，以得到外消旋-(2S,5R)-2-(苯并噻吩-5-基)-5-甲基哌啶(2.1g，9.08mmol，83.27％产率)。
1H NMR(DMSO,400MHz):δ0.82(d,3H),1.07(m,1H),1.36(dd,1H),1.51(m,1H),1.68-1.72(m,2H),2.25(dd,1H),2.97(d,1H),3.25(brs,1H),3.54(d,1H),7.33-7.37(m,2H),7.66(d,1H),7.81-7.85(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值231.1；实测值232.0；Rt＝0.790min。
6T.2-甲基-5-(5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑的合成
步骤1：5-溴-2-甲基苯并[d]噻唑的合成
将2-氨基-4-溴-苯硫醇(19g，93.10mmol)和4-甲基苯磺酸水合物(106.25mg，558.58μmol，85.69μL)溶解于原乙酸三甲酯(38.03g，316.53mmol，3.49mL)中。将所得溶液在100℃下再搅拌6h。然后直接浓缩混合物，以得到所需产物5-溴-2-甲基-1,3-苯并噻唑(20g，87.68mmol，94.18％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.79(s,3H),7.55(d,1H),8.00(d,1H),8.11(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值228.2；实测值229.2；Rt＝1.267min。
步骤2：2-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑的合成
将乙酸钾(18.93g，192.89mmol，12.06mL)添加到5-溴-2-甲基-1,3-苯并噻唑(22g，96.45mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(28.16g，110.91mmol)于DMSO(200mL)中的溶液中。将反应烧瓶抽真空且用氩气再填充3次。然后在氩气流下添加PddppfCl2*DCM(3.94g，4.82mmol)。在90℃、惰性气氛下将所得混合物搅拌28h。然后，将其冷却，用EA(400mL)稀释且用水(2x200mL)洗涤。将有机层经Na2SO4干燥且在减压下浓缩。通过硅胶快速色谱，以0-100％己烷-EA梯度洗脱来纯化残余物，以得到2-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噻唑(22g，79.95mmol，82.90％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.35(s,12H),2.81(s,3H),7.78(m,2H),8.36(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值275.2；实测值276.2；Rt＝1.531min。
步骤3：3-甲基-6-(2-甲基苯并[d]噻唑-5-基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
将3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(16.73g，48.45mmol)、2-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噻唑(16g，58.15mmol)、[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)与DCM的络合物(1.98g，2.42mmol)和碳酸钠(15.41g，145.36mmol，6.09mL)于二噁烷(300mL)和水(100mL)的混合物在80℃、氩气气氛下搅拌18h。冷却至室温之后，过滤出反应混合物。将滤饼用二噁烷(500mL)洗涤且丢弃。在减压下浓缩滤液且通过硅胶快速色谱，以0至100％ MTBE-己烷梯度洗脱来纯化残余物，以得到3-甲基-6-(2-甲基-1,3-苯并噻唑-5-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(12g，34.84mmol，71.89％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.01(s,12H),1.85(m,1H),2.02(m,1H),2.43(m,1H),2.80(s,3H),3.01(t,1H),4.10(d,1H),5.36(m,1H),7.29(d,1H),7.69(d,1H),7.86(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值344.2；实测值345.2；Rt＝1.654min。
步骤4：2-甲基-5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯并[d]噻唑的合成
将3-甲基-6-(2-甲基-1,3-苯并噻唑-5-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(12.51g，36.31mmol)于TFA(66.25g，581.04mmol，44.76mL)中的溶液在20℃下搅拌1h，然后在真空中蒸发。将碎冰(50g)添加到残余物中且用10％氢氧化钠水溶液将pH调节至8。将所得混合物用乙酸乙酯(2*100mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到呈黄色固体的2-甲基-5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1,3-苯并噻唑(8.8g，36.01mmol，99.17％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.92(d,3H),1.33(m,1H),1.63(m,1H),1.86(m,1H),2.48(m,1H),2.81(s,3H),3.19(m,1H),3.92(m,1H),7.88(d,1H),7.97(d,1H),8.23(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值244.2；实测值245.2；Rt＝0.871min。
步骤5：2-甲基-5-(5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑的合成
在0℃下，将硼氢化钠(2.04g，54.02mmol，1.91mL)一次性添加到2-甲基-5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1,3-苯并噻唑(8.8g，36.01mmol)于MeOH(200mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在0℃下搅拌1h，然后在真空中蒸发。将残余物用水(150mL)稀释且用二氯甲烷(2*150mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到呈黄色固体的2-甲基-5-(5-甲基-2-哌啶基)-1,3-苯并噻唑(8g，32.47mmol，90.17％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.83(d,3H),1.34(m,1H),1.36(m,1H),1.52(m,1H),1.75(m,2H),2.26(m,1H),2.38(m,1H),2.75(s,3H),3.01(m,1H),3.55(m,1H),7.38(d,1H),7.83(s,1H),7.89(d,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值246.2；实测值247.2；Rt＝0.696min。
6U.2-(3,4-二氟苯基)-5-甲基哌啶的合成
步骤1：6-(3,4-二氟苯基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
将3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(5g，14.48mmol)、(3,4-二氟苯基)硼酸(2.29g，14.48mmol)和碳酸钠(4.60g，43.44mmol，1.82mL)添加到二噁烷(45mL)和水(15mL)的混合物中。将所得混合物抽真空然后用氩气回填，将此操作重复三次，然后在氩气下添加Pd(dppf)2Cl2*DCM(723.93μmol)。将反应混合物在氩气、70℃下搅拌14h，然后冷却且过滤。将滤饼用1,4-二噁烷(2*20ml)洗涤且丢弃。在真空中蒸发滤液，以得到呈棕色油状物的6-(3,4-二氟苯基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(4g，12.93mmol，89.31％产率)，其不经纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值209.2；实测值210.2；Rt＝0.683min。
步骤2：6-(3,4-二氟苯基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶的合成
将6-(3,4-二氟苯基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(4g，12.93mmol)于三氟乙酸(29.49g，258.61mmol，19.92mL)中的溶液在25℃下搅拌1h，然后在真空中蒸发。将碎冰(15g)添加到残余物中且用10％氢氧化钠水溶液将pH调节至10。将所得混合物用DCM(2*30ml)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到呈棕色固体的6-(3,4-二氟苯基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶(2g，9.56mmol，73.92％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值209.2；实测值210.2；Rt＝0.671min。
步骤3：2-(3,4-二氟苯基)-5-甲基哌啶的合成
在0℃下，将硼氢化钠(723.26mg，19.12mmol，675.94μL)一次性添加到6-(3,4-二氟苯基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶(2g，9.56mmol)于MeOH(50mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在0℃下搅拌1h，然后在真空中蒸发。将残余物用水(20ml)稀释且用DCM(2*40ml)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发。使所获得的油状物经历CC，以得到2-(3,4-二氟苯基)-5-甲基哌啶(0.528g，2.50mmol，26.15％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.86(d,3H),1.24(m,1H),1.86(m,3H),2.08(m,1H),2.48(m,1H),2.58(m,1H),3.18(m,1H),7.48(m,2H),7.84(s,1H),9.61(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值211.2；实测值212.2；Rt＝0.969min。
6V.5-甲基-2-(3,4,5-三氟苯基)哌啶的合成
步骤1：3-甲基-6-(3,4,5-三氟苯基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
将3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(5g，14.48mmol)、(3,4,5-三氟苯基)硼酸(2.55g，14.48mmol)和碳酸钠(4.60g，43.44mmol，1.82mL)添加到二噁烷(45mL)和水(15mL)的混合物中。将所得混合物抽真空然后用氩气回填，将此操作重复三次，然后在氩气下添加Pd(dppf)2Cl2*DCM(723.94μmol)。将反应混合物在氩气、70℃下搅拌12h，然后冷却且过滤。将滤饼用1,4-二噁烷(2*20ml)洗涤且丢弃。在真空中蒸发滤液，以得到呈棕色油状物的3-甲基-6-(3,4,5-三氟苯基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(4.5g，13.75mmol，94.95％产率)，其不经纯化即用于下一步骤。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值227.2；实测值228.2；Rt＝1.586min。
步骤2：3-甲基-6-(3,4,5-三氟苯基)-2,3,4,5-四氢吡啶的合成
将3-甲基-6-(3,4,5-三氟苯基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(4.5g，13.75mmol)于三氟乙酸(31.35g，274.94mmol，21.18mL)中的溶液在25℃下搅拌1h，然后在真空中蒸发。将碎冰(15g)添加到残余物中且用10％氢氧化钠水溶液将pH调节至10。将所得混合物用DCM(2*30ml)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到呈棕色固体的3-甲基-6-(3,4,5-三氟苯基)-2,3,4,5-四氢吡啶(2.5g，11.00mmol，80.03％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值227.2；实测值228.2；Rt＝0.887min。
步骤3：5-甲基-2-(3,4,5-三氟苯基)哌啶的合成
在0℃下，将硼氢化钠(832.49mg，22.00mmol，778.03μL)一次性添加到3-甲基-6-(3,4,5-三氟苯基)-2,3,4,5-四氢吡啶(2.5g，11.00mmol)于MeOH(50mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在0℃下搅拌1h，然后在真空中蒸发。将残余物用水(20ml)稀释且用二氯甲烷(2*40ml)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发。使所获得的油状物经历CC，以得到5-甲基-2-(3,4,5-三氟苯基)哌啶(0.45g，1.96mmol，17.84％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)0.86(d,3H),1.12(m,1H),1.28(m,1H),1.46(m,1H),1.63(m,1H),1.82(m,2H),2.36(m,1H),3.18(m,1H),3.48(m,1H),7.02(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值229.2；实测值230.2；Rt＝0.773min。
6W.4-(5-甲基哌啶-2-基)环己醇的合成
步骤1：3-甲基-6-(1,4-二氧杂螺[4.5]癸-7-烯-8-基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
将3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(7.22g，18.82mmol)、2-(1,4-二氧杂螺[4.5]癸-7-烯-8-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(5.01g，18.82mmol)和碳酸钠(5.98g，56.45mmol)添加到二噁烷(120mL)和水(40mL)的混合物中。将所得混合物抽真空然后用氩气回填，将此操作重复三次，然后在氩气下添加Pd(dppf)Cl2(688.40mg，940.83μmol)。将反应混合物在氩气、90℃下搅拌16h，然后冷却且过滤。将滤饼用乙酸乙酯(200ml)洗涤且丢弃。在真空中蒸发滤液，且通过硅胶柱色谱使用己烷/MTBE梯度(0-100％ MTBE)纯化残余物，以得到呈淡黄色胶状物的6-(1,4-二氧杂螺[4.5]癸-7-烯-8-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(2.00g，5.96mmol，31.69％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.96(d,3H),1.48(s,9H),1.68(m,1H),1.82(m,2H),1.96(m,1H),2.26(m,2H),2.38(m,3H),2.76(m,1H),3.82(m,1H),3.96(d,4H),5.21(m,1H),5.68(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值235.2；实测值236.2；Rt＝1.392min。
步骤2：4-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)环己-3-烯酮的合成
在25℃下，将三氟乙酸(40.79g，357.74mmol，27.56mL)添加到6-(1,4-二氧杂螺[4.5]癸-7-烯-8-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.2g，3.58mmol)中。将所得反应混合物在25℃下搅拌18h，然后在真空中蒸发，以得到呈橙色胶状物的粗品4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)环己-3-烯-1-酮(3g，粗品)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)1.08(d,3H),1.56(m,1H),2.12(m,2H),2.62(m,2H),2.89(m,2H),3.32(m,3H),4.02(m,1H),4.66(m,2H),7.27(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值191.2；实测值192.2；Rt＝1.648min。
步骤3：4-(5-甲基哌啶-2-基)环己-3-烯醇的合成
在0.2h内将硼氢化钠(2.5g，66.09mmol，2.34mL)分批添加到4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)环己-3-烯-1-酮(3g，15.68mmol)于DME(100mL)中的搅拌溶液中。将反应混合物在0℃下搅拌2h，然后在0℃下缓慢添加MeOH(50mL)以淬灭反应物(起泡！)。使所得混合物升温至25℃，搅拌0.5h，然后在真空中蒸发。将残余物用水(50ml)稀释且用10％氢氧化钠水溶液将pH调节至10。将所得混浊溶液用二氯甲烷(2*70ml)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到呈淡黄色胶状物的粗品4-(5-甲基-2-哌啶基)环己-3-烯-1-醇(0.65g，3.33mmol，21.22％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)0.96(d,3H),1.22(m,1H),1.96(m,8H),2.36(m,3H),2.86(m,1H),3.42(m,1H),3.52(m,1H),3.85(m,1H),3.96(m,1H),5.57(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值195.2；实测值196.2；Rt＝0.598min。
步骤4：4-(5-甲基哌啶-2-基)环己醇的合成
将4-(5-甲基-2-哌啶基)环己-3-烯-1-醇(0.65g，3.33mmol)和钯(10％于碳上)(0.5g，3.33mmol)于MeOH(40mL)中的混合物在氢气气氛、45℃下搅拌12h。过滤出催化剂，在真空中蒸发滤液，以得到呈淡黄色胶状物的4-(5-甲基-2-哌啶基)环己醇(0.4g，2.03mmol，60.91％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.86(d,3H),1.12(m,2H),1.36(m,2H),1.54(m,5H),1.86(m,4H),2.08(m,2H),2.28(m,2H),3.12(m,1H),3.55(m,1H),4.02(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值197.2；实测值198.2；Rt＝0.719min。
6X.5-(5-甲基-2-哌啶基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶的合成
步骤1：5-溴吡唑并[3,4-b]吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
在0℃下，将二碳酸二-叔丁酯(8.99g，41.21mmol，9.46mL)逐滴添加到5-溴-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶(8g，40.40mmol)和DMAP(49.36mg，404.00μmol)于DCM(80mL)中的经搅拌悬浮液中。将所得混合物在室温下搅拌12h，然后在真空中蒸发，倒入到水(100ml)中且用DCM(2x50 ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(2*30ml)洗涤，经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到产物5-溴吡唑并[3,4-b]吡啶-1-甲酸叔丁酯(9.3g，31.19mmol，77.21％产率)。
1H NMR(CDCl3,500MHz):1.73(s,9H),8.13(s,1H),8.23(s,1H),8.78(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc+H]+m/z：计算值298.1；实测值200.0；Rt＝1.243min。
步骤2：5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡唑并[3,4-b]吡啶-1-甲酸叔丁酯(P1)和5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶(P2)的合成
将5-溴吡唑并[3,4-b]吡啶-1-甲酸叔丁酯(9.3g，31.19mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(7.92g，31.19mmol)一起混合于二噁烷(100mL)中。将所得混合物抽真空然后用氩气回填，将此操作重复三次，然后在氩气下添加[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)(1.14g，1.56mmol)。将反应混合物在氩气、100℃下搅拌8h，然后冷却且在真空中蒸发，将其倒入水(150ml)中且用EtOAc(2x80 ml)萃取。将合并的有机萃取物用水洗涤(2*40ml)，经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，留下13g粗产物，13g粗产物通过硅胶柱色谱，使用己烷/MTBE梯度(10-100％ MTBE)洗脱进行纯化，以得到5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡唑并[3,4-b]吡啶-1-甲酸叔丁酯(2.5g，7.24mmol，23.22％产率)和5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶(2g，8.16mmol，26.16％产率)。
P1-1：1H NMR(CDCl3,500MHz):1.36(s,12H),1.73(s,9H),8.15(s,1H),8.51(s,1H),9.07(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc+H]+m/z：计算值345.2；实测值246.2；Rt＝0.940min。
P1-2：1H NMR(CDCl3,500MHz):1.32(s,12H),8.13(s,1H),8.61(s,1H),8.95(s,1H),未观察到NH。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值245.1；实测值246.2；Rt＝0.555min。
步骤3：5-(1-叔丁氧基羰基-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-6-基)吡唑并[3,4-b]吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡唑并[3,4-b]吡啶-1-甲酸叔丁酯(4g，11.59mmol)和3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(4.00g，11.59mmol)一起混合于水(8mL)中。将所得混合物抽真空然后用氩气回填，将此操作重复三次，然后在氩气下添加水(8mL)中的碳酸钠(2.46g，23.17mmol，970.88μL)和[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)与二氯甲烷的络合物(473.14mg，579.37μmol)。将反应混合物在氩气、80℃下搅拌12h，然后冷却且在真空中蒸发，将其倒入水(120ml)中且用EtOAc(2x60 ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(2*40ml)洗涤，经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，留下3.6g粗产物，3.6g粗产物通过硅胶柱色谱，使用己烷/MTBE梯度(10-100％ MTBE)进行纯化，以得到产物5-(1-叔丁氧基羰基-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-6-基)吡唑并[3,4-b]吡啶-1-甲酸叔丁酯(2.4g，5.79mmol，49.97％产率)。
1H NMR(DMSO,400MHz):1.04(s,9H),1.91(m,6H),3.05(m,1H),4.07(m,1H),5.33(m,1H),7.97(s,1H),8.05(s,1H),8.57(s,1H),11.78(s,1H)(仅一个Boc基团存在于结构中)
LCMS(ESI)：[M-Boc+H]+m/z：计算值414.5；实测值315.2；Rt＝1.367min。
步骤4：5-(3-甲基-1,2,3,4-四氢吡啶-6-基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶的合成
将3-甲基-6-(1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(2.4g，7.63mmol)于TFA(26.11g，229.02mmol，17.64mL)中的溶液在0℃下搅拌1h，然后在真空中蒸发。将碎冰(20g)添加到残余物中且用10％碳酸氢钠水溶液将pH调节至8。将所得混合物用乙酸乙酯(2*40mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到呈黄色固体的5-(3-甲基-1,2,3,4-四氢吡啶-6-基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶(1.3g，6.07mmol，79.48％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(500MHz,CDCl3)1.03(d,3H),1.46(m,1H),1.61(m,1H),1.77(m,1H),2.82(m,1H),2.86(m,1H),3.32(m,1H),4.07(m,1H),8.08(s,1H),8.47(s,1H),9.11(s,1H),11.35(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值214.27；实测值215.2；Rt＝0.722min。
步骤5：5-(5-甲基-2-哌啶基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶的合成
在0℃下，将硼氢化钠(344.31mg，9.10mmol，321.78μL)一次性添加到5-(3-甲基-1,2,3,4-四氢吡啶-6-基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶(1.3g，6.07mmol)于MeOH(25mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在0℃下搅拌2h，然后在真空中蒸发。将残余物用水(20mL)稀释且用二氯甲烷(2*30mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到呈棕色固体的5-(5-甲基-2-哌啶基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶(1.2g，5.55mmol，91.45％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(500MHz,CDCl3)1.08(d,3H),1.62(m,2H),1.73(m,2H),1.93(m,2H),2.48(t,1H),3.18(m,1H),3.76(m,1H),8.06(s,1H),8.15(s,1H),8.63(s,1H),11.78(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值216.2；实测值217.2；Rt＝0.728min。
6Y.2-(3-氯-4-氟苯基)-5-甲基哌啶的合成
步骤1：N-[5-(3-氯-4-氟苯基)-2-甲基-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯的合成
在搅拌的情况下，在Ar下，向干燥的2颈烧瓶中添加镁(1.16g，47.75mmol，666.93μL)、无水THF(75mL)和4-溴-2-氯-1-氟苯(10g，47.75mmol，5.78mL)。轻微加热混合物，直到其自身保持回流。当回流平息时，施加外部加热以再保持回流1小时。将5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(7.83g，36.73mmol)添加到具有温度计的干燥的3颈圆底烧瓶中。在搅拌的情况下，在Ar下，添加无水THF(75mL)且将溶液冷却至-78℃。在1小时内将格任亚试剂添加到t-Boc-内酰胺中，使内部温度保持低于-70℃。使溶液升温至室温且添加饱和NH4Cl。将水层用DCM萃取3x 50mL且将有机层合并，经Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩。获得呈淡黄色油状物的N-[5-(3-氯-4-氟苯基)-2-甲基-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯(13g，粗品)且其不经进一步纯化即用于下一步骤。
1H NMR(CDCl3,500MHz):δ0.95(d,3H),1.44(s,9H),1.71-1.80(m,4H),2.98(t,2H),4.02(t,1H),4.68(brs,1H),7.20(t,1H),7.87(dd,1H),8.03(d,1H)。
LCMS(ESI)：[M+Na]+m/z：计算值343.2；实测值366.2；Rt＝1.622min。
步骤2：2-(3-氯-4-氟苯基)-5-甲基哌啶的合成
将N-[5-(3-氯-4-氟苯基)-2-甲基-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯(13g，37.81mmol)于三氟乙酸(17.25g，151.24mmol，11.65mL)中搅拌1h。使用TLC检查反应进展。将50％重量/体积NaOH溶液添加到混合物中，直到pH为13-14。将产物用DCM萃取4x 20mL且将有机层合并，以MgSO4干燥且蒸发。将产物溶解于水(25mL)/MeOH(150mL)混合物中且添加到烧瓶中，随后添加硼氢化钠(1.43g，37.81mmol，1.34mL)。将混合物在Ar下搅拌过夜。将混合物用1-2M HCl酸化，直到pH为1-3且静置30分钟。然后添加NaOH溶液，直到pH为13-14且将产物用DCM(4x 100mL)萃取，将有机层合并，以Na2SO4干燥，过滤且蒸发。通过CC(Companioncombiflash；120gSiO2；氯仿/乙腈，其中乙腈为0至17％，流速＝85ml/min，Rv＝7-11cv.)纯化残余物，以得到呈淡黄色油状物的2-(3-氯-4-氟苯基)-5-甲基哌啶(2.2g，9.66mmol，25.55％产率)。
1H NMR(CDCl3,400MHz):δ0.86(d,3H),1.12(m,1H),1.42(m,1H),1.61-1.84(m,4H),2.37(t,1H),3.10(d,1H),3.48(d,1H),7.04(t,1H),7.18(dd,1H),7.42(d,1H)
LCMS(ESI)：[M+Н]+m/z：计算值227.1；实测值228.2；Rt＝0.895min。
6Z.2-(3,4-二氯苯基)-5-甲基哌啶的合成
步骤1：6-(3,4-二氯苯基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(5g，14.48mmol)、(3,4-二氯苯基)硼酸(2.76g，14.48mmol)和碳酸钠(4.60g，43.44mmol，1.82mL)添加到二噁烷(45mL)和水(15mL)的混合物中。将所得混合物抽真空然后用氩气回填，将此操作重复三次，然后在氩气下添加Pd(dppf)2Cl2*DCM(723.93μmol)。将反应混合物在氩气、70℃下搅拌15h，然后冷却且过滤。将滤饼用1,4-二噁烷(2*20ml)洗涤且丢弃。在真空中蒸发滤液，以得到呈棕色油状物的6-(3,4-二氯苯基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(4.5g，13.15mmol，90.81％产率)，其不经纯化即用于下一步骤。
步骤2：6-(3,4-二氯苯基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶的合成
将6-(3,4-二氯苯基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(4.5g，13.15mmol)于三氟乙酸(29.98g，262.96mmol，20.26mL)中的溶液在25℃下搅拌1h，然后在真空中蒸发。将碎冰(15g)添加到残余物中且用10％氢氧化钠水溶液将pH调节至10。将所得混合物用二氯甲烷(2*30ml)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到呈棕色固体的6-(3,4-二氯苯基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶(3g，12.39mmol，94.23％产率)，其直接用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M+Н]+m/z：计算值241.1；实测值242.2；Rt＝0.793min。
步骤3：2-(3,4-二氯苯基)-5-甲基哌啶的合成
在0℃下，将硼氢化钠(937.44mg，24.78mmol，876.11μL)一次性添加到6-(3,4-二氯苯基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶(3g，12.39mmol)于MeOH(50mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在0℃下搅拌1h，然后在真空中蒸发。将残余物用水(20ml)稀释且用二氯甲烷(2*40ml)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发。使所获得的油状物经历HPLC(2-10min 50-70％ ACN+HCL/H2O 30ml/min(装载泵4ml ACN+HCL柱：SunFire 100*19mm，5微米)，以得到2-(3,4-二氯苯基)-5-甲基哌啶(1.43g，5.86mmol，47.27％产率)。
1H NMR(DMSO,400MHz):0.88(d,3H),1.22(m,1H),1.85(m,2H),2.05(m,1H),2.67(m,1H),4.22(m,1H),7.52(d,1H),7.69(d,1H),8.02(s,1H),9.62(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+Н]+m/z：计算值243.1；实测值244.2；Rt＝2.063min。
6AA.2-(3-氯-4-甲基苯基)-5-甲基哌啶的合成
步骤1：6-(3-氯-4-甲基苯基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(5g，14.48mmol)、(3-氯-4-甲基苯基)硼酸(2.47g，14.48mmol)和碳酸钠(4.60g，43.44mmol，1.82mL)添加到二噁烷(45mL)和水(15mL)的混合物中。将所得混合物抽真空然后用氩气回填，将此操作重复三次，然后在氩气下添加Pd(dppf)2Cl2*DCM(723.93μmol)。将反应混合物在氩气、70℃下搅拌15h，然后冷却且过滤。将滤饼用1,4-二噁烷(2*20ml)洗涤且丢弃。在真空中蒸发滤液，以得到呈棕色油状物的6-(3-氯-4-甲基苯基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(4g，12.43mmol，85.84％产率)，其不经纯化即用于下一步骤。
LCMS(ESI)：[M-tBu]+m/z：计算值265.1；实测值266.2；Rt＝1.827min。
步骤2：6-(3-氯-4-甲基苯基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶的合成
将6-(3-氯-4-甲基苯基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(4g，12.43mmol)于三氟乙酸(28.34g，248.57mmol，19.15mL)中的溶液在25℃下搅拌1h，然后在真空中蒸发。将碎冰(15g)添加到残余物中且用10％氢氧化钠水溶液将pH调节至10。将所得混合物用二氯甲烷(2*30ml)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到呈棕色固体的6-(3-氯-4-甲基苯基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶(2g，9.02mmol，72.58％产率)，其直接用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值221.1；实测值222.0；Rt＝0.999min。
步骤3：2-(3-氯-4-甲基苯基)-5-甲基哌啶的合成
在0℃下，将硼氢化钠(682.51mg，18.04mmol，637.86μL)一次性添加到6-(3-氯-4-甲基苯基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶(2g，9.02mmol)于MeOH(50mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在0℃下搅拌1h，然后在真空中蒸发。将残余物用水(20ml)稀释且用二氯甲烷(2*40ml)萃取。将残余物用水(20ml)稀释且用二氯甲烷(2*40ml)萃取。使所获得的油状物经历HPLC(Waters SunFire C18 19*100mm 5mkm柱，以己烷-MeOH 50-50为流动相，流速12mL/min)，以得到2-(3-氯-4-甲基苯基)-5-甲基哌啶(513.6mg，2.30mmol，25.45％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值223.1；实测值224.4；Rt＝2.606min。
6BB.4-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]-1H-吲唑的合成
步骤1：6-(1H-吲唑-4-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将碳酸钠(7.82g，73.74mmol，3.09mL)添加到3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(9.34g，27.04mmol)和4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吲唑(6g，24.58mmol)于二噁烷(90mL)和水(30mL)中的溶液中。将反应烧瓶抽真空且用氩气再填充3次。然后，在氩气流下添加Pd(dppf)Cl2*DCM(1.00g，1.23mmol)。在90℃、惰性气氛下将所得混合物搅拌14h。将反应混合物蒸发，以得到粗产物(25g)，其通过梯度柱色谱进行纯化，以得到6-(1H-吲唑-4-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(4.2g，13.40mmol，54.52％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值313.2；实测值314.2；Rt＝1.337min。
步骤2：4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1H-吲唑的合成
向6-(1H-吲唑-4-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(2g，6.38mmol)中添加三氟乙酸(7.28g，63.82mmol，4.92mL)且将反应混合物在25℃下搅拌1h。蒸发TFA。将残余物用氯仿稀释且蒸发至干，以得到4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1H-吲唑(0.9g，4.22mmol，66.12％产率)。
1H NMR(CDCl3,400MHz):1.53(d,3H),1.73(m,1H),2.22(m,2H),3.45(m,1H),3.49(m,2H),4.14(m,1H),7.58(d,1H),7.65(dd,1H),7.90(d,1H),8.35(s,1H),12.55(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值213.2；实测值214.2；Rt＝0.608min。
步骤3：4-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]-1H-吲唑的合成
向4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1H-吲唑(0.9g，4.22mmol)于MeOH(10mL)中的预冷却(0℃)溶液中分批添加硼氢化钠(191.56mg，5.06mmol，179.03μL)。然后将反应混合物在25℃下搅拌1h。蒸发MeOH，将残余物溶解于MeOH(5ml)中且添加二噁烷*HCl(5ml)。将混合物搅拌15min。蒸发溶剂，以得到粗品固体产物，将其用THF(2*10ml)洗涤，在真空中干燥，以得到4-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]-1H-吲唑(1.7g，粗品，HCl)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值215.2；实测值216.0；Rt＝0.773min。
6CC.6-(5-甲基哌啶-2-基)异吲哚啉-1-酮的合成
步骤1：3-甲基-6-(3-氧代异吲哚啉-5-基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
将3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(10.00g，28.96mmol)、6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)异吲哚啉-1-酮(7.50g，28.96mmol)和碳酸钠(9.21g，86.87mmol，3.64mL)添加到二噁烷(90mL)和水(30mL)的混合物中。将所得混合物抽真空然后用氩气回填，将此操作重复三次，然后在氩气下添加Pd(dppf)Cl2 DCM(1.18g，1.45mmol)。将反应混合物在氩气、70℃下搅拌12h，然后冷却且过滤。将滤饼用1,4-二噁烷(2*20ml)洗涤且丢弃。在真空中蒸发滤液，以得到呈棕色油状物的3-甲基-6-(3-氧代异吲哚啉-5-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(9g，27.41mmol，94.64％产率)，其不经纯化即用于下一步骤。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.96(d,3H),1.12(s,9H),1.42(m,1H),1.96(m,2H),2.48(m,1H),3.06(m,1H),3.54(s,2H),5.38(m,1H),7.49(m,2H),8.51(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值228.2；实测值229.2；Rt＝1.375min。
步骤2：6-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)异吲哚啉-1-酮的合成
将3-甲基-6-(3-氧代异吲哚啉-5-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(9g，27.41mmol)于TFA(31.25g，274.05mmol，21.11mL)中的溶液在25℃下搅拌1h，然后在真空中蒸发。将碎冰(15g)添加到残余物中且用10％氢氧化钠水溶液将pH调节至10。将所得混合物用DCM(2*30ml)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到呈棕色油状物的6-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)异吲哚啉-1-酮(6g，26.28mmol，95.90％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.97(d,3H),1.31(m,1H),1.72(m,1H),1.89(m,1H),2.72(m,1H),2.96(m,1H),3.33(m,2H),3.92(m,1H),4.42(s,2H),6.98(d,1H),7.12(d,1H),8.07(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值228.2；实测值229.2；Rt＝0.514min。
步骤3：6-(5-甲基哌啶-2-基)异吲哚啉-1-酮的合成
在0℃下，将硼氢化钠(1.99g，52.56mmol，1.86mL)分批添加到6-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)异吲哚啉-1-酮(6g，26.28mmol)于MeOH(60mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在0℃下搅拌1h，然后将溶液升温至室温。10h之后，将其在真空中蒸发。向残余物中添加水(20ml)且过滤。所获得的呈灰色固体的6-(5-甲基-2-哌啶基)异吲哚啉-1-酮(1g，4.34mmol，16.52％产率)不经纯化即用于下一步骤中。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.86(d,3H),1.12(m,1H),1.32(m,1H),1.56(m,1H),1.74(m,2H),2.22(m,1H),2.38(m,1H),3.01(m,1H),3.58(m,1H),4.38(s,2H),7.48(d,1H),7.55(d,1H),7.67(s,1H),8.49(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值230.2；实测值231.2；Rt＝0.761min。
6DD.外消旋-(2R,5S)-2-(3-氯-5-(三氟甲基)苯基)-5-甲基哌啶的合成
步骤1：2-(3-氯-5-(三氟甲基)苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷的合成
将1-溴-3-氯-5-(三氟甲基)苯(19.9g，76.70mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(29.22g，115.05mmol)和KOAc(22.58g，230.10mmol，14.38mL)于二噁烷(300mL)中的混合物用氩气脱气10min。接着添加Pd(dppf)Cl2*DCM(1g，1.22mmol)且将反应混合物加热至90℃达16h。将反应混合物冷却至室温，过滤且在减压下浓缩。将残余物用己烷处理，通过SiO2薄层过滤且蒸发至干。通过SiO2快速色谱(己烷:CHCl3)纯化粗产物，以得到2-[3-氯-5-(三氟甲基)苯基]-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(8.1g，26.43mmol，34.45％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.12(s,12H),7.92(m,3H)。
GCMS：计算值306.2；实测值306.2；Rt＝7.597min。
步骤2：6-(3-氯-5-(三氟甲基)苯基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
将3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(6.76g，19.57mmol)、2-[3-氯-5-(三氟甲基)苯基]-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(7.5g，24.47mmol)和碳酸钠(6.22g，58.72mmol，2.46mL)添加到1,4-二噁烷(22.5mL)和水(7.5mL)的混合物中。将所得混合物抽真空，然后用氩气回填，然后在氩气下添加Pd(dppf)Cl2*DCM(798.65mg，978.74μmol)。将反应混合物在75℃下搅拌16h，然后用水处理且将所需产物用DCM萃取，然后蒸发。获得6-[3-氯-5-(三氟甲基)苯基]-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(7g，粗品)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.93(d,3H),1.01(s,9H),1.36(m,1H),1.81(m,1H),2.36(m,1H),3.05(m,1H),3.87(m,1H),5.58(m,1H),7.47(s,1H),7.59(s,1H),7.72(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值275.2；实测值276.2；Rt＝1.752min。
步骤3：6-(3-氯-5-(三氟甲基)苯基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶的合成
将6-[3-氯-5-(三氟甲基)苯基]-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(7g，18.63mmol)(来自前一阶段的粗产物)溶解于99％三氟乙酸(22.20g，194.70mmol，15mL)中且搅拌1h，然后蒸发至干，以得到6-[3-氯-5-(三氟甲基)苯基]-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶(10g，粗品)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.06(d,3H),1.53(m,1H),1.98(m,2H),3.36(m,3H),3.95(m,1H),8.25(m,3H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值275.2；实测值276.2；Rt＝0.958min。
步骤4：外消旋-(2R,5S)-2-(3-氯-5-(三氟甲基)苯基)-5-甲基哌啶的合成
将6-[3-氯-5-(三氟甲基)苯基]-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶(10g，36.27mmol)溶解于甲醇(20mL)中，然后添加硼氢化钠(2.5g，66.08mmol，2.34mL)。剧烈搅拌1h(pH>7)之后，蒸发溶剂，将粗产物用水处理，然后用DCM(2*75ml)萃取且在真空中浓缩。通过硅胶快速色谱(CHCl3:MeOH，梯度)纯化粗产物。获得(2R,5S)-2-[3-氯-5-(三氟甲基)苯基]-5-甲基哌啶(1g，3.60mmol，9.93％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.88(d,3H),1.12(m,1H),1.32(m,1H),1.55(m,1H),1.81(m,2H),2.28(t,1H),3.02(d,1H),3.57(d,1H),7.53(s,1H),7.61(s,1H),7.66(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值277.2；实测值278.2；Rt＝0.929min。
6EE.2-(3-氯-5-氟苯基)-5-甲基哌啶的合成
步骤1：6-(3-氯-5-氟苯基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
将(3-氯-5-氟苯基)硼酸(3g，17.21mmol)和3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(5.94g，17.21mmol)溶解于二噁烷(30mL)中且将反应混合物彻底脱气，随后后续添加碳酸铯(22.42g，68.82mmol)和四(三苯基膦)钯(0)(198.82mg，172.05μmol)。将所获得的反应混合物在回流下搅拌过夜；反应完成之后，在减压下蒸发有机溶剂，且将粗混合物分配于EtOAc与H2O之间。将水层另外用EtOAc萃取两次；将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥且蒸发，以得到6-(3-氯-5-氟苯基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(7g，粗品)，其不经纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)0.96(d,3H),1.25(s,9H),1.95(m,2H),2.38(m,1H),2.93(t,1H),4.01(d,1H),5.32(m,1H),6.88(s,2H),7.05(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值325.2；实测值326.2；Rt＝1.815min。
步骤2：6-(3-氯-5-氟苯基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶的合成
将6-(3-氯-5-氟苯基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(7g，17.19mmol)溶解于DCM(50mL)中，随后添加TFA(9.80g，85.94mmol，6.62mL)且搅拌过夜。反应完成之后，将混合物用10％ NaOH水溶液洗涤，且蒸发有机溶剂，以得到6-(3-氯-5-氟苯基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶(3.5g，15.51mmol，90.22％产率)，其不经纯化即用于下一步骤。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.96(d,3H),1.36(m,1H),1.68(m,1H),1.91(m,1H),2.50(m,1H),2.68(m,1H),3.24(m,1H),3.96(m,1H),7.08(s,1H),7.38(s,1H),7.54(s,1H)。
步骤3：2-(3-氯-5-氟苯基)-5-甲基哌啶的合成
将6-(3-氯-5-氟苯基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶(3.5g，15.51mmol)溶解于MeOH(20mL)且冷却至0℃。将硼氢化钠(1.17g，31.02mmol，1.10mL)分批添加到所获得的混合物且再搅拌过夜。反应完成之后，将反应混合物用10％ HCl水溶液酸化至pH＝2，用MTBE洗涤(2*10mL)，用10％ NaOH水溶液碱化至pH＝10且用DCM(40mL)萃取。蒸发溶剂，得到纯的(2R,5S)-2-(3-氯-5-氟苯基)-5-甲基哌啶。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.88(d,3H),1.12(m,1H),1.48(m,1H),1.86(m,4H),2.39(m,1H),3.12(m,1H),3.52(m,1H),6.95(s,1H),7.00(s,1H),7.16(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值227.2；实测值228.2；Rt＝0.752min。
6FF.2-(3-氯-4-(三氟甲基)苯基)-5-甲基哌啶的合成
步骤1：6-(3-氯-4-(三氟甲基)苯基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
将2-[3-氯-4-(三氟甲基)苯基]-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(9g，29.36mmol)、3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(8.11g，23.49mmol)、碳酸钠(9.34g，88.09mmol，3.69mL)和Pd(dppf)Cl2 DCM(23.98g，29.36mmol)添加到1,4-二噁烷(100mL)和水(50mL)的混合物中且将反应混合物在氩气气氛、80℃下搅拌15h。冷却之后，将反应混合物用水稀释且用DCM萃取。将将有机层分离，经Na2SO4干燥，在减压下浓缩且提交至快速色谱(以己烷-MTBE为洗脱液混合物)，以得到6-[3-氯-4-(三氟甲基)苯基]-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(5g，粗品)，其不具有高杂质，但不经另外纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98(d,3H),1.12(s,9H),1.98(m,2H),2.41(m,1H),3.02(m,1H),3.98(m,1H),5.42(m,1H),7.38(m,2H),7.76(d,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值275.2；实测值276.2；Rt＝1.826min。
步骤2：6-(3-氯-4-(三氟甲基)苯基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶的合成
在室温下，向粗品6-[3-氯-4-(三氟甲基)苯基]-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(2g，5.32mmol)于DCM(5mL)中的搅拌溶液中添加TFA(7.40g，64.90mmol，5mL)。将所得反应混合物在室温下搅拌0.5h。完成之后，将反应混合物在减压下浓缩且将残余物用NaOH溶液处理且用DCM萃取。将合并的有机相用水、盐水洗涤，经Na2SO4干燥且在减压下浓缩，以获得粗品6-[3-氯-4-(三氟甲基)苯基]-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶(1.4g，粗品)，其不经纯化即直接用于下一步骤。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值275.2；实测值276.2；Rt＝0.953min。
步骤3：2-(3-氯-4-(三氟甲基)苯基)-5-甲基哌啶的合成
在室温下，向6-[3-氯-4-(三氟甲基)苯基]-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶(1.4g，4.72mmol)于MeOH(15mL)中的搅拌溶液中分3批添加硼氢化钠(232.27mg，6.14mmol，217.07μL)。将所得反应混合物在室温下搅拌12h，然后在减压下浓缩。将残余物溶解于DCM(15mL)中，用水洗涤，经Na2SO4干燥且在旋转蒸发仪上浓缩，以得到2-[3-氯-4-(三氟甲基)苯基]-5-甲基哌啶(1.8g，粗品)，其不经纯化即用于后续步骤。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值277.2；实测值278.2；Rt＝0.748min。
6GG.外消旋-3-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯磺酰胺的合成
步骤1：3-甲基-6-(3-氨磺酰基苯基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
将碳酸钠(1.87g，17.66mmol，739.77μL)添加到3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯磺酰胺(2g，7.06mmol)和3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(2.56g，7.42mmol)于二噁烷(20mL)和水(7.5mL)中的溶液中。将反应烧瓶抽真空且用氩气再填充3次。然后，在氩气流下添加PdCl2dppf*DCM(230.73mg，282.53μmol)。在90℃、惰性气氛下将所得混合物搅拌15h。然后，将其在减压下浓缩且将残余物用乙酸乙酯(50ml)萃取。通过短硅胶垫过滤所获得的溶液且在减压下蒸发，得到3-甲基-6-(3-氨磺酰基苯基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(4.58g，粗品)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.91(d,3H),1.44(s,9H),1.87(m,2H),2.42(m,1H),3.04(m,1H),3.88(m,1H),5.40(m,1H),7.34(m,2H),7.58(m,2H),7.68(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值252.4；实测值253.2；Rt＝1.354min。
步骤2：3-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯磺酰胺的合成
将三氟乙酸(22.20g，194.70mmol，15mL)添加到3-甲基-6-(3-氨磺酰基苯基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(4.58g，12.99mmol)于DCM(30mL)中的溶液中。将所得混合物在20℃下搅拌2h。然后，在减压下移除挥发物且将残余物用水(40ml)稀释。通过棉绒垫过滤出不溶性焦油。将滤液用20％ K2CO3水溶液碱化至pH≈10-11。过滤出经沉淀的白色固体且将其干燥，得到3-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯磺酰胺(968mg，3.84mmol，29.52％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.95(d,3H),1.34(m,1H),1.65(m,1H),1.88(m,1H),2.58(m,1H),2.79(m,1H),3.22(m,1H),3.94(m,1H),7.36(m,2H),7.58(t,1H),7.83(d,1H),7.96(d,1H),8.31(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值252.4；实测值253.2；Rt＝0.593min。
步骤3：外消旋-3-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯磺酰胺的合成
在15分钟内将硼氢化钠(217.69mg，5.75mmol，203.44μL)一次性添加到3-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯磺酰胺(968mg，3.84mmol)于MeOH(20mL)中的溶液中。将所得溶液在20℃下搅拌1h。然后，在减压下移除溶剂且将残余物分配于水(20ml)与乙酸乙酯(40ml)之间。将有机层分离，经Na2SO4干燥且在真空中蒸发，得到3-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]苯磺酰胺(980mg，粗品)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.85(d,3H),1.12(m,2H),1.31(m,1H),1.53(m,1H),1.77(m,2H),2.26(m,1H),3.01(m,1H),3.54(t,1H),7.30(m,2H),7.47(t,1H),7.54(d,1H),7.66(d,1H),7.85(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值254.4；实测值255.2；Rt＝0.766min。
6HH.外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-(3-(甲基磺酰基)苯基)哌啶的合成
步骤1：3-甲基-6-(3-(甲基磺酰基)苯基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
将3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(18g，52.12mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(3-甲基磺酰基苯基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(15g，53.16mmol)和碳酸钠(17g，160.39mmol，6.72mL)添加到1,4-二噁烷(270mL)和水(90mL)的混合物中。将所得混合物抽真空然后用氩气回填，将此操作重复三次，然后在氩气下添加Pd(dppf)Cl2*DCM(2.13g，2.61mmol)。将反应混合物在氩气、90℃下搅拌18h，然后冷却且过滤。将滤饼用二噁烷(2*50ml)洗涤且丢弃。在真空中蒸发滤液，且通过硅胶柱色谱，使用氯仿/乙酸乙酯梯度(0-100％乙酸乙酯)纯化残余物，以得到呈黄色胶状物的3-甲基-6-(3-甲基磺酰基苯基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(8.5g，24.18mmol，46.40％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)1.02(d,3H),1.03(m,1H),1.09(s,9H),1.89(d,1H),2.04(m,2H),2.44(d,1H),3.02(s,3H),4.12(m,1H),7.49(t,1H),7.57(d,1H),7.80(d,1H),7.86(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值251.4；实测值252.2；Rt＝1.360min。
步骤2：3-甲基-6-(3-(甲基磺酰基)苯基)-2,3,4,5-四氢吡啶的合成
将3-甲基-6-(3-甲基磺酰基苯基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(3g，8.54mmol)于三氟乙酸(29.20g，256.08mmol，19.73mL)中的溶液在25℃下搅拌1h。1小时之后，在减压下浓缩反应混合物。将所获得的残余物用冰冷水(50mL)稀释且用10％ NaOH水溶液中和，直至pH＝10。将所得混合物用二氯甲烷(2x50 mL)萃取。将合并的有机相经硫酸钠干燥且在减压下浓缩，以得到呈淡黄色胶状物的3-甲基-6-(3-甲基磺酰基苯基)-2,3,4,5-四氢吡啶(2g，7.96mmol，93.22％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)1.02(d,3H),1.46(m,1H),1.72(m,1H),1.94(m,1H),2.59(m,1H),2.79(m,1H),3.06(s,3H),3.27(m,1H),4.04(d,1H),7.58(t,1H),7.93(d,1H),8.05(d,1H),8.32(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值251.4；实测值252.2；Rt＝0.584min。
步骤3：外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-(3-(甲基磺酰基)苯基)哌啶的合成
在0℃下，向3-甲基-6-(3-甲基磺酰基苯基)-2,3,4,5-四氢吡啶(2g，7.96mmol)于MeOH(50mL)中的搅拌溶液中分批添加硼氢化钠(0.9g，23.79mmol，841.12μL)。将所得反应混合物在0℃下搅拌1h，然后使其升温至25℃且搅拌12h，且在减压下浓缩。将残余物用水(50mL)稀释且用二氯甲烷(2x 50mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空下浓缩，以获得呈淡黄色固体的粗产物(2R,5S)-5-甲基-2-(3-甲基磺酰基苯基)哌啶(1.8g，7.10mmol，89.28％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)0.98(d,3H),1.07(m,1H),1.87(m,5H),2.39(m,1H),3.06(s,3H),3.17(d,1H),3.67(d,1H),7.53(t,1H),7.68(d,1H),7.82(d,1H),7.95(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值253.4；实测值254.2；Rt＝0.626min。
6II.外消旋-N-甲基-3-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯磺酰胺的合成
步骤1：N-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯磺酰胺的合成
将40％重量/重量甲胺水溶液(2.71g，34.95mmol，3.02mL，40％纯度)添加到3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯磺酰基氟(2g，6.99mmol)于二噁烷(10mL)中的溶液中。将所得混合物在20℃下搅拌15h。然后，在减压下移除挥发物且将残余物用水(15ml)稀释。通过过滤收集所得白色沉淀且干燥，得到N-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯磺酰胺(1.75g，5.89mmol，84.25％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.32(s,12H),2.62(d,3H),4.48(m,1H),7.51(t,1H),7.91(d,1H),7.96(d,1H),8.25(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值297.4；实测值298.2；Rt＝1.323min。
步骤2：3-甲基-6-(3-(N-甲基氨磺酰基)苯基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
将碳酸钠(1.56g，14.72mmol，616.74μL)添加到N-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯磺酰胺(1.75g，5.89mmol)和3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(2.14g，6.18mmol)于二噁烷(17mL)和水(6.5mL)中的溶液中。将反应烧瓶抽真空且用氩气再填充3次。然后，在氩气流下添加PdCl2dppf*DCM(192.36mg，235.55μmol)。在90℃、惰性气氛下将所得混合物搅拌15h。然后，将其在减压下浓缩且将残余物用乙酸乙酯(50ml)萃取。通过短硅胶垫过滤所获得的溶液且在减压下蒸发，得到3-甲基-6-[3-(甲基氨磺酰基)苯基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(3.98g，粗品)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.89(d,3H),1.01(s,9H),1.36(m,2H),1.91(m,1H),2.38(d,3H),3.07(m,1H),3.56(m,2H),3.92(m,1H),7.53(m,2H),7.64(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值266.4；实测值267.2；Rt＝1.302min。
步骤3：N-甲基-3-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯磺酰胺的合成
将三氟乙酸(22.20g，194.70mmol，15mL)添加到3-甲基-6-[3-(甲基氨磺酰基)苯基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(3.97g，10.83mmol)于DCM(20mL)中的溶液中。将所得混合物在20℃下搅拌2h。然后，在减压下移除挥发物且将残余物用水(40ml)稀释。通过棉绒垫过滤出不溶性焦油。将滤液用20％ K2CO3水溶液碱化至pH≈10-11且用乙酸乙酯(2x25ml)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥且在减压下浓缩，得到N-甲基-3-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯磺酰胺(1.34g，5.03mmol，46.44％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.92(d,3H),1.31(m,1H),1.53(m,1H),1.96(m,1H),2.38(d,3H),2.56(m,1H),2.78(m,1H),3.20(m,1H),3.88(m,1H),7.45(m,1H),7.61(t,1H),7.78(d,1H),7.99(d,1H),8.23(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值266.4；实测值267.2；Rt＝0.693min。
步骤4：外消旋-N-甲基-3-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯磺酰胺的合成
在15分钟内将硼氢化钠(285.49mg，7.55mmol，266.82μL)分批添加到N-甲基-3-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯磺酰胺(1.34g，5.03mmol)于MeOH(20mL)中的溶液中。将所得溶液在20℃下搅拌1h。然后，在减压下移除溶剂且将残余物分配于水(20ml)与乙酸乙酯(40ml)之间。将有机层分离，经Na2SO4干燥且在真空中蒸发，得到N-甲基-3-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]苯磺酰胺(1.07g，3.99mmol，79.25％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.85(d,3H),1.17(m,2H),1.32(m,1H),1.52(m,1H),1.77(m,2H),2.26(m,1H),2.38(d,3H),3.01(m,1H),3.55(t,1H),7.39(m,1H),7.49(t,1H),7.61(m,2H),7.79(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值268.4；实测值269.2；Rt＝0.848min。
6JJ.N-甲基-5-(5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-胺的合成
步骤1：N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑-2-胺的合成
将乙酸钾(8.88g，90.49mmol，5.66mL)添加到5-溴-N-甲基-1,3-苯并噻唑-2-胺(11g，45.24mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(13.21g，52.03mmol)于二噁烷(150mL)中的溶液中。将反应烧瓶抽真空且用氩气再填充3次。然后在氩气流下添加Pd(dppf)Cl2*DCM(1.85g，2.26mmol)。在100℃、惰性气氛下将所得混合物搅拌28h。然后，将其冷却，用二噁烷(700mL)稀释且过滤。在减压下浓缩滤液且通过硅胶快速色谱，使用0至100％ MTBE-氯仿梯度洗脱来纯化残余物，以得到N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噻唑-2-胺(3.5g，12.06mmol，26.66％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.29(s,12H),2.96(d,3H),7.32(d,1H),7.58(d,1H),7.65(s,1H),7.89(bds,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值290.2；实测值291.2；Rt＝1.201min。
步骤2：3-甲基-6-(2-(甲基氨基)苯并[d]噻唑-5-基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
将6-二苯氧基磷酰氧基-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(4.76g，9.09mmol)、N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噻唑-2-胺(2.9g，9.99mmol)、环戊基(二苯基)磷烷；二氯甲烷；二氯钯；铁(370.96mg，454.25μmol)和碳酸钠(2.89g，27.26mmol，1.14mL)于二噁烷(45mL)和水(15mL)中的混合物在90℃、氩气气氛下搅拌24h。冷却至室温之后，过滤出反应混合物。将滤饼用二噁烷(300mL)洗涤且丢弃。在减压下浓缩滤液且通过硅胶快速色谱，以0至100％ MTBE-己烷梯度洗脱来纯化残余物，以得到3-甲基-6-[2-(甲基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.5g，4.17mmol，45.93％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.02(s,9H),1.12(d,3H),1.78(m,1H),1.94(m,1H),2.32(m,1H),2.96(d,3H),3.11(m,1H),3.91(d,1H),5.22(m,1H),6.88(d,1H),7.18(s,1H),7.42(d,1H),7.76(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值359.2；实测值360.2；Rt＝1.341min。
步骤3：N-甲基-5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-胺的合成
将3-甲基-6-[2-(甲基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(2g，5.56mmol)于TFA(10.15g，89.02mmol，6.86mL)中的溶液在20℃下搅拌1h，然后在真空中蒸发。将碎冰(20g)添加到残余物中且用10％氢氧化钠水溶液将pH调节至8。将所得混合物用乙酸乙酯(2*30mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到呈黄色胶状物的N-甲基-5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1,3-苯并噻唑-2-胺(1.5g，粗品)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.94(d,3H),1.32(m,1H),1.62(m,1H),1.85(m,1H),2.49(m,1H),2.74(m,1H),2.94(d,3H),3.33(m,1H),4.02(m,1H),7.52(d,1H),7.64(d,1H),7.77(s,1H),7.96(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值259.2；实测值260.2；Rt＝0.803min。
步骤4：N-甲基-5-(5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-胺的合成
在0℃下，将硼氢化钠(328.17mg，8.67mmol，306.70μL)一次性添加到N-甲基-5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1,3-苯并噻唑-2-胺(1.5g，5.78mmol)于MeOH(40mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在0℃下搅拌1h，然后在真空中蒸发。将残余物用水(20mL)稀释且用DCM(2*30mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到呈黄色固体的N-甲基-5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-2-胺(1.5g，5.74mmol，99.23％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.84(d,3H),1.07(m,2H),1.34(m,1H),1.51(m,1H),1.70(m,2H),2.26(m,1H),2.91(d,3H),3.00(m,1H),3.47(d,1H),7.00(d,1H),7.36(s,1H),7.54(d,1H),7.85(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值261.2；实测值262.2；Rt＝0.787min。
6KK.5-(5-甲基-2-哌啶基)-1,3-苯并噻唑的合成
步骤1：5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噻唑的合成
将乙酸钾(13.75g，140.13mmol，8.76mL)添加到5-溴-1,3-苯并噻唑(15g，70.07mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(20.46g，80.58mmol)于DMSO(100mL)中的溶液中。将反应烧瓶抽真空且用氩气再填充3次。然后，在氩气流下添加PdCl2DPPF*CH2Cl2(2.86g，3.50mmol)。在90℃、惰性气氛下将所得混合物搅拌28h。然后，将其冷却，用MTBE(100mL)稀释且用水(2x40mL)洗涤。将有机层经Na2SO4干燥且在减压下浓缩。通过硅胶快速色谱，以0至100％ CHCl3-EA梯度洗脱来纯化残余物，以得到5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噻唑(8.6g，32.93mmol，47.00％产率)。
1H NMR(CDCl3,400MHz):δ1.36(s,12H),7.82(d,1H),7.94(d,1H),8.57(s,1H),8.98(s,1H)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值261.1；实测值261.2；Rt＝1.375min。
步骤2：6-(1,3-苯并噻唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(7.72g，22.36mmol)、5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噻唑(7.3g，27.95mmol)、[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)与二氯甲烷的络合物(913.12mg，1.12mmol)和碳酸钠(7.11g，67.09mmol，2.81mL)于二噁烷(120mL)和水(40mL)中的混合物在80℃、氩气气氛下搅拌18h。冷却至室温之后，过滤出反应混合物。将滤饼用二噁烷(500mL)洗涤且丢弃。在减压下浓缩滤液且通过硅胶快速色谱，以0至100％ MTBE-己烷梯度洗脱来纯化残余物，以得到6-(1,3-苯并噻唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(5.9g，17.85mmol，79.84％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ0.95-1.03(m,12H),1.86(m,1H),1.90(s,1H),2.50(m,1H),3.0(t,1H),3.97(d,1H),5.41(s,1H),7.37(d,1H),7.78(s,1H),7.99(d,1H),9.27(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值330.2；实测值331.2；Rt＝1.435min。
步骤3：5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1,3-苯并噻唑的合成
将6-(1,3-苯并噻唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(5.9g，17.85mmol)于TFA(32.57g，285.68mmol，22.01mL)中的溶液在20℃下搅拌1h，然后在真空中蒸发。将碎冰(10g)添加到残余物中且用10％氢氧化钠水溶液将pH调节至8。将所得混合物用乙酸乙酯(2*30mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到呈黄色固体的5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1,3-苯并噻唑(4.1g，17.80mmol，99.70％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ0.95(m,3H),1.35(m,1H),1.65(m,1H),1.89(m,1H),2.67(m,1H),2.87(d,1H),3.19(t,1H),3.95(d,1H),8.02(d,1H),8.14(d,1H),8.43(s,1H),9.41(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值230.1；实测值231.2；Rt＝0.828min。
步骤4：5-(5-甲基-2-哌啶基)-1,3-苯并噻唑的合成
在0℃下，将硼氢化钠(1.01g，26.70mmol，944.02μL)一次性添加到5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1,3-苯并噻唑(4.1g，17.80mmol)于甲醇(90mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在0℃下搅拌1h，然后在真空中蒸发。将残余物用水(50mL)稀释且用二氯甲烷(2*75mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到呈黄色油状物的5-(5-甲基-2-哌啶基)-1,3-苯并噻唑(4.1g，17.65mmol，99.13％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(DMSO-d6,400MHz):δ0.82(d,3H),1.05(m,1H),1.34(m,1H),1.52(m,1H),1.75(m,2H),2.26(t,1H),3.00(d,1H),3.61(d,1H),7.46(d,1H),8.03(m,2H),9.31(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值232.1；实测值233.0；Rt＝0.691min。
6LL.5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑的合成
步骤1.(3S)-3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
在氩气下，将双(三甲基甲硅烷基)酰胺化锂(102.00g，121.91mmol，113.33mL，20％纯度)(1.08M于THF/乙苯中)逐滴添加到冷却至-78℃的(5S)-5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(20g，93.78mmol)于THF(200mL)中的溶液中达0.5h。将所得溶液在-78℃下搅拌1.5h，然后一次性添加1,1,1-三氟-N-苯基-N-(三氟甲基磺酰基)甲磺酰胺(41.88g，117.22mmol)。使反应混合物缓慢升温(不移除冷却浴！)至25℃且搅拌12h，然后用水(50ml)和MTBE(250ml)稀释。将有机层分离，另外用MTBE(50ml)萃取水层。将合并的有机萃取物用10％氢氧化钠水溶液(3*15ml)洗涤，经碳酸钾干燥，且在真空中浓缩。将残余物用己烷/MTBE混合物稀释(3/1,200mL，重复8次)且搅拌0.5h。将所得混浊溶液自油状残余物倾析，通过短硅胶垫(40ml无水硅胶)过滤且在真空中蒸发，以得到呈淡黄色油状物的粗品(3S)-3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(32g，92.66mmol，98.81％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.99(d,1H),1.49(s,9H),1.80-1.90(m,2H),2.40(m,1H),2.99(dd,1H),3.88(d,1H),5.25(t,1H)。
LCMS(ESI)：[M-tBu]+m/z：计算值345.0；实测值290.0；Rt＝1.710min。
步骤2.(3S)-6-(1,3-苯并噻唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将(3S)-3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(32g，83.40mmol)、5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噻唑(23.96g，91.74mmol)、环戊基(二苯基)磷烷；二氯甲烷；二氯钯；铁(3.41g，4.17mmol)和碳酸钠(26.52g，250.19mmol，10.48mL)于二噁烷(525mL)和水(175mL)中的混合物在90℃、氩气气氛下搅拌18h。冷却至室温之后，过滤出反应混合物。将滤饼用二噁烷(300mL)洗涤且丢弃。在减压下浓缩滤液且通过硅胶快速色谱，使用0至100％己烷-MTBE梯度洗脱来纯化残余物，以得到(3S)-6-(1,3-苯并噻唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(14g，42.37mmol，50.80％产率)。
1H NMR(CDCl3,500MHz):δ1.03(s,9H),1.35(m,1H),1.92(m,1H),2.05(m,1H),2.42(m,1H),3.03(t,1H),4.13(d,1H),5.42(s,1H),7.26(d,1H),7.42(d,1H),8.07(s,1H),8.98(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值330.1；实测值331.2；Rt＝1.596min。
步骤3.5-[(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]-1,3-苯并噻唑的合成
将(3S)-6-(1,3-苯并噻唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(14.35g，43.43mmol)于TFA(79.22g，694.82mmol，53.53mL)中的溶液在20℃下搅拌1h，然后在真空中蒸发。将碎冰(70g)添加到残余物中且用10％氢氧化钠水溶液将pH调节至8。将所得混合物用乙酸乙酯(2*100mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到呈黄色固体的5-[(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]-1,3-苯并噻唑(10g，43.42mmol，99.98％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ0.95(m,3H),1.35(m,1H),1.65(m,1H),1.89(m,1H),2.67(m,1H),2.87(d,1H),3.19(t,1H),3.95(d,1H),8.02(d,1H),8.14(d,1H),8.43(s,1H),9.41(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值230.1；实测值231.2；Rt＝0.828min。
步骤4.5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑的合成
在0℃下，将硼氢化钠(2.46g，65.12mmol，2.30mL)一次性添加到5-[(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]-1,3-苯并噻唑(10.00g，43.42mmol)于甲醇(200mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在0℃下搅拌1h，然后在真空中蒸发。将残余物用水(100mL)稀释且用二氯甲烷(2*80mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到呈黄色油状物的5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑(10g，43.04mmol，99.13％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(DMSO-d6,400MHz):δ0.91(d,3H),1.18(m,1H),1.30-1.60(m,6H),2.47(t,1H),3.17(d,1H),3.73(d,1H),7.52(d,1H),7.88(d,1H),8.12(s,1H),8.98(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值232.1；实测值233.0；Rt＝0.691min。
6MM.2-(4,4-二氟环己基)哌啶的合成
步骤1：6-(4,4-二氟环己烯-1-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(8g，24.15mmol)、2-(4,4-二氟环己烯-1-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(6.48g，26.56mmol)和碳酸钠(5.12g，48.29mmol，2.02mL)于1,4-二噁烷(75mL)和水(25mL)中的搅拌溶液用氩气吹扫。然后，在氩气下添加Pd(dppf)Cl2(985.95mg，1.21mmol)。将反应混合物在氩气、75℃下搅拌18小时。18小时之后，将反应混合物过滤。将滤饼用1.4-二噁烷(2x25mL)洗涤且丢弃。在真空中蒸发滤液且将残余物溶解于水(100mL)和MTBE(150mL)的混合物中。分离有机层。将水层用MTBE(100mL)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且在减压下蒸发。通过柱色谱纯化残余物以获得呈黄色油状物的6-(4,4-二氟环己烯-1-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(3.40g，11.36mmol，47.04％产率)。
LCMS(ESI)：[M+Boc]+m/z：计算值299.2；实测值244.0(t-Bu裂解的产物质量)；Rt＝1.668min。
步骤2：2-(4,4-二氟环己基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将6-(4,4-二氟环己烯-1-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(3.40g，11.36mmol)于甲醇(120mL)中的溶液在487型钯(10％于碳上)(483.48mg，4.54mmol)上在氢气气氛(30atm)、室温下氢化48小时。完成之后，过滤反应混合物且在减压下蒸发滤液，以得到呈淡黄色胶状物的2-(4,4-二氟环己基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.83g，9.33mmol，82.13％产率)。粗产物直接用于下一步骤。
GCMS:m/z：计算值303.2；实测值246.1；Rt＝9.752min
步骤3：2-(4,4-二氟环己基)哌啶的合成
向2-(4,4-二氟环己基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.83g，9.33mmol)于MTBE(50mL)中的搅拌溶液中添加于二噁烷中的4.0M HCl(1.36g，37.31mmol，1.70mL)。将所得反应混合物在室温下搅拌过夜。然后在减压下浓缩反应混合物。LCMS指示反应无进展。将残余物溶解于MeOH(15mL)中且添加于二噁烷中的4.0M HCl(15mL)。将所得反应混合物搅拌2小时，然后在减压下浓缩，以获得呈红色胶状物的2-(4,4-二氟环己基)哌啶(2.6g，粗品，HCl)。粗产物不经任何进一步纯化即用于下一步反应。
6NN.2-(苯并噻吩-3-基)-5-甲基哌啶的合成
步骤1：6-(苯并噻吩-3-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(8g，20.85mmol)、苯并噻吩-3-基硼酸(4.45g，25.02mmol)和碳酸钠(7.29g，68.80mmol，2.88mL)添加到1,4-二噁烷(100mL)和水(30mL)的混合物中。将所得混合物抽真空然后用氩气回填，将此操作重复三次，然后在氩气下添加Pd(dppf)Cl2*DCM(851.32mg，1.04mmol)。将反应混合物在氩气、90℃下搅拌18h，然后冷却且过滤。将滤饼用二噁烷(2*30mL)洗涤且丢弃。在真空中蒸发滤液，且通过硅胶柱色谱，使用己烷/MTBE梯度(0-100％ MTBE)纯化残余物，以得到呈红色胶状物的6-(苯并噻吩-3-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(4.2g，12.75mmol，61.14％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ0.87(s,9H),1.22(m,3H),1.90(m,1H),2.10(m,1H),2.44(m,1H),3.13(m,1H),4.19(m,1H),5.38(m,1H),7.22(s,1H),7.35(m,2H),7.80(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M-t-Bu]+m/z：计算值273.0；实测值274.1；Rt＝1.608min。
步骤2：6-(苯并噻吩-3-基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶的合成
将6-(苯并噻吩-3-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(4.20g，12.75mmol)于三氟乙酸(29.60g，259.60mmol，20mL)中的混合物在25℃下搅拌1h。1小时之后，在减压下浓缩反应混合物。将所获得的残余物用冰冷水(50mL)稀释且用10％ NaOH水溶液中和，直至pH 10。将所得悬浮液用二氯甲烷(3*30mL)萃取。将合并的有机相用水(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤且在减压下浓缩，以获得呈灰白色固体的产物6-(苯并噻吩-3-基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶(2.20g，9.59mmol，75.25％产率)。将粗产物用于下一步骤反应中。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.04(m,3H),1.44(m,1H),1.79(m,1H),1.95(m,1H),2.68(m,1H),2.85(m,1H),3.36(m,1H),4.10(d,1H),7.40(m,2H),7.71(s,1H),7.84(d,1H),8.80(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值229.1；实测值230.2；Rt＝0.839min。
步骤3：2-(苯并噻吩-3-基)-5-甲基哌啶的合成
在0℃下，向6-(苯并噻吩-3-基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶(2.20g，9.59mmol)于甲醇(60mL)中的搅拌溶液中分批添加硼氢化钠(544.38mg，14.39mmol)。将所得反应混合物在同一温度下搅拌2h。然后，在减压下浓缩反应混合物，以获得红色胶状残余物。将所获得的残余物用水(30mL)稀释且用二氯甲烷(3*30mL)萃取。将合并的有机相用水(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤且在真空下浓缩，以获得呈红色胶状物的粗产物2-(苯并噻吩-3-基)-5-甲基哌啶(2.20g，粗品)。将粗产物用于下一步骤反应中。粗产物含有约10-11％顺式杂质。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.94(m,3H),1.30(m,1H),1.69(m,2H),1.73(m,2H),2.01(m,1H),2.61(m,1H),3.21(m,1H),3.98(m,1H),7.36(m,3H),7.87(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值231.1；实测值232.2；Rt＝0.977min
6OO.3-(5-甲基-2-哌啶基)环己醇的合成
步骤1：3-甲基-6-(3-氧代环己烯-1-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(16.5g，47.78mmol)、3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)环己-2-烯-1-酮(10.61g，47.78mmol)和碳酸钠(15.19g，143.34mmol，6.00mL)添加到1,4-二噁烷(180mL)和水(60mL)的混合物中。将所得混合物抽真空然后用氩气回填，将此操作重复三次，然后在氩气下添加Pd(dppf)Cl2*DCM(1.56g，1.91mmol)。将反应混合物在氩气、90℃下搅拌18h，然后冷却且过滤。将滤饼用1,4-二噁烷(2*20ml)洗涤且丢弃。在真空中蒸发滤液，且通过硅胶柱色谱，使用己烷/MTBE梯度(5-100％ MTBE)纯化残余物，以得到呈淡黄色胶状物的3-甲基-6-(3-氧代环己烯-1-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(9g，30.89mmol，64.64％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.99(d,3H),1.42(s,9H),1.80(m,1H),2.02(m,3H),2.39(m,2H),2.86(m,3H),2.89(m,1H),3.92(m,1H),5.51(m,1H),6.06(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M-tBu]+m/z：计算值235.2；实测值236.2；Rt＝1.358min。
步骤2：3-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)环己-2-烯-1-酮的合成
在25℃下，将三氟乙酸(150g，1.32mol，101.35mL)添加到3-甲基-6-(3-氧代环己烯-1-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(9g，30.89mmol)中。将所得反应混合物在25℃下搅拌1h，然后在真空中蒸发，以得到呈橙色胶状物的粗品3-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)环己-2-烯-1-酮(15g，粗品)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ1.11(s,3H),1.56(m,1H),2.11(m,4H),3.16(m,4H),3.36(m,1H),3.38(m,1H),3.40(m,1H),4.01(m,1H),6.73(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值191.1；实测值192.2；Rt＝0.535min。
步骤3：3-(5-甲基-2-哌啶基)环己-2-烯-1-醇的合成
在0℃下，在0.2h内，将硼氢化钠(6g，158.60mmol，5.61mL)分批添加到3-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)环己-2-烯-1-酮(15g，78.42mmol)于DME(300mL)中的搅拌溶液中。将反应混合物在0℃下搅拌2h，然后在0℃下缓慢添加甲醇(100mL)以淬灭反应物(起泡！)。使所得混合物升温至25℃，搅拌0.5h，然后在真空中蒸发。将残余物用水(200ml)稀释且用10％氢氧化钠水溶液将pH调节至10。将所得混浊溶液用二氯甲烷(2*150ml)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发。将残余物用100ml MTBE再蒸发，以得到呈淡黄色泡沫的粗品3-(5-甲基-2-哌啶基)环己-2-烯-1-醇(4.5g，23.04mmol，29.38％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.91(m,3H),1.77(m,10H),1.79(m,1H),2.35(m,1H),3.29(m,1H),4.16(m,1H),5.71(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值195.2；实测值196.2；Rt＝0.327min。
步骤4：3-(5-甲基-2-哌啶基)环己醇的合成
将3-(5-甲基-2-哌啶基)环己-2-烯-1-醇(4.5g，23.04mmol)和钯(10％于碳上)(0.5g，23.04mmol)于甲醇(100mL)中的混合物在氢气气氛、42℃下搅拌48h。过滤出催化剂，在真空中蒸发滤液，以得到呈淡黄色胶状物的3-(5-甲基-2-哌啶基)环己醇(4g，20.27mmol，87.98％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.95(d,3H),1.14(m,6H),1.68(m,5H),1.93(m,2H),2.21(m,2H),3.01(m,1H),3.54(m,1H),4.08(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值197.2；实测值198.2；Rt＝0.512min。
6PP.2-甲氧基-4-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶的合成
步骤1：6-(2-甲氧基-4-吡啶基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(5g，14.48mmol)、(2-甲氧基-4-吡啶基)硼酸(2.21g，14.48mmol)和碳酸钠(4.60g，43.44mmol，1.82mL)添加到水(15mL)和二噁烷(45mL)的混合物中。将所得混合物抽真空然后用氩气回填，将此操作重复三次，然后在氩气下添加Pd(dppf)2Cl2*DCM(723.93μmol)。将反应混合物在氩气、70℃下搅拌16h，然后冷却且过滤。将滤饼用1,4-二噁烷(2*20ml)洗涤且丢弃。在真空中蒸发滤液，以得到呈棕色油状物的6-(2-甲氧基-4-吡啶基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(3g，9.86mmol，68.07％产率)，其不经纯化即用于下一步骤。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值304.2；实测值305.2；Rt＝1.437min。
步骤2：2-甲氧基-4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)吡啶的合成
将6-(2-甲氧基-4-吡啶基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(3g，9.86mmol)于TFA(11.24g，98.56mmol，7.59mL)中的溶液在25℃下搅拌1h，然后在真空中蒸发。将碎冰(15g)添加到残余物中且用10％氢氧化钠水溶液将pH调节至10。将所得混合物用二氯甲烷(2*30ml)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到呈棕色固体的2-甲氧基-4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)吡啶(2g，9.79mmol，99.34％产率)，其直接用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值206.2；实测值207.2；Rt＝0.628min。
步骤3：2-甲氧基-4-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶的合成
在0℃下，将硼氢化钠(740.84mg，19.58mmol，692.38μL)一次性添加到2-甲氧基-4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)吡啶(2g，9.79mmol)于MeOH(50mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在0℃下搅拌2h，然后在真空中蒸发。将残余物用水(20ml)稀释且用二氯甲烷(2*40ml)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发。使所获得的油状物经历HPLC，以得到2-甲氧基-4-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶(720.2mg，3.49mmol，35.66％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值206.2；实测值207.4；Rt＝1.697min。
6QQ.外消旋-3-甲基-5-(5-甲基-2-哌啶基)-1H-吲唑的合成
步骤1：3-甲基-6-(3-甲基-1H-吲唑-5-基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
将3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(9.86g，28.55mmol)、C14H19BN2O2·HCl(9.25g，31.40mmol，HCl)、[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)与二氯甲烷的络合物(1.17g，1.43mmol)和碳酸钠(9.08g，85.64mmol，3.59mL)于二噁烷(150mL)和水(50mL)中的混合物在90℃、氩气气氛下搅拌24h。冷却至室温之后，过滤出反应混合物。将滤饼用二噁烷(400mL)洗涤且丢弃。在减压下浓缩滤液且通过硅胶快速色谱，使用0至100％CHCl3-EtOAc梯度洗脱来纯化残余物，以得到3-甲基-6-(3-甲基-1H-吲唑-5-基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(10g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值327.2；实测值328.2；Rt＝1.133min。
步骤2：3-甲基-5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1H-吲唑的合成
将3-甲基-6-(3-甲基-1H-吲唑-5-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(10g，30.54mmol)于TFA(55.72g，488.67mmol，37.65mL)中的溶液在20℃下搅拌1h，然后在真空中蒸发。将碎冰(10g)添加到残余物中且用10％氢氧化钠水溶液将pH调节至8。将所得混合物用乙酸乙酯(2*40mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到呈黄色固体的3-甲基-5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1H-吲唑(8g，粗品)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.89(d,3H),1.26(m,2H),1.32(m,1H),1.46(m,1H),2.43(s,3H),2.67(m,1H),2.93(m,1H),3.72(m,1H),7.53(d,1H),7.90(d,1H),8.04(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值227.2；实测值228.2；Rt＝0.801min。
步骤3：外消旋-3-甲基-5-(5-甲基-2-哌啶基)-1H-吲唑的合成
在0℃下，将硼氢化钠(2.00g，52.79mmol，1.87mL)一次性添加到3-甲基-5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1H-吲唑(8g，35.20mmol)于甲醇(200mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在0℃下搅拌1h，然后在真空中蒸发。将残余物用水(20mL)稀释且用二氯甲烷(2*30mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到呈棕色固体的外消旋-3-甲基-5-(5-甲基-2-哌啶基)-1H-吲唑(4g，17.44mmol，49.56％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.84(d,3H),1.07(m,2H),1.41(m,2H),1.77(m,1H),2.27(m,2H),2.45(s,3H),3.00(m,1H),3.53(m,1H),7.32(m,2H),7.61(s,1H),12.47(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值229.2；实测值230.2；Rt＝0.830min。
6RR.7-甲基-5-(5-甲基-2-哌啶基)-1H-吲唑的合成
步骤1：5-溴-7-甲基-吲唑-1-甲酸叔丁酯的合成
在0℃下，将二碳酸二-叔丁酯(8.99g，41.21mmol，9.46mL)逐滴添加到5-溴-7-甲基-1H-吲唑(8.53g，40.40mmol)和DMAP(49.36mg，404.00μmol)于DCM(100mL)中的搅拌悬浮液中。将所得混合物在室温下搅拌12h，然后在真空中蒸发，倒入到水(100ml)中且用DCM(2x50 ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(2*30ml)洗涤，经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到产物5-溴-7-甲基-吲唑-1-甲酸叔丁酯(12g，38.56mmol，95.45％产率)。
1H NMR(CDCl3,400MHz):1.69(s,9H),2.59(s,3H),7.12(s,1H),7.60(s,1H),8.46(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc+H]+m/z：计算值311.2；实测值211.0；Rt＝1.487min。
步骤2：7-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吲唑-1-甲酸叔丁酯的合成
将5-溴-7-甲基-吲唑-1-甲酸叔丁酯(10.3g，33.10mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(8.41g，33.10mmol)一起混合于二噁烷(150mL)中。将所得混合物抽真空然后用氩气回填，将此操作重复三次，然后在氩气下添加[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)(1.35g，1.66mmol)。将反应混合物在氩气、100℃下搅拌17h，然后冷却且在真空中蒸发，将其倒入水(150ml)中且用EtOAc(2x80 ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(2*40ml)洗涤，经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，留下13g粗产物，13g粗产物通过硅胶柱色谱使用己烷/EtOAc梯度(10-100％ EtOAc)进行纯化，以得到产物7-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吲唑-1-甲酸叔丁酯(4.3g，12.00mmol，36.26％产率)。
1H NMR(CDCl3,500MHz):1.34(s,12H),1.70(s,9H),2.60(s,3H),7.40(s,1H),8.01(s,1H),8.54(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M-C4H8]+m/z：计算值358.2；实测值302.2；Rt＝1.727min。
步骤3：5-(1-叔丁氧基羰基-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-6-基)-7-甲基-吲唑-1-甲酸叔丁酯的合成
将7-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吲唑-1-甲酸叔丁酯(4.3g，12.00mmol)和3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(4.15g，12.00mmol)一起混合于水(1mL)中。将所得混合物抽真空然后用氩气回填，将此操作重复三次，然后在氩气下添加水(1mL)中的碳酸钠(1.27g，12.00mmol，502.85μL)和[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)与二氯甲烷的络合物(439.14mg，600.16μmol)。将反应混合物在氩气、100℃下搅拌80h，然后冷却且在真空中蒸发，将其倒入水(120ml)中且用EtOAc(2x90 ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(2*40ml)洗涤，经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，留下8g粗产物，8g粗产物通过硅胶柱色谱使用己烷/IPA梯度(10-100％ IPA)进行纯化，以得到产物5-(1-叔丁氧基羰基-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-6-基)-7-甲基-吲唑-1-甲酸叔丁酯(3.4g，7.95mmol，66.25％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H-Boc]+m/z：计算值427.5；实测值328.2；Rt＝1.478min。
步骤4：7-甲基-5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1H-吲唑的合成
将5-(1-叔丁氧基羰基-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-6-基)-7-甲基吲唑-1-甲酸叔丁酯(3g，7.02mmol)于MeOH(30mL)和三氟乙酸(24.00g，210.51mmol，16.22mL)中的溶液在25℃下搅拌8h，然后在真空中蒸发。将碎冰(20g)添加到残余物中且用10％碳酸氢钠水溶液将pH调节至8。将所得混合物用乙酸乙酯(2*60mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到呈黄色固体的7-甲基-5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1H-吲唑(1g，4.40mmol，62.70％产率)，其直接用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值227.3；实测值228.2；Rt＝1.207min。
步骤5：7-甲基-5-(5-甲基-2-哌啶基)-1H-吲唑的合成
在0℃下，将硼氢化钠(366.17mg，9.68mmol，342.21μL)一次性添加到7-甲基-5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1H-吲唑(1.1g，4.84mmol)于MeOH(20mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在0℃下搅拌4h，然后在真空中蒸发。将残余物用水(20mL)稀释且用二氯甲烷(2*50mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到7-甲基-5-(5-甲基-2-哌啶基)-1H-吲唑(0.7g，3.05mmol，63.08％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值229.3；实测值230.2；Rt＝1.263min。
6SS.4-氟-5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1H-吲唑的合成
步骤1：5-溴-4-氟-1H-吲唑的合成
将4-溴-3-氟-2-甲基苯胺(10g，49.01mmol)溶解于AcOH(200mL)中且在室温下分批添加亚硝酸钠(4.06g，58.81mmol，1.87mL)。搅拌所得混合物18h。将反应混合物倒入水(500ml)中且将所形成的沉淀过滤，用水(2*200ml)洗涤。将沉淀溶解于DCM(400ml)中，经Na2SO4干燥，过滤且蒸发，以获得5-溴-4-氟-1H-吲唑(8.54g，39.71mmol，81.02％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值213.9；实测值215.0；Rt＝1.086min。
步骤2：5-溴-4-氟-1-四氢吡喃-2-基-吲唑的合成
将5-溴-4-氟-1H-吲唑(8.54g，39.72mmol)和3,4-二氢-2H-吡喃(4.18g，49.65mmol，4.51mL)溶解于DCM(170mL)中且添加对甲苯磺酸单水合物(377.74mg，1.99mmol，304.63μL)。将反应混合物搅拌20h。将反应混合物倒入NaHCO3(浓)水溶液中且将有机层分离，经Na2SO4干燥，过滤且蒸发，以获得5-溴-4-氟-1-四氢吡喃-2-基-吲唑(11.76g，39.30mmol，98.95％产率)。
1H NMR(CDCl3,500MHz):1.43(m,2H),1.53(m,1H),1.69(m,2H),1.96(m,1H),3.70(m,1H),3.81(m,1H),5.85(m,1H),7.56(m,2H),8.23(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值298.03；实测值300.8；Rt＝1.244min。
步骤3：4-氟-1-四氢吡喃-2-基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吲唑的合成
将5-溴-4-氟-1-四氢吡喃-2-基吲唑(11.25g，37.62mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(9.55g，37.62mmol)和乙酸钾(7.38g，75.24mmol，4.70mL)一起混合于二噁烷(225mL)中，且将所得混合物抽真空且用氩气回填三次。向其中添加[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)与二氯甲烷的络合物(1.54g，1.88mmol)且将反应混合物在100℃下加热20h。冷却反应混合物且过滤。在真空中浓缩滤液且通过柱色谱纯化，以获得4-氟-1-四氢吡喃-2-基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吲唑(9.22g，26.63mmol，70.79％产率)。
1H NMR(DMSO,500MHz):1.31(s,12H),1.60(m,2H),1.74(m,1H),1.95(m,1H),2.04(m,1H),2.38(m,1H),3.72(m,1H),3.85(m,1H),5.81(m,1H),7.46(d,1H),7.55(d,1H),8.11(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值346.2；实测值347.0；Rt＝1.505min。
步骤4：6-(4-氟-1-四氢吡喃-2-基吲唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(5.02g，14.55mmol)、4-氟-1-四氢吡喃-2-基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吲唑(5.54g，16.00mmol)和碳酸钠(3.08g，29.09mmol，1.22mL)一起混合于二噁烷(60mL)和水(20mL)的混合物中。将所得混合物抽真空且用氩气回填三次，且向其中添加[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)与二氯甲烷的络合物(594.00mg，727.37μmol)。将反应混合物在90℃下加热18h。冷却反应混合物且用水(120ml)稀释。将所得混合物用EtOAc(2*100ml)萃取且将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且蒸发，以获得6-(4-氟-1-四氢吡喃-2-基吲唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(7.92g，粗品)。
1H NMR(400MHz,DMSO)0.92(m,12H),1.54(m,3H),1.94(m,2H),2.35(m,3H),3.03(m,1H),3.69(m,2H),3.85(m,2H),5.21(m,1H),5.82(m,1H),7.23(d,1H),7.45(d,1H),8.14(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值415.3；实测值416.2；Rt＝1.745min。
步骤5：4-氟-5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1H-吲唑的合成
将6-(4-氟-1-四氢吡喃-2-基吲唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(7.92g，19.06mmol)溶解于DCM(30mL)中且向其中添加CF3COOH(30mL)。将反应混合物搅拌18h。将反应混合物蒸发至干且将残余物用K2CO3水溶液碱化。将所得混合物用DCM(3*50ml)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且蒸发，以获得4-氟-5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1H-吲唑(6.75g，粗品)。
1H NMR(500MHz,DMSO)0.94(d,3H),1.81(m,2H),2.70(m,2H),3.16(m,1H),3.87(m,2H),7.31(d,1H),7.67(d,1H),8.19(s,1H),13.42(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值231.1；实测值232.2；Rt＝0.482min。
步骤6：4-氟-5-(5-甲基-2-哌啶基)-1H-吲唑的合成
将4-氟-5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1H-吲唑(6.75g，29.19mmol)溶解于MeOH(50mL)中且分批添加硼氢化钠(3.31g，87.56mmol，3.10mL)。将反应混合物搅拌18h。将反应混合物蒸发至干。将残余物溶解于DCM(100ml)中且将所得混合物用NaHSO4水溶液(2*50ml)萃取。将合并的水层用DCM(3*100ml)洗涤，然后用K2CO3碱化。将所得混合物用DCM(2*100ml)萃取且将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且蒸发，以获得4-氟-5-(5-甲基-2-哌啶基)-1H-吲唑(2.13g，9.13mmol，31.28％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO)0.81(d,3H),1.12(m,2H),1.39(m,1H),1.51(m,1H),1.62(m,1H),1.77(m,1H),2.25(m,1H),2.97(m,1H),3.85(m,1H),7.26(d,1H),7.47(d,1H),8.06(s,1H),13.23(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值233.2；实测值234.2；Rt＝0.642min。
6TT.2-氟-5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯酚的合成
步骤1：6-(4-氟-3-甲氧基苯基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(20g，52.12mmol)、(4-氟-3-甲氧基苯基)硼酸(9.74g，57.34mmol)和碳酸钠(18.23g，172.01mmol，7.21mL)添加到1,4-二噁烷(240mL)和水(80mL)的混合物中。将所得混合物抽真空然后用氩气回填，将此操作重复三次，然后在氩气下添加Pd(dppf)Cl2 DCM(2.13g，2.61mmol)。将反应混合物在氩气、90℃下搅拌18h，然后冷却且过滤。将滤饼用二噁烷(2*50ml)洗涤且丢弃。在真空中蒸发滤液，且通过硅胶柱色谱，使用己烷/MTBE梯度(0-100％MTBE)进行第一次纯化且使用己烷/氯仿梯度(5-100％氯仿)进行第二次纯化来纯化残余物两次，以得到呈淡黄色胶状物的6-(4-氟-3-甲氧基苯基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(6.2g，19.29mmol，37.01％产率)。
1H NMR(CDCl3,400MHz):0.92(d,3H),1.10(s,9H),1.81(m,1H),2.01(m,1H),2.41(m,1H),2.99(m,1H),3.87(s,3H),4.07(m,1H),5.28(s,1H),6.84(m,1H),6.89(d,1H),7.00(dd,1H)。
LCMS(ESI)：[M+Na]+m/z：计算值321.4；实测值344.0；Rt＝1.659min。
步骤2：6-(4-氟-3-甲氧基苯基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶的合成
将6-(4-氟-3-甲氧基苯基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(6.2g，19.29mmol)于三氟乙酸(65.99g，578.74mmol，44.59mL)中的溶液在25℃下搅拌1h。1小时之后，在减压下浓缩反应混合物。将所获得的残余物用冰冷水(50mL)稀释且用10％ NaOH水溶液中和，直至pH＝10。用二氯甲烷(2x 100mL)萃取所得混合物。将合并的有机相用水(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤且在减压下浓缩，以获得呈淡黄色胶状物的产物6-(4-氟-3-甲氧基苯基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶(3.5g，15.82mmol，81.99％产率)。
1H NMR(CDCl3,500MHz):1.10(d,1H),1.70(m,1H),1.92(m,1H),2.10(m,1H),2.55(m,1H),2.78(m,1H),3.25(m,1H),3.94(s,3H),4.01(m,1H),7.05(dd,1H),7.21(m,1H),7.56(d,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值221.3；实测值222.0；Rt＝0.699min。
步骤3：(2R,5S)-2-(4-氟-3-甲氧基苯基)-5-甲基哌啶的合成
在0℃下，向6-(4-氟-3-甲氧基苯基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶(3.5g，15.82mmol)于甲醇(60mL)中的搅拌溶液中分批添加硼氢化钠(897.58mg，23.73mmol，838.86μL)。将所得反应混合物在0℃下搅拌1h，然后在减压下浓缩。将残余物用水(50mL)稀释且用二氯甲烷(2x 100mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空下浓缩，以获得呈淡黄色胶状物的粗产物(2R,5S)-2-(4-氟-3-甲氧基苯基)-5-甲基哌啶(3.3g，14.78mmol，93.43％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(CDCl3,500MHz):0.92(d,3H),1.14(m,1H),1.50(m,1H),1.77(m,4H),2.42(m,1H),3.13(m,1H),3.50(m,1H),3.90(s,3H),6.85(m,1H),7.00(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值223.3；实测值224.2；Rt＝0.687min。
步骤4：2-氟-5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯酚的合成
使用回流冷凝器将(2R,5S)-2-(4-氟-3-甲氧基苯基)-5-甲基哌啶(1.60g，7.17mmol)于48％氢溴酸(35g，432.57mmol，23.49mL)中的溶液在110℃下搅拌48h，然后冷却且在真空中蒸发。将残余物另外在真空中(1mm.Hg)干燥，以得到呈棕色固体的2-氟-5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯酚(2.2g，粗品，HBr)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(500MHz,DMSO)0.92(d,3H),1.32(m,1H),1.90(m,4H),2.70(m,1H),3.23(m,1H),4.11(m,1H),6.95(m,1H),7.07(d,1H),7.21(dd,1H),9.00(m,2H),10.09(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值209.2；实测值210.2；Rt＝0.783min。
6UU.5-(5-甲基-2-哌啶基)-1H-吲唑-3-胺的合成
步骤1：6-(3-氰基-4-氟苯基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将2-氟-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯甲腈(5g，20.24mmol)和3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(8.39g，24.28mmol)一起混合于水(5mL)中。将所得混合物抽真空然后用氩气回填，将此操作重复三次，然后在氩气下添加水(5mL)中的碳酸钠(4.29g，40.47mmol，1.70mL)和[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)与二氯甲烷的络合物(826.31mg，1.01mmol)。将反应混合物在氩气、90℃下搅拌48h，然后冷却且在真空中蒸发，将其倒入水(120ml)中且用EtOAc(2x60 ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(2*40ml)洗涤，经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，留下6g粗产物，6g粗产物通过硅胶柱色谱，使用己烷/MTBE梯度(10-100％ MTBE)进行纯化，以得到产物6-(3-氰基-4-氟苯基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(5.7g，18.02mmol，89.03％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值316.4；实测值317.2；Rt＝1.586min。
步骤2：6-(3-氨基-1H-吲唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
在100℃下，将于水中的35％水合肼溶液(22％肼)(2.56g，51.21mmol，2.49mL)一次性添加到6-(3-氰基-4-氟苯基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(2.7g，8.53mmol)于二噁烷(50mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在100℃下搅拌48h，然后在真空中蒸发。将残余物用水(20mL)稀释且用二氯甲烷(2*40mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到6-(3-氨基-1H-吲唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(2g，6.09mmol，71.36％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值328.4；实测值329.2；Rt＝1.262min。
步骤3：5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1H-吲唑-3-胺的合成
将6-(3-氨基-1H-吲唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(0.7g，2.13mmol)于DCM(10mL)和三氟乙酸(10g，87.70mmol，6.76mL)中的溶液在0℃下搅拌5h，然后在真空中蒸发。将碎冰(30g)添加到残余物中且用10％碳酸氢钠水溶液将pH调节至8。将所得混合物用乙酸乙酯(2*50mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1H-吲唑-3-胺(0.3g，1.31mmol，61.65％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值228.3；实测值229.2；Rt＝0.528min。
步骤4：5-(5-甲基-2-哌啶基)-1H-吲唑-3-胺的合成
在0℃下，将硼氢化钠(139.20mg，3.68mmol，130.10μL)一次性添加到5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1H-吲唑-3-胺(0.42g，1.84mmol)于MeOH(20mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在0℃下搅拌6h，然后在真空中蒸发。将残余物用水(30mL)稀释且用二氯甲烷(2*50mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到5-(5-甲基-2-哌啶基)-1H-吲唑-3-胺(0.34g，1.48mmol，80.24％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值230.3；实测值231.0；Rt＝0.776min。
6VV.(2R,5S)-5-甲基-2-(4-甲基磺酰基苯基)哌啶的合成
步骤1：3-甲基-6-(4-甲基磺酰基苯基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(20g，57.91mmol)、(4-甲基磺酰基苯基)硼酸(15.8g，78.99mmol)和碳酸钠(24.55g，231.66mmol，9.70mL)添加到1,4-二噁烷(350mL)和水(110mL)的混合物中。将所得混合物抽真空然后用氩气回填，将此操作重复三次，然后在氩气下添加Pd(dppf)Cl2 DCM(2.36g，2.90mmol)。将反应混合物在氩气、90℃下搅拌18h，然后冷却且过滤。将滤饼用二噁烷(2*50ml)洗涤且丢弃。在真空中蒸发滤液，且通过硅胶柱色谱使用氯仿/乙酸乙酯梯度(0-100％乙酸乙酯)纯化残余物，以得到呈米色固体的3-甲基-6-(4-甲基磺酰基苯基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(11.3g，32.15mmol，55.52％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(CDCl3,400MHz):0.92(d,3H),1.18(m,9H),1.93(m,1H),2.02(m,1H),2.46(m,1H),3.05(m,4H),4.05(m,1H),5.44(s,1H),7.49(d,2H),7.87(d,2H)。
LCMS(ESI)：[M+Na]+m/z：计算值351.5；实测值374.2；Rt＝1.345min。
步骤2：3-甲基-6-(4-甲基磺酰基苯基)-2,3,4,5-四氢吡啶的合成
将3-甲基-6-(4-甲基磺酰基苯基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(3g，8.54mmol)于三氟乙酸(29.20g，256.08mmol，19.73mL)中的溶液在25℃下搅拌1h。1小时之后，在减压下浓缩反应混合物。将所获得的残余物用冰冷水(50mL)稀释且用10％ NaOH水溶液中和，直至pH 10。用二氯甲烷(2x 50mL)萃取所得混合物。将合并的有机相经干燥硫酸钠且在减压下浓缩，以得到呈白色固体的3-甲基-6-(4-甲基磺酰基苯基)-2,3,4,5-四氢吡啶(2.05g，8.16mmol，95.55％产率)。
1H NMR(CDCl3,500MHz):1.01(d,3H),1.42(m,1H),1.62(m,1H),1.97(m,1H),2.60(m,1H),2.75(m,1H),2.80(s,3H),3.30(m,1H),4.08(m,1H),7.95(m,4H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值251.3；实测值252.0；Rt＝0.746min。
步骤3：(2R,5S)-5-甲基-2-(4-甲基磺酰基苯基)哌啶的合成
在0℃下，向3-甲基-6-(4-甲基磺酰基苯基)-2,3,4,5-四氢吡啶(2.05g，8.16mmol)于甲醇(50mL)中的搅拌悬浮液中分批添加硼氢化钠(900mg，23.79mmol，841.12μL)。将所得反应混合物在0℃下搅拌1h，然后使其升温至25℃且搅拌12h，然后在减压下浓缩。将残余物用水(50mL)稀释且用二氯甲烷(2x 50mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空下浓缩，以获得呈白色固体的粗产物(2R,5S)-5-甲基-2-(4-甲基磺酰基苯基)哌啶(1.9g，7.50mmol，91.95％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(CDCl3,400MHz):1.01(d,3H),1.42(m,1H),1.62(m,1H),1.87(m,2H),1.90(m,2H),2.40(m,1H),3.05(s,3H),3.15(m,1H),3.66(m,1H),7.58(d,2H),7.88(d,2H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值253.4；实测值254.0；Rt＝0.610min。
6WW.6-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]噻唑并[5,4-b]吡啶的合成
步骤1：6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)噻唑并[5,4-b]吡啶的合成
将6-溴噻唑并[5,4-b]吡啶(3g，13.95mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(5.31g，20.92mmol)和CH3COOK(4.11g，41.85mmol，2.62mL)于二噁烷(10mL)中的混合物用氩气脱气10min。接着添加(dppf)PdCl2*CH2Cl2(1.14g，1.39mmol)且将反应混合物加热至90℃达16h。将反应混合物冷却至室温，过滤且在减压下浓缩。通过SiO2快速色谱(梯度CHCl3:乙腈)纯化粗产物，以得到6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)噻唑并[5,4-b]吡啶(2.6g，9.92mmol，71.11％产率)。
LCMS(ESI)：[M-4Me]+m/z：计算值180.2；实测值181.2；Rt＝0.698min。
步骤2：3-甲基-6-噻唑并[5,4-b]吡啶-6-基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(2.54g，7.35mmol)、6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)噻唑并[5,4-b]吡啶(2.41g，9.19mmol)和碳酸钠(2.34g，22.06mmol，924.02μL)添加到1,4-二噁烷(30mL)和水(10mL)的混合物中。将所得混合物抽真空，然后用氩气回填，然后在氩气下添加Pd(dppf)Cl2 DCM(299.97mg，367.61μmol)。将反应混合物在氩气、75℃下搅拌16h，然后用水处理且将所需产物用DCM萃取，然后蒸发。通过SiO2快速色谱(梯度MTBE:甲醇)纯化粗产物，以得到3-甲基-6-噻唑并[5,4-b]吡啶-6-基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.55g，4.68mmol，63.61％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,500MHz):0.96(s,11H),1.85(m,2H),3.10(m,2H),3.90(m,2H),5.56(s,1H),8.23(s,1H),8.56(s,1H),9.52(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值331.2；实测值332.2；Rt＝1.493min。
步骤3：6-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)噻唑并[5,4-b]吡啶的合成
将3-甲基-6-噻唑并[5,4-b]吡啶-6-基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.55g，4.68mmol)溶解于99％三氟乙酸(22.20g，194.70mmol，15mL)中且搅拌1h。将反应混合物蒸发至干，将残余物溶解于40ml DCM中，用饱和NaHCO3溶液洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩，以得到6-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)噻唑并[5,4-b]吡啶(0.8g，3.46mmol，73.95％产率)。
1H NMR(CDCl3,400MHz):1.01(d,3H),1.44(m,1H),1.75(m,1H),1.97(m,1H),2.68(m,1H),2.87(m,1H),3.29(m,1H),4.06(m,1H),8.65(s,1H),9.11(s,2H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值231.1；实测值232.2；Rt＝0.582min。
步骤4：6-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]噻唑并[5,4-b]吡啶的合成
将6-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)噻唑并[5,4-b]吡啶(0.8g，3.46mmol)溶解于甲醇(20mL)中且分若干批添加硼氢化钠(196.26mg，5.19mmol，183.42μL)。1h之后，将反应混合物在真空中浓缩，然后溶解于DCM中，用水洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩，以得到6-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]噻唑并[5,4-b]吡啶(0.65g，2.79mmol，80.55％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO)0.93(d,3H),1.18(m,1H),1.59(m,1H),1.62(m,1H),1.90(m,3H),2.47(m,1H),3.19(m,1H),3.77(m,1H),8.39(s,1H),8.69(s,1H),9.10(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值233.1；实测值234.2；Rt＝0.561min。
6XX.外消旋-6-(5-甲基-2-哌啶基)-1H-喹啉-2-酮的合成
步骤1：6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-喹啉-2-酮的合成
将乙酸钾(7.88g，80.34mmol，5.02mL)添加到6-溴-1H-喹啉-2-酮(9g，40.17mmol)于二噁烷(200mL)中的溶液中，随后添加4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(10.20g，40.17mmol)和Pd(dppf)Cl2*DCM(1.64g，2.01mmol)。将溶液在90℃、Ar下搅拌过夜。将所得混合物在真空下浓缩，用EtOAc稀释，过滤且蒸发。通过柱色谱(己烷/MTBE)纯化所得粗沉淀物，以获得6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-喹啉-2-酮(10.54g，粗品)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.30(s,12H),6.48(d,1H),7.27(d,1H),7.72(d,1H),7.97(s,1H),7.99(d,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值271.2；实测值272.2；Rt＝1.106min。
步骤2：3-甲基-6-(2-氧代-1H-喹啉-6-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
向碳酸钾(7.65g，55.33mmol，3.34mL)、Pd(dppf)Cl2*DCM(753.02mg，922.11μmol)于水(5mL)中的溶液中添加6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-喹啉-2-酮(5g，18.44mmol)于二噁烷(5mL)中的溶液，随后添加3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(7.01g，20.29mmol)和Pd(dppf)Cl2*DCM(753.02mg，922.11μmol)。将所得混合物在90℃、Ar下搅拌过夜。将所得混合物在真空下浓缩，用EtOAc稀释且用水(2x40 ml)洗涤。将有机相经硫酸钠干燥，过滤且蒸发，以获得3-甲基-6-(2-氧代-1H-喹啉-6-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(8.3g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值340.2；实测值341.2；Rt＝1.239min。
步骤3：6-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1H-喹啉-2-酮的合成
将3-甲基-6-(2-氧代-1H-喹啉-6-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(8.3g，24.38mmol)于TFA(40mL)中的溶液在25℃下搅拌13h。将饱和碳酸钾水溶液添加到所述溶液(50ml)中，然后用DCM(2x50ml)萃取。将有机相经硫酸钠干燥，过滤出且蒸发，以获得6-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1H-喹啉-2-酮(6.3g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值240.2；实测值241.2；Rt＝0.593min。
步骤4：外消旋-6-(5-甲基-2-哌啶基)-1H-喹啉-2-酮的合成
将硼氢化钠(1.98g，52.43mmol，1.85mL)分批添加到6-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1H-喹啉-2-酮(6.3g，26.22mmol)于甲醇(100mL)中的溶液中。将混合物在室温下搅拌12h。添加水(50ml)且将所得混合物用EtOAc(2x50 ml)萃取。将有机相经硫酸钠干燥，过滤且蒸发。通过柱色谱纯化所得粗产物，以获得外消旋-6-(5-甲基-2-哌啶基)-1H-喹啉-2-酮(1.1g，4.54mmol，17.32％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ0.89(d,3H),1.16(m,2H),1.63(m,2H),1.82(m,1H),2.38(m,1H),3.05(m,1H),3.63(m,2H),6.44(d,1H),7.24(d,1H),7.30(d,1H),7.58(s,1H),7.78(d,1H),11.64(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值242.2；实测值243.0；Rt＝0.714min。
6YY.6-(5-甲基-2-哌啶基)异喹啉的合成
步骤1：6-(6-异喹啉基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)异喹啉(5.3g，20.77mmol)、3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(7.17g，20.77mmol)和碳酸钠(2.20g，20.77mmol，870.32μL)一起混合于二噁烷(45mL)中且向其中添加H2O(15mL)。将所得混合物抽真空且用氩气回填三次。将Pd(dppf)Cl2 DCM(20.77mmol)添加到先前混合物中且将所得混合物在90℃下加热18h。冷却反应混合物且用水(150ml)稀释。过滤所得混合物且用水(100ml)和EtOAc(200ml)冲洗。将滤液转移至分液漏斗且分离有机层。将水层用EtOAc(2*200ml)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥且蒸发，以获得粗产物，其通过CC进行纯化，以获得6-(6-异喹啉基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(5.3g，16.34mmol，78.64％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值324.2；实测值325.4；Rt＝1.189min。
步骤2：6-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)异喹啉的合成
将6-(6-异喹啉基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(5.3g，16.34mmol)和三氟乙酸(18.63g，163.37mmol，12.59mL)溶解于DCM(18mL)中且在室温下搅拌1h，然后在真空中蒸发。将残余物溶解于Na2CO3水溶液中且添加DCM。将有机相分离，用盐水洗涤，干燥且蒸发，以获得6-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)异喹啉(2.3g，10.25mmol，62.77％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.02(d,3H),1.43(m,1H),1.78(m,1H),1.97(m,1H),2.69(m,1H),2.88(m,1H),3.30(m,1H),4.06(m,1H),7.67(d,1H),7.95(d,1H),8.10(s,1H),8.12(d,1H),8.51(d,1H),9.23(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值224.2；实测值225.2；Rt＝0.676min。
步骤3：6-(5-甲基-2-哌啶基)异喹啉的合成
将6-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)异喹啉(2.3g，10.25mmol)溶解于甲醇(25mL)中且逐滴添加硼氢化钠(775.88mg，20.51mmol，725.12μL)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物蒸发至干。将残余物溶解于DCM(150ml)中且将所得混合物用柠檬酸溶液(2*100mL)萃取。将合并的水层用DCM(3*50mL)洗涤，然后用K2CO3碱化。将所得混合物用DCM(2*200mL)萃取且将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且蒸发。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.89(d,3H),1.18(m,2H),1.71(m,1H),1.88(m,2H),2.12(m,1H),2.45(m,1H),3.18(m,1H),3.73(m,1H),7.60(m,2H),7.81(s,1H),7.88(d,1H),8.46(d,1H),8.18(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值226.2；实测值227.2；Rt＝0.607min。
6ZZ.外消旋-(2R,5S)-1',5-二甲基-2,4'-联哌啶的合成
步骤1：1',5-二甲基-1',2',3',5,6,6'-六氢-[2,4'-联吡啶]-1(4H)-甲酸叔丁酯的合成
将3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(22.17g，54.56mmol)、1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,6-二氢-2H-吡啶(14g，62.75mmol)、[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)与DCM的络合物(2.23g，2.73mmol)和碳酸钠(17.35g，163.69mmol，6.86mL)于二噁烷(225mL)和水(75mL)中的混合物在90℃、氩气气氛下搅拌28h。冷却至室温之后，过滤出反应混合物。将滤饼用二噁烷(500mL)洗涤且丢弃。在减压下浓缩滤液且通过硅胶快速色谱，使用0至100％ MeOH-MTBE梯度洗脱来纯化残余物，以得到3-甲基-6-(1-甲基-3,6-二氢-2H-吡啶-4-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(6g，20.52mmol，37.61％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.85(d,3H),1.31(s,9H),1.73(m,2H),2.01(m,1H),2.10(m,2H),2.18(s,3H),2.46(m,2H),2.75(m,1H),2.83(m,2H),3.69(m,1H),5.09(m,1H),5.48(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值292.2；实测值293.2；Rt＝1.118min。
步骤2：1',5-二甲基-1',2',3,3',4,5,6,6'-八氢-2,4'-联吡啶的合成
将3-甲基-6-(1-甲基-3,6-二氢-2H-吡啶-4-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(6g，20.52mmol)于TFA(37.43g，328.30mmol，25.29mL)中的溶液在20℃下搅拌1h，然后在真空中蒸发。将碎冰(10g)添加到残余物中且用10％氢氧化钠水溶液将pH调节至10。将所得混合物用乙酸乙酯(2*30mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到呈棕色固体的1-甲基-4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-3,6-二氢-2H-吡啶(3g，15.60mmol，76.03％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.85(d,3H),1.15(m,2H),1.71(m,2H),2.26(s,3H),2.37(m,2H),2.48(m,2H),2.94(m,3H),3.72(m,1H),3.90(m,1H),6.19(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值192.2；实测值193.2；Rt＝0.198min。
步骤3：外消旋-1-甲基-4-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶的合成
在0℃下，将硼氢化钠(885.26mg，23.40mmol，827.34μL)一次性添加到1-甲基-4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-3,6-二氢-2H-吡啶(3g，15.60mmol)于MeOH(90mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在0℃下搅拌1h，然后在真空中蒸发。将残余物用水(100mL)稀释且用DCM(2*200mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到呈黄色油状物的1-甲基-4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-3,6-二氢-2H-吡啶(2.6g，13.38mmol，85.77％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.75(d,3H),1.06(m,4H),1.37(m,1H),1.54(m,1H),1.70(m,1H),2.09(m,3H),2.16(s,3H),2.36(m,2H),2.75(m,2H),2.86(m,1H),5.47(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值194.2；实测值195.2；Rt＝0.151min。
步骤4：外消旋-(2R,5S)-1',5-二甲基-2,4'-联哌啶的合成
向1-甲基-4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-3,6-二氢-2H-吡啶(2.60g，13.38mmol)于MeOH(300mL)中的溶液中添加钯(10％于碳上)(1.42g，13.38mmol)。在氢气气氛(1巴)下进行反应且在45℃下剧烈搅拌。24h之后，通过过滤移除催化剂，且在真空中浓缩滤液，以得到1-甲基-4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]哌啶(2.6g，13.24mmol，98.97％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.73(d,3H),0.78(m,1H),0.89(m,1H),1.15(m,3H),1.32(m,2H),1.71(m,7H),2.09(s,3H),2.27(m,1H),2.72(m,2H),2.86(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值196.2；实测值197.2；Rt＝0.112min。
6AAA.外消旋-4-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸苯甲酯 的合成
步骤1：4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸苯甲酯的合成
在10℃下，向4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶(36g，146.61mmol，HCl)和碳酸氢钠(30.79g，366.53mmol，14.26mL)于THF(700mL)和水(350mL)中的溶液中逐滴添加氯甲酸苯甲酯(32.51g，190.59mmol)。将反应混合物在室温下搅拌搅拌12h，且在真空中蒸发溶剂。将残余物用水(300mL)处理且用EtOAc(2x200 mL)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩，以得到呈黄色固体的产物4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸苯甲酯(45g，131.11mmol，89.43％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.15(s,12H),2.06(m,2H),3.36(m,2H),3.92(m,2H),5.04(s,2H),6.35(m,1H),7.32(m,5H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值343.2；实测值344.2；Rt＝1.676min。
步骤2：5-甲基-5,5',6,6'-四氢-[2,4'-联吡啶]-1,1'(2'H,4H)-二甲酸1'-苯甲酯1-叔丁酯的合成
将3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(30.79g，89.15mmol)、4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸苯甲酯(45g，111.44mmol)、[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)与DCM的络合物(3.64g，4.46mmol)和碳酸钠(28.35g，267.46mmol，11.20mL)于二噁烷(420mL)和水(140mL)中的混合物在90℃、氩气气氛下搅拌28h。冷却至室温之后，过滤出反应混合物。将滤饼用二噁烷(600mL)洗涤且丢弃。在减压下浓缩滤液且通过硅胶快速色谱，使用0至100％ EtOAc-己烷梯度洗脱来纯化残余物，以得到6-(1-苯甲氧基羰基-3,6-二氢-2H-吡啶-4-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(9.1g，22.06mmol，24.74％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.94(d,3H),1.26(m,2H),1.42(s,9H),1.71(m,1H),1.89(m,1H),2.27(m,2H),2.83(m,1H),3.70(m,2H),3.88(m,1H),4.03(m,2H),5.16(s,2H),5.67(m,1H),7.35(m,5H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值312.2；实测值313.2；Rt＝1.634min。
步骤3：5-甲基-3,4,5,5',6,6'-六氢-[2,4'-联吡啶]-1'(2'H)-甲酸苯甲酯的合成
在室温下，将磷酸(21.38g，218.17mmol，12.58mL)小心添加到6-(1-苯甲氧基羰基-3,6-二氢-2H-吡啶-4-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(9g，21.82mmol)于DCM(100mL)中的溶液中。然后将反应混合物在室温下搅拌12h。将碎冰(25g)添加到残余物中且将pH用5％ Na2CO3水溶液调节至8。将所得混合物用DCM(2*150mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到呈棕色油状物的4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸苯甲酯(7g，粗品)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.84(d,3H),1.29(m,5H),2.12(m,4H),2.86(m,2H),3.48(m,1H),4.12(m,2H),5.05(s,2H),7.29(m,5H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值312.2；实测值313.2；Rt＝1.039min。
步骤4：外消旋-4-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸苯甲酯的合成
在0℃下，将硼氢化钠(1.27g，33.61mmol，1.19mL)一次性添加到4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸苯甲酯(7g，22.41mmol)于MeOH(150mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在0℃下搅拌1h，然后在真空中蒸发。将残余物用水(150mL)稀释且用DCM(2*200mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到呈棕色油状物的4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸苯甲酯(7g，粗品)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.74(d,3H),0.96(m,1H),1.06(m,5H),1.56(m,2H),2.12(m,3H),2.86(m,2H),3.29(m,1H),4.12(m,1H),4.46(m,1H),5.04(s,2H),7.29(m,5H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值314.2；实测值315.2；Rt＝1.076min。
6BBB.外消旋-3-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸苯甲酯 的合成
步骤1：5-甲基-5,5',6,6'-四氢-[2,3'-联吡啶]-1,1'(2'H,4H)-二甲酸1'-苯甲酯1-叔丁酯的合成
将5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸苯甲酯*(12g，34.96mmol)、3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(14.49g，41.96mmol)、碳酸钠(11.12g，104.89mmol，4.39mL)于二噁烷(100mL)和水(30mL)中的溶液抽真空且用Ar再填充三次。向此混合物中添加[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)与DCM的络合物(1.43g，1.75mmol)且将所得混合物在95℃下搅拌12h，冷却，过滤且蒸发。将残余物溶解于水(200ml)中且用MTBE(3*200ml)萃取。将有机层用盐水(150ml)洗涤，经Na2SO4干燥，通过SiO2薄层过滤且在真空中蒸发，以得到6-(1-苯甲氧基羰基-3,6-二氢-2H-吡啶-5-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(15g，粗品)。此化合物不经进一步纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)0.93(d,3H),1.21(s,9H),2.16(m,4H),2.77(m,1H),3.48(m,3H),3.86(m,2H),4.06(m,1H),4.25(m,1H),5.11(s,2H),5.77(m,1H),7.32(m,5H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值312.2；实测值313.2；Rt＝1.749min。
步骤2：5-甲基-3,4,5,5',6,6'-六氢-[2,3'-联吡啶]-1'(2'H)-甲酸苯甲酯的合成
将6-(1-苯甲氧基羰基-3,6-二氢-2H-吡啶-5-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(15g，36.36mmol)于TFA(62.19g，545.43mmol，42.02mL)中的溶液在25℃下搅拌2h且在真空中移除溶剂。将残余物溶解于水(150ml)中且将pH用NaOH溶液调节至8-9，用DCM(3*100)萃取。将有机层用盐水(100ml)洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中移除溶剂，以得到呈棕色胶状物的5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸苯甲酯(11g，粗品)。此化合物不经进一步纯化即用于下一步骤。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.88(d,3H),1.23(m,2H),1.68(m,2H),1.96(m,2H),2.24(m,4H),2.78(m,1H),3.54(m,1H),4.25(m,1H),4.57(m,1H),5.15(s,2H),7.35(m,5H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值312.2；实测值313.2；Rt＝0.901min。
步骤3：外消旋-3-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸苯甲酯的合成
在0℃下，向5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸苯甲酯(11g，35.21mmol)于MeOH(100mL)中的溶液中分批添加硼氢化钠(2.00g，52.82mmol，1.87mL)。将所得混合物搅拌2h，且在真空中蒸发溶剂，且将残余物溶解于水(150ml)且用DCM(3*100ml)萃取，用盐水(100ml)洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中蒸发，以得到粗品5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸苯甲酯(10g，粗品)。此化合物不经纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)0.82(m,1H),0.98(d,3H),1.69(m,3H),1.95(m,1H),2.10(m,2H),2.62(m,2H),3.17(m,2H),3.54(m,1H),3.95(m,2H),4.55(m,1H),4.78(m,1H),5.12(s,2H),7.33(m,5H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值314.2；实测值315.2；Rt＝0.941min。
6CCC.7-(5-甲基哌啶-2-基)-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噁嗪的合成
步骤1：7-溴-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噁嗪的合成
在氩气下，向LAH(1.21g，31.85mmol)于THF(10mL)中的悬浮液中小心逐滴添加于THF(100mL)中的7-溴-4H-1,4-苯并噁嗪-3-酮(6.05g，26.54mmol)。将所得混合物在70℃下加热12h。冷却至室温之后，逐滴添加1ml于水中的50％ KOH溶液。过滤所得沉淀，用THF(2x5ml)洗涤且丢弃。将所获得的溶剂合并，用硫酸钠干燥且蒸发，以获得7-溴-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪(5.9g，粗品)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)3.38(t,2H),4.22(t,2H),5.28(m,1H),6.46(d,1H),6.82(d,1H),6.89(s,1H)。
GCMS：计算值214.2；实测值214.2；Rt＝9.248min。
步骤2：7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噁嗪的合成
将乙酸钾(3.97g，40.46mmol，2.53mL)添加到7-溴-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪(3.94g，18.39mmol)于二噁烷(40mL)中的溶液中，随后添加双(频哪醇)二硼(4.67g，18.39mmol)和Pd(dppf)Cl2(672.76mg，919.44μmol)。将所得溶液在90℃、Ar下搅拌过夜。将所得混合物在真空下浓缩，用EtOAc稀释，过滤且蒸发。通过柱色谱(己烷/MTBE)纯化所得粗沉淀，以获得7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪(710mg，2.72mmol，14.79％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.29(s,12),3.42(t,2H),4.20(t,2H),6.52(d,1H),7.21(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值261.2；实测值262.2；Rt＝1.369min。
步骤3：6-(3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-7-基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
向碳酸钾(1.13g，8.16mmol，492.31μL)于水(10mL)中的溶液中添加7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪(710mg，2.72mmol)于二噁烷(10mL)中的溶液，随后添加3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.03g，2.99mmol)和Pd(dppf)Cl2(99.48mg，135.95μmol)。将所得混合物在90℃、Ar下搅拌过夜。将所得混合物在真空下浓缩，用EtOAc稀释且用水(2x40 ml)洗涤。将有机相经硫酸钠干燥，过滤且蒸发，以获得6-(3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪-7-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(900mg，粗品)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.01(d,3H),1.17(m,3H),1.29(s,9H),1.81(m,1H),1.99(m,1H),2.38(m,1H),2.93(m,1H),3.43(m,2H),3.98(m,1H),4.24(m,1H),6.64(m,3H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值330.2；实测值331.2；Rt＝1.394min。
步骤4：7-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噁嗪的合成
将6-(3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪-7-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.25g，3.78mmol)于TFA(5mL)和DCM(5mL)中的溶液在25℃下搅拌12h。将饱和碳酸钾水溶液添加到所述溶液(50ml)中，然后用DCM(2x50 ml)萃取。将有机相经硫酸钠干燥，过滤且蒸发，以获得7-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪(882mg，粗品)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)0.94(d,3H),1.72(m,4H),2.49(m,1H),3.02(m,1H),3.22(m,1H),3.40(m,2H),3.89(m,1H),4.21(m,1H),6.58(m,2H),6.74(m,1H),6.98(m,1H)。
步骤5：7-(5-甲基哌啶-2-基)-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噁嗪的合成
将硼氢化钠(173.87mg，4.60mmol，162.49μL)分批添加到7-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪(882mg，3.83mmol)于MeOH(10mL)中的溶液中。将混合物在室温下搅拌2h。添加水(50ml)且将所得混合物用EtOAc(2x30 ml)萃取。将有机相经硫酸钠干燥，过滤且蒸发，以获得7-(5-甲基-2-哌啶基)-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪(0.68g，粗品)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)0.84(d,3H),1.48(m,2H),1.76(m,5H),2.36(m,1H),3.09(m,1H),3.40(m,2H),4.22(m,2H),6.58(m,2H),6.75(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值232.2；实测值233.2；Rt＝0.789min。
6DDD.外消旋-5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)异吲哚啉-1-酮的合成
步骤1：3-甲基-6-(1-氧代异吲哚啉-5-基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
将5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)异吲哚啉-1-酮(4g，15.44mmol)、3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(5.86g，16.98mmol)和碳酸钠(3.27g，30.88mmol，1.29mL)一起混合于二噁烷(60mL)和水(20mL)的混合物中。将烧瓶抽真空且用氩气回填三次，且向其中添加二氯(1,1'-双(二苯基磷烷基)二茂铁)钯(II)*DCM(630.12mg，771.88μmol)。将反应混合物在75℃下加热12h。将反应混合物用EtOAc稀释，将所形成的固体过滤出，用另外的EtOAc洗涤且在真空下干燥，以得到3-甲基-6-(1-氧代异吲哚啉-5-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(3.7g，11.27mmol，72.98％产率)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98(s,12H),1.87(m,2H),2.41(m,1H),3.03(m,1H),3.88(m,1H),4.32(m,2H),5.43(m,1H),7.42(m,3H),8.46(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值328.2；实测值329.2；Rt＝3.610min。
步骤2：5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)异吲哚啉-1-酮的合成
将3-甲基-6-(1-氧代异吲哚啉-5-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(3.67g，11.18mmol)溶解于DCM(11mL)和TFA(11mL)的混合物中，然后在室温下搅拌1h。将反应混合物用20％ NaOH水溶液中和，将所获得的溶液用DCM稀释，将有机相分离且将水层用额外DCM洗涤。将有机相经Na2SO4干燥，过滤且在真空下浓缩，以得到5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)异吲哚啉-1-酮(1.77g，7.73mmol，69.18％产率)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)1.03(d,3H),1.41(m,1H),1.75(m,2H),1.97(m,1H),2.65(m,1H),2.83(m,1H),3.31(m,1H),4.07(m,1H),4.46(m,1H),6.88(m,1H),7.88(m,3H)。
步骤3：外消旋-5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)异吲哚啉-1-酮的合成
将5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)异吲哚啉-1-酮(1.77g，7.73mmol)溶解于MeOH(20mL)中且在使用冰水冷却的情况下分批添加硼氢化钠(877.50mg，23.19mmol，820.09μL)。将反应混合物加热至室温且搅拌12h。添加NH4Cl(水溶液)且蒸发MeOH，将水层用DCM(3*30ml)萃取且将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且在45℃下在真空下蒸发，以得到5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]异吲哚啉-1-酮(1.24g，5.38mmol，69.64％产率)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]异吲哚啉-1-酮(1.24g，5.38mmol，69.64％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)0.89(d,3H),1.17(m,2H),1.85(m,4H),2.42(m,1H),3.15(m,1H),3.64(m,1H),4.40(m,2H),6.96(m,1H),7.50(m,2H),7.78(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值230.2；实测值231.2；Rt＝0.889min。
6EEE.5-(4-(5-甲基哌啶-2-基)苯基)噻唑的合成
步骤1：5-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)噻唑的合成
将乙酸钾(11.44g，116.61mmol，7.29mL)添加到5-(4-溴苯基)噻唑(14g，58.30mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(16.29g，64.13mmol)于二噁烷(150mL)中的溶液中。将反应烧瓶抽真空且用Ar再填充3次。然后在氩气流下添加Pd(dppf)Cl2*DCM(2.38g，2.92mmol)。在90℃、惰性气氛下将所得混合物搅拌14h。然后，将其冷却，用EtOAc(400mL)稀释且用水(2x200mL)洗涤。将有机层经Na2SO4干燥且在减压下浓缩。通过硅胶快速色谱，使用0至100％己烷-MTBE梯度洗脱来纯化残余物，以得到5-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]噻唑(10g，34.82mmol，59.72％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.32(s,12H),7.58(d,2H),7.68(d,2H),8.12(s,1H),8.82(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值287.2；实测值288.2；Rt＝1.546min。
步骤2：3-甲基-6-(4-(噻唑-5-基)苯基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
将3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(4.81g，13.93mmol)、5-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]噻唑(4g，13.93mmol)和碳酸钠(4.43g，41.79mmol，1.75mL)添加到水(15mL)和二噁烷(45mL)的混合物中。将所得混合物抽真空然后用氩气回填，将此操作重复三次，然后在氩气下添加Pd(dppf)Cl2*DCM(568.72mg，696.42μmol)。将反应混合物在氩气、70℃下搅拌14h，然后冷却且过滤。将滤饼用1,4-二噁烷(2*20ml)洗涤且丢弃。在真空中蒸发滤液，以得到呈棕色油状物的3-甲基-6-(4-噻唑-5-基苯基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(4g，11.22mmol，80.56％产率)，其不经纯化即用于下一步骤。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.95(d,3H),1.06(s,9H),1.86(m,1H),2.46(m,1H),3.12(m,1H),3.26(m,1H),4.42(m,1H),5.72(m,1H),7.28(d,2H),7.67(d,2H),8.29(s,1H),9.06(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值356.2；实测值357.2；Rt＝1.654min。
步骤3：5-(4-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯基)噻唑的合成
将3-甲基-6-(4-噻唑-5-基苯基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(4g，11.22mmol)于TFA(19.19g，168.31mmol，12.97mL)中的溶液在25℃下搅拌1h，然后在真空中蒸发。将碎冰(15g)添加到残余物中且用10％氢氧化钠水溶液将pH调节至10。将所得混合物用DCM(2*30ml)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到呈棕色油状物的5-[4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯基]噻唑(2.8g，10.92mmol，97.34％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.89(d,3H),1.28(m,1H),1.58(m,1H),1.82(m,1H),2.71(m,1H),3.15(m,1H),3.86(m,1H),4.30(m,1H),7.41(d,2H),7.64(d,2H),8.32(s,1H),9.05(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值256.2；实测值257.2；Rt＝0.945min。
步骤4：5-(4-(5-甲基哌啶-2-基)苯基)噻唑的合成
在0℃下，将硼氢化钠(826.41mg，21.84mmol，772.34μL)一次性添加到5-[4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯基]噻唑(2.8g，10.92mmol)于MeOH(50mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在25℃下搅拌12h，然后在真空中蒸发。将残余物用水(20ml)稀释且用DCM(2*40ml)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发。使所获得的油状物经历HPLC(Waters Sunfire C18 19*100 5mkm柱且以MeOH为洗脱液混合物)，以得到5-[4-(5-甲基-2-哌啶基)苯基]噻唑(0.37g，1.43mmol，13.11％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.81(d,3H),1.08(m,1H),1.22(m,1H),1.48(m,1H),1.71(m,2H),2.22(m,1H),2.96(m,1H),3.46(m,1H),4.36(m,1H),7.39(d,2H),7.54(d,2H),8.28(s,1H),9.05(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值258.2；实测值259.2；Rt＝1.410min。
6FFF.6-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑的合成
步骤1.6-(1,3-苯并噻唑-6-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将碳酸钠(4.06g，38.29mmol，1.60mL)添加到6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噻唑(5g，19.15mmol)和3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(7.27g，21.06mmol)于二噁烷(60mL)和水(20mL)中的溶液中。将反应烧瓶抽真空且用氩气再填充3次。然后，在氩气流下添加二氯(1,1'-双(二苯基磷烷基)二茂铁)钯(II)*CH2Cl2(781.50mg，957.32μmol)。在90℃、惰性气氛下将所得混合物搅拌12h。在减压下移除溶剂且将残余物再溶解于EA中。通过短硅胶垫过滤出不溶性固体且在真空中浓缩滤液，得到6-(1,3-苯并噻唑-6-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(6.11g，18.49mmol，96.57％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.99(m,13H),1.46(m,1H),1.85(m,1H),2.02(m,1H),2.40(m,1H),3.04(m,1H),4.07(m,1H),5.37(m,1H),7.46(d,1H),7.84(s,1H),7.99(d,1H),8.92(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值330.2；实测值331.0；Rt＝1.542min。
步骤2.6-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1,3-苯并噻唑的合成
将6-(1,3-苯并噻唑-6-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(6.11g，18.49mmol)溶解于DCM(18mL)和TFA(18mL)的混合物中，然后在室温下搅拌1h。将反应混合物用20％ NaOH水溶液中和，将所获得的溶液用DCM稀释，将有机相分离且将水层用额外DCM洗涤。将有机相经Na2SO4干燥，过滤且在真空下浓缩，以得到6-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1,3-苯并噻唑(4.1g，17.80mmol，96.27％产率)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)1.00(m,3H),1.42(m,1H),1.74(m,1H),1.96(m,1H),2.65(m,1H),2.84(m,1H),3.29(m,1H),4.02(d,1H),7.96(d,1H),8.10(d,1H),8.39(s,1H),9.01(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值230.1；实测值231.2；Rt＝0.581min。
步骤3.6-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑的合成
将6-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1,3-苯并噻唑(4.1g，17.80mmol)溶解于甲醇(40mL)中且在使用冰水冷却的情况下分批添加硼氢化钠(2.02g，53.40mmol，1.89mL)。将反应混合物加热至室温且搅拌12h。添加NH4Cl(水溶液)且蒸发甲醇，将水层用DCM(3*30ml)萃取且将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且在真空下在45℃下蒸发，以得到6-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑(4g，17.22mmol，96.71％产率)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)0.90(m,3H),1.16(m,2H),1.57-1.65(m,3H),1.85(m,2H),2.43(t,1H),3.15(d,1H),3.67(d,1H),7.49(d,1H),7.98(s,1H),8.02(d,1H),8.92(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值232.1；实测值233.2；Rt＝0.837min。
6GGG.外消旋-5-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-二氢苯并咪唑-2-酮的合成
步骤1：3-甲基-6-(2-氧代-1,3-二氢苯并咪唑-5-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(3.98g，11.53mmol)、5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-二氢苯并咪唑-2-酮(3g，11.53mmol)和碳酸钾(4.78g，34.60mmol，2.09mL)于1,4-二噁烷(50mL)和水(50mL)中的搅拌悬浮液用氩气吹扫。然后，在氩气下添加Pd(dppf)Cl2(421.98mg，576.71μmol)。将反应混合物在氩气、90℃下搅拌12小时。12小时之后，将反应混合物冷却且过滤。在真空中蒸发滤液且将残余物用水(80mL)和EtOAc稀释。分离两层。将有机层经Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩，以获得呈黑色胶状物的3-甲基-6-(2-氧代-1,3-二氢苯并咪唑-5-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(2.01g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值329.2；实测值330.2；Rt＝1.231min。
步骤2：5-(3-甲基-1,2,3,4-四氢吡啶-6-基)-1,3-二氢苯并咪唑-2-酮的合成
在0℃下，向3-甲基-6-(2-氧代-1,3-二氢苯并咪唑-5-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.8g，5.46mmol)于DCM(20mL)中的搅拌溶液中逐滴添加CF3CO2H(20mL)。将所得反应混合物在25℃下搅拌2小时。2小时之后，将反应混合物小心倒入到K2CO3溶液(50mL)中且用DCM(2x 50mL)萃取。将合并的有机相经Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩，以获得5-(3-甲基-1,2,3,4-四氢吡啶-6-基)-1,3-二氢苯并咪唑-2-酮(1.92g，粗品)。粗产物不经任何进一步纯化即用于下一步反应。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值229.1；实测值230.2；Rt＝0.697min。
步骤3：5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1,3-二氢苯并咪唑-2-酮的合成
将碳酸钾(1.74g，12.56mmol)于水(40mL)中的溶液添加到5-(3-甲基-1,2,3,4-四氢吡啶-6-基)-1,3-二氢苯并咪唑-2-酮(1.92g，8.37mmol)中。将所得混合物搅拌30分钟，然后蒸发至干。添加DCM(50mL)且过滤所得混合物。将所获得的残余物用DCM洗涤且在真空下干燥，以获得呈棕色固体的5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1,3-二氢苯并咪唑-2-酮(1.8g，粗品)。
1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)0.92(s,3H),1.26(m,1H),1.60(m,1H),1.83(m,1H),2.70(m,1H),3.14(m,2H),3.82(m,1H),6.91(m,2H),7.41(m,2H)。
步骤4：外消旋-5-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-二氢苯并咪唑-2-酮的合成
在0℃下，将硼氢化钠(593.99mg，15.70mmol)分批添加到5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1,3-二氢苯并咪唑-2-酮(1.8g，7.85mmol)于MeOH(20mL)中的搅拌溶液中。将反应混合物在20℃下搅拌3小时。3小时之后，在减压下浓缩反应混合物。将所获得的残余物用水(50mL)稀释。将所得混合物用EtOAc(2x 50mL)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩。通过HPLC纯化所获得的残余物，以获得呈白色固体的外消旋-5-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-二氢苯并咪唑-2-酮(50.4mg，217.91μmol，2.78％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值231.2；实测值232.2；Rt＝0.754min。
6HHH.N-[4-(5-甲基-2-哌啶基)环己基]乙酰胺的合成
步骤1：4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)环己-3-烯-1-胺的合成
向N-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)环己-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯(7.5g，23.20mmol)于DCM(50mL)中的搅拌溶液中添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(8.00g，219.41mmol，10mL)。将所得混合物在25℃下搅拌12小时。12小时之后，将反应混合物在减压下浓缩，以获得呈白色固体的4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)环己-3-烯-1-胺(5.9g，22.73mmol，97.96％产率，盐酸盐)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值223.2；实测值224.2；Rt＝0.840min。
步骤2：N-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)环己-3-烯-1-基]乙酰胺的合成
在0℃下，向4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)环己-3-烯-1-胺(5.9g，22.73mmol，盐酸盐)和三乙胺(6.90g，68.19mmol，9.50mL)于DCM(100mL)中的搅拌悬浮液中逐滴添加乙酰氯(2.14g，27.27mmol，1.66mL)。将所得反应混合物在室温下搅拌3小时。3小时之后，添加水(50mL)。分离两层。将有机层用盐水(2x 40mL)洗涤，经Na2SO4干燥且在减压下浓缩，以获得呈白色固体的N-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)环己-3-烯-1-基]乙酰胺(5.5g，20.74mmol，91.26％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值265.2；实测值266.2；Rt＝1.109min。
步骤3：6-(4-乙酰胺基环己烯-1-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将N-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)环己-3-烯-1-基]乙酰胺(5.5g，20.74mmol)、3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(7.16g，20.74mmol)和碳酸钠(6.60g，62.23mmol，2.61mL)于二噁烷(100mL)和水(20mL)中的搅拌悬浮液用氩气吹扫10分钟。10分钟之后，添加[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)与二氯甲烷的络合物(846.96mg，1.04mmol)。将所得反应混合物在氩气、55℃下搅拌12小时。12小时之后，使反应混合物冷却至室温且过滤。将滤饼用二噁烷(50mL)洗涤。在减压下浓缩滤液。将水(150mL)添加到所获得的残余物中且用EtOAc(2x 100mL)萃取。将合并的有机相用盐水(100mL)洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中蒸发，以获得粗产物(9g)，其通过柱色谱进行纯化，以获得呈淡黄色固体的6-(4-乙酰胺基环己烯-1-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(2.4g，7.18mmol，34.60％产率)。
LCMS(ESI)：[M+Boc]+m/z：计算值334.2；实测值279.4(t-Bu裂解的产物质量)；Rt＝1.374min。
步骤4：2-(4-乙酰胺基环己基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将6-(4-乙酰胺基环己烯-1-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(2.4g，7.18mmol)于MeOH(60mL)中的溶液在干燥的487型钯(10％于碳上)(305.46mg，2.87mmol)上在氢气气氛、25℃下氢化120小时。120小时之后，过滤反应混合物且在减压下浓缩滤液，以获得呈白色固体的2-(4-乙酰胺基环己基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.3g，6.80mmol，94.69％产率)。产物不经任何进一步纯化即用于下一步反应。
LCMS(ESI)：[M+Boc]+m/z：计算值336.2；实测值337.2；Rt＝1.346min。
步骤5：N-[4-(5-甲基-2-哌啶基)环己基]乙酰胺的合成
将2-(4-乙酰胺基环己基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.3g，6.80mmol)溶解于三氟乙酸(14.80g，129.80mmol，10mL)中且在25℃下搅拌2小时。2小时之后，将NaOH溶液添加到反应混合物中以调节pH＝9，然后用DCM(3x 30mL)萃取。将合并的有机相用盐水(40mL)洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中蒸发。将所获得的粗产物溶解于MeOH(50mL)中，且将所得溶液在干燥的487型钯(10％于碳上)(144.63mg，1.36mmol)上在氢气气氛、25℃下再氢化24小时。然后过滤反应混合物且在真空中蒸发滤液，以得到呈白色固体的N-[4-(5-甲基-2-哌啶基)环己基]乙酰胺(0.9g，3.78mmol，55.57％产率)。
GCMS:m/z：计算值238.2；实测值238.2；Rt＝10.371min。
6III.外消旋-2,6-二氟-4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯酚的合成
步骤1：4-溴-2,6-二氟苯酚的合成
在0℃下，向2,6-二氟苯酚(10g，76.87mmol)于DMF(60mL)中的搅拌溶液中添加NBS(13.68g，76.87mmol，6.51mL)。将所得反应混合物在室温下搅拌16小时。将所得反应混合物在真空中浓缩，将水添加到所获得的残余物中且用乙酸乙酯萃取。将有机相经Na2SO4干燥且在减压下浓缩，以得到呈黄色固体的4-溴-2,6-二氟苯酚(13g，62.20mmol，80.92％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,400MHz):δ(ppm)7.32(s,2H),10.41(s,1H)。
步骤2：2,6-二氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯酚的合成
将4-溴-2,6-二氟苯酚(9g，43.06mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(12.03g，47.37mmol)和KOAc(16.91g，172.26mmol)于1,4-二噁烷(200mL)中的搅拌溶液用氩气吹扫10分钟。10分钟之后，在氩气下添加Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2(1.78g，2.15mmol)。将反应混合物在氩气、80℃下搅拌24小时。然后将反应混合物冷却至室温，通过硅藻土过滤且在减压下浓缩滤液。通过快速色谱纯化所获得的粗产物，以得到呈白色固体的2,6-二氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯酚(4g，15.62mmol，36.28％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)1.25(s,12H),7.20(s,2H),10.30(s,1H)。
步骤3：叔丁基-[2,6-二氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯氧基]-二甲基硅烷的合成
在0℃下，向2,6-二氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯酚(2.88g，11.25mmol)和咪唑(1.44g，21.15mmol)于DMF(42mL)中的搅拌溶液中分批添加叔丁基氯二甲基硅烷(2g，13.27mmol，2.47mL)。使反应混合物升温至室温且在同一温度下搅拌18小时。18小时之后，将反应混合物在真空中浓缩且将所获得的残余物分配于水(100mL)与DCM(100mL)之间。将有机层经Na2SO4干燥且在减压下浓缩，以得到叔丁基-[2,6-二氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯氧基]二甲基硅烷(2.4g，粗品)。粗产物不经任何进一步纯化即用于下一步反应。
1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)0.16(s,6H),0.96(s,9H),1.27(s,12H),7.24(s,2H)。
步骤4：6-(3,5-二氟-4-羟基苯基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(2.01g，5.83mmol)、叔丁基-[2,6-二氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯氧基]二甲基硅烷(2.4g，6.48mmol)和碳酸钠(2.06g，19.44mmol)于1,4-二噁烷(20mL)和水(10mL)中的搅拌溶液用氩气吹扫。然后，在氩气下添加Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2(267.90mg，324.05μmol)。将反应混合物在氩气、75℃下搅拌14小时。14小时之后，将反应混合物用水稀释且用DCM萃取。将有机层经Na2SO4干燥且在减压下浓缩。通过柱色谱(SiO2，洗脱液：0-100％甲醇中的CHCl3)纯化所获得的粗材料，以得到6-(3,5-二氟-4-羟基苯基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.15g，3.53mmol，54.54％产率)。
步骤5：2,6-二氟-4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯酚的合成
将TFA(2.98g，26.14mmol，2mL)添加到6-(3,5-二氟-4-羟基苯基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(0.65g，2.00mmol)于DCM(2mL)中的搅拌溶液中。将所得反应混合物搅拌30分钟然后在真空中浓缩，以得到呈棕色油状物的2,6-二氟-4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯酚(0.2g，粗品)。粗产物不经任何进一步纯化即直接用于下一步反应。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值225.1；实测值226.2；Rt＝0.741min。
步骤6：外消旋-2,6-二氟-4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯酚的合成
将硼氢化钠(24.02mg，634.90μmol)一次性添加到2,6-二氟-4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯酚(0.2g，488.38μmol)于甲醇(4mL)中的搅拌溶液中。将反应混合物在室温下搅拌14小时。14小时之后，将反应混合物在减压下浓缩，通过反相HPLC纯化(洗脱液：2-10min，80-95％水-MeOH+NH3；流速：30mL/min；装载泵：4mL/min，MeOH+NH3；柱：TRIART C18，100x 20mm，5μM)纯化残余物，以获得外消旋-2,6-二氟-4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯酚(0.05g，220.02μmol，45.05％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值227.1；实测值228.2；Rt＝0.849min。
6JJJ.外消旋-2-[4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]噻唑的合成
步骤1：2-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]噻唑的合成
将2-(4-溴苯基)噻唑(10g，41.65mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(11.32g，44.56mmol)、乙酸钾(16.35g，166.58mmol，10.41mL)和Pd(dppf)Cl2DCM(1.70g，2.08mmol)混合于1,4-二噁烷(300mL)中且将混合物在80℃下搅拌17h。冷却之后，将反应混合物用水稀释且用DCM萃取若干次。将合并的萃取物在减压下浓缩且将残余物提交至快速柱色谱，以得到2-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]噻唑(10g，34.82mmol，83.61％产率)。
色谱数据：120g SiO2，CHCl3-MeCN 0～100％，流速＝100mL/min，cv＝7
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值287.2；实测值288.2；Rt＝1.585min。
步骤2：3-甲基-6-(4-噻唑-2-基苯基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将2-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]噻唑(9g，31.34mmol)、3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(8.66g，25.07mmol)、Pd(dppf)Cl2 DCM(1.02g，1.25mmol)和碳酸钠(9.96g，94.02mmol，3.94mL)添加到1,4-二噁烷(105mL)和水(35mL)的混合物中且将所得混合物在80℃下搅拌15h。冷却之后，将反应混合物用水稀释且用DCM萃取。将有机层分离，经Na2SO4干燥且在减压下浓缩。将残余物提交至快速柱色谱，以得到3-甲基-6-(4-噻唑-2-基苯基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(5.5g，15.43mmol，49.23％产率)。
色谱数据：Companion combiflash；120g SiO2，HEX-MTBE 0～100％，流速＝85mL/min，cv＝7
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值356.2；实测值357.2；Rt＝1.673min。
步骤3：2-[4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯基]噻唑的合成
在室温下，向3-甲基-6-(4-噻唑-2-基苯基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(5.5g，15.43mmol)于DCM(15mL)中的搅拌溶液中添加TFA(10g，87.70mmol，6.76mL)。将所得反应混合物在室温下搅拌0.5h。将反应混合物在减压下浓缩，用NaOH水溶液处理且用DCM萃取。将有机层经Na2SO4干燥且在减压下浓缩，以得到2-[4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯基]噻唑(3.9g，粗品)，其不经纯化即直接用于下一步骤。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值256.2；实测值257.0；Rt＝0.961min。
步骤4：外消旋-2-[4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]噻唑的合成
将2-[4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯基]噻唑(3.9g，15.21mmol)溶解于甲醇(50mL)中且一次性添加硼氢化钠(805.75mg，21.30mmol，753.04μL)。将反应混合物在25℃下搅拌16h，然后在减压下浓缩。将残余物溶解于DCM中，用NaOH水溶液、盐水洗涤且在旋转蒸发仪上浓缩，以得到2-[4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]噻唑(2g，粗品)，其不经进一步纯化即用于下面的步骤。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值258.2；实测值259.2；Rt＝0.874min。
6KKK.外消旋-5-(5-甲基-2-哌啶基)-2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑的合成
步骤1：5-溴-2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑的合成
在80℃下，将2-氨基-4-溴-苯硫醇(9.5g，46.55mmol)一次性添加到三氟乙酸(70g，613.93mmol，47.30mL)的搅拌溶液中。将所得混合物在80℃下搅拌17h，然后在真空中蒸发。将残余物用水(200mL)稀释且用EtOAc(2*90mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到5-溴-2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑(9g，31.91mmol，68.54％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.66(d,1H),7.84(d,1H),8.35(s,1H)。
步骤2：5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑的合成
将乙酸钾(6.26g，63.81mmol，3.99mL)添加到5-溴-2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑(9g，31.91mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(9.72g，38.29mmol)于二噁烷(250mL)中的溶液中。将反应烧瓶抽真空且用氩气再填充3次。然后，在氩气流下添加Pd(dppf)Cl2*DCM(1.30g，1.60mmol)。在100℃、惰性气氛下将所得混合物搅拌15h。然后，将其冷却，用MTBE(600mL)稀释且过滤。在减压下浓缩滤液，留下14.5g粗产物，14.5g粗产物通过硅胶柱色谱，使用己烷/MTBE梯度(10-100％ MTBE)进行纯化，以得到产物5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑(7.5g，22.79mmol，71.42％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ1.38(s,12H),7.96(m,2H),8.67(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值329.0；实测值330.0；Rt＝1.609min。
步骤3：3-甲基-6-[2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑(4.52g，13.73mmol)和3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(5.69g，16.48mmol)一起混合于水(2mL)中。将所得混合物抽真空然后用氩气回填，将此操作重复三次，然后在氩气下添加水(2mL)中的碳酸钠(2.91g，27.47mmol，1.15mL)和[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)与二氯甲烷的络合物(502.41mg，686.63μmol)。将反应混合物在氩气、100℃下搅拌14h，然后冷却且在真空中蒸发，将其倒入水(120ml)中且用EtOAc(2x90 ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(2*40ml)洗涤，经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，留下8g粗产物，8g粗产物通过硅胶柱色谱，使用己烷/MTBE梯度(10-100％ MTBE)进行纯化，以得到产物3-甲基-6-[2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(4g，10.04mmol，73.10％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.02(s,9H),1.54(d,3H),2.01(m,2H),2.42(m,1H),3.02(m,1H),4.07(m,1H),5.42(m,1H),7.50(d,1H),7.86(d,1H),8.11(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M-tBu]+m/z：计算值342.2；实测值343.0；Rt＝1.685min。
步骤4：5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑的合成
将3-甲基-6-[2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(4g，10.04mmol)于DCM(20mL)和三氟乙酸(22.89g，200.78mmol，15.47mL)中的溶液在0℃下搅拌8h，然后在真空中蒸发。将碎冰(50g)添加到残余物中且用10％碳酸氢钠水溶液将pH调节至8。将所得混合物用乙酸乙酯(2*50mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑(2.3g，7.71mmol，76.80％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.02(d,3H),1.24(m,1H),1.48(m,1H),1.96(m,1H),2.90(m,2H),3.33(m,1H),4.04(m,1H),7.96(d,1H),8.19(d,1H),8.47(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值298.2；实测值299.2；Rt＝0.965min。
步骤5：外消旋-5-(5-甲基-2-哌啶基)-2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑的合成
在0℃下，将硼氢化钠(583.35mg，15.42mmol，545.19μL)一次性添加到5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑(2.3g，7.71mmol)于MeOH(30mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在0℃下搅拌9h，然后在真空中蒸发。将残余物用水(40mL)稀释且用二氯甲烷(2*50mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到外消旋-5-(5-甲基-2-哌啶基)-2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑(1.8g，5.99mmol，77.74％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.01(d,3H),1.14(m,2H),1.68(m,3H),2.45(m,1H),3.19(m,1H),3.73(m,1H),5.28(s,1H),7.62(d,1H),7.90(d,1H),8.16(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值300.2；实测值301.2；Rt＝0.977min。
6LLL.外消旋-6-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]-3,4-二氢-1H-1,8-萘啶-2-酮的合 成
步骤1：6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,4-二氢-1H-1,8-萘啶-2-酮的合成
将乙酸钾(12.53g，127.72mmol，7.98mL)添加到6-溴-3,4-二氢-1H-1,8-萘啶-2-酮(14.5g，63.86mmol)于二噁烷(250mL)中的溶液中，随后添加双(频哪醇)二硼(17.84g，70.25mmol)和Pd(dppf)Cl2·DCM(2.61g，3.19mmol)。将所得溶液在90℃、Ar下搅拌过夜。将所得混合物在真空下浓缩，用EtOAc稀释，过滤且蒸发。使所得沉淀于MTBE中结晶，以获得6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,4-二氢-1H-1,8-萘啶-2-酮(14.7g，53.63mmol，83.97％产率)。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ1.33(s,12H),2.67(t,2H),2.94(t2H),7.84(s,1H),8.56(s,1H),9.16(s,1H)。
步骤2：3-甲基-6-(7-氧代-6,8-二氢-5H-1,8-萘啶-3-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
向3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(9.70g，28.09mmol)于二噁烷(200mL)中的溶液中添加碳酸钠(8.12g，76.61mmol，3.21mL)于水(50mL)中的溶液，随后添加6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,4-二氢-1H-1,8-萘啶-2-酮(7g，25.54mmol)和Pd(dppf)Cl2*DCM(1.04g，1.28mmol)。将所得混合物在90℃、Ar下搅拌过夜。将所得混合物在真空下浓缩，用EtOAc稀释且用水(2x40 mL)洗涤。将有机相经硫酸钠干燥，过滤且蒸发，以获得3-甲基-6-(7-氧代-6,8-二氢-5H-1,8-萘啶-3-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(9.5g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值343.2；实测值344.2；Rt＝1.231min。
步骤3：6-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-3,4-二氢-1H-1,8-萘啶-2-酮的合成
将3-甲基-6-(7-氧代-6,8-二氢-5H-1,8-萘啶-3-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(9.5g，27.66mmol)于TFA(50mL)中的溶液在25℃下搅拌12h。将饱和碳酸钾水溶液添加到所述溶液(200ml)中，然后用DCM(2x300 mL)萃取。将有机相经硫酸钠干燥，过滤且蒸发，以获得6-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-3,4-二氢-1H-1,8-萘啶-2-酮(7.1.g，粗品)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.94(d,3H),1.01(m,2H),1.32(m,2H),2.02(m,2H),2.62(m,2H),2.94(m,2H),4.05(m,1H),8.01(s,1H),8.21(s,1H),9.12(s,1H)。
步骤4：外消旋-6-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]-3,4-二氢-1H-1,8-萘啶-2-酮的合成
将硼氢化钠(2.21g，58.36mmol，2.06mL)分批添加到6-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-3,4-二氢-1H-1,8-萘啶-2-酮(7.1g，29.18mmol)于甲醇(100mL)中的溶液中。将混合物在室温下搅拌12h。添加水(50mL)且将所得混合物用EtOAc(2x50 mL)萃取。将有机相经硫酸钠干燥，过滤且蒸发。通过柱色谱纯化所得粗产物，以获得6-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]-3,4-二氢-1H-1,8-萘啶-2-酮(1.2g，4.89mmol，16.76％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值245.2；实测值246.2；Rt＝0.791min。
6MMM.外消旋-5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-胺的合成
步骤1：5-溴苯并[d]噻唑-2(3H)-酮的合成
在氩气下，将2-氨基-4-溴苯硫醇(30g，147.00mmol)溶解于无水THF(500mL)中。在氩气下，向以上溶液中一次性添加二(咪唑-1-基)甲酮(26.5g，163.43mmol)且将反应混合物在氩气、25℃下搅拌1h(观察到轻微放热反应)。然后将反应混合物在50℃下搅拌1h(在放热反应过去之后)，然后冷却且在真空中浓缩。将残余物用水(300ml)稀释，将沉淀过滤，用水(3*50ml)洗涤且在真空中干燥，以得到呈白色固体的5-溴-3H-1,3-苯并噻唑-2-酮(33.5g，145.60mmol，99.05％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)7.23(s,1H),7.31(d,1H),7.55(s,1H),12.05(bds,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值230.2；实测值231.2；Rt＝1.083min。
步骤2：5-溴-2-氯苯并[d]噻唑的合成
使用回流冷凝器将5-溴-3H-1,3-苯并噻唑-2-酮(33.5g，145.60mmol)于磷酰氯(431.84g，2.82mol，261.72mL)中的悬浮液在110℃下搅拌32h(在8h后形成澄清溶液)。将反应混合物冷却且在真空中浓缩。将碎冰(300g)添加到残余物中，且过滤沉淀，用水(4*50ml)洗涤且风干，以得到呈米色固体的5-溴-2-氯-1,3-苯并噻唑(34g，136.81mmol，93.96％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)7.68(d,1H),8.08(d,1H),8.20(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值248.2；实测值249.2；Rt＝1.159min。
步骤3：5-溴苯并[d]噻唑-2-胺的合成
在高压釜中将5-溴-2-氯-1,3-苯并噻唑(30g，120.71mmol)和氢氧化铵(25％NH3)(136.50g，150mL)于1.4-二噁烷(150mL)中的混合物在135℃(反应混合物的内部温度)下搅拌40h。冷却之后，打开高压釜且在真空中将所得悬浮液浓缩至干。将残余物用水(250ml)稀释，将沉淀过滤，用水(3*50ml)、50％乙醇水溶液(20ml)和己烷(3*50ml)连续洗涤，然后在真空中干燥，以得到呈淡黄色固体的5-溴-1,3-苯并噻唑-2-胺(25g，109.12mmol，90.40％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)7.12(d,1H),7.48(s,1H),7.60(d,1H),7.69(s,2H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值229.2；实测值230.2；Rt＝1.023min。
步骤4：(5-溴苯并[d]噻唑-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
在25℃下，将二碳酸二-叔丁酯(5.24g，24.01mmol，5.51mL)一次性添加到5-溴-1,3-苯并噻唑-2-胺(5g，21.82mmol)和N,N-二甲基吡啶-4-胺(266.63mg，2.18mmol)于THF(75mL)中的搅拌溶液中。将反应混合物在25℃下搅拌3h。将所得悬浮液在真空中浓缩至大约20mL，然后用己烷(50ml)稀释。过滤沉淀，用己烷(2*20ml)洗涤且风干，以得到呈白色固体的粗品N-(5-溴-1,3-苯并噻唑-2-基)氨基甲酸叔丁酯(6.2g，18.83mmol，86.29％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.51(s,9H),7.42(d,1H),7.85(s,1H),7.91(d,1H),12.02(bds,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值229.2；实测值230.2；Rt＝1.588min。
步骤5：(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
将N-(5-溴-1,3-苯并噻唑-2-基)氨基甲酸叔丁酯(6.2g，18.83mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(5.26g，20.72mmol)和乙酸钾(3.70g，37.67mmol，2.35mL)于1,4-二噁烷(120mL)中的混合物抽真空，然后用氩气回填。将此操作重复两次，然后添加Pd(dppf)Cl2*DCM(1.54g，1.88mmol)且将反应混合物在氩气、90℃下搅拌48h，然后冷却，用MTBE(120ml)稀释且通过短硅胶垫过滤。将滤饼用MTBE(2*50ml)洗涤且丢弃。在真空中浓缩滤液，以得到呈棕色胶状物的粗品N-[5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噻唑-2-基]氨基甲酸叔丁酯(12g，粗品)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.12(s,12H),1.46(s,9H),7.48(d,1H),7.93(m,3H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值376.2；实测值377.2；Rt＝1.601min。
步骤6：6-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)苯并[d]噻唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
将N-[5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噻唑-2-基]氨基甲酸叔丁酯(12g，19.13mmol)、3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(6.5g，18.82mmol)和碳酸钠(6.08g，57.40mmol，2.40mL)添加到1,4-二噁烷(100mL)和水(25mL)的混合物中。将所得混合物抽真空然后用氩气回填，将此操作重复三次，然后在氩气下添加Pd(dppf)Cl2*DCM(781.31mg，956.74μmol)。将反应混合物在氩气、90℃下搅拌15h。将反应混合物冷却且通过短硅胶垫过滤。将滤饼另外用1.4-二噁烷(2*25ml)洗涤且丢弃。在真空中浓缩滤液，且通过硅胶柱色谱，使用己烷/MTBE梯度(0-100％MTBE)纯化残余物(16g)，以得到呈淡黄色固体的6-[2-(叔丁氧基羰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.8g，4.04mmol，21.11％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)1.02(d,3H),1.12(s,9H),1.51(s,9H),1.98(m,1H),2.04(m,1H),2.42(m,1H),3.05(m,1H),4.08(d,1H),5.37(m,1H),7.23(d,1H),7.68(d,1H),7.77(s,1H),10.25(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值445.2；实测值446.2；Rt＝1.714min。
步骤7：5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-胺的合成
将6-[2-(叔丁氧基羰基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.8g，4.04mmol)于三氟乙酸(44.40g，389.41mmol，30mL)中的溶液在25℃下搅拌1h。1h之后，在减压下浓缩反应混合物。将所获得的残余物用冰冷水(30mL)稀释且用10％ NaOH水溶液中和，直至pH＝10。过滤沉淀，用水(2*10ml)洗涤且风干，以得到呈淡黄色固体的5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1,3-苯并噻唑-2-胺(0.8g，3.26mmol，80.72％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.96(d,3H),1.36(m,1H),1.65(m,1H),1.86(m,1H),2.78(m,3H),3.17(m,1H),3.87(m,1H),7.47(m,2H),7.61(d,1H),7.71(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值245.2；实测值246.2；Rt＝0.734min。
步骤8：外消旋-5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-胺的合成
在0℃下，向5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1,3-苯并噻唑-2-胺(0.8g，3.26mmol)于MeOH(30mL)中的搅拌悬浮液中分批添加硼氢化钠(370.06mg，9.78mmol，345.85μL)。将所得反应混合物在0℃下搅拌1h，然后使其升温至25℃且搅拌12h，且在减压下浓缩。将残余物用水(20mL)稀释且用二氯甲烷(80mL)萃取。将有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空下浓缩，以获得呈淡黄色固体的粗产物5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-2-胺(700mg，2.83mmol，86.79％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.86(d,3H),1.22(m,2H),1.86(m,4H),2.44(m,1H),3.16(m,1H),3.62(m,1H),5.28(s,2H),7.18(d,1H),7.50(d,1H),7.53(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值247.2；实测值248.2；Rt＝0.766min。
6NNN.6-(5-甲基-2-哌啶基)异喹啉-1-醇的合成
步骤1：6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)异喹啉-1-醇的合成
将乙酸钾(8.76g，89.26mmol，5.58mL)添加到6-溴异喹啉-1-醇(10g，44.63mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(12.47g，49.10mmol)于二噁烷(150mL)中的溶液中。将反应烧瓶抽真空且用Ar再填充3次。然后，在氩气流下添加Pd(dppf)Cl2·DCM(1.82g，2.23mmol)。在90℃、惰性气氛下将所得混合物搅拌14h。然后，将其冷却，用EtOAc(400mL)稀释且用水(2x200 mL)洗涤。将有机层经Na2SO4干燥且在减压下浓缩。通过硅胶快速色谱，使用CHCl3-MeCN系统洗脱来纯化残余物，以得到6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)异喹啉-1-醇(9.3g，34.30mmol，76.86％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值271.2；实测值272.2；Rt＝1.133min。
步骤2：6-(1-羟基-6-异喹啉基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.66g，4.79mmol)、6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)异喹啉-1-醇(1.3g，4.79mmol)和碳酸钠(1.52g，14.38mmol，602.62μL)添加到水(5mL)和二噁烷(15mL)的混合物中。将所得混合物抽真空然后用氩气回填，将此操作重复三次，然后在氩气下添加Pd(dppf)Cl2·DCM(195.79mg，239.75μmol)。将反应混合物在氩气、70℃下搅拌14h，然后冷却且过滤。将滤饼用1,4-二噁烷(2*20mL)洗涤且丢弃。在真空中蒸发滤液，以得到呈棕色油状物的6-(1-羟基-6-异喹啉基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(0.5g，1.47mmol，30.63％产率)，其不经纯化即用于下一步骤。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值340.2；实测值341.2；Rt＝1.377min。
步骤3：6-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)异喹啉-1-醇的合成
将6-(1-羟基-6-异喹啉基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(0.5g，1.47mmol)于TFA(2.51g，22.03mmol，1.70mL)中的溶液在25℃下搅拌1h，然后在真空中蒸发。将碎冰(15g)添加到残余物中且用10％氢氧化钠水溶液将pH调节至10。将所得混合物用二氯甲烷(2*30ml)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到呈棕色油状物的6-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)异喹啉-1-醇(0.35g，1.46mmol，99.16％产率)，其直接用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值240.2；实测值241.2；Rt＝0.684min。
步骤4：6-(5-甲基-2-哌啶基)异喹啉-1-醇的合成
在0℃下，将硼氢化钠(110.21mg，2.91mmol，103.00μL)一次性添加到6-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)异喹啉-1-醇(0.35g，1.46mmol)于MeOH(15mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在25℃下搅拌12h，然后在真空中蒸发。将残余物用水(20ml)稀释且用二氯甲烷(2*40mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发。使所获得的油状物经历HPLC(Waters Sunfire C18 19*100 5mkm柱且以MeOH为洗脱液混合物)，以得到6-(5-甲基-2-哌啶基)异喹啉-1-醇(0.1g，412.68μmol，28.33％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值242.2；实测值243.2；Rt＝0.988min。
6OOO.6-(5-甲基-2-哌啶基)-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-1,5-萘啶-2-酮 的合成
步骤1：3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(10g，46.9mmol)于THF(200mL)中的混合物在真空下密封且脱气，且用氮气吹扫三次，然后在-78℃下逐滴添加1M LiHMDS/THF(85mL，85mmol)，将混合物在-78℃下搅拌1.5小时，然后添加PhNTf2(26g，72.8mmol)于THF(50mL)中的溶液。将溶液在25℃下搅拌12小时。通过添加饱和NH4Cl水溶液(100mL)淬灭所得混合物且用EtOAc(200mL*3)萃取。将合并的有机层用饱和NH4Cl水溶液(100mL)、盐水(100mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩。通过快速色谱(80g二氧化硅快速柱，石油醚/EtOAc，其中EtOAc为0～1％，流速＝60mL/min，I2)纯化残余物，以得到呈黄色油状物的3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(13g，80.3％产率)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δppm 5.25(t,J＝3.8Hz,1H),3.87(dd,J＝12.7,3.2Hz,1H),3.00(dd,J＝12.8,9.1Hz,1H),2.29-2.49(m,1H),1.77-2.00(m,2H),1.49(s,9H),0.99(d,J＝6.6Hz,3H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值346.1，实测值290.0(t-Bu裂解的质量)。
步骤2：6-溴-2-碘吡啶-3-胺的合成
向6-溴吡啶-3-胺(10g，57.8mmol)于EtOH(100mL)中的溶液中添加Ag2SO4(18g，57.7mmol)和I2(16g，63.0mmol)。然后将混合物在25℃下搅拌3小时。将所得混合物在减压下浓缩以移除EtOH，然后通过添加水(100mL)淬灭粗品且用DCM(100mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩。通过快速色谱(40g二氧化硅快速柱，石油醚/EtOAc，其中EtOAc为0～20％，流速＝30mL/min，254nm)纯化残余物，以得到呈红色固体的6-溴-2-碘-吡啶-3-胺(9g，52.1％产率)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δppm 7.18(d,J＝8.3Hz,1H),6.82(d,J＝8.3Hz,1H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值298.9，实测值298.8。
步骤3：(E)-3-(3-氨基-6-溴-2-吡啶基)丙-2-烯酸乙酯的合成
向6-溴-2-碘-吡啶-3-胺(9g，30.1mmol)于MeCN(100mL)中的溶液中添加Pd(OAc)2(1.3g，5.79mmol)、TEA(16.5mL，0.118mol)、PPh3(1.50g，5.72mmol)和丙-2-烯酸乙酯(3.2mL，29.5mmol)。将所得混合物在真空下密封且脱气，且用氮气吹扫三次，然后在70℃、氮气气氛下搅拌12小时。将所得混合物在减压下浓缩，以得到粗产物，其通过快速色谱(40g二氧化硅快速柱，石油醚/EtOAc，其中EtOAc为0～20％，流速＝30mL/min，254nm)进行纯化，以得到呈淡黄色固体的(E)-3-(3-氨基-6-溴-2-吡啶基)丙-2-烯酸乙酯(4.4g，53.9％产率)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δppm 7.67(d,J＝15.1Hz,1H),7.21(d,J＝8.3Hz,1H),6.86-7.03(m,2H),4.27(q,J＝7.0Hz,2H),1.33(t,J＝7.2Hz,3H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值273.0，实测值273.0。
步骤4：6-溴-1H-1,5-萘啶-2-酮的合成
在20℃下，向(E)-3-(3-氨基-6-溴-2-吡啶基)丙-2-烯酸乙酯(2.2g，8.11mmol)于EtOH(20mL)中的溶液中添加DBU(6.1mL，40.9mmol)于EtOH(5mL)中的溶液。然后将混合物在100℃、氮气下搅拌36小时。将所得混合物在减压下浓缩，以得到粗产物，其通过快速色谱(40g二氧化硅快速柱，石油醚/EtOAc，其中EtOAc为0～100％，流速＝50mL/min，254nm)进行纯化，以得到呈棕色固体的6-溴-1H-1,5-萘啶-2-酮(2g，粗品)。LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值225.0，实测值225.0。
步骤6：3-甲基-6-[6-氧代-5-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-1,5-萘啶-2-基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
向6-溴-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-1,5-萘啶-2-酮(900mg，2.53mmol)和3-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.3g，4.02mmol)于二噁烷(10mL)和H2O(1mL)中的混合物中添加Pd(OAc)2(114mg，0.508mmol)、PPh3(265mg，1.01mmol)和Cs2CO3(1.6g，4.91mmol)。将所得混合物在真空下密封且脱气，且用氮气吹扫三次，然后在100℃、氮气气氛下搅拌12小时。所得混合物通过添加水(100mL)来淬灭且用EtOAc(100mL*3)萃取。将合并的有机层用饱和NH4Cl水溶液(100mL*2)、盐水(100mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩。通过快速色谱(25g二氧化硅快速柱，石油醚/EtOAc，其中EtOAc为0～20％，流速＝30mL/min，254nm)纯化残余物，以得到呈黄色油状物的3-甲基-6-[6-氧代-5-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-1,5-萘啶-2-基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(800mg，粗品)。LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值472.3，实测值472.2。
步骤7：6-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-1,5-萘啶-2-酮的合成
向3-甲基-6-[6-氧代-5-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-1,5-萘啶-2-基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(800mg，1.70mmol)于DCM(20mL)中的溶液中添加ZnBr2(764mg，3.39mmol)。在20℃、氮气下将混合物搅拌12小时。所得混合物通过添加水(100mL)来淬灭且用EtOAc(100mL*3)萃取。将合并的有机层用饱和NH4Cl水溶液(100mL*2)、盐水(100mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩。通过快速色谱(25g二氧化硅快速柱，石油醚/EtOAc，其中EtOAc为0～50％，流速＝30mL/min，245nm)纯化残余物，以得到呈黄色固体的6-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-1,5-萘啶-2-酮(600mg，粗品)。LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值372.3，实测值372.2。
步骤8：6-(5-甲基-2-哌啶基)-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-1,5-萘啶-2-酮的合成
在0℃下，向6-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-1,5-萘啶-2-酮(600mg，1.61mmol)于MeOH(10mL)中的溶液中添加NaBH4(93.0mg，2.46mmol)。将混合物在20℃下搅拌30分钟。所得混合物通过添加水(10mL)来淬灭且用DCM(50mL*3)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩，以得到呈黄色固体的6-(5-甲基-2-哌啶基)-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-1,5-萘啶-2-酮(800mg，粗品)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
6PPP.2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶-2-d的合成
步骤1：5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯
将5-甲基哌啶-2-酮(1)(3.0g，26.51mmol)溶解于THF(75mL)且在-78C下添加n-BuLi(17.7mL 1.5M于己烷中的溶液，26.51mmol)。搅拌30min之后，逐滴添加Boc2O的THF(37.5mL)溶液(8.7g，9.14mmol)且将所得混合物在室温下搅拌过夜。将反应物用饱和NH4Cl水溶液(30mL)和EtOAc(30mL)淬灭。分离各层，且用CH2Cl2(2*30mL)洗涤水层。将合并的有机层干燥(Na2SO4)，过滤，且在真空中浓缩。通过硅胶柱色谱(10/0环己烷/乙酸乙酯至95/5)纯化残余物，以得到呈无色油状物的5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(2)(3.20mg，56％)
1H NMR(CDCl3,400MHz)δ3.72(ddd,J＝1.9,4.7,12.6Hz,1H),3.04(dd,J＝10.4,12.6Hz,1H),2.54-2.35(m,2H),1.97-1.76(m,2H),1.46(s,9H),1.40-1.31(m,1H)0.97(d,J＝6.6Hz,2.8H),0.83(d,J＝6.6Hz,0.2H)
步骤2：3-甲基-6-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
将5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(2)(660mg，3.09mmol)于无水THF(23mL)中的溶液冷却至-78℃。在5min内添加1M KHMDS溶液(4.64mL 1M于THF中的溶液，4.64mmol)，且将混合物搅拌70min。然后添加PhNTf2的无水THF(6.8mL)溶液(1.1g，3.09mmol)且将混合物在-78℃下搅拌(2h)。添加饱和Na2CO3水溶液(30mL)和CH2Cl2(30mL)，且分离各层。将水层用CH2Cl2(2*30mL)洗涤。将合并的有机层干燥(Na2SO4)，过滤，且在真空中浓缩。通过硅胶柱色谱(10/0环己烷/乙酸乙酯至85/15)纯化残余物，以得到呈无色油状物的3-甲基-6-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(3)。
1H NMR(CDCl3,400MHz)δ5.27(t,J＝3.8Hz,1H),3.87(dd,J＝3.3,12.7Hz,1H),3.00(dd,J＝9.2,12.7Hz,1H),2.39(ddd,J＝3.7,6.1,18.0Hz,1H),1.98-1.78(m,2H),1.49(s,9H),0.99(d,J＝6.6Hz,3H)。
步骤3：6-(4-氟苯基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
在氮气气氛下，向3-甲基-6-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(400mg，1.16mmol)于THF(11.6mL)中的溶液中添加(Ph3P)2PdCl2(41mg，57.9μmol)、(4-氟苯基)硼酸(243mg，1.74mmol)和2M Na2CO3水溶液(9.3mL)。在40℃下，将混合物搅拌16h。然后添加水(10mL)且将混合物用乙醚萃取且干燥(Na2SO4)。通过硅胶柱色谱(10/0环己烷/乙酸乙酯至1/9)纯化残余物，以得到呈无色油状物的6-(4-氟苯基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(4)(200mg，60％)。
1H NMR(CDCl3,400MHz)δ7.28-7.23(m,2H),6.97(d,J＝8.7Hz,2H),5.24(t,J＝3.7Hz,1H),4.06(dd,J＝3.4,12.7Hz,1H),3.00(dd,J＝9.2,12.7Hz,1H),2.39(ddd,J＝3.8,6.4,18.6Hz,1H),2.05-1.94(m,1H),1.84(ddd,J＝3.7,8.6,18.6Hz,1H),1.10(s,9H),1.01(d,J＝6.6Hz,3H)。
步骤4：2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶-2-d的合成
将TFA(0.86mL)添加到6-(4-氟苯基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(50mg，0.17mmol)的CH2Cl2(0.86mL)溶液中。将溶液在室温下搅拌1h且在真空下浓缩。添加饱和Na2CO3水溶液(3mL)和CH2Cl2(3mL)且分离各层。将水层用CH2Cl2(2x5 mL)洗涤，将所有有机层合并，干燥且在真空下浓缩。将甲醇-d4(1.7mL)添加到残余物中，随后添加NaBD4(11mg，0.26mmol)。将混合物在室温下搅拌过夜。蒸发挥发物且添加水。将水层用CH2Cl2(3x5mL)洗涤。将所有有机层合并，干燥且在真空下浓缩，以获得呈白色固体的2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶-2-d(23mg，69％)。
1H NMR(CDCl3,400MHz)δ7.35-7.29(m,2H),6.98(d,J＝8.8Hz,2H),3.15-3.08(m,1H),2.40(t,J＝11.3Hz,1H),1.90-1.46(m,3H),1.14(d,J＝7.1Hz,1H),0.89(d,J＝6.6Hz,3H)。
6QQQ.2-(4-氟苯基-2,3,5,6-d4)-5-甲基哌啶-2-d和2-(4-氟苯基-2,3,5,6-d4)- 5-甲基哌啶-2-d的合成
步骤1：6-(4-氟苯基-2,3,5,6-d4)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(5)的合成
在氮气气氛下，向3-甲基-6-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(200mg，0.58mmol)于THF(3.9mL)中的溶液中添加(Ph3P)2PdCl2(20mg，29.0μmol)、(4-氟苯基-2,3,5,6-d4)硼酸(243mg，0.58mmol)和2M Na2CO3水溶液(2.3mL)。在80℃下，将混合物搅拌16h。然后添加水(10mL)且将混合物用乙醚萃取且干燥(Na2SO4)。通过硅胶柱色谱(10/0环己烷/乙酸乙酯至1/9)纯化残余物，以得到呈黄色油状物的6-(4-氟苯基-2,3,5,6-d4)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(5)(80mg，47％)。
1H NMR(CDCl3,400MHz)5.24(t,J＝3.8Hz,1H),4.06(dd,J＝3.4,12.6Hz,1H),2.97(dd,J＝9.4,12.2Hz,1H),2.39(ddd,J＝3.9,6.4,18.6Hz,1H),2.06-1.95(m,1H),1.84(ddd,J＝3.7,8.6,18.6Hz,1H),1.10(s,9H),1.01(d,J＝6.7Hz,3H)。
步骤2：2-(4-氟苯基-2,3,5,6-d4)-5-甲基哌啶-2-d的合成
将TFA(0.4mL)添加到6-(4-氟苯基-2,3,5,6-d4)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(5)(23mg，78μmol)的CH2Cl2(0.4mL)溶液中。将溶液在室温下搅拌1h且在真空下浓缩。添加饱和Na2CO3水溶液(2mL)和CH2Cl2(2mL)且分离各层。将水层用CH2Cl2(2x2 mL)洗涤，将所有有机层合并，干燥且在真空下浓缩。将甲醇(0.4mL)添加到残余物中，随后添加NaBH4(4mg，0.1mmol)。将混合物在室温下搅拌过夜。蒸发挥发物且添加水。将水层用CH2Cl2(3x5 mL)洗涤。将所有有机层合并，干燥且在真空下浓缩，以获得呈白色固体的2-(4-氟苯基-2,3,5,6-d4)-5-甲基哌啶(15mg，100％)。
1H NMR(CDCl3,400MHz)δ3.53(dd,J＝2.2,11.3Hz,1H),3.13(ddd,J＝1.9,3.9,11.5Hz,1H),2.41(t,J＝11.2Hz,1H),1.90-1.46(m,3H),1.16-1.12(m,1H),0.90(d,J＝6.6Hz,3H)。
步骤3：2-(4-氟苯基-2,3,5,6-d4)-5-甲基哌啶-2-d的合成
将TFA(2.0mL)添加到6-(4-氟苯基-2,3,5,6-d4)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(5)(120mg，0.41mmol)的CH2Cl2(2.0mL)溶液中。将溶液在室温下搅拌1h且在真空下浓缩。添加饱和Na2CO3水溶液(10mL)和CH2Cl2(10mL)且分离各层。将水层用CH2Cl2(2x10mL)洗涤，将所有有机层合并，干燥且在真空下浓缩。将甲醇-d4(2.0mL)添加到残余物中，随后添加NaBD4(22mg，0.53mmol)。将混合物在室温下搅拌过夜。蒸发挥发物且添加水。将水层用CH2Cl2(3x5mL)洗涤。将所有有机层合并，干燥且在真空下浓缩，以获得呈白色固体的2-(4-氟苯基-2,3,5,6-d4)-5-甲基哌啶-2-d(81mg，100％)。
1H NMR(CDCl3,400MHz)δ3.13(ddd,J＝2.0,3.9,11.5Hz,1H),2.40(t,J＝11.2Hz,1H),1.90-1.46(m,3H),1.19-1.12(m,1H),0.90(d,J＝6.6Hz,3H)。
6RRR.5-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]噻唑的合成
步骤1：3-甲基-6-噻唑-5-基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
在氩气气氛下，向3-甲基-6-噻唑-5-基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(14.61g，52.11mmol)、5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)噻唑(10g，47.37mmol)、碳酸钠(15.06g，142.12mmol，5.95mL)于二噁烷(150mL)和水(50mL)中的溶液中添加1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)与二氯甲烷的络合物(1.55g，1.89mmol)。将所得混合物在90℃下搅拌48h，冷却，过滤且蒸发。将残余物溶解于EtOAc中且经Na2SO4干燥，在真空中蒸发且通过梯度色谱(己烷-MTBE)纯化，以得到3-甲基-6-噻唑-5-基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(0.4g，1.43mmol，3.01％产率)。
1H NMR(CDCl3,400MHz):δ1.01(d,3H),1.19(s,9H),1.41(m,1H),1.86(m,1H),1.97(m,1H),2.37(d,1H),2.96(dd,1H),4.01(d,1H),5.47(t,1H),7.74(s,1H),8.63(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值280.15；实测值281.2；Rt＝1.29min。
步骤2：5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)噻唑的合成
将3-甲基-6-噻唑-5-基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(0.4g，1.43mmol)于三氟乙酸(8g，70.16mmol，5.41mL)中的溶液在25℃下搅拌2h且在真空中蒸发。将残余物用NaHCO3饱和溶液(50ml)稀释，用DCM(3*30ml)萃取，用盐水洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中蒸发，以获得5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)噻唑(0.25g，1.39mmol，97.21％产率)。
1H NMR(CDCl3,500MHz):δ1.00(d,3H),1.41(m,1H),1.73(m,1H),1.93(m,1H),2.59(m,1H),2.80(dd,1H),3.23(m,1H),3.94(d,1H),8.03(s,1H),8.77(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+Н]+m/z：计算值180.1；实测值181.2；Rt＝0.466min。
步骤3：5-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]噻唑的合成
在0℃下，向5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)噻唑(0.25g，1.39mmol)于MeOH(30mL)中的溶液中添加硼氢化钠(104.93mg，2.77mmol，98.07μL)。将所得混合物搅拌2h且真空蒸发。将残余物用水(20ml)稀释且用DCM(3*20ml)萃取。将合并的有机层用盐水(20ml)洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中蒸发，以获得5-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]噻唑(0.25g，1.37mmol，98.89％产率)。
1H NMR(DMSO,400MHz):δ0.87(d,3H),1.13-1.20(m,2H),1.55-1.60(m,2H),1.60-1.84(m,2H),1.87(d,1H),1.97(d,1H),2.42(t,1H),3.11(d,1H),3.93(d,1H),7.72(s,1H),8.67(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+Н]+m/z：计算值182.1；实测值183.0；Rt＝0.684min。
6SSS.外消旋-4-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)吡啶的合成
步骤1：5-甲基-5,6-二氢-[2,4'-联吡啶]-1(4H)-甲酸叔丁酯的合成
将3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(5.62g，16.27mmol)和4-吡啶基硼酸(2g，16.27mmol)溶解于二噁烷中且将反应混合物彻底脱气，随后后续添加碳酸铯(26.51g，81.36mmol)、H2O和Pd(dppf)Cl2*DCM(1.63mmol)。将所获得的反应混合物在回流下搅拌过夜；反应完成之后，在减压下蒸发有机溶剂，且将粗混合物分配于EtOAc与H2O之间。将水层另外用EtOAc萃取两次；将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥且蒸发，以得到3-甲基-6-(4-吡啶基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(7g，粗品)，其不经纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.96(d,3H),1.08(s,9H),1.85(m,2H),2.32(m,1H),2.98(m,1H),3.83(d,1H),5.52(m,1H),7.18(d,2H),8.42(d,2H)。
步骤2：5-甲基-3,4,5,6-四氢-2,4'-联吡啶的合成
将3-甲基-6-(4-吡啶基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(7g，25.51mmol)溶解于DCM(200mL)中，随后添加TFA(2.91g，25.51mmol，1.97mL)且搅拌过夜。反应完成之后，将混合物用10％ NaOH水溶液洗涤，且将有机溶剂蒸发，以得到4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)吡啶(3.5g，20.09mmol，78.73％产率)，其不经纯化即用于下一步骤。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)1.02(d,3H),1.22(m,1H),1.73(m,1H),1.98(m,1H),2.45(m,1H),2.77(m,1H),3.27(m,1H),4.03(m,1H),7.62(d,2H),8.64(d,2H)。
步骤3：外消旋-4-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)吡啶的合成
将4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)吡啶(3.5g，20.09mmol)溶解于MeOH(50mL)和H2O(10mL)中且冷却至0℃。将硼氢化钠(759.89mg，20.09mmol，710.18μL)分批添加到所获得的混合物中且再搅拌过夜。反应完成之后，将反应混合物用10％ HCl水溶液酸化至pH＝2，用MTBE洗涤(2*10mL)，用10％ NaOH水溶液碱化至pH＝10且用DCM(50mL)萃取。蒸发溶剂，得到纯的4-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]吡啶(2.5g，14.18mmol，70.61％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.86(d,3H),1.18(m,2H),1.75(m,4H),2.40(m,1H),3.14(m,1H),3.56(m,1H),7.28(d,2H),8.53(d,2H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值176.2；实测值177.2；Rt＝0.226min。
方案A.式1化合物的合成
式1、1a、1b、1c和1d化合物为式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物，其中R1、R2、R3、R4、R6、R7和R8如本文所定义，且R1或R2中的至少一者为-NH2，
R1a为R1或-NH-PG，R2a为R2或-NH-PG。PG为如本文所述的氮保护基(例如，-Boc)。
一般程序1
注意，在某些情况下，起始哌啶已经呈顺式或反式构型。在那些情况下，手性分离步骤仅得到四种所描绘对映异构体中的二者。
如方案A中所示，式(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物可自式(I)化合物的混合物分离，其中R1、R2、R3、R4、R6、R7、R8和n如本文所述。替代地，式(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物可由其被保护的前体制备。在一些实施方案中，R1a选自R1和-NH-PG且R2a选自R2和-NH-PG，其中PG为如本文所定义的氮保护基(例如，-Boc)。在某些实施方案中(例如，当R1a为NH-PG且R1为-NH2，或R2a为NH-PG且R2为-NH2时)，采用脱保护步骤将R1a转化成R1或将R2a转化成R2。在一些实施方案中，可在手性分离之前或之后进行脱保护。用于移除保护基-PG(例如，-Boc)的条件可采用例如酸性条件(例如，水/二噁烷、于质子性溶剂(例如，甲醇)中的盐酸、于非质子性溶剂(例如，二噁烷)中的盐酸、于非质子性溶剂(例如，二氯甲烷、氯仿等)中的TFA)。在一些实施方案中，脱保护步骤采用于二噁烷中的HCl(4.0M)。在一些实施方案中，脱保护步骤采用于DCM中的HCl(4.0M)。
手性分离方法为本领域普通技术人员已知的。例如，在一些实施方案中，可通过使用手性HPLC纯化(柱：AD-H III(250*20mm，5μm)完成手性分离。示例性洗脱液包括但不限于己烷、IPA、MeOH、MeCN和H2O及其混合物。
如方案A所示，本文所述的化合物的制备可包括酰胺键偶联步骤。在一些实施方案中，酰胺键偶联包含使哌啶与2,2,2-三氟乙基酯在存在强碱(例如，烷基锂碱)的情况下，在非质子性溶剂(例如，THF)中，在惰性气氛下(例如，在氩气下)偶联。在一些实施方案中，反应在-100℃与-60℃之间的温度下发生。在一些实施方案中，反应在约-78℃的温度下发生。在一些实施方案中，酰胺键偶联包括在-78℃下使用于THF中的n-BuLi。
实施例1.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-2-(2-苯基-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)乙酰胺(化合物63、化合物62、化合物64、化合物65)的合成
步骤1：(3-甲基-5-(2-氧代-2-(2-苯基-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)乙酰胺基)吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
在-78℃、Ar气氛下，向4-苯基-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷(0.5g，2.67mmol)和2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(1.01g，2.67mmol)于THF(50mL)中的溶液中添加正丁基锂(2.60g，9.34mmol，3.76mL，23％纯度)。将所得混合物搅拌15min且升温至室温，用NH4Cl水溶液淬灭，用EtOAc萃取，经Na2SO4干燥，蒸发且使其经历HPLC(LC 11 60-60-70％0-1-6min水-甲醇，流速：30ml/min(装载泵4ml/min甲醇)，目标质量464柱：SunFire C18 100x19mm，5um)。纯化后观察到3种级分：第1级分(非对映异构体对)：181mg，第2级分(混合物)：127mg，第3级分(非对映异构体对)：65mg。任意分配构型。使级分1和3经历手性分离。D1：LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值464.5；实测值465.2；Rt＝4.122min。D2：LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值464.5；实测值465.2；Rt＝4.326min。
步骤2：手性分离(E1和E2)
在系统Hex-IPA-MeOH，80-10-10，12mL/min中在手性柱上进行纯化。注入次数：1，注入体积：700mkl。自181mg外消旋物获得79mg和76mg个别对映异构体。
E1：保留时间：33.56min。LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值364.5；实测值365.2；Rt＝5.463min。
E2：保留时间：18.49min。LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值364.5；实测值365.2；Rt＝5.462min。
步骤3：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(1S,4R,5R)-4-苯基-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基]乙酰胺(化合物63)的合成
将N-[3-甲基-5-[[2-氧代-2-[(1S,4R,5R)-4-苯基-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基]乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(79mg，170.06μmol)溶解于于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(1.60g，43.88mmol，2mL)中，在25℃下搅拌12h，蒸发且干燥，以获得粗产物。通过HPLC(LC 11 40-40-70％0-1-6min 0.1％ NH3-甲醇，流速：30ml/min(装载泵4ml/min甲醇)，目标质量364柱：YMC Actus Triart C18 100x20mm，5um)纯化粗产物，以获得N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(1S,4R,5R)-4-苯基-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基]乙酰胺(23mg，63.11μmol，37.11％产率)。LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值364.4；实测值365.2；Rt＝2.661min。
步骤4：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(1S,4S,5R)-4-苯基-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基]乙酰胺(化合物65)的合成
将N-[3-甲基-5-[[2-氧代-2-[(1S,4S,5R)-4-苯基-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基]乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(76mg，163.60μmol)溶解于于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(1.60g，43.88mmol，2mL)中，在25℃下搅拌12h，蒸发且干燥，以获得粗产物。通过HPLC(LC 11 40-40-70％0-1-6min 0.1％ NH3-甲醇，流速：30ml/min(装载泵4ml/min甲醇)，目标质量364柱：YMC Actus Triart C18 100x20mm，5um)纯化粗产物，以获得N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(1S,4S,5R)-4-苯基-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基]乙酰胺(21mg，57.62μmol，35.22％产率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)1.36(m,1H),1.62(m,3H),1.76(m,2H),1.95(m,1H),2.15(m,3H),2.30(m,1H),2.78(m,1H),3.38(m,1H),4.47(m,1H),4.81(m,2H),5.88(m,1H),7.21(m,2H),7.35(m,2H),7.72(m,1H),8.06(m,1H),8.97(m,1H)。LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值364.4；实测值365.2；Rt＝2.640min。
步骤5：手性分离(E3和E4)
在系统Hex-IPA-MeOH，60-20-20，12mL/min中在手性柱上进行纯化。注入次数：1，注入体积：40mkl。自65mg外消旋物获得14mg和12mg个别对映异构体。
E3：保留时间：27.78min。LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值364.5；实测值365.2；Rt＝5.640min。
E4：保留时间：14.46min。LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值364.5；实测值365.2；Rt＝5.753min。
步骤6：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(1R,4S,5S)-4-苯基-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基]乙酰胺(化合物64)的合成
将N-[3-甲基-5-[[2-氧代-2-[(1R,4S,5S)-4-苯基-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基]乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(14mg，30.14μmol)溶解于于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(800.00mg，21.94mmol，1mL)中，在25℃下搅拌12h，蒸发且干燥，以获得粗产物。通过HPLC(LC 11 40-40-70％0-1-6min 0.1％ NH3-甲醇，流速：30ml/min(装载泵4ml/min甲醇)，目标质量364柱：YMC Actus Triart C18 100x20mm，5um)纯化粗产物，以获得N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(1R,4S,5S)-4-苯基-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基]乙酰胺(8mg，21.95μmol，72.84％产率)。LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值364.4；实测值365.2；Rt＝2.619min
步骤7：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(1R,4R,5S)-4-苯基-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基]乙酰胺(化合物62)的合成
将N-[3-甲基-5-[[2-氧代-2-[(1R,4R,5S)-4-苯基-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基]乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(12mg，25.83μmol)溶解于于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(800.00mg，21.94mmol，1mL)中，在25℃下搅拌12h，蒸发且干燥，以获得粗产物。通过HPLC(LC 11 40-40-70％0-1-6min 0.1％ NH3-甲醇，流速：30ml/min(装载泵4ml/min甲醇)，目标质量364柱：YMC Actus Triart C18 100x20mm，5um)纯化粗产物，以获得N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(1R,4R,5S)-4-苯基-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基]乙酰胺(7mg，19.21μmol，74.36％产率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)1.36(m,1H),1.64(d,2H),1.75(d,3H),1.93(d,1H),2.16(m,3H),2.27(m,1H),2.78(m,1H),3.31(m,1H),4.54(m,1H),5.03(m,2H),5.87(m,1H),7.22(m,2H),7.36(m,2H),7.77(m,1H),8.08(m,1H),9.00(m,1H)。LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值364.4；实测值365.2；Rt＝2.608min。
实施例2.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物233)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物242)的合成
步骤1.N-[5-[[2-[2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
在-78℃、Ar气氛下，向2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶(0.3g，1.55mmol)于THF(15mL)中的溶液中添加正丁基锂(1.30g，4.66mmol，1.87mL，23％纯度)。15min之后，一次性添加2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(585.71mg，1.55mmol)。将所得混合物升温至室温，用NH4Cl水溶液淬灭，用EtOAc萃取，经Na2SO4干燥，蒸发且使其经历HPLC(50-75％ ACN，30ml/min，sunfire C18 19*100，5uM)。获得呈浅黄色固体的N-[5-[[2-[2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(181.7mg，386.16μmol，24.88％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.07(d,3H),1.39(m,1H),1.48(s,9H),1.65-1.97(m,4H),2.17-2.31(m,4H),2.92-3.33(m,1H,两种单独旋转异构体信号),4.19-4.76(m,1H,两种单独旋转异构体信号),5.73-6.39(m,1H,两种单独旋转异构体信号),6.83(brs,1H),7.04(m,2H),8.05(s,1H),8.41(s,1H),8.40(m,1H),9.39(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值470.5；实测值471.2；Rt＝1.495min。
步骤2.N-[5-[[2-[(2S,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯、N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯、N-[5-[[2-[(2R,5R)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯和N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
在以下条件下分离立体异构体的混合物：IC(250*30，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，70-15-15，13ml/min。
N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯峰1(P1)的RT＝23.601min
N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯峰2(P2)的RT＝30.270min
微量顺式级分为在RT 20.5min和28.5min处。
将N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯峰1(P1)用于制备化合物242。下文给出此级分的分析数据：
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值470.5；实测值472.0；Rt＝5.536min。
RT(IC，己烷-IPA-MeOH，70-15-15，0.6ml/min)＝27.123min
将N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯峰2(P2)用于制备化合物233
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值470.5；实测值472.0；Rt＝5.529min。
RT(IC，己烷-IPA-MeOH，70-15-15，0.6ml/min)＝36.392min
步骤3.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物233)的合成
在21℃下，向N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(32.43mg，68.92μmol)于二噁烷(1mL)中的溶液中添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(12.56mg，344.61μmol，15.71μL)。将所得混合物搅拌2h。将所得混合物蒸发至干且使其经历HPLC(C18，H2O-ACN，33-50％ ACN，30ml/min)。获得呈米色固体的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(13.7mg，36.99μmol，53.66％产率)。
1NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.97-1.04(m,3H),1.24-1.37(m,1H),1.58-1.71(m,1H),1.82-1.91(m,1H),1.95-2.03(m,4H),2.12-2.26(m,1H),2.67-3.19(m,1H),3.41-4.02(m,1H),5.10-5.56(m,1H),5.57-5.65(m,2H),7.17-7.22(m,2H),7.30-7.39(m,2H),7.43-7.51(m,1H),7.92-8.04(m,1H),10.43-10.53(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值370.2；实测值371.2；Rt＝2.774min。
步骤3.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物242)的合成
在21℃下，向N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(34.38mg，73.07μmol)于二噁烷(1mL)中的溶液中添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(13.32mg，365.33μmol，16.65μL)。将所得混合物搅拌2h。将所得混合物蒸发至干且使其经历HPLC(C18，H2O-ACN，34-51％ ACN，30ml/min)。获得呈米色固体的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(16.5mg，44.54μmol，60.96％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.92-1.05(m,3H),1.26-1.38(m,1H),1.60-1.69(m,1H),1.80-1.90(m,1H),1.95-2.10(m,4H),2.12-2.25(m,1H),2.66-3.18(m,1H),3.41-4.03(m,1H),5.05-5.56(m,1H),5.57-6.08(m,2H),6.94-7.24(m,2H),7.28-7.40(m,2H),7.42-7.50(m,1H),7.62-8.08(m,1H),9.69-10.55(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值368.4；实测值369.2；Rt＝2.787min。
实施例3.2-(5,5-二甲基-2-苯基-1-哌啶基)-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物146)、N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物301)的合成和步骤5：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物309)的合成
步骤1：N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-(3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
在-78℃、Ar气氛下，向3-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶(0.2g，1.13mmol)于THF(10mL)中的溶液中添加正丁基锂(948.04mg，3.40mmol，1.37mL，23％纯度)。15min之后，一次性添加2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(428.14mg，1.13mmol)。将所得混合物升温至室温，用NH4Cl水溶液淬灭，用EtOAc萃取，经Na2SO4干燥，蒸发且使其经历HPLC(2-7 30-55％ ACN，30ML/MIN；SUNFIRE C18，100*19)。获得呈灰白色固体的N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-(3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.1277g，281.57μmol，24.81％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值453.2；实测值454.2；Rt＝1.063min。
步骤2：N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-(3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(化合物146)的合成
在21℃下，向N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-(3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(97.7mg，215.42μmol)于二噁烷(1mL)中的溶液中添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(78.54mg，2.15mmol，98.18μL)。将所得混合物搅拌1h。通过HNMR监测反应进展。过滤出沉淀，用MTBE洗涤且在高真空(0.3毫巴)下干燥，以得到呈黄色固体的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(8mg，22.64μmol，10.51％产率)。
1H NMR(氯仿-d,400MHz):δ(ppm)0.84(m,1H),1.08(m,3H),1.42(m,1H),1.79(m,2H),2.00(m,1H),2.11(m,3H),2.19(m,1H),3.10(dd,1H),4.60(m,3H),6.15(m,1H),7.29(m,1H),7.60(dd,1H),7.71(s,1H),8.03(m,1H),8.51(m,1H),8.57(m,1H),9.18(m,1H)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值353.4；实测值354.4；Rt＝0.710min。
步骤3：N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯和N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的手性纯化
使N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-(3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(化合物146，75.8mg)经历手性HPLC(柱：AD，250x 30mm，20um；洗脱液：MeOH；流速：32mL/min)，以得到呈白色固体的N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(17.25mg)和N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(17.9mg)。
N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
LCMS(ESI)：[M+Boc]+m/z：计算值453.2；实测值354.2；Rt＝3.905min。
手性HPLC：Rt＝10.33min(柱：IC；洗脱液：CO2/MeOH，60/40；流速：2mL/min)。
N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
LCMS(ESI)：[M+Boc]+m/z：计算值453.2；实测值354.2；Rt＝3.908min。
手性HPLC：Rt＝12.42min(柱：IC；洗脱液：CO2/MeOH，60/40；流速：2mL/min)。
步骤4：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物301)的合成
在21℃下，向N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(17.25mg，38.03μmol)于二噁烷(2mL)中的搅拌溶液中添加于二噁烷中的4M氯化氢(6.93mg，190.17μmol，8.67μL)。将所得反应混合物在同一温度下搅拌2小时。完成之后，将反应混合物在减压下浓缩且通过HPLC(洗脱液：30-80％，水-MeOH(NH3)；流速：30mL/min；装载泵：4mL/min，MeOH；柱：X-Bridge 19*100mm，5um)纯化粗产物，以得到呈米色固体的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物301，6.9mg，19.52μmol，51.33％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)0.98-1.10(m,3H),1.29-1.40(m,1H),1.62-1.72(m,1H),1.85-1.96(m,1H),1.98-2.05(m,3H),2.05-2.17(m,1H),2.17-2.32(m,1H),2.73-3.25(m,1H),3.48-4.08(m,1H),5.22-5.68(m,3H),7.38-7.52(m,2H),7.66-7.81(m,1H),7.95-8.09(m,1H),8.46-8.53(m,1H),8.53-8.61(m,1H),10.48-10.61(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值353.2；实测值354.2；Rt＝0.783min。
步骤5：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物309)的合成
在21℃下，向N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(17.9mg，39.47μmol)于二噁烷(2mL)中的搅拌溶液中添加于二噁烷中的4M氯化氢(7.20mg，197.34μmol，8.99μL)。将所得反应混合物在同一温度下搅拌2小时。完成之后，将反应混合物在减压下浓缩且通过HPLC(洗脱液：30-80％，水-MeOH(NH3)；流速：30mL/min；装载泵：4mL/min，MeOH；柱：X-Bridge 19*100mm，5um)纯化粗产物，以得到呈米色固体的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物309，6.8mg，19.24μmol，48.75％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)1.01-1.05(m,3H),1.31-1.40(m,1H),1.62-1.70(m,1H),1.84-1.91(m,1H),1.99-2.05(m,3H),2.13-2.32(m,2H),2.72-3.20(m,1H),3.38-4.10(m,1H),5.24-5.67(m,3H),7.38-7.44(m,1H),7.44-7.52(m,1H),7.69-7.78(m,1H),7.95-8.06(m,1H),8.46-8.53(m,1H),8.53-8.60(m,1H),10.40-10.60(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值353.2；实测值354.2；Rt＝0.783min。
实施例4.5-[[2-[2-(2-甲基吡唑-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物26)的合成
步骤1：5-[[2-[2-(2-甲基吡唑-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物26)的合成
将2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(0.2g，549.48μmol)、2-(2-甲基吡唑-3-基)哌啶(55.41mg，274.74μmol，HCl)和DIPEA(53.26mg，412.11μmol，71.78μL)一起混合于CH3CN(2mL)中。将所得反应混合物在密封管中在100℃下加热12小时。12小时之后，将反应混合物在减压下浓缩且通过反相HPLC(洗脱液：CH3CN 10-30％，0-5min，水-CH3CN，流速：30mL/min，装载泵：4mL/min CH3CN；柱：SunFire C18 100*19mm,5um)纯化所获得的粗产物且冷冻干燥，以获得呈淡黄色固体的纯产物5-[[2-[2-(2-甲基吡唑-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(3.9mg，10.94μmol，3.98％产率)。
1H NMR(CDCl3,400MHz):δ(ppm)1.82(m,3H),2.03(m,2H),2.20(m,1H),3.03(m,1H),3.85(m,3H),4.68(m,1H),5.94(m,2H),6.34(m,2H),7.43(m,1H),8.62(m,1H),8.81(m,1H),8.97(m,1H),9.69(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值356.2；实测值357.2；Rt＝0.858min。
实施例5.5-[[2-氧代-2-(2-苯基-1-哌啶基)乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物29)的合成
所述化合物以与实施例4类似的方式制备。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.44(m,2H),1.61(m,2H),1.86(m,1H),2.47(m,1H),2.89(m,1H),4.06(m,1H),5.48(m,1H),7.28(m,1H),7.34(m,2H),7.39(m,2H),7.59(m,1H),8.15(m,1H),8.49(m,1H),8.76(m,1H),8.87(m,1H),11.26(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值352.3；实测值353.2；Rt＝1.147min。
实施例6.外消旋-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(间甲苯基)-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物8)的合成以及2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(间甲苯基)-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物11)和2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(间甲苯基)-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物10)的分离
步骤1.外消旋-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(间甲苯基)-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物8)的合成
在-78℃、氩气气氛下，向5-甲基-2-(间甲苯基)哌啶(0.2g，1.06mmol)于THF(20mL)中的搅拌溶液中逐滴添加正丁基锂(2.5M于己烷中，135.35mg，2.11mmol，0.84mL)。将所得溶液在同一温度下搅拌5分钟。5分钟之后，将2-[(5-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(277.01mg，1.06mmol)一次性添加到溶液中。使所得反应混合物升温至室温且在同一温度下搅拌12小时。12小时之后，将反应混合物用饱和NH4Cl水溶液淬灭。将所得混合物蒸发至干。通过HPLC纯化所获得的残余物(0.8g)，以获得呈黄色固体的外消旋-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(间甲苯基)-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物8，0.045g，128.04μmol，12.12％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,400MHz):δ(ppm)1.21(m,3H),1.46(m,1H),1.63(m,2H),1.87(m,1H),2.26(s,1H),2.31(s,2H),2.62(m,7.6H),2.98(t,0.4H),3.63(d,0.6H),4.30(d,0.4H),5.10(s,0.4H),5.64(s,0.6H),7.24(m,4H),7.89(s,0.4H),7.97(s,0.6H),8.15(s,0.4H),8.20(s,0.6H),8.55(s,0.4H),8.64(s,0.6H),11.06(s,0.4H),11.08(s,0.6H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值351.2；实测值352.4；Rt＝3.361min。
步骤2：2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(间甲苯基)-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺和2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(间甲苯基)-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物11和化合物10)的手性分离
使外消旋-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(间甲苯基)-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物8)经历手性色谱(柱：OJ-H 250*20mm，5um，洗脱液：己烷-MeOH-IPA，70-15-15，流速：12mL/min)，以得到呈黄色固体的2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(间甲苯基)-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物11)和2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(间甲苯基)-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物10)。
2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(间甲苯基)-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物11)
1H NMR(DMSO-d6,400MHz):δ(ppm)1.10(m,3H),1.41(t,1H),1.77(m,1H),1.91(m,1H),2.13(m,1H),2.22(m,1H),2.35(m,6H),2.82(d,0.35H),3.29(d,0.65H),3.60(d,0.65H),4.09(d,0.35H),5.21(s,0.35H),5.65(s,0.65H),7.03(m,1H),7.10(m,2H),7.23(m,1H),7.94(s,0.35H),7.99(s,0.65H),8.05(s,0.35H),8.09(s,0.65H),8.52(s,0.35H),8.59(s,0.65H),10.86(s,0.35H),10.91(s,0.65H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值351.2；实测值352.0；Rt＝4.962min。
手性HPLC：Rt＝23.37min(柱：OJ-H；洗脱液：己烷-MeOH-IPA，70-15-15；流速：0.6mL/min)。
2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(间甲苯基)-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物10)
1H NMR(DMSO-d6,400MHz):δ(ppm)1.11(m,3H),1.44(m,1H),1.72(m,1H),1.91(m,1H),2.11(m,1H),2.22(m,1H),2.35(m,6H),2.83(d,0.35H),3.28(d,0.65H),3.60(d,0.65H),4.10(d,0.35H),5.21(s,0.35H),5.65(s,0.65H),7.03(m,1H),7.10(m,2H),7.23(m,1H),7.94(s,0.35H),7.99(s,0.65H),8.05(s,0.35H),8.09(s,0.65H),8.52(s,0.35H),8.59(s,0.65H),10.86(s,0.35H),10.91(s,0.65H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值351.2；实测值352.0；Rt＝4.966min。
手性HPLC：Rt＝9.77min(柱：OJ-H；洗脱液：己烷-MeOH-IPA，70-15-15；流速：0.6mL/min)。
实施例7.2-[(2S,5R)-2-(3,4-二甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺和2-[(2R,5S)-2-(3,4-二甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物21和化合物19)的合成
在-78℃、氩气气氛下，向2-(3,4-二甲基苯基)-5-甲基哌啶(0.7g，3.44mmol)于THF(10mL)中的搅拌溶液中添加正丁基锂(2.5M于己烷中，661.59mg，10.33mmol，4.13mL)。将所得混合物在同一温度下搅拌5分钟。5分钟之后，将于THF(10mL)中的2-[(5-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(902.65mg，3.44mmol)添加到反应混合物中。使所得混合物升温至室温且在同一温度下搅拌过夜。完成之后，添加MeOH(5mL)且在真空中蒸发反应混合物。通过反相HPLC(50％，水-乙腈，0.5-6.5min；流速：30mL/min；装载泵：4mL/min乙腈；柱：SunFire 100*19mm，5um)和手性柱色谱(柱：OJ-H250*20mm，5um，洗脱液：己烷-MeOH-IPA，70-15-15，流速：15mL/min)纯化所获得的粗残余物，以得到呈黄色固体的2-[(2S,5R)-2-(3,4-二甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物21，48mg，131.34μmol，3.81％产率)和2-[(2R,5S)-2-(3,4-二甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物19，55mg，150.49μmol，4.37％产率)。
[(2S,5R)-2-(3,4-二甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物21)：
1H NMR(CDCl3,400MHz):δ(ppm)1.07(m,3H),1.34(m,1H),1.89(m,2H),2.15(m,2H),2.22(m,6H),2.29(m,3H),3.20(m,1H),4.62(m,1H),5.95(m,1H),7.00(m,2H),7.09(m,1H),7.99(s,1H),8.19(m,1H),8.49(m,1H),9.65(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值365.2；实测值366.2；Rt＝1.397min。
手性HPLC：Rt＝6.57min(柱：OJ-3；洗脱液：己烷-MeOH-IPA，70-15-15；流速：0.155mL/min)。
2-[(2R,5S)-2-(3,4-二甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物19)：
1H NMR(CDCl3,400MHz):δ(ppm)1.07(m,3H),1.34(m,1H),1.88(m,2H),2.15(m,2H),2.22(m,6H),2.30(m,3H),3.24(m,1H),4.40(m,1H),5.95(m,1H),7.00(m,2H),7.09(m,1H),7.99(s,1H),8.19(m,1H),8.50(m,1H),9.65(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值365.2；实测值366.2；Rt＝1.397min。
手性HPLC：Rt＝33.27min(柱：OJ-3；洗脱液：己烷-MeOH-IPA，70-15-15；流速：0.155mL/min
实施例8.2-[(2R,5S)-2-(3-氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物13)、2-((2R,5S)-2-(3-氯苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-N-(5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺(化合物90)和2-((2S,5R)-2-(3-氯苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-N-(5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺(化合物87)的合成
在-78℃、Ar气氛下，向[(5-甲基吡啶-3-基)氨基](氧代)乙酸2,2,2-三氟乙酯(625.10mg，2.38mmol)于THF(10mL)中的溶液中添加正丁基锂(1.33g，4.77mmol，1.92mL，23％纯度)。15min分钟之后，一次性添加2-(3-氯苯基)-5-甲基哌啶(0.5g，2.38mmol)。将所得混合物升温至室温，用NH4Cl水溶液淬灭，用EtOAc萃取，经Na2SO4干燥，蒸发且使其经历HPLC(2-7min 50-100％ MeOH(0.1％氢氧化铵)，30mL/min；柱：YMC-ACTUS TRIAT C18 100*20 5微米)。获得呈淡黄色胶状物的2-[(2R,5S)-2-(3-氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(6.7mg，18.02μmol，7.56e-1％产率)，其缓慢结晶。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.81(m,1H),1.09(m,3H),1.37(m,1H),1.84(m,1H),1.97(m,1H),2.20(m,2H),2.33(m,3H),3.15(m,1H),4.53(m,1H),6.09(m,1H),7.16(m,1H),7.22(m,1H),7.29(m,2H),8.00(s,1H),8.22(m,1H),8.48(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值371.2；实测值372.2；Rt＝1.236min。
使用IC chiralpak(250*20，5mkm)柱，以Hex-IPA-MeOH为流动相，70-15-15，0.6mL/min；注入体积5mkL)进行手性分离，得到2-((2R,5S)-2-(3-氯苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-N-(5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺(化合物90)(56.84mg，152.85μmol，32.80％产率)和2-((2S,5R)-2-(3-氯苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-N-(5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺(化合物87)(40.55mg，109.05μmol，23.40％产率)。
2-((2S,5R)-2-(3-氯苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-N-(5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺(化合物87)：
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.02(m,3H),1.33(m,1H),1.64(m,1H),1.89(m,1H),2.04(m,1H),2.19(m,1H),2.27(m,3H),3.02(m,1H),3.74(m,1H),5.35(m,1H),7.33(m,3H),7.43(m,1H),7.90(m,1H),8.16(m,1H),8.57(m,1H),11.06(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+4H]+m/z：计算值371.2；实测值375.3；Rt＝5.04min。
RT(IC，Hex-IPA-MeOH，70-15-15，0.6mL/min)＝30.688min。
2-((2R,5S)-2-(3-氯苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-N-(5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺(化合物90)：
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.02(m,3H),1.32(m,1H),1.64(m,1H),1.89(m,1H),2.08(m,1H),2.19(m,1H),2.27(m,3H),2.94(m,1H),3.84(m,1H),5.35(m,1H),7.33(m,3H),7.43(m,1H),7.90(m,1H),8.16(m,1H),8.57(m,1H),11.06(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值371.2；实测值372.3；Rt＝5.03min。
RT(IC，Hex-IPA-MeOH，70-15-15，0.6mL/min)＝20.398min。
实施例9.2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-甲基-4-吡啶基)-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物14)的合成
在-78℃、氩气气氛下，向2-甲基-4-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶(0.187g，982.74μmol)于THF(20mL)中的搅拌溶液中添加正丁基锂(2.5M于己烷中，125.90mg，1.97mmol，0.78mL)。将所得混合物在同一温度下搅拌5分钟。5分钟之后，一次性添加2-[(5-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(257.66mg，982.74μmol)。使所得混合物升温至室温且在同一温度下搅拌12小时。12小时之后，将反应混合物用饱和NH4Cl水溶液淬灭且在真空中蒸发。通过反相HPLC纯化粗产物(1g)，以获得呈白色固体的产物2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-甲基-4-吡啶基)-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(0.058g，164.57μmol，16.75％产率)。
1H NMR(DMSO-d6+CCl4,400MHz):δ(ppm)1.11(d,3H),1.41(m,1H),1.69(m,1H),1.92(m,1H),2.19(m,2H),2.34(m,3H),2.53(m,3H),2.79(m,0.4H),3.25(m,0.6H),3.89(m,1H),5.42(m,1H),7.07(m,1H),7.13(m,1H),7.94(m,1H),8.08(m,1H),8.38(m,1H),8.57(m,1H),10.93(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值352.2；实测值353.2；Rt＝1.923min。
实施例10.2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(对甲苯基)-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物16)和2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(对甲苯基)-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物12)的合成
步骤1：外消旋-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(对甲苯基)-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺的合成
在-78℃、氩气气氛下，向[(5-甲基吡啶-3-基)氨基](氧代)乙酸2,2,2-三氟乙酯(1.39g，5.28mmol)于THF(25mL)中的搅拌溶液中逐滴添加正丁基锂(2.5M于己烷中，2.94g，10.57mmol，4.25mL)。将所得溶液在同一温度下搅拌15分钟。15分钟之后，将5-甲基-2-(对甲苯基)哌啶(1g，5.28mmol)一次性添加到溶液中。使所得反应混合物升温至室温且在同一温度下搅拌1小时。1小时之后，将反应混合物用饱和NH4Cl水溶液淬灭且用EtOAc萃取。将有机层经Na2SO4干燥，过滤且在减压下蒸发。通过反相HPLC(洗脱液：CH3CN,50-55％，2-7min，流速：30mL/min；柱：SunFire C18 100*19mm，5uM)纯化粗产物，以获得呈淡黄色胶状物的外消旋-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(对甲苯基)-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(0.0731g，208.00μmol，3.94％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值351.2；实测值352.2；Rt＝3.269min。
步骤2：2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(对甲苯基)-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺和2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(对甲苯基)-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物16和化合物12)的手性分离
使外消旋-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(对甲苯基)-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(0.0621g，176.70μmol)经历手性色谱(柱：Chiralcel OJ-H 250*20mm，5um，洗脱液：己烷-MeOH-IPA，70-15-15，流速：15mL/min)，以得到呈灰白色固体的2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(对甲苯基)-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物16，30.5mg)和2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(对甲苯基)-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物12，23.4mg)。
2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(对甲苯基)-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物16)：
1H NMR(CD3OD,400MHz):δ(ppm)1.12(m,6H),1.40(m,1H),1.87(m,2H),2.28(m,3H),2.37(m,3H),3.52(m,1H),3.96(m,1H),5.47(m,1H),7.20(m,4H),7.90(m,1H),8.17(m,1H),8.57(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值351.2；实测值352.2；Rt＝1.218min。
手性HPLC：Rt＝13.72min(柱：OJ-3；洗脱液：己烷-MeOH-IPA，70-15-15；流速：0.15mL/min)。
2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(对甲苯基)-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物12)：
1H NMR(CD3OD,400MHz):δ(ppm)1.12(m,6H),1.41(m,1H),1.87(m,2H),2.25(m,3H),2.37(m,3H),3.51(m,1H),3.95(m,1H),5.47(m,1H),7.21(m,4H),7.90(m,1H),8.18(m,1H),8.57(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值351.2；实测值352.0；Rt＝1.218min。
手性HPLC：Rt＝40.48min(柱：OJ-3；洗脱液：己烷-MeOH-IPA，70-15-15；流速：0.15mL/min)。
实施例11.外消旋-2-[(2S,5R)-2-(3-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物70)、2-[(2S,5S)-2-(3-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物1080)、2-[(2S,5R)-2-(3-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物77)、2-[(2R,5S)-2-(3-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物84)和2-[(2R,5R)-2-(3-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物93)的合成
步骤1：外消旋-2-[(2S,5R)-2-(3-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物70)的合成
在-78℃、Ar气氛下，向[(5-甲基吡啶-3-基)氨基](氧代)乙酸2,2,2-三氟乙酯(406.99mg，1.55mmol)于THF(50mL)中的溶液中添加正丁基锂(864.64mg，3.10mmol，1.25mL，23％纯度)。15min分钟之后，一次性添加2-(3-氟苯基)-5-甲基哌啶(0.3g，1.55mmol)。将所得混合物升温至室温，用NH4Cl水溶液淬灭，用EtOAc萃取，经Na2SO4干燥，蒸发且使其经历HPLC(SunFira C18 19*100mm 5mkm柱；2-7min 40-65％ MeCN，流速30ml/min)。HPLC之后，获得两种级分：呈非对映异构体的混合物的2-[2-(3-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(81.6mg，229.60μmol，14.79％产率)以及2-[(2S,5R)-2-(3-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(9.9mg，27.86μmol，1.79％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ1.02(m,3H),1.31(m,1H),1.63(m,1H),1.88(m,1H),2.06(m,1H),2.20(m,1H),2.27(m,3H),3.24(m,1H),3.84(m,1H),5.36(m,1H),7.15(m,3H),7.44(m,1H),7.90(m,1H),8.16(m,1H),8.62(m,1H),11.04(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值355.1；实测值356.4；Rt＝3.052min。
步骤2：2-[(2S,5R)-2-(3-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺的手性分离
使用AD-H-III(250*20，5mkm)Chiralpak柱(以己烷-IPA-MeOH，60-20-20为流动相；流速12ml/min)进行2-[(2S,5R)-2-(3-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺的手性分离，得到化合物1080 2-[(2S,5S)-2-(3-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(4.77mg，5.85％；RT＝21.76min)、化合物772-[(2S,5R)-2-(3-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(27.41mg，33.62％；RT＝33.70min)、化合物842-[(2R,5S)-2-(3-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(3.18mg，3.90％；RT＝39.42min)和化合物932-[(2R,5R)-2-(3-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(32.62mg，39.98％；RT＝27.90min)。
2-[(2S,5S)-2-(3-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物1080)：
RT(OJ-H，己烷-IPA-MeOH，90-5-5，0.6ml/min)＝21.760min。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ0.88(m,3H),1.27(m,1H),1.75(m,2H),1.88(m,1H),2.06(m,1H),2.43(m,3H),2.61(m,1H),4.67(m,1H),6.17(m,1H),6.99(m,2H),7.09(m,1H),7.37(m,1H),8.21(m,1H),8.28(m,1H),8.73(m,1H),9.63(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值355.2；实测值356.2；Rt＝4.859min。
2-[(2S,5R)-2-(3-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物77)：
RT(OJ-H，己烷-IPA-MeOH，90-5-5，0.6ml/min)＝33.704min。
1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)1.11(m,3H),1.40(m,1H),1.76(m,1H),1.92(m,1H),2.18(m,2H),2.33(m,3H),3.27(m,1H),3.87(m,1H),5.45(m,1H),6.99(m,1H),7.12(m,2H),7.38(m,1H),7.97(m,1H),8.08(m,1H),8.56(m,1H),10.91(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值355.2；实测值356.2；Rt＝4.808min。
2-[(2R,5S)-2-(3-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物84)
RT(OJ-H，己烷-IPA-MeOH，90-5-5，0.6ml/min)＝39.426min。
1H NMR(氯仿-d,500MHz):δ(ppm)0.88(m,3H),1.27(m,1H),1.75(m,2H),2.06(m,1H),2.34(m,1H),2.43(m,3H),2.60(m,1H),4.60(m,1H),6.17(m,1H),6.99(m,2H),7.08(m,1H),7.37(m,1H),8.22(m,1H),8.29(m,1H),8.75(m,1H),9.66(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值355.2；实测值356.0；Rt＝4.705min。
2-[(2R,5R)-2-(3-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物93)：
RT(OJ-H，己烷-IPA-MeOH，90-5-5，0.6ml/min)＝27.991min。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ1.10(m,3H),1.41(m,1H),1.78(m,1H),1.92(m,1H),2.22(m,2H),2.33(m,3H),2.80(m,0H),3.28(m,1H),3.87(m,1H),5.46(m,1H),6.99(m,1H),7.12(m,2H),7.38(m,1H),7.97(m,1H),8.08(m,1H),8.56(m,1H),10.91(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值355.2；实测值356.2；Rt＝4.821min。
实施例12.2-(5-甲基-2-(噻吩-2-基)哌啶-1-基)-N-(5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺(化合物60、化合物68、化合物76)的合成
步骤1：外消旋-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(噻吩-2-基)哌啶-1-基)-N-(5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺(化合物60)的合成
在-78℃、Ar气氛下，向[(5-甲基吡啶-3-基)氨基](氧代)乙酸2,2,2-三氟乙酯(433.85mg，1.65mmol)于THF(15mL)中的溶液中添加正丁基锂(921.70mg，3.31mmol，1.33mL，23％纯度)。15min分钟之后，一次性添加5-甲基-2-(2-噻吩基)哌啶(0.3g，1.65mmol)。将所得混合物升温至室温，用NH4Cl水溶液淬灭，用EtOAc萃取，经Na2SO4干燥，蒸发且使其经历HPLC(2-7 35-60％acn，30ml/min；sunfire C18100*19，5uM)。HPLC之后，获得N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-噻吩基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(84.5mg，246.04μmol，14.87％产率)的2种级分：49.8mg(98.98％纯度)和34.7mg(96.38％纯度)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.02(t,3H),1.45(m,1H),1.89(m,2H),2.06(m,2H),2.29(m,3H),2.78(m,1H),3.65(m,1H),5.64(m,1H),7.05(m,2H),7.50(m,1H),7.94(m,1H),8.18(m,1H),8.62(s,1H),11.05(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值343.4；实测值344.2；Rt＝3.273min。
步骤2：手性分离(化合物68和化合物76)
在系统Hex-IPA-MeOH，70-15-15，0.6mL/min中在手性柱上进行纯化。注入次数：1，注入体积：5mkl。自39mg外消旋物获得17.01mg和17.38mg个别对映异构体。
2-((2R,5S)-5-甲基-2-(噻吩-2-基)哌啶-1-基)-N-(5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺(化合物68)：
保留时间：17.81min
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.02(m,3H),1.43(m,1H),1.89(m,2H),2.05(m,2H),2.29(m,3H),3.28(m,1H),3.46(m,1H),5.84(m,1H),7.04(m,2H),7.50(m,1H),7.94(m,1H),8.18(m,1H),8.61(m,1H),11.03(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值343.4；实测值344.2；Rt＝4.460min。
2-((2S,5R)-5-甲基-2-(噻吩-2-基)哌啶-1-基)-N-(5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺(化合物76)：
保留时间：22.70min
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.02(m,3H),1.43(m,1H),1.88(m,2H),2.05(m,2H),2.29(m,3H),3.36(m,1H),3.44(m,1H),5.83(m,1H),7.04(m,2H),7.49(m,1H),7.94(m,1H),8.18(m,1H),8.61(m,1H),11.03(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值343.4；实测值344.2；Rt＝4.475min。
实施例13.外消旋-2-((2R,5S)-2-(3-(1-乙酰基哌啶-4-基)苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-N-(5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺(化合物44)的合成
在-78℃、Ar气氛下，向1-[4-[3-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]-1-哌啶基]乙酮(500.00mg，1.66mmol)和2-[(5-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(479.97mg，1.83mmol)于THF(50mL)中的溶液中添加正丁基锂(1.16g，4.16mmol，1.67mL，23％纯度)。将所得混合物搅拌15min且将其升温至室温，用NH4Cl水溶液淬灭，用EtOAc萃取，经Na2SO4干燥，蒸发且使其经历HPLC(19_R1+FA 1-6min 55-55％水-MeOH+FA，流速30ml/min(装载泵4ml/min MeOH+FA))，以获得2-[(2S,5R)-2-[3-(1-乙酰基-4-哌啶基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(7mg，15.13μmol，9.09e-1％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.12(d,3H),1.41(m,1H),1.54(m,2H),1.82(m,4H),2.04(s,3H),2.26(m,2H),2.36(m,3H),2.78(m,2H),3.15(m,2H),3.61(m,1H),3.93(m,1H),4.61(d,1H),5.55(m,1H),7.27(m,4H),8.06(m,1H),8.11(m,1H),8.61(m,1H),10.91(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值462.6；实测值463.2；Rt＝1.206min。
实施例14.rel-(R)-5-(2-(2-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物59)和rel-(S)-5-(2-(2-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物46)的合成
步骤1：5-[[2-[2-(2-甲基吡唑-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
将2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(0.5g，1.72mmol)、2-(2-甲基吡唑-3-基)哌啶(283.73mg，1.41mmol，HCl)和dipea(443.85mg，3.43mmol，598.19μL)混合于乙腈(5mL)中且在剧烈搅拌的情况下在密封管中在100℃下加热。16h之后，过滤混合物，蒸发溶剂且使粗产物经历HPLC(H2O/MeOH+NH3为溶剂混合物；YMC-ACTUS TRIART C18,100*20mm，5um柱)，以得到5-[[2-[2-(2-甲基吡唑-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(24mg，67.34μmol，3.92％产率)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ1.82(m,3H),2.12(m,3H),2.65(m,1H),3.19(m,1H),3.80(s,3H),3.85(m,1H),5.91(m,1H),6.52(d,1H),7.40(d,1H),8.55(s,1H),8.77(s,1H),8.89(s,1H),未观察到NH2。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值356.2；实测值357.2；Rt＝2.056min。
步骤2：rel-(R)-5-(2-(2-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物59)和rel-(S)-5-(2-(2-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物46)的合成
使用AD-HII Chiralpak柱和作为流动相的50-25-25己烷-IPA-MeOH(流速12mL/min)手性分离5-[[2-[2-(2-甲基吡唑-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(24.0mg，67.34μmol)，得到化合物59rel-(R)-5-(2-(2-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(8.04mg，22.56μmol；33.5％产率；RT(AD-HII，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，流速12mL/min)＝32.552min)和化合物46rel-(S)-5-(2-(2-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(8.8mg，24.69μmol；36.67％产率；RT(AD-HII，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，12mL/min)＝18.482min)。
化合物46：RT(AD-H，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝22.757min。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ1.86(m,3H),2.12(m,3H),3.10(m,1H),3.86(m,3H),4.61(m,1H),6.11(m,2H),6.40(m,2H),7.44(m,1H),8.68(m,1H),8.92(m,1H),9.01(m,1H),9.83(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值356.2；实测值356.9；Rt＝3.484min。
化合物59：RT(AD-H，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝38.353min。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ1.83(m,3H),2.12(m,3H),3.01(m,1H),3.86(m,3H),4.62(m,1H),6.12(m,2H),6.40(m,2H),7.45(m,1H),8.67(m,1H),8.91(m,1H),9.02(m,1H),9.75(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值356.2；实测值356.9；Rt＝3.480min。
实施例15.5-(2-(5,5-二甲基-2-苯基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物45)的合成
将2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(150mg，515.14μmol)、5,5-二甲基-2-苯基哌啶(97.51mg，515.14μmol)和DIPEA(66.58mg，515.14μmol，89.73μL)混合于乙腈(1mL)中且在剧烈搅拌的情况下在100℃下加热16h。冷却至室温之后，过滤混合物，在真空中蒸发且使其经历HPLC(柱：YMC Actus Triart C18100x20 mm，5um且MeOH+NH3为流动相)，获得5-[[2-(5,5-二甲基-2-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(3.9mg，10.25μmol，1.99％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)0.86(m,3H),1.03(m,3H),1.37(m,1H),1.50(m,1H),2.16(m,1H),2.31(m,1H),2.87(m,1H),4.34(m,1H),6.11(m,3H),7.26(m,4H),7.35(m,2H),8.62(m,1H),8.79(m,1H),8.95(m,1H)。LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值380.4；实测值381.2；Rt＝1.192min。
实施例16.外消旋-2-((2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-N-(5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺(化合物89)的合成
在-78℃、Ar气氛下，向[(5-甲基吡啶-3-基)氨基](氧代)乙酸2,2,2-三氟乙酯(406.99mg，1.55mmol)于THF(15mL)中的溶液中添加正丁基锂(864.64mg，3.10mmol，1.25mL，23％纯度)。15min分钟之后，一次性添加2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶(0.3g，1.55mmol)。将所得混合物升温至室温，用NH4Cl水溶液淬灭，用EtOAc萃取，经Na2SO4干燥，蒸发且使其经历HPLC(柱SunFire 100*19mm 5um，ACN+FA(0.01％)作为洗脱液混合物)。获得2-[(2S,5R)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(13.1mg，36.86μmol，2.37％产率)的两种级分：7.4mg(通过LCMS测得98.21％，单非对映异构体)和5.7mg(通过LCMS测得100％，非对映异构体的混合物)。浅黄色胶状物，其缓慢结晶。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.02(d,3H),1.33(m,1H),1.66(m,1H),1.87(m,1H),2.11(m,2H),2.27(m,3H),2.99(m,1H),3.82(m,1H),5.34(m,1H),7.21(m,2H),7.38(m,2H),7.90(m,1H),8.16(m,1H),8.58(m,1H),11.02(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值355.4；实测值356.2；Rt＝3.033min。
实施例17.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(2-环己基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物30、化合物42、化合物34)的合成
步骤1：(5-(2-(2-环己基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-3-甲基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
在-70℃、Ar下，向2-环己基哌啶(306.90mg，1.19mmol)于THF(15mL)中的溶液中逐滴添加于己烷中的2.5M正丁基锂溶液(458.37mg，7.16mmol，3mL)。将反应混合物在-70℃下搅拌20min，然后分批添加2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(0.45g，1.19mmol)。将所得溶液在-70℃下搅拌30min且在室温下搅拌1h。将所得溶液冷却至-50℃且用饱和NH4Cl(水溶液)(50ml)淬灭。分离有机层且将水层用EtOAc(20mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥且浓缩至干燥，以得到N-[5-[[2-(2-环己基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.5g，粗品)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.85(m,6H),1.26(m,6H),1.45(s,9H),1.69(m,6H),2.14(s,3H),2.22(m,1H),2.98(d,1H),8.02(m,1H),8.49(m,1H),9.06(m,1H),9.65(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值444.5；实测值445.2；Rt＝1.572min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(2-环己基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物30、化合物42、化合物34)的合成
在室温下将于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(732.27mg，2.81mmol，697.40μL，14％纯度)小心添加到N-[5-[[2-(2-环己基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.5g，281.17μmol)于DCM(20mL)中的溶液中。然后将反应混合物在室温下搅拌12h且在真空中蒸发溶剂，以得到0.5g粗材料。使其经历RP-HPLC(柱：YMC ActusTriart C18 100x20 mm，5um；55％；0-5min以0.1％ NH3-甲醇为流动相)，以得到化合物30N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-环己基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(33mg)。通过手性HPLC(柱：OJ-H(250*20，5mkm)，以己烷-IPA-MeOH 90-5-5％为流动相)分离对映异构体，以得到两种个别对映异构体化合物34N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S)-2-环己基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(12mg，34.84μmol，24.78％产率)和化合物42N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R)-2-环己基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(12.1mg，35.13μmol，24.99％产率)。
化合物30：1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.94(m,3H),1.20(m,4H),1.52(m,2H),1.64(m,5H),1.80(m,4H),2.08(s,3H),3.68(dd,1H),4.23(dd,1H),5.20(s,2H),7.53(s,1H),8.01(s,1H),10.13(s,1H)。LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值344.2；实测值345.2；Rt＝2.912min。
化合物42：保留时间：32.70min 1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.94(m,3H),1.19(m,3H),1.48(m,2H),1.65(m,5H),1.78(m,4H),2.08(m,3H),3.05(m,1H),3.68(m,1H),4.22(m,1H),5.20(s,2H),7.53(m,1H),8.01(m,1H),10.13(s,1H)。LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值344.2；实测值345.2；Rt＝1.103min。
化合物34：保留时间：24.50min 1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.92(m,3H),1.20(m,3H),1.48(m,2H),1.63(m,5H),1.78(m,4H),2.08(m,3H),3.05(m,1H),3.68(m,1H),4.23(m,1H),5.20(s,2H),7.52(m,1H),8.01(m,1H),10.13(s,1H)。LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值344.2；实测值345.2；Rt＝4.052min。
实施例18.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2R)-2-(3-吡啶基)-1-哌啶基]乙酰胺(化合物74)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2S)-2-(3-吡啶基)-1-哌啶基]乙酰胺(化合物69)的合成
步骤1：N-[3-甲基-5-[[2-氧代-2-[2-(3-吡啶基)-1-哌啶基]乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
在-78℃、Ar下，向3-(2-哌啶基)吡啶(300.97mg，1.86mmol)于THF(29mL)中的溶液中逐滴添加丁基锂(392.19mg，6.12mmol，2.45mL)。将反应混合物在-78℃下搅拌20min，然后分批添加2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(0.7g，1.86mmol)。将所得溶液在-78℃下搅拌30min且在室温下搅拌1h。将所得溶液冷却至-50℃且用饱和NH4Cl(水溶液)(30ml)淬灭。分离有机层且将水层用EtOAc(20mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥且浓缩至干燥，以得到N-[3-甲基-5-[[2-氧代-2-[2-(3-吡啶基)-1-哌啶基]乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.51g，1.16mmol，62.55％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值439.2；实测值440.2；Rt＝1.058min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[2-(3-吡啶基)-1-哌啶基]乙酰胺(化合物38)的合成
将于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(800.00mg，21.94mmol，1mL)添加到N-[3-甲基-5-[[2-氧代-2-[2-(3-吡啶基)-1-哌啶基]乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.51g，1.16mmol)于DCM(5mL)中的溶液中。将反应混合物在25℃下搅拌1h，然后在真空中蒸发且通过制备型HPLC(100％甲醇-水，流速30ml/min)纯化0.3g所获得的粗产物，以得到产物N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[2-(3-吡啶基)-1-哌啶基]乙酰胺(0.0381g，101.37μmol，8.74％产率，HCl)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ1.53(m,2H),1.66(m,2H),1.74(m,1H),1.96(m,1H),2.08(m,3H),2.40(m,1H),4.10(m,1H),5.28(m,2H),5.57(m,1H),7.35(m,1H),7.55(m,1H),7.70(m,1H),8.03(m,1H),8.45(m,1H),8.54(m,1H),10.43(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值339.2；实测值340.2；Rt＝0.622min。
步骤3：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2R)-2-(3-吡啶基)-1-哌啶基]乙酰胺(化合物74)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2S)-2-(3-吡啶基)-1-哌啶基]乙酰胺(化合物69)的合成
通过手性HPLC(柱：AD-H(250*20，5mkm)Chiralpak柱，以IPA-MeOH-DEA，50-50-0.2，0.5ml/min为流动相)，以得到两种个别对映异构体化合物74N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2R)-2-(3-吡啶基)-1-哌啶基]乙酰胺(0.01467g，39.03μmol，36.67％产率，HCl；RT＝80.477min)和化合物69N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2S)-2-(3-吡啶基)-1-哌啶基]乙酰胺(8.15mg，21.68μmol，20.37％产率，HCl；RT＝51.702min)。
化合物74RT(AD-H，IPA-MeOH-DEA，50-50-0.2，0.5ml/min)＝80.789min。
1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)1.41(m,1H),1.62(m,2H),1.88(m,1H),2.03(m,3H),2.41(m,2H),2.97(m,1H),4.00(m,1H),5.66(m,3H),7.43(m,1H),7.50(m,1H),7.75(m,1H),8.02(m,1H),8.51(m,1H),8.57(m,1H),10.59(s,1H)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值339.2；实测值340.2；Rt＝2.562min。
化合物74RT(AD-H，IPA-MeOH-DEA，50-50-0.2，0.5ml/min)＝51.702min。
1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)1.41(m,1H),1.60(m,3H),1.89(m,1H),2.03(m,3H),2.94(m,1H),4.00(m,1H),5.49(m,3H),7.44(m,1H),7.51(m,1H),7.75(m,1H),8.02(m,1H),8.51(m,1H),8.57(m,1H),10.59(s,1H)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值339.2；实测值340.2；Rt＝2.570min。
实施例19.2-(2-(3-(二甲基氨基)苯基)哌啶-1-基)-N-(5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺(化合物15)的合成
步骤1：2-(2-(3-(二甲基氨基)苯基)哌啶-1-基)-N-(5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺(化合物15)的合成
在-78℃下，将正丁基锂(250.82mg，3.92mmol)(2.5M于己烷中)逐滴添加到N,N-二甲基-3-(2-哌啶基)苯胺(0.4g，1.96mmol)于THF(20mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加2-[(5-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(513.31mg，1.96mmol)。将所得混合物升温至室温且在所述温度下搅拌12h.向其中添加NH4Cl(0.6g)水溶液。将所得混合物蒸发至干。使残余物(1g)经历HPLC(流动相，柱)：16_ACN 36％0.5-6.5min；水-乙腈；流速30ml/min；(装载泵4ml/min乙腈)；目标质量366；柱SunFire 100*19mm5um)，以获得2-[2-[3-(二甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(0.054g，147.36μmol，7.53％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.50(m,2H),1.60(m,2H),1.80(m,1H),2.29(m,3H),2.89(m,6H),3.08(m,1H),3.42(m,1H),3.97(m,1H),5.35(m,1H),6.62(m,3H),7.21(m,1H),7.94(m,1H),8.18(m,1H),8.59(m,1H),11.09(m,1H)。LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值366.5；实测值367.2；Rt＝2.518min。
实施例20.外消旋-2-((2R,5S)-2-(3-甲氧基苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-N-(5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺(化合物28)的合成
在-78℃下，将丁基锂(187.21mg，2.92mmol)(2.5M于己烷中)逐滴添加到2-(3-甲氧基苯基)-5-甲基哌啶(0.3g，1.46mmol)于THF(20mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加2-[(5-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(383.13mg，1.46mmol)。将所得混合物升温至室温且在所述温度下搅拌12h。向其中添加NH4Cl(0.6g)水溶液。将所得混合物蒸发至干。通过HPLC(柱SunFire100*19mm 5um，以水-MeCN为洗脱液混合物)纯化残余物(4g)，以获得2-[(2S,5R)-2-(3-甲氧基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(130.90mg，356.25μmol，24.38％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.03(m,3H),1.34(m,1H),1.67(m,1H),1.91(m,1H),2.15(m,3H),2.29(m,3H),3.45(m,1H),3.75(m,3H),5.35(m,1H),6.88(m,3H),7.33(m,1H),7.92(m,1H),8.17(m,1H),8.59(m,1H),11.06(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值367.4；实测值368.2；Rt＝1.193min。
方案B.式2化合物的合成
式2、2a、2b、2c和2d化合物为式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物，其中R1、R2、R3、R4、R6、R7和R8如本文所述。
一般程序2
注意，分离步骤为任选的，且在某些情况下用于分离顺式/反式非对映异构体，且在某些情况下分离不同的对映异构体，如详细程序中所述。在某些情况下，起始哌啶呈限定顺式或反式构型，在那些情况下，手性分离步骤仅得到所描绘的四种对映异构体中的两者。
手性分离方法为本领域普通技术人员已知的。例如，在一些实施方案中，可通过使用手性HPLC纯化(柱：AD-H III(250*20mm，5μm)完成手性分离。示例性洗脱液包括但不限于己烷、IPA、MeOH、MeCN和H2O及其混合物。
在一些实施方案中，本公开的化合物可通过包含酰胺键偶联的方法来制备。在一些实施方案中，酰胺键偶联采用哌啶和羧酸。已知促进酰胺键偶联的条件的实例包括但不限于：添加偶联剂(诸如CDI、HATU、HOBT、HBTU或PyBOP)、碱(诸如氢化物碱(例如NaH或KH)、胺碱(诸如DBU、NEt3和NEt(iPr)2)或碳酸盐碱(例如，Na2CO3、K2CO3或Cs2CO3))；以及在一个实施方案中在0℃至室温下或在另一个实施方案中在70℃或更高温度下(例如在70℃至110℃范围内或在70℃至80℃范围内的温度下、或在80℃下)搅拌反应物。可在诸如但不限于DMF和MTBE的溶剂中进行反应。在一些实施方案中，反应包含HATU、Et3N和DMF。在一些实施方案中，反应包含采用HATU、Et3N和MeCN。在一些实施方案中，反应包含TATU、Et3N和DMF。在一些实施方案中，反应包含HATU、DIPEA和DMSO。在一些实施方案中，反应包含HATU、DIPEA和DMF。在一些实施方案中，反应包含HATU、TEA和DMSO。
实施例21.5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物300)的合成
在0℃下，向2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(盐酸盐，5.34g，21.73mmol)和(2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶(4.2g，21.73mmol)(中间体4A)于DMF(70mL)中的搅拌溶液中分别添加HATU(8.26g，21.73mmol)和Et3N(8.80g，86.93mmol，12.12mL)。将所得反应混合物在环境温度下搅拌9小时。9小时之后，将反应混合物在减压下浓缩且倒入到水(300mL)中。将水层用EtOAc(2x 150mL)萃取。将合并的有机相用水(2x40mL)洗涤，经Na2SO4干燥且在减压下浓缩，以获得粗产物(8g)。通过柱色谱(SiO2，洗脱液：10-100％于MTBE中的CH3OH)纯化粗产物，以获得(5.2g，13.53mmol，62.25％产率)产物。使产物经历手性HPLC纯化(柱：AD-H III(250*20mm,5um)，洗脱液：己烷-IPA-MeOH，70-15-15，流速：12mL/min)。将2种不同的级分混合，用MeOH稀释，在旋转蒸发仪中在30℃下蒸发然后在油泵(0.5mm Hg)下在35℃下干燥8小时，以获得呈白色固体的纯产物5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物300_3，3.6g，9.37mmol，52.94％产率)。1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.01(m,3H),1.33(m,1H),1.65(m,1H),1.88(m,1H),2.02(m,1H),2.19(m,1H),2.99(m,1H),3.73(m,1H),5.35(m,1H),7.22(m,2H),7.36(m,2H),7.59(m,1H),8.14(m,1H),8.46(m,1H),8.75(m,1H),8.86(m,1H),11.22(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值384.2；实测值385.0；Rt＝3.021
手性HPLC：Rt＝35.17min(柱：AD-H；洗脱液：己烷-MeOH-IPA，70-15-15；流速：0.6mL/min)。
α21D＝+98.75(EtOH,0.25M)
mp＝100-122℃
实施例22.5-(2-(5-甲基-2-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物72、化合物81)的合成
在21℃下，将2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸酯；三乙基铵(0.25g，805.55μmol)、HATU(336.92mg，886.10μmol)和三乙胺(244.54mg，2.42mmol，336.83μL)混合于无水ACN(20mL)且将所得混合物搅拌6h。向其中添加5-甲基-2-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)哌啶(203.15mg，805.55μmol，2HCl)且将所得混合物在21℃下搅拌过夜。将所得混合物蒸发至干且使其经历HPLC(2-7min15-30％acn，30ml/min；柱：SunFire C18 100*19 5微米)。获得3种级分：7.5mg(通过LCMS测得95.65％)5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-甲基吡唑-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(7.5mg，20.25μmol，2.51％产率)和23mg(通过LCMS测得100％)+99mg(通过LCMS测得95.17％)5-[[2-[(2S,5S)-5-甲基-2-(2-甲基吡唑-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(122.9mg，331.80μmol，41.19％产率)。
化合物72：1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.98(m,3H),1.83(m,5H),2.08(m,1H),2.23(m,1H),2.66(m,1H),3.86(m,3H),4.57(m,1H),6.11(m,1H),6.37(m,1H),7.46(m,1H),8.66(m,1H),8.93(m,2H),9.68(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]m/z：计算值370.4；实测值371.2；Rt＝2.432min。
化合物81：1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)1.08(m,3H),1.52(m,2H),2.15(m,5H),3.40(m,1H),3.86(m,3H),4.60(m,1H),6.07(m,1H),6.39(m,1H),7.43(m,1H),8.67(m,1H),8.89(m,2H),9.60(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]m/z：计算值370.4；实测值371.2；Rt＝2.432min。
实施例23.5-[[2-氧代-2-[2-(2-噻吩基)-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物120)的合成
在21℃下，将2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(991.96mg，4.74mmol，Et3N)、TATU(1.68g，5.22mmol)和三乙胺(959.81mg，9.49mmol，1.32mL)混合于无水DMF(50mL)中且将所得混合物搅拌16h。向其中添加2-(2-噻吩基)哌啶(1.06g，5.22mmol，HCl)且将所得混合物在21℃下搅拌过夜。将所得混合物倒入到水中，用EtOAc萃取三次，将合并的有机物用水、盐水洗涤，干燥且蒸发。通过CC(SiO2，以Hex-EtOAc为流动相)纯化残余物，以得到5-[[2-氧代-2-[2-(2-噻吩基)-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.26g，725.42μmol，15.30％产率)的两种级分：0.26g(通过LCMS测得96.9％)和0.6g(通过LCMS测得84.77％)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6+CCl4)δ1.51(m,1H),1.67(m,3H),1.95(m,1H),2.26(m,1H),2.94(m,1H),4.01(m,1H),5.66(m,1H),7.05(m,2H),7.51(m,1H),7.61(m,1H),8.17(m,1H),8.52(m,1H),8.79(m,1H),8.90(m,1H),11.26(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值358.1；实测值359.2；Rt＝1.029min。
实施例24.5-(2-(5-甲基-2-(噻吩-2-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物99、化合物198、化合物201)的合成
步骤1：5-(2-(5-甲基-2-(噻吩-2-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺的合成
在21℃下，将5-甲基-2-(2-噻吩基)哌啶(0.3g，1.65mmol)、2-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲四氟硼酸盐(532.94mg，1.65mmol)和三乙胺(334.89mg，3.31mmol，461.28μL)混合于无水MeCN(25mL)中且将所得混合物搅拌6h。向其中添加[(5-氨基甲酰基吡啶-3-基)氨基](氧代)乙酸锂(355.92mg，1.65mmol)且将所得混合物在21℃下搅拌过夜。将反应混合物蒸发且使其经历HPLC(20-45％MeCN，30ml/min；SUNFIRE C18，100*19,5μM)。获得呈浅黄色固体的5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-噻吩基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(10.5mg，28.19μmol，1.70％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.09(m,3H),1.46(m,1H),2.06(m,4H),2.27(m,1H),3.35(m,1H),4.41(m,1H),6.24(m,3H),6.96(m,2H),8.62(s,1H),8.79(s,1H),8.98(m,1H),9.90(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值372.4；实测值373.2；Rt＝1.213min。
步骤2：手性分离(化合物198和化合物201)
在系统Hex-IPA-MeOH，60-20-20，0.6mL/min中在手性柱上进行纯化。注入次数：1，注入体积：2mkl。自46mg外消旋物获得23mg和23mg个别对映异构体。
rel-5-(2-((2R,5S)-5-甲基-2-(噻吩-2-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物198)：
保留时间：31.34min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.00(m,3H),1.41(m,1H),1.89(m,2H),2.03(m,1H),2.13(m,1H),3.34(m,1H),3.75(m,1H),5.63(m,1H),7.02(m,2H),7.47(m,1H),7.59(m,1H),8.14(m,1H),8.49(m,1H),8.76(m,1H),8.88(s,1H),11.21(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值372.4；实测值373.2；Rt＝4.479min。
rel-5-(2-((2S,5R)-5-甲基-2-(噻吩-2-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物201)：
保留时间：21.28min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.00(m,3H),1.41(m,1H),1.88(m,2H),2.03(m,1H),2.14(m,1H),3.34(m,1H),3.74(m,1H),5.63(m,1H),7.02(m,2H),7.47(m,1H),7.59(m,1H),8.14(m,1H),8.49(m,1H),8.76(m,1H),8.88(s,1H),11.21(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值372.4；实测值373.2；Rt＝4.478min。
实施例25.2-甲氧基-5-(2-(5-甲基-2-(噻吩-2-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物310、化合物303)的合成
步骤1：2-甲氧基-5-(2-(5-甲基-2-(噻吩-2-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺的合成
在21℃下，将2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(0.5g，1.47mmol，Et3N)、TATU(567.73mg，1.76mmol)和三乙胺(148.64mg，1.47mmol，204.74μL)混合于无水DMF(25mL)中且将所得混合物搅拌1h。向其中添加5-甲基-2-(2-噻吩基)哌啶(266.32mg，1.47mmol)且将所得混合物在21℃下搅拌过夜。将所得混合物倒入到水中，用EtOAc萃取3次，将合并的有机物用水、盐水洗涤且蒸发。使残余物经历HPLC(40-40-80％0-1-6min 0.1％ NH3-甲醇，流速：30ml/min(装载泵4ml/min甲醇)；柱：XBridge C18 100x20mm，5um)。获得呈白色固体的2-甲氧基-5-[[2-[5-甲基-2-(2-噻吩基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(258.7mg，642.79μmol，43.76％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.07(m,1H),1.28(d,3H),1.64(m,1H),2.19(m,2H),2.49(m,1H),3.64(m,1H),4.28(s,3H),4.43(m,1H),6.40(m,1H),7.15(m,2H),7.42(m,2H),7.93(m,1H),8.94(m,1H),9.09(m,1H),10.07(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值402.4；实测值403.2；Rt＝3.394min。
步骤2：手性分离(化合物310和化合物303)
在系统Hex-IPA-MeOH，80-10-10，25mL/min中在手性柱上进行纯化。注入次数：1，注入体积：5mkl。自250mg外消旋物获得107.68mg和111.65mg个别对映异构体。
rel-2-甲氧基-5-(2-((2R,5S)-5-甲基-2-(噻吩-2-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物310)：
保留时间：23.85min
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99-1.08(m,3H),1.29-1.48(m,1H),1.82-2.00(m,2H),2.01-2.22(m,2H),2.87-3.27(m,1H),3.50-4.07(m,4H),5.42-5.89(m,1H),6.99-7.08(m,2H),7.43-7.54(m,1H),7.70-7.79(m,2H),8.44-8.52(m,1H),8.53-8.61(m,1H),11.00-11.07(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值402.4；实测值403.2；Rt＝3.297min。
rel-2-甲氧基-5-(2-((2S,5R)-5-甲基-2-(噻吩-2-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物303)：
保留时间：29.57min
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.96-1.11(m,3H),1.26-1.46(m,1H),1.66-2.00(m,2H),2.00-2.34(m,2H),2.87-3.28(m,1H),3.48-4.06(m,4H),5.44-5.89(m,1H),6.95-7.11(m,2H),7.42-7.55(m,1H),7.70-7.81(m,2H),8.44-8.51(m,1H),8.53-8.64(m,1H),11.03(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值402.4；实测值403.2；Rt＝3.295min。
实施例26.2-(2-(3-(1-乙酰基哌啶-4-基)苯基)哌啶-1-基)-N-(5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺(化合物7、化合物78、化合物73)的合成
步骤1 2-(2-(3-(1-乙酰基哌啶-4-基)苯基)哌啶-1-基)-N-(5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺(化合物7)的合成
向1-[4-[3-(2-哌啶基)苯基]-1-哌啶基]乙酮(0.4g，1.40mmol)、2-[(5-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(392.93mg，1.40mmol，Et3N)和HATU(584.13mg，1.54mmol)于DMF(3mL)中的悬浮液中添加三乙胺(423.96mg，4.19mmol，583.97μL)。将所得混合物在25℃下搅拌3h。通过HPLC(LC 09 40-40-75％0-1-6min 0.1％ NH3-甲醇，流速：30ml/min(装载泵4ml/min甲醇)，目标质量448，柱：YMC Triart C18100x20 mm，5um)纯化所得混合物，以获得2-[2-[3-(1-乙酰基-4-哌啶基)苯基]-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(0.395g，880.60μmol，63.05％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)1.63(m,4H),1.71(m,2H),1.91(m,4H),2.13(m,3H),2.34(m,3H),2.49(m,1H),2.61(m,1H),2.98(m,3H),4.29(m,1H),4.84(m,1H),6.14(m,1H),7.11(m,3H),7.32(m,1H),8.03(m,1H),8.23(m,1H),8.53(m,1H),9.46(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值448.6；实测值449.2；Rt＝3.090min。
步骤2：手性分离(化合物78和化合物73)
在系统Hex-IPA-MeOH，60-20-20，0.6mL/min中在手性柱上进行纯化。注入次数：1，注入体积：40mkl。自38.82mg外消旋物获得15.34mg和14.79mg个别对映异构体。
rel-(R)-2-(2-(3-(1-乙酰基哌啶-4-基)苯基)哌啶-1-基)-N-(5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺峰2(化合物78)：
保留时间：38.02min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.41(m,2H),1.55(m,2H),1.62(m,2H),1.80(m,3H),2.01(m,3H),2.27(m,3H),2.66(m,3H),3.05(m,2H),3.78(m,2H),4.51(m,1H),5.47(m,1H),7.15(m,3H),7.33(m,1H),7.92(m,1H),8.16(m,1H),8.57(m,1H),11.08(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值448.6；实测值449.2；Rt＝3.909min。
rel-(S)-2-(2-(3-(1-乙酰基哌啶-4-基)苯基)哌啶-1-基)-N-(5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺峰1(化合物73)：
保留时间：27.22min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.41(m,2H),1.57(m,2H),1.62(m,2H),1.75(m,3H),2.01(m,3H),2.27(m,3H),2.69(m,3H),3.05(m,2H),3.78(m,2H),4.51(m,1H),5.65(m,1H),7.15(m,3H),7.33(m,1H),7.95(m,1H),8.18(m,1H),8.62(m,1H),11.08(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值448.6；实测值449.2；Rt＝3.910min。
实施例27.5-(2-(2-(3-(1-乙酰基哌啶-4-基)苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物346、化合物332)的合成
步骤1：2-(2-(3-(1-乙酰基哌啶-4-基)苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-N-(5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺的合成
向1-[4-[3-(5-甲基-2-哌啶基)苯基]-1-哌啶基]乙酮(0.3g，998.54μmol)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(245.26mg，998.54μmol，HCl)和三乙胺(101.04mg，998.54μmol，139.18μL)于DMF(5mL)中的悬浮液中添加HATU(379.68mg，998.54μmol)。将反应混合物在40℃下搅拌24h且使其经历HPLC：20-20-65％0-1-6min 0.1％ NH3-甲醇，流速：30ml/min(装载泵4ml/min甲醇)，目标质量491，柱：XBridge C18 100x20 mm，5um)，以获得5-[[2-[2-[3-(1-乙酰基-4-哌啶基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.150g，305.14μmol，30.56％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.03(m,3H),1.34(m,2H),1.75(m,6H),2.02(s,3H),2.24(m,1H),2.58(m,1H),2.77(m,1H),3.12(m,1H),3.27(m,1H),3.47(m,1H),3.90(m,1H),4.01(m,1H),4.52(m,1H),5.52(m,1H),7.21(m,2H),7.34(m,1H),7.61(m,1H),8.18(m,1H),8.49(m,1H),8.79(m,1H),8.92(m,1H),11.31(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值491.6；实测值492.2；Rt＝3.016min。
步骤2：手性分离(化合物332和化合物346)
在系统Hex-IPA-MeOH，70-5-15，12mL/min中在手性柱上进行纯化。注入次数：1，注入体积：900mkl。自150mg外消旋物获得57mg和69mg个别对映异构体。
rel-5-(2-((2R,5S)-2-(3-(1-乙酰基哌啶-4-基)苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺峰1
保留时间：18.32min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.02(m,3H),1.32(m,1H),1.42(m,1H),1.67(m,4H),1.87(m,1H),1.99(m,3H),2.08(m,1H),2.22(m,1H),2.54(m,1H),2.82(m,2H),3.15(m,1H),3.78(m,2H),4.50(m,1H),5.35(m,1H),7.15(m,3H),7.31(m,1H),7.60(m,1H),8.15(m,1H),8.47(m,1H),8.75(m,1H),8.85(m,1H),11.23(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值491.6；实测值492.2；Rt＝2.867min。
rel-5-(2-((2R,5S)-2-(3-(1-乙酰基哌啶-4-基)苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺峰2(化合物346)：
保留时间：31.56min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.02(m,3H),1.32(m,1H),1.42(m,1H),1.66(m,4H),1.87(m,1H),1.99(m,3H),2.04(m,1H),2.22(m,1H),2.54(m,1H),2.77(m,2H),3.17(m,1H),3.78(m,2H),4.50(m,1H),5.35(m,1H),7.14(m,3H),7.31(m,1H),7.60(m,1H),8.15(m,1H),8.47(m,1H),8.75(m,1H),8.85(m,1H),11.23(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值491.6；实测值492.2；Rt＝2.865min。
实施例28.外消旋-5-[[2-氧代-2-[(1R,4R,5S)-4-苯基-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物86)、5-[[2-氧代-2-[(1R,4R,5S)-4-苯基-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺和5-[[2-氧代-2-[(1S,4S,5R)-4-苯基-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物205和化合物194)的合成
步骤1：外消旋-5-[[2-氧代-2-[(1R,4R,5S)-4-苯基-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物86)的合成
向外消旋-(1R,4R,5S)-4-苯基-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷(200.00mg，1.07mmol)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(Et3N盐，331.43mg，1.07mmol)和HATU(446.66mg，1.17mmol)于DMF(3mL)中的经搅拌悬浮液中添加三乙胺(540.31mg，5.34mmol，744.23μL)。将所得反应混合物在40℃下搅拌5小时。5小时之后，通过反相HPLC(流动相：水-MeOH+0.1％ NH3,0-5min，15-65％，流速：30mL/min；装载泵：4mL/min，MeOH+0.1％ NH3；柱：YMC-Actus Triart C18100*20mm，5um)纯化粗反应混合物，以得到呈白色固体的产物外消旋-5-[[2-氧代-2-[(1R,4R,5S)-4-苯基-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(150mg，396.38μmol，37.12％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值378.2；实测值379.2；Rt＝2.755min。
步骤2：5-[[2-氧代-2-[(1R,4R,5S)-4-苯基-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺和5-[[2-氧代-2-[(1S,4S,5R)-4-苯基-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物205和化合物194)的手性分离
使外消旋-5-[[2-氧代-2-[(1R,4R,5S)-4-苯基-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(100mg，264.25μmol)经历手性色谱(柱：YMC 250*20mm，5um，洗脱液：己烷-IPA-MeOH，40-30-30；流速：12mL/min)，以获得5-[[2-氧代-2-[(1R,4R,5S)-4-苯基-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(46mg，化合物205)和5-[[2-氧代-2-[(1S,4S,5R)-4-苯基-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(48mg，化合物194)。
化合物205：1H NMR(DMSO,600MHz):δ(ppm)1.24(m,2H),1.53(m,3H),1.78(m,1H),2.40(m,1H),2.61(m,1H),3.49(m,1H),3.85(m,1H),5.27(m,1H),7.12(m,4H),7.31(t,1H),7.55(m,1H),7.99(m,1H),8.23(m,1H),8.53(m,1H),8.82(m,1H),10.73(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值378.2；实测值379.0；Rt＝4.240min。手性HPLC：Rt＝16.26min(柱：IC；流动相：己烷-MeOH-IPA，40-30-30；流速：0.6mL/min)。
化合物194：1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.24(m,2H),1.53(m,3H),1.76(m,1H),2.36(m,1H),2.62(m,1H),3.49(m,1H),3.85(m,1H),5.27(m,1H),7.00(m,3H),7.28(m,2H),7.55(m,1H),7.99(m,1H),8.23(m,1H),8.53(m,1H),8.82(m,1H),10.74(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值378.2；实测值379.0；Rt＝4.237min。手性HPLC：Rt＝38.56min(柱：IC；流动相：己烷-MeOH-IPA，40-30-30；流速：0.6mL/min)。
实施例29.5-(2-(2-环戊基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-2-甲氧基烟酰胺(化合物289、化合物294)的合成
步骤1：5-(2-(2-环戊基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-2-甲氧基烟酰胺的合成
在21℃下，将2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(0.5g，1.47mmol，Et3N)、TATU(567.73mg，1.76mmol)和TEA(148.65mg，1.47mmol，204.75μL)混合于无水DMF(15mL)中且将所得混合物搅拌1h。向其中添加2-环戊基哌啶(225.14mg，1.47mmol)且将所得混合物在21℃下搅拌过夜。将所得混合物倒入到水中，用EtOAc萃取3次，将合并的有机物用水、盐水洗涤且蒸发。使残余物经历HPLC(40-90％0.5-5min；水-MeOH(+NH3)；30ml/min；装载泵4ml/min；柱xbridge 20*100mm)。获得呈黄色胶状物的5-[[2-(2-环戊基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(251.3mg，671.15μmol，45.69％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.61(m,15H),3.21(t,1H),3.56(t,1H),3.96(s,3H),4.22(d,1H),7.75(m,2H),8.46(m,1H),8.56(m,1H),10.89(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+1]m/z：计算值374.4；实测值375.2；Rt＝1.257min。
步骤2：手性分离(化合物289、化合物294)
在系统己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.6mL/min中在手性柱上进行纯化。注入次数：1，注入体积：1mkl。自251.3mg外消旋物获得112.88mg和109.48mg个别对映异构体。
化合物289：保留时间：22.02min 1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.03-1.26(m,2H),1.37-1.80(m,13H),2.78-3.19(m,1H),3.57(t,1H),3.95(s,3H),4.19-4.27(m,1H),7.74(s,2H),8.42-8.49(m,1H),8.50-8.58(m,1H),10.81-10.93(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+1]m/z：计算值374.2；实测值375.2；Rt＝3.305min。
化合物294：保留时间：30.45min 1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99-1.23(m,2H),1.31-1.80(m,13H),2.77-3.17(m,1H),3.56(t,1H),3.95(s,3H),4.16-4.27(m,1H),7.70-7.85(m,2H),8.43-8.48(m,1H),8.50-8.58(m,1H),10.80-10.93(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+1]m/z：计算值374.2；实测值375.2；Rt＝3.313min。
实施例30.5-(2-(3,5-二甲基-2-苯基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物183、化合物275、化合物311、化合物267、化合物286)的合成
步骤1：5-(2-(3,5-二甲基-2-苯基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物183)的合成
向2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(0.4g，1.29mmol，Et3N)、3,5-二甲基-2-苯基哌啶(268.38mg，1.42mmol)和HATU(539.08mg，1.42mmol)于DMF(4mL)中的悬浮液中添加TEA(652.11mg，6.44mmol，898.22μL)。将所得混合物在40℃下搅拌3h且使其经历HPLC：20-45％0-5min水-0.1％ FA-ACN流速30ml/min(装载泵4ml/min 0.1％ FA-ACN)；目标质量380.45柱：SunFire C18100x18mm 5um)，以得到5-[[2-(3,5-二甲基-2-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(120mg，315.42μmol，24.47％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.86(d,3H),0.96(d,3H),1.07(m,1H),1.91(m,1H),2.06(m,1H),2.16(m,1H),3.84(m,2H),4.52(m,1H),7.42(m,4H),7.62(m,1H),8.17(m,1H),8.42(m,1H),8.82(m,1H)。LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值380.4；实测值381.2；Rt＝4.616min。
步骤2：手性分离(化合物275、化合物311、化合物267和化合物286)
在系统Hex-IPA-MeOH，70-15-15，0.6mL/min中在手性柱上进行纯化。注入次数：1，注入体积：2mkl。由120mg外消旋物获得8.5mg，14mg，37mg和40mg个别对映异构体。
化合物275：保留时间：26.07min LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值380.4；实测值381.2；Rt＝4.834min。
化合物311：保留时间：38.08min 1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.83-0.87(m,3H),0.94-0.99(m,3H),1.85-1.95(m,1H),1.99-2.10(m,1H),2.09-2.25(m,1H),3.45-3.61(m,1H),3.79-3.92(m,1H),4.46-4.66(m,1H),7.11-7.43(m,6H),7.59(s,1H),8.12-8.29(m,1H),8.38-8.62(m,1H),8.67-8.88(m,2H),10.61-11.17(m,1H)。LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值380.4；实测值381.2；Rt＝4.838min。
化合物267：保留时间：32.12min 1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.64-0.76(m,3H),1.00-1.10(m,3H),1.35-1.43(m,1H),1.87-2.00(m,1H),2.11-2.24(m,1H),2.25-2.36(m,1H),3.37-3.96(m,2H),4.97-5.43(m,1H),7.25-7.29(m,1H),7.29-7.36(m,2H),7.36-7.48(m,2H),7.55-7.64(m,1H),8.10-8.20(m,1H),8.41-8.51(m,1H),8.71-8.77(m,1H),8.79-8.86(m,1H),10.89-11.23(m,1H)。LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值380.4；实测值381.2；Rt＝4.841min。
化合物286：保留时间：23.06min LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值380.4；实测值381.2；Rt＝4.840min。
实施例31.5-(2-(2-环己基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物101、化合物113、化合物108)的合成
步骤1：5-(2-(2-环己基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物101)的合成
将2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(507.49mg，1.39mmol)和2-环己基哌啶(246.67mg，958.59μmol)混合于DMF(10mL)中。将反应悬浮液冷却至0℃且添加HATU(728.97mg，1.92mmol)，随后添加TEA(582.00mg，5.75mmol，801.65μL)。将澄清溶液在环境温度下搅拌36h，然后在减压下蒸发挥发物，且使残余物(1.5g)经历RP-HPLC(柱：YMCActus Triart C18 100x20 mm，5um；40-70％，0-5min，以0.1％ NH3-甲醇为流动相)，以得到化合物101 5-[[2-(2-环己基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(68.5mg，191.11μmol，19.94％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)0.93(m,2H),1.17(m,3H),1.59(m,8H),1.77(m,4H),1.93(m,1H),2.89(m,1H),4.49(m,2H),6.13(m,1H),8.60(m,1H),8.79(s,1H),8.93(m,1H),9.68(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值358.4；实测值359.2；Rt＝3.222min。
步骤2：手性分离(化合物113、化合物108)
在系统Hex-IPA-MeOH，60-20-20，0.6mL/min中在手性柱上进行纯化。注入次数：1，注入体积：1mkl。自30mg外消旋物获得14.2mg和14.5mg个别对映异构体。
化合物113：保留时间：15.27min 1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.85(m,2H),1.20(m,4H),1.43(m,2H),1.64(m,7H),1.86(m,2H),3.00(m,1H),3.49(m,1H),4.18(m,1H),7.61(m,1H),8.17(m,1H),8.49(s,1H),8.77(s,1H),8.88(m,1H),11.06(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值358.2；实测值359.2；Rt＝4.677min。
化合物108：保留时间：11.84min 1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.84(m,2H),1.24(m,4H),1.68(m,11H),2.86(m,1H),3.51(m,1H),4.18(m,1H),7.61(m,1H),8.17(m,1H),8.49(s,1H),8.77(s,1H),8.88(m,1H),11.06(s,1H)。LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值358.2；实测值359.2；Rt＝4.676min。
实施例32.5-(2-(2-环己基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-2-甲氧基烟酰胺(化合物347、化合物317)的合成
步骤1：5-(2-(2-环己基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-2-甲氧基烟酰胺的合成
将2-环己基哌啶(0.25g，1.49mmol)、2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(508.66mg，1.49mmol，Et3N)和TEA(1.51g，14.94mmol，2.08mL)一起混合于DMF(5mL)中且向其中添加HATU(852.33mg，2.24mmol)。搅拌所得混合物18h。将反应混合物倒入水(20ml)中且将所得混合物用EtOAc(2*40ml)萃取。将合并的有机层用水(3*20ml)、盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且蒸发。通过HPLC(2-10min 60-85％ MeOH/H2O，30ml/min(装载泵4ml MeOH)，柱：SunFire 100*19mm，5微米)纯化残余物，以获得5-[[2-(2-环己基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(76.90mg，197.96μmol，13.25％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.86(m,2H),1.08(m,3H),1.23(m,2H),1.58(m,8H),1.86(m,2H),2.66(m,1H),3.57(m,1H),3.98(s,3H),4.22(m,1H),7.75(m,2H),8.53(m,2H),10.86(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值388.4；实测值389.2；Rt＝1.436min。
步骤2：手性分离(化合物347、化合物317)
在系统CO2-MeOH，50-50，2mL/min中在手性柱上进行纯化。注入次数：1，注入体积：1mkl。自76.9mg外消旋物获得28.47mg和27.6mg个别对映异构体。
化合物347：保留时间：6.93min 1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.83(m,2H),1.17(m,3H),1.41(m,1H),1.62(m,9H),1.84(m,2H),3.07(m,1H),3.56(m,1H),3.95(s,3H),4.19(m,1H),7.74(m,2H),8.46(s,1H),8.54(m,1H),10.85(s,1H)。LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值388.2；实测值389.2；Rt＝5.449min。
化合物317：保留时间：5.78min 1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.83(m,2H),1.14(m,3H),1.39(m,1H),1.65(m,9H),1.83(m,2H),2.85(m,1H),3.48(m,1H),3.93(s,3H),4.13(m,1H),7.73(m,2H),8.44(m,1H),8.51(m,1H),10.84(m,1H)。LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值388.2；实测值389.2；Rt＝5.454min。
实施例33.2-[(2R,5S)-2-(3-氨基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物91)和2-[(2S,5R)-2-(3-乙酰胺基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物110)的合成
步骤1：2-[(2R,5S)-2-(3-氨基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物91)的合成
将2-[(5-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(297.00mg，1.37mmol，HCl)溶解于DMF(5mL)中，随后添加DIPEA(1.07g，8.24mmol，1.44mL)和HATU(626.82mg，1.65mmol)。将所得混合物搅拌10min(观察到颜色变化)且一次性添加3-(5-甲基-2-哌啶基)苯胺(0.5g，1.65mmol，TFA)。将反应混合物搅拌过夜。蒸发溶剂通过HPLC(27％0.5-6.5min；水-乙腈；流速30mL/min；(装载泵4mL/min乙腈)；目标质量352；柱SunFire 100*19mm 5um)纯化，得到2-[(2R,5S)-2-(3-氨基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(0.035g，99.31μmol，6.02％产率)。通过2D NMR确认反式构型。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.99(m,3H),1.30(m,1H),1.69(m,1H),1.81(m,1H),1.95(m,1H),2.08(m,1H),2.25(m,3H),3.22(m,1H),3.42(m,1H),5.17(m,3H),6.44(m,3H),6.98(m,1H),7.89(m,1H),8.14(m,1H),8.60(m,1H),10.99(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值352.2；实测值353.2；Rt＝2.214min。
步骤2：2-[(2S,5R)-2-(3-乙酰胺基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物110)的合成
将2-[(2S,5R)-2-(3-氨基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(15.00mg，42.56μmol)溶解于DCM中且添加TEA(4.31mg，42.56μmol，5.93μL)。将所得混合物冷却至0℃且逐滴添加乙酰氯(3.34mg，42.56μmol，2.59μL)。将反应混合物搅拌2h。然后，在减压下移除溶剂。使用HPLC(40-90％0.5-6.5min；水-MeOH；流速30mL/min；(装载泵4mL/min MeOH)；目标质量394；柱SunFire100*19mm 5um)纯化所获得的残余物，以得到2-[(2S,5R)-2-(3-乙酰胺基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(13mg，32.96μmol，77.43％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)1.03(dd,3H),1.34(m,1H),1.71(m,1H),1.91(m,1H),2.03(m,3H),2.12(m,2H),2.28(d,3H),3.05(m,1H),3.77(m,1H),5.36(m,1H),7.00(dd,1H),7.31(m,1H),7.49(m,1H),7.57(d,1H),7.92(m,1H),8.17(m,1H),8.60(m,1H),9.95(m,1H),10.98(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值394.2；实测值395.2；Rt＝2.671min。
实施例34.5-[[2-[(2R)-2-[3-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物316)和5-[[2-[(2S)-2-[3-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物334)的合成
将N-甲基-3-(2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯胺(1.2g，6.37mmol)和N-甲基-3-(2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯胺(1.2g，6.37mmol)溶解于MeOH(20mL)和H2O(20mL)中。将所得混合物冷却至25℃且一次性添加硼氢化钠(482.28mg，12.75mmol，450.73μL)。然后，将反应混合物再搅拌过夜。反应完成之后，将混合物用10％ HCl水溶液酸化至pH 2。将所获得的混合物用MTBE(2*10mL)洗涤，用10％ NaOH水溶液碱化至pH 10且用DCM(50mL)萃取。蒸发溶剂，得到纯的N-甲基-3-(2-哌啶基)苯胺(0.9g，4.73mmol，74.21％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.74(m,8H),2.82(m,4H),3.12(m,1H),3.51(m,1H),6.47(d,1H),6.65(s,1H),6.68(d,1H),7.11(dd,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值190.1；实测值191.2；Rt＝0.539min。
步骤1：5-[[2-[2-[3-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
将DIPEA(368.33mg，2.85mmol，496.41μL)添加到相应2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(0.2g，814.27μmol，HCl)和N-甲基-3-(2-哌啶基)苯胺(154.94mg，814.27μmol)于DMF(10mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU(340.57mg，895.69μmol)于DMF(2mL)中的溶液。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。将所获得的固体经历HPLC(2-10min 0-85％ MeOH-H2O；流速30mL/min；装载泵4mL MeOH；SunFire 100*19mm,5mkm柱)，以得到纯的5-[[2-[2-[3-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.15g，393.26μmol，48.30％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.55(m,4H),1.87(m,1H),2.47(m,1H),2.81(m,3H),3.12(m,1H),3.52(s,3H),4.52(m,1H),6.15(m,2H),6.62(m,2H),7.20(m,1H),8.52(m,1H),8.78(s,1H),9.02(m,1H),10.05(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值381.2；实测值382.2；Rt＝2.061min。
步骤2：5-[[2-[(2R)-2-[3-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物316)和5-[[2-[(2S)-2-[3-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物334)的合成
使用IB(250*20，5mkm)(Chiralpak柱；以己烷-MeOH-IPA，60-20-20为流动相；流速12mL/min)进行5-[[2-[2-[3-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的手性分离，得到化合物316 5-[[2-[(2R)-2-[3-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(61.9mg，41.27％产率；RT＝11.456min)和化合物334 5-[[2-[(2S)-2-[3-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(58.4mg，38.93％产率；RT＝15.476min)。
化合物316：
RT(IB，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝16.409min。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.60(m,1H),1.90(m,2H),2.42(m,1H),2.63(m,1H),2.80(m,3H),3.03(m,2H),4.48(m,1H),5.98(m,2H),6.42(m,1H),6.55(m,2H),6.63(m,1H),7.18(t,1H),8.57(m,1H),8.78(m,1H),8.96(m,1H),9.88(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值381.2；实测值382.2；Rt＝3.376min。
化合物334：
RT(IB，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝11.846min。
1H NMR(400MHz,cdcl3)δ1.55(m,1H),1.96(m,2H),2.43(m,1H),2.61(m,1H),2.80(s,3H),2.95(m,2H),4.49(m,1H),5.97(m,2H),6.42(m,1H),6.55(m,2H),6.63(m,1H),7.18(t,1H),8.57(m,1H),8.78(m,1H),8.97(m,1H),9.91(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值381.2；实测值382.2；Rt＝3.375min。
实施例35.5-[[2-[(2R)-2-[3-(二甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物366)和5-[[2-[(2S)-2-[3-(二甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物365)的合成
步骤1：5-[[2-[2-[3-(二甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
将DIPEA(336.76mg，2.61mmol，453.86μL)添加到相应2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(0.16g，651.41μmol，HCl)和N,N-二甲基-3-(2-哌啶基)苯胺(133.09mg，651.41μmol)于DMF(5mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU(272.46mg，716.56μmol)于DMF(2mL)中的溶液。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC(2-10min，35-60％H2O-MeCN；装载泵4mL MeCN；Triart C18 100*20 5mkm柱)，以得到纯的5-[[2-[2-[3-(二甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.12g，303.45μmol，46.58％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.42(m,3H),1.96(m,2H),2.40(m,1H),2.92(s,6H),3.18(m,1H),3.47(s,2H),4.49(m,1H),6.08(m,2H),6.72(m,3H),8.54(d,1H),8.81(s,1H),9.01(m,1H),9.87(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值395.2；实测值396.2；Rt＝0.993min。
步骤2：5-[[2-[(2R)-2-[3-(二甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物366)和5-[[2-[(2S)-2-[3-(二甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物365)的合成
使用OJ-H(250*30，20mkm)(Chiralpak柱；以CO2-MeOH，60-40为流动相；流速80mL/min)进行5-[[2-[2-[3-(二甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的手性分离，得到化合物3665-[[2-[(2R)-2-[3-(二甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(40.3mg，33.58％产率；RT＝10.140min)和化合物3655-[[2-[(2S)-2-[3-(二甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(41.1mg，34.25％产率；RT＝4.335min)。
化合物366：RT(OJ-H，CO2-MeOH，60-40，2.0mL/min)＝7.26min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.40-1.56(m,2H),1.57-1.68(m,2H),1.76-1.94(m,1H),2.41-2.44(m,1H),2.61-2.67(m,0H),2.84-2.88(m,6H),3.03-3.10(m,1H),3.63-4.29(m,1H),5.08-5.63(m,1H),6.59-6.64(m,3H),7.15-7.21(m,1H),7.53-7.65(m,1H),8.09-8.20(m,1H),8.44-8.54(m,1H),8.72-8.79(m,1H),8.80-8.90(m,1H),11.23-11.39(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值395.2；实测值396.2；Rt＝0.932min。
化合物365：RT(OJ-H，CO2-MeOH，60-40，2.0mL/min)＝4.07min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.37-1.54(m,2H),1.56-1.68(m,2H),1.77-1.94(m,1H),2.41-2.44(m,1H),2.59-2.67(m,0.3H),2.84-2.89(m,6H),3.02-3.12(m,0.7H),3.64-4.33(m,1H),5.07-5.64(m,1H),6.58-6.67(m,3H),7.15-7.22(m,1H),7.53-7.66(m,1H),8.11-8.23(m,1H),8.43-8.54(m,1H),8.70-8.79(m,1H),8.80-8.91(m,1H),11.22-11.35(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值395.2；实测值396.2；Rt＝0.931min。
实施例36.5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物321)和5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[3-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物348)的合成
步骤1：5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
将DIPEA(331.50mg，2.56mmol，446.77μL)添加到相应2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(0.18g，732.84μmol，HCl)和N-甲基-3-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]苯胺(149.73mg，732.84μmol)于DMF(10mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU(306.51mg，806.12μmol)于DMF(2mL)中的溶液。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC(2-10min，以0-85％ MeCN-H2O为流动相，流速30mL/min；装载泵4mL MeCN；SunFireC18 19*100mm 5mkm柱)，以得到纯的5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.17g，429.89μmol，58.66％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.08(m,3H),1.37(m,1H),1.94(m,3H),2.21(m,2H),2.77(s,3H),3.41(m,1H),3.49(m,1H),4.34(m,1H),6.28(m,3H),7.22(m,1H),8.58(m,1H),8.72(s,1H),8.99(m,1H),9.89(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值395.2；实测值396.2；Rt＝2.354min。
步骤2：5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物321)和5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[3-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物348)的合成
使用IC(250*20，5mkm)柱(以CO2-MeOH，55-45为流动相；流速40mL/min)进行5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的手性分离，得到化合物3215-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(65.2mg，38.35％产率；RT＝16.522min)和化合物348 5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[3-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(59.8mg，35.18％产率；RT＝10.591min)。
化合物321：RT(IC，CO2-MeOH，50-50，2.0mL/min)＝7.03min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.01(m,3H),1.32(m,1H),1.70(m,1H),1.87(m,1H),2.06(m,2H),2.63(m,3H),2.83(m,1H),3.73(m,1H),5.28(m,1H),5.59(m,1H),6.40(m,1H),6.48(m,2H),7.07(m,1H),7.59(m,1H),8.15(m,1H),8.47(m,1H),8.75(m,1H),8.87(m,1H),11.19(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值395.2；实测值396.2；Rt＝3.582min。
化合物348RT(IC，CO2-MeOH，50-50，2.0mL/min)＝5.40min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.01(m,3H),1.32(m,1H),1.70(m,1H),1.87(m,1H),2.06(m,2H),2.63(m,3H),2.83(m,1H),3.73(m,1H),5.29(m,1H),5.62(m,1H),6.40(m,1H),6.49(m,2H),7.07(m,1H),7.59(m,1H),8.15(m,1H),8.48(m,1H),8.75(m,1H),8.88(m,1H),11.19(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值395.2；实测值396.2；Rt＝3.575min。
实施例37.5-[[2-[(2R,5S)-2-[3-(二甲基氨基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物374)和5-[[2-[(2S,5R)-2-[3-(二甲基氨基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物375)的合成
步骤1：5-[[2-[(2R,5S)-2-[3-(二甲基氨基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
将DIPEA(315.72mg，2.44mmol，425.49μL)添加到相应2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(0.15g，610.70μmol，HCl)和N,N-二甲基-3-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]苯胺(133.34mg，610.70μmol)于DMF(5mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU(255.43mg，671.77μmol)于DMF(2mL)中的溶液。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC(2-10min 85-100％ H2O-MeOH-NH3为流动相；装载泵4mL MeOH；Triart C18 100*20mm5mkm柱)，以得到纯的5-[[2-[(2R,5S)-2-[3-(二甲基氨基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.1g，244.21μmol，39.99％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.04(m,2H),1.41(m,1H),1.82(m,2H),2.21(m,2H),2.84(m,6H),3.14(m,1H),3.71(m,2H),4.32(m,1H),5.87(m,1H),6.37(m,1H),6.68(m,3H),7.21(m,1H),8.03(m,1H),8.82(m,2H),10.12(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值409.2；实测值410.2；Rt＝2.354min。
步骤2：5-[[2-[(2R,5S)-2-[3-(二甲基氨基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物374)和5-[[2-[(2S,5R)-2-[3-(二甲基氨基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物375)的合成
使用AD-H-II(250*20，5mkm)柱(以己烷(0.001％EDA)-IPA-MeOH，60-20-20为流动相；流速12mL/min)进行5-[[2-[(2R,5S)-2-[3-(二甲基氨基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的手性分离，得到化合物3745-[[2-[(2R,5S)-2-[3-(二甲基氨基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(42.8mg，42.8％产率；RT＝14.388min)和化合物375 5-[[2-[(2S,5R)-2-[3-(二甲基氨基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(47.2mg，47.20％产率；RT＝19.902min)。
化合物374：RT(AD-H，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.6mL/min)＝14.74min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.96-1.06(m,3H),1.26-1.40(m,1H),1.66-1.80(m,1H),1.83-1.95(m,1H),1.98-2.13(m,1H),2.15-2.25(m,1H),2.78-3.06(m,7H),3.41-4.05(m,1H),5.06-5.57(m,1H),6.52-6.66(m,3H),7.12-7.22(m,1H),7.52-7.67(m,1H),8.09-8.22(m,1H),8.44-8.54(m,1H),8.70-8.80(m,1H),8.81-8.92(m,1H),11.06-11.35(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值409.2；实测值410.2；Rt＝3.721min。
化合物375：RT(AD-H，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.6mL/min)＝21.07min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.99-1.05(m,3H),1.20-1.39(m,2H),1.65-1.78(m,1H),1.81-1.95(m,1H),1.98-2.14(m,1H),2.15-2.26(m,1H),2.83-2.88(m,6H),3.43-4.04(m,1H),5.04-5.60(m,1H),6.58-6.66(m,3H),7.09-7.21(m,1H),7.51-7.69(m,1H),8.10-8.21(m,1H),8.42-8.53(m,1H),8.69-8.80(m,1H),8.80-8.92(m,1H),10.92-11.59(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值409.2；实测值410.2；Rt＝3.718min。
实施例38.5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物300)和5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物302)的合成
步骤1.5-[[2-[2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
在21℃下，将2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(0.5g，2.04mmol，HCl)、HATU(837.98mg，2.44mmol)和三乙胺(617.97mg，6.11mmol，851.20μL)混合于无水DMF(25mL)中且将所得混合物搅拌12h。向其中添加2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶(393.41mg，2.04mmol)且将所得混合物在21℃下搅拌过夜。将所得混合物倒入到水中，用EtOAc萃取3次，将合并的有机物用水、盐水洗涤且蒸发。使残余物经历HPLC(0-5min 20-70％水-甲醇(NH3 0.1％)，流速30ml/min(装载泵4ml/min甲醇(NH3 0.1％))，柱：YMC-Actus TriartC18100*20mml.D.S-5um)。获得呈灰白色固体的5-[[2-[2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(151.4mg，393.86μmol，19.35％产率)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值384.4；实测值385.2；Rt＝3.156min。
步骤2.5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物300)和5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物302)的合成
在以下条件下将外消旋物分离成对映异构体：AD-H I(250*20，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，70-15-15，12ml/min，以得到5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(50.04mg，130.18μmol，33.05％产率)化合物300(其中RT＝31.416min)和5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(53.89mg，140.19μmol，35.59％产率)化合物302(其中RT＝23.788min)。将样品于水-乙腈溶液中冷冻干燥，以得到白色粉末。
化合物300
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ1.00-1.07(m,3H),1.29-1.42(m,1H),1.62-1.74(m,1H),1.84-1.98(m,1H),2.03-2.15(m,1H),2.17-2.29(m,1H),2.76-3.25(m,1H),3.45-4.09(m,1H),5.12-5.62(m,1H),7.16-7.30(m,2H),7.34-7.49(m,2H),7.57-7.66(m,1H),8.10-8.24(m,1H),8.42-8.57(m,1H),8.74-8.84(m,1H),8.84-8.99(m,1H),11.17-11.34(m,1H)。
5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(50.04mg，130.18μmol，33.05％产率)的RT＝34.379min(AD-H，己烷-IPA-MeOH，70-15-15，0.6ml/min)
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值384.2；实测值385.4；Rt＝3.034min。
化合物302
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ1.01-1.06(m,3H),1.29-1.44(m,1H),1.61-1.76(m,1H),1.81-1.97(m,1H),2.05-2.28(m,2H),2.77-3.25(m,1H),3.47-4.06(m,1H),5.08-5.66(m,1H),7.15-7.30(m,2H),7.32-7.47(m,2H),7.56-7.69(m,1H),8.11-8.22(m,1H),8.44-8.55(m,1H),8.72-8.82(m,1H),8.84-9.01(m,1H),11.10-11.38(m,1H)。
5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(53.89mg，140.19μmol，35.59％产率)的RT＝26.492min(AD-H，己烷-IPA-MeOH，70-15-15，0.6ml/min)
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值384.2；实测值385.4；Rt＝3.04min。
实施例39.5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(化合物446)和5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(化合物445)的合成
步骤1.5-[[2-[2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺的合成
在21℃下，将2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(0.3，881.38μmol，Et3N)、HATU(335.13mg，881.38μmol)和三乙胺(89.19mg，881.38μmol，122.85μL)混合于无水DMF(5mL)中且将所得混合物搅拌15min。向其中添加2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶(170.34mg，881.38μmol)且将所得混合物在21℃下搅拌过夜。将所得混合物倒入到水中，用EtOAc萃取3次，将合并的有机物用水、盐水洗涤且蒸发。使残余物经历HPLC(2-7min；水-r1(+NH3)；30ml/min；装载泵4ml/min R1+NH3；柱YMC-ACTUS TRIAT 20*100mm)。获得呈白色固体的5-[[2-[2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(129.1mg，311.51μmol，35.34％产率)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值414.2；实测值415.2；Rt＝1.195min。
步骤2.5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(化合物446)和5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(化合物445)的分离
在以下条件下进行手性分离：IA(250*20mm，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，13ml/min，RT化合物445＝34.429min，RT化合物446＝26.540min。
5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(48.42mg，116.84μmol，40.35％产率)的RT＝14.6942min(IA，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.15ml/min)
5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(43.64mg，105.30μmol，36.37％产率)的RT＝18.7292min(IA，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.15ml/min)
化合物445：1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.01(m,3H),1.33(m,1H),1.64(t,1H),1.88(m,1H),2.13(m,2H),2.97(m,1H),3.93(m,4H),5.34(m,1H),7.20(m,2H),7.34(m,2H),7.72(dd,2H),8.43(m,1H),8.52(m,1H),11.01(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值414.2；实测值415.2；Rt＝3.291min。
化合物446：1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.01(m,3H),1.33(m,1H),1.64(t,1H),1.88(m,1H),2.13(m,2H),2.97(m,1H),3.93(m,4H),5.34(m,1H),7.20(m,2H),7.34(m,2H),7.72(dd,2H),8.43(m,1H),8.52(m,1H),11.01(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值414.2；实测值415.2；Rt＝3.291min。
实施例40.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-(2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物710)的合成
在21℃下，将2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(234.90mg，1.12mmol)和TEA(340.86mg，3.37mmol，469.50μL)混合于无水DMF(5mL)中且将所得混合物搅拌15min。向其中添加HATU(426.94mg，1.12mmol)且将所得混合物在21℃下搅拌过夜。将所得混合物倒入到水中，用EtOAc萃取3次，将合并的有机物用水、盐水洗涤且蒸发。使残余物经历HPLC(50-90％0.5-6.5min；水-MeOH+NH3；流速30ml/min(装载泵4ml/min MeOH-NH3)；柱：YMS-actus triat100x19mm 5um(R))。获得N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(185.6mg，482.77μmol，43.00％产率)的两种级分：第1级分-24.7mg(通过LCMS测得96.16％，无顺式杂质)；第2级分-160.9mg(92.1％反式；7.9％顺式杂质)；ee-94-95％。
化合物710：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98(d,3H),1.07(m,3H),1.28(m,1H),1.65(m,1H),1.88(m,1H),2.01(m,1H),2.14(m,1H),2.39(m,2H),3.02(m,1H),3.98(m,1H),5.12(m,1H),5.63(m,2H),7.20(m,2H),7.32(m,2H),7.48(m,1H),8.04(m,1H),10.50(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值384.2；实测值385.2；Rt＝1.724min。
实施例41.5-(2-((2S,5R)-2-(4-氨基苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物398)和5-(2-((2R,5S)-2-(4-氨基苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物381)的合成
步骤1：5-[[2-[2-(4-氨基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
将DIPEA(644.58mg，4.99mmol，868.71μL)添加到2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(0.35g，1.42mmol，HCl)和4-(5-甲基-2-哌啶基)苯胺(271.15mg，1.42mmol)于DMF(10mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU(596.00mg，1.57mmol)于DMF(5mL)中的溶液。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC(SnFire C18100*18mm，5mkm柱；2-10min 30-55％ MeCN-H2O为流动相；流速30mL/min(装载泵4mL，MeCN))，以得到纯的5-[[2-[2-(4-氨基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.13g，340.83μmol，23.92％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.05(m,2H),1.31(m,1H),1.85(m,2H),3.09(d,3H),3.23(m,1H),3.34(m,1H),4.05(m,2H),5.21(m,2H),6.61(m,2H),7.82(m,2H),7.71(m,1H),8.36(m,1H),8.49(m,1H),8.77(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值381.1；实测值382.2；Rt＝2.033min。
步骤2：5-[[2-[2-(4-氨基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的手性拆分
使用OJ-H(250*20，5mkm)(Chiralpak柱；以己烷-MeOH-IPA，50-25-25为流动相；流速15mL/min；注入体积900mkL)进行手性分离，以得到呈黄色油状物的化合物398 5-(2-((2S,5R)-2-(4-氨基苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(8.9mg，6.85％产率)和呈黄色油状物的化合物381 5-(2-((2R,5S)-2-(4-氨基苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(60.1mg，46.23％产率)。
化合物398：RT(IB(250*20,5mkm)柱；己烷-MeOH-IPA，50-25-25，15mL/min)＝26.42min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.97-1.04(m,3H),1.25-1.36(m,1H),1.66-1.78(m,1H),1.79-1.90(m,1H),1.91-2.07(m,1H),2.08-2.17(m,1H),2.74-3.16(m,1H),3.38-3.99(m,1H),4.93-5.58(m,3H),6.51-6.60(m,2H),6.92-7.03(m,2H),7.54-7.64(m,1H),8.09-8.22(m,1H),8.41-8.50(m,1H),8.71-8.79(m,1H),8.80-8.90(m,1H),11.05-11.38(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值381.1；实测值382.0；Rt＝3.265min。
化合物381：RT(IB(250*20,5mkm)柱；己烷-MeOH-IPA，50-25-25，15mL/min)＝14.61min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.97-1.02(m,3H),1.25-1.35(m,1H),1.66-1.78(m,1H),1.79-1.90(m,1H),1.92-2.05(m,1H),2.09-2.17(m,1H),2.73-3.19(m,1H),3.36-3.97(m,1H),4.87-5.55(m,3H),6.48-6.62(m,2H),6.90-7.04(m,2H),7.51-7.68(m,1H),8.07-8.22(m,1H),8.42-8.52(m,1H),8.70-8.80(m,1H),8.82-8.94(m,1H),11.05-11.34(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值381.1；实测值382.0；Rt＝3.265min。
实施例42.5-(2-((2R,5S)-2-(4-乙酰胺基苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物451)和5-(2-((2S,5R)-2-(4-乙酰胺基苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物452)的合成
步骤1与以上相同
步骤2：5-(2-(2-(4-乙酰胺基苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺的合成
向5-(2-(2-(4-氨基苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(0.15g，393.26μmol)于THF(10mL)中的预冷却溶液中添加吡啶(77.77mg，983.15μmol，79.52μL)。将所得混合物搅拌5min，随后在0℃下逐滴添加乙酰氯(33.96mg，432.59μmol，26.32μL)。然后，将反应混合物在室温下搅拌10h。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC(2-10min，以40-60％水/MeCN+NH3为流动相；装载泵4mL MeCN+NH3；TRIART 100*20 5微米柱；注入体积：1500.0mL)，以得到纯的5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-乙酰胺基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(76.3mg，180.18μmol，45.82％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值423.2；实测值424.2；Rt＝0.939min。
步骤3：5-(2-(2-(4-乙酰胺基苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺的手性分离
使用IB(250*20，5mkm)Chiralpak柱；以己烷-MeOH-IPA,50-25-25为流动相；流速12mL/min来进行手性分离，以得到化合物451 5-(2-((2R,5S)-2-(4-乙酰胺基苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(25.37mg；33.25％产率)和化合物452 5-(2-((2S,5R)-2-(4-乙酰胺基苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(25.56mg；33.50％产率)。
化合物451：RT(IB柱，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝10.74min
1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)1.04(m,3H),1.35(m,1H),1.74(m,1H),2.03(m,3H),2.22(m,1H),2.64(s,2H),3.08(m,1H),3.74(m,1H),5.40(m,1H),7.27(m,2H),7.60(m,3H),8.17(m,1H),8.50(m,1H),8.78(m,1H),8.89(m,1H),9.95(m,1H),11.21(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值423.2；实测值424.0；Rt＝2.447min。
化合物452：RT(IB柱，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝24.15min
1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)1.04(m,3H),1.36(m,1H),1.69(m,1H),1.89(m,1H),2.03(m,4H),2.19(m,1H),2.93(m,1H),3.66(m,1H),5.35(m,1H),7.27(dd,2H),7.58(m,3H),8.17(m,1H),8.49(m,1H),8.78(m,1H),8.90(m,1H),9.95(m,1H),11.21(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值423.2；实测值424.0；Rt＝2.446min。
实施例43.5-[[2-[(2R,5S)-2-[4-(甲磺酰胺基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物469)和5-[[2-[(2S,5R)-2-[4-(甲磺酰胺基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物462)的合成
步骤1与以上相同
步骤2：5-[[2-[(2R,5S)-2-[4-(甲磺酰胺基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
向5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-氨基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.26g，681.65μmol)于THF(5mL)中的预冷却溶液中添加吡啶(134.80mg，1.70mmol，137.83μL)。此后，在0℃下逐滴添加甲磺酰氯(85.89mg，749.82μmol，58.04μL)。然后，将反应混合物在室温下搅拌12h。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC(2-10min，以40-60％水/MeOH+NH3为流动相；装载泵4ml MeOH+NH3；TRIART 100*20 5微米柱)，以得到纯的5-[[2-[(2R,5S)-2-[4-(甲磺酰胺基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.19g，413.48μmol，60.66％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值459.2；实测值460.2；Rt＝2.760min。
步骤3：5-[[2-[(2R,5S)-2-[4-(甲磺酰胺基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物469)和5-[[2-[(2S,5R)-2-[4-(甲磺酰胺基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物462)的合成
使用AS-H(250*20，10mkm)柱；以CO2-MeOH，60-40为流动相；流速40mL/min进行5-[[2-[(2R,5S)-2-[4-(甲磺酰胺基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的手性分离，得到呈淡黄色油状物的化合物469 5-[[2-[(2R,5S)-2-[4-(甲磺酰胺基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(73.14mg，38.49％产率；RT(AS-H，CO2-MeOH，15mL/min)＝8.44min)和呈淡黄色油状物的化合物462 5-[[2-[(2S,5R)-2-[4-(甲磺酰胺基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(76.84min；40.44％产率；RT(AS-H,CO2-MeOH，15mL/min)＝6.62min)。
化合物469：RT(AS-H，CO2-MeOH，60-40，2.0mL/min)＝5.22min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.97-1.05(m,3H),1.28-1.39(m,1H),1.63-1.74(m,1H),1.80-1.94(m,1H),2.00-2.13(m,1H),2.13-2.23(m,1H),2.72-3.28(m,4H),3.41-4.04(m,1H),5.05-5.68(m,1H),7.14-7.24(m,2H),7.24-7.32(m,2H),7.52-7.65(m,1H),8.10-8.21(m,1H),8.41-8.53(m,1H),8.72-8.80(m,1H),8.82-8.93(m,1H),9.71(s,1H),11.11-11.37(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+3H]+m/z：计算值459.2；实测值462.2；Rt＝4.067min。
化合物462：RT(AS-H，CO2-MeOH，60-40，2.0mL/min)＝3.77min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.97-1.05(m,3H),1.27-1.39(m,1H),1.62-1.72(m,1H),1.81-1.94(m,1H),2.01-2.13(m,1H),2.14-2.23(m,1H),2.76-3.21(m,4H),3.43-4.03(m,1H),5.07-5.57(m,1H),7.17-7.24(m,2H),7.24-7.32(m,2H),7.54-7.63(m,1H),8.11-8.19(m,1H),8.41-8.51(m,1H),8.71-8.79(m,1H),8.83-8.92(m,1H),9.71(s,1H),11.09-11.28(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+3H]+m/z：计算值459.2；实测值462.2；Rt＝4.067min。
实施例44.2-[(2R,5S)-2-(4-氨基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物67)和2-[(2R,5S)-2-(4-乙酰胺基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物111)的合成
步骤1：2-[(2R,5S)-2-(4-氨基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物67)的合成
将2-[(5-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(446.39mg，1.65mmol，HCl)溶解于DMF(5mL)中。将所得混合物搅拌5min，随后添加DIPEA(1.07g，8.24mmol，1.44mL)和HATU(626.82mg，1.65mmol)。搅拌10min(观察到颜色变化)之后，一次性添加4-(5-甲基-2-哌啶基)苯胺(0.5g，1.65mmol，TFA)且将反应混合物搅拌过夜。蒸发溶剂且通过HPLC(27％0.5-6.5min；水-乙腈；流速30mL/min；(装载泵4mL/min乙腈)；柱SunFire 100*19mm 5um)纯化，得到2-[(2R,5S)-2-(4-氨基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(0.017g，48.24μmol，2.93％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.98(m,3H),1.26(m,1H),1.70(m,1H),1.81(m,1H),1.92(m,1H),2.09(m,1H),2.25(m,3H),3.02(m,1H),3.35(m,1H),5.23(m,3H),6.53(m,2H),6.94(m,2H),7.88(m,1H),8.14(m,1H),8.59(m,1H),10.95(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值352.2；实测值353.2；Rt＝2.420min。
步骤2：2-[(2R,5S)-2-(4-乙酰胺基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物111)的合成
将2-[(2R,5S)-2-(4-氨基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(10.00mg，25.54μmol)溶解于DCM(1mL)中。将所得混合物搅拌5min，随后添加TEA(2.58mg，25.54μmol，3.56μL)和乙酰氯(2.00mg，25.54μmol，1.55μL)。蒸发溶剂且使用HPLC(50％0.5-6.5min；水-MeOH；流速30mL/min；装载泵4mL/min MeOH；柱SunFire 100*19mm5um)纯化，以得到2-[(2R,5S)-2-(4-乙酰胺基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(0.005g，12.68μmol，49.64％产率)。
1H NMR(氯仿-d,600MHz):δ(ppm)0.92(m,3H),1.17(m,1H),1.68(m,4H),1.83(m,5H),1.97(m,3H),2.67(m,1H),3.75(m,1H),5.06(m,1H),6.04(m,2H),6.26(m,2H),6.72(m,1H),6.87(m,1H),7.11(m,1H),7.83(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值394.2；实测值395.4；Rt＝2.464min。
实施例45.5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物424)和5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物438)的合成
步骤1：5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
将2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(223.89mg，721.42μmol，N(C2H5)3)、N-甲基-4-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]苯胺(0.2g，721.42μmol，2HCl)、HATU(301.73mg，793.56μmol)和DIPEA(279.71mg，2.16mmol，376.96μL)一起混合于DMSO(4mL)中。将所得混合物在室温下搅拌16h。然后，使所获得的于DMSO中的溶液经历HPLC(2-10min35-100％ MeOH/H2O为流动相；30mL/min；装载泵4mL MeOH；SunFire 100*19mm，5微米柱)，以得到5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.086g，217.47μmol，30.15％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值395.2；实测值396.2；Rt＝2.233min。
步骤2：5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物424)和5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物438)的合成
使用Chiralpak AD-HIII(250*20mm，5mkm)柱；以己烷-IPA-MeOH，50-25-25为流动相；流速：12mL/min；(m＝0.085g，3次注入，Vph＝3L，4.5h)进行5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的手性分离，得到呈淡黄色固体的化合物424 5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(17.7mg，20.58％产率；RT＝22.230min)和呈淡黄色固体的化合物438 5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(22.1mg，25.70％产率，RT＝54.618min)。
化合物438：RT(AD-H，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min＝59.935min
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ0.90-1.16(m,3H),1.28-1.38(m,1H),1.68-1.93(m,2H),1.93-2.11(m,1H),2.12-2.22(m,1H),2.63-2.75(m,3H),2.77-3.25(m,1H),3.36-4.02(m,1H),5.00-5.59(m,1H),5.59-5.65(m,1H),6.46-6.66(m,2H),6.97-7.13(m,2H),7.51-7.73(m,1H),8.11-8.27(m,1H),8.41-8.58(m,1H),8.69-8.85(m,1H),8.85-8.97(m,1H),11.10-11.30(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值395.2；实测值396.2；Rt＝1.975min。
化合物424：RT(AD-H，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min＝20.107min
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ0.95-1.14(m,3H),1.26-1.40(m,1H),1.65-1.94(m,2H),1.94-2.11(m,1H),2.13-2.24(m,1H),2.64-2.69(m,3H),2.74-3.27(m,1H),3.36-4.01(m,1H),4.98-5.58(m,1H),5.58-5.67(m,1H),6.44-6.67(m,2H),6.99-7.14(m,2H),7.52-7.70(m,1H),8.08-8.27(m,1H),8.40-8.56(m,1H),8.69-8.84(m,1H),8.84-8.98(m,1H),11.12-11.31(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值395.2；实测值396.2；Rt＝1.976min。
实施例46.N-(5,6-二甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[4-(甲磺酰胺基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物630)和N-(5,6-二甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[4-(甲磺酰胺基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物621)的合成
步骤1：N-(5,6-二甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[4-(甲磺酰胺基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
在25℃下，在0.5h内，向4-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]苯胺(250mg，1.31mmol)、2-[(5,6-二甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(388.07mg，1.31mmol，N(C2H5)3)和三乙胺(1.33g，13.14mmol，1.83mL)于DMF(5mL)中的搅拌溶液中小批量添加HATU(549.51mg，1.45mmol)。将所得反应混合物在25℃下搅拌18h。将反应混合物样品提交用于LCMS分析。LCMS指示在RT＝0.862min处26.88％的所需产物质量曲线下面积。然后，逐滴添加甲磺酰氯(180.60mg，1.58mmol，122.03μL)，且将反应混合物在25℃下再搅拌3h。通过反相HPLC(柱：YMC Triart C18 100*20mm，5um，流动相：40-90％1-6min水-甲醇(NH3 0.1％)，流速：30mL/min，装载泵4mL/min甲醇(NH30.1％))纯化粗反应混合物，以得到呈黄色胶状物的N-(5,6-二甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[4-(甲磺酰胺基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(65mg，146.22μmol，11.13％产率)，其直接用于下一步骤(手性分离)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值444.2；实测值445.2；Rt＝2.092min。
步骤2：N-(5,6-二甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[4-(甲磺酰胺基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物630)和N-(5,6-二甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[4-(甲磺酰胺基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物621)的合成
将外消旋N-(5,6-二甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[4-(甲磺酰胺基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(65mg，146.22μmol)提交至制备型手性HPLC(柱：ChiralpakIA-II(250*20mm，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH 50-25-25；流速：12mL/min)，以得到呈白色固体的化合物630N-(5,6-二甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[4-(甲磺酰胺基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(21.2mg，47.69μmol，32.62％产率)(RT＝31.713min)和化合物621N-(5,6-二甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[4-(甲磺酰胺基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(21.7mg，48.81μmol，33.38％产率)(RT＝46.866min)。
化合物630：RT(IA，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝33.389min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.98(m,3H),1.23(m,1H),1.54(m,1H),1.69(m,1H),2.12(s,3H),2.24(s,3H),2.87(m,6H),3.21(dd,1H),3.41(dd,1H),4.01(m,2H),7.19(m,4H),7.79(d,1H),8.42(d,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值444.2；实测值445.2；Rt＝1.963min。
化合物621：RT(IA，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝50.039min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.98(m,3H),1.23(m,1H),1.54(m,1H),1.69(m,1H),2.14(s,3H),2.20(s,3H),2.87(m,6H),3.17(m,1H),3.40(m,1H),4.01(m,2H),7.21(m,4H),7.80(d,1H),8.42(d,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值444.2；实测值445.2；Rt＝1.969min。
实施例47.外消旋-2-((2R,5S)-2-(4-羟基苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-N-(5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺(化合物557)的合成
在室温下将HATU(283.88mg，746.59μmol)分批添到2-[(5-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(210.05mg，746.59μmol),4-(5-甲基-2-哌啶基)苯酚(0.21g，746.59μmol)和TEA(453.29mg，4.48mmol，624.36μL)于DMF(10mL)中的悬浮液中。将澄清溶液在25℃下搅拌32h且在真空中蒸发溶剂，以得到1g粗材料。使其经历RP-HPLC(柱：SunFireC18 100x19mm5um；38-60％0-5min水-MeOH 30ml/min为流动相)，以得到化合物557 2-[(2S,5R)-2-(4-羟基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(42mg，118.84μmol，15.92％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.95-1.05(m,3H),1.25-1.37(m,1H),1.63-1.77(m,1H),1.78-1.93(m,1H),1.93-2.10(m,1H),2.10-2.20(m,1H),2.22-2.32(m,3H),2.71-3.21(m,1H),3.39-4.03(m,1H),4.98-5.63(m,1H),6.71-6.78(m,2H),7.05-7.17(m,2H),7.86-7.97(m,1H),8.09-8.22(m,1H),8.51-8.63(m,1H),9.35(s,1H),10.79-11.13(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值353.4；实测值354.2；Rt＝1.781min。
实施例48.5-(2-(2-(4-羟基苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-2-甲氧基烟酰胺(化合物288、化合物292)的合成
步骤1：5-(2-(2-(4-羟基苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-2-甲氧基烟酰胺的合成
将4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯酚(200mg，597.20μmol，HCl)、2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(203.27mg，597.20μmol，Et3N)和TEA(151.08mg，1.49mmol，208.09μL)溶解于DMF(3mL)中。在5min期间分批添加HATU(249.78mg，656.92μmol)。将所得溶液在25℃下搅拌12h。然后使其经历HPLC(柱：SunFireC18 100*19mm，5um；0-5min 20-45％水-MeCN，流速30ml/min)，得到5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-羟基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(40mg，96.98μmol，16.24％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值412.4；实测值413.2；Rt＝2.814min。
步骤2：手性分离(化合物288和化合物292)
使外消旋物经历手性HPLC(柱：Chiralpak IA II(250*20mm，5um)；流动相：己烷-IPA-MeOH，60-20-20；流速：12mL/min；m＝0.04g，3次注入，12mg/注入V＝2,2L.时间＝3,5h.)，得到5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-羟基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(13mg，31.52μmol，63.41％产率)(保留时间＝33.85min)和5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-羟基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(12mg，29.10μmol，58.54％产率)(保留时间＝47.087min)。化合物288于分析条件下(柱：IA，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.6ml/min为流动相)的保留时间为44.81min且化合物292的保留时间为32.41min。
化合物288：保留时间：44.81min
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98-1.06(m,3H),1.27-1.40(m,1H),1.63-1.77(m,1H),1.80-1.93(m,1H),1.96-2.12(m,1H),2.12-2.25(m,1H),2.72-3.20(m,1H),3.39-3.47(m,1H),3.93-4.01(m,3H),4.95-5.66(m,1H),6.68-6.81(m,2H),7.06-7.21(m,2H),7.68-7.82(m,2H),8.41-8.49(m,1H),8.50-8.60(m,1H),9.37(s,1H),10.86-11.11(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值412.4；实测值413.2；Rt＝2.861min。
化合物292：保留时间：32.41min
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99-1.06(m,3H),1.28-1.42(m,1H),1.66-1.81(m,1H),1.82-1.94(m,1H),1.97-2.11(m,1H),2.12-2.22(m,1H),2.75-3.20(m,1H),3.39-3.48(m,1H),3.94-4.04(m,3H),5.01-5.61(m,1H),6.69-6.87(m,2H),7.07-7.18(m,2H),7.67-7.79(m,2H),8.42-8.51(m,1H),8.50-8.60(m,1H),9.37(s,1H),10.91-11.13(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值412.4；实测值413.2；Rt＝2.859min。
实施例49.5-(2-(2-(4-羟基苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物287、化合物297)的合成
将TEA(1.76g，17.41mmol，2.43mL)添加到4-(5-甲基-2-哌啶基)苯酚(0.65g，1.74mmol，HCl)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(540.35mg，1.74mmol)和HATU(662.02mg，1.74mmol)于DMF(10mL)中的搅拌混合物中。将反应混合物在25℃下搅拌2h，然后提交至反相HPLC(柱：XBridge C18 100x19 mm，5um，流动相：10-10-40％0-2-6min0.1％ NH3-MeOH)，以得到95mg呈淡黄色固体的外消旋酰胺。然后将其提交至手性HPLC(柱：Chiralpak AD-H I，(250*20mm，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH 70-15-15；流速：12mL/min)，以得到化合物287 5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-羟基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(28mg，73.22μmol，4.21％产率)(RT＝29.61)和化合物297 5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-羟基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(24mg，62.76μmol，3.60％产率)(RT＝20.32)。化合物287于分析条件下(柱：AD-H，己烷-IPA-MeOH 70-15-15，0.6ml/min为流动相)的保留时间为31.37min且化合物297的保留时间为22.48min。
化合物287：保留时间：31.37min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98-1.04(m,3H),1.27-1.38(m,1H),1.65-1.77(m,1H),1.80-1.91(m,1H),1.96-2.11(m,1H),2.12-2.20(m,1H),2.74-3.21(m,1H),3.37-4.02(m,1H),5.01-5.56(m,1H),6.70-6.78(m,2H),7.04-7.15(m,2H),7.53-7.68(m,1H),8.10-8.22(m,1H),8.41-8.51(m,1H),8.69-8.81(m,1H),8.82-8.93(m,1H),9.36(s,1H),11.11-11.28(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值382.5；实测值383.2；Rt＝2.558min。
化合物297：保留时间：22.48min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98-1.05(m,3H),1.24-1.37(m,1H),1.61-1.76(m,1H),1.79-1.92(m,1H),1.94-2.10(m,1H),2.12-2.19(m,1H),2.73-3.21(m,1H),3.38-4.01(m,1H),5.01-5.59(m,1H),6.71-6.81(m,2H),7.05-7.20(m,2H),7.52-7.69(m,1H),8.07-8.21(m,1H),8.42-8.59(m,1H),8.70-8.80(m,1H),8.82-8.95(m,1H),9.35(s,1H),11.11-11.27(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值382.5；实测值383.2；Rt＝2.560min。
实施例50.5-[[2-[(2R,5R)-4,4-二氟-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物473)、5-[[2-[(2S,5S)-4,4-二氟-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物457)的合成
将(2S,5S)-4,4-二氟-5-甲基-2-苯基哌啶(200.00mg，946.75μmol)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(293.82mg，946.75μmol，Et3N)、TEA(958.01mg，9.47mmol，1.32mL)和HATU(539.97mg，1.42mmol)溶解于DMF(7mL)中且在20℃下搅拌3h。将反应混合物用水稀释且用EA萃取三次，然后将EA用盐水萃取三次。将有机相经Na2SO4干燥，过滤且在40℃下蒸发，以得到粗产物，其通过HPLC(40-60％水/MeCN+NH3，2-10min，流速30ml/min(装载泵4ml/min MeCN+NH3)柱：TRIART 100*20 5mM)进行纯化，以得到2种对映异构体的纯混合物。
使用柱：Chiralpak IB(250*20mm，5mkm)；注入体积900mkl；流动相：己烷-IPA-MeOH 60-20-20；流速：15mL/min进行手性分离，以得到呈单一对映异构体的5-[[2-[(2S,5S)-4,4-二氟-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.034g，84.49μmol，8.92％产率)和呈单一对映异构体的5-[[2-[(2R,5R)-4,4-二氟-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.035g，86.98μmol，9.19％产率)。
化合物473：RT(IB，Hex-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min)＝14.870min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.09(d,3H),2.09-2.28(m,1H),2.42-2.46(m,1H),2.80-2.91(m,1H),3.02-3.09(m,0.4H),3.44-3.52(m,0.6H),3.78-4.35(m,1H),5.53-5.96(m,1H),7.21-7.30(m,1H),7.30-7.37(m,3H),7.37-7.41(m,1H),7.55-7.67(m,1H),8.09-8.21(m,1H),8.41-8.56(m,1H),8.69-8.81(m,1H),8.81-8.96(m,1H),11.13-11.49(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值402.2；实测值403.2；Rt＝2.994min
化合物457：RT(IB，Hex-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min)＝10.108min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.09(d,3H),2.09-2.28(m,1H),2.42-2.46(m,1H),2.80-2.91(m,1H),3.02-3.09(m,0.4H),3.44-3.52(m,0.6H),3.78-4.35(m,1H),5.53-5.96(m,1H),7.21-7.30(m,1H),7.30-7.37(m,3H),7.37-7.41(m,1H),7.55-7.67(m,1H),8.09-8.21(m,1H),8.41-8.56(m,1H),8.69-8.81(m,1H),8.81-8.96(m,1H),11.13-11.49(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值402.2；实测值403.2；Rt＝2.996min
5-(2-(5-氟-5-甲基-2-苯基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物795、化合物798)的合成
步骤1：5-(2-(5-氟-5-甲基-2-苯基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺的合成
将2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(17.79mg，72.44μmol，HCl)和TEA(73.30mg，724.41μmol，100.97μL)溶解于DMF(2mL)中且冷却至0℃，添加HATU(41.32mg，108.66μmol)且将混合物在0℃下搅拌15min。添加(2R,5R)-5-氟-5-甲基-2-苯基哌啶(0.014g，72.44μmol)且将混合物升温至室温且搅拌3h。添加10ml乙酸乙酯且将有机相用盐水洗涤三次。将有机相经Na2SO4干燥，过滤且在45℃下在真空中浓缩，以得到粗产物，其通过HPLC(5-95％ MeCN 6min.Poroshell 120EC-C18 4,6*100mm)进行纯化，以得到5-[[2-[(2R,5R)-5-氟-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.013g，33.82μmol，46.68％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值384.2；实测值385.2；Rt＝3.852min。
步骤2：手性分离(化合物795和化合物798)
通过手性色谱(IA-II(250*20,5mkm)，IPA-MeOH，50-50，12ml/min)分离非对映异构体的混合物，以获得N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-乙基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(21.02mg，43.56μmol，34.12％产率)(RT＝19.23)。
使用柱：Chiralpak AD-H-III(250*20，5mkm)，己烷-MeOH-IPA，60-20-20，12ml/min进行手性分离，以得到5-[[2-[(2R,5R)-5-氟-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.0044g，11.45μmol，33.85％产率)(RT＝42.39)。
化合物795于分析条件下(柱：IA，IPA-MeOH，50-50，0.6ml/min为流动相)的保留时间为17.48min且化合物798的保留时间为11.91min。
化合物795：保留时间：17.48min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值384.2；实测值385.2；Rt＝3.859min。
化合物798：保留时间：11.91min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值384.2；实测值385.2；Rt＝3.858min。
实施例51.外消旋-2-[(2R,3R,6S)-2,3-二甲基-6-苯基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺和外消旋-2-[(2S,3R,6S)-2,3-二甲基-6-苯基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物25和化合物23)的合成；2-[(2S,3R,6S)-2,3-二甲基-6-苯基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺、2-[(2R,3S,6R)-2,3-二甲基-6-苯基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物39和化合物32)、2-[(2R,3R,6S)-2,3-二甲基-6-苯基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺和2-[(2S,3S,6R)-2,3-二甲基-6-苯基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物41和化合物35)的手性分离
步骤1-外消旋-2-[(2R,3R,6S)-2,3-二甲基-6-苯基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺和外消旋-2-[(2S,3R,6S)-2,3-二甲基-6-苯基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺的合成
在-78℃、氩气气氛下，向2,3-二甲基-6-苯基哌啶(1.7g，8.98mmol)于THF(20mL)中的搅拌溶液中逐滴添加正丁基锂(2.5M于己烷中，1.15g，17.96mmol，7.18mL)。将所得混合物在同一温度下搅拌5分钟。5分钟之后，添加2-[(5-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(2.35g，8.98mmol)。使所得混合物升温至室温且在同一温度下搅拌12小时。完成之后，将反应混合物用饱和NH4Cl水溶液淬灭。将所得混合物蒸发至干。通过反相HPLC(洗脱液：0.5-6.5min；水-乙腈；流速：30mL/min；装载泵：4mL/min，乙腈；柱：SunFire100*19mm，5um)纯化所获得的残余物(1g)，以获得呈黄色固体的外消旋-2-[(2R,3R,6S)-2,3-二甲基-6-苯基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物25，41.30mg)和外消旋-2-[(2S,3R,6S)-2,3-二甲基-6-苯基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物23，35.9mg)。
化合物25：1H NMR(DMSO-d6+CCl4,400MHz):δ(ppm)0.66(m,3H),0.98(m,3H),1.65(m,2H),1.99(m,2H),2.34(m,3H),2.61(m,1H),4.30(m,1H),5.49(m,1H),7.21(m,1H),7.31(m,2H),7.43(m,2H),7.99(m,1H),8.08(m,1H),8.55(m,1H),10.90(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值351.2；实测值352.2；Rt＝3.380min。
化合物23：1H NMR(DMSO-d6+CCl4,400MHz):δ(ppm)0.76(m,3H),1.11(m,3H),1.51(m,1H),1.71(m,1H),1.98(m,1H),2.12(m,1H),2.34(m,3H),2.61(m,1H),3.84(m,1H),5.57(m,1H),7.21(m,1H),7.31(m,2H),7.43(m,2H),7.97(m,1H),8.10(m,1H),8.57(m,1H),10.89(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值351.2；实测值352.2；Rt＝3.365min。
步骤2.2-[(2R,3R,6S)-2,3-二甲基-6-苯基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺和2-[(2S,3S,6R)-2,3-二甲基-6-苯基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺的手性分离
使外消旋-2-[(2R,3R,6S)-2,3-二甲基-6-苯基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物25，41mg)经历手性分离(Chiralcel OJ-H(250*20mm，5um；流动相：己烷-IPA-MeOH 90-5-5；流速：12mL/min)，以获得呈黄色固体的(化合物35，10mg)和(化合物41，10mg)。
化合物41：LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值351.2；实测值352.2；Rt＝1.270min。
手性HPLC：Rt＝28.22min(柱：Chiralcel OJ-H；流动相：己烷-MeOH-IPA，70-15-15；流速：0.6mL/min)。
化合物35：LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值351.2；实测值352.2；Rt＝1.270min。
手性HPLC：Rt＝8.69min(柱：Chiralcel OJ-H；流动相：己烷-MeOH-IPA，70-15-15；流速：0.6mL/min)。
步骤3.2-[(2S,3R,6S)-2,3-二甲基-6-苯基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺和2-[(2R,3S,6R)-2,3-二甲基-6-苯基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺的手性分离
使外消旋-2-[(2S,3R,6S)-2,3-二甲基-6-苯基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物23，35.9mg)经历手性分离(Chiralcel OJ-H(250*20mm，5um；流动相：己烷-IPA-MeOH 90-5-5；流速：12mL/min)，以获得呈黄色固体的(化合物39，12mg)和(化合物32，10mg)。
化合物39：LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值351.2；实测值352.2；Rt＝1.202min。
手性HPLC：Rt＝14.78min(柱：Chiralcel OJ-H；流动相：己烷-MeOH-IPA，70-15-15；流速：0.6mL/min)。
化合物32：LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值351.2；实测值352.2；Rt＝1.266min。
手性HPLC：Rt＝23.10min(柱：Chiralcel OJ-H；流动相：己烷-MeOH-IPA，70-15-15；流速：0.6mL/min)。
实施例52.5-[[2-[5-甲基-2-(3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物102)、5-[[2-[(2S,5S)-5-甲基-2-(3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺、5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺、5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺和5-[[2-[(2R,5R)-5-甲基-2-(3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(+-*化合物104、化合物105、化合物106和化合物98)的合成
步骤1：5-[[2-[5-甲基-2-(3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物102)的合成
在21℃下，向2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(0.4，1.29mmol，Et3N盐)、TATU(622.66mg，1.93mmol)和三乙胺(130.42mg，1.29mmol，179.64μL)于无水CH3CN(25mL)中的搅拌溶液中添加3-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶(272.61mg，1.55mmol)。将所得反应混合物在21℃下搅拌过夜。将所得反应混合物蒸发至干且使其经历HPLC(洗脱液：20-70％，0-11.5min，水-甲醇；流速：30mL/min；装载泵4mL/min，甲醇；柱：SunFireC18 100*19mm，5um)，以得到5-[[2-[5-甲基-2-(3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物102，37.2mg，101.25μmol，7.86％产率)。
1H NMR(CDCl3,400MHz):δ(ppm)1.10(m,3H),1.42(m,1H),1.86(m,2H),2.01(m,1H),2.24(m,1H),3.14(m,1H),4.50(m,1H),6.35(m,1H),7.32(m,1H),7.63(m,1H),8.52(m,1H),8.60(m,3H),8.80(m,1H),8.95(m,1H),9.84(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值367.2；实测值368.2；Rt＝1.699min。
步骤2：5-[[2-[(2S,5S)-5-甲基-2-(3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺、5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺、5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺和5-[[2-[(2R,5R)-5-甲基-2-(3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物104、化合物105、化合物106和化合物98)的手性分离
使5-[[2-[5-甲基-2-(3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物102，37.2mg，101.25μmol)经历手性HPLC纯化，以得到呈白色固体的5-[[2-[(2S,5S)-5-甲基-2-(3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物104，3.72mg)、5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物105，9.15mg)、5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物106，8.49mg)和5-[[2-[(2R,5R)-5-甲基-2-(3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物98，3.72mg)。
化合物104：
1H NMR(CDCl3,400MHz):δ(ppm)0.90(m,3H),1.29(m,2H),1.83(m,2H),2.10(m,1H),2.52(m,2H),4.63(m,1H),6.26(m,1H),7.37(m,1H),7.66(m,1H),8.61(m,3H),8.84(m,1H),8.94(m,1H),9.63(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值367.2；实测值368.2；Rt＝2.889min。
手性HPLC：Rt＝21.83min(柱：AD-H；洗脱液：己烷-MeOH-IPA，50-25-25；流速：0.6mL/min)。
化合物105：
1H NMR(CDCl3,500MHz):δ(ppm)1.14(m,3H),1.46(m,1H),1.90(d,1H),2.05(m,1H),2.27(m,2H),3.25(m,1H),4.54(m,1H),6.16(m,2H),7.35(m,1H),7.66(m,1H),8.59(m,3H),8.84(m,1H),8.92(m,1H),9.67(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值367.2；实测值368.2；Rt＝2.844min。
手性HPLC：Rt＝47.00min(柱：AD-H；洗脱液：己烷-MeOH-IPA，50-25-25；流速：0.6mL/min)。
化合物106：
1H NMR(CDCl3,600MHz):δ(ppm)0.95(m,3H),1.22(m,1H),1.58(m,1H),1.70(m,1H),1.91(m,2H),2.65(m,1H),3.77(m,1H),5.16(m,2H),6.13(m,1H),6.38(m,1H),7.15(m,3H),7.36(s,1H),7.44(m,1H),8.09(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值367.2；实测值368.2；Rt＝2.843min。
手性HPLC：Rt＝36.06min(柱：AD-H；洗脱液：己烷-MeOH-IPA，50-25-25；流速：0.6mL/min)。
化合物98：
1H NMR(CDCl3,500MHz):δ(ppm)0.90(m,3H),1.27(m,1H),1.81(m,2H),1.91(m,1H),2.10(m,1H),2.52(m,2H),4.63(m,1H),6.27(m,1H),7.38(m,1H),7.67(m,1H),8.62(m,3H),8.85(m,1H),8.97(m,1H),9.62(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值367.2；实测值368.2；Rt＝2.890min。
手性HPLC：Rt＝24.08min(柱：AD-H；洗脱液：己烷-MeOH-IPA，50-25-25；流速：0.6mL/min)。
实施例53.化合物369、化合物370、化合物371和化合物389的合成
步骤1：5-[[2-(2-环己基-5-甲基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺的合成
将2-环己基-5-甲基哌啶(0.219g，1.01mmol，HCl)、2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(342.28mg，1.01mmol)和三乙胺(1.02g，10.06mmol，1.40mL)一起混合于DMF(5mL)中且向其中添加HATU(573.55mg，1.51mmol)。将反应混合物搅拌18h。然后，将反应混合物倒入到水(20mL)中且将所得混合物用EtOAc(2*30mL)萃取。将合并的有机层用水(3*25mL)、盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且蒸发。通过HPLC(2-10min 60-85％MeOH/H2O+甲酸，30mL/min(装载泵4mL+甲酸)，柱：SunFire 100*19mm，5微米)纯化残余物，以获得5-[[2-(2-环己基-5-甲基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(0.0428g，106.34μmol，10.57％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.82(m,2H),0.94(m,3H),1.19(m,4H),1.64(m,10H),2.85(m,1H),3.47(m,1H),3.96(s,3H),4.13(m,1H),7.75(s,1H),8.53(m,1H),8.55(s,1H),10.87(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值402.2；实测值403.2；Rt＝1.475min。
步骤2：5-[[2-[(2R,5S)-2-环己基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(化合物369)、5-[[2-[(2S,5R)-2-环己基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(化合物370)、5-[[2-[(2S,5S)-2-环己基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(化合物371)和5-[[2-[(2R,5R)-2-环己基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(化合物389)的合成
对5-[[2-(2-环己基-5-甲基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(0.0428g，106.34μmol)进行手性分离(IC柱(250*20，5mkm)，CO2-MeOH，50-50，2.0mL/min和AS-H，CO2-MeOH，80-20，3.0mL/min)，以获得化合物369 5-[[2-[(2R,5S)-2-环己基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(0.01316g，32.70μmol，30.75％产率)、化合物370 5-[[2-[(2S,5R)-2-环己基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(0.00924g，22.96μmol，21.59％产率)、化合物371 5-[[2-[(2S,5S)-2-环己基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(0.00277g，6.88μmol，6.47％产率)和化合物389 5-[[2-[(2R,5R)-2-环己基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(0.009g，22.36μmol，21.03％产率)。
化合物369：
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.67-0.87(m,2H),0.91-0.96(m,3H),1.04-1.28(m,4H),1.52-1.63(m,4H),1.65-1.71(m,2H),1.74-1.79(m,1H),1.80-1.98(m,3H),2.82-3.25(m,1H),3.32-3.48(m,1H),3.93-3.95(m,3H),3.98-4.13(m,1H),7.68-7.76(m,2H),8.40-8.48(m,1H),8.50-8.56(m,1H),10.78-10.88(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值402.2；实测值404.2；Rt＝5.763min。
RT(IC,CO2-MeOH,50-50,2.0mL/min)＝6.246min。
化合物370：
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.68-0.90(m,2H),0.91-0.98(m,3H),1.04-1.28(m,4H),1.53-1.65(m,4H),1.65-1.72(m,2H),1.73-1.78(m,1H),1.80-1.99(m,3H),2.51-2.88(m,1H),3.32-3.48(m,1H),3.92-3.96(m,3H),3.97-4.15(m,1H),7.67-7.78(m,2H),8.39-8.47(m,1H),8.50-8.56(m,1H),10.76-10.89(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值402.2；实测值404.2；Rt＝5.759min。
RT(IC,CO2-MeOH,50-50,2.0mL/min)＝5.387min。
化合物371：
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值402.2；实测值404.2；Rt＝5.811min。
RT(AS-H,CO2-MeOH,80-20,3.0mL/min)＝3.657和5.686min。
化合物389：
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.66-1.03(m,6H),1.05-1.22(m,3H),1.26-1.45(m,1H),1.52-1.60(m,3H),1.61-1.72(m,3H),1.73-1.90(m,3H),2.25-2.31(m,0.4H),2.63-2.88(m,0.6H),3.33-3.52(m,1H),3.91-3.95(m,3H),3.98-4.17(m,1H),7.66-7.78(m,2H),8.39-8.46(m,1H),8.48-8.55(m,1H),10.77-10.87(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值402.2；实测值404.2；Rt＝5.802min。
RT(AS-H,CO2-MeOH,80-20,3.0mL/min)＝3.295和3.932min。
实施例54.化合物130、化合物127、化合物121和化合物117的合成
步骤1：5-[[2-(2-环己基-5-甲基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
将2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(402.37mg，1.10mmol，C6H15N)和2-环己基-5-甲基哌啶(300mg，1.10mmol，HCl)混合于DMF(10mL)中。将反应悬浮液冷却至0℃且添加HATU(419.03mg，1.10mmol)，随后添加TEA(557.58mg，5.51mmol，768.01μL)。将澄清溶液在环境温度下搅拌12h。然后在减压下蒸发挥发物，且使残余物(1g)经历RP-HPLC(柱：YMC Triart C18 100*20mm，5um；50-50-85％0-1-5min 0.1％ NH3-甲醇为流动相)，以得到呈非对映异构体混合物的三种级分20、141和41mg的5-[[2-(2-环己基-5-甲基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(202mg，542.34μmol，49.21％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6+CCl4)δ0.83(m,2H),0.98(m,3H),1.24(m,4H),1.67(m,6H),1.88(m,4H),2.81(m,1H),3.49(m,1H),4.08(m,1H),7.62(m,1H),8.17(m,1H),8.48(m,1H),8.78(m,1H),8.90(m,1H),11.05(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值372.4；实测值373.2；Rt＝3.461min。
步骤2：5-[[2-[(2S,5S)-2-环己基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物121)、5-[[2-[(2R,5R)-2-环己基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物127)、5-[[2-[(2R,5S)-2-环己基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物117)和5-[[2-[(2S,5R)-2-环己基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物130)的合成
通过手性HPLC(柱：IA(250*20，5mkm)，以己烷-IPA-MeOH，80-10-10，14mL/min为流动相，然后对前二者通过另一柱：IC(250*20，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，12mL/min为流动相)分离对映异构体，以得到两种单独的顺式对映异构体化合物1215-[[2-[(2S,5S)-2-环己基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(15mg，40.27μmol，42.55％产率)和化合物1275-[[2-[(2R,5R)-2-环己基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(15mg，40.27μmol，42.55％产率)以及两种单独的反式对映异构体化合物117 5-[[2-[(2R,5S)-2-环己基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(30mg，80.55μmol，85.11％产率)和化合物130 5-[[2-[(2S,5R)-2-环己基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(28mg，75.18μmol，79.43％产率)。
化合物121：
1H NMR(500MHz,DMSO-d6+CCl4)δ0.83(m,2H),0.98(m,3H),1.24(m,4H),1.67(m,6H),1.88(m,4H),2.81(m,1H),3.49(m,1H),4.08(m,1H),7.62(m,1H),8.17(m,1H),8.48(m,1H),8.78(m,1H),8.90(m,1H),11.05(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值372.2；实测值374.2；Rt＝5.022min。
RT(IC，Hex-IPA-MeOH，60-20-20，0.6mL/min)＝15.851min。
化合物127：
1H NMR(500MHz,DMSO-d6+CCl4)δ0.83(m,2H),0.98(m,3H),1.19(m,4H),1.67(m,6H),1.83(m,4H),2.58(m,1H),3.40(m,1H),4.08(m,1H),7.62(m,1H),8.17(m,1H),8.49(m,1H),8.78(m,1H),8.90(m,1H),11.05(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值372.2；实测值374.2；Rt＝5.019min。
RT(IC，Hex-IPA-MeOH，60-20-20，0.6mL/min)＝28.529min。
化合物117：
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.93(m,5H),1.18(m,8H),1.57(m,4H),1.94(m,1H),2.66(m,1H),3.65(m,1H),4.32(m,1H),4.58(m,1H),6.24(m,2H),8.62(s,1H),8.81(s,1H),8.96(s,1H),9.70(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值372.2；实测值374.2；Rt＝4.930min。
RT(IC，Hex-IPA-MeOH，60-20-20，0.6mL/min)＝19.507min。
化合物130：
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.93(m,5H),1.21(m,8H),1.64(m,4H),1.94(m,1H),2.55(m,1H),4.00(m,1H),4.33(m,1H),4.57(m,1H),6.44(m,2H),8.61(s,1H),8.81(s,1H),8.96(s,1H),9.76(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值372.2；实测值374.2；Rt＝4.929min。
RT(IC，Hex-IPA-MeOH，60-20-20，0.6mL/min)＝24.368min。
实施例55.5-(2-(2-(1H-吲哚-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物372、化合物481)的合成
步骤1：5-(2-(2-(1H-吲哚-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺的合成在室温下，将HATU(603.24mg，1.59mmol)分批添加到2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(389.68mg，1.59mmol，HCl)、5-(5-甲基-2-哌啶基)-1H-吲哚(400mg，1.59mmol)和TEA(963.24mg，9.52mmol，1.33mL)于DMF(5mL)中的悬浮液中。将澄清溶液在30℃下搅拌32h且在真空中蒸发溶剂，以得到1g粗材料。使其经历RP-HPLC(柱：SunFireC18100x19mm 5um；20-20-45％0-1-6min 0.2％ FA-MeCN为流动相)，以得到5-[[2-[2-(1H-吲哚-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(84mg，207.18μmol，13.06％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值405.2；实测值406.2；Rt＝1.141min。
步骤2：手性分离(化合物372和化合物481)
通过手性HPLC(柱：IA-I(250*20，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，12ml/min为流动相)分离对映异构体，以得到两种个别对映异构体化合物372 5-[[2-[(2S,5R)-2-(1H-吲哚-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(21mg，51.79μmol，50.00％产率)(保留时间＝23.35min)和化合物481(35mg)(保留时间＝45.08min)，其另外在以下条件下纯化-柱：Chiralpak IB(250*20mm，5m)；流动相：己烷-IPA-MeOH，50-25-25；流速：10mL/min；柱温：24℃；波长：205nm、225nm、260nm)，保留时间(异构体A)＝10.33min)，以得到(18mg，44.40μmol，42.86％产率)化合物4815-[[2-[(2R,5S)-2-(1H-吲哚-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(18mg，44.40μmol，42.86％产率)。化合物372于分析条件下(柱：IA,己烷-IPA-MeOH,50-25-25,0.6ml/min为流动相)的保留时间为17.31min且化合物481的保留时间为38.68min。
化合物372：保留时间：17.31min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99-1.08(m,3H),1.29-1.42(m,1H),1.74-1.93(m,2H),2.04-2.21(m,1H),2.25-2.34(m,1H),2.78-3.25(m,1H),3.42-4.07(m,1H),5.20-5.73(m,1H),6.36-6.43(m,1H),7.00-7.13(m,1H),7.28-7.34(m,1H),7.34-7.42(m,1H),7.45-7.54(m,1H),7.54-7.66(m,1H),8.04-8.22(m,1H),8.41-8.54(m,1H),8.70-8.80(m,1H),8.80-8.94(m,1H),10.97-11.15(m,1H),11.15-11.39(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值405.2；实测值406.2；Rt＝2.865min。
化合物481：保留时间：38.68min
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.00-1.14(m,3H),1.32-1.47(m,1H),1.69-2.07(m,2H),2.07-2.30(m,1H),2.30-2.38(m,1H),2.82-3.25(m,1H),3.43-4.07(m,1H),5.21-5.80(m,1H),6.36-6.47(m,1H),7.01-7.16(m,1H),7.26-7.46(m,2H),7.47-7.68(m,2H),8.08-8.27(m,1H),8.43-8.60(m,1H),8.70-8.84(m,1H),8.84-9.02(m,1H),10.99-11.16(m,1H),11.16-11.34(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值405.2；实测值406.2；Rt＝2.811min。
实施例56.5-(2-(2-(1H-苯并[d]咪唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物344、化合物362)的合成
步骤1：5-(2-(2-(1H-苯并[d]咪唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺的合成
将2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(342.26mg，1.39mmol，HCl)和5-(5-甲基-2-哌啶基)-1H-苯并咪唑(400.00mg，1.39mmol)混合于DMF(5mL)中。将反应悬浮液冷却至0℃且添加HATU(529.83mg，1.39mmol)，随后添加TEA(846.02mg，8.36mmol，1.17mL)。将澄清溶液在30℃下搅拌72h，然后在减压下蒸发挥发物，且使残余物(1g)经历RP-HPLC(柱：XBridge C18 100x19 mm，5um；20-20-70％0-1-6min以0.1％ NH3-MeOH为流动相)，以得到5-[[2-[2-(1H-苯并咪唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(55mg，135.32μmol，9.71％产率)和250mg反应物杂质5-(5-甲基-2-哌啶基)-1H-苯并咪唑。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值406.2；实测值407.2；Rt＝1.877min。
步骤2：手性分离(化合物344和化合物362)
通过手性HPLC(柱：Chiralcel OJ-H(250*20，5mkm)，以己烷-IPA-MeOH，70-15-15，12ml/min为流动相)分离对映异构体，以得到两种个别对映异构体化合物344 5-[[2-[(2S,5R)-2-(1H-苯并咪唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(22mg，54.13μmol，80.00％产率)(保留时间＝16.21min)和化合物3625-[[2-[(2R,5S)-2-(1H-苯并咪唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(18.5mg，45.52μmol，67.27％产率)(保留时间＝43.90min)。通过HPLC(柱：C18，以H2O-ACN，15-40％ACN，30ml/min为流动相)再纯化后一种。
化合物344：保留时间：16.21min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.04(m,3H),1.36(m,1H),1.74(m,1H),1.87(m,1H),2.13(m,1H),2.29(m,1H),2.94(m,1H),3.75(m,1H),5.49(m,1H),7.17(m,1H),7.49(m,1H),7.63(m,2H),8.19(m,2H),8.47(m,1H),8.75(m,1H),8.87(m,1H),11.26(m,1H),12.38(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值406.2；实测值407.2；Rt＝1.688min。
化合物362：保留时间：43.90min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.01-1.08(m,3H),1.30-1.42(m,1H),1.71-1.81(m,1H),1.83-1.94(m,1H),2.03-2.22(m,1H),2.25-2.35(m,1H),2.79-3.24(m,1H),3.43-4.07(m,1H),5.23-5.78(m,1H),7.11-7.26(m,1H),7.41-7.54(m,1H),7.54-7.69(m,2H),8.07-8.22(m,2H),8.40-8.53(m,1H),8.68-8.79(m,1H),8.81-8.95(m,1H),11.11-11.39(m,1H),12.26-12.49(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值406.2；实测值407.2；Rt＝1.947min。
实施例57.2-(2-(1H-苯并[d]咪唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺(化合物771、化合物748)的合成
步骤1：2-(2-(1H-苯并[d]咪唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺的合成
在室温下，将HATU(353.22mg，928.96μmol)分批添加到2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(194.34mg，928.96μmol)、5-(5-甲基-2-哌啶基)-1H-苯并咪唑(200.00mg，928.96μmol)和TEA(564.01mg，5.57mmol，776.88μL)于DMF(13mL)中的悬浮液中。将澄清溶液在环境温度下搅拌32h且在真空中蒸发溶剂，以得到1g粗材料。使其经历RP-HPLC(柱：YMC-Actus Triart C18 100x20 mm，5um；15-70％0-5min，以水-MeOH(0.1％ NH3)为流动相)，以得到N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[2-(1H-苯并咪唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(69mg，169.75μmol，18.27％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值406.2；实测值407.2；Rt＝0.952min。
步骤2：手性分离(化合物771和化合物748)
通过手性HPLC(柱：IA-II(250*20，5mkm)，以己烷-IPA-MeOH,60-20-20,12ml/min为流动相)分离对映异构体，以得到两种个别对映异构体化合物771N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(1H-苯并咪唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(23.8mg，58.55μmol，68.99％产率)(保留时间＝27.2min)和化合物748N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(1H-苯并咪唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(26.2mg，64.46μmol，75.94％产率)(保留时间＝38.7min)。
化合物771：保留时间：27.20min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.00-1.04(m,3H),1.05-1.16(m,3H),1.28-1.41(m,1H),1.68-1.80(m,1H),1.81-1.92(m,1H),2.01-2.18(m,1H),2.21-2.30(m,1H),2.36-2.43(m,2H),2.74-3.27(m,1H),3.44-4.05(m,1H),5.22-5.60(m,1H),5.61-5.74(m,2H),7.10-7.26(m,1H),7.35-7.54(m,2H),7.54-7.68(m,1H),7.96-8.09(m,1H),8.18(s,1H),10.44-10.60(m,1H),12.27-12.49(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值406.2；实测值407.2；Rt＝1.400min。
化合物748：保留时间：38.70min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99-1.04(m,3H),1.05-1.15(m,3H),1.29-1.41(m,1H),1.70-1.80(m,1H),1.81-1.92(m,1H),2.01-2.19(m,1H),2.19-2.31(m,1H),2.36-2.43(m,2H),2.75-3.26(m,1H),3.41-4.05(m,1H),5.24-5.60(m,1H),5.60-5.74(m,2H),7.07-7.26(m,1H),7.37-7.55(m,2H),7.55-7.67(m,1H),7.96-8.23(m,2H),10.43-10.60(m,1H),12.30-12.47(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值406.2；实测值407.2；Rt＝1.385min。
实施例58.5-(2-(2-(1H-苯并[d]咪唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-2-甲氧基烟酰胺(化合物805、化合物794)的合成
步骤1：5-(2-(2-(1H-苯并[d]咪唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-2-甲氧基烟酰胺的合成
在室温下，将HATU(392.76mg，1.03mmol)分批添加到2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(351.59mg，1.03mmol)、5-(5-甲基-2-哌啶基)-1H-苯并咪唑(222.39mg，1.03mmol)和TEA(627.15mg，6.20mmol，863.84μL)于DMF(10mL)中的悬浮液中。将澄清溶液在20℃下搅拌48h且在真空中蒸发溶剂，以得到1g粗材料。使其经历RP-HPLC(柱：YMC-Actus Triart C18 100*20mml.D.S-5um；0-5min，以5-30％水-MeCN-NH4OH，流速：30ml/min为流动相)，以得到5-[[2-[2-(1H-苯并咪唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(130mg，297.85μmol，28.83％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值436.2；实测值437.2；Rt＝1.267min。
步骤2：手性分离(化合物805和化合物794)
通过手性HPLC(柱：IC-II(250*20,5mkm)，己烷-IPA-MeOH,70-15-15,12ml/min为流动相)分离对映异构体，以得到两种个别对映异构体化合物794 5-[[2-[(2S,5R)-2-(1H-苯并咪唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(56mg，128.30μmol，86.15％产率)(保留时间＝85.1min)和化合物805 5-[[2-[(2R,5S)-2-(1H-苯并咪唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(57mg，130.60μmol，87.69％产率)(保留时间＝115.5min)。化合物805于分析条件下(柱：IC,己烷-IPA-MeOH,60-20-20,0.6ml/min为流动相)的保留时间为45.22min且化合物794的保留时间为58.76min。
化合物805：保留时间：45.22min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.05(d,3H),1.38(m,1H),1.96(m,2H),2.25(m,2H),3.48(m,1H),3.56(m,1H),3.96(s,3H),5.52(m,1H),7.56(m,5H),8.46(m,3H),11.05(m,1H),12.41(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值436.2；实测值437.2；Rt＝0.942min。
化合物794：保留时间：58.76min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.05(d,3H),1.38(m,1H),1.94(m,2H),2.18(m,2H),3.48(m,1H),3.56(m,1H),3.96(s,3H),5.52(m,1H),7.56(m,5H),8.09(m,1H),8.26(m,2H),11.05(m,1H),12.41(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值436.2；实测值437.2；Rt＝0.942min。
实施例59.5-[[2-[(2R,5S)-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物360)和5-[[2-[(2S,5R)-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物361)的合成
步骤1：5-[[2-[2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
向5-(5-甲基-2-哌啶基)-1H-吲唑(0.23g，1.07mmol)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(262.40mg，1.07mmol，HCl)和三乙胺(540.51mg，5.34mmol，744.51μL)于DMF(5mL)中的悬浮液中添加HATU(446.82mg，1.18mmol)。将反应混合物在30℃下搅拌12h且使其经历HPLC(10-10-30％0-1-6min 0.2％ TFA-乙腈，流速：30ml/min(装载泵4ml/min乙腈)，目标质量406，柱：SunFireC18 100*19mm 5um)，以获得5-[[2-[2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(110mg，270.64μmol，25.33％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值406.2；实测值407.2；Rt＝2.559min。
步骤2：5-[[2-[(2R,5S)-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物360)和5-[[2-[(2S,5R)-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物361)的合成
使5-[[2-[2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(110mg，270.64μmol)经历HPLC(OJ-H(250*20，5mkm)柱；己烷-IPA-MeOH，60-20-20为流动相；流速15ml/min)，以得到化合物360 5-[[2-[(2R,5S)-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(39.0mg，70.91％产率；RT＝31.364min)和化合物361 5-[[2-[(2S,5R)-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(38.0mg，69.09％产率；RT＝12.133min)。
化合物360：RT(OJ-3，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.15ml/min)＝16.677min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.01-1.06(m,3H),1.32-1.40(m,1H),1.75-1.83(m,1H),1.83-1.94(m,1H),2.09-2.23(m,1H),2.26-2.34(m,1H),2.78-3.26(m,1H),3.40-4.05(m,1H),5.20-5.71(m,1H),7.26-7.39(m,1H),7.47-7.64(m,2H),7.67-7.76(m,1H),8.01-8.08(m,1H),8.10-8.21(m,1H),8.40-8.53(m,1H),8.70-8.80(m,1H),8.82-8.95(m,1H),11.18-11.33(m,1H),12.98-13.07(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值406.2；实测值407.2；Rt＝3.992min。
化合物361：RT(OJ-3，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.15ml/min)
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.00-1.06(m,3H),1.30-1.43(m,1H),1.73-1.83(m,1H),1.83-1.93(m,1H),2.07-2.23(m,1H),2.25-2.35(m,1H),2.78-3.26(m,1H),3.44-4.06(m,1H),5.20-5.74(m,1H),7.27-7.39(m,1H),7.49-7.64(m,2H),7.69-7.75(m,1H),8.00-8.07(m,1H),8.08-8.21(m,1H),8.42-8.55(m,1H),8.71-8.80(m,1H),8.80-8.96(m,1H),11.16-11.33(m,1H),12.96-13.07(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值406.2；实测值407.2；Rt＝4.010min。
实施例60.5-[[2-[(2S,5R)-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(化合物465)和5-[[2-[(2R,5S)-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(化合物464)的合成
步骤1：5-[[2-[(2S,5R)-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺的合成
向5-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]-1H-吲唑(0.3g，975.41μmol)、2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(332.00mg，975.41μmol，Et3N)和三乙胺(493.51mg，4.88mmol，679.77μL)的溶液中分批添加HATU(407.97mg，1.07mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌3h且使其经历HPLC(0-5min 20-70％水-甲醇(NH3 0.1％)，流速30ml/min(装载泵4ml/min甲醇(NH3 0.1％))，柱：YMC-Actus Triart C18 100*20mml.D.S-5um)，以得到5-[[2-[(2S,5R)-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(150mg，343.67μmol，35.23％产率)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值436.2；实测值437.2；Rt＝2.886min。
步骤2：5-[[2-[(2S,5R)-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(化合物465)和5-[[2-[(2R,5S)-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(化合物464)的合成
对5-[[2-[(2S,5R)-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(150mg，343.67μmol)进行手性分离(IC_I(250*20，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，40-30-30，10ml/min)，以获得化合物465 5-[[2-[(2S,5R)-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(45mg，103.10μmol，60.00％产率；RT＝30.290min)和化合物464 5-[[2-[(2R,5S)-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(44mg，100.81μmol，58.67％产率；RT＝23.440min)。
化合物465：RT(IA，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min)＝49.555min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.01-1.06(m,3H),1.30-1.42(m,1H),1.66-1.81(m,1H),1.81-1.96(m,1H),2.02-2.23(m,1H),2.24-2.35(m,1H),2.74-3.28(m,1H),3.48-4.04(m,4H),5.24-5.73(m,1H),7.26-7.39(m,1H),7.49-7.55(m,1H),7.67-7.75(m,3H),8.01-8.06(m,1H),8.42-8.61(m,2H),10.98-11.11(m,1H),13.00-13.04(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值436.2；实测值437.2；Rt＝2.909min。
化合物464：RT(IA，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min)＝45.171min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.00-1.05(m,3H),1.28-1.42(m,1H),1.71-1.82(m,1H),1.83-1.94(m,1H),2.02-2.23(m,1H),2.24-2.34(m,1H),2.76-3.26(m,1H),3.48-4.03(m,4H),5.18-5.76(m,1H),7.25-7.38(m,1H),7.49-7.57(m,1H),7.67-7.76(m,3H),8.01-8.08(m,1H),8.42-8.47(m,1H),8.47-8.60(m,1H),10.91-11.17(m,1H),12.95-13.12(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值436.2；实测值437.2；Rt＝2.907min。
实施例61.N-(5,6-二甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物631)和N-(5,6-二甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
步骤1：N-(5,6-二甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
在25℃下，在0.5h内，向5-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]-1H-吲唑(250mg，1.16mmol)、2-[(5,6-二甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(342.99mg，1.16mmol，N(C2H5)3)和三乙胺(1.18g，11.61mmol，1.62mL)于DMF(8mL)中的搅拌溶液中小批量添加HATU(485.68mg，1.28mmol)。将所得反应混合物在25℃下搅拌12h。通过反相HPLC(柱：YMCTriart C18 100*20mm，5um，流动相：50-50-80％0-1-5min0.1％ NH3-甲醇，流速：30ml/min，装载泵4ml/min甲醇)纯化粗反应混合物，以得到呈淡黄色固体的N-(5,6-二甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(240mg，613.08μmol，52.80％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.03(d,3H),1.32(m,1H),1.49(s,3H),1.78(m,2H),2.26(s,5H),3.28(s,3H),7.28(d,1H),7.52(d,1H),7.69(s,1H),7.83(s,1H),8.05(s,1H),8.52(s,1H),10.90(m,1H),13.03(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值391.2；实测值392.2；Rt＝1.468min。
步骤2：N-(5,6-二甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物631)和N-(5,6-二甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
将外消旋N-(5,6-二甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(240mg，613.08μmol)提交至制备型手性HPLC(柱：Chiralpak IB-I(250*20mm，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH，50-25-25；流速：10mL/min；柱温：23℃；波长：205nm.)，以得到呈白色固体的化合物631N-(5,6-二甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(111mg，283.55μmol，46.25％产率)(保留时间＝12.32min)；和化合物620N-(5,6-二甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(112mg，286.10μmol，46.67％产率)(保留时间＝20.73min)。
化合物631：RT(IB，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min)＝7.939min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.98-1.06(m,3H),1.30-1.40(m,1H),1.70-1.80(m,1H),1.82-1.93(m,1H),2.04-2.14(m,1H),2.15-2.25(m,3H),2.25-2.31(m,1H),2.31-2.38(m,3H),2.77-3.25(m,1H),3.37-4.05(m,1H),5.14-5.76(m,1H),7.25-7.39(m,1H),7.45-7.56(m,1H),7.66-7.72(m,1H),7.72-7.85(m,1H),7.98-8.08(m,1H),8.38-8.55(m,1H),10.73-11.11(m,1H),12.95-13.14(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值391.2；实测值392.2；Rt＝1.918min。
化合物620：RT(IB，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min)＝12.720min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.99-1.05(m,3H),1.29-1.41(m,1H),1.71-1.80(m,1H),1.81-1.92(m,1H),2.04-2.14(m,1H),2.16-2.24(m,3H),2.24-2.30(m,1H),2.31-2.37(m,3H),2.77-3.26(m,1H),3.42-4.06(m,1H),5.16-5.73(m,1H),7.24-7.40(m,1H),7.47-7.57(m,1H),7.66-7.72(m,1H),7.72-7.85(m,1H),8.00-8.06(m,1H),8.38-8.53(m,1H),10.79-11.01(m,1H),12.93-13.12(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值391.2；实测值392.2；Rt＝1.946min。
实施例62.5-[[2-[(2R,5S)-2-(3-氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物440)和5-[[2-[(2S,5R)-2-(3-氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物441)的合成
以与以上所述的化合物类似的方式制备Rel 5-[[2-[(2R,5S)-2-(3-氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺。
使用Chiralpak IA-II(250*20mm,5mkm)柱(以己烷-IPA-MeOH为流动相，70-15-15流速：12mL/min)进行手性分离，得到呈白色固体的化合物440 5-[[2-[(2R,5S)-2-(3-氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(46.05mg，114.88μmol，35.78％产率)和呈白色固体的化合物441 5-[[2-[(2S,5R)-2-(3-氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(48.11mg，120.02μmol，37.38％产率)。
化合物440：1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.01(m,3H),1.33(m,1H),1.64(m,1H),1.89(m,1H),2.14(m,2H),3.01(m,1H),3.76(m,1H),5.36(m,1H),7.32(m,3H),7.42(m,1H),7.59(m,1H),8.14(m,1H),8.47(m,1H),8.76(m,1H),8.86(m,1H),11.26(m,1H)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值400.1；实测值401.1；Rt＝3.179min。
化合物441：1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.01(m,3H),1.34(m,1H),1.63(m,1H),1.89(m,1H),2.14(m,2H),2.96(m,1H),3.66(m,1H),5.37(d,1H),7.32(m,3H),7.43(m,1H),7.59(m,1H),8.14(m,1H),8.47(m,1H),8.76(m,1H),8.86(m,1H),11.26(m,1H)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值400.1；实测值401.1；Rt＝3.179min。
实施例63.5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-羟基-3-甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺和5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-羟基-3-甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物330和化合物323)的合成
步骤1：5-[[2-[2-(4-羟基-3-甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
向2-甲基-4-(5-甲基-2-哌啶基)苯酚(0.21g，1.02mmol)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(317.46mg，1.02mmol，Et3N盐)和HATU(427.84mg，1.13mmol)于DMSO(4mL)中的搅拌溶液中添加DIPEA(264.40mg，2.05mmol，356.34μL)。将反应混合物在25℃下搅拌16小时。16小时之后，通过反相HPLC(洗脱液：2-10min，35-100％，CH3CN+甲酸/H2O；流速：30mL/min；装载泵：4mL，CH3CN+甲酸；柱：SunFireC18 100x 19mm，5um)纯化反应混合物，以获得呈白色固体的5-[[2-[2-(4-羟基-3-甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(100mg，252.25μmol，24.66％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值396.2；实测值397.0；Rt＝1.165min。
步骤2：5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-羟基-3-甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺和5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-羟基-3-甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物330和化合物323)的手性分离
使5-[[2-[2-(4-羟基-3-甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(100mg，252.25μmol)经历手性HPLC纯化(柱：Chiralpak IC-I(250x 20mm，5um)；流动相：己烷-IPA-MeOH，60-20-20；流速：12mL/min)，以得到呈淡黄色固体的5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-羟基-3-甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物330，28.37mg)和5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-羟基-3-甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物323，28.46mg)。
化合物330：1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)0.95-1.10(m,3H),1.27-1.38(m,1H),1.66-1.79(m,1H),1.81-1.94(m,1H),1.95-2.21(m,5H),2.77-3.21(m,1H),3.45-4.01(m,1H),4.99-5.57(m,1H),6.69-6.83(m,1H),6.90-6.99(m,1H),6.99-7.08(m,1H),7.54-7.67(m,1H),8.10-8.24(m,1H),8.41-8.55(m,1H),8.71-8.82(m,1H),8.82-8.94(m,1H),9.20-9.29(s,1H),11.12-11.29(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值396.2；实测值397.2；Rt＝2.862min。
手性HPLC：Rt＝30.96min(柱：IC；流动相：己烷-IPA-MeOH，50-25-25；流速：0.6mL/min)。
化合物323：1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)0.94-1.10(m,3H),1.26-1.40(m,1H),1.66-1.79(m,1H),1.80-1.94(m,1H),1.93-2.23(m,5H),2.78-3.22(m,1H),3.44-4.01(m,1H),4.98-5.57(m,1H),6.68-6.82(m,1H),6.86-6.98(m,1H),6.98-7.07(m,1H),7.51-7.72(m,1H),8.06-8.28(m,1H),8.37-8.61(m,1H),8.69-8.82(m,1H),8.82-8.97(m,1H),9.16-9.32(s,1H),11.09-11.32(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值396.2；实测值397.2；Rt＝2.863min。
手性HPLC：Rt＝19.20min(柱：IC；流动相：己烷-IPA-MeOH，50-25-25；流速：0.6mL/min)。
实施例64.5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺和5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物325和化合物319)的合成
步骤1：5-[[2-[5-甲基-2-(2-氧代吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
在室温下，向5-(5-甲基-2-哌啶基)吲哚啉-2-酮(0.4g，1.74mmol)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(426.60mg，1.74mmol，盐酸盐)和三乙胺(1.76g，17.37mmol，2.42mL)于DMF(5mL)中的搅拌溶液中添加HATU(990.59mg，2.61mmol)。将所得反应混合物在同一温度下搅拌18小时。18小时之后，在减压下浓缩反应混合物。通过HPLC(洗脱液：2-10min，60-85％，MeOH/H2O；流速：30mL/min；装载泵：4mL，MeOH；柱：SunFire 100x19mm，5μM)纯化所获得的残余物，以得到呈红色固体的5-[[2-[5-甲基-2-(2-氧代吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.09g，213.55μmol，12.30％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值421.2；实测值422.2；Rt＝1.067min。
步骤2：5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺和5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物325和化合物319)的手性分离
使5-[[2-[5-甲基-2-(2-氧代吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.09g，213.55μmol)经历手性HPLC(柱：IC(250x 20mm，5um)，洗脱液：CO2-MeOH，50-50；流速：40mL/min)，以得到呈淡红色固体的5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物325，26.54mg，62.97μmol，29.49％产率)和5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物319，0.0312g，74.03μmol，34.67％产率)。
化合物319：
1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)1.03(m,3H),1.33(m,1H),1.72(m,1H),1.89(m,1H),2.02(m,1H),2.18(m,1H),2.83(m,1H),3.64(m,3H),5.33(m,1H),6.81(m,1H),7.16(m,2H),7.60(m,1H),8.15(m,1H),8.47(m,1H),8.75(m,1H),8.90(m,1H),10.35(m,1H),11.26(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值421.2；实测值422.2；Rt＝2.467min。
手性HPLC：Rt＝17.33min(柱：IC；洗脱液：CO2-MeOH，60-40；流速：3.0mL/min)。
化合物325：
1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)1.03(m,3H),1.33(m,1H),1.72(m,1H),1.88(m,1H),2.04(m,1H),2.19(m,1H),3.09(m,1H),3.64(m,3H),5.33(m,1H),6.81(m,1H),7.16(m,2H),7.61(m,1H),8.16(m,1H),8.48(m,1H),8.76(m,1H),8.86(m,1H),10.36(m,1H),11.26(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值421.2；实测值422.2；Rt＝2.486min。
手性HPLC：Rt＝12.75min(柱：IC；洗脱液：CO2-MeOH，60-40；流速：3.0mL/min)。
实施例65.2-甲氧基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺和2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物453和化合物454)的合成
步骤1：2-甲氧基-5-(5-甲基-2-(2-氧代吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
在室温下，向5-(5-甲基-2-哌啶基)吲哚啉-2-酮(200mg，868.41μmol)、2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(295.58mg，868.41μmol，Et3N盐)和三乙胺(439.37mg，4.34mmol，605.19μL)于DMF(4mL)中的搅拌溶液中添加HATU(495.30mg，1.30mmol)。将所得反应混合物在同一温度下搅拌12小时。12小时之后，在减压下浓缩反应混合物。通过HPLC纯化所获得的残余物，以得到呈淡黄色固体的2-甲氧基-5-(5-甲基-2-(2-氧代吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(67.3mg，149.07μmol，17.17％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值451.2；实测值452.2；Rt＝1.158min。
步骤2：2-甲氧基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺和2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物453和化合物454)的手性分离
使2-甲氧基-5-(5-甲基-2-(2-氧代吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(67.3mg，149.07μmol)经历手性HPLC(柱：Chiralpak IB(250x 30mm，5um)；流动相：CO2-MeOH，70-30；流速：80mL/min)，以得到呈白色固体的2-甲氧基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物453，17.04mg，37.74μmol，25.32％产率)和2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物454，18.37mg，40.69μmol，27.30％产率)。
化合物453：
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.00(m,3H),1.31(m,1H),1.83(m,3H),2.14(m,1H),3.01(m,1H),3.45(m,3H),3.93(m,3H),5.30(m,1H),6.78(d,1H),7.14(m,2H),7.71(m,2H),8.48(m,2H),10.33(m,1H),10.98(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值451.2；实测值452.2；Rt＝2.688min。
手性HPLC：Rt＝13.46min(柱：IB；洗脱液：CO2-MeOH，75-25；流速：2.0mL/min)。
化合物454：
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.00(m,3H),1.32(m,1H),1.71(m,1H),1.87(m,1H),2.07(m,2H),3.01(m,1H),3.45(m,2H),3.93(m,3H),5.30(m,1H),6.79(dd,1H),7.13(m,2H),7.72(m,2H),8.48(m,2H),10.33(m,1H),10.98(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值451.2；实测值452.2；Rt＝2.687min。
手性HPLC：Rt＝16.19min(柱：IB；洗脱液：CO2-MeOH，75-25；流速：2.0mL/min)。
实施例66.5-[[2-[(2R,4R,5S)-4,5-二甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物231)和5-[[2-[(2S,4S,5S)-4,5-二甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物229)的合成
将4,5-二甲基-2-苯基哌啶(0.076g，401.49μmol)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(83.97mg，401.49μmol)、TEA(406.27mg，4.01mmol，559.59μL)和HATU(228.99mg，602.23μmol)溶解于DMF(2mL)中。将反应混合物在20℃下搅拌3h。将所得混合物用水稀释且用EtOAc萃取三次。然后，将EtOAc用盐水萃取三次。将有机相经Na2SO4干燥，过滤出且在40℃下蒸发，以得到粗产物。通过HPLC(0-50％甲醇，2-10min，流速30ml/min(装载泵4ml/min甲醇)柱：SunFire C18 100x20mm)纯化所获得的残余物，以得到化合物229 5-[[2-[(2S,4S,5S)-4,5-二甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.017g，44.69μmol，11.13％产率)和化合物2315-[[2-[(2R,4R,5S)-4,5-二甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.035g，92.00μmol，22.91％产率)。
化合物231：1H NMR(甲醇-d4,400MHz):δ(ppm)1.05(dd,6H),1.64(m,3H),2.07(m,1H),3.80(m,2H),5.19(m,1H),7.26(m,5H),8.70(m,3H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值380.2；实测值381.2；Rt＝1.167min。
化合物229：1H NMR(氯仿-d,400MHz):δ(ppm)0.77(m,6H),2.04(m,6H),2.88(m,1H),4.52(m,1H),6.24(m,2H),7.27(m,4H),8.52(m,1H),8.84(m,2H),9.90(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值380.2；实测值381.2；Rt＝1.180min。
实施例67.5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(2,2,2-三氟乙基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物455)和5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(2,2,2-三氟乙基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物456)的合成
步骤1：4-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]-N-(2,2,2-三氟乙基)苯胺的合成
将(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(2,2,2-三氟乙基氨基)苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.85g，4.97mmol)溶解于二氯甲烷(20mL)中且添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(18.11g，49.67mmol，17.93mL，10％纯度)。将所得混合物在25℃下搅拌15h，且在减压下浓缩。将残余物用乙酸乙酯(25ml)研磨。将所获得的灰色沉淀过滤且干燥，得到4-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]-N-(2,2,2-三氟乙基)苯胺(1.2g，3.48mmol，69.97％产率，2HCl)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.87(m,1H),1.05(d,3H),1.49(m,1H),1.75(m,2H),1.97(m,2H),2.83(m,1H),3.09(m,1H),3.88(m,2H),4.04(m,1H),5.74(s,1H),6.71(d,2H),7.26(d,2H),8.53(m,1H),9.43(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值272.2；实测值273.2；Rt＝0.967min。
步骤2：5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(2,2,2-三氟乙基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
将4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-N-(2,2,2-三氟乙基)苯胺(300mg，1.10mmol，2HCl)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(270.60mg，1.10mmol，HCl)和三乙胺(557.40mg，5.51mmol，767.77μL)一起混合于二甲基甲酰胺(3mL)中。将所获得的混合物简单加热至60-70℃，直到形成澄清溶液。冷却至5-10℃之后，在5min期间分批添加HATU(460.78mg，1.21mmol)。将所得溶液在25℃下搅拌15h。然后使其经历HPLC(柱：YMC-TriartC18 100*20mm，5um；30-85％0-5min 0.1％ NH3-甲醇，流速30ml/min)，得到5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(2,2,2-三氟乙基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(274mg，591.22μmol，53.66％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值463.2；实测值464.2；Rt＝3.207min。
步骤3：5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(2,2,2-三氟乙基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物455)和5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(2,2,2-三氟乙基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物456)的合成
通过手性HPLC(柱：Chiralpak OJ(250*30mm，20mkm)；流动相：CO2-MeOH，60-40％；流速：90mL/min；40℃；波长：215nm.)将5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(2,2,2-三氟乙基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(226mg，487.64μmol)分离成对映异构体，得到：化合物455 5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(2,2,2-三氟乙基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(61mg，131.62μmol，53.98％产率)(保留时间＝2.92min)和化合物4565-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(2,2,2-三氟乙基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(61mg，131.62μmol，53.98％产率)(保留时间＝8,11min)
化合物455：RT(OJ-H，CO2-MeOH，50-50，2.0mL/min)＝2.786min。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)0.74(m,3H),1.13(m,1H),1.63(m,2H),1.83(m,1H),2.37(m,2H),3.76(m,3H),5.27(d,1H),6.20(t,1H),6.72(m,2H),7.03(d,1H),7.07(d,1H),7.58(m,1H),8.14(m,1H),8.47(m,1H),8.75(m,1H),8.86(m,1H),11.22(m,1H)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值463.2；实测值464.2；Rt＝3.067min。
化合物456：RT(OJ-H，CO2-MeOH，50-50，2.0mL/min)＝8.110min。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)0.74(m,3H),1.12(m,1H),1.64(m,2H),1.81(m,1H),2.37(m,2H),3.76(m,3H),5.27(m,1H),6.20(t,1H),6.72(m,2H),7.03(d,1H),7.07(d,1H),7.58(m,1H),8.14(m,1H),8.47(m,1H),8.75(m,1H),8.86(m,1H),11.23(m,1H)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值463.2；实测值464.2；Rt＝3.064min。
实施例68.5-[[2-[(2R,5R)-2-[4-[[2-(二甲基氨基)-2-氧代乙基]氨基]苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物422)、5-[[2-[(2S,5R)-2-[4-[[2-(二甲基氨基)-2-氧代乙基]氨基]苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物437)和5-[[2-[(2R,5S)-2-[4-[[2-(二甲基氨基)-2-氧代乙基]氨基]苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物1082)的合成
步骤1：5-[[2-[(2R,5R)-2-[4-[[2-(二甲基氨基)-2-氧代乙基]氨基]苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物422)的合成
将N,N-二甲基-2-[4-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]苯胺基]乙酰胺(400mg，1.45mmol，2HCl)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(321.09mg，1.31mmol，HCl)和三乙胺(734.89mg，7.26mmol，1.01mL)一起混合于二甲基甲酰胺(4mL)中。将所获得的混合物简单加热至60-70℃，直到形成澄清溶液。冷却至5-10℃之后，在5min期间分批添加HATU(552.28mg，1.45mmol)。将所得溶液在25℃下搅拌15h。然后，使其经历HPLC(柱：YMC-Triart C18 100*20mm，5um；30-30-60％0-1-6min 0.1％ NH3-甲醇，流速30ml/min.)，得到5-[[2-[(2S,5R)-2-[4-[[2-(二甲基氨基)-2-氧代乙基]氨基]苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(227mg，486.57μmol，33.50％产率)和5-[[2-[(2R,5R)-2-[4-[[2-(二甲基氨基)-2-氧代乙基]氨基]苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(19mg，40.73μmol，2.80％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ0.71-0.91(m,3H),1.10-1.23(m,1H),1.57-1.74(m,2H),1.77-1.95(m,1H),2.40-2.44(m,1H),2.57-2.60(m,1H),2.79-2.94(m,3H),2.93-3.09(m,3H),3.53-4.23(m,3H),5.00-5.61(m,2H),6.60-6.78(m,2H),6.99-7.14(m,2H),7.57-7.68(m,1H),8.12-8.23(m,1H),8.44-8.57(m,1H),8.73-8.84(m,1H),8.84-8.96(m,1H),11.23-11.30(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值466.2；实测值467.2；Rt＝2.659min。
步骤2：5-[[2-[(2S,5R)-2-[4-[[2-(二甲基氨基)-2-氧代乙基]氨基]苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物437)和5-[[2-[(2R,5S)-2-[4-[[2-(二甲基氨基)-2-氧代乙基]氨基]苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物1082)的合成
通过手性HPLC(柱：Chiralpak IB(250*20mm，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH，50-25-25；流速：12mL/min；m 200mg，2次注入，100mg/注入，V＝2l，时间2,5h.))将5-[[2-[(2S,5R)-2-[4-[[2-(二甲基氨基)-2-氧代乙基]氨基]苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(200mg，428.70μmol)分离成对映异构体，得到：化合物437 5-[[2-[(2S,5R)-2-[4-[[2-(二甲基氨基)-2-氧代乙基]氨基]苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(78mg，167.19μmol，78.00％产率)(其中保留时间26.49min)和化合物10825-[[2-[(2R,5S)-2-[4-[[2-(二甲基氨基)-2-氧代乙基]氨基]苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(78mg，167.19μmol，78.00％产率)(其中保留时间42.74min)。
化合物437：RT(IB，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝25.532min。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ1.01-1.06(m,3H),1.28-1.42(m,1H),1.67-1.94(m,2H),1.94-2.12(m,1H),2.12-2.22(m,1H),2.76-2.82(m,0.3H),2.82-2.93(m,3H),2.96-3.07(m,3H),3.21-3.26(m,0.7H),3.41-3.97(m,3H),4.98-5.58(m,2H),6.57-6.77(m,2H),6.97-7.13(m,2H),7.46-7.73(m,1H),8.11-8.26(m,1H),8.41-8.57(m,1H),8.70-8.85(m,1H),8.85-8.98(m,1H),11.08-11.33(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值466.2；实测值467.2；Rt＝2.595min。
化合物1082：RT(IB，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝50.919min。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ1.01-1.05(m,3H),1.28-1.41(m,1H),1.66-1.94(m,2H),1.94-2.11(m,1H),2.11-2.21(m,1H),2.76-2.82(m,0.4H),2.85-2.89(m,3H),2.98-3.03(m,3H),3.17-3.23(m,0.6H),3.43-3.98(m,3H),4.95-5.60(m,2H),6.54-6.75(m,2H),6.98-7.14(m,2H),7.52-7.74(m,1H),8.09-8.27(m,1H),8.39-8.57(m,1H),8.70-8.82(m,1H),8.82-8.97(m,1H),11.15-11.29(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值466.2；实测值467.2；Rt＝2.593min。
实施例69.5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-[[(3R)-1-甲基-2-氧代-吡咯烷-3-基]氨基]苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物430)和5-[[2-[(2R,5R)-5-甲基-2-[4-[[(3R)-1-甲基-2-氧代-吡咯烷-3-基]氨基]苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物427)的合成
将(3R)-1-甲基-3-[4-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]苯胺基]吡咯烷-2-酮(500.00mg，1.74mmol，2HCl)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(427.31mg，1.74mmol，HCl)和三乙胺(880.22mg，8.70mmol，1.21mL)一起混合于二甲基甲酰胺(5mL)中。将所获得的混合物简单加热至60-70℃，直到形成澄清溶液。冷却至5-10℃之后，在5min期间分批添加HATU(727.65mg，1.91mmol)。将所得溶液在25℃下搅拌15h。然后使其经历HPLC(柱：YMC Triart C18 100*20mm，5um；30-30-65％0-1-5min 0.1％ NH3-甲醇，流速：30ml/min)，得到5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-[[(3R)-1-甲基-2-氧代-吡咯烷-3-基]氨基]苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(180mg，376.14μmol，21.62％产率)和5-[[2-[(2R,5R)-5-甲基-2-[4-[[(3R)-1-甲基-2-氧代-吡咯烷-3-基]氨基]苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(28mg，58.51μmol，3.36％产率)。
化合物430：
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ0.96-1.07(m,3H),1.27-1.41(m,1H),1.65-1.79(m,2H),1.79-2.02(m,2H),2.07-2.24(m,2H),2.56-2.61(m,1H),2.75-3.27(m,4H),3.34-3.99(m,2H),4.00-4.07(m,1H),5.00-5.55(m,1H),5.63-5.78(m,1H),6.60-6.78(m,2H),6.96-7.13(m,2H),7.53-7.68(m,1H),8.10-8.25(m,1H),8.38-8.57(m,1H),8.68-8.84(m,1H),8.84-8.97(m,1H),11.06-11.32(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值478.2；foun 479.2；Rt＝2.707
min。
化合物427：
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ0.72-0.82(m,3H),1.09-1.25(m,1H),1.56-1.70(m,2H),1.70-1.84(m,2H),1.84-2.23(m,1H),2.39-2.44(m,1H),2.58-2.61(m,1H),2.77-2.79(m,3H),3.30-3.31(m,1H),3.35-3.37(m,1H),3.53-4.21(m,2H),4.98-5.61(m,1H),5.70-5.84(m,1H),6.67-6.72(m,2H),7.01-7.10(m,2H),7.57-7.66(m,1H),8.14-8.21(m,1H),8.47-8.55(m,1H),8.76-8.81(m,1H),8.86-8.94(m,1H),11.24-11.28(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值478.2；foun 479.2；Rt＝2.636min。
实施例70.5-[[2-[(2R,5S)-2-[4-[[(1R)-2-(二甲基氨基)-1-甲基-2-氧代乙基]氨基]苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物414)的合成
将(2R)-N,N-二甲基-2-[4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯胺基]丙酰胺(0.69g，2.38mmol，2HCl)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(585.59mg，2.38mmol，HCl)和三乙胺(1.21g，11.92mmol，1.66mL)一起混合于二甲基甲酰胺(8mL)中。将所获得的混合物简单加热至60-70℃，直到形成澄清溶液。冷却至5-10℃之后，在5min期间分批添加HATU(997.17mg，2.62mmol)。将所得溶液在25℃下搅拌15h。然后使其经历HPLC(柱：YMC-Triart C18 100*20mm，5um；10-10-50％0-1-6min 0.1％ NH3-甲醇，流速30ml/min.)，得到5-[[2-[(2R,5S)-2-[4-[[(1R)-2-(二甲基氨基)-1-甲基-2-氧代乙基]氨基]苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(467mg，971.79μmol，40.76％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ1.00-1.19(m,3H),1.20-1.31(m,3H),1.34-1.45(m,1H),1.78-1.98(m,2H),2.00-2.22(m,2H),2.86-2.92(m,3H),3.10-3.15(m,3H),3.19-3.32(m,1H),3.55-4.10(m,1H),4.32-4.47(m,1H),5.08-5.65(m,2H),6.48-6.65(m,2H),6.94-7.10(m,2H),7.25-7.43(m,1H),7.95-8.12(m,1H),8.46-8.56(m,1H),8.63-8.77(m,1H),8.81-9.04(m,1H),10.99-11.17(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值480.2；实测值481.2；Rt＝2.687min。
实施例71.5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物426)和5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物432)的合成
步骤1：5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
将6-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,2,3,4-四氢喹啉(0.1g，377.69μmol)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(0.148g，707.60μmol，TEA)、HATU(0.217g，570.71μmol)、DIPEA(0.086g，665.41μmol，115.90μL)置于8mL小瓶中且在25℃下于DMSO(1mL)中搅拌12h。反应混合物的LCMS光谱显示38％所需产物。将反应混合物提交至HPLC，以得到5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.048g，113.88μmol，30.15％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值421.2；实测值422.2；Rt＝0.959min。
步骤2：5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物426)和5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物432)的合成
将初始外消旋物提交至手性分离，以得到5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.04g，94.90μmol，42.11％产率，化合物426)和5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.03g，71.18μmol，31.58％产率，化合物432)。
制备性样品信息：IA(250*30,5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，12ml/min，和
HPLC样品信息：注入体积900.000μl，C18，H2O-MeCN，15-45％MeCN，30ml/min
化合物426：
RT(IA，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝21.419min。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ1.00-1.05(m,3H),1.27-1.38(m,1H),1.72-1.85(m,4H),1.93-2.06(m,1H),2.10-2.18(m,1H),2.64-2.70(m,2H),2.86-3.23(m,3H),3.37-4.00(m,1H),4.92-5.51(m,1H),5.58-5.63(m,1H),6.39-6.46(m,1H),6.78-6.86(m,2H),7.58-7.66(m,1H),8.13-8.20(m,1H),8.45-8.53(m,1H),8.75-8.81(m,1H),8.83-8.93(m,1H),11.12-11.30(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值421.2；实测值422.2；Rt＝3.526min。
化合物432：
RT(IA，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝47.532min。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ1.00-1.06(m,3H),1.25-1.37(m,1H),1.69-1.90(m,4H),1.92-2.06(m,1H),2.08-2.18(m,1H),2.63-2.72(m,2H),2.84-3.25(m,3H),3.36-3.97(m,1H),4.91-5.56(m,1H),5.57-5.67(m,1H),6.35-6.49(m,1H),6.72-6.90(m,2H),7.50-7.73(m,1H),8.07-8.24(m,1H),8.41-8.60(m,1H),8.70-8.83(m,1H),8.83-8.97(m,1H),11.08-11.29(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值421.2；实测值422.2；Rt＝3.582min。
实施例72.5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物479)和5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物480)的合成
步骤1：5-(2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺的合成
将6-(5-甲基-2-哌啶基)-3,4-二氢-1H-喹啉-2-酮(0.4g，1.24mmol，HCl)、C8H7N3O4(311.06mg，1.49mmol，TEA)、HATU(612.61mg，1.61mmol)和DIPEA(742.00mg，5.74mmol，1mL)的混合物在DMSO(5mL)中搅拌过夜。反应混合物的LCMS分析显示24％所需产物。此后，将反应混合物提交至HPLC(2-10min 40-60％水/MeCN+NH3(装载泵4ml MeCN+NH3))柱：TRIART 100*20mm 5微米)，以得到5-(2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(0.084g，192.89μmol，15.56％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值435.2；实测值436.2；Rt＝2.416min。
步骤2：5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物479)和5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物480)的合成
将5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.084g，192.89μmol)提交至手性分离(注入体积:100mkl；样品信息：IC-I(250*20，5mic)，IPA-MeOH，50-50，10ml/min)，以得到纯的化合物4795-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.038g，87.26μmol，45.24％产率)和化合物480 5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.035g，80.37μmol，41.67％产率)。
化合物479：RT(IC，MeOH-IPA，50-50，0.6mL/min)＝26.004min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.98-1.04(m,3H),1.27-1.37(m,1H),1.59-1.77(m,1H),1.80-1.94(m,1H),1.95-2.11(m,1H),2.12-2.23(m,1H),2.37-2.44(m,2H),2.83-3.25(m,3H),3.43-4.00(m,1H),5.01-5.57(m,1H),6.78-6.94(m,1H),7.04-7.17(m,2H),7.53-7.63(m,1H),8.06-8.20(m,1H),8.41-8.53(m,1H),8.69-8.79(m,1H),8.79-8.93(m,1H),10.00-10.06(m,1H),11.09-11.40(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值435.2；实测值436.2；Rt＝2.215min。
化合物480：RT(IC，MeOH-IPA，50-50，0.6mL/min)＝17.820min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.97-1.06(m,3H),1.27-1.39(m,1H),1.65-1.76(m,1H),1.81-1.94(m,1H),1.94-2.12(m,1H),2.13-2.21(m,1H),2.38-2.44(m,2H),2.81-3.26(m,3H),3.42-4.00(m,1H),5.02-5.60(m,1H),6.79-6.89(m,1H),7.05-7.19(m,2H),7.54-7.67(m,1H),8.08-8.20(m,1H),8.41-8.53(m,1H),8.68-8.79(m,1H),8.79-8.93(m,1H),10.00-10.11(m,1H),11.12-11.30(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值435.2；实测值436.2；Rt＝2.213min。
实施例73.2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物673)和2-甲氧基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物674)的合成
步骤1：2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
向6-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-3,4-二氢-1H-喹啉-2-酮(0.4g，1.64mmol)、2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(469.89mg，1.96mmol，TEA)和DIPEA(1.06g，8.19mmol，1.43mL)于DMSO(5mL)中的搅拌溶液中添加HATU(746.98mg，1.96mmol)。将所得反应混合物在25℃下搅拌16h。完成之后，将反应混合物提交至反相HPLC(2-10min 50-60％水/MeOH(装载泵4mL MeOH)柱：TRIART 100*20 5微米)，以得到呈淡黄色固体的2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.228g，489.79μmol，29.92％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值465.2；实测值466.4；Rt＝0.934min。
步骤2：2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物673)和2-甲氧基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物674)的合成
将2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.228g，489.80μmol)提交至手性分离(IA-II(250*20，5mkm)，MeOH，100，16mL/min)，以得到化合物673 2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.063g，135.34μmol，27.63％产率)和化合物674 2-甲氧基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.066g，141.78μmol，28.95％产率)。
化合物673：RT(IC,CO2-MeOH,50-50,2.0mL/min)＝22.191min。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.00(m,3H),1.32(m,1H),1.92(m,5H),2.95(m,4H),3.93(m,4H),5.27(m,1H),6.86(m,1H),7.09(m,2H),7.72(m,2H),8.47(m,2H),10.03(m,1H),10.98(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值465.2；实测值466.0；Rt＝2.279min。
化合物674：RT(IC，CO2-MeOH，50-50，2.0mL/min)＝28.266min。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.00(m,3H),1.32(m,1H),1.68(m,1H),1.86(m,1H),2.09(m,2H),2.43(m,2H),2.86(m,3H),3.93(m,4H),5.28(m,1H),6.84(m,1H),7.09(m,2H),7.72(m,2H),8.47(m,2H),10.03(m,1H),10.99(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值465.2；实测值466.0；Rt＝2.279min。
实施例74.N-(5,6-二甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4,4a,8a-四氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物632)和N-(5,6-二甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4,4a,8a-四氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物619)的合成
步骤1：N-(5,6-二甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4,4a,8a-四氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
向6-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-3,4,4a,8a-四氢-1H-喹啉-2-酮(300mg，1.22mmol)、2-[(5,6-二甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(359.71mg，1.22mmol，Et3N)和三乙胺(123.23mg，1.22mmol，169.74μL)于DMF(3mL)中的溶液中分批添加HATU(463.04mg，1.22mmol)。将混合物在25℃下搅拌3h。然后通过反相HPLC(40-40-65％0-1-5min 0.2％TFA-甲醇，流速：30ml/min(装载泵4ml/min甲醇)，目标质量420，柱：YMC Triart C18 100*20mm,5um)纯化反应混合物，以得到呈2种级分的N-(5,6-二甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4,4a,8a-四氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(320mg，757.36μmol，62.19％产率)：
第1级分：120mg(96％ LCMS；含有4％顺式异构体)。(将第1级分提交用于手性分离)
第2级分：200mg(91％ LCMS；含有9％顺式异构体)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值422.2；实测值421.2；Rt＝1.894min。
步骤2：N-(5,6-二甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4,4a,8a-四氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物632)和N-(5,6-二甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4,4a,8a-四氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物619)的合成
使外消旋N-(5,6-二甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4,4a,8a-四氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(120mg，284.01μmol)经历手性HPLC(Chiralpak IA 250*20mm，5mkm；己烷-IPA-MeOH，50-25-25，15ml/min)，以得到呈白色固体的化合物632N-(5,6-二甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4,4a,8a-四氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(34mg，80.47μmol，56.67％产率)(保留时间：23.778min)和化合物619N-(5,6-二甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4,4a,8a-四氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(36mg，85.20μmol，60.00％产率)(保留时间：35.085min)。
化合物632：RT(IA，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝23.778min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.95-1.04(m,3H),1.27-1.37(m,1H),1.62-1.74(m,1H),1.81-1.92(m,1H),1.95-2.12(m,1H),2.12-2.17(m,1H),2.17-2.24(m,3H),2.32-2.36(m,3H),2.39-2.45(m,2H),2.78-3.22(m,3H),3.38-3.98(m,1H),4.98-5.54(m,1H),6.78-6.88(m,1H),7.03-7.16(m,2H),7.70-7.85(m,1H),8.38-8.53(m,1H),10.00-10.07(m,1H),10.80-10.95(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值420.2；实测值421.2；Rt＝1.959min。
化合物619：RT(IA，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝35.085min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.96-1.04(m,3H),1.26-1.36(m,1H),1.63-1.74(m,1H),1.79-1.92(m,1H),1.95-2.10(m,1H),2.10-2.17(m,1H),2.17-2.23(m,3H),2.32-2.36(m,3H),2.41-2.46(m,2H),2.81-3.23(m,3H),3.36-3.99(m,1H),4.98-5.56(m,1H),6.79-6.88(m,1H),7.04-7.14(m,2H),7.71-7.83(m,1H),8.39-8.51(m,1H),9.94-10.14(m,1H),10.73-11.07(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值420.2；实测值421.2；Rt＝1.960min。
实施例75.N-(5-氯-6-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物639)、N-(5-氯-6-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物727)和N-(5-氯-6-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物726)的合成
步骤1：N-(5-氯-6-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物639)
在轻微加热下，将2-[(5-氯-6-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(250mg，1.13mmol，Li+)、6-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-3,4-二氢-1H-喹啉-2-酮(275.71mg，1.13mmol)和DIPEA(175.01mg，1.35mmol，235.86μL)溶解于DMSO(3mL)中。在剧烈搅拌和偶尔加热下，小批量添加HATU(643.60mg，1.69mmol)。反应混合物的LCMS显示形成产物；使粗反应混合物经历HPLC(28％0.5-6.5min水-乙腈；流速30ml/min(装载泵4ml/min乙腈)；目标质量440；柱SunFireC18100x19 mm 5um(R))和再纯化(61％0.5-6.5min水-MeOH；流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeOH)；目标质量440；柱SunFire 100x19mm 5um(L))，以得到N-(5-氯-6-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(50mg，113.40μmol，10.05％产率)和2％杂质N-(5-氯-6-甲基-3-吡啶基)-N',N'-二甲基草酰胺。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.00(m,3H),1.32(m,1H),1.70(m,1H),1.86(m,1H),2.01(m,1H),2.15(m,1H),2.39(m,4H),2.60(m,1H),3.03(m,3H),3.61(m,1H),5.28(m,1H),6.83(m,1H),7.08(m,2H),8.15(m,1H),8.58(m,1H),10.02(m,1H),11.15(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值440.2；实测值441.4；Rt＝2.971min。
步骤2：N-(5-氯-6-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物727)和N-(5-氯-6-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物726)的合成
使用Chiralpak AD-H-III(250*20mm,5mkm)柱(以己烷-IPA-MeOH，50-25-25为流动相，速率：12mL/min；柱温：24℃；波长：210nm、254nm)进行N-(5-氯-6-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(29.8mg，67.59μmol)的手性分离，得到呈黄色固体的化合物727N-(5-氯-6-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(18.63mg，42.25μmol，62.52％产率)(RT＝55.148min)和呈黄色固体的化合物726N-(5-氯-6-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(19.71mg，44.70μmol，66.14％产率)(RT＝39.309min)。
化合物727：RT(AD-H，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min)＝66.902min
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.01(m,3H),1.30(m,1H),1.68(m,1H),1.86(m,1H),1.98(s,1H),2.07(m,1H),2.15(m,1H),2.40(m,3H),2.94(m,3H),3.42(m,2H),4.18(m,1H),5.27(m,1H),6.82(m,1H),7.08(m,2H),8.15(m,1H),8.57(m,1H),10.02(m,1H),11.16(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值440.1；实测值441.2；Rt＝1.129min。
化合物726：RT(AD-H，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min)＝47.393min
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.03(m,3H),1.31(m,1H),1.69(m,1H),1.86(m,1H),2.03(m,1H),2.15(m,1H),2.41(m,3H),2.86(m,3H),3.43(m,2H),4.18(m,1H),5.28(m,1H),6.82(m,1H),7.08(m,2H),8.15(m,1H),8.58(m,1H),10.02(m,1H),11.15(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值440.1；实测值441.2；Rt＝1.129min。
实施例76.2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-N-[6-甲基-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物697)和2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-N-[6-甲基-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物698)的合成
步骤1：2-[5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-N-[6-甲基-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]-2-氧代乙酰胺的合成将DIPEA(203.12mg，1.57mmol，273.74μL)添加到相应2-[[6-甲基-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(0.13g，523.86μmol)和6-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-3,4-二氢-1H-喹啉-2-酮(127.99mg，523.86μmol)于DMF(5mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU(219.11mg，576.24μmol)。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC(Waters Sunfire C18 20*100 5mkm柱且以H2O-MeCN为洗脱液混合物)，以得到2-[5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-N-[6-甲基-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]-2-氧代乙酰胺(0.11g，231.84μmol，44.26％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值474.2；实测值475.2；Rt＝3.264min。
步骤2：2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-N-[6-甲基-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物697)和2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-N-[6-甲基-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物698)的合成
使用OJ-H-I(250*20，5mkm)柱(以己烷-IPA-MeOH 60-20-20为流动相，流速13mL/min)手性分离2-[5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-N-[6-甲基-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]-2-氧代乙酰胺(110mg)，得到化合物697 2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-N-[6-甲基-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]-2-氧代乙酰胺(32.87mg，29.88％产率；RT＝9.077min)和化合物6982-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-N-[6-甲基-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]-2-氧代乙酰胺(42.43mg，38.57％产率；RT＝16.671min)。
化合物697：RT(OJ-H，己烷-IPA-MeOH，70-15-15，0.6mL/min)＝15.362min。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)0.99(m,3H),1.30(m,1H),1.70(m,1H),1.87(m,1H),2.02(m,1H),2.16(m,1H),2.43(m,2H),2.56(m,3H),2.86(m,3H),3.78(m,1H),5.29(m,1H),6.83(m,1H),7.08(t,2H),8.39(m,1H),8.87(m,1H),10.02(m,1H),11.29(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值474.2；实测值475.4；Rt＝1.311min。
化合物698：RT(OJ-H，己烷-IPA-MeOH，70-15-15，0.6mL/min)＝51.594min。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.00(m,3H),1.32(m,1H),1.69(m,1H),1.88(m,1H),2.04(m,1H),2.16(m,1H),2.37(m,1H),2.43(m,2H),2.56(m,3H),2.99(m,2H),3.79(m,1H),5.30(m,1H),6.83(m,1H),7.08(m,2H),8.39(m,1H),8.88(m,1H),10.02(m,1H),11.28(m,1H)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值474.2；实测值475.2；Rt＝1.311min。
实施例77.2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-N-[5-甲基-6-(三氟甲基)-3-吡啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物650)的合成
在轻微加热下，将2-[[5-甲基-6-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(0.25g，980.01μmol，Li+)、6-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-3,4-二氢-1H-喹啉-2-酮(239.45mg，980.01μmol)和DIPEA(151.99mg，1.18mmol，204.84μL)溶解于DMSO(6mL)中。在剧烈搅拌和偶尔加热下，小批量添加HATU(558.94mg，1.47mmol)。反应混合物的LCMS显示形成产物；使粗反应混合物经历HPLC(37％0.5-6.5min水-乙腈；流速30ml/min(装载泵4ml/min乙腈)；目标质量474；柱SunFireC18 100x19 mm 5um(R))和再纯化(62％0.5-5min水-MeOH；流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeOH)；目标质量474；柱SunFire100x19 mm 5um(L))，以得到2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-N-[5-甲基-6-(三氟甲基)-3-吡啶基]-2-氧代乙酰胺(18mg，37.94μmol，3.87％产率)和2％杂质N',N'-二甲基-N-[5-甲基-6-(三氟甲基)-3-吡啶基]草酰胺。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.00(dd,3H),1.31(m,1H),1.71(m,1H),1.88(m,1H),2.02(m,1H),2.16(m,1H),2.37(m,3H),2.44(m,3H),2.85(m,2H),3.68(m,1H),5.26(m,1H),6.83(m,1H),7.09(m,2H),8.16(m,1H),8.70(m,1H),10.03(m,1H),11.37(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值474.2；实测值475.0；Rt＝3.166min。
实施例78.外消旋-N-[5-(二氟甲基)-6-甲基-3-吡啶基]-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物803)、和N-[5-(二氟甲基)-6-甲基-3-吡啶基]-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物874)、和N-[5-(二氟甲基)-6-甲基-3-吡啶基]-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物903)的合成
步骤1：N-[5-(二氟甲基)-6-甲基-3-吡啶基]-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物803)的合成
将6-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]-3,4-二氢-1H-喹啉-2-酮(309.14mg，1.27mmol)和TEA(1.28g，12.65mmol，1.76mL)溶解于DMF(10mL)且冷却至0℃，添加HATU(721.62mg，1.90mmol)且将混合物在0℃下搅拌15min。添加2-[[5-(二氟甲基)-6-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(0.3g，1.27mmol，Li)且将混合物升温至室温且搅拌3h。添加10ml乙酸乙酯且将有机相用盐水洗涤三次。将有机相经Na2SO4干燥，过滤且在45℃下在真空中浓缩，以得到粗产物，其通过HPLC(2-10min 20-30％ MeCN/H2O 30ml/min(装载泵4mlMeCN)；柱：SunFire C18,5micro)进行纯化，以得到N-[5-(二氟甲基)-6-甲基-3-吡啶基]-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.053g，116.10μmol，9.18％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.99(d,3H),1.29(m,1H),1.89(m,4H),2.16(m,2H),2.43(s,3H),2.84(m,3H),3.96(m,1H),5.06(m,1H),5.25(d,1H),6.85(m,1H),7.09(m,2H),8.27(s,1H),8.78(s,1H),10.04(m,1H),11.22(m,1H)。
步骤2：N-[5-(二氟甲基)-6-甲基-3-吡啶基]-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物874)和N-[5-(二氟甲基)-6-甲基-3-吡啶基]-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物903)的合成
使用柱：Chiralcel OJ-H 250*20(5-I己烷-IPA-MeOH，50-25-25，12ml/min，RT＝12.43min，0.36l/注入，16mg/注入，每两次运行为0.6小时)进行手性分离，以得到化合物874N-[5-(二氟甲基)-6-甲基-3-吡啶基]-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.02g，43.81μmol，37.74％产率)和化合物903N-[5-(二氟甲基)-6-甲基-3-吡啶基]-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.017g，37.24μmol，32.08％产率)。
化合物874：RT(Chiracel OJ-3，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.15mL/min)＝6.864min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.99(d,3H),1.29(m,1H),2.06(m,4H),2.16(m,3H),2.58(s,3H),2.83(m,3H),3.96(m,1H),5.30(m,1H),6.84(m,1H),7.08(m,2H),8.25(s,1H),8.74(s,1H),10.04(m,1H),11.22(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值456.2；实测值457.2；Rt＝2.794min。
化合物903：RT(Chiracel OJ-3，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.15mL/min)＝12.683min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.99(m,3H),1.27(m,1H),2.08(m,4H),2.23(m,3H),2.88(s,3H),2.61(m,3H),3.98(m,1H),5.32(m,1H),7.10(m,1H),7.63(m,2H),8.26(s,1H),8.76(s,1H),10.03(m,1H),11.25(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值456.2；实测值457.2；Rt＝2.794min。
实施例79.N-[6-(二氟甲基)-5-甲基-3-吡啶基]-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物641)的合成
在轻微加热下，将2-[[6-(二氟甲基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(0.25g，1.05mmol，Li+)、6-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-3,4-二氢-1H-喹啉-2-酮(257.62mg，1.05mmol)和DIPEA(163.52mg，1.27mmol，220.38μL)溶解于DMSO(3mL)中。在剧烈搅拌和偶尔加热下，小批量添加HATU(601.35mg，1.58mmol)。反应混合物的LCMS显示形成产物；使反应混合物经历HPLC(28％0.5-6.5min水-乙腈；流速30ml/min(装载泵4ml/min乙腈)；目标质量440；柱SunFireC18100x19 mm 5um(R))和再纯化(56％0.5-6.5min水-MeOH；流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeOH)；目标质量456；柱SunFire 100x19mm 5um(L))，以得到N-[6-(二氟甲基)-5-甲基-3-吡啶基]-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(18mg，39.43μmol，3.74％产率)和3％杂质N-[6-(二氟甲基)-5-甲基-3-吡啶基]-N',N'-二甲基草酰胺。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.00(m,3H),1.32(m,1H),1.69(m,1H),1.88(m,1H),2.03(m,1H),2.16(m,1H),2.36(m,3H),2.42(m,2H),2.87(m,2H),3.23(m,1H),3.68(m,1H),5.27(m,1H),6.83(m,1H),7.03(m,3H),8.04(m,1H),8.65(m,1H),10.03(m,1H),11.23(m,1H)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值456.2；实测值457.4；Rt＝2.799min。
实施例80.2-甲氧基-5-(2-(5-甲基-2-苯基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物308、化合物291、化合物333、化合物322)和外消旋-2-羟基-5-(2-((2R,5S)-5-甲基-2-苯基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物494)的合成
步骤1：2-甲氧基-5-(2-(5-甲基-2-苯基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺的合成
在21℃下，将2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(0.5g，1.47mmol，Et3N)、TATU(567.73mg，1.76mmol)、5-甲基-2-苯基哌啶(257.47mg，1.47mmol)和三乙胺(148.64mg，1.47mmol，204.74μL)混合于无水DMF(25mL)中且将所得混合物搅拌过夜。将所得混合物倒入到水中，用EtOAc萃取3次，将合并的有机物用水、盐水洗涤且蒸发。使残余物经历HPLC(0-5min 30-80％水-甲醇(NH3 0.1％)，流速30ml/min(装载泵4ml/min甲醇(NH3 0.1％))，柱：YMC-Actus Triart C18 100*20mml.D.S-5um)。获得呈白色固体的2-甲氧基-5-[[2-(5-甲基-2-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.211g，532.24μmol，36.23％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.86(d,3H),1.11(m,1H),1.40(m,2H),1.96(m,2H),2.24(m,2H),3.72(m,1H),4.12(s,3H),5.83(m,1H),6.03(m,1H),7.40(m,4H),7.76(m,1H),8.80(m,2H),9.62(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]m/z：计算值396.4；实测值397.2；Rt＝3.545min。
步骤3：手性分离(化合物308、化合物291、化合物333和化合物322)
使用Chiralpak OJ-H 250*20(5mkm柱；以CO2-MeOH，60-40为流动相；流速2mL/min)分离2-甲氧基-5-[[2-(5-甲基-2-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(211mg，532.24μmol)，得到呈白色固体的化合物308 2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5R)-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(15.38mg，38.80μmol，7.29％产率)(RT＝15.74min)、呈白色固体的化合物291 2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(63.97mg，161.36μmol，30.32％产率)(RT＝19.53min)、呈白色固体的化合物333 2-甲氧基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(70.77mg，178.51μmol，33.54％产率)(RT＝22.71min)和呈白色固体的化合物322 2-甲氧基-5-[[2-[(2S,5S)-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(10.02mg，25.28μmol，4.75％产率)(RT＝20.29min)。
化合物308：1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.70-0.84(m,3H),1.02-1.09(m,2H),1.56-1.82(m,2H),1.82-2.02(m,1H),2.59-2.66(m,1H),3.59-4.35(m,4H),5.17-5.72(m,1H),7.28-7.39(m,3H),7.39-7.46(m,2H),7.70-7.85(m,2H),8.41-8.52(m,1H),8.52-8.63(m,1H),11.03-11.17(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]m/z：计算值396.4；实测值397.2；Rt＝5.305min。
化合物291：1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.01-1.07(m,3H),1.30-1.40(m,1H),1.62-1.75(m,1H),1.83-1.99(m,1H),2.04-2.19(m,1H),2.20-2.31(m,1H),2.76-3.24(m,1H),3.48-4.07(m,4H),5.15-5.67(m,1H),7.25-7.33(m,2H),7.34-7.45(m,3H),7.67-7.81(m,2H),8.42-8.50(m,1H),8.50-8.61(m,1H),10.98-11.13(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]m/z：计算值396.4；实测值397.2；Rt＝3.338min。
化合物333：1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.04(m,3H),1.35(m,1H),1.67(m,1H),1.89(m,1H),2.06(m,1H),2.23(m,1H),3.47(m,1H),3.96(m,3H),4.22(m,1H),5.40(m,1H),7.32(m,2H),7.40(m,3H),7.75(m,2H),8.47(m,1H),8.55(m,1H),11.04(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]m/z：计算值396.4；实测值397.2；Rt＝3.361min。
化合物322：1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.77(m,3H),1.06(m,2H),1.66(m,2H),1.99(m,1H),3.57(m,1H),3.96(m,3H),4.28(m,1H),5.55(m,1H),7.31(m,2H),7.37(m,1H),7.41(m,2H),7.75(m,2H),8.52(m,2H),11.09(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]m/z：计算值396.4；实测值397.2；Rt＝3.405min。
步骤4：外消旋-2-羟基-5-(2-((2R,5S)-5-甲基-2-苯基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物494)的合成
向2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(350mg，882.86μmol)于MeCN(15mL)中的搅拌溶液中添加碘化钠(423.47mg，2.83mmol，115.39μL)，随后添加对甲苯磺酸单水合物(503.81mg，2.65mmol，406.29μL)。将所得混合物在80℃下搅拌2h。蒸发乙腈。通过反相HPLC(15-70％0-1-6min0.1％ NH3-甲醇30ml/min(装载泵4ml/min 0.1％ NH3-甲醇)；柱：YMC-Triart C18 100x20mm 5um)纯化残余物，以得到2-羟基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(53mg，138.59μmol，15.70％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.90-1.11(m,3H),1.26-1.43(m,1H),1.60-1.75(m,1H),1.78-1.95(m,1H),1.95-2.19(m,1H),2.19-2.37(m,1H),2.70-3.26(m,1H),3.47-4.11(m,1H),5.07-5.72(m,1H),7.25-7.46(m,5H),7.59-7.77(m,1H),8.03-8.26(m,1H),8.40-8.60(m,1H),9.01-9.21(m,1H),10.78-10.94(m,1H),12.28-12.57(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]m/z：计算值382.4；实测值383.2；Rt＝2.950min。
实施例81.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-苯基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物736和化合物709)的合成
在轻微加热下，将2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(0.5g，2.39mmol)、(2R,5S)-5-甲基-2-苯基哌啶(418.90mg，2.39mmol)和DIPEA(926.67mg，7.17mmol，1.25mL)溶解于DMF(6mL)中。在剧烈搅拌和偶尔加热下，小批量添加HATU(1.09g，2.87mmol)。反应完成之后，通过HPLC(35％0.5-6.5min水-MeCN；流速30ml/min；(装载泵4ml/min MeCN)；目标质量366；柱SunFireC18100x19mm 5um(L))纯化混合物且再纯化(58％0.5-6.5min水-MeOH+NH3；流速30ml/min；(装载泵4ml/min MeOH)；目标质量366；柱SunFireC18 100x19mm 5um(L))，以得到外消旋产物，使其经历手性HPLC(OJ-H-I(250*20，0,5mkm)，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，12ml/min)，以得到N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.02g，54.58μmol，2.28％产率)(10％杂质顺式异构哌啶)和N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.022g，60.03μmol，2.51％产率)。
化合物736于分析条件下(柱：OJ-H，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min为流动相)的保留时间为11.91min且化合物709的保留时间为24.37min。
化合物736：保留时间：11.91min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99(d,3H),1.08(m,3H),1.31(m,1H),1.63(m,1H),1.83(m,1H),2.01(m,1H),2.22(m,1H),2.39(m,2H),3.19(m,1H),4.00(m,1H),5.15(m,1H),5.58(m,2H),7.28(m,2H),7.38(m,3H),7.49(m,1H),8.05(m,1H),10.48(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值366.2；实测值367.2；Rt＝1.645min。
化合物709：保留时间：24.37min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99(d,3H),1.06(m,3H),1.31(m,1H),1.65(m,1H),1.83(m,1H),2.01(m,1H),2.20(m,1H),2.39(m,2H),3.19(m,1H),4.00(m,1H),5.15(m,1H),5.58(m,2H),7.28(m,2H),7.38(m,3H),7.49(m,1H),8.05(m,1H),10.48(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值366.2；实测值367.2；Rt＝1.638min。
实施例82.rel-5-[[2-[(2R,5S)-2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物493)和rel-5-[[2-[(2S,5R)-2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物492)的合成
步骤1：5-[[2-[2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
将5-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶-2-胺(0.3g，1.57mmol)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(385.24mg，1.57mmol，HCl)和三乙胺(1.59g，15.68mmol，2.19mL)一起混合于DMF(6mL)中且添加HATU(894.56mg，2.35mmol)。将反应混合物搅拌20h。将反应混合物在真空中浓缩且通过HPLC(2-10min 35-100％ MeCN/H2O 30mL/min(装载泵4mL MeCN柱：SunFire 100*19mm，5微米)纯化残余物，以获得5-[[2-[2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.2533g，662.37μmol，42.23％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值382.2；实测值383.2；Rt＝0.778min。
步骤2：rel-5-[[2-[(2R,5S)-2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物493)和rel-5-[[2-[(2S,5R)-2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物492)的合成
对5-[[2-[2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.2533g，662.37μmol)进行手性分离(柱：Chiralpak IC(250*20mm，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH-DEA，40-30-30-0.1；流速：12mL/min；柱温：40℃；波长：205nm；保留时间(异构体A)＝36.22min且保留时间(异构体B)＝53.07min)，以获得化合物4935-[[2-[(2R,5S)-2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(27.46mg，71.81μmol，10.84％产率；Rt＝53.07)和化合物492 5-[[2-[(2S,5R)-2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.02459g，64.30μmol，9.71％产率；Rt＝36.22)。
化合物493：RT(IC，己烷-IPA-MeOH，40-30-30，0.6mL/min)＝55.490min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.96-1.05(m,3H),1.27-1.39(m,1H),1.65-1.78(m,1H),1.82-1.92(m,1H),1.94-2.05(m,1H),2.06-2.16(m,1H),2.75-3.25(m,1H),3.38-3.99(m,1H),4.96-5.54(m,1H),5.86(s,2H),6.38-6.51(m,1H),7.24-7.38(m,1H),7.55-7.66(m,1H),7.85(s,1H),8.05-8.22(m,1H),8.43-8.53(m,1H),8.70-8.81(m,1H),8.82-8.91(m,1H),11.05-11.33(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值382.2；实测值383.2；Rt＝2.940min。
化合物492：RT(IC，己烷-IPA-MeOH，40-30-30，0.6mL/min)＝33.637min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.97-1.04(m,3H),1.28-1.39(m,1H),1.66-1.77(m,1H),1.78-1.92(m,1H),1.93-2.05(m,1H),2.05-2.15(m,1H),2.73-3.23(m,1H),3.38-3.98(m,1H),4.95-5.50(m,1H),5.87(s,2H),6.39-6.49(m,1H),7.21-7.38(m,1H),7.56-7.63(m,1H),7.85(s,1H),8.11-8.21(m,1H),8.41-8.50(m,1H),8.73-8.80(m,1H),8.83-8.91(m,1H),11.15-11.37(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值382.2；实测值383.0；Rt＝2.948min。
实施例83.rel-5-[[2-[(2S,5R)-2-[6-(甲磺酰胺基)-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物1003)和rel-5-[[2-[(2R,5S)-2-[6-(甲磺酰胺基)-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物985)的合成
步骤1：5-[[2-[2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
在室温下将HATU(496.98mg，1.31mmol)分批添加到2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(369.19mg，1.50mmol，HCl)、5-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶-2-胺(250mg，1.31mmol)和TEA(793.56mg，7.84mmol，1.09mL)于DMF(10mL)中的悬浮液中。将澄清溶液在20℃下搅拌18h且在真空中蒸发溶剂，以得到5-[[2-[2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(1g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值382.2；实测值383.2；Rt＝0.723min。
步骤2：5-[[2-[2-[6-(甲磺酰胺基)-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
在室温下，将甲磺酰氯(165.07mg，1.44mmol，111.53μL)逐滴添加到5-[[2-[2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(982.28mg，1.31mmol)、TEA(795.35mg，7.86mmol，1.10mL)于DMF(10mL)中的悬浮液中。将溶液在25℃下搅拌18h且在真空中蒸发溶剂。通过RP-HPLC(柱：Chromatorex 18SMB100-5T 100*19mm5um；0-20％0-5min H2O/MeCN/0.1％ TFA，流速：30mL/min为流动相)纯化残余物，以得到5-[[2-[2-[6-(甲磺酰胺基)-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(103mg，223.67μmol，17.07％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值460.0；实测值461.0；Rt＝1.568min。
步骤3：rel-5-[[2-[(2S,5R)-2-[6-(甲磺酰胺基)-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物1003)和rel-5-[[2-[(2R,5S)-2-[6-(甲磺酰胺基)-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物985)的合成
通过手性HPLC(柱：AS(250*20，5mkm)，CO2-MeOH，65-35，50mL/min补充流速-15mL/min为流动相)分离对映异构体，以得到两种个别对映异构体化合物1003rel-5-[[2-[(2S,5R)-2-[6-(甲磺酰胺基)-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(30.2mg，65.58μmol，54.91％产率)(保留时间＝6.20min)和化合物985rel-5-[[2-[(2R,5S)-2-[6-(甲磺酰胺基)-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(25.4mg，55.16μmol，46.18％产率)(保留时间＝9.28min)。
化合物1003：RT(AS-H(250*4.6，5mkm，CO2-MeOH，65-35，3.0mL/min)＝3.413min。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值460.0；实测值461.0；Rt＝0.772min。
化合物985：RT(AS-H(250*4.6，5mkm，CO2-MeOH，65-35，3.0mL/min)＝4.856min。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值460.0；实测值461.0；Rt＝0.772min。
实施例84.rel-5-[[2-[(2S,5R)-2-(6-乙酰胺基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物934)和rel-5-[[2-[(2R,5S)-2-(6-乙酰胺基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物905)的合成
步骤1：5-[[2-[2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
在室温下将HATU(496.98mg，1.31mmol)分批添加到2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(353.14mg，1.44mmol，HCl)、5-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶-2-胺(250mg，1.31mmol)和TEA(793.56mg，7.84mmol，1.09mL)于DMF(10mL)中的悬浮液中。将澄清溶液在20℃下搅拌18h且在真空中蒸发溶剂，以得到5-[[2-[2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(1g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值382.2；实测值383.2；Rt＝0.706min。
步骤2：5-[[2-[2-(6-乙酰胺基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
在室温下，将乙酰氯(113.11mg，1.44mmol，87.69μL)逐滴添加到5-[[2-[2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(705.58mg，1.31mmol)、TEA(795.35mg，7.86mmol，1.10mL)于DMF(10mL)中的悬浮液中。将溶液在25℃下搅拌18h且在真空中蒸发溶剂。通过RP-HPLC(柱：YMC Triart C18 100*20mml.D.S-5um；0-1-6min 15-15-50％水-甲醇-NH4OH 0.1％，流速30mL/min为流动相)纯化残余物，以得到5-[[2-[2-(6-乙酰胺基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(113mg，266.23μmol，20.32％产率)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值424.2；实测值426.2；Rt＝1.735min。
步骤3：rel-5-[[2-[(2S,5R)-2-(6-乙酰胺基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物934)和rel-5-[[2-[(2R,5S)-2-(6-乙酰胺基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物905)的合成
通过手性HPLC(柱：Chiralpak IA(250*20，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25,12mL/min为流动相)分离对映异构体，以得到两种个别对映异构体化合物934rel-5-[[2-[(2S,5R)-2-(6-乙酰胺基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(41.8mg，98.48μmol，73.98％产率)(保留时间＝150.7min)和化合物905rel-5-[[2-[(2R,5S)-2-(6-乙酰胺基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(35mg，82.46μmol，61.95％产率)(保留时间＝256.3min)。
化合物934：RT(IA(250*4.6，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.155mL/min)＝63.750min。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.01(m,3H),1.32(m,1H),1.68(m,1H),1.89(m,1H),2.06(m,4H),2.20(m,1H),3.01(m,1H),3.73(dd,1H),5.37(m,1H),7.59(m,1H),7.71(m,1H),8.10(m,2H),8.24(m,1H),8.46(m,1H),8.75(m,1H),8.86(m,1H),10.49(s,1H),11.22(m,1H)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值424.2；实测值425.2；Rt＝0.784min。
化合物905：RT(IA(250*4.6，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.155mL/min)＝98.302min。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.01(m,3H),1.33(m,1H),1.69(m,1H),1.88(m,1H),2.06(m,4H),2.18(m,1H),3.02(m,1H),3.82(m,1H),5.37(m,1H),7.59(m,1H),7.71(m,1H),8.15(m,3H),8.46(d,1H),8.75(m,1H),8.86(m,1H),10.49(s,1H),11.22(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值424.2；实测值425.0；Rt＝0.784min。
实施例85.rel-5-[[2-[(2S,5R)-2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(化合物471)和rel-5-[[2-[(2R,5S)-2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(化合物460)的合成
步骤1：5-[[2-[(2S,5R)-2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺的合成
将5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]吡啶-2-胺(168.58mg，881.38μmol)、2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(300mg，881.38μmol，Et3N)、三乙胺(445.94mg，4.41mmol，614.24μL)混合于DMF(5mL)中，然后添加HATU(502.69mg，1.32mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌12h。将混合物在减压下蒸发，且使用HPLC(2-10min 35-100％MeCN/H2O 30mL/min)纯化，以获得5-[[2-[(2S,5R)-2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(61.6mg，149.35μmol，16.95％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值412.2；实测值413.2；Rt＝0.869min。
步骤2：rel-5-[[2-[(2S,5R)-2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(化合物471)和rel-5-[[2-[(2R,5S)-2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(化合物460)的合成
通过手性色谱(柱：Chiralcel OD-H(250*30mm，5m)；流动相：己烷-IPA-MeOH，70-15-15；流速：25mL/min；柱温：24℃；波长：205nm、245nm、300nm；保留时间(异构体A)＝20.78min；保留时间(异构体B)＝29.49min)分离非对映异构体的混合物，以获得化合物471rel-5-[[2-[(2S,5R)-2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(10.95mg，26.55μmol，17.78％产率)(RT＝20.78)和化合物460rel-5-[[2-[(2R,5S)-2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(10.13mg，24.56μmol，16.44％产率)(RT＝29.49)。
化合物460：RT(OD-3，己烷-IPA-MeOH，70-15-15，0.6mL/min)＝12.283min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.96-1.04(m,3H),1.26-1.38(m,1H),1.64-1.74(m,1H),1.74-1.90(m,1H),1.90-2.05(m,1H),2.05-2.16(m,1H),2.70-3.26(m,1H),3.39-3.98(m,4H),4.95-5.50(m,1H),5.86(s,2H),6.39-6.47(m,1H),7.24-7.37(m,1H),7.69-7.76(m,2H),7.84(s,1H),8.40-8.47(m,1H),8.50-8.58(m,1H),10.87-11.11(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值412.2；实测值413.2；Rt＝3.290min。
化合物471：RT(OD-3，己烷-IPA-MeOH，70-15-15，0.6mL/min)＝8.759min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.96-1.03(m,3H),1.23-1.37(m,1H),1.66-1.76(m,1H),1.78-2.06(m,2H),2.06-2.15(m,1H),2.74-3.21(m,1H),3.36-3.91(m,1H),3.92-3.97(m,3H),4.93-5.49(m,1H),5.86(s,2H),6.41-6.48(m,1H),7.25-7.37(m,1H),7.68-7.78(m,2H),7.84(s,1H),8.40-8.47(m,1H),8.49-8.58(m,1H),10.94-11.03(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值412.2；实测值413.2；Rt＝3.288min。
实施例86.rel-5-[[2-[(2S,5R)-2-[6-(甲磺酰胺基)-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(化合物986)和rel-5-[[2-[(2R,5S)-2-[6-(甲磺酰胺基)-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(化合物999)的合成
步骤1：5-[[2-[2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺的合成
在室温下将HATU(496.98mg，1.31mmol)分批添加到2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(359.52mg，1.50mmol)、5-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶-2-胺(250mg，1.31mmol)和TEA(793.56mg，7.84mmol，1.09mL)于DMF(10mL)中的悬浮液中。将澄清溶液在20℃下搅拌18h且在真空中蒸发溶剂，以得到5-[[2-[2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(1g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值412.2；实测值413.2；Rt＝0.819min。
步骤2：5-[[2-[2-[6-(甲磺酰胺基)-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺的合成
在室温下将甲磺酰氯(165.07mg，1.44mmol，111.53μL)逐滴添加到5-[[2-[2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(1.10g，1.31mmol)、TEA(795.35mg，7.86mmol，1.10mL)于DMF(10mL)中的悬浮液中。将溶液在25℃下搅拌18h且在真空中蒸发溶剂。通过RP-HPLC(柱：Chromatorex 18SMB100-5T 100*19mm 5um；0-40％0-5min H2O/MeCN/0.1％ TFA，流速：30mL/min为流动相)纯化残余物，以得到5-[[2-[2-[6-(甲磺酰胺基)-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(158mg，322.10μmol，24.59％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值490.2；实测值491.2；Rt＝1.857min。
步骤3：rel-5-[[2-[(2S,5R)-2-[6-(甲磺酰胺基)-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(化合物986)和rel-5-[[2-[(2R,5S)-2-[6-(甲磺酰胺基)-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(化合物999)的合成
通过手性HPLC(柱：AS(250*20，5mkm)，CO2-MeOH，60-40，50mL/min补充流速-15mL/min为流动相)分离对映异构体，以得到两种个别对映异构体化合物986rel-5-[[2-[(2S,5R)-2-[6-(甲磺酰胺基)-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(29.4mg，59.93μmol，37.22％产率)(保留时间＝6.52min)和化合物999rel-5-[[2-[(2R,5S)-2-[6-(甲磺酰胺基)-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(30.7mg，62.59μmol，38.86％产率)(保留时间＝8.26min)。
化合物986：RT(AS(250*20，5mkm)，CO2-MeOH，60-40，2.0mL/min)＝4.972min。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值490.2；实测值491.2；Rt＝0.827min。
化合物999：RT(AS(250*20，5mkm)，CO2-MeOH，60-40，2.0mL/min)＝6.367min。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值490.2；实测值491.2；Rt＝0.828min。
实施例87.rel-5-[[2-[(2S,5R)-2-(6-乙酰胺基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(化合物930)和rel-5-[[2-[(2R,5S)-2-(6-乙酰胺基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(化合物910)的合成
步骤1：5-[[2-[2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺的合成
在室温下将HATU(496.98mg，1.31mmol)分批添加到2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(359.52mg，1.50mmol)、5-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶-2-胺(250mg，1.31mmol)和TEA(793.56mg，7.84mmol，1.09mL)于DMF(10mL)中的悬浮液中。将澄清溶液在20℃下搅拌18h且在真空中蒸发溶剂，以得到5-[[2-[2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(1g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值412.2；实测值413.2；Rt＝0.788min。
步骤2：5-[[2-[2-(6-乙酰胺基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺的合成
在室温下将乙酰氯(113.11mg，1.44mmol，87.69μL)逐滴添加到5-[[2-[2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(1.17g，1.31mmol)、TEA(795.35mg，7.86mmol，1.10mL)于DMF(10mL)中的悬浮液中。将溶液在25℃下搅拌18h且在真空中蒸发溶剂。通过RP-HPLC(柱：Chromatorex 18SMB100-5T 100*19mm5um；5-22％0-5min H2O/MeCN/0.1％ TFA，流速：30mL/min为流动相)纯化残余物，以得到5-[[2-[2-(6-乙酰胺基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(77mg，169.43μmol，12.93％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值454.2；实测值455.4；Rt＝2.009min。
步骤3：rel-5-[[2-[(2S,5R)-2-(6-乙酰胺基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(化合物930)和rel-5-[[2-[(2R,5S)-2-(6-乙酰胺基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(化合物910)的合成
通过手性HPLC(柱：AS(250*20，10mkm)，CO2-MeOH，65-35，50mL/min补充流速-20mL/min为流动相)分离对映异构体，以得到两种个别对映异构体化合物930rel-5-[[2-[(2S,5R)-2-(6-乙酰胺基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(19mg，41.81μmol，49.35％产率)(保留时间＝7.33min)和化合物910rel-5-[[2-[(2R,5S)-2-(6-乙酰胺基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(16mg，35.21μmol，41.56％产率)(保留时间＝9.85min)。
化合物930：RT(IC(250*4.6，5mkm)，IPA-MeOH，50-50，0.6mL/min)＝25.671min。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.01(m,3H),1.34(m,1H),1.68(m,1H),1.89(m,1H),2.06(m,4H),2.18(m,1H),3.09(m,1H),3.93(m,4H),5.36(m,1H),7.72(m,3H),8.05(m,1H),8.23(m,1H),8.47(m,2H),10.48(s,1H),11.01(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值454.2；实测值455.2；Rt＝1.032min。
化合物910：RT(IC(250*4.6，5mkm)，IPA-MeOH，50-50，0.6mL/min)＝18.813min。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.01(m,3H),1.35(m,1H),1.68(m,1H),1.89(m,1H),2.06(m,4H),2.18(m,1H),3.09(m,1H),3.77(m,4H),5.36(m,1H),7.71(m,3H),8.04(m,1H),8.23(m,1H),8.47(m,2H),10.48(s,1H),11.01(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值454.2；实测值455.2；Rt＝1.030min。
实施例88.rel-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物444)和rel-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物443)的合成
步骤1：5-[[2-[5-甲基-2-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
将N-甲基-5-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶-2-胺(0.3g，1.46mmol)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(358.92mg，1.46mmol，HCl)和三乙胺(1.48g，14.61mmol，2.04mL)一起混合于DMF(6mL)中且添加HATU(833.44mg，2.19mmol)。搅拌所得混合物20h。将反应混合物在真空中浓缩且通过HPLC(2-10min 40-60％水/MeCN+NH3(装载泵4mL MeCN+NH3))柱：TRIART 100*20mm 5微米)纯化残余物，以获得5-[[2-[5-甲基-2-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.2864g，722.43μmol，49.44％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.03(d,3H),1.34(m,1H),1.86(m,2H),2.74(d,3H),3.17(s,3H),3.25(m,1H),4.08(m,2H),5.50(m,1H),6.45(m,1H),7.31(d,1H),7.64(d,1H),8.19(s,1H),8.51(s,1H),8.80(s,1H),8.91(s,1H),11.21(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值396.2；实测值397.2；Rt＝0.737min。
步骤2：rel-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物444)和rel-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物443)的合成
对5-[[2-[5-甲基-2-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.2863g，722.17μmol)进行手性分离(注入体积：1mkL；样品信息：IC，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.15mL/min)，以获得化合物444 5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(120.44mg，303.80μmol，42.07％产率)和化合物443 5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.11031g，278.25μmol，38.53％产率)。
化合物444：RT(IC，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.15mL/min)＝44.121min。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.00(m,4H),1.32(m,1H),1.73(m,1H),1.94(m,1H),2.12(m,1H),2.72(m,3H),3.00(m,1H),3.75(m,1H),5.24(m,1H),6.44(m,2H),7.32(m,1H),7.59(m,1H),7.93(s,1H),8.14(m,1H),8.46(m,1H),8.75(m,1H),8.86(m,1H),11.17(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值396.2；实测值397.2；Rt＝1.638min。
化合物443：RT(IC，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.15mL/min)＝32.216min。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.00(m,4H),1.32(m,1H),1.75(m,2H),1.95(m,1H),2.72(m,3H),3.08(m,1H),4.04(m,1H),5.24(m,1H),6.43(m,2H),7.33(m,1H),7.59(m,1H),7.93(s,1H),8.14(m,1H),8.46(m,1H),8.75(m,1H),8.86(m,1H),11.17(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值396.2；实测值397.2；Rt＝1.633min。
实施例89.rel-2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5R)-5-甲基-2-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物467)、rel-2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物447)、rel-2-甲氧基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物448)和rel-2-甲氧基-5-[[2-[(2S,5S)-5-甲基-2-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物468)的合成
步骤1：2-甲氧基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
将N-甲基-5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]吡啶-2-胺(180.95mg，881.38μmol)、2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(300mg，881.38μmol，Et3N)、三乙胺(445.94mg，4.41mmol，614.24μL)混合于DMF(5mL)中然后添加HATU(502.69mg，1.32mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌12h。将混合物在减压下蒸发，且使用HPLC(2-10min40-60％水/MeCN+NH3)纯化，以获得2-甲氧基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(86.2mg，202.13μmol，22.93％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.02(d,3H),1.03(m,1H),1.95(m,4H),2.75(d,3H),3.17(m,1H),3.24(m,1H),3.34(m,2H),3.97(s,3H),5.27(m,1H),6.45(m,2H),7.80(s,1H),7.82(s,1H),8.52(m,1H),11.05(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值426.2；实测值427.2；Rt＝0.824min。
步骤2：rel-2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5R)-5-甲基-2-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物467)、rel-2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物447)、rel-2-甲氧基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物448)和rel-2-甲氧基-5-[[2-[(2S,5S)-5-甲基-2-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物468)的合成
通过手性色谱(柱：Chiralpak IC(250，20mm，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH，50-25-25；流速：12mL/min；柱温：24℃；波长：205nm、252nm、306nm；保留时间(异构体A)＝23.52min；保留时间(异构体B)＝29.28min；保留时间(异构体C)＝36.86min；保留时间(异构体D)＝51.27min)分离非对映异构体的混合物，以获得化合物467 2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5R)-5-甲基-2-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(8.01mg，18.78μmol；RT＝29.28)、化合物447 2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(23.01mg，53.95μmol，26.69％产率；RT＝51.27)、化合物448 2-甲氧基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(24.25mg，56.86μmol，28.13％产率；RT＝36.86)、化合物468 2-甲氧基-5-[[2-[(2S,5S)-5-甲基-2-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(6.87mg，16.11μmol，7.97％产率；RT＝23.53)。
化合物467：
RT(IC-3，己烷-IPA-MeOH，40-30-30，0.15mL/min)＝15.419min。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz)δ0.92-1.06(m,3H),1.26-1.38(m,1H),1.65-1.77(m,1H),1.79-2.06(m,2H),2.06-2.17(m,1H),2.70-2.75(m,3H),3.15-3.42(m,1H),3.91-3.95(m,3H),4.95-5.51(m,1H),6.37-6.46(m,2H),7.23-7.40(m,1H),7.65-7.77(m,2H),7.93(s,1H),8.38-8.47(m,1H),8.47-8.57(m,1H),10.89-11.03(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值426.2；实测值427.2；Rt＝3.452min。
化合物447：RT(IC-3，己烷-IPA-MeOH，40-30-30，0.15mL/min)＝26.173min。
1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)1.03(m,3H),1.36(m,1H),1.75(m,1H),2.00(m,3H),2.75(m,3H),3.24(m,1H),3.41(m,1H),3.96(m,3H),5.25(m,1H),6.46(m,2H),7.34(m,1H),7.75(m,2H),7.95(s,1H),8.46(m,1H),8.54(m,1H),10.98(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值426.2；实测值427.2；Rt＝3.339min。
化合物448：RT(IC-3，己烷-IPA-MeOH，40-30-30，0.15mL/min)＝18.859min。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.00(m,3H),1.31(m,1H),1.71(m,1H),1.87(m,1H),1.95(m,1H),2.10(m,1H),2.72(m,3H),3.20(m,1H),3.93(m,4H),5.23(m,1H),6.43(m,2H),7.31(m,1H),7.72(m,2H),7.93(s,1H),8.43(m,1H),8.52(m,1H),10.96(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值426.2；实测值427.2；Rt＝3.342min。
化合物468：RT(IC-3，己烷-IPA-MeOH，40-30-30，0.15mL/min)＝12.322min。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz)δ0.92-1.06(m,3H),1.26-1.38(m,1H),1.65-1.77(m,1H),1.79-2.06(m,2H),2.06-2.17(m,1H),2.70-2.75(m,3H),3.15-3.42(m,1H),3.91-3.95(m,3H),4.95-5.51(m,1H),6.37-6.46(m,2H),7.23-7.40(m,1H),7.65-7.77(m,2H),7.93(s,1H),8.38-8.47(m,1H),8.47-8.57(m,1H),10.89-11.03(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值426.2；实测值427.2；Rt＝3.428min。
实施例90.外消旋-5-[[2-[(2S,5R)-2-(苯并噻吩-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物409)、5-[[2-[(2S,5R)-2-(苯并噻吩-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物586)和5-[[2-[(2R,5S)-2-(苯并噻吩-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物585)的合成
步骤1：外消旋-5-[[2-[(2S,5R)-2-(苯并噻吩-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物409)的合成
向(2S,5R)-2-(苯并噻吩-5-基)-5-甲基哌啶(0.3g，1.30mmol)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(318.50mg，1.30mmol，HCl)和三乙胺(656.07mg，6.48mmol，903.67μL)的溶液中添加HATU(542.35mg，1.43mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌3h且使其经历HPLC：50-50-90％0-1-6min 0.1％ NH3-甲醇，流速：30ml/min(装载泵4ml/min甲醇)，目标质量414，柱：YMC Triart C18 100x20 mm，5um)，以得到5-[[2-[(2S,5R)-2-(苯并噻吩-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(278mg，657.99μmol，50.74％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO)δ1.03-1.07(m,3H),1.32-1.49(m,1H),1.72-1.84(m,1H),1.86-1.99(m,1H),2.09-2.27(m,1H),2.29-2.36(m,1H),2.83-3.27(m,1H),3.54-4.11(m,1H),5.26-5.81(m,1H),7.32-7.43(m,1H),7.43-7.51(m,1H),7.56-7.68(m,1H),7.73-7.84(m,1H),7.84-7.93(m,1H),7.95-8.08(m,1H),8.09-8.25(m,1H),8.44-8.58(m,1H),8.71-8.83(m,1H),8.83-8.98(m,1H),11.18-11.43(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值422.2；实测值423.0；Rt＝3.485min。
步骤2：5-[[2-[(2S,5R)-2-(苯并噻吩-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物586)和5-[[2-[(2R,5S)-2-(苯并噻吩-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物585)的合成
使用Chiralpak IA 250*20，5mkm柱(以己烷-IPA-MeOH，50-25-25为流动相；流速25mL/min；注入体积:900mkl；3pins；56mg/1pin)分离5-[[2-[(2S,5R)-2-(苯并噻吩-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(169.5mg，401.18μmol)；得到呈黄色固体的化合物586 5-[[2-[(2S,5R)-2-(苯并噻吩-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(59.73mg，141.37μmol，35.24％产率)(RT(IA-3，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.155ml/min)＝10.599min)和呈米色固体的化合物585 5-[[2-[(2R,5S)-2-(苯并噻吩-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(60.8mg，143.91μmol，35.87％产率)(RT(IA-3，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.155ml/min)＝14.975min)。
化合物586：1H NMR(500MHz,DMSO)δ1.03-1.07(m,3H),1.32-1.49(m,1H),1.72-1.84(m,1H),1.86-1.99(m,1H),2.09-2.27(m,1H),2.29-2.36(m,1H),2.83-3.27(m,1H),3.54-4.11(m,1H),5.26-5.81(m,1H),7.32-7.43(m,1H),7.43-7.51(m,1H),7.56-7.68(m,1H),7.73-7.84(m,1H),7.84-7.93(m,1H),7.95-8.08(m,1H),8.09-8.25(m,1H),8.44-8.58(m,1H),8.71-8.83(m,1H),8.83-8.98(m,1H),11.18-11.43(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值422.2；实测值423.0；Rt＝2.884min。
RT(IA-3，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.155ml/min)＝10.599min
化合物585：1H NMR(500MHz,DMSO)δ1.03-1.07(m,3H),1.32-1.49(m,1H),1.72-1.84(m,1H),1.86-1.99(m,1H),2.09-2.27(m,1H),2.29-2.36(m,1H),2.83-3.27(m,1H),3.54-4.11(m,1H),5.26-5.81(m,1H),7.32-7.43(m,1H),7.43-7.51(m,1H),7.56-7.68(m,1H),7.73-7.84(m,1H),7.84-7.93(m,1H),7.95-8.08(m,1H),8.09-8.25(m,1H),8.44-8.58(m,1H),8.71-8.83(m,1H),8.83-8.98(m,1H),11.18-11.43(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值422.2；实测值423.0；Rt＝2.884min。
RT(IA-3，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.155ml/min)＝14.975min
实施例91.5-[[2-[(2R,5S)-2-(苯并噻吩-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(化合物618)和5-[[2-[(2R,5S)-2-(苯并噻吩-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物633)的合成
步骤1：5-[[2-[(2S,5R)-2-(苯并噻吩-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺的合成
向(2S,5R)-2-(苯并噻吩-5-基)-5-甲基哌啶(0.3g，1.30mmol)、2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(441.36mg，1.30mmol，Et3N)和三乙胺(656.07mg，6.48mmol，903.67μL)中的溶液中分批添加HATU(542.35mg，1.43mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌3h且通过HPLC(50-100％1-6min水-甲醇(NH3 0.1％)，流速30ml/min(装载泵4ml/min甲醇(NH3 0.1％))，目标质量453，柱：SunFireC18 100*19mm 5um)纯化，以获得5-[[2-[(2S,5R)-2-(苯并噻吩-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(190mg，419.87μmol，32.38％产率)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值452.2；实测值453.2；Rt＝1.381min。
步骤2：5-[[2-[(2R,5S)-2-(苯并噻吩-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(化合物618)和5-[[2-[(2S,5R)-2-(苯并噻吩-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(化合物633)的合成
对5-[[2-[(2S,5R)-2-(苯并噻吩-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(190mg，419.87μmol)进行手性分离(注入体积：900mkl；样品信息：IC_II，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，12ml/min)，以获得5-[[2-[(2R,5S)-2-(苯并噻吩-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(57mg，125.96μmol，60.00％产率)和5-[[2-[(2S,5R)-2-(苯并噻吩-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(44mg，97.23μmol，46.32％产率)。
化合物618：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.99-1.08(m,3H),1.30-1.42(m,1H),1.67-1.80(m,1H),1.81-1.95(m,1H),2.05-2.21(m,1H),2.22-2.33(m,1H),2.77-3.25(m,1H),3.47-4.07(m,4H),5.16-5.88(m,1H),7.27-7.38(m,1H),7.41-7.47(m,1H),7.66-7.73(m,1H),7.73-7.78(m,2H),7.81-7.88(m,1H),7.96-8.03(m,1H),8.39-8.60(m,2H),10.91-11.23(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值452.2；实测值453.0；Rt＝3.159min。
RT(IC，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min)＝30.076min
化合物633：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.98-1.13(m,3H),1.29-1.43(m,1H),1.71-1.80(m,1H),1.82-1.95(m,1H),2.05-2.23(m,1H),2.26-2.36(m,1H),2.78-3.27(m,1H),3.49-4.09(m,4H),5.23-5.81(m,1H),7.28-7.38(m,1H),7.41-7.47(m,1H),7.66-7.73(m,1H),7.73-7.78(m,2H),7.80-7.88(m,1H),7.96-8.04(m,1H),8.40-8.60(m,2H),10.98-11.13(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值452.2；实测值453.2；Rt＝3.159min，其中顺式杂质少于5％
RT(IC，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min)＝25.019min，其中顺式杂质少于5％
实施例92.5-(2-(5-甲基-2-(2-甲基苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物702和化合物693)的合成
步骤1：5-(2-(5-甲基-2-(2-甲基苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺的合成
在室温下，将HATU(463.00mg，1.22mmol)分批添加到2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(299.09mg，1.22mmol，HCl)、2-甲基-5-(5-甲基-2-哌啶基)-1,3-苯并噻唑(300mg，1.22mmol)和TEA(739.30mg，7.31mmol，1.02mL)于DMF(10mL)中的悬浮液中。将澄清溶液在20℃下搅拌18h且在真空中蒸发溶剂，以得到1g粗材料。使其经历RP-HPLC(柱：YMC-Actus Triart C18 100*20mml.D.S-5um；1-6min 45-60％水-MeOH(NH3 0.1％)，流速：30ml/min为流动相)，以得到5-[[2-[5-甲基-2-(2-甲基-1,3-苯并噻唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(249mg，569.12μmol，46.74％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值437.2；实测值438.2；Rt＝2.680min。
步骤2：手性分离(化合物702和化合物693)
通过手性HPLC(柱：OJ(250*30，20mkm)，CO2-MeOH，70-30，80ml/min补充流速-30ml/min为流动相)分离对映异构体，以得到两种个别对映异构体化合物693 5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-甲基-1,3-苯并噻唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(74mg，169.14μmol，76.68％产率)(保留时间＝6.46min)和化合物7025-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-甲基-1,3-苯并噻唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(72.3mg，165.25μmol，74.92％产率)(保留时间＝9.11min)。
化合物693于分析条件下(柱：OJ-H，CO2-MeOH，70-30，3ml/min为流动相)的保留时间为3.18min且化合物702的保留时间为5.82min。
化合物693：保留时间：3.18min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.03(m,3H),1.37(m,1H),1.71(m,1H),1.89(m,1H),2.19(m,2H),2.77(m,3H),3.04(m,1H),3.76(m,1H),5.49(m,1H),7.37(m,1H),7.59(m,1H),7.86(m,1H),8.01(m,1H),8.14(m,1H),8.46(m,1H),8.75(m,1H),8.87(m,1H),11.26(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值437.2；实测值438.2；Rt＝1.143min。
化合物702：保留时间：5.82min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.03(m,3H),1.37(m,1H),1.71(m,1H),1.88(m,1H),2.13(m,1H),2.29(m,1H),2.77(m,3H),2.85(m,1H),3.67(m,1H),5.49(m,1H),7.37(m,1H),7.58(m,1H),7.86(m,1H),8.02(m,1H),8.14(m,1H),8.46(m,1H),8.75(m,1H),8.87(m,1H),11.26(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值437.2；实测值438.2；Rt＝1.143min。
实施例93.2-甲氧基-5-(2-(5-甲基-2-(2-甲基苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物797和化合物808)的合成
步骤1：2-甲氧基-5-(2-(5-甲基-2-(2-甲基苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺的合成
在室温下，将HATU(390.98mg，1.03mmol)分批添加到2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(350mg，1.03mmol)、2-甲基-5-(5-甲基-2-哌啶基)-1,3-苯并噻唑(253.34mg，1.03mmol)和TEA(624.31mg，6.17mmol，859.93μL)于DMF(10mL)中的悬浮液中。将澄清溶液在20℃下搅拌18h且在真空中蒸发溶剂，以得到1g粗材料。使其经历RP-HPLC(柱：YMC-Actus Triart C18100*20mml.D.S-5um；1-6min 60-70％水-MeOH(NH30.1％)，流速：30ml/min为流动相)，以得到2-甲氧基-5-[[2-[5-甲基-2-(2-甲基-1,3-苯并噻唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(260mg，556.10μmol，54.08％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值467.2；实测值468.2；Rt＝3.043min。
步骤2：手性分离(化合物808和化合物797)
通过手性HPLC(柱：IA-I，己烷-IPA-MeOH，40-30-30，12ml/min为流动相)分离对映异构体，以得到两种个别对映异构体化合物808 2-甲氧基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-甲基-1,3-苯并噻唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(45.7mg，97.75μmol，91.40％产率)(保留时间＝52.2min)和化合物797 2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-甲基-1,3-苯并噻唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(48.1mg，102.88μmol，96.20％产率)(保留时间＝96.7min)。
化合物808于分析条件下(柱：IA，IPA-MeOH，50-50，0.6ml/min为流动相)的保留时间为39.25min且化合物797的保留时间为51.68min。
化合物808：保留时间：39.25min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.97-1.06(m,3H),1.30-1.40(m,1H),1.64-1.76(m,1H),1.81-1.94(m,1H),2.07-2.21(m,1H),2.25-2.34(m,1H),2.73-2.80(m,3H),2.80-3.27(m,1H),3.37-3.54(m,0.6H),3.86-3.98(m,3H),3.99-4.06(m,0.4H),5.26-5.75(m,1H),7.31-7.42(m,1H),7.63-7.78(m,2H),7.80-7.88(m,1H),7.97-8.10(m,1H),8.37-8.60(m,2H),10.93-11.23(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值467.2；实测值468.2；Rt＝3.030min。
化合物797：保留时间：51.68min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.97-1.06(m,3H),1.29-1.41(m,1H),1.60-1.78(m,1H),1.79-1.93(m,1H),2.05-2.21(m,1H),2.25-2.34(m,1H),2.73-2.79(m,3H),2.79-3.27(m,1H),3.42-3.52(m,0.6H),3.85-3.98(m,3H),3.99-4.07(m,0.4H),5.22-5.77(m,1H),7.30-7.44(m,1H),7.65-7.78(m,2H),7.81-7.89(m,1H),7.96-8.11(m,1H),8.37-8.61(m,2H),10.98-11.18(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值467.2；实测值468.2；Rt＝3.032min。
实施例94.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(2-甲基苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物801和化合物800)的合成
步骤1：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(2-甲基苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺的合成
在室温下将HATU(363.51mg，956.01μmol)分批添加到2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(200mg，956.02μmol)、2-甲基-5-(5-甲基-2-哌啶基)-1,3-苯并噻唑(235.53mg，956.01μmol)和TEA(580.43mg，5.74mmol，799.50μL)于DMF(10mL)中的悬浮液中。将澄清溶液在20℃下搅拌18h且在真空中蒸发溶剂，以得到1g粗材料。使其经历RP-HPLC(柱：YMC-Actus Triart C18 100*20mml.D.S-5um；1-6min 60-70％水-MeOH(NH3 0.1％)，流速：30ml/min为流动相)，以得到N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[5-甲基-2-(2-甲基-1,3-苯并噻唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(249mg，569.07μmol，59.53％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值437.2；实测值438.2；Rt＝2.393min。
步骤2：手性分离(化合物800和化合物808)
通过手性HPLC(柱：IC，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，12ml/min为流动相)分离对映异构体，以得到两种个别对映异构体化合物801N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-甲基-1,3-苯并噻唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(75mg，171.41μmol，62.50％产率)(保留时间＝29.5min)和化合物800N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-甲基-1,3-苯并噻唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(99mg，226.26μmol，82.50％产率)(保留时间＝49.4min)。
化合物800于分析条件下(柱：IC，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min为流动相)的保留时间为47.90min且化合物801的保留时间为29.65min。
化合物800：保留时间：47.90min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98-1.04(m,3H),1.04-1.15(m,3H),1.30-1.41(m,1H),1.65-1.73(m,1H),1.80-1.91(m,1H),2.02-2.21(m,1H),2.25-2.33(m,1H),2.35-2.41(m,2H),2.75-2.78(m,3H),2.80-3.27(m,1H),3.41-4.09(m,1H),5.24-5.59(m,1H),5.60-5.72(m,2H),7.30-7.41(m,1H),7.42-7.55(m,1H),7.79-7.88(m,1H),7.97-8.07(m,2H),10.48-10.63(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值437.2；实测值438.2；Rt＝2.313min。
化合物801：保留时间：29.65min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99-1.04(m,3H),1.04-1.15(m,3H),1.30-1.42(m,1H),1.63-1.75(m,1H),1.81-1.93(m,1H),2.01-2.21(m,1H),2.24-2.32(m,1H),2.36-2.43(m,2H),2.77(s,3H),2.79-3.26(m,1H),3.42-4.08(m,1H),5.23-5.60(m,1H),5.60-5.75(m,2H),7.30-7.41(m,1H),7.41-7.59(m,1H),7.79-7.89(m,1H),7.95-8.09(m,2H),10.44-10.61(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值437.2；实测值438.2；Rt＝2.313min。
实施例95.5-(2-(2-(3,4-二氟苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物475、化合物474)的合成
步骤1：5-(2-(2-(3,4-二氟苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺的合成
将DIPEA(385.43mg，2.98mmol，519.45μL)添加到相应2-(3,4-二氟苯基)-5-甲基哌啶(0.18g，852.07μmol)和2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(178.22mg，725.59μmol，HCl)于DMF(10mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU溶液(356.38mg，937.28μmol)。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC(柱：Triart 100*20，5mkl；以MeOH+NH3为洗脱液混合物)，以得到纯的5-[[2-[(2R,5S)-2-(3,4-二氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.19g，472.17μmol，55.41％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值402.2；实测值403.2；Rt＝3.380min。
步骤2：手性分离(化合物475和化合物474)
使用Chiralpak IC-II 250*20，5mkm柱(以己烷-IPA-MeOH，50-25-25为流动相；流速12mL/min；注入体积：900mkl)分离5-[[2-[(2R,5S)-2-(3,4-二氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(108mg，268.39μmol)，得到呈黄色固体的化合物4755-[[2-[(2S,5R)-2-(3,4-二氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(56.59mg，140.63μmol，52.40％产率)(RT(IC，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min)＝24.70min)和呈黄色固体的化合物474 5-[[2-[(2R,5S)-2-(3,4-二氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(50.99mg，126.72μmol，47.21％产率)(RT(IC，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min)＝15.21min)。
化合物475：保留时间：24.70min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99-1.03(m,3H),1.26-1.37(m,1H),1.58-1.71(m,1H),1.82-1.97(m,1H),2.00-2.13(m,1H),2.14-2.25(m,1H),2.74-3.24(m,1H),3.42-4.02(m,1H),5.11-5.58(m,1H),7.11-7.22(m,1H),7.32-7.50(m,2H),7.55-7.64(m,1H),8.08-8.21(m,1H),8.42-8.52(m,1H),8.71-8.80(m,1H),8.81-8.92(m,1H),11.15-11.40(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值402.2；实测值403.2；Rt＝1.225min。
化合物474：保留时间：15.21min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99-1.08(m,3H),1.21-1.43(m,1H),1.59-1.74(m,1H),1.83-1.98(m,1H),1.99-2.16(m,1H),2.17-2.30(m,1H),2.74-3.31(m,1H),3.43-4.11(m,1H),5.12-5.63(m,1H),7.14-7.27(m,1H),7.33-7.53(m,2H),7.58-7.69(m,1H),8.12-8.24(m,1H),8.44-8.56(m,1H),8.73-8.85(m,1H),8.85-8.98(m,1H),11.18-11.36(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值402.2；实测值403.2；Rt＝1.226min。
实施例96.5-(2-(5-甲基-2-(3,4,5-三氟苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物476、化合物477)的合成
步骤1：5-(2-(5-甲基-2-(3,4,5-三氟苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺的合成
将DIPEA(394.65mg，3.05mmol，531.87μL)添加到相应5-甲基-2-(3,4,5-三氟苯基)哌啶(0.2g，872.44μmol)和2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(182.48mg，742.94μmol，HCl)于DMF(10mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU溶液(364.90mg，959.69μmol)。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC，以得到纯的5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(3,4,5-三氟苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(209mg，497.16μmol，56.99％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值420.2；实测值421.2；Rt＝3.479min。
步骤2：手性分离(化合物476和化合物477)
使用Chiralpak IC-II 250*20，5mkm柱(己烷-IPA-MeOH，70-15-15为流动相；流速14mL/min；注入体积：900mkl)分离5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(3,4,5-三氟苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(209mg，497.16μmol)，得到呈黄色固体的化合物476 5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(3,4,5-三氟苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(104.08mg，247.58μmol，49.80％产率)(RT(IC，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min)＝143.22min)和呈黄色固体的化合物4775-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(3,4,5-三氟苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(104.85mg，249.41μmol，50.17％产率)(RT(IC，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min)＝19.38min)。
化合物476：保留时间：13.22min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99-1.01(m,3H),1.24-1.38(m,1H),1.58-1.68(m,1H),1.82-1.94(m,1H),1.98-2.12(m,1H),2.13-2.24(m,1H),2.76-3.28(m,1H),3.45-4.05(m,1H),5.10-5.53(m,1H),7.22-7.31(m,2H),7.55-7.63(m,1H),8.11-8.22(m,1H),8.42-8.52(m,1H),8.73-8.81(m,1H),8.81-8.93(m,1H),11.20-11.32(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值420.2；实测值421.2；Rt＝3.351min。
化合物477：保留时间：19.38min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99-1.01(m,3H),1.24-1.38(m,1H),1.57-1.69(m,1H),1.79-1.94(m,1H),1.94-2.11(m,1H),2.11-2.23(m,1H),2.77-3.28(m,1H),3.44-4.04(m,1H),5.11-5.53(m,1H),7.20-7.33(m,2H),7.54-7.65(m,1H),8.10-8.21(m,1H),8.42-8.51(m,1H),8.72-8.81(m,1H),8.81-8.92(m,1H),11.11-11.39(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值420.2；实测值421.2；Rt＝3.348min。
实施例97.2-甲氧基-5-(2-(5-甲基-2-(3,4,5-三氟苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物739、化合物742)的合成
步骤1：2-甲氧基-5-(2-(5-甲基-2-(3,4,5-三氟苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺的合成
将DIPEA(398.69mg，3.08mmol，537.32μL)添加到相应5-甲基-2-(3,4,5-三氟苯基)哌啶(202.05mg，760.44μmol，HCl)和2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(0.3g，881.38μmol，Et3N)于DMF(5mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU(368.64mg，969.52μmol)。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC(WatersSunfire C18 20*100 5mkm柱且以H2O-MeOH+NH3为洗脱液混合物)，以得到2-甲氧基-5-[[2-[5-甲基-2-(3,4,5-三氟苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(166mg，368.55μmol，41.82％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.02(d,3H),1.24(m,1H),1.58(m,1H),1.98(m,1H),2.24(m,2H),3.36(m,1H),3.96(s,3H),4.02(m,1H),5.48(m,1H),7.28(m,2H),7.86(m,2H),8.52(m,1H),8.62(m,1H),11.12(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值450.2；实测值451.2；Rt＝3.229min。
步骤2：手性分离(化合物739和化合物742)
使用Chiralpak IA 250*20,5mkm柱(己烷-IPA-MeOH，60-20-20为流动相；流速12mL/min；注入体积：900mkl)分离2-甲氧基-5-[[2-[5-甲基-2-(3,4,5-三氟苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(100mg，222.02μmol)，得到呈黄色固体的化合物739 2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(3,4,5-三氟苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(49.57mg，110.06μmol，49.57％产率)(RT(IC，CO2-MeOH，60-40，2ml/min)＝6.03min)和呈黄色固体的化合物7422-甲氧基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(3,4,5-三氟苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(45.74mg，101.55μmol，45.74％产率)(RT(IC，CO2-MeOH，60-40,2ml/min)＝8.50min)。
化合物739：保留时间：6.03min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99(m,3H),1.27(m,1H),1.63(m,1H),1.87(m,1H),2.01(m,1H),2.16(m,1H),3.01(m,1H),3.78(m,4H),5.30(m,1H),7.25(m,2H),7.72(m,2H),8.48(m,2H),11.04(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值450.2；实测值451.2；Rt＝1.158min。
化合物742：保留时间：8.50min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99(m,3H),1.28(m,1H),1.62(m,1H),1.87(m,1H),2.02(m,1H),2.18(m,1H),2.92(m,1H),3.93(m,4H),5.30(m,1H),7.26(m,2H),7.72(m,2H),8.48(m,2H),11.04(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值450.2；实测值451.2；Rt＝1.159min。
实施例98.5-(2-(2-(4-羟基环己基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物393、化合物382和化合物394、化合物395)的合成
步骤1：5-(2-(2-(4-羟基环己基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺的合成
在25℃下，将4-(5-甲基-2-哌啶基)环己醇(0.4g，2.03mmol)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(566.22mg，1.82mmol)和TEA(2.05g，20.27mmol，2.83mL)于DMF(20mL)中的混合物搅拌0.25h，然后在0.5h内小批量添加HATU(693.72mg，1.82mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌2h，然后在真空中浓缩至5ml且提交至反相HPLC(柱：SunFireC18100x19 mm 5um，流动相：20-65％0-5min水-MeOH+FA，流速：30ml/min)，这得到呈淡黄色胶状物的5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-羟基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(148mg，380.99μmol，18.79％产率)和5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-羟基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(212mg，545.75μmol，26.92％产率)。
D1：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.96(d,3H),1.28(m,8H),1.62(m,4H),1.84(m,4H),3.71(m,1H),4.23(m,2H),7.57(s,1H),8.10(m,1H),8.47(m,1H),8.73(s,1H),8.87(m,1H),11.06(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值388.2；实测值389.2；Rt＝2.388min。
D2：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.96(d,3H),1.28(m,8H),1.62(m,4H),1.84(m,4H),3.71(m,1H),4.23(m,2H),7.57(s,1H),8.10(m,1H),8.47(m,1H),8.73(s,1H),8.87(m,1H),11.06(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值388.2；实测值389.2；Rt＝2.595min。
步骤2：手性分离(化合物393、化合物382和化合物394、化合物395)
将外消旋5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-羟基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(212.00mg，545.75μmol)提交至制备型手性HPLC(柱：СhiralcelIA(250*20，5mkm)，流动相：己烷-IPA-MeOH，60-20-20；流速：12ml/min.24℃，波长：205nm、225nm)，以得到化合物382 5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-羟基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(63.1mg，162.44μmol，29.76％产率)(保留时间＝13.45min)和化合物393 5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-羟基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(63.3mg，162.95μmol，29.86％产率)(保留时间＝31.52min)。
将外消旋5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-羟基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(148mg，380.99μmol)提交至制备型手性HPLC(柱：Chiralpak IB(250*20,5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH，80-10-10；流速：15ml/min)，以得到化合物3955-[[2-[(2R,5S)-2-(4-羟基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(47.9mg，123.31μmol，32.36％产率)(保留时间＝17.290min)和化合物394 5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-羟基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(43.6mg，112.24μmol，29.46％产率)(保留时间＝24.069min)。
化合物393：保留时间：31.52min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.92-1.02(m,3H),1.09-1.21(m,1H),1.21-1.32(m,3H),1.33-1.45(m,3H),1.45-1.57(m,1H),1.58-1.67(m,3H),1.81-2.00(m,3H),2.84-3.25(m,1H),3.33-3.57(m,1H),3.69-3.80(m,1H),3.95-4.37(m,2H),7.59(s,1H),8.15(s,1H),8.42-8.53(m,1H),8.71-8.80(m,1H),8.84-8.92(m,1H),10.98-11.16(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值388.2；实测值389.2；Rt＝2.415min。
化合物382：保留时间：13.45min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.89-1.04(m,3H),1.07-1.29(m,3H),1.29-1.45(m,4H),1.45-1.57(m,1H),1.57-1.66(m,3H),1.80-1.99(m,3H),2.84-3.22(m,1H),3.34-3.58(m,1H),3.67-3.81(m,1H),3.98-4.33(m,2H),7.59(s,1H),8.15(s,1H),8.43-8.51(m,1H),8.65-8.80(m,1H),8.84-8.93(m,1H),10.95-11.13(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值388.2；实测值389.2；Rt＝2.417min。
化合物394：保留时间：24.07min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.77-0.87(m,1H),0.89-1.02(m,5H),1.07-1.16(m,2H),1.21-1.30(m,1H),1.50-1.68(m,3H),1.72-2.00(m,6H),2.86-3.19(m,1H),3.35-3.78(m,1H),3.95-4.11(m,1H),4.31-4.50(m,1H),7.59(s,1H),8.09-8.23(m,1H),8.37-8.52(m,1H),8.70-8.79(m,1H),8.82-8.92(m,1H),10.94-11.13(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值388.2；实测值389.2；Rt＝2.225min。
化合物395：保留时间：17.29min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.71-0.91(m,2H),0.91-1.01(m,4H),1.04-1.18(m,2H),1.22-1.34(m,1H),1.50-1.68(m,3H),1.72-1.98(m,6H),2.85-3.24(m,1H),3.40-3.76(m,1H),3.96-4.11(m,1H),4.31-4.51(m,1H),7.59(s,1H),8.07-8.22(m,1H),8.42-8.50(m,1H),8.72-8.79(m,1H),8.81-8.95(m,1H),10.97-11.09(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值388.2；实测值389.2；Rt＝2.222min。
实施例99.5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物550和5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物574)的合成
步骤1：5-[[2-[5-甲基-2-(1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
将2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(340.69mg，1.39mmol，HCl)(190.00mg，1.01mmol)和5-(5-甲基-2-哌啶基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶(0.3g，1.39mmol)混合于DMF(10mL)中。将反应悬浮液冷却至20℃且添加HATU(527.41mg，1.39mmol)，随后添加TEA(421.08mg，4.16mmol，579.99μL)，且在环境温度下搅拌14h。在真空中蒸发反应混合物且通过制备型20-70％0-9.5min水-甲醇(NH30.1％)(流速30ml/min)纯化所获得的粗产物0.41g，以得到产物5-[[2-[5-甲基-2-(1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.045g，110.45μmol，7.96％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值407.2；实测值408.2；Rt＝1.945min。
步骤2：5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物550)和5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物574)的合成
通过手性HPLC(柱：OJ-H(250*20,5mkm))，以己烷-IPA-MeOH，60-20-20，14ml/min为流动相)分离对映异构体，以得到两种个别对映异构体化合物574 5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(11.97mg，29.38μmol，26.60％产率)和化合物550 5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.01063g，26.09μmol，23.62％产率)。
化合物550：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.00-1.06(m,3H),1.32-1.43(m,1H),1.73-1.81(m,1H),1.86-1.93(m,1H),2.08-2.23(m,1H),2.26-2.33(m,1H),2.84-3.05(m,1H),3.47-4.02(m,1H),5.33-5.75(m,1H),7.51-7.65(m,1H),8.09-8.22(m,3H),8.40-8.56(m,2H),8.69-8.79(m,1H),8.79-8.95(m,1H),11.11-11.46(m,1H),13.56-13.81(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值407.4；实测值408.2；Rt＝3.677min。
RT(己烷-IPA-MeOH，60-20-20，14ml/min)＝16.901min。
化合物574：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.02-1.07(m,3H),1.30-1.44(m,1H),1.71-1.84(m,1H),1.84-1.96(m,1H),2.06-2.28(m,1H),2.28-2.36(m,1H),2.80-3.22(m,1H),3.49-4.07(m,1H),5.27-5.73(m,1H),7.50-7.65(m,1H),8.06-8.21(m,3H),8.41-8.57(m,2H),8.70-8.79(m,1H),8.79-8.96(m,1H),11.07-11.56(m,1H),13.42-13.84(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值407.4；实测值408.2；Rt＝3.676min。
RT(己烷-IPA-MeOH，60-20-20，14ml/min)＝22.91min。
实施例100.2-甲氧基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物537)和2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物546)的合成
步骤1：2-甲氧基-5-[[2-[5-甲基-2-(1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
将2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(472.13mg，1.39mmol，C6H15N)和5-(5-甲基-2-哌啶基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶(0.3g，1.39mmol)混合于DMF中。将反应悬浮液冷却至0℃且添加HATU(527.41mg，1.39mmol)，随后添加TEA(421.08mg，4.16mmol，579.99μL)，且在环境温度下搅拌12h。在真空中蒸发反应混合物且通过制备型HPLC(C18柱，30-80％0-9.5min水-甲醇(NH30.1％)，流速30ml/min)纯化所获得的粗产物0.4g，以得到产物2-甲氧基-5-[[2-[5-甲基-2-(1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.11g，251.46μmol，18.13％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值437.2；实测值438.2；Rt＝1.037min。
步骤2：2-甲氧基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物537)和2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物546)的合成
通过HPLC(30-80％0-9.5min水-甲醇(NH3 0.1％)，流速30mL/min；(装载泵4mL/min甲醇(NH3 0.1％))；目标质量438；柱：YMC-Actus Triart C18 100*20mml.D.S-5um)为流动相)分离对映异构体，以得到两种个别对映异构体化合物537rel-2-甲氧基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.03614g，82.61μmol，32.85％产率)和化合物546rel-2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.04262g，97.43μmol，38.75％产率)。
化合物537：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.97-1.09(m,3H),1.28-1.43(m,1H),1.69-1.81(m,1H),1.84-1.96(m,1H),2.05-2.23(m,1H),2.23-2.35(m,1H),2.64-3.27(m,1H),3.45-4.04(m,4H),5.27-5.77(m,1H),7.63-7.82(m,2H),8.06-8.22(m,2H),8.39-8.59(m,3H),10.99-11.11(m,1H),13.57-13.67(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值437.5；实测值438.0；Rt＝4.053min。
RT(IB，CO2-MeOH，70-30，2.0mL/min)＝8.8722min。
化合物546：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.99-1.07(m,3H),1.28-1.43(m,1H),1.71-1.81(m,1H),1.84-1.95(m,1H),2.07-2.23(m,1H),2.24-2.34(m,1H),2.63-3.26(m,1H),3.47-4.04(m,4H),5.25-5.80(m,1H),7.62-7.81(m,2H),8.03-8.26(m,2H),8.37-8.62(m,3H),10.97-11.12(m,1H),13.57-13.68(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值437.5；实测值438.0；Rt＝4.051min。
RT(IB，CO2-MeOH，70-30，2.0mL/min)＝12.1912min。
实施例101.5-[[2-[(2S,5R)-2-(3-氯-4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物513)和5-[[2-[(2R,5S)-2-(3-氯-4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物512)的合成
步骤1：5-[[2-[2-(3-氯-4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
在21℃下，将2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(545.17mg，1.76mmol，Et3N)、HATU(667.93mg，1.76mmol)和三乙胺(177.76mg，1.76mmol，244.84μL)混合于无水DMF(5mL)中且将所得混合物搅拌1h。向其中添加2-(3-氯-4-氟苯基)-5-甲基哌啶(0.4g，1.76mmol)且将所得混合物在21℃下搅拌过夜。将所得混合物倒入到水中，用EtOAc萃取3次，将合并的有机物用水、盐水洗涤且蒸发。使残余物经历HPLC(50-80％2-7min；水-r1+nh3；30ml/min；装载泵4ml/min r1+nh3；柱SunFire 19*100mm)。获得两种级分的5-[[2-[2-(3-氯-4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(404.2mg，965.03μmol，54.94％产率)：第1级分-95.9mg(92.55％反式)和第2级分-308.3mg(88.21％反式)。
LCMS(ESI)：[M+Н]+m/z：计算值418.1；实测值419.2；Rt＝3.248min。
步骤2：5-[[2-[(2S,5R)-2-(3-氯-4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物513)和5-[[2-[(2R,5S)-2-(3-氯-4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物512)的合成
手性分离：IA(100*20,5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，15ml/min，V(溶剂)＝0.225L/注入；V注入＝10mL/注入；时间为0.5小时/注入；Rt(化合物513)＝11.9min；Rt(化合物512)＝15.07min；
5-[[2-[(2S,5R)-2-(3-氯-4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(36.54mg，87.24μmol，38.10％产率)的RT＝7.7912min(IA-3，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.155ml/min)
5-[[2-[(2R,5S)-2-(3-氯-4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(31.56mg，75.35μmol，32.91％产率)的RT＝10.0042min(IA-3，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.155ml/min)
化合物512：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.98-1.05(m,3H),1.25-1.41(m,1H),1.59-1.69(m,1H),1.81-1.95(m,1H),1.99-2.14(m,1H),2.14-2.28(m,1H),2.77-3.24(m,1H),3.46-4.06(m,1H),5.11-5.59(m,1H),7.29-7.38(m,1H),7.38-7.46(m,1H),7.46-7.53(m,1H),7.56-7.66(m,1H),8.08-8.23(m,1H),8.43-8.53(m,1H),8.71-8.81(m,1H),8.81-8.92(m,1H),11.09-11.39(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+Н]+m/z：计算值418.1；实测值419.2；Rt＝2.789min。
RT(IA-3，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.155ml/min)＝10.0042min
化合物513：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.98-1.05(m,3H),1.26-1.39(m,1H),1.61-1.71(m,1H),1.81-1.96(m,1H),2.00-2.14(m,1H),2.14-2.25(m,1H),2.77-3.23(m,1H),3.46-4.04(m,1H),5.08-5.58(m,1H),7.28-7.38(m,1H),7.38-7.46(m,1H),7.46-7.54(m,1H),7.55-7.64(m,1H),8.02-8.22(m,1H),8.37-8.54(m,1H),8.71-8.80(m,1H),8.81-8.95(m,1H),11.01-11.49(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+Н]+m/z：计算值418.1；实测值419.2；Rt＝2.787min。
RT(IA-3，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.155ml/min)＝7.7912min
实施例102.5-[[2-[(2S,5R)-2-(3,4-二氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物488)和5-[[2-[(2R,5S)-2-(3,4-二氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物489)的合成
步骤1：5-[[2-[2-(3,4-二氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(-[[2-[2-(3,4-二氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
将DIPEA(762.25mg，5.90mmol，1.03mL)添加到相应2-(3,4-二氯苯基)-5-甲基哌啶(0.36g，1.47mmol)和2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(308.39mg，1.26mmol，HCl)于DMF(10mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU溶液(616.69mg，1.62mmol)。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC(2-10min 40-60％水/乙腈+NH3(装载泵4ml)柱：TRIART 100*20 5微米)，以得到纯的5-[[2-[2-(3,4-二氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.43g，987.82μmol，67.00％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO)1.03(d,3H),1.23(m,1H),1.62(m,1H),2.10(m,3H),2.39(s,3H),4.10(m,1H),2.35(m,1H),7.38(s,1H),7.61(d,1H),8.10(d,1H),8.28(s,1H),8.52(s,1H),8.92(s,1H),11.30(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值434.1；实测值435.2；Rt＝3.547min。
步骤2：5-[[2-[(2S,5R)-2-(3,4-二氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物488)和5-[[2-[(2R,5S)-2-(3,4-二氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物489)的合成
对5-[[2-[2-(3,4-二氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.43g，987.82μmol)进行手性分离，得到化合物489rel-5-[[2-[(2R,5S)-2-(3,4-二氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(125.57mg，29.20％产率)和化合物488rel-5-[[2-[(2S,5R)-2-(3,4-二氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(132.39mg，30.79％产率)。
手性分离条件：Chiralpak IA(250*30mm，5mkm)；己烷-IPA-MeOH，50-25-25。流速：28mL/min；柱温：21℃；波长：205nm。保留时间(异构体A)＝12.85min；保留时间(异构体B)＝13.87min；保留时间(异构体C)＝16.97min；保留时间(异构体D)＝24.58min
化合物488：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.98-1.04(m,3H),1.26-1.38(m,1H),1.59-1.68(m,1H),1.82-1.95(m,1H),1.99-2.12(m,1H),2.13-2.25(m,1H),2.75-3.27(m,1H),3.42-4.05(m,1H),5.12-5.56(m,1H),7.26-7.36(m,1H),7.51-7.56(m,1H),7.56-7.62(m,1H),7.62-7.68(m,1H),8.09-8.19(m,1H),8.42-8.52(m,1H),8.71-8.80(m,1H),8.81-8.91(m,1H),11.21-11.39(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值434.1；实测值435.0；Rt＝1.324min。
RT(己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.155ml/min)＝14.85min。
化合物489：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.94-1.04(m,3H),1.24-1.40(m,1H),1.56-1.71(m,1H),1.83-1.96(m,1H),2.00-2.13(m,1H),2.14-2.25(m,1H),2.75-3.27(m,1H),3.45-4.08(m,1H),5.13-5.59(m,1H),7.27-7.36(m,1H),7.51-7.57(m,1H),7.57-7.62(m,1H),7.62-7.68(m,1H),8.09-8.19(m,1H),8.42-8.52(m,1H),8.70-8.80(m,1H),8.80-8.92(m,1H),11.13-11.37(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值434.1；实测值435.2；Rt＝1.325min。
RT(己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.155ml/min)＝9.49min。
实施例103.5-[[2-[(2S,5R)-2-(3-氯-4-甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物484)和5-[[2-[(2R,5S)-2-(3-氯-4-甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物485)的合成
步骤1：5-[[2-[2-(3-氯-4-甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
将DIPEA(554.54mg，4.29mmol，747.36μL)添加到相应2-(3-氯-4-甲基苯基)-5-甲基哌啶(0.24g，1.07mmol)和2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(263.47mg，1.07mmol，HCl)于DMF(10mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU溶液(448.65mg，1.18mmol)。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC(Waters SunFire C18 19*100mm 5mkm柱，以己烷-MeOH 50-50为流动相，流速12mL/min)，以得到5-[[2-[2-(3-氯-4-甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]哌啶-3-甲酰胺(0.349g，841.20μmol，78.42％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值414.1；实测值415.2；Rt＝3.513min。
步骤2：5-[[2-[(2S,5R)-2-(3-氯-4-甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物484)和5-[[2-[(2R,5S)-2-(3-氯-4-甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物485)的合成
柱：IA(100*20mm，5mkm)Chiralpak柱；反相和梯度：己烷-IPA-MeOH，50-25-25，15.0mL/min
5-[[2-[(2R,5S)-2-(3-氯-4-甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(64.53mg，18.49％产率)化合物485于分析条件下的保留时间46.81min
5-[[2-[(2S,5R)-2-(3-氯-4-甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(62.68mg，17.96％产率)化合物484于分析条件下的保留时间15.45min
化合物485：RT(IA，己烷-IPa-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝46.840min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.98-1.04(m,3H),1.26-1.39(m,1H),1.60-1.69(m,1H),1.81-1.93(m,1H),1.97-2.13(m,1H),2.14-2.23(m,1H),2.25-2.32(m,3H),2.75-3.25(m,1H),3.43-4.05(m,1H),5.08-5.58(m,1H),7.16-7.24(m,1H),7.28-7.40(m,2H),7.54-7.66(m,1H),8.10-8.20(m,1H),8.42-8.52(m,1H),8.72-8.79(m,1H),8.80-8.93(m,1H),11.11-11.46(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值414.2；实测值415.2；Rt＝1.324min。
化合物484：RT(IA，己烷-IPa-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝15.499min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.98-1.05(m,3H),1.24-1.36(m,1H),1.58-1.69(m,1H),1.80-1.94(m,1H),1.96-2.14(m,1H),2.14-2.22(m,1H),2.26-2.32(m,3H),2.74-3.25(m,1H),3.43-4.05(m,1H),5.10-5.58(m,1H),7.15-7.24(m,1H),7.28-7.40(m,2H),7.51-7.64(m,1H),8.08-8.21(m,1H),8.40-8.52(m,1H),8.69-8.80(m,1H),8.80-8.92(m,1H),11.05-11.44(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值414.2；实测值415.2；Rt＝1.325min。
实施例104.5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-甲基-4-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺和5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-甲基-4-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物534和化合物519)的合成
在轻微加热下，将2-甲基-4-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶(0.3g，1.58mmol)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(Et3N盐，362.73mg，1.73mmol)和DIPEA(611.28mg，4.73mmol，823.82μL)溶解于DMF(6mL)中。在剧烈搅拌和偶尔加热下，小批量添加HATU(719.36mg，1.89mmol)。将反应混合物在50℃下搅拌3小时。完成之后，通过反相HPLC(洗脱液：水-乙腈，10％0.5-6.5min；流速：30mL/min；装载泵：4mL/min，乙腈；柱SunFire 19*100mm，5um)和手性HPLC(柱：Chiralpak AD-H(250x 20mm x 5um)；流动相：己烷-IPA-MeOH，60-20-20；流速：12mL/min)纯化反应混合物，以得到呈白色固体的5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-甲基-4-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物534，80mg，209.74μmol，13.30％产率)和5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-甲基-4-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物519，90mg，235.96μmol，14.97％产率)。
化合物534：1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.01(m,3H),1.33(m,1H),1.56(m,1H),2.06(m,3H),2.44(s,2H),2.77(m,0.4H),3.23(m,0.6H),3.51(m,0.6H),4.06(d,0.4H),5.17(s,0.4H),5.52(s,0.6H),7.14(m,2H),7.59(m,1H),8.14(m,1H),8.44(m,2H),8.82(m,2H),11.25(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值381.2；实测值382.2；Rt＝2.926min。
手性HPLC：Rt＝33.14min(柱：AD-H；洗脱液：己烷-IPA-MeOH，60-20-20；流速：0.6mL/min)。
化合物519：1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.01(m,3H),1.33(m,1H),1.56(m,1H),2.06(m,3H),2.44(s,2H),2.77(m,0.4H),3.23(m,0.6H),3.51(m,0.6H),4.06(d,0.4H),5.17(s,0.4H),5.52(s,0.6H),7.14(m,2H),7.59(m,1H),8.14(m,1H),8.44(m,2H),8.82(m,2H),11.25(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值381.2；实测值382.2；Rt＝2.922min。
手性HPLC：Rt＝19.89min(柱：AD-H；洗脱液：己烷-IPA-MeOH，60-20-20；流速：0.6mL/min)。
实施例105.外消旋-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(1H-吡唑-5-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物524)、5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(1H-吡唑-3-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物626)和5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(1H-吡唑-3-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物627)的合成
步骤1：外消旋-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(1H-吡唑-5-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物524)的合成
向(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(1H-吡唑-5-基)苯基]哌啶(125mg，397.77μmol，2HCl)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(97.70mg，397.77μmol，HCl)和三乙胺(241.50mg，2.39mmol，332.65μL)的溶液中分批添加HATU(166.37mg，437.55μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌3h且使其经历HPLC：30-30-70％0-1-6min水-甲醇(NH30.1％)，流速30ml/min(装载泵4ml/min甲醇(NH3 0.1％))柱：YMC-Actus Triart C18 100*20mml.D.S-5um)，以得到5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(1H-吡唑-5-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(92mg，212.73μmol，53.48％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.00-1.06(m,3H),1.29-1.43(m,1H),1.65-1.76(m,1H),1.79-1.97(m,1H),2.02-2.16(m,1H),2.16-2.30(m,1H),2.75-3.27(m,1H),3.47-4.07(m,1H),5.13-5.65(m,1H),6.66-6.73(m,1H),7.32-7.39(m,2H),7.39-7.98(m,5H),8.07-8.23(m,1H),8.44-8.53(m,1H),8.65-8.80(m,1H),8.82-8.96(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值432.2；实测值433.2；Rt＝2.020min。
步骤2：5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(1H-吡唑-3-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物626)和5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(1H-吡唑-3-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物627)的合成
5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(1H-吡唑-3-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(82.7mg，191.23μmol)(化合物524)的手性分离使用Chiralpak IC(250*20mm，5mkm)柱(191.23μmol)，以己烷-IPA-MeOH，50-25-25为流动相；流速：12mL/min；柱温：21℃；波长：205nm进行，得到化合物626rel-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(1H-吡唑-3-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(19.1mg，44.16μmol，23.10％产率)(保留时间＝138.94min)和化合物627rel-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(1H-吡唑-3-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(22.03mg，50.94μmol，26.64％产率)(保留时间(异构体B)＝158.77min)。
化合物626：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.99-1.06(m,3H),1.29-1.43(m,1H),1.64-1.76(m,1H),1.83-1.96(m,1H),2.00-2.19(m,1H),2.20-2.31(m,1H),2.77-3.28(m,1H),3.45-4.08(m,1H),5.15-5.67(m,1H),6.62-6.74(m,1H),7.29-7.41(m,2H),7.41-7.61(m,1H),7.61-7.79(m,2H),7.80-7.85(m,1H),8.08-8.21(m,1H),8.43-8.53(m,1H),8.72-8.79(m,1H),8.83-8.94(m,1H),11.20-11.39(m,1H),12.75-13.38(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值432.2；实测值433.2；Rt＝2.311min。
RT(己烷-IPA-MeOH，50-25-25，12ml/min)＝10.3252min。
化合物627：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.01-1.06(m,3H),1.31-1.41(m,1H),1.65-1.75(m,1H),1.83-1.95(m,1H),2.01-2.19(m,1H),2.20-2.30(m,1H),2.76-3.28(m,1H),3.44-4.07(m,1H),5.14-5.65(m,1H),6.65-6.73(m,1H),7.32-7.43(m,2H),7.48-7.62(m,1H),7.62-7.76(m,1H),7.75-7.86(m,2H),8.08-8.22(m,1H),8.41-8.54(m,1H),8.66-8.81(m,1H),8.84-8.98(m,1H),11.15-11.40(m,1H),12.79-13.30(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值432.2；实测值433.2；Rt＝2.316min。
RT(己烷-IPA-MeOH，50-25-25，12ml/min)＝6.410min。
实施例106.5-(2-(2-(3-羟基-4-甲基苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物554)的合成
向2-甲基-5-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]苯酚(299.37mg，1.46mmol，HCl)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(358.18mg，1.15mmol，Et3N)和TEA(1.03g，10.21mmol，1.42mL)于DMF(5mL)中的溶液中分批添加HATU(609.92mg，1.60mmol)。将混合物在25℃下搅拌2h。将反应混合物提交用于HPLC(20-20-70％0-1-6min 0.1％ NH3-MeOH，流速：30ml/min(装载泵4ml/min MeOH)，目标质量396，柱：YMC Triart C18 100x20 mm，5um)，以得到5-[[2-[(2S,5R)-2-(3-羟基-4-甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(48mg，121.08μmol，8.30％产率)。产物含有6％顺式异构体。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.94-1.07(m,3H),1.25-1.35(m,1H),1.66-1.73(m,1H),1.79-1.91(m,1H),1.92-2.04(m,1H),2.04-2.09(m,4H),2.78-3.24(m,1H),3.48-4.06(m,1H),5.04-5.56(m,1H),6.61-6.69(m,1H),6.70-6.82(m,1H),7.00-7.08(m,1H),7.52-7.65(m,1H),8.07-8.23(m,1H),8.38-8.54(m,1H),8.67-8.80(m,1H),8.82-8.96(m,1H),9.16-9.30(m,1H),11.01-11.37(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值396.4；实测值397.2；Rt＝2.351min。
实施例107.5-[[2-[(2S,5R)-2-(1H-吲唑-4-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物883)和5-[[2-[(2R,5S)-2-(1H-吲唑-4-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物897)的合成
步骤1：5-[[2-[(2S,5R)-2-(1H-吲唑-4-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
向4-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]-1H-吲唑(475mg，1.32mmol，2HCl)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(275.77mg，1.12mmol，HCl)和三乙胺(667.07mg，6.59mmol，918.83μL)于二甲基甲酰胺(4mL)中的搅拌混合物中添加HATU(551.45mg，1.45mmol)。将所得反应混合物在20℃下搅拌4h。然后，使其经历HPLC(30-30-60％0-1-6minH2O/MeOH/0.1％ NH4OH，流速：30ml/min；柱：YMC Triart C18 100x20 mm，5um)，得到5-[[2-[(2S,5R)-2-(1H-吲唑-4-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(100mg，246.04μmol，18.66％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值406.2；实测值407.2；Rt＝2.098min。
步骤2：5-[[2-[(2S,5R)-2-(1H-吲唑-4-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物883)和5-[[2-[(2R,5S)-2-(1H-吲唑-4-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物897)的合成
通过手性HPLC(柱：Chiralpak IA-I(250*20mm，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH50-25-25，流速：12mL/min；5次注入，2mg/注入V＝3,5L，时间5,5h.)将5-[[2-[(2S,5R)-2-(1H-吲唑-4-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(10mg，24.60μmol)分成对映异构体，得到：化合物883 5-[[2-[(2S,5R)-2-(1H-吲唑-4-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(3.5mg，8.61μmol，70.00％产率)(其中保留时间＝35.174min)和化合物8975-[[2-[(2R,5S)-2-(1H-吲唑-4-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(3mg，7.38μmol，60.00％产率)(其中保留时间＝42.954min)。
化合物883：LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值406.4；实测值407.4；Rt＝3.303min。
RT(己烷-IPA-MeOH，50-25-25，12ml/min)＝25.1832min。
化合物897：LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值406.4；实测值407.4；Rt＝3.287min。
RT(己烷-IPA-MeOH，50-25-25，12ml/min)＝35.4262min。
实施例108.5-[[2-[(2R,5S)-2-(1H-吲唑-4-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(化合物918)和5-[[2-[(2S,5R)-2-(1H-吲唑-4-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(化合物926)的合成
步骤1：5-[[2-[(2S,5R)-2-(1H-吲唑-4-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺的合成
向4-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]-1H-吲唑(475mg，1.32mmol，2HCl)、2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(315.35mg，1.32mmol)和三乙胺(667.07mg，6.59mmol，918.83μL)于二甲基甲酰胺(4mL)中的搅拌混合物中添加HATU(551.45mg，1.45mmol)。将所得反应混合物在20℃下搅拌4h。然后，使其经历HPLC(20-20-50％0-1-6min H2O/MeCN/0.1％ NH4OH，流速：30ml/min；柱：YMC Triart C18 100x20 mm，5um)，得到5-[[2-[(2S,5R)-2-(1H-吲唑-4-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(135mg，309.30μmol，23.46％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值436.2；实测值437.0；Rt＝2.420min。
步骤2：5-[[2-[(2R,5S)-2-(1H-吲唑-4-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基-吡啶-3-甲酰胺(化合物918)和5-[[2-[(2S,5R)-2-(1H-吲唑-4-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基-吡啶-3-甲酰胺(化合物926)的合成
通过手性HPLC(柱：Chiralpak IB(250*30mm，5mkm)；流动相：CO2-MeOH，60-40；流速：80mL/min；柱温：40℃；波长：215nm.)将5-[[2-[(2S,5R)-2-(1H-吲唑-4-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(135mg，309.30μmol)分成对映异构体，得到：化合物926 5-[[2-[(2S,5R)-2-(1H-吲唑-4-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(25mg，57.28μmol，37.04％产率)(其中保留时间＝7.46min)和化合物9185-[[2-[(2R,5S)-2-(1H-吲唑-4-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(24mg，54.99μmol，35.56％产率)(其中保留时间＝9.87min)。
化合物918：1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.03(m,3H),1.34(m,1H),1.87(m,2H),2.18(m,2H),3.46(m,2H),3.92(m,3H),5.74(m,1H),7.07(m,1H),7.32(m,1H),7.45(d,1H),7.71(m,2H),8.07(m,1H),8.46(m,2H),10.98(m,1H),13.12(s,1H)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值436.2；实测值437.2；Rt＝2.431min。
RT(CO2-MeOH，60-40，80ml/min)＝5.8212min。
化合物926：1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.02(m,3H),1.34(m,1H),1.86(m,2H),2.22(m,2H),3.38(m,1H),3.92(m,4H),5.75(m,1H),7.04(m,1H),7.32(t,1H),7.45(d,1H),7.71(m,2H),8.07(m,1H),8.45(m,2H),10.99(m,1H),13.12(s,1H)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值436.2；实测值437.2；Rt＝2.455min。
RT(CO2-MeOH，60-40，80ml/min)＝6.9102min。
实施例109.5-(2-(5-甲基-2-(3-氧代异吲哚啉-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物746和化合物751)的合成
步骤1：5-(2-(5-甲基-2-(3-氧代异吲哚啉-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺的合成
将DIPEA(412.47mg，3.19mmol，555.89μL)添加到相应2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(190.72mg，776.48μmol，HCl)和6-(5-甲基-2-哌啶基)异吲哚啉-1-酮(0.21g，911.84μmol)于DMF(5mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU(381.38mg，1.00mmol)。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC(Waters Sunfire C18 20*100 5mkm柱且以H2O-MeOH为洗脱液混合物)，以得到5-[[2-[5-甲基-2-(3-氧代异吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.14g，332.19μmol，36.43％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.02(d,3H),1.36(m,1H),1.68(m,1H),1.89(m,1H),2.08(m,1H),2.28(m,1H),2.72(m,1H),3.56(m,1H),3.96(m,1H),4.34(s,2H),5.56(m,1H),7.62(m,3H),8.21(m,1H),8.49(m,1H),8.62(m,1H),8.78(m,1H),8.96(m,1H),11.32(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值421.2；实测值422.2；Rt＝1.882min。
步骤2：手性分离(化合物751和化合物746)
通过手性HPLC(柱：AS(250*20，10mkm)，以CO2-MeOH，60-40，50ml/min补充流速-15ml/min为流动相)分离对映异构体，以得到两种个别对映异构体化合物751 5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(3-氧代异吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(68.43mg，162.37μmol，48.88％产率)和化合物746 5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(3-氧代异吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(65.37mg，155.11μmol，46.69％产率)。
化合物751于分析条件下(柱：AS-H，CO2-MeOH，60-40，2ml/min为流动相)的保留时间为5.80min且化合物746的保留时间为3.93min。
化合物751：保留时间：5.80min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.01-1.06(m,3H),1.27-1.40(m,1H),1.60-1.70(m,1H),1.83-1.95(m,1H),2.07-2.21(m,1H),2.21-2.33(m,1H),2.77-3.26(m,1H),3.45-4.11(m,1H),4.28-4.38(m,2H),5.22-5.71(m,1H),7.52-7.64(m,4H),8.07-8.19(m,1H),8.39-8.51(m,1H),8.52-8.57(m,1H),8.71-8.80(m,1H),8.81-8.93(m,1H),11.21-11.39(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值421.2；实测值422.2；Rt＝0.812min。
化合物746：保留时间：3.93min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.00-1.05(m,3H),1.29-1.41(m,1H),1.63-1.70(m,1H),1.83-1.93(m,1H),2.08-2.21(m,1H),2.22-2.29(m,1H),2.78-3.26(m,1H),3.48-4.09(m,1H),4.31-4.41(m,2H),5.22-5.72(m,1H),7.52-7.64(m,4H),8.08-8.20(m,1H),8.38-8.52(m,1H),8.51-8.60(m,1H),8.69-8.80(m,1H),8.81-8.93(m,1H),11.19-11.39(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值421.2；实测值422.2；Rt＝0.812min。
实施例110.2-甲氧基-5-(2-(5-甲基-2-(3-氧代异吲哚啉-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物759)的合成
将DIPEA(284.78mg，2.20mmol，383.80μL)添加到相应2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(0.3g，881.38μmol，Et3N)和6-(5-甲基-2-哌啶基)异吲哚啉-1-酮(202.99mg，881.38μmol)于DMF(10mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU(368.64mg，969.52μmol)。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC(Waters SunfireC18 20*100 5mkm柱且以H2O-MeOH为洗脱液混合物)，以得到2-甲氧基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(3-氧代异吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(164.5mg，364.36μmol，41.34％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.01-1.03(m,3H),1.28-1.41(m,1H),1.60-1.71(m,1H),1.81-1.93(m,1H),2.05-2.20(m,1H),2.20-2.32(m,1H),2.74-3.27(m,1H),3.48-4.04(m,4H),4.32-4.35(m,2H),5.20-5.69(m,1H),7.51-7.60(m,3H),7.64-7.78(m,2H),8.37-8.47(m,1H),8.48-8.58(m,2H),10.99-11.10(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值451.2；实测值452.2；Rt＝2.197min。
实施例111.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(3-氧代异吲哚啉-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物700和化合物695)的合成
步骤1：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(3-氧代异吲哚啉-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺的合成
将DIPEA(617.79mg，4.78mmol，832.60μL)添加到相应2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(0.25g，1.20mmol)和6-(5-甲基-2-哌啶基)异吲哚啉-1-酮(275.22mg，1.20mmol)于DMF(10mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU(499.82mg，1.31mmol)。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC(Waters Sunfire C18 20*100 5mkm柱且以H2O-MeOH+NH3为洗脱液混合物)，以得到N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[5-甲基-2-(3-氧代异吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.37g，877.84μmol，73.46％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值421.2；实测值422.2；Rt＝1.852min。
步骤2：手性分离(化合物700和化合物695)
通过手性HPLC(柱：IC-II，以己烷-IPA-MeOH，60-20-20，12ml/min为流动相)分离对映异构体，以得到两种个别对映异构体化合物700N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(3-氧代异吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(118.61mg，281.41μmol，32.06％产率)和化合物695N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(3-氧代异吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(113.03mg，268.17μmol，30.55％产率)。
化合物700于分析条件下(柱：IC，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min为流动相)的保留时间为50.38min且化合物695的保留时间为37.16min。
化合物700：保留时间：50.38min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.07(m,6H),1.36(m,1H),1.65(m,1H),1.87(m,1H),2.08(m,1H),2.33(m,3H),2.97(m,1H),3.76(m,1H),4.33(m,2H),5.61(m,3H),7.56(m,4H),8.01(m,1H),8.54(s,1H),10.54(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值421.2；实测值422.2；Rt＝1.789min。
化合物695：保留时间：37.16min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.07(m,6H),1.36(m,1H),1.65(m,1H),1.87(m,1H),2.08(m,1H),2.33(m,3H),2.97(m,1H),3.76(m,1H),4.33(m,2H),5.61(m,3H),7.56(m,4H),8.01(m,1H),8.54(m,1H),10.54(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值421.2；实测值422.2；Rt＝1.793min。
实施例112.5-(2-(2-(3-氯-4,5-二氟苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物834和化合物846)的合成
步骤1：5-(2-(2-(3-氯-4,5-二氟苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺的合成
向(2R,5S)-2-(3-氯-4,5-二氟苯基)-5-甲基哌啶(200mg，814.02μmol)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(199.94mg，814.02μmol，HCl)和TEA(247.11mg，2.44mmol，340.37μL)于DMF(3mL)中的搅拌混合物中添加HATU(340.46mg，895.42μmol)。将所得反应混合物在20℃下搅拌5h。然后，使其经历HPLC(40-90％0-5min H2O/MeOH/0.1％NH4OH，流速：30ml/min；柱：YMC Triart C18100x20 mm，5um)，得到5-[[2-[(2R,5S)-2-(3-氯-4,5-二氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(192mg，439.52μmol，53.99％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值436.2；实测值437.2；Rt＝2.972min。
步骤2：手性分离(化合物834和化合物846)
通过手性HPLC(柱：Chiralpak AD-H-I(250*20mm，5mkm)；流动相：CO2-MeOH 50-50；流速：40mL/min)将5-[[2-[(2R,5S)-2-(3-氯-4,5-二氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(192mg，439.52μmol)分成对映异构体，得到：5-[[2-[(2R,5S)-2-(3-氯-4,5-二氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(55mg，125.90μmol，57.29％产率)(其中保留时间＝6.3min)(化合物846)和5-[[2-[(2S,5R)-2-(3-氯-4,5-二氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(68mg，155.66μmol，70.83％产率)(其中保留时间＝8.98min)(化合物834)。
化合物834于分析条件下(柱：AD-H，CO2-MeOH，50-50，2ml/min为流动相)的保留时间为8.34min且化合物846的保留时间为5.93min。
化合物834：保留时间：8.34min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.93-1.06(m,3H),1.24-1.40(m,1H),1.58-1.68(m,1H),1.78-1.96(m,1H),1.96-2.12(m,1H),2.12-2.25(m,1H),2.77-3.28(m,1H),3.44-4.03(m,1H),5.12-5.52(m,1H),7.31-7.48(m,2H),7.55-7.65(m,1H),8.09-8.21(m,1H),8.41-8.51(m,1H),8.71-8.80(m,1H),8.80-8.93(m,1H),11.20-11.34(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值436.2；实测值437.2；Rt＝1.277min。
化合物846：保留时间：5.93min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.95-1.05(m,3H),1.23-1.37(m,1H),1.58-1.68(m,1H),1.81-1.93(m,1H),1.97-2.11(m,1H),2.11-2.25(m,1H),2.77-3.29(m,1H),3.44-4.04(m,1H),5.10-5.52(m,1H),7.30-7.46(m,2H),7.55-7.65(m,1H),8.10-8.20(m,1H),8.42-8.51(m,1H),8.71-8.79(m,1H),8.80-8.91(m,1H),11.16-11.33(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值436.2；实测值437.2；Rt＝1.284min。
实施例113.5-(2-(2-(3-氯-5-(三氟甲基)苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物646和化合物653)的合成
步骤1：5-(2-(2-(3-氯-5-(三氟甲基)苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺的合成
将2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(279.38mg，900.21μmol)、(2R,5S)-2-[3-氯-5-(三氟甲基)苯基]-5-甲基哌啶(250mg，900.21μmol)、HATU(342.29mg，900.21μmol)和TEA(91.09mg，900.21μmol，125.47μL)混合于DMSO(2mL)中且在20℃下搅拌3h。使反应混合物经历HPLC 2-10min 45-60％水/ACN(装载泵4ml ACN)柱：TRIART 100*20，5微米。获得5-[[2-[(2R,5S)-2-[3-氯-5-(三氟甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(240mg，511.88μmol，56.86％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值468.2；实测值469.2；Rt＝3.311min。
步骤2：手性分离(化合物653和化合物646)
将外消旋5-[[2-[(2R,5S)-2-[3-氯-5-(三氟甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(240mg，511.88μmol)使用(Chiralpak IA-II 250*20，5mkm柱；以己烷-IPA-MeOH，80-10-10为流动相；流速12mL/min；注入体积：900mkl)分离；得到5-[[2-[(2S,5R)-2-[3-氯-5-(三氟甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(82mg，174.89μmol，68.33％产率)和5-[[2-[(2R,5S)-2-[3-氯-5-(三氟甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(86mg，183.43μmol，71.67％产率)。化合物653于分析条件下(柱：IA，以己烷-IPA-MeOH，70-15-15，0.6ml/min为流动相)的保留时间为13.53min且化合物646的保留时间为20.36min。
化合物653：保留时间：13.53min 1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.01(m,3H),1.32(m,1H),1.62(m,1H),1.91(m,1H),2.18(m,3H),3.78(m,1H),5.41(m,1H),7.59(m,2H),7.68(m,1H),7.77(m,1H),8.14(m,1H),8.46(m,1H),8.80(m,2H),11.30(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值468.2；实测值469.2；Rt＝3.312min。
化合物646：保留时间：20.36min 1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.01(m,3H),1.33(m,1H),1.61(m,1H),1.91(m,1H),2.19(m,3H),3.78(m,1H),5.41(m,1H),7.63(m,3H),7.77(m,1H),8.14(m,1H),8.46(m,1H),8.80(m,2H),11.29(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值468.2；实测值469.2；Rt＝3.313min。
实施例114.5-(2-(2-(3-氯-5-氟苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物1084、化合物615、化合物625和化合物624)的合成
在轻微加热下，将(2R,5S)-2-(3-氯-5-氟苯基)-5-甲基哌啶(0.3g，1.32mmol)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(323.60mg，1.32mmol，HCl)和DIPEA(340.55mg，2.63mmol，458.97μL)溶解于DMF(8mL)中。在剧烈搅拌和偶尔加热下，小批量添加HATU(500.95mg，1.32mmol)。反应完成之后，通过HPLC(23％0.5-6.5min水-MeCN；流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeCN)；目标质量380；柱：SunFireC18 100x19 mm 5um(L))纯化混合物且通过手性色谱(IA(250*30，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，70-15-15，20ml/min)分离对映异构体，以得到5-[[2-[(2R,5S)-2-(3-氯-5-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(83mg，198.16μmol，15.04％产率)、5-[[2-[(2S,5R)-2-(3-氯-5-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(87mg，207.71μmol，15.77％产率)、5-[[2-[(2R,5R)-2-(3-氯-5-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(10mg，23.88μmol，1.81％产率)和5-[[2-[(2S,5S)-2-(3-氯-5-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(10mg，23.88μmol，1.81％产率)。
化合物1084于分析条件下(柱：IC，以CO2-MeOH，70-30，3ml/min为流动相)的保留时间为9.30min，化合物615的保留时间为10.08min，化合物625的保留时间为7.53min且化合物624的保留时间为6.97min。
化合物1084：保留时间：9.30min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99-1.01(m,3H),1.26-1.39(m,1H),1.53-1.67(m,1H),1.78-1.95(m,1H),2.01-2.13(m,1H),2.15-2.26(m,1H),2.74-3.28(m,1H),3.47-4.04(m,1H),5.11-5.65(m,1H),7.12-7.20(m,1H),7.20-7.26(m,1H),7.30-7.39(m,1H),7.56-7.65(m,1H),8.11-8.20(m,1H),8.41-8.52(m,1H),8.69-8.81(m,1H),8.81-8.96(m,1H),11.11-11.46(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值418.2；实测值419.2；Rt＝2.922min。
化合物615：保留时间：10.08min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98-1.03(m,3H),1.25-1.39(m,1H),1.58-1.66(m,1H),1.83-1.94(m,1H),2.02-2.13(m,1H),2.15-2.29(m,1H),2.78-3.28(m,1H),3.47-4.09(m,1H),5.14-5.58(m,1H),7.09-7.20(m,1H),7.20-7.26(m,1H),7.30-7.40(m,1H),7.55-7.67(m,1H),8.10-8.22(m,1H),8.39-8.54(m,1H),8.69-8.80(m,1H),8.80-8.96(m,1H),11.19-11.43(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值418.2；实测值419.2；Rt＝2.921min。
化合物625：保留时间：7.53min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.73-0.82(m,3H),0.98-1.05(m,1H),1.60-1.76(m,2H),1.79-1.96(m,1H),2.11-2.18(m,0.4H),2.57-2.60(m,1.6H),3.63-4.28(m,1H),5.15-5.67(m,1H),7.13-7.19(m,1H),7.19-7.24(m,1H),7.32-7.41(m,1H),7.58-7.65(m,1H),8.10-8.22(m,1H),8.41-8.56(m,1H),8.70-8.80(m,1H),8.80-8.96(m,1H),11.27-11.36(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值418.2；实测值419.2；Rt＝2.981min。
化合物624：保留时间：6.97min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.66-0.86(m,3H),0.94-1.09(m,1H),1.55-1.77(m,2H),1.80-1.98(m,1H),2.11-2.19(m,0.4H),2.53-2.61(m,1.6H),3.62-4.29(m,1H),5.14-5.68(m,1H),7.13-7.19(m,1H),7.19-7.26(m,1H),7.32-7.40(m,1H),7.54-7.66(m,1H),8.09-8.20(m,1H),8.43-8.55(m,1H),8.72-8.80(m,1H),8.80-8.94(m,1H),11.28-11.44(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值418.2；实测值419.2；Rt＝2.979min。
实施例115.5-(2-(2-(3,4-二氟苯基)-4,4-二氟-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物683和化合物706)的合成
步骤1：5-(2-(2-(3,4-二氟苯基)-4,4-二氟-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺的合成
向(2S,5S)-2-(3,4-二氟苯基)-4,4-二氟-5-甲基哌啶(0.3g，1.21mmol)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(298.04mg，1.21mmol，HCl)和TEA(613.94mg，6.07mmol，845.65μL)的溶液中分批添加HATU(507.52mg，1.33mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌3h且通过HPLC(30-70％0-5min水-MeOH，流速30ml/min(装载泵4ml/min MeOH)，柱：SunFireC18 100*19mm 5um)纯化，以获得5-[[2-[(2S,5S)-2-(3,4-二氟苯基)-4,4-二氟-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(160mg，364.98μmol，30.08％产率)。此化合物不经H-NMR即用于手性拆分。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值438.2；实测值439.2；Rt＝2.684min。
步骤2：手性分离(化合物683和化合物706)
对5-[[2-[(2S,5S)-2-(3,4-二氟苯基)-4,4-二氟-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(160mg，364.98μmol)进行手性分离(样品信息：IA-I(250*.0,5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，14ml/min)，以获得5-[[2-[(2S,5S)-2-(3,4-二氟苯基)-4,4-二氟-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(73mg，166.52μmol，91.25％产率)和5-[[2-[(2R,5R)-2-(3,4-二氟苯基)-4,4-二氟-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(75mg，171.09μmol，93.75％产率)。
化合物683于分析条件下(柱：AD-H，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min为流动相)的保留时间为28.60min且化合物706的保留时间为16.55min。
化合物683：保留时间：28.60min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.08(m,3H),2.20(m,2H),2.86(m,1H),3.45(m,1H),4.07(m,1H),5.69(m,1H),7.17(m,1H),7.43(m,2H),7.60(m,1H),8.18(m,1H),8.48(m,1H),8.82(m,2H),11.36(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值438.2；实测值439.2；Rt＝2.800min。
化合物706：保留时间：16.55min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.08(m,3H),2.27(m,2H),2.93(m,1H),3.45(m,1H),4.08(m,1H),5.69(m,1H),7.17(m,1H),7.44(m,2H),7.60(m,1H),8.15(m,1H),8.48(m,1H),8.82(m,2H),11.28(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值438.2；实测值439.2；Rt＝2.796min。
实施例116.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-(2-(3,4-二氟苯基)-4,4-二氟-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物721和化合物728)的合成
步骤1：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-(2-(3,4-二氟苯基)-4,4-二氟-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺的合成
向(2S,5S)-2-(3,4-二氟苯基)-4,4-二氟-5-甲基哌啶(0.25g，1.01mmol)、2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(296.16mg，1.42mmol)和TEA(511.62mg，5.06mmol，704.71μL)的溶液中分批添加HATU(499.83mg，1.31mmol)。将所得混合物在40℃下搅拌3h且通过HPLC(0-5min 40-80％水-MeOH(NH3 0.1％)，流速30ml/min(装载泵4ml/min MeOH(NH3 0.1％))柱：YMC-Actus Triart C18 100*20mml.D.S-5um)纯化，以获得N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-2-(3,4-二氟苯基)-4,4-二氟-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(190mg，433.38μmol，42.86％产率)。此化合物不经H-NMR即用于手性拆分。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值438.2；实测值439.2；Rt＝2.475min。
步骤2：手性分离(化合物721和化合物728)
对N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-2-(3,4-二氟苯基)-4,4-二氟-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(190mg，433.38μmol)进行手性分离(注入体积：900mkl样品信息：AD-H I(250*20，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，13ml/min)，以获得N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-2-(3,4-二氟苯基)-4,4-二氟-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(73mg，166.51μmol，76.84％产率)和N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5R)-2-(3,4-二氟苯基)-4,4-二氟-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(74mg，168.79μmol，77.89％产率)。
化合物721于分析条件下(柱：AD-H，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min为流动相)的保留时间为31.65min且化合物728的保留时间为18.67min。
化合物721：保留时间：31.65min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.08(m,6H),2.18(m,1H),2.39(m,2H),2.93(m,2H),3.41(m,1H),3.96(m,1H),5.69(m,3H),7.15(m,1H),7.43(m,3H),8.03(m,1H),10.58(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值438.2；实测值439.2；Rt＝1.208min。
化合物728：保留时间：18.67min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.09(m,6H),2.18(m,1H),2.40(m,2H),2.92(m,2H),3.41(m,1H),3.97(m,1H),5.69(m,3H),7.15(m,1H),7.43(m,3H),8.03(m,1H),10.58(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值438.2；实测值439.2；Rt＝1.205min。
实施例117.5-(2-(2-(3-氯-4-(三氟甲基)苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物655、化合物647)的合成
步骤1：5-(2-(2-(3-氯-4-(三氟甲基)苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺的合成
向(2R,5S)-2-[3-氯-4-(三氟甲基)苯基]-5-甲基哌啶(0.9g，3.24mmol)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(955.19mg，3.89mmol，HCl)和DIPEA(1.05g，8.10mmol，1.41mL)于DMSO(5mL)中的搅拌溶液中添加HATU(1.48g，3.89mmol)。将所得反应混合物在20℃下搅拌13h。完成之后，将反应混合物提交至反相HPLC(柱：SunFire 19*100mm，5mkl；MeOH为洗脱液混合物)，以得到呈淡黄色固体的5-[[2-[(2R,5S)-2-[3-氯-4-(三氟甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.1g，213.29μmol，6.58％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值468.2；实测值469.2；Rt＝1.202min。
步骤2：手性分离(化合物655和化合物647)
将5-[[2-[(2R,5S)-2-[3-氯-4-(三氟甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.1g，213.29μmol)提交至手性分离(IA-II(250*20，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，12ml/min)，以得到5-[[2-[(2R,5S)-2-[3-氯-4-(三氟甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.038g，81.05μmol，38.00％产率)和5-[[2-[(2S,5R)-2-[3-氯-4-(三氟甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.039g，83.18μmol，39.00％产率)。化合物655于分析条件下(柱：IC，以CO2-MeOH，60-40，2.5ml/min为流动相)的保留时间为5.15min且化合物647的保留时间为4.04min。
化合物655：保留时间：5.15min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.01(m,3H),1.31(m,1H),1.63(m,1H),1.90(m,1H),2.15(m,2H),2.82(m,1H),3.78(m,1H),5.42(m,1H),7.49(m,1H),7.63(m,2H),7.86(m,1H),8.14(m,1H),8.46(m,1H),8.76(m,1H),8.86(m,1H),11.27(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值468.2；实测值469.2；Rt＝3.227min。
化合物647：保留时间：4.04min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.01(m,3H),1.31(m,1H),1.63(m,1H),1.90(m,1H),2.17(m,2H),2.83(m,1H),3.70(m,1H),5.42(d,1H),7.50(m,1H),7.63(m,2H),7.86(m,1H),8.13(d,1H),8.46(m,1H),8.76(m,1H),8.86(m,1H),11.27(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值468.2；实测值469.2；Rt＝3.226min。
实施例118.N-(5,6-二甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(3-(甲基磺酰基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物648)的合成
在25℃下，在0.5h内，向(2R,5S)-5-甲基-2-(3-甲基磺酰基苯基)哌啶(250.00mg，986.74μmol)、2-[(5,6-二甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(291.46mg，986.74μmol)和TEA(998.48mg，9.87mmol，1.38mL)于DMF(5mL)中的搅拌溶液中小批量添加HATU(412.71mg，1.09mmol)。将所得反应混合物在25℃下搅拌18h。通过反相HPLC(柱：YMC Triart C18100x20 mm，5um，流动相：40-54％0-5min 0.1％NH3-MeOH，流速：30ml/min(装载泵4ml/minMeOH))纯化粗反应混合物，以得到化合物648N-(5,6-二甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(3-甲基磺酰基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(180mg，419.06μmol，42.47％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.01(dd,3H),1.34(m,1H),1.64(m,1H),1.89(d,1H),2.07(m,1H),2.20(m,4H),2.34(m,4H),3.21(m,3H),3.77(m,1H),5.43(m,1H),7.66(m,2H),7.82(m,3H),8.43(m,1H),10.96(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值429.4；实测值430.2；Rt＝1.980min。
实施例119.5-(2-(5-甲基-2-(3-(N-甲基氨磺酰基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物666)的合成
向N-甲基-3-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]苯磺酰胺(535mg，1.99mmol)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(489.64mg，1.99mmol，HCl)和TEA(605.16mg，5.98mmol，833.56μL)于DMF(4mL)中的搅拌混合物中添加HATU(833.78mg，2.19mmol)。将所得反应混合物在20℃下搅拌4h。然后，使其经历HPLC(柱：YMC-Actus Triart C18 100*20mm，5um；0-5min 10-60％水-MeOH(NH3 0.1％)，流速30ml/min)，得到5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[3-(甲基氨磺酰基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(237mg，515.76μmol，25.87％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.02(m,3H),1.36(m,1H),1.65(m,1H),1.90(m,1H),2.16(m,2H),2.38(m,3H),2.99(m,1H),3.80(m,1H),5.46(m,1H),7.46(m,1H),7.56(m,1H),7.63(m,2H),7.69(m,2H),8.16(m,1H),8.47(m,1H),8.75(m,1H),8.86(m,1H),11.26(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值459.4；实测值460.2；Rt＝2.036min。
实施例120.5-(2-(5-甲基-2-(2-(甲基氨基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物862和化合物877)的合成
步骤1：5-(2-(5-甲基-2-(2-(甲基氨基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺的合成
将2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(281.91mg，1.15mmol，HCl)和N-甲基-5-(5-甲基-2-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-2-胺(0.3g，1.15mmol)混合于DMF(20mL)。将反应悬浮液冷却至0℃且添加HATU(523.68mg，1.38mmol)，随后添加TEA(348.42mg，3.44mmol，479.91μL)，且在环境温度下搅拌12h。将反应混合物在真空中蒸发且通过制备型(50-50-55％0-1-6min H2O/MeOH/0.1％ NH4OH，流速：30ml)纯化0.36g所获得的粗产物，以得到产物5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(甲基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.15g，331.47μmol，28.88％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值452.2；实测值453.2；Rt＝1.875min。
步骤2：手性分离(化合物862和化合物877)
使5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(甲基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.15g，331.47μmol)经历手性HPLC纯化(柱：IA-II(250*20,5mkm)，洗脱液：己烷-IPA-MeOH，70-15-15，流速：15mL/min)，以得到两种个别对映异构体化合物8775-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[2-(甲基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.02767g，61.15μmol，18.45％产率)和化合物862 5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(甲基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.03257g，71.97μmol，21.71％产率)。
化合物862于分析条件下(柱：IA-3，以己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.15ml/min为流动相)的保留时间为7.95min且化合物877的保留时间为12.36min。
化合物862：保留时间：7.95min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98-1.06(m,3H),1.26-1.40(m,1H),1.63-1.77(m,1H),1.81-1.94(m,1H),1.98-2.19(m,1H),2.20-2.31(m,1H),2.78-2.84(m,0.4H),2.89-2.96(m,3H),3.22-3.28(m,0.6H),3.44-4.04(m,1H),5.15-5.66(m,1H),6.91-7.05(m,1H),7.28-7.40(m,1H),7.53-7.62(m,1H),7.62-7.71(m,1H),7.81-7.98(m,1H),8.03-8.25(m,1H),8.41-8.55(m,1H),8.69-8.79(m,1H),8.83-8.94(m,1H),11.11-11.39(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值452.2；实测值453.2；Rt＝1.960min。
化合物877：保留时间：12.36min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99-1.06(m,3H),1.30-1.40(m,1H),1.65-1.77(m,1H),1.81-1.93(m,1H),1.98-2.18(m,1H),2.19-2.31(m,1H),2.79-2.82(m,0.3H),2.88-2.93(m,3H),3.25-3.28(m,0.7H),3.44-4.03(m,1H),5.15-5.67(m,1H),6.94-7.03(m,1H),7.29-7.40(m,1H),7.54-7.62(m,1H),7.62-7.70(m,1H),7.89-7.94(m,1H),8.09-8.22(m,1H),8.42-8.51(m,1H),8.69-8.80(m,1H),8.82-8.94(m,1H),10.97-11.54(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值452.2；实测值453.2；Rt＝1.961min。
实施例121.2-甲氧基-5-(2-(5-甲基-2-(2-(甲基氨基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物863和化合物875)的合成
步骤1：2-甲氧基-5-(2-(5-甲基-2-(2-(甲基氨基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺的合成
将2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(201.31mg，841.67μmol)和N-甲基-5-(5-甲基-2-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-2-胺(0.22g，841.67μmol)混合于DMF(20mL)中。将反应悬浮液冷却至0℃且添加HATU(384.03mg，1.01mmol)，随后添加TEA(170.34mg，1.68mmol，234.62μL)，且在环境温度下搅拌12h。将反应混合物在真空中蒸发且通过制备型(55-75％0-1-6min H2O/MeOH/0.1％NH4OH，流速：30ml/min)纯化0.5g所获得的粗产物，以得到产物2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(甲基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.155g，321.21μmol，38.16％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.11(d,3H),1.42(m,1H),2.12(m,4H),2.98(m,3H),3.32(m,1H),3.52(m,1H),3.98(m,3H),5.55(m,1H),7.02(m,1H),7.46(m,1H),7.82(m,3H),7.96(m,1H),8.56(m,2H),11.12(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值482.2；实测值483.2；Rt＝2.409min。
步骤2：手性分离(化合物863和化合物875)
使2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(甲基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.155g，321.21μmol)经历手性HPLC纯化(柱：IA-II(250*20,5mkm)，洗脱液：己烷-IPA-MeOH，50-25-25，流速：12mL/min)，以得到两种个别对映异构体化合物863 2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(甲基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.05441g，112.75μmol，35.10％产率)和化合物875 2-甲氧基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[2-(甲基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.0451g，93.46μmol，29.10％产率)。
化合物863于分析条件下(柱：IA，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min为流动相)的保留时间为63.81min且化合物875的保留时间为38.60min。
化合物863：保留时间：63.81min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99-1.03(m,3H),1.27-1.37(m,1H),1.65-1.74(m,1H),1.79-1.92(m,1H),1.99-2.17(m,1H),2.20-2.30(m,1H),2.77-2.81(m,0.3H),2.89-2.92(m,3H),3.24-3.28(m,0.7H),3.42-3.49(m,0.7H),3.89-3.96(m,3H),3.99-4.04(m,0.3H),5.13-5.74(m,1H),6.90-7.04(m,1H),7.29-7.38(m,1H),7.58-7.68(m,1H),7.68-7.78(m,2H),7.87-7.95(m,1H),8.33-8.48(m,1H),8.49-8.59(m,1H),10.93-11.21(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值482.2；实测值483.2；Rt＝1.749min。
化合物875：保留时间：38.60min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.97-1.10(m,3H),1.27-1.42(m,1H),1.64-1.76(m,1H),1.81-1.93(m,1H),2.01-2.20(m,1H),2.20-2.33(m,1H),2.76-2.83(m,0.3H),2.88-2.97(m,3H),3.24-3.28(m,0.7H),3.43-3.47(m,0.7H),3.88-3.98(m,3H),3.98-4.03(m,0.3H),5.11-5.65(m,1H),6.91-7.04(m,1H),7.27-7.38(m,1H),7.59-7.67(m,1H),7.66-7.77(m,2H),7.84-7.96(m,1H),8.37-8.49(m,1H),8.49-8.60(m,1H),10.89-11.25(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值482.2；实测值483.2；Rt＝1.743min。
实施例122.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(2-(甲基氨基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物896和化合物884)的合成
步骤1：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(2-(甲基氨基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺的合成
将2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(230.50mg，1.10mmol)和N-甲基-5-(5-甲基-2-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-2-胺(0.32g，1.22mmol)混合于DMF(20mL)中。将反应悬浮液冷却至0℃且添加HATU(465.50mg，1.22mmol)，随后添加TEA(247.76mg，2.45mmol，341.27μL)，且在环境温度下搅拌12h。将反应混合物在真空中蒸发且通过制备型(60-60-70％0-1-6min H2O/MeOH/0.1％ NH4OH，流速：30ml/min)纯化0.61g所获得的粗产物，以得到产物N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(甲基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.18g，397.73μmol，32.49％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.18(m,6H),1.36(m,1H),2.12(m,3H),2.48(m,2H),2.98(m,2H),3.12(m,2H),3.36(m,2H),4.12(m,1H),5.62(m,2H),7.02(m,1H),7.51(m,2H),7.68(m,1H),8.06(m,2H),10.58(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值452.2；实测值453.2；Rt＝1.983min。
步骤2：手性分离(化合物896和化合物884)
使N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(甲基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.18g，397.73μmol)经历手性HPLC纯化(柱：IA-II(250*20,5mkm)，洗脱液：己烷-IPA-MeOH，60-20-20，流速：12mL/min)，以得到两种个别对映异构体化合物884N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(甲基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.026g，57.45μmol，14.44％产率)和化合物896N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(甲基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(30.20mg，66.73μmol，16.78％产率)。
化合物896于分析条件下(柱：IA，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min为流动相)的保留时间为24.85min且化合物884的保留时间为43.94min。
化合物896：保留时间：24.85min
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.03(m,6H),1.34(m,1H),1.70(m,1H),1.86(m,1H),2.01(m,1H),2.14(m,1H),2.24(m,1H),2.38(m,2H),2.92(m,3H),3.43(m,1H),5.63(m,3H),6.98(m,1H),7.34(d,1H),7.48(d,1H),7.64(m,1H),7.92(m,1H),8.03(d,1H),10.54(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值452.2；实测值453.2；Rt＝2.047min。
化合物884：保留时间：43.94min
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.03(m,6H),1.32(m,1H),1.71(m,1H),1.87(m,1H),2.01(d,1H),2.18(m,1H),2.38(m,3H),2.92(s,3H),3.43(m,1H),5.62(m,3H),6.98(dd,1H),7.34(d,1H),7.48(d,1H),7.64(m,1H),7.92(m,1H),8.03(d,1H),10.53(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值452.2；实测值453.2；Rt＝2.051min。
实施例123.N-(5,6-二甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(2-(甲基氨基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物828)的合成
在室温下将HATU(436.40mg，1.15mmol)分批添加到2-[(5,6-二甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(339.01mg，1.15mmol)、N-甲基-5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-2-胺(300mg，1.15mmol)和TEA(696.83mg，6.89mmol，959.83μL)于DMF(13mL)中的悬浮液中。将澄清溶液在环境温度下搅拌18h且在真空中蒸发溶剂，以得到1g粗材料。使其经历RP-HPLC(柱：YMC Triart C18 100x20 mm，5um；以40-55％0-5min H2O/MeCN/0.1％ NH4OH，流速：30ml/min为流动相)，以得到化合物828N-(5,6-二甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(甲基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(293mg，669.63μmol，58.34％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.70-1.03(m,3H),1.11-1.36(m,1H),1.64-1.73(m,1H),1.79-1.92(m,1H),2.12-2.19(m,2H),2.20-2.27(m,3H),2.31-2.37(m,3H),2.78-3.26(m,4H),3.38-4.24(m,1H),5.07-6.70(m,1H),6.92-7.02(m,1H),7.28-7.39(m,1H),7.58-7.66(m,1H),7.72-7.86(m,1H),7.86-7.97(m,1H),8.36-8.53(m,1H),10.85-11.03(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值437.2；实测值438.2；Rt＝1.992min。
实施例124.5-[[2-[(2S,5R)-2-(5-乙酰胺基-2-噻吩基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物704)和5-[[2-[(2R,5S)-2-(5-乙酰胺基-2-噻吩基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物686)的合成
步骤1：5-[[2-[2-(5-乙酰胺基-2-噻吩基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
将2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(627.34mg，2.55mmol，HCl)和N-[5-(5-甲基-2-哌啶基)-2-噻吩基]乙酰胺(0.9g，2.55mmol，CF3COOH)混合于DMF(15mL)中。将反应悬浮液冷却至20℃且添加HATU(971.15mg，2.55mmol)，随后添加TEA(1.29g，12.77mmol，1.78mL)，且在环境温度下搅拌14h。将反应混合物在真空中蒸发且倒入到水(100ml)中且用EtOAc(2*30ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(2*30ml)洗涤，经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，且通过制备型(25-75％0-5min水-甲醇，流速30ml/min)纯化0.45g所获得的粗产物，以得到产物5-[[2-[2-(5-乙酰胺基-2-噻吩基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.100g，232.83μmol，9.12％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值429.1；实测值430.0；Rt＝1.948min。
步骤2：5-[[2-[(2S,5R)-2-(5-乙酰胺基-2-噻吩基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物704)和5-[[2-[(2R,5S)-2-(5-乙酰胺基-2-噻吩基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物686)的合成
通过手性HPLC(柱：OJ-H(250*20，5mkm))，以己烷-IPA-MeOH，70-15-15，14ml/min为流动相)分离对映异构体，以得到两种个别对映异构体化合物704 5-[[2-[(2S,5R)-2-(5-乙酰胺基-2-噻吩基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(37.20mg，86.61μmol，37.20％产率)和化合物686 5-[[2-[(2R,5S)-2-(5-乙酰胺基-2-噻吩基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.0461g，107.34μmol，46.10％产率)。
化合物686：RT(IA，己烷-IPA-MeOH，70-15-15，0.6mL/min)＝30.346min。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)0.78(m,3H),1.30(m,2H),1.68(m,2H),1.88(m,1H),2.02(m,3H),2.21(m,1H),3.90(m,1H),5.53(m,1H),6.47(m,1H),6.69(m,1H),7.58(m,1H),8.15(m,1H),8.49(m,1H),8.81(m,2H),11.05(s,1H),11.23(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值429.2；实测值430.2；Rt＝1.042min。
化合物704：RT(IA，己烷-IPA-MeOH，70-15-15，0.6mL/min)＝26.867min。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)0.79(dd,3H),1.31(m,1H),1.68(m,2H),1.89(m,1H),2.01(m,3H),2.20(m,1H),2.72(m,1H),3.89(m,1H),5.53(m,1H),6.47(m,1H),6.69(m,1H),7.59(d,1H),8.15(d,1H),8.49(m,1H),8.75(m,1H),8.87(m,1H),11.05(s,1H),11.23(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值429.2；实测值430.2；Rt＝1.041min。
实施例125.5-(2-(2-(5-氨基甲酰基噻吩-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物796和化合物792)的合成
步骤1：5-(2-(2-(5-氨基甲酰基噻吩-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺的合成
向5-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]噻吩-2-甲酰胺(185mg，824.71μmol)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(202.56mg，824.71μmol，HCl)和TEA(250.36mg，2.47mmol，344.84μL)于DMF(3mL)中的搅拌混合物中添加HATU(344.94mg，907.18μmol)。将所得反应混合物在20℃下搅拌4h。然后，使其经历HPLC(柱：YMC-Actus Triart C18 100*20mml.D.S-5um；20-40％1-6min水-MeOH(NH3 0.1％)，流速30ml/min)，得到5-[[2-[(2S,5R)-2-(5-氨基甲酰基-2-噻吩基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(127mg，305.68μmol，37.07％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值415.2；实测值416.2；Rt＝1.784min。
步骤2：手性分离(化合物796和化合物792)
通过手性HPLC将5-[[2-[(2S,5R)-2-(5-氨基甲酰基-2-噻吩基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(59mg，142.01μmol)分成对映异构体(CHIRALPACIB 250*20mm，5mkm；己烷-IPA-MeOH，70-15-15，流速：15ml/min，10mg/注入，6次注入)，得到：5-[[2-[(2S,5R)-2-(5-氨基甲酰基-2-噻吩基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(24mg，57.77μmol，81.36％产率)(其中保留时间＝27.71min)(化合物792)和5-[[2-[(2R,5S)-2-(5-氨基甲酰基-2-噻吩基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(26mg，62.58μmol，88.14％产率)(其中保留时间＝46.89min)(化合物796)。
化合物796于分析条件下(柱：IB，以己烷-IPA-MeOH，70-15-15，0.6ml/min为流动相)的保留时间为55.18min且化合物792的保留时间为30.99min。
化合物796：保留时间：55.18min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99-1.03(m,3H),1.37-1.47(m,1H),1.76-1.86(m,1H),1.86-1.97(m,1H),1.99-2.04(m,1H),2.06-2.22(m,1H),2.88-2.93(m,0.4H),3.32-3.36(m,0.6H),3.44-4.09(m,1H),5.43-5.85(m,1H),7.01(s,1H),7.25-7.40(m,1H),7.55-7.67(m,2H),7.84-7.97(m,1H),8.10-8.20(m,1H),8.45-8.51(m,1H),8.71-8.91(m,2H),11.09-11.46(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值415.2；实测值416.2；Rt＝1.699min。
化合物792：保留时间：30.99min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98-1.01(m,3H),1.37-1.45(m,1H),1.77-1.85(m,1H),1.87-1.98(m,1H),1.99-2.04(m,1H),2.06-2.21(m,1H),2.88-2.93(m,0.4H),3.32-3.35(m,0.6H),3.46-4.07(m,1H),5.43-5.87(m,1H),7.01(s,1H),7.27-7.40(m,1H),7.55-7.66(m,2H),7.86-7.97(m,1H),8.11-8.21(m,1H),8.44-8.52(m,1H),8.72-8.83(m,1H),8.83-8.91(m,1H),11.09-11.37(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值415.2；实测值416.2；Rt＝1.699min。
实施例126.5-(2-(2-(5-氨基甲酰基噻吩-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-2-甲氧基烟酰胺(化合物844和化合物837)的合成
步骤1：5-(2-(2-(5-氨基甲酰基噻吩-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-2-甲氧基烟酰胺的合成
向5-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]噻吩-2-甲酰胺(190mg，847.00μmol)、2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(202.59mg，847.00μmol)和TEA(171.42mg，1.69mmol，236.11μL)于DMF(3mL)中的搅拌混合物中添加HATU(354.26mg，931.70μmol)。将所得反应混合物在20℃下搅拌4h。然后，使其经历HPLC(20-60％0-5minH2O/MeOH/0.1％ NH4OH，流速：30ml/min；柱：YMC Triart C18100x20 mm，5um)，得到5-[[2-[(2S,5R)-2-(5-氨基甲酰基-2-噻吩基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(164mg，368.13μmol，43.46％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值445.2；实测值446.2；Rt＝2.187min。
步骤2：手性分离(化合物844和化合物837)
通过手性HPLC(柱：Chiralpak IA(250x 20mm，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH，50-25-25，流速：12mL/min；柱温：24℃)将5-[[2-[(2S,5R)-2-(5-氨基甲酰基-2-噻吩基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(164mg，368.13μmol)分成对映异构体，得到：5-[[2-[(2S,5R)-2-(5-氨基甲酰基-2-噻吩基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(40mg，89.79μmol，48.78％产率)(其中保留时间＝45.11min)(化合物844)和5-[[2-[(2R,5S)-2-(5-氨基甲酰基-2-噻吩基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(40mg，89.79μmol，48.78％产率)(其中保留时间＝77.66min)(化合物837)。
化合物844于分析条件下(柱：IA，以己烷-IPA-MeOH，40-30-30，0.6ml/min为流动相)的保留时间为30.58min且化合物837的保留时间为49.18min。
化合物844：保留时间：30.58min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.97-1.00(m,3H),1.37-1.45(m,1H),1.75-1.84(m,1H),1.85-1.96(m,1H),1.98-2.04(m,1H),2.07-2.21(m,1H),2.88(d,1H),3.44-4.06(m,4H),5.43-5.81(m,1H),6.98-7.02(m,1H),7.29-7.35(m,1H),7.59-7.64(m,1H),7.68-7.76(m,2H),7.86-7.94(m,1H),8.42-8.49(m,1H),8.51-8.55(m,1H),10.99-11.04(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值445.2；实测值446.2；Rt＝1.016min。
化合物837：保留时间：49.18min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.96-1.00(m,3H),1.36-1.45(m,1H),1.76-1.94(m,2H),1.95-2.03(m,1H),2.05-2.19(m,1H),2.85-3.27(m,1H),3.44-4.07(m,4H),5.40-5.82(m,1H),6.93-7.06(m,1H),7.24-7.40(m,1H),7.55-7.67(m,1H),7.67-7.78(m,2H),7.83-7.97(m,1H),8.42-8.49(m,1H),8.51-8.56(m,1H),10.97-11.06(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值445.2；实测值446.2；Rt＝1.017min。
实施例127.5-(1-(2-((6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)氨基)-2-氧代乙酰基)-5-甲基哌啶-2-基)噻吩-2-甲酰胺(化合物845和化合物838)的合成
步骤1：5-(1-(2-((6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)氨基)-2-氧代乙酰基)-5-甲基哌啶-2-基)噻吩-2-甲酰胺的合成
向5-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]噻吩-2-甲酰胺(190mg，847.00μmol)、2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(177.19mg，847.00μmol)和TEA(171.42mg，1.69mmol，236.11μL)于DMF(3mL)中的搅拌混合物中添加HATU(354.26mg，931.70μmol)。将所得反应混合物在20℃下搅拌4h。然后，使其经历HPLC(25-50％0-5min H2O/ACN/0.1％NH4OH，流速：30ml/min；柱：YMC Triart C18 100x20mm，5um)，得到5-[(2S,5R)-1-[2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酰基]-5-甲基-2-哌啶基]噻吩-2-甲酰胺(147mg，353.78μmol，41.77％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值415.2；实测值416.2；Rt＝1.753min。
步骤2：手性分离(化合物845和化合物838)
通过手性HPLC(柱：Сhiralpak IA(250*20，5mkm)，流动相：己烷-IPA-MeOH，60-20-20；流速：12ml/min。24℃)将5-[(2S,5R)-1-[2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酰基]-5-甲基-2-哌啶基]噻吩-2-甲酰胺(147mg，353.78μmol)分成对映异构体，得到：5-[(2R,5S)-1-[2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酰基]-5-甲基-2-哌啶基]噻吩-2-甲酰胺(60mg，144.40μmol，81.63％产率)(其中保留时间＝32.2min)(化合物845)和5-[(2S,5R)-1-[2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酰基]-5-甲基-2-哌啶基]噻吩-2-甲酰胺(68mg，163.66μmol，92.52％产率)(其中保留时间＝43.5min)(化合物838)。
化合物845于分析条件下(柱：IA，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min为流动相)的保留时间为35.87min且化合物838的保留时间为54.27min。
化合物845：保留时间：35.87min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.97-1.11(m,6H),1.34-1.44(m,1H),1.73-1.96(m,2H),1.96-2.17(m,2H),2.36-2.42(m,2H),2.82-3.28(m,1H),3.38-4.04(m,1H),5.38-5.83(m,3H),6.94-7.03(m,1H),7.23-7.39(m,1H),7.42-7.52(m,1H),7.58-7.65(m,1H),7.80-7.95(m,1H),7.95-8.06(m,1H),10.42-10.54(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值415.2；实测值416.2；Rt＝0.915min。
化合物838：保留时间：54.27min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.97-1.01(m,3H),1.06-1.12(m,3H),1.34-1.44(m,1H),1.74-1.85(m,1H),1.85-1.96(m,1H),2.00-2.19(m,2H),2.33-2.36(m,1H),2.38-2.40(m,1H),3.29(s,1H),3.42-4.06(m,1H),5.39-5.80(m,3H),6.94-7.02(m,1H),7.32(s,1H),7.45-7.51(m,1H),7.59-7.65(m,1H),7.90(s,1H),7.97-8.06(m,1H),10.45-10.53(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值415.2；实测值416.2；Rt＝0.916min。
实施例128.2-甲氧基-5-(2-(5-甲基-2-(5-(甲基氨基甲酰基)噻吩-2-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物833和化合物843)的合成
步骤1：2-甲氧基-5-(2-(5-甲基-2-(5-(甲基氨基甲酰基)噻吩-2-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺的合成
向N-甲基-5-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]噻吩-2-甲酰胺(186mg，780.37μmol)、2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(186.65mg，780.37μmol)和TEA(157.93mg，1.56mmol，217.54μL)于DMF(3mL)中的搅拌混合物中添加HATU(326.39mg，858.41μmol)。将所得反应混合物在20℃下搅拌4h。然后，使其经历HPLC(30-50％0-5minH2O/MeOH/0.1％ NH4OH，流速：30ml/min；柱：YMC Triart C18 100x20 mm，5um)，得到2-甲氧基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[5-(甲基氨基甲酰基)-2-噻吩基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(185mg，402.60μmol，51.59％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值459.2；实测值460.2；Rt＝2.264min。
步骤2：手性分离(化合物833和化合物843)
通过手性HPLC(柱：Chiralpak IA(250x 20mm，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH，60-20-20，流速：12mL/min；柱温：24℃)将2-甲氧基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[5-(甲基氨基甲酰基)-2-噻吩基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(185mg，402.60μmol)分成对映异构体，得到：2-甲氧基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[5-(甲基氨基甲酰基)-2-噻吩基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(81mg，176.27μmol，87.57％产率)(其中保留时间＝55.00min)(化合物843)和2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[5-(甲基氨基甲酰基)-2-噻吩基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(83mg，180.62μmol，89.73％产率)(其中保留时间＝74.84min)(化合物833)。
化合物833于分析条件下(柱：IA，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min为流动相)的保留时间为46.47min且化合物843的保留时间为34.75min。
化合物833：保留时间：46.47min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.96-1.02(m,3H),1.36-1.44(m,1H),1.72-1.85(m,1H),1.86-1.97(m,1H),1.98-2.04(m,1H),2.06-2.19(m,1H),2.69-2.74(m,3H),2.84-3.29(m,1H),3.44-4.07(m,4H),5.43-5.80(m,1H),6.97-7.04(m,1H),7.54-7.61(m,1H),7.68-7.77(m,2H),8.34-8.42(m,1H),8.44-8.49(m,1H),8.52-8.56(m,1H),10.95-11.08(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值459.2；实测值460.2；Rt＝0.958min。
化合物843：保留时间：34.75min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.97-1.01(m,3H),1.37-1.44(m,1H),1.72-1.95(m,2H),1.96-2.04(m,1H),2.08-2.22(m,1H),2.67-2.76(m,3H),2.84-3.29(m,1H),3.45-4.05(m,4H),5.41-5.81(m,1H),6.96-7.03(m,1H),7.53-7.60(m,1H),7.67-7.77(m,2H),8.32-8.43(m,1H),8.43-8.49(m,1H),8.51-8.55(m,1H),11.00-11.05(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值459.2；实测值460.2；Rt＝0.958min。
实施例129.5-(1-(2-((6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)氨基)-2-氧代乙酰基)-5-甲基哌啶-2-基)-N-甲基噻吩-2-甲酰胺(化合物840和化合物835)的合成
步骤1：5-(1-(2-((6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)氨基)-2-氧代乙酰基)-5-甲基哌啶-2-基)-N-甲基噻吩-2-甲酰胺的合成
向N-甲基-5-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]噻吩-2-甲酰胺(186mg，780.37μmol)、2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(163.26mg，780.37μmol)和TEA(157.93mg，1.56mmol，217.54μL)于DMF(3mL)中的搅拌混合物中添加HATU(326.39mg，858.41μmol)。将所得反应混合物在20℃下搅拌4h。然后，使其经历HPLC(20-45％0-5minH2O/ACN/0.1％ NH4OH，流速：30ml/min；柱：YMC Triart C18100x20 mm，5um)，得到5-[(2S,5R)-1-[2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酰基]-5-甲基-2-哌啶基]-N-甲基-噻吩-2-甲酰胺(145mg，337.57μmol，43.26％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值429.2；实测值430.2；Rt＝1.942min。
步骤2：手性分离(化合物840和化合物835)
通过手性HPLC(柱：Chiralpak AD-H(250*20mm，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH，50-25-25；流速：11mL/min；柱温：20℃)将5-[(2S,5R)-1-[2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酰基]-5-甲基-2-哌啶基]-N-甲基-噻吩-2-甲酰胺(145mg，337.57μmol)分成对映异构体，得到：5-[(2S,5R)-1-[2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酰基]-5-甲基-2-哌啶基]-N-甲基-噻吩-2-甲酰胺(76mg，176.94μmol，52.41％产率)(其中保留时间＝30.25min)(化合物835)和5-[(2R,5S)-1-[2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酰基]-5-甲基-2-哌啶基]-N-甲基-噻吩-2-甲酰胺(88mg，204.87μmol，60.69％产率)(其中保留时间＝64.89min)(化合物840)。
化合物840于分析条件下(柱：AD-H，己烷-IPA-MeOH，40-30-30，0.6ml/min为流动相)的保留时间为50.87min且化合物835的保留时间为25.71min。
化合物840：保留时间：50.87min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.96-1.01(m,3H),1.07-1.12(m,3H),1.35-1.44(m,1H),1.73-1.84(m,1H),1.86-2.04(m,2H),2.05-2.18(m,1H),2.36-2.41(m,2H),2.69-2.74(m,3H),2.82-3.28(m,1H),3.41-4.06(m,1H),5.41-5.78(m,3H),6.95-7.03(m,1H),7.44-7.50(m,1H),7.53-7.59(m,1H),7.99-8.05(m,1H),8.34-8.40(m,1H),10.46-10.53(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值429.2；实测值430.2；Rt＝1.753min。
化合物835：保留时间：25.71min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.97-1.01(m,3H),1.06-1.12(m,3H),1.34-1.44(m,1H),1.74-1.84(m,1H),1.86-2.03(m,2H),2.04-2.17(m,1H),2.36-2.41(m,2H),2.69-2.75(m,3H),2.82-3.28(m,1H),3.33-4.06(m,1H),5.39-5.81(m,3H),6.95-7.03(m,1H),7.45-7.52(m,1H),7.53-7.60(m,1H),8.01-8.05(m,1H),8.34-8.39(m,1H),10.47-10.52(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值429.2；实测值430.2；Rt＝0.975min。
实施例130.5-(2-(5-甲基-2-(5-(甲基氨基甲酰基)噻吩-2-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物839和化合物829)的合成
步骤1：5-(2-(5-甲基-2-(5-(甲基氨基甲酰基)噻吩-2-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺的合成
向N-甲基-5-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]噻吩-2-甲酰胺(186mg，780.37μmol)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(191.67mg，780.37μmol，HCl)和TEA(236.90mg，2.34mmol，326.30μL)于DMF(3mL)中的搅拌混合物中添加HATU(326.39mg，858.41μmol)。将所得反应混合物在20℃下搅拌4h。然后，使其经历HPLC(20-45％0-5minH2O/MeOH/0.1％ NH4OH，流速：30ml/min；柱：YMC Triart C18 100x20 mm，5um)，得到5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[5-(甲基氨基甲酰基)-2-噻吩基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(195mg，454.02μmol，58.18％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值429.2；实测值430.2；Rt＝1.898min。
步骤2：手性分离(化合物839和化合物829)
通过手性HPLC(柱：Сhiralpak IA(250*20，5mkm)，流动相：己烷-IPA-MeOH，60-20-20；流速：12ml/min，柱温24℃)将5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[5-(甲基氨基甲酰基)-2-噻吩基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(195mg，454.02μmol)分成对映异构体，得到：5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[5-(甲基氨基甲酰基)-2-噻吩基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(45mg，104.77μmol，46.15％产率)(其中保留时间＝27.9min)(化合物839)和5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[5-(甲基氨基甲酰基)-2-噻吩基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(48mg，111.76μmol，49.23％产率)(其中保留时间＝35.6min)(化合物829)。
化合物839于分析条件下(柱：IA，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min为流动相)的保留时间为20.57min且化合物829的保留时间为25.04min。
化合物839：保留时间：20.57min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.92-1.06(m,3H),1.36-1.46(m,1H),1.74-1.97(m,2H),2.00-2.21(m,2H),2.69-2.76(m,3H),2.85-3.28(m,1H),3.45-4.08(m,1H),5.42-5.82(m,1H),6.95-7.05(m,1H),7.53-7.64(m,2H),8.10-8.19(m,1H),8.35-8.43(m,1H),8.45-8.52(m,1H),8.73-8.79(m,1H),8.87-8.91(m,1H),11.20-11.30(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值429.2；实测值430.2；Rt＝1.000min。
化合物829：保留时间：25.04min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98-1.01(m,3H),1.37-1.45(m,1H),1.74-1.91(m,2H),1.91-2.02(m,1H),2.07-2.18(m,1H),2.66-2.77(m,3H),2.87-3.29(m,1H),3.33-4.08(m,1H),5.42-5.83(m,1H),6.98-7.08(m,1H),7.50-7.66(m,2H),8.07-8.21(m,1H),8.32-8.44(m,1H),8.44-8.51(m,1H),8.68-8.81(m,1H),8.83-8.93(m,1H),11.18-11.30(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值429.2；实测值430.2；Rt＝0.999min。
实施例131.rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物579)和rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物589)的合成
步骤1：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
向2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(0.5g，2.39mmol)、5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1H-吲唑(321.60mg，1.49mmol)和三乙胺(906.93mg，8.96mmol，1.25mL)于DMF(5.0mL)中的溶液中分批添加HATU(681.57mg，1.79mmol)。将所得混合物在50℃下搅拌3h且使其经历HPLC(40-40-80％0-1-5min 0.1％ NH3-甲醇，流速：30ml/min(装载泵4ml/min甲醇)，目标质量406，柱：YMC Triart C18 100*20mm，5um)，以得到N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.2g，492.03μmol，32.94％产率)。此化合物不经HNMR即用于手性拆分。
步骤2：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的手性分离
对N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.2g，492.03μmol)进行手性分离(样品信息：IC-I(250*20，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，流速12ml/min)，以获得化合物579rel-2-((2R,5S)-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺(92mg，226.33μmol，92.00％产率)和化合物589rel-2-((2R,5S)-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺(88mg，216.49μmol，88.00％产率)。
化合物579：RT(IB，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min)＝9.16min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.00-1.04(m,4H),1.05-1.14(m,3H),1.29-1.38(m,1H),1.71-1.80(m,1H),1.80-1.89(m,1H),2.03-2.16(m,1H),2.22-2.30(m,1H),2.38-2.41(m,1H),2.72-3.24(m,1H),3.43-4.03(m,1H),5.20-5.60(m,1H),5.61-5.71(m,2H),7.25-7.38(m,1H),7.41-7.50(m,1H),7.51-7.56(m,1H),7.66-7.73(m,1H),7.95-8.03(m,1H),8.03-8.09(m,1H),10.43-10.58(m,1H),13.01(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值406.2；实测值407.2；Rt＝3.684min。
化合物589：RT(IB，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min)＝12.20min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.97-1.14(m,6H),1.28-1.42(m,1H),1.68-1.80(m,1H),1.80-1.92(m,1H),2.00-2.21(m,1H),2.23-2.30(m,1H),2.31-2.35(m,1H),2.37-2.41(m,1H),2.71-3.26(m,1H),3.40-4.04(m,1H),5.18-5.60(m,1H),5.61-5.74(m,2H),7.23-7.38(m,1H),7.38-7.57(m,2H),7.65-7.73(m,1H),7.95-8.09(m,2H),10.44-10.57(m,1H),13.01(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值406.2；实测值407.2；Rt＝1.957min。
实施例132.5-[[2-[(2S,5R)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物495)、5-[[2-[(2S,5R)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物587)和5-[[2-[(2R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物588)的合成
步骤1.5-[[2-[(2S,5R)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物495)的合成
在室温下将HATU(654.60mg，1.72mmol)分批添加到2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(422.86mg，1.72mmol，HCl)、5-(5-甲基-2-哌啶基)-1,3-苯并噻唑(400mg，1.72mmol)和TEA(1.05g，10.33mmol，1.44mL)于DMF(10mL)中的悬浮液中。将澄清溶液在25℃下搅拌32h且在真空中蒸发溶剂，以得到1g粗材料。使其经历RP-HPLC(柱：YMCTriart C18 100x20 mm，5um；以30-60％0-5min0.1％ NH3-甲醇，流速：30ml/min为流动相)，以得到化合物4955-[[2-[(2S,5R)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(290mg，684.79μmol，39.78％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.98-1.09(m,3H),1.31-1.44(m,1H),1.67-1.77(m,1H),1.81-1.97(m,1H),2.07-2.24(m,1H),2.29-2.36(m,1H),2.81-3.29(m,1H),3.46-4.12(m,1H),5.28-5.79(m,1H),7.42-7.52(m,1H),7.52-7.65(m,1H),8.01-8.06(m,1H),8.09-8.24(m,2H),8.35-8.54(m,1H),8.69-8.79(m,1H),8.81-8.93(m,1H),9.35-9.43(m,1H),11.05-11.46(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值423.2；实测值242.0；Rt＝2.322min。
步骤2.5-[[2-[(2S,5R)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物587)和5-[[2-[(2R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物588)的合成
使用(Chiralpak IA-I(250*20mm,5mkm)柱；以己烷-IPA-MeOH 40-30-30为流动相；流速：12mL/min；2pins，60mg/1pin)对5-[[2-[(2S,5R)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(125.6mg，296.59μmol)进行手性分离，得到呈黄色固体的化合物587 5-[[2-[(2S,5R)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(52.93mg，124.99μmol，42.14％产率)(RT(IA，己烷-IPA-MeOH，40-30-30，0.6ml/min)＝44.85min)和呈米色固体的化合物588 5-[[2-[(2R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(50.51mg，119.27μmol，40.21％产率)(RT(IA，己烷-IPA-MeOH，40-30-30，0.6ml/min＝72.39min)。
化合物587：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.00-1.09(m,3H),1.32-1.45(m,1H),1.68-1.76(m,1H),1.83-1.98(m,1H),2.05-2.32(m,1H),2.32-2.37(m,1H),2.80-3.27(m,1H),3.48-4.08(m,1H),5.30-5.76(m,1H),7.42-7.53(m,1H),7.53-7.66(m,1H),8.00-8.05(m,1H),8.08-8.23(m,2H),8.39-8.52(m,1H),8.69-8.79(m,1H),8.80-8.93(m,1H),9.36-9.41(m,1H),11.15-11.40(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值423.2；实测值242.2；Rt＝2.381min。
化合物588：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.00-1.09(m,3H),1.32-1.45(m,1H),1.68-1.76(m,1H),1.83-1.98(m,1H),2.05-2.32(m,1H),2.32-2.37(m,1H),2.80-3.27(m,1H),3.48-4.08(m,1H),5.30-5.76(m,1H),7.42-7.53(m,1H),7.53-7.66(m,1H),8.00-8.05(m,1H),8.08-8.23(m,2H),8.39-8.52(m,1H),8.69-8.79(m,1H),8.80-8.93(m,1H),9.36-9.41(m,1H),11.15-11.40(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值423.2；实测值242.2；Rt＝2.380min。
实施例133.rel-5-[[2-[(2S,5R)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(化合物603)和rel-5-[[2-[(2R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(化合物602)的合成
步骤1：5-[[2-[2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺的合成
在室温下将HATU(490.95mg，1.29mmol)分批添加到2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(439.49mg，1.29mmol，C6H15N)、5-(5-甲基-2-哌啶基)-1,3-苯并噻唑(300mg，1.29mmol)和TEA(783.93mg，7.75mmol，1.08mL)于DMF(10mL)中的悬浮液中。将澄清溶液在20℃下搅拌18h且在真空中蒸发溶剂，以得到1g粗材料。使其经历RP-HPLC(柱：YMC-Actus Triart C18 100*20mml.D.S-5um；以0-5min 20-70％水-甲醇(NH30.1％)，流速：30ml/min为流动相)，以得到5-[[2-[2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(214mg，471.87μmol，36.55％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值453.2；实测值454.2；Rt＝2.724min。
步骤2：rel-5-[[2-[(2S,5R)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(化合物603)和rel-5-[[2-[(2R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(化合物602)的合成
通过手性HPLC(柱：IC-I(250*20，5mkm)，以己烷-IPA-MeOH，50-25-25，12ml/min为流动相)分离对映异构体，以得到两种个别对映异构体化合物603 5-[[2-[(2S,5R)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(44mg，97.02μmol，41.12％产率)(保留时间＝69.1min)和化合物6025-[[2-[(2R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(62mg，136.71μmol，57.94％产率)(保留时间＝96.6min)。
化合物603：RT(IC，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min)＝49.073min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.01-1.05(m,3H),1.32-1.42(m,1H),1.68-1.76(m,1H),1.83-1.94(m,1H),2.07-2.22(m,1H),2.28-2.35(m,1H),2.80-3.26(m,1H),3.51-4.10(m,4H),5.28-5.77(m,1H),7.39-7.53(m,1H),7.66-7.80(m,2H),7.97-8.07(m,1H),8.12-8.20(m,1H),8.39-8.59(m,2H),9.36-9.41(m,1H),11.01-11.17(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值453.1；实测值454.2；Rt＝4.695min。
化合物602：RT(IC，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min)＝67.435min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.01-1.06(m,3H),1.32-1.40(m,1H),1.69-1.75(m,1H),1.83-1.93(m,1H),2.08-2.23(m,1H),2.29-2.35(m,1H),2.77-3.28(m,1H),3.50-4.09(m,4H),5.26-5.75(m,1H),7.41-7.51(m,1H),7.65-7.78(m,2H),8.00-8.04(m,1H),8.14-8.20(m,1H),8.38-8.57(m,2H),9.35-9.44(m,1H),10.98-11.21(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值453.1；实测值454.0；Rt＝4.695min。
实施例134.2-甲氧基-5-[[2-[5-甲基-2-(6-氧代-5H-1,5-萘啶-2-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物1077)的合成
步骤1：2-甲氧基-5-[[2-[5-甲基-2-[6-氧代-5-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-1,5-萘啶-2-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
向2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(100mg，0.418mmol，TEA)、6-(5-甲基-2-哌啶基)-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-1,5-萘啶-2-酮(300mg，0.803mmol)、HATU(250mg，0.658mmol)于DMF(8mL)中的溶液中添加DIEA(300μL，1.72mmol)。将混合物在20℃下搅拌6小时。在减压下浓缩所得混合物。通过快速色谱(12g二氧化硅快速柱，石油醚/EtOAc，其中EtOAc为0～100％，然后EtOAc/MeOH，其中MeOH为0～5％，流速＝30mL/min，254nm)纯化残余物，以得到呈黄色油状物的2-甲氧基-5-[[2-[5-甲基-2-[6-氧代-5-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-1,5-萘啶-2-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(160mg，64.4％产率)。
步骤2：2-甲氧基-5-[[2-[5-甲基-2-(6-氧代-5H-1,5-萘啶-2-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物1077)的合成
向2-甲氧基-5-[[2-[5-甲基-2-[6-氧代-5-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-1,5-萘啶-2-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(160mg，0.269mmol)于DCM(2mL)中的溶液中添加TFA(800μL，0.010mol)。将混合物在20℃下搅拌12小时。在减压下浓缩所得混合物。通过制备型HPLC(仪器：Gilson GX-281Liquid Handler，Gilson322泵，Gilson 156UV检测器；柱：Welch Xtimate C18 150×25mm×5μm；流动相A：具有0.225％ FA(v％)的H2O；流动相B：MeCN；梯度：在9.5min内16％至46％ B，保持100％ B达2min；流速：25mL/min；柱温：30℃；波长：220nm、254nm)纯化残余物，以得到呈白色固体的2-甲氧基-5-[[2-[5-甲基-2-(6-氧代-5H-1,5-萘啶-2-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(35mg，28.0％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 11.58(br s,1H),10.72(br s,1H),8.42-8.69(m,2H),7.90(d,J＝9.8Hz,1H),7.72(br d,J＝8.5Hz,1H),7.50(br s,3H),6.72(d,J＝9.8Hz,1H),5.29-5.81(m,1H),3.88-4.16(m,4H),2.43(br d,J＝10.8Hz,1H),1.73-2.23(m,4H),1.37(br d,J＝9.8Hz,1H),1.07(br d,J＝7.0Hz,3H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值465.2，实测值465.1；HPLC：在254nm下为98.73％。
实施例135.5-[[2-氧代-2-[(1S,4S,5R)-4-(2-噻吩基)-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物79)的合成
将(1S,4S,5R)-4-(2-噻吩基)-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷(300.00mg，1.55mmol)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(Et3N盐，324.60mg，1.05mmol)、HATU(619.59mg，1.63mmol)和三乙胺(785.20mg，7.76mmol，1.08mL)于DMF(3mL)中的悬浮液在40℃下搅拌12小时。12小时之后，在真空中浓缩反应混合物且使粗产物经历反相HPLC纯化(洗脱液：40-40-60％，0-1-6min 0.1％ NH3-甲醇，流速：30mL/min；装载泵：4mL/min，甲醇；柱：YMC Actus Triart C18 100x 20mm，5um)，以获得呈白色固体的产物5-[[2-氧代-2-[(1S,4S,5R)-4-(2-噻吩基)-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物79，56mg，145.66μmol，9.39％产率)。
注意：获得呈单一非对映异构体的标题化合物。结构通过2DNMR证实为反式。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值384.1；实测值385.0；Rt＝1.121min。
实施例136.5-[[2-[2-(4,4-二氟环己基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物170)的合成
将2-(4,4-二氟环己基)哌啶(0.2g，983.91μmol)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(305.35mg，983.91μmol，Et3N盐)和三乙胺(995.62mg，9.84mmol，1.37mL)于DMF(3mL)中的混合物在25℃下搅拌20分钟。20分钟之后，添加HATU(561.17mg，1.48mmol)。将所得反应混合物在25℃下搅拌过夜。在完成之后，将水(20mL)添加到反应混合物中且用乙酸乙酯(2x 25mL)萃取。将合并的有机相用水(3x 20mL)、盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且在减压下干燥。使粗产物经历反相HPLC纯化(洗脱液：20-60％，1.3-11min，0.1％ NH3-甲醇；流速：30mL/min；柱：XBridge C18 100x 20mm，5um)，以获得呈淡黄色固体的5-[[2-[2-(4,4-二氟环己基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物170，50.3mg，127.53μmol，12.96％产率)。
化合物170：1H NMR(CDCl3 400MHz):δ(ppm)1.34(m,3H),1.83(m,14H),2.95(m,1H),4.55(m,2H),7.24(s,1H),8.56(m,1H),8.78(m,1H),8.97(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值394.2；实测值395.2；Rt＝2.927min。
实施例137.5-[[2-[(2S,5R)-2-异丙基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物176)的合成
向2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(0.23g，1.10mmol)和2-异丙基-5-甲基哌啶(195.42mg，1.10mmol，HCl)于DMF(10mL)中的搅拌溶液中添加DIPEA(497.42mg，3.85mmol，670.38μL)。将所得混合物搅拌5分钟。5分钟之后，添加HATU(439.02mg，1.15mmol)于DMF(2mL)中的溶液。将所得反应混合物在室温下搅拌过夜。完成之后，在减压下浓缩所得悬浮液且通过HPLC纯化粗产物且冷冻干燥，以得到呈白色固体的5-[[2-[(2S,5R)-2-异丙基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物176，50.9mg，153.13μmol，13.93％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)0.89(m,9H),1.30(m,1H),1.64(m,1H),1.89(m,3H),2.21(m,1H),2.90(m,1H),3.42(m,1H),4.04(m,1H),7.61(s,1H),8.17(s,1H),8.49(m,1H),8.77(s,1H),8.89(m,1H),11.08(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值332.2；实测值333.4；Rt＝2.739min。
实施例138.5-[[2-(2-异丙基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物100)的合成
在21℃下，将2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(0.3g，966.66μmol，Et3N盐)、TATU(342.46mg，1.06mmol)和三乙胺(195.63mg，1.93mmol，269.47μL)一起混合于无水CH3CN(25mL)中且将所得混合物搅拌15分钟。15分钟之后，添加2-异丙基哌啶(135.28mg，826.47μmol，盐酸盐)，且将所得混合物在21℃下搅拌过夜。将所得混合物蒸发至干且使其经历HPLC纯化(洗脱液：2-7min，15-30％ CH3CN，流速：30mL/min；柱：SunFireC18 100*19mm，5um)，以获得呈灰白色固体的5-[[2-(2-异丙基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物100，52.9mg，166.16μmol，17.19％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,400MHz):δ(ppm)0.89(m,6H),1.58(m,5H),1.85(m,1H),2.20(m,1H),2.99(m,1H),3.49(m,1H),4.14(m,1H),7.63(s,1H),8.18(s,1H),8.50(s,1H),8.78(s,1H),8.89(d,1H),11.10(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+Boc]+m/z：计算值318.2；实测值319.2；Rt＝0.983min。
实施例139.5-[[2-[(2R,5S)-2-环丁基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物155)、5-[[2-[(2S,5R)-2-环丁基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺和5-[[2-[(2R,5S)-2-环丁基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物216和化合物211)的合成
步骤1：5-[[2-[(2R,5S)-2-环丁基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物155)的合成
向2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(0.23g，1.10mmol)和2-环丁基-5-甲基哌啶(168.54mg，1.10mmol)于DMF(10mL)中的搅拌溶液中添加DIPEA(355.30mg，2.75mmol，478.84μL)。将所得混合物搅拌5分钟。5分钟之后，添加HATU(439.02mg，1.15mmol)于DMF(2mL)中的溶液。将所得反应混合物在室温下搅拌过夜。完成之后，在减压下浓缩所得悬浮液且通过HPLC纯化粗产物且冷冻干燥，以得到呈白色固体的外消旋-5-[[2-[(2R,5S)-2-环丁基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物155，20.4mg，59.23μmol，5.39％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)0.95(dd,3H),1.32(m,2H),1.80(m,9H),2.93(m,2H),3.81(m,1H),4.24(m,1H),7.62(m,1H),8.18(m,1H),8.50(m,1H),8.78(m,1H),8.90(m,1H),11.09(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值344.2；实测值345.4；Rt＝2.876min。
步骤2：5-[[2-[(2S,5R)-2-环丁基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺和5-[[2-[(2R,5S)-2-环丁基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物216和化合物211)的手性分离
使外消旋-5-[[2-[(2R,5S)-2-环丁基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物155)经历手性色谱(柱：IA-II 250*20mm，5um，洗脱液：己烷-IPA-MeOH，70-15-15，流速：12mL/min)，以得到呈白色固体的5-[[2-[(2R,5S)-2-环丁基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物211)和5-[[2-[(2S,5R)-2-环丁基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物216)。
化合物216：LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值344.2；实测值345.2；Rt＝4.427min。
手性HPLC：Rt＝31.56min(柱：IA；洗脱液：己烷-MeOH-IPA，70-15-15；流速：0.6mL/min)。
1H NMR(氯仿-d,400MHz):δ(ppm)0.99(m,3H),1.38(m,2H),1.83(m,10H),3.04(m,2H),4.29(m,1H),4.75(m,1H),6.35(s,1H),6.70(s,1H),8.70(m,1H),8.91(m,1H),9.10(m,1H),10.05(m,1H)
化合物211：LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值344.2；实测值345.2；Rt＝4.425min。
手性HPLC：Rt＝22.02min(柱：IA；洗脱液：己烷-MeOH-IPA，70-15-15；流速：0.6mL/min)。
1H NMR(氯仿-d,400MHz):δ(ppm)0.99(m,3H),1.38(m,2H),1.83(m,10H),3.04(m,2H),4.29(m,1H),4.75(m,1H),6.35(s,1H),6.70(s,1H),8.70(m,1H),8.91(m,1H),9.10(m,1H),10.05(m,1H)
实施例140.5-[[2-(2-环丁基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物103)的合成
在21℃下，将2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(0.3g，966.66μmol，Et3N盐)、TATU(311.33mg，966.66μmol)和三乙胺(97.82mg，966.66μmol，134.73μL)混合于无水CH3CN(25mL)且将所得混合物搅拌15分钟。15分钟之后，添加2-环丁基哌啶(148.05mg，1.06mmol)，且将所得混合物在21℃下搅拌过夜。将所得混合物蒸发至干且使其经历HPLC纯化(洗脱液：2-7min，15-30％ CH3CN；流速：30mL/min；柱：SunFire C18 100*19mm，5μM)，以获得呈灰白色固体的5-[[2-(2-环丁基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物103，91.3mg，276.35μmol，28.59％产率)。
1H NMR(CDCl3,400MHz):δ(ppm)1.92(m,13H),3.00(m,2H),4.89(m,1H),6.27(m,2H),8.73(d,1H),8.98(m,2H),9.72(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值330.2；实测值331.2；Rt＝2.637min。
实施例141.5-[[2-[(2S,5R)-2-(4,4-二氟环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺和5-[[2-[(2R,5S)-2-(4,4-二氟环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物486和化合物320)的合成
将2-(4,4-二氟环己基)-5-甲基哌啶(370mg，1.70mmol)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(418.22mg，1.70mmol，盐酸盐)和三乙胺(1.72g，17.03mmol，2.37mL)于DMF(5mL)中的混合物在25℃下搅拌20分钟。20分钟之后，在30分钟内小批量添加HATU(712.17mg，1.87mmol)。将所得反应混合物在25℃下搅拌12小时。完成之后，使粗反应混合物经历反相HPLC纯化(洗脱液：35-40％，0-5min，0.1％ NH3-甲醇；流速：30mL/min；柱：YMC Triart C18 100x 20mm，5um)，以得到120mg外消旋产物(通过LCMS为100％纯度)，其通过手性HPLC(洗脱液：己烷-IPA-MeOH，60-20-20；流速：12mL/min；柱：AD-H-III(250x 20mm,5um)进一步纯化，以得到呈白色固体的5-[[2-[(2S,5R)-2-(4,4-二氟环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物486，62.1mg，152.04μmol，8.93％产率)和5-[[2-[(2R,5S)-2-(4,4-二氟环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物320，62mg，151.80μmol，8.91％产率)。
化合物486：
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)0.91-0.99(m,3H),1.10-1.23(m,2H),1.25-1.34(m,1H),1.53-1.73(m,3H),1.73-1.90(m,5H),1.90-2.11(m,4H),2.90-3.27(m,1H),3.53-4.18(m,1H),7.59(s,1H),8.15(s,1H),8.42-8.51(m,1H),8.70-8.80(m,1H),8.84-8.89(m,1H),11.01-11.10(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值408.2；实测值409.2；Rt＝3.077min。
手性HPLC：Rt＝10.737min(洗脱液：己烷-IPA-MeOH，50-25-25；流速：0.6mL/min；柱：AD-H)。
化合物320：
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)0.93-0.99(m,3H),1.08-1.23(m,2H),1.24-1.34(m,1H),1.56-1.73(m,3H),1.73-1.89(m,5H),1.91-2.13(m,4H),2.89-3.28(m,1H),3.52-4.17(m,1H),7.59(s,1H),8.15(s,1H),8.42-8.49(m,1H),8.70-8.79(m,1H),8.84-8.91(m,1H),11.00-11.11(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值408.2；实测值409.2；Rt＝3.090min。
手性HPLC：Rt＝28.151min(洗脱液：己烷-IPA-MeOH，50-25-25；流速：0.6mL/min；柱：AD-H)。
实施例142.5-(2-(2-环戊基-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物172)的合成
将2-环戊基-5-甲基哌啶(200.00mg，1.20mmol)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(371.03mg，1.20mmol)、三乙胺(1.21g，11.96mmol，1.67mL)混合于DMF(5mL)中，然后添加HATU(681.86mg，1.79mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌12h。将混合物在减压下蒸发且通过HPLC(30-40％水-MeCN，10min，流速30ml/min)纯化，以获得5-[[2-[(2R,5S)-2-环戊基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(45.1mg，125.83μmol，10.52％产率)，E/Z＝1/9。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.97(m,3H),1.24(m,3H),1.64(m,9H),1.94(m,3H),3.53(m,1H),4.14(m,1H),7.63(s,1H),8.18(s,1H),8.50(m,1H),8.78(s,1H),8.90(s,1H),11.09(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值358.4；实测值359.2；Rt＝1.249min。
实施例143.5-(2-(2-环戊基-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-2-甲氧基烟酰胺(化合物306、化合物298、化合物295、化合物312)的合成
步骤1：5-(2-(2-环戊基-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-2-甲氧基烟酰胺的合成
在21℃下，将2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(0.5g，1.47mmol，Et3N)、TATU(567.73mg，1.76mmol)和TEA(148.65mg，1.47mmol，204.75μL)混合于无水DMF(15mL)中且将所得混合物搅拌15min。向其中添加2-环戊基-5-甲基哌啶(245.75mg，1.47mmol)，且将所得混合物在21℃下搅拌过夜。将所得混合物倒入到水中，用EtOAc萃取3次，将合并的有机物用水、盐水洗涤且蒸发。使残余物经历HPLC(50-100％2-7min；水-MeOH+NH3；30ml/min；装载泵4ml/min水；柱XBridge 19*100mm)。获得呈白色固体的5-[[2-(2-环戊基-5-甲基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(189mg，486.54μmol，33.12％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)0.97(d,3H),1.57(m,11H),2.05(m,2H),2.44(m,1H),3.40(m,1H),4.22(s,3H),4.56(m,2H),6.24(m,1H),7.75(m,1H),8.71(m,1H),8.86(s,1H),9.70(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值388.4；实测值389.2；Rt＝3.704min。
步骤2：手性分离(化合物306、化合物298、化合物295和化合物312)
将5-[[2-(2-环戊基-5-甲基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(180mg，463.37μmol)使用(Chiralpak IC 250*20，5mkm柱；以己烷-IPA-MeOH，70-15-15为流动相；流速12mL/min；注入体积：900mkl，和Chiralpak IA 250*30，5mkm柱；以己烷-IPA-MeOH，70-15-15为流动相；流速27mL/min；注入体积：900mkl)分离；得到呈白色固体的化合物306 5-[[2-[(2S,5R)-2-环戊基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(60.96mg，156.93μmol，33.87％产率)(RT(IB，己烷-IPA-MeOH，90-5-5，0.6ml/min)＝43.14min)、呈白色固体的化合物298 5-[[2-[(2R,5S)-2-环戊基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(75.83mg，195.21μmol，42.13％产率)(RT(IB，己烷-IPA-MeOH，90-5-5，0.6ml/min)＝29.19min)、呈白色固体的化合物2955-[[2-[(2S,5S)-2-环戊基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(12.95mg，33.34μmol，7.19％产率)(RT(IB，己烷-IPA-MeOH，90-5-5，0.6ml/min)＝27.47min)和呈白色固体的化合物312 5-[[2-[(2R,5R)-2-环戊基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(10.81mg，27.83μmol，6.01％产率)(RT(IB，己烷-IPA-MeOH，90-5-5，0.6ml/min)＝39.37min)。
化合物306：保留时间：43.14min
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.91-1.00(m,3H),1.02-1.23(m,2H),1.27-1.35(m,1H),1.42-1.78(m,8H),1.87-2.00(m,2H),2.93-3.26(m,1H),3.36-3.60(m,2H),3.95(s,3H),4.00-4.27(m,1H),7.74(s,2H),8.41-8.48(m,1H),8.52-8.58(m,1H),10.81-10.90(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值388.2；实测值389.2；Rt＝3.520min。
化合物298：保留时间：29.19min
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.92-0.98(m,3H),1.00-1.08(m,1H),1.12-1.28(m,2H),1.28-1.36(m,1H),1.45-1.77(m,8H),1.87-1.98(m,2H),2.96-3.19(m,1H),3.42-3.59(m,1H),3.95(s,3H),4.00-4.25(m,1H),7.74(s,2H),8.41-8.48(m,1H),8.53-8.57(m,1H),10.82-10.89(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值388.2；实测值389.2；Rt＝3.513min。
化合物295：保留时间：27.47min
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.78-0.93(m,3H),1.01-1.23(m,2H),1.29-1.40(m,1H),1.48-1.75(m,10H),2.41-2.44(m,1H),2.78-3.19(m,1H),3.49-3.56(m,1H),3.92-3.98(m,3H),4.15-4.29(m,1H),7.70-7.80(m,2H),8.43-8.49(m,1H),8.51-8.57(m,1H),10.79-10.96(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值388.2；实测值389.2；Rt＝3.556min。
化合物312：保留时间：39.37min
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.81-0.92(m,3H),1.00-1.26(m,3H),1.32-1.41(m,1H),1.49-1.61(m,7H),1.64-1.79(m,3H),2.41-2.44(m,1H),2.79-2.86(m,0.5H),3.50-3.53(m,0.5H),3.95-3.98(m,3H),4.12-4.25(m,1H),7.72-7.79(m,2H),8.43-8.49(m,1H),8.49-8.57(m,1H),10.81-10.93(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值388.2；实测值389.2；Rt＝3.556min。
实施例144.5-(2-(4-羟基-2-苯基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物185)的合成
将DIPEA(145.76mg，1.13mmol，196.44μL)添加到相应2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(0.1g，322.22μmol，Et3N)和(2S,4R)-2-苯基哌啶-4-醇(57.11mg，267.24μmol，HCl)于DMF(10mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU(134.77mg，354.44μmol)于DMF(2mL)中的溶液。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC，以得到纯的5-[[2-[(2R,4S)-4-羟基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(61.2mg，166.13μmol，51.56％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.54(m,1H),1.89(m,1H),2.07(m,1H),2.37(m,1H),3.49(m,1H),3.83(m,2H),4.46(m,1H),5.29(m,1H),7.29(m,5H),7.57(m,1H),8.13(m,1H),8.44(m,1H),8.80(m,2H),11.14(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值368.4；实测值369.2；Rt＝1.828min。
实施例145.外消旋-5-[[2-[(2R,4R,5R)-4-羟基-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物459)、外消旋-5-[[2-[(2R,4S,5R)-4-羟基-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物470)的合成
将(2R,5R)-5-甲基-2-苯基哌啶-4-醇(0.1g，522.82μmol)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(162.26mg，522.82μmol，NEt3)、TEA(529.05mg，5.23mmol，728.71μL)和HATU(298.19mg，784.24μmol)溶解于DMF(5mL)中且在20℃下搅拌3h。将反应混合物用水稀释且用乙酸乙酯萃取三次，然后将有机层用盐水洗涤三次。将有机相经Na2SO4干燥，过滤且在40℃下蒸发，以得到粗产物，其通过HPLC(0-80％ MeCN/水，2-10min，流速30ml/min(装载泵4ml/min MeCN)柱：SunFire 100*19 5mM)进行纯化，以得到5-[[2-[(2R,4R,5R)-4-羟基-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.034g，88.91μmol，17.01％产率)化合物459和5-[[2-[(2R,4S,5R)-4-羟基-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.017g，44.45μmol，8.50％产率)化合物470。
化合物470：
1H NMR(600MHz,DMSO)δ0.88-0.95(m,3H),1.78-1.99(m,2H),2.32-2.38(m,1H),2.67-3.21(m,1H),3.56-4.22(m,2H),4.75-4.82(m,1H),5.25-5.81(m,1H),7.23-7.31(m,2H),7.31-7.42(m,3H),7.54-7.66(m,1H),8.08-8.22(m,1H),8.43-8.53(m,1H),8.71-8.80(m,1H),8.82-8.95(m,1H),11.19-11.33(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值382.2；实测值383.2；Rt＝2.221min
化合物459：
1H NMR(600MHz,DMSO)δ0.99(d,3H),1.67-1.73(m,1H),2.10-2.19(m,2H),3.48-3.52(m,1H),3.71-3.91(m,1H),4.61-4.69(m,1H),5.13-5.38(m,1H),7.09-7.28(m,2H),7.29-7.36(m,4H),7.51-7.64(m,1H),8.07-8.19(m,1H),8.26-8.52(m,1H),8.68-8.77(m,1H),8.77-8.94(m,1H),10.87-11.24(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值382.2；实测值383.2；Rt＝2.221min
实施例146.5-[[2-[(4aR,8aS)-5,5-二甲基-1,3,4,4a,6,7,8,8a-八氢异喹啉-2-基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物193)和5-[[2-[(4aS,8aR)-5,5-二甲基-1,3,4,4a,6,7,8,8a-八氢异喹啉-2-基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物197)的合成
步骤1：5-[[2-[(4aS,8aR)-5,5-二甲基-1,3,4,4a,6,7,8,8a-八氢异喹啉-2-基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
向(4aS,8aR)-5,5-二甲基-2,3,4,4a,6,7,8,8a-八氢-1H-异喹啉(239.95mg，1.43mmol)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(300mg，1.43mmol，三乙胺)、DIPEA(556.11mg，4.30mmol，749.48μL)于DMF(5mL)中的溶液中分批添加EDC(329.95mg，1.72mmol)。将所得溶液在25℃下搅拌16h。然后，将溶剂蒸发且使残余物经历HPLC(35-70％0-5min 0.1％ NH3-甲醇，流速：30ml/min)，以得到5-[[2-[(4aS,8aR)-5,5-二甲基-1,3,4,4a,6,7,8,8a-八氢异喹啉-2-基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(87mg，242.72μmol，16.92％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值358.2；实测值359.2；Rt＝3.392min。
步骤2：5-[[2-[(4aR,8aS)-5,5-二甲基-1,3,4,4a,6,7,8,8a-八氢异喹啉-2-基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物193)和5-[[2-[(4aS,8aR)-5,5-二甲基-1,3,4,4a,6,7,8,8a-八氢异喹啉-2-基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物197)的合成
通过手性色谱(OD-H(250*30，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，70-15-15，30ml/min)分离5-[[2-[(4aS,8aR)-5,5-二甲基-1,3,4,4a,6,7,8,8a-八氢异喹啉-2-基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(87mg，242.72μmol)，以得到5-[[2-[(4aR,8aS)-5,5-二甲基-1,3,4,4a,6,7,8,8a-八氢异喹啉-2-基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(37mg，103.23μmol，42.53％产率)(RT＝12.56min)和5-[[2-[(4aS,8aR)-5,5-二甲基-1,3,4,4a,6,7,8,8a-八氢异喹啉-2-基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(36mg，100.44μmol，41.38％产率)(RT＝19.56min)。
化合物193：
RT(OD-H，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.6mL/min)＝12.56min。
1H NMR(dmso,600MHz):δ(ppm)0.82(m,6H),0.91(d,1H),1.04(m,2H),1.18(m,2H),1.36(m,3H),1.57(m,1H),1.70(m,1H),2.30(m,1H),2.65(m,1H),2.88(m,1H),3.74(m,1H),4.31(m,1H),7.60(s,1H),8.15(s,1H),8.47(m,1H),8.75(s,1H),8.85(s,1H),11.09(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值358.2；实测值359.2；Rt＝3.175min。
化合物197：
RT(OD-H，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.6mL/min)＝19.56min。
1H NMR(dmso,600MHz):δ(ppm)0.80(m,6H),1.03(m,2H),1.18(m,2H),1.38(m,4H),1.70(m,1H),2.30(m,1H),2.64(m,1H),2.88(m,1H),3.74(m,1H),4.31(m,1H),7.59(s,1H),8.14(s,1H),8.47(m,1H),8.75(s,1H),8.84(s,1H),11.09(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值358.2；实测值359.2；Rt＝3.175min。
实施例147.5-[[2-[(2R,4S)-4-氰基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺和5-[[2-[(2S,4R)-4-氰基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物353和化合物352)的合成
步骤1：5-[[2-[(2S,4R)-4-氰基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
向2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(0.2g，814.27μmol，盐酸盐)和(2S,4R)-2-苯基哌啶-4-甲腈(151.66mg，680.96μmol，盐酸盐)于DMF(10mL)中的搅拌溶液中添加DIPEA(578.81mg，4.48mmol，780.07μL)。将所得反应混合物搅拌5分钟。5分钟之后，添加HATU(340.57mg，895.69μmol)。将所得反应混合物在室温下搅拌过夜。完成之后，在减压下浓缩所得悬浮液。通过HPLC纯化所获得的粗产物，以得到呈淡黄色固体的纯的5-[[2-[(2S,4R)-4-氰基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.15g，397.46μmol，48.81％产率)。
LCMS(ESI)：[M+Boc]+m/z：计算值377.2；实测值378.4；Rt＝2.314min。
步骤2：5-[[2-[(2R,4S)-4-氰基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺和5-[[2-[(2S,4R)-4-氰基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物353和化合物352)的手性分离
使5-[[2-[(2S,4R)-4-氰基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.15g)经历手性HPLC(柱：IB(250*20,5um)；洗脱液：己烷-IPA-MeOH，50-25-25；流速：13mL/min)，以获得呈淡黄色固体的5-[[2-[(2R,4S)-4-氰基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物353，48.8mg)和5-[[2-[(2S,4R)-4-氰基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物352，57.1mg)。
化合物353：1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.84-1.90(m,1H),1.98-2.06(m,1H),2.20-2.29(m,1H),2.59-2.71(m,1H),3.05-3.23(m,1H),3.34-3.50(m,1H),3.88-4.44(m,1H),5.30-5.62(m,1H),7.22-7.29(m,1H),7.31-7.40(m,4H),7.51-7.65(m,1H),8.09-8.21(m,1H),8.34-8.56(m,1H),8.71-8.95(m,2H),11.06-11.32(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值377.2；实测值378.2；Rt＝3.903min。
手性HPLC：Rt＝14.44min(柱：IB；洗脱液：己烷-IPA-MeOH，50-25-25；流速：0.15mL/min)。
化合物352：1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.83-2.04(m,2H),2.20-2.25(m,1H),2.59-2.72(m,1H),3.04-3.24(m,1H),3.32-3.52(m,1H),3.87-4.46(m,1H),5.31-5.58(m,1H),7.21-7.28(m,1H),7.31-7.38(m,4H),7.51-7.65(m,1H),8.06-8.21(m,1H),8.36-8.55(m,1H),8.71-8.93(m,2H),11.07-11.31(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值377.2；实测值378.2；Rt＝3.897min。
手性HPLC：Rt＝8.97min(柱：IB；洗脱液：己烷-IPA-MeOH，50-25-25；流速：0.15mL/min)。
实施例148.5-[[2-[(2S,4aR,8aR)-2-甲基-3,4,4a,5,6,7,8,8a-八氢-2H-喹啉-1-基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺和5-[[2-[(2R,4aS,8aS)-2-甲基-3,4,4a,5,6,7,8,8a-八氢-2H-喹啉-1-基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物245和化合物236)的合成
步骤1：5-[[2-(2-甲基-3,4,4a,5,6,7,8,8a-八氢-2H-喹啉-1-基)-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
向2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(0.5g，1.61mmol，Et3N盐)和2-甲基-1,2,3,4,4a,5,6,7,8,8a-十氢喹啉(305.67mg，1.61mmol，盐酸盐)于DMF(10mL)中的搅拌溶液中添加DIPEA(728.78mg，5.64mmol，982.18μL)。将所得反应混合物搅拌5分钟。5分钟之后，添加HATU(673.85mg，1.77mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。完成之后，在减压下浓缩所得悬浮液。通过柱色谱纯化所获得的粗产物，以获得呈淡黄色固体的5-[[2-(2-甲基-3,4,4a,5,6,7,8,8a-八氢-2H-喹啉-1-基)-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.18g，522.64μmol，32.44％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值344.2；实测值345.2；Rt＝1.180min。
5-[[2-[(2S,4aR,8aR)-2-甲基-3,4,4a,5,6,7,8,8a-八氢-2H-喹啉-1-基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺和5-[[2-[(2R,4aS,8aS)-2-甲基-3,4,4a,5,6,7,8,8a-八氢-2H-喹啉-1-基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物245和化合物236)的手性分离
使5-[[2-(2-甲基-3,4,4a,5,6,7,8,8a-八氢-2H-喹啉-1-基)-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.18g)经历手性HPLC(柱：Chiralpak IA(250*20mm，5um)；洗脱液：己烷-IPA-MeOH,80-10-10；流速：12mL/min)，以获得呈白色固体的5-[[2-[(2S,4aR,8aR)-2-甲基-3,4,4a,5,6,7,8,8a-八氢-2H-喹啉-1-基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物245，10mg)和5-[[2-[(2R,4aS,8aS)-2-甲基-3,4,4a,5,6,7,8,8a-八氢-2H-喹啉-1-基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物236，9.6mg)。
化合物236：1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)0.96-1.18(m,1H),1.20-1.30(m,5H),1.30-1.40(m,1H),1.40-1.55(m,1H),1.55-1.66(m,4H),1.68-1.77(m,2H),1.78-1.87(m,1H),1.90-2.03(m,1H),3.61-4.00(m,1H),4.28-4.58(m,1H),7.58-7.65(m,1H),8.09-8.19(m,1H),8.43-8.50(m,1H),8.72-8.78(m,1H),8.80-8.86(m,1H),11.00-11.11(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值344.2；实测值345.2；Rt＝3.080min。
手性HPLC：Rt＝21.02min(柱：IA；洗脱液：己烷-IPA-MeOH，70-15-15；流速：0.6mL/min)。
化合物245：1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)0.95-1.18(m,1H),1.20-1.30(m,5H),1.31-1.43(m,1H),1.44-1.56(m,1H),1.56-1.66(m,4H),1.68-1.77(m,2H),1.78-1.89(m,1H),1.93-2.05(m,1H),3.59-4.03(m,1H),4.24-4.58(m,1H),7.54-7.66(m,1H),8.11-8.20(m,1H),8.41-8.49(m,1H),8.71-8.79(m,1H),8.81-8.87(m,1H),10.99-11.12(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值344.2；实测值345.2；Rt＝2.560min。
手性HPLC：Rt＝17.37min(柱：IA；洗脱液：己烷-IPA-MeOH，70-15-15；流速：0.6mL/min)。
实施例149.5-[[2-[2-(苯并噻吩-3-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(化合物501)的合成
在25℃下，向2-(苯并噻吩-3-基)-5-甲基哌啶(0.3g，1.30mmol)、2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(441.36mg，1.30mmol，Et3N)和N,N-二异丙基乙胺(837.95mg，6.48mmol，1.13mL)于DMF(6mL)中的搅拌溶液中添加HATU(591.65mg，1.56mmol)。将所得反应混合物在同一温度下搅拌16h。粗反应混合物的LCMS分析指示在RT＝1.353min处31.88％所需产物质量曲线下面积。通过制备型HPLC(柱：SunFireC18 100*19mm 5um，流动相：30-30-70％0-1-5min水-乙腈，流速：30mL/min，装载泵4mL/min乙腈)纯化粗反应混合物，以得到产物呈灰白色固体的化合物501 5-[[2-[2-(苯并噻吩-3-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(200mg，441.96μmol，34.08％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.94-1.08(m,3H),1.33-1.57(m,1H),1.91-1.99(m,1H),2.00-2.13(m,2H),2.13-2.30(m,1H),3.35-3.48(m,1H),3.48-3.65(m,1H),3.91-4.05(m,3H),5.51-6.00(m,1H),7.28-7.41(m,2H),7.67-7.74(m,2H),7.75-7.81(m,1H),7.81-7.90(m,1H),7.92-8.02(m,1H),8.34-8.46(m,1H),8.45-8.58(m,1H),10.86-11.12(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值452.1；实测值453.4；Rt＝3.392min。
实施例150.5-[[2-[(2R,5S)-2-(苯并噻吩-3-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物466)和5-[[2-[(2S,5R)-2-(苯并噻吩-3-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物463)的合成
步骤1：5-[[2-[2-(苯并噻吩-3-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
在25℃下，向2-(苯并噻吩-3-基)-5-甲基哌啶(0.3g，1.30mmol)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(318.50mg，1.30mmol，HCl)和N,N-二异丙基乙基胺(837.95mg，6.48mmol，1.13mL)于DMF(6mL)中的搅拌溶液中添加HATU(591.65mg，1.56mmol)。将所得反应混合物在25℃下搅拌16h。粗反应混合物的LCMS指示在RT＝1.25min处55.77％所需产物质量曲线下面积。通过制备型HPLC(柱：SunFireC18 100*19mm 5um，流动相：30-30-65％0-1-5min水-乙腈，流速：30mL/min，装载泵4mL/min乙腈)纯化粗反应混合物，以得到呈灰白色固体的5-[[2-[2-(苯并噻吩-3-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(400mg，946.75μmol，73.01％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.04(m,3H),1.42(m,1H),2.12(m,4H),3.40(m,1H),3.56(m,2H),6.00(m,1H),7.33(m,1H),7.40(s,1H),7.83(m,1H),7.94(m,1H),8.01(m,1H),8.18(m,1H),8.51(m,1H),8.79(s,1H),8.91(m,1H),11.28(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值422.1；实测值423.2；Rt＝3.45min。
步骤2：5-[[2-[(2R,5S)-2-(苯并噻吩-3-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物466)和5-[[2-[(2S,5R)-2-(苯并噻吩-3-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物463)的合成
将外消旋5-[[2-[(2S,5R)-2-(苯并噻吩-3-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(130mg，307.69μmol)提交至制备型手性HPLC(柱：IB-I(250*20，5mkm)，流动相：己烷-IPA-MeOH，70-15-15，流速：12mL/min)，以得到呈白色固体的纯产物(化合物466)5-[[2-[(2R,5S)-2-(苯并噻吩-3-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(68.5mg，162.13μmol，52.69％产率)(RT＝28.469min)和杂质级分(RT＝18.587min)，其通过制备型手性HPLC(柱：IA-II(250*20，5mkm)，流动相：己烷-IPA-MeOH，50-25-25，流速：10mL/min)进一步纯化，以获得呈白色固体的纯产物(化合物463)5-[[2-[(2S,5R)-2-(苯并噻吩-3-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(49.8mg，117.87μmol，38.31％产率)(RT＝26.354min)。
化合物466：RT(IA，Hex-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝19.058min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.97-1.04(m,3H),1.36-1.47(m,1H),1.91-2.01(m,1H),2.05-2.15(m,2H),2.15-2.32(m,1H),3.33-3.45(m,1H),3.50-4.06(m,1H),5.50-5.97(m,1H),7.24-7.41(m,2H),7.52-7.63(m,1H),7.70-7.87(m,2H),7.90-8.02(m,1H),8.06-8.19(m,1H),8.34-8.50(m,1H),8.69-8.91(m,2H),11.01-11.39(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值422.1；实测值423.0；Rt＝3.309min。
化合物463：RT(IA，Hex-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝23.854min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.98-1.06(m,3H),1.37-1.46(m,1H),1.93-2.01(m,1H),2.05-2.14(m,2H),2.14-2.31(m,1H),3.33-3.43(m,1H),3.52-4.04(m,1H),5.52-5.94(m,1H),7.28-7.41(m,2H),7.53-7.62(m,1H),7.69-7.88(m,2H),7.90-8.01(m,1H),8.07-8.19(m,1H),8.34-8.52(m,1H),8.68-8.91(m,2H),11.01-11.34(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值422.1；实测值423.0；Rt＝3.310min。
实施例151.5-(2-(八氢异喹啉-2(1H)-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物429)的合成
将DIPEA(123.14mg，952.77μmol，165.96μL)添加到相应(4aS,8aS)-1,2,3,4,4a,5,6,7,8,8a-十氢异喹啉(37.2mg，211.73μmol，HCl)和2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(57.20mg，232.90μmol，HCl)于DMF(5mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU(96.61mg，254.07μmol)。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC(Waters Sunfire C18 20*100 5mkm柱且以MeOH+NH3为洗脱液混合物)，以得到5-[[2-[(4aS,8aS)-3,4,4a,5,6,7,8,8a-八氢-1H-异喹啉-2-基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(51.4mg，155.58μmol，73.48％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.17-1.33(m,2H),1.33-1.42(m,3H),1.43-1.52(m,2H),1.52-1.62(m,2H),1.63-1.81(m,2H),1.84-1.95(m,1H),2.92-3.25(m,2H),3.52-3.73(m,1H),3.77-4.11(m,1H),7.47-7.76(s,1H),8.08-8.24(s,1H),8.38-8.58(m,1H),8.69-8.81(m,1H),8.82-8.94(m,1H),10.57-11.17(br s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值330.4；实测值331.2；Rt＝2.719min。
实施例152.5-[[2-[(2S,5R)-2-[(1S,3S)-3-羟基环己基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物530)、5-[[2-[(2R,5S)-2-[(1R,3R)-3-羟基环己基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物520)、5-[[2-[(2R,5S)-2-[(1R,3S)-3-羟基环己基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物529)和5-[[2-[(2S,5R)-2-[(1S,3R)-3-羟基环己基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物531)的合成
步骤1：5-[[2-[(2S,5R)-2-[(1S,3S)-3-羟基环己基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺和5-[[2-[(2S,5R)-2-[(1S,3R)-3-羟基环己基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
在25℃下，将3-(5-甲基-2-哌啶基)环己醇(400.00mg，2.03mmol)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(497.92mg，2.03mmol，HCl)和三乙胺(2.05g，20.27mmol，2.83mL)于DMF(6mL)中的混合物搅拌0.25h，然后在0.5h内小批量添加HATU(847.88mg，2.23mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌12h，提交至反相HPLC(柱：YMC-TriartC18 100*20mm 5um，流动相：20-55％0-5min 0.1％ NH3-甲醇，流速：30ml/min)，得到呈黄色胶状物的5-[[2-[(2S,5R)-2-[(1S,3S)-3-羟基环己基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(161mg，414.46μmol，20.44％产率)和5-[[2-[(2S,5R)-2-[(1S,3R)-3-羟基环己基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(257mg，661.59μmol，32.64％产率)。
第1级分：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.9(m,2H),1.01(m,3H),1.31(m,2H),1.65(m,4H),1.98(m,5H),2.87(m,1H),3.61(m,1H),4.12(m,3H),4.56(m,1H),7.62(s,1H),8.18(s,1H),8.51(m,1H),8.78(s,1H),8.90(m,1H),11.05(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值388.2；实测值389.2；Rt＝2.317min。
第2级分：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.9(m,2H),1.00(m,3H),1.31(m,2H),1.82(m,10H),3.61(m,1H),4.09(m,3H),4.52(m,1H),7.62(s,1H),8.18(s,1H),8.51(m,1H),8.78(s,1H),8.90(m,1H),11.05(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值388.2；实测值389.2；Rt＝2.636min。
步骤2：5-[[2-[(2S,5R)-2-[(1S,3S)-3-羟基环己基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物530)和5-[[2-[(2R,5S)-2-[(1R,3R)-3-羟基环己基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物520)的合成
将外消旋5-[[2-[(2S,5R)-2-[(1S,3S)-3-羟基环己基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(161mg，414.46μmol)提交至制备型手性HPLC(柱：Chiralpak IC-I(250*20mm，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH，50-25-25；流速：12mL/min；柱温：23℃；波长：205nm.)，以得到呈白色固体的化合物530 5-[[2-[(2S,5R)-2-[(1S,3S)-3-羟基环己基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(62.7mg，161.41μmol，38.94％产率)(R.T.＝25.85min)和化合物5205-[[2-[(2R,5S)-2-[(1R,3R)-3-羟基环己基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(62.7mg，161.41μmol，38.94％产率)(R.T.＝49.50min)。
化合物530：RT(IC-3，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.15mL/min)＝11.276min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.58-0.81(m,2H),0.92-0.98(m,3H),1.13-1.31(m,2H),1.41-1.53(m,1H),1.53-1.69(m,3H),1.69-2.04(m,6H),2.83-3.26(m,1H),3.32-3.53(m,2H),3.92-4.19(m,1H),4.43-4.56(m,1H),7.59(s,1H),8.14(s,1H),8.42-8.51(m,1H),8.71-8.79(m,1H),8.82-8.90(m,1H),10.95-11.15(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值388.2；实测值389.2；Rt＝3.610min。
化合物520：RT(IC-3，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.15mL/min)＝21.019min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.59-0.79(m,2H),0.93-1.02(m,3H),1.13-1.30(m,2H),1.40-1.53(m,1H),1.52-1.68(m,3H),1.68-2.01(m,6H),2.85-3.26(m,1H),3.32-3.53(m,2H),3.95-4.17(m,1H),4.43-4.57(m,1H),7.53-7.62(m,1H),8.09-8.19(m,1H),8.43-8.50(m,1H),8.70-8.78(m,1H),8.83-8.91(m,1H),10.92-11.13(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值388.2；实测值389.2；Rt＝3.615min。
步骤3：5-[[2-[(2R,5S)-2-[(1R,3S)-3-羟基环己基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物529)和5-[[2-[(2S,5R)-2-[(1S,3R)-3-羟基环己基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物531)的合成
首先使用制备型手性HPLC(柱：Chiralpak IA-II(250*20mm，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH，50-25-25；流速：12mL/min)将外消旋5-[[2-[(2S,5R)-2-[(1S,3R)-3-羟基环己基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(257mg，661.59μmol)与其他杂质纯化，然后使用制备型手性HPLC(柱：Chiralpak IC-I(250*20mm，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH，50-25-25；流速：12mL/min)分离成对映异构体，以得到呈白色固体的化合物5295-[[2-[(2R,5S)-2-[(1R,3S)-3-羟基环己基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(78mg，200.79μmol，30.35％产率)(R.T.＝35.628min)和化合物5315-[[2-[(2S,5R)-2-[(1S,3R)-3-羟基环己基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(76mg，195.64μmol，29.57％产率)(R.T.＝53.630min)。
化合物529：RT(IC-3，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.15mL/min)＝14.944min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.58-0.78(m,2H),0.92-0.98(m,3H),1.17-1.30(m,2H),1.54-1.75(m,5H),1.75-2.00(m,5H),2.84-3.27(m,1H),3.34-3.57(m,2H),3.99-4.15(m,1H),4.43-4.54(m,1H),7.59(s,1H),8.15(s,1H),8.41-8.55(m,1H),8.69-8.79(m,1H),8.84-8.92(m,1H),10.92-11.20(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值388.2；实测值389.2；Rt＝4.009min。
化合物531：RT(IC-3，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.15mL/min)＝23.569min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.57-0.78(m,2H),0.92-0.98(m,3H),1.17-1.30(m,2H),1.52-1.75(m,5H),1.75-2.01(m,5H),2.84-3.24(m,1H),3.33-3.57(m,2H),3.98-4.15(m,1H),4.42-4.52(m,1H),7.59(s,1H),8.15(s,1H),8.42-8.52(m,1H),8.73-8.78(m,1H),8.86-8.91(m,1H),10.92-11.19(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值388.2；实测值389.2；Rt＝4.013min。
实施例153.5-(2-(2-(3-溴苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物601)的合成
向(2S,5R)-2-(3-溴苯基)-5-甲基哌啶(374.58mg，1.29mmol，HCl)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(400mg，1.29mmol，Et3N)和TEA(1.30g，12.89mmol，1.80mL)于DMF(3mL)中的溶液中分批添加HATU(539.08mg，1.42mmol)。将混合物在25℃下搅拌1.5h。然后通过反相HPLC(50-50-90％0-1-5min 0.2％ FA-MeOH，流速：30ml/min(装载泵4ml/min MeCN)，目标质量445，柱：YMC Triart C18 100x20 mm，5um)纯化反应混合物，以得到呈2种级分的5-[[2-[(2S,5R)-2-(3-溴苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(153mg，343.58μmol，26.66％产率)：第1级分：55mg(100％ LCMS)；第2级分：98mg(97％ LCMS)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99-1.03(m,3H),1.27-1.36(m,1H),1.59-1.68(m,1H),1.82-1.94(m,1H),1.99-2.14(m,1H),2.15-2.25(m,1H),2.75-3.26(m,1H),3.47-4.06(m,1H),5.10-5.60(m,1H),7.31-7.37(m,2H),7.43-7.50(m,2H),7.55-7.67(m,1H),8.09-8.21(m,1H),8.44-8.52(m,1H),8.70-8.80(m,1H),8.80-8.95(m,1H),11.11-11.42(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值445.4；实测值446.2；Rt＝3.051min。
实施例154.5-(2-(2-(5-氯吡啶-3-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物791)的合成
在轻微加热下，将3-氯-5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]吡啶(0.17g，806.82μmol)和2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(168.75mg，687.06μmol，HCl)溶解于DMSO(6mL)中。在剧烈搅拌和偶尔加热下，小批量添加HATU(368.13mg，968.19μmol)。反应完成(通过反应混合物的LCMS推测)之后，通过HPLC(14％0.5-6.5min水-MeCN；流速30ml/min；(装载泵4ml/min MecN)；目标质量575；柱SunFireC18 100x19 mm 5um(L))纯化混合物，以得到呈顺式/反式异构体的比率不同的2种级分的5-[[2-[(2R,5S)-2-(5-氯-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.3g，746.55μmol，92.53％产率)：第1级分3:97(200mg)；第2级分20:80(100mg)(通过HNMR和LCMS推测)。
化合物791：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.95-1.10(m,3H),1.26-1.41(m,1H),1.61-1.71(m,1H),1.84-1.95(m,1H),2.04-2.14(m,1H),2.19-2.31(m,1H),2.80-3.29(m,1H),3.36-4.08(m,1H),5.24-5.62(m,1H),7.56-7.67(m,1H),7.80-7.88(m,1H),8.09-8.22(m,1H),8.40-8.50(m,1H),8.50-8.60(m,2H),8.71-8.80(m,1H),8.80-8.92(m,1H),11.15-11.34(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值401.2；实测值402.2；Rt＝2.211min。
实施例155.5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[5-(甲基氨基)-2-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物907)的合成
将2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(10.77mg，43.84μmol，HCl)和N-甲基-6-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶-3-胺(0.009g，43.84μmol)混合于DMF(2mL)中。将反应悬浮液冷却至20℃且添加HATU(18.34mg，48.22μmol)，随后添加TEA(13.31mg，131.52μmol，18.33μL)，且在环境温度下搅拌5h。将反应混合物在真空中蒸发且通过制备型(25-60％0-5min H2O/MeOH/0.1％ NH4OH，流速：30ml/min)纯化所获得的粗产物0.06g，以得到产物5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[5-(甲基氨基)-2-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.0035g，8.83μmol，20.14％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.00(m,3H),1.30(m,1H),1.72(m,1H),1.86(m,2H),2.36(m,2H),2.68(m,3H),2.77(m,1H),3.81(m,1H),5.26(m,1H),5.83(m,1H),6.88(m,1H),7.08(m,1H),7.56(m,1H),7.90(m,1H),8.12(m,1H),8.45(m,1H),8.72(m,1H),8.84(m,1H)
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值396.2；实测值397.2；Rt＝1.457min。
实施例156.5-[[2-[(2R,5S)-2-(2-甲氧基-4-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物533)和5-[[2-[(2S,5R)-2-(2-甲氧基-4-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物532)的合成
步骤1：5-[[2-[2-(2-甲氧基-4-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
将DIPEA(701.72mg，5.43mmol，945.71μL)添加到相应2-甲氧基-4-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶(0.28g，1.36mmol)和2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(333.39mg，1.36mmol，HCl)于DMF(10mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU溶液(448.65mg，1.18mmol)。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC，以得到纯的5-[[2-[2-(2-甲氧基-4-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.33g，830.34μmol，61.17％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值397.2；实测值398.2；Rt＝2.593min。
步骤2：5-[[2-[(2R,5S)-2-(2-甲氧基-4-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物533)和5-[[2-[(2S,5R)-2-(2-甲氧基-4-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物532)的合成
使用(Chiralpak IС250*20mm 5mkm柱，以IPA-MeOH，50-50为流动相，流速12mL/min)对5-[[2-[2-(2-甲氧基-4-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(330.0mg，830.34μmol)进行手性分离，得到化合物532 5-[[2-[(2S,5R)-2-(2-甲氧基-4-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(162.88mg，49.36％产率)和化合物533 5-[[2-[(2R,5S)-2-(2-甲氧基-4-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(141.67mg，42.93％产率)。
化合物532(IC，MeOH-IPA，50-50，0.6mL/min)的保留时间＝18.87min
化合物533(IC，MeOH-IPA，50-50，0.6mL/min)的保留时间＝35.96min
化合物533：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.99-1.01(m,3H),1.29-1.42(m,1H),1.51-1.61(m,1H),1.80-1.94(m,1H),1.97-2.14(m,1H),2.13-2.24(m,1H),2.74-3.25(m,1H),3.45-3.54(m,0.7H),3.80-3.88(m,3H),4.00-4.09(m,0.3H),5.06-5.69(m,1H),6.70-6.78(m,1H),6.91-6.97(m,1H),7.50-7.67(m,1H),8.05-8.21(m,2H),8.40-8.54(m,1H),8.69-8.80(m,1H),8.81-8.96(m,1H),11.18-11.35(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值397.2；实测值398.2；Rt＝0.895min。
RT(IC，IPA-MeOH，50-50，12ml/min)＝35.9532min
化合物532：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.00-1.01(m,3H),1.29-1.36(m,1H),1.54-1.60(m,1H),1.75-1.97(m,1H),1.97-2.13(m,1H),2.13-2.23(m,1H),2.75-3.23(m,1H),3.47-3.50(m,0.7H),3.82-3.85(m,3H),4.02-4.06(m,0.3H),5.12-5.50(m,1H),6.71-6.73(m,1H),6.92-6.95(m,1H),7.56-7.63(m,1H),8.11-8.17(m,2H),8.43-8.50(m,1H),8.71-8.78(m,1H),8.83-8.90(m,1H),11.20-11.30(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值397.2；实测值398.2；Rt＝4.140min。
RT(IC，IPA-MeOH，50-50，12ml/min)＝18.8732min。
实施例157.5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(7-甲基-1H-吲唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物638)和5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(7-甲基-1H-吲唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物611)的合成
步骤1：5-[[2-[5-甲基-2-(7-甲基-1H-吲唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
将2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(638.46mg，3.05mmol)和7-甲基-5-(5-甲基-2-哌啶基)-1H-吲唑(0.7g，3.05mmol)混合于DMF(25mL)中。将反应悬浮液冷却至0℃且添加HATU(1.16g，3.05mmol)，随后添加TEA(926.65mg，9.16mmol，1.28mL)，且在环境温度下搅拌14h。将反应混合物在真空中蒸发且倒入水(100ml)中且用EtOAc(2x30 ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(2*30ml)洗涤，经硫酸钠干燥且在真空中蒸发且通过制备型(30-80％1-6min水-甲醇(NH3 0.1％)，流速30ml/min)纯化所获得的粗产物0.82g，以得到产物5-[[2-[5-甲基-2-(7-甲基-1H-吲唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.042g，99.89μmol，3.27％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值420.2；实测值421.2；Rt＝1.124min。
步骤2：5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(7-甲基-1H-吲唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物638)和5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(7-甲基-1H-吲唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物611)的合成
使5-[[2-[5-甲基-2-(7-甲基-1H-吲唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.03g，71.35μmol)经历手性HPLC纯化(柱：IC-II(250*20，5um)，洗脱液：以己烷-IPA-MeOH，60-20-20为流动相，流速：12mL/min)，以得到两种个别对映异构体化合物6115-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(7-甲基-1H-吲唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.007g，16.65μmol，23.33％产率)和化合物638 5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(7-甲基-1H-吲唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.007g，16.65μmol，23.33％产率)。
化合物638：1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ1.00-1.06(m,3H),1.33-1.42(m,1H),1.75-1.91(m,2H),1.98-2.11(m,1H),2.11-2.25(m,1H),2.41-2.45(m,3H),2.79-3.24(m,1H),3.46-4.05(m,1H),5.19-5.70(m,1H),7.05-7.16(m,1H),7.48-7.68(m,2H),7.99-8.08(m,1H),8.09-8.22(m,1H),8.41-8.56(m,1H),8.70-8.79(m,1H),8.79-8.99(m,1H),11.16-11.38(m,1H),13.06-13.17(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值420.5；实测值421.4；Rt＝3.923min。
RT(己烷-IPA-MeOH，60-20-20，12ml/min)＝52.9202min。
化合物611：1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ0.97-1.10(m,3H),1.30-1.44(m,1H),1.72-1.92(m,2H),2.04-2.19(m,1H),2.23-2.30(m,1H),2.40-2.47(m,3H),2.81-3.28(m,1H),3.46-4.08(m,1H),5.10-5.73(m,1H),7.04-7.17(m,1H),7.49-7.55(m,1H),7.55-7.69(m,1H),7.99-8.08(m,1H),8.09-8.21(m,1H),8.41-8.57(m,1H),8.70-8.80(m,1H),8.80-8.96(m,1H),11.10-11.46(m,1H),13.01-13.27(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值420.5；实测值421.4；Rt＝3.926min。
RT(己烷-IPA-MeOH，60-20-20，12ml/min)＝34.8442min。
实施例158.5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-氟-1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物637)和5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-氟-1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物612)的合成
步骤1：5-[[2-[2-(4-氟-1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
将4-氟-5-(5-甲基-2-哌啶基)-1H-吲唑(0.3g，1.29mmol)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(315.86mg，1.29mmol，HCl)和三乙胺(1.30g，12.86mmol，1.79mL)一起混合于DMF(5mL)中。将HATU(733.46mg，1.93mmol)添加到前一混合物中且将所得混合物搅拌过夜。在真空中浓缩反应混合物且通过HPLC(2-10min50-60％ MeOH/H2O，30ml/min(装载泵4ml MeOH，柱：SunFire100*19mm，5微米)纯化残余物，以获得5-[[2-[2-(4-氟-1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.0866g，204.04μmol，15.87％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值424.2；实测值425.2；Rt＝1.066min。
步骤2：5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-氟-1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物637)和5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-氟-1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物612)的合成
对5-[[2-[2-(4-氟-1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.0886g，208.75μmol)进行手性分离(柱：Chiralpak IC(250*20mm，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH，50-25-25；流速：12mL/min；柱温：24℃；波长：205nm.，以获得：
保留时间＝54.05min：5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-氟-1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.04274g，100.70μmol，48.24％产率)
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.00-1.03(m,3H),1.16-1.36(m,1H),1.83-1.94(m,1H),1.98-2.20(m,3H),3.53-3.98(m,2H),5.45-5.58(m,1H),7.23-7.39(m,2H),7.51-7.65(m,1H),7.98-8.20(m,2H),8.27-8.54(m,1H),8.58-8.91(m,2H),10.70-11.39(m,1H),13.11-13.52(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值424.4；实测值425.2；Rt＝4.117min。
保留时间＝26.80min：5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-氟-1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(43.61mg，102.75μmol，49.22％产率)
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.00-1.01(m,3H),1.18-1.41(m,1H),1.82-2.02(m,3H),2.04-2.13(m,1H),3.56-3.91(m,2H),5.45-5.56(m,1H),7.22-7.38(m,2H),7.48-7.64(m,1H),8.00-8.17(m,2H),8.26-8.48(m,1H),8.61-8.92(m,2H),10.75-11.33(m,1H),13.12-13.46(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值424.4；实测值425.2；Rt＝4.115min。
实施例159.5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-氟-3-羟基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物540)的合成
在25℃下，向2-氟-5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯酚(500mg，1.72mmol，HBr)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(423.23mg，1.72mmol，HCl)和三乙胺(1.74g，17.23mmol，2.40mL)于DMF(20mL)中的搅拌溶液中小批量添加HATU(1.31g，3.45mmol)。将所得反应混合物在25℃下搅拌16h，然后在真空中浓缩至大约5ml且提交至反相HPLC(柱：YMC Triart C18 100x20 mm，5um，流动相30-30-60％0-1-6min 0.2％甲酸-甲醇，流速：30ml/min)，以得到呈白色固体的化合物540 5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-氟-3-羟基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(128mg，319.68μmol，18.55％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.93-1.07(m,3H),1.25-1.38(m,1H),1.62-1.73(m,1H),1.81-2.14(m,3H),2.74-3.24(m,1H),3.44-4.04(m,1H),5.06-5.52(m,1H),6.67-6.78(m,1H),6.84-6.97(m,1H),7.04-7.16(m,1H),7.54-7.63(m,1H),8.08-8.20(m,1H),8.42-8.50(m,1H),8.71-8.79(m,1H),8.83-8.92(m,1H),9.75-9.92(m,1H),11.13-11.31(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值400.4；实测值401.2；Rt＝2.299min。
实施例160.2-[(2R,5S)-2-(3-氨基-1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(5,6-二甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物958)和2-[(2S,5R)-2-(3-氨基-1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(5,6-二甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物948)的合成
步骤1：2-[(2R,5S)-2-(3-氨基-1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(5,6-二甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺的合成
将2-[(5,6-二甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(177.07mg，599.47μmol，C6H15N)和5-(5-甲基-2-哌啶基)-1H-吲唑-3-胺(0.21g，911.82μmol)混合于DMF(15mL)中。将反应悬浮液冷却至0℃且添加HATU(381.37mg，1.00mmol)，随后添加TEA(276.80mg，2.74mmol，381.27μL)，且在环境温度下搅拌14h。将反应混合物在真空中蒸发且通过制备型(40-70％0-5min H2O/MeOH/0.1％ NH4OH，流速：30ml/min)纯化0.31g所获得的粗产物，以得到产物2-[(2R,5S)-2-(3-氨基-1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(5,6-二甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(22.60mg，55.60μmol，6.10％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值406.2；实测值407.0；Rt＝1.599min。
步骤2：2-[(2R,5S)-2-(3-氨基-1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(5,6-二甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物958)和2-[(2S,5R)-2-(3-氨基-1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(5,6-二甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物948)的合成
使2-[(2R,5S)-2-(3-氨基-1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(5,6-二甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(0.0456g，112.18μmol)经历手性HPLC纯化(柱：IA-II(250*20,5mkm)，洗脱液：己烷-IPA-MeOH，60-20-20，流速：12mL/min)，以得到两种个别对映异构体化合物9582-[(2R,5S)-2-(3-氨基-1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(5,6-二甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(0.01055g，25.95μmol，23.14％产率)和化合物948 2-[(2S,5R)-2-(3-氨基-1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(5,6-二甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(0.01676g，41.23μmol，36.75％产率)
化合物958：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.97-1.06(m,3H),1.30-1.40(m,1H),1.79-1.93(m,2H),2.01-2.28(m,5H),2.31-2.37(m,3H),2.75-3.24(m,1H),3.41-4.02(m,1H),5.13-5.69(m,3H),7.09-7.20(m,1H),7.20-7.26(m,1H),7.68(s,1H),7.73-7.85(m,1H),8.37-8.55(m,1H),10.82-10.92(m,1H),11.28-11.36(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值406.2；实测值407.2；Rt＝0.762min。
RT(己烷-IPA-MeOH，80-10-10，0.6ml/min)＝31.4212min。
化合物948：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.00-1.05(m,3H),1.30-1.38(m,1H),1.82-1.93(m,2H),2.00-2.12(m,1H),2.13-2.27(m,5H),2.30-2.36(m,3H),2.78-3.19(m,1H),3.41-4.02(m,1H),5.14-5.30(m,2H),7.10-7.20(m,1H),7.20-7.26(m,1H),7.68(s,1H),7.73-7.85(m,1H),8.38-8.52(m,1H),10.82-10.91(m,1H),11.29-11.35(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值406.2；实测值407.2；Rt＝0.692min。
RT(己烷-IPA-MeOH，80-10-10，0.6ml/min)＝36.6272min。
实施例161.N-(5,6-二甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(4-甲基磺酰基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物649)的合成
在25℃下，在0.5h内，向(2R,5S)-5-甲基-2-(4-甲基磺酰基苯基)哌啶(250mg，986.74μmol)、2-[(5,6-二甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(291.46mg，986.74μmol，N(C2H5)3)和三乙胺(998.48mg，9.87mmol，1.38mL)于DMF(5mL)中的搅拌溶液中小批量添加HATU(412.71mg，1.09mmol)。将所得反应混合物在25℃下搅拌18h。通过反相HPLC(柱：SunFireC18 100x19 mm 5um，流动相：15-40％0-5min水-甲醇+FA，流速：30ml/min(装载泵4ml/min甲醇))纯化粗反应混合物，以得到化合物649N-(5,6-二甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(4-甲基磺酰基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(87mg，202.55μmol，20.53％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.01(dd,3H),1.33(m,1H),1.63(m,1H),1.88(m,1H),2.06(m,1H),2.21(m,4H),2.36(m,4H),3.20(m,3H),3.76(m,1H),5.41(m,1H),7.60(m,2H),7.81(m,1H),7.92(m,2H),8.48(m,1H),10.97(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值429.2；实测值430.2；Rt＝1.962min。
实施例162.外消旋5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(4-氨磺酰基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物651)、5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(4-氨磺酰基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物725)和5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(4-氨磺酰基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物724)的合成
步骤1：5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(4-氨磺酰基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物651)的合成
向4-(5-甲基-2-哌啶基)苯磺酰胺(350mg，1.20mmol，HCl)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(295.61mg，1.20mmol，HCl)和三乙胺(608.93mg，6.02mmol，838.75μL)于二甲基甲酰胺(4mL)中的搅拌混合物中添加HATU(503.38mg，1.32mmol)。将所得反应混合物在20℃下搅拌5h。然后，使其经历HPLC(柱：YMC Triart C18100x20 mm，5um；10-10-40％0-2-6min 0.1％ NH3-甲醇，流速：30ml/min-第1次运行，和30-30-65％0-1-5min 0.2％FA-甲醇，流速：30ml/min；第2次运行)，得到5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(4-氨磺酰基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(57mg，127.95μmol，10.63％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.01(dd,3H),1.35(m,1H),1.62(m,1H),1.93(m,1H),2.19(m,3H),3.79(m,1H),5.42(m,1H),7.32(m,2H),7.52(m,2H),7.59(m,1H),7.82(m,2H),8.14(m,1H),8.47(m,1H),8.76(m,1H),8.90(m,1H),11.23(m,1H)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值445.2；实测值446.2；Rt＝1.855min。
步骤2：5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(4-氨磺酰基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物725)和5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(4-氨磺酰基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物724)的合成
使用(IB(250*20，5mkm)Chiralpak柱，以己烷-IPA-MeOH，70-15-15为流动相，流速12ml/min)对5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(4-氨磺酰基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(47.0mg，105.50μmol)进行手性分离，得到呈米色固体的化合物7245-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(4-氨磺酰基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(22.43mg，50.35μmol，47.72％产率)(RT＝58.148min)和呈米色固体的化合物725 5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(4-氨磺酰基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(20.4mg，45.79μmol，43.40％产率)(RT＝39.671min)。
化合物724：(IB，己烷-IPA-MeOH，70-15-15，0.6ml/min)＝72.148min
化合物725：(IB，己烷-IPA-MeOH，70-15-15，0.6ml/min)＝51.595min
化合物725：1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.02(m,3H),1.34(m,1H),1.64(m,1H),1.89(m,1H),2.17(m,2H),2.77(m,1H),3.79(m,1H),5.42(m,1H),7.32(m,2H),7.55(m,3H),7.82(m,2H),8.14(m,1H),8.47(m,1H),8.75(m,1H),8.87(m,1H),11.24(m,1H)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值445.2；实测值446.2；Rt＝0.785min。
RT(己烷-IPA-MeOH，70-15-15，0.6ml/min)＝51.622min。
化合物724：1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.00(m,3H),1.34(m,1H),1.61(m,1H),1.89(m,1H),2.17(m,2H),2.79(m,1H),3.79(m,1H),5.42(m,1H),7.32(m,2H),7.54(m,3H),7.82(m,2H),8.14(m,1H),8.47(m,1H),8.77(m,1H),8.87(m,1H),11.22(m,1H)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值445.2；实测值446.2；Rt＝0.785min。
RT(己烷-IPA-MeOH，70-15-15，0.6ml/min)＝72.1842min。
实施例163.外消旋5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(甲基氨磺酰基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物652)、5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(甲基氨磺酰基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物722)和5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(甲基氨磺酰基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物723)的合成
步骤1：外消旋5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(甲基氨磺酰基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物652)的合成
向N-甲基-4-(5-甲基-2-哌啶基)苯磺酰胺(370mg，1.38mmol，HCl)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(338.63mg，1.38mmol，HCl)和三乙胺(697.54mg，6.89mmol，960.80μL)于二甲基甲酰胺(4mL)中的搅拌混合物中添加HATU(576.63mg，1.52mmol)。将所得反应混合物在20℃下搅拌5h。然后，使其经历HPLC(柱：YMC Triart C18100x20 mm，5um；10-10-60％0-1-6min 0.1％ NH3-甲醇，流速：30ml/min)，得到5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(甲基氨磺酰基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(130mg，282.91μmol，20.52％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.02(m,3H),1.34(m,1H),1.64(m,1H),1.89(m,1H),2.20(m,3H),2.37(m,3H),3.78(m,1H),5.60(m,1H),7.42(m,1H),7.56(m,3H),7.77(m,2H),8.13(m,1H),8.45(m,1H),8.74(m,1H),8.86(m,1H),11.22(s,1H)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值459.2；实测值460.2；Rt＝2.096min。
步骤2：5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(甲基氨磺酰基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物722)和5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(甲基氨磺酰基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物723)的合成
通过手性HPLC(柱：Chiralpak IA II(250*20mm，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH40-30-30；流速：12mL/min；m＝0.12g，2次注入，60mg/注入，V＝2,5L，时间＝3h.)将5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(甲基氨磺酰基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(120.00mg，261.14μmol)分成对映异构体，得到：5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(甲基氨磺酰基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(33mg，71.81μmol，55.00％产率)(其中保留时间＝19.304min)(化合物723)和5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(甲基氨磺酰基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(30mg，65.29μmol，50.00％产率)(其中保留时间＝42.724min)(化合物722)
化合物722：1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.02(m,3H),1.34(m,1H),1.64(m,1H),1.89(m,1H),2.10(m,1H),2.23(m,1H),2.38(m,3H),2.77(m,1H),3.69(m,1H),5.43(m,1H),7.42(m,1H),7.56(m,3H),7.77(m,2H),8.14(m,1H),8.46(m,1H),8.75(m,1H),8.86(m,1H),11.25(m,1H)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值459.2；实测值460.2；Rt＝2.059min。
RT(IPA-MeOH，50-50，0.6ml/min)＝18.2272min。
化合物723：1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.02(m,3H),1.34(m,1H),1.64(m,1H),1.89(m,1H),2.15(m,2H),2.38(m,3H),2.91(m,1H),3.78(m,1H),5.43(m,1H),7.42(m,1H),7.56(m,3H),7.77(m,2H),8.14(m,1H),8.46(d,1H),8.75(m,1H),8.87(m,1H),11.23(m,1H)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值459.2；实测值460.2；Rt＝2.059min。
RT(IPA-MeOH，50-50，0.6ml/min)＝11.0232min。
实施例164.5-[[2-[(2S,5S)-3,3-二氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物836)的合成
在轻微加热下，将2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(203.76mg，974.21μmol)、(2S,5S)-3,3-二氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶(223.33mg，974.21μmol)和dipea(377.73mg，2.92mmol，509.07μL)溶解于DMSO(6mL)中。在剧烈搅拌和偶尔加热下，小批量添加HATU(444.51mg，1.17mmol)。反应完成之后，通过HPLC纯化混合物，以得到5-[[2-[(2S,5S)-3,3-二氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(35mg，83.26μmol，8.55％产率)
HPLC条件：(23％0.5-6.5min水-乙腈；流速30ml/min；(装载泵4ml/min乙腈)；目标质量420；柱SunFireC18 100x19 mm 5um(L))
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.04-1.09(m,3H),1.90-2.01(m,1H),2.20-2.27(m,1H),2.37-2.46(m,1H),3.38-3.54(m,1H),3.58-4.05(m,1H),5.58-5.78(m,1H),7.15-7.29(m,2H),7.44-7.53(m,2H),7.60(s,1H),8.15(s,1H),8.47(s,1H),8.77(s,1H),8.80-8.91(m,1H),11.11-11.34(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值420.2；实测值421.2；Rt＝2.607min。
实施例165.5-[[2-[(2R,3R,5R)-3-氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物898)和5-[[2-[(2R,3S,5R)-3-氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物879)的合成
在轻微加热下，将2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(203.76mg，974.21μmol)、(2S,5S)-3-氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶(205.80mg，974.21μmol)和dipea(377.73mg，2.92mmol，509.07μL)溶解于DMSO(6mL)中。在剧烈搅拌和偶尔加热下，小批量添加HATU(444.51mg，1.17mmol)。反应完成之后，通过HPLC纯化混合物，以得到5-[[2-[(2R,3R,5R)-3-氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(130mg，323.07μmol，33.16％产率)和第二异构体，将第二异构体再纯化(16-18％0.5-7min水-乙腈+NH3；流速30ml/min(装载泵4ml/min乙腈)；目标质量200；柱XBridge100x19 mm5um)，以得到5-[[2-[(2R,3S,5R)-3-氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(15mg，37.28μmol，3.83％产率)
HPLC条件：19-23％0.5-6min水-乙腈；流速30ml/min；(装载泵4ml/min乙腈)；目标质量402；柱SunFireC18 100x19mm 5um(L))
化合物879：1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.07(m,3H),1.73(m,1H),1.89(m,2H),3.36(m,1H),3.71(m,1H),5.59(m,2H),7.23(m,2H),7.42(m,2H),7.58(m,1H),8.14(m,1H),8.49(m,1H),8.75(m,1H),8.87(m,1H),11.28(m,1H)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值402.2；实测值403.2；Rt＝2.565min。
化合物898：1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.03(d,3H),1.36(m,1H),2.20(m,2H),3.63(m,2H),5.34(m,2H),7.20(m,2H),7.36(m,2H),7.59(m,1H),8.13(m,1H),8.40(m,1H),8.79(m,2H),11.09(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值402.2；实测值403.0；Rt＝2。
实施例166.5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1H-吡唑-4-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物970)和5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-吡唑-4-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物942)的合成
步骤1.5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-吡唑-4-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺
在25℃下，在1.5h时段内，将HATU(702.48mg，1.85mmol)小批量添加到(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-吡唑-4-基)哌啶(400mg，1.68mmol，2HCl)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(474.41mg，1.93mmol，HCl)和三乙胺(1.36g，13.44mmol，1.87mL)于DMF(6mL)中的搅拌混合物中。将所得混合物在25℃下搅拌18h，然后提交至反相HPLC(柱：YMCTriart C18 100x20 mm，5um；流动相：10-50％0-5min H2O/MeOH/0.1％ NH4OH，流速：30ml/min(装载泵4ml/min甲醇)，以得到呈淡黄色胶状物的5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-吡唑-4-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(173mg，485.44μmol，28.90％产率)，将其直接提交至制备型手性HPLC。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值356.2；实测值357.2；Rt＝1.525min。
步骤2.5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1H-吡唑-4-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物970)和5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-吡唑-4-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物942)的合成
将外消旋5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-吡唑-4-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(173mg，485.44μmol)提交至制备型手性HPLC(柱：Chiralpak AD-H-III(250*20mm，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH 60-20-20；流速：12mL/min)，以得到化合物9705-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1H-吡唑-4-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(73mg，204.84μmol，42.20％产率)(R.T.＝23.439min)和化合物942 5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-吡唑-4-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(72mg，202.03μmol，41.62％产率)(R.T.＝32.685min)。
化合物970 1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.96-1.01(m,3H),1.30-1.43(m,1H),1.74-1.89(m,2H),1.90-2.02(m,2H),2.79-3.27(m,1H),3.34-3.97(m,1H),5.02-5.63(m,1H),7.35-7.77(m,3H),8.10-8.21(m,1H),8.43-8.52(m,1H),8.72-8.79(m,1H),8.84-8.91(m,1H),11.08-11.21(m,1H),12.77(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值356.2；实测值357.4；Rt＝1.589min。
化合物942 1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.96-1.01(m,3H),1.30-1.43(m,1H),1.74-1.89(m,2H),1.90-2.02(m,2H),2.79-3.27(m,1H),3.34-3.97(m,1H),5.02-5.63(m,1H),7.35-7.77(m,3H),8.10-8.21(m,1H),8.43-8.52(m,1H),8.72-8.79(m,1H),8.84-8.91(m,1H),11.08-11.21(m,1H),12.77(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值356.2；实测值357.2；Rt＝1.584min。
实施例167.5-[[2-[(2S,5R)-2-(5-氨基-2-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物607)和5-[[2-[(2R,5S)-2-(5-氨基-2-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物594)的合成
步骤1.叔丁基(2R,5S)-5-甲基-2-[1-(1H-吡唑-3-基)吡唑-4-基]哌啶
将DIPEA(260.15mg，2.01mmol，350.60μL)添加到相应2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(120.29mg，489.73μmol，HCl)和6-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶-3-胺(0.11g，575.10μmol)于DMF(5mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU(240.54mg，632.61μmol)。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC，以得到纯的5-[[2-[2-(5-氨基-2-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(69.4mg，181.48μmol，31.56％产率)和顺式杂质。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值382.2；实测值383.2；Rt＝1.322min。
步骤2.5-[[2-[(2S,5R)-2-(5-氨基-2-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物607)和5-[[2-[(2R,5S)-2-(5-氨基-2-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物594)的合成
在以下条件下分离外消旋物：OJ-H(250*30，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，13ml/min，RT(化合物607)＝10.557min，RT(化合物594)＝20.873min。自69mg外消旋物获得17.8mg(化合物607)和4.96mg(化合物594)对映异构体。
在以下条件下记录分析数据：仪器：反相和梯度：己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.6ml/min，柱：OD-H
化合物594于分析条件下的保留时间为20.10min
化合物607于分析条件下的保留时间为35.91min
化合物594：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.68-0.83(m,3H),1.02-1.18(m,1H),1.37-1.67(m,2H),1.67-1.85(m,1H),2.11-2.36(m,1H),2.66-3.28(m,1H),3.57-4.22(m,1H),5.00-5.57(m,3H),6.88-7.10(m,2H),7.53-7.63(m,1H),7.87-7.95(m,1H),8.08-8.19(m,1H),8.44-8.54(m,1H),8.70-8.79(m,1H),8.79-8.91(m,1H),11.09-11.37(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值382.4；实测值383.2；Rt＝3,825min。
化合物607：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.69-0.84(m,3H),1.07-1.15(m,1H),1.52-1.68(m,2H),1.68-1.84(m,1H),2.15-2.21(m,0.5H),2.58-2.73(m,1.5H),3.57-4.22(m,1H),5.01-5.55(m,3H),6.88-7.08(m,2H),7.51-7.66(m,1H),7.86-7.93(m,1H),8.09-8.19(m,1H),8.43-8.55(m,1H),8.67-8.79(m,1H),8.79-8.94(m,1H),11.05-11.28(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值382.4；实测值383.2；Rt＝3,742min。
实施例168.5-[[2-[5-甲基-2-(2-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺和5-[[2-[(2R,5R)-5-甲基-2-(2-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物584)、5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物590)和5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物578)的合成
步骤1.5-[[2-[5-甲基-2-(2-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺和5-[[2-[(2R,5R)-5-甲基-2-(2-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物584)的合成
添加2-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶(0.5g，2.35mmol，HCl)溶解于DMF(8mL)和三乙胺(2.38g，23.51mmol，3.28mL)，随后添加2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(491.63mg，2.00mmol，HCl)。然后逐滴添加HATU(1.34g，3.53mmol)且将反应混合物搅拌过夜。次日，将其在真空中蒸发且通过HPLC纯化，以获得5-[[2-[5-甲基-2-(2-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.1135g，308.93μmol，13.14％产率)和5-[[2-[(2R,5R)-5-甲基-2-(2-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(86.47mg，235.36μmol，53.05％产率)
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值367.2；实测值368.2；Rt＝1.758min。(反式)
化合物584
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.72-0.83(m,3H),0.98-1.08(m,1H),1.59-1.73(m,2H),1.78-1.95(m,1H),2.25-2.30(m,0H),2.63-2.80(m,2H),3.66-4.28(m,1H),5.45(dd,1H),7.25-7.31(m,1H),7.31-7.43(m,1H),7.54-7.65(m,1H),7.77-7.89(m,1H),8.09-8.21(m,1H),8.42-8.54(m,1H),8.54-8.62(m,1H),8.69-8.80(m,1H),8.80-8.94(m,1H),11.11-11.39(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值367.2；实测值368.2；Rt＝1.876min。(顺式)
步骤2.5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物590)和5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物578)的合成
对5-[[2-[5-甲基-2-(2-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.1135g，308.93μmol)进行手性分离(柱：YMC CHIRAL ART Cellulose-SC 250*20,5己烷-IPA-MeOH，50-25-25，13ml/min，保留时间(化合物578)＝19.244min且保留时间(化合物578)＝29.63min)，以获得5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.047g，127.93μmol，41.41％产率)和5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.046g，125.20μmol，40.53％产率)
化合物590：
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.01-1.04(m,3H),1.29-1.37(m,1H),1.58-1.65(m,1H),1.83-1.94(m,1H),1.94-2.04(m,1H),2.04-2.14(m,1H),2.85-3.40(m,1H),3.51-4.08(m,1H),5.21-5.61(m,1H),7.23-7.44(m,2H),7.49-7.64(m,1H),7.74-7.87(m,1H),8.05-8.22(m,1H),8.39-8.52(m,1H),8.53-8.61(m,1H),8.68-8.79(m,1H),8.79-8.93(m,1H),11.05-11.34(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值367.2；实测值368.2；Rt＝1.758min。
化合物578：
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.02-1.05(m,3H),1.26-1.38(m,1H),1.56-1.69(m,1H),1.81-1.95(m,1H),1.95-2.13(m,1H),2.41-2.44(m,1H),2.85-3.39(m,1H),3.44-4.14(m,1H),5.21-5.61(m,1H),7.22-7.31(m,1H),7.31-7.46(m,1H),7.51-7.65(m,1H),7.75-7.87(m,1H),8.05-8.20(m,1H),8.42-8.50(m,1H),8.53-8.61(m,1H),8.69-8.80(m,1H),8.81-8.92(m,1H),11.07-11.28(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值367.2；实测值368.2；Rt＝1.758min。
实施例169.5-[[2-[(2R,5R)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物718)和5-[[2-[(2S,5S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物731)的合成
步骤1：外消旋-5-[[2-[(2R,5R)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
将(2R,5R)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶(0.6g，2.62mmol)、TEA(2.65g，26.17mmol，3.65mL)和2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(642.87mg，2.62mmol，HCl)溶解于(26mL)中且一次性添加HATU(1.49g，3.93mmol)，将所得混合物在20℃下搅拌3h。将反应混合物倒入到水中且将水相用EA萃取(3次)，然后将合并的有机相用盐水洗涤(3次)，经Na2SO4干燥且在真空下浓缩。通过反相HPLC(2-10min 50-60％ ACN/H2O30ml/min(装载泵4ml ACN)柱：SunFire 100*19mm，5微米)纯化粗产物。所述反应为成功的。分离呈棕色固体的所需产物(5-[[2-[(2R,5R)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.205g，487.65μmol，18.63％产率))。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值420.2；实测值421.2；Rt＝1.146min。
步骤2：5-[[2-[(2R,5R)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物718)和5-[[2-[(2S,5S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物731)的手性分离
使用(柱：Chiralcel OJ-H(250*20，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，12ml/min)进行手性分离，以得到5-[[2-[(2R,5R)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.083g，197.44μmol，40.49％产率)化合物731(保留时间为16.022min(Chiralcel OJ-3(150*2.1，3mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.15ml/min)和5-[[2-[(2S,5S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.085g，202.20μmol，41.46％产率)化合物718(保留时间为10.577min(Chiralcel OJ-3(150*2.1，3mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.15ml/min)。
化合物718 1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.08(m,3H),2.20(m,1H),2.84(m,1H),3.05(d,1H),3.44(m,1H),3.99(m,1H),5.69(m,1H),7.19(m,2H),7.36(m,2H),7.59(m,1H),8.14(m,1H),8.47(m,1H),8.76(m,1H),8.87(m,1H),11.27(m,1H)
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值420.2；实测值421.2；Rt＝2.034min。
化合物731 1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.08(m,3H),2.20(m,1H),2.84(m,1H),3.05(d,1H),3.44(m,1H),3.99(m,1H),5.69(m,1H),7.19(m,2H),7.36(m,2H),7.59(m,1H),8.14(m,1H),8.47(m,1H),8.76(m,1H),8.87(m,1H),11.27(m,1H)
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值420.2；实测值421.2；Rt＝2.034min。
实施例170.5-[[2-[(2S,5S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(化合物1047)和5-[[2-[(2R,5R)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(化合物1068)的合成
步骤1：5-[[2-[(2R,5R)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺的合成
将(2R,5R)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶(0.4g，1.74mmol)、TEA(1.77g，17.45mmol，2.43mL)和2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(417.35mg，1.74mmol)溶解于DMF(18mL)中且一次性添加HATU(995.19mg，2.62mmol)，将所得混合物在20℃下搅拌3h。将反应混合物倒入到水中且将水相用EA萃取(3次)，然后将合并的有机相用盐水洗涤(3次)，经Na2SO4干燥且在真空下浓缩。通过反相HPLC(2-10min 10-50％甲醇，30ml/min(装载泵4ml甲醇)柱：SunFire 100*19mm，5微米)纯化粗产物。所述反应为成功的。分离呈淡黄色固体的所需产物5-[[2-[(2R,5R)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(0.151g，335.25μmol，19.21％产率)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值450.2；实测值451.2；Rt＝1.340min。
步骤2.5-[[2-[(2S,5S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(化合物1047)和5-[[2-[(2R,5R)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(化合物1068)的分离
使用(柱：Chiralcel OJ-H(250*20，5mkm)，IPA-MeOH，50-50，12ml/min)进行手性分离，以得到5-[[2-[(2S,5S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(0.068g，150.97μmol，45.03％产率)(保留时间为32.799min)和5-[[2-[(2R,5R)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(0.063g，139.87μmol，41.72％产率)(保留时间为10.884min)。
化合物1068 1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.08(d,3H),2.12-2.28(m,1H),2.40-2.46(m,1H),2.79-2.89(m,1H),2.99-3.07(m,0.3H),3.41-3.50(m,0.7H),3.79-3.91(m,0.7H),3.90-3.99(m,3H),4.23-4.34(m,0.3H),5.52-6.01(m,1H),7.13-7.27(m,2H),7.33-7.41(m,2H),7.66-7.81(m,2H),8.41-8.62(m,2H),10.76-11.27(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值450.2；实测值451.2；Rt＝3.147min。
化合物1047 1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.08(d,3H),2.12-2.28(m,1H),2.40-2.46(m,1H),2.79-2.89(m,1H),2.99-3.07(m,0.3H),3.41-3.50(m,0.7H),3.79-3.91(m,0.7H),3.90-3.99(m,3H),4.23-4.34(m,0.3H),5.52-6.01(m,1H),7.13-7.27(m,2H),7.33-7.41(m,2H),7.66-7.81(m,2H),8.41-8.62(m,2H),10.76-11.27(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值450.2；实测值451.2；Rt＝3.147min。
实施例171.5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物787)和5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物778)的合成
步骤1.外消旋-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
将2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(241.77mg，1.16mmol)和5-(5-甲基-2-哌啶基)-1H-吡唑并[4,3-b]吡啶(0.25g，1.16mmol)混合于DMF(20mL)中。将反应悬浮液冷却至0℃且添加HATU(439.51mg，1.16mmol)，随后添加TEA(116.97mg，1.16mmol，161.11μL)，且在环境温度下搅拌12h。在真空中蒸发反应混合物且通过制备型(25-45％1-6min水-甲醇(NH3 0.1％)，流速30ml/min)纯化所获得的0.48g粗产物，以得到产物5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.14g，343.62μmol，29.73％产率)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值407.2；实测值408.2；Rt＝1.756min。
步骤2.5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物787)和5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物778)的分离
使5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(187.70mg，460.70μmol)经历手性HPLC分离(柱：IC-II(250*20，5um)，洗脱液：己烷-IPA-MeOH，60-20-20，流速：12mL/min)，以得到两种个别对映异构体化合物7785-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.056g，137.45μmol，29.83％产率)和化合物787 5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(61.63mg，151.27μmol，32.83％产率)
化合物778RT(AD-H，CO2-MeOH，60-40，2.0ml/min)＝11.035min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.01-1.10(m,3H),1.33-1.41(m,1H),1.73-1.85(m,1H),1.85-1.98(m,1H),1.99-2.15(m,1H),2.50-2.55(m,1H),2.88-2.95(m,0.4H),3.34-3.42(m,0.6H),3.50-4.13(m,1H),5.28-5.82(m,1H),7.28-7.50(m,1H),7.53-7.65(m,1H),8.00-8.07(m,1H),8.08-8.19(m,1H),8.22-8.31(m,1H),8.42-8.53(m,1H),8.69-8.79(m,1H),8.81-8.93(m,1H),11.07-11.37(m,1H),13.30(br s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值408.2；实测值415.2；Rt＝1.558min。
化合物787RT(AD-H，CO2-MeOH，60-40，2.0ml/min)＝7.7min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.01-1.10(m,3H),1.33-1.41(m,1H),1.73-1.85(m,1H),1.85-1.98(m,1H),1.99-2.15(m,1H),2.50-2.55(m,1H),2.88-2.95(m,0.4H),3.34-3.42(m,0.6H),3.50-4.13(m,1H),5.28-5.82(m,1H),7.28-7.50(m,1H),7.53-7.65(m,1H),8.00-8.07(m,1H),8.08-8.19(m,1H),8.22-8.31(m,1H),8.42-8.53(m,1H),8.69-8.79(m,1H),8.81-8.93(m,1H),11.07-11.37(m,1H),13.30(br s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值408.2；实测值415.2；Rt＝1.558min。
实施例172.5-[[2-[(2S,5R)-2-(3,5-二氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物490)和5-[[2-[(2R,5S)-2-(3,5-二氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物491)的合成
步骤1.5-[[2-[2-(3,5-二氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
在21℃下，将2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(508.43mg，1.64mmol，Et3N)、HATU(622.92mg，1.64mmol)和三乙胺(165.78mg，1.64mmol，228.34μL)混合于无水DMF(5mL)中且将所得混合物搅拌5h。向其中添加2-(3,5-二氯苯基)-5-甲基哌啶(0.4g，1.64mmol)，且将所得混合物在21℃下搅拌过夜将所得混合物倒入到水中，用EtOAc萃取3次，将合并的有机物用水、盐水洗涤且蒸发。使残余物经历HPLC(50-100％2-7min；水-r1+nh3 30ml/min；装载泵r1+h3 4ml/min；柱YMC-Actus triat 19*100mm)。获得两种级分的5-[[2-[2-(3,5-二氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(347.9mg，799.21μmol，48.78％产率)：233.7mg(90.57％反式)和114.2mg(80.33％反式)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值435.1；实测值436.0；Rt＝1.222min。
步骤2.5-[[2-[(2S,5R)-2-(3,5-二氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物490和5-[[2-[(2R,5S)-2-(3,5-二氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物491)的分离
在以下条件下进行手性分离：IA-II(250*20,5mkm)，己烷-IPA-MeOH，70-15-15，12ml/min,RT(化合物491)＝29.063min，RT(化合物490)＝19.574min
5-[[2-[(2S,5R)-2-(3,5-二氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺化合物490(85.97mg，197.49μmol，36.79％产率)的RT＝20.8502min(IA，己烷-IPA-MeOH，70-15-15，0.6ml/min)
5-[[2-[(2R,5S)-2-(3,5-二氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺化合物491(92.28mg，211.99μmol，39.49％产率)的RT＝31.7442min(IA，己烷-IPA-MeOH，70-15-15，0.6ml/min)
化合物490：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.96-1.04(m,3H),1.23-1.38(m,1H),1.56-1.68(m,1H),1.84-1.95(m,1H),1.98-2.14(m,1H),2.14-2.29(m,1H),2.76-3.27(m,1H),3.47-4.07(m,1H),5.12-5.56(m,1H),7.30-7.38(m,2H),7.49-7.55(m,1H),7.56-7.65(m,1H),8.04-8.20(m,1H),8.41-8.54(m,1H),8.72-8.80(m,1H),8.80-8.91(m,1H),11.23-11.44(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值434.2；实测值345.2；Rt＝3.594min。
化合物491：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.96-1.04(m,3H),1.23-1.38(m,1H),1.56-1.68(m,1H),1.84-1.95(m,1H),1.98-2.14(m,1H),2.14-2.29(m,1H),2.76-3.27(m,1H),3.47-4.07(m,1H),5.12-5.56(m,1H),7.30-7.38(m,2H),7.49-7.55(m,1H),7.56-7.65(m,1H),8.04-8.20(m,1H),8.41-8.54(m,1H),8.72-8.80(m,1H),8.80-8.91(m,1H),11.23-11.44(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值434.2；实测值345.2；Rt＝3.594min。
实施例173.N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(3,5-二氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物966)和N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(3,5-二氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物951)的合成
步骤1.N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(3,5-二氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
在21℃下，将2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(0.2g，956.01μmol)、HATU(363.51mg，956.01μmol)和三乙胺(106.41mg，1.05mmol，146.57μL)混合于无水DMF(5mL)中且将所得混合物搅拌15min。向其中添加(2S,5R)-2-(3,5-二氯苯基)-5-甲基哌啶(233.42mg，956.01μmol)，且将所得混合物在21℃下搅拌过夜。将所得混合物倒入到水中，用EtOAc萃取3次，将合并的有机物用水、盐水洗涤且蒸发。使残余物经历HPLC(50-75％0.5-6min水-乙腈；流速30ml/min(装载泵4ml/min；乙腈)；柱SunFire 100x19 mm 5um(R))。获得呈米色固体的三种级分的N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(3,5-二氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(258.3mg，593.32μmol，62.06％产率)：第1级分-41.1mg(通过LCMS为100％)；第2级分-109.3mg(93.46％反式、6.54％顺式)；第3级分-107.9mg(84.79％反式、13.83％顺式)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值434.2；实测值435.2；Rt＝2.909min。
步骤2.N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(3,5-二氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物966)和N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(3,5-二氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物951)的合成
在以下条件下分离对映异构体：CHIRALPAC AD-H 250*20,5己烷-IPA-MeOH，50-25-25，12ml/min。RT(化合物966)＝13.308min，RT(化合物951)＝25.111min
N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(3,5-二氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(39.37mg，90.43μmol，26.18％产率)的RT＝7.7182min(Chiralpak AD-3(150*2.1，3mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.15ml/min)
N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(3,5-二氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(53.66mg，123.26μmol，35.68％产率)的RT＝15.6142min(ChiralpakAD-3(150*2.1，3mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.15ml/min)
化合物951：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.96-1.02(m,3H),1.06-1.13(m,3H),1.23-1.36(m,1H),1.56-1.65(m,1H),1.82-1.93(m,1H),1.96-2.10(m,1H),2.11-2.24(m,1H),2.39(q,2H),2.70-3.28(m,1H),3.44-4.04(m,1H),5.09-5.54(m,1H),5.56-5.68(m,2H),7.26-7.39(m,2H),7.39-7.55(m,2H),7.90-8.10(m,1H),10.48-10.64(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值434.2；实测值435.2；Rt＝2.936min。
化合物966：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.96-1.02(m,3H),1.06-1.13(m,3H),1.23-1.36(m,1H),1.56-1.65(m,1H),1.82-1.93(m,1H),1.96-2.10(m,1H),2.11-2.24(m,1H),2.39(q,2H),2.70-3.28(m,1H),3.44-4.04(m,1H),5.09-5.54(m,1H),5.56-5.68(m,2H),7.26-7.39(m,2H),7.39-7.55(m,2H),7.90-8.10(m,1H),10.48-10.64(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值434.2；实测值435.2；Rt＝2.936min。
实施例174.5-[[2-[(2R,5S)-2-(3,5-二氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(化合物945)和5-[[2-[(2S,5R)-2-(3,5-二氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(化合物965)的合成
步骤1.5-[[2-[(2S,5R)-2-(3,5-二氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺的合成
在21℃下，将2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(0.2g，836.17μmol)、HATU(317.94mg，836.17μmol)和三乙胺(93.07mg，919.79μmol，128.20μL)混合于无水DMF(5mL)中且将所得混合物搅拌15min。向其中添加(2S,5R)-2-(3,5-二氯苯基)-5-甲基哌啶(204.16mg，836.17μmol)，且将所得混合物在21℃下搅拌过夜。将所得混合物倒入到水中，用EtOAc萃取3次，将合并的有机物用水、盐水洗涤且蒸发。使残余物经历HPLC(45-70％0.5-6min水-乙腈；流速30ml/min(装载泵4ml/min；乙腈)；柱SunFire 100x19 mm5um(R))。获得呈白色固体的三种级分：第1级分-76.5mg(100％)；第2级分-89.8mg(89.71％反式、10.29％顺式)；第3级分-95.8mg(82.39％反式、17.61％顺式)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值464.2；实测值465.2；Rt＝3.489min。
步骤2.5-[[2-[(2R,5S)-2-(3,5-二氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(化合物945)和5-[[2-[(2S,5R)-2-(3,5-二氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(化合物965)的分离
在以下条件下分离对映异构体：Chiralpak IС250*20，5-II己烷-IPA-MeOH，60-20-20，15ml/min
制备型：CHIRALPAK-IC(250*20mm，5mkm)己烷-IPAMeOH，60-20-20，15ml/min
5-[[2-[(2S,5R)-2-(3,5-二氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺化合物965(74.22mg，159.50μmol，44.63％产率)的RT＝17.005min
5-[[2-[(2R,5S)-2-(3,5-二氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺化合物945(77.71mg，167.00μmol，46.73％产率)的RT＝23.346min
5-[[2-[(2R,5S)-2-(3,5-二氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺化合物945(74.22mg，159.50μmol，44.63％产率)的RT＝21.185min(Chiralpak IC-3(150*2.1，3mkm)，己烷-IPA-MeOH，70-15-15，0.15ml/min)
5-[[2-[(2S,5R)-2-(3,5-二氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺化合物965(77.71mg，167.00μmol，46.73％产率)的RT＝15,456min(Chiralpak IC-3(150*2.1，3mkm)，己烷-IPA-MeOH，70-15-15，0.15ml/min)
化合物945：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.97-1.02(m,3H),1.23-1.37(m,1H),1.56-1.67(m,1H),1.82-1.94(m,1H),1.95-2.24(m,2H),2.59-3.11(m,1H),3.48-4.04(m,4H),5.14-5.52(m,1H),7.29-7.38(m,2H),7.48-7.55(m,1H),7.66-7.78(m,2H),8.40-8.58(m,2H),10.99-11.18(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值464.2；实测值465.2；Rt＝3.591min。
化合物965：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.97-1.02(m,3H),1.23-1.37(m,1H),1.56-1.67(m,1H),1.82-1.94(m,1H),1.95-2.24(m,2H),2.59-3.11(m,1H),3.48-4.04(m,4H),5.14-5.52(m,1H),7.29-7.38(m,2H),7.48-7.55(m,1H),7.66-7.78(m,2H),8.40-8.58(m,2H),10.99-11.18(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值464.2；实测值465.2；Rt＝3.591min。
实施例175.外消旋-5-(2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-1,2-二氢喹啉-6-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物670)、rel--5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物804)和rel-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物809)的合成
步骤1：外消旋-5-(2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-1,2-二氢喹啉-6-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物670)的合成
将6-(5-甲基-2-哌啶基)-1H-喹啉-2-酮(0.25g，1.03mmol)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(253.41mg，1.03mmol，HCl)和三乙胺(1.04g，10.32mmol，1.44mL)一起混合于DMF(5mL)中。向其中添加HATU(588.43mg，1.55mmol)，且将所得混合物搅拌18h。在真空中浓缩反应混合物且通过HPLC(2-10min 50-60％MeOH/H2O，30mL/min(装载泵4mL MeOH)，柱：SunFire 100*19mm，5微米)纯化残余物，以获得5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.2025g，467.17μmol，45.28％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.03(m,3H),1.35(m,1H),1.73(m,1H),1.88(m,1H),2.19(m,2H),2.82(m,1H),3.74(m,1H),5.40(m,1H),6.47(m,1H),7.30(m,1H),7.45(m,1H),7.61(m,2H),7.87(m,1H),8.14(m,1H),8.47(m,1H),8.80(m,2H),11.21(m,1H),11.70(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值433.2；实测值434.0；Rt＝1.879min。
步骤2：rel-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物804)和rel-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物809)的合成
通过手性色谱(OJ-H，CO2-MeOH，70-30，3.0ml/min)分离非对映异构体的混合物，以获得化合物804rel-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(36.05mg，83.17μmol，23.02％产率)和化合物809rel-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(37.44mg，86.37μmol，23.91％产率)。
化合物804：RT(OJ-H，CO2-MeOH，70-30，3.0mL/min)＝2.726min。
1H NMR(dmso,600MHz):δ(ppm)0.99-1.07(m,3H),1.28-1.44(m,1H),1.66-1.77(m,1H),1.81-1.95(m,1H),2.01-2.16(m,1H),2.20-2.31(m,1H),2.78-3.23(m,1H),3.45-4.05(m,1H),5.15-5.67(m,1H),6.42-6.50(m,1H),7.26-7.36(m,1H),7.40-7.52(m,1H),7.54-7.68(m,2H),7.82-7.96(m,1H),8.05-8.24(m,1H),8.40-8.56(m,1H),8.68-8.79(m,1H),8.79-8.96(m,1H),10.92-11.49(m,1H),11.51-11.89(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值433.2；实测值434.2；Rt＝1.005min。
化合物809：RT(OJ-H，CO2-MeOH，70-30，3.0mL/min)＝4.383min。
1H NMR(dmso,600MHz):δ(ppm)1.00-1.09(m,3H),1.30-1.42(m,1H),1.67-1.79(m,1H),1.82-1.95(m,1H),2.01-2.19(m,1H),2.20-2.29(m,1H),2.78-3.23(m,1H),3.44-4.02(m,1H),5.11-5.70(m,1H),6.41-6.56(m,1H),7.25-7.37(m,1H),7.39-7.52(m,1H),7.53-7.67(m,2H),7.84-7.93(m,1H),8.08-8.23(m,1H),8.39-8.54(m,1H),8.69-8.79(m,1H),8.79-8.98(m,1H),11.11-11.52(m,1H),11.52-11.92(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值433.2；实测值434.2；Rt＝1.917min。
实施例176.rel-2-甲氧基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物810)和rel-2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物807)的合成
步骤1：外消旋-2-甲氧基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
将6-(5-甲基-2-哌啶基)-1H-喹啉-2-酮(0.3g，1.24mmol)、2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(296.12mg，1.24mmol)、三乙胺(626.39mg，6.19mmol，862.80μL)混合于DMF(10mL)中，然后添加HATU(706.12mg，1.86mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌12h。将溶剂蒸发且将所得混合物与于甲醇(10ml)中的DMT(50mg)一起搅拌。将混合物过滤且在减压下蒸发。通过HPLC(2-10min 40-45％甲醇/H2O，30mL/min)纯化所得粗材料，以获得外消旋-2-甲氧基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(138.6mg，299.04μmol，24.15％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值463.2；实测值464.1；Rt＝1.087min。
步骤2：rel-2-甲氧基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物810)和rel-2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物807)的合成
通过手性色谱(IA-II(250*20，5mkm)，IPA-MeOH，50-50，12mL/min)分离非对映异构体的混合物，以获得(化合物807)rel-2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(38.31mg，82.66μmol，27.64％产率)和(化合物810)rel-2-甲氧基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(37.06mg，79.96μmol，26.74％产率)
制备型：
化合物807的RT(IA-II(250*20，5mkm)，IPA-MeOH，50-50，12ml/min)＝41.297min。
化合物810的RT(IA-II(250*20，5mkm)，IPA-MeOH，50-50，12ml/min)＝31.249min。
化合物810：RT(IC，IPA-MeOH，50-50，0.6mL/min)＝24.885min。
1H NMR(dmso,600MHz):δ(ppm)0.98-1.09(m,3H),1.30-1.44(m,1H),1.63-1.76(m,1H),1.81-1.93(m,1H),2.02-2.18(m,1H),2.19-2.28(m,1H),2.77-3.24(m,1H),3.45-3.50(m,0.6H),3.88-3.96(m,3H),3.97-4.02(m,0.4H),5.11-5.72(m,1H),6.40-6.54(m,1H),7.21-7.36(m,1H),7.37-7.50(m,1H),7.57-7.64(m,1H),7.65-7.77(m,2H),7.82-7.93(m,1H),8.37-8.59(m,2H),10.91-11.11(m,1H),11.66-11.76(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值463.2；实测值464.2；Rt＝2.401min。
化合物807：RT(IC，IPA-MeOH，50-50，0.6mL/min)＝32.686min。
1H NMR(dmso,600MHz):δ(ppm)0.97-1.04(m,3H),1.27-1.38(m,1H),1.66-1.75(m,1H),1.81-1.94(m,1H),2.01-2.17(m,1H),2.20-2.31(m,1H),2.80-3.23(m,1H),3.46-3.53(m,1H),3.89-3.96(m,3H),5.15-5.67(m,1H),6.40-6.52(m,1H),7.23-7.36(m,1H),7.39-7.50(m,1H),7.57-7.62(m,1H),7.66-7.77(m,2H),7.83-7.91(m,1H),8.40-8.59(m,2H),10.92-11.14(m,1H),11.60-11.77(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值463.2；实测值464.0；Rt＝2.401min。
实施例177.rel-5-[[2-[(2S,5R)-2-(6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物892)和rel-5-[[2-[(2R,5S)-2-(6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物885)的合成
步骤1：5-[[2-[2-(6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
将6-(5-甲基-2-哌啶基)异喹啉(0.3g，1.33mmol)溶解于DMF中且添加三乙胺(1.34g，13.26mmol，1.85mL)，随后添加2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(325.59mg，1.33mmol，HCl)。然后逐滴添加HATU(756.04mg，1.99mmol)且将反应混合物搅拌过夜。次日，将其在真空中蒸发且通过HPLC纯化，以获得5-[[2-[2-(6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.11g，263.50μmol，19.88％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值417.2；实测值418.2；Rt＝0.681min。
步骤2：rel-5-[[2-[(2S,5R)-2-(6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物892)和rel-5-[[2-[(2R,5S)-2-(6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物885)的合成
对外消旋-5-[[2-[2-(6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.11g，263.50μmol)进行手性分离(柱：Chiralpak AD-H(250*20mm，5m)；流动相：己烷-IPA-MeOH，70-15-15；流速：12mL/min；柱温：24℃；波长：205nm、210nm、254nm保留时间(异构体A)＝41.75min)，以获得化合物892 5-[[2-[(2S,5R)-2-(6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.05085g，121.81μmol，46.23％产率)和化合物8855-[[2-[(2R,5S)-2-(6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.04934g，118.19μmol，44.85％产率)。
化合物892：RT(AD-H，Hex-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝23.254min。
1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)1.06(t,3H),1.39(m,1H),1.73(m,1H),1.89(m,1H),2.18(m,1H),2.39(m,2H),3.83(dd,1H),5.58(m,1H),7.66(m,2H),7.83(m,1H),7.92(m,1H),8.15(m,2H),8.49(m,2H),8.75(m,1H),8.87(m,1H),9.28(m,1H),11.29(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值417.2；实测值418.2；Rt＝0.854min。
化合物885：RT(AD-H，Hex-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝34.603min。
1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)1.06(m,3H),1.39(m,1H),1.79(m,2H),2.25(m,3H),3.83(dd,1H),5.58(m,1H),7.66(m,2H),7.82(t,1H),7.92(d,1H),8.15(m,2H),8.49(m,2H),8.76(m,1H),8.87(m,1H),9.28(m,1H),11.29(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值417.2；实测值418.2；Rt＝0.855min。
实施例178.rel-5-[[2-[(2R,5S)-2-(6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(化合物914)和rel-5-[[2-[(2S,5R)-2-(6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(化合物933)的合成
步骤1：5-[[2-[2-(6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺的合成
将6-(5-甲基-2-哌啶基)异喹啉(0.44g，1.94mmol)溶解于DMF(10mL)中且添加三乙胺(1.97g，19.44mmol，2.71mL)，随后添加2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(465.02mg，1.94mmol)。然后逐滴添加HATU(1.11g，2.92mmol)且将反应混合物搅拌过夜。次日，将其在真空中蒸发且通过HPLC纯化，以获得5-[[2-[2-(6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(0.12g，268.17μmol，13.79％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值447.2；实测值448.0；Rt＝0.954min。
步骤2：rel-5-[[2-[(2R,5S)-2-(6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(化合物914)和rel-5-[[2-[(2S,5R)-2-(6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(化合物933)的合成
对5-[[2-[2-(6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(0.12g，268.17μmol)进行手性分离(柱：Chiralpak IB(250*30mm，5mkm)；以CO2-MeOH，65-35为流动相，90mL/min；柱温：40℃；波长：215nm。保留时间(异构体A)＝8.55min；保留时间(异构体B)＝9.23min)，以获得化合物933rel-5-[[2-[(2S,5R)-2-(6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(0.04984g，111.38μmol，41.53％产率)和化合物914 5-[[2-[(2R,5S)-2-(6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(56.12mg，125.41μmol，46.77％产率)。
化合物933：RT(IB，CO2-MeOH，60-40，2.0mL/min)＝6.159min。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.04(m,3H),1.37(m,1H),1.72(m,1H),1.90(m,1H),2.19(m,1H),2.37(m,1H),2.84(m,1H),3.92(m,4H),5.56(d,1H),7.66(m,3H),7.81(m,1H),7.90(m,1H),8.13(m,1H),8.51(m,3H),9.27(m,1H),11.07(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值447.2；实测值448.2；Rt＝0.964min。
化合物914：RT(IB，CO2-MeOH，60-40，2.0mL/min)＝6.890min。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.02(m,3H),1.38(m,1H),1.72(m,1H),1.90(m,1H),2.20(m,1H),2.37(m,1H),2.84(m,1H),3.92(m,4H),5.56(d,1H),7.61(d,1H),7.68(m,1H),7.74(m,1H),7.81(m,1H),7.90(m,1H),8.13(dd,1H),8.50(m,3H),9.27(m,1H),11.07(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值447.2；实测值448.2；Rt＝0.962min。
实施例179.rel-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物645)和rel-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物654)的合成
步骤1：5-[[2-[5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
将DIPEA(631.43mg，4.89mmol，850.98μL)添加到相应2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(0.3g，1.22mmol，HCl)和2-甲基-5-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶(232.41mg，1.22mmol)于DMF(10mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU(510.85mg，1.34mmol)。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC(Waters Sunfire 100*19mm，5mkm柱且以H2O-MeOH为洗脱液混合物)，以得到5-[[2-[5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.23g，603.00μmol，49.37％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值381.4；实测值382.4；Rt＝1.202min。
步骤2：rel-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物645)和rel-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物654)的合成
使用(OJ-H I(250*20mm，5mkm)Chiralpak柱且以己烷-IPA-MeOH，70-15-15为流动相，流速15mL/min)对5-[[2-[5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(180.0mg，471.91μmol)进行手性分离，得到化合物645rel-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(79.97mg，43.89％产率)和化合物654rel-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(94.9mg，52.72％产率)。
化合物645：RT(OJ-H，己烷-IPA-MeOH，70-15-15，0.6mL/min)＝23.503min。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.02(m,3H),1.34(m,1H),1.65(m,1H),1.88(m,1H),2.07(m,1H),2.21(m,1H),2.38(m,3H),3.00(m,1H),3.73(m,1H),5.38(m,1H),7.25(m,1H),7.61(m,2H),8.17(m,1H),8.44(m,2H),8.75(m,1H),8.86(m,1H),11.21(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值381.2；实测值382.2；Rt＝0.787min。
化合物654：RT(OJ-H，己烷-IPA-MeOH，70-15-15，0.6mL/min)＝14.127min。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.01(m,3H),1.33(m,1H),1.65(m,1H),1.89(m,1H),2.05(m,1H),2.20(m,1H),2.38(m,3H),2.99(m,1H),3.69(m,1H),5.38(m,1H),7.25(m,1H),7.60(m,2H),8.14(m,1H),8.44(m,2H),8.75(m,1H),8.86(m,1H),11.21(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值381.2；实测值382.2；Rt＝0.789min。
实施例180.rel-2-甲氧基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物754)和rel-2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物770)的合成
步骤1：2-甲氧基-5-[[2-[5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
将DIPEA(398.69mg，3.08mmol，537.32μL)添加到相应2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(0.3g，881.38μmol，Et3N)和2-甲基-5-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶(167.71mg，881.38μmol)于DMF(5mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU(368.64mg，969.52μmol)。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC(Waters SunfireC18 20*100 5mkm柱且以H2O-MeCN为洗脱液混合物)，以得到2-甲氧基-5-[[2-[5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.13g，315.95μmol，35.85％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ0.94(s,3H),1.07(m,1H),1.44(m,1H),1.62(m,1H),2.01(m,2H),2.41(m,2H),3.09(s,3H),3.42(m,1H),4.01(s,3H),5.19(m,1H),7.22(m,1H),7.59(m,1H),7.72(m,2H),8.49(m,2H),8.56(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值411.2；实测值412.0；Rt＝1.467min。
步骤5：rel-2-甲氧基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物754)和rel-2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物770)的合成
对2-甲氧基-5-[[2-[5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(130.0mg，315.95μmol)使用(Chiralpak IA(250*20mm，5mkm)且以己烷-IPA-MeOH，40-30-30为流动相，流速：12mL/min；柱温：24℃；波长：205nm、266nm、308nm)，保留时间(异构体A)＝35.04min；保留时间(异构体B)＝46.12min)进行手性分离，得到化合物754rel-2-甲氧基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(22.66mg，17.43％产率)和化合物770 2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(40.84mg，31.42％产率)。
化合物754：RT(IA，己烷-IPA-MeOH，40-30-30，0.6mL/min)＝10.508min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.93-1.08(m,3H),1.26-1.40(m,1H),1.56-1.74(m,1H),1.83-1.93(m,1H),1.98-2.15(m,1H),2.15-2.25(m,1H),2.41-2.45(m,3H),2.71-3.24(m,1H),3.44-4.02(m,4H),5.12-5.62(m,1H),7.19-7.32(m,1H),7.51-7.65(m,1H),7.65-7.77(m,2H),8.34-8.47(m,2H),8.47-8.58(m,1H),10.88-11.10(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值411.2；实测值412.2；Rt＝0.862min。
化合物770：RT(IA，己烷-IPA-MeOH，40-30-30，0.6mL/min)＝72.637min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.02-1.04(m,3H),1.27-1.38(m,1H),1.59-1.70(m,1H),1.80-1.93(m,1H),1.99-2.15(m,1H),2.15-2.25(m,1H),2.41-2.44(m,3H),2.72-3.24(m,1H),3.44-4.02(m,4H),5.13-5.60(m,1H),7.19-7.30(m,1H),7.54-7.65(m,1H),7.66-7.78(m,2H),8.37-8.47(m,2H),8.47-8.56(m,1H),10.94-11.08(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值411.2；实测值412.2；Rt＝0.862min。
实施例181.5-[[2-[(2S,5R)-2-(5-乙酰胺基-2-噻吩基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物704)和5-[[2-[(2R,5S)-2-(5-乙酰胺基-2-噻吩基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物686)的合成
步骤1：5-[[2-[2-(5-乙酰胺基-2-噻吩基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
将2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(627.34mg，2.55mmol，HCl)和N-[5-(5-甲基-2-哌啶基)-2-噻吩基]乙酰胺(0.9g，2.55mmol，CF3COOH)混合于DMF(15mL)中。将反应悬浮液冷却至20℃且添加HATU(971.15mg，2.55mmol)，随后添加TEA(1.29g，12.77mmol，1.78mL)，且在环境温度下搅拌14h。将反应混合物在真空中蒸发且倒入到水(100ml)中且用EtOAc(2*30ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(2*30ml)洗涤，经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，且通过制备型(25-75％0-5min水-甲醇，流速30ml/min)纯化0.45g所获得的粗产物，以得到产物5-[[2-[2-(5-乙酰胺基-2-噻吩基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.100g，232.83μmol，9.12％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值429.1；实测值430.0；Rt＝1.948min。
步骤2：5-[[2-[(2S,5R)-2-(5-乙酰胺基-2-噻吩基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物704)和5-[[2-[(2R,5S)-2-(5-乙酰胺基-2-噻吩基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物686)的合成
通过手性HPLC(柱：OJ-H(250*20，5mkm))，以己烷-IPA-MeOH，70-15-15，14ml/min为流动相)分离对映异构体，以得到两种个别对映异构体化合物704 5-[[2-[(2S,5R)-2-(5-乙酰胺基-2-噻吩基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(37.20mg，86.61μmol，37.20％产率)和化合物686 5-[[2-[(2R,5S)-2-(5-乙酰胺基-2-噻吩基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.0461g，107.34μmol，46.10％产率)。
化合物686：RT(IA，己烷-IPA-MeOH，70-15-15，0.6mL/min)＝30.346min。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)0.78(m,3H),1.30(m,2H),1.68(m,2H),1.88(m,1H),2.02(m,3H),2.21(m,1H),3.90(m,1H),5.53(m,1H),6.47(m,1H),6.69(m,1H),7.58(m,1H),8.15(m,1H),8.49(m,1H),8.81(m,2H),11.05(s,1H),11.23(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值429.2；实测值430.2；Rt＝1.042min。
化合物704：RT(IA，己烷-IPA-MeOH，70-15-15，0.6mL/min)＝26.867min。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)0.79(dd,3H),1.31(m,1H),1.68(m,2H),1.89(m,1H),2.01(m,3H),2.20(m,1H),2.72(m,1H),3.89(m,1H),5.53(m,1H),6.47(m,1H),6.69(m,1H),7.59(d,1H),8.15(d,1H),8.49(m,1H),8.75(m,1H),8.87(m,1H),11.05(s,1H),11.23(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值429.2；实测值430.2；Rt＝1.041min。
实施例182.5-(2-(2-(3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-7-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物598和化合物605)的合成
步骤1：5-(2-(2-(3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-7-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺的合成
将7-(5-甲基-2-哌啶基)-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪(0.68g，1.46mmol)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(359.46mg，1.46mmol，HCl)、TEA(740.46mg，7.32mmol，1.02mL)混合于DMF(10mL)中，然后添加HATU(834.70mg，2.20mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌13h。将混合物在减压下蒸发，且使用HPLC(2-10min50-60％ MeOH/H20+NH3，30ml/min)纯化，以获得5-[[2-[(2S,5R)-2-(3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪-7-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(166.9mg，394.13μmol，26.93％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值423.2；实测值424.2；Rt＝1.029min。
步骤2：手性分离(化合物598和化合物605)
通过手性色谱(IA-II(250*20，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，40-30-30，10ml/min)分离非对映异构体的混合物，以获得5-[[2-[(2R,5S)-2-(3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪-7-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(58.99mg，139.30μmol，35.34％产率)(RT＝57.029)和5-[[2-[(2S,5R)-2-(3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪-7-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(48.14mg，113.68μmol，28.84％产率)(RT＝32.475)。
化合物598于分析条件下(柱：IA，IPA-MeOH，50-50，0.6ml/min为流动相)的保留时间为48.55min且化合物605的保留时间为15.51min。
化合物598：保留时间：48.55min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.96-1.03(m,3H),1.24-1.35(m,1H),1.65-1.78(m,1H),1.78-1.90(m,1H),1.91-2.06(m,1H),2.06-2.14(m,1H),2.77-3.26(m,3H),3.36-3.97(m,1H),4.05-4.17(m,2H),4.92-5.74(m,2H),6.49-6.60(m,2H),6.60-6.65(m,1H),7.47-7.63(m,1H),8.08-8.21(m,1H),8.42-8.51(m,1H),8.70-8.80(m,1H),8.81-8.95(m,1H),10.84-11.39(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值423.2；实测值424.2；Rt＝2.289min。
化合物605：保留时间：15.51min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.95-1.03(m,3H),1.24-1.37(m,1H),1.65-1.76(m,1H),1.79-1.90(m,1H),1.93-2.06(m,1H),2.06-2.15(m,1H),2.75-3.24(m,3H),3.37-3.98(m,1H),4.05-4.12(m,2H),4.86-5.77(m,2H),6.49-6.60(m,2H),6.60-6.64(m,1H),7.45-7.65(m,1H),8.07-8.21(m,1H),8.38-8.51(m,1H),8.68-8.79(m,1H),8.83-8.93(m,1H),10.94-11.31(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值423.2；实测值424.2；Rt＝2.290min。
实施例183.5-(2-(2-(3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-7-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-2-甲氧基烟酰胺(化合物869)的合成
将7-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪(0.2g，860.88μmol)、TEA(871.12mg，8.61mmol，1.20mL)和2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(205.91mg，860.88μmol)溶解于DMF(8.5mL)中且一次性添加HATU(491.00mg，1.29mmol)，将所得混合物在20℃下搅拌3h。将反应混合物倒入到水中且将水相用EtOAc萃取(3次)，然后将合并的有机相用盐水洗涤(3次)，经Na2SO4干燥且在真空下浓缩。通过反相HPLC(2-10min 10-25％MeCN/H2O 30ml/min(装载泵4ml MeCN)；柱：SunFire 100*19mm,5毫米)纯化粗产物，以得到呈白色固体的5-[[2-[(2R,5S)-2-(3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪-7-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(0.052g，114.67μmol，13.32％产率)。所述反应为成功的。分离呈白色固体的所需产物5-[[2-[(2R,5S)-2-(3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪-7-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(0.052g，114.67μmol，13.32％产率)。
化合物869：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.94-1.03(m,3H),1.25-1.34(m,1H),1.62-1.75(m,1H),1.77-1.88(m,1H),1.90-2.04(m,1H),2.06-2.13(m,1H),2.74-3.20(m,1H),3.21-3.25(m,2H),3.36-3.40(m,1H),3.90-3.95(m,3H),4.05-4.13(m,2H),4.91-5.50(m,1H),5.69(s,1H),6.48-6.68(m,3H),7.66-7.79(m,2H),8.39-8.47(m,1H),8.48-8.60(m,1H),10.75-11.21(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值453.2；实测值454.2；Rt＝1.129min。
实施例184.5-(2-(5-甲基-2-(1-氧代异吲哚啉-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物741和化合物740)的合成
步骤1：5-(2-(5-甲基-2-(1-氧代异吲哚啉-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺的合成
将5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]异吲哚啉-1-酮(200.00mg，868.41μmol)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(269.51mg，868.41μmol)、HATU(363.22mg，955.26μmol)和TEA(87.87mg，868.41μmol，121.04μL)混合于DMSO(4mL)中且在20℃下搅拌3h。使反应混合物经历HPLC(2-10min 0-65％ MeCN/水30ml/min(装载泵4ml MeCN)柱：YMC-ACTUS TRIART C18 100*20 5微米)，以得到5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1-氧代异吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(190mg，450.83μmol，51.91％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值421.2；实测值422.2；Rt＝1.884min。
步骤2：手性分离(化合物741和化合物740)
通过手性HPLC(AD(250*30，20mkm)，CO2-MeOH，55-45，90ml/min补充流速-30ml/min)将外消旋-5-(2-((2R,5S)-5-甲基-2-(1-氧代异吲哚啉-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(190mg，450.83mmol)分成对映异构体。
化合物741于分析条件下(柱：AD-H，CO2-MeOH，50-50，2ml/min为流动相)的保留时间为14.43min且化合物740的保留时间为10.20min。
化合物741：保留时间：14.43min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.03(m,3H),1.35(m,1H),1.68(m,1H),1.89(m,1H),2.07(m,1H),2.20(m,1H),2.97(m,1H),3.69(m,1H),4.35(m,2H),5.46(m,1H),7.44(m,1H),7.53(m,1H),7.59(m,1H),7.67(m,1H),8.15(m,1H),8.48(m,2H),8.75(m,1H),8.87(m,1H),11.23(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值421.2；实测值422.2；Rt＝1.981min。
化合物740：保留时间：10.20min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.03(m,3H),1.35(m,1H),1.68(m,1H),1.96(m,2H),2.23(m,1H),2.83(m,1H),3.78(m,1H),4.35(m,2H),5.46(m,1H),7.57(m,4H),8.14(m,1H),8.48(m,2H),8.80(m,2H),11.23(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值421.2；实测值422.2；Rt＝1.982min。
实施例185.2-甲氧基-5-(2-(5-甲基-2-(1-氧代异吲哚啉-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物749和化合物750)的合成
步骤1：2-甲氧基-5-(2-(5-甲基-2-(1-氧代异吲哚啉-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺的合成
将5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]异吲哚啉-1-酮(200.00mg，868.41μmol)、2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(295.59mg，868.41μmol)、HATU(363.22mg，955.26μmol)和TEA(87.87mg，868.41μmol，121.04μL)混合于DMSO(4mL)中且在20℃下搅拌3h。使反应混合物经历HPLC(2-10min 45-60％水/MeOH+NH3(装载泵4ml MeOH+NH3)柱：TRIART 100*20 5微米)。获得2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1-氧代异吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(170mg，376.54μmol，43.36％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值451.2；实测值452.2；Rt＝2.251min。
步骤2：手性分离(化合物749和化合物750)
通过手性HPLC(IA，IPA-MeOH，50-50，12ml/min)将外消旋-2-甲氧基-5-(2-((2R,5S)-5-甲基-2-(1-氧代异吲哚啉-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(170mg，376.54mmol)分成对映异构体。
化合物749于分析条件下(柱：IA，IPA-MeOH，50-50，0.6ml/min为流动相)的保留时间为20.24min且化合物750的保留时间为37.82min。
化合物749：保留时间：20.24min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.00-1.04(m,3H),1.26-1.41(m,1H),1.59-1.74(m,1H),1.81-1.94(m,1H),2.04-2.19(m,1H),2.19-2.32(m,1H),2.79-3.27(m,1H),3.47-3.56(m,0.6H),3.89-3.98(m,3H),4.00-4.06(m,0.4H),4.31-4.41(m,2H),5.24-5.70(m,1H),7.39-7.47(m,1H),7.49-7.56(m,1H),7.62-7.68(m,1H),7.68-7.78(m,2H),8.41-8.58(m,3H),10.87-11.15(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值451.2；实测值452.2；Rt＝2.124min。
化合物750：保留时间：37.82min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.00-1.07(m,3H),1.30-1.42(m,1H),1.61-1.71(m,1H),1.82-1.95(m,1H),2.02-2.18(m,1H),2.20-2.31(m,1H),2.78-3.26(m,1H),3.46-3.56(m,0.7H),3.87-3.98(m,3H),4.01-4.05(m,0.3H),4.28-4.42(m,2H),5.25-5.71(m,1H),7.39-7.47(m,1H),7.49-7.55(m,1H),7.62-7.67(m,1H),7.68-7.79(m,2H),8.40-8.60(m,3H),11.01(br s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值451.2；实测值452.2；Rt＝2.134min。
实施例186.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(1-氧代异吲哚啉-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物696和化合物699)的合成
步骤1：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(1-氧代异吲哚啉-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺的合成
将2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(472.35mg，2.26mmol)和TEA(1.76g，17.37mmol，2.42mL)溶解于DMF(12mL)中且冷却至0℃，添加HATU(990.59mg，2.61mmol)且将混合物在0℃下搅拌15min。添加5-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]异吲哚啉-1-酮(0.4g，1.74mmol)且将混合物升温至室温且搅拌3h。添加乙酸乙酯且将有机相用盐水洗涤三次。将有机相经Na2SO4干燥，过滤且在45℃下在真空中浓缩，以得到粗产物，其通过HPLC(2-10min 60-80％ MeOH/H2O30ml/min(装载泵4ml MeOH)柱：SunFire 100*19mm，5微米)进行纯化，以得到N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1-氧代异吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.049g，116.25μmol，6.69％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值421.2；实测值422.2；Rt＝0.967min。
步骤2：手性分离(化合物696和化合物699)
使用柱：Chiralpak IB(250*30mm，5mkm)；流动相：CO2-MeOH 70-30流速：80mL/min进行手性分离，以得到N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1-氧代异吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.016g，37.96μmol，32.65％产率)和N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1-氧代异吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(15.7mg，37.25μmol，32.04％产率)。
化合物699于分析条件下(柱：IB，以CO2-MeOH，70-30，2ml/min为流动相)的保留时间为28.36min且化合物696的保留时间为14.52min。
化合物699：保留时间：28.36min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.06(m,6H),1.33(m,1H),1.65(m,1H),1.87(m,1H),2.06(m,1H),2.23(m,1H),2.36(m,1H),2.40(m,1H),2.77(m,1H),3.76(m,1H),4.35(m,2H),5.52(m,3H),7.46(m,3H),7.66(m,1H),8.01(m,1H),8.50(s,1H),10.50(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值421.2；实测值422.2；Rt＝0.859min。
化合物696：保留时间：14.52min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.05(m,6H),1.34(m,1H),1.65(m,1H),1.87(m,1H),2.06(m,1H),2.24(m,1H),2.36(m,2H),2.78(m,1H),3.76(m,1H),4.35(m,2H),5.52(m,3H),7.46(m,3H),7.65(m,1H),8.02(m,1H),8.51(s,1H),10.51(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值421.2；实测值422.2；Rt＝0.864min。
实施例187.5-(2-(5-甲基-2-(4-(噻唑-5-基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物821和化合物817)的合成
步骤1：5-(2-(5-甲基-2-(4-(噻唑-5-基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺的合成
将DIPEA(331.50mg，2.56mmol，446.77μL)添加到相应2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(0.18g，732.84μmol，HCl)和5-[4-(5-甲基-2-哌啶基)苯基]噻唑(189.35mg，732.84μmol)于DMF(10mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU(306.51mg，806.12μmol)。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC(Waters Sunfire C1820*100 5mkm柱且以MeCN为洗脱液混合物)，以得到5-[[2-[5-甲基-2-(4-噻唑-5-基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.18g，400.42μmol，54.64％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值449.2；实测值450.2；Rt＝2.576min。
步骤6：手性分离(化合物817和化合物821)
通过手性HPLC(IC-II(250*20，5mkm)，IPA-MeOH，50-50，10ml/min)将5-(2-(5-甲基-2-(4-(噻唑-5-基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(185mg，411.55mmol)分成对映异构体。
化合物817于分析条件下(柱：IC，以CO2-MeOH，50-50，2ml/min为流动相)的保留时间为25.94min且化合物821的保留时间为56.45min。
化合物817：保留时间：25.94min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.00-1.05(m,3H),1.32-1.41(m,1H),1.63-1.73(m,1H),1.85-1.96(m,1H),2.04-2.17(m,1H),2.20-2.30(m,1H),2.77-3.26(m,1H),3.47-4.08(m,1H),5.15-5.69(m,1H),7.36-7.44(m,2H),7.55-7.63(m,1H),7.66-7.73(m,2H),8.10-8.20(m,1H),8.28-8.33(m,1H),8.45-8.52(m,1H),8.71-8.81(m,1H),8.82-8.93(m,1H),9.04-9.09(m,1H),11.21-11.34(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值449.2；实测值450.2；Rt＝2.573min。
化合物821：保留时间：56.45min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.00-1.05(m,3H),1.33-1.40(m,1H),1.64-1.72(m,1H),1.84-1.94(m,1H),2.03-2.15(m,1H),2.22-2.32(m,1H),2.79-3.27(m,1H),3.47-4.08(m,1H),5.14-5.64(m,1H),7.35-7.45(m,2H),7.56-7.66(m,1H),7.66-7.77(m,2H),8.10-8.22(m,1H),8.25-8.35(m,1H),8.41-8.55(m,1H),8.71-8.81(m,1H),8.82-8.93(m,1H),9.02-9.11(m,1H),11.18-11.33(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值449.2；实测值450.2；Rt＝2.573min。
实施例188.2-甲氧基-5-(2-(5-甲基-2-(4-(噻唑-5-基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物830和化合物842)的合成
步骤1：2-甲氧基-5-(2-(5-甲基-2-(4-(噻唑-5-基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺的合成
将DIPEA(187.58mg，1.45mmol，252.80μL)添加到相应5-[4-(5-甲基-2-哌啶基)苯基]噻唑(0.15g，580.54μmol)和2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(138.86mg，580.54μmol)于DMF(10mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU(242.81mg，638.59μmol)。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC(Waters SunfireC18 20*100 5mkm柱且以MeCN为洗脱液混合物)，以得到2-甲氧基-5-[[2-[5-甲基-2-(4-噻唑-5-基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(187.1mg，390.16μmol，67.21％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值479.2；实测值480.2；Rt＝2.929min。
步骤2：手性分离(化合物830和化合物842)
通过手性HPLC(AS(250*20mm，5mkm)，CO2-MeOH，55-45，50mL/min)将2-甲氧基-5-[[2-[5-甲基-2-(4-噻唑-5-基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(187.1mg，390.16mmol)分成对映异构体。
化合物830于分析条件下(柱：AS-H，CO2-MeOH，55-45，2ml/min为流动相)的保留时间为5.64min且化合物842的保留时间为7.27min。
化合物830：保留时间：5.64min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.00-1.05(m,3H),1.30-1.40(m,1H),1.63-1.71(m,1H),1.83-1.92(m,1H),2.03-2.15(m,1H),2.20-2.28(m,1H),2.77-3.27(m,1H),3.45-4.05(m,4H),5.15-5.62(m,1H),7.35-7.43(m,2H),7.65-7.72(m,3H),7.72-7.75(m,1H),8.26-8.33(m,1H),8.41-8.48(m,1H),8.48-8.58(m,1H),9.03-9.10(m,1H),10.98-11.08(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值479.2；实测值480.2；Rt＝1.299min。
化合物842：保留时间：7.27min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99-1.04(m,3H),1.28-1.38(m,1H),1.59-1.72(m,1H),1.82-1.95(m,1H),2.00-2.15(m,1H),2.19-2.28(m,1H),2.76-3.26(m,1H),3.45-4.05(m,4H),5.15-5.63(m,1H),7.36-7.43(m,2H),7.65-7.76(m,4H),8.28-8.32(m,1H),8.40-8.48(m,1H),8.48-8.58(m,1H),9.03-9.08(m,1H),10.99-11.08(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值479.2；实测值480.2；Rt＝1.297min。
实施例189.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(4-(噻唑-5-基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物827和化合物841)的合成
步骤1：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(4-(噻唑-5-基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺的合成
将DIPEA(231.67mg，1.79mmol，312.23μL)添加到相应2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(0.15g，717.01μmol)和5-[4-(5-甲基-2-哌啶基)苯基]噻唑(185.26mg，717.01μmol)于DMF(10mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU(299.89mg，788.71μmol)。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC(Waters Sunfire C1820*100 5mkm柱且以MeCN为洗脱液混合物)，以得到N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[5-甲基-2-(4-噻唑-5-基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(140mg，311.41μmol，43.43％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值449.2；实测值450.2；Rt＝0.948min。
步骤2：手性分离(化合物841和化合物827)
通过手性HPLC(OD-H(250*30mm，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，75-15-15，28mL/min)将N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[5-甲基-2-(4-噻唑-5-基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(140mg，311.46mmol)分成对映异构体。
化合物841于分析条件下(柱：IB，以CO2-MeOH，70-30，2ml/min为流动相)的保留时间为17.44min且化合物827的保留时间为13.86min。
化合物841：保留时间：17.44min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99-1.02(m,3H),1.04-1.13(m,3H),1.29-1.38(m,1H),1.59-1.71(m,1H),1.80-1.94(m,1H),1.97-2.14(m,1H),2.16-2.27(m,1H),2.31-2.35(m,1H),2.38-2.41(m,1H),2.71-3.25(m,1H),3.42-4.06(m,1H),5.13-5.69(m,3H),7.32-7.51(m,3H),7.64-7.73(m,2H),7.97-8.09(m,1H),8.24-8.33(m,1H),9.04-9.79(m,1H),10.47-10.57(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值449.2；实测值450.2；Rt＝1.082min。
化合物827：保留时间：13.86min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99-1.02(m,3H),1.04-1.12(m,3H),1.26-1.40(m,1H),1.59-1.69(m,1H),1.81-1.92(m,1H),1.98-2.14(m,1H),2.16-2.29(m,1H),2.29-2.35(m,1H),2.38-2.41(m,1H),2.69-3.26(m,1H),3.42-4.04(m,1H),5.10-5.68(m,3H),7.31-7.52(m,3H),7.61-7.73(m,2H),7.95-8.07(m,1H),8.24-8.34(m,1H),9.06(s,1H),10.45-10.55(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值449.2；实测值450.2；Rt＝1.088min。
实施例190.乙酸4-(1-(2-((5-氨基甲酰基吡啶-3-基)氨基)-2-氧代乙酰基)-5-甲基哌啶-2-基)苯酯(化合物599和化合物604)的合成
步骤1：乙酸4-(1-(2-((5-氨基甲酰基吡啶-3-基)氨基)-2-氧代乙酰基)-5-甲基哌啶-2-基)苯酯的合成
将2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(291.36mg，1.19mmol，HCl)和TEA(1.20g，11.86mmol，1.65mL)溶解于DMF(12mL)中且冷却至0℃，添加HATU(676.55mg，1.78mmol)且将混合物在0℃下搅拌15min。添加乙酸[4-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]苯]酯(0.32g，1.19mmol，HCl)且将混合物升温至室温且搅拌3h。添加10ml乙酸乙酯且将有机相用盐水洗涤三次。将有机相经Na2SO4干燥，过滤且在45℃下在真空中浓缩，以得到粗产物，其通过HPLC(2-10min35-60％ MeOH，30ml/min(装载泵4ml MeOH)柱：SunFire 100*19mm，5微米)进行纯化，以得到乙酸[4-[(2S,5R)-1-[2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酰基]-5-甲基-2-哌啶基]苯]酯(0.101g，237.96μmol，20.06％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值424.2；实测值425.2；Rt＝1.181min。
步骤2：手性分离(化合物604和化合物599)
使用柱：Chiralpak IB(250*20mm，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH 60-20-20；流速：13mL/min进行手性分离，以得到乙酸[4-[(2S,5R)-1-[2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酰基]-5-甲基-2-哌啶基]苯]酯(0.051g，120.16μmol，51.00％产率)和乙酸[4-[(2R,5S)-1-[2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酰基]-5-甲基-2-哌啶基]苯]酯(0.048g，113.09μmol，48.00％产率)。
化合物604于分析条件下(柱：IB，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min为流动相)的保留时间为11.42min且化合物599的保留时间为15.56min。
化合物604：保留时间：11.42min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99-1.05(m,3H),1.29-1.39(m,1H),1.63-1.71(m,1H),1.83-1.94(m,1H),1.99-2.13(m,1H),2.13-2.23(m,1H),2.23-2.26(m,3H),2.72-3.23(m,1H),3.46-4.05(m,1H),5.13-5.60(m,1H),7.08-7.16(m,2H),7.30-7.41(m,2H),7.53-7.65(m,1H),8.09-8.20(m,1H),8.40-8.51(m,1H),8.67-8.80(m,1H),8.81-8.92(m,1H),11.17-11.30(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值424.2；实测值425.2；Rt＝2.373min。
化合物599：保留时间：15.56min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99-1.04(m,3H),1.25-1.41(m,1H),1.60-1.75(m,1H),1.79-1.97(m,1H),2.00-2.15(m,1H),2.15-2.23(m,1H),2.23-2.25(m,3H),2.73-3.27(m,1H),3.45-4.06(m,1H),5.15-5.58(m,1H),7.10-7.16(m,2H),7.33-7.41(m,2H),7.53-7.65(m,1H),8.10-8.20(m,1H),8.39-8.50(m,1H),8.72-8.79(m,1H),8.83-8.91(m,1H),11.13-11.29(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值424.2；实测值425.2；Rt＝2.372min。
实施例191.rel-5-[[2-[(2S,5R)-2-(7-氟-1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物663)和rel-5-[[2-[(2R,5S)-2-(7-氟-1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物680)的合成
步骤1：外消旋-5-[[2-[2-(7-氟-1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
将7-氟-5-(5-甲基-2-哌啶基)-1H-吲唑(0.180g，771.59μmol)溶解于DMF(6mL)中且添加三乙胺(780.77mg，7.72mmol，1.08mL)，随后添加2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(159.42mg，649.07μmol，HCl)。然后逐滴添加HATU(440.07mg，1.16mmol)且将反应混合物搅拌过夜。在真空中浓缩反应混合物且通过HPLC(2-10min 50-60％甲醇/H2O30mL/min(装载泵4mL甲醇)柱：SunFire100*19mm，5微米)纯化残余物，以获得62.9mg。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值424.1；实测值425.2；Rt＝1.034min。
步骤2：rel-5-[[2-[(2S,5R)-2-(7-氟-1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物663)和rel-5-[[2-[(2R,5S)-2-(7-氟-1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物680)的合成
对外消旋-5-[[2-[2-(7-氟-1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.0629g，148.20μmol)进行手性分离(柱：Chiralpak AD-H(250*20mm，5mkm)；流动相：CO2-MeOH，50-50；流速：45mL/min；柱温：40℃；波长：215nm。保留时间(异构体B)＝6.48min)，以获得化合物680rel-5-[[2-[(2R,5S)-2-(7-氟-1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.022g，51.83μmol，34.98％产率)和
化合物680：1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.03(m,3H),1.35(m,1H),1.74(m,1H),1.88(m,1H),2.11(m,1H),2.27(m,1H),2.96(m,1H),3.75(m,1H),5.44(m,1H),7.17(m,1H),7.57(m,2H),8.14(m,2H),8.47(m,1H),8.75(m,1H),8.86(m,1H),11.26(m,1H),13.59(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值424.2；实测值425.0；Rt＝1.055min。
化合物663：1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.03(m,3H),1.35(m,1H),1.77(m,1H),1.89(m,1H),2.11(m,1H),2.27(m,1H),2.82(m,1H),3.75(m,1H),5.44(m,1H),7.17(m,1H),7.57(m,2H),8.12(m,1H),8.17(m,1H),8.47(m,1H),8.75(m,1H),8.86(m,1H),11.26(m,1H),13.59(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值424.2；实测值425.2；Rt＝1.055min。
实施例192.外消旋-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-1,3-二氢苯并咪唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物623)的合成
在室温下，向外消旋-5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-二氢苯并咪唑-2-酮(50.4mg，217.91μmol)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(46.02mg，217.91μmol)和三乙胺(110.25mg，1.09mmol，151.86μL)于DMF(1mL)中的搅拌溶液中添加HATU(124.28mg，326.86μmol)。将所得反应混合物在同一温度下搅拌12小时。12小时之后，在减压下浓缩反应混合物。通过HPLC纯化所获得的残余物，以得到呈白色固体的外消旋-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-1,3-二氢苯并咪唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物623，23mg，54.45μmol，24.99％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)0.98-1.05(m,3H),1.28-1.38(m,1H),1.68-1.77(m,1H),1.81-1.94(m,1H),1.96-2.12(m,1H),2.13-2.24(m,1H),2.78-3.25(m,1H),3.43-4.04(m,1H),5.08-5.64(m,1H),6.83-6.96(m,3H),7.47-7.65(m,1H),8.04-8.19(m,1H),8.43-8.52(m,1H),8.69-8.81(m,1H),8.81-8.94(m,1H),10.53-10.62(m,2H),11.13-11.37(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值422.2；实测值423.2；Rt＝1.916min。
实施例193.5-(2-(4-甲基-2-苯基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物442)的合成
向2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(177.07mg，570.55μmol，Et3N盐)于DMF(2mL)中的搅拌溶液中添加HATU(216.94mg，570.55μmol)。将所得混合物在20℃下搅拌10分钟。10分钟之后，添加4-甲基-2-苯基哌啶(0.1g，570.55μmol)。将所得反应混合物在20℃下搅拌12小时。12小时之后，通过HPLC(洗脱液：0.5-6.5min,15-30％,水-乙腈；流速：30mL/min；装载泵：4mL/min；乙腈；柱：SunFire 19x 100mm，5um)纯化粗反应混合物，以获得呈灰白色固体的5-(2-(4-甲基-2-苯基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物442，0.0114g，31.11μmol，5.45％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)0.86(m,4H),1.27(m,1H),1.86(m,1H),2.07(m,2H),3.48(m,1H),5.18(m,1H),7.29(m,6H),7.62(m,1H),8.16(m,1H),8.52(m,1H),8.78(m,1H),8.92(m,1H),11.20(m,1H)
实施例194.LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值366.2；实测值367.0；Rt＝2.951min。外消旋-5-[[2-[(2S,4R)-4-乙基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物497)的合成
在轻微加热下，在剧烈搅拌下，向2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(331.48mg，1.58mmol，Et3N盐)、外消旋-(2S,4R)-4-乙基-2-苯基哌啶(0.3g，1.58mmol)和DIPEA(614.47mg，4.75mmol，828.12μL)于DMF(6mL)中的搅拌溶液中小批量添加HATU(723.12mg，1.90mmol)。完成之后，通过反相HPLC(洗脱液：0.5-6.5min，21％，水-乙腈；流速：30mL/min；装载泵：4mL/min；柱：SunFire19x 100mm，5um)纯化粗反应混合物，以得到外消旋-5-[[2-[(2S,4R)-4-乙基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物497，0.35g，919.99μmol，58.05％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,400MHz):δ(ppm)0.76-0.91(m,3H),1.14-1.42(m,3H),1.54-1.91(m,2H),1.97-2.19(m,2H),3.17-3.31(0.25H),3.42-3.56(m,0.75H),3.77-4.28(m,1H),5.11-5.18(m,1H),7.08-7.30(m,2H),7.30-7.39(m,3H),7.56-7.70(m,1H),8.08-8.24(m,1H),8.27-8.58(m,1H),8.63-8.99(m,2H),10.73-11.31(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值380.2；实测值381.2；Rt＝3.236min。
实施例195.外消旋-5-[[2-[(2R,5S)-2-(3,5-二氟-4-羟基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物560)的合成
向外消旋-2,6-二氟-4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯酚(0.05g，220.02μmol)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(55.22mg，264.03μmol，Et3N盐)和HATU(117.12mg，308.03μmol)于DMSO(1mL)中的搅拌溶液中添加DIPEA(56.87mg，440.04μmol，76.65μL)。将反应混合物在25℃下搅拌16小时。16小时之后，通过反相HPLC(洗脱液：2-10min，90％，MeOH/H2O；流速：30mL/min；装载泵：4mL，MeOH；柱：SunFireC18 100x 19mm，5um)纯化反应混合物，以获得呈米色固体的外消旋-5-[[2-[(2R,5S)-2-(3,5-二氟-4-羟基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物560，0.012g，28.68μmol，13.04％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)0.97-1.02(m,3H),1.23-1.35(m,1H),1.58-1.74(m,1H),1.80-1.93(m,1H),1.94-2.10(m,1H),2.10-2.19(m,1H),2.75-3.24(m,1H),3.40-4.04(m,1H),4.98-5.53(m,1H),6.85-7.02(m,2H),7.51-7.65(m,1H),8.12-8.19(m,1H),8.40-8.52(m,1H),8.68-8.80(m,1H),8.80-8.91(m,1H),11.07-11.49(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值418.2；实测值419.2；Rt＝2.057min。
实施例196.外消旋-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(3-甲基-1H-吲唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物500)的合成
在室温下，将HATU(411.20mg，1.08mmol)分批添加到2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(265.63mg，1.08mmol，HCl)、3-甲基-5-(5-甲基-2-哌啶基)-1H-吲唑(310mg，1.08mmol)和TEA(656.60mg，6.49mmol，904.40μL)于DMF(10mL)中的悬浮液中。将澄清溶液在25℃下搅拌32h且在真空中蒸发溶剂，以得到1g粗材料。使其经历RP-HPLC(柱：SunFireC18 100x19 mm 5um；以40-50％0-6min水-甲醇+FA，流速：30ml/min为流动相)，以得到化合物500外消旋-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(3-甲基-1H-吲唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(150mg，356.75μmol，32.99％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.01-1.07(m,3H),1.30-1.42(m,1H),1.71-1.94(m,2H),1.95-2.25(m,1H),2.28-2.37(m,1H),2.42-2.46(m,3H),2.82-3.27(m,1H),3.36-4.08(m,1H),5.17-5.73(m,1H),7.24-7.36(m,1H),7.39-7.47(m,1H),7.53-7.67(m,2H),8.07-8.21(m,1H),8.42-8.54(m,1H),8.71-8.79(m,1H),8.79-8.95(m,1H),11.14-11.32(m,1H),12.54-12.63(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值420.2；实测值421.2；Rt＝2.640min
实施例197.rel-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(4-噻唑-2-基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物772)和rel-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(4-噻唑-2-基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物783)的合成
步骤1：外消旋-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(4-噻唑-2-基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
向2-[4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]噻唑(315.59mg，1.22mmol)、DIPEA(473.56mg，3.66mmol，638.22μL)和DIPEA(473.56mg，3.66mmol，638.22μL)于DMSO(4mL)中的搅拌溶液中添加HATU(557.30mg，1.47mmol)。将所得反应混合物在25℃下搅拌15h。完成之后，将反应混合物提交至反相HPLC，以得到外消旋-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(4-噻唑-2-基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.12g，266.95μmol，21.86％产率)。
HPLC数据：2-10min 50-60％ R1/H2O，30ml/min(装载泵4ml ACN)，柱：HILIC，5微米
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值449.2；实测值450.2；Rt＝1.171min。
步骤2：rel-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(4-噻唑-2-基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物772)和rel-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(4-噻唑-2-基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物783)的合成
将外消旋-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(4-噻唑-2-基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.12g，266.95μmol)提交至手性分离，以得到呈白色固体的化合物772rel-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(4-噻唑-2-基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.056g，124.58μmol，46.67％产率)和化合物783rel-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(4-噻唑-2-基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.051g，113.45μmol，42.50％产率)。
色谱数据：柱：Сhiralpak IC(250*20，5mkm)，流动相：己烷-IPA-MeOH，50-25-25；流速：12mL/min。24℃，波长：205nm、225nm，保留时间(异构体1(SR))化合物783＝35.4；保留时间(异构体2(RS)化合物772)＝109.9
化合物772：RT(IB，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.6mL/min)＝24.123min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.99-1.05(m,3H),1.33-1.44(m,1H),1.65-1.73(m,1H),1.84-1.97(m,1H),2.07-2.18(m,1H),2.22-2.31(m,1H),2.81-3.27(m,1H),3.48-4.08(m,1H),5.20-5.66(m,1H),7.43-7.51(m,2H),7.55-7.64(m,1H),7.75-7.78(m,1H),7.87-7.93(m,1H),7.93-8.00(m,2H),8.11-8.22(m,1H),8.42-8.54(m,1H),8.70-8.81(m,1H),8.84-8.96(m,1H),11.09-11.34(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值449.2；实测值450.2；Rt＝2.715min。
化合物783：RT(IB，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.6mL/min)＝20.994min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.99-1.06(m,3H),1.29-1.43(m,1H),1.59-1.76(m,1H),1.84-1.96(m,1H),2.04-2.19(m,1H),2.19-2.32(m,1H),2.78-3.27(m,1H),3.48-4.09(m,1H),5.20-5.69(m,1H),7.43-7.53(m,2H),7.54-7.64(m,1H),7.75-7.78(m,1H),7.89-7.92(m,1H),7.92-7.99(m,2H),8.08-8.21(m,1H),8.43-8.53(m,1H),8.69-8.81(m,1H),8.82-8.95(m,1H),11.15-11.43(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值449.2；实测值450.2；Rt＝2.734min。
实施例198.rel-2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(4-噻唑-2-基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物811)和rel-2-甲氧基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(4-噻唑-2-基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物799)的合成
步骤1：外消旋-2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(4-噻唑-2-基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
向外消旋-2-[4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]噻唑(0.15g，580.54μmol)、2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(138.86mg，580.54μmol，三乙胺)和DIPEA(150.06mg，1.16mmol，202.23μL)于DMSO(3mL)中的搅拌溶液中添加HATU(264.89mg，696.65μmol)。将所得反应混合物在25℃下搅拌14h。完成之后，将反应混合物提交至反相HPLC，以得到外消旋-2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(4-噻唑-2-基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.085g，177.25μmol，30.53％产率)。
HPLC：2-10min 50-60％ MeOH/H2O；30mL/min(装载泵4mL MeOH)，柱：SunFireC18,5微米
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值479.2；实测值480.2；Rt＝1.316min。
步骤2：rel-2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(4-噻唑-2-基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物811)和rel-2-甲氧基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(4-噻唑-2-基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物799)的合成
将外消旋-2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(4-噻唑-2-基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.085g，177.25μmol)提交至手性分离，以得到化合物811rel-2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(4-噻唑-2-基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.034g，70.90μmol，40.00％产率)和化合物799rel-2-甲氧基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(4-噻唑-2-基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.034g，70.90μmol，40.00％产率)。
分离数据：Chiralpak IB 250*20，5-II己烷-IPA-MeOH，70-15-15，15mL/min；Rt1＝23.43min；Rt2＝30.94min
化合物811：RT(IB，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝17.214min。
1H NMR(dmso,600MHz):δ(ppm)0.97-1.05(m,3H),1.31-1.41(m,1H),1.64-1.72(m,1H),1.83-1.94(m,1H),2.04-2.17(m,1H),2.19-2.29(m,1H),2.80-3.26(m,1H),3.46-3.54(m,0.6H),3.89-3.99(m,3H),4.01-4.07(m,0.4H),5.20-5.69(m,1H),7.40-7.51(m,2H),7.66-7.76(m,2H),7.76-7.78(m,1H),7.88-7.92(m,1H),7.92-8.00(m,2H),8.36-8.68(m,2H),10.87-11.31(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值479.2；实测值480.2；Rt＝2.983min。
化合物799：RT(IB，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝13.684min。
1H NMR(dmso,600MHz):δ(ppm)1.00-1.08(m,3H),1.31-1.43(m,1H),1.63-1.74(m,1H),1.81-1.94(m,1H),2.02-2.17(m,1H),2.20-2.29(m,1H),2.79-3.26(m,1H),3.47-3.54(m,0.6H),3.87-3.97(m,3H),4.01-4.06(m,0.4H),5.19-5.71(m,1H),7.41-7.50(m,2H),7.67-7.75(m,2H),7.76-7.79(m,1H),7.88-7.92(m,1H),7.92-8.00(m,2H),8.41-8.60(m,2H),10.87-11.23(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值479.2；实测值480.2；Rt＝2.983min。
实施例199.5-[[2-[(2R,5R)-5-甲基-2-(5-甲基-2-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物880)和5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(5-甲基-2-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物937)的合成
将2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(195.72mg，630.64μmol，N(C2H5)3)、5-甲基-2-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶(120mg，630.64μmol)、HATU(263.77mg，693.70μmol)和TEA(70.20mg，693.70μmol，96.69μL)混合于DMSO(2mL)中且在20℃下搅拌2h。使反应混合物经历HPLC。
HPLC数据：2-10min 20-45％ MeCN/H2O+TFA 30mL/min(装载泵4mL MeCN)柱：SunFire 100*19mm，5微米
获得5-[[2-[(2R,5R)-5-甲基-2-(5-甲基-2-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(96.7mg，253.52μmol，40.20％产率)(顺式，淡棕色，固体)。通过2DHNMR确认顺式构型(化合物880，H2359620)
获得5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(5-甲基-2-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(44.7mg，117.19μmol，18.58％产率)(反式)。通过2D HNMR确认反式构型(化合物937，H2359619)
化合物880：1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)0.76(dd,3H),1.03(m,1H),1.70(m,3H),2.27(m,3H),2.68(m,2H),3.96(dd,1H),5.40(m,1H),7.27(dd,1H),7.61(m,2H),8.14(d,1H),8.46(m,2H),8.75(dd,1H),8.86(dd,1H),11.21(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值381.2；实测值382.2；Rt＝1.971min。
化合物937：1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.02(t,3H),1.32(m,1H),1.61(m,1H),1.91(m,2H),2.27(m,3H),2.41(m,2H),2.86(m,1H),3.77(dd,1H),5.38(m,1H),7.29(dd,1H),7.59(m,1H),7.66(m,1H),8.14(m,1H),8.41(m,1H),8.47(m,1H),8.75(m,1H),8.87(m,1H),11.19(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值381.2；实测值382.0；Rt＝1.831min。
实施例200.2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5R)-5-甲基-2-(5-甲基-2-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物886)和2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(5-甲基-2-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物932)的合成
将2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(214.65mg，630.64μmol，N(C2H5)3)、5-甲基-2-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶(120mg，630.64μmol)、HATU(263.77mg，693.70μmol)和TEA(70.20mg，693.70μmol，96.69μL)混合于DMSO(2mL)中且在20℃下搅拌2h。使反应混合物经历HPLC。
HPLC数据：2-10min 20-45％ MeCN/H2O+TFA 30mL/min(装载泵4mL MeCN)柱：SunFire 100*19mm，5微米
获得2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5R)-5-甲基-2-(5-甲基-2-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(101.7mg，247.17μmol，39.19％产率)。通过2D HNMR确认顺式构型(化合物886，H2359596)
获得2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(5-甲基-2-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(36.2mg，87.98μmol，13.95％产率)。通过2D HNMR确认反式构型(化合物932，H2359618)
化合物886：1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)0.75(dd,3H),1.02(m,1H),1.62(m,2H),1.79(m,1H),2.27(m,3H),2.69(m,2H),3.93(m,4H),5.40(m,1H),7.25(dd,1H),7.62(m,1H),7.71(m,2H),8.44(m,2H),8.53(dd,1H),11.01(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值411.2；实测值412.2；Rt＝2.337min。
化合物932：1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.01(m,3H),1.31(m,1H),1.62(m,1H),1.95(m,2H),2.27(m,3H),2.41(m,1H),2.72(m,1H),3.78(m,4H),5.37(m,1H),7.27(m,1H),7.69(m,3H),8.48(m,3H),10.98(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值411.2；实测值412.0；Rt＝2.194min。
实施例201.rel-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物1029)和rel-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物1023)的合成
步骤1：外消旋-5-[[2-[5-甲基-2-[2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
将外消旋-2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(269.87mg，1.10mmol，HCl)和5-(5-甲基-2-哌啶基)-2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑(0.33g，1.10mmol)混合于DMF(15mL)中。将反应悬浮液冷却至0℃且添加HATU(459.55mg，1.21mmol)，随后添加TEA(222.36mg，2.20mmol，306.29μL)，且在环境温度下搅拌12h。将反应混合物在真空中蒸发且通过制备型(60-80％0-5min H2O/MeOH/0.1％ NH4OH，流速：30mL/min)纯化0.46g所获得的粗产物，以得到产物外消旋-5-[[2-[5-甲基-2-[2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.210g，427.28μmol，38.89％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值491.2；实测值492.2；Rt＝3.092min。
步骤2：rel-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物1029)和rel-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物1023)的合成
使外消旋-5-[[2-[5-甲基-2-[2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.210g，427.28μmol)经历手性HPLC纯化(柱：ChiralArt YMC(250*20，5um)，洗脱液：己烷-IPA-MeOH，50-25-25，流速：14mL/min)，以得到两种个别对映异构体化合物1029rel-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.0696g，141.61μmol，33.14％产率)和化合物1023rel-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.0876g，178.24μmol，41.71％产率)。
化合物1029：RT(IC，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝18.399min。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值491.2；实测值492.0；Rt＝1.224min。
化合物1023：RT(IC，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝34.083min。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值491.2；实测值492.0；Rt＝1.224min。
实施例202.rel-2-甲氧基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物1030)和rel-2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物1024)的合成
步骤1：外消旋-2-甲氧基-5-[[2-[5-甲基-2-[2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
将2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(238.91mg，998.86μmol)和外消旋-5-(5-甲基-2-哌啶基)-2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑(0.30g，998.86μmol)混合于DMF(15mL)。将反应悬浮液冷却至0℃且添加HATU(417.78mg，1.10mmol)，随后添加TEA(202.15mg，2.00mmol，278.44μL)，且在环境温度下搅拌12h。将反应混合物在真空中蒸发且通过制备型(55-90％0-5min H2O/MeOH/0.1％ NH4OH，流速：30mL/min)纯化0.39g所获得的粗产物，以得到产物外消旋-2-甲氧基-5-[[2-[5-甲基-2-[2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.1596g，306.03μmol，30.64％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值521.2；实测值522.2；Rt＝3.608min。
步骤2：rel-2-甲氧基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物1030)和rel-2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物1024)的合成
使外消旋-2-甲氧基-5-[[2-[5-甲基-2-[2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.1596g，306.03μmol)经历手性HPLC纯化(柱：ChiralPac IC(250*20，5um)，洗脱液：己烷-IPA-MeOH，60-20-20，流速：15mL/min)，以得到两种个别对映异构体化合物1030rel-2-甲氧基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.0521g，99.90μmol，32.64％产率)和化合物1024rel-2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.0575g，110.26μmol，36.03％产率)。
化合物1030：RT(IC，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝19.034min。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值521.0；实测值522.0；Rt＝3.459min。
化合物1024：RT(IC，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝29.406min。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值521.0；实测值522.0；Rt＝3.459min。
实施例203.rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1027)和rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1022)的合成
步骤1：外消旋-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[5-甲基-2-[2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
将2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(208.96mg，998.86μmol)和外消旋-5-(5-甲基-2-哌啶基)-2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑(0.3g，998.86μmol)混合于DMF(15mL)中。将反应悬浮液冷却至0℃且添加HATU(417.78mg，1.10mmol)，随后添加TEA(202.15mg，2.00mmol，278.44μL)，且在环境温度下搅拌12h。将反应混合物在真空中蒸发且通过制备型(65-85％0-5min H2O/MeOH/0.1％ NH4OH，流速：30mL/min)纯化0.39g所获得的粗产物，以得到产物外消旋-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[5-甲基-2-[2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(227.20mg，462.23μmol，46.28％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值491.2；实测值492.2；Rt＝2.992min。
步骤2：rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1027)和rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1022)的合成
使外消旋-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[5-甲基-2-[2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(227.20mg，462.23μmol)经历手性HPLC纯化(柱：ChiralArt YMC(250*20，5um)，洗脱液：己烷-IPA-MeOH，50-25-25，流速：14mL/min)，以得到两种个别对映异构体化合物1027rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.0675g，137.33μmol，29.71％产率)和化合物1022rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.0795g，161.74μmol，34.99％产率)。
化合物1027：RT(IC，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝12.813min。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值491.0；实测值492.0；Rt＝1.146min。
化合物1022：RT(IC，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝20.716min。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值491.0；实测值492.2；Rt＝3.364min。
实施例204.5-(2-(5-甲基-2-(1H-噻吩并[3,2-c]吡唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物868和化合物873)的合成
在轻微加热下，将2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(236.26mg，1.13mmol)、5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1H-噻吩并[3,2-c]吡唑(0.25g，1.13mmol)和DIPEA(437.96mg，3.39mmol，590.24μL)溶解于DMSO(6mL)中。在剧烈搅拌和偶尔加热下，小批量添加HATU(515.40mg，1.36mmol)。反应完成之后，通过HPLC(39％0.5-6.5min水-MeOH；流速30ml/min(装载泵4ml/min MeOH)；目标质量412；柱SunFireC18 100x19mm 5um(R))纯化混合物，以得到外消旋产物。在手性HPLC(IA-I(250*20,5mkm),己烷-IPA-MeOH,50-25-25,12ml/min)后，获得5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1H-噻吩并[3,2-c]吡唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(29mg，70.31μmol，6.22％产率)和5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-噻吩并[3,2-c]吡唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(29mg，70.31μmol，6.22％产率)。
化合物868于分析条件下(柱：IA，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min为流动相)的保留时间为37.50min且化合物873的保留时间为54.49min。
化合物868：保留时间：37.50min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.97-1.03(m,3H),1.35-1.49(m,1H),1.82-2.01(m,2H),2.04-2.20(m,2H),2.96-3.02(m,0.4H),3.39-3.43(m,0.6H),3.45-4.14(m,1H),5.46-5.89(m,1H),6.98-7.20(m,1H),7.55-7.66(m,1H),7.68-8.02(m,1H),8.10-8.23(m,1H),8.44-8.52(m,1H),8.71-8.94(m,2H),11.19-11.32(m,1H),12.93-13.36(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值412.2；实测值413.2；Rt＝1.676min。
化合物873：保留时间：54.49min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.95-1.02(m,3H),1.39-1.48(m,1H),1.81-1.98(m,2H),2.05-2.24(m,2H),2.96-3.02(m,0.4H),3.37-3.43(m,0.6H),3.43-4.14(m,1H),5.43-5.91(m,1H),7.00-7.15(m,1H),7.54-7.65(m,1H),7.66-8.01(m,1H),8.11-8.21(m,1H),8.49(s,1H),8.70-8.94(m,2H),11.11-11.39(m,1H),12.79-13.38(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值412.2；实测值413.2；Rt＝1.700min。
实施例205.2-甲氧基-5-(2-(5-甲基-2-(1H-噻吩并[3,2-c]吡唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物1006和化合物952)的合成
在轻微加热下，将5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1H-噻吩并[3,2-c]吡唑(300.79mg，1.36mmol)、2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(325.07mg，1.36mmol)和DIPEA(526.94mg，4.08mmol，710.16μL)溶解于DMSO(6mL)中。在剧烈搅拌和偶尔加热下，小批量添加HATU(620.11mg，1.63mmol)。反应完成之后，通过HPLC(46％0.5-6.5min水-MeOH；流速30ml/min(装载泵4ml/min MeOH)；目标质量442；柱SunFireC18 100x19mm 5um(R))纯化混合物，以得到外消旋产物。在手性HPLC(Chiral ARTCellulose-SC(250*20，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，12ml/min)之后，分离呈光学纯形式但具有未知杂质的异构体2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-噻吩并[3,2-c]吡唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(40mg，90.40μmol，6.65％产率)；通过HPLC(18％0.5-6.5min水-MeCN；流速30ml/min(装载泵4ml/min MeCN)；目标质量442；柱SunFireC18 100x19 mm 5um(R))纯化，以得到纯产物。分离具有相应顺式杂质的异构体2-甲氧基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1H-噻吩并[3,2-c]吡唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(53mg，119.78μmol，8.81％产率)且通过手性HPLC(Chiralcel OJ-H(250*20mm，5mkm)；流动相：IPA-MeOH，50-50，流速：10mL/min；柱温：24℃；波长：205nm、254nm、306nm)，保留时间(异构体A)＝21.24min；保留时间(异构体B)＝29.74min)纯化，以得到纯产物2-甲氧基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1H-噻吩并[3,2-c]吡唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(53mg，119.78μmol，8.81％产率)。
化合物1006于分析条件下(柱：IC，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min为流动相)的保留时间为74.26min且化合物952的保留时间为31.77min。
化合物1006：保留时间：74.26min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.95-1.06(m,3H),1.37-1.48(m,1H),1.84-1.99(m,2H),2.03-2.22(m,2H),2.94-3.01(m,0.4H),3.39-3.44(m,0.6H),3.47-3.52(m,0.6H),3.91-3.97(m,3H),4.03-4.08(m,0.4H),5.42-5.88(m,1H),7.00-7.10(m,1H),7.68-7.75(m,2H),7.80(br s,1H),8.44-8.50(m,1H),8.52-8.57(m,1H),11.01(br s,1H),13.06(brs,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值442.2；实测值443.2；Rt＝2.428min。
化合物952：保留时间：31.77min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98-1.02(m,3H),1.37-1.46(m,1H),1.82-1.98(m,2H),2.05-2.20(m,2H),2.92-3.42(m,1H),3.47-4.06(m,4H),5.45-5.86(m,1H),6.97-7.15(m,1H),7.63-8.04(m,3H),8.41-8.51(m,1H),8.51-8.57(m,1H),11.05(s,1H),12.93-13.34(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值442.2；实测值443.2；Rt＝2.430min。
实施例206.5-(2-(5-甲基-2-(1H-噻吩并[2,3-c]吡唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物971和化合物943)的合成
在轻微加热下，将2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(284.26mg，1.36mmol)、5-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]-2H-噻吩并[2,3-c]吡唑(300.79mg，1.36mmol)和DIPEA(526.94mg，4.08mmol，710.16μL)溶解于DMSO(6mL)中。在剧烈搅拌和偶尔加热下，小批量添加HATU(620.11mg，1.63mmol)。反应完成之后，通过HPLC(40-90％0.5-6.5min水-MeOH；流速30ml/min；(装载泵4ml/min MeOH)；目标质量498；柱SunFireC18 100x19 mm 5um(L))和手性HPLC(Chiralpak IA-II(250*30，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，12ml/min)纯化混合物，以得到5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1H-噻吩并[2,3-c]吡唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(55mg，133.34μmol，9.81％产率)、和5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-噻吩并[2,3-c]吡唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(90mg，218.20μmol，16.06％产率)、和5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1H-噻吩并[2,3-c]吡唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(55mg，133.34μmol，9.81％产率)。
化合物971于分析条件下(柱：IA，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min为流动相)的保留时间为81.55min且化合物943的保留时间为41.81min。
化合物971：保留时间：81.55min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.01(d,3H),1.41(m,1H),1.89(m,2H),2.17(m,2H),3.12(m,1H),4.02(m,1H),5.65(m,1H),6.95(s,1H),7.58(d,1H),7.94(bds,1H),8.13(d,1H),8.49(s,1H),8.77(s,1H),8.89(s,1H),11.23(bds,1H),13.29(bds,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值412.2；实测值413.2；Rt＝2.028min。
化合物943：保留时间：41.81min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.02(d,3H),1.42(m,1H),1.95(m,2H),2.07(m,2H),3.12(m,1H),4.05(m,1H),5.65(m,1H),6.95(s,1H),7.60(d,1H),7.94(bds,1H),8.13(d,1H),8.49(s,1H),8.77(s,1H),8.89(s,1H),11.23(bds,1H),13.29(bds,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值412.2；实测值413.2；Rt＝2.020min。
实施例207.2-甲氧基-5-(2-(5-甲基-2-(1H-噻吩并[2,3-c]吡唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物950和化合物968)的合成
在轻微加热下，将2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(325.07mg，1.36mmol)、5-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]-2H-噻吩并[2,3-c]吡唑(300.79mg，1.36mmol)和DIPEA(526.94mg，4.08mmol，710.16μL)溶解于DMSO(6mL)中。在剧烈搅拌和偶尔加热下，小批量添加HATU(620.11mg，1.63mmol)。反应完成之后，通过HPLC(45-50％0.5-6min水-MeOH；流速30ml/min(装载泵4ml/min R1)；目标质量442；柱SunFireC18 100x19 mm 5um(R))纯化混合物且使经纯化的外消旋混合物经历手性HPLC(Chiralcel OD-H(250*30，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，70-15-15,30ml/min)，以得到2-甲氧基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1H-噻吩并[2,3-c]吡唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(210mg，474.59μmol，34.92％产率)、和2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-噻吩并[2,3-c]吡唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(140mg，316.39μmol，23.28％产率)、和2-甲氧基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1H-噻吩并[2,3-c]吡唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(210mg，474.59μmol，34.92％产率)。
化合物950于分析条件下(柱：OD-H，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min为流动相)的保留时间为11.75min且化合物968的保留时间为14.25min。
化合物950：保留时间：11.75min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.01(d,3H),1.40(m,1H),1.89(m,2H),2.04(m,2H),3.12(m,1H),3.92(m,1H),3.94(s,3H),5.65(m,1H),6.95(s,1H),7.73(m,2H),7.93(m,1H),8.46(m,1H),8.55(s,1H),11.02(s,1H),13.30(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值452.2；实测值453.2；Rt＝2.390min。
化合物968：保留时间：14.25min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.01(d,3H),1.42(m,1H),1.89(m,2H),2.05(m,2H),3.12(m,1H),3.86(m,1H),3.94(s,3H),5.65(m,1H),6.95(s,1H),7.73(m,2H),7.93(m,1H),8.46(m,1H),8.55(s,1H),11.02(s,1H),13.30(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值452.2；实测值453.2；Rt＝2.394min。
实施例208.5-(2-(5-甲基-2-(1H-吡唑-3-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物978和化合物1007)的合成
步骤1：5-(2-(5-甲基-2-(1H-吡唑-3-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺的合成
在25℃下，在1h时段内，将HATU(702.48mg，1.85mmol)小批量添加到(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-吡唑-3-基)哌啶(400mg，1.68mmol，2HCl)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(474.41mg，1.93mmol，HCl)和TEA(1.36g，13.44mmol，1.87mL)于DMF(6mL)中的搅拌混合物中。将所得混合物在25℃下搅拌18h，然后提交至反相HPLC(柱：YMC Triart C18100x20 mm，5um；流动相：5-55％0-5min H2O/MeOH；流速：30ml/min(装载泵4ml/min MeOH)，以得到呈淡黄色胶状物的5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-吡唑-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(125mg，350.75μmol，20.88％产率)，将其直接提交至制备型手性HPLC。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值356.2；实测值357.2；Rt＝1.694min。
步骤2：手性分离(化合物978和化合物1007)
将外消旋5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-吡唑-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(125mg，350.75μmol)提交至制备型手性HPLC(柱：Chiralpak IC(250*20，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH，60-20-20；流速：12ml/min，柱温：20℃；波长：205nm、215nm)，以得到化合物1007 5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1H-吡唑-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(28mg，78.57μmol，22.40％产率)(RT＝36.540min)和化合物978 5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-吡唑-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(32mg，89.79μmol，25.60％产率)(RT＝58.232min)。
化合物978于分析条件下(柱：IC，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min为流动相)的保留时间为31.91min且化合物1007的保留时间为22.90min。
化合物978：保留时间：31.91min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.69-0.95(m,3H),1.16-1.40(m,2H),1.54-1.69(m,1H),1.76-2.00(m,3H),2.03-2.12(m,1H),2.73-2.96(m,1H),3.42-3.62(m,1H),6.01-6.34(m,1H),7.24-7.62(m,2H),7.64-7.89(m,1H),8.13-8.20(m,1H),8.46-8.52(m,1H),8.71-8.79(m,1H),11.09-11.19(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值356.2；实测值357.2；Rt＝1.637min。
化合物1007：保留时间：22.90min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.69-0.95(m,3H),1.16-1.40(m,2H),1.54-1.69(m,1H),1.76-2.00(m,3H),2.03-2.12(m,1H),2.73-2.96(m,1H),3.42-3.62(m,1H),6.01-6.34(m,1H),7.24-7.62(m,2H),7.64-7.89(m,1H),8.13-8.20(m,1H),8.46-8.52(m,1H),8.71-8.79(m,1H),11.09-11.19(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值356.2；实测值357.2；Rt＝1.638min。
实施例209.2-(2-(1'H-[1,3'-联吡唑]-3-基)-5-甲基哌啶-1-基)-N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺(化合物931和化合物913)的合成
步骤1：2-(2-(1'H-[1,3'-联吡唑]-3-基)-5-甲基哌啶-1-基)-N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺的合成
在25℃下，在1.5h时段内，将HATU(798.01mg，2.10mmol)小批量添加到(2R,5S)-5-甲基-2-[1-(1H-吡唑-3-基)吡唑-3-基]哌啶(650mg，1.91mmol，3HCl)、2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(399.15mg，1.91mmol)和TEA(1.5g，14.82mmol，2.07mL)于DMF(4.5mL)中的搅拌混合物中。将所得混合物在25℃下搅拌18h，然后提交至反相HPLC(柱：YMC Triart C18 100x20 mm，5um)，流动相：45-55％0-5min H2O/MeOH/0.1％ NH4OH，流速：30ml/min(装载泵4ml/min MeOH)，以得到230mg粗产物，其通过反相HPLC(柱：Chromatorex18SMB100-5T 100x19 mm 5um；流动相：20-70％0-5min H2O/MeOH；流速：30ml/min(装载泵4ml/min MeOH))进行纯化，以得到呈粉色胶状物的N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[1-(1H-吡唑-3-基)吡唑-3-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(64mg，151.49μmol，7.94％产率)，其直接用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值422.2；实测值423.2；Rt＝1.017min。
步骤2：手性分离(化合物931和化合物913)
将外消旋N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[1-(1H-吡唑-3-基)吡唑-3-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(64mg，151.49μmol)提交至制备型手性HPLC(柱Chiralpak AD-H-II(250*20，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH，60-20-20；流速：12ml/min；柱温20℃；波长：230nm、225nm)，以得到化合物913N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[1-(1H-吡唑-3-基)吡唑-3-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(21mg，49.71μmol，32.81％产率)(RT＝26.645min)和化合物931N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[1-(1H-吡唑-3-基)吡唑-3-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(22.6mg，53.49μmol，35.31％产率)(RT＝36.187min)。
化合物931于分析条件下(柱：IC，以己烷-IPA-MeOH，70-15-15，0.6ml/min为流动相)的保留时间为46.80min且化合物913的保留时间为37.45min。
化合物931：保留时间：46.80min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.06(m,6H),1.38(m,1H),1.89(m,3H),2.16(m,1H),2.38(m,2H),2.87(m,1H),3.65(m,1H),5.63(m,3H),6.40(m,2H),7.48(m,1H),7.78(d,1H),8.03(m,1H),8.17(m,1H),10.45(s,1H),12.78(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值422.2；实测值423.2；Rt＝1.947min。
化合物913：保留时间：37.45min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.07(m,6H),1.37(m,1H),1.85(m,1H),1.97(m,2H),2.17(m,1H),2.37(m,2H),2.86(m,1H),3.74(dd,1H),5.63(m,3H),6.40(m,2H),7.48(m,1H),7.78(d,1H),8.03(m,1H),8.17(dd,1H),10.45(s,1H),12.78(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值422.2；实测值423.2；Rt＝1.931min。
实施例210.5-(2-(2-(1'H-[1,3'-联吡唑]-3-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-2-甲氧基烟酰胺(化合物894和化合物881)的合成
步骤1：5-(2-(2-(1'H-[1,3'-联吡唑]-3-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-2-甲氧基烟酰胺的合成
在25℃下，在1.5h时段内，将HATU(798.01mg，2.10mmol)小批量添加到(2R,5S)-5-甲基-2-[1-(1H-吡唑-3-基)吡唑-3-基]哌啶(650mg，1.91mmol，3HCl)、2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(456.35mg，1.91mmol)和TEA(1.5g，14.82mmol，2.07mL)于DMF(4.5mL)中的搅拌混合物中。将所得混合物在25℃下搅拌18h，然后提交至反相HPLC(柱：YMC Triart C18 100x20 mm，5um)，流动相：40-65％0-5min H2O/MeOH/0.1％NH4OH，流速：30ml/min(装载泵4ml/min MeOH)，得到呈淡黄色胶状物的2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[1-(1H-吡唑-3-基)吡唑-3-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(230mg，508.33μmol，26.64％产率)，其直接用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值452.2；实测值453.2；Rt＝2.399min。
步骤2：手性分离(化合物894和化合物881)
将外消旋2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[1-(1H-吡唑-3-基)吡唑-3-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(230mg，508.33μmol)提交至制备型手性HPLC(柱：Chiralpak AD-H III(250*30mm，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH，50-25-25；流速：12ml/min)，以得到化合物894 2-甲氧基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[1-(1H-吡唑-3-基)吡唑-3-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(47.8mg，105.64μmol，20.78％产率)(RT＝21.268min)和化合物881 2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[1-(1H-吡唑-3-基)吡唑-3-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(59.5mg，131.50μmol，25.87％产率)(RT＝29.096min)。
化合物894于分析条件下(柱：AD-H，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min为流动相)的保留时间为22.91min且化合物881的保留时间为33.22min。
化合物894：保留时间：22.91min
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.02(d,3H),1.39(m,1H),2.00(m,5H),3.78(m,4H),5.47(dd,1H),6.41(m,2H),7.76(m,3H),8.18(dd,1H),8.53(m,2H),11.01(s,1H),12.79(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值452.2；实测值453.2；Rt＝1.118min。
化合物881：保留时间：33.22min
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.02(d,3H),1.38(m,1H),1.86(m,1H),2.10(m,3H),3.78(m,5H),5.48(dd,1H),6.41(m,2H),7.76(m,3H),8.18(dd,1H),8.47(s,1H),8.54(m,1H),10.99(s,1H),12.80(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值452.2；实测值453.2；Rt＝1.120min。
实施例211.5-(2-(2-(1'H-[1,3'-联吡唑]-3-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物899和化合物882)的合成
步骤1：5-(2-(2-(1'H-[1,3'-联吡唑]-3-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺的合成
在25℃下，在1.5h时段内，将HATU(798.01mg，2.10mmol)小批量添加到(2R,5S)-5-甲基-2-[1-(1H-吡唑-3-基)吡唑-3-基]哌啶(650mg，1.91mmol，3HCl)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(468.63mg，1.91mmol，HCl)和TEA(1.5g，14.82mmol，2.07mL)于DMF(4.5mL)中的搅拌混合物中。将所得混合物在25℃下搅拌18h，然后提交至反相HPLC(柱：YMC Triart C18 100x20 mm，5um；流动相：25-50％0-5min H2O/MeOH/0.1％ NH4OH，流速：30ml/min(装载泵4ml/min MeOH)，以得到呈淡黄色胶状物的5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[1-(1H-吡唑-3-基)吡唑-3-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(56mg，132.56μmol，6.95％产率)，其直接用于下一步骤中(将所有3种级分提交至制备型手性HPLC)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值422.2；实测值423.2；Rt＝2.060min。
步骤2：手性分离(化合物899和化合物882)
将外消旋5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[1-(1H-吡唑-3-基)吡唑-3-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(56mg，132.56μmol)提交至制备型手性HPLC(Chiralcel OJ-H-I(250*20，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH，50-25-25；流速：12mL/min；柱温：24℃；波长：205nm、215nm)，以得到化合物899 5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[1-(1H-吡唑-3-基)吡唑-3-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(13.7mg，32.43μmol，24.46％产率)(RT＝14.700min)和化合物8825-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[1-(1H-吡唑-3-基)吡唑-3-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(15.2mg，35.98μmol，27.14％产率)(RT＝33.865min)。
化合物899于分析条件下(柱：OJ-H，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min为流动相)的保留时间为11.87min且化合物882的保留时间为33.79min。
化合物899：保留时间：11.87min
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.03(d,3H),1.40(m,1H),2.02(m,5H),3.68(m,1H),5.48(m,1H),6.40(m,1H),6.45(m,1H),7.60(d,1H),7.79(d,1H),8.17(m,2H),8.50(s,1H),8.76(m,1H),8.88(m,1H),11.22(s,1H),12.79(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值422.2；实测值423.2；Rt＝1.016min。
化合物882：保留时间：33.79min
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.03(d,3H),1.38(m,1H),1.94(m,3H),2.18(m,2H),3.70(m,1H),5.48(dd,1H),6.40(m,1H),6.45(m,1H),7.59(dd,1H),7.79(m,1H),8.18(m,2H),8.50(s,1H),8.75(d,1H),8.88(d,1H),11.19(s,1H),12.80(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值422.2；实测值423.2；Rt＝1.016min。
实施例212.rel-5-[[2-[(2S,5S)-4,4-二氟-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物946)和rel-5-[[2-[(2R,5R)-4,4-二氟-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物974)的合成
步骤1：外消旋-5-[[2-[(2S,5S)-4,4-二氟-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
向5-[(2S,5S)-4,4-二氟-5-甲基-2-哌啶基]-2-甲基吡啶(0.35g，1.55mmol)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(417.93mg，1.70mmol，HCl)和三乙胺(782.63mg，7.73mmol，1.08mL)的溶液中分批添加HATU(705.79mg，1.86mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌12h且通过HPLC(5-5-50％0-1-5min H2O/MeOH/0.1％ NH4OH，流速：30mL/min(装载泵4mL/min甲醇)目标质量417.42柱：YMC Triart C18 100x20 mm，5um)纯化，以获得5-[[2-[(2S,5S)-4,4-二氟-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(170mg，407.27μmol，26.33％产率)。
此化合物不经HNMR即用于手性拆分。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值417.2；实测值418.2；Rt＝1.295min。
步骤2：rel-5-[[2-[(2S,5S)-4,4-二氟-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物946)和rel-5-[[2-[(2R,5R)-4,4-二氟-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物974)的合成
对外消旋-5-[[2-[(2S,5S)-4,4-二氟-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.17g，407.27μmol)进行手性分离(样品信息：YMC Chiral Art(250*20mm，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，40-30-30，12mL/min)，以获得化合物946rel-5-[[2-[(2S,5S)-4,4-二氟-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(81mg，194.05μmol，95.29％产率)和化合物974rel-5-[[2-[(2R,5R)-4,4-二氟-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(84mg，201.24μmol，98.82％产率)。
化合物946：RT(IC,CO2-MeOH,60-40,0.6mL/min)＝6.533min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.05-1.15(m,3H),2.12-2.28(m,1H),2.37-2.45(m,4H),2.80-2.91(m,1H),3.01-3.47(m,1H),3.81-4.29(m,1H),5.57-5.88(m,1H),7.15-7.29(m,1H),7.54-7.66(m,2H),8.07-8.21(m,1H),8.37-8.52(m,2H),8.72-8.80(m,1H),8.80-8.95(m,1H),11.16-11.39(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值417.2；实测值418.4；Rt＝1.332min。
化合物974：RT(IC,CO2-MeOH,60-40,0.6mL/min)＝7.087min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.05-1.13(m,3H),2.11-2.26(m,1H),2.37-2.45(m,4H),2.79-2.90(m,1H),3.00-3.46(m,1H),3.79-4.29(m,1H),5.57-5.87(m,1H),7.16-7.28(m,1H),7.53-7.66(m,2H),8.08-8.21(m,1H),8.34-8.53(m,2H),8.70-8.80(m,1H),8.80-8.94(m,1H),11.15-11.38(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值417.2；实测值418.4；Rt＝1.338min。
实施例213.rel-5-[[2-[(2S,5S)-4,4-二氟-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(化合物936)和rel-5-[[2-[(2R,5R)-4,4-二氟-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(化合物908)的合成
步骤1：外消旋-5-[[2-[(2S,5S)-4,4-二氟-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺的合成
向5-[(2S,5S)-4,4-二氟-5-甲基-2-哌啶基]-2-甲基吡啶(0.35g，1.55mmol)、2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(406.98mg，1.70mmol)和三乙胺(782.63mg，7.73mmol，1.08mL)的溶液中分批添加HATU(705.79mg，1.86mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌12h且通过HPLC(15-65％0-5min H2O/MeOH，流速：30mL/min(装载泵4mL/min甲醇)目标质量447.45柱：YMC Triart C18 100x20 mm，5um)纯化，以获得5-[[2-[(2S,5S)-4,4-二氟-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(0.27g，603.44μmol，39.01％产率)。
此化合物不经HNMR即用于手性拆分。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值447.2；实测值448.2；Rt＝1.747min。
步骤2：rel-5-[[2-[(2S,5S)-4,4-二氟-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(化合物936)和rel-5-[[2-[(2R,5R)-4,4-二氟-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(化合物908)的合成
对外消旋-5-[[2-[(2S,5S)-4,4-二氟-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(0.27g，603.44μmol)进行手性分离(Chiralpak IC-II(250*20，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，12mL/min)，以获得5-[[2-[(2S,5S)-4,4-二氟-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(106mg，236.91μmol，78.52％产率)和5-[[2-[(2R,5R)-4,4-二氟-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(98mg，219.03μmol，72.59％产率)。
化合物936：RT(IC，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝23.904min。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.06(d,3H),2.19(m,1H),2.42(m,4H),2.87(m,2H),3.62(dd,1H),3.91(m,3H),5.72(dd,1H),7.23(dd,1H),7.61(d,1H),7.72(m,2H),8.42(m,1H),8.49(m,2H),11.09(m,1H)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值447.2；实测值448.4；Rt＝1.648min。
化合物908：RT(IC，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝39.401min。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.08(d,3H),2.19(m,1H),2.42(m,4H),2.88(m,2H),3.62(dd,1H),3.93(m,3H),5.72(dd,1H),7.23(dd,1H),7.61(d,1H),7.72(m,2H),8.40(m,1H),8.49(m,2H),11.08(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值447.2；实测值448.4；Rt＝1.650min。
实施例214.rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-4,4-二氟-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物935)和rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5R)-4,4-二氟-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物909)的合成
步骤1：外消旋-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-4,4-二氟-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
向5-[(2S,5S)-4,4-二氟-5-甲基-2-哌啶基]-2-甲基吡啶(0.35g，1.55mmol)、2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(355.97mg，1.70mmol)和三乙胺(782.63mg，7.73mmol，1.08mL)的溶液中分批添加HATU(705.79mg，1.86mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌12h且通过HPLC(15-65％0-5min H2O/MeOH/0.1％ NH4OH，流速：30mL/min(装载泵4mL/min甲醇)目标质量417.46柱：YMC Triart C18100x20 mm，5um)，以获得N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-4,4-二氟-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.2g，479.10μmol，30.97％产率)。
此化合物不经HNMR即用于手性拆分。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值417.0；实测值418.0；Rt＝1.282min。
步骤2rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-4,4-二氟-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物935)和rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5R)-4,4-二氟-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物909)的合成
对外消旋-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-4,4-二氟-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.2g，479.10μmol)进行手性分离(YMC ChiralArt(250*20，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，12mL/min)，以获得rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-4,4-二氟-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(86mg，206.01μmol，86.00％产率)和rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5R)-4,4-二氟-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(86mg，206.01μmol，86.00％产率)。
化合物935：
RT(IC，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝15.626min。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.08(m,6H),2.18(m,1H),2.40(m,5H),2.57(m,2H),2.89(m,1H),3.59(m,1H),5.70(m,3H),7.24(m,1H),7.47(m,1H),7.60(m,1H),8.03(m,1H),8.39(s,1H),10.58(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值417.2；实测值418.2；Rt＝1.298min。
化合物909：
RT(IC，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝19.9458min。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.08(m,7H),2.19(m,1H),2.40(m,6H),2.91(m,1H),3.67(m,1H),5.71(m,3H),7.23(m,1H),7.51(m,2H),8.03(m,1H),8.39(s,1H),10.58(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值417.2；实测值418.2；Rt＝1.335min。
实施例215.外消旋-2-甲氧基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(7-氧代-6,8-二氢-5H-1,8-萘啶-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物891)的合成
将外消旋-6-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]-3,4-二氢-1H-1,8-萘啶-2-酮(200mg，815.26μmol)、2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(195.00mg，815.26μmol)、三乙胺(412.48mg，4.08mmol，568.16μL)混合于DMF(5mL)中，然后添加HATU(464.98mg，1.22mmol)。将所得混合物在24℃下搅拌12h。将溶剂蒸发且将所得混合物与于甲醇(10mL)中的DMT(50mg)一起搅拌。将混合物过滤且在减压下蒸发。通过HPLC(2-10min 50-100％甲醇/H2O)纯化所得粗材料，以获得2-甲氧基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(7-氧代-6,8-二氢-5H-1,8-萘啶-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(51mg，109.33μmol，13.41％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.01(m,3H),1.33(m,1H),1.71(m,1H),1.89(m,1H),2.04(m,1H),2.18(m,1H),2.98(m,4H),3.45(m,1H),3.93(m,4H),5.32(m,1H),7.53(m,1H),7.72(m,2H),8.03(s,1H),8.49(m,2H),10.44(m,1H),11.01(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值466.2；实测值467.2；Rt＝1.028min。
实施例216.外消旋-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(7-氧代-6,8-二氢-5H-1,8-萘啶-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物888)的合成
将外消旋-6-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]-3,4-二氢-1H-1,8-萘啶-2-酮(200mg，815.26μmol)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(200.24mg，815.26μmol，HCl)、三乙胺(412.48mg，4.08mmol，568.16μL)混合于DMF(5mL)中，然后添加HATU(464.98mg，1.22mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌12h。将溶剂蒸发且将所得混合物与于甲醇(10ml)中的DMT(50mg)一起搅拌。将混合物过滤且在减压下蒸发。通过HPLC(2-10min 50-100％甲醇/H2O)纯化所得粗材料，以获得5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(7-氧代-6,8-二氢-5H-1,8-萘啶-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(126.9mg，290.75μmol，35.66％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.01(m,3H),1.33(m,1H),1.70(m,1H),1.89(m,1H),2.05(m,1H),2.17(m,1H),2.87(m,4H),3.81(m,1H),5.32(m,1H),7.54(m,1H),7.59(m,1H),8.04(s,1H),8.15(m,1H),8.47(m,1H),8.75(m,1H),8.85(m,1H),10.44(m,1H),11.22(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值436.2；实测值437.0；Rt＝0.930min。
实施例217.5-(2-(2-(2-氨基苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物987和化合物1001)的合成
步骤1：5-(2-(2-(2-氨基苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺的合成
在25℃下，在0.5h时段内，将HATU(169.09mg，444.70μmol)小批量添加到5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-2-胺(100mg，404.27μmol)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(114.19mg，464.91μmol，HCl)和TEA(204.54mg，2.02mmol，281.74μL)于DMF(4mL)中的搅拌混合物中。将所得混合物在25℃下搅拌18h，然后提交至反相HPLC(柱：YMC Triart C18 100x20 mm，5um；流动相：10-60％0-5min H2O/MeOH/0.1％NH4OH，流速：30ml/min(装载泵4ml/min MeOH)，以得到呈白色固体的5-[[2-[(2R,5S)-2-(2-氨基-1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(106mg，241.73μmol，59.79％产率)，将其直接提交至制备型手性HPLC。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值438.2；实测值439.2；Rt＝1.810min。
步骤2：手性分离(化合物987和化合物1001)
外消旋5-[[2-[(2R,5S)-2-(2-氨基-1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(106mg，241.73μmol)提交至制备型手性HPLC(柱：Chiralpak IA-I(250*20，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH，50-25-25；流速：12ml/min；柱温：24℃；波长：205nm、215nm、254nm)，以得到化合物1001 5-[[2-[(2S,5R)-2-(2-氨基-1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(45mg，102.62μmol，42.45％产率)(RT＝22.501min)和化合物9875-[[2-[(2R,5S)-2-(2-氨基-1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(116mg，粗品)(RT＝39.531min)。
化合物987于分析条件下(柱：IA，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min为流动相)的保留时间为43.57min且化合物1001的保留时间为23.68min。
化合物987：保留时间：43.57min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98-1.06(m,3H),1.26-1.41(m,1H),1.67-1.77(m,1H),1.82-1.94(m,1H),2.02-2.19(m,1H),2.19-2.28(m,1H),2.80-3.20(m,1H),3.44-4.04(m,1H),5.16-5.66(m,1H),6.92-7.03(m,1H),7.25-7.32(m,1H),7.42-7.47(m,2H),7.53-7.61(m,1H),7.61-7.66(m,1H),8.09-8.20(m,1H),8.42-8.53(m,1H),8.69-8.79(m,1H),8.82-8.94(m,1H),11.06-11.43(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值438.2；实测值439.2；Rt＝1.705min。
化合物1001：保留时间：23.68min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98-1.06(m,3H),1.26-1.41(m,1H),1.67-1.77(m,1H),1.82-1.94(m,1H),2.02-2.19(m,1H),2.19-2.28(m,1H),2.80-3.20(m,1H),3.44-4.04(m,1H),5.16-5.66(m,1H),6.92-7.03(m,1H),7.25-7.32(m,1H),7.42-7.47(m,2H),7.53-7.61(m,1H),7.61-7.66(m,1H),8.09-8.20(m,1H),8.42-8.53(m,1H),8.69-8.79(m,1H),8.82-8.94(m,1H),11.06-11.43(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值438.2；实测值439.2；Rt＝1.703min。
实施例218.2-甲氧基-5-(2-(5-甲基-2-(1H-噻吩并[3,2-c]吡唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物954)的合成
在25℃下，在0.5h时段内，将HATU(169.09mg，444.70μmol)小批量添加到5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-2-胺(100mg，404.27μmol)、2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(111.20mg，464.91μmol)和TEA(163.63mg，1.62mmol，225.39μL)于DMF(4mL)中的搅拌混合物中。将所得混合物在25℃下搅拌18h，然后提交至反相HPLC(柱：YMC Triart C18 100x20 mm，5um；流动相：15-65％0-5min H2O/MeOH/0.1％NH4OH，流速：30ml/min(装载泵4ml/min MeOH)，以得到呈白色固体的化合物9545-[[2-[(2R,5S)-2-(2-氨基-1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(123mg，262.52μmol，64.94％产率)。
化合物954：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.94-1.08(m,3H),1.27-1.39(m,1H),1.65-1.73(m,1H),1.81-1.91(m,1H),2.08-2.29(m,2H),2.75-3.02(m,1H),3.43-4.03(m,4H),5.14-5.64(m,1H),6.92-7.01(m,1H),7.24-7.32(m,1H),7.37-7.48(m,2H),7.58-7.65(m,1H),7.65-7.77(m,2H),8.38-8.47(m,1H),8.49-8.59(m,1H),11.06(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值468.2；实测值469.2；Rt＝2.106min。
实施例219.2-(2-(2-氨基苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-N-(5,6-二甲基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺(化合物920)的合成
在25℃下，在0.5h时段内，将HATU(169.09mg，444.70μmol)小批量添加到5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-2-胺(100mg，404.27μmol)、2-[(5,6-二甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(137.32mg，464.91μmol)和TEA(163.63mg，1.62mmol，225.39μL)于DMF(4mL)中的搅拌混合物中。将所得混合物在25℃下搅拌18h，然后提交至反相HPLC(柱：YMC Triart C18 100x20 mm，5um；流动相：50-80％0-5min H2O/MeOH/0.1％ NH4OH，流速：30ml/min(装载泵4ml/min MeOH)，以得到呈白色固体的化合物920 2-[(2R,5S)-2-(2-氨基-1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(5,6-二甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(70mg，165.28μmol，40.88％产率)。
化合物920：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.01(dd,3H),1.33(m,1H),1.70(m,1H),1.86(m,1H),2.02(m,1H),2.20(m,4H),2.34(m,3H),2.95(m,1H),3.71(dd,1H),5.37(m,1H),6.96(dd,1H),7.27(m,1H),7.44(m,2H),7.62(m,1H),7.78(m,1H),8.46(m,1H),10.92(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值423.2；实测值424.2；Rt＝1.861min。
实施例220.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-(2-(2-氨基苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物984和化合物996)的合成
步骤1：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-(2-(2-氨基苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺的合成
在25℃下，在0.5h时段内，将HATU(169.09mg，444.70μmol)小批量添加到5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-2-胺(100mg，404.27μmol)、2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(97.26mg，464.91μmol)和TEA(163.63mg，1.62mmol，225.39μL)于DMF(4mL)中的搅拌混合物中。将所得混合物在25℃下搅拌18h，然后提交至反相HPLC(柱：YMC Triart C18 100x20 mm，5um；流动相：20-70％0-5min H2O/MeOH/0.1％ NH4OH，流速：30ml/min(装载泵4ml/min MeOH)，以得到呈粉色胶状物的2-[(2R,5S)-2-(2-氨基-1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(110mg，250.83μmol，62.04％产率)，将其直接提交至制备型手性HPLC。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值438.2；实测值439.2；Rt＝1.781min。
步骤2：手性分离(化合物984和化合物996)
将外消旋2-[(2R,5S)-2-(2-氨基-1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(110mg，250.83μmol)提交至制备型手性HPLC(柱：Chiralpak IA-I(250*20，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH，50-25-25；流速：12ml/min；柱温：24℃；波长：205nm、215nm、254nm)，以得到第1粗级分(RT＝30.983min)和化合物9962-[(2R,5S)-2-(2-氨基-1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(46.8mg，106.72μmol，42.55％产率)(RT＝48.378min)。通过制备型手性HPLC(柱：Chiralpak IC-II(250*20，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH，60-20-20；流速：12ml/min；柱温：24℃；波长：205nm、215nm)纯化第1粗级分，以得到化合物984 2-[(2S,5R)-2-(2-氨基-1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(53mg，120.85μmol，48.18％产率)(RT＝44.479min)。
化合物996于分析条件下(柱：IA，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min为流动相)的保留时间为64.84min且化合物984的保留时间为34.41min。
化合物996：保留时间：64.84min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98-1.02(m,3H),1.05-1.14(m,3H),1.28-1.41(m,1H),1.65-1.76(m,1H),1.80-1.90(m,1H),1.98-2.15(m,1H),2.17-2.27(m,1H),2.35-2.42(m,2H),2.75-3.26(m,1H),3.45-4.03(m,1H),5.14-5.66(m,3H),6.91-7.00(m,1H),7.23-7.32(m,1H),7.41-7.54(m,3H),7.59-7.66(m,1H),7.96-8.07(m,1H),10.37-10.62(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值438.2；实测值439.2；Rt＝1.700min。
化合物984：保留时间：34.41min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99-1.03(m,3H),1.05-1.15(m,3H),1.26-1.39(m,1H),1.65-1.75(m,1H),1.80-1.92(m,1H),1.95-2.17(m,1H),2.17-2.28(m,1H),2.35-2.42(m,2H),2.73-3.24(m,1H),3.43-4.04(m,1H),5.15-5.67(m,3H),6.91-7.02(m,1H),7.24-7.31(m,1H),7.41-7.51(m,3H),7.59-7.64(m,1H),7.95-8.08(m,1H),10.43-10.62(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值438.2；实测值439.2；Rt＝1.690min。
实施例221.2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-噻唑-5-基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物514)和2-甲氧基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-噻唑-5-基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物516)的合成
步骤1：2-甲氧基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-噻唑-5-基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
向5-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]噻唑(0.25g，1.37mmol)、2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(466.81mg，1.37mmol，Et3N)和三乙胺(693.90mg，6.86mmol，955.78μL)的溶液中分批添加HATU(547.55mg，1.44mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌3h且使其经历HPLC：40-40-75％0-1-5min水-甲醇，流速：30ml/min(装载泵4ml/min甲醇)，目标质量403，柱：YMC Triart C18100x20 mm，5um)，以得到2-甲氧基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-噻唑-5-基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(150mg，371.79μmol，27.11％产率)。
此物质不经NMR-光谱即用于手性拆分。
LCMS(ESI)：[M+Н]+m/z：计算值403.1；实测值404.2；Rt＝2.305min。
步骤2：2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-噻唑-5-基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物514)和2-甲氧基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-噻唑-5-基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物516)的合成
在以下条件下分离对映异构体：柱：Chiral ART纤维素-SC(250*20，5mkm)；流动相：IPA-MeOH，50-50，流速：10mL/min；柱温：24℃；波长：218nm、246nm、302nm)，保留时间(化合物514)＝17.49min；保留时间(化合物516)＝34.43min
在以下条件下另外纯化分离的对映异构体：
柱：Chiralcel OJ-H(250*20mm/5m)；流动相：己烷-IPA-MeOH，60-20-20；流速：12mL/min；柱温：24℃；波长：218nm、246nm、302nm),
保留时间(化合物514)＝41.12min
保留时间(化合物516)＝30.488min
化合物514：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.96-1.02(m,3H),1.38-1.48(m,1H),1.79-1.88(m,1H),1.88-1.98(m,1H),1.98-2.04(m,1H),2.04-2.29(m,1H),2.78-3.27(m,1H),3.43-3.50(m,0.7H),3.92-3.96(m,3H),4.02-4.05(m,0.3H),5.53-5.92(m,1H),7.69-7.78(m,2H),7.79-7.88(m,1H),8.43-8.50(m,1H),8.51-8.56(m,1H),9.02-9.09(m,1H),10.93-11.19(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+Н]+m/z：计算值403.5；实测值404.0；Rt＝4.221min。
RT(IPA-MeOH，50-50，10ml/min)＝33.40min。
化合物516：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.97-1.01(m,3H),1.37-1.47(m,1H),1.79-1.87(m,1H),1.88-1.97(m,1H),1.99-2.06(m,1H),2.09-2.24(m,1H),2.80-3.27(m,1H),3.44-3.50(m,0.7H),3.93-3.96(m,3H),4.02-4.06(m,0.3H),5.46-5.95(m,1H),7.69-7.77(m,2H),7.78-7.88(m,1H),8.41-8.51(m,1H),8.51-8.56(m,1H),9.03-9.08(m,1H),11.00-11.04(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+Н]+m/z：计算值403.5；实测值404.0；Rt＝4.222min。
RT(IPA-MeOH，50-50，10ml/min)＝27.93min。
实施例222.5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(6-氧代-5H-1,5-萘啶-2-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物1076)和5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(6-氧代-5H-1,5-萘啶-2-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物1079)的合成
步骤1：5-[[2-[5-甲基-2-[6-氧代-5-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-1,5-萘啶-2-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
将6-(5-甲基-2-哌啶基)-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-1,5-萘啶-2-酮(300mg，0.803mmol)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(100mg，0.322mmol，Et3N)、HATU(147mg，0.387mmol)和TEA(0.130mL，0.933mmol)于DMF(6mL)中的混合物在25℃下搅拌2小时。所得混合物通过添加水(20mL)来淬灭且用DCM(100mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩。通过快速色谱(25g二氧化硅快速柱，石油醚/EtOAc，其中EtOAc为0～50％，然后EtOAc/MeOH，其中MeOH为0～5％，流速＝30mL/min，254nm)纯化残余物，以得到呈白色固体的5-[[2-[5-甲基-2-[6-氧代-5-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-1,5-萘啶-2-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(150mg，82.4％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值565.3，实测值565.3。
步骤2：5-[[2-[5-甲基-2-(6-氧代-5H-1,5-萘啶-2-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
向5-[[2-[5-甲基-2-[6-氧代-5-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-1,5-萘啶-2-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(140mg，0.248mmol)于DCM(5mL)中的混合物中添加TFA(1mL，13.0mmol)。将所得混合物在20℃下搅拌1小时。将所得混合物用饱和NaHCO3溶液调节至pH＝8，然后将混合物在真空中浓缩，以得到粗产物，其通过快速色谱(12g二氧化硅快速柱，DCM/MeOH，其中MeOH为0～20％，流速＝30mL/min，254nm)进行纯化，以得到呈白色固体的5-[[2-[5-甲基-2-(6-氧代-5H-1,5-萘啶-2-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(50mg，46.4％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值435.2，实测值435.2；HPLC：在254nm下为90.34％。
步骤3：5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(6-氧代-5H-1,5-萘啶-2-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物1076)和5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(6-氧代-5H-1,5-萘啶-2-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物1079)的合成
将5-[[2-[5-甲基-2-(6-氧代-5H-1,5-萘啶-2-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(50mg，0.115mmol)通过SFC(仪器：Berger，Multigr AM-II；柱：DaicelChiralcel OJ-H 250mm×30mm×5μm；流动相：超临界CO2/MeOH(0.1％ NH3-H2O，v％)＝70/30；流速：70mL/min；柱温：38℃；喷嘴压力：100巴；喷嘴温度：60℃；蒸发器温度：20℃；修整器温度：25℃；波长：220nm)分离，以得到化合物1076(峰3，保留时间＝4.899min)和化合物1079(峰4，保留时间＝6.996min)。
化合物1076：5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(6-氧代-5H-1,5-萘啶-2-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(10.5mg，具有反式相对化学的单一未知对映异构体，峰3，保留时间＝4.899min，白色固体)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.64-8.95(m,2H),8.40(br s,1H),7.88(d,J＝9.8Hz,1H),7.71(br d,J＝8.5Hz,2H),7.49(br s,2H),6.71(d,J＝9.8Hz,1H),5.32-5.71(m,1H),2.44(br dd,J＝13.8,3.3Hz,1H),2.10(br s,1H),1.92(br s,1H),1.81(br t,J＝12.7Hz,2H),1.36(br d,J＝10.8Hz,2H),1.07(d,J＝6.8Hz,4H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值435.2，实测值435.1；HPLC：在254nm下为100％；97.5％ee。
化合物1079：5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(6-氧代-5H-1,5-萘啶-2-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(10mg，具有反式相对化学的单一未知对映异构体，峰4，保留时间＝6.996min，白色固体)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.61-8.94(m,2H),8.40(br s,1H),7.88(d,J＝9.5Hz,1H),7.70(br d,J＝8.5Hz,2H),7.49(br s,2H),6.70(d,J＝9.8Hz,1H),5.34-5.68(m,1H),2.41(br d,J＝3.0Hz,1H),1.99-2.20(m,1H),1.92(br s,1H),1.70-1.87(m,2H),1.36(br d,J＝9.0Hz,2H),1.06(d,J＝6.8Hz,3H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值435.2，实测值435.1；HPLC：在254nm下为100％；100％ee。
实施例223.5-(2-(6-(4-氟苯基)-5-氮杂螺[2.5]辛-5-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物776)的合成
在0℃下，向酸性2-((5-氨基甲酰基吡啶-3-基)氨基)-2-氧代乙酸(36mg，0.17mmol)和6-(4-氟苯基)-5-氮杂螺[2.5]辛烷(35mg，0.17mmol)于DMF(1.00mL)中的搅拌溶液中添加HATU(65mg，0.17mmol)和三乙胺(52mg，71μL，0.51mmol)。将所得反应混合物在环境温度下搅拌18小时。18小时之后，将反应混合物在减压下浓缩且添加水。将水层用EtOAc(2x)萃取。将合并的有机相用水(2x)洗涤，干燥(Na2SO4)且在减压下浓缩，以获得粗产物。通过硅胶柱色谱(5/5环己烷/乙酸乙酯至0/1)纯化残余物，以得到呈白色固体的苯甲基5-(2-(6-(4-氟苯基)-5-氮杂螺[2.5]辛-5-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物776)(14mg，25％)。
1H NMR(CD3OD,400MHz)δ8.96(d,J＝2.4Hz,0.7H),8.90(d,J＝2.4Hz,0.3H),8.79(d,J＝1.9Hz,0.7H),8.76(d,J＝1.9Hz,0.3H),8.62(t,J＝2.2Hz,0.7H),8.58(t,J＝2.2Hz,0.3H),7.48-7.36(m,2H),7.19-7.10(m,2H),5.90(app s,0.7H),5.52(app s,0.3H),3.63(d,J＝13.7Hz,0.3H),3.52(d,J＝13.7Hz,0.7H),3.17-3.08(m,1H),2.52-2.61(m,1H),2.32-2.01(m,2H),1.02-0.93(m,1H),0.70-0.59(m,1H),0.48-0.32(m,3H)。
19F NMR(CD3OD,376MHz)δ-118.3,118.1。
实施例224.5-(2-(2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶-1-基-2-d)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物1008)的合成
在0℃下，向酸性2-((5-氨基甲酰基吡啶-3-基)氨基)-2-氧代乙酸盐酸盐(108mg，0.51mmol)和2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶-2-d(100mg，0.51mmol)于DMF(0.2mL)中的搅拌溶液中添加HATU(196mg，0.51mmol)和三乙胺(215μL，1.54mmol)。将所得反应混合物在环境温度下搅拌18小时。18小时之后，将反应混合物在减压下浓缩且添加水。将水层用EtOAc(2x)萃取。将合并的有机相用水(2x)洗涤，干燥(Na2SO4)且在减压下浓缩，以获得粗产物。通过硅胶柱色谱(CH2Cl2/MeOH 10/0至9/1)纯化残余物，以得到呈白色固体的5-(2-(2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶-1-基-2-d)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物1008)(60mg，30％)
1H NMR(CDCl3,400MHz)9.93(s,1H),9.06-8.91(m,1H),8.75(s,1H),8.56(s,1H),7.24-7.11(m,2H),7.04-6.90(m,2H),6.56(s,1H),6.22(s,1H),4.41(d,J＝13.2Hz,0.7H),4.12(d,J＝13.2Hz,0.3H)3.28(d,J＝12.5Hz,1H),2.19-2.02(m,1H),1.98-1.84(m,1H),1.84-1.70(m,1H),1.05-0.95(m,3H)
19F NMR(CDCl3,376MHz)δ-115.9,-115.8。
实施例225.5-(2-(2-(4-氟苯基-2,3,5,6-d4)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物1004)的合成
在0℃下，向酸性2-((5-氨基甲酰基吡啶-3-基)氨基)-2-氧代乙酸盐酸盐(62mg，0.25mmol)和2-(4-氟苯基-2,3,5,6-d4)-5-甲基哌啶(50mg，0.25mmol)于DMF(4mL)中的搅拌溶液中添加HATU(96mg，0.25mmol)和三乙胺(140μL，1.0mmol)。将所得反应混合物在环境温度下搅拌18小时。18小时之后，将反应混合物在减压下浓缩且添加水。将水层用EtOAc(2x)萃取。将合并的有机相用水(2x)洗涤，干燥(Na2SO4)且在减压下浓缩，以获得粗产物。通过硅胶柱色谱(环己烷/乙酸乙酯10/0至0/10)纯化残余物，以得到呈白色固体的5-(2-(2-(4-氟苯基-2,3,5,6-d4)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物1004)(60mg，30％)
1H NMR(DMSO-d6,400MHz)11.3(s,0.6H),11.2(m,0.4H),8.93(app d,0.6H),8.86(s,0.4H),8.81(s,0.6H),8.77(s,0.4H),8.52(s,0.6H),8.48(s,0.4H),8.20(s,0.6H),8.16(s,0.4H),7.65(s,0.6H),7.60(s,0.4H),5.59(s,0.6H),5.16(s,0.4H),3.48(d,J＝13.6Hz),3.25(dd,J＝3.2,13.7Hz,1H),2.82-2.75(m,1H)2.24-1.80(m,3.4H),1.75-1.62(m,1H),1.42-1.35(m,1H),1.10-1.01(m,3H)
19F NMR(DMSO-d6,376MHz)δ-116.9,-117.0。
LRMS(APCI-)m/z(C20H16D4FN4O3)：理论值387.2，实验值387.3。
实施例226.5-(2-(2-(4-氟苯基-2,3,5,6-d4)-5-甲基哌啶-1-基-2-d)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物1010)的合成
在0℃下，向酸性2-((5-氨基甲酰基吡啶-3-基)氨基)-2-氧代乙酸盐酸盐(108mg，0.51mmol)和2-(4-氟苯基-2,3,5,6-d4)-5-甲基哌啶-2-d(100mg，0.51mmol)于DMF(0.2mL)中的搅拌溶液中添加HATU(196mg，0.51mmol)和三乙胺(215μL，1.54mmol)。将所得反应混合物在环境温度下搅拌18小时。18小时之后，将反应混合物在减压下浓缩且添加水。将水层用EtOAc(2x)萃取。将合并的有机相用水(2x)洗涤，干燥(Na2SO4)且在减压下浓缩，以获得粗产物。通过硅胶柱色谱(CH2Cl2/MeOH 10/0至9/1)纯化残余物，以得到呈白色固体的5-(2-(2-(4-氟苯基-2,3,5,6-d4)-5-甲基哌啶-1-基-2-d)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物1010)(60mg，30％)
1H NMR(DMSO-d6,400MHz)11.3(s,0.6H),11.2(m,0.4H),8.93(app d,0.6H),8.87(s,0.4H),8.81(app d,0.6H),8.77(app d,0.4H),8.52(s,0.6H),8.48(s,0.4H),8.20(s,0.6H),8.16(s,0.4H),7.64(s,0.6H),7.60(s,0.4H),4.04(d,J＝13.2Hz,0.7H),4.12(d,J＝13.0Hz,0.3H),3.25(d,J＝3.4,14.3Hz,1H),2.81-2.75(m,1H)2.27-1.85(m,3.4H),1.75-1.62(m,1H),1.42-1.29(m,1H),1.10-1.01(m,3H)
19F NMR(DMSO-d6,376MHz)δ-116.9,-117.0。
LRMS(APCI+)m/z(C20H16D5FN4O3H)：理论值390.1，实验值390.4。
实施例227.5-(2-(5-甲基-2-(吡啶-4-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物539和化合物544)的合成
在轻微加热下，将4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]吡啶(0.3g，1.70mmol)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(356.00mg，1.70mmol，TEA)和DIPEA(659.92mg，5.11mmol，889.38μL)溶解于DMF(6mL)中在剧烈搅拌和偶尔加热下，小批量添加HATU(776.60mg，2.04mmol)。反应完成之后，通过HPLC(0-25％，0.5-6.5min；30ml/min；水-MeCN(装载泵4ml/min MeCN)；目标质量368；柱SunFire100*19mm 5um)纯化混合物且通过手性HPLC(系统2.柱：Chiralpak IA(250*20mm*5mm)；流动相：己烷-IPA-MeOH，50-25-25；流速：12mL/min；柱温：24℃；波长：210nm、215nm、254nm)分离所获得的外消旋混合物，以得到5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(4-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(44mg，119.76μmol，7.04％产率)和5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(4-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(43mg，117.04μmol，6.88％产率)。
化合物539于分析条件下(柱：IA，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min为流动相)的保留时间为38.74min且化合物544的保留时间为31.88min。
化合物539：保留时间：38.74min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.96-1.05(m,3H),1.28-1.40(m,1H),1.51-1.61(m,1H),1.80-1.94(m,1H),1.99-2.15(m,1H),2.15-2.25(m,1H),2.73-3.25(m,1H),3.46-4.12(m,1H),5.18-5.63(m,1H),7.27-7.39(m,2H),7.52-7.66(m,1H),8.09-8.21(m,1H),8.39-8.53(m,1H),8.53-8.63(m,2H),8.70-8.81(m,1H),8.81-8.93(m,1H),11.14-11.38(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值367.2；实测值368.2；Rt＝1.211min。
化合物544：保留时间：31.88min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99-1.04(m,3H),1.29-1.39(m,1H),1.51-1.60(m,1H),1.82-1.93(m,1H),2.01-2.15(m,1H),2.17-2.24(m,1H),2.74-3.25(m,1H),3.46-4.10(m,1H),5.17-5.63(m,1H),7.28-7.37(m,2H),7.53-7.67(m,1H),8.09-8.21(m,1H),8.41-8.52(m,1H),8.53-8.61(m,2H),8.71-8.81(m,1H),8.82-8.93(m,1H),11.19-11.31(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值367.2；实测值368.2；Rt＝1.209min。
实施例228.5-(2-(5-甲基-2-(3-氨磺酰基苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物661)的合成
向3-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]苯磺酰胺(490mg，1.93mmol)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(473.19mg，1.93mmol，HCl)和TEA(584.83mg，5.78mmol，805.55uL)于DMF(4mL)中的搅拌混合物中添加HATU(805.76mg，2.12mmol)。将所得反应混合物在20℃下搅拌4h。然后，使其经历HPLC(柱：YMC-Actus Triart C18100*20mm，5um；0-1-6min 5-5-50％水-CAN(NH3 0.1％)，流速30ml/min)，得到5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(3-氨磺酰基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(190mg，426.50umol，22.14％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.03(m,3H),1.36(m,1H),1.66(m,1H),1.91(m,1H),2.18(m,2H),3.01(m,1H),3.81(m,1H),5.46(m,1H),7.36(m,2H),7.55(m,3H),7.75(m,2H),8.14(m,1H),8.48(m,1H),8.75(m,1H),8.86(m,1H),11.24(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值445.4；实测值446.2；Rt＝1.855min。
实施例229.5-[[2-[(2R,5R)-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物75)、5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物88)、5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物71)和5-[[2-[(2S,5S)-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物82)的合成
步骤1：5-[[2-(5-甲基-2-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
将5-甲基-2-苯基哌啶(200mg，1.14mmol)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(354.14mg，1.14mmol，N(Et)3)和HATU(477.27mg，1.26mmol)混合于DMSO(4mL)中且在25℃下搅拌16h。使最终溶液经历HPLC(03_MeCN 2-9min 20-45％ MeCN，30ml/min柱：SunFire C18 100*19 5微米)，以得到5-[[2-(5-甲基-2-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(229mg，624.98μmol，54.77％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.02(d,3H),1.65(m,2H),2.10(m,2H),2.60(m,1H),3.11(m,3H),3.26(m,1H),4.12(m,1H),5.36(m,1H),7.31(m,5H),7.54(d,1H),8.36(d,1H),8.50(m,1H),8.82(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值366.1；实测值367.2；Rt＝1.199min。
步骤2：5-[[2-[(2R,5R)-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物75)、5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物88)、5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物71)和5-[[2-[(2S,5S)-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物82)的合成
使用(IA(250*25，5mkm)柱，以己烷-IPA-MeOH，70-15-15为流动相；流速12ml/min)对5-[[2-(5-甲基-2-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺进行手性分离，得到化合物75 5-[[2-[(2R,5R)-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(19.9mg，12.54％；RT＝29.173min)、化合物88 5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(56.2mg，35.41％；RT＝78.286min)、化合物71 5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(49.2mg，31.0％；RT＝40.746min)和化合物82 5-[[2-[(2S,5S)-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(14.2mg，8.95％；RT＝34.172min)。
化合物71：RT(IA(250*25，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.6ml/min)＝19.56min。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ1.05(m,3H),1.35(m,1H),1.69(m,1H),1.90(m,1H),2.23(m,1H),3.23(m,2H),3.77(m,1H),5.41(m,1H),7.35(m,5H),7.60(m,1H),8.16(m,1H),8.49(m,1H),8.78(m,1H),8.90(m,1H),11.24(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值366.2；实测值367.2；Rt＝4.361min。
化合物82：RT(IA(250*25，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.6ml/min)＝16.02min。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ0.77(m,3H),1.07(m,1H),1.66(m,2H),1.92(m,1H),2.21(m,1H),2.59(m,1H),3.94(m,1H),5.44(m,1H),7.37(m,5H),7.61(m,1H),8.17(m,1H),8.50(m,1H),8.78(m,1H),8.89(m,1H),11.28(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值366.2；实测值367.2；Rt＝4.421min。
化合物88：RT(IA(250*25，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.6ml/min)＝38.93min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.03(m,3H),1.34(m,1H),1.66(m,1H),1.85(m,1H),2.05(m,1H),2.21(m,1H),3.26(m,1H),3.75(m,1H),5.61(m,1H),7.27(m,1H),7.37(m,4H),7.59(m,1H),8.15(m,1H),8.48(m,1H),8.77(m,1H),8.89(m,1H),11.23(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值366.2；实测值367.2；Rt＝4.363min。
化合物75：RT(IA(250*25，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.6ml/min)＝14.26min。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ0.77(m,3H),1.07(m,1H),1.69(m,2H),1.92(m,1H),2.23(m,1H),2.60(m,1H),3.94(m,1H),5.44(m,1H),7.36(m,5H),7.61(m,1H),8.17(m,1H),8.50(m,1H),8.78(m,1H),8.89(m,1H),11.28(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值366.2；实测值367.2；Rt＝4.421min。
实施例230.外消旋-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(萘-2-基)哌啶-1-基)-N-(5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺(化合物83)的合成
将[2-[(5-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酰基]氧基锂(412.94mg，2.22mmol)和HATU(843.73mg，2.22mmol)混合于DMF(3mL)中且将所得混合物在20℃下搅拌20min，随后添加5-甲基-2-(2-萘基)哌啶(0.5g，2.22mmol)且将所得混合物在20℃下搅拌12h。使所得混合物经历HPLC，以获得2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-萘基)-1-哌啶基]-N-(间甲苯基)-2-氧代乙酰胺(0.029g，75.04μmol，3.38％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.11(d,3H),1.43(m,1H),1.96(m,2H),2.31(m,5H),3.23(m,1H),4.55(m,1H),6.27(m,1H),7.42(m,3H),7.79(m,4H),8.00(m,1H),8.21(m,1H),8.48(m,1H),9.40(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值386.5；实测值387.2；Rt＝3.213min。
实施例231.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-甲基-1,3-苯并噁唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(对映异构化合物1170))和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-5-甲基-2-(2-甲基-1,3-苯并噁唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1170)的合成
步骤1：(3S)-3-甲基-6-(2-甲基-1,3-苯并噁唑-5-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
向圆底烧瓶中添加2-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噁唑(100mg，0.386mmol)、(3S)-3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(135mg，0.391mmol)、Pd(dppf)Cl2-DCM(65mg，0.0796mmol)、Na2CO3(125mg，1.18mmol)、H2O(0.5mL)和二噁烷(2mL)。将混合物脱气且用氮气回填三次，然后在90℃、氮气下搅拌12小时。所得混合物通过添加水(10mL)来淬灭且用EtOAc(20mL*3)萃取。将合并的有机层用饱和NH4Cl水溶液(20mL*2)、盐水(20mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩。通过快速色谱(8g Agela二氧化硅快速柱，石油醚/EtOAc，其中EtOAc为0～30％，流速：30mL/min)纯化残余物，以得到呈白色胶状物的(3S)-3-甲基-6-(2-甲基-1,3-苯并噁唑-5-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(100mg，78.9％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值329.2，实测值329.1。
步骤2：(5S)-5-甲基-2-(2-甲基-1,3-苯并噁唑-5-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
向(3S)-3-甲基-6-(2-甲基-1,3-苯并噁唑-5-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(80mg，0.244mmol)于MeOH(5mL)中的溶液中添加Pd/C(10mg，具有50重量％水的10重量％Pd)。将混合物脱气且用氢气回填3次。将混合物在20℃、氢气气氛下(在气球中，约15psi)搅拌12小时。将所得混合物过滤且在减压下浓缩，以得到呈黄色油状物的(5S)-5-甲基-2-(2-甲基-1,3-苯并噁唑-5-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(70mg，87.0％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值331.1，实测值331.1。
步骤3：2-甲基-5-[(5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噁唑的合成
向(5S)-5-甲基-2-(2-甲基-1,3-苯并噁唑-5-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(70mg，0.212mmol)于DCM(3mL)中的溶液中添加TFA(0.5mL，6.49mmol)。将混合物在20℃下搅拌12小时。通过添加饱和NaHCO3水溶液(20mL)淬灭所得混合物且用DCM(50mL*3)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩，以得到呈黄色油状物的2-甲基-5-[(5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噁唑(50mg，粗品)。LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值231.1，实测值231.1。
步骤4：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(5S)-5-甲基-2-(2-甲基-1,3-苯并噁唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
向2-甲基-5-[(5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噁唑(45mg，0.195mmol)于DMF(5mL)中的溶液中添加2-[(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(45mg，0.231mmol)和HATU(80mg，0.210mmol)。然后，添加DIPEA(90mg，0.696mmol)且将混合物在20℃下搅拌12小时。所得混合物通过添加水(10mL)来淬灭且用EtOAc(20mL*3)萃取。将合并的有机层用饱和NH4Cl水溶液(10mL*2)、盐水(10mL*3)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩。通过制备型TLC(二氧化硅，DCM/MeOH＝10:1，254nm)纯化残余物，以得到呈黄色油状物的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(5S)-5-甲基-2-(2-甲基-1,3-苯并噁唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(35mg，44.0％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值408.2，实测值408.1。
步骤5：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-甲基-1,3-苯并噁唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(对映异构化合物1170))和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-5-甲基-2-(2-甲基-1,3-苯并噁唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1170)的合成
将N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(5S)-5-甲基-2-(2-甲基-1,3-苯并噁唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(30mg，73.6μmol)通过手性SFC(仪器：Thar80；柱：DaicelChiralcel OJ(250mm*30mm，10μm)；流动相：超临界CO2/EtOH(0.1％ NH3-H2O，v％)＝65/35；流速：80mL/min；柱温：38℃；喷嘴温度：100巴；喷嘴温度：60℃；蒸发器温度：20℃；修整器温度：25℃；波长：220nm)分离，以得到对映异构化合物1170(峰1，保留时间＝1.520min)和化合物1170(峰2，保留时间＝1.641min)。
对映异构化合物1170：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-甲基-1,3-苯并噁唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(5mg，具有一个已知手性中心的单一未知对映异构体，峰1，保留时间＝1.520min，16.7％产率，黄色固体)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 7.87-8.02(1H,m),7.43-7.58(3H,m),7.23-7.36(1H,m),5.39-5.82(1H,m),3.71(1H,dd,J＝13.30,3.76Hz),2.46-2.64(4H,m),2.02-2.27(3H,m),1.86-1.99(1H,m),1.62-1.82(2H,m),0.69-0.82(5H,m)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值408.2，实测值408.1；HPLC：在220nm下为98.32％，在254nm下为99.30％；>95％ee、99.8％de。
化合物1170：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-5-甲基-2-(2-甲基-1,3-苯并噁唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(3mg，16.7％产率)，黄色固体。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 7.88-8.12(1H,m),7.53-7.67(3H,m),7.39(1H,br s),5.79(1H,brs),4.07-3.72(1H,m),2.61-2.65(3H,m),2.30(2H,br s),2.09-2.18(3H,m),1.93(2H,brd,J＝12.30Hz),1.45(1H,br d,J＝12.30Hz),1.14(3H,d,J＝6.78Hz),0.89(1H,br d,J＝7.53Hz)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值408.2，实测值408.1；HPLC：在220nm下为92.86％，在254nm下为94.72％；>95％ee、93.0％de。
实施例232.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(3-甲基-1,2-苯并噻唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1166)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(3-甲基-1,2-苯并噻唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(对映异构化合物1166)的合成
步骤6：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[5-甲基-2-(3-甲基-1,2-苯并噻唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
向2-[(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(59mg，0.302mmol)、3-甲基-5-(5-甲基-2-哌啶基)-1,2-苯并噻唑(75.0mg，0.304mmol)和DMF(2mL)中的混合物中添加HATU(118mg，0.310mmol)和DIPEA(117mg，0.903mmol)，然后将混合物在20℃下搅拌12小时。所得混合物通过添加水(10mL)来淬灭且用EtOAc(10mL*3)萃取。将合并的有机层用饱和NH4Cl水溶液(10mL*2)、盐水(10mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩，以得到粗产物，其通过快速色谱(12g二氧化硅快速柱，EtOAc/MeOH，其中MeOH为0～5％，流速：30mL/min，254nm)进行纯化，以得到呈黄色油状物的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[5-甲基-2-(3-甲基-1,2-苯并噻唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(52mg，40.6％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值424.1，实测值424.1。
步骤7：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(3-甲基-1,2-苯并噻唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1166)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(3-甲基-1,2-苯并噻唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(对映异构化合物1166)的合成
将N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[5-甲基-2-(3-甲基-1,2-苯并噻唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(50mg，0.118mmol)通过手性SFC(仪器：Thar800Q；DaicelChiralpak IG(250mm*30mm，10μm)；流动相：超临界CO2/EtOH(0.1％ NH3-H2O，v％)＝60/40；流速：80mL/min；柱温：38℃；喷嘴温度：100巴；喷嘴温度：60℃；蒸发器温度：20℃；修整器温度：25℃；波长：220nm)纯化，以得到化合物1166和对映异构化合物1166。
化合物1166：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(3-甲基-1,2-苯并噻唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(16mg，具有反式相对化学的单一未知对映异构体，峰3，保留时间＝4.341min，白色固体)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 10.26(br s,1H),8.12(d,J＝8.5Hz,1H),8.02(br s,1H),7.97(s,1H),7.59(br d,J＝8.5Hz,1H),7.47(br s,1H),5.62(br s,1H),5.34(br s,2H),3.55-3.87(m,1H),3.05-3.09(m,1H),2.66-2.75(m,3H),2.16-2.35(m,2H),2.01-2.08(m,3H),1.96(br d,J＝11.3Hz,1H),1.75-1.87(m,1H),1.34-1.43(m,1H),1.08(d,J＝7.0Hz,3H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值424.1，实测值424.1；HPLC：在220nm下为100％，在254nm下为100％；100％ee。
对映异构化合物1166：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(3-甲基-1,2-苯并噻唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(16mg，具有反式相对化学的单一未知对映异构体，峰4，保留时间＝5.604min，白色固体)，1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 10.26(br s,1H),8.12(d,J＝8.5Hz,1H),8.02(br s,1H),7.97(s,1H),7.59(br d,J＝8.5Hz,1H),7.47(br s,1H),5.62(br s,1H),5.34(br s,2H),3.55-3.87(m,1H),3.05-3.09(m,1H),2.66-2.75(m,3H),2.16-2.35(m,2H),2.01-2.08(m,3H),1.96(br d,J＝11.3Hz,1H),1.75-1.87(m,1H),1.34-1.43(m,1H),1.08(d,J＝7.0Hz,3H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值424.1，实测值424.1；HPLC：在220nm下为100％，在254nm下为100％；100％ee。
实施例233.N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1319)的合成
步骤1：3-环丙基吡啶-2-胺的合成
向3-溴吡啶-2-胺(50.0g，289mmol)于甲苯(500mL)和水(100mL)中的溶液中添加环丙基硼酸(32.3g，376mmol)、三环己基膦(8.10g，28.9mmol)、无水磷酸钾(184g，867mmol)和乙酸钯(II)(3.24g，14.5mmol)。将反应混合物抽真空，然后用Ar回填。将反应混合物在90℃下搅拌16h。将所获得的混合物在真空中浓缩。将所获得的物质用水稀释且用MTBE(3x500mL)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥且在真空中浓缩至干，以得到呈棕色油状物的3-环丙基吡啶-2-胺(59.0g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值135.1；实测值135.2；Rt＝0.609。
步骤2：5-溴-3-环丙基吡啶-2-胺的合成
将NBS(50.9g，286mmol，24.2mL)分批添加到3-环丙基吡啶-2-胺(59.0g，286mmol)于无水DCM中的溶液。将反应混合物在室温下搅拌3h。将所获得的混合物用水洗涤。将水层用二氯甲烷萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤且经Na2SO4干燥。在减压下移除溶剂。通过CC(Interchim；800g SiO2，氯仿/乙腈，其中乙腈为0～40％，流速＝150mL/min,Rv＝5-6CV)纯化残余物，以得到呈棕色固体的5-溴-3-环丙基吡啶-2-胺(30.4g，143mmol，49.9％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值213.01和215.01；实测值215.0；Rt＝0.834。
步骤3：5-(二苯亚甲基氨基)-3-环丙基吡啶-2-胺的合成
将5-溴-3-环丙基吡啶-2-胺(15.0g，70.4mmol)、二苯基甲亚胺(14.0g，77.4mmol，12.9mL)、碳酸铯(68.8g，211mmol)、XantPhos(2.04g，3.52mmol)和Pd2(dba)3(1.61g，1.76mmol)于二噁烷(250mL)中的混合物抽真空，然后用Ar回填。在90℃、Ar气氛下将反应混合物搅拌12h。将反应混合物冷却至室温，用MTBE(250mL)稀释，且过滤。将滤液在真空中浓缩，以得到呈棕色胶状物的5-(二苯亚甲基氨基)-3-环丙基吡啶-2-胺(27.3g，粗品)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.26-0.27(m,2H),0.75-0.76(m,2H),1.46-1.47(m,1H),4.52(br,2H),6.62(m,1H),7.08(m,2H),7.29-7.41(m,6H),7.53(m,1H),7.69(m,2H)。
步骤4：3-环丙基吡啶-2,5-二胺的合成
将36％重量/重量盐酸水溶液(4.50g，123mmol，5.63mL)添加到5-(二苯亚甲基氨基)-3-环丙基吡啶-2-胺(15.0g，35.9mmol)于THF(150mL)和水(100mL)中的溶液中。将所得混合物在21℃下搅拌18h。将所获得的混合物用水(20.0mL)稀释且用MTBE(2x25.0 mL)萃取。收集有机层且丢弃。将水层用固体K2CO3碱化至pH≈10-11且用DCM(4x25.0 mL)萃取。将合并的有机层经K2CO3干燥且在减压下浓缩，以得到呈红色油状物的3-环丙基吡啶-2,5-二胺(5.30g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值150.11；实测值150.2；Rt＝0.323。
步骤5：N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1319)的合成
在室温下将3-环丙基吡啶-2,5-二胺(1.15g，2.31mmol)和HAT U(923mg，2.43mmol)混合于无水DMF(10.0mL)中。将所得混合物搅拌15min。向其中添加2-[(2R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酸锂(718mg，2.31mmol)，且在室温下继续搅拌过夜。将所获得的混合物倒入到水中且用EtOAc萃取3次。将合并的有机层用水、盐水洗涤且在真空中浓缩。使残余物经历HPLC(0.5-6.5min 30-65％水-ACN；流速：30mL/min，柱：Waters SunFi re C18，100x19 mm，5μm)。通过手性柱(Chiral ART(250*20，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，12ml/min，RT＝34.231min)纯化所获得的物质(236.5mg)，以得到呈棕色固体的N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(168mg，385μmol，16.7％产率)。
RT＝58.171min(Chiralpak IC(250*4.6，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.40-0.47(m,2H),0.83-0.89(m,2H),1.00-1.04(m,3H),1.32-1.40(m,2H),1.60-1.90(m,2H),2.05-2.37(m,2H),3.50(d,1H),4.05(d,1H),5.30-5.77(m,3H),7.28-7.50(m,2H),7.99-8.06(m,2H),8.15-8.18(m,1H),9.39(m,1H),10.55(m,1H)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值436.2；实测值436.2；Rt＝2.536。
实施例234.rel-N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-甲基-1,3-苯并噻唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(对映异构化合物1313)和rel-N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-甲基-1,3-苯并噻唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1313)的合成
步骤1：N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[5-甲基-2-(2-甲基-1,3-苯并噻唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺
在室温下将2-[(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸锂盐(2.10g，3.25mmol)和HATU(1.36g，3.57mmol)混合于无水DMF(25mL)中且将所得混合物搅拌15min。向其中添加2-甲基-5-(5-甲基-2-哌啶基)-1,3-苯并噻唑(0.8g，3.25mmol)，且将所得混合物在室温下搅拌2h。使所得混合物经历HPLC(40-65 0.5-6.5min水-乙腈；流速30ml/min(装载泵4ml/min乙腈)；柱SunFire 100x19 mm 5um(R))。获得呈米色固体的N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[5-甲基-2-(2-甲基-1,3-苯并噻唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.3398g，755.84umol，23.28％产率)和13％顺式杂质。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值449.2；实测值450.2；Rt＝2.663min。
步骤2：rel-N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-甲基-1,3-苯并噻唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(对映异构化合物1313)和rel-N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-甲基-1,3-苯并噻唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1313)的合成
通过手性色谱(第1次运行：Chiralpak IC-III(250*20，5mkm)，IPA-MeOH，50-50，10ml/min，然后第2次运行：Chiralcel OD-H(250*20，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，12ml/min)分离非对映异构体的混合物，以获得N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-甲基-1,3-苯并噻唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(117.08mg，260.43umol，34.46％产率)和N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-甲基-1,3-苯并噻唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(110.18mg，245.08umol，32.42％产率)
分析型：
化合物1313的RT(Chiralpak IC(250*4.6，5mkm)，IPA-MeOH，50-50，0.6ml/min)-26.667min；
对映异构化合物1313的RT(Chiralpak IC(250*4.6，5mkm)，IPA-MeOH，50-50，0,5ml/min)-16.52min。
制备型：
安装运行(自P2和其顺式杂质的混合物分离P1)：
化合物1313的RT(Chiralpak IC-III(250*20，5mkm)，IPA-MeOH，50-50，10ml/min)-34.014min；
对映异构化合物1313的RT(具有顺式杂质)(Chiralpak IC-III(250*20，5mkm)，IPA-MeOH，50-50，10ml/min)-19.557min。
制备型，第二次运行(P2与顺式杂质的分离)
对映异构化合物1313的RT(Chiralcel OD-H(250*20，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，12ml/min)＝17.823min。
化合物1313：
1H NMR(600MHz,dmso)δ0.40-0.47(m,2H),0.83-0.89(m,2H),1.00-1.04(m,3H),1.22-1.39(m,2H),1.61-1.89(m,2H),2.05-2.36(m,2H),2.78(s,3H),3.48(d,1H),4.03(d,1H),5.28-5.76(m,3H),7.28-7.40(m,2H),7.83-7.86(m,1H),7.99-8.06(m,2H),10.54(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值263.1；实测值264.2；Rt＝2.800min。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值449.2；实测值450.2；Rt＝2.551min。
对映异构化合物1313：
1H NMR(600MHz,dmso)δ0.40-0.47(m,2H),0.83-0.89(m,2H),1.00-1.04(m,3H),1.22-1.38(m,2H),1.60-1.89(m,2H),2.05-2.36(m,2H),2.78(s,3H),3.48(d,1H),4.03(d,1H),5.28-5.76(m,3H),7.28-7.39(m,2H),7.83-7.86(m,1H),7.99-8.06(m,2H),10.54(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值449.2；实测值450.2；Rt＝2.527min。
实施例235.N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1361)和N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1251)的合成
步骤1：N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
在21℃下，将5-(5-甲基-2-哌啶基)-1H-吲唑(0.1g，464.48umol)、HATU(229.59mg，603.83umol)混合于无水DMF(5mL)中，且将所得混合物搅拌15min。向其中添加2-[(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸钠(225.92mg，464.48umol)，且将所得混合物在21℃下搅拌过夜。使所得混合物经历HPLC(30-55 0.5-6.5min水-乙腈；流速30ml/min(装载泵5ml/min乙腈)；柱SunFire 100x19 mm 5um(R))。获得呈淡黄色固体的N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(57.1mg，136.44umol，29.38％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值418.2；实测值419.4；Rt＝2.211min。
步骤2：实施例236.N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1361)和N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1251)的合成
通过手性色谱(柱：Chiralpak IC-III(250*20mm，5mkm)；流动相：IPA-MeOH 50-50流速：10mL/min)分离非对映异构体的混合物，以获得N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺化合物1361(21.4mg，51.14umol，37.48％产率，具有5.4％顺式杂质)和N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺化合物1251(20.41mg，48.77umol，35.74％产率)
分析型：
化合物1361的RT(Chiralpak IC(250*4.6，5mkm),IPA-MeOH，50-50，0,5ml/min)-11.4912min；
化合物1251的RT(Chiralpak IC(250*4.6，5mkm)，IPA-MeOH，50-50，0,5ml/min)-24.8342min。
制备型：
化合物1361的RT(Chiralpak IC-III(250*20，5mkm)，IPA-MeOH，50-50，10ml/min)-12.466min；
化合物1251的RT(Chiralpak IC-III(250*20，5mkm)，IPA-MeOH，50-50，10ml/min)-25.178min。
化合物1361：
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)0.44(m,2H),0.87(m,2H),1.02(m,3H),1.33(m,1H),1.76(m,3H),2.19(m,2H),2.76(m,1H),3.74(m,1H),5.72(m,3H),7.27(d,1H),7.36(m,1H),7.53(m,1H),7.69(m,1H),8.03(m,2H),10.50(s,1H),13.00(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值418.2；实测值419.2；Rt＝1.843min。
化合物1251：
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)0.44(m,2H),0.87(m,2H),1.01(m,3H),1.35(m,1H),1.76(m,3H),2.19(m,2H),2.76(m,1H),3.74(dd,1H),5.72(m,3H),7.27(m,1H),7.37(m,1H),7.53(m,1H),7.69(m,1H),8.03(m,2H),10.49(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值418.2；实测值419.2；Rt＝1.838min。
实施例236.双环哌啶化合物的文库合成
将DIPEA(3.5当量)添加到2-((5-氨基甲酰基吡啶-3-基)氨基)-2-氧代乙酸(1.1当量；反应物1)和相应胺(1.0当量；反应物2)于DMF(2.0mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU(1.2当量)于DMF(1.0mL)中的溶液。将反应混合物在室温下搅拌过夜。在消耗所有起始材料(如通过LCMS展示)之后，将所得混合物在减压下浓缩。使残余物经历HPLC(C18柱且以MeOH-H2O+0.1％ NH3为流动相，运行时间5min)，以得到纯产物。
5-[2-(1-苯甲基-十氢-1,6-萘啶-6-基)-2-氧代乙酰胺基]吡啶-3-甲酰胺(化合物412)的合成
产率：31.0mg，43.44％
1H NMR(500MHz,DMSO)δ1.34-1.49(m,2H),1.50-1.65(m,3H),1.88-2.09(m,2H),2.16-2.34(m,1H),2.44-2.47(m,1H),2.68-2.99(m,2H),3.04-3.16(m,1H),3.48-3.57(m,1H),3.59-3.83(m,2H),3.98-4.15(m,1H),7.20-7.27(m,1H),7.27-7.35(m,4H),7.62(s,1H),8.18(s,1H),8.47-8.55(m,1H),8.75-8.80(m,1H),8.85-8.92(m,1H),11.11(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值421.2；实测值422.2；Rt＝0.759min。
5-[2-(4a-羟基-十氢异喹啉-2-基)-2-氧代乙酰胺基]吡啶-3-甲酰胺(化合物421)的合成
产率：21.8mg，30.16％
1H NMR(500MHz,DMSO)δ1.16-1.29(m,3H),1.30-1.51(m,4H),1.53-1.64(m,4H),1.83-1.99(m,1H),3.12-3.27(m,1H),3.55-3.69(m,1H),3.77-4.11(m,1H),4.48-4.55(m,1H),7.62(s,1H),8.17(s,1H),8.47-8.54(m,1H),8.74-8.80(m,1H),8.87(dd,1H),11.08(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值346.2；实测值347.2；Rt＝2.126min。
5-[2-(6-羟基-十氢异喹啉-2-基)-2-氧代乙酰胺基]吡啶-3-甲酰胺(化合物418)的合成
产率：5.4mg，8.35％
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值346.2；实测值347.2；Rt＝1.765min。
5-{2-[6-(氨基甲酰基甲基)-十氢异喹啉-2-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物420)的合成
产率：19.9mg，28.46％
1H NMR(500MHz,DMSO)δ0.87-1.02(m,1H),1.17-1.31(m,1H),1.33-1.56(m,4H),1.60-1.84(m,3H),1.86-1.95(m,1H),1.96-2.02(m,1H),2.07-2.26(m,1H),2.68-2.97(m,2H),3.09-3.26(m,1H),3.59-4.00(m,1H),4.11-4.48(m,1H),6.70(s,1H),7.11-7.30(m,1H),7.62(s,1H),8.17(s,1H),8.44-8.57(m,1H),8.73-8.81(m,1H),8.84-9.14(m,1H),11.10(br s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值387.2；实测值388.2；Rt＝2.023min。
外消旋-5-{2-[(1R,5S)-3-氧杂螺[双环[3.1.0]己烷-2,3'-哌啶]-1'-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物124)的合成
通过一般程序制备。产率：16.0mg，32.0％
1H NMR(500MHz,cdcl3)δ0.52(m,2H),1.42(m,1H),1.80(m,4H),3.05(m,1H),3.40(m,1H),3.75(m,3H),4.10(m,1H),4.43(m,1H),5.96(m,2H),8.62(m,1H),8.86(m,2H),9.41(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值344.2；实测值345.4；Rt＝2.275min。
5-(2-{十氢-1H-环庚并[c]吡啶-2-基}-2-氧代乙酰胺基)吡啶-3-甲酰胺(化合物133)的合成
通过一般程序制备。产率：18.1mg，51.71％
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ1.27(m,5H),1.52(m,3H),1.64(m,4H),1.76(m,1H),1.83(m,1H),1.92(m,1H),3.18(m,1H),3.49(m,1H),3.64(m,1H),7.61(s,1H),8.16(s,1H),8.50(m,1H),8.77(m,1H),8.86(m,1H),10.77(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值344.2；实测值345.1；Rt＝1.161min。
5-[2-(5-环戊基-2-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基]吡啶-3-甲酰胺(化合物143)的合成
通过一般程序制备。产率：18.0mg，51.43％
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ0.97(m,2H),1.23(m,3H),1.35(m,2H),1.44(m,2H),1.56(m,3H),1.71(m,2H),1.88(m,3H),3.01(m,0.5H),3.45(m,1H),4.23(m,1.5H),7.61(s,1H),8.17(s,1H),8.49(s,1H),8.77(m,1H),8.87(m,1H),10.80(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值358.2；实测值359.1；Rt＝1.214min。
5-(2-{3-氧杂螺[双环[3.1.0]己烷-2,4'-哌啶]-1'-基}-2-氧代乙酰胺基)吡啶-3-甲酰胺(化合物149)的合成
通过一般程序制备。产率：16.0mg，45.71％
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)0.27(m,1H),0.45(m,1H),1.54(m,3H),1.63(m,3H),3.20(m,1H),3.35(m,1H),3.59(m,1H),3.68(m,2H),3.90(m,1H),7.59(s,1H),8.15(s,1H),8.47(s,1H),8.75(m,1H),8.85(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值344.2；实测值345.1；Rt＝0.916min。
5-[2-(2-甲基-十氢喹啉-1-基)-2-氧代乙酰胺基]吡啶-3-甲酰胺(化合物144)的合成
通过一般程序制备。产率：3.4mg，9.71％
1H NMR(氯仿-d,600MHz):δ(ppm)1.33(m,6H),1.48(m,1H),1.66(m,2H),1.73(m,2H),1.89(m,3H),2.01(m,3H),4.53(m,1H),4.75(m,1H),6.25(s,1H),6.86(s,1H),8.78(s,1H),8.98(s,1H),9.11(s,1H),10.02(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值344.2；实测值345.1；Rt＝1.141min。
5-{2-[2-(2-羟基环戊基)哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物169)的合成
通过一般程序制备。产率：6.1mg，17.43％
1H NMR(氯仿-d,500MHz):δ(ppm)1.31(m,1H),1.73(m,8H),2.05(m,2H),2.42(m,1H),3.01(m,1H),4.03(m,1H),4.52(m,1H),5.06(m,1H),8.63(s,1H),8.83(m,1H),8.89(m,1H),9.47(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值360.2；实测值361.2；Rt＝0.830min。
5-(2-氧代-2-{9-硫杂-2-氮杂螺[5.5]十一烷-2-基}乙酰胺基)吡啶-3-甲酰胺(化合物166)的合成
通过一般程序制备。产率：10.2mg，29.14％
1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)1.53(m,6H),2.43(m,2H),2.66(m,2H),3.28(m,2H),3.43(m,4H),7.62(m,1H),8.17(m,1H),8.49(s,1H),8.77(s,1H),8.88(m,1H),10.47(s,1H)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值362.2；实测值363.1；Rt＝1.002min。
5-[2-(5,5-二甲基-十氢异喹啉-2-基)-2-氧代乙酰胺基]吡啶-3-甲酰胺(化合物141)的合成
通过一般程序制备。产率：14.5mg，41.43％
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ0.84(m,6H),1.01(m,2H),1.21(m,2H),1.37(m,1H),1.46(m,3H),1.69(m,1H),2.31(m,1H),2.87(m,2H),3.77(m,1H),4.34(m,1H),7.61(s,1H),8.16(s,1H),8.49(m,1H),8.77(s,1H),8.86(s,1H),10.70(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值358.2；实测值359.2；Rt＝1.289min。
实施例237.螺哌啶化合物的文库合成：
一般程序：
将TEA(10.0当量)添加到2-((5-氨基甲酰基吡啶-3-基)氨基)-2-氧代乙酸(1.1当量；反应物1)、相应胺(1.0当量；反应物2)和HATU(1.1当量)于DMF(3mL)中的溶液中。将反应混合物在25℃下搅拌12h，然后提交至反相HPLC(柱：YMC-Triart C18 100x20 mm 5um，流动相：0-20％0-5min 0.1％ NH3-甲醇)，以得到粗产物。通过反相HPLC(柱：SunFireC18100x19 mm 5um，流动相：0-25％0-5min水+甲醇+甲酸)再纯化所获得的固体，以得到目标产物。
5-[[2-(3-氧杂-9-氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物191)的合成
通过一般程序制备。产率：28.0mg(12.55％)
1H NMR(CD3OD,400MHz):δ(ppm)1.58(m,4H),1.65(m,4H),3.67(m,8H),8.07(s,1H),8.58(m,1H),8.77(d,1H),8.93(d,1H)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值346.2；实测值347.2；Rt＝2.062min。
5-(2-(3,3-二氧桥-3-硫杂-9-氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物195)的合成
通过一般程序制备。产率：44.0mg(26.75％)
1H NMR(dmso,600MHz):δ(ppm)1.53(m,4H),1.89(m,4H),3.02(m,4H),3.43(m,2H),3.50(m,2H),7.59(s,1H),8.15(s,1H),8.47(s,1H),8.75(s,1H),8.85(s,1H),11.11(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值394.2；实测值395.2；Rt＝1.565min。
5-[[2-(3-氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物203)的合成
通过一般程序制备。产率：53.0mg(29.20％)
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.39(m,15H),3.43(m,4H),7.64(s,1H),8.49(s,1H),8.78(s,1H),8.86(s,1H),11.12(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值344.2；实测值345.2；Rt＝3.186min。
实施例238.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1314)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1293)的合成
步骤1：5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噻唑的合成
将5-溴-1,3-苯并噻唑(500mg，2.34mmol)、KOAc(1.32g，4.67mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(900mg，3.54mmol)、环戊基(二苯基)磷烷；二氯钯；铁(171mg，0.234mmol)和二噁烷(10mL)的混合物在100℃下搅拌12小时。所得混合物通过添加水(100mL)来淬灭且用EtOAc(100mL*3)萃取。将合并的有机层用饱和NH4Cl水溶液(100mL*2)、盐水(100mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩，以得到残余物，其通过快速色谱(24g二氧化硅快速柱，石油醚/EtOAc，其中EtOAc为0～40％，流速：30mL/min，254nm)进行纯化，以得到呈黄色固体的5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噻唑(500mg，82.0％产率)。
步骤2：6-(1,3-苯并噻唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噻唑(500mg，1.91mmol)、3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(800mg，2.32mmol)、Na2CO3(660mg，6.23mmol)、Pd(dppf)Cl2-DCM(160mg，0.196mmol)、二噁烷(10mL)和H2O(3mL)的混合物在85℃下搅拌12小时。所得混合物通过添加水(100mL)来淬灭且用EtOAc(100mL*3)萃取。将合并的有机层用饱和NH4Cl水溶液(100mL*2)、盐水(100mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩，以得到残余物，其通过快速色谱(24g二氧化硅快速柱，石油醚/EtOAc，其中EtOAc为0～20％，流速：30mL/min，254nm)进行纯化，以得到呈黄色油状物的6-(1,3-苯并噻唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(528mg，83.4％产率)。
步骤3：2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将6-(1,3-苯并噻唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(300mg，0.908mmol)、TFA(2.5mL，32.4mmol)和DCM(2mL)的混合物在20℃下搅拌1小时。然后，在减压下浓缩混合物且将残余物溶解于MeOH(5mL)中，随后添加NaBH4(120mg，3.17mmol)。将混合物在0℃下搅拌30分钟。添加Boc2O(500mg，2.29mmol)、K2CO3(400mg，2.89mmol)和H2O(2mL)且将混合物在20℃下搅拌2.5小时。所得混合物通过添加水(50mL)来淬灭且用EtOAc(50mL*3)萃取。将合并的有机层用饱和NH4Cl水溶液(10mL*2)、盐水(10mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩。通过快速色谱(24g二氧化硅快速柱，石油醚/EtOAc，其中EtOAc为0～20％，流速：30mL/min，254nm)纯化残余物，以得到呈黄色油状物的2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(300mg，99.4％产率)。
步骤4：2-(2-溴-1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
向2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(300mg，0.902mol)、2-甲基丙-2-醇酸钠(350mg，3.64mmol)和DMF(1mL)的混合物中添加CBr4(333mg，1.00mmol)且将混合物在20℃下搅拌30分钟。所得混合物通过添加水(10mL)来淬灭且用EtOAc(30mL*3)萃取。将合并的有机层用饱和NH4Cl水溶液(10mL*2)、盐水(10mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩，以得到呈黄色油状物的2-(2-溴-1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(350mg，94.3％产率)。
步骤5：3-甲基-6-[2-(1-甲基-3,6-二氢-2H-吡啶-4-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
在微波下，将2-(2-溴-1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(350mg，0.851mmol)、1-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-硼酸频哪醇酯(280mg，1.25mmol)、Pd(PPh3)4(105mg，90.9umol)、K2CO3(364.00mg，2.63mmol)、H2O(3mL)和EtOH(10mL)的混合物在95℃下搅拌1.5小时。所得混合物通过添加水(10mL)来淬灭且用EtOAc(50mL*3)萃取。将合并的有机层用饱和NH4Cl水溶液(10mL*2)、盐水(10mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩，以得到残余物，其通过快速色谱(12g A二氧化硅快速柱，DCM/MeOH，其中MeOH为0～20％，流速：30mL/min，254nm)进行纯化，以得到呈黄色固体的3-甲基-6-[2-(1-甲基-3,6-二氢-2H-吡啶-4-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(250mg，69.0％产率)。
步骤6：5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
在氢气下(在气球中，15psi)，将5-甲基-2-[2-(1-甲基-3,6-二氢-2H-吡啶-4-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(250mg，0.585mmol)、Pd/C(170mg，具有50重量％水的10重量％Pd)于MeOH(5mL)中的混合物在20℃下搅拌12小时。将混合物过滤且在减压下浓缩，以得到呈黄色油状物的5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(120mg，47.8％产率)。
步骤7：2-(1-甲基-4-哌啶基)-5-(5-甲基-2-哌啶基)-1,3-苯并噻唑的合成
将5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(120mg，0.279mmol)、TFA(1mL，13.0mmol)和DCM(2mL)的混合物在20℃下搅拌2小时。在减压下浓缩混合物，以得到残余物，将其溶解于MeOH(约5mL)中且通过Na2CO3固体中和至pH＝7。在减压下浓缩混合物，以得到残余物，将其用DCM(50mL)研磨。将混合物过滤且将滤液在减压下浓缩，以得到呈黄色油状物的2-(1-甲基-4-哌啶基)-5-(5-甲基-2-哌啶基)-1,3-苯并噻唑(90mg，97.8％产率)。
步骤8：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
向2-[(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(55mg，0.22mmol)、2-(1-甲基-4-哌啶基)-5-(5-甲基-2-哌啶基)-1,3-苯并噻唑(90mg，0.273mmol)、HATU(104mg，0.274mmol)和DMF(5mL)的混合物中添加DIPEA(0.3mL，1.72mmol)且将混合物在20℃下搅拌12小时。通过快速色谱(柱：Sphercial C18，25g，40-60μm，MeCN/水(0.5v％NH3-H2O)，其中MeCN为0-45％，25mL/min，254nm)纯化混合物，以得到呈黄色油状物的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(60mg，42.0％产率)。
步骤9：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1314)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1293)的合成
将N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(45mg，88.8μmol)通过手性SFC分离(仪器：Thar800Q；柱：Daicel Chiralpak IG(250mm*30mm，10μm)；流动相：超临界CO2/EtOH(0.1％NH3-H2O，v％)＝50/50；流速：80mL/min；柱温：38℃；喷嘴温度：100巴；喷嘴温度：60℃；蒸发器温度：20℃；修整器温度：25℃；波长：220nm)来分离，以得到化合物1314(峰2，保留时间＝1.610min)和化合物1293(峰3，保留时间＝2.469min)。
化合物1314：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(15mg，具有反式相对化学的单一未知对映异构体，峰2，保留时间＝1.610min，白色固体)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm10.30(br s,1H),8.03(br d,J＝8.3Hz,2H),7.90(s,1H),7.50(br s,1H),7.40(br d,J＝8.0Hz,1H),5.60(br s,1H),5.37(br s,2H),3.71(br s,1H),2.89(br d,J＝11.8Hz,2H),2.23-2.34(m,5H),2.08-2.20(m,6H),2.06(s,3H),1.84-1.96(m,3H),1.71-1.83(m,1H),1.38(br d,J＝7.5Hz,1H),1.07(d,J＝7.0Hz,3H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值507.2，实测值507.2；HPLC：在220nm下为100％，在254nm下为100％；100％ee
化合物1293：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(15mg，具有反式相对化学的单一未知对映异构体，峰3，保留时间＝2.469min，白色固体)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm10.31(br s,1H),8.04(br d,J＝8.3Hz,2H),7.90(s,1H),7.50(br s,1H),7.41(br d,J＝8.3Hz,1H),5.60(br s,1H),5.37(br s,2H),3.70-3.90(m,1H),2.60(br t,J＝11.0Hz,4H),2.09-2.35(m,8H),2.06(br s,3H),1.90-2.02(m,4H),1.71-1.83(m,1H),1.37(br d,J＝11.3Hz,1H),1.07(d,J＝7.0Hz,3H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值507.2，实测值507.2；HPLC：在220nm下为100％，在254nm下为100％；100％ee。
实施例239.5-(2-(2-(2-(2-(二甲基氨基)乙基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-2-甲氧基烟酰胺(化合物1281、化合物1281和化合物1197)的合成
步骤1：5-(2-(2-(2-(2-(二甲基氨基)乙基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-2-甲氧基烟酰胺(化合物1281)的合成
通过一般程序2制备。产率：19.8mg(5.73％)。
HPLC条件：柱：YMC Triart C18 100*20mm，5微米；0-5min40-90％水-MeOH+0.1％NH4OH，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeOH)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.02-1.06(m,3H),1.35(m,1H),1.70(m,1H),1.90(m,1H),2.09(m,2H),2.20(s,6H),2.29(m,2H),2.69(m,2H),3.22(m,2H),3.91-3.96(m,3H),5.71(m,1H),7.35(m,1H),7.65-7.74(m,2H),7.85(m,1H),7.98-8.05(m,1H),8.40-8.57(m,2H),11.10(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值524.2；实测值525.2；Rt＝2.151min。
步骤2：手性分离(化合物1281和化合物1197)
对外消旋5-(2-(2-(2-(2-(二甲基氨基)乙基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-2-甲氧基烟酰胺(290mg，552.77umol)进行手性分离(柱：Chirapak IC-III(250*20mm，5mkm)，IPA-MeOH，50-50，12ml/min)，以获得5-[[2-[(2R,5S)-2-[2-[2-(二甲基氨基)乙基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(140mg，266.85umol，96.55％产率)(RT＝53.79min)和5-[[2-[(2S,5R)-2-[2-[2-(二甲基氨基)乙基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(140mg，266.85umol，96.55％产率)(RT＝27.78min)。
化合物1197于分析条件下(柱：IC，IPA-MeOH，50-50，0.6ml/min为流动相)的保留时间为57.47min且化合物1197的保留时间为29.97min。
化合物1281：
保留时间：57.47min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.04(m,3H),1.35(m,1H),1.72(m,1H),1.88(m,1H),2.11(m,1H),2.20(d,6H),2.31(m,1H),2.69(m,3H),3.21(m,2H),3.50(m,1H),3.94(m,3H),5.50(m,1H),7.37(dd,1H),7.72(m,2H),7.86(d,1H),8.02(dd,1H),8.50(m,2H),11.07(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值524.2；实测值525.2；Rt＝2.635min。
化合物1197：
保留时间：29.97min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.04(m,3H),1.37(m,1H),1.72(m,1H),1.88(m,1H),2.11(m,1H),2.20(m,6H),2.31(m,1H),2.69(m,3H),3.21(m,2H),3.95(m,4H),5.50(m,1H),7.37(dd,1H),7.73(m,2H),7.86(m,1H),8.02(dd,1H),8.52(m,2H),11.07(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值524.2；实测值525.2；Rt＝2.632min。
实施例240.N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[6-[(2S)-2,4-二甲基哌嗪-1-基]-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1099)和N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[6-[(2R)-2,4-二甲基哌嗪-1-基]-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1294)的合成
手性分离条件：Chiralpak IA，250*20mm，5mkm，IPA-MeOH，50-50，10mL/min，注入体积：200.000μl；柱温：24℃；波长：205nm、264nm)，保留时间(异构体A)＝34.968min；保留时间(异构体B)＝51.008min
通过手性HPLC将N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[6-(2,4-二甲基哌嗪-1-基)-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(100mg，208.50umol)分成对映异构体，得到：化合物1099N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[6-[(2S)-2,4-二甲基哌嗪-1-基]-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(41mg，85.49umol，42.00％产率)(其中保留时间＝28.721min(分析型)、34.968min(制备型))和化合物1294N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[6-[(2R)-2,4-二甲基哌嗪-1-基]-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(38mg，79.23umol，38.00％产率)(其中保留时间＝40.733min(分析型)、51.008min(制备型))。
化合物1294：
产率：41.0mg(42.00％)
RT(Chiralpak IA(250*20mm，5mkm)，IPA-MeOH，50-50，0.6mL/min)＝38.669min。
1H NMR(500MHz,dmso)δ0.96-1.03(m,3H),1.07-1.14(m,6H),1.26-1.38(m,1H),1.66-1.77(m,1H),1.81-2.00(m,3H),2.04-2.14(m,2H),2.17(s,3H),2.36-2.41(m,2H),2.65-2.72(m,1H),2.79-3.19(m,3H),3.36-3.99(m,2H),4.43(s,1H),5.00-5.53(m,1H),5.58-5.67(m,2H),6.71-6.80(m,1H),7.38-7.54(m,2H),7.98-8.09(m,2H),10.42-10.52(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值481.2；实测值481.2；Rt＝0.736min。
化合物1099：
产率：38.0mg(38.00％)
RT(Chiralpak IA(250*20mm，5mkm)，IPA-MeOH，50-50，0.6mL/min)＝28.704min。
1H NMR(500MHz,dmso)δ0.97-1.03(m,3H),1.07-1.13(m,6H),1.27-1.37(m,1H),1.63-1.76(m,1H),1.78-2.02(m,3H),2.03-2.12(m,2H),2.17(s,3H),2.36-2.41(m,2H),2.65-3.23(m,4H),3.38-3.97(m,2H),4.43(s,1H),5.00-5.52(m,1H),5.56-5.67(m,2H),6.71-6.80(m,1H),7.38-7.54(m,2H),8.00-8.10(m,2H),10.44-10.54(m,1H)。
6LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值481.2；实测值481.4；Rt＝0.734min。
实施例241.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(3-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1310)的合成
将N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(5S)-5-甲基-2-[2-(3-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(50mg，0.103mmol)通过SFC(仪器：Berger，MultigrAM-II；柱：Daicel Chiralcel OD-H 250mm×30mm×5μm；流动相：超临界CO2/EtOH(0.1％NH3-H2O，v％)＝55/45；流速：80mL/min；柱温：38℃；喷嘴压力：100巴；喷嘴温度：60℃；蒸发器温度：20℃；修整器温度：25℃；波长：220nm)纯化，以得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(3-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(44.4mg，具有反式相对化学的单一已知对映异构体，峰2，保留时间：8.370min，白色固体)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 9.27(br s,1H),8.70(br s,1H),8.26-8.57(m,2H),7.99-8.23(m,2H),7.39-7.88(m,3H),5.49-5.89(m,1H),3.77-4.13(m,1H),3.50(br s,1H),2.37(br s,2H),2.25(br s,2H),2.13(br s,1H),1.85-2.09(m,2H),1.50(br s,1H),1.15(brd,J＝6.5Hz,3H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值487.2，实测值487.3；HPLC：在254nm下为100％；100％ee、99.5％de。
实施例242.rel-5-[[2-[(2S,4R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-甲氧基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(化合物1364)和rel-5-[[2-[(2R,4S,5R)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-甲氧基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(化合物1344)的合成
步骤1：外消旋-(6S,9S)-9-(1,3-苯并噻唑-5-基)-6-甲基-1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷的合成
将2-(2-甲基-1,3-二氧环戊烷-2-基)丙-1-胺(6.67g，45.96mmol)溶解于甲苯(60mL)中且向其中添加1,3-苯并噻唑-5-甲醛(7.5g，45.96mmol)，随后添加对甲苯磺酸单水合物(26.23g，137.87mmol，21.15mL)。将所得混合物加热至回流且以迪安-斯塔克分离器回流过夜。冷却反应混合物且添加K2CO3水溶液(50mL)。将所得混合物转移至分离漏斗且分离有机层。用EtOAc(2x100 mL)萃取水层，且将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且浓缩。将残余物溶解于CHCl3(200mL)中且将所得混合物用NaHSO4水溶液(于10mL水中的1g，2*50mL)萃取。将合并的水层用CHCl3(2*100mL)洗涤，然后用K2CO3(20g)碱化。将所得混合物用CHCl3(2*100mL)萃取且将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且蒸发，以获得(6S,9S)-9-(1,3-苯并噻唑-5-基)-6-甲基-1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷(4.63g，粗品)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0093(d,3H),1.70(m,4H),1.99(m,2H),2.84(m,1H),3.14(m,1H),4.01(m,3H),7.54(d,1H),7.91(d,1H),8.13(s,1H),9.00(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值291.2；实测值291.2；Rt＝0.752min。
步骤2：外消旋-(2S,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-4-酮的合成
将(6S,9S)-9-(1,3-苯并噻唑-5-基)-6-甲基-1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷(7.53g，25.93mmol)溶解于6N HCl(300mL)中且将所得混合物在80℃下(在油浴中)加热过夜。将反应混合物冷却且用K2CO3碱化至pH＝10。将所得混合物用DCM(2*200mL)萃取且将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且蒸发，以获得(2S,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-4-酮(6.3g，粗品)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)1.08(d,3H),2.89(m,4H),3.53(m,1H),4.12(m,1H),7.50(d,1H),7.95(d,1H),8.16(s,1H),9.01(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值247.0；实测值247.0；Rt＝0.551min。
步骤3：外消旋-(2S,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-4-醇的合成
将硼氢化钠(635.80mg，16.81mmol，594.21uL)分批添加到(2S,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-4-酮(6.9g，28.01mmol)于甲醇中的溶液中。将所得悬浮液在室温下搅拌1h。添加水(10mL)且将混合物用MTBE(2x10 mL)萃取。将有机相经Na2SO4干燥，过滤且蒸发，以获得(2S,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-4-醇(5.06g，粗品)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)1.02(d,3H),1.69(m,4H),2.17(m,1H),2.49(m,1H),3.28(m,2H),3.85(m,1H),7.47(d,1H),7.89(d,1H),8.09(s,1H),8.95(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值249.0；实测值249.0；Rt＝0.463min。
步骤4：外消旋-(2S,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-羟基-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将99％碳酸氢钠(3.04g，36.24mmol，1.41mL)溶解于THF(15mL)和水(15mL)中，然后添加(2S,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-4-醇(3g，12.08mmol)。将反应混合物在室温下搅拌5min，随后添加二碳酸二-叔丁酯(2.90g，13.29mmol，3.05mL)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物用EtOAc/水稀释，分离有机相且将水层用EtOAc(2次)洗涤，将合并的有机相用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩，以得到(2S,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-羟基-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.4g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值349.2；实测值349.2；Rt＝1.107min。
步骤5：外消旋-(2S,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-甲氧基-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将氢化钠(909.15mg，37.88mmol)添加到(2S,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-羟基-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.4g，12.63mmol)于DMF(44mL)中的溶液中且将混合物搅拌30分钟。添加碘甲烷(5.38g，37.88mmol，2.36mL)且将混合物搅拌5h。添加水(10mL)且将混合物用乙醚(2×10mL)萃取。将合并的有机级分用水(4×10mL)和盐水洗涤，干燥(MgSO4)且将溶剂在减压下蒸发，以得到标题化合物(2S,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-甲氧基-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.23g，粗品)，其不经进一步纯化即用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值363.2；实测值363.2；Rt＝1.342min。
步骤6：外消旋-5-[(2S,5S)-4-甲氧基-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑的合成
将(2S,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-甲氧基-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.23g，11.67mmol)于二噁烷/HCl(5mL)中的溶液在室温下搅拌2h。将所形成的沉淀过滤，用MTBE(2x 10mL)洗涤且在减压下干燥，以获得5-[(2S,5S)-4-甲氧基-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑(2.98g，粗品，HCl)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值263.0；实测值263.0；Rt＝0.802min
步骤7：外消旋-5-[[2-[(2S,4R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-甲氧基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺的合成
将5-[(2S,5S)-4-甲氧基-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑(0.2g，762.28umol)、2-[(5-氨基甲酰基-2-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(182.33mg，762.28umol)、三乙胺(385.68mg，3.81mmol，531.24uL)混合于DMF(2mL)中，然后添加HATU(434.76mg，1.14mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌12h。蒸发溶剂。通过HPLC(2-10min 0-45％ MeCN30mL/min(装载泵4mL MeCN；柱：SunFire 100*19mm，5微米)纯化所得粗产物，以获得外消旋-5-[[2-[(2S,4R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-甲氧基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(44.2mg，91.41umol，11.99％产率)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值484.2；实测值484.2；Rt＝1.013min。
步骤8：rel-5-[[2-[(2S,4R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-甲氧基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(化合物1364)和rel-5-[[2-[(2R,4S,5R)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-甲氧基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(化合物1344)的合成
对外消旋-5-[[2-[(2S,4R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-甲氧基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(44.20mg，91.41umol)进行手性分离(Chiralpak AD-HIII(250*20，5mkm)，IP A-MeOH，50-50，11mL/min)，以获得化合物1344rel-5-[[2-[(2R,4S,5R)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-甲氧基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(12.84mg，26.55umol，29.05％产率)和化合物1364rel-5-[[2-[(2S,4R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-甲氧基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(14.14mg，29.24umol，31.99％产率)。
制备型：
化合物1344的RT(Chiralpak AD-HIII(250*20，5mkm)，IPA-MeOH，50-50，11ml/min)＝89.951
化合物1364的RT(Chiralpak AD-HIII(250*20，5mkm)，IPA-MeOH，50-50，11ml/min)＝67.124
化合物1344：
产率：12.84mg(29.05％)
RT(Chiralcel OD-H(250*4.6，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝15.273min。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.04(d,3H),1.88(m,1H),2.28(m,1H),2.38(m,1H),3.06(m,3H),3.18(m,1H),3.59(m,1H),3.93(m,4H),5.44(m,1H),7.48(m,1H),7.71(m,2H),8.05(m,2H),8.42(m,2H),9.35(m,1H),10.95(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值484.2；实测值484.2；Rt＝2.873min。
化合物1364：
产率：14.14mg(31.99％)
RT(Chiralcel OD-H(250*4.6，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝19.962min。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.04(d,3H),1.88(m,1H),2.28(m,1H),2.38(m,1H),3.06(m,3H),3.18(m,1H),3.58(m,1H),3.92(m,4H),5.44(m,1H),7.48(m,1H),7.71(m,2H),8.04(m,2H),8.42(m,2H),9.35(m,1H),10.95(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值484.2；实测值484.2；Rt＝2.873min。
实施例243.rel-5-[[2-[(2R,4S,5R)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-甲氧基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物1161)和rel-5-[[2-[(2S,4R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-甲氧基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物1221)的合成
根据一般方法制备。
制备型：
化合物1221的RT(ChirapakAS-H(250*20mm，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，70-15-15，15mL/min)＝28.857min。
化合物1161的RT(ChirapakAS-H(250*20mm，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，70-15-15，15mL/min)＝17.976min。
化合物1221：
产率：7.87mg(32.66％)
RT(Chiralpak AS-H(250*4.6，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，70-15-15，0.6mL/min)＝29.012min。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.05(d,3H),1.91(m,1H),2.28(m,2H),3.06(m,3H),3.19(m,1H),3.76(m,2H),5.44(m,1H),7.52(m,2H),8.07(m,3H),8.41(m,1H),8.79(m,2H),9.34(m,1H),11.15(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值454.2；实测值454.2；Rt＝2.517min。
化合物1161：
产率：8.35mg(34.65％)
RT(Chiralpak AS-H(250*4.6，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，70-15-15，0.6mL/min)＝19.651min。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.05(d,3H),1.93(m,1H),2.28(m,2H),3.06(m,3H),3.19(m,1H),3.76(m,2H),5.44(m,1H),7.52(m,2H),8.08(m,3H),8.41(m,1H),8.79(m,2H),9.35(m,1H),11.15(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值454.2；实测值454.2；Rt＝2.520min。
实施例244.rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,4R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-甲氧基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1138)和rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,4S,5R)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-甲氧基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1286)的合成
步骤1：外消旋-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-甲氧基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
将5-[(2S,5S)-4-甲氧基-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑(246.00mg，937.61μmol)、2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(196.15mg，937.61μmol)和三乙胺(474.38mg，4.69mmol，653.42μL)一起混合于DMF(3mL)中且向其中添加HATU(427.81mg，1.13mmol)。将所得混合物搅拌过夜。将反应混合物提交至HPLC且纯化(2-10min 45-55％甲醇+NH3流速30mL/min(装载泵4mL甲醇)，柱：SunFire 100*19mm，5微米)，以获得N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-甲氧基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(44.1mg，97.23μmol，10.37％产率)、N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-甲氧基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(33mg，72.76μmol，7.76％产率)和N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-甲氧基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(31.7mg，69.89μmol，7.45％产率)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值454.0；实测值454.0；Rt＝0.964min。
步骤2：rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,4R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-甲氧基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1138)和rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,4S,5R)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-甲氧基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1286)的合成
对外消旋-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-甲氧基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(108.8mg，239.88μmol)(合并的级分)进行手性分离(Chiralcel OD-H(250*20mm，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，12mL/min，保留时间(化合物1138)＝12.331min，保留时间(化合物1286)＝14.940min)，以获得rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,4R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-甲氧基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(34.1mg，75.18μmol，31.34％产率)(化合物1138)和rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,4S,5R)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-甲氧基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(30.98mg，68.30μmol，28.47％产率)(化合物1286)
化合物1138：
产率：34.1mg(31.34％)
RT(Chiracel OD-H(250*4.6，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝11.014min。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.05(m,6H),1.89(m,1H),2.26(m,2H),2.41(m,2H),3.05(m,3H),3.18(m,1H),3.64(m,2H),5.58(m,3H),7.49(m,2H),8.07(m,3H),9.37(s,1H),10.43(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值454.0；实测值454.0；Rt＝0.967min。
化合物1286：
产率：30.98mg(28.47％)
RT(Chiracel OD-H(250*4.6，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝13.123min。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.05(m,6H),1.89(m,1H),2.26(m,2H),2.41(m,2H),3.05(m,3H),3.18(m,1H),3.65(m,2H),5.58(m,3H),7.49(m,2H),8.07(m,3H),9.37(s,1H),10.43(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值454.0；实测值454.0；Rt＝0.967min。
实施例245.rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,4R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-甲氧基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1130)和rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,4S,5R)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-甲氧基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1216)的合成
步骤1：外消旋-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-甲氧基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
将5-[(2S,5S)-4-甲氧基-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑(200mg，762.28μmol)、2-[(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(148.78mg，762.28μmol)和三乙胺(385.68mg，3.81mmol，531.24μL)一起混合于DMF(3mL)中且向其中添加HATU(347.81mg，914.74μmol)。所得混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物提交至HPLC且纯化(2-10min30-45％ MeOH 30mL/min(装载泵4mL MeOH柱：SunFire 100*19mm，5微米)，以获得N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-甲氧基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(34.4mg，78.27μmol，10.27％产率)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-甲氧基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(20.7mg，47.10μmol，6.18％产率)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值440.1；实测值440.1；Rt＝0.912min。
步骤2：rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,4R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-甲氧基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1130)和rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,4S,5R)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-甲氧基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1216)的合成
对外消旋-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-甲氧基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(55.1mg，125.36μmol)进行手性分离(Chiralpak IA(250*30mm，5mkm)，IPA-MeO H，50-50，20mL/min，Rt(化合物1130)＝40.066min，Rt(化合物1216)＝56.059min)，以获得rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,4R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-甲氧基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(14.26mg，32.44μmol，25.88％产率)和rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,4S,5R)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-甲氧基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(14.09mg，32.06μmol，25.57％产率)。
化合物1130：
产率：14.26mg(25.88％)
RT(Chiralpak IA(250*4.6，5mkm)，IPA-MeOH，50-50，0.6mL/min)＝31.408min。
1H NMR(600MHz,dmso)δ1.00-1.10(m,3H),1.83-2.21(m,5H),2.22-2.35(m,1H),3.03-3.29(m,4H),3.34-4.10(m,2H),5.30-5.67(m,3H),7.21-7.54(m,2H),7.79-8.15(m,3H),9.32-9.39(m,1H),10.28-10.58(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值440.2；实测值440.2；Rt＝2.399min。
化合物1216：
产率：14.09mg(25.57％)
RT(Chiralpak IA(250*4.6，5mkm)，IPA-MeOH，50-50，0.6mL/min)＝51.749min。
1H NMR(600MHz,dmso)δ0.99-1.09(m,3H),1.84-2.18(m,5H),2.24-2.35(m,1H),3.01-3.28(m,4H),3.34-4.08(m,2H),5.29-5.73(m,3H),7.20-7.54(m,2H),7.80-8.16(m,3H),9.33-9.41(m,1H),10.28-10.64(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值440.2；实测值440.2；Rt＝2.395min。
实施例246.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1223、化合物1121和化合物1229)的合成
步骤4：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1223)的合成
将DIPEA(87.45mg，676.63umol，117.86uL)添加到相应2-[(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(52.82mg，270.65umol)和1-甲基-4-[3-(5-甲基-2-哌啶基)苯基]哌嗪(74mg，270.65umol)于DMF(5mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU(113.20mg，297.72umol)。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC(Waters Sunfire C1820*100 5mkm柱且以MeOH+NH3为洗脱液混合物)，以得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(30.7mg，68.14umol，25.17％产率)。
化合物1223：
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.96-1.03(m,3H),1.25-1.38(m,1H),1.61-1.76(m,1H),1.80-1.93(m,1H),1.96-2.03(m,3H),2.04-2.17(m,1H),2.17-2.23(m,4H),2.40-2.44(m,4H),2.72-2.76(m,0.4H),3.07-3.13(m,4H),3.22-3.26(m,0.6H),3.39-4.04(m,1H),5.07-5.55(m,1H),5.58-5.67(m,2H),6.68-6.79(m,1H),6.78-6.84(m,2H),7.15-7.24(m,1H),7.40-7.50(m,1H),7.94-8.06(m,1H),10.45-10.58(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值450.2；实测值451.2；Rt＝1.880min。
步骤5：手性分离(化合物1121和化合物1229)
对外消旋N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(18.5mg，41.06μmol)进行手性分离(柱：Chiralpak AD-H(250-20mm-5m)；流动相：己烷-IPA-MeOH，40-30-30流速：12mL/min)，以获得N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[3-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(8.66mg，19.22μmol，46.81％产率)(RT＝25.5min)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(8.29mg，18.40μmol，44.81％产率)(RT＝47.1min)。
化合物1121：
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99-1.00(m,3H),1.33-1.36(m,2H),1.64-1.90(m,3H),1.99-2.20(m,6H),2.42-2.43(m,2H),3.08-3.26(m,4H),3.41-4.01(m,3H),5.10-5.62(m,4H),6.70-6.82(m,3H),7.19-7.22(m,1H),7.44-7.49(m,1H),7.96-8.01(m,1H),10.48-10.51(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值450.2；实测值451.2；Rt＝1.934min。
化合物1229：
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99-1.00(m,3H),1.22-1.36(m,2H),1.62-1.90(m,3H),1.99-2.20(m,6H),2.42-2.43(m,2H),3.08-3.24(m,4H),3.41-4.01(m,3H),5.10-5.62(m,4H),6.70-6.82(m,3H),7.19-7.22(m,1H),7.44-7.49(d,1H),7.96-8.01(d,1H),10.48-10.51(d,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值450.2；实测值451.2；Rt＝1.603min。
实施例247.rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,4R,5R)-4-异丙氧基-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1327)、rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,4S,5S)-4-异丙氧基-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1088)、rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,4S,5R)-4-异丙氧基-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1302)和rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,4R,5S)-4-异丙氧基-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1351)的合成
步骤1：(6R,9R)-6-甲基-9-苯基-1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷的合成
将2-(2-甲基-1,3-二氧环戊烷-2-基)丙-1-胺(2g，13.77mmol)溶解于苯(40mL)中且向其中添加苯甲醛(1.46g，13.77mmol，1.41mL)，随后添加对甲苯磺酸单水合物(7.86g，41.32mmol，6.34mL)。将所得混合物加热至回流且以迪安-斯塔克分离器回流过夜。反应完成之后，蒸发苯。将残余物溶解于20mL水中，添加K2CO3至碱性pH，将水相用CHCl3(3*15mL)萃取。将合并的有机层用NaHSO4水溶液(于20mL水中的2g，2*20mL)萃取。将合并的水层用K2CO3碱化。将所得混合物用CHCl3(3*20mL)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且蒸发，以获得(6R,9R)-6-甲基-9-苯基-1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷(1.1g，4.71mmol，34.23％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.88(d,3H),1.64(m,2H),1.88(m,1H),1.89(m,1H),2.73(m,1H),3.03(m,1H),3.82(m,1H),3.98(m,4H),7.29-7.33(m,5H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值234.2；实测值234.2；Rt＝0.803min。
步骤2：(2R,5R)-5-甲基-2-苯基哌啶-4-酮的合成
使(6R,9R)-6-甲基-9-苯基-1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷(1g，4.29mmol)于6NHCl(10mL)中的混合物在80℃下搅拌15h。反应完成之后，将10mL水添加到混合物且将溶液用K2CO3碱化至碱性pH。将水层用CHCl3(3*10mL)萃取，将合并的有机相经Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩，以获得(2R,5R)-5-甲基-2-苯基哌啶-4-酮(0.76g，4.02mmol，93.69％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)1.08(d,3H),2.57(m,2H),2.70(m,2H),3.47(m,1H),3.95(m,1H),7.37(m,5H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值190.2；实测值190.2；Rt＝0.626min。
步骤3：(2R,5R)-5-甲基-4-氧代-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
向(2R,5R)-5-甲基-2-苯基哌啶-4-酮(0.76g，4.02mmol)于THF(15mL)中的混合物中一次性添加碳酸叔丁氧基羰基叔丁酯(876.43mg，4.02mmol，921.59uL)。使所得混合物在室温下搅拌过夜。反应完成之后，在减压下蒸发THF，以得到(2R,5R)-5-甲基-4-氧代-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.1g，3.80mmol，94.66％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)1.17(m,3H),1.43(s,9H),2.48(m,1H),2.94(m,2H),3.58(m,1H),3.81(m,1H),5.60(m,1H),7.22-7.32(m,5H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值190.2；实测值190.2；Rt＝1.414min。
步骤4：(2R,4S,5R)-4-羟基-5-甲基-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将硼氢化钠(143.81mg，3.80mmol，134.40uL)一次性添加到(2R,5R)-5-甲基-4-氧代-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.1g，3.80mmol)于MeOH(20mL)中的冰冷溶液中。使所得混合物在25℃下搅拌过夜。反应完成之后，将MeOH蒸发至干。将20mL水添加到残余物中且将混合物用K2CO3碱化至碱性pH，将水相用CHCl3(3*15mL)萃取，将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且在减压下蒸发，以得到(2R,4S,5R)-4-羟基-5-甲基-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.9g，3.09mmol，81.25％产率)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值192.2；实测值192.2；Rt＝1.362min。
步骤5：(2R,4S,5R)-4-甲氧基-5-甲基-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
向(2R,4S,5R)-4-羟基-5-甲基-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.4g，1.37mmol)于DMF(10mL)中的混合物中分批添加于矿物油中的氢化钠(油分散体)60％分散物(47.34mg，2.06mmol)，将所得混合物在室温下搅拌20min且用冰冷却至0℃。一次性添加碘甲烷(292.27mg，2.06mmol，128.19uL)且使反应物在室温下搅拌48h。反应完成之后，将25mL水添加到混合物中。将水相用EtOAc(3*15mL)萃取，将合并的有机层用盐水(3*10mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩，以获得(2R,4S,5R)-4-甲氧基-5-甲基-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.4g，1.31mmol，95.41％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值306.2；实测值306.2；Rt＝1.428min。
步骤6：(2R,4S,5R)-4-甲氧基-5-甲基-2-苯基哌啶的合成
将(2R,4S,5R)-4-甲氧基-5-甲基-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.41g，1.34mmol)溶解于二噁烷/HCl(10mL)中。使所得混合物在25℃下搅拌17h。反应完成之后，将溶剂蒸发至干，以获得(2R,4S,5R)-4-甲氧基-5-甲基-2-苯基哌啶(0.23g，951.37umol，70.87％产率，HCl)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值206.2；实测值206.2；Rt＝0.842min。
步骤7：外消旋-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,4S,5R)-4-异丙氧基-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
向(2R,4S,5R)-4-异丙氧基-5-甲基-2-苯基哌啶(0.2g，741.26umol，HCl)、2-[(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(144.68mg，741.26umol)和三乙胺(525.06mg，5.19mmol，723.22uL)于DMF(4mL)中的混合物中一次性添加HATU(338.22mg，889.52umol)。使所得混合物在室温下搅拌19h。反应完成之后，将DMF蒸发，使残余物经历HPLC(0-5min30-80％水/MeOH/0.1％ NH4OH，流速：30mL/min(装载泵4mL/min MeOH)，柱：YMC TriartC18 100*20mm，5um)，以得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,4S,5R)-4-异丙氧基-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.052g，126.67umol，17.09％产率)。
1H NMR(500MHz,dmso)δ0.62-1.05(m,9H),1.67-1.92(m,1H),1.94-2.05(m,3H),2.15(s,1H),2.67-3.14(m,1H),3.37-3.68(m,3H),3.69-4.20(m,1H),5.14-5.57(m,1H),5.58-5.80(m,2H),7.02-7.23(m,1H),7.24-7.32(m,3H),7.34-7.42(m,1H),7.43-7.53(m,1H),7.80-8.06(m,1H),10.18-10.60(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值411.2；实测值411.2；Rt＝2.297min。
步骤8：rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,4R,5R)-4-异丙氧基-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1327)、rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,4S,5S)-4-异丙氧基-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1088)、rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,4S,5R)-4-异丙氧基-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1302)和rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,4R,5S)-4-异丙氧基-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1351)的合成
通过手性色谱(Chiralcel OD-H(250*20，5mkm)，己烷-IPA-Me OH，90-5-5，12mL/min)分离非对映异构体的混合物，以获得化合物1327rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,4R,5R)-4-异丙氧基-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.00422g，10.28μmol，8.12％产率)、化合物1088rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,4S,5S)-4-异丙氧基-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(3.39mg，8.26μmol，6.52％产率)、化合物1302rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,4S,5R)-4-异丙氧基-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.01669g，40.66μmol，32.10％产率)、化合物1351rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,4R,5S)-4-异丙氧基-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.01743g，42.46μmol，33.52％产率)。
制备型：
化合物1088的RT(Chiralcel OD-H(250*20，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，90-5-5，12mL/min)＝33.950min。
化合物1351的RT(Chiralcel OD-H(250*20，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，90-5-5，12mL/min)＝45.434min。
化合物1302的RT(Chiralcel OD-H(250*20，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，90-5-5，12mL/min)＝57.493min。
化合物1327的RT(Chiralcel OD-H(250*20，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，90-5-5，12mL/min)＝79.390min。
化合物1327：
产率：4.22mg(8.12％)
RT(Chiralcel OD-H(250*4.6，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，80-10-10，0.6mL/min)＝26.456min。
1H NMR(dmso,600MHz):δ(ppm)0.87-0.91(m,3H),1.00-1.04(m,6H),1.78-1.85(m,1H),1.92-1.99(m,1H),1.99-2.05(m,3H),2.05-2.11(m,1H),2.65-3.14(m,1H),3.45-3.61(m,2H),3.61-4.21(m,1H),5.23-5.89(m,3H),7.27-7.31(m,2H),7.35-7.37(m,1H),7.38-7.44(m,2H),7.47-7.55(m,1H),7.95-8.09(m,1H),10.50-10.67(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值411.2；实测值411.2；Rt＝2.149min。
化合物1088：
产率：3.39mg(6.52％)
RT(Chiralcel OD-H(250*4.6，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，80-10-10，0.6mL/min)＝14.072min。
1H NMR(dmso,600MHz):δ(ppm)0.87-0.91(m,3H),1.00-1.04(m,6H),1.78-1.85(m,1H),1.92-1.99(m,1H),1.99-2.05(m,3H),2.05-2.10(m,1H),2.65-3.14(m,1H),3.45-3.61(m,2H),3.61-4.21(m,1H),5.23-5.88(m,3H),7.27-7.31(m,2H),7.35-7.38(m,1H),7.38-7.42(m,2H),7.47-7.55(m,1H),7.95-8.09(m,1H),10.50-10.67(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值411.2；实测值411.2；Rt＝2.147min。
化合物1302：
产率：16.69mg(32.10％)
RT(Chiralcel OD-H(250*4.6，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，80-10-10，0.6mL/min)＝20.214min。
1H NMR(dmso,600MHz):δ(ppm)0.43-0.72(m,3H),0.88-0.97(m,3H),0.97-1.07(m,3H),1.64-1.81(m,1H),1.94-2.05(m,3H),2.09-2.27(m,2H),2.89-3.29(m,1H),3.36-3.57(m,2H),3.66-4.07(m,1H),5.15-5.43(m,1H),5.54-6.02(m,2H),7.11-7.22(m,1H),7.23-7.33(m,4H),7.33-7.54(m,1H),7.69-8.11(m,1H),9.67-10.69(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值411.2；实测值411.2；Rt＝2.105min。
化合物1351：
产率：17.43mg(33.52％)
RT(Chiralcel OD-H(250*4.6，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，80-10-10，0.6mL/min)＝17.795min。
1H NMR(dmso,600MHz):δ(ppm)0.42-0.72(m,3H),0.87-0.98(m,3H),0.97-1.07(m,3H),1.64-1.81(m,1H),1.94-2.05(m,3H),2.09-2.26(m,2H),2.89-3.28(m,1H),3.36-3.57(m,2H),3.66-4.07(m,1H),5.16-5.43(m,1H),5.55-6.02(m,2H),7.11-7.22(m,1H),7.21-7.33(m,4H),7.33-7.54(m,1H),7.69-8.11(m,1H),9.67-10.69(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值411.2；实测值411.2；Rt＝2.103min。
实施例248.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(4-(2-(二甲基氨基)乙基)苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1228)的合成
步骤1：(S)-6-(4-(2-(二甲基氨基)乙基)苯基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
将[4-[2-(二甲基氨基)乙基]苯基]硼酸(8g，41.44mmol)和(3S)-3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(21.47g，62.16mmol)一起混合于二噁烷(91.71mL)中。将所得混合物抽真空然后用氩气回填，将此操作重复三次，然后在氩气下添加水(4.83mL)中的碳酸钠(8.78g，82.88mmol，3.47mL)和[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)与DCM的络合物(1.52g，2.07mmol)。将反应混合物在氩气、90℃下搅拌15h，然后冷却且在真空中蒸发，将其倒入水(180ml)中且用EtOAc(2x150 ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(2*40ml)洗涤，经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，留下14g粗产物，14g粗产物通过硅胶柱色谱使用己烷/MTBE梯度(10-100％ MTBE)进行纯化，以得到(3S)-6-[4-[2-(二甲基氨基)乙基]苯基]-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(3.5g，10.16mmol，24.52％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值344.2；实测值345.2；Rt＝1.163min。
步骤2：(S)-N,N-二甲基-2-(4-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯基)乙胺的合成
将(3S)-6-[4-[2-(二甲基氨基)乙基]苯基]-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(3.50g，10.16mmol)于DCM(20mL)和99％ TFA(20g，175.40mmol，13.51mL)中的溶液在0℃下搅拌5h，然后在真空中蒸发。将碎冰(50g)添加到残余物中且将pH用10％碳酸氢钠水溶液调节至8。将所得混合物用MTBE(2*40mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到N,N-二甲基-2-[4-[(3S)-3-甲基-1,2,3,4-四氢吡啶-6-基]苯基]乙胺(2g，8.18mmol，80.55％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值244.2；实测值245.2；Rt＝0.584min。
步骤3：N,N-二甲基-2-(4-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯基)乙胺的合成
在0℃下，将硼氢化钠(619.26mg，16.37mmol，576.59μL)一次性添加到N,N-二甲基-2-[4-[(3S)-3-甲基-1,2,3,4-四氢吡啶-6-基]苯基]乙胺(2.00g，8.18mmol)于MeOH(20mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在0℃下搅拌6h，然后在真空中蒸发。将残余物用水(40mL)稀释且用DCM(2*50mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到N,N-二甲基-2-[4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]乙胺(1.7g，6.90mmol，84.30％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值246.2；实测值247.2；Rt＝0.556min。
将2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(339.63mg，1.62mmol)和N,N-二甲基-2-[4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]乙胺(0.32g，1.30mmol)混合于DMF(20mL)中。将反应悬浮液冷却至0℃且添加HATU(617.28mg，1.62mmol)，随后添加TEA(131.42mg，1.30mmol，181.02μL)，且在环境温度下搅拌14h。将反应混合物在真空中蒸发且通过制备型(50-50-75％0-1-6min H2O/MeOH/0.1％ NH4OH，流速：30ml/min)纯化0.7g所获得的粗产物，以得到产物N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[4-[2-(二甲基氨基)乙基]苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.268g，612.46μmol，47.16％产率)。
化合物1228：
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.71-1.36(m,6H),1.29-1.36(m,2H),1.65-1.89(m,2H),1.99-2.21(m,8H),2.35-2.39(m,2H),2.65-2.72(m,2H),3.19-3.21(m,1H),3.42-4.01(m,2H),5.11-5.64(m,3H),7.18-7.23(m,4H),7.45-7.50(d,1H),8.00-8.08(d,1H),10.46-10.54(d,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值437.2；实测值438.2；Rt＝1.969min。
实施例249.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(4-(吡啶-4-基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1233、化合物1322和化合物1358)的合成
步骤1：2-(4-溴苯基)-N,N-二甲基乙胺的合成
向2-(4-溴苯基)乙胺(5g，24.99mmol，3.88mL)于甲酸(30mL)中的溶液中添加用7-8％ MeOH稳定的37％重量/重量甲醛水溶液(4.50g，149.94mmol，4.17mL)。在100℃下搅拌48h之后，将反应混合物蒸发且倒入到H2O(200ml)中且将pH用10％碳酸氢钠水溶液调节至9，用MTBE(50ml*2)萃取且将合并的有机层用H2O(40ml*2)洗涤，干燥且浓缩，以得到产物2-(4-溴苯基)-N,N-二甲基乙胺(5.1g，22.36mmol，89.46％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值228.2；实测值229.2；Rt＝0.622min。
步骤2：N,N-二甲基-2-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)乙胺的合成
将乙酸钾(4.39g，44.71mmol，2.79mL)添加到2-(4-溴苯基)-N,N-二甲基乙胺(5.1g，22.36mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(7.38g，29.06mmol)于二噁烷(150mL)中的溶液中。将反应烧瓶抽真空且用氩气再填充3次。然后在氩气流下添加Pd(dppf)Cl2*DCM(817.89mg，1.12mmol)。将所得混合物在100℃、惰性气氛下搅拌12h，然后冷却且在真空中蒸发，倒入到水(200ml)中且用DCM(2x100 ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(150ml)洗涤，经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到产物N,N-二甲基-2-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]乙胺(5.5g，19.99mmol，89.40％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值275.2；实测值276.2；Rt＝0.974min。
步骤3：6-(4-(2-(二甲基氨基)乙基)苯基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
将N,N-二甲基-2-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]乙胺(3g，10.90mmol)和3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(8.28g，23.98mmol)一起混合于二噁烷(95mL)中。将所得混合物抽真空然后用氩气回填，将此操作重复三次，然后在氩气下添加水(5mL)中的碳酸钠(2.31g，21.80mmol，913.39uL)和[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)与DCM的络合物(398.83mg，545.07umol)。将反应混合物在氩气、90℃下搅拌48h，然后冷却且在真空中蒸发，将其倒入水(180ml)中且用EtOAc(2x150ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(2*40ml)洗涤，经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，留下4g粗产物，4g粗产物通过硅胶柱色谱使用己烷/MTBE梯度(10-100％ MTBE)进行纯化，以得到6-[4-[2-(二甲基氨基)乙基]苯基]-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(0.35g，1.02mmol，9.32％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值344.2；实测值345.2；Rt＝1.139min。
步骤4：N,N-二甲基-2-(4-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯基)乙胺的合成
将6-[4-[2-(二甲基氨基)乙基]苯基]-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(0.35g，1.02mmol)于DCM(20mL)和TFA(20g，175.41mmol，13.51mL)中的溶液在0℃下搅拌5h，然后在真空中蒸发。将碎冰(50g)添加到残余物中且将pH用10％碳酸氢钠水溶液调节至8。将所得混合物用MTBE(2*40mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到N,N-二甲基-2-[4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯基]乙胺(0.248g，1.01mmol，99.89％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)1.01(d,3H),1.22(m,1H),1.38(m,1H),1.95(m,1H),2.29(s,6H),2.53(m,3H),2.82(m,3H),3.28(m,1H),3.93(m,1H),7.21(m,2H),7.70(m,2H)。
步骤5：N,N-二甲基-2-(4-(5-甲基哌啶-2-基)苯基)乙胺的合成
在0℃下，将硼氢化钠(84.46mg，2.23mmol，78.94uL)一次性添加到N,N-二甲基-2-[4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯基]乙胺(0.248g，1.01mmol)于MeOH(20mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在0℃下搅拌5h，然后在真空中蒸发。将残余物用水(40mL)稀释且用DCM(2*50mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到N,N-二甲基-2-[4-(5-甲基-2-哌啶基)苯基]乙胺(0.2g，811.72umol，79.99％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值246.2；实测值247.2；Rt＝0.344min。
步骤6：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(4-(吡啶-4-基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1233)的合成
将2-[(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(158.43mg，811.72umol)和N,N-二甲基-2-[4-(5-甲基-2-哌啶基)苯基]乙胺(0.2g，811.72umol)混合于DMF(15mL)中。将反应悬浮液冷却至20℃且添加HATU(339.50mg，892.89umol)，随后添加TEA(328.55mg，3.25mmol，452.55uL)，且在环境温度下搅拌7h。将反应混合物在真空中蒸发且通过制备型(30-30-80％0-1-6min H2O/MeOH，流速：30ml/mi)纯化0.5g所获得的粗产物，以得到产物N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-[4-[2-(二甲基氨基)乙基]苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.1175g，277.42umol，34.18％产率)。
化合物1233：
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.96-1.05(m,3H),1.25-1.39(m,1H),1.58-1.69(m,1H),1.80-1.91(m,1H),1.97-2.03(m,3H),2.05-2.13(m,1H),2.14-2.16(m,6H),2.17-2.28(m,1H),2.41-2.44(m,2H),2.65-2.70(m,2H),2.72-3.21(m,1H),3.39-4.04(m,1H),5.06-5.57(m,1H),5.58-5.72(m,2H),7.17-7.25(m,4H),7.42-7.54(m,1H),7.92-8.07(m,1H),10.42-10.55(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值423.2；实测值424.2；Rt＝1.704min。
步骤7：手性分离(化合物1322和化合物1358)
对外消旋N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[4-[2-(二甲基氨基)乙基]苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.0979g，231.14μmol)进行手性分离(柱：Chiralpak AD-H(250-20mm-5m)；流动相：IPA-MeOH，50-50流速：12mL/min)，以获得N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[4-[2-(二甲基氨基)乙基]苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.04862g，114.79μmol，49.66％产率)和N-(6-氨基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.05775g，124.60umol，50.22％产率)。
化合物1322于分析条件下(柱：AD-H，IPA-MeOH，50-50，0.6ml/min为流动相)的保留时间为52.72min且化合物1358的保留时间为36.60min。
化合物1322：
保留时间：52.72min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99-1.2(m,3H),1.22-1.36(m,2H),1.63-1.88(m,2H),1.98-2.26(m,10H),2.37-2.44(m,2H),2.65-2.72(m,2H),3.18-3.21(m,1H),3.42-4.01(m,1H),5.10-5.62(m,3H),7.18-7.25(m,4H),7.44-7.49(d,1H),7.96-8.02(d,1H),10.46-10.49(d,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值423.2；实测值424.2；Rt＝2.040min。
化合物1358：
保留时间：36.60min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99-1.02(m,3H),1.22-1.36(m,2H),1.63-1.88(m,2H),1.98-2.26(m,10H),2.41-2.44(m,2H),2.65-2.71(m,2H)3.18-3.21(m,1H),3.42-4.01(m,1H),5.10-5.62(m,3H),7.18-7.25(m,4H),7.44-7.49(d,1H),7.96-8.02(d,1H),10.45-10.49(d,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值423.2；实测值424.2；Rt＝2.051min。
实施例250.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(3-(1-甲基哌啶-4-基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1149、化合物1253和化合物1291)的合成
步骤1：5-甲基-2-(3-(1-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,6-二氢-2H-吡啶(314.89mg，1.41mmol)、2-(3-溴苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.5g，1.41mmol)和碳酸钠(448.75mg，4.23mmol，177.37uL)添加到水(5mL)和二噁烷(15mL)的混合物中。将所得混合物抽真空，然后用氩气回填，将此操作重复三次，然后在氩气下添加Pd(dppf)Cl2DCM(57.63mg，70.57umol)。将反应混合物在氩气、70℃下搅拌16h，然后冷却且过滤。将滤饼用二噁烷(2*20ml)洗涤且丢弃。将滤液在真空中蒸发，以得到呈黄色油状物的5-甲基-2-[3-(1-甲基-3,6-二氢-2H-吡啶-4-基)苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.45g，1.21mmol，86.05％产率)，其不经纯化即用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值370.2；实测值371.2；Rt＝1.094min。
步骤2：5-甲基-2-(3-(1-甲基哌啶-4-基)苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将5-甲基-2-[3-(1-甲基-3,6-二氢-2H-吡啶-4-基)苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.45g，1.21mmol)溶解于MeOH(30mL)中且添加10％钯/碳(129.25mg，1.21mmol)。将所得混合物抽真空，然后用H2回填，且将其在室温下搅拌48h。然后将其蒸发，以得到5-甲基-2-[3-(1-甲基-4-哌啶基)苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.4g，1.07mmol，88.41％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值372.2；实测值373.2；Rt＝1.134min。
步骤3：1-甲基-4-(3-(5-甲基哌啶-2-基)苯基)哌啶的合成
将5-甲基-2-[3-(1-甲基-4-哌啶基)苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.4g，1.07mmol)溶解于MeOH(20mL)中且添加二噁烷/HCl(1.07mmol，5mL)。然后将其蒸发且使其经历HPLC(Waters Sunfire C18 19*100 5mkm柱且以水-MeOH+NH3为洗脱液混合物)，以得到1-甲基-4-[3-(5-甲基-2-哌啶基)苯基]哌啶(107.4mg，394.23umol，36.72％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值272.2；实测值273.2；Rt＝1.334min。
步骤4：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(3-(1-甲基哌啶-4-基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1149)的合成
将DIPEA(127.38mg，985.58umol，171.67uL)添加到相应2-[(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(76.94mg，394.23umol)和1-甲基-4-[3-(5-甲基-2-哌啶基)苯基]哌啶(107.4mg，394.23umol)于DMF(5mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU(164.89mg，433.66umol)。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC(Waters SunfireC18 20*100 5mkm柱且以MeOH+NH3为洗脱液混合物)，以得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[3-(1-甲基-4-哌啶基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(40.4mg，89.86umol，22.79％产率)。
化合物1149：
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.82-1.02(m,3H),1.29-1.40(m,1H),1.61-1.71(m,4H),1.83-2.03(m,6H),2.17-2.26(m,4H),2.44(m,1H),2.70-3.22(m,4H),3.43-4.02(m,2H),5.12-5.62(m,3H),7.00-7.31(m,4H),7.44-7.50(m,1H),7.95-8.02(m,1H),10.50-10.55(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值449.2；实测值450.2；Rt＝2.102min。
步骤5：手性分离(化合物1253和化合物1291)
对外消旋N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[3-(1-甲基-4-哌啶基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(34.6mg，76.96μmol)进行手性分离(柱：Chiralpak AD-H-V(250*20mm，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH 50-25-25流速：12mL/min)，以获得N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[3-(1-甲基-4-哌啶基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(13.99mg，31.12μmol，40.43％产率)(RT＝17.07min)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-(1-甲基-4-哌啶基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(12.8mg，28.47μmol，36.99％产率)(RT＝22.83min)。
化合物1253于分析条件下(柱：AD-H，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min为流动相)的保留时间为22.91min且化合物1291的保留时间为16.11min。
化合物1253：
保留时间：22.91min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.97-1.04(m,3H),1.22-1.40(m,1H),1.60-1.73(m,5H),1.79-1.90(m,1H),1.90-2.06(m,6H),2.06-2.18(m,1H),2.20(s,3H),2.21-2.29(m,1H),2.69-2.74(m,0.4H),2.84-2.90(m,2H),3.19-3.23(m,0.6H),3.41-4.03(m,1H),5.08-5.57(m,1H),5.57-5.67(m,2H),7.08-7.19(m,3H),7.26-7.33(m,1H),7.41-7.54(m,1H),7.92-8.06(m,1H),10.46-10.54(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值449.2；实测值450.2；Rt＝2.009min。
化合物1291：
保留时间：16.11min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98-1.05(m,3H),1.26-1.40(m,1H),1.60-1.73(m,5H),1.81-1.92(m,1H),1.94-2.04(m,5H),2.04-2.17(m,1H),2.20(s,3H),2.21-2.29(m,1H),2.42-2.45(m,1H),2.70-2.74(m,0.4H),2.83-2.90(m,2H),3.19-3.23(m,0.6H),3.41-4.06(m,1H),5.10-5.57(m,1H),5.57-5.65(m,2H),7.07-7.14(m,2H),7.14-7.21(m,1H),7.24-7.35(m,1H),7.42-7.52(m,1H),7.94-8.05(m,1H),10.41-10.57(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值449.2；实测值450.2；Rt＝2.007min。
实施例251.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1230)的合成
将1-甲基-4-[3-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]哌嗪(130mg，475.47μmol)溶解于DMF(5mL)中且添加TEA(481.13mg，4.75mmol，662.71μL)，随后添加2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(99.47mg，475.47μmol)。然后，逐滴添加HATU(271.18mg，713.20μmol)且将反应混合物搅拌过夜。次日，将其在真空中蒸发且通过HPLC(2-10min 34-45％水/MeOH+NH3；30ml/min；装载泵MeOH 4ml/min；柱SunFire 19*100mm)纯化，以获得N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(30.9mg，66.51μmol，13.99％产率)。
化合物1230：
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.97-1.04(m,3H),1.07-1.13(m,3H),1.26-1.38(m,1H),1.62-1.75(m,1H),1.80-1.92(m,1H),1.95-2.12(m,1H),2.15-2.22(m,4H),2.34-2.40(m,2H),2.40-2.44(m,4H),2.72-3.27(m,5H),3.41-4.05(m,1H),5.08-5.53(m,1H),5.57-5.67(m,2H),6.69-6.79(m,1H),6.79-6.85(m,2H),7.17-7.23(m,1H),7.43-7.53(m,1H),7.99-8.08(m,1H),10.49-10.57(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值464.2；实测值465.2；Rt＝0.806min。
实施例252.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1367)的合成
对N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]-1-哌啶基]乙酰胺(75mg，161.43μmol)进行手性分离(Chiralcel OJ-H-I(250*20mm，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，70-15-15，12ml/min)，以获得N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]-1-哌啶基]乙酰胺(54mg，116.23μmol，72.00％产率)。
化合物1367于分析条件下(柱：OJ-H，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min为流动相)8.51min
化合物1367：
保留时间：8.51min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98-1.03(m,3H),1.07-1.16(m,3H),1.25-1.38(m,1H),1.59-1.76(m,1H),1.79-1.92(m,1H),1.95-2.15(m,1H),2.15-2.19(m,1H),2.20(s,3H),2.34-2.38(m,1H),2.40-2.45(m,5H),2.73-2.77(m,0.3H),3.03-3.14(m,4H),3.23-3.27(m,0.7H),3.43-4.04(m,1H),5.08-5.55(m,1H),5.58-5.66(m,2H),6.68-6.78(m,1H),6.79-6.84(m,2H),7.14-7.25(m,1H),7.41-7.54(m,1H),7.94-8.10(m,1H),10.44-10.58(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值464.2；实测值465.2；Rt＝1.766min。
实施例253.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(3-氯-4-(2-(二甲基氨基)乙基)苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1402)的合成
步骤1：2-(4-溴-2-氯苯基)-N,N-二甲基乙胺的合成
向2-(4-溴-2-氯苯基)乙胺(1g，4.26mmol)于甲酸(30mL)中的溶液中添加用7-8％MeOH稳定的37％重量/重量甲醛水溶液(256.10mg，8.53mmol，236.47μL)。在100℃下搅拌24h之后，将反应混合物蒸发且倒入到H2O(200ml)中且将pH用10％碳酸氢钠水溶液调节至9，用MTBE(50ml*2)萃取且将合并的有机层用H2O(40ml*2)洗涤，干燥且浓缩，以得到产物2-(4-溴-2-氯苯基)-N,N-二甲基乙胺(0.6g，2.29mmol，53.59％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值262.2；实测值263.2；Rt＝2.009min。
步骤2：2-(2-氯-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)-N,N-二甲基乙胺的合成
将乙酸钾(3.59g，36.56mmol，2.29mL)添加到2-(4-溴-2-氯苯基)-N,N-二甲基乙胺(4.8g，18.28mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(5.57g，21.94mmol)于二噁烷(200mL)中的溶液中。将反应烧瓶抽真空且用氩气再填充3次。然后在氩气流下添加Pd(dppf)Cl2*DCM(1.34g，1.83mmol)。将所得混合物在100℃、惰性气氛下搅拌12h，然后冷却且在真空中蒸发，倒入到水(300ml)中且用DCM(2x80 ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(80ml)洗涤，经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到产物2-[2-氯-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]-N,N-二甲基乙胺(7.2g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值309.2；实测值310.2；Rt＝1.074min。
步骤3：(S)-6-(3-氯-4-(2-(二甲基氨基)乙基)苯基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
将2-[2-氯-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]-N,N-二甲基乙胺(3g，9.69mmol)和(3S)-3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(3.35g，9.69mmol)一起混合于二噁烷(90mL)中。将所得混合物抽真空然后用氩气回填，将此操作重复三次，然后在氩气下添加水(10mL)中的碳酸钠(2.05g，19.38mmol，811.14μL)和[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)与DCM的络合物(354.46mg，484.44μmol)。将反应混合物在氩气、90℃下搅拌18h，然后冷却且在真空中蒸发，将其倒入水(180ml)中且用EtOAc(2x150 ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(2*40ml)洗涤，经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，留下4.2g粗产物，4.2g粗产物通过硅胶柱色谱使用MTBE/MeOH梯度(10-100％ MeOH)进行纯化，以得到(3S)-6-[3-氯-4-[2-(二甲基氨基)乙基]苯基]-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.1g，2.90mmol，29.96％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值378.2；实测值379.2；Rt＝1.110min。
步骤4：(S)-2-(2-氯-4-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯基)-N,N-二甲基乙胺的合成
将(3S)-6-[3-氯-4-[2-(二甲基氨基)乙基]苯基]-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.1g，2.90mmol)于DCM(10mL)和TFA(10g，87.70mmol，6.76mL)中的溶液在0℃下搅拌8h，然后在真空中蒸发。将碎冰(50g)添加到残余物中且将pH用10％碳酸氢钠水溶液调节至8。将所得混合物用MTBE(2*40mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到2-[2-氯-4-[(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]苯基]-N,N-二甲基乙胺(0.3g，1.08mmol，37.07％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值278.2；实测值279.2；Rt＝0.669min。
步骤5：2-(2-氯-4-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯基)-N,N-二甲基乙胺的合成
在0℃下，将硼氢化钠(81.41mg，2.15mmol，75.80μL)一次性添加到2-[2-氯-4-[(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]苯基]-N,N-二甲基乙胺(0.3g，1.08mmol)于MeOH(10mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在0℃下搅拌5h，然后在真空中蒸发。将残余物用水(20mL)稀释且用DCM(2*20mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到2-[2-氯-4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]-N,N-二甲基乙胺(0.15g，534.12μmol，49.64％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值280.2；实测值281.2；Rt＝1.250min。
将2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(139.67mg，667.65μmol)和2-[2-氯-4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]-N,N-二甲基乙胺(0.15g，534.12μmol)混合于DMF(10mL)中。将反应悬浮液冷却至20℃且添加HATU(253.86mg，667.65μmol)，随后添加TEA(162.14mg，1.60mmol，223.34μL)，且在环境温度下搅拌14h。将反应混合物在真空中蒸发且通过制备型(45-90％0-5min H2O/Me OH/0.1％ NH4OH，流速：30ml/min)纯化0.5g所获得的粗产物，以得到产物N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[3-氯-4-[2-(二甲基氨基)乙基]苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.0702g，148.72μmol，27.84％产率)。
化合物1402：
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.97-1.03(m,3H),1.07-1.13(m,3H),1.25-1.37(m,1H),1.57-1.66(m,1H),1.80-1.93(m,1H),1.97-2.09(m,1H),2.12-2.21(m,8H),2.35-2.40(m,2H),2.42-2.45(m,1H),2.70-3.25(m,3H),3.41-4.04(m,1H),5.09-5.53(m,1H),5.59-5.70(m,2H),7.18-7.25(m,1H),7.27-7.39(m,2H),7.42-7.53(m,1H),7.94-8.09(m,1H),10.48-10.60(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值472.2；实测值473.2；Rt＝1.885min。
实施例254.N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-(1-甲基-4-哌啶基)苯基]-1-哌啶基]乙酰胺(化合物1363)的合成
对N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-(1-甲基-4-哌啶基)苯基]-1-哌啶基]乙酰胺(54mg，116.48μmol)进行手性分离(Chiralpak IA-III(250*20mm，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，70-15-15，12ml/min)，以获得N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-(1-甲基-4-哌啶基)苯基]-1-哌啶基]乙酰胺(44mg，94.91μmol，81.48％产率)(RT＝31.06min)。
化合物1363于分析条件下(柱：IA，以己烷-IPA-MeOH，70-15-15，0.6ml/min为流动相)的保留时间为33.82min
化合物1363：
保留时间：33.82min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98-1.03(m,3H),1.06-1.13(m,3H),1.27-1.37(m,1H),1.60-1.71(m,5H),1.80-2.04(m,4H),2.07-2.27(m,5H),2.39-2.44(m,2H),2.70-3.21(m,3H),3.40-4.03(m,1H),5.11-5.58(m,1H),5.58-5.66(m,2H),7.09-7.19(m,3H),7.26-7.32(m,1H),7.42-7.52(m,1H),7.97-8.07(m,1H),10.49-10.55(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值463.2；实测值464.2；Rt＝2.081min。
实施例255.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(3-((1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1362)的合成
步骤1：(2R,5S)-5-甲基-2-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将(2R,5S)-2-(3-溴苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(3.4g，9.60mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(2.68g，10.56mmol)和乙酸钾(2.35g，23.99mmol，1.50mL)一起混合于二噁烷(40.00mL)中且将所得混合物抽真空且用氩气回填三次。将Pd(dppf)Cl2*DCM(391.86mg，479.85μmol)添加到先前混合物中且将所得混合物在100℃下加热过夜。将反应混合物在真空中浓缩且将水(25mL)添加到残余物中。将所得混合物用MTBE(2*40mL)萃取且将合并的有机层用水(25mL)、盐水(25mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩，以获得(2R,5S)-5-甲基-2-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(3.5g，8.72mmol，90.87％产率)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值301.2；实测值302.2；Rt＝1.745min。
步骤2：(2R,5S)-2-(3-羟基苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将(2R,5S)-5-甲基-2-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(3.7g，9.22mmol)溶解于THF(50.73mL)中且在室温下小心地逐滴添加35％过氧化氢(1.34g，13.83mmol，1.22mL，35％纯度)。添加完成之后，将反应混合物搅拌1h且在室温下逐滴添加氢氧化钠珠粒水溶液(590.01mg，14.75mmol，277.00μL)。添加完成之后，将反应混合物搅拌1h。将反应混合物用柠檬酸酸化且将所得混合物转移至分离漏斗。分离有机层且将水层用MTBE(2*40mL)萃取。将合并的有机层用亚硫酸钠水溶液洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩，以获得(2R,5S)-2-(3-羟基苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(3g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值191.2；实测值192.2；Rt＝1.482min。
步骤3：(2R,5S)-5-甲基-2-(3-(((外消旋-S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将(2R,5S)-2-(3-羟基苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.75g，2.57mmol)溶解于DMF(10mL)中且向其中添加3-溴-1-甲基哌啶(1.33g，5.15mmol，HBr)，随后添加碳酸铯(3.35g，10.30mmol)。将所得混合物在50℃下加热过夜。将反应混合物倒入到水(5mL)中且将所得混合物用EtOAc(3*20mL)萃取。将合并的有机层用水(3*10mL)、盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值388.2；实测值389.2；Rt＝1.063min。
步骤4：(2R,5S)-5-甲基-2-(3-(((外消旋-S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)苯基)哌啶的合成
将(2R,5S)-5-甲基-2-[3-[[外消旋-(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(550.00mg，1.42mmol)溶解于DCM(5mL)中且向其中添加TFA(3mL)。搅拌所得混合物1h。将反应混合物小心倒入NaHCO3水溶液(3g于10mL水中)且将所得混合物用DCM(2*15mL)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤且在真空中浓缩，以获得(2R,5S)-5-甲基-2-[3-[[外消旋-(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]苯基]哌啶(350mg，1.21mmol，85.73％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值288.2；实测值289.2；Rt＝0.685min。
步骤5：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(3-((1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1362)的合成
将(2R,5S)-5-甲基-2-[3-[[外消旋-(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]苯基]哌啶(0.35g，1.21mmol)溶解于DMF(5mL)中且添加TEA(1.23g，12.13mmol，1.69mL)，随后添加2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(253.86mg，1.21mmol)。然后逐滴添加HATU(692.10mg，1.82mmol)且将反应混合物搅拌过夜。次日，将其在真空中蒸发且通过HPLC(2-10min 35-60％ MeOH+NH3 30mL/min(装载泵4mL MeOH+NH3)柱：SunFire 100*19mm，5微米)纯化，以获得N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-[[外消旋-(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]苯基]-1-哌啶基]乙酰胺(56.4mg，117.59μmol，9.69％产率)和N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-[[外消旋-(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]苯基]-1-哌啶基]乙酰胺(84.6mg，176.39μmol，14.54％产率)。
化合物1362：1H NMR(600MHz,dmso)δ0.97-1.03(m,3H),1.06-1.13(m,3H),1.27-1.36(m,1H),1.53-1.69(m,4H),1.77-2.24(m,6H),2.31-2.35(m,3H),2.38-2.42(m,2H),2.72-3.27(m,3H),3.78-4.03(m,2H),5.07-5.57(m,1H),5.57-5.68(m,2H),6.77-6.95(m,3H),7.24-7.32(m,1H),7.43-7.53(m,1H),7.98-8.09(m,1H),10.46-10.63(m,1H)。LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值479.2；实测值480.2；Rt＝0.878min。
实施例256.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(3-(3-(二甲基氨基)-1,1-二氟丙基)苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1381)的合成
步骤1：3-(3-溴苯基)-3,3-二氟-N,N-二甲基丙-1-胺的合成
将1-(3-溴苯基)-3-(二甲基氨基)丙-1-酮(4g，15.62mmol)和HF(4mL)置于哈氏合金(Hastelloy)高压釜中。将其冷却至-196℃，抽真空且使SF4(5.06g，46.85mmol)冷凝。将高压釜在室温下保持15h，释放气体产物且将反应混合物倒入到NaHCO3/H2O上。将产物用MTBE萃取，将合并的萃取物用水洗涤，经Na2SO4干燥且蒸发，以得到3-(3-溴苯基)-3,3-二氟-N,N-二甲基丙-1-胺(3.4g，12.22mmol，78.28％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值278.2；实测值279.2；Rt＝0.851min。
步骤2：3,3-二氟-N,N-二甲基-3-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)丙-1-胺的合成
将3-(3-溴苯基)-3,3-二氟-N,N-二甲基丙-1-胺(3.4g，12.22mmol)、双(频哪醇)二硼(3.73g，14.67mmol)和乙酸钾(3.60g，36.67mmol，2.29mL)于二噁烷(50mL)中的混合物用氩气脱气10min。接着添加Pd(dppf)Cl2*DCM(499.14mg，611.21μmol)且将反应混合物在90℃下加热12h。将反应混合物冷却至室温，用DCM和水稀释。将有机相分离且在减压下浓缩。将粗产物用HCl/二噁烷溶液处理且再次浓缩。将残余物用MTBE处理且通过过滤收集沉淀，以得到3,3-二氟-N,N-二甲基-3-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]丙-1-胺(1.55g，粗品，HCl)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值325.2；实测值326.2；Rt＝1.123min。
步骤3：(S)-6-(3-(3-(二甲基氨基)-1,1-二氟丙基)苯基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
将3,3-二氟-N,N-二甲基-3-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]丙-1-胺(1.55g，3.21mmol，HCl)和碳酸钠(1.36g，12.86mmol，538.21μL)混合于H2O(10mL)和二噁烷(30mL)中且搅拌20min，然后在氩气下添加(3S)-3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.33g，3.86mmol)和Pd(dppf)Cl2*DCM(262.29mg，321.43μmol)且在75℃下搅拌12h。将反应混合物用水稀释且将所需产物用DCM萃取，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩。获得(3S)-6-[3-[3-(二甲基氨基)-1,1-二氟丙基]苯基]-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.95g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值394.2；实测值395.2；Rt＝1.236min。
步骤4：(S)-3,3-二氟-N,N-二甲基-3-(3-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯基)丙-1-胺的合成
将(3S)-6-[3-[3-(二甲基氨基)-1,1-二氟丙基]苯基]-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.95g，2.17mmol)溶解于TFA(6.64g，58.23mmol，4.49mL)和DCM(20.93mL)的混合物中且搅拌1h。将反应混合物在真空中浓缩且将残余物用NaHCO3溶液处理，随后用DCM(2*50mL)萃取。然后，将水层再次用EtOAc处理，将有机相经Na2SO4干燥且在减压下浓缩，以得到3,3-二氟-N,N-二甲基-3-[3-[(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]苯基]丙-1-胺(210g，粗品)，其不经纯化即用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值294.2；实测值295.2；Rt＝0.645min。
步骤5：3,3-二氟-N,N-二甲基-3-(3-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯基)丙-1-胺的合成
将3,3-二氟-N,N-二甲基-3-[3-[(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]苯基]丙-1-胺(210mg，292.48μmol)溶解于MeOH(20mL)中且添加硼氢化钠(22.13mg，584.95μmol，20.60μL)。搅拌12h之后，将反应混合物浓缩且不经任何纯化即用于下一步骤中。3,3-二氟-N,N-二甲基-3-[3-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]丙-1-胺(250mg，粗品)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值296.2；实测值297.2；Rt＝0.244min。
步骤6：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(3-(3-(二甲基氨基)-1,1-二氟丙基)苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1381)的合成
将来自前一阶段的粗产物3,3-二氟-N,N-二甲基-3-[3-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]丙-1-胺(250mg，337.38μmol)与TEA(400mg，3.95mmol，550.96μL)混合于DMSO(3.92mL)中，接着添加2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(70.58mg，337.38μmol)和HATU(179.60mg，472.34μmol)且搅拌过夜。过滤RM且使其经历HPLC(2-10min 0-55％水/MeOH+NH3 30mL/min；装载泵4mL/min MeOH；柱SunFire 19*100mm)，以得到N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2R,5S)-2-[3-[3-(二甲基氨基)-1,1-二氟丙基]苯基]-5-甲基-1-哌啶基]乙酰胺(29.8mg，61.12μmol，18.12％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.73-1.04(m,3H),1.05-1.16(m,3H),1.25-1.41(m,1H),1.58-1.72(m,1H),1.80-1.96(m,1H),2.04-2.08(m,6H),2.08-2.20(m,1H),2.20-2.32(m,3H),2.34-2.43(m,4H),2.70-3.23(m,1H),3.46-4.05(m,1H),5.14-5.75(m,3H),7.36-7.47(m,3H),7.47-7.58(m,2H),7.97-8.12(m,1H),10.49-10.62(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值487.2；实测值488.2；Rt＝1.923min。
实施例257.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(3-((2,6-二甲基吡啶-4-基)氧基)苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1297)的合成
步骤1：4-(3-溴苯氧基)-2,6-二甲基吡啶的合成
将3-溴苯酚(30g，173.40mmol)溶解于DMSO(400mL)中，随后添加叔丁醇钾(29.19g，260.10mmol)。将反应混合物在室温下搅拌1h，然后添加4-氯-2,6-二甲基吡啶(36.83g，260.10mmol)。将反应混合物在160℃下搅拌16h。完成之后，将反应混合物用水(3L)稀释且用乙酸乙酯萃取。将有机相干燥，在减压下浓缩且将残余物提交至快速柱色谱(Interchim；330g SiO2，CHCl3-MeCN 0～100％，流速＝100mL/min，cv＝7.6)，以得到4-(3-溴苯氧基)-2,6-二甲基吡啶(12g，43.14mmol，24.88％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值278.2；实测值279.2；Rt＝0.870min。
步骤2：2,6-二甲基-4-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯氧基)吡啶的合成
将4-(3-溴苯氧基)-2,6-二甲基吡啶(12g，43.14mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(13.2g，51.98mmol)、乙酸钾(12.7g，129.40mmol，8.09mL)和Pd(dppf)Cl2*DCM(1.76g，2.16mmol)混合于二噁烷(250mL)中且将反应混合物在惰性气氛、85℃下搅拌17h。完成之后，通过SiO2薄垫过滤反应混合物。将滤液用DCM稀释，用水洗涤且浓缩。将残余物用己烷处理，过滤且在减压下浓缩，以得到2,6-二甲基-4-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯氧基]吡啶(12g，粗品)，其不经纯化即用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值325.2；实测值326.2；Rt＝1.186min。
步骤3：(S)-6-(3-((2,6-二甲基吡啶-4-基)氧基)苯基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
将2,6-二甲基-4-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯氧基]吡啶(4g，12.30mmol)、(3S)-3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(4.3g，12.45mmol)、碳酸钠(3.9g，36.80mmol，1.54mL)和Pd(dppf)Cl2*DCM(0.5g，612.27μmol)在二噁烷(60mL)和水(20mL)的混合物中在惰性气氛、85℃下搅拌15h。完成之后，将反应混合物冷却，用水稀释且用DCM萃取。将有机层分离，经Na2SO4干燥且将残余物提交至快速柱色谱(Interchim；120gSiO2，己烷-EtOAc 0～100％，流速＝70mL/min，cv＝13.3)，以得到(3S)-6-[3-[(2,6-二甲基-4-吡啶基)氧基]苯基]-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(3g，7.60mmol，61.83％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值394.2；实测值395.2；Rt＝1.262min。
步骤4：(S)-2,6-二甲基-4-(3-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯氧基)吡啶的合成
将(3S)-6-[3-[(2,6-二甲基-4-吡啶基)氧基]苯基]-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(0.7g，1.77mmol)溶解于TFA(1.48g，12.98mmol，1mL)和DCM(1mL)的混合物中。将反应混合物在室温下搅拌0.5h且在真空中浓缩，以得到2,6-二甲基-4-[3-[(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]苯氧基]吡啶(0.5g，粗品)，其不经纯化和分析数据收集即直接用于下一步骤中。
步骤5：2,6-二甲基-4-(3-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯氧基)吡啶的合成
将2,6-二甲基-4-[3-[(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]苯氧基]吡啶(0.5g，1.70mmol)溶解于MeOH(6mL)中，随后分批添加硼氢化钠(192.77mg，5.10mmol，179.49μL)。将反应混合物在室温下搅拌15h且在真空中浓缩。将残余物溶解于DCM中，用水洗涤。将有机层经Na2SO4干燥且在减压下浓缩，以得到2,6-二甲基-4-[3-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯氧基]吡啶(0.2g，粗品)，其不经纯化即用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值296.2；实测值297.2；Rt＝0.710min。
步骤6：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(3-((2,6-二甲基吡啶-4-基)氧基)苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1297)的合成
向2,6-二甲基-4-[3-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯氧基]吡啶(0.2g，674.75μmol)、2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(155.27mg，742.23μmol)和DIPEA(348.83mg，2.70mmol，470.12μL)于DMSO(2mL)中的搅拌溶液中添加HATU(359.18mg，944.65μmol)。将所得反应混合物在25℃下搅拌4h。完成之后，将反应混合物提交至反相HPLC(2-10min 55-75％ MeOH+NH3流速30mL/min(装载泵4mL/min MeOH)，柱Sun Fire C18 100*19mm)，以得到N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2R,5S)-2-[3-[(2,6-二甲基-4-吡啶基)氧基]苯基]-5-甲基-1-哌啶基]乙酰胺(0.1g，205.09μmol，30.39％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98-1.04(m,3H),1.07-1.13(m,3H),1.29-1.38(m,1H),1.61-1.71(m,1H),1.83-1.94(m,1H),1.98-2.11(m,1H),2.16-2.26(m,1H),2.30-2.34(m,6H),2.36-2.41(m,2H),2.74-3.23(m,1H),3.44-4.05(m,1H),5.16-5.66(m,3H),6.55-6.60(m,2H),7.02(dd,1H),7.05-7.16(m,1H),7.18-7.29(m,1H),7.41-7.52(m,2H),7.97-8.06(m,1H),10.43-10.58(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值487.2；实测值488.2；Rt＝2.203min。
实施例258.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(3-(吡啶-3-基氧基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1297)的合成
步骤1：3-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯氧基)吡啶的合成
将3-碘吡啶(30g，146.34mmol)、3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯酚(32.21g，146.34mmol)、TMEDA(1.70g，14.63mmol，2.19mL)、碘化铜(I)(2.79g，14.63mmol，495.93μL)和碳酸铯(95.36g，292.69mmol)混合于DMSO(500mL)中。向反应混合物中装入Ar且在130℃下搅拌24h。完成之后，将反应混合物用水(3L)稀释且用乙酸乙酯萃取。将有机层用水洗涤若干次，分离，经Na2SO4干燥且在减压下浓缩。将残余物提交至快速柱色谱(Interchim；120gSiO2，CHCl3-MeCN 0～100％，流速＝70mL/min，cv＝16)，以得到3-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯氧基]吡啶(7g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值297.2；实测值298.2；Rt＝1.437min。
步骤2：(S)-3-甲基-6-(3-(吡啶-3-基氧基)苯基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
将3-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯氧基]吡啶(4g，13.46mmol)、(3S)-3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(4.71g，13.63mmol)、碳酸钠(4.27g，40.27mmol，1.69mL)和Pd(dppf)Cl2*DCM(547.20mg，670.07μmol)在二噁烷(60mL)和水(20mL)的混合物中在惰性气氛、85℃下搅拌16h。完成之后，将反应混合物冷却，用水稀释且用DCM萃取。将有机层分离，经Na2SO4干燥且在减压下浓缩，以得到(3S)-3-甲基-6-[3-(3-吡啶基氧基)苯基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(5g，粗品)，其不经纯化即用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值366.2；实测值367.2；Rt＝1.578min。
步骤3：(S)-3-(3-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯氧基)吡啶的合成
将(3S)-3-甲基-6-[3-(3-吡啶基氧基)苯基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1g，2.73mmol)溶解于TFA(2.22g，19.47mmol，1.5mL)和DCM(1.5mL)的混合物中。将反应混合物在室温下搅拌0.5h且在真空中浓缩，以得到3-[3-[(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]苯氧基]吡啶(0.5g，粗品)，其不经纯化和分析数据收集即直接用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值266.2；实测值267.2；Rt＝min。
步骤4：3-(3-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯氧基)吡啶的合成
将3-[3-[(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]苯氧基]吡啶(0.5g，1.88mmol)溶解于MeOH(5mL)中，随后分批添加硼氢化钠(142.04mg，3.75mmol，132.25μL)。将反应混合物在室温下搅拌15h且在真空中浓缩。将残余物溶解于DCM中，用水洗涤。将有机层经Na2SO4干燥且在减压下浓缩，以得到3-[3-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯氧基]吡啶(0.5g，粗品)，其不经纯化即用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值268.2；实测值269.2；Rt＝0.713min。
步骤5：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(3-(吡啶-3-基氧基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1297)的合成
向3-[3-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯氧基]吡啶(0.5g，1.86mmol)、2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(428.77mg，2.05mmol)和DIPEA(722.41mg，5.59mmol，973.59μL)于DMSO(8.32mL)中的搅拌溶液中添加HATU(991.83mg，2.61mmol)。将所得反应混合物在25℃下搅拌4h。完成之后，将反应混合物提交至反相HPLC(2-10min 55-75％ MeOH+NH3流速30mL/min(装载泵4mL/min MeOH)，柱Sun Fire C18 100*19mm)，以得到N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-(3-吡啶基氧基)苯基]-1-哌啶基]乙酰胺(0.023g，50.05μmol，2.69％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98-1.05(m,3H),1.06-1.12(m,3H),1.25-1.37(m,1H),1.60-1.73(m,1H),1.82-1.91(m,1H),1.96-2.12(m,1H),2.14-2.24(m,1H),2.37-2.43(m,2H),2.76-3.21(m,1H),3.46-4.08(m,1H),5.14-5.59(m,1H),5.60-5.69(m,2H),6.89-6.96(m,1H),7.03-7.11(m,1H),7.12-7.22(m,1H),7.36-7.52(m,4H),7.95-8.09(m,1H),8.29-8.41(m,2H),10.25(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值459.2；实测值460.2；Rt＝0.855min。
实施例259.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(3-(3-(二甲基氨基)丙基)苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1393)的合成
步骤1：3-(3-溴苯基)-N,N-二甲基丙-1-胺的合成
将氰基硼氢化钠(13.22g，210.33mmol)分4批添加到3-(3-溴苯基)丙-1-胺(5.27g，21.03mmol，HCl)和福马林(12.34g，152.04mmol，11.39mL，37％纯度)于MeOH(100.00mL)中的混合物中且搅拌过夜。将反应混合物用NaHCO3水溶液处理且将所需产物用300mL DCM萃取，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩，以得到3-(3-溴苯基)-N,N-二甲基丙-1-胺(3.4g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值242.2；实测值243.2；Rt＝0.631min。
步骤2：N,N-二甲基-3-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)丙-1-胺的合成
将3-(3-溴苯基)-N,N-二甲基丙-1-胺(3.4g，14.04mmol)、双(频哪醇)二硼(4.64g，18.25mmol)和乙酸钾(4.13g，42.12mmol，2.63mL)于二噁烷(49.66mL)中的混合物用氩气脱气10min。接着添加Pd(dppf)Cl2*DCM(573.30mg，702.03μmol)且将反应混合物在90℃下加热12h。将反应混合物冷却至室温，用DCM稀释。将有机相分离且在减压下浓缩。将粗产物用HCl/二噁烷溶液(10％ HCl)处理且再次浓缩。将残余物用MTBE处理且通过过滤收集沉淀，以得到N,N-二甲基-3-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]丙-1-胺(2.67g，粗品，HCl)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值289.2；实测值290.2；Rt＝1.085min。
步骤3：(S)-6-(3-(3-(二甲基氨基)丙基)苯基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
将N,N-二甲基-3-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]丙-1-胺(2.67g，6.15mmol，HCl)和碳酸钠(2.61g，24.59mmol，1.03mL)混合于H2O(10mL)和二噁烷(30mL)中且搅拌20min，然后在氩气下添加(3S)-3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(2.55g，7.38mmol)和Pd(dppf)Cl2*DCM(501.73mg，614.87μmol)且在75℃下搅拌12h。将反应混合物用水稀释且将所需产物用100mL DCM萃取，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩。获得(3S)-6-[3-[3-(二甲基氨基)丙基]苯基]-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(3.2g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值358.2；实测值359.2；Rt＝1.226min。
步骤4：(S)-N,N-二甲基-3-(3-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯基)丙-1-胺的合成
将(3S)-6-[3-[3-(二甲基氨基)丙基]苯基]-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(3.2g，3.79mmol)溶解于TFA(8g，70.16mmol，5.41mL)和DCM(20mL)的混合物中且搅拌1h。将反应混合物在真空中浓缩且将残余物用NaHCO3溶液处理，随后用DCM(2*50mL)萃取。然后，将水层再次用EtOAc处理，将有机相经Na2SO4干燥且在减压下浓缩，以得到N,N-二甲基-3-[3-[(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]苯基]丙-1-胺(320mg，粗品)，其不经纯化即用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值258.2；实测值259.2；Rt＝0.613min。
步骤5：N,N-二甲基-3-(3-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯基)丙-1-胺的合成
将N,N-二甲基-3-[3-[(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]苯基]丙-1-胺(320mg，850.52μmol)溶解于MeOH(20mL)中且添加硼氢化钠(64.35mg，1.70mmol，59.92μL)。搅拌12h之后，将RM浓缩且不经纯化即用于下一步骤中。获得N,N-二甲基-3-[3-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]丙-1-胺(250mg，粗品)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值260.2；实测值261.2；Rt＝0.203min。
步骤6：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(3-(3-(二甲基氨基)丙基)苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1393)的合成
将来自前一阶段的粗产物N,N-二甲基-3-[3-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]丙-1-胺(320mg，847.87μmol)与TEA(400mg，3.95mmol，550.96μL)混合于DMSO(4mL)中，接着添加2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(177.38mg，847.87μmol)和HATU(451.34mg，1.19mmol)且搅拌过夜。过滤RM且使其经历HPLC(2-10min 0-55％水/MeOH+NH330mL/min；装载泵4mL/min MeOH；柱SunFire 19*100mm)，以得到N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2R,5S)-2-[3-[3-(二甲基氨基)丙基]苯基]-5-甲基-1-哌啶基]乙酰胺(34.2mg，75.73μmol，8.93％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.75-1.03(m,3H),1.06-1.15(m,3H),1.28-1.39(m,1H),1.61-1.69(m,3H),1.79-1.93(m,1H),1.96-2.07(m,1H),2.07-2.11(m,6H),2.14-2.25(m,3H),2.35-2.42(m,2H),2.56-2.62(m,2H),2.72-3.23(m,1H),3.44-4.05(m,1H),5.11-5.58(m,1H),5.59-5.67(m,2H),7.06-7.12(m,2H),7.12-7.18(m,1H),7.25-7.32(m,1H),7.43-7.54(m,1H),7.95-8.09(m,1H),10.47-10.58(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值451.2；实测值452.2；Rt＝1.832min。
实施例260.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(3-(3-(二甲基氨基)丙氧基)苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1384)的合成
步骤1：(2R,5S)-5-甲基-2-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将(2R,5S)-2-(3-溴苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(3.4g，9.60mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(2.68g，10.56mmol)和乙酸钾(2.35g，23.99mmol，1.50mL)一起混合于二噁烷(40.00mL)中且将所得混合物抽真空且用氩气回填三次。将Pd(dppf)Cl2*DCM(391.86mg，479.85μmol)添加到先前混合物中且将所得混合物在100℃下加热过夜。将反应混合物在真空中浓缩且将水(25mL)添加到残余物中。将所得混合物用MTBE(2*40mL)萃取且将合并的有机层用水(25mL)、盐水(25mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩，以获得(2R,5S)-5-甲基-2-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(3.5g，8.72mmol，90.87％产率)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值301.2；实测值302.2；Rt＝1.745min。
步骤2：(2R,5S)-2-(3-羟基苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将(2R,5S)-5-甲基-2-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(3.7g，9.22mmol)溶解于THF(50.73mL)中且在室温下小心地逐滴添加35％过氧化氢(1.34g，13.83mmol，1.22mL，35％纯度)。添加完成之后，将反应混合物搅拌1h且在室温下逐滴添加氢氧化钠珠粒水溶液(590.01mg，14.75mmol，277.00μL)。添加完成之后，将反应混合物搅拌1h。将反应混合物用柠檬酸酸化且将所得混合物转移至分离漏斗。分离有机层且将水层用MTBE(2*40mL)萃取。将合并的有机层用亚硫酸钠水溶液洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩，以获得(2R,5S)-2-(3-羟基苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(3g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值191.2；实测值192.2；Rt＝1.428min。
步骤3：(2R,5S)-2-(3-(3-(二甲基氨基)丙氧基)苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将(2R,5S)-2-(3-羟基苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.75g，2.57mmol)溶解于DMF(10mL)中且向其中添加3-溴-N,N-二甲基丙-1-胺(1.27g，5.15mmol，HBr)，随后添加碳酸铯(3.35g，10.30mmol)。将所得混合物在50℃下加热过夜。将反应混合物倒入到水(5mL)中且将所得混合物用EtOAc(3*20mL)萃取。将合并的有机层用水(3*10mL)、盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩，以得到产物。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值376.2；实测值377.2；Rt＝1.109min。
步骤4：N,N-二甲基-3-(3-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯氧基)丙-1-胺的合成
将(2R,5S)-2-[3-[3-(二甲基氨基)丙氧基]苯基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(350mg，929.54μmol)溶解于DCM(1.5mL)中且向其中添加TFA(1.5mL)。搅拌所得混合物1h。将反应混合物小心倒入NaHCO3水溶液(3g于10mL水中)且将所得混合物用DCM(2*15mL)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤且在真空中浓缩，以获得N,N-二甲基-3-[3-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯氧基]丙-1-胺(250mg，粗品)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值276.2；实测值277.2；Rt＝0.581min。
步骤5：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(3-(3-(二甲基氨基)丙氧基)苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1384)的合成
将N,N-二甲基-3-[3-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯氧基]丙-1-胺(250mg，904.43μmol)溶解于DMF(5mL)中且添加TEA(915.20mg，9.04mmol，1.26mL)，随后添加2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(189.21mg，904.43μmol)。然后逐滴添加HATU(515.84mg，1.36mmol)且将反应混合物搅拌过夜。次日，将其在真空中蒸发且通过HPLC(2-10min 0-55％水/MeOH+NH3 30mL/min；装载泵4mL/min MeOH+NH3；柱SunFire 19*100mm)纯化，以获得N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2R,5S)-2-[3-[3-(二甲基氨基)丙氧基]苯基]-5-甲基-1-哌啶基]乙酰胺(33.4mg，71.43μmol，7.90％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99-1.05(m,3H),1.07-1.13(m,3H),1.26-1.37(m,1H),1.60-1.72(m,1H),1.80-1.91(m,3H),1.97-2.09(m,1H),2.11-2.14(m,6H),2.15-2.25(m,1H),2.34-2.43(m,4H),2.72-3.23(m,1H),3.44-4.02(m,3H),5.11-5.55(m,1H),5.59-5.67(m,2H),6.78-6.95(m,3H),7.25-7.31(m,1H),7.43-7.53(m,1H),7.99-8.09(m,1H),10.41-10.62(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值467.2；实测值468.2；Rt＝0.779min。
实施例261.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(3-(2-(吡咯烷-1-基)乙氧基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1391)的合成
步骤1：(S)-3-甲基-6-(3-(2-(吡咯烷-1-基)乙氧基)苯基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
将(3S)-3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1g，2.90mmol)、1-[2-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯氧基]乙基]吡咯烷(853.50mg，2.41mmol，HCl)和碳酸钠(767.30mg，7.24mmol，303.04μL)一起混合于二噁烷(12mL)和水(4mL)的混合物中。将所得混合物抽真空且用氩气回填三次，且向其中添加Pd(dppf)Cl2*DCM(98.53mg，120.66μmol)。将所得混合物在90℃下加热过夜。将所得混合物冷却且用水(40mL)稀释。将所得混合物用EtOAc(2*45mL)萃取且将合并的有机层用盐水(40mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩。通过柱色谱(梯度，于氯仿中的MeOH，0％至9％)纯化残余物(1.12g粗产物)，以获得(3S)-3-甲基-6-[3-(2-吡咯烷-1-基乙氧基)苯基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(0.534g，1.38mmol，57.25％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值386.2；实测值387.2；Rt＝1.210min。
步骤2：(S)-3-甲基-6-(3-(2-(吡咯烷-1-基)乙氧基)苯基)-2,3,4,5-四氢吡啶的合成
将(3S)-3-甲基-6-[3-(2-吡咯烷-1-基乙氧基)苯基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(0.534g，1.38mmol)溶解于DCM(2mL)中且向其中添加TFA(2mL)。搅拌所得混合物1h。将反应混合物小心倒入NaHCO3水溶液(3g于25mL水中)且将所得混合物用DCM(2*30mL)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤且在真空中浓缩，以获得(3S)-3-甲基-6-[3-(2-吡咯烷-1-基乙氧基)苯基]-2,3,4,5-四氢吡啶(333mg，1.16mmol，84.16％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值286.2；实测值287.2；Rt＝0.386min。
步骤3：(2R,5S)-5-甲基-2-(3-(2-(吡咯烷-1-基)乙氧基)苯基)哌啶的合成
将(3S)-3-甲基-6-[3-(2-吡咯烷-1-基乙氧基)苯基]-2,3,4,5-四氢吡啶(333mg，1.16mmol)溶解于MeOH(5mL)中且分批添加硼氢化钠(87.97mg，2.33mmol，81.91μL)。将所得混合物搅拌过夜。将水(10mL)添加到反应混合物中且在真空中浓缩所得混合物。将残余物用水(15mL)稀释且将所得混合物用DCM(2*35mL)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩，以获得(2R,5S)-5-甲基-2-[3-(2-吡咯烷-1-基乙氧基)苯基]哌啶(235mg，814.77μmol，70.08％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值288.2；实测值289.2；Rt＝0.548min。
步骤4：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(3-(2-(吡咯烷-1-基)乙氧基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺的合成
将(2R,5S)-5-甲基-2-[3-(2-吡咯烷-1-基乙氧基)苯基]哌啶(235.00mg，814.77μmol)、2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(170.45mg，814.77μmol)和TEA(412.23mg，4.07mmol，567.81μL)一起混合于DMF(2mL)中且向其中添加HATU(371.76mg，977.72μmol)。将所得混合物搅拌过夜。将反应混合物提交至HPLC且纯化(2-10min 40-65％MeOH+NH3，30mL/min(装载泵4mL MeOH+NH3)柱：SunFire 100*19mm，5微米)，以获得N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-(2-吡咯烷-1-基乙氧基)苯基]-1-哌啶基]乙酰胺(87.7mg，182.86μmol，22.44％产率)和N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-(2-吡咯烷-1-基乙氧基)苯基]-1-哌啶基]乙酰胺(49.4mg，103.00μmol，12.64％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值479.2；实测值480.2；Rt＝0.909min。
步骤5：手性分离(化合物1391)的合成
对N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-(2-吡咯烷-1-基乙氧基)苯基]-1-哌啶基]乙酰胺(49.4mg，103.00μmol)进行手性分离(Chiralpak AS-H(250*20mm，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH，50-25-25；流速：10mL/min)，以获得N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-(2-吡咯烷-1-基乙氧基)苯基]-1-哌啶基]乙酰胺(34.53mg，72.00μmol，69.90％产率)(RT＝8min)。
化合物1391于分析条件下(柱：AS-H，以己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min为流动相)的保留时间为6.92min
化合物1391：保留时间：6.92min
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99-1.04(m,3H),1.05-1.13(m,3H),1.25-1.39(m,1H),1.62-1.71(m,5H),1.81-1.95(m,1H),1.96-2.13(m,1H),2.14-2.25(m,1H),2.35-2.45(m,3H),2.68-2.84(m,3H),3.20-3.27(m,1H),3.34-3.50(m,2H),3.96-4.36(m,3H),5.09-5.57(m,1H),5.57-5.69(m,2H),6.78-6.94(m,3H),7.23-7.33(m,1H),7.42-7.53(m,1H),7.97-8.09(m,1H),10.43-10.64(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值479.2；实测值480.2；Rt＝2.115min。
实施例262.rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,4S,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-异丁基-5-甲基-1-哌啶基]乙酰胺(化合物1157)、rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,4R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-异丁基-5-甲基-1-哌啶基]乙酰胺(化合物1284)、rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2S,4S,5R)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-异丁基-5-甲基-1-哌啶基]乙酰胺(化合物1210)和rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2S,4R,5R)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-异丁基-5-甲基-1-哌啶基]乙酰胺(化合物1190)的合成
步骤1：2-甲氧基-5-甲基-4-(2-甲基丙-1-烯基)吡啶的合成
将4-碘-2-甲氧基-5-甲基吡啶(3.54g，14.23mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(2-甲基丙-1-烯基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(3.24g，17.79mmol)和碳酸钠(3.77g，35.58mmol，1.49mL)一起混合于二噁烷(52.5mL)和水(17.5mL)的混合物中。将所得混合物抽真空且用氩气回填三次。将Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2(581.04mg，711.51μmol)添加到前一混合物中且将所得混合物在90℃下(油浴)加热过夜。将反应混合物在真空中浓缩，且将残余物以水(75mL)稀释。将所得混合物用DCM(3*75mL)萃取且将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩。通过柱色谱(SiO2，以己烷-EtOAc为溶剂混合物)纯化残余物，以获得2-甲氧基-5-甲基-4-(2-甲基丙-1-烯基)吡啶(2.29g，12.92mmol，90.79％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.63(s,3H),1.84(s,3H),2.02(s,3H),3.79(s,3H),6.11(m,1H),6.47(s,1H),7.86(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值178.2；实测值178.2；Rt＝1.122min。
步骤2：4-异丁基-2-甲氧基-5-甲基吡啶的合成
将2-甲氧基-5-甲基-4-(2-甲基丙-1-烯基)吡啶(2.29g，12.92mmol)溶解于MeOH(30mL)中且添加钯(5％于碳上)Noblyst P1093(549.99mg，5.17mmol)。将所得混合物抽真空且用氢气回填三次，且在周末内将所得混合物在1atm(气球)下氢化。过滤出催化剂且将滤液在真空中浓缩，以获得4-异丁基-2-甲氧基-5-甲基吡啶(2.13g，11.91mmol，92.18％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值180.2；实测值180.2；Rt＝1.327min。
步骤3：4-异丁基-5-甲基吡啶-2-醇的合成
将4-异丁基-2-甲氧基-5-甲基吡啶(1.88g，10.49mmol)溶解于48％ HBr溶液(53mL)中且将所得混合物回流过夜。将反应混合物冷却且用Na2CO3中和。将所得混合物用氯仿(2*50mL)萃取且将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩，以获得4-异丁基-5-甲基吡啶-2-醇(1.69g，10.20mmol，97.29％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.89(m,6H),1.79(m,1H),1.94(s,3H),2.26(m,2H),6.05(s,1H),7.08(s,1H),11.18(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值166.2；实测值166.2；Rt＝1.104min。
步骤4：4-异丁基-5-甲基哌啶-2-酮的合成
将4-异丁基-5-甲基吡啶-2-醇(1.91g，11.57mmol)溶解于MeOH(20mL)中且向其中添加AcOH(7mL)。将Pd/C JM A402028-10(369.24mg，3.47mmol)添加到前一混合物中且将所得混合物在50atm、60℃下氢化过夜。通过等分试样的NMR得到10％产物。将干燥的487型钯(10％于碳上)(738.49mg，6.94mmol)添加到反应混合物中且将所得混合物在50atm、60℃下氢化过夜。通过等分试样的NMR得到80％产物。将干燥的487型钯(10％于碳上)(246.16mg，2.31mmol)添加到反应混合物中且在周末内将所得混合物在50atm、60℃下氢化。冷却反应混合物且过滤。将滤液在真空中浓缩且将残余物溶解于CHCl3中。将所得溶液用NaHCO3水溶液洗涤且将有机层在真空中浓缩，以获得4-异丁基-5-甲基哌啶-2-酮(1.80g，10.61mmol，91.74％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.79-0.99(m,9H),0.99-1.10(m,2H),1.27-1.86(m,4H),2.12-2.21(m,1H),2.76-2.85(m,1H),3.09-3.19(m,1H),7.26-7.36(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值170.2；实测值170.2；Rt＝1.179min。
步骤5：4-异丁基-5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将4-异丁基-5-甲基哌啶-2-酮(1.80g，10.61mmol)和DMAP(129.63mg，1.06mmol)溶解于MeCN(35mL)中且添加二碳酸二-叔丁酯(2.66g，12.20mmol，2.80mL)。将所得混合物搅拌过夜。在真空中浓缩反应混合物且将残余物溶解于氯仿(75mL)中。将所得溶液用NaHSO4溶液(2*40mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩，以获得4-异丁基-5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.77g，10.28mmol，96.91％产率)。
LCMS(ESI)：[M-tBu]+m/z：计算值214.2；实测值214.2；Rt＝1.575min。
步骤6：4-异丁基-3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将六甲基二硅氮烷(2.07g，12.85mmol，2.68mL)溶解于THF(30mL)中且在氩气气氛下将所得溶液冷却至-78℃。在-78℃下逐滴添加正丁基锂(803.64mg，12.55mmol)且将所得混合物搅拌30min。在-78℃下逐滴添加4-异丁基-5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.77g，10.28mmol)于THF(10mL)中的溶液且在添加完成之后，将所得混合物在-78℃下搅拌1.5h。将1,1,1-三氟-N-苯基-N-(三氟甲基磺酰基)甲磺酰胺(3.86g，10.80mmol)一次性添加到将反应混合物且将所得混合物在-78℃下搅拌30min。然后，使反应混合物升温至室温且搅拌过夜。将反应混合物用水(15mL)和MTBE(50mL)稀释且分离有机层。将水层另外用MTBE(35mL)萃取且将合并的有机层用10％氢氧化钠水溶液(3*15mL)洗涤，经碳酸钾干燥且在真空中浓缩。将残余物用己烷/MTBE混合物稀释(3:1，40mL，重复5次)且搅拌30min。将所得混浊溶液自油状残余物倾析通过硅胶短垫(20g无水硅胶)过滤且蒸发，以获得粗品4-异丁基-3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(3.92g，9.76mmol，94.91％产率)，其不经纯化即用于进一步的步骤中。
LCMS(ESI)：[M-Tf-tBu]+m/z：计算值214.2；实测值214.2；Rt＝1.291min。
步骤7：6-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-异丁基-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将4-异丁基-3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.2g，2.99mmol)、5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噻唑(936.76mg，3.59mmol)和碳酸钠(633.66mg，5.98mmol，250.26μL)混合于二噁烷(9mL)和水(3mL)的混合物中。将所得混合物抽真空且用氩气回填三次，且添加Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2(122.06mg，149.46μmol)。将所得混合物抽真空且用氩气回填，且将所得混合物在90℃下加热过夜。将所得混合物冷却且用水(45mL)稀释。将所得混合物用EtOAc(2*75mL)萃取且将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩。将残余物(1.3g粗产物)与残余物(240mg粗产物)合并且通过柱色谱(梯度，于己烷中的EtOAc，0％至9％)纯化，以获得6-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-异丁基-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(0.922g，2.39mmol，79.79％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值387.2；实测值387.5；Rt＝1.756min。
步骤8：5-(4-异丁基-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1,3-苯并噻唑的合成
将6-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-异丁基-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(0.922g，2.39mmol)溶解于DCM(4mL)中且添加TFA(4mL)。搅拌所得混合物1h。将反应混合物倒入到NaHCO3水溶液(7g于40mL水中)中且将所得混合物用DCM(2*45mL)萃取。将合并的有机层用水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤且在真空中浓缩，以获得5-(4-异丁基-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1,3-苯并噻唑(642mg，2.24mmol，93.97％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.88-1.01(m,9H),1.50-2.01(m,4H),2.25(m,1H),2.48-2.96(m,2H),3.86-4.02(m,2H),7.96(d,1H),8.01(d,1H),8.46(s,1H),9.01(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值287.2；实测值287.2；Rt＝0.904min。
步骤9：外消旋-5-[(2R,5S)-4-异丁基-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑的合成
溶解5-(4-异丁基-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1,3-苯并噻唑(642mg，2.24mmol)且添加硼氢化钠(169.59mg，4.48mmol，157.91μL)。将所得混合物搅拌过夜。将水(10mL)添加到反应混合物中且将所得混合物在真空中浓缩。将残余物用水(20mL)稀释且将所得混合物用DCM(2*45mL)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤且在真空中浓缩，以获得5-[(2R,5S)-4-异丁基-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑(644mg，2.23mmol，99.61％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值289.0；实测值289.0；Rt＝0.963min。
步骤10：外消旋-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-异丁基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成：
将5-[(2R,5S)-4-异丁基-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑(235mg，814.70μmol)、2-[(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(159.01mg，814.70μmol)和三乙胺(412.20mg，4.07mmol，567.76μL)一起混合于DMF(2mL)中且添加HATU(371.73mg，977.64μmol)。将所得混合物搅拌过夜。将反应混合物提交至HPLC且纯化(2-10mi n；55-70％甲醇+NH3；流速30mL/min(装载泵4mL/min甲醇)，柱Sun Fire C18 100*19mm，5um)，以获得N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-异丁基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(158.4mg，340.20μmol，41.76％产率)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-异丁基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(42.6mg，91.49μmol，11.23％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值466.2；实测值466.2；Rt＝1.107min。
步骤11：rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,4S,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-异丁基-5-甲基-1-哌啶基]乙酰胺(化合物1157)、rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,4R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-异丁基-5-甲基-1-哌啶基]乙酰胺(化合物1284)、rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2S,4S,5R)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-异丁基-5-甲基-1-哌啶基]乙酰胺(化合物1210)和rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2S,4R,5R)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-异丁基-5-甲基-1-哌啶基]乙酰胺(化合物1190)的合成
对外消旋-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-异丁基-5-甲基-1-哌啶基]乙酰胺(158.4mg，340.20μmol)进行手性分离(柱：Chiralcel OD-H(250x 20mm，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH，80-10-10；流速：12mL/min；柱温：24℃；波长：205nm、215nm；保留时间(化合物1157)＝29,35min；保留时间(化合物1284)＝35,45min；保留时间(化合物1210)＝41,11min；保留时间(化合物1190)＝44,65min)，以获得N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,4S,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-异丁基-5-甲基-1-哌啶基]乙酰胺(44.91mg，96.45μmol，28.35％产率)、N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,4R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-异丁基-5-甲基-1-哌啶基]乙酰胺(24.39mg，52.38μmol，15.40％产率)、N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2S,4S,5R)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-异丁基-5-甲基-1-哌啶基]乙酰胺(23.15mg，49.72μmol，14.61％产率)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2S,4R,5R)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-异丁基-5-甲基-1-哌啶基]乙酰胺(47.5mg，102.02μmol，29.99％产率)。
化合物1157：产率：44.91mg(28.35％)
RT(Chiralpak OD-H(250*4.6，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，80-10-10，0.6mL/min)＝26.450min。
1H NMR(600MHz,dmso)δ0.80-0.86(m,6H),0.98-1.02(m,3H),1.07-1.20(m,3H),1.48-1.55(m,1H),1.58-1.71(m,2H),1.86-2.04(m,3H),2.11-2.22(m,1H),3.41-3.68(m,1H),3.74-4.12(m,1H),5.14-5.38(m,1H),5.47-5.68(m,2H),7.35-7.63(m,2H),7.89-8.03(m,2H),8.03-8.15(m,1H),9.27-9.40(m,1H),9.85-10.53(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值466.2；实测值466.2；Rt＝1.104min。
化合物1284：产率：24.39mg(15.40％)
RT(Chiralpak OD-H(250*4.6，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，80-10-10，0.6mL/min)＝31.136min。
1H NMR(600MHz,dmso)δ0.42-0.64(m,3H),0.71-0.81(m,6H),0.83-0.98(m,2H),1.42-1.57(m,1H),1.74-1.83(m,1H),1.87-2.10(m,5H),2.12-2.20(m,1H),2.71-3.05(m,1H),3.80-4.34(m,1H),5.23-5.70(m,3H),7.21-7.56(m,2H),7.77-8.07(m,2H),8.07-8.16(m,1H),9.34-9.41(m,1H),10.30-10.59(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值466.2；实测值466.2；Rt＝1.118min。
化合物1210：产率：23.15mg(14.61％)
RT(Chiralpak OD-H(250*4.6，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，80-10-10，0.6mL/min)＝35.461min。
1H NMR(600MHz,dmso)δ0.41-0.63(m,3H),0.70-0.81(m,6H),0.82-0.98(m,2H),1.43-1.56(m,1H),1.71-1.84(m,1H),1.91-2.09(m,5H),2.12-2.21(m,1H),2.72-3.06(m,1H),3.78-4.36(m,1H),5.28-5.68(m,3H),7.22-7.56(m,2H),7.75-8.07(m,2H),8.07-8.16(m,1H),9.35-9.40(m,1H),10.27-10.57(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值466.2；实测值466.2；Rt＝1.121min。
化合物1190：产率：47.5mg(29.99％)
RT(Chiralpak OD-H(250*4.6，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，80-10-10，0.6mL/min)＝38.015min。
1H NMR(600MHz,dmso)δ0.80-0.87(m,6H),0.98-1.02(m,3H),1.08-1.25(m,3H),1.48-1.55(m,1H),1.57-1.69(m,2H),1.87-2.05(m,3H),2.11-2.21(m,1H),3.39-3.67(m,1H),3.75-4.09(m,1H),5.11-5.37(m,1H),5.46-5.67(m,2H),7.31-7.52(m,2H),7.87-8.18(m,3H),9.33-9.41(m,1H),9.93-10.51(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值466.2；实测值466.2；Rt＝1.119min。
实施例263.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(3-(2-(二甲基氨基)乙氧基)苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1175)的合成
将N,N-二甲基-2-[3-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯氧基]乙胺(293mg，1.12mmol)、2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(233.61mg，1.12mmol)和TEA(564.97mg，5.58mmol，778.20μL)一起混合于DMF(3mL)中且向其中添加HATU(509.51mg，1.34mmol)。将所得混合物搅拌过夜。将反应混合物提交至HPLC且纯化(2-10min 10-50％MeCN+FA，30mL/min(装载泵4mL MeCN+FA)柱：SunFire 100*19mm，5微米)，以获得N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[3-[2-(二甲基氨基)乙氧基]苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(18.7mg，37.43μmol，3.35％产率，HCOOH)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.96-1.06(m,3H),1.06-1.17(m,3H),1.27-1.38(m,1H),1.58-1.76(m,1H),1.82-1.92(m,1H),1.97-2.15(m,1H),2.19-2.21(m,6H),2.36-2.43(m,2H),2.59-2.76(m,3H),3.22-3.24(m,1H),3.42-3.48(m,1H),4.01-4.07(m,2H),5.09-5.57(m,1H),5.57-5.66(m,2H),6.77-6.94(m,3H),7.25-7.32(m,1H),7.43-7.52(m,1H),7.97-8.07(m,1H),10.49-10.56(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值453.2；实测值454.2；Rt＝1.946min。
对N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2R,5S)-2-[3-[2-(二甲基氨基)乙氧基]苯基]-5-甲基-1-哌啶基]乙酰胺(117.1mg，258.17μmol)进行手性分离(ChiralpakAD-H-V(250*20mm，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，12mL/min)，以获得N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2R,5S)-2-[3-[2-(二甲基氨基)乙氧基]苯基]-5-甲基-1-哌啶基]乙酰胺(99.36mg，219.06μmol，84.85％产率)(RT＝41.69min)。
化合物1175于分析条件下(柱：AD-H，以IPA-MeOH，50-50，0.6mL/min为流动相)的保留时间为35.98min
化合物1175：保留时间：35.98min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.96-1.03(m,3H),1.06-1.14(m,3H),1.26-1.39(m,1H),1.60-1.72(m,1H),1.82-1.92(m,1H),1.96-2.13(m,1H),2.13-2.18(m,1H),2.18-2.23(m,6H),2.34-2.41(m,2H),2.58-2.61(m,2H),2.72-3.24(m,1H),3.42-4.00(m,1H),4.00-4.06(m,2H),5.06-5.57(m,1H),5.57-5.66(m,2H),6.77-6.84(m,1H),6.84-6.93(m,2H),7.20-7.34(m,1H),7.41-7.56(m,1H),7.96-8.11(m,1H),10.46-10.57(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值453.2；实测值454.2；Rt＝0.895min。
实施例264.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(3-(1-甲基哌啶-3-基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1353、化合物1285和化合物1090)的合成
步骤1：(2R,5S)-2-(3-溴苯基)-5-甲基哌啶的合成
将(2R,5S)-2-(3-溴苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.3g，12.14mmol)溶解于DCM(16mL)中且向其中添加TFA(16mL)。搅拌所得混合物1h。将反应混合物在真空中浓缩且将K2CO3水溶液(70mL水中的25g)小心添加到残余物中。将所得混合物用DCM(2*40mL)萃取且将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩，以获得(2R,5S)-2-(3-溴苯基)-5-甲基哌啶(2.70g，10.60mmol，87.36％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值254.2；实测值255.2；Rt＝0.619min。
步骤2：(2R,5S)-2-(3-溴苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸苯甲酯的合成
将(2R,5S)-2-(3-溴苯基)-5-甲基哌啶(2.7g，10.62mmol)溶解于THF(25mL)中且向其中添加碳酸钠(2.25g，21.25mmol，889.35μL)，随后添加水(30mL)。将所得混合物在冰浴中冷却至0℃且在0℃下逐滴添加氯甲酸苯甲酯(1.90g，11.15mmol，1.59mL)于THF(5mL)中的溶液。在添加完成之后，使反应混合物升温至室温且搅拌过夜。将反应混合物在真空中浓缩且将残余物用水(50mL)稀释。将所得混合物用MTBE(2*50mL)萃取且将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩，以获得(2R,5S)-2-(3-溴苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸苯甲酯(4.27g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值388.2；实测值389.2；Rt＝1.636min。
步骤3：3-(3-((2R,5S)-1-((苯甲基氧基)羰基)-5-甲基哌啶-2-基)苯基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
将(2R,5S)-2-(3-溴苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸苯甲酯(1g，2.58mm ol)、5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(915.76mg，2.96mmol)和碳酸钠(545.92mg，5.15mmol，215.61μL)溶解于二噁烷(7.5mL)和水(2.5mL)的混合物中。将所得混合物抽真空且用氩气回填三次，且向其中添加Pd(dppf)Cl2*DCM(105.16mg，128.77μmol)。将所得混合物在90℃下加热过夜。将反应混合物在真空中浓缩且将残余物用水(20mL)稀释。将所得混合物用EtOAc(2*30mL)萃取且将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩。通过柱色谱纯化残余物，以获得5-[3-[(2R,5S)-1-苯甲基氧基羰基-5-甲基-2-哌啶基]苯基]-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(800mg，1.63mmol，63.31％产率)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值390.2；实测值391.2；Rt＝1.885min。
步骤4：3-(3-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将5-[3-[(2R,5S)-1-苯甲基氧基羰基-5-甲基-2-哌啶基]苯基]-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(800.00mg，1.63mmol)溶解于MeOH(30mL)中且向其中添加钯(10％于碳上)(433.81mg，407.64μmol，10％纯度)。将所得混合物在50atm下氢化过夜。过滤出催化剂且将滤液在真空中浓缩，以获得3-[3-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(661mg，粗品)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值358.2；实测值359.2；Rt＝1.201min。
步骤5：1-甲基-3-(3-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯基)哌啶的合成
将LAH(349.88mg，9.22mmol)溶解于THF(8mL)中且将3-[3-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(661.00mg，1.84mmol)于THF(2mL)中的溶液逐滴添加到前一混合物中。将所得混合物加热至回流且回流3h。使反应混合物冷却至室温且搅拌过夜。将水(350mkl)添加到反应混合物中，随后添加KOH水溶液(350mkl)和水(700mkl)。将反应混合物搅拌30min且过滤。将滤饼用THF(15mL)洗涤且将滤液浓缩，以获得1-甲基-3-[3-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]哌啶(450mg，1.65mmol，89.59％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值272.2；实测值273.2；Rt＝0.684min。
步骤6：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(3-(1-甲基哌啶-3-基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1353)的合成
将1-甲基-3-[3-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]哌啶(250mg，917.68μmol)、2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(191.98mg，917.68μmol)和TEA(464.30mg，4.59mmol，639.53μL)混合于DMF(2.5mL)中且向其中添加HATU(418.71mg，1.10mmol)。将所得混合物搅拌过夜。将反应混合物提交至HPLC且纯化(2-10min60-80％ MeOH+NH3 30min(装载泵4mL MeOH)，柱：SunFire 100*19mm，5微米)，以获得N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-(1-甲基-3-哌啶基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(165.3mg，356.55μmol，38.85％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98-1.03(m,3H),1.06-1.13(m,3H),1.29-1.41(m,2H),1.55-1.69(m,3H),1.72-1.79(m,1H),1.82-1.90(m,3H),1.95-2.11(m,1H),2.14-2.16(m,3H),2.18-2.28(m,1H),2.39-2.42(m,1H),2.69-3.24(m,5H),3.42-4.04(m,1H),5.10-5.58(m,1H),5.58-5.68(m,2H),7.11-7.19(m,3H),7.24-7.33(m,1H),7.42-7.53(m,1H),7.98-8.07(m,1H),10.49-10.56(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值463.2；实测值464.2；Rt＝2.113min。
步骤7：手性分离(化合物1396和化合物1090)
对外消旋N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-(1-甲基-3-哌啶基)苯基]-1-哌啶基]乙酰胺(50.7mg，109.36μmol)进行手性分离(柱：Chiralpak IA(250，20mm，5mkm)；流动相：IPA-MeOH，50-50；流速：10mL/min)，以获得N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-[(3S)-1-甲基-3-哌啶基]苯基]-1-哌啶基]乙酰胺(19.97mg，43.07μmol，39.39％产率)(RT＝15.04min)和N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-[(3R)-1-甲基-3-哌啶基]苯基]-1-哌啶基]乙酰胺(25.54mg，55.09μmol，50.37％产率)(RT＝23.16min)。
化合物1396于分析条件下(柱：IA，以MeOH，50-50，0.6mL/min为流动相)的保留时间为21.21min且化合物1090的保留时间为12.00min。
化合物1396：保留时间：21.21min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98-1.04(m,3H),1.06-1.15(m,3H),1.28-1.41(m,2H),1.51-1.70(m,3H),1.72-1.79(m,1H),1.80-1.92(m,3H),1.96-2.36(m,6H),2.38-2.42(m,1H),2.72-3.22(m,4H),3.41-4.04(m,1H),5.11-5.57(m,1H),5.58-5.67(m,2H),7.11-7.20(m,3H),7.27-7.32(m,1H),7.41-7.53(m,1H),7.98-8.09(m,1H),10.49-10.55(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值463.2；实测值464.2；Rt＝2.107min。
化合物1090：保留时间：12.00min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98-1.03(m,3H),1.06-1.13(m,3H),1.28-1.41(m,2H),1.54-1.70(m,3H),1.72-1.80(m,1H),1.81-1.90(m,3H),1.97-2.12(m,1H),2.13-2.16(m,3H),2.18-2.27(m,1H),2.32-2.36(m,1H),2.38-2.42(m,1H),2.72-3.22(m,4H),3.42-4.06(m,1H),5.11-5.58(m,1H),5.59-5.67(m,2H),7.09-7.21(m,3H),7.26-7.32(m,1H),7.43-7.52(m,1H),7.99-8.08(m,1H),10.48-10.55(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值463.2；实测值464.2；Rt＝2.104min。
实施例265.N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-2-[3-氯-4-[2-(二甲基氨基)乙氧基]苯基]-5-甲基-1-哌啶基]乙酰胺(化合物1305)的合成
步骤1：4-溴-3-氯苯甲酰氯的合成
将4-溴-3-氯苯甲酸(22g，93.43mmol)悬浮于DCM(250mL)中。添加二甲基甲酰胺(204.88mg，2.80mmol，217.04uL)。将所得混合物在25℃下搅拌15h。当气体逸出停止时，在减压下浓缩所得澄清溶液。将残余物再溶解于己烷(30mL)中，过滤且在真空中蒸发，得到4-溴-3-氯苯甲酰氯(21.8g，85.86mmol，91.89％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)7.71(d,1H),7.81(d,1H),7.98(s,1H)。
步骤2：3-(4-溴-3-氯苯甲酰基)-5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
在-78℃下，将双(三甲基甲硅烷基)酰胺化钠(15.17g，82.71mmol)逐滴添加到5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁基酯(8.40g，39.38mmol)于THF(50mL)中的预冷却溶液中。添加完成之后，将其在同一温度下搅拌1h。此后，逐滴添加4-溴-3-氯苯甲酰氯(10g，39.38mmol)于THF中的溶液。添加完成之后，移除冷却浴。将所得混合物缓慢升温至20℃且在此温度下搅拌1h。然后，将其用15％ NH4Cl(150mL)淬灭且用乙酸乙酯(2*200mL)萃取。将有机层用20％ NaCl(2x100 mL)洗涤，经Na2SO4干燥且在减压下蒸发，得到3-(4-溴-3-氯苯甲酰基)-5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(16g，37.15mmol，94.32％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值430.2；实测值430.0；Rt＝1.598min。
步骤3：6-(4-溴-3-氯苯基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶的合成
将3-(4-溴-3-氯苯甲酰基)-5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(16g，37.15mmol)溶解于AcOH(100mL)中且分批添加36％重量/重量盐酸水溶液(19.23g，527.49mmol，24.04mL)。添加完成之后，将所得混合物在100℃下搅拌15h。然后，在减压下移除溶剂且将残余物分配于1N HCl(100mL)与DCM(200mL)之间。分离有机层且丢弃。将水层用10％ NaOH碱化至pH≈10且用DCM(2x200 mL)萃取。将DCM层合并，经Na2SO4干燥且在减压下蒸发，得到6-(4-溴-3-氯苯基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶(1.6g，5.58mmol，15.03％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值286.0；实测值286.0；Rt＝0.775min。
步骤4：(5S)-2-(4-溴-3-氯苯基)-5-甲基哌啶的合成
在0℃下，向(3S)-6-(4-溴-3-氯苯基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶(3.3g，11.51mmol)于MeOH(34.19mL)中的搅拌溶液中添加硼氢化钠(871.25mg，23.03mmol，811.22μL)。将所得反应混合物在25℃下搅拌12h。完成之后，将反应混合物在减压下浓缩，然后用水20mL和50mL EtOAc淬灭。将合并的有机相用盐水20mL洗涤，经Na2SO4干燥且在减压下浓缩，以获得(5S)-2-(4-溴-3-氯苯基)-5-甲基哌啶(3.2g，11.09mmol，96.29％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值288.0；实测值288.0；Rt＝0.851min。
步骤5：(5S)-2-(4-溴-3-氯苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
在25℃下，向(5S)-2-(4-溴-3-氯苯基)-5-甲基哌啶(3.2g，11.09mmol)于DCM(47.46mL)中的搅拌溶液中添加2.0M于THF中的二碳酸二-叔丁酯(2.42g，11.09mmol，2.54mL)。将所得反应混合物在25℃下搅拌15h。完成之后，将反应混合物在减压下浓缩，以获得(5S)-2-(4-溴-3-氯苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(4g，10.29mmol，92.81％产率)。
LCMS(ESI)：[M-tBu]+m/z：计算值332.0；实测值332.0；Rt＝1.793min。
步骤6：(5S)-2-[3-氯-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
向(5S)-2-(4-溴-3-氯苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(4g，10.29mmol)的溶液中添加乙酸钾(2.02g，20.58mmol，1.29mL)和双(频哪醇)二硼(2.61g，10.29mmol)。将反应混合物脱气且一次性添加Pd(dppf)Cl2*DCM(420.16mg，514.50μmol)。将混合物用Ar进一步脱气且在90℃下加热16h。在此时间之后，使反应混合物冷却至室温，过滤且在真空中移除溶剂，以获得(5S)-2-[3-氯-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(4g，9.18mmol，89.20％产率)。
LCMS(ESI)：[M-tBu]+m/z：计算值380.2；实测值380.2；Rt＝1.886min。
步骤7：(5S)-2-(3-氯-4-羟基苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
向(5S)-2-[3-氯-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(4g，9.18mmol)于水(18.94mL)和THF(18.94mL)的混合物中的溶液中添加35％过氧化氢(2.34g，68.84mmol，2.13mL)且搅拌过夜。将反应混合物用水(40mL)和MTBE(40mL)稀释，且用硫代硫酸钠处理，然后将有机相用水洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩。使粗品经历CC(将CHCl3/MTBE用作洗脱液混合物)，以得到(5S)-2-(3-氯-4-羟基苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(2g，6.14mmol，66.87％产率)。
LCMS(ESI)：[M-tBu]+m/z：计算值270.0；实测值270.0；Rt＝1.461min。
步骤8：(5S)-2-[3-氯-4-[2-(二甲基氨基)乙氧基]苯基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将(5S)-2-(3-氯-4-羟基苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(2g，6.14mmol)溶解于DMF(50mL)中且添加碳酸铯(18.00g，55.24mmol)。然后，添加2-溴-N,N-二甲基乙胺(6.43g，27.62mmol，HBr)。将反应混合物在65℃下搅拌过夜。此后，将其蒸发且在水与EtOAc之间萃取，然后将其用盐水洗涤且经Na2SO4干燥。将其蒸发，以得到(5S)-2-[3-氯-4-[2-(二甲基氨基)乙氧基]苯基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.3g，3.27mmol，53.35％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值397.2；实测值397.2；Rt＝0.998min。
步骤9：2-[2-氯-4-[(5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯氧基]-N,N-二甲基乙胺的合成
将(5S)-2-[3-氯-4-[2-(二甲基氨基)乙氧基]苯基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.65g，1.64mmol)溶解于DCM(5.74mL)中且添加TFA(1.87g，16.37mmol，1.26mL)。然后，将反应物在室温下搅拌1h。将其蒸发，以得到2-[2-氯-4-[(5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯氧基]-N,N-二甲基乙胺(0.7g，1.34mmol，81.76％产率，2TFA)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值297.2；实测值297.2；Rt＝0.354min。
步骤10：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-2-[3-氯-4-[2-(二甲基氨基)乙氧基]苯基]-5-甲基-1-哌啶基]乙酰胺(化合物1305)的合成
将DIPEA(1.73g，13.39mmol，2.33mL)添加到相应2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(280.07mg，1.34mmol)和2-[2-氯-4-[(5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯氧基]-N,N-二甲基乙胺(0.7g，1.34mmol，2TFA)于DMF(7.67mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU(559.95mg，1.47mmol)。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。反应完成(通过LCMS监测)之后，在减压下浓缩所得悬浮液，将其溶解于EtOAc中且用水和盐水洗涤，经Na2SO4干燥。使所获得的固体经历HPLC(Waters Sunfire C18 20*100 5mkm柱且以MeCN+FA为洗脱液混合物)，以得到N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-2-[3-氯-4-[2-(二甲基氨基)乙氧基]苯基]-5-甲基-1-哌啶基]乙酰胺(51.8mg，97.00μmol，7.25％产率，HCOOH)。
1H NMR(600MHz,dmso)δ0.96-1.06(m,3H),1.05-1.14(m,3H),1.26-1.37(m,1H),1.62-1.70(m,1H),1.80-1.91(m,1H),1.96-2.10(m,1H),2.11-2.20(m,1H),2.23(s,6H),2.37-2.42(m,2H),2.64-2.68(m,2H),2.69-3.23(m,1H),3.43-4.02(m,1H),4.09-4.16(m,2H),5.05-5.55(m,1H),5.57-5.70(m,2H),7.09-7.26(m,2H),7.28-7.39(m,1H),7.43-7.53(m,1H),7.97-8.08(m,1H),10.30-10.68(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值488.2；实测值488.2；Rt＝2.126min。
实施例266.N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-2-[3-氯-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]乙酰胺(化合物1265)的合成
步骤4：1-[2-氯-4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯基]-4-甲基哌嗪的合成
在Ar气氛下，向1-甲基哌嗪(524.23mg，5.23mmol，580.55uL)、6-(4-溴-3-氯苯基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶(1.5g，5.23mmol)和[1,1'-联苯基]-2-基二环己基膦(366.87mg，1.05mmol)于甲苯(10mL)中的悬浮液中添加叔丁醇钠(754.49mg，7.85mmol)和三(二苯亚甲基丙酮)二钯(0)(143.78mg，157.02umol)。将所得混合物在80℃下搅拌16h。将反应混合物冷却，将沉淀过滤，将溶剂蒸发，以获得1-[2-氯-4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯基]-4-甲基哌嗪(1g，3.27mmol，62.47％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值306.2；实测值306.2；Rt＝0.650min。
步骤5：1-[2-氯-4-(5-甲基-2-哌啶基)苯基]-4-甲基哌嗪的合成
在0℃下，将硼氢化钠(247.40mg，6.54mmol，230.35μL)一次性添加到1-[2-氯-4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯基]-4-甲基哌嗪(1g，3.27mmol)于MeOH(49.77mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在25℃下搅拌15h，然后在真空中蒸发。将残余物用水(20mL)稀释且用EtOAc(2*40mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发。使所获得的油状物经历HPLC(Waters Sunfire C1819*100 5mkm柱且以MeCN+NH3为洗脱液混合物)，以得到1-[2-氯-4-(5-甲基-2-哌啶基)苯基]-4-甲基哌嗪(0.13g，422.27μmol，12.91％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值308.2；实测值308.2；Rt＝1.500min。
步骤6：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-2-[3-氯-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]乙酰胺(化合物1265)的合成
将DIPEA(136.44mg，1.06mmol，183.88μL)添加到相应2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(88.34mg，422.27μmol)和1-[2-氯-4-(5-甲基-2-哌啶基)苯基]-4-甲基哌嗪(0.13g，422.27μmol)于DMF(4.82mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU(176.62mg，464.50μmol)。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。反应完成(通过LCMS监测)之后，在减压下浓缩所得悬浮液，将其溶解于EtOAc中且用水和盐水洗涤，经Na2SO4干燥。使所获得的固体经历HPLC(Waters Sunfire C18 20*100 5mkm柱且以水-MeCN+FA为洗脱液混合物)，以得到N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-2-[3-氯-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]乙酰胺(17mg，28.76μmol，6.81％产率，2HCOOH)。
1H NMR(600MHz,dmso)δ0.97-1.05(m,3H),1.12-1.18(m,3H),1.26-1.38(m,1H),1.60-1.70(m,1H),1.82-1.93(m,1H),1.99-2.09(m,1H),2.14-2.25(m,1H),2.62-2.85(m,1H),2.88(s,3H),2.96-3.02(m,2H),3.17-3.26(m,4H),3.50-3.55(m,4H),3.70-4.05(m,1H),5.09-5.58(m,1H),7.22-7.30(m,2H),7.31-7.40(m,1H),7.42-7.80(m,2H),7.80-7.87(m,1H),8.24-8.35(m,1H),9.68-9.84(m,1H),11.01-11.16(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值500.2；实测值500.2；Rt＝1.580min。
实施例267.rel-N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-((2R,4S,5R)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-4-(三氟甲氧基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1323)和rel-N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-((2R,4S,5R)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-4-(三氟甲氧基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1213)的合成
步骤3：[(2R,5R)-2-(4-氟苯基)-4-羟基-5-甲基-1-哌啶基]-苯基甲酮的合成
将(2R,5R)-2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶-4-醇(1.7g，6.92mmol，HCl)和TEA(3.50g，34.59mmol，4.82mL)一起混合于DCM(20mL)中且在冰/甲醇浴中将所得溶液冷却至0℃。将苯甲酰氯(1.07g，7.61mmol)逐滴添加到前一溶液中且使所得混合物升温至室温且搅拌过夜。将反应混合物用DCM稀释且将所得溶液用水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且蒸发，以获得[(2R,5R)-2-(4-氟苯基)-4-羟基-5-甲基-1-哌啶基]-苯基甲酮(2.15g，6.86mmol，99.17％产率)，其不经进一步纯化即用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值314.2；实测值314.2；Rt＝1.276min。
步骤4：O-[(2R,5R)-1-苯甲酰基-2-(4-氟苯基)-5-甲基-4-哌啶基]甲基氢硫基甲硫酸酯的合成
将(2R,5R)-2-(4-氟苯基)-4-羟基-5-甲基-1-哌啶基]-苯基甲酮(2.15g，6.86mmol)溶解于THF(20mL)中且在用冰/水的冷却下向所得混合物中添加于矿物油中的氢化钠(油分散体)60％分散物(473.20mg，20.58mmol)，使反应混合物搅拌1h，然后在用冰/水的冷却下添加二硫化碳(1.57g，20.58mmol)，将反应混合物加热至室温且搅拌30min，然后将反应混合物再次用冰/水冷却且添加碘甲烷(2.92g，20.58mmol，1.28mL)，将所得混合物加热至室温且搅拌过夜。将反应混合物用EA稀释且用盐水洗涤两次。获得呈棕色胶状物的O-[(2R,5R)-1-苯甲酰基-2-(4-氟苯基)-5-甲基-4-哌啶基]甲基氢硫基甲硫酸酯(2.5g，6.20mmol，90.30％产率)。所获得的产物不经进一步纯化即用于下一步骤中
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值404.2；实测值404.2；Rt＝1.483min。
步骤5：[(2R,5R)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-4-(三氟甲氧基)-1-哌啶基]-苯基甲酮的合成
将1,3-二溴-5,5-二甲基乙内酰脲(7.09g，24.78mmol)溶解于DCM(60mL)中且将所获得的溶液冷却至-70℃，且在此温度下，添加氟化氢-吡啶(70％ HF)(8.60g，86.73mmol，7.54mL)，使反应混合物在-70℃下搅拌30min。然后，在-70℃下添加O-[(2R,5R)-1-苯甲酰基-2-(4-氟苯基)-5-甲基-4-哌啶基]甲基氢硫基甲硫酸酯(2.5g，6.20mmol)于DCM(5mL)中的溶液且将所获得的混合物搅拌1h，然后加热至室温，搅拌过夜。将反应混合物倒入到Na2CO3的饱和水溶液中，将DCM层分离且将水层用额外DCM萃取，将合并的有机相经Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩。通过FCC(于己烷中的EtOAc，0％至100％)纯化所获得的粗产物。获得呈黄色胶状物的[(2R,5R)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-4-(三氟甲氧基)-1-哌啶基]-苯基甲酮(0.3g，786.65μmol，12.70％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值382.0；实测值382.0；Rt＝1.538min。
步骤6：(2R,5R)-1-苯甲基-2-(4-氟苯基)-5-甲基-4-(三氟甲氧基)哌啶的合成
将氢化锂铝(40.91mg，1.21mmol)悬浮于THF(10mL)中且在回流下加热，然后逐滴添加[(2R,5R)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-4-(三氟甲氧基)-1-哌啶基]-苯基甲酮(0.115g，301.55μmol)于THF(2mL)中的溶液且将反应混合物在66℃下搅拌12h。将反应混合物用冰/甲醇冷却且逐滴添加水(1mL/g LiAlH4)，然后逐滴添加40％ KOH水溶液(1mL/gLiAlH4)，然后逐滴添加水(2mL/g LiAlH4)。过滤出所形成的固体且将其用EA洗涤三次，将滤液在真空中浓缩。获得呈黄色胶状物的(2R,5R)-1-苯甲基-2-(4-氟苯基)-5-甲基-4-(三氟甲氧基)哌啶(0.1g，272.20μmol，90.27％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值368.2；实测值368.2；Rt＝1.196min。
步骤7：(2R,5R)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-4-(三氟甲氧基)哌啶的合成
将(2R,5R)-1-苯甲基-2-(4-氟苯基)-5-甲基-4-(三氟甲氧基)哌啶(0.1g，272.20μmol)溶解于MeOH中且向其中添加Pd/C(10％)(0.01g，272.20μmol)。将所得反应混合物脱气且用氢气填充且在20℃下搅拌60h。将反应混合物过滤，将滤饼用额外MeOH洗涤且将滤液在真空中浓缩。获得呈黄色胶状物的(2R,5R)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-4-(三氟甲氧基)哌啶(0.07g，252.47μmol，92.75％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值278.0；实测值278.0；Rt＝0.967min。
步骤8：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5R)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-4-(三氟甲氧基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
将(2R,5R)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-4-(三氟甲氧基)哌啶(0.07g，252.47μmol)、TEA(76.64mg，757.42μmol，105.57μL)和2-[(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(49.28mg，252.47μmol)溶解于DMF(4mL)中且一次性添加HATU(105.60mg，277.72μmol)，将所得混合物在20℃下搅拌3h。通过反相HPLC(2-10min；65-75％MeCN流速30mL/min(装载泵4mL MeCN)柱：SunFire 100*19mm，5微米)纯化粗产物。分离呈淡黄色固体的所需产物N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5R)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-4-(三氟甲氧基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.028g，61.62μmol，24.41％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值455.2；实测值455.2；Rt＝1.225min。
步骤9：实施例1.rel-N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-((2R,4S,5R)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-4-(三氟甲氧基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1323)和rel-N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-((2R,4S,5R)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-4-(三氟甲氧基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1213)的合成
使用以下进行手性拆分：
柱：ChiralART YMC(250*20mm，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，90-5-5，流速12mL/min；柱温：24℃；波长：205nm、215nm，以得到：化合物1323rel-N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-((2R,4S,5R)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-4-(三氟甲氧基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(0.008g，17.60μmol，28.57％产率)(其中保留时间＝12.706min(分析型)、43.854min(制备型))和化合物1213rel-N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-((2R,4S,5R)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-4-(三氟甲氧基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(0.009g，19.81μmol，32.14％产率)(其中保留时间＝17.66min(分析型)、66.502min(制备型))。
化合物1323：RT(Chiralpak IC(250*4.6，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，70-15-15，0.6mL/min)＝12.607min。
1H NMR(600MHz,dmso)δ0.98-1.03(m,3H),2.00-2.07(m,3H),2.14-2.30(m,2H),2.60-2.66(m,1H),2.80-3.26(m,1H),3.63-4.27(m,1H),4.43-4.57(m,1H),5.34-6.14(m,3H),7.23-7.30(m,2H),7.31-7.41(m,2H),7.48-7.57(m,1H),8.00-8.09(m,1H),10.59-10.69(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值455.2；实测值455.2；Rt＝2.941min。
化合物1213：RT(Chiralpak IC(250*4.6，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，70-15-15，0.6mL/min)＝17.532min。
1H NMR(600MHz,dmso)δ0.99-1.04(m,3H),1.99-2.07(m,3H),2.13-2.30(m,2H),2.60-2.65(m,1H),2.78-3.25(m,1H),3.61-4.30(m,1H),4.47-4.54(m,1H),5.34-6.00(m,3H),7.24-7.30(m,2H),7.31-7.42(m,2H),7.49-7.56(m,1H),7.98-8.10(m,1H),10.58-10.67(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值455.2；实测值455.2；Rt＝2.938min。
实施例268.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(3-(2-(二甲基氨基)乙基)苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1226)的合成
步骤1：2-(3-溴苯基)-N,N-二甲基乙胺的合成
将甲酸(6.61g，143.50mmol，5.41mL)小心添加到2-(3-溴苯基)乙胺(9.57g，47.83mmol)中。此后，添加用7-8％ MeOH稳定的37％重量/重量甲醛水溶液(4.31g，143.50mmol，3.98mL)(小心：有气体逸出！)且将反应混合物在80℃下搅拌16h。将混合物冷却且添加20mL 6N HCl。将其用30mL MTBE洗涤。然后，将水层用K2CO3碱化且用DCM(3x15 mL)萃取。将DCM层合并，经Na2SO4干燥且在减压下蒸发。通过柱色谱纯化粗产物，以得到2-(3-溴苯基)-N,N-二甲基乙胺(2g，8.77mmol，18.33％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值228.2；实测值229.2；Rt＝0.840min。
步骤2：N,N-二甲基-2-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)乙胺的合成
将2-(3-溴苯基)-N,N-二甲基乙胺(1g，4.38mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(1.11g，4.38mmol)和乙酸钾(860.39mg，8.77mmol，548.02μL)于二噁烷(24.45mL)中的混合物抽真空，然后用氩气回填。将此操作重复两次，然后添加Pd(dppf)Cl2*DCM(178.99mg，219.17μmol)且将反应混合物在氩气、100℃下搅拌15h。完成之后，在减压下蒸发混合物；通过穿过SiO2(以MeOH为洗脱液)来纯化粗产物。将合并的层在真空中浓缩，添加30mL CHCl3，将混合物搅拌30min且过滤出沉淀。在减压下蒸发母液，以得到N,N-二甲基-2-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]乙胺(1.2g，4.36mmol，99.48％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值275.2；实测值276.2；Rt＝0.870min。
步骤3：(S)-6-(3-(2-(二甲基氨基)乙基)苯基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
将碳酸钠(924.35mg，8.72mmol，365.07μL)添加到N,N-二甲基-2-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]乙胺(1.2g，4.36mmol)和(3S)-3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.81g，5.23mmol)于水(7.95mL)和二噁烷(23.86mL)中的溶液中。将反应烧瓶抽真空且用氩气再填充3次。然后，在氩气流下添加Pd(dppf)Cl2*DCM(178.05mg，218.03μmol)。在90℃、惰性气氛下将所得混合物搅拌15h。完成之后，蒸发溶剂，将40mL CHCl3添加到残余物中，过滤出沉淀。将母液浓缩至干，以得到(3S)-6-[3-[2-(二甲基氨基)乙基]苯基]-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(2g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值344.2；实测值345.2；Rt＝1.214min。
步骤4：(S)-N,N-二甲基-2-(3-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯基)乙胺的合成
向(3S)-6-[3-[2-(二甲基氨基)乙基]苯基]-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(2g，5.81mmol)于DCM(40mL)中的混合物中一次性添加TFA(9.93g，87.09mmol，6.71mL)且使所得混合物在25℃下搅拌48h。反应完成之后，将溶剂浓缩，将40mL水添加到残余物中。将所得混合物用K2CO3碱化至碱性pH，用DCM(3*20mL)萃取，将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且浓缩，以获得N,N-二甲基-2-[3-[(3S)-3-甲基-1,2,3,4-四氢吡啶-6-基]苯基]乙胺(0.7g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值244.2；实测值245.2；Rt＝0.224min。
步骤5：N,N-二甲基-2-(3-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯基)乙胺的合成
向N,N-二甲基-2-[3-[(3S)-3-甲基-1,2,3,4-四氢吡啶-6-基]苯基]乙胺(0.7g，2.86mmol)于MeOH(30mL)中的混合物中一次性添加硼氢化钠(130.04mg，3.44mmol，121.08μL)。使所得混合物在25℃下搅拌过夜。完成之后，将溶剂蒸发至干。使残余物经历HPLC(柱：YMC Triart C18 100x20 mm，5um；流动相：50-50-75％0-1-6mi n H2O/MeOH/0.1％ NH4OH，流速：30mL/min(装载泵4mL/min MeOH))，以得到N,N-二甲基-2-[3-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]乙胺(0.0587g，238.24μmol，8.32％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值246.2；实测值247.2；Rt＝0.603min。
步骤6：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(3-(2-(二甲基氨基)乙基)苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1226)的合成
向N,N-二甲基-2-[3-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]乙胺(0.0587g，238.24μmol)、2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(49.84mg，238.24μmol)和TEA(120.54mg，1.19mmol，166.03μL)于DMF(3mL)中的混合物中一次性添加HATU(108.70mg，285.89μmol)。使所得混合物在25℃下搅拌15h。完成之后，将DMF蒸发，使残余物经历HPLC(柱：XBridge BEH C18 5um 130A；流动相：30-80％0-5min H2O/MeOH/0.1％ NH4OH，流速：30mL/min(装载泵4mL/min MeOH))，以得到N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2R,5S)-2-[3-[2-(二甲基氨基)乙基]苯基]-5-甲基-1-哌啶基]乙酰胺(67.2mg，153.57μmol，64.46％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.75-1.03(m,3H),1.06-1.15(m,3H),1.22-1.41(m,1H),1.59-1.71(m,1H),1.79-1.92(m,1H),1.97-2.10(m,1H),2.12-2.16(m,6H),2.18-2.29(m,1H),2.37-2.44(m,4H),2.68-2.73(m,2H),3.18-3.26(m,1H),3.48-4.04(m,1H),5.13-5.59(m,1H),5.59-5.72(m,2H),7.07-7.19(m,3H),7.24-7.32(m,1H),7.41-7.53(m,1H),7.97-8.11(m,1H),10.45-10.62(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值437.2；实测值438.2；Rt＝1.759min。
实施例269.2-[(2R,5S)-2-[4-[(3aR,7aS)-2-甲基-3,3a,4,6,7,7a-六氢-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-5-基]苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物1349)的合成
步骤1：(3aS,7aR)-2-甲基-3,3a,4,6,7,7a-六氢-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-5-甲酸叔丁酯的合成
向(3aS,7aR)-1,2,3,3a,4,6,7,7a-八氢吡咯并[3,4-c]吡啶-5-甲酸叔丁酯(2g，8.84mmol)和用10-15％甲醇稳定的37％甲醛水溶液(ACS 36.5-38.0％)(610.38mg，20.33mmol，563.60μL)于EtOH(30mL)中的溶液中添加干燥的487型钯(10％于碳上)(188.09mg，1.77mmol)。在氢气气氛、30℃下搅拌所得混合物12h。过滤出催化剂且在真空中移除溶剂，以得到(3aS,7aR)-2-甲基-3,3a,4,6,7,7a-六氢-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-5-甲酸叔丁酯(1.9g，7.91mmol，89.46％产率)。产率：1.9g(89.46％)
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)1.20(m,2H),1.45(s,9H),1.62(m,2H),2.18-2.30(m,5H),2.72-2.78(m,2H),3.15-3.16(m,2H),3.64-3.68(m,3H),4.78-4.91(m,1H)。
步骤2：(3aR,7aR)-2-甲基-1,3,3a,4,5,6,7,7a-八氢吡咯并[3,4-c]吡啶的合成
将(3aS,7aR)-2-甲基-3,3a,4,6,7,7a-六氢-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-5-甲酸叔丁酯(1,9g，7.91mmol)和4M于99％1,4-二噁烷中的氯化氢(4.00g，109.71mmol，5mL)于MeOH(30mL)中的溶液在20℃下搅拌8h。将所得混合物在真空中蒸发且将残余物用MTBE研磨，过滤且干燥，以得到(3aR,7aR)-2-甲基-1,3,3a,4,5,6,7,7a-八氢吡咯并[3,4-c]吡啶(1.5g，7.04mmol，89.02％产率，2HCl)。
产率：1.5g(89.02％)
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值141.2；实测值141.2；Rt＝0.133min。
步骤3：(5S)-2-(4-溴苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序2制备。
产率：14g(87.34％)
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值254.0；实测值254.0；Rt＝1.539min。
步骤4：(2R,5S)-2-[4-[(3aS,7aR)-2-甲基-3,3a,4,6,7,7a-六氢-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-5-基]苯基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序2(方法B)制备。产率：0.7g(粗品)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值414.2；实测值414.4；Rt＝2.565min。
步骤5：(3aS,7aR)-2-甲基-5-[4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]-3,3a,4,6,7,7a-六氢-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶的合成
通过一般程序2(方法A)制备。产率：0.55g(76.85％，3HCl)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值315.2；实测值315.2；Rt＝0.542min。
步骤6：2-[(2R,5S)-2-[4-[(3aR,7aS)-2-甲基-3,3a,4,6,7,7a-六氢-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-5-基]苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物1349)的合成
通过一般程序2制备。产率：82.30mg(20.45％)。
HPLC条件：柱：SunFire 100*19mm，5微米；2-10min 50-50-80％MeOH+NH3 30mL/min(装载泵4mL MeOH)。
1H NMR(500MHz,dmso)δ0.70-1.01(m,3H),1.06-1.14(m,3H),1.23-1.40(m,1H),1.62-1.73(m,2H),1.79-1.90(m,2H),1.92-2.07(m,1H),2.09-2.17(m,1H),2.21(s,3H),2.24-2.30(m,2H),2.36-2.44(m,4H),2.59-2.71(m,2H),3.05-3.12(m,2H),3.16-3.26(m,2H),3.38-4.00(m,2H),4.96-5.55(m,1H),5.58-5.68(m,2H),6.63-6.75(m,2H),7.03-7.15(m,2H),7.42-7.55(m,1H),7.93-8.12(m,1H),10.42-10.54(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值506.2；实测值506.2；Rt＝1.916min。
实施例270.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(4-((1-甲基哌啶-4-基)甲氧基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1216)的合成
步骤1：(2R,5S)-5-甲基-2-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
在氩气下，向(2R,5S)-2-(4-溴苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1g，2.82mmol)、乙酸钾(637.13mg，6.49mmol，405.81μL)和4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(788.45mg，3.10mmol)于二噁烷(15mL)中的溶液中添加Pd(dppf)Cl2*DCM(138.30mg，169.36μmol)。将反应混合物在90℃下搅拌14h。然后，将反应混合物浓缩，溶解于10mL乙酸乙酯中且用水洗涤。将有机层用硫酸钠干燥且在减压下蒸发。通过FCC纯化残余物，以得到(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.6g，1.49mmol，52.96％产率)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值301.2；实测值302.2；Rt＝1.769min。
步骤2：(2R,5S)-2-(4-羟基苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
向(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(700mg，1.57mmol)于H2O(6mL)和THF(6mL)的混合物中的溶液中添加35％过氧化氢(400mg，11.76mmol，363.64μL)且搅拌过夜。将反应混合物用水(40mL)和MTBE(40mL)稀释，且用硫代硫酸钠处理，然后将有机相用水洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩，以得到(2R,5S)-2-(4-羟基苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.5g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值191.2；实测值192.2；Rt＝1.456min。
步骤3：(2R,5S)-5-甲基-2-(4-((1-甲基哌啶-4-基)甲氧基)苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将(2R,5S)-2-(4-羟基苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(250mg，857.97μmol)、4-(溴甲基)-1-甲基哌啶(257.66mg，943.77μmol，HBr)和碳酸铯(838.63mg，2.57mmol)混合于DMFA(5mL)中且在搅拌的情况下在90℃下加热24h。将反应混合物用水稀释且用30mL EtOAc萃取，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩。使DMSO溶液经历HPLC(2-10min 30-45％水/MeOH+NH3；30mL/min；装载泵MeOH；4mL/min；柱SunFire 19*100mm)。获得(2R,5S)-5-甲基-2-[4-[(1-甲基-4-哌啶基)甲氧基]苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(72.2mg，179.35μmol，20.90％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值402.2；实测值403.2；Rt＝3.477min。
步骤4：1-甲基-4-((4-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯氧基)甲基)哌啶的合成
将(2R,5S)-5-甲基-2-[4-[(1-甲基-4-哌啶基)甲氧基]苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(72.2mg，179.35μmol)溶解于5mL HCl/二噁烷(10％)(6.54mg，179.35μmol)中，然后添加1mL MeOH以便使产物更好溶解。在搅拌1h之后，将RM在真空中浓缩。获得1-甲基-4-[[4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯氧基]甲基]哌啶(80mg，粗品，2HCl)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值302.2；实测值303.2；Rt＝0.602min。
步骤5：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(4-((1-甲基哌啶-4-基)甲氧基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1250)的合成
将1-甲基-4-[[4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯氧基]甲基]哌啶(80mg，213.12μmol，2HCl)和TEA(107.83mg，1.07mmol，148.52μL)混合于DMSO(2mL)中且搅拌5min。然后添加2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(44.59mg，213.12μmol)且再搅拌10min。最后添加HATU(105.35mg，277.06μmol)且搅拌2h。使反应混合物经历HPLC。第一装载HPLC数据：装置(流动相，柱)：SYSTEM 2-10min 10-50％ MeOH+FA 30mL/min(装载泵4mLMeOH)柱：SunFire100*19mm，5微米。第二装载HPLC数据：装置(流动相，柱)：SYSTEM 2-10min10-50％ MeOH+NH3,30mL/min(装载泵4mL MeOH)柱：SunFire 100*19mm，5微米。获得呈异构体的混合物的N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-[(1-甲基-4-哌啶基)甲氧基]苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(36.2mg，73.33μmol，34.41％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.76-1.02(m,3H),1.06-1.14(m,3H),1.17-1.43(m,3H),1.64-1.76(m,3H),1.81-1.85(m,1H),1.86-2.04(m,2H),2.05-2.10(m,1H),2.13-2.20(m,3H),2.20-2.28(m,1H),2.32-2.41(m,3H),2.60-2.65(m,1H),2.68-2.78(m,1H),3.13-3.28(m,1H),3.38-3.45(m,1H),3.77-3.95(m,2H),4.93-5.58(m,1H),5.58-5.74(m,2H),6.85-7.01(m,2H),7.16-7.31(m,2H),7.38-7.57(m,1H),7.96-8.16(m,1H),10.42(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值493.2；实测值494.2；Rt＝1.753min。
实施例271.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(3-((1-甲基哌啶-2-基)甲基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1273)的合成
步骤1：2-(3-溴苯甲基)-1-甲基哌啶的合成
在25℃下，向2-[(3-溴苯基)甲基]哌啶(1g，3.93mmol)于DCM中的搅拌溶液中分别添加37％重量/重量甲醛水溶液(7.87mmol)和乙酸(708.79mg，11.80mmol，675.68μL)。将所得反应混合物在25℃下搅拌1h。然后添加氰基硼氢化钠(494.48mg，7.87mmol)。将混合物继续搅拌12h。完成之后，将反应混合物用20mL NaHCO3溶液淬灭。然后将有机相用水20mL洗涤，经Na2SO4干燥且在减压下浓缩，以获得呈黄色状态的粗产物。通过反相HPLC(装置(流动相，柱)：SYSTEM 20-20-65％0-1-5min H2O/MeOH/0.01％ HCl，流速：30mL/min(装载泵4mL/min MeOH)；柱：Chromatorex 18SMB100-5T100x19 mm 5um)纯化所获得的粗产物，以得到呈黄色状态的产物的盐酸盐。和另一个装置((流动相，柱)：SYSTEM 40-40-90％0-1-6minH2O/MeOH/0.1％ NH4OH，流速：30mL/min(装载泵4mL/min MeOH)，以获得呈碱的产物。分离呈白色状态的所需产物2-[(3-溴苯基)甲基]-1-甲基哌啶(0.25g，932.17μmol，23.69％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值268.2；实测值269.2；Rt＝2.094min。
步骤2：1-甲基-2-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯甲基)哌啶的合成
向2-[(3-溴苯基)甲基]-1-甲基哌啶(1.2g，4.47mmol)于二噁烷(6.45mL)中的搅拌溶液中添加4,4,5,5-四甲基-2-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(1.25g，4.92mmol)和乙酸钾(1.10g，11.19mmol，699.23μL)。将所得悬浮液用氩气脱气。添加Pd(dppf)Cl2*DCM(327.08mg，447.44μmol)。将反应混合物在90℃下搅拌16h。完成之后，过滤反应混合物且在真空中蒸发滤液，以得到油状残余物。然后将产物用MTBE/水(50mL/50mL)萃取。将有机层经Na2SO4干燥且蒸发。然后添加二噁烷/HCl(15mL)且再次蒸发。然后将化合物用MTBE(20mL)洗涤且过滤。在减压下干燥沉淀。分离所需产物1-甲基-2-[[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]甲基]哌啶(0.9g，2.56mmol，57.19％产率，HCl)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值315.2；实测值316.2；Rt＝2.758min。
步骤3：(3S)-3-甲基-6-(3-((1-甲基哌啶-2-基)甲基)苯基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
向1-甲基-2-[[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]甲基]哌啶(0.7g，1.99mmol，HCl)和(3R)-3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(687.30mg，1.99mmol)于二噁烷(5mL)中的搅拌溶液中添加碳酸钠(210.94mg，1.99mmol，83.31μL)。将所得悬浮液用氩气脱气。添加Pd(dppf)Cl2*DCM(1.63g，1.99mmol)。将反应混合物在90℃下搅拌16h。完成之后，过滤反应混合物且在真空中蒸发滤液，以得到油状残余物。分离所需产物(3S)-3-甲基-6-[3-[(1-甲基-2-哌啶基)甲基]苯基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(0.9g，2.34mmol，117.59％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值384.2；实测值385.2；Rt＝3.113min。
步骤4：(3S)-3-甲基-6-(3-((1-甲基哌啶-2-基)甲基)苯基)-2,3,4,5-四氢吡啶的合成
在25℃下，向(3S)-3-甲基-6-[3-[(1-甲基-2-哌啶基)甲基]苯基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(0.9g，2.34mmol)于DCM中的搅拌溶液中分别添加TFA(13.34g，117.02mmol，9.02mL)。将所得反应混合物在25℃下搅拌12h。完成之后，将反应混合物在减压下浓缩。然后将粗产物三氟乙酸盐溶解于100mL水中，将水用MTBE(30mL)洗涤。然后将水层用Na2CO3碱化且用DCM萃取两次(100mL)。将有机层用水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥且蒸发。分离呈棕色状态的所需产物(3S)-3-甲基-6-[3-[(1-甲基-2-哌啶基)甲基]苯基]-2,3,4,5-四氢吡啶(0.5g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值284.2；实测值285.2；Rt＝0.650min。
步骤5：1-甲基-2-(3-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯甲基)哌啶的合成
在25℃下，向(3S)-3-甲基-6-[3-[(1-甲基-2-哌啶基)甲基]苯基]-2,3,4,5-四氢吡啶(0.5g，1.76mmol)于MeOH(9.94mL)中的搅拌溶液中分别添加硼氢化钠(66.50mg，1.76mmol，61.92μL)。将所得反应混合物在25℃下搅拌12h。完成之后，将反应混合物在减压下浓缩。然后将化合物用DCM/H2O(100mL/20mL)萃取。将有机层用水洗涤，经Na2SO4干燥且蒸发。通过反相HPLC(装置(流动相，柱)：SYSTEM 40-80％0-6min H2O/MeCN/0.1％ NH4OH，流速：30mL/min(装载泵4mL/min MeOH)；柱：XBridge BEH C18 5um)纯化所获得的粗产物，以得到呈棕色状态的产物1-甲基-2-[[3-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]甲基]哌啶(37mg，129.17μmol，7.35％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值286.2；实测值287.2；Rt＝1.011min。
步骤6：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(3-((1-甲基哌啶-2-基)甲基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1273)的合成
在25℃下，向1-甲基-2-[[3-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]甲基]哌啶(37mg，129.17μmol)于DMF(1.98mL)中的搅拌溶液中分别添加DIPEA(33.39mg，258.33μmol，45.00μL)、2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(27.02mg，129.17μmol)和HATU(49.11mg，129.17μmol)。使所得反应混合物在25℃下搅拌12h。完成之后，将反应混合物在减压下浓缩，以获得呈棕色状态的粗产物。通过反相HPLC(装置(流动相，柱)：SYSTEM 40-40-70％0-1-6min H2O/MeCN/0.1％ NH4OH，流速：30mL/min(装载泵4mL/min MeOH)；柱：YMCTriart C18 100x20 mm，5um)纯化所获得的粗产物，以得到呈棕色状态的产物N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-[(1-甲基-2-哌啶基)甲基]苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(23mg，48.15μmol，37.28％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98-1.14(m,8H),1.19-1.37(m,2H),1.37-1.47(m,2H),1.49-1.58(m,1H),1.59-1.73(m,1H),1.79-1.94(m,1H),1.95-2.07(m,2H),2.09-2.21(m,1H),2.24-2.29(m,3H),2.33-2.43(m,3H),2.60-2.76(m,2H),2.93-3.23(m,2H),3.45-4.04(m,1H),5.12-5.59(m,1H),5.58-5.68(m,2H),7.03-7.17(m,3H),7.24-7.32(m,1H),7.42-7.54(m,1H),7.97-8.10(m,1H),10.52(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值477.2；实测值478.2；Rt＝1.698min。
实施例272.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(4-(2-(二甲基氨基)乙氧基)苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1292)的合成
步骤1：(2R,5S)-2-(4-(2-(二甲基氨基)乙氧基)苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将(2R,5S)-2-(4-羟基苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(50mg，171.59μmol)、2-溴-N,N-二甲基乙胺(43.97mg，188.75μmol，HBr)和叔丁醇钾(48.14mg，428.99μmol)混合于DMF(5mL)中且在搅拌的情况下在90℃下加热12h。12h之后的转化率-55％。另外添加20mg2-溴-N,N-二甲基乙胺和25mg叔丁醇钾。+24h之后的转化率-71％。另外添加20mg 2-溴-N,N-二甲基乙胺和25mg叔丁醇钾。+24h之后的转化率-100％。将反应混合物用水稀释且用30mLEtOAc萃取，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩，以得到(2R,5S)-2-[4-[2-(二甲基氨基)乙氧基]苯基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(120mg，粗品)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值362.2；实测值363.2；Rt＝1.169min。
步骤2：N,N-二甲基-2-(4-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯氧基)乙胺的合成
将(2R,5S)-2-[4-[2-(二甲基氨基)乙氧基]苯基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(120mg，182.07μmol)溶解于5mL HCl/二噁烷(10％)(6.64mg，182.07μmol)中，然后添加1mLMeOH以使产物更好溶解。在搅拌2h之后，将RM在真空中浓缩。获得N,N-二甲基-2-[4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯氧基]乙胺(70mg，粗品，2HCl)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值262.2；实测值263.2；Rt＝0.243min。
步骤3：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(4-(2-(二甲基氨基)乙氧基)苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1292)的合成
将N,N-二甲基-2-[4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯氧基]乙胺(70mg，177.45μmol，2HCl)和HATU(87.71mg，230.68μmol)混合于DMSO(1.91mL)中且搅拌5min。然后添加2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(44.55mg，212.94μmol)且再搅拌10min。最后添加TEA(89.78mg，887.24μmol，123.66μL)且搅拌2h。使反应混合物经历HPLC。第一装载HPLC数据：装置(流动相，柱)：SYSTEM 2-10min 10-50％ MeOH+FA 30mL/min(装载泵4mLMeOH)柱：SunFire 100*19mm，5微米。第二装载HPLC数据：2-10min 10-50％水/MeOH+NH330mL/min；装载泵4mL/min MeOH+NH3；柱SunFire19*100mm。获得N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[4-[2-(二甲基氨基)乙氧基]苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(19.3mg，42.55μmol，23.98％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.71-1.02(m,3H),1.07-1.15(m,3H),1.26-1.39(m,1H),1.59-1.73(m,1H),1.79-1.92(m,1H),1.96-2.12(m,1H),2.12-2.18(m,1H),2.19(s,6H),2.35-2.41(m,2H),2.58-2.61(m,2H),2.67-3.21(m,1H),3.37-3.99(m,1H),3.99-4.06(m,2H),5.02-5.58(m,1H),5.58-5.69(m,2H),6.90-6.98(m,2H),7.15-7.28(m,2H),7.43-7.54(m,1H),7.98-8.11(m,1H),10.52(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值453.2；实测值454.2；Rt＝1.532min。
实施例273.rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,4S,5S)-4-甲氧基-5-甲基-2-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1159)、外消旋-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,4S,5R)-4-甲氧基-5-甲基-2-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1349)、rel-N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2S,4R,5S)-4-甲氧基-5-甲基-2-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1089)的合成
步骤1：外消旋-(6R,9R)-9-(4-溴苯基)-6-甲基-1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷的合成
向其中添加2-(2-甲基-1,3-二氧环戊烷-2-基)丙-1-胺(6.9g，47.52mmol)溶解于甲苯(150mL)和4-溴苯甲醛(8.79g，47.52mmol)，随后添加p-TSA(24.55g，142.56mmol)。将所得混合物加热至回流且以迪安-斯塔克分离器回流过夜。
冷却反应混合物且添加K2CO3水溶液(50mL)。将所得混合物转移至分离漏斗且分离有机层。用EtOAc(50mL)萃取水层，且将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且浓缩。将残余物溶解于CHCl3(100mL)中且将所得混合物用NaHSO4水溶液(于50mL水中的5g，2*50mL)萃取。将合并的水层用CHCl3(2*50mL)洗涤，然后用K2CO3(10g)碱化。将所得混合物用CHCl3(2*50mL)萃取且将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且蒸发，以获得(6R,9R)-9-(4-溴苯基)-6-甲基-1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷(2.7g，8.65mmol，18.20％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值312.0；实测值312.0；Rt＝0.712min。
步骤2：(2R,5R)-2-(4-溴苯基)-5-甲基哌啶-4-酮的合成
将(6R,9R)-9-(4-溴苯基)-6-甲基-1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷(2.7g，8.65mmol)溶解于6N HCl(80mL)中且将所得混合物在80℃下(在油浴中)加热过夜。将反应混合物冷却，用MTBE萃取(两次)，然后将水层用K2CO3碱化。将所得混合物用CHCl3萃取(两次)且将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且蒸发，以获得(2R,5R)-2-(4-溴苯基)-5-甲基哌啶-4-酮(1g，3.73mmol，43.12％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值270.2；实测值270.2；Rt＝0.812min。
步骤3：(2R,5R)-2-(4-溴苯基)-5-甲基-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将(2R,5R)-2-(4-溴苯基)-5-甲基哌啶-4-酮(2.1g，7.83mmol)和三乙胺(1.19g，11.75mmol，1.64mL)溶解于DCM(20mL)中，然后在冰/水冷却下逐滴添加二碳酸二-叔丁酯(1.97g，9.01mmol，2.07mL)，此后将反应混合物在20℃下搅拌12h。在将反应混合物用NaHSO4(水溶液)洗涤三次，将DCM层经Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩。通过FCC纯化粗产物，以获得(2R,5R)-2-(4-溴苯基)-5-甲基-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(3g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值368.2；实测值368.2；Rt＝1.545min。
步骤4：(2R,5R)-2-(4-溴苯基)-4-羟基-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将硼氢化钠(148.95mg，3.94mmol，138.69μL)分批添加到于无水甲醇(30mL)中的(2R,5R)-2-(4-溴苯基)-5-甲基-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.9g，7.87mmol)中，然后搅拌过夜。通过添加饱和氯化铵水溶液来淬灭反应物。用乙酸乙酯(15mL x 3)萃取且将合并的有机层用饱和盐水洗涤且经无水硫酸钠干燥。过滤且在减压下浓缩滤液，得到(2R,5R)-2-(4-溴苯基)-4-羟基-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.5g，6.75mmol，85.74％产率)
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值272.2；实测值272.2；Rt＝1.300min。
步骤5：(2R,5R)-2-(4-溴苯基)-4-甲氧基-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将(2R,5R)-2-(4-溴苯基)-4-羟基-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1g，2.70mmol)溶解于DMF(10.00mL)中且向其中添加于矿物油中的氢化钠(油分散体)60％分散物(186.26mg，8.10mmol，310.44μL)。将所得混合物搅拌1h且将碘甲烷(1.15g，8.10mmol，504.38μL)添加到前一混合物中且将所得混合物搅拌过夜。将反应混合物倒入到水(30mL)中且将所得混合物用MTBE(3*20mL)萃取。将合并的有机层用水(3*20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩。由于转化率较差，用残余物重复所述程序，以获得(2R,5R)-2-(4-溴苯基)-4-甲氧基-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.0g，粗品)
步骤6：(2R,5R)-4-甲氧基-5-甲基-2-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将(2R,5R)-2-(4-溴苯基)-4-甲氧基-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(700.00mg，1.82mmol)、1-甲基哌嗪(182.44mg，1.82mmol，202.04μL)、4,5-双(二苯基膦基)-9,9-二甲基氧杂蒽(105.39mg，182.15μmol)和叔丁醇钠(262.56mg，2.73mmol)一起混合于二噁烷(15mL)中且将所得混合物抽真空且用氩气回填三次。将三(二苯亚甲基丙酮)二钯(0)氯仿加合物(94.27mg，91.07μmol)添加到前一混合物中且将所得混合物在100℃下(油浴)加热过夜。将反应混合物冷却且用水(5mL)稀释。将所得混合物用EtOAc(2*5mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且蒸发。通过柱色谱纯化残余物，以获得(2R,5R)-4-甲氧基-5-甲基-2-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.6g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值402.2；实测值402.2；Rt＝1.082min。
步骤7：1-[4-[(2R,5R)-4-甲氧基-5-甲基-2-哌啶基]苯基]-4-甲基哌嗪的合成
将(2R,5R)-4-甲氧基-5-甲基-2-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(400.00mg，991.19μmol)溶解于DCM(1.5mL)中且添加TFA(1.5mL)。搅拌所得混合物1h。将反应混合物倒入到K2CO3水溶液中且将所得混合物用DCM萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且蒸发，以获得1-[4-[(2R,5R)-4-甲氧基-5-甲基-2-哌啶基]苯基]-4-甲基哌嗪，其不经进一步纯化即用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值304.2；实测值304.2；Rt＝0.227min。
步骤8：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5R)-4-甲氧基-5-甲基-2-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
将1-[4-[(2R,5R)-4-甲氧基-5-甲基-2-哌啶基]苯基]-4-甲基哌嗪(300.00mg，988.66μmol)溶解于DMF(5mL)中且添加三乙胺(1.00g，9.89mmol，1.38mL)，随后添加2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(206.83mg，988.66μmol)。然后逐滴添加HATU(563.88mg，1.48mmol)且将反应混合物搅拌过夜。次日，将其在真空中蒸发且通过HPLC(1.2-10min 40-60％甲醇+nh3 30min(装载泵4mL甲醇)，柱：SunFire 100*19mm，5微米；2.2-10min 0-25％乙腈+fa 30min(装载泵4mL乙腈)，柱：SunFire 100*19mm，微米)纯化，以获得N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5R)-4-甲氧基-5-甲基-2-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(400.0mg，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值496.2；实测值496.2；Rt＝0.802min。
步骤9：rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,4S,5S)-4-甲氧基-5-甲基-2-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1159)、外消旋-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,4S,5R)-4-甲氧基-5-甲基-2-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1349)、rel-N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2S,4R,5S)-4-甲氧基-5-甲基-2-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺的合成
对N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5R)-4-甲氧基-5-甲基-2-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(17.60mg，35.58μmol)进行手性分离(柱：Chiralpak IB(250，20mm，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH，60-20-20；流速：10mL/min；柱温：24℃；波长：205nm。保留时间(异构体A)＝22,31min；保留时间(异构体B)＝25,87min
柱：Chiralcel OD-H(250*20mm，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH，80-10-10；流速：12mL/min；柱温：24℃；波长：205nm。保留时间(异构体A)＝74,42min；保留时间(异构体B)＝90,87min)，以获得N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,4S,5S)-4-甲氧基-5-甲基-2-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(6.17mg，12.47μmol，35.06％产率)和
化合物1159：LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值495.2；实测值495.2；Rt＝1.419min。
化合物1349：LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值495.2；实测值495.2；Rt＝1.440min。
实施例274.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(3-(1-甲基吡咯烷-3-基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1342)的合成
步骤1：(2R,5S)-2-(3-溴苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸苯甲酯的合成
将(2R,5S)-2-(3-溴苯基)-5-甲基哌啶(2.7g，10.62mmol)溶解于THF(25mL)中且向其中添加碳酸钠(2.25g，21.25mmol，889.35μL)，随后添加水(30mL)。将所得混合物在冰浴中冷却至0℃且在0℃下逐滴添加CbzCl(1.90g，11.15mmol，1.59mL)于THF(5mL)中的溶液。在添加完成之后，使反应混合物升温至室温且搅拌过夜。将反应混合物在真空中浓缩且将残余物用水(50ml)稀释。将所得混合物用MTBE(2*50ml)萃取且将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩，以获得(2R,5S)-2-(3-溴苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸苯甲酯(4.27g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值388.2；实测值389.2；Rt＝1.636min。
步骤2：(2R,5S)-2-(3-(1-(叔丁氧基羰基)-2,5-二氢-1H-吡咯-3-基)苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸苯甲酯的合成
将(2R,5S)-2-(3-溴苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸苯甲酯(1g，2.58mmol)、3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-2,5-二氢吡咯-1-甲酸叔丁酯(874.22mg，2.96mmol)和碳酸钠(545.92mg，5.15mmol，215.61μL)一起混合于二噁烷(7.5mL)和水(2.5mL)的混合物中。将含有前一混合物的烧瓶抽真空且用氩气回填三次。将Pd(dppf)Cl2*DCM(105.16mg，128.77μmol)添加到先前混合物中且将所得混合物在90℃下加热过夜。将反应混合物在真空中浓缩且将残余物用水(20ml)稀释。将所得混合物用EtOAc(2*30ml)萃取且将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩。通过柱色谱纯化残余物，以获得(2R,5S)-2-[3-(1-叔丁氧基羰基-2,5-二氢吡咯-3-基)苯基]-5-甲基哌啶-1-甲酸苯甲酯(750mg，1.57mmol，61.10％产率)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值376.2；实测值377.2；Rt＝1.594min。
步骤3：3-(3-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯的合成
将(2R,5S)-2-[3-(1-叔丁氧基羰基-2,5-二氢吡咯-3-基)苯基]-5-甲基哌啶-1-甲酸苯甲酯(750mg，1.57mmol)溶解于MeOH(10mL)中且向其中添加干燥的487型钯(10％于碳上)(251.20mg，2.36mmol)。在周末内将所得混合物在50atm下氢化。过滤出催化剂，且在真空中浓缩滤液。将残余物再溶解于MeOH(10mL)中且向其中添加干燥的487型钯(10％于碳上)(251.20mg，2.36mmol)。将所得混合物在50atm下氢化过夜。过滤出催化剂且将滤液在真空中浓缩，以获得3-[3-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(416mg，1.21mmol，76.74％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值344.2；实测值345.2；Rt＝1.160min。
步骤4：(2R,5S)-5-甲基-2-(3-(1-甲基吡咯烷-3-基)苯基)哌啶的合成
将LAH(152.04mg，4.01mmol)溶解于THF(5mL)中且逐滴添加3-[3-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(276mg，801.19μmol)于THF(2mL)中的溶液。将所得混合物加热至回流且回流3h。使反应混合物冷却至室温且搅拌过夜。将水(150mkl)添加到反应混合物中，随后添加KOH水溶液(150mkl)和水(300mkl)。将反应混合物搅拌30min且过滤。将滤饼用THF(10ml)洗涤且将滤液在真空中浓缩，以获得(2R,5S)-5-甲基-2-[3-(1-甲基吡咯烷-3-基)苯基]哌啶(227mg，粗品)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值258.2；实测值259.2；Rt＝0.644min。
步骤5：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(3-(1-甲基吡咯烷-3-基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1342)的合成
将(2R,5S)-5-甲基-2-[3-(1-甲基吡咯烷-3-基)苯基]哌啶(292mg，1.13mmol)、2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(236.40mg，1.13mmol)和TEA(571.74mg，5.65mmol，787.52μL)一起混合于DMF(3mL)中且向其中添加HATU(515.60mg，1.36mmol)。将所得混合物搅拌过夜。将反应混合物提交至HPLC且纯化(2-10min60-80％ MeOH+NH3 30min(装载泵4ml MeOH)，柱：SunFire 100*19mm，5微米)，以获得N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-(1-甲基吡咯烷-3-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(87.9mg，195.51μmol，17.30％产率)和N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-(1-甲基吡咯烷-3-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(54.3mg，120.78μmol，10.69％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99-1.03(m,3H),1.06-1.13(m,3H),1.28-1.38(m,1H),1.62-1.75(m,2H),1.82-1.92(m,1H),1.96-2.25(m,4H),2.25-2.27(m,3H),2.31-2.36(m,1H),2.38-2.43(m,2H),2.51-2.58(m,2H),2.72-3.24(m,2H),3.43-4.03(m,1H),5.12-5.57(m,1H),5.58-5.67(m,2H),7.09-7.20(m,3H),7.26-7.32(m,1H),7.42-7.52(m,1H),7.98-8.07(m,1H),10.45-10.54(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值449.2；实测值450.2；Rt＝2.033min。
实施例275.N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,4S,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-异丙氧基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1343)和N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,4R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-异丙氧基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1094)的合成
步骤7：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,4S,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-异丙氧基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1343)和N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,4R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-异丙氧基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1094)的合成
将5-[(2S,5S)-4-异丙氧基-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑(0.085g，292.68μmol)、TEA(88.85mg，878.03μmol，122.38μL)和2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(61.23mg，292.68μmol)溶解于DMF(4mL)中且一次性添加HATU(122.41mg，321.94μmol)。将所得混合物在20℃下搅拌3h。通过反相HPLC(2-10min 50-65％甲醇+NH3流速30mL/min(装载泵4mL甲醇)，柱：SunFire 100*19mm，5微米)纯化粗反应混合物。分离呈淡黄色固体的所需产物N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,4S,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-异丙氧基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(4.10mg，8.51μmol，2.91％产率)和N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,4R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-异丙氧基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.0029g，6.02μmol，2.06％产率)。
化合物1343：1H NMR(600MHz,dmso)δ0.92(d,3H),1.02-1.05(m,6H),1.13(t,3H),1.84-2.01(m,1H),2.03-2.13(m,1H),2.32-2.36(m,1H),2.39-2.43(m,2H),2.77-3.24(m,1H),3.52-4.27(m,3H),5.44-5.63(m,1H),5.64-5.98(m,2H),7.42-7.48(m,1H),7.48-7.56(m,1H),7.96-8.02(m,1H),8.02-8.11(m,1H),8.17-8.25(m,1H),9.34-9.45(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值482.2；实测值482.2；Rt＝0.934min。
化合物1094：1H NMR(600MHz,dmso)δ0.59-0.69(m,3H),0.87-0.93(m,3H),1.02-1.14(m,6H),1.74-1.84(m,1H),2.22-2.30(m,2H),2.37-2.43(m,2H),3.39-3.60(m,3H),3.72-4.11(m,1H),5.35-5.53(m,1H),5.55-5.67(m,2H),7.24-7.46(m,1H),7.47-7.71(m,1H),7.84-8.06(m,2H),8.06-8.28(m,1H),9.28-9.39(m,1H),10.35(br s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值482.2；实测值482.2；Rt＝2.647min。
实施例276.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-N-吗啉基苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1267)的合成
步骤1：(2R,5S)-5-甲基-2-(2-N-吗啉基苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
在25℃下，将吗啉(847.15mg，9.72mmol，850.55μL)一次性添加到(2R,5S)-2-(2-溴-1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.8g，1.94mmol)于MeCN(15mL)中的溶液中。将所得混合物在70℃下搅拌12h，然后冷却且在真空中浓缩。将残余物用10％氢氧化钠水溶液碱化至pH 11且用DCM(2*25ml)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中浓缩，以得到呈棕色固体的(2R,5S)-5-甲基-2-(2-N-吗啉基-1,3-苯并噻唑-5-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.7g，1.68mmol，86.20％产率)，其直接用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值417.2；实测值418.2；Rt＝1.593min。
步骤2：4-(5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)吗啉的合成
将4.0M于二噁烷中的氯化氢溶液(21.00g，80.06mmol，20mL，13.9％纯度)一次性添加到(2R,5S)-5-甲基-2-(2-N-吗啉基-1,3-苯并噻唑-5-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.7g，1.68mmol)于MeOH(15mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在25℃下搅拌12h，然后在真空中蒸发至干，以得到呈棕色固体的粗品4-[5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-2-基]吗啉(0.65g，1.67mmol，99.33％产率，2HCl)，其直接用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值317.2；实测值318.2；Rt＝0.934min。
步骤3：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-N-吗啉基苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1267)的合成
在25℃下，在0.5h时段内，将HATU(219.16mg，576.38μmol)小批量添加到4-[5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-2-基]吗啉(150mg，384.25μmol，2HCl)、2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(160.77mg，768.50μmol)和三乙胺(466.59mg，4.61mmol，642.68μL)于DMF(3mL)中的搅拌混合物中。将所得混合物搅拌在25℃下搅拌12h，然后提交至反相HPLC(柱：YMC Triart C18 100x20mm，5um；流动相：40-40-80％0-1-6min H2O/MeOH/0.1％ NH4OH，流速：30ml/min(装载泵4ml/min甲醇)，得到化合物1267N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-N-吗啉基-1,3-苯并噻唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(62mg，121.90μmol，31.72％产率)。转移2mg此产物，剩余量通过制备型手性HPLC(柱：Chiralpak IC-III(250*20mm，5mkm)；流动相：IPA-MeOH 50-50；流速：10mL/min)纯化，以得到第2批产物化合物1267N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-(2-N-吗啉基-1,3-苯并噻唑-5-基)-1-哌啶基]乙酰胺(44.6mg，87.69μmol，22.82％产率)(保留时间＝45.951min)。
化合物1267：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.97-1.05(m,3H),1.06-1.15(m,3H),1.26-1.39(m,1H),1.62-1.76(m,1H),1.79-1.94(m,1H),2.01-2.19(m,1H),2.21-2.32(m,1H),2.33-2.37(m,1H),2.39-2.42(m,1H),2.74-3.25(m,1H),3.41-3.49(m,0.7H),3.51-3.56(m,4H),3.68-3.73(m,4H),3.98-4.06(m,0.3H),5.15-5.67(m,3H),7.02-7.12(m,1H),7.35-7.53(m,2H),7.71-7.82(m,1H),7.98-8.10(m,1H),10.46-10.64(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值508.2；实测值509.2；Rt＝2.757min。
实施例277.N-[6-氨基-5-[(3S)-四氢呋喃-3-基]-3-吡啶基]-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1154)和N-[6-氨基-5-[(3R)-四氢呋喃-3-基]-3-吡啶基]-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1312)的合成
步骤1：N-(5-氨基-3-四氢呋喃-3-基-2-吡啶基)-N-叔丁氧基羰基氨基甲酸叔丁酯的合成
将N-叔丁氧基羰基-N-[3-(3-呋喃基)-5-硝基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(1g，2.47mmol)、MeOH(6mL)、AcOH(5mL，2.47mmol)和Pd/C(400mg，具有50重量％水的10重量％Pd/C)的混合物在50℃下在氢气下(在气球中)搅拌12小时。将所得混合物过滤且在减压下浓缩，以得到呈白色固体的N-(5-氨基-3-四氢呋喃-3-基-2-吡啶基)-N-叔丁氧基羰基氨基甲酸叔丁酯(1.2g，粗品，2CH3COOH)。
步骤2：2-[[6-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-5-四氢呋喃-3-基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸苯甲酯的合成
将N-(5-氨基-3-四氢呋喃-3-基-2-吡啶基)-N-叔丁氧基羰基氨基甲酸叔丁酯(1.2g，2.40mmol，2CH3COOH)、2-氯-2-氧代乙酸苯甲酯(1g，5.04mmol)、DIPEA(2mL，11.5mmol)于MeCN(15mL)中的混合物在20℃下搅拌12小时。所得混合物通过添加水(50mL)来淬灭且用EtOAc(100mL*3)萃取。将合并的有机层用饱和NH4Cl水溶液(100mL)、盐水(100mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩。通过快速色谱(25gAgelaFlash Silica Flash二氧化硅快速Silica Flash柱，石油醚/EtOAc，其中EtOAc为0～50％，流速＝30mL/min,254nm)纯化残余物，以得到呈白色固体的2-[[6-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-5-四氢呋喃-3-基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸苯甲酯(1.2g，92.2％产率)。1HNMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 8.73(d,J＝2.3Hz,1H),8.34(d,J＝2.3Hz,1H),7.19-7.41(m,5H),4.60(s,2H),4.11-4.15(m,2H),4.03(t,J＝7.9Hz,1H),3.73(dd,J＝8.5,5.5Hz,1H),3.37-3.50(m,1H),2.33-2.48(m,1H),1.94-2.00(m,1H),1.40(s,18H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值542.2，实测值542.3。
步骤3：2-[[6-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-5-四氢呋喃-3-基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸的合成
向2-[[6-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-5-四氢呋喃-3-基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸苯甲酯(1.2g，2.22mmol)于EtOAc(15mL)中的混合物中添加TEA(0.93mL，6.67mmol)和Pd/C(130mg，具有50重量％水的10重量％Pd/C)。将所得混合物在真空下密封且脱气，且用氢气吹扫三次，然后在20℃下在氢气(在气球中)下搅拌12小时。将所得混合物过滤且在减压下浓缩，以得到呈白色固体的2-[[6-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-5-四氢呋喃-3-基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(850mg，粗品，Et3N)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 8.74(d,J＝2.3Hz,1H),8.35(d,J＝2.3Hz,1H),4.09-4.17(m,1H),4.04(t,J＝8.0Hz,1H),3.90(q,J＝7.9Hz,1H),3.72(dd,J＝8.4,6.1Hz,1H),3.35-3.48(m,1H),2.32-2.48(m,1H),2.00-2.06(m,1H),1.39(s,18H)。
步骤4：N-叔丁氧基羰基-N-[5-[[2-[(5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-四氢呋喃-3-基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
向2-[[6-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-5-四氢呋喃-3-基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(300mg，0.543mmol，Et3N)和2-(1-甲基-4-哌啶基)-5-[(5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑(195mg，0.592mmol)于DMF(6mL)中的混合物中添加HATU(250mg，0.658mmol)和DIPEA(0.3mL，1.72mmol)。将所得混合物在20℃下搅拌2小时。所得混合物通过添加水(50mL)来淬灭且用EtOAc(100mL*3)萃取。将合并的有机层用饱和NH4Cl水溶液(100mL)、盐水(100mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩。通过快速色谱(12g二氧化硅快速柱，EtOAc/MeOH，其中MeOH为0～20％，流速＝30mL/min，254nm)纯化残余物，以得到呈黄色固体的N-叔丁氧基羰基-N-[5-[[2-[(5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-四氢呋喃-3-基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(280mg，67.6％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值763.4，实测值763.4。
步骤5：N-(6-氨基-5-四氢呋喃-3-基-3-吡啶基)-2-[(5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
将N-叔丁氧基羰基-N-[5-[[2-[(5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-四氢呋喃-3-基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(280mg，0.367mmol)、DCM(4mL)和TFA(4mL，51.9mmol)中的混合物在20℃下搅拌2小时。在减压下浓缩混合物。通过制备型HPLC(仪器：Gilson GX-281Liquid Handler，Gilson 322泵，Gilson 156UV检测器；柱：Phenomenex Gemini-NX 80*40mm*3μm；流动相A：具有10mmolNH4HCO3的H2O(v％)；流动相B：MeCN；梯度：在9.5min内20％至50％ B，保持100％ B达1min；流速：25mL/min；柱温：30℃；波长：220nm、254nm)纯化残余物，以得到呈白色固体的N-(6-氨基-5-四氢呋喃-3-基-3-吡啶基)-2-[(5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(150mg，72.6％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值563.3，实测值563.3；HPLC：在220nm下为100％，在254nm下为100％。
步骤6：N-(6-氨基-5-四氢呋喃-3-基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
将N-(6-氨基-5-四氢呋喃-3-基-3-吡啶基)-2-[(5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(150mg，0.267mmol)通过SFC(仪器：Berger，Multigr AM-II；柱：Daicel chiralpak IG(250mm*30mm*10μm)；流动相：超临界CO2/MeOH(0.1％ NH3 -H2O，IPA v％)＝60/40；流速：80mL/min；柱温：38℃；喷嘴温度：100巴；喷嘴温度：60℃；蒸发器温度：20℃；修整器温度：25℃；波长：220nm)纯化。将级分在减压下浓缩，然后冻干过夜，以得到呈白色干燥粉末的N-(6-氨基-5-四氢呋喃-3-基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(100mg，峰2，保留时间：5.588min)。HPLC：在220nm下为100％，在254nm下为100％。
步骤7：N-[6-氨基-5-[(3S)-四氢呋喃-3-基]-3-吡啶基]-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1154)和N-[6-氨基-5-[(3R)-四氢呋喃-3-基]-3-吡啶基]-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1312)的合成
将N-(6-氨基-5-四氢呋喃-3-基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(50mg，0.0889mmol)通过SFC(仪器：Berger，Multigr AM-II；柱：Daicel chiralpak IC(250mm*30mm*5μm)；流动相：超临界己烷-IPA(0.1％ NH3，IPA v％)＝60/40；流速：80mL/min；柱温：38℃；喷嘴压力：100巴；喷嘴温度：60℃；蒸发器温度：20℃；修整器温度：25℃；波长：220nm)纯化。将级分在减压下浓缩，然后冻干过夜，以得到化合物1154和化合物1312。
化合物1154：N-[6-氨基-5-[(3S)-四氢呋喃-3-基]-3-吡啶基]-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(20mg，单一未知对映异构体，峰1，保留时间：5.181min，白色固体)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 8.16(br s,1H),7.91-8.03(m,1H),7.91-8.03(m,1H),7.55-7.77(m,1H),7.34-7.49(m,1H),5.48-5.85(m,1H),4.05(br d,J＝7.5Hz,2H),3.71-3.92(m,2H),3.43(br d,J＝9.8Hz,2H),3.15(br d,J＝13.1Hz,1H),3.03(br d,J＝11.0Hz,2H),2.16-2.46(m,10H),1.89-2.07(m,5H),1.36-1.53(m,2H),1.14(d,J＝7.0Hz,3H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值563.3，实测值563.3；HPLC：在220nm下为100％，在254nm下为100％；99.9％ee。
化合物1312：N-[6-氨基-5-[(3R)-四氢呋喃-3-基]-3-吡啶基]-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(20.1mg，单一未知对映异构体，峰2，保留时间：6.562min，白色固体)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm8.16(br s,1H),7.91-8.04(m,2H),7.54-7.80(m,1H),7.43(br d,J＝8.8Hz,1H),5.47-5.88(m,1H),4.05(br d,J＝6.9Hz,2H),3.70-3.92(m,2H),3.43(br d,J＝9.6Hz,2H),3.17(br s,1H),3.04(br d,J＝11.5Hz,2H),2.15-2.44(m,10H),1.89-2.09(m,5H),1.41-1.54(m,2H),1.14(d,J＝6.9Hz,3H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值563.3，实测值563.3；HPLC：在220nm下为100％，在254nm下为100％；99.2％ee。
实施例278.N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2S,5R)-2-[1-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]乙酰胺(化合物1374)和N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-2-[1-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]乙酰胺(对映异构化合物1374)的合成
步骤1：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-2-[1-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]乙酰胺的合成
向N,N-二甲基-2-[5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]吲唑-1-基]乙胺(220mg，556μmol，3盐酸盐)、2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(128mg，611μmol)和三乙胺(337mg，3.34mmol，465μL)于二甲基甲酰胺(4.00mL)中的搅拌混合物中添加HATU(243mg，639μmol)。将反应混合物在20℃下搅拌4h。使所获得的混合物经历HPLC(0-1-6min 30-30-80％水-甲醇，+0.1体积％25％ NH3水溶液，30mL/min，柱：XBridge BEH C18，100x20 mm，5μm)，以得到呈黄色固体的N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-2-[1-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]乙酰胺(160mg，335μmol，60.3％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值478.33；实测值479.2；Rt＝2.044。
步骤2：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2S,5R)-2-[1-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]乙酰胺和N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-2-[1-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]乙酰胺的合成
使N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-2-[1-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]乙酰胺(160mg，335.μmol)经历手性HPLC(柱：Chiralpak IA-II(250*20mm，5mkm)，流动相：IPA-MeOH，50-50，流速：10mL/min，5次注入，32mg/注入，V＝4L)，以得到：呈淡黄色固体的N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2S,5R)-2-[1-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]乙酰胺(60.0mg，126μmol，75.0％产率)(化合物1374，其中保留时间＝11.570min(分析型)，29.630min(制备型))和N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-2-[1-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]乙酰胺(53.0mg，111μmol，66.3％产率)(对映异构化合物1374，其中保留时间＝16.312min(分析型)，49.692min(制备型))。
化合物1374：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2S,5R)-2-[1-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]乙酰胺
1H NMR(600MHz,DMSO-d6):δ(ppm)1.03(m,3H),1.11(m,3H),1.36(m,1H),1.76(m,1H),1.88(m,1H),2.06(m,1H),2.14(s,6H),2.30(m,4H),2.68(m,2H),2.76(m,1H),3.74(dd,1H),4.46(m,2H),5.63(t,2H),7.34(m,1H),7.48(m,1H),7.67(m,2H),8.03(m,2H),10.52(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值478.33；实测值479.4；Rt＝1.656。
对映异构化合物1374：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-2-[1-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]乙酰胺
1H NMR(600MHz,DMSO-d6):δ(ppm)1.02(m,3H),1.12(m,3H),1.36(m,1H),1.76(m,1H),1.88(m,1H),2.07(m,1H),2.14(s,6H),2.26(m,1H),2.37(m,3H),2.68(m,2H),3.01(m,1H),3.84(m,1H),4.46(m,2H),5.63(m,3H),7.34(dd,1H),7.48(d,1H),7.67(m,2H),8.03(m,2H),10.52(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值478.33；实测值479.4；Rt＝1.651。
实施例279.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(3-氯-5-(2-(二甲基氨基)乙氧基)苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1247)的合成
步骤1：2-(3-溴-5-氯苯氧基)-N,N-二甲基乙胺的合成
在50℃下，向3-溴-5-氯苯酚(4g，19.28mmol)于DMF(200mL)中的搅拌溶液中分别添加(2-溴乙基)二甲胺氢溴酸盐(5.39g，23.14mmol)和碳酸铯(21.99g，67.49mmol)。在等分试样之后，未检测到产物。然后添加(2-溴乙基)二甲胺氢溴酸盐(5.39g，23.14mmol)和碳酸铯(43.98g，134.97mmol)且将温度升温至70℃。次日，添加(2-溴乙基)二甲胺氢溴酸盐(16.17g，69.41mmol)和碳酸铯(21.99g，67.49mmol)且将温度升温至80℃。将反应混合物冷却且倒入水(800ml)中且将所得混合物用MTBE(2*100ml)萃取。将合并的有机层用水(3*100ml)、盐水(100ml)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩。然后，通过快速色谱纯化粗产物。将其用SiO2垫过滤。在EtOAc/己烷洗脱液中仅获得s.m.。然后，将SiO2垫用MeOH和5％Et3N的混合物(1000ml)洗涤。分离呈黄色状态的所需产物2-(3-溴-5-氯苯氧基)-N,N-二甲基乙胺(0.5g，1.79mmol，9.31％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)2.33(s,6H),2.71(t,2H),4.03(t,2H),6.86(s,1H),6.96(s,1H),7.09(s,1H)。
步骤2：2-(3-氯-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯氧基)-N,N-二甲基乙胺的合成
向2-(3-溴-5-氯苯氧基)-N,N-二甲基乙胺(200mg，717.95μmol)和4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(200.54mg，789.74μmol)于二噁烷(20mL)中的搅拌溶液中添加乙酸钾(176.15mg，1.79mmol，112.20μL)。将所得悬浮液用氩气脱气。添加Pd(dppf)Cl2*DCM(58.58mg，71.79μmol)。将反应混合物在85℃下搅拌16h。完成之后，过滤反应混合物且在真空中蒸发滤液，以得到油状残余物。然后将化合物用DCM/水(50ml/10ml)萃取，将有机层经Na2SO4干燥且蒸发。然后，添加10ml二噁烷/HCl且再次蒸发。然后，将粗产物用20ml MTBE洗涤且过滤。分离所需产物2-[3-氯-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯氧基]-N,N-二甲基乙胺(240mg，粗品，HCl)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值325.2；实测值326.2；Rt＝1.154min。
步骤3：(S)-6-(3-氯-5-(2-(二甲基氨基)乙氧基)苯基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
向2-[3-氯-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯氧基]-N,N-二甲基乙胺(240mg，662.80μmol，HCl)和(3S)-3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(251.78mg，729.08μmol)于二噁烷(6mL)中的搅拌溶液中添加碳酸铯(431.91mg，1.33mmol)。将所得悬浮液用氩气脱气。添加Pd(dppf)Cl2*DCM(27.04mg，33.14μmol)。将反应混合物在85℃下搅拌16h。完成之后，将反应混合物过滤且将滤液在真空中蒸发，以获得油状残余物。然后将化合物用DCM/水(30ml/10ml)萃取，将有机层经Na2SO4干燥且蒸发。分离所需产物(3S)-6-[3-氯-5-[2-(二甲基氨基)乙氧基]苯基]-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(240mg，粗品)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值394.2；实测值395.2；Rt＝1.232min。
步骤4：(S)-2-(3-氯-5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯氧基)-N,N-二甲基乙胺的合成
在25℃下，向(3S)-6-[3-氯-5-[2-(二甲基氨基)乙氧基]苯基]-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(240mg，607.70μmol)于DCM(3mL)中的搅拌溶液中分别添加TFA(2.77g，24.31mmol，1.87mL)。将所得反应混合物在25℃下搅拌12h。完成之后，将反应混合物在减压下浓缩。然后将水层用10％ KOH碱化且用DCM萃取两次(10ml)。将有机层用水(10ml)洗涤，经Na2SO4干燥且蒸发。分离呈棕色状态的所需产物2-[3-氯-5-[(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]苯氧基]-N,N-二甲基乙胺(115mg，390.07μmol，64.19％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值294.2；实测值295.2；Rt＝0.639min。
步骤5：2-(3-氯-5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯氧基)-N,N-二甲基乙胺的合成
在25℃下，向2-[3-氯-5-[(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]苯氧基]-N,N-二甲基乙胺(115mg，390.07μmol)于MeOH(4.97mL)中的搅拌溶液中分别添加硼氢化钠(29.51mg，780.14μmol，27.48μL)。将所得反应混合物在25℃下搅拌12h。完成之后，将反应混合物蒸发。然后将化合物用DCM/水(40ml/10ml)萃取，将有机层经Na2SO4干燥且在减压下浓缩，以获得呈棕色状态的粗产物。分离呈棕色状态的所需产物2-[3-氯-5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯氧基]-N,N-二甲基乙胺(52mg，175.18μmol，44.91％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值296.2；实测值297.2；Rt＝0.714min。
步骤6：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(3-氯-5-(2-(二甲基氨基)乙氧基)苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1247)的合成
在25℃下，向2-[3-氯-5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯氧基]-N,N-二甲基乙胺(52mg，175.18μmol)于DMF(2mL)中的搅拌溶液中分别添加2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(36.65mg，175.18μmol)、DIPEA(22.64mg，175.18μmol，30.51μL)和HATU(66.61mg，175.18μmol)。使所得反应混合物在25℃下搅拌12h。完成之后，将反应混合物在减压下浓缩，以获得呈棕色状态的粗产物。通过反相HPLC(装置(流动相，柱)：SYSTEM 5-5-45％0-1-6min H2O/MeCN/0.1％FA，流速：30ml/min(装载泵4ml/min MeCN)；柱：XBridgeBEH C18 5um)纯化所获得的粗产物。分离呈棕色状态的所需产物N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2R,5S)-2-[3-氯-5-[2-(二甲基氨基)乙氧基]苯基]-5-甲基-1-哌啶基]乙酰胺(14.9mg，30.53μmol，17.43％产率)。
1H NMR(600MHz,dmso)δ0.96-1.03(m,3H),1.07-1.14(m,3H),1.24-1.38(m,1H),1.55-1.70(m,1H),1.78-1.94(m,1H),1.94-2.07(m,1H),2.10-2.17(m,1H),2.20(s,6H),2.37-2.42(m,2H),2.71-2.83(m,1H),3.98-4.10(m,3H),5.07-5.53(m,1H),5.57-5.71(m,2H),6.73-6.86(m,1H),6.86-6.97(m,2H),7.41-7.54(m,1H),7.96-8.09(m,1H),8.12-9.05(m,2H),10.47-10.73(m,1H)。LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值488.2；实测值489.2；Rt＝1.959min。
实施例280.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[1-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(对映异构化合物1182)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[1-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1182)的合成
步骤1：5-溴吲唑-1-甲酸叔丁酯的合成
在25℃下，向5-溴-1H-吲唑(50.0g，254mmol)于乙腈(500mL)中的搅拌溶液中添加三乙胺(25.7g，254mmol，35.4mL)、二碳酸二叔丁酯(66.5g，305mmol，69.9mL)和DMAP(3.10g，25.4mmol)。将反应混合物在同一温度下搅拌3h。将所获得的混合物在减压下浓缩。使粗产物(80.0g)经历柱色谱(SiO2；己烷/MTBE梯度(0-100％于己烷中的MTBE))，以得到呈黄色胶状物的5-溴吲唑-1-甲酸叔丁酯(49.0g，165mmol，64.9％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ1.72(s,9H),7.26-7.28(m,1H),7.62(s,1H),8.10-8.11(m,2H)。
步骤2：5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吲唑-1-甲酸叔丁酯的合成
在室温下，向5-溴吲唑-1-甲酸叔丁酯(49.0g，165mmol)于二噁烷(1000mL)中的搅拌溶液中添加4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(46.1g，181mmol)、乙酸钾(32.4g，330mmol，20.6mL)和Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2(13.5g，16.5mmol)。将反应混合物在90℃、惰性气氛下搅拌20h。将所获得的混合物冷却至室温且通过二氧化硅垫过滤。将滤饼用乙酸乙酯(200mL)洗涤。在减压下浓缩滤液。通过柱色谱(SiO2；己烷/乙酸乙酯梯度(0-100％乙酸乙酯))纯化粗产物，以得到呈淡黄色固体的5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吲唑-1-甲酸叔丁酯(45.0g，131mmol，79.3％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ1.37(s,12H),1.73(s,9H),7.94(m,1H),8.16-8.23(m,3H)。
步骤3：5-(1-叔丁氧基羰基-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-6-基)吲唑-1-甲酸叔丁酯的合成
将5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吲唑-1-甲酸叔丁酯(15.7g，45.6mmol)、3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(18.9g，54.7mmol)和碳酸钠(14.50g，136.8mmol)于二噁烷(200mL)和水(70.0mL)中的悬浮液抽真空，然后用Ar回填。添加[1,1'-双(联苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)与二氯甲烷的络合物(1.86g，2.28mmol)。将所得混合物在90℃下搅拌24h。将所获得的混合物冷却至25℃，过滤且在真空中浓缩。使残余物经历梯度色谱(SiO2；己烷-EA)，以得到呈淡黄色胶状物的5-(1-叔丁氧基羰基-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-6-基)吲唑-1-甲酸叔丁酯(7.30g，17.7mmol，38.7％产率)。
LCMS(ESI)：[M-boc+H]+m/z：计算值314.27；实测值314.0；Rt＝1.445。
步骤4：5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1H-吲唑的合成
将三氟乙酸(29.6g，260mmol，20.0mL)添加到5-(1-叔丁氧基羰基-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-6-基)吲唑-1-甲酸叔丁酯(7.30g，17.6mmol)于二氯甲烷(25.0mL)中的溶液中。将所得混合物在25℃下搅拌14h。将所获得的混合物在减压下浓缩。将残余物溶解于水(60.0mL)中且通过脱脂棉塞过滤。将滤液用固体K2CO3碱化至pH≈10。过滤所形成的白色固体且干燥，以得到呈白色固体的5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1H-吲唑(3.40g，15.9mmol，90.3％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值214.15；实测值214.2；Rt＝0.700。
步骤5：5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1H-吲唑的合成
向5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1H-吲唑(3.40g，15.9mmol)于甲醇(60.0mL)中的搅拌悬浮液中分批添加硼氢化钠(905mg，23.9mmol，845μL)。将所得混合物在25℃下搅拌2h。将所获得的混合物在减压下浓缩。将残余物分配于水(50.0mL)与乙酸乙酯(80.0mL)之间。将有机层分离，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩，以得到呈灰色固体的5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1H-吲唑(3.50g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值216.17；实测值216.3；Rt＝0.792。
步骤6：(2R,5S)-2-(2H-吲唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将碳酸叔丁氧基羰基叔丁酯(2.66g，12.2mmol，2.80mL)添加到5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-2H-吲唑(2.60g，12.1mmol)于THF(50.0mL)中的溶液中。将所得混合物在25℃下搅拌15h且在减压下浓缩，以得到呈淡黄色胶状物的(2R,5S)-2-(2H-吲唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(3.20g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值316.23；实测值316.0；Rt＝1.458。
步骤7：(2S,5R)-2-[2-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯和(2S,5R)-2-[1-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
向(2S,5R)-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(500mg，1.59mmol)于ACN(50.0mL)中的搅拌溶液中添加99％无水碳酸钾(548mg，3.96mmol)，随后添加2-氯-N,N-二甲基乙胺(274mg，1.90mmol，205μL，盐酸盐)。将所得混合物在70℃下搅拌90h。使反应混合物经历HPLC(0-5min 55-65％水-甲醇，+0.1体积％25％ NH3水溶液，30mL/min，柱：XBridge C18，100x19 mm，5μm)，以得到呈无色油状物的(2S,5R)-2-[2-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(60.0mg，155μmol，19.6％产率)和(2S,5R)-2-[1-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(70.0mg，181μmol，22.8％产率)。
(2S,5R)-2-[2-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值387.32；实测值387.4；Rt＝2.687。
(2S,5R)-2-[1-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯
LCMS(ESI)：[M-H]+m/z：计算值385.32；实测值386.2；Rt＝1.431。
步骤8：N,N-二甲基-2-[5-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]吲唑-1-基]乙胺的合成
向(2S,5R)-2-[1-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(71.0mg，184μmol)于MeOH(2.00mL)中的溶液中添加4.0M二噁烷中的氯化氢溶液(837mg，1.84mmol，1.05mL，8％纯度)。将反应混合物在25℃下搅拌12h且将溶剂在真空中蒸发，以得到呈淡黄色固体的N,N-二甲基-2-[5-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]吲唑-1-基]乙胺(65.0mg，181μmol，98.5％产率，2盐酸盐)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值387.26；实测值387.0；Rt＝0.442。
步骤9：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[1-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
向N,N-二甲基-2-[5-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]吲唑-1-基]乙胺(65.0mg，181μmol，2盐酸盐)、2-[(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(45.9mg，235μmol)和三乙胺(91.5mg，904μmol，126μL)于DMF(3.00mL)中的溶液中添加HATU(82.5mg，217μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌2h。使反应混合物经历HPLC(0-6min25-50％水-ACN，+0.1体积％25％ NH3水溶液，30mL/min，柱：YMC-Actus Triart C18，100x20 mm，5μm)，以得到呈白色固体的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[1-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(57.0mg，123μmol，67.9％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.98-1.07(m,3H),1.30-1.42(m,1H),1.71-1.82(m,1H),1.82-1.92(m,1H),1.97-2.05(m,3H),2.06-2.13(m,1H),2.15(s,6H),2.24-2.36(m,1H),2.65-2.71(m,2H),2.74-3.23(m,1H),3.44-4.04(m,1H),4.42-4.51(m,2H),5.18-5.60(m,1H),5.60-5.74(m,2H),7.27-7.41(m,1H),7.41-7.52(m,1H),7.64-7.71(m,2H),7.94-8.07(m,2H),10.47-10.56(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值464.31；实测值464.4；Rt＝1.507。
步骤10：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[1-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(对映异构化合物1182)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[1-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1182)的合成
使N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[1-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(50.0mg，108μmol)经历手性分离(柱：Chiralcel OJ-H(250/20mm/5m)；流动相：己烷-IPA-MeOH，50-25-25，流速：12mL/min；柱温：24℃；波长：205nm，220nm，265nm，298nm)，以得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[1-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(19.0mg，40.9μmol，76.0％产率)(保留时间(对映异构化合物1182)＝23.94min)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[1-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(18.0mg，38.8μmol，72.0％产率)(保留时间(化合物1182)＝17.00min)。
(对映异构化合物1182)：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[1-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.01-1.04(m,3H),1.32-1.40(m,2H),1.72-1.88(m,2H),1.97-2.16(m,9H),2.25-2.37(m,1H),2.64-2.77(m,2H),3.46(d,1H),4.01(d,1H),4.45-4.47(m,2H),5.57-5.67(m,3H),7.29-7.50(m,2H),7.66-7.75(m,2H),7.96-8.04(m,2H),10.52(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值464.31；实测值464.4；Rt＝1.640。
(化合物1182)：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[1-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.01-1.04(m,3H),1.32-1.39(m,2H),1.68-1.89(m,3H),1.97-2.37(m,8H),2.67-2.98(m,4H),3.45(m,1H),4.01(m,1H),4.46(m,2H),5.57-5.67(m,2H),7.29-7.50(m,2H),7.66-7.73(m,2H),7.96-8.04(m,2H),10.53(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值464.31；实测值464.4；Rt＝1.910。
实施例281.N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(5S)-5-甲基-2-(2-甲基吲唑-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1199)的合成
步骤1：(3S)-3-甲基-6-(2-甲基吲唑-6-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将2-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吲唑(1.00g，3.87mmol)、(3S)-3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.47g，4.26mmol)、碳酸钠(1.23g，11.6mmol，487μL)和Pd(dppf)Cl2*DCM(158mg，194μmol)添加到水(5.00mL)和1,4-二噁烷(15.0mL)的混合物中。将反应混合物在惰性气氛、80℃下搅拌16h。将所得混合物冷却，用水稀释且用DCM萃取。将有机层分离，经Na2SO4干燥且在减压下浓缩。将残余物悬浮于MTBE中，搅拌2h且过滤。在减压下浓缩滤液，以得到(3S)-3-甲基-6-(2-甲基吲唑-6-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.00g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值328.23；实测值328.2；Rt＝1.367。
步骤2：2-甲基-6-[(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]吲唑的合成
将(3S)-3-甲基-6-(2-甲基吲唑-6-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.00g，3.05mmol)溶解于TFA(4.00mL)和DCM(6.00mL)的混合物中。将反应混合物在25℃下搅拌0.5h。将所获得的混合物在减压下浓缩，以得到2-甲基-6-[(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]吲唑(0.76g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值228.17；实测值228.2；Rt＝0.781。
步骤3：2-甲基-6-[(5S)-5-甲基-2-哌啶基]吲唑的合成
向2-甲基-6-[(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]吲唑(0.76g，3.34mmol)于甲醇(8.00mL)中的溶液中分批添加硼氢化钠(164mg，4.35mmol，154μL)。将反应混合物搅拌过夜。添加HCl-甲醇的混合物。将所获得的混合物在减压下浓缩，以得到2-甲基-6-[(5S)-5-甲基-2-哌啶基]吲唑(1.00g，粗品，盐酸盐)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值230.19；实测值230.2；Rt＝0.821。
步骤4：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(5S)-5-甲基-2-(2-甲基吲唑-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1199)的合成
向2-甲基-6-[(5S)-5-甲基-2-哌啶基]吲唑(0.14g，527μmol，盐酸盐)、2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(121mg，579μmol)和DIPEA(306mg，2.37mmol，413μL)于DMSO(2.00mL)中的搅拌溶液中添加HATU(240mg，632μmol)。将反应混合物在25℃下搅拌16h。将所得混合物提交至反相HPLC(第1次运行：2-10min 10-35％水+FA(0.1体积％)-MeOH+FA(0.1体积％)；流速：30mL/min，柱：Waters SunFire C18，100x19 mm，5μm；第2次运行：2-10min 10-35％水-甲醇，+0.1体积％25％ NH3水溶液，30mL/min，柱：Waters SunFireC18，100x19 mm，5μm)，以得到呈米色固体的N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(5S)-5-甲基-2-(2-甲基吲唑-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.02g，40.4μmol，7.67％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6):δ(ppm)0.98-1.05(m,3H),1.05-1.16(m,3H),1.30-1.45(m,1H),1.68-1.81(m,1H),1.82-1.92(m,1H),2.04-2.20(m,1H),2.23-2.32(m,1H),2.37-2.44(m,2H),2.74-3.24(m,1H),3.42-4.06(m,1H),4.14(s,3H),5.18-5.61(m,1H),5.61-5.69(m,2H),6.89-7.08(m,1H),7.40-7.53(m,2H),7.62-7.71(m,1H),7.97-8.09(m,1H),8.11-8.36(m,1H),10.45-10.60(m,1H)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值421.26；实测值421.2；Rt＝2.443。
实施例282.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)苯并噻吩-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1220)的合成
步骤1：(3S)-6-(苯并噻吩-5-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将碳酸钠(4.24g，39.9mmol，1.67mL)添加到(3S)-3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(8.28g，23.9mmol)和2-(苯并噻吩-5-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(5.20g，19.9mmol)于二噁烷(15.0mL)和水(55.0mL)中的溶液中。将反应混合物抽真空，然后用Ar回填。添加Pd(dppf)Cl2*DCM(1.63g，2.00mmol)。将所得混合物在90℃下搅拌14h。将所获得的混合物在减压下浓缩。使残余物经历梯度柱色谱(SiO2；己烷-MTBE)，以得到呈棕色固体的(3S)-6-(苯并噻吩-5-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(3.00g，9.11mmol，45.6％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ1.01(m,12H),1.84-1.90(m,1H),1.91-1.98(m,1H),2.39-2.45(m,1H),3.01-3.05(m,1H),4.09-4.13(m,1H),5.35-5.37(m,1H),7.25-7.31(m,2H),7.40-7.42(d,1H),7.72(s,1H),7.80-7.82(d,1H)。
步骤2：(3S)-6-(苯并噻吩-5-基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶的合成
将(3S)-6-(苯并噻吩-5-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(3.00g，9.11mmol)混合于三氟乙酸(10.4g，91.1mmol，7.02mL)中。将所得混合物在25℃下搅拌1h。将所获得的混合物在真空中浓缩。将残余物用DCM(25.0mL)稀释且用NaHCO3溶液(3*15.0mL)洗涤。将有机相经Na2SO4干燥且在真空中浓缩，以得到呈黄色固体的(3S)-6-(苯并噻吩-5-基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶(2.00g，8.72mmol，95.8％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值230.12；实测值230.0；Rt＝0.765。
步骤3：(2R,5S)-2-(苯并噻吩-5-基)-5-甲基哌啶的合成
向(3S)-6-(苯并噻吩-5-基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶(2.00g，8.72mmol)于甲醇(20.0mL)中的搅拌溶液中分批添加硼氢化钠(330mg，8.72mmol，308μL)。将反应混合物在25℃下搅拌1.5h。将所获得的混合物在真空中浓缩。将残余物用水(50.0mL)稀释且用DCM(2*25.0mL)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩，以得到呈棕色固体的(2R,5S)-2-(苯并噻吩-5-基)-5-甲基哌啶(2.00g，8.64mmol，99.1％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值232.14；实测值232.2；Rt＝0.784。
步骤4：(2R,5S)-2-(苯并噻吩-5-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
向(2R,5S)-2-(苯并噻吩-5-基)-5-甲基哌啶(2.00g，8.64mmol)于DCM(50.0mL)中的搅拌溶液中逐滴添加二碳酸二叔丁酯(1.98g，9.08mmol，2.08mL)。将反应混合物在25℃下搅拌14h。将所获得的混合物用水(3*25.0mL)洗涤。将有机层经Na2SO4干燥且在真空中浓缩，以得到呈淡黄色固体的(2R,5S)-2-(苯并噻吩-5-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.50g，7.54mmol，87.3％产率)。
LCMS(ESI)：[M-boc]+m/z：计算值230.2；实测值232.0；Rt＝1.603。
步骤5：(2R,5S)-2-(2-溴苯并噻吩-5-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
向(2R,5S)-2-(苯并噻吩-5-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.94g，7.54mmol)于ACN(29.8mL)中的搅拌溶液中分批添加N-溴琥珀酰亚胺(1.34g，7.54mmol，640μL)。将反应混合物在25℃下搅拌14h。将所获得的混合物在真空中浓缩。将残余物用DCM(40.0mL)稀释，用水和NaHSO4溶液洗涤。将有机层经Na2SO4干燥且在真空中浓缩，以得到呈红色固体的(2R,5S)-2-(2-溴苯并噻吩-5-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.80g，6.82mmol，90.5％产率)。
LCMS(ESI)：[M-boc]+m/z：计算值310.01；实测值310.2；Rt＝1.831。
步骤6：(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-3,6-二氢-2H-吡啶-4-基)苯并噻吩-5-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将碳酸钠(1.45g，13.7mmol)添加到(2R,5S)-2-(2-溴苯并噻吩-5-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.80g，6.82mmol)和1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,6-二氢-2H-吡啶(1.52g，6.82mmol)于二噁烷(20.0mL)和水(5.00mL)中的溶液中。将反应混合物抽真空，然后用Ar回填。添加Pd(dppf)Cl2*DCM(279mg，341μmol)。将所得混合物在90℃下搅拌14h。在减压下浓缩反应混合物。使残余物经历梯度柱色谱(SiO2；MTBE-MeOH)，以得到呈棕色固体的(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-3,6-二氢-2H-吡啶-4-基)苯并噻吩-5-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.90g，6.80mmol，99.6％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值427.29；实测值427.2；Rt＝1.315。
步骤7：(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)苯并噻吩-5-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将钯(5％于碳上)5R452(0.50g，4.70mmol)添加到(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-3,6-二氢-2H-吡啶-4-基)苯并噻吩-5-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.30g，5.39mmol)于甲醇(30.0mL)中的溶液中。将反应混合物抽真空，然后用氢气回填。将所得混合物在50℃下搅拌6天。将反应混合物过滤且在真空中浓缩，以得到呈黄色油状物的(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)苯并噻吩-5-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.80g，4.20mmol，77.9％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值429.31；实测值429.2；Rt＝3.591。
步骤8：1-甲基-4-[5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯并噻吩-2-基]哌啶的合成
将(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)苯并噻吩-5-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.80g，4.20mmol)混合于4.0M于二噁烷中的氯化氢溶液(40.0g，1.10mol，50.0mL)中。将所得混合物在25℃下搅拌14h。将所获得的混合物用MTBE(15.0mL)稀释且过滤。将滤饼用MTBE洗涤且在真空中干燥，以得到呈棕色固体的1-甲基-4-[5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯并噻吩-2-基]哌啶(1.50g，3.74mmol，88.9％产率，2盐酸盐)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值329.25；实测值329.2；Rt＝0.502。
步骤9：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)苯并噻吩-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1220)的合成
向1-甲基-4-[5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯并噻吩-2-基]哌啶(0.50g，1.37mmol，盐酸盐)、2-[(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(267mg，1.37mmol)和三乙胺(693mg，6.85mmol，955μL)于DMF(4.00mL)中的溶液中分批添加HATU(573mg，1.51mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌1.5h。使所获得的混合物经历反相HPLC(0-1-5min30-30-60％水-ACN，+0.1体积％25％ NH3水溶液，30mL/min，柱：YMC-Actus Triart C18，100x20 mm，5μm)，以得到呈黄色固体的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)苯并噻吩-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(23.0mg，45.5μmol，3.32％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.00-1.06(m,3H),1.30-1.40(m,1H),1.59-1.95(m,7H),1.95-2.05(m,4H),2.06-2.12(m,2H),2.19(s,3H),2.30(d,1H),2.82-2.87(m,2H),2.89-3.29(m,1H),3.46-4.06(m,1H),5.23-5.73(m,3H),7.30-7.39(m,1H),7.40-7.52(m,2H),7.67-7.71(m,1H),7.93-8.09(m,2H),10.46-10.60(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值506.3；实测值506.2；Rt＝1.794。
实施例283.2-甲氧基-5-[[2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[外消旋-(3R,4S)-1,3-二甲基-4-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物1168)的合成
向2-[外消旋-(3R,4S)-1,3-二甲基-4-哌啶基]-5-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑(80mg，0.211mmol，HCl)、2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(76mg，0.318mmol)和HATU(136mg，0.358mmol)于DMF(2mL)中的混合物中添加DIPEA(0.18mL，1.03mmol)。将混合物在20℃下搅拌2小时。通过制备型HPLC(仪器：Gilson GX-281Liquid Handler，Gilson 322泵，Gilson 156UV检测器；柱：Phenomenex C1880×40mm×3μm；流动相A：具有10mmol NH4HCO3的H2O(v％)；流动相B：MeCN；梯度：在9.5min内36％至66％ B，保持100％ B达2min；流速：25mL/min；柱温：30℃；波长：220nm，254nm)纯化混合物，以得到呈白色无水粉末的2-甲氧基-5-[[2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[外消旋-(3R,4S)-1,3-二甲基-4-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(48mg，40.4％产率)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 8.35-8.76(m,2H),7.89-8.03(m,2H),7.37-7.56(m,1H),5.39-5.93(m,1H),4.01-4.16(m,3H),3.76(d,J＝13.9Hz,1H),3.44(d,J＝12.1Hz,1H),2.99-3.22(m,2H),2.71-2.88(m,1H),1.84-2.50(m,12H),1.47(d,J＝11.1Hz,1H),1.14(d,J＝6.9Hz,3H),0.86(d,J＝6.3Hz,3H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值565.3；实测值565.2；HPLC：在220nm下为99.71％，在254nm下为99.69％；98.1％ee。
实施例284.2-甲氧基-5-[[2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[外消旋-(3R,4S)-1,3-二甲基-4-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(WX-TGX-1498A_002)和2-甲氧基-5-[[2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[外消旋-(3R,4R)-1,3-二甲基-4-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(WX-TGX-1498B_001)的合成
步骤1：2-甲氧基-5-[[2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[外消旋-(3R)-1,3-二甲基-4-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
将2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(85mg，355.37μmol)、2-[外消旋-(3R)-1,3-二甲基-4-哌啶基]-5-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑(80mg，0.233mmol)、HATU(130mg，0.342mmol)、DIPEA(130μL，0.746mmol)于DMF(4mL)中的混合物在20℃下搅拌2小时。通过制备型HPLC(仪器：Gilson GX-281LiquidHandler，Gilson 322泵，Gilson 156UV检测器；柱：Phenomenex C18 80×40mm×3μm；流动相A：具有0.05％ NH3-H2O(v％)的H2O；流动相B：MeCN；梯度：在9.5min内40％至70％ B，保持100％ B达0min；流速：30mL/min；柱温：30℃；波长：220nm，254nm)纯化残余物，以得到呈白色固体的2-甲氧基-5-[[2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[外消旋-(3R)-1,3-二甲基-4-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(50mg，37.4％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值565.3，实测值565.3
步骤2：2-甲氧基-5-[[2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[外消旋-(3R,4S)-1,3-二甲基-4-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(WX-TGX-1498A_002)和2-甲氧基-5-[[2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[外消旋-(3R,4R)-1,3-二甲基-4-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(WX-TGX-1498B_001)的合成
将2-甲氧基-5-[[2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[外消旋-(3R)-1,3-二甲基-4-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(50mg，0.089mmol)通过手性SFC(仪器：Berger，MULTIGR AM-II；柱：Chiralpak OD 250×30mmI.D.10μm；流动相：超临界CO2/EtOH(0.1％ NH3`H2O，v％)＝40/40；流速：80mL/min；柱温：38℃；喷嘴温度：100巴；喷嘴温度：60℃；蒸发器温度：20℃；修整器温度：25℃；波长：220nm)纯化，以得到WX-TGX-1498A_002和TGX-1498B_001。
WX-TGX-1498A_002
2-甲氧基-5-[[2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[外消旋-(3R,4S)-1,3-二甲基-4-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(40mg，峰1，保留时间＝3.651min，具有反式相对化学的单一未知对映异构体，白色固体)。
1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 8.38-8.90(m,2H),7.84-8.11(m,2H),7.46(br d,J＝8.5Hz,1H),5.43-5.96(m,1H),4.02-4.22(m,3H),3.40-3.86(m,1H),3.13(br t,J＝13.3Hz,2H),2.85(br d,J＝9.3Hz,1H),2.47(s,3H),1.78-2.42(m,9H),1.48(br d,J＝13.1Hz,1H),1.15(d,J＝6.8Hz,3H),0.88(br d,J＝5.5Hz,3H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值565.3，实测值565.3；HPLC：在254nm下为99.9％；98.86％ee。
WX-TGX-1498B_001
2-甲氧基-5-[[2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[外消旋-(3R,4R)-1,3-二甲基-4-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(11mg，峰2，保留时间＝4.177min，具有反式相对化学的单一未知对映异构体，白色固体)。
1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 8.38-8.72(m,1H),7.84-8.06(m,2H),7.26-7.71(m,2H),5.36-6.04(m,1H),3.98-4.27(m,3H),3.35-3.88(m,2H),2.77-3.27(m,2H),1.81-2.58(m,9H),1.48(br d,J＝12.8Hz,1H),1.28(s,1H),1.15(d,J＝7.0Hz,3H),0.93(br d,J＝7.0Hz,3H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值565.3，实测值565.4；HPLC：在254nm下为100.0％；99.4％ee。
实施例285.2-甲氧基-5-[[2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[外消旋-(3S,4R)-1,3-二甲基-4-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物1127)的合成
将2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(85mg，0.355mmol)、2-[外消旋-(3S,4R)-1,3-二甲基-4-哌啶基]-5-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑(80mg，0.233mmol)、HATU(135mg，0.355mmol)、DIPEA(0.13mL，0.746mmol)于DMF(4mL)中的混合物在20℃下搅拌2小时。在减压下浓缩混合物。通过制备型HPLC(仪器：Gilson GX-281Liquid Handler，Gilson 322泵，Gilson156UV检测器；柱：Phenomenex C18 80*40mm*3μm；流动相A：具有NH4HCO3(v％)的H2O；流动相B：MeCN；梯度：在9.5min内43％至73％ B，保持100％ B达1min；流速：25mL/min；柱温：30℃；波长：220nm，254nm)纯化残余物，以得到呈白色固体的2-甲氧基-5-[[2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[外消旋-(3S,4R)-1,3-二甲基-4-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(27mg，20.2％产率，单一未知对映异构体)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 8.59-8.74(m,1H),8.36-8.56(m,1H),7.91-8.04(m,2H),7.45(br s,1H),5.84(brs,1H),4.05-4.13(m,3H),3.76(br d,J＝14.0Hz,2H),2.86(br s,2H),2.02-2.45(m,13H),1.49(br s,1H),1.15(br s,3H),0.86(br d,J＝6.0Hz,3H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值565.3，实测值565.3；HPLC：在254nm下为98.22％，在254nm下为99.12％；100％ee。
实施例286.2-甲氧基-5-[[2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[外消旋-(3S,4S)-1,3-二甲基-4-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物1185)的合成
将2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(85mg，0.355mmol)、2-[外消旋-(3S,4S)-1,3-二甲基-4-哌啶基]-5-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑(80mg，0.233mmol)、HATU(130mg，0.342mmol)、DIPEA(130μL，0.746mmol)于DMF(4mL)中的混合物在20℃下搅拌2小时。通过制备型HPLC(仪器：GilsonGX-281Liquid Handler，Gilson 322泵，Gilson 156UV检测器；柱：Phenomenex C18 80×40mm×3μm；流动相A：具有0.05％ NH3-H2O(v％)的H2O；流动相B：MeCN；梯度：在7.8min内42％至72％ B，保持100％ B达1min；流速：30mL/min；柱温：30℃；波长：220nm，254nm)纯化残余物，以得到呈白色固体的2-甲氧基-5-[[2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[外消旋-(3S,4S)-1,3-二甲基-4-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(45mg，33.6％产率)。
1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 8.36-8.75(m,2H),7.91-8.02(m,2H),7.37-7.48(m,1H),5.41-5.93(m,1H),4.02-4.12(m,3H),3.35-3.86(m,2H),3.03-3.26(m,1H),2.88(br s,1H),2.14-2.62(m,10H),1.85-2.13(m,3H),1.47(br d,J＝11.8Hz,1H),1.14(d,J＝7.0Hz,3H),0.93(br d,J＝6.5Hz,3H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值565.3，实测值565.1；HPLC：在254nm下为98.46％；99.7％ee。
实施例287.N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-7-喹啉基]-1-哌啶基]乙酰胺(化合物1365)的合成
步骤1：7-溴-2-(1-甲基-4-哌啶基)喹啉
将2-氨基-4-溴苯甲醛(1.3g，6.50mmol)、1-(1-甲基-4-哌啶基)乙酮(917.72mg，6.50mmol)和叔丁醇钠(1.25g，13.00mmol)混合于乙醇(20mL)中且在80℃下搅拌12h。将RM在真空中浓缩，然后用DCM处理，用水洗涤。将有机相经Na2SO4干燥且蒸发，以得到7-溴-2-(1-甲基-4-哌啶基)喹啉(1.65g，粗品)
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值304.1；实测值305；Rt＝0.934min。
步骤2：2-(1-甲基-4-哌啶基)-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)喹啉
将7-溴-2-(1-甲基-4-哌啶基)喹啉(1.95g，6.39mmol)(300mg)、双(频哪醇)二硼(2.11g，8.31mmol)和乙酸钾(1.88g，19.17mmol，1.20mL)于二噁烷(30.03mL)中的混合物用氩气脱气10min。接着添加Pd(dppf)Cl2*DCM(521.75mg，638.90μmol)且将反应混合物在80℃下加热12h。将反应混合物过滤，然后在真空中浓缩。将残余物用MTBE-己烷(1:1)的混合物处理，过滤，然后在减压下浓缩，以得到2-(1-甲基-4-哌啶基)-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)喹啉(3g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值352.3；实测值353.2；Rt＝1.119min。
步骤3：(3S)-3-甲基-6-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-7-喹啉基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯
在氩气下，将2-(1-甲基-4-哌啶基)-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)喹啉(2.8g，7.95mmol)、碳酸钠(2.53g，23.84mmol，998.15μL)、(3S)-3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(2.74g，7.95mmol)和Pd(dppf)Cl2*DCM(0.5g，612.75μmol)混合于H2O(15mL)和二噁烷(50mL)中且在75℃下搅拌12h。将反应混合物用水稀释且将所需产物用DCM萃取，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩。获得(3S)-3-甲基-6-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-7-喹啉基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(4g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值421.3；实测值422.2；Rt＝1.174min。
步骤4：2-(1-甲基-4-哌啶基)-7-[(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]喹啉
将(3S)-3-甲基-6-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-7-喹啉基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(4g，9.49mmol)溶解于DCM(40mL)中且添加CF3COOH(15g，9.49mmol)。将RM搅拌2h，然后浓缩。将残余物用MTBE处理两次。将黑色胶状物用NaHCO3水溶液处理，然后用DCM萃取。将有机相经Na2SO4干燥，然后在真空中浓缩，以得到2-(1-甲基-4-哌啶基)-7-[(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]喹啉(1g，粗品)
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值321.2；实测值322.2；Rt＝0.682min。
步骤5：2-(1-甲基-4-哌啶基)-7-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]喹啉
向2-(1-甲基-4-哌啶基)-7-[(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]喹啉(1g，2.49mmol)于甲醇(30mL)中的溶液中添加硼氢化钠(188.30mg，4.98mmol，175.33μL)，然后搅拌过夜。将RM在真空中浓缩，然后用DCM处理，过滤且蒸发，以得到2-(1-甲基-4-哌啶基)-7-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]喹啉(0.75g，粗品)
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值323.2；实测值324.2；Rt＝0.705min。
步骤6：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-7-喹啉基]-1-哌啶基]乙酰胺(化合物1365)的合成
将来自前一阶段的粗产物2-(1-甲基-4-哌啶基)-7-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]喹啉(100.00mg，216.40μmol)与TEA(109.49mg，1.08mmol，150.81μL)混合于DMSO(2mL)中，接着添加2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(54.33mg，259.68μmol)和HATU(98.74mg，259.68μmol)且搅拌过夜。将RM用水处理且将所需产物过滤，用水洗涤且溶解于DMSO中，然后经历HPLC。HPLC数据：SYSTEM 2-10min 30-60％ ACN+FA 30ml/min(装载泵4mlACN)柱：SunFire 100*19mm，5微米。获得N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-7-喹啉基]-1-哌啶基]乙酰胺(42.3mg，82.19μmol，37.98％产率)。
1H NMR(600MHz,dmso)δ1.03-1.15(m,6H),1.33-1.44(m,1H),1.70-1.76(m,1H),1.86-1.94(m,5H),2.10-2.20(m,3H),2.27-2.31(m,3H),2.32-2.35(m,1H),2.37-2.43(m,2H),2.80-2.88(m,2H),2.97-3.00(m,2H),4.08-4.24(m,1H),5.35-5.78(m,3H),7.42-7.49(m,2H),7.51-7.57(m,1H),7.80-7.86(m,1H),7.92-7.98(m,1H),7.99-8.10(m,1H),8.23-8.31(m,1H),10.54-10.66(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值514.3；实测值515.2；Rt＝2.125min。
实施例288.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(2-氘-1,3-苯并噻唑-5-yl)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(WX-TANT_17)的合成
步骤1：(2R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(ES18795-7)的合成
将5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑(2g，8.61mmol，1当量)、TEA(1.74g，17.22mmol，2.40mL，2当量)、Boc2O(2.82g，12.91mmol，2.97mL，1.5当量)于DCM(10mL)中的混合物脱气且用N2吹扫3次，然后在N2气氛下将混合物在25℃下搅拌16h。LC-MS显示反应物1完全消耗，DCM经蒸发。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝0/1至3/1)纯化残余物，获得呈白色固体的化合物(2R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.4g，7.22mmol，83.86％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 9.19-9.52(m,1H)8.15(d,J＝8.38Hz,1H)7.82-7.94(m,1H)7.36(dd,J＝8.50,1.25Hz,1H)5.33(t,J＝4.57Hz,1H)3.67(br d,J＝13.38Hz,1H)3.00(dd,J＝13.45,3.81Hz,1H)2.01-2.22(m,2H)1.82(br s,1H)1.56-1.72(m,1H)1.18-1.33(m,1H)0.99(d,J＝6.88Hz,3H)。LCMS(ESI)[M+H]+m/z计算值333.1，实测值333.2。
步骤2：(2R,5S)-2-(2-氘-1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(ES18795-8)的合成
在-60℃下，向(2R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(500mg，1.50mmol，1当量)于THF(8mL)中的溶液中逐滴添加n-BuLi(2.5M，902.37uL，1.5当量)。然后在0℃下添加D2O(602.4mg，30.1mmol，20当量)。将所得混合物在0℃下搅拌30min。LCMS显示反应完成。将反应混合物浓缩，以得到残余物。通过制备型HPLC(碱性条件)纯化残余物。获得呈白色固体的化合物(2R,5S)-2-(2-氘-1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(250mg，749.70umol，49.85％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 9.40(s,1H)8.15(d,J＝8.38Hz,1H)7.84-7.94(m,1H)7.36(dd,J＝8.38,1.25Hz,1H)5.33(t,J＝4.57Hz,1H)3.67(br d,J＝13.51Hz,1H)3.01(dd,J＝13.51,3.75Hz,1H)2.04-2.22(m,2H)1.82(br s,1H)1.53-1.71(m,1H)1.22-1.33(m,1H)1.00(d,J＝7.00Hz,3H)。LCMS(ESI)[M+H]+m/z计算值334.1，实测值334.1。
步骤3：2-氘-5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑(ES18795-的合成
将(2R,5S)-2-(2-氘-1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(250mg，749.70umol，1当量)于TFA/DCM(5mL)中的混合物脱气且用N2吹扫3次，然后将混合物在N2气氛、25℃下搅拌2h。LCMS显示反应完成。蒸发TFA/DCM。呈白色固体的粗产物2-氘-5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑(175mg，粗品)不经进一步纯化即用于下一步骤中。LCMS(ESI)[M+H]+m/z计算值234.1，实测值234.1。
步骤4：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(2-氘-1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(ES18795-12)的合成
将2-氘-5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑(175mg，749.95umol，1当量)、2-[(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(220mg，1.13mmol，1.50当量)、HATU(570.30mg，1.50mmol，2当量)、DIEA(484.63mg，3.75mmol，653.14uL，5当量)于DMF(10mL)中的混合物脱气且用N2吹扫3次，然后将混合物在N2气氛、25℃下搅拌16h。LC-MS显示检测到约80％所需化合物。将反应混合物用30mL EtOAc(10mL*3)萃取。将合并的有机层用饱和NaCl水溶液(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩，以得到残余物。通过制备型HPLC(碱性条件)纯化残余物。获得呈白色固体的化合物N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(2-氘-1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(52mg，126.67umol，16.89％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 10.33(br s,1H)8.15(d,J＝8.44Hz,1H)8.05(s,2H)7.49(br d,J＝8.56Hz,2H)5.17-5.88(m,3H)2.12-2.38(m,2H)2.00-2.11(m,3H)1.93(br s,1H)1.72-1.85(m,1H)1.38(br d,J＝9.90Hz,1H)1.07(d,J＝6.97Hz,3H)。LCMS(ESI)[M+H]+m/z计算值411.1，实测值411.1。
实施例289.N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-甲基-2-(1-甲基-4-哌啶基)-7-喹啉基]-1-哌啶基]乙酰胺(化合物1368)的合成
步骤1：4-(7-溴-3-甲基-2-喹啉基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
将2-氨基-4-溴苯甲醛(1.5g，7.50mmol)、4-丙酰基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.81g，7.50mmol)和叔丁醇钠(1.44g，15.00mmol)混合于乙醇(20mL)中且在80℃下搅拌12h。将RM在真空中浓缩，然后用DCM处理，用水洗涤。将有机相经Na2SO4干燥且蒸发，以得到4-(7-溴-3-甲基-2-喹啉基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.2g，粗品)
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值405.3；实测值406.0；Rt＝1.771min。
步骤2：7-溴-3-甲基-2-(4-哌啶基)喹啉
将4-(7-溴-3-甲基-2-喹啉基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.5g，6.17mmol)溶解于DCM(19.87mL)中且逐滴添加三氟乙酸(15g，131.55mmol，10.14mL)，然后搅拌0.5h。将RM浓缩，用NaHCO3水溶液处理且将所需产物用DCM萃取。将有机相经Na2SO4干燥，然后蒸发，以得到7-溴-3-甲基-2-(4-哌啶基)喹啉(1.6g，粗品)
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值305.2；实测值306.2；Rt＝0.781min。
步骤3：7-溴-3-甲基-2-(1-甲基-4-哌啶基)喹啉
将氰基硼氢化钠(1.77g，28.10mmol)分4批添加到7-溴-3-甲基-2-(4-哌啶基)喹啉(1.6g，4.68mmol，HCl)和福马林(1.90g，23.41mmol，1.75mL，37％纯度)于甲醇(20.08mL)中的混合物中且搅拌过夜。将反应混合物用NaHCO3水溶液处理且将所需产物用100ml DCM萃取，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩，以得到7-溴-3-甲基-2-(1-甲基-4-哌啶基)喹啉(1.1g，粗品)
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值318.1；实测值321.2；Rt＝0.958min。
步骤4：3-甲基-2-(1-甲基-4-哌啶基)-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)喹啉
将7-溴-3-甲基-2-(1-甲基-4-哌啶基)喹啉(1.1g，3.45mmol)、双(频哪醇)二硼(1.14g，4.48mmol)和乙酸钾(1.01g，10.34mmol，646.17μL)于二噁烷(20mL)中的混合物用氩气脱气10min。接着添加Pd(dppf)Cl2*DCM(281.39mg，344.57μmol)且将反应混合物在80℃下加热12h。将反应混合物过滤，然后在真空中浓缩。将残余物用MTBE-己烷的混合物(1:1)处理，过滤，然后在减压下浓缩，以得到3-甲基-2-(1-甲基-4-哌啶基)-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)喹啉(2.2g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值366.2；实测值367.2；Rt＝1.193min。
步骤5：(3S)-3-甲基-6-[3-甲基-2-(1-甲基-4-哌啶基)-7-喹啉基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯
在氩气下，将3-甲基-2-(1-甲基-4-哌啶基)-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)喹啉(2g，5.46mmol)、碳酸钠(1.74g，16.38mmol，685.66μL)、(3S)-3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.89g，5.46mmol)和Pd(dppf)Cl2*DCM(343.47mg，420.92μmol)混合于H2O(15mL)和二噁烷(50mL)中且在75℃下搅拌12h。将反应混合物用水稀释且将所需产物用DCM萃取，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩。获得外消旋-(3S)-3-甲基-6-[3-甲基-2-(1-甲基-4-哌啶基)-7-喹啉基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(2.8g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值435.3；实测值436.3；Rt＝1.161min。
步骤6：3-甲基-2-(1-甲基-4-哌啶基)-7-[(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]喹啉的合成
将外消旋-(3S)-3-甲基-6-[3-甲基-2-(1-甲基-4-哌啶基)-7-喹啉基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(2.8g，2.89mmol)溶解于DCM(40mL)中且添加CF3COOH(15g，2.89mmol)。将RM搅拌3h，然后浓缩。将残余物用MTBE处理两次。将黑色胶状物用NaHCO3水溶液处理，然后用DCM萃取。将有机相经Na2SO4干燥，然后在真空中浓缩，以得到3-甲基-2-(1-甲基-4-哌啶基)-7-[外消旋-(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]喹啉(600mg，粗品)
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值335.2；实测值336.2；Rt＝0.737min。
步骤7：3-甲基-2-(1-甲基-4-哌啶基)-7-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]喹啉的合成
向3-甲基-2-(1-甲基-4-哌啶基)-7-[外消旋-(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]喹啉(600mg，1.25mmol)于甲醇(15mL)中的溶液中添加硼氢化钠(94.73mg，2.50mmol，88.20μL)，然后搅拌过夜。将RM在真空中浓缩，然后用DCM和水处理，将有机相用水洗涤，经Na2SO4干燥且蒸发，以得到3-甲基-2-(1-甲基-4-哌啶基)-7-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]喹啉(0.5g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值337.2；实测值338.2；Rt＝0.765min。
步骤8：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-甲基-2-(1-甲基-4-哌啶基)-7-喹啉基]-1-哌啶基]乙酰胺(化合物1868)的合成
将来自前一阶段的粗产物3-甲基-2-(1-甲基-4-哌啶基)-7-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]喹啉(100.00mg，192.59μmol)与TEA(97.44mg，962.96μmol，134.22μL)混合于DMSO(1.95mL)中，接着添加2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(48.35mg，231.11μmol)和HATU(87.88mg，231.11μmol)且搅拌过夜。将RM用水处理且将所需产物过滤，用水洗涤且溶解于DMSO中，然后经历HPLC。HPLC数据：SYSTEM 2-10min 30-60％ ACN+FA30ml/min(装载泵4ml ACN)柱：SunFire 100*19mm，5微米。获得N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[3-甲基-2-(1-甲基-4-哌啶基)-7-喹啉基]-1-哌啶基]乙酰胺(14.2mg，26.86μmol，13.95％产率)。
1H NMR(600MHz,dmso)δ1.02-1.14(m,6H),1.33-1.42(m,1H),1.69-2.02(m,7H),2.09-2.35(m,9H),2.40-2.43(m,2H),2.94-3.02(m,4H),3.50-4.09(m,1H),5.29-5.77(m,3H),7.41-7.54(m,2H),7.76-7.87(m,2H),7.99-8.09(m,2H),10.53-10.61(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值530.2；实测值528.4；Rt＝2.396min。
实施例290.N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-2-[4-(4-异丙基哌嗪-1-基)-3-甲基苯基]-5-甲基-1-哌啶基]乙酰胺(化合物1163)的合成
步骤1：1-异丙基-4-(2-甲基-4-硝基苯基)哌嗪的合成
在Ar下，将1-异丙基哌嗪(2.5g，19.50mmol，2.79mL)、1-氟-2-甲基-4-硝基苯(4.23g，27.30mmol)、碳酸钾(6.74g，48.75mmol，2.94mL)混合于DMF(20mL)中。将反应混合物在130℃下搅拌过夜。在冷却至室温之后，将反应混合物用水稀释，用EtOAc萃取。将有机相在真空中蒸发，得到1-异丙基-4-(2-甲基-4-硝基苯基)哌嗪(4.8g，粗品)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值264.2；实测值264.2；Rt＝0.880min。
步骤2：4-(4-异丙基哌嗪-1-基)-3-甲基苯胺的合成
在H2气氛下，将1-异丙基-4-(2-甲基-4-硝基苯基)哌嗪(4.8g，18.23mmol)和Pd/C(1.94g，18.23mmol)于甲醇中的混合物在25℃下搅拌16h。过滤混合物且蒸发滤液。使残余物在己烷中结晶，以得到4-(4-异丙基哌嗪-1-基)-3-甲基苯胺(2.7g，11.57mmol，63.48％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值234.2；实测值234.4；Rt＝0.539min。
步骤3：1-异丙基-4-[2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]哌嗪的合成
在圆底烧瓶中称量4-(4-异丙基哌嗪-1-基)-3-甲基苯胺(2.65g，11.36mmol)和双(频哪醇)二硼(3.46g，13.63mmol)。然后连续添加MeCN(25mL)和亚硝酸叔丁酯(1.76g，17.03mmol，2.03mL)。将所得反应溶液在80℃下搅拌12h(N2逸出在5至15min内完成)。然后将溶液在减压下浓缩，且通过快速色谱纯化粗残余物，以获得1-异丙基-4-[2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]哌嗪(6g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值345.2；实测值345.2；Rt＝1.027min。
步骤4：外消旋-(3S)-6-[4-(4-异丙基哌嗪-1-基)-3-甲基苯基]-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将1-异丙基-4-[2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]哌嗪(5.8g，16.85mmol)、外消旋-(3S)-3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(5.82g，16.85mmol)和碳酸钠(3.57g，33.69mmol，1.41mL)一起混合于二噁烷(60mL)和水(20mL)的混合物中。将所得混合物用氩气吹扫10min且添加Pd(dppf)Cl2 DCM(687.85mg，842.29μmol)。将所得混合物在90℃下加热过夜。将所得混合物冷却且用水(5mL)稀释。将所得混合物用EtOAc(2*15mL)萃取且将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值414.2；实测值414.2；Rt＝1.287min。
步骤5：1-异丙基-4-[2-甲基-4-[外消旋-(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]苯基]哌嗪的合成
将三氟乙酸(23.16g，203.10mmol，15.65mL)一次性添加到外消旋-(3S)-6-[4-(4-异丙基哌嗪-1-基)-3-甲基苯基]-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(7g，16.92mmol)于DCM(20mL)中的搅拌溶液中。将所得溶液在25℃下搅拌1h，然后在真空中浓缩。用水(100mL)稀释残余物。将产物的TFA盐的所得溶液自深棕色油状残余物倾析，将其另外用水(2*25mL)冲洗。通过脱脂棉垫过滤合并的水溶液，以移除痕量油状杂质，然后用10％氢氧化钠水溶液碱化至pH 11-12且用二氯甲烷(2*50mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中浓缩，以得到呈淡黄色胶状物的1-异丙基-4-[2-甲基-4-[外消旋-(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]苯基]哌嗪(1.5g，4.79mmol，28.27％产率)，其直接用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值314.2；实测值314.2；Rt＝0.643min。
步骤6：1-异丙基-4-[2-甲基-4-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]哌嗪的合成
将1-异丙基-4-[2-甲基-4-[外消旋-(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]苯基]哌嗪(1.5g，4.79mmol)溶解于甲醇(15mL)中且分批添加硼氢化钠(362.06mg，9.57mmol，337.11μL)。将所得混合物搅拌过夜。将水(20mL)添加到反应混合物中且将所得混合物在真空中浓缩。将残余物用水(30mL)稀释且将所得混合物用DCM(2*50mL)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩，以获得1-异丙基-4-[2-甲基-4-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]哌嗪(0.5g，1.58mmol，33.12％产率)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值316.2；实测值316.2；Rt＝0.670min。
步骤7：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-2-[4-(4-异丙基哌嗪-1-基)-3-甲基苯基]-5-甲基-1-哌啶基]乙酰胺(化合物7234)的合成
将1-异丙基-4-[2-甲基-4-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]哌嗪(150mg，475.44μmol)溶解于DMF(2mL)中且添加三乙胺(481.10mg，4.75mmol，662.67μL)，随后添加2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(99.46mg，475.44μmol)。然后，逐滴添加HATU(271.17mg，713.17μmol)且将反应混合物搅拌过夜。次日，将其在真空中蒸发且通过HPLC(2-10min 0-65％水/MeOH+NH3 30mL/min；装载泵4mL/min MeOH；柱SunFire 19*100mm)纯化，以获得N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-2-[4-(4-异丙基哌嗪-1-基)-3-甲基苯基]-5-甲基-1-哌啶基]乙酰胺(22.3mg，44.01μmol，9.26％产率)。
1H NMR(600MHz,dmso)δ0.98-1.01(m,9H),1.07-1.14(m,3H),1.26-1.37(m,1H),1.62-1.73(m,1H),1.80-1.93(m,1H),1.96-2.11(m,1H),2.12-2.20(m,1H),2.21-2.25(m,3H),2.37-2.43(m,2H),2.53-2.58(m,4H),2.65-2.70(m,1H),2.72-2.77(m,0.3H),2.78-2.85(m,4H),3.18-3.23(m,0.7H),3.43-4.01(m,1H),5.03-5.54(m,1H),5.55-5.67(m,2H),6.95-7.02(m,1H),7.05-7.16(m,2H),7.44-7.53(m,1H),7.98-8.10(m,1H),10.39-10.64(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值507.2；实测值507.4；Rt＝0.838min。
实施例291.N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-2-[4-(4-乙基哌嗪-1-基)-3-甲基苯基]-5-甲基-1-哌啶基]乙酰胺(化合物1376)的合成
步骤1：1-乙基-4-(2-甲基-4-硝基苯基)哌嗪的合成
在Ar下，将1-乙基哌嗪(2.5g，21.89mmol，2.78mL)、1-氟-2-甲基-4-硝基苯(4.75g，30.65mmol)、碳酸钾(9.08g，65.68mmol，3.96mL)混合于DMF(25mL)中。将反应混合物在130℃下搅拌过夜。在冷却至室温之后，将反应混合物用水稀释，用EA萃取。将有机相在真空中蒸发，得到1-乙基-4-(2-甲基-4-硝基苯基)哌嗪(5g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值250.2；实测值250.2；Rt＝0.761min。
步骤2：4-(4-乙基哌嗪-1-基)-3-甲基苯胺的合成
在H2气氛下，将1-乙基-4-(2-甲基-4-硝基苯基)哌嗪(5g，20.06mmol)和Pd/C(2.13g，20.06mmol)于甲醇中的混合物在25℃下搅拌16h。过滤混合物且蒸发滤液。将残余物在己烷中结晶，以得到4-(4-乙基哌嗪-1-基)-3-甲基苯胺(2.9g，13.22mmol，65.93％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值220.2；实测值220.4；Rt＝0.511min。
步骤3：1-乙基-4-[2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]哌嗪的合成
在圆底烧瓶中称量4-(4-乙基哌嗪-1-基)-3-甲基苯胺(2.8g，12.77mmol)和双(频哪醇)二硼(3.89g，15.32mmol)。然后连续添加MeCN(28mL)和亚硝酸叔丁酯(1.97g，19.15mmol，2.28mL)。将所得反应溶液在80℃下搅拌12h(N2逸出在5至15min内完成)。然后将溶液在减压下浓缩，且通过快速色谱纯化粗残余物，以获得1-乙基-4-[2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]哌嗪(7g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值331.2；实测值331.2；Rt＝1.005min。
步骤4：外消旋-(3S)-6-[4-(4-乙基哌嗪-1-基)-3-甲基苯基]-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将1-乙基-4-[2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]哌嗪(6.8g，20.59mmol)、外消旋-(3S)-3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(7.11g，20.59mmol)和碳酸钠(4.36g，41.18mmol，1.72mL)一起混合于二噁烷(60mL)和水(20mL)的混合物中。将所得混合物用氩气吹扫10min且向其中添加Pd(dppf)Cl2 DCM(840.69mg，1.03mmol)。将所得混合物在90℃下加热过夜。将所得混合物冷却且用水(5mL)稀释。将所得混合物用EtOAc(2*15mL)萃取且将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值400.2；实测值400.2；Rt＝1.270min。
步骤5：1-乙基-4-[2-甲基-4-[外消旋-(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]苯基]哌嗪的合成
将三氟乙酸(23.97g，210.23mmol，16.20mL)一次性添加到外消旋-(3S)-6-[4-(4-乙基哌嗪-1-基)-3-甲基苯基]-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(7g，17.52mmol)于DCM(20mL)中的搅拌溶液中。将所得溶液在25℃下搅拌1h，然后在真空中浓缩。用水(100mL)稀释残余物。将产物的TFA盐的所得溶液自深棕色油状残余物倾析，将其另外用水(2*25mL)冲洗。通过脱脂棉垫过滤合并的水溶液，以移除痕量油状杂质，然后用10％氢氧化钠水溶液碱化至pH 11-12且用二氯甲烷(2*50mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中浓缩，以得到呈淡黄色胶状物的1-乙基-4-[2-甲基-4-[外消旋-(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]苯基]哌嗪(1.2g，4.01mmol，22.87％产率)，其直接用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值300.2；实测值300.4；Rt＝0.682min。
步骤6：1-乙基-4-[2-甲基-4-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]哌嗪的合成
将1-乙基-4-[2-甲基-4-[外消旋-(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]苯基]哌嗪(1.2g，4.01mmol)溶解于甲醇(12mL)中且分批添加硼氢化钠(303.19mg，8.01mmol，282.30μL)。将所得混合物搅拌过夜。将水(20mL)添加到反应混合物中且将所得混合物在真空中浓缩。将残余物用水(30mL)稀释且将所得混合物用DCM(2*50mL)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩，以获得1-乙基-4-[2-甲基-4-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]哌嗪(0.5g，1.66mmol，41.39％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值302.2；实测值302.2；Rt＝0.643min。
步骤7：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-2-[4-(4-乙基哌嗪-1-基)-3-甲基苯基]-5-甲基-1-哌啶基]乙酰胺(化合物1376)的合成
将1-乙基-4-[2-甲基-4-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]哌嗪(150mg，497.56μmol)溶解于DMF(1.38mL)中且添加三乙胺(503.49mg，4.98mmol，693.51μL)，随后添加2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(104.09mg，497.56μmol)。然后，逐滴添加HATU(283.78mg，746.35μmol)且将反应混合物搅拌过夜。次日，将其在真空中蒸发且通过HPLC(2-10min 0-55％水/ACN+fa 30ml/min；装载泵4ml/min ACN；柱SunFire 19*100mm)纯化，以获得N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-2-[4-(4-乙基哌嗪-1-基)-3-甲基苯基]-5-甲基-1-哌啶基]乙酰胺(7.9mg，16.04μmol，3.22％产率)。
1H NMR(600MHz,dmso)δ0.97-1.04(m,6H),1.07-1.14(m,3H),1.25-1.36(m,1H),1.63-1.75(m,1H),1.79-1.91(m,1H),1.93-2.07(m,1H),2.12-2.18(m,1H),2.21-2.27(m,3H),2.35-2.41(m,5H),2.73-3.06(m,8H),3.95-4.21(m,1H),5.01-5.55(m,1H),5.55-5.68(m,2H),6.95-7.16(m,3H),7.43-7.57(m,1H),7.98-8.09(m,1H),10.43-10.55(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值494.2；实测值494.4；Rt＝0.881min。
实施例292.N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-甲基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1390)的合成
步骤1：1-甲基-4-[2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]哌嗪的合成
在圆底烧瓶中称量3-甲基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯胺(4.5g，21.92mmol)和双(频哪醇)二硼(6.12g，24.11mmol)。然后连续添加MeCN(120mL)和亚硝酸叔丁酯(3.39g，32.88mmol，3.91mL)。将所得反应溶液在80℃下搅拌12h(N2逸出在5至15min内完成)。然后将溶液在减压下浓缩，且通过快速色谱纯化粗残余物，以获得1-甲基-4-[2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]哌嗪(1.5g，4.74mmol，21.64％产率)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值317.2；实测值317.2；Rt＝0.893min。
步骤2：(3S)-3-甲基-6-[3-甲基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将1-甲基-4-[2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]哌嗪(1.35g，4.27mmol)、(3S)-3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.41g，4.27mmol)和碳酸钠(678.68mg，6.40mmol，268.04μL)一起混合于二噁烷(15mL)中且添加H2O(5mL)。将所得混合物抽真空且用氩气回填三次。将Pd(dppf)Cl2 DCM(174.30mg，213.44μmol)添加到前一混合物中且将所得混合物在90℃下加热12h。将反应混合物冷却且用水(15mL)稀释。将所得混合物过滤且用水(10mL)和EtOAc(20mL)冲洗。将滤液转移至分液漏斗且分离有机层。将水层用EtOAc(2*20mL)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥且蒸发，以获得粗品(3S)-3-甲基-6-[3-甲基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(0.75g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值386.2；实测值386.2；Rt＝1.055min。
步骤3：1-甲基-4-[2-甲基-4-[(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]苯基]哌嗪的合成
将(3S)-3-甲基-6-[3-甲基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(0.75g，1.95mmol)溶解于DCM(3mL)中且向其中添加TFA(3mL)。搅拌所得混合物1h。将反应混合物倒入到K2CO3水溶液中且将所得混合物用DCM萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且蒸发，以获得1-甲基-4-[2-甲基-4-[(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]苯基]哌嗪(0.6g，粗品)，其不经进一步纯化即用于下一步骤中。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值286.2；实测值286.2；Rt＝0.787min。
步骤4：1-甲基-4-[2-甲基-4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]哌嗪的合成
将1-甲基-4-[2-甲基-4-[(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]苯基]哌嗪(0.6g，2.10mmol)溶解于甲醇(10mL)中且逐滴添加硼氢化钠(159.05mg，4.20mmol，148.09μL)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物蒸发至干。将残余物溶解于DCM(10mL)中且将所得混合物用柠檬酸溶液(2*10mL)萃取。将合并的水层用DCM(3*10mL)洗涤，然后用K2CO3碱化。将所得混合物用DCM(2*15mL)萃取且将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且蒸发，以获得1-甲基-4-[2-甲基-4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]哌嗪(0.2g，695.79μmol，33.10％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值288.2；实测值288.2；Rt＝0.713min。
步骤5：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-甲基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1390)的合成
将1-甲基-4-[2-甲基-4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]哌嗪(270mg，939.32μmol)溶解于DMF(5mL)中且添加三乙胺(950.50mg，9.39mmol，1.31mL)，随后添加2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(196.51mg，939.32μmol)。然后逐滴添加HATU(535.74mg，1.41mmol)且将反应混合物搅拌过夜。次日，将其在真空中蒸发且通过HPLC(2-10min 0-30％乙腈+fa 30min(装载泵4mL/min乙腈)，柱：SunFire 100*19mm，5微米)纯化，以获得N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-甲基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(12.6mg，26.33μmol，2.80％产率)和N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-甲基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(10mg，20.89μmol，2.22％产率)
1H NMR(600MHz,dmso)δ1.00(t,3H),1.06-1.13(m,3H),1.26-1.36(m,1H),1.63-1.73(m,1H),1.79-1.92(m,1H),1.93-2.09(m,1H),2.11-2.19(m,1H),2.20-2.25(m,7H),2.31-2.36(m,1H),2.38-2.42(m,2H),2.72-3.22(m,7H),3.40-4.00(m,1H),5.03-5.53(m,1H),5.58-5.68(m,2H),6.97-7.02(m,1H),7.03-7.07(m,1H),7.08-7.14(m,1H),7.42-7.53(m,1H),7.96-8.09(m,1H),10.41-10.55(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值480.2；实测值480.2；Rt＝0.741min。
方案C.式3化合物的合成
式3、3a、3b、3c和3d化合物为式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)化合物，其中R1为NH2且R2、R3、R4、R6、R7和R8如本文所述。
一般程序3
注意，分离步骤为任选的，且在某些情况下用于分离顺式/反式非对映异构体，且在某些情况下分离不同的对映异构体，如详细程序中所述。在某些情况下，起始哌啶呈限定顺式或反式构型，在那些情况下，手性分离步骤仅得到所描绘的四种对映异构体中的两者。
如方案C中所示，式(3a)、(3b)、(3c)和(3d)化合物可自式(3-1)化合物的混合物分离，其中R1、R2、R3、R4、R6、R7、R8和n如本文所述。手性分离方法为本领域普通技术人员已知的。例如，在一些实施方案中，可通过使用手性HPLC纯化(柱：AD-H III(250*20mm，5μm)完成手性分离。示例性洗脱液包括但不限于己烷、IPA、MeOH、MeCN和H2O及其混合物。
替代地，式(3a)、(3b)、(3c)和(3d)可由中间体(3a-1)、(3b-1)、(3c-1)和(3d-1)制备。在一些实施方案中，可在手性分离之前或之后进行脱保护。用于移除保护基-PG(例如，-Boc)的条件可采用例如酸性条件(例如，水/二噁烷、于质子性溶剂(例如，甲醇)中的盐酸、于非质子性溶剂(例如，二噁烷)中的盐酸、于非质子性溶剂(例如，二氯甲烷、氯仿等)中的TFA)。在一些实施方案中，脱保护步骤采用于二噁烷中的HCl(4.0M)。在一些实施方案中，脱保护步骤采用于DCM中的HCl(4.0M)。
在一些实施方案中，本公开的化合物可通过包含酰胺键偶联的方法来制备。在一些实施方案中，酰胺键偶联采用哌啶和羧酸。已知促进酰胺键偶联的条件的实例包括但不限于：添加偶联剂(诸如CDI、HATU、HOBT、HBTU或PyBOP)、碱(诸如氢化物碱(例如NaH或KH)、胺碱(诸如DBU、NEt3和NEt(iPr)2)或碳酸盐碱(例如，Na2CO3、K2CO3或Cs2CO3))；以及在一个实施方案中在0℃至室温下或在另一个实施方案中在70℃或更高温度下(例如在70℃至110℃范围内或在70℃至80℃范围内的温度下、或在80℃下)搅拌反应物。可在诸如但不限于DMF和MTBE的溶剂中进行反应。在一些实施方案中，反应包含HATU、Et3N和DMF。在一些实施方案中，反应包含采用HATU、Et3N和MeCN。在一些实施方案中，反应包含TATU、Et3N和DMF。在一些实施方案中，反应包含HATU、DIPEA和DMSO。在一些实施方案中，反应包含HATU、DIPEA和DMF。在一些实施方案中，反应包含HATU、TEA和DMSO。
实施例293.外消旋-N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物235)的合成
将三乙胺(1.41g，13.95mmol，1.94mL)添加到来自中间体合成2A的5-甲基-2-(2-甲基吡唑-3-基)哌啶(250mg，1.39mmol)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(411.82mg，1.39mmol)和HATU(583.30mg，1.53mmol)于DMF(5mL)中的搅拌混合物中。将所得混合物在25℃下搅拌2h，然后在真空中蒸发。将残余物溶解于DCM(4mL)中且添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(4.20g，16.01mmol，5.25mL，13.9％纯度)。将所得悬浮液在25℃下搅拌18h，然后在真空中蒸发且通过反相HPLC(柱：XBridge C18 100x20mm，5um)使用20-40％0-5min 0.1％ NH3-甲醇纯化残余物，以得到呈白色固体的化合物235N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-甲基吡唑-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(201mg，563.94μmol，40.44％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.96-1.05(m,3H),1.35-1.46(m,1H),1.82-1.91(m,1H),1.93-2.00(m,1H),2.01-2.14(m,5H),3.16-3.29(m,1H),3.43-3.54(m,1H),3.70-3.80(m,3H),5.40-5.66(m,2H),5.66-5.79(m,1H),6.38-6.54(m,1H),7.30-7.40(m,1H),7.47(s,1H),7.91-8.23(m,1H),10.34-10.54(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]m/z：计算值356.4；实测值357.2；Rt＝1.889min。
实施例294.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(噻吩-2-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物122、化合物115)的合成
步骤1：(3-甲基-5-(2-(5-甲基-2-(噻吩-2-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
将DIPEA(461.13mg，3.57mmol，621.47μL)添加到2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(421.43mg，1.43mmol)和5-甲基-2-(2-噻吩基)哌啶(258.74mg，1.43mmol)于DMF(10mL)中的溶液。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU(569.78mg，1.50mmol)于DMF中的溶液。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在减压下浓缩所得悬浮液且使其经历HPLC(柱SunFire 100*20mm 5um，以MeCN+NH3为洗脱液混合物)，以得到纯的N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-(2-噻吩基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.27g，588.78μmol，41.26％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.08(d,3H),1.48(s,9H),2.04(m,3H),2.28(s,3H),2.62(m,1H),3.48(m,2H),4.72(m,2H),6.65(m,1H),6.96(m,2H),7.22(m,1H),8.02(m,1H),8.32(m,1H),9.31(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值458.4；实测值459.2；Rt＝3.715min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(噻吩-2-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺的合成
将N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-(2-噻吩基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(279.14mg，608.71μmol)溶解于二噁烷(2mL)和水(5mL)中。然后，将所得混合物在100℃下搅拌过夜。此后，将溶液在真空中蒸发，以得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[5-甲基-2-(2-噻吩基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(87mg，242.71μmol，39.87％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.11(d,3H),1.46(m,1H),2.18(m,3H),2.32(m,2H),3.48(s,3H),3.88(m,1H),4.51(m,2H),5.55(m,1H),6.99(m,2H),7.22(m,1H),7.72(m,1H),8.09(m,1H),9.07(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值358.4；实测值359.2；Rt＝2.688min。
步骤3：手性分离(化合物122和化合物115)
在系统Hex-IPA-MeOH，75-15-15，12mL/min中在手性柱上进行纯化。注入次数：1，注入体积：900mkl。自87mg外消旋物获得17.8mg和22.7mg个别对映异构体。
rel-N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-((2S,5R)-5-甲基-2-(噻吩-2-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺化合物122：
保留时间：23.37min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98(m,3H),1.40(m,1H),1.83(m,2H),1.95(m,1H),2.01(m,3H),2.09(m,1H),2.86(m,1H),3.82(m,1H),5.67(m,3H),7.01(m,2H),7.48(m,2H),8.00(s,1H),10.48(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值358.4；实测值359.2；Rt＝2.275min。
rel-N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(噻吩-2-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺化合物115：
保留时间：18.58min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98(m,3H),1.40(t,1H),1.91(m,3H),2.01(m,3H),2.11(m,1H),2.85(m,1H),3.72(m,1H),5.51(m,1H),5.71(m,2H),7.01(m,2H),7.48(m,2H),8.00(m,1H),10.48(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值358.4；实测值359.2；Rt＝2.278min。
实施例295.2-(2-(3-(1-乙酰基哌啶-4-基)苯基)哌啶-1-基)-N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺(化合物95、化合物94、化合物96)的合成
步骤1：(5-(2-(2-(3-(1-乙酰基哌啶-4-基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-3-甲基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
向1-[4-[3-(2-哌啶基)苯基]-1-哌啶基]乙酮(161.65mg，564.42μmol)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(0.2g，677.30μmol)和HATU(257.53mg，677.30μmol)于DMF(3mL)中的悬浮液中添加三乙胺(171.34mg，1.69mmol，236.01μL)。将所得混合物在25℃下搅拌3h。将所得混合物蒸发至干，以获得N-[5-[[2-[2-[3-(1-乙酰基-4-哌啶基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.7g，粗品)。其不经纯化即用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值563.6；实测值564.2；Rt＝1.371min。
步骤2：2-(2-(3-(1-乙酰基哌啶-4-基)苯基)哌啶-1-基)-N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺(化合物95)的合成
将N-[5-[[2-[2-[3-(1-乙酰基-4-哌啶基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.3g，532.21μmol)溶解于于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(3.20g，87.77mmol，4mL)中且在25℃下搅拌12h。将溶剂蒸发且在真空中干燥残余物，以获得粗产物(0.7g)。此化合物通过HPLC(LC 09 40-40-60％0-1-6min 0.1％ NH3-甲醇，流速：30ml/min(装载泵4ml/min甲醇)，目标质量463，柱：YMC Triart C18 100x20 mm，5um)、第二HPLC(LC 11 50-50-60％0-1-5min水-乙腈，流速：30ml/min(装载泵4ml/min乙腈)，目标质量463柱：SunFire C18 100x19 mm，5um)纯化，以获得2-[2-[3-(1-乙酰基-4-哌啶基)苯基]-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(61mg，131.59μmol，24.72％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.67(m,6H),1.84(m,2H),1.97(m,1H),2.11(m,6H),2.52(m,2H),2.93(m,3H),4.14(m,3H),4.84(m,2H),6.15(m,1H),7.08(m,3H),7.31(m,1H),7.74(m,1H),8.06(m,1H),9.08(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值463.6；实测值464.2；Rt＝2.592min。
步骤3：手性分离(化合物94和化合物96)
在系统Hex-IPA-MeOH，60-20-20，0.6mL/min中在手性柱上进行纯化。注入次数：1，注入体积：1mkl。自53mg外消旋物获得16mg和18mg个别对映异构体。
rel-(R)-2-(2-(3-(1-乙酰基哌啶-4-基)苯基)哌啶-1-基)-N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺峰1(化合物94)：
保留时间：18.09min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.42(m,2H),1.59(m,4H),1.79(m,3H),2.01(m,6H),2.62(m,2H),3.03(m,2H),3.65(m,2H),4.30(m,2H),5.61(m,3H),7.16(m,3H),7.31(m,1H),7.48(m,1H),8.00(m,1H),10.53(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值463.6；实测值464.2；Rt＝3.543min。
rel-(R)-2-(2-(3-(1-乙酰基哌啶-4-基)苯基)哌啶-1-基)-N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺峰2(化合物96)：
保留时间：23.84min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.42(m,2H),1.59(m,4H),1.79(m,3H),2.01(m,6H),2.66(m,2H),3.03(m,2H),3.73(m,2H),4.31(m,2H),5.60(m,3H),7.13(m,2H),7.17(m,1H),7.31(m,1H),7.52(m,1H),8.04(m,1H),10.53(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值463.6；实测值464.2；Rt＝3.544min。
实施例296.2-(2-(3-(1-乙酰基哌啶-4-基)苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺(化合物324、化合物331)的合成
步骤1：(5-(2-(2-(3-(1-乙酰基哌啶-4-基)苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-3-甲基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
向1-[4-[3-(5-甲基-2-哌啶基)苯基]-1-哌啶基]乙酮(0.4g，1.33mmol)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(393.15mg，1.33mmol)和HATU(556.86mg，1.46mmol)于DMF(5mL)中的悬浮液中添加三乙胺(673.62mg，6.66mmol，927.85μL)。将所得混合物在25℃下搅拌24h，溶解于水(50ml)中且用EtOAc(3*20ml)萃取。将合并的有机层用盐水(3*20ml)洗涤，经Na2SO4干燥且蒸发，以获得N-[5-[[2-[2-[3-(1-乙酰基-4-哌啶基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.7g，粗品)。此化合物不经纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99(m,3H),1.40(s,9H),1.73(m,3H),1.98(m,5H),2.16(m,3H),2.65(m,5H),3.07(m,1H),3.86(m,1H),4.50(m,1H),5.35(m,1H),7.14(m,3H),7.23(m,2H),7.91(m,3H),8.39(m,1H),9.04(m,1H),11.03(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值577.6；实测值578.2；Rt＝1.396min。
步骤2：2-(2-(3-(1-乙酰基哌啶-4-基)苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺的合成
向N-[5-[[2-[2-[3-(1-乙酰基-4-哌啶基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.7g，1.21mmol)于DCM(10mL)中的溶液中添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(8.00g，219.41mmol，10mL)。将所得混合物在25℃下搅拌12h且在真空中蒸发且使其经历HPLC：50-55％0-5min 0.1％ NH3-甲醇，流速：30ml/min(装载泵4ml/min甲醇)，目标质量478，柱：YMC Triart C18100x20mm,5um)，以得到2-[2-[3-(1-乙酰基-4-哌啶基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(200mg，418.76μmol，34.56％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.02(m,3H),1.32(m,3H),1.78(m,7H),2.02(m,4H),2.12(m,1H),2.55(m,1H),2.74(m,1H),3.16(m,2H),3.43(m,1H),3.89(m,1H),4.51(m,1H),5.63(m,3H),7.16(m,3H),7.32(m,1H),7.51(m,1H),8.02(m,1H),10.54(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值477.6；实测值478.2；Rt＝2.475min。
步骤3：手性分离(化合物324和化合物331)
在系统Hex-IPA-MeOH，50-25-25，10mL/min中在手性柱上进行纯化。注入次数：1，注入体积：500mkl。自200mg外消旋物获得63mg和60mg个别对映异构体。
rel-2-((2R,5S)-2-(3-(1-乙酰基哌啶-4-基)苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺峰2(化合物324)：
保留时间：36.18min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.00(m,3H),1.31(m,1H),1.42(m,1H),1.58(m,2H),1.74(m,2H),1.86(m,1H),2.00(m,6H),2.05(m,1H),2.19(m,1H),2.54(m,1H),2.81(m,2H),3.17(m,1H),3.83(m,2H),4.50(m,1H),5.33(m,1H),5.60(m,2H),7.13(m,3H),7.30(m,1H),7.46(m,1H),7.98(m,1H),10.50(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值477.6；实测值478.2；Rt＝2.441min。
rel-2-((2R,5S)-2-(3-(1-乙酰基哌啶-4-基)苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺峰1(化合物331)：
保留时间：22.94min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.00(m,3H),1.31(m,1H),1.42(m,1H),1.58(m,2H),1.75(m,2H),1.85(m,1H),2.00(m,6H),2.07(m,1H),2.20(m,1H),2.54(m,1H),2.85(m,2H),3.17(m,1H),3.83(m,2H),4.50(m,1H),5.33(m,1H),5.60(m,2H),7.12(m,2H),7.17(m,1H),7.30(m,1H),7.46(m,1H),7.98(m,1H),10.50(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值477.6；实测值478.2；Rt＝2.445min。
实施例297.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-(2-苯基-1-哌啶基)乙酰胺(化合物53)、N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2R)-2-苯基-1-哌啶基]乙酰胺(化合物55)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2S)-2-苯基-1-哌啶基]乙酰胺(化合物51)的合成
步骤1：N-[3-甲基-5-[[2-氧代-2-(2-苯基-1-哌啶基)乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸酯的合成
在-78℃、Ar下，向2-苯基哌啶(345.82mg，1.75mmol，HCl)于THF(15mL)中的溶液中逐滴添加丁基锂(481.83mg，7.52mmol，3mL)。将反应混合物在-78℃下搅拌20min，然后分批添加2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(0.66g，1.75mmol)。将所得溶液在-78℃下搅拌30min且在室温下搅拌1h。将所得溶液冷却至-50℃且用饱和NH4Cl(水溶液)(40ml)淬灭。分离有机层且将水层用EtOAc(20mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥且浓缩至干，以得到N-[3-甲基-5-[[2-氧代-2-(2-苯基-1-哌啶基)乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.67g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值438.2；实测值439.2；Rt＝1.352min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-(2-苯基-1-哌啶基)乙酰胺(化合物53)的合成
将于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(800.00mg，21.94mmol，1mL)添加到N-[3-甲基-5-[[2-氧代-2-(2-苯基-1-哌啶基)乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.67g，1.53mmol)于DCM(10mL)中的溶液中。将反应混合物在25℃下搅拌8h，然后在真空中蒸发且通过制备型(45-70％0-9.5min水-甲醇，流速30ml/min)纯化0.5g所获得的粗产物，以得到产物N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-(2-苯基-1-哌啶基)乙酰胺(16.30mg，43.48μmol，2.85％产率，HCl)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.58(m,3H),1.99(m,3H),2.11(m,3H),2.47(m,1H),2.98(m,1H),4.64(m,3H),6.19(m,1H),7.26(m,3H),7.35(m,2H),7.74(m,1H),8.05(m,1H),9.12(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值338.2；实测值339.2；Rt＝0.922min。
步骤3：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2R)-2-苯基-1-哌啶基]乙酰胺(化合物55)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2S)-2-苯基-1-哌啶基]乙酰胺(化合物51)的合成
通过手性HPLC(柱：OJ-H(250*20，5mkm)，以己烷-IPA-MeOH，50-25-25％，15ml/min为流动相)分离对映异构体，以得到两种个别对映异构体化合物55N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2R)-2-苯基-1-哌啶基]乙酰胺(0.0027g，7.20μmol，16.56％产率，HCl；RT＝34.348min)和化合物51N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2S)-2-苯基-1-哌啶基]乙酰胺(0.0026g，6.94μmol，15.95％产率，HCl；RT＝15.833min)。
化合物51：RT(OJ-H，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min)＝15.411min。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值338.2；实测值339.2；Rt＝1.048min。
化合物55：RT(OJ-H，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min)＝41.216min。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值338.2；实测值339.2；Rt＝1.043min。
实施例298.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-(5-甲基-2-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物27)、N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-苯基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物33)、N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物37)、N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物43)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物40)的合成
步骤1：N-[3-甲基-5-[[2-(5-甲基-2-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
在-78℃、Ar下，向5-甲基-2-苯基哌啶(222.97mg，1.27mmol)于THF(15mL)中的溶液中逐滴添加丁基锂(268.91mg，4.20mmol，2.4mL)。将反应混合物在-78℃下搅拌20min，然后分批添加2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(0.48g，1.27mmol)。将所得溶液在-78℃下搅拌30min且在室温下搅拌1h。将所得溶液冷却至-50℃且用饱和NH4Cl(水溶液)(30ml)淬灭。分离有机层且将水层用EtOAc(20mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥且浓缩至干，以得到N-[3-甲基-5-[[2-(5-甲基-2-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.54g，粗品)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.87(d,3H),1.16(m,4H),1.48(s,9H),1.62(m,2H),1.82(m,2H),2.27(m,2H),3.72(m,2H),6.68(m,1H),7.19(m,5H),8.04(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值452.2；实测值453.2；Rt＝1.419min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-(5-甲基-2-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物27)的合成
将于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(800.00mg，21.94mmol，1mL)添加到N-[3-甲基-5-[[2-(5-甲基-2-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.54g，1.19mmol)于DCM(10mL)中的溶液中。将反应混合物在25℃下搅拌6h，然后在真空中蒸发且通过制备型(50-75％0-10.5min水-甲醇，流速30ml/min)纯化0.4g所获得的粗产物，以得到产物N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-(5-甲基-2-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰胺(0.0167g，42.94μmol，3.60％产率，HCl)1H NMR(400MHz,CD3OD)δ0.85(m,2H),1.13(m,3H),1.35(m,1H),1.64(m,1H),1.87(m,2H),2.13(m,3H),2.26(m,1H),3.60(m,1H),5.62(m,1H),7.26(m,1H),7.37(m,4H),7.57(m,1H),8.02(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值352.2；实测值353.4；Rt＝2.499min。
步骤3：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-苯基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物33)、N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物37)、N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物43)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物40)的合成
使用(OJ-H Chiralpak柱，己烷-IPA-MeOH为溶剂混合物，70-15-15，流速15ml/min)进行N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-苯基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(22.0mg，62.42μmol)的手性分离，得到呈黄色固体的化合物33N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-苯基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(7.8mg，22.13μmol，35.45％产率；RT＝22.466min)、化合物37N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(3.4mg，9.65μmol，15.45％产率；RT＝17.308min)、化合物43N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(2.7mg，7.66μmol，12.27％产率；RT＝42.900min)和化合物40N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(7.8mg，22.13μmol，35.45％产率；RT＝49.446min)。
化合物33：RT(OJ-H，己烷-IPA-MeOH，70-15-15，0.6ml/min)＝23.187min。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ1.11(d,3H),1.41(m,1H),1.90(m,2H),2.15(m,3H),2.23(m,2H),3.26(m,1H),4.62(m,3H),5.82(m,1H),7.30(m,3H),7.38(m,2H),7.76(s,1H),8.04(m,1H),9.08(s,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值352.2；实测值353.0；Rt＝3.821min。
化合物37：RT(OJ-H，己烷-IPA-MeOH，70-15-15，0.6ml/min)＝16.722min。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ0.86(m,3H),1.32(m,1H),1.44(m,1H),1.72(m,2H),1.86(m,1H),2.03(m,1H),2.15(m,3H),2.56(m,2H),4.65(m,2H),6.25(m,1H),7.30(m,2H),7.39(m,2H),7.78(m,1H),8.07(m,1H),9.03(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值352.2；实测值353.0；Rt＝3.789min。
化合物43：RT(OJ-H，己烷-IPA-MeOH，70-15-15，0.6ml/min)＝47.178min。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ0.86(m,3H),1.31(m,1H),1.46(m,1H),1.73(m,2H),1.87(m,1H),2.03(m,1H),2.15(m,3H),2.53(m,2H),4.66(m,2H),6.24(m,1H),7.30(m,2H),7.39(m,2H),7.78(m,1H),8.07(m,1H),9.04(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值352.2；实测值353.0；Rt＝3.792min。
化合物40：RT(OJ-H，己烷-IPA-MeOH，70-15-15，0.6ml/min)＝57.061min。1H NMR(500MHz,CDCl3))δ1.11(d,3H),1.41(m,1H),1.92(m,2H),2.15(m,3H),2.26(m,2H),3.32(m,1H),4.73(m,3H),6.17(m,1H),7.30(m,3H),7.38(m,2H),7.76(s,1H),8.07(m,1H),9.08(s,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值352.2；实测值353.0；Rt＝3.710min。
实施例299.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[2-(4-吡啶基)-1-哌啶基]乙酰胺(化合物36)、N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2R)-2-(4-吡啶基)-1-哌啶基]乙酰胺(化合物50)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2S)-2-(4-吡啶基)-1-哌啶基]乙酰胺(化合物47)的合成
步骤1：N-[3-甲基-5-[[2-氧代-2-[2-(4-吡啶基)-1-哌啶基]乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
在-78℃、Ar下，向4-(2-哌啶基)吡啶(300.97mg，1.86mmol)于THF(19mL)中的溶液中逐滴添加丁基锂(392.19mg，6.12mmol，2.45mL)。将反应混合物在-78℃下搅拌20min，然后分批添加2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(0.7g，1.86mmol)。将所得溶液在-78℃下搅拌30min且在室温下搅拌1h。将所得溶液冷却至-50℃且用饱和NH4Cl(水溶液)(30ml)淬灭。分离有机层且将水层用EtOAc(20mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥且浓缩至干燥，以得到N-[3-甲基-5-[[2-氧代-2-[2-(4-吡啶基)-1-哌啶基]乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.48g，1.09mmol，58.87％产率)。1H NMR(500MHz,DCMSO-d6)δ0.87(m,3H),1.44(s,9H),2.08(m,2H),2.31(m,4H),2.60(m,2H),3.71(m,2H),6.75(d,1H),7.22(d,1H),7.99(d,1H),8.05(s,1H),8.33(d,1H),8.62(s,1H),9.45(m,1H)。LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值339.2；实测值340.2；Rt＝1.033min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[2-(4-吡啶基)-1-哌啶基]乙酰胺(化合物36)的合成
将于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(640.00mg，17.55mmol，0.8mL)添加到N-[3-甲基-5-[[2-氧代-2-[2-(4-吡啶基)-1-哌啶基]乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.48g，1.09mmol)于DCM(5mL)中的溶液中。将反应混合物在25℃下搅拌1h，然后在真空中蒸发且通过制备型(20-70％甲醇-NH3，流速30ml/min)纯化0.32g所获得的粗产物，以得到产物N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[2-(4-吡啶基)-1-哌啶基]乙酰胺(0.037g，109.02μmol，9.98％产率)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ1.45(m,2H),1.65(m,2H),1.73(m,1H),1.96(m,1H),2.07(m,3H),2.45(m,1H),4.12(m,1H),5.24(m,2H),5.55(m,1H),7.30(m,2H),7.55(m,1H),8.03(m,1H),8.53(m,2H),10.41(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值339.2；实测值340.2；Rt＝0.522min。
步骤3：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2R)-2-(4-吡啶基)-1-哌啶基]乙酰胺(化合物50)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2S)-2-(4-吡啶基)-1-哌啶基]乙酰胺(化合物47)的合成
通过手性HPLC(柱：OJ-H(250*20，5mkm)，以己烷-IPA-MeOH，50-25-25％，15ml/min为流动相)分离对映异构体，以得到两种个别对映异构体化合物50N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2R)-2-(4-吡啶基)-1-哌啶基]乙酰胺(0.0125g，36.83μmol，31.25％产率；RT＝27.483min)和化合物47N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2S)-2-(4-吡啶基)-1-哌啶基]乙酰胺(0.0108g，31.82μmol，27.00％产率；RT＝14.224min)。
化合物47：RT(OJ-H，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min)＝15.367min。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ1.53(m,1H),1.86(m,1H),2.04(m,2H),2.17(m,3H),2.46(m,1H),2.71(m,1H),3.05(m,1H),4.79(m,3H),6.26(m,1H),7.22(m,2H),7.77(m,1H),8.14(m,1H),8.62(m,2H),9.14(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值339.2；实测值341.2；Rt＝2.309min。
化合物50：RT(OJ-H，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min)＝39.557min。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ1.54(m,2H),2.04(m,2H),2.20(m,3H),2.48(m,1H),2.71(m,1H),3.05(m,1H),4.81(m,3H),6.26(m,1H),7.22(m,2H),7.76(m,1H),8.13(m,1H),8.62(m,2H),9.13(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值339.2；实测值341.2；Rt＝2.352min。
实施例300.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-(间甲苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物31)、N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R)-2-(间甲苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物57)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S)-2-(间甲苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物54)的合成
步骤1：N-[3-甲基-5-[[2-[2-(间甲苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
在-78℃、Ar下，向2-(间甲苯基)哌啶(315.87mg，1.80mmol)于THF(15mL)中的溶液中逐滴添加丁基锂(380.98mg，5.95mmol，2.4mL)。将反应混合物在-78℃下搅拌20min，然后分批添加2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(0.68g，1.80mmol)。将所得溶液在-78℃下搅拌30min且在室温下搅拌1h。将所得溶液冷却至-50℃且用饱和NH4Cl(水溶液)(30ml)淬灭。分离有机层且将水层用EtOAc(20mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥且浓缩至干，以得到N-[3-甲基-5-[[2-[2-(间甲苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.64g，1.41mmol，78.47％产率)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值452.2；实测值453.2；Rt＝1.449min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-(间甲苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物31)的合成
将于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(800.00mg，21.94mmol，1mL)添加到N-[3-甲基-5-[[2-[2-(间甲苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.64g，1.41mmol)于DCM(5mL)中的溶液中。将反应混合物在25℃下搅拌1h，然后在真空中蒸发且通过制备型(50-100％0-9.5min水-甲醇，流速30ml/min)纯化0.51g所获得的粗产物，以得到产物N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-(间甲苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(54.70mg，140.66μmol，9.95％产率，HCl)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.59(m,3H),1.95(m,2H),2.10(m,3H),2.33(s,3H),2.45(m,1H),3.00(m,1H),4.73(m,3H),6.13(m,1H),7.05(m,3H),7.23(m,1H),7.73(m,1H),8.04(m,1H),9.18(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值352.2；实测值353.2；Rt＝1.013min。
步骤3：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R)-2-(间甲苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物57)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S)-2-(间甲苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物54)的合成
通过手性HPLC(柱：OJ-H(250*20，5mkm)，以己烷-IPA-MeOH，50-25-25，5ml/min为流动相)分离对映异构体，以得到两种个别对映异构体化合物57N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R)-2-(间甲苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.0145g，41.14μmol，94.62％产率；RT＝24.885min)和化合物54N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S)-2-(间甲苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(13.70mg，38.87μmol，89.40％产率；RT＝11.660min)。
化合物54：RT(OJ-H，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min)＝11.352min。1H NMR(氯仿-d,400MHz):δ(ppm)1.62(m,4H),1.96(m,1H),2.11(m,3H),2.34(s,3H),2.45(m,1H),2.94(m,1H),4.60(m,3H),6.17(m,1H),7.05(m,4H),7.75(m,1H),8.05(m,1H),9.08(s,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值352.2；实测值353.0；Rt＝3.847min。
化合物57：RT(OJ-H，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min)＝31.245min。1H NMR(氯仿-d,400MHz):δ(ppm)1.19(d,3H),1.60(m,2H),1.96(m,1H),2.13(m,1H),2.33(s,3H),2.45(m,1H),2.94(m,1H),4.15(m,3H),4.69(m,1H),6.16(m,1H),7.05(m,4H),7.74(m,1H),8.04(m,1H),9.08(s,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值352.2；实测值353.0；Rt＝3.854min。
实施例301.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-(4-甲基噻唑-2-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物49)的合成
步骤1：N-[3-甲基-5-[[2-[2-(4-甲基噻唑-2-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
在-70℃、Ar下，向4-甲基-2-(2-哌啶基)噻唑(217.40mg，1.19mmol)和2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(600.00mg，1.19mmol)于THF(15mL)中的溶液中逐滴添加于己烷中的2.5M正丁基锂溶液(252.12mg，3.94mmol，1.6mL)。将反应混合物在-70℃下搅拌30min且在室温下搅拌1h。将所得溶液冷却至-50℃且用饱和NH4Cl(水溶液)(40ml)淬灭。分离有机层且将水层用EtOAc(20mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥且浓缩至干，以得到N-[3-甲基-5-[[2-[2-(4-甲基噻唑-2-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.5g，粗品)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值459.2；实测值460.2；Rt＝1.318min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-(4-甲基噻唑-2-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物49)的合成
在室温下将于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(141.67mg，544.00μmol，177.09μL，14％纯度)小心添加到N-[3-甲基-5-[[2-[2-(4-甲基噻唑-2-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.5g，54.40μmol)于DCM(20mL)中的溶液中。然后将反应混合物在室温下搅拌12h且在真空中蒸发溶剂，以得到0.5g粗材料。使其经历RP-HPLC(柱：YMC Triart C18 100*20mm，5um；以40-40-65％，0-1-6min 0.1％ NH3-甲醇为流动相)，以得到化合物49N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-(4-甲基噻唑-2-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(8mg，22.26μmol，40.91％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.74(m,2H),1.96(m,3H),2.11(m,3H),2.41(m,3H),2.53(m,1H),3.02(m,1H),4.41(m,2H),4.63(m,1H),6.25(m,1H),6.83(m,1H),7.73(m,1H),8.01(m,1H),9.19(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值359.2；实测值360.2；Rt＝2.128min。
实施例302.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(1S,4S,5R)-4-(2-噻吩基)-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基]乙酰胺(化合物134和化合物137)的合成
步骤1：N-[3-甲基-5-[[2-氧代-2-[(1S,4S,5R)-4-(2-噻吩基)-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基]乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将(1S,4S,5R)-4-(2-噻吩基)-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷(400.00mg，2.07mmol)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(611.03mg，2.07mmol)、HATU(826.13mg，2.17mmol)和三乙胺(1.05g，10.35mmol，1.44mL)于DMF(3mL)中的悬浮液在30℃下搅拌3小时。3小时之后，在真空中浓缩反应混合物且使粗产物经历反相HPLC纯化(洗脱液：1-6min，45％水-乙腈；流速：30mL/min；装载泵：4mL/min，乙腈)，以获得呈白色固体的产物N-[3-甲基-5-[[2-氧代-2-[(1S,4S,5R)-4-(2-噻吩基)-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基]乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(170mg，361.25μmol，17.46％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值470.2；实测值471.2；Rt＝3.682min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(1S,4S,5R)-4-(2-噻吩基)-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基]乙酰胺的合成
将N-[3-甲基-5-[[2-氧代-2-[(1S,4S,5R)-4-(2-噻吩基)-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基]乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(170.00mg，361.25μmol)于水(3mL)和二噁烷(1mL)中的悬浮液在100℃下加热24小时。使粗反应混合物经历反相HPLC纯化(洗脱液：40-40-90％，0-1-5min 0.1％ NH3-甲醇，流速：30mL/min；装载泵：4mL/min，甲醇；柱：YMC Triart C18 100x 20mm，5um)，以获得呈白色固体的产物N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(1S,4S,5R)-4-(2-噻吩基)-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基]乙酰胺(78mg，210.54μmol，58.28％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值370.2；实测值371.2；Rt＝2.184min。
步骤3：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(1S,4S,5R)-4-(2-噻吩基)-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基]乙酰胺和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(1R,4R,5S)-4-(2-噻吩基)-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基]乙酰胺(化合物134和化合物137)的手性分离
使N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(1S,4S,5R)-4-(2-噻吩基)-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基]乙酰胺(40.00mg，107.97μmol)经历手性HPLC纯化(柱：Chiralpak OJ(250x 30mm，20um；流动相：己烷-IPA-MeOH，50-25-25；流速：28mL/min；柱温：24℃；波长：205nm)，以获得呈白色固体的产物N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(1S,4S,5R)-4-(2-噻吩基)-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基]乙酰胺(化合物134，17mg，45.89μmol)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(1R,4R,5S)-4-(2-噻吩基)-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基]乙酰胺(化合物137，16mg，43.19μmol)。
化合物134 1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)1.41(m,5H),1.63(m,2H),2.00(m,4H),3.92(m,1H),5.56(m,3H),6.88(m,3H),7.42(m,2H),8.03(m,1H),10.34(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值370.2；实测值371.0；Rt＝3.685min手性HPLC：Rt＝14.19min(OJ-H，流动相：己烷-IPA-MeOH，50-25-25；流速：0.6mL/min)。
化合物137 1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)1.41(m,5H),1.63(m,2H),2.01(m,4H),3.92(m,1H),5.56(m,3H),6.88(m,3H),7.42(m,2H),8.02(m,1H),10.34(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值370.2；实测值371.0；Rt＝3.689min手性HPLC：Rt＝28.84min(OJ-H，流动相：己烷-IPA-MeOH，50-25-25；流速：0.6mL/min)。
实施例303.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(5,5-二甲基-2-苯基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物56、化合物52和化合物58)的合成
步骤1：(5-(2-(5,5-二甲基-2-苯基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-3-甲基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
向5,5-二甲基-2-苯基哌啶(0.3g，1.58mmol)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(561.58mg，1.90mmol)和HATU(723.12mg，1.90mmol)于DMF(3mL)中的悬浮液中添加三乙胺(481.10mg，4.75mmol，662.68μL)。将所得混合物在25℃下搅拌3h且使其经历HPLC(柱：SunFireC18 100*19 5um且以水-MeCN为流动相)，以获得N-[5-[[2-(5,5-二甲基-2-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.3g，642.99μmol，40.57％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.87(m,3H),1.05(m,3H),1.36(m,2H),1.51(s,9H),1.59(m,2H),2.45(s,3H),2.75(m,1H),4.55(m,1H),5.89(m,1H),6.51(d,1H),7.26(m,3H),7.38(m,2H),8.06(s,1H),8.38(d,1H),9.33(s,1H)。LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值466.6；实测值467.2；Rt＝4.129min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(5,5-二甲基-2-苯基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物56)的合成
将N-[5-[[2-(5,5-二甲基-2-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.3g，642.99μmol)溶解于于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(2.00g，54.85mmol，2.5mL)中且在25℃下搅拌3h。将溶剂蒸发且将残余物在真空中干燥且经历HPLC(柱：YMC Actus Triart C18 100x20 mm，5um且以MeOH为流动相)，以获得N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-(5,5-二甲基-2-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰胺(0.220g，546.02μmol，84.92％产率，HCl)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.78(m,3H),0.97(m,3H),1.33(m,2H),2.03(m,1H),2.18(m,3H),2.30(m,2H),2.77(m,0,5H),3.93(m,0,5H),5.42(m,1H),7.29(m,2H),7.38(m,3H),7.90(m,3H),8.29(m,1H),11.20(m,1H),13.94(m,1H)。LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值366.2；实测值367.2；Rt＝2.915min。
步骤3：手性分离(化合物52和化合物58)
在系统Hex-IPA-MeOH，50-25-25，0.15mL/min中在手性柱上进行纯化。注入次数：1，注入体积：1mkl。自50mg外消旋物获得18mg和15mg个别对映异构体。
化合物52：保留时间：5.22min。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.84(m,3H),1.02(m,3H),1.40(m,2H),2.08(m,1H),2.22(m,3H),2.33(m,1H),2.79(m,1H),3.75(m,1H),5.53(m,1H),7.26(m,2H),7.34(m,3H),7.75(m,2H),7.92(m,1H),8.32(m,1H),11.04(m,1H)。LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值366.2；实测值367.2；Rt＝4.009min。
化合物58：保留时间：8.92min 1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.83(m,3H),1.03(m,3H),1.40(m,2H),2.08(m,3H),2.28(m,2H),2.78(m,1H),3.81(m,1H),5.30(m,2H),5.72(m,1H),7.26(m,2H),7.35(m,3H),7.55(m,1H),8.09(m,1H),10.40(m,1H)。LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值366.2；实测值367.2；Rt＝4.033min。
实施例304.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-(3,5-二甲基-2-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物314、化合物339、化合物343)的合成
步骤1：(5-(2-(3,5-二甲基-2-苯基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-3-甲基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
将2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(779.97mg，2.64mmol)、HATU(1.10g，2.91mmol)和TEA(534.56mg，5.28mmol，736.31μL)一起混合于DMF(8mL)中且向其中添加3,5-二甲基-2-苯基哌啶(500mg，2.64mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌4h。然后，将其用水(30ml)稀释且用乙酸乙酯(2x30 ml)萃取。将有机层用水(3x20 ml)和盐水(30ml)连续洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩，得到N-[5-[[2-(3,5-二甲基-2-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(930mg，1.99mmol，75.46％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.95(d,3H),1.04(d,3H),1.17(m,1H),1.43(s,9H),1.98(m,1H),2.16(s,3H),2.91(m,2H),3.83(m,1H),4.03(m,1H),4.46(m,1H),7.88(m,7H),8.39(m,1H),9.04(m,1H)。LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值466.5；实测值467.2；Rt＝1.490min。
步骤2：手性分离(化合物314、化合物339和化合物343)
将于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(6.25g，17.15mmol，7.82mL，10％纯度)添加到N-[5-[[2-(3,5-二甲基-2-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(800.07mg，1.71mmol)于DCM(5mL)中的溶液中。将所得混合物在25℃下搅拌15h。然后，将其在减压下浓缩且使残余物经历HPLC(柱：YMC Triart C18100x20 mm，5um；40-40-90％0-1-6min 0.1％ NH3-甲醇，流速：30ml/min)，得到167mg异构体混合物。使所获得的外消旋物经历手性HPLC(柱：OD-H(250*30，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，90-5-5，30ml/min)，得到：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,3S,5R)-3,5-二甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(20mg，54.58μmol，3.18％产率)、N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-(3,5-二甲基-2-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰胺(59mg，161.00μmol，9.39％产率)、N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,3R,5R)-3,5-二甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(29mg，79.14μmol，4.61％产率)。
化合物314：保留时间：34.68+37.54min LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值366.2；实测值367.2；Rt＝2.434min。化合物339：保留时间：41.95min 1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.78(m,1H),0.84(m,3H),0.94(m,3H),1.85(m,1H),1.99(m,4H),2.12(m,1H),3.53(m,1H),3.77(m,1H),4.48(m,1H),5.59(m,2H),7.33(m,6H),7.94(m,1H),10.37(m,1H)。LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值366.2；实测值367.2；Rt＝4.059min。
化合物343：保留时间：31.46min 1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.70(m,3H),1.02(m,3H),1.38(m,1H),1.90(td,1H),1.99(m,3H),2.15(m,1H),2.26(m,1H),3.40(m,1H),3.69(m,1H),5.18(m,1H),5.61(m,2H),7.31(m,4H),7.44(m,2H),7.95(m,1H),10.29(m,1H)。LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值366.2；实测值367.2；Rt＝4.101min。
实施例305.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-(苯并噻吩-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物123)的合成
步骤1：N-[5-[[2-[2-(苯并噻吩-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
向2-(苯并噻吩-3-基)哌啶(0.4g，1.84mmol)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(543.49mg，1.84mmol)和HATU(699.82mg，1.84mmol)于DMF(3mL)中的悬浮液中添加三乙胺(931.21mg，9.20mmol，1.28mL)。将所得混合物在环境温度下搅拌12h。然后，将混合物溶解于水(40ml)中且用EtOAc(3*20ml)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤(3*20ml)，经Na2SO4干燥且蒸发，以获得N-[5-[[2-[2-(苯并噻吩-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.9g，粗品)。此化合物不经纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.43(s,9H),1.69(m,2H),1.98(m,2H),2.18(s,3H),2.32(m,2H),3.09(m,2H),3.67(m,1H),5.99(m,1H),7.39(m,2H),7.93(m,3H),8.45(s,1H),9.06(s,1H),11.02(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值494.2；实测值495.2；Rt＝1.417min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-(苯并噻吩-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物123)的合成
向N-[5-[[2-[2-(苯并噻吩-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.9g，1.82mmol)于DCM(20mL)中的溶液中添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(8.00g，219.41mmol，10mL)。将所得混合物在25℃下搅拌12h且在真空中蒸发，以获得粗产物(0.g)。通过HPLC(40/60％0-5min 0.1％ NH3-甲醇，流速：30ml/min(装载泵4ml/min甲醇)，目标质量394，柱：YMC Triart C18100*20mm，5um)纯化粗产物，以得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-(苯并噻吩-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(57mg，144.49μmol，7.94％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO+CCL4)δ1.72(m,3H),1.89(m,1H),2.01(m,4H),2.32(m,1H),3.08(m,1H),3.68(m,1H),5.87(m,3H),7.41(m,3H),7.82(m,1H),7.90(m,1H),8.02(m,2H),10.50(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值394.2；实测值395.2；Rt＝2.609min。
实施例306.外消旋-N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(3-羟基苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物187)的合成
步骤1：(5-(2-(2-(3-羟基苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-3-甲基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
将TEA(2.49g，24.57mmol，3.42mL)添加到3-(5-甲基-2-哌啶基)苯酚(0.47g，2.46mmol)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(725.61mg，2.46mmol)和HATU(1.03g，2.70mmol)于DMF(5mL)中的混合物中。将反应混合物在25℃下搅拌1h，然后提交至反相HPLC(柱：SunFireC18 100x19 mm 5um，流动相35-40％0-5min水-MeCN)，以得到呈白色固体的N-[5-[[2-[2-(3-羟基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(130mg，277.46μmol，11.29％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.11(d,3H),1.32(m,1H),1.48(s,9H),1.99(m,2H),2.12(m,2H),2.28(s,3H),2.98(m,1H),3.42(d,1H),4.38(m,1H),5.98(m,1H),6.76(m,4H),7.18(m,1H),7.97(m,1H),8.34(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值468.5；实测值469.2；Rt＝3.448min。
步骤2：外消旋-N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(3-羟基苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物187)的合成
将N-[5-[[2-[2-(3-羟基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(130mg，277.46μmol)溶解于1,4-二噁烷(1.5mL)和水(2.5mL)的混合物中。将所得混合物在90℃下搅拌48h，然后冷却且提交至反相HPLC(柱：YMCTriart C18 100x20mm，5um，流动相：40-60％0-5min 0.1％ NH3-MeOH)，以得到51mg粗产物，其使用反相HPLC(柱：YMC Triart C18 100x20 mm，5um，流动相：15-40％0-5min 0.1％NH3-MeOH)再次再纯化，以得到呈白色固体的两种级分的化合物187：11mg(第1级分)和20mg(第2级分)N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(3-羟基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(31mg，84.14μmol，30.33％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.01(m,3H),1.32(m,1H),1.69(m,1H),1.88(m,1H),2.02(m,4H),2.12(m,1H),3.08(m,1H),3.74(m,1H),5.62(m,3H),6.71(m,3H),7.17(m,1H),7.48(m,1H),8.01(m,1H),9.40(m,1H),10.48(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值368.4；实测值369.2；Rt＝2.020min。
实施例307.外消旋-N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(4-羟基苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物164)的合成
将TEA(1.75g，17.25mmol，2.40mL)添加到4-(5-甲基-2-哌啶基)苯酚(2.2g，1.73mmol)(来自前一步骤的粗品)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(509.47mg，1.73mmol)和HATU(1.31g，3.45mmol)于DMF(15mL)的混合物中。将反应混合物在25℃下搅拌12h，然后在真空中蒸发。将残余物用水(30ml)稀释且用乙酸乙酯(2*20ml)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(10ml)洗涤，经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，留下800mg残余物，其通过反相HPLC(柱：SunFire C18 100x18mm 5um)使用25-50％0-5min水-MeCN作为流动相进行纯化，以得到两种级分的boc保护的酰胺：20mg(通过LCMS测得40％，第1级分)和40mg(通过LCMS测得73％，第2级分)。将两种级分合并，溶解于1,4-二噁烷(1.5mL)和水(2mL)的混合物中，且在95℃下搅拌48h。等分试样的LCMS显示完全boc-脱保护，将反应混合物冷却且提交至反相HPLC(柱：YMC Triart C18 100x20 mm，5um)使用35-60％0-5min0.1％ NH3-MeOH作为流动相，以得到呈白色固体的化合物164N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(4-羟基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(16mg，43.43μmol，2.52％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.00(m,3H),1.30(m,1H),1.68(m,1H),1.86(m,1H),2.02(m,4H),2.14(m,1H),2.96(m,2H),3.97(m,1H),5.58(m,3H),6.76(m,2H),7.12(m,2H),7.48(m,1H),8.00(m,1H),10.46(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值368.4；实测值369.2；Rt＝2.266min。
实施例308.外消旋-N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-((2R,5R)-5-甲基-2-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物66)的合成
将TEA(1.20g，11.90mmol，1.66mL)添加到5-甲基-2-(2-甲基吡唑-3-基)哌啶(300mg，1.19mmol，2HCl)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(351.28mg，1.19mmol)和HATU(497.56mg，1.31mmol)于DMF(15mL)中的混合物中。将反应混合物在25℃下搅拌1h，然后在真空中蒸发。将残余物溶解于二氯甲烷(10mL)中且添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(21.00g，80.06mmol，26.25mL，13.9％纯度)。将所得混合物在25℃下搅拌2h，然后在真空中蒸发且通过反相HPLC(柱：YMC Triart C18 100x20mm，5um)使用30-50％，50-60％0-5min 0.1％ NH3-甲醇作为流动相纯化残余物，以得到化合物66N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-5-甲基-2-(2-甲基吡唑-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(98mg，274.96μmol，23.11％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.82(m,3H),1.56(m,2H),1.74(m,2H),1.92(m,1H),2.03(m,5H),2.62(m,1H),3.54(m,1H),5.71(m,4H),6.44(m,1H),7.37(m,1H),7.50(m,1H),8.02(m,1H),10.47(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+1]m/z：计算值356.4；实测值357.2；Rt＝2.214min。
实施例309.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物498)的合成
步骤1：(3-甲基-5-(2-((2S,5R)-5-甲基-2-(4-(甲基氨基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
将2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(213.03mg，721.42μmol)、N-甲基-4-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]苯胺(0.2g，721.42μmol，2HCl)、HATU(301.73mg，793.56μmol)和DIPEA(279.71mg，2.16mmol，376.96μL)一起混合于DMSO(4mL)中且搅拌4h。使所获得的于DMSO中的溶液经历HPLC(依次重复两次纯化，以获得95+％纯度的产物：第1次装载：2-10min以35-100％MeOH/H2O为流动相；流速30mL/min；装载泵4ml MeOH；SunFire100*19mm，5微米柱；第2次装载：2-10min以40-60％水/MeCN+NH3为流动相；装载泵4mL MeCN+NH3；TRIART 100*20 5微米柱)，以获得N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(16mg，33.22μmol，4.61％产率)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值481.2；实测值483.2；Rt＝1.074min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物498)的合成
将N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(16mg，33.22μmol)溶解于水(0.5mL)和二噁烷(0.5mL)的混合物中。将反应混合物在100℃下搅拌16h。然后，使当前溶液中的粗产物经历HPLC(2-10min以40-60％水/MeCN+NH3为流动相；装载泵4mL MeCN+NH3；TRIART 100*20 5微米柱)，以得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(8.7mg，22.81μmol，68.65％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.04-1.22(m,3H),1.27-1.41(m,1H),1.63-1.94(m,2H),1.95-2.11(m,4H),2.10-2.18(m,1H),2.69(s,3H),2.74-2.79(m,0.4H),3.19-3.26(m,0.6H),3.50-4.04(m,1H),5.06-5.13(m,0.4H),5.16-5.35(m,3H),5.53-5.62(m,0.6H),6.44-6.53(m,2H),6.92-6.98(m,1H),6.99-7.08(m,1H),7.48-7.59(m,1H),7.97-8.05(m,1H),10.24-10.35(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值381.2；实测值382.2；Rt＝2.042min。
实施例310.2-(2-(1H-吲哚-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺(化合物385、化合物388)的合成
步骤1：(5-(2-(2-(1H-吲哚-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-3-甲基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
在室温下将HATU(603.24mg，1.59mmol)分批添加到2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(468.48mg，1.59mmol)、5-(5-甲基-2-哌啶基)-1H-吲哚(400mg，1.59mmol)和TEA(963.24mg，9.52mmol，1.33mL)于DMF(9mL)中的悬浮液中。将澄清溶液在30℃下搅拌32h且在真空中蒸发溶剂，以得到1g粗材料。使其经历RP-HPLC(柱：SunFireC18 100x19 mm 5um；以65-56-90％0-1-5min水-MeOH为流动相)，以得到N-[5-[[2-[2-(1H-吲哚-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(192.8mg，392.20μmol，24.72％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值491.2；实测值492.2；Rt＝3.712min。
步骤2：2-(2-(1H-吲哚-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺的合成
将N-[5-[[2-[2-(1H-吲哚-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(170mg，345.82μmol)于二噁烷(2mL)和水(1mL)中的溶液在95℃下搅拌12h且在真空中蒸发溶剂，以得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-(1H-吲哚-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(120mg，306.54μmol，88.64％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值391.2；实测值392.2；Rt＝1.051min。
步骤3：手性分离(化合物385和化合物388)
通过手性HPLC分离对映异构体，以得到两种个别对映异构体化合物385N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(1H-吲哚-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(50mg，127.73μmol，83.33％产率)(保留时间＝56.6min)和化合物388N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(1H-吲哚-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(50mg，127.73μmol，83.33％产率)(保留时间＝68.8min)。
系统1.柱：Chiralpak IA(250*20，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH，70-15-15；流速：12mL/min；柱温：24℃；波长：205nm，225nm，372nm)；
系统2.柱：Chiralpak IC(250*20，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH，80-10-10流速：12mL/min；柱温：24℃；波长：205nm，225nm，372nm)。
化合物385于分析条件下(柱：IC，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.6ml/min为流动相)的保留时间为19.53min且化合物388的保留时间为27.05min。
化合物385：保留时间：19.53min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.00-1.03(m,3H),1.26-1.39(m,1H),1.74-1.90(m,2H),1.96-2.03(m,3H),2.04-2.21(m,1H),2.23-2.32(m,1H),2.75-3.24(m,1H),3.37-4.01(m,1H),5.14-5.58(m,1H),5.58-5.72(m,2H),6.34-6.42(m,1H),6.96-7.12(m,1H),7.29-7.32(m,1H),7.33-7.39(m,1H),7.41-7.47(m,1H),7.48-7.52(m,1H),7.91-8.09(m,1H),10.41-10.58(m,1H),11.03(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值391.2；实测值392.2；Rt＝2.214min。
化合物388：保留时间：27.05min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98-1.05(m,3H),1.28-1.39(m,1H),1.72-1.91(m,2H),1.95-2.03(m,3H),2.04-2.21(m,1H),2.22-2.33(m,1H),2.77-3.24(m,1H),3.39-4.03(m,1H),5.19-5.57(m,1H),5.57-5.74(m,2H),6.38(s,1H),6.96-7.12(m,1H),7.27-7.33(m,1H),7.33-7.40(m,1H),7.40-7.48(m,1H),7.48-7.54(m,1H),7.92-8.09(m,1H),10.38-10.62(m,1H),11.03(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值391.2；实测值392.2；Rt＝2.228min。
实施例311.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S)-2-(1H-吲唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物518)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R)-2-(1H-吲唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物535)的合成
步骤1：N-[5-[[2-[2-(1H-吲唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
在25℃下，向5-(2-哌啶基)-1H-吲唑(200mg，993.70μmol)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(293.43mg，993.70μmol)和DIPEA(642.15mg，4.97mmol，865.43μL)于DMF(5mL)中的搅拌溶液中添加HATU(566.75mg，1.49mmol)。将所得反应混合物在25℃下搅拌16h。将反应混合物样品提交用于LCMS分析。LCMS指示在RT＝1.169min处34.89％所需产物质量曲线下面积。通过反相HPLC(柱：YMC Triart C18 100x20mm，5um，流动相：40-40-80％0-1-6min 0.1％ NH3-甲醇，流速：30ml/min，装载泵4ml/min甲醇)纯化粗反应混合物，以得到呈淡黄色固体的N-[5-[[2-[2-(1H-吲唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(267mg，557.94μmol，56.15％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO)δ1.20-1.30(m,9H),1.45-1.70(m,4H),1.95(m,1H),2.13(m,3H),2.59和3.02(m,两种旋转异构体的2H),3.70和4.29(d,两种旋转异构体的1H),5.25和5.78(s,两种旋转异构体的1H),7.29和7.37(d,两种旋转异构体的1H),7.55(m,1H),7.73(d,1H),7.88和7.97(s,两种旋转异构体的1H),8.07(s,1H),8.37和8.48(s,两种旋转异构体的1H),9.02和9.07(s,两种旋转异构体的1H),11.07(s,1H),13.05(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+Н]+m/z：计算值478.3；实测值479.2；Rt＝2.787min。
步骤2：N-[5-[[2-[(2S)-2-(1H-吲唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(P1)和N-[5-[[2-[(2R)-2-(1H-吲唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(P2)的合成
将外消旋N-[5-[[2-[2-(1H-吲唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(267mg，557.94μmol)提交至制备型手性HPLC(柱：ChiralpakIA-II(250*20mm，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH 60-20-20；流速：12mL/min)，以得到呈淡黄色固体的N-[5-[[2-[(2S)-2-(1H-吲唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(P1)(88mg，183.89μmol，32.96％产率)(R.T.＝23.157min)和N-[5-[[2-[(2R)-2-(1H-吲唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(P2)(83mg，173.44μmol，31.09％产率)(R.T.＝32.819)。
P1：1H NMR(500MHz,DMSO)δ1.20-1.30(m,9H),1.45-1.70(m,4H),1.95(m,1H),2.13(m,3H),2.59和3.02(m,两种旋转异构体的2H),3.70和4.29(d,两种旋转异构体的1H),5.25和5.78(s,两种旋转异构体的1H),7.29和7.37(d,两种旋转异构体的1H),7.55(m,1H),7.73(d,1H),7.88和7.97(s,两种旋转异构体的1H),8.07(s,1H),8.37和8.48(s,两种旋转异构体的1H),9.02和9.07(s,两种旋转异构体的1H),11.07(s,1H),13.05(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+Н]+m/z：计算值478.3；实测值479.2；Rt＝3.158min。
RT(IA-3，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，12ml/min)＝24.48min
P2：1H NMR(500MHz,DMSO)δ1.20-1.30(m,9H),1.45-1.70(m,4H),1.95(m,1H),2.13(m,3H),2.59和3.02(m,两种旋转异构体的2H),3.70和4.29(d,两种旋转异构体的1H),5.25和5.78(s,两种旋转异构体的1H),7.29和7.37(d,两种旋转异构体的1H),7.55(m,1H),7.73(d,1H),7.88和7.97(s,两种旋转异构体的1H),8.07(s,1H),8.37和8.48(s,两种旋转异构体的1H),9.02和9.07(s,两种旋转异构体的1H),11.07(s,1H),13.05(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+Н]+m/z：计算值478.3；实测值479.2；Rt＝3.159min。
RT(IA-3，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，12ml/min)＝34.42min
步骤3：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S)-2-(1H-吲唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物518)的合成
将N-[5-[[2-[(2S)-2-(1H-吲唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(P1)(88mg，183.89μmol)于水(2mL)和1.4-二噁烷(2mL)的混合物中的溶液在95℃下搅拌24h，然后冷却且提交至反相HPLC(柱：YMC Triart C18 100x20mm，5um；流动相30-30-80％0-1-5min 0.1％ NH3-甲醇，流速：30ml/min)，以得到呈白色固体的化合物518N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S)-2-(1H-吲唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(48.4mg，127.90μmol，69.55％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.43-1.61(m,3H),1.61-1.70(m,1H),1.77-1.96(m,1H),1.96-2.07(m,3H),2.51-2.57(m,2H),2.93-3.27(m,1H),3.61-4.29(m,1H),5.17-5.57(m,1H),5.57-5.79(m,2H),7.24-7.38(m,1H),7.41-7.58(m,2H),7.65-7.73(m,1H),7.93-8.06(m,2H),10.45-13.05(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+Н]+m/z：计算值378.2；实测值379.2；Rt＝1.420min。
步骤4：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R)-2-(1H-吲唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物535)的合成
将N-[5-[[2-[(2R)-2-(1H-吲唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(P2)(83mg，173.44μmol)于水(2mL)和1.4-二噁烷(2mL)的混合物中的溶液在95℃下搅拌24h，然后冷却且提交至反相HPLC(柱：YMC Triart C18 100x20mm，5um；流动相30-30-80％0-1-5min 0.1％ NH3-甲醇，流速：30ml/min)，以得到呈白色固体的化合物535N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R)-2-(1H-吲唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(49.2mg，130.01μmol，74.96％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.42-1.61(m,3H),1.62-1.68(m,1H),1.81-1.95(m,1H),1.95-2.06(m,3H),2.50-2.56(m,2H),2.94-3.27(m,1H),3.59-4.32(m,1H),5.20-5.59(m,1H),5.59-6.00(m,2H),7.24-7.39(m,1H),7.40-7.59(m,2H),7.65-7.73(m,1H),7.92-8.07(m,2H),10.30-13.30(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+Н]+m/z：计算值378.2；实测值379.2；Rt＝1.413min。
实施例312.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物364)、N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物363)、N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5R)-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1083)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物392)的合成
步骤1：N-[5-[[2-[2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
向5-(5-甲基-2-哌啶基)-1H-吲唑(0.23g，1.07mmol)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(315.46mg，1.07mmol)和HATU(446.82mg，1.18mmol)于DMF(6mL)中的悬浮液中添加三乙胺(540.51mg，5.34mmol，744.51μL)。将所得混合物在30℃下搅拌12h，用水(50ml)淬灭且用EtOAc(3*30ml)萃取。将合并的有机层用盐水(3*20ml)洗涤，经Na2SO4干燥且蒸发，以获得N-[5-[[2-[2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.6g，粗品)。
此化合物不经纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.00(d,3H),1.40(s,9H),1.74(m,4H),2.16(s,3H),3.98(m,2H),5.21(m,2H),5.67(m,2H),7.27(d,1H),7.49(d,1H),7.67(s,1H),8.02(s,1H),8.44(s,1H),9.04(s,1H),11.03(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值492.2；实测值493.2；Rt＝1.158min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
向N-[5-[[2-[2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.6g，1.22mmol)于DCM(10mL)中的溶液中添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(8.00g，219.41mmol，10mL)。将所得混合物在25℃下搅拌18h，在真空中蒸发且使其经历HPLC(40-40-80％0-1-5min 0.1％ NH3-甲醇，流速：30ml/min(装载泵4ml/min甲醇)，目标质量392，柱：YMC Triart C18100x20 mm，5um)，以得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(152mg，387.31μmol，31.80％产率)。
未获得此化合物的NMR谱且将其直接用于手性拆分。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值392.2；实测值393.2；Rt＝2.085min。
步骤3：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物364)、N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物363)、N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5R)-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1083)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物392)的合成
使N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(152.0mg)经历HPLC(IA_II柱，以己烷-IPA-MeOH，50-25-25为流动相；流速10ml/min)，以得到化合物364N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(43.0mg，62.87％产率；RT＝41.665min)、化合物363N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(42.0mg，61.4％产率；RT＝26.796min)、化合物1083N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5R)-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(2.0mg，26.32％产率；RT＝36.456min)和化合物392N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(4.0mg，52.63％产率；RT＝23.296min)。
化合物364：RT(IA-3，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.15ml/min)＝28.600min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.00-1.04(m,3H),1.29-1.40(m,1H),1.71-1.80(m,1H),1.81-1.91(m,1H),1.95-2.03(m,3H),2.05-2.20(m,1H),2.25-2.34(m,1H),2.75-3.23(m,1H),3.35-4.05(m,1H),5.19-5.57(m,1H),5.57-5.70(m,2H),7.31(dd,1H),7.40-7.55(m,2H),7.66-7.72(m,1H),7.93-8.07(m,2H),10.40-10.56(m,1H),12.96-13.07(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值392.2；实测值393.2；Rt＝3.563min。
化合物363：RT(IA-3，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.15ml/min)＝16.782min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.98-1.03(m,3H),1.29-1.40(m,1H),1.71-1.79(m,1H),1.82-1.94(m,1H),1.96-2.04(m,3H),2.05-2.20(m,1H),2.22-2.30(m,1H),2.74-3.23(m,1H),3.41-4.03(m,1H),5.20-5.58(m,1H),5.59-5.70(m,2H),7.24-7.38(m,1H),7.40-7.57(m,2H),7.67-7.73(m,1H),7.93-8.07(m,2H),10.43-10.55(m,1H),12.94-13.08(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值392.2；实测值393.2；Rt＝3.551min。
化合物1083：RT(IA-3，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.15ml/min)＝24.432min。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值392.2；实测值393.2；Rt＝3.599min。
化合物392：RT(IA-3，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.15ml/min)＝15.413min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.68-0.79(m,3H),1.10-1.21(m,1H),1.57-1.78(m,2H),1.81-1.96(m,1H),1.96-2.07(m,3H),2.54-2.57(m,1H),3.52-3.60(m,1.7H),4.16-4.22(m,0.3H),5.17-6.02(m,3H),7.24-7.39(m,1H),7.41-7.52(m,1H),7.52-7.56(m,1H),7.64-7.75(m,1H),7.92-8.03(m,1H),8.04-8.20(m,1H),10.49-10.61(m,1H),13.02(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值392.2；实测值393.2；Rt＝3.600min。
实施例313.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(4-羟基-3-甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(4-羟基-3-甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物551和化合物572)的合成
步骤1：N-[5-[[2-[2-(4-羟基-3-甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
向2-甲基-4-(5-甲基-2-哌啶基)苯酚(250mg，1.22mmol)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(359.59mg，1.22mmol)和HATU(509.33mg，1.34mmol)于DMSO(4mL)中的搅拌溶液中添加Et3N(246.45mg，2.44mmol，339.46μL)。将反应混合物在20℃下搅拌16小时。16小时之后，LCMS指示起始材料未完全消耗。将HATU(120mg)进一步添加到反应混合物中且将反应混合物搅拌40小时。40小时之后，通过反相HPLC(洗脱液：2-10min，40-60％，H2O-MeOH；流速：30mL/min；装载泵：4mL，MeOH；柱：TRIART 100x20mm，5μM)纯化反应混合物，以获得呈棕色固体的N-[5-[[2-[2-(4-羟基-3-甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.12g，248.67μmol，20.42％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值482.3；实测值483.2；Rt＝3.257min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-(4-羟基-3-甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
将N-[5-[[2-[2-(4-羟基-3-甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.12g，248.67μmol)溶解于1,4-二噁烷(1mL)和水(1mL)中。将所得反应混合物在100℃下搅拌过夜。然后通过反相HPLC(洗脱液：2-10min，40-60％，水+NH3/MeOH+NH3；装载泵：4mL，MeOH+NH3；柱：TRIART 100x 20mm，5μM)纯化反应混合物，以获得呈淡棕色固体的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-(4-羟基-3-甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(69mg，180.41μmol，72.55％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值382.3；实测值383.4；Rt＝1.960min。
步骤3：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(4-羟基-3-甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(4-羟基-3-甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物551和化合物572)的手性分离
使N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-(4-羟基-3-甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(69mg，180.41μmol)经历手性HPLC纯化(柱：OJ-H-I(250x 20mm，5um)，洗脱液：己烷-MeOH-IPA，60-20-20，流速：12mL/min)，以获得呈淡黄色固体的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(4-羟基-3-甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物551，24.61mg)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(4-羟基-3-甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物572，24.03mg)。
化合物551：
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)0.94-1.03(m,3H),1.23-1.35(m,1H),1.63-1.76(m,1H),1.77-1.88(m,1H),1.90-1.97(m,1H),1.96-2.02(m,3H),2.07-2.16(m,4H),2.68-3.23(m,1H),3.37-3.99(m,1H),4.94-5.52(m,1H),5.52-5.63(m,2H),6.70-6.77(m,1H),6.84-6.94(m,1H),6.95-7.04(m,1H),7.39-7.51(m,1H),7.91-8.05(m,1H),9.20(s,1H),10.34-10.53(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值382.3；实测值383.2；Rt＝1.265min。
手性HPLC：Rt＝21.77min(柱：AD-H；流动相：己烷-IPA-MeOH，50-25-25；流速：0.6mL/min)。
化合物572：
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)0.95-1.01(m,3H),1.24-1.33(m,1H),1.63-1.75(m,1H),1.78-1.89(m,1H),1.90-1.97(m,1H),1.98-2.03(m,3H),2.08-2.17(m,4H),2.68-3.21(m,1H),3.37-3.97(m,1H),4.95-5.53(m,1H),5.55-5.63(m,2H),6.69-6.80(m,1H),6.86-6.95(m,1H),6.95-7.03(m,1H),7.39-7.55(m,1H),7.93-8.09(m,1H),9.03-9.43(m,1H),10.32-10.60(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值382.3；实测值383.2；Rt＝1.265min。
手性HPLC：Rt＝19.12min(柱：AD-H；流动相：己烷-IPA-MeOH，50-25-25；流速：0.6mL/min)。
实施例314.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[5-甲基-2-(2-氧代吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物373)的合成
步骤1：N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-(2-氧代吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
在室温下，向5-(5-甲基-2-哌啶基)吲哚啉-2-酮(0.4g，1.74mmol)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(512.87mg，1.74mmol)和三乙胺(1.76g，17.37mmol，2.42mL)于DMF(5mL)中的搅拌溶液中添加HATU(990.59mg，2.61mmol)。将所得反应混合物在同一温度下搅拌18小时。18小时之后，在减压下浓缩反应混合物。通过HPLC(洗脱液：2-10min，60-85％，MeOH/H2O；流速：30mL/min；装载泵：4mL，MeOH；柱：SunFire100x19 mm，5μM)纯化所获得的残余物，以获得呈红色固体的N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-(2-氧代吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.1017g，200.36μmol，11.54％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值507.3；实测值508.2；Rt＝1.298min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[5-甲基-2-(2-氧代吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物373)的合成
将N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-(2-氧代吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.1017g，200.36μmol)溶解于二噁烷(2mL)和水(2mL)中。将所得反应混合物在100℃下加热18小时。完成之后，将反应混合物蒸发至干，以获得呈红色固体的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[5-甲基-2-(2-氧代吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物373，0.056g，137.44μmol，68.59％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)0.99-1.03(m,3H),1.22-1.37(m,1H),1.67-1.77(m,1H),1.82-1.93(m,1H),2.00-2.07(m,3H),2.09-2.24(m,1H),2.72-2.81(m,0.3H),3.21-3.25(m,0.7H),3.40-3.53(m,3H),3.64-4.02(m,1H),5.03-5.58(m,1H),5.58-5.70(m,2H),6.78-6.89(m,1H),7.07-7.27(m,2H),7.40-7.54(m,1H),7.93-8.08(m,1H),10.36(s,1H),10.43-10.57(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值407.2；实测值408.2；Rt＝0.856min。
实施例315.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,4R,5R)-4,5-二甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物304)、N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,4S,5S)-4,5-二甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物299)、N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,4R,5S)-4,5-二甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物313)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,4S,5R)-4,5-二甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物305)的合成
步骤1：N-[5-[[2-(4,5-二甲基-2-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将4,5-二甲基-2-苯基哌啶(0.076g，401.49μmol)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(118.56mg，401.49μmol)、TEA(406.27mg，4.01mmol，559.59μL)和HATU(228.99mg，602.23μmol)溶解于DMF(2mL)中。将反应混合物在20℃下搅拌3h。将所得混合物用水稀释且用EtOAc萃取三次。然后将EtOAc用盐水萃取三次。将有机相经Na2SO4干燥，过滤出且在40℃下蒸发，以得到N-[5-[[2-(4,5-二甲基-2-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.164g，351.50μmol，87.55％产率)，其不经进一步纯化即用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值466.2；实测值467.2；Rt＝3.991min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-(4,5-二甲基-2-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰胺的合成
将N-[5-[[2-(4,5-二甲基-2-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.164g，351.50μmol)溶解于二噁烷(2mL)和水(2mL)的混合物中。然后，在100℃下搅拌12h。在真空、55℃下浓缩反应混合物，以得到粗产物，其通过HPLC(35-60％水-甲醇+NH3，2-10min，流速30ml/min(装载泵4ml/min甲醇+NH3)，柱：SUNFIRE C18100*20mm)进行纯化，以得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-(4,5-二甲基-2-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰胺(0.047g，128.26μmol，36.49％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.72(m,2H),0.93(m,3H),1.45(m,1H),2.03(m,3H),3.66(m,1H),5.64(m,2H),7.31(m,4H),7.48(m,1H),8.02(d,1H),10.46(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值366.2；实测值367.2；Rt＝1.110min。
步骤3：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,4R,5R)-4,5-二甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物304)、N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,4S,5S)-4,5-二甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物299)、N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,4R,5S)-4,5-二甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物313)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,4S,5R)-4,5-二甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物305)的合成
将N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-(4,5-二甲基-2-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰胺(0.047g，128.26μmol)使用柱：Chiralpak IB(250*20mm，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH，80-10-10流速：12mL/min；柱温：24℃；波长：205nm，266nm，308nm)进行手性分离，得到化合物304N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,4R,5R)-4,5-二甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(6.5mg，17.74μmol，13.83％产率；RT＝20.645min)、化合物299N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,4S,5S)-4,5-二甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(6.90mg，18.83μmol，14.68％产率；RT＝28.632min)、化合物313N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,4R,5S)-4,5-二甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(14.8mg，40.39μmol，31.49％产率；RT＝22.209min)和化合物305N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,4S,5R)-4,5-二甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(14.1mg，38.48μmol，30.0％产率；RT＝25.742min)。
化合物304：RT(IB，己烷-IPA-MeOH，80-10-10，0.6ml/min)＝20.891min。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ0.44-0.63(m,3H),0.70-0.83(m,3H),1.87-1.92(m,1H),1.94-2.15(m,6H),2.91-3.01(m,1H),3.43-4.27(m,1H),5.12-5.47(m,1H),5.91(brs,2H),7.18-7.29(m,2H),7.29-7.39(m,3H),7.40-7.63(m,1H),7.87-8.14(m,1H),10.39-10.67(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值366.2；实测值367.2；Rt＝4.101min。
化合物299：RT(IB，己烷-IPA-MeOH，80-10-10，0.6ml/min)＝28.641min。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ0.45-0.60(m,3H),0.70-0.80(m,3H),1.89-1.94(m,1H),1.97-2.09(m,5H),2.09-2.18(m,1H),2.84-3.09(m,1H),3.40-4.35(m,1H),5.13-5.45(m,1H),5.56-5.97(m,2H),7.21-7.36(m,5H),7.38-7.58(m,1H),7.68-8.14(m,1H),9.82-10.60(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值366.2；实测值367.2；Rt＝4.069min。
化合物313：RT(IB，己烷-IPA-MeOH，80-10-10，0.6ml/min)＝22.277min。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ0.91-1.04(m,6H),1.14-1.27(m,1H),1.45-1.55(m,1H),1.55-1.68(m,1H),1.96-2.10(m,4H),3.42-4.03(m,2H),5.03-5.26(m,1H),5.51-5.71(m,2H),7.19-7.35(m,5H),7.36-7.54(m,1H),7.70-8.08(m,1H),9.98-10.53(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值366.2；实测值367.2；Rt＝4.036min。
化合物305：RT(IB，己烷-IPA-MeOH，80-10-10，0.6ml/min)＝25.609min。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ0.89-1.00(m,6H),1.15-1.25(m,1H),1.44-1.53(m,1H),1.55-1.68(m,1H),1.97-2.10(m,4H),3.55-4.02(m,2H),5.03-5.27(m,1H),5.53-5.67(m,2H),7.18-7.34(m,5H),7.36-7.54(m,1H),7.68-8.10(m,1H),9.98-10.51(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值366.2；实测值367.2；Rt＝4.009min。
实施例316.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(2,2,2-三氟乙基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物522)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(2,2,2-三氟乙基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物528)的合成
步骤1：N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(2,2,2-三氟乙基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-N-(2,2,2-三氟乙基)苯胺(300mg，1.10mmol，2HCl)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(325.32mg，1.10mmol，HCl)和三乙胺(557.40mg，5.51mmol，767.77μL)一起混合于二甲基甲酰胺(5mL)中。将所获得的混合物简单加热至60-70℃，直到形成澄清溶液。冷却至5-10℃之后，在5min期间分批添加HATU(460.78mg，1.21mmol)。将所得溶液在25℃下搅拌15h。然后使其经历HPLC(柱：SunFireC18 100*19mm，5um；60-60-90％0-1-6min水-甲醇，流速：30ml/min)，得到N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(2,2,2-三氟乙基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(99mg，180.14μmol，16.35％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ0.73(m,2H),1.01(m,2H),1.43(m,9H),1.64(m,2H),2.19(d,3H),3.54(m,2H),3.90(m,2H),4.15(m,2H),5.00(m,1H),5.57(m,1H),6.22(s,1H),6.76(m,2H),7.06(m,2H),7.96(m,1H),8.45(m,1H),9.05(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值549.2；实测值550.2；Rt＝3.496min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(2,2,2-三氟乙基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
将N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(2,2,2-三氟乙基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(99mg，180.14μmol)溶解于二噁烷(1mL)和水(0.5mL)中。将所得溶液在100℃下搅拌15h。然后，使其经历HPLC(柱：YMC TriartC18 100*20mm，5um；50-90％0-5min 0.1％ NH3-甲醇，流速：30ml/min)，得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(2,2,2-三氟乙基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(55mg，122.37μmol，67.93％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值449.2；实测值450.2；Rt＝2.468min。
步骤3：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(2,2,2-三氟乙基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物522)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(2,2,2-三氟乙基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物528)的合成
通过手性HPLC(柱：Chiralpak IB(250*20mm，5mkm；流动相：己烷-IPA-MeOH，60-20-20；流速：12mL/min；温度＝24℃)将N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(2,2,2-三氟乙基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(55mg，122.37μmol)分成对映异构体，得到：化合物522N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(2,2,2-三氟乙基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(19mg，42.27μmol，69.09％产率)(其中保留时间＝16.417min)(化合物522)和化合物528N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(2,2,2-三氟乙基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(33.9mg，粗品)(其中保留时间＝36.985-38.961min)(化合物528)
化合物522：RT(IB，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.15mL/min)＝7.556min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.70-0.78(m,3H),1.08-1.15(m,1H),1.56-1.65(m,2H),1.72-1.86(m,1H),1.86-2.18(m,5H),3.46-3.54(m,0.5H),3.85-3.89(m,2H),4.09-4.17(m,0.5H),4.94-5.53(m,1H),5.57-5.63(m,2H),6.18-6.21(m,1H),6.70-6.73(m,2H),7.01-7.08(m,2H),7.43-7.52(m,1H),7.95-8.05(m,1H),10.46-10.51(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值449.2；实测值450.2；Rt＝2.543min。
化合物528：RT(IB，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.15mL/min)＝4.220min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.69-0.99(m,3H),1.03-1.18(m,1H),1.45-1.72(m,2H),1.74-1.90(m,1H),1.97-2.03(m,3H),2.04-2.20(m,1H),2.65-3.28(m,1H),3.36-3.54(m,0.7H),3.84-3.92(m,2H),4.10-4.16(m,0.3H),4.92-5.55(m,1H),5.54-5.66(m,2H),6.14-6.25(m,1H),6.65-6.78(m,2H),7.00-7.12(m,2H),7.39-7.55(m,1H),7.89-8.07(m,1H),10.38-10.58(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值449.2；实测值450.2；Rt＝19.009min。
实施例317.N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物720)和N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物729)的合成
步骤1：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
将HATU(176.04mg，462.98μmol)在室温下分批添加到2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(96.86mg，462.98μmol)、6-(5-甲基-2-哌啶基)-3,4-二氢-1H-喹啉-2-酮(130mg，462.98μmol，HCl)和TEA(281.09mg，2.78mmol，387.18μL)于DMF(10mL)中的悬浮液中。将澄清溶液在20℃下搅拌18h且在真空中蒸发溶剂，以得到1g粗材料。使其经历RP-HPLC(柱：YMC-Actus Triart C18 100*20mml.D.S-5um；以1-6min 45-55％水-甲醇(NH30.1％)，流速：30ml/min为流动相)，以得到N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(75mg，172.21μmol，37.20％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值435.2；实测值436.2；Rt＝2.017min。
步骤2：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物720)和N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物729)的合成
通过手性HPLC(柱：IA(250*20，5mkm)，以己烷-IPA-MeOH，60-20-20，12ml/min为流动相)分离对映异构体，以得到两种个别对映异构体化合物720N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(28.7mg，65.90μmol，76.53％产率)(保留时间＝59.6min)和化合物729N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(28.6mg，65.67μmol，76.27％产率)(保留时间＝79.4min)。
化合物720：RT(IA，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.6mL/min)＝43.376min。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.06(m,6H),1.29(m,1H),1.69(m,1H),1.92(m,2H),2.11(m,2H),2.42(m,2H),2.99(m,4H),3.79(m,1H),5.57(m,3H),6.84(m,1H),7.08(m,2H),7.46(m,1H),8.03(m,1H),10.02(m,1H),10.45(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值435.2；实测值436.4；Rt＝1.014min。
化合物729：RT(IA，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.6mL/min)＝60.621min。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.03(m,6H),1.33(m,1H),1.67(m,1H),1.85(m,1H),1.97(m,1H),2.14(m,1H),2.39(m,2H),2.86(m,4H),3.45(m,1H),4.09(m,1H),5.57(m,3H),6.84(m,1H),7.08(m,2H),7.46(m,1H),8.03(m,1H),10.02(m,1H),10.45(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值435.2；实测值436.2；Rt＝0.778min。
实施例318.rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物860)和rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物848)的合成
步骤1：N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将5-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶-2-胺(300mg，1.57mmol)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(463.15mg，1.57mmol)、三乙胺(793.56mg，7.84mmol，1.09mL)混合于DMF(5mL)中，然后添加HATU(894.56mg，2.35mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌12h。将溶剂蒸发且将所得混合物与于甲醇(10mL)中的DMT(50mg)一起搅拌。将混合物过滤出且在减压下蒸发。通过HPLC(2-10min 50-75％甲醇/H2O，30mL/min)纯化所获得的粗材料，以获得N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(48.5mg，103.51μmol，6.60％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值468.2；实测值469.2；Rt＝0.943min。
步骤2：rel-N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯和rel-N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
通过手性色谱(IA-II(250*20mm，5mkm)，IPA-MeOH，50-50，12mL/min)分离非对映异构体的混合物，以获得N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(14.71mg，31.39μmol，30.33％产率；P1)和N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(11.26mg，24.03μmol，23.22％产率；P2)。
制备型：P2的RT(IC-II(250*20，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，12mL/min)＝35.062min。
分析型：P2的RT(IC，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝29.410min。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值468.2；实测值470.2；Rt＝2.001min。
制备型：P1的RT(IC-II(250*20，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，12mL/min)＝76.389min。
分析型：P1的RT(IC，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝64.482min。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值468.2；实测值469.2；Rt＝2.005min。
步骤3：rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物860)的合成
将N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(14.71mg，31.39μmol)于二噁烷(1mL)和水(1mL)中的溶液在100℃下加热13h。蒸发溶剂且通过HPLC(2-10min 20-65％甲醇/H2O+NH330mL/min(装载泵4mL甲醇+NH3))纯化所得沉淀，以获得N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(6.9mg，18.73μmol，59.65％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)0.94-1.01(m,3H),1.26-1.36(m,1H),1.66-1.73(m,1H),1.75-1.88(m,1H),1.88-1.96(m,1H),1.98-2.02(m,3H),2.04-2.12(m,1H),2.67-3.19(m,1H),3.34-3.96(m,1H),4.93-5.49(m,1H),5.56-5.63(m,2H),5.84(s,2H),6.40-6.45(m,1H),7.23-7.38(m,1H),7.43-7.49(m,1H),7.82-7.88(m,1H),7.94-8.02(m,1H),10.26-10.48(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值368.2；实测值370.2；Rt＝0.514min。
步骤4：rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物848)的合成
将N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(11.26mg，24.03μmol)于二噁烷(1mL)和水(1mL)中的溶液在100℃下加热12h。蒸发溶剂且通过HPLC(2-10min 20-65％甲醇/H2O+NH330mL/min(装载泵4mL甲醇+NH3))纯化所得沉淀，以获得N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(5.2mg，14.11μmol，58.73％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)0.94-1.01(m,3H),1.26-1.36(m,1H),1.66-1.73(m,1H),1.75-1.88(m,1H),1.88-1.96(m,1H),1.98-2.02(m,3H),2.04-2.12(m,1H),2.67-3.19(m,1H),3.34-3.96(m,1H),4.93-5.49(m,1H),5.56-5.63(m,2H),5.84(s,2H),6.40-6.45(m,1H),7.23-7.38(m,1H),7.43-7.49(m,1H),7.82-7.88(m,1H),7.94-8.02(m,1H),10.26-10.48(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值368.2；实测值370.2；Rt＝0.516min。
实施例319.rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[6-(甲磺酰胺基)-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物980)和rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[6-(甲磺酰胺基)-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物998)的合成
步骤1：N-[5-[[2-[2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
在室温下，将HATU(496.98mg，1.31mmol)分批添加到2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(424.55mg，1.44mmol)、5-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶-2-胺(250mg，1.31mmol)和TEA(793.56mg，7.84mmol，1.09mL)于DMF(10mL)中的悬浮液中。将澄清溶液在20℃下搅拌18h且在真空中蒸发溶剂，以得到N-[5-[[2-[2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(1g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值468.2；实测值469.2；Rt＝0.974min。
步骤2：N-[5-[[2-[2-[6-(甲磺酰胺基)-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
在室温下将甲磺酰氯(165.07mg，1.44mmol，111.53μL)逐滴添加到N-[5-[[2-[2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(1.33g，1.31mmol)、TEA(795.35mg，7.86mmol，1.10mL)于DMF(10mL)中的悬浮液中。将溶液在25℃下搅拌18h且在真空中蒸发溶剂。通过RP-HPLC(柱：YMC Triart C18 100*20mm，5um；以30-75％0-1-6min H2O/MeOH，流速：30mL/min为流动相)纯化残余物，以得到N-[5-[[2-[2-[6-(甲磺酰胺基)-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(165mg，301.85μmol，23.04％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值546.2；实测值547.2；Rt＝1.876min。
步骤3：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-[6-(甲磺酰胺基)-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
将N-[5-[[2-[2-[6-(甲磺酰胺基)-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(165mg，301.85μmol)于二噁烷(2mL)和水(1mL)中的溶液在90℃下搅拌18h且在真空中蒸发溶剂，以得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-[6-(甲磺酰胺基)-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(130mg，291.14μmol，96.45％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值446.2；实测值447.0；Rt＝0.827min。
步骤4：rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[6-(甲磺酰胺基)-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物980)和rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[6-(甲磺酰胺基)-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物998)的合成
通过手性HPLC(柱：Chiralpak IA-I(250*20mm，5mkm)，以IPA-MeOH，50-50，12mL/min为流动相)分离对映异构体，以得到两种个别对映异构体化合物980rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[6-(甲磺酰胺基)-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(31.2mg，69.87μmol，48.00％产率)(保留时间＝31.1min)和化合物998rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[6-(甲磺酰胺基)-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(31.4mg，70.32μmol，48.31％产率)(保留时间＝45.6min)。
化合物980：RT(IA(250*4.6，5mkm)，IPA-MeOH，50-50，0.6mL/min)＝30.873min。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值446.2；实测值447.2；Rt＝1.493min。
化合物998：RT(IA(250*4.6，5mkm)，IPA-MeOH，50-50，0.6mL/min)＝48.374min。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值446.2；实测值447.2；Rt＝1.495min。
实施例320.rel-2-[(2S,5R)-2-(6-乙酰胺基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物927)和rel-2-[(2R,5S)-2-(6-乙酰胺基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物915)的合成
步骤1：N-[5-[[2-[2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
在室温下，将HATU(496.98mg，1.31mmol)分批添加到2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(424.55mg，1.44mmol)、5-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶-2-胺(250mg，1.31mmol)和TEA(793.56mg，7.84mmol，1.09mL)于DMF(10mL)中的悬浮液中。将澄清溶液在20℃下搅拌18h且在真空中蒸发溶剂，以得到N-[5-[[2-[2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(1g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值468.2；实测值469.2；Rt＝0.901min。
步骤2：N-[5-[[2-[2-(6-乙酰胺基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
在室温下将乙酰氯(113.11mg，1.44mmol，87.69μL)逐滴添加到N-[5-[[2-[2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(1.33g，1.31mmol)、TEA(795.35mg，7.86mmol，1.10mL)于DMF(10mL)中的悬浮液中。将溶液在25℃下搅拌18h且在真空中蒸发溶剂。通过RP-HPLC(柱：Chromatorex 18SMB100-5T100*19mm 5um；以0-1-6min 30-40％水-MeCN，流速30mL/min为流动相)纯化残余物，以得到N-[5-[[2-[2-(6-乙酰胺基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(209mg，409.34μmol，31.25％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值510.2；实测值511.2；Rt＝2.557min。
步骤3：2-[2-(6-乙酰胺基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺的合成
将N-[5-[[2-[2-(6-乙酰胺基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(203.41mg，398.39μmol)于二噁烷(2mL)和水(1mL)中的溶液在85℃下搅拌24h且在真空中蒸发溶剂，以得到2-[2-(6-乙酰胺基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(160mg，389.80μmol，97.84％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值410.2；实测值411.2；Rt＝0.725min。
步骤4：rel-2-[(2S,5R)-2-(6-乙酰胺基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物927)和rel-2-[(2R,5S)-2-(6-乙酰胺基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物915)的合成
通过手性HPLC(柱：IB(250*30，5mkm)，以CO2-MeOH，60-40，80mL/min补充流速-30mL/min为流动相)分离对映异构体，以得到两种个别对映异构体化合物927rel-2-[(2S,5R)-2-(6-乙酰胺基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(31.2mg，76.01μmol，39.00％产率)(保留时间＝5.99min)和化合物915rel-2-[(2R,5S)-2-(6-乙酰胺基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(31.8mg，77.47μmol，39.75％产率)(保留时间＝6.76min)。
化合物927：RT(OJ-H(250*4.6，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝15.921min。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)0.99(m,3H),1.32(m,1H),1.66(m,1H),1.84(m,1H),2.03(m,7H),2.18(m,1H),2.89(m,1H),3.71(dd,1H),5.58(m,3H),7.45(m,1H),7.69(m,1H),8.00(m,2H),8.22(m,1H),10.48(s,2H)
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值410.2；实测值412.2；Rt＝0.894min。
化合物915：RT(OJ-H(250*4.6，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝24.255min。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.00(m,3H),1.32(m,1H),1.66(m,1H),1.86(m,1H),2.02(m,7H),2.19(m,1H),2.97(dd,1H),3.71(dd,1H),5.58(m,3H),7.45(m,1H),7.70(m,1H),8.00(m,2H),8.22(m,1H),10.48(s,2H)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值410.2；实测值412.2；Rt＝0.894min。
实施例321.rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物856)和rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物851)的合成
步骤1：N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-乙基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将5-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶-2-胺(250mg，1.31mmol)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-乙基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(404.29mg，1.31mmol)、三乙胺(661.30mg，6.54mmol，910.88μL)混合于DMF(5mL)中，然后添加HATU(745.46mg，1.96mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌12h。将溶剂蒸发且将所得混合物与于甲醇(10mL)中的DMT(50mg)一起搅拌。将混合物过滤出且在减压下蒸发。通过HPLC(2-10min 50-65％甲醇/H2O，30mL/min)纯化所获得的粗材料，以获得N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-乙基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(61.6mg，127.65μmol，9.77％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值482.2；实测值483.2；Rt＝0.984min。步骤2：rel-N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-乙基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯和rel-N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-乙基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
通过手性色谱(IA-II(250*20，5mkm)，IPA-MeOH，50-50，12mL/min)分离非对映异构体的混合物，以获得N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-乙基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(21.02mg，43.56μmol，34.12％产率；P1)和N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-乙基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(22.05mg，45.69μmol，35.80％产率；P2)。
制备型：P1的RT(IA(250*30，5mkm)，IPA-MeOH，50-50，20mL/min)＝19.231min。分析型：P1的RT(IA，IPA-MeOH，50-50，0.6mL/min)＝16.786min。LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值482.2；实测值484.2；Rt＝2.159min。
制备型：P2的RT(IA(250*30，5mkm)，IPA-MeOH，50-50，20mL/min)＝42.391min。分析型：P2的RT(IA，IPA-MeOH，50-50，0.6mL/min)＝38.638min。LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值482.2；实测值484.2；Rt＝2.174min。
步骤3：rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物856)的合成
将N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-乙基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(21.02mg，43.56μmol)于二噁烷(1mL)和水(1mL)中的溶液在100℃下加热12h。蒸发溶剂且通过HPLC(2-10min 20-65％甲醇/H2O+NH330mL/min(装载泵4mL甲醇+NH3))纯化所得沉淀，以获得N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(10.8mg，28.24μmol，64.83％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)0.95-1.02(m,3H),1.06-1.14(m,3H),1.23-1.37(m,1H),1.64-1.75(m,1H),1.80-2.06(m,2H),2.06-2.15(m,1H),2.36-2.41(m,2H),2.65-3.20(m,1H),3.35-3.99(m,1H),4.95-5.50(m,1H),5.58-5.65(m,2H),5.84(s,2H),6.39-6.47(m,1H),7.19-7.35(m,1H),7.43-7.52(m,1H),7.78-7.88(m,1H),7.98-8.06(m,1H),10.36-10.54(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值382.4；实测值383.4；Rt＝0.557min。
步骤4：rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物851)的合成
将N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-乙基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(22.05mg，45.69μmol)于二噁烷(1mL)和水(1mL)中的溶液在100℃下加热12h。蒸发溶剂且通过HPLC(2-10min 20-65％甲醇/H2O+NH330mL/min(装载泵4mL甲醇+NH3))纯化所得沉淀，以获得N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(8.2mg，21.44μmol，46.92％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)0.97-1.02(m,3H),1.07-1.11(m,3H),1.26-1.34(m,1H),1.61-1.77(m,1H),1.78-1.90(m,1H),1.90-2.05(m,1H),2.06-2.17(m,1H),2.36-2.41(m,2H),2.64-3.21(m,1H),3.35-3.98(m,1H),4.93-5.49(m,1H),5.59-5.65(m,2H),5.85(s,2H),6.40-6.48(m,1H),7.25-7.36(m,1H),7.43-7.51(m,1H),7.81-7.87(m,1H),7.94-8.05(m,1H),10.43-10.51(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值382.4；实测值383.4；Rt＝0.554min。
实施例322.rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[6-(甲磺酰胺基)-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物995)和rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[6-(甲磺酰胺基)-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物983)的合成
步骤1：5-[[2-[2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺的合成
在室温下将HATU(496.98mg，1.31mmol)分批添加到2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(359.52mg，1.50mmol)、5-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶-2-胺(250mg，1.31mmol)和TEA(793.56mg，7.84mmol，1.09mL)于DMF(10mL)中的悬浮液中。将澄清溶液在20℃下搅拌18h且在真空中蒸发溶剂，以得到5-[[2-[2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(1g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值482.2；实测值483.4；Rt＝1.021min。
步骤2：N-[3-乙基-5-[[2-[2-[6-(甲磺酰胺基)-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
在室温下将甲磺酰氯(165.07mg，1.44mmol，111.53μL)逐滴添加到N-[5-[[2-[2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-乙基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(1.92g，1.31mmol)、TEA(795.35mg，7.86mmol，1.10mL)于DMF(10mL)中的悬浮液中。将溶液在25℃下搅拌18h且在真空中蒸发溶剂。通过RP-HPLC(柱：YMC Triart C18 100*20mm，5um；以40-70％0-1-6min H2O/MeOH，流速：30mL/min为流动相)纯化残余物，以得到N-[3-乙基-5-[[2-[2-[6-(甲磺酰胺基)-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(135mg，240.79μmol，18.38％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值560.2；实测值561.2；Rt＝2.029min。
步骤3：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[2-[6-(甲磺酰胺基)-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
将N-[3-乙基-5-[[2-[2-[6-(甲磺酰胺基)-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(135mg，240.79μmol)于二噁烷(2mL)和水(1mL)中的溶液在90℃下搅拌18h且在真空中蒸发溶剂，以得到N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[2-[6-(甲磺酰胺基)-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(110mg，238.85μmol，99.19％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值460.2；实测值461.2；Rt＝0.854min。
步骤4：rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[6-(甲磺酰胺基)-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物995)和rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[6-(甲磺酰胺基)-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物983)的合成
通过手性HPLC(柱：Chiralpak IA-I(250*20，5mkm)，以IPA-MeOH，50-50，12mL/min为流动相)分离对映异构体，以得到两种个别对映异构体化合物995rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[6-(甲磺酰胺基)-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(29.3mg，63.62μmol，53.27％产率)(保留时间＝23.87min)和化合物983rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[6-(甲磺酰胺基)-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(33.8mg，73.39μmol，61.45％产率)(保留时间＝41.22min)。
化合物995：RT(IA(250*4.6，5mkm)，IPA-MeOH，50-50，0.6mL/min)＝23.505min。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值460.2；实测值461.2；Rt＝1.647min。
化合物983：RT(IA(250*4.6，5mkm)，IPA-MeOH，50-50，0.6mL/min)＝41.482min。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值460.2；实测值461.2；Rt＝1.640min。
实施例323.rel-2-[(2S,5R)-2-(6-乙酰胺基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物921)和rel-2-[(2R,5S)-2-(6-乙酰胺基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物925)的合成
步骤1：N-[5-[[2-[2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-乙基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
在室温下，将HATU(496.98mg，1.31mmol)分批添加到2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-乙基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(444.72mg，1.44mmol)、5-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶-2-胺(250mg，1.31mmol)和TEA(793.56mg，7.84mmol，1.09mL)于DMF(10mL)中的悬浮液中。将澄清溶液在20℃下搅拌18h且在真空中蒸发溶剂，以得到N-[5-[[2-[2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-乙基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(1g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值482.2；实测值483.2；Rt＝0.944min。
步骤2：N-[5-[[2-[2-(6-乙酰胺基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-乙基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
在室温下将乙酰氯(113.11mg，1.44mmol，87.69μL)逐滴添加到N-[5-[[2-[2-(6-氨基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-乙基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(632.17mg，1.31mmol)、TEA(795.35mg，7.86mmol，1.10mL)于DMF(10mL)中的悬浮液中。将溶液在25℃下搅拌18h且在真空中蒸发溶剂。通过RP-HPLC(柱：YMC Triart C18 100*20mml.D.S-5um；以0-5min 48-65％水-甲醇(NH30.1％)，流速30mL/min为流动相)纯化残余物，以得到N-[5-[[2-[2-(6-乙酰胺基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-乙基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(169mg，322.14μmol，24.59％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值524.2；实测值525.2；Rt＝2.093min。
步骤3：2-[2-(6-乙酰胺基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺的合成
在室温下将于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(838.98mg，3.22mmol，791.49μL，14％纯度)小心添加到N-[5-[[2-[2-(6-乙酰胺基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-乙基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(169mg，322.14μmol)于DCM(2mL)中的溶液中。然后将反应混合物在室温下搅拌18h且在真空中蒸发溶剂。使残余物经历RP-HPLC(柱：YMC Triart C18 100*20mm，5um；以35-60％0-5min以H2O/MeOH/0.1％ NH4OH，流速：30mL/min为流动相)，以得到2-[2-(6-乙酰胺基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(70.6mg，166.32μmol，51.63％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值424.2；实测值425.4；Rt＝1.712min。
步骤4：rel-2-[(2S,5R)-2-(6-乙酰胺基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(EN-TG1-4950)和rel-2-[(2R,5S)-2-(6-乙酰胺基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物925)的合成
通过手性HPLC(柱：Chiralcel OJ-H(250*20mm，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH，60-20-20；流速：12mL/min；然后用于化合物921的另外条件：柱OJ-H(250*20，5mkm)，以己烷-IPA-MeO H，70-15-15，14mL/min为流动相)分离对映异构体，以得到两种个别对映异构体化合物921rel-2-[(2S,5R)-2-(6-乙酰胺基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(24.2mg，57.01μmol，29.25％产率)(保留时间＝13.8min)和化合物925rel-2-[(2R,5S)-2-(6-乙酰胺基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(28.5mg，67.14μmol，34.45％产率)(保留时间＝22.7min)。
化合物921：RT(OJ-H(250*4.6，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝13.066min。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.04(m,6H),1.34(m,1H),1.68(m,1H),1.88(m,1H),2.06(m,4H),2.19(m,1H),2.39(m,2H),3.05(m,1H),3.62(m,1H),5.60(m,3H),7.45(m,1H),7.69(dd,1H),8.01(m,2H),8.22(m,1H),10.49(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值424.2；实测值425.2；Rt＝0.909min。
化合物925：RT(OJ-H(250*4.6，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝19.819min。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.00(m,3H),1.08(m,3H),1.32(m,1H),1.66(m,1H),1.87(m,1H),2.06(m,4H),2.18(m,1H),2.38(m,2H),2.88(m,1H),3.81(m,1H),5.60(m,3H),7.48(m,1H),7.70(m,1H),8.01(m,2H),8.22(m,1H),10.49(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值424.2；实测值425.2；Rt＝0.906min。
实施例324.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(苯并噻吩-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物617)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(苯并噻吩-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物634)的合成
步骤1：N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(苯并噻吩-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
向(2S,5R)-2-(苯并噻吩-5-基)-5-甲基哌啶(0.3g，1.30mmol)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(382.91mg，1.30mmol)和三乙胺(656.07mg，6.48mmol，903.67μL)的溶液中分批添加HATU(542.35mg，1.43mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌3h，溶解于水(50ml)中且用EtOAc(3*20ml)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤(2*15ml)，经Na2SO4干燥且移除溶剂，以得到N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(苯并噻吩-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.6g，1.18mmol，90.97％产率)。此化合物不经进一步纯化即用于下一步骤。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值508.2；实测值509.2；Rt＝1.306min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(苯并噻吩-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
将N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(苯并噻吩-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.6g，1.18mmol)于DCM(20mL)以及于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(4.00g，109.71mmol，5mL)中的溶液在25℃下搅拌12h。移除溶剂且通过HPLC(60-65％0-5min 0.1％ NH3-甲醇，流速：30ml/min(装载泵4ml/min甲醇)，目标质量409，柱：YMC Triart C18 100x20 mm，5um)纯化残余物，以获得N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(苯并噻吩-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(190mg，465.10μmol，39.43％产率)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值408.2；实测值409.2；Rt＝2.556min。
步骤3N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(苯并噻吩-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
将N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(苯并噻吩-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.6g，1.18mmol)于DCM(20mL)以及于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(4.00g，109.71mmol，5mL)中的溶液在25℃下搅拌12h。移除溶剂且通过HPLC(60-65％0-5min 0.1％ NH3-甲醇，流速：30ml/min(装载泵4ml/min甲醇)，目标质量409，柱：YMC Triart C18 100x20 mm，5um)纯化残余物，以获得N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(苯并噻吩-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(190mg，465.10μmol，39.43％产率)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值408.2；实测值409.2；Rt＝2.556min。
步骤4：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(苯并噻吩-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物617)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(苯并噻吩-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物634)的合成
对N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(苯并噻吩-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(190mg，465.10μmol)进行手性分离(注入体积：100mkl；样品信息：IB(250*20，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，70-15-15，12ml/min)，以获得N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(苯并噻吩-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(56mg，137.08μmol，58.95％产率)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(苯并噻吩-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(55mg，134.63μmol，57.89％产率)。保留时间(化合物617)＝20.82min；保留时间(化合物634)＝22.48min，其中顺式杂质少于5％
化合物617：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.99-1.04(m,3H),1.30-1.40(m,1H),1.69-1.77(m,1H),1.81-1.92(m,1H),1.93-2.03(m,3H),2.04-2.22(m,1H),2.24-2.35(m,1H),2.76-3.27(m,1H),3.37-4.08(m,1H),5.22-5.73(m,3H),7.26-7.38(m,1H),7.39-7.51(m,2H),7.72-7.77(m,1H),7.79-7.87(m,1H),7.92-7.99(m,1H),7.99-8.05(m,1H),10.46-10.56(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值408.2；实测值409.2；Rt＝2.677min。
RT(IA，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min)＝33.903min
化合物634：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.99-1.03(m,3H),1.28-1.41(m,1H),1.66-1.78(m,1H),1.80-1.93(m,1H),1.94-2.04(m,3H),2.05-2.22(m,1H),2.24-2.36(m,1H),2.77-3.28(m,1H),3.31-4.11(m,1H),5.21-5.57(m,1H),5.65(d,2H),7.27-7.38(m,1H),7.39-7.52(m,2H),7.72-7.77(m,1H),7.80-7.88(m,1H),7.93-8.06(m,2H),10.40-10.61(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值408.2；实测值409.2；Rt＝2.676min。
RT(IA，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min)＝45.004min
实施例325.N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物694)和N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物701)的合成
步骤1.N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物495)的合成
在室温下将HATU(392.76mg，1.03mmol)分批添加到2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(216.10mg，1.03mmol)、5-(5-甲基-2-哌啶基)-1,3-苯并噻唑(240mg，1.03mmol)和TEA(627.15mg，6.20mmol，863.84μL)于DMF(10mL)中的悬浮液中。将澄清溶液在20℃下搅拌18h且在真空中蒸发溶剂，以得到1g粗材料。使其经历RP-HPLC(柱：YMC-Actus Triart C18 100*20mml.D.S-5um；以1-6min55-60％水-甲醇(NH3 0.1％)，流速：30ml/min为流动相)，以得到N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(265mg，625.69μmol，60.57％产率)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值423.2；实测值424.2；Rt＝2.048min。
步骤2.N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物694)和N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物701)的合成
通过手性HPLC(柱：OJ-H(250*.0，5mkm)，以己烷-IPA-MeOH，80-10-10，14ml/min为流动相)分离对映异构体，以得到两种个别对映异构体化合物701N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(49mg，115.69μmol，52.45％产率)(保留时间＝39.0min)和化合物694N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(40.9mg，96.57μmol，43.78％产率)(保留时间＝46.3min)。
化合物694
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.09(m,6H),1.36(m,2H),1.70(m,1H),1.87(m,1H),2.14(m,1H),2.34(m,2H),2.39(m,1H),2.78(m,1H),3.77(m,1H),5.65(m,3H),7.42(s,1H),7.50(m,1H),7.99(m,1H),8.05(m,1H),8.17(m,1H),9.39(s,1H),10.55(m,1H)
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值423.2；实测值424.2；Rt＝2.048min。
化合物701
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.09(m,6H),1.36(m,2H),1.70(m,1H),1.87(m,1H),2.14(m,1H),2.34(m,2H),2.39(m,1H),2.78(m,1H),3.77(m,1H),5.65(m,3H),7.42(s,1H),7.50(m,1H),7.99(m,1H),8.05(m,1H),8.17(m,1H),9.39(s,1H),10.55(m,1H)
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值423.2；实测值424.2；Rt＝2.048min。
实施例326.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(2-甲基苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物730和化合物719)的合成
步骤1：(3-甲基-5-(2-(5-甲基-2-(2-甲基苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
在室温下将HATU(463.00mg，1.22mmol)分批添加到2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(359.57mg，1.22mmol)、2-甲基-5-(5-甲基-2-哌啶基)-1,3-苯并噻唑(300mg，1.22mmol)和TEA(739.30mg，7.31mmol，1.02mL)于DMF(10mL)中的悬浮液中。将澄清溶液在25℃下搅拌18h且在真空中蒸发溶剂。将残余物溶解于EtOAc(50mL)中，用水(3x10 mL)洗涤且在真空中蒸发，以得到N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-(2-甲基-1,3-苯并噻唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(700mg，粗品)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.96(m,1H),1.09(d,3H),1.22(m,1H),1.48(s,9H),2.02(m,2H),2.27(m,4H),2.78(s,3H),2.84(m,1H),3.86(m,1H),4.12(m,1H),6.25(m,1H),7.80(m,4H),8.09(m,1H),9.61(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值523.2；实测值524.2；Rt＝1.396min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(2-甲基苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺的合成
在室温下将于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(3.48g，13.37mmol，3.32mL，14％纯度)小心添加到N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-(2-甲基-1,3-苯并噻唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(700mg，1.34mmol)于DCM(10mL)中的溶液中。然后将反应混合物在室温下搅拌12h且在真空中蒸发溶剂。使残余物经历RP-HPLC(柱：YMCTriart C18 100x20 mm，5um；以50-50-80％0-1-6min 0.1％水-MeOH-0.1％ NH3为流动相)，以得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[5-甲基-2-(2-甲基-1,3-苯并噻唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(178mg，420.28μmol，31.44％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值423.2；实测值424.2；Rt＝2.323min。
步骤3：手性分离(化合物730和化合物719)
通过手性HPLC(柱：IC-II(250*20，5mkm)，以己烷-MeOH-IPA，50-25-25，12ml/min为流动相)分离对映异构体，以得到两种个别对映异构体化合物730N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-甲基-1,3-苯并噻唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(42.5mg，100.35μmol，47.75％产率)(保留时间＝32.9min)和化合物719N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-甲基-1,3-苯并噻唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(43.3mg，102.24μmol，48.65％产率)(保留时间＝51.1min)。
化合物719于分析条件下(柱：IC，IPA-MeOH，50-50，0.6ml/min为流动相)的保留时间为22.22min且化合物730的保留时间为15.44min。
化合物719：保留时间：22.22min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.01(m,3H),1.34(m,1H),1.69(m,1H),1.86(m,1H),1.99(m,3H),2.19(m,1H),2.29(m,1H),2.77(m,3H),3.25(m,1H),3.65(m,1H),5.62(m,3H),7.35(m,1H),7.45(m,1H),7.84(m,1H),7.99(m,2H),10.52(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值423.2；实测值424.2；Rt＝2.399min。
化合物730：保留时间：15.44min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.01(d,3H),1.35(m,1H),1.69(m,1H),1.86(m,1H),1.99(m,3H),2.12(m,1H),2.28(m,1H),2.77(s,3H),3.25(m,1H),3.74(m,1H),5.62(m,3H),7.32(m,1H),7.49(m,1H),7.84(m,1H),7.99(m,2H),10.52(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值423.2；实测值424.2；Rt＝2.422min。
实施例327.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物549)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物573)的合成
步骤1：N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-(1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(1.10g，2.77mmol，C6H15N)和5-(5-甲基-2-哌啶基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶(0.6g，2.77mmol)混合于DMF(20mL)中。将反应悬浮液冷却至0℃且添加HATU(1.05g，2.77mmol)，随后添加TEA(842.15mg，8.32mmol，1.16mL)，且在环境温度下搅拌15h。将反应混合物在真空中蒸发且倒入水(150ml)中且用EtOAc(2x50 ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(2*30ml)洗涤，经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到产物N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-(1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.8g，1.62mmol，58.43％产率)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值493.6；实测值494.2；Rt＝1.194min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[5-甲基-2-(1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
在室温下将水(20mL)一次性添加到N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-(1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.8g，1.62mmol)于二噁烷(10mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在90℃下搅拌48h，然后在真空中蒸发。将残余物用水(20mL)稀释且用二氯甲烷(2*30mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发且通过制备型HPLC(10-30％2-7min水-乙腈+nh3；流速：30ml/min)纯化0.5g所获得的粗产物，以得到产物N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[5-甲基-2-(1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.106g，269.42μmol，16.62％产率)
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)0.98-1.06(m,3H),1.30-1.41(m,1H),1.65-1.79(m,1H),1.79-1.93(m,1H),1.95-2.06(m,3H),2.07-2.21(m,1H),2.22-2.34(m,1H),2.79-3.16(m,1H),3.43-4.04(m,1H),5.25-5.77(m,3H),7.38-7.52(m,1H),7.90-8.03(m,1H),8.08-8.20(m,2H),8.44-8.55(m,1H),10.48-10.60(m,1H),13.54-13.68(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值393.2；实测值394.2；Rt＝1.715min。
步骤3：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物549)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物573)的合成
通过手性HPLC(OD-H(250*30，5mkm)，以己烷-IPA-MeOH，50-25-2，25ml/min为流动相)分离对映异构体，以得到两种个别对映异构体化合物549N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(33.96mg，86.32μmol，32.04％产率)和化合物573N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.03314g，84.23μmol，31.26％产率)
化合物549：
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.98-1.06(m,3H),1.30-1.41(m,1H),1.65-1.79(m,1H),1.79-1.93(m,1H),1.95-2.06(m,3H),2.07-2.21(m,1H),2.22-2.34(m,1H),2.79-3.16(m,1H),3.43-4.04(m,1H),5.25-5.77(m,3H),7.38-7.52(m,1H),7.90-8.03(m,1H),8.08-8.20(m,2H),8.44-8.55(m,1H),10.48-10.60(m,1H),13.54-13.68(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值393.4；实测值416.0；Rt＝3.349min。
RT(己烷-IPA-MeOH，50-25-25，25ml/min)＝30.1052min。
化合物573：
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.99-1.05(m,3H),1.29-1.42(m,1H),1.71-1.79(m,1H),1.85-1.93(m,1H),1.96-2.06(m,3H),2.08-2.20(m,1H),2.23-2.34(m,1H),2.75-3.27(m,1H),3.44-4.05(m,1H),5.19-5.74(m,3H),7.36-7.53(m,1H),7.89-8.05(m,1H),8.07-8.21(m,2H),8.42-8.55(m,1H),10.47-10.57(m,1H),13.42-13.68(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值393.4；实测值394.0；Rt＝3.330min。
RT(己烷-IPA-MeOH，50-25-25，25ml/min)＝13.1472min。
实施例328.外消旋N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(1H-吡唑-5-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物526)、N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(1H-吡唑-5-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物675)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(1H-吡唑-5-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物676)的合成
步骤1：N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(1H-吡唑-5-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
向(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(1H-吡唑-5-基)苯基]哌啶(125mg，397.77μmol，2HCl)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(117.46mg，397.77μmol)和三乙胺(241.50mg，2.39mmol，332.65μL)的溶液中分批添加HATU(166.37mg，437.55μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌3h，用水(30ml)淬灭且用EtOAc(3*20ml)萃取。将合并的有机层用盐水(2*20ml)洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中蒸发，以获得N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(1H-吡唑-5-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.2g，385.65μmol，96.95％产率)。
此化合物不经纯化即用于下一步骤。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值518.3；实测值519.2；Rt＝1.190min。
步骤2：外消旋N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(1H-吡唑-5-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物526)的合成
向N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(1H-吡唑-5-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.2g，385.65μmol)于DCM(5mL)中的溶液中添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(4.00g，109.71mmol，5mL)。将所得混合物在25℃下搅拌12h，移除溶剂且通过HPLC(40-60％0-5min 0.1％ NH3-甲醇，流速：30ml/min(装载泵4ml/min甲醇)，目标质量419，柱：YMC Triart C18 100x20mm，5um)纯化残余物，以得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(1H-吡唑-5-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(40mg，95.58μmol，24.78％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.98-1.08(m,3H),1.29-1.39(m,1H),1.63-1.74(m,1H),1.80-1.92(m,1H),1.95-2.04(m,4H),2.12-2.29(m,1H),2.72-3.24(m,1H),3.35-4.06(m,1H),5.14-5.58(m,1H),5.58-5.65(m,2H),6.68(s,1H),7.30-7.39(m,2H),7.42-7.51(m,1H),7.66-7.74(m,1H),7.74-7.81(m,2H),7.95-8.05(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值418.2；实测值419.2；Rt＝1.805min。
步骤3：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(1H-吡唑-5-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物675)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(1H-吡唑-5-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物676)的合成
对N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(1H-吡唑-5-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(200mg，477.91μmol)进行手性分离(样品信息：IC-II(250*20，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，12ml/min)，以获得N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(1H-吡唑-5-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(88mg，210.28μmol，88.00％产率)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(1H-吡唑-5-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(91mg，217.45μmol，91.00％产率)。
化合物675：
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.02(m,3H),1.35(m,1H),1.69(m,1H),1.88(m,1H),1.99(m,4H),2.21(m,1H),2.98(m,1H),3.75(m,1H),5.59(m,3H),6.68(m,1H),7.43(m,3H),7.78(m,3H),7.99(m,1H),10.50(m,1H),12.84(m,1H)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值418.2；实测值419.2；Rt＝1.016min。
RT(己烷-IPA-MeOH，60-20-20，12ml/min)＝41.6162min。
化合物676：
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.00(m,3H),1.34(m,1H),1.68(m,1H),1.86(m,1H),1.99(m,4H),2.18(m,2H),3.23(m,1H),3.59(m,1H),5.59(m,3H),6.68(s,1H),7.35(m,2H),7.49(m,1H),7.77(m,3H),7.99(m,1H),10.49(m,1H)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值418.2；实测值419.2；Rt＝1.011min。
RT(己烷-IPA-MeOH，60-20-20，12ml/min)＝59.3602min。
实施例329.外消旋N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(1H-吡唑-4-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物525)、rel-2-((2R,5S)-2-(4-(1H-吡唑-4-基)苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺(化合物628)和rel-2-((2R,5S)-2-(4-(1H-吡唑-4-基)苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺(化合物629)的合成
步骤1：N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(1H-吡唑-4-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(1H-吡唑-4-基)苯基]哌啶(250mg，795.54μmol，2HCl)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(234.92mg，795.54μmol)和三乙胺(402.50mg，3.98mmol，554.41μL)一起混合于二甲基甲酰胺(3mL)中。将所获得的混合物简单加热至60-70℃，直到形成澄清溶液。冷却至5-10℃之后，在5min期间分批添加HATU(332.74mg，875.09μmol)。将所得溶液在20℃下搅拌4h。然后，将其用水(15ml)稀释且用乙酸乙酯(30ml)萃取。将有机层用水(2x15 ml)和盐水(15ml)洗涤，经Na2SO4干燥且在减压下蒸发，得到N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(1H-吡唑-4-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(330mg，636.32μmol，79.99％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz)δ0.83(m,3H),1.13(m,1H),1.41(s,9H),1.67(m,1H),1.94(m,1H),2.00(d,4H),2.16(m,1H),2.28(m,1H),3.00(m,1H),5.10-5.57(m,2H),7.22-7.33(m,2H),7.26(m,1H),7.48(m,2H),7.60-7.85(m,3H),11.03(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+Н]+m/z：计算值518.3；实测值519.4；Rt＝1.171min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(1H-吡唑-4-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物525)的合成
将于99％1,4-二噁烷中的4.0M氯化氢(2.32g，6.36mmol，2.30mL，10％纯度)添加到N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(1H-吡唑-4-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(330mg，636.32μmol)于二氯甲烷(10mL)中的溶液中。将所得混合物在20℃下搅拌18h。然后，将其在减压下浓缩且使残余物经历HPLC(柱：YMCTriart C18 100x20 mm，5um；40-40-80％0-1-5min 0.1％ NH3-甲醇，流速：30ml/min)，得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(1H-吡唑-4-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(100mg，238.95μmol，37.55％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.93-1.05(m,3H),1.27-1.39(m,1H),1.61-1.74(m,1H),1.80-1.93(m,1H),2.00(d,4H),2.11-2.28(m,1H),2.71-3.22(m,1H),3.41-4.04(m,1H),5.05-5.73(m,3H),7.22-7.33(m,2H),7.41-7.54(m,1H),7.54-7.61(m,2H),7.87-8.17(m,3H),10.42-10.64(m,1H),12.89(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+Н]+m/z：计算值418.2；实测值419.2；Rt＝1.761min。
步骤3：rel-2-((2R,5S)-2-(4-(1H-吡唑-4-基)苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺(化合物628)和rel-2-((2R,5S)-2-(4-(1H-吡唑-4-基)苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺(化合物629)的合成
化合物525外消旋-2-((2R,5S)-2-(4-(1H-吡唑-4-基)苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺(103mg，246.12μmol)的手性分离使用(Chiralpak IA-II(250*20mm，5mkm)柱；以IPA-MeOH，50-50为流动相；流速：10mL/min；柱温：22℃；波长：254nm)进行，得到化合物628rel-2-((2R,5S)-2-(4-(1H-吡唑-4-基)苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺(41.65mg，99.52μmol，40.44％产率)(保留时间(对映异构体A)＝22.41min)和化合物629rel-2-((2R,5S)-2-(4-(1H-吡唑-4-基)苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺(38.47mg，91.93μmol，37.35％产率)(保留时间(对映异构体B)＝35.83min)。
化合物628：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.96-1.03(m,3H),1.28-1.37(m,1H),1.63-1.73(m,1H),1.80-1.92(m,1H),1.97-2.03(m,3H),2.03-2.16(m,1H),2.18-2.28(m,1H),2.70-3.22(m,1H),3.40-4.04(m,1H),5.09-5.66(m,3H),7.22-7.33(m,2H),7.42-7.51(m,1H),7.56-7.63(m,2H),7.86-7.94(m,1H),7.95-8.20(m,2H),10.40-10.61(m,1H),12.90(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+Н]+m/z：计算值418.2；实测值419.2；Rt＝1.998min。
RT(IPA-MeOH，50-50，10ml/min)＝21.379min
化合物629：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.98-1.03(m,3H),1.28-1.40(m,1H),1.62-1.74(m,1H),1.80-1.91(m,1H),1.97-2.03(m,3H),2.02-2.16(m,1H),2.17-2.28(m,1H),2.73-3.21(m,1H),3.40-4.04(m,1H),5.08-5.66(m,3H),7.23-7.33(m,2H),7.42-7.50(m,1H),7.56-7.65(m,2H),7.82-7.97(m,1H),7.97-8.05(m,1H),8.05-8.22(m,1H),10.45-10.61(m,1H),12.90(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+Н]+m/z：计算值418.2；实测值419.2；Rt＝1.990min。
RT(IPA-MeOH，50-50，10ml/min)＝33.245min。
实施例330.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(2-(3-羟基-4-甲基苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物580)的合成
步骤1：外消旋-(5-(2-((2R,5S)-2-(3-羟基-4-甲基苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-3-甲基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
向2-甲基-5-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]苯酚(0.25g，1.03mmol，HCl)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(241.67mg，818.42μmol)和TEA(732.48mg，7.24mmol，1.01mL)于DMF(5mL)中的溶液中分批添加HATU(432.52mg，1.14mmol)。将混合物在25℃下搅拌2h。将反应混合物提交用于HPLC(0-1-6min45-45-90％水-MeOH(NH3 0.1％)，流速30ml/min；柱：YMC-Actus Triart C18 100*20mml)，以得到N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(3-羟基-4-甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(69mg，142.98μmol，13.83％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.03(d,3H),1.40(m,1H),1.42(s,9H),1.92(m,3H),2.08(m,4H),2.17(s,3H),5.25(m,1H),6.62(m,1H),6.67(m,1H),7.05(m,1H),7.91(m,1H),8.44(m,1H),9.05(m,1H),9.27(m,1H),11.01(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值482.4；实测值483.2；Rt＝3.265min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(2-(3-羟基-4-甲基苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物580)的合成
将N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(3-羟基-4-甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(69mg，142.98μmol)溶解于二噁烷(1mL)和水(1.5mL)中且在95℃下搅拌14h。蒸发溶剂。通过反相HPLC(40-90％0-9.5min水-MeOH(NH30.1％))纯化残余物，以得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(3-羟基-4-甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(29mg，75.83μmol，53.03％产率)。产物含有6％顺式异构体。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.95-1.02(m,3H),1.25-1.35(m,1H),1.64-1.73(m,1H),1.79-1.88(m,1H),1.97-2.02(m,3H),2.03-2.10(m,5H),2.74-3.22(m,1H),3.39-4.02(m,1H),5.00-5.53(m,1H),5.55-5.62(m,2H),6.59-6.67(m,1H),6.69-6.77(m,1H),7.00-7.05(m,1H),7.41-7.49(m,1H),7.95-8.02(m,1H),9.21(br.s,1H),10.44(br.s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值382.4；实测值383.2；Rt＝2.173min。
实施例331.外消旋-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(1H-吲唑-4-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物690)、N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(2H-吲唑-4-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物785)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(2H-吲唑-4-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物790)的合成
步骤1：N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(1H-吲唑-4-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
向4-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]-1H-吲唑(360mg，1.43mmol，HCl)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(422.25mg，1.43mmol)和三乙胺(1.01g，10.01mmol，1.40mL)于DMF(3mL)中的溶液中分批添加HATU(598.09mg，1.57mmol)。将混合物在25℃下搅拌2h。将反应混合物用水(50ml)稀释且将产物用EtOAc(3*25ml)萃取。将合并的有机层用水、盐水洗涤且经Na2SO4干燥。将溶剂蒸发，以得到N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(1H-吲唑-4-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(320mg，649.66μmol，45.43％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,400MHz):δ(ppm)1.11(m,3H),1.40(s,9H),1.95(m,4H),2.16(s,3H),2.21(m,2H),2.65(m,2H),2.85(m,2H),7.05(m,1H),7.44(d,2H),7.91(s,1H),8.12(s,1H),8.43(s,1H),11.07(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc+H]+m/z：计算值492.3；实测值392.2；Rt＝1.278min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(1H-吲唑-4-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物690)的合成
向N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(1H-吲唑-4-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(320mg，649.66μmol)于DCM(10mL)中的搅拌溶液中添加于99％1,4-二噁烷中的4M氯化氢(236.87mg，6.50mmol，296.09μL)。将反应混合物在25℃下搅拌2h。在真空中蒸发溶剂，以得到粗产物(220mg)，其通过反相HPLC(0-5min 20-70％水-甲醇(NH3 0.1％)，流速30ml/min(装载泵4ml/min甲醇(NH3 0.1％))，目标质量392.46柱：YMC-Actus Triart C18 100*20mml.D.S-5um)进行纯化，以得到呈2种级分的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(1H-吲唑-4-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(42mg，107.02μmol，16.47％产率)：
第1级分：42mg(100％ LCMS)
第2级分：78mg(89％反式异构体；9.5％顺式异构体)
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.01(m,3H),1.32(m,1H),1.90(m,3H),2.02(s,3H),2.21(m,2H),3.54(m,1H),5.74(m,3H),7.05(m,1H),7.31(t,1H),7.44(d,1H),7.49(s,1H),8.03(s,1H),8.13(s,1H),10.45(m,1H),13.10(s,1H)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值392.2；实测值393.2；Rt＝1.626min。
步骤3：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(2H-吲唑-4-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物785)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(2H-吲唑-4-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物790)的合
使用(IA-II(250*20，5mkm)柱，以己烷-IPA-MeOH，40-30-30为流动相；流速12ml/min；24℃，波长：205nm，210nm)对N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(2H-吲唑-4-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(82.0mg，208.94μmol)进行手性分离，得到呈黄色固体的化合物785N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(2H-吲唑-4-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(49.32mg，125.67μmol，60.15％产率)(RT＝65.675min)和呈黄色固体的化合物790N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(2H-吲唑-4-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(31.2mg，79.50μmol，38.05％产率)(RT＝46.697min)。
化合物785：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.99-1.03(m,3H),1.28-1.34(m,1H),1.74-1.86(m,1H),1.86-1.92(m,1H),1.93-2.04(m,3H),2.13-2.33(m,2H),3.31-3.37(m,1H),3.54-4.09(m,1H),5.54-5.93(m,3H),7.00-7.08(m,1H),7.29-7.33(m,1H),7.39-7.45(m,1H),7.50(s,1H),7.82-8.03(m,1H),8.03-8.17(m,1H),10.33-10.58(m,1H),13.11(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值392.2；实测值393.2；Rt＝1.777min。
RT(己烷-IPA-MeOH，40-30-30，12ml/min)＝34.8612min。
化合物790：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.99-1.03(m,3H),1.27-1.37(m,1H),1.73-1.86(m,1H),1.86-1.92(m,1H),1.93-2.05(m,3H),2.12-2.32(m,2H),2.94-3.01(m,0.2H),3.32-3.36(m,0.8H),3.51-4.12(m,1H),5.53-5.91(m,3H),6.98-7.08(m,1H),7.26-7.32(m,1H),7.32-7.44(m,1H),7.44-7.52(m,1H),7.84-8.03(m,1H),8.03-8.15(m,1H),10.36-10.59(m,1H),13.10(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值392.3；实测值393.2；Rt＝1.771min。
RT(己烷-IPA-MeOH，40-30-30，12ml/min)＝25.8692min。
实施例332.N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(1H-吲唑-4-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物911)和N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(1H-吲唑-4-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物928)的合成
步骤1：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(1H-吲唑-4-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
向4-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]-1H-吲唑(475mg，1.32mmol，2HCl)、2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(275.82mg，1.32mmol)和三乙胺(667.07mg，6.59mmol，918.83μL)于二甲基甲酰胺(4mL)中的搅拌混合物中添加HATU(551.45mg，1.45mmol)。将所得反应混合物在20℃下搅拌4h。然后，使其经历HPLC(30-30-55％0-1-6minH2O/ACN/0.1％ NH4OH，流速：30ml/min；柱：YMC Triart C18 100x20 mm，5um)，得到N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(1H-吲唑-4-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(88mg，216.49μmol，16.42％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值406.2；实测值407.2；Rt＝2.041min。
步骤2：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(1H-吲唑-4-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物911)和N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(1H-吲唑-4-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物928)的合成
通过手性HPLC(柱：Chiralpak IA-I(250*20mm，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH50-25-25；流速：12mL/min；5次注入，17mg/注入，V＝6L，时间＝9,3h.)将N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(1H-吲唑-4-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(88mg，216.49μmol)分成对映异构体，得到：化合物911N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(1H-吲唑-4-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(31.7mg，77.99μmol，72.05％产率)(其中保留时间＝62.752min)和化合物928N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(1H-吲唑-4-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(27.9mg，68.64μmol，63.41％产率)(其中保留时间＝75.464min)。
化合物911：
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.06(m,6H),1.32(m,1H),1.85(m,2H),2.19(m,2H),2.29(m,1H),2.39(m,1H),2.97(m,1H),3.54(m,1H),5.76(m,3H),7.06(d,1H),7.31(t,1H),7.44(d,1H),7.51(s,1H),8.07(m,2H),10.46(m,1H),13.11(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值406.2；实测值407.4；Rt＝2.015min。
RT(己烷-IPA-MeOH，50-25-25，12ml/min)＝55.1092min。
化合物928：
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.05(m,6H),1.32(m,1H),1.85(m,2H),2.18(m,2H),2.30(m,1H),2.39(m,2H),3.72(m,1H),5.76(m,3H),7.06(d,1H),7.31(t,1H),7.44(d,1H),7.51(s,1H),8.09(m,2H),10.47(m,1H),13.11(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值406.2；实测值407.4；Rt＝2.008min。
RT(己烷-IPA-MeOH，50-25-25，12ml/min)＝72.1832min。
实施例333.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(3-氧代异吲哚啉-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物582、化合物657和化合物656)的合成
步骤1：(3-甲基-5-(2-(5-甲基-2-(3-氧代异吲哚啉-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
将DIPEA(322.68mg，2.50mmol，434.88μL)添加到相应2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(294.90mg，998.68μmol)和6-(5-甲基-2-哌啶基)异吲哚啉-1-酮(0.23g，998.68μmol)于DMF(5mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU(417.70mg，1.10mmol)。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC，以得到纯的N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-(3-氧代异吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(291.6mg，574.49μmol，57.53％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.03(d,3H),1.48(s,9H),1.68(m,1H),1.92(m,1H),2.18(m,3H),2.22(s,3H),2.78(m,1H),3.86(m,1H),4.36(s,2H),5.55(m,1H),7.68(m,3H),7.96(m,1H),8.49(m,2H),8.98(m,1H),11.08(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值507.2；实测值508.2；Rt＝2.791min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(3-氧代异吲哚啉-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺的合成
将N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-(3-氧代异吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.29g，571.34μmol)溶解于二噁烷(2mL)和水(5mL)的混合物中。然后，将反应混合物在100℃下搅拌14h。在反应完成(通过LCMS监测)之后，在减压下浓缩所得悬浮液。使所获得的固体经历HPLC，以得到纯的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(3-氧代异吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(112.2mg，275.36μmol，48.20％产率)。样品含有95％反式异构体和5％顺式异构体。
化合物582：1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.01(d,3H),1.33(m,1H),1.66(m,1H),1.84(m,1H),1.97(s,3H),2.02(m,1H),2.28(m,1H),3.02(m,1H),3.78(m,1H),4.34(s,2H),5.57(m,3H),7.48(m,2H),7.59(m,2H),8.02(m,1H),8.55(s,1H),10.54(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值407.2；实测值408.2；Rt＝1.300min。
步骤3：手性分离(化合物657和化合物656)
使用(Chiralpak AS(250*20mm，10mkm)柱；以己烷-IPA-MeOH 60-20-20为流动相；流速：12mL/min；4pin)进行N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(3-氧代异吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(60mg，147.25μmol)的手性分离，得到呈米色固体的化合物656N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(3-氧代异吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(27.22mg，66.80μmol，45.37％产率)(RT(IC，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min)＝40.546min)和呈米色固体的化合物657N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(3-氧代异吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(26.87mg，65.94μmol，44.78％产率)(IC，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min)＝50.183min)。
化合物656：保留时间：40.54min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.01(m,3H),1.34(m,1H),1.65(m,1H),1.85(m,1H),1.99(m,3H),2.14(m,1H),2.26(m,1H),3.21(m,1H),3.76(m,1H),4.33(m,2H),5.61(m,3H),7.47(m,2H),7.58(m,2H),7.98(m,1H),8.54(s,1H),10.53(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值407.2；实测值408.2；Rt＝1.687min。
化合物657：保留时间：50.18min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.01(m,3H),1.34(m,1H),1.66(m,1H),1.84(m,1H),1.99(m,3H),2.14(m,1H),2.24(m,1H),3.05(m,1H),3.66(m,1H),4.33(m,2H),5.61(m,3H),7.55(m,4H),7.98(m,1H),8.54(m,1H),10.53(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值407.2；实测值408.2；Rt＝1.696min。
实施例334.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(2-(3-氯-4,5-二氟苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物857和化合物847)的合成
步骤1：外消旋-(5-(2-((2R,5S)-2-(3-氯-4,5-二氟苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-3-甲基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
向(2R,5S)-2-(3-氯-4,5-二氟苯基)-5-甲基哌啶(200mg，814.02μmol)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(240.37mg，814.02μmol)和TEA(164.74mg，1.63mmol，226.92μL)于DCM(3mL)中的搅拌混合物中添加HATU(340.46mg，895.42μmol)。将所得反应混合物在20℃下搅拌5h。然后，使其经历HPLC(55-90％0-5minH2O/MeOH/0.1％ NH4OH，流速：30ml/min；柱：YMC Triart C18 100x20 mm，5um)，得到N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(3-氯-4,5-二氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(220mg，420.67μmol，51.68％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值522.2；实测值523.2；Rt＝3.873min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(2-(3-氯-4,5-二氟苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺的合成
将水(1.00g，55.51mmol，1mL)添加到N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(3-氯-4,5-二氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(220mg，420.67μmol)于二噁烷(2mL)中的溶液中。将所得混合物在100℃下搅拌15h。然后，使其经历HPLC(60-60-90％0-1-6min H2O/MeOH/0.1％ NH4OH，流速：30ml/min；柱：YMC Triart C18100x20 mm，5um)，得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(3-氯-4,5-二氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(145mg，342.91μmol，81.51％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值422.2；实测值423.2；Rt＝2.565min。
步骤3：手性分离(化合物847和化合物857)
通过手性HPLC(Chiralpak AD-H(250*20mm，5mkm)；己烷-IPA-MeOH，50-25-25，10mL/min；柱温：20℃)将N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(3-氯-4,5-二氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(145mg，342.91μmol)分成对映异构体，得到：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(3-氯-4,5-二氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(59mg，139.53μmol，81.38％产率)(其中保留时间＝18.50min)(化合物847)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(3-氯-4,5-二氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(62mg，146.62μmol，85.52％产率)(其中保留时间＝25.84min)(化合物857)。
化合物847于分析条件下(柱：AD-H，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min为流动相)的保留时间为18.96min且化合物857的保留时间为32.05min。
化合物847：保留时间：18.96min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.96-1.00(m,3H),1.21-1.36(m,1H),1.58-1.68(m,1H),1.80-1.91(m,1H),1.96-2.04(m,4H),2.12-2.24(m,1H),2.71-3.25(m,1H),3.41-4.05(m,1H),5.04-5.50(m,1H),5.56-5.69(m,2H),7.28-7.42(m,2H),7.42-7.50(m,1H),7.91-8.05(m,1H),10.34-10.64(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值422.2；实测值423.2；Rt＝2.680min。
化合物857：保留时间：32.05min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.97-1.01(m,3H),1.23-1.35(m,1H),1.57-1.66(m,1H),1.82-1.91(m,1H),1.95-2.04(m,4H),2.12-2.25(m,1H),2.71-3.24(m,1H),3.42-4.05(m,1H),5.02-5.50(m,1H),5.56-5.68(m,2H),7.28-7.42(m,2H),7.42-7.51(m,1H),7.85-8.05(m,1H),10.38-10.71(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值422.2；实测值423.2；Rt＝2.684min。
实施例335.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(2-(3-氯-5-(三氟甲基)苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物665和化合物679)的合成
步骤1：外消旋-(5-(2-((2R,5S)-2-(3-氯-5-(三氟甲基)苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-3-甲基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
将2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(265.82mg，900.21μmol)、(2R,5S)-2-[3-氯-5-(三氟甲基)苯基]-5-甲基哌啶(250mg，900.21μmol)、HATU(342.29mg，900.21μmol)和TEA(91.09mg，900.21μmol，125.47μL)混合于DMSO(2mL)中且在20℃下搅拌3h。使反应混合物经历HPLC，2-10min 45-60％水/ACN(装载泵4ml ACN)柱：TRIART 100*20 5微米。获得N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-[3-氯-5-(三氟甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(306mg，551.36μmol，61.25％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值554.2；实测值555.2；Rt＝4.179min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(2-(3-氯-5-(三氟甲基)苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺的合成
将N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-[3-氯-5-(三氟甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(306mg，551.36μmol)溶解于用HCl饱和的二噁烷(4mL)中。剧烈搅拌1h之后，在真空中浓缩反应混合物。获得N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[3-氯-5-(三氟甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(270mg，粗品)。使粗产物经历手性分离。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值454.2；实测值455.2；Rt＝1.223min。
步骤3：手性分离(化合物665和化合物679)
使用(Chiralpak AD-H-III 250*20，5mkm柱；以己烷-IPA-MeOH，60-20-20为流动相；流速12mL/min；注入体积：900mkl)分离外消旋N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[3-氯-5-(三氟甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(150mg，329.76μmol)，得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[3-氯-5-(三氟甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(20mg，43.97μmol，26.67％产率)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[3-氯-5-(三氟甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(53mg，116.52μmol，70.67％产率)。化合物665于分析条件下(柱：AD-H，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.6ml/min为流动相)的保留时间为31.13min且化合物679的保留时间为13.31min。
化合物665：保留时间：31.13min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99(m,3H),1.61(m,1H),1.88(m,1H),2.01(m,4H),2.26(m,3H),3.76(m,1H),5.37(m,1H),5.76(s,2H),7.48(m,1H),7.57(m,1H),7.66(m,1H),7.77(m,1H),7.99(m,1H),10.61(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值454.2；实测值455.2；Rt＝2.869min。
化合物679：保留时间：13.31min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98(m,3H),1.30(m,1H),1.58(m,1H),1.86(m,1H),2.02(m,4H),2.20(m,2H),3.82(m,1H),5.37(m,1H),5.61(m,2H),7.45(m,1H),7.57(m,1H),7.66(m,1H),7.77(m,1H),7.96(m,1H),10.57(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值454.2；实测值455.2；Rt＝2.874min。
实施例336.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(2-(3,4-二氟苯基)-4,4-二氟-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物684和化合物705)的合成
步骤1：外消旋-(5-(2-((2R,5R)-2-(3,4-二氟苯基)-4,4-二氟-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-3-甲基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
向(2S,5S)-2-(3,4-二氟苯基)-4,4-二氟-5-甲基哌啶(0.3g，1.21mmol)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(358.32mg，1.21mmol)和TEA(613.94mg，6.07mmol，845.65μL)中的溶液中分批添加HATU(507.52mg，1.33mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌3h，溶解于水(50ml)中且用EtOAc(3*20ml)萃取。将合并的有机层用盐水(2*25ml)洗涤，经Na2SO4干燥且移除溶剂，以得到N-[5-[[2-[(2S,5S)-2-(3,4-二氟苯基)-4,4-二氟-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.6g，1.14mmol，94.27％产率)。此化合物不经进一步纯化即用于下一步骤。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.07(d,3H),1.42(s,9H),2.18(s,3H),2.87(m,1H),2.97(m,1H),3.73(m,1H),4.02(m,1H),5.75(m,1H),7.23(m,1H),7.43(m,3H),7.95(m,1H),8.46(m,1H),9.08(m,1H),11.15(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值524.2；实测值525.2；Rt＝1.475min。
步骤2：外消旋-N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-((2R,5R)-2-(3,4-二氟苯基)-4,4-二氟-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺的合成
将N-[5-[[2-[(2S,5S)-2-(3,4-二氟苯基)-4,4-二氟-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.6g，1.14mmol)于DCM(20mL)以及于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(5g，137.13mmol，6.25mL)中的溶液在25℃下搅拌12h。移除溶剂且通过HPLC(50-65％0-5min水/MeOH/0.1％ NH3，流速：30ml/min(装载泵4ml/min MeOH)目标质量425柱：YMC Triart C18 100x20 mm，5um)纯化残余物(0.5g)，以获得N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-2-(3,4-二氟苯基)-4,4-二氟-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(127mg，299.25μmol，26.16％产率)。此化合物不经H-NMR即用于手性拆分。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值424.2；实测值425.2；Rt＝2.412min。
步骤3：手性分离(化合物684和化合物705)
对N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-2-(3,4-二氟苯基)-4,4-二氟-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(127mg，299.25μmol)进行手性分离(样品信息：OJ-H-I(250*.0,5mkm)，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，12ml/min)，以获得N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5R)-2-(3,4-二氟苯基)-4,4-二氟-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(49mg，115.46μmol，77.17％产率)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-2-(3,4-二氟苯基)-4,4-二氟-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(49mg，115.46μmol，77.17％产率)。
化合物684于分析条件下(柱：AD-H，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min为流动相)的保留时间为38.68min且化合物705的保留时间为27.92min。
化合物684：保留时间：38.68min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.05(m,3H),2.00(m,3H),2.19(m,2H),2.86(m,1H),3.41(m,1H),4.03(m,1H),5.56(m,1H),5.71(m,2H),7.14(m,1H),7.44(m,3H),7.99(m,1H),10.57(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值424.2；实测值425.2；Rt＝2.424min。
化合物705：保留时间：27.92min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.05(m,3H),2.00(m,3H),2.19(m,2H),2.86(m,1H),3.41(m,1H),3.95(m,1H),5.68(m,3H),7.44(m,4H),7.99(m,1H),10.58(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值424.2；实测值425.2；Rt＝2.426min。
实施例337.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(3-氨磺酰基苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物688)的合成
步骤1：外消旋-(3-甲基-5-(2-((2R,5S)-5-甲基-2-(3-氨磺酰基苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
向3-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]苯磺酰胺(490mg，1.93mmol)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(568.88mg，1.93mmol)和TEA(584.83mg，5.78mmol，805.55μL)于DMF(4mL)中的搅拌混合物中添加HATU(805.76mg，2.12mmol)。将所得反应混合物在20℃下搅拌4h。然后，使其经历HPLC(柱：YMC-Actus Triart C18 100*20mm，5um；40-90％1-6min水-MeOH(NH3 0.1％)，流速30ml/min)，得到N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(3-氨磺酰基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(200mg，376.21μmol，19.53％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值531.4；实测值532.2；Rt＝2.752min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(3-氨磺酰基苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物688)的合成
将N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(3-氨磺酰基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(200mg，376.21μmol)溶解于水(1.00g，55.49mmol，1mL)和二噁烷(2mL)的混合物中。将所得溶液在100℃下搅拌18h。然后，使其经历HPLC(柱：YMC-Actus Triart C18 100*20mm，5um；0-5min 20-70水-MeOH(NH3 0.1％))，得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(3-氨磺酰基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(45mg，104.29μmol，27.72％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.01(m,3H),1.35(m,1H),1.64(m,1H),1.87(m,1H),1.99(m,5H),2.18(m,2H),2.96(m,1H),3.79(m,1H),5.60(m,3H),7.46(m,2H),7.58(m,2H),7.72(d,1H),7.77(d,1H),8.00(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值431.4；实测值432.2；Rt＝1.582min。
实施例338.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(3-(甲基磺酰基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物667、化合物901、化合物895)的合成
步骤1：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(3-(甲基磺酰基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺的合成
在25℃下，在0.5h内，向(2R,5S)-5-甲基-2-(3-甲基磺酰基苯基)哌啶(250.00mg，986.74μmol)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(291.37mg，986.74μmol)和TEA(998.48mg，9.87mmol，1.38mL)于DMF(5mL)中的搅拌溶液中小批量添加HATU(412.71mg，1.09mmol)。将所得反应混合物在25℃下搅拌18h。在真空中浓缩反应混合物，将残余物溶解于二氯甲烷(10mL)中，且一次性添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(15.75g，60.04mmol，15.00mL，13.9％纯度)。将所得混合物在25℃下搅拌3h，然后在真空中浓缩。通过反相HPLC(柱：YMC Triart C18 100x20 mm，5um；流动相：35-45％0-5min水/MeOH/0.1％ NH3，流速：30ml/min(装载泵4ml/min MeOH))纯化残余物，以得到呈白色固体的化合物667N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(3-甲基磺酰基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(111mg，257.83μmol，26.13％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.01(m,3H),1.35(m,1H),1.62(m,1H),1.87(m,1H),1.99(m,3H),2.19(m,2H),3.21(m,4H),3.77(m,1H),5.41(m,1H),5.62(m,2H),7.45(m,1H),7.65(m,2H),7.83(m,2H),7.97(m,1H),10.54(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值430.2；实测值431.2；Rt＝1.744min。
步骤2：手性分离(化合物901和化合物895)
柱：Chiralpak IA-II(250*20mm，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH 40-30-30；流速：12mL/min；m＝0.09г，2次注入，45mL/注入，V＝2L，2.5h，RT(化合物895)＝20.805min，RT(化合物901)＝37.044min。在以下条件下另外纯化对映异构体：化合物895N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(3-甲基磺酰基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(30.78mg，71.50μmol，32.68％产率)。柱：Chiralcel OJ-H-I(250*20mm，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH 50-25-25；流速：12mL/min；m＝0,04г，2次注入，20mL/注入，V＝2L，2小时(RT＝28.825min)。化合物901N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(3-甲基磺酰基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(30.81mg，71.56μmol，32.71％产率)。柱：Chiralpak IC-II(250*20mm，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH 50-25-25；流速：12mL/min；m＝0,04г，2次注入，20mL/注入，V＝1.5L，2.5小时(RT＝31.957min)。化合物901于分析条件下(柱：OJ-H，己烷-IPA-MeOH 50-25-25，0.6ml/min为流动相)的保留时间为31.97min且化合物895的保留时间为28.82min。
化合物901：保留时间：31.97min
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.04(m,3H),1.32(m,1H),1.64(m,1H),1.88(m,1H),2.00(m,3H),2.21(m,1H),3.22(m,3H),3.42(m,2H),3.78(m,1H),5.61(m,3H),7.46(d,1H),7.67(m,2H),7.83(m,2H),7.98(d,1H),10.55(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值430.2；实测值431.2；Rt＝1.703min。
化合物895：保留时间：28.82min
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.02(m,3H),1.34(m,1H),1.61(m,1H),1.89(m,1H),2.00(m,3H),2.18(m,2H),3.22(m,4H),3.78(dd,1H),5.61(m,3H),7.46(d,1H),7.66(m,2H),7.84(m,2H),7.98(d,1H),10.55(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值430.2；实测值431.2；Rt＝1.768min。
实施例339.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(3-(N-甲基氨磺酰基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物691)的合成
步骤1：外消旋-(3-甲基-5-(2-((2R,5S)-5-甲基-2-(3-(N-甲基氨磺酰基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
向N-甲基-3-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]苯磺酰胺(535mg，1.99mmol)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(588.66mg，1.99mmol)和TEA(605.16mg，5.98mmol，833.56μL)于DMF(4mL)中的搅拌混合物中添加HATU(833.78mg，2.19mmol)。将所得反应混合物在20℃下搅拌4h。然后，使其经历HPLC(柱：YMC-ActusTriart C18 100*20mm，5um；40-90％1-6min水-MeOH(NH3 0.1％)，流速30ml/min)，得到N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[3-(甲基氨磺酰基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(242mg，443.51μmol，22.25％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值545.4；实测值546.2；Rt＝2.969min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(3-(N-甲基氨磺酰基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物691)的合成
将N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[3-(甲基氨磺酰基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(242mg，443.51μmol)溶解于水(1.00g，55.51mmol，1mL)和二噁烷(2mL)的混合物中。将所得溶液在100℃下搅拌18h。然后，使其经历HPLC(柱：YMC-Actus Triart C18 100*20mm，5um；0-5min 30-70％水-MeOH(NH3 0.1％)，流速30ml/min)，得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[3-(甲基氨磺酰基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(107mg，240.16μmol，54.15％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.01(m,3H),1.34(m,1H),1.62(m,1H),1.89(m,1H),1.99(m,3H),2.12(m,2H),2.36(m,1H),2.40(m,3H),2.87(m,1H),3.77(m,1H),5.60(m,3H),7.45(m,1H),7.58(m,3H),7.68(m,2H),7.97(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值445.4；实测值446.2；Rt＝1.824min。
实施例340.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(2-(甲基氨基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物852和化合物855)的合成
步骤1：(3-甲基-5-(2-(5-甲基-2-(2-(甲基氨基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
将2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(338.91mg，1.15mmol)和N-甲基-5-(5-甲基-2-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-2-胺(0.3g，1.15mmol)混合于DMF(20mL)中。将反应悬浮液冷却至0℃且添加HATU(523.68mg，1.38mmol)，随后添加TEA(348.42mg，3.44mmol，479.91μL)，且在环境温度下搅拌14h。将反应混合物在真空中蒸发且倒入到水(100ml)中且用EtOAc(2x40 ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(2*30ml)洗涤，经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到产物N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-[2-(甲基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.35g，649.76μmol，56.61％产率)。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ(ppm)1.11(d,3H),1.22(d,3H),1.44(m,1H),1.53(s,9H),1.98(m,1H),2.24(s,3H),2.30(m,3H),3.11(m,1H),4.56(m,1H),5.48(m,1H),6.68(m,1H),7.02(m,1H),7.55(m,3H),8.04(m,1H),8.35(m,1H),9.40(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值538.2；实测值539.2；Rt＝1.356min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(2-(甲基氨基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺的合成
在室温下将二噁烷(20mL)添加到N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-[2-(甲基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.35g，649.76μmol)于水(10mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在100℃下搅拌12h，然后在真空中蒸发且通过制备型(55-55-75％0-1-6min H2O/MeOH/0.1％ NH4OH，流速：30ml/min(装载泵4ml/min MeOH)目标质量)纯化0.25g所获得的粗产物，以得到产物N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(甲基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.12g，273.63μmol，42.11％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值438.2；实测值439.2；Rt＝1.828min。
步骤3：手性分离(化合物852和化合物855)
使N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(甲基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(120.00mg，273.63μmol)经历手性HPLC纯化(柱：IA-II(250*20,5mkm)，洗脱液：己烷-IPA-MeOH，50-25-25，流速：12mL/min)，以得到两种个别对映异构体化合物855N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(甲基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.05076g，115.75μmol，42.30％产率)和化合物852N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[2-(甲基氨基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(58.16mg，132.62μmol，48.47％产率)。
化合物852于分析条件下(柱：IC，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min为流动相)的保留时间为38.91min且化合物855的保留时间为29.63min。
化合物852：保留时间：38.91min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98-1.02(m,3H),1.26-1.39(m,1H),1.63-1.74(m,1H),1.77-1.90(m,1H),1.97-2.03(m,3H),2.03-2.17(m,1H),2.19-2.29(m,1H),2.72-2.78(m,0.4H),2.88-2.95(m,3H),3.20-3.26(m,0.6H),3.41-4.04(m,1H),5.11-5.59(m,1H),5.59-5.67(m,2H),6.90-7.02(m,1H),7.28-7.38(m,1H),7.39-7.51(m,1H),7.59-7.66(m,1H),7.88-7.94(m,1H),7.94-8.05(m,1H),10.34-10.77(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值438.2；实测值439.2；Rt＝0.821min。
化合物855：保留时间：29.63min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98-1.02(m,3H),1.28-1.37(m,1H),1.63-1.78(m,1H),1.80-1.91(m,1H),1.96-2.02(m,3H),2.03-2.17(m,1H),2.18-2.28(m,1H),2.73-2.78(m,0.4H),2.88-2.93(m,3H),3.21-3.26(m,0.6H),3.41-4.03(m,1H),5.12-5.58(m,1H),5.58-5.64(m,2H),6.93-7.01(m,1H),7.27-7.38(m,1H),7.41-7.50(m,1H),7.60-7.66(m,1H),7.85-7.93(m,1H),7.95-8.05(m,1H),10.44-10.65(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值438.2；实测值439.2；Rt＝0.821min。
实施例341.2-[(2S,5R)-2-(5-乙酰胺基-2-噻吩基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物732)和2-[(2R,5S)-2-(5-乙酰胺基-2-噻吩基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物717)的合成
步骤1：N-[5-[[2-[2-(5-乙酰胺基-2-噻吩基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(1.01g，3.41mmol)和N-[5-(5-甲基-2-哌啶基)-2-噻吩基]乙酰胺(1.2g，3.41mmol，CF3COOH)混合于DMF中。将反应悬浮液冷却至20℃且添加HATU(1.29g，3.41mmol)，随后添加TEA(1.38g，13.62mmol，1.90mL)，且在环境温度下搅拌15h。将反应混合物在真空中蒸发且倒入水(100ml)中且用EtOAc(2*30ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(2*30ml)洗涤，经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到产物N-[5-[[2-[2-(5-乙酰胺基-2-噻吩基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.8g，1.55mmol，45.56％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.88(m,3H),1.21(m,1H),1.47(s,9H),2.02(m,3H),2.24(s,3H),2.26(m,4H),4.10(m,2H),6.43(d,1H),6.56(d,1H),6.80(s,1H),8.02(s,1H),8.58(m,1H),9.32(m,1H),9.58(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值515.2；实测值516.4；Rt＝1.227min。
步骤2：2-[2-(5-乙酰胺基-2-噻吩基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺的合成
在室温下将水(10mL)添加到N-[5-[[2-[2-(5-乙酰胺基-2-噻吩基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.8g，1.55mmol)于二噁烷(20mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在95℃下搅拌15h，然后在真空中蒸发。将残余物用水(20mL)稀释且用EtOAc(2*30mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发且通过制备型(40-55％1-6min水-甲醇(NH3 0.1％)，流速30ml/min)纯化0.55g所获得的粗产物，以得到产物2-[2-(5-乙酰胺基-2-噻吩基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(0.16g，385.07μmol，24.82％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值415.2；实测值416.4；Rt＝1.777min。
步骤3：2-[(2S,5R)-2-(5-乙酰胺基-2-噻吩基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物732)和2-[(2R,5S)-2-(5-乙酰胺基-2-噻吩基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物717)的合成
通过手性HPLC(柱：OJ-H(250*20，5mkm))，以己烷-MeOH-IPA，80-10-10，13ml/min为流动相)分离对映异构体，以得到两种个别对映异构体化合物732 2-[(2S,5R)-2-(5-乙酰胺基-2-噻吩基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(0.126g，303.24μmol，78.75％产率)和化合物717 2-[(2R,5S)-2-(5-乙酰胺基-2-噻吩基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(0.0426g，102.53μmol，26.63％产率)。
化合物717：RT(OD-H，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝20.402min。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)0.78(m,3H),1.29(m,1H),1.67(m,2H),1.88(m,1H),2.00(m,6H),2.22(m,1H),2.69(m,1H),3.86(m,1H),5.64(m,3H),6.46(m,1H),6.66(m,1H),7.48(d,1H),8.00(d,1H),10.49(m,1H),11.03(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值415.2；实测值416.2；Rt＝1.837min。
化合物732：RT(OD-H，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝7.887min。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)0.79(m,3H),1.29(m,1H),1.67(m,2H),1.88(m,1H),2.01(d,6H),2.24(m,1H),2.68(m,1H),3.86(m,1H),5.61(m,3H),6.47(m,1H),6.66(m,1H),7.50(d,1H),8.01(d,1H),10.51(m,1H),11.04(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值415.2；实测值416.2；Rt＝1.831min。
实施例342.5-(1-(2-((6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)氨基)-2-氧代乙酰基)-5-甲基哌啶-2-基)噻吩-2-甲酰胺(化合物644、化合物823、化合物733和化合物733)的合成
步骤1：外消旋-(5-(2-((2R,5S)-2-(5-氨基甲酰基噻吩-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-3-甲基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
向5-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]噻吩-2-甲酰胺(185mg，824.71μmol)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(243.53mg，824.71μmol)和TEA(250.36mg，2.47mmol，344.84μL)于DMF(3mL)中的搅拌混合物中添加HATU(344.94mg，907.18μmol)。将所得反应混合物在20℃下搅拌4h。然后，使其经历HPLC(柱：YMC-ActusTriart C18 100*20mml，5um；50-75％1-6min水-MeOH(NH3 0.1％)，流速30ml/min)，得到N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(5-氨基甲酰基-2-噻吩基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(165mg，328.95μmol，39.89％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值501.2；实测值502.2；Rt＝2.438min。
步骤2：5-(1-(2-((6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)氨基)-2-氧代乙酰基)-5-甲基哌啶-2-基)噻吩-2-甲酰胺(化合物644)的合成
将水(1.00g，55.51mmol，1mL)添加到N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(5-氨基甲酰基-2-噻吩基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(165mg，328.95μmol)于二噁烷(2mL)中的溶液中。将所得溶液在100℃下搅拌16h。然后，使其经历HPLC(柱：YMC Triart C18 100x20 mm，5um；以10-60％0-5min H2O/MeOH/0.1％NH4OH，流速：30ml/min)，得到5-[(2S,5R)-1-[2-[(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酰基]-5-甲基-2-哌啶基]噻吩-2-甲酰胺(130mg，323.80μmol，98.43％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98(d,3H),1.40(m,1H),1.79(m,1H),1.90(m,1H),2.00(m,4H),2.07(m,1H),2.16(m,1H),3.73(m,1H),5.66(m,3H),6.99(m,1H),7.31(s,1H),7.48(d,1H),7.61(m,1H),7.91(s,1H),8.00(s,1H),10.48(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值401.2；实测值402.2；Rt＝1.607min。
步骤3：手性分离(化合物823、化合物733和化合物733)
通过手性HPLC将5-[(2S,5R)-1-[2-[(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酰基]-5-甲基-2-哌啶基]噻吩-2-甲酰胺(130mg，323.80μmol)分成对映异构体：系统1：柱：Chiralcel OJ-H(250x 20mm，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH，70-15-15，流速：12mL/min；柱温：24℃；波长：205nm，272nm)；系统2：系统2.柱：Chiralpak IC(250x 20mm，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH，50-25-25，流速：12mL/min；柱温：24℃；波长：205nm，272nm)，得到：5-[(2S,5R)-1-[2-[(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酰基]-5-甲基-2-哌啶基]噻吩-2-甲酰胺(50mg，124.54μmol，76.92％产率)(其中保留时间＝34.629min)(化合物823)和5-[(2R,5S)-1-[2-[(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酰基]-5-甲基-2-哌啶基]噻吩-2-甲酰胺(52mg，129.52μmol，80.00％产率)(其中保留时间＝50.495min)(化合物733)。
化合物823于分析条件下(柱：IB，以CO2-MeOH，80-20，3ml/min为流动相)的保留时间为17.78min且化合物733、化合物733的保留时间为19.47min。
化合物823：保留时间：17.78min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.96-1.01(m,3H),1.36-1.44(m,1H),1.74-1.85(m,1H),1.85-1.96(m,1H),1.97-2.04(m,4H),2.04-2.19(m,1H),2.83-3.28(m,1H),3.42-4.05(m,1H),5.37-5.85(m,3H),6.94-7.02(m,1H),7.32(br s,1H),7.45-7.51(m,1H),7.58-7.67(m,1H),7.90(br s,1H),7.98-8.03(m,1H),10.36-10.61(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值401.2；实测值402.2；Rt＝0.915min。
化合物733：保留时间：19.47min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.96-1.01(m,3H),1.36-1.44(m,1H),1.74-1.85(m,1H),1.85-1.96(m,1H),1.97-2.04(m,4H),2.04-2.19(m,1H),2.83-3.28(m,1H),3.42-4.05(m,1H),5.37-5.85(m,3H),6.94-7.02(m,1H),7.32(br s,1H),7.45-7.51(m,1H),7.58-7.67(m,1H),7.90(br s,1H),7.98-8.03(m,1H),10.36-10.61(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值401.2；实测值402.2；Rt＝0.917min。
实施例343.5-(1-(2-((6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)氨基)-2-氧代乙酰基)-5-甲基哌啶-2-基)-N-甲基噻吩-2-甲酰胺(化合物859和化合物849)的合成
步骤1：外消旋-(3-甲基-5-(2-((2R,5S)-5-甲基-2-(5-(甲基氨基甲酰基)噻吩-2-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
向N-甲基-5-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]噻吩-2-甲酰胺(186mg，780.37μmol)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(230.44mg，780.37μmol)和TEA(157.93mg，1.56mmol，217.54μL)于DMF(3mL)中的搅拌混合物中添加HATU(326.39mg，858.41μmol)。将所得反应混合物在20℃下搅拌4h。然后，使其经历HPLC(20-50％0-5min H2O/ACN，流速：30ml/min；柱：YMC Triart C18100x20 mm，5um)，得到N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[5-(甲基氨基甲酰基)-2-噻吩基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(167mg，323.88μmol，41.50％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值515.2；实测值516.2；Rt＝2.621min。
步骤2：5-(1-(2-((6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)氨基)-2-氧代乙酰基)-5-甲基哌啶-2-基)-N-甲基噻吩-2-甲酰胺的合成
将水(5.83mg，323.88μmol，5.83μL)添加到N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[5-(甲基氨基甲酰基)-2-噻吩基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(167mg，323.88μmol)于二噁烷(2mL)中的溶液中。将所得混合物在100℃下搅拌15h。然后，使其经历HPLC(30-30-80％0-1-6min H2O/MeOH/0.1％ NH4OH，流速：30ml/min；柱：YMC Triart C18 100x20 mm，5um)，得到5-[(2S,5R)-1-[2-[(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酰基]-5-甲基-2-哌啶基]-N-甲基-噻吩-2-甲酰胺(89mg，214.20μmol，66.13％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值415.2；实测值416.2；Rt＝1.708min。
步骤3：手性分离(化合物859和化合物849)
通过手性HPLC(Chiralpak IA 250*20mm，5mkm；己烷-IPA-MeOH，50-25-25，12ml/min)将5-[(2S,5R)-1-[2-[(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酰基]-5-甲基-2-哌啶基]-N-甲基-噻吩-2-甲酰胺(89mg，214.20μmol)分成对映异构体，得到：5-[(2S,5R)-1-[2-[(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酰基]-5-甲基-2-哌啶基]-N-甲基-噻吩-2-甲酰胺(28.9mg，69.55μmol，64.94％产率)(其中保留时间＝24.6min)(化合物849)和5-[(2R,5S)-1-[2-[(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酰基]-5-甲基-2-哌啶基]-N-甲基-噻吩-2-甲酰胺(33.3mg，80.14μmol，74.83％产率)(其中保留时间＝56.64min)(化合物859)。
化合物859于分析条件下(柱：IA，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min为流动相)的保留时间为49.85min且化合物849的保留时间为29.12min。
化合物859：保留时间：49.85min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.97-1.01(m,3H),1.34-1.49(m,2H),1.75-1.84(m,1H),1.86-1.96(m,1H),2.03-2.06(m,3H),2.06-2.19(m,1H),2.70-2.74(m,3H),2.84-3.24(m,1H),3.45-4.06(m,1H),5.34-5.85(m,1H),6.21(br s,2H),6.97-7.02(m,1H),7.54-7.62(m,2H),8.08(s,1H),8.33-8.41(m,1H),10.55-10.79(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值415.2；实测值416.2；Rt＝1.755min。
化合物849：保留时间：29.12min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.95-1.00(m,3H),1.37-1.44(m,1H),1.76-1.84(m,1H),1.86-1.96(m,1H),2.00-2.04(m,1H),2.12-2.19(m,3H),2.69-2.74(m,3H),2.84-3.21(m,1H),3.46-4.09(m,1H),5.38-5.88(m,1H),6.98-7.03(m,1H),7.25(br s,2H),7.53-7.60(m,1H),7.71-7.84(m,1H),8.22(s,1H),8.35-8.41(m,1H),10.95(s,1H),13.14(brs,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值415.2；实测值416.2；Rt＝1.756min。
实施例344.rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物616)和rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物635)的合成
步骤1：N-[5-[[2-[2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
在室温下将HATU(490.95mg，1.29mmol)分批添加到2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(381.28mg，1.29mmol)、5-(5-甲基-2-哌啶基)-1,3-苯并噻唑(300mg，1.29mmol)和TEA(783.93mg，7.75mmol，1.08mL)于DMF(10mL)中的悬浮液中。将澄清溶液在25℃下搅拌18h且在真空中蒸发溶剂。将残余物溶解于EtOAc(100mL)中，用水(3x50 mL)洗涤且在真空中蒸发，以得到N-[5-[[2-[2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(700mg，粗品)。
1H NMR(DMSO-d6,400MHz):δ1.01(d,3H),1.39(m,13H),2.09(m,8H),5.71(m,1H),7.43(m,2H),8.12(m,1H),8.43(s,1H),9.03(s,1H),9.38(m,1H),11.00(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值509.2；实测值510.2；Rt＝1.319min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
在室温下将于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(3.58g，13.74mmol，3.41mL，14％纯度)小心添加到N-[5-[[2-[2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(700mg，1.37mmol)于DCM(10mL)中的溶液中。然后将反应混合物在室温下搅拌12h且在真空中蒸发溶剂。使残余物经历RP-HPLC(柱：YMCTriart C18 100x20 mm，5um；以40-40-90％0-1-5min 0.1％NH3-甲醇为流动相)，以得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(331mg，808.30μmol，58.85％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值409.2；实测值410.2；Rt＝2.176min。
步骤3：rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物616)和rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物635)的合成
通过手性HPLC(柱：IC II，以己烷-IPA-MeOH，50-25-25，12ml/min为流动相)分离对映异构体，以得到两种个别对映异构体化合物635N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(161mg，393.16μmol，97.28％产率)(保留时间＝32.4min，[α]21D＝-176.7°)(c＝0.1g/100mL，EtOH)和化合物616N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(160mg，390.72μmol，96.68％产率)(保留时间＝45.8min，[α]21D＝+191.5°)(c＝0.1g/100mL，EtOH)。
化合物616：RT(IC，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min)＝47.098min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.98-1.06(m,3H),1.30-1.42(m,1H),1.66-1.75(m,1H),1.82-1.91(m,1H),1.95-2.04(m,3H),2.06-2.23(m,1H),2.26-2.35(m,1H),2.76-3.27(m,1H),3.38-4.06(m,1H),5.26-5.60(m,1H),5.60-5.76(m,2H),7.39-7.46(m,1H),7.50(s,1H),7.92-8.01(m,1H),8.01-8.06(m,1H),8.13-8.20(m,1H),9.37-9.43(m,1H),10.50-10.70(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值409.2；实测值410.0；Rt＝1.992min。
化合物635RT(IC，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min)＝35.176min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.00-1.05(m,3H),1.27-1.40(m,1H),1.64-1.75(m,1H),1.82-1.93(m,1H),1.95-2.04(m,3H),2.07-2.25(m,1H),2.27-2.35(m,1H),2.75-3.27(m,1H),3.42-4.11(m,1H),5.28-5.59(m,1H),5.60-5.74(m,2H),7.40-7.45(m,1H),7.49(s,1H),7.94-8.01(m,1H),8.01-8.06(m,1H),8.13-8.19(m,1H),9.36-9.42(m,1H),10.52-10.58(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值409.2；实测值410.2；Rt＝2.001min。
实施例345.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-(4,4-二氟环己基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物186)的合成
步骤1：N-[5-[[2-[2-(4,4-二氟环己基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将2-(4,4-二氟环己基)哌啶(0.2g，983.91μmol)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(330.77mg，1.12mmol)和三乙胺(844.19mg，8.34mmol，1.16mL)于DMF(3mL)中的混合物在25℃下搅拌20分钟。20分钟之后，添加HATU(475.82mg，1.25mmol)。将所得反应混合物在25℃下搅拌过夜。完成之后，将水(20mL)添加到反应混合物中且用乙酸乙酯(2x 25mL)萃取。将合并的有机相用水(3x 25mL)、盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且在减压下干燥。使粗反应混合物经历反相HPLC纯化(洗脱液：10-50％，2-10min，甲醇；流速：30mL/min；装载泵：4mL MeOH；柱：SunFire 100*19mm，5μM)，以获得呈淡黄色固体的N-[5-[[2-[2-(4,4-二氟环己基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(81.10mg，168.77μmol，20.23％产率)。
LCMS(ESI)：[M+Boc]+m/z：计算值480.3；实测值481.2；Rt＝1.386min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-(4,4-二氟环己基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物186)的合成
将N-[5-[[2-[2-(4,4-二氟环己基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(81.10mg，168.77μmol)于二噁烷(2mL)和水(2mL)中的搅拌溶液在100℃下加热18小时。然后，将反应混合物蒸发至干且通过HPLC(洗脱液：2-10min，35-60％，水-MeOH+NH3；装载泵：4mL/min，MeOH+NH3；柱：Sunfire 100*20mm，5μM)纯化粗产物，以获得呈淡黄色固体的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-(4,4-二氟环己基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物186,22.60mg，59.41μmol，35.20％产率)。
化合物186：1H NMR(DMSO-d6,400MHz):δ(ppm)1.18(m,2H),1.44(m,2H),1.63(m,4H),1.81(m,4H),2.01(d,6H),2.91(m,1H),3.53(m,1H),4.21(m,1H),5.63(m,2H),7.47(m,1H),7.99(m,1H),10.34(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值380.2；实测值381.1；Rt＝1.014min。
实施例346.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-异丙基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物165)的合成
步骤1：N-[5-[[2-(2-异丙基-5-甲基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
向2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(0.33g，1.12mmol)和2-异丙基-5-甲基哌啶(198.60mg，1.12mmol，HCl)于DMF(10mL)中的搅拌溶液中添加DIPEA(505.52mg，3.91mmol，681.29μL)。将所得混合物搅拌5分钟。5分钟之后，添加HATU(446.17mg，1.17mmol)于DMF(2mL)中的溶液。将所得反应混合物在室温下搅拌过夜。完成之后，在减压下浓缩所得悬浮液且通过HPLC纯化粗产物，以得到呈淡黄色固体的N-[5-[[2-(2-异丙基-5-甲基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(131.5mg，314.20μmol，28.11％产率)。
LCMS(ESI)：[M+Boc]+m/z：计算值418.2；实测值419.4；Rt＝3.635min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-异丙基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物165)的合成
将N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-异丙基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(131.50mg，314.20μmol)于二噁烷(2mL)和水(5mL)中的搅拌溶液在100℃下加热17小时。然后，将反应混合物蒸发至干且通过HPLC(洗脱液：2-10min，10-50％CH3CN+NH3；流速：30mL/min；装载泵：4mL/min，CH3CN；柱：Triart C18 100*20mm，5um)纯化粗产物，以获得呈淡黄色固体的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-异丙基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物165，50mg，157.03μmol，49.98％产率)。
化合物165：1H NMR(CDCl3,400MHz):δ(ppm)0.94(m,8H),1.29(m,1H),1.82(m,5H),2.11(s,4H),3.11(m,1H),4.21(m,1H),4.43(s,2H),4.65(m,1H),7.70(d,1H),8.02(s,1H),9.14(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值318.2；实测值319.4Rt＝2.464min。
实施例347.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-(2-异丙基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物135)、N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R)-2-异丙基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰胺和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S)-2-异丙基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物204和化合物192)的合成
步骤1：N-[5-[[2-(2-异丙基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
在21℃下，将2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(0.3g，1.02mmol)、TATU(392.65mg，1.22mmol)和三乙胺(308.41mg，3.05mmol，424.81μL)一起混合于无水CH3CN(25mL)中且将所得混合物搅拌6小时。6小时之后，添加2-异丙基哌啶(182.93mg，1.12mmol，盐酸盐)，且将所得混合物在21℃下搅拌过夜。然后将所得混合物蒸发至干且使其经历HPLC纯化(洗脱液：0.1％甲酸/CH3CN，5-95％ CH3CN，6min；柱：ZorbaxEclipse-plus C18，4.6*100mm，3.5um)，以获得呈白色固体的N-[5-[[2-(2-异丙基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(45.7mg，112.98μmol，11.12％产率)。
LCMS(ESI)：[M+Boc]+m/z：计算值404.3；实测值405.4；Rt＝3.291min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-(2-异丙基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物135)的合成
在21℃下，向N-[5-[[2-(2-异丙基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(45.7mg，112.98μmol)于二噁烷(5mL)中的搅拌溶液中添加于二噁烷中的4.0M HCl(800.00mg，21.94mmol，1mL)。将所得反应混合物搅拌12小时。完成之后，过滤出经沉淀的固体，用MTBE洗涤且在高压下(0.3毫巴)干燥。通过反相HPLC(洗脱液：2-7min，15-30％ CH3CN，流速：30mL/min；柱：SunFire C18 100*19mm，5μM)纯化所获得的粗产物，以得到呈淡黄色固体的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-(2-异丙基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物135,15.9mg，52.24μmol，46.24％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)0.85(m,6H),1.33(m,2H),1.59(m,4H),1.82(m,1H),2.16(m,1H),2.97(m,2H),3.47(m,2H),4.13(m,1H),5.60(m,2H),7.48(m,1H),8.00(m,1H),10.32(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值304.2；实测值305.2；Rt＝0.973min。
N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R)-2-异丙基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰胺和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S)-2-异丙基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物204和化合物192)的手性分离
使外消旋-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-(2-异丙基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物135)经历手性色谱，以得到呈白色固体的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R)-2-异丙基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物204)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S)-2-异丙基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物192)。
化合物204：LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值304.2；实测值305.0；Rt＝3.318min。
手性HPLC：Rt＝11.54min(柱：OJ-H；洗脱液：己烷-MeOH-IPA，80-10-10；流速：0.6mL/min)。
化合物192：LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值304.2；实测值305.0；Rt＝3.363min。
手性HPLC：Rt＝13.54min(柱：OJ-H；洗脱液：己烷-MeOH-IPA，80-10-10；流速：0.6
实施例348.5-[[2-[(2R,5S)-2-环丁基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物161)的合成
步骤1：5-[[2-[(2R,5S)-2-环丁基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物155)的合成
向2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(0.23g，1.10mmol)和2-环丁基-5-甲基哌啶(168.54mg，1.10mmol)于DMF(10mL)中的搅拌溶液中添加DIPEA(355.30mg，2.75mmol，478.84μL)。将所得混合物搅拌5分钟。5分钟之后，添加HATU(439.02mg，1.15mmol)于DMF(2mL)中的溶液。将所得反应混合物在室温下搅拌过夜。完成之后，在减压下浓缩所得悬浮液且通过HPLC纯化粗产物且冷冻干燥，以得到呈白色固体的外消旋-5-[[2-[(2R,5S)-2-环丁基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物155，20.4mg，59.23μmol，5.39％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)0.95(dd,3H),1.32(m,2H),1.80(m,9H),2.93(m,2H),3.81(m,1H),4.24(m,1H),7.62(m,1H),8.18(m,1H),8.50(m,1H),8.78(m,1H),8.90(m,1H),11.09(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值344.2；实测值345.4；Rt＝2.876min。
步骤2：5-[[2-[(2R,5S)-2-环丁基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物155)的合成
向2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(0.23g，1.10mmol)和2-环丁基-5-甲基哌啶(168.54mg，1.10mmol)于DMF(10mL)中的搅拌溶液中添加DIPEA(355.30mg，2.75mmol，478.84μL)。将所得混合物搅拌5分钟。5分钟之后，添加HATU(439.02mg，1.15mmol)于DMF(2mL)中的溶液。将所得反应混合物在室温下搅拌过夜。完成之后，在减压下浓缩所得悬浮液且通过HPLC纯化粗产物且冷冻干燥，以得到呈白色固体的外消旋-5-[[2-[(2R,5S)-2-环丁基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物155，20.4mg，59.23μmol，5.39％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)0.95(dd,3H),1.32(m,2H),1.80(m,9H),2.93(m,2H),3.81(m,1H),4.24(m,1H),7.62(m,1H),8.18(m,1H),8.50(m,1H),8.78(m,1H),8.90(m,1H),11.09(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值344.2；实测值345.4；Rt＝2.876min。
实施例349.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-(2-环丁基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物182)的合成
步骤1：N-[5-[[2-(2-环丁基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
在21℃下，将2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(0.3g，1.02mmol)、TATU(392.65mg，1.22mmol)和三乙胺(205.61mg，2.03mmol，283.21μL)混合于无水CH3CN(25mL)中且将所得混合物搅拌15分钟。15分钟之后，添加2-环丁基哌啶(155.60mg，1.12mmol)，且将所得混合物在21℃下搅拌过夜。将所得混合物蒸发至干且使其经历HPLC(洗脱液：50-90％，0-9.5min，H2O-MeOH(0.1％ NH3)；流速：30mL/min；装载泵：4mL/min，MeOH(0.1％ NH3)；柱：YMC-Actus Triart C18 100*20mm，5um)，以获得呈白色固体的N-[5-[[2-(2-环丁基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(7.3mg，17.53μmol，1.73％产率)。
LCMS(ESI)：[M+Boc]+m/z：计算值416.3；实测值417.2；Rt＝3.640min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-(2-环丁基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物182)的合成
在21℃下，向N-[5-[[2-(2-环丁基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(7.3mg，17.53μmol)于二噁烷(1mL)中的搅拌溶液中添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(3.20mg，87.63μmol，3.99μL)。将所得混合物搅拌2小时。2小时之后，将所得混合物蒸发至干且通过HPLC(洗脱液：2-7min，15-30％ CH3CN；流速：30mL/min；柱：SunFire C18 100*19mm，5μM)纯化且冷冻干燥，以获得呈黄色固体的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-(2-环丁基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物182，3.3mg，10.43μmol，59.51％产率)。
1H NMR(CDCl3,400MHz):δ(ppm)1.54(m,4H),1.85(m,8H),2.12(m,3H),2.86(m,2H),4.69(m,3H),4.99(m,1H),7.72(d,1H),8.03(s,1H),9.00(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值316.2；实测值317.2；Rt＝0.953min。
实施例350.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(2-环戊基-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物190)的合成
步骤1：(5-(2-(2-环戊基-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-3-甲基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
将2-环戊基-5-甲基哌啶(200mg，1.20mmol)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(353.03mg，1.20mmol)、TEA(604.88mg，5.98mmol，833.16μL)混合于DMF(5mL)中，然后添加HATU(681.86mg，1.79mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌12h。将混合物在减压下蒸发且通过HPLC(2-10min 10-50％ MeOH，30ml/min)纯化，以获得N-[5-[[2-(2-环戊基-5-甲基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(176.1mg，396.12μmol，33.13％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)0.97(d,3H),1.26(m,3H),1.44(s,9H),1.65(m,7H),1.88(m,2H),2.17(s,3H),3.16(m,1H),3.45(m,1H),4.17(m,3H),7.91(d,1H),8.42(s,1H),9.06(s,1H),10.86(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值113.2；实测值114.2；Rt＝1.524min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(2-环戊基-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物190)的合成
将N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-环戊基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(171.60mg，385.99μmol)于二噁烷(2mL)和水(2mL)中的溶液在100℃下加热12h。将混合物在减压下蒸发且通过HPLC(2-10min 10-50％ MeCN+NH3)纯化，以获得N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-环戊基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(16.7mg，48.48μmol，12.56％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.92(m,3H),1.22(m,3H),1.57(m,8H),1.89(m,2H),2.00(s,3H),3.48(m,3H),4.08(dd,1H),5.59(m,2H),7.44(m,1H),7.98(s,1H),10.28(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值344.4；实测值345.2；Rt＝1.070min。
实施例351.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(2-(3-溴苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物600)的合成
步骤1：外消旋-(5-(2-((2R,5S)-2-(3-溴苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-3-甲基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
向(2S,5R)-2-(3-溴苯基)-5-甲基哌啶(262.83mg，1.03mmol，HCl)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(400mg，1.35mmol)和TEA(1.05g，10.34mmol，1.44mL)于DMF(3mL)中的溶液中分批添加HATU(432.52mg，1.14mmol)。将混合物在25℃下搅拌1.5h。将反应混合物用水(20ml)稀释且将产物用EtOAc(3*25ml)萃取。将合并的有机层用水、盐水洗涤且经Na2SO4干燥。蒸发溶剂，以得到N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(3-溴苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(800mg，粗品)。粗产物不经进一步纯化即用于下一步骤中。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.05(d,3H),1.23(m,1H),1.48(s,9H),1.98(m,2H),2.21(s,3H),2.28(m,2H),2.93(m,1H),3.35(m,1H),4.08(m,1H),5.72(m,1H),6.71(m,1H),7.24(m,2H),7.37(m,1H),8.01(m,1H),8.35(m,1H),9.39(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值531.4；实测值532.2；Rt＝1.527min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(2-(3-溴苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物600)的合成
向N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(3-溴苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(800mg，1.51mmol)于DCM(15mL)中的搅拌溶液中添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(548.86mg，15.05mmol，686.08μL)且在25℃下将反应混合物搅拌2h。蒸发溶剂，以得到粗产物(700mg)，其通过反相HPLC(60-60-90％0-1-5min 0.1％NH3-MeOH，流速：30ml/min(装载泵4ml/min MeOH)目标质量431柱：YMC Triart C18 100x20mm，5um)进行纯化，以得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(3-溴苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(270mg，625.98μmol，41.58％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.96-1.03(m,3H),1.25-1.37(m,1H),1.58-1.66(m,1H),1.80-1.93(m,1H),1.97-2.07(m,4H),2.13-2.25(m,1H),2.68-3.25(m,1H),3.33-4.07(m,1H),5.12-5.57(m,1H),5.57-5.68(m,2H),7.29-7.38(m,2H),7.42-7.55(m,3H),7.93-8.04(m,1H),10.42-10.64(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值431.4；实测值432.2；Rt＝2.503min。
实施例352.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(2-(6-羟基螺[3.3]庚-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物711、化合物768、化合物769、化合物766和化合物767)的合成
步骤1：外消旋-(5-(2-((2R,5S)-2-(6-羟基螺[3.3]庚-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-3-甲基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
向6-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]螺[3.3]庚-2-醇(250mg，1.19mmol，HCl)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(352.67mg，1.19mmol)和TEA(845.96mg，8.36mmol，1.17mL)于DMF(4mL)中的溶液中分批添加HATU(499.52mg，1.31mmol)。将混合物在25℃下搅拌2h。将反应混合物用水(50ml)稀释且将产物用EtOAc(3*25ml)萃取。将合并的有机层用水、盐水洗涤且经Na2SO4干燥。蒸发溶剂，以得到N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(2-羟基螺[3.3]庚-6-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(500mg，1.03mmol，86.04％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.89(d,3H),1.22(m,3H),1.42(s,9H),1.88(m,6H),2.08(m,6H),2.15(m,1H),2.87(s,3H),3.98(m,2H),4.98(m,1H),7.88(m,1H),8.39(m,1H),9.05(s,1H),10.87(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值486.2；实测值487.2；Rt＝1.252min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(2-羟基螺[3.3]庚-6-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物711)的合成
向N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(2-羟基螺[3.3]庚-6-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(500mg，1.03mmol)于DCM(15mL)中的搅拌溶液中添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(374.64mg，10.28mmol，468.30μL)且在25℃下将反应混合物搅拌2h。蒸发溶剂，以得到粗产物(550mg)，其通过反相HPLC(30-30-65％0-1-6min H2O/MeOH/0.1％ NH3，流速：30ml/min(装载泵4ml/min甲醇)，目标质量386，柱：YMCTriart C18 100x20 mm，5um)进行纯化，以得到呈单一非对映异构体的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(2-羟基螺[3.3]庚-6-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(25mg，64.69μmol，6.30％产率)和呈非对映异构体的混合物的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(2-羟基螺[3.3]庚-6-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(60mg，155.24μmol，15.11％产率)。将所有量的产物(85mg)提交用于手性拆分。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.89(m,3H),1.26(m,2H),1.73(m,7H),1.92(m,3H),2.01(m,3H),2.22(m,1H),2.76(m,2H),3.95(m,3H),4.79(m,1H),5.58(m,2H),7.44(m,1H),7.98(m,1H),10.28(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值386.2；实测值387.2；Rt＝1.788min。
步骤3：手性分离(化合物768、化合物769、化合物766和化合物767)
将外消旋N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(2-羟基螺[3.3]庚-6-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(85mg，219.93μmol)提交用于手性拆分，以得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(2-羟基螺[3.3]庚-6-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(6.4mg，16.56μmol，7.53％产率)(保留时间＝47.305min)；N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(2-羟基螺[3.3]庚-6-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(13.6mg，35.19μmol，16.00％产率)(保留时间＝21.24)；N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(2-羟基螺[3.3]庚-6-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(4.6mg，11.90μmol，5.41％产率)(保留时间＝20.477)；N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(2-羟基螺[3.3]庚-6-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(15.7mg，40.62μmol，18.47％产率)(保留时间＝34.600)。化合物767于分析条件下(柱：IC，以己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.6ml/min为流动相)的保留时间为47.30min，化合物766的保留时间为20.48min，化合物769的保留时间为21.24min且化合物768的保留时间为34.60min。
化合物767：保留时间：47.30min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.84-0.94(m,3H),1.20-1.49(m,3H),1.53-1.64(m,1H),1.65-1.78(m,4H),1.79-1.83(m,1H),1.84-1.93(m,2H),1.93-1.98(m,1.5H),1.99-2.04(m,3H),2.15-2.19(m,0.5H),2.25-2.30(m,1H),2.69-2.76(m,1H),2.79-3.25(m,1H),3.61-3.75(m,0.5H),3.80-3.90(m,1H),4.27-4.42(m,0.5H),4.71-4.85(m,1H),5.50-5.64(m,2H),7.36-7.50(m,1H),7.90-8.05(m,1H),10.18-10.37(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值386.2；实测值387.2；Rt＝1.835min。
化合物766：保留时间：20.48min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.86-0.92(m,3H),1.20-1.30(m,2H),1.45-1.62(m,2H),1.64-1.78(m,4H),1.78-1.92(m,3H),1.93-1.98(m,1.5H),1.99-2.03(m,3H),2.11-2.21(m,0.5H),2.23-2.31(m,1H),2.66-2.79(m,1H),2.79-3.24(m,1H),3.65-3.71(m,0.5H),3.79-3.89(m,1H),4.32-4.38(m,1H),4.75-4.82(m,0.5H),5.53-5.64(m,2H),7.38-7.48(m,1H),7.92-8.01(m,1H),10.19-10.37(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值386.2；实测值387.2；Rt＝1.837min。
化合物769：保留时间：21.24min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.83-0.94(m,3H),1.20-1.30(m,2H),1.44-1.62(m,2H),1.63-1.76(m,4H),1.78-1.93(m,3H),1.93-1.98(m,1H),2.00-2.02(m,3H),2.02-2.15(m,1H),2.24-2.34(m,1H),2.68-2.76(m,1H),2.77-3.25(m,1H),3.66-3.73(m,0.5H),3.87-3.94(m,1H),4.31-4.38(m,0.5H),4.74-4.83(m,1H),5.50-5.62(m,2H),7.39-7.47(m,1H),7.93-8.02(m,1H),10.20-10.35(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值386.2；实测值387.2；Rt＝2.066min。
化合物768：保留时间：34.60min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.86-0.93(m,3H),1.19-1.31(m,2H),1.45-1.62(m,2H),1.64-1.76(m,4H),1.78-1.92(m,3H),1.93-1.99(m,1H),2.00-2.02(m,3H),2.03-2.14(m,1H),2.25-2.33(m,1H),2.66-2.77(m,1H),2.77-3.24(m,1H),3.67-3.73(m,0.5H),3.86-3.94(m,1H),4.31-4.42(m,0.5H),4.74-4.84(m,1H),5.52-5.63(m,2H),7.39-7.49(m,1H),7.93-8.03(m,1H),10.19-10.39(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值386.2；实测值387.2；Rt＝2.078min。
N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(2-(5-氯吡啶-3-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1025)的合成
步骤1：外消旋-(5-(2-((2R,5S)-2-(5-氯吡啶-3-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-3-甲基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
在轻微加热下，将3-氯-5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]吡啶(0.3g，1.42mmol)和2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(358.03mg，1.21mmol，HCl)溶解于DMSO(6mL)中。在剧烈搅拌和偶尔加热下，小批量添加HATU(649.65mg，1.71mmol)。反应完成(通过反应混合物的LCMS推测)之后，通过HPLC(42％0.5-6.5min水-MeCN；流速30ml/min(42％0.5-6.5min水-MeCN；流速30ml/min(装载泵4ml/min MeCN)；目标质量487；柱SunFireC18 100x19mm 5um(R))纯化混合物，以得到呈纯度不同的2种级分的N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(5-氯-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(290mg，594.29μmol，41.74％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值487.2；实测值488.2；Rt＝3.236min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(2-(5-氯吡啶-3-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1025)的合成
将N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(5-氯-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(99mg，202.88μmol)溶解于二噁烷(4mL)和H2O(0.5mL)中。将所获得的溶液在100℃下搅拌48h；反应完成之后，使混合物经历HPLC(20-30％0.5-6.5min水-MeCN；流速30ml/min(装载泵4ml/min MeCN)；目标质量387；柱SunFire100x19 mm 5um(R))，以得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(5-氯-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(21mg，54.14μmol，26.69％产率)和3％相应顺式异构体杂质。
化合物1025：LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值387.2；实测值388.2；Rt＝1.898min。
实施例353.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(4-氟-3-羟基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物555)的合成
在25℃下，向2-氟-5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯酚(550mg，1.90mmol，HBr)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(559.70mg，1.90mmol)和三乙胺(1.92g，18.95mmol，2.64mL)于DMF(20mL)中的搅拌溶液中小批量添加HATU(1.44g，3.79mmol)。将所得反应混合物在25℃下搅拌16h，然后在真空中浓缩至大约5ml且提交至反相HPLC(柱：YMC-Actus Triart C18 100*20mml.D.S-5um，流动相：0-5min 25-80％水-甲醇(NH3 0.1％)，流速：30ml/min)，以得到Boc保护的酰胺的3种级分：75mg，通过LCMS为91％纯度(第1级分)；68mg，通过LCMS为95.66％纯度(第2级分)；和70mg，通过LCMS为93.86％纯度(第3级分)。将Boc保护的酰胺的第二级分(68mg)溶解于1,4-二噁烷(2mL)和水(2.5mL)的混合物中。将所得混合物在95℃下搅拌12h，然后冷却且提交至反相HPLC(柱：YMC-Actus Triart C18 100*20mml.D.S-5um，流动相：20-40％1-6min水-甲醇(NH30.1％)，流速：30ml/min)，以得到25mg产物(通过LCMS为93.69％纯度)，其通过反相HPLC(柱：SunFireC18 100*19mm5um，流动相：15-45％1-6min水-乙腈，流速：30ml/min)进行再次再纯化，以得到呈白色固体的化合物555N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(4-氟-3-羟基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(18mg，46.58μmol，2.46％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.95-1.05(m,3H),1.24-1.35(m,1H),1.62-1.71(m,1H),1.80-1.91(m,1H),1.92-2.05(m,4H),2.05-2.13(m,1H),2.69-3.23(m,1H),3.43-4.06(m,1H),5.01-5.51(m,1H),5.55-5.69(m,2H),6.62-6.78(m,1H),6.80-6.96(m,1H),7.03-7.15(m,1H),7.40-7.50(m,1H),7.93-8.03(m,1H),9.57-10.06(m,1H),10.24-10.70(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值386.4；实测值387.2；Rt＝1.948min。
实施例354.外消旋N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(4-甲基磺酰基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物643)、
rel-N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(4-(甲基磺酰基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物976)和rel-N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-((2S,5R)-5-甲基-2-(4-(甲基磺酰基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物938)的合成
步骤1：外消旋N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(4-甲基磺酰基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物643)的合成
在25℃下，在0.5h内，向(2R,5S)-5-甲基-2-(4-甲基磺酰基苯基)哌啶(250mg，986.74μmol)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(291.37mg，986.74μmol)和三乙胺(998.48mg，9.87mmol，1.38mL)于DMF(5mL)中的搅拌溶液中小批量添加HATU(412.71mg，1.09mmol)。将所得反应混合物在25℃下搅拌18h。在真空中浓缩反应混合物，将残余物溶解于二氯甲烷(10mL)中，且一次性添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(15.75g，60.04mmol，15mL，13.9％纯度)。将所得混合物在25℃下搅拌3h，然后在真空中浓缩。通过反相HPLC(柱：YMC-Actus Triart C18 100*20mml.D.S-5um，流动相：0-5min 20-70％水-甲醇(NH3 0.1％)，流速30ml/min(装载泵4ml/min甲醇(NH3 0.1％))纯化残余物，以得到呈白色固体的化合物643N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(4-甲基磺酰基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(143mg，332.16μmol，33.66％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.00(m,3H),1.34(m,1H),1.60(m,1H),1.89(m,1H),2.01(m,4H),2.23(m,2H),3.20(m,3H),3.68(m,1H),5.62(m,3H),7.46(m,1H),7.59(m,2H),7.95(m,3H),10.51(m,1H)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值430.2；实测值431.2；Rt＝1.827min。
步骤2：rel-N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(4-(甲基磺酰基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物976)和rel-N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-((2S,5R)-5-甲基-2-(4-(甲基磺酰基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物938)的合成
在以下条件下分离对映异构体：柱：Chiralpak IB(250*30mm，5mkm)；流动相：CO2-MeOH，60-40；流速：90mL/min；柱温：40℃；波长：215nm。保留时间(化合物938)＝6.53min；保留时间(化合物643)＝10.14min
在以下条件下另外自顺式杂质纯化化合物643：柱：Chiralcel OJ-H(250*20mm，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH，50-25-25；流速：10mL/min；柱温：20℃；波长：205nm。保留时间(异构体A)＝36.22min；保留时间(异构体B)＝38.61min，以得到呈橙色固体的化合物976(47.78mg，110.98μmol，41.99％产率)(RT(Chiralpak IB(250*4.6，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，40-30-30，0.6ml/min)＝21.522min)和呈黄色固体的化合物938(47.82mg，111.08μmol，42.02％产率)(RT(Chiralpak IB(250*4.6，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，40-30-30，0.6ml/min)＝13.780min)。
化合物976：1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.00(m,3H),1.33(m,1H),1.62(m,1H),1.88(m,1H),1.99(m,3H),2.15(m,2H),3.19(m,4H),3.76(dd,1H),5.60(m,3H),7.45(m,1H),7.61(m,2H),7.91(m,2H),7.98(m,1H),10.51(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值430.2；实测值431.4；Rt＝1.765min。
RT(己烷-IPA-MeOH，40-30-30，0.6ml/min)＝21.5222min。
化合物938：1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.00(m,3H),1.33(m,1H),1.61(m,1H),1.87(m,1H),1.99(m,3H),2.15(m,2H),3.19(m,4H),3.76(dd,1H),5.60(m,3H),7.45(m,1H),7.58(dd,2H),7.91(m,2H),7.98(m,1H),10.51(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值430.2；实测值431.4；Rt＝1.750min。
RT(己烷-IPA-MeOH，40-30-30，0.6ml/min)＝13.7802min。
实施例355.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(4-氨磺酰基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物662)的合成
步骤1：N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(4-氨磺酰基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
向4-(5-甲基-2-哌啶基)苯磺酰胺(350mg，1.20mmol，HCl)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(355.39mg，1.20mmol)和三乙胺(365.36mg，3.61mmol，503.25μL)于二甲基甲酰胺(4mL)中的搅拌混合物中添加HATU(503.38mg，1.32mmol)。将所得反应混合物在20℃下搅拌5h。然后，使其经历HPLC(柱：YMC Triart C18100x20 mm，5um；40-55％0-5min 0.1％ NH3-甲醇，流速：30ml/min)，得到N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(4-氨磺酰基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(97mg，182.46μmol，15.16％产率)。
在下一个步骤前将两种级分合并。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值531.2；实测值532.2；Rt＝2.860min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(4-氨磺酰基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物662)的合成
将水(1.00g，55.51mmol，1mL)添加到N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(4-氨磺酰基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(97mg，182.46μmol)于二噁烷(2mL)中的溶液中。将所得混合物在95℃下搅拌36h。然后，使其经历HPLC(柱：YMC-Actus Triart C18 100*20mm，5um；0-5min 5-55％水-MeO H(NH3 0.1％)，流速30ml/min)，得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(4-氨磺酰基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(27mg，62.57μmol，34.29％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.00(m,3H),1.32(m,1H),1.62(m,1H),1.86(m,1H),1.99(m,4H),2.22(m,1H),2.96(m,1H),3.67(m,1H),5.47(m,3H),7.32(m,2H),7.50(m,3H),7.80(m,2H),7.98(m,1H),10.50(m,1H)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值431.2；实测值432.2；Rt＝1.645min。
实施例356.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(甲基氨磺酰基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物668)的合成
步骤1：N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(甲基氨磺酰基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
向N-甲基-4-(5-甲基-2-哌啶基)苯磺酰胺(370mg，1.38mmol，HCl)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(407.11mg，1.38mmol)和三乙胺(418.52mg，4.14mmol，576.48μL)于二甲基甲酰胺(4mL)中的搅拌混合物中添加HATU(576.63mg，1.52mmol)。将所得反应混合物在20℃下搅拌5h。然后，使其经历HPLC(柱：YMCTriart C18 100x20 mm，5um；40-70％0-5min 0.1％NH3-甲醇，流速：30ml/min)，得到N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(甲基氨磺酰基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(140mg，256.57μmol，18.61％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值545.3；实测值546.2；Rt＝3.010min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(甲基氨磺酰基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物668)的合成
将水(1.00g，55.49mmol，1mL)添加到N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(甲基氨磺酰基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(140mg，256.57μmol)于二噁烷(2mL)中的溶液中。将所得混合物在95℃下搅拌18h。然后，使其经历HPLC(柱：YMC-Actus Triart C18 100*20mm，5um；0-5min 10-60％水-MeOH(NH30.1％)，流速30ml/min)，得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(甲基氨磺酰基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(85mg，190.78μmol，74.36％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.00(m,3H),1.33(m,1H),1.62(m,1H),1.87(m,1H),1.99(m,3H),2.14(m,2H),2.39(m,3H),2.97(m,1H),3.76(m,1H),5.60(m,3H),7.43(m,1H),7.50(m,2H),7.56(m,1H),7.76(m,2H),7.98(m,1H),10.49(m,1H)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值445.2；实测值446.2；Rt＝1.267min。
实施例357.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-噻唑并[5,4-b]吡啶-6-基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物685)的合成
步骤1：N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-噻唑并[5,4-b]吡啶-6-基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
在剧烈搅拌的情况下，将2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(316.38mg，1.07mmol)、6-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]噻唑并[5,4-b]吡啶(250.00mg，1.07mmol)、HATU(448.13mg，1.18mmol)和TEA(119.26mg，1.18mmol，164.27μL)混合于DMSO(2mL)中。将反应混合物用水处理且将所需产物用50ml EA萃取，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩，以得到N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-噻唑并[5,4-b]吡啶-6-基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.45g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值510.2；实测值511.0；Rt＝1.340min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-噻唑并[5,4-b]吡啶-6-基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物685)的合成
将N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-噻唑并[5,4-b]吡啶-6-基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(200.00mg，391.69μmol)溶解于二噁烷(3mL)中且添加H2O(3mL)。在剧烈搅拌的情况下，将反应混合物在90℃下搅拌64h。将溶液在真空中浓缩，再溶解于4ml甲醇中且经历HPLC。
HPLC数据：2-10min 10-60％水/R1(装载泵4ml R1)柱：TRIART 100*20 5微米
获得N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-噻唑并[5,4-b]吡啶-6-基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.051g，124.24μmol，31.72％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.02(m,3H),1.37(m,1H),1.72(m,1H),1.87(m,1H),1.99(m,3H),2.15(m,1H),2.31(m,1H),3.33(m,1H),3.75(m,1H),5.64(m,3H),7.44(m,1H),8.01(m,1H),8.39(m,1H),8.66(m,1H),9.56(m,1H),10.54(m,1H)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值410.2；实测值411.2；Rt＝1.543min。
实施例358.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-3,3-二氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物871)的合成
步骤1：N-[5-[[2-[(2S,5S)-3,3-二氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
在轻微加热下，将2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(287.67mg，974.21μmol)、(2S,5S)-3,3-二氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶(223.33mg，974.21μmol)和dipea(377.73mg，2.92mmol，509.07μL)溶解于DMSO(6mL)中。在剧烈搅拌和偶尔加热下，小批量添加HATU(444.51mg，1.17mmol)。反应完成之后，通过HPLC纯化混合物，以得到N-[5-[[2-[(2S,5S)-3,3-二氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(80mg，157.94μmol，16.21％产率)
HPLC条件：(48％0.5-6.5min水-乙腈；流速30ml/min；(装载泵4ml/min乙腈)；目标质量506；柱SunFireC18 100x19 mm 5um(L))。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值506.3；实测值507.2；Rt＝3.521min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-3,3-二氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物871)的合成
将N-[5-[[2-[(2S,5S)-3,3-二氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(80mg，157.94μmol)溶解于水(1mL)/二噁烷(1mL)的混合物中且在回流下搅拌过夜。等分试样显示起始材料完全消耗；在减压下溶剂的蒸发和以HPLC(5-40％0.5-6.5min水-乙腈；流速30ml/min(装载泵4ml/min乙腈)；目标质量382；柱SunFireC18 100x19mm 5um(R))的纯化产生N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-3,3-二氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(31mg，76.28μmol，48.30％产率)
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.98-1.08(m,3H),1.28-1.42(m,1H),1.57-1.70(m,1H),1.82-1.96(m,1H),2.03-2.19(m,1H),2.19-2.32(m,1H),2.70-3.24(m,1H),3.50-4.07(m,1H),5.22-5.76(m,1H),7.57-7.72(m,5H),8.08-8.19(m,1H),8.38-8.53(m,1H),8.67-8.78(m,1H),8.78-8.93(m,1H),11.29(br s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值406.2；实测值407.2；Rt＝2.294min。
实施例359.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,3R,5R)-3-氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物939)、N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,3R,5S)-3-氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物940)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,3S,5S)-3-氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物904)的合成
步骤1：N-[5-[[2-[(2R,3R,5S)-3-氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(P1)、N-[5-[[2
-[(2R,3S,5S)-3-氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(P2)、N-[5-[[2-[(2R,3R,5R)-3-氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(P4)和N-[5-[[2-[(2R,3R,5R)-3-氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(P3)的合成
在轻微加热下，将2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(287.67mg，974.21μmol)、(2S,5S)-3-氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶(205.80mg，974.21μmol)和dipea(377.73mg，2.92mmol，509.07μL)溶解于DMSO(6mL)中。在剧烈搅拌和偶尔加热下，小批量添加HATU(444.51mg，1.17mmol)。反应完成之后，通过HPLC纯化混合物，以得到N-[5-[[2-[(2R,3R,5S)-3-氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯P1(10mg，20.47μmol，2.10％产率)、N-[5-[[2-[(2R,3S,5S)-3-氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(30mg，61.41μmol，6.30％产率)、N-[5-[[2-[(2R,3R,5R)-3-氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯P3(100mg，204.70μmol，21.01％产率)和N-[5-[[2-[(2R,3R,5R)-3-氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯P4(40mg，81.88μmol，8.40％产率)
HPLC条件：(48％0.5-6.5min水-乙腈；流速30ml/min；(装载泵4ml/min乙腈)；目标质量506；柱SunFireC18 100x19 mm 5um(L))
P1：LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值488.3；实测值489.4；Rt＝3.580min。
P2：LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值488.3；实测值489.0；Rt＝3.350min。
P3：LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值488.3；实测值489.2；Rt＝2.906min。
P4：LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值488.3；实测值489.4；Rt＝3.379min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,3R,5S)-3-氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物940)的合成
将N-[5-[[2-[(2R,3R,5S)-3-氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯P1(10mg，20.47μmol)溶解于二噁烷(2mL)/H2O(0.5mL)混合物中且在回流下搅拌过夜。等分试样显示起始材料完全消耗；在减压下溶剂的蒸发和以HPLC(32-36％0.5-6.5min水-乙腈；流速30ml/min(装载泵4ml/min乙腈)；目标质量388；柱SunFireC18 100x19mm 5um(R))的纯化产生N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,3R,5S)-3-氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(5mg，12.87μmol，62.89％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)0.87(dd,3H),1.63(m,2H),2.00(m,4H),2.08(m,1H),2.72(m,1H),3.68(m,1H),5.03(m,1H),5.65(m,3H),7.20(m,2H),7.46(m,2H),7.97(m,1H),10.51(m,1H)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值388.2；实测值389.0；Rt＝2.128min。
步骤3：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,3S,5S)-3-氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物904)的合成
将N-[5-[[2-[(2R,3S,5S)-3-氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯P2(30mg，61.41μmol)溶解于二噁烷(4mL)/H2O(0.5mL)混合物中且在回流下搅拌过夜。等分试样显示起始材料完全消耗；在减压下溶剂的蒸发和以HPLC 32-36％0.5-6.5min水-乙腈；流速30ml/min(装载泵4ml/min乙腈)；目标质量388；柱SunFireC18 100x19mm 5um(R))的纯化产生N-[5-[[2-[(2R,3S,5S)-3-氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(11mg，22.52μmol，36.67％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.05(m,3H),1.72(m,1H),1.87(m,2H),2.00(m,3H),3.01(m,1H),3.70(m,1H),5.60(m,4H),7.22(m,2H),7.43(m,3H),8.00(m,1H),10.51(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值388.2；实测值389.2；Rt＝2.419min。
步骤4：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,3R,5R)-3-氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物939)的合成
将N-[5-[[2-[(2R,3R,5R)-3-氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(P3(100mg，204.70μmol)溶解于二噁烷(2mL)/水(0.5mL)混合物中且在回流下搅拌过夜。等分试样显示起始材料完全消耗；在减压下溶剂的蒸发和以HPLC(32-36％0.5-6.5min水-乙腈；流速30ml/min(装载泵4ml/min乙腈)；目标质量388；柱SunFireC18 100x19mm 5um(R))的纯化产生N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,3R,5R)-3-氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(54mg，139.03μmol，67.92％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.02(d,3H),1.36(m,1H),2.03(m,4H),2.26(m,1H),3.53(m,1H),3.61(m,1H),5.26(m,2H),5.61(m,2H),7.18(m,2H),7.34(m,2H),7.45(s,1H),7.99(m,1H),10.37(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值388.2；实测值389.2；Rt＝2.090min。
实施例360.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[1-(1H-吡唑-3-基)吡唑-4-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物793)的合成
在25℃下，在0.5h时段内，将HATU(877.81mg，2.31mmol)小批量添加到(2R,5S)-5-甲基-2-[1-(1H-吡唑-3-基)吡唑-4-基]哌啶(1.1g，2.10mmol，3HCl)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(619.74mg，2.10mmol)和三乙胺(2.12g，20.99mmol，2.93mL)于DMF(10mL)中的搅拌混合物中。将所得混合物在25℃下搅拌18h，然后在真空中浓缩。将残余物溶解于二氯甲烷(10mL)且一次性添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(19.25g，73.39mmol，24.06mL，13.9％纯度)。将所得混合物在25℃下搅拌3h，然后在真空中浓缩。通过反相HPLC((柱：YMC Triart C18 100x20 mm，5um)，流动相：35-60％0-5minH2O/MeOH/0.1％ NH4OH，流速：30ml/min(装载泵4ml/min甲醇)用于第1次HPLC，和35-50％0-5min H2O/MeOH/0.1％ NH4OH，流速：30ml/min(装载泵4ml/min甲醇)用于第2次HPLC)纯化残余物两次，以得到呈白色固体的化合物793N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[1-(1H-吡唑-3-基)吡唑-4-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(61mg，149.34μmol，7.12％产率)。
1H NMR(dmso,600MHz):δ(ppm)0.75-1.01(m,3H),1.18-1.39(m,1H),1.53-1.88(m,2H),1.89-1.98(m,1H),1.98-2.02(m,3H),2.02-2.10(m,1H),2.79-3.25(m,1H),3.36-4.00(m,1H),5.07-5.59(m,1H),5.59-5.64(m,2H),6.41-6.49(m,1H),7.42-7.53(m,1H),7.56-7.68(m,1H),7.73-7.84(m,1H),7.94-8.05(m,1H),8.09-8.20(m,1H),10.44-10.55(m,1H),12.71-12.85(m,1H)
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值408.2；实测值409.2；Rt＝1.719min。
实施例361.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1H-吡唑-4-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物969)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-吡唑-4-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物941)的合成
步骤1.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-吡唑-4-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺
在25℃下，在0.5h时段内，将HATU(456.61mg，1.20mmol)小批量添加到(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-吡唑-4-基)哌啶(400mg，1.09mmol，2HCl)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(370.73mg，1.26mmol)和三乙胺(883.77mg，8.73mmol，1.22mL)于DMF(10mL)中的搅拌混合物中。将所得混合物在25℃下搅拌18h，然后在真空中浓缩。将残余物溶解于二氯甲烷(10mL)且一次性添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(10.50g，40.03mmol，10mL，13.9％纯度)。将所得混合物在25℃下搅拌12h，然后在真空中浓缩。通过反相HPLC(柱：YMC Triart C18 100x20 mm，5um；流动相：25-55％0-5min H2O/MeOH/0.1％NH4OH，流速：30ml/min(装载泵4ml/min甲醇)纯化残余物，以得到呈淡黄色胶状物的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-吡唑-4-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(227mg，662.98μmol，60.73％产率)，将其直接提交至制备型手性HPLC。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值342.4；实测值343.2；Rt＝1.329min。
步骤2.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1H-吡唑-4-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物969)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-吡唑-4-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物941)的合成
将外消旋N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-吡唑-4-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(227mg，662.98μmol)提交至制备型手性HPLC(柱：ChiralpakIС-II(250*20mm，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH 60-20-20；流速：12mL/min)，以得到粗品第1级分(R.T.＝27.732min，60mg)和化合物941(第2级分)N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-吡唑-4-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(54.8mg，160.05μmol，24.14％产率)(R.T.＝39.160min)。通过制备型手性HPLC(柱：Chiralcel OJ-H(250*20mm，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH 80-10-10；流速：12mL/min)纯化粗品第1级分(60mg)，以得到化合物969N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1H-吡唑-4-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(42.7mg，124.71μmol，18.81％产率)(R.T.＝25.846min)。
化合物941：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.94-1.00(m,3H),1.29-1.39(m,1H),1.76-1.83(m,1H),1.84-1.94(m,2H),1.94-2.07(m,4H),2.72-3.24(m,1H),3.38-3.95(m,1H),4.98-5.57(m,1H),5.57-5.65(m,2H),7.22-7.80(m,3H),7.91-8.05(m,1H),10.28-10.53(m,1H),12.75(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值342.4；实测值343.4；Rt＝1.388min。
化合物969：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.94-0.99(m,3H),1.29-1.40(m,1H),1.70-1.89(m,2H),1.89-1.99(m,2H),1.99-2.03(m,3H),2.74-3.22(m,1H),3.35-3.95(m,1H),4.96-5.57(m,1H),5.57-5.65(m,2H),7.31-7.71(m,3H),7.98(d,1H),10.30-10.51(m,1H),12.75(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值342.4；实测值343.4；Rt＝1.379min。
实施例362.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-(5-氨基-2-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物658)的合成
步骤1.N-[5-[[2-[2-(5-氨基-2-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将DIPEA(787.83mg，6.10mmol，1.06mL)添加到相应2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(0.3g，1.02mmol)和6-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶-3-胺(194.32mg，735.53μmol，2HCl)于DMF(10mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU(424.92mg，1.12mmol)。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC(Waters Sunfire C182*100 5mkm柱且以H2O-MeCN为洗脱液混合物)，以得到N-[5-[[2-[2-(5-氨基-2-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.11g，234.77μmol，23.11％产率)
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值468.2；实测值369.2；Rt＝2.265min。
步骤2.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-(5-氨基-2-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物658)
将N-[5-[[2-[2-(5-氨基-2-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.11g，234.77μmol)溶解于水(5mL)和二噁烷(2mL)的混合物中。然后，将反应混合物在100℃下搅拌17h。在反应完成(通过LCMS监测)之后，在减压下浓缩所得悬浮液。使所获得的固体经历HPLC(Waters Sunfire C18 20*100 5mkm柱且以MeOH为洗脱液混合物)，以得到纯的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-(5-氨基-2-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(3.9mg，10.59μmol，4.51％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)0.75(m,3H),1.12(m,1H),1.64(m,3H),2.01(m,3H),2.63(m,1H),3.44(m,1H),4.27(m,1H),5.36(m,5H),6.98(m,2H),7.47(m,1H),7.89(m,1H),7.98(m,1H),10.43(m,1H)
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值368.2；实测值370.4；Rt＝1.148min。
实施例363.N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物701)的合成
步骤1.N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-乙基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
在室温下将HATU(4.50g，11.84mmol)分批添加到2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-乙基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(3.66g，11.84mm ol)、5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑(2.5g，10.76mmol)(中间体6LL)和TEA(6.53g，64.56mmol，9.00mL)于DMF(35mL)中的悬浮液中。将澄清溶液在20℃下搅拌32h且在真空中蒸发溶剂。将残余物溶解于EtOAc(300mL)中，用水(5x100 mL)洗涤，在真空中蒸发且通过硅胶快速色谱使用0至100％ACN-氯仿梯度洗脱来纯化，以得到2.5g具有顺式杂质的产物。通过手性HPLC(柱：ChiralcelOJ(250*30，20mkm)，以CO2-MeOH，75-25，80ml/mi n补充流速-30ml/min为流动相)分离单独的反式异构体，以得到N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-乙基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(1.94g，3.70mmol，34.43％产率)。通过RP-HPLC(柱：YMC-Actus Triart C18 100*20mml.D.S-5um；以35-55％0-5minH2O/ACN/0.1％ NH4OH，流速：30ml/min为流动相)纯化经Boc脱保护的产物，以得到N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.9g，2.12mmol，19.75％产率)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值523.2；实测值524.2；Rt＝1.288min。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值423.2；实测值424.2；Rt＝2.199min。
Boc-中间体(99+ee)的RT(OJ-H，CO2-MeOH，80-20，3.0mL/min)＝2.859min
步骤2.N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物701)的合成
将N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-乙基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(1.94g，3.70mmol)于二噁烷(20mL)和水(10mL)中的溶液在85℃下搅拌12h且在真空中蒸发溶剂。通过RP-HPLC(柱：YMC-ActusTriart C18 100*20mml.D.S-5um；以35-60％0-5min H2O/ACN/0.1％ NH4OH，流速：30ml/min为流动相，然后另一柱：Chromatorex 18SMB 100-5T 100x19mm 5um；以30-60％0-5minH2O/MeOH/0.1％ FA，流速：30ml/min为流动相)纯化残余物，以得到0.8g具有溶剂的产物。将其溶解于15mL无水乙醇中，在真空中蒸发且在45℃下在真空中干燥24h，以得到化合物701N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.5g，1.18mmol，31.87％产率)。[α]21D＝+135.0°(c＝0.1g/100mLEtOH)。1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)1.04(t,6H),1.36(m,1H),1.72(m,1H),1.87(m,1H),2.13(m,1H),2.35(m,2H),3.78(m,3H),4.33(s,1H),5.66(m,3H),7.43(d,1H),7.51(d,1H),8.00(d,1H),8.06(d,1H),8.17(m,1H),9.40(s,1H),10.56(m,1H)
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值423.2；实测值424.2；Rt＝2.082min。
实施例364.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物788)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物780)的合成
步骤1.N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-(1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(327.67mg，1.11mmol)和5-(5-甲基-2-哌啶基)-1H-吡唑并[4,3-b]吡啶(0.24g，1.11mmol)混合于DMF(20mL)中。将反应悬浮液冷却至0℃且添加HATU(506.31mg，1.33mmol)，随后添加TEA(336.86mg，3.33mmol，464.00μL)，且在环境温度下搅拌14h。将反应混合物在真空中蒸发，以得到产物N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-(1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.7g，粗品)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值493.5；实测值494.2；Rt＝1.214min。
步骤2.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[5-甲基-2-(1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
在室温下将水(10mL)一次性添加到N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-(1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.7g，1.42mmol)于二噁烷(50mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在100℃下搅拌14h，然后在真空中蒸发。将残余物用水(20mL)稀释且用二氯甲烷(2*30mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发且通过制备型(30-65％0-5min H2O/MeOH/0.1％ NH4OH，流速30ml/min)纯化0.45g所获得的粗产物，以得到产物N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[5-甲基-2-(1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.082g，208.42μmol，14.70％产率)
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值393.2；实测值394.2；Rt＝2.082min。
步骤3.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物788)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物780)的分离
使N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.082g，208.42μmol)经历手性HPLC纯化(柱：OJ-H(250*20，5mkm)，洗脱液：己烷-IPA-MeOH，70-15-15，流速：12mL/min)，以得到两种个别对映异构体化合物788N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.0159g，40.41μmol，19.39％产率)和化合物780N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.0189g，48.04μmol，23.05％产率)
化合物788：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.00-1.07(m,3H),1.32-1.41(m,1H),1.74-1.82(m,1H),1.81-1.92(m,1H),1.96-2.11(m,4H),2.53-2.56(m,1H),2.80-3.25(m,1H),3.44-4.10(m,1H),5.30-5.59(m,1H),5.59-5.75(m,2H),7.25-7.45(m,1H),7.45-7.51(m,1H),7.95-8.06(m,2H),8.24-8.32(m,1H),10.41-10.57(m,1H),13.30(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值393.2；实测值394.0；Rt＝1.898min。
化合物780：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.00-1.07(m,3H),1.32-1.41(m,1H),1.74-1.82(m,1H),1.81-1.92(m,1H),1.96-2.11(m,4H),2.53-2.56(m,1H),2.80-3.25(m,1H),3.44-4.10(m,1H),5.30-5.59(m,1H),5.59-5.75(m,2H),7.25-7.45(m,1H),7.45-7.51(m,1H),7.95-8.06(m,2H),8.24-8.32(m,1H),10.41-10.57(m,1H),13.30(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值393.2；实测值394.0；Rt＝1.898min。
实施例365.外消旋-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[5-甲基-2-(2-氧代-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物671)、rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物762、化合物762)和rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(EN-TG-4743、化合物763)的合成
步骤1：外消旋-N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-(2-氧代-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将DIPEA(266.68mg，2.06mmol，359.41μL)添加到相应6-(5-甲基-2-哌啶基)-1H-喹啉-2-酮(0.2g，825.37μmol)和2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(243.72mg，825.37μmol)于DMF(10mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU(345.21mg，907.91μmol)。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC(WatersSunfire C18 20*100 5mkm柱且以MeOH为洗脱液混合物)，以得到N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-(2-氧代-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.21g，404.16μmol，48.97％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值519.2；实测值520.4；Rt＝2.748min。
步骤2：外消旋-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[5-甲基-2-(2-氧代-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物671)的合成
将N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-(2-氧代-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]-氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.21g，404.16μmol)溶解于二噁烷(2mL)和水(5mL)的混合物中。然后，将反应混合物在100℃下搅拌16h。在反应完成(通过LCMS监测)之后，在减压下浓缩所得悬浮液。使所获得的固体经历HPLC(Waters Sunfire C1820*1005mkm柱且以MeOH为洗脱液混合物)，以得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[5-甲基-2-(2-氧代-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(121.9mg，290.60μmol，71.90％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.01(m,3H),1.34(m,1H),1.69(m,1H),1.86(m,1H),2.01(m,4H),2.20(m,1H),2.90(m,1H),3.63(m,1H),5.59(m,3H),6.47(m,1H),7.29(m,1H),7.40(m,1H),7.48(m,1H),7.59(m,1H),7.87(m,1H),7.97(m,1H),10.46(m,1H),11.70(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值419.2；实测值420.2；Rt＝1.670min。
步骤3：rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物762、化合物762)和rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(EN-TG-4743、化合物763)的合成
使用(Chiralpak IC(250*20mm，5mm)柱且以己烷-IPA-MeOH，50-25-25为流动相，流速：12mL/min；柱温：24℃；波长：205nm，215nm，254nm)对外消旋-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[5-甲基-2-(2-氧代-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(121.9mg，290.60μmol)进行手性分离，得到化合物762(化合物762)rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(42.1mg，34.54％产率)和化合物763(化合物763)rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(52.29mg，42.90％产率)。保留时间(为A)＝60.01min；保留时间(为B)＝66.66min，保留时间(为C)＝89.81
化合物762(化合物762)：RT(IC(250*4.6，5mkm，IPA-MeOH，50-50，0.5mL/min)＝28.057min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.99-1.02(m,3H),1.28-1.37(m,1H),1.66-1.73(m,1H),1.82-1.90(m,1H),1.96-2.03(m,3H),2.04-2.16(m,1H),2.18-2.26(m,1H),2.72-3.22(m,1H),3.42-4.02(m,1H),5.13-5.58(m,1H),5.58-5.65(m,2H),6.42-6.50(m,1H),7.24-7.32(m,1H),7.36-7.44(m,1H),7.44-7.51(m,1H),7.54-7.65(m,1H),7.82-7.90(m,1H),7.90-8.04(m,1H),10.35-10.57(m,1H),11.58-11.82(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值419.2；实测值420.2；Rt＝0.991min。
化合物763(化合物763)：RT(IC(250*4.6，5mkm，IPA-MeOH，50-50，0.5mL/min)＝20.804min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.98-1.02(m,3H),1.28-1.37(m,1H),1.65-1.74(m,1H),1.81-1.90(m,1H),1.96-2.03(m,3H),2.04-2.16(m,1H),2.19-2.27(m,1H),2.70-3.23(m,1H),3.40-4.03(m,1H),5.10-5.58(m,1H),5.58-5.65(m,2H),6.42-6.51(m,1H),7.22-7.33(m,1H),7.35-7.42(m,1H),7.45-7.52(m,1H),7.54-7.65(m,1H),7.83-7.90(m,1H),7.90-8.05(m,1H),10.36-10.57(m,1H),11.70(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值419.2；实测值420.2；Rt＝0.988min。
实施例366.rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物825、化合物825)和rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物819、化合物819)的合成
步骤1：外消旋-N-[3-乙基-5-[[2-[5-甲基-2-(2-氧代-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将DIPEA(266.68mg，2.06mmol，359.41μL)添加到相应6-(5-甲基-2-哌啶基)-1H-喹啉-2-酮(0.2g，825.37μmol)和2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-乙基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(255.30mg，825.37μmol)于DMF(10mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU(345.21mg，907.91μmol)。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC(WatersSunfire C18 20*100 5mkm柱且以MeOH为洗脱液混合物)，以得到N-[3-乙基-5-[[2-[5-甲基-2-(2-氧代-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.2g，374.80μmol，45.41％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值533.2；实测值534.4；Rt＝2.921min。
步骤2：外消旋-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[5-甲基-2-(2-氧代-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
将N-[3-乙基-5-[[2-[5-甲基-2-(2-氧代-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]-氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.2g，374.80μmol)溶解于二噁烷(2mL)和水(5mL)的混合物中。然后，将反应混合物在100℃下搅拌16h。在反应完成(通过LCMS监测)之后，在减压下浓缩所得悬浮液。使所获得的固体经历HPLC(Waters Sunfire C1820*1005mkm柱且以MeOH+NH3为洗脱液混合物)，以得到N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[5-甲基-2-(2-氧代-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(97.2mg，224.22μmol，59.82％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值433.2；实测值434.2；Rt＝1.882min。
步骤3：rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物825、化合物825)和rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物819、化合物819)的合成
使用(Chiralpak IС-II(250*20mm，5mkm)柱且以己烷-IPA-MeOH 50-25-25为流动相，流速：12mL/min)对外消旋-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[5-甲基-2-(2-氧代-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(97.2mg，224.22μmol)进行手性分离，得到化合物825(化合物825)rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(32.76mg，33.70％产率)和化合物819(化合物819)rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(28.39mg，29.21％产率)。
化合物825(化合物825)：RT(OJ-H(250*4.6,5mkm)，Hex-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝30.120min。
1H NMR(dmso,600MHz):δ(ppm)0.97-1.03(m,3H),1.04-1.13(m,3H),1.28-1.40(m,1H),1.66-1.74(m,1H),1.80-1.93(m,1H),2.01-2.16(m,1H),2.18-2.28(m,1H),2.35-2.42(m,2H),2.72-3.21(m,1H),3.39-4.05(m,1H),5.09-5.59(m,1H),5.59-5.71(m,2H),6.45-6.51(m,1H),7.25-7.34(m,1H),7.38-7.43(m,1H),7.45-7.51(m,1H),7.56-7.64(m,1H),7.84-7.90(m,1H),7.94-8.09(m,1H),10.24-10.70(m,1H),11.70(br s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值433.2；实测值434.2；Rt＝1.910min。
化合物819(化合物819)：RT(OJ-H(250*4.6,5mkm)，Hex-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝12.280min。
1H NMR(dmso,600MHz):δ(ppm)0.99-1.03(m,3H),1.04-1.15(m,3H),1.29-1.38(m,1H),1.64-1.77(m,1H),1.81-1.91(m,1H),2.00-2.16(m,1H),2.18-2.30(m,1H),2.33-2.41(m,2H),2.76-3.21(m,1H),3.46-4.03(m,1H),5.11-5.59(m,1H),5.59-5.69(m,2H),6.43-6.50(m,1H),7.26-7.33(m,1H),7.39-7.43(m,1H),7.46-7.52(m,1H),7.55-7.64(m,1H),7.84-7.91(m,1H),7.95-8.08(m,1H),10.46(br s,1H),11.66(br s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值433.2；实测值434.2；Rt＝1.905min。
实施例367.rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物756)和rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物784)的合成
步骤1：rel-N-[3-乙基-5-[[2-[5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将DIPEA(522.29mg，4.04mmol，703.90μL)添加到相应2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-乙基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(0.5g，1.62mmol)和2-甲基-5-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶(307.59mg，1.62mmol)于DMF(15mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU(676.09mg，1.78mmol)。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC(Waters Sunfire C1820*100 5mkm柱且以MeOH为洗脱液混合物)，以得到rel-N-[3-乙基-5-[[2-[5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(430.2mg，893.30μmol，55.26％产率)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值481.2；实测值483.2；Rt＝2.306min。
步骤2：rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
将Rel-N-[3-乙基-5-[[2-[5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(430.2mg，893.30μmol)溶解于二噁烷(2mL)和水(5mL)混合物中。然后，将反应混合物在100℃下搅拌17h。在反应完成(通过LCMS监测)之后，在减压下浓缩所得悬浮液。使所获得的固体经历HPLC(Waters Sunfire C1820*100 5mkm柱且以MeCN为洗脱液混合物)，以得到rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(184.6mg，483.92μmol，54.17％产率)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值381.2；实测值383.2；Rt＝1.209min。
步骤3：rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物756)和rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物784)的合成
使用(Chiralpak IС-II(250*20mm，5mkm)柱且以己烷-IPA-MeOH 60-20-20为流动相，流速：12mL/min)对rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(184.6mg，483.92μmol)进行手性分离，得到化合物756rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(72.55mg，39.30％产率)和化合物784rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(71.94mg，38.97％产率)。
化合物756：RT(Chiralpak IC(250*4.6，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝24.564min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.98-1.01(m,3H),1.05-1.12(m,3H),1.25-1.40(m,1H),1.57-1.67(m,1H),1.78-1.93(m,1H),1.94-2.14(m,1H),2.14-2.26(m,1H),2.37-2.45(m,5H),2.66-3.22(m,1H),3.40-4.03(m,1H),5.11-5.58(m,1H),5.58-5.66(m,2H),7.17-7.28(m,1H),7.41-7.51(m,1H),7.53-7.64(m,1H),7.95-8.07(m,1H),8.34-8.43(m,1H),10.43-10.53(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值381.2；实测值383.4；Rt＝1.211min。
化合物784：RT(Chiralpak IC(250*4.6，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝34.051min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.98-1.02(m,3H),1.05-1.12(m,3H),1.28-1.38(m,1H),1.60-1.67(m,1H),1.82-1.91(m,1H),1.99-2.13(m,1H),2.16-2.26(m,1H),2.39-2.45(m,5H),2.69-3.19(m,1H),3.40-4.03(m,1H),5.14-5.59(m,1H),5.59-5.66(m,2H),7.23-7.27(m,1H),7.43-7.50(m,1H),7.54-7.64(m,1H),7.98-8.07(m,1H),8.35-8.41(m,1H),10.44-10.60(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值381.2；实测值383.4；Rt＝1.217min。
实施例368.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(1',5-二甲基-[2,4'-联哌啶]-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物614)的合成
步骤1：外消旋-(5-(2-((2R,5S)-1',5-二甲基-[2,4'-联哌啶]-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-3-甲基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
在室温下将HATU(490.95mg，1.29mmol)分批添加到2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(381.28mg，1.29mmol)、1-甲基-4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]哌啶(298.24mg，1.29mmol)和DIPEA(1.00g，7.75mmol，1.35mL)于DMF(10mL)中的悬浮液中。将澄清溶液在25℃下搅拌18h且在真空中蒸发溶剂。使残余物经历RP-HPLC(柱：YMC Triart C18 100x20 mm，5um；以50-80％0-5min水-MeOH(NH3 0.1％)，流速30ml/min为流动相)，以得到N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1-甲基-4-哌啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(206mg，434.96μmol，33.69％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)0.85(d,3H),1.12(m,2H),1.36(m,5H),1.48(s,9H),1.76(m,4H),2.12(m,2H),2.27(m,6H),2.96(m,1H),3.04(m,2H),4.12(m,1H),6.62(m,1H),8.03(m,1H),8.33(m,1H),9.36(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值473.2；实测值474.2；Rt＝2.046min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(1',5-二甲基-[2,4'-联哌啶]-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物614)的合成
在室温下将于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(1.13g，4.35mmol，1.08mL，14％纯度)小心添加到N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1-甲基-4-哌啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(206.00mg，434.96μmol)于DCM(2mL)中的溶液中。然后将反应混合物在室温下搅拌12h且在真空中蒸发溶剂。使残余物经历RP-HPLC(柱：YMC Triart C18 100x20 mm，5um；以30-80％1-6min水-MeOH(NH3 0.1％)，流速30ml/min为流动相)，以得到化合物614N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1-甲基-4-哌啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(114mg，305.23μmol，70.17％产率)。
化合物614：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.91-0.96(m,3H),1.00-1.17(m,2H),1.21-1.32(m,1H),1.39-1.48(m,1H),1.51-1.66(m,3H),1.72-1.81(m,4H),1.81-1.96(m,2H),1.98-2.03(m,3H),2.07-2.14(m,3H),2.64-2.86(m,3H),3.47-4.11(m,1H),5.54-5.65(m,2H),7.41-7.48(m,1H),7.94-8.00(m,1H),10.16-10.38(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值373.2；实测值374.2；Rt＝1.064min。
实施例369.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-(2-(3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-7-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物870)的合成
步骤1：外消旋-(5-(2-((2R,5S)-2-(3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-7-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-3-乙基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
将7-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪(0.2g，860.88μmol)、TEA(871.12mg，8.61mmol，1.20mL)和2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-乙基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(266.28mg，860.88μmol)溶解于DMF(8.5mL)中且一次性添加HATU(491.00mg，1.29mmol)，将所得混合物在20℃下搅拌3h。将反应混合物倒入到水中且将水相用EtOAc萃取(3次)，然后将合并的有机相用盐水洗涤(3次)，经Na2SO4干燥且在真空下浓缩。通过反相HPLC(55-65％2-10min；水-MeOH；流速30ml/min(装载泵4ml/min MeOH)；柱SunFireC18 100*19mm 5um)纯化粗产物，以得到呈粉色固体的N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪-7-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-乙基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.096g，183.34μmol，21.30％产率)。所述反应为成功的。分离呈粉色固体的所需N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪-7-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-乙基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.096g，183.34μmol，21.30％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值523.2；实测值524.2；Rt＝1.377min。
步骤2：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-(2-(3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-7-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物870)的合成
将N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪-7-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-乙基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.096g，183.34μmol)溶解于二噁烷(2mL)和水(2mL)的混合物中，然后在100℃下搅拌12h。在真空下浓缩反应混合物。通过HPLC(35-55％MeCN/H2O-2-10min流速：30ml/min；装载泵4ml/min MeCN；柱Sun FireC18 100x 19mm，5mk)纯化粗产物，以得到呈白色固体的N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪-7-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.02g，47.22μmol，25.76％产率)。
化合物870：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.94-1.04(m,3H),1.06-1.14(m,3H),1.23-1.34(m,1H),1.63-1.76(m,1H),1.77-1.87(m,1H),1.88-2.04(m,1H),2.04-2.13(m,1H),2.36-2.42(m,2H),2.70-3.16(m,1H),3.21-3.25(m,2H),3.35-3.96(m,1H),4.05-4.12(m,2H),4.89-5.58(m,1H),5.58-5.65(m,2H),5.66-5.71(m,1H),6.48-6.65(m,3H),7.43-7.53(m,1H),7.96-8.07(m,1H),10.38-10.55(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值423.2；实测值424.2；Rt＝1.004min。
实施例370.1-(2-((6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)氨基)-2-氧代乙酰基)-N,5-二甲基-[2,3'-联哌啶]-1'-甲酰胺(化合物814)的合成
步骤1：N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[1-(甲基氨基甲酰基)-3-哌啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
向N-甲基-3-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]哌啶-1-甲酰胺(0.75g，2.72mmol，HCl)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(802.95mg，2.72mmol)和TEA(1.38g，13.60mmol，1.90mL)中的溶液中分批添加HATU(1.14g，2.99mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌3h，溶解于水(50ml)中且用EtOAc(3*20ml)萃取。将合并的有机层用盐水(2*25ml)洗涤，经Na2SO4干燥且移除溶剂，以得到N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[1-(甲基氨基甲酰基)-3-哌啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(1.1g，2.13mmol，78.30％产率)。此化合物不经进一步纯化即用于下一步骤。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值516.2；实测值517.2；Rt＝1.147min。
步骤2：1-(2-((6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)氨基)-2-氧代乙酰基)-N,5-二甲基-[2,3'-联哌啶]-1'-甲酰胺(化合物814)的合成
将N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[1-(甲基氨基甲酰基)-3-哌啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(1.1g，2.13mmol)和于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(8g，219.41mmol，10.00mL)于DCM(30mL)中的溶液在25℃下搅拌3h。移除溶剂且通过HPLC(20-20-65％0-1-6min H2O/MeOH/0.1％ NH4OH，流速：30ml/min(装载泵4ml/min MeOH)目标质量320柱：YMC Triart C18100x20 mm，5um)纯化残余物，以获得3-[(2R,5S)-1-[2-[(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酰基]-5-甲基-2-哌啶基]-N-甲基哌啶-1-甲酰胺(172mg，412.95μmol，19.39％产率)和(2S,5R)-2-[1-[2-[(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酰基]-3-哌啶基]-N,5-二甲基哌啶-1-甲酰胺(111mg，266.50μmol，12.52％产率)。
化合物814：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.78-0.94(m,3H),0.97-1.04(m,1H),1.23-1.33(m,2H),1.51-1.65(m,4H),1.78-1.88(m,2H),1.91-1.96(m,1H),1.99-2.04(m,3H),2.25-2.46(m,1H),2.51-2.54(m,3H),2.58-2.70(m,1H),2.81-3.26(m,1H),3.31-3.63(m,1H),3.67-3.74(m,1H),3.79-3.90(m,1H),3.94-4.22(m,1H),5.24-5.63(m,2H),6.32-6.42(m,1H),7.23-7.49(m,1H),7.87-8.01(m,1H),9.47-10.54(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值416.2；实测值417.2；Rt＝1.427min。
实施例371.外消旋-2-[(2R,5S)-2-(1-乙酰基-3-哌啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物757)的合成
步骤1：外消旋-N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(1-乙酰基-3-哌啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
向1-[3-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1-哌啶基]乙酮(0.7g，2.68mmol，HCl)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(792.57mg，2.68mmol)和TEA(1.36g，13.42mmol，1.87mL)中的溶液中分批添加HATU(1.12g，2.95mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌3h，溶解于水(50ml)中且用EtOAc(3*20ml)萃取。将合并的有机层用盐水(2*25ml)洗涤，经Na2SO4干燥且移除溶剂，以得到N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(1-乙酰基-3-哌啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(1.2g，2.39mmol，89.13％产率)。此化合物不经进一步纯化即用于下一步骤。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.93(d,3H),1.12(m,3H),1.42(s,9H),1.62(m,4H),1.85(m,2H),1.97(s,3H),2.16(s,3H),2.66(m,5H),3.78(m,2H),4.21(m,1H),7.93(m,1H),8.41(m,1H),9.04(m,1H),10.86(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值501.2；实测值502.2；Rt＝1.286min。
步骤2：外消旋-2-[(2R,5S)-2-(1-乙酰基-3-哌啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物757)的合成
将N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(1-乙酰基-3-哌啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(1.2g，2.39mmol)和于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(4g，109.71mmol，5.00mL)于DCM(25mL)中的溶液在25℃下搅拌12h。移除溶剂且通过HPLC(25-50％0.5-7.5min水-MeOH(NH3 0.1％)，流速30ml/min(装载泵4ml/min MeOH)目标质量402)纯化残余物，以获得两种2-[(2R,5S)-2-(1-乙酰基-3-哌啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(146mg，363.64μmol，15.20％产率)和2-[3-[(2R,5S)-1-乙酰基-5-甲基-2-哌啶基]-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(106mg，264.01μmol，11.04％产率)。.通过2D-NMR证明经氢化的产物的结构为反式。通过2D-NMR也证明最终产物的结构。
化合物757：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.89-0.96(m,3H),1.05-1.16(m,1H),1.18-1.40(m,2H),1.51-1.70(m,4H),1.74-1.88(m,2H),1.89-1.95(m,2H),1.95-1.99(m,3H),1.99-2.02(m,3H),2.78-2.96(m,1H),2.97-3.27(m,1H),3.55-3.67(m,1H),3.68-4.00(m,1H),4.09-4.24(m,2H),5.53-5.63(m,2H),7.40-7.49(m,1H),7.94-8.02(m,1H),10.26-10.35(m,1H)。
实施例372.LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值401.2；实测值402.2；Rt＝1.517min。
N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(1',5-二甲基-[2,3'-联哌啶]-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物832)的合成
步骤1：外消旋-N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1-甲基-3-哌啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
向1-甲基-3-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]哌啶(0.7g，2.60mmol，2HCl)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(767.69mg，2.60mmol)和TEA(1.58g，15.60mmol，2.17mL)中的溶液中分批添加HATU(1.09g，2.86mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌3h，溶解于水(50ml)中且用EtOAc(3*20ml)萃取。将合并的有机层用盐水(2*25ml)洗涤，经Na2SO4干燥且移除溶剂，以得到N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1-甲基-3-哌啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.95g，2.01mmol，77.16％产率)。此化合物不经进一步纯化即用于下一步骤。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.78(m,2H),0.93(d,3H),1.12(m,2H),1.42(s,9H),1.62(m,6H),2.56(m,2H),2.65(s,3H),2.86(m,6H),3.31(m,2H),7.46(m,1H),8.41(m,1H),9.04(m,1H),10.87(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值373.2；实测值374.2；Rt＝1.080min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(1',5-二甲基-[2,3'-联哌啶]-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物832)的合成
将N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1-甲基-3-哌啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.95g，2.01mmol)和于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(5g，137.13mmol，6.25mL)于DCM(15mL)中的溶液在25℃下搅拌5h。移除溶剂且通过HPLC(45-45-65％0-1-6min H2O/MeOH/0.1％ NH4OH，流速：30ml/min(装载泵4ml/min MeOH)柱：YMC Triart C18 100x20 mm，5um)，且第二次：20-20-30％0-1-6min H2O/ACN/0.1％NH4OH，流速：30ml/min(装载泵4ml/min MeOH)目标质量373.49柱：YMC Triart C18100x20mm，5um)纯化残余物，以获得N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1-甲基-3-哌啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(24mg，64.26μmol，3.20％产率)。
化合物832：
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.73-0.89(m,1H),0.89-0.97(m,3H),1.22-1.31(m,1H),1.34-1.41(m,1H),1.42-1.56(m,3H),1.56-1.68(m,2H),1.70-1.79(m,1H),1.79-1.85(m,2H),1.86-1.98(m,1H),1.99-2.03(m,3H),2.05-2.09(m,2H),2.10-2.16(m,2H),2.61-2.70(m,1H),2.80-3.28(m,1H),3.32-4.29(m,2H),5.53-5.65(m,2H),7.39-7.48(m,1H),7.90-8.03(m,1H),10.23-10.35(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值373.2；实测值374.2；Rt＝0.703min。
实施例373.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-[2,3'-联哌啶]-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物744)的合成
步骤1：外消旋-3-((2R,5S)-1-(2-((6-((叔丁氧基羰基)氨基)-5-甲基吡啶-3-基)氨基)-2-氧代乙酰基)-5-甲基哌啶-2-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸苯甲酯的合成
向5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸苯甲酯(10g，3.18mmol)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(939.16mg，3.18mmol)和TEA(1.61g，15.90mmol，2.22mL)于DMF(50mL)中的溶液中分批添加HATU(1.33g，3.50mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌3h，溶解于水(300ml)中且用EtOAc(3*100ml)萃取。将合并的有机层用盐水(3*100ml)洗涤，经Na2SO4干燥且蒸发，以获得粗产物(11g)。通过梯度色谱(CHCl3-MTBE)纯化粗产物，以获得5-[(2R,5S)-1-[2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酰基]-5-甲基-2-哌啶基]-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸苯甲酯(1g，1.69mmol，53.14％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.90(d,3H),1.12(m,1H),1.42(s,9H),1.98(m,4H),2.22(m,2H),2.24(s,3H),2.78(m,4H),3.12(m,2H),3.78(m,4H),4.12(m,1H),4.56(m,1H),5.06(s,2H),7.32(m,5H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值591.2；实测值592.2；Rt＝1.606min。
步骤2：外消旋-N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(3-哌啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
向5-[(2R,5S)-1-[2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酰基]-5-甲基-2-哌啶基]-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸苯甲酯(1g，1.69mmol)于MeOH(40mL)中的溶液中添加干燥的487型钯(10％于碳上)(0.5g，469.84μmol，10％纯度)且将所得混合物在氢气气氛、40℃下搅拌72h。通过LCMS控制转化。过滤出催化剂且移除溶剂，以获得粗产物顺式异构体和反式异构体的混合物(在氢化期间，观测到双键的迁移)。通过HPLC(50-50-80％0-1-6min H2O/MeOH/0.1％ NH3，流速：30ml/min(装载泵4ml/min MeOH)目标质量459柱：YMC Triart C18 100x20 mm，5um)纯化粗产物，以获得三种级分。纯化各级分，以获得两种产物：N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(3-哌啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(170mg，369.90μmol，21.89％产率)和N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5S)-5-甲基-2-(3-哌啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(80mg，174.07μmol，10.30％产率)。通过2D-NMR证明主要级分的结构为反式。将此级分用于下一步骤。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值459.2；实测值460.2；Rt＝1.620min。
步骤3：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-[2,3'-联哌啶]-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物744)的合成
将N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(3-哌啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(80mg，174.07μmol)于DCM(5mL)中的溶液在25℃下搅拌12h。移除溶剂且通过HPLC(0-5min 30-80％水-MeOH(NH3 0.1％)，流速30ml/min(装载泵4ml/min MeCN(NH3 0.1％))柱：YMC-Actus Triart C18 100*20mml.D.S-5um)纯化残余物，以得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(3-哌啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(11mg，30.60μmol，17.58％产率)和具有顺式异构体杂质的其他级分29mg。
化合物744：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.91-0.94(m,3H),1.19-1.33(m,2H),1.47-1.64(m,4H),1.73-2.00(m,6H),2.00-2.03(m,3H),2.15-2.28(m,2H),2.77-2.82(m,1H),2.87-2.99(m,1H),3.38-3.57(m,1H),3.98-4.34(m,1H),5.52-5.64(m,2H),7.40-7.50(m,1H),7.93-8.04(m,1H),10.18-10.42(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值359.2；实测值360.2；Rt＝0.887min。
实施例374.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(4-(噻唑-5-基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物887和化合物900)的合成
步骤1：(3-甲基-5-(2-(5-甲基-2-(4-(噻唑-5-基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
将DIPEA(656.52mg，5.08mmol，884.80μL)添加到相应2-((6-((叔丁氧基羰基)氨基)-5-甲基吡啶-3-基)氨基)-2-氧代乙酸(0.6g，2.03mmol)和5-(4-(5-甲基哌啶-2-基)苯基)噻唑(525.00mg，2.03mmol)于DMF(10mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU(849.85mg，2.24mmol)。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC(Waters Sunfire C1820*100 5mkm柱且以MeOH-水为洗脱液混合物)，以得到(3-甲基-5-(2-(5-甲基-2-(4-(噻唑-5-基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(119.4mg，222.90μmol，10.97％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值535.2；实测值536.2；Rt＝3.532min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(4-(噻唑-5-基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺的合成
将(3-甲基-5-(2-(5-甲基-2-(4-(噻唑-5-基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(119.4mg，222.90μmol)溶解于水(5mL)和二噁烷(2mL)的混合物中。然后，将反应混合物在100℃下搅拌17h。在反应完成(通过LCMS监测)之后，在减压下浓缩所得悬浮液。使所获得的固体经历HPLC(Waters Sunfire C18 20*100 5mkm柱且以MeOH为洗脱液混合物)，以得到N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(4-(噻唑-5-基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(46.5mg，106.76μmol，47.90％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值435.2；实测值436.2；Rt＝2.221min。
步骤3：手性分离(化合物887和化合物900)
通过手性HPLC(柱：YMC Chiral Art Cellulose-SC(250*20mm，5mkm)，IPA-MeOH，50-50，10mL/min；215nm，柱温：20℃；保留时间(异构体A)＝17.69min；保留时间(异构体B)＝18.70min；保留时间(异构体С)＝23,65min；保留时间(异构体D)＝33,10min)将N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(4-(噻唑-5-基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(46.5mg，106.76mmol)分成对映异构体。
化合物887于分析条件下(柱：IC，IPA-MeOH，50-50，0.5ml/min为流动相)的保留时间为48.43min且化合物900的保留时间为25.41min。
化合物887：保留时间：48.43min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.01(m,3H),1.34(m,1H),1.65(m,1H),1.87(m,1H),1.99(m,3H),2.19(m,2H),2.98(dd,1H),3.73(dd,1H),5.60(m,3H),7.36(d,1H),7.41(m,1H),7.48(s,1H),7.68(m,2H),7.99(m,1H),8.30(s,1H),9.06(s,1H),10.50(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值435.2；实测值436.2；Rt＝0.858min。
化合物900：保留时间：25.41min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.01(m,3H),1.34(m,1H),1.66(m,1H),1.86(m,1H),1.99(m,4H),2.18(m,1H),2.99(m,1H),3.83(m,1H),5.60(m,3H),7.41(m,3H),7.68(m,2H),7.99(m,1H),8.30(s,1H),9.06(s,1H),10.50(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值435.2；实测值436.2；Rt＝0.867min。
实施例375.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4,4-二氟-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1069)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5R)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4,4-二氟-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1049)的合成
步骤1.N-[5-[[2-[(2R,5R)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4,4-二氟-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将5-[(2R,5R)-4,4-二氟-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑(480mg，1.79mmol)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(528.24mg，1.79mmol)、三乙胺(905.08mg，8.94mmol，1.25mL)混合于DMF(10mL)中，然后添加HATU(1.02g，2.68mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌12h。蒸发溶剂且通过HPLC(2-10min 60-65％甲醇30ml/min，装载泵4ml/min甲醇，目标质量545，柱：SunFire 100*19mm，5微米)纯化粗品沉淀，以获得N-[5-[[2-[(2R,5R)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4,4-二氟-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(69.2mg，126.83μmol，7.09％产率)
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值545.2；实测值546.2；Rt＝1.403min。
步骤2.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5R)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4,4-二氟-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
将N-[5-[[2-[(2R,5R)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4,4-二氟-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(56.8mg，104.11μmol)于二噁烷(2mL)和水(2mL)中的溶液在100℃下加热12h。蒸发溶剂，以获得N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5R)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4,4-二氟-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(44mg，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值445.2；实测值446.0；Rt＝2.330min。
步骤3.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4,4-二氟-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1069)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5R)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4,4-二氟-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1049)的拆分
通过手性色谱(Chiralpak IC-II(250*30mm，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，12ml/min)分离非对映异构体的混合物，以获得N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5R)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4,4-二氟-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(15.7mg，35.24μmol，35.68％产率)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4,4-二氟-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(12.73mg，28.58μmol，28.93％产率)
制备型：化合物1069的RT(Chiralpak IC-II(250*30mm，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，12ml/min)＝31.414；化合物1049的RT(Chiralpak IC-II(250*30mm，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，12ml/min)＝37.133
分析型：化合物1049的RT(Chiralpak IC(250*4.6，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min)＝24.265；分析型：化合物1069的RT(Chiralpak IC(250*4.6，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min)＝20.813
化合物1049 1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.09-1.14(m,3H),1.95-2.08(m,3H),2.15-2.30(m,1H),2.95-3.16(m,2H),3.38-3.56(m,1H),3.80-4.41(m,1H),5.54-5.69(m,2H),5.69-6.06(m,1H),7.38-7.56(m,2H),7.91-8.09(m,2H),8.11-8.21(m,1H),9.40(s,1H),10.51-10.75(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值445.2；实测值446.0；Rt＝2.330min。
化合物1069 1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.09-1.14(m,3H),1.95-2.08(m,3H),2.15-2.30(m,1H),2.95-3.16(m,2H),3.38-3.56(m,1H),3.80-4.41(m,1H),5.54-5.69(m,2H),5.69-6.06(m,1H),7.38-7.56(m,2H),7.91-8.09(m,2H),8.11-8.21(m,1H),9.40(s,1H),10.51-10.75(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值445.2；实测值446.0；Rt＝2.330min。
实施例376.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-乙基-2-(1H-吡唑-4-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1032)的合成
向(2R,5S)-5-乙基-2-(1H-吡唑-4-基)哌啶(200mg，793.07μmol，2HCl)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(245.90mg，832.73μmol)和三乙胺(401.26mg，3.97mmol，552.69μL)于二甲基甲酰胺(3mL)中的搅拌混合物中添加TATU(280.97mg，872.38μmol)。将所得反应混合物在25℃下搅拌4h。然后，使其经历HPLC(40-40-75％0-1-6min H2O/MeOH，流速：30ml/min；柱：Chromatorex 18SMB 100-5T 100x19 mm，5um)，得到N-[5-[[2-[(2R,5S)-5-乙基-2-(1H-吡唑-4-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(133mg，291.32μmol，36.73％产率)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值456.2；实测值457.2；Rt＝2.741min。
将水(500.00mg，27.75mmol，0.5mL)添加到N-[5-[[2-[(2R,5S)-5-乙基-2-(1H-吡唑-4-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(133mg，291.32μmol)于二噁烷(1.5mL)中的溶液中。将所得混合物在100℃下搅拌16h。然后，使其经历HPLC(30-75％0-5min H2O/MeOH/0.1％ NH4OH，流速：30ml/min；柱：YMC Triart C18100x20 mm，5um)，得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-乙基-2-(1H-吡唑-4-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(69mg，193.59μmol，66.45％产率)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值356.2；实测值357.2；Rt＝2.161min。
实施例377.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(1,3-苯并噻唑-6-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物716)的合成
步骤1.N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(1,3-苯并噻唑-6-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(508.37mg，1.72mmol)和TEA(1.74g，17.22mmol，2.40mL)溶解于DMF(12mL)中且冷却至0℃，添加HATU(981.90mg，2.58mmol)且在0℃下将混合物搅拌15min。添加6-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑(0.4g，1.72mmol)且将混合物升温至室温且搅拌3h。添加10ml乙酸乙酯且将有机相用盐水洗涤三次。将有机相经Na2SO4干燥，过滤且在45℃下在真空中浓缩，以得到粗产物，其通过HPLC(2-10min 10-60％水/甲醇(装载泵4ml甲醇)，柱：TRIART 100*20 5微米)进行纯化，以得到N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(1,3-苯并噻唑-6-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.147g，288.45μmol，16.75％产率)
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值509.2；实测值510.2；Rt＝1.35min。
步骤2.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(1,3-苯并噻唑-6-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物716)的合成
将N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(1,3-苯并噻唑-6-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.147g，288.45μmol)溶解于二噁烷(2mL)和水(2mL)的混合物中，然后在100℃下搅拌12h。在真空、55℃下浓缩反应混合物，以得到粗产物，其通过HPLC(2-10min 50-60％甲醇/H2O 30ml/min(装载泵4ml甲醇)，柱：SunFire 100*19mm，5微米)进行纯化，以得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(1,3-苯并噻唑-6-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.04g，97.68μmol，33.86％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.01(m,3H),1.35(m,1H),1.71(m,1H),1.87(m,1H),1.99(m,3H),2.13(m,1H),2.29(m,1H),2.78(m,1H),3.76(m,1H),5.63(m,3H),7.45(m,2H),8.08(m,3H),9.36(s,1H),10.49(m,1H)
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值409.2；实测值410.2；Rt＝1.745min。
实施例378.2-[(2S,5R)-2-(4-乙酰胺基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺和2-[(2R,5S)-2-(4-乙酰胺基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物281和化合物296)的合成
步骤1：外消旋-N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-乙酰胺基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
向N-[4-(5-甲基-2-哌啶基)环己基]乙酰胺(0.5g，2.10mmol)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(619.40mg，2.10mmol)和HATU(797.57mg，2.10mmol)于DMF(4mL)中的搅拌溶液中添加三乙胺(1.06g，10.49mmol，1.46mL)。将所得反应混合物在室温下搅拌12小时。12小时之后，添加水(40mL)且用EtOAc(3x 20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(3x 20mL)洗涤，经Na2SO4干燥且在减压下蒸发，以获得粗产物，其通过HPLC(洗脱液：30-30-65％，0-1-5min，水-乙腈；流速：30mL/min；装载泵：4mL/min，乙腈；柱：SunFireC18 100x 19mm，5um)进行纯化，以获得呈淡黄色固体的外消旋-N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-乙酰胺基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(220mg，426.65μmol，20.34％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值515.4；实测值516.4；Rt＝3.229min。
步骤2：外消旋-(2-[(2S,5R)-2-(4-乙酰胺基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺的合成
向外消旋-N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-乙酰胺基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(220.00mg，426.65μmol)于DCM(10mL)中的搅拌溶液中添加于二噁烷中的4M氯化氢溶液(4.00g，109.71mmol，5mL)。将所得反应混合物在25℃下搅拌12小时。12小时之后，在真空中蒸发反应混合物且使粗产物经历HPLC纯化(洗脱液：0-5min，30-40％，水-甲醇(0.1％NH3)；流速：30mL/min；装载泵：5mL/min，甲醇(0.1％ NH3)；柱：YMC-Actus Triart C18 100x 20mm，5um)，以得到呈白色固体的外消旋-(2-[(2S,5R)-2-(4-乙酰胺基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(73mg，175.68μmol，41.18％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值415.3；实测值416.4；Rt＝2.120min。
步骤3：2-[(2S,5R)-2-(4-乙酰胺基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺和2-[(2R,5S)-2-(4-乙酰胺基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物281和化合物296)的手性分离
使外消旋-(2-[(2S,5R)-2-(4-乙酰胺基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(73mg，175.68μmol)经历手性HPLC纯化(柱：ChiralpakOJ-H(250x 20mm，5um)；流动相：己烷-IPA-MeOH，80-10-10；流速：12mL/min)，以得到呈白色固体的2-[(2S,5R)-2-(4-乙酰胺基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物281，21mg)和2-[(2R,5S)-2-(4-乙酰胺基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物296，39mg)。
化合物281：1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)0.81-0.98(m,5H),1.02-1.24(m,3H),1.27-1.46(m,1H),1.54-1.68(m,3H),1.73-1.92(m,9H),2.00-2.08(m,3H),2.65-2.97(m,1H),3.40-3.47(m,1H),3.95-4.21(m,1H),5.61(s,2H),7.41-7.53(m,1H),7.63-7.73(m,1H),7.96-8.04(m,1H),10.25-10.37(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值415.3；实测值416.2；Rt＝3.326min。
手性HPLC：Rt＝23.08min(柱：OJ-H；流动相：己烷-IPA-MeOH，80-10-10；流速：0.6mL/min)。
化合物296：1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)0.81-0.98(m,5H),1.02-1.24(m,3H),1.27-1.46(m,1H),1.54-1.68(m,3H),1.73-1.92(m,9H),2.00-2.08(m,3H),2.65-2.97(m,1H),3.40-3.47(m,1H),3.95-4.21(m,1H),5.61(s,2H),7.41-7.53(m,1H),7.63-7.73(m,1H),7.96-8.04(m,1H),10.25-10.37(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值415.3；实测值416.2；Rt＝3.375min。
手性HPLC：Rt＝11.89min(柱：OJ-H；流动相：己烷-IPA-MeOH，80-10-10；流速：0.6mL/min)。
实施例379.外消旋-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物861)、rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物959)和rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物972)的合成
步骤1：外消旋-N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-[2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(294.95mg，998.86μmol)和外消旋-5-(5-甲基-2-哌啶基)-2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑(0.3g，998.86μmol)混合于DMF(15mL)中。将反应悬浮液冷却至0℃且添加HATU(417.78mg，1.10mmol)，随后添加TEA(202.15mg，2.00mmol，278.44μL)，且在环境温度下搅拌12h。将反应混合物在真空中蒸发且倒入水(100ml)中且用EtOAc(2x40 ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(2*30ml)洗涤，经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到产物外消旋-N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-[2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.42g，727.13μmol，72.80％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值577.2；实测值578.2；Rt＝1.469min。
步骤2：外消旋-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物861)的合成
在室温下将二噁烷(20mL)添加到外消旋-N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-[2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.42g，727.13μmol)于水(10mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在100℃下搅拌12h，然后在真空中蒸发且通过制备型(70-70-90％0-1-6min H2O/MeOH/0.1％ NH4OH，流速：30mL/min目标质量)纯化0.3g所获得的粗产物，以得到产物外消旋-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.148g，309.95μmol，42.63％产率)。
1H NMR(dmso,600MHz):δ(ppm)0.89-1.12(m,3H),1.29-1.43(m,1H),1.63-1.75(m,1H),1.79-1.93(m,1H),1.94-2.05(m,3H),2.07-2.23(m,1H),2.27-2.35(m,1H),2.81-3.22(m,1H),3.48-4.06(m,1H),5.28-5.59(m,1H),5.59-5.82(m,2H),7.36-7.54(m,1H),7.60-7.73(m,1H),7.90-8.08(m,1H),8.14-8.24(m,1H),8.29-8.42(m,1H),10.42-10.77(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值477.2；实测值478.4；Rt＝2.825min。
步骤3：rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物959)和rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物972)的合成
使外消旋-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.1155g，241.88μmol)经历手性HPLC纯化(柱：YMC ChiralArt(250*20mm，5mkm)；洗脱液：己烷-IPA-MeOH，50-25-25，流速：12mL/min)，以得到两种个别对映异构体化合物959rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.05461g，114.37μmol，47.28％产率)和化合物972rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(43.86mg，91.85μmol，37.97％产率)。
化合物959：RT(IC，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝13.762min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.98-1.06(m,3H),1.29-1.44(m,1H),1.63-1.73(m,1H),1.80-1.92(m,1H),1.94-2.03(m,3H),2.08-2.21(m,1H),2.26-2.33(m,1H),2.76-3.20(m,1H),3.45-4.06(m,1H),5.27-5.59(m,1H),5.61-5.74(m,2H),7.37-7.51(m,1H),7.60-7.72(m,1H),7.91-8.04(m,1H),8.15-8.22(m,1H),8.30-8.37(m,1H),10.48-10.59(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值477.2；实测值478.2；Rt＝2.884min。
化合物972：RT(IC，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝21.265min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.00-1.05(m,3H),1.30-1.39(m,1H),1.63-1.72(m,1H),1.83-1.91(m,1H),1.94-2.03(m,3H),2.09-2.21(m,1H),2.22-2.34(m,1H),2.75-3.08(m,1H),3.45-4.07(m,1H),5.28-5.59(m,1H),5.60-5.75(m,2H),7.36-7.54(m,1H),7.59-7.72(m,1H),7.90-8.04(m,1H),8.15-8.23(m,1H),8.30-8.39(m,1H),10.49-10.60(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值477.2；实测值478.2；Rt＝2.833min。
实施例380.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(1H-噻吩并[3,2-c]吡唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物743、化合物824和化合物826)的合成
步骤1：外消旋-(3-甲基-5-(2-((2R,5S)-5-甲基-2-(1H-噻吩并[3,2-c]吡唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
将DIPEA(765.94mg，5.93mmol，1.03mL)添加到相应2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(0.5g，1.69mmol)和5-(5-甲基-2-哌啶基)-1H-噻吩并[3,2-c]吡唑(374.75mg，1.69mmol)于DMF(10mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU(708.20mg，1.86mmol)。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC(WatersSunfire C18 20*100 5mkm柱且以H2O-MeOH为洗脱液混合物)，以得到N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-(1H-噻吩并[3,2-c]吡唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(275.4mg，552.35μmol，32.62％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值498.2；实测值499.2；Rt＝2.933min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(1H-噻吩并[3,2-c]吡唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物743)的合成
将N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-(1H-噻吩并[3,2-c]吡唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(275.40mg，552.35μmol)溶解于二噁烷(2mL)和水(5mL)的混合物中。然后，将反应混合物在100℃下搅拌16h。在反应完成(通过LCMS监测)之后，在减压下浓缩所得悬浮液。使所获得的固体经历HPLC(Waters SunfireC1820*100 5mkm柱且以H2O-MeOH(45-60％)+NH3为洗脱液混合物)，以得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-噻吩并[3,2-c]吡唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(148.6mg，372.92μmol，67.51％产率)。
化合物743：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.97-1.00(m,3H),1.37-1.45(m,1H),1.80-1.98(m,3H),1.98-2.02(m,3H),2.07-2.21(m,1H),2.93-2.97(m,0.4H),3.36-3.40(m,0.6H),3.45-4.08(m,1H),5.47-5.60(m,1H),5.61-5.82(m,2H),7.02-7.06(m,1H),7.48(s,1H),7.69-7.90(m,1H),8.01(d,1H),10.50(bs s,1H),13.05(br s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值398.2；实测值399.2；Rt＝1.779min。
步骤3：手性分离(化合物824和化合物826)
通过以下条件的手性色谱(柱：Chiralpak IB(250*20mm，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH 70-15-15；流速：12mL/min；m(化合物)＝0,12g，进行5次注入，20mg/1次注入，V(级分)＝3L，4,5小时。Rt(化合物826)＝24.57min和Rt(化合物824)＝33.68min)分离N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-噻吩并[3,2-c]吡唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(148.60g，372.92mmol)，以得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-噻吩并[3,2-c]吡唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(37.74mg，94.71μmol，2.54e-2％产率)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1H-噻吩并[3,2-c]吡唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(38.75mg，97.24μmol，2.61e-2％产率)。
化合物824于分析条件下(柱：IB，以己烷-IPA-MeOH，70-15-15，0.6ml/min为流动相)的保留时间为29.27min且化合物826的保留时间为21.00min。
化合物824：保留时间：29.27min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98-1.01(m,3H),1.37-1.45(m,1H),1.83-1.97(m,2H),1.97-2.03(m,3H),2.04-2.19(m,2H),2.92-2.97(m,0.4H),3.35-3.39(m,0.6H),3.43-4.08(m,1H),5.43-5.85(m,3H),6.95-7.13(m,1H),7.48(s,1H),7.69-7.97(m,1H),8.01(d,1H),10.38-10.61(m,1H),12.91-13.34(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值398.2；实测值399.2；Rt＝1.762min。
化合物826：保留时间：21.00min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.95-1.03(m,3H),1.37-1.47(m,1H),1.81-1.97(m,2H),1.98-2.03(m,3H),2.03-2.20(m,2H),2.92-2.97(m,0.4H),3.35-3.41(m,0.6H),3.43-4.08(m,1H),5.44-5.84(m,3H),6.97-7.12(m,1H),7.46-7.52(m,1H),7.67-7.99(m,1H),7.99-8.03(m,1H),10.47-10.55(m,1H),12.91-13.32(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值398.2；实测值399.2；Rt＝1.752min。
实施例381.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(1H-噻吩并[3,2-c]吡唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物955和化合物967)的合成
步骤1：(3-乙基-5-(2-(5-甲基-2-(1H-噻吩并[3,2-c]吡唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
在轻微加热下，将2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-乙基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(349.40mg，1.13mmol)、5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1H-噻吩并[3,2-c]吡唑(0.25,1.13mmol)和DIPEA(437.96mg，3.39mmol，590.24μL)溶解于DMSO(6mL)中。在剧烈搅拌和偶尔加热下，小批量添加HATU(515.40mg，1.36mmol)。反应完成之后，通过HPLC(60％0.5-6.5min水-MeOH；流速30ml/min(装载泵4ml/min MeOH)；目标质量512；柱SunFireC18100x19mm 5um(R))纯化混合物，以得到外消旋产物。在手性HPLC(Chiral ART Cellulose-SC(250*20，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，12ml/min)之后，获得N-[3-乙基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1H-噻吩并[3,2-c]吡唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(32mg，62.42μmol，5.53％产率)和N-[3-乙基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-噻吩并[3,2-c]吡唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(34mg，66.33μmol，5.87％产率)。
E1于分析条件下(柱：IB，以己烷-IPA-MeOH，80-10-10，0.6ml/min为流动相)的保留时间为27.65min且E2的保留时间为24.09min。
E1：保留时间：27.65min
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值512.2；实测值513.2；Rt＝3.142min。
E2：保留时间：24.09min
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值512.2；实测值513.2；Rt＝3.202min。
步骤2：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(1H-噻吩并[3,2-c]吡唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物955和化合物967)的合成
将N-[3-乙基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1H-噻吩并[3,2-c]吡唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(32mg，62.42μmol)和N-[3-乙基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-噻吩并[3,2-c]吡唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(32mg，62.42μmol)溶解于二噁烷(2mL)和H2O(0.5mL)中。将所获得的溶液在100℃下搅拌3h；反应完成之后，使混合物经历HPLC(22％0.5-6.5min水-MeCN；流速30ml/min(装载泵4ml/min MeCN)；目标质量412；柱SunFire 100x19 mm 5um(R))，以得到N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1H-噻吩并[3,2-c]吡唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(15mg，36.36μmol，58.25％产率)和N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-噻吩并[3,2-c]吡唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(15mg，36.36μmol，58.25％产率)。
化合物955：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.95-1.02(m,3H),1.04-1.14(m,3H),1.36-1.47(m,1H),1.80-1.97(m,2H),2.01-2.20(m,2H),2.39(q,2H),2.92-3.40(m,1H),3.44-4.08(m,1H),5.43-5.87(m,3H),6.99-7.12(m,1H),7.42-7.53(m,1H),7.59-7.93(m,1H),8.02-8.09(m,1H),10.52(s,1H),13.03(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值412.2；实测值413.2；Rt＝1.018min。
化合物967：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.80-1.01(m,3H),1.06-1.12(m,3H),1.37-1.45(m,1H),1.82-1.97(m,2H),2.02-2.20(m,2H),2.39(q,2H),2.91-3.40(m,1H),3.76(dd,1H),5.46-5.83(m,3H),6.95-7.09(m,1H),7.42-7.53(m,1H),7.59-7.98(m,1H),7.98-8.09(m,1H),10.52(s,1H),12.88-13.41(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值412.2；实测值413.2；Rt＝1.442min。
实施例382.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(1H-噻吩并[2,3-c]吡唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物815、化合物1085和化合物1086)的合成
步骤1：外消旋-(3-甲基-5-(2-((2R,5S)-5-甲基-2-(1H-噻吩并[2,3-c]吡唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
在轻微加热下，将2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(401.32mg，1.36mmol)、5-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]-2H-噻吩并[2,3-c]吡唑(300.79mg，1.36mmol)和DIPEA(526.94mg，4.08mmol，710.16μL)溶解于DMSO(6mL)中。在剧烈搅拌和偶尔加热下，小批量添加HATU(620.11mg，1.63mmol)。反应完成之后，通过HPLC(40-90％0.5-6.5min水-MeOH；流速30ml/min；(装载泵4ml/min MeOH)；目标质量498；柱SunFireC18 100x19mm 5um(L))纯化混合物，以得到N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1H-噻吩并[2,3-c]吡唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(80mg，160.45μmol，11.81％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值498.2；实测值499.2；Rt＝2.857min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(1H-噻吩并[2,3-c]吡唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物815)的合成
将N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1H-噻吩并[2,3-c]吡唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(80mg，160.45μmol)溶解于二噁烷(2mL)和水(0.5mL)中。将所获得的溶液在100℃下搅拌2h；反应完成之后，使混合物经历HPLC(18％0.5-6.5min水-MeCN；流速30ml/min(装载泵4ml/min MeCN)；目标质量398；柱SunFireC18 100x19 mm 5um(R))，以得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1H-噻吩并[2,3-c]吡唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(40mg，100.38μmol，62.56％产率)。
化合物815：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98(d,3H),1.37-1.48(m,1H),1.83-1.96(m,2H),1.98-2.02(m,3H),2.02-2.17(m,2H),2.91-2.96(m,0.4H),3.34-3.39(m,0.6H),3.44-4.08(m,1H),5.40-5.81(m,3H),6.88-6.98(m,1H),7.46-7.51(m,1H),7.87-8.00(m,1H),8.01(s,1H),10.42-10.64(m,1H),13.29(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值398.2；实测值399.2；Rt＝1.722min。
步骤3：手性分离(化合物1085和化合物1086)
通过手性HPLC(Chiralpak IA(250*20，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，12ml/min)纯化外消旋物，得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-噻吩并[2,3-c]吡唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(8mg，20.08μmol，25.02％产率)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1H-噻吩并[2,3-c]吡唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(8mg，20.08μmol，25.02％产率)。
化合物1085于分析条件下(柱：IA，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min为流动相)的保留时间为65.80min且化合物1086的保留时间为43.62min。
化合物1085：保留时间：65.80min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.96-1.03(m,3H),1.39-1.44(m,1H),1.86-1.96(m,2H),1.99-2.03(m,3H),2.04-2.19(m,2H),2.90-3.40(m,1H),3.45-4.09(m,1H),5.39-5.81(m,3H),6.89-7.00(m,1H),7.49(s,1H),7.95(s,1H),7.99-8.05(m,1H),10.43-10.53(m,1H),13.29(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值398.2；实测值399.2；Rt＝0.803min。
化合物1086：保留时间：43.62min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.97-1.03(m,3H),1.38-1.45(m,1H),1.84-1.97(m,2H),1.99-2.18(m,5H),2.91-3.40(m,1H),3.44-4.07(m,1H),5.41-5.60(m,1H),5.61-5.79(m,2H),6.87-6.97(m,1H),7.45-7.52(m,1H),7.89-7.97(m,1H),8.02(d,1H),10.43-10.52(m,1H),13.29(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值398.2；实测值399.2；Rt＝0.803min。
实施例383.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(1H-噻吩并[2,3-c]吡唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1055和化合物1075)的合成
步骤1：外消旋-(3-乙基-5-(2-((2R,5S)-5-甲基-2-(1H-噻吩并[2,3-c]吡唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
在轻微加热下，将2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-乙基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(419.28mg，1.36mmol)、5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1H-噻吩并[3,2-c]吡唑(0.3g，1.36mmol)和HATU(566.94mg，1.49mmol)溶解于DMSO(10mL)中。在剧烈搅拌和偶尔加热下，小批量添加DIPEA(613.14mg，4.74mmol，826.34μL)。反应完成之后，通过HPLC(37-39-56-70％0.5-4.5-4.6-8min水-MeCN；流速30ml/min(装载泵4ml/min MeCN)；目标质量512；柱SunFireC18 100x19 mm 5um(R))纯化混合物，以得到N-[3-乙基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-噻吩并[2,3-c]吡唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(33mg，64.37μmol，4.75％产率)和N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(2-叔丁基噻吩并[2,3-c]吡唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-乙基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(190mg，334.08μmol，24.65％产率)。通过2D-NMR光谱法证明第二产物的结构。N-[3-乙基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-噻吩并[2,3-c]吡唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(33mg，64.37μmol，4.75％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值512.2；实测值513.2；Rt＝3.221min。
步骤2：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(1H-噻吩并[2,3-c]吡唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1055和化合物1075)的合成
将N-[3-乙基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-噻吩并[2,3-c]吡唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(41.13mg，80.23μmol)溶解于二噁烷(3mL)/水(0.5mL)混合物中且在回流下搅拌过夜。等分试样显示起始材料完全消耗；在减压下溶剂的蒸发和以手性HPLC(Chiralpak IA(250*20，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，14ml/min)的纯化得到N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-噻吩并[2,3-c]吡唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(9mg，21.82μmol，27.20％产率)和N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1H-噻吩并[2,3-c]吡唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(7mg，16.97μmol，21.15％产率)。
化合物1055于分析条件下(柱：IA，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min为流动相)的保留时间为33.52min且化合物1075的保留时间为50.94min。
化合物1055：保留时间：33.52min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.00(d,3H),1.07-1.13(m,3H),1.38-1.48(m,1H),1.88-1.99(m,2H),2.02-2.06(m,1H),2.06-2.19(m,1H),2.38-2.43(m,2H),2.93-2.98(m,0.3H),3.35-3.39(m,0.7H),3.44-4.10(m,1H),5.43-5.63(m,1H),5.63-5.79(m,2H),6.91-6.96(m,1H),7.47-7.53(m,1H),7.91-7.98(m,1H),8.05(s,1H),10.47-10.54(m,1H),13.29(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值412.2；实测值413.2；Rt＝0.838min。
化合物1075：保留时间：50.94min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.96-1.02(m,3H),1.08-1.15(m,3H),1.39-1.46(m,1H),1.85-1.97(m,2H),2.02-2.17(m,2H),2.37-2.43(m,2H),2.93-2.98(m,0.3H),3.36-3.39(m,0.7H),3.48-4.11(m,1H),5.41-5.63(m,1H),5.63-5.81(m,2H),6.90-7.00(m,1H),7.46-7.58(m,1H),7.88-8.13(m,2H),10.44-10.57(m,1H),13.30(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值412.2；实测值413.2；Rt＝0.837min。
实施例384.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(1H-吡唑-3-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1071和化合物1050)的合成
步骤1：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(1H-吡唑-3-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺的合成
在25℃下，在0.5h时段内，将HATU(1.10g，2.89mmol)小批量添加到(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-吡唑-3-基)哌啶(530mg，2.63mmol，HCl)、2-[(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(589.79mg，3.02mmol)和TEA(1.60g，15.77mmol，2.20mL)于DMF(5mL)中的搅拌混合物中。将所得混合物在25℃下搅拌18h，然后提交至反相HPLC(柱：YMC Triart C18100x20 mm，5um；流动相：35-50％0-5min H2O/MeOH/0.1％ NH4OH，流速：30ml/min(装载泵4ml/min MeOH)，以得到430mg粗产物，其通过反相HPLC(柱：YMC Triart C18 100x20mm，5um；流动相：35-40％0-5min H2O/MeOH/0.1％ NH4OH，流速：30ml/min(装载泵4ml/minMeOH)进行纯化，以得到呈淡黄色胶状物的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-吡唑-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(200mg，584.12μmol，22.23％产率)，将其直接提交至制备型手性HPLC。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值342.2；实测值343.2；Rt＝1.020min。
步骤2：手性分离(化合物1071和化合物1050)
将外消旋N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-吡唑-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(200mg，584.12μmol)提交至制备型手性HPLC(柱：ChiralpakIC-II(250*20，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH；流速：70-15-15，12ml/min；柱温：24℃；波长：205nm、215nm、254nm)，以得到化合物1050N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1H-吡唑-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(38mg，110.98μmol，19.00％产率)(RT＝37.07min)；和化合物1071N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-吡唑-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(13.8mg，40.30μmol，6.90％产率)(RT＝48.1min)。
化合物1071于分析条件下(柱：IC，以己烷-IPA-MeOH，70-15-15，0.6ml/min为流动相)的保留时间为46.80min且化合物1050的保留时间为37.45min。
化合物1071：保留时间：46.80min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.75-1.02(m,3H),1.25-1.40(m,1H),1.51-1.68(m,1H),1.78-1.87(m,1H),1.88-1.97(m,1H),1.99-2.04(m,3H),2.11-2.32(m,1H),2.69-3.22(m,1H),3.42-4.21(m,1H),5.14-5.66(m,3H),6.10-6.25(m,1H),7.21-7.49(m,1H),7.68(s,1H),7.96-8.03(m,1H),10.36-10.49(m,1H),12.60-12.72(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值342.2；实测值343.2；Rt＝1.854min。
化合物1050：保留时间：37.45min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.72-0.96(m,3H),1.33(d,1H),1.52-1.62(m,1H),1.67-1.94(m,2H),1.99-2.04(m,3H),2.07-2.27(m,1H),2.73-3.20(m,1H),3.42-4.20(m,1H),5.14-5.64(m,3H),6.10-6.23(m,1H),7.46-7.51(m,1H),7.68(br s,1H),7.97-8.03(m,1H),10.36-10.46(m,1H),12.66(br s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值342.2；实测值343.2；Rt＝1.859min。
实施例385.2-(2-(1'H-[1,3'-联吡唑]-3-基)-5-甲基哌啶-1-基)-N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺(化合物715、化合物789和化合物782)的合成
步骤1：2-(2-(1'H-[1,3'-联吡唑]-3-基)-5-甲基哌啶-1-基)-N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺(化合物715)的合成
在25℃下，在0.5h时段内，将HATU(718.21mg，1.89mmol)小批量添加到(2R,5S)-5-甲基-2-[1-(1H-吡唑-3-基)吡唑-3-基]哌啶(900mg，1.72mmol，3HCl)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(507.06mg，1.72mmol)和TEA(1.74g，17.17mmol，2.39mL)于DMF(10mL)中的搅拌混合物中。将所得混合物在25℃下搅拌18h，然后在真空中浓缩。将残余物溶解于DCM(10mL)中且一次性添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(15.75g，60.04mmol，15mL，13.9％纯度)。将所得混合物在25℃下搅拌3h，然后在真空中浓缩。通过反相HPLC((柱：YMC Triart C18 100x20 mm，5um)，流动相：30-30-80％0-1-6minH2O/MeOH/0.1％ NH3，流速：30ml/min(装载泵4ml/min MeOH)用于第1次HPLC，和30-30-60％0-1-6min H2O/MeOH/0.1％ NH3，流速：30ml/min(装载泵4ml/min MeOH)用于第2次HPLC)纯化残余物两次，以得到呈白色固体的化合物715N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[1-(1H-吡唑-3-基)吡唑-3-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(112mg，274.20μmol，15.97％产率)。
化合物715：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.00(d,3H),1.37(m,1H),1.85(m,1H),1.93(m,1H),2.00(m,4H),2.16(m,1H),2.87(m,1H),3.74(m,1H),5.61(m,3H),6.38(m,2H),7.48(s,1H),7.78(m,1H),8.00(m,1H),8.16(d,1H),10.43(s,1H),12.77(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值408.2；实测值409.2；Rt＝1.753min。
步骤2：手性分离(化合物789和化合物782)
使用(Сhiralcel OJ-H(250*20，5mkm)柱，己烷-IPA-MeOH，60-20-20为流动相；流速：12ml/min；24℃，波长：205nm，210nm)对N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[1-(1H-吡唑-5-基)吡唑-3-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(89.8mg，219.85μmol)进行手性分离，得到呈黄色胶状物的化合物782N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[1-(1H-吡唑-5-基)吡唑-3-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(26.64mg，65.22μmol，29.67％产率)(RT＝14.5min)和呈米色固体的化合物789N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[1-(1H-吡唑-5-基)吡唑-3-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(RT＝22.2min)。
化合物789于分析条件下(柱：OJ-H，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.6ml/min为流动相)的保留时间为28.28min且化合物782的保留时间为16.98min。
化合物789：保留时间：28.28min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99-1.01(m,3H),1.34-1.42(m,1H),1.81-1.87(m,1H),1.90-1.95(m,1H),1.96-2.10(m,4H),2.13-2.19(m,1H),2.85-2.89(m,0.4H),3.33-3.38(m,0.6H),3.43-4.06(m,1H),5.21-5.24(m,0.4H),5.57-5.62(m,2H),5.64-5.68(m,0.6H),6.33-6.45(m,2H),7.47-7.49(m,1H),7.76-7.81(m,1H),7.99-8.02(m,1H),8.14-8.20(m,1H),10.44(s,1H),12.77(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值408.2；实测值409.2；Rt＝1.722min。
化合物782：保留时间：16.98min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98-1.01(m,3H),1.34-1.41(m,1H),1.80-1.87(m,1H),1.87-1.95(m,1H),1.95-2.10(m,4H),2.14-2.19(m,1H),2.85-2.89(m,0.4H),3.33-3.38(m,0.6H),3.42-4.05(m,1H),5.57-5.62(m,2H),5.63-5.67(m,1H),6.33-6.44(m,2H),7.48(d,1H),7.78(d,1H),7.96-8.02(m,1H),8.14-8.19(m,1H),10.44(s,1H),12.77(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值408.2；实测值409.2；Rt＝1.723min。
实施例386.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,4S)-4-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物640)的合成
步骤1：N-[3-甲基-5-[[2-(4-甲基-2-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
向2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(0.4g，1.35mmol)和4-甲基-2-苯基哌啶(237.42mg，1.35mmol)于DMF(10mL)中的搅拌溶液中添加DIPEA(525.22mg，4.06mmol，707.84μL)。将所得混合物在20℃下搅拌5分钟。5分钟之后，添加HATU(566.56mg，1.49mmol)。在20℃下搅拌所得反应混合物。完成之后，在减压下浓缩反应混合物且通过HPLC纯化粗产物，以获得呈黄色固体的N-[3-甲基-5-[[2-(4-甲基-2-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(80.5mg，177.88μmol，13.13％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值452.3；实测值453.4；Rt＝3.209min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,4S)-4-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物640)的合成
将N-[3-甲基-5-[[2-(4-甲基-2-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(38.9mg，85.96μmol)溶解于二噁烷(2mL)和水(5mL)中。然后将反应混合物在100℃下搅拌17小时。完成之后，在减压下浓缩所得悬浮液。使所获得的固体残余物经历HPLC纯化(洗脱液：60-85％ H2O-CH3CN；柱：SunfireC18 20x 100mm，5um)，以得到呈淡黄色固体的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,4S)-4-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物640，13.7mg，38.87μmol，45.22％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)0.84(m,3H),1.22(m,1H),1.78(m,2H),2.04(m,5H),3.40(m,1H),3.76(m,1H),5.15(m,1H),5.60(m,2H),7.33(m,6H),8.02(m,1H),10.43(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值352.2；实测值353.4；Rt＝2.251min。
实施例387.外消旋-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(7-氧代-6,8-二氢-5H-1,8-萘啶-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物923)的合成
步骤1：外消旋-N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(7-氧代-6,8-二氢-5H-1,8-萘啶-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将外消旋-6-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]-3,4-二氢-1H-1,8-萘啶-2-酮(300mg，1.22mmol)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(361.11mg，1.22mmol)、三乙胺(618.72mg，6.11mmol，852.24μL)混合于DMF(5mL)中，然后添加HATU(697.47mg，1.83mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌12h。蒸发溶剂且通过HPLC(2-10min20-45％ MeCN/H2O 30mL/min(装载泵4mL MeCN)，柱：SunFire 100*19mm，5微米)纯化粗品沉淀，以获得N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(7-氧代-6,8-二氢-5H-1,8-萘啶-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(80.8mg，154.61μmol，12.64％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值522.2；实测值523.2；Rt＝1.178min。
步骤2：外消旋-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(7-氧代-6,8-二氢-5H-1,8-萘啶-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物923)的合成
将外消旋-N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(7-氧代-6,8-二氢-5H-1,8-萘啶-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(80.8mg，154.61μmol)于二噁烷(2mL)和水(2mL)中的溶液在100℃下加热11h。蒸发溶剂且通过HPLC(35-55％MeCN/H20-2-10min流速：30mL/min；装载泵4mL/min MeCN)纯化所得沉淀，以获得外消旋-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(7-氧代-6,8-二氢-5H-1,8-萘啶-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(44.1mg，104.38μmol，67.51％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)0.99(m,3H),1.33(m,1H),1.68(m,1H),1.87(m,1H),2.00(m,4H),2.18(m,1H),2.41(m,2H),3.04(m,3H),3.70(dd,1H),5.57(m,3H),7.48(m,2H),8.00(m,2H),10.47(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值422.2；实测值423.2；Rt＝0.870min。
实施例388.外消旋-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(7-氧代-6,8-二氢-5H-1,8-萘啶-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物916)的合成
步骤1：外消旋-N-[3-乙基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(7-氧代-6,8-二氢-5H-1,8-萘啶-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将外消旋-6-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]-3,4-二氢-1H-1,8-萘啶-2-酮(300mg，1.22mmol)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-乙基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(378.26mg，1.22mmol)、三乙胺(618.72mg，6.11mmol，852.24μL)混合于DMF(5mL)中，然后添加HATU(697.47mg，1.83mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌12h。蒸发溶剂且通过HPLC(40-100％2-10min；水-乙腈30mL/min；装载泵乙腈4mL/min，目标质量536，柱SunFire 19*100mm 5um)纯化粗品沉淀，以获得外消旋-N-[3-乙基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(7-氧代-6,8-二氢-5H-1,8-萘啶-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(62.9mg，117.21μmol，9.59％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值536.2；实测值537.2；Rt＝0.993min。
步骤2：外消旋-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(7-氧代-6,8-二氢-5H-1,8-萘啶-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物916)的合成
将N-[3-乙基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(7-氧代-6,8-二氢-5H-1,8-萘啶-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(62.9mg，117.21μmol)于二噁烷(2mL)和水(2mL)中的溶液在100℃下加热12h。蒸发溶剂且通过HPLC(35-55％ MeCN-水2-10min流速：30mL/min；装载泵4mL/min MeCN)纯化所得沉淀，以获得N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(7-氧代-6,8-二氢-5H-1,8-萘啶-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(24mg，54.98μmol，46.91％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.05(m,6H),1.33(m,1H),1.69(m,1H),1.87(m,1H),2.00(m,1H),2.16(m,1H),2.38(m,3H),3.01(m,4H),3.70(m,1H),5.59(m,3H),7.49(m,2H),8.01(m,2H),10.48(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值436.2；实测值437.2；Rt＝0.908min。
实施例389.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(2-(2-氨基苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物997和化合物981)的合成
步骤1：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(2-(2-氨基苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺的合成
在25℃下，在0.5h时段内，将HATU(253.63mg，667.05μmol)小批量添加到到5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-2-胺(150mg，606.41μmol)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(205.93mg，697.37μmol)和TEA(245.45mg，2.43mmol，338.08μL)于DMF(5mL)中的搅拌混合物中。将所得混合物在25℃下搅拌18h，然后在真空中浓缩。将残余物溶解于DCM(10mL)中且一次性添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(10.50g，40.03mmol，10.00mL，13.9％纯度)。将所得混合物在25℃下搅拌12h，然后在真空中浓缩。通过反相HPLC(柱：YMC Triart C18 100x20 mm，5um；流动相：40-70％0-5min H2O/MeOH/0.1％ NH4OH，流速：30ml/min(装载泵4ml/min MeOH)纯化残余物，以得到呈淡黄色胶状物的2-[(2R,5S)-2-(2-氨基-1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(131mg，308.59μmol，50.89％产率)，将其直接提交至制备型手性HPLC。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值424.2；实测值425.2；Rt＝1.719min。
步骤2：手性分离(化合物997和化合物981)
将外消旋2-[(2R,5S)-2-(2-氨基-1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(131mg，308.59μmol)提交至制备型手性HPLC(柱：Chiralpak IA-II(250*20，5mkm)；流动相：IPA-MeOH，50-50；流速：9ml/min；柱温：24℃；波长：205nm，215nm，254nm)，以得到化合物981 2-[(2S,5R)-2-(2-氨基-1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(57mg，134.27μmol，43.51％产率)(RT＝22.601min)和粗品第2级分(RT＝35.267min)，通过制备型手性HPLC(柱：Chiralpak IC-II(250*20，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH，60-20-20；流速：12ml/min；柱温：24℃；波长：205nm，215nm)再纯化粗品第2级分，以得到化合物997 2-[(2R,5S)-2-(2-氨基-1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(51mg，120.14μmol，38.93％产率)(RT＝45.230min)。
化合物997于分析条件下(柱：IA，IPA-MeOH，50-50，0.6ml/min为流动相)的保留时间为30.40min且化合物981的保留时间为18.36min。
化合物997：保留时间：30.40min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99-1.02(m,3H),1.27-1.38(m,1H),1.65-1.73(m,1H),1.80-1.91(m,1H),1.95-2.02(m,3H),2.02-2.16(m,1H),2.17-2.27(m,1H),2.74-3.24(m,1H),3.41-4.03(m,1H),5.13-5.58(m,1H),5.58-5.64(m,2H),6.91-7.01(m,1H),7.22-7.30(m,1H),7.39-7.50(m,3H),7.58-7.64(m,1H),7.93-8.03(m,1H),10.39-10.56(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值424.2；实测值425.2；Rt＝1.550min。
化合物981：保留时间：18.36min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99-1.03(m,3H),1.27-1.37(m,1H),1.66-1.75(m,1H),1.80-1.91(m,1H),1.96-2.02(m,3H),2.03-2.17(m,1H),2.18-2.28(m,1H),2.73-3.23(m,1H),3.43-4.03(m,1H),5.13-5.57(m,1H),5.58-5.65(m,2H),6.88-7.01(m,1H),7.21-7.31(m,1H),7.40-7.50(m,3H),7.58-7.64(m,1H),7.94-8.03(m,1H),10.39-10.68(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值424.2；实测值425.2；Rt＝1.552min。
实施例390.rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(1-羟基-6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物953)和rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(1-羟基-6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物961)的合成
步骤1：N-[5-[[2-[2-(1-羟基-6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将DIPEA(133.34mg，1.03mmol，179.71μL)添加到相应2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(121.86mg，412.69μmol)和6-(5-甲基-2-哌啶基)异喹啉-1-酮(0.1g，412.69μmol)于DMF(5mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU(172.61mg，453.95μmol)。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC(WatersSunfire C18 20*100 5mkm柱且以MeCN为洗脱液混合物)，以得到N-[5-[[2-[2-(1-羟基-6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(83.7mg，161.09μmol，39.03％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值519.2；实测值520.4；Rt＝1.062min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-(1-羟基-6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
将N-[5-[[2-[2-(1-羟基-6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(83.7mg，161.09μmol)溶解于二噁烷(2mL)和水(5mL)的混合物中。然后，将反应混合物在100℃下搅拌16h。在反应完成(通过LCMS监测)之后，在减压下浓缩所得悬浮液。使所获得的固体经历HPLC(Waters Sunfire C1820*1005mkm柱且以MeOH为洗脱液混合物)，以得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-(1-羟基-6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(60.8mg，144.94μmol，89.98％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值419.2；实测值420.2；Rt＝0.747min。
步骤3：rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(1-羟基-6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物953)和rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(1-羟基-6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物961)的合成
使用(Chiralсel OD-H 250*20mm柱，以己烷-IPA-MeOH，50-25-25为流动相，流速30mL/min(Rt1＝99,95min且Rt2＝104,3min))对N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-(1-羟基-6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(60.8mg，144.94μmol)进行手性分离，得到化合物953rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(1-羟基-6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(10.55mg，17.35％产率)和化合物961rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(1-羟基-6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(18.02mg，29.64％产率)。
化合物953：RT(OD-H，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝18.325min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.98-1.03(m,3H),1.29-1.39(m,1H),1.61-1.70(m,1H),1.80-1.91(m,1H),1.95-2.03(m,3H),2.06-2.19(m,1H),2.23-2.32(m,1H),2.74-3.14(m,1H),3.47-4.07(m,1H),5.23-5.61(m,1H),5.61-5.69(m,2H),6.49-6.57(m,1H),7.08-7.20(m,1H),7.37-7.50(m,2H),7.52-7.61(m,1H),7.90-8.05(m,1H),8.11-8.18(m,1H),10.47-10.55(m,1H),11.15-11.24(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值419.2；实测值420.2；Rt＝0.729min。
化合物961：RT(OD-H，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝22.983min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.98-1.04(m,3H),1.29-1.41(m,1H),1.61-1.70(m,1H),1.82-1.92(m,1H),1.95-2.04(m,3H),2.07-2.21(m,1H),2.23-2.34(m,1H),2.76-3.25(m,1H),3.47-4.07(m,1H),5.19-5.62(m,1H),5.65(s,2H),6.50-6.55(m,1H),7.10-7.18(m,1H),7.36-7.52(m,2H),7.52-7.63(m,1H),7.91-8.07(m,1H),8.10-8.18(m,1H),10.46-10.57(m,1H),11.15-11.22(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值419.2；实测值420.2；Rt＝0.730min
实施例391.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶-1-基-2-d)-2-氧代乙酰胺盐酸盐(化合物1009)的合成
步骤1：(5-(2-(2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶-1-基-2-d)-2-氧代乙酰胺基)-3-甲基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
在0℃下，向2-((6-((叔丁氧基羰基)氨基)-5-甲基吡啶-3-基)氨基)-2-氧代乙酸(167mg，0.57mmol)和2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶-2-d(110mg，0.57mmol)于DMF(0.2mL)中的搅拌溶液中添加HATU(215mg，0.57mmol)和三乙胺(237μL，1.70mmol)。将所得反应混合物在环境温度下搅拌18小时。18小时之后，将反应混合物在减压下浓缩且添加水。将水层用EtOAc(2x)萃取。将合并的有机相用水(2x)洗涤，干燥(Na2SO4)且在减压下浓缩，以获得粗产物。通过硅胶柱色谱(己烷/乙酸乙酯10/0至0/10)纯化残余物，得到呈白色固体的(5-(2-(2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶-1-基-2-d)-2-氧代乙酰胺基)-3-甲基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯)(170mg，64％)
1H NMR(DMSO-d6,400MHz)11.05(s,0.6H),10.98(s,0.4H),9.07(s,0.6H),9.03(s,0.4H),8.45(s,0.6H),8.38(s,0.4H),7.93(app d,0.6H),7.89(s,0.4H),7.44-7.32(m,2H),7.28-7.17(m,2H),3.46(d,J＝13.7Hz,0.6H),3.24(dd,J＝3.7,13.8Hz,0.6H),2.76(dd,J＝3.7,13.4Hz,0.4H),2.26-1.99(m,4H),1.96-1.80(m,1H)1.74-1.61(m,1H),1.47-1.41(m,9H),1.07-0.99(m,3H)。
19F NMR(DMSO-d6,376MHz)δ-116.4,-116.5。
LRMS(APCI+)m/z(C25H30DFN4O4H)：理论值472.2，实验值472.5。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶-1-基-2-d)-2-氧代乙酰胺盐酸盐(化合物1009)的合成
向-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶-1-基-2-d)-2-氧代乙酰胺基)-3-甲基吡啶-2-基)氨基甲酸酯(20mg，42μmol)的搅拌溶液中添加于二噁烷中的4M HCl(11mL，4.0mol，0.42mmol)。将所得反应混合物在环境温度下搅拌，直到所有起始材料均消耗(3h)。在真空下浓缩挥发物且在醚中研磨固体残余物。过滤固体且用醚冲洗(将所述操作重复1次)。过滤之后，获得呈白色固体的N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶-1-基-2-d)-2-氧代乙酰胺盐酸盐(化合物1009)(15mg，87％)
1H NMR(CD3OD,400MHz)11.10(s,0.6H),11.04(s,0.4H),8.30(s,0.6H),8.24(s,0.4H),7.84(s,0.6H),7.82(s,0.4H),7.75-7.50(br s,2H),7.42-7.31(m,2H),7.28-7.18(m,2H),4.01(d,J＝13.4Hz,0.4H),3.48(d,J＝12.9Hz,0.6H),3.26-3.20(app d,0.6H),2.780-2.73(app d,0.4H),2.24-2.12(m,4H),2.12-1.82(m,2H)1.74-1.60(m,1H),1.40-1.27(m,1H),1.06-0.98(app t,3H)。
LRMS(APCI+)m/z(C20H22DFN4O2H)：理论值372.2，实验值372.4。
实施例392.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R)-2-[3-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物356)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S)-2-[3-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物357)的合成
步骤1：N-[3-甲基-5-[[2-[2-[3-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将DIPEA(273.55mg，2.12mmol，368.67μL)添加到相应2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(0.25g，846.62μmol)和N-甲基-3-(2-哌啶基)苯胺(161.10mg，846.62μmol)于DMF(10mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU溶液(354.10mg，931.28μmol)。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC(2-10，于85-100％ H2O-MeOH+NH3中；装载泵4.0mL MeOH+NH3)；Triart C18 100*20 5mkm柱)，以得到纯的N-[3-甲基-5-[[2-[2-[3-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.15g，320.82μmol，37.89％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.43(m,11H),1.82(m,1H),2.25(m,4H),2.41(m,1H),2.84(s,3H),3.20(m,1H),3.47(m,1H),4.72(m,1H),6.01(m,1H),6.41(m,2H),6.54(m,2H),7.20(m,1H),8.01(m,1H),8.30(m,1H),9.37(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值467.2；实测值469.2；Rt＝2.998min
步骤2：N-[3-甲基-5-[[2-[2-[3-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的手性分离
使用(IC-II(250*20，5mkm)柱；己烷-MeOH-IPA，50-25-25为流动相；流速12mL/min)进行N-[3-甲基-5-[[2-[2-[3-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的手性分离，得到异构体2N-[3-甲基-5-[[2-[(2R)-2-[3-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(46.5mg；31.0％产率；RT＝)和异构体1N-[3-甲基-5-[[2-[(2S)-2-[3-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(52.0mg，34.67％产率)。
异构体1：
RT(IC，CO2-MeOH，50-50，2.0mL/min)＝7.218min。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值467.2；实测值469.2；Rt＝4.512min。
异构体2：
RT(IC，CO2-MeOH，50-50，2.0mL/min)＝4.665min。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值467.2；实测值468.2；Rt＝4.512min。
步骤3：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R)-2-[3-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物356)的合成
将N-[3-甲基-5-[[2-[(2R)-2-[3-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯异构体2(46.5mg，99.45μmol)溶解于水(5mL)和二噁烷(2mL)中。然后，将反应混合物在100℃下搅拌15h。在反应完成(通过LCMS监测)之后，在减压下浓缩所得悬浮液。使所获得的固体经历HPLC(2-10min 0-70％MeOH-H2O；流速30mL/min；装载泵4mL MeOH；SunFire C18 100*19mm，5mkm柱)，以得到纯的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R)-2-[3-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(14mg，38.10μmol，38.31％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.40-1.52(m,2H),1.54-1.64(m,2H),1.71-1.88(m,1H),1.97-2.03(m,3H),2.32-2.36(m,1H),2.54-2.57(m,0.4H),2.61-2.67(m,3H),2.96-3.04(m,0.6H),3.56-4.33(m,1H),5.03-5.54(m,1H),5.54-5.63(m,3H),6.37-6.42(m,1H),6.43-6.46(m,1H),6.46-6.52(m,1H),7.04-7.11(m,1H),7.40-7.53(m,1H),7.94-8.05(m,1H),10.40-10.53(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值367.2；实测值368.4；Rt＝1.968min。
步骤4：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S)-2-[3-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物357)的合成
将N-[3-甲基-5-[[2-[(2S)-2-[3-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯异构体1(52mg，111.22μmol)溶解于二噁烷(2mL)和水(5mL)中。然后，将反应混合物在100℃下搅拌15h。在反应完成(通过LCMS监测)之后，在减压下浓缩所得悬浮液。使所获得的固体经历HPLC(2-10min 0-70％ MeOH-H2O；流速30mL/min；装载泵4mL MeOH；SunFire C18 100*19mm，5mkm柱)，以得到纯的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S)-2-[3-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(22.2mg，60.42μmol，54.32％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.50(m,4H),1.79(m,1H),2.00(m,3H),2.32(m,1H),2.55(m,1H),2.63(m,3H),3.00(m,0.6H),3.41(m,0.4H),3.93(m,1H),5.37(m,1H),5.59(m,2H),6.39(m,1H),6.44(m,1H),6.48(m,1H),7.07(m,1H),7.47(m,1H),7.99(m,1H),10.46(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值367.2；实测值368.4；Rt＝1.967min。
实施例393.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(2-环戊基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物61、化合物336、化合物340)的合成
步骤1：(5-(2-(2-环戊基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-3-甲基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
将2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(352.94mg，1.02mmol)和2-环戊基哌啶(155.71mg，1.02mmol)混合于DMF(15mL)中。将反应悬浮液冷却至0℃且添加HATU(386.29mg，1.02mmol)，随后添加TEA(308.41mg，3.05mmol，424.81μL)。将澄清溶液在环境温度下搅拌5h，然后在减压下蒸发挥发物，且使残余物(1g)经历RP-HPLC(柱：SunFire C18 100x19 mm，5um；以60-60-90％0-1-5min水-甲醇为流动相)，以得到N-[5-[[2-(2-环戊基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(264mg，613.18μmol，60.36％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.03(m,3H),1.43(s,9H),1.65(m,12H),2.17(s,3H),3.16(m,1H),3.53(m,1H),4.23(m,1H),7.91(m,1H),8.41(m,1H),9.05(m,1H),10.88(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值430.5；实测值431.2；Rt＝3.533min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(2-环戊基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物61)的合成
在室温下将于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(1.51g，5.81mmol，1.44mL，14％纯度)小心添加到N-[5-[[2-(2-环戊基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(250mg，580.67μmol)于DCM(4mL)中的溶液中。然后将反应混合物在室温下搅拌12h且在真空中蒸发溶剂，以得到0.25g粗材料。使其经历RP-HPLC(柱：YMC Triart C18100x20 mm，5um；以50-60％0-5min 0.1％ NH3-甲醇为流动相)，以得到化合物61N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-(2-环戊基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰胺(98mg，296.59μmol，51.08％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.12(m,2H),1.40(m,1H),1.55(m,6H),1.66(m,5H),2.03(s,3H),2.74(m,1H),3.14(m,1H),3.54(m,1H),4.21(m,1H),5.62(m,2H),7.48(m,1H),8.01(m,1H),10.26(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+1]m/z：计算值330.5；实测值331.2；Rt＝2.706min。
步骤3：手性分离
在系统CO2-MeOH，90-10，2mL/min中在手性柱上进行纯化。注入次数：1，注入体积：1mkl。自183.1mg外消旋物获得71.84mg和60mg个别对映异构体。
E1：保留时间：3.58min 1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.23(m,3H),1.47(s,9H),1.61(m,12H),2.14(s,3H),3.02(m,1H),4.43(m,1H),4.78(m,1H),7.08(m,1H),8.08(s,1H),8.46(s,1H),9.51(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+1]m/z：计算值430.2；实测值431.2；Rt＝5.746min。
保留时间：4.22min 1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.21(m,3H),1.48(s,9H),1.62(m,12H),2.14(s,3H),3.03(m,1H),4.42(m,1H),4.82(m,1H),6.98(m,1H),8.08(s,1H),8.42(s,1H),9.41(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+1]m/z：计算值430.2；实测值431.2；Rt＝5.757min。
步骤4：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(2-环戊基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物336、化合物340)的合成
将N-[5-[[2-[(2S)-2-环戊基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.07184g，166.86μmol)和N-[5-[[2-[(2R)-2-环戊基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.06g，139.36μmol)于二噁烷/HCl(5mL)中的溶液在20℃下搅拌12h。使所得混合物经历HPLC(柱SunFire 19*100mm，以水-MeCN+HCl为流动相)，以获得N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S)-2-环戊基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.0329g，89.67μmol，53.74％产率，HCl)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R)-2-环戊基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.0329，89.67μmol，64.35％产率，HCl)。
化合物336：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.08(m,2H),1.37(m,1H),1.56(m,11H),2.16(s,3H),2.42(m,1H),3.05(m,1H),3.53(m,1H),4.19(m,1H),7.72(m,2H),7.82(m,1H),8.26(m,1H),10.93(m,1H),13.49(br s,1H)。LCMS(ESI)：[M+1]m/z：计算值330.2；实测值331.2；Rt＝2.281min。
化合物340：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.11(m,2H),1.36(m,1H),1.55(m,11H),2.16(s,3H),2.43(m,1H),2.94(m,1H),3.53(m,1H),4.19(m,1H),7.69(m,2H),7.81(m,1H),8.26(m,1H),10.92(m,1H),13.44(br s,1H)。LCMS(ESI)：[M+1]m/z：计算值330.2；实测值331.2；Rt＝2.424min。
实施例394.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R)-2-[3-(二甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物390)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S)-2-[3-(二甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物384)的合成
步骤1：N-[5-[[2-[2-[3-(二甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将DIPEA(262.61mg，2.03mmol，353.92μL)添加到相应2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(0.2g，677.30μmol)和N,N-二甲基-3-(2-哌啶基)苯胺(138.38mg，677.30μmol)于DMF(10mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU溶液(283.28mg，745.03μmol)。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC(2-10min35-60％ H2O-MeOH；装载泵4mL MeOH；SunFire C18 100*19mm 5mkm柱)，以得到纯的N-[5-[[2-[2-[3-(二甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.1g，207.65μmol，30.66％产率)
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.42(m,9H),1.63(m,4H),2.18(m,2H),2.36(m,2H),2.93(m,6H),3.22(m,3H),4.01(m,2H),6.64(m,3H),7.20(m,1H),7.94(m,1H),8.43(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值481.2；实测值482.2；Rt＝3.235min。
步骤2：N-[5-[[2-[2-[3-(二甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的手性分离
使用(IC-II(250*20，5mkm)柱；己烷-MeOH-IPA，50-25-25为流动相；流速12mL/min)进行N-[5-[[2-[2-[3-(二甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的手性分离，得到异构体1N-[5-[[2-[(2R)-2-[3-(二甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(29.4mg，29.40％产率；RT＝39.731min)和异构体2N-[5-[[2-[(2S)-2-[3-(二甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(29.5mg，29.50％产率；RT＝30.341min)。
异构体1：RT(IC，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝33.49min。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值481.2；实测值482.2；Rt＝4.733min。
异构体2：RT(IC，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝25.16min。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值481.2；实测值483.2；Rt＝4.742min。
步骤3：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R)-2-[3-(二甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物390)的合成
将N-[5-[[2-[(2R)-2-[3-(二甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯异构体1(29.4mg，61.05μmol)溶解于二噁烷(2mL)和水(5mL)的混合物中。然后，将反应混合物在100℃下搅拌17h。在反应完成(通过LCMS监测)之后，在减压下浓缩所得悬浮液。使所获得的固体经历HPLC(2-10min 0-60％H2O-MeOH+NH3；装载泵4mL MeOH+NH3；Triart 100*20 5mkm柱)，以得到纯的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R)-2-[3-(二甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(16.1mg，42.21μmol，69.13％产率)
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.37-1.53(m,2H),1.53-1.64(m,2H),1.72-1.87(m,1H),1.96-2.04(m,3H),2.39-2.42(m,1H),2.54-2.56(m,0.3H),2.83-2.90(m,6H),2.99-3.06(m,0.7H),3.61-4.32(m,1H),5.03-5.58(m,1H),5.58-5.66(m,2H),6.55-6.63(m,3H),7.13-7.21(m,1H),7.42-7.53(m,1H),7.92-8.04(m,1H),10.45-10.56(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值381.2；实测值382.2；Rt＝1.900min。
步骤4：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S)-2-[3-(二甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物384)的合成
将N-[5-[[2-[(2S)-2-[3-(二甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯异构体2(29.5mg，61.26μmol)溶解于二噁烷(2mL)和水(5mL)的混合物中。然后，将反应混合物在100℃下搅拌17h。在反应完成(通过LCMS监测)之后，在减压下浓缩所得悬浮液。使所获得的固体经历HPLC(2-10min 0-60％H2O-MeOH+NH3；装载泵4mL MeOH+NH3；Triart 100*20 5mkm柱)，以得到纯的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S)-2-[3-(二甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(16.2mg，42.47μmol，69.33％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.35-1.53(m,2H),1.53-1.65(m,2H),1.72-1.90(m,1H),1.96-2.03(m,3H),2.38-2.43(m,1H),2.84-2.88(m,6H),2.98-3.27(m,1H),3.62-4.27(m,1H),5.06-5.64(m,3H),6.55-6.65(m,3H),7.13-7.22(m,1H),7.40-7.55(m,1H),7.90-8.08(m,1H),10.47-10.55(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值381.2；实测值382.2；Rt＝2.225min。
实施例395.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物449)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[3-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物450)的合成
步骤1：N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将DIPEA(765.94mg，5.93mmol，1.03mL)添加到相应2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(0.5g，1.69mmol)和N-甲基-3-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]苯胺(345.95mg，1.69mmol)于DMF(15mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU溶液(708.20mg，1.86mmol)。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC(2-10min以35-100％MeCN-H2O为流动相；流速30mL/min；装载泵4mL MeCN；Sunfire C18 19*100mm5mkm柱)，以得到纯的N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.29g，602.18μmol，35.56％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.04(m,3H),1.32(m,2H),1.47(s,9H),2.12(m,6H),2.91(m,3H),3.41(m,3H),4.61(m,1H),6.67(m,3H),7.21(m,1H),8.05(m,1H),8.38(m,1H),9.41(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值481.2；实测值482.2；Rt＝1.297min。
步骤2：N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的手性分离
使用(IB(250*20，5mkm)柱，己烷-MeOH-IPA，50-25-25为流动相；流速12mL/min)进行N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的手性分离，得到异构体1N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(101.59mg，35.03％产率；RT＝15.696min)和异构体2N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[3-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(111.87mg，38.58％产率；RT＝33.861min)。
异构体1：RT(IC，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝17.22min。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值481.2；实测值482.2；Rt＝2.964min。
异构体2：RT(IC，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝42.79min。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值481.2；实测值483.2；Rt＝2.961min。
步骤3：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[3-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物450)的合成
将N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[3-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯异构体2(111.87mg，232.30μmol)溶解于水(5mL)和二噁烷(2mL)的混合物中。然后，将反应混合物在100℃下搅拌15h。在反应完成(通过LCMS监测)之后，在减压下浓缩所得悬浮液。使所获得的固体经历HPLC(2-10min35-100％MeCN-H2O；流速30mL/min；装载泵4mL MeCN；Sunfire C18 19*100mm 5mkm柱)，以得到纯的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[3-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(61.6mg，161.48μmol，69.52％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)1.02(m,3H),1.33(m,1H),1.68(m,1H),1.86(m,1H),2.03(m,3H),2.14(m,1H),2.66(m,3H),2.95(m,1H),3.65(m,1H),5.30(m,1H),5.61(m,3H),6.46(m,3H),6.52(d,1H),7.09(m,1H),7.48(m,1H),8.01(m,1H),10.45(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值381.2；实测值382.2；Rt＝1.866min
步骤4：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物449)的合成
将N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯异构体1(101.59mg，210.95μmol)溶解于水(5mL)和二噁烷(2mL)的混合物中。然后，将反应混合物在100℃下搅拌15h。在反应完成(通过LCMS监测)之后，在减压下浓缩所得悬浮液。使所获得的固体经历HPLC(2-10min35-100％MeCN-H2O；流速30mL/min；装载泵4mL MeCN；Sunfire C18 19*100mm 5mkm柱)，以得到纯的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-(甲基氨基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(55.3mg，144.97μmol，68.72％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)1.02(m,3H),1.34(m,1H),1.76(m,1H),2.03(m,3H),2.13(m,1H),2.66(m,5H),3.03(m,1H),3.74(m,1H),5.30(m,1H),5.61(m,3H),6.43(d,1H),6.50(m,2H),7.09(t,1H),7.49(m,1H),8.02(m,1H),10.45(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值381.2；实测值382.2；Rt＝1.831min。
实施例396.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[3-(二甲基氨基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物387)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[3-(二甲基氨基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物386)的合成
步骤1：N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-[3-(二甲基氨基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将DIPEA(207.90mg，1.61mmol，280.19μL)添加到相应2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(0.19g，643.43μmol)和N,N-二甲基-3-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]苯胺(140.49mg，643.43μmol)于DMF(10mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU溶液(269.12mg，707.78μmol)。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC(2-10min以35-60％ H2O-MeCN为流动相；装载泵4mL MeCN；Triart C18 100*20mm5mkm柱)，以得到纯的N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-[3-(二甲基氨基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(67mg，135.19μmol，21.01％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.05(m,3H),1.37(m,2H),1.51(s,9H),2.12(m,6H),2.91(m,6H),3.48(s,3H),4.22(m,1H),5.78(m,1H),6.51(m,2H),7.20(m,1H),7.94(m,1H),8.31(m,1H),9.43(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值495.2；实测值496.2；Rt＝1.398min。
步骤2：N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-[3-(二甲基氨基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的手性分离
使用(YMC(250*20，5mkm)柱，以己烷-MeOH-IPA，50-25-25为流动相；流速12mL/min)进行N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-[3-(二甲基氨基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的手性分离，得到异构体1N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-[3-(二甲基氨基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(67.0g，29.55％；RT＝14.517min)和异构体2N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-[3-(二甲基氨基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(20.1mg，30.0％产率；RT＝19.991min)。
异构体1：RT(IC，己烷-IPA-MeOH，40-30-30，0.6mL/min)＝15.76min。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值495.2；实测值496.4；Rt＝1.315min。
异构体2：RT(IC，己烷-IPA-MeOH，40-30-30，0.6mL/min)＝25.50min。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值495.2；实测值496.4；Rt＝1.316min。
步骤3：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[3-(二甲基氨基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物386)的合成
将N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-[3-(二甲基氨基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯异构体1(19.8mg，39.95μmol)溶解于二噁烷(2mL)和水(5mL)的混合物中。然后，将反应混合物在100℃下搅拌15h。在反应完成(通过LCMS监测)之后，在减压下浓缩所得悬浮液。使所获得的固体经历HPLC(2-10min以45-60％H2O-MeCN-NH3为流动相；装载泵4mL MeCN；Triart100*20mm 5mkm柱)，以得到纯的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[3-(二甲基氨基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(7.5mg，18.96μmol，47.47％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.96-1.02(m,3H),1.24-1.37(m,1H),1.59-1.75(m,1H),1.80-1.91(m,1H),1.95-2.02(m,3H),2.02-2.23(m,2H),2.75-2.79(m,0.4H),2.83-2.88(m,6H),3.24-3.27(m,0.6H),3.40-4.03(m,1H),5.03-5.53(m,1H),5.53-5.67(m,2H),6.55-6.67(m,3H),7.10-7.21(m,1H),7.41-7.55(m,1H),7.90-8.05(m,1H),10.43-10.60(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值395.2；实测值396.2；Rt＝1.838min。
步骤4：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[3-(二甲基氨基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物387)的合成
将N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-[3-(二甲基氨基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯异构体2(20.1mg，40.56μmol)溶解于二噁烷(2mL)和水(5mL)的混合物中。然后，将反应混合物在100℃下搅拌15h。在反应完成(通过LCMS监测)之后，在减压下浓缩所得悬浮液。使所获得的固体经历HPLC(2-10min以45-60％H2O-MeCN-NH3为流动相；装载泵4mL MeCN；Triart100*20mm 5mkm柱)，以得到纯的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[3-(二甲基氨基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(7mg，17.70μmol，43.64％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.96-1.02(m,3H),1.25-1.38(m,1H),1.63-1.75(m,1H),1.80-1.91(m,1H),1.97-2.02(m,3H),2.02-2.23(m,2H),2.75-2.79(m,0.4H),2.83-2.90(m,6H),3.24-3.27(m,0.6H),3.40-4.03(m,1H),5.04-5.54(m,1H),5.56-5.66(m,2H),6.55-6.64(m,3H),7.09-7.20(m,1H),7.41-7.52(m,1H),7.92-8.03(m,1H),10.40-10.55(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值395.2；实测值396.2；Rt＝1.837min。
实施例397.化合物148、化合物152、化合物175的合成
步骤1：N-[5-[[2-(2-环己基-5-甲基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(200mg，609.57μmol)和2-环己基-5-甲基哌啶(165.94mg，609.57μmol，HCl)混合于DMF(10mL)中。将反应悬浮液冷却至0℃且添加HATU(231.78mg，609.57μmol)，随后添加TEA(370.09mg，3.66mmol，509.77μL)。将澄清溶液在环境温度下搅拌12h。然后在减压下蒸发挥发物且使残余物(1g)经历RP-HPLC(柱：SunFire C18 100*19mm，5um；以60-60-100％0-1-6min水-甲醇为流动相)，以得到N-[5-[[2-(2-环己基-5-甲基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(88mg，191.89μmol，31.48％产率)和30mg经Boc脱保护的产物(呈非对映异构体混合物)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.93(m,6H),1.15(m,6H),1.56(m,16H),1.91(m,2H),2.28(s,3H),3.47(m,1H),6.60(s,1H),8.03(m,1H),8.32(s,1H),9.17(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值458.2；实测值459.4；Rt＝4.306min。
步骤2：N-[5-[[2-[(2R,5R)-2-环己基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯、N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-环己基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯和N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-环己基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
通过手性HPLC(柱：AD-H(I，250*20，5mkm)，以CO2-MeOH，80-20，50mL/min为流动相)分离非对映异构体，以得到顺式对映异构体的混合物N-[5-[[2-[(2R,5R)-2-环己基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(异构体3)(13.3mg，29.00μmol，30.23％产率)，和两种单独的反式对映异构体N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-环己基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(异构体2)(15.1mg，32.93μmol，68.64％产率)和N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-环己基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(异构体1)(19.4mg，42.30μmol，88.18％产率)。
化合物1：
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ0.92(m,3H),1.17(m,4H),1.62(m,22H),2.28(s,3H),4.30(m,1H),4.81(m,1H),6.63(s,1H),8.02(m,1H),8.33(s,1H),9.22(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值458.2；实测值460.2；Rt＝6.157min。
RT(AD-H，CO2-MeOH，70-30，3.0mL/min)＝7.018min。
化合物2：
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.92(m,3H),1.17(m,4H),1.62(m,22H),2.28(s,3H),4.29(m,1H),4.76(m,1H),6.69(s,1H),8.02(m,1H),8.33(s,1H),9.28(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值458.2；实测值460.2；Rt＝6.157min。
RT(AD-H，CO2-MeOH，70-30，3.0mL/min)＝9.507min。
化合物3：
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ0.92(m,3H),1.17(m,4H),1.62(m,22H),2.28(s,3H),4.32(m,1H),4.81(m,1H),6.61(s,1H),8.01(s,1H),8.32(s,1H),9.14(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值458.2；实测值460.2；Rt＝6.191min。
RT(AD-H，CO2-MeOH，70-30，3.0mL/min)＝5.690min和6.463min(混合物)。
步骤3：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-环己基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物148)的合成
在室温下将于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(110.17mg，423.03μmol，104.92μL，14％纯度)小心添加到N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-环己基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯异构体1(19.40mg，42.30μmol)于DCM(2mL)中的溶液中。然后将反应混合物在室温下搅拌24h且在真空中蒸发溶剂，以得到15mg粗材料。使其经历RP-HPLC(柱：YMC Triart C18 100*20mm，5um；以50-75％，0-5min，0.1％ NH3-甲醇为流动相)，以得到化合物148N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-环己基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(9mg，25.11μmol，59.35％产率)。
1H NMR(氯仿-d,400MHz):δ(ppm)0.91(m,2H),1.01(m,3H),1.20(m,4H),1.49(m,1H),1.71(m,8H),1.97(m,2H),2.12(s,3H),3.09(m,1H),4.27(m,3H),4.73(m,1H),7.71(m,1H),8.03(s,1H),9.07(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值358.2；实测值359.2；Rt＝1.166min。
步骤4：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-环己基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物152)的合成
在室温下将于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(85.75mg，329.27μmol，81.67μL，14％纯度)小心添加到N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-环己基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯异构体2(15.10mg，32.93μmol)于DCM(2mL)中的溶液中。然后将反应混合物在室温下搅拌24h且在真空中蒸发溶剂，以得到15mg粗材料。使其经历RP-HPLC(柱：YMC Triart C18 100*20mm，5um；以50-75％，0-5min，0.1％ NH3-甲醇为流动相)，以得到化合物152N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-环己基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(8mg，22.32μmol，67.78％产率)。
1H NMR(氯仿-d,400MHz):δ(ppm)0.91(m,2H),1.02(m,3H),1.18(m,4H),1.74(m,9H),1.96(m,2H),2.12(s,3H),3.09(m,1H),4.29(m,3H),4.76(m,1H),7.72(m,1H),8.02(s,1H),9.02(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值358.2；实测值359.2；Rt＝1.154min。
步骤5：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5R)-2-环己基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物175)的合成
在室温下将于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(75.53mg，290.02μmol，71.93μL，14％纯度)小心添加到N-[5-[[2-[(2R,5R)-2-环己基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯异构体3(13.3mg，29.00μmol)于DCM(2mL)中的溶液中。然后将反应混合物在室温下搅拌24h且在真空中蒸发溶剂，以得到15mg粗材料。使其经历RP-HPLC(柱：YMC Triart C18 100*20mm，5um；以50-75％，0-5min，0.1％ NH3-甲醇为流动相)，以得到化合物175N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5R)-2-环己基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(6.5mg，18.13μmol，62.52％产率)。
1H NMR(氯仿-d,400MHz):δ(ppm)0.91(m,5H),1.20(m,3H),1.67(m,9H),1.91(m,2H),2.13(s,3H),2.48(m,1H),4.32(m,1H),4.45(s,2H),4.77(m,1H),7.72(s,1H),8.03(s,1H),8.98(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值358.2；实测值359.2；Rt＝3.090min。
实施例398.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(4-氨基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1081)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(4-氨基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物461)的合成
步骤1：N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-氨基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将DIPEA(765.94mg，5.93mmol，1.03mL)添加到2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(0.5g，1.69mmol)和4-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]苯胺(322.20mg，1.69mmol)于DMF(10mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU(708.20mg，1.86mmol)。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC(2-10min以40-60％水/MeCN+NH3为流动相；装载泵4mL MeCN+NH3；柱：TRIART 100*20 5mkm)，以得到纯的N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-氨基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(174mg，372.15μmol，21.98％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.12(m,3H),1.43(m,2H),1.52(d,9H),1.96(m,2H),2.18(m,5H),2.87(m,1H),3.32(m,1H),4.22(m,1H),4.62(m,1H),5.74(m,1H),6.62(m,2H),7.29(m,2H),8.11(s,1H),8.42(m,1H),9.41(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值467.2；实测值468.2；Rt＝1.018min。
步骤2：N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-氨基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的手性拆分
使用(IB(250*20，5mkm)Chiralpak柱；以己烷-MeOH-IPA，80-10-10为流动相；流速15mL/min；注入体积：900mkL)进行手性分离，得到两种异构体：(5-(2-((2R,5S)-2-(4-氨基苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-3-甲基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯异构体1(174.0mg，32.06％产率；RT(IB-3，己烷-IPA-MeOH，70-15-15，0.15mL/min)＝8.93min))和(5-(2-((2S,5R)-2-(4-氨基苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-3-甲基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯异构体2(174.0mg，35.00％产率；RT(IB-3，己烷-IPA-MeOH，70-15-15，0.15mL/min)＝14.96min)。
异构体1：RT(IB-3，己烷-IPA-MeOH，70-15-15，0.15mL/min)＝8.93min
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值467.2；实测值469.2；Rt＝4.211min。
异构体2：RT(IB-3，己烷-IPA-MeOH，70-15-15，0.15mL/min)＝14.96min
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值467.2；实测值469.2；Rt＝4.196min。
步骤3：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(4-氨基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物461)的合成
将N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-氨基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯异构体1(55.78mg，119.30μmol)溶解于二噁烷(2mL)和水(5mL)的混合物中。然后，将反应混合物在100℃下搅拌16h。在反应完成(通过LCMS监测)之后，在减压下浓缩所得悬浮液。使所获得的固体经历HPLC(2-10min以40-60％水/MeCN+NH3为流动相；装载泵4mL；TRIART 100*20 5微米柱)，以得到纯的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(4-氨基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(9.8mg，26.67μmol，22.36％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.94-1.04(m,3H),1.23-1.36(m,1H),1.65-1.75(m,1H),1.75-1.87(m,1H),1.87-1.98(m,1H),1.98-2.05(m,3H),2.06-2.15(m,1H),2.65-3.25(m,1H),3.35-3.97(m,1H),4.89-5.49(m,3H),5.54-5.64(m,2H),6.50-6.59(m,2H),6.88-7.00(m,2H),7.41-7.51(m,1H),7.92-8.08(m,1H),10.36-10.54(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值367.2；实测值368.2；Rt＝1.524min。
步骤4：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(4-氨基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1081)的合成
将N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-氨基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯异构体2(60.9mg，130.25μmol)溶解于二噁烷(2mL)和水(5mL)的混合物中。然后，将反应混合物在100℃下搅拌16h。在反应完成(通过LCMS监测)之后，在减压下浓缩所得悬浮液。使所获得的固体经历HPLC(2-10min以40-60％水/MeCN+NH3为流动相；装载泵4mL；TRIART 100*20 5微米柱)，以得到纯的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(4-氨基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(14.8mg，40.28μmol，30.92％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.91-1.04(m,3H),1.20-1.37(m,1H),1.60-1.97(m,3H),1.97-2.04(m,3H),2.05-2.16(m,1H),2.63-3.24(m,1H),3.34-3.96(m,1H),4.94-5.48(m,3H),5.54-5.63(m,2H),6.48-6.56(m,2H),6.88-7.00(m,2H),7.41-7.52(m,1H),7.93-8.04(m,1H),10.36-10.54(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值367.2；实测值368.2；Rt＝1.928min。
实施例399.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[4-(甲磺酰胺基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物499)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[4-(甲磺酰胺基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物506)的合成
步骤1：N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-[4-(甲磺酰胺基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
向N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-氨基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(156.8mg，335.36μmol)于二噁烷(10mL)中的预冷却溶液中添加吡啶(66.32mg，838.40μmol，67.81μL)。此后，在0℃下逐滴添加甲磺酰氯(42.26mg，368.89μmol，28.55μL)。然后，将反应混合物在室温下搅拌12h。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC(2-10min以40-60％水/MeCN+NH3为流动相；装载泵4mL；TRIART 100*20 5微米柱)，以得到纯的N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-[4-(甲磺酰胺基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(74.6mg，136.72μmol，40.77％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.2(m,3H),1.34(m,2H),1.49(s,9H),2.1(m,9H),3.12(s,3H),3.62(m,1H),4.32(m,1H),6.02(m,1H),7.21(m,3H),8.12(m,1H),8.36(m,1H),9.52(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值545.2；实测值546.2；Rt＝3.362min。
步骤2：N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-[4-(甲磺酰胺基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的手性分离
使用(IC-II(250*20，5mkm)柱；以IPA-MeOH，50-50为流动相；流速12mL/min)进行N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-[4-(甲磺酰胺基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的手性分离；得到两种异构体：N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-[4-(甲磺酰胺基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(异构体1：RT(IC柱；MeOH-IPA，50-50，0.6mL/min)＝19.14min；14.78mg，33.22％产率)和N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-[4-(甲磺酰胺基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(异构体1：RT(IC柱；MeOH-IPA，50-50，0.6mL/min)＝11.48min；23.98mg，32.14％产率)。
异构体1：RT(IC柱；MeOH-IPA，50-50，0.6mL/min)＝19.14minLCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值545.2；实测值546.2；Rt＝1.270min。
异构体2：RT(IC柱；MeOH-IPA，50-50，0.6mL/min)＝11.48minLCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值545.2；实测值546.2；Rt＝1.270min。
步骤3：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[4-(甲磺酰胺基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物499)的合成
将N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-[4-(甲磺酰胺基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯异构体1(14.78mg，45.41μmol)溶解于二噁烷(2mL)和水(5mL)的混合物中。然后，将反应混合物在100℃下搅拌16h。在反应完成(通过LCMS监测)之后，在减压下浓缩所得悬浮液。使所获得的固体经历HPLC(2-10min，以25-70％MeCN-H2O为流动相；流速：30mL/min；装载泵4mL，MeCN；SunFire 100*19mm，5mkm柱)，以得到纯的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[4-(甲磺酰胺基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(13.6mg，30.53μmol，67.22％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.95-1.04(m,3H),1.25-1.37(m,1H),1.60-1.72(m,1H),1.80-1.91(m,1H),1.96-2.07(m,4H),2.12-2.21(m,1H),2.68-2.74(m,0H),2.93-2.97(m,3H),3.16-3.21(m,1H),3.41-4.01(m,1H),5.04-5.55(m,1H),5.55-5.65(m,2H),7.15-7.21(m,2H),7.22-7.31(m,2H),7.40-7.51(m,1H),7.91-8.03(m,1H),9.66-9.76(m,1H),10.38-10.50(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值445.3；实测值446.2；Rt＝2.479min。
步骤4：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[4-(甲磺酰胺基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物506)的合成
将N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-[4-(甲磺酰胺基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯异构体2(23.98mg，43.95μmol)溶解于二噁烷(2mL)和水(5mL)的混合物中。然后，将反应混合物在100℃下搅拌16h。在反应完成(通过LCMS监测)之后，在减压下浓缩所得悬浮液。使所获得的固体经历HPLC(2-10min，以25-70％MeCN-H2O为流动相；流速：30mL/min；装载泵4mL，MeCN；SunFire 100*19mm，5mkm柱)，以得到纯的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[4-(甲磺酰胺基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(12mg，26.93μmol，61.29％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.97-1.03(m,3H),1.26-1.36(m,1H),1.60-1.72(m,1H),1.80-1.93(m,1H),1.96-2.09(m,4H),2.11-2.23(m,1H),2.68-2.73(m,0.4H),2.93-2.97(m,3H),3.17-3.20(m,0.6H),3.47-4.00(m,1H),5.05-5.55(m,1H),5.56-5.66(m,2H),7.16-7.22(m,2H),7.23-7.32(m,2H),7.40-7.52(m,1H),7.94-8.05(m,1H),9.61-9.79(m,1H),10.40-10.50(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值445.3；实测值446.2；Rt＝2.467min。
实施例400.2-[(2R,5S)-2-(4-乙酰胺基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物527)和2-[(2S,5R)-2-(4-乙酰胺基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物523)的合成
步骤1：N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-乙酰胺基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
向N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-氨基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(155mg，331.51μmol)于THF(15mL)中的预冷却溶液中添加吡啶(65.56mg，828.77μmol，67.03μL)。此后，在0℃下逐滴添加乙酰氯(28.62mg，364.66μmol，22.19μL)。然后，将反应混合物在室温下搅拌12h。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC(2-10min以50-70％ MeOH/H2O为流动相；流速30mL/min；装载泵4mL MeOH；SunFire 100*19mm，5mkm柱)，以得到纯的N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-乙酰胺基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(76mg，149.14μmol，44.99％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值509.2；实测值510.2；Rt＝2.784min。
步骤2：N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-乙酰胺基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的手性分离
使用(IC-I(250*20，5mkm)柱；IPA-MeOH，50-50为流动相；流速11mL/min)进行N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-乙酰胺基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的手性分离，得到两种异构体：N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-乙酰胺基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯异构体1(RT(IC柱，MeOH-IPA，50-50，0.6mL/min)＝10.07min；22.33mg，35.67％产率)和N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-乙酰胺基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯异构体2(RT(IC柱，MeOH-IPA，50-50，0.6mL/min)＝38.88min；53.20mg，29.38％产率)。
异构体1：RT(IC柱，MeOH-IPA，50-50，0.6mL/min)＝10.07minLCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值509.2；实测值510.2；Rt＝2.843min。
异构体2：RT(IC柱，MeOH-IPA，50-50，0.6mL/min)＝38.88minLCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值509.2；实测值510.2；Rt＝2.839min。
步骤3：2-[(2R,5S)-2-(4-乙酰胺基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物527)的合成
将N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-乙酰胺基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯异构体1(22.33mg，43.82μmol)溶解于水(5mL)和二噁烷(2mL)混合物中。然后，将反应混合物在100℃下搅拌17h。在反应完成(通过LCMS监测)之后，在减压下浓缩所得悬浮液。使所获得的固体经历HPLC(2-10min以40-60％水/MeOH为溶剂混合物；装载泵4mL MeOH；以TRIART 100*20 5微米为柱)，以得到纯的2-[(2R,5S)-2-(4-乙酰胺基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(14.2mg，34.68μmol，79.14％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.94-1.02(m,3H),1.24-1.38(m,1H),1.60-1.74(m,1H),1.76-1.91(m,1H),1.92-2.04(m,7H),2.10-2.23(m,1H),2.66-3.25(m,1H),3.38-3.99(m,1H),5.06-5.56(m,1H),5.56-5.69(m,2H),7.16-7.30(m,2H),7.40-7.49(m,1H),7.52-7.59(m,2H),7.92-8.05(m,1H),9.88-9.96(m,1H),10.36-10.53(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值409.2；实测值410.4；Rt＝1.894min。
步骤4：2-[(2S,5R)-2-(4-乙酰胺基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物523)的合成
将N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-乙酰胺基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯异构体2(27.11mg，53.20μmol)溶解于水(5mL)和二噁烷(2mL)混合物中。然后，将反应混合物在100℃下搅拌17h。在反应完成(通过LCMS监测)之后，在减压下浓缩所得悬浮液。使所获得的固体经历HPLC(2-10min以40-60％水/MeOH为溶剂混合物；装载泵4mL MeOH；以TRIART 100*20 5微米为柱)，以得到纯的2-[(2S,5R)-2-(4-乙酰胺基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(17.5mg，42.74μmol，80.33％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.92-1.03(m,3H),1.23-1.39(m,1H),1.58-1.73(m,1H),1.76-1.92(m,1H),1.94-2.06(m,7H),2.08-2.22(m,1H),2.66-3.21(m,1H),3.36-4.02(m,1H),5.06-5.56(m,1H),5.56-5.66(m,2H),7.16-7.29(m,2H),7.38-7.49(m,1H),7.51-7.60(m,2H),7.93-8.05(m,1H),9.88-9.98(m,1H),10.39-10.50(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值409.2；实测值410.2；Rt＝1.90min。
实施例401.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(2-(4-羟基苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物397、化合物396)的合成
步骤1：(5-(2-(2-(4-羟基苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-3-甲基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
将4-(5-甲基-2-哌啶基)苯酚(300mg，895.80μmol，HCl)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(264.52mg，895.80μmol)和TEA(906.46mg，8.96mmol，1.25mL)于DMF(10mL)中的混合物在25℃下搅拌0.25h，然后在0.5h内小批量添加HATU(340.61mg，895.80μmol)。将反应混合物在25℃下搅拌2h，然后在真空中浓缩至5ml且提交至反相HPLC(柱：XBridge C18 100x20mm，5um；流动相40-80％0-5min 0.1％ NH3-MeOH，流速：30ml/min)，得到190mg外消旋酰胺，然后将其提交至制备型手性HPLC(柱：Chiralpak IC(250*20mm，5mkm)；CO2-MeOH，55-45.流速：35mL/min；柱温：40℃；波长：215nm.)，以得到呈淡黄色胶状物的N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-羟基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯E1(49mg，104.58μmol，11.67％产率)(RT＝5.47min)和N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-羟基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯E2(67mg，143.00μmol，15.96％产率)(RT＝23.21min)，其直接用于下一步骤中。E1于分析条件下(柱：IC，以CO2-MeOH，50-50，2ml/min为流动相)的保留时间为8.40min且E2的保留时间为3.72min。
E1：保留时间：8.40min
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值468.5；实测值469.2；Rt＝4.932min。
E2：保留时间：3.72min
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值468.5；实测值469.2；Rt＝4.924min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(2-(4-羟基苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物397和化合物396)
将N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-羟基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯E1(49mg，104.58μmol)和N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-羟基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯E2(67mg，143.00μmol)于水(2mL)和1,4-二噁烷(1.5mL)的混合物中的溶液在95℃下搅拌18h，然后冷却且提交至反相HPLC(柱：YMC Triart C18 100x20 mm，5um；流动相30-30-80％0-1-6min 0.1％ NH3-MeOH，流速：30ml/min)，以得到呈白色固体的化合物397N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(4-羟基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(25.7mg，69.76μmol，66.70％产率)和化合物396N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(4-羟基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(33.5mg，90.93μmol，63.59％产率)。
化合物397：
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.96-1.01(m,3H),1.26-1.36(m,1H),1.63-1.75(m,1H),1.78-1.89(m,1H),1.93-2.04(m,4H),2.11-2.19(m,1H),2.68-3.18(m,1H),3.37-3.96(m,1H),4.96-5.52(m,1H),5.53-5.66(m,2H),6.69-6.79(m,2H),7.04-7.15(m,2H),7.39-7.53(m,1H),7.91-8.06(m,1H),9.26-9.38(m,1H),10.40-10.51(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值368.4；实测值369.2；Rt＝2.013min。
化合物396：
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.95-1.01(m,3H),1.25-1.35(m,1H),1.61-1.75(m,1H),1.78-1.90(m,1H),1.91-2.03(m,4H),2.09-2.19(m,1H),2.65-3.22(m,1H),3.40-3.98(m,1H),4.98-5.52(m,1H),5.54-5.67(m,2H),6.71-6.77(m,2H),7.05-7.16(m,2H),7.42-7.50(m,1H),7.93-8.04(m,1H),9.08-9.49(m,1H),10.32-10.67(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值368.4；实测值369.2；Rt＝1.932min。
实施例402.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-4,4-二氟-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物713)、N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5R)-4,4-二氟-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物735)的合成
步骤1：外消旋-N-[5-[[2-[(2R,5R)-4,4-二氟-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(503.22mg，1.70mmol)和TEA(1.72g，17.04mmol，2.38mL)溶解于DMF(8mL)中且冷却至0℃，添加HATU(971.95mg，2.56mmol)且在0℃下将混合物搅拌15min。添加(2R,5R)-4,4-二氟-5-甲基-2-苯基哌啶(0.36g，1.70mmol)且将混合物升温至室温且搅拌3h。添加乙酸乙酯且将有机相用盐水洗涤三次。将有机相经Na2SO4干燥，过滤且在45℃下在真空中浓缩，以得到粗产物，其通过HPLC(2-10min60-80％甲醇/H2O 30ml/min(装载泵4ml甲醇)，柱：SunFire 100*19mm，5微米)进行纯化，以得到N-[5-[[2-[(2R,5R)-4,4-二氟-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.095g，194.46μmol，11.41％产率)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值488.2；实测值489.2；Rt＝3.194min
步骤2：N-[5-[[2-[(2R,5R)-4,4-二氟-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯和N-[5-[[2-[(2S,5S)-4,4-二氟-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
使用(柱：Chiralpak IA-II(250*20mm，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH 50-25-25；流速：12mL/min)进行手性分离，以得到N-[5-[[2-[(2R,5R)-4,4-二氟-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.037g，75.74μmol，38.95％产率)和N-[5-[[2-[(2S,5S)-4,4-二氟-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.033g，67.55μmol，34.74％产率)。LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值488.2；实测值489.2；Rt＝3.194min
步骤3：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5R)-4,4-二氟-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物735)的合成
将N-[5-[[2-[(2R,5R)-4,4-二氟-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.036g，73.69μmol)溶解于二噁烷(2mL)和水(2mL)的混合物中，然后在100℃下搅拌12h。在真空、55℃下浓缩反应混合物，以得到粗产物，其通过HPLC(6min5-95％ H2O/MeCN 30ml/min(装载泵4ml MeCN)，柱：SunFire 100*19mm，5微米)进行纯化，以得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5R)-4,4-二氟-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.023g，59.22μmol，80.36％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.06(m,3H),2.00(m,3H),2.17(m,1H),2.91(m,2H),3.43(m,1H),3.97(m,1H),5.61(m,3H),7.31(m,5H),7.47(m,1H),7.99(m,1H),10.56(m,1H)
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值388.2；实测值389.2；Rt＝1.820min
步骤4：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-4,4-二氟-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物713)的合成
将N-[5-[[2-[(2S,5S)-4,4-二氟-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.033g，67.55μmol)溶解于二噁烷(2mL)和水(2mL)的混合物中，然后在100℃下搅拌12h。在真空、55℃下浓缩反应混合物，以得到粗产物，其通过HPLC(6min5-95％ H2O/MeCN 30ml/min(装载泵4ml MeCN)，柱：SunFire 100*19mm，5微米)进行纯化，以得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-4,4-二氟-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.022g，56.64μmol，83.85％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.06(m,3H),2.00(m,3H),2.17(m,1H),2.91(m,2H),3.43(m,1H),3.97(m,1H),5.61(m,3H),7.31(m,5H),7.47(m,1H),7.99(m,1H),10.56(m,1H)
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值388.2；实测值389.2；Rt＝1.820min
实施例403.2-(2-(1H-苯并[d]咪唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺(化合物408、化合物404)的合成
步骤1：(5-(2-(2-(1H-苯并[d]咪唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-3-甲基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
在室温下将HATU(353.22mg，928.96μmol)分批添加到2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(274.31mg，928.96μmol)、5-(5-甲基-2-哌啶基)-1H-苯并咪唑(250mg，928.96μmol)和TEA(564.01mg，5.57mmol，776.88μL)于DMF(9mL)中的悬浮液中。将澄清溶液在环境温度下搅拌108h且在真空中蒸发溶剂，以得到1g粗材料。使其经历RP-HPLC(柱：YMC Triart C18 100x20 mm，5um；以40-72％0-5min 0.1％ NH3-MeOH为流动相)，以得到N-[5-[[2-[2-(1H-苯并咪唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(65mg，131.96μmol，14.21％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值492.2；实测值493.2；Rt＝2.724min。
步骤2：手性分离
通过手性HPLC(柱：IA(250*20，5mkm)，以己烷-IPA-MeOH，50-25-25，12ml/min为流动相)分离对映异构体，以得到两种个别对映异构体N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(1H-苯并咪唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(E1)(39mg，79.18μmol，70.91％产率)(保留时间＝12.95min)和N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(1H-苯并咪唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(E2)(35mg，71.06μmol，63.64％产率)(保留时间＝16.57min)。
E1：保留时间：12.95min
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值492.5；实测值493.2；Rt＝3.851min。
E2：保留时间：16.57min
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值492.5；实测值493.2；Rt＝3.850min。
步骤3：2-(2-(1H-苯并[d]咪唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺(化合物404和化合物408)的合成
在室温下将于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(206.20mg，791.77μmol，196.38μL，14％纯度)小心添加到N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(1H-苯并咪唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯E1(39mg，79.18μmol)和N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(1H-苯并咪唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯E2(35mg，71.06μmol)于DCM(0.5mL)中的溶液中。然后将反应混合物在室温下搅拌12h且在真空中蒸发溶剂。使残余物经历RP-HPLC(柱：YMC Triart C18100x20 mm，5um；以30-70％0-5min 0.1％ NH3-MeOH为流动相)，以得到呈固体材料的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(1H-苯并咪唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺化合物404(17mg，43.32μmol，54.71％产率)以及N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(1H-苯并咪唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺化合物408(15mg，38.22μmol，53.79％产率)。
化合物404：
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98-1.05(m,3H),1.27-1.41(m,1H),1.69-1.81(m,1H),1.79-1.91(m,1H),1.96-2.03(m,3H),2.03-2.20(m,1H),2.22-2.34(m,1H),2.72-3.21(m,1H),3.43-4.05(m,1H),5.20-5.59(m,1H),5.59-5.74(m,2H),7.11-7.24(m,1H),7.38-7.52(m,2H),7.55-7.67(m,1H),7.92-8.07(m,1H),8.18(s,1H),10.40-10.59(m,1H),12.28-12.44(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值392.4；实测值393.2；Rt＝1.523min。
化合物408：
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.03-1.06(m,3H),1.29-1.45(m,1H),1.71-1.83(m,1H),1.82-1.94(m,1H),1.94-2.19(m,4H),2.20-2.35(m,1H),2.77-3.28(m,1H),3.47-4.08(m,1H),5.23-5.62(m,1H),5.61-5.78(m,2H),7.12-7.27(m,1H),7.40-7.56(m,2H),7.59-7.68(m,1H),7.94-8.10(m,1H),8.18-8.24(m,1H),10.48-10.59(m,1H),12.33-12.47(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值392.4；实测值393.2；Rt＝1.857min。
实施例404.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物677)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物678)的合成
如对于化合物化合物373的合成所述进行第一步骤
步骤2：N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯和N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的手性分离
使N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-(2-氧代吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.2028g，399.54μmol)经历手性HPLC纯化(柱：Chiralpak IB(250x 20mm，5um)；流动相：CO2-MeOH，80-20；流速：50mL/min)，以获得呈淡黄色固体的N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.07683g，151.37μmol，37.88％产率)和N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(74.80mg，147.37μmol，36.88％产率)。
N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯：
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值507.3；实测值508.4；Rt＝3.951min。
N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值507.3；实测值508.6；Rt＝3.951min。
步骤3：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物677)的合成
将N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.07683g，151.37μmol)溶解于二噁烷(2.5mL)和水(2.5mL)中。将所得反应混合物在100℃下加热过夜。然后，在真空中浓缩反应混合物且通过HPLC(洗脱液：2-10min，30-55％，MeOH/H2O；流速：30ml/min(装载泵4mlMeOH)，柱：SunFire 100x 19mm，5um)纯化残余物，以获得呈白色固体的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物677，0.031g，76.08μmol，50.26％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.00(m,3H),1.30(m,1H),1.70(m,1H),1.84(m,1H),1.99(m,4H),2.14(m,1H),3.05(m,1H),3.43(m,3H),5.52(m,1H),5.59(m,2H),6.79(m,1H),7.13(m,2H),7.44(m,1H),7.98(m,1H),10.40(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值407.2；实测值408.0；Rt＝1.634min。
步骤4：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物678)的合成
将N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(74.80mg，147.37μmol)溶解于二噁烷(2.5mL)和水(2.5mL)中。将所得反应混合物在100℃下加热过夜。然后，在真空中浓缩反应混合物且通过HPLC(洗脱液：2-10min，30-55％，MeOH/H2O；流速：30ml/min(装载泵4mlMeOH)，柱：SunFire 100x 19mm，5um)纯化残余物，以获得呈白色固体的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物678，0.042g，103.08μmol，69.95％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.00(m,3H),1.30(m,1H),1.70(m,1H),1.85(m,1H),1.99(m,4H),2.15(m,1H),3.04(m,1H),3.43(m,3H),5.56(m,3H),6.80(m,1H),7.10(m,2H),7.44(m,1H),7.98(m,1H),10.40(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值407.2；实测值408.0；Rt＝1.634min。
实施例405.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物504)和N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸酯(化合物503)的合成
步骤1：N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将于DMSO(4mL)中的6-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,2,3,4-四氢喹啉(0.3g，1.30mmol)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(461.50mg，1.56mmol)、HATU(693.28mg，1.82mmol)和DIPEA(336.65mg，2.60mmol，453.70μL)在25℃下搅拌15h。反应混合物的HPLC显示13％所需产物。将反应混合物提交至LCMS，以得到N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.077g，151.69μmol，11.65％产率)。
HPLC数据：2-10min 0-70％ MeCN/H2O 30ml/min(装载泵4mL MeCN；柱：SunFire100*19mm，5微米.
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值507.2；实测值509.2；Rt＝1.107min。
步骤2：N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯和N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.077g，147.14μmol)提交至手性分离(样品信息：IC I(250*20mm，5mkm)IPA-MeOH，50-50，10ml/min；注入体积：900.000μl)，以得到N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.022g，43.34μmol，29.46％产率)和N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.021g，41.37μmol，28.12％产率)。
N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯：
RT(IC，MeOH-IPA，50-50，0.5mL/min)＝11.391min。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值507.2；实测值508.2；Rt＝4.556min。
N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯：
RT(IC，MeOH-IPA，50-50，0.5mL/min)＝36.735min。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值507.2；实测值508.2；Rt＝4.561min。
步骤3：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物504)的合成
将N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.022g，43.34μmol)溶解于HCl于1,4-二噁烷中的溶液(10％)且在25℃下搅拌2h。在真空中浓缩反应混合物且将粗材料提交至HPLC(HPLC数据：2-10min 40-60％水/MeOH+NH3(装载泵4ml MeOH)，柱：TRIART 100*20mm 5微米；注入体积4000.000)，以得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.003g，7.36μmol，16.99％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.06-1.17(m,3H),1.27-1.40(m,1H),1.88-2.05(m,5H),2.10-2.23(m,5H),2.69-2.81(m,2H),2.96-3.33(m,2H),3.33-3.86(m,1H),4.11-4.28(m,0.3H),4.40-4.61(m,2H),4.68-4.97(m,0.7H),5.63-6.35(m,1H),6.42-6.52(m,1H),6.80-6.97(m,2H),7.78(s,1H),8.00-8.18(m,1H),9.02-9.26(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值407.2；实测值408.2；Rt＝1.74min。
步骤4：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物503)的合成
将N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.021g，41.37μmol)溶解于HCl于1,4-二噁烷中的溶液(10％)且在25℃下搅拌2h。在真空中浓缩反应混合物且将残余物提交至HPLC(HPLC数据：2-10min 40-60％水/MeOH+NH3(装载泵4ml MeOH)，柱：TRIART 100*20 5微米)，以得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.002g，4.91μmol，11.86％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.10(s,3H),1.35-1.40(m,1H),1.94-2.03(m,4H),2.14-2.22(m,5H),2.75-2.81(m,2H),3.29-3.35(m,2H),3.37-3.46(m,1H),4.21-4.87(m,3H),5.66-6.35(m,1H),6.45-6.51(m,1H),6.85-6.93(m,2H),7.28-7.30(m,1H),7.76-7.80(m,1H),8.03-8.14(m,1H),9.02-9.21(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值407.2；实测值408.2；Rt＝1.738min。
实施例406.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物505)、N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物502)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物583)的合成
步骤1：N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将6-(5-甲基-2-哌啶基)-3,4-二氢-1H-喹啉-2-酮(0.5g，1.44mmol，HCl)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(425.91mg，1.44mmol)、HATU(712.95mg，1.88mmol)和DIPEA(932.07mg，7.21mmol，1.26mL)的混合物在DMSO(5mL)中在25℃下搅拌16h。反应完成之后，将反应混合物倒入到水(10mL)中且用DCM萃取。将有机层分离，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩。将粗材料提交至HPLC(2-10min 40-60％水/MeCN+NH3(装载泵4ml MeCN+NH3)，柱：TRIART 100*20 5微米)，以得到呈两种级分的N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.137g，262.65μmol，18.21％产率)：91mg(通过LCMS为93％)和48mg(通过LCMS为90％)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值421.2；实测值422.2；Rt＝3.057min。
步骤2：N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯和N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.137g，262.65μmol)提交至手性分离(IB(250*20，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，70-15-15，12ml/min)，以得到N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.05g，95.86μmol，36.50％产率)和N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.047g，90.11μmol，34.31％产率)。
N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯：
RT(IB，己烷-IPA-MeOH，70-15-15，0.6ml/min)＝17.300min。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值521.2；实测值522.2；Rt＝4.990min。
N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯：
RT(IB，己烷-IPA-MeOH，70-15-15，0.6ml/min)＝15.437min。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值521.2；实测值；Rt＝4.989min。
步骤3：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物505)的合成
将N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.05g，92.98μmol)溶解于水(1.5mL)和1,4-二噁烷(0.5mL)的混合物中且在95℃下搅拌20h。在真空中浓缩反应混合物，以得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.036g，85.41μmol，91.86％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.95-1.12(m,3H),1.24-1.36(m,1H),1.61-1.74(m,1H),1.78-1.90(m,1H),1.93-2.07(m,4H),2.09-2.22(m,1H),2.39-2.44(m,2H),2.72-2.76(m,0.4H),2.82-2.90(m,2H),3.17-3.24(m,0.6H),3.41-4.00(m,1H),4.99-5.53(m,1H),5.57-5.72(m,2H),6.79-6.86(m,1H),7.03-7.13(m,2H),7.37-7.57(m,1H),7.92-8.10(m,1H),10.03(s,1H),10.40-10.56(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值421.2；实测值422.4；Rt＝1.872min。
步骤4：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物502、化合物502、化合物502_3)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物583)的合成
将N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.047g，89.21μmol)溶解于水(1.5mL)和1,4-二噁烷(0.5mL)的混合物中且将反应混合物在95℃下搅拌16h。冷却之后，在真空中浓缩反应混合物，以得到具有顺式杂质的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.032g，75.92μmol，85.11％产率)，在以下条件下对其进行纯化：柱：Chiralpak IA(250/20mm/5m)；流动相：己烷-IPA-MeOH，60-20-20；流速：12mL/min；柱温：24℃；波长：205nm，210nm，308nm)，保留时间(异构体A)＝70.02min；保留时间(异构体B)＝77.91min，以得到20mg N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.032g，75.92μmol，85.11％产率)(化合物502)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.0015g，3.56μmol，3.99％产率)(化合物583)。
化合物502：
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.98-1.20(m,3H),1.26-1.37(m,1H),1.63-1.75(m,1H),1.80-1.92(m,1H),1.95-2.07(m,4H),2.11-2.21(m,1H),2.40-2.43(m,2H),2.72-2.75(m,0.4H),2.83-2.89(m,2H),3.17-3.22(m,0.6H),3.42-3.99(m,1H),5.01-5.53(m,1H),5.57-5.66(m,2H),6.79-6.86(m,1H),7.04-7.13(m,2H),7.39-7.52(m,1H),7.91-8.07(m,1H),10.02(s,1H),10.41-10.52(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值421.2；实测值422.4；Rt＝1.868min。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值421.2；实测值422.2；Rt＝1.782min。
化合物583：
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.70-0.98(m,3H),1.24-1.38(m,1H),1.60-1.67(m,1H),1.78-1.89(m,1H),1.95-2.07(m,4H),2.09-2.18(m,1H),2.42-2.44(m,2H),2.74-3.20(m,3H),3.34-4.20(m,1H),4.98-5.63(m,1H),5.87(br.s,2H),6.77-6.88(m,1H),7.03-7.13(m,2H),7.42-7.60(m,1H),7.95-8.10(m,1H),10.03(s,1H),10.48-10.64(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值421.2；实测值422.2；Rt＝1.23min。
实施例407.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物864)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物876)的合成
步骤1：N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将N-甲基-5-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶-2-胺(0.5g，2.44mmol)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(719.17mg，2.44mmol)和三乙胺(2.46g，24.35mmol，3.39mL)一起混合于DMF(10mL)中。添加HATU(1.39g，3.65mmol)且将所得混合物搅拌18h。在真空中浓缩反应混合物且通过HPLC(50-75％ MeOH-2-10min流速：30mL/min；装载泵4mL/min MeOH；柱Sun Fire 100*19mm，5mkm)纯化残余物，以获得N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.184g，381.29μmol，15.66％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值482.2；实测值483.2；Rt＝0.991min。
步骤2：N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯和N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
对N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.184g，381.29μmol)进行手性分离(柱：Chiralpak ICII(250*20mm，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH 50-25-25；流速：12mL/min；9次注入，20mg/注入，11h)，以获得N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯异构体1(0.05273g，109.27μmol，28.66％产率；保留时间＝28.35)和N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯异构体2(0.06791g，140.72μmol，36.91％产率；保留时间＝54.813)。
第1种异构体：RT(IC，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝28.386min。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值482.2；实测值484.2；Rt＝2.009min。
第2种异构体：RT(IC，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝56.615min。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值482.2；实测值484.2；Rt＝2.002min。
步骤3：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物864)的合成
将N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯异构体1(0.05273g，109.27μmol)溶解于二噁烷(1mL)和水(1mL)的混合物中且将所得混合物在100℃下加热18h。在真空中浓缩反应混合物且通过HPLC(35-55％ MeOH/H2O+NH3 -2-10min，流速：30ml/min；装载泵4ml/minMeOH+NH3；目标质量382)纯化残余物，以获得N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.0281g，73.47μmol，67.24％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)0.95-1.03(m,3H),1.24-1.40(m,1H),1.65-1.77(m,1H),1.77-1.89(m,1H),1.89-1.98(m,1H),1.98-2.03(m,3H),2.06-2.15(m,1H),2.71-2.74(m,3H),2.77-3.18(m,1H),3.39-3.95(m,1H),4.95-5.50(m,1H),5.54-5.66(m,2H),6.38-6.46(m,2H),7.24-7.38(m,1H),7.42-7.50(m,1H),7.89-7.94(m,1H),7.95-8.03(m,1H),10.32-10.65(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值382.2；实测值384.2；Rt＝0.684min。
步骤4：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物876)的合成
将N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯异构体2(0.06791g，140.72μmol)溶解于二噁烷(1mL)和水(1mL)的混合物中且将所得混合物在100℃下加热18h。在真空中浓缩反应混合物且通过HPLC(35-55％ MeOH/H2O+NH3 -2-10min，流速：30mL/min；装载泵4mL/minMeOH+NH3；目标质量382)纯化残余物，以获得N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.0368g，96.22μmol，68.37％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)0.94-1.01(m,3H),1.26-1.36(m,1H),1.65-1.78(m,1H),1.78-1.97(m,2H),1.97-2.03(m,3H),2.06-2.15(m,1H),2.72(s,3H),2.75-3.20(m,1H),3.38-3.95(m,1H),4.92-5.50(m,1H),5.56-5.66(m,2H),6.37-6.47(m,2H),7.23-7.40(m,1H),7.42-7.50(m,1H),7.92(s,1H),7.95-8.02(m,1H),10.44(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值382.2；实测值384.2；Rt＝0.681min。
实施例408.N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物865)和N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物878)的合成
步骤1：N-[3-乙基-5-[[2-[5-甲基-2-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将N-甲基-5-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶-2-胺(0.4g，1.95mmol)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-乙基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(602.67mg，1.95mmol)和三乙胺(1.97g，19.48mmol，2.72mL)一起混合于DMF(10mL)中。向其中添加HATU(1.11g，2.92mmol)，且将所得混合物搅拌18h。在真空中浓缩反应混合物且通过HPLC(50-75％MeOH 2-10min流速：30mL/min；装载泵4mL/min MeOH；柱Sun Fire100*19mm，5mkm)纯化残余物，以获得N-[3-乙基-5-[[2-[5-甲基-2-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.1351g，272.05μmol，13.96％产率)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值496.2；实测值497.2；Rt＝1.023min。
步骤2：N-[3-乙基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯和N-[3-乙基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
对N-[3-乙基-5-[[2-[5-甲基-2-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.1351g，272.05μmol)进行手性分离(柱：Chiralpak ICII(250*20mm，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH 50-25-25；流速：12mL/min；7次注入，20mg/注入，7.5h)，以获得N-[3-乙基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯异构体1(0.04623g，93.09μmol，34.22％产率；保留时间＝28.48)和N-[3-乙基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯异构体2(0.0479g，96.46μmol，35.46％产率；保留时间＝51.36)
第1种异构体：RT(IC，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝27.861min。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值496.2；实测值497.2；Rt＝2.178min。
第2种异构体：RT(IC，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝52.672min。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值496.2；实测值497.2；Rt＝2.173min。
步骤3：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物865)的合成
将N-[3-乙基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯异构体1(0.04623g，93.09μmol)溶解于二噁烷(1mL)和水(1mL)的混合物中且将所得混合物在100℃下加热18h。在真空中浓缩反应混合物且通过HPLC(35-55％ MeOH/H2O+NH3 2-10min，流速：30mL/min；装载泵4mL/minMeOH+NH3)纯化残余物，以获得N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.0251g，63.31μmol，68.00％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)0.96-1.02(m,3H),1.06-1.13(m,3H),1.25-1.36(m,1H),1.67-1.77(m,1H),1.79-1.91(m,1H),1.92-2.05(m,1H),2.06-2.18(m,1H),2.36-2.42(m,2H),2.73(s,3H),2.77-3.17(m,1H),3.40-3.96(m,1H),4.96-5.50(m,1H),5.55-5.65(m,2H),6.37-6.46(m,2H),7.24-7.38(m,1H),7.43-7.49(m,1H),7.92(s,1H),7.97-8.06(m,1H),10.44(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值396.2；实测值398.2；Rt＝0.719min。
步骤4：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物878)的合成
将N-[3-乙基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯异构体2(0.0479g，96.46μmol)溶解于二噁烷(1mL)和水(1mL)的混合物中且将所得混合物在100℃下加热18h。在真空中浓缩反应混合物且通过HPLC(35-55％ MeOH/H2O+NH3 2-10min，流速：30mL/min；装载泵4mL/minMeOH+NH3)纯化残余物，以获得N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.0248g，62.55μmol，64.85％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)0.95-1.02(m,3H),1.07-1.12(m,3H),1.25-1.36(m,1H),1.65-1.77(m,1H),1.79-1.91(m,1H),1.92-2.05(m,1H),2.06-2.14(m,1H),2.36-2.41(m,2H),2.73(s,3H),2.82-3.19(m,1H),3.42-3.97(m,1H),4.94-5.51(m,1H),5.56-5.65(m,2H),6.37-6.46(m,2H),7.23-7.39(m,1H),7.41-7.52(m,1H),7.92(s,1H),7.98-8.06(m,1H),10.45(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值396.2；实测值398.2；Rt＝0.723min。
实施例409.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(2-(3,4-二氟苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物472、化合物458)的合成
步骤1：(5-(2-(2-(3,4-二氟苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-3-甲基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
将DIPEA(525.22mg，4.06mmol，707.84μL)添加到相应2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(0.4g，1.35mmol)和(2S,5R)-2-(3,4-二氟苯基)-5-甲基哌啶(286.16mg，1.35mmol)于DMF(10mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU溶液(566.56mg，1.49mmol)。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC(柱：Triart 100*20，5mkl；以MeOH+NH3为洗脱液混合物)，以得到纯的N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(3,4-二氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(370mg，757.38μmol，55.91％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值488.2；实测值489.2；Rt＝4.078min。
步骤2：手性分离
使用(Chiralpak IC 250*20，5mkm柱；以CO2-MeOH，70-30为流动相；流速50mL/min；注入体积：900mkl)分离N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(3,4-二氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(370mg，757.38μmol)；得到呈米色固体的E1 N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(3,4-二氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(142.29mg，291.26μmol，38.46％产率)(RT(IC，CO2-MeOH，60-40，2ml/min)＝5.93min)和呈米色固体的E2 N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(3,4-二氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(111.93mg，229.12μmol，30.25％产率)(RT(IC，CO2-MeOH，60-40，2ml/min)＝4.83min)。
E1：保留时间：5.93min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值488.2；实测值489.2；Rt＝5.938min。
E2：保留时间：4.83min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值488.2；实测值489.2；Rt＝5.939min。
步骤3：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(2-(3,4-二氟苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物472和化合物458)的合成
将N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(3,4-二氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯E2(111.93mg，229.12μmol)和N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(3,4-二氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯E1(142.29mg，291.26μmol)溶解于二噁烷(2mL)和水(5mL)的混合物中。然后，将反应混合物在100℃下搅拌16h。在反应完成(通过LCMS监测)之后，在减压下浓缩所得悬浮液。使所获得的固体经历HPLC(柱：Triart 100*20，5mkl；以MeCN+NH3为洗脱液混合物)，以得到纯的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(3,4-二氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物458)(67.1mg，172.76μmol，75.40％产率)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(3,4-二氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物472)(87.2mg，224.51μmol，77.08％产率)。
化合物472：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.94-1.02(m,3H),1.25-1.38(m,1H),1.57-1.68(m,1H),1.80-1.92(m,1H),1.95-2.07(m,4H),2.12-2.23(m,1H),2.67-3.23(m,1H),3.38-4.05(m,1H),5.07-5.54(m,1H),5.56-5.65(m,2H),7.10-7.21(m,1H),7.31-7.40(m,1H),7.40-7.49(m,2H),7.93-8.04(m,1H),10.45-10.64(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值388.2；实测值389.2；Rt＝2.875min。
化合物458：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.97-1.00(m,3H),1.25-1.36(m,1H),1.57-1.67(m,1H),1.80-1.92(m,1H),1.96-2.03(m,4H),2.12-2.24(m,1H),2.68-3.22(m,1H),3.41-4.03(m,1H),5.08-5.52(m,1H),5.58-5.63(m,2H),7.09-7.20(m,1H),7.30-7.40(m,1H),7.41-7.49(m,2H),7.93-8.03(m,1H),10.47-10.53(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值388.2；实测值389.2；Rt＝2.882min。
实施例410.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(3,4,5-三氟苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物478、化合物487)的合成
步骤1：(3-甲基-5-(2-(5-甲基-2-(3,4,5-三氟苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
将DIPEA(459.56mg，3.56mmol，619.36μL)添加到相应2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(0.3g，1.02mmol)和5-甲基-2-(3,4,5-三氟苯基)哌啶(232.90mg，1.02mmol)于DMF(10mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU溶液(424.92mg，1.12mmol)。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC(柱：Triart 100*20,5mkl；以MeOH+NH3为洗脱液混合物)，以得到纯的N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-(3,4,5-三氟苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.21g，414.60μmol，40.81％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值506.2；实测值507.2；Rt＝4.196min。
步骤2：手性分离
使用(Chiralpak AD 250*30，5mkm柱；CO2-MeOH，60-40为流动相；流速30mL/min；注入体积：900mkl)分离N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-(3,4,5-三氟苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(57mg，149.04μmol)；得到呈黄色固体的E1 N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(3,4,5-三氟苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(66.11mg，130.52μmol，31.48％产率)(RT(AD-H，CO2-MeOH，60-40，2ml/min)＝9.02min)和呈黄色固体的E2 N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(3,4,5-三氟苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(70.13mg，138.46μmol，33.40％产率)(RT(AD-H，CO2-MeOH，60-40，2ml/min)＝5.75min)。
E1：保留时间：9.02min
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值506.2；实测值507.2；Rt＝6.118min。
E2：保留时间：5.75min
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值506.2；实测值507.2；Rt＝6.118min。
步骤3：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(3,4,5-三氟苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物487和化合物478)的合成
将N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(3,4,5-三氟苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯E1(66.11mg，130.52μmol)和N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(3,4,5-三氟苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯E2(70.13mg，138.46μmol)溶解于二噁烷(2mL)和水(5mL)的混合物中。然后，将反应混合物在100℃下搅拌16h。在反应完成(通过LCMS监测)之后，在减压下浓缩所得悬浮液。使所获得的固体经历HPLC(柱：Triart100*20，5mkl；以MeOH+NH3为洗脱液混合物)，以得到纯的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(3,4,5-三氟苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物487)(34.9mg，85.88μmol，65.80％产率)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(3,4,5-三氟苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物478)(44.3mg，109.01μmol，78.73％产率)。
化合物487：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.95-1.02(m,3H),1.24-1.36(m,1H),1.57-1.67(m,1H),1.79-1.91(m,1H),1.97-2.06(m,4H),2.12-2.24(m,1H),2.70-3.25(m,1H),3.39-4.03(m,1H),5.05-5.50(m,1H),5.56-5.68(m,2H),7.17-7.33(m,2H),7.41-7.52(m,1H),7.91-8.06(m,1H),10.40-10.67(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值406.2；实测值407.2；Rt＝2.170min。
化合物478：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.96-1.01(m,3H),1.23-1.36(m,1H),1.55-1.68(m,1H),1.80-1.92(m,1H),1.95-2.04(m,4H),2.13-2.24(m,1H),2.70-3.24(m,1H),3.40-4.05(m,1H),5.06-5.48(m,1H),5.58-5.65(m,2H),7.19-7.32(m,2H),7.40-7.51(m,1H),7.91-8.06(m,1H),10.45-10.64(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值406.2；实测值407.2；Rt＝2.169min。
实施例411.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(2-(4-羟基环己基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物423、化合物436、化合物431和化合物434)的合成
步骤1：(5-(2-(2-(4-羟基环己基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-3-甲基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
将4-(5-甲基-2-哌啶基)环己醇(500mg，2.53mmol)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(748.27mg，2.53mmol)和TEA(2.56g，25.34mmol，3.53mL)于DMF(20mL)中的混合物在25℃下搅拌0.25h，然后在0.5h内小批量添加HATU(963.50mg，2.53mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌2h，然后在真空中浓缩至5ml且提交至反相HPLC(柱：SunFireC18 100x19 mm 5um，流动相：20-65％0-5min水-MeOH+FA，流速：30ml/min)，得到呈淡黄色胶状物的N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-羟基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(260mg，547.84μmol，21.62％产率)和N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-羟基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(240mg，505.70μmol，19.96％产率)，将其直接提交至制备型手性HPLC。
D1：LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值474.2；实测值475.2；Rt＝2.953min。
D2：CMS(ESI)：[M]+m/z：计算值474.2；实测值475.2；Rt＝3.100min。
步骤2：手性分离
将外消旋N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-羟基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(240mg，505.70μmol)提交至制备型手性HPLC(柱：Chiralpak IC(250*20mm，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH，40-30-30；流速：11mL/min；柱温：21℃；波长：205nm)，以得到含有痕量溶剂的粗品N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-羟基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(121mg，254.96μmol，50.42％产率)E2(R.T.＝14.766min)和N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-羟基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(119mg，250.74μmol，49.58％产率)E1(R.T.＝24.933min)，其直接用于下一步骤中。
将外消旋N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-羟基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(260mg，547.84μmol)提交至制备型手性HPLC(柱：IB(250*30，5mkm)，流动相：己烷-IPA-MeOH，80-10-10，流速12ml/min)，以得到含有痕量溶剂的粗品N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-羟基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(117mg，246.53μmol，45.00％产率)E4(R.T.＝14.531min)和N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-羟基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯E3(114mg，240.21μmol，43.85％产率)(R.T.＝29.070min)，其直接用于下一步骤中。
E1：保留时间：24.93min
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值474.5；实测值475.2；Rt＝4.856min。
E2：保留时间：14.76min
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值474.5；实测值475.2；Rt＝4.854min。
E3：保留时间：29.07min
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值474.5；实测值475.2；Rt＝4.621min。
E4：保留时间：14.53min
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值474.5；实测值475.2；Rt＝4.622min。
步骤3：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(2-(4-羟基环己基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物423、化合物436和化合物431、化合物434)的合成
将N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-羟基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯E2(121mg，254.96μmol)、N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-羟基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯E1(119mg，250.74μmol)、N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-羟基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯E4(117.00mg，246.53μmol)和N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-羟基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯E3(114mg，240.21μmol)于水(2mL)和1.4-二噁烷(2mL)的混合物中的溶液在95℃下搅拌12h，然后冷却且提交至反相HPLC(柱：YMC Triart C18 100x20mm，5um；流动相40-40-65％0-1-5min 0.1％ NH3-MeOH，流速：30ml/min)，以得到呈白色固体的化合物436N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(4-羟基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(48mg，128.18μmol，50.27％产率)、化合物423N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(4-羟基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(47.8mg，127.65μmol，50.91％产率)、化合物434N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(4-羟基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(57.7mg，154.08μmol，62.50％产率)和化合物431N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(4-羟基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(52.5mg，140.20μmol，58.36％产率)。
化合物423：1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.92-0.98(m,3H),1.11-1.32(m,4H),1.33-1.51(m,4H),1.59-1.65(m,3H),1.81-1.95(m,3H),1.99-2.05(m,3H),2.85-3.22(m,1H),3.36-3.61(m,1H),3.72-3.79(m,1H),3.98-4.29(m,2H),5.53-5.63(m,2H),7.42-7.54(m,1H),7.96-8.10(m,1H),10.24-10.38(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值374.4；实测值375.2；Rt＝2.217min。
化合物436：1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.90-1.01(m,3H),1.13-1.33(m,4H),1.33-1.51(m,4H),1.58-1.66(m,3H),1.80-1.96(m,3H),1.99-2.08(m,3H),2.81-3.31(m,1H),3.33-3.59(m,1H),3.72-3.78(m,1H),3.97-4.28(m,2H),5.56-5.65(m,2H),7.44-7.51(m,1H),7.99-8.06(m,1H),10.24-10.33(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值374.4；实测值375.2；Rt＝2.125min。
化合物431：1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.72-0.90(m,2H),0.91-1.00(m,3H),1.05-1.19(m,2H),1.22-1.29(m,1H),1.56(d,3H),1.63-2.01(m,7H),2.01-2.14(m,3H),2.82-3.27(m,1H),3.42-4.02(m,1H),4.03-4.13(m,1H),4.46-4.51(m,1H),5.52-5.67(m,2H),7.43-7.50(m,1H),7.96-8.03(m,1H),10.25-10.33(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值374.4；实测值375.2；Rt＝1.941min。
化合物434：1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.75-0.90(m,2H),0.91-1.01(m,3H),1.05-1.17(m,2H),1.21-1.30(m,1H),1.41-1.62(m,3H),1.64-2.00(m,7H),2.00-2.13(m,3H),2.82-3.27(m,1H),3.41-4.02(m,1H),4.03-4.13(m,1H),4.46-4.53(m,1H),5.55-5.68(m,2H),7.43-7.51(m,1H),7.98-8.06(m,1H),10.23-10.31(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值374.4；实测值375.2；Rt＝2.105min。
实施例412.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(2-(3-氯-5-氟苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物682和化合物659)的合成
步骤1：(5-(2-(2-(3-氯-5-氟苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-3-甲基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
将DIPEA(393.91mg，3.05mmol，530.88μL)添加到相应2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(0.3g，1.02mmol)和2-(3-氯-5-氟苯基)-5-甲基哌啶(231.34mg，1.02mmol)于DMF(15mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU(424.92mg，1.12mmol)。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC(Waters Sunfire C1819*100 5mkm柱且以H2O-MeOH为洗脱液混合物)，以得到纯的N-[5-[[2-[2-(3-氯-5-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.32g，633.69μmol，62.37％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值504.2；实测值505.2；Rt＝3.569min。
步骤2：手性分离
通过手性HPLC(柱：IC-II(250*20，5mkm)，以己烷-MeOH-IPA，80-15-15，12ml/min为流动相)分离对映异构体，以得到两种个别对映异构体E1 N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(3-氯-5-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(116.9mg，231.49μmol，36.53％产率)和E2 N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(3-氯-5-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(109.4mg，216.64μmol，34.19％产率)。
E1于分析条件下(柱：IC，以己烷-IPA-MeOH，70-15-15，0.6ml/min为流动相)的保留时间为20.40min且E2的保留时间为29.38min。
E1：LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值504.2；实测值505.2；Rt＝1.227min。
E2：LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值504.2；实测值505.2；Rt＝1.224min。
步骤3：(5-(2-(2-(3-氯-5-氟苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-3-甲基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(化合物659和化合物682)的合成
将N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(3-氯-5-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯E2(109.4mg，216.64μmol)和N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(3-氯-5-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯E1(116.9mg，231.49μmol)溶解于二噁烷(2mL)和水(5mL)混合物中。然后，将反应混合物在100℃下搅拌17h。在反应完成(通过LCMS监测)之后，在减压下浓缩所得悬浮液。使所获得的固体经历HPLC(Waters Sunfire C1820*100 5mkm柱且以H2O-MeOH(45-60％)+NH3为洗脱液混合物)，以得到纯的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(3-氯-5-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(68.6mg，169.44μmol，78.21％产率)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(3-氯-5-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(48.8mg，120.53μmol，52.07％产率)。
化合物659：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99(m,3H),1.30(m,1H),1.61(m,1H),1.86(m,1H),2.00(m,4H),2.16(m,1H),2.97(m,1H),3.64(m,1H),5.31(m,1H),5.61(m,2H),7.14(m,2H),7.34(m,1H),7.45(m,1H),7.97(m,1H),10.54(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值404.2；实测值405.2；Rt＝2.525min。
化合物682：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99(m,3H),1.30(m,1H),1.60(m,1H),1.88(m,1H),2.00(m,4H),2.17(m,1H),2.98(m,1H),3.73(m,1H),5.31(m,1H),5.61(m,2H),7.14(m,2H),7.34(m,1H),7.45(d,1H),7.97(m,1H),10.54(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值404.2；实测值405.2；Rt＝2.494min。
实施例413.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(2-(3-氯-4-(三氟甲基)苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物689、化合物703)的合成
步骤1：(5-(2-(2-(3-氯-4-(三氟甲基)苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-3-甲基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
向(2R,5S)-2-[3-氯-4-(三氟甲基)苯基]-5-甲基哌啶(0.9g，3.24mmol)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(1.15g，3.89mmol，HCl)和DIPEA(1.05g，8.10mmol，1.41mL)于DMSO(5mL)中的搅拌溶液中添加HATU(1.48g，3.89mmol)。将所得反应混合物在20℃下搅拌13h。完成之后，将反应混合物提交至反相HPLC(柱：SunFire 19*100mm，5mkl；MeOH为洗脱液混合物)，以得到呈淡黄色固体的N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-[3-氯-4-(三氟甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.32g，576.59μmol，17.79％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值554.2；实测值555.2；Rt＝1.445min。
步骤2：手性分离
将N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-[3-氯-4-(三氟甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.32g，576.59μmol)提交至手性分离(IA-I(250*20，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，12ml/min)，以得到N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-[3-氯-4-(三氟甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.12g，216.22μmol，37.50％产率)和N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-[3-氯-4-(三氟甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.1g，180.18μmol，31.25％产率)。E1于分析条件下(柱：IA，以己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.6ml/min为流动相)的保留时间为20.78min且E2的保留时间为15.01min。
E1：保留时间：20.78min
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值554.2；实测值555.2；Rt＝5.656min。
E2：保留时间：15.01min
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值554.2；实测值555.2；Rt＝6.191min。
步骤3：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(2-(3-氯-4-(三氟甲基)苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物703和化合物689)的合成
将N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-[3-氯-4-(三氟甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.11g，198.20μmol)和N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-[3-氯-4-(三氟甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.1g，180.18μmol)添加到水(0.7mL)和1,4-二噁烷(2mL)的混合物中且将反应混合物在80℃下搅拌16h。冷却之后，在减压下浓缩溶液且将残余物提交至反相HPLC(柱：SunFire 19*100mm，5mkl；以水-MeOH为洗脱液混合物)，以得到呈白色固体的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[3-氯-4-(三氟甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.037g，81.34μmol，41.04％产率)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[3-氯-4-(三氟甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.04g，87.94μmol，48.80％产率)。
化合物689：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99(m,3H),1.31(m,1H),1.61(m,1H),1.88(m,1H),2.00(m,3H),2.14(m,2H),3.01(m,1H),3.65(m,1H),5.59(m,3H),7.45(m,2H),7.61(m,1H),7.85(m,1H),7.97(m,1H),10.53(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值454.2；实测值455.2；Rt＝2.501min。
化合物703：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99(m,3H),1.31(m,1H),1.62(m,1H),1.87(m,1H),2.00(m,3H),2.13(m,2H),3.00(m,1H),3.75(m,1H),5.58(m,3H),7.45(m,2H),7.61(m,1H),7.85(m,1H),7.97(m,1H),10.53(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值454.2；实测值455.2；Rt＝2.481min。
实施例414.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[4-(羟基甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物806)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[4-(羟基甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物802)的合成
步骤1：N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-[4-(羟基甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(P1)和N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-[4-(羟基甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(P2)的合成
在轻微加热下，将2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(287.67mg，974.21μmol)、[4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]甲醇(0.2g，974.21μmol)和dipea(377.73mg，2.92mmol，509.07μL)溶解于DMSO(6mL)中。在剧烈搅拌和偶尔加热下，小批量添加HATU(444.51mg，1.17mmol)。反应完成之后，通过HPLC纯化混合物，以得到外消旋产物，使其经历手性HPLC，以得到N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-[4-(羟基甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(30mg，62.17μmol，6.38％产率)和N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-[4-(羟基甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(39mg，80.82μmol，8.30％产率)
HPLC条件：(32-36％0.9-6min水-乙腈；流速30ml/min；(装载泵4ml/min乙腈)；目标质量482；柱SunFireC18 100x19mm 5um(R))
手性制备型HPLC条件：Сhiralcel OJ-H(250*20，5mkm)，流动相：己烷-IPA-MeOH，80-10-10；流速：12ml/min。24℃，波长：205nm，215nm，保留时间(异构体1(SR))＝19.9，保留时间(异构体2(RS))＝33.28
P1：LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值482.6；实测值483.2；Rt＝5.045min。
RT(己烷-IPA-MeOH，80-10-10，12ml/min)＝11.3442min。
P2：LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值482.6；实测值483.2；Rt＝5.043min。
RT(己烷-IPA-MeOH，80-10-10，12ml/min)＝19.8252min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[4-(羟基甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物806)的合成
将N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-[4-(羟基甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(30mg，62.17μmol)溶解于水(1mL)/二噁烷(1mL)混合物中且在回流下搅拌过夜。等分试样显示起始材料完全消耗；在减压下蒸发溶剂且通过HPLC(5-50％0.5-6.5min水-乙腈；流速30ml/min(装载泵4ml/min乙腈)；目标质量382；柱SunFireC18 100x19 mm 5um(R))纯化，产生N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[4-(羟基甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(20mg，52.29μmol，84.12％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值382.2；实测值383.4；Rt＝1.541min。
步骤3：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[4-(羟基甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物802)的合成
将N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-[4-(羟基甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(38mg，78.74μmol)溶解于水(1mL)/二噁烷(1mL)混合物中且在回流下搅拌过夜。等分试样显示起始材料完全消耗；在减压下蒸发溶剂且通过HPLC(5-40％0.5-6.5min水-乙腈；流速30ml/min(装载泵4ml/min乙腈)；目标质量382；柱SunFireC18 100x19 mm 5um(R))纯化，产生N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[4-(羟基甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(10mg，26.15μmol，33.20％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)0.98-1.03(m,3H),1.27-1.36(m,1H),1.61-1.69(m,1H),1.80-1.91(m,1H),1.97-2.02(m,3H),2.02-2.14(m,1H),2.16-2.27(m,1H),2.68-3.19(m,1H),3.41-4.05(m,1H),4.42-4.50(m,2H),5.09-5.57(m,2H),5.57-5.65(m,2H),7.21-7.24(m,1H),7.24-7.34(m,3H),7.42-7.54(m,1H),7.88-8.05(m,1H),10.41-10.52(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值382.2；实测值383.4；Rt＝1.752min。
实施例415.外消旋-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(4-叔丁基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物145)、N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(4-叔丁基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物260)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(4-叔丁基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物290)的合成
步骤1：N-[5-[[2-[2-(4-叔丁基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
向2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(621.87mg，2.11mmol)、2-(4-叔丁基环己基)-5-甲基哌啶(0.5g，2.11mmol)和HATU(880.82mg，2.32mmol)于DMF(1.5mL)中的搅拌溶液中添加三乙胺(852.40mg，8.42mmol，1.17mL)。将所得反应混合物在25℃下搅拌4小时。4小时之后，将反应混合物在减压下浓缩且通过反相HPLC(洗脱液：70-70-100％，0-1-6min，水-甲醇；流速：30mL/min；装载泵：4mL/min，甲醇；柱：SunFireC18 100x19mm，5um)纯化所获得的粗产物，以得到呈白色固体的N-[5-[[2-[2-(4-叔丁基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.25g，485.72μmol，23.06％产率)。
LCMS(ESI)：[M+Boc]+m/z：计算值514.4；实测值515.4；Rt＝4.992min。
步骤2：外消旋-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(4-叔丁基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物145)的合成
将N-[5-[[2-[2-(4-叔丁基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.1g，194.29μmol)于二噁烷中的4.0M HCl(70.84mg，1.94mmol，88.55μL)中的溶液在25℃下搅拌2小时。2小时之后，在减压下浓缩反应混合物且通过反相HPLC(洗脱液：0-5min，65-85％，水-甲醇(0.1％ NH3)；流速：30mL/min；装载泵：4mL/min，甲醇(0.1％ NH3)；柱：YMC-Actus Triart C18 100*20mm，5um)纯化粗产物，以获得呈白色固体的外消旋-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(4-叔丁基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物145,42mg，101.31μmol，52.14％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)0.82(m,11H),0.94(m,6H),1.28(m,1H),1.62(m,2H),1.76(m,5H),1.85(m,2H),2.03(s,3H),2.84(m,1H),3.45(d,1H),4.04(m,1H),5.60(m,2H),7.47(m,1H),8.08(m,1H),10.26(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值414.4；实测值415.4；Rt＝3.779min。
步骤3：N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-叔丁基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯和N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-叔丁基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的手性分离
通过手性HPLC(洗脱液：己烷-IPA-MeOH，60-20-20；柱：IC，250*20mm，5um；流速：12mL/min)纯化外消旋-N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-叔丁基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(90mg，174.86μmol)，以得到呈白色固体的N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-叔丁基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(34mg，66.06μmol，37.78％产率)和N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-叔丁基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(26mg，50.52μmol，28.89％产率)。
N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-叔丁基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯：LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值514.4；实测值515.4；Rt＝7.292min。手性HPLC：Rt＝7.76min(洗脱液：CO2-MeOH，60-40；柱：IC；流速：2mL/min)。
N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-叔丁基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯：LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值514.4；实测值515.2；Rt＝7.368min；手性HPLC：Rt＝6.39min(洗脱液：CO2-MeOH，60-40；柱：IC；流速：2mL/min)。
步骤4：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(4-叔丁基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物260)的合成
向N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-叔丁基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(26mg，50.52μmol)于DCM(3mL)中的搅拌溶液中添加于二噁烷中的4.0M HCl(18.42mg，505.15μmol，23.02μL)。将所得反应混合物在25℃下搅拌2小时。2小时之后，在减压下浓缩反应混合物且通过反相HPLC(洗脱液：0-5min，65-100％，水-甲醇(0.1％ NH3)；流速：30mL/min；装载泵：4mL/min，甲醇；柱：YMC-ActusTriart C18 100*20mm，5um)纯化粗产物，以获得呈白色固体的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(4-叔丁基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物260,15mg，36.18μmol，71.62％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)0.65-0.78(m,2H),0.78-0.82(m,9H),0.82-0.91(m,3H),0.91-0.95(m,3H),0.95-1.04(m,1H),1.20-1.30(m,1H),1.52-1.63(m,2H),1.65-1.77(m,4H),1.78-1.97(m,3H),1.98-2.04(m,3H),2.78-3.27(m,1H),3.44-4.09(m,1H),5.53-5.66(m,2H),7.39-7.48(m,1H),7.95-8.02(m,1H),10.21-10.32(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值414.4；实测值415.4；Rt＝3.275min。
步骤5：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(4-叔丁基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物290)的合成
向N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-叔丁基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(34mg，66.06μmol)于DCM(3mL)中的搅拌溶液中添加于二噁烷中的4.0M HCl(24.09mg，660.58μmol，30.11μL)。将所得反应混合物在25℃下搅拌2小时。2小时之后，在减压下浓缩反应混合物且通过反相HPLC(洗脱液：0-5min，65-100％，水-甲醇(0.1％ NH3)；流速：30mL/min；装载泵：4mL/min，甲醇；柱：YMC-ActusTriart C18 100*20mm，5um)纯化粗产物，以获得呈白色固体的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(4-叔丁基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物290,15mg，36.18μmol，54.77％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)0.65-0.78(m,2H),0.78-0.82(m,9H),0.82-0.91(m,3H),0.91-0.95(m,3H),0.95-1.04(m,1H),1.20-1.30(m,1H),1.52-1.63(m,2H),1.65-1.77(m,4H),1.78-1.97(m,3H),1.98-2.04(m,3H),2.78-3.27(m,1H),3.44-4.09(m,1H),5.53-5.66(m,2H),7.39-7.48(m,1H),7.95-8.02(m,1H),10.21-10.32(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值414.4；实测值415.4；Rt＝3.926min。
实施例416.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5R)-2,5-二甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物158)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2,5-二甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物168)的合成
步骤1：N-[5-[[2-[(2R,5R)-2,5-二甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯和N-[5-[[2-[(2S,5R)-2,5-二甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
向2,5-二甲基哌啶(0.08g，706.71μmol)和2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(208.69mg，706.71μmol)于DMF(10mL)中的搅拌溶液中添加DIPEA(228.34mg，1.77mmol，307.74μL)。将所得混合物搅拌5分钟。5分钟之后，添加HATU(282.15mg，742.05μmol)于DMF(2mL)中的溶液。将反应混合物在室温下搅拌过夜。完成之后，在减压下浓缩所得悬浮液。使所获得的粗产物经历HPLC纯化(柱：Waters SunFire C1819*100mm，5um；洗脱液：40-60％ CH3CN)，以得到呈淡黄色固体的N-[5-[[2-[(2R,5R)-2,5-二甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(53.9mg，138.04μmol，19.53％产率)和N-[5-[[2-[(2S,5R)-2,5-二甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(16.6mg，42.51μmol，6.02％产率)。
N-[5-[[2-[(2R,5R)-2,5-二甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯：LCMS(ESI)：[M+Boc]+m/z：计算值390.3；实测值391.2；Rt＝3.340min。
N-[5-[[2-[(2S,5R)-2,5-二甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯：LCMS(ESI)：[M+Boc]+m/z：计算值390.3；实测值391.2；Rt＝3.389min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5R)-2,5-二甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物158)的合成
将N-[5-[[2-[(2R,5R)-2,5-二甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(53.9mg，138.04μmol)溶解于水(5mL)和二噁烷(5mL)中。将反应混合物在100℃下搅拌17小时。完成之后，在减压下浓缩所得悬浮液。使所获得的粗产物经历HPLC纯化，以得到呈淡黄色固体的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5R)-2,5-二甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物158，18.5mg，63.71μmol，46.16％产率)。
1H NMR(CDCl3,400MHz):δ(ppm)1.01(m,3H),1.23(m,4H),1.35(m,2H),1.95(m,4H),2.14(s,3H),3.35(m,1H),4.81(m,3H),7.73(m,1H),8.05(m,1H),9.01(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值290.2；实测值291.4；Rt＝2.008min。
步骤3：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2,5-二甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物168)的合成
将N-[5-[[2-[(2S,5R)-2,5-二甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(16mg，40.98μmol)溶解于水(5mL)和二噁烷(2mL)中。将反应混合物在100℃下搅拌17小时。完成之后，在减压下浓缩所得悬浮液。使所获得的粗产物经历HPLC纯化(洗脱液：2-10min，50-70％水-CH3CN(以甲酸为添加剂)；装载泵：4mL/min，CH3CN；柱：Sunfire C18 100x 20mm，5um)且冷冻干燥，以得到呈淡黄色固体的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2,5-二甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物168，3.5mg，12.05μmol，29.42％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值290.2；实测值291.2；Rt＝2.240min。
实施例417.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,4R)-4-氰基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物380)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,4S)-4-氰基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物399)的合成
步骤1：N-[5-[[2-[(2S,4R)-4-氰基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯和N-[5-[[2-[(2R,4S)-4-氰基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
向2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(0.3g，1.02mmol)和(2R,4S)-2-苯基哌啶-4-甲腈(226.27mg，1.02mmol，盐酸盐)于DMF(10mL)中的搅拌溶液中添加DIPEA(525.22mg，4.06mmol，707.84μL)。将所得反应混合物搅拌5分钟。5分钟之后，添加HATU(424.92mg，1.12mmol)。然后将所得反应混合物在室温下搅拌过夜。完成之后，在减压下浓缩所得悬浮液且通过反相HPLC纯化粗产物，以得到呈淡黄色固体的外消旋-N-[5-[[2-[(2S,4R)-4-氰基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.11g，237.31μmol，23.36％产率)。使所获得的纯产物经历手性HPLC纯化(柱：IB(250x 20，5um)；洗脱液：己烷-MeOH-IPA，70-15-15；流速：12mL/min)，以得到呈淡黄色固体的N-[5-[[2-[(2S,4R)-4-氰基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(36.1mg)和N-[5-[[2-[(2R,4S)-4-氰基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(36.8mg)。
N-[5-[[2-[(2S,4R)-4-氰基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯：LCMS(ESI)：[M+Boc]+m/z：计算值463.2；实测值464.4；Rt＝3.389min。
手性HPLC：Rt＝36.62min(柱：IB；洗脱液：己烷-MeOH-IPA，70-15-15；流速：0.6mL/min)。
N-[5-[[2-[(2R,4S)-4-氰基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯：LCMS(ESI)：[M+Boc]+m/z：计算值463.2；实测值464.4；Rt＝3.390min。
手性HPLC：Rt＝23.36min(柱：IB；洗脱液：己烷-MeOH-IPA，70-15-15；流速：0.6mL/min)。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,4S)-4-氰基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物399)的合成
将N-[5-[[2-[(2R,4S)-4-氰基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(36.8mg，79.39μmol)溶解于二噁烷(2mL)和水(5mL)中。将所得反应混合物在100℃下搅拌15小时。完成之后，在减压下浓缩所得悬浮液。通过HPLC纯化所获得的粗产物，以得到呈白色固体的纯的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,4S)-4-氰基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物399，16.9mg，46.50μmol，58.58％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.82-1.87(m,1H),1.93-1.97(m,1H),1.97-2.04(m,3H),2.16-2.23(m,1H),2.60-3.06(m,1H),3.18-3.24(m,1H),3.36-3.47(m,1H),3.79-4.50(m,1H),5.29-5.53(m,1H),5.54-5.69(m,2H),7.21-7.28(m,1H),7.30-7.36(m,4H),7.36-7.54(m,1H),7.84-8.11(m,1H),10.34-10.62(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值363.2；实测值364.2；Rt＝2.235min。
步骤3：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,4R)-4-氰基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物380)的合成
将N-[5-[[2-[(2S,4R)-4-氰基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(36.1mg，77.88μmol)溶解于水(5mL)和二噁烷(2mL)中。然后将反应混合物在100℃下搅拌15小时。完成之后，在减压下浓缩所得悬浮液。通过HPLC纯化所获得的粗产物，以得到呈白色固体的纯的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,4R)-4-氰基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物380，18.8mg，51.73μmol，66.42％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.82-1.87(m,1H),1.95-2.03(m,4H),2.15-2.25(m,1H),2.64-3.05(m,1H),3.18-3.24(m,1H),3.35-3.45(m,1H),3.81-4.44(m,1H),5.31-5.54(m,1H),5.55-5.67(m,2H),7.18-7.27(m,1H),7.31-7.53(m,5H),7.83-8.10(m,1H),10.32-10.63(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值363.2；实测值364.2；Rt＝2.262min。
实施例418.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[(1S,3R)-3-羟基环己基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物566)、N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[(1R,3S)-3-羟基环己基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物567)、N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[(1R,3R)-3-羟基环己基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物568)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[(1S,3S)-3-羟基环己基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物559)的合成
步骤1：N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-[(1S,3S)-3-羟基环己基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯、N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-[(1R,3R)-3-羟基环己基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯、N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-[(1R,3S)-3-羟基环己基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯和N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-[(1S,3R)-3-羟基环己基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将3-(5-甲基-2-哌啶基)环己醇(550mg，2.79mmol)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(823.09mg，2.79mmol)和三乙胺(2.82g，27.87mmol，3.89mL)于DMF(20mL)中的混合物在25℃下搅拌0.25h，然后在0.5h内小批量添加HATU(1.06g，2.79mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌2h，然后在真空中浓缩至5ml且提交至反相HPLC(柱：SunFireC18 100x19 mm 5um，流动相：50-50-80％0-1-6min水-甲醇，流速：30ml/min)，得到呈无色胶状物的产物的两种级分：259mg(第1级分)和337mg(第2级分)。然后将HPLC之后的第1级分(259mg)提交至制备型手性HPLC(柱：IC-II(250*20，5mkm)，流动相：己烷-IPA-MeOH,70-15-15，流速：12ml/min)，以得到呈无色胶状物的N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-[(1S,3S)-3-羟基环己基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(89mg，187.53μmol，6.73％产率)(R.T.＝30.039min)和N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-[(1R,3R)-3-羟基环己基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(70mg，147.50μmol，5.29％产率)(R.T.＝34.388min)，其含有痕量溶剂。将HPLC之后的第2级分(337mg)提交至制备型手性HPLC(柱：IC-II(250*20，5mkm)，流动相：己烷-IPA-MeOH,70-15-15，流速：12ml/min)，以得到呈无色胶状物的N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-[(1R,3S)-3-羟基环己基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(119mg，250.74μmol，9.00％产率)(R.T.＝38.496min)和N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-[(1S,3R)-3-羟基环己基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(83mg，174.89μmol，6.27％产率)(R.T.＝47.540min)，其含有痕量溶剂。所有产物均直接用于后续步骤中。
第1级分：RT(IC，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝15.559min。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值474.2；实测值475.2；Rt＝4.558min。
第2级分：RT(IC，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝17.928min。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值474.2；实测值475.2；Rt＝4.558min。
第3级分：RT(IC，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝20.008min。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值474.2；实测值475.2；Rt＝4.896min。
第4级分：RT(IC，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝23.341min。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值474.2；实测值475.2；Rt＝4.894min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[(1S,3S)-3-羟基环己基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物559)的合成
将N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-[(1S,3S)-3-羟基环己基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(89mg，187.53μmol)溶解于1,4-二噁烷(2mL)和水(2.5mL)的混合物中。将所得溶液在95℃下搅拌12h，然后冷却且提交至反相HPLC(柱：YMC-Actus Triart C18 100*20mml.D.S-5um，流动相：30-45％1-6min水-甲醇(NH30.1％)，流速：30ml/min)，以得到呈白色固体的化合物559N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[(1S,3S)-3-羟基环己基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(51.7mg，138.06μmol，73.62％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.57-0.67(m,1H),0.73-0.89(m,1H),0.91-0.95(m,3H),0.95-1.05(m,1H),1.11-1.19(m,1H),1.21-1.30(m,1H),1.42-1.51(m,1H),1.52-1.62(m,2H),1.62-1.68(m,1H),1.74-1.96(m,6H),1.99-2.05(m,3H),2.78-3.24(m,1H),3.37-3.52(m,1H),3.93-4.14(m,1H),4.44-4.55(m,1H),5.54-5.62(m,2H),7.39-7.47(m,1H),7.94-8.03(m,1H),10.23-10.32(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值374.2；实测值375.2；Rt＝1.588min。
步骤3：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[(1R,3R)-3-羟基环己基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物568)的合成
将N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-[(1R,3R)-3-羟基环己基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(70mg，147.50μmol)溶解于1,4-二噁烷(2mL)和水(2.5mL)的混合物中。将所得溶液在95℃下搅拌12h，然后冷却且提交至反相HPLC(柱：YMC-Actus Triart C18 100*20mml.D.S-5um，流动相：35-60％1-6min水-甲醇(NH30.1％)，流速：30ml/min)，以得到呈白色固体的化合物568N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[(1R,3R)-3-羟基环己基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(33mg，88.12μmol，59.75％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.54-0.78(m,2H),0.89-0.94(m,3H),0.95-1.04(m,1H),1.11-1.20(m,1H),1.21-1.30(m,1H),1.39-1.51(m,1H),1.51-1.63(m,2H),1.63-1.70(m,1H),1.71-1.99(m,6H),1.99-2.05(m,3H),2.78-3.25(m,1H),3.37-3.51(m,1H),3.94-4.14(m,1H),4.45-4.56(m,1H),5.55-5.61(m,2H),7.40-7.49(m,1H),7.97(s,1H),10.17-10.35(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值374.2；实测值375.2；Rt＝1.717min。
步骤4：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[(1R,3S)-3-羟基环己基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物567)的合成
将N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-[(1R,3S)-3-羟基环己基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(119mg，250.74μmol)溶解于1,4-二噁烷(2mL)和水(2.5mL)的混合物中。将所得溶液在95℃下搅拌12h，然后冷却且提交至反相HPLC(柱：YMC-Actus Triart C18 100*20mml.D.S-5um，流动相：40-60％1-6min水-甲醇(NH30.1％)，流速：30ml/min)，以得到呈白色固体的化合物567N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[(1R,3S)-3-羟基环己基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(59mg，157.55μmol，62.83％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.54-0.78(m,2H),0.87-1.04(m,4H),1.15-1.29(m,2H),1.54-1.62(m,2H),1.62-1.72(m,2H),1.72-1.83(m,3H),1.84-1.98(m,2H),1.99-2.04(m,3H),2.79-3.28(m,1H),3.36-3.57(m,1H),3.92-4.16(m,1H),4.38-4.50(m,1H),5.55-5.63(m,2H),7.38-7.51(m,1H),7.92-8.02(m,1H),10.20-10.38(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值374.2；实测值375.2；Rt＝1.929min。
步骤5：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[(1S,3R)-3-羟基环己基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物566)的合成
将N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-[(1S,3R)-3-羟基环己基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(83mg，174.89μmol)溶解于1,4-二噁烷(2mL)和水(2.5mL)的混合物中。将所得溶液在95℃下搅拌12h，然后冷却且提交至反相HPLC(柱：YMC-Actus Triart C18 100*20mml.D.S-5um，流动相：40-60％1-6min水-甲醇(NH30.1％)，流速：30ml/min)，以得到呈白色固体的化合物566N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[(1S,3R)-3-羟基环己基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(52mg，138.86μmol，79.40％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.52-0.79(m,2H),0.90-0.95(m,3H),0.95-1.03(m,1H),1.14-1.29(m,2H),1.54-1.62(m,2H),1.62-1.71(m,2H),1.71-1.83(m,3H),1.83-1.98(m,2H),1.99-2.05(m,3H),2.79-3.27(m,1H),3.36-3.57(m,1H),3.94-4.14(m,1H),4.39-4.49(m,1H),5.54-5.62(m,2H),7.42-7.50(m,1H),7.96-8.02(m,1H),10.16-10.36(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值374.2；实测值375.2；Rt＝1.940min。
实施例419.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(2-甲氧基-4-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物545)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(2-甲氧基-4-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物538)的合成
步骤1：N-[5-[[2-[2-(2-甲氧基-4-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将DIPEA(525.22mg，4.06mmol，707.84μL)添加到相应2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(0.4g，1.35mmol)和2-甲氧基-4-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶(279.43mg，1.35mmol)于DMF(10mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU溶液(566.56mg，1.49mmol)。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC，以得到N-[5-[[2-[2-(2-甲氧基-4-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.34g，703.12μmol，51.91％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值483.3；实测值484.4；Rt＝3.696min。
步骤2：N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(2-甲氧基-4-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(P1)和N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(2-甲氧基-4-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(P2)的合成
使用(IC(100*20，5mkm)Chiralpak柱，以IPA-MeOH，50-50为流动相，流速10mL/min)对N-[5-[[2-[2-(2-甲氧基-4-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(330.0mg，682.44μmol)进行手性分离，得到P1 N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(2-甲氧基-4-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(79.26mg，24.02％产率)和P2 N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(2-甲氧基-4-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(119.89mg，36.33％产率)。
P1：LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值483.6；实测值484.6；Rt＝5.139min。
RT(IC，IPA-MeOH，50-50，0.6mL/min)＝56.1162min。
P2：LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值483.6；实测值484.6；Rt＝5.140min。
RT(IC，IPA-MeOH，50-50，0.6mL/min)＝14.6942min。
步骤3：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(2-甲氧基-4-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物545)的合成
将N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(2-甲氧基-4-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(119.89mg，247.93μmol)溶解于二噁烷(2mL)和水(5mL)的混合物中。然后，将反应混合物在100℃下搅拌16h。在反应完成(通过LCMS监测)之后，在减压下浓缩所得悬浮液。使所获得的固体经历HPLC，以得到纯的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(2-甲氧基-4-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(67.7mg，176.56μmol，71.21％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.89-1.05(m,3H),1.25-1.36(m,1H),1.44-1.65(m,1H),1.79-1.91(m,1H),1.97-2.02(m,3H),2.10-2.20(m,1H),2.49-2.49(m,1H),2.68-3.23(m,1H),3.40-4.06(m,4H),5.06-5.51(m,1H),5.54-5.70(m,2H),6.63-6.76(m,1H),6.88-6.99(m,1H),7.39-7.53(m,1H),7.92-8.04(m,1H),8.11-8.21(m,1H),10.44-10.61(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值383.2；实测值384.2；Rt＝1.929min。
步骤4：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(2-甲氧基-4-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物538)的合成
将N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(2-甲氧基-4-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(79.26mg，163.91μmol)溶解于二噁烷(2mL)和水(5mL)的混合物中。然后，将反应混合物在100℃下搅拌16h。在反应完成(通过LCMS监测)之后，在减压下浓缩所得悬浮液。使所获得的固体经历HPLC，以得到纯的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(2-甲氧基-4-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(43.7mg，113.97μmol，69.53％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.88-1.03(m,3H),1.25-1.38(m,1H),1.49-1.62(m,1H),1.78-1.91(m,1H),1.91-2.13(m,4H),2.13-2.22(m,1H),2.67-3.23(m,1H),3.40-4.10(m,4H),5.02-5.52(m,1H),5.54-5.73(m,2H),6.63-6.74(m,1H),6.86-6.97(m,1H),7.39-7.51(m,1H),7.93-8.04(m,1H),8.09-8.20(m,1H),10.46-10.57(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值383.2；实测值384.2；Rt＝1.933m
实施例420.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物777)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5R)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物786)的合成
步骤1：外消旋-(5-(2-((2R,5R)-2-(3,4-二氟苯基)-4,4-二氟-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-3-甲基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
将(2R,5R)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶(0.6g，2.62mmol)、TEA(2.65g，26.17mmol，3.65mL)和2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(772.88mg，2.62mmol)溶解于DMF(26mL)中且一次性添加HATU(1.49g，3.93mmol)，将所得混合物在20℃下搅拌3h。将反应混合物倒入到水中且将水相用EA萃取(3次)，然后将合并的有机相用盐水洗涤(3次)，经Na2SO4干燥且在真空上浓缩。通过反相HPLC(45-60％2-10min；水-乙腈；30ml/min；装载泵4ml/min乙腈，柱SunFire 19*100mm)纯化粗产物。所述反应为成功的。分离呈棕色固体的所需产物(N-[5-[[2-[(2R,5R)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.23g，454.08μmol，17.35％产率))。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值506.2；实测值507.2；Rt＝1.471min。
步骤2：N-[5-[[2-[(2R,5R)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯和N-[5-[[2-[(2S,5S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的手性拆分
使用(柱：Chiralpak IC-II(250*20，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH，60-20-20，流速：12mL/min；柱温：24℃；波长：205nm，258nm，290nm)，以得到N-[5-[[2-[(2R,5R)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.097g，191.50μmol，42.17％产率)(保留时间为11.162min)和N-[5-[[2-[(2S,5S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.089g，175.71μmol，38.70％产率)(保留时间为15.271min)。
步骤3：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物777)的合成
将N-[5-[[2-[(2S,5S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.089g，175.71μmol)溶解于二噁烷(3mL)和水(3mL)的混合物中，然后在100℃下搅拌12h。在真空下浓缩反应混合物。
通过HPLC(10-65％2-10min；水/MeCN+TFA；30ml/min；装载泵4ml/min MeCN；柱SunFire 19*100mm)纯化粗产物。获得呈淡黄色固体的所需产物(N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.04g，98.42μmol，56.02％产率))。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.07(d,3H),1.96-2.05(m,3H),2.12-2.26(m,1H),2.37-2.46(m,1H),2.80-2.89(m,1H),2.95-3.01(m,0H),3.38-3.48(m,1H),3.73-4.36(m,1H),5.49-5.63(m,1H),5.63-5.86(m,2H),7.13-7.28(m,2H),7.33-7.41(m,2H),7.41-7.55(m,1H),7.91-8.11(m,1H),10.46-10.68(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值406.2；实测值407.2；Rt＝2.740min。
步骤4：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5R)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物786)的合成
将N-[5-[[2-[(2R,5R)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.097g，191.50μmol)溶解于二噁烷(3mL)和水(3mL)的混合物中，然后在100℃下搅拌12h。在真空下浓缩反应混合物。
通过HPLC(10-65％2-10min；水/MeCN+TFA；30ml/min；装载泵4ml/min MeCN；柱SunFire 19*100mm)纯化粗产物。获得呈淡黄色固体的所需产物(N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5R)-4,4-二氟-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.046g，113.19μmol，59.11％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.07(d,3H),1.96-2.05(m,3H),2.12-2.26(m,1H),2.37-2.46(m,1H),2.80-2.89(m,1H),2.95-3.01(m,0H),3.38-3.48(m,1H),3.73-4.36(m,1H),5.49-5.63(m,1H),5.63-5.86(m,2H),7.13-7.28(m,2H),7.33-7.41(m,2H),7.41-7.55(m,1H),7.91-8.11(m,1H),10.46-10.68(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值406.2；实测值407.2；Rt＝2.740min。
实施例421.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(3,5-二氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物681)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(3,5-二氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物660)的合成
步骤1.N-[5-[[2-[2-(3,5-二氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
向2-[2-(3,5-二氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酸甲酯(0.88g，2.67mmol)于MeOH(10mL)中的溶液中添加羟基钠(106.59mg，2.67mmol，50.04μL)且将所得混合物搅拌1h。然后，蒸发溶剂且将残余物与EtOH一起再蒸发。此后，将固体溶解于DMF中且添加HATU(1.01g，2.67mmol)，随后添加N-(5-氨基-3-甲基-2-吡啶基)氨基甲酸叔丁酯(595.02mg，2.67mmol)且将所得混合物搅拌12h。将所得混合物倒入到水中，用EtOAc萃取3次，将合并的有机物用水、盐水洗涤且蒸发。使残余物经历HPLC(60-85％2-7min水-乙腈；流速30ml/min(装载泵4ml/min；乙腈)；柱SunFireC18 100x19mm 5um(R))。获得呈灰白色固体的N-[5-[[2-[2-(3,5-二氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(920mg，1.76mmol，66.20％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ1.09(m,3H),1.44(m,1H),1.51(s,9H),1.91-2.18(m,4H),2.34(m,3H),2.97-3.38(m,1H),4.26-4.86(m,1H),5.59-6.42(m,1H),6.91(m,1H),7.16(m,2H),7.26(m,1H),8.08(m,1H),8.39(m,1H),9.47(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值521.2；实测值522.2；Rt＝4.140min。
步骤2.N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(3,5-二氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯和N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(3,5-二氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的分离
手性拆分第一次：分离P1与顺式1杂质和P2(未与顺式2杂质分离)(IC-II(250*20，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，80-10-10，12ml/min)，第二次：分离P2与顺式2杂质(AD-H(250*20，5mkm)，己烷-EtOH，80-20，12ml/min)，P1的RT＝31.454min(IC，己烷-IPA-MeOH，80-10-10，0.6ml/min)，P2的RT＝44.868min(IC，己烷-IPA-MeOH，80-10-10，0.6ml/min)。
步骤3.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(3,5-二氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物681)的合成
在21℃下，向N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(3,5-二氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(271.36mg，520.41μmol)于二噁烷(3mL)中的溶液中添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(94.87mg，2.60mmol，118.59μL)。使将所得混合物搅拌8h。将所得混合物蒸发至干且经历HPLC(50％0.5-6min水-乙腈+NH3；流速30ml/min(装载泵4ml/min；乙腈)；柱Tiart 100x19 mm5um(R))。获得呈灰白色固体的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(3,5-二氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(152.5mg，361.96μmol，69.55％产率)。旋光能力：+136.15°(C＝0.2g/100mL；21℃)。RT＝36.109min(IC，己烷-IPA-MeOH，80-10-10，0.6ml/min)。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)0.99(m,3H),1.30(m,1H),1.60(m,1H),1.87(m,1H),2.01(m,4H),2.16(m,1H),2.90(m,1H),3.73(m,1H),5.30(m,1H),5.61(m,2H),7.33(m,2H),7.47(m,2H),7.97(m,1H),10.55(m,1H)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值420.2；实测值421.2；Rt＝2.679min。
步骤4.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(3,5-二氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物660)的合成
在21℃下，向N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(3,5-二氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(297.59mg，570.71μmol)于二噁烷(3mL)中的溶液中添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(104.04mg，2.85mmol，130.05μL)。使将所得混合物搅拌8h。将所得混合物蒸发至干且经历HPLC(50％0.5-6min水-乙腈+NH3；流速30ml/min(装载泵4ml/min；乙腈)；柱Tiart 100x19 mm5um(R))。获得呈灰白色固体的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(3,5-二氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(176.9mg，419.87μmol，73.57％产率)。
旋光能力：-139.95°(C＝0.2g/100mL；21℃)
RT＝30.522min(IC，己烷-IPA-MeOH，80-10-10，0.6ml/min)
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)0.99(m,3H),1.30(m,1H),1.60(m,1H),1.87(m,1H),2.01(m,4H),2.16(m,1H),2.90(m,1H),3.73(m,1H),5.30(m,1H),5.61(m,2H),7.33(m,2H),7.47(m,2H),7.97(m,1H),10.55(m,1H)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值420.2；实测值421.2；Rt＝2.679min。
实施例422.外消旋N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-(6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物758)、rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1002)和rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1000)的合成
步骤1：(5-(2-(2-(异喹啉-6-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-3-甲基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
将6-(5-甲基-2-哌啶基)异喹啉(0.32g，1.41mmol)溶解于DMF(5mL)中且添加三乙胺(1.43g，14.14mmol，1.97mL)，随后添加2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(417.53mg，1.41mmol)。然后逐滴添加HATU(806.44mg，2.12mmol)且将反应混合物搅拌过夜。次日，将其在真空中蒸发且通过HPLC纯化
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值503.2；实测值504.4；Rt＝1.137min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-(6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物758)的合成
将N-[5-[[2-[2-(6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.142g，281.97μmol)溶解于二噁烷(1.5mL)和水(1.5mL)中且在100℃下搅拌过夜。次日，将其在真空中蒸发且通过HPLC纯化，以获得N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-(6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.0264g，65.43μmol，23.20％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.00-1.04(m,3H),1.31-1.47(m,1H),1.66-1.85(m,2H),1.86-1.97(m,2H),1.98-2.09(m,3H),2.09-2.21(m,1H),2.21-2.34(m,1H),2.77-3.27(m,1H),3.48-4.09(m,2H),5.31-5.75(m,1H),5.84-6.16(m,1H),7.57-7.69(m,1H),7.77-7.85(m,1H),7.87-8.04(m,1H),8.10-8.15(m,1H),8.43-8.53(m,1H),9.24-9.31(m,1H),10.56-10.67(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值403.2；实测值405.2；Rt＝0.834min。
步骤3：rel-N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯和rel-N-(5-{2-[(2R,5S)-2-(异喹啉-6-基)-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}-3-甲基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
对N-[5-[[2-[2-(6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.14g，278.00μmol)进行手性分离(柱：Chiralpak IA-II(250*20mm，5mkm)柱且以己烷-IPA-MeOH，60-20-20为流动相，流速：12mL/min；柱温：24℃；波长：205nm，220nm，258nm)，以获得异构体B N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(55.74mg，110.69μmol，39.81％产率；保留时间＝38.79min)和异构体A rel-N-(5-{2-[(2R,5S)-2-(异喹啉-6-基)-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}-3-甲基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.06222g，123.55μmol，44.44％产率；保留时间＝28.38min)
异构体B：RT(IA，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.6mL/min)＝34.111min。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值503.2；实测值505.2；Rt＝2.360min。
异构体A：RT(IA，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.6mL/min)＝26.066min。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值503.2；实测值504.2；Rt＝2.358min。
步骤4：rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1000)的合成
将N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.06222g，123.55μmol)溶解于二噁烷(1mL)和H2O(1mL)中且在100℃下搅拌过夜。次日，将其在真空中蒸发且通过HPLC纯化，以获得N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.0108g，26.77μmol，21.66％产率)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值403.2；实测值405.2；Rt＝0.774min。
步骤5：rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1002)的合成
将N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(55.74mg，110.68μmol)溶解于二噁烷(1mL)和H2O(1mL)中且在100℃下搅拌过夜。次日，将其在真空中蒸发且通过HPLC纯化，以获得N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.0115g，28.50μmol，25.75％产率)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值403.2；实测值405.2；Rt＝0.775min。
实施例423.rel-N-[3-乙基-5-[[2-[(2S,5R)-2-(6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸酯(化合物919)和rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物929)的合成
步骤1：N-[3-乙基-5-[[2-[2-(6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将6-(5-甲基-2-哌啶基)异喹啉(0.5g，2.21mmol)溶解于DMF(10mL)中且添加三乙胺(2.24g，22.09mmol，3.08mL)，随后添加2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-乙基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(683.37mg，2.21mmol)。然后逐滴添加HATU(1.26g，3.31mmol)且将反应混合物搅拌过夜。次日，将其在真空中蒸发且通过HPLC纯化，以获得N-[3-乙基-5-[[2-[2-(6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.13g，251.15μmol，11.37％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值517.2；实测值518.2；Rt＝0.971min。
步骤2：rel-N-[3-乙基-5-[[2-[(2S,5R)-2-(6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯和rel-N-[3-乙基-5-[[2-[(2R,5S)-2-(6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
对N-[3-乙基-5-[[2-[2-(6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.13g，251.15μmol)进行手性分离(柱：Chiralpak AD-H(250*20mm，5m)；流动相：己烷-IPA-MeOH，70-15-15；流速：12mL/min；柱温：24℃；波长：210nm，225nm，254nm，以获得N-[3-乙基-5-[[2-[(2S,5R)-2-(6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.04g，77.28μmol，30.77％产率；保留时间＝22.46min；异构体A)和N-[3-乙基-5-[[2-[(2R,5S)-2-(6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.0497g，96.02μmol，38.23％产率；保留时间＝26.31min；异构体B)。
异构体A：RT(AD-H，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.6mL/min)＝19.622min。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值517.2；实测值519.2；Rt＝1.167min。
异构体B：RT(AD-H，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.6mL/min)＝27.358min。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值517.2；实测值519.2；Rt＝1.166min。
步骤3：rel-N-[3-乙基-5-[[2-[(2S,5R)-2-(6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸酯(化合物919)的合成
将N-[3-乙基-5-[[2-[(2S,5R)-2-(6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.04g，77.28μmol)溶解于H2O(1mL)和二噁烷(1mL)中且在100℃下搅拌过夜。次日，将其在真空中蒸发且通过HPLC纯化，以获得rel-N-[3-乙基-5-[[2-[(2S,5R)-2-(6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸酯(0.0214g，51.26μmol，66.33％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.07(m,6H),1.37(m,1H),1.71(m,1H),1.89(m,1H),2.38(m,4H),3.03(m,1H),3.80(m,1H),5.67(m,3H),7.45(m,1H),7.64(m,1H),7.81(m,1H),8.01(m,3H),8.48(m,1H),9.27(m,1H),10.55(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值417.2；实测值418.2；Rt＝1.528min。
步骤4：rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物929)的合成
将N-[3-乙基-5-[[2-[(2R,5S)-2-(6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.0497g，96.02μmol)溶解于H2O(1mL)和二噁烷(1mL)中且在100℃下搅拌过夜。次日，将其在真空中蒸发且通过HPLC纯化，以获得rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(6-异喹啉基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.0249g，59.64μmol，62.11％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.07(m,6H),1.37(m,1H),1.72(m,1H),1.87(m,1H),2.14(m,1H),2.36(m,3H),2.95(m,1H),3.80(m,1H),5.65(m,3H),7.45(m,1H),7.64(dd,1H),7.81(m,1H),7.90(m,1H),8.03(m,1H),8.12(m,1H),8.48(m,1H),9.27(m,1H),10.54(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值417.2；实测值418.2；Rt＝1.502min。
实施例424.rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物707)和rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物687)的合成
步骤1：N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将DIPEA(547.10mg，4.23mmol，737.33μL)添加到相应2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(0.5g，1.69mmol)和2-甲基-5-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶(322.20mg，1.69mmol)于DMF(10mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU(708.20mg，1.86mmol)。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC(Waters Sunfire C1820*100 5mkm柱且以MeOH为洗脱液混合物)，以得到N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(329.8mg，705.37μmol，41.66％产率)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值467.2；实测值469.2；Rt＝2.087min。
步骤2：rel-N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(P1)和rel-N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(P2)的合成
使用(Chiralpak IC-II(250*30mm，5mkm)柱且以己烷-IPA-MeOH，60-20-20为流动相，流速12mL/min)对N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(329.8mg，705.37μmol)进行手性分离，得到呈米色固体的rel-N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(119.4mg，36.20％产率；P1)和也呈米色固体的rel-N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(110.77mg，33.59％产率；P2)。
P1：RT(Chiralpak IC(250*4.6，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.6mL/min)＝60.357min。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值467.2；实测值468.2；Rt＝2.151min。
P2：RT(Chiralpak IC(250*4.6，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.6mL/min)＝48.066min。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值467.2；实测值468.2；Rt＝2.168min。
步骤3：rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物707)的合成
将N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]-氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(119.14mg，254.81μmol)溶解于二噁烷(2mL)和水(5mL)的混合物中。然后，将反应混合物在100℃下搅拌16h。在反应完成(通过LCMS监测)之后，在减压下浓缩所得悬浮液。使所获得的固体经历HPLC(Waters Sunfire C18 20*100 5mkm柱且以MeCN+NH3为洗脱液混合物)，以得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(74.4mg，202.48μmol，79.46％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.00(m,3H),1.33(m,1H),1.65(m,1H),1.86(m,1H),2.00(m,4H),2.10(m,1H),2.19(m,1H),2.43(m,3H),3.03(m,1H),3.71(dd,1H),5.59(m,3H),7.24(m,1H),7.45(d,1H),7.59(dd,1H),7.97(m,1H),8.39(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值367.2；实测值369.2；Rt＝1.071min。
步骤4：rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物687)的合成
将N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]-氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(110.77mg，236.91μmol)溶解于二噁烷(2mL)和水(5mL)的混合物中。然后，将反应混合物在100℃下搅拌16h。在反应完成(通过LCMS监测)之后，在减压下浓缩所得悬浮液。使所获得的固体经历HPLC(Waters Sunfire C18 20*100 5mkm柱且以MeCN+NH3为洗脱液混合物)，以得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(58.1mg，158.12μmol，66.74％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)0.98(m,3H),1.32(m,1H),1.63(m,1H),1.86(m,1H),2.00(m,4H),2.19(m,1H),2.43(m,3H),2.94(m,1H),3.71(dd,1H),5.59(m,3H),7.25(m,1H),7.45(m,1H),7.59(m,1H),7.97(m,1H),8.39(m,1H),10.49(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值367.2；实测值369.4；Rt＝1.073min。
实施例425.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(1-氧代异吲哚啉-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物591和化合物581)的合成
步骤1：外消旋-(3-甲基-5-(2-((2R,5S)-5-甲基-2-(1-氧代异吲哚啉-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
将N-[3-甲基-5-(草酰胺酰基氨基)-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(511.16mg，1.74mmol)和TEA(1.76g，17.37mmol，2.42mL)溶解于DMF(12mL)中且冷却至0℃，添加HATU(990.59mg，2.61mmol)且在0℃下将混合物搅拌15min。添加5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]异吲哚啉-1-酮(0.4g，1.74mmol)且将混合物升温至室温且搅拌3h。添加10ml乙酸乙酯且将有机相用盐水洗涤三次。将有机相经Na2SO4干燥，过滤且在45℃下在真空中浓缩，以得到粗产物，其通过HPLC(90％水-MeOH，2-10min，流速：30ml/min(装载泵4ml/min MeOH)柱：TSunFire 100*19mm，5微米)进行纯化，以得到N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1-氧代异吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.28g，551.64μmol，31.76％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值507.2；实测值508.2；Rt＝1.254min。
步骤2：手性分离
使用(柱：Chiralpak IС-I(250*20mm，5mkm)；流动相：IPA-MeOH 50-50流速：10mL/min)进行手性分离，以得到N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1-氧代异吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.068g，133.97μmol，24.29％产率)和N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1-氧代异吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.089g，175.34μmol，31.79％产率)。
E1于分析条件下(柱：IC，以IPA-MeOH，50-50，0.6ml/min为流动相)的保留时间为46.83min且E2的保留时间为22.80min。
E1：保留时间：46.83min
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值507.2；实测值508.2；Rt＝2.851min。
E2：保留时间：22.80min
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值507.2；实测值508.2；Rt＝2.856min。
步骤3：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(1-氧代异吲哚啉-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物581和化合物591)的合成
将N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1-氧代异吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.068g，133.97μmol)和N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1-氧代异吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.089g，175.34μmol)溶解于二噁烷(2mL)和水(2mL)的混合物中，然后在100℃下搅拌12h。在真空、55℃下浓缩反应混合物，以得到粗产物，其通过HPLC(0-60％MeCN-水，2-10min，流速30ml/min(装载泵4ml/min MeCN)，柱：SUNFIRE 100*19mm)进行纯化，以得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1-氧代异吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.03g，73.63μmol，54.96％产率)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1-氧代异吲哚啉-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.034g，83.44μmol，47.59％产率)。
化合物581：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99-1.03(m,3H),1.27-1.36(m,1H),1.61-1.69(m,1H),1.82-1.90(m,1H),1.96-2.03(m,3H),2.05-2.15(m,1H),2.19-2.27(m,1H),2.76-3.24(m,1H),3.33-4.06(m,1H),4.32-4.39(m,2H),5.18-5.60(m,1H),5.60-5.65(m,2H),7.38-7.46(m,1H),7.46-7.56(m,2H),7.61-7.70(m,1H),7.90-8.04(m,1H),8.50(s,1H),10.41-10.54(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值407.2；实测值408.2；Rt＝1.669min。
化合物591：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.97-1.04(m,3H),1.27-1.40(m,1H),1.57-1.73(m,1H),1.77-1.94(m,1H),1.94-2.14(m,4H),2.14-2.31(m,1H),2.74-3.26(m,1H),3.47-4.04(m,1H),4.32-4.38(m,2H),5.19-5.59(m,1H),5.60-5.67(m,2H),7.34-7.54(m,3H),7.61-7.71(m,1H),7.87-8.09(m,1H),8.43-8.53(m,1H),10.40-10.53(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值407.2；实测值408.2；Rt＝0.921min。
实施例426.乙酸4-(1-(2-((6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)氨基)-2-氧代乙酰基)-5-甲基哌啶-2-基)苯酯(化合物1087和化合物597)的合成
步骤1：乙酸外消旋-4-((2R,5S)-1-(2-((6-((叔丁氧基羰基)氨基)-5-甲基吡啶-3-基)氨基)-2-氧代乙酰基)-5-甲基哌啶-2-基)苯酯的合成
将N-[3-甲基-5-(草酰胺酰基氨基)-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(446.56mg，1.52mmol)和TEA(1.54g，15.17mmol，2.11mL)溶解于DMF(10mL)中且冷却至0℃，添加HATU(865.40mg，2.28mmol)且在0℃下将混合物搅拌15min。添加乙酸[4-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]苯]酯(0.354g，1.52mmol)且将混合物升温至室温且搅拌3h。添加10ml EtOAc且将有机相用盐水洗涤三次。将有机相经Na2SO4干燥，过滤且在45℃下在真空中浓缩，以得到粗产物，其通过HPLC(55-80％水/MeOH，2-10min，(装载泵4ml MeOH)，柱：TRIART 100*20)进行纯化，以得到乙酸[4-[(2S,5R)-1-[2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酰基]-5-甲基-2-哌啶基]苯]酯(0.177g，346.66μmol，22.85％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值510.2；实测值511.2；Rt＝1.238min。
步骤2：手性分离使用(柱：Chiralpak OJ-H-I(250*20，5mkm)；流动相：己烷-MeOH-IPA，60-20-20，流速：12mL/min)进行手性分离，以得到乙酸[4-[(2S,5R)-1-[2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酰基]-5-甲基-2-哌啶基]苯]酯(0.048g，94.01μmol，27.12％产率)和乙酸[4-[(2R,5S)-1-[2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酰基]-5-甲基-2-哌啶基]苯]酯(0.047g，92.05μmol，26.55％产率)。
E1于分析条件下(柱：OJ-H，以己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.6ml/min为流动相)的保留时间为14.46min且E2的保留时间为32.46min。
E1：保留时间：14.46min
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值510.2；实测值511.2；Rt＝3.486min。
E2：保留时间：32.46min
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值510.2；实测值511.2；Rt＝3.488min。
步骤3：乙酸4-(1-(2-((6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)氨基)-2-氧代乙酰基)-5-甲基哌啶-2-基)苯酯(化合物1087和化合物597)的合成
将乙酸[4-[(2S,5R)-1-[2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酰基]-5-甲基-2-哌啶基]苯]酯(0.048g，94.01μmol)和乙酸[4-[(2R,5S)-1-[2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酰基]-5-甲基-2-哌啶基]苯]酯(0.047g，92.05μmol)溶解于二噁烷(2mL)和水(2mL)的混合物中，然后在100℃下搅拌12h。在真空、55℃下浓缩反应混合物，以得到粗产物，其通过HPLC(50-60％MeCN-水，2-10min，流速30ml/min(装载泵4ml/min MeCN)，柱：SUNFIRE 100*19mm)进行纯化，以得到粗产物：乙酸[4-[(2S,5R)-1-[2-[(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酰基]-5-甲基-2-哌啶基]苯]酯(0.009g，粗品)和乙酸[4-[(2R,5S)-1-[2-[(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酰基]-5-甲基-2-哌啶基]苯]酯(0.014g，34.11μmol，37.05％产率)。
化合物1087：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98-1.03(m,3H),1.28-1.38(m,1H),1.62-1.71(m,1H),1.82-1.93(m,1H),1.96-2.05(m,4H),2.10-2.20(m,1H),2.23-2.26(m,3H),2.67-3.22(m,1H),3.42-4.04(m,1H),5.11-5.57(m,1H),5.57-5.69(m,2H),7.10-7.14(m,2H),7.30-7.39(m,2H),7.43-7.50(m,1H),7.92-8.03(m,1H),10.42-10.55(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值410.2；实测值411.2；Rt＝1.104min。
化合物597：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98-1.03(m,3H),1.28-1.38(m,1H),1.62-1.71(m,1H),1.82-1.93(m,1H),1.96-2.05(m,4H),2.10-2.20(m,1H),2.23-2.26(m,3H),2.67-3.22(m,1H),3.42-4.04(m,1H),5.11-5.57(m,1H),5.57-5.69(m,2H),7.10-7.14(m,2H),7.30-7.39(m,2H),7.43-7.50(m,1H),7.92-8.03(m,1H),10.42-10.55(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值410.2；实测值411.2；Rt＝2.323min。
实施例427.rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(4-噻唑-2-基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物816)和rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(4-噻唑-2-基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物820)的合成
步骤1：外消旋-N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(4-噻唑-2-基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
向2-[4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]噻唑(0.3g，1.16mmol)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(342.85mg，1.16mmol)和DIPEA(300.12mg，2.32mmol，404.48μL)于DMSO(7mL)中的搅拌溶液中添加HATU(529.77mg，1.39mmol)。将所得反应混合物在25℃下搅拌12h。完成之后，将反应混合物提交至反相HPLC，以得到外消旋-N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(4-噻唑-2-基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.2g，373.37μmol，32.16％产率)。
HPLC数据：2-10min 60-90％ MeCN/H2O；30mL/min(装载泵4mL MeCN)，柱：HILIC，5微米
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值535.2；实测值536.2；Rt＝1.415min。
步骤2：rel-N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(4-噻唑-2-基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(P1)和rel-N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(4-噻唑-2-基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(P2)的合成
将外消旋-N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(4-噻唑-2-基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.2g，373.37μmol)提交至手性分离，以得到P1 rel-N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(4-噻唑-2-基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.085g，158.68μmol，42.50％产率)和P2 rel-N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(4-噻唑-2-基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.072g，134.41μmol，36.00％产率)。
分离数据：柱：Сhiralcel OD-H(250*30，5mkm)，流动相：己烷-IPA-MeOH，70-15-15；流速：28ml/min。24℃，波长：205nm，215nm，保留时间P1＝13.24；保留时间P2＝17.67
P1：RT(OD-H，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝12.231min。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值535.2；实测值536.2；Rt＝5.623min。
P2：RT(OD-H，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝9.621min。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值535.2；实测值536.2；Rt＝5.621min。
步骤3：rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(4-噻唑-2-基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物820)的合成：
将rel-N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(4-噻唑-2-基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯P1(0.085g，158.68μmol)溶解于1,4-二噁烷(2mL)和水(1mL)的混合物中且将混合物在80℃下搅拌17h。完成之后，在减压下浓缩反应混合物且将残余物提交至反相HPLC，以得到rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(4-噻唑-2-基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.033g，75.77μmol，47.75％产率)。
HPLC数据：50-75％ MeOH-2-10min流速：30mL/min；装载泵4mL/min MeOH，柱SunFire 100x 19mm，5mkm
1H NMR(dmso,600MHz):δ(ppm)0.98-1.04(m,3H),1.29-1.41(m,1H),1.61-1.73(m,1H),1.80-1.93(m,1H),1.96-2.03(m,3H),2.04-2.18(m,1H),2.18-2.29(m,1H),2.76-3.24(m,1H),3.44-4.06(m,1H),5.17-5.59(m,1H),5.59-5.66(m,2H),7.40-7.47(m,2H),7.47-7.50(m,1H),7.75-7.78(m,1H),7.88-7.91(m,1H),7.91-7.96(m,2H),7.96-8.03(m,1H),10.45-10.55(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值435.2；实测值436.2；Rt＝1.052min。
步骤4：rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(4-噻唑-2-基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物816)的合成
将rel-N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(4-噻唑-2-基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯P2(0.072g，134.41μmol)溶解于1,4-二噁烷和水的混合物中且将混合物在80℃下搅拌17h。完成之后，在减压下浓缩反应混合物且将残余物提交至反相HPLC，以得到rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(4-噻唑-2-基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.031g，71.18μmol，52.95％产率)。
HPLC数据：50-75％ MeOH-2-10min流速：30mL/min；装载泵4mL/min MeOH，柱SunFire 100x 19mm，5mkm
1H NMR(dmso,600MHz):δ(ppm)0.97-1.05(m,3H),1.28-1.40(m,1H),1.63-1.71(m,1H),1.82-1.94(m,1H),1.96-2.04(m,3H),2.04-2.17(m,1H),2.19-2.29(m,1H),2.77-3.27(m,1H),3.45-4.06(m,1H),5.18-5.59(m,1H),5.59-5.68(m,2H),7.40-7.47(m,2H),7.47-7.50(m,1H),7.75-7.78(m,1H),7.89-7.91(m,1H),7.92-7.96(m,2H),7.96-8.04(m,1H),10.40-10.64(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值435.2；实测值436.2；Rt＝1.052min。
实施例428.rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(4-噻唑-2-基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物822)和rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(4-噻唑-2-基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物813)的合成
步骤1：外消旋-N-[3-乙基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(4-噻唑-2-基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将外消旋-2-[4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]噻唑(0.25g，967.56μmol)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-乙基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(299.28mg，967.56μmol)、HATU(441.48mg，1.16mmol)和DIPEA(250.10mg，1.94mmol，337.06μL)混合于DMSO(7mL)中且将反应混合物在室温下搅拌过夜。完成之后，将反应混合物提交至反相HPLC，以得到外消旋-N-[3-乙基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(4-噻唑-2-基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.2g，363.85μmol，37.60％产率)。
HPLC数据；60-95％(MeCN)-2-10min流速：30mL/min；装载泵4mL/min MeCN，柱SunFire 100x 19mm，5mkm
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值459.2；实测值550.2；Rt＝1.502min。
步骤2：rel-N-[3-乙基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(4-噻唑-2-基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(P1)和rel-N-[3-乙基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(4-噻唑-2-基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(P2)的合成
将外消旋-N-[3-乙基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(4-噻唑-2-基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.2g，363.85μmol)提交至手性分离，以得到rel-N-[3-乙基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(4-噻唑-2-基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯P1(0.067g，121.89μmol，33.50％产率)和rel-N-[3-乙基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(4-噻唑-2-基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯P2(0.077g，140.08μmol，38.50％产率)。
制备型分离：样品信息：IC(250*20，5mkm)，IPA-MeOH，50-25-25，10mL/min
P1：RT(IC，IPA-MeOH，50-50，0.6mL/min)＝34.861min。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值549.2；实测值550.4；Rt＝1.403min。
P2：RT(IC，IPA-MeOH，50-50，0.6mL/min)＝16.318min。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值549.2；实测值550.4；Rt＝1.405min。
步骤3：rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(4-噻唑-2-基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物822)的合成：
将rel-N-[3-乙基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(4-噻唑-2-基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯P1(0.067g，121.89μmol)溶解于1,4-二噁烷(2mL)和水(1mL)的混合物中且将混合物在80℃下搅拌16h。完成之后，在减压下浓缩反应混合物且将残余物提交至反相HPLC，以得到N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(4-噻唑-2-基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.0335g，74.52μmol，61.13％产率)。
HPLC数据：50-75％ MeOH-2-10min流速：30mL/min；装载泵4mL/min MeOH，柱SunFire 100x 19mm，5mkm
1H NMR(dmso,600MHz):δ(ppm)0.99-1.04(m,3H),1.04-1.13(m,3H),1.30-1.40(m,1H),1.62-1.71(m,1H),1.82-1.96(m,1H),2.01-2.17(m,1H),2.18-2.30(m,1H),2.36-2.43(m,2H),2.73-3.24(m,1H),3.39-4.09(m,1H),5.17-5.60(m,1H),5.60-5.67(m,2H),7.40-7.47(m,2H),7.47-7.51(m,1H),7.76-7.78(m,1H),7.89-7.92(m,1H),7.92-7.97(m,2H),7.98-8.07(m,1H),10.45-10.59(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值449.2；实测值450.4；Rt＝2.493min。
步骤4：rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(4-噻唑-2-基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物813)的合成：
将rel-N-[3-乙基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(4-噻唑-2-基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯P2(0.077g，140.08μmol)溶解于1,4-二噁烷(2mL)和水(1mL)的混合物中且将混合物在80℃下搅拌16h。完成之后，在减压下浓缩反应混合物且将残余物提交至反相HPLC，以得到rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(4-噻唑-2-基苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.0364g，80.97μmol，57.80％产率)。
HPLC数据：50-75％ MeOH-2-10min流速：30mL/min；装载泵4mL/min MeOH，柱SunFire 100x 19mm，5mkm
1H NMR(dmso,600MHz):δ(ppm)1.00-1.04(m,3H),1.04-1.15(m,3H),1.29-1.40(m,1H),1.60-1.75(m,1H),1.82-1.94(m,1H),2.03-2.16(m,1H),2.19-2.29(m,1H),2.36-2.43(m,2H),2.72-3.24(m,1H),3.46-4.08(m,1H),5.18-5.60(m,1H),5.60-5.68(m,2H),7.40-7.47(m,2H),7.47-7.51(m,1H),7.75-7.78(m,1H),7.88-7.92(m,1H),7.92-7.97(m,2H),7.98-8.08(m,1H),10.52(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值449.2；实测值450.4；Rt＝min。
实施例429.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(5-甲基-2-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1005)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-(5-甲基-2-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物982)的合成
步骤1：N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(5-甲基-2-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯和N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5R)-5-甲基-2-(5-甲基-2-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(625.09mg，1.58mmol，N(C2H5)3)、5-甲基-2-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶(300mg，1.58mmol)、HATU(659.41mg，1.73mmol)和TEA(175.49mg，1.73mmol，241.72μL)混合于DMSO(4mL)中且在20℃下搅拌2h。使反应混合物经历HPLC。
HPLC数据：2-10min20-45％ MeCN/H2O 30mL/min(装载泵4mL MeCN)，柱：SunFire100*19mm，5微米
获得N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(5-甲基-2-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(90mg，粗品)。
获得N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5R)-5-甲基-2-(5-甲基-2-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(367mg，784.93μmol，49.79％产率)(主要为顺式)
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值467.2；实测值469.2；Rt＝3.031min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(5-甲基-2-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1005)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-(5-甲基-2-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物982)的合成
将N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(5-甲基-2-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(90mg，192.49μmol)溶解于二噁烷(1.5mL)和水(0.5mL)中且在90℃下搅拌过夜。使反应混合物经历HPLC。
HPLC数据：2-10min 10-50％ MeCN+TFA，30mL/min(装载泵4mL MeCN)，柱：SunFire 100*19mm，5微米
获得N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(5-甲基-2-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(17.3mg，47.08μmol，24.46％产率)。
化合物1005：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.97-1.04(m,3H),1.26-1.35(m,1H),1.56-1.66(m,1H),1.78-1.88(m,1H),1.88-1.96(m,1H),1.97-2.04(m,3H),2.24-2.29(m,3H),2.40-2.43(m,1H),2.77-2.97(m,1H),3.52-4.07(m,1H),5.13-5.54(m,1H),5.55-5.63(m,2H),7.15-7.34(m,1H),7.40-7.49(m,1H),7.58-7.64(m,1H),7.93-8.03(m,1H),8.36-8.42(m,1H),10.32-10.54(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值367.2；实测值368.2；Rt＝1.730min。
化合物982：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.67-0.81(m,3H),0.96-1.06(m,1H),1.54-1.70(m,2H),1.72-1.90(m,1H),1.99-2.07(m,3H),2.24-2.29(m,3H),2.59-2.72(m,2H),3.61-4.25(m,1H),5.14-5.61(m,1H),5.67-6.29(m,2H),7.16-7.31(m,1H),7.48-7.58(m,1H),7.59-7.64(m,1H),7.97-8.09(m,1H),8.36-8.42(m,1H),10.49-10.75(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值367.2；实测值368.2；Rt＝1.846min。
实施例430.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(2-(3-氯苯基)-4,4-二氟-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1074和化合物1045)的合成
步骤1：外消旋-(5-(2-((2S,5R)-2-(3-氯苯基)-4,4-二氟-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-3-甲基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
将(2R,5R)-2-(3-氯苯基)-4,4-二氟-5-甲基哌啶(300mg，1.22mmol)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(360.56mg，1.22mmol)、TEA(370.67mg，3.66mmol，510.56μL)混合于DMF(6mL)中，然后添加HATU(696.40mg，1.83mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌12h。蒸发溶剂且通过HPLC(45-90％2-10min；水-MeOH 30ml/min；装载泵MeOH 4ml/min，目标质量511，柱SunFire 19*100mm 5um)纯化粗品沉淀，以获得N-[5-[[2-[(2R,5R)-2-(3-氯苯基)-4,4-二氟-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(102.8mg，196.57μmol，16.10％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值522.2；实测值523.2；Rt＝1.372min。
步骤2：手性分离
通过手性色谱(IA-II(250*20，5mkm)，IPA-MeOH，50-50，12ml/min)分离非对映异构体的混合物，以获得N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(3-氯苯基)-4,4-二氟-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯E1(33.06mg，63.22μmol，31.55％产率)(其中RT＝15.17min)和N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(3-氯苯基)-4,4-二氟-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯E2(38.78mg，74.15μmol，37.72％产率)(其中RT＝21.89min)。
E1于分析条件下(柱：IC，以己烷-IPA-MeOH，70-15-15，0.6ml/min为流动相)的保留时间为15.08min且E2的保留时间为23.16min。
E1：保留时间：15.08min
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值522.2；实测值523.2；Rt＝3.820min。
E2：保留时间：23.16min
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值522.2；实测值523.2；Rt＝3.818min。
步骤3：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(2-(3-氯苯基)-4,4-二氟-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1074和化合物1045)的合成
将N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(3-氯苯基)-4,4-二氟-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯E1(33.06mg，63.22μmol)和N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(3-氯苯基)-4,4-二氟-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯E2(38.78mg，74.15μmol)于水(2mL)和二噁烷(2mL)中的溶液在100℃下加热12h。蒸发溶剂且通过HPLC(2-10min 55-65％ MeOH 30ml/min，装载泵4ml/minMeOH，目标质量422，柱：SunFire 100*19mm，5微米)纯化所得沉淀，以获得N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(3-氯苯基)-4,4-二氟-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(19.4mg，45.88μmol，72.57％产率)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(3-氯苯基)-4,4-二氟-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(22.7mg，53.68μmol，72.39％产率)。
化合物1074：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.08(d,3H),2.05(s,3H),2.20(m,1H),2.45(m,1H),2.87(m,1H),3.42(m,1H),4.02(m,1H),5.62(m,1H),5.82(m,2H),7.37(m,4H),7.52(m,1H),8.05(m,1H),10.67(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值422.2；实测值423.2；Rt＝1.127min。
化合物1045：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.08(d,3H),2.05(s,3H),2.22(m,1H),2.42(m,1H),2.87(m,1H),3.44(m,1H),4.02(m,1H),5.62(m,1H),5.82(m,2H),7.37(m,4H),7.52(m,1H),8.05(m,1H),10.67(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值422.2；实测值423.2；Rt＝1.127min。
实施例431.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-甲基-4-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物593)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-甲基-4-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物608)的合成
步骤1.外消旋-N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-甲基-4-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将DIPEA(525.22mg，4.06mmol，707.84μL)添加到相应2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(0.3g，1.02mmol)和2-甲基-4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]吡啶(193.32mg，1.02mmol)于DMF(5mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU(424.92mg，1.12mmol)。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC(WatersSunfire C18 19*100 5mkm柱且以H2O-MeCN为洗脱液混合物)，以得到纯的N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-甲基-4-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.24g，513.30μmol，50.52％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值467.2；实测值468.2；Rt＝1.845min。
步骤2.N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-甲基-4-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯和N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-甲基-4-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
在以下条件下分离对映异构体：柱：Chiral ART纤维素-SC(250*20，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH，50-25-25，流速：12mL/min；柱温：24℃；波长：205nm，256nm，290nm)，保留时间(顺式异构体)＝21.53；保留时间(反式异构体)＝23.03min；保留时间(顺式异构体)＝31.75min；保留时间(反式异构体)＝39.93min
分析数据：仪器：反相和梯度：CO2-MeOH,60-40,2ml/min，柱：IC，反式异构体1的保留时间＝11.60min；反式异构体2的保留时间＝23.98min；
步骤3A.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-甲基-4-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物593)的合成
将N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-甲基-4-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(103.22mg，220.76μmol，异构体2)溶解于二噁烷(2mL)和水(5mL)的混合物中。然后，将反应混合物在100℃下搅拌17h。在反应完成(通过LCMS监测)之后，在减压下浓缩所得悬浮液。使所获得的固体经历HPLC(Waters SunfireC18 20*100 5mkm柱且以H2O-MeOH(50-60％)为洗脱液混合物)，以得到纯的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-甲基-4-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(48.6mg，132.27μmol，59.91％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.94-1.03(m,3H),1.26-1.39(m,1H),1.50-1.63(m,1H),1.80-1.92(m,1H),1.97-2.03(m,3H),2.03-2.13(m,1H),2.13-2.23(m,1H),2.49-2.53(m,3H),2.71-3.18(m,1H),3.45-4.08(m,1H),5.08-5.53(m,1H),5.54-5.67(m,2H),7.04-7.13(m,1H),7.13-7.22(m,1H),7.37-7.53(m,1H),7.91-8.06(m,1H),8.35-8.46(m,1H),10.46-10.61(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值367.2；实测值368.4；Rt＝1.035min。
步骤3B.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-甲基-4-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物608)的合成
将N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-甲基-4-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(88.45mg，189.17μmol，异构体1)溶解于二噁烷(2mL)和水(5mL)的混合物中。然后，将反应混合物在100℃下搅拌17h。在反应完成(通过LCMS监测)之后，在减压下浓缩所得悬浮液。使所获得的固体经历HPLC(Waters SunfireC18 20*100 5mkm柱且以H2O-MeOH(50-60％)为洗脱液混合物)，以得到纯的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-甲基-4-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(50.6mg，137.71μmol，72.79％产率)
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.94-1.03(m,3H),1.26-1.39(m,1H),1.50-1.63(m,1H),1.80-1.92(m,1H),1.97-2.03(m,3H),2.03-2.13(m,1H),2.13-2.23(m,1H),2.49-2.53(m,3H),2.71-3.18(m,1H),3.45-4.08(m,1H),5.08-5.53(m,1H),5.54-5.67(m,2H),7.04-7.13(m,1H),7.13-7.22(m,1H),7.37-7.53(m,1H),7.91-8.06(m,1H),8.35-8.46(m,1H),10.46-10.61(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值367.2；实测值368.4；Rt＝1.035min。
实施例432.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(吡啶-4-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物609和化合物592)的合成
步骤1：外消旋-(3-甲基-5-(2-((2R,5S)-5-甲基-2-(吡啶-4-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
将DIPEA(525.22mg，4.06mmol，707.84μL)添加到相应2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(0.3g，1.02mmol)和4-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]吡啶(179.07mg，1.02mmol)于DMF(5mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU(424.92mg，1.12mmol)。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC(柱：Triart 100*20*5mm，水-MeOH为洗脱液混合物)，以得到纯的N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(4-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.24g，529.18μmol，52.09％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6δ(ppm)0.98(d,3H),1.32(m,1H),1.42(s,9H),1.58(m,1H),1.88(m,1H),2.12(m,1H),2.24(s,3H),3.22(m,1H),3.51(m,1H),4.08(m,1H),5.48(m,1H),7.32(d,2H),7.92(m,1H),8.41(m,1H),8.56(d,2H),9.04(m,1H),11.11(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值453.2；实测值454.2；Rt＝1.889min。
步骤2：手性分离
使外消旋-(3-甲基-5-(2-((2R,5S)-5-甲基-2-(吡啶-4-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(240.00mg，529.18μmol)经历手性HPLC纯化(柱：ID-H-III(250*20，5mkm)，洗脱液：己烷-IPA-MeOH，60-20-20，流速：12mL/min)，以得到两种个别对映异构体E1 N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(4-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(71.45mg，157.54μmol，29.77％产率)和E2 N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(4-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(82mg，180.80μmol，34.17％产率)。
E1于分析条件下(柱：IC，以IPA-MeOH，50-50，0.6ml/min为流动相)的保留时间为21.25min且E2的保留时间为55.10min。
E1：保留时间：38.91min
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值453.2；实测值454.2；Rt＝1.849min。
E2：保留时间：55.10min
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值453.2；实测值454.2；Rt＝1.842min。
步骤3：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(吡啶-4-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物609和化合物592)的合成
将N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(4-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(71.45mg，157.54μmol)和N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(4-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(82mg，180.80μmol)溶解于二噁烷(2mL)和水(5mL)的混合物中。然后，将反应混合物在100℃下搅拌16h。在反应完成(通过LCMS监测)之后，在减压下浓缩所得悬浮液。使所获得的固体经历HPLC(柱：Triart 100*20*5mm，水-MeCN为洗脱液混合物)，以得到纯的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(4-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(44.1mg，124.78μmol，79.21％产率)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(4-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(43.8mg，123.93μmol，68.55％产率)。
化合物609：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98-1.04(m,3H),1.25-1.41(m,1H),1.51-1.59(m,1H),1.76-1.91(m,1H),1.92-2.10(m,4H),2.11-2.25(m,1H),2.65-3.24(m,1H),3.41-4.08(m,1H),5.15-5.57(m,1H),5.57-5.69(m,2H),7.25-7.38(m,2H),7.42-7.53(m,1H),7.91-8.05(m,1H),8.51-8.60(m,2H),10.44-10.65(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值353.2；实测值354.2；Rt＝0.590min。
化合物592：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98-1.04(m,3H),1.26-1.40(m,1H),1.46-1.61(m,1H),1.80-1.92(m,1H),1.97-2.13(m,4H),2.15-2.27(m,1H),2.68-3.21(m,1H),3.44-4.07(m,1H),5.15-5.56(m,1H),5.57-5.69(m,2H),7.28-7.36(m,2H),7.42-7.51(m,1H),7.91-8.03(m,1H),8.52-8.59(m,2H),10.48-10.67(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值353.2；实测值354.2；Rt＝0.591min。
实施例433.rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-4,4-二氟-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物944)和rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5R)-4,4-二氟-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物973)的合成
步骤1：外消旋-N-[5-[[2-[(2S,5S)-4,4-二氟-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
向5-[(2S,5S)-4,4-二氟-5-甲基-2-哌啶基]-2-甲基吡啶(0.4g，1.77mmol)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(574.23mg，1.94mmol)和三乙胺(894.44mg，8.84mmol，1.23mL)中的溶液中分批添加HATU(806.62mg，2.12mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌12h，溶解于水(50mL)中且用EtOAc(3*20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2*25mL)洗涤，经Na2SO4干燥且移除溶剂，以得到N-[5-[[2-[(2S,5S)-4,4-二氟-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.7g，1.39mmol，78.64％产率)。
此化合物不经进一步纯化即用于下一步骤。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值503.2；实测值504.2；Rt＝0.950min。
步骤2：外消旋-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-4,4-二氟-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
将N-[5-[[2-[(2S,5S)-4,4-二氟-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.7g，1.39mmol)和于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(10g，274.27mmol，12.50mL)于DCM(10mL)中的溶液在25℃下搅拌24h。移除溶剂且通过HPLC(15-65％0-5min H2O/MeOH/0.1％ NH4OH，流速：30mL/min(装载泵4mL/min甲醇)目标质量403.44柱：YMC Triart C18 100x20 mm，5um)，以获得N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-4,4-二氟-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.34g，842.78μmol，60.63％产率)。
此化合物不经HNMR即用于手性拆分。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值403.2；实测值404.2；Rt＝1.203min。
步骤3：rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-4,4-二氟-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物944)和rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5R)-4,4-二氟-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物973)的合成
对外消旋-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-4,4-二氟-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.34g，842.78μmol)进行手性分离(ChiralpakIA(250*20，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，12mL/min)，以获得rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-4,4-二氟-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(50mg，123.94μmol，29.41％产率)和rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5R)-4,4-二氟-5-甲基-2-(6-甲基-3-吡啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(65mg，161.12μmol，38.24％产率)。
化合物944：RT(IC，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.15mL/min)＝10.430min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.02-1.10(m,3H),1.93-2.04(m,3H),2.10-2.24(m,1H),2.37-2.45(m,4H),2.66-3.17(m,2H),3.75-4.30(m,1H),5.52-5.87(m,3H),7.16-7.29(m,1H),7.40-7.54(m,1H),7.56-7.64(m,1H),7.90-8.07(m,1H),8.36-8.42(m,1H),10.46-10.68(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值403.2；实测值405.4；Rt＝1.144min。
化合物973：RT(IC，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.15mL/min)＝13.589min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.03-1.09(m,3H),1.93-2.04(m,3H),2.11-2.22(m,1H),2.38-2.44(m,4H),2.80-3.22(m,2H),3.69-4.30(m,1H),5.53-5.62(m,1H),5.62-5.86(m,2H),7.16-7.28(m,1H),7.40-7.54(m,1H),7.54-7.63(m,1H),7.91-8.06(m,1H),8.34-8.42(m,1H),10.44-10.67(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值403.2；实测值405.4；Rt＝1.145min。
实施例434.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-(4,4-二氟-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1357和化合物1148)的合成
步骤4：外消旋-(5-(2-((2R,5R)-4,4-二氟-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-3-乙基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成将5-[(2S,5R)-4,4-二氟-5-甲基-2-哌啶基]-1H-吲唑(0.42g，1.67mmol)、TEA(1.69g，16.71mmol，2.33mL)和2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-乙基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(517.02mg，1.67mmol)溶解于DMF(18mL)中且一次性添加HATU(953.32mg，2.51mmol)，将所得混合物在20℃下搅拌3h。将反应混合物倒入到水中且将水相用EtOAc(3次)萃取，然后将合并的有机相用盐水洗涤(3次)，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩。通过反相HPLC(2-10min 55-70％ MeOH 30ml/min，装载泵4ml/min MeOH，目标质量542，柱：SunFire 19*100mm，5微米)纯化粗反应混合物。分离呈淡黄色固体的所需产物N-[5-[[2-[(2S,5R)-4,4-二氟-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-乙基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.071g，130.86umol，7.83％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值542.2；实测值543.2；Rt＝1.365min。
步骤5：手性分离
使用(柱：Chiralpak IB(250*20，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH，70-15-15，流速：12mL/min；柱温：24℃；波长：205nm，258nm，290nm)进行手性分离，以得到N-[5-[[2-[(2S,5R)-4,4-二氟-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-乙基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.018g，33.18umol，25.35％产率)(RT为12.445min)和N-[5-[[2-[(2R,5S)-4,4-二氟-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-乙基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.02g，36.86umol，28.17％产率)(RT为13.865min)。
E1于分析条件下(柱：IB，以己烷-IPA-MeOH，70-15-15，0.6ml/min为流动相)的保留时间为15.37min且E2的保留时间为18.40min。
E1：
保留时间：15.37min
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值542.2；实测值543.2；Rt＝1.306min。
E2：
保留时间：18.40min
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值542.2；实测值543.2；Rt＝1.307min。
步骤6：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-(4,4-二氟-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1148和化合物1357)的合成
将N-[5-[[2-[(2R,5R)-4,4-二氟-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-乙基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.018g，33.18umol)和N-[5-[[2-[(2S,5S)-4,4-二氟-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-乙基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.02g，36.86umol)溶解于二噁烷(2mL)和水(2mL)的混合物中，然后在100℃下搅拌12h。在真空下浓缩反应混合物。通过HPLC(2-10min45-60％ MeOH30ml/min，装载泵4ml/min MeOH，目标质量442，柱：SunFire 100*19mm，5微米)纯化粗反应混合物。获得呈淡黄色固体的所需产物N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-4,4-二氟-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.009g，20.34umol，61.31％产率)和N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-4,4-二氟-2-(1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.01g，22.60umol，61.31％产率)。
化合物1357：
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值442.2；实测值443.2；Rt＝0.986min。
化合物1148：
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值442.2；实测值443.2；Rt＝0.987min。
实施例435.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(2-(7-氟-1H-吲唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1350和化合物1191)的合成
步骤1：(5-(2-(2-(7-氟-1H-吲唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-3-甲基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
将2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(1.09g，3.69mmol)和7-氟-5-(5-甲基-2-哌啶基)-1H-吲唑(0.86g，3.69mmol)混合于DMF(50mL)中。将反应悬浮液冷却至0℃且添加HATU(1.54g，4.06mmol)，随后添加TEA(746.07mg，7.37mmol，1.03mL)且在室温下搅拌14h。将反应混合物在真空中蒸发且倒入到水(100ml)中且用EtOAc(2x50 ml)萃取。将合并的有机萃取物用水洗涤(2*30ml)，经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到产物N-[5-[[2-[2-(7-氟-1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(1.42g，2.78mmol，75.44％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值510.2；实测值511.2；Rt＝1.284min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(2-(7-氟-1H-吲唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺的合成
在室温下将水(10mL)添加到N-[5-[[2-[2-(7-氟-1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(1.42g，2.78mmol)于二噁烷(30mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在100℃下搅拌15h，然后在真空中蒸发且通过制备型(35-75％0-5min H2O/MeOH/0.1％ NH4OH，流速：30ml/min)纯化0.9g所获得的粗产物，以得到产物N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-(7-氟-1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.400g，974.55umol，35.04％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值410.2；实测值411.2；Rt＝2.340min。
步骤3：手性分离(化合物1350和化合物1191)
对外消旋N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-(7-氟-1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.400g，974.55umol)进行手性分离(柱：Chiralcel OD-H(250*20，5um)，洗脱液：己烷-IPA-MeOH，50-25-25，流速：12mL/min)，以获得N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(7-氟-1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(110.40mg，268.98umol，27.60％产率)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(7-氟-1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.1061g，258.50umol，26.53％产率)。
化合物1350于分析条件下(柱：OD-H，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min为流动相)的保留时间为17.08min且化合物1191的保留时间为8.00min。
化合物1350：
保留时间：17.08min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98-1.07(m,3H),1.29-1.40(m,1H),1.69-1.81(m,1H),1.82-1.92(m,1H),1.95-2.04(m,3H),2.06-2.21(m,1H),2.22-2.31(m,1H),2.74-3.28(m,1H),3.43-4.04(m,1H),5.15-5.69(m,3H),7.06-7.26(m,1H),7.40-7.52(m,1H),7.52-7.59(m,1H),7.92-8.05(m,1H),8.15(s,1H),10.47-10.58(m,1H),13.60(s,1H)。LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值410.2；实测值411.2；Rt＝2.486min。
化合物1191：
保留时间：8.00min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98-1.06(m,3H),1.29-1.41(m,1H),1.69-1.80(m,1H),1.82-1.92(m,1H),1.96-2.04(m,3H),2.06-2.20(m,1H),2.23-2.31(m,1H),2.74-3.28(m,1H),3.43-4.04(m,1H),5.13-5.69(m,3H),7.05-7.25(m,1H),7.37-7.52(m,1H),7.52-7.59(m,1H),7.90-8.05(m,1H),8.16(s,1H),10.49-10.59(m,1H),13.60(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值410.2；实测值411.2；Rt＝2.482min。
实施例436.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(1H-噻吩并[2,3-c]吡唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1392和化合物1120)的合成
步骤1：外消旋-(3-甲基-5-(2-((2R,5S)-5-甲基-2-(1H-噻吩并[2,3-c]吡唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
在轻微加热下，将2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(401.32mg，1.36mmol)、5-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]-2H-噻吩并[2,3-c]吡唑(300.79mg，1.36mmol)和DIPEA(526.94mg，4.08mmol，710.16uL)溶解于DMSO(6mL)中。在剧烈搅拌和偶尔加热下，小批量添加HATU(620.11mg，1.63mmol)。反应完成之后，通过HPLC(40-90％0.5-6.5min水-MeOH；流速30ml/min；(装载泵4ml/min MeOH)；目标质量498；柱SunFireC18 100x19mm 5um(L))纯化混合物，以得到N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1H-噻吩并[2,3-c]吡唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(80mg，160.45umol，11.81％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值498.2；实测值499.2；Rt＝2.857min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(1H-噻吩并[2,3-c]吡唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺的合成
将N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1H-噻吩并[2,3-c]吡唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(80mg，160.45umol)溶解于二噁烷(2mL)和水(0.5mL)中。将所获得的溶液在100℃下搅拌2h；反应完成之后，使混合物经历HPLC(18％0.5-6.5min水-MeCN；流速30ml/min(装载泵4ml/min MeCN)；目标质量398；柱SunFireC18 100x19 mm 5um(R))，以得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1H-噻吩并[2,3-c]吡唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(40mg，100.38umol，62.56％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98(d,3H),1.37-1.48(m,1H),1.83-1.96(m,2H),1.98-2.02(m,3H),2.02-2.17(m,2H),2.91-2.96(m,0.4H),3.34-3.39(m,0.6H),3.44-4.08(m,1H),5.40-5.81(m,3H),6.88-6.98(m,1H),7.46-7.51(m,1H),7.87-8.00(m,1H),8.01(s,1H),10.42-10.64(m,1H),13.29(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值398.2；实测值399.2；Rt＝1.722min。
步骤3：手性分离(化合物1392和化合物1120)
通过手性HPLC(Chiralpak IA(250*20，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，12ml/min)纯化外消旋物，得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(1H-噻吩并[2,3-c]吡唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(8mg，20.08umol，25.02％产率)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(1H-噻吩并[2,3-c]吡唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(8mg，20.08umol，25.02％产率)。化合物1392于分析条件下(柱：IA，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min为流动相)的保留时间为65.80min且化合物1120的保留时间为43.62min。
化合物1392：
保留时间：65.80min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.96-1.03(m,3H),1.39-1.44(m,1H),1.86-1.96(m,2H),1.99-2.03(m,3H),2.04-2.19(m,2H),2.90-3.40(m,1H),3.45-4.09(m,1H),5.39-5.81(m,3H),6.89-7.00(m,1H),7.49(s,1H),7.95(s,1H),7.99-8.05(m,1H),10.43-10.53(m,1H),13.29(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值398.2；实测值399.2；Rt＝0.803min。
化合物1120：
保留时间：43.62min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.97-1.03(m,3H),1.38-1.45(m,1H),1.84-1.97(m,2H),1.99-2.18(m,5H),2.91-3.40(m,1H),3.44-4.07(m,1H),5.41-5.60(m,1H),5.61-5.79(m,2H),6.87-6.97(m,1H),7.45-7.52(m,1H),7.89-7.97(m,1H),8.02(d,1H),10.43-10.52(m,1H),13.29(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值398.2；实测值399.2；Rt＝0.803min。
实施例437.N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[6-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1103)的合成
步骤1：N-叔丁氧基羰基-N-[3-乙基-5-[[2-[(5S)-5-甲基-2-[6-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
向1-甲基-4-[5-[(5S)-5-甲基-2-哌啶基]-2-吡啶基]哌嗪(40mg，0.146mmol)、2-[[6-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-5-乙基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(60mg，0.146mmol)和DCM(2mL)的混合物中添加HATU(70mg，0.184mmol)和DIPEA(0.1mL，0.574mmol)且将混合物在25℃下搅拌2小时。所得混合物通过添加水(10mL)来淬灭且用EtOAc(10mL*3)萃取。将合并的有机层用饱和NH4Cl水溶液(10mL*2)、盐水(10mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩，以得到残余物，其通过快速色谱(12g二氧化硅快速柱，石油醚/EtOAc，其中EtOAc为0～20％，流速：30mL/min)进行纯化，以得到呈黄色油状物的N-叔丁氧基羰基-N-[3-乙基-5-[[2-[(5S)-5-甲基-2-[6-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(80mg，82.4％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值666.3，实测值666.3。
步骤2：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(5S)-5-甲基-2-[6-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
向N-叔丁氧基羰基-N-[3-乙基-5-[[2-[(5S)-5-甲基-2-[6-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(80mg，0.120mmol)和DCM(1mL)的混合物中添加TFA(1mL，13.0mmol)且将混合物在20℃下搅拌1小时。过滤混合物且在减压下浓缩，以得到粗产物，其通过快速色谱(柱：Sphercial C18，25g，40-60μm，MeCN/水(0.5％ NH3-H2O)，其中MeCN为0-45％，25mL/min，220nm)进行纯化，以得到呈白色固体的N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(5S)-5-甲基-2-[6-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(35mg，62.6％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值466.2，实测值466.2。
步骤3：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[6-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1103)的合成
通过手性SFC(仪器：Berger，Multigr AM-II；柱：Daicel Chiralcel OD-H(250mm*30mm，5μm)；流动相：超临界CO2/EtOH(0.1％NH3-H2O，v％)＝50/50；流速：80mL/min；柱温：38℃；喷嘴温度：100巴；喷嘴温度：60℃；蒸发器温度：20℃；修整器温度：25℃；波长：220nm)纯化N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(5S)-5-甲基-2-[6-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(30mg，64.4umol)，以得到化合物1103(峰2，保留时间＝5.269min)。
N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[6-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(21mg，具有反式相对化学的单一已知对映异构体，峰2，保留时间＝5.269min，白色固体)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 10.22(s,1H),8.08(brd,J＝17.1Hz,2H),7.44-7.56(m,2H),6.81(d,J＝8.8Hz,1H),5.36(br s,3H),3.46-3.57(m,5H),2.40-2.49(m,7H),2.28(s,3H),2.02-2.13(m,2H),1.72-1.96(m,2H),1.35(br d,J＝13.3Hz,1H),1.16(t,J＝7.4Hz,3H),1.05(d,J＝6.8Hz,3H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值466.2，实测值466.2。HPLC：在220nm下为100％，在254nm下为100％；100％ee。
实施例438.N-(6-氨基-5-环丙基吡啶-3-基)-2-(2-(咪唑并[1,5-a]吡啶-6-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1336和化合物1205)的合成
步骤1：N-(6-氨基-5-环丙基吡啶-3-基)-2-(2-(咪唑并[1,5-a]吡啶-6-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺的合成
在21℃下，将2-[(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸钠(225.92mg，464.48umol)、HATU(229.59mg，603.83umol)混合于无水DMF(5mL)中且将所得混合物搅拌15min。向其中添加6-(5-甲基-2-哌啶基)咪唑并[1,5-a]吡啶(100mg，464.48umol)且将所得混合物在21℃下搅拌过夜。将所得混合物倒入到水中，用EtOAc萃取3次，将合并的有机物用水、盐水洗涤且蒸发。使残余物经历HPLC(20-400.5-6.5min水-MeCN；流速30ml/min(装载泵5ml/min MeCN)；柱SunFire 100x19mm 5um(R))。获得两种级分的N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-(2-咪唑并[1,5-a]吡啶-6-基-5-甲基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰胺(56.7mg，135.49umol，29.17％产率)：第1级分-17mg(通过LCMS为91.41％)，第2级分-39.7mg(通过LCMS为100％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值418.2；实测值419.2；Rt＝1.973min。
步骤2：手性分离(化合物1336和化合物1205)
对外消旋N-(6-氨基-5-环丙基吡啶-3-基)-2-(2-(咪唑并[1,5-a]吡啶-6-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(56.7mg，135.49umol)进行手性分离(柱：Chiralpak IB(250*20mm，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，12ml/min)，以获得N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-咪唑并[1,5-a]吡啶-6-基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(15.21mg，36.34umol，26.83％产率)(RT＝21.13min)和N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-咪唑并[1,5-a]吡啶-6-基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(16.15mg，38.59umol，28.48％产率)(RT＝10.23min)。
化合物1336于分析条件下(柱：IB，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min为流动相)的保留时间为12.98min且化合物1205的保留时间为30.65min。
化合物1336：
保留时间：12.98min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.44(m,2H),0.87(m,2H),1.01(m,3H),1.35(m,1H),1.65(m,1H),1.99(m,4H),2.82(m,1H),3.76(dd,1H),5.35(m,1H),5.75(m,2H),6.74(m,1H),7.32(m,2H),7.54(m,1H),8.02(m,1H),8.31(m,2H),10.47(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值418.2；实测值419.2；Rt＝1.654min。
化合物1205：
保留时间：30.65min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.44(m,2H),0.87(m,2H),1.01(m,3H),1.35(m,1H),1.65(m,1H),1.97(m,4H),2.82(m,1H),3.76(dd,1H),5.75(m,3H),6.71(m,1H),7.32(m,2H),7.54(m,1H),8.02(m,1H),8.31(m,2H),10.47(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值418.2；实测值419.2；Rt＝1.663min。
实施例439.N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(1,2-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1400)和N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(1,2-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1153)的合成
步骤1：6-(1,2-苯并噻唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将碳酸钠(812mg，7.66mmol，321μL)添加到5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,2-苯并噻唑(1.00g，3.83mmol)和3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.45g，4.21mmol)于二噁烷(15.0mL)和水(5.00mL)中的溶液中。将所获得的混合物抽真空，然后用Ar回填。添加Pd(dppf)Cl2*DCM(125mg，153μmol)。将所得混合物在90℃、惰性气氛下搅拌16h。将所获得的混合物在减压下浓缩。将残余物用MTBE(40.0mL)萃取。通过短硅胶垫过滤所获得的混合物且在减压下浓缩，以得到呈棕色油状物的6-(1,2-苯并噻唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.24g，3.76mmol，98.2％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值331.17；实测值331.2；Rt＝1.529。
步骤2：5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1,2-苯并噻唑的合成
将三氟乙酸(4.29g，37.6mmol，2.90mL)添加到6-(1,2-苯并噻唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.24g，3.76mmol)于二氯甲烷(20.0mL)中的溶液中。将所得混合物在25℃下搅拌14h。将所获得的混合物在减压下浓缩。将残余物用水(40.0mL)稀释且过滤出。将滤液用固体K2CO3碱化至pH≈10。将所得混合物用DCM(2x20.0mL)萃取。将有机层分离，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩，以得到呈黄色胶状物的5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1,2-苯并噻唑(540mg，2.34mmol，62.4％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值231.11；实测值231.0；Rt＝0.700。
步骤3：5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,2-苯并噻唑的合成
向5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1,2-苯并噻唑(540mg，2.34mmol)于甲醇(30.0mL)中的搅拌溶液中分批添加硼氢化钠(133mg，3.52mmol，124μL)。将所得混合物在20℃下搅拌1.5h。将所获得的混合物在减压下浓缩。将残余物分配于水(30.0mL)与DCM(40.0mL)之间。将有机层分离，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩，以得到呈黄色油状物的5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,2-苯并噻唑(460mg，1.98mmol，84.5％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值233.13；实测值233.2；Rt＝0.785。
步骤4：N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(1,2-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-环丙基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
向5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,2-苯并噻唑(230mg，990μmol)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-环丙基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(318mg，990μmol)和三乙胺(250mg，2.47mmol，345μL)于二甲基甲酰胺(3.00mL)中的搅拌混合物中添加HATU(414mg，1.09mmol)。将所得反应混合物在25℃下搅拌4h。使所获得的混合物经历HPLC(0-5min 40-65％水-ACN；流速：30mL/min，柱：Chromatorex 18SMB100-5T，100x19 mm，5μm)，以得到呈白色固体的N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(1,2-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-环丙基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(74.0mg，138μmol，13.9％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值536.26；实测值536；Rt＝3.898。
步骤5：N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(1,2-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
将水(1.00g，55.5mmol，1.00mL)添加到N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(1,2-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-环丙基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(74.0mg，138μmol)于二噁烷(2.00mL)中的溶液中。将所得混合物在90℃下搅拌16h。使所获得的混合物经历HPLC(0-5min 40-90％水-甲醇，+0.1体积％25％ NH3水溶液，30mL/min，柱：YMC-Actus Triart C18，100x20 mm，5μm)，以得到呈白色固体的N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(1,2-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(44.0mg，101μmol，73.1％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值436.2；实测值436.2；Rt＝2.413。
步骤6：N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(1,2-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺和N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(1,2-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
使N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(1,2-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(44.0mg，101μmol)经历手性HPLC(系统：柱：Chiralpak IB(250*20mm，5mkm)，流动相：己烷-IPA-MeOH，50-25-25；流速：12mL/min。24℃，波长：205nm，215nm)，以得到呈白色固体的化合物1400N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(1,2-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(16.9mg，38.8μmol，76.8％产率；保留时间＝11.112min(分析型)，13.9min(制备型))和化合物1153N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(1,2-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(23.0mg，粗品；保留时间＝19.536min(分析型)，23.5min(制备型))。
(化合物1400)：
N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(1,2-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ10.53-10.43(m,1H),9.12-9.08(m,1H),8.26-8.19(m,1H),8.18-8.13(m,1H),8.09-7.96(m,1H),7.65-7.51(m,1H),7.38-7.24(m,1H),5.79-5.27(m,3H),4.07-3.49(m,1H),3.28-2.78(m,1H),2.35-2.26(m,1H),2.23-2.07(m,1H),1.93-1.84(m,1H),1.75-1.60(m,2H),1.41-1.30(m,1H),1.04-1.00(m,3H),0.91-0.82(m,2H),0.48-0.38(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值436.2；实测值436.2；Rt＝1.041。
(化合物1153)：
N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(1,2-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ10.52-10.44(m,1H),9.12-9.07(m,1H),8.26-8.19(m,1H),8.19-8.13(m,1H),8.08-7.95(m,1H),7.64-7.52(m,1H),7.41-7.22(m,1H),5.79-5.28(m,3H),4.07-3.49(m,1H),3.27-2.78(m,1H),2.33-2.26(m,1H),2.23-2.08(m,1H),1.93-1.84(m,1H),1.76-1.61(m,2H),1.40-1.32(m,1H),1.03-1.01(m,3H),0.90-0.82(m,2H),0.49-0.38(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值436.2；实测值436.2；Rt＝1.060。
实施例440.N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1222)和N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1201)的合成
步骤1：N-叔丁氧基羰基-N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
向2-(1-甲基-4-哌啶基)-5-(5-甲基-2-哌啶基)-1,3-苯并噻唑(150mg，0.46mmol)、2-[[6-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-5-环丙基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(191mg，0.45mmol)于DMF(5mL)中的混合物中添加DIPEA(371mg，2.87mmol)和HATU(225mg，0.59mmol)且将混合物在20℃下搅拌12小时。将混合物用EtOAc(50mL)稀释，用盐水(20mL*3)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩，以得到粗产物。通过快速色谱(ISCO；24gAgelaFlash二氧化硅快速柱，石油醚/EtOAc，其中EtOAc为0～50％，流速＝30mL/min，254nm)纯化粗产物，以得到呈淡黄色固体的N-叔丁氧基羰基-N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(150mg，46.6％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值733.3，实测值733.4。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
将N-叔丁氧基羰基-N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(145mg，0.21mmol)于TFA(7.25mL，94.1mmol)和DCM(2mL)中的溶液在20℃下搅拌1小时。在减压下浓缩混合物，以得到呈棕色油状物的粗产物。通过制备型HPLC纯化(仪器：Gilson GX-281Liquid Handler，Gilson 322泵，Gilson 156UV检测器；柱：Durashell150×25mm×5μm；流动相A：水(0.05％ NH3H2O+10mM NH4HCO3)；流动相B：MeCN；梯度：在7.8min内36％至66％B，保持100％ B达2.0min；流速：25mL/min；柱温：30℃；波长：220nm，254nm)进一步纯化粗产物，以得到呈白色固体的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(64mg，61.6％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值533.2，实测值533.2。
步骤3：N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1222)和N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1201)的合成
将N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(50mg，0.094mmol)送至SFC纯化(仪器：Berger，Multigr AM-II；柱：Chiralpak AD 250×30mm I.D.5μm；流动相：超临界CO2/EtOH(0.1％NH3-H2O，v％)＝65/35；流速：70mL/min；柱温：38℃；喷嘴温度：100巴；喷嘴温度：60℃；蒸发器温度：20℃；修整器温度：25℃；波长：220nm)，以得到化合物1222(峰1，保留时间＝5.166min)和化合物1201(峰2，保留时间＝5.951min)。
化合物1222：N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(23.1mg，具有反式相对化学的单一未知对映异构体，峰1，保留时间＝5.166min，白色固体)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.77-8.15(m,3H),7.34-7.62(m,1H),7.21-7.64(m,1H),5.42-5.98(m,1H),3.68-3.87(m,1H),3.67-4.16(m,1H),3.36-3.59(m,1H),3.24(br s,1H),2.84-2.97(m,1H),2.77-3.23(m,2H),2.61-2.83(m,1H),2.20-2.41(m,4H),1.78-2.05(m,4H),1.38-1.75(m,2H),1.16(br d,J＝6.9Hz,3H),0.81-1.03(m,2H),0.41-0.70(m,2H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值533.1，实测值533.2；HPLC：在254nm下为100％；100.0％ee。
化合物1201：N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(22.4mg，具有反式相对化学的单一未知对映异构体，峰2，保留时间＝5.951min，白色固体)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.12(br s,1H),7.72-8.15(m,2H),7.58(br s,1H),7.20-7.65(m,1H),5.85(br s,1H),5.38-5.56(m,1H),3.72-4.15(m,1H),3.40-3.52(m,1H),3.03(br d,J＝11.1Hz,1H),2.86-3.24(m,2H),2.17-2.40(m,8H),1.82-2.09(m,3H),1.56-1.76(m,1H),1.37-1.55(m,1H),1.07-1.30(m,3H),0.83-1.04(m,2H),0.46-0.72(m,2H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值533.1，实测值533.2；HPLC：在254nm下为98.82％；100％ee。
实施例441.N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-5-甲基-2-(2-四氢吡喃-4-基-1,3-苯并噻唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1258)的合成
步骤9：N-叔丁氧基羰基-N-[3-环丙基-5-[[2-[(5S)-5-甲基-2-(2-四氢吡喃-4-基-1,3-苯并噻唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
向5-((5S)-5-甲基-2-哌啶基)-2-四氢吡喃-4-基-1,3-苯并噻唑(70mg，0.198mmol，HCl)、[2-[[6-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-5-环丙基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酰基]氧基钠(89.8mg，0.202mmol)、HATU(80mg，0.210mmol)和DMF(3mL)的混合物中添加DIPEA(0.1mL，0.574mmol)且将混合物在20℃下搅拌12小时。所得混合物通过添加水(10mL)来淬灭且用EtOAc(50mL*3)萃取。将合并的有机层用饱和NH4Cl水溶液(10mL*2)、盐水(10mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩，以得到残余物，其通过快速色谱(12g二氧化硅快速柱，石油醚/EtOAc，其中EtOAc为0～68％，流速：30mL/min，254nm)进行纯化，以得到呈黄色固体的N-叔丁氧基羰基-N-[3-环丙基-5-[[2-[(5S)-5-甲基-2-(2-四氢吡喃-4-基-1,3-苯并噻唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(110mg，77.0％产率)。
步骤10：N-叔丁氧基羰基-N-[3-环丙基-5-[[2-[(5S)-5-甲基-2-(2-四氢吡喃-4-基-1,3-苯并噻唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将N-叔丁氧基羰基-N-[3-环丙基-5-[[2-[(5S)-5-甲基-2-(2-四氢吡喃-4-基-1,3-苯并噻唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(110mg，0.153mmol)和4M MeOH/HCl(4mL，16mmol)的混合物在20℃下搅拌2小时。向混合物中添加NH3-H2O(1mL)且在减压下浓缩，以得到残余物，其通过制备型HPLC(仪器：Gilson GX-281Liquid Handler，Gilson 322泵，Gilson 156UV检测器；柱：Waters Xbridge 150×25mm×5μm；流动相A：具有0.05％NH3-H2O(v％)的H2O；流动相B：MeCN；梯度：在7.8min内35％至65％ B，保持100％ B达2.5min；流速：25mL/min；柱温：30℃；波长：220nm，254nm)进行纯化，以得到呈白色固体的N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(5S)-5-甲基-2-(2-四氢吡喃-4-基-1,3-苯并噻唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(40mg，50.4％产率)。
步骤11：N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-5-甲基-2-(2-四氢吡喃-4-基-1,3-苯并噻唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1258)的合成
通过SFC仪器(Thar 800Q；Daicel Chiralpak IG(250mm*30mm，10μm)；流动相：超临界CO2/EtOH(0.1％ NH3-H2O，v％)＝60/40；流速：80mL/min；柱温：38℃；喷嘴温度：100巴；喷嘴温度：60℃；蒸发器温度：20℃；修整器温度：25℃；波长：220nm)分离N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(5S)-5-甲基-2-(2-四氢吡喃-4-基-1,3-苯并噻唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(40mg，77.0μmol)，以得到N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-5-甲基-2-(2-四氢吡喃-4-基-1,3-苯并噻唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(25mg，具有反式相对化学的单一已知对映异构体，峰2，保留时间＝5.211min，白色固体)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.73-8.17(m,3H),7.18-7.63(m,2H),5.46-5.89(m,1H),4.00-4.17(m,2H),3.53-3.80(m,2H),3.44(br d,J＝11.6Hz,2H),2.93-3.28(m,1H),1.87-2.40(m,8H),1.57-1.76(m,1H),1.49(br d,J＝11.9Hz,1H),1.16(br d,J＝6.9Hz,3H),0.84-1.04(m,2H),0.49-0.69(m,2H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值520.2，实测值520.2；HPLC：在220nm下为100％，在254nm下为100％；100％ee。
实施例442.rel-N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(3-氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1169)和rel-N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(3-氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1119)的合成
步骤1：N-[5-[[2-[2-(3-氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-环丙基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
在室温下将2-(3-氯苯基)-5-甲基哌啶(150mg，715.26umol)和HATU(326.36mg，858.31umol)混合于无水DMF(5mL)中且将所得混合物搅拌5min。向其中添加HATU(326.36mg，858.31umol)且将所得混合物在室温下搅拌15min。将所得混合物倒入到水中，用EtOAc萃取3次，将合并的有机物用水、盐水洗涤且蒸发。使残余物经历HPLC(50-100％0.5-6.5min水-乙腈+FA；流速30mL/min(装载泵；4mL/min乙腈)；柱SunFireC18 100x19 mm5um(R)。获得呈带棕色胶状物的N-[5-[[2-[2-(3-氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-环丙基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(287.9mg，561.18umol，78.46％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值513.2；实测值513.2；Rt＝3.883min。
步骤2：N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[2-(3-氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
将N-[5-[[2-[2-(3-氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-环丙基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(287.9mg，561.18umol)溶解于水(2mL)/二噁烷(2mL)混合物中且在90℃下加热过夜。将所得混合物蒸发至干，以得到呈黄色固体的N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[2-(3-氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.22g，532.80umol，94.94％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值413.2；实测值413.4；Rt＝3.124min。
步骤3：rel-N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(3-氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1169)和rel-N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(3-氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1119)的合成
通过手性色谱在以下两次运行中分离非对映异构体的混合物：第1次运行(Chiralpak IC-III(250*20，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，12mL/min)和第2次运行(Chiralpak AD-H-III(250*20mm，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，70-15-15，12mL/min)，以获得N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(3-氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(51.72mg，125.26umol，21.55％产率)和N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(3-氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(44.25mg，107.17umol，18.44％产率)。
制备型：
第1次运行：
化合物1169的RT(Chiralpak IC-III(250*20，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，12mL/min)＝18.792min；(连同其顺式杂质)
化合物1119的RT(Chiralpak IC-III(250*20，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，12mL/min)＝25.119min。
制备型：
第2次运行：
化合物1169的RT(Chiralpak AD-H-III(250*20mm，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，70-15-15，12mL/min)＝41.448min；(连同其顺式杂质)
化合物1169：
产率：51.72mg(21.55％)
RT(Chiralpak IC(250*4.6，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.6mL/min)＝17.466min。
1H NMR(500MHz,dmso)δ0.40-0.50(m,2H),0.84-0.90(m,2H),0.96-1.05(m,3H),1.24-1.37(m,1H),1.59-1.69(m,2H),1.79-1.91(m,1H),1.99-2.10(m,1H),2.14-2.25(m,1H),2.68-3.25(m,1H),3.45-4.04(m,1H),5.13-5.57(m,1H),5.71-5.80(m,2H),7.23-7.37(m,4H),7.39-7.47(m,1H),7.96-8.10(m,1H),10.46-10.58(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值413.2；实测值413.2；Rt＝2.535min。
化合物1119：
产率：44.25mg(18.44％)
RT(Chiralpak IC(250*4.6，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.6mL/min)＝22.691min。
1H NMR(500MHz,dmso)δ0.40-0.50(m,2H),0.82-0.90(m,2H),0.96-1.04(m,3H),1.24-1.38(m,1H),1.54-1.73(m,2H),1.80-1.92(m,1H),1.96-2.08(m,1H),2.11-2.26(m,1H),2.69-3.26(m,1H),3.44-4.06(m,1H),5.13-5.59(m,1H),5.70-5.82(m,2H),7.24-7.37(m,4H),7.38-7.44(m,1H),7.94-8.06(m,1H),10.43-10.57(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值413.2；实测值413.2；Rt＝2.553min。
实施例443.rel-N-(6-氨基-5-环丙基吡啶-3-基)-2-((2R,5R)-2-(苯并[d]噻唑-5-基)-4,4-二氟-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1307)和rel-N-(6-氨基-5-环丙基吡啶-3-基)-2-((2R,5R)-2-(苯并[d]噻唑-5-基)-4,4-二氟-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1207)的合成
将N-[5-[[2-[(2R,5R)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4,4-二氟-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-环丙基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(1.5g，2.62mmol)于二噁烷(15mL)和水(15mL)中的溶液在100℃下加热12h。蒸发溶剂且通过HPLC(2-10min；20-55％乙腈，30mL/min(装载泵4mL MeCN)，柱：SunFire 100*19mm，5微米)纯化粗材料，以获得外消旋混合物。通过手性色谱(Chiralpak AS-H(250*20mm，5mkm)，己烷-IPA-MeOH,60-20-20，12mL/min)纯化所得混合物。在柱上观测到外消旋。获得N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5R)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4,4-二氟-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(60.28mg，127.84umol，4.87％产率)的非对映异构体比率不同(12％/88％-16.23mg和65％/35％-44.05mg)的两种级分。
化合物1307：
产率：16.23mg(26.92％)
RT(Chiralpak AS-H(250*4.6，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝11.576min(12％)，16.249min(88％)。
1H NMR(600MHz,dmso)δ0.37-0.54(m,2H),0.81-0.94(m,2H),1.10(d,3H),1.55-1.73(m,1H),2.14-2.27(m,1H),2.82-3.21(m,2H),3.40-3.58(m,1H),3.84-4.37(m,1H),5.71-6.06(m,3H),7.25-7.43(m,1H),7.47(d,1H),7.97-8.20(m,3H),9.40(s,1H),10.49-10.72(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值472.2；实测值472.2；Rt＝2.795min。
化合物1207：
产率：44.05mg(73.07％)
RT(Chiralpak AS-H(250*4.6，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝11.576min(65％)，16.249min(35％)。
1H NMR(600MHz,dmso)δ0.53-0.66(m,2H),0.95-1.03(m,2H),1.10(d,3H),1.68-1.82(m,1H),2.19-2.27(m,1H),2.61-3.02(m,2H),3.15-3.58(m,1H),3.93-4.36(m,1H),5.75-6.01(m,1H),7.39-7.73(m,4H),8.01(s,1H),8.11-8.19(m,1H),8.19-8.35(m,1H),9.40(s,1H),10.85-11.19(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值472.2；实测值472.2；Rt＝2.803min。
实施例444.N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1143)的合成
步骤1：(5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-3,6-二氢-2H-吡啶-4-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将(5S)-2-(2-溴-1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.2g，2.92mmol)、1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,6-二氢-2H-吡啶(700mg，3.14mmol)、K2CO3(1.20g，8.68mmol)、钯；三苯基磷烷(360mg，0.312mmol)、EtOH(10mL)和H2O(2mL)的混合物在95℃下搅拌1.5小时。所得混合物通过添加水(10mL)来淬灭且用EtOAc(20mL*3)萃取。将合并的有机层用饱和NH4Cl水溶液(10mL*2)、盐水(10mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩，以得到残余物，其通过快速色谱(24g二氧化硅快速柱，DCM/MeOH，其中MeOH为0～20％，流速：30mL/min，254nm)进行纯化，以得到呈黄色固体的(5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-3,6-二氢-2H-吡啶-4-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.1g，88.2％产率)。
步骤2：(5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
在H2气氛(15psi)下，将(5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-3,6-二氢-2H-吡啶-4-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.10g，2.57mmol)、Pd/C(1g，具有50重量％水的10重量％Pd)和MeOH(5mL)的混合物在20℃下搅拌12小时。过滤混合物且在减压下浓缩，以得到呈黑色油状物的(5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(1g，90.5％产率)。
步骤3：2-(1-甲基-4-哌啶基)-5-[(5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑的合成
将(5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(1g，2.33mmol)、TFA(2mL，26.0mmol)和DCM(10mL)的混合物在20℃下搅拌2小时。在减压下浓缩混合物，以得到残余物，将其与Na2CO3固体和MeOH混合且将混合物在20℃下搅拌1小时.在减压下浓缩混合物，以得到残余物，将其用DCM(100mL)研磨。过滤混合物且在减压下浓缩滤液，以得到呈黄色油状物的2-(1-甲基-4-哌啶基)-5-[(5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑(700mg，91.3％产率)
步骤4：N-叔丁氧基羰基-N-[3-乙基-5-[[2-[(5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将2-[[6-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-5-乙基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(130mg，0.317mmol)、2-(1-甲基-4-哌啶基)-5-[(5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑(105mg，0.319mmol)、HATU(130mg，0.342mmol)、DIPEA(0.2mL，1.15mmol)和DCM(20mL)的混合物在20℃下搅拌2小时。过滤混合物且在减压下浓缩，以得到残余物，其通过快速色谱(24g二氧化硅快速柱DCM/MeOH，其中MeOH为0～20％，流速：30mL/min，254nm)进行纯化，以得到呈黄色油状物的N-叔丁氧基羰基-N-[3-乙基-5-[[2-[(5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(150mg，65.5％产率)。
步骤5：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
将N-叔丁氧基羰基-N-[3-乙基-5-[[2-[(5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(150mg，0.208mmol)、TFA(1mL，13.0mmol)和DCM(2mL)的混合物在20℃下搅拌2小时。在减压下浓缩混合物，以得到残余物，其通过制备型HPLC(仪器：Gilson GX-281Liquid Handler，Gilson 322泵，Gilson 156UV检测器；柱：Waters Xbridge 150×25mm×5μm；流动相A：具有0.05％ NH3-H2O(v％)的H2O；流动相B：MeCN；梯度：在7.8min内28％至58％ B，保持100％ B达2.5min；流速：25mL/min；柱温：30℃；波长：220nm，254nm)进行纯化，以得到呈白色固体的N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(100mg，92.3％产率)。
步骤6：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1143)的合成
将N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(50mg，96.0μmol)通过手性SFC(仪器：Thar800Q；Daicel Chiralpak IG(250mm*30mm，10μm)；流动相：超临界CO2/EtOH(0.1％ NH3-H2O，v％)＝55/45；流速：80mL/min；柱温：38℃；喷嘴温度：100巴；喷嘴温度：60℃；蒸发器温度：20℃；修整器温度：25℃；波长：220nm)分离，以得到N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(30mg，具有反式相对化学的单一已知对映异构体，峰2，保留时间＝5.155min，白色固体)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.88-8.29(m,3H),7.20-7.88(m,2H),5.44-5.90(m,1H),3.70-4.20(m,1H),3.36-3.52(m,1H),3.17(br s,1H),3.03(br d,J＝11.3Hz,2H),2.12-2.62(m,9H),1.99(br d,J＝11.8Hz,4H),1.41-1.56(m,1H),1.04-1.37(m,6H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值521.3，实测值521.3；HPLC：在220nm下为99.11％，在254nm下为100％；100％ee。
实施例445.rel-N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,4S,5R)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-甲氧基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1370)和rel-N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2S,4R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-甲氧基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1241)的合成
步骤7：外消旋-N-[5-[[2-[(2S,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-甲氧基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-环丙基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
在室温下将5-[(2S,5S)-4-甲氧基-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑(0.2g，669.28umol，HCl)、TEA(338.62mg，3.35mmol，466.42uL)和HATU(305.37mg，803.13umol)混合于无水DMF(5mL)中且将所得混合物搅拌15min.向其中添加2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-环丙基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(219.70mg，669.28umol，Li)且将所得混合物在室温下搅拌12h。将所得混合物蒸发至干，以获得N-[5-[[2-[(2S,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-甲氧基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-环丙基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(670mg，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值566.2；实测值566.2；Rt＝1.373min。
步骤8：外消旋-N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-甲氧基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
将外消旋-N-[5-[[2-[(2S,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-甲氧基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-环丙基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(670mg，1.18mmol)于二噁烷(5mL)和水(5mL)中的溶液在100℃下加热12h。蒸发溶剂且通过HPLC(2-10min 30-55％甲醇+NH3，30mL/min(装载泵4mL甲醇)，柱：SunFire 100*19mm，5微米)纯化所得沉淀，以获得外消旋-N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-甲氧基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(33.8mg，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值466.2；实测值466.2；Rt＝0.923min。
步骤9：rel-N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,4S,5R)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-甲氧基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1370)和rel-N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2S,4R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-甲氧基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1241)的合成
对外消旋-N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-甲氧基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(33.8mg，72.60umol)进行手性分离(Chiralcel OD-H(250*20，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，80-10-10，12mL/min)，以获得化合物1241rel-N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2S,4R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-甲氧基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(8.75mg，18.79umol，25.89％产率)和化合物1370rel-N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,4S,5R)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-4-甲氧基-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(12.9mg，27.71umol，38.17％产率)。
制备型：
化合物1241的RT(Chiralcel OD-H(250*20，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，80-10-10，12mL/min)＝58.183min。
化合物1370的RT(Chiralcel OD-H(250*20，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，80-10-10，12mL/min)＝46.633min。
化合物1241：
产率：8.75mg(25.89％)
RT(Chiralcel OD-H(250*4.6，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.6mL/min)＝18.234min。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)0.41(m,2H),0.85(m,2H),1.03(d,3H),1.63(m,1H),1.91(m,1H),2.25(m,1H),3.05(m,3H),3.21(m,2H),3.50(m,1H),3.70(m,1H),5.64(m,3H),7.44(m,2H),8.05(m,3H),9.36(m,1H),10.39(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值466.2；实测值466.2；Rt＝0.938min。
化合物1370：
产率：12.9mg(38.17％)
RT(Chiralcel OD-H(250*4.6，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.6mL/min)＝15.314min。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)0.41(m,2H),0.85(m,2H),1.03(d,3H),1.63(m,1H),1.91(m,1H),2.25(m,1H),3.05(m,3H),3.20(m,2H),3.50(m,1H),3.71(m,1H),5.64(m,3H),7.44(m,2H),8.05(m,3H),9.36(m,1H),10.39(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值466.2；实测值466.2；Rt＝0.929min。
实施例446.N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-甲基-3,4-二氢-1H-异喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1264)的合成
步骤3：(3S)-3-甲基-6-(2-甲基-3,4-二氢-1H-异喹啉-6-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将(5S)-5-甲基-2-(三氟甲基磺酰基氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.07g，11.71mmol)、2-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,4-二氢-1H-异喹啉(3.2g，11.71mmol)和碳酸钠(3.72g，35.14mmol，1.47mL)添加到二噁烷(30mL)和水(10mL)的混合物中。将所得混合物抽真空，然后用氩气回填，将此操作重复三次，然后在氩气下添加Pd(dppf)Cl2*DCM(478.30mg，585.70umol)。将反应混合物在氩气、70℃下搅拌16h，然后冷却且过滤。将滤饼用1,4-二噁烷(2*20mL)洗涤且丢弃。在真空中蒸发滤液，以得到呈棕色油状物的(3S)-3-甲基-6-(2-甲基-3,4-二氢-1H-异喹啉-6-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(4g，11.68mmol，99.71％产率)，其不经纯化即用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值343.2；实测值343.2；Rt＝1.050min。
步骤4：2-甲基-6-[(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]-3,4-二氢-1H-异喹啉的合成
将(3S)-3-甲基-6-(2-甲基-3,4-二氢-1H-异喹啉-6-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(4g，11.68mmol)于TFA(19.98g，175.20mmol，13.50mL)中的溶液在25℃下搅拌1h，然后在真空中蒸发。将碎冰(15g)添加到残余物中且用10％氢氧化钠水溶液将pH调节至10。将所得混合物用二氯甲烷(2*30ml)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到呈棕色油状物的2-甲基-6-[(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]-3,4-二氢-1H-异喹啉(2.3g，9.49mmol，81.25％产率)，其直接用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值243.2；实测值243.2；Rt＝0.219min。
步骤5：2-甲基-6-[(5S)-5-甲基-2-哌啶基]-3,4-二氢-1H-异喹啉的合成
在0℃下，将硼氢化钠(718.07mg，18.98mmol，671.09uL)一次性添加到2-甲基-6-[(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]-3,4-二氢-1H-异喹啉(2.3g，9.49mmol)于MeOH(20mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在25℃下搅拌15h，然后在真空中蒸发。将残余物用水(20mL)稀释且用EtOAc(2*40mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发。使所获得的油状物经历HPLC(Waters Sunfire C1819*100 5mkm柱且以MeCN为洗脱液混合物)，以得到2-甲基-6-[(5S)-5-甲基-2-哌啶基]-3,4-二氢-1H-异喹啉(0.4g，1.64mmol，17.25％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值245.2；实测值245.2；Rt＝0.322min。
步骤6：N-[3-环丙基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-甲基-3,4-二氢-1H-异喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将DIPEA(180.74mg，1.40mmol，243.59uL)添加到相应2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-环丙基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸盐(182.93mg，559.39umol，Li+)和2-甲基-6-[(5S)-5-甲基-2-哌啶基]-3,4-二氢-1H-异喹啉(136.7mg，559.39umol)于DMF(5mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU(233.97mg，615.33umol)。然后，在室温下在Ar下将反应混合物搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC(Waters Sunfire C18 20*100 5mkm柱且以MeOH+NH3为洗脱液混合物)，以得到N-[3-环丙基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-甲基-3,4-二氢-1H-异喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(106.4mg，194.27μmol，34.73％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值548.2；实测值548.4；Rt＝2.229min。
步骤7：N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-甲基-3,4-二氢-1H-异喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1264)的合成
将N-[3-环丙基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-甲基-3,4-二氢-1H-异喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(106.4mg，194.27μmol)溶解于二噁烷(2mL)和水(5mL)的混合物中。然后，将反应混合物在100℃下搅拌16h。在反应完成(通过LCMS监测)之后，在减压下浓缩所得悬浮液。使所获得的固体经历HPLC(WatersSunfire C18 20*100 5mkm柱且以水-MeCN+NH3为洗脱液混合物)，以得到N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-甲基-3,4-二氢-1H-异喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(10.3mg，23.01μmol，11.85％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)0.41-0.46(m,2H),0.84-1.01(m,5H),1.22-1.35(m,2H),1.61-1.67(m,2H),1.81-2.31(m,7H),2.54-2.57(m,2H),2.73-2.80(m,2H),3.43-3.45(m,2H),5.09-5.75(m,4H),7.01-7.08(m,3H),7.29-7.36(m,1H),10.41-10.47(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值448.2；实测值448.4；Rt＝1.372min。
实施例447.N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[(3S)-1-甲基吡咯烷-3-基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1311)和N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1308)的合成
步骤1：N-(5-溴-2-氟苯基)-1-甲基-吡咯烷-3-甲酰胺的合成
向1-甲基吡咯烷-3-甲酸(1g，7.74mmol)、5-溴-2-氟苯胺(1.47g，7.74mmol)、2-氯-1-甲基吡啶-1-鎓；碘化物(2.4g，9.39mmol)和DCM(12mL)中的混合物中添加DIPEA(3g，23.2mmol)且将混合物在20℃下搅拌12小时。在减压下浓缩混合物。通过快速色谱(40g二氧化硅快速柱，石油醚/EtOAc，其中EtOAc为0～20％，流速：30mL/min)纯化残余物，以得到呈黄色油状物的N-(5-溴-2-氟苯基)-1-甲基-吡咯烷-3-甲酰胺(1.8g，77.2％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值284.0，实测值302.9(M+H2O)。
步骤2：5-溴-2-(1-甲基吡咯烷-3-基)-1,3-苯并噻唑的合成
向N-(5-溴-2-氟苯基)-1-甲基-吡咯烷-3-甲酰胺(1.8g，5.98mmol)、劳森试剂(Lawessons reagent)(1.46g，3.61mmol)和DMF(20mL)的混合物中添加Cs2CO3(4.93g，15.1mmol)且将混合物在100℃下搅拌24小时。所得混合物通过添加水(100mL)来淬灭且用EtOAc(100mL*3)萃取。将合并的有机层用饱和NH4Cl水溶液(100mL*2)、盐水(100mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩，以得到粗产物，其通过快速色谱(24g二氧化硅快速柱，石油醚/EtOAc，其中EtOAc为0～100％，流速：30mL/min)进行纯化，以得到粗产物，其通过制备型HPLC(仪器：Gilson GX-281Liquid Handler，Gilson322泵，Gilson 156UV检测器；柱：Phenomenex Gemini-NX C18 75*30mm*3μm；流动相A：具有10mM NH4HCO3的H2O(v％)；流动相B：MeCN；梯度：在7.8min内31％至61％ B，保持100％ B达2min；流速：25mL/min；柱温：30℃；波长：220nm，254nm)进行进一步纯化，以得到呈黄色固体的5-溴-2-(1-甲基吡咯烷-3-基)-1,3-苯并噻唑(350mg，21.2％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值299.0，实测值299.0。
步骤3：2-(1-甲基吡咯烷-3-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噻唑的合成
将5-溴-2-(1-甲基吡咯烷-3-基)-1,3-苯并噻唑(330mg，1.11mmol)、KOAc(630mg，2.23mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(430mg，1.69mmol)、环戊基(二苯基)磷烷；二氯化钯；铁(80mg，0.109mmol)和二噁烷(8mL)的混合物在100℃下搅拌12小时。所得混合物通过添加水(50mL)来淬灭且用EtOAc(100mL*3)萃取。将合并的有机层用饱和NH4Cl水溶液(50mL)、盐水(100mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩。通过快速色谱(80g二氧化硅快速柱，EtOAc/MeOH，其中MeOH为0～5％，流速：30mL/min)纯化残余物，以得到呈棕色固体的2-(1-甲基吡咯烷-3-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噻唑(240mg，62.8％产率)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.30(s,1H),7.96(d,J＝8.0Hz,1H),7.75(d,J＝8.0Hz,1H),4.01-4.10(m,1H),3.35-3.40(m,1H),3.24-3.28(m,1H),3.02-3.10(m,2H),2.64(s,3H),2.54-2.62(m,1H),2.29-2.38(m,1H),1.38(s,12H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值345.2，实测值345.2。
步骤4：(3S)-3-甲基-6-[2-(1-甲基吡咯烷-3-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
向2-(1-甲基吡咯烷-3-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噻唑(200mg，0.581mmol)、(3S)-3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(300mg，0.869mmol)于二噁烷(1.5mL)和H2O(0.5mL)中的混合物中添加Pd(dppf)Cl2-DCM(47mg，0.0576mmol)和Cs2CO3(280mg，0.859mmol)。将所得混合物密封且在真空下脱气且用N2吹扫三次，然后在100℃下于微波中加热1小时。所得混合物通过添加水(30mL)来淬灭且用EtOAc(50mL*3)萃取。将合并的有机层用饱和NH4Cl水溶液(50mL)、盐水(50mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩。通过快速色谱(12g二氧化硅快速柱，DCM/MeOH，其中MeOH为0～10％，流速＝30mL/min)纯化残余物，以得到呈黄色固体的(3S)-3-甲基-6-[2-(1-甲基吡咯烷-3-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(200mg，83.2％产率)。
步骤5：5-[(5S)-5-甲基-2-哌啶基]-2-(1-甲基吡咯烷-3-基)-1,3-苯并噻唑的合成
将(3S)-3-甲基-6-[2-(1-甲基吡咯烷-3-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(200mg，0.484mmol)、DCM(3mL)和TFA(2mL，26.0mmol)的混合物在20℃下搅拌2小时。在减压下浓缩所得混合物。将残余物用MeOH(5mL)稀释且用饱和Na2CO3调节至pH＝6，然后在0℃下将NaBH4(30mg，0.793mmol)缓慢添加到混合物中。将所得混合物在0℃下搅拌1小时。在减压下浓缩混合物。通过快速色谱(柱：Sphercial C18，40g，40-60μm，MeCN/水(0.05v％NH3-H2O)，其中MeCN为0-50％，25mL/min，220nm)纯化残余物，以得到呈白色固体的5-[(5S)-5-甲基-2-哌啶基]-2-(1-甲基吡咯烷-3-基)-1,3-苯并噻唑(70mg，45.9％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值316.2，实测值316.2。
步骤6：N-叔丁氧基羰基-N-[3-乙基-5-[[2-[(5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基吡咯烷-3-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将2-[[6-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-5-乙基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(90mg，0.220mmol)、5-[(5S)-5-甲基-2-哌啶基]-2-(1-甲基吡咯烷-3-基)-1,3-苯并噻唑(70.0mg，0.222mmol)、HATU(100mg，0.263mmol)和DIPEA(0.11mL，0.632mmol)于DCM(5mL)中的混合物在20℃下搅拌2小时。所得混合物通过添加水(50mL)来淬灭且用DCM(50mL*3)萃取。将合并的有机层用饱和NH4Cl水溶液(50mL)、盐水(50mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩。通过快速色谱(4g二氧化硅快速柱，DCM/MeOH，其中MeOH为0～20％，流速＝30mL/min，254nm)纯化残余物，以得到呈黄色油状物的N-叔丁氧基羰基-N-[3-乙基-5-[[2-[(5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基吡咯烷-3-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(130mg，83.7％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值707.4，实测值707.4。
步骤7：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基吡咯烷-3-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
将N-叔丁氧基羰基-N-[3-乙基-5-[[2-[(5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基吡咯烷-3-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(130mg，0.184mmol)、DCM(3mL)和TFA(2mL，26.0mmol)的混合物在20℃下搅拌2小时。将所得混合物用28重量％NH3-H2O调节至pH＝8，然后在减压下浓缩混合物，以得到粗产物，其通过制备型HPLC(仪器：Gilson GX-281Liquid Handler，Gilson 322泵，Gilson 156UV检测器；柱：Phenomenex Gemini-NX 80*40mm*3μm；流动相A：具有10mmol NH4HCO3的H2O(v％)；流动相B：MeCN；梯度：在9.5min内27％至57％ B，保持100％ B达2min；流速：25mL/min；柱温：30℃；波长：220nm，254nm)进行纯化，以得到呈白色固体的N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基吡咯烷-3-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(60mg，64.4％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值507.2，实测值507.3；HPLC：在254nm下为96.24％；在254nm下为100％。
步骤8：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基吡咯烷-3-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
通过SFC(仪器：Berger，Multigr AM-II；柱：Daicel Chiralcel OJ 250mm×30mm×10μm；流动相：超临界CO2/EtOH(0.1％ NH3-H2O,v％)＝70/30；流速：80mL/min；柱温：38℃；喷嘴压力：100巴；喷嘴温度：60℃；蒸发器温度：20℃；修整器温度：25℃；波长：220nm)纯化N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基吡咯烷-3-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(50mg，0.0987mmol)。将级分在减压下浓缩，然后冻干过夜，以得到N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基吡咯烷-3-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(45mg，90.0％产率，峰2，保留时间：3.415min，两种非对映异构体的混合物，白色固体，递送2.1mg)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.11(br s,1H),7.87-8.00(m,2H),7.65(br s,1H),7.44(br s,1H),5.43-5.90(m,1H),3.88-4.13(m,1H),3.41-3.81(m,1H),3.10-3.21(m,1H),2.92(br s,1H),2.81(br s,2H),2.21-2.59(m,10H),1.95(br s,2H),1.47(br d,J＝12.5Hz,1H),1.10-1.29(m,6H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值507.2，实测值507.3；HPLC：在220nm下为100％，在254nm下为100％。
步骤9：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[(3S)-1-甲基吡咯烷-3-基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1311)和N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1308)的合成
通过手性SFC(仪器：Berger，Multigr AM-II；柱：Daicel Chiralcel OJ 250mm×10mm×10μm；流动相：超临界CO2/EtOH(0.1％NH3-H2O,v％)＝70/30；流速：80mL/min；柱温：38℃；喷嘴压力：100巴；喷嘴温度：60℃；蒸发器温度：20℃；修整器温度：25℃；波长：220nm)分离N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基吡咯烷-3-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(40mg，0.0790mmol)，以得到化合物1311和化合物1308。
化合物1311：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[(3S)-1-甲基吡咯烷-3-基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(17.2mg，具有反式相对化学的单一未知对映异构体，峰1，保留时间：6.269min，白色固体)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm8.12(br s,1H),7.91-8.01(m,2H),7.65(br s,1H),7.38-7.54(m,1H),5.46-5.87(m,1H),3.93-4.17(m,1H),3.39-3.84(m,1H),3.14(br d,J＝5.3Hz,1H),2.97(br d,J＝5.8Hz,2H),2.20-2.72(m,10H),1.92(br d,J＝12.3Hz,2H),1.47(br d,J＝11.8Hz,1H),1.08-1.31(m,6H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值507.2，实测值507.3；HPLC：在254nm下为98.34％，在254nm下为99.43％；96.9％ee。
化合物1308：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(16.8mg，具有反式相对化学的单一未知对映异构体，峰2，保留时间：7.179min，白色固体)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm8.11(br s,1H),7.90-8.01(m,2H),7.65(br s,1H),7.40-7.53(m,1H),5.44-5.87(m,1H),3.93(br s,1H),3.41-3.82(m,1H),3.12-3.22(m,1H),2.92(br s,1H),2.76-2.86(m,2H),2.08-2.64(m,10H),1.94(br s,2H),1.47(br d,J＝12.5Hz,1H),1.14(br d,J＝7.0Hz,6H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值507.2，实测值507.3；HPLC：在254nm下为97.87％，在254nm下为97.79％；93.2％ee。
实施例448.N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(5S)-2-[2-(1,3-二甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1382)、N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[外消旋-(3R,4R)-1,3-二甲基-4-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰胺(化合物1131)、N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[外消旋-(3S,4S)-1,3-二甲基-4-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰胺(化合物1373)、N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[外消旋-(3S,4R)-1,3-二甲基-4-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰胺(化合物1227)和N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[外消旋-(3R,4S)-1,3-二甲基-4-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰胺(化合物1098)的合成
步骤1：(1,3-二甲基-3,6-二氢-2H-吡啶-4-基)三氟甲磺酸酯的合成
将1,3-二甲基哌啶-4-酮(1.5g，0.0118mol)于THF(10mL)中的混合物密封且在真空中脱气且用N2吹扫三次，然后在-78℃下逐滴添加1M锂；双(三甲基甲硅烷基)氮烷(azanide)/THF(17mL，17.0mmol)，将混合物在-78℃下搅拌1小时，然后添加THF(10mL)中的PhNTf2(6.3g，0.176mol)。将溶液在20℃下搅拌12小时。所得混合物通过添加水(50mL)来淬灭且用EtOAc(50mL*3)萃取。将合并的有机层用饱和NH4Cl水溶液(50mL*2)、盐水(50mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩。通过快速色谱(24g二氧化硅快速柱，石油醚/EtOAc，其中EtOAc为0～80％，流速＝30mL/min，254nm)纯化残余物，以得到呈黄色油状物的(1,3-二甲基-3,6-二氢-2H-吡啶-4-基)三氟甲磺酸酯(2g，65.4％产率)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 5.83(br s,1H),3.21-3.28(m,1H),3.06-3.21(m,1H),2.99(br dd,J＝11.5,5.3Hz,1H),2.80(br s,1H),2.36-2.48(m,4H),1.16(d,J＝7.0Hz,3H)。LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值260.0，实测值260.0。
步骤2：1,3-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,6-二氢-2H-吡啶的合成
向(1,3-二甲基-3,6-二氢-2H-吡啶-4-基)三氟甲磺酸酯(2g，7.71mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(2.43g，9.56mmol)、环戊基(二苯基)磷烷；二氯甲烷；二氯化钯；铁(650mg，0.796mmol)于二噁烷(20mL)中的溶液中添加CH3COOK(2.29g，0.0233mol)。将所得混合物密封且在真空中脱气且用N2吹扫三次，然后在90℃、N2下搅拌12小时。所得混合物通过添加水(50mL)来淬灭且用EtOAc(50mL*3)萃取。将合并的有机层用饱和NH4Cl水溶液(50mL*2)、盐水(50mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩。通过快速色谱(24g二氧化硅快速柱，EtOAc/MeOH，其中MeOH为0～20％，流速＝30mL/min，254nm)纯化残余物，以得到呈棕色固体的1,3-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,6-二氢-2H-吡啶(1g，54.7％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值238.2，实测值238.1。
步骤3：(5S)-2-[2-(1,3-二甲基-3,6-二氢-2H-吡啶-4-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将(5S)-2-(2-溴-1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(300mg，0.729mmol)、1,3-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,6-二氢-2H-吡啶(300mg，1.27mmol)、K2CO3(300mg，2.17mmol)和Pd(PPh3)4(120mg，0.104mmol)溶解到微波管中的EtOH(10mL)和H2O(1mL)中。将密封管在90℃下于微波中加热1小时。所得混合物通过添加水(20mL)来淬灭且用EtOAc(20mL*3)萃取。将合并的有机层用饱和NH4Cl水溶液(20mL*2)、盐水(20mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩。通过快速色谱(24g二氧化硅快速柱，石油醚/EtOAc，其中EtOAc为0～100％，流速＝30mL/min，254nm)纯化残余物，以得到呈棕色油状物的(5S)-2-[2-(1,3-二甲基-3,6-二氢-2H-吡啶-4-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(300mg，粗品)。LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值442.2，实测值442.2。
步骤4：(5S)-2-[2-(1,3-二甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
向(5S)-2-[2-(1,3-二甲基-3,6-二氢-2H-吡啶-4-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(300mg，0.679mmol)于MeOH(4mL)中的溶液中添加Pd/C(300mg，具有50重量％水的10重量％Pd/C)。将所得混合物密封且在真空下脱气且用H2吹扫三次，然后在20℃、H2(在气球中)下搅拌18小时。过滤所得混合物且在减压下浓缩，以得到呈黄色油状物的(5S)-2-[2-(1,3-二甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(250mg，粗品)。LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值442.2，实测值444.3。
步骤5：2-(1,3-二甲基-4-哌啶基)-5-[(5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑的合成
向(5S)-2-[2-(1,3-二甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(250mg，0.564mmol)于DCM(6mL)中的溶液中添加TFA(0.8mL，10.4mmol)。将混合物在20℃下搅拌12小时。将所得混合物在减压下浓缩，以得到呈黄色油状物的2-(1,3-二甲基-4-哌啶基)-5-[(5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑(150mg，77.5％产率)。
步骤6：N-叔丁氧基羰基-N-[5-[[2-[(5S)-2-[2-(1,3-二甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-乙基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
向2-(1,3-二甲基-4-哌啶基)-5-[(5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑(150mg，0.437mmol)、2-[[6-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-5-乙基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(170mg，0.415mmol)、HATU(225mg，0.592mmol)于DCM(4mL)中的溶液中添加N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(0.4mL，2.30mmol)。将混合物在20℃下搅拌2小时。所得混合物通过添加水(100mL)来淬灭且用EtOAc(100mL*3)萃取。将合并的有机层用饱和NH4Cl水溶液(100mL*2)、盐水(100mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩。通过快速色谱(12g二氧化硅快速柱，EtOAc/MeOH，其中MeOH为0～20％，流速＝30mL/min，254nm)纯化残余物，以得到呈黄色油状物的N-叔丁氧基羰基-N-[5-[[2-[(5S)-2-[2-(1,3-二甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-乙基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(200mg，68.9％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值735.4，实测值735.4。
步骤7：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(5S)-2-[2-(1,3-二甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1382)的合成
向N-叔丁氧基羰基-N-[5-[[2-[(5S)-2-[2-(1,3-二甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-乙基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(200mg，0.272mmol)于DCM(4mL)中的溶液中添加TFA(0.02mL，0.272mmol)。将混合物在20℃下搅拌12小时。在减压下浓缩所得混合物。通过制备型HPLC(仪器：Gilson GX-281LiquidHandler，Gilson 322泵，Gilson 156UV检测器；柱：Phenomenex Gemini-NX 80×40mm×3μm；流动相A：具有10mmol NH4HCO3的H2O(v％)；流动相B：MeCN；梯度：在9.5min内35％至65％B，保持100％ B达1min；流速：25mL/min；柱温：30℃；波长：220nm，254nm)纯化残余物，以得到呈白色固体的N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(5S)-2-[2-(1,3-二甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(50mg，34.4％产率)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.88-8.17(m,3H),7.36-7.71(m,2H),5.43-5.91(m,1H),3.67-4.20(m,1H),3.43(br s,1H),2.72-3.20(m,3H),1.82-2.63(m,15H),1.20-1.52(m,3H),1.15(br d,J＝6.8Hz,3H),0.84-0.97(m,3H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值535.3，实测值535.3；HPLC：在220nm下为100％，在254nm下为100％。
步骤8：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[外消旋-(3R,4R)-1,3-二甲基-4-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰胺(化合物1131)、N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[外消旋-(3S,4S)-1,3-二甲基-4-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰胺(化合物1373)、N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[外消旋-(3S,4R)-1,3-二甲基-4-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰胺(化合物1227)和N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[外消旋-(3R,4S)-1,3-二甲基-4-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰胺(化合物1098)的合成
通过手性SFC(仪器：Thar800Q；柱：daicel chiralcel OJ 250×30mm I.D.10μm；流动相：超临界CO2/EtOH(0.1％ NH3`H2O，v％)＝75/25；流速：70mL/min；柱温：38℃；喷嘴温度：100巴；喷嘴温度：60℃；蒸发器温度：20℃；修整器温度：25℃；波长：220nm)纯化N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(5S)-2-[2-(1,3-二甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(50mg，0.0935mmol)，以得到两种产物。
通过手性SFC(仪器：ACSSH-CO；柱：daicel chiralcel IC 250×30mm*5μm；流动相：超临界己烷/IPA(0.1％ NH3-H2O，v％)＝70/30；流速：25mL/min；柱温：38℃；喷嘴温度：100巴；喷嘴温度：60℃；蒸发器温度：20℃；修整器温度：25℃；波长：220nm)进一步纯化峰1，以得到化合物1131和化合物1373。
化合物1131：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[外消旋-(3R,4R)-1,3-二甲基-4-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰胺(峰1，保留时间＝4.028min，单一未知对映异构体，白色固体)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.41-8.81(m,1H),7.86-8.11(m,3H),7.35-7.51(m,1H),5.44-5.91(m,1H),3.39-4.20(m,7H),3.14(br d,J＝11.5Hz,1H),3.00(br d,J＝12.0Hz,2H),2.13-2.61(m,14H),1.98(br d,J＝12.0Hz,5H),1.47(br d,J＝12.0Hz,1H),1.14(d,J＝7.0Hz,3H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值535.3，实测值535.3；HPLC：在220nm下为96.51％，在254nm下为96.00％；96.7％ee。
化合物1373：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[外消旋-(3S,4S)-1,3-二甲基-4-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰胺(峰2，保留时间＝4.169min，单一未知对映异构体，白色固体)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.41-8.81(m,1H),7.86-8.11(m,3H),7.35-7.51(m,1H),5.44-5.91(m,1H),3.39-4.20(m,7H),3.14(br d,J＝11.5Hz,1H),3.00(br d,J＝12.0Hz,2H),2.13-2.61(m,14H),1.98(br d,J＝12.0Hz,5H),1.47(br d,J＝12.0Hz,1H),1.14(d,J＝7.0Hz,3H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值535.3，实测值535.3；HPLC：在220nm下为96.75％，在254nm下为96.89％；74.6％ee。
通过手性SFC(仪器：Berger，Multigr AM-II；柱：daicel chiralcel AD 250×30mm*10μm；流动相：超临界CO2/EtOH(0.1％ NH3-H2O，v％)＝50/50；流速：80mL/min；柱温：38℃；喷嘴温度：100巴；喷嘴温度：60℃；蒸发器温度：20℃；修整器温度：25℃；波长：220nm)进一步纯化峰2，以得到化合物1227和化合物1098。
化合物1227：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[外消旋-(3S,4R)-1,3-二甲基-4-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰胺(峰3，保留时间＝4.648min，单一未知对映异构体，白色固体)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.90-8.21(m,3H),7.29-7.78(m,2H),5.84(br s,1H),3.67-4.19(m,1H),3.37-3.55(m,1H),2.72-3.18(m,2H),1.80-2.61(m,12H),1.47(br d,J＝11.3Hz,1H),1.07-1.35(m,6H),0.92(br s,3H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值535.3，实测值535.3；HPLC：在220nm下为97.75％，在254nm下为100％；98.8％ee。
化合物1098：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[外消旋-(3R,4S)-1,3-二甲基-4-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰胺(峰4，保留时间＝4.689min，单一未知对映异构体，白色固体)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.86-8.17(m,3H),7.32-7.72(m,2H),5.45-5.90(m,1H),3.69-4.18(m,1H),3.37-3.49(m,1H),2.95-3.20(m,1H),2.82(br d,J＝9.5Hz,1H),1.88-2.59(m,14H),1.47(br d,J＝12.0Hz,1H),1.22-1.31(m,2H),1.15(d,J＝6.8Hz,3H),0.93(br d,J＝5.5Hz,3H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值535.3，实测值535.3；HPLC：在220nm下为96.27％，在254nm下为100％；100％ee。
实施例449.N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1187)的合成
步骤1：(8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-烯-3-基)三氟甲磺酸酯的合成
将8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-酮(1g，7.18mmol)于THF(20mL)中的混合物密封且在真空下脱气且用N2吹扫三次，然后在-78℃下逐滴添加1M LiHMDS/THF(13mL，13.0mmol)，且将混合物在-78℃下搅拌1小时。然后添加PhNTf2(3.85g，10.8mmol)于THF(20mL)中的溶液。将溶液在25℃下搅拌12小时。通过添加饱和NH4Cl水溶液(100mL)淬灭所得混合物且用EtOAc(100mL*3)萃取。将合并的有机层用饱和NH4Cl水溶液(100mL)、盐水(100mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩。通过快速色谱(25g二氧化硅快速柱，石油醚/EtOAc，其中EtOAc为0～60％，流速＝60mL/min，I2)纯化残余物，以得到呈棕色油状物的(8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-烯-3-基)三氟甲磺酸酯(1.6g，82.1％产率)。1HNMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 5.95(br d,J＝5.4Hz,1H),3.52(t,J＝5.7Hz,1H),3.44(br dd,J＝6.1,4.9Hz,1H),2.85(br dd,J＝17.5,3.1Hz,1H),2.40(s,3H),2.15-2.26(m,1H),1.95-2.12(m,3H),1.68(ddd,J＝12.9,9.2,6.5Hz,1H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值272.0，实测值272.0。
步骤2：(8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-烯-3-基)硼酸的合成
向(8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-烯-3-基)三氟甲磺酸酯(1.6g，5.90mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(1.86g，7.31mmol)、环戊基(二苯基)磷烷；二氯甲烷；二氯化钯；铁(430mg，0.527mmol)于二噁烷(20mL)中的溶液中添加CH3COOK(1.75g，17.8mmol)。将所得混合物密封且在真空下脱气且用N2吹扫三次。然后在90℃、N2气氛下将混合物搅拌12小时。所得混合物通过添加水(100mL)来淬灭且用EtOAc(100mL*3)萃取。将合并的水层在减压下浓缩，以得到粗产物，将其溶解于DCM/MeOH(10:1)(100mL)中。然后，过滤溶液且在减压下浓缩滤液，以得到呈黄色固体的(8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-烯-3-基)硼酸(2g，粗品)。LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值168.1，实测值168.1。
步骤3：(5S)-5-甲基-2-[2-(8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-烯-3-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
向(5S)-2-(2-溴-1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(300mg，0.729mmol)、(8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-烯-3-基)硼酸(1.5g，8.98mmol)于EtOH(6mL)和H2O(2mL)中的混合物中添加Pd(PPh3)4(80mg，0.0692mmol)和K2CO3(300mg，2.17mmol)。将所得混合物在90℃下于微波中加热1小时。在减压下浓缩所得混合物。通过快速色谱(12g二氧化硅快速柱，EtOAc/MeOH，其中MeOH为0～20％，流速＝60mL/min，254nm)纯化残余物，以得到呈棕色油状物的(5S)-5-甲基-2-[2-(8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-烯-3-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(300mg，90.7％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值454.2，实测值454.2。
步骤4：(5S)-5-甲基-2-[2-(8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
在氢气下(在气球中)，将(5S)-5-甲基-2-[2-(8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-烯-3-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(300mg，0.661mmol)、Pd/C(50mg，具有50重量％水的10重量％Pd)和MeOH(10mL)中的混合物在20℃下搅拌12小时。过滤所得混合物且在减压下浓缩。通过制备型HPLC(仪器：Gilson GX-281Liquid Handler，Gilson 322泵，Gilson 156UV检测器；柱：Welch Xtimate C18 150*25mm*5μm；流动相A：具有0.225％FA的H2O(v％)；流动相B：MeOH；梯度：在9.5min内45％至75％ B，保持100％ B达2min；流速：25mL/min；柱温：30℃；波长：220nm，254nm)纯化残余物，以得到呈白色固体的(5S)-5-甲基-2-[2-(8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(150mg，49.8％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值456.3，实测值456.2。
步骤5：2-(8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)-5-[(5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑的合成
将(5S)-5-甲基-2-[2-(8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(150mg，0.329mmol)、MeOH(3mL)和4M HCl/MeOH(3mL，12.0mmol)的混合物在20℃下搅拌2小时。将所得混合物在减压下浓缩，以得到呈白色固体的2-(8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)-5-[(5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑(110mg，粗品，HCl)。LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值356.2，实测值356.1。
步骤6：N-叔丁氧基羰基-N-[3-乙基-5-[[2-[(5S)-5-甲基-2-[2-(8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
向2-(8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)-5-[(5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑(110mg，0.281mmol，HCl)、2-[[6-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-5-乙基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(120mg，0.293mmol)于DCM(5mL)中的混合物中添加HATU(130mg，0.342mmol)和DIPEA(0.25mL，1.44mmol)。将所得混合物在20℃下搅拌2小时。在减压下浓缩反应所得混合物。通过快速色谱(12g二氧化硅快速柱，EtOAc/MeOH，其中MeOH为0～40％，流速＝30mL/min，254nm)纯化残余物，以得到呈黄色油状物的N-叔丁氧基羰基-N-[3-乙基-5-[[2-[(5S)-5-甲基-2-[2-(8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(200mg，95.4％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值747.4，实测值747.5。
步骤7：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1187)的合成
将N-叔丁氧基羰基-N-[3-乙基-5-[[2-[(5S)-5-甲基-2-[2-(8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(200mg，0.268mmol)、DCM(3mL)和TFA(3mL，38.9mmol)的混合物在20℃下搅拌2小时。将所得混合物用饱和NaHCO3溶液调节至pH＝9，然后在减压下浓缩混合物。通过制备型HPLC(仪器：Gilson GX-281Liquid Handler，Gilson 322泵，Gilson 156UV检测器；柱：Phenomenex Gemini-NX 80*40mm*3μm；流动相A：具有10mmol NH4HCO3的H2O(v％)；流动相B：MeCN；梯度：在9.5min内22％至52％ B，保持100％ B达1min；流速：25mL/min；柱温：30℃；波长：220nm，254nm)纯化残余物，以得到呈白色固体的N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(39.4mg，26.9％产率)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.01-8.21(m,1H),7.86-8.01(m,2H),7.61-7.85(m,1H),7.37-7.51(m,1H),5.44-5.86(m,1H),3.69-4.13(m,1H),3.54(br s,1H),3.33-3.46(m,3H),2.51(br d,J＝6.9Hz,2H),2.38(s,5H),2.17-2.25(m,2H),1.99-2.15(m,4H),1.78-1.96(m,4H),1.40-1.55(m,1H),1.17-1.33(m,3H),1.14(br d,J＝6.9Hz,3H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值547.3，实测值547.3；HPLC：在220nm下为100％，在254nm下为99.11％；96.8％ee。
实施例450.N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[4-[外消旋-(3aS,7aS)-5-甲基-3,3a,4,6,7,7a-六氢-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-2-基]苯基]-1-哌啶基]乙酰胺(化合物1167)和N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[4-[外消旋-(3aR,7aR)-5-甲基-3,3a,4,6,7,7a-六氢-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-2-基]苯基]-1-哌啶基]乙酰胺(化合物1287)的合成
通过手性SFC(仪器：Berger，Multigr AM-II；柱：Daicel chiralpak AS(250mm*30mm*5μm)；流动相：超临界己烷-IPA(0.1％ NH3，MeOH v％)＝60/40；流速：80mL/min；柱温：38℃；喷嘴压力：100巴；喷嘴温度：60℃；蒸发器温度：20℃；修整器温度：25℃；波长：220nm)纯化N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(5-甲基-3,3a,4,6,7,7a-六氢-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-2-基)苯基]-1-哌啶基]乙酰胺(50mg，0.0991mmol)。将级分在减压下浓缩，然后冻干过夜，以得到化合物1167和化合物1287。
化合物1167：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[4-[外消旋-(3aS,7aS)-5-甲基-3,3a,4,6,7,7a-六氢-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-2-基]苯基]-1-哌啶基]乙酰胺(11mg，单一未知对映异构体，峰2，保留时间：1.337min，白色固体)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.93-8.13(m,1H),7.49-7.69(m,1H),7.16(br d,J＝8.3Hz,2H),6.48-6.60(m,2H),5.58-5.74(m,1H),3.60-4.00(m,1H),3.23(br s,3H),2.40-2.64(m,7H),2.28(s,6H),1.91(br d,J＝10.5Hz,3H),1.72(br s,2H),1.23-1.44(m,5H),1.11(br d,J＝6.9Hz,3H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值505.3，实测值505.4；HPLC：在220nm下为98.69％，在254nm下为99.23％；100％ee。
化合物1287：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[4-[外消旋-(3aR,7aR)-5-甲基-3,3a,4,6,7,7a-六氢-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-2-基]苯基]-1-哌啶基]乙酰胺(13.2mg，单一未知对映异构体，峰3，保留时间：2.427min，白色固体)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.92-8.19(m,1H),7.43-7.69(m,1H),7.08-7.23(m,2H),6.31-6.64(m,2H),5.12-5.74(m,1H),3.55-4.26(m,1H),3.08-3.27(m,3H),2.35-2.75(m,8H),2.17-2.33(m,5H),1.90(br d,J＝7.8Hz,3H),1.70(br d,J＝8.8Hz,2H),1.18-1.48(m,5H),1.11(br d,J＝6.8Hz,3H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值505.3，实测值505.3；HPLC：在254nm下为100％，在254nm下为99.05％；98.6％ee。
实施例451.N-(6-氨基-5-环丙基吡啶-3-基)-2-((2S,5R)-5-甲基-2-(2-甲基-2H-吲唑-6-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1043)的合成
步骤1：N-[3-环丙基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-甲基吲唑-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-环丙基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(0.32g，996μmol)添加到2-甲基-6-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]吲唑(228mg，996μmol)和三乙胺(504mg，4.98mmol，694μL)于DMFA(4.00mL)的混合物中。将所得混合物搅拌10min。添加HATU(454mg，1.20mmol)且在25℃下继续搅拌17h。将所获得的混合物在真空中浓缩。使残余物经历HPLC(0-5min 40-90％水-MeOH；流速：30mL/min，柱：Chromatorex 18SMB100-5T，100x19mm，5μm)，以得到呈黄色固体的N-[3-环丙基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-甲基吲唑-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.164g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值533.32；实测值533.2；Rt＝3.460。
步骤2：N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-甲基吲唑-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
将N-[3-环丙基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-甲基吲唑-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.12g，225μmol)溶解于水(2.00mL)和二噁烷(2.00mL)的混合物中。使所得混合物在100℃下搅拌20h。使所获得的混合物经历HPLC(0-5min 30-80％水-甲醇，+0.1体积％25％ NH3水溶液，30mL/min，柱：YMC-Actus TriartC18,100x20 mm，5μm)，以得到呈黄色固体的N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-甲基吲唑-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.04g，90.2μmol，40.0％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值433.26；实测值433.4；Rt＝2.443。
步骤3：N-(6-氨基-5-环丙基吡啶-3-基)-2-((2S,5R)-5-甲基-2-(2-甲基-2H-吲唑-6-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺的合成
使N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-甲基吲唑-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.04g，90.2μmol)经历手性色谱(Chiralpak As-H(250*20，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，12mL/min)，以得到N-(6-氨基-5-环丙基吡啶-3-基)-2-((2S,5R)-5-甲基-2-(2-甲基-2H-吲唑-6-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(0.01786g，41.29μmol，4.47％产率)
制备型：
对映异构化合物1403的RT(Chiralpak As-H(250*20，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，12mL/min)＝10.623
化合物1403的RT(Chiralpak As-H(250*20，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，12mL/min)＝15.580。
分析型：化合物1403的RT(Chiralpak As-H(250*4.6，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝9.495。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.35-0.51(m,2H),0.81-0.92(m,2H),0.96-1.08(m,3H),1.29-1.42(m,1H),1.61-1.80(m,2H),1.82-1.94(m,1H),1.98-2.19(m,1H),2.20-2.36(m,1H),2.75-3.25(m,1H),3.45-4.05(m,1H),4.14(s,3H),5.14-5.66(m,1H),5.67-5.79(m,2H),6.89-7.08(m,1H),7.27-7.43(m,1H),7.44-7.53(m,1H),7.63-7.74(m,1H),7.95-8.09(m,1H),8.28(s,1H),10.40-10.57(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值433.26；实测值433.2；Rt＝0.955。
分析型：对映异构化合物1403的RT(Chiralpak As-H(250*4.6，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝13.320。
1H NMR(600MHz,dmso)δ0.39-0.50(m,2H),0.82-0.91(m,2H),0.99-1.05(m,3H),1.31-1.42(m,1H),1.61-1.81(m,2H),1.82-1.93(m,1H),2.01-2.21(m,1H),2.23-2.33(m,1H),2.78-3.25(m,1H),3.46-4.03(m,1H),4.14(s,3H),5.20-5.67(m,1H),5.69-5.79(m,2H),6.91-7.08(m,1H),7.26-7.40(m,1H),7.46-7.53(m,1H),7.63-7.71(m,1H),7.97-8.09(m,1H),8.28(s,1H),10.40-10.57(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值433.26；实测值433.2；Rt＝0.955。
实施例452.N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[2-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1156)和N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[2-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(对映异构化合物1156)的合成
步骤1：N-[3-环丙基-5-[[2-[(2R,5S)-2-[2-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
向N,N-二甲基-2-[5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]吲唑-2-基]乙胺(200mg，505μmol，3盐酸盐)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-环丙基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸盐(174mg，531μmol，Li+盐)和三乙胺(256mg，2.53mmol，352μL)于二甲基甲酰胺(2.50mL)中的搅拌混合物中添加HATU(211mg，556μmol)。将反应混合物在20℃下搅拌4h。使所获得的混合物经历HPLC(0-5min 50-100％水-ACN；流速：30mL/min，柱：Chromatorex 18SMB100-5T，100x19 mm，5μm)，以得到呈淡黄色固体的N-[3-环丙基-5-[[2-[(2R,5S)-2-[2-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(179mg，303μmol，60.1％产率)。
LCMS(ESI)：[M-H]+m/z：计算值588.39；实测值588.0；Rt＝2.360。
步骤2：N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[2-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
将水(1.00g，55.5mmol，1.00mL)添加到N-[3-环丙基-5-[[2-[(2R,5S)-2-[2-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(179mg，304μmol)于二噁烷(2.00mL)中的溶液中。将所得混合物在95℃下搅拌15h。使所获得的混合物经历HPLC(0-1-6min 40-40-85％水-甲醇，+0.1体积％25％ NH3水溶液，30mL/min，柱：XBridge BEH C18，100x20 mm，5μm)，以得到呈白色固体的N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[2-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(101mg，206μmol，67.9％产率)。
LCMS(ESI)：[M-H]+m/z：计算值488.33；实测值488.2；Rt＝1.773。
步骤3：N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[2-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺和N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[2-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
使N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[2-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(101mg，206μmol)经历手性HPLC(柱：CHIRALCEL OJ-H 250*20，5um，流动相：己烷-IPA-MeOH，50-25-25，流速：10mL/min，10mg/注入，10次注入，V＝4L)，以得到：呈白色固体的N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[2-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(38.0mg，77.6μmol，75.3％产率)化合物1156(其中保留时间＝13.490min(分析型)，16.023min(制备型))和N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[2-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(34.0mg，69.4μmol，67.3％产率)对映异构化合物1156(其中保留时间＝25.422min(分析型)，29.223min(制备型))。
(化合物1156)：N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[2-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.37-0.49(m,2H),0.81-0.90(m,2H),1.00-1.07(m,3H),1.29-1.43(m,1H),1.58-1.70(m,1H),1.72-1.82(m,1H),1.82-1.95(m,1H),2.01-2.14(m,1H),2.16(s,6H),2.21-2.31(m,1H),2.76(t,2H),2.78-3.26(m,1H),3.45-4.07(m,1H),4.48(t,2H),5.16-5.67(m,1H),5.67-5.80(m,2H),7.05-7.25(m,1H),7.28-7.42(m,1H),7.54-7.69(m,2H),7.97-8.10(m,1H),8.25-8.37(m,1H),10.47(br s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值490.33；实测值490.2；Rt＝1.640。
(对映异构化合物1156)：N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[2-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.37-0.49(m,2H),0.81-0.91(m,2H),0.96-1.06(m,3H),1.30-1.39(m,1H),1.61-1.70(m,1H),1.72-1.82(m,1H),1.82-1.96(m,1H),2.00-2.13(m,1H),2.17(s,6H),2.22-2.33(m,1H),2.74-2.82(m,2H),2.88-3.26(m,1H),3.44-4.04(m,1H),4.49(t,2H),5.13-5.68(m,1H),5.68-5.87(m,2H),7.10-7.27(m,1H),7.27-7.44(m,1H),7.50-7.64(m,2H),7.97-8.15(m,1H),8.25-8.37(m,1H),10.41-10.54(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值490.33；实测值490.2；Rt＝1.641。
实施例453.N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[1-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1249)和N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[1-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(对映异构化合物1249)的合成
步骤1：N-[3-环丙基-5-[[2-[(2R,5S)-2-[1-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
向N,N-二甲基-2-[5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]吲唑-1-基]乙胺(200mg，505μmol，3盐酸盐)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-环丙基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸盐(174mg，531μmol，Li+)和三乙胺(256mg，2.53mmol，352μL)于二甲基甲酰胺(2.50mL)中的搅拌混合物中添加HATU(211mg，556μmol)。将反应混合物在20℃下搅拌4h。使所获得的混合物经历HPLC(0-5min 50-50-80％水-甲醇，+0.1体积％25％ NH3水溶液，30mL/min，柱：YMC-Actus Triart C18，100x20mm，5μm)，以得到呈淡黄色固体的N-[3-环丙基-5-[[2-[(2R,5S)-2-[1-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(220mg，373μmol，73.8％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值590.39；实测值590.2；Rt＝2.586。
步骤2：N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[1-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
将水(1.00g，55.5mmol，1.00mL)添加到N-[3-环丙基-5-[[2-[(2R,5S)-2-[1-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(220mg，373μmol)于二噁烷(2.00mL)中的溶液中。将所得混合物在95℃下搅拌15h。使所获得的混合物经历HPLC(0-5min 50-90％水-甲醇，+0.1体积％25％ NH3水溶液，30mL/min，柱：YMC-Actus Triart C18，100x20 mm，5μm)，以得到呈白色固体的N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[1-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(126mg，257μmol，68.9％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值490.33；实测值490.2；Rt＝2.033。
步骤3：N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[1-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1249)和N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[1-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(对映异构化合物1249)的合成
使N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[1-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(126mg，257μmol)经历手性HPLC(ChiralсelOJ-H 250*20，5-I己烷-IPA-MeOH，60-20-20，12mL/min，0.36L(15mg)/注入，8次注入)，以得到呈白色固体的N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[1-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(48.0mg，98.0μmol，76.2％产率)化合物1249(其中保留时间＝12.828min(分析型)，16,18min(制备型))和N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[1-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(29.0mg，59.2μmol，46.0％产率)对映异构化合物1249(其中保留时间＝18.201min(分析型)，22.28min(制备型))。
化合物1249：N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[1-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.37-0.51(m,2H),0.82-0.93(m,2H),1.00-1.05(m,3H),1.30-1.41(m,1H),1.60-1.71(m,1H),1.72-1.82(m,1H),1.83-1.93(m,1H),2.01-2.13(m,1H),2.14(s,6H),2.25-2.35(m,1H),2.64-2.71(m,2H),2.77-3.27(m,1H),3.44-4.06(m,1H),4.39-4.52(m,2H),5.18-5.70(m,1H),5.70-5.82(m,2H),7.25-7.34(m,1H),7.34-7.44(m,1H),7.64-7.70(m,2H),7.98-8.10(m,2H),10.44-10.60(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M-H]+m/z：计算值488.33；实测值488.2；Rt＝1.801。
对映异构化合物1249：N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[1-[2-(二甲基氨基)乙基]吲唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.38-0.48(m,2H),0.82-0.91(m,2H),0.98-1.07(m,3H),1.29-1.43(m,1H),1.60-1.76(m,2H),1.83-1.92(m,1H),2.05-2.19(m,1H),2.25-2.33(m,1H),2.49-2.57(m,6H),2.70-2.96(m,1H),2.99-3.20(m,2H),3.43-4.05(m,1H),4.62(s,2H),5.21-5.71(m,1H),5.71-5.83(m,2H),7.26-7.46(m,2H),7.67-7.77(m,2H),7.96-8.12(m,2H),10.44-10.56(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M-H]+m/z：计算值488.33；实测值488.2；Rt＝1.812。
实施例454.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[3-[2-(二甲基氨基)乙基]苯并噻吩-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1142)的合成
步骤1：2-(5-溴苯并噻吩-3-基)乙酸甲酯的合成
将2-(5-溴苯并噻吩-3-基)乙酸(0.50g，1.84mmol)溶解于无水甲醇(20.0mL)中且添加硫酸(1.00g，10.2mmol)。将反应混合物在75℃下加热12h。将所获得的混合物在真空中浓缩。将残余物用水处理且过滤。将沉淀溶解于EA(50.0mL)中，用NaHCO3水溶液洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩，以得到呈黄色固体的2-(5-溴苯并噻吩-3-基)乙酸甲酯(0.60g，粗品)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ3.62(s,3H),3.97(s,2H),7.49-7.52(m,1H),7.68(s,1H),7.68-7.72(m,2H)。
步骤2：2-[5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并噻吩-3-基]乙酸甲酯的合成
向2-(5-溴苯并噻吩-3-基)乙酸甲酯(0.39g，1.35mmol)和4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-二(1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷)(326mg，1.29mmol)于DME(25.0mL)中的搅拌溶液中添加乙酸钾(266mg，2.71mmol，169μL)。将所得悬浮液抽真空且用氩气回填。将反应混合物在50℃下搅拌1h。添加[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(99.1mg，135μmol)。将反应混合物在80℃下搅拌6h。将所获得的混合物在减压下浓缩。将残余物溶解于CHCl3中，通过硅胶垫过滤且在真空中浓缩滤液，以得到呈淡黄色胶状物的2-[5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并噻吩-3-基]乙酸甲酯(170mg，512μmol，37.8％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值333.15；实测值-；Rt＝4.046。
步骤3：6-[3-(2-甲氧基-2-氧代乙基)苯并噻吩-5-基]-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
向2-[5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并噻吩-3-基]乙酸甲酯(19.3g，34.8mmol)和3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(11.8g，34.1mmol)于水(100mL)和二噁烷(250mL)中的搅拌溶液中添加碳酸钠(7.37g，69.5mmol，2.91mL)。将所得悬浮液抽真空，然后用氩气回填。将所获得的混合物在50℃下搅拌1h。添加[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(1.27g，1.74mmol)。将反应混合物在80℃下搅拌18h。将所获得的混合物在减压下浓缩，溶解于CHCl3中，经Na2SO4干燥，通过硅胶垫过滤且在真空中浓缩滤液，以得到呈棕色胶状物的6-[3-(2-甲氧基-2-氧代乙基)苯并噻吩-5-基]-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(15.4g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值402.2；实测值-；Rt＝4.557。
步骤4：2-[5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯并噻吩-3-基]乙酸的合成
将6-[3-(2-甲氧基-2-氧代乙基)苯并噻吩-5-基]-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(15.4g，24.9mmol)于二噁烷(150mL)和氯化氢20％(100mL)中的溶液在21℃下搅拌15h。在真空中浓缩反应混合物，以得到呈棕色胶状物的2-[5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯并噻吩-3-基]乙酸(12.7g，粗品，盐酸盐)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值288.10；实测值288.2；Rt＝2.133。
步骤5：2-[5-(1-叔丁氧基羰基-5-甲基-2-哌啶基)苯并噻吩-3-基]乙酸的合成
向2-[5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯并噻吩-3-基]乙酸(12.5g，23.9mmol，盐酸盐)于MeOH(250mL)中的冰冷溶液中添加硼氢化钠(1.81g，47.9mmol，1.69mL)。使所得混合物在室温下搅拌过夜将所获得的混合物用1N HCl酸化至pH＝3-4。添加于MeOH(250mL)和水(50.0mL)中的氢氧化钠珠粒(1.91g，47.9mmol，899μL)，随后添加二碳酸二-叔丁酯(5.22g，23.9mmol，5.49mL)。使反应混合物搅拌过夜。将所获得的混合物在真空中浓缩。将残余物用EtOAc/水进行分配。将所获得的混合物用EtOAc(100mL)萃取。将水酸化至pH＝1且用DCM萃取两次。将合并的有机物用盐水洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩，以得到呈米色固体的2-[5-(1-叔丁氧基羰基-5-甲基-2-哌啶基)苯并噻吩-3-基]乙酸(9.15g，23.5mmol，98.2％产率)。
LCMS(ESI)：[M-boc]+m/z：计算值290.2；实测值290.2；Rt＝4.087。
步骤6：2-[3-[2-(二甲基氨基)-2-氧代乙基]苯并噻吩-5-基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
在室温下将2-[5-(1-叔丁氧基羰基-5-甲基-2-哌啶基)苯并噻吩-3-基]乙酸(1.00g，2.57mmol)、HATU(1.17g，3.08mmol)和TEA(779mg，7.70mmol，1.07mL)混合于无水DCM(25.0mL)中。将所得混合物搅拌15min。添加二甲胺(419mg，5.13mmol，540μL，盐酸盐)。将所得混合物在室温下搅拌过夜。将所获得的混合物用水、盐水洗涤且在真空中浓缩，以得到呈棕色胶状物的2-[3-[2-(二甲基氨基)-2-氧代乙基]苯并噻吩-5-基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.30g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值417.26；实测值-；Rt＝4.352。
步骤7：2-[3-[2-(二甲基氨基)乙基]苯并噻吩-5-基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
在惰性气氛中，向2-[3-[2-(二甲基氨基)-2-氧代乙基]苯并噻吩-5-基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.10g，2.64mmol)于THF(25.0mL)中的溶液中添加双(2-甲氧基乙氧基)氢化铝钠(3.05g，10.6mmol，3.02mL，70％纯度)。在室温下搅拌12h之后，将所得混合物用1N NaOH萃取，用MTBE(2x25.0 mL)萃取，干燥且在真空中浓缩至干，以得到呈带棕色胶状物的2-[3-[2-(二甲基氨基)乙基]苯并噻吩-5-基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.10g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值403.29；实测值403.2；Rt＝3.089。
步骤8：N,N-二甲基-2-[5-(5-甲基-2-哌啶基)苯并噻吩-3-基]乙胺的合成
在21℃下，向2-[3-[2-(二甲基氨基)乙基]苯并噻吩-5-基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.21g，3.01mmol)于MeOH(25.0mL)中的溶液中添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(4.00g，110mmol，5.00mL)。将所得混合物搅拌12h。将所获得的混合物在真空中浓缩，以得到呈米色固体的N,N-二甲基-2-[5-(5-甲基-2-哌啶基)苯并噻吩-3-基]乙胺(0.90g，2.40mmol，79,2％)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值303.23；实测值303.2；Rt＝1.129。
步骤9：N-[5-[[2-[2-[3-[2-(二甲基氨基)乙基]苯并噻吩-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
在室温下将N,N-二甲基-2-[5-(5-甲基-2-哌啶基)苯并噻吩-3-基]乙胺(0.45g，1.20mmol，2盐酸盐)、HATU(456mg，1.20mmol)和TEA(607mg，5.99mmol，835μL)混合于无水DMF(5.00mL)中。将所得混合物搅拌15min。向其中添加2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(354mg，1.20mmol)且在室温下继续搅拌过夜。将所获得的混合物倒入到水中且用EtOAc萃取3次。将合并的有机物用水、盐水洗涤且在真空中浓缩。使残余物经历HPLC(0.5-6.5min 63％水-乙腈+NH3，30mL/min(装载泵4mL；乙腈)，柱：YMC-ACTUS TRIART C18 100*20 5微米)，以得到呈米色固体的N-[5-[[2-[2-[3-[2-(二甲基氨基)乙基]苯并噻吩-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(159mg，274μmol，22.9％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值580.34；实测值580.4；Rt＝3.059。
步骤10：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[3-[2-(二甲基氨基)乙基]苯并噻吩-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1141)的合成
将N-[5-[[2-[2-[3-[2-(二甲基氨基)乙基]苯并噻吩-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(159mg，274μmol)溶解于水(2.00mL)/二噁烷(2.00mL)中。将反应混合物在90℃下加热过夜。将所获得的混合物在真空中浓缩至干。使残余物经历HPLC(第1次运行：45-70％0.5-6.5min水-乙腈+NH3；流速30mL/min(装载泵4ml/min乙腈)；柱xbridgeC18 100x19 mm 5um(R)；第2次运行：10-40％0.5-6.5min水-ACN+FA；流速30ml/min(装载泵4mL/min acn)；柱SunFireC18 100x19 mm 5um(R))，以得到呈米色固体的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[3-[2-(二甲基氨基)乙基]苯并噻吩-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(61.4mg，128μmol，46.7％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.01-1.06(m,3H),1.32-1.42(m,1H),1.66-1.79(m,1H),1.81-1.92(m,1H),1.95-2.04(m,3H),2.06-2.18(m,1H),2.22-2.26(m,6H),2.27-2.34(m,1H),2.58-2.65(m,2H),2.93-3.00(m,2H),3.28-3.30(m,1H),3.65-4.11(m,1H),5.25-5.60(m,1H),5.59-5.77(m,2H),7.28-7.39(m,1H),7.39-7.53(m,2H),7.67-7.73(m,1H),7.92-8.07(m,2H),10.46-10.59(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值480.28；实测值480.4；Rt＝2.171。
方案D.式4化合物的合成
式4化合物为式(I)、(Ia)和(Ib)化合物，其中R1为H，R2为-C(＝O)NH2，R3、R4和R8为H，R7为-Me
一般程序4
步骤1：将化合物1(1.0当量)、相应硼酸(1.25当量)、碳酸钠(3当量)、Pd(dppf)Cl2*DCM(0.04当量)、水(1mL)和1,4-二噁烷(2mL)置于8ml小瓶中且在手套箱中装入Ar。将反应混合物在75℃下搅拌12h。冷却至室温之后，将水(4mL)添加到小瓶中且将混合物用DCM萃取。将分离的有机层浓缩，以得到粗化合物2，其不经另外纯化即用于下一步骤中。
步骤2：向粗化合物2于DCM(0.5mL)中的溶液中添加TFA(0.5mL)。将反应混合物在室温下搅拌30min。然后，将所得混合物蒸发且将残余物溶解于DCM(5mL)中。将有机层用NaOH水溶液洗涤两次且在减压下浓缩，以得到粗化合物3，其不经纯化即用于下一步骤。
步骤3：将NaBH4(1.1当量)一次性添加到粗化合物3(1当量)于甲醇(4mL)中的溶液中。将反应混合物搅拌过夜且蒸发。将残余物溶解于DCM(5mL)中且用水洗涤两次。将有机层在真空中浓缩，以得到粗胺A1，其不经纯化即用于下一步骤中。
示例性偶联程序1：将胺A1(约1当量)、2-((5-氨基甲酰基吡啶-3-基)氨基)-2-氧代乙酸三乙基铵盐(约1.1当量)、HATU(1.1当量)、DIPEA(1.5当量)在DMSO中搅拌过夜。在LCMS确认所需产物存在之后，将反应混合物提交至HPLC(Sunfire C18 19*100 5mkm柱，以H2O-MeOH为流动相，流速15ml/min，运行时间5min)，以得到纯的式4化合物。
示例性偶联程序2：在21℃下，将2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(约1当量)、HATU(约1.1当量)和三乙胺(约3当量)混合于无水DMF中且将所得混合物搅拌12h。向其中添加胺A1(约1当量)且将所得混合物在21℃下搅拌过夜。将所得混合物倒入到水中，用EtOAc萃取3次，将合并的有机物用水、盐水洗涤且蒸发。使残余物经历HPLC(0-5min20-70％水-甲醇(NH3 0.1％)，流速30ml/min(装载泵4ml/min甲醇(NH3 0.1％))，柱：YMC-Actus Triart C18100*20mml.D.S-5um)，提供式4化合物。
在以上程序之后，产生起始材料变化文库。使在所述系列的各反应中的试剂和反应条件的摩耳比保持相同。在以下页中呈现最终产物的产率和LC-MS和NMR描述。所有硼酸和频哪醇酯均为商业烯胺储备液。
实施例455.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-2-(4-氟-3-甲基苯基)-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物131)的合成
通过一般程序1制备。产率：12.8mg，9.18％1H NMR(500MHz,CDCl3)δ1.11(m,3H),1.40(m,2H),1.89(m,1H),2.00(m,2H),2.18(m,2H),2.28(m,3H),3.40(m,1H),5.97(m,1H),7.00(m,1H),7.08(m,2H),8.92(m,2H),9.53(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值398.2；实测值399.2；Rt＝3.381min。
实施例456.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-2-(6-甲氧基吡啶-3-基)-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物128)的合成
通过一般程序1制备。产率：6.1mg，4.38％1H NMR(500MHz,CDCl3)δ1.12(m,3H),1.45(m,1H),1.98(m,2H),2.23(m,2H),3.36(m,1H),3.96(m,3H),4.57(m,1H),6.34(m,1H),6.79(m,1H),7.54(m,1H),8.16(s,1H),8.69(s,1H),8.90(s,1H),8.99(s,1H),9.74(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值397.2；实测值398.2；Rt＝2.770min。
实施例457.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-2-(3,5-二甲基苯基)-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物118)的合成
通过一般程序1制备。产率：5.2mg，3.77％1H NMR(500MHz,CDCl3)δ1.12(m,3H),1.39(m,1H),1.99(m,3H),2.23(m,2H),2.33(m,6H),3.44(m,1H),4.83(m,1H),6.03(m,2H),6.90(m,3H),8.69(m,1H),8.94(m,2H),9.79(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值394.2；实测值395.4；Rt＝3.518min。
实施例458.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-2-(3,4-二氟苯基)-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物263)的合成
通过一般程序1制备。产率：8.3mg，5.89％1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.96-1.07(m,3H),1.26-1.38(m,1H),1.59-1.69(m,1H),1.81-1.94(m,1H),2.00-2.14(m,1H),2.14-2.29(m,1H),2.78-3.26(m,1H),3.45-4.05(m,1H),5.06-5.65(m,1H),7.10-7.23(m,1H),7.33-7.50(m,2H),7.51-7.68(m,1H),8.10-8.23(m,1H),8.42-8.53(m,1H),8.70-8.80(m,1H),8.81-8.93(m,1H),11.17-11.33(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值402.2；实测值403.2；Rt＝3.123min。
实施例459.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-2-(3-氯-4-氟苯基)-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物338)的合成
通过一般程序1制备。产率：1.7mg，1.16％ LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值418.2；实测值419.2；Rt＝1.308min
实施例460.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-2-[4-氟-3-(三氟甲基)苯基]-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物255)的合成
通过一般程序1制备。产率：17.7mg，11.18％1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.86-1.07(m,3H),1.21-1.42(m,1H),1.60-1.71(m,1H),1.84-1.98(m,1H),2.04-2.31(m,2H),2.73-3.28(m,1H),3.45-4.04(m,1H),5.15-5.71(m,1H),7.48-7.72(m,4H),8.07-8.22(m,1H),8.39-8.56(m,1H),8.72-8.80(m,1H),8.80-8.97(m,1H),11.17-11.36(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值452.2；实测值453.2；Rt＝1.281min。
实施例461.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-2-[4-(二氟甲氧基)苯基]-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物271)的合成
通过一般程序1制备。产率：13.3mg，8.79％1H R(600MHz,DMSO-d6)δ0.96-1.04(m,3H),1.28-1.40(m,1H),1.62-1.69(m,1H),1.82-1.95(m,1H),2.02-2.14(m,1H),2.16-2.29(m,1H),2.75-3.24(m,1H),3.46-4.04(m,1H),5.10-5.60(m,1H),7.06-7.33(m,3H),7.34-7.41(m,2H),7.53-7.65(m,1H),8.10-8.20(m,1H),8.42-8.51(m,1H),8.70-8.80(m,1H),8.81-8.93(m,1H),11.13-11.35(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值432.2；实测值433.2；Rt＝3.218min。
实施例462.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(环氧乙烷-4-基氧基)苯基]哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物269)的合成
通过一般程序制备。产率：8.1mg，4.96％1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.98-1.03(m,3H),1.27-1.36(m,1H),1.49-1.57(m,2H),1.65-1.73(m,1H),1.79-1.89(m,1H),1.90-1.97(m,2H),1.98-2.12(m,1H),2.14-2.22(m,1H),2.79-3.21(m,1H),3.40-3.49(m,3H),3.80-3.98(m,2H),4.48-4.59(m,1H),5.02-5.60(m,1H),6.92-7.00(m,2H),7.18-7.28(m,2H),7.55-7.66(m,1H),8.10-8.21(m,1H),8.41-8.53(m,1H),8.67-8.80(m,1H),8.81-8.93(m,1H),11.08-11.35(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值466.2；实测值467.2；Rt＝3.057min。
实施例463.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(氧戊环-3-基氧基)苯基]哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物264)的合成
通过一般程序1制备。产率：5.4mg，3.41％1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.98-1.04(m,3H),1.28-1.38(m,1H),1.63-1.73(m,1H),1.82-1.95(m,2H),1.97-2.13(m,1H),2.15-2.23(m,2H),2.77-3.23(m,1H),3.40-3.70(m,1H),3.73-4.00(m,4H),4.95-5.04(m,1H),5.05-5.63(m,1H),6.87-6.94(m,2H),7.19-7.26(m,2H),7.55-7.64(m,1H),8.11-8.20(m,1H),8.40-8.51(m,1H),8.71-8.80(m,1H),8.81-8.94(m,1H),11.13-11.28(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值452.2；实测值453.2；Rt＝2.921min。
实施例464.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-2-(6-氟吡啶-3-基)-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物276)的合成
通过一般程序1制备。产率：14.9mg，11.05％1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.80-1.07(m,3H),1.28-1.41(m,1H),1.62-1.70(m,1H),1.81-1.96(m,1H),1.99-2.15(m,1H),2.15-2.27(m,1H),2.70-3.25(m,1H),3.48-4.23(m,1H),5.21-5.78(m,1H),7.15-7.30(m,1H),7.49-7.64(m,1H),7.87-8.00(m,1H),8.07-8.26(m,2H),8.36-8.52(m,1H),8.65-8.78(m,1H),8.78-8.94(m,1H),11.21(br s,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值385.3；实测值386.2；Rt＝2.738min。
实施例465.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(三氟甲氧基)苯基]哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物250)的合成
通过一般程序1制备。产率：10.3mg，6.53％1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.97-1.11(m,3H),1.27-1.41(m,1H),1.57-1.70(m,1H),1.82-1.98(m,1H),1.98-2.14(m,1H),2.14-2.29(m,1H),2.79-3.20(m,1H),3.38-4.08(m,1H),5.09-5.71(m,1H),7.34-7.40(m,2H),7.42-7.49(m,2H),7.54-7.65(m,1H),8.08-8.20(m,1H),8.41-8.51(m,1H),8.72-8.79(m,1H),8.81-8.92(m,1H),11.13-11.31(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值450.2；实测值451.2；Rt＝1.299min。
实施例466.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-2-[4-(环丙基甲基)苯基]-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物273)的合成
通过一般程序1制备。产率：12.4mg，8.42％1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.14-0.19(m,2H),0.41-0.47(m,2H),0.88-0.97(m,1H),0.97-1.06(m,3H),1.23-1.38(m,1H),1.60-1.72(m,1H),1.77-1.95(m,1H),1.98-2.16(m,1H),2.16-2.29(m,1H),2.43-2.45(m,1H),2.49-2.52(m,1H),2.74-3.20(m,1H),3.45-4.04(m,1H),5.08-5.63(m,1H),7.19-7.27(m,4H),7.49-7.64(m,1H),8.05-8.28(m,1H),8.38-8.54(m,1H),8.68-8.79(m,1H),8.80-8.93(m,1H),11.22(br s,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值420.2；实测值421.4；Rt＝3.738min。
实施例467.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-2-(4-氰基苯基)-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物246)的合成
通过一般程序1制备。产率：8.0mg，5.34％1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.87-1.06(m,3H),1.26-1.41(m,1H),1.56-1.65(m,1H),1.66-1.89(m,1H),1.89-2.13(m,1H),2.15-2.28(m,1H),2.73-3.25(m,1H),3.47-4.31(m,1H),5.22-5.77(m,1H),7.50-7.56(m,2H),7.56-7.64(m,1H),7.83-7.89(m,2H),8.11-8.21(m,1H),8.42-8.53(m,1H),8.72-8.79(m,1H),8.81-8.92(m,1H),11.18-11.32(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值391.2；实测值392.2；Rt＝1.017min。
实施例468.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-2-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物337)的合成
通过一般程序1制备。产率：14.7mg，8.96％1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.03(m,3H),1.35(m,3H),1.72(m,1H),1.86(m,1H),2.01(m,1H),2.14(m,1H),2.74(m,1H),3.00(m,1H),3.42(m,2H),4.22(m,1H),4.87(m,1H),5.27(m,1H),6.69(m,1H),7.02(m,1H),7.14(m,1H),7.59(m,1H),8.14(m,1H),8.46(m,1H),8.75(m,1H),8.85(m,1H),11.17(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值468.2；实测值469.2；Rt＝3.388min。
实施例469.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(1H-吡唑-1-基)苯基]哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物256)的合成
通过一般程序1制备。产率：10.8mg，7.2％1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.99-1.08(m,3H),1.29-1.44(m,1H),1.64-1.75(m,1H),1.84-1.96(m,1H),2.04-2.19(m,1H),2.20-2.32(m,1H),2.77-3.17(m,1H),3.47-4.06(m,1H),5.17-5.74(m,1H),6.50-6.55(m,1H),7.41-7.49(m,2H),7.55-7.64(m,1H),7.67-7.75(m,1H),7.80-7.87(m,2H),8.10-8.21(m,1H),8.43-8.53(m,2H),8.71-8.80(m,1H),8.83-8.94(m,1H),11.05-11.39(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值432.2；实测值433.2；Rt＝3.037min。
实施例470.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-2-(4-氰基-3-环丙基苯基)-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物244)的合成
通过一般程序1制备。产率：2.9mg，1.93％1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.75-0.84(m,2H),0.97-1.15(m,5H),1.23-1.38(m,1H),1.51-1.63(m,1H),1.81-1.93(m,1H),1.99-2.27(m,3H),2.75-3.23(m,1H),3.42-4.06(m,1H),5.13-5.65(m,1H),6.89-6.99(m,1H),7.21-7.33(m,1H),7.54-7.67(m,1H),7.70-7.83(m,1H),8.08-8.21(m,1H),8.39-8.57(m,1H),8.68-8.79(m,1H),8.79-8.93(m,1H),11.12-11.35(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值431.2；实测值432.2；Rt＝1.306min。
实施例471.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-2-{4-[(1H-咪唑-1-基)甲基]苯基}-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物238)的合成
通过一般程序1制备。产率：26.6mg，17.02％1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.98-1.08(m,3H),1.26-1.40(m,1H),1.58-1.68(m,1H),1.81-1.91(m,1H),2.00-2.26(m,2H),2.74-3.24(m,1H),3.43-4.03(m,1H),5.13-5.57(m,3H),7.25-7.28(m,1H),7.29(s,2H),7.30-7.35(m,1H),7.55-7.65(m,1H),7.91-7.98(m,1H),8.08-8.22(m,1H),8.40-8.51(m,1H),8.61-8.66(m,1H),8.71-8.79(m,1H),8.81-8.92(m,1H),11.12-11.28(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值446.2；实测值447.2；Rt＝0.809min。
实施例472.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-5-甲基-2-{4-[(1H-1,2,4-三唑-1-基)甲基]苯基}哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物252)的合成
通过一般程序1制备。产率：22.2mg，14.17％1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.98-1.08(m,3H),1.26-1.40(m,1H),1.58-1.68(m,1H),1.81-1.91(m,1H),2.00-2.26(m,2H),2.74-3.24(m,1H),3.43-4.03(m,1H),5.13-5.57(m,3H),7.25-7.28(m,1H),7.29(s,2H),7.30-7.35(m,1H),7.55-7.65(m,1H),7.91-7.98(m,1H),8.08-8.22(m,1H),8.40-8.51(m,1H),8.61-8.66(m,1H),8.71-8.79(m,1H),8.81-8.92(m,1H),11.12-11.28(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值447.2；实测值448.2；Rt＝1.008min。
实施例473.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-2-(3,4-二氯苯基)-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物243)的合成
通过一般程序1制备。产率：13.4mg，8.79％1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.93-1.08(m,3H),1.24-1.42(m,1H),1.56-1.70(m,1H),1.78-1.97(m,1H),2.01-2.28(m,2H),2.76-3.25(m,1H),3.43-4.09(m,1H),5.12-5.58(m,1H),7.27-7.36(m,1H),7.51-7.56(m,1H),7.56-7.62(m,1H),7.62-7.70(m,1H),8.10-8.20(m,1H),8.42-8.52(m,1H),8.71-8.80(m,1H),8.80-8.93(m,1H),11.09-11.34(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值435.3；实测值437.1；Rt＝1.336min。
实施例474.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-2-(4-氯-3-氟苯基)-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物327)的合成
通过一般程序1制备。产率：7.0mg，4.78％1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.01(m,3H),1.32(m,1H),1.63(m,1H),1.88(m,1H),2.10(m,2H),2.90(m,1H),3.84(m,1H),5.35(m,1H),7.19(m,1H),7.36(m,1H),7.60(m,2H),8.15(m,1H),8.46(m,1H),8.76(m,1H),8.87(m,1H),11.24(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值418.2；实测值419.2；Rt＝1.311min。
实施例475.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-2-(3-氟苯基)-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物247)的合成
通过一般程序1制备。产率：9.8mg，7.28％1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.95-1.08(m,3H),1.29-1.43(m,1H),1.59-1.71(m,1H),1.81-1.95(m,1H),2.00-2.15(m,1H),2.17-2.29(m,1H),2.74-3.25(m,1H),3.46-4.08(m,1H),5.13-5.69(m,1H),7.05-7.22(m,3H),7.37-7.50(m,1H),7.54-7.66(m,1H),8.09-8.22(m,1H),8.41-8.54(m,1H),8.70-8.80(m,1H),8.80-8.93(m,1H),11.29(br s,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值384.2；实测值385.2；Rt＝1.235min。
实施例476.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-2-[3-(二氟甲基)苯基]-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物268)的合成
通过一般程序1制备。产率：7.6mg，5.21％1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.98-1.07(m,3H),1.28-1.39(m,1H),1.60-1.69(m,1H),1.82-1.95(m,1H),2.04-2.17(m,1H),2.18-2.30(m,1H),2.74-3.25(m,1H),3.51-4.10(m,1H),5.18-5.75(m,1H),6.90-7.15(m,1H),7.45-7.67(m,5H),8.09-8.22(m,1H),8.41-8.55(m,1H),8.69-8.81(m,1H),8.81-8.98(m,1H),11.19-11.34(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值416.2；实测值417.2；Rt＝3.096min。
实施例477.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-2-(3-环丁基苯基)-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物261)的合成
通过一般程序1制备。产率：1.8mg，1.22％ LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值420.2；实测值421.2；Rt＝1.386min。
实施例478.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-(三氟甲氧基)苯基]哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物279)的合成
通过一般程序1制备。产率：19.6g，12.43％1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.97-1.07(m,3H),1.28-1.42(m,1H),1.58-1.68(m,1H),1.83-1.96(m,1H),2.01-2.16(m,1H),2.16-2.30(m,1H),2.71-3.24(m,1H),3.47-4.07(m,1H),5.19-5.70(m,1H),7.23-7.32(m,2H),7.34-7.44(m,1H),7.50-7.61(m,2H),8.10-8.21(m,1H),8.39-8.53(m,1H),8.70-8.80(m,1H),8.80-8.92(m,1H),11.17-11.38(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值450.2；实测值451.2；Rt＝3.477min。
实施例479.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-2-(2,3-二氢-1H-茚-5-基)-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物277)的合成
通过一般程序1制备。产率：4.8mg，3.73％1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.98-1.07(m,3H),1.27-1.38(m,1H),1.62-1.74(m,1H),1.79-1.91(m,1H),1.95-2.12(m,3H),2.15-2.23(m,1H),2.77-2.85(m,4H),3.23-3.27(m,1H),3.46-4.01(m,1H),4.99-5.62(m,1H),7.02-7.10(m,1H),7.14-7.24(m,2H),7.50-7.68(m,1H),8.06-8.22(m,1H),8.38-8.53(m,1H),8.69-8.79(m,1H),8.79-9.01(m,1H),11.02-11.40(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值406.2；实测值407.2；Rt＝3.466min。
实施例480.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-2-(1-苯并呋喃-6-基)-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物241)的合成
通过一般程序1制备。产率：10.0mg，7.03％1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.01-1.06(m,3H),1.28-1.39(m,1H),1.69-1.77(m,1H),1.83-1.94(m,1H),2.05-2.20(m,1H),2.26-2.34(m,1H),2.81-3.21(m,1H),3.47-4.06(m,1H),5.18-5.75(m,1H),6.90-6.95(m,1H),7.20-7.28(m,1H),7.52-7.56(m,1H),7.56-7.62(m,1H),7.62-7.68(m,1H),7.95-8.00(m,1H),8.09-8.22(m,1H),8.42-8.53(m,1H),8.70-8.80(m,1H),8.82-8.93(m,1H),11.11-11.39(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值406.2；实测值407.1；Rt＝1.248min。
实施例481.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-2-(2,3-二氢-1-苯并呋喃-6-基)-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物405)的合成
通过一般程序1制备。产率：8.8mg，6.0％1H NMR(500MHz,DMSO)δ1.00-1.05(m,3H),1.26-1.38(m,1H),1.66-1.78(m,1H),1.84-1.96(m,1H),1.97-2.10(m,1H),2.15-2.25(m,1H),2.82-3.14(m,2H),3.46-4.04(m,1H),4.23-4.59(m,3H),5.05-5.60(m,1H),6.68-6.77(m,1H),6.77-6.88(m,1H),7.17-7.31(m,1H),7.56-7.69(m,1H),8.10-8.26(m,1H),8.43-8.56(m,1H),8.72-8.83(m,1H),8.84-8.96(m,1H),11.08-11.38(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值408.2；实测值409.2；Rt＝3.179min。
实施例482.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-2-(3-氰基苯基)-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物239)的合成
通过一般程序1制备。产率：14.5mg，10.58％1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.83-1.08(m,3H),1.23-1.39(m,1H),1.56-1.70(m,1H),1.82-1.97(m,1H),2.00-2.19(m,1H),2.19-2.35(m,1H),2.73-3.26(m,1H),3.48-4.06(m,1H),5.12-5.72(m,1H),7.56-7.71(m,3H),7.72-7.81(m,2H),8.09-8.21(m,1H),8.40-8.54(m,1H),8.72-8.80(m,1H),8.80-8.94(m,1H),11.15-11.39(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值391.2；实测值392.2；Rt＝1.169min。
实施例483.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-2-(1,3-二氧杂茚-5-基)-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物270)的合成
通过一般程序1制备。产率：2.4mg，1.67％ LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值410.2；实测值411.0；Rt＝1.181min。
实施例484.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-(三氟甲基)苯基]哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物265)的合成
通过一般程序1制备。产率：11.7mg，7.69％1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.98-1.08(m,3H),1.28-1.42(m,1H),1.57-1.70(m,1H),1.82-1.96(m,1H),2.03-2.19(m,1H),2.19-2.32(m,1H),2.70-3.24(m,1H),3.50-4.07(m,1H),5.22-5.76(m,1H),7.57-7.72(m,5H),8.08-8.19(m,1H),8.38-8.53(m,1H),8.67-8.78(m,1H),8.78-8.93(m,1H),11.29(br s,1H)LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值434.2；实测值435.2；Rt＝3.373min。
实施例485.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-2-(3,4-二氢-2H-1-苯并吡喃-6-基)-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物341)的合成
通过一般程序1制备。产率：10.2mg，6.90％1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.00(m,3H),1.31(m,1H),1.70(m,1H),1.88(m,3H),2.01(m,1H),2.14(m,1H),2.71(m,2H),3.03(m,1H),3.68(m,1H),4.08(m,2H),5.26(m,1H),6.70(m,1H),6.98(m,2H),7.59(m,1H),8.15(m,1H),8.46(m,1H),8.75(m,1H),8.85(m,1H),11.19(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值422.2；实测值423.2；Rt＝3.122min。
实施例486.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[6-(甲基氨基)吡啶-3-基]哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物209)的合成
通过一般程序1制备。产率：18.3mg，13.19％1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)1.03(m,3H),1.34(m,1H),1.94(m,4H),2.75(m,3H),3.10(m,1H),3.68(m,1H),5.26(m,1H),6.46(m,2H),7.35(m,1H),7.61(m,1H),7.96(m,1H),8.17(m,1H),8.48(m,1H),8.78(m,1H),8.89(m,1H),11.19(m,1H)LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值396.2；实测值397.2；Rt＝0.782min。
实施例487.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-2-(6-氨基吡啶-3-基)-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物224)的合成
通过一般程序1制备。产率：6.7mg，5.01％1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)1.02(m,3H),1.34(m,1H),1.96(m,4H),3.01(m,1H),3.61(m,1H),5.25(m,1H),5.88(s,2H),6.45(m,1H),7.34(m,1H),7.61(m,1H),7.87(s,1H),8.17(m,1H),8.48(m,1H),8.77(m,1H),8.88(m,1H)LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值382.2；实测值383.1；Rt＝0.742min。
实施例488.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(4-甲基-1H-吡唑-1-基)苯基]哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物218)的合成
通过一般程序1制备。产率：20.8mg，13.31％1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)1.05(m,3H),1.37(m,1H),1.71(m,1H),1.92(m,1H),2.10(s,4H),2.26(m,1H),3.05(m,1H),3.78(m,1H),5.42(m,1H),7.44(m,2H),7.58(m,2H),7.79(m,2H),8.17(m,1H),8.26(m,1H),8.50(m,1H),8.78(m,1H),8.90(m,1H),11.29(s,1H)LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值446.2；实测值447.2；Rt＝1.234min
实施例489.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[6-(吡咯烷-1-基)吡啶-3-基]哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物207)的合成
通过一般程序1制备。产率：10.9mg，7.13％1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.00(m,3H),1.32(m,1H),1.89(m,6H),2.05(m,2H),3.10(m,1H),3.35(s,4H),3.61(m,1H),5.25(m,1H),6.41(m,1H),7.41(m,1H),7.59(m,1H),8.01(m,1H),8.14(m,1H),8.44(m,1H),8.75(m,1H),8.85(m,1H),11.15(m,1H)LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值436.2；实测值437.2；Rt＝0.866min。
实施例490.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-2-(4-氟-3-甲氧基苯基)-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物222)的合成
通过一般程序1制备。产率：2.2mg，1.52％1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)1.03(m,3H),1.34(m,1H),1.71(m,1H),1.92(m,1H),2.16(m,3H),3.71(m,4H),5.34(m,1H),6.90(m,1H),7.05(m,1H),7.21(m,1H),7.63(m,1H),8.17(m,1H),8.49(m,1H),8.77(m,1H),8.87(m,1H),11.27(s,1H)LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值414.2；实测值415.2；Rt＝1.219min。
实施例491.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-5-甲基-2-{4-[(吗啉-4-基)甲基]苯基}哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物213)的合成
通过一般程序1制备。产率：20.4mg，12.52％1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)1.04(m,3H),1.35(m,1H),1.69(m,1H),1.89(m,1H),2.14(m,2H),2.33(m,4H),2.96(m,1H),3.44(m,3H),3.55(m,4H),5.38(m,1H),7.31(m,4H),7.61(m,1H),8.16(m,1H),8.48(m,1H),8.83(m,2H),11.22(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值465.2；实测值466.2；Rt＝0.854min。
实施例492.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-2-(4-氯-3-甲基苯基)-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物173)的合成
通过一般程序1制备。产率：12.8mg，8.81％ LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值414.2；实测值415.2；Rt＝1.359min。
实施例493.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-2-[3-(3,5-二甲基-1H-吡唑-1-基)苯基]-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物153)的合成
通过一般程序1制备。产率：15.1mg，9.37％1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.03(dd,3H),1.34(m,1H),1.67(m,1H),1.98(m,2H),2.15(m,3H),2.25(m,4H),2.82(m,1H),3.77(m,1H),6.05(m,2H),7.36(m,3H),7.51(m,1H),7.59(m,1H),8.14(m,1H),8.47(m,1H),8.76(m,1H),8.86(m,1H),11.26(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值460.2；实测值461.2；Rt＝1.160min。
实施例494.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-甲基-4-(氧戊环-3-基氧基)苯基]哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物171)的合成
通过一般程序1制备。产率：21.6mg，12.23％1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.01(m,3H),1.33(m,1H),1.69(m,1H),1.92(m,3H),2.11(m,3H),2.19(m,2H),3.03(m,1H),3.76(m,5H),4.97(m,1H),6.88(m,1H),7.08(m,2H),7.58(m,1H),8.14(m,1H),8.46(m,1H),8.80(m,2H),11.19(m,1H)LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值466.3；实测值467.2；Rt＝1.175min。
实施例495.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-甲基-2,3-二氢-1-苯并呋喃-5-基)哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物151)的合成
通过一般程序1制备。产率：22.4mg，15.15％1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)1.03(m,3H),1.37(m,4H),1.75(m,1H),1.89(m,1H),2.11(m,2H),2.89(m,2H),3.70(m,1H),4.88(m,1H),5.29(m,1H),6.71(dd,1H),7.04(m,1H),7.16(m,1H),7.60(m,1H),8.16(m,1H),8.48(m,1H),8.77(m,1H),8.88(m,1H),11.19(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值422.2；实测值423.2；Rt＝1.263min。
实施例496.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-甲基喹啉-6-基)哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物167)的合成
通过一般程序1制备。产率：18.2mg，12.05％1H NMR(DMSO-d6,400MHz):δ(ppm)1.07(m,3H),1.41(m,1H),1.85(m,2H),2.30(m,2H),2.65(m,4H),3.82(m,1H),5.58(m,1H),7.42(m,1H),7.70(m,2H),7.93(m,2H),8.24(m,2H),8.50(m,1H),8.84(m,2H),11.30(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值431.2；实测值432.2；Rt＝0.859min。
实施例497.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-2-(3-氟-4-甲基苯基)-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物162)的合成
通过一般程序1制备。产率：8.6mg，6.17％1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)1.03(m,3H),1.34(m,1H),1.67(m,1H),1.89(m,1H),2.03(m,1H),2.21(m,4H),3.02(m,1H),3.75(m,1H),5.35(m,1H),7.08(m,2H),7.31(m,1H),7.61(m,1H),8.17(m,1H),8.48(m,1H),8.83(m,2H),11.25(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值398.2；实测值399.2；Rt＝1.189min。
实施例498.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-2-(3,4-二甲基苯基)-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物180)的合成
通过一般程序1制备。产率：13.1mg，9.49％1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.01(m,3H),1.31(m,1H),1.66(m,1H),1.86(m,1H),2.03(m,1H),2.18(m,7H),3.08(m,1H),3.71(m,1H),5.31(m,1H),7.07(m,3H),7.58(m,1H),8.14(m,1H),8.46(m,1H),8.80(m,2H),11.20(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值394.2；实测值395.2；Rt＝1.274min。
实施例499.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-2-(3-氯-4-甲基苯基)-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物179)的合成
通过一般程序1制备。产率：25.4mg，17.49％1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)1.03(m,3H),1.34(m,1H),1.65(m,1H),1.90(m,1H),2.11(m,2H),2.31(m,3H),2.80(m,1H),3.48(m,1H),5.35(m,1H),7.21(m,1H),7.36(m,2H),7.61(d,1H),8.17(m,1H),8.48(m,1H),8.83(m,2H),11.26(s,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值414.2；实测值415.4；Rt＝1.319min。
实施例500.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-2-(3,5-二氟苯基)-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物416)的合成
通过一般程序1制备。产率：3.4mg,2.35％1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ0.99-1.08(m,3H),1.21-1.37(m,1H),1.60-1.75(m,1H),1.82-1.99(m,1H),2.07-2.22(m,1H),2.79-3.26(m,1H),3.52-4.11(m,1H),5.12-5.68(m,1H),6.95-7.11(m,2H),7.10-7.25(m,1H),7.45-7.65(m,2H),8.08-8.30(m,1H),8.37-8.60(m,1H),8.71-8.83(m,1H),8.83-9.02(m,1H),11.21-11.45(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值402.2；实测值403.0；Rt＝1.209min。
实施例501.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-2-(3,5-二氯苯基)-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物206)的合成
通过一般程序1制备。产率：2.5mg，1.64％1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)1.03(m,3H),1.35(m,1H),1.65(m,1H),1.91(m,1H),2.15(m,2H),3.52(m,1H),3.87(m,1H),5.37(m,1H),7.36(m,2H),7.58(m,2H),8.17(m,1H),8.51(m,1H),8.83(m,2H),11.31(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值435.2；实测值436.2；Rt＝1.377min。
实施例502.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-2-(3-氨基-4-氯苯基)-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物280)的合成
通过一般程序1制备。产率：4.9mg，3.37％1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.92-1.06(m,3H),1.25-1.37(m,1H),1.64-1.75(m,1H),1.81-1.95(m,1H),1.95-2.12(m,2H),2.81-3.25(m,1H),3.46-4.03(m,1H),5.02-5.29(m,1H),5.29-5.51(m,2H),6.45-6.54(m,1H),6.73-6.83(m,1H),7.11-7.20(m,1H),7.52-7.63(m,1H),8.08-8.21(m,1H),8.43-8.53(m,1H),8.71-8.79(m,1H),8.83-8.93(m,1H),10.73-11.52(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值415.2；实测值416.2；Rt＝1.199min。
实施例503.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-2-(4-环丁基苯基)-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物406)的合成
通过一般程序1制备。产率：27.1mg，15.5％1H NMR(500MHz,DMSO)δ1.01-1.06(m,3H),1.28-1.42(m,1H),1.66-1.75(m,1H),1.76-1.90(m,2H),1.91-2.04(m,2H),2.04-2.15(m,3H),2.18-2.34(m,3H),2.80-3.29(m,1H),3.50-4.06(m,1H),5.12-5.65(m,1H),7.22-7.31(m,4H),7.55-7.70(m,1H),8.05-8.28(m,1H),8.45-8.58(m,1H),8.75-8.85(m,1H),8.85-8.97(m,1H),11.09-11.39(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值420.2；实测值421.2；Rt＝1.420min。
实施例504.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(三氟甲基)苯基]哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物251)的合成
通过一般程序1制备。产率：3.4mg，2.27％1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.96-1.07(m,3H),1.27-1.40(m,1H),1.57-1.68(m,1H),1.82-1.96(m,1H),2.05-2.18(m,1H),2.19-2.31(m,1H),2.73-3.25(m,1H),3.46-4.12(m,1H),5.18-5.80(m,1H),7.50-7.57(m,2H),7.58-7.65(m,1H),7.69-7.79(m,2H),8.07-8.23(m,1H),8.41-8.55(m,1H),8.71-8.80(m,1H),8.81-8.95(m,1H),11.16-11.33(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值434.2；实测值435.0；Rt＝1.366min。
实施例505.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-2-(4-甲氧基苯基)-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物228)的合成
通过一般程序1制备。产率：2.1mg，1.51％1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)1.03(m,3H),1.35(m,1H),1.80(m,3H),2.02(m,1H),2.19(m,1H),3.64(m,4H),5.34(m,1H),6.95(m,2H),7.26(m,2H),7.61(m,1H),8.16(m,1H),8.48(m,1H),8.77(m,1H),8.89(m,1H),11.26(s,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值396.2；实测值397.2；Rt＝1.195min。
实施例506.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-2-(3,5-二甲氧基苯基)-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物428)的合成
通过一般程序1制备。产率：14.7mg，7.2％1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ0.91-1.10(m,3H),1.28-1.41(m,1H),1.62-1.75(m,1H),1.84-1.97(m,1H),1.99-2.11(m,1H),2.14-2.24(m,1H),2.83-3.20(m,1H),3.44-3.52(m,0.7H),3.68-3.80(m,6H),3.97-4.07(m,0.3H),5.08-5.61(m,1H),6.33-6.55(m,3H),7.55-7.69(m,1H),8.11-8.23(m,1H),8.42-8.55(m,1H),8.73-8.82(m,1H),8.83-8.93(m,1H),11.18-11.42(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值426.2；实测值427.0；Rt＝3.024min。
实施例507.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-2-(2-甲氧基吡啶-4-基)-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物225)的合成
通过一般程序1制备。产率：1.3mg，0.94％ LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值397.2；实测值398.2；Rt＝1.088min。
实施例508.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-2-(4-氨基甲酰基苯基)-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物220)的合成
通过一般程序1制备。产率：16.7mg，11.65％1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)1.04(m,3H),1.38(m,1H),1.66(m,1H),1.89(m,1H),2.17(m,2H),3.02(m,1H),3.79(m,1H),5.43(m,1H),7.40(m,3H),7.61(m,1H),7.89(m,2H),7.97(m,1H),8.17(m,1H),8.49(m,1H),8.78(m,1H),8.89(m,1H),11.27(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值409.2；实测值410.2；Rt＝0.944min。
实施例509.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-2-(3-甲氧基苯基)-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物214)的合成
通过一般程序1制备。产率：19.1mg，13.76％1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)1.04(m,3H),1.34(m,1H),1.68(m,1H),1.90(m,1H),2.14(m,3H),3.66(m,4H),5.36(m,1H),6.89(m,3H),7.33(m,1H),7.61(m,1H),8.17(m,1H),8.49(m,1H),8.83(m,2H),11.27(s,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值396.2；实测值397.2；Rt＝1.177min。
实施例510.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-2-(3-氟-4-甲氧基苯基)-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物208)的合成
通过一般程序1制备。产率：24.1mg，16.61％1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)1.03(m,3H),1.34(m,1H),1.68(m,1H),1.89(m,1H),2.10(m,2H),2.79(m,1H),3.70(m,4H),5.32(m,1H),7.15(m,3H),7.61(m,1H),8.17(m,1H),8.48(m,1H),8.78(m,1H),8.89(m,1H),11.25(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值414.2；实测值415.2；Rt＝1.181min。
实施例511.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-2-(3,4-二甲氧基苯基)-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物230)的合成
通过一般程序1制备。产率：12.4mg，8.31％1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)1.03(m,3H),1.35(m,1H),1.72(m,1H),1.89(m,1H),2.07(m,1H),2.20(m,1H),2.97(m,1H),3.74(m,7H),5.33(m,1H),6.91(m,3H),7.61(m,1H),8.17(m,1H),8.49(m,1H),8.77(m,1H),8.88(m,1H),11.25(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值426.2；实测值427.2；Rt＝1.142min。
实施例512.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-2-(3-氯苯基)-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物174)的合成
通过一般程序1制备。产率：5.7mg，4.06％1H NMR(DMSO-d6,400MHz):δ(ppm)1.04(m,3H),1.35(m,1H),1.66(m,1H),1.92(m,1H),2.14(m,2H),3.03(m,1H),3.78(m,1H),5.39(m,1H),7.39(m,4H),7.62(m,1H),8.18(m,1H),8.50(m,1H),8.84(m,2H),11.29(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值400.2；实测值401.2；Rt＝1.250min。
实施例513.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-2-(3-氨基甲酰基苯基)-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物125)的合成
通过一般程序制备。产率：2.9mg，2.02％
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值409.2；实测值410.4；Rt＝2.455min。
实施例514.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(环氧乙烷-4-基氧基)苯基]哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物269)的合成
通过一般程序制备。产率：8.1mg，4.96％
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.98-1.03(m,3H),1.27-1.36(m,1H),1.49-1.57(m,2H),1.65-1.73(m,1H),1.79-1.89(m,1H),1.90-1.97(m,2H),1.98-2.12(m,1H),2.14-2.22(m,1H),2.79-3.21(m,1H),3.40-3.49(m,3H),3.80-3.98(m,2H),4.48-4.59(m,1H),5.02-5.60(m,1H),6.92-7.00(m,2H),7.18-7.28(m,2H),7.55-7.66(m,1H),8.10-8.21(m,1H),8.41-8.53(m,1H),8.67-8.80(m,1H),8.81-8.93(m,1H),11.08-11.35(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值466.2；实测值467.2；Rt＝3.057min。
实施例515.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-2-(5-氟吡啶-3-基)-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物248)的合成
通过一般程序制备。产率：7.3mg，5.41％
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.84-1.09(m,3H),1.28-1.40(m,1H),1.61-1.74(m,1H),1.84-1.97(m,1H),2.01-2.18(m,1H),2.18-2.32(m,1H),2.76-3.26(m,1H),3.46-4.08(m,1H),5.25-5.76(m,1H),7.56-7.64(m,1H),7.64-7.73(m,1H),8.15(d,1H),8.42-8.53(m,3H),8.70-8.80(m,1H),8.82-8.93(m,1H),11.20-11.31(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值385.3；实测值386.1；Rt＝1.031min。
实施例516.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(喹啉-3-基)哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物257)的合成
通过一般程序制备。产率：6.6mg，4.52％
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.82-1.13(m,3H),1.31-1.50(m,1H),1.71-1.81(m,1H),1.85-1.99(m,1H),2.06-2.34(m,1H),2.65-3.23(m,1H),3.32-3.38(m,1H),3.56-4.11(m,1H),5.39-5.97(m,1H),7.47-7.64(m,2H),7.69-7.79(m,1H),7.96-8.03(m,2H),8.07-8.19(m,1H),8.26-8.34(m,1H),8.38-8.55(m,1H),8.64-8.79(m,1H),8.79-8.88(m,1H),8.88-8.94(m,1H),11.03-11.68(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值417.2；实测值418.0；Rt＝1.045min。
实施例517.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-2-{咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基}-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物234)的合成
通过一般程序制备。产率：6.7mg，4.71％
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.95-1.15(m,3H),1.30-1.47(m,1H),1.80-2.01(m,2H),2.02-2.24(m,2H),2.83-3.27(m,1H),3.46-4.07(m,1H),5.15-5.76(m,1H),6.86-7.27(m,1H),7.51-7.64(m,3H),7.87-7.96(m,1H),8.08-8.21(m,1H),8.44-8.58(m,2H),8.71-8.79(m,1H),8.81-8.94(m,1H),11.25(br s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值406.2；实测值407.1；Rt＝0.800min。
实施例518.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-5-甲基-2-{[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-6-基}哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物272)的合成
通过一般程序制备。产率：5.2mg，3.65％
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.98-1.07(m,3H),1.31-1.42(m,1H),1.81-1.96(m,2H),2.05-2.20(m,2H),2.74-3.15(m,1H),3.50-4.07(m,1H),5.17-5.64(m,1H),7.23-7.48(m,1H),7.49-7.62(m,1H),7.74-7.86(m,1H),8.06-8.18(m,1H),8.37-8.49(m,1H),8.52-8.59(m,1H),8.64-8.75(m,1H),8.76-8.92(m,1H),9.15-9.23(m,1H),11.24(br s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值407.2；实测值408.2；Rt＝2.016min。
实施例519.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-2-(2,3-二氢-1-苯并呋喃-5-基)-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物282)的合成
通过一般程序制备。产率：7.3mg，5.11％
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.96-1.06(m,3H),1.25-1.37(m,1H),1.67-1.79(m,1H),1.80-1.94(m,1H),1.98-2.11(m,1H),2.12-2.23(m,1H),2.81-3.11(m,1H),3.13-3.24(m,2H),3.42-3.98(m,1H),4.44-4.53(m,2H),4.96-5.66(m,1H),6.65-6.82(m,1H),6.98-7.08(m,1H),7.13-7.24(m,1H),7.53-7.66(m,1H),8.07-8.23(m,1H),8.41-8.54(m,1H),8.71-8.79(m,1H),8.79-8.96(m,1H),11.05-11.31(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值408.2；实测值409.4；Rt＝2.925min。
实施例520.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-5-甲基-2-{1-甲基-1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-6-基}哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物178)的合成
通过一般程序制备。产率：14.1mg，9.56％
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.04(m,3H),1.37(m,1H),1.78(m,1H),1.91(m,1H),2.18(m,1H),2.33(m,1H),2.95(m,1H),3.46(m,1H),4.07(m,3H),5.57(m,1H),7.58(m,1H),8.16(m,3H),8.48(m,2H),8.80(m,2H),11.24(m,1H)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值421.2；实测值422.0；Rt＝1.003min。
实施例521.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(8-甲基喹啉-3-基)哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物215)的合成
通过一般程序制备。产率：3.8mg，2.52％
1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)1.07(m,3H),1.42(m,1H),1.79(m,1H),1.94(m,1H),2.22(m,1H),2.38(m,2H),2.72(m,3H),3.82(m,1H),5.64(m,1H),7.51(m,1H),7.61(m,2H),7.83(m,1H),8.24(m,2H),8.49(m,1H),8.77(m,1H),8.90(m,2H),11.29(m,1H)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值431.2；实测值432.2；Rt＝1.137min。
实施例522.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[5-(1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基]哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物226)的合成
通过一般程序制备。产率：20.5mg，13.51％
1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)1.06(m,3H),1.38(m,1H),1.72(m,1H),1.96(m,1H),2.22(m,2H),3.40(m,1H),3.75(m,1H),5.53(m,1H),6.62(m,1H),7.61(m,1H),7.83(m,1H),8.17(m,2H),8.50(m,2H),8.64(m,1H),8.78(m,1H),8.88(m,1H),9.03(m,1H),11.29(m,1H)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值433.2；实测值434.2；Rt＝1.031min。
实施例523.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(三氟甲基)吡啶-4-基]哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物221)的合成
通过一般程序制备。产率：19.2mg，12.60％
1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)1.04(m,3H),1.36(m,1H),1.58(m,1H),1.92(m,1H),2.23(m,2H),2.80(m,1H),3.83(m,1H),5.49(m,1H),7.65(m,2H),7.79(m,1H),8.17(d,1H),8.49(m,1H),8.81(m,3H),11.33(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值435.2；实测值436.2；Rt＝1.173min。
实施例524.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-2-[4-(3,5-二甲基-1H-吡唑-1-基)苯基]-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物157)的合成
通过一般程序制备。产率：15.5mg，9.62％
1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)1.06(m,3H),1.38(m,1H),1.72(m,1H),2.05(m,2H),2.17(m,3H),2.29(m,4H),2.98(m,1H),3.80(m,1H),5.86(m,2H),7.43(m,1H),7.50(m,3H),7.61(m,1H),8.17(m,1H),8.50(m,1H),8.78(m,1H),8.90(m,1H),11.26(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值460.3；实测值461.2；Rt＝1.129min。
实施例525.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(3,4,5-三氟苯基)哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物403)的合成
通过一般程序制备。产率：2.2mg，1.45％
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值420.2；实测值421.2；Rt＝1.247min。
实施例526.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-2-[4-(1-羟基环丁基)苯基]-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物259)的合成
通过一般程序制备。产率：11.3mg，7.54％
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.74-1.07(m,3H),1.28-1.40(m,1H),1.55-1.74(m,2H),1.81-1.94(m,2H),1.97-2.17(m,1H),2.17-2.31(m,3H),2.31-2.37(m,2H),2.77-3.25(m,1H),3.44-4.05(m,1H),5.12-5.68(m,2H),7.24-7.34(m,2H),7.43-7.51(m,2H),7.53-7.65(m,1H),8.08-8.22(m,1H),8.42-8.55(m,1H),8.71-8.80(m,1H),8.81-8.94(m,1H),11.15-11.34(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+3H]+m/z：计算值436.2；实测值439.2；Rt＝1.201min。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值416.2；实测值417.4；Rt＝3.108min。
实施例527.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-2-(3-氰基-4-甲氧基苯基)-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物237)的合成
通过一般程序制备。产率：8.5mg，5.76％
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.96-1.07(m,3H),1.25-1.38(m,1H),1.59-1.68(m,1H),1.82-1.93(m,1H),2.00-2.11(m,1H),2.16-2.26(m,1H),2.78-3.23(m,1H),3.44-3.49(m,0.6H),3.86-3.92(m,3H),3.95-4.00(m,0.4H),4.98-5.61(m,1H),7.19-7.31(m,1H),7.56-7.68(m,3H),8.10-8.20(m,1H),8.40-8.52(m,1H),8.70-8.79(m,1H),8.80-8.93(m,1H),11.18-11.34(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值421.2；实测值422.2；Rt＝2.961min。
实施例528.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-2-[5-甲氧基-6-(三氟甲基)吡啶-3-基]-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物223)的合成
通过一般程序制备。产率：15.4mg，9.45％
1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)1.05(m,3H),1.36(m,1H),1.70(m,1H),1.94(m,1H),2.20(m,2H),3.50(m,2H),3.96(m,3H),5.48(m,1H),7.63(m,2H),8.22(m,2H),8.49(m,1H),8.83(m,2H),11.28(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值465.2；实测值466.2；Rt＝1.193min。
实施例529.外消旋-5-{2-[(2R,5S)-2-(4-氯-3-甲氧基苯基)-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺基}吡啶-3-甲酰胺(化合物114)的合成
通过一般程序制备。产率：16mg，10.7％
1H NMR(500MHz,СDCl3)δ1.11(m,3H),1.39(m,2H),2.00(m,2H),2.22(m,2H),3.46(m,1H),3.90(m,3H),4.43(m,1H),5.95(m,1H),6.84(m,2H),7.34(m,1H),8.85(m,2H),9.50(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值430.2；实测值431.2；Rt＝3.356min。
实施例530.2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物1126)的合成
步骤1：2-甲氧基-5-[[2-[(5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
向2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(489mg，2.04mmol)、2-(1-甲基-4-哌啶基)-5-[(5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑(500mg，1.37mmol，HCl)和HATU(856mg，2.25mmol)于DMF(5mL)中的混合物中添加DIPEA(1.1mL，6.32mmol)。将混合物在20℃下搅拌1小时。通过制备型HPLC纯化(仪器：Gilson GX-281Liquid Handler，Gilson 322泵，Gilson 156UV检测器；柱：Phenomenex Gemini-NX 80×40mm×3μm；流动相A：具有10mmol NH4HCO3的H2O(v％)；流动相B：MeCN；梯度：在9.5min内18％至48％ B，保持100％ B达2.0min；流速：25mL/min；柱温：30℃；波长：220nm，254nm)纯化混合物，以得到呈白色干燥粉末的2-甲氧基-5-[[2-[(5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(240mg，31.9％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值551.2；实测值551.3。
步骤2：2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物1126)的合成
通过手性SFC(仪器：SFC-80Q；柱：Daicel Chiralpak OD-H 250×30mm I.D.5μm；流动相：超临界CO2/EtOH(0.1％ NH3-H2O，v％)＝40/60；流速：80mL/min；柱温：38℃；喷嘴压力：100巴；喷嘴温度：60℃；蒸发器温度：20℃；修整器温度：25℃；波长：220nm)分离2-甲氧基-5-[[2-[(5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(240mg，0.436mmol)，以得到化合物1126。
化合物1126：2-甲氧基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(160mg，66.7％产率，峰2，保留时间＝2.600min，具有反式相对化学的单一已知对映异构体，白色干燥粉末)。1HNMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.35-8.73(m,2H),7.88-8.01(m,2H),7.39-7.50(m,1H),5.41-5.90(m,1H),3.93-4.19(m,4H),3.77(d,J＝13.8Hz,1H),3.43(d,J＝14.1Hz,1H),2.96-3.27(m,4H),2.13-2.43(m,10H),1.87-2.07(m,4H),1.46(d,J＝12.3Hz,1H),1.14(d,J＝7.0Hz,3H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值551.2，实测值551.2；HPLC：在220nm下为98.13％，在254nm下为99.22％；99.7％ee。
实施例531.5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物1255)的合成
步骤1：5-[[2-[(5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
将2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(50.0mg，0.239mmol)、2-(1-甲基-4-哌啶基)-5-[(5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑(50mg，0.152mmol)、HATU(70mg，0.184mmol)和DIPEA(0.08mL，0.459mmol)于DMF(3mL)中的混合物在20℃下搅拌2小时。在减压下浓缩混合物，以得到粗产物，其通过制备型HPLC(仪器：Gilson GX-281LiquidHandler，Gilson 322泵，Gilson 156UV检测器；柱：Phenomenex Gemini-NX 80*40mm*3μm；流动相A：具有0.05％NH3-H2O+10mM NH4HCO3的H2O(v％)；流动相B：MeCN；梯度：在9.5min内26％至56％ B，保持100％ B达2min；流速：25mL/min；柱温：30℃；波长：220nm、254nm)进行纯化，以得到呈黄色油状物的5-[[2-[(5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(40mg，50.6％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值521.2，实测值521.2。
步骤2：5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物1255)的合成
通过SFC(仪器：Berger，Multigr AM-II；柱：Daicel Chiralcel OD-H250mm×30mm×5μm；流动相：超临界CO2/EtOH(0.1％ NH3-H2O，v％)＝50/50；流速：80mL/min；柱温：38℃；喷嘴压力：100巴；喷嘴温度：60℃；蒸发器温度：20℃；修整器温度：25℃；波长：220nm)纯化5-[[2-[(5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(40mg，0.0768mmol)，以得到5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(21mg，具有反式相对化学的单一已知对映异构体，峰2，保留时间：6.929min，白色固体)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.32-9.17(m,3H),7.84-8.07(m,2H),7.46(br s,1H),5.44-5.89(m,1H),3.77-4.07(m,1H),3.46(br d,J＝13.4Hz,2H),3.02-3.21(m,2H),2.18-2.43(m,9H),1.98(br s,4H),1.50(br s,1H),1.15(br d,J＝6.6Hz,3H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值521.2，实测值521.3；HPLC：在220nm下为100％，在254nm下为100％；100％ee，99.5％de。
实施例532.2-甲氧基-5-(2-((2R,5S)-5-甲基-2-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物1277)的合成
将1-甲基-4-[3-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]哌嗪(115mg，420.61μmol)、2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(100.60mg，420.61μmol)和TEA(425.61mg，4.21mmol，586.24μL)一起混合于DMF(5mL)中。向其中添加HATU(239.89mg，630.91μmol)且将所得混合物在20℃下搅拌16h，然后提交至反相HPLC(2-10min 50-70％MeOH+NH3流速30mL/min(装载泵4mL MeOH)，柱：sun fire c18)，以得到2-甲氧基-5-[[2-氧代-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(64mg，129.40μmol，30.77％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.10(m,3H),1.27-1.41(m,1H),1.60-1.77(m,1H),1.82-1.94(m,1H),1.97-2.15(m,1H),2.15-2.27(m,4H),2.40-2.46(m,4H),2.78-2.83(m,0.3H),3.04-3.16(m,4H),3.23-3.27(m,0.7H),3.40-3.49(m,0.7H),3.91-3.99(m,3H),3.99-4.04(m,0.3H),5.08-5.64(m,1H),6.69-6.78(m,1H),6.78-6.86(m,2H),7.16-7.26(m,1H),7.65-7.79(m,2H),8.38-8.49(m,1H),8.49-8.60(m,1H),10.94-11.12(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值494.2；实测值495.2；Rt＝2.246min。
实施例533.5-(2-((2R,5S)-2-(3-氯-4-(2-(二甲基氨基)乙基)苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-2-甲氧基烟酰胺(化合物1341)的合成
将2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(71.54mg，299.11μmol)和2-[2-氯-4-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]-N,N-二甲基乙胺(0.07g，249.26μmol)混合于DMF(10mL)中。将反应悬浮液冷却至20℃且添加HATU(113.73mg，299.11μmol)，随后添加TEA(75.67mg，747.77μmol，104.22μL)，且在环境温度下搅拌13h。将反应混合物在真空中蒸发且通过制备型(30-90％0-5min H2O/MeOH/0.1％ NH4OH，流速：30mL/min)纯化0.3g所获得的粗产物，以得到产物2-甲氧基-5-[[2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-2-[3-氯-4-[2-(二甲基氨基)乙基]苯基]-5-甲基-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.0179g，35.66μmol，14.31％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.03(d,3H),1.34(m,1H),1.64(m,1H),1.86(m,1H),2.01(m,1H),2.18(s,6H),2.42(m,2H),2.79(m,3H),3.23(m,1H),3.46(m,1H),3.98(s,3H),5.53(m,1H),7.20(m,1H),7.35(m,1H),7.40(m,1H),7.72(m,2H),8.46(m,1H),8.56(m,1H),11.09(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值502.2；实测值503.2；Rt＝2.589min。
实施例534.5-(2-((2R,5S)-2-(3-(2-(二甲基氨基)乙氧基)苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-2-甲氧基烟酰胺(化合物1352)的合成
将N,N-二甲基-2-[3-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯氧基]乙胺(200mg，762.23μmol)、2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(182.31mg，762.23μmol)和TEA(385.65mg，3.81mmol，531.20μL)混合于DMF(2mL)中且向其中添加HATU(347.79mg，914.67μmol)。将所得混合物搅拌过夜。将反应混合物提交至HPLC且纯化(2-10min 40-65％MeOH+NH3，30mL/min(装载泵4mL MeOH+NH3)柱：SunFire 100*19mm，5微米)，以获得2-甲氧基-5-[[2-氧代-2-[(2R,5S)-2-[3-[2-(二甲基氨基)乙氧基]苯基]-5-甲基-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(36.4mg，75.28μmol，9.88％产率)和2-甲氧基-5-[[2-氧代-2-[(2R,5S)-2-[3-[2-(二甲基氨基)乙氧基]苯基]-5-甲基-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(124.7mg，257.88μmol，33.83％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.95-1.08(m,3H),1.27-1.40(m,1H),1.61-1.71(m,1H),1.83-1.94(m,1H),1.98-2.12(m,1H),2.17-2.21(m,6H),2.55-2.62(m,3H),2.77-3.25(m,1H),3.36-3.49(m,1H),3.91-3.98(m,3H),4.00-4.06(m,2H),5.09-5.65(m,1H),6.80-6.94(m,3H),7.24-7.33(m,1H),7.67-7.81(m,2H),8.38-8.48(m,1H),8.48-8.60(m,1H),10.96-11.14(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值483.2；实测值484.2；Rt＝2.191min。
实施例535.2-甲氧基-5-[[2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[外消旋-(3S)-1-甲基吡咯烷-3-基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物1260)和2-甲氧基-5-[[2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[外消旋-(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物1278)的合成
步骤1：2-甲氧基-5-[[2-氧代-2-[外消旋-(5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基吡咯烷-3-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
向2-[(5-氨基甲酰基-6-甲氧基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(400mg，1.67mmol)、2-(1-甲基吡咯烷-3-基)-5-[外消旋-(5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑(500mg，1.58mmol)于DMF(6mL)中的混合物中添加HATU(760mg，2.00mmol)和DIPEA(0.87mL，4.99mmol)。将所得混合物在20℃下搅拌2小时。在减压下浓缩混合物。通过制备型HPLC(仪器：Gilson GX-281Liquid Handler，Gilson 322泵，Gilson156UV检测器；柱：PhenomenexGemini-NX 80*40mm*3μm；流动相A：具有10mmol NH4HCO3的H2O(v％)；流动相B：MeCN；梯度：在9.5min内28％至58％ B，保持100％ B达2min；流速：25mL/min；柱温：30℃；波长：220nm，254nm)纯化残余物，以得到呈黄色固体的2-甲氧基-5-[[2-氧代-2-[外消旋-(5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基吡咯烷-3-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(110mg，12.3％产率)。HPLC：在220nm下为89.17％，在254nm下为93.20％。
步骤2：2-甲氧基-5-[[2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[外消旋-(3S)-1-甲基吡咯烷-3-基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物1260)和2-甲氧基-5-[[2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[外消旋-(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物1278)的合成
通过SFC(仪器：Berger，multigr AM-II；柱：Daicel chiralpak IC 250mm×30mm×5μm；流动相：超临界CO2/MeOH-MeCN(0.1％NH3-H2O，v％)＝50/50；流速：80mL/min；柱温：38℃；喷嘴压力：100巴；喷嘴温度：60℃；蒸发器温度：20℃；修整器温度：25℃；波长：220nm)纯化2-甲氧基-5-[[2-氧代-2-[外消旋-(5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基吡咯烷-3-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(110mg，0.205mmol)。将级分在减压下浓缩，然后冻干过夜，以得到化合物1260和化合物1278。
化合物1260：2-甲氧基-5-[[2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[外消旋-(3S)-1-甲基吡咯烷-3-基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(30.5mg，单一未知对映异构体，峰1，保留时间：3.854min，白色固体)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm8.57-8.72(m,1H),8.34-8.54(m,1H),7.87-8.00(m,2H),7.42(br d,J＝7.9Hz,1H),5.41-5.87(m,1H),4.00-4.16(m,3H),3.91(br s,1H),3.76(br d,J＝13.6Hz,1H),3.43(br d,J＝12.9Hz,1H),3.15(br s,1H),2.74-2.94(m,3H),2.43(s,4H),2.19-2.38(m,3H),1.94(br s,2H),1.46(br d,J＝11.9Hz,1H),1.14(br d,J＝6.6Hz,3H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值537.2，实测值537.2；HPLC：在220nm下为99.36％，在254nm下为100％；98.6％ee。
化合物1278：2-甲氧基-5-[[2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[外消旋-(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(31.5mg，单一未知对映异构体，峰2，保留时间：7.108min，白色固体)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm8.58-8.75(m,1H),8.33-8.54(m,1H),7.80-8.08(m,2H),7.34-7.52(m,1H),5.37-5.93(m,1H),3.99-4.17(m,3H),3.90(br s,1H),3.76(br d,J＝14.3Hz,1H),3.43(brd,J＝14.1Hz,1H),3.10-3.24(m,1H),2.73-2.95(m,3H),2.43(s,4H),2.17-2.38(m,3H),1.94(br s,2H),1.46(br d,J＝12.8Hz,1H),1.14(br d,J＝6.3Hz,3H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值537.2，实测值537.2；HPLC：在220nm下为98.90％，在254nm下为100％；98.7％ee。
方案E-式5化合物的合成
式5化合物为式(I)化合物，其中R1、R2、R3、R4、R6、R7和R8如本文所述。
一般程序5
注意，分离步骤为任选的，且在某些情况下用于分离顺式/反式非对映异构体，且在某些情况下分离不同的对映异构体，如详细程序中所述。在某些情况下，起始哌啶呈限定顺式或反式构型，在那些情况下，手性分离步骤仅得到所描绘的四种对映异构体中的两者
一般文库程序
将DIPEA(1.5当量+1.0当量，如果使用盐形式的反应物)添加到吡啶反应物(1.0当量)于MeCN(0.7mL)中的溶液中。将所得混合物在室温下搅拌30min，随后逐滴添加2-氯-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(1.0当量)。然后，将混合物再搅拌30min且添加哌啶反应物(1.1当量)。将反应混合物在室温下搅拌1h，然后在100℃下搅拌16h。此后，使所得混合物冷却至室温且添加MeOH(2.0mL)。搅拌悬浮液，直到观测到澄清溶液且添加SiliaMetS DMT(二巯基三嗪)(50.0mg)。将所获得的悬浮液在室温下搅拌30min且过滤出。将滤液在减压下浓缩且将残余物再溶解于DMSO(0.5mL)中。使所得溶液经历HPLC(装备有DAD和质量检测器的Agilent 1260Infinity系统；Waters SunFire C18 OBD制备型柱，100A，5mkm，19*100mm，具有SunFire C18制备型保护柱，100A，10mkm，19*100mm；MeOH-H2O为流动相，Run Time5min)，以得到式5产物。
实施例536.2-[(2S,5R)-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物2)、2-(5-甲基-2-苯基-1-哌啶基)-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物3)、2-[(2S,5S)-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物5)
通过一般文库程序制备2-(5-甲基-2-苯基哌啶-1-基)-N-(5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1)。产率：11.3mg(11.3％)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ1.11(m,3H),1.42(m,1H),1.80(m,1H),1.91(m,1H),2.14(m,1H),2.25(m,1H),2.33(m,3H),2.81(m,0.4H),3.28(m,0.6H),4.11(m,1H),5.48(m,1H),7.24(m,1H),7.34(m,4H),7.95(m,1H),8.07(m,1H),8.56(m,1H),10.88(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值337.2；实测值338.2；Rt＝3.157min。
手性分离条件：仪器：制备型Agilent HPLC 1200(DAD)；反相和梯度：己烷-IPA-MeOH，70-15-15，12mL/min柱：CHIRALPAK OJ-H，250*20mm，5μm；注入体积：600mL
观测到三种产物：2-[(2S,5R)-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(6.35mg，18.82μmol，12.12％产率)(化合物2；米色固体)、2-(5-甲基-2-苯基-1-哌啶基)-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(3.54mg，10.49μmol，6.76％产率)(灰色固体)、2-[(2S,5S)-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(10.16mg，30.11μmol，19.39％产率)(米色固体)。
2-(5-甲基-2-苯基-1-哌啶基)-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物3)(呈非对映异构体的混合物获得)：
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ0.87(m,3H),1.30(m,1H),1.79(m,2H),2.04(m,1H),2.36(m,3H),2.53(m,1H),2.66(m,1H),4.64(m,1H),6.23(m,1H),7.30(m,3H),7.40(m,2H),8.06(m,1H),8.26(m,1H),8.51(m,1H),9.27(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值337.18；实测值339.03；Rt＝4.808min。
RT(OJ-H，己烷-IPA-MeOH，70-15-15，0.6mL/min)＝10.295min。
2-[(2S,5S)-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物5)(10.16mg，30.11μmol，19.39％产率)：
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ0.99(m,3H),1.35(m,1H),1.80(m,1H),2.01(m,1H),2.24(m,1H),2.37(m,3H),2.61(m,1H),3.21(m,1H),4.53(m,1H),6.20(m,1H),7.30(m,3H),7.39(m,2H),8.06(m,1H),8.25(m,1H),8.50(m,1H),9.29(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值337.18；实测值339.03；Rt＝4.743min。
RT(OJ-H，己烷-IPA-MeOH，70-15-15，0.6mL/min)＝28.230min。
2-[(2S,5R)-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物2)：
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ1.12(d,3H),1.42(m,1H),1.95(m,2H),2.27(m,2H),2.36(m,3H),3.21(m,1H),4.56(m,1H),6.16(m,1H),7.30(m,3H),7.39(m,2H),8.04(m,1H),8.25(m,1H),8.50(m,1H),9.33(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值337.18；实测值339.03；Rt＝4.740min。
RT(OJ-H，己烷-IPA-MeOH，70
实施例537.N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R)-2-(间甲苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺和N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S)-2-(间甲苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物4和化合物6)的手性分离
使N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-(间甲苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(34.6mg，102.54μmol)(通过一般程序制备)经历手性色谱(柱：Chiralpak OJ-H 250x 30mm，5um；流动相：CO2-MeOH，60-40；流速：80mL/min；柱温：40℃；波长：225nm)，以获得N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R)-2-(间甲苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(12.42mg，化合物4)和N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S)-2-(间甲苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物6)。
N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R)-2-(间甲苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物4)
1H NMR(DMSO+CCl4,500MHz):δ(ppm)1.60(m,2H),1.68(m,2H),1.94(m,1H),2.35(m,6H),2.45(m,1H),3.05(m,1H),4.07(m,1H),5.46(m,1H),7.04(m,1H),7.10(m,2H),7.24(m,1H),7.98(m,1H),8.08(m,1H),8.55(m,1H),10.91(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值337.2；实测值338.0；Rt＝4.543min。
手性HPLC：Rt＝3.864min(柱：CHIRALPAK OJ-H，150x 4.6mm，5μm；流动相：CO2-MeOH，60-40；流速：2.0mL/min)。
N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S)-2-(间甲苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物6)。
1H NMR(DMSO+CCl4,500MHz)δ(ppm)1.58(m,2H),1.68(m,2H),1.97(m,1H),2.35(m,6H),2.46(m,1H),3.04(m,1H),4.07(m,1H),5.46(m,1H),7.04(m,1H),7.10(m,2H),7.24(m,1H),8.00(m,1H),8.08(m,1H),8.55(m,1H),10.91(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值337.2；实测值338.0；Rt＝4.542min。
手性HPLC：Rt＝5.894min(柱：CHIRALPAK OJ-H，150x 4.6mm，5μm；流动相：CO2-MeOH，60-40；流速：2.0mL/min)
方案F-式6化合物的合成
式6化合物为式(I)化合物，其中R1、R2、R3、R4、R6、R7和R8如本文所述。
一般程序6
步骤1：6B的合成
在0℃下，向6A(1.0当量)的溶液中分批添加硼氢化钠(1.0当量)。将所得混合物在室温下搅拌2h且在真空中移除挥发物。将残余物用水(2mL)稀释且用DCM(3*4mL)萃取。将有机层经Na2SO4干燥且在真空中移除溶剂，以获得6B。
步骤1A：3.1D的合成
向6A(1.0当量)于溶剂(5mL)中的搅拌溶液中添加碱(2.5当量)。将所得悬浮液用氩气脱气。添加配体(0.05当量)和Pd催化剂(0.05当量)。将反应混合物在70…100℃下搅拌14…36h。反应完成(通过LCMS监测)之后，使所得混合物冷却至室温，通过SiO2薄层过滤且用溶剂(2mL)洗涤。在真空中移除挥发物且使残余物经历纯化，以得到6D。
布赫瓦尔德反应步骤：
方法： Pd催化剂 碱 配体 惰性气氛 溶剂 温度 时间
A Pd2(dba)3 Cs2CO3 XanthPhos Ar 二噁烷 100℃ 18h
B Pd2(dba)3 叔丁醇钾 CyJohnPhos Ar 甲苯 100℃ 16h
C Pd(OAc)2 Cs2CO3 XanthPhos Ar 二噁烷 100℃ 15-36h
步骤2：6C的合成
将6B(1.0当量)溶解于DCM(5mL)中且逐滴添加二碳酸二-叔丁酯(1.02当量)于DCM(2mL)中的溶液(剧烈气体逸出！)。将所得混合物在25℃下搅拌4h。然后，在减压下移除挥发物，以得到化合物和使用方法
步骤2A：6F的合成
在0℃下，向6D(1.0当量)的溶液中分批添加硼氢化钠(1.0当量)。将所得混合物在室温下搅拌2h且在真空中移除挥发物。将残余物用水(2mL)稀释且用DCM(3*4mL)萃取。将有机层经Na2SO4干燥且在真空中移除溶剂，以获得6F。
步骤3：6E的合成
向6C(1.0当量)于溶剂(5mL)中的搅拌溶液中添加碱(2.5当量)。将所得悬浮液用氩气脱气。添加配体(0.05当量)和Pd催化剂(0.05当量)。将反应混合物在70…100℃下搅拌14…36h。反应完成(通过LCMS监测)之后，使所得混合物冷却至室温，通过SiO2薄层过滤且用溶剂(2mL)洗涤。在真空中移除挥发物且使残余物经历纯化，以得到6E。
布赫瓦尔德反应步骤：
方法： Pd催化剂 碱 配体 惰性气氛 溶剂 温度 时间
A Pd2(dba)3 Cs2CO3 XanthPhos Ar 二噁烷 100℃ 16-24h
B Pd G4 RuPhos LiHMDS RuPhos Ar THF 70℃ 18h
C Pd(OAc)2 Cs2CO3 XanthPhos Ar 二噁烷 100℃ 15-36h
D Pd G4 RuPhos Cs2CO3 RuPhos Ar 二噁烷 100℃ 16h
E Pd(OAc)2 Cs2CO3 RuPhos Ar 二噁烷 100℃ 15h
F Pd2(dba)3 叔丁醇钠 CyJohnPhos Ar 甲苯 80℃ 16h
步骤3A：6H的合成
在0℃下，将2-氯-2-氧代乙酸苯甲酯(1.1当量)于MeCN(2mL)中的溶液逐滴添加到6F(1.0当量)和DIPEA(2.5当量)于MeCN(4mL)中的搅拌溶液中。使反应混合物升温至25℃且搅拌12h。然后，在真空中蒸发挥发物。使残余物经历HPLC纯化，以得到6I。
步骤4：6F的合成
将6E(1.0当量)溶解于溶剂(2…10mL)中且添加酸(50.0当量)。将反应混合物在室温下搅拌1…4h。在真空中移除溶剂，以获得6F.。
Boc移除步骤：
方法 酸 溶剂 温度 时间
A HCl(二噁烷中的4.0M溶液) MeOH 室温 30min…12h
B TFA DCM 20…50℃ 1h
C H2O 二噁烷 100℃ 12…16h
步骤4A：6I的合成
将6H(1.0当量)的溶液与MeOH中的氨溶液(20.0当量)混合且在45℃下搅拌12小时。然后，在真空中移除挥发物，以得到6I。
步骤5：6G的合成
将6F(1.0当量)、草酰胺酸(1.0当量)和TEA(2.5当量+1.0当量/各酸当量，如果使用胺盐)或DIPEA(2.5当量+1.0当量/各酸当量，如果使用胺盐)一起混合于DMF或DMS+SO中。向其中添加HATU(1.5当量)且将所得混合物搅拌过夜。在真空中浓缩反应混合物且通过HPLC纯化残余物，以获得6G。
步骤5A：6G的合成
在Ar气氛下，将6I(1.0当量)、R3I(1.0当量)、CuI(0.2当量)、CuI(0.2当量)、N1,N2-二甲基环己-1,2-二胺(0.2当量)和Cs2CO3一起混合于二噁烷(6mL)中。将反应混合物在100℃下搅拌48h。然后，使混合物冷却至室温且过滤出。使滤液经历HPLC，以得到6G。
实施例538.外消旋-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1209)、rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1371)和rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1116)的合成
步骤1：外消旋-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1209)的合成
通过一般程序方案F步骤5制备
HPLC条件：45-60％0-5min H2O/MeOH/0.1％ NH4OH，流速：30mL/min(装载泵4mL/min甲醇)；YMC Triart C18 100x20 mm，5um
产率：0.4g(33.63％)
1H NMR(600MHz,dmso)δ0.98-1.13(m,6H),1.26-1.37(m,1H),1.60-1.74(m,1H),1.78-1.91(m,1H),1.92-2.18(m,2H),2.20(s,3H),2.34-2.39(m,2H),2.40-2.44(m,4H),2.70(d,0.5H),3.07-3.12(m,4H),3.17(d,0.5H),3.37-4.00(m,1H),5.01-5.55(m,1H),5.57-5.67(m,2H),6.88-6.97(m,2H),7.09-7.19(m,2H),7.43-7.52(m,1H),7.98-8.09(m,1H),10.44-10.54(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值465.2；实测值465.2；Rt＝1.937min。
步骤2：rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1371)和rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1116)的合成
通过一般程序方案F步骤6制备
手性分离条件：Chiralpak AS-H(250*20，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，80-10-10，12mL/min，注入体积：200.000μl；柱温：24℃；波长：205nm，264nm)，化合物1371的保留时间＝88.90min且化合物1116的保留时间＝62.12min
化合物1371：
产率：140.0mg(35.0％)
RT(Chiralpak IA(250*4.6mm，5mkm)，MeOH-IPA，50-50，0.8mL/min)＝48.14min。
1H NMR(600MHz,dmso)δ0.99-1.34(m,7H),1.65-2.20(m,8H),2.35-2.42(m,4H),2.70(m,1H),3.05-3.18(m,4H),3.40(d,1H),3.97(d,1H),5.05-5.63(m,3H),6.90-6.93(m,2H),7.11-7.18(m,2H),7.46-7.49(d,1H),8.01-8.05(d,1H),10.49(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值466.2；实测值466.2；Rt＝0.830min。
化合物1116：
产率：190.0mg(47.5％)
RT(Chiralpak IA(250*4.6mm，5mkm)，MeOH-IPA，50-50，0.8mL/min)＝32.53min。
1H NMR(600MHz,dmso)δ0.99-1.34(m,7H),1.67-2.20(m,8H),2.35-2.43(m,4H),2.70(m,1H),3.06-3.19(m,4H),3.40(d,1H),3.97(d,1H),5.04-5.63(m,3H),6.90-6.93(m,2H),7.11-7.19(m,2H),7.46-7.49(d,1H),8.01-8.05(d,1H),10.49(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值466.2；实测值466.2；Rt＝0.826min。
实施例539.N-[6-氨基-5-(氧杂环丁烷-3-基)-3-吡啶基]-2-[(2R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1356)的合成
将2-[(2R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(140mg，362μmol)添加到5-碘-3-(氧杂环丁烷-3-基)吡啶-2-胺(100mg，362μmol)、Cu(11.5mg，181μmol)、碘化铜(I)(6.90mg，36.2μmol，1.23μL)和碳酸铯(236mg，724μmol)于二噁烷(2.00mL)中的混合物中。使所得混合物在100℃下搅拌18h。通过硅藻土垫过滤所获得的混合物且在真空中浓缩。使残余物经历HPLC(0.5-6.5min20-0％水-ACN，+0.1体积％25％NH3水溶液，30mL/min，柱：XBridge，100x19 mm，5μm)。使所获得的材料(44.3mg)经历手性HPLC(第1次运行-Chiralcel OJ-H(250*21，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，12mL/min，在38.717min下的主峰；第2次运行-Chiralpak IA II(250*21，5mkm)，IPA-MeOH，50-50，10mL/min)，以得到化合物1356(20.7mg，99+ee，在两次运行后)。
分析型：化合物1356的RT(Chiralcel OJ-H(250*4.6mm，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0,6mL/min)-39.803min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6):δ(ppm)0.92-1.06(m,3H),1.22-1.41(m,2H),1.72-1.92(m,2H),2.08-2.33(m,2H),2.80-2.83(m,1H),3.86-4.56(m,3H),4.87-4.95(m,2H),5.35-5.74(m,3H),7.43-7.76(m,3H),8.02-8.19(m,2H),9.39-9.41(m,1H),10.61-10.67(m,1H)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值452.19；实测值452.0；Rt＝0.824。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.03-1.06(m,3H),1.33-1.41(m,1H),1.71-1.91(m,2H),2.09-2.37(m,2H),3.53-4.24(m,3H),4.47-4.56(m,2H),4.87-4.95(m,2H),5.36-5.73(m,3H),7.43-7.51(m,1H),7.68-7.76(m,1H),8.02-8.19(m,3H),9.39(s,1H),10.61-10.67(d,1H)。
实施例540.外消旋-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1105)、rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1193)和rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1328)的合成
步骤1：1-甲基-4-(4-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯基)哌嗪的合成
通过一般程序6步骤1A制备。
产率：4.0g(74.33％)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值272.2；实测值272.2；Rt＝0.608min。
步骤2：外消旋-1-甲基-4-[4-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]哌嗪的合成
通过一般程序6步骤2A制备
产率：3.7g(91.82％)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值274.4；实测值374.4；Rt＝0.464min。
步骤3：外消旋-N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序6步骤5制备
HPLC条件：40-90％0-5min H2O/MeOH/0.1％ NH4OH，流速：30mL/min；柱：YMCTriart C18 100x20 mm，5um
产率：260.0mg(43.91％)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值552.4；实测值552.4；Rt＝2.770min。
步骤4：外消旋-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1105)的合成
通过一般程序6步骤6制备
HPLC条件：30-50％0-6min H2O/MeCN/0.1％ NH4OH，流速：30mL/min；柱：YMCTriart C18 100x20 mm，5um
产率：154.0mg(72.39％)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值451.2；实测值451.2；Rt＝1.320min。
步骤5：rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1193)和rel-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1328)的合成
通过一般程序6步骤7制备
手性分离条件：Chiralpak IB(250*20mm，10mkm)；流动相：CO2-MeOH，60-40.流速：80mL/min；柱温：40℃；波长：215nm。化合物1193)＝12.65min；保留时间(化合物1328)＝16.12min
化合物1193：
产率：49.14mg(34.90％)。
RT(Chiralpak IA，IPA-MeOH，50-50，1.0mL/min)＝26.336min。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.00(m,3H),1.31(m,1H),1.67(m,1H),1.84(m,1H),2.01(m,4H),2.21(m,4H),2.45(m,4H),3.11(m,5H),3.68(dd,1H),5.57(m,3H),6.92(m,2H),7.15(m,2H),7.46(m,1H),7.99(m,1H),10.47(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值452.2；实测值452.2；Rt＝1.619min。
化合物1328：
产率：45.07mg(32.01％)。
RT(Chiralpak IA，IPA-MeOH，50-50，1.0mL/min)＝34.522min。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.00(m,3H),1.31(m,1H),1.66(m,1H),1.84(m,1H),2.01(m,4H),2.20(m,4H),2.42(m,5H),3.15(m,4H),3.68(m,1H),5.57(m,3H),6.92(m,2H),7.15(dd,2H),7.46(m,1H),8.00(m,1H),10.46(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值452.2；实测值452.2；Rt＝1.619min。
实施例541.rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[4-(4-乙基哌嗪-1-基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1360)和rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[4-(4-乙基哌嗪-1-基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1097)的合成
步骤1：1-乙基-4-[4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯基]哌嗪的合成
通过一般程序6步骤1A(方法C)制备
产率：0.65g(粗品)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值286.2；实测值286.2；Rt＝0.617min。
步骤2：外消旋-1-乙基-4-[4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]哌嗪的合成
通过一般程序6步骤2A制备
产率：0.39g(95.62％)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值288.2；实测值288.2；Rt＝0.606min。
步骤3：外消旋-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[4-(4-乙基哌嗪-1-基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
通过一般程序6步骤5制备
HPLC条件：2-10min 40-100％ MeCN/H2O 30mL/min(装载泵4mL MeCN柱；SunFire100*19mm，5微米
产率：0.18g(18.25％)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值480.2；实测值480.2；Rt＝0.781min。
步骤4：rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[4-(4-乙基哌嗪-1-基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1360)和rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[4-(4-乙基哌嗪-1-基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1097)的合成
通过一般程序方案F步骤6制备
手性分离条件：Chiralpak AS-H(250*20mm；5m)；流动相：己烷-IPA-MeOH，70-15-15流速：12mL/min；柱温：20℃；波长：205nm，保留时间(异构体A)＝11.37min；保留时间(异构体B)＝19.30min
化合物1360：
产率：42.0mg(23.33％)
RT(Chiralpak AS-H(250*20mm；5m)，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，流速：0.6mL/min)＝12.74min。
1H NMR(600MHz,cd3od)δ1.11(d,3H),1.14-1.27(m,6H),1.39-1.46(m,1H),1.85-1.99(m,2H),2.08-2.28(m,2H),2.45-2.53(m,4H),2.61-2.67(m,4H),3.00-3.38(m,5H),3.61-4.08(m,1H),5.21-5.71(m,1H),6.93-7.03(m,2H),7.20-7.28(m,2H),7.49-7.66(m,1H),7.94-8.12(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值479.4；实测值479.4；Rt＝2.042min。
化合物1097：
产率：42.0mg(23.33％)
RT(Chiralpak AS-H(250*20mm；5m)，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，流速：0.6mL/min)＝8.94min。
1H NMR(600MHz,dmso)δ0.99-1.03(m,6H),1.06-1.13(m,3H),1.26-1.36(m,1H),1.62-1.73(m,1H),1.79-1.90(m,1H),1.93-2.10(m,1H),2.12-2.22(m,1H),2.34-2.41(m,4H),2.49-2.53(m,4H),2.67-3.20(m,5H),3.37-4.00(m,1H),5.00-5.55(m,1H),5.57-5.66(m,2H),6.89-6.95(m,2H),7.10-7.19(m,2H),7.44-7.52(m,1H),7.98-8.07(m,1H),10.38-10.53(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值479.4；实测值479.4；Rt＝2.035min。
实施例542.rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[4-(4-异丙基哌嗪-1-基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1208)和rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[4-(4-异丙基哌嗪-1-基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1234)的合成
步骤1：外消旋-(2R,5S)-2-[4-(4-异丙基哌嗪-1-基)苯基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案F步骤3(方法C)制备
产率：0.7g(粗品)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值402.2；实测值402.2；Rt＝1.054min。
步骤2：外消旋-1-异丙基-4-[4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]哌嗪的合成
通过一般程序方案F步骤4(方法A)制备
产率：0.58g(88.88％，2HCl)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值302.2；实测值302.2；Rt＝0.671min。
步骤3：外消旋-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[4-(4-异丙基哌嗪-1-基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成通过一般程序方案F步骤5制备
HPLC条件：2-10min 50-100％甲醇/水；流速30mL/min；装载泵4mL/min甲醇；柱SunFire 19*100mm
产率：0.178g(18.78％)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值493.2；实测值493.2；Rt＝0.854min。
步骤4：rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[4-(4-异丙基哌嗪-1-基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1208)和rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[4-(4-异丙基哌嗪-1-基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1234)的合成
通过一般程序方案F步骤6制备
手性分离条件：Chiralpak AS-H(250*20,5mkm)，己烷-IPA-MeOH，70-15-15，流速12mL/min；保留时间＝10.582min且保留时间＝16.370min。
化合物1208：
产率：72.8mg(40.90％)
RT(Chiralpak AS-H(250*20，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝7.584min。
1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)0.99(m,9H),1.09(m,3H),1.30(m,1H),1.68(m,1H),1.85(m,1H),1.91(m,1H),2.12(m,2H),2.38(m,2H),2.55(m,4H),2.69(m,1H),3.09(m,5H),3.68(dd,1H),5.58(m,3H),6.92(m,2H),7.15(m,2H),7.48(m,1H),8.03(m,1H),10.47(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值493.2；实测值493.2；Rt＝1.815min。
化合物1234：
产率：61.9mg(34.78％)
RT(Chiralpak AS-H(250*20，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝9.703min。
1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)0.99(m,9H),1.09(m,3H),1.30(m,1H),1.68(m,1H),1.85(m,1H),1.91(m,1H),2.12(m,2H),2.38(m,2H),2.55(m,4H),2.69(m,1H),3.09(m,5H),3.68(dd,1H),5.58(m,3H),6.92(m,2H),7.15(m,2H),7.48(m,1H),8.03(m,1H),10.47(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值493.2；实测值493.2；Rt＝1.814min。
实施例543.rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(2-甲基-2,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1269)和rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(2-甲基-2,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1243)的合成
步骤1：(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(2-甲基-2,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案F步骤3(方法B)制备
HPLC条件：60-88％0-6min H2O/MeOH/0.1％ NH4OH，流速：30mL/min(装载泵4mL/min甲醇)；柱：YMC Triart C18 100x20 mm，5um
产率：42.0mg(6.74％)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值442.4；实测值442.4；Rt＝2.592min。
步骤2：外消旋-2-甲基-9-[4-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]-2,9-二氮杂螺[5.5]十一烷的合成
通过一般程序方案F步骤4(方法A)制备
产率：43.0mg(99.37％，3HCl)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值342.4；实测值342.4；Rt＝1.466min。
步骤3：外消旋-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(2-甲基-2,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
通过一般程序方案F步骤5制备
HPLC条件：60-100％0-5min H2O/MeOH/0.1％ NH4OH，流速：30mL/min(装载泵4mL/min甲醇)；柱：YMC Triart C18 100x20 mm，5um
产率：14.0mg(20.87％)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值533.2；实测值533.2；Rt＝2.228min。
步骤4：rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(2-甲基-2,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1269)和rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(2-甲基-2,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1243)的合成
通过一般程序方案F步骤6制备
手性分离条件：Chiralpak IB(250*20mm，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，流速12mL/min；注入体积：200.000μl；柱温：24℃；波长：205nm，264nm)，保留时间(化合物1269)＝16.655min)且保留时间(化合物1243)＝21.256min
化合物1269：
产率：3.8mg(38.00％)
RT(Chiralpak IB(250*20mm，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝16.655min。
1H NMR(600MHz,dmso)δ0.99-1.11(m,6H),1.22-1.31(m,3H),1.52-1.67(m,6H),1.81-2.15(m,8H),2.39-2.40(m,2H),2.69-2.71(m,1H),3.11-3.18(m,6H),3.39-3.98(m,2H),5.04-5.63(m,3H),6.90-6.93(m,2H),7.10-7.16(m,2H),7.46-7.49(d,1H),8.01-8.05(d,1H),10.45-10.49(d,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值533.2；实测值533.2；Rt＝0.752min。
化合物1243：
产率：2.8mg(28.00％)
RT(Chiralpak IB(250*20mm，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝21.256min。
1H NMR(600MHz,dmso)δ0.99-1.22(m,6H),1.22-1.29(m,3H),1.51-1.67(m,6H),1.82-2.16(m,8H),2.40(m,2H),2.69-2.71(m,2H),3.10-3.18(m,5H),3.39-3.98(m,2H),5.04-5.63(m,3H),6.90-6.93(m,2H),7.10-7.16(m,2H),7.46-7.49(d,1H),8.07-8.05(d,1H),10.45-10.49(d,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值533.2；实测值533.2；Rt＝0.758min。
实施例544.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-[(2R,5S)-2-[4-(4-{[乙基(甲基)氨基]甲基}哌啶-1-基)苯基]-5-甲基哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺(化合物1232)的合成：
产率：13.70mg；26.30％。
1H NMR(600MHz,dmso)δ0.94-0.96(m,3H),0.98-1.03(m,3H),1.08-1.18(m,5H),1.23-1.38(m,1H),1.54-1.60(m,1H),1.63-1.72(m,1H),1.73-1.77(m,2H),1.80-1.90(m,1H),1.92-2.06(m,1H),2.11(s,6H),2.14-2.22(m,1H),2.28-2.33(m,2H),2.39-2.41(m,1H),2.60-2.65(m,2H),2.72-3.20(m,1H),3.38-3.43(m,0.7H),3.62-3.66(m,2H),3.93-4.01(m,0.3H),5.02-5.57(m,1H),5.58-5.66(m,2H),6.88-6.93(m,2H),7.09-7.17(m,2H),7.44-7.52(m,1H),7.99-8.07(m,1H),10.39-10.56(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值521.4；实测值521.4；Rt＝2.050min。
实施例545.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(4-{4-[(吡咯烷-1-基)甲基]哌啶-1-基}苯基)哌啶-1-基]-2-氧代乙酰胺(化合物1276)的合成
产率：22.70mg；21.30％。
1H NMR(600MHz,dmso)δ0.97-1.03(m,3H),1.07-1.13(m,3H),1.15-1.22(m,2H),1.27-1.36(m,1H),1.50-1.74(m,7H),1.75-2.22(m,6H),2.24-2.28(m,2H),2.38-2.41(m,5H),2.62-2.73(m,1H),3.13-3.99(m,4H),5.00-5.53(m,1H),5.55-5.65(m,2H),6.88-6.94(m,2H),7.07-7.19(m,2H),7.44-7.52(m,1H),7.99-8.09(m,1H),10.43-10.53(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值534.4；实测值534.4；Rt＝1.677min。
实施例546.外消旋-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(2-甲基-5-氧杂-2,8-二氮杂螺[3.5]壬-8-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1329)、rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(2-甲基-5-氧杂-2,8-二氮杂螺[3.5]壬-8-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1150)和rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(2-甲基-5-氧杂-2,8-二氮杂螺[3.5]壬-8-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1339)的合成
步骤1：外消旋-2-甲基-5-氧杂-2,8-二氮杂螺[3.5]壬烷的合成
将LiAlH4(374.08mg，9.86mmol)悬浮于THF(50mL)中且逐滴添加5-氧杂-2,8-二氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(1.5g，6.57mmol)于THF(50mL)中的溶液。完成添加之后，将反应混合物回流1h，然后使其冷却至室温。将水(10mL)小心逐滴添加到预冷却反应混合物中。将所得混合物搅拌30min且过滤。将滤饼用THF(3*40mL)冲洗且将滤液在真空中浓缩，以获得粗品2-甲基-5-氧杂-2,8-二氮杂螺[3.5]壬烷(1.2g，8.44mmol，128.43％产率)。所获得的材料不经纯化即用于下一步骤中。
产率：1.2g(粗品)
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)1.23(m,1H),2.35(s,3H),2.77-2.97(m,4H),3.41-3.43(m,2H),3.55-3.57(m,2H),4.84(s,2H)。
步骤2：外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(2-甲基-2,6-二氮杂螺[3.5]壬-6-基)苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案F步骤3(方法E)制备
产率：0.1g(48.12％)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值416.4；实测值416.4；Rt＝1.064min。
步骤3：外消旋-2-甲基-8-[4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]-5-氧杂-2,8-二氮杂螺[3.5]壬烷的合成
通过一般程序方案F步骤4(方法B)制备
产率：0.12g(粗品)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值316.2；实测值316.2；Rt＝0.700min。
步骤4：外消旋-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(2-甲基-5-氧杂-2,8-二氮杂螺[3.5]壬-8-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1329)的合成
通过一般程序方案F步骤5制备
HPLC条件：40-50％2-10min；水/MeCN；流速30mL/min；装载泵4mL/min MeCN；柱SunFire 19*100mm，5um
产率：28.0mg(14.53％)
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)0.71-0.78(m,1H),0.99-1.13(m,5H),1.29-2.20(m,5H),2.32-2.40(m,4H),2.89-2.90(m,2H),3.03(m,2H),3.13-3.18(m,3H),3.38-3.42(m,3H),3.64-4.19(m,3H),5.05-5.63(m,3H),6.93-6.97(m,2H),7.15-7.21(m,2H),7.46-7.51(m,1H),7.99-8.16(m,1H),10.47-10.54(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值507.4；实测值507.4；Rt＝2.217min。
步骤5：rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(2-甲基-5-氧杂-2,8-二氮杂螺[3.5]壬-8-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1150)和rel-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(2-甲基-5-氧杂-2,8-二氮杂螺[3.5]壬-8-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1339)的合成
通过一般程序方案F步骤6制备
手性分离条件：Chiracel OD-H(250*20mm，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH，80-10-10；流速＝12mL/min；柱温：24℃；波长：205nm；保留时间(异构体A)＝63.71min，保留时间(异构体B)＝85.15min。
化合物1339：
产率：12.21mg(48.84％)
RT(Chiracel OD-H(250*20mm,5mkm)；己烷-IPA-MeOH,80-10-10；0.6mL/min)＝75.345min。
1H NMR(600MHz,dmso)δ0.97-1.04(m,3H),1.05-1.14(m,3H),1.32(t,1H),1.68(d,1H),1.85(d,1H),2.03(d,1H),2.16(d,1H),2.35(s,3H),2.40(d,3H),2.69-3.06(m,5H),3.19(d,3H),3.38-4.02(m,6H),5.30(d,1H),5.62(d,2H),6.95(dd,2H),7.18(dd,2H),7.44-7.52(m,1H),8.03(d,1H),10.48(d,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值507.2；实测值507.2；Rt＝0.886min。
化合物1150：
产率：11.18mg(44.72％)
RT(Chiracel OD-H(250*20mm,5mkm)；己烷-IPA-MeOH,80-10-10；0.6mL/min)＝59.883min。
1H NMR(600MHz,dmso)δ0.99-1.13(m,6H),1.27-1.37(m,1H),1.63-1.72(m,1H),1.79-1.90(m,1H),1.92-2.22(m,2H),2.36-2.39(m,4H),2.70-3.07(m,5H),3.13-3.22(m,3H),3.42-3.98(m,5H),5.02-5.57(m,1H),5.58-5.66(m,2H),6.93-6.99(m,2H),7.13-7.23(m,2H),7.44-7.52(m,1H),7.99-8.09(m,1H),10.44-10.53(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值508.4；实测值508.4；Rt＝0.883min。
实施例547.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(3-(2-(二甲基氨基)丙氧基)苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1290)的合成
步骤1：1-(3-溴苯氧基)丙-2-酮的合成
将3-溴苯酚(6.6g，38.15mmol)和碳酸铯(21.13g，64.85mmol)溶解于DMF(70mL)中且在室温下搅拌15min。添加1-氯丙-2-酮(5.29g，57.22mmol，4.56mL)且将所得混合物在室温下搅拌过夜。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值229.2；实测值230.2；Rt＝1.253min。
步骤2：1-(3-溴苯氧基)-N,N-二甲基丙-2-胺的合成
将N-甲基甲胺(4.92g，43.65mmol，6.35mL)和乙酸(2.62g，43.65mmol，2.50mL)添加到1-(3-溴苯氧基)丙-2-酮(5g，21.83mmol)于MeOH(50mL)中的溶液中。将所得混合物在20℃下搅拌1h，之后向其中添加氰基硼氢化钠(2.74g，43.65mmol)。此后，继续搅拌16h。然后，在减压下移除溶剂且将残余物分配于10％ K2CO3水溶液(30ml)与DCM(80ml)之间。将有机层分离，经固体K2CO3干燥且在减压下浓缩，通过FCC(Companion comb flash；40g SiO2，CHCl3-MeCN 0～100％，流速＝40mL/min，cv＝15)纯化，以获得1-(3-溴苯氧基)-N,N-二甲基丙-2-胺(1g，3.87mmol，17.75％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值258.2；实测值259.2；Rt＝0.877min。
步骤3：N,N-二甲基-1-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯氧基)丙-2-胺的合成
将1-(3-溴苯氧基)-N,N-二甲基丙-2-胺(872mg，3.38mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(857.76mg，3.38mmol)和乙酸钾(663.00mg，6.76mmol，422.29μL)于二噁烷(10mL)中的混合物抽真空，然后用氩气回填。将此操作重复两次，然后添加Pd(dppf)Cl2*DCM(247.16mg，337.78μmol)且将反应混合物在氩气、90℃下搅拌12h，然后冷却且过滤。将滤饼用二噁烷(2*50ml)洗涤且丢弃。将滤液在真空中浓缩，以得到呈棕色油状物的粗品N,N-二甲基-1-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯氧基]丙-2-胺，其直接用于所述步骤中。
步骤4：(3S)-6-(3-(2-(二甲基氨基)丙氧基)苯基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
将N,N-二甲基-1-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯氧基]丙-2-胺(1.56g，5.10mmol)、(3S)-3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.76g，5.10mmol)和碳酸钠(1.08g，10.21mmol，427.35μL)混合于二噁烷(9mL)和水(3mL)的混合物中且将所得混合物抽真空且用氩气回填三次。将Pd(dppf)Cl2*DCM(208.43mg，255.23μmol)添加到先前混合物中且将所得混合物在90℃下加热过夜。将反应混合物用水(30ml)稀释且将所得混合物用EtOAc(2*30ml)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤(30ml)，经硫酸钠干燥，过滤且在真空中浓缩，以获得(3S)-6-[3-[2-(二甲基氨基)丙氧基]苯基]-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.63g，4.34mmol，85.11％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值374.2；实测值375.2；Rt＝1.313min。
步骤5：N,N-二甲基-1-(3-((S)-5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯氧基)丙-2-胺的合成
将(3S)-6-[3-[2-(二甲基氨基)丙氧基]苯基]-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.63g，4.35mmol)溶解于DCM(6mL)中且向其中添加TFA(6mL)。搅拌所得混合物1h。将反应混合物在真空中浓缩。将K2CO3水溶液(12g于140ml水中)添加到残余物中且将所得混合物用DCM(2*40ml)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤且在真空中浓缩，以获得N,N-二甲基-1-[3-[(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]苯氧基]丙-2-胺(1g，3.64mmol，83.73％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值274.2；实测值275.2；Rt＝0.590min。
步骤6：N,N-二甲基-1-(3-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯氧基)丙-2-胺的合成
将N,N-二甲基-1-[3-[(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]苯氧基]丙-2-胺(1g，3.64mmol)溶解于MeOH(20mL)中且分批添加硼氢化钠(413.62mg，10.93mmol，385.12μL)。将所得混合物搅拌过夜。将水(10ml)添加到反应混合物中且在真空中浓缩所得混合物。将残余物用水(30ml)稀释且将所得混合物用DCM(2*40ml)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤且在真空中浓缩，以获得N,N-二甲基-1-[3-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯氧基]丙-2-胺(1.03g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值276.2；实测值277.2；Rt＝0.672min。
步骤7：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(3-(2-(二甲基氨基)丙氧基)苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1290)的合成
将N,N-二甲基-1-[3-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯氧基]丙-2-胺(328mg，1.19mmol)、2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(248.24mg，1.19mmol)和TEA(600.37mg，5.93mmol，826.95μL)一起混合于DMF(3mL)中且向其中添加HATU(541.43mg，1.42mmol)。将所得混合物搅拌过夜。将反应混合物提交至HPLC且纯化(2-10min 30-60％MeOH+NH3 30ml/min(装载泵4ml MeOH)，柱：SunFire 100*19mm，5微米)，以获得N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2R,5S)-2-[3-[2-(二甲基氨基)丙氧基]苯基]-5-甲基-1-哌啶基]乙酰胺(15.7mg，33.58μmol，2.83％产率)和N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2R,5S)-2-[3-[2-(二甲基氨基)丙氧基]苯基]-5-甲基-1-哌啶基]乙酰胺(32.7mg，69.93μmol，5.89％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98-1.03(m,6H),1.06-1.13(m,3H),1.27-1.38(m,1H),1.58-1.71(m,1H),1.80-1.93(m,1H),1.95-2.18(m,2H),2.19-2.22(m,6H),2.36-2.42(m,2H),2.73-3.26(m,2H),3.44-4.05(m,3H),5.10-5.55(m,1H),5.57-5.67(m,2H),6.77-6.94(m,3H),7.21-7.32(m,1H),7.42-7.54(m,1H),7.97-8.09(m,1H),10.47-10.58(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值467.2；实测值468.2；Rt＝2.156min。
实施例548.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(1-甲基哌啶-4-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-7-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1274)的合成
步骤1：4-(7-溴咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将4-溴吡啶-2-胺(2.83g，16.33mmol)和4-(2-溴乙酰基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(5g，16.33mmol)溶解于EtOH(50mL)中且将其回流16h。然后将其蒸发，以得到4-(7-溴咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(5.6g，14.73mmol，90.18％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值380.2；实测值381.2；Rt＝0.950min。
步骤2：7-溴-2-(哌啶-4-基)咪唑并[1,2-a]吡啶的合成
将4-(7-溴咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(5.6g，14.73mmol)溶解于MeOH(50mL)中且添加二噁烷/HCl(14.73mmol，6mL)。然后将反应混合物在室温下搅拌4h且将其过滤。将固体干燥，以得到7-溴-2-(4-哌啶基)咪唑并[1,2-a]吡啶(4.9g，13.88mmol，94.24％产率，2HCl)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值280.2；实测值281.2；Rt＝0.339min。
步骤3：7-溴-2-(1-甲基哌啶-4-基)咪唑并[1,2-a]吡啶的合成
将用7-8％ MeOH稳定的37重量％甲醛水溶液(833.38mg，27.76mmol，769.51μL)和乙酸钠(2.28g，27.76mmol，1.49mL)添加到7-溴-2-(4-哌啶基)咪唑并[1,2-a]吡啶(4.9g，13.88mmol，2HCl)于MeOH(77.88mL)中的溶液中。将所得混合物在20℃下搅拌1小时，之后向其中添加氰基硼氢化钠(1.74g，27.76mmol)。此后，继续搅拌16h。然后，在减压下移除溶剂且将残余物分配于15％ K2CO3水溶液(30ml)与DCM(50ml)之间。将有机层分离，经固体Na2SO4干燥且在减压下浓缩，留下7-溴-2-(1-甲基-4-哌啶基)咪唑并[1,2-a]吡啶(4g，13.60mmol，97.98％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值294.2；实测值295.2；Rt＝0.256min。
步骤4：2-(1-甲基哌啶-4-基)-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶的合成
向7-溴-2-(1-甲基-4-哌啶基)咪唑并[1,2-a]吡啶(4g，13.60mmol)的溶液中添加乙酸钾(2.67g，27.19mmol，1.70mL)和双(频哪醇)二硼(3.45g，13.60mmol)。将反应混合物脱气且一次性添加Pd(dppf)Cl2*DCM(555.18mg，679.83μmol)。将混合物用Ar进一步脱气且在90℃下加热16h。在此时间之后，使反应混合物冷却至室温，过滤且在真空中移除溶剂，以得到2-(1-甲基-4-哌啶基)-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶(4.6g，13.48mmol，99.14％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值341.2；实测值342.2；Rt＝0.209min。
步骤5：(S)-3-甲基-6-(2-(1-甲基哌啶-4-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-7-基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
将(3S)-3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(6.98g，20.22mmol)、2-(1-甲基-4-哌啶基)-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)咪唑并[1,2-a]吡啶(4.6g，13.48mmol)和碳酸钠(4.29g，40.44mmol，1.69mL)添加到二噁烷(58.95mL)和水(19.65mL)的混合物中。将所得混合物抽真空，然后用氩气回填，将此操作重复三次，然后在氩气下添加Pd(dppf)Cl2*DCM(550.40mg，673.98μmol)。将反应混合物在氩气、70℃下搅拌16h，然后冷却且过滤。将滤饼用二噁烷(2*20ml)洗涤且丢弃。将滤液在真空中蒸发，以得到呈棕色油状物的(3S)-3-甲基-6-[2-(1-甲基-4-哌啶基)咪唑并[1,2-a]吡啶-7-基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(5g，12.18mmol，90.35％产率)，其不经纯化即用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值410.2；实测值411.2；Rt＝0.928min。
步骤6：(S)-7-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)-2-(1-甲基哌啶-4-基)咪唑并[1,2-a]吡啶的合成
将(3S)-3-甲基-6-[2-(1-甲基-4-哌啶基)咪唑并[1,2-a]吡啶-7-基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(5g，12.18mmol)溶解于MeOH(50mL)中且向其中添加二噁烷/HCl(10.96mmol，5mL)。然后将其在室温下搅拌2h。将反应混合物蒸发，以得到2-(1-甲基-4-哌啶基)-7-[(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]咪唑并[1,2-a]吡啶(3.8g，9.91mmol，81.39％产率，2HCl)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值310.2；实测值311.2；Rt＝0.581min。
步骤7：7-((5S)-5-甲基哌啶-2-基)-2-(1-甲基哌啶-4-基)咪唑并[1,2-a]吡啶的合成
在0℃下，向2-(1-甲基-4-哌啶基)-7-[(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]咪唑并[1,2-a]吡啶(3.8g，9.91mmol，2HCl)于MeOH(50mL)中的搅拌溶液中添加硼氢化钠(750.03mg，19.82mmol，698.35μL)。将所得反应混合物在25℃下搅拌16h。完成之后，将反应混合物在减压下浓缩，然后用水20mL和50ml EtOAc萃取。将合并的有机相用盐水20mL洗涤，经Na2SO4干燥且在减压下浓缩，以获得2-(1-甲基-4-哌啶基)-7-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]咪唑并[1,2-a]吡啶(2.5g，8.00mmol，80.72％产率)，其不经进一步纯化即用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值312.2；实测值313.2；Rt＝0.255min。
步骤8：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(1-甲基哌啶-4-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-7-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1274)的合成
将DIPEA(308.90mg，2.39mmol，416.30μL)添加到相应2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(0.2g，956.02μmol)和2-(1-甲基-4-哌啶基)-7-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]咪唑并[1,2-a]吡啶(298.71mg，956.02μmol)于DMF(19.58mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU(399.86mg，1.05mmol)。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC(Waters Sunfire C18 20*100 5mkm柱且以MeCN+FA为洗脱液混合物)，以得到N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)咪唑并[1,2-a]吡啶-7-基]-1-哌啶基]乙酰胺(21.9mg，39.84μmol，4.17％产率，HCOOH)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99-1.14(m,6H),1.30-1.39(m,1H),1.66-1.74(m,3H),1.76-2.18(m,7H),2.19-2.27(m,4H),2.35-2.42(m,1H),2.62-2.65(m,1H),2.76-2.91(m,3H),3.93-4.07(m,1H),5.13-5.58(m,1H),5.58-5.67(m,2H),6.71-6.86(m,1H),7.33-7.54(m,2H),7.62-7.69(m,1H),7.99-8.09(m,1H),8.40-8.45(m,1H),10.50-10.64(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值503.2；实测值504.2；Rt＝1.336min。
实施例549.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(3-(((R)-1-甲基吡咯烷-3-基)甲氧基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1178)的合成
步骤1：(2R,5S)-2-(3-(((R)-1-((苯甲氧基)羰基)吡咯烷-3-基)甲氧基)苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将(2R,5S)-2-(3-羟基苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.9g，3.09mmol)、(3R)-3-(甲基磺酰基氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸苯甲酯(1.26g，4.02mmol)和99％无水碳酸钾(853.78mg，6.18mmol，372.83μL)一起混合于MeCN(19.63mL)中且在81℃下加热36h。在真空下浓缩反应混合物。将所获得的残余物溶解于EtOAc/H2O中，分离EtOAc层且将水层用EtOAc萃取两次。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且在真空下浓缩。通过FCC(于己烷中的MTBE，0％至100％)纯化粗产物。获得呈淡黄色胶状物的(2R,5S)-5-甲基-2-[3-[[(3R)-1-苯甲氧基羰基吡咯烷-3-基]甲氧基]苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.25g，491.50μmol，15.91％产率)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值408.2；实测值409.2；Rt＝1.814min。
步骤2：(2R,5S)-5-甲基-2-(3-((R)-吡咯烷-3-基甲氧基)苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
在H2(1atm)、20℃下，将(2R,5S)-5-甲基-2-[3-[[(3R)-1-苯甲氧基羰基吡咯烷-3-基]甲氧基]苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.25g，491.50μmol)于MeOH(10mL)中的溶液经Pd/C(10％)(0.075g，491.50μmol)氢化12h。过滤反应混合物，将滤饼用MeOH洗涤且在减压下浓缩滤液。所获得的产物不经进一步纯化即用于下一步骤中。获得呈淡黄色胶状物的(2R,5S)-5-甲基-2-[3-[[(3R)-吡咯烷-3-基]甲氧基]苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.21g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值374.2；实测值375.2；Rt＝1.241min。
步骤3：(2R,5S)-5-甲基-2-(3-(((R)-1-甲基吡咯烷-3-基)甲氧基)苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将(2R,5S)-5-甲基-2-[3-[[(3R)-吡咯烷-3-基]甲氧基]苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.21g，560.72μmol)、用7-8％ MeOH稳定的37重量％甲醛水溶液(25.25mg，841.09μmol，23.32μL)和乙酸(67.35mg，1.12mmol，64.20μL)溶解于MeOH(5mL)中且搅拌1h，然后在用冰+水冷却时分批添加氰基硼氢化钠(105.71mg，1.68mmol)且将反应混合物搅拌12h。蒸发溶剂，将所获得的残余物溶解于Na2CO3(水溶液)中且用DCM(3*50ml)萃取，将DCM层经Na2SO4干燥，过滤且在真空上蒸发。所获得的产物不经进一步纯化即用于下一步骤中。获得呈淡黄色胶状物的(2R,5S)-5-甲基-2-[3-[[(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]甲氧基]苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.21g，540.48μmol，96.39％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值388.2；实测值389.2；Rt＝0.954min。
步骤4：(2R,5S)-5-甲基-2-(3-(((R)-1-甲基吡咯烷-3-基)甲氧基)苯基)哌啶的合成
将(2R,5S)-5-甲基-2-[3-[[(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]甲氧基]苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.21g，540.48μmol)溶解于MeOH(7mL)和二噁烷/HCl(7mL)的混合物中。将所得澄清溶液在20℃下搅拌4h。在真空下浓缩反应混合物。获得呈淡黄色胶状物的(2R,5S)-5-甲基-2-[3-[[(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]甲氧基]苯基]哌啶(0.2g，粗品，2HCl)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值288.2；实测值289.2；Rt＝0.601min。
步骤5：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(3-(((R)-1-甲基吡咯烷-3-基)甲氧基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1178)的合成
将(2R,5S)-5-甲基-2-[3-[[(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]甲氧基]苯基]哌啶(0.2g，553.48μmol，2HCl)、TEA(392.05mg，3.87mmol，540.01μL)和2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(115.79mg，553.48μmol)溶解于DMF(5mL)中且一次性添加HATU(231.50mg，608.83μmol)，将所得混合物在20℃下搅拌3h。将反应混合物提交至HPLC(2-10min 60-85％ MeOH+NH3流速30ml/min(装载泵4ml MeOH)，柱：SunFire C18)。获得呈淡黄色固体的N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-[[(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]甲氧基]苯基]-1-哌啶基]乙酰胺(0.099g，206.42μmol，37.29％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.71-1.04(m,3H),1.07-1.16(m,3H),1.24-1.37(m,1H),1.42-1.52(m,1H),1.61-1.73(m,1H),1.80-1.96(m,2H),1.97-2.14(m,1H),2.14-2.20(m,1H),2.21(s,3H),2.29-2.45(m,5H),2.51-2.52(m,2H),2.73-3.24(m,1H),3.42-3.47(m,0.7H),3.78-3.87(m,2H),3.99-4.05(m,0.3H),5.03-5.57(m,1H),5.57-5.69(m,2H),6.77-6.94(m,3H),7.23-7.32(m,1H),7.42-7.55(m,1H),7.98-8.10(m,1H),10.47(brs,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值479.2；实测值480.2；Rt＝0.754min。
实施例550.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(3-((1-甲基哌啶-4-基)甲氧基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1348)的合成
步骤1：(2R,5S)-2-(3-((1-((苯甲氧基)羰基)哌啶-4-基)甲氧基)苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将(2R,5S)-2-(3-羟基苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.9g，3.09mmol)、4-(甲基磺酰基氧基甲基)哌啶-1-甲酸苯甲酯(1.52g，4.63mmol)和99％无水碳酸钾(853.75mg，6.18mmol，372.82μL)一起混合于MeCN(20mL)中且在80℃下加热12h。在真空下浓缩反应混合物。将所获得的残余物溶解于EtOAc/H2O中，分离EtOAc层且将水层用EtOAc萃取两次。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩。通过FCC(于己烷中的MTBE，0％至100％)纯化粗产物。获得呈淡黄色胶状物的(2R,5S)-2-[3-[(1-苯甲氧基羰基-4-哌啶基)甲氧基]苯基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.75g，1.43mmol，46.46％产率)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值422.2；实测值423.2；Rt＝1.863min。
步骤2：(2R,5S)-5-甲基-2-(3-(哌啶-4-基甲氧基)苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
在H2(1atm)、20℃下，将(2R,5S)-2-[3-[(1-苯甲氧基羰基-4-哌啶基)甲氧基]苯基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.75g，1.43mmol)于MeOH(10mL)中的溶液经Pd/C(10％)(0.1g，1.43mmol)氢化12h。过滤反应混合物，将滤饼用MeOH洗涤且在减压下浓缩滤液。所获得的产物不经进一步纯化即用于下一步骤中。获得呈淡黄色胶状物的(2R,5S)-5-甲基-2-[3-(4-哌啶基甲氧基)苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.61g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值388.2；实测值389.2；Rt＝1.269min。
步骤3：(2R,5S)-5-甲基-2-(3-((1-甲基哌啶-4-基)甲氧基)苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将(2R,5S)-5-甲基-2-[3-(4-哌啶基甲氧基)苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.61g，1.57mmol)、用7-8％ MeOH稳定的37重量％甲醛水溶液(70.71mg，2.35mmol，65.29μL)和乙酸(188.56mg，3.14mmol，179.75μL)溶解于MeOH(10mL)中且搅拌1h，然后在用冰+水冷却时分批添加氰基硼氢化钠(295.98mg，4.71mmol)且将反应混合物搅拌12h。蒸发溶剂，将所获得的残余物溶解于Na2CO3(水溶液)中且用DCM(3*50ml)萃取，将DCM层经Na2SO4干燥，过滤且在真空上蒸发。所获得的产物不经进一步纯化即用于下一步骤中。获得呈淡黄色胶状物的(2R,5S)-5-甲基-2-[3-[(1-甲基-4-哌啶基)甲氧基]苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.41g，1.02mmol，64.87％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值402.2；实测值403.2；Rt＝0.967min。
步骤4：1-甲基-4-((3-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯氧基)甲基)哌啶的合成
将(2R,5S)-5-甲基-2-[3-[(1-甲基-4-哌啶基)甲氧基]苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.41g，1.02mmol)溶解于MeOH(7mL)和二噁烷(HCl)(7mL)的混合物中。将所得澄清溶液在20℃下搅拌4h。将反应混合物在真空中浓缩。获得呈淡黄色固体的1-甲基-4-[[3-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯氧基]甲基]哌啶(0.3g，799.20μmol，78.47％产率，2HCl)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值302.2；实测值303.2；Rt＝0.631min。
步骤5：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(3-((1-甲基哌啶-4-基)甲氧基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1348)的合成
将1-甲基-4-[[3-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯氧基]甲基]哌啶(0.3g，799.20μmol，2HCl)、TEA(566.10mg，5.59mmol，779.75μL)和2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(167.19mg，799.20μmol)溶解于DMF(5mL)中且一次性添加HATU(334.27mg，879.12μmol)，将所得混合物在20℃下搅拌3h。将反应混合物提交至HPLC(2-10min 60-80％MeOH+NH3流速30ml/min(装载泵4ml MeOH)，柱：SunFire C18)。获得呈淡黄色固体的N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-[(1-甲基-4-哌啶基)甲氧基]苯基]-1-哌啶基]乙酰胺(0.153g，309.94μmol，38.78％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.76-1.03(m,3H),1.06-1.14(m,3H),1.22-1.37(m,3H),1.62-1.75(m,4H),1.80-1.85(m,2H),1.86-2.11(m,2H),2.12(s,3H),2.14-2.26(m,1H),2.37-2.44(m,2H),2.73-2.80(m,2.3H),3.21-3.25(m,0.7H),3.43-3.48(m,0.7H),3.76-3.84(m,2H),3.99-4.06(m,0.3H),5.08-5.57(m,1H),5.58-5.68(m,2H),6.76-6.91(m,3H),7.22-7.32(m,1H),7.43-7.54(m,1H),7.97-8.12(m,1H),10.21(br s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值493.2；实测值494.2；Rt＝0.773min。
实施例551.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(3-(((S)-1-甲基吡咯烷-3-基)甲氧基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1179)的合成
步骤1：(2R,5S)-2-(3-(((S)-1-((苯甲氧基)羰基)吡咯烷-3-基)甲氧基)苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将(2R,5S)-2-(3-羟基苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.9g，3.09mmol)、(3S)-3-(甲基磺酰基氧基甲基)吡咯烷-1-甲酸苯甲酯(1.26g，4.02mmol)和99％无水碳酸钾(853.78mg，6.18mmol，372.83μL)一起混合于MeCN(19.92mL)中且在81℃下加热36h。在真空下浓缩反应混合物。将所获得的残余物溶解于EtOAc/H2O中，分离EtOAc层且将水层用EtOAc萃取两次。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩。通过FCC(于己烷中的MTBE，0％至100％)纯化粗产物。获得呈淡黄色胶状物的(2R,5S)-5-甲基-2-[3-[[(3S)-1-苯甲氧基羰基吡咯烷-3-基]甲氧基]苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.25g，491.50μmol，15.91％产率)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值408.2；实测值409.2；Rt＝1.814min。
步骤2：(2R,5S)-5-甲基-2-(3-((S)-吡咯烷-3-基甲氧基)苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
在H2(1atm)、20℃下，将(2R,5S)-5-甲基-2-[3-[[(3S)-1-苯甲氧基羰基吡咯烷-3-基]甲氧基]苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.25g，491.50μmol)于MeOH(10mL)中的溶液经Pd/C(10％)(0.075g，491.50μmol)氢化12h。过滤反应混合物，将滤饼用MeOH洗涤且在减压下浓缩滤液。所获得的产物不经进一步纯化即用于下一步骤中。获得呈淡黄色胶状物的(2R,5S)-5-甲基-2-[3-[[(3S)-吡咯烷-3-基]甲氧基]苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.21g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值374.2；实测值375.2；Rt＝1.249min。
步骤3：(2R,5S)-5-甲基-2-(3-(((S)-1-甲基吡咯烷-3-基)甲氧基)苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将(2R,5S)-5-甲基-2-[3-[[(3S)-吡咯烷-3-基]甲氧基]苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.21g，560.72μmol)、用7-8％ MeOH稳定的37重量％甲醛水溶液(25.25mg，841.09μmol，23.32μL)和乙酸(67.35mg，1.12mmol，64.20μL)溶解于MeOH(5mL)中且搅拌1h，然后在用冰+水冷却时分批添加氰基硼氢化钠(105.71mg，1.68mmol)且将反应混合物搅拌12h。蒸发溶剂，将所获得的残余物溶解于Na2CO3(水溶液)中且用DCM(3*50ml)萃取，将DCM层经Na2SO4干燥，过滤且在真空上蒸发。所获得的产物不经进一步纯化即用于下一步骤中。获得呈淡黄色胶状物的(2R,5S)-5-甲基-2-[3-[[(3S)-1-甲基吡咯烷-3-基]甲氧基]苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.21g，540.48μmol，96.39％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值388.2；实测值389.2；Rt＝0.956min。
步骤4：(2R,5S)-5-甲基-2-(3-(((S)-1-甲基吡咯烷-3-基)甲氧基)苯基)哌啶的合成
将(2R,5S)-5-甲基-2-[3-[[(3S)-1-甲基吡咯烷-3-基]甲氧基]苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.21g，540.48μmol)溶解于MeOH(7mL)和二噁烷(HCl)(7mL)的混合物中。将所得澄清溶液在20℃下搅拌12h。在真空下浓缩反应混合物。获得呈淡黄色固体的(2R,5S)-5-甲基-2-[3-[[(3S)-1-甲基吡咯烷-3-基]甲氧基]苯基]哌啶(0.18g，498.13μmol，92.16％产率，2HCl)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值288.2；实测值289.2；Rt＝0.604min。
步骤5：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(3-(((S)-1-甲基吡咯烷-3-基)甲氧基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1179)的合成
将(2R,5S)-5-甲基-2-[3-[[(3S)-1-甲基吡咯烷-3-基]甲氧基]苯基]哌啶(0.18g，498.13μmol，2HCl)、TEA(352.84mg，3.49mmol，486.01μL)和2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(104.21mg，498.13μmol)溶解于DMF(5mL)中且一次性添加HATU(208.35mg，547.95μmol)，将所得混合物在20℃下搅拌3h。将反应混合物提交至HPLC(2-10min 60-85％ MeOH+NH3流速30ml/min(装载泵4ml MeOH)，柱：SunFire C18)。获得呈淡黄色固体的N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-[[(3S)-1-甲基吡咯烷-3-基]甲氧基]苯基]-1-哌啶基]乙酰胺(0.078g，162.63μmol，32.65％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.75-1.02(m,3H),1.07-1.15(m,3H),1.26-1.38(m,1H),1.42-1.55(m,1H),1.58-1.73(m,1H),1.80-1.95(m,2H),1.98-2.11(m,1H),2.11-2.20(m,1H),2.21(s,3H),2.29-2.43(m,5H),2.50-2.52(m,2H),2.72-2.77(m,0.3H),3.20-3.26(m,0.7H),3.42-3.50(m,0.7H),3.76-3.86(m,2H),3.97-4.05(m,0.3H),5.07-5.59(m,1H),5.59-5.69(m,2H),6.75-6.95(m,3H),7.23-7.34(m,1H),7.41-7.55(m,1H),7.96-8.13(m,1H),10.45(br s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值479.2；实测值480.2；Rt＝2.217min。
方案G-式7化合物的合成
式7化合物为式(I)化合物，其中R1、R2、R3、R4、R6、R7和R8如本文所述。
一般程序7
步骤1：7B的合成
将7A(1.0当量)溶解于DCM(280mL)中且逐滴添加二碳酸二-叔丁酯(1.02当量)于DCM(20mL)中的溶液(剧烈气体逸出！)。将所得混合物在20℃下搅拌4h。然后，在减压下移除挥发物，得到粗产物，其通过FCC(CHCl3-MeCN，100％-0％至0％-100％)进行纯化，以得到(2R,5S)-2-(4-溴苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(7B)。
步骤2：7C的合成
向(2R,5S)-2-(4-溴苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(7B；1.0当量)和相应胺(1.0当量)于溶剂(5mL)中的搅拌溶液中添加碱(2.5当量)。将所得悬浮液用氩气脱气。添加配体(0.05当量)和Pd催化剂(0.05当量)。将反应混合物在65…100℃下搅拌15…48h。反应完成(通过LCMS监测)之后，使所得混合物冷却至室温，通过SiO2薄层过滤且用溶剂(2mL)洗涤。在真空中移除挥发物且使残余物经历纯化，以得到7C。
布赫瓦尔德反应步骤：
步骤3：7D的合成
将7C溶解于溶剂(2…10mL)中且添加酸(50.0当量)。将反应混合物在室温下搅拌1…4h。在真空中移除溶剂，以获得7D。
Boc移除步骤：
步骤4：7的合成
将7D(1.0当量)、草酰胺酸(1.0当量)和TEA(2.5当量+1.0当量/各酸当量，如果使用胺盐)一起混合于DMF中。向其中添加HATU(1.5当量)且将所得混合物搅拌过夜。在真空中浓缩反应混合物且通过HPLC纯化残余物，以获得7。
步骤4A：7E的合成
将7D(1.0当量)和TEA(1.2当量)溶解于THF中且冷却至0℃，随后逐滴添加2-氯-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(1.1当量)且将反应混合物在0℃下搅拌2h。所述混合物(7E)不经进一步纯化即用于下一步骤中。
步骤4B：7E的合成
通过7E(1.0当量)于THF(50mL)中的溶液，将氨(50.0当量)在20℃下鼓泡10min。将混合物搅拌2h，在真空中蒸发且用MTBE-MeCN研磨。过滤沉淀且干燥，以得到7F。
步骤4C：7的合成
在Ar气氛下，将7F(1.0当量)、R3I(1.0当量)、CuI(0.2当量)、CuI(0.2当量)、N1,N2-二甲基环己-1,2-二胺(0.2当量)和Cs2CO3一起混合于二噁烷(6mL)中。将反应混合物在100℃下搅拌48h。然后，使混合物冷却至室温且过滤出。使滤液经历HPLC，以得到7。
实施例552.N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(9-甲基-2,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-2-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1401)的合成
步骤1：(5S)-2-(4-溴苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序7制备。
产率：14g(87.34％)
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值254.0；实测值254.0；Rt＝1.539min。
步骤2：(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(9-甲基-2,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-2-基)苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序7制备
产率：105.0mg(粗品)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值442.4；实测值442.4；Rt＝1.159min。
步骤3：9-甲基-2-[4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]-2,9-二氮杂螺[5.5]十一烷的合成
通过一般程序方案7制备
产率：96.0mg(粗品)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值342.2；实测值342.2；Rt＝0.754min。
步骤4：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(9-甲基-2,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-2-基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1401)的合成
通过一般程序方案G步骤4制备
产率：10.5mg(7.01％)。
HPLC条件：2-10min 40-65％水-MeOH-0.1％ NH4OH；30mL/min；装载泵MeOH-0.1％NH4OH 4mL/min；柱SunFire 19*100mm，5mkm
1H NMR(600MHz,dmso)δ0.88-1.03(m,3H),1.04-1.15(m,4H),1.26-1.35(m,1H),1.36-1.44(m,4H),1.48-1.54(m,2H),1.59-1.64(m,2H),1.64-1.76(m,1H),1.77-1.91(m,1H),1.92-2.10(m,1H),2.11-2.19(m,4H),2.20-2.26(m,2H),2.26-2.33(m,2H),2.39-2.42(m,1H),2.70-2.74(m,0.4H),2.89-2.94(m,2H),3.01-3.08(m,2H),3.16-3.22(m,0.6H),3.50-3.98(m,1H),5.02-5.59(m,1H),5.59-5.69(m,2H),6.85-6.93(m,2H),7.08-7.21(m,2H),7.40-7.55(m,1H),7.97-8.10(m,1H),10.42-10.51(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值533.4；实测值533.4；Rt＝1.961min。
实施例553.rel-2-[(2R,5S)-2-[4-[(4aR,8aS)-1-甲基-2,3,4,4a,5,7,8,8a-八氢-1,6-萘啶-6-基]苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物1111)和rel-2-[(2R,5S)-2-[4-[(4aS,8aR)-1-甲基-2,3,4,4a,5,7,8,8a-八氢-1,6-萘啶-6-基]苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物1132)的合成
步骤1：(5S)-2-(4-溴苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成通过一般程序方案G步骤1制备产率：14g(87.34％)
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值254.0；实测值254.0；Rt＝1.539min。
步骤2：(2R,5S)-2-[4-[(4aS,8aR)-1-甲基-2,3,4,4a,5,7,8,8a-八氢-1,6-萘啶-6-基]苯基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案G步骤2(方法B)制备
产率：0.8g(粗品)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值428.4；实测值428.4；Rt＝1.268min。
步骤3：(4aS,8aR)-1-甲基-6-[4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]-2,3,4,4a,5,7,8,8a-八氢-1,6-萘啶的合成
通过一般程序方案G步骤3(方法A)制备
产率：0.7g(85.64％)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值328.4；实测值328.4；Rt＝0.666min。
步骤4：2-[(2R,5S)-2-[4-[(4aS,8aR)-1-甲基-2,3,4,4a,5,7,8,8a-八氢-1,6-萘啶-6-基]苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺的合成通过一般程序7步骤4制备
产率：340.0mg(40.91％)
HPLC条件：40-40-90％0-1-6min H2O/MeOH/0.1％ NH4OH，流速：30mL/min(装载泵4mL/min甲醇)；YMC Triart C18 100x 20mm，5um
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值519.2；实测值519.2；Rt＝2.452min。
步骤5：rel-2-[(2R,5S)-2-[4-[(4aR,8aS)-1-甲基-2,3,4,4a,5,7,8,8a-八氢-1,6-萘啶-6-基]苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物1111)和rel-2-[(2R,5S)-2-[4-[(4aS,8aR)-1-甲基-2,3,4,4a,5,7,8,8a-八氢-1,6-萘啶-6-基]苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物1132)的合成
通过一般程序7步骤5制备
化合物1132：产率：103mg(60.59％)。
化合物1111：产率：94mg(55.29％)。
手性分离条件：柱：Chiralpak IB(250*20mm，5mkm)流动相：己烷-IPA-MeOH，50-25-25流速：12mL/min；m＝0.25g，注入37，6.75mg/注入，V＝11.1l，15.4h.
化合物1111：
RT(Chiralpak IB(250*4.6,5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝16.35min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.97-1.04(m,3H),1.07-1.14(m,3H),1.27-1.35(m,1H),1.40-1.73(m,7H),1.80-2.33(m,10H),2.37-2.42(m,2H),2.64-3.24(m,5H),3.38-4.00(m,1H),5.02-5.54(m,1H),5.58-5.66(m,2H),6.87-6.94(m,2H),7.07-7.18(m,2H),7.44-7.52(m,1H),8.00-8.09(m,1H),10.40-10.55(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值518.0；实测值518.0；Rt＝2.214min。
化合物1132：
RT(Chiralpak IB(250*4.6,5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝19.69min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.97-1.03(m,3H),1.07-1.13(m,3H),1.27-1.73(m,8H),1.80-2.26(m,9H),2.37-2.43(m,2H),2.61-3.26(m,6H),3.37-4.00(m,1H),5.01-5.54(m,1H),5.57-5.66(m,2H),6.87-6.94(m,2H),7.06-7.17(m,2H),7.44-7.52(m,1H),7.99-8.09(m,1H),10.40-10.53(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值519.4；实测值519.4；Rt＝2.216min。
rel-2-[(2R,5S)-2-[4-[(4aR,8aS)-7-甲基-1,3,4,4a,5,6,8,8a-八氢-2,7-萘啶-2-基]苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物1204)和rel-2-[(2R,5S)-2-[4-[(4aS,8aR)-7-甲基-1,3,4,4a,5,6,8,8a-八氢-2,7-萘啶-2-基]苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物1144)的合成
通过一般程序方案G步骤5制备。
化合物1204：产率：49.0mg(46.65％)。
化合物1144：产率：39.0mg(37.15％)。
HPLC条件：15-15-65％0-1-6min H2O/MeCN/0.1％ NH4OH，流速：30mL/min(装载泵4mL/min乙腈)；柱：XBridge BEH C18 5um130A
手性分离条件：柱：ChiralART YMC(250*20mm，5mkm)；流动相：IPA-MeOH，50-50.流速：12mL/min；柱温：24℃；波长：205nm
化合物1204：
1H NMR(600MHz,dmso)δ0.94-1.05(m,3H),1.06-1.13(m,3H),1.26-1.36(m,1H),1.37-1.78(m,7H),1.80-1.91(m,2H),1.93-2.10(m,5H),2.12-2.21(m,2H),2.32-2.42(m,3H),2.70-3.26(m,5H),3.36-4.00(m,1H),4.99-5.54(m,1H),5.54-5.65(m,2H),6.86-6.94(m,2H),7.07-7.17(m,2H),7.43-7.53(m,1H),7.97-8.10(m,1H),10.47(s,1H)。
RT(Chiralpak IA(250*4.6，5mkm)，IPA-MeOH，50-50，0.6mL/min)＝26.19min。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值519.2；实测值519.2；Rt＝1.704min。
化合物1144：
1H NMR(600MHz,dmso)δ0.97-1.03(m,3H),1.07-1.13(m,3H),1.27-1.35(m,1H),1.40-1.75(m,7H),1.81-1.97(m,3H),2.02-2.22(m,7H),2.33-2.42(m,2H),2.69-3.25(m,5H),3.38-3.99(m,1H),5.00-5.54(m,1H),5.56-5.65(m,2H),6.85-6.92(m,2H),7.06-7.18(m,2H),7.42-7.54(m,1H),7.98-8.09(m,1H),10.39-10.55(m,1H)。
RT(Chiralpak IA(250*4.6，5mkm)，IPA-MeOH，50-50，0.6mL/min)＝20.31min。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值519.2；实测值519.2；Rt＝1.703min。
实施例554.N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-[(1-甲基-4-哌啶基)氨基]苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1112)的合成
步骤2：(2R,5S)-5-甲基-2-[4-[(1-甲基-4-哌啶基)氨基]苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案G步骤2制备。产率：94.0mg(9.55％)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值388.2；实测值388.2；Rt＝1.075min。
步骤3：1-甲基-N-[4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]哌啶-4-胺的合成
通过一般程序方案G步骤3(方法B)制备。产率：150.0mg(粗品)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值288.2；实测值288.2；Rt＝0.583min。
步骤4：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-[(1-甲基-4-哌啶基)氨基]苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1112)的合成
通过一般程序方案G步骤4制备。产率：42.5mg(35.56％)
HPLC条件：2-10min 30-45％水-MeOH-0.1％ NH4OH；30mL/min；装载泵MeOH-0.1％NH4OH；4mL/min；柱SunFire 19*100mm，5mkm
1H NMR(dmso,600MHz):δ(ppm)0.71-0.78(m,1H),0.98-1.13(m,5H),1.27-1.36(m,3H),1.59-1.99(m,7H),2.14(s,3H),2.35-2.41(m,2H),2.68-2.70(m,2H),3.12-3.19(m,1H),3.36-4.14(m,3H),5.37-5.62(m,4H),6.54-6.57(m,2H),6.96-7.03(m,2H),7.46-7.51(m,1H),7.99-8.07(m,1H),10.27(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值479.2；实测值479.2；Rt＝0.841min。
方案H-式8化合物的合成
式8化合物为式(I)化合物，其中R1、R2、R3、R4、R6、R7和R8如本文所述。
一般程序8
方案H
步骤1A：8-C的合成
将磷酸(4当量)和五氧化二磷(4当量)混合在一起。将反应悬浮液在室温下搅拌10min，然后在Ar下添加8a-A(1当量)，随后添加8a-B(1.2当量)。将溶液在110℃下搅拌18h，然后将其用水研磨，碱化(NaOH，10％水溶液)至pH＝10，用DCM萃取两次，干燥且在真空中蒸发，以得到8-C。
步骤1B：8-C的合成
向8b-A(1当量)于DMSO中的搅拌溶液中添加8b-B(1当量)。将所得混合物在100℃下搅拌14h。将反应混合物倒入到冷水中且用MTBE萃取两次。将合并的有机层用水和盐水洗涤，经Na2SO4干燥。在真空中蒸发MTBE，以得到8-C。
步骤1C：8-C的合成
向8c-A(1当量)于1,2-二氯乙烷中的搅拌溶液中添加8c-B(2当量)且使其在25℃下搅拌2h，添加(三乙酰氧基)硼氢化钠(2当量)。将反应混合物在25℃下搅拌16h。完成之后，将反应混合物蒸发，用水萃取且通过K2CO3中和至pH＝10。将水相用CHCl3萃取两次。将合并的有机相经Na2SO4干燥且在减压下蒸发，以得到8-C。(将TEA(1.5当量/各酸当量，如果使用胺盐)添加到相应胺的溶液中)
步骤2：8-D的合成
将8-C(1当量)、B2Pin2(1.1当量)和KOAc(2当量)混合于二噁烷中。将所得混合物抽真空，然后用氩气回填，将此操作重复三次，然后在氩气下添加Pd(dppf)Cl2*DCM(0.05当量)。将反应混合物在氩气、90℃下搅拌14h，然后冷却且过滤。将滤饼用二噁烷洗涤两次。蒸发溶剂，以得到8-D。
步骤3：8-F的合成
将8-D(1当量)、(3S)-3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.2当量)、碳酸钠(3当量)一起混合于二噁烷-水混合物(3:1)中。将所得混合物抽真空，然后用氩气回填。将此操作重复两次，然后添加Pd(dppf)Cl2*DCM(819.86mg，1.00mmol)且将反应混合物在氩气、90℃下搅拌过夜，然后冷却，且在真空中浓缩。将残余物用MTBE稀释且搅拌0.5h。在大部分残余物已溶解之后，添加无水硫酸钠，且过滤所得混合物。将滤饼另外用MTBE(5*50ml)洗涤且丢弃。将滤液在真空中浓缩，以得到8-F。
步骤4：8-G的合成
将8-F(1当量)于TFA(15当量)中的溶液在室温下搅拌1h，然后在真空中浓缩。将冷水添加到残余物中，且将所得混合物用DCM萃取两次。丢弃DCM层，且将水层碱化至pH 11。将所得混合物用DCM萃取两次。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥，且在真空中浓缩，以得到8-G。
步骤5：8-H的合成
将8-G(1当量)溶解于MeOH中且将所得溶液在冰浴中冷却至0℃。将硼氢化钠(2当量)分批添加到先前溶液中。在添加完成之后，使反应混合物升温至室温且搅拌过夜。将水添加到反应混合物且将所得混合物在真空中浓缩。将残余物用水稀释且将所得混合物用DCM萃取两次，经Na2SO4干燥，过滤且蒸发，以获得8-H。
步骤6A：式8的合成
将8-H(1当量)、草酰胺酸(1当量)和TEA(2.5当量+1.0当量/各酸当量，如果使用胺盐)一起混合于DMF中。向其中添加HATU(1.5当量)且将所得混合物搅拌过夜。将反应混合物在真空中浓缩且通过HPLC纯化残余物，以获得式8。
步骤6B：式8的合成
将DIPEA(2.5当量+1.0当量/各酸当量，如果使用胺盐)添加到相应胺或其盐(8-H)(1当量)和草酰胺酸(1当量)于DMF中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU(1.1当量)于DMF中的溶液。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的滤液经历HPLC(Waters SunFire C1819*100 5mkm柱且以H2O-MeOH为流动相)，以得到纯产物(式8)。
实施例555.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1280)的合成
步骤1：2-(5-溴苯并[d]噻唑-2-基)-2,2-二氟-N,N-二甲基乙胺的合成
通过一般程序方案H步骤1A制备。产率：8.3g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值321.2；实测值322.2；Rt＝1.068min。
步骤2：2,2-二氟-N,N-二甲基-2-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)乙胺的合成
将2-(5-溴-1,3-苯并噻唑-2-基)-2,2-二氟-N,N-二甲基乙胺(8.3g，25.84mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(7.87g，31.01mmol)和乙酸钾(5.07g，51.68mmol，3.23mL)一起混合于二噁烷(100mL)中。将反应烧瓶抽真空且用氩气再填充3次。然后，在氩气流下，添加XPhos(2.46g，5.17mmol)和三(二苯亚甲基丙酮)二钯(0)(1.18g，1.29mmol)。将所得混合物在100℃下搅拌16h。然后，将其在减压下浓缩且通过梯度柱色谱(SiO2，CHCl3/MTBE)纯化残余物，得到2,2-二氟-N,N-二甲基-2-[5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噻唑-2-基]乙胺(8.8g，23.90mmol，92.47％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值368.2；实测值369.2；Rt＝1.076min。
步骤3：(S)-6-(2-(2-(二甲基氨基)-1,1-二氟乙基)苯并[d]噻唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤3制备。产率：2.22g(88.77％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值437.2；实测值438.2；Rt＝1.299min。
步骤4：(S)-2,2-二氟-N,N-二甲基-2-(5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)乙胺的合成
通过一般程序方案H步骤4制备。产率：1.14g(66.59％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值337.2；实测值338.2；Rt＝0.586min。
步骤5：2,2-二氟-N,N-二甲基-2-(5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)乙胺的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：1.04g(90.69％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值339.2；实测值340.2；Rt＝0.771min。
步骤6：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1280)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：133mg(56.72％)。
HPLC条件：柱：YMC Triart C18 100*20mm，5微米；0-5min40-100％水-MeOH+0.1％ NH4OH，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeOH)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.02-1.07(t,3H),1.11-1.14(m,3H),1.32-1.41(m,1H),1.67-1.71(m,2H),1.86-1.90(m,1H),2.06-2.13(m,1H),2.17-2.23(m,6H),2.34-2.41(m,3H),2.78-2.81(m,1H),3.49-4.07(m,2H),5.32-5.72(m,3H),7.43-7.60(m,2H),7.99-8.11(m,2H),8.22-8.26(m,1H),10.54-10.59(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值530.2；实测值531.2；Rt＝2.162min。
实施例556.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(2-((乙基(异丙基)氨基)甲基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1380)的合成
步骤1：N-((5-溴苯并[d]噻唑-2-基)甲基)-N-乙基丙-2-胺的合成通过一般程序方案H步骤1C制备。产率：1.2g(92.74％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值313.2；实测值314.2；Rt＝1.016min。
步骤2：N-乙基-N-((5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)甲基)丙-2-胺的合成
通过一般程序方案H步骤2制备。产率：1.3g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值360.2；实测值361.2；Rt＝1.192min。
步骤3：(S)-6-(2-((乙基(异丙基)氨基)甲基)苯并[d]噻唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤3制备。产率：0.65g(41.94％)。
CC条件：通过硅胶使用CHCl3/EtOAc作为洗脱液混合物纯化粗产物。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值429.2；实测值430.2；Rt＝1.340min。
步骤4：(S)-N-乙基-N-((5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)甲基)丙-2-胺的合成
使(3S)-6-[2-[[乙基(异丙基)氨基]甲基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(650.00mg，1.51mmol)于MeOH(10mL)和二噁烷/HCl(5mL)中的搅拌溶液在25℃下搅拌16h。完成之后，将反应混合物蒸发，将粗产物用水(20mL)萃取且通过NaHCO3中和至pH＝8。将水相用CHCl3(2*20mL)萃取。将合并的有机相经Na2SO4干燥且在减压下浓缩。分离所需产物N-乙基-N-[[5-[(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]-1,3-苯并噻唑-2-基]甲基]丙-2-胺(0.49g，1.49mmol，98.29％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值329.2；实测值330.2；Rt＝0.483min。
步骤5：N-乙基-N-((5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)甲基)丙-2-胺的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：0.49g(99.39％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值331.2；实测值332.2；Rt＝0.777min。
步骤6：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(2-((乙基(异丙基)氨基)甲基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1380)的合成
通过一般程序方案H步骤6B制备。产率：48mg(30.44％)。
HPLC条件：柱：XBridge C18 100*19mm，5微米；0-5min 60-80％水-MeOH+0.1％NH4OH，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeCN)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.02-1.06(m,10H),1.11-1.13(t,3H),1.32-1.39(m,1H),1.69-1.71(m,2H),1.85-1.89(m,1H),2.06-2.20(m,2H),2.27-2.41(m,3H),2.56-2.79(m,3H),2.98-3.02(m,1H),3.47-4.05(m,3H),5.27-5.69(m,3H),7.31-7.51(m,2H),7.80-7.83(d,1H),7.99-8.07(m,2H),10.55(br s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值522.2；实测值523.2；Rt＝1.999min。
实施例557.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(吡啶-3-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1200)的合成
步骤6：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(吡啶-3-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1200)的合成
通过一般程序方案H步骤6B制备。产率：18.9mg(12.37％)。
HPLC条件：柱：SunFire C18 100*19mm，5微米；2-10min50-75％ MeOH+NH3，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeOH)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.03-1.06(t,3H),1.12-1.14(m,3H),1.34-1.42(m,1H),1.70-1.75(m,1H),1.88-1.96(m,1H),2.11-2.29(m,1H),2.30-2.35(m,1H),2.40-2.48(m,1H),2.81-2.8(m,1H),3.50-4.08(m,2H),5.33-5.73(m,3H),7.36-7.62(m,3H),8.00-8.08(m,2H),8.21-8.22(m,1H),8.43-8.46(m,1H),8.74-8.75(d,1H),9.25-9.27(m,1H),10.57(br s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值500.2；实测值501.2；Rt＝2.793min。
实施例558.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(2-((异丙基(甲基)氨基)甲基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1303)的合成
步骤1：N-((5-溴苯并[d]噻唑-2-基)甲基)-N-甲基丙-2-胺的合成通过一般程序方案H步骤1C制备。产率：1.2g(97.09％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值299.2；实测值300.2；Rt＝0.789min。
步骤2：N-甲基-N-((5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)甲基)丙-2-胺的合成
通过一般程序方案H步骤2制备。产率：1.3g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值346.2；实测值347.2；Rt＝0.917min。
步骤3：(S)-6-(2-((异丙基(甲基)氨基)甲基)苯并[d]噻唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤3制备。产率：0.6g(38.46％)。
CC条件：通过硅胶使用CHCl3/EtOAc作为洗脱液混合物纯化粗产物。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值415.2；实测值416.2；Rt＝1.292min。
步骤4：(S)-N-甲基-N-((5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)甲基)丙-2-胺的合成
使(3S)-6-[2-[[异丙基(甲基)氨基]甲基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(600.00mg，1.44mmol)于MeOH(10mL)和二噁烷/HCl(5mL)中的搅拌溶液在25℃下搅拌16h。完成之后，将反应混合物蒸发，将粗产物用水(20mL)萃取且通过NaHCO3中和至pH＝8。将水相用CHCl3(2*20mL)萃取。将合并的有机相经Na2SO4干燥且在减压下浓缩。分离所需产物N-甲基-N-[[5-[(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]-1,3-苯并噻唑-2-基]甲基]丙-2-胺(0.45g，1.43mmol，98.80％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值315.2；实测值316.2；Rt＝0.395min。
步骤5：N-甲基-N-((5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)甲基)丙-2-胺的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：0.45g(99.37％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值317.2；实测值318.2；Rt＝0.744min。
步骤6：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(2-((异丙基(甲基)氨基)甲基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1303)的合成
通过一般程序方案H步骤6B制备。产率：62mg(38.70％)。
HPLC条件：柱：XBridge C18 100*19mm，5微米；0-5min 50-80％水-MeOH+0.1％NH4OH，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeCN)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.03-1.14(m,12H),1.32-1.40(m,1H),1.67-1.71(m,1H),1.85-1.89(m,1H),2.08(m,1H),2.18-2.26(m,4H),2.34-2.41(m,2H),2.77-2.95(m,2H),3.47-4.05(m,3H),5.28-5.69(m,3H),7.32-7.51(m,2H),7.82-7.86(d,1H),7.99-8.07(m,2H),10.52-10.57(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值508.2；实测值509.2；Rt＝1.915min。
实施例559.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(N-吗啉基甲基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1092)的合成
步骤1：4-((5-氯苯并[d]噻唑-2-基)甲基)吗啉的合成
向5-氯-2-(氯甲基)-1,3-苯并噻唑(5g，22.92mmol)和吗啉(2.00g，22.92mmol，2.01mL)于MeCN(50mL)中的溶液中添加碳酸钾(6.34g，45.85mmol，2.77mL)。然后将反应混合物在70℃下搅拌24h，然后在真空中蒸发。将残余物用水(50mL)稀释且用DCM(2*50mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到4-[(5-氯-1,3-苯并噻唑-2-基)甲基]吗啉(6g，22.32mmol，97.38％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值268.2；实测值269.2；Rt＝0.918min。
步骤2：4-((5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)甲基)吗啉的合成
将乙酸钾(4.38g，44.65mmol，2.79mL)添加到4-[(5-氯-1,3-苯并噻唑-2-基)甲基]吗啉(6g，22.32mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(6.24g，24.56mmol)于二噁烷(100mL)中的溶液中。将反应烧瓶抽真空且用氩气再填充3次。然后在氩气流下添加三(二苯亚甲基丙酮)二钯(0)(1.02g，1.12mmol)和XPhos(2.13g，4.46mmol)。在90℃、惰性气氛下将所得混合物搅拌18h。然后，将其冷却，用EtOAc(100mL)稀释且过滤出。将滤液在减压下浓缩且通过硅胶快速色谱使用0至100％CHCl3-MeCN梯度洗脱来纯化残余物，以得到4-[[5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噻唑-2-基]甲基]吗啉(8g，22.21mmol，99.46％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值360.2；实测值361.2；Rt＝1.128min。
步骤3：(S)-3-甲基-6-(2-(N-吗啉基甲基)苯并[d]噻唑-5-基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序8制备。产率：12g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值429.2；实测值430.2；Rt＝1.299min。
步骤4：(S)-4-((5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)甲基)吗啉的合成
通过一般程序方案8制备。产率：5g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值329.2；实测值330.2；Rt＝0.774min。
步骤5：4-((5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)甲基)吗啉的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：4g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值331.2；实测值332.2；Rt＝0.798min。
步骤6：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(N-吗啉基甲基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1092)的合成
通过一般程序方案8制备。产率：90mg(31.20％)。
HPLC条件：柱：YMC Triart C18 100*20mm，5微米；0-1-5min35-35-60％水-MeCN+0.1％ NH4OH，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeCN)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.02-1.06(t,3H),1.11-1.13(m,3H),1.32-1.39(m,2H),1.69-1.89(m,3H),2.05-2.20(m,2H),2.27-2.41(m,3H),2.52-2.54(m,2H),2.77-2.79(m,1H),3.47-3.61(m,4H),3.91-4.05(m,2H),5.28-5.69(m,3H),7.35-7.51(m,2H),7.86-8.07(m,3H),10.55(br s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值522.2；实测值523.2；Rt＝2.102min。
实施例560.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(2-(羟基甲基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1152)的合成
步骤1：N-((5-溴苯并[d]噻唑-2-基)甲基)-N-异丙基丙-2-胺的合成通过一般程序方案H步骤1C制备。产率：0.8g(59.18％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值327.2；实测值328.2；Rt＝1.122min。
步骤2：N-异丙基-N-((5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)甲基)丙-2-胺的合成
通过一般程序方案H步骤2制备。产率：1.1g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值374.2；实测值375.2；Rt＝1.196min。
步骤3：(S)-6-(2-(羟基甲基)苯并[d]噻唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
将N-异丙基-N-[[5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噻唑-2-基]甲基]丙-2-胺(1.1g，2.94mmol)和(3S)-3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.12g，3.23mmol)混合于二噁烷(30mL)中。将所得混合物抽真空，然后用氩气回填，将此操作重复三次，然后在氩气下添加于水(10mL)中的碳酸钠(934.33mg，8.82mmol，369.01μL)和Pd(dppf)Cl2*DCM(119.98mg，146.92μmol)。将反应混合物在氩气、90℃下搅拌12h。然后将反应混合物冷却且在真空中蒸发，倒入到水(100ml)中且用EtOAc(3x20 ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(2*10ml)洗涤，经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到粗产物，其通过柱色谱以系统CHCl3/MeOH(1:1)进行纯化，以得到两种级分：(3S)-6-[2-[(二异丙基氨基)甲基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(0.95g，2.14mmol，72.87％产率)和(3S)-6-[2-(羟基甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(0.1g，277.42μmol，9.44％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值360.2；实测值361.2；Rt＝1.423min。
步骤4：(S)-(5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)甲醇的合成
将(3S)-6-[2-(羟基甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(0,1g，277.42μmol)溶解于二噁烷/HCl(50mL)中且将所得反应混合物在25℃下搅拌12h。然后将溶剂蒸发至干，通过水(20ml)稀释残余物，且通过DCM(3*20mL)洗涤所得水相。然后将NaHCO3添加到碱性反应物中且将此水相通过DCM(3*30mL)进行萃取，经Na2SO4干燥且在减压下蒸发，以得到纯的[5-[(3S)-3-甲基-1,2,3,4-四氢吡啶-6-基]-1,3-苯并噻唑-2-基]甲醇(0.04g，153.64μmol，55.38％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值260.2；实测值261.2；Rt＝0.514min。
步骤5：(5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)甲醇的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：40mg粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值262.2；实测值263.2；Rt＝0.813min。
步骤6：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(2-(羟基甲基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1152)的合成
通过一般程序方案H步骤6B制备。产率：28.8mg(41.65％)。
HPLC条件：柱：XBridge C18 100*19mm，5微米；0-5min 25-75％水-MeOH+0.1％NH4OH，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeCN)。
然后通过手性色谱纯化产物N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[2-(羟基甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.0288g，63.50μmol，41.65％产率)，以得到作为第2批的更纯的产物N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[2-(羟基甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(13.81mg，30.45μmol，19.97％产率)-化合物1152。
手性色谱的条件：
Chirailcel OD-H(250*20mm，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，80-10-10，10ml/min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.75-1.05(m,3H),1.06-1.14(m,3H),1.28-1.44(m,1H),1.67-1.75(m,1H),1.82-1.94(m,1H),2.03-2.22(m,1H),2.25-2.37(m,2H),2.39-2.44(m,1H),2.75-3.28(m,1H),3.47-F1(m,1H),4.82-4.87(m,2H),5.26-5.61(m,1H),5.61-5.75(m,2H),6.29(br s,1H),7.32-7.43(m,1H),7.43-7.55(m,1H),7.83-7.90(m,1H),7.97-8.12(m,2H),10.55(br s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值453.2；实测值454.2；Rt＝2.154min。
实施例561.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(四氢呋喃-3-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1145)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：200mg(50.45％)。
HPLC条件：柱：XBridge C18 100*19mm，5微米；0-1-6min40-40-75％水-MeOH+0.1％ NH4OH，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeOH)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.03(m,3H),1.36(m,1H),1.70(m,1H),1.87(m,1H),1.99(m,3H),2.25(m,2H),2.42(m,2H),2.96(dd,1H),3.64(m,2H),4.03(m,4H),5.63(m,3H),7.41(m,2H),7.91(m,1H),8.04(m,2H),10.54(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值479.2；实测值480.2；Rt＝1.254min。
实施例562.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1186)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：199mg(50.80％)。
HPLC条件：柱：YMC Triart C18 100*20mm，5微米；0-1-5min20-20-45％水-MeCN+0.1％ NH4OH，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeCN)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.03-1.05(m,3H),1.34-1.40(m,1H),1.73(m,1H),1.87-2.19(m,5H),2.30-2.33(m,1H),3.40-3.52(m,2H),4.05-4.33(m,4H),5.58-5.71(m,2H),7.13(s,1H),7.41-7.50(m,3H),7.92-8.13(m,3H),10.53-10.58(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值489.2；实测值490.2；Rt＝2.879min。
实施例563.2-((2R,5S)-2-(2-(1-乙酰基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1093)的合成
步骤1：1-(4-(5-氯苯并[d]噻唑-2-基)哌啶-1-基)乙酮的合成
在0℃下，将乙酰氯(931.68mg，11.87mmol，722.23uL)逐滴添加到5-氯-2-(4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑(2.5g，9.89mmol)和TEA(1.50g，14.84mmol，2.07mL)于DCM(75mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在0℃下搅拌2h，然后用水(25ml)洗涤。将有机层分离，经硫酸钠干燥且在真空中浓缩，以得到呈淡黄色固体的1-[4-(5-氯-1,3-苯并噻唑-2-基)-1-哌啶基]乙酮(2.8g，9.50mmol，96.03％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值294.2；实测值295.2；Rt＝1.357min。
步骤2：1-(4-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)哌啶-1-基)乙酮的合成
将1-[4-(5-氯-1,3-苯并噻唑-2-基)-1-哌啶基]乙酮(2.3g，7.80mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(2.18g，8.58mmol)和乙酸钾(1.53g，15.60mmol，975.39uL)于二噁烷(100mL)中的混合物抽真空，然后用氩气回填。将此操作重复两次，然后在氩气下添加三(1,5-二苯基戊-1,4-二烯-3-酮)二钯(357.22mg，390.10umol)和二环己基[2',4',6'-三(丙-2-基)-[1,1'-联苯基]-2-基]磷烷(743.87mg，1.56mmol)，且将反应混合物在95℃下搅拌18h。将反应混合物冷却且在真空中浓缩。通过硅胶柱色谱使用氯仿/乙酸乙酯梯度(0-100％乙酸乙酯)纯化残余物，以得到呈淡黄色固体的1-[4-[5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噻唑-2-基]-1-哌啶基]乙酮(2.3g，5.95mmol，76.31％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值386.2；实测值387.2；Rt＝1.347min。
步骤3：(S)-6-(2-(1-乙酰基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案8制备。产率：2.2g(81.10％)。
CC条件：通过硅胶使用CHCl3/EtOAc作为洗脱液混合物纯化粗产物。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值455.2；实测值456.2；Rt＝1.546min。
步骤4：(S)-1-(4-(5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)哌啶-1-基)乙酮的合成
通过一般程序8制备。产率：1.2g(69.91％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值355.2；实测值356.2；Rt＝0.730min。
步骤5：1-(4-(5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)哌啶-1-基)乙酮的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：0.7g(58％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值357.2；实测值358.2；Rt＝0.750min。
步骤6：2-((2R,5S)-2-(2-(1-乙酰基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1093)的合成
通过一般程序8制备。产率：48mg(8.02％)。
HPLC条件：柱：YMC Triart C18 100*20mm，5微米；0-1-6min30-30-50％水-MeCN+0.1％ NH4OH，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeCN)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.03(m,3H),1.35(m,1H),1.59(m,1H),1.73(m,2H),1.87(m,1H),2.03(m,6H),2.11(m,3H),2.31(m,1H),2.76(m,1H),3.19(m,2H),3.40(m,2H),3.68(dd,1H),4.22(dd,1H),5.56(m,3H),7.43(m,2H),7.88(m,1H),8.00(m,1H),8.09(m,1H),10.56(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值534.2；实测值535.2；Rt＝2.699min。
实施例564.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1214)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：267mg(57.10％)。
HPLC条件：柱：Chromatorex C18 100*19mm，5微米；0-5min20-70％水-MeOH，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeOH)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.02-1.05(m,3H),1.69-2.37(m,8H),2.79-2.81(m,1H),3.47-4.06(m,4H),5.27-5.70(m,3H),7.31-7.55(m,2H),7.78-8.06(m,5H),10.52-10.62(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值489.2；实测值490.2；Rt＝2.455min。
实施例565.N-(6-氨基-5-环丙基吡啶-3-基)-2-(2-(2-(2-甲氧基乙基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1176和化合物1332)的合成
步骤1：外消旋-(3-环丙基-5-(2-((2R,5S)-2-(2-(2-甲氧基乙基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：0.7g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值534.2；实测值535.2；Rt＝2.624min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(2-(2-(2-甲氧基乙基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺的合成
将N-[3-环丙基-5-[[2-[(2R,5S)-2-[2-(2-甲氧基乙基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.7g，1.18mmol)于二噁烷(6mL)和水(3mL)中的溶液在65℃下搅拌64h且在真空中蒸发溶剂。使残余物经历RP-HPLC(柱：XBridge BEH C18 5um 130A；以45-45-80％0-1-6min H2O/MeOH/0.1％NH4OH，流速：30ml/min为流动相)，以得到N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[2-(2-甲氧基乙基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(158mg，320.08umol，27.15％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值493.2；实测值494.2；Rt＝2.452min。
步骤3：手性分离(化合物1176和化合物1332)
对外消旋N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(2-(2-(2-甲氧基乙基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(158mg，320.08μmol)进行手性分离(柱：Chiralpak IC-III(250*20，5mkm)，IPA-MeOH，50-50，10ml/min)，以获得N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[2-(2-甲氧基乙基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(60mg，121.55umol，75.95％产率)(RT＝24.22)和N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[2-(2-甲氧基乙基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(57mg，115.47umol，72.15％产率)(RT＝38.03)。
化合物1176于分析条件下(柱：IC，以IPA-MeOH，50-50，0.6ml/min为流动相)的保留时间为18.91min且化合物1332的保留时间为29.26min。
化合物1176：
保留时间：18.91min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.36-0.53(m,2H),0.82-0.91(m,2H),0.99-1.07(m,3H),1.30-1.42(m,1H),1.57-1.75(m,2H),1.82-1.91(m,1H),2.06-2.23(m,1H),2.26-2.36(m,1H),2.75-3.26(m,1H),3.27(s,3H),3.31-3.34(m,2H),3.44-3.52(m,0.6H),3.72-3.79(m,2H),4.02-4.07(m,0.4H),5.25-5.70(m,1H),5.70-5.82(m,2H),7.24-7.46(m,2H),7.83-7.90(m,1H),7.96-8.10(m,2H),10.46-10.66(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值493.2；实测值494.2；Rt＝2.609min
化合物1332：
保留时间：29.26min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.38-0.52(m,2H),0.81-0.91(m,2H),1.00-1.07(m,3H),1.31-1.42(m,1H),1.59-1.75(m,2H),1.79-1.95(m,1H),2.06-2.22(m,1H),2.26-2.35(m,1H),2.76-3.26(m,1H),3.27(s,3H),3.31-3.34(m,2H),3.44-3.53(m,0.6H),3.71-3.80(m,2H),4.02-4.06(m,0.4H),5.25-5.70(m,1H),5.70-5.84(m,2H),7.27-7.43(m,2H),7.82-7.92(m,1H),7.96-8.10(m,2H),10.46-10.57(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值493.2；实测值494.2；Rt＝2.605min。
实施例566.2-((2R,5S)-2-(2-((二甲基氨基)甲基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代-N-(5-氧代-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶-3-基)乙酰胺(化合物1354)的合成
步骤1：(3-环丙基-5-(2-((2R,5S)-2-(2-((二甲基氨基)甲基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：268mg粗品。
HPLC条件：柱：SunFire C18 100*19mm，5微米；2-10min 50-80％MeOH+NH3；(装载泵4ml/min MeOH+NH3)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值592.2；实测值593.2；Rt＝1.029min。
步骤2：2-((2R,5S)-2-(2-((二甲基氨基)甲基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代-N-(5-氧代-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶-3-基)乙酰胺(化合物1354)的合成
将N-[3-环丙基-5-[[2-[(2R,5S)-2-[2-[(二甲基氨基)甲基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(73mg，87.44umol)溶解于水(1mL)和二噁烷(1mL)的混合物中且在100℃下在搅拌下加热12h。将粗产物溶解于DMSO中且使其经历HPLC(SYSTEM 2-10min 30-55％ MeCN+NH3流速30ml/min(装载泵4ml/min)，柱Sun Fire C18 100*19mm)。获得N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[2-[(二甲基氨基)甲基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(19.8mg，40.19umol，45.97％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.38-0.51(m,2H),0.82-0.91(m,2H),0.98-1.06(m,3H),1.28-1.41(m,1H),1.58-1.73(m,2H),1.81-1.93(m,1H),2.04-2.20(m,1H),2.25-2.32(m,7H),2.75-3.26(m,1H),3.45-4.09(m,3H),5.26-5.70(m,1H),5.72-5.82(m,2H),7.26-7.46(m,2H),7.82-7.90(m,1H),7.96-8.08(m,2H),10.43-10.60(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值492.2；实测值493.2；Rt＝1.651min。
实施例567.外消旋-N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1104)的合成
通过一般程序8步骤6A制备。产率：88.4mg(20.15％)。
HPLC条件：柱：YMC Triart C18 100*20mm，5微米；0-5min30-70％水-MeCN+0.1％NH4OH，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeCN)。
化合物1104：
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.03(m,3H),1.38(m,1H),1.72(m,1H),1.86(m,1H),2.00(m,3H),2.26(m,2H),3.92(m,5H),5.64(m,3H),7.40(m,2H),7.95(m,4H),8.48(m,1H),10.58(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值489.2；实测值490.2；Rt＝2.469min。
实施例568.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(2-(1-环丙基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1181)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：53mg(12.63％)。
HPLC条件：柱：YMC Triart C18 100*20mm，5微米；0-5min50-100％水-MeOH+0.1％ NH4OH，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeOH)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.30(m,2H),0.41(m,2H),1.03(m,3H),1.35(m,1H),1.62(m,1H),1.70(m,3H),1.87(m,1H),2.05(m,5H),2.32(m,3H),2.89(m,3H),3.09(m,1H),3.75(dd,1H),5.63(m,3H),7.34(d,1H),7.41(m,1H),7.50(s,1H),7.98(m,3H),10.55(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值532.2；实测值533.2；Rt＝2.114min。
实施例569.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1158)的合成
步骤1：(S)-6-(苯并[d]噻唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤3制备。产率：3g(45.56％)。
CC条件：通过硅胶使用己烷/MTBE作为洗脱液混合物来纯化粗产物。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值329.2；实测值330.2；Rt＝1.635min。
步骤2：(S)-5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤4制备。产率：2g(95.77％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值229.2；实测值230.2；Rt＝0.783min。
步骤3：5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：2g(99.13％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值231.2；实测值232.2；Rt＝0.795min。
步骤4：(2R,5S)-2-(苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
在25℃下，将二碳酸二-叔丁酯(493.15mg，2.26mmol，518.56μL)一次性添加到5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑(0.5g，2.15mmol)于DCM(15mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在25℃下搅拌1h，然后在真空中浓缩，以得到呈棕色胶状物的(2R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(800mg，粗品)，其在静置时结晶，以得到棕色固体。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值332.2；实测值333.2；Rt＝3.995min。
步骤5：(2R,5S)-2-(2-溴苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
在25℃下，将叔丁醇钠(563.68mg，5.87mmol)一次性添加到(2R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(650mg，1.96mmol)和四溴化碳(778.05mg，2.35mmol，227.50μL)于DMF(10mL)中的搅拌溶液中(轻微放热反应！)。将所得混合物在25℃下搅拌12h，然后用水(15ml)稀释且用MTBE(3*15ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(2*5ml)洗涤，经硫酸钠干燥且在真空中浓缩，以得到呈棕色固体的(2R,5S)-2-(2-溴-1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(750mg，1.82mmol，93.25％产率)，其直接用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值411.2；实测值412.2；Rt＝4.734min。
步骤6：(2R,5S)-5-甲基-2-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
在25℃下，将1-甲基哌嗪(852.22mg，8.51mmol，943.77μL)一次性添加到(2R,5S)-2-(2-溴-1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(700mg，1.70mmol)于MeCN(20mL)中的溶液中。将所得混合物在70℃下搅拌8h，然后冷却且在真空中浓缩。将残余物用10％氢氧化钠水溶液碱化至pH 11且用DCM(2*25ml)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中浓缩，以得到呈棕色固体的(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(4-甲基哌嗪-1-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(750mg，粗品)，其直接用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值430.2；实测值431.2；Rt＝3.638min。
步骤7：2-(4-甲基哌嗪-1-基)-5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑的合成
将于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(31.50g，120.09mmol，39.38mL，13.9％纯度)一次性添加到(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(4-甲基哌嗪-1-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(775.25mg，1.80mmol)于MeOH(25.01mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在25℃下搅拌1h，然后在真空中蒸发至干，以得到呈棕色固体的粗品2-(4-甲基哌嗪-1-基)-5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑(900mg，粗品，3HCl)，其直接用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值330.2；实测值331.2；Rt＝0.544min。
步骤8：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1158)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：83mg(18.01％)。
HPLC条件：柱：YMC Triart C18 100*20mm，5微米；0-1-5min30-30-65％水-MeCN+0.1％ NH4OH；(装载泵4ml/min MeCN)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.02(m,3H),1.34(m,1H),1.71(m,1H),1.86(m,1H),2.03(m,3H),2.13(m,1H),2.21(s,4H),2.42(t,4H),3.01(dd,1H),3.52(m,5H),5.60(m,3H),7.04(dd,1H),7.43(m,2H),7.75(m,1H),8.01(m,1H),10.52(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值507.2；实测值508.2；Rt＝1.998min。
实施例570.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(氧杂环丁烷-3-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1266)的合成
步骤1：5-溴-2-(氧杂环丁烷-3-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤1B制备。产率：2.7g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值270.2；实测值271.2；Rt＝1.154min。
步骤2：2-(氧杂环丁烷-3-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤2制备。产率：1.6g(50.47％)。
CC条件：通过硅胶使用环己烷/MTBE作为洗脱液混合物来纯化粗产物。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值317.2；实测值318.2；Rt＝1.507min。
步骤3：(S)-3-甲基-6-(2-(氧杂环丁烷-3-基)苯并[d]噻唑-5-基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤3制备。产率：1.2g(61.55％)。
CC条件：通过硅胶使用己烷/MTBE作为洗脱液混合物来纯化粗产物。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值386.2；实测值387.2；Rt＝1.534min。
步骤4：(S)-5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)-2-(氧杂环丁烷-3-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤4制备。产率：0.33g(89.07％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值286.2；实测值287.2；Rt＝0.853min。
步骤5：5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)-2-(氧杂环丁烷-3-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：0.21g(63.19％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值288.2；实测值289.2；Rt＝0.904min。
步骤6：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(氧杂环丁烷-3-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1266)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：101mg(29.79％)。
HPLC条件：柱：Chromatorex C18 100*19mm，5微米；0-1-6min25-25-50％水-MeCN，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeCN)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.03(m,3H),1.36(m,1H),1.71(m,1H),1.87(m,1H),2.00(m,3H),2.14(m,1H),2.31(m,1H),2.79(m,1H),3.76(dd,1H),4.75(m,1H),4.83(m,2H),5.00(m,2H),5.64(m,3H),7.43(m,2H),7.98(m,2H),8.10(m,1H),10.56(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值465.2；实测值466.2；Rt＝2.604min。
实施例571.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(2-N-吗啉基乙基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1387)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：211mg(42.27％)。
HPLC条件：柱：YMC Triart C18 100*20mm，5微米；0-5min35-35-70％水-MeOH+0.1％ NH4OH，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeOH)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.02(m,3H),1.34(m,1H),1.70(m,1H),1.87(m,1H),2.00(m,3H),2.13(m,1H),2.30(m,2H),2.46(m,4H),2.75(t,2H),3.25(t,2H),3.55(m,5H),5.63(m,3H),7.40(m,2H),7.95(m,3H),10.54(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值522.2；实测值523.2；Rt＝2.140min。
实施例572.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(2-(1-(2-氟乙基)哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1114)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：109mg(33.25％)。
HPLC条件：柱：YMC Triart C18 100*20mm，5微米；0-1-5min30-30-45％水-MeCN+0.1％ NH4OH，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeCN)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.03(m,3H),1.35(m,1H),1.70(m,1H),1.81(m,4H),2.00(m,3H),2.08(m,2H),2.20(t,2H),2.31(m,1H),2.64(m,2H),3.02(m,4H),3.75(dd,1H),4.49(t,1H),4.57(t,1H),5.63(m,3H),7.40(m,2H),7.98(m,3H),10.54(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值538.2；实测值539.2；Rt＝2.191min。
实施例573.N-(6-氨基-5-环丙基吡啶-3-基)-2-(2-(2-(2-(二甲基氨基)乙基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1331和化合物1218)的合成
步骤1：外消旋-(3-环丙基-5-(2-((2R,5S)-2-(2-(2-(二甲基氨基)乙基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：223g(33.29％)。
HPLC条件：柱：YMC Triart C18 100*20mm，5微米；0-2-5min50-50-85％水-MeCN+0.1％ NH4OH，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeCN)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值606.2；实测值607.2；Rt＝2.835min。
步骤2：N-(6-氨基-5-环丙基吡啶-3-基)-2-(2-(2-(2-(二甲基氨基)乙基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺的合成
将N-[3-环丙基-5-[[2-[(2R,5S)-2-[2-[2-(二甲基氨基)乙基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(223mg，367.52umol)于二噁烷(2mL)和水(1mL)中的溶液在65℃下搅拌48h且在真空中蒸发溶剂。通过RP-HPLC(柱：YMC Triart C18 100x20 mm，5um；以35-65％0-5min H2O/MeCN/0.1％NH4OH，流速：30ml/min，流速：30ml/min)纯化残余物，以得到N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[2-[2-(二甲基氨基)乙基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(84mg，165.79umol，45.11％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值506.2；实测值507.2；Rt＝1.869min。
步骤3：手性分离(化合物1331和化合物1218)
对外消旋N-(6-氨基-5-环丙基吡啶-3-基)-2-(2-(2-(2-(二甲基氨基)乙基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(84mg，165.79μmol)进行手性分离(柱：Chiralpak AS-H(250*20，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，70-15-15，12ml/min，然后第一柱的另一个柱：Chiralcel OJ-H(250*30，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，70-15-15，12ml/min)，以获得N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[2-[2-(二甲基氨基)乙基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(31mg，61.18umol，73.81％产率)(RT＝27.27)和N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[2-[2-(二甲基氨基)乙基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(27mg，53.29umol，64.29％产率)(RT＝15.45)。
化合物1331于分析条件下(柱：AS-H，以己烷-IPA-MeOH，70-15-15，0.6ml/min为流动相)的保留时间为21.46min且化合物1218的保留时间为13.49min。
化合物1331：
保留时间：21.46min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.36-0.49(m,2H),0.82-0.90(m,2H),0.99-1.06(m,3H),1.31-1.43(m,1H),1.60-1.72(m,2H),1.81-1.90(m,1H),2.03-2.17(m,1H),2.21(s,6H),2.27-2.34(m,1H),2.66-2.72(m,2H),2.76-3.20(m,1H),3.21-3.26(m,2H),3.34-4.08(m,1H),5.25-5.70(m,1H),5.71-5.83(m,2H),7.27-7.35(m,1H),7.36-7.41(m,1H),7.80-7.89(m,1H),7.98-8.02(m,1H),8.03-8.08(m,1H),10.45-10.64(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值506.2；实测值507.2；Rt＝1.812min。
化合物1218：
保留时间：13.49min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.38-0.49(m,2H),0.80-0.92(m,2H),0.98-1.06(m,3H),1.29-1.40(m,1H),1.60-1.75(m,2H),1.79-1.91(m,1H),2.03-2.17(m,1H),2.20(s,6H),2.26-2.34(m,1H),2.66-2.74(m,2H),2.74-3.19(m,1H),3.19-3.23(m,2H),3.37-4.08(m,1H),5.26-5.70(m,1H),5.70-5.82(m,2H),7.22-7.36(m,1H),7.36-7.42(m,1H),7.81-7.89(m,1H),7.96-8.14(m,2H),10.45-10.57(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值506.2；实测值507.2；Rt＝1.806min。
实施例574.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(2-(吡咯烷-1-基)乙基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1296)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：100mg(40.02％)。
HPLC条件：柱：XBridge C18 100*19mm，5微米；0-5min 30-55％水-MeCN+0.1％NH4OH；(装载泵4ml/min MeCN)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99-1.07(m,3H),1.29-1.41(m,1H),1.64-1.75(m,5H),1.79-1.93(m,1H),1.95-2.04(m,3H),2.07-2.22(m,1H),2.25-2.36(m,1H),2.50-2.53(m,4H),2.75-2.80(m,0.3H),2.81-2.90(m,2H),3.20-3.28(m,2.7H),3.43-4.07(m,1H),5.22-5.59(m,1H),5.59-5.73(m,2H),7.31-7.41(m,1H),7.42-7.53(m,1H),7.79-7.91(m,1H),7.94-8.07(m,2H),10.45-10.67(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值506.2；实测值507.2；Rt＝2.173min。
实施例575.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(2-(1-(2,2-二氟乙基)哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1377)的合成
步骤1：5-氯-2-(1-(2,2-二氟乙基)哌啶-4-基)苯并[d]噻唑的合成
将5-氯-2-(4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑(3.6g，11.05mmol，2HCl)、三氟甲磺酸2,2-二氟乙酯(2.84g，13.26mmol)和TEA(5.59g，55.27mmol，7.70mL)于MeCN(100mL)中的混合物在60℃下搅拌72h，然后冷却且在真空中浓缩。将残余物用水(50ml)稀释且用10％氢氧化钠水溶液碱化至pH 11。将所得混合物用MTBE(250ml)萃取。将有机层用水(50ml)洗涤，经硫酸钠干燥且在真空中浓缩，以得到呈棕色固体的粗品5-氯-2-[1-(2,2-二氟乙基)-4-哌啶基]-1,3-苯并噻唑(3g，9.47mmol，85.67％产率)，其直接用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值316.2；实测值317.2；Rt＝2.015min。
步骤2：2-(1-(2,2-二氟乙基)哌啶-4-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑的合成
将5-氯-2-[1-(2,2-二氟乙基)-4-哌啶基]-1,3-苯并噻唑(3g，9.47mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(2.65g，10.42mmol)和乙酸钾(1.86g，18.94mmol，1.18mL)于二噁烷(100mL)中的混合物抽真空，然后用氩气回填。将此操作重复两次，然后在氩气下添加三(1,5-二苯基戊-1,4-二烯-3-酮)二钯(433.58mg，473.49umol)和二环己基[2',4',6'-三(丙-2-基)-[1,1'-联苯基]-2-基]磷烷(902.89mg，1.89mmol)，且将反应混合物在95℃下搅拌18h。将反应混合物冷却且在真空中浓缩。通过硅胶柱色谱使用己烷/乙酸乙酯梯度(0-100％乙酸乙酯)来纯化残余物，以得到呈米色固体的2-[1-(2,2-二氟乙基)-4-哌啶基]-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噻唑(1.5g，3.67mmol，38.79％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值408.2；实测值409.2；Rt＝0.989min。
步骤3：(S)-6-(2-(1-(2,2-二氟乙基)哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤3制备。产率：0.9g(51.29％)。
CC条件：通过硅胶使用己烷/MTBE作为洗脱液混合物来纯化粗产物。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值477.2；实测值478.2；Rt＝1.120min。
步骤4：(S)-2-(1-(2,2-二氟乙基)哌啶-4-基)-5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤4制备。产率：0.67g(9F9％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值377.2；实测值378.2；Rt＝0.707min。
步骤5：2-(1-(2,2-二氟乙基)哌啶-4-基)-5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：0.55g(81.65％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值379.2；实测值380.2；Rt＝0.744min。
步骤6：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(2-(1-(2,2-二氟乙基)哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1377)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：109mg(29.72％)。
HPLC条件：柱：YMC Triart C18 100*20mm，5微米；0-1-6min30-30-50％水-MeCN+0.1％ NH4OH，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeCN)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99-1.06(m,3H),1.26-1.41(m,1H),1.63-1.94(m,5H),1.96-2.04(m,3H),2.05-2.11(m,3H),2.13-2.29(m,1H),2.33-2.37(m,2H),2.72-2.78(m,2H),2.96-3.00(m,2H),3.07-3.14(m,1H),3.35-4.10(m,1H),5.26-5.62(m,1H),5.62-5.72(m,2H),6.14(tt,1H),7.34-7.53(m,2H),7.85-7.93(m,1H),7.95-8.08(m,2H),10.50-10.58(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值556.2；实测值557.2；Rt＝2.426min。
实施例576.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(2-(1-乙基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1335)的合成
步骤1：5-氯-2-(哌啶-4-基)苯并[d]噻唑的合成
在搅拌的情况下，将五氧化二磷(V)(50g，352.25mmol)分批添加到磷酸(60g，612.27mmol，35.29mL)中。将所得混合物在80-90℃下搅拌，直到形成澄清溶液，然后在氩气下一次性添加哌啶-4-甲酸(15g，116.14mmol)和2-氨基-4-氯苯硫酚(18.54g，116.14mmol)且将所得混合物在氩气、160℃下搅拌15h，然后冷却且用水(500ml)稀释。过滤所得沉淀，将其转移至烧杯且用10％氢氧化钠水溶液碱化至pH11。将所得混合物用DCM(2*250ml)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥，然后将于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(157.50g，600.44mmol，150mL，13.9％纯度)缓慢添加到所述产物的无水二氯甲烷溶液中。过滤所得沉淀，用DCM(3*50ml)洗涤且在真空中干燥，以得到呈绿色固体的5-氯-2-(4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑(22g，67.55mmol，58.16％产率,2HCl)，其直接用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值252.2；实测值253.2；Rt＝0.963min。
步骤1：5-氯-2-(1-乙基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑的合成
在25℃下，将乙醛(973.88mg，22.11mmol，790.23uL)一次性添加到5-氯-2-(4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑(4g，12.28mmol，2HCl)和无水乙酸钠(2.52g，30.70mmol，1.65mL)于MeOH(100mL)中的搅拌混合物中。将所得混合物在25℃下搅拌2h，然后在25℃下一次性添加氰基硼氢化钠(1.54g，24.56mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌12h，LCMS仅显示存在起始材料。添加更多乙醛(1.08g，24.56mmol)，且将反应混合物在25℃下搅拌24h，然后在真空中浓缩。将残余物用水(40ml)稀释且用10％氢氧化钠水溶液碱化至pH 10-11。将所得混合物用MTBE(2*150ml)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥，且在真空中浓缩，以得到呈淡黄色固体的5-氯-2-(1-乙基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑(2.4g，8.55mmol，69.59％产率)，其直接用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值280.2；实测值281.2；Rt＝2.381min。
步骤2：2-(1-乙基哌啶-4-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑的合成
将5-氯-2-(1-乙基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑(2.4g，8.55mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(2.39g，9.40mmol)和乙酸钾(1.68g，17.09mmol，1.07mL)于二噁烷(100mL)中的混合物抽真空，然后用氩气回填。将此操作重复两次，然后在氩气下添加三(1,5-二苯基戊-1,4-二烯-3-酮)二钯(391.31mg，427.33umol)和二环己基[2',4',6'-三(丙-2-基)-[1,1'-联苯基]-2-基]磷烷(814.86mg，1.71mmol)，且将反应混合物在95℃下搅拌18h。将反应混合物冷却且在真空中浓缩。通过硅胶柱色谱使用MTBE/MeOH梯度(0-100％ MeOH)纯化残余物，以得到呈淡棕色固体的2-(1-乙基-4-哌啶基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噻唑(1.2g，3.22mmol，37.71％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值372.2；实测值373.2；Rt＝1.181min。
步骤3：(S)-6-(2-(1-乙基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤3制备。产率：1.4g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值441.2；实测值442.2；Rt＝2.481min。
步骤4：(S)-2-(1-乙基哌啶-4-基)-5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤4制备。产率：250mg粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值341.2；实测值342.2；Rt＝0.567min。
步骤5：2-(1-乙基哌啶-4-基)-5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：130mg(51.69％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值343.2；实测值344.2；Rt＝0.610min。
步骤6：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(2-(1-乙基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1335)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：13mg(6.60％)。
HPLC条件：柱：YMC Triart C18 100*20mm，5微米；0-5min30-80％水-MeCN+0.1％NH4OH，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeCN)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99-1.03(m,5H),1.32-1.39(m,2H),1.69-2.09(m,10H),2.28-2.37(m,3H),2.77-3.10(m,5H),3.46-3.48(m,1H),4.03-4.05(m,1H),5.27-5.69(m,3H),7.34-7.50(m,2H),7.86-8.06(m,3H),10.52-10.57(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值520.2；实测值521.2；Rt＝1.879min。
实施例577.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(1-(氧杂环丁烷-3-基)哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1268)的合成
步骤1：5-氯-2-(1-(氧杂环丁烷-3-基)哌啶-4-基)苯并[d]噻唑的合成
在25℃下，将氧杂环丁烷-3-酮(1.33g，18.42mmol，1.19mL)一次性添加到5-氯-2-(4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑(4g，12.28mmol，2HCl)和无水乙酸钠(2.52g，30.70mmol，1.65mL)于MeOH(100mL)中的搅拌混合物中。将所得混合物在25℃下搅拌2h，然后一次性添加氰基硼氢化钠(1.54g，24.56mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌15h，然后在真空中浓缩至干。将残余物用水(40ml)稀释且用10％氢氧化钠水溶液碱化至pH 10-11。将所得混合物用DCM(2*75ml)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中浓缩，以得到呈绿色固体的5-氯-2-[1-(氧杂环丁烷-3-基)-4-哌啶基]-1,3-苯并噻唑(3.5g，11.33mmol，92.28％产率)，其直接用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值308.2；实测值309.2；Rt＝1.776min。
步骤2：2-(1-(氧杂环丁烷-3-基)哌啶-4-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑的合成
将5-氯-2-[1-(氧杂环丁烷-3-基)-4-哌啶基]-1,3-苯并噻唑(3.5g，11.33mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(3.17g，12.47mmol)和乙酸钾(2.22g，22.67mmol，1.42mL)于二噁烷(100mL)中的混合物抽真空，然后用氩气回填。将此操作重复两次，然后在氩气下添加三(1,5-二苯基戊-1,4-二烯-3-酮)二钯(518.90mg，566.66umol)和二环己基[2',4',6'-三(丙-2-基)-[1,1'-联苯基]-2-基]磷烷(1.08g，2.27mmol)，且将反应混合物在95℃下搅拌36h。将反应混合物冷却且在真空中浓缩。通过硅胶柱色谱使用氯仿/MeCN梯度(0-100％ MeCN)纯化残余物，以得到呈绿色固体的2-[1-(氧杂环丁烷-3-基)-4-哌啶基]-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噻唑(2.6g，6.49mmol，57.30％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值400.2；实测值401.2；Rt＝1.113min。
步骤3：(S)-3-甲基-6-(2-(1-(氧杂环丁烷-3-基)哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤3制备。产率：2.7g(88.52％)。
CC条件：通过硅胶使用CHCl3/MeCN梯度(0-100％ MeCN)作为洗脱液混合物纯化粗产物。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值469.2；实测值470.2；Rt＝1.233min。
步骤4：(S)-5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)-2-(1-(氧杂环丁烷-3-基)哌啶-4-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤4制备。产率：900mg粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值369.2；实测值370.2；Rt＝0.484min。
步骤5：5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)-2-(1-(氧杂环丁烷-3-基)哌啶-4-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：650mg(71.83％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值371.2；实测值372.2；Rt＝0.625min。
步骤6：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(1-(氧杂环丁烷-3-基)哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1268)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：117mg(31.69％)。
HPLC条件：柱：YMC Triart C18 100*20mm，5微米；0-1-5min20-20-45％水-MeCN+0.1％ NH4OH；(装载泵4ml/min MeCN)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.02-1.04(m,3H),1.32-1.39(m,1H),1.66-1.70(m,3H),1.79 -2.31(m,8H),2.76-2.78(m,3H),3.10-3.14(m,1H),3.40-3.48(m,2H),4.040(m,1H),4.42-4.54(dt,4H),5.27(m,1H),5.58-5.69(m,3H),7.34-7.50(m,2H),7.86-8.07(m,3H),10.52-10.57(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值548.2；实测值549.2；Rt＝2.201min。
实施例578.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(1-甲基-2-氧代哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1333)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：63.4mg(11.95％)。
HPLC条件：柱：YMC Triart C18 100*20mm，5微米；0-1-6min40-40-65％水-MeOH+0.1％ NH4OH，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeOH)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.02-1.04(m,3H),1.31-1.39(m,1H),1.69-1.71(m,1H),1.84-2.31(m,9H),2.60-2.82(m,5H),3.39-4.05(m,4H),5.27-5.69(m,3H),7.36-7.50(m,2H),7.88-8.09(m,3H),10.52-10.56(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值520.2；实测值521.2；Rt＝2.359min。
实施例579.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(1-(氧杂环丁烷-3-基)哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1224)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：96mg(42.26％)。
HPLC条件：柱：XBridge C18 100*19mm，5微米；0-5min 20-45％水-MeCN+0.1％NH4OH；(装载泵4ml/min MeCN)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.02-1.14(m,6H),1.32-1.39(m,1H),1.69-1.97(m,6H),2.09-2.11(m,3H),2.28-2.40(m,3H),2.76-2.77(m,2H),3.12(m,1H),3.40-4.06(m,3H),4.42-4.54(m,4H),5.28-5.69(m,3H),7.34-7.51(m,2H),7.86-8.07(m,3H),10.52-10.58(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值562.2；实测值563.2；Rt＝1.926min。
实施例580.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(1-甲基-2-氧代哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1110、化合物1256和化合物1136)的合成
步骤1：4-(5-氯苯并[d]噻唑-2-基)-1-甲基哌啶-2-酮的合成
通过一般程序方案H步骤1A制备。产率：3.1g(35.25％)。
CC条件：通过硅胶使用CHCl3/MTBE(梯度10-100％ MTBE)作为洗脱液混合物纯化粗产物。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值280.2；实测值281.2；Rt＝1.118min。
步骤2：1-甲基-4-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)哌啶-2-酮的合成
将三(二苯亚甲基丙酮)二钯(0)(303.31mg，331.23umol)和XPhos(631.61mg，1.32mmol)添加到4-(5-氯-1,3-苯并噻唑-2-基)-1-甲基哌啶-2-酮(3.1g，11.04mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(3.64g，14.35mmol)于二噁烷(100mL)中的溶液中。将反应烧瓶抽真空且用氩气再填充3次。然后在氩气流下添加乙酸钾(2.17g，22.08mmol，1.38mL)。在惰性气氛下将所得混合物在100℃下搅拌12h，然后冷却且在真空中蒸发，倒入到水(200ml)中且用DCM(2x100 ml)萃取，经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，留下5g粗产物，5g粗产物通过硅胶柱色谱使用CHCl3/MeCN梯度(10-100％ MeCN)进行纯化，以得到1-甲基-4-[5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噻唑-2-基]哌啶-2-酮(3g，8.06mmol，72.99％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值372.2；实测值373.2；Rt＝1.299min。
步骤3：(3S)-3-甲基-6-(2-(1-甲基-2-氧代哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤3制备。产率：3g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值441.2；实测值442.2；Rt＝4.017min。
步骤4：1-甲基-4-(5-((S)-5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)哌啶-2-酮的合成
通过一般程序8步骤4制备。产率：1.1g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值341.2；实测值342.2；Rt＝0.860min。
步骤5：1-甲基-4-(5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)哌啶-2-酮的合成
通过一般程序8步骤5制备。产率：0.7g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值343.2；实测值344.2；Rt＝0.706min。
步骤6：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(1-甲基-2-氧代哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：48mg(15.42％)。
HPLC条件：柱：YMC Triart C18 100*20mm，5微米；0-1-6min30-30-75％水-MeOH+0.1％ NH4OH；(装载泵4ml/min MeOH)。
化合物1110：
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.02-1.13(m,6H),1.32-1.39(m,1H),1.69-1.90(m,2H),2.08-2.19(m,2H),2.31-2.40(m,3H),2.59-2.82(m,5H),3.40-4.06(m,4H),5.27-5.69(m,3H),7.36-7.51(m,2H),7.88-8.16(m,3H),10.53-10.59(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值534.2；实测值535.2；Rt＝2.632min。
步骤7：手性分离(化合物1256和化合物1136)
对外消旋N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-2-氧代-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.068g，127.18μmol)进行手性分离(柱：Chiralpak OJ-H(250-20mm-5m)；流动相：己烷-IPA-MeOH，70-15-15流速：15mL/min)，以获得N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-2-氧代-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.02603g，48.68μmol，38.28％产率)和N-(6-氨基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[2-(三氟甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.05775g，124.60umol，50.22％产率)。
化合物1256于分析条件下(柱：OJ-H，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.6ml/min为流动相)的保留时间为31.50min且化合物1136的保留时间为38.37min。
化合物1256：
保留时间：31.50min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.01-1.14(m,6H),1.32-1.40(m,1H),1.65-1.74(m,1H),1.84-1.92(m,1H),2.05-2.18(m,2H),2.28-2.43(m,5H),2.58-2.81(m,3H),2.82(s,3H),3.36-3.44(m,1H),3.46-4.07(m,2H),5.25-5.73(m,3H),7.34-7.53(m,2H),7.87-7.95(m,1H),7.96-8.12(m,2H),10.50-10.61(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值534.2；实测值535.2；Rt＝2.624min。
化合物1136：
保留时间：38.37min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值534.2；实测值535.2；Rt＝2.627min。
实施例581.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(2-(1-(2-氟乙基)哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1174)的合成
步骤1：5-氯-2-(1-(2-氟乙基)哌啶-4-基)苯并[d]噻唑的合成
将5-氯-2-(4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑(5g，15.35mmol，2HCl)、甲磺酸2-氟乙酯(2.29g，16.12mmol)和TEA(6.21g，61.41mmol，8.56mL)于MeCN(100mL)中的混合物在50℃下搅拌24h。等分试样的LCMS显示61％转化。将甲磺酸2-氟乙酯(2.18g，15.35mmol)和TEA(4.66g，46.06mmol，6.42mL)添加到反应混合物且将其在60℃下搅拌72h，然后冷却且在真空中浓缩。将残余物用水(50ml)稀释且用10％氢氧化钠水溶液碱化至pH 11。将所得混合物用MTBE(250ml)萃取。将有机层用水(50ml)洗涤，经硫酸钠干燥且在真空中浓缩，以得到呈棕色固体的5-氯-2-[1-(2-氟乙基)-4-哌啶基]-1,3-苯并噻唑(3.3g，11.04mmol，71.94％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值298.2；实测值299.2；Rt＝1.812min。
步骤2：2-(1-(2-氟乙基)哌啶-4-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑的合成
将5-氯-2-[1-(2-氟乙基)-4-哌啶基]-1,3-苯并噻唑(3.3g，11.04mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(3.08g，12.15mmol)和乙酸钾(2.17g，22.09mmol，1.38mL)于二噁烷(100mL)中的混合物抽真空，然后用氩气回填。将此操作重复两次，然后在氩气下添加三(1,5-二苯基戊-1,4-二烯-3-酮)二钯(505.66mg，552.20umol)和二环己基[2',4',6'-三(丙-2-基)-[1,1'-联苯基]-2-基]磷烷(1.05g，2.21mmol)，且将反应混合物在95℃下搅拌18h。将反应混合物冷却且在真空中浓缩。通过硅胶柱色谱使用MeCN/MeOH梯度(0-100％ MeOH)纯化残余物，以得到呈淡黄色固体的2-[1-(2-氟乙基)-4-哌啶基]-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噻唑(2.8g，7.17mmol，64.95％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值390.2；实测值391.2；Rt＝1.011min。
步骤3：(S)-6-(2-(1-(2-氟乙基)哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤3制备。产率：2g(60.66％)。
CC条件：通过硅胶使用CHCl3/MeCN作为洗脱液混合物纯化粗产物。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值459.2；实测值460.2；Rt＝1.248min。
步骤4：(S)-2-(1-(2-氟乙基)哌啶-4-基)-5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤4制备。产率：760mg(48.58％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值359.2；实测值360.2；Rt＝0.574min。
步骤5：2-(1-(2-氟乙基)哌啶-4-基)-5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：620mg(81.12％)。LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值361.2；实测值362.2；Rt＝0.724min。
N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(2-(1-(2-氟乙基)哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1174)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：70.6mg(30.79％)。
HPLC条件：柱：YMC Triart C18 100*20mm，5微米；0-1-5min50-50-60％水-MeOH+0.1％ NH4OH；(装载泵4ml/min MeOH)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.02-1.13(m,6H),1.32-1.39(m,1H),1.69-1.89(m,4H),2.07-2.22(m,5H),2.28-2.41(m,3H),2.60-2.67(m,2H),2.77-2.97(m,3H),3.07-3.11(m,1H),3.46-4.05(m,1H),4.48-4.58(dt,2H),5.27-5.69(m,3H),7.34-7.51(m,2H),7.86-7.90(d,1H),7.99-8.07(m,2H),10.53-10.58(d,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值552.2；实测值553.2；Rt＝2.212min。
实施例582.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(2-(1-(2,2-二氟乙基)哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1304)的合成
步骤1：5-氯-2-(1-(2,2-二氟乙基)哌啶-4-基)苯并[d]噻唑的合成
将5-氯-2-(4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑(3.6g，11.05mmol，2HCl)、三氟甲磺酸2,2-二氟乙酯(2.84g，13.26mmol)和TEA(5.59g，55.27mmol，7.70mL)于MeCN(100mL)中的混合物在60℃下搅拌72h，然后冷却且在真空中浓缩。将残余物用水(50ml)稀释且用10％氢氧化钠水溶液碱化至pH 11。将所得混合物用MTBE(250ml)萃取。将有机层用水(50ml)洗涤，经硫酸钠干燥且在真空中浓缩，以得到呈棕色固体的粗品5-氯-2-[1-(2,2-二氟乙基)-4-哌啶基]-1,3-苯并噻唑(3g，9.47mmol，85.67％产率)，其直接用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值316.2；实测值317.2；Rt＝2.015min。
步骤2：2-(1-(2,2-二氟乙基)哌啶-4-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑的合成
将5-氯-2-[1-(2,2-二氟乙基)-4-哌啶基]-1,3-苯并噻唑(3g，9.47mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(2.65g，10.42mmol)和乙酸钾(1.86g，18.94mmol，1.18mL)于二噁烷(100mL)中的混合物抽真空，然后用氩气回填。将此操作重复两次，然后在氩气下添加三(1,5-二苯基戊-1,4-二烯-3-酮)二钯(433.58mg，473.49umol)和二环己基[2',4',6'-三(丙-2-基)-[1,1'-联苯基]-2-基]磷烷(902.89mg，1.89mmol)，且将反应混合物在95℃下搅拌18h。将反应混合物冷却且在真空中浓缩。通过硅胶柱色谱使用己烷/乙酸乙酯梯度(0-100％乙酸乙酯)来纯化残余物，以得到呈米色固体的2-[1-(2,2-二氟乙基)-4-哌啶基]-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噻唑(1.5g，3.67mmol，38.79％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值408.2；实测值409.2；Rt＝0.989min。
步骤3：(S)-6-(2-(1-(2,2-二氟乙基)哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤3制备。产率：0.9g(51.29％)。
CC条件：通过硅胶使用己烷/MTBE作为洗脱液混合物来纯化粗产物。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值477.2；实测值478.2；Rt＝1.120min。
步骤4：(S)-2-(1-(2,2-二氟乙基)哌啶-4-基)-5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤4制备。产率：0.67g(94.19％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值377.2；实测值378.2；Rt＝0.707min。
步骤5：2-(1-(2,2-二氟乙基)哌啶-4-基)-5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：0.55g(81.65％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值379.2；实测值380.2；Rt＝0.744min。
步骤6：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(2-(1-(2,2-二氟乙基)哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1304)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：26mg(11.53％)。
HPLC条件：柱：XBridge C18 100*19mm，5微米；0-5min 30-55％水-MeCN+0.1％NH4OH；(装载泵4ml/min MeOH)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.02-1.13(m,6H),1.32-1.39(m,1H),1.69-1.90(m,4H),2.06-2.18(m,3H),2.28-2.40(m,4H),2.72-2.78(m,3H),2.97-3.10(m,3H),3.47-4.05(m,2H),5.28-5.69(m,3H),6.04-6.23(m,1H),7.34-7.51(m,2H),7.86-8.07(m,3H),10.53-10.58(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值570.2；实测值571.2；Rt＝2.104min。
实施例583.外消旋-N,N-二甲基-2-(5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)乙胺的合成
步骤1：2-(5-溴苯并[d]噻唑-2-基)-N,N-二甲基乙胺的合成
通过一般程序方案J步骤1A制备。产率：1g(11.18％)。
CC条件：通过硅胶使用CHCl3/MeOH作为洗脱液混合物纯化粗产物。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值285.2；实测值286.2；Rt＝0.824min。
步骤2：N,N-二甲基-2-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)乙胺的合成
通过一般程序方案J步骤2制备。产率：1.1g粗品
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值332.2；实测值333.2；Rt＝1.004min。
步骤3：6-(2-(2-(二甲基氨基)乙基)苯并[d]噻唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案J步骤3制备。产率：1.5g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值401.2；实测值402.2；Rt＝1.064min。
步骤4：N,N-二甲基-2-(5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)乙胺的合成
通过一般程序方案J步骤4制备。产率：1.3g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值301.2；实测值302.2；Rt＝0.641min。
步骤5：外消旋-N,N-二甲基-2-(5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)乙胺的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：1.2g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值303.2；实测值304.2；Rt＝0.486min。
实施例584.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(2-(吡咯烷-1-基)乙基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1095)的合成
通过一般程序8制备。产率：33mg(21.42％)。
HPLC条件：柱：YMC Triart C18 100*19mm，5微米；0-1-5min30-30-65％水-MeCN+0.1％ NH4OH；(装载泵4ml/min MeCN)。
化合物1095：
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.02-1.14(m,6H),1.32-1.40(m,2H),1.68(m,5H),1.85-1.90(m,2H),2.06-2.37(m,5H),2.76-2.86(m,3H),3.24(m,2H),3.47-4.05(m,2H),5.28-5.69(m,3H),7.32-7.51(m,2H),7.84-7.88(d,1H),8.00-8.07(m,2H),10.51-10.56(d,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值520.2；实测值521.2；Rt＝1.944min。
实施例585.2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(1-甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-N-(6-甲基-5-(氧杂环丁烷-3-基)吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1309)的合成
通过一般程序方案H步骤6B制备。产率：9mg(5.31％)。
HPLC条件：柱：SunFire C18 100*19mm，5微米；2-10min50-100％ MeOH；(装载泵4ml/min MeOH)。
通过手性HPLC(柱：Chiralcel OD-H(250*20mm，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，12ml/min)纯化2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-N-[6-甲基-5-(氧杂环丁烷-3-基)-3-吡啶基]-2-氧代乙酰胺，以获得2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-N-[6-甲基-5-(氧杂环丁烷-3-基)-3-吡啶基]-2-氧代乙酰胺(0.009g，16.43μmol，5.31％产率)。
化合物1309于分析条件下(柱：OD-H，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min为流动相)17.78min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98-1.08(m,3H),1.27-1.42(m,1H),1.66-1.77(m,1H),1.77-2.00(m,3H),2.08-2.21(m,3H),2.22-2.28(m,3H),2.28-2.36(m,3H),2.45-2.46(m,3H),2.82-3.09(m,3H),3.09-3.22(m,1H),3.54-4.07(m,1H),4.36-4.50(m,1H),4.52-4.67(m,2H),4.86-4.99(m,2H),5.27-5.75(m,1H),7.34-7.46(m,1H),7.85-7.97(m,1H),7.98-8.12(m,2H),8.52-8.67(m,1H),10.84-11.29(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值547.2；实测值548.2；Rt＝2.313min。
实施例586.N-(5,6-二甲基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(1-甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1137)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：47mg(27.84％)。
HPLC条件：柱：XBridge C18 100*19mm，5微米；0-1-6min10-10-60％水-MeCN+0.1％ NH4OH；(装载泵4ml/min MeCN)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.00-1.07(m,3H),1.29-1.42(m,1H),1.64-1.75(m,1H),1.76-1.92(m,3H),1.99-2.13(m,5H),2.17-2.25(m,6H),2.31-2.39(m,4H),2.50-2.51(m,1H),2.80-2.85(m,2H),3.00-3.10(m,1H),3.43-4.06(m,1H),5.22-5.76(m,1H),7.32-7.44(m,1H),7.72-7.85(m,1H),7.85-7.94(m,1H),8.02-8.09(m,1H),8.39-8.55(m,1H),10.79-11.14(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值505.2；实测值506.2；Rt＝1.873min。
实施例587.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1389)的合成
步骤1：5-氯-2-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤1A制备。产率：8g(96.96％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值249.2；实测值250.2；Rt＝1.539min。
步骤2：2-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑的合成
将乙酸钾(6.29g，64.07mmol，4.01mL)添加到5-氯-2-(2-甲基吡唑-3-基)-1,3-苯并噻唑(8.00g，32.04mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(8.95g，35.24mmol)于二噁烷(100mL)中的溶液中。将反应烧瓶抽真空且用氩气再填充3次。然后在氩气流下添加三(二苯亚甲基丙酮)二钯(0)(1.47g，1.60mmol)和X-Phos(3.05g，6.41mmol)。在90℃、惰性气氛下将所得混合物搅拌18h。然后，将其冷却，用EtOAc(200mL)稀释且过滤出。将滤液在减压下浓缩且通过硅胶快速色谱使用0至100％氯仿-MTBE梯度洗脱来纯化残余物，以得到2-(2-甲基吡唑-3-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噻唑(6.7g，19.63mmol，61.29％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值341.2；实测值342.2；Rt＝1.600min。
步骤3：(S)-3-甲基-6-(2-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)苯并[d]噻唑-5-基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤3制备。产率：12g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值410.2；实测值411.2；Rt＝1.654min。
步骤4：(S)-2-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤4制备。产率：8g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值310.2；实测值311.2；Rt＝0.983min。
步骤5：2-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：8g(99.35％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值312.2；实测值313.2；Rt＝0.967min。
步骤6：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1389)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：28mg(4.34％)。
HPLC条件：柱：YMC Triart C18 100*20mm，5微米；0-1-6min10-10-65％水-MeCN+0.1％ NH4OH，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeCN)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.04-1.19(m,6H),1.29-1.50(m,1H),1.67-1.81(m,1H),1.84-2.00(m,1H),2.07-2.28(m,1H),2.34-2.47(m,3H),2.82-3.26(m,1H),3.51-4.15(m,1H),4.30(s,3H),5.31-5.61(m,1H),5.60-5.79(m,2H),6.96-7.03(m,1H),7.43-7.50(m,1H),7.50-7.56(m,1H),7.57-7.65(m,1H),7.98-8.11(m,2H),8.13-8.24(m,1H),10.49-10.66(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值503.2；实测值504.2；Rt＝2.867min。
实施例588.N-(5-氯-6-甲基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(1-甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1102)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：113mg(39.32％)。
HPLC条件：柱：YMC Triart C18 100*20mm，5微米；0-1-6min60-90％水-MeOH+0.1％ NH4OH；(装载泵4ml/min MeOH)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99-1.07(m,3H),1.30-1.40(m,1H),1.69-1.92(m,4H),2.00-2.13(m,5H),2.18(s,3H),2.28-2.35(m,1H),2.50(s,3H),2.80-3.09(m,4H),3.48-4.04(m,1H),5.28-5.73(m,1H),7.32-7.42(m,1H),7.86-7.92(m,1H),8.00-8.25(m,2H),8.52-8.69(m,1H),11.14-11.34(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值526.2；实测值527.2；Rt＝3.173min。
实施例589.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(2-N-吗啉基乙基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1248)的合成
步骤1：4-(2-(5-氯苯并[d]噻唑-2-基)乙基)吗啉的合成
通过一般程序方案H步骤1A制备。产率：3.5g(39.52％)。
CC条件：通过硅胶使用CHCl3/MeCN作为洗脱液混合物纯化粗产物。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值282.2；实测值283.2；Rt＝0.916min。
步骤2：4-(2-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)乙基)吗啉的合成
将乙酸钾(2.43g，24.75mmol，1.55mL)添加到4-[2-(5-氯-1,3-苯并噻唑-2-基)乙基]吗啉(3.5g，12.38mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(3.46g，13.61mmol)于二噁烷(40mL)中的溶液中。将反应烧瓶抽真空且用氩气再填充3次。然后在氩气流下添加三(二苯亚甲基丙酮)二钯(0)(566.68mg，618.84umol)和XPhos(1.18g，2.48mmol)。在惰性气氛下将所得混合物在90℃下搅拌18h。然后，将其冷却，用EtOAc(200mL)稀释且用Na2CO3(50mL，饱和水溶液)洗涤。将有机层经Na2SO4干燥，在减压下浓缩且通过硅胶快速色谱使用0至100％氯仿-MeCN梯度洗脱来纯化残余物，以得到产物4-[2-[5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噻唑-2-基]乙基]吗啉(2.1g，5.61mmol，45.33％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值374.2；实测值375.2；Rt＝0.889min。
步骤3：(S)-3-甲基-6-(2-(2-N-吗啉基乙基)苯并[d]噻唑-5-基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤3制备。产率：3.5g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值443.2；实测值444.2；Rt＝1.080min。
步骤4：(S)-4-(2-(5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)乙基)吗啉的合成
通过一般程序方案H步骤4制备。产率：3.5g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值343.2；实测值344.2；Rt＝0.501min。
步骤5：4-(2-(5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)乙基)吗啉的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：2g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值345.2；实测值346.2；Rt＝0.551min。
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：92mg(39.48％)。
HPLC条件：柱：XBridge C18 100*19mm，5微米；0-5min 15-65％水-MeCN+0.1％NH4OH；(装载泵4ml/min MeCN)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.02-1.14(m,6H),1.32-1.41(m,1H),1.65-1.73(m,1H),1.82-1.91(m,1H),2.05-2.46(m,8H),2.73-2.76(m,2H),3.24-3.27(m,2H),3.45-4.06(m,6H),5.28-5.71(m,3H),7.30-7.42(m,1H),7.43-7.54(m,1H),7.82-7.90(m,1H),7.97-8.09(m,2H),10.46-10.64(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值536.2；实测值537.2；Rt＝2.116min。
实施例590.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1244)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：42.6mg(17.96％)。
HPLC条件：柱：YMC Triart C18 100*20mm，5微米；0-1-6min10-10-60％水-MeCN+0.1％ NH4OH；(装载泵4ml/min MeOH)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99-1.05(m,3H),1.06-1.13(m,3H),1.29-1.40(m,1H),1.65-1.74(m,1H),1.81-1.91(m,1H),2.01-2.15(m,1H),2.21(s,3H),2.23-2.31(m,1H),2.33-2.40(m,2H),2.41-2.43(m,4H),2.73-3.27(m,1H),3.46-4.01(m,5H),5.18-5.66(m,3H),7.00-7.09(m,1H),7.36-7.52(m,2H),7.72-7.78(m,1H),7.99-8.08(m,1H),10.48-10.60(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值521.2；实测值522.2；Rt＝2.333min。
实施例591.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(2-甲基-2-氮杂螺[3.3]庚-6-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1283)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：83mg(26.61％)。
HPLC条件：柱：YMC Triart C18 100*20mm，5微米；0-1-5min20-20-60％水-MeCN+0.1％ NH4OH；(装载泵4ml/min MeCN)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.00-1.14(m,6H),1.31-1.41(m,1H),1.65-1.74(m,1H),1.82-1.91(m,1H),2.00-2.25(m,5H),2.27-2.35(m,2H),2.39-2.43(m,2H),2.55-2.60(m,2H),3.04(s,2H),3.20(s,2H),3.38-4.06(m,3H),5.26-5.70(m,3H),7.31-7.41(m,1H),7.42-7.54(m,1H),7.83-7.91(m,1H),7.96-8.10(m,2H),10.44-10.71(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值532.2；实测值533.2；Rt＝2.002min。
实施例592.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(2-((二甲基氨基)甲基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1325)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：54.9mg(17.20％)。
HPLC条件：柱：SunFire C18 100*19mm，5微米；2-10min 10-50％MeCN+FA；(装载泵4ml/min MeCN)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.01-1.14(m,6H),1.31-1.41(m,1H),1.65-1.74(m,1H),1.83-1.93(m,1H),2.05-2.22(m,1H),2.25-2.36(m,8H),2.39-2.42(m,1H),2.77-3.27(m,1H),3.47-4.05(m,3H),5.24-5.62(m,1H),5.62-5.72(m,2H),7.32-7.55(m,2H),7.82-7.92(m,1H),7.97-8.12(m,2H),10.49-10.62(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值480.2；实测值481.2；Rt＝1.782min。
实施例593.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(1-甲基氮杂环丁烷-3-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1151)的合成
步骤1：3-(5-氯苯并[d]噻唑-2-基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤1B制备。产率：1.5g(14.74％)。
CC条件：通过硅胶使用己烷/MTBE作为洗脱液混合物来纯化粗产物。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值324.2；实测值325.2；Rt＝1.591min。
步骤2：2-(氮杂环丁烷-3-基)-5-氯苯并[d]噻唑的合成
将3-(5-氯-1,3-苯并噻唑-2-基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(2g，6.16mmol)用于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(10.67g，292.55mmol，13.33mL)处理。将所得混合物在25℃下搅拌12h。过滤沉淀且另外用MTBE处理。然后在真空中干燥，以得到2-(氮杂环丁烷-3-基)-5-氯-1,3-苯并噻唑(2g，粗品，HCl)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值224.2；实测值225.2；Rt＝0.570min。
步骤3：5-氯-2-(1-甲基氮杂环丁烷-3-基)苯并[d]噻唑的合成
向2-(氮杂环丁烷-3-基)-5-氯-1,3-苯并噻唑(3g，11.49mmol，HCl)于MeOH(24.06mL)中的搅拌溶液中添加用7-8％ MeOH稳定的37重量％甲醛水溶液(1.40g，17.23mmol，1.29mL，37％纯度)和无水乙酸钠(2.36g，28.72mmol，1.54mL)。将所得混合物在25℃下搅拌2h。然后分批添加氰基硼氢化钠(1.44g，22.97mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌12h。蒸发甲醇。将残余物用水(50ml)稀释且用DCM(3*25ml)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥。在真空中蒸发DCM，以得到5-氯-2-(1-甲基氮杂环丁烷-3-基)-1,3-苯并噻唑(2.3g，9.63mmol，83.87％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值238.2；实测值239.2；Rt＝1.608min。
步骤4：2-(1-甲基氮杂环丁烷-3-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑的合成
将5-氯-2-(1-甲基氮杂环丁烷-3-基)-1,3-苯并噻唑(2.3g，9.63mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(2.69g，10.60mmol)和乙酸钾(1.89g，19.27mmol，1.20mL)混合于二噁烷(40mL)中。将所得混合物抽真空，然后用氩气回填，将此操作重复三次，然后在氩气下添加三(二苯亚甲基丙酮)二钯(0)(441.11mg，481.70μmol)。将反应混合物在氩气、90℃下搅拌14h，然后冷却且在减压下浓缩。通过柱色谱纯化残余物，以得到2-(1-甲基氮杂环丁烷-3-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噻唑(0.6g，1.82mmol，18.86％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值330.2；实测值331.2；Rt＝0.942min。
步骤5：(S)-3-甲基-6-(2-(1-甲基氮杂环丁烷-3-基)苯并[d]噻唑-5-基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤3制备。产率：0.8g粗品
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值399.2；实测值400.2；Rt＝1.232min。
步骤6：(S)-5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)-2-(1-甲基氮杂环丁烷-3-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤4制备。产率：0.5g(83.4％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值299.2；实测值300.2；Rt＝0.497min。
步骤7：2-(1-甲基氮杂环丁烷-3-基)-5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：0.35g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值301.2；实测值302.2；Rt＝0.556min。
步骤8：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(1-甲基氮杂环丁烷-3-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1151)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：29mg(12.68％)。
HPLC条件：柱：YMC Triart C18 100*20mm，5微米；0-1-6min10-10-50％水-MeCN+0.1％ NH4OH，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeCN)
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.01-1.15(m,6H),1.30-1.41(m,1H),1.64-1.75(m,1H),1.81-1.91(m,1H),2.05-2.21(m,1H),2.22-2.32(m,4H),2.32-2.36(m,1H),2.39-2.42(m,1H),2.76-3.27(m,1H),3.32-3.36(m,2H),3.46-4.09(m,4H),5.24-5.72(m,3H),7.33-7.55(m,2H),7.84-7.92(m,1H),7.96-8.11(m,2H),10.50-10.65(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值492.2；实测值493.2；Rt＝2.240min。
实施例594.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1231)的合成
步骤1：5-氯-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤1A制备。产率：1.3g(81.78％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值253.2；实测值254.2；Rt＝1.258min。
步骤2：2-(四氢-2H-吡喃-4-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑的合成
将5-氯-2-四氢吡喃-4-基-1,3-苯并噻唑(1.3g，5.12mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(1.30g，5.12mmol)、三(二苯亚甲基丙酮)二钯(0)(703.71mg，768.48μmol)和二环己基-[2-(2,4,6-三异丙基苯基)苯基]磷烷(293.08mg，614.78μmol)混合于二噁烷(40mL)中。将所得混合物抽真空，然后用氩气回填，将此操作重复三次。添加乙酸钾(1.01g，10.25mmol，640.51μL)且将反应混合物在氩气、100℃下搅拌12h。然后将反应混合物冷却且通过薄硅胶垫过滤。将滤饼用二噁烷(2*10ml)洗涤且丢弃。所获得的粗品2-四氢吡喃-4-基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噻唑(1.72g，4.98mmol，97.24％产率)不经纯化即用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值345.2；实测值346.2；Rt＝1.607min。
步骤3：(S)-3-甲基-6-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤3制备。产率：1.14g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值414.2；实测值415.2；Rt＝1.540min。
步骤4：(S)-5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)苯并[d]噻唑的合成
将(3S)-3-甲基-6-(2-四氢吡喃-4-基-1,3-苯并噻唑-5-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.14g，2.75mmol)溶解于二噁烷/HCl(10mL)中且将反应混合物在25℃下搅拌12h。完成之后，在减压下蒸发溶剂，将残余物溶解于10mL水中，通过DCM(3*20mL)洗涤水溶液。将NaHCO3添加到碱性反应物中且通过DCM(3*30mL)萃取此溶液。将此有机相经Na2SO4干燥且在减压下蒸发，以得到粗品5-[(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]-2-四氢吡喃-4-基-1,3-苯并噻唑(0.07g，222.62μmol，8.11％产率)，其用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值314.2；实测值315.2；Rt＝0.969min。
步骤5：5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：50mg(67.81％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值316.2；实测值317.2；Rt＝0.895min。
步骤6：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1231)的合成
通过一般程序方案H步骤6B制备。产率：20.95mg(7.26％)。
HPLC条件：柱：XBridge C18 100*19mm，5微米；0-5min50-50-65％水-MeOH+0.1％NH4OH，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeOH)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.01-1.05(m,3H),1.06-1.15(m,3H),1.29-1.41(m,1H),1.66-1.75(m,1H),1.79-1.91(m,3H),1.96-2.12(m,3H),2.17-2.36(m,2H),2.39-2.42(m,1H),2.76-3.22(m,1H),3.36-3.42(m,1H),3.46-4.06(m,5H),5.26-5.71(m,3H),7.34-7.53(m,2H),7.86-7.93(m,1H),7.97-8.09(m,2H),10.55(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值507.2；实测值508.2；Rt＝2.996min。
实施例595.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(1,2,2-三甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1125)的合成
步骤1：5-氯-2-(2,2-二甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤1A制备。产率：6.8g(77.52％)。
CC条件：通过硅胶使用MTBE/MeOH作为洗脱液混合物来纯化粗产物。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值280.2；实测值281.2；Rt＝0.859min。
步骤2：5-氯-2-(1,2,2-三甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑的合成
将用7-8％ MeOH稳定的37重量％甲醛水溶液(577.47mg，19.23mmol，533.21μL)和乙酸(1.15g，19.23mmol，1.10mL)添加到5-氯-2-(2,2-二甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑(2.7g，9.61mmol)于MeOH(60mL)中的溶液中。将所得混合物在20℃下搅拌1h，之后向其中添加氰基硼氢化钠(1.21g，19.23mmol)。此后，继续搅拌16h。然后，在减压下移除溶剂且将残余物分配于10％ K2CO3水溶液(20ml)与DCM(40ml)之间。将有机层分离，经固体K2CO3干燥且在减压下浓缩，留下5-氯-2-(1,2,2-三甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑(2.7g，9.16mmol，95.24％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值294.2；实测值295.2；Rt＝1.019min。
步骤3：5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-2-(1,2,2-三甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑的合成
将5-氯-2-(1,2,2-三甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑(2.7g，9.16mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(2.67g，10.53mmol)和乙酸钾(1.80g，18.31mmol，1.14mL)一起混合于二噁烷(50mL)中。将反应烧瓶抽真空且用氩气再填充3次。然后，在氩气流下，添加XPhos(873.10mg，1.83mmol)和三(二苯亚甲基丙酮)二钯(0)(419.28mg，457.87μmol)。将所得混合物在100℃下搅拌16h。然后，将其在减压下浓缩且通过梯度柱色谱(SiO2，MTBE/MeOH)纯化残余物，得到5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-2-(1,2,2-三甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑(1.96g，5.07mmol，55.40％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值386.2；实测值387.2；Rt＝1.101min。
步骤4：(3S)-3-甲基-6-(2-(1,2,2-三甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤3制备。产率：2.5g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值455.2；实测值456.2；Rt＝1.357min。
步骤5：5-((S)-5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)-2-(1,2,2-三甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤4制备。产率：1.6g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值355.2；实测值356.2；Rt＝0.716min。
步骤6：5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)-2-(1,2,2-三甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：1.2g(74.58％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值357.2；实测值358.2；Rt＝0.715min。
步骤7：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(1,2,2-三甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1125)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：94mg(24.65％)。
HPLC条件：柱：YMC Triart C18 100*20mm，5微米；0-1-5min50-50-90％水-MeOH+0.1％ NH4OH，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeOH)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.88-1.00(m,4H),1.00-1.08(m,4H),1.09-1.14(m,5H),1.29-1.42(m,1H),1.62(t,1H),1.67-1.76(m,2H),1.82-1.90(m,2H),1.99-2.13(m,2H),2.15(s,3H),2.17-2.36(m,2H),2.39-2.42(m,1H),2.54-2.63(m,2H),2.74-3.27(m,1H),3.46-4.07(m,1H),5.23-5.71(m,3H),7.31-7.42(m,1H),7.42-7.52(m,1H),7.83-7.89(m,1H),7.95-8.11(m,2H),10.43-10.66(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值548.2；实测值549.2；Rt＝2.034min。
实施例596.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(2-(1-乙基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1252)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：93mg(49.79％)。
HPLC条件：柱：XBridge C18 100*19mm，5微米；0-5min 45-90％水-MeOH+0.1％NH4OH；(装载泵4ml/min MeOH)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98-1.13(m,9H),1.31-1.41(m,1H),1.66-1.80(m,3H),1.82-1.92(m,1H),2.00-2.10(m,5H),2.31-2.36(m,3H),2.41(q,1H),2.74-3.28(m,5H),3.43-4.09(m,1H),5.21-5.72(m,3H),7.31-7.43(m,1H),7.43-7.56(m,1H),7.82-7.95(m,1H),7.98-8.10(m,2H),10.50-10.64(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值534.2；实测值535.2；Rt＝1.967min。
实施例597.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(1,2,2,6,6-五甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1340)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：83mg(28.75％)。
HPLC条件：柱：YMC Triart C18 100*20mm，5微米；0-1-6min50-50-90％水-MeOH+0.1％ NH4OH，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeOH)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99-1.10(m,11H),1.11-1.15(m,8H),1.28-1.40(m,1H),1.60-1.75(m,3H),1.81-1.92(m,1H),1.92-1.97(m,2H),2.05-2.19(m,1H),2.21(s,3H),2.28-2.35(m,1H),2.39-2.43(m,1H),2.76-3.28(m,1H),3.46-4.07(m,2H),5.23-5.73(m,3H),7.32-7.43(m,1H),7.43-7.53(m,1H),7.85-7.93(m,1H),7.98-8.09(m,2H),10.51-10.63(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值576.2；实测值577.2；Rt＝2.156min。
实施例598.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(4-甲基吗啉-2-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1275)的合成
步骤1：2-(5-氯苯并[d]噻唑-2-基)-4-甲基吗啉的合成
通过一般程序方案H步骤1A制备。产率：11.5g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值268.2；实测值269.2；Rt＝0.966min。
步骤2：4-甲基-2-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)吗啉的合成
将2-(5-氯-1,3-苯并噻唑-2-基)-4-甲基吗啉(11.5g，42.79mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(11.95g，47.07mmol)和乙酸钾(8.40g，85.58mmol，5.35mL)混合于二噁烷(150mL)中。将所得混合物抽真空，然后用氩气回填，将此操作重复三次，然后在氩气下添加三(二苯亚甲基丙酮)二钯(0)(1.57g，1.71mmol)和XPhos(3.26g，6.85mmol)。将反应混合物在氩气、95℃下搅拌18h，然后冷却，过滤且在减压下浓缩。通过梯度色谱(MTBE-MeOH)纯化残余物，以得到4-甲基-2-[5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噻唑-2-基]吗啉(11g，30.53mmol，71.36％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值360.2；实测值361.2；Rt＝1.012min。
步骤3：(3S)-3-甲基-6-(2-(4-甲基吗啉-2-基)苯并[d]噻唑-5-基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤3制备。产率：3g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值429.2；实测值430.2；Rt＝1.232min。
步骤4：4-甲基-2-(5-((S)-5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)吗啉的合成
通过一般程序方案H步骤4制备。产率：1.3g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值329.2；实测值330.2；Rt＝0.673min。
步骤5：4-甲基-2-(5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)吗啉的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：0.9g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值331.2；实测值332.2；Rt＝0.695min。
步骤6：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(4-甲基吗啉-2-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1275)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：35mg(8.88％)。
HPLC条件：柱：XBridge C18 100*19mm，5微米；0-1-6min10-10-60％水-MeCN+0.1％ NH4OH，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeOH)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.00-1.05(m,3H),1.06-1.16(m,3H),1.66-1.76(m,1H),1.81-1.89(m,1H),2.01-2.22(m,4H),2.24(s,3H),2.27-2.35(m,2H),2.38-2.42(m,2H),2.67-2.78(m,1H),3.15-3.27(m,1H),3.43-3.52(m,0.6H),3.75-3.82(m,1H),3.94-4.10(m,1.4H),4.86-4.96(m,1H),5.27-5.62(m,1H),5.64-5.73(m,2H),7.36-7.44(m,1H),7.45-7.54(m,1H),7.87-7.95(m,1H),7.96-8.08(m,1H),8.08-8.16(m,1H),10.46-10.62(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值522.2；实测值523.2；Rt＝1.536min。
实施例599.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(4-甲基吗啉-2-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1134和化合物1203)的合成
对外消旋N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(4-甲基吗啉-2-基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(74mg，141.58μmol)进行手性分离(柱：Chiralpak IС50*20，5-III流动相：IPA-MeOH，50-50流速：10mL/min)，以获得N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[(2S)-4-甲基吗啉-2-基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰胺(16mg，30.61μmol，43.24％产率)(RT＝30.24min)和N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[(2R)-4-甲基吗啉-2-基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰胺(19mg，36.35μmol，51.35％产率)(RT＝41.35min)。
化合物1134于分析条件下(柱：IC，以IPA-MeOH，50-50，0.6mL/min为流动相)的保留时间为22.27min且化合物1202的保留时间为29.82min。
化合物1134：保留时间：22.27min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.01-1.14(m,6H),1.30-1.42(m,1H),1.64-1.74(m,1H),1.78-2.05(m,2H),2.06-2.23(m,2H),2.23-2.39(m,7H),2.39-2.43(m,2H),2.73-2.88(m,1H),3.34-3.52(m,1H),3.75-3.88(m,1H),4.02-4.12(m,1H),4.93-5.29(m,1H),5.69-5.82(m,2H),7.38-7.46(m,1H),7.46-7.55(m,1H),7.86-7.95(m,1H),7.99-8.09(m,1H),8.09-8.15(m,1H),10.47-10.70(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值522.2；实测值523.2；Rt＝1.949min。
化合物1202：保留时间：29.82min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.01-1.14(m,6H),1.30-1.42(m,1H),1.64-1.74(m,1H),1.78-2.05(m,2H),2.06-2.23(m,2H),2.23-2.39(m,7H),2.39-2.43(m,2H),2.73-2.88(m,1H),3.34-3.52(m,1H),3.75-3.88(m,1H),4.02-4.12(m,1H),4.93-5.29(m,1H),5.69-5.82(m,2H),7.38-7.46(m,1H),7.46-7.55(m,1H),7.86-7.95(m,1H),7.99-8.09(m,1H),8.09-8.15(m,1H),10.47-10.70(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值522.2；实测值523.2；Rt＝1.951min。
实施例600.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(2-(3-(二甲基氨基)丙基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1262)的合成
步骤1：3-(5-氯苯并[d]噻唑-2-基)-N,N-二甲基丙-1-胺的合成
使2-氨基-4-氯苯硫酚(1g，6.26mmol)和4-(二甲基氨基)丁酸(1.3g，7.76mmol，HCl)于PPA(5mL)的搅拌溶液在120℃下搅拌16h。完成之后，将反应混合物用水(100mL)萃取且通过NaOH中和至pH＝8。将水相用EtOAc(2*20mL)萃取。将合并的有机相经Na2SO4干燥且在减压下浓缩。分离所需产物3-(5-氯-1,3-苯并噻唑-2-基)-N,N-二甲基丙-1-胺(1.2g，4.71mmol，75.19％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值254.2；实测值255.2；Rt＝0.909min。
步骤2：N,N-二甲基-3-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)丙-1-胺的合成
向3-(5-氯-1,3-苯并噻唑-2-基)-N,N-二甲基丙-1-胺(0.6g，2.35mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(0.6g，2.36mmol)于二噁烷(10mL)中的搅拌溶液中添加Pd2dba3(0.4g，436.82μmol)和XPhos(0.4g，839.10μmol)。将所得悬浮液在50℃下用氩气脱气0.5h。添加乙酸钾(0.5g，5.09mmol，318.47μL)。将反应混合物在100℃下搅拌16h。完成之后，将反应混合物在减压下浓缩，用水(20mL)萃取，将水相用CHCl3(2*20mL)萃取。将有机相用10％ HCl(2*40ml)萃取。将水相通过NaHCO3中和至pH＝8，用CHCl3(2*20mL)萃取。将有机相经Na2SO4干燥且在真空中蒸发。分离所需产物N,N-二甲基-3-[5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噻唑-2-基]丙-1-胺(0.8g，2.31mmol，98.10％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值346.2；实测值347.2；Rt＝0.940min。
步骤3：(S)-6-(2-(3-(二甲基氨基)丙基)苯并[d]噻唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤3制备。产率：0.4g粗品。
CC条件：通过硅胶使用EtOAc/MeOH作为洗脱液混合物来纯化粗产物。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值415.2；实测值416.2；Rt＝1.033min。
步骤4：(S)-N,N-二甲基-3-(5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)丙-1-胺的合成
使(3S)-6-[2-[3-(二甲基氨基)丙基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(400.00mg，962.49μmol)于MeOH(10mL)和二噁烷/HCl(10mL)中的搅拌溶液在25℃下搅拌16h。完成之后，将反应混合物蒸发，将粗产物用水(20mL)萃取且通过NaHCO3中和至pH＝8。将水相用CHCl3(2*20mL)萃取。将合并的有机相经Na2SO4干燥且在减压下浓缩。分离所需产物N,N-二甲基-3-[5-[(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]-1,3-苯并噻唑-2-基]丙-1-胺(0.3g，950.95μmol，98.80％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值315.2；实测值316.2；Rt＝0.671min。
步骤5：N,N-二甲基-3-(5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)丙-1-胺的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：0.3g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值317.2；实测值318.2；Rt＝0.754min。
步骤6：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(2-(3-(二甲基氨基)丙基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1262)的合成
通过一般程序方案H步骤6B制备。产率：27mg(5.62％)。
HPLC条件：柱：YMC Triart C18 100*20mm，5微米；0-1-6min30-30-80％水-MeOH+0.1％ NH4OH，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeOH)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.01-1.17(m,6H),1.28-1.42(m,1H),1.66-1.76(m,1H),1.83-1.95(m,3H),2.06-2.19(m,7H),2.21-2.33(m,3H),2.33-2.45(m,2H),2.77-3.27(m,3H),3.45-4.07(m,1H),5.23-5.72(m,3H),7.33-7.42(m,1H),7.42-7.54(m,1H),7.82-7.93(m,1H),7.96-8.11(m,2H),10.49-10.63(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值508.2；实测值509.2；Rt＝2.054min。
实施例601.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(1-甲基哌啶-3-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1388)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：32mg(6.75％)。
HPLC条件：柱：YMC Triart C18 100*20mm，5微米；0-1-6min45-45-80％水-MeOH+0.1％ NH4OH，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeOH)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.01-1.14(m,6H),1.29-1.40(m,1H),1.55-1.65(m,2H),1.67-1.76(m,2H),1.83-1.92(m,1H),2.00-2.19(m,3H),2.22(s,3H),2.23-2.33(m,2H),2.34-2.44(m,2H),2.61-3.07(m,4H),3.44-4.07(m,1H),5.24-5.73(m,3H),7.33-7.54(m,2H),7.84-7.92(m,1H),7.97-8.18(m,2H),10.49-10.60(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值520.2；实测值521.2；Rt＝2.114min。
实施例602.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-((2R,4r,6S)-1,2,6-三甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1261)的合成
步骤1：5-氯-2-((2R,4r,6S)-2,6-二甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤1A制备。产率：5.5g(91.96％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值280.2；实测值281.2；Rt＝1.025min。
步骤2：5-氯-2-((2R,4r,6S)-1,2,6-三甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑的合成
将用7-8％ MeOH稳定的37重量％甲醛水溶液(1.18g，39.17mmol，1.09mL)和乙酸(2.35g，39.17mmol，2.24mL)添加到5-氯-2-[(2R,6S)-2,6-二甲基-4-哌啶基]-1,3-苯并噻唑(5.5g，19.59mmol)于MeOH(80mL)中的溶液中。将所得混合物在20℃下搅拌1h，之后向其中添加氰基硼氢化钠(2.46g，39.17mmol)。此后，继续搅拌16h。然后，在减压下移除溶剂且将残余物分配于10％ K2CO3水溶液(40ml)与DCM(60ml)之间。将有机层分离，经固体K2CO3干燥且在减压下浓缩，留下5-氯-2-[(2R,6S)-1,2,6-三甲基-4-哌啶基]-1,3-苯并噻唑(5.8g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值294.2；实测值295.2；Rt＝1.020min。
步骤3：5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-2-((2R,4r,6S)-1,2,6-三甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑的合成
将5-氯-2-[(2R,6S)-1,2,6-三甲基-4-哌啶基]-1,3-苯并噻唑(5.8g，19.67mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(5.74g，22.62mmol)和乙酸钾(3.86g，39.34mmol，2.46mL)一起混合于二噁烷(80mL)中。将反应烧瓶抽真空且用氩气再填充3次。然后，在氩气流下，添加XPhos(1.88g，3.93mmol)和三(二苯亚甲基丙酮)二钯(0)(900.68mg，983.58μmol)。将所得混合物在100℃下搅拌16h。然后，将其在减压下浓缩且通过梯度柱色谱(SiO2，MTBE/MeOH)纯化残余物，得到5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-2-[(2R,6S)-1,2,6-三甲基-4-哌啶基]-1,3-苯并噻唑(4.95g，12.81mmol，65.13％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值386.2；实测值387.2；Rt＝1.060min。
步骤4：(S)-3-甲基-6-(2-((2R,4r,6S)-1,2,6-三甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤3制备。产率：3.7g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值455.2；实测值456.2；Rt＝3.417min。
步骤5：5-((S)-5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)-2-((2R,4r,6S)-1,2,6-三甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤4制备。产率：1.27g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值355.2；实测值356.2；Rt＝0.696min。
步骤6：5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)-2-((2R,4r,6S)-1,2,6-三甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：0.93g(72.82％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值357.2；实测值358.2；Rt＝0.762min。
步骤7：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-((2R,4r,6S)-1,2,6-三甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1261)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：42mg(12.77％)。
HPLC条件：柱：YMC Triart C18 100*20mm，5微米；0-1-5min50-50-90％水-MeOH+0.1％ NH4OH，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeOH)。
通过手性HPLC(柱：Chiralpak IC-III(250*20mm，5mkm)；流动相：IPA-MeOH，50-50；流速：12mL/min)纯化N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-((2R,4r,6S)-1,2,6-三甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺，以获得N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-((2R,4r,6S)-1,2,6-三甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(42mg，78.55μmol，12.77％产率)。
化合物1261于分析条件下(柱：IC，IPA-MeOH，50-50，0.6ml/min为流动相)的保留时间为31.03min。
保留时间：31.03min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.03(t,3H),1.05-1.14(m,9H),1.29-1.40(m,1H),1.52(q,2H),1.65-1.74(m,1H),1.82-1.91(m,1H),2.00-2.12(m,3H),2.17(s,3H),2.18-2.21(m,2H),2.27-2.43(m,3H),2.75-3.28(m,2H),3.44-4.07(m,1H),5.26-5.75(m,3H),7.31-7.54(m,2H),7.84-7.93(m,1H),7.97-8.11(m,2H),10.48-10.61(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值548.2；实测值549.2；Rt＝2.176min。
实施例603.N-(5-乙基-6-甲基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(1-甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1100)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：51mg(16.17％)。
HPLC条件：柱：YMC Triart C18 100*20mm，5微米；0-6min50-85％水-MeOH+0.1％NH4OH；(装载泵4ml/min MeOH)。
化合物1100：
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99-1.08(m,3H),1.08-1.19(m,3H),1.30-1.41(m,1H),1.64-1.88(m,4H),1.90-2.10(m,5H),2.18(s,3H),2.26-2.35(m,1H),2.36-2.42(m,3H),2.52-2.62(m,3H),2.81-2.85(m,2H),3.00-3.10(m,1H),3.44-4.08(m,1H),5.25-5.82(m,1H),7.32-7.43(m,1H),7.76-7.91(m,2H),8.01-8.10(m,1H),8.43-8.59(m,1H),10.91-11.08(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值519.2；实测值520.2；Rt＝2.263min。
实施例604.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(2-(3-((二甲基氨基)甲基)氧杂环丁烷-3-基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1165)的合成
步骤1：2-(3-(叠氮基甲基)氧杂环丁烷-3-基)-5-氯苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤1B制备。产率：11g粗品
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值280.2；实测值281.2；Rt＝3.578min。
步骤2：(3-(5-氯苯并[d]噻唑-2-基)氧杂环丁烷-3-基)甲胺的合成
将2-[3-(叠氮基甲基)氧杂环丁烷-3-基]-5-氯-1,3-苯并噻唑(11g，39.18mmol)(大约50mL)的粗品MTBE溶液用甲醇(100mL)稀释且添加氯化铵(12.58g，235.10mmol，8.22mL)。在搅拌的情况下，在25℃下，将锌粉(7.69g，117.55mmol)分批添加到以上混合物中。将反应混合物在25℃下搅拌12h，然后过滤。将滤饼用MeOH(2*25mL)洗涤且丢弃。将合并的滤液在真空中浓缩。将残余物用MTBE(100mL)稀释且用5％硫酸氢钠水溶液(100mL)萃取。然后将所得硫酸氢胺(amine hydrogen sulphate)水溶液用10％氢氧化钠水溶液碱化至pH11且用DCM(2*50mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中浓缩，以得到呈淡黄色胶状物的粗品[3-(5-氯-1,3-苯并噻唑-2-基)氧杂环丁烷-3-基]甲胺(1.2g，4.71mmol，12.02％产率)，其直接用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值254.2；实测值255.2；Rt＝1.985min。
步骤3：1-(3-(5-氯苯并[d]噻唑-2-基)氧杂环丁烷-3-基)-N,N-二甲基甲胺的合成
在25℃下，将用7-8％ MeOH稳定的37重量％甲醛水溶液(946.16mg，11.66mmol，873.64μL，37％纯度)和乙酸(518.63mg，8.64mmol，494.41μL)添加到[3-(5-氯-1,3-苯并噻唑-2-基)氧杂环丁烷-3-基]甲胺(1.1g，4.32mmol)于MeOH(30.49mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在25℃下搅拌1h，然后在25℃下一次性添加氰基硼氢化钠(542.73mg，8.64mmol)(发泡！)。将反应混合物在25℃下搅拌12h，然后在真空中浓缩。将残余物用10％氢氧化钠水溶液(20mL)稀释且用DCM(2*20mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中浓缩，以得到呈淡黄色胶状物的粗品1-[3-(5-氯-1,3-苯并噻唑-2-基)氧杂环丁烷-3-基]-N,N-二甲基甲胺(1.3g，粗品)，其直接用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值282.2；实测值283.2；Rt＝1.530min。
步骤4：N,N-二甲基-1-(3-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)氧杂环丁烷-3-基)甲胺的合成
将1-[3-(5-氯-1,3-苯并噻唑-2-基)氧杂环丁烷-3-基]-N,N-二甲基甲胺(1.4g，4.95mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(1.38g，5.45mmol)和乙酸钾(971.72mg，9.90mmol，618.93μL)于二噁烷(35mL)中的混合物抽真空，然后用氩气回填。将此操作重复两次，然后在氩气下添加三(1,5-二苯基戊-1,4-二烯-3-酮)二钯(226.67mg，247.53μmol)和二环己基[2',4',6'-三(丙-2-基)-[1,1'-联苯基]-2-基]磷烷(472.02mg，990.14μmol)，且将反应混合物在95℃下搅拌18h。冷却反应混合物且过滤。将滤饼用二噁烷(2*10mL)洗涤且丢弃。将合并的滤液在真空中浓缩。将残余物用DCM(30mL)稀释且用硫酸氢钠(1.19g，9.90mmol)于水(20mL)中的溶液萃取(重复两次)。将合并的水层用10％氢氧化钠水溶液碱化至pH 10且用DCM(3*25mL)反萃取。两种DCM萃取物的蒸发未显示所需产物。似乎硼酸酯在水性介质中水解且呈硼酸留在水相中。合并的水层(大约100mL)含有N,N-二甲基-1-[3-[5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噻唑-2-基]氧杂环丁烷-3-基]甲胺(1.85g，4.94mmol，100.00％产率)(理论量的产物，最可能呈硼酸形式)，其直接用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值374.2；实测值375.2；Rt＝2.586min。
步骤5：(S)-6-(2-(3-((二甲基氨基)甲基)氧杂环丁烷-3-基)苯并[d]噻唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤3制备。产率：1.3g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值443.2；实测值444.2；Rt＝1.279min。
步骤6：(S)-N,N-二甲基-1-(3-(5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)氧杂环丁烷-3-基)甲胺的合成
通过一般程序方案H步骤4制备。产率：450mg粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值343.2；实测值344.2；Rt＝0.624min。
步骤7：N,N-二甲基-1-(3-(5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)氧杂环丁烷-3-基)甲胺的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：330mg(72.91％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值345.2；实测值346.2；Rt＝0.574min。
步骤8：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(2-(3-((二甲基氨基)甲基)氧杂环丁烷-3-基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1165)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：47mg(23.27％)。
HPLC条件：柱：YMC Triart C18 100*20mm，5微米；0-1-6min30-30-60％水-MeCN+0.1％ NH4OH，流速：30mL/min；(装载泵4mL/min MeCN)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.02-1.14(m,6H),1.31-1.43(m,1H),1.67-1.77(m,1H),1.85-1.93(m,1H),2.04-2.31(m,8H),2.33-2.43(m,2H),2.78-3.26(m,3H),3.47-4.09(m,1H),4.74(d,2H),4.95(d,2H),5.28-5.74(m,3H),7.36-7.44(m,1H),7.45-7.54(m,1H),7.92-8.10(m,3H),10.37(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值536.2；实测值537.2；Rt＝1.983min。
实施例605.N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,4S,5R)-2-[3-[2-(二甲基氨基)乙氧基]苯基]-4-甲氧基-5-甲基-1-哌啶基]乙酰胺(化合物1139)和N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,4R,5R)-2-[3-[2-(二甲基氨基)乙氧基]苯基]-4-甲氧基-5-甲基-1-哌啶基]乙酰胺(化合物1172)的合成
步骤1：外消旋-(6R,9R)-9-(3-溴苯基)-6-甲基-1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷的合成
将3-溴苯甲醛(2.80g，15.15mmol，1.77mL)和2-(2-甲基-1,3-二氧环戊烷-2-基)丙-1-胺(2.2g，15.15mmol)溶解于甲苯(35mL)中且添加对甲苯磺酸单水合物(8.65g，45.45mmol，6.97mL)。将所得混合物以迪安-斯塔克分离器回流过夜。将反应混合物冷却且用K2CO3水溶液(10g于60mL水中)碱化。将所得混合物用EtOAc(2*75mL)萃取且将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤且在真空中浓缩。将残余物溶解于CHCl3(75mL)中且将所得溶液用NaHSO4水溶液(2.5g于25mL中，两次)萃取。将合并的水层用CHCl3(2*45mL)洗涤且用K2CO3水溶液(10g于30mL水中)碱化。将所得混合物用CHCl3(2*50mL)萃取且将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩，以获得外消旋-(6R,9R)-9-(3-溴苯基)-6-甲基-1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷(2.5g，8.01mmol，52.85％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值312.0；实测值312.0；Rt＝0.804min。
步骤2：外消旋-(2R,5R)-2-(3-溴苯基)-5-甲基哌啶-4-酮的合成
将外消旋-(6R,9R)-9-(3-溴苯基)-6-甲基-1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷(2.5g，8.01mmol)溶解于6N HCl(40mL)中且将所得混合物在80℃下加热过夜。将反应混合物冷却，转移至分液漏斗且用EtOAc(2*40mL)洗涤。将水层用K2CO3中和。将所得混合物用EtOAc(2*50mL)萃取且将合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤且在真空中浓缩，以获得外消旋-(2R,5R)-2-(3-溴苯基)-5-甲基哌啶-4-酮(1.56g，5.83mmol，72.84％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值268.0；实测值268.0；Rt＝0.668min。
步骤3：外消旋-(2R,5R)-2-(3-溴苯基)-5-甲基-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将外消旋-(2R,5R)-2-(3-溴苯基)-5-甲基哌啶-4-酮(1.56g，5.83mmol)和三乙胺(885.30mg，8.75mmol，1.22mL)溶解于DCM(20mL)中且逐滴添加二碳酸二-叔丁酯(1.46g，6.71mmol，1.54mL)于DCM(5mL)中的溶液。将所得混合物搅拌过夜。在真空中浓缩反应混合物且将残余物再溶解于DCM(50mL)中。将所得溶液用NaHSO4溶液(45mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩。通过柱色谱(梯度，于己烷中的EtOAc，0至50％)纯化残余物，以获得外消旋-(2R,5R)-2-(3-溴苯基)-5-甲基-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(377mg，1.02mmol，17.55％产率)和外消旋-(2R,5R)-2-(3-溴苯基)-5-甲基-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.14g，3.09mmol，52.98％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.16(d,3H),1.45(s,9H),2.45(m,1H),2.84-2.92(m,2H),3.64(m,1H),3.77(m,1H),5.48(m,1H),7.14-7.18(m,2H),7.36(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M-tBu]+m/z：计算值314.2；实测值314.2；Rt＝1.536min。
步骤4：外消旋-(2R,5R)-2-(3-溴苯基)-4-羟基-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将外消旋-(2R,5R)-2-(3-溴苯基)-5-甲基-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.14g，3.09mmol)溶解于MeOH(15mL)中且将所得溶液在冰浴中冷却至0℃。将硼氢化钠(175.36mg，4.64mmol，163.28μL)添加到先前溶液中且使所得混合物升温至室温且搅拌过夜。添加水(10mL)且将所得混合物在真空中浓缩。将所得混合物用DCM(2*35mL)萃取且将合并的有机层用水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤且在真空中浓缩，以获得外消旋-(2R,5R)-2-(3-溴苯基)-4-羟基-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.15g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值272.0；实测值272.0；Rt＝1.416min。
步骤5：外消旋-(2R,5R)-2-(3-溴苯基)-4-甲氧基-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将外消旋-(2R,5R)-2-(3-溴苯基)-4-羟基-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.15g，3.09mmol)溶解于DMF(10mL)中且分批添加于矿物油中的氰化钠(油分散体)60％分散物(355.45mg，9.28mmol，60％纯度)。将所得混合物搅拌1h且一次性添加碘甲烷(1.32g，9.28mmol，577.51μL)。将所得混合物搅拌过夜。将反应混合物倒入到水(50mL)中且将所得混合物用MTBE(2*50mL)萃取。将合并的有机层用水(3*50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤且在真空中浓缩，以获得外消旋-(2R,5R)-2-(3-溴苯基)-4-甲氧基-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.26g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M-tBu]+m/z：计算值328.2；实测值328.2；Rt＝1.667min。
步骤6：外消旋-(2R,5R)-4-甲氧基-5-甲基-2-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成将外消旋-(2R,5R)-2-(3-溴苯基)-4-甲氧基-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.26g，3.27mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(871.42mg，3.43mmol)混合于二噁烷(16mL)中且向其中添加乙酸钾(801.88mg，8.17mmol，510.75μL)。将所得混合物抽真空且用氩气回填三次，且添加Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2(133.45mg，163.41μmol)。将所得混合物在100℃下加热过夜。在真空中浓缩反应混合物且将水(35mL)添加到残余物中。将所得混合物用MTBE(2*50mL)萃取且将合并的有机层用水(25mL)、盐水(25mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩，以获得外消旋-(2R,5R)-4-甲氧基-5-甲基-2-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.79g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值377.2；实测值377.2；Rt＝4.523min。
步骤7：外消旋-(2R,5R)-2-(3-羟基苯基)-4-甲氧基-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将外消旋-(2R,5R)-4-甲氧基-5-甲基-2-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.79g，4.14mmol)溶解于THF(16mL)中且向其中小心添加35％过氧化氢(603.56mg，6.21mmol，548.69μL，35％纯度)。添加完成之后，将所得混合物搅拌1h且添加氢氧化钠珠粒水溶液(264.96mg，6.62mmol，124.39μL)。添加完成之后，将所得混合物搅拌1h。将反应混合物用柠檬酸酸化且将所得混合物转移至分液漏斗。将有机层分离且将水层用MTBE(2*50mL)萃取。将合并的有机层用亚硫酸钠水溶液洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩，以获得外消旋-(2R,5R)-2-(3-羟基苯基)-4-甲氧基-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.51g，粗品)，其不经纯化即用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值222.2；实测值222.2；Rt＝1.362min。
步骤8：外消旋-(2R,5R)-2-[3-[2-(二甲基氨基)乙氧基]苯基]-4-甲氧基-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将外消旋-(2R,5R)-2-(3-羟基苯基)-4-甲氧基-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.51g，4.71mmol)、2-溴-N,N-二甲基乙胺(5.49g，23.55mmol，HBr)和碳酸铯(7.67g，23.55mmol)一起混合于DMF(15mL)中且将所得混合物在60℃下加热过夜。将反应混合物倒入到水(50mL)中且将所得混合物用EtOAc(3*50mL)萃取。将合并的有机层用水(3*50mL)、盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩。将残余物(1.109g)再溶解于DMF(15mL)中且向其中添加叔丁醇钾(2.38g，21.20mmol)，随后添加2-溴-N,N-二甲基乙胺；HBr(2.19g，9.42mmol)。将所得混合物在90℃下加热过夜。通过等分试样的LCMS，留下5％起始材料。将1.1g 2-溴-N,N-二甲基乙胺(HBr)和1.2g叔丁醇钾添加到反应混合物中且将所得混合物在90℃下加热过夜。将反应混合物倒入到水(50mL)中且将所得混合物用MTBE(3*50mL)萃取。将合并的有机层用水(3*50mL)、盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩，以获得外消旋-(2R,5R)-2-[3-[2-(二甲基氨基)乙氧基]苯基]-4-甲氧基-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.05g，2.67mmol，56.79％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值393.2；实测值393.2；Rt＝1.015min。
步骤9：N,N-二甲基-2-[3-[外消旋-(2R,5R)-4-甲氧基-5-甲基-2-哌啶基]苯氧基]乙胺的合成
将外消旋-(2R,5R)-2-[3-[2-(二甲基氨基)乙氧基]苯基]-4-甲氧基-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.05g，2.67mmol)溶解于DCM(4mL)中且添加TFA(4mL)。搅拌所得混合物1h。将反应混合物倒入到K2CO3水溶液(10g于45mL水中)且将所得混合物用DCM(2*45mL)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩，以获得N,N-二甲基-2-[3-[外消旋-(2R,5R)-4-甲氧基-5-甲基-2-哌啶基]苯氧基]乙胺(851mg，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值293.2；实测值293.2；Rt＝0.474min。
步骤10：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,4S,5R)-2-[3-[2-(二甲基氨基)乙氧基]苯基]-4-甲氧基-5-甲基-1-哌啶基]乙酰胺(化合物1139)和N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,4R,5R)-2-[3-[2-(二甲基氨基)乙氧基]苯基]-4-甲氧基-5-甲基-1-哌啶基]乙酰胺(化合物1172)的合成
将N,N-二甲基-2-[3-[外消旋-(2R,5R)-4-甲氧基-5-甲基-2-哌啶基]苯氧基]乙胺(334mg，1.14mmol)、2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(238.95mg，1.14mmol)和三乙胺(577.90mg，5.71mmol，796.01μL)一起混合于DMF(3mL)中且向其中添加HATU(521.16mg，1.37mmol)。将所得混合物搅拌过夜。将反应混合物提交至HPLC且纯化(2-10min；0-25％水/MeOH+NH3 30mL/min；装载泵4mL/min MeOH+NH3；柱SunFire 19*100mm，5um)，以获得N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,4S,5R)-2-[3-[2-(二甲基氨基)乙氧基]苯基]-4-甲氧基-5-甲基-1-哌啶基]乙酰胺(101.7mg，210.30μmol，18.41％产率)和N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,4R,5R)-2-[3-[2-(二甲基氨基)乙氧基]苯基]-4-甲氧基-5-甲基-1-哌啶基]乙酰胺(54mg，111.66μmol，9.78％产率)。
化合物1139：产率：101.7mg(18.41％)nLCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值485.2；实测值485.2；Rt＝1.806min。
化合物1172：产率：54.0mg(9.78％)LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值485.2；实测值485.2；Rt＝1.813min。
实施例606.N-(5,6-二甲基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(1-甲基氮杂环丁烷-3-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1123)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：47.5mg(13.63％)。
HPLC条件：柱：XBridge C18 100*19mm，5微米；0-5min 30-80％水-MeOH+0.1％NH4OH；(装载泵4mL/min MeOH)。
1H NMR(500MHz,dmso)δ1.01-1.06(m,3H),1.30-1.41(m,1H),1.66-1.76(m,1H),1.81-1.92(m,1H),2.04-2.14(m,1H),2.15-2.32(m,8H),2.34-2.39(m,3H),2.78-3.06(m,1H),3.44-4.06(m,5H),5.24-5.76(m,1H),7.34-7.45(m,1H),7.72-7.85(m,1H),7.87-7.94(m,1H),8.02-8.10(m,1H),8.40-8.54(m,1H),10.81-11.10(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值477.2；实测值478.2；Rt＝2.209min。
实施例607.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(1,2,2-三甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1183、化合物1397和化合物1129)的合成
步骤1：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(1,2,2-三甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：94mg(24.65％)。
HPLC条件：柱：YMC Triart C18 100*20mm，5微米；0-1-5min50-50-90％水-MeOH+0.1％ NH4OH，流速：30mL/min；(装载泵4mL/min MeOH)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值548.2；实测值549.2；Rt＝1.860min。
步骤2：手性分离(化合物1183、化合物1397和化合物1129)
对外消旋N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(1,2,2-三甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(0.079g，147.74μmol)进行手性分离(柱：Chiralpak IA(250x 20mm，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH，40-30-30流速：12mL/min)，以获得N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(rel-(S)-1,2,2-三甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(0.0364g，68.07μmol，92.15％产率)(RT＝45.37)和N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(rel-(R)-1,2,2-三甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(0.0389g，72.75μmol，98.48％产率)(RT＝34.77)。
化合物1183于分析条件下(柱：IA，以己烷-IPA-MeOH，40-30-30，0.6mL/min为流动相)的保留时间为46.41min且化合物1129的保留时间为35.14min。
通过手性HPLC(柱：Chiralcel OD-H(250*20mm，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH70-15-15；流速：12mL/min)进一步纯化30mg化合物1183，得到N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(2-((S)-2,2-二甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(19mg，35.53μmol，48.10％产率)(RT＝17.56)。
化合物1397于分析条件下(柱：OD-H，以己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.6mL/min为流动相)的保留时间为13.69min。
化合物1183：1H NMR(500MHz,dmso)δ0.98-1.05(m,6H),1.06-1.16(m,6H),1.30-1.41(m,1H),1.62-1.77(m,3H),1.82-1.94(m,2H),1.99-2.11(m,2H),2.20(s,3H),2.25-2.35(m,2H),2.38-2.43(m,2H),2.56-2.71(m,2H),2.75-3.20(m,1H),3.45-4.07(m,1H),5.25-5.60(m,1H),5.62-5.74(m,2H),7.31-7.42(m,1H),7.42-7.56(m,1H),7.83-7.92(m,1H),7.95-8.12(m,2H),10.51-10.63(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值548.2；实测值549.2；Rt＝0.755min。
化合物1397：1H NMR(500MHz,dmso)δ0.98-1.05(m,6H),1.06-1.16(m,6H),1.30-1.41(m,1H),1.62-1.77(m,3H),1.82-1.94(m,2H),1.99-2.11(m,2H),2.20(s,3H),2.25-2.35(m,2H),2.38-2.43(m,2H),2.56-2.71(m,2H),2.75-3.20(m,1H),3.45-4.07(m,1H),5.25-5.60(m,1H),5.62-5.74(m,2H),7.31-7.42(m,1H),7.42-7.56(m,1H),7.83-7.92(m,1H),7.95-8.12(m,2H),10.51-10.63(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值548.2；实测值549.2；Rt＝2.426min。
化合物1129：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.97-1.00(m,3H),1.02-1.09(m,4H),1.09-1.15(m,5H),1.29-1.42(m,1H),1.60-1.78(m,3H),1.83-1.93(m,2H),1.99-2.16(m,2H),2.16(s,3H),2.21-2.37(m,2H),2.39-2.43(m,1H),2.52-2.58(m,2H),2.60-2.67(m,1H),2.77-3.24(m,1H),3.48-4.07(m,1H),5.19-5.62(m,1H),5.61-5.72(m,2H),7.31-7.43(m,1H),7.42-7.57(m,1H),7.84-7.92(m,1H),7.97-8.11(m,2H),10.48-10.66(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值548.2；实测值549.2；Rt＝2.257min。
实施例608.N-(5,6-二甲基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(1,2,2-三甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1215和化合物1113)的合成
步骤1：N-(5,6-二甲基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(1,2,2-三甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：81mg(36.18％)。
HPLC条件：柱：XBridge C18 100*19mm，5微米；0-6min 60-75％水-MeOH+0.1％NH4OH，流速：30mL/min；(装载泵4mL/min MeCN)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值533.2；实测值534.2；Rt＝1.881min。
步骤2：手性分离(化合物1215和化合物1113)
对外消旋N-(5,6-二甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1,2,2-三甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰胺(0.081g，151.76μmol)进行手性分离(柱：Chiralpak IA-III(250-20mm-5m)；流动相：IPA-MeOH，50-50流速：12mL/min)，以获得N-(5,6-二甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[(4R)-1,2,2-三甲基-4-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰胺(0.031g，58.08μmol，38.27％产率)和N-(5,6-二甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[(4S)-1,2,2-三甲基-4-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰胺(0.05775g，124.60umol，50.22％产率)。
化合物1215于分析条件下(柱：IA，以IPA-MeOH，50-50，0.6mL/min为流动相)的保留时间为61.75min且化合物1113的保留时间为27.05min。
化合物1215：保留时间：61.75min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98(s,3H),1.00-1.06(m,3H),1.10(s,3H),1.30-1.41(m,1H),1.59-1.65(m,1H),1.66-1.77(m,2H),1.83-1.92(m,2H),1.98-2.13(m,2H),2.15(s,3H),2.16-2.25(m,3H),2.28-2.38(m,4H),2.52-2.62(m,3H),2.80-3.26(m,1H),3.44-4.05(m,1H),5.23-5.74(m,1H),7.32-7.44(m,1H),7.71-7.84(m,1H),7.85-7.92(m,1H),8.00-8.08(m,1H),8.39-8.53(m,1H),10.72-11.13(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值533.2；实测值534.2；Rt＝2.106min。
化合物1113：保留时间：27.05min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98(s,3H),1.00-1.07(m,3H),1.11(s,3H),1.30-1.41(m,1H),1.58-1.65(m,1H),1.65-1.76(m,2H),1.81-1.93(m,2H),1.98-2.13(m,2H),2.14-2.19(m,4H),2.24(s,2H),2.29-2.38(m,4H),2.52-2.62(m,3H),2.81-3.27(m,1H),3.43-4.05(m,1H),5.23-5.73(m,1H),7.33-7.43(m,1H),7.72-7.84(m,1H),7.86-7.92(m,1H),8.01-8.08(m,1H),8.39-8.55(m,1H),10.69-11.19(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值533.2；实测值534.2；Rt＝2.108min。
实施例609.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(2-((R)-2-(二甲基氨基)丙基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1198)的合成
步骤1：(R)-1-(5-氯苯并[d]噻唑-2-基)-N,N-二甲基丙-2-胺的合成
使(3R)-3-(二甲基氨基)丁酸(1g，7.62mmol)和2-氨基-4-氯苯硫酚(1g，6.26mmol)于PPA(5mL)的搅拌溶液在120℃下搅拌24h。完成之后，将反应混合物用水(50mL)萃取且通过NaOH中和至pH＝8。将水相用EtOAc(2*20mL)萃取。将合并的有机相经Na2SO4干燥且在减压下浓缩。通过硅胶柱色谱使用MeOH/EtOAc(1:5，v:v)作为洗脱液(Rt＝0.2)纯化粗产物，以得到(2R)-1-(5-氯-1,3-苯并噻唑-2-基)-N,N-二甲基丙-2-胺(0.7g，2.75mmol，43.86％产率)。分离所需产物(2R)-1-(5-氯-1,3-苯并噻唑-2-基)-N,N-二甲基丙-2-胺(0.7g，2.75mmol，43.86％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值254.2；实测值255.2；Rt＝0.934min。
步骤2：(R)-N,N-二甲基-1-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)丙-2-胺的合成
向(2R)-1-(5-氯-1,3-苯并噻唑-2-基)-N,N-二甲基丙-2-胺(0.7g，2.75mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(0.7g，2.76mmol)于二噁烷(30mL)中的搅拌溶液中添加Pd2(dba)3(0.5g，546.03μmol)和XPhos(0.5g，1.05mmol)。将所得悬浮液在50℃下用氩气脱气0.5h。添加乙酸钾(0.55g，5.60mmol，350.32μL)。将反应混合物在100℃下搅拌16h。完成之后，将反应混合物在减压下浓缩，用水(50mL)萃取，将水相用CHCl3(2*50mL)萃取。将有机相用10％ HCl(2*50mL)萃取。将水相通过NaHCO3中和至pH＝8，用CHCl3(2*50mL)萃取。将有机相经Na2SO4干燥且在真空中蒸发。分离所需产物(2R)-N,N-二甲基-1-[5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噻唑-2-基]丙-2-胺(0.4g，1.16mmol，42.04％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值346.2；实测值347.2；Rt＝1.182min。
步骤3：(S)-6-(2-((R)-2-(二甲基氨基)丙基)苯并[d]噻唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤3制备。产率：0.48g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值415.2；实测值416.2；Rt＝1.151min。
步骤4：(R)-N,N-二甲基-1-(5-((S)-5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)丙-2-胺的合成
使外消旋-(3S)-3-甲基-6-[2-[外消旋-(2R)-2-(二甲基氨基)丙基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(0.48g，1.15mmol)于MeOH(10mL)和二噁烷/HCl(5mL)中的搅拌溶液在25℃下搅拌16h。完成之后，将反应混合物蒸发，将粗产物用水(20mL)萃取且通过NaHCO3中和至pH＝8。将水相用CHCl3(2*20mL)萃取。将合并的有机相经Na2SO4干燥且在减压下浓缩。分离所需产物外消旋-(2R)-N,N-二甲基-1-[5-[外消旋-(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]-1,3-苯并噻唑-2-基]丙-2-胺(0.36g，1.14mmol，98.80％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值315.2；实测值316.2；Rt＝0.478min。
步骤5：(R)-N,N-二甲基-1-(5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)丙-2-胺的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：0.36g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值317.2；实测值318.2；Rt＝0.697min。
步骤6：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(2-((R)-2-(二甲基氨基)丙基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1198)的合成
通过一般程序方案H步骤6B制备。产率：24mg(8.32％)。
HPLC条件：柱：XBridge C18 100*19mm，5微米；0-5min 35-60％水-MeCN+0.1％NH4OH，流速：30mL/min；(装载泵4mL/min MeOH)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.95-1.09(m,6H),1.30-1.42(m,1H),1.66-1.75(m,1H),1.83-1.93(m,1H),2.05-2.34(m,8H),2.81-3.27(m,4H),3.48-4.09(m,4H),5.27-5.74(m,1H),7.28-7.42(m,1H),7.65-7.77(m,2H),7.83-7.90(m,1H),7.99-8.05(m,1H),8.39-8.60(m,2H),10.99-11.15(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值508.2；实测值509.2；Rt＝1.854min。
实施例610.5-(2-((2R,5S)-2-(2-((R)-2-(二甲基氨基)丙基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-2-甲氧基烟酰胺(化合物1317)的合成
步骤6：5-(2-((2R,5S)-2-(2-((R)-2-(二甲基氨基)丙基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-2-甲氧基烟酰胺(化合物1317)的合成
通过一般程序方案H步骤6B制备。产率：22mg(6.60％)。
HPLC条件：柱：XBridge C18 100*19mm，5微米；0-5min 40-80％水-MeOH+0.1％NH4OH，流速：30mL/min；(装载泵4mL/min MeOH)。
通过手性HPLC自顺式杂质纯化产物(柱：Chiralpak IC(250，20mm，5mkm)；流动相：IPA-MeOH，50-50；流速：10mL/min)(RT＝54.03min)。
化合物1317：保留时间：39.98min
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值538.2；实测值539.2；Rt＝2.215min。
实施例611.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(2-(1,4-二甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1171)的合成
步骤1：5-氯-2-(1,4-二甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑胺的合成
通过一般程序方案H步骤1A制备。产率：3g(41.38％)。
CC条件：通过硅胶使用MeCN/MeOH(梯度10-100％ MeOH)作为洗脱液混合物来纯化粗产物。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值280.2；实测值281.2；Rt＝1.529min。
步骤2：2-(1,4-二甲基哌啶-4-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑的合成
将三(二苯亚甲基丙酮)二钯(0)(652.18mg，712.21μmol)和XPhos(1.36g，2.85mmol)添加到5-氯-2-(1,4-二甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑(4g，14.24mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(4.70g，18.52mmol)于二噁烷(60.00mL)中的溶液中。将反应烧瓶抽真空且用氩气再填充3次。然后在氩气流下添加乙酸钾(2.80g，28.49mmol，1.78mL)。在惰性气氛下，将所得混合物在100℃下搅拌15h，然后冷却且在真空中蒸发，倒入到水(120mL)中且用DCM(2x50 mL)萃取，经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到2-(1,4-二甲基-4-哌啶基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噻唑(0.9g，2.42mmol，16.97％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值372.2；实测值373.2；Rt＝3.119min。
步骤3：(S)-6-(2-(1,4-二甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤3制备。产率：1.3g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值441.2；实测值442.2；Rt＝1.289min。
步骤4：(S)-2-(1,4-二甲基哌啶-4-基)-5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤4制备。产率：0.7g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值341.2；实测值342.2；Rt＝0.724min。
步骤5：2-(1,4-二甲基哌啶-4-基)-5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：0.55g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值343.2；实测值344.2；Rt＝1.772min。
步骤6：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(2-(1,4-二甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1171)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：31.4mg(13.45％)。
HPLC条件：柱：XBridge C18 100*19mm，5微米；0-6min 35-70％水-MeCN+0.1％NH4OH，流速：30mL/min；(装载泵4mL/min MeOH)。
1H NMR(600MHz,dmso)δ0.98-1.06(m,3H),1.06-1.15(m,3H),1.31-1.40(m,4H),1.67-1.75(m,1H),1.78-1.93(m,3H),2.01-2.11(m,1H),2.12-2.17(m,3H),2.17-2.32(m,5H),2.32-2.38(m,2H),2.38-2.44(m,2H),2.77-3.26(m,1H),3.43-4.11(m,1H),5.26-5.61(m,1H),5.62-5.75(m,2H),7.35-7.43(m,1H),7.43-7.53(m,1H),7.85-7.93(m,1H),7.98-8.11(m,2H),10.49-10.68(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值534.2；实测值535.2；Rt＝2.430min。
实施例612.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(四氢呋喃-3-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1242)的合成
步骤1：四氢呋喃-3-羰基氯的合成
向四氢呋喃-3-甲酸(3g，25.84mmol)于DCM(100mL)中的搅拌溶液中添加DMF(1.89mg，25.84umol，2.00uL)，随后添加草酰氯(9.84g，77.51mmol，6.74mL)。将所得混合物在25℃下搅拌3h。在真空中蒸发DCM，以得到四氢呋喃-3-羰基氯(3.2g，23.78mmol，92.04％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)2.22(m,1H),2.31(m,1H),3.54(m,1H),3.82(m,1H),3.95(m,2H),4.09(m,1H)。
步骤2：5-溴-2-(四氢呋喃-3-基)苯并[d]噻唑的合成
向四氢呋喃-3-羰基氯(3.16g，23.52mmol)于NMP(15mL)中的搅拌溶液中添加2-氨基-4-溴苯硫酚(4g，19.60mmol)。将所得混合物在100℃下搅拌14h。反应混合物的LCMS分析显示完全转化。将反应混合物倒入到水中且用MTBE(3*50ml)萃取。将合并的有机层用水和盐水洗涤，经Na2SO4干燥。在真空中蒸发MTBE，以得到粗品5-溴-2-四氢呋喃-3-基-1,3-苯并噻唑(4.5g，15.84mmol，80.80％产率)，其不经纯化即用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值284.2；实测值285.2；Rt＝1.408min。
步骤3：2-(四氢呋喃-3-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤2制备。产率：4.8g(91.51％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值331.2；实测值332.2；Rt＝1.566min。
步骤4：(3S)-3-甲基-6-(2-(四氢呋喃-3-基)苯并[d]噻唑-5-基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤3制备。产率：0.5g(8.61％)。
CC条件：通过硅胶使用己烷/MTBE作为洗脱液混合物来纯化粗产物。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值400.2；实测值401.2；Rt＝1.562min。
步骤5：5-((S)-5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)-2-(四氢呋喃-3-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤4制备。产率：350mg(93.33％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值300.2；实测值301.2；Rt＝0.774min。
步骤6：5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)-2-(四氢呋喃-3-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：0.25g(70.95％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值302.2；实测值303.2；Rt＝0.787min。
步骤7：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(四氢呋喃-3-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1242)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：127mg(38.91％)。
HPLC条件：柱：YMC Triart C18 100*20mm，5微米；0-5min50-100％水-MeOH+0.1％ NH4OH；(装载泵4mL/min MeOH)。
1H NMR(600MHz,dmso)δ1.00-1.05(m,3H),1.06-1.15(m,3H),1.30-1.41(m,1H),1.65-1.75(m,1H),1.81-1.93(m,1H),2.04-2.18(m,1H),2.20-2.32(m,2H),2.32-2.36(m,1H),2.39-2.44(m,2H),2.76-3.27(m,1H),3.34-3.51(m,1H),3.80-3.85(m,1H),3.90-3.98(m,3H),4.07-4.13(m,1H),5.26-5.61(m,1H),5.61-5.75(m,2H),7.33-7.43(m,1H),7.43-7.55(m,1H),7.84-7.92(m,1H),7.97-8.09(m,2H),10.49-10.71(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值493.2；实测值494.2；Rt＝2.640min。
实施例613.N-(5,6-二甲基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(1,2,2,6,6-五甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1315)的合成
步骤1：5-氯-2-(2,2,6,6-四甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑(化合物1315)的合成
通过一般程序方案H步骤1A制备。产率：3.75g(40.80％)。
CC条件：通过硅胶使用MTBE/MeOH作为洗脱液混合物来纯化粗产物。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值308.2；实测值309.2；Rt＝1.063min。
步骤2：5-氯-2-(1,2,2,6,6-五甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑的合成
将甲苯磺酸甲酯(2.35g，12.64mmol，1.91mL)和碳酸钾(3.18g，22.99mmol，1.39mL)添加到5-氯-2-(2,2,6,6-四甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑(3.55g，11.49mmol)于MeCN(50mL)中的溶液中。将所得混合物在80℃下搅拌48h。然后，在减压下移除溶剂。将残余物悬浮于MTBE(60ml)中，过滤且在真空中浓缩，留下5-氯-2-(1,2,2,6,6-五甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑(3.89g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值322.2；实测值323.2；Rt＝1.071min。
步骤3：2-(1,2,2,6,6-五甲基哌啶-4-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑的合成
将5-氯-2-(1,2,2,6,6-五甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑(3.89g，12.05mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(3.52g，13.85mmol)和乙酸钾(2.36g，24.09mmol，1.51mL)一起混合于二噁烷(60mL)中。将反应烧瓶抽真空且用氩气再填充3次。然后，在氩气流下，添加XPhos(1.15g，2.41mmol)和三(二苯亚甲基丙酮)二钯(0)(551.60mg，602.36μmol)。将所得混合物在100℃下搅拌16h。然后，将其在减压下浓缩且通过梯度柱色谱(SiO2，MTBE/MeOH)纯化残余物，得到2-(1,2,2,6,6-五甲基-4-哌啶基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噻唑(3g，7.24mmol，60.09％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值414.2；实测值415.2；Rt＝1.144min。
步骤4：(S)-3-甲基-6-(2-(1,2,2,6,6-五甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤3制备。产率：3.6g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值483.2；实测值484.2；Rt＝1.398min。
步骤5：(S)-5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)-2-(1,2,2,6,6-五甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤4制备。产率：1.2g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值383.2；实测值384.2；Rt＝0.753min。
步骤6：5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)-2-(1,2,2,6,6-五甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：0.92g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值385.2；实测值386.2；Rt＝0.796min。
N-(5,6-二甲基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(1,2,2,6,6-五甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1315)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：33.7mg(14.30％)。
HPLC条件：柱：YMC Triart C18 100*20mm，5微米；0-1-6min70-70-85％水-MeOH+0.1％ NH4OH；(装载泵4mL/min MeOH)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.01-1.06(m,3H),1.06-1.09(m,6H),1.10-1.14(m,6H),1.31-1.41(m,1H),1.59-1.76(m,3H),1.82-1.98(m,3H),2.07-2.19(m,2H),2.21(s,3H),2.24(s,2H),2.28-2.38(m,4H),2.80-3.28(m,1H),3.43-4.05(m,2H),5.24-5.73(m,1H),7.34-7.44(m,1H),7.71-7.85(m,1H),7.85-7.92(m,1H),8.02-8.09(m,1H),8.37-8.54(m,1H),10.90-11.03(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值561.2；实测值562.2；Rt＝2.465min。
实施例614.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(2-((3-(二甲基氨基)氧杂环丁烷-3-基)甲基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1399)的合成
步骤1：((5-氯苯并[d]噻唑-2-基)甲基)三苯基鏻的合成
将三苯基磷烷(4.01g，15.29mmol)添加到5-氯-2-(氯甲基)-1,3-苯并噻唑(2.9g，13.30mmol)于MeCN(50mL)中的溶液中。将所得混合物在80℃下搅拌24h。然后，在减压下移除溶剂。将残余物用冷MTBE(60mL)研磨。过滤所沉淀的棕色固体且干燥，得到(5-氯-1,3-苯并噻唑-2-基)甲基三苯基鏻(5.16g，10.74mmol，80.78％产率，Cl-)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值480.2；实测值481.2；Rt＝1.358min。
步骤2：3-((5-氯苯并[d]噻唑-2-基)甲基)-N,N-二甲基氧杂环丁烷-3-胺的合成
将叔丁醇钾(991.15mg，8.83mmol)添加到(5-氯-1,3-苯并噻唑-2-基)甲基三苯基鏻(4.16g，8.66mmol，Cl-)于THF(80mL)中的悬浮液中。在20℃下搅拌2.5h之后，向其中添加氧杂环丁烷-3-酮(686.44mg，9.53mmol，610.71μL)且将所得混合物再搅拌2.5h。然后，添加于THF中的17％二甲胺溶液(9.19g，34.64mmol，17％纯度)且将所得混合物在50℃下搅拌18h。此后，在减压下移除溶剂且将固体残余物用5％ NaHSO4水溶液(2x60 mL)彻底萃取。过滤出不溶性三苯基膦氧化物且将滤液用DCM(20mL)洗涤。分离水层且将其用固体K2CO3碱化至pH≈10-11。将所得混浊溶液用DCM(3x30 mL)萃取。将合并的有机层经固体K2CO3干燥且在减压下浓缩，得到3-[(5-氯-1,3-苯并噻唑-2-基)甲基]-N,N-二甲基-氧杂环丁烷-3-胺(2.6g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值282.2；实测值283.2；Rt＝0.962min。
步骤3：N,N-二甲基-3-((5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)甲基)氧杂环丁烷-3-胺的合成
将3-[(5-氯-1,3-苯并噻唑-2-基)甲基]-N,N-二甲基-氧杂环丁烷-3-胺(2.6g，9.19mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(2.80g，11.03mmol)和乙酸钾(1.80g，18.39mmol，1.15mL)一起混合于二噁烷(50mL)中。将反应烧瓶抽真空且用氩气再填充3次。然后在氩气流下添加三(二苯亚甲基丙酮)二钯(0)(420.96mg，459.71μmol)和XPhos(876.60mg，1.84mmol)。将所得混合物在100℃下搅拌18h。然后，将其在减压下浓缩且将残余物用MTBE(2x30 mL)萃取。将所得MTBE溶液用硫酸氢钠(3.31g，27.58mmol)于水(50mL)中的溶液萃取。分离水层且通过纸过滤器过滤，以移除混浊。所得澄清溶液按原样用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值374.2；实测值375.2；Rt＝1.172min。
步骤4：(S)-6-(2-((3-(二甲基氨基)氧杂环丁烷-3-基)甲基)苯并[d]噻唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤3制备。产率：3.73g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值443.2；实测值444.2；Rt＝1.264min。
步骤5：(S)-N,N-二甲基-3-((5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)甲基)氧杂环丁烷-3-胺的合成
通过一般程序方案H步骤4制备。产率：0.7g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值343.2；实测值344.2；Rt＝0.636min。
步骤6：N,N-二甲基-3-((5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)甲基)氧杂环丁烷-3-胺的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：0.57g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值345.2；实测值346.2；Rt＝0.575min。
步骤7：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(2-((3-(二甲基氨基)氧杂环丁烷-3-基)甲基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1399)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：53.9mg(30.44％)。
HPLC条件：柱：YMC Triart C18 100*20mm，5微米；0-1-5min10-10-45％水-MeCN+0.1％ NH4OH，流速：30mL/min；(装载泵4mL/min MeCN)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.97-1.05(m,3H),1.06-1.16(m,3H),1.30-1.41(m,1H),1.66-1.76(m,1H),1.83-1.92(m,1H),2.04-2.35(m,9H),2.39-2.43(m,1H),2.74-3.28(m,1H),3.42-4.11(m,3H),4.40-4.50(m,2H),4.50-4.60(m,2H),5.24-5.72(m,3H),7.32-7.55(m,2H),7.84-7.93(m,1H),7.97-8.11(m,2H),10.48-10.65(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值536.2；实测值537.2；Rt＝2.147min。
实施例615.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(4-甲基吗啉-3-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1245)的合成
步骤1：3-(5-氯苯并[d]噻唑-2-基)吗啉-4-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤1B制备。产率：2.2g(14.14％)。
CC条件：通过硅胶使用己烷/MTBE(梯度10-100％ MTBE)作为洗脱液混合物纯化粗产物。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值354.2；实测值355.2；Rt＝1.582min。
步骤2：3-(5-氯苯并[d]噻唑-2-基)吗啉的合成
将于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(800.00mg，21.94mmol，1mL)添加到3-(5-氯-1,3-苯并噻唑-2-基)吗啉-4-甲酸叔丁酯(0.2g，563.62μmol)于MeOH(10mL)中的溶液中。将反应混合物在20℃下搅拌7h，然后蒸发且添加到MTBE(10mL)中，过滤出所得沉淀，用MTBE(10mL)洗涤且干燥，以得到3-(5-氯-1,3-苯并噻唑-2-基)吗啉(0.1g，343.41μmol，60.93％产率，HCl)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值254.2；实测值255.2；Rt＝0.746min。
步骤3：3-(5-氯苯并[d]噻唑-2-基)-4-甲基吗啉的合成
将3-(5-氯-1,3-苯并噻唑-2-基)吗啉(1.3g，4.46mmol，HCl)溶解于MeOH(29.00mL)中且添加无水乙酸钠(439.47mg，5.36mmol，287.61μL)、用7-8％ MeOH稳定的37重量％甲醛水溶液(268.13mg，8.93mmol，247.58μL)，向其中添加AcOH(536.19mg，8.93mmol，511.14μL)且将反应混合物在室温下搅拌1h。然后分批添加氰基硼氢化钠(561.08mg，8.93mmol)。将所得混合物在0℃下搅拌7h，然后在真空中蒸发。将残余物用100mL NaOH(10％)稀释且用DCM(2*30mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到4-氟-4-(羟基甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(5.6g，24.01mmol，83.10％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值268.2；实测值269.2；Rt＝2.096min。
步骤4：4-甲基-3-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)吗啉的合成
将三(二苯亚甲基丙酮)二钯(0)(238.50mg，260.45μmol)和XPhos(496.65mg，1.04mmol)添加到3-(5-氯-1,3-苯并噻唑-2-基)-4-甲基吗啉(1.4g，5.21mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(1.72g，6.77mmol)于二噁烷(29.35mL)中的溶液中。将反应烧瓶抽真空且用氩气再填充3次。然后在氩气流下添加乙酸钾(1.53g，15.63mmol，976.85μL)。在惰性气氛下将所得混合物在100℃下搅拌12h，然后冷却且在真空中蒸发，倒入到水(200mL)中且用DCM(2x30 mL)萃取，经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，留下1.8g粗产物，1.8g粗产物通过硅胶柱色谱使用己烷/MTBE梯度(10-100％ MTBE)进行纯化，得到4-甲基-3-[5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噻唑-2-基]吗啉(1.1g，3.05mmol，58.61％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值360.2；实测值361.2；Rt＝2.608min。
步骤5：(3S)-3-甲基-6-(2-(4-甲基吗啉-3-基)苯并[d]噻唑-5-基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤3制备。产率：1.4g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值429.2；实测值430.2；Rt＝3.782min。
步骤6：4-甲基-3-(5-((S)-5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)吗啉的合成
通过一般程序方案H步骤4制备。产率：0.7g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值329.2；实测值330.2；Rt＝0.635min。
步骤7：4-甲基-3-(5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)吗啉的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：0.6g(85.19％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值331.2；实测值332.2；Rt＝0.828min。
步骤8：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(4-甲基吗啉-3-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1245)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：57.4mg(18.20％)。
HPLC条件：柱：XBridge C18 100*19mm，5微米；0-6min 40-90％水-MeOH+0.1％NH4OH，流速：30mL/min；(装载泵4mL/min MeCN)。
1H NMR(600MHz,dmso)δ1.00-1.05(m,3H),1.05-1.14(m,3H),1.30-1.40(m,1H),1.65-1.74(m,1H),1.82-1.93(m,1H),2.07-2.21(m,4H),2.25-2.36(m,2H),2.40-2.43(m,1H),2.76-3.27(m,2H),3.38-4.08(m,7H),5.26-5.71(m,3H),7.37-7.44(m,1H),7.44-7.54(m,1H),7.88-7.94(m,1H),7.97-8.12(m,2H),10.42-10.65(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值522.2；实测值523.2；Rt＝2.532min。
实施例616.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(2-(2-(二甲基氨基)丙-2-基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1250)的合成
步骤1：N-((5-溴苯并[d]噻唑-2-基)甲基)-N-乙基乙胺的合成
通过一般程序方案H步骤1C制备。产率：4.1g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值299.2；实测值300.2；Rt＝0.785min。
步骤2：N-乙基-N-((5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)甲基)乙胺的合成
通过一般程序方案H步骤2制备。产率：4.2g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值346.2；实测值347.2；Rt＝1.030min。
步骤3：(S)-6-(2-((二乙基氨基)甲基)苯并[d]噻唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤3制备。产率：1.2g(36.07％)。
CC条件：通过硅胶使用MTBE/MeOH作为洗脱液混合物来纯化粗产物。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值415.2；实测值416.2；Rt＝1.264min。
步骤4：(S)-N-乙基-N-((5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)甲基)乙胺的合成
通过一般程序方案H步骤4制备。产率：0.67g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值315.2；实测值316.2；Rt＝0.225min。
步骤5：N-乙基-N-((5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)甲基)乙胺的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：0.62g(91.95％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值317.2；实测值318.2；Rt＝0.697min。
步骤6：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(2-(2-(二甲基氨基)丙-2-基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1250)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：20.8mg(11.91％)。
HPLC条件：柱：SunFire C18 100*19mm，5微米；2-10min40-55％水-MeCN+FA，流速：30mL/min；(装载泵4mL/min MeCN)。
1H NMR(600MHz,dmso)δ0.99-1.05(m,9H),1.05-1.14(m,3H),1.30-1.41(m,1H),1.66-1.75(m,1H),1.82-1.92(m,1H),2.05-2.23(m,1H),2.27-2.35(m,1H),2.40(q,1H),2.57-2.63(m,5H),2.75-3.00(m,1H),3.45-4.07(m,3H),5.23-5.73(m,3H),7.30-7.41(m,1H),7.42-7.55(m,1H),7.81-7.87(m,1H),7.98-8.05(m,1H),8.06-8.21(m,1H),10.49-10.59(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值508.2；实测值509.2；Rt＝2.151min。
实施例617.2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(1-甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-N-(6-甲基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1300)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：58mg(20.85％)。
HPLC条件：柱：XBridge C18 100*19mm，5微米；0-5min 40-90％水-MeOH+0.1％NH4OH；(装载泵4mL/min MeCN)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99-1.07(m,3H),1.31-1.40(m,1H),1.68-1.76(m,1H),1.77-1.84(m,2H),1.84-1.95(m,1H),1.98-2.11(m,5H),2.18(s,3H),2.29-2.34(m,1H),2.54-2.60(m,3H),2.78-3.12(m,4H),3.51-4.04(m,1H),5.28-5.75(m,1H),7.32-7.42(m,1H),7.88(s,1H),8.00-8.11(m,1H),8.31-8.51(m,1H),8.82-8.98(m,1H),11.24-11.49(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值559.2；实测值560.2；Rt＝3.137min。
实施例618.5-(2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(1-甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-2-(三氟甲氧基)烟酰胺(化合物1337)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：78mg(31.65％)。
HPLC条件：柱：XBridge C18 100*19mm，5微米；0-5min 30-80％水-MeOH+0.1％NH4OH；(装载泵4mL/min MeOH)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.95-1.09(m,3H),1.31-1.43(m,1H),1.66-1.75(m,1H),1.75-1.93(m,3H),1.93-2.16(m,5H),2.18(s,3H),2.28-2.37(m,1H),2.78-2.87(m,2.3H),2.98-3.08(m,1H),3.31-3.37(m,0.7H),3.45-4.12(m,1H),5.15-5.76(m,1H),7.30-7.43(m,1H),7.71-7.83(m,1H),7.85-7.91(m,1H),7.91-8.02(m,1H),8.02-8.10(m,1H),8.27-8.41(m,1H),8.50-8.68(m,1H),11.16-11.59(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值604.2；实测值605.2；Rt＝2.888min。
实施例619.2-甲基-5-(2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(1-甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物1326)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：103mg(47.27％)。
HPLC条件：柱：YMC Triart C18 100*20mm，5微米；0-5min15-50％水-MeCN+0.1％NH4OH；(装载泵4mL/min MeCN)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.96-1.09(m,3H),1.30-1.43(m,1H),1.65-1.74(m,1H),1.75-1.95(m,3H),1.98-2.12(m,5H),2.18(s,3H),2.28-2.35(m,1H),2.43-2.47(m,3H),2.81-2.86(m,2H),3.02-3.11(m,1H),3.32-3.38(m,1H),3.45-4.09(m,1H),5.22-5.73(m,1H),7.32-7.44(m,1H),7.48-7.60(m,1H),7.82-7.89(m,1H),7.89-7.94(m,1H),7.96-8.10(m,2H),8.57-8.79(m,1H),10.80(br s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值534.2；实测值535.2；Rt＝2.375min。
实施例620.2-甲氧基-5-(2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(1,2,2,6,6-五甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物1108)的合成
通过一般程序8步骤6A制备。产率：64.1mg(27.16％)。
HPLC条件：柱：YMC Triart C18 100*20mm，5微米；0-1-6min65-65-80％水-MeOH+0.1％ NH4OH；(装载泵4mL/min MeOH)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.01-1.06(m,3H),1.06-1.09(m,6H),1.10-1.15(m,6H),1.32-1.41(m,1H),1.59-1.67(m,2H),1.67-1.75(m,1H),1.81-1.98(m,3H),2.04-2.19(m,1H),2.19-2.23(m,3H),2.27-2.37(m,1H),2.80-3.28(m,1H),3.44-3.55(m,1.7H),3.90-3.97(m,3H),4.01-4.05(m,0.3H),5.22-5.76(m,1H),7.33-7.44(m,1H),7.64-7.78(m,2H),7.86-7.92(m,1H),8.03-8.09(m,1H),8.33-8.63(m,2H),10.90-11.19(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值606.2；实测值607.2；Rt＝2.453min。
实施例621.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(2-(1,4-二甲基-5-氧代哌嗪-2-基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1231)的合成
步骤1：5-(5-氯苯并[d]噻唑-2-基)-1-甲基哌嗪-2-酮的合成
通过一般程序方案H步骤1A制备。产率：9.5g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值281.2；实测值282.2；Rt＝0.885min。
步骤2：5-(5-氯苯并[d]噻唑-2-基)-1,4-二甲基哌嗪-2-酮的合成
将5-(5-氯-1,3-苯并噻唑-2-基)-1-甲基哌嗪-2-酮(8.5g，30.17mmol)、甲醛(3.43g，42.23mmol，3.16mL)和乙酸(3.62g，60.33mmol，3.45mL)于MeOH(170mL)中的混合物在室温下搅拌2h。向混合物中一次性添加氰基硼氢化钠(3.79g，60.33mmol)。将混合物在20℃下搅拌18h，然后在真空中浓缩。将残余物碱化至pH＝9(K2CO3 10％水溶液)且用DCM(2*90mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到5-(5-氯-1,3-苯并噻唑-2-基)-1,4-二甲基哌嗪-2-酮(9g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值295.2；实测值296.2；Rt＝1.098min。
步骤3：1,4-二甲基-5-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)哌嗪-2-酮的合成
将乙酸钾(6.17g，62.88mmol，3.93mL)添加到5-(5-氯-1,3-苯并噻唑-2-基)-1,4-二甲基哌嗪-2-酮(9.3g，31.44mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(8.78g，34.59mmol)于二噁烷(48.09mL)中的溶液中。将反应烧瓶抽真空且用氩气再填充3次。然后在氩气流下添加三(二苯亚甲基丙酮)二钯(0)(1.44g，1.57mmol)和XPhos(3.00g，6.29mmol)。在惰性气氛下将所得混合物在90℃下搅拌18h。然后，将其冷却，用EtOAc(200mL)稀释且用Na2CO3(50mL，饱和水溶液)洗涤。将有机层经Na2SO4干燥，在减压下浓缩且通过硅胶快速色谱使用0至100％CHCl3-MeCN梯度洗脱来纯化残余物，以得到产物1,4-二甲基-5-[5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噻唑-2-基]哌嗪-2-酮(8.8g，22.72mmol，72.27％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值387.2；实测值388.2；Rt＝1.213min。
步骤4：(3S)-6-(2-(1,4-二甲基-5-氧代哌嗪-2-基)苯并[d]噻唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤3制备。产率：17g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值456.2；实测值457.2；Rt＝1.371min。
步骤5：1,4-二甲基-5-(5-((S)-5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)哌嗪-2-酮的合成
通过一般程序方案H步骤4制备。产率：7g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值356.2；实测值357.2；Rt＝0.646min。
步骤6：1,4-二甲基-5-(5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)哌嗪-2-酮的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：4g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值358.2；实测值359.2；Rt＝0.746min。
步骤7：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(2-(1,4-二甲基-5-氧代哌嗪-2-基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1231)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：81mg(26.41％)。
HPLC条件：柱：XBridge C18 100*19mm，5微米；0-5min 30-80％水-MeOH+0.1％NH4OH，流速：30mL/min；(装载泵4mL/min MeOH)。
1H NMR(600MHz,dmso)δ1.02-1.06(m,3H),1.06-1.16(m,3H),1.30-1.43(m,1H),1.65-1.74(m,1H),1.81-1.91(m,1H),2.07-2.20(m,1H),2.27-2.32(m,4H),2.32-2.36(m,1H),2.37-2.44(m,2H),2.78-2.82(m,0.3H),2.86-2.88(m,3H),3.19-3.28(m,1.7H),3.44-3.53(m,0.7H),3.71-3.78(m,2H),4.03-4.07(m,0.3H),4.32-4.46(m,1H),5.24-5.61(m,1H),5.62-5.73(m,2H),7.40-7.55(m,2H),7.89-7.96(m,1H),7.98-8.07(m,1H),8.10-8.17(m,1H),10.49-10.62(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值549.2；实测值550.2；Rt＝2.332min。
实施例622.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(2-(甲基(氧杂环丁烷-3-基)氨基)乙基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1195)的合成
步骤1：5-溴-2-(2-氯乙基)苯并[d]噻唑的合成
在15min时段内，向2-氨基-4-溴苯硫酚(1g，4.90mmol，170.94uL)于甲苯(15mL)中的溶液中逐滴添加3-氯丙酰氯(684.34mg，5.39mmol，514.54μL)，在此期间形成灰白色沉淀。将反应混合物在室温下搅拌13h。然后，将其用水研磨，中和(NaHCO3，5％水溶液)至pH7，用DCM(2x50 mL)萃取，干燥且在真空中蒸发，以得到产物5-溴-2-(2-氯乙基)-1,3-苯并噻唑(1.3g，4.70mmol，95.93％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值276.2；实测值377.2；Rt＝1.505min。
步骤2：N-(2-(5-溴苯并[d]噻唑-2-基)乙基)-N-甲基氧杂环丁烷-3-胺的合成
向5-溴-2-(2-氯乙基)-1,3-苯并噻唑(4.9g，17.72mmol)和N-甲基氧杂环丁烷-3-胺(2.58g，19.49mmol)于MeCN(60mL)中的溶液中添加碳酸钾颗粒(6.12g，44.29mmol，2.67mL)。然后将反应混合物在40℃下搅拌5天，然后在真空中蒸发。将残余物用水(50mL)稀释且用DCM(2*50mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到N-[2-(5-溴-1,3-苯并噻唑-2-基)乙基]-N-甲基-氧杂环丁烷-3-胺(6g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值327.2；实测值328.2；Rt＝0.781min。
步骤3：N-甲基-N-(2-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)乙基)氧杂环丁烷-3-胺的合成
通过一般程序方案H步骤2制备。产率：16g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值374.2；实测值375.2；Rt＝1.006min。
步骤4：(S)-3-甲基-6-(2-(2-(甲基(氧杂环丁烷-3-基)氨基)乙基)苯并[d]噻唑-5-基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤3制备。产率：22g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值443.2；实测值444.2；Rt＝1.083min。
步骤5：(S)-N-甲基-N-(2-(5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)乙基)氧杂环丁烷-3-胺的合成
通过一般程序方案H步骤4制备。产率：5.5g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值343.2；实测值344.2；Rt＝0.640min。
步骤6：N-甲基-N-(2-(5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)乙基)氧杂环丁烷-3-胺的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：4g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值345.2；实测值346.2；Rt＝0.707min。
步骤7：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(2-(甲基(氧杂环丁烷-3-基)氨基)乙基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1195)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：5.7mg(1.83％)。
HPLC条件：柱：XBridge C18 100*19mm，5微米；0-6min 35-80％水-MeOH+0.1％NH4OH，流速：30mL/min；(装载泵4mL/min MeOH)。
1H 1H NMR(600MHz,dmso)δ1.02-1.06(m,3H),1.06-1.15(m,3H),1.31-1.41(m,1H),1.66-1.75(m,1H),1.83-1.93(m,1H),2.14(s,3H),2.15-2.36(m,2H),2.37-2.43(m,2H),2.65-2.69(m,2H),2.76-3.08(m,1H),3.20-3.24(m,2H),3.46-3.50(m,0.7H),3.57-3.61(m,1H),4.02-4.07(m,0.3H),4.40(t,2H),4.50(t,2H),5.26-5.61(m,1H),5.61-5.73(m,2H),7.33-7.42(m,1H),7.42-7.54(m,1H),7.83-7.92(m,1H),7.97-8.09(m,2H),9.33(br s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值536.2；实测值537.2；Rt＝2.164min。
实施例623.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1192)的合成
步骤1：5-氯-2-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤1B制备。产率：13g(95.54％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值249.2；实测值250.2；Rt＝3.165min。
步骤2：2-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑的合成
将5-氯-2-(1-甲基咪唑-2-基)-1,3-苯并噻唑(5g，20.02mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(5.59g，22.02mmol)和乙酸钾(3.93g，40.05mmol，2.50mL)于二噁烷(100mL)中的混合物抽真空，然后用氩气回填。将此操作重复两次，然后在氩气下添加三(1,5-二苯基戊-1,4-二烯-3-酮)二钯(916.75mg，1.00mmol)和二环己基[2',4',6'-三(丙-2-基)-[1,1'-联苯基]-2-基]磷烷(1.91g，4.00mmol)，且将反应混合物在95℃下搅拌18h。将反应混合物冷却且在真空中浓缩。通过硅胶柱色谱使用己烷/MTBE梯度(0-100％ MTBE)纯化残余物，以得到呈紫色固体的2-(1-甲基咪唑-2-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噻唑(7g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值341.2；实测值342.2；Rt＝1.567min。
步骤3：(S)-3-甲基-6-(2-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)苯并[d]噻唑-5-基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤3制备。产率：1.6g(53.20％)。
CC条件：通过硅胶使用己烷/MTBE(梯度0-100％ MTBE)作为洗脱液混合物纯化粗产物。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值410.2；实测值411.2；Rt＝1.510min。
步骤4：(S)-2-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)-5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤4制备。产率：1.1g(90.92％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值310.2；实测值311.2；Rt＝0.916min。
步骤5：2-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)-5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：0.9g(81.29％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值312.2；实测值313.2；Rt＝0.806min。
步骤6：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1192)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：93mg(38.46％)。
HPLC条件：柱：XBridge C18 100*19mm，5微米；0-1-6min10-10-60％水-MeCN+0.1％ NH4OH；(装载泵4ml/min MeCN)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.03-1.14(m,6H),1.34-1.41(m,1H),1.73(m,1H),1.87-2.20(m,3H),2.30-2.41(m,2H),2.81-2.83(m,1H),3.33-3.52(m,1H),4.16(s,3H),5.30-5.72(m,3H),7.13(s,1H),7.41-7.52(m,3H),7.92-8.13(m,3H),10.54-10.60(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值503.2；实测值504.2；Rt＝2.408min。
实施例624.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(2-(1-(二甲基氨基)丙-2-基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1324)的合成
步骤1：2-(5-氯苯并[d]噻唑-2-基)-N,N-二甲基丙-1-胺的合成
使2-氨基-4-氯苯硫酚(1.5g，9.40mmol)和2-氨基-4-氯苯硫酚(1.5g，9.40mmol)于PPA(10mL)中的搅拌溶液在140℃下搅拌16h。完成之后，将反应混合物用水(200mL)萃取且通过NaOH中和至pH＝8。将水相用EtOAc(2*20mL)萃取。将合并的有机相经Na2SO4干燥且在减压下浓缩。分离所需产物2-(5-氯-1,3-苯并噻唑-2-基)-N,N-二甲基丙-1-胺(1.5g，5.89mmol，62.66％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值254.2；实测值255.2；Rt＝0.672min。
步骤2：N,N-二甲基-2-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)丙-1-胺的合成
向2-(5-氯-1,3-苯并噻唑-2-基)-N,N-二甲基丙-1-胺(1.5g，5.89mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(1.50g，5.89mmol)于二噁烷(30mL)中的搅拌溶液中添加Pd2(dba)3(1.08g，1.18mmol)和XPhos(1.12g，2.35mmol)。将所得悬浮液在50℃下用氩气脱气0.5h。添加乙酸钾(1.2g，12.23mmol，764.33μL)。将反应混合物在100℃下搅拌16h。完成之后，将反应混合物在减压下浓缩，用水(50mL)萃取，将水相用CHCl3(2*50mL)萃取。将有机相用10％ HCl(2*50mL)萃取。将水相通过NaHCO3中和至pH＝8，用CHCl3(2*50mL)萃取。将有机相经Na2SO4干燥且在真空中蒸发。分离所需产物N,N-二甲基-2-[5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噻唑-2-基]丙-1-胺(1.4g，4.04mmol，68.67％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值346.2；实测值347.2；Rt＝1.121min。
步骤3：(3S)-6-(2-(1-(二甲基氨基)丙-2-基)苯并[d]噻唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤3制备。产率：0.7g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值415.2；实测值416.2；Rt＝1.238min。
步骤4：N,N-二甲基-2-(5-((S)-5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)丙-1-胺的合成
使(3S)-6-[2-[2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(700.00mg，1.68mmol)于MeOH(10mL)和二噁烷/HCl(10mL)中的搅拌溶液在25℃下搅拌16h。完成之后，将反应混合物蒸发，将粗产物用水(20mL)萃取且通过NaHCO3中和至pH＝8。将水相用CHCl3(2*20mL)萃取。将合并的有机相经Na2SO4干燥且在减压下浓缩。分离所需产物N,N-二甲基-2-[5-[(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]-1,3-苯并噻唑-2-基]丙-1-胺(0.5g，1.58mmol，94.10％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值315.2；实测值316.2；Rt＝0.666min。
步骤5：N,N-二甲基-2-(5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)丙-1-胺的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：0.5g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值317.2；实测值318.2；Rt＝0.471min。
步骤6：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(2-(1-(二甲基氨基)丙-2-基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1324)的合成
通过一般程序方案H步骤6B制备。产率：17mg(10.61％)。
HPLC条件：柱：XBridge C18 100*19mm，5微米；0-5min 40-90％水-MeOH+0.1％NH4OH，流速：30mL/min；(装载泵4mL/min MeOH)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98-1.05(m,3H),1.06-1.16(m,3H),1.30-1.44(m,4H),1.66-1.77(m,1H),1.79-1.96(m,1H),2.04-2.11(m,1H),2.15-2.23(m,6H),2.26-2.36(m,1H),2.38-2.47(m,3H),2.61-2.67(m,1H),2.78-3.25(m,1H),3.42-4.09(m,2H),5.24-5.60(m,1H),5.60-5.73(m,2H),7.32-7.42(m,1H),7.43-7.54(m,1H),7.82-7.92(m,1H),7.96-8.11(m,2H),10.32-10.69(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值508.2；实测值509.2；Rt＝1.563min。
实施例625.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(1-(3,3,3-三氟丙基)哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1124)的合成
步骤1：5-氯-2-(1-(3,3,3-三氟丙基)哌啶-4-基)苯并[d]噻唑的合成
将碳酸钾(3.83g，27.69mmol，1.67mL)添加到5-氯-2-(4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑(3.5g，13.85mmol)和甲磺酸3,3,3-三氟丙酯(3.73g，19.39mmol)于MeCN(80mL)中的溶液中。将所得混合物在80℃下搅拌72h。然后，将其在减压下浓缩且将残余物分配于水(30mL)与MTBE(50mL)之间。将有机层分离，经Na2SO4干燥且在真空中蒸发，得到5-氯-2-[1-(3,3,3-三氟丙基)-4-哌啶基]-1,3-苯并噻唑(5.5g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值348.2；实测值349.2；Rt＝1.055min。
步骤2：5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-2-(1-(3,3,3-三氟丙基)哌啶-4-基)苯并[d]噻唑的合成
将5-氯-2-[1-(3,3,3-三氟丙基)-4-哌啶基]-1,3-苯并噻唑(6.33g，18.13mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(5.53g，21.76mmol)和乙酸钾(3.56g，36.27mmol，2.27mL)一起混合于二噁烷(100mL)中。将反应烧瓶抽真空且用氩气再填充3次。然后在氩气流下添加三(二苯亚甲基丙酮)二钯(0)(830.24mg，906.66μmol)和XPhos(1.73g，3.63mmol)。将所得混合物在100℃下搅拌16h。然后，将其在减压下浓缩且通过梯度柱色谱(SiO2，CHCl3/MeCN)纯化残余物，得到5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-2-[1-(3,3,3-三氟丙基)-4-哌啶基]-1,3-苯并噻唑(1.7g，3.86mmol，21.29％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值440.2；实测值441.2；Rt＝1.192min。
步骤3：(S)-3-甲基-6-(2-(1-(3,3,3-三氟丙基)哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤3制备。产率：1.97g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值509.2；实测值510.2；Rt＝1.225min。
步骤4：(S)-5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)-2-(1-(3,3,3-三氟丙基)哌啶-4-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤4制备。产率：1.16g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值409.2；实测值410.2；Rt＝0.746min。
步骤5：5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)-2-(1-(3,3,3-三氟丙基)哌啶-4-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：830mg粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值411.2；实测值422.2；Rt＝0.640min。
步骤6：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(1-(3,3,3-三氟丙基)哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1124)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：41mg(26.66％)。
HPLC条件：柱：YMC Triart C18 100*20mm，5微米；0-6min50-90％水-MeOH+0.1％NH4OH，流速：30mL/min；(装载泵4mL/min MeOH)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.68-1.04(m,3H),1.05-1.16(m,3H),1.28-1.41(m,1H),1.65-1.73(m,1H),1.75-1.82(m,2H),1.83-1.94(m,1H),2.03-2.17(m,5H),2.24-2.36(m,2H),2.38-2.47(m,3H),2.53-2.56(m,2H),2.91-2.99(m,2H),3.06-3.15(m,1H),3.22-3.28(m,1H),3.35-4.09(m,1H),5.24-5.60(m,1H),5.61-5.74(m,2H),7.31-7.43(m,1H),7.43-7.55(m,1H),7.85-7.92(m,1H),7.96-8.11(m,2H),10.39-10.63(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值602.2；实测值603.2；Rt＝2.347min。
实施例626.2-甲氧基-5-(2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(2-甲基-2-氮杂螺[3.3]庚-6-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物1236)的合成
步骤1：2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-甲酸的合成
将二碳酸二-叔丁酯(7.88g，36.12mmol，8.29mL)逐滴添加到2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-甲酸(6.11g，34.40mmol，HCl)于DCM(102.40mL)和TEA(8.70g，85.99mmol，11.99mL)中的悬浮液中。将所得反应混合物在20℃下搅拌16h。然后，添加10％ NaHSO4水溶液(80mL)且继续搅拌5min。此后，将有机层分离，经Na2SO4干燥且在减压下浓缩，留下2-叔丁氧基羰基-2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-甲酸(8.8g，粗品)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.41(s,9H),1.51(m,1H),2.43(m,4H),3.00(m,1H),3.90(m,4H)。
步骤2：6-(5-溴苯并[d]噻唑-2-基)-2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-甲酸叔丁酯的合成
将三苯基膦(516.35mg，1.97mmol)一次性添加到2-叔丁氧基羰基-2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-甲酸(190mg，787.46μmol)、2-氨基-4-溴苯硫酚(160.71mg，787.46μmol)、四氯化碳(795.00mg，5.17mmol，0.5mL)和TEA(398.41mg，3.94mmol，548.78μL)的溶液中。由于放热反应，所得反应混合物暂时升温至大约50-60℃。此后，将其在20℃下搅拌18h。然后，在减压下移除挥发物且将残余物用MTBE(100mL)研磨。过滤出所得浅色沉淀。将滤液在减压下浓缩且通过梯度柱色谱(SiO2，己烷/EtOAc)纯化残余物，得到6-(5-溴-1,3-苯并噻唑-2-基)-2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-甲酸叔丁酯(4.6g，11.24mmol，31.53％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值409.2；实测值410.2；Rt＝1.581min。
步骤3：5-溴-2-(2-氮杂螺[3.3]庚-6-基)苯并[d]噻唑的合成
将三氟乙酸(12.81g，112.38mmol，8.66mL)添加到6-(5-溴-1,3-苯并噻唑-2-基)-2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-甲酸叔丁酯(4.6g，11.24mmol)于DCM(60mL)中的溶液中。将所得混合物在20℃下搅拌5h。然后，将其在减压下浓缩，留下2-(2-氮杂螺[3.3]庚-6-基)-5-溴-1,3-苯并噻唑(5g，粗品，TFA)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值309.2；实测值310.2；Rt＝0.830min。
步骤4：5-溴-2-(2-甲基-2-氮杂螺[3.3]庚-6-基)苯并[d]噻唑的合成
将用7-8％ MeOH稳定的37重量％甲醛水溶液(711.21mg，23.68mmol，656.70μL)和乙酸钠(1.94g，23.68mmol，1.27mL)添加到2-(2-氮杂螺[3.3]庚-6-基)-5-溴-1,3-苯并噻唑(5g，11.84mmol，TFA)于MeOH(60mL)中的溶液中。将所得混合物在20℃下搅拌1h，之后向其中添加氰基硼氢化钠(1.49g，23.68mmol)。此后，继续搅拌16h。然后，在减压下移除溶剂且将残余物分配于15％ K2CO3水溶液(30mL)与DCM(50mL)之间。将有机层分离，经固体K2CO3干燥且在减压下浓缩，留下5-溴-2-(2-甲基-2-氮杂螺[3.3]庚-6-基)-1,3-苯并噻唑(3.8g，11.76mmol，99.27％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值323.2；实测值324.2；Rt＝1.079min。
步骤5：2-(2-甲基-2-氮杂螺[3.3]庚-6-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤2制备。产率：1.5g(34.46％)。
CC条件：通过硅胶使用MTBE/MeOH作为洗脱液混合物来纯化粗产物。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值370.2；实测值371.2；Rt＝2.997min。
步骤6：(S)-3-甲基-6-(2-(2-甲基-2-氮杂螺[3.3]庚-6-基)苯并[d]噻唑-5-基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤3制备。产率：1.2g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值439.2；实测值440.2；Rt＝1.166min。
步骤7：(S)-5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)-2-(2-甲基-2-氮杂螺[3.3]庚-6-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤4制备。产率：700mg粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值339.2；实测值340.2；Rt＝0.774min。
步骤8：2-(2-甲基-2-氮杂螺[3.3]庚-6-基)-5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：600mg(72.91％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值341.2；实测值342.2；Rt＝0.770min。
步骤9：2-甲氧基-5-(2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(2-甲基-2-氮杂螺[3.3]庚-6-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物1236)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：42mg(16.99％)。
HPLC条件：柱：XBridge C18 100*19mm，5微米；0-5min 40-85％水-MeOH+0.1％NH4OH，流速：30mL/min；(装载泵4mL/min MeOH)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.97-1.09(m,3H),1.32-1.42(m,1H),1.66-1.76(m,1H),1.83-1.93(m,1H),2.05-2.24(m,4H),2.27-2.35(m,1H),2.40-2.46(m,2H),2.56-2.84(m,3H),3.05(s,2H),3.21(s,2H),3.46-4.08(m,5H),5.25-5.73(m,1H),7.31-7.42(m,1H),7.61-7.78(m,2H),7.83-7.91(m,1H),7.98-8.07(m,1H),8.40-8.63(m,2H),10.98-11.16(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值562.2；实测值563.2；Rt＝2.487min。
实施例627.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(2-(1-(二甲基氨基)乙基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1316和化合物1188)的合成
步骤1：1-(5-溴苯并[d]噻唑-2-基)-N,N-二甲基乙胺的合成
通过一般程序方案H步骤1A制备。产率：2.5g(89.45％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值285.2；实测值286.2；Rt＝0.759min。
步骤2：N,N-二甲基-1-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)乙胺的合成
通过一般程序方案H步骤2制备。产率：2.9g(99.57％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值332.2；实测值333.2；Rt＝1.123min。
步骤3：(3S)-6-(2-(1-(二甲基氨基)乙基)苯并[d]噻唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤3制备。产率：4g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值401.2；实测值402.2；Rt＝1.198min。
步骤4：N,N-二甲基-1-(5-((S)-5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)乙胺的合成
通过一般程序方案H步骤4制备。产率：4g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值301.2；实测值302.2；Rt＝0.560min。
步骤5：N,N-二甲基-1-(5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)乙胺的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：4g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值303.2；实测值304.2；Rt＝0.509min。
步骤6：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(2-(1-(二甲基氨基)乙基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：81mg(29.67％)。
HPLC条件：柱：XBridge C18 100*19mm，5微米；0-1-6min15-15-65％水-MeCN+0.1％ NH4OH，流速：30mL/min；(装载泵4mL/min MeOH)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值494.2；实测值495.2；Rt＝2.099min。
步骤7：手性分离(化合物1316和化合物1188)
对外消旋N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[2-[1-(二甲基氨基)乙基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(81mg，163.75umol)进行手性分离(柱：Chiralpak AD-H III(250*20mm，5mkm)；己烷-IPA-MeOH，50-25-25.流速：10mL/min)，以获得N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[2-[(1R)-1-(二甲基氨基)乙基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(22.3mg，45.08μmol，55.06％产率)(RT＝75.09min)和N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[2-[(1S)-1-(二甲基氨基)乙基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(25mg，50.54μmol，61.73％产率)(RT＝91.19min)。
化合物1316于分析条件下(柱：AD-H，以己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min为流动相)的保留时间为58.24min且化合物1188的保留时间为72.96min。
化合物1316：保留时间：58.24min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.02-1.14(m,6H),1.31-1.38(m,1H),1.39-1.42(m,3H),1.66-1.75(m,1H),1.83-1.92(m,1H),2.04-2.21(m,1H),2.27(s,6H),2.29-2.35(m,1H),2.38-2.42(m,1H),2.76-3.29(m,2H),3.47-4.06(m,2H),5.25-5.72(m,3H),7.32-7.43(m,1H),7.43-7.53(m,1H),7.84-7.91(m,1H),7.97-8.11(m,2H),10.50-10.62(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值494.2；实测值495.2；Rt＝2.102min。
化合物1188：保留时间：72.96min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.02-1.15(m,6H),1.31-1.38(m,1H),1.39-1.44(m,3H),1.67-1.74(m,1H),1.82-1.92(m,1H),2.06-2.22(m,1H),2.24-2.36(m,8H),2.39-2.42(m,1H),2.76-3.25(m,1H),3.46-4.08(m,2H),5.24-5.72(m,3H),7.33-7.42(m,1H),7.43-7.53(m,1H),7.84-7.91(m,1H),7.97-8.09(m,2H),10.49-10.61(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值494.2；实测值495.2；Rt＝2.109min。
实施例628.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(2-(2-(二甲基氨基)丙基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1345)的合成
步骤1：3-(二甲基氨基)丁酸的合成
使3-(二甲基氨基)丁酸乙酯(0.5g，3.14mmol)于HCl(15％)(5mL)中的搅拌溶液在90℃下搅拌2h。完成之后，将反应混合物在减压下浓缩。分离所需产物3-(二甲基氨基)丁酸(0.4g，2.39mmol，75.99％产率，HCl)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)1.25(d,3H),2.64(s,6H),2.97(m,1H),3.56(m,1H),4.77(m,2H),10.91(m,1H)。
步骤2：1-(5-溴苯并[d]噻唑-2-基)-N,N-二甲基丙-2-胺的合成
使3-(二甲基氨基)丁酸(0.4g，2.39mmol，HCl)和2-氨基-4-溴苯硫酚(0.5g，2.45mmol)于PPA(5mL)中的搅拌溶液在140℃下搅拌16h。完成之后，将反应混合物用水(50mL)萃取且通过NaOH中和至pH＝8。将水相用EtOAc(2*20mL)萃取。将合并的有机相经Na2SO4干燥且在减压下浓缩。分离所需产物1-(5-溴-1,3-苯并噻唑-2-基)-N,N-二甲基丙-2-胺(0.6g，2.01mmol，84.03％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值299.2；实测值300.2；Rt＝0.938min。
步骤3：N,N-二甲基-1-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)丙-2-胺的合成
通过一般程序方案H步骤2制备。产率：0.3g(56.64％)。
CC条件：通过硅胶使用EtOAc/MeOH作为洗脱液混合物来纯化粗产物。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值264.2；实测值265.2；Rt＝0.536min。
步骤4：(3S)-6-(2-(2-(二甲基氨基)丙基)苯并[d]噻唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤3制备。产率：0.3g(63.56％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值415.2；实测值416.2；Rt＝0.992min。
步骤5：N,N-二甲基-1-(5-((S)-5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)丙-2-胺的合成
将(3S)-6-[2-[2-(二甲基氨基)丙基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(0.3g，721.86μmol)于MeOH(15mL)和二噁烷/HCl(5mL)中的搅拌溶液在25℃下搅拌4h。完成之后，将反应混合物蒸发，将粗产物用水(20mL)萃取且通过NaHCO3中和至pH＝8。将水相用CHCl3(2*20mL)萃取。将合并的有机相经Na2SO4干燥且在减压下浓缩。分离所需产物N,N-二甲基-1-[5-[(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]-1,3-苯并噻唑-2-基]丙-2-胺(0.22g，697.36μmol，96.61％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值315.2；实测值316.2；Rt＝0.655min。
步骤6：N,N-二甲基-1-(5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)丙-2-胺的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：0.22g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值317.2；实测值318.2；Rt＝0.445min。
步骤7：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(2-(2-(二甲基氨基)丙基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1345)的合成
通过一般程序方案H步骤6B制备。产率：38mg(10.78％)。
HPLC条件：柱：XBridge C18 100*19mm，5微米；0-1-6min35-50％水-MeCN+0.1％NH4OH，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeOH)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98-1.14(m,9H),1.29-1.41(m,1H),1.64-1.75(m,1H),1.81-1.93(m,1H),2.02-2.19(m,1H),2.21(s,6H),2.28-2.34(m,1H),2.39-2.43(m,1H),2.76-3.27(m,5H),3.46-4.07(m,1H),5.24-5.71(m,3H),7.30-7.40(m,1H),7.42-7.52(m,1H),7.81-7.89(m,1H),7.97-8.08(m,2H),10.41(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值508.2；实测值509.2；Rt＝2.166min。
实施例629.5-(2-((2R,5S)-2-(2-(1-环丙基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-2-甲氧基烟酰胺(化合物1219)的合成
步骤1：5-氯-2-(1-环丙基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤1A制备。产率：8g(90.63％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值292.2；实测值293.2；Rt＝0.848min。
步骤2：2-(1-环丙基哌啶-4-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑的合成
将5-氯-2-(1-环丙基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑(4g，13.66mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(3.82g，15.03mmol)和乙酸钾(2.68g，27.32mmol，1.71mL)混合于二噁烷(70mL)中。将所得混合物抽真空，然后用氩气回填，将此操作重复三次，然后在氩气下添加三(二苯亚甲基丙酮)二钯(0)(625.43mg，683.00umol)。将反应混合物在氩气、90℃下搅拌14h，然后冷却且在减压下浓缩。通过柱色谱纯化残余物，以得到2-(1-环丙基-4-哌啶基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噻唑(2.4g，6.24mmol，45.71％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值384.2；实测值385.2；Rt＝1.026min。
步骤3：(S)-6-(2-(1-环丙基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤3制备。产率：0.6g(29.90％)。
CC条件：通过硅胶使用己烷/EtOAc作为洗脱液混合物来纯化粗产物。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值453.2；实测值454.2；Rt＝1.372min。
步骤4：(S)-2-(1-环丙基哌啶-4-基)-5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤4制备。产率：0.3g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值353.2；实测值354.2；Rt＝0.719min。
步骤5：2-(1-环丙基哌啶-4-基)-5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：0.28g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值355.2；实测值356.2；Rt＝0.751min。
步骤6：5-(2-((2R,5S)-2-(2-(1-环丙基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-2-甲氧基烟酰胺(化合物1219)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：30mg(13.21％)。
HPLC条件：柱：XBridge C18 100*19mm，5微米；0-55min40-90％水-MeOH+0.1％NH4OH；(装载泵4ml/min MeOH)。
通过手性HPLC(柱：Chiralpak IB(250*30mm，5mkm)，流动相：己烷-IPA-MeOH，60-20-20；流速：12ml/min)纯化5-[[2-[(2R,5S)-2-[2-(1-环丙基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺，以获得5-[[2-[(2R,5S)-2-[2-(1-环丙基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(30mg，52.02μmol，13.21％产率)。
化合物1219于分析条件下(柱：IB，以己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min为流动相)的保留时间为15.85min。
化合物1219：保留时间：15.85min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.26-0.32(m,2H),0.38-0.44(m,2H),1.00-1.07(m,3H),1.30-1.42(m,1H),1.58-1.64(m,1H),1.66-1.75(m,3H),1.82-1.93(m,1H),2.02-2.22(m,3H),2.27-2.35(m,3H),2.81-3.28(m,4H),3.47-4.06(m,4H),5.26-5.73(m,1H),7.33-7.43(m,1H),7.66-7.77(m,2H),7.85-7.90(m,1H),8.01-8.09(m,1H),8.38-8.60(m,2H),10.92-11.19(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值576.2；实测值577.2；Rt＝2.630min。
实施例630.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(吡啶-2-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1238)的合成
步骤1：5-氯-2-(吡啶-2-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤1A制备。产率：1.3g(28.04％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值246.2；实测值247.2；Rt＝1.228min。
步骤2：2-(吡啶-2-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑的合成
将5-氯-2-(2-吡啶基)-1,3-苯并噻唑(1.2g，4.86mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(1.36g，5.35mmol)和乙酸钾(954.69mg，9.73mmol，608.08μL)混合于二噁烷(19.82mL)中。将所得混合物抽真空，然后用氩气回填，将此操作重复三次，然后在氩气下添加三(二苯亚甲基丙酮)二钯(0)(222.70mg，243.20μmol)。将反应混合物在氩气、90℃下搅拌14h，然后冷却且在减压下浓缩。通过柱色谱(SiO2，CHCl3-MeCN 0～100％，流速＝70mL/min，cv＝8.8)纯化残余物，以得到2-(2-吡啶基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噻唑(0.45g，1.33mmol，27.35％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值338.2；实测值339.2；Rt＝1.596min。
步骤3：(S)-3-甲基-6-(2-(吡啶-2-基)苯并[d]噻唑-5-基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤3制备。产率：0.47g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值407.2；实测值408.2；Rt＝1.660min。
步骤4：(S)-5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)-2-(吡啶-2-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤4制备。产率：0.35g(98.72％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值307.2；实测值308.2；Rt＝0.836min。
步骤5：5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)-2-(吡啶-2-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：0.35g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值309.2；实测值310.2；Rt＝0.986min。
步骤6：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(吡啶-2-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1238)的合成
通过一般程序方案H步骤6B制备。产率：17.5mg(7.49％)。
HPLC条件：柱：SunFire C18 100*19mm，5微米；2-10min0-100％ MeCN+FA，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeCN)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.03-1.15(m,6H),1.31-1.44(m,1H),1.70-1.77(m,1H),1.86-1.96(m,1H),2.09-2.26(m,1H),2.30-2.35(m,1H),2.38-2.44(m,2H),2.81-3.22(m,1H),3.48-4.10(m,1H),5.30-5.77(m,3H),7.43-7.48(m,1H),7.48-7.55(m,1H),7.55-7.61(m,1H),7.98-8.09(m,3H),8.13-8.21(m,1H),8.28-8.35(m,1H),8.70-8.76(m,1H),10.52-10.64(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值500.2；实测值501.2；Rt＝2.553min。
实施例631.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(2-(3-(二甲基氨基)环丁基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1101)的合成
步骤1：(3-(5-溴苯并[d]噻唑-2-基)环丁基)氨基甲酸叔丁酯的合成通过一般程序8步骤1B制备。产率：5g(53.24％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值383.2；实测值384.2；Rt＝1.402min。
步骤2：3-(5-溴苯并[d]噻唑-2-基)环丁胺的合成
将N-[3-(5-溴-1,3-苯并噻唑-2-基)环丁基]氨基甲酸叔丁酯(5g，13.04mmol)用于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(24.00g，658.26mmol，30mL)处理。将所得混合物在25℃下搅拌14h。过滤沉淀且另外用MTBE处理。然后在真空中干燥，以得到3-(5-溴-1,3-苯并噻唑-2-基)环丁胺(4g，12.51mmol，95.93％产率，HCl)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值284.2；实测值285.2；Rt＝0.931min。
步骤3：3-(5-溴苯并[d]噻唑-2-基)-N,N-二甲基环丁胺的合成
向3-(5-溴-1,3-苯并噻唑-2-基)环丁胺(4g，12.51mmol，HCl)于MeOH(71.00mL)中的搅拌溶液中添加用7-8％ MeOH稳定的37重量％甲醛水溶液(2.54g，31.28mmol，2.34mL，37％纯度)且添加无水乙酸钠(2.57g，31.28mmol，1.68mL)。将所得混合物在25℃下搅拌2h。然后分批添加氰基硼氢化钠(1.57g，25.03mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌12h。蒸发MeOH。将残余物用水(100ml)稀释且用DCM(3*50ml)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥。在真空中蒸发DCM，以得到3-(5-溴-1,3-苯并噻唑-2-基)-N,N-二甲基-环丁胺(3.9g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值311.2；实测值312.2；Rt＝0.829min。
步骤4：N,N-二甲基-3-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)环丁胺的合成
通过一般程序方案H步骤2制备。产率：4g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值358.2；实测值359.2；Rt＝1.029min。
通过一般程序方案H步骤3制备。产率：7g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值427.2；实测值428.2；Rt＝1.057min。
步骤6：(S)-N,N-二甲基-3-(5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)环丁胺的合成
通过一般程序方案H步骤4制备。产率：3g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值327.2；实测值328.2；Rt＝0.635min。
步骤7：N,N-二甲基-3-(5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)环丁胺的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：80mg(2.65％)。
HPLC条件：柱：Chromatorex C18 100*19mm，5微米；0-1-6min45-45-85％水-MeOH，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeOH)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值329.2；实测值330.2；Rt＝1.324min。
步骤8：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(2-(3-(二甲基氨基)环丁基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1101)的合成
通过一般程序8步骤6A制备。产率：5mg(1.61％)。
HPLC条件：柱：YMC Triart C18 100*20mm，5微米；0-1-6min60-60-70％水-MeOH+0.1％ NH4OH，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeOH)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.02-1.14(m,6H),1.32-1.39(m,1H),1.65-1.75(m,1H),1.81-1.93(m,1H),2.04(s,6H),2.09-2.14(m,2H),2.26-2.36(m,2H),2.39-2.42(m,2H),2.54-2.56(m,2H),2.65-2.71(m,1H),2.77-2.97(m,1H),3.45-4.07(m,2H),5.24-5.71(m,3H),7.32-7.41(m,1H),7.42-7.53(m,1H),7.85-7.91(m,1H),7.98-8.09(m,2H),10.56(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值520.2；实测值521.2；Rt＝2.206min。
实施例632.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(1-甲基吡咯烷-2-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1282)的合成
步骤1：5-溴-2-(1-甲基吡咯烷-2-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤1A制备。产率：2.8g(97.34％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值297.2；实测值298.2；Rt＝0.958min。
步骤2：2-(1-甲基吡咯烷-2-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤2制备。产率：3.2g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值344.2；实测值345.2；Rt＝1.005min。
步骤3：(3S)-3-甲基-6-(2-(1-甲基吡咯烷-2-基)苯并[d]噻唑-5-基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤3制备。产率：5g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值413.2；实测值414.2；Rt＝1.143min。
步骤4：5-((S)-5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)-2-(1-甲基吡咯烷-2-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤4制备。产率：1.2g(31.67％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值313.2；实测值314.2；Rt＝0.624min。
步骤5：5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)-2-(1-甲基吡咯烷-2-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：0.85g(70.38％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值315.2；实测值316.2；Rt＝0.664min。
步骤6：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(1-甲基吡咯烷-2-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1282)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：140mg(34.87％)。
HPLC条件：柱：XBridge C18 100*19mm，5微米；0-5min 40-90％水-MeOH+0.1％NH4OH，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeOH)。
对此物质进行手性分离(柱：Chiral ART Cellulose-SC(250*20mm，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH，70-15-15.流速：12mL/min)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.02-1.06(m,3H),1.06-1.16(m,3H),1.29-1.44(m,1H),1.67-1.91(m,5H),2.08-2.25(m,1H),2.26-2.35(m,2H),2.37(s,3H),2.38-2.40(m,1H),2.40-2.46(m,2H),2.77-3.30(m,2H),3.32-4.12(m,2H),5.24-5.62(m,1H),5.62-5.78(m,2H),7.29-7.43(m,1H),7.43-7.56(m,1H),7.82-7.89(m,1H),7.98-8.11(m,2H),10.56(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值506.2；实测值507.2；Rt＝1.629min。
实施例633.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(2-(1-环丙基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1330)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：30mg(8.31％)。
HPLC条件：柱：XBridge C18 100*19mm，5微米；0-1-6min60-60-80％水-MeOH+0.1％ NH4OH；(装载泵4ml/min MeOH)。
通过手性HPLC(柱：Chiralpak IC-III(250*20mm，5mkm)；流动相：IPA-MeOH，50-50；流速：12mL/min)纯化N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[2-(1-环丙基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺，以获得N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[2-(1-环丙基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(22mg，40.24μmol，3.58％产率)。
化合物1330于分析条件下(柱：IC，IPA-MeOH，50-50，0.6ml/min为流动相)的保留时间为30.27min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.30-0.41(m,4H),1.02-1.13(m,6H),1.31-1.39(m,1H),1.62-1.71(m,3H),1.84-1.89(m,2H),2.05-2.07(m,3H)2.30-2.41(m,4H),2.77-2.79(m,1H),2.99-3.10(m,3H),3.47-4.05(m,2H),5.27-5.69(m,3H),7.33-7.51(m,2H),7.85-7.89(d,1H),7.99-8.06(m,2H),10.52-10.58(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值546.2；实测值547.2；Rt＝1.974min。
实施例634.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(吡啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1194)的合成
步骤1：5-氯-2-(吡啶-4-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤1A制备。产率：0.25g(5.39％)。
CC条件：通过硅胶使用己烷/IPA作为洗脱液混合物来纯化粗产物。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值246.2；实测值247.2；Rt＝1.182min。
步骤2：2-(吡啶-4-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑的合成
将5-氯-2-(4-吡啶基)-1,3-苯并噻唑(0.3g，1.22mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(339.66mg，1.34mmol)和乙酸钾(238.67mg，2.43mmol，152.02μL)混合于二噁烷(20.27mL)中。将所得混合物抽真空，然后用氩气回填，将此操作重复三次，然后在氩气下添加三(二苯亚甲基丙酮)二钯(0)(55.67mg，60.80μmol)。将反应混合物在氩气、90℃下搅拌14h，然后冷却且在减压下浓缩。通过柱色谱(柱：SunFire 100*19mm，5微米；2-10min 50-100％ MeCN 30ml/min(装载泵4ml MecN))纯化残余物，以得到[2-(4-吡啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]硼酸(0.06g，234.29μmol，19.27％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值338.2；实测值339.2；Rt＝1.341min。
步骤3：(S)-3-甲基-6-(2-(吡啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤3制备。产率：96mg粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值407.2；实测值408.2；Rt＝1.323min。
步骤4：(S)-5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)-2-(吡啶-4-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤4制备。产率：75mg粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值307.2；实测值308.2；Rt＝0.755min。
步骤5：5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)-2-(吡啶-4-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：69mg粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值309.2；实测值310.2；Rt＝0.770min。
步骤6：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(吡啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1194)的合成
通过一般程序方案H步骤6B制备。产率：10mg(15.28％)。
HPLC条件：柱：SunFire C18 100*19mm，5微米；2-10min50-75％ MeOH+NH3，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeOH)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.03-1.05(t,3H),1.12-1.14(m,3H),1.34-1.42(m,2H),1.72-1.74(m,2H),1.87-1.92(m,2H),2.32-2.37(m,1H),2.40-2.42(m,1H),3.50-4.08(m,1H),5.33-5.73(m,3H),7.43-7.56(m,2H),8.03-8.08(m,4H),8.24(m,1H),8.78-8.79(m,2H),10.51(br s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值500.2；实测值501.2；Rt＝2.663min。
实施例635.5-(2-((2R,5S)-2-(2-(1-乙基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-2-甲氧基烟酰胺(化合物1164)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：65mg(39.54％)。
HPLC条件：柱：YMC Triart C18 100*20mm，5微米；0-1-6min40-40-80％水-MeOH+0.1％ NH4OH；(装载泵4ml/min MeOH)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99-1.03(m,6H),1.32-1.40(m,1H),1.71-1.90(m,4H),2.01-2.19(m,6H),2.29-2.37(m,3H),2.83-2.94(m,2H),3.06-3.11(m,1H),3.49-4.05(m,4H),5.29-5.70(m,1H),7.35-7.42(dd,1H),7.68-7.75(m,2H),7.87-7.89(m,1H),8.03-8.07(m,1H),8.41-8.58(m,2H),11.02-11.10(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值564.2；实测值565.2；Rt＝2.643min。
实施例636.5-(2-((2R,5S)-2-(2-((二甲基氨基)甲基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-2-甲氧基烟酰胺(化合物1162)的合成
步骤1：1-(5-溴苯并[d]噻唑-2-基)-N,N-二甲基甲胺的合成
通过一般程序方案H步骤1C制备。产率：3.7g(82.58％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值271.2；实测值272.2；Rt＝0.801min。
步骤2：N,N-二甲基-1-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)甲胺的合成
通过一般程序方案H步骤2制备。产率：12.91g(70.07％)。
CC条件：通过硅胶使用DCM/MeCN(梯度)作为洗脱液混合物来纯化粗产物。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值318.2；实测值319.2；Rt＝0.758min。
步骤3：(S)-6-(2-((二甲基氨基)甲基)苯并[d]噻唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤3制备。产率：3.5g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值387.2；实测值388.2；Rt＝1.192min。
步骤4：(S)-N,N-二甲基-1-(5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)甲胺的合成
通过一般程序方案H步骤4制备。产率：3.04g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值287.2；实测值288.2；Rt＝0.602min。
步骤5：N,N-二甲基-1-(5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)甲胺的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：2.5g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值289.2；实测值290.2；Rt＝0.686min。
步骤6：5-(2-((2R,5S)-2-(2-((二甲基氨基)甲基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-2-甲氧基烟酰胺(化合物1162)的合成
通过一般程序方案H步骤6B制备。产率：68.4mg(38.77％)。
HPLC条件：柱：SunFire C18 100*19mm，5微米；2-10min25-30％水-MeOH+NH3；(装载泵4ml/min MeOH+NH3)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.02 -1.06(m,3H),1.33-1.40(m,1H),1.71-1.73(m,1H),1.86-1.91(m,1H),2.06-2.21(m,2H),2.30(s,6H),3.49-3.51(m,1H),3.85-4.05(m,5H),5.29-5.73(m,2H),7.36-7.42(m,1H),7.68-7.74(m,2H),7.87-7.88(m,1H),8.03-8.07(m,1H),8.40-8.58(m,2H),11.04(br s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值510.2；实测值511.2；Rt＝2.168min。
实施例637.2-甲氧基-5-(2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(2-(吡咯烷-1-基)乙基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物1288)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：26.7mg(23.85％)。
HPLC条件：柱：YMC Triart C18 100*20mm，5微米；0-1-6min50-50-80％水-MeOH+0.1％ NH4OH；(装载泵4ml/min MeOH)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99-1.16(m,4H),1.32-1.39(m,2H),1.68(m,4H),1.85-1.91(m,2H),2.08-2.37(m,2H),2.84-2.86(m,2H),3.23-3.26(m,3H),3.49-3.73(m,2H),3.86-4.20(m,4H),4.48-4.95(m,1H),5.30-5.79(m,2H),7.24-7.54(m,1H),7.69-7.88(m,2H),8.00-8.05(m,1H),8.31-8.68(m,1H),11.02-11.11(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值550.2；实测值551.2；Rt＝2.099min。
实施例638.N-(咪唑并[1,2-a]吡啶-7-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(1-甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1301)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：86mg(47.56％)。
HPLC条件：柱：XBridge C18 100*19mm，5微米；0-5min 15-65％水-MeCN+0.1％NH4OH；(装载泵4ml/min MeCN)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.97-1.07(m,3H),1.30-1.41(m,1H),1.64-1.74(m,1H),1.77-1.93(m,3H),1.99-2.14(m,5H),2.18(s,3H),2.29-2.36(m,1H),2.49-2.51(m,3H),2.80-2.86(m,2H),3.01-3.09(m,1H),3.31-3.33(m,1H),3.36-4.07(m,1H),5.27-5.82(m,1H),7.06-7.31(m,1H),7.34-7.44(m,1H),7.86-7.91(m,1H),8.01-8.09(m,1H),8.19-8.35(m,1H),8.69-8.83(m,1H),11.13-11.40(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值541.2；实测值542.2；Rt＝2.872min。
实施例639.外消旋-2-(2-甲氧基乙基)-5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑的合成
步骤1：5-溴-2-(2-甲氧基乙基)苯并[d]噻唑的合成
将2-氨基-4-溴苯硫酚(5.5g，26.95mmol，170.94uL)、3-甲氧基丙腈(3.44g，40.42mmol，3.67mL)、乙酸铜(II)(489.49mg，2.69mmol)、TEA(2.73g，26.95mmol，3.76mL)溶解于EtOH(100mL)中。将混合物在70℃(油浴温度)下搅拌13h。在反应完成(通过LCMS监测)之后，将混合物冷却至室温且用Na2CO3水溶液萃取，且将粗产物用EtOAc萃取。将有机萃取物在真空中浓缩，且通过硅胶柱色谱使用己烷/EtOAc作为洗脱液来纯化所得残余物，以得到5-溴-2-(2-甲氧基乙基)-1,3-苯并噻唑(2.75g，10.10mmol，37.49％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值272.2；实测值273.2；Rt＝1.369min。
步骤2：2-(2-甲氧基乙基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案J步骤2制备。产率：3.2g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值319.2；实测值320.2；Rt＝1.562min。
步骤3：6-(2-(2-甲氧基乙基)苯并[d]噻唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案J步骤3制备。产率：3.2g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值388.2；实测值389.2；Rt＝1.577min。
步骤4：2-(2-甲氧基乙基)-5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案J步骤4制备。产率：3.2g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值288.2；实测值289.2；Rt＝0.764min。
步骤5：外消旋-2-(2-甲氧基乙基)-5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：3g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值290.2；实测值291.2；Rt＝0.877min。
实施例640.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(2-(3-(二甲基氨基)双环[1.1.1]戊-1-基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1404)的合成
步骤1：(2R,5S)-2-(苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
在室温下向5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑(3g，7.80mmol)和碳酸氢钠(1.97g，23.41mmol，910.82μL)于DCM(22.89mL)中的溶液中分批添加二碳酸二-叔丁酯(1.70g，7.80mmol，1.79mL)。当停止气体逸出时，用10％ NaHCO3水溶液和盐水洗涤，经Na2SO4干燥且蒸发至干，以得到呈黄色固体的(2R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.3g，6.92mmol，88.67％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.04(d,3H),1.34(m,1H),1.44(s,9H),1.79(m,2H),2.11(m,2H),3.03(m,1H),3.75(m,1H),5.46(m,1H),7.33(d,1H),7.88(d,1H),8.01(s,1H),8.90(s,1H)。
步骤2：(2R,5S)-2-(3-氨基-4-巯基苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
在Ar气氛、室温下，向(2R,5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(3.1g，9.32mmol)于EtOH(50mL)中的溶液中添加单水合肼(4.67g，93.24mmol，4.55mL)。然后将反应混合物在回流下搅拌过夜。注意：冷凝器顶部用橡胶隔片加盖且通过针连接具有氩气的气球以平衡压力。通过LCMS监测反应进展。注意：在LCMS上可发现产物为硫化物或二硫化物，因为硫化物可在LCMS过程期间氧化为二硫化物。然后将所得混合物冷却，蒸发且分配于水与EtOAc之间。将有机相用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，且在真空中浓缩，以得到呈棕色油状物的(2R,5S)-2-(3-氨基-4-氢硫基苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(3g，9.30mmol，99.77％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值322.2；实测值323.2；Rt＝4.134min。
步骤3：(2R,5S)-2-(2-(3-(甲氧基羰基)双环[1.1.1]戊-1-基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤1B制备。产率：2.5g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值456.2；实测值457.2；Rt＝4.909min。
步骤4：3-(5-((2R,5S)-1-(叔丁氧基羰基)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)双环[1.1.1]戊烷-1-甲酸的合成
向(2R,5S)-2-[2-(3-甲氧基羰基-1-双环[1.1.1]戊基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.5g，5.48mmol)于MeOH(50mL)中的溶液中添加氢氧化钠珠粒(437.99mg，10.95mmol，205.63μL)且使所得混合物在室温下搅拌18h。然后，将所得混合物蒸发至干，溶解于水中，酸化至pH＝1且用EtOAc萃取两次，将有机物用盐水洗涤，经Na2SO4干燥且蒸发。获得呈米色固体的3-[5-[(2R,5S)-1-叔丁氧基羰基-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-2-基]双环[1.1.1]戊烷-1-甲酸(1.9g，4.29mmol，78.41％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.97(d,3H),1.29(m,1H),1.38(s,9H),1.40(m,2H),1.52(m,1H),1.80(m,1H),2.07(m,2H),2.43(m,4H),2.99(m,1H),3.63(m,1H),5.30(m,1H),7.28(d,1H),7.79(s,1H),8.03(d,1H),12.57(bds,1H)。
步骤5：(2R,5S)-2-(2-(3-(((苯甲氧基)羰基)氨基)双环[1.1.1]戊-1-基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
向3-[5-[(2R,5S)-1-叔丁氧基羰基-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-2-基]双环[1.1.1]戊烷-1-甲酸(1.7g，3.84mmol)、TEA(427.56mg，4.23mmol，588.93μL)于甲苯(50mL)中的溶液中添加叠氮磷酸二苯酯(1.06g，3.84mmol，830.40μL)和苯甲醇(498.47mg，4.61mmol，477.00μL)且将所得混合物在90℃下搅拌过夜。将反应混合物蒸发，溶解于K2CO3水溶液/DCM混合物中，将水用DCM反萃取，将合并的有机物用盐水洗涤，干燥且蒸发，以得到呈深黄色胶状物的(2R,5S)-2-[2-[3-(苯甲氧基羰基氨基)-1-双环[1.1.1]戊基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(2g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值547.2；实测值548.2；Rt＝4.770min。
步骤6：(2R,5S)-2-(2-(3-(二甲基氨基)双环[1.1.1]戊-1-基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
在三颈圆底烧瓶中，向(2R,5S)-2-[2-[3-(苯甲氧基羰基氨基)-1-双环[1.1.1]戊基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(2g，3.65mmol)和用7-8％ MeOH稳定的37重量％甲醛水溶液(328.93mg，10.95mmol，303.72μL)于MeOH(50mL)中的溶液中添加干燥的487型钯(10％于碳上)(38.86mg，365.16μmol)。将反应烧瓶抽真空且用氢气(368.04mg，182.58mmol)回填且使混合物搅拌72h。通过薄硅胶垫过滤，随后浓缩且在真空下干燥，得到残余物，其通过CC(Interchim；80g SiO2，氯仿/MeCN，其中MeCN为0～100％，进一步为MeCN/MeOH，其中MeOH为0～20％，流速＝60mL/min，Rv＝29-33CV)进行纯化，以得到呈黄色油状物的(2R,5S)-2-[2-[3-(二甲基氨基)-1-双环[1.1.1]戊基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.34g，769.88μmol，21.08％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值441.2；实测值442.2；Rt＝1.568min。
步骤7：N,N-二甲基-3-(5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)双环[1.1.1]戊-1-胺的合成
在21℃下，向(2R,5S)-2-[2-[3-(二甲基氨基)-1-双环[1.1.1]戊基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(100mg，113.22μmol)于DCM(5mL)中的溶液中添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(20.64mg，566.09μmol，25.80μL)。使所得混合物搅拌6h。将所得混合物蒸发至干且不经进一步纯化即用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值341.2；实测值342.2；Rt＝1.225min。
步骤8：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(2-(3-(二甲基氨基)双环[1.1.1]戊-1-基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1404)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：14.4mg(24.62％)。
HPLC条件：柱：XBridge C18 100*19mm，5微米；0.5-6.5min30-55％水-MeCN+NH3，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeCN)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99-1.05(m,3H),1.05-1.15(m,3H),1.27-1.40(m,1H),1.62-1.75(m,1H),1.81-1.92(m,1H),2.02-2.13(m,1H),2.15(s,6H),2.17(s,6H),2.27-2.34(m,1H),2.39-2.45(m,2H),2.77-3.14(m,1H),3.48-4.06(m,1H),5.27-5.61(m,1H),5.62-5.73(m,2H),7.32-7.43(m,1H),7.42-7.55(m,1H),7.86-7.96(m,1H),7.97-8.13(m,2H),10.53(br s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值532.2；实测值533.2；Rt＝2.240min。
实施例641.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(2-(1-((二甲基氨基)甲基)环丙基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1347)的合成
步骤1：((1-(5-溴苯并[d]噻唑-2-基)环丙基)甲基)氨基甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤1B制备。产率：5.2g(92.29％)
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值383.2；实测值384.2；Rt＝1.648min。
步骤2：(1-(5-溴苯并[d]噻唑-2-基)环丙基)甲胺的合成
在25℃下，将TFA(22.20g，194.70mmol，15mL)一次性添加到N-[[1-(5-溴-1,3-苯并噻唑-2-基)环丙基]甲基]氨基甲酸叔丁酯(2.7g，7.04mmol)于DCM(30mL)中的搅拌溶液中。将所得溶液在25℃下搅拌0.5h，然后在真空中浓缩。将残余物用冰冷的水(50ml)稀释且用10％氢氧化钠水溶液碱化至pH 11。将所得混合物用DCM(2*50ml)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中浓缩，以得到呈红色胶状物的粗品[1-(5-溴-1,3-苯并噻唑-2-基)环丙基]甲胺(1.9g，6.71mmol，95.25％产率)，其直接用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值383.2；实测值384.2；Rt＝0.862min。
步骤3：1-(1-(5-溴苯并[d]噻唑-2-基)环丙基)-N,N-二甲基甲胺的合成
在25℃下，将用7-8％ MeOH稳定的37重量％甲醛水溶液(1.6g，19.71mmol，1.48mL，37％纯度)和乙酸(805.79mg，13.42mmol，768.15μL)添加到[1-(5-溴-1,3-苯并噻唑-2-基)环丙基]甲胺(1.9g，6.71mmol)于MeOH(60mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在25℃下搅拌1h，然后在25℃下一次性添加氰基硼氢化钠(843.23mg，13.42mmol)(发泡！)。将反应混合物在25℃下搅拌18h，然后在真空中浓缩。将残余物用10％氢氧化钠水溶液(40ml)稀释且用DCM(2*30ml)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中浓缩，以得到呈淡棕色胶状物的粗品1-[1-(5-溴-1,3-苯并噻唑-2-基)环丙基]-N,N-二甲基甲胺(1.9g，6.10mmol，90.99％产率)，其直接用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值311.2；实测值312.2；Rt＝2.196min。
步骤4：N,N-二甲基-1-(1-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)环丙基)甲胺的合成
通过一般程序方案H步骤2制备。产率：2.19g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值358.2；实测值359.2；Rt＝3.096min。
步骤5：(S)-6-(2-(1-((二甲基氨基)甲基)环丙基)苯并[d]噻唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤3制备。产率：3.9g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值427.2；实测值428.2；Rt＝1.315min。
步骤6：(S)-N,N-二甲基-1-(1-(5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)环丙基)甲胺的合成
通过一般程序方案H步骤4制备。产率：0.85g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值327.2；实测值328.2；Rt＝0.616min。
步骤7：N,N-二甲基-1-(1-(5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)环丙基)甲胺的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：0.67g(78.34％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值329.2；实测值330.2；Rt＝0.685min。
步骤8：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(2-(1-((二甲基氨基)甲基)环丙基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1347)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：62mg(35.67％)。
HPLC条件：柱：XBridge C18 100*19mm，5微米；0-5min50-100％水-MeOH+0.1％NH4OH，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeOH)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.09(m,8H),1.39(m,3H),1.69(m,1H),1.86(m,1H),2.12(m,1H),2.25(s,6H),2.36(m,2H),2.62(m,3H),2.76(m,1H),3.85(m,1H),5.64(m,3H),7.31(m,1H),7.47(m,1H),7.76(m,1H),7.99(m,2H),10.54(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值520.2；实测值521.2；Rt＝1.924min。
实施例642.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-(2-甲基-6-(2-(1-甲基哌啶-4-基)苯并[b]噻吩-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1395和化合物1173)的合成
步骤1：5-溴-2-(1-甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑的合成
向磷酸(7.82g，79.80mmol，4.60mL)中添加五氧化二磷(V)(9.20g，64.82mmol，4.00mL)，将所得混合物在80℃下搅拌0.25h。然后添加1-甲基哌啶-4-甲酸(2.02g，11.27mmol，HCl)和2-氨基-4-溴苯硫酚(2.3g，11.27mmol)且将所得混合物在160℃下搅拌13h。将混合物冷却，用冰冷水(150ml)稀释。将溶液的pH用NaOH调节至10且用DCM(3*40ml)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥且在真空中蒸发，以得到5-溴-2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑(3.5g，11.25mmol，99.78％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值311.2；实测值312.2；Rt＝0.774min。
步骤2：2-(1-甲基哌啶-4-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑的合成
将5-溴-2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑(3.5g，11.25mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(2.86g，11.25mmol)和乙酸钾(2.21g，22.49mmol，1.41mL)混合于二噁烷(70mL)中。将所得混合物抽真空，然后用氩气回填，将此操作重复三次，然后在氩气下添加Pd(dppf)Cl2*DCM(459.17mg，562.27μmol)。将反应混合物在氩气、90℃下搅拌13h，然后冷却且过滤。将滤饼用二噁烷(2*20ml)洗涤且丢弃。将所获得的2-(1-甲基-4-哌啶基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噻唑(3.9g，10.88mmol，96.79％产率)溶液直接用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值358.2；实测值359.2；Rt＝0.962min。
步骤3：2-甲基-6-(2-(1-甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
将碳酸钠(2.31g，21.77mmol，911.25μL)添加到2-(1-甲基-4-哌啶基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噻唑(3.9g，10.88mmol)和2-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(3.76g，10.88mmol)于二噁烷(80mL)和H2O(10mL)中的溶液中。将反应烧瓶抽真空且用氩气再填充3次。然后，在氩气流下添加Pd(dppf)Cl2*DCM(444.44mg，544.23μmol)。在惰性气氛下将所得混合物在90℃下搅拌14h。将反应溶液倾析且在减压下浓缩。将残余物用MTBE(250ml)稀释。将所得混浊溶液自油状残余物倾析。在真空中蒸发MTBE，以得到2-甲基-6-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(5g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值427.2；实测值428.2；Rt＝1.226min。
步骤4：5-(6-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)-2-(1-甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑的合成
将2-甲基-6-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(5g，11.69mmol)用TFA(13.33g，116.93mmol，9.01mL)稀释。将所得混合物在25℃下搅拌1h。在真空中蒸发TFA。将残余物用水(150ml)稀释。将所得混浊溶液自油状残余物倾析，然后用NaHCO3碱化。将产物用DCM(3*50ml)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥。在真空中蒸发DCM，以得到2-(1-甲基-4-哌啶基)-5-(2-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1,3-苯并噻唑(3g，9.16mmol，78.34％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值327.2；实测值328.2；Rt＝0.658min。
步骤5：5-(6-甲基哌啶-2-基)-2-(1-甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑的合成
向2-(1-甲基-4-哌啶基)-5-(2-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1,3-苯并噻唑(3g，9.16mmol)于MeOH(15mL)中的搅拌溶液中分批添加硼氢化钠(346.55mg，9.16mmol，322.67μL)。将反应混合物在25℃下搅拌1h。在真空中蒸发MeOH。将残余物用水(50ml)稀释且用DCM(3*30ml)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥。蒸发DCM，以得到2-(1-甲基-4-哌啶基)-5-(6-甲基-2-哌啶基)-1,3-苯并噻唑(2.3g，6.98mmol，76.20％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值329.2；实测值330.2；Rt＝0.682min。
步骤6：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-(2-甲基-6-(2-(1-甲基哌啶-4-基)苯并[b]噻吩-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺的合成
向1-甲基-4-[5-(6-甲基-2-哌啶基)苯并噻吩-2-基]哌啶(500.00mg，747.32μmol，2HCl)、2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(187.61mg，896.78μmol)和TEA(378.11mg，3.74mmol，520.81μL)于DMF(3mL)中的溶液中分批添加HATU(312.57mg，822.05μmol)。将混合物在25℃下搅拌1.5h。将反应混合物提交至HPLC(SYSTEM 40-70％0-5min H2O/MeOH/0.1％ NH4OH，流速：30ml/min(装载泵4ml/min MeOH)目标质量521柱：YMCTriart C18 100x20 mm，5um)，以得到N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[2-甲基-6-[2-(1-甲基-4-哌啶基)苯并噻吩-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(94mg，180.87μmol，24.20％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值519.2；实测值520.2；Rt＝1.816min。
步骤7：手性分离(化合物1173和化合物1395)
对外消旋N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[2-甲基-6-[2-(1-甲基-4-哌啶基)苯并噻吩-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(94mg，180.87μmol)进行手性分离(柱：Chiralpak IA-II(250*20mm，5mkm)；流动相：IPA-MeOH，50-50；流速：10mL/min)，以获得N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,6S)-2-甲基-6-[2-(1-甲基-4-哌啶基)苯并噻吩-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(19mg，36.56μmol，80.85％产率)和N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,6R)-2-甲基-6-[2-(1-甲基-4-哌啶基)苯并噻吩-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(10mg，19.24μmol，42.55％产率)。
化合物1173于分析条件下(柱：OD-H，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min为流动相)的保留时间为10.09min且化合物1395的保留时间为11.36min。
化合物1173：
保留时间：10.09min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.68-0.81(m,3H),1.07-1.16(m,3H),1.44-1.57(m,1H),1.58-1.67(m,1H),1.71-1.91(m,5H),2.04-2.18(m,4H),2.23(s,3H),2.35-2.44(m,2H),2.62-2.70(m,1H),2.83-2.97(m,2H),3.03-3.12(m,1H),4.06-4.84(m,1H),5.14-5.63(m,1H),5.63-5.92(m,2H),7.39-7.55(m,2H),7.95-8.09(m,3H),10.58(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值520.2；实测值521.2；Rt＝1.706min。
化合物1395：
保留时间：11.36min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99-1.14(m,3H),1.34-1.40(m,3H),1.40-1.50(m,1H),1.50-1.59(m,1H),1.62-1.77(m,2H),1.77-1.87(m,2H),2.02-2.12(m,3H),2.12-2.36(m,7H),2.39-2.43(m,1H),2.82-3.13(m,3H),4.12-4.41(m,1H),5.31-5.40(m,1H),5.47-5.71(m,2H),7.07-7.53(m,2H),7.73-7.78(m,0.5H),7.84(s,1H),7.93-8.02(m,1H),8.05-8.11(m,0.5H),10.10-10.52(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值520.2；实测值521.2；Rt＝1.645min。
实施例643.2-((2R,5S)-2-(2-(1-氮杂双环[2.2.1]庚-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1298)的合成
步骤1：2-(1-氮杂双环[2.2.1]庚-4-基)-5-溴苯并[d]噻唑的合成通过一般程序方案H步骤1A制备。产率：3.5g(92.4％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值309.2；实测值310.2；Rt＝0.961min。
步骤2：2-(1-氮杂双环[2.2.1]庚-4-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤2制备。产率：4g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值356.2；实测值357.2；Rt＝1.025min。
步骤3：(S)-6-(2-(1-氮杂双环[2.2.1]庚-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤3制备。产率：8g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值425.2；实测值426.2；Rt＝1.254min。
步骤4：(S)-2-(1-氮杂双环[2.2.1]庚-4-基)-5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤4制备。产率：6g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值325.2；实测值326.2；Rt＝0.683min。
步骤5：2-(1-氮杂双环[2.2.1]庚-4-基)-5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：2g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值327.2；实测值328.2；Rt＝0.709min。
步骤6：2-((2R,5S)-2-(2-(1-氮杂双环[2.2.1]庚-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1298)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：71mg(37.36％)。
HPLC条件：柱：YMC Triart C18 100*20mm，5微米；0-1-5min50-80％水-MeOH+0.1％ NH4OH，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeOH)。
通过手性HPLC(Chiralpak IA-III(250*20，5mkm)，IPA-MeOH，50-50，10ml/min)移除顺式杂质。
1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)1.02(m,3H),1.08(m,3H),1.35(m,1H),1.72(m,3H),1.86(m,1H),2.11(m,3H),2.33(m,2H),2.40(m,1H),2.66(m,5H),3.00(m,2H),3.86(m,1H),5.64(m,3H),7.41(m,2H),7.89(m,1H),8.04(m,2H),10.51(s,1H)
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值518.2；实测值519.2；Rt＝2.109min。
实施例644.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-((1R,5S,6s)-3-甲基-3-氮杂双环[3.1.0]己-6-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1366)的合成
步骤1：(1R,5S,6s)-6-(5-溴苯并[d]噻唑-2-基)双环[3.1.0]己烷-3-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤1B制备。产率：1.5g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值395.2；实测值396.2；Rt＝1.692min。
步骤2：2-((1R,5S,6s)-3-氮杂双环[3.1.0]己-6-基)-5-溴苯并[d]噻唑的合成
分别在25℃下向(1R,5S)-6-(5-溴-1,3-苯并噻唑-2-基)-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-甲酸叔丁酯(2.3g，5.82mmol)于DCM(10mL)中的搅拌溶液中添加二噁烷/HCl(6.9mL)。将所得反应混合物在25℃下搅拌12h。完成之后，将反应混合物在减压下浓缩。然后将产物的盐酸盐溶解于20ml水中，添加10％ Na2CO3(20ml)，用DCM(20ml两次)萃取。将有机层经Na2SO4干燥且蒸发。分离呈黄色状态的所需产物5-溴-2-[(1R,5S)-3-氮杂双环[3.1.0]己-6-基]-1,3-苯并噻唑(1.9g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值295.2；实测值296.2；Rt＝0.820min。
步骤3：5-溴-2-((1R,5S,6s)-3-甲基-3-氮杂双环[3.1.0]己-6-基)苯并[d]噻唑的合成
向5-溴-2-[(1R,5S)-3-氮杂双环[3.1.0]己-6-基]-1,3-苯并噻唑(1.9g，6.44mmol)于MeOH(100mL)中的搅拌溶液中添加37％甲醛水溶液(289.89mg，9.65mmol，267.67μL)和乙酸(773.03mg，12.87mmol，736.92μL)，30分钟之后，在25℃下分别添加氰基硼氢化钠(606.71mg，9.65mmol)。将所得反应混合物在25℃下搅拌14h。完成之后，将反应混合物在减压下浓缩，然后用DCM/水(100ml/50ml)萃取。将有机相经Na2SO4干燥，蒸发，以获得呈黄色状态的粗产物。分离呈黄色状态的所需产物5-溴-2-[(1R,5S)-3-甲基-3-氮杂双环[3.1.0]己-6-基]-1,3-苯并噻唑(1.7g，5.50mmol，85.42％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值309.2；实测值310.2；Rt＝0.951min。
步骤4：2-((1R,5S,6s)-3-甲基-3-氮杂双环[3.1.0]己-6-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤2制备。产率：1.6g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值356.2；实测值357.2；Rt＝1.081min。
步骤5：(S)-3-甲基-6-(2-((1R,5S,6s)-3-甲基-3-氮杂双环[3.1.0]己-6-基)苯并[d]噻唑-5-基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤3制备。产率：1.7g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值425.2；实测值426.2；Rt＝1.191min。
步骤6：5-((S)-5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)-2-((1R,5S,6s)-3-甲基-3-氮杂双环[3.1.0]己-6-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤4制备。产率：0.434g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值325.2；实测值326.2；Rt＝0.633min。
步骤7：2-((1R,5S,6r)-3-甲基-3-氮杂双环[3.1.0]己-6-基)-5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：0.187g(42.82％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值327.2；实测值328.2；Rt＝0.707min。
步骤8：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-((1R,5S,6s)-3-甲基-3-氮杂双环[3.1.0]己-6-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1366)的合成
通过一般程序方案H步骤6B制备。产率：49mg(28.65％)。
HPLC条件：柱：XBridge C18 100*19mm，5微米；0-5min 40-90％水-MeOH+0.1％NH4OH，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeOH)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.95-1.05(m,3H),1.05-1.16(m,3H),1.27-1.39(m,1H),1.64-1.73(m,1H),1.81-1.91(m,1H),2.02-2.12(m,1H),2.12-2.16(m,2H),2.26(s,3H),2.33-2.37(m,3H),2.37-2.44(m,2H),2.70(s,1H),2.73-2.79(m,0.3H),3.06-3.10(m,2H),3.24-3.27(m,0.7H),3.38-3.52(m,0.7H),4.01-4.06(m,0.3H),5.24-5.60(m,1H),5.60-5.71(m,2H),7.25-7.38(m,1H),7.41-7.58(m,1H),7.72-7.85(m,1H),7.92-8.12(m,2H),10.48-10.65(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值518.2；实测值519.2；Rt＝2.146min。
实施例645.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(2-(4-甲氧基-1-甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1118)的合成
步骤1：4-(5-氯苯并[d]噻唑-2-基)-4-甲氧基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
在0℃下，向4-(5-氯-1,3-苯并噻唑-2-基)-4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯(7g，18.98mmol)于THF(79.82mL)中的搅拌溶液中分批添加于矿物油中的氢化钠(油分散体)60％分散物(872.54mg，20.87mmol，55％纯度)。将所得混合物在0℃下搅拌40min。逐滴添加碘甲烷(3.10g，21.82mmol，1.36mL)且将所得混合物在25℃下搅拌12h。将反应混合物倒入到水(150ml)中且将产物用MTBE(3*50ml)萃取。将合并的有机层用水(2*30ml)洗涤，经Na2SO4干燥。在真空中蒸发溶剂，以得到4-(5-氯-1,3-苯并噻唑-2-基)-4-甲氧基哌啶-1-甲酸叔丁酯(7g，18.28mmol，96.34％产率)。
LCMS(ESI)：[M-t-Bu]+m/z：计算值326.2；实测值327.2；Rt＝1.608min。
步骤2：5-氯-2-(4-甲氧基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑的合成
向4-(5-氯-1,3-苯并噻唑-2-基)-4-甲氧基哌啶-1-甲酸叔丁酯(7g，18.28mmol)于DCM(50mL)中的搅拌溶液中添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(40.00g，1.10mol，50mL)。将所得混合物在25℃下搅拌14h。在真空中蒸发溶剂。将残余物用MTBE(50ml)稀释。将固体过滤，用MTBE洗涤，然后在真空中干燥，以得到5-氯-2-(4-甲氧基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑(3.3g，10.34mmol，56.54％产率，HCl)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值282.2；实测值283.2；Rt＝1.003min。
步骤3：5-氯-2-(4-甲氧基-1-甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑的合成
向5-氯-2-(4-甲氧基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑(3g，9.40mmol，HCl)于MeOH(100mL)中的搅拌溶液中添加用7-8％ MeOH稳定的37重量％甲醛水溶液(1.14g，14.10mmol，1.06mL，37％纯度)和无水乙酸钠(1.54g，18.79mmol，1.01mL)。将所得混合物在25℃下搅拌2h。然后分批添加氰基硼氢化钠(708.61mg，11.28mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌12h。蒸发甲醇。将残余物用水(70ml)稀释且用DCM(3*30ml)萃取。将合并的有机层用K2CO3溶液洗涤且经Na2SO4干燥。在真空中蒸发DCM，以得到5-氯-2-(4-甲氧基-1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑(2.1g，7.08mmol，75.29％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值296.2；实测值297.2；Rt＝2.139min。
步骤4：2-(4-甲氧基-1-甲基哌啶-4-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑的合成
将5-氯-2-(4-甲氧基-1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑(2.1g，7.08mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(1.98g，7.78mmol)和乙酸钾(1.39g，14.15mmol，884.52μL)混合于二噁烷(30mL)中。将所得混合物抽真空，然后用氩气回填，将此操作重复三次，然后在氩气下添加三(二苯亚甲基丙酮)二钯(0)(323.94mg，353.76μmol)和X-Phos(337.29mg，707.51μmol)。将反应混合物在氩气、90℃下搅拌14h。冷却反应混合物且过滤。将滤饼用二噁烷(2*10ml)洗涤且丢弃。将合并的滤液在真空中浓缩。将残余物用MTBE(50ml)稀释且用NaHSO4水溶液(20ml)萃取(重复3次)。将合并的水层用10％氢氧化钠水溶液碱化至pH 10，以得到2-(4-甲氧基-1-甲基-4-哌啶基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噻唑(2.6g，6.70mmol，94.63％产率)的水溶液，其直接用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值388.2；实测值389.2；Rt＝1.067min。
步骤5：(S)-6-(2-(4-甲氧基-1-甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤3制备。产率：1.9g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值457.2；实测值458.2；Rt＝1.403min。
步骤6：(S)-2-(4-甲氧基-1-甲基哌啶-4-基)-5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤4制备。产率：0.76g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值357.2；实测值358.2；Rt＝0.719min。
步骤7：2-(4-甲氧基-1-甲基哌啶-4-基)-5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：0.5g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值359.2；实测值360.2；Rt＝0.754min。
步骤8：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(2-(4-甲氧基-1-甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1118)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：56mg(24.37％)。
HPLC条件：柱：YMC Triart C18 100*20mm，5微米；0-5min45-75％水-MeOH+0.1％NH4OH，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeOH)。
化合物1118：
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.01-1.05(m,3H),1.06-1.14(m,3H),1.31-1.39(m,1H),1.68-1.73(m,1H),1.84-1.92(m,1H),2.03-2.09(m,3H),2.11-2.16(m,2H),2.18(s,3H),2.25-2.32(m,3H),2.38-2.43(m,2H),2.55-2.59(m,2H),2.77-3.06(m,1H),3.11(s,3H),3.46-4.08(m,1H),5.28-5.73(m,3H),7.37-7.45(m,1H),7.45-7.56(m,1H),7.89-7.96(m,1H),7.98-8.14(m,2H),10.52-10.63(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值550.2；实测值551.2；Rt＝1.726min。
实施例646.5-(2-((2R,5S)-2-(2-(1-((二甲基氨基)甲基)环丙基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-2-甲氧基烟酰胺(化合物1109)的合成
通过一般程序8步骤6A制备。产率：197mg(21.43％)。
HPLC条件：柱：YMC Triart C18 100*20mm，5微米；0-1-6min50-80％水-MeOH+0.1％ NH4OH，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeOH)。
然后将其另外使用制备型手性HPLC(柱：Chiralcel OD-H(250*20mm，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH，60-20-20；流速：12ml/min)进行纯化，以得到呈白色固体的化合物11092-甲氧基-5-[[2-氧代-2-[(2R,5S)-2-[2-[1-[(二甲基氨基)甲基]环丙基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(197mg，357.75μmol，21.43％产率)(RT＝16.790min)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.97-1.08(m,5H),1.31-1.41(m,1H),1.41-1.47(m,2H),1.67-1.76(m,1H),1.84-1.96(m,1H),2.01-2.36(m,8H),2.58-2.65(m,2H),2.78-3.24(m,1H),3.47-4.04(m,4H),5.19-5.71(m,1H),7.25-7.38(m,1H),7.65-8.03(m,4H),8.38-8.59(m,2H),10.96-11.15(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值550.2；实测值551.2；Rt＝2.439min。
实施例647.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(2-(4-氟-1-甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1160)的合成
步骤1：4-(5-氯苯并[d]噻唑-2-基)-4-氟哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成通过一般程序方案H步骤1B制备。产率：0.8g粗品。
LCMS(ESI)：[M-t-Bu]+m/z：计算值314.2；实测值315.2；Rt＝1.721min。
步骤2：5-氯-2-(4-氟哌啶-4-基)苯并[d]噻唑的合成
将于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(1.60g，43.88mmol，2mL)添加到4-(5-氯-1,3-苯并噻唑-2-基)-4-氟-哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.8g，2.16mmol)于MeOH(20mL)中的溶液中。将反应混合物在0℃下搅拌6h，然后蒸发且添加到MTBE(40ml)中，将所得沉淀过滤，用MTBE(30ml)洗涤且干燥，以得到5-氯-2-(4-氟-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑(0.5g，1.63mmol，75.45％产率，HCl)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值270.2；实测值271.2；Rt＝1.483min。
步骤3：5-氯-2-(4-氟-1-甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑的合成
将用7-8％ MeOH稳定的37重量％甲醛水溶液(146.62mg，4.88mmol，135.39μL)和乙酸(293.20mg，4.88mmol，279.50μL)添加到5-氯-2-(4-氟-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑(0.5g，1.63mmol，HCl)和无水乙酸钠(146.86mg，1.79mmol，96.12μL)于MeOH(21.02mL)中的溶液中。将所得混合物在0℃下搅拌1h，之后向其中添加氰基硼氢化钠(204.55mg，3.26mmol)。此后，继续搅拌6h。然后，在减压下移除溶剂且将残余物分配于10％ K2CO3水溶液(20ml)与DCM(40ml)之间。将有机层分离，经固体K2CO3干燥且在减压下浓缩，留下5-氯-2-(4-氟-1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑(0.5g，粗品)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.12(m,2H),2.45(s,3H),2.52(m,4H),2.75(m,2H),7.54(d,1H),8.14(s,1H),8.19(d,1H)。
步骤4：2-(4-氟-1-甲基哌啶-4-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑的合成
将三(二苯亚甲基丙酮)二钯(0)(80.39mg，87.79μmol)和X-Phos(167.40mg，351.15μmol)添加到5-氯-2-(4-氟-1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑(0.5g，1.76mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(579.60mg，2.28mmol)于二噁烷(20mL)中的溶液中。将反应烧瓶抽真空且用氩气再填充3次。然后在氩气流下添加乙酸钾(172.31mg，1.76mmol，109.75μL)。在惰性气氛下将所得混合物在90℃下搅拌15h，然后冷却且在真空中蒸发，倒入到水(200ml)中且用DCM(2x30 ml)萃取，经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，留下0.6g粗产物，0.6g残余物通过硅胶柱色谱使用MeCN梯度(10-100％ MeCN)进行纯化，以得到2-(4-氟-1-甲基-4-哌啶基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噻唑(0.16g，425.20μmol，24.22％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值376.2；实测值377.2；Rt＝1.181min。
步骤5：(S)-6-(2-(4-氟-1-甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤3制备。产率：0.3g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值445.2；实测值446.2；Rt＝3.023min。
步骤6：(S)-2-(4-氟-1-甲基哌啶-4-基)-5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤4制备。产率：0.2g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值345.2；实测值346.2；Rt＝1.379min。
步骤7：2-(4-氟-1-甲基哌啶-4-基)-5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：0.12g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值347.2；实测值348.2；Rt＝1.802min。
步骤8：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(2-(4-氟-1-甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1160)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：6.4mg(2.74％)。
HPLC条件：柱：YMC Triart C18 100*20mm，5微米；0-1-6min60-60-85％水-MeOH+0.1％ NH4OH，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeOH)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.02-1.06(m,6H),1.30-1.41(m,1H),1.64-1.73(m,1H),1.83-1.92(m,1H),2.10-2.20(m,3H),2.22-2.36(m,8H),2.38-2.42(m,2H),2.70-2.93(m,3H),3.45-4.08(m,1H),5.26-5.74(m,3H),7.40-7.45(m,1H),7.49-7.53(m,1H),7.94-8.07(m,2H),8.13-8.19(m,1H),10.49-10.63(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值538.2；实测值539.2；Rt＝2.357min。
实施例648.5-(2-((2R,5S)-2-(2-(3-((二甲基氨基)甲基)氧杂环丁烷-3-基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-2-甲氧基烟酰胺(化合物1155)的合成
步骤1：2-(3-(叠氮基甲基)氧杂环丁烷-3-基)-5-氯苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤1B制备。产率：11g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值280.2；实测值281.2；Rt＝3.578min。
步骤2：(3-(5-氯苯并[d]噻唑-2-基)氧杂环丁烷-3-基)甲胺的合成
将2-[3-(叠氮基甲基)氧杂环丁烷-3-基]-5-氯-1,3-苯并噻唑(11g，39.18mmol)(大约50ml)的粗MTBE溶液用MeOH(100mL)稀释且添加氯化铵(12.58g，235.10mmol，8.22mL)。在搅拌的情况下，在25℃下，将锌粉(7.69g，117.55mmol)分批添加到以上混合物中。将反应混合物在25℃下搅拌12h，然后过滤。将滤饼用MeOH(2*25ml)洗涤且丢弃。将合并的滤液在真空中浓缩。将残余物用MTBE(100ml)稀释且用5％硫酸氢钠水溶液(100ml)萃取。然后将所得硫酸氢胺水溶液用10％氢氧化钠水溶液碱化至pH 11且用DCM(2*50ml)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中浓缩，以得到呈淡黄色胶状物的粗品[3-(5-氯-1,3-苯并噻唑-2-基)氧杂环丁烷-3-基]甲胺(1.2g，4.71mmol，12.02％产率)，其直接用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值254.2；实测值255.2；Rt＝1.985min。
步骤3：1-(3-(5-氯苯并[d]噻唑-2-基)氧杂环丁烷-3-基)-N,N-二甲基甲胺的合成
在25℃下，将用7-8％ MeOH稳定的37重量％甲醛水溶液(946.16mg，11.66mmol，873.64μL，37％纯度)和乙酸(518.63mg，8.64mmol，494.41μL)添加到[3-(5-氯-1,3-苯并噻唑-2-基)氧杂环丁烷-3-基]甲胺(1.1g，4.32mmol)于MeOH(30.49mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在25℃下搅拌1h，然后在25℃下一次性添加氰基硼氢化钠(542.73mg，8.64mmol)(发泡！)。将反应混合物在25℃下搅拌12h，然后在真空中浓缩。将残余物用10％氢氧化钠水溶液(20ml)稀释且用DCM(2*20ml)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中浓缩，以得到呈淡黄色胶状物的粗品1-[3-(5-氯-1,3-苯并噻唑-2-基)氧杂环丁烷-3-基]-N,N-二甲基甲胺(1.3g，粗品)，其直接用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值282.2；实测值283.2；Rt＝1.530min。
步骤4：N,N-二甲基-1-(3-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)氧杂环丁烷-3-基)甲胺的合成
将1-[3-(5-氯-1,3-苯并噻唑-2-基)氧杂环丁烷-3-基]-N,N-二甲基甲胺(1.4g，4.95mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(1.38g，5.45mmol)和乙酸钾(971.72mg，9.90mmol，618.93μL)于二噁烷(35mL)中的混合物抽真空，然后用氩气回填。将此操作重复两次，然后在氩气下添加三(1,5-二苯基戊-1,4-二烯-3-酮)二钯(226.67mg，247.53μmol)和二环己基[2',4',6'-三(丙-2-基)-[1,1'-联苯基]-2-基]磷烷(472.02mg，990.14μmol)，且将反应混合物在95℃下搅拌18h。冷却反应混合物且过滤。将滤饼用二噁烷(2*10ml)洗涤且丢弃。将合并的滤液在真空中浓缩。将残余物用DCM(30ml)稀释且用硫酸氢钠(1.19g，9.90mmol)于水(20ml)中的溶液萃取(重复两次)。将合并的水层用10％氢氧化钠水溶液碱化至pH 10且用DCM(3*25ml)反萃取。两种DCM萃取物的蒸发未显示所需产物。似乎硼酸酯在水性介质中水解且呈硼酸留在水相中。合并的水层(大约100ml)含有N,N-二甲基-1-[3-[5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噻唑-2-基]氧杂环丁烷-3-基]甲胺(1.85g，4.94mmol，100.00％产率)(理论量的产物，最可能呈硼酸形式)，其直接用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值374.2；实测值375.2；Rt＝2.586min。
步骤5：(S)-6-(2-(3-((二甲基氨基)甲基)氧杂环丁烷-3-基)苯并[d]噻唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤3制备。产率：1.3g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值443.2；实测值444.2；Rt＝1.279min。
步骤6：(S)-N,N-二甲基-1-(3-(5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)氧杂环丁烷-3-基)甲胺的合成
通过一般程序方案H步骤4制备。产率：0.45g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值343.2；实测值344.2；Rt＝0.624min。
步骤7：N,N-二甲基-1-(3-(5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)氧杂环丁烷-3-基)甲胺的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：0.33g(72.91％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值345.2；实测值346.2；Rt＝0.574min。
步骤8：5-(2-((2R,5S)-2-(2-(3-((二甲基氨基)甲基)氧杂环丁烷-3-基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-2-甲氧基烟酰胺(化合物1155)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：27.3mg(11.1％)。
HPLC条件：柱：YMC Triart C18 100*20mm，5微米；0-1-5min20-60％水-MeCN+0.1％ NH4OH，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeOH)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.01-1.09(m,3H),1.32-1.42(m,1H),1.70-1.77(m,1H),1.84-1.94(m,1H),2.08(s,6H),2.11-2.36(m,2H),2.83-3.37(m,3H),3.50-4.09(m,4H),4.70-4.78(m,2H),4.91-4.97(m,2H),5.28-5.75(m,1H),7.37-7.46(m,1H),7.66-7.78(m,2H),7.93-7.99(m,1H),8.04-8.12(m,1H),8.41-8.49(m,1H),8.49-8.60(m,1H),10.97-11.20(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值566.2；实测值567.2；Rt＝2.625min。
实施例649.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((5S)-5-甲基-2-(2-(3-甲基-3-氮杂双环[3.2.0]庚-6-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1147)的合成
步骤1：2-(3-氮杂双环[3.2.0]庚-6-基)-5-溴苯并[d]噻唑的合成通过一般程序方案H步骤1A制备。产率：2.3g(89.73％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值309.2；实测值310.2；Rt＝0.815min。
步骤2：5-溴-2-(3-甲基-3-氮杂双环[3.2.0]庚-6-基)苯并[d]噻唑的合成
在25℃下，将用7-8％ MeOH稳定的37重量％甲醛水溶液(783.90mg，26.11mmol，723.82μL)和乙酸(893.33mg，14.88mmol，851.60μL)添加到2-(3-氮杂双环[3.2.0]庚-6-基)-5-溴-1,3-苯并噻唑(2.3g，7.44mmol)于MeOH(60.07mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在25℃下搅拌0.5h，然后在25℃下一次性添加氰基硼氢化钠(934.83mg，14.88mmol)(发泡！)。将反应混合物在25℃下搅拌17h，然后在真空中浓缩。将残余物用10％氢氧化钠水溶液(20ml)稀释且用DCM(2*20ml)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中浓缩，以得到粗品5-溴-2-(3-甲基-3-氮杂双环[3.2.0]庚-6-基)-1,3-苯并噻唑(1.5g，4.64mmol，62.39％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值323.2；实测值324.2；Rt＝0.840min。
步骤3：2-(3-甲基-3-氮杂双环[3.2.0]庚-6-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤2制备。产率：1g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值370.2；实测值371.2；Rt＝0.886min。
步骤4：(3S)-3-甲基-6-(2-(3-甲基-3-氮杂双环[3.2.0]庚-6-基)苯并[d]噻唑-5-基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤3制备。产率：1.4g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值439.2；实测值440.2；Rt＝1.366min。
步骤5：5-((S)-5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)-2-(3-甲基-3-氮杂双环[3.2.0]庚-6-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤4制备。产率：1g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值339.2；实测值340.2；Rt＝0.697min。
步骤6：2-(3-甲基-3-氮杂双环[3.2.0]庚-6-基)-5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：0.7g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值341.2；实测值342.2；Rt＝0.658min。
步骤7：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((5S)-5-甲基-2-(2-(3-甲基-3-氮杂双环[3.2.0]庚-6-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1147)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：12.7mg(6.26％)。
HPLC条件：柱：YMC Triart C18 100*20mm，5微米；0-1-6min60-60-85％水-MeOH+0.1％ NH4OH，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeOH)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.02-1.14(m,6H),1.30-1.39(m,1H),1.67-1.73(m,1H),1.82-2.15(m,5H),2.17-2.32(m,4H),2.39-2.43(m,2H),2.67-2.98(m,4H),3.06-3.21(m,2H),3.46-4.11(m,2H),5.25-5.73(m,3H),7.31-7.41(m,1H),7.43-7.53(m,1H),7.82-7.92(m,1H),7.97-8.10(m,2H),10.49-10.63(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值532.2；实测值533.2；Rt＝2.075min。
实施例650.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(3-甲基-3-氮杂双环[3.1.1]庚-1-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1212)的合成
步骤1：1-(5-溴苯并[d]噻唑-2-基)-3-氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤1B制备。产率：1.3g粗品。
LCMS(ESI)：[M-t-Bu]+m/z：计算值353.2；实测值354.2；Rt＝1.756min。
步骤2：2-(3-氮杂双环[3.1.1]庚-1-基)-5-溴苯并[d]噻唑的合成
将1-(5-溴-1,3-苯并噻唑-2-基)-3-氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-甲酸叔丁酯(1.3g，3.18mmol)溶解于DCM(10mL)中且添加TFA(10mL)。将混合物在25℃下搅拌2h。然后将其蒸发，溶解于水中且添加Na2CO3。将混合物用DCM萃取两次，将合并的有机相经Na2SO4干燥且在减压下浓缩，以获得2-(3-氮杂双环[3.1.1]庚-1-基)-5-溴-1,3-苯并噻唑(930mg，粗品)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值309.2；实测值310.2；Rt＝1.021min。
步骤3：5-溴-2-(3-甲基-3-氮杂双环[3.1.1]庚-1-基)苯并[d]噻唑的合成
将2-(3-氮杂双环[3.1.1]庚-1-基)-5-溴-1,3-苯并噻唑(930mg，3.01mmol)溶解于MeOH(30mL)中且依次添加乙酸(361.22mg，6.02mmol，344.34μL)、2-(3-氮杂双环[3.1.1]庚-1-基)-5-溴-1,3-苯并噻唑(930mg，3.01mmol)、氰基硼氢化钠(283.50mg，4.51mmol)。将反应物在25℃下搅拌12h。将反应混合物蒸发。添加水且将其用DCM萃取两次。将合并的有机相用盐水洗涤，经Na2SO4干燥且在减压下浓缩，以获得5-溴-2-(3-甲基-3-氮杂双环[3.1.1]庚-1-基)-1,3-苯并噻唑(950mg，粗品)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值323.2；实测值324.2；Rt＝0.835min。
步骤4：2-(3-甲基-3-氮杂双环[3.1.1]庚-1-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤2制备。产率：1.8g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值370.2；实测值371.2；Rt＝1.041min。
步骤5：(S)-3-甲基-6-(2-(3-甲基-3-氮杂双环[3.1.1]庚-1-基)苯并[d]噻唑-5-基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤3制备。产率：0.94g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值439.2；实测值440.2；Rt＝1.288min。
步骤6：(S)-5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)-2-(3-甲基-3-氮杂双环[3.1.1]庚-1-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤4制备。产率：0.8g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值339.2；实测值340.2；Rt＝0.768min。
步骤7：2-(3-甲基-3-氮杂双环[3.1.1]庚-1-基)-5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：0.65g(78.34％)。
步骤8：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(3-甲基-3-氮杂双环[3.1.1]庚-1-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1212)的合成
通过一般程序方案H步骤6B制备。产率：19.7mg(19.43％)。
HPLC条件：柱：SunFire C18 100*19mm，5微米；2-10min40-50％ MeOH+NH3，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeOH)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98-1.05(m,3H),1.05-1.15(m,3H),1.29-1.41(m,1H),1.62-1.76(m,1H),1.82-1.93(m,1H),1.96-2.00(m,2H),2.04-2.23(m,1H),2.25-2.36(m,4H),2.38(s,3H),2.40-2.43(m,2H),2.75-2.78(m,0.3H),2.79(s,2H),3.02-3.12(m,2H),3.24-3.27(m,0.7H),3.47-4.05(m,1H),5.25-5.61(m,1H),5.61-5.74(m,2H),7.33-7.43(m,1H),7.42-7.54(m,1H),7.86-7.93(m,1H),7.97-8.11(m,2H),10.56(br s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值532.2；实测值533.2；Rt＝0.990min。
实施例651.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-((3aR,5r,6aS)-2-甲基八氢环戊[c]吡咯-5-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1338)的合成
步骤1：(3aR,5s,6aS)-5-(5-溴苯并[d]噻唑-2-基)六氢环戊[c]吡咯-2(1H)-甲酸叔丁酯的合成
将三苯基膦(6.17g，23.52mmol)一次性添加到(3aR,6aS)-2-叔丁氧基羰基-3,3a,4,5,6,6a-六氢-1H-环戊[c]吡咯-5-甲酸(2.50g，9.80mmol)、2-氨基-4-溴苯硫酚(2g，9.80mmol)、四氯化碳(8.74g，56.84mmol)和TEA(4.96g，49.00mmol，6.83mL)的溶液中。由于放热反应，所得反应混合物暂时升温至大约50-60℃。此后，将其在20℃下搅拌18h。然后，在减压下移除挥发物且将残余物用MTBE(100ml)研磨。过滤出所得浅色沉淀。在减压下浓缩滤液且通过梯度柱色谱(SiO2，己烷/MTBE)纯化残余物，得到5-(5-溴-1,3-苯并噻唑-2-基)-3,3a,4,5,6,6a-六氢-1H-环戊[c]吡咯-2-甲酸叔丁酯(1.55g，3.66mmol，37.36％产率)。
LCMS(ESI)：[M-t-Bu]+m/z：计算值367.2；实测值368.2；Rt＝1.737min。
步骤2：5-溴-2-((3aR,5s,6aS)-八氢环戊[c]吡咯-5-基)苯并[d]噻唑的合成
将TFA(4.17g，36.61mmol，2.82mL)添加到5-(5-溴-1,3-苯并噻唑-2-基)-3,3a,4,5,6,6a-六氢-1H-环戊[c]吡咯-2-甲酸叔丁酯(1.55g，3.66mmol)于DCM(7.18mL)中的溶液中。将所得混合物在20℃下搅拌5h。然后，将其在减压下浓缩，留下5-溴-2-[(3aR,6aS)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氢环戊[c]吡咯-5-基]-1,3-苯并噻唑(1.2g，2.75mmol，75.13％产率，TFA)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值324.2；实测值325.2；Rt＝0.999min。
步骤3：5-溴-2-((3aR,5s,6aS)-2-甲基八氢环戊[c]吡咯-5-基)苯并[d]噻唑的合成
将用7-8％ MeOH稳定的37重量％甲醛水溶液(222.93mg，7.42mmol，205.85μL)和乙酸钠(609.07mg，7.42mmol，398.60μL)添加到5-溴-2-[(3aR,6aS)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氢环戊[c]吡咯-5-基]-1,3-苯并噻唑(1.2g，3.71mmol)于MeOH(19.40mL)中的溶液中。将所得混合物在20℃下搅拌1h，之后向其中添加氰基硼氢化钠(466.58mg，7.42mmol)。此后，继续搅拌16h。然后，在减压下移除溶剂且将残余物分配于15％ K2CO3水溶液(30ml)与DCM(50ml)之间。将有机层分离，经固体K2CO3干燥且在减压下浓缩，留下5-溴-2-[(3aR,6aS)-2-甲基-3,3a,4,5,6,6a-六氢-1H-环戊[c]吡咯-5-基]-1,3-苯并噻唑(1.2g，3.56mmol，95.84％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值337.2；实测值338.2；Rt＝0.918min。
步骤4：(2-((3aR,5s,6aS)-2-甲基八氢环戊[c]吡咯-5-基)苯并[d]噻唑-5-基)硼酸的合成
通过一般程序方案H步骤2制备。产率：0.5g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值302.2；实测值303.2；Rt＝0.618min。
步骤5：(S)-3-甲基-6-(2-((3aR,5s,6aS)-2-甲基八氢环戊[c]吡咯-5-基)苯并[d]噻唑-5-基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(化合物1338)的合成
通过一般程序方案H步骤3制备。产率：0.7g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值453.2；实测值454.2；Rt＝1.152min。
步骤6：5-((S)-5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)-2-((3aR,5s,6aS)-2-甲基八氢环戊[c]吡咯-5-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤4制备。产率：0.5g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值353.2；实测值354.2；Rt＝0.603min。
步骤7：2-((3aR,5s,6aS)-2-甲基八氢环戊[c]吡咯-5-基)-5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：0.3g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值355.2；实测值356.2；Rt＝0.710min。
步骤8：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-((3aR,5r,6aS)-2-甲基八氢环戊[c]吡咯-5-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1338)的合成
通过一般程序方案H步骤6B制备。产率：7.4mg(2.61％)。
HPLC条件：柱：SunFire C18 100*19mm，5微米；0-5min50-100％水-MeCN+FA，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeOH)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.00-1.05(m,3H),1.06-1.14(m,3H),1.27-1.40(m,1H),1.58-1.76(m,3H),1.79-2.05(m,3H),2.07-2.13(m,2H),2.19-2.23(m,3H),2.25-2.36(m,3H),2.38-2.43(m,3H),2.60-2.75(m,3H),2.76-2.89(m,1H),3.71-4.05(m,1H),5.25-5.71(m,3H),7.30-7.42(m,1H),7.42-7.55(m,1H),7.80-7.92(m,1H),7.97-8.08(m,2H),10.49-10.59(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值546.2；实测值547.2；Rt＝2.250min。
实施例652.2-甲氧基-5-(2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-((S)-1-甲基哌啶-3-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物1359)的合成
步骤1：5-溴-2-(1-甲基哌啶-3-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤1A制备。产率：4.3g(93.99％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值311.2；实测值312.2；Rt＝0.990min。
步骤2：2-(1-甲基哌啶-3-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤2制备。产率：4.9g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值358.2；实测值359.2；Rt＝0.965min。
步骤3：(3S)-3-甲基-6-(2-(1-甲基哌啶-3-基)苯并[d]噻唑-5-基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案H步骤3制备。产率：5.8g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值427.2；实测值428.2；Rt＝1.150min。
步骤4：5-((S)-5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)-2-(1-甲基哌啶-3-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤4制备。产率：3g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值327.2；实测值328.2；Rt＝0.656min。
步骤5：5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)-2-(1-甲基哌啶-3-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案H步骤5制备。产率：1.8g(59.63％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值329.2；实测值330.2；Rt＝0.491min。
步骤6：(2R,5S)-5-甲基-2-(2-(1-甲基哌啶-3-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
向2-(1-甲基-3-哌啶基)-5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑(1.5g，4.55mmol)于THF(4mL)中的溶液中添加二碳酸二-叔丁酯(993.53mg，4.55mmol，1.04mL)。将所得混合物在25℃下搅拌3h且通过HPLC(装置(流动相，柱)：SYSTEM 55-95％0-5min H2O/MeCN/0.1％ NH4OH，流速：30ml/min(装载泵4ml/min MeCN)，目标质量429，柱：XBridge BEHC18 5um 130A)纯化，以获得(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-3-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.99g，2.30mmol，50.62％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值429.2；实测值430.2；Rt＝3.390min。
步骤7：手性分离
对外消旋(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-3-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.99g，2.30mmol)进行手性分离(柱：Chiralpak AD-H-III(250*20mm，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，80-10-10，12ml/min)，以获得(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[(3S)-1-甲基-3-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-5-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(384mg，893.82μmol，77.58％产率)。
此异构体于分析条件下(柱：AD-H，以己烷-IPA-MeOH，80-10-10,0.8ml/min为流动相)的保留时间为11.83min。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值429.2；实测值430.2；Rt＝1.099min。
步骤8：5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)-2-((S)-1-甲基哌啶-3-基)苯并[d]噻唑的合成
将(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[(3S)-1-甲基-3-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-5-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(384mg，893.82μmol)于MeOH(4mL)和于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(325.89mg，8.94mmol，407.37μL)中的溶液在25℃下搅拌3h。蒸发溶剂，以得到5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-2-[(3S)-1-甲基-3-哌啶基]-1,3-苯并噻唑(392mg，893.17μmol，99.93％产率，3HCl)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值329.2；实测值330.2；Rt＝0.729min。
步骤9：2-甲氧基-5-(2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-((S)-1-甲基哌啶-3-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物1359)的合成
通过一般程序方案H步骤6A制备。产率：77mg(62.62％)。
HPLC条件：柱：XBridge C18 100*20mm，5微米；0-1-6min40-40-90％水-MeOH+0.1％ NH4OH，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeOH)。
1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)1.04(m,3H),1.36(m,1H),1.59(m,2H),1.71(m,2H),1.88(m,1H),2.06(m,3H),2.21(s,3H),2.29(m,2H),2.63(m,2H),2.93(m,2H),3.79(m,4H),5.49(d,1H),7.38(dd,1H),7.72(m,2H),7.88(m,1H),8.05(dd,1H),8.55(m,2H),11.04(s,1H)
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值550.2；实测值551.2；Rt＝2.550min。
方案I-式9化合物的合成
式9化合物为式(I)化合物，其中R1、R2、R3、R4、R6、R7和R8如本文所述。
一般程序9
方案I
步骤1：9-A的合成
8-H描述于方案H中。
将8-H(1当量)和TEA(1.1当量)溶解于THF中且冷却至0℃，随后在Ar下逐滴添加2-氯-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(1.1当量)且将反应混合物在室温下搅拌12h且在减压下蒸发，以得到9-A，其不经进一步纯化即用于下一步骤中。
步骤2：9-B的合成
在0℃下，向9-A(1当量)于THF(10mL)中的溶液鼓泡氨(1当量)达10min。然后将反应混合物在室温下搅拌18h。过滤出反应混合物且将滤液在真空中蒸发，以得到9-B，其不经进一步纯化即用于下一步骤中。
步骤3A：式9的合成
在氩气下，将9-B(1当量)、R3Br(1.1当量)、Cu(1当量)、CuI(1当量)、K2CO3(2当量)和N,N-二甲基环己-1,2-二胺(1.5当量)混合于二噁烷中，然后在小瓶中在95℃下搅拌过夜达24h。通过HPLC纯化残余物，以获得纯产物(式9)。
实施例653.N-(6-氨基-5-(氧杂环丁烷-3-基)吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(1-甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1334)的合成
通过一般程序方案9步骤3A制备。产率：67.6mg(30.46％)。
HPLC条件：柱：XBridge C18 100*19mm，5微米；0-6min 15-35％水-MeCN+0.1％NH4OH；(装载泵4ml/min MeCN)。
外消旋化合物1334：
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.03-1.05(d,3H),1.32-1.40(m,1H),1.70-1.90(m,4H),2.01-2.07(m,4H),2.18(s,3H),2.29-2.31(m,1H),2.82-3.07(m,3H),3.51-4.24(m,4H),4.47-4.54(m,2H),4.88-4.95(m,2H),5.31-5.70(m,3H),7.34-7.42(m,1H),7.68-7.90(m,2H),8.03-8.14(m,2H),10.61-10.67(d,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值548.2；实测值549.2；Rt＝1.834min。
通过手性HPLC(柱：Chiralpak AS-H(250x 20mm，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH，60-20-20；流速：13mL/min)纯化N-[6-氨基-5-(氧杂环丁烷-3-基)-3-吡啶基]-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺，以获得N-[6-氨基-5-(氧杂环丁烷-3-基)-3-吡啶基]-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(52mg，94.77μmol，22.33％产率)(RT＝11.43min)。
化合物1334于分析条件下(柱：AS-H，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min为流动相)10.48min。
化合物1334：
保留时间：10.48min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.02-1.04(m,3H),1.34-1.39(m,1H),1.70(m,1H),1.79-1.86(m,3H),2.03-2.07(m,4H),2.18(s,3H),2.29-2.37(m,1H),2.60(m,1H),2.82-2.84(m,2H),3.05(m,1H),3.51-3.53(m,1H),4.04-4.23(m,2H),4.48-4.54(m,2H),4.88-4.93(m,2H),5.31-5.70(m,3H),7.34-7.42(m,1H),7.68-7.76(d,1H),7.87-7.90(d,1H),8.03-8.07(m,1H),8.14(s,1H),10.60-10.67(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值548.2；实测值549.2；Rt＝1.806min。
实施例654.N-(6-氨基-5-(氧杂环丁烷-3-基)吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(2-(吡咯烷-1-基)乙基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1379)的合成
通过一般程序方案9步骤3A制备。产率：15.9mg(7.25％)。
HPLC条件：柱：YMC Triart C18 100*20mm，5微米；0-1-6min10-10-65％水-MeCN+0.1％ NH4OH；(装载泵4ml/min MeCN)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.94-1.14(m,3H),1.30-1.48(m,1H),1.66-1.69(m,3H),1.69-1.76(m,2H),1.83-1.95(m,1H),2.02-2.29(m,1H),2.29-2.37(m,1H),2.44-2.47(m,2H),2.53-2.58(m,2H),2.77-2.82(m,0.3H),2.83-2.88(m,2H),3.21-3.26(m,2H),3.26-3.28(m,0.7H),3.41-4.07(m,1H),4.13-4.29(m,1H),4.43-4.59(m,2H),4.87-4.99(m,2H),5.25-5.61(m,1H),5.61-5.75(m,2H),7.30-7.45(m,1H),7.65-7.80(m,1H),7.82-7.93(m,1H),7.99-8.06(m,1H),8.06-8.19(m,1H),10.54-10.77(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值548.2；实测值549.2；Rt＝2.110min。
实施例655.N-(6-氨基-5-甲氧基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(1-甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1203)的合成
通过一般程序方案9步骤3A制备。产率：55mg(42.15％)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.01-1.06(m,3H),1.31-1.42(m,1H),1.65-1.74(m,1H),1.78-1.93(m,3H),1.99-2.11(m,5H),2.18(s,3H),2.24-2.36(m,1H),2.83(d,2H),3.00-3.28(m,2H),3.49-4.06(m,4H),5.27-5.72(m,3H),7.28-7.44(m,2H),7.72-7.83(m,1H),7.85-7.92(m,1H),8.02-8.08(m,1H),10.48-10.70(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值522.2；实测值523.2；Rt＝2.451min。
在手性HPLC上使用以下条件纯化初始批次：
柱：Chiralpak IC-III(250*20mm，5mkm)；流动相：MeOH-IPA 50-50流速：11mL/min，RT＝45.776min。
化合物1203：
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.02-1.05(m,3H),1.32-1.40(m,2H),1.69-1.88(m,4H),2.01-2.07(m,4H),2.18(s,3H),2.29-2.37(m,1H),2.82-2.84(m,2H),3.03-3.07(m,1H),3.49-4.05(m,5H),5.30-5.70(m,3H),7.31-7.42(m,2H),7.74-7.91(m,2H),8.04-8.07(m,1H),10.59-10.56(d,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值522.2；实测值523.2；Rt＝1.852min。
方案J-式10化合物的合成
式10化合物为式(I)化合物，其中R1、R2、R3、R4、R6、R7和R8如本文所述。
一般程序10
方案J
步骤1A：10-C的合成
将磷酸(4当量)和五氧化二磷(4当量)混合在一起。将反应悬浮液在室温下搅拌10min，然后在Ar下添加10a-A(1当量)，随后添加10a-B(1.2当量)。将溶液在110℃下搅拌18h，然后将其用水研磨，碱化(NaOH，10％水溶液)至pH＝10，用DCM萃取两次，干燥且在真空中蒸发，以得到10-C。
步骤1B：10-C的合成
向10b-A(1当量)于DMSO中的搅拌溶液中添加4.1b-B(1当量)。将所得混合物在100℃下搅拌14h。将反应混合物倒入到冷水中且用MTBE萃取两次。将合并的有机层用水和盐水洗涤，经Na2SO4干燥。在真空中蒸发MTBE，以得到10-C。
步骤1C：10-C的合成
向10c-A(1当量)于1,2-二氯乙烷中的搅拌溶液中添加10c-B(2当量)且使其在25℃下搅拌2h，添加(三乙酰氧基)硼氢化钠(2当量)。将反应混合物在25℃下搅拌16h。完成之后，将反应混合物蒸发，用水萃取且通过K2CO3中和至pH＝10。将水相用CHCl3萃取两次。将合并的有机相经Na2SO4干燥且在减压下蒸发，以得到10-C。(将TEA(1.5当量/各酸当量，如果使用胺盐)添加到相应胺的溶液中)
步骤2：10-D的合成
将10-C(1当量)、B2Pin2(1.1当量)和KOAc(2当量)混合于二噁烷中。将所得混合物抽真空，然后用氩气回填，将此操作重复三次，然后在氩气下添加Pd(dppf)Cl2*DCM(0.05当量)。将反应混合物在氩气、90℃下搅拌14h，然后冷却且过滤。将滤饼用二噁烷洗涤两次。蒸发溶剂，以得到10-D。
步骤3：10-F的合成
将10-D(1当量)、3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.2当量)、碳酸钠(3当量)一起混合于二噁烷-水混合物(3:1)中。将所得混合物抽真空，然后用氩气回填。将此操作重复两次，然后添加Pd(dppf)Cl2*DCM(819.86mg，1.00mmol)且将反应混合物在氩气、90℃下搅拌过夜，然后冷却，且在真空中浓缩。将残余物用MTBE稀释且搅拌0.5h。在大部分残余物已溶解之后，添加无水硫酸钠，且过滤所得混合物。将滤饼另外用MTBE(5*50ml)洗涤且丢弃。将滤液在真空中浓缩，以得到10-F。
步骤4：10-G的合成
将10-F(1当量)于TFA(15当量)中的溶液在室温下搅拌1h，然后在真空中浓缩。将冷水添加到残余物中，且将所得混合物用DCM萃取两次。丢弃DCM层，且将水层碱化至pH 11。将所得混合物用DCM萃取两次。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥，且在真空中浓缩，以得到10-G。
步骤5：10-H的合成
将10-G(1当量)溶解于MeOH中且将所得溶液在冰浴中冷却至0℃。将硼氢化钠(2当量)分批添加到先前溶液中。在添加完成之后，使反应混合物升温至室温且搅拌过夜。将水添加到反应混合物且将所得混合物在真空中浓缩。将残余物用水稀释且将所得混合物用DCM萃取两次，经Na2SO4干燥，过滤且蒸发，以获得10-H。
步骤6A：式10的合成
将10-H(1当量)、草酰胺酸(1当量)和TEA(2.5当量+1.0当量/各酸当量，如果使用胺盐)一起混合于DMF中。向其中添加HATU(1.5当量)且将所得混合物搅拌过夜。将反应混合物在真空中浓缩且通过HPLC纯化残余物，以获得式10。
步骤6B：式10的合成
将DIPEA(2.5当量+1.0当量/各酸当量，如果使用胺盐)添加到相应胺或其盐(10-H)(1当量)和草酰胺酸(1当量)于DMF中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU(1.1当量)于DMF中的溶液。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的滤液经历HPLC(Waters SunFire C1819*100 5mkm柱且以H2O-MeOH为流动相)，以得到纯产物(式10)。
实施例656.外消旋-2-(2-甲氧基乙基)-5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑
步骤1：5-溴-2-(2-甲氧基乙基)苯并[d]噻唑的合成
将2-氨基-4-溴苯硫酚(5.5g，26.95mmol，170.94uL)、3-甲氧基丙腈(3.44g，40.42mmol，3.67mL)、乙酸铜(II)(489.49mg，2.69mmol)、TEA(2.73g，26.95mmol，3.76mL)溶解于EtOH(100mL)中。将混合物在70℃(油浴温度)下搅拌13h。在反应完成(通过LCMS监测)之后，将混合物冷却至室温且用Na2CO3水溶液萃取，且将粗产物用EtOAc萃取。将有机萃取物在真空中浓缩，且通过硅胶柱色谱使用己烷/EtOAc作为洗脱液来纯化所得残余物，以得到5-溴-2-(2-甲氧基乙基)-1,3-苯并噻唑(2.75g，10.10mmol，37.49％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值272.2；实测值273.2；Rt＝1.369min。
步骤2：2-(2-甲氧基乙基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案J步骤2制备。产率：3.2g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值319.2；实测值320.2；Rt＝1.562min。
步骤3：6-(2-(2-甲氧基乙基)苯并[d]噻唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案J步骤3制备。产率：3.2g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值388.2；实测值389.2；Rt＝1.577min。
步骤4：2-(2-甲氧基乙基)-5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案J步骤4制备。产率：3.2g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值288.2；实测值289.2；Rt＝0.764min。
步骤5：外消旋-2-(2-甲氧基乙基)-5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑的合成
通过一般程序方案J步骤5制备。产率：3g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值290.2；实测值291.2；Rt＝0.877min。
实施例657.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(2-(2-(2-(二甲基氨基)乙基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1279和对映异构化合物1279)的合成
步骤1：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(2-(2-(2-(二甲基氨基)乙基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺的合成
通过一般程序方案J步骤6A制备。产率：57mg(9.67％)。
HPLC条件：柱：YMC Triart C18 100*20mm，5微米；0-5min30-55％水-MeCN+0.1％NH4OH，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeCN)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值480.2；实测值481.2；Rt＝1.828min。
步骤2：手性分离(化合物1279和对映异构化合物1279)
对外消旋N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(2-(2-(2-(二甲基氨基)乙基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(57mg，118.60umol)进行手性分离(柱：Chiralpak IA-II(250*20，5mkm)，MeOH-IPA，50-50，10ml/min)，以获得N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[2-[2-(二甲基氨基)乙基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(18.7mg，38.91umol，65.61％产率)(RT＝33.47min)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[2-[2-(二甲基氨基)乙基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(20mg，41.61umol，70.18％产率)(RT＝57.96min)。
对映异构化合物1279于分析条件下(柱：OJ-H，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.6ml/min为流动相)的保留时间为15.71min且化合物1279的保留时间为37.52min。
对映异构化合物1279：
保留时间：15.71min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.02-1.04(m,3H),1.22-1.40(m,2H),1.66-1.90(m,3H),2.04-2.37(m,9H),2.68-2.78(m,2H),3.20-3.23(m,2H),3.47(d,1H),4.03(d,1H),5.27-5.69(m,3H),7.32-7.50(m,2H),7.84-8.04(m,3H),10.56(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值480.2；实测值481.2；Rt＝1.818min。
化合物1279：
保留时间：37.52min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.02-1.04(m,3H),1.22-1.39(m,2H),1.66-1.71(m,2H),1.84-2.32(m,10H),2.69(m,1H),3.21(m,3H),3.47(d,1H),4.04(d,1H),5.27-5.69(m,3H),7.32-7.50(m,2H),7.84-8.04(m,3H),10.56(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值480.2；实测值481.2；Rt＝1.818min。
实施例658.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(2-(2-(甲氧基甲基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1211和对映异构化合物1211)的合成
步骤6：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(2-(2-(甲氧基甲基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺的合成
通过一般程序方案J步骤6B制备。产率：26.5mg(12.82％)。
HPLC条件：柱：SunFire C18 100*19mm，5微米；2-10min 0-100％MeCN+FA，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeCN)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.01-1.04(m,3H),1.33-1.40(m,2H),1.68-1.73(m,1H),1.86-1.92(m,2H),2.12(m,2H),2.18(s,3H),3.44(s,3H),4.01(m,1H),4.84(m,2H),5.26(m,1H),5.70(m,1H),7.38(d,1H),7.83(s,1H),7.89(m,1H),8.08(m,1H),8.30(s,1H),11.01(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值453.2；实测值454.2；Rt＝2.765min。
步骤7：手性分离(化合物1211和对映异构化合物1211)
对外消旋N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[2-(甲氧基甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(53mg，116.85umol)进行手性分离(柱：ChiraI ART(250*20mm，5mkm)；流动相：IPA-MeOH，50-50；流速：12ml/min)，以获得N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[2-(甲氧基甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(17.8mg，39.25umol，33.58％产率)(RT＝13.11min)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[2-(甲氧基甲基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(18mg，39.69umol，33.96％产率)(RT＝17.54min)。
对映异构化合物1211于分析条件下(柱：IC，以IPA-MeOH，50-50，0.6ml/min为流动相)的保留时间为17.95min且化合物1211的保留时间为24.51min。
对映异构化合物1211：
保留时间：17.95min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)10.58-10.49(m,1H),8.13-8.07(m,1H),8.05-7.88(m,2H),7.51-7.36(m,2H),5.74-5.25(m,3H),4.85-4.81(m,2H),4.06-3.45(m,1H),3.44(s,3H),3.19-2.76(m,1H),2.35-2.27(m,1H),2.20-2.08(m,1H),2.05-1.96(m,3H),1.91-1.83(m,1H),1.73-1.66(m,1H),1.41-1.31(m,1H),1.04-1.01(m,3H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值453.2；实测值454.2；Rt＝2.540min。
化合物1211：
保留时间：24.51min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)10.59-10.49(m,1H),8.13-7.88(m,3H),7.52-7.36(m,2H),5.73-5.26(m,3H),4.86-4.80(m,2H),4.06-3.46(m,1H),3.44(s,3H),3.25-2.75(m,1H),2.36-2.25(m,1H),2.24-2.07(m,1H),2.06-1.96(m,3H),1.93-1.82(m,1H),1.76-1.64(m,1H),1.41-1.30(m,1H),1.04-1.00(m,3H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值453.2；实测值454.2；Rt＝2.549min。
实施例659.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(2-(2-((二甲基氨基)甲基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1106、化合物1122和对映异构化合物1122)的合成
步骤6：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(2-(2-((二甲基氨基)甲基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1106)的合成
通过一般程序10步骤6A制备。产率：27mg(9.97％)。
HPLC条件：柱：SunFire C18 100*19mm，5微米；2-8min 50-75％水-MeCN+NH3，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeCN)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.71-0.78(m,2H),1.03(m,3H),1.32-1.39(m,1H),1.67-1.73(m,2H),1.85(m,1H),1.97(m,1H),2.08(m,2H),2.30(m,6H),2.78(m,1H),3.86(m,3H),5.62(m,2H),7.34-7.54(m,2H),7.85(s,1H),7.88-8.06(m,2H),10.51(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值466.2；实测值467.2；Rt＝2.007min。
步骤7：手性分离(化合物1122和对映异构化合物1122)
对外消旋N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[2-[(二甲基氨基)甲基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(60mg，128.59umol)进行手性分离(柱：Chiralpak AS-H(250*20mm，5mkm)；流动相：己烷-MeOH-IPA，60-20-20；流速：12ml/min)，以获得N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[2-[(二甲基氨基)甲基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(18.9mg，40.51umol，31.50％产率)(RT＝11.78min)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[2-[(二甲基氨基)甲基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(18.6mg，39.86umol，31.00％产率)(RT＝18.73min)。
对映异构化合物1122于分析条件下(柱：AS-H，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min为流动相)的保留时间为11.73min且化合物1122的保留时间为8.74min。
对映异构化合物1122：
保留时间：11.73min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)10.57-10.49(m,1H),8.09-7.95(m,2H),7.91-7.83(m,1H),7.54-7.32(m,2H),5.74-5.25(m,3H),4.05-3.45(m,3H),3.25-2.75(m,1H),2.30(s,6H),2.29-2.05(m,2H),2.05-1.95(m,3H),1.93-1.82(m,1H),1.75-1.66(m,1H),1.41-1.29(m,1H),1.05-1.00(m,3H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值466.2；实测值467.2；Rt＝1.458min。
化合物1122：
保留时间：8.74min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)10.57-10.47(m,1H),8.08-7.94(m,2H),7.91-7.83(m,1H),7.52-7.32(m,2H),5.71-5.24(m,3H),4.05-3.44(m,3H),3.28-2.76(m,1H),2.30(s,6H),2.28-2.06(m,2H),2.04-1.96(m,3H),1.91-1.84(m,1H),1.76-1.67(m,1H),1.40-1.31(m,1H),1.04-1.01(m,3H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值466.2；实测值467.2；Rt＝1.460min。
实施例660.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-(2-(2-(2-(二甲基氨基)乙基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1196和化合物1133)的合成
步骤1：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-(2-(2-(2-(二甲基氨基)乙基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺的合成
通过一般程序方案J步骤6A制备。产率：264mg(48.35％)。
HPLC条件：柱：XBridge C18 100*19mm，5微米；0-1-5min35-35-65％水-MeCN+0.1％ NH4OH，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeCN)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值494.2；实测值495.2；Rt＝1.955min。
步骤2：手性分离(化合物1196和化合物1133)
对外消旋N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-(2-(2-(2-(二甲基氨基)乙基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(264mg，533.71umol)进行手性分离(柱：Chirapak IC-III(250*20mm，5mkm)，IPA-MeOH，50-50，10ml/min)，以获得N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[2-[2-(二甲基氨基)乙基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(60mg，121.30umol，45.45％产率)(RT＝34.84min)和N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[2-[2-(二甲基氨基)乙基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(53mg，107.15umol，40.15％产率)(RT＝24.54min)。
化合物1196于分析条件下(柱：IC，以IPA-MeOH，50-50，0.6ml/min为流动相)的保留时间为34.84min且化合物1133的保留时间为12.90min。
化合物1196：
保留时间：34.84min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.00-1.05(m,3H),1.06-1.16(m,3H),1.31-1.41(m,1H),1.66-1.76(m,1H),1.82-1.92(m,1H),2.04-2.18(m,1H),2.23(s,6H),2.26-2.32(m,1H),2.32-2.36(m,1H),2.40-2.43(m,1H),2.68-2.76(m,2H),2.76-3.27(m,3H),3.35-4.08(m,1H),5.26-5.61(m,1H),5.61-5.73(m,2H),7.30-7.42(m,1H),7.43-7.56(m,1H),7.81-7.91(m,1H),7.99-8.03(m,1H),8.03-8.09(m,1H),10.49-10.60(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值494.2；实测值495.2；Rt＝1.745min。
化合物1133：
保留时间：12.90min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.00-1.05(m,3H),1.06-1.16(m,3H),1.30-1.42(m,1H),1.63-1.77(m,1H),1.80-1.94(m,1H),2.03-2.18(m,1H),2.20(s,6H),2.27-2.33(m,1H),2.36-2.44(m,2H),2.65-2.72(m,2H),2.74-3.27(m,3H),3.36-4.11(m,1H),5.26-5.61(m,1H),5.61-5.75(m,2H),7.31-7.42(m,1H),7.42-7.54(m,1H),7.78-7.89(m,1H),7.98-8.03(m,1H),8.03-8.11(m,1H),10.51-10.66(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值494.2；实测值495.2；Rt＝1.730min。
实施例661.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(2-(2-乙基苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1184)的合成
通过一般程序方案J步骤6B制备。产率：49mg(14.58％)。
HPLC条件：柱：YMC Triart C18 100*20mm，5微米；0-6min40-65％水-MeCN+0.1％NH4OH，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeOH)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.02(m,3H),1.36(m,4H),1.70(m,1H),1.87(m,1H),2.04(m,3H),2.25(m,2H),3.00(m,3H),3.85(m,1H),5.63(m,3H),7.40(m,2H),7.96(m,3H),10.54(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值437.2；实测值438.2；Rt＝2.168min。
实施例662.5-(2-(2-(2-(2-(二甲基氨基)乙基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物1355、化合物1128和化合物1254)的合成
步骤6：5-(2-(2-(2-(2-(二甲基氨基)乙基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物1355)的合成
通过一般程序方案J步骤6A制备。产率：20mg(6.14％)。
HPLC条件：柱：YMC Triart C18 100*20mm，5微米；0-5min15-40％水-MeCN+0.1％NH4OH，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeCN)。
化合物1355：
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.03-1.04(m,3H),1.33-1.40(m,2H),1.68-1.99(m,3H),2.08-2.30(m,6H),2.67-2.85(m,2H),3.19-3.23(m,2H),3.50-4.05(m,2H),5.30-5.70(m,2H),7.34-7.42(m,1H),7.53-7.59(m,1H),7.86-7.89(m,1H),8.00-8.16(m,2H),8.40-8.51(m,1H),8.69-8.90(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值494.2；实测值495.2；Rt＝1.914min。
步骤7：手性分离(化合物1128和化合物1254)
对外消旋5-(2-(2-(2-(2-(二甲基氨基)乙基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(235mg，475.12umol)进行手性分离(柱：Chiralcel OJ-H-II(250*20mm，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，12ml/min)，以获得5-[[2-[(2R,5S)-2-[2-[2-(二甲基氨基)乙基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(90mg，181.96umol，76.60％产率)(RT＝29.78min)和5-[[2-[(2S,5R)-2-[2-[2-(二甲基氨基)乙基]-1,3-苯并噻唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(86mg，173.88umol，73.19％产率)(RT＝14.44min)。
化合物1128于分析条件下(柱：OJ-H，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min为流动相)的保留时间为22.93min且化合物1254的保留时间为11.34min。
化合物1128：
保留时间：22.93min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.05(m,3H),1.37(m,1H),1.72(m,1H),1.89(m,1H),2.08(m,1H),2.20(m,6H),2.31(m,1H),2.68(m,3H),3.22(m,2H),3.77(dd,1H),5.50(m,1H),7.38(dd,1H),7.58(m,1H),7.87(m,1H),8.03(m,1H),8.14(m,1H),8.47(m,1H),8.81(m,2H),11.08(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值494.2；实测值495.2；Rt＝2.340min。
化合物1254
保留时间：11.34min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.05(m,3H),1.37(m,1H),1.72(m,1H),1.89(m,1H),2.09(m,1H),2.20(m,6H),2.31(m,1H),2.68(m,2H),3.21(m,3H),3.52(m,1H),5.30(s,1H),7.38(dd,1H),7.59(d,1H),7.87(m,1H),8.03(dd,1H),8.15(d,1H),8.49(m,1H),8.77(m,1H),8.89(m,1H),11.28(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值494.2；实测值495.2；Rt＝2.370min。
实施例663.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-(2-(2-(2-甲氧基乙基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1375和化合物1386)的合成
步骤1：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-(2-(2-(2-甲氧基乙基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺的合成
通过一般程序方案J步骤6A制备。产率：207mg(62.41％)。
HPLC条件：柱：XBridge C18 100*19mm，5微米；0-5min 5-55％水-MeCN+0.1％NH4OH，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeCN)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值481.2；实测值482.2；Rt＝2.923min。
步骤2：手性分离(化合物1375和化合物1386)
对外消旋N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-(2-(2-(2-甲氧基乙基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(170mg，352.98umol)进行手性分离(柱：ChiralART YMC(250*20mm，5mkm)，IPA-MeOH，50-50，10ml/min)，以获得N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[2-(2-甲氧基乙基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(53mg，110.05μmol，62.35％产率)(RT＝14.57min)和N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[2-(2-甲氧基乙基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(55mg，114.20μmol，64.71％产率)(RT＝18.81min)。化合物1375于分析条件下(柱：IC，以IPA-MeOH，50-50，0.6ml/min为流动相)的保留时间为16.50min且化合物1386的保留时间为22.49min。
化合物1375：
保留时间：16.50min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.00-1.05(m,3H),1.05-1.15(m,3H),1.30-1.42(m,1H),1.64-1.75(m,1H),1.81-1.95(m,1H),2.03-2.37(m,3H),2.39-2.42(m,1H),2.75-3.28(m,4H),3.31-3.35(m,2H),3.43-4.09(m,3H),5.25-5.75(m,3H),7.32-7.43(m,1H),7.43-7.53(m,1H),7.82-7.92(m,1H),7.97-8.09(m,2H),10.51-10.62(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值481.2；实测值482.2；Rt＝2.642min。
化合物1386：
保留时间：22.49min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.01-1.06(m,3H),1.06-1.15(m,3H),1.30-1.39(m,1H),1.62-1.75(m,1H),1.81-1.92(m,1H),2.03-2.36(m,3H),2.39-2.43(m,1H),2.75-3.28(m,4H),3.31-3.34(m,2H),3.45-4.06(m,3H),5.24-5.72(m,3H),7.31-7.43(m,1H),7.43-7.54(m,1H),7.82-7.92(m,1H),7.98-8.08(m,2H),10.50-10.62(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值481.2；实测值482.2；Rt＝2.658min。
实施例664.N-(6-氨基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-(1-甲基哌啶-4-基)苯并[d]噻唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1117)的合成
通过一般程序方案J步骤3A制备。产率：31mg(13.18％)。
HPLC条件：柱：XBridge C18 100*19mm，5微米；0-5min 25-45％水-MeCN+0.1％NH4OH，流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeCN)。
化合物1117：
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.97-1.07(m,3H),1.28-1.41(m,1H),1.66-1.74(m,1H),1.76-1.91(m,3H),2.04-2.09(m,4H),2.10-2.24(m,4H),2.26-2.34(m,1H),2.83-2.87(m,2H),3.04-3.09(m,1H),3.26-3.31(m,1H),3.52-4.06(m,1H),5.29-5.75(m,1H),6.32-6.42(m,2H),7.32-7.42(m,1H),7.85-7.89(m,1H),7.98-8.12(m,2H),8.34-8.47(m,1H),10.81-10.96(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值560.2；实测值561.2；Rt＝2.547min。
实施例665.N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(2-(2-(二甲基氨基)丙-2-基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1237)的合成
步骤1：2-(5-溴苯并[d]噻唑-2-基)-N,N-二甲基丙-2-胺的合成
通过一般程序方案J步骤1B制备。产率：1.5g(20.46％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值299.2；实测值300.2；Rt＝0.956min。
步骤2：N,N-二甲基-2-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)丙-2-胺的合成
通过一般程序方案J步骤2制备。产率：1.74g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值346.2；实测值347.2；Rt＝0.945min。
步骤3：(S)-6-(2-(2-(二甲基氨基)丙-2-基)苯并[d]噻唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案J步骤3制备。产率：3g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值415.2；实测值416.2；Rt＝1.041min。
步骤4：(S)-N,N-二甲基-2-(5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)丙-2-胺的合成
通过一般程序方案J步骤4制备。产率：0.44g粗品。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值315.2；实测值316.2；Rt＝0.524min。
步骤5：N,N-二甲基-2-(5-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)苯并[d]噻唑-2-基)丙-2-胺的合成
通过一般程序方案J步骤5制备。产率：0.36g(81.30％)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值317.2；实测值318.2；Rt＝0.535min。
步骤6：N-(6-氨基-5-乙基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-2-(2-(2-(二甲基氨基)丙-2-基)苯并[d]噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1237)的合成
通过一般程序方案J步骤6A制备。产率：54.7mg(34.14％)。
HPLC条件：柱：YMC Triart C18 100*20mm，5微米；0-1-6min50-50-90％水-MeOH+0.1％ NH4OH，流速：30mL/min；(装载泵4mL/min MeOH)。
1H NMR(600MHz,dmso)δ1.00-1.06(m,3H),1.06-1.19(m,3H),1.28-1.40(m,1H),1.42(s,6H),1.62-1.76(m,1H),1.83-1.95(m,1H),2.03-2.18(m,1H),2.22(s,6H),2.26-2.33(m,1H),2.36-2.44(m,2H),2.76-3.29(m,1H),3.43-4.10(m,1H),5.18-5.61(m,1H),5.61-5.73(m,2H),7.31-7.42(m,1H),7.42-7.57(m,1H),7.82-7.91(m,1H),7.98-8.14(m,2H),10.43-10.65(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值508.2；实测值509.2；Rt＝1.645min。
方案K-式11化合物的合成
式11化合物为式(I)化合物，其中R1、R2、R3、R4、R6、R7和R8如本文所述。
一般程序11
方案K
步骤1：11B的合成
在氩气下，将LiHMDS(1.3当量；1.08M于THF/乙苯中)逐滴添加到11A(1.0当量)于THF(400mL)中的经冷却至-78℃的溶液中。将所得溶液在-78℃下搅拌1.5h，随后添加1,1,1-三氟-N-苯基-N-(三氟甲基磺酰基)甲磺酰胺(1.05当量)。使反应混合物缓慢升温(不移除冷却浴！)至25℃且搅拌12h。然后，将混合物用水(100mL)和MTBE(700mL)稀释。将有机层分离，将水层另外用MTBE(200mL)萃取。将合并的有机萃取物用10％氢氧化钠水溶液(2*100mL)洗涤，经碳酸钾(250g)干燥且在真空中浓缩。将残余物用己烷/MTBE混合物稀释(4/1,500ml，重复8次)且搅拌30min。将所得混浊溶液自油状残余物倾析，通过短硅胶垫(150mL无水硅胶)过滤且在真空中蒸发，以得到11B。
步骤2：11C的合成
将11B(1.0当量)、(6-氟-3-吡啶基)硼酸(1.38当量)和碳酸钠(3.05当量)添加到1,4-二噁烷(100mL)和水(30mL)的混合物中。将所得混合物抽真空，然后用氩气回填，将此操作重复三次，然后在氩气下添加Pd(dppf)Cl2*DCM(0.05当量)。将反应混合物在氩气、85℃下搅拌18h。使所得混合物冷却至室温且过滤。将滤饼用二噁烷(2*50mL)洗涤且丢弃。将滤液在真空中浓缩，且通过硅胶柱色谱使用己烷/MTBE梯度(0-100％ MTBE)纯化残余物两次，以得到11C。
步骤3：11D的合成
将11C(1.0当量)于三氟乙酸(50.0mL)中的溶液在25℃下搅拌1h，然后在真空中浓缩。将碎冰(10g)添加到残余物中，且将所得混合物用10％碳酸钾水溶液碱化至pH 10且用二氯甲烷(2*100.0mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在减压下浓缩，以得到11D。
步骤4：11E的合成
在-10℃下将硼氢化钠(2.14当量)一次性添加到11D(1.0当量)于甲醇(50mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在-10℃下搅拌30min，且使其升温至25℃且搅拌1h。在真空中浓缩反应混合物，将残余物用水(30.0mL)稀释且用二氯甲烷(2*100.0mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中浓缩，以得到11E。
步骤5：11F的合成
在25℃下，在30min内，将HATU(1.15当量)以小批量添加到11E(1.0当量)、2-[(6-氨基-5-甲基/乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(1.25当量)和三乙胺(6.0当量)于DMSO(22.0mL)中的搅拌混合物中。将所得混合物在25℃下搅拌2h。使用LCMS分析混合物且将反应混合物直接用于下一步骤中。
步骤6：式9的合成
方法A：
将相应胺(2.5当量)添加到来自前一步骤且含有11F(1.0当量)的反应混合物中。将所得混合物在密封小瓶中在115℃下搅拌40-61h(LCMS对照)。然后，使混合物冷却至室温且提交至反相HPLC，以得到式9。
方法B：
将相应胺(2.5当量)和三乙胺(2.0当量)添加到11E(1.0当量)的搅拌混合物中。将所得混合物在密封小瓶中在115℃下搅拌60h，然后冷却且倒入到冷水(40mL)中。使所得混合物静置0.5h。将所得沉淀过滤，用水(3*5mL)洗涤，然后溶解于二氯甲烷(30mL)中。将溶液经硫酸钠干燥且在真空中浓缩。将残余物溶解于无水二氯甲烷(10mL)中且一次性添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(60.0当量)。将所得混合物在25℃下搅拌0.5h，然后在真空中蒸发至干。将残余物提交至反相HPLC，以得到式9。
实施例666.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[6-[甲基-(1-甲基-4-哌啶基)氨基]-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1225)的合成
通过一般程序方案K步骤6(方法A)制备
HPLC条件：柱：XBridge BEH C18 5um 130A；流动相：30-30-75％0-1-6min H2O/MeOH/0.1％ NH4OH；流速：30mL/min(装载泵4mL/min甲醇)
产率：106.0mg(28.70％)
1H NMR(600MHz,dmso)δ1.00(m,3H),1.29-1.36(m,2H),1.48(m,2H),1.70-1.74(m,3H),1.94-1.99(m,2H),2.03(s,3H),2.15(m,3H),2.80(m,5H),3.92-3.94(m,1H),4.38(m,2H),5.01(m,1H),5.49(m,1H),5.61(m,2H),6.58-6.62(m,1H),7.39-7.48(m,2H),7.97-8.02(m,2H),10.46(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值481.2；实测值481.2；Rt＝1.552min。
实施例667.N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[6-[(3S)-3,4-二甲基哌嗪-1-基]-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1289)和N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[6-[(3R)-3,4-二甲基哌嗪-1-基]-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1263)的合成
步骤1：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(6-氟-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
通过一般程序方案K步骤5制备
产率：1.79g(粗品)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值386.2；实测值386.2；Rt＝2.227min。
步骤2：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[6-(3,4-二甲基哌嗪-1-基)-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
通过一般程序方案K步骤6(方法A)制备
HPLC条件：柱：YMC Triart C18 100x20 mm，5um；流动相：30-30-45％0-2-5minH2O/乙腈/0.1％ NH4OH，流速：30mL/min；(装载泵4mL/min甲醇)
产率：285mg(60.27％)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值480.4；实测值480.4；Rt＝1.782min。
步骤3：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[6-[(3S)-3,4-二甲基哌嗪-1-基]-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1289)和N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[6-[(3R)-3,4-二甲基哌嗪-1-基]-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1263)的合成
通过一般程序方案K步骤7制备
手性分离条件：Chiralcel OJ-H，250*20mm，5mkm，MeOH，100％，18mL/min，注入体积：200.000μl；柱温：25℃；波长：205nm、264nm)，保留时间(异构体A)＝21.799min；保留时间(异构体B)＝57.625min
化合物1289：
产率：46.0mg(36.80％)
RT(Chiralcel OJ-H,250*20mm，5mkm，Hex-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝48.548min。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.01(m,6H),1.09(m,3H),1.32(m,1H),1.70(m,1H),1.85(m,1H),1.95(m,2H),2.12(m,2H),2.18(s,3H),2.39(m,2H),2.91(m,4H),3.69(m,1H),4.04(m,2H),5.58(m,3H),6.83(m,1H),7.45(m,2H),8.03(m,2H),10.47(s,1H)
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值481.2；实测值481.2；Rt＝1.804min。
化合物1263：
产率：52.0mg(41.60％)
RT(Chiralcel OJ-H,250*20mm，5mkm，Hex-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝81.723min。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.01(m,6H),1.10(m,3H),1.32(m,1H),1.70(m,1H),1.87(m,1H),2.00(m,2H),2.11(m,1H),2.18(s,3H),2.39(m,3H),2.88(m,4H),3.67(dd,1H),4.03(m,2H),5.58(m,3H),6.83(t,1H),7.45(m,2H),8.03(m,2H),10.48(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值480.2；实测值480.4；Rt＝1.810min。
实施例668.N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[6-[(1-甲基-4-哌啶基)氨基]-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1306)的合成
步骤1：(3S)-6-(6-氟-3-吡啶基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案K步骤2制备
产率：3.0g(44.30％)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值293.2；实测值293.2；Rt＝1.500min。
步骤2：2-氟-5-[(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]吡啶的合成通过一般程序方案K步骤3制备
产率：1.9g(96.32％)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值193.2；实测值193.2；Rt＝0.634min。
步骤3：2-氟-5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]吡啶的合成
通过一般程序方案K步骤4制备
产率：1.8g(93.75％)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值195.2；实测值195.2；Rt＝0.544min。步骤4：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(6-氟-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
通过一般程序方案K步骤5制备
产率：1.79g(粗品)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值386.2；实测值386.2；Rt＝2.227min。
步骤5：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[6-[(1-甲基-4-哌啶基)氨基]-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1306)的合成
通过一般程序方案K步骤6(方法A)制备
HPLC条件：柱：YMC Triart C18 100x20 mm，5um；流动相：5-95％0-5min H2O/MeOH/0.1％ NH4OH，流速：30mL/min；(装载泵4mL/min甲醇)
产率：83.0mg(26.68％)
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值480.2；实测值480.2；Rt＝1.488min。
方案L-式12化合物的合成
式11化合物为式(I)化合物，其中R1、R2、R3、R4、R6、R7和R8如本文所述。
一般程序12
方案L
步骤1：12B的一般程序
将2-硝基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯甲醛(1.0当量)和12A(1.0当量，或其盐)溶解于i-PrOH(140mL)中。将所得混合物在80℃下搅拌2小时，随后添加三-正丁基膦(Bu3P，3.0当量)。将反应混合物在回流下搅拌2小时。然后，在真空中移除挥发物。将残余物溶解于DCM且用水洗涤。将有机层分离，经Na2SO4干燥且在减压下浓缩。通过快速色谱纯化残余物，以得到12B。
步骤1A：12F的一般程序
将5-溴-2-硝基苯甲醛(1.0当量)和12A(1.0当量)溶解于i-PrOH(400.0mL)中。将所得混合物在80℃下搅拌2h，随后添加三-正丁基膦(3.0当量)。将反应混合物再回流16h。然后将反应混合物在减压下蒸发且通过快速色谱纯化，以得到12F。
步骤1B：12H的一般程序
将5-溴-2-硝基苯甲醛(1.0当量)和12G(1.0当量)溶解于i-PrOH(80.0mL)中。将所得混合物在80℃下搅拌2h且添加三-正丁基膦(3.0当量)。将反应混合物再回流16h。然后将反应混合物在减压下蒸发且通过快速色谱纯化，以得到12H。
步骤1C：12J的一般程序
将99％无水碳酸钾(3.0当量)和碘甲烷(1.7当量)添加到12B(1.0当量)于MeCN(大约45.0mL)中的溶液中。将所得混合物在25℃下搅拌16h。然后，在减压下移除溶剂。将残余物用水(40.0mL)稀释且将所得混合物用DCM萃取，得到12J。
步骤2：12C的一般程序
在惰性气氛、85℃下，将12B(1.0当量)、外消旋-(3S)-3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.01当量)、碳酸钠(3.0当量)和Pd(dppf)Cl2DCM(0.05当量)在1,4-二噁烷(6.0mL)和水(2.0mL)的混合物中搅拌15h。完成之后，将反应混合物冷却，用水稀释且用DCM萃取。将有机层分离，经Na2SO4干燥且在减压下浓缩，以得到12C。所获得的材料不经额外纯化即用于下一步骤中。
步骤2A：12B的一般程序
将12F(1.0当量)、B2Pin2(1.1当量)和乙酸钾(2.0当量)一起混合于1.4-二噁烷(大约20.0mL)中。将所得混合物抽真空然后用氩气回填，将此操作重复三次，然后在氩气下添加Pd(dppf)2Cl2 DCM(993.01mg，1.22mmol)。将反应混合物在氩气气氛、90℃下搅拌14h。然后使混合物冷却至室温且在真空中移除挥发物，以得到12B。
步骤2B：12I的一般程序
将12H(1.0当量)溶解于TFA(1.0mL)和DCM(1.0mL)的混合物中。将反应混合物在室温下搅拌30分钟。然后，在真空中浓缩混合物，以得到12I。所获得的材料不经额外纯化即用于下一步骤中。
步骤2C：式12的一般程序
将碳酸钠(2.0当量)添加到12J(1.0当量)和外消旋-(5S)-5-甲基-2-(三氟甲基磺酰基氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.1当量)于水(大约15.0mL)和1,4-二噁烷(大约50.0mL)中的溶液中。将反应烧瓶抽真空且用氩气再填充3次。然后，在氩气流下添加Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2(0.05当量)。在惰性气氛下将所得混合物在90℃下搅拌15h。反应完成之后，添加水(大约50.0mL)。将所得混合物用EtOAc(3*20.0mL)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩，以获得12C。所获得的材料不经额外纯化即用于下一步骤中。
步骤3：12D的一般程序
方法A：
将12C(1.0当量)溶解于TFA(1.0mL)和DCM(1.0mL)的混合物中。将反应混合物在室温下搅拌30分钟。然后，将混合物在真空中浓缩，得到12D。所获得的材料不经额外纯化即用于下一步骤中。
方法B：
将12C(1.0当量)溶解于HCl(于二噁烷中的4.0M溶液，1.0mL)和MeOH(1.0mL)的混合物中。在室温下将反应混合物搅拌过夜。然后，将混合物在真空中浓缩，得到12D。所获得的材料不经额外纯化即用于下一步骤中。
步骤3B：12F的一般程序
向12I(1.0当量)、乙酸(1.0当量)和用10-15％甲醇稳定的37％甲醛水溶液(ACS，36.5-38.0％)(1.0当量)于DCM(大约25.0mL)中的溶液中添加三乙酰氧基硼氢化钠(1.0当量)。将所得混合物在25℃下搅拌16h。然后，在真空中移除溶剂。将残余物倒入到H2O(50.0mL)中且用EtOAc(2x20.0 mL)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(2*20.0mL)洗涤，经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到12F。
步骤4：12E的一般程序
将硼氢化钠(2.0当量)分批添加到12D(1.0当量)于MeOH(5.0mL)中的溶液中。将反应混合物在室温下搅拌17小时。然后，将混合物用HCl(于二噁烷中的4.0M溶液)酸化至pH5且在真空中移除挥发物，以得到12E。所获得的材料不经额外纯化即用于下一步骤中。
步骤5：式12的一般程序
将HATU(1.4当量)添加到12E(1.0当量)、相应酸(1.1当量)和DIPEA(10.0当量)于DMSO(大约6.0mL)中的搅拌溶液中。将所得反应混合物在25℃下搅拌4h。完成之后，将反应混合物提交至反相HPLC，以得到式12。
实施例669.N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)吲唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1321)的合成
步骤1：4-(5-溴吲唑-2-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案L步骤1B制备
FCC条件：Interchim；120g SiO2，HEX-ETOAC 0～100％，流速＝70mL/min，cv＝10.4
产率：4.2g(84.68％)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值382.0；实测值382.0；Rt＝1.402min。
步骤2：5-溴-2-(4-哌啶基)吲唑的合成
通过一般程序方案L步骤2B制备
产率：0.42g(38.01％)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值280.0；实测值280.0；Rt＝0.895min。
步骤3：5-溴-2-(1-甲基-4-哌啶基)吲唑的合成
通过一般程序方案L步骤3B制备
产率：0.42g(88.88％)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值294.0；实测值294.0；Rt＝0.880min。
步骤4：2-(1-甲基-4-哌啶基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吲唑的合成
通过一般程序方案L步骤2A制备
产率：0.45g(粗品)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值342.2；实测值342.2；Rt＝0.916min。
步骤5：(3S)-3-甲基-6-[2-(1-甲基-4-哌啶基)吲唑-5-基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案L步骤2制备
产率：0.38g(粗品)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值411.2；实测值411.2；Rt＝1.048min。
步骤6：2-(1-甲基-4-哌啶基)-5-[(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]吲唑的合成
通过一般程序方案L步骤3(方法A)制备
产率：0.25g(87.01％)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值311.2；实测值311.2；Rt＝0.881min。
步骤7：2-(1-甲基-4-哌啶基)-5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]吲唑的合成
通过一般程序方案L步骤4制备
产率：0.22g(粗品)
步骤8：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)吲唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1321)的合成
通过一般程序方案L步骤5制备
HPLC条件：2-15min 40-60％甲醇+NH3，流速30mL/min(装载泵4mL/min甲醇)，柱：SunFire 100*19mm，5微米，和2-10min0-30％乙腈+FA流速30mL/min(装载泵4mL/min乙腈)，柱Sun Fire C18 100*19mm
产率：0.006g(1.69％)
1H NMR(600MHz,dmso)δ0.85-1.04(m,3H),1.06-1.14(m,3H),1.31-1.41(m,1H),1.69-1.93(m,2H),2.03-2.13(m,7H),2.22(s,3H),2.23-2.34(m,1H),2.37-2.43(m,2H),2.75-2.78(m,0H),2.87-2.90(m,2H),3.19-3.22(m,1H),3.49-4.03(m,1H),4.37-4.47(m,1H),5.15-5.70(m,3H),7.12-7.29(m,1H),7.41-7.54(m,1H),7.57-7.64(m,2H),7.97-8.10(m,1H),8.35-8.40(m,1H),10.45-10.69(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值504.2；实测值504.2；Rt＝1.976min。
实施例670.2-甲氧基-5-[[2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)吲唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物1115)的合成
步骤1：5-溴-2-(1-甲基-4-哌啶基)吲唑的合成
通过一般程序方案L步骤1A制备
产率：20g(78.19％)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值295.0；实测值295.0；Rt＝0.785min。
步骤2：2-(1-甲基-4-哌啶基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吲唑的合成
通过一般程序方案L步骤1制备
FCC条件：Interchim；330g SiO2，MTBE-MeOH 0～100％，流速＝100mL/min，cv＝9.4
产率：9.0g(77.59％)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值342.2；实测值342.2；Rt＝0.799min。
步骤3：(3S)-3-甲基-6-[2-(1-甲基-4-哌啶基)吲唑-5-基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案L步骤2制备
FCC条件：Interchim；120g SiO2，MTBE-MeOH 0～100％，流速＝70mL/min，cv＝15.3
产率：6.0g(55.41％)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值411.2；实测值411.5；Rt＝1.019min。
步骤4：2-(1-甲基-4-哌啶基)-5-[(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]吲唑的合成
通过一般程序方案L步骤3(方法B)制备
产率：1.2g(79.35％)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值311.2；实测值311.2；Rt＝0.769min。
步骤5：2-(1-甲基-4-哌啶基)-5-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]吲唑的合成
通过一般程序方案L步骤4制备
产率：3.2g(79.48％)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值313.2；实测值313.2；Rt＝0.664min。
步骤6：2-甲氧基-5-[[2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)吲唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
(化合物1115)的合成
通过一般程序方案L步骤5制备
HPLC条件：2-10min 30-100％甲醇，流速30mL/min(装载泵4mL/min甲醇)，柱SunFire C18 100*19mm
产率：0.088g(35.52％)
1H NMR(600MHz,dmso)δ1.01-1.05(m,3H),1.30-1.40(m,1H),1.73-1.94(m,2H),1.96-2.33(m,11H),2.80-2.90(m,2H),3.40-4.34(m,5H),4.38-4.47(m,1H),5.17-5.75(m,1H),7.07-7.30(m,1H),7.55-7.64(m,2H),7.66-7.80(m,2H),8.31-8.63(m,3H),10.94(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值534.2；实测值534.2；Rt＝1.820min。
实施例671.N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[外消旋-(3S)-1-甲基吡咯烷-3-基]吲唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰胺(化合物1091)的合成
步骤1：2-[外消旋-(3S)-1-甲基吡咯烷-3-基]-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吲唑的合成
通过一般程序12制备
FCC条件：Interchim；120g SiO2，MTB-MeOH 0～100％，流速＝
70mL/min，cv＝13.9
产率：2.6g(31.45％)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值328.2；实测值328.2；Rt＝0.904min。
步骤2：外消旋-(3S)-3-甲基-6-[2-[外消旋-(3S)-1-甲基吡咯烷-3-基]吲唑-5-基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序12制备
产率：2.0g(粗品)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值397.2；实测值397.2；Rt＝1.189min。
步骤3：2-[外消旋-(3S)-1-甲基吡咯烷-3-基]-5-[外消旋-(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]吲唑的合成
通过一般程序12制备
产率：1.55g(粗品)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值297.2；实测值297.2；Rt＝0.668min。
步骤4：5-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-2-[外消旋-(3S)-1-甲基吡咯烷-3-基]吲唑的合成
通过一般程序12制备
产率：1.5g(粗品，2HCl)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值299.2；实测值299.2；Rt＝0.680min。
步骤5：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[外消旋-(3S)-1-甲基吡咯烷-3-基]吲唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰胺(化合物1091)的合成
通过一般程序12制备
HPLC条件：2-10min 40-100％甲醇+NH3流速30mL/min(装载泵4mL/min甲醇)，柱Sun Fire C18 100*19mm
产率：0.057g，(14.41％)
1H NMR(600MHz,dmso)δ1.00-1.14(m,6H),1.29-1.40(m,1H),1.72-1.92(m,2H),2.02-2.25(m,3H),2.30(s,3H),2.38-2.44(m,2H),2.52-2.54(m,1H),2.75-3.24(m,5H),3.43-4.04(m,1H),5.15-5.68(m,4H),7.12-7.27(m,1H),7.42-7.53(m,1H),7.56-7.64(m,2H),7.97-8.08(m,1H),8.36-8.42(m,1H),10.51(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值490.2；实测值490.4；Rt＝2.198min。
实施例672.N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[外消旋-(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]吲唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰胺(化合物1398)的合成
步骤1：2-[外消旋-(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吲唑的合成
通过一般程序方案L步骤1制备
FCC条件：Interchim；120g SiO2，MTBE-MeOH 0～100％，流速＝70mL/min，cv＝13.7
产率：3.6g(43.55％)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值328.2；实测值328.2；Rt＝0.897min。
步骤2：外消旋-(3S)-3-甲基-6-[2-[外消旋-(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]吲唑-5-基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案L步骤2制备
产率：3.5g(粗品)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值397.2；实测值397.4；Rt＝1.010min。
步骤3：2-[外消旋-(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]-5-[外消旋-(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]吲唑的合成
通过一般程序方案L步骤3(方法A)制备
产率：2.0g(粗品)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值297.2；实测值297.1；Rt＝0.380min。
步骤4：5-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-2-[外消旋-(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]吲唑的合成
通过一般程序方案L步骤4制备
产率：1.9g(粗品，2HCl)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值299.2；实测值299.0；Rt＝0.675min。
步骤5：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[外消旋-(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]吲唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰胺(化合物1398)的合成
通过一般程序方案L步骤5制备
HPLC条件：2-10min 50-70％甲醇+NH3流速30mL/min(装载泵4mL/min甲醇)，柱：sun fire C18
产率：0.06g(15.17％)
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.02(m,3H),1.10(m,3H),1.35(m,1H),1.82(m,2H),2.06(m,1H),2.19(m,2H),2.30(s,3H),2.38(m,3H),2.53(m,2H),2.84(m,2H),2.93(m,1H),3.83(m,1H),5.41(m,4H),7.20(m,1H),7.54(m,3H),8.03(m,1H),8.39(m,1H),10.50(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值490.2；实测值490.4；Rt＝1.708min。
实施例673.N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基氮杂环丁烷-3-基)吲唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰胺(化合物1239)的合成
步骤1：2-(1-甲基氮杂环丁烷-3-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吲唑的合成
通过一般程序方案L步骤1制备
FCC条件：Interchim；120g SiO2,MTB-MeOH 0～100％，流速＝70
mL/min，cv＝8.1
产率：3.0g(37.91％)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值314.2；实测值314.2；Rt＝0.898min。
步骤2：外消旋-(3S)-3-甲基-6-[2-(1-甲基氮杂环丁烷-3-基)吲唑-5-基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案L步骤2制备
产率：0.7g(粗品)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值383.0；实测值383.0；Rt＝1.179min。
步骤3：2-(1-甲基氮杂环丁烷-3-基)-5-[外消旋-(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]吲唑的合成
通过一般程序方案L步骤3(方法A)制备
产率：0.6g(粗品)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值283.2；实测值283.5；Rt＝0.371min。
步骤4：2-(1-甲基氮杂环丁烷-3-基)-5-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]吲唑的合成
通过一般程序方案L步骤4制备
产率：0.6g(79.03％，2HCl)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值285.2；实测值285.2；Rt＝0.660min。
步骤5：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基氮杂环丁烷-3-基)吲唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰胺(化合物1239)的合成
通过一般程序方案L步骤5制备
HPLC条件：2-10min 50-60％甲醇+NH3流速30mL/min(装载泵4mL/min甲醇)，柱SunFire C18 100*19mm
产率：0.047g(5.89％)
1H NMR(600MHz,dmso)δ0.99-1.05(m,3H),1.06-1.13(m,3H),1.29-1.42(m,1H),1.66-1.79(m,1H),1.81-1.90(m,1H),2.02-2.18(m,1H),2.21-2.29(m,1H),2.34(s,3H),2.38-2.44(m,2H),2.76-3.19(m,1H),3.48-4.03(m,5H),5.21-5.28(m,1H),5.54-5.68(m,3H),7.15-7.29(m,1H),7.42-7.52(m,1H),7.59-7.65(m,2H),7.98-8.08(m,1H),8.41-8.48(m,1H),10.51(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值477.2；实测值477.4；Rt＝2.184min。
实施例674.N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[外消旋-(3R)-1-甲基-3-哌啶基]吲唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰胺(化合物1270)的合成
步骤1：2-[外消旋-(3R)-1-甲基-3-哌啶基]-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吲唑的合成
通过一般程序方案L步骤1制备
FCC条件：Interchim；120g SiO2，MTBE-MeOH 0～100％，流速＝70mL/min，cv＝6
产率：3g(34.80％)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值342.2；实测值342.2；Rt＝0.926min。
步骤2：外消旋-(3S)-3-甲基-6-[2-[外消旋-(3R)-1-甲基-3-哌啶基]吲唑-5-基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案L步骤2制备
产率：0.7g(粗品)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值411.4；实测值411.4；Rt＝0.870min。
步骤3：2-[外消旋-(3R)-1-甲基-3-哌啶基]-5-[外消旋-(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]吲唑的合成
通过一般程序方案L步骤3(方法A)制备
产率：0.45g(粗品)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值311.2；实测值311.2；Rt＝0.660min。
步骤4：5-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-2-[外消旋-(3R)-1-甲基-3-哌啶基]吲唑的合成
通过一般程序方案L步骤4制备
产率：0.5g(粗品，2HCl)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值313.2；实测值313.2；Rt＝0.687min。
步骤5：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[外消旋-(3R)-1-甲基-3-哌啶基]吲唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰胺(化合物1270)的合成
通过一般程序方案L步骤5制备
HPLC条件：2-10min 50-100％甲醇+NH3流速30mL/min(装载泵4mL/min甲醇)，柱：sun fire C18
产率：0.018g(2.75％)
1H NMR(600MHz,dmso)δ0.99-1.05(m,3H),1.05-1.15(m,4H),1.29-1.41(m,1H),1.61-1.95(m,6H),1.98-2.09(m,3H),2.21-2.29(m,4H),2.66-3.03(m,4H),3.43-4.03(m,1H),4.55-4.63(m,1H),5.15-5.66(m,3H),7.12-7.26(m,1H),7.41-7.53(m,1H),7.55-7.64(m,2H),7.97-8.10(m,1H),8.40-8.46(m,1H),10.44-10.56(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值504.2；实测值504.4；Rt＝2.092min。
实施例675.N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[外消旋-(3S)-1-甲基-3-哌啶基]吲唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰胺(化合物1271)的合成
步骤1：2-[外消旋-(3S)-1-甲基-3-哌啶基]-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吲唑的合成
通过一般程序方案L步骤1制备
FCC条件：Interchim；120g SiO2，MTB-MeOH 0～100％，流速＝
70mL/min，cv＝6
产率：3.1g(35.96％)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值342.2；实测值342.2；Rt＝1.132min。
步骤2：外消旋-(3S)-3-甲基-6-[2-[外消旋-(3S)-1-甲基-3-哌啶基]吲唑-5-基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案L步骤2制备
产率：1.2g(粗品)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值411.2；实测值411.2；Rt＝1.062min。
步骤3：2-[外消旋-(3S)-1-甲基-3-哌啶基]-5-[外消旋-(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]吲唑的合成
通过一般程序方案L步骤3(方法A)制备
产率：0.7g(粗品)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值311.2；实测值311.2；Rt＝0.937min。
步骤4：5-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-2-[外消旋-(3S)-1-甲基-3-哌啶基]吲唑的合成
通过一般程序方案L步骤4制备
产率：0.5g(粗品，2HCl)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值313.2；实测值313.2；Rt＝0.345min。
步骤5：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[外消旋-(3S)-1-甲基-3-哌啶基]吲唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰胺(化合物1271)的合成
通过一般程序方案L步骤5制备
HPLC条件：2-10min 50-65％甲醇+NH3流速30mL/min(装载泵4mL/min甲醇)，柱：sun fire C18
产率：0.06g(14.75％)
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.07(m,6H),1.33(m,1H),1.69(m,3H),1.89(m,3H),2.04(m,3H),2.15(m,1H),2.22(s,4H),2.40(m,3H),2.74(m,1H),3.03(m,1H),3.83(m,1H),4.89(m,1H),5.61(m,2H),7.20(m,1H),7.54(m,3H),8.03(m,1H),8.43(m,1H),10.42(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值505.2；实测值505.2；Rt＝1.707min。
实施例676.2-甲氧基-5-[[2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[外消旋-(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]吲唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物1141)的合成
步骤1：2-[外消旋-(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吲唑的合成
通过一般程序方案L步骤1制备
FCC条件：Interchim；120g SiO2，MTBE-MeOH 0～100％，流速＝70mL/min，cv＝13.7
产率：3.6g(43.55％)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值328.2；实测值328.2；Rt＝0.897min。
步骤2：外消旋-(3S)-3-甲基-6-[2-[外消旋-(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]吲唑-5-基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案L步骤2制备
产率：3.5g(粗品)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值397.2；实测值397.4；Rt＝1.010min。
步骤3：2-[外消旋-(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]-5-[外消旋-(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]吲唑的合成
通过一般程序方案L步骤3(方法A)制备
产率：2.0g(粗品)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值297.2；实测值297.1；Rt＝0.380min。
步骤4：5-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-2-[外消旋-(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]吲唑的合成
通过一般程序方案L步骤4制备
产率：1.9g(粗品，2HCl)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值299.2；实测值299.0；Rt＝0.675min。
步骤5：2-甲氧基-5-[[2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[外消旋-(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]吲唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物1141)的合成
通过一般程序方案L步骤5制备
HPLC条件：2-10min 45-60％甲醇+NH3流速30mL/min(装载泵4mL/min甲醇)，柱：sun fire C18
产率：0.02g(9.53％)
1H NMR(600MHz,dmso)δ0.96-1.09(m,3H),1.30-1.40(m,1H),1.57-2.07(m,3H),2.11-2.26(m,2H),2.31(s,3H),2.78-3.23(m,5H),3.47-4.00(m,5H),5.14-5.68(m,2H),7.13-7.28(m,1H),7.55-7.63(m,2H),7.68-7.76(m,2H),8.35-8.59(m,3H),10.94-11.13(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值520.2；实测值520.4；Rt＝2.407min。
实施例677.2-甲氧基-5-[[2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[外消旋-(3S)-1-甲基吡咯烷-3-基]吲唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物1318)的合成
步骤1：2-[外消旋-(3S)-1-甲基吡咯烷-3-基]-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吲唑的合成
通过一般程序方案L步骤1制备
FCC条件：Interchim；120g SiO2，MTBE-MeOH 0～100％，流速＝70mL/min，cv＝13.9
产率：2.6g(31.45％)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值328.2；实测值328.2；Rt＝0.904min。
步骤2：外消旋-(3S)-3-甲基-6-[2-[外消旋-(3S)-1-甲基吡咯烷-3-基]吲唑-5-基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案L步骤2制备
产率：2.0g(粗品)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值397.2；实测值397.2；Rt＝1.189min。
步骤3：2-[外消旋-(3S)-1-甲基吡咯烷-3-基]-5-[外消旋-(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]吲唑的合成
通过一般程序方案L步骤3(方法A)制备
产率：1.55g(粗品)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值297.2；实测值297.2；Rt＝0.668min。
步骤4：5-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-2-[外消旋-(3S)-1-甲基吡咯烷-3-基]吲唑的合成
通过一般程序方案L步骤4制备
产率：1.5g(粗品，2HCl)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值299.2；实测值299.2；Rt＝0.680min。
步骤5：2-甲氧基-5-[[2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-[外消旋-(3S)-1-甲基吡咯烷-3-基]吲唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物1318)的合成
通过一般程序方案L步骤5制备
HPLC条件：2-10min 50-65％甲醇+NH3流速30.0mL/min(装载泵4mL/min甲醇)，柱：SunFire C18
产率：0.017g(8.10％)
1H NMR(600MHz,dmso)δ0.99-1.07(m,3H),1.29-1.40(m,1H),1.72-1.83(m,1H),1.83-1.94(m,1H),2.03-2.27(m,3H),2.30(s,3H),2.75-3.20(m,5H),3.46-4.03(m,5H),5.13-5.68(m,2H),7.13-7.27(m,1H),7.55-7.65(m,2H),7.67-7.76(m,2H),8.36-8.42(m,1H),8.43-8.68(m,2H),10.93-11.10(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值520.2；实测值520.2；Rt＝2.393min。
实施例678.N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1,2,2,6,6-五甲基-4-哌啶基)吲唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰胺(化合物1140)的合成
步骤1：5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-2-(2,2,6,6-四甲基-4-哌啶基)吲唑的合成
通过一般程序方案L步骤1制备
产率：2.8g(粗品)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值384.2；实测值384.2；Rt＝1.133min
步骤2：2-(1,2,2,6,6-五甲基-4-哌啶基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吲唑的合成
通过一般程序方案L步骤1C制备
产率：3.0g(粗品)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值398.2；实测值398.1；Rt＝1.152min。
步骤3：外消旋-(3S)-3-甲基-6-[2-(1,2,2,6,6-五甲基-4-哌啶基)吲唑-5-基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案L步骤2C制备
产率：3.5g(粗品)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值467.2；实测值467.2；Rt＝1.232min。
步骤4：2-(1,2,2,6,6-五甲基-4-哌啶基)-5-[外消旋-(3S)-3-甲基-1,2,3,4-四氢吡啶-6-基]吲唑的合成
通过一般程序方案L步骤3(方法A)制备
产率：1.1g(粗品)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值367.2；实测值367.2；Rt＝0.725min。
步骤5：2-(1,2,2,6,6-五甲基-4-哌啶基)-5-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]吲唑的合成
通过一般程序方案L步骤4制备
产率：1.3g(粗品)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值369.2；实测值369.2；Rt＝0.756min。
步骤6：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1,2,2,6,6-五甲基-4-哌啶基)吲唑-5-基]-1-哌啶基]乙酰胺(化合物1140)的合成
通过一般程序方案L步骤5制备
HPLC条件：柱：XBridge C18 100x19 mm 5um；流动相：35-35-60％0-1-6min H2O/MeCN/0.1％ NH4OH，流速：30mL/min(装载泵4mL/min MeCN)
产率：78.2mg(25.74％)
1H NMR(600MHz,dmso)δ0.86-1.09(m,6H),1.10-1.12(m,6H),1.13-1.16(m,6H),1.32-1.46(m,2H),1.75-2.07(m,7H),2.11-2.19(m,1H),2.21-2.24(m,3H),2.39-2.43(m,1H),2.76-3.23(m,1H),3.45-4.05(m,1H),4.78-4.90(m,1H),5.14-5.71(m,3H),7.11-7.28(m,1H),7.41-7.54(m,1H),7.57-7.74(m,2H),7.98-8.11(m,1H),8.36-8.45(m,1H),10.52(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值561.2；实测值561.1；Rt＝2.193min。
方案M-式13化合物的合成
式11化合物为式(I)化合物，其中R1、R2、R3、R4、R6、R7和R8如本文所述。
一般程序13方案M
方案M
步骤1：13B的一般程序
将2-硝基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯甲醛(1.0当量)和13A(1.0当量，或其盐)溶解于i-PrOH(140mL)中。将所得混合物在80℃下搅拌2小时，随后添加三-正丁基膦(Bu3P，3.0当量)。将反应混合物在回流下搅拌2小时。然后，在真空中移除挥发物。将残余物溶解于DCM且用水洗涤。将有机层分离，经Na2SO4干燥且在减压下浓缩。通过快速色谱纯化残余物，以得到13B。
步骤1A：13F的一般程序
将5-溴-2-硝基苯甲醛(1.0当量)和13A(1.0当量)溶解于i-PrOH(400.0mL)中。将所得混合物在80℃下搅拌2h，随后添加三-正丁基膦(3.0当量)。将反应混合物再回流16h。然后将反应混合物在减压下蒸发且通过快速色谱纯化，以得到13F。
步骤1B：13H的一般程序
将5-溴-2-硝基苯甲醛(1.0当量)和13G(1.0当量)溶解于i-PrOH(80.0mL)中。将所得混合物在80℃下搅拌2h且添加三-正丁基膦(3.0当量)。将反应混合物再回流16h。然后将反应混合物在减压下蒸发且通过快速色谱纯化，以得到13H。
步骤1C：13J的一般程序
将99％无水碳酸钾(3.0当量)和碘甲烷(1.7当量)添加到13B(1.0当量)于MeCN(大约45.0mL)中的溶液中。将所得混合物在25℃下搅拌16h。然后，在减压下移除溶剂。将残余物用水(40.0mL)稀释且将所得混合物用DCM萃取，得到13J。
步骤2：13C的一般程序
在惰性气氛、85℃下，将13B(1.0当量)、外消旋-(3S)-3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.01当量)、碳酸钠(3.0当量)和Pd(dppf)Cl2DCM(0.05当量)在1,4-二噁烷(6.0mL)和水(2.0mL)的混合物中搅拌15h。完成之后，将反应混合物冷却，用水稀释且用DCM萃取。将有机层分离，经Na2SO4干燥且在减压下浓缩，以得到13C。所获得的材料不经额外纯化即用于下一步骤中。
步骤2A：13B的一般程序
将13F(1.0当量)、B2Pin2(1.1当量)和乙酸钾(2.0当量)一起混合于1.4-二噁烷(大约20.0mL)中。将所得混合物抽真空然后用氩气回填，将此操作重复三次，然后在氩气下添加Pd(dppf)2Cl2 DCM(993.01mg，1.22mmol)。将反应混合物在氩气气氛、90℃下搅拌14h。然后使混合物冷却至室温且在真空中移除挥发物，以得到13B。
步骤2B：13I的一般程序
将13H(1.0当量)溶解于TFA(1.0mL)和DCM(1.0mL)的混合物中。将反应混合物在室温下搅拌30分钟。然后，将混合物在真空中浓缩，得到13I。所获得的材料不经额外纯化即用于下一步骤中。
步骤2C：13C的一般程序
将碳酸钠(2.0当量)添加到13J(1.0当量)和外消旋-(5S)-5-甲基-2-(三氟甲基磺酰基氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.1当量)于水(大约15.0mL)和1,4-二噁烷(大约50.0mL)中的溶液中。将反应烧瓶抽真空且用氩气再填充3次。然后，在氩气流下添加Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2(0.05当量)。在惰性气氛下将所得混合物在90℃下搅拌15h。反应完成之后，添加水(大约50.0mL)。将所得混合物用EtOAc(3*20.0mL)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩，以获得13C。所获得的材料不经额外纯化即用于下一步骤中。
步骤3：13D的一般程序
方法A：
将13C(1.0当量)溶解于TFA(1.0mL)和DCM(1.0mL)的混合物中。将反应混合物在室温下搅拌30分钟。然后，将混合物在真空中浓缩，得到13D。所获得的材料不经额外纯化即用于下一步骤中。
方法B：
将13C(1.0当量)溶解于HCl(于二噁烷中的4.0M溶液，1.0mL)和MeOH(1.0mL)的混合物中。将反应混合物在室温下搅拌过夜。然后，将混合物在真空中浓缩，得到13D。所获得的材料不经额外纯化即用于下一步骤中。
步骤3B：13F的一般程序
向13I(1.0当量)、乙酸(1.0当量)和用10-15％甲醇稳定的37％甲醛水溶液(ACS，36.5-38.0％)(1.0当量)于DCM(大约25.0mL)中的溶液中添加三乙酰氧基硼氢化钠(1.0当量)。将所得混合物在25℃下搅拌16h。然后，在真空中移除溶剂。将残余物倒入到H2O(50.0mL)中且用EtOAc(2x20.0 mL)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(2*20.0mL)洗涤，经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到13F。
步骤4：13E的一般程序
将硼氢化钠(2.0当量)分批添加到13D(1.0当量)于MeOH(5.0mL)中的溶液中。将反应混合物在室温下搅拌17小时。然后，将混合物用HCl(于二噁烷中的4.0M溶液)酸化至pH5且在真空中移除挥发物，以得到13E。所获得的材料不经额外纯化即用于下一步骤中。
步骤5：式13的一般程序
将HATU(1.4当量)添加到13E(1.0当量)、相应酸(1.1当量)和DIPEA(10.0当量)于DMSO(大约6.0mL)中的搅拌溶液中。将所得反应混合物在25℃下搅拌4h。将所得混合物提交至反相HPLC，以得到式E。
实施例679.N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1,2,2,6,6-五甲基-4-哌啶基)吲唑-6-基]-1-哌啶基]乙酰胺(化合物1295)的合成
步骤1：6-溴-2-(2,2,6,6-四甲基-4-哌啶基)吲唑的合成
通过一般程序方案M步骤1A制备
产率：3.6g(82.08％)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值336.2；实测值336.2；Rt＝1.061min。
步骤2：6-溴-2-(1,2,2,6,6-五甲基-4-哌啶基)吲唑的合成
通过一般程序方案M步骤1C制备
产率：2.7g(72.0％)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值352.2；实测值350.2；Rt＝1.015min。
步骤3：2-(1,2,2,6,6-五甲基-4-哌啶基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吲唑的合成
通过一般程序方案M步骤2A制备
产率：1.8g(58.77％)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值398.2；实测值398.0；Rt＝1.118min。
步骤4：外消旋-(3S)-3-甲基-6-[2-(1,2,2,6,6-五甲基-4-哌啶基)吲唑-6-基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案M步骤2制备
产率：2.0g(粗品)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值467.2；实测值467.4；Rt＝1.276min。
步骤5：2-(1,2,2,6,6-五甲基-4-哌啶基)-6-[外消旋-(3S)-3-甲基-1,2,3,4-四氢吡啶-6-基]吲唑的合成
通过一般程序方案M步骤3(方法A)制备
产率：0.9g(57.29％)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值367.2；实测值367.2；Rt＝0.727min。
步骤6：2-(1,2,2,6,6-五甲基-4-哌啶基)-6-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]吲唑的合成
通过一般程序方案M步骤4制备
产率：0.8g(93.60％)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值369.2；实测值369.2；Rt＝0.767min。
步骤7：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1,2,2,6,6-五甲基-4-哌啶基)吲唑-6-基]-1-哌啶基]乙酰胺(化合物1295)的合成
通过一般程序方案M步骤5制备
HPLC条件：柱：XBridge C18 100x19 mm 5um；流动相：50-100％0-5min H2O/MeOH/0.1％ NH4OH，流速：30mL/min(装载泵4mL/min MeCN)
产率：79.9mg(35.07％)
1H NMR(600MHz,dmso)δ1.02-1.07(m,3H),1.10-1.17(m,15H),1.31-1.43(m,1H),1.69-1.80(m,1H),1.82-1.92(m,1H),1.93-2.00(m,4H),2.02-2.12(m,1H),2.13-2.22(m,1H),2.22(s,3H),2.37-2.45(m,2H),2.78-3.10(m,1H),3.43-4.07(m,1H),4.79-4.89(m,1H),5.19-5.70(m,3H),6.94-7.09(m,1H),7.41-7.53(m,2H),7.64-7.71(m,1H),7.97-8.10(m,1H),8.41(s,1H),10.36-10.71(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值560.2；实测值560.2；Rt＝2.166min。
实施例680.2-甲氧基-5-[[2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)吲唑-6-基]-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物1299)的合成
步骤1：6-溴-2-(1-甲基-4-哌啶基)吲唑的合成
通过一般程序方案M步骤1A制备
FCC条件：Interchim；330g SiO2，MTBE-MeOH 0～100％，流速＝100mL/min，cv＝10
产率：38.0g(74.28％)
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值296.2；实测值296.2；Rt＝0.808min。
步骤2：2-(1-甲基-4-哌啶基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吲唑的合成
通过一般程序方案M步骤2A制备
FCC条件：Interchim；120g SiO2，MTBE-MeOH 0～100％，流速＝70mL/min，cv＝7
产率：21.0g(47.64％)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值342.2；实测值342.0；Rt＝1.045min。
步骤3：外消旋-(3S)-3-甲基-6-[2-(1-甲基-4-哌啶基)吲唑-6-基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序方案M步骤2制备
FCC条件：Interchim；120g SiO2，MTBE-MeOH 0～100％，流速＝70mL/min，cv＝11
产率：9.0g(74.81％)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值411.2；实测值411.4；Rt＝1.165min。
步骤4：2-(1-甲基-4-哌啶基)-6-[外消旋-(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]吲唑的合成
通过一般程序方案M步骤3(方法B)制备
产率：6.0g(71.40％，2HCl)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值311.2；实测值311.2；Rt＝0.578min。
步骤5：2-(1-甲基-4-哌啶基)-6-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]吲唑的合成
通过一般程序方案M步骤4制备
产率：4.9g(粗品)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值313.2；实测值313.2；Rt＝0.543min。
步骤6：2-甲氧基-5-[[2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)吲唑-6-基]-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物1299)的合成
通过一般程序方案M步骤5制备
HPLC条件：2-10min 50-100％水-MeOH+NH3流速30mL/min(装载泵4mL甲醇)，柱：sun fire C18
产率：0.22g(44.40％)
1H NMR(600MHz,dmso)δ0.73-1.06(m,3H),1.27-1.43(m,1H),1.65-1.82(m,1H),1.82-1.94(m,1H),2.02-2.15(m,7H),2.21(s,3H),2.24-2.34(m,1H),2.80-3.13(m,3H),3.46-3.51(m,0.7H),3.91-3.97(m,3H),4.01-4.05(m,0.3H),4.38-4.45(m,1H),5.17-5.73(m,1H),6.95-7.10(m,1H),7.53(s,1H),7.64-7.73(m,2H),7.74(s,1H),8.35-8.39(m,1H),8.39-8.49(m,1H),8.49-8.64(m,1H),10.76(br s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值534.2；实测值534.2；Rt＝2.454min。
实施例681.N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-3-氧代异吲哚啉-5-基]-1-哌啶基]乙酰胺(化合物1272)的合成
步骤1：6-溴-2-(1-甲基-4-哌啶基)异吲哚啉-1-酮
将5-溴-2-(溴甲基)苯甲酸甲酯(5g，16.24mmol)和1-甲基哌啶-4-胺(1.85g，16.24mmol)溶解于MeCN(69.35mL)中，向其中添加DIPEA(4.20g，32.47mmol，5.66mL)。将此混合物回流24h。然后将其蒸发且通过CC(SiO2，将MTBE/MeOH用作洗脱液混合物)纯化，以得到6-溴-2-(1-甲基-4-哌啶基)异吲哚啉-1-酮(1.3g，4.20mmol，25.90％产率)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值309.2；实测值311.0；Rt＝0.845min。
步骤2：2-(1-甲基-4-哌啶基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)异吲哚啉-1-酮
向6-溴-2-(1-甲基-4-哌啶基)异吲哚啉-1-酮(1.3g，4.20mmol)的溶液中添加乙酸钾(825.26mg，8.41mmol，525.64μL)和双(频哪醇)二硼(1.07g，4.20mmol)。将反应混合物脱气且一次性添加Pd(dppf)Cl2·DCM(171.67mg，210.22μmol)。将混合物用Ar进一步脱气且在90℃下加热16h。在此时间之后，使反应混合物冷却至室温，过滤且在真空中移除溶剂，以得到2-(1-甲基-4-哌啶基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)异吲哚啉-1-酮(1.50g，4.21mmol，100.00％产率)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值356.2；实测值357.2；Rt＝0.869min。
步骤3：(3S)-3-甲基-6-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-3-氧代异吲哚啉-5-基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯
将(3S)-3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.45g，4.21mmol)、2-(1-甲基-4-哌啶基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)异吲哚啉-1-酮(1.5g，4.21mmol)和碳酸钠(1.34g，12.63mmol，528.73μL)添加到二噁烷(29.60mL)和水(9.87mL)的混合物中。将所得混合物抽真空，然后用氩气回填，将此操作重复三次，然后在氩气下添加Pd(dppf)Cl2·DCM(171.92mg，210.52μmol)。将反应混合物在氩气、70℃下搅拌16h，然后冷却且过滤。将滤饼用1,4-二噁烷(2*20ml)洗涤且丢弃。在真空中蒸发滤液，以得到呈棕色油状物的(3S)-3-甲基-6-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-3-氧代异吲哚啉-5-基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.58g，3.71mmol，88.18％产率)，其不经纯化即用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值425.2；实测值426.4；Rt＝1.146min。
步骤4：2-(1-甲基-4-哌啶基)-6-[(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]异吲哚啉-1-酮
将(3S)-3-甲基-6-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-3-氧代异吲哚啉-5-基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.58g，3.71mmol)于TFA(6.35g，55.69mmol，4.29mL)中的溶液在25℃下搅拌1h，然后在真空中蒸发。将碎冰(15g)添加到残余物中且用10％氢氧化钠水溶液将pH调节至10。将所得混合物用二氯甲烷(2*30ml)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到呈棕色油状物的2-(1-甲基-4-哌啶基)-6-[(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]异吲哚啉-1-酮(1.18g，3.63mmol，97.66％产率)，其直接用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值325.2；实测值326.0；Rt＝0.596min。
步骤5：2-(1-甲基-4-哌啶基)-6-[(5S)-5-甲基-2-哌啶基]异吲哚啉-1-酮的合成
在0℃下，向2-(1-甲基-4-哌啶基)-6-[(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]异吲哚啉-1-酮(1.18g，3.63mmol)于MeOH(19.74mL)中的搅拌溶液中添加硼氢化钠(274.35mg，7.25mmol，255.44μL)。将所得反应混合物在25℃下搅拌16h。完成之后，将反应混合物在减压下浓缩，然后用水20mL和50ml EtOAc萃取。将合并的有机相用盐水20mL洗涤，经Na2SO4干燥且在减压下浓缩，以获得2-(1-甲基-4-哌啶基)-6-[(5S)-5-甲基-2-哌啶基]异吲哚啉-1-酮(1.1g，3.36mmol，92.65％产率)，其不经进一步纯化即用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值327.2；实测值328.2；Rt＝0.656min。
步骤6：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-3-氧代异吲哚啉-5-基]-1-哌啶基]乙酰胺(化合物1272)的合成
将DIPEA(308.90mg，2.39mmol，416.30μL)添加到相应2-[(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(0.2g，956.02μmol)和2-(1-甲基-4-哌啶基)-6-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]异吲哚啉-1-酮(313.06mg，956.02μmol)于DMF(19.58mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU(399.86mg，1.05mmol)。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC(Waters Sunfire C18 20*100 5mkm柱且以水-MeOH+NH3为洗脱液混合物)，以得到N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)-3-氧代异吲哚啉-5-基]-1-哌啶基]乙酰胺(54.9mg，105.85μmol，11.07％产率)。
1H NMR(600MHz,dmso)δ0.98-1.04(m,3H),1.06-1.13(m,3H),1.30-1.38(m,1H),1.62-1.70(m,3H),1.77-1.87(m,3H),2.01-2.12(m,3H),2.21-2.29(m,4H),2.35-2.41(m,2H),2.73-2.91(m,3H),3.96-4.06(m,2H),4.41-4.45(m,2H),5.22-5.65(m,3H),7.42-7.54(m,2H),7.57-7.59(m,1H),7.60-7.63(m,1H),7.98-8.08(m,1H),10.53-10.58(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值518.6；实测值517.2；Rt＝1.935min。
实施例682.N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)吲唑-6-基]-1-哌啶基]乙酰胺(化合物1096)的合成
步骤1：4-(6-溴吲唑-2-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序13制备。步骤1B
FCC条件：Interchim 120g SiO2，HEX-EtOAc 0～100％，流速＝
70mL/min，cv＝17.1
产率：2.98g(60.08％)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值380.2；实测值380.0；Rt＝1.540min。
步骤2：6-溴-2-(4-哌啶基)吲唑的合成
通过一般程序13制备。步骤2B
产率：0.57g(77.37％)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值282.2；实测值282.2；Rt＝0.770min。
步骤3：6-溴-2-(1-甲基-4-哌啶基)吲唑的合成
通过一般程序13制备。步骤3B
产率：0.27g(45.11％)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值294.2；实测值294.0；Rt＝0.866min。
步骤4：2-(1-甲基-4-哌啶基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吲唑的合成
通过一般程序13制备。步骤2A
产率：0.35g(84.35％)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值342.2；实测值342.2；Rt＝0.947min。
步骤5：外消旋-(3S)-3-甲基-6-[2-(1-甲基-4-哌啶基)吲唑-6-基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
通过一般程序13制备。步骤2
HPLC条件：2-10min 20-100％水-甲醇+FA；流速30mL/min(装载泵4mL/min甲醇)，柱Sun Fire C18 100*19mm
产率：0.07g(16.62％)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值411.2；实测值411.2；Rt＝0.910min。
步骤6：2-(1-甲基-4-哌啶基)-6-[外消旋-(3S)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基]吲唑的合成
通过一般程序13制备。步骤3(方法A)
产率：0.05g(94.46％)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值311.2；实测值311.2；Rt＝0.542min。
步骤7：2-(1-甲基-4-哌啶基)-6-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]吲唑的合成
通过一般程序13制备。步骤4
产率：0.041g(81.47％)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值313.2；实测值313.2；Rt＝0.613min。
步骤8：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(1-甲基-4-哌啶基)吲唑-6-基]-1-哌啶基]乙酰胺(化合物1096)的合成
通过一般程序13制备。步骤5
HPLC条件：2-10min 40-100％水-甲醇+NH3 30ml/min(装载泵4ml甲醇)，柱：sunfire c18
产率：8.2mg(21.92％)
1H NMR(600MHz,dmso)δ0.74-1.05(m,3H),1.05-1.17(m,3H),1.29-1.40(m,1H),1.70-1.81(m,1H),1.82-1.92(m,1H),2.01-2.15(m,7H),2.21(s,3H),2.26-2.35(m,1H),2.37-2.44(m,2H),2.75-3.21(m,3H),3.45-4.07(m,1H),4.34-4.48(m,1H),5.17-5.76(m,3H),6.91-7.08(m,1H),7.42-7.57(m,2H),7.62-7.71(m,1H),7.98-8.12(m,1H),8.37(s,1H),10.53(br s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值504.2；实测值504.2；Rt＝1.667min。
其他实施例
实施例683.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-2-(2-(噻吩-2-基)哌啶-1-基)乙酰胺(化合物9)的合成
步骤1：2-[(6-溴-5-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯的合成
在0℃下，向6-溴-5-甲基吡啶-3-胺(5g，26.73mmol)和三乙胺(2.71g，26.73mmol，3.73mL)于THF(250mL)中的溶液中添加2-氯-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(5.09g，26.73mmol)。在室温下搅拌1h之后，过滤所得混合物且蒸发至干，以得到呈米色固体的2-[(6-溴-5-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(9g，26.39mmol，98.71％产率)且其不经进一步纯化即用于下一步骤中。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ2.33(s,3H),4.99(q,2H),8.13(s,1H),8.59(s,1H),11.28(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值341.0；实测值342.2；Rt＝1.277min。
步骤2：N-(6-溴-5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-2-(2-噻吩-2-基哌啶-1-基)乙酰胺的合成
向2-[(6-溴-5-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(3g，8.80mmol)和2-(2-噻吩基)哌啶(1.47g，7.22mmol，HCl)于乙腈(50mL)中的溶液中添加DIPEA(3.41g，26.40mmol，4.60mL)。将所得混合物加热至回流达18h。将反应混合物蒸发至干且使其经历柱色谱(Companion combiflash；120g SiO2，石油醚/乙酸乙酯，其中乙酸乙酯为10～35％，流速＝85mL/min，Rv＝6CV)。获得呈浅黄色胶状物的N-(6-溴-5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-2-(2-噻吩-2-基哌啶-1-基)乙酰胺(1.5g，3.67mmol，41.75％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.56(m,5H),1.76(m,1H),2.36(m,4H),3.22(m,1H),4.80(m,1H),6.05(m,1H),6.93(m,2H),8.05(m,1H),8.33(d,1H),9.32(d,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值407.0；实测值408.0；Rt＝1.426min。
步骤3：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-2-(2-(噻吩-2-基)哌啶-1-基)乙酰胺(化合物9)的合成
在Ar下，向N-(6-溴-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[2-(2-噻吩基)-1-哌啶基]乙酰胺(0.5g，1.22mmol)、氨基甲酸叔丁酯(286.90mg，2.45mmol)和碳酸铯(797.97mg，2.45mmol)于二噁烷(10mL)中的混合物中添加XantPhos(35.43mg，61.23μmol)和XantPhosPd G3(87.10mg，91.84μmol)。将混合物在100℃下加热42h。过滤最终混合物且蒸发，以得到N-[3-甲基-5-[[2-氧代-2-[2-(2-噻吩基)-1-哌啶基]乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.95g，粗品)。将所获得的固体溶解于HCl(于二噁烷中的4.0M溶液，2ml)且搅拌1h。然后，在真空中浓缩混合物。使残余物经历HPLC(SunFire C18 19*100 5mkm柱；25-70％H2O-MeCN，10min，流速：30mL/min，装载泵4ml/min MeCN)，以得到呈黄色油状物的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[2-(2-噻吩基)-1-哌啶基]乙酰胺(0.007g，20.32μmol，1.66％产率)。
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ1.69(m,2H),1.78(m,2H),2.00(m,1H),2.13(m,3H),2.33(m,1H),2.65(s,3H),3.01(m,1H),4.07(m,1H),5.86(m,1H),7.01(m,2H),7.35(m,1H),7.59(m,1H),8.06(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值344.1；实测值345.2；Rt＝0.982min。
实施例684.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2S)-2-(2-噻吩基)-1-哌啶基]乙酰胺(化合物24)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2R)-2-(2-噻吩基)-1-哌啶基]乙酰胺(化合物22)的合成
步骤1-3与化合物9相同。
步骤4：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2S)-2-(2-噻吩基)-1-哌啶基]乙酰胺(化合物24)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2R)-2-(2-噻吩基)-1-哌啶基]乙酰胺(化合物22)的合成
使用(IB(250*20，5mkm)Chiralpak柱，己烷-IPA-MeOH，90-5-5，流速15ml/min)进行手性分离，得到化合物24N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2S)-2-(2-噻吩基)-1-哌啶基]乙酰胺(8.84mg，32.74％产率；RT＝54.098min)和化合物22N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2R)-2-(2-噻吩基)-1-哌啶基]乙酰胺(9.35mg，34.63％产率；RT＝51.528min)。
化合物22：RT(IB，己烷-IPA-MeOH，90-5-5，0.6ml/min)＝50.937min。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ1.76(m,4H),1.84(m,1H),2.05(m,1H),2.15(m,3H),2.33(m,1H),3.08(m,1H),4.40(m,2H),4.73(m,1H),6.43(m,1H),6.95(m,1H),7.00(m,1H),7.78(m,1H),8.07(m,1H),9.01(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值344.1；实测值345.0；Rt＝3.711min。
化合物24：RT(IB，己烷-IPA-MeOH，90-5-5，0.6ml/min)＝46.420min。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ1.76(m,4H),1.84(m,1H),2.05(m,1H),2.15(m,3H),2.33(m,1H),3.10(m,1H),4.40(m,2H),4.74(m,1H),6.43(m,1H),6.95(m,1H),7.00(m,1H),7.78(m,1H),8.07(m,1H),9.00(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值344.1；实测值345.0；Rt＝3.707min。
实施例685.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,6R)-2-甲基-6-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物415)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,6S)-2-甲基-6-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物417)的合成
步骤1：N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,6R)-2-甲基-6-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
向2-[(2R,6R)-2-甲基-6-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酸甲酯(0.74g，2.83mmol)于MeOH(10mL)中的溶液中添加氢氧化钠珠粒(113.26mg，2.83mmol，53.18μL)且将所得混合物搅拌1h。然后，蒸发溶剂且将残余物与EtOH一起再蒸发。此后，将固体溶解于DMF中且添加TATU(1.09g，3.40mmol)，随后添加N-(5-氨基-3-甲基-2-吡啶基)氨基甲酸叔丁酯(632.26mg，2.83mmol)且将所得混合物搅拌12h。将反应混合物倒入到水中，用EtOAc萃取3次。将合并的有机物用水、盐水洗涤且蒸发。使残余物经历HPLC(40-60％0.5-5min；水(hcl)-乙腈30mL/min；装载泵4mL/min；柱SunFire 19*100mm)。获得呈白色固体的N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,6R)-2-甲基-6-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.2964g，654.96μmol，23.13％产率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ0.94(m,3H),1.52(s,9H),1.87(m,4H),2.31(s,3H),2.59(m,1H),5.02(m,1H),6.78(m,1H),7.25(m,2H),7.34(m,3H),8.09(s,1H),8.37(s,1H),9.33(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值452.2；实测值453.2；Rt＝1.427min。
步骤2：N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,6R)-2-甲基-6-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的手性拆分
使用(IA(250*20，5mkm)Chiralpak柱；以己烷-IPA-MeOH 70-15-15为流动相；流速12mL/min)进行手性拆分；得到N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,6R)-2-甲基-6-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(147.1mg，325.05μmol，49.63％产率)(RT(IA，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝9.7692min)和N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,6S)-2-甲基-6-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(123.99mg，273.98μmol，41.83％产率)(RT(IA，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝16.8562min。RT(IA，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6mL/min)＝9.7692min。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ0.94(m,3H),1.25(m,1H),1.49(s,9H),1.64(m,2H),1.96(m,3H),2.30(s,3H),2.61(m,1H),5.02(m,1H),6.82(m,1H),7.32(m,2H),7.38(m,3H),8.10(s,1H),8.41(s,1H),9.38(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值452.2；实测值454.2；Rt＝5.688mi
步骤3：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,6R)-2-甲基-6-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物415)的合成
在21℃下，向N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,6R)-2-甲基-6-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(147.1mg，325.05μmol)于二噁烷(5mL)中的溶液中添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(59.26mg，1.63mmol，74.07μL)。使所得混合物搅拌2h。将所得混合物蒸发至干且使其经历HPLC(C18柱，H2O-MeCN，30-50％MeCN，30mL/min)，以获得呈白色固体的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,6R)-2-甲基-6-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(40.84mg，115.88μmol，35.65％产率)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.65-0.80(m,3H),1.49-1.57(m,1H),1.57-1.67(m,1H),1.70-1.84(m,3H),2.01-2.13(m,3H),4.05-4.75(m,1H),5.13-5.73(m,3H),7.16-7.42(m,5H),7.42-7.60(m,2H),7.91-8.19(m,1H),10.38-10.63(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值352.2；实测值353.2；Rt＝2.577min。
步骤4：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,6S)-2-甲基-6-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物417)的合成
在21℃下，向N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,6S)-2-甲基-6-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(123.99mg，273.98μmol)于二噁烷(5mL)中的溶液中添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(49.95mg，1.37mmol，62.44μL)。使所得混合物搅拌2h。将所得混合物蒸发至干且使其经历HPLC(C18柱，H2O-MeCN，30-50％MeCN，30mL/min)，得到呈白色固体的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,6S)-2-甲基-6-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(48.4mg，137.33μmol，50.12％产率)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.64-0.86(m,3H),1.46-1.57(m,1H),1.57-1.66(m,1H),1.70-1.97(m,3H),1.99-2.10(m,3H),2.56-2.60(m,1H),3.91-4.84(m,1H),5.06-5.76(m,3H),7.22-7.30(m,1H),7.33-7.41(m,3H),7.40-7.62(m,2H),7.91-8.15(m,1H),10.39-10.65(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值352.2；实测值353.2；Rt＝2.569min。
实施例686.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[外消旋-(2R,6R)-2-甲基-6-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物112)的合成
在21℃下，向N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,6R)-2-甲基-6-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(141.73mg，234.89μmol)(如实施例685中所述制备)于二噁烷(2mL)中的溶液中添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(400.00mg，10.97mmol，0.5mL)。使所得混合物搅拌6h。将所得混合物蒸发至干且通过HPLC(2-7min，40-90min，R130mL/min；Sunfire C18，100x19x5 um；装载泵：5mL/min R1)纯化，以得到呈白色固体的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,6R)-2-甲基-6-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(17.7mg，50.22μmol，21.38％产率)。1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)0.91(m,5H),1.54(m,3H),1.79(m,3H),2.10(m,3H),4.77(m,1H),6.09(m,2H),7.40(m,6H),8.19(m,1H),10.71(s,1H)LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值352.2；实测值353.2；Rt＝2.737min。
实施例687.5-(2-(2-环戊基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物240)的合成
步骤1：2-(2-环戊基哌啶-1-基)-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯的合成在-10℃下，将2-氯-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(1.14g，5.98mmol)逐滴添加到2-环戊基-5-甲基哌啶(1g，5.98mmol)和TEA(604.88mg，5.98mmol，833.16μL)于THF(30mL)中的溶液中。使所得混合物升温至室温且搅拌12h。过滤出所得沉淀。蒸发滤液，以获得2-(2-环戊基-5-甲基-1-哌啶基)-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(2g，粗品)，其不经纯化即用于下一步骤中。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.25(m,6H),1.68(m,8H),3.14(m,1H),3.26(m,1H),3.59(m,1H),4.15(m,1H),5.05(m,2H)。LCMS(ESI)：[M+1]m/z：计算值307.3；实测值308.2；Rt＝1.548min。
步骤2：2-(2-环戊基哌啶-1-基)-2-氧代乙酸锂的合成
将98％氢氧化锂单水合物(261.18mg，6.22mmol，172.97μL)添加到2-(2-环戊基-1-哌啶基)-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(1.91g，6.22mmol)于水(2mL)和THF(20mL)中的溶液中且将所得混合物在20℃下搅拌12h。将所得混合物蒸发至干，以获得[2-(2-环戊基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氧基锂(1.3g，5.62mmol，90.33％产率)，其不经纯化即用于下一步骤中。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.25(m,6H),1.68(m,8H),2.36(m,1H),3.27(m,1H),3.89(m,1H),4.13(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+1]m/z：计算值225.3；实测值226.2；Rt＝1.121min。
步骤3：5-(2-(2-环戊基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺的合成将[2-(2-环戊基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氧基锂(0.5g，2.16mmol)与HATU(904.46mg，2.38mmol)混合于DMF(5mL)中且将所得混合物在20℃下搅拌10min，随后添加5-氨基吡啶-3-甲酰胺(296.56mg，2.16mmol)。将所得混合物在20℃下搅拌12h。使所得溶液经历HPLC(柱SunFire19*100mm，以水-MeCN为流动相)，以获得5-[[2-(2-环戊基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.194g，563.29μmol，26.05％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98-1.23(m,2H),1.33-1.42(m,1H),1.42-1.78(m,12H),2.75-3.19(m,1H),3.49-3.60(m,1H),4.18-4.25(m,1H),7.50-7.65(m,1H),8.09-8.18(m,1H),8.43-8.55(m,1H),8.73-8.78(m,1H),8.83-8.92(m,1H),11.02-11.12(m,1H)。LCMS(ESI)：[M+1]m/z：计算值344.4；实测值345.2；Rt＝3.146min。
实施例688.N-甲基-4-(5-甲基-1-(2-((5-甲基吡啶-3-基)氨基)-2-氧代乙酰基)哌啶-2-基)苯甲酰胺(化合物92)的合成
步骤1：4-(5-甲基吡啶-2-基)苯甲酸甲酯的合成
将2-溴-5-甲基吡啶(1.82g，10.57mmol)和(4-甲氧基羰基苯基)硼酸(2g，11.11mmol)溶解于二噁烷(40mL)和水(5mL)中。向其中添加碳酸铯(8.23g，25.26mmol)。然后，添加四(三苯基磷烷)钯(0)(583.73mg，505.15μmol)且将反应烧瓶快速抽真空且用氩气再填充。将所得混合物在65℃下搅拌12h。此后，将其冷却且蒸发。将残余物分配于EtOAc(100ml)与水(100ml)之间。收集有机相，将其经Na2SO4干燥且蒸发。使残余物经历柱色谱，以获得4-(5-甲基-2-吡啶基)苯甲酸甲酯(0.3g，1.32mmol，13.07％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.35(s,3H),3.87(s,3H),7.74(d,1H),7.96(d,1H),8.04(d,2H),8.20(d,2H),8.55(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值227.2；实测值228.2；Rt＝1.255min。
步骤2：4-(5-甲基吡啶-2-基)苯甲酸的合成
将氢氧化钠珠粒(105.60mg，2.64mmol，49.58μL)添加到4-(5-甲基-2-吡啶基)苯甲酸甲酯(0.3g，1.32mmol)于MeOH(20mL)中的溶液且将所得混合物在65℃下加热12h。将所得溶液冷却至室温且蒸发。将残余物分配于DCM(10ml)与水(10ml)之间。收集水层且用硫酸氢钠(316.98mg，2.64mmol)酸化。将所得混合物用EtOAc(2x30 ml)萃取。蒸发合并的有机层，以获得4-(5-甲基-2-吡啶基)苯甲酸(0.28g，1.31mmol，99.47％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.32(s,3H),7.65(d,1H),7.83(d,1H),7.93(m,4H),8.48(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值213.2；实测值214.2；Rt＝0.881min。
步骤3：N-甲基-4-(5-甲基吡啶-2-基)苯甲酰胺的合成
将4-(5-甲基-2-吡啶基)苯甲酸(0.28g，1.31mmol)、甲胺(177.32mg，2.63mmol，197.24μL，HCl)、HATU(549.22mg，1.44mmol)和三乙胺(465.06mg，4.60mmol，640.58μL)混合于DMF(5mL)中且将所得混合物在20℃下搅拌12h。将所得混合物分配于EtOAc(50ml)与水(50ml)之间。收集有机层，将其用水、盐水洗涤且蒸发。使残余物经历柱色谱，以获得N-甲基-4-(5-甲基-2-吡啶基)苯甲酰胺(0.2g，883.89μmol，67.31％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)2.34(s,3H),2.80(d,3H),7.71(d,1H),7.93(m,3H),8.13(d,2H),8.50(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值226.2；实测值227.2；Rt＝0.783min。
步骤4：N-甲基-4-(5-甲基哌啶-2-基)苯甲酰胺的合成
将干燥的487型钯(10％于碳上)(1.88mg，17.68μmol)添加到N-甲基-4-(5-甲基-2-吡啶基)苯甲酰胺(0.2g，883.89μmol)于MeOH(30mL)中的溶液中且将所得混合物在50atm压力和50℃下氢化72h。在起始材料消耗(H-NMR对照)之后，将所得混合物冷却至室温且过滤。将滤液蒸发至干。使残余物经历HPLC(柱SunFire 100*19mm 5um，以水-MeCN+NH3为洗脱液混合物)，以获得N-甲基-4-(5-甲基-2-哌啶基)苯甲酰胺(0.012g，51.65μmol，5.84％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值232.3；实测值233.2；Rt＝1.556min。
步骤5：N-甲基-4-(5-甲基-1-(2-((5-甲基吡啶-3-基)氨基)-2-氧代乙酰基)哌啶-2-基)苯甲酰胺(化合物92)的合成
将[2-[(5-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酰基]氧基锂(9.61mg，51.65μmol)和HATU(19.64mg，51.65μmol)混合于DMF(2mL)中且将所得混合物在20℃下搅拌20min，随后添加N-甲基-4-(5-甲基-2-哌啶基)苯甲酰胺(0.012g，51.65μmol)且将所得混合物在20℃下搅拌12h。使所得混合物经历HPLC(柱SunFire 100*19mm 5um，以水-MeCN为洗脱液混合物)，以获得N-甲基-4-[5-甲基-1-[2-[(5-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酰基]-2-哌啶基]苯甲酰胺(0.005g，12.68μmol，24.54％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)1.12(m,3H),1.41(m,1H),2.00(m,2H),2.25(m,2H),2.38(m,3H),3.20(m,4H),4.47(m,1H),6.18(m,2H),7.36(d,2H),7.78(d,2H),8.13(m,1H),8.25(m,1H),8.62(m,1H),9.57(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值394.5；实测值395.2；Rt＝2.496min。
实施例689.N-甲基-3-[(2R,5S)-5-甲基-1-[2-[(5-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酰基]-2-哌啶基]苯甲酰胺(化合物48)的合成
步骤1：3-(5-甲基-2-吡啶基)苯甲酸甲酯的合成
向2-溴-5-甲基吡啶(2g，11.63mmol)和(3-甲氧基羰基苯基)硼酸(2.30g，12.79mmol)于二噁烷(40mL)和水(4mL)中的搅拌溶液中添加碳酸铯(9.47g，29.07mmol)。将所得悬浮液用氩气脱气。添加四(三苯基磷烷)钯(0)(671.75mg，581.32μmol)。将反应混合物在65℃下搅拌12小时。完成之后，将反应混合物过滤且将滤液在真空中蒸发。将残余物分配于EtOAc(100mL)与水(100mL)之间。将有机相经Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩。通过柱色谱纯化粗产物，以获得3-(5-甲基-2-吡啶基)苯甲酸甲酯(1g，4.40mmol，37.85％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)2.35(s,3H),3.89(s,3H),7.63(t,1H),7.72(d,1H),7.93(d,1H),7.99(d,1H),8.32(m,1H),8.54(s,1H),8.67(s,1H)。
步骤2：3-(5-甲基-2-吡啶基)苯甲酸的合成
向3-(5-甲基-2-吡啶基)苯甲酸甲酯(1g，4.40mmol)于MeOH(20mL)中的搅拌溶液中添加氢氧化钠(352.00mg，8.80mmol)。将所得反应混合物在65℃下搅拌12小时。完成之后，使反应混合物冷却至室温且在减压下浓缩。将所获得的残余物分配于DCM(10mL)与水(10mL)之间。将水层用硫酸氢钠(1.06g，8.80mmol)酸化。将所得混合物用EtOAc(2x 30mL)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩，以获得3-(5-甲基-2-吡啶基)苯甲酸(0.9g，4.22mmol，95.92％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)2.34(s,3H),7.59(t,1H),7.72(d,1H),7.96(m,2H),8.27(d,1H),8.53(s,1H),8.64(s,1H),13.05(brs,1H)。
步骤3：N-甲基-3-(5-甲基-2-吡啶基)苯甲酰胺的合成
向3-(5-甲基-2-吡啶基)苯甲酸(1g，4.69mmol)、甲胺(盐酸盐，633.28mg，9.38mmol)和HATU(1.96g，5.16mmol)于DMF(5mL)中的搅拌溶液中添加三乙胺(1.66g，16.41mmol，2.29mL)。将所得反应混合物在20℃下搅拌12小时。12小时之后，将反应混合物分配于EtOAc(50mL)与水(50mL)之间。将有机层用水、盐水洗涤，经Na2SO4干燥且在减压下浓缩。通过柱色谱纯化粗产物，以获得N-甲基-3-(5-甲基-2-吡啶基)苯甲酰胺(1.05g，4.64mmol，98.95％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)2.35(s,3H),2.81(d,3H),7.55(t,1H),7.74(m,1H),7.85(d,1H),7.93(m,1H),8.18(d,1H),8.52(m,3H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值226.1；实测值227.2；Rt＝0.852min。
步骤4：N-甲基-3-(5-甲基-2-哌啶基)苯甲酰胺的合成
在50atm H2压力、50℃下，将N-甲基-3-(5-甲基-2-吡啶基)苯甲酰胺(1.05g，4.64mmol)于MeOH(30mL)中的溶液经干燥的487型钯(10％于碳上)(493.83mg，4.64mmol)氢化52小时。完成之后，过滤反应混合物；将残余物用MeOH洗涤。在减压下浓缩滤液且通过反相HPLC(洗脱液：水-乙腈，0-10％，0.5-6min；流速：30mL/min；装载泵：4mL/min，乙腈；柱：SunFire 100*19mm，5um)纯化粗产物，以获得N-甲基-3-(5-甲基-2-哌啶基)苯甲酰胺(210mg)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值232.2；实测值233.2；Rt＝1.668min。
步骤5：N-甲基-3-[(2R,5S)-5-甲基-1-[2-[(5-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酰基]-2-哌啶基]苯甲酰胺(化合物48)的合成
向[2-[(5-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酰基]氧基锂(104.13mg，559.57μmol)和HATU(212.77mg，559.57μmol)于DMF(3mL)中的搅拌溶液中添加N-甲基-3-(5-甲基-2-哌啶基)苯甲酰胺(0.13g，559.57μmol)。将所得反应混合物在20℃下搅拌12小时。使所得混合物经历反相HPLC纯化(洗脱液：水-乙腈，20-25％，0.5-6min；流速：30mL/min；装载泵：4mL/min，乙腈；柱：SunFire 100*19mm，5um)，以获得呈灰白色固体的N-甲基-3-[(2R,5S)-5-甲基-1-[2-[(5-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酰基]-2-哌啶基]苯甲酰胺(化合物48，40.10mg，101.66μmol，18.17％产率)。
1H NMR(DMSO-d6+CCl4,400MHz):δ(ppm)1.12(m,3H),1.43(m,1H),1.92(m,2H),2.15(m,1H),2.35(m,3H),2.84(m,3H),3.03(m,1H),3.30(m,1H),3.88(m,1H),5.49(m,1H),7.44(m,2H),7.74(m,2H),7.97(m,1H),8.08(m,1H),8.25(m,1H),8.55(m,1H),10.92(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值394.2；实测值395.2；Rt＝1.013min。
实施例690.N-(6-氨基-4,5-二甲基吡啶-3-基)-2-(2-(4-羟基苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物383、化合物391)的合成
步骤1：2-(2-(4-羟基苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯的合成
在-40℃下，将2-氯-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(996.01mg，5.23mmol)逐滴添加到4-(5-甲基-2-哌啶基)苯酚(1g，5.23mmol)和TEA(529.05mg，5.23mmol，728.71μL)于THF(20mL)中的溶液中。使所得混合物升温至室温且搅拌12h。过滤出所得沉淀。蒸发滤液，以获得2-[2-(4-羟基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(1.2g，3.48mmol，66.47％产率)，其不经纯化即用于下一步骤中。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.92(d,3H),1.28(m,1H),1.67(m,1H),1.89(m,1H),2.11(m,1H),3.18(m,1H),3.79(m,2H),4.62(m,1H),5.04(m,2H),6.77(m,2H),7.05(m,2H),9.44(m,1H)。LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值345.2；实测值346.2；Rt＝1.354min
步骤2：2-(2-(4-羟基苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酸的合成
将98％氢氧化锂单水合物(145.83mg，3.48mmol，96.57μL)添加到2-[2-(4-羟基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(1.2g，3.48mmol)于THF(20mL)和水(2mL)中的溶液中且将所得混合物在20℃下搅拌12h。将所得混合物蒸发至干，以获得2-[2-(4-羟基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酸(0.8g，2.96mmol，85.19％产率，Li+)，其不经纯化即用于下一步骤中。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98(d,3H),1.18(m,1H),1.38(m,1H),1.98(m,3H),2.84(m,1H),3.12(m,1H),4.65(m,1H),5.04(m,1H),6.78(m,2H),7.17(m,2H),9.55(m,1H)。LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值263.2；实测值264.2；Rt＝0.885min。
步骤3：3,4-二甲基-5-硝基吡啶-2-胺的合成
将3-溴-4-甲基-5-硝基吡啶-2-胺(5g，15.98mmol，HBr)和甲基硼酸(4.78g，79.89mmol)溶解于THF(100mL)和水(10mL)中。向其中添加碳酸铯(33.84g，103.85mmol)。然后，添加Pd(dppf)Cl2*DCM(798.86μmol)且将反应烧瓶快速抽真空且用氩气再填充。将所得混合物在80℃下搅拌12h。此后，将其冷却且蒸发。将残余物分配于EtOAc(100ml)与水(100ml)之间。收集有机相，将其经Na2SO4干燥且蒸发，以获得3,4-二甲基-5-硝基吡啶-2-胺(2g，11.96mmol，74.88％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)2.64(s,3H),2.99(s,3H),7.65(bds,2H),9.16(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值167.2；实测值168.2；Rt＝0.881min。
步骤4：3,4-二甲基吡啶-2,5-二胺的合成
将干燥的487型钯(10％于碳上)(636.62mg，5.98mmol)添加到3,4-二甲基-5-硝基吡啶-2-胺(1g，5.98mmol)于MeOH(30mL)中的溶液且将所得混合物在50atm压力和20℃下氢化12h。过滤所得混合物且将其蒸发，以获得3,4-二甲基吡啶-2,5-二胺(0.7g，5.10mmol，85.30％产率)，其不经纯化即用于下一步骤中。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.90(s,3H),1.93(s,3H),4.01(bds,2H),4.60(bds,2H),7.27(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值137.2；实测值138.2；Rt＝min。
步骤5：N-(6-氨基-4,5-二甲基吡啶-3-基)-2-(2-(4-羟基苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺的合成
将2-[2-(4-羟基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酸(0.4g，1.48mmol，Li+)与HATU(562.83mg，1.48mmol)混合于DMF(5mL)中且将所得混合物在20℃下搅拌10min，随后添加3,4-二甲基吡啶-2,5-二胺(203.06mg，1.48mmol)。将所得混合物在20℃下搅拌12h。使所得溶液经历HPLC(柱：TRIART 100*20，5微米，水/ACN+NH3为洗脱液混合物)，以获得N-(6-氨基-4,5-二甲基-3-吡啶基)-2-[2-(4-羟基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.057g，149.04μmol，10.07％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值382.5；实测值383.2；Rt＝0.811min。
步骤6：手性分离(化合物383和化合物391)
使用(Chiralpak OD-H 250*30，5mkm柱；以己烷-IPA-MeOH，70-15-15为流动相；流速30mL/min；注入体积：900mkl)分离N-(6-氨基-4,5-二甲基-3-吡啶基)-2-[2-(4-羟基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(57mg，149.04μmol)，得到呈黄色固体的化合物383N-(6-氨基-4,5-二甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(4-羟基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(21mg，54.91μmol，36.84％产率)(RT(OD-H，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.6ml/min)＝14.05min)和呈黄色固体的化合物391N-(6-氨基-4,5-二甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(4-羟基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(22mg，57.52μmol，38.60％产率)(RT(OD-H，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.6ml/min)＝8.29min)。
化合物383：保留时间：14.05min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98-1.04(m,3H),1.26-1.34(m,1H),1.65-1.73(m,1H),1.83(d,1H),1.87-2.04(m,7H),2.11-2.19(m,1H),2.70-3.13(m,1H),3.40-4.02(m,1H),4.97-5.54(m,1H),5.56-5.85(m,2H),6.67-6.80(m,2H),7.02-7.22(m,2H),7.43-7.68(m,1H),9.16-9.45(m,1H),9.48-10.14(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值382.4；实测值383.2；Rt＝1.974min。
化合物391：保留时间：8.29min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.91-1.06(m,3H),1.18-1.38(m,1H),1.59-1.74(m,1H),1.76-1.87(m,1H),1.87-2.04(m,7H),2.08-2.20(m,1H),2.66-3.18(m,1H),3.41-4.00(m,1H),5.00-5.55(m,1H),5.57-5.85(m,2H),6.71-6.78(m,2H),7.03-7.19(m,2H),7.46-7.67(m,1H),9.16-9.38(m,1H),9.51-10.14(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值382.4；实测值383.2；Rt＝1.980min。
实施例691.2-甲氧基-5-(2-氧代-2-(2-苯基哌啶-1-基)乙酰胺基)烟酰胺(化合物138、化合物199和化合物202)的合成
步骤1：2-甲氧基-5-(2-氧代-2-(2-苯基哌啶-1-基)乙酰胺基)烟酰胺(化合物138)的合成
将DIPEA(138.52mg，1.07mmol，186.68μL)添加到相应2-氧代-2-(2-苯基-1-哌啶基)乙酸(0.1g，428.70μmol)和5-氨基-2-甲氧基吡啶-3-甲酰胺(71.66mg，428.70μmol)于DMF(10mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU(179.31mg，471.57μmol)于DMF(2mL)中的溶液。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC，以得到纯的2-甲氧基-5-[[2-氧代-2-(2-苯基-1-哌啶基)乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(117.4mg，307.00μmol，71.61％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.44(m,2H),1.61(m,2H),1.92(m,1H),3.00(m,2H),3.96(m,4H),5.69(m,1H),7.33(m,3H),7.41(m,2H),7.73(m,1H),7.77(m,1H),8.51(m,1H),8.57(m,1H),11.08(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值382.4；实测值383.2；Rt＝3.030min。
步骤2：手性分离(化合物199和化合物202)
使用(Chiralpak IB 250*20，5mkm柱；CO2-MeOH，70-30为流动相；流速2mL/min)分离2-甲氧基-5-[[2-氧代-2-(2-苯基-1-哌啶基)乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(46.2mg，120.81μmol)；得到呈米色固体的化合物199 2-甲氧基-5-[[2-氧代-2-[(2R)-2-苯基-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(22mg，57.53μmol，47.62％产率)(RT＝7.02min)和呈米色固体的化合物202 2-甲氧基-5-[[2-氧代-2-[(2S)-2-苯基-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(24.15mg，63.15μmol，52.27％产率)(RT＝7.71min)。
化合物199：保留时间：7.02min
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.53(m,4H),1.87(m,1H),3.01(m,1H),3.70(m,1H),3.95(m,3H),4.23(m,1H),5.44(m,1H),7.37(m,5H),7.76(m,2H),8.52(m,2H),11.09(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值382.2；实测值383.2；Rt＝3.359min。
化合物202：保留时间：7.71min
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.55(m,4H),1.83(m,1H),3.01(m,1H),3.70(m,1H),3.95(m,3H),4.30(m,1H),5.45(m,1H),7.37(m,5H),7.75(m,2H),8.53(m,2H),11.09(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值382.2；实测值383.2；Rt＝3.360min。
实施例692.N-(5-(羟基甲基)吡啶-3-基)-2-氧代-2-(2-苯基哌啶-1-基)乙酰胺(化合物136)和N-(5-甲酰基吡啶-3-基)-2-氧代-2-(2-苯基哌啶-1-基)乙酰胺(化合物147)的合成
步骤1：N-(5-(羟基甲基)吡啶-3-基)-2-氧代-2-(2-苯基哌啶-1-基)乙酰胺(化合物136)的合成
将DIPEA(138.52mg，1.07mmol，186.68μL)添加到相应2-氧代-2-(2-苯基-1-哌啶基)乙酸(0.1g，428.70μmol)和(5-氨基-3-吡啶基)甲醇(53.22mg，428.70μmol)于DMF(10mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU(179.31mg，471.57μmol)于DMF(2mL)中的溶液。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC，以得到纯的N-[5-(羟基甲基)-3-吡啶基]-2-氧代-2-(2-苯基-1-哌啶基)乙酰胺(0.1g，294.65μmol，68.73％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.42(m,2H),1.61(m,2H),1.82(m,1H),2.98(m,2H),3.96(m,1H),4.49(m,2H),5.42(m,2H),7.26(m,1H),7.33(m,2H),7.39(m,2H),8.05(m,1H),8.24(m,1H),8.64(m,1H),11.10(m,1H)。LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值339.4；实测值340.2；Rt＝2.490min。
步骤2：N-(5-甲酰基吡啶-3-基)-2-氧代-2-(2-苯基哌啶-1-基)乙酰胺(化合物147)的合成
将N-[5-(羟基甲基)-3-吡啶基]-2-氧代-2-(2-苯基-1-哌啶基)乙酰胺(84.4mg，248.68μmol)和2-碘氧基苯甲酸(90.53mg，323.29μmol)溶解于MeCN(10mL)中且在回流下搅拌3h。使所得溶液冷却至室温且通过滤纸过滤。在减压下蒸发溶剂。通过HPLC使用水-MeOH作为流动相纯化固体残余物，以得到N-(5-甲酰基-3-吡啶基)-2-氧代-2-(2-苯基-1-哌啶基)乙酰胺(14.6mg，43.28μmol，17.40％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.63(m,2H),2.01(m,2H),2.50(m,1H),2.99(m,1H),3.70(m,1H),4.68(m,1H),6.19(m,1H),7.27(m,3H),7.36(m,2H),8.72(m,1H),8.86(m,1H),9.01(m,1H),9.76(m,1H),10.10(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值337.4；实测值338.2；Rt＝3.284min。
实施例693.N-(5,6-二甲基吡啶-3-基)-2-氧代-2-(2-苯基哌啶-1-基)乙酰胺(化合物139、化合物189和化合物188)的合成
步骤1：N-(5,6-二甲基吡啶-3-基)-2-氧代-2-(2-苯基哌啶-1-基)乙酰胺(化合物139)的合成
将DIPEA(138.52mg，1.07mmol，186.68μL)添加到相应5,6-二甲基吡啶-3-胺(52.37mg，428.70μmol)和2-氧代-2-(2-苯基-1-哌啶基)乙酸(0.1g，428.70μmol)于DMF(10mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU(179.31mg，471.57μmol)于DMF(2mL)中的溶液。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC(Waters SunFire C18 19*1005mkm柱且以40-60％ MeCN为流动相)，以得到纯的N-(5,6-二甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-(2-苯基-1-哌啶基)乙酰胺(99.6mg，295.19μmol，68.86％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6+CCl4)δ(ppm)1.44(m,2H),1.62(m,2H),1.82(m,1H),2.23(m,3H),2.37(m,3H),2.98(m,2H),3.67(m,1H),5.68(m,1H),7.33(m,3H),7.41(m,2H),7.86(m,1H),8.53(m,1H),10.97(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值337.4；实测值338.2；Rt＝2.510min。
步骤2：手性分离(化合物189和化合物188)
使用(Chiralpak OJ-H 250*20，5mkm柱；以己烷-IPA-MeOH，60-20-20为流动相；流速12mL/min；注入体积：900mkl)分离N-(5,6-二甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-(2-苯基-1-哌啶基)乙酰胺(52.93mg，156.87μmol)；得到呈米色固体的化合物189N-(5,6-二甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2R)-2-苯基-1-哌啶基]乙酰胺(26.84mg，79.55μmol，50.71％产率)(RT(OJ-H，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.6ml/min)＝24.48min)和呈米色固体的化合物188N-(5,6-二甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[(2S)-2-苯基-1-哌啶基]乙酰胺(26.09mg，77.32μmol，49.29％产率)(RT(OJ-H，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.6ml/min)＝10.69min)。
化合物189：保留时间：24.48min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.49(m,4H),1.85(m,1H),2.20(m,3H),2.34(m,3H),2.43(m,1H),2.96(m,1H),4.02(m,1H),5.39(m,1H),7.33(m,5H),7.80(m,1H),8.46(m,1H),10.94(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值337.2；实测值338.2；Rt＝3.802min。
化合物188：保留时间：10.69min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.51(m,4H),1.83(m,1H),2.20(m,3H),2.34(m,3H),2.43(m,1H),2.96(m,1H),4.12(m,1H),5.40(m,1H),7.34(m,5H),7.80(m,1H),8.46(m,1H),10.93(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值337.2；实测值338.2；Rt＝3.808min。
实施例694.N-羟基-5-(2-氧代-2-(2-苯基哌啶-1-基)乙酰胺基)烟酰胺(化合物378)的合成
步骤1：5-((叔丁氧基羰基)氨基)烟酸甲酯的合成
将一部分5-甲氧基羰基吡啶-3-甲酸(4.23g，23.35mmol)溶解于无水叔丁醇(98.25g，1.33mol，125mL)中且依次用99％ TEA(3.54g，35.03mmol，4.88mL)和叠氮磷酸二苯酯(8.52g，35.03mmol)处理。将混合物回流8h。在减压下移除溶剂且将残余物分配于水与DCM之间。分离各层且用DCM萃取水相两次。将合并的有机相干燥且浓缩，以产生5-(叔丁氧基羰基氨基)吡啶-3-甲酸甲酯(8g，粗品)，其不经进一步纯化即使用。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.49(s,9H),3.96(s,3H),8.49(s,1H),8.69(s,1H),8.84(s,1H),12.06(bds,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值252.2；实测值253.2；Rt＝1.216min。
步骤2：5-((叔丁氧基羰基)氨基)烟酸的合成
将5-(叔丁氧基羰基氨基)吡啶-3-甲酸甲酯(8g，31.71mmol)溶解于MeOH(128mL)和水(32mL)中，一次性添加氢氧化钠珠粒(1.90g，47.57mmol，893.25μL)，将混合物在室温下搅拌8h，将混合物浓缩，将残余物用1N HCl处理，直到所得浆液达到pH 3。收集残余物且用水洗涤，干燥。使粗品经历CC(SiO2，梯度ACN/CHCl3)，以产生5-(叔丁氧基羰基氨基)吡啶-3-甲酸(1.1g，4.62mmol，14.56％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.49(s,9H),8.48(s,1H),8.69(s,1H),8.78(s,1H),9.82(bds,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值238.2；实测值239.2；Rt＝0.964min。
步骤3：(5-((苯甲酰基氧基)氨基甲酰基)吡啶-3-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
将5-(叔丁氧基羰基氨基)吡啶-3-甲酸(0.2g，839.49μmol)溶解于DMF(4mL)中且一次性添加O-苯甲基羟基胺(200.99mg，1.26mmol，HCl)、EDC(321.86mg，1.68mmol)、HOBt(124.78mg，923.44μmol)和DIPEA(336.35mg，2.60mmol，453.30μL)。将混合物在室温下搅拌8h且通过LCMS控制。将混合物用EtOAc(30mL)稀释且用盐水(3*10mL)洗涤，经Na2SO4干燥且浓缩，以产生N-[5-(苯甲基氧基氨基甲酰基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.3g，粗品)，其不经进一步纯化即使用。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)1.49(s,9H),4.84(s,2H),5.45(bds,2H),7.40(m,5H),8.01(s,1H),8.57(s,1H),8.65(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值343.2；实测值344.2；Rt＝1.221min。
步骤4：5-氨基-N-(苯甲酰基氧基)烟酰胺的合成
将N-[5-(苯甲基氧基氨基甲酰基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.3g，873.68μmol)溶解于二噁烷(1mL)中且添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(318.55mg，8.74mmol，398.19μL)，将混合物在室温下搅拌4h且浓缩，以产生5-氨基-N-苯甲基氧基吡啶-3-甲酰胺(0.3g，粗品，HCl)，其不经进一步纯化即使用。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值243.2；实测值244.2；Rt＝0.780min。
步骤5：N-(苯甲酰基氧基)-5-(2-氧代-2-(2-苯基哌啶-1-基)乙酰胺基)烟酰胺的合成
将5-氨基-N-苯甲基氧基吡啶-3-甲酰胺(0.3g，1.07mmol，HCl)、2-氧代-2-(2-苯基-1-哌啶基)乙酸(250.17mg，1.07mmol)、TEA(325.58mg，3.22mmol，448.45μL)和HATU(611.69mg，1.61mmol)于DMF(5mL)中的溶液在25℃下搅拌12h。将反应混合物用EtOAc(30ml)稀释且用盐水(3x30 ml)洗涤。将有机层经Na2SO4干燥，过滤且在真空下浓缩。使残余物经历HPLC(30-55％2-7min；水-MecN；30ml/min；柱SunFire 19*100mm)，以产生N-苯甲基氧基-5-[[2-氧代-2-(2-苯基-1-哌啶基)乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(24.4mg，53.22μmol，4.96％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值458.4；实测值459.2；Rt＝1.349min。
步骤6：N-羟基-5-(2-氧代-2-(2-苯基哌啶-1-基)乙酰胺基)烟酰胺(化合物378)的合成
将N-苯甲基氧基-5-[[2-氧代-2-(2-苯基-1-哌啶基)乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(24.4mg，53.22μmol)溶解于MeOH(2mL)中且添加钯(5％于活性碳糊上)5R437(1.13mg，10.64μmol)。将混合物抽真空且添加具有氢气的气球。通过LCMS控制混合物。将混合物过滤且使溶液经历HPLC(10-50％0.5-6.5min；水-MeCN；30ml/min；柱SunFire19*100mm)，以产生N-[5-(羟基氨基甲酰基)-3-吡啶基]-2-氧代-2-(2-苯基-1-哌啶基)乙酰胺(4.1mg，11.13μmol，20.91％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值368.2；实测值369.2；Rt＝2.523min。
实施例695.N-(6-氨基-4,5-二甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-苯基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物368、化合物367)的合成
步骤1：N-(6-氨基-4,5-二甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-苯基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺的合成
将2-(5-甲基-2-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酸(0.4g，1.57mmol，Li+)与HATU(598.25mg，1.57mmol)混合于DMF(5mL)中且将所得混合物在20℃下搅拌10min，随后添加3,4-二甲基吡啶-2,5-二胺(215.84mg，1.57mmol)(如上文所制备)。将所得混合物在20℃下搅拌12h。使所得溶液经历HPLC(2-10min 45-60％水+NH3/MeOH+NH3(装载泵4ml MeOH+NH3)；柱：TRIART 100*20 5微米)，以获得N-(6-氨基-4,5-二甲基-3-吡啶基)-2-(5-甲基-2-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰胺(0.19g，518.48μmol，32.95％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值366.2；实测值367.2；Rt＝1.082min。
步骤2：手性分离(化合物368、化合物368和化合物367)
使用(Chiralpak IA-II 250*20，5mkm柱；己烷-IPA-MeOH，40-30-30为流动相；流速11mL/min；注入体积：900mkl)分离N-(6-氨基-4,5-二甲基-3-吡啶基)-2-(5-甲基-2-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰胺(190mg，518.48μmol)；得到呈黄色固体的化合物368和化合物368N-(6-氨基-4,5-二甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(83mg，226.49μmol，43.68％产率)(RT(OJ-H，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.6ml/min)＝12.09min)和呈黄色固体的化合物367N-(6-氨基-4,5-二甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(68.49mg，186.90μmol，36.05％产率)(RT(OJ-H，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.6ml/min)＝15.44min)。在以下条件下再纯化样品：柱：Chiralpak OJ-H；流动相：己烷-MeOH-IPA，70-15-15，13mL/min；45mg纯的化合物368。
化合物368：保留时间：12.09min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.94-1.06(m,3H),1.27-1.38(m,1H),1.38-1.85(m,2H),1.85-2.07(m,7H),2.12-2.25(m,1H),2.68-3.24(m,1H),3.35-4.07(m,1H),5.12-5.57(m,1H),5.58-6.47(m,2H),7.07-7.26(m,1H),7.26-7.42(m,4H),7.46-7.68(m,1H),9.47-10.19(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值366.2；实测值367.2；Rt＝2.550min。
化合物367：保留时间：15.44min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.95-1.07(m,3H),1.24-1.39(m,1H),1.40-1.85(m,2H),1.86-2.12(m,7H),2.12-2.27(m,1H),2.53-2.73(m,1H),2.89-3.24(m,1H),3.41-4.13(m,1H),5.10-5.57(m,1H),5.57-5.89(m,2H),7.12-7.26(m,1H),7.27-7.31(m,1H),7.35-7.38(m,2H),7.38-7.69(m,1H),9.39-10.29(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值366.2；实测值367.2；Rt＝2.544min。
实施例696.N-(6-氨基-4,5-二甲基吡啶-3-基)-2-(2-甲基-6-苯基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物425、化合物439)的合成
步骤1：外消旋-2-((2R,6R)-2-甲基-6-苯基哌啶-1-基)-2-氧代乙酸钠的合成
向2-[(2R,6R)-2-甲基-6-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酸甲酯(0.92g，3.52mmol)于MeOH(25mL)中的溶液中添加氢氧化钠珠粒(154.90mg，3.87mmol，72.72μL)且使所得混合物在室温下搅拌1h。然后，将所得混合物蒸发至干且呈钠盐([2-[(2R,6R)-2-甲基-6-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氧基钠(0.9g，3.34mmol，94.94％产率)用于下一步骤中。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值247.2；实测值248.2；Rt＝1.181min。
步骤2：N-(6-氨基-4,5-二甲基吡啶-3-基)-2-(2-甲基-6-苯基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺的合成
在21℃下，将[2-[(2R,6R)-2-甲基-6-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氧基钠(0.45，1.67mmol)、TATU(645.88mg，2.01mmol)和TEA(169.11mg，1.67mmol，232.93μL)混合于无水DMF(8mL)中且将所得混合物搅拌15min。向其中添加3,4-二甲基吡啶-2,5-二胺(229.26mg，1.67mmol)(如上文所制备)且将所得混合物在21℃下搅拌过夜。将所得混合物倒入到水中，用EtOAc萃取3次，将合并的有机物用水、盐水洗涤且蒸发。使残余物经历HPLC(0.5-6.5min；水-MeOH(+NH3)；30ml/min；装载泵4ml/min R1；柱YMC-Actus Triat20*100mm)。获得呈棕色固体的N-(6-氨基-4,5-二甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,6R)-2-甲基-6-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(122.3mg，333.74μmol，19.97％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.92(d,3H),1.87(m,3H),2.08(s,3H),2.18(s,3H),2.58(m,1H),4.46(m,2H),4.97(m,1H),6.17(m,1H),7.24(m,2H),7.36(m,5H),8.05(s,1H),8.59(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值366.2；实测值367.2；Rt＝0.954min。
步骤3：手性分离(化合物425和化合物439)
使用(Chiralpak OJ-H 250*20，5mkm柱；己烷-IPA-MeOH，60-20-20为流动相；流速12mL/min；注入体积：900mkl)分离N-(6-氨基-4,5-二甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,6R)-2-甲基-6-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(120mg，327.46μmol)；得到呈白色固体的化合物425N-(6-氨基-4,5-二甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,6S)-2-甲基-6-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(52.57mg，143.46μmol，43.81％产率)(RT(OJ-H，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.6ml/min)＝31.68min)和呈白色固体的化合物439N-(6-氨基-4,5-二甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,6R)-2-甲基-6-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(50.39mg，137.51μmol，41.99％产率)(RT(OJ-H，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.6ml/min)＝13.17min)。
化合物425
保留时间：31.68min
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.67-0.91(m,3H),1.47-1.62(m,2H),1.68-1.85(m,3H),1.87-2.16(m,7H),3.99-4.86(m,1H),5.07-5.62(m,1H),5.62-5.91(m,2H),7.25(t,1H),7.30-7.38(m,2H),7.38-7.52(m,2H),7.52-7.70(m,1H),9.54-10.21(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值366.2；实测值367.2；Rt＝3.980min。
化合物439：保留时间：13.17min
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.62-0.84(m,3H),1.48-1.64(m,2H),1.65-1.84(m,3H),1.85-2.20(m,7H),3.94-4.78(m,1H),5.13-5.61(m,1H),5.62-5.83(m,2H),7.22-7.28(t,1H),7.30-7.38(m,2H),7.38-7.54(m,2H),7.57-7.72(m,1H),9.49-10.27(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值366.2；实测值367.2；Rt＝3.971min。
实施例697.5-(2-(2-甲基-6-苯基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物278、化合物274)的合成
步骤1：外消旋-2-((2S,6S)-2-甲基-6-苯基哌啶-1-基)-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯的合成
向(2S,6S)-2-甲基-6-苯基哌啶(0.23g，1.31mmol)于DCM(10mL)中的溶液中添加TEA(159.35mg，1.57mmol，219.48μL)，随后在0℃、惰性气氛下，添加2-氯-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(274.99mg，1.44mmol)。1h之后，将反应混合物用水淬灭，将DCM干燥且蒸发，以得到呈黄色固体的2-[(2S,6S)-2-甲基-6-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(0.43g，1.31mmol，99.50％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.84(d,3H),1.68(m,2H),1.96(m,2H),2.58(d,1H),3.11(m,1H),3.82(m,1H),4.76(m,2H),5.89(m,1H),7.26(m,1H),7.37(m,4H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值329.2；实测值330.2；Rt＝1.532min。
步骤2：外消旋-2-((2S,6S)-2-甲基-6-苯基哌啶-1-基)-2-氧代乙酸的合成
向2-[(2S,6S)-2-甲基-6-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(0.43g，1.31mmol)于THF(25mL)中的溶液中添加氢氧化锂水合物(65.75mg，1.57mmol，43.54μL)且使所得混合物在室温下搅拌1h。然后将所得混合物蒸发至干，溶解于水中，用DCM洗涤三次。将水酸化至pH＝1且用EtOAc萃取两次，将有机物用盐水洗涤，经Na2SO4干燥且蒸发。获得呈浅黄色固体的2-[(2S,6S)-2-甲基-6-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酸(0.26g，1.05mmol，80.52％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.88(d,3H),1.68(m,2H),1.96(m,3H),2.61(d,1H),4.68(m,1H),5.89(m,1H),7.36(m,5H),7.87(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值247.2；实测值248.2；Rt＝1.028min。
步骤3：5-(2-(2-甲基-6-苯基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺的合成
在21℃下，将2-[(2S,6S)-2-甲基-6-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酸(0.26g，1.05mmol)、TATU(372.49mg，1.16mmol)和TEA(212.78mg，2.10mmol，293.09μL)混合于无水DMF(15mL)中且将所得混合物搅拌15min。向其中添加5-氨基吡啶-3-甲酰胺(144.19mg，1.05mmol)且将所得混合物在21℃下搅拌过夜。将所得混合物倒入到水中，用EtOAc萃取3次，将合并的有机物用水、盐水洗涤且蒸发。使残余物经历HPLC(2-7min 25-50％ MeCN，30ml/min Sunfire c18 5μM)。获得呈微黄色固体的5-[[2-[(2S,6S)-2-甲基-6-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(166.2mg，453.59μmol，43.14％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)0.91(d,3H),1.61(m,2H),1.91(m,3H),2.55(m,2H),4.88(m,1H),6.42(m,2H),7.36(m,5H),8.68(s,1H),8.87(s,1H),9.04(s,1H),9.91(s,1H),
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值366.2；实测值367.2；Rt＝1.233min。
步骤4：手性分离(化合物278和化合物274)
使用(Chiralpak AS-H 250*20，5mkm柱；CO2-MeOH，60-40为流动相；流速2mL/min)分离5-[[2-[(2S,6S)-2-甲基-6-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(166.2mg，453.59μmol)，得到呈米色固体的化合物278 5-[[2-[(2R,6R)-2-甲基-6-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(47.87mg，130.64μmol，28.80％产率)(RT＝4.54min)和呈米色固体的化合物274 5-[[2-[(2S,6S)-2-甲基-6-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(51.47mg，140.36μmol，30.94％产率)(RT＝3.59min)。
化合物278：保留时间：4.54min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.64-0.82(m,3H),1.48-1.55(m,1H),1.55-1.67(m,1H),1.69-1.96(m,3H),2.53-2.62(m,1H),3.98-4.83(m,1H),5.05-5.82(m,1H),7.19-7.29(m,1H),7.30-7.50(m,4H),7.56-7.68(m,1H),8.09-8.25(m,1H),8.40-8.54(m,1H),8.69-8.80(m,1H),8.80-8.97(m,1H),11.25(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值366.2；实测值367.2；Rt＝3.046min。
化合物274：保留时间：3.59min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.66-0.86(m,3H),1.46-1.55(m,1H),1.55-1.63(m,1H),1.70-1.92(m,3H),2.55-2.64(m,1H),4.00-4.80(m,1H),5.05-5.80(m,1H),7.17-7.28(m,1H),7.31-7.52(m,4H),7.54-7.67(m,1H),8.08-8.22(m,1H),8.42-8.54(m,1H),8.68-8.80(m,1H),8.80-8.96(m,1H),11.25(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值366.2；实测值367.2；Rt＝3.048min。
实施例698.外消旋-5-[[2-[(2R,3R,6S)-2,3-二甲基-6-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺、外消旋-5-[[2-[(2R,3R,6R)-2,3-二甲基-6-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺和外消旋-5-[[2-[(2S,3R,6S)-2,3-二甲基-6-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物154、化合物163和化合物181)的合成；5-[[2-[(2S,3S,6R)-2,3-二甲基-6-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺和5-[[2-[(2R,3R,6S)-2,3-二甲基-6-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物435和化合物433)的手性分离；-[[2-[(2S,3R,6S)-2,3-二甲基-6-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺和5-[[2-[(2R,3S,6R)-2,3-二甲基-6-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物482和化合物483)的手性分离
步骤1：2-(2,3-二甲基-6-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯的合成
在-10℃下，向2,3-二甲基-6-苯基哌啶(0.5g，2.64mmol)和三乙胺(267.28mg，2.64mmol，368.15μL)于THF(10mL)中的搅拌溶液中逐滴添加2-氯-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(503.19mg，2.64mmol)。使所得反应混合物升温至室温且在同一温度下搅拌12小时。12小时之后，过滤反应混合物且在减压下浓缩滤液，以获得2-(2,3-二甲基-6-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(0.8g，粗品)。粗产物不经任何进一步纯化即用于下一步反应。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值343.2；实测值344.0；Rt＝1.571min。
步骤2：[2-(2,3-二甲基-6-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氧基锂的合成
向2-(2,3-二甲基-6-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(0.8g，2.33mmol)于水(2mL)和THF(20mL)中的搅拌溶液中添加98％氢氧化锂单水合物(97.78mg，2.33mmol)。将所得反应混合物在20℃下搅拌24小时。24小时之后，将反应混合物蒸发至干，以获得[2-(2,3-二甲基-6-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氧基锂(0.5g，粗品)，其不经任何进一步纯化即用于下一步骤反应。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值261.1；实测值262.2；Rt＝1.109min。
步骤3：外消旋-5-[[2-[(2R,3R,6S)-2,3-二甲基-6-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺、外消旋-5-[[2-[(2R,3R,6R)-2,3-二甲基-6-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺和外消旋-5-[[2-[(2S,3R,6S)-2,3-二甲基-6-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物154、化合物163和化合物181)的合成
向[2-(2,3-二甲基-6-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氧基锂(0.5g，1.87mmol)于DMF(5mL)中的搅拌溶液中添加HATU(711.38mg，1.87mmol)。将所得反应混合物在20℃下搅拌10分钟。10分钟之后，添加5-氨基吡啶-3-甲酰胺(256.58mg，1.87mmol)且使所得反应混合物在20℃下搅拌12小时。通过反相HPLC(流动相：0.5-6.5min；水-乙腈，流速：30mL/min；装载泵：4mL/min，乙腈；柱：SunFire19*100mm，5um)纯化所得反应混合物，以获得呈黄色固体的外消旋-5-[[2-[(2R,3R,6S)-2,3-二甲基-6-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物154，27.7mg)、外消旋-5-[[2-[(2R,3R,6R)-2,3-二甲基-6-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物163，24.30mg)和外消旋-5-[[2-[(2S,3R,6S)-2,3-二甲基-6-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物181，35.2mg)。
化合物154：
1H NMR(DMSO-d6,400MHz):δ(ppm)0.85(m,3H),1.26(m,3H),1.48(m,1H),1.95(m,1H),2.23(m,3H),4.30(m,1H),5.20(m,1H),7.28(m,5H),7.62(m,1H),8.43(m,3H),8.88(m,1H),10.98(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值380.2；实测值381.2；Rt＝1.199min。
化合物163：
1H NMR(DMSO-d6,400MHz):δ(ppm)0.54(m,3H),0.80(m,3H),1.57(m,2H),2.62(m,2H),4.07(m,1H),5.44(m,1H),7.26(m,1H),7.39(m,4H),7.57(m,1H),8.18(m,1H),8.50(m,1H),8.83(m,2H),11.30(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值380.2；实测值381.2；Rt＝1.222min。
化合物181：
1H NMR(DMSO-d6,400MHz):δ(ppm)0.82(m,3H),1.00(m,3H),1.35(m,1H),1.70(m,1H),2.13(m,3H),3.99(m,1H),5.41(m,1H),7.32(m,5H),7.66(m,1H),8.20(m,1H),8.51(m,1H),8.84(m,2H),11.29(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值380.2；实测值381.2；Rt＝1.215min。
步骤4：5-[[2-[(2S,3S,6R)-2,3-二甲基-6-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺和5-[[2-[(2R,3R,6S)-2,3-二甲基-6-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的手性分离
使外消旋-5-[[2-[(2R,3R,6S)-2,3-二甲基-6-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物154)经历手性分离(柱：Chiralpak IC-I，250*20mm，5um；流动相：己烷-IPA-MeOH，50-25-25；流速：12mL/min)，以获得呈黄色固体的(化合物435)和(化合物433)。
化合物435：LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值380.2；实测值381.2；Rt＝3.039min。
手性HPLC：Rt＝18.22min(柱：IA；流动相：己烷-MeOH-IPA，60-20-20；流速：0.6mL/min)。
化合物433：LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值380.2；实测值381.2；Rt＝3.030min
手性HPLC：Rt＝17.00min(柱：IA；流动相：己烷-MeOH-IPA，60-20-20；流速：0.6mL/min)。
步骤5：5-[[2-[(2S,3R,6S)-2,3-二甲基-6-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺和5-[[2-[(2R,3S,6R)-2,3-二甲基-6-苯基-1-哌啶基]-2-侧基乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物482和化合物483)的手性分离
使外消旋-5-[[2-[(2S,3R,6S)-2,3-二甲基-6-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物181)经历手性分离(Chiralpak OJ，250*30mm，20um；流动相：CO2-MeOH，60-40；流速：90mL/min)，以获得呈黄色固体的(化合物482)和(化合物483)。
化合物482：LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值380.2；实测值381.2；Rt＝4.815min。
手性HPLC：Rt＝2.61min(柱：OJ-H；流动相：CO2-MeOH，60-40；流速：2.0mL/min)。
化合物483：LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值380.2；实测值381.2；Rt＝4.817min。
手性HPLC：Rt＝4.13min(柱：OJ-H；流动相：CO2-MeOH，60-40；流速：2.0mL/min)。
实施例699.N-(5,6-二甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物254)和N-(5,6-二甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物258)的合成
步骤1：2-(5-甲基-2-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯的合成
在-10℃下，将2-氯-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(5.43g，28.53mmol)逐滴添加到5-甲基-2-苯基哌啶(5g，28.53mmol)和三乙胺(2.89g，28.53mmol，3.98mL)于THF(50mL)中的溶液中。将所得混合物升温至室温且搅拌12h。过滤出所得沉淀。将滤液蒸发，以获得2-(5-甲基-2-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(9g，27.33mmol，95.80％产率)，其不经纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.19(m,3H),1.33(m,1H),1.91(m,4H),3.10(m,2H),5.10(m,3H),7.19(d,1H),7.21(d,1H),7.40(m,3H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值329.1；实测值330.1；Rt＝1.496min。
步骤2：2-(5-甲基-2-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酸的合成
将氢氧化锂(654.50mg，27.33mmol)添加到2-(5-甲基-2-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(9g，27.33mmol)于THF(100mL)和水(10mL)中的溶液中。将所得混合物在20℃下搅拌12h。然后，将混合物蒸发至干，以获得2-(5-甲基-2-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酸(5g，19.67mmol，71.96％产率，Li+)，其不经纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.13(m,3H),1.30(m,1H),1.63(m,2H),2.01(m,2H),3.56(m,2H),5.04(m,1H),7.16(m,3H),7.32(m,2H)。
LCMS(ESI)：酸[M+H]+m/z：计算值247.1.1；实测值248.2；Rt＝1.133min。
步骤3：N-(5,6-二甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
将DIPEA(261.32mg，2.02mmol，352.18μL)添加到相应2-(5-甲基-2-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酸(0.2g，808.77μmol)和5,6-二甲基吡啶-3-胺(98.81mg，808.77μmol)于DMF(5mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU(338.27mg，889.65μmol)于DMF(2mL)中的溶液。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC(Waters SunFire C18 19*100mm5mkm柱，以H2O-MeOH为流动相)，以得到纯的N-(5,6-二甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(70mg，199.18μmol，24.63％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值351.2；实测值352.4；Rt＝2.702min。
步骤4：N-(5,6-二甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物254)和N-(5,6-二甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物258)的合成
手性分离条件：反相和梯度：己烷-IPA-MeOH，70-15-15，12ml/min柱：OJ-H(250*20，5mkm)；化合物254的保留时间为15.77min，化合物258的保留时间为10.18min
化合物254：RT(OJ-H，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.6mL/min)＝15.778min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.96-1.04(m,3H),1.26-1.36(m,1H),1.59-1.72(m,1H),1.80-1.94(m,1H),1.99-2.14(m,1H),2.16-2.25(m,4H),2.32-2.37(m,3H),2.72-3.23(m,1H),3.40-4.07(m,1H),5.11-5.62(m,1H),7.23-7.28(m,1H),7.28-7.31(m,1H),7.31-7.38(m,2H),7.38-7.41(m,1H),7.70-7.86(m,1H),8.37-8.60(m,1H),10.85-11.01(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值351.2；实测值352.2；Rt＝4.089min。
化合物258：RT(OJ-H，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.6mL/min)＝10.184min。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.98-1.04(m,3H),1.28-1.38(m,1H),1.59-1.70(m,1H),1.81-1.93(m,1H),2.00-2.16(m,1H),2.17-2.26(m,4H),2.32-2.38(m,3H),2.73-3.25(m,1H),3.41-4.05(m,1H),5.03-5.68(m,1H),7.23-7.28(m,1H),7.28-7.31(m,1H),7.31-7.38(m,2H),7.38-7.41(m,1H),7.73-7.86(m,1H),8.36-8.54(m,1H),10.84-11.00(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值351.2；实测值352.2；Rt＝4.081min。
实施例700.2-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物200)和2-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺
(化合物196)的合成
步骤1：2-甲基-5-[[2-(5-甲基-2-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
将5-氨基-2-甲基吡啶-3-甲酰胺(213.95mg，1.42mmol)、2-(5-甲基-2-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酸(350mg，1.42mmol)、HATU(591.97mg，1.56mmol)和TEA(157.54mg，1.56mmol，217.00μL)混合于DMSO(5mL)中。将反应混合物在室温下搅拌16h。使于DMSO中的溶液经历HPLC(2-10min35-60％水-MeCN+NH3(装载泵4ml MeCN+NH3)；柱：TRIART 100*20 5微米)，以得到2-甲基-5-[[2-(5-甲基-2-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(302mg，793.82μmol，56.09％产率)。在HPLC之后获得呈三种级分的最终产物。使级分1和2在下一步骤时经历手性分离。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值380.2；实测值381.2；Rt＝3.064min。
步骤2：2-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物200)和2-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺
(化合物196)的合成
对2-甲基-5-[[2-(5-甲基-2-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(142.3mg，374.04μmol)进行手性分离(样品信息：AD-H，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.6ml/min)，得到化合物200 2-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(46.9mg，123.28μmol，32.96％产率)和化合物196 2-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(35.7mg，142.30μmol，25.09％产率)。
化合物196：RT(AD-H，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.6mL/min)＝29.9min。
1H NMR(dmso,600MHz):δ(ppm)1.01(m,3H),1.33(m,1H),1.66(m,1H),1.87(m,1H),2.05(m,1H),2.22(m,1H),2.51(m,3H),3.08(m,1H),3.73(m,1H),5.37(m,1H),7.27(t,1H),7.30(d,1H),7.37(m,3H),7.54(m,1H),7.88(m,1H),8.01(m,1H),8.69(m,1H),11.10(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值380.2；实测值381.2；Rt＝4.332min。
化合物200：RT(AD-H，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.6mL/min)＝12.8min。
1H NMR(dmso,600MHz):δ(ppm)1.01(m,3H),1.33(m,1H),1.65(m,1H),1.84(m,1H),2.00(m,1H),2.18(m,1H),2.44(m,3H),2.99(m,1H),3.73(m,1H),5.37(m,1H),7.27(t,1H),7.30(d,1H),7.38(m,3H),7.54(m,1H),7.87(m,1H),8.01(m,1H),8.68(m,1H),11.10(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值380.2；实测值381.2；Rt＝4.330min。
实施例701.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(4-(三氟甲基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物548、化合物575)的合成
步骤1：(3-甲基-5-(2-(5-甲基-2-(4-(三氟甲基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
将2-[5-甲基-2-[4-(三氟甲基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酸(0.3g，931.02μmol，Li+)与HATU(389.40mg，1.02mmol)混合于DMF(5mL)中且将所得混合物在20℃下搅拌10min，随后添加N-(5-氨基-3-甲基-2-吡啶基)氨基甲酸叔丁酯(207.87mg，931.02μmol)。将所得混合物在20℃下搅拌12h。使所得溶液经历HPLC(柱：SunFire 19*100mm，5mkl；以水-MeCN为洗脱液混合物)，以获得N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-[4-(三氟甲基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.1555g，298.73μmol，32.09％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值520.2；实测值521.2；Rt＝4.261min。
步骤2：手性分离
使用(Chiralpak IC 200*20，5mkm柱；以己烷-IPA-MeOH，80-10-10为流动相；流速15mL/min；注入体积：300mkl)分离N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-[4-(三氟甲基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(217.2mg，417.26μmol)；得到E1 N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(三氟甲基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(52.94mg，101.70μmol，24.37％产率)(RT＝21.62min)和E2 N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(三氟甲基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(61.88mg，118.88μmol，28.49％产率)(RT＝25.74min)。E1于分析条件下(柱：IC-3，以己烷-IPA-MeOH，80-10-10，0.155ml/min为流动相)的保留时间为15.75min且E2的保留时间为19.80min。
E1：保留时间：15.75min
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值520.2；实测值521.2；Rt＝1.301min。
E2：保留时间：19.80min
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值520.2；实测值521.2；Rt＝1.302min。
步骤3：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(4-(三氟甲基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物548和化合物575)的合成
将N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(三氟甲基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(61.88mg，118.88μmol)和N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(三氟甲基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.05294g，101.70μmol)溶解于水(3mL)和二噁烷(1mL)中且将所得混合物加热至100℃达12h。将所得混合物冷却至室温且使其经历HPLC(柱：SunFire 19*100mm，5mkl；以水-MeCN为洗脱液混合物)，以获得N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(三氟甲基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.022g，52.33μmol，44.02％产率)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(三氟甲基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.0255g，60.65μmol，59.64％产率)。
化合物548：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98-1.05(m,3H),1.26-1.40(m,1H),1.56-1.67(m,1H),1.81-1.92(m,1H),1.96-2.03(m,3H),2.03-2.15(m,1H),2.16-2.29(m,1H),2.70-3.23(m,1H),3.45-4.08(m,1H),5.20-5.67(m,3H),7.40-7.49(m,1H),7.50-7.59(m,2H),7.71-7.77(m,2H),7.93-8.04(m,1H),10.30-10.61(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值420.2；实测值421.2；Rt＝2.728min。
化合物575：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.97-1.03(m,3H),1.24-1.39(m,1H),1.55-1.67(m,1H),1.75-1.93(m,1H),1.94-2.03(m,3H),2.03-2.15(m,1H),2.16-2.29(m,1H),2.75-3.24(m,1H),3.46-4.06(m,1H),5.19-5.64(m,3H),7.41-7.49(m,1H),7.49-7.60(m,2H),7.69-7.80(m,2H),7.90-8.06(m,1H),10.45-10.55(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值420.2；实测值421.2；Rt＝2.647min。
实施例702.5-(2-(5-甲基-2-(4-(三氟甲基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物511、化合物508)的合成
步骤1：5-(2-(5-甲基-2-(4-(三氟甲基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺的合成
将2-[5-甲基-2-[4-(三氟甲基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酸(0.3g，931.02μmol，Li+)与HATU(389.40mg，1.02mmol)混合于DMF(5mL)中且将所得混合物在20℃下搅拌10min，随后添加5-氨基吡啶-3-甲酰胺(127.68mg，931.02μmol)。将所得混合物在20℃下搅拌12h。使所得溶液经历HPLC(柱：SunFire 19*100mm，5mkl；以水-MeCN为洗脱液混合物)，以获得5-[[2-[5-甲基-2-[4-(三氟甲基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.1145.g，263.58μmol，28.31％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值434.2；实测值435.2；Rt＝3.492min。
步骤2：手性分离(化合物511和化合物508)
使用(Chiralpak IC 250*20，5mkm柱；以己烷-IPA-MeOH，60-20-20为流动相；流速12mL/min；注入体积：300mkl)分离5-[[2-[5-甲基-2-[4-(三氟甲基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(114.5mg，263.58μmol)；得到化合物511 5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(三氟甲基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(50.03mg，115.17μmol，43.69％产率)(RT＝22.82min)和化合物5085-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-(三氟甲基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(58.4mg，134.43μmol，51％产率)(RT＝38.04min)。化合物511于分析条件下(柱：IC-3，以己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.6ml/min为流动相)的保留时间为16.70min且化合物508的保留时间为27.34min。
化合物511：保留时间：16.70min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.00-1.04(m,3H),1.27-1.40(m,1H),1.58-1.69(m,1H),1.83-1.95(m,1H),2.01-2.18(m,1H),2.18-2.30(m,1H),2.78-3.27(m,1H),3.50-4.09(m,1H),5.20-5.68(m,1H),7.50-7.65(m,3H),7.68-7.83(m,2H),8.05-8.19(m,1H),8.42-8.55(m,1H),8.70-8.81(m,1H),8.81-8.97(m,1H),11.15-11.36(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值434.2；实测值435.2；Rt＝2.927min。
化合物508：保留时间：27.34min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98-1.05(m,3H),1.28-1.40(m,1H),1.58-1.71(m,1H),1.83-1.94(m,1H),2.03-2.18(m,1H),2.18-2.28(m,1H),2.74-3.26(m,1H),3.49-4.10(m,1H),5.22-5.88(m,1H),7.50-7.64(m,3H),7.69-7.79(m,2H),8.08-8.24(m,1H),8.40-8.54(m,1H),8.72-8.81(m,1H),8.81-8.94(m,1H),11.11-11.40(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值434.2；实测值435.2；Rt＝2.929min。
实施例703.5-(2-(2-(4-氟-3-甲基苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物307、化合物293)的合成
步骤1：(5-(4-氟-3-甲基苯基)-2-甲基-5-氧代戊基)氨基甲酸叔丁酯的合成
在-78℃下，将5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(5.64g，26.45mmol)(15％于THF溶液中)冷却至室温且逐滴添加到4-溴-1-氟-2-甲基苯(5g，26.45mmol，3.36mL)于THF(50mL)中的溶液中。使所得混合物升温至室温然后倒入到NH4Cl水溶液中。将所得混合物用EtOAc(2x40 ml)萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经Na2SO4干燥且蒸发，以获得N-[5-(4-氟-3-甲基苯基)-2-甲基-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯(5g，15.46mmol，58.45％产率)，其不经纯化即用于下一步骤中。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98(d,3H),1.49(s,9H),1.85(m,4H),2.22(s,3H),2.95(m,2H),3.80(m,1H),5.55(m,1H),7.12(m,3H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值223.2；实测值224.2；Rt＝1.556min
步骤2：2-(4-氟-3-甲基苯基)-5-甲基哌啶的合成
将N-[5-(4-氟-3-甲基苯基)-2-甲基-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯(5g，15.46mmol)溶解于三氟乙酸(44.07g，386.52mmol，29.78mL)中且将所得混合物搅拌1h。向其中添加50％ NaOH水溶液，直至pH11-12。将所得混合物用DCM(4x40 ml)萃取，将合并的有机层蒸发至干。将残余物溶解于MeOH(50mL)中且添加硼氢化钠(584.92mg，15.46mmol，546.65μL)。将所得混合物在20℃下搅拌12h且蒸发。将50％ NaOH水溶液添加到残余物中。将所得混合物用DCM(4x40ml)萃取，将合并的有机层蒸发至干，以获得2-(4-氟-3-甲基苯基)-5-甲基哌啶(1.4g，6.75mmol，43.68％产率)，其不经纯化即用于下一步骤中。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.82(d,3H),1.46(m,1H),1.50(m,1H),1.66(m,1H),1.76(m,1H),2.19(m,2H),2.25(s,3H),2.98(d,1H),3.40(d,1H),4.17(bds,1H),7.00(m,1H),7.22(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值207.2；实测值208.2；Rt＝0.950min。
步骤3：2-(2-(4-氟-3-甲基苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯的合成
在-10℃下，将2-氯-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(919.04mg，4.82mmol)逐滴添加到2-(4-氟-3-甲基苯基)-5-甲基哌啶(1g，4.82mmol)和TEA(488.17mg，4.82mmol，672.40μL)于THF(20mL)中的溶液中。使所得混合物升温至室温且搅拌12h。过滤出所得沉淀。蒸发滤液，以获得2-[2-(4-氟-3-甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(1.7g，4.70mmol，97.52％产率)，其不经纯化即用于下一步骤中。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.96(d,3H),1.45(m,2H),1.68(m,2H),1.98(m,2H),2.25(s,3H),3.09(m,1H),3.62(s,2H),5.13(m,1H),7.20(m,3H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值361.2；实测值362.2；Rt＝1.645min
步骤4：2-(2-(4-氟-3-甲基苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酸锂的合成
将98％氢氧化锂单水合物(197.43mg，4.70mmol，130.75μL)添加到2-[2-(4-氟-3-甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(1.7g，4.70mmol)于水(3mL)和THF(30mL)中的溶液中且将所得混合物在20℃下搅拌12h。将所得混合物蒸发至干，以获得[2-[2-(4-氟-3-甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氧基锂(1g，3.51mmol，74.52％产率)，其不经纯化即用于下一步骤中。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值285.2；实测值286.2；Rt＝min。
步骤5：5-(2-(2-(4-氟-3-甲基苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺的合成
将[2-[2-(4-氟-3-甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氧基锂(0.3g，1.05mmol)与HATU(399.91mg，1.05mmol)混合于DMF(5mL)中且将所得混合物在20℃下搅拌10min，随后添加5-氨基吡啶-3-甲酰胺(144.24mg，1.05mmol)。将所得混合物在20℃下搅拌12h。使所得溶液经历HPLC(Waters Sunfire C18 19*100 5mkm柱且以MeCN-水为洗脱液混合物)，以获得5-[[2-[2-(4-氟-3-甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.1354g，339.83μmol，32.31％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值398.2；实测值399.2；Rt＝3.091min
步骤6：手性分离(化合物307和化合物293)
使用(Chiralpak IC-I 250*20，5mkm柱；以己烷-IPA-MeOH，50-5-25为流动相；流速10mL/min；注入体积：900mkl)分离5-(2-(2-(4-氟-3-甲基苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(135.4mg，339.83μmol)；得到呈黄色固体的化合物307 5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-氟-3-甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(41mg，102.90μmol，30.28％产率)(RT(IC-3，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.155ml/min)＝9.67min)和呈黄色固体的化合物2935-[[2-[(2R,5S)-2-(4-氟-3-甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(60.8mg，143.91μmol，35.87％产率)(RT(IC-3，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.155ml/min)＝15.26min)。
化合物307：保留时间：9.67min
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.00-1.05(m,3H),1.30-1.42(m,1H),1.63-1.74(m,1H),1.84-1.96(m,1H),2.01-2.15(m,1H),2.16-2.27(m,4H),2.80-3.19(m,1H),3.47-4.03(m,1H),5.07-5.61(m,1H),7.11-7.29(m,3H),7.57-7.69(m,1H),8.10-8.23(m,1H),8.43-8.56(m,1H),8.74-8.83(m,1H),8.83-9.00(m,1H),11.16-11.32(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值398.2；实测值399.2；Rt＝3.274min。
化合物293：保留时间：15.26min
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.01-1.06(m,3H),1.23-1.41(m,1H),1.63-1.79(m,1H),1.84-1.96(m,1H),2.00-2.12(m,1H),2.16-2.28(m,4H),2.79-3.24(m,1H),3.49-4.05(m,1H),5.08-5.62(m,1H),7.11-7.30(m,3H),7.53-7.68(m,1H),8.07-8.29(m,1H),8.41-8.53(m,1H),8.74-8.82(m,1H),8.82-8.94(m,1H),11.15-11.35(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值398.2；实测值399.2；Rt＝3.264min。
实施例704.5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(间甲苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺和5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(间甲苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物227和化合物219)的合成
N-[2-甲基-5-(间甲苯基)-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯的合成
在-10℃下，向5-甲基-2-(间甲苯基)哌啶(1g，5.28mmol)和三乙胺(534.56mg，5.28mmol，736.31μL)于THF(30mL)中的搅拌溶液中逐滴添加2-氯-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(1.01g，5.28mmol)。使所得反应混合物升温至室温且在同一温度下搅拌12小时。12小时之后，过滤反应混合物。在减压下浓缩滤液，以获得2-[5-甲基-2-(间甲苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(1.6g，4.66mmol，88.21％产率)。粗产物不经任何进一步纯化即用于下一步反应。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值343.2；实测值344.2；Rt＝1.590min。
步骤2：[2-[5-甲基-2-(间甲苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氧基锂的合成
向2-[5-甲基-2-(间甲苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(1.6g，4.66mmol)于THF(20mL)和水(2mL)中的搅拌溶液中添加98％氢氧化锂单水合物(195.55mg，4.66mmol)。使所得反应混合物在20℃下搅拌12小时。完成之后，在减压下浓缩反应混合物，以获得[2-[5-甲基-2-(间甲苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氧基锂(0.9g，3.37mmol，72.27％产率)。粗产物不经任何进一步纯化即用于下一步反应。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值261.1；实测值262.2；Rt＝1.110min。
步骤3：5-[[2-[5-甲基-2-(间甲苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
向[2-[5-甲基-2-(间甲苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氧基锂(0.3g，1.12mmol)于DMF(5mL)中的搅拌溶液中添加HATU(426.83mg，1.12mmol)。将所得反应混合物在20℃下搅拌10分钟。10分钟之后，添加5-氨基吡啶-3-甲酰胺(153.95mg，1.12mmol)。将所得反应混合物在20℃下搅拌12小时。使所得反应混合物经历反相HPLC纯化(洗脱液：水-乙腈，28％，0.5-6.5min；流速：30mL/min；装载泵：4mL/min；柱：SunFire 19*100mm，5um)，以获得5-[[2-[5-甲基-2-(间甲苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.0844g，221.85μmol，19.76％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值380.2；实测值381.2；Rt＝3.375min。
5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(间甲苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺和5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(间甲苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物227和化合物219)的手性分离
使5-[[2-[5-甲基-2-(间甲苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.084g，220.80μmol)经历手性色谱(柱：Chiralpak IA II，250*20mm，5um，洗脱液：己烷-MeOH-IPA，70-15-15，流速：12mL/min)，以得到呈黄色固体的5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(间甲苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物227，33mg)和5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(间甲苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物219，31mg)。
化合物227：1H NMR(DMSO-d6,400MHz):δ(ppm)1.05(m,3H),1.35(m,1H),1.71(m,1H),1.89(m,1H),2.04(m,1H),2.21(m,1H),2.32(m,3H),3.13(m,1H),3.76(m,1H),5.36(m,1H),7.18(m,4H),7.63(m,1H),8.18(m,1H),8.50(m,1H),8.83(m,2H),11.26(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值380.2；实测值381.4；Rt＝3.232min。
手性HPLC：Rt＝24.77min(柱：IA；洗脱液：己烷-MeOH-IPA，70-15-15；流速：0.6mL/min)。
化合物219：1H NMR(DMSO-d6,400MHz):δ(ppm)1.04(m,3H),1.36(m,1H),1.69(m,1H),1.90(m,1H),2.13(m,2H),2.32(m,3H),3.11(m,1H),3.76(m,1H),5.36(m,1H),7.13(m,3H),7.27(m,1H),7.63(m,1H),8.18(m,1H),8.50(m,1H),8.78(m,1H),8.89(m,1H),11.26(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值380.2；实测值381.2；Rt＝3.248min。
手性HPLC：Rt＝31.95min(柱：IA；洗脱液：己烷-MeOH-IPA，70-15-15；流速：0.6mL/min)。
实施例705.5-(2-(5-甲基-2-(3-(三氟甲基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物509、化合物510)的合成
步骤1：5-(2-(5-甲基-2-(3-(三氟甲基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺的合成
将2-[5-甲基-2-[3-(三氟甲基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酸(0.3g，931.02μmol，Li+)与HATU(354.00mg，931.02μmol)混合于DMF(5mL)中且将所得混合物在20℃下搅拌10min，随后添加5-氨基吡啶-3-甲酰胺(127.68mg，931.02μmol)。将所得混合物在20℃下搅拌12h。使所得溶液经历HPLC(柱：SunFire 19*100mm，5mkl；以水-MeCN为洗脱液混合物)，以获得5-[[2-[5-甲基-2-[3-(三氟甲基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.166g，382.13μmol，41.04％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值434.2；实测值435.2；Rt＝3.308min。
步骤2：手性分离(化合物509和化合物510)
使用(Chiralpak IC-I 250*20，5mkm柱；以己烷-IPA-MeOH，60-20-20为流动相；流速12mL/min；注入体积：400mkl)分离5-[[2-[5-甲基-2-[3-(三氟甲基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(166mg，382.13μmol)；得到化合物509 5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-(三氟甲基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(60.41mg，139.06μmol，36.39％产率)(RT＝22.68min)和化合物5105-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[3-(三氟甲基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(54.87mg，166μmol，33.05％产率)(RT＝15.63min)。化合物509于分析条件下(柱：IC，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，0.6ml/min为流动相)的保留时间为23.08min且化合物510的保留时间为15.71min。
化合物509：保留时间：23.08min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99-1.06(m,3H),1.27-1.38(m,1H),1.56-1.66(m,1H),1.84-1.96(m,1H),2.06-2.18(m,1H),2.20-2.30(m,1H),2.74-3.28(m,1H),3.49-4.07(m,1H),5.20-5.64(m,1H),7.57-7.69(m,5H),8.06-8.25(m,1H),8.41-8.56(m,1H),8.68-8.80(m,1H),8.80-8.93(m,1H),11.21-11.32(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值434.2；实测值435.2；Rt＝3.363min。
化合物510：保留时间：15.71min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98-1.06(m,3H),1.27-1.41(m,1H),1.57-1.67(m,1H),1.85-1.95(m,1H),2.06-2.20(m,1H),2.20-2.32(m,1H),2.74-3.27(m,1H),3.48-4.10(m,1H),5.24-5.65(m,1H),7.55-7.70(m,5H),8.07-8.22(m,1H),8.38-8.53(m,1H),8.69-8.80(m,1H),8.80-8.94(m,1H),11.17-11.37(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值434.2；实测值435.2；Rt＝3.367min。
实施例706.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(3-(三氟甲基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物507、化合物496)的合成
步骤1：(3-甲基-5-(2-(5-甲基-2-(3-(三氟甲基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
将2-[5-甲基-2-[3-(三氟甲基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酸(0.3g，931.02μmol，Li+)与HATU(389.40mg，1.02mmol)混合于DMF(5mL)中且将所得混合物在20℃下搅拌10min，随后添加N-(5-氨基-3-甲基-2-吡啶基)氨基甲酸叔丁酯(207.87mg，931.02μmol)。将所得混合物在20℃下搅拌12h。使所得溶液经历HPLC(柱：SunFire 19*100mm，5mkl；以水-MeCN为洗脱液混合物)，以获得N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-[3-(三氟甲基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(323.90mg，622.24μmol，66.83％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值520.2；实测值521.2；Rt＝4.245min。
步骤2：手性分离
使用Chiralpak IC 250*20 5mkm柱(以己烷-IPA-MeOH，80-10-10为流动相；流速12mL/min；注入体积：300mkl)分离N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-[3-(三氟甲基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(217.2mg，417.26μmol)；得到E1N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[4-(三氟甲基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(132.86mg，255.23μmol，41.13％产率)(RT＝39.76min)和E2 N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-(三氟甲基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(107.18mg，205.90μmol，33.18％产率)(RT＝32.18min)。E1于分析条件下(柱：IC，以己烷-IPA-MeOH，80-10-10，0.6ml/min为流动相)的保留时间为25.79min且E2的保留时间为23.60min。
E1：保留时间：25.79min
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值520.2；实测值521.2；Rt＝6.125min。
E2：保留时间：23.60min
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值520.2；实测值521.2；Rt＝6.199min。
步骤3：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(3-(三氟甲基)苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物507和化合物496)的合成
将N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-(三氟甲基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.107g，205.55μmol)和N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[3-(三氟甲基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.132g，253.58μmol)溶解于二噁烷/HCl(3mL)中且将所得混合物在20℃下搅拌12h。将所得混合物蒸发且使残余物经历HPLC(柱：Triart 20*100mm，5mkl；以水-MeOH+NH3为洗脱液混合物)，以获得N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[3-(三氟甲基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.0582g，138.43μmol，67.34％产率)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[3-(三氟甲基)苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.0156g，37.11μmol，14.63％产率)。
化合物507：LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值420.2；实测值421.2；Rt＝1.063min。
化合物496：LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值420.2；实测值421.2；Rt＝1.072min。
实施例707.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(3-氯-4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物606)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(3-氯-4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物596)的合成
步骤1：2-[2-(3-氯-4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酸甲酯的合成
在0℃下，向2-(3-氯-4-氟苯基)-5-甲基哌啶(0.5g，2.20mmol)和三乙胺(266.63mg，2.63mmol，367.27μL)于DCM中的溶液中添加2-氯-2-氧代乙酸甲酯(295.90mg，2.42mmol)。在室温下搅拌1h之后，将所得混合物用Et2O稀释且过滤，然后蒸发至干，以得到呈黄色固体的2-[2-(3-氯-4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酸甲酯(0.75g，粗品)，其不经进一步纯化即用于下一步骤中。
1H NMR(CDCl3,500MHz):δ1.08(d,3H),1.47(m,1H),1.79(m,1H),1,94(m,1H),2.17-2.24(m,2H),3.23(dd,2H),3.80-3.91(两个单峰,3H),5.72(s,1H),7.17-7.29(m,3H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值313.1；实测值314.2；Rt＝1.453min。
步骤2：N-[5-[[2-[2-(3-氯-4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
向2-[2-(3-氯-4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酸甲酯(0.75g，2.39mmol)于MeOH(12.50mL)中的溶液中添加羟基钠(105.17mg，2.63mmol，49.38μL)且将所得混合物搅拌1h。然后，蒸发溶剂且将残余物与EtOH一起再蒸发。此后，将固体溶解于DMF中且添加HATU(908.91mg，2.39mmol)，随后添加N-(5-氨基-3-甲基-2-吡啶基)氨基甲酸叔丁酯(533.71mg，2.39mmol)且将所得混合物搅拌12h。将所得混合物倒入到水中，用EtOAc萃取3次，将合并的有机物用水、盐水洗涤且蒸发。使残余物经历HPLC(55-80％2-7min水-乙腈；流速：30ml/min；(装载泵4ml/min，乙腈)；柱：SunFireC18 100x19mm5um)。获得两种级分的N-[5-[[2-[2-(3-氯-4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(654.6mg，1.30mmol，54.23％产率)：385.7mg(通过LCMS测得100％，几乎单一非对映异构体)和268.9mg(通过LCMS为100％，3:1＝反式/顺式)。
1H NMR(CDCl3,400MHz):δ1.06(m,3H),1.47(m,10H),1.79(m,1H),1,94(m,1H),2.17-2.24(m,2H),3.23(dd,2H),3.80-3.91(两个单峰,3H),5.72(s,1H),7.17-7.29(m,3H)。
LCMS(ESI)：[M+Н]+m/z：计算值504.2；实测值505.4；Rt＝3.312min。
步骤3：N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(3-氯-4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(P1)和N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(3-氯-4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(P2)的合成
对N-[5-[[2-[2-(3-氯-4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(385.7mg，763.79μmol)进行手性分离(柱：Chiralpak IC(250*20mm，5mkm)；以己烷-IPA-MeOH，70-15-15为流动相；流速：14mL/min；柱温：20℃；波长：205nm)，得到rel-N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(3-氯-4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(106.44mg，27.60％产率；P1)和rel-N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(3-氯-4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(131.29mg，34.04％产率；P2)。
P2：LCMS(ESI)：[M+Н]+m/z：计算值504.9；实测值505.2；Rt＝6.158min。
RT(IA-3，己烷-IPA-MeOH，70-15-15，14ml/min)＝29.07min
P1：LCMS(ESI)：[M-BOC]+m/z：计算值504.9；实测值449.2；Rt＝6.163min。
RT(IA-3，己烷-IPA-MeOH，70-15-15，14ml/min)＝25.61min
步骤4：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(3-氯-4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物606)的合成
在21℃下，向N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(3-氯-4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(106.44mg，210.78μmol)于二噁烷(2mL)中的溶液中添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(38.43mg，1.05mmol，48.03μL)。使所得混合物搅拌2h。将所得混合物蒸发至干且使其经历HPLC(40-100％2-7min水-MeOH-NH3；流速：30mL/min；(装载泵4mL/min，MeOH+NH3)；柱：ymc-actus triat 100*19mm 5um(L))。获得呈白色固体的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(3-氯-4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(43.6mg，107.69μmol，51.09％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.97-1.01(m,3H),1.24-1.37(m,1H),1.59-1.68(m,1H),1.81-1.93(m,1H),1.95-2.07(m,4H),2.12-2.24(m,1H),2.69-3.26(m,1H),3.42-4.03(m,1H),5.09-5.54(m,1H),5.58-5.66(m,2H),7.26-7.37(m,1H),7.39-7.46(m,2H),7.46-7.54(m,1H),7.92-8.04(m,1H),10.38-10.60(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+Н]+m/z：计算值404.1；实测值405.2；Rt＝2.663min。
步骤6：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(3-氯-4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物596)的合成
在21℃下，向N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(3-氯-4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(131.29mg，259.99μmol)于二噁烷(2mL)中的溶液中添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(47.40mg，1.30mmol，59.25μL)。使所得混合物搅拌2h。将所得混合物蒸发至干且使其经历HPLC(40-100％2-7min水-MeOH-NH3；流速：30ml/min；(装载泵4ml/min，MeOH+NH3)；柱：ymc-actus triat 100x19mm 5um(L))。获得呈白色固体的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(3-氯-4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(55.7mg，137.58μmol，52.92％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.96-1.02(m,3H),1.24-1.38(m,1H),1.56-1.71(m,1H),1.81-1.92(m,1H),1.96-2.10(m,4H),2.11-2.25(m,1H),2.68-3.24(m,1H),3.41-4.04(m,1H),5.08-5.54(m,1H),5.55-5.69(m,2H),7.27-7.37(m,1H),7.39-7.46(m,2H),7.46-7.53(m,1H),7.93-8.04(m,1H),10.45-10.65(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+Н]+m/z：计算值404.1；实测值405.2；Rt＝2.654min。
实施例708.2-氨基-5-[[2-氧代-2-(2-苯基-1-哌啶基)乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物126)的合成
步骤1：2-氯-5-硝基吡啶-3-羰基氯的合成
将2-氯-5-硝基吡啶-3-甲酸(5.00g，24.69mmol)与亚硫酰氯(29.37g，246.85mmol)混合。添加3滴DMF且在剧烈搅拌的情况下将所得混合物在90℃下加热12h。在真空中移除过量亚硫酰氯，以获得2-氯-5-硝基吡啶-3-羰基氯(5g，22.62mmol，91.65％产率)，其不经纯化即用于下一步骤中。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.09(s,1H),9.38(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值219.9；实测值221.0；Rt＝0.431min。
步骤2：2-氨基-5-硝基吡啶-3-甲酰胺的合成
将2-氯-5-硝基吡啶-3-羰基氯(5g，22.62mmol)溶解于THF(100mL)中。使氨(385.31mg，22.62mmol)穿过溶液达10分钟且将所得混合物在20℃下搅拌12h。等分试样的LCMS显示63％所需产物。将反应混合物蒸发至干。添加50ml饱和氨水溶液。将所得混合物在20℃下再搅拌12h。过滤所获得的沉淀，将其用水洗涤且干燥，以获得2-氨基-5-硝基吡啶-3-甲酰胺(2.25g，粗品)，其不经纯化即用于下一步骤中。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.64(m,2H),8.39(m,2H),8.79(s,1H),8.96(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值182.0；实测值183.0；Rt＝0.643min。
步骤3：2,5-二胺基吡啶-3-甲酰胺的合成
使用Noblyst P8078 2％V 1％ Pt/碳(54.90μmol)作为催化剂在1atm压力下将2-氨基-5-硝基吡啶-3-甲酰胺(1g，5.49mmol)于AcOH(3mL)中的溶液氢化12h。过滤所得混合物且蒸发滤液，以获得呈乙酸酯形式的乙酸过量的粗产物(1.5g)。将0.4g此材料再溶解于6N HCl中且蒸发至干，以获得2,5-二胺基吡啶-3-甲酰胺(0.3g，1.33mmol，24.28％产率，2HCl)，其不经纯化即用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值152.1；实测值153.2；Rt＝0.169min。
步骤4：2-氨基-5-[[2-氧代-2-(2-苯基-1-哌啶基)乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(EN-TG-3082)的合成
将[2-氧代-2-(2-苯基-1-哌啶基)乙酰基]氧基锂(318.82mg，1.33mmol)与HATU(557.48mg，1.47mmol)和三乙胺(337.19mg，3.33mmol，464.44μL)混合于DMF(5mL)中。将所得混合物在20℃下搅拌10min，随后添加2,5-二胺基吡啶-3-甲酰胺(0.3g，1.33mmol，2HCl)。将所得混合物在20℃下搅拌12h。使所获得的溶液经历HPLC(16_水-MeOH+NH3；以20-55％水-MeOH+NH3为流动相；Waters SunFire C18 19*100 5mkm柱，流速12ml/min)，以获得2-氨基-5-[[2-氧代-2-(2-苯基-1-哌啶基)乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.0579g，157.59μmol，11.82％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.52(m,4H),1.90(m,1H),2.99(m,1H),3.40(m,1H),3.75(m,1H),5.46(m,1H),7.02(m,2H),7.31(m,3H),7.40(m,3H),7.99(m,1H),8.09(m,1H),8.18(m,1H),10.68(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值367.2；实测值368.2；Rt＝2.596min。
实施例709.N-(4-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-2-(2-苯基哌啶-1-基)乙酰胺(化合物184)的合成
步骤1：5-甲基吡啶-3,4-二胺的合成
将3-甲基-5-硝基吡啶-4-胺(0.5g，3.27mmol)、Fe粉(0.72g，12.89mmol，91.60μL)和5ml HCl混合于乙醇(25mL)中且将其回流2h。将乙醇蒸馏。将所得悬浮液用水稀释且通过添加2N NaOH将pH调节至13。用乙酸乙酯萃取，用无水硫酸钠干燥合并的有机相且蒸发溶剂，得到5-甲基吡啶-3,4-二胺(90mg，粗品)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值123.3；实测值124.2；Rt＝0.225min。
步骤2：N-(4-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-2-(2-苯基哌啶-1-基)乙酰胺的合成
将5-甲基吡啶-3,4-二胺(90mg，365.39μmol)、2-氧代-2-(2-苯基-1-哌啶基)乙酸(45.00mg，192.92μmol)、HATU(138.93mg，365.39μmol)和TEA(36.97mg，365.39μmol，50.93μL)混合于DMSO(1mL)中。使未分离所需化合物的于DMSO中的溶液经历HPLC(柱：SUNFIRE C18 100*19mm，5微米且以MeCN+FA为流动相)，以得到纯的N-(4-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-(2-苯基-1-哌啶基)乙酰胺(15.2mg，44.92μmol，12.29％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.66(m,5H),2.02(m,1H),2.14(m,3H),2.42(m,1H),2.90(m,1H),4.16(m,1H),5.64(m,1H),6.35(m,2H),7.35(m,4H),7.78(m,1H),8.39(m,1H),8.58(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值338.4；实测值339.2；Rt＝2.527min。
N-(2-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-2-(2-苯基哌啶-1-基)乙酰胺(化合物160)的合成
将TEA(1.23g，12.18mmol，1.70mL)添加到5-甲基吡啶-2,3-二胺(150mg，1.22mmol)、2-氧代-2-(2-苯基-1-哌啶基)乙酸(284.11mg，1.22mmol)和HATU(509.42mg，1.34mmol)于DMF(5mL)中的搅拌混合物中。将反应混合物在25℃下搅拌2h，然后通过反相HPLC(柱：YMC-Actus Triart C18 100*20mml.D.S-5um)使用0-5min 30-75％水-甲醇(NH30.1％)直接纯化，以得到呈棕色固体的N-(2-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-(2-苯基-1-哌啶基)乙酰胺(156mg，460.99μmol，37.85％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.53(m,4H),1.89(m,1H),2.11(m,3H),3.00(m,1H),3.99(m,1H),5.58(m,3H),7.36(m,6H),7.62(m,2H),10.10(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值338.4；实测值339.2；Rt＝2.530min。
实施例710.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[4-(二氟甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物410)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[4-(二氟甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物419)的合成
步骤1：N-[5-[[2-[2-[4-(二氟甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
在21℃下，将[2-[2-[4-(二氟甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氧基钠(0.45g，1.41mmol)、TATU(544.72mg，1.69mmol)(如上文所制备)和三乙胺(142.62mg，1.41mmol，196.45μL)混合于无水DMF(5mL)中且将所得混合物搅拌15min。向其中添加N-(5-氨基-3-甲基-2-吡啶基)氨基甲酸叔丁酯(314.68mg，1.41mmol)且将所得混合物在21℃下搅拌过夜。将所得混合物倒入到水中，用EtOAc萃取3次，将合并的有机物用水、盐水洗涤且蒸发。使残余物经历HPLC(50-75％2-7min；水-乙腈30ml/min；装载泵：乙腈4ml/min；柱SunFire 19*100mm)。获得呈浅黄色胶状物的N-[5-[[2-[2-[4-(二氟甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.44g，875.53μmol，62.12％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.07(d,3H),1.48(s,9H),1.97(m,4H),2.28(m,5H),3.20(m,1H),4.80(m,1H),5.77(m,2H),7.36(m,2H),7.50(m,2H),8.02(s,1H),8.32(m,1H),9.33(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值502.2；实测值503.2；Rt＝1.341min。
步骤2：N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-[4-(二氟甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯和N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-[4-(二氟甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
手性拆分IC_II(250*20，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，60-20-20，12ml/min
异构体1N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-[4-(二氟甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(83.83mg，166.81μmol，20.55％产率)的RT为18.493(IC，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min)。
异构体2N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-[4-(二氟甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(83.83mg，166.81μmol，20.55％产率)的RT为14.346min(IC，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min)。
异构体1：
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值502.2；实测值503.2；Rt＝5.806min。
异构体2：
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值502.2；实测值503.2；Rt＝5.806min。
步骤3：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[4-(二氟甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物419)的合成
在21℃下，向N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-[4-(二氟甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(83.83mg，166.81μmol)于二噁烷(2mL)中的溶液中添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(30.41mg，834.04μmol，38.01μL)。使所得混合物搅拌8h。将所得混合物蒸发至干且使其经历HPLC(C18，H2O-MeCN，34-50％MeCN，30ml/min)。获得呈白色固体的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[4-(二氟甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(24.32mg，60.43μmol，36.23％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ0.99-1.05(m,3H),1.27-1.44(m,1H),1.57-1.70(m,1H),1.81-1.93(m,1H),1.97-2.10(m,4H),2.17-2.28(m,1H),2.71-3.17(m,1H),3.49-4.14(m,1H),5.22-5.67(m,3H),6.92-7.17(m,1H),7.44-7.54(m,3H),7.57-7.66(m,2H),7.94-8.11(m,1H),10.45-10.65(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值402.2；实测值403.0；Rt＝2.740min。
步骤4：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[4-(二氟甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物410)的合成
在21℃下，向N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-[4-(二氟甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(87.01mg，173.14μmol)于二噁烷(2mL)中的溶液中添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(31.56mg，865.68μmol，39.45μL)。使所得混合物搅拌8h。将所得混合物蒸发至干且使其经历HPLC(50-100％0.5-6min；水-MeOH+NH3 30ml/min；装载泵MeOH+NH3 4ml/min；柱xbridge20*100mm；然后C18，H2O-MeCN，34-50％MeCN，30ml/min)。获得呈白色固体的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[4-(二氟甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(33.34mg，82.85μmol，47.85％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ1.00-1.11(m,3H),1.30-1.41(m,1H),1.57-1.76(m,1H),1.83-1.95(m,1H),1.97-2.12(m,4H),2.13-2.30(m,1H),2.72-3.23(m,1H),3.48-4.14(m,1H),5.20-5.67(m,3H),6.88-7.15(m,1H),7.42-7.53(m,3H),7.56-7.66(m,2H),7.85-8.12(m,1H),10.47-10.65(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值402.2；实测值403.0；Rt＝2.753min。
实施例711.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(3-氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物283)的合成和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(3-氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物284)的合成
步骤1：2-[2-(3-氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酸甲酯的合成
在0℃下，向2-(3-氯苯基)-5-甲基哌啶(0.5g，2.38mmol)和三乙胺(265.38mg，2.62mmol，365.54μL)于DCM(25mL)中的溶液中添加2-氯-2-氧代乙酸甲酯(292.08mg，2.38mmol)。在室温下搅拌1h之后，将所得混合物过滤且蒸发至干，以得到呈黄色固体的2-[2-(3-氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酸甲酯(0.9g，粗品)，其不经进一步纯化即用于下一步骤中。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.789-1.07(m,3H),1.37(m,2H),1.56-2.00(m,2H),2.16(m,1H),2.84-3.08(m,1H),3.20(dd,1H),3.79-3.88(m,3H),4.83(s,0.5H),6.71(s,0.5H),7.24(m,4H)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值295.2；实测值296.2；Rt＝1.443min。
步骤2：N-[5-[[2-[2-(3-氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
向2-[2-(3-氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酸甲酯(0.9g，3.04mmol)于MeOH(12.50mL)中的溶液中添加羟基钠(121.71mg，3.04mmol，57.14μL)且将所得混合物搅拌1h。然后，蒸发溶剂且将残余物与EtOH一起再蒸发。此后，将固体溶解于DMF中且添加HATU(1.16g，3.04mmol)，随后添加N-(5-氨基-3-甲基-2-吡啶基)氨基甲酸叔丁酯(679.41mg，3.04mmol)且将所得混合物搅拌12h。将所得混合物倒入到水中，用EtOAc萃取3次，将合并的有机物用水、盐水洗涤且蒸发。使残余物经历HPLC(50-75％2-7min；水-乙腈；30ml/min；装载泵4ml/min；乙腈；柱SunFire 19*100mm)。获得两种级分的N-[5-[[2-[2-(3-氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(495.2mg，1.02mmol，33.42％产率)：131mg(通过LCMS为80.66％，单一非对映异构体)和364.2mg(通过LCMS为94.21％，约4:1非对映异构体的混合物)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.85-1.07(m,3H),1.36(m,1H),1.48(s,9H),1.85(m,1H),1.99(m,1H),2.15(m,1H),2.29(s,3H),2.96-3.33(m,1H),3.76(s,1H),4.24-4.80(m,1H),5.73-6.41(m,1H),6.80(m,1H),7.15-7.25(m,4H),8.03(s,1H),8.34-8.36(m,1H),9.41(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值486.2；实测值487.2；Rt＝3.523min。
步骤3：N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(3-氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯和N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(3-氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
在以下条件下分离外消旋物：柱：IC-II(250*20，5mkm)，流动相：己烷-IPA-MeOH，60-20-20；流速：14ml/min。24℃，波长：205nm，215nm
N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(3-氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(133.55mg，274.24μmol，36.67％产率)的RT＝27.9min且N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(3-氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.14g，287.48μmol，38.44％产率)的RT＝20.6min
步骤4：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(3-氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物283)的合成
在21℃下，向N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(3-氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(133.55mg，274.24μmol)于二噁烷(2mL)中的溶液中添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(49.99mg，1.37mmol，62.49μL)。使所得混合物搅拌1h。将所得混合物蒸发至干且使其经历HPLC(50-100％2-7min水-乙腈；流速30ml/min(装载泵4ml/min；MeOH+NH3)；柱YMC-actus triat100x19 mm 5um)。获得呈白色固体的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(3-氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(56.8mg，146.82μmol，53.54％产率)(呈两种级分)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.94-1.02(m,3H),1.25-1.38(m,1H),1.56-1.66(m,1H),1.81-1.91(m,1H),1.91-2.06(m,4H),2.14-2.24(m,1H),2.70-3.22(m,1H),3.33-4.05(m,1H),5.09-5.56(m,1H),5.57-5.64(m,2H),7.21-7.37(m,3H),7.37-7.42(m,1H),7.42-7.50(m,1H),7.93-8.04(m,1H),10.45-10.58(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值386.2；实测值387.2；Rt＝2.528min。
步骤5：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(3-氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物284)的合成
在21℃下，向N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(3-氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(140.00mg，287.48μmol)于二噁烷(2mL)中的溶液中添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(52.41mg，1.44mmol，65.51μL)。使所得混合物搅拌1h。将所得混合物蒸发至干且使其经历HPLC(40-65％2-7min水-乙腈；流速30ml/min(装载泵4ml/min；乙腈)；柱SunFireC18 100x19mm5um)。获得呈白色固体的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(3-氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(40.7mg，105.20μmol，36.59％产率)(呈两种级分)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.95-1.04(m,3H),1.25-1.38(m,1H),1.56-1.66(m,1H),1.79-1.92(m,1H),1.94-2.11(m,4H),2.13-2.26(m,1H),2.70-3.22(m,1H),3.43-4.05(m,1H),5.11-5.56(m,1H),5.56-5.66(m,2H),7.18-7.42(m,4H),7.42-7.50(m,1H),7.91-8.04(m,1H),10.47-10.58(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值386.2；实测值387.2；Rt＝1.615min。
实施例712.5-[[2-[(2S,5R)-2-[4-(二氟甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物358)和5-[[2-[(2R,5S)-2-[4-(二氟甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物359)的合成
步骤1：2-[2-[4-(二氟甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酸甲酯的合成
在0℃下，向2-[4-(二氟甲基)苯基]-5-甲基哌啶(0.63g，2.80mmol)和三乙胺(339.58mg，3.36mmol，467.74μL)于DCM(15mL)中的溶液中添加2-氯-2-氧代乙酸甲酯(376.86mg，3.08mmol)。在室温下搅拌1h之后，过滤所得混合物且将其蒸发至干，以得到呈黄色固体的2-[2-[4-(二氟甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酸甲酯(0.88g，粗品)，其不经进一步纯化即用于下一步骤中。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.08(d,3H),1.44(m,2H),1.80(m,2H),2.17(m,2H),3.20(m,1H),3.89(s,3H),5.78(m,2H),7.34(m,2H),7.51(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值311.2；实测值312.0；Rt＝1.426min。
步骤2：[2-[2-[4-(二氟甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氧基钠的合成
向2-[2-[4-(二氟甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酸甲酯(0.88g，2.83mmol)于MeOH(10mL)中的溶液中添加氢氧化钠(124.36mg，3.11mmol，58.39μL)且使所得混合物在室温下搅拌1h。然后将所得混合物蒸发至干，以得到[2-[2-[4-(二氟甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氧基钠(0.9g，2.82mmol，99.72％产率)，其呈钠盐用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值297.1；实测值298.2；Rt＝1.537min。
步骤3：5-[[2-[2-[4-(二氟甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
在21℃下，将[2-[2-[4-(二氟甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氧基钠(0.45g，1.41mmol)、TATU(544.72mg，1.69mmol)和三乙胺(142.62mg，1.41mmol，196.45μL)混合于无水DMF(5mL)中且将所得混合物搅拌1h。向其中添加5-氨基吡啶-3-甲酰胺(193.29mg，1.41mmol)且将所得混合物在21℃下搅拌过夜。将所得混合物倒入到水中，用EtOAc萃取3次，将合并的有机物用水、盐水洗涤且蒸发。使残余物经历HPLC(30-65％2-7min；水-MeOH(+NH3)；30ml/min；装载泵4ml/min；乙腈；柱xbridge 19*100mm)。获得呈黄色胶状物的5-[[2-[2-[4-(二氟甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(156.2mg，375.10μmol，26.61％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.95(m,3H),1.39(m,1H),1.77(m,4H),2.20(m,2H),3.37(m,1H),4.30(m,1H),5.77(m,2H),7.37(m,2H),7.49(m,2H),8.60(m,1H),8.81(s,1H),9.01(m,1H),9.87(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值416.2；实测值417.2；Rt＝1.136min。
步骤4：5-[[2-[(2S,5R)-2-[4-(二氟甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物358)和5-[[2-[(2R,5S)-2-[4-(二氟甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物359)的合成
手性拆分：IA(250*20，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，12ml/min
5-[[2-[(2S,5R)-2-[4-(二氟甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(62.76mg，150.71μmol，40.18％产率)的RT为24.9482min(IA，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min)
5-[[2-[(2R,5S)-2-[4-(二氟甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(65.89mg，158.23μmol，42.18％产率)的RT为33.4822min(IA，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min)
化合物358：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.00-1.04(m,3H),1.28-1.38(m,1H),1.60-1.68(m,1H),1.82-1.95(m,1H),2.05-2.18(m,1H),2.19-2.30(m,1H),2.75-3.24(m,1H),3.38-4.11(m,1H),5.19-5.67(m,1H),6.90-7.12(m,1H),7.43-7.51(m,2H),7.55-7.65(m,3H),8.09-8.20(m,1H),8.41-8.52(m,1H),8.71-8.80(m,1H),8.81-8.93(m,1H),11.13-11.39(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值416.2；实测值417.2；Rt＝3.134min。
化合物359：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.00-1.04(m,3H),1.28-1.38(m,1H),1.60-1.68(m,1H),1.82-1.95(m,1H),2.05-2.18(m,1H),2.19-2.30(m,1H),2.75-3.24(m,1H),3.38-4.11(m,1H),5.19-5.67(m,1H),6.90-7.12(m,1H),7.43-7.51(m,2H),7.55-7.65(m,3H),8.09-8.20(m,1H),8.41-8.52(m,1H),8.71-8.80(m,1H),8.81-8.93(m,1H),11.13-11.39(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值416.2；实测值417.2；Rt＝3.135min。
实施例713.4-氨基-5-[[2-氧代-2-(2-苯基-1-哌啶基)乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物119)的合成
步骤1：4-羟基-5-硝基吡啶-3-甲酸的合成
在0℃下，将硝酸(18.36g，291.37mmol，12mL)逐滴添加到4-羟基吡啶-3-甲酸(6g，43.13mmol)于硫酸(50mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在100℃下搅拌24小时。24小时之后，使反应混合物冷却且倒入到碎冰(500g)中。过滤所沉淀的固体，将其用水(5x20mL)洗涤且在真空中干燥，以获得呈白色固体的4-羟基-5-硝基吡啶-3-甲酸(4.90g，26.62mmol，61.71％产率)。粗产物直接用于下一步骤。
LCMS(ESI)：[M-H]-m/z：计算值184.0；实测值183.0；Rt＝0.508min。
步骤2：4-氯-5-硝基吡啶-3-羰基氯的合成
向4-羟基-5-硝基吡啶-3-甲酸(4.90g，26.62mmol)和二甲基甲酰胺(194.54mg，2.66mmol，206.08μL)于氯仿(100mL)中的搅拌悬浮液中添加亚硫酰氯(31.66g，266.15mmol)。将所得反应混合物在70℃下搅拌24小时。然后在减压下浓缩所得溶液，以获得呈淡黄色油状物的粗产物4-氯-5-硝基吡啶-3-羰基氯(5.80g，26.24mmol，98.61％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(CDCl3,400MHz):δ(ppm)9.17(s,1H),9.33(s,1H)。
步骤3：4-氨基-5-硝基吡啶-3-甲酰胺的合成
在0℃下，将气态氨鼓泡穿过4-氯-5-硝基吡啶-3-羰基氯(5.80g，26.24mmol)于乙腈(100mL)中的溶液。反应混合物的颜色立即自无色转变成黄色。移除冷却浴且在25℃下进一步鼓泡氨达1小时。过滤所沉淀的固体，用乙腈(2x 20mL)和水(2x 20mL)洗涤，且在真空中干燥，以得到呈黄色固体的4-氨基-5-硝基吡啶-3-甲酰胺(3.80g，20.86mmol，79.50％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值182.0；实测值183.0；Rt＝0.499min。
步骤4：4,5-二胺基吡啶-3-甲酰胺的合成
在氢气气氛、25℃下将4-氨基-5-硝基吡啶-3-甲酰胺(500mg，2.75mmol)于甲醇(20mL)中的溶液经钯(10％于碳上)(200mg，2.75mmol)氢化12小时。12小时之后，过滤催化剂且将滤饼用甲醇(2x 20mL)洗涤。在减压下浓缩滤液，以获得呈白色固体的4,5-二胺基吡啶-3-甲酰胺(350mg，2.30mmol，83.79％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,400MHz):δ(ppm)4.71(s,2H),6.80(s,2H),7.16(s,1H),7.66(s,1H),7.80(s,1H),8.05(d,1H)。
步骤5：4-氨基-5-[[2-氧代-2-(2-苯基-1-哌啶基)乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物119)的合成
向4,5-二胺基吡啶-3-甲酰胺(200mg，1.31mmol)、2-氧代-2-(2-苯基-1-哌啶基)乙酸(306.61mg，1.31mmol)和HATU(549.78mg，1.45mmol)于DMF(10mL)中的搅拌混合物中添加三乙胺(1.33g，13.14mmol，1.83mL)。将所得反应混合物在25℃下搅拌2小时。2小时之后，将反应混合物在减压下浓缩，且通过反相HPLC纯化(洗脱液：25-70％，水-甲醇(0.1％NH3)；柱：SunFireC18 100*19mm，5um)纯化残余物，以得到呈灰白色固体的4-氨基-5-[[2-氧代-2-(2-苯基-1-哌啶基)乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物119，26mg，70.77μmol，5.38％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值367.2；实测值368.4；Rt＝2.198min。
实施例714.5-[[2-[(2R,4S)-4-乙酰胺基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物745)的合成
步骤1：5-[[2-[(2R,4S)-4-(苯甲基氨基)-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
将(2R,4S)-N-苯甲基-2-苯基哌啶-4-胺(0.5g，1.47mmol，2HCl)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(308.22mg，1.25mmol，HCl)和三乙胺(671.01mg，6.63mmol，924.26μL)混合于DMF(5mL)中。在剧烈搅拌的情况下，向其中小批量添加HATU(616.34mg，1.62mmol)且将所得混合物在20℃下搅拌12h。使反应混合物经历HPLC，以获得5-[[2-[(2R,4S)-4-(苯甲基氨基)-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.1896g，414.41μmol，28.12％产率)。
HPLC条件：24％0.5-6.5min水-乙腈；流速：30ml/min；(装载泵4ml/min乙腈)；目标质量457；柱SunFire 100x19 mm 5um(L)
1H NMR(DMSO-d6,400MHz):1.75(m,2H),2.21(m,2H),2.95(m,1H),3.20(s,2H),3.66(m,4H),4.13(m,1H),5.16(m,1H),7.40(m,9H),8.30(m,4H),11.28(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值457.2；实测值458.2；Rt＝1.263min。
步骤2：5-[[2-[(2R,4S)-4-氨基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
在1atm压力下使用干燥的487型钯(10％于碳上)(2.21mg，20.72μmol)作为催化剂将5-[[2-[(2R,4S)-4-(苯甲基氨基)-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.1896g，414.41μmol)于MeOH(10mL)中的溶液氢化24h。过滤所得混合物且将滤液蒸发至干，以获得5-[[2-[(2R,4S)-4-氨基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.12g，326.62μmol，78.82％产率)，其不经纯化即用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值367.2；实测值368.0；Rt＝0.746min。
步骤3：5-[[2-[(2R,4S)-4-乙酰胺基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物745)的合成
将5-[[2-[(2R,4S)-4-氨基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.12g，326.62μmol)与乙酸乙酰酯(66.69mg，653.24μmol，61.75μL)混合于DCM(5mL)中且将所得混合物在20℃下搅拌12h。将所得混合物蒸发且使残余物经历HPLC，以获得5-[[2-[(2R,4S)-4-乙酰胺基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(33.30mg，81.33μmol，24.90％产率)
HPLC条件：0-10％0.5-6.5min水-乙腈；流速30ml/min；(装载泵4ml/min乙腈)；目标质量409；柱SunFireC18 100x19 mm 5um(L)
1H NMR(400MHz,TFA)δ3.02-3.25(m,2H),3.25-3.34(m,3H),3.36-3.75(m,3H),3.76-3.96(m,1H),4.84-5.15(m,1H),5.45-6.19(m,3H),6.73-7.24(m,1H),8.34-8.45(m,3H),8.47-8.58(m,3H),10.26-10.51(m,2H),10.62-10.88(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值409.2；实测值410.4；Rt＝1.411min。
实施例715.2-[(2R,4S)-4-乙酰胺基-2-苯基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物831)的合成
步骤1：N-[5-[[2-[(2R,4S)-4-(苯甲基氨基)-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
在轻微加热下，将(2R,4S)-N-苯甲基-2-苯基哌啶-4-胺(392.54mg，1.47mmol，2HCl)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(435.14mg，1.47mmol)和DIPEA(761.81mg，5.89mmol，1.03mL)溶解于DMSO(5mL)中。在剧烈搅拌和偶尔加热下，小批量添加HATU(672.37mg，1.77mmol)。在反应完成之后，通过HPLC纯化混合物，以得到N-[5-[[2-[(2R,4S)-4-(苯甲基氨基)-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.5g，919.70μmol，62.41％产率)。
HPLC条件：(2-4 58-62％0.5-6.5min水-MeOH+NH3；流速30ml/min；(装载泵4ml/min MeOH)；目标质量543；柱SunFireC18 100x19mm 5um(L))。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值543.3；实测值544.0；Rt＝2.183min。
步骤2：N-[5-[[2-[(2R,4S)-4-氨基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将N-[5-[[2-[(2R,4S)-4-(苯甲基氨基)-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(80.00mg，147.15μmol)溶解于MeOH(5mL)中，随后添加Pd/C(1.79mg，14.72μmol)。在氢气气氛(1atm)下搅拌所获得的混合物过夜。在反应完成之后，过滤出固体且蒸发有机溶剂，以得到N-[5-[[2-[(2R,4S)-4-氨基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(60mg，132.29μmol，89.90％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值453.3；实测值454.2；Rt＝0.982min。
步骤3：N-[5-[[2-[(2R,4S)-4-乙酰胺基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将N-[5-[[2-[(2R,4S)-4-氨基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(30mg，66.15μmol)溶解于DCM(3mL)中，随后添加乙酸酐(8.10mg，79.38μmol，7.50μL)。在反应完成之后，在减压下蒸发有机溶剂，以得到N-[5-[[2-[(2R,4S)-4-乙酰胺基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(60mg，粗品)，其不经纯化即用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值409.2；实测值410.4；Rt＝1.411min。
步骤4：2-[(2R,4S)-4-乙酰胺基-2-苯基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物831)的合成
将N-[5-[[2-[(2R,4S)-4-乙酰胺基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(60mg，60.54μmol)溶解于H2O(1mL)/二噁烷(2mL)混合物中且在回流下搅拌过夜。等分试样显示起始材料完全消耗；在减压下蒸发溶剂且通过HPLC(10-60％0.5-7.5min水-MeOH+NH3流速30ml/min(装载泵4ml/min MeCN)目标质量396柱：sunfire C18 100*19mm 5um)纯化，得到2-[(2R,4S)-4-乙酰胺基-2-苯基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(10mg，25.29μmol，41.77％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.43-1.55(m,4H),1.94-2.07(m,5H),2.26-2.35(m,1H),3.47-3.59(m,1H),3.67-3.79(m,1H),3.82-4.27(m,1H),5.13-5.35(m,1H),5.52-5.66(m,2H),7.17-7.24(m,3H),7.28-7.34(m,2H),7.34-7.56(m,2H),7.80-8.07(m,1H),10.26-10.56(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值395.2；实测值396.4；Rt＝1.286min。
实施例716.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,4S)-4-(二甲基氨基)-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物975)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,4S)-4-(二甲基氨基)-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物906)的合成
步骤1：4-(二甲基氨基)-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将4-氧代-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.5g，1.82mmol)溶解于甲醇(20mL)/40％二甲胺水溶液(818.68mg，18.16mmol，1.06mL)混合物中且在高压釜中、在氢气气氛下氢化。在反应完成之后，过滤出固体且将有机溶剂蒸发至干，得到粗品4-(二甲基氨基)-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.6g，1.97mmol，108.54％产率)，其不经纯化即用于下一步骤中。
注意：获得非对映异构体的混合物。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值304.3；实测值305.2；Rt＝0.986min。
步骤2：N,N-二甲基-2-苯基哌啶-4-胺的合成
将4-(二甲基氨基)-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.6g，1.97mmol)溶解于二噁烷(3mL)中，随后添加HCl(10M，1.97mL)且搅拌过夜。在反应完成之后，过滤所获得的固体，用MTBE(10mL)洗涤且风干，以得到N,N-二甲基-2-苯基哌啶-4-胺(0.4g，1.44mmol，73.21％产率，2HCl)。
1H NMR(DMSO-d6,400MHz):2.10(m,4H),2.37(s,3H),2.41(s,3H),2.62(m,2H),4.32(m,1H),7.43(m,5H),9.97(m,2H),11.43(s,1H)。
步骤3：N-[5-[[2-[4-(二甲基氨基)-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
在轻微加热下，将2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(426.05mg，1.44mmol)、N,N-二甲基-2-苯基哌啶-4-胺(0.4g，1.44mmol，2HCl)和DIPEA(559.41mg，4.33mmol，753.93μL)溶解于DMSO(6mL)中。在剧烈搅拌和偶尔加热下，小批量添加HATU(658.33mg，1.73mmol)。在反应完成之后，通过HPLC(24％0.5-6.5min水-乙腈+NH3；流速30ml/min(装载泵4ml/min乙腈)；目标质量481；柱XBridge 100x19 mm 5um(R))纯化混合物，以得到N-[5-[[2-[4-(二甲基氨基)-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.55g，1.14mmol，79.15％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值481.3；实测值482.2；Rt＝1.952min。
步骤4：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,4S)-4-(二甲基氨基)-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物975)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,4S)-4-(二甲基氨基)-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物906)的合成
将N-[5-[[2-[4-(二甲基氨基)-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.5g，1.04mmol)溶解于二噁烷(5mL)/水(1mL)混合物中且在回流下搅拌过夜。等分试样显示起始材料完全消耗；在减压下蒸发溶剂且通过HPLC(5-40％0.5-6.5min水-乙腈；流速30ml/min(装载泵4ml/min乙腈)；目标质量382；柱SunFireC18 100x19 mm 5um(R))纯化，得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,4S)-4-(二甲基氨基)-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(140mg，367.00μmol，35.35％产率)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,4S)-4-(二甲基氨基)-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(90mg，235.93μmol，22.72％产率)
通过2D NMR确定相对构型。
化合物975：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.54-1.64(m,1H),1.70-1.79(m,1H),1.93-1.97(m,1H),1.97-2.04(m,3H),2.05-2.12(m,6H),2.11-2.24(m,3H),3.43-3.61(m,1H),3.77-4.30(m,1H),4.95-5.21(m,1H),5.47-5.69(m,2H),7.14-7.33(m,5H),7.49(s,1H),7.66-8.10(m,1H),9.93-10.50(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值381.3；实测值382.4；Rt＝0.846min。
化合物906：1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.36(m,1H),1.70(m,2H),2.00(m,4H),2.15(d,6H),2.27(m,1H),2.86(m,1H),4.05(m,1H),5.66(m,3H),7.29(m,3H),7.38(m,2H),7.47(m,1H),7.99(m,1H),10.54(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值381.3；实测值382.2；Rt＝1.061min。
实施例717.5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-(三氟甲氧基)吡啶-3-甲酰胺(化合物1039)的合成
步骤1A.2-[(2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯的合成
在0℃下，向(2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶(3.00g，15.52mmol)(中间体4A)和TEA(1.88g，18.63mmol，2.60mL)于DCM(50mL)中的溶液中添加2-氯-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(3.25g，17.08mmol)。在室温下搅拌1h，将所得混合物过滤且蒸发至干，以得到呈黄色胶状物的2-[(2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(5.72g，粗品)，其不经进一步纯化即用于下一步骤中。
1H NMR(CDCl3,400MHz):δ(ppm)1.06(m,3H),1.43(m,1H),1.86-2.00(m,2H),2.17(m,2H),2.89(dd,0.3H,旋转异构性),3.08(m,1H),3.30(dd,0.7H),4.09(d,0.3H),4.58(m,1H),4.77(m,1H),5.73(s,0.7H),7.04(m,2H),7.20(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值347.1；实测值348.2；Rt＝3.756min。
步骤2A.2-[(2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酸的合成
向2-[(2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(3.81g，10.97mmol)于MeOH(50mL)中的溶液中添加98％氢氧化锂单水合物(598.45mg，14.26mmol，396.33μL)且使所得混合物在室温下搅拌1h。然后将所得混合物蒸发至干，溶解于水中，将水酸化至pH＝1且用DCM萃取两次，将有机物用盐水洗涤，经Na2SO4干燥且蒸发。获得呈白色固体的2-[(2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酸(2.5g，9.42mmol，85.91％产率)。
1H NMR(CDCl3,400MHz):δ(ppm)1.06(m,3H),1.40(m,1H),1.83(m,1H),1.95(m,1H),2.18(m,2H),2.90-3.30(两个双峰,1H,旋转异构性),4.18(m,1H),5.79(m,1H),7.04(t,2H),7.23(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值265.1；实测值266.2；Rt＝1.212min。
步骤1 2-苯甲基氧基-5-溴-吡啶的合成
在-78℃下，将丁基锂(1.20g，18.75mmol，7.51mL)逐滴添加到6-(三氟甲氧基)吡啶-3-胺(1.67g，9.38mmol)于THF(20mL)中的溶液中，接着在1min后添加氯三甲基硅烷(2.14g，19.69mmol，2.50mL)。使反应混合物达到25℃达2h，之后过滤到硅藻土垫上。移除溶剂且在真空(101-103 0C/1毫巴)下蒸馏粗品油状物，以得到6-(三氟甲氧基)-N,N-双(三甲基甲硅烷基)吡啶-3-胺(2.93g，粗品)。在0℃下，将丁基锂(1.18g，18.43mmol，7.38mL)逐滴添加到二异丙胺(1.95g，19.31mmol，2.72mL)于THF(56mL)中的溶液中。在-78 0℃下，逐滴添加6-(三氟甲氧基)-N,N-双(三甲基甲硅烷基)吡啶-3-胺(2.83g，8.78mmol)于THF(2mL)中的溶液且将反应混合物在此温度下搅拌1h。然后通过具有硫酸的干燥容器将CO2喷入溶液中达15min。在-78℃下30min之后，使溶液达到室温。蒸发溶剂。通过柱色谱(MTBE/甲醇)纯化所得粗材料，以获得5-氨基-2-(三氟甲氧基)吡啶-3-甲酸(0.1g，450.20μmol，5.13％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)5.20-5.30(brs,2H),7.35(s,1H),7.65(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值222.0；实测值223.0；Rt＝0.641min。
步骤2.5-氨基-2-(三氟甲氧基)吡啶-3-甲酰胺的合成
将5-氨基-2-(三氟甲氧基)吡啶-3-甲酸(90mg，405.18μmol)、碳酸铵(116.80mg，1.22mmol)、三乙胺(205.00mg，2.03mmol，282.37μL)混合到DMF(2mL)中，然后添加HATU(231.09mg，607.78μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌13h。将溶剂蒸发，以获得粗产物，其通过HPLC(35-55％(甲醇)-2-10min，流速：30ml/min)进行纯化，以获得5-氨基-2-(三氟甲氧基)吡啶-3-甲酰胺(18.9mg，85.47μmol，21.09％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)5.19(d,1H),5.37(s,2H),5.65(d,1H),6.63(m,1H),6.78(d,1H),7.24-7.63(m,5),7.71(d,1H),8.19(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值221.0；实测值222.0；Rt＝0.727min。
步骤3.5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-(三氟甲氧基)吡啶-3-甲酰胺(化合物1039)的合成
将5-氨基-2-(三氟甲氧基)吡啶-3-甲酰胺(0.154g，696.40μmol)、2-[(2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酸(184.74mg，696.40μmol)、三乙胺(704.69mg，6.96mmol，970.65μL)混合于DMF(5mL)中，然后添加HATU(397.19mg，1.04mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌12h。将溶剂蒸发且将所得混合物与于甲醇(10ml)中的DMT(50mg)一起搅拌。将混合物过滤且在减压下蒸发。通过HPLC(2-10min 50-100％甲醇/H2O)纯化所得粗材料，以获得5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-(三氟甲氧基)吡啶-3-甲酰胺(104.80mg，223.74μmol，32.13％产率)
1H NMR(dmso,600MHz):δ(ppm)0.97-1.06(m,3H),1.27-1.39(m,1H),1.59-1.73(m,1H),1.82-1.94(m,1H),2.00-2.13(m,1H),2.14-2.24(m,1H),2.74-3.23(m,1H),3.44-4.07(m,1H),5.11-5.65(m,1H),7.16-7.26(m,2H),7.30-7.40(m,2H),7.74-7.85(m,1H),7.91-8.04(m,1H),8.29-8.37(m,1H),8.54-8.67(m,1H),11.23-11.60(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值468.0；实测值469.0；Rt＝3.289min。
实施例718.外消旋5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-(三氟甲氧基)吡啶-3-甲酰胺(化合物818)的合成
将5-氨基-2-(三氟甲氧基)吡啶-3-甲酰胺(18.9mg，85.47μmol)(如上文所制备)、外消旋2-[(2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酸(22.67mg，85.47μmol)(以与上文对映异构纯的材料的程序类似的方式制备)、三乙胺(43.24mg，427.34μmol，59.56μL)混合于DMF(2mL)中然后添加HATU(48.75mg，128.20μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌11h。将溶剂蒸发且将所得混合物与于甲醇(10ml)中的DMT(50mg)一起搅拌。将混合物过滤且在减压下蒸发。通过HPLC(2-10min 50-100％甲醇/H2O)纯化所得粗材料，以获得外消旋5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-(三氟甲氧基)吡啶-3-甲酰胺(14.1mg，30.10μmol，35.22％产率)
1H NMR(dmso,600MHz):δ(ppm)0.97-1.06(m,3H),1.27-1.39(m,1H),1.59-1.73(m,1H),1.82-1.94(m,1H),2.00-2.13(m,1H),2.14-2.24(m,1H),2.74-3.23(m,1H),3.44-4.07(m,1H),5.11-5.65(m,1H),7.16-7.26(m,2H),7.30-7.40(m,2H),7.74-7.85(m,1H),7.91-8.04(m,1H),8.29-8.37(m,1H),8.54-8.67(m,1H),11.23-11.60(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值468.0；实测值469.0；Rt＝3.289min。
实施例719.N-(5-氯-6-甲基吡啶-3-基)-2-(2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物622)的合成
将外消旋-2-[(2S,5R)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酸(300.00mg，1.13mmol)(以与上文针对对映异构纯的材料所述的方式类似的方式制备)、5-氯-6-甲基吡啶-3-胺(161.25mg，1.13mmol)和TEA(1.14g，11.31mmol，1.58mL)一起混合于DMF(5mL)中。将HATU(644.99mg，1.70mmol)添加到前一混合物中且将所得混合物搅拌18h。在真空中浓缩反应混合物且通过HPLC(2-10min 50-60％水/MeOH(装载泵4ml MeOH)柱：TRIART 100*20 5微米)纯化残余物，以获得N-(5-氯-6-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.1985g，509.17μmol，45.02％产率)。
化合物622：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.68-1.02(m,3H),1.22-1.38(m,1H),1.61-1.71(m,1H),1.80-1.95(m,1H),1.98-2.13(m,1H),2.13-2.30(m,1H),2.42-2.46(m,3H),2.73-3.26(m,1H),3.43-4.25(m,1H),5.08-5.67(m,1H),7.15-7.28(m,2H),7.30-7.40(m,2H),8.11-8.27(m,1H),8.53-8.69(m,1H),11.05-11.34(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值389.2；实测值390.2；Rt＝1.504min。
实施例720.N-(6-氨基-5-(二氟甲基)吡啶-3-基)-2-(2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物867)的合成
将2-[(2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(590mg，2.23mmol)、5-溴-3-(二氟甲基)吡啶-2-胺(497.86mg，2.23mmol)、铜(70.93mg，1.12mmol)、碘化铜(I)(42.52mg，223.24μmol，7.56μL)、(S,S)-(+)-N,N'-二甲基-1,2-环己烷二胺(31.75mg，223.24μmol，35.20μL)和碳酸钾(617.05mg，4.46mmol，269.45μL)一起混合于甲苯(12mL)中。将氩气流鼓泡穿过反应混合物达2min，此后将其在密封烧瓶中在105℃下搅拌18h。然后，将其用乙酸乙酯(20ml)和5％ NH3水溶液(15ml)稀释。通过弗罗里垫(florisilpad)过滤所得双相混合物。将有机层分离，经Na2SO4干燥且在减压下浓缩。通过HPLC(第1次运行：50-70％0-5min H2O/MeOH/0.1％ NH4OH，流速：30ml/min；第2次运行：50-60％0-6minH2O/MeOH/0.1％ NH4OH，流速：30ml/min；柱：YMC Triart C18 100x20 mm，5um)纯化残余物，得到N-[6-氨基-5-(二氟甲基)-3-吡啶基]-2-[(2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(190mg，467.52μmol，20.94％产率)。化合物867：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.72-1.05(m,3H),1.21-1.38(m,1H),1.58-1.69(m,1H),1.78-1.93(m,1H),1.96-2.08(m,1H),2.09-2.26(m,1H),2.71-3.20(m,1H),3.47-4.05(m,1H),5.09-5.68(m,1H),6.10-6.23(m,2H),6.87-7.13(m,1H),7.14-7.25(m,2H),7.30-7.42(m,2H),7.87-8.00(m,1H),8.20-8.32(m,1H),10.64-10.91(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值406.2；实测值407.2；Rt＝2.966min。
实施例721.N-(6-氨基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-2-(2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物872)的合成
步骤1：5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺的合成
将2-氯-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶(4.5g，19.86mmol)和氨(338.29mg，19.86mmol)于THF(50mL)溶液中的溶液在室温下搅拌14h。在反应完成之后，将反应混合物过滤且在真空下浓缩，以得到呈白色固体的5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(3.5g，粗品)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)7.96(bds,2H),8.35(s,1H),9.01(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值207.2；实测值208.2；Rt＝0.985min。
步骤2：(5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
在0℃下，向5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(3.5g，16.90mmol)于DMF(15mL)中的溶液中分批添加于矿物油中的氢化钠(油分散体)60％分散物(743.50mg，18.59mmol，60％纯度)。将所得混合物搅拌0.5h(直至气体逸出结束)且逐滴添加二碳酸二-叔丁酯(4.06g，18.59mmol，4.27mL)于DMF(5mL)中的溶液。将所得混合物在25℃下搅拌16h。将混合物用水(1000mL)淬灭，用水萃取3次，将合并的有机物用水、盐水洗涤，干燥且蒸发，以得到呈棕色固体的N-[5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(6.8g，粗品)，其不经进一步纯化即用于下一步骤中。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.42(s,9H),8.69(s,1H),9.35(s,1H),10.12(s,1H)。LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值307.2；实测值308.2；Rt＝1.222min。
步骤3：(5-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
在三颈圆底烧瓶中向N-[5-硝基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.65g，2.12mmol)于MeOH(25mL)中的溶液中添加Pd/C(0.06g，2.12mmol)。将反应烧瓶抽真空且用分子氢(4.26mg，2.12mmol)回填且使混合物搅拌过夜。通过薄硅胶垫过滤，随后浓缩且在真空下干燥，得到呈米色固体的N-[5-氨基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.5g，1.80mmol，85.24％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.38(s,9H),5.78(bds,2H),7.23(s,1H),7.97(s,1H),8.73(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值277.2；实测值278.2；Rt＝1.091min。
步骤4：外消旋-(5-(2-((2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
在21℃下，将N-[5-氨基-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(252.91mg，912.24μmol)、TEA(184.62mg，1.82mmol，254.30μL)和HATU(346.86mg，912.24μmol)混合于无水DMF(5mL)中且将所得混合物搅拌15min。向其中添加2-[2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酸(0.242g，912.24μmol)且将所得混合物在21℃下搅拌过夜。将所得混合物倒入到水中，用EtOAc萃取3次，将合并的有机物用水、盐水洗涤且蒸发。使残余物经历HPLC(50-75％2-7min水-MeCN流速30ml/min(装载泵4ml/min acn；柱sunfire 100x19mm5um(R))。获得呈灰白色固体的N-[5-[[2-[2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(256.7mg，489.41μmol，53.65％产率)(存在顺式杂质)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.38(s,9H),5.78(bds,2H),7.23(s,1H),7.97(s,1H),8.73(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值524.2；实测值525.2；Rt＝4.018min。
步骤5：N-(6-氨基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-2-(2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物872)的合成
在21℃下，向N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-(三氟甲基)-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.2567g，489.41μmol)于二噁烷(5mL)中的溶液中添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(89.22mg，2.45mmol，111.53μL)。使所得混合物搅拌2h。将所得混合物蒸发至干且使其经历HPLC(40-65％2-7min水-MeCN；流速30ml/min；(装载泵4ml/min MeCN)；柱sunfire 100x19 mm 5um(L))。获得呈米色固体的呈三种级分的N-[6-氨基-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]-2-[(2S,5R)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(114.2mg，269.09μmol，54.98％产率)：第1级分-29.5mg(通过LCMS为100％，单一非对映异构体)；第2级分-70.4mg(通过LCMS为84.06％，15.94％顺式)；第3级分-14.3mg(通过LCMS为59.51％，40.49％顺式)。
化合物872：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.96-1.03(m,3H),1.20-1.37(m,1H),1.59-1.70(m,1H),1.80-1.94(m,1H),1.99-2.13(m,1H),2.13-2.24(m,1H),2.70-3.20(m,1H),3.44-4.02(m,1H),5.12-5.60(m,1H),6.32-6.41(m,2H),7.15-7.24(m,2H),7.27-7.40(m,2H),7.96-8.11(m,1H),8.32-8.45(m,1H),10.70-10.93(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值424.2；实测值425.2；Rt＝3.503min。
N-(6-氨基-5-甲氧基吡啶-3-基)-2-(2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物979)的合成
步骤1：(3-甲氧基-5-硝基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
将3-甲氧基-5-硝基吡啶-2-胺(2.00g，11.82mmol)、碳酸叔丁氧基羰基叔丁酯(3.87g，17.74mmol，4.07mL)和DMAP(72.23mg，591.23μmol)在DCM(50mL)中回流16h。在冷却之后，将反应混合物用水洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩，以得到N-(3-甲氧基-5-硝基-2-吡啶基)氨基甲酸叔丁酯(1.2g，粗品)，其不经纯化即用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值269.2；实测值270.2；Rt＝1.128min。
步骤2：(5-氨基-3-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
将粗品N-(3-甲氧基-5-硝基-2-吡啶基)氨基甲酸叔丁酯(250.00mg，928.49μmol)溶解于MeOH(20mL)中，随后一次性添加氯化铵(695.33mg，13.00mmol，454.46μL)和锌(425.00mg，6.50mmol，59.52μL)。将反应混合物在23℃下搅拌48h然后过滤。在减压下浓缩滤液且将残余物溶解于DCM和水的混合物中。将有机层分离，经Na2SO4干燥且在旋转蒸发器上浓缩，以得到N-(5-氨基-3-甲氧基-2-吡啶基)氨基甲酸叔丁酯(0.18g，粗品)，其不经纯化即用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值239.2；实测值240.2；Rt＝0.906min。
步骤3：外消旋-(5-(2-((2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-3-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
向N-(5-氨基-3-甲氧基-2-吡啶基)氨基甲酸叔丁酯(0.18g，752.29μmol)、2-[(2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酸(199.57mg，752.29μmol)和DIPEA(97.23mg，752.29μmol，131.03μL)于DMSO(2mL)中的搅拌溶液中添加HATU(286.04mg，752.29μmol)。将所得反应混合物在25℃下搅拌14h。完成之后，将反应混合物用水稀释且用DCM萃取。将有机层分离，经Na2SO4干燥且在减压下浓缩，以得到N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲氧基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.3g，粗品)，其不经纯化即用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值486.2；实测值487.2；Rt＝1.331min。
步骤4：N-(6-氨基-5-甲氧基吡啶-3-基)-2-(2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物979)的合成
将N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲氧基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.3g，616.61μmol)溶解于水(1mL)和1,4-二噁烷(2.5mL)的混合物中且将反应混合物在80℃下搅拌17h。在冷却之后，在减压下浓缩反应混合物且将残余物提交至反相HPLC(2-10min 0-100％ MeOH/水+FA，30ml/min(装载泵4mlMeOH)；柱：SunFire 100*19mm，5微米)，以得到N-(6-氨基-5-甲氧基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.056g，144.92μmol，23.50％产率)。
化合物979：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.97-1.05(m,3H),1.25-1.39(m,1H),1.59-1.71(m,1H),1.80-1.92(m,1H),1.97-2.13(m,1H),2.13-2.25(m,1H),2.69-3.21(m,1H),3.43-3.47(m,0.6H),3.70-3.77(m,3H),3.96-4.04(m,0.4H),5.13-5.56(m,1H),5.56-5.64(m,2H),7.16-7.24(m,2H),7.28-7.34(m,2H),7.34-7.41(m,1H),7.71-7.81(m,1H),10.47-10.64(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值386.2；实测值387.2；Rt＝2.282min。
实施例722.2-(二氟甲氧基)-5-(2-(2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物889)的合成
步骤1：2-(二氟甲氧基)-5-硝基烟酸甲酯的合成
向2-羟基-5-硝基吡啶-3-甲酸甲酯(5g，25.24mmol)于无水MeCN(100mL)中的搅拌溶液中添加2,2-二氟-2-氟磺酰基乙酸(22.47g，126.18mmol，13.06mL)和硫酸钠(11.95g，50.47mmol，4.46mL，60％纯度)，且将混合物在室温下在氮气气氛下搅拌120h。通过添加饱和NaHCO3水溶液来淬灭反应物且将混合物用乙酸乙酯萃取。将有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥且浓缩。通过CC(Companion combiflash；120g SiO2，氯仿/MeCN，其中MeCN为0～5％，流速＝85mL/min，Rv＝2-2.5CV)纯化残余物，以得到呈淡黄色固体的2-(二氟甲氧基)-5-硝基吡啶-3-甲酸甲酯(1g，4.03mmol，15.97％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)3.90(s,3H),7.78(t,1H),8.91(s,1H),9.23(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值248.2；实测值249.2；Rt＝1.249min。
步骤2：5-氨基-2-(二氟甲氧基)烟酸甲酯的合成
在三颈圆底烧瓶中向2-(二氟甲氧基)-5-硝基吡啶-3-甲酸甲酯(0.91g，3.67mmol)于MeOH(25mL)中的溶液中添加钯(10％于碳上)(91.00mg，855.10μmol)。将反应烧瓶抽真空且用分子氢(7.39mg，3.67mmol)回填且使混合物搅拌过夜。通过薄硅胶垫过滤，得到甲醇溶液，其不经蒸发即用于下一步骤中。计算质量，如同产率为80％一般。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值218.2；实测值219.2；Rt＝0.780min。
步骤3：5-氨基-2-(二氟甲氧基)烟酰胺的合成
将氨(49.96mg，2.93mmol)鼓泡穿过5-氨基-2-(二氟甲氧基)吡啶-3-甲酸甲酯(0.64g，2.93mmol)的溶液。16h之后，将反应混合物蒸发至干，以得到呈米色固体的5-氨基-2-(二氟甲氧基)吡啶-3-甲酰胺(700mg，粗品)，其不经进一步纯化即用于下一步骤中。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)5.35(bds,2H),7.44(m,5H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值203.2；实测值204.2；Rt＝0.644min。
步骤4：2-(二氟甲氧基)-5-(2-(2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物889)的合成
在室温下将5-氨基-2-(二氟甲氧基)吡啶-3-甲酰胺(114.87mg，565.44μmol)、HATU(215.00mg，565.44μmol)和TEA(57.22mg，565.44μmol，78.81μL)混合于无水DMF(5mL)中且将所得混合物搅拌15min。向其中添加2-[2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酸(0.15g，565.44μmol)且将所得混合物在室温下搅拌过夜。将所得混合物倒入到水中，用EtOAc萃取3次，将合并的有机物用水、盐水洗涤且蒸发。使残余物经历HPLC(35-60％0.5-6min水-MeCN；流速30ml/min(装载泵4ml/min；MeCN)；柱SunFire 100x19 mm 5um(R))。获得呈米色固体的三种级分：第1级分-13.4mg(94.68％反式、5.32％顺式)，第2级分-37.3mg(90.84％反式、9.16％顺式)，第3级分-13.5mg(68.57％反式、31.43％顺式)。
化合物889：1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.01(m,3H),1.32(m,1H),1.66(m,1H),1.89(m,1H),2.14(m,2H),3.23(m,1H),3.74(m,1H),5.36(m,1H),7.22(m,2H),7.35(m,2H),7.67(m,3H),8.32(d,1H),8.54(d,1H),11.23(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值450.2；实测值451.2；Rt＝3.172min。
实施例723.N-(5-(二氟甲基)-6-甲氧基吡啶-3-基)-2-(2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1057)的合成
步骤1：5-(二氟甲基)-N-(二苯基亚甲基)-6-甲氧基吡啶-3-胺的合成
通过将氩气鼓泡到5-溴-3-(二氟甲基)-2-甲氧基吡啶(1g，4.20mmol)、二苯基甲亚胺(837.53mg，4.62mmol，775.49μL)、Xantphos(729.26mg，1.26mmol)、Pd2(dba)3(192.36mg，210.06μmol)和碳酸铯(4.11g，12.60mmol)于二噁烷(50mL)中的混合物若干分钟来将混合物脱气。在90℃、Ar气氛下，将反应混合物搅拌12h。将反应混合物冷却至室温且过滤。在真空中浓缩滤液且将残余物用水稀释。将混合物用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层用水稀释，经Na2SO4干燥，过滤且浓缩，以得到N-[5-(二氟甲基)-6-甲氧基-3-吡啶基]-1,1-二苯基-甲亚胺(1.65g，粗品)，其不经进一步纯化即用于下一步骤中。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)3.89(s,3H),6.69(t,1H),7.32(m,10H),7.74(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值338.2；实测值339.2；Rt＝1.549min。
步骤2：5-(二氟甲基)-6-甲氧基吡啶-3-胺的合成
将36％重量/重量盐酸水溶液(8.00g，219.41mmol，10mL)添加到N-[5-(二氟甲基)-6-甲氧基-3-吡啶基]-1,1-二苯基-甲亚胺(1.65g，4.88mmol)于THF(20mL)和水(10mL)中的溶液中。将所得混合物在20℃下搅拌15h。然后，将其用水(20ml)稀释且用MTBE(2x20ml)萃取。收集有机层且丢弃。将水层用固体K2CO3碱化至pH≈10-11且用DCM(4x10 ml)萃取。将合并的DCM层经K2CO3干燥且在减压下浓缩，得到呈红色油状物的5-(二氟甲基)-6-甲氧基吡啶-3-胺(0.64g，3.68mmol，75.36％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)3.52(bds,2H),3.89(s,3H),6.77(t,1H),7.25(s,1H),7.72(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值174.2；实测值175.2；Rt＝0.744min。
步骤3：N-(5-(二氟甲基)-6-甲氧基吡啶-3-基)-2-(2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1057)的合成
在室温下将5-(二氟甲基)-6-甲氧基吡啶-3-胺(0.05g，287.11μmol)、HATU(109.17mg，287.11μmol)和TEA(29.05mg，287.11μmol，40.02μL)混合于无水DMF(5mL)中且将所得混合物搅拌15min。向其中添加2-[(2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酸(76.17mg，287.11μmol)且将所得混合物在室温下搅拌过夜。将所得混合物倒入到水中，用EtOAc萃取3次，将合并的有机物用水、盐水洗涤且蒸发。使残余物经历HPLC(第1次运行：45-70％0.5-6.5min水-MeCN；流速30ml/min(装载泵4ml/min；MeCN)；柱SunFireC18100x19 mm 5um(R)，第2次运行：50-100％0.5-6.5min水-MeOH；流速30ml/min(装载泵4ml/min MeOH)；柱xbridge C18100x19mm 5um(R))。获得呈黄色胶状物的N-[5-(二氟甲基)-6-甲氧基-3-吡啶基]-2-[(2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(63.5mg，150.68μmol，52.48％产率)。
化合物1057：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.01(d,3H),1.32(m,1H),1.66(m,1H),1.91(m,1H),2.03(m,1H),2.17(m,1H),3.21(m,1H),3.48(m,1H),3.92(s,3H),5.48(m,1H),7.03(m,1H),7.21(m,2H),7.35(m,2H),8.23(m,1H),8.55(m,1H),11.12(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值421.2；实测值422.2；Rt＝3.962min。
实施例724.N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物989)的合成
步骤1.3-环丙基吡啶-2-胺的合成
向3-溴吡啶-2-胺(50g，289.00mmol)于甲苯(500mL)和水(100mL)中的溶液中添加环丙基硼酸(32.27g，375.70mmol)、三环己基膦(8.10g，28.90mmol)、无水磷酸钾(184.03g，867.00mmol)和乙酸钯(II)(3.24g，14.45mmol)。将反应混合物用Ar吹扫2min且加热至90℃达16h且随后在真空中浓缩至干。将所得黏性物质用水稀释且用MTBE(3x500mL)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥且在真空中浓缩至干。获得呈棕色油状物的3-环丙基吡啶-2-胺(59g，粗品)，其不经进一步纯化即用于下一步骤中。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.57(m,2H),0.92(m,2H),1.61(m,1H),4.88(brs,2H),6.58(m,1H),7.23(m,1H),7.94(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值134,1；实测值135.2；Rt＝0.609min。
步骤2.5-溴-3-环丙基吡啶-2-胺的合成
将NBS(50.87g，285.81mmol，24.22mL)分批添加到3-环丙基吡啶-2-胺(59g，285.81mmol)于无水DCM中的溶液中且将反应混合物在室温下搅拌3h。将其用水(1×)洗涤且将水层用二氯甲烷(3×)再萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤(1×)且干燥(Na2SO4)。在减压下移除溶剂，以得到残余物，其通过CC(Interchim；800g SiO2，氯仿/乙腈，其中乙腈为0～40％，流速＝150mL/min，Rv＝5-6CV)进行纯化，以得到呈棕色固体的5-溴-3-环丙基吡啶-2-胺(30.4g，142.67mmol，49.92％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.59(m,2H),0.94(m,2H),1.59(m,1H),4.78(brs,2H),7.32(s,1H),7.96(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值212.1；实测值213.2；Rt＝0.834min。
步骤3.6-[5-[叔丁氧基羰基(甲基)氨基]-2-吡啶基]-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
在室温下将氨(93.66mg，5.50mmol)鼓泡穿过2-[(2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(1.91g，5.50mmol)(如上文所述制备)于MeOH(50mL)中的溶液。1h之后，将所得混合物蒸发至干且与苯一起再蒸发。获得呈白色半固体的2-[(2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(1.35g，粗品)。
1H NMR(500MHz,DMSO)δ(ppm)0.98(m,3H),1.32(m,1H),1.65-1.97(m,3H),2.60(m,1H),3.14(d,1H),3.39-3.96(m,1H),5.04and 5.51(two singles rotamers,1H),7.21(m,3H),7.29(m,1H),7.72(m,1H),8.21(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值264.1；实测值265.2；Rt＝2.369min。
步骤4.N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物989)的合成
将2-[(2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.1g，378.37μmol)、5-溴-3-环丙基吡啶-2-胺(120.93mg，567.55μmol)、铜(12.02mg，189.18μmol)、碘化铜(I)(7.21mg，37.84μmol，1.28μL)、(S,S)-(+)-N,N'-二甲基-1,2-环己烷二胺(5.38mg，37.84μmol，5.97μL)和碳酸钾(104.59mg，756.73μmol，45.67μL)一起混合于甲苯(12mL)中。将氩气流鼓泡穿过反应混合物达2min，此后将其在密封烧瓶中在105℃下搅拌18h。然后，将其用乙酸乙酯(20ml)和5％ NH3溶液(15ml)稀释，通过弗罗里垫过滤所得双相混合物。将有机层分离，经Na2SO4干燥且在减压下浓缩。通过HPLC(35-60％0.5-6.5min水-乙腈；流速30ml/min(装载泵4ml/min乙腈)；柱SunFireC18 100x19 mm5um(R))纯化残余物，得到呈黄色胶状物的N-(6-氨基-5-环丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(2.7mg，6.81μmol，1.80％产率)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值396.2；实测值397.2；Rt＝2.41min。
实施例725.N-(6-氨基-5-(二氟甲氧基)吡啶-3-基)-2-(2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1026)的合成
步骤1：5-溴-3-(二氟甲氧基)吡啶-2-胺的合成
向3-(二氟甲氧基)吡啶-2-胺(3g，18.74mmol)于MeCN(25mL)中的搅拌溶液中添加N-溴琥珀酰亚胺(3.50g，19.67mmol，1.67mL)。将所得混合物在25℃下搅拌12h。在减压下蒸发MeCN。将残余物用水(50ml)稀释且用EtOAc(2*50ml)萃取。将合并的有机层用水和盐水洗涤，经Na2SO4干燥。在减压下蒸发EtOAc，以得到5-溴-3-(二氟甲氧基)吡啶-2-胺(4g，16.74mmol，89.32％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)4.75(bds,2H),6.52(t,1H),7.41(s,1H),7.98(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值239.2；实测值240.2；Rt＝1.192min。
步骤2：N-(6-氨基-5-(二氟甲氧基)吡啶-3-基)-2-(2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物1026)的合成
在装备有回流冷凝器和玻璃塞的100ml单颈圆底烧瓶中将5-溴-3-(二氟甲氧基)吡啶-2-胺(0.2g，836.76μmol)、2-[(2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(221.15mg，836.76μmol)(如上文所示制备)、碘化铜(I)(31.87mg，167.35μmol，5.67μL)、无水碳酸钾99％(231.30mg，1.67mmol，101.00μL)、N1,N2-二甲基环己烷-1,2-二胺(23.80mg，167.35μmol)、铜(2.66mg，41.84μmol)和MeCN(10mL)的混合物抽真空然后用氩气回填。然后将反应混合物在氩气、100℃下搅拌36h。然后通过反相HPLC(50-65％0-6minH2O/MeOH/0.1％ NH4OH，流速：30ml/min(装载泵4ml/min MeOH)目标质量423柱：YMC TriartC18 100x20 mm，5um)纯化反应混合物，以得到N-[6-氨基-5-(二氟甲氧基)-3-吡啶基]-2-[(2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(19mg，44.98μmol，5.38％产率)。
化合物1026：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98(d,3H),1.31(m,1H),2.01(m,3H),3.20(m,1H),3.65(m,2H),5.53(m,1H),5.98(m,2H),7.18(m,1H),7.21(m,2H),7.31(m,2H),7.68(m,1H),8.07(m,1H),10.74(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值422.2；实测值423.2；Rt＝2.925min。
实施例726.N-(6-氨基-5-异丙基吡啶-3-基)-2-(2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物993)的合成
步骤1：5-溴-3-异丙基吡啶-2-胺的合成
将NBS(1.37g，7.71mmol，653.42μL)一次性添加到3-异丙基吡啶-2-胺(1g，7.34mmol)于无水DCM(25mL)中的溶液中且将反应混合物在室温下搅拌2h。将其用水洗涤且将水层用二氯甲烷再萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤且经Na2SO4干燥。在减压下移除溶剂，以得到呈棕色固体的粗品5-溴-3-异丙基吡啶-2-胺(1.44g，粗品)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.26(d,6H),2.73(m,1H),5.02(bds,2H),7.45(s,1H),7.96(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值215.2；实测值216.2；Rt＝0.902min。
步骤2：N-(6-氨基-5-异丙基吡啶-3-基)-2-(2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物993)的合成
将2-[(2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.1g，378.37μmol)、5-溴-3-异丙基吡啶-2-胺(81.38mg，378.37μmol)、铜(12.02mg，189.18μmol)、碘化铜(I)(7.21mg，37.84μmol，1.28μL)、(S,S)-(+)-N,N'-二甲基-1,2-环己烷二胺(5.38mg，37.84μmol，5.97μL)和碳酸钾(104.59mg，756.73μmol，45.67μL)一起混合于甲苯(12mL)中。将氩气流鼓泡穿过反应混合物达2min，此后将其在密封烧瓶中在105℃下搅拌18h。然后，将其用乙酸乙酯(20ml)和5％ NH3水溶液(15ml)稀释。通过硅藻土垫过滤所得双相混合物。将有机层分离，经Na2SO4干燥且在减压下浓缩。通过HPLC(40-70 0.5-6.5min水-MeCN；流速30ml/min(装载泵4ml/min；MeCN)；柱SunFireC18100x19 mm 5um(R))纯化残余物，得到呈黄色胶状物的N-(6-氨基-5-异丙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(7.4mg，18.57μmol，4.91％产率)。获得两种级分：第1级分-1.7mg(通过LCMS为93.81％)；第2级分-5.7mg(96.8％反式；3.2％顺式)。
化合物993：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.96-1.04(m,3H),1.06-1.15(m,6H),1.26-1.38(m,1H),1.59-1.71(m,1H),1.79-1.94(m,1H),1.96-2.12(m,1H),2.13-2.26(m,1H),2.67-2.74(m,0.3H),2.84-2.91(m,1H),3.17-3.22(m,0.7H),3.44-4.05(m,1H),5.11-5.60(m,1H),5.61-5.71(m,2H),7.17-7.24(m,2H),7.31-7.41(m,2H),7.47-7.57(m,1H),7.98-8.11(m,1H),10.39-1化合物0.69(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值398.2；实测值399.2；Rt＝2.635min。
实施例727.N-(5-乙基-6-甲基吡啶-3-基)-2-(2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物779)的合成
步骤1：2-(3-溴-5-硝基吡啶-2-基)丙二酸二乙酯的合成
将丙二酸二乙酯(20.24g，126.35mmol，19.09mL)逐滴添加到于矿物油中的氢化钠(油分散体)60％分散物(5.81g，145.30mmol，60％纯度)于DMF(200mL)中的悬浮液中。在H2逸出停止之后，在30分钟期间分批添加3-溴-2-氯-5-硝基吡啶(15g，63.17mmol)。将所得混合物在20℃下搅拌15h。然后，将其倒入到硫酸氢钠单水合物(21.81g，157.94mmol)于水(800mL)中的冰冷溶液中。将所得混合物用乙酸乙酯(2x250 ml)萃取。将有机层分离且依次用水(2x150 ml)和盐水(100ml)洗涤，经Na2SO4干燥且在减压下浓缩。将残余物用冷(-5-0℃)己烷(150ml)稀释。通过过滤收集沉淀的橙色固体且干燥，得到2-(3-溴-5-硝基-2-吡啶基)丙二酸二乙酯(21.8g，60.36mmol，95.55％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)1.30(t,6H),4.31(m,4H),5.28(s,1H),8.68(s,1H),9.33(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值361.2；实测值362.2；Rt＝1.373min。
步骤2：3-溴-2-甲基-5-硝基吡啶的合成
将2-(3-溴-5-硝基-2-吡啶基)丙二酸二乙酯(21.8g，60.36mmol)悬浮于硫酸(10％)(214.00g，218.19mmol，200mL，10％纯度)中且将所得混合物在110℃下搅拌5h。然后，将其冷却且用DCM(3x60 ml)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥且在减压下浓缩，得到3-溴-2-甲基-5-硝基吡啶(12.5g，57.60mmol，95.42％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)2.78(s,3H),8.58(s,1H),9.22(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值217.2；实测值218.2；Rt＝1.188min。
步骤3：2-甲基-5-硝基-3-乙烯基吡啶的合成
将碳酸钠(7.33g，69.12mmol，2.90mL)添加到3-溴-2-甲基-5-硝基吡啶(6g，27.65mmol)和三氟(乙烯基)硼氢化物(5.18g，38.71mmol，K+)于二噁烷(80mL)和水(30mL)中的溶液中。将反应烧瓶抽真空且用氩气再填充3次。然后，在氩气流下添加Pd(dppf)Cl2*DCM(903.11mg，1.11mmol)。在惰性气氛下将所得混合物在90℃下搅拌24h。然后，将其在减压下浓缩且将残余物用50:50混合物己烷/MTBE(100ml)萃取。通过短硅胶垫过滤所获得的溶液且在减压下蒸发，得到2-甲基-5-硝基-3-乙烯基吡啶(3.2g，19.49mmol，70.51％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)2.69(s,3H),5.61(d,1H),5.86(d,1H),6.92(m,1H),8.47(s,1H),9.20(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值164.2；实测值165.2；Rt＝1.132min。
步骤4：5-乙基-6-甲基吡啶-3-胺的合成
将钯(10％于碳上)(400mg，375.87μmol，10％纯度)添加到2-甲基-5-硝基-3-乙烯基吡啶(3.2g，19.49mmol)于MeOH(60mL)中的溶液中。将反应烧瓶抽真空且用来自所附气球的氢气(785.88mg，389.86mmol)回填。将所得混合物在20℃下搅拌16h。然后，过滤出催化剂且在减压下浓缩滤液，得到5-乙基-6-甲基吡啶-3-胺(2.6g，19.09mmol，97.93％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.15(t,3H),2.38(s,3H),2.52(m,2H),3.45(m,2H),6.77(s,1H),7.82(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值136.2；实测值137.2；Rt＝0.568min。
步骤5：2-((5-乙基-6-甲基吡啶-3-基)氨基)-2-氧代乙酸苯甲酯的合成
在0℃下，将2-氯-2-氧代乙酸苯甲酯(4.17g，21.00mmol)于MeCN(15mL)中的溶液逐滴添加到5-乙基-6-甲基吡啶-3-胺(2.6g，19.09mmol)和N,N-二异丙基乙胺(2.96g，22.91mmol，3.99mL)于MeCN(30mL)中的搅拌溶液中。使反应混合物升温至25℃且搅拌4h，然后在真空中蒸发。将残余物用水(60ml)稀释且搅拌0.5h。过滤沉淀，将其依次用水(2x30ml)和己烷(30ml)洗涤且风干，以得到呈淡棕色固体的2-[(5-乙基-6-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸苯甲酯(5.06g，16.96mmol，88.84％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.15(t,3H),2.41(s,3H),2.59(m,2H),5.33(s,2H),7.46(m,5H),7.88(s,1H),8.62(s,1H),10.94(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值298.2；实测值299.2；Rt＝1.002min。
步骤6：2-((5-乙基-6-甲基吡啶-3-基)氨基)-2-氧代乙酸的合成
将2-[(5-乙基-6-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸苯甲酯(5.06g，16.96mmol)和钯(10％于碳上)(0.6g，563.80μmol，10％纯度)于MeOH(100mL)中的混合物在氢气气氛、20℃下搅拌12h。然后，添加TEA(3.43g，33.92mmol，4.73mL)且继续搅拌5分钟。过滤出催化剂，且在减压下将滤液蒸发至干，得到2-[(5-乙基-6-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(5.06g，16.35mmol，96.42％产率，Et3N)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.13(t,3H),2.34(s,3H),2.52(m,2H),7.88(s,1H),8.59(s,1H),10.13(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值208.2；实测值209.2；Rt＝0.636min。
步骤7：N-(5-乙基-6-甲基吡啶-3-基)-2-(2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物779)的合成
向2-[(5-乙基-6-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(128mg，413.70μmol，Et3N)、(2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基哌啶(80mg，413.95μmol)和TEA(62.79mg，620.55μmol，86.49μL)于DMF(2mL)中的搅拌混合物中添加HATU(173.03mg，455.07μmol)。将所得反应混合物在20℃下搅拌4h。然后，使其经历HPLC(柱：YMC Triart C18 100x20mm，5um 50-90％0-5min；H2O-MeOH(0.1％ NH3)，流速：30ml/min)且随后使其经历手性HPLC(柱：Chiralpak AD-H(250x20 mm，5um)；流动相：己烷-IPA-MeOH，50-25-25；流速：12mL/min；柱温：24℃)，得到N-(5-乙基-6-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(96mg，250.35μmol，60.52％产率)。
化合物779：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.96-1.03(m,3H),1.08-1.17(m,3H),1.27-1.38(m,1H),1.59-1.71(m,1H),1.81-1.91(m,1H),1.98-2.13(m,1H),2.14-2.24(m,1H),2.36-2.42(m,3H),2.50-2.58(m,2H),2.70-3.25(m,1H),3.38-4.04(m,1H),5.07-5.62(m,1H),7.15-7.26(m,2H),7.31-7.42(m,2H),7.75-7.85(m,1H),8.37-8.57(m,1H),10.83-11.03(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值383.2；实测值384.2；Rt＝1.088min。
实施例728.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(5-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)噻吩-2-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物556和化合物577)的合成
步骤1：(5-(2-(2-(5-溴噻吩-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-3-甲基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
将2-(5-溴-2-噻吩基)-5-甲基哌啶(0.35g，1.35mmol)(如中间体3C的合成中所述制备)和2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(397.21mg，1.35mmol)混合于DMF(30mL)中。将反应悬浮液冷却至20℃且添加HATU(511.47mg，1.35mmol)，随后添加TEA(136.12mg，1.35mmol，187.49μL)，且在环境温度下搅拌15h。将反应混合物在真空中蒸发且倒入到水(200ml)中且用EtOAc(2x60 ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(2*30ml)洗涤，经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到产物N-[5-[[2-[2-(5-溴-2-噻吩基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.5g，930.29μmol，69.16％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.26(d,3H),1.49(s,9H),2.02(s,3H),2.27(m,4H),2.77(m,1H),3.69(m,1H),4.76(m,2H),6.71(m,2H),6.93(m,1H),8.04(m,1H),8.32(m,1H),9.20(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值537.2；实测值538.2；Rt＝1.443min。
步骤2：外消旋-(3-甲基-5-(2-((2R,5S)-5-甲基-2-(5-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)噻吩-2-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
将N-[5-[[2-[2-(5-溴-2-噻吩基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.5g，930.29μmol)和1-四氢吡喃-2-基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡唑(258.76mg，930.29μmol)一起混合于水(2mL)中。将所得混合物抽真空然后用氩气回填，将此操作重复三次，然后在氩气下添加水(2mL)中的碳酸钠(197.20mg，1.86mmol，77.95μL)和[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)与DCM的络合物(37.99mg，46.51μmol)。将反应混合物在氩气、100℃下搅拌18h，然后冷却且在真空中蒸发，将其倒入水(50ml)中且用EtOAc(2x20 ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(2*10ml)洗涤，经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到产物N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-[5-(2-四氢吡喃-2-基吡唑-3-基)-2-噻吩基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.63g，粗品)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.09(d,3H),1.23(s,9H),1.57(m,5H),2.02(s,3H),3.36(m,1H),3.68(m,4H),4.09(m,4H),4.36(m,2H),5.34(m,2H),6.93(m,2H),7.72(m,3H),8.04(m,1H),9.04(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值508.2；实测值509.2；Rt＝1.054min。
步骤3：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(5-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)噻吩-2-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物556和化合物577)的合成
将于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(2.40g，65.82mmol，3mL)添加到N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-[5-(2-四氢吡喃-2-基吡唑-3-基)-2-噻吩基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.63g，1.03mmol)于MeOH(20mL)中的溶液中。将反应混合物在25℃下搅拌14h，然后在真空中蒸发且通过制备型(50-100％0-9.5min水-MeOH(NH30.1％)，流速30ml/min)纯化0.36g所获得的粗产物，以得到产物N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[5-(1H-吡唑-5-基)-2-噻吩基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.0159g，37.45μmol，3.62％产率)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-[5-(1H-吡唑-5-基)-2-噻吩基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.0045g，10.60μmol，1.02％产率)。
化合物556：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.75-1.00(m,3H),1.27-1.43(m,1H),1.64-1.93(m,2H),1.97-2.04(m,4H),2.05-2.29(m,1H),2.59-2.96(m,1H),3.44-4.23(m,1H),5.36-5.81(m,3H),6.86-6.93(m,1H),7.03-7.10(m,1H),7.45-7.52(m,1H),7.66-7.75(m,1H),7.97-8.06(m,2H),10.43-10.53(m,1H),12.95(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值424.2；实测值425.2；Rt＝0.873min。
化合物577：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.84(d,3H),1.85(m,1H),1.97(m,1H),2.00(s,3H),2.17(m,1H),3.03(m,1H),3.13(m,1H),5.68(m,2H),5.91(m,1H),6.53(d,1H),6.85(d,1H),7.01(d,1H),7.59(m,1H),7.70(s,1H),8.00(s,1H),8.16(d,1H),8.88(t,1H),10.34(s,1H),12.96(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值424.2；实测值425.2；Rt＝2.092min。
实施例729.2-(1'-乙酰基-5-甲基-[2,4'-联哌啶]-1-基)-N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺(化合物737)、N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-[2,4'-联哌啶]-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物708)和1-(2-((6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)氨基)-2-氧代乙酰基)-N,5-二甲基-[2,4'-联哌啶]-1'-甲酰胺(化合物781)的合成
步骤1：外消旋-4-((2R,5S)-1-(2-((6-((叔丁氧基羰基)氨基)-5-甲基吡啶-3-基)氨基)-2-氧代乙酰基)-5-甲基哌啶-2-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸苯甲酯的合成
在室温下将HATU(3.39g，8.91mmol)分批添加到2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(2.63g，8.91mmol)、4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸苯甲酯(7g，8.91mmol)和DIPEA(6.91g，53.43mmol，9.31mL)于DMF(100mL)中的悬浮液中。将澄清溶液在25℃下搅拌32h且在真空中蒸发溶剂。将残余物溶解于EtOAc(300mL)中，用水(5x100 mL)洗涤，在真空中蒸发且通过硅胶快速色谱使用0至100％ MTBE-氯仿梯度洗脱来纯化，以得到4-[(2R,5S)-1-[2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酰基]-5-甲基-2-哌啶基]-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸苯甲酯(3.3g，5.58mmol，62.63％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.06(d,3H),1.39(s,9H),2.14(m,8H),2.36(m,4H),3.89(m,4H),4.36(m,1H),5.06(s,2H),5.86(m,1H),7.31(m,5H),7.86(m,1H),8.38(m,1H),9.03(m,1H),10.89(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值591.2；实测值592.2；Rt＝1.390min。
步骤2：外消旋-(3-甲基-5-(2-((2R,5S)-5-甲基-[2,4'-联哌啶]-1-基)-2-氧代乙酰胺基)吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
向4-[(2R,5S)-1-[2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酰基]-5-甲基-2-哌啶基]-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸苯甲酯(3.5g，5.92mmol)于MeOH(350mL)中的溶液中添加钯(10％于碳上)(629.50mg，5.92mmol)。在氢气气氛(1巴)下进行反应且在45℃下剧烈搅拌。48h之后，通过过滤移除催化剂，且在真空中浓缩滤液，以得到N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(4-哌啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(2.5g，5.44mmol，91.96％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.92(d,3H),1.36(s,3H),1.41(s,9H),1.96(m,4H),2.19(m,4H),2.96(m,3H),3.14(m,4H),4.26(m,1H),7.91(m,2H),8.38(m,1H),9.02(m,2H),11.05(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值459.2；实测值460.2；Rt＝1.014min。
步骤3：2-(1'-乙酰基-5-甲基-[2,4'-联哌啶]-1-基)-N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺(化合物737)的合成
在室温下将HATU(413.67mg，1.09mmol)分批添加到N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(4-哌啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.5g，1.09mmol)、乙酸(65.33mg，1.09mmol，62.22μL)和DIPEA(843.64mg，6.53mmol，1.14mL)于DMF(50mL)中的悬浮液中。将澄清溶液在25℃下搅拌32h且在真空中蒸发溶剂。通过RP-HPLC(柱：YMC-Actus Triart C18 100*20mml.D.S-5um；25-65％0-5min水-MeOH(NH30.1％)，流速30ml/min)纯化残余物，以得到N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(1-乙酰基-4-哌啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(26mg，51.83μmol，4.76％产率)和化合物737 2-[(2R,5S)-2-(1-乙酰基-4-哌啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(222mg，552.93μmol，50.82％产率)。
化合物737：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.94(m,3H),0.96(m,1H),1.33(m,1H),1.61(m,2H),1.85(m,2H),1.95(m,7H),2.11(m,2H),2.91(m,3H),3.70(m,3H),4.05(m,1H),4.36(m,1H),5.59(s,2H),7.44(m,1H),7.97(m,1H),10.28(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值401.2；实测值402.2；Rt＝1.215min。
步骤4：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-[2,4'-联哌啶]-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物708)的合成
在室温下将于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(1.98g，7.62mmol，1.89mL，14％纯度)小心添加到N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(4-哌啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.35g，761.56μmol)于DCM(3.5mL)中的溶液中。然后将反应混合物在室温下搅拌12h且在真空中蒸发溶剂。使残余物经历RP-HPLC(柱：YMCTriart C18 100x20 mm，5um；以40-60％0-5min 0.1％NH3-MeOH为流动相)，以得到化合物708N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(4-哌啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(62mg，172.48μmol，22.65％产率)。
化合物708：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.93(m,5H),1.27(m,1H),1.41(m,1H),1.58(m,3H),1.85(m,4H),2.00(m,3H),2.37(m,2H),2.88(m,3H),3.46(m,1H),4.03(m,1H),5.58(m,2H),7.45(m,1H),7.98(m,1H),10.27(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值359.2；实测值360.2；Rt＝0.997min。
步骤5：1-(2-((6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)氨基)-2-氧代乙酰基)-N,5-二甲基-[2,4'-联哌啶]-1'-甲酰胺(化合物781)的合成
在室温下将DIPEA(140.61mg，1.09mmol，189.50μL)分批添加到N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(4-哌啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.5g，1.09mmol)、DIPEA(140.61mg，1.09mmol，189.50μL)于ACN(50mL)中的悬浮液中。将澄清溶液在25℃下搅拌18h且在真空中蒸发溶剂。通过RP-HPLC(柱：YMC-ActusTriart C18 100*20mml.D.S-5um；以0-5min 30-50％水-MeOH(NH3 0.1％)，流速30ml/min为流动相，然后另一个柱：C18，以水-ACN 5-95％30ml/min为流动相)纯化残余物，以得到化合物7814-[(2R,5S)-1-[2-[(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酰基]-5-甲基-2-哌啶基]-N-甲基哌啶-1-甲酰胺(38mg，91.23μmol，8.39％产率)。
化合物781：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.74-0.92(m,2H),0.92-0.97(m,3H),1.22-1.32(m,1H),1.38-1.48(m,1H),1.48-1.74(m,3H),1.74-1.99(m,3H),1.99-2.08(m,4H),2.51-2.57(m,4H),2.83-3.28(m,1H),3.32-3.49(m,1H),3.84-4.14(m,3H),5.55-5.63(m,2H),6.29-6.37(m,1H),7.40-7.49(m,1H),7.94-8.02(m,1H),10.24-10.36(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值416.2；实测值417.2；Rt＝1.658min。
实施例730.外消旋-2-[(2R,5S)-2-[4-(乙酰胺基甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物1036)的合成
步骤1：(2R,5S)-2-(4-氰基苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将98+％六氰基高铁酸钾(II)三水合物(741.85mg，1.01mmol，401.00μL)和乙酸钾(24.76mg，252.27μmol，15.77μL)添加到(2R,5S)-2-(4-溴苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(715mg，2.02mmol)于二噁烷(5mL)和水(5mL)中的溶液中。将反应烧瓶抽真空且用氩气再填充3次。在氩气流下向其中添加XPhos-Pd-G3(17.08mg，20.18μmol)和XPhos(9.62mg，20.18μmol)且将所得混合物在100℃下搅拌2h。然后，在减压下移除挥发物且将残余物再溶解于乙酸乙酯(20ml)中。通过短硅胶垫过滤此溶液且在真空中蒸发，得到(2R,5S)-2-(4-氰基苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(887mg，粗品)。
1H NMR(CDCl3,500MHz):1.05(d,3H),1.30(m,1H),1.43(s,9H),1.65(m,H),1.84(m,1H),1.96(m,1H),2.15(m,1H),2.99(m,1H),3.70(m,1H),5.28(s,1H),7.34(m,2H),7.62(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值300.2；实测值301.8；Rt＝1.619min。
步骤2：外消旋-(2R,5S)-2-[4-(氨基甲基)苯基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将外消旋-(2R,5S)-2-(4-氰基苯基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.9g，3.00mmol)添加到雷氏镍(149.80μmol)于MeOH(20mL)中的悬浮液中且在室温下、在高压釜中、在氢气气氛下搅拌2h。在反应完成之后，过滤出混合物且在减压下蒸发，以得到(2R,5S)-2-[4-(氨基甲基)苯基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1g，粗品)，其不经纯化即用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值247.0；实测值247.0；Rt＝1.573min。
步骤3：外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[4-[[(2,2,2-三氟乙酰基)氨基]甲基]苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将外消旋-(2R,5S)-2-[4-(氨基甲基)苯基]-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1g，3.28mmol)溶解于DCM(20mL)中且冷却至-30℃，随后以逐滴方式添加三乙胺(498.59mg，4.93mmol，686.77μL)和TFAA(827.91mg，3.94mmol，555.65μL)。再搅拌15min之后，用H2O(2mL)淬灭，且将有机层用10％ NaHCO3水溶液洗涤。经Na2SO4干燥有机溶剂且在减压下蒸发，得到外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[4-[[(2,2,2-三氟乙酰基)氨基]甲基]苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.1g，2.75mmol，83.63％产率)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值300.2；实测值301.2；Rt＝1.602min。
步骤4：外消旋-2,2,2-三氟-N-[[4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]甲基]乙酰胺的合成
将外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-[4-[[(2,2,2-三氟乙酰基)氨基]甲基]苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.1g，2.75mmol)溶解于DCM(30mL)中，随后添加TFA(3.13g，27.47mmol，2.12mL)且再搅拌12h。在反应完成之后，在减压下蒸发有机溶剂且将混合物与甲苯(100mL)一起再蒸发，以得到粗品外消旋-2,2,2-三氟-N-[[4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]甲基]乙酰胺(1.3g，粗品，TFA)，其不经纯化即用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值300.2；实测值301.0；Rt＝0.795min。
步骤5：外消旋-N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-[[(2,2,2-三氟乙酰基)氨基]甲基]苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
在轻微加热下，将2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(287.67mg，974.21μmol)、外消旋-2,2,2-三氟-N-[[4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]甲基]乙酰胺(292.57mg，974.21μmol)和DIPEA(377.73mg，2.92mmol，509.07μL)溶解于DMSO(6mL)中。在剧烈搅拌和偶尔加热下，小批量添加HATU(444.51mg，1.17mmol)。在反应完成之后，通过HPLC纯化混合物，以得到外消旋产物，使其经历手性HPLC，以得到外消旋-N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-[[(2,2,2-三氟乙酰基)氨基]甲基]苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(60mg，103.88μmol，10.66％产率)。
HPLC条件：(42％0.5-6.5min水-乙腈；流速30mL/min(装载泵4mL/min乙腈)；目标质量577；柱SunFireC18 100x19 mm 5um(R))
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值577.2；实测值578.2；Rt＝3.417min。
步骤6：外消旋-N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-[4-(氨基甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将外消旋-N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[4-[[(2,2,2-三氟乙酰基)氨基]甲基]-苯基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(60mg，103.88μmol)溶解于MeOH(5mL)/H2O(1mL)混合物中，随后添加99％无水碳酸钾(71.78mg，519.40μmol，31.35μL)。在搅拌72h之后，将有机溶剂蒸发至干且将粗残余物分配于DCM(6mL)与水(1mL)之间。将水层丢弃；将有机层分成2个部分，其用于合成2个目标。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值481.2；实测值482.4；Rt＝0.894min。
步骤7：外消旋-N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-[4-(乙酰胺基甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将先前获得的外消旋-N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-[4-(氨基甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(25mg，51.91μmol)于DCM中的溶液冷却至0℃且一次性添加乙酸酐(5.30mg，51.91μmol，4.91μL)。在反应完成之后，将有机溶剂蒸发至干且粗残余物不经纯化即用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值523.2；实测值524.4；Rt＝0.674min。
步骤8：外消旋-2-[(2R,5S)-2-[4-(乙酰胺基甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物1036)的合成
将外消旋-N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-[4-(乙酰胺基甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(25mg，47.74μmol)溶解于二噁烷(2mL)和H2O(0.5mL)中且在100℃下搅拌3h。在反应完成之后，使粗品RM经历HPLC(12-14％0.5-6.5min水-乙腈+NH3；流速30mL/min(装载泵4mL/min乙腈)；目标质量423；柱XBridge 100x19 mm 5um(R))，以得到外消旋-2-[(2R,5S)-2-[4-(乙酰胺基甲基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(7mg，16.53μmol，34.62％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.95-1.02(m,3H),1.26-1.37(m,1H),1.59-1.67(m,1H),1.79-1.87(m,4H),1.97-2.10(m,4H),2.15-2.25(m,1H),2.66-3.21(m,1H),3.40-4.03(m,1H),4.18-4.23(m,2H),5.07-5.56(m,1H),5.56-5.65(m,2H),7.20-7.31(m,4H),7.41-7.52(m,1H),7.93-8.04(m,1H),8.26-8.32(m,1H),10.47(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值423.2；实测值424.4；Rt＝1.634min。
实施例731.外消旋-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(3-噻吩基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物977)的合成
步骤1：N-[2-甲基-5-氧代-5-(3-噻吩基)戊基]氨基甲酸叔丁酯的合成
在-78℃、Ar气氛下，向3-溴噻吩(5g，30.67mmol，2.91mL)于THF(50mL)中的溶液中添加正丁基锂(8.54g，30.67mmol，12.33mL，23％纯度)。1h之后，在-78℃下，将所得混合物逐滴添加到5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(5.45g，25.56mmol)于THF中的溶液中。此后，使其升温至室温。将所得混合物用NH4Cl水溶液淬灭，将水用EtOAc萃取，将合并的有机物用盐水洗涤，干燥且蒸发。获得呈淡黄色油状物的N-[2-甲基-5-氧代-5-(3-噻吩基)戊基]氨基甲酸叔丁酯(6.55g，粗品)且其不经进一步纯化即用于下一步骤中。
步骤2：5-甲基-2-(3-噻吩基)哌啶的合成
将N-[2-甲基-5-氧代-5-(3-噻吩基)戊基]氨基甲酸叔丁酯(6.55g，22.02mmol)溶解于TFA(7.53g，66.07mmol，5.09mL)中且将所得反应混合物搅拌1小时。1小时之后，将50％ NaOH水溶液添加到反应混合物中，直到pH＝13-14。将所得混合物用DCM(4x 20mL)萃取。将合并的有机相经MgSO4干燥且在减压下浓缩。将所获得的残余物溶解于水(25mL)和MeOH(100mL)中且分批添加硼氢化钠(833.19mg，22.02mmol，778.69μL)。将所得反应混合物在氩气气氛、21℃下搅拌16小时。16小时之后，将反应混合物用1-2M HCl酸化，直到pH为1-3且搅拌30分钟。然后，添加50％ NaOH水溶液，直到pH＝13-14。将所得混合物用DCM(4x100mL)萃取。将合并的有机相经Na2SO4干燥且在减压下浓缩。通过CC(Companioncombiflash；220g SiO2，氯仿/乙腈，其中乙腈为10至100％，另外为乙腈/甲醇，其中甲醇为0至25％，流速＝85mL/min，Rv＝14CV)纯化残余物，以获得呈淡黄色油状物的5-甲基-2-(3-噻吩基)哌啶(0.15g，827.37μmol，3.76％产率)。粗产物不经任何进一步纯化即用于下一步反应。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值181.2；实测值182.0；Rt＝0.637min。
步骤3：2-[5-甲基-2-(3-噻吩基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酸甲酯的合成
在0℃下，向5-甲基-2-(3-噻吩基)哌啶(0.15g，827.37μmol)和三乙胺(100.47mg，992.84μmol，138.38μL)于DCM(25mL)中的溶液中添加2-氯-2-氧代乙酸甲酯(111.49mg，910.11μmol)。在室温下搅拌1h之后，将所得混合物过滤且蒸发至干，以得到呈微棕色油状物的2-[5-甲基-2-(3-噻吩基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酸甲酯(200mg，粗品)，其不经进一步纯化即用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值267.2；实测值268.2；Rt＝1.305min。
步骤4：N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-(3-噻吩基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
向2-[5-甲基-2-(3-噻吩基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酸甲酯(200mg，748.10μmol)于MeOH(5mL)中的溶液中添加氢氧化钠珠粒(29.92mg，748.10μmol，14.05μL)且将所得混合物搅拌1h。然后，蒸发溶剂且将残余物与EtOH一起再蒸发。此后，将固体溶解于DMF中且添加HATU(284.45mg，748.10μmol)，随后添加N-(5-氨基-3-甲基-2-吡啶基)氨基甲酸叔丁酯(167.03mg，748.10μmol)且将所得混合物搅拌12h。将所得混合物倒入到水中，用EtOAc萃取3次，将合并的有机物用水、盐水洗涤且蒸发。使残余物经历HPLC(45-70％0.5-6.5min水-乙腈；流速30mL/min(装载泵4mL/min乙腈)；柱SunFireC18100x19 mm 5um(R))，以得到呈灰白色固体的N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-(3-噻吩基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(91.8mg，200.19μmol，26.76％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值458.2；实测值459.2；Rt＝3.517min。
步骤5：外消旋-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(3-噻吩基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物977)的合成
在21℃下，向N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-(3-噻吩基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(91.8mg，200.19μmol)于二噁烷(5mL)中的溶液中添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(36.49mg，1.00mmol，45.62μL)。使所得混合物搅拌21h。将所得混合物蒸发至干且使其经历HPLC(0-30％0.5-6.5min水-乙腈；流速30mL/min(装载泵4mL/min水)；柱SunFireC18 100x19 mm 5um(R))。获得呈黄色固体的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(3-噻吩基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(17.2mg，47.98μmol，23.97％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.97-1.04(m,3H),1.31-1.42(m,1H),1.65-1.80(m,1H),1.82-1.93(m,1H),1.96-2.09(m,1H),2.11-2.14(m,3H),2.73-3.16(m,1H),3.39-4.01(m,2H),5.07-5.64(m,1H),6.96-7.05(m,1H),7.05-7.33(m,2H),7.34-7.41(m,1H),7.51-7.59(m,1H),7.74(s,1H),8.17-8.23(m,1H),10.75-11.03(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值358.2；实测值359.2；Rt＝2.187min。
实施例732.2-乙基-5-(2-(5-甲基-2-苯基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物747)的合成
步骤1：5-氨基-2-乙基烟酸甲酯的合成
在20℃下，向5-氨基-2-乙基吡啶-3-甲酸(1.05g，6.32mmol)于MeOH(20mL)中的搅拌溶液中逐滴添加亚硫酰氯(826.89mg，6.95mmol，504.20μL)。将混合物在70℃下回流16h。将混合物冷却，在真空中浓缩，以得到5-氨基-2-乙基吡啶-3-甲酸甲酯(1.25g，5.77mmol，91.31％产率，HCl)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.16(t,3H),3.06(m,2H),3.85(s,3H),6.45(m,2H),8.01(s,1H),8.04(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值180.2；实测值181.2；Rt＝0.465min。
步骤2：5-氨基-2-乙基烟酰胺的合成
将5-氨基-2-乙基吡啶-3-甲酸甲酯(1.1g，5.08mmol，HCl)溶解于28％ NH3氢氧化铵(5.40g，154.07mmol，6mL)中且在70℃下加热过夜。将反应混合物蒸发且使其经历HPLC(2-10min 0-60％acn/H2O 30ml/min(装载泵4ml MeCN)柱：SunFire 100*19mm，5微米)纯化粗产物。获得5-氨基-2-乙基吡啶-3-甲酰胺(220mg，1.33mmol，26.23％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.12(t,3H),2.68(m,2H),5.28(m,2H),6.89(s,1H),7.32(s,1H),7.78(s,1H),7.92(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值165.2；实测值166.2；Rt＝0.141min。
步骤3：2-乙基-5-(2-(5-甲基-2-苯基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物747)的合成
将5-氨基-2-乙基吡啶-3-甲酰胺(220mg，1.33mmol)、[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氧基锂(337.24mg，1.33mmol)、HATU(557.02mg，1.46mmol)和TEA(336.91mg，3.33mmol，464.06μL)混合于DMSO(4mL)中且搅拌1h。使DMSO中的溶液经历HPLC(2-10min 45-60％水/MeCN(装载泵4ml MeCN)柱：TRIART 100*20 5微米)。2-乙基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(303.3mg，768.89μmol，57.73％产率)。
化合物747：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98-1.03(m,3H),1.14(dt,3H),1.33(dd,1H),1.66(d,1H),1.87(d,1H),2.01-2.16(m,1H),2.17-2.29(m,1H),2.73-2.81(m,2H),3.22-3.26(m,1H),3.37-4.06(m,1H),5.09-5.64(m,1H),7.22-7.31(m,2H),7.33-7.43(m,3H),7.49-7.60(m,1H),7.84-7.94(m,1H),7.94-8.02(m,1H),8.66-8.78(m,1H),11.03-11.25(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值394.2；实测值395.2；Rt＝1.088min。
实施例733.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(2-(3,5-二氟苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物712和化合物734)的合成
步骤1：6-(3,5-二氟苯基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
将3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(5g，14.48mmol)、(3,5-二氟苯基)硼酸(2.29g，14.48mmol)和碳酸钠(4.60g，43.44mmol，1.82mL)添加到水(15mL)和二噁烷(45mL)的混合物中。将所得混合物抽真空然后用氩气回填，将此操作重复三次，然后在氩气下添加Pd(dppf)Cl2*DCM(591.19mg，723.94μmol)。将反应混合物在氩气、70℃下搅拌14h，然后冷却且过滤。将滤饼用1,4-二噁烷(2*20ml)洗涤且丢弃。在真空中蒸发滤液，以得到呈棕色油状物的6-(3,5-二氟苯基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(4g，12.93mmol，89.31％产率)，其不经纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.89(d,3H),1.04(s,9H),1.81(m,1H),2.33(m,1H),2.96(m,1H),3.80(d,1H),5.46(m,1H),6.87(m,2H),7.06(m,1H),7.53(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值209.2；实测值210.2；Rt＝1.626min。
步骤2：6-(3,5-二氟苯基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶的合成
将6-(3,5-二氟苯基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(4g，12.93mmol)于TFA(22.12g，193.96mmol，14.94mL)中的溶液在25℃下搅拌1h，然后在真空中蒸发。将碎冰(15g)添加到残余物中且用10％氢氧化钠水溶液将pH调节至10。将所得混合物用二氯甲烷(2*30ml)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到呈棕色油状物的6-(3,5-二氟苯基)-3-甲基-1,2,3,4-四氢吡啶(2.5g，11.95mmol，92.41％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.93(d,3H),1.36(m,1H),1.77(m,2H),2.80(m,1H),3.21(m,1H),3.82(d,1H),4.31(m,1H),7.20(m,1H),7.34(m,1H),8.39(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值209.2；实测值210.2；Rt＝0.832min。
步骤3：2-(3,5-二氟苯基)-5-甲基哌啶的合成
在0℃下，将硼氢化钠(723.26mg，19.12mmol，675.94μL)一次性添加到6-(3,5-二氟苯基)-3-甲基-1,2,3,4-四氢吡啶(2g，9.56mmol)于MeOH(25mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在25℃下搅拌2h，然后在真空中蒸发。将残余物用水(20ml)稀释且用DCM(2*40ml)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发。使所获得的油状物经历HPLC(Waters Sunfire C18 19*100 5mkm柱且以H2O-MeOH+HCl为洗脱液混合物)，以得到2-(3,5-二氟苯基)-5-甲基哌啶(0.85g，3.43mmol，35.90％产率，HCl)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.88(d,3H),1.27(m,1H),1.84(m,3H),2.07(m,1H),2.62(m,1H),3.19(d,1H),4.18(m,1H),7.24(m,1H),7.42(m,2H),9.53(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值211.2；实测值212.2；Rt＝1.447min。
步骤4：(5-(2-(2-(3,5-二氟苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-3-甲基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
将DIPEA(615.66mg，4.76mmol，829.73μL)添加到相应2-(3,5-二氟苯基)-5-甲基哌啶(0.295g，1.19mmol，HCl)和2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(351.66mg，1.19mmol)于DMF(10mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU(498.10mg，1.31mmol)。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC(Waters SunfireC18 20*100 5mkm柱且以H2O-MeCN为洗脱液混合物)，以得到N-[5-[[2-[2-(3,5-二氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.32g，655.03μmol，55.00％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98(d,3H),1.25(m,2H),1.39(s,9H),1.59(m,1H),1.87(m,1H),2.04(m,1H),2.13(s,3H),3.24(m,1H),3.46(m,1H),5.51(m,1H),7.03(m,3H),7.88(m,1H),8.39(m,1H),9.03(m,1H),11.03(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值488.2；实测值489.2；Rt＝3.673min。
步骤5：手性分离
通过手性HPLC(柱：IC(250*20，5mkm)，以CO2-MeOH，55-45，15ml/min为流动相)分离对映异构体，以得到两种个别对映异构体E1N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(3,5-二氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(50.82mg，104.03μmol，15.88％产率)和E2 N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(3,5-二氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(32.01mg，65.52μmol，10％产率)。
E1于分析条件下(柱：IC，以CO2-MeOH，60-40，2ml/min为流动相)的保留时间为5.90min且E2的保留时间为4.60min。
E1：LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值488.2；实测值489.2；Rt＝1.478min。
E2：LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值488.2；实测值489.2；Rt＝1.479min。
步骤6：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(2-(3,5-二氟苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物712和化合物734)的合成
将N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(3,5-二氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(32.01mg，65.52μmol)和N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(3,5-二氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(50.82mg，104.03μmol)溶解于水(5mL)和二噁烷(2mL)的混合物中。然后，将反应混合物在100℃下搅拌17h。在反应完成(通过LCMS监测)之后，在减压下浓缩所得悬浮液。使所获得的固体经历HPLC(Waters Sunfire C18 20*100 5mkm柱且以H2O-MeOH(100-50％)+FA为洗脱液混合物)，以得到纯的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(3,5-二氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(10.7mg，27.55μmol，42.04％产率)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(3,5-二氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(24.7mg，63.59μmol，61.13％产率)。
化合物712：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99(m,3H),1.30(m,1H),1.61(m,1H),1.84(m,1H),2.00(m,4H),2.17(m,1H),2.72(m,1H),3.72(m,1H),5.57(m,3H),7.05(m,3H),7.45(m,1H),7.97(m,1H),10.52(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值388.2；实测值389.2；Rt＝2.308min。
化合物734：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.99(m,3H),1.31(m,1H),1.60(m,1H),1.86(m,1H),2.00(m,4H),2.19(m,1H),2.71(m,1H),3.62(m,1H),5.57(m,3H),7.05(m,3H),7.45(m,1H),7.97(m,1H),10.52(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值388.2；实测值389.2；Rt＝2.319min。
实施例734.5-(2-(5-甲基-2-(2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物329、化合物376、化合物345、化合物377)的合成
步骤1：3-甲基-6-(2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
将3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(4.5g，13.03mmol)、(2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)硼酸(2.78g，15.64mmol)和碳酸钠(4.14g，39.09mmol，1.64mL)添加到1,4-二噁烷(60mL)和水(20mL)的混合物中。将所得混合物抽真空然后用氩气回填，将此操作重复三次，然后在氩气下添加Pd(dppf)Cl2 DCM(425.33mg，521.23μmol)。将反应混合物在氩气、75℃下搅拌12h，然后冷却且过滤。将滤饼用1,4-二噁烷(2*20ml)洗涤且丢弃。在真空中蒸发滤液，且通过硅胶柱色谱，使用己烷/MTBE梯度(0-100％MTBE)纯化残余物，以得到呈淡黄色胶状物的3-甲基-6-(2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.1g，3.34mmol，25.62％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.02(d,3H),1.12(s,9H),1.48(d,3H),1.86(m,2H),2.39(d,1H),2.96(m,2H),3.30(m,1H),4.08(d,1H),4.93(m,1H),5.20(m,1H),6.67(d,1H),7.05(d,1H),7.09(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值229.2；实测值230.2；Rt＝1.798min。
步骤2：5-(2-(5-甲基-2-(2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物329、化合物376和化合物345、化合物377)的合成
在25℃下，将HATU(328.73mg，864.56μmol)一次性添加到5-甲基-2-(2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)哌啶(200mg，864.56μmol)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(268.31mg，864.56μmol)和TEA(87.48mg，864.56μmol，120.50μL)于DMF(10mL)中的搅拌混合物中。将反应混合物在25℃下搅拌2h，然后在真空中浓缩至大约5ml且将其提交至反相HPLC(柱：YMC Triart C18 100x20 mm，5um；流动相45-75％0-5min 0.1％ NH3-MeOH，流速：30ml/min)，以得到100mg呈淡黄色胶状物的外消旋酰胺，然后将其提交至手性HPLC(柱：Chiralpak OJ-H(250*20mm，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH，40-30-30流速：10mL/min；柱温：24℃；波长：205nm，236nm)，以得到呈混合物之前两种对映异构体(分别地，rt＝14.67和16.566min)和两种粗品对映异构体(分别地，R.T.36.105和68.199min)。然后再次通过手性HPLC纯化前两种对映异构体的混合物(其中分别地，R.T.＝14.67和16.566min)(柱：Chiralpak OJ-H(250*20mm，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH，70-15-15流速：12mL/min；柱温：24℃；波长：205nm，236nm)，以得到呈白色固体的化合物329 5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[(2R)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(16.8mg，39.77μmol，4.60％产率)(R.T.＝25.258min)和呈白色固体的化合物3455-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[(2S)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(17.6mg，41.66μmol，4.82％产率)(R.T.＝31.452min)。通过反相HPLC纯化粗品第三对映异构体(其中R.T.36.105(通过LCMS为87％纯度))(柱C18，流动相H2O-MeCN，35-60％ MeCN，流速30ml/min)，以得到化合物376 5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[(2S)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(14.5mg，34.32μmol，3.97％产率)。第四对映异构体(其中R.T.＝68.199min)不经进一步纯化即提交为化合物377 5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[(2R)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(17.1mg，40.48μmol，4.68％产率)。化合物329于分析条件下(柱：OJ-H，以CO2-MeOH，60-40，2ml/min为流动相)的保留时间为3.66min，化合物376的保留时间为5.68min，化合物345的保留时间为4.09min且化合物377的保留时间为8.90min。
化合物329：保留时间：3.66min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.01(m,3H),1.29(m,1H),1.35(m,3H),1.71(m,1H),1.87(m,1H),1.97(m,1H),2.14(m,1H),2.77(m,1H),3.24(m,1H),3.52(m,2H),4.87(m,1H),5.27(m,1H),6.68(m,1H),7.02(m,1H),7.14(m,1H),7.59(m,1H),8.14(m,1H),8.46(m,1H),8.75(m,1H),8.85(m,1H),11.18(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值422.2；实测值423.2；Rt＝3.143min。
化合物376：保留时间：5.68min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98-1.04(m,3H),1.19-1.32(m,2H),1.32-1.39(m,3H),1.69-1.78(m,1H),1.82-1.93(m,1H),1.99-2.10(m,1H),2.12-2.21(m,1H),2.67-2.79(m,1H),2.83-3.22(m,1H),3.32-3.99(m,1H),4.79-4.95(m,1H),4.99-5.54(m,1H),6.65-6.75(m,1H),6.98-7.05(m,1H),7.11-7.18(m,1H),7.52-7.63(m,1H),8.09-8.21(m,1H),8.43-8.51(m,1H),8.71-8.81(m,1H),8.81-8.94(m,1H),11.07-11.29(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值422.2；实测值423.2；Rt＝3.184min。
化合物345：保留时间：4.09min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.03(m,3H),1.35(m,3H),1.72(m,1H),1.86(m,1H),2.01(m,1H),2.14(m,1H),2.74(m,1H),3.00(m,1H),3.42(m,2H),4.22(m,1H),4.87(m,1H),5.27(m,1H),6.69(m,1H),7.02(m,1H),7.14(m,1H),7.59(m,1H),8.14(m,1H),8.46(m,1H),8.75(m,1H),8.85(m,1H),11.17(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值422.2；实测值423.2；Rt＝3.139min。
化合物377：保留时间：8.90min
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.97-1.03(m,3H),1.19-1.32(m,2H),1.33-1.41(m,3H),1.69-1.78(m,1H),1.83-1.93(m,1H),1.97-2.10(m,1H),2.13-2.20(m,1H),2.69-2.79(m,1H),2.79-3.24(m,1H),3.39-3.97(m,1H),4.83-4.92(m,1H),5.00-5.55(m,1H),6.64-6.73(m,1H),6.98-7.06(m,1H),7.11-7.18(m,1H),7.56-7.66(m,1H),8.09-8.20(m,1H),8.41-8.51(m,1H),8.71-8.78(m,1H),8.81-8.92(m,1H),11.06-11.31(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值422.2；实测值423.2；Rt＝3.184min。
实施例735.2-[(2S,5S)-5-乙基-2-苯基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺、2-[(2S,5R)-5-乙基-2-苯基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺和2-[(2R,5S)-5-乙基-2-苯基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物20、化合物17和化合物18)的合成
步骤1：5-乙基-2-苯基吡啶的合成
向2-溴-5-乙基吡啶(1g，5.37mmol)和苯基硼酸(655.36mg，5.37mmol)于二噁烷(10mL)中的搅拌溶液中添加碳酸铯(5.25g，16.12mmol)。将所得悬浮液用氩气脱气。添加四(三苯基膦)钯(0)(620mg，0.537mmol)将反应混合物在65℃下搅拌过夜。完成之后，将反应混合物过滤且在真空中蒸发滤液，以获得油状残余物。通过反相HPLC(49％水-乙腈；0.5-6.5min；流速：30mL/min；装载泵：4mL/min，乙腈；柱：SunFire 100*19mm，5um)纯化残余物，以得到呈黄色油状物的产物5-乙基-2-苯基吡啶(0.56g，3.06mmol，56.86％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,400MHz):δ(ppm)1.22(t,3H),2.65(q,2H),7.44(m,3H),7.71(dd,1H),7.87(d,1H),8.06(d,2H),8.53(d,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值183.1；实测值184.2；Rt＝2.645min。
步骤2：5-乙基-2-苯基哌啶的合成
在100atm H2压力、50℃下，将5-乙基-2-苯基吡啶(0.5g，2.73mmol)于MeOH(20mL)中的溶液经5％ Pd(OH)2/碳(16.84mg，136.43μmol)氢化18小时。完成之后，过滤反应混合物，将残余物用MeOH(10mL)洗涤且在减压下浓缩滤液，以获得5-乙基-2-苯基哌啶(0.38g，2.01mmol，73.57％产率)。粗产物不经任何进一步纯化即用于下一步骤。
步骤3：2-[(2S,5S)-5-乙基-2-苯基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺,2-[(2S,5R)-5-乙基-2-苯基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺和2-[(2R,5S)-5-乙基-2-苯基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物20、化合物17和化合物18)的合成
在氩气气氛、-78℃下，向5-乙基-2-苯基哌啶(0.38g，2.01mmol)于THF(10mL)中的搅拌溶液中添加正丁基锂(2.5M于己烷中，385.76mg，6.02mmol，2.4mL)。将所得混合物在同一温度下搅拌5分钟。5分钟之后，将溶解于THF(10mL)中的2-[(5-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(526.32mg，2.01mmol)添加到反应混合物中。使所得混合物升温至室温且在同一温度下搅拌过夜。完成之后，添加MeOH(5mL)且在真空中蒸发反应混合物。通过反相HPLC(洗脱液：44％水-乙腈，0.5-6.5min；流速：30mL/min；装载泵：4mL/min，乙腈；柱：SunFire 100*19mm，5um)和手性柱色谱(柱：IA，250*20mm，5um，洗脱液：己烷-MeOH-IPA，80-10-10，流速：12mL/min)纯化所获得的粗残余物，以得到呈黄色固体的产物2-[(2S,5S)-5-乙基-2-苯基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物20)(2mg，5.69μmol，2.83e-1％产率)、2-[(2S,5R)-5-乙基-2-苯基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物17)(24mg，68.29μmol，3.40％产率)和2-[(2R,5S)-5-乙基-2-苯基-1-哌啶基]-N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物18)(28mg，79.67μmol，3.97％产率)。
化合物18：1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)0.92(m,3H),1.44(m,1H),1.50(m,1H),1.61(m,2H),1.74(m,1H),2.16(m,2H),2.33(m,3H),2.76(m,0.4H)3.26(m,0.6H),3.99(m,1H),5.46(m,1H),7.24(m,1H),7.30(m,1H),7.36(m,3H),7.96(m,1H),8.07(m,1H),8.56(m,1H),10.86(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值351.2；实测值352.0；Rt＝4.946min。
手性HPLC：Rt＝24.87min(柱：IA；流动相：己烷-MeOH-IPA，80-10-10；流速：0.8mL/min)。
化合物17：1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)0.92(m,3H),1.44(m,1H),1.50(m,1H),1.61(m,2H),1.74(m,1H),2.16(m,2H),2.33(m,3H),2.76(m,0.4H),3.26(m,0.6H),3.99(m,1H),5.46(m,1H),7.24(m,1H),7.30(m,1H),7.36(m,3H),7.96(m,1H),8.07(m,1H),8.56(m,1H),10.86(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值351.2；实测值352.0；Rt＝4.996min。
手性HPLC：Rt＝32.61min(柱：IA；流动相：己烷-MeOH-IPA，80-10-10；流速：0.8mL/min)。
化合物20：LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值351.2；实测值352.0；Rt＝5.027min。
手性HPLC：Rt＝17.96min(柱：IA；流动相：己烷-MeOH-IPA，80-10-10；流速：0.8mL/min)。
实施例736.5-(2-(5-乙基-2-苯基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物547、化合物576和化合物565)的合成
步骤1：1-(叔丁氧基羰基)-5-乙基哌啶-2-甲酸的合成
将5-乙基哌啶-2-甲酸(5g，25.82mmol，HCl)溶解于水(50mL)中且向其中添加氢氧化钠珠粒(4.13g，103.27mmol，1.94mL)。将所得混合物用THF(50mL)稀释且将二碳酸二-叔丁酯(8.45g，38.73mmol，8.89mL)逐滴添加到先前的混合物中。将反应混合物搅拌18h。将反应混合物在真空中浓缩且将残余物用水(50ml)稀释。将所得混合物用MTBE(3*50ml)洗涤，然后用NaHSO4酸化。将所得混合物用DCM(3*50ml)萃取且将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且蒸发，以获得1-叔丁氧基羰基-5-乙基哌啶-2-甲酸(4.03g，15.65mmol，60.62％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.87(m,3H),1.26(m,2H),1.38(s,9H),1.48(m,3H),1.79(m,2H),3.06(m,1H),3.68(m,1H),4.53(m,1H),12.55(bds,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值157.2；实测值158.2；Rt＝1.289min。
步骤2：5-乙基-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将Ir[dF(CF3)ppy]2(dtbbpy)PF6(43.60mg，38.86μmol)、NiCl2·甘醇二甲醚(85.39mg，388.61μmol)和dtbbpy(156.45mg，582.92μmol)一起混合于DMF(50mL)中。将1-叔丁氧基羰基-5-乙基哌啶-2-甲酸(1g，3.89mmol)、2-叔丁基-1,1,3,3-四甲基(665.62mg，3.89mmol)和碘苯(792.80mg，3.89mmol，433.22μL)添加到前一混合物中且通过用氩气吹扫将所得混合物脱气15min。将小瓶密封，用石蜡膜包裹且置于蓝色LED光反应器中。将反应混合物在50℃下搅拌48h。在真空中浓缩反应混合物且将水(50ml)添加到残余物中。将所得混合物用EtOAc(2*50ml)萃取。将合并的有机层用水(3*50ml)、盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且蒸发。通过HPLC(2-10min 50-70％ MeOH/H2O30ml/min(装载泵4ml MeOH)，柱：SunFire100*19mm，5微米)纯化残余物，以获得5-乙基-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.2822g，975.08μmol，25.09％产率)和5-乙基-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯(112.20mg，387.68μmol，9.98％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.89(t,3H),1.08(m,1H),1.40(s,9H),1.61(m,1H),1.79(m,1H),1.97(m,1H),2.28(m,2H),2.90(d,1H),3.77(d,1H),3.96(m,1H),5.25(m,1H),7.22(m,3H),7.36(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值189.2；实测值190.2；Rt＝1.550min。
步骤3：5-乙基-2-苯基哌啶的合成
将5-乙基-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.464g，1.60mmol)溶解于MeOH(5mL)中且向其中添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(584.56mg，16.03mmol，730.70μL)。将所得混合物搅拌18h，然后蒸发至干，以获得5-乙基-2-苯基哌啶(0.337g，1.49mmol，93.11％产率，HCl)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.90(d,3H),1.68(m,6H),2.72(m,1H),3.06(m,1H),3.26(m,1H),4.22(m,1H),7.42(m,3H),7.54(m,2H),9.52(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值189.2；实测值190.2；Rt＝0.775min。
步骤4：5-(2-(5-乙基-2-苯基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺的合成
将5-乙基-2-苯基哌啶(0.337g，1.49mmol，HCl)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(366.65mg，1.49mmol，HCl)和TEA(1.51g，14.93mmol，2.08mL)一起混合于DMF(6mL)中且向其中添加HATU(851.39mg，2.24mmol)。将反应混合物搅拌18h。在真空中浓缩反应混合物且通过HPLC(2-10min 50-70％ MeOH/H2O 30ml/min(装载泵4ml MeOH)，柱：SunFire 100*19mm，5微米)纯化残余物，以获得5-[[2-(5-乙基-2-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.2344g，616.13μmol，41.27％产率)
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.82(m,3H),1.22(m,2H),1.86(m,4H),2.70(m,1H),3.18(m,2H),3.68(m,1H),4.32(m,1H),5.55(m,1H),7.34(m,4H),7.58(m,1H),8.22(m,1H),8.48(m,1H),8.76(m,1H),11.38(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值380.2；实测值381.2；Rt＝1.129min。
步骤5：手性分离(化合物547、化合物576和化合物565)
对5-[[2-(5-乙基-2-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.2344g，616.13μmol)进行手性分离(顺式/反式分离：C18，19*100，H2O-ACN，70-30，30ml/min，10次注入，23mg/注入，保留时间＝15.166；反式异构体分离：Chiralpak IA II(250*20mm，5mkm)己烷-IPA-MeOH，50-25-25，13ml/min，2次注入，20mg/注入，保留时间＝20.247)，以获得5-[[2-[(2S,5R)-5-乙基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.02606g，68.50μmol，11.12％产率)。
对5-[[2-(5-乙基-2-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.2344g，616.13μmol)进行手性分离(顺式/反式分离：C18，19*100，H2O-ACN，70-30，30ml/min，10次注入，23mg/注入，保留时间＝15.166；反式异构体分离：Chiralpak IA II(250*20mm，5mkm)己烷-IPA-MeOH，50-25-25，13ml/min，2次注入，20mg/注入，保留时间＝34.381)，以获得5-[[2-[(2R,5S)-5-乙基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.02981g，78.36μmol，12.72％产率)。
对5-[[2-(5-乙基-2-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.2344g，616.13μmol)进行手性分离(C18,19*100，H2O-ACN，70-30，30ml/min，10次注入，23mg/注入，保留时间＝18.860)，以获得5-[[2-[(2R,5R)-5-乙基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(97.35mg，255.89μmol，41.53％产率)。
化合物547：保留时间：34.38min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.74-0.94(m,3H),1.32-1.47(m,2H),1.47-1.57(m,2H),1.59-1.68(m,1H),1.91-2.09(m,1H),2.14-2.28(m,1H),2.75-3.23(m,1H),3.59-4.20(m,1H),5.10-5.61(m,1H),7.23-7.29(m,1H),7.29-7.32(m,1H),7.32-7.42(m,3H),7.54-7.70(m,1H),8.05-8.20(m,1H),8.40-8.55(m,1H),8.70-8.80(m,1H),8.80-8.96(m,1H),11.06-11.38(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值380.2；实测值381.2；Rt＝1.077min。
化合物576：保留时间：20.25min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.71-0.93(m,3H),1.30-1.48(m,2H),1.48-1.58(m,2H),1.59-1.69(m,1H),1.92-2.10(m,1H),2.14-2.27(m,1H),2.74-3.26(m,1H),3.56-4.26(m,1H),5.12-5.59(m,1H),7.23-7.29(m,1H),7.29-7.32(m,1H),7.32-7.41(m,3H),7.53-7.67(m,1H),8.09-8.22(m,1H),8.39-8.53(m,1H),8.70-8.80(m,1H),8.81-8.94(m,1H),11.01-11.46(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值380.2；实测值381.2；Rt＝1.073min。
化合物565：保留时间：18.86min
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.71-0.85(m,3H),0.99-1.13(m,3H),1.41-1.57(m,1H),1.69-1.75(m,1H),1.84-1.96(m,1H),2.54-2.63(m,2H),3.64-4.36(m,1H),5.14-5.76(m,1H),7.24-7.29(m,1H),7.29-7.32(m,1H),7.32-7.36(m,1H),7.36-7.42(m,2H),7.53-7.66(m,1H),8.11-8.20(m,1H),8.39-8.54(m,1H),8.70-8.80(m,1H),8.80-8.96(m,1H),11.26(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值380.2；实测值381.2；Rt＝2.860min。
实施例737.5-[[2-[(2S,5R)-2-(6-氟-1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物571)和5-[[2-[(2R,5S)-2-(6-氟-1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物553)的合成
步骤1：1-(5-溴-6-氟-1H-吲唑-1-基)乙酮的合成
在冰浴冷却下，将乙酸酐(10.01g，98.02mmol，9.27mL)添加到4-溴-5-氟-2-甲基苯胺(10g，49.01mmol)于氯仿(100mL)中的悬浮液中且将混合物在室温下搅拌5min。然后添加乙酸钾(5.29g，53.91mmol，3.37mL)、18-冠-6(25.91g，98.02mmol，21.96mL)于氯仿(30mL)中的溶液和亚硝酸叔丁酯(10.61g，102.92mmol，12.24mL)且将混合物在75℃下加热16h。然后将深棕色混合物冷却，添加DCM(20mL)且将有机层用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤。通过柱色谱纯化粗产物。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ2.76(s,3H),7.92(s,1H),8.04(s,1H),8.23(s,1H)。
步骤2：1-[6-氟-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吲唑-1-基]乙酮的合成
将乙酸钾(1.68g，17.12mmol，1.07mL)添加到1-(5-溴-6-氟-吲唑-1-基)乙酮(2g，7.78mmol)于二噁烷(20mL)中的溶液中，随后添加双(频哪醇)二硼(2.17g，8.56mmol)和Pd(dppf)Cl2(284.64mg，389.02μmol)。将所得溶液在90℃、Ar下搅拌过夜。将所得混合物在真空下浓缩，用EtOAc稀释，过滤且蒸发。通过柱色谱(己烷/MTBE，流速：85ml/min)纯化所得粗沉淀，以获得1-[6-氟-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吲唑-1-基]乙酮(1.29g，4.24mmol，54.52％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ1.40(s,12H),2.79(s,3H),8.10(s,1H),8.11(s,1H),8.13(s,1H)。
步骤3：6-(6-氟-1H-吲唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将碳酸钾(1.76g，12.73mmol，768.01μL)于水(15mL)中的溶液中添加到3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.46g，4.24mmol)于二噁烷(15mL)中的溶液中，随后添加1-[6-氟-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吲唑-1-基]乙酮(1.29g，4.24mmol)和Pd(dppf)Cl2(155.18mg，212.08μmol)。将所得混合物在90℃、Ar下搅拌过夜。将所得混合物在真空下浓缩，用EtOAc稀释，过滤且蒸发。通过HPLC(2-10min 10-50％ MeCN，30ml/min)纯化粗产物，以获得6-(6-氟-1H-吲唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.8g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值331.2；实测值332.2；Rt＝1.312min。
步骤4：6-氟-5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1H-吲唑的合成
将6-(6-氟-1H-吲唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.8g，5.43mmol)于TFA(10mL)和DCM(10mL)中的溶液在25℃下搅拌3h。将饱和碳酸钾水溶液添加到所述溶液(50ml)中，然后用DCM(2x50 ml)萃取。将有机相经硫酸钠干燥，过滤且蒸发，以获得6-氟-5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1H-吲唑(1.45g，粗品)。所获得的产物不经另外处理即用于下一步骤中。
步骤5：6-氟-5-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]-1H-吲唑的合成
将硼氢化钠(170.79mg，4.51mmol，159.61μL)分批添加到6-氟-5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1H-吲唑(1.45g，3.76mmol)于甲醇(15mL)中的溶液中。将混合物在室温下搅拌12h。添加水(50ml)且将所得混合物用EtOAc(2x50 ml)萃取。将有机相经硫酸钠干燥，过滤且蒸发，以获得6-氟-5-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]-1H-吲唑(753mg，粗品)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ0.94(d,3H),1.25(m,2H),1.58(m,2H),1.93(m,2H),2.51(m,1H),3.20(m,1H),3.93(m,1H),7.10(s,1H),7.86(s,1H),7.99(s,1H),10.51(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值233.2；实测值234.0；Rt＝0.802min。
步骤6：5-[[2-[(2S,5R)-2-(6-氟-1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
将6-氟-5-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]-1H-吲唑(450mg，1.93mmol)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(473.80mg，1.93mmol，HCl)、三乙胺(975.97mg，9.64mmol，1.34mL)混合于DMF(10mL)中然后添加HATU(1.10g，2.89mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌12h。将混合物在减压下蒸发且通过HPLC(2-10min 30-100％甲醇/H2O，30ml/min)纯化，以获得5-[[2-[(2S,5R)-2-(6-氟-1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(127.3mg，299.93μmol，15.55％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值424.2；实测值425.2；Rt＝1.081min。
步骤7：5-[[2-[(2S,5R)-2-(6-氟-1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物571)和5-[[2-[(2R,5S)-2-(6-氟-1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物553)的合成
通过手性色谱(Chiralpak IB 250*20，5B己烷-IPA-MeOH，50-25-25，15ml/min0,113l)分离非对映异构体的混合物，以获得化合物571 5-[[2-[(2S,5R)-2-(6-氟-1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(49.4mg，116.39μmol，38.81％产率)(RT＝9.988)和化合物553 5-[[2-[(2R,5S)-2-(6-氟-1H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(46.71mg，110.05μmol，36.69％产率)(RT＝14.543)。
化合物571：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.93-1.02(m,3H),1.18-1.42(m,1H),1.82-1.91(m,1H),1.91-2.07(m,2H),2.10-2.27(m,1H),3.37-3.67(m,1H),3.69-3.97(m,1H),5.44-5.55(m,1H),7.19-7.41(m,1H),7.49-7.65(m,1H),7.68-7.83(m,1H),7.90-8.24(m,2H),8.26-8.57(m,1H),8.60-8.93(m,2H),10.70-11.34(m,1H),12.95-13.22(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值424.2；实测值425.2；Rt＝2.168min。
化合物553：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.99-1.02(m,3H),1.19-1.39(m,1H),1.82-1.91(m,1H),1.93-2.10(m,2H),2.11-2.26(m,1H),3.38-3.65(m,1H),3.71-3.97(m,1H),5.46-5.55(m,1H),7.18-7.38(m,1H),7.50-7.64(m,1H),7.70-7.81(m,1H),7.97-8.19(m,2H),8.28-8.54(m,1H),8.61-8.93(m,2H),10.81-11.31(m,1H),12.91-13.20(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值424.2；实测值425.2；Rt＝2.168min。
实施例738.5-[[2-[(2R,5S)-2-(3-氟-4-羟基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺和5-[[2-[(2S,5R)-2-(3-氟-4-羟基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物355和化合物354)的合成
步骤1：6-(3-氟-4-甲氧基苯基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(3.8g，11.00mmol)、(3-氟-4-甲氧基苯基)硼酸(1.87g，11.00mmol)和碳酸钠(3.50g，33.01mmol，1.38mL)于1,4-二噁烷(30mL)和水(10mL)中的搅拌悬浮液用氩气吹扫10分钟。10分钟之后，在氩气下添加Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2(450mg，550.19μmol)。将反应混合物在氩气、70℃下搅拌13小时。13小时之后，将反应混合物冷却至室温且过滤。将滤饼用1.4-二噁烷(2x 20mL)洗涤且丢弃。在减压下蒸发滤液，以获得呈黄色油状物的6-(3-氟-4-甲氧基苯基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(3g，9.33mmol，84.83％产率)。粗产物不经任何进一步纯化即用于下一步反应。
LCMS(ESI)：[M+Boc]+m/z：计算值321.2；实测值266.0(t-Bu裂解的产物质量)；Rt＝1.528min
步骤2：6-(3-氟-4-甲氧基苯基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶的合成
将三氟乙酸(21.29g，186.69mmol，14.38mL)添加到6-(3-氟-4-甲氧基苯基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(3g，9.33mmol)中且将所得反应混合物在25℃下搅拌1小时。1小时之后，在减压下浓缩反应混合物。将所获得的残余物溶解于20mL冰冷水中且逐滴添加10％ NaOH溶液，直到pH＝10。将所得悬浮液用二氯甲烷(2x 30mL)萃取。将合并的有机相经Na2SO4干燥且在减压下浓缩，以获得呈黄色胶状物的6-(3-氟-4-甲氧基苯基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶(1.5g，6.78mmol，72.62％产率)，其直接用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值221.2；实测值222.2；Rt＝0.828min。
步骤3：2-(3-氟-4-甲氧基苯基)-5-甲基哌啶的合成
在0℃下，将硼氢化钠(512.94mg，13.56mmol)一次性添加到6-(3-氟-4-甲氧基苯基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶(1.5g，6.78mmol)于甲醇(30mL)中的搅拌溶液中。将反应混合物在0℃下搅拌1小时。1小时之后，在减压下浓缩反应混合物。将所获得的残余物溶解于水(20mL)中且用二氯甲烷(2x 40mL)萃取。将合并的有机相经Na2SO4干燥且在减压下浓缩。通过柱色谱纯化所获得的粗产物，以获得2-(3-氟-4-甲氧基苯基)-5-甲基哌啶(0.8g，3.58mmol，52.85％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值223.2；实测值224.1；Rt＝0.873min。
步骤4：2-氟-4-(5-甲基-2-哌啶基)苯酚的合成
将2-(3-氟-4-甲氧基苯基)-5-甲基哌啶(0.4g，1.79mmol)于HBr(1.48g，18.27mmol，992.26μL)的混合物在100℃下搅拌24小时。在真空中蒸发所得反应混合物。使所获得的粗产物经历HPLC纯化，以得到呈棕色胶状物的2-氟-4-(5-甲基-2-哌啶基)苯酚(0.26g，1.24mmol，69.36％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值209.2；实测值210.4；Rt＝1.766min。
步骤5：外消旋-5-[[2-[(2S,5R)-2-(3-氟-4-羟基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺)的合成
在25℃下，向2-氟-4-(5-甲基-2-哌啶基)苯酚(0.26g，1.24mmol)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(259.88mg，1.06mmol，盐酸盐)和DIPEA(562.04mg，4.35mmol，757.46μL)于DMF(10mL)中的搅拌溶液中分批添加HATU(519.67mg，1.37mmol)。将所得反应混合物在25℃下搅拌。完成之后，在减压下浓缩反应混合物，以获得粗产物，其通过反相HPLC进行纯化，以得到呈淡黄色固体的外消旋-5-[[2-[(2S,5R)-2-(3-氟-4-羟基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.15g，374.62μmol，30.15％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值400.2；实测值401.2；Rt＝2.593min。
步骤6：5-[[2-[(2R,5S)-2-(3-氟-4-羟基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺和5-[[2-[(2S,5R)-2-(3-氟-4-羟基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物355和化合物354)的手性分离
使外消旋-5-[[2-[(2S,5R)-2-(3-氟-4-羟基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺经历手性HPLC纯化(柱：Chiralpak IA-I(250x 20mm，5um)；流动相：己烷-IPA-MeOH，75-15-15；流速：12mL/min)，以得到呈米色固体的5-[[2-[(2R,5S)-2-(3-氟-4-羟基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物355，54.5mg)和5-[[2-[(2S,5R)-2-(3-氟-4-羟基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物354，54.6mg)。
化合物355：
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)0.99-1.03(m,3H),1.28-1.35(m,1H),1.63-1.73(m,1H),1.81-1.94(m,1H),1.97-2.06(m,1H),2.10-2.18(m,1H),2.71-3.21(m,1H),3.41-4.02(m,1H),5.00-5.53(m,1H),6.90-6.99(m,2H),7.01-7.15(m,1H),7.53-7.66(m,1H),8.10-8.19(m,1H),8.42-8.50(m,1H),8.73-8.81(m,1H),8.81-8.91(m,1H),9.77-9.83(m,1H),11.17-11.28(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值400.2；实测值401.4；Rt＝2.596min。
手性HPLC：Rt＝12.14min(柱：IA；流动相：己烷-IPA-MeOH，50-25-25；流速：0.6mL/min)。
化合物354：
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)0.98-1.02(m,3H),1.27-1.37(m,1H),1.63-1.73(m,1H),1.82-1.92(m,1H),1.94-2.04(m,1H),2.11-2.17(m,1H),2.75-3.21(m,1H),3.36-4.00(m,1H),5.01-5.52(m,1H),6.91-6.97(m,2H),7.02-7.14(m,1H),7.54-7.65(m,1H),8.12-8.24(m,1H),8.43-8.51(m,1H),8.71-8.81(m,1H),8.81-8.90(m,1H),9.80(s,1H),11.16-11.31(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值400.2；实测值401.4；Rt＝2.605min。
手性HPLC：Rt＝16.37min(柱：IA；流动相：己烷-IPA-MeOH，50-25-25；流速：0.6mL/min)。
实施例739.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[6-(三氟甲基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1012)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[6-(三氟甲基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1015)的合成
步骤1：3-甲基-6-[6-(三氟甲基)-3-吡啶基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
向圆底烧瓶中添加[6-(三氟甲基)-3-吡啶基]硼酸(500mg，2.62mmol)、3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.00g，2.90mmol)、Pd(dppf)Cl2-DCM(450mg，0.551mmol)、Na2CO3(850mg，8.02mmol)、H2O(5mL)和二噁烷(20mL)。将混合物脱气且用氮气回填三次，然后在80℃、氮气下搅拌12小时。所得混合物通过添加水(30mL)来淬灭且用EtOAc(50mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩。通过快速色谱(20g二氧化硅快速柱，石油醚/EtOAc，其中EtOAc为0～40％，流速：30mL/min)纯化残余物，以得到呈黄色固体的3-甲基-6-[6-(三氟甲基)-3-吡啶基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(720mg，80.3％产率)。1HNMR(400MHz,氯仿-d)δppm 8.65(d,J＝1.5Hz,1H),7.73(dd,J＝8.1,1.5Hz,1H),7.62(d,J＝8.1Hz,1H),5.44(t,J＝3.7Hz,1H),4.08(br dd,J＝12.5,2.8Hz,1H),3.05(dd,J＝12.5,9.5Hz,1H),2.38-2.54(m,1H),1.98-2.17(m,1H),1.84-1.97(m,1H),1.12(br s,9H),1.05(d,J＝6.6Hz,3H)；19FNMR(377MHz,氯仿-d)δppm-67.63。
步骤2：5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-2-(三氟甲基)吡啶的合成
向3-甲基-6-[6-(三氟甲基)-3-吡啶基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(700mg，2.04mmol)于DCM(2mL)中的溶液中添加TFA(2mL，26.0mmol)。将混合物在20℃下搅拌12小时。通过添加饱和NaHCO3水溶液(30mL)淬灭所得混合物且用DCM(20mL*3)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩，以得到呈黄色固体的5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-2-(三氟甲基)吡啶(480mg，96.9％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值243.1，实测值243.1。
步骤3：5-(5-甲基-2-哌啶基)-2-(三氟甲基)吡啶的合成
向5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-2-(三氟甲基)吡啶(480mg，1.98mmol)于MeOH(20mL)中的溶液中添加NaBH4(120mg，3.17mmol)。将混合物在20℃下搅拌1小时。通过添加饱和NH4Cl水溶液(20mL)淬灭所得混合物且用EtOAc(30mL*3)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩，以得到呈黄色固体的5-(5-甲基-2-哌啶基)-2-(三氟甲基)吡啶(350mg，72.3％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值245.1，实测值245.1。
步骤4：N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-[6-(三氟甲基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
向2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(150mg，0.508mmol)和5-(5-甲基-2-哌啶基)-2-(三氟甲基)吡啶(150mg，0.614mmol)于DCM(3mL)中的溶液中添加HATU(200mg，0.526mmol)和DIPEA(0.3mL，1.72mmol)。将混合物在20℃下搅拌1小时。所得混合物通过添加水(100mL)来淬灭且用EtOAc(100mL*3)萃取。将合并的有机层用饱和NH4Cl水溶液(100mL*2)、盐水(100mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩，以得到呈黄色油状物的N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-[6-(三氟甲基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(250mg，粗品)。LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值522.2，实测值522.3。
步骤5：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[5-甲基-2-[6-(三氟甲基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
向N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-[6-(三氟甲基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(250mg，0.479mmol)于DCM(1mL)中的溶液中添加TFA(1mL，13.0mmol)。将混合物在20℃下搅拌12小时。通过添加饱和NaHCO3水溶液(30mL)淬灭所得混合物且用DCM(30mL*3)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩。通过制备型HPLC(仪器：Gilson GX-281Liquid Handler，Gilson 322泵，Gilson156UV检测器；柱：Waters Xbridge 150×50mm×10μm；流动相A：具有0.04％氢氧化铵的H2O(v％)+10mmol NH4HCO3)；流动相B：MeCN；梯度：9.5min内29％至59％ B，保持100％ B达2min；流速：25mL/min；柱温：30℃；波长：220nm，254nm)纯化残余物，以得到呈白色固体的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[5-甲基-2-[6-(三氟甲基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(50mg，24.8％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值422.2，实测值422.2。
步骤6：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[6-(三氟甲基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1012)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[6-(三氟甲基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1015)的合成
通过手性SFC(仪器：Thar80；柱：Daicel Chiralcel OJ(250mm*30mm，10μm)；流动相：超临界CO2/EtOH(0.1％ NH3-H2O，v％)＝55/45；流速：80mL/min；柱温：38℃；喷嘴温度：100巴；喷嘴温度：60℃；蒸发器温度：20℃；修整器温度：25℃；波长：220nm)分离N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[5-甲基-2-[6-(三氟甲基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(60mg，0.142mmol)，以得到化合物1012(峰2，保留时间：2.081min)和化合物1015(峰3，保留时间：3.816min)。
化合物1012：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[6-(三氟甲基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(29mg，具有反式相对化学的单一未知对映异构体，峰2，保留时间＝2.081min，白色固体)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 10.25(br s,1H),8.75(s,1H),8.02(br d,J＝5.3Hz,2H),7.87(d,J＝8.0Hz,1H),7.49(br s,1H),5.55(brs,1H),5.36(br s,2H),3.18-3.95(m,2H),2.19(br s,2H),2.06(s,3H),1.95(br s,1H),1.68-1.80(m,1H),1.31-1.42(m,1H),1.06(d,J＝7.0Hz,3H)；19F NMR(376MHz,DMSO-d6)δppm-66.25；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值422.2；实测值422.1；HPLC：在254nm下为100％；100％ee。
化合物1015：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[6-(三氟甲基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(29mg，具有反式相对化学的单一未知对映异构体，峰3，保留时间＝3.816min，白色固体)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 10.30(br s,1H),8.75(s,1H),7.99-8.10(m,2H),7.87(d,J＝8.3Hz,1H),7.52(br s,1H),5.55(br s,2H),3.74(s,2H),3.10-3.15(m,1H),2.19(br s,2H),2.07(s,3H),1.95(br s,1H),1.66-1.80(m,1H),1.31-1.43(m,1H),1.06(d,J＝7.0Hz,3H)；19F NMR(376MHz,DMSO-d6)δppm-66.25；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值422.2，实测值422.1；HPLC：在254nm下为100％；100％ee。
实施例740.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(6-乙基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1016)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(6-乙基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1013)的合成
步骤1：2-乙基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶的合成
将5-溴-2-乙基吡啶(4.8g，25.8mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(7.2g，28.4mmol)、Pd(dppf)Cl2-DCM(632mg，0.774mmol)、KOAc(7.6g，77.5mmol)于二噁烷(150mL)的混合物在氮气下在100℃下搅拌12小时。所得混合物通过添加水(100mL)来淬灭且用EtOAc(100mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩，以得到粗产物，其通过快速色谱(40g二氧化硅快速柱，石油醚/EtOAc，其中EtOAc为0～55％，40mL/min，254nm)进行纯化，以得到呈棕色油状物的2-乙基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(5.2g，86.5％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm8.86(s,1H),7.98(dd,J＝7.7,1.6Hz,1H),7.16(d,J＝7.8Hz,1H),2.84(d,J＝7.6Hz,2H),1.35(s,12H),1.30(t,J＝7.7Hz,3H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值234.2，实测值234.1。
步骤2：6-(6-乙基-3-吡啶基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1g，2.90mmol)、2-乙基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(1.5g，6.43mmol)、Pd(dppf)Cl2(106mg，0.145mmol)、K2CO3(1.2g，8.68mmol)、二噁烷(20mL)和H2O(5mL)的混合物在氮气、100℃下搅拌12小时。所得混合物通过添加水(30mL)来淬灭且用EtOAc(30mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL*3)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩，以得到粗产物，其通过快速色谱(25g二氧化硅快速柱，石油醚/EtOAc，其中EtOAc为0～15％，35mL/min，254nm)进行纯化，以得到呈白色固体的6-(6-乙基-3-吡啶基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(800mg，91.4％产率)。1HNMR(400MHz,CDCl3)δppm8.45(d,J＝1.8Hz,1H),7.48(dd,J＝8.1,2.3Hz,1H),7.09(d,J＝8.0Hz,1H),5.31(t,J＝3.6Hz,1H),4.03-4.11(m,1H),3.00(dd,J＝12.4,9.6Hz,1H),2.82(q,J＝7.5Hz,2H),2.35-2.48(m,1H),1.80-1.99(m,2H),1.29(t,J＝7.6Hz,3H),1.10(s,9H),1.02(d,J＝6.6Hz,3H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值303.2，实测值303.2.
步骤3：2-乙基-5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)吡啶的合成
将6-(6-乙基-3-吡啶基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(800mg，2.65mmol)于TFA(3.3mL，42.8mmol)中的溶液在20℃下搅拌1小时。在真空中蒸发混合物。将碎冰(10g)添加到残余物中且将pH用10重量％NaOH水溶液调节至8。将所得混合物用EtOAc(20mL*3)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩，以得到呈黄色固体的2-乙基-5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)吡啶(530mg，99.0％产率)，其不经进一步纯化即直接使用。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.75(d,J＝2.0Hz,1H),8.06(dd,J＝8.2,2.4Hz,1H),7.36(d,J＝8.3Hz,1H),3.87-3.96(m,1H),3.22(dd,J＝17.4,9.9Hz,1H),2.80-2.91(m,3H),1.96(d,J＝12.5Hz,1H),1.69-1.83(m,1H),1.37-1.46(m,1H),1.27-1.33(m,4H),1.02(d,J＝6.5Hz,3H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值203.1，实测值203.2。
步骤4：2-乙基-5-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶的合成
在0℃下，将NaBH4(149mg，3.94mmol)一次性添加到2-乙基-5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)吡啶(530mg，2.62mmol)于MeOH(10mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在0℃下搅拌1小时。在真空中蒸发混合物。将残余物用水(50mL)稀释且用DCM(30mL*3)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩，以得到呈黄色油状物的2-乙基-5-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶(440mg，82.2％产率)，其不经进一步纯化即直接使用。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.42(d,J＝2.0Hz,1H),7.76(dd,J＝8.0,2.3Hz,1H),7.29(d,J＝8.0Hz,1H),3.59(dd,J＝11.5,2.5Hz,1H),3.04-3.12(m,1H),2.79(q,J＝7.5Hz,2H),2.39(t,J＝11.5Hz,1H),1.88-1.96(m,1H),1.82(dq,J＝13.2,3.1Hz,1H),1.54-1.72(m,2H),1.25-1.30(m,4H),0.92(d,J＝6.5Hz,3H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值205.2，实测值205.2。
步骤5：N-[5-[[2-[2-(6-乙基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
在20℃下，向2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(100mg，0.339mmol)和2-乙基-5-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶(83mg，0.406mmol)于DCM(5mL)中的搅拌溶液中添加HATU(129mg，0.339mmol)和TEA(0.14mL，1.00mmol)。将所得反应混合物在20℃下搅拌12小时。在LCMS上，反应物未完全转化。添加HATU(129mg，0.339mmol)和TEA(0.14mL，1.00mmol)且将混合物在20℃下再搅拌12小时。在减压下浓缩反应混合物且倒入到水(10mL)中。将水层用EtOAc(15mL*2)萃取。将合并的有机相用盐水(50mL*2)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩，以得到粗产物，其通过快速色谱(4g*3二氧化硅快速柱，石油醚/EtOAc，其中EtOAc为0～85％，25mL/min，254nm)进行纯化，以得到呈无色油状物的N-[5-[[2-[2-(6-乙基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(70mg，42.9％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值482.3，实测值382.3(Boc裂解的质量)。
步骤6：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-(6-乙基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
在20℃下，向N-[5-[[2-[2-(6-乙基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(70mg，0.145mmol)于DCM(2mL)中的溶液中添加TFA(0.25mL，3.24mmol)。将所得反应混合物在20℃下搅拌1小时。将所得混合物用饱和NaHCO3水溶液调节至pH＝8，且在减压下浓缩，以得到粗产物，其通过快速色谱4g*2二氧化硅快速柱，DCM/MeOH，其中MeOH为0～7％，25mL/min，254nm)进行纯化，以得到呈无色油状物的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-(6-乙基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(40mg，72.1％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值382.2，实测值382.2；外消旋物。
步骤7：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(6-乙基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1016)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(6-乙基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1013)的合成
通过手性SFC(仪器：Sepiatec Prep SFC100；柱：Daicel Chiralpak IC 250×30mm I.D.10μm；流动相：超临界CO2/EtOH(0.1％NH3-H2O，v％)＝55/45；流速：80mL/min；柱温：38℃；喷嘴压力：100巴；喷嘴温度：60℃；蒸发器温度：20℃；修整器温度：25℃；波长：220nm)分离N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-(6-乙基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(40mg，0.105mmol)，以得到化合物1016和化合物1013。
化合物1016：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(6-乙基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(30.9mg，具有反式相对立体化学的单一未知对映异构体，峰2，保留时间＝2.802min，白色干燥粉末)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 10.23(brs,1H),8.46(s,1H),8.02(s,1H),7.63(d,J＝7.5Hz,1H),7.49(s,1H),7.25(d,J＝8.3Hz,1H),5.24-5.61(m,3H),2.76(q,J＝7.5Hz,2H),1.98-2.24(m,6H),1.93(s,1H),1.68-1.79(m,1H),1.31-1.39(m,1H),1.24(t,J＝7.5Hz,4H),1.05(d,J＝7.0Hz,3H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值382.2，实测值382.2；HPLC：在254nm下为100％；100％ee；98.2％de。
化合物1013：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(6-乙基-3-吡啶基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(30.8mg，具有反式相对立体化学的单一未知对映异构体，峰4，保留时间＝3.896min，白色干燥粉末)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 10.23(brs,1H),8.46(s,1H),8.02(s,1H),7.63(d,J＝7.8Hz,1H),7.49(s,1H),7.25(d,J＝8.3Hz,1H),5.30-5.54(m,3H),2.76(q,J＝7.5Hz,2H),1.98-2.23(m,6H),1.88-1.97(m,1H),1.69-1.79(m,1H),1.31-1.39(m,1H),1.24(t,J＝7.5Hz,4H),1.05(d,J＝7.0Hz,3H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值382.2，实测值382.2；HPLC：在254nm下为98.97％；100％ee；100％de。
实施例741.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[6-(二氟甲基)-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[6-(二氟甲基)-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1018)和(化合物1011)的合成
步骤1：[6-(二氟甲基)-3-吡啶基]硼酸的合成
向5-溴-2-(二氟甲基)吡啶(1g，4.81mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(1.55g，6.10mmol)、CH3COOK(1.03g，10.5mmol)于二噁烷(10mL)中的溶液中添加Pd(dppf)Cl2-DCM(200mg，0.245mmol)。在微波下将混合物在90℃下搅拌2小时。将所得混合物在减压下浓缩，以得到呈黑色油状物的[6-(二氟甲基)-3-吡啶基]硼酸(1.5g，粗品)。
步骤2：6-[6-(二氟甲基)-3-吡啶基]-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
在微波下，将[6-(二氟甲基)-3-吡啶基]硼酸(800mg，4.63mmol)、3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.5g，4.34mmol)、Na2CO3(1.50g，14.2mmol)、Pd(dppf)Cl2-DCM(200mg，0.245mmol)、二噁烷(10mL)和H2O(2mL)的混合物在100℃下搅拌1小时。所得混合物通过添加水(10mL)来淬灭且用EtOAc(50mL*3)萃取。将合并的有机层用饱和NH4Cl水溶液(50mL*2)、盐水(10mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩，以得到残余物，其通过快速色谱12g二氧化硅快速柱，石油醚/EtOAc，其中EtOAc为0～13％，流速：30mL/min，254nm)纯化残余物，以得到呈白色固体的6-[6-(二氟甲基)-3-吡啶基]-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(500mg，33.3％产率)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δppm 8.58(d,J＝1.51Hz,1H),7.71(dd,J＝8.03,2.01Hz,1H),7.57(d,J＝8.03Hz,1H),6.45-6.83(m,1H),5.41(t,J＝3.76Hz,1H),4.08(dd,J＝12.42,2.89Hz,1H),3.04(dd,J＝12.42,9.41Hz,1H),2.32-2.53(m,1H),1.96-2.11(m,1H),1.84-1.96(m,1H),1.65(s,1H),1.06-1.24(m,9H),1.04(d,J＝6.53Hz,3H)；19F NMR(376MHz,氯仿-d)δppm-115.056ppm。
步骤3：2-(二氟甲基)-5-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶的合成
将6-[6-(二氟甲基)-3-吡啶基]-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(400mg，1.23mmol)、TFA(2mL，26.0mmol)和DCM(5mL)的混合物在20℃下搅拌30分钟。然后通过添加水(10mL)来淬灭混合物且用EtOAc(10mL*3)萃取。将合并的有机层用饱和NH4Cl水溶液(10mL*2)、盐水(10mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩。将残余物溶解于MeOH(5mL)中且在0℃下添加NaBH4(200mg，5.29mmol)，然后将混合物在20℃下搅拌30分钟。将所得混合物用Na2CO3溶液调节至pH＝8～9且用DCM(50mL*3)萃取。将合并的有机层用饱和NH4Cl水溶液(10mL*2)、盐水(10mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩，以得到呈黄色固体的2-(二氟甲基)-5-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶(300mg，粗品)。LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值227.2，实测值227.2。
步骤4：N-[5-[[2-[2-[6-(二氟甲基)-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
向2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(100mg，0.339mmol)和2-(二氟甲基)-5-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶(100mg，0.442mmol)于DCM(5mL)中的混合物中添加HATU(150mg，0.394mmol)和DIPEA(297mg，2.30mmol)且将混合物在20℃下搅拌12小时。所得混合物通过添加水(10mL)来淬灭且用EtOAc(50mL*3)萃取。将合并的有机层用饱和NH4Cl水溶液(10mL*2)、盐水(10mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩。通过快速色谱(12g二氧化硅快速柱，石油醚/EtOAc，其中EtOAc为0～50％，流速：30mL/min)纯化残余物，以得到呈黄色固体的N-[5-[[2-[2-[6-(二氟甲基)-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(110mg，64.5％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值504.2，实测值504.2。
步骤5：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-[6-(二氟甲基)-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺的合成
将N-[5-[[2-[2-[6-(二氟甲基)-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(130mg，0.258mmol)、TFA(1.19g，10.4mmol)和DCM(3mL)的混合物在20℃下搅拌1小时。将所得混合物用NH3-H2O调节至pH＝7～8且在减压下浓缩，以得到粗产物，其通过快速色谱(柱：Sphercial C18，25g，40-60μm,MeCN/水(0.5％ NH3-H2O)，其中MeCN为0-45％，25mL/min，254nm)进行纯化，以得到呈黄色固体的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-[6-(二氟甲基)-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(50mg，48.0％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值404.3，实测值404.2。
步骤6：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[6-(二氟甲基)-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[6-(二氟甲基)-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1018)和(化合物1011)的合成
通过SFC(仪器：Berger，Multigr AM-II；柱：Daicel Chiralpak AD(250mm*30mm，10μm)；流动相：超临界CO2/EtOH(0.1％ NH3-H2O，v％)＝50/50；流速：60mL/min；柱温：38℃；喷嘴温度：100巴；喷嘴温度：60℃；蒸发器温度：20℃；修整器温度：25℃；波长：220nm)纯化N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-[6-(二氟甲基)-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(49mg，0.121mmol)，以得到化合物1018和化合物1011。
化合物1018：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[6-(二氟甲基)-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(20mg，具有反式相对化学的单一未知对映异构体，峰3，保留时间＝2.434min，白色固体)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 10.26(br s,1H),8.67(s,1H),7.89-8.06(m,2H),7.70(d,J＝8.03Hz,1H),7.49(br s,1H),6.68-7.05(m,1H),5.54(br s,1H),5.36(br s,2H),3.06(br s,1H),2.19(br s,2H),2.01-2.09(m,3H),1.95(br s,1H),1.64-1.78(m,1H),1.37(br d,J＝9.54Hz,1H),1.06(d,J＝7.03Hz,3H)；19FNMR(376MHz,DMSO-d6)δppm-115.086ppm；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值404.3，实测值404.3；HPLC在254nm下为100％；100％ee；98.3％de。
化合物1011：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-[6-(二氟甲基)-3-吡啶基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(20mg，具有反式相对化学的单一未知对映异构体，峰4，保留时间＝2.890min，白色固体)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 10.25(br s,1H),8.67(s,1H),8.03(br s,1H),7.94(br d,J＝6.78Hz,1H),7.70(d,J＝8.28Hz,1H),7.50(brs,1H),6.70-7.08(m,1H),5.54(br s,1H),5.36(br s,2H),3.04(br d,J＝5.52Hz,2H),2.19(br s,2H),2.07(s,3H),1.95(br s,1H),1.67-1.80(m,1H),1.37(br d,J＝8.53Hz,1H),1.06(d,J＝7.03Hz,3H)；19F NMR(376MHz,DMSO-d6)δppm-115.085ppm；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值404.3，实测值404.3；HPLC：在254nm下为100％；99.8％ee；99.6％de。
实施例742.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[6-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1017)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[6-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1014)的合成
步骤1：[6-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-吡啶基]硼酸的合成
向2-氟-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(3g，0.013mol)、1-甲基哌嗪(2g，0.020mol)于DMSO(10mL)中的溶液中添加TEA(5.8mL，0.041mol)。将混合物在90℃下搅拌12小时。所得混合物通过添加水(50mL)来淬灭且用EtOAc(50mL*3)萃取。将合并的有机层用饱和NH4Cl水溶液(50mL*2)、盐水(50mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩，以得到呈白色固体的[6-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-吡啶基]硼酸(2.5g，粗品)。
步骤2：3-甲基-6-[6-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-吡啶基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
在氮气下，将[6-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-吡啶基]硼酸(1g，4.52mmol)、3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.2g，3.47mmol)、Pd(dppf)Cl2-DCM(175mg，0.214mmol)、Na2CO3(1.47g，0.014mol)、二噁烷(3mL)和H2O(1mL)的混合物在80℃下搅拌12小时。所得混合物通过添加水(20mL)来淬灭且用EtOAc(20mL*3)萃取。将合并的有机层用饱和NH4Cl水溶液(20mL*2)、盐水(20mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩。通过快速色谱(25g二氧化硅快速柱DCM/MeOH，其中MeOH为0～10％，流速＝30mL/min，254nm)纯化残余物，以得到呈棕色油状物的3-甲基-6-[6-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-吡啶基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(700mg，41.5％产率)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.01(s,1H),7.46(br d,J＝8.5Hz,1H),6.81(br d,J＝8.8Hz,1H),5.29(br s,1H),3.94(br dd,J＝12.4,2.4Hz,1H),3.54(br s,4H),3.08(br dd,J＝12.2,9.2Hz,1H),2.57(br d,J＝4.3Hz,4H),2.27-2.48(m,4H),1.79-2.01(m,2H),1.15(s,9H),1.02(br d,J＝6.5Hz,3H)。
步骤3：1-甲基-4-[5-(3-甲基-1,2,3,4-四氢吡啶-6-基)-2-吡啶基]哌嗪的合成
向3-甲基-6-[6-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-吡啶基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(700mg，1.88mmol)于DCM(2mL)中的溶液中添加TFA(2.0mL，0.026mol)。将混合物在20℃下搅拌12小时。将所得混合物用饱和NaHCO3水溶液调节至pH＝8且用DCM(50mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩，以得到呈灰白色固体的1-甲基-4-[5-(3-甲基-1,2,3,4-四氢吡啶-6-基)-2-吡啶基]哌嗪(400mg，78.2％产率)。
步骤4：1-甲基-4-[5-(5-甲基-2-哌啶基)-2-吡啶基]哌嗪的合成
向1-甲基-4-[5-(3-甲基-1,2,3,4-四氢吡啶-6-基)-2-吡啶基]哌嗪(400mg，1.47mmol)于MeOH(2mL)中的溶液中添加NaBH4(120mg，3.17mmol)。将混合物在20℃下搅拌1小时。将所得混合物在减压下浓缩以移除MeOH且通过添加水(30mL)来淬灭，用EtOAc(30mL*3)萃取。将合并的有机层用饱和NH4Cl水溶液(30mL*2)、盐水(100mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩，以得到呈黄色固体的1-甲基-4-[5-(5-甲基-2-哌啶基)-2-吡啶基]哌嗪(300mg，74.5％产率)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.08(d,J＝2.0Hz,1H),7.60(dd,J＝8.8,2.5Hz,1H),6.81(d,J＝8.8Hz,1H),3.44-3.57(m,5H),3.05(br dd,J＝11.9,1.9Hz,1H),2.55(t,J＝5.1Hz,4H),2.36-2.43(m,1H),2.33(s,3H),1.73-1.97(m,2H),1.53-1.70(m,2H),1.15-1.32(m,1H),0.91(d,J＝6.5Hz,3H)。
步骤5：N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-[6-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯)的合成
向2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(50mg，0.169mmol)、1-甲基-4-[5-(5-甲基-2-哌啶基)-2-吡啶基]哌嗪(50mg，0.182mmol)于DCM(4mL)中的溶液中添加HATU(100mg，0.263mmol)和DIEA(100μL,0.573mmol)。将混合物在20℃下搅拌2小时。所得混合物通过添加水(20mL)来淬灭且用DCM(20mL*3)萃取。将合并的有机层用饱和NH4Cl水溶液(100mL*2)、盐水(100mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩。通过快速色谱(12g二氧化硅快速柱，MeOH/EtOAc，其中EtOAc为0～60％，流速＝30mL/min，254nm)纯化残余物，以得到呈淡黄色油状物的N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-[6-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(50mg，49.7％产率)。
步骤6：N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-[6-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸酯的合成
向N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-[6-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(50mg，0.091mmol)于DCM(2mL)中的溶液中添加TFA(160μL，2.12mmol)。将混合物在20℃下搅拌1小时。将所得混合物过滤且在减压下浓缩，以得到呈白色固体的N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-[6-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸酯(40mg)。
步骤7：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[6-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1017)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[6-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1014)的合成
通过手性SFC 1(仪器：Berger，Multigr AM-II；柱：Chiralpak AD 250×30mmI.D.20μm；流动相：超临界CO2/EtOH(0.1％ NH3-H2O，v％)＝60/40；流速：80mL/min；柱温：38℃；喷嘴温度：100巴；喷嘴温度：60℃；蒸发器温度：20℃；修整器温度：25℃；波长：220nm)纯化N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-[6-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸酯(40mg)，以得到化合物1017(与一种非对映异构体混合，峰2，保留时间＝5.910min)或化合物1014(峰3，保留时间＝6.357min)。
化合物1014：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[6-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(29mg，具有反式相对化学的单一未知对映异构体，峰3，保留时间＝6.357min，白色固体)。1H NMR(400MHz,DMSO-d4)δppm 10.19(brs,1H),7.94-8.20(m,2H),7.44-7.53(m,2H),6.78(d,J＝8.8Hz,1H),5.34(br s,3H),3.36-3.61(m,5H),2.34-2.46(m,5H),2.23(s,3H),2.00-2.13(m,5H),1.72-1.96(m,2H),1.34(brd,J＝12.5Hz,1H),1.04(d,J＝7.0Hz,3H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值452.2，实测值452.3；HPLC：在254nm下为99.50％；97.9％ee。
化合物1017：通过手性SFC 2(仪器：SFC-80Q；柱：Daicel Chiralpak IC 250×30mm I.D.10μm；流动相：超临界CO2/EtOH(0.1％NH3-H2O，v％)＝55/45；流速：80mL/min；柱温：38℃；喷嘴压力：100巴；喷嘴温度：60℃；蒸发器温度：20℃；修整器温度：25℃；波长：220nm)进一步分离N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[6-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(与一种非对映异构体混合，峰2，保留时间＝5.910min)，以得到化合物1017：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-[6-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(30mg，具有反式相对立体化学的单一未知对映异构体，峰2，保留时间＝3.832min，白色固体)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 10.08(br s,1H),7.92-8.26(m,2H),7.49(br s,2H),6.79(d,J＝8.8Hz,1H),5.34(brs,3H),3.34-3.63(m,5H),2.35-2.45(m,5H),2.23(s,3H),2.01-2.13(m,5H),1.71-1.96(m,2H),1.34(br d,J＝13.3Hz,1H),1.04(d,J＝7.0Hz,3H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值452.2，实测值452.3；HPLC：在254nm下为100％；100.0％ee。
实施例743.5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-羟基-3-异丙基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物552)的合成
步骤1：2-异丙基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯酚的合成
将4-溴-2-异丙基苯酚(10g，46.49mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(12.6g，49.62mmol)、乙酸钾(18.25g，185.97mmol，11.63mL)和Pd(dppf)Cl2 DCM(1.54g，1.86mmol)混合于1,4-二噁烷(200mL)中且在惰性气氛、80℃下搅拌16h。将反应混合物用水(500mL)稀释且用DCM(3x200mL)萃取。将有机层合并，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩。将粗材料提交至柱色谱，以得到2-异丙基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯酚(7.5g，28.61mmol，61.54％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值262.2；实测值263.2；Rt＝1.333min。
步骤2：6-(4-羟基-3-异丙基苯基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将2-异丙基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯酚(3g，11.44mmol)、3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(3.16g，9.16mmol)、碳酸钠(3.64g，34.33mmol，1.44mL)和Pd(dppf)Cl2 DCM(378.43mg，457.75μmol)溶解于1,4-二噁烷(25mL)和水(9mL)的混合物中。将反应混合物在氩气气氛、75℃下搅拌12h。冷却之后，将反应混合物用水稀释且用DCM(3x40 mL)萃取。将合并的萃取物经Na2SO4干燥，在真空中浓缩且将残余物提交至柱色谱，以得到6-(4-羟基-3-异丙基苯基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(0.8g，2.41mmol，21.09％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.93(d,3H),0.99(s,9H),1.05(m,6H),1.81(m,2H),2.13(m,1H),2.98(m,1H),3.81(m,1H),5.02(m,1H),6.34(d,1H),6.45(d,1H),6.98(s,1H),9.02(s,1H)。
步骤3：2-异丙基-4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯酚的合成
将6-(4-羟基-3-异丙基苯基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(0.3g，905.12μmol)添加到TFA(1.48g，12.98mmol，1mL)和DCM(1mL)的混合物中。将反应混合物搅拌0,5h且在真空中浓缩，以得到2-异丙基-4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯酚(0.2g，粗品，TFA)，其不经纯化即直接用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值231.2；实测值232.2；Rt＝0.988min。
步骤4：2-异丙基-4-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]苯酚的合成
将粗品2-异丙基-4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯酚(0.2g，580.81μmol，TFA)溶解于甲醇(3mL)中且在搅拌的情况下一次性添加硼氢化钠(26.37mg，696.97μmol，24.64μL)。当反应混合物的LCMS显示反应完成时，添加过量HCl二噁烷溶液且在减压下浓缩反应混合物，以得到2-异丙基-4-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]苯酚(0.18g，粗品)，其不经纯化即用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值233.2；实测值234.2；Rt＝0.791min。
步骤5：5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-羟基-3-异丙基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物552)的合成
将粗品2-异丙基-4-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]苯酚(0.18g，667.14μmol，HCl)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(167.45mg，800.57μmol)、HATU(304.40mg，800.57μmol)和DIPEA(742.00mg，5.74mmol，1mL)混合于DMSO(3mL)中且在25℃下搅拌15h。在反应完成之后，将反应混合物提交至HPLC，以得到5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-羟基-3-异丙基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.166g，391.06μmol，58.62％产率)。
HPLC数据：2-10min 40-60％水+NH3/MeOH+NH3(装载泵4ml MeOH+NH3)柱：TRIART100*20 5微米，注入体积1500.000
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.98-1.03(m,3H),1.08-1.16(m,6H),1.26-1.36(m,1H),1.63-1.76(m,1H),1.80-1.92(m,1H),1.96-2.11(m,1H),2.11-2.20(m,1H),2.77-3.24(m,2H),3.39-4.02(m,1H),4.99-5.59(m,1H),6.70-6.81(m,1H),6.85-6.97(m,1H),6.98-7.05(m,1H),7.53-7.67(m,1H),8.06-8.19(m,1H),8.41-8.51(m,1H),8.69-8.78(m,1H),8.81-8.93(m,1H),9.21(s,1H),10.99-11.44(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值424.2；实测值425.2；Rt＝2.662min。
实施例744.5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-羟基-3,5-二甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺和5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-羟基-3,5-二甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物335和化合物326)的合成
步骤1：2,6-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯酚的合成
将4-溴-2,6-二甲基苯酚(18.7g，93.01mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(28.34g，111.61mmol)和KOAc(27.38g，279.02mmol，17.44mL)于1,4-二噁烷(400mL)中的搅拌溶液用氩气吹扫10分钟。10分钟之后，在氩气下添加Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2(1.5g，1.84mmol)。将反应混合物在氩气、100℃下搅拌16小时。然后将反应混合物冷却至室温，过滤且在减压下浓缩滤液。通过快速色谱(SiO2，洗脱液：CHCl3:乙腈)纯化所获得的粗产物，以得到2,6-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯酚(10.4g，41.91mmol，45.07％产率)。
LCMS(ESI)：[M-H]-m/z：计算值248.2；实测值247.2；Rt＝1.475min
步骤2：6-(4-羟基-3,5-二甲基苯基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.11g，3.22mmol)、2,6-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯酚(1g，4.03mmol)和碳酸钠(1.03g，9.67mmol，405.21μL)于1,4-二噁烷(7.5mL)和水(2.5mL)中的搅拌溶液用氩气吹扫。然后，在氩气下添加Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2(131.55mg，161.21μmol)。将反应混合物在氩气、75℃下搅拌40小时。40小时之后，使反应混合物冷却至室温且过滤。将滤饼用1,4-二噁烷(10mL)洗涤且丢弃。将滤液用水洗涤且用DCM萃取。将合并的有机相经Na2SO4干燥且在减压下浓缩，以获得6-(4-羟基-3,5-二甲基苯基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.15g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值317.2；实测值318.2；Rt＝1.594min。
步骤3：2,6-二甲基-4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯酚的合成
将6-(4-羟基-3,5-二甲基苯基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.15g，粗品)溶解于三氟乙酸(4.44g，38.94mmol，3mL)中且在室温下搅拌16小时。16小时之后，将反应混合物在减压下浓缩，以得到深棕色油状物。将所获得的粗产物用NaOH水溶液处理，然后用NaHSO4中和至pH＝4-5。将所得悬浮液用DCM萃取。将有机层经Na2SO4干燥且在真空下浓缩，以得到2,6-二甲基-4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯酚(0.5g，粗品)。粗产物不经任何进一步纯化即用于下一步反应。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值203.2；实测值204.2；Rt＝0.680min。
步骤4：2,6-二甲基-4-(5-甲基-2-哌啶基)苯酚的合成
在0℃下，将硼氢化钠(87.05mg，2.30mmol)分批添加到2,6-二甲基-4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯酚(0.5g，2.30mmol)于甲醇(10mL)中的搅拌溶液中。将反应混合物在室温下搅拌1小时。1小时之后，将反应混合物在减压下浓缩，将残余物用水稀释且用DCM(2x25mL)萃取。将合并的有机相经Na2SO4干燥且在真空中蒸发，以获得2,6-二甲基-4-(5-甲基-2-哌啶基)苯酚(0.4g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值219.2；实测值220.2；Rt＝0.780min。
步骤5：5-[[2-[2-(4-羟基-3,5-二甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
向2,6-二甲基-4-(5-甲基-2-哌啶基)苯酚(0.4g，1.82mmol)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(283.31mg，912.88μmol，Et3N盐)和HATU(416.85mg，1.10mmol)于DMSO(4mL)中的搅拌溶液中添加DIPEA(120.39mg，931.48μmol，162.24μL)。将反应混合物在25℃下搅拌16小时。16小时之后，通过反相HPLC(洗脱液：2-10min,0-85％，MeOH/H2O；流速：30mL/min；装载泵：4mL，MeOH；柱：SunFireC18 100x 19mm，5um)纯化反应混合物，以获得5-[[2-[2-(4-羟基-3,5-二甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(60mg，146.18μmol，8.01％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值410.2；实测值411.2；Rt＝2.913min。
步骤6：5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-羟基-3,5-二甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺和5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-羟基-3,5-二甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物335和化合物326)的手性分离
使5-[[2-[2-(4-羟基-3,5-二甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(60mg，146.18μmol)经历手性HPLC纯化(柱：Chiralpak IC(250x 20mm，5um)；流动相：CO2-MeOH，60-40；流速：40mL/min)，以得到呈淡棕色固体的5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-羟基-3,5-二甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物335，18.7mg)和5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-羟基-3,5-二甲基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物326，19.7mg)。
化合物335：
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.00(m,3H),1.31(m,1H),1.70(m,1H),1.85(m,1H),1.95(m,1H),2.07(m,1H),2.15(m,6H),3.02(m,1H),3.68(m,1H),5.23(m,1H),6.84(m,2H),7.59(m,1H),8.16(m,2H),8.47(m,1H),8.75(m,1H),8.85(m,1H),11.21(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值410.2；实测值411.2；Rt＝4.399min。
手性HPLC：Rt＝5.29min(柱：IC；流动相：CO2-MeOH，60-40；流速：0.6mL/min)。
化合物326：
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.00(m,3H),1.30(m,1H),1.72(m,1H),1.85(m,1H),2.00(m,1H),2.13(m,8H),2.92(m,1H),3.68(m,1H),5.23(m,1H),6.86(m,1H),7.59(m,1H),8.16(m,2H),8.47(m,1H),8.75(m,1H),8.85(m,1H),11.21(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值410.2；实测值411.2；Rt＝4.398min。
手性HPLC：Rt＝6.28min(柱：IC；流动相：CO2-MeOH，60-40；流速：0.6mL/min)。
实施例745.外消旋-5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物212)、rel-5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物570)和rel-5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物569)的合成
步骤1：6-(4-氯苯基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(6g，17.37mmol)、(4-氯苯基)硼酸(3.53g，22.59mmol)和碳酸钠(5.52g，52.12mmol，2.18mL)添加到1,4-二噁烷(90mL)和水(30mL)的混合物中。将所得混合物抽真空然后用氩气回填，将此操作重复三次，然后在氩气下添加Pd(dppf)Cl2·DCM(567.10mg，694.98μmol)。将反应混合物在氩气、70℃下搅拌12h，然后冷却且过滤。将滤饼用1,4-二噁烷(2*20ml)洗涤且丢弃。在真空中蒸发滤液，且通过硅胶柱色谱使用己烷/MTBE梯度(0-70％ MTBE)纯化残余物，以得到呈白色固体的6-(4-氯苯基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(3.2g，10.40mmol，59.83％产率)。
1H NMR(CDCl3,400MHz):δ0.98(d,3H),1.08(s,9H),1.78(m,1H),1.98(m,1H),2.38(m,1H),2.97(t,1H),4.02(d,1H),5.26(s,1H),7.24(m,4H)。
LCMS(ESI)：[M-tBu]+m/z：计算值307.8；实测值252.0；Rt＝1.829min。
步骤2：6-(4-氯苯基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶的合成
将6-(4-氯苯基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(3.2g，10.40mmol)溶解于三氟乙酸(22.56g，197.87mmol，15.24mL)中。将所得溶液在25℃下搅拌1h，然后添加碎冰(20g)且将pH用氢氧化钠珠粒(10.40g，259.90mmol，4.88mL)于水(50ml)中的溶液调节至10。将所得混浊溶液转移至分液漏斗且用二氯甲烷(2*50ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(20ml)洗涤，经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到呈黄色胶状物的6-(4-氯苯基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶(2.1g，10.11mmol，97.26％产率)。
1H NMR(CDCl3,500MHz):δ1.0(d,3H),1.30(m,1H),1.70(m,1H),1.95(m,1H),2.50(m,1H),2.70(d,1H),3.20(m,1H),4.00(d,1H),7.33(d,2H),7.73(d,2H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值207.0；实测值208.0；Rt＝0.89min。
步骤3：2-(4-氯苯基)-5-甲基哌啶的合成
在0℃下，将硼氢化钠(764.98mg，20.22mmol，714.94μL)一次性添加到6-(4-氯苯基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶(2.1g，10.11mmol)于甲醇(20mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在0℃下搅拌1h，然后在真空中蒸发。将残余物用水(20ml)稀释且用二氯甲烷(2*40ml)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到呈无色油状物的2-(4-氯苯基)-5-甲基哌啶(1.9g，9.06mmol，89.61％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(CDCl3,400MHz):δ0.80(d,3H),1.15(m,1H),1.45(m,1H),1.60(brs,1H),1.75(m,1H),1.85(m,1H),2.38(t,1H),3.11(d,1H),3.50(d,1H),7.30(m,4H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值209.2；实测值210.2；Rt＝0.861min。
步骤4：5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物212)的合成
将三乙胺(1.21g，11.92mmol，1.66mL)添加到2-(4-氯苯基)-5-甲基哌啶(250mg，1.19mmol)(来自前一步骤的粗品)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(369.96mg，1.19mmol，N(C2H5)3)和HATU(498.60mg，1.31mmol)于DMF(4mL)的混合物中。将反应混合物在25℃下搅拌12h，然后提交至反相HPLC(柱：YMC-Triart C18 100x20 mm 5um，流动相：35-75％1-6min 0.1％ NH3-甲醇)，以得到呈白色固体的化合物212 5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(173mg，431.57μmol，36.20％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)1.03(m,3H),1.34(m,1H),1.66(m,1H),1.91(d,1H),2.14(m,2H),3.01(m,1H),3.76(m,1H),5.38(d,1H),7.41(m,4H),7.61(m,1H),8.17(m,1H),8.48(m,1H),8.83(m,2H),11.25(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值400.2；实测值401.2；Rt＝3.189min
步骤5：rel-5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物570)和rel-5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物569)的合成
对5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(150mg，374.20μmol)进行手性分离(系统：柱：IA-I(250*20，5mkm)，流动相：己烷-IPA-MeOH，50-25-25；流速：13ml/min。24℃，波长：205nm，215nm)
Rt1＝14.03-顺式杂质
Rt2＝20.5-化合物569
Rt3＝27.1-化合物570)
以获得呈米色固体的化合物570 5-[[2-[(2S,5R)-2-(4-氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(59.69mg，148.91μmol，39.79％产率)(RT(IA，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min)＝30.693min)和呈米色固体的化合物569 5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-氯苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(65.53mg，163.47μmol，43.69％产率)(RT(IA，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min)＝23.405min)。
化合物569：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.98-1.07(m,3H),1.26-1.40(m,1H),1.56-1.70(m,1H),1.82-1.97(m,1H),2.00-2.13(m,1H),2.14-2.25(m,1H),2.76-3.25(m,1H),3.43-4.06(m,1H),5.11-5.63(m,1H),7.30-7.40(m,2H),7.39-7.48(m,2H),7.54-7.65(m,1H),8.09-8.20(m,1H),8.43-8.52(m,1H),8.72-8.80(m,1H),8.81-8.93(m,1H),11.13-11.40(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值400.2；实测值401.2；Rt＝2.845min
化合物570：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.99-1.07(m,3H),1.27-1.36(m,1H),1.56-1.70(m,1H),1.82-1.95(m,1H),2.02-2.14(m,1H),2.14-2.23(m,1H),2.73-3.24(m,1H),3.45-4.04(m,1H),5.10-5.66(m,1H),7.29-7.39(m,2H),7.40-7.49(m,2H),7.54-7.67(m,1H),8.08-8.22(m,1H),8.40-8.51(m,1H),8.68-8.80(m,1H),8.80-8.94(m,1H),11.13-11.34(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值400.2；实测值401.2；Rt＝2.845min
实施例746.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(4-异丁酰基-2-(2-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物854和化合物853)的合成
步骤1：1-(2-氯吡啶-4-基)-2-甲基丙-1-醇的合成
在0℃、氩气气氛下，向2-氯吡啶-4-甲醛(13.6g，96.08mmol)于THF(100mL)中的搅拌溶液中逐滴添加氯(异丙基)镁(104.50g，135.27mmol，110mL，LiCl)。将所得溶液在同一温度下搅拌30分钟。使反应混合物升温至室温且在20℃下搅拌12h。将反应混合物用饱和NH4Cl水溶液淬灭且用MTBE萃取。将有机层经Na2SO4干燥，过滤且在减压下蒸发。通过柱色谱(梯度氯仿-乙腈，流速：65ml/min)纯化粗产物，以获得1-(2-氯-4-吡啶基)-2-甲基丙-1-醇(4.6g，24.78mmol，25.79％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.70(d,6H),1.68(m,1H),4.15(m,1H),5.18(m,1H),7.14(m,2H),8.12(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值185.2；实测值186.2；Rt＝0.991min。
步骤2：6-(4-(1-羟基-2-甲基丙基)吡啶-2-基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮的合成
在氩气下，向6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,4-二氢-1H-喹啉-2-酮(6.62g，24.24mmol)、1-(2-氯-4-吡啶基)-2-甲基丙-1-醇(4.5g，24.24mmol)和碳酸钠(7.71g，72.72mmol，3.05mL)于二噁烷(90mL)和水(90mL)的混合物中的搅拌溶液中添加Pd(dppf)Cl2*DCM(1.19g，1.45mmol)。将反应混合物在80℃下加热12h。然后将反应混合物用水稀释且用DCM萃取，经Na2SO4干燥且在减压下浓缩。通过柱色谱(梯度己烷:CHCl3)纯化所获得的粗产物，以得到6-[4-(1-羟基-2-甲基丙基)-2-吡啶基]-3,4-二氢-1H-喹啉-2-酮(1.8g，6.07mmol，25.06％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.94(d,6H),1.98(m,1H),2.42(m,2H),3.06(m,2H),4.28(m,1H),5.24(m,1H),6.86(m,1H),7.18(m,1H),7.66(m,1H),7.91(m,2H),8.48(m,1H),10.22(m,1H)。LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值296.2；实测值297.2；Rt＝0.852min。
步骤3：6-(4-(1-羟基-2-甲基丙基)哌啶-2-基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮的合成
将6-[4-(1-羟基-2-甲基丙基)-2-吡啶基]-3,4-二氢-1H-喹啉-2-酮(900mg，3.04mmol)溶解于CH3COOH(25mL)中。在压力H2(3.04mmol)40atm、20℃下，将起始材料经Pt/C(200mg)氢化16h。然后添加200mg Evonik Pt/C催化剂且在同一压力、20℃下将反应混合物再氢化24h。然后添加250mg Evonik Pt/C催化剂且在同一压力、20℃下将反应混合物再氢化24h。将反应混合物过滤且在真空中浓缩，以获得6-[4-(1-羟基-2-甲基丙基)-2-哌啶基]-3,4-二氢-1H-喹啉-2-酮(1.2g，粗品，CH3COOH)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值302.2；实测值303.2；Rt＝0.871min。
步骤4：4-(1-羟基-2-甲基丙基)-2-(2-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将6-[4-(1-羟基-2-甲基丙基)-2-哌啶基]-3,4-二氢-1H-喹啉-2-酮(1.5g，4.96mmol，CH3COOH)和TEA(1.51g，14.88mmol，2.07mL)混合于DCM(40mL)中，用冰水浴冷却且逐滴添加于5ml DCM中的Boc2O(1.19g，5.46mmol，1.25mL)，然后搅拌过夜。将反应混合物用水洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩，以得到4-(1-羟基-2-甲基丙基)-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.2g，粗品)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.80(d,6H),1.21(s,9H),1.36(m,1H),1.64(m,4H),2.39(m,2H),2.81(m,2H),3.13(m,1H),3.81(m,1H),4.31(m,1H),4.58(m,1H),6.75(d,1H),6.95(d,1H),6.99(s,1H),9.98(s,1H)。LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值302.2；实测值303.2；Rt＝1.389min。
步骤5：4-异丁酰基-2-(2-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将4-(1-羟基-2-甲基丙基)-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1g，2.48mmol)溶解于无水DCM(30mL)中。添加氯铬酸吡啶(1.07g，4.97mmol)且将反应混合物在20℃下搅拌过夜。将反应混合物用水洗涤然后蒸发至干。获得4-(2-甲基丙酰基)-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.5g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值300.2；实测值301.2；Rt＝1.249min。
步骤6：6-(4-异丁酰基哌啶-2-基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮的合成
将4-(2-甲基丙酰基)-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.5g，3.75mmol)溶解于TFA(10g，3.75mmol)中且搅拌过夜。然后将反应混合物在真空中浓缩至干。将粗产物用碳酸氢钠水溶液处理且将所需产物用EA萃取，经Na2SO4干燥且在真空中蒸发，以得到6-[4-(2-甲基丙酰基)-2-哌啶基]-3,4-二氢-1H-喹啉-2-酮(200mg，粗品)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值300.2；实测值301.2；Rt＝0.809min。
步骤7：(5-(2-(4-异丁酰基-2-(2-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-3-甲基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
将6-[4-(2-甲基丙酰基)-2-哌啶基]-3,4-二氢-1H-喹啉-2-酮(200mg，665.79μmol)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(196.60mg，665.79μmol)、HATU(303.78mg，798.95μmol)和TEA(134.74mg，1.33mmol，185.60μL)混合于DMSO(2mL)中且在20℃下搅拌过夜。使DMSO中的溶液经历HPLC(50-75％ R1-2-10min流速：30ml/min；装载泵4ml/min MeOH柱Sun Fire 100x19mm，5mkm)。获得N-[3-甲基-5-[[2-[4-(2-甲基丙酰基)-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(109mg，188.69μmol，28.34％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值577.2；实测值578.2；Rt＝2.935min。
步骤8：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(4-异丁酰基-2-(2-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物854和化合物853)的合成
将N-[3-甲基-5-[[2-[4-(2-甲基丙酰基)-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(109mg，188.69μmol)溶解于二噁烷(1.5mL)和水(0.5mL)的混合物且在100℃下搅拌过夜达12h。使溶液经历HPLC(2-10min 10-40％MeCN/H2O 30ml/min(装载泵4ml MeCN)柱：SunFire C18，5微米)。获得N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S)-4-(2-甲基丙酰基)-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(25.8mg，54.03μmol，28.63％产率)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,4R)-4-(2-甲基丙酰基)-2-(2-氧代-3,4-二氢-1H-喹啉-6-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(25.5mg，53.40μmol，28.30％产率)。
化合物854：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.91-0.98(m,6H),1.71-1.76(m,1H),1.78-1.89(m,1H),1.98-2.04(m,3H),2.16-2.32(m,1H),2.39-2.44(m,2H),2.80-2.88(m,3H),2.93-3.06(m,1H),3.40-3.72(m,1H),3.76-4.35(m,1H),5.05-5.58(m,1H),5.59-5.75(m,2H),6.64-6.86(m,1H),6.86-7.05(m,1H),7.04-7.18(m,2H),7.41-7.54(m,1H),7.91-8.17(m,1H),9.98-10.08(m,1H),10.37-10.58(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值477.2；实测值478.2；Rt＝1.783min。
化合物853：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.88-1.00(m,6H),1.69-1.77(m,1H),1.79-1.87(m,1H),1.87-1.98(m,2H),1.98-2.06(m,3H),2.14-2.35(m,2H),2.36-2.45(m,2H),2.81-2.87(m,2H),2.91-3.04(m,1H),3.43-3.90(m,1H),5.03-5.08(m,1H),5.49-5.65(m,2H),6.67-6.79(m,1H),6.93-7.12(m,2H),7.11-7.55(m,1H),7.58-8.14(m,1H),9.95-10.51(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值477.2；实测值478.2；Rt＝1.775min。
实施例747.N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-四氢萘-6-基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物80)的合成
步骤1：5-甲基-2-(萘-2-基)吡啶的合成
将2-溴-5-甲基吡啶(3g，17.44mmol)和萘-2-基硼酸(3.60g，20.93mmol)溶解于二噁烷(40mL)和水(4mL)的混合物中。将所得混合物搅拌5min，随后添加碳酸铯(14.21g，43.60mmol)和四(三苯基磷烷)钯(0)(87.20μmol)。然后，将反应烧瓶快速抽真空且用氩气再填充。将所得混合物在65℃下搅拌12h。此后，将其冷却且蒸发。将残余物分配于EtOAc(100mL)与水(100mL)之间。收集有机相，将其经Na2SO4干燥且蒸发。使残余物经历柱色谱，以获得5-甲基-2-(萘-2-基)吡啶(0.7g，3.19mmol，18.30％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ2.388(s,3H),7.46(m,2H),7.59(d,1H),7.77(m,1H),7.84(m,1H),7.92(m,2H),8.11(m,1H),8.44(d,1H),8.56(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值219.1；实测值220.2；Rt＝1.217min。
步骤2：5-甲基-2-四氢萘-6-基哌啶的合成
将干燥的487型钯(10％于碳上)(33.97mg，319.23μmol)添加到5-甲基-2-(2-萘基)吡啶(0.7g，3.19mmol)于MeOH(10mL)中的溶液中。将所得混合物在50atm压力和80℃下氢化12h。在起始材料消耗(HNMR对照)之后，将所得混合物冷却至室温且过滤。将滤液蒸发至干，以获得5-甲基-2-四氢萘-6-基哌啶(0.35g，1.53mmol，47.80％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.82(m,3H),1.15(m,1H),1.34(m,1H),1.62(m,2H),1.76(m,6H),2.28(m,1H),2.61(m,4H),2.98(m,1H),3.48(m,1H),6.94(m,1H),7.10(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值229.1；实测值230.2；Rt＝1.01min。
步骤3：N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-四氢萘-6-基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物80)的合成
在-78℃下，将丁基锂(195.50mg，3.05mmol)(2.5M于己烷中)逐滴添加到5-甲基-2-四氢萘-6-基哌啶(350.00mg，1.53mmol)于THF(30mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加2-[(5-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸2,2,2-三氟乙酯(400.09mg，1.53mmol)。将所得混合物升温至室温且在所述温度下搅拌12h。添加NH4Cl(0.6g)水溶液。将所得混合物蒸发至干。通过HPLC(58％0.5-6.5min；水-乙腈为流动相；流速30mL/min；(装载泵4mL/min乙腈)；目标质量391；柱SunFire 100*19mm 5um)纯化残余物(1g)，以获得N-(5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-四氢萘-6-基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.027g，68.96μmol，4.52％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.03(m,3H),1.33(m,1H),1.72(m,5H),1.94(m,2H),2.19(m,1H),2.28(m,3H),2.70(m,4H),2.89(m,1H),3.43(m,1H),5.30(m,1H),7.03(m,3H),7.91(m,1H),8.17(m,1H),8.59(m,1H),11.03(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值391.2；实测值392.4；Rt＝3.68min。
实施例748.外消旋-N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-甲基嘧啶-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物107)的合成
步骤1：3-甲基-6-(2-甲基嘧啶-5-基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
将3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(9g，26.06mmol)、2-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)嘧啶(7.17g，32.58mmol)和碳酸钠(8.29g，78.19mmol，3.28mL)添加到1,4-二噁烷(75mL)和水(25mL)的混合物中。将所得混合物抽真空然后用氩气回填，将此操作重复三次，然后在氩气下添加Pd(dppf)Cl2*DCM(850.65mg，1.04mmol)。将反应混合物在氩气、70℃下搅拌12h，然后冷却且过滤。将滤饼用1,4-二噁烷(2*20ml)洗涤且丢弃。在真空中蒸发滤液，且通过硅胶柱色谱使用二氯甲烷/MTBE梯度(0-100％ MTBE)纯化残余物，以得到呈淡棕色固体的3-甲基-6-(2-甲基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(4.5g，15.55mmol，59.67％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.98(d,3H),1.22(s,9H),1.98(m,1H),2.03(m,1H),2.42(m,1H),2.73(s,3H),3.06(m,1H),4.07(d,1H),5.36(m,1H),8.52(s,2H)。
LCMS(ESI)：[M+1]m/z：计算值289.3；实测值290.2；Rt＝1.389min。
步骤2：2-甲基-5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)嘧啶的合成
将3-甲基-6-(2-甲基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.6g，5.53mmol)溶解于三氟乙酸(12g，105.24mmol，8.11mL)中。将所得溶液在25℃下搅拌1h，然后添加碎冰(20g)且将pH用氢氧化钠珠粒(6.63g，165.88mmol，3.11mL)于水(50ml)中的溶液调节至10。将所得混浊溶液转移至分液漏斗且用二氯甲烷(2*50ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(20ml)洗涤，经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到呈黄色固体的2-甲基-5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)嘧啶(0.9g，4.76mmol，86.01％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)0.98(d,3H),1.42(m,1H),1.68(m,1H),1.95(m,1H),2.52(m,1H),2.68(m,1H),2.76(s,3H),3.27(m,1H),4.04(m,1H),8.98(s,2H)。
LCMS(ESI)：[M+1]m/z：计算值189.2；实测值190.2；Rt＝0.682min。
步骤3：2-甲基-5-(5-甲基哌啶-2-基)嘧啶的合成
在0℃下，将硼氢化钠(107.95mg，2.85mmol，100.88μL)一次性添加到2-甲基-5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)嘧啶(0.9g，4.76mmol)于甲醇(15mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在0℃下搅拌1h，然后在真空中蒸发。将残余物用水(20ml)稀释且用二氯甲烷(2*40ml)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到呈黄色固体的2-甲基-5-(5-甲基-2-哌啶基)嘧啶(0.82g，4.29mmol，90.15％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)0.88(d,3H),1.21(m,1H),1.68(m,5H),2.39(m,1H),2.71(s,3H),3.15(m,1H),3.57(m,1H),8.65(s,2H)。
LCMS(ESI)：[M+1]m/z：计算值191.2；实测值192.2；Rt＝0.634min。
步骤4：外消旋-N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(2-甲基嘧啶-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物107)的合成
将TEA(1.16g，11.50mmol，1.60mL)添加到2-甲基-5-(5-甲基-2-哌啶基)嘧啶(220mg，1.15mmol)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(339.64mg，1.15mmol)和HATU(481.07mg，1.27mmol)于DMF(15mL)的混合物中。将反应混合物在25℃下搅拌1h，然后在真空中蒸发。将残余物溶解于DCM(20mL)中且添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(15.09g，57.51mmol，18.86mL，13.9％纯度)。将所得混合物在25℃下搅拌1h，然后再次在真空中蒸发。通过反相HPLC(柱：YMC Triart C18 100x20 mm，5um)使用30-40％0-5min 0.1％ NH3-甲醇作为流动相进行第一次HPLC且使用30-35％0-6min 0.1％NH3-MeCN进行第二次HPLC来纯化残余物，以得到呈白色固体的化合物107N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-甲基嘧啶-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(20mg，54.28μmol，4.72％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.08(m,3H),1.42(m,1H),1.79(m,1H),1.99(m,1H),2.12(m,5H),2.69(s,3H),3.07(m,1H),4.63(m,3H),6.07(m,1H),7.67(s,1H),8.01(s,1H),8.55(m,2H),9.27(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]m/z：计算值368.4；实测值369.2；Rt＝1.992min。
实施例749.外消旋-N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(嘧啶-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物109)的合成
步骤1：3-甲基-6-(嘧啶-5-基)-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
将3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(7g，20.27mmol)、嘧啶-5-基硼酸(3.27g，26.35mmol)和碳酸钠(6.45g，60.81mmol，2.55mL)添加到1,4-二噁烷(90mL)和水(30mL)的混合物中。将所得混合物抽真空然后用氩气回填，将此操作重复三次，然后在氩气下添加Pd(dppf)Cl2*DCM(827.02mg，1.01mmol)。将反应混合物在氩气、75℃下搅拌12h，然后冷却且过滤。将滤饼用1,4-二噁烷(2*20ml)洗涤且丢弃。在真空中蒸发滤液，且通过硅胶柱色谱使用DCM/MTBE梯度(0-100％ MTBE)纯化残余物，以得到呈淡棕色固体的3-甲基-6-嘧啶-5-基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(3.3g，11.98mmol，59.13％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)1.03(d,3H),1.21(s,9H),1.98(m,1H),2.04(m,1H),2.42(m,1H),3.07(m,1H),4.08(m,1H),5.41(d,1H),8.64(s,2H),9.09(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]m/z：计算值275.3；实测值276.2；Rt＝1.371min。
步骤2：5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)嘧啶的合成
将3-甲基-6-嘧啶-5-基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.7g，6.17mmol)溶解于三氟乙酸(14.08g，123.48mmol，9.51mL)中。将所得溶液在25℃下搅拌1h，然后添加碎冰(20g)且将pH用氢氧化钠珠粒(7.41g，185.22mmol，3.48mL)于水(50ml)中的溶液调节至10。将所得混浊溶液转移至分液漏斗且用二氯甲烷(2*50ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(20ml)洗涤，经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到呈黄色油状物的5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)嘧啶(1g，5.71mmol，92.43％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)1.02(d,3H),1.46(m,1H),1.69(m,1H),1.95(m,1H),2.59(m,1H),2.75(m,1H),3.28(m,1H),4.05(m,1H),9.08(s,2H),9.21(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]m/z：计算值175.2；实测值176.2；Rt＝0.555min。
步骤3：5-(5-甲基哌啶-2-基)嘧啶的合成
在0℃下，将硼氢化钠(129.53mg，3.42mmol，121.06μL)一次性添加到5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)嘧啶(1g，5.71mmol)于甲醇(15mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在0℃下搅拌1h，然后在真空中蒸发。将残余物用水(20ml)稀释且用DCM(2*40ml)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到呈黄色固体的5-(5-甲基-2-哌啶基)嘧啶(0.8g，4.51mmol，79.09％产率)，其直接用于下一步骤中。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.88(d,3H),1.21(m,1H),1.68(m,5H),2.44(m,1H),3.17(m,1H),3.61(m,1H),8.75(s,2H),9.11(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]m/z：计算值177.2；实测值178.2；Rt＝0.573min。
步骤4：外消旋-N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(嘧啶-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物109)的合成
将TEA(1.43g，14.10mmol，1.97mL)添加到5-(5-甲基-2-哌啶基)嘧啶(0.25g，1.41mmol)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(458.15mg，1.55mmol)和HATU(589.93mg，1.55mmol)于DMF(15mL)的混合物中。将反应混合物在25℃下搅拌1h，然后在真空中蒸发。将残余物溶解于DCM(20mL)中且添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(18.50g，70.52mmol，23.12mL，13.9％纯度)。将所得混合物在25℃下搅拌1h，然后再次在真空中蒸发。通过反相HPLC(柱：YMC Triart C18 100x20 mm，5um)使用30-30-50％0-1-5min 0.1％ NH3-甲醇作为流动相纯化残余物，以得到呈淡黄色泡沫的化合物109N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-嘧啶-5-基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(80mg，225.73μmol，16.00％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.10(m,3H),1.44(m,1H),1.84(m,1H),2.01(m,1H),2.11(m,3H),2.24(m,2H),3.08(m,1H),4.69(m,3H),6.16(m,1H),7.69(s,1H),8.03(s,1H),8.69(m,2H),9.18(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M+1]m/z：计算值354.4；实测值355.2；Rt＝1.830min。
实施例750.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[4-(1-羟基-1-甲基乙基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物672)的合成
步骤1：2-[4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]丙-2-醇的合成
在氩气气氛、-80℃下，向(2R,5S)-2-(4-溴苯基)-5-甲基哌啶(300mg，1.18mmol)于四氢呋喃(10mL)中的搅拌溶液中逐滴添加叔丁基锂(标称1.5M于正戊烷中)(1.65g，3.78mmol，2.52mL，14.7％纯度)。将所得溶液在同一温度下搅拌40min分钟。然后，将丙酮(274.21mg，4.72mmol，346.66μL)逐滴添加到溶液中。使所得反应混合物升温至室温且用20％ NH4Cl水溶液(15ml)淬灭。将所得混合物用乙酸乙酯(20ml)萃取。将有机层分离，经Na2SO4干燥且在减压下蒸发，得到2-[4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]丙-2-醇(290mg，粗品)。
1H NMR(CDCl3,400MHz):0.85(d,3H),1.28(m,2H),1.23(s,3H),1.55(s,3H),1.88(m,1H),1.87(m,2H),2.39(t,1H),2.60(s,1H),3.10(m,1H),3.53(m,1H),7.34(m,2H),7.42(m,2H),未观测到NH。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值233.2；实测值234.2；Rt＝0.843min。
步骤2：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[4-(1-羟基-1-甲基乙基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物672)的合成
向2-[4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]丙-2-醇(290mg，1.24mmol)、2-[(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(260mg，1.33mmol)和三乙胺(251.51mg，2.49mmol，346.44μL)于二甲基甲酰胺(3mL)中的搅拌混合物中添加HATU(519.80mg，1.37mmol)。将所得反应混合物在20℃下搅拌4h。然后，使其经历HPLC(柱：YMC-ActusTriart C18 100*20mml.D.S-5um；0-5min 20-70％水-MeOH(NH30.1％)，流速30ml/min)，得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[4-(1-羟基-1-甲基乙基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(200mg，487.20μmol，39.20％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.00(m,3H),1.39(m,8H),1.67(m,1H),1.85(m,1H),1.97(m,4H),2.21(m,1H),2.70(m,1H),3.61(m,1H),4.95(s,1H),5.57(m,3H),7.23(m,2H),7.46(m,3H),7.98(m,1H),10.47(m,1H)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值410.3；实测值411.2；Rt＝1.475min。
实施例751.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[4-(1-羟基乙基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物956)的合成
步骤1：1-[4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]乙醇的合成
将(2R,5S)-2-(4-溴苯基)-5-甲基哌啶(0.5g，1.97mmol)溶解于THF(10mL)中且冷却，随后添加丁基锂(2.5M,786.89μL)且搅拌10min。在短暂延迟后，一次性添加甲醛(173.32mg，3.93mmol)且将反应混合物缓慢升温至0℃，倾倒在NH4Cl水溶液上且用EtOAc(20mL)萃取。蒸发有机溶剂，得到粗品1-[4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]乙醇(0.5g，粗品)，其不经纯化即用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值219.2；实测值220.2；Rt＝0.701min。
步骤2：N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-[4-(1-羟基乙基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
在轻微加热下，将2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(419.24mg，1.42mmol)、1-[4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯基]乙醇(311.39mg，1.42mmol，185.76μL)和DIPEA(550.47mg，4.26mmol，741.88μL)溶解于DMSO(6mL)中。在剧烈搅拌和偶尔加热下，小批量添加HATU(647.81mg，1.70mmol)。在反应完成之后，通过HPLC(34-40％0.5-5.5min水-乙腈；流速30ml/min(装载泵4ml/min乙腈)；目标质量496；柱SunFireC18 100x19 mm 5um(R))纯化混合物，以得到N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-[4-(1-羟基乙基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(90mg，181.23μmol，12.76％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值496.3；实测值497.2；Rt＝3.130min。
步骤3：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[4-(1-羟基乙基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物956)的合成
将N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-[4-(1-羟基乙基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(80mg，136.93μmol)溶解于二噁烷(3mL)和h2o(1mL)中。将所获得的溶液在100℃下搅拌3hr；在反应完成之后，使混合物经历HPLC(19％0.5-6.5min水-乙腈；流速30ml/min(装载泵4ml/min乙腈)；目标质量396；柱SunFireC18 100x19 mm 5um(R))，以得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-[4-(1-羟基乙基)苯基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(35mg，88.28μmol，64.47％产率)
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.97-1.01(m,3H),1.27-1.33(m,4H),1.60-1.67(m,1H),1.80-1.90(m,1H),1.95-2.04(m,4H),2.15-2.25(m,1H),2.67-3.21(m,1H),3.39-4.03(m,1H),4.67-5.10(m,2H),5.55(s,1H),5.56-5.63(m,2H),7.19-7.28(m,2H),7.29-7.35(m,2H),7.41-7.50(m,1H),7.93-8.04(m,1H),10.47(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值396.3；实测值397.2；Rt＝1.997min。
实施例752.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(3,4,5-三氟苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物478)的合成
步骤1：3,4,5-三氟苯甲酰氯的合成
将3,4,5-三氟苯甲酸(25g，141.97mmol)分批添加到亚硫酰氯(50.67g，425.91mmol)于CHCl3(100mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在68℃下搅拌15h，然后在真空中蒸发。将残余物倒入到己烷(200ml)中且过滤。将滤液干燥且在真空中蒸发，以得到3,4,5-三氟苯甲酰氯(22.1g，113.60mmol，80.02％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)7.79(s,2H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值194.2；实测值195.2；Rt＝1.205min。
步骤2：(5S)-5-甲基-2-氧代-3-(3,4,5-三氟苯甲酰基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
在Ar气氛、-78℃下，向(5S)-5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.1g，19.22mmol)于THF(100mL)中的溶液中逐滴添加98％双(三甲基甲硅烷基)酰胺化钠(7.76g，42.29mmol，27mL)。使所得混合物搅拌1h。将3,4,5-三氟苯甲酰氯(4.11g，21.15mmol)逐滴添加到t-boc-内酰胺中，使内部温度维持低于-70℃。将溶液升温至室温且逐滴添加于水(20mL)中的硫酸氢钠(10.16g，84.59mmol)。将水层用EtOAc萃取3x 50mL且将有机层合并，经Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩。获得呈黄色油状物的(5S)-5-甲基-2-氧代-3-(3,4,5-三氟苯甲酰基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(10.2g，粗品)且其不经进一步纯化即用于下一步骤中。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.02(d,3H),1.56(s,9H),2.24(m,3H),3.26(m,2H),3.96(m,1H),7.17(s,1H),7.72(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值271.2；实测值272.2；Rt＝1.617min。
步骤3：(S)-3-甲基-6-(3,4,5-三氟苯基)-2,3,4,5-四氢吡啶的合成
将(5S)-5-甲基-2-氧代-3-(3,4,5-三氟苯甲酰基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(10.2g，27.47mmol)溶解于氯化氢(40mL)中且分批添加CH3COOH(30mL)。添加完成之后，将所得混合物在110℃下搅拌16h。然后，在减压下移除溶剂且将残余物分配于1N HCl(150ml)与DCM(30ml)之间。分离有机层且丢弃。将水层用10％ NaHCO3碱化至ph≈9且用DCM(2x60 ml)萃取。将DCM溶液分离，经K2CO3干燥且在减压下蒸发，得到(3S)-3-甲基-6-(3,4,5-三氟苯基)-2,3,4,5-四氢吡啶(4.2g，18.48mmol，67.29％产率)。
步骤4：(2R,5S)-5-甲基-2-(3,4,5-三氟苯基)哌啶的合成
在0℃下，将硼氢化钠(1.40g，36.97mmol，1.31mL)一次性添加到(3S)-3-甲基-6-(3,4,5-三氟苯基)-2,3,4,5-四氢吡啶(4.2g，18.48mmol)于MeOH(50mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在0℃下搅拌4h，然后在真空中蒸发。将残余物用水(20mL)稀释且用DCM(2*50mL)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以得到(2R,5S)-5-甲基-2-(3,4,5-三氟苯基)哌啶(4.1g，17.89mmol，96.76％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.88(d,3H),1.14(m,1H),1.48(m,1H),1.65(m,2H),1.87(m,2H),2.38(t,1H),3.13(d,1H),3.49(d,1H),7.02(s,2H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值229.2；实测值230.2；Rt＝0.618min。
步骤5：(3-甲基-5-(2-(5-甲基-2-(3,4,5-三氟苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
将2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(5.28g，17.89mmol)和5-甲基-2-(3,4,5-三氟苯基)哌啶(4.1g，17.89mmol)混合于DMF(100mL)中。将反应悬浮液冷却至0℃且添加HATU(8.84g，23.25mmol)，随后添加TEA(5.43g，53.66mmol，7.48mL)，且在环境温度下搅拌14h。将反应混合物在真空中蒸发且倒入到水(300ml)中且用EtOAc(2x100 ml)萃取。将合并的有机萃取物用水(2*50ml)洗涤，经硫酸钠干燥且在真空中蒸发，以留下8.2g粗产物，8.2g粗产物通过硅胶柱色谱使用己烷/MTBE梯度(10-100％MTBE)进行纯化，以得到产物N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-(3,4,5-三氟苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(5.5g，10.86mmol，60.71％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.12(d,3H),1.56(s,9H),1.98(m,1H),2.24(s,3H),2.36(m,5H),3.12(m,1H),4.68(m,1H),6.20(m,1H),6.98(m,2H),8.32(m,2H),9.48(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值506.2；实测值507.2；Rt＝1.477min。
步骤6：手性分离
使N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-(3,4,5-三氟苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(10.5g，20.73mmol)(具有约10％顺式异构体)经历手性HPLC纯化(柱：AD-H III(250*30mm，20um)，洗脱液：CO2-MeOH，60-40，90ml/min补充流速-30ml/min)，以获得呈白色固体的纯产物N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(3,4,5-三氟苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(6.1g，12.04mmol，58.10％产率)。
保留时间：5.59min
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)1.09(d,3H),1.41(m,1H),1.56(s,9H),1.86(m,1H),2.04(m,2H),2.28(m,1H),2.31(s,3H),3.26(m,1H),4.68(m,1H),6.20(m,1H),6.71(m,1H),6.90(m,2H),8.03(m,1H),8.38(m,1H),9.32(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值506.2；实测值507.2；Rt＝1.354min。
步骤7：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-((2R,5S)-5-甲基-2-(3,4,5-三氟苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物478)的合成
在室温下将水(50mL)添加到N-[3-甲基-5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(3,4,5-三氟苯基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(6.1g，12.04mmol)于二噁烷(100mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在95℃下搅拌15h，然后在真空中蒸发，留下4.75g粗产物，4.75g粗产物通过硅胶柱色谱使用MTBE/MeOH梯度(10-100％MeOH)纯化，以得到4.3g纯产物，将其用MeOH稀释，在旋转蒸发器中在30℃下蒸发，然后在油泵(0.5mm Hg)下在35℃下干燥12h，以获得呈白色固体的纯产物5-[[2-[(2R,5S)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(23.4g，60.87mmol，66.29％产率)化合物478。a21D＝+103.2(EtOH,0.25M)
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.96-1.01(m,3H),1.25-1.36(m,1H),1.56-1.69(m,1H),1.81-1.93(m,1H),1.97-2.09(m,4H),2.11-2.23(m,1H),2.72-3.24(m,1H),3.38-4.02(m,1H),5.05-5.49(m,1H),5.57-5.66(m,2H),7.20-7.32(m,2H),7.42-7.50(m,1H),7.93-8.02(m,1H),10.42-10.60(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值406.2；实测值407.2；Rt＝1.752min。
实施例753.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-(1-甲基苯并咪唑-4-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物132)的合成
步骤1：1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并咪唑的合成
将乙酸钾(3.72g，37.90mmol，2.37mL)添加到4-溴-1-甲基苯并咪唑(4g，18.95mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(5.78g，22.74mmol)于二噁烷(50mL)中的溶液中。将反应烧瓶抽真空且用氩气再填充3次。然后，在氩气流下添加PdCl2DPPF*CH2Cl2(773.85mg，947.61μmol)。在惰性气氛下将所得混合物在100℃下搅拌48h。然后，将其冷却，用MTBE(80ml)稀释且过滤。将滤液在减压下浓缩，得到1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并咪唑(6.49g，粗品)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ1.18(m,12H),3.82(s,3H),7.23(dd,1H),7.52(d,1H),7.64(d,1H),8.15(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M-C6H12]+m/z：计算值176.1；实测值177.2；Rt＝0.481min。
步骤2：6-(1-甲基苯并咪唑-4-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将碳酸钾(6.46g，46.77mmol，2.82mL)添加到1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并咪唑(6.49g，15.59mmol)和6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(6.18g，17.15mmol)于二噁烷(50mL)和水(15mL)中的溶液中。将反应烧瓶抽真空且用氩气再填充3次。然后，在氩气流下添加PdCl2DPPF*CH2Cl2(636.51mg，779.43μmol)。在惰性气氛下将所得混合物在60℃下搅拌18h。然后，在减压下移除溶剂且通过柱色谱(RediSep柱：330g；22-38％氯仿-MeCN；流速：90ml/min)纯化残余物，得到6-(1-甲基苯并咪唑-4-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(4.1g，13.08mmol，83.92％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ1.02(s,9H),1.24(m,1H),1.40(m,1H),1.66(m,2H),1.95(s,3H),2.37(m,1H),3.83(m,1H),5.75(m,1H),7.26(m,3H),7.84(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值313.2；实测值314.2；Rt＝0.986min。
步骤3：1-甲基-4-(2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯并咪唑的合成
将6-(1-甲基苯并咪唑-4-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(4.1g，13.08mmol)溶解于三氟乙酸(22.38g，196.24mmol，15.12mL)中。将所得溶液在25℃下搅拌1h。然后，将其倒入到氢氧化钠(10.47g，261.65mmol，4.91mL)于水(150ml)中的冰冷溶液中。将所得混合物用DCM(4*30ml)萃取。在经Na2SO4干燥之后，在减压下移除溶剂，得到1-甲基-4-(2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯并咪唑(2.1g，9.85mmol，75.26％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.21(m,1H),1.74(m,2H),1.88(m,2H),2.30(m,1H),3.09(m,1H),3.88(s,3H),5.27(m,1H),7.31(m,2H),7.57(d,1H),7.87(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值213.1；实测值214.2；Rt＝0.818min。
步骤4：1-甲基-4-(2-哌啶基)苯并咪唑的合成
将1-甲基-4-(2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯并咪唑(2.1g，9.85mmol)溶解于甲醇(40mL)中，且在20min期间分批添加硼氢化钠(744.97mg，19.69mmol，696.23μL)。在添加完成之后，将所得混合物在25℃下搅拌1h。然后，将其在减压下浓缩且将残余物分配于水(20ml)与EtOAc(40ml)之间。将有机层分离，经Na2SO4干燥且用4M二噁烷/HCl酸化。将所得沉淀过滤且干燥，得到1-甲基-4-(2-哌啶基)苯并咪唑(2.18g，7.56mmol，76.82％产率，2HCl)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.04(m,1H),1.85(m,6H),3.10(m,1H),3.42(m,1H),4.05(s,3H),5.12(m,1H),7.66(dd,1H),7.95(m,2H),9.57(s,1H),10.01(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值215.1；实测值216.1；Rt＝0.748min。
步骤5：N-[3-甲基-5-[[2-[2-(1-甲基苯并咪唑-4-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(205.74mg，696.72μmol)、HATU(291.41mg，766.39μmol)和三乙胺(352.51mg，3.48mmol，485.55μL)一起混合于二甲基甲酰胺(1.5mL)中且添加1-甲基-4-(2-哌啶基)苯并咪唑(150mg，696.72μmol，2HCl)。将所得混合物在25℃下搅拌15h。然后，将其用水(10ml)稀释且用乙酸乙酯(2*15ml)萃取。将有机层用水(3*10ml)和盐水(20ml)洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩，得到N-[3-甲基-5-[[2-[2-(1-甲基苯并咪唑-4-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(170mg，345.13μmol，49.54％产率)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值492.2；实测值494.2；Rt＝1.048min。
步骤6：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-(1-甲基苯并咪唑-4-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物132)的合成
将于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(1.52g，4.16mmol，1.5mL，10％纯度)添加到N-[3-甲基-5-[[2-[2-(1-甲基苯并咪唑-4-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(170mg，345.13μmol)于二氯甲烷(2mL)中的溶液中。将所得混合物在25℃下搅拌15h。然后，将其在减压下浓缩且使残余物经历HPLC(柱：YMC-Actus Triart C18100*20mm，5um；0-5min 20-70％水-甲醇(NH3 0.1％)，流速30ml/min)，得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-(1-甲基苯并咪唑-4-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(26mg，66.25μmol，19.20％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.30(m,2H),1.61(m,2H),1.91(m,1H),2.01(m,3H),2.91(m,1H),3.47(m,1H),3.85(m,3H),4.15(m,1H),5.76(m,3H),7.10(m,1H),7.28(m,1H),7.50(m,2H),7.98(m,1H),8.24(m,1H),10.70(d,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值392.2；实测值393.2；Rt＝1.766min。
实施例754.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-(1H-苯并咪唑-4-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物142)的合成
步骤1：4-溴-1-四氢吡喃-2-基苯并咪唑的合成
将二氢吡喃(3.84g，45.68mmol，4.15mL)和对甲苯磺酸单水合物(144.81mg，761.30μmol，116.78μL)添加到4-溴-1H-苯并咪唑(3g，15.23mmol)于氯仿(50mL)中的悬浮液中。将所得混合物在60℃下搅拌20h。然后，将其冷却至室温且在剧烈搅拌的情况下添加过量固体NaHCO3，随后添加1ml水。当CO2逸出停止时，通过硅胶垫过滤混合物。将滤液在减压下浓缩且将残余物用冷己烷(30ml)研磨。将所得固体过滤且干燥，得到4-溴-1-四氢吡喃-2-基苯并咪唑(3.76g，13.37mmol，87.84％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ1.76(m,4H),2.13(m,3H),3.75(m,1H),4.12(m,1H),5.48(m,1H),7.17(dd,1H),7.48(m,2H),8.12(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值280.0；实测值281.2；Rt＝1.127min。
步骤2：1-四氢吡喃-2-基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并咪唑的合成
将乙酸钾(2.63g，26.75mmol，1.67mL)添加到4-溴-1-四氢吡喃-2-基苯并咪唑(3.76g，13.37mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(4.08g，16.05mmol)于二噁烷(30mL)中的溶液中。将反应烧瓶抽真空且用氩气再填充3次。然后，在氩气流下添加PdCl2DPPF*CH2Cl2(436.86mg，534.95μmol)。在惰性气氛下将所得混合物在100℃下搅拌48h。然后，将其冷却，用MTBE(50ml)稀释且过滤。将滤液在减压下浓缩，得到1-四氢吡喃-2-基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并咪唑(6.09g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M-THP]+m/z：计算值244.2；实测值247.2；Rt＝0.827min。
步骤3：6-(1-四氢吡喃-2-基苯并咪唑-4-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将碳酸钾(3.19g，23.06mmol，1.39mL)添加到1-四氢吡喃-2-基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并咪唑(5.74g，11.53mmol)和6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(4.98g，13.84mmol)于二噁烷(50mL)和水(10mL)中的溶液中。将反应烧瓶抽真空且用氩气再填充3次。然后，在氩气流下添加PdCl2DPPF*CH2Cl2(376.71mg，461.30μmol)。在惰性气氛下将所得混合物在60℃下搅拌18h。然后，在减压下移除溶剂且通过柱色谱(RediSep柱：220g；0-20％氯仿-MeCN；流速：85ml/min)纯化残余物，得到6-(1-四氢吡喃-2-基苯并咪唑-4-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(3.4g，8.87mmol，76.88％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.81(s,9H),1.21(m,2H),1.66(m,4H),1.92(m,2H),2.06(m,2H),2.33(m,1H),3.72(m,1H),3.82(m,1H),4.10(m,1H),5.47(m,1H),5.66(s,1H),7.19(m,2H),7.36(d,1H),8.01(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值383.2；实测值384.2；Rt＝1.205min。
步骤4：1-四氢吡喃-2-基-4-(2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯并咪唑的合成
将6-(1-四氢吡喃-2-基苯并咪唑-4-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(3.4g，8.87mmol)溶解于三氟乙酸(15.16g，132.99mmol，10.25mL)中。将所得溶液在25℃下搅拌1h。然后，将其倒入到氢氧化钠(7.09g，177.32mmol，3.33mL)于水(150ml)中的冰冷溶液中。将所得混合物用DCM(4*30ml)萃取。在经Na2SO4干燥之后，在减压下移除溶剂，得到1-四氢吡喃-2-基-4-(2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯并咪唑(2g，7.06mmol，79.61％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值283.2；实测值284.2；Rt＝0.906min。
步骤5：4-(2-哌啶基)-1-四氢吡喃-2-基苯并咪唑)的合成
将1-四氢吡喃-2-基-4-(2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯并咪唑(2g，7.06mmol)溶解于甲醇(40mL)中，且在20min期间分批添加硼氢化钠(534.04mg，14.12mmol，499.11μL)。在添加完成之后，将所得混合物在25℃下搅拌1h。然后，将其在减压下浓缩且将残余物分配于水(20ml)与EtOAc(40ml)之间。将有机层分离，经Na2SO4干燥且用4M二噁烷/HCl酸化。将所得沉淀过滤且干燥，得到4-(2-哌啶基)-1-四氢吡喃-2-基苯并咪唑(2.3g，6.42mmol，90.95％产率，2HCl)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ1.15(m,1H),1.82(m,2H),1.98(m,5H),3.09(m,2H),3.39(m,2H),3.79(m,1H),3.99(m,1H),5.02(m,1H),5.17(m,1H),5.89(m,1H),7.66(m,2H),7.92(m,2H),9.55(m,2H),9.74(s,1H),10.04(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值285.2；实测值286.2；Rt＝0.883min。
步骤6：4-(2-哌啶基)-1H-苯并咪唑的合成
将于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(3.03g，8.31mmol，3mL，10％纯度)添加到4-(2-哌啶基)-1-四氢吡喃-2-基苯并咪唑(2.3g，6.42mmol，2HCl)于甲醇(30mL)中的溶液中。将所得溶液在60℃下搅拌15h。然后，在减压下移除溶剂且将残余物用乙酸乙酯(20ml)研磨。将所得沉淀过滤且干燥，得到4-(2-哌啶基)-1H-苯并咪唑(1.6g，5.84mmol，90.91％产率，2HCl)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.85(m,6H),(m,2H),3.40(m,2H),5.14(m,1H),7.63(dd,1H),7.85(d,1H),7.95(d,1H),9.56(m,1H),9.67(s,1H),9.95(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值201.1；实测值202.2；Rt＝0.623min。
步骤7：N-[5-[[2-[2-(1H-苯并咪唑-4-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(269.24mg，911.78μmol)、HATU(381.35mg，1.00mmol)和三乙胺(461.32mg，4.56mmol，635.42μL)一起混合于二甲基甲酰胺(2mL)中且添加4-(2-哌啶基)-1H-苯并咪唑(250mg，911.78μmol，2HCl)。将所得混合物在25℃下搅拌4h。然后，使其经历HPLC(柱：YMC TriartC18 100*20mm，5um；40-40-90％0-1-6min 0.1％ NH3-甲醇，流速：30ml/min)，得到N-[5-[[2-[2-(1H-苯并咪唑-4-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(128mg，267.48μmol，29.34％产率)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值478.2；实测值480.2；Rt＝2.824min。
步骤8：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-(1H-苯并咪唑-4-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物142)的合成
将于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(1.46g，4.01mmol，1.45mL，10％纯度)添加到N-[5-[[2-[2-(1H-苯并咪唑-4-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(128mg，267.48μmol)于二氯甲烷(2mL)中的溶液中。将所得混合物在25℃下搅拌16h。然后，将其在减压下浓缩且使残余物经历HPLC(柱：YMC-Actus Triart C18 100*20mm，5um；0-5min 20-45％水-乙腈(NH3 0.1％)，流速30ml/min)，得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-(1H-苯并咪唑-4-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(51mg，134.77μmol，50.38％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.25(m,1H),1.47(m,1H),1.56(m,1H),1.64(m,1H),1.90(m,1H),1.98(m,3H),3.03(m,1H),3.44(m,1H),4.04(m,1H),5.58(m,3H),7.07(m,1H),7.19(m,1H),7.46(m,2H),7.94(m,1H),8.24(m,1H),10.54(m,1H),12.38(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+2H]+m/z：计算值378.2；实测值380.2；Rt＝0.734min。
实施例755.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[2-(2-氧代吲哚啉-4-基)-1-哌啶基]乙酰胺(化合物116)的合成
步骤1：6-(2-氧代吲哚啉-4-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(8g，24.15mmol)、4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吲哚啉-2-酮(5.96g，23.00mmol)和碳酸钠(7.31g，68.99mmol，2.89mL)于二噁烷(100mL)和水(20mL)中的悬浮液脱气且用Ar再填充三次。向此溶液中添加Pd(dppf)Cl2*DCM(939.00mg，1.15mmol)。将所得混合物脱气，用Ar再填充且在65℃下搅拌12h。过滤出沉淀，将其用二噁烷(50ml)洗涤。在真空中蒸发溶剂且将残余物溶解于150ml水中且用EtOAc(2*100ml)萃取。将合并的有机层用盐水(100ml)洗涤，经Na2SO4干燥且蒸发，以获得粗产物(9g)。通过梯度色谱(SiO2；己烷-EtOAc)纯化粗产物，以获得6-(2-氧代吲哚啉-4-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(4.2g，13.36mmol，58.09％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ1.00(s,9H),1.21(m,2H),1.84(m,2H),2.25(m,2H),3.62(m,2H),5.24(s,1H),6.68(d,1H),6.76(d,1H),7.07(dd,1H),10.27(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值214.2；实测值215.2；Rt＝1.330min。
步骤2：4-(2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)吲哚啉-2-酮的合成
将6-(2-氧代吲哚啉-4-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(4.2g，13.36mmol)溶解于三氟乙酸(1.52g，13.36mmol，1.03mL)中。将所得混合物在25℃下搅拌2h(直至气体逸出结束)。将溶液的pH用10％NaOH溶液调节至8且用DCM(3*70ml)萃取。将合并的有机层用盐水(50ml)洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中蒸发，以获得4-(2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)吲哚啉-2-酮(2.5g，11.67mmol，87.34％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.56(m,2H),1.72(m,2H),2.53(m,2H),3.58(s,2H),3.73(m,2H),6.83(dd,1H),7.21(m,2H),10.37(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值214.2；实测值215.2；Rt＝0.513min。
步骤3：4-(2-哌啶基)吲哚啉-2-酮的合成
在0℃下，向4-(2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)吲哚啉-2-酮(2.5g，11.67mmol)于甲醇(50mL)中的溶液中分批添加硼氢化钠(441.43mg，11.67mmol，412.55μL)。将所得混合物在环境温度下搅拌2h且蒸发。将残余物溶解于水(50ml)中且用DCM(3*50ml)萃取。将合并的有机层用盐水(2*40ml)洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中蒸发，以获得4-(2-哌啶基)吲哚啉-2-酮(1.9g，8.78mmol，75.29％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值216.2；实测值217.2；Rt＝0.599min。
步骤4：N-[3-甲基-5-[[2-氧代-2-[2-(2-氧代吲哚啉-4-基)-1-哌啶基]乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
向4-(2-哌啶基)吲哚啉-2-酮(0.3g，1.39mmol)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(409.60mg，1.39mmol)和HATU(527.42mg，1.39mmol)于DMF(3mL)中的悬浮液中添加三乙胺(701.80mg，6.94mmol，966.67μL)。将所得混合物在环境温度下搅拌12h，溶解于水(40ml)中且用EtOAc(3*20ml)萃取。将合并的有机层用盐水(3*20ml)洗涤，经Na2SO4干燥且蒸发，以获得N-[3-甲基-5-[[2-氧代-2-[2-(2-氧代吲哚啉-4-基)-1-哌啶基]乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.6g，粗品)。此化合物不经纯化即用于下一步骤。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ1.43(s,9H),1.65(m,4H),2.18(s,3H),2.29(m,2H),2.68(m,2H),3.50(m,2H),5.54(m,1H),6.76(dd,1H),7.01(d,1H),7.21(d,1H),7.95(s,1H),8.45(s,1H),9.05(s,1H),10.42(s,1H),11.00(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值393.2；实测值394.2；Rt＝1.191min。
步骤5：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[2-(2-氧代吲哚啉-4-基)-1-哌啶基]乙酰胺(化合物116)的合成
向N-[3-甲基-5-[[2-氧代-2-[2-(2-氧代吲哚啉-4-基)-1-哌啶基]乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.6g，1.22mmol)于DCM(20mL)中的溶液中添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(8.00g，219.41mmol，10mL)。将所得混合物在25℃下搅拌12h且在真空中蒸发，以获得粗产物(0.8g)。通过HPLC(40-40-80％0-1-6min 0.1％ NH3-甲醇，流速：30ml/min(装载泵4ml/min甲醇)，目标质量393，柱：YMC Triart C18 100*20mm，5um)纯化粗产物，以得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[2-(2-氧代吲哚啉-4-基)-1-哌啶基]乙酰胺(115mg，292.30μmol，24.04％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO+CCl4)δ1.54(m,1H),1.65(m,3H),1.83(m,1H),2.02(m,3H),2.31(m,1H),3.06(m,1H),3.46(m,2H),3.99(m,1H),5.54(m,1H),5.62(m,2H),6.77(m,1H),6.96(m,1H),7.21(m,1H),7.46(m,1H),7.99(m,1H),10.41(m,1H),10.48(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值393.2；实测值394.2；Rt＝1.995min。
实施例756.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代吲哚啉-4-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物714)的合成
步骤1：3-甲基-6-(2-氧代吲哚啉-4-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将碳酸钠(4.91g，46.31mmol，1.94mL)添加到3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(8.80g，25.47mmol)和4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吲哚啉-2-酮(6g，23.16mmol)于二噁烷(90mL)和水(30mL)中的溶液中。将反应烧瓶抽真空且用氩气再填充3次。然后，在氩气流下添加Pd(dppf)Cl2*DCM(945.52mg，1.16mmol)，在惰性气氛下将所得混合物在90℃下搅拌14h。然后，将混合物蒸发，以得到粗产物(21g)，其通过梯度柱色谱(SiO2；己烷-MeOH)进行纯化，以得到3-甲基-6-(2-氧代吲哚啉-4-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(5.2g，15.83mmol，68.38％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ1.04(s,9H),1.28(m,2H),1.33(d,3H),1.46(m,1H),1.86(m,1H),2.04(m,1H),3.47(m,2H),5.25(s,1H),6.77(d,1H),6.95(d,1H),7.16(dd,1H),8.30(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值228.2；实测值229.2；Rt＝1.376min
步骤2：4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)吲哚啉-2-酮的合成
向3-甲基-6-(2-氧代吲哚啉-4-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(2g，6.09mmol)中添加三氟乙酸(6.94g，60.90mmol，4.69mL)且将反应混合物在25℃下搅拌1h。蒸发TFA。将残余物用氯仿稀释且蒸发至干，以得到4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)吲哚啉-2-酮(1.1g，粗品)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.05(m,2H),1.43(m,3H),2.12(m,1H),3.19(m,1H),3.41(m,2H),3.82(m,2H),4.05(m,1H),7.24(m,2H),7.41(dd,1H),9.43(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值228.1；实测值229.2；Rt＝0.683min。
步骤3：4-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]吲哚啉-2-酮的合成
向4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)吲哚啉-2-酮(1.1g，4.82mmol)于MeOH(15mL)中的预冷却(0℃)溶液中分批添加硼氢化钠(218.75mg，5.78mmol，204.44μL)。然后将反应混合物在25℃下搅拌1h。将MeOH蒸发，将残余物再溶解于MeOH(5ml)中且添加HCl(于二噁烷中的4.0M溶液，5ml)。将混合物搅拌15min且将溶剂蒸发，以得到粗品固体。将产物用THF(2*10ml)洗涤，在真空中干燥，以得到4-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]吲哚啉-2-酮(2.1g，粗品，HCl)。
产物含有约17％ NaCl。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ0.93(m,2H),1.03(m,2H),1.28(m,2H),1.86(m,2H),3.58(m,1H),3.78(m,3H),4.01(m,2H),6.84(d,1H),7.24(dd,1H),7.37(d,1H),9.58(m,1H),10.56(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值230.1；实测值231.2；Rt＝0.611min。
步骤4：N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代吲哚啉-4-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
向4-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]吲哚啉-2-酮(330mg，1.24mmol，HCl)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(365.29mg，1.24mmol)和三乙胺(876.23mg，8.66mmol，1.21mL)于DMF(4mL)中的溶液中分批添加HATU(517.40mg，1.36mmol)。将混合物在25℃下搅拌2h。将反应混合物用水(50ml)稀释且将产物用EtOAc(3*25ml)萃取。将合并的有机层用水、盐水洗涤且经Na2SO4干燥。将溶剂蒸发，以得到N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代吲哚啉-4-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(260mg，512.23μmol，41.41％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.96(m,3H),1.13(m,1H),1.40(s,9H),1.95(m,2H),2.14(m,3H),2.65(m,5H),2.85(m,1H),3.98(m,1H),5.31(m,1H),6.71(d,1H),6.94(d,1H),7.16(dd,1H),7.91(m,1H),8.40(m,1H),9.02(s,1H),10.38(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值507.2；实测值508.2；Rt＝1.242min。
步骤5：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代吲哚啉-4-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物714)的合成
向N-[3-甲基-5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代吲哚啉-4-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(260mg，512.23μmol)于DCM(10mL)中的搅拌溶液中添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(186.77mg，5.12mmol，233.46μL)。将反应混合物在25℃下搅拌4h。在真空中蒸发溶剂，以得到粗产物(250mg)，其通过反相HPLC(0-5min 15-65％水-甲醇(NH3 0.1％)，流速30ml/min(装载泵4ml/min甲醇(NH3 0.1％))，目标质量407.48柱：YMC-Actus Triart C18100*20mml.D.S-5um)进行纯化，以得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(2-氧代吲哚啉-4-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(44mg，107.98μmol，21.08％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)0.98(m,3H),1.24(m,1H),1.98(m,7H),3.45(m,3H),5.46(m,3H),6.69(m,1H),6.94(m,1H),7.17(m,1H),7.35(m,1H),7.89(m,1H),10.43(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值407.2；实测值408.2；Rt＝1.816min。
实施例757.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-(1,3-苯并噻唑-4-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物129)的合成
步骤1：6-(1,3-苯并噻唑-4-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(9.5g，28.67mmol)、4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噻唑(7.13g，27.31mmol)和碳酸钠(8.68g，81.93mmol，3.43mL)于二噁烷(100mL)和水(25mL)中的悬浮液脱气且用Ar再填充三次。向此溶液中添加Pd(dppf)Cl2*DCM(1.12g，1.37mmol)。将所得混合物脱气，用Ar再填充且在60℃下搅拌12h。过滤出沉淀，将其用二噁烷(50ml)洗涤。在真空中蒸发溶剂且将残余物溶解于150ml水中且用EtOAc(2*100ml)萃取。将合并的有机层用盐水(100ml)洗涤，经Na2SO4干燥且蒸发，以获得粗产物(9g)。通过梯度色谱纯化粗产物(SiO2，己烷-EtOAc)，以获得6-(1,3-苯并噻唑-4-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(3.5g，11.06mmol，40.50％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ0.89(s,9H),1.92(m,2H),2.33(m,2H),3.74(m,2H),5.36(m,1H),7.36(m,2H),7.94(d,1H),9.21(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值216.2；实测值217.2；Rt＝1.540min。
步骤2：4-(2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1,3-苯并噻唑的合成
将6-(1,3-苯并噻唑-4-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(3.5g，11.06mmol)溶解于三氟乙酸(12.61g，110.61mmol，8.52mL)中。将所得混合物在25℃下搅拌2h(直至气体逸出结束)。将溶液的pH用10％ NaOH溶液调节至8且用DCM(3*70ml)萃取。将合并的有机层用盐水(50ml)洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中蒸发，以获得4-(2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1,3-苯并噻唑(2.3g，10.63mmol，96.13％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ1.64(m,2H),1.76(m,2H),2.91(m,2H),3.73(m,2H),7.47(dd,1H),7.59(d,1H),8.17(d,1H),9.41(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值216.2；实测值217.2；Rt＝0.727min。
步骤3：4-(2-哌啶基)-1,3-苯并噻唑的合成
在0℃下，向4-(2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1,3-苯并噻唑(2.3g，10.63mmol)于MeOH(50mL)中的溶液中分批添加硼氢化钠(402.29mg，10.63mmol，375.97μL)。将所得混合物在环境温度下搅拌2h且蒸发。将残余物溶解于水(50ml)中且用DCM(3*50ml)萃取。将合并的有机层用盐水(2*40ml)洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中蒸发，以获得4-(2-哌啶基)-1,3-苯并噻唑(1.75g，8.02mmol，75.38％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.48(m,4H),1.88(m,2H),2.74(m,1H),3.11(m,1H),4.46(m,1H),7.44(dd,1H),7.50(d,1H),8.00(d,1H),9.37(s,1H),未观测到NH。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值218.1；实测值219.0；Rt＝0.877min。
步骤4：N-[5-[[2-[2-(1,3-苯并噻唑-4-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
向4-(2-哌啶基)-1,3-苯并噻唑(0.4g，1.83mmol)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(541.03mg，1.83mmol)和HATU(696.66mg，1.83mmol)于DMF(3mL)中的悬浮液中添加三乙胺(927.00mg，9.16mmol，1.28mL)。将所得混合物在环境温度下搅拌12h，溶解于水(40ml)中且用EtOAc(3*20ml)萃取。将合并的有机层用盐水(3*20ml)洗涤，经Na2SO4干燥且蒸发，以获得N-[5-[[2-[2-(1,3-苯并噻唑-4-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.9g，粗品)。此化合物不经纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.43(s,9H),1.59(m,2H),1.74(m,2H),1.98(m,2H),2.19(s,3H),2.68(m,2H),3.67(m,1H),3.93(m,1H),7.41(m,2H),8.12(m,1H),8.46(m,1H),9.07(m,1H),9.44(m,1H),11.02(m,1H)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值495.2；实测值496.2；Rt＝1.316min。
步骤5：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-(1,3-苯并噻唑-4-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物129)的合成
向N-[5-[[2-[2-(1,3-苯并噻唑-4-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.9g，1.82mmol)于DCM(20mL)中的溶液中添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(8.00g，219.41mmol，10mL)。将所得混合物在25℃下搅拌12h且在真空中蒸发，以获得粗产物(0.8g)。通过HPLC(40/60％0-4min 0.1％ NH3-甲醇，流速：30ml/min(装载泵4ml/min甲醇)，目标质量395，柱：YMC Triart C18 100*20mm，5um)纯化粗产物，以得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-(1,3-苯并噻唑-4-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(311mg，786.39μmol，43.30％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO+CCl4)δ1.31(m,1H),1.63(m,2H),1.75(m,1H),2.06(m,3H),2.65(m,1H),3.10(m,1H),3.66(m,1H),4.20(m,1H),5.69(m,2H),6.09(m,1H),7.34(m,1H),7.51(m,2H),7.98(m,1H),8.10(m,1H),9.40(m,1H),10.40(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值395.1；实测值396.2；Rt＝2.325min。
实施例758.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-(1,3-苯并噁唑-4-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物140)的合成
步骤1：6-(1,3-苯并噁唑-4-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(9.5g，28.67mmol)、4-(4,4,5,5-四甲基-1,3-二氧环戊烷-2-基)-1,3-苯并噁唑(6.95g，28.11mmol)和碳酸钠(8.94g，84.34mmol，3.53mL)于二噁烷(100mL)和水(25mL)中的悬浮液脱气且用Ar再填充三次。向此溶液中添加Pd(dppf)Cl2*DCM(918.29mg，1.12mmol)。将所得混合物脱气，用Ar再填充且在65℃下搅拌12h。过滤出沉淀，将其用二噁烷(50ml)洗涤。在真空中蒸发溶剂且将残余物溶解于150ml水中且用EtOAc(2*100ml)萃取。将合并的有机层用盐水(100ml)洗涤，经Na2SO4干燥且蒸发，以获得粗产物(9g)。通过梯度色谱(SiO2，己烷-EtOAc)纯化粗产物，以获得6-(1,3-苯并噁唑-4-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(3.5g，11.65mmol，41.45％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ0.85(s,9H),1.89(m,2H),2.35(m,2H),3.71(m,2H),5.59(m,1H),7.20(d,1H),7.30(dd,1H),7.49(d,1H),8.50(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值200.1；实测值201.2；Rt＝1.482min。
步骤2：4-(2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1,3-苯并噁唑的合成
将6-(1,3-苯并噁唑-4-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(3.5g，11.65mmol)溶解于三氟乙酸(14.80g，129.80mmol，10mL)中。将所得混合物在25℃下搅拌2h(直至气体逸出结束)。将溶液的pH用10％NaOH溶液调节至8且用DCM(3*70ml)萃取。将合并的有机层用盐水(50ml)洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中蒸发，以获得4-(2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1,3-苯并噁唑(2.05g，10.24mmol，87.86％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ1.73(m,2H),1.88(m,2H),3.00(m,2H),3.89(m,2H),7.39(dd,1H),7.58(d,1H),7.69(d,1H),8.09(s,1H)。
步骤3：4-(2-哌啶基)-1,3-苯并噁唑的合成
在0℃下，向4-(2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1,3-苯并噁唑(2.05g，10.24mmol)于MeOH中的溶液中分批添加硼氢化钠(387.33mg，10.24mmol，361.99μL)。将所得混合物在环境温度下搅拌2h且蒸发。将残余物溶解于水(50ml)中且用DCM(3*50ml)萃取。将合并的有机层用盐水(2*40ml)洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中蒸发，以获得4-(2-哌啶基)-1,3-苯并噁唑(1.45g，粗品)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ1.44(m,4H),1.85(m,2H),2.70(m,1H),3.10(m,1H),4.15(m,1H),7.39(m,2H),7.59(d,1H),8.69(s,1H),未观测到NH。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值202.1；实测值203.2；Rt＝0.666min。
步骤4：N-[5-[[2-[2-(1,3-苯并噁唑-4-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
向4-(2-哌啶基)-1,3-苯并噁唑(0.4g，1.98mmol)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(584.01mg，1.98mmol)和HATU(751.99mg，1.98mmol)于DMF(3mL)中的悬浮液中添加三乙胺(1.00g，9.89mmol，1.38mL)。将所得混合物在环境温度下搅拌12h，溶解于水(40ml)中且用EtOAc(3*20ml)萃取。将合并的有机层用盐水(3*20ml)洗涤，经Na2SO4干燥且蒸发，以获得N-[5-[[2-[2-(1,3-苯并噁唑-4-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.8g，粗品)。此化合物不经纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.45(s,9H),1.64(m,4H),2.19(s,3H),2.95(m,2H),3.89(m,1H),5.69(m,1H),5.98(m,1H),6.99(d,1H),7.25(dd,1H),7.48(d,1H),8.19(s,1H),8.31(s,1H),8.79(s,1H),9.07(s,1H),11.02(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值479.2；实测值480.2；Rt＝1.21min。
步骤5：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-(1,3-苯并噁唑-4-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物140)的合成
向N-[5-[[2-[2-(1,3-苯并噁唑-4-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.8g，1.67mmol)于DCM(20mL)中的溶液中添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(8.00g，219.41mmol，10mL)。将所得混合物在25℃下搅拌12h且在真空中蒸发，以获得粗产物(0.8g)。通过HPLC(0-5min 30-80％水-甲醇(NH3 0.1％)，流速30ml/min(装载泵4ml/min甲醇(NH3 0.1％))柱：YMC-Actus Triart C18 100*20mml.D.S-5um)纯化粗产物，以得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[2-(1,3-苯并噁唑-4-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(250mg，658.92μmol，39.50％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.29(m,1H),1.62(m,3H),2.01(m,4H),2.99(m,1H),3.41(m,1H),4.02(m,1H),5.62(m,3H),7.26(m,1H),7.49(m,2H),7.71(m,1H),8.07(m,1H),8.79(m,1H),10.52(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值397.2；实测值；Rt＝0.939min。
实施例759.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(3,3-二甲基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物150)的合成
步骤1：6-(5,5-二甲基环己烯-1-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
向3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(8.04g，23.29mmol)和2-(5,5-二甲基环己烯-1-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(5g，21.17mmol)于二噁烷(90mL)中的搅拌溶液中添加碳酸钠(6.73g，63.52mmol，2.66mL)于水(30mL)中的溶液。将所得混合物用氩气吹扫。然后，添加Pd(dppf)Cl2(864.50mg，1.06mmol)且将所得反应混合物在80℃下搅拌14小时。14小时之后，在减压下浓缩反应混合物且通过柱色谱纯化残余物，以获得呈无色油状物的产物6-(5,5-二甲基环己烯-1-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.70g，5.57mmol，26.29％)。
LCMS(ESI)：[M+Boc]+m/z：计算值305.3；实测值250.2(t-Bu裂解的产物质量)；Rt＝1.954min。
步骤2：6-(5,5-二甲基环己烯-1-基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶的合成
将6-(5,5-二甲基环己烯-1-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.7g，5.57mmol)和三氟乙酸(20g，175.41mmol，13.51mL)的混合物在25℃下搅拌3小时。3小时之后，逐滴添加20％ NaOH水溶液(15g)。将所得悬浮液用DCM(2x 100mL)萃取。将合并的有机层用水(100mL)、盐水洗涤，经Na2SO4干燥且在减压下浓缩，以得到呈无色油状物的产物6-(5,5-二甲基环己烯-1-基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶(1.2g，粗品)。粗产物不经任何进一步纯化即用于下一步反应。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值205.2；实测值206.2；Rt＝1.018min。
步骤3：2-(5,5-二甲基环己烯-1-基)-5-甲基哌啶的合成
向6-(5,5-二甲基环己烯-1-基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶(1.2g，5.84mmol)于MeOH(25mL)中的搅拌溶液中添加硼氢化钠(221.09mg，5.84mmol)。将所得反应混合物在25℃下搅拌4小时。4小时之后，在减压下浓缩反应混合物。将所获得的残余物用水(70mL)稀释且用DCM(2x 100mL)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥且在减压下浓缩，以获得呈淡黄色油状物的2-(5,5-二甲基环己烯-1-基)-5-甲基哌啶(0.9g，4.34mmol，74.27％产率)。粗产物不经任何进一步纯化即用于下一步反应。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值207.3；实测值208.2；Rt＝1.058min
步骤4：2-(3,3-二甲基环己基)-5-甲基哌啶的合成
在25℃、氢气气氛下，将2-(5,5-二甲基环己烯-1-基)-5-甲基哌啶(0.9g，4.34mmol)于MeOH(25mL)中的溶液经干燥的487型钯(10％于碳上)(0.1g，939.67μmol)氢化72小时。72小时之后，将反应混合物过滤，将滤饼用MeOH洗涤且蒸发滤液，以得到呈黄色油状物的2-(3,3-二甲基环己基)-5-甲基哌啶(0.6g，2.87mmol，66.02％产率)。粗产物不经任何进一步纯化即用于下一步反应。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值209.3；实测值210.2；Rt＝1.016min。
步骤5：N-[5-[[2-[2-(3,3-二甲基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
向2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(423.11mg，1.43mmol)、2-(3,3-二甲基环己基)-5-甲基哌啶(0.3g，1.43mmol)和HATU(599.30mg，1.58mmol)于DMF(1mL)中的搅拌溶液中添加三乙胺(579.97mg，5.73mmol，798.86μL)。将所得反应混合物在25℃下搅拌4小时。4小时之后，通过反相HPLC(洗脱液：50-100％，0-6min，水-乙腈；流速：30mL/min；装载泵：4mL/min，乙腈；柱：SunFireC18 100x19mm 5um)纯化反应混合物，以得到N-[5-[[2-[2-(3,3-二甲基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.19g，390.43μmol，27.25％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值486.4；实测值487.4；Rt＝4.673min。
步骤6：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(3,3-二甲基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物150)的合成
将N-[5-[[2-[2-(3,3-二甲基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.14g，287.68μmol)和于二噁烷中的4M氯化氢溶液(104.89mg，2.88mmol，131.12μL)的混合物在25℃下搅拌2小时。2小时之后，通过反相HPLC(洗脱液：0-1-6min，65-65-70％，水-0.1％ NH3-甲醇；流速：30mL/min；装载泵：4mL/min；柱：YMC-Triart C18 100x 20mm，5um)纯化反应混合物，以得到呈灰白色固体的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(3,3-二甲基环己基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物150，25mg，64.68μmol，22.48％产率)。
1H NMR(CDCl3,400MHz):δ(ppm)0.87(m,8H),1.01(m,3H),1.35(m,4H),1.61(m,3H),1.82(m,2H),1.99(m,3H),2.12(s,3H),3.08(m,1H),4.23(m,1H),4.50(m,2H),4.73(m,1H),7.71(m,1H),8.04(m,1H),9.06(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值386.3；实测值387.2；Rt＝3.476min。
实施例760.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[2-[3-(三氟甲基)-1-双环[1.1.1]戊基]-1-哌啶基]乙酰胺和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-(2-二级丁基-1-哌啶基)乙酰胺(化合物217和化合物232)的合成
步骤1：6-[3-(三氟甲基)-1-双环[1.1.1]戊基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将3-碘-1-(三氟甲基)双环[1.1.1]戊烷(2g，7.63mmol)溶解于乙醚(20mL)中且在氩气气氛下冷却至-78℃。经由注射器逐滴添加叔丁基锂(18％于戊烷中)(5.70g，16.03mmol，8.44mL)，同时保持温度低于-70℃。将所得溶液在-70℃下搅拌1小时。1小时之后，逐滴添加氯化锌(无水)(1.14g，8.40mmol)于四氢呋喃(10mL)中的溶液。使所得反应混合物升温至室温且在同一温度下搅拌1小时。此后，添加6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(2.53g，7.63mmol)且将所得混合物加热至50℃，直到大部分乙醚被蒸发。将所获得的残余物用四氢呋喃(20mL)稀释且分成2个相等部分。向第一部分中添加Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2(62.34mg，76.33μmol)且向第二部分中添加四(三苯基磷烷)钯(0)(99.8％(基于金属)，Pd 9％min)(88.21mg，76.33μmol)。将两种所得混合物在60℃下搅拌15小时。GCMS和NMR指示在Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2的情况下的更好转化。将反应(第1部分)混合物用饱和K2CO3溶液(4mL)淬灭且搅拌5分钟。5分钟之后，将有机层分离，经K2CO3干燥且在减压下浓缩，以获得呈棕色油状物的6-[3-(三氟甲基)-1-双环[1.1.1]戊基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.1g，3.47mmol，90.82％产率)。
GCMS:m/z：计算值317.2；实测值317.2；Rt＝8.316min。
步骤2：2-[3-(三氟甲基)-1-双环[1.1.1]戊基]哌啶的合成
将三氟乙酸(13.20g，115.80mmol，8.92mL)添加到6-[3-(三氟甲基)-1-双环[1.1.1]戊基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.05g，3.31mmol)且将所得溶液在室温下搅拌30分钟。30分钟之后，在减压下浓缩反应混合物且将所获得的残余物溶解于甲醇(20mL)中。在10分钟期间分批添加硼氢化钠(1.00g，26.47mmol，935.90μL)。将所得反应混合物在20℃下搅拌1小时，然后在减压下浓缩。将所获得的残余物分配于2N HCl(30mL)与MTBE(20mL)之间。将水层用K2CO3碱化至pH＝10且用DCM(3x 15mL)萃取。将合并的有机层经K2CO3干燥且在真空中蒸发，以获得呈黄色油状物的2-[3-(三氟甲基)-1-双环[1.1.1]戊基]哌啶(200mg，912.22μmol，27.57％产率)。粗产物不经任何进一步纯化即用于下一步反应。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值219.2；实测值220.2；Rt＝0.957min。
步骤3：N-[3-甲基-5-[[2-氧代-2-[2-[3-(三氟甲基)-1-双环[1.1.1]戊基]-1-哌啶基]乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
向2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(296.31mg，1.00mmol)、HATU(398.88mg，1.05mmol)和三乙胺(184.61mg，1.82mmol，254.29μL)于二甲基甲酰胺(3mL)中的搅拌溶液中添加2-[3-(三氟甲基)-1-双环[1.1.1]戊基]哌啶(200mg，912.22μmol)。将所得混合物在20℃下搅拌15小时。15小时之后，将反应混合物用水(15mL)稀释且用乙酸乙酯(2x15 mL)萃取。将合并的有机层用水(3x10 mL)和盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩，以得到呈棕色胶状物的N-[3-甲基-5-[[2-氧代-2-[2-[3-(三氟甲基)-1-双环[1.1.1]戊基]-1-哌啶基]乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(390mg，785.47μmol，86.11％产率)。粗产物不经任何进一步纯化即用于下一步反应。
LCMS(ESI)：[M+Boc]+m/z：计算值496.3；实测值497.2；Rt＝1.388min。
步骤4：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[2-[3-(三氟甲基)-1-双环[1.1.1]戊基]-1-哌啶基]乙酰胺和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-(2-二级丁基-1-哌啶基)乙酰胺(化合物217和化合物232)的合成
将于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(2.86g，7.85mmol，3.58mL)添加到N-[3-甲基-5-[[2-氧代-2-[2-[3-(三氟甲基)-1-双环[1.1.1]戊基]-1-哌啶基]乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(390mg，785.46μmol)于二氯甲烷(5mL)中的搅拌溶液中。将所得反应混合物在20℃下搅拌4小时。4小时之后，将反应混合物用DCM(30mL)和10％ K2CO3水溶液(20mL)稀释。将有机层分离，经Na2SO4干燥且在减压下浓缩。使所获得的残余物经历HPLC纯化(洗脱液：0-50-75％,0-1-6min，0.1％ NH3-甲醇；流速30mL/min；柱：YMC Triart C18100x 20mm，5um)，以得到呈白色固体的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-[2-[3-(三氟甲基)-1-双环[1.1.1]戊基]-1-哌啶基]乙酰胺(化合物217，111mg，280.02μmol，35.65％产率)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代-2-(2-二级丁基-1-哌啶基)乙酰胺(化合物232，52mg，163.31μmol，20.79％产率)。
化合物217 1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)1.35(m,1H),1.65(m,5H),2.01(m,9H),2.96(m,1H),4.02(m,2H),5.62(s,2H),7.48(s,1H),8.00(m,1H),10.33(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值396.2；实测值397.2；Rt＝2.654min。
化合物232 1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)0.80(d,3H),0.91(t,3H),1.26-1.51(m,3H),1.51-1.75(m,6H),1.95-2.06(m,3H),2.75-3.21(m,1H),3.50-3.98(m,1H),4.14-4.69(m,1H),5.52-5.82(m,2H),6.95-7.51(m,1H),7.56-8.09(m,1H),9.65-10.45(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值318.2；实测值319.2；Rt＝2.463min。
实施例761.N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-4-哌啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-4-哌啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物156和化合物159)的合成
步骤1：4-(1-叔丁氧基羰基-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-6-基)-6-氧代-2,3-二氢吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(4.00g，11.58mmol)、6-氧代-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-2,3-二氢吡啶-1-甲酸叔丁酯(3.74g，11.58mmol)和碳酸钠(3.68g，34.75mmol)于1,4-二噁烷(75mL)和水(25mL)中的搅拌溶液用氩气吹扫。然后，在氩气下添加Pd(dppf)Cl2(378.07mg，463.32μmol)。将反应混合物在氩气、65℃下搅拌12小时。12小时之后，将反应混合物冷却且过滤。将滤饼用1.4-二噁烷(2x 20mL)洗涤且丢弃。在真空中蒸发滤液且通过柱色谱(SiO2，洗脱液：己烷中的0-100％MTBE)纯化残余物，以得到呈淡棕色油状物的4-(1-叔丁氧基羰基-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-6-基)-6-氧代-2,3-二氢吡啶-1-甲酸叔丁酯(3.00g，7.64mmol，65.99％产率)。
LCMS(ESI)：[M+Boc]+m/z：计算值392.2；实测值338.2(t-Bu裂解的产物质量)；Rt＝1.591min。
步骤2：4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-2,3-二氢-1H-吡啶-6-酮的合成
将4-(1-叔丁氧基羰基-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-6-基)-6-氧代-2,3-二氢吡啶-1-甲酸叔丁酯(1g，2.55mmol)溶解于三氟乙酸(11.62g，101.91mmol，7.85mL)中。将所得反应混合物在25℃下搅拌1小时。1小时之后，添加碎冰(20g)且将pH用氢氧化钠珠粒(4.59g，114.65mmol，2.15mL)于水(35mL)中的溶液调节至10。将所得悬浮液用二氯甲烷(2x50mL)萃取。将合并的有机相经Na2SO4干燥且在减压下蒸发，以得到呈白色固体的4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-2,3-二氢-1H-吡啶-6-酮(0.35g，1.82mmol，71.45％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值192.2；实测值193.2；Rt＝0.325min。
步骤3：4-(5-甲基-2-哌啶基)-2,3-二氢-1H-吡啶-6-酮的合成
在0℃下，将硼氢化钠(344.34mg，9.10mmol)分批添加到4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-2,3-二氢-1H-吡啶-6-酮(0.35g，1.82mmol)于甲醇(10mL)中的搅拌溶液中。将反应混合物在0℃下搅拌1小时。1小时之后，移除冷却浴且使反应混合物升温至25℃。将反应混合物在同一温度下搅拌12小时。12小时之后，在减压下浓缩反应混合物，将残余物用氯仿(50mL)稀释，搅拌30min且过滤。在真空中蒸发滤液，以得到呈淡黄色胶状物的4-(5-甲基-2-哌啶基)-2,3-二氢-1H-吡啶-6-酮(0.27g，1.39mmol，76.34％产率)，其直接用于下一步骤中
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值194.2；实测值195.2；Rt＝0.581min。
步骤4：4-(5-甲基-2-哌啶基)哌啶-2-酮的合成
在氢气气氛、25℃下，将4-(5-甲基-2-哌啶基)-2,3-二氢-1H-吡啶-6-酮(0.27g，1.39mmol)于甲醇(20mL)中的溶液经钯(10％于碳上)(0.5g)氢化12小时。完成之后，过滤反应混合物，将滤饼用甲醇(10mL)洗涤且在减压下浓缩滤液，以得到呈淡黄色胶状物的4-(5-甲基-2-哌啶基)哌啶-2-酮(0.23g，1.17mmol，84.31％产率)，其直接用于下一步骤中
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值196.2；实测值197.4；Rt＝0.628min。
步骤5：N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-4-哌啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-4-哌啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物156和化合物159)的合成
向4-(5-甲基-2-哌啶基)哌啶-2-酮(230mg，1.17mmol)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(346.01mg，1.17mmol)和HATU(445.53mg，1.17mmol)于DMF(5mL)中的搅拌溶液中添加三乙胺(1.19g，11.72mmol，1.63mL)。将反应混合物在25℃下搅拌1小时。1小时之后，将反应混合物在减压下浓缩，且通过反相HPLC纯化(洗脱液：30-65％，0-6min，水-甲醇；柱：SunFireC18100x 19mm，5um)纯化残余物，以得到两种级分。
将HPLC后的第1级分(34mg)溶解于二氯甲烷(2mL)中且添加于二噁烷中的4.0M氯化氢(2.10g，8.01mmol，2mL，13.9％纯度)。将所得反应混合物在25℃下搅拌1小时。1小时之后，在真空中浓缩反应混合物且通过反相HPLC(洗脱液：5-35％，0-5min，0.1％ NH3-乙腈；柱：YMC Triart C18 100x 20mm，5um)纯化残余物，以获得呈白色固体的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-4-哌啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物159，20mg，53.55μmol，4.57％产率)。
将HPLC后的第2级分(94mg)溶解于二氯甲烷(2mL)中且添加于二噁烷中的4.0M氯化氢(2.10g，8.01mmol，2mL，13.9％纯度)。将所得反应混合物在25℃下搅拌1小时。1小时之后，在真空中浓缩反应混合物且通过反相HPLC(洗脱液：5 -40％，0-5min，0.1％ NH3-乙腈；柱：YMC Triart C18 100x 20mm，5um)纯化残余物，以获得呈白色固体的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(2-氧代-4-哌啶基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物156，59mg，157.99μmol，13.48％产率)。
化合物156：1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)0.96(m,3H),1.26(m,2H),1.77(m,5H),2.06(m,5H),2.40(m,1H),2.79(m,1H),3.15(m,2H),4.11(m,1H),5.61(m,2H),7.48(m,2H),7.96(m,1H),10.38(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值373.2；实测值374.2；Rt＝2.091min。
化合物159：1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)0.96(m,3H),1.21(m,2H),1.78(m,7H),2.03(s,3H),2.29(m,3H),3.13(m,3H),4.10(m,1H),5.61(s,2H),7.48(m,2H),8.00(s,1H),10.32(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值373.2；实测值374.2；Rt＝1.918min。
实施例762.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(5-氧代吡咯烷-3-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物210)的合成
步骤1：3-(5-甲基吡啶-2-基)丙烯酸乙酯的合成
将膦酰基乙酸三乙酯(10.18g，45.40mmol，9.01mL)逐滴添加到于矿物油中的氢化钠(油分散体)60％分散物(1.73g，43.34mmol)于THF(100mL)中的悬浮液中。在环境温度下搅拌1h之后，逐滴添加于THF(10mL)中的5-甲基吡啶-2-甲醛(5g，41.28mmol)。将所得溶液搅拌过夜。蒸发THF且将混合物用DCM(100ml)稀释且用水(2x50ml)洗涤。将有机相经硫酸钠干燥，过滤且蒸发，以获得3-(5-甲基-2-吡啶基)丙-2-烯酸乙酯(7.7g，40.27mmol，97.56％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)1.31(t,3H),2.34(s,3H),4.24(m,2H),6.82(d,1H),7.32(d,1H),7.48(d,1H),7.63(d,1H),8.45(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值191.2；实测值192.2；Rt＝1.083min。
步骤2：3-(5-甲基吡啶-2-基)-4-硝基丁酸乙酯的合成
将3-(5-甲基-2-吡啶基)丙-2-烯酸乙酯(7.7g，40.27mmol)、硝基甲烷(7.37g，120.80mmol，6.53mL)和于THF中的1M四丁基氟化铵(2.11g，8.05mmol，2.33mL)于THF(77mL)中的溶液回流12h。在减压下蒸发溶剂。将所得材料用MTBE(200ml)稀释且用盐水(2x50ml)洗涤。将有机相经硫酸钠干燥，过滤且蒸发，以获得3-(5-甲基-2-吡啶基)-4-硝基丁酸乙酯(10g，39.64mmol，98.45％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.16(t,3H),2.27(s,3H),2.75(m,2H),4.04(m,2H),4.79(m,2H),7.11(d,1H),7.40(d,1H),8.32(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值252.2；实测值253.2；Rt＝1.172min。
步骤3：4-(5-甲基吡啶-2-基)吡咯烷-2-酮的合成
将3-(5-甲基-2-吡啶基)-4-硝基丁酸乙酯(9.5g，37.66mmol)和5％氢氧化钯/碳(464.82mg，3.77mmol)混合于甲醇(100mL)中。在高压釜中，在70℃、H2(50atm)气氛下，将混合物搅拌24h。将反应混合物冷却至室温，过滤且在真空中蒸发溶剂。通过柱色谱(80gSiO2，MTBE/MeOH 0～95％，流速＝60mL/min，Rt＝16min)纯化所得粗材料，以获得4-(5-甲基-2-吡啶基)吡咯烷-2-酮(0.5g，2.84mmol，7.53％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)2.29(s,3H),2.67(m,1H),3.59(m,1H),3.78(m,2H),6.21(m,2H),7.06(d,1H),7.42(d,1H),8.37(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值176.2；实测值177.2；Rt＝0.477min。
步骤4：4-(5-甲基哌啶-2-基)吡咯烷-2-酮的合成
将4-(5-甲基-2-吡啶基)吡咯烷-2-酮(0.4g，2.27mmol)和干燥的487型钯(10％于碳上)(24.16mg，227.00μmol)JM催化剂(A402028-10)混合于甲醇(4mL)中。在高压釜中，在70℃、H2(50atm)气氛下，将混合物搅拌100h。将反应混合物冷却至室温，过滤且在真空中蒸发溶剂，以获得4-(5-甲基-2-哌啶基)吡咯烷-2-酮(450mg，粗品)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.86(d,3H),1.70(m,9H),2.45(m,2H),3.05(m,1H),3.20(m,1H),3.43(m,1H),5.75(bds,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值182.2；实测值183.2；Rt＝0.261min。
步骤5：(3-甲基-5-(2-(5-甲基-2-(5-氧代吡咯烷-3-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
将4-(5-甲基-2-哌啶基)吡咯烷-2-酮(200mg，1.10mmol)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(324.03mg，1.10mmol)、TEA(555.19mg，5.49mmol，764.72μL)混合于DMF(5mL)中，然后添加HATU(625.85mg，1.65mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌12h。将混合物在减压下蒸发且通过HPLC(2-10min 10-50％MeOH，30ml/min)纯化，以获得N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-(5-氧代吡咯烷-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(77.1mg，粗品)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值459.5；实测值460.2；Rt＝1.065min。
步骤6：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(5-氧代吡咯烷-3-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物210)的合成
将N-[3-甲基-5-[[2-[5-甲基-2-(5-氧代吡咯烷-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(77.1mg，167.78μmol)于二噁烷(2mL)和水(2mL)中的溶液在100℃下加热12h。将混合物在减压下蒸发且通过HPLC(2-10min 10-50％水-MeOH+NH3)纯化，以获得N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[5-甲基-2-(5-氧代吡咯烷-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(18.2mg，50.64μmol，30.18％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.02(m,3H),1.40(m,2H),1.90(m,2H),2.10(m,5H),2.28(m,2H),3.10(m,3H),4.43(m,3H),4.90(m,1H),6.47(m,1H),7.68(m,1H),8.00(m,1H),9.50(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值359.4；实测值360.2；Rt＝0.790min。
实施例763.外消旋-N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-2-((2R,5S)-2-苯基-5-(三氟甲基)哌啶-1-基)乙酰胺(化合物177)的合成
步骤1：2-氧代-5-(三氟甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将二碳酸二-叔丁酯(11.06g，50.68mmol，11.63mL)逐滴添加到5-(三氟甲基)哌啶-2-酮(7.7g，46.07mmol)和4-二甲基氨基吡啶(281.43mg，2.30mmol，4.89mL)于乙腈(140mL)中的溶液中。将所得溶液在25℃下搅拌12h。然后蒸发溶剂且将所得粗材料用EtOAc(100ml)稀释且用饱和碳酸氢钠溶液(2x100 ml)洗涤。将有机相经硫酸钠干燥且在减压下蒸发，以获得2-氧代-5-(三氟甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(11.18g，41.83mmol，90.80％产率)
1H NMR(CDCl3,400MHz):δ1.53(s,9H),1.93(m,1H),2.13(m,1H),2.50(m,1H),2.65(m,1H),3.75(m,1H),4.02(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M-tBu+1]+m/z：计算值267.2；实测值212.0；Rt＝1.277min。
步骤2：N-[5-氧代-5-苯基-2-(三氟甲基)戊基]氨基甲酸叔丁酯的合成
在-78℃、惰性气氛下，将苯基溴化镁(9.10g，50.20mmol)(62.75ml，于THF中的0.8M溶液)添加到2-氧代-5-(三氟甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(11.18g，41.83mmol)于THF(200mL)中的溶液中。将所得溶液在-78℃下搅拌1h，之后升温至室温且搅拌12h。将反应物用MTBE(500ml)稀释且用100mL饱和氯化钠水溶液缓慢萃取。将有机相用饱和碳酸氢钠水溶液(2x200 ml)洗涤。将合并的水性级分用MTBE反萃取两次。将合并的有机级分经硫酸钠干燥，且通过旋转蒸发来浓缩，以获得粗材料，其通过柱色谱(120g SiO2，己烷/MTBE，其中MTBE为0～15％，流速＝80mL/min，RC 9CV)进行纯化，以获得N-[5-氧代-5-苯基-2-(三氟甲基)戊基]氨基甲酸叔丁酯(5.5g，15.93mmol，38.07％产率)
1H NMR(CDCl3,400MHz):δ1.41(s,9H),1.92(m,1H),2.05(m,1H),2.42(m,1H),3.16(m,2H),3.30(m,1H),3.41(m,1H),4.86(brs,1H),7.44(t,2H),7.55(t,1H),7.95(d,2H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值345.3；实测值246.2；Rt＝1,502min。
步骤3：6-苯基-3-(三氟甲基)-2,3,4,5-四氢吡啶的合成
将N-[5-氧代-5-苯基-2-(三氟甲基)戊基]氨基甲酸叔丁酯(5.5g，15.93mmol)于TFA(25mL)和DCM(25mL)中的溶液在25℃下搅拌2h。将硫酸钠饱和水溶液添加到溶液(50ml)中，然后用DCM(2x50 ml)萃取。将有机相经硫酸钠干燥，过滤且蒸发，以获得6-苯基-3-(三氟甲基)-2,3,4,5-四氢吡啶(3.5g，15.40mmol，96.72％产率)
1H NMR(CDCl3,500MHz):δ1.83(m,1H),2.19(m,1H),2.40(m,1H),2.64(m,1H),2.91(m,1H),3.75(m,1H),4.23(d,1H),7.42(m,3H),7.77(d,2H)
步骤4：2-苯基-5-(三氟甲基)哌啶的合成
将硼氢化钠(1.17g，30.81mmol，1.09mL)分批添加到6-苯基-3-(三氟甲基)-2,3,4,5-四氢吡啶(3.5g，15.40mmol)于甲醇(70mL)中的溶液中。将混合物在室温下搅拌12h。添加水(50ml)且将所得混合物用EtOAc(2x50 ml)萃取。将有机相经硫酸钠干燥，过滤且蒸发，以获得2-苯基-5-(三氟甲基)哌啶(3.3g，14.40mmol，93.46％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.59(m,2H),1.73(brs,1H),1.92(m,1H),2.15(m,1H),2.35(m,1H),2.82(t,1H),3.39(d,1H),3.61(d,1H),7.34(m,5H)。
GCMS[M]+m/z：计算值229.2；实测值229.1；Rt＝6.295min
步骤5：N-[3-甲基-5-[[2-氧代-2-[2-苯基-5-(三氟甲基)-1-哌啶基]乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将2-苯基-5-(三氟甲基)哌啶(200mg，872.44μmol)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(257.63mg，872.44μmol)、三乙胺(441.41mg，4.36mmol，608.01μL)混合于DMF(5mL)中，然后添加HATU(497.59mg，1.31mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌12h。将混合物在减压下蒸发且通过HPLC(2-10min 10-50％R1，30ml/min)纯化，以获得N-[3-甲基-5-[[2-氧代-2-[2-苯基-5-(三氟甲基)-1-哌啶基]乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(94.6mg，186.77μmol，21.41％产率)
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.48(s,9H),1.50-2.10(m,4H),2.22(m,4H),2.34(m,1H),3.57(m,0.5H),4.79(m,0.5H),5.66(m,1H),6.66(m,1H),7.26(m,5H),7.98(s,1H),8.33(s,1H),9.20(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值506.2；实测值507.2；Rt＝1,436min。
步骤6：外消旋-N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-2-((2R,5S)-2-苯基-5-(三氟甲基)哌啶-1-基)乙酰胺(化合物177)的合成
将N-[3-甲基-5-[[2-氧代-2-[2-苯基-5-(三氟甲基)-1-哌啶基]乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(94.6mg，186.77μmol)于二噁烷(2mL)和水(2mL)中的溶液在100℃下加热12h。将溶剂蒸发至干。。通过HPLC(30-40％水-乙腈，10min，流速30ml/min)纯化粗材料，以得到外消旋-N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-2-((2R,5S)-2-苯基-5-(三氟甲基)哌啶-1-基)乙酰胺(54.2mg，133.37μmol，71.41％产率)
1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)1.76(m,2H),2.00(m,3H),2.18(m,2H),2.81(m,1H),3.56(m,1H),4.50(m,1H),5.39(m,1H),5.61(m,2H),7.36(m,6H),7.96(m,1H),10.40(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值406.2；实测值407.0；Rt＝1.001min。
实施例764.1-(2-((6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)氨基)-2-氧代乙酰基)-6-苯基哌啶-3-甲酰胺(化合物315、化合物328)的合成
步骤1：2-氰基-5-氧代-5-苯基戊酸乙酯的合成
将KOH(9.98g，177.92mmol，4.89mL)添加到EtOH(200mL)中。在均质化之后，添加2-氰基乙酸乙酯(80.50g，711.66mmol，75.94mL)，且在5min之后添加3-氯-1-苯基丙-1-酮(20g，118.61mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌2h。蒸发溶剂且通过柱色谱纯化残余物(60g)，以得到产物与2-氰基乙酸乙酯的混合物。通过在真空中蒸馏移除2-氰基乙酸乙酯，以得到2-氰基-5-氧代-5-苯基戊酸乙酯(18g，73.39mmol，61.87％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)1.32(t,3H),2.32(m,1H),2.48(m,1H),3.26(t,2H),3.81(t,1H),4.29(m,2H),7.48(t,2H),7.59(t,1H),7.96(d,2H)。
LCMS(ESI)：[M+1]m/z：计算值245.2；实测值246.2；Rt＝1.306min。
步骤2：6-苯基哌啶-3-甲酸乙酯的合成
将2-氰基-5-氧代-5-苯基戊酸乙酯(2g，8.15mmol)溶解于EtOH(80mL)中且添加于水中的雷氏镍(300mg，3.50mmol)。将反应混合物在70℃下在高压容器中在50atm H2压力下加热48h。过滤出催化剂，用MeOH洗涤且蒸发溶剂，将残余物干燥，以得到6-苯基哌啶-3-甲酸乙酯(1.5g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+1]m/z：计算值233.2；实测值234.2；Rt＝0.947min。
步骤3：6-苯基哌啶-1,3-二甲酸1-叔丁酯3-乙酯的合成
向6-苯基哌啶-3-甲酸乙酯(1.5g，6.43mmol)于THF(30mL)中的悬浮液中添加TEA(1.63g，16.07mmol，2.24mL)和二碳酸二-叔丁酯(1.54g，7.07mmol，1.62mL)。将反应混合物在25℃下搅拌12h且蒸发。将残余物溶解于水且用DCM萃取。将有机萃取物经Na2SO4干燥且蒸发，以得到呈略黄色油状物的6-苯基哌啶-1,3-二甲酸O1-叔丁酯O3-乙酯(1.9g，粗品)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)1.25(t,3H),1.43(s,9H),1.92(m,2H),2.49(m,1H),2.78(t,1H),3.03(m,1H),4.15(m,2H),4.28(m,1H),4.48(m,1H),5.33(m,1H),7.23(m,5H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值233.4；实测值234.2；Rt＝0.846min。
步骤4：1-(叔丁氧基羰基)-6-苯基哌啶-3-甲酸的合成
向6-苯基哌啶-1,3-二甲酸O1-叔丁酯O3-乙酯(1.9g，5.70mmol)于MeOH(25mL)/H2O(10mL)中的溶液中添加氢氧化钾(639.44mg，11.40mmol，313.45μL)且将反应混合物在25℃下搅拌13h。将混合物蒸发至干。将残余物(水溶液)用硫酸氢钠酸化至稍微酸性pH。将产物用EtOAc(3*30ml)萃取，经Na2SO4干燥。蒸发EtOAc，以得到1-叔丁氧基羰基-6-苯基哌啶-3-甲酸(1g，粗品)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.45(s,9H),1.97(m,2H),2.48(m,1H),2.92(t,1H),2.96(m,1H),4.28(m,1H),4.45(m,1H),5.30(m,1H),7.25(m,5H)。LCMS(ESI)：
[M-Boc]+m/z：计算值205.4；实测值206.2；Rt＝1.384min。
步骤5：5-氨基甲酰基-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
向1-叔丁氧基羰基-6-苯基哌啶-3-甲酸(1g，3.27mmol)于THF(30mL)中的搅拌溶液中添加羰基二咪唑(690.29mg，4.26mmol)且将反应混合物在50℃下搅拌1.5h。使氨鼓泡穿过反应混合物30min。将反应混合物在25℃下搅拌30min。蒸发THF。将残余物用水(40ml)稀释，将产物用EtOAc(50ml)萃取。将有机层经Na2SO4干燥。蒸发EtOAc，以得到5-氨基甲酰基-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.2g，粗品)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)1.45(s,9H),1.73(m,2H),2.48(m,1H),2.87(t,1H),3.03(m,1H),4.34(m,1H),5.42(m,1H),5.65(m,1H),7.25(m,5H),9.55(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值204.2；实测值205.2；Rt＝1.333min。
步骤6：6-苯基哌啶-3-甲酰胺的合成
向5-氨基甲酰基-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.7g，2.30mmol)于DCM(7mL)中的溶液中添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(838.50mg，23.00mmol，1.05mL)且将所得混合物在25℃下搅拌1.5h。蒸发溶剂，以得到6-苯基哌啶-3-甲酰胺(0.5g，粗品，HCl)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.95(m,3H),3.25(m,4H),4.28(m,1H),7.48(m,5H),7.63(m,2H),9.17(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]m/z：计算值204.2；实测值205.2；Rt＝0.619min。
步骤7：(5-(2-(5-氨基甲酰基-2-苯基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-3-甲基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
向6-苯基哌啶-3-甲酰胺(0.5g，2.08mmol，HCl)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(613.33mg，2.08mmol)和HATU(868.72mg，2.28mmol)于DMF(8mL)中的溶液中添加三乙胺(840.70mg，8.31mmol，1.16mL)。将混合物在25℃下搅拌2h。将混合物用水(30ml)稀释且用EtOAc(3*50ml)萃取。将合并的有机层用水(3*50ml)和盐水洗涤，然后经Na2SO4干燥且蒸发，以得到N-[5-[[2-(5-氨基甲酰基-2-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.5g，粗品)。
LCMS(ESI)[M+1]m/z：计算值481.5；实测值482.2；Rt＝1.138min。
步骤8：1-(2-((6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)氨基)-2-氧代乙酰基)-6-苯基哌啶-3-甲酰胺(化合物315和化合物328)的合成
向N-[5-[[2-(5-氨基甲酰基-2-苯基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.5g，1.04mmol)于DCM(5mL)中的溶液中添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(378.58mg，10.38mmol，473.23μL)且将所得混合物在25℃下搅拌2h。蒸发溶剂。通过反相HPLC(30-30-40％0-1-6min 0.1％ NH3-甲醇，流速：30ml/min(装载泵4ml/min甲醇)，目标质量381，柱：YMC Triart C18 100x20mm，5um)纯化残余物，以得到(3R,6R)-1-[2-[(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酰基]-6-苯基哌啶-3-甲酰胺(78mg，204.50μmol，19.69％产率)和(3R,6S)-1-[2-[(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酰基]-6-苯基哌啶-3-甲酰胺(21mg，55.06μmol，5.30％产率)。
化合物315：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)2.08(m,3H),2.18(m,1H),2.33(m,1H),2.52(m,1H),3.19(m,1H),4.45(m,2H),4.91(m,1H),5.85(m,1H),6.16(m,1H),7.31(m,8H),7.69(m,1H),8.07(m,1H),9.47(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]m/z：计算值381.4；实测值382.2；Rt＝1.751min。
化合物328：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.47(m,1H),1.84(m,2H),2.00(m,3H),2.96(m,2H),3.99(m,1H),5.50(m,3H),6.87(m,1H),7.29(m,3H),7.34(m,1H),7.39(m,3H),7.48(m,1H),8.00(d,1H),10.57(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]m/z：计算值381.4；实测值382.2；Rt＝1.678min。
实施例765.1-(2-((6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)氨基)-2-氧代乙酰基)-N-甲基-6-苯基哌啶-3-甲酰胺(化合物249、化合物253)的合成
步骤1：5-(甲基氨基甲酰基)-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
向1-叔丁氧基羰基-6-苯基哌啶-3-甲酸(如上文所述制备)(3g，9.82mmol)于THF(100mL)中的搅拌溶液中添加羰基二咪唑(2.07g，12.77mmol)且将反应混合物在50℃下搅拌1.5h。使甲胺鼓泡穿过反应混合物达30min。将反应混合物在25℃下搅拌30min。蒸发THF。将残余物用水(150ml)稀释，将产物用EtOAc(2*100ml)萃取。将有机层经Na2SO4干燥。蒸发EtOAc，以得到5-(甲基氨基甲酰基)-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯(2g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值218.2；实测值219.2；Rt＝1.360min。
步骤2：N-甲基-6-苯基哌啶-3-甲酰胺的合成
向5-(甲基氨基甲酰基)-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.7g，2.20mmol)于DCM(7mL)中的溶液中添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(801.57mg，21.98mmol，1.00mL)且将所得混合物在25℃下搅拌2h。蒸发溶剂，以得到N-甲基-6-苯基哌啶-3-甲酰胺(0.5g，粗品，HCl)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.28(m,1H),1.55(m,2H),1.97(m,2H),2.83(m,2H),3.55(d,3H),4.29(m,1H),7.44(m,5H),8.15(m,1H),8.43(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]m/z：计算值218.2；实测值219.2；Rt＝0.656min。
步骤3：(3-甲基-5-(2-(5-(甲基氨基甲酰基)-2-苯基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
向N-甲基-6-苯基哌啶-3-甲酰胺(0.5g，2.29mmol)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(676.36mg，2.29mmol)和HATU(870.91mg，2.29mmol)于DMF(2mL)中的溶液中添加三乙胺(231.77mg，2.29mmol，319.25μL)。将混合物在25℃下搅拌2h。将混合物用水(30ml)稀释且用EtOAc(3*50ml)萃取。将合并的有机层用水(3*50ml)和盐水洗涤，然后经Na2SO4干燥且蒸发，以得到N-[3-甲基-5-[[2-[5-(甲基氨基甲酰基)-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.8g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+1]m/z：计算值495.5；实测值496.2；Rt＝1.183min。
步骤4：1-(2-((6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)氨基)-2-氧代乙酰基)-N-甲基-6-苯基哌啶-3-甲酰胺(化合物249和化合物253)的合成
向N-[3-甲基-5-[[2-[5-(甲基氨基甲酰基)-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.8g，1.61mmol)于DCM(15mL)中的溶液中添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(58.86mg，1.61mmol，73.57μL)且将所得混合物在25℃下搅拌1.5h。蒸发溶剂且将残余物提交用于反相HPLC(30-30-50％0-1-6min 0.1％ NH3-甲醇，流速：30ml/min(装载泵4ml/min甲醇))，以得到2种级分：第1级分：100mg(100％ LCMS)；(2D-NMR：顺式异构体)和第2级分：71mg(98.5％ LCMS)；(2D-NMR：反式异构体)。
化合物249：LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值395.4；实测值396.2；Rt＝1.916min。
化合物253：LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值395.4；实测值396.2；Rt＝1.916min。
实施例766.外消旋-5-(2-氧代-2-((2R,5S)-2-苯基-5-(1H-吡唑-5-基)哌啶-1-基)乙酰胺基)烟酰胺(化合物669)的合成
步骤1：5-(甲氧基(甲基)氨基甲酰基)-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
向1-叔丁氧基羰基-6-苯基哌啶-3-甲酸(13.5g，44.21mmol)(如上文所述制备)于THF(200mL)中的搅拌溶液中添加CDI(9.32g，57.47mmol)且将反应混合物在25℃下搅拌2h。添加N,O-二甲基羟基胺盐酸盐(6.04g，61.89mmol)，随后添加三乙胺(6.26g，61.89mmol，8.63mL)。将反应混合物在25℃下搅拌15h。蒸发四氢呋喃。将残余物用DCM(200ml)稀释且用水(3*100ml)洗涤。将有机层经Na2SO4干燥。蒸发DCM，以得到5-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯(20g，粗品)，其不经进一步纯化即用于下一步骤中。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)1.48(s,9H),1.75(m,2H),1.84(m,2H),2.48(m,1H),2.88(m,1H),3.68(s,3H),3.72(s,3H),4.72(m,1H),5.41(m,1H),7.24(m,5H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值248.2；实测值249.2；Rt＝1.366min。
步骤2：2-苯基-5-丙炔酰基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
在-30℃下，向于THF中的0.5M经搅拌乙炔基溴化镁溶液(9.27g，71.75mmol，143mL)中逐滴添加5-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯(5g，14.35mmol)于THF(70mL)中的溶液。将反应混合物缓慢加热至室温且搅拌12h。将反应混合物添加到经剧烈搅拌(先前制备)的NaHSO4溶液(17.2g于170ml水中)中且在25℃下搅拌4h。蒸发有机相。将水相用DCM(2*60ml)萃取。将合并的有机相用水、盐水洗涤且经Na2SO4干燥。在真空中蒸发溶剂，以得到2-苯基-5-丙-2-炔酰基哌啶-1-甲酸叔丁酯(3.5g，11.17mmol，77.83％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.46(s,9H),1.82(m,2H),2.02(m,1H),2.45(m,1H),2.66(m,1H),2.77(m,1H),3.21(m,1H),4.39(m,1H),5.43(m,1H),7.28(m,5H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]m/z：计算值213.2；实测值214.2；Rt＝1.507min。
步骤3：5-(3-(二乙基氨基)丙烯酰基)-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
向2-苯基-5-丙-2-炔酰基哌啶-1-甲酸叔丁酯(3.5g，11.17mmol)于乙醇(100mL)中的溶液中添加二乙胺(1.23g，16.75mmol，1.74mL)且将反应混合物在25℃下搅拌1.5h。在真空中蒸发乙醇，以得到5-[(E)-3-(二乙基氨基)丙-2-烯酰基]-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯(3.5g，粗品)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.18(m,6H),1.42(s,9H),1.67(m,2H),1.88(m,3H),2.44(m,2H),2.79(m,1H),3.18(m,4H),5.05(m,1H),7.27(m,5H),7.50(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]m/z：计算值286.2；实测值287.2；Rt＝1.520min。
步骤4：2-苯基-5-(1H-吡唑-5-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成向5-[(E)-3-(二乙基氨基)丙-2-烯酰基]-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1g，2.59mmol)于乙醇(30mL)中的搅拌溶液中添加于水中的55％水合肼溶液(35％肼)(518.05mg，5.17mmol，502.97μL，50％纯度)且将所得混合物在78℃下搅拌24h。蒸发乙醇。将残余物用水(100ml)稀释且用乙酸乙酯(2*50ml)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥。蒸发EtOAc，以得到2-苯基-5-(1H-吡唑-5-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(700mg，粗品)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)1.49(s,9H),1.74(m,2H),2.08(m,2H),2.48(m,1H),2.79(m,1H),2.98(m,1H),4.34(m,1H),5.52(m,1H),6.04(m,1H),7.35(m,5H),7.43(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]m/z：计算值227.2；实测值228.2；Rt＝1.406min。
步骤5：2-苯基-5-(1H-吡唑-5-基)哌啶的合成
向2-苯基-5-(1H-吡唑-5-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(700mg，2.14mmol)于DCM(5mL)中的搅拌溶液中添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(779.51mg，21.38mmol，974.39μL)。将反应混合物在25℃下搅拌3h。在真空中蒸发溶剂，以得到2-苯基-5-(1H-吡唑-5-基)哌啶(700mg，粗品，2HCl)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.68(m,1H),1.87(m,1H),2.09(m,3H),3.39(m,2H),4.42(m,1H),6.33(m,1H),7.46(m,5H),7.76(m,1H),8.49(m,1H),10.03(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]m/z：计算值227.2；实测值228.2；Rt＝0.860min。
步骤6：外消旋-5-(2-氧代-2-((2R,5S)-2-苯基-5-(1H-吡唑-5-基)哌啶-1-基)乙酰胺基)烟酰胺(化合物669)的合成
向2-苯基-5-(1H-吡唑-5-基)哌啶(300mg，999.25μmol，2HCl)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(209.00mg，673.44μmol，Et3N)和三乙胺(707.80mg，6.99mmol，974.93μL)于DMF(3mL)中的溶液中分批添加HATU(417.94mg，1.10mmol)。将混合物在25℃下搅拌2h。通过反相HPLC(20-70％0-5min水/MeOH+FA，流速：30ml/min(装载泵4ml/min甲醇)，目标质量419，柱：Chromatorex 18SMB100-5T 100x19mm 5u)纯化反应混合物，以得到5-[[2-氧代-2-[(2S,5R)-2-苯基-5-(1H-吡唑-5-基)-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(97mg，231.81μmol，23.20％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.52(m,1H),1.96(m,1H),2.59(m,1H),2.86(m,1H),3.00(m,1H),4.23(m,2H),5.52(m,1H),6.00(m,1H),7.28(m,3H),7.40(m,3H),7.48(m,1H),7.62(m,1H),8.15(m,1H),8.51(m,1H),8.75(m,1H),8.91(m,1H),11.3(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值418.4；实测值419.2；Rt＝2.052min。
实施例767.5-(2-(5-(羟基甲基)-2-苯基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物266、化合物285)的合成
步骤1：(6-苯基哌啶-3-基)甲醇的合成
向6-苯基哌啶-3-甲酸乙酯(2g，8.57mmol)(如上文所述制备)于THF(50mL)中的预冷却(-10℃)搅拌溶液中分批添加氢化锂铝(325.36mg，8.57mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌1.5h。将反应混合物用于THF中的20％水溶液淬灭。过滤所获得的沉淀且将残余物用热THF洗涤。将合并的滤液在减压下蒸发，以得到(6-苯基-3-哌啶基)甲醇(1.7g，粗品)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.95(m,4H),2.32(m,1H),2.82(m,1H),3.48(m,1H),3.63(m,2H),3.95(m,1H),4.04(m,1H),7.32(m,5H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值191.2；实测值192.2；Rt＝0.724min。
步骤2：5-(2-(5-(羟基甲基)-2-苯基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物266和化合物285)的合成
向(6-苯基-3-哌啶基)甲醇(0.4g，2.09mmol)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(513.66mg，2.09mmol，HCl)和HATU(874.69mg，2.30mmol)于DMF(4.5mL)中的溶液中添加三乙胺(1.06g，10.46mmol，1.46mL)。将混合物在25℃下搅拌2h。将混合物提交用于反相HPLC(0-5min 0-40％水-甲醇(NH3 0.1％)，流速30ml/min(装载泵4ml/min甲醇(NH3 0.1％))，以得到3种级分：第1级分：97mg(96％ LCMS)-(2D研究：顺式异构体)，第2级分：68mg(96％ LCMS)-(2D研究：反式异构体)，第3级分：40mg(非对映异构体的混合物)。
化合物266：LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值382.4；实测值383.2；Rt＝2.569min。
化合物285：LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值382.4；实测值383.2；Rt＝2.525min。
实施例768.5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(6-氧代-1H-吡啶-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺和5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(6-氧代-1H-吡啶-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺、5-[[2-[(2R,5R)-5-甲基-2-(6-氧代-1H-吡啶-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺和5-[[2-[(2S,5S)-5-甲基-2-(6-氧代-1H-吡啶-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物350、化合物351、化合物401和化合物402)的合成
步骤1：6-(6-甲氧基-3-吡啶基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(10g，26.06mmol)、(6-甲氧基-3-吡啶基)硼酸(3.99g，26.06mmol)和碳酸钠(8.29g，78.19mmol，3.28mL)于1,4-二噁烷(120mL)和水(40mL)中的搅拌悬浮液用氩气吹扫10分钟。10分钟之后，在氩气下添加Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2(956.99mg，1.17mmol)。将反应混合物在氩气、90℃下搅拌18小时。18小时之后，将反应混合物冷却至室温且过滤。将滤饼用乙酸乙酯(4x50mL)洗涤且丢弃。在减压下蒸发滤液，且通过柱色谱(SiO2，己烷中的0-100％ MTBE)纯化粗残余物，以获得呈淡黄色固体的6-(6-甲氧基-3-吡啶基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(3.60g，11.83mmol，45.38％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值304.2；实测值305.2；Rt＝1.528min
步骤2：2-甲氧基-5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)吡啶的合成
将三氟乙酸(11.99g，105.13mmol，8.10mL)添加到6-(6-甲氧基-3-吡啶基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.60g，5.26mmol)中且将所得反应混合物在25℃下搅拌1小时。1小时之后，在减压下浓缩反应混合物，以获得淡黄色液体残余物。将所获得的残余物溶解于20mL冰冷水中且逐滴添加10％ NaOH溶液，直到pH＝9-10。将所得悬浮液用二氯甲烷(3x 20mL)萃取。将合并的有机相用水(10mL)洗涤，经Na2SO4干燥且在减压下浓缩，以获得呈淡黄色固体的2-甲氧基-5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)吡啶(1.30g，粗品)。粗产物不经任何进一步纯化即用于下一步反应。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值204.2；实测值205.2；Rt＝0.728min。
步骤3：2-甲氧基-5-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶的合成
在0℃下，将硼氢化钠(325.15mg，8.59mmol)分批添加到2-甲氧基-5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)吡啶(1.30g，5.73mmol)于甲醇(15mL)中的搅拌溶液中。将反应混合物在室温下搅拌2小时。2小时之后，在减压下浓缩反应混合物，以获得淡黄色液体残余物。将所获得的残余物溶解于水(20mL)中且用二氯甲烷(3x 25mL)萃取。将合并的有机相用水(2x 10mL)洗涤，经Na2SO4干燥且在减压下浓缩，以获得呈黄色液体的粗产物2-甲氧基-5-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶(1.00g，4.85mmol，84.61％产率)。粗产物不经任何进一步纯化即用于下一步反应。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值206.2；实测值207.2；Rt＝0.668min。
步骤4：5-(5-甲基-2-哌啶基)-1H-吡啶-2-酮的合成
将2-甲氧基-5-(5-甲基-2-哌啶基)吡啶(0.3g，1.45mmol)于6N盐酸水溶液(10mL)中的溶液在95℃下搅拌48小时。48小时之后，使反应混合物冷却至室温且在真空中蒸发，以得到呈黄色固体的5-(5-甲基-2-哌啶基)-1H-吡啶-2-酮(320mg，1.40mmol，96.20％产率，盐酸盐)。粗产物直接用于下一步反应中。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值192.2；实测值193.2；Rt＝0.591min。
步骤5：5-[[2-[5-甲基-2-(6-氧代-1H-吡啶-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
在25℃下，向5-(5-甲基-2-哌啶基)-1H-吡啶-2-酮(300mg，1.31mmol，盐酸盐)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(407.07mg，1.31mmol，Et3N盐)和N,N-二异丙基乙胺(847.61mg，6.56mmol，1.14mL)于DMF(10mL)中的搅拌溶液中分批添加HATU(598.48mg，1.57mmol)。将所得反应混合物在25℃下搅拌72小时。72小时之后，将样品提交用于LCMS分析。LCMS指示约20％所需产物质量。在减压下浓缩反应混合物，以获得粗产物，其通过反相HPLC(洗脱液：0-5min，10-25％水-甲醇+甲酸；柱：SunFireC18 100x 19mm，5um；流速：30mL/min；装载泵：4mL/min，甲醇)进行纯化，以得到呈黄色胶状物的产物5-[[2-[5-甲基-2-(6-氧代-1H-吡啶-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(120mg，312.99μmol，23.86％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值383.2；实测值384.2；Rt＝2.035min。
步骤6：5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(6-氧代-1H-吡啶-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺和5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(6-氧代-1H-吡啶-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺、5-[[2-[(2R,5R)-5-甲基-2-(6-氧代-1H-吡啶-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺和5-[[2-[(2S,5S)-5-甲基-2-(6-氧代-1H-吡啶-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物350、化合物351、化合物401和化合物402)的手性分离
使5-[[2-[5-甲基-2-(6-氧代-1H-吡啶-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(120mg，312.99μmol)经历手性HPLC纯化(柱：Chiralpak AD-H-III(250x20mm，5um)；流动相：己烷-IPA-MeOH，60-20-20；流速：14mL/min)，以得到呈灰白色固体的5-[[2-[(2S,5S)-5-甲基-2-(6-氧代-1H-吡啶-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物402，5.6mg，14.61μmol，4.67％产率)、5-[[2-[(2R,5R)-5-甲基-2-(6-氧代-1H-吡啶-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物401，5.6mg，14.61μmol，4.67％产率)、5-[[2-[(2S,5R)-5-甲基-2-(6-氧代-1H-吡啶-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物351，44mg，114.76μmol，36.67％产率)和5-[[2-[(2R,5S)-5-甲基-2-(6-氧代-1H-吡啶-3-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物350，62mg，161.71μmol，51.67％产率)。
化合物350：1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.00-1.03(m,3H),1.26-1.35(m,1H),1.69-1.76(m,1H),1.84-1.91(m,1H),1.93-2.06(m,2H),2.81-3.23(m,1H),3.39-3.93(m,1H),4.88-5.38(m,1H),6.29-6.40(m,1H),7.17-7.24(m,1H),7.33-7.48(m,1H),7.56-7.64(m,1H),8.11-8.18(m,1H),8.42-8.50(m,1H),8.73-8.79(m,1H),8.83-8.90(m,1H),11.12-11.26(m,1H),11.60(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值383.2；实测值384.0；Rt＝3.340min。
手性HPLC：Rt＝20.45min(柱：AD-H；流动相：己烷-IPA-MeOH，50-25-25；流速：0.6mL/min)。
化合物351：1H NMR(DMSO-d6,500MHz):δ(ppm)0.97-1.02(m,3H),1.25-1.38(m,1H),1.68-1.76(m,1H),1.79-1.91(m,1H),1.91-1.98(m,1H),1.99-2.03(m,1H),2.79-3.23(m,1H),3.36-3.96(m,1H),4.86-5.38(m,1H),6.29-6.40(m,1H),7.20(s,1H),7.31-7.46(m,1H),7.54-7.64(m,1H),8.08-8.21(m,1H),8.43-8.50(m,1H),8.71-8.81(m,1H),8.82-8.91(m,1H),11.15-11.34(m,1H),11.60(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值383.2；实测值384.0；Rt＝3.338min。
手性HPLC：Rt＝15.45min(柱：AD-H；流动相：己烷-IPA-MeOH，50-25-25；流速：0.6mL/min)。
化合物401：1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)0.75-0.84(m,3H),1.11-1.18(m,1H),1.57-1.69(m,2H),1.71-1.87(m,1H),2.26-2.29(m,1H),2.51-2.58(m,1H),3.54-4.18(m,1H),4.88-5.45(m,1H),6.34-6.42(m,1H),7.16-7.21(m,1H),7.30-7.43(m,1H),7.57-7.65(m,1H),8.11-8.22(m,1H),8.44-8.50(m,1H),8.74-8.79(m,1H),8.82-8.90(m,1H),11.07-11.39(m,1H),11.62(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值383.2；实测值384.0；Rt＝3.311min。
手性HPLC：Rt＝12.57min(柱：AD-H；流动相：己烷-IPA-MeOH，50-25-25；流速：0.6mL/min)。
化合物402：
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)0.73-0.84(m,3H),1.10-1.17(m,1H),1.57-1.70(m,2H),1.73-1.85(m,1H),2.13-2.19(m,0.6H),2.25-2.30(m,1H),2.54-2.58(m,0.4H),3.42-4.19(m,1H),4.87-5.48(m,1H),6.32-6.42(m,1H),7.14-7.24(m,1H),7.32-7.46(m,1H),7.56-7.65(m,1H),8.10-8.22(m,1H),8.44-8.54(m,1H),8.71-8.80(m,1H),8.82-8.91(m,1H),11.20-11.33(m,1H),11.62(br s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值383.2；实测值384.0；Rt＝3.313min。
手性HPLC：Rt＝9.96min(柱：AD-H；流动相：己烷-IPA-MeOH，50-25-25；流速：0.6mL/min)。
实施例769.5-[[2-[(2S,5R)-2-(3-羟基环戊基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物517)的合成
步骤1：3-溴环戊-2-烯-1-酮的合成
在0℃下，向三苯基膦(6.42g，24.46mmol)于DCM(50mL)中的搅拌溶液中添加溴(3.26g，20.39mmol，2.19mL)。将反应混合物在同一温度下搅拌45min。然后，添加环戊烷-1,3-二酮(2g，20.39mmol)和三乙胺(2.48g，24.46mmol，3.41mL)于DCM(50mL)中的溶液。将反应混合物在25℃下搅拌15h。蒸发DCM，以得到粗产物，其通过快速色谱使用己烷(两次)进行纯化。蒸发己烷，以得到3-溴环戊-2-烯-1-酮(0.5g，3.11mmol，15.23％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ2.54(m,2H),2.98(m,2H),8.41(s,1H)。
GCMS(EI)：[M+H]+m/z：计算值161.0；实测值160.0；Rt＝4.321min。
步骤2：3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)环戊-2-烯-1-酮的合成
向3-溴环戊-2-烯-1-酮(0.5g，3.11mmol)于二噁烷(15mL)中的溶液中添加4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(1.58g，6.21mmol)、Pd(dppf)Cl2(126.81mg，155.28μmol)和乙酸钾(914.39mg，9.32mmol，582.41μL)。将所得混合物在80℃下搅拌15h。将溶液冷却至室温，用水(40ml)稀释且用二氯甲烷(2*50ml)萃取。将所收集的有机层经Na2SO4干燥，过滤。蒸发DCM，以得到3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)环戊-2-烯-1-酮(0.8g，粗品)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ1.31(m,8H),2.34(m,2H),2.75(m,2H),3.69(s,4H),6.62(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值208.1；实测值209.2；Rt＝0.269min。
步骤3：3-甲基-6-(3-氧代环戊烯-1-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
向3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)环戊-2-烯-1-酮(7g，33.64mmol)和3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(11.62g，33.64mmol)于二噁烷(150mL)中的搅拌溶液中添加碳酸钠(10.70g，100.93mmol，4.23mL)于水(50mL)中的溶液。将所得混合物抽真空，然后用氩气回填，将此操作重复三次。添加Pd(dppf)Cl2(1.37g，1.68mmol)且将反应混合物在80℃下搅拌14h。过滤反应混合物，蒸发溶剂。通过梯度色谱纯化残余物，以得到3-甲基-6-(3-氧代环戊烯-1-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(2.5g，9.01mmol，26.79％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ1.01(d,3H),1.40(s,9H),.97(m,1H),1.99(m,1H),2.49(m,3H),2.89(m,1H),2.77(m,1H),2.92(m,1H),3.92(m,1H),5.76(s,1H),6.04(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M-tBu]+m/z：计算值221.2；实测值222.2；Rt＝1.258min。
步骤4：3-(5-甲基-2-哌啶基)环戊-2-烯-1-醇的合成
向3-甲基-6-(3-氧代环戊烯-1-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.9g，6.85mmol)中添加三氟乙酸(7.81g，68.50mmol，5.28mL)且将反应混合物在25℃下搅拌1.5h。蒸发TFA。将残余物用DME(40mL)稀释且在0℃下分批添加硼氢化钠(1.30g，34.25mmol，1.21mL)。将反应混合物在25℃下搅拌1.5h，然后用甲醇(5ml)淬灭。蒸发溶剂。将残余物用10％ NaOH溶液洗涤且用DCM(2*50ml)萃取。将有机层合并，经Na2SO4干燥。蒸发DCM，以得到3-(5-甲基-2-哌啶基)环戊-2-烯-1-醇(0.85g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值181.2；实测值182.2；Rt＝0.698min。
步骤5：3-(5-甲基-2-哌啶基)环戊醇的合成
向3-(5-甲基-2-哌啶基)环戊-2-烯-1-醇(0.85g，4.69mmol)于MeOH(40mL)中的搅拌溶液中添加干燥的487型钯(10％于碳上)(0.6g，5.64mmol)。将反应烧瓶抽真空且通过氢气再填充。在氢气气氛下将反应混合物在54℃下搅拌14h。通过SiO2过滤反应混合物。蒸发甲醇，以得到3-(5-甲基-2-哌啶基)环戊醇(0.45g，2.46mmol，52.36％产率)，其不经进一步纯化即用于下一步骤中。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ0.81(d,3H),1.22(m,6H),2.17(m,8H),2.28(m,2H),3.01(m,1H),4.33(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值183.2；实测值184.2；Rt＝0.524min。
步骤6：5-[[2-[(2S,5R)-2-(3-羟基环戊基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物517)的合成
向3-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]环戊醇(0.35g，1.91mmol)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(592.62mg，1.91mmol，Et3N)和三乙胺(1.35g，13.37mmol，1.86mL)于DMF(4mL)中的溶液中分批添加HATU(798.67mg，2.10mmol)。将混合物在25℃下搅拌2h。反应混合物的LCMS分析显示45％产物。将反应混合物提交用于反相HPLC(10-10-60％0-1-5min 0.1％ NH3-甲醇，流速：30ml/min(装载泵4ml/min甲醇)，目标质量374，柱：YMCTriart C18 100*20mm，5um)，以得到呈围绕C-OH的非对映异构体的混合物的5-[[2-[(2S,5R)-2-(3-羟基环戊基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(66mg，176.27μmol，9.23％产率)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值374.2；实测值375.2；Rt＝1.846min。
实施例770.5-[[2-氧代-2-[2-苯基-5-(三氟甲氧基)-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物411)的合成
步骤1：6-苯基哌啶-3-醇的合成
将6-苯基吡啶-3-醇(8.00g，46.73mmol)溶解于MeOH(250mL)中且添加干燥的487型钯(10％于碳上)(2.49g，2.34mmol，10％纯度)。将反应混合物在50℃下、在高压容器中、在100巴H2压力下加热120h。过滤出催化剂，用MeOH洗涤且蒸发溶剂，以得到6-苯基哌啶-3-醇(8.1g，45.70mmol，97.80％产率)。
此化合物不经纯化即用于下一步骤。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ1.33(m,2H),1.69(m,2H),1.94(m,1H),2.35(m,1H),3.98(m,1H),3.44(m,2H),7.27(m,5H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值177.2；实测值178.2；Rt＝0.656min。
步骤2：5-羟基-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
向6-苯基哌啶-3-醇(8.1g，45.70mmol)于THF(150mL)中的溶液中添加二碳酸二-叔丁酯(10.47g，47.99mmol，11.01mL)。将所得混合物在25℃下搅拌12h，蒸发，溶解于水(30ml)中，用DCM(3*50ml)萃取，经Na2SO4干燥且在真空中蒸发，以获得粗产物，通过梯度色谱(己烷-MTBE)纯化所述粗产物，以获得5-羟基-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯(2g，7.21mmol，15.78％产率)和通过GCMS为纯度87％的级分(4g)。
纯级分的结构使用2D NMR证实为反式。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值227.2；实测值228.0；Rt＝1.342min。
步骤3：2-苯基-5-(三氟甲氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
在Ar气氛下，向装备有搅拌棒且用铝箔覆盖的反应烧瓶中添加5-羟基-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.55g，1.98mmol)、三氟甲基磺酸银(1.53g，5.95mmol)、氟化钾(460.82mg，7.93mmol)和1-氯甲基-4-氟-1,4-二氮杂双环[2.2.2]辛烷双(四氟硼酸酯)(1.05g，2.97mmol)。然后依次逐滴添加EtOAc(10mL)、2-氟-吡啶(577.59mg，5.95mmol，511.14μL)和三氟甲基三甲基硅烷(845.91mg，5.95mmol，945.16μL)，同时使用水浴保持内部温度低于30℃。将反应混合物在25℃下搅拌12h。通过硅胶塞过滤所得混合物且将滤液(80ml)用盐水(3*50ml)洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中蒸发，以获得粗品2-苯基-5-(三氟甲氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.7g，粗品)。
此化合物不经纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.43(m,9H),1.69(m,2H),1.91(m,2H),2.90(m,1H),4.28(m,1H),5.45(m,1H),7.20(m,3H),7.35(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值245.2；实测值246.2；Rt＝1.446min。
步骤4：2-苯基-5-(三氟甲氧基)哌啶的合成
向2-苯基-5-(三氟甲氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.7g，2.03mmol)于DCM(15mL)中的溶液中添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(6.40g，175.53mmol，8mL)。将所得混合物在25℃下搅拌12h且在真空中蒸发，以得到2-苯基-5-(三氟甲氧基)哌啶(0.7g，粗品，HCl)。此化合物不经纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.72(m,2H),3.67(m,2H),3.90(m,3H),4.28(m,1H),4.98(m,1H),7.16(m,1H),7.38(m,2H),7.58(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值245.2；实测值246.0；Rt＝0.897min。
步骤5：5-[[2-氧代-2-[2-苯基-5-(三氟甲氧基)-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物411)的合成
向2-苯基-5-(三氟甲氧基)哌啶(0.7g，2.00mmol)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(490.76mg，2.00mmol，HCl)和三乙胺(1.01g，9.99mmol，1.39mL)的溶液中添加HATU(835.69mg，2.20mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌3h且使其经历HPLC：20-45％0-5min水-乙腈+0.1％ FA流速30ml/min(装载泵4ml/min乙腈+0.1％FA)，目标质量436.39，柱：XBridge C18 100x19 mm 5um)，以得到5-[[2-氧代-2-[2-苯基-5-(三氟甲氧基)-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(10mg，22.92μmol，1.15％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO)δ1.72-1.93(m,2H),2.08-2.27(m,1H),2.38-2.42(m,1H),2.88-3.28(m,1H),4.06-4.15(m,0.6H),4.54-4.59(m,0.4H),4.61-4.76(m,1H),5.37-5.87(m,1H),7.31-7.47(m,5H),7.56-7.73(m,1H),8.11-8.22(m,1H),8.44-8.59(m,1H),8.69-8.84(m,1H),8.84-8.98(m,1H),11.23-11.42(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值436.2；实测值437.2；Rt＝3.108min。
实施例771.5-[[2-[(2S,5R)-5-(二氟甲氧基)-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物379)和5-[[2-[(2R,5R)-5-(二氟甲氧基)-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物400)的合成
步骤1：5-(二氟甲氧基)-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将5-羟基-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.6g，2.16mmol)(如上文所述制备)和碘化铜(I)(82.40mg，432.65μmol，14.66μL)溶解于ACN(30mL)中且在氩气气氛下加热至45℃。在10min内向此溶液中逐滴添加2,2-二氟-2-氟磺酰基乙酸(770.50mg，4.33mmol，447.97μL)于ACN(3ml)中的溶液。将所得混合物在45℃下搅拌1.5h且在10min内逐滴添加额外2,2-二氟-2-氟磺酰基乙酸(770.50mg，4.33mmol，447.97μL)于ACN(3ml)中的溶液。将所得混合物在45℃下搅拌12小时且在真空中蒸发。将残余物用DCM(75ml)和饱和碳酸氢钠水溶液(75ml)稀释。将有机层分离，用盐水(50ml)洗涤，经Na2SO4干燥且蒸发，以得到5-(二氟甲氧基)-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.7g，粗品)。此化合物不经纯化即用于下一步骤。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.45(s,9H),1.65(m,2H),2.14(m,1H),2.29(m,2H),2.60(m,1H),2.88(m,1H),4.22(m,2H),7.24(m,5H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值227.2；实测值228.2；Rt＝0.847min。
步骤2：5-(二氟甲氧基)-2-苯基哌啶的合成
向5-(二氟甲氧基)-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.7g，2.14mmol)于DCM(15mL)中的溶液中添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(8.00g，219.41mmol，10mL)。将所得混合物在25℃下搅拌3h且在真空中蒸发，以得到5-(二氟甲氧基)-2-苯基哌啶(0.5g，粗品，HCl)。此化合物不经纯化即用于下一步骤。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ1.67(m,2H),1.82(m,2H),2.16(m,2H),2.90(2,1H),4.24(m,2H),7.25(m,5H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值227.1；实测值228.2；Rt＝0.740min。
步骤3：5-[[2-[(2S,5R)-5-(二氟甲氧基)-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物379)和5-[[2-[(2R,5R)-5-(二氟甲氧基)-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物400)的合成
向5-(二氟甲氧基)-2-苯基哌啶(0.5g，1.90mmol，HCl)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(465.70mg，1.90mmol，HCl)和三乙胺(959.29mg，9.48mmol，1.32mL)的溶液中添加HATU(793.01mg，2.09mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌3h且使其经历HPLC：0-5min 15-40％水-乙腈+0.1％ TFA，流速30ml/min(装载泵4ml/min乙腈+0.1％TFA)，目标质量418.40，柱：SunFireC18 100*19mm 5um)，以得到5-[[2-[(2S,5R)-5-(二氟甲氧基)-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(34mg，81.26μmol，5.36％产率)。
化合物379：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.62-1.71(m,1H),1.71-1.81(m,1H),2.07-2.24(m,1H),2.29-2.35(m,1H),2.82-3.21(m,1H),3.97-4.52(m,2H),5.26-5.77(m,1H),6.50-6.92(m,1H),7.23-7.31(m,1H),7.31-7.33(m,1H),7.33-7.36(m,1H),7.37-7.45(m,2H),7.52-7.66(m,1H),8.09-8.18(m,1H),8.43-8.53(m,1H),8.71-8.80(m,1H),8.83-8.92(m,1H),11.15-11.39(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值418.2；实测值419.2；Rt＝2.811min。
化合物400：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.41-1.49(m,1H),1.90-2.06(m,2H),2.40-2.45(m,1H),2.54-2.56(m,0.4H),2.81-2.86(m,0.6H),3.98-4.20(m,1H),4.31-4.51(m,1H),5.17-5.66(m,1H),6.48-6.91(m,1H),7.15-7.30(m,1H),7.31-7.34(m,1H),7.35-7.38(m,1H),7.39-7.43(m,2H),7.55-7.67(m,1H),8.10-8.22(m,1H),8.42-8.54(m,1H),8.72-8.81(m,1H),8.81-8.95(m,1H),11.29-11.33(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值418.2；实测值419.2；Rt＝3.015min。
实施例772.5-[[2-[(2R,5S)-5-羟基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物349)的合成
步骤1：(3S,6R)-6-苯基哌啶-3-醇的合成
来自先前实施例的boc保护的胺的结构被证实为反式。
将(2R,5S)-5-羟基-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯(500.00mg，1.80mmol)于于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(6.40g，175.53mmol，8mL)中的溶液在25℃下搅拌3h且在真空中蒸发，以获得(3S,6R)-6-苯基哌啶-3-醇(0.3g，1.40mmol，77.87％产率，HCl)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.55(m,1H),1.95(m,3H),2.74(m,1H),3.23(m,1H),4.02(m,1H),4.19(m,1H),7.41(m,3H),7.59(m,2H),9.46(m,1H),9.85(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值177.1；实测值178.2；Rt＝0.662min。
步骤2：5-[[2-[(2R,5S)-5-羟基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物349)的合成
向(3S,6R)-6-苯基哌啶-3-醇(290.28mg，1.64mmol，HCl)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(402.27mg，1.64mmol，HCl)和三乙胺(828.64mg，8.19mmol，1.14mL)的溶液中添加HATU(685.01mg，1.80mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌3h且使其经历HPLC：20-20-65％0-1-6min 0.2％TFA-甲醇，流速：30ml/min(装载泵4ml/min甲醇)，目标质量368，柱：YMC Triart C18 100*20mm，5um)，以得到5-[[2-[(2R,5S)-5-羟基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(250mg，678.64μmol，41.44％产率)。
boc保护的胺的结构被证实为反式。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.44-1.64(m,2H),2.09-2.27(m,2H),2.65-3.13(m,1H),3.67-4.33(m,2H),4.73-4.95(m,1H),5.19-5.73(m,1H),7.24-7.29(m,1H),7.29-7.34(m,2H),7.35-7.42(m,2H),7.54-7.63(m,1H),8.08-8.21(m,1H),8.44-8.57(m,1H),8.69-8.78(m,1H),8.81-8.95(m,1H),11.01-11.33(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值368.2；实测值369.2；Rt＝2.375min。
实施例773.5-[[2-氧代-2-[(2S,5S)-2-苯基-5-(2,2,2-三氟乙基)-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物342)和5-[[2-氧代-2-[(2R,5S)-2-苯基-5-(2,2,2-三氟乙基)-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物318)的合成
步骤1：2-氧代-5-(2,2,2-三氟乙基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将碳酸叔丁氧基羰基酯叔丁酯(15.06g，69.00mmol，15.84mL)于DCM(25.00mL)中的溶液缓慢(达5h)添加到5-(2,2,2-三氟乙基)哌啶-2-酮(5g，27.60mmol)和DMAP(33.72mg，276.01μmol)于DCM(25.00mL)中的经回流的溶液中。等分试样显示约50％转化成所需产物；以类似方式添加另外1当量碳酸叔丁氧基羰基酯叔丁酯(15.06g，69.00mmol，15.84mL)。在反应完成之后，将有机溶剂蒸发，以得到2-氧代-5-(2,2,2-三氟乙基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(8.2g，粗品)，其不经纯化即用于下一步骤中。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ1.38(s,9H),1.55(m,1H),1.82(m,1H),2.18(m,1H),2.39(m,4H),3.41(m,1H),3.62(m,1H)。
步骤2：N-[5-氧代-5-苯基-2-(2,2,2-三氟乙基)戊基]氨基甲酸叔丁酯的合成
将2-氧代-5-(2,2,2-三氟乙基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1g，3.56mmol)溶解于THF(5.00mL)中且在Ar下冷却至-78℃。逐滴添加溴(苯基)镁(644.62mg，3.56mmol，1.4mL)的溶液且将反应混合物升温至室温。30min之后，将反应物用过量饱和NH4Cl水溶液淬灭，且用EtOAc(15mL)萃取。蒸发溶剂，得到N-[5-氧代-5-苯基-2-(2,2,2-三氟乙基)戊基]氨基甲酸叔丁酯(0.8g，粗品)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.46(m,9H),1.83(m,7H),3.05(m,4H),4.77(m,1H),7.45(m,3H),7.95(s,2H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值259.2；实测值260.2；Rt＝1.406min。
步骤3：6-苯基-3-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,5-四氢吡啶的合成
将N-[5-氧代-5-苯基-2-(2,2,2-三氟乙基)戊基]氨基甲酸叔丁酯(3g，8.35mmol)溶解于DCM(20mL)中，随后添加TFA(2.86g，25.04mmol，1.93mL)。在反应完成(通过HNMR推测)之后，将反应混合物用50％ KOH水溶液(4.68g，83.48mmol，2.30mL)中和。将混合物用DCM(50mL)萃取，将有机溶剂经Na2SO4干燥且蒸发，以得到6-苯基-3-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,5-四氢吡啶(1.3g，5.39mmol，64.55％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ1.55(m,1H),2.11(m,4H),2.64(m,1H),2.84(m,1H),3.45(m,1H),4.11(m,1H),7.40(m,3H),7.78(m,2H)。
步骤4：2-苯基-5-(2,2,2-三氟乙基)哌啶的合成
将6-苯基-3-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,5-四氢吡啶(1.3g，5.39mmol)、6-苯基-3-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,5-四氢吡啶(1.3g，5.39mmol)溶解于MeOH(20mL)和H2O(5mL)中且冷却至25℃。将硼氢化钠(407.73mg，10.78mmol，381.05μL)分批添加到所获得的混合物中且再搅拌过夜。反应完成之后，将反应混合物用10％ HCl水溶液酸化至pH 2，用MTBE(2*10mL)洗涤，用10％ NaOH水溶液碱化至pH 10且用DCm(30mL)萃取。蒸发溶剂，得到呈顺式异构体和反式异构体(20:80)的混合物的纯的2-苯基-5-(2,2,2-三氟乙基)哌啶(1g，4.11mmol，76.29％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.31(m,1H),1.44(m,1H),1.71(m,1H),1.94(m,4H),2.51(m,1H),3.01(m,1H),3.22(m,1H),3.48(m,1H),7.28(m,5H)。
步骤5：5-[[2-氧代-2-[(2S,5S)-2-苯基-5-(2,2,2-三氟乙基)-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物342)和5-[[2-氧代-2-[(2R,5S)-2-苯基-5-(2,2,2-三氟乙基)-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物318)的合成
将DIPEA(368.33mg，2.85mmol，496.41μL)添加到相应2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(0.2g，814.27μmol，HCl)和2-苯基-5-(2,2,2-三氟乙基)哌啶(198.08mg，814.27μmol)于DMF(10mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU(340.57mg，895.69μmol)于DMF(2mL)中的溶液。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC(Waters Sunfire C1819*100 5mkm柱且以H2O-MeCN为流动相)，以得到纯的反式5-[[2-氧代-2-[(2S,5S)-2-苯基-5-(2,2,2-三氟乙基)-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.18g，414.35μmol，50.89％产率)和顺式5-[[2-氧代-2-[(2R,5S)-2-苯基-5-(2,2,2-三氟乙基)-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(30.2mg，69.52μmol，8.54％产率)非对映异构体。
化合物342：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.54(m,1H),1.67(m,1H),1.97(m,1H),2.09(m,1H),2.27(m,1H),2.43(m,1H),2.79(m,1H),4.01(m,1H),5.39(m,1H),7.27(m,1H),7.31(m,2H),7.36(m,1H),7.40(m,2H),7.60(m,1H),8.15(m,1H),8.45(m,1H),8.76(m,1H),8.86(m,1H),11.25(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值434.2；实测值435.2；Rt＝3.262min。
化合物318：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ1.25(m,1H),1.77(m,1H),1.88(m,1H),1.98(m,1H),2.08(m,2H),2.70(m,2H),4.07(m,1H),5.50(m,1H),7.28(m,1H),7.30(m,1H),7.35(m,1H),7.40(m,2H),7.60(m,1H),8.15(m,1H),8.46(m,1H),8.77(m,1H),8.86(m,1H),11.29(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值434.2；实测值435.2；Rt＝3.217min。
实施例774.外消旋-5-[[2-[(2R,5S)-2-(3-羟基环丁基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物413)和外消旋-5-[[2-[(2R,5S)-2-(3-羟基环丁基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物407)的合成
步骤1：3-(3-苯甲基氧基环丁烷羰基)-5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
向5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(3.6g，16.88mmol)于THF(100mL)中的预冷却(-78℃)溶液中逐滴添加LiHMDS(35.45mmol，33.5mL)。将所得混合物在-78℃下搅拌1h。一次性添加3-苯甲基氧基环丁烷羰基氯(3.79g，16.88mmol)的溶液。使反应混合物升温至室温且在所述温度下搅拌4h。将反应混合物用NaHSO4(10g；10％溶液)淬灭且用DCM(2*100ml)萃取。将有机层用水洗涤，经Na2SO4干燥。蒸发DCM，以得到3-(3-苯甲基氧基环丁烷羰基)-5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(8g，粗品)
1H NMR(CDCl3,400MHz):δ0.95(s,3H),1.20(m,2H),1.45(m,9H),1.90(m,2H),2.10-2.25(m,4H),3.00(m,2H),3.75(m,1H),3.95(m,1H),4.42(m,2H),7.31(m,5H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值401.2；实测值302.2；Rt＝1.447min。
步骤2：3-(5-甲基-2-哌啶基)环丁醇的合成
将3-(3-苯甲基氧基环丁烷羰基)-5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(2g，4.98mmol)溶解于AcOH(25mL)中且分批添加氯化氢水溶液(1.82g，4.98mmol，25mL，10％纯度)。添加完成之后，将所得混合物在100℃下搅拌14h。然后，在减压下移除溶剂且将残余物分配于1N HCl(5ml)与DCM(20ml)之间。分离有机层且丢弃。将水层用10％NaOH碱化至ph≈10且用EtOAc(2x30 ml)萃取。分离EtOAc溶液，经Na2SO4干燥且在减压下蒸发，得到3-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)环丁醇(300mg，1.79mmol，36.01％产率)。粗产物不经进一步纯化即用于下一步骤中。
1H NMR(CDCl3,400MHz):δ0.90(m,3H),1.10-1.20(m,1H),1.50(m,1H),1.70(m,1H),1.85-2.20(m,4H),2.30-2.50(m,3H),2.95(m,1H),3.25-3.40(brs,1H),3.68(d,1H),4.13(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值257.2；实测值258.2；Rt＝0.803min。
步骤3：3-(5-甲基-2-哌啶基)环丁醇的合成
在25℃下，向3-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)环丁醇(0.45g，2.69mmol)于MeOH(10mL)中的溶液中分批添加硼氢化钠(101.79mg，2.69mmol，95.13μL)。将所得混合物在25℃下搅拌2h且在真空中蒸发。将残余物用氯化氢二噁烷溶液处理。然后蒸发二噁烷。将沉淀用THF洗涤，在真空中干燥，以得到3-(5-甲基-2-哌啶基)环丁醇(300mg，粗品，HCl)
1H NMR(CDCl3,400MHz):δ0.90(d,3H),1.00-1.10(m,1H),1.20-1.30(m,1H),1.40-1.50(m,1H),1.60-2.00(m,5H),2.10-2.40(m,3H),2.80(m,1H),3.00(m,1H),3.50(brs,1H),3.83(m,1H),9.00(brs,1H),9.40(brs,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值169.2；实测值170.2；Rt＝0.645min。
步骤4：外消旋-5-[[2-[(2R,5S)-2-(3-羟基环丁基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物413)和外消旋-5-[[2-[(2R,5S)-2-(3-羟基环丁基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物407)的合成
向3-(5-甲基-2-哌啶基)环丁醇(0.3g，1.46mmol，HCl)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(358.18mg，1.46mmol，HCl)和三乙胺(1.48g，14.58mmol，2.03mL)于DMF(3mL)中的溶液中分批添加HATU(609.92mg，1.60mmol)。将混合物在25℃下搅拌2h。将反应混合物提交用于HPLC(10-10-40％0-1-6min 0.1％ NH3-甲醇，流速：30ml/min(装载泵4ml/min甲醇)，目标质量360，柱：YMC Triart C18 100x20 mm，5um)，以得到5-[[2-[(2R,5S)-2-(3-羟基环丁基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(12mg，33.30μmol，2.28％产率)和5-[[2-[(2R,5S)-2-(3-羟基环丁基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(100mg，277.46μmol，19.03％产率)。5-[[2-[(2R,5S)-2-(3-羟基环丁基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(12mg，33.30μmol，2.28％产率)
化合物413：
1H NMR(500MHz,DMSO)δ0.89-1.00(m,3H),1.21-1.33(m,1H),1.35-1.48(m,1H),1.64-1.80(m,1H),1.80-1.89(m,3H),1.91-2.15(m,3H),2.71-2.81(m,1H),2.85-3.25(m,1H),3.41-3.47(m,1H),3.78-4.01(m,1H),4.22-4.44(m,1H),4.94-5.05(m,1H),7.57-7.65(m,1H),8.14-8.21(m,1H),8.45-8.57(m,1H),8.72-8.83(m,1H),8.86-8.94(m,1H),11.10(br s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值360.2；实测值361.2；Rt＝2.180min。
化合物407：
1H NMR(500MHz,DMSO)δ0.90-1.01(m,3H),1.24-1.45(m,3H),1.47-1.68(m,2H),1.68-2.04(m,3H),2.19-2.23(m,1H),2.28-2.33(m,1H),2.93-3.25(m,1H),3.41-3.78(m,1H),3.82-3.93(m,1H),3.97-4.45(m,1H),4.88-5.03(m,1H),7.54-7.70(m,1H),8.11-8.24(m,1H),8.44-8.57(m,1H),8.72-8.85(m,1H),8.87-8.97(m,1H),11.00-11.17(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+1]+m/z：计算值360.2；实测值361.2；Rt＝2.336min。
实施例775.5-(2-(5-甲基八氢异喹啉-2(1H)-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物515、化合物536)的合成
步骤1：5-甲基十氢异喹啉的合成
将5-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉(0.5g，2.72mmol，HCl)溶解于MeOH中且在高压力下氢化48h。在反应完成之后，过滤出催化剂且蒸发有机溶剂，得到5-甲基-1,2,3,4,4a,5,6,7,8,8a-十氢异喹啉(0.3g，1.58mmol，58.09％产率，HCl)，其不经纯化即用于下一步骤中。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.86(d,3H),1.52(m,7H),2.92(m,4H),3.28(m,2H),4.16(m,2H),8.45(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值153.2；实测值154.2；Rt＝0.723min。
步骤2：5-(2-(5-甲基八氢异喹啉-2(1H)-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物515和化合物536)的合成
在轻微加热下，将5-甲基-1,2,3,4,4a,5,6,7,8,8a-十氢异喹啉(0.35g，1.84mmol，HCl)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(385.85mg，1.84mmol，TEA)和DIPEA(715.27mg，5.53mmol，963.98μL)溶解于DMF(6mL)中。在剧烈搅拌和偶尔加热下，小批量添加HATU(841.73mg，2.21mmol)。在反应完成之后，通过HPLC(21％0.5-6.5min；水-MeCN；30ml/min；装载泵4ml/minMeCN；目标质量344；柱SunFire 19*100mm)纯化混合物且再纯化(11-18％0.5-5min；水-MeCN+NH3 30ml/min；装载泵MeCN 4ml/min；目标质量344，柱Triart 19*100mm)，以得到呈4种级分的5-[[2-[(4aS,5R,8aR)-5-甲基-3,4,4a,5,6,7,8,8a-八氢-1H-异喹啉-2-基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(5mg，14.52μmol，7.87-1％产率)。胺核心的结构未得到验证；由于1D H-NMR而分配相对构型。
化合物515：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.83-0.92(m,4H),0.95-1.07(m,2H),1.06-1.32(m,3H),1.32-1.42(m,1H),1.52-1.77(m,3H),1.83-1.98(m,1H),2.25-2.32(m,0.5H),2.58-2.66(m,0.5H),2.66-2.74(m,0.5H),3.02-3.08(m,0.5H),3.74-4.07(m,1H),4.21-4.54(m,1H),7.29(s,1H),7.96(s,1H),8.41-8.48(m,1H),8.70(s,1H),8.86(s,1H),10.87(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值344.2；实测值345.2；Rt＝2.642min。
化合物536：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.79-0.86(m,3H),0.97-1.05(m,1H),1.17-1.31(m,3H),1.35-1.52(m,3H),1.54-1.65(m,2H),1.68-1.86(m,2H),2.63-2.85(m,1H),2.97-3.24(m,1H),3.56-3.90(m,1H),4.10-4.45(m,1H),7.59(s,1H),8.14(s,1H),8.43-8.50(m,1H),8.74-8.77(m,1H),8.82-8.88(m,1H),11.05(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值344.2；实测值345.2；Rt＝2.445min。
实施例776.5-(2-(2,5-二甲基-2-苯基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物521)的合成
步骤1：5-甲基-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将5-甲基-2-苯基哌啶(1g，5.71mmol)溶解于THF(20mL)中，随后以逐滴方式添加boc2O(1.25g，5.71mmol，1.31mL)。1h之后，蒸发溶剂且通过CC(Companion combiflash；40gSiO2；氯仿/MeCN，其中MeCN为0至10％，流速＝40ml/min，Rv＝3-8cv.)纯化，得到5-甲基-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.1g，3.99mmol，70.01％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.06(d,3H),1.21(m,1H),1.46(s,9H),1.86(m,2H),2.08(m,2H),2.98(d,1H),3.86(d,1H),5.24(m,1H),7.28(m,5H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值175.4；实测值176.2；Rt＝1.617min。
步骤2：2,5-二甲基-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将5-甲基-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.4g，1.45mmol)溶解于THF(5mL)中且在Ar下冷却至-40℃。以逐滴方式添加丁基锂(2.5M，697.21μL)，同时保持温度低于-35℃，且在同一温度下再搅拌30min。中间体等分试样(用氘化甲醇CD3OD淬灭)显示约80％转化成锂化产物。将反应混合物冷却至-78℃且一次性添加碘甲烷(618.50mg，4.36mmol，271.27μL)且将反应混合物升温至室温，随后再搅拌2h。将反应混合物用过量饱和NH4Cl水溶液淬灭且用EtOAc萃取两次。将合并的有机层经Na2SO4干燥且在减压下蒸发，以得到2,5-二甲基-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.33g，粗品)，其不经纯化即用于下一步骤中。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.06(d,3H),1.21(s,3H),1.46(s,9H),1.58(m,2H),2.98(m,1H),3.12(m,1H),3.86(m,1H),4.12(m,1H),5.24(m,1H),7.28(m,5H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值189.4；实测值190.2；Rt＝1.758min。
步骤3：2,5-二甲基-2-苯基哌啶的合成
将2,5-二甲基-2-苯基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.3g，1.04mmol)溶解于二噁烷(5mL)中，随后添加HCl(377.95mg，10.37mmol，472.44μL)于二噁烷(5mL)中的溶液。在反应完成之后，将有机溶剂蒸发，且将粗产物与MeOH(10mL)和甲苯(10mL)一起再蒸发，以得到2,5-二甲基-2-苯基哌啶(0.2g，885.91μmol，85.46％产率，HCl)，其不经纯化即用于下一步骤中。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98(d,3H),1.42(s,3H),1.92(m,4H),2.12(m,1H),2.56(m,3H),7.58(m,5H)。
步骤4：5-(2-(2,5-二甲基-2-苯基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺(化合物521)的合成
在轻微加热下，将2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(185.30mg，885.91μmol，TEA)、2,5-二甲基-2-苯基哌啶(0.2g，885.91μmol，HCl)和DIPEA(343.48mg，2.66mmol，462.92μL)溶解于DMF(6mL)中。在剧烈搅拌和偶尔加热下，小批量添加HATU(404.22mg，1.06mmol)。反应完成之后，通过HPLC(23％0.5-6.5min水-MeCN；流速：30ml/min；(装载泵4ml/min MeCN)；目标质量380；柱：SunFireC18 100x19mm 5um(L))纯化混合物，以得到5-[[2-[(2R,5S)-2,5-二甲基-2-苯基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(27mg，70.97μmol，8.01％产率)。通过2D-NMR光谱法证实胺核心的结构。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.93(d,3H),1.11-1.19(m,1H),1.48-1.59(m,1H),1.66-1.74(m,1H),1.81(s,3H),1.86-1.99(m,2H),3.08-3.19(m,1H),3.54-3.63(m,1H),7.12-7.20(m,1H),7.25-7.34(m,4H),7.60(s,1H),8.15(s,1H),8.49(s,1H),8.76(s,1H),8.89(d,1H),10.97(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值380.4；实测值381.2；Rt＝2.619min。
实施例777.5-[[2-[(2R,5S)-2-(3-叔丁基-4-羟基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物610)的合成
步骤1：2-叔丁基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯酚的合成
在氩气气氛下，将4-溴-2-叔丁基苯酚(15g，65.47mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(17.79g，70.05mmol)、无水乙酸钾(25.70g，261.88mmol，16.37mL)、Pd(dppf)Cl2*DCM(2.71g，3.27mmol)和1,4-二噁烷(200mL)置于3颈圆底烧瓶中且在80℃下搅拌15h。冷却之后，将反应混合物用水(500mL)稀释且用DCM萃取。将有机层分离，经Na2SO4干燥且在减压下浓缩。将所得残余物提交至快速柱色谱，以得到2-叔丁基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯酚(12g，43.45mmol，66.37％产率)。
色谱数据：RediSep柱：330g，运行长度：18.7CV，流速：100ml/min
溶剂A：CHCl3；溶剂B：乙腈
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.19(s,12H),1.27(s,9H),6.63(d,1H),7.22(d,1H),7.38(s,1H),9.35(s,1H)。
步骤2：6-(3-叔丁基-4-羟基苯基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将2-叔丁基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯酚(6.8g，24.62mmol)、3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(6.80g，19.70mmol)、碳酸钠(7.83g，73.87mmol，3.09mL)和Pd(dppf)Cl2*DCM(814.21mg，984.87μmol)添加到1,4-二噁烷(50mL)和水(20mL)的混合物中。将反应混合物在85℃、氩气气氛下搅拌85℃。冷却之后，将反应混合物用水(100mL)稀释且用DCM萃取。将有机层分离，经Na2SO4干燥且在减压下浓缩，以得到6-(3-叔丁基-4-羟基苯基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(5g，粗品)，其不经纯化即用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M-tBu]+m/z：计算值289.2；实测值290.2；Rt＝1.532min。
步骤3：2-叔丁基-4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯酚的合成
将6-(3-叔丁基-4-羟基苯基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(2.3g，4.39mmol)溶解于TFA(7.40g，64.90mmol，5mL)和DCM(5mL)的混合物中且在室温下搅拌0.5h。在旋转蒸发器上浓缩反应混合物(浴温45C)，以得到粗品甲亚胺，其直接用于下一步骤中。将来自前一步骤的粗材料溶解于甲醇(50mL)中，随后一次性添加硼氢化钠(216.11mg，5.71mmol，201.97μL)。将反应混合物在室温下搅拌过夜且用HCl/二噁烷溶液酸化。将所得溶液在减压下浓缩，以得到2-叔丁基-4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯酚，其不经纯化即用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值247.2；实测值248.2；Rt＝0.783min。
步骤4：5-[[2-[(2R,5S)-2-(3-叔丁基-4-羟基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物610)的合成
将2-叔丁基-4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯酚(500.00mg，1.03mmol)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(237.17mg，1.13mmol，TEA)和DIPEA(742.00mg，5.74mmol，1mL)溶解于DMSO(5mL)中，随后添加HATU(509.54mg，1.34mmol)。将反应混合物在室温下搅拌15h，然后提交至HPLC，以得到5-[[2-[(2R,5S)-2-(3-叔丁基-4-羟基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.07g，159.63μmol，15.49％产率)。
HPLC数据：2-10min 50-60％ MeCN/H2O 30ml/min(装载泵4ml MeCN)柱：SunFire100*19mm，5微米；样品信息：2-10min 50-60％水/MeCN+NH3(装载泵4ml MeCN+NH3)，柱：TRIART 100*20 5微米
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.95-1.07(m,3H),1.25-1.36(m,10H),1.63-1.79(m,1H),1.79-1.94(m,1H),1.96-2.09(m,1H),2.09-2.18(m,1H),2.74-3.26(m,1H),3.37-3.98(m,1H),5.01-5.58(m,1H),6.69-6.81(m,1H),6.90-7.01(m,1H),7.01-7.12(m,1H),7.50-7.65(m,1H),8.08-8.21(m,1H),8.40-8.55(m,1H),8.67-8.79(m,1H),8.79-8.92(m,1H),9.28(s,1H),11.02-11.32(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值438.2；实测值439.2；Rt＝3.087min。
实施例778.5-[[2-[(2R,5S)-2-(3-乙基-4-羟基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物642)的合成
步骤1：4-溴-2-乙基苯酚的合成
将2-乙基苯酚(14g，114.60mmol，13.73mL)和硫酸(224.80mg，2.29mmol)溶解于THF(500mL)中且将混合物冷却至-25℃。在-25℃下，在搅拌的情况下，分批添加NBS(21.21g，119.18mmol)且在此温度下将反应混合物搅拌1h，然后使其升温至室温达2h。在减压下浓缩反应混合物且将其溶解于乙酸乙酯中。将有机层用NaHCO3溶液、NaHSO3溶液、水洗涤，经Na2SO4干燥且在旋转蒸发器上浓缩，以得到4-溴-2-乙基苯酚(18g，粗品)，其不经纯化即用于下一步骤中。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.10(t,3H),2.49(q,2H),6.72(d,1H),7.12(d,1H),7.19(s,1H),9.55(s,1H)。
步骤2：2-乙基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯酚的合成
将4-溴-2-乙基苯酚(18g，80.57mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(22.51g，88.63mmol)、乙酸钾(31.63g，322.29mmol，20.15mL)和Pd(dppf)Cl2DCM(3.33g，4.03mmol)混合于1,4-二噁烷(400mL)中且将反应混合物在氩气气氛、80℃下搅拌16h。在反应完成之后，将反应混合物冷却，用水稀释且用DCM萃取。将有机层分离，经Na2SO4干燥且在减压下浓缩。将所得残余物提交至快速柱色谱，以得到2-乙基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯酚(10g，40.30mmol，50.02％产率)。色谱数据：RediSep柱：330g，运行长度：25.0CV，流速：100ml/min，溶剂A：CHCl3，溶剂B：乙腈。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.10(t,3H),1.14(s,12H),2.49(q,2H),6.67(d,1H),7.26(d,1H),7.33(s,1H),9.39(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值247.2；实测值248.2；Rt＝1.447min。
步骤3：6-(3-乙基-4-羟基苯基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将2-乙基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯酚(2.5g，10.08mmol)、3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(2.78g，8.06mmol)、碳酸钠(3.20g，30.23mmol，1.27mL)和Pd(dppf)Cl2 DCM(333.19mg，403.02μmol)添加到1,4-二噁烷(20mL)和水(10mL)的混合物中且将反应混合物在氩气气氛、80℃下搅拌18h。冷却之后，将反应混合物用水稀释且用DCM萃取。将有机层分离，经Na2SO4干燥且通过小硅胶垫过滤。在减压下浓缩滤液，以得到6-(3-乙基-4-羟基苯基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(2g，粗品)，其不经纯化即用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M-tBu]+m/z：计算值261.2；实测值262.2；Rt＝1.585min。
步骤4：2-乙基-4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯酚的合成
将6-(3-乙基-4-羟基苯基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(2g，2.90mmol)溶解于TFA(7.40g，64.90mmol，5mL)和DCM(5mL)的混合物中且将反应混合物在室温下搅拌0.5h且在减压下浓缩，以得到2-乙基-4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯酚(1.36g，粗品)，其不经纯化即用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值217.2；实测值218.4；Rt＝0.919min。
步骤5：2-乙基-4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯酚的合成
将粗品2-乙基-4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)苯酚(1.36g，2.38mmol)溶解于甲醇(30mL)中且一次性添加硼氢化钠(0.2g，5.29mmol，186.92μL)。将反应混合物在室温下搅拌12h，然后用HCl-二噁烷溶液酸化。将所得溶液在减压下浓缩，以得到2-乙基-4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯酚(1.3g，粗品，HCl)，其不经纯化即用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值219.2；实测值220.2；Rt＝0.901min。
步骤6：5-[[2-[(2R,5S)-2-(3-乙基-4-羟基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物642)的合成
将2-乙基-4-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]苯酚(0.2g，265.85μmol，HCl)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(78.36mg，319.02μmol，HCl)和DIPEA(742.00mg，5.74mmol，1mL)添加到DMSO(1.5mL)中，随后添加HATU(141.52mg，372.19μmol)。将反应混合物在20℃下搅拌15h。在反应完成(LCMS对照)之后，将反应混合物提交至HPLC，以得到呈两种级分的5-[[2-[(2R,5S)-2-(3-乙基-4-羟基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.021g，51.16μmol，19.24％产率)：级分_1(8mg，通过LCMS为100％)和级分(14mg，通过LCMS为98％)。
HPLC数据：
样品信息：2-10min 60-85％水/MeOH+NH3(装载泵4ml MeOH+NH3)，柱：TRIART100*20mm 5微米
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)1.05(m,6H),1.31(m,1H),1.72(m,1H),1.84(m,1H),2.01(m,1H),2.14(m,1H),2.52(m,2H),2.92(m,1H),3.58(m,1H),5.27(m,1H),6.74(m,1H),6.98(m,2H),7.57(m,1H),8.13(m,1H),8.46(m,1H),8.73(m,1H),8.96(m,2H),11.20(s,1H)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值410.2；实测值411.4；Rt＝2.425min。
实施例779.2-(2-(1H-吲唑-6-基)-5-甲基哌啶-1-基)-N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺(化合物613和化合物636)的合成
步骤1：6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吲唑-1-甲酸叔丁酯的合成
在环境温度下，向6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吲唑(2.00g，8.19mmol)、TEA(1.04g，10.24mmol，1.43mL)于MeCN(20mL)中的搅拌混合物中添加二碳酸二-叔丁酯(1.97g，9.01mmol，2.07mL)，随后添加DMAP(100.10mg，819.35μmol)，然后将反应混合物在70℃下搅拌12h。将反应混合物在真空中浓缩且将所获得的残余物溶解于DCM中，用NaHSO4(水溶液)、NaHCO3(水溶液)、盐水洗涤，然后经Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩，以得到6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吲唑-1-甲酸叔丁酯(1g，2.91mmol，35.46％产率)，其不经进一步纯化即用于下一步骤中。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.29(s,12H),1.62(s,9H),7.59(m,1H),7.83(m,1H),8.40(m,1H),8.48(m,1H)。
步骤2：6-(1H-吲唑-6-基)-3-甲基-3,4-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的合成
将6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吲唑-1-甲酸叔丁酯(1.87g，5.43mmol)、3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(2.06g，5.98mmol)和碳酸钠(1.15g，10.87mmol，455.19μL)一起混合于二噁烷(30mL)和水(10mL)的混合物中。将烧瓶抽真空且用氩气回填三次，且向其中添加二氯(1,1'-双(二苯基磷烷基)二茂铁)钯(II)*DCM(221.75mg，271.63μmol)。将反应混合物在85℃下加热12h。将反应混合物用EtOAc/水稀释，将有机相分离，将水相用额外EtOAc洗涤，将合并的有机相经Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩，以得到6-(1-叔丁氧基羰基-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-6-基)吲唑-1-甲酸叔丁酯(2.2g，5.32mmol，97.93％产率)，其不经进一步纯化即用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值313.2；实测值314.2；Rt＝1.464min。
步骤3：6-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)-1H-吲唑的合成
将6-(1-叔丁氧基羰基-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-6-基)吲唑-1-甲酸叔丁酯(3.4g，8.22mmol)溶解于DCM(12mL)和TFA(12mL)的混合物，然后在室温下搅拌1h。将反应混合物用20％ NaOH水溶液中和，将所获得的溶液用DCM稀释，将有机相分离且将水层用额外DCM洗涤。将有机相经Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩，以得到6-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-1H-吲唑(1.15g，5.39mmol，65.58％产率)，其不经进一步纯化即用于下一步骤中。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.91(d,3H),1.27(m,1H),1.61(m,1H),1.83(m,1H),2.59(m,1H),2.78(m,1H),3.12(m,1H),3.83(m,1H),7.43(d,1H),7.50(d,1H),7.84(s,1H),7.89(s,1H)。LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值213.2；实测值214.2；Rt＝0.878min。
步骤4：外消旋-6-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)-1H-吲唑的合成
将6-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)-1H-吲唑(1.15g，5.39mmol)溶解于MeOH(15mL)中且在用冰水冷却下分批添加硼氢化钠(1.02g，26.96mmol，953.24μL)。将反应混合物加热至室温且搅拌12h。添加NH4Cl(水溶液)且蒸发MeOH，将水层用DCM(3*30ml)萃取且将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且在真空中在45℃下蒸发，以得到外消旋-6-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)-1H-吲唑(0.36g，1.67mmol，31.01％产率)，其不经纯化即用于下一步骤中。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.80(d,3H),1.07(m,1H),1.34(m,1H),1.49(m,1H),1.73(m,2H),2.25(m,1H),2.35(m,1H),2.97(m,1H),3.54(m,2H),7.05(d,1H),7.43(s,1H),7.58(d,1H),7.93(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值215.2；实测值216.2；Rt＝1.035min。
步骤5：外消旋-(5-(2-((2R,5S)-2-(1H-吲唑-6-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-3-甲基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
将N-[3-甲基-5-(酰胺草酰基氨基)-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(492.12mg，1.67mmol)和TEA(1.69g，16.72mmol，2.33mL)溶解于DMF(10mL)中且冷却至0℃，添加HATU(953.69mg，2.51mmol)且在0℃下将混合物搅拌15min。添加6-[(2S,5R)-5-甲基-2-哌啶基]-1H-吲唑(0.36g，1.67mmol)且将混合物升温至室温且搅拌3h。添加10ml乙酸乙酯且将有机相用盐水洗涤三次。将有机相经Na2SO4干燥，过滤且在45℃下在真空中浓缩，以得到粗产物，其通过HPLC(40-60％水/MeOH，2-10min，(装载泵4ml MeOH)，柱：TRIART 100*20)进行纯化，以得到N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(1H-吲唑-6-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.07g，142.11μmol，8.50％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值492.2；实测值493.2；Rt＝1.120min。
步骤6：手性分离
使用(柱：Chiralpak OD-H(250*30mm，5mkm)；流动相：己烷-IPA-MeOH 50-25-25；流速：20mL/min)进行手性分离，以得到呈顺式异构体和反式异构体的混合物的第1对映异构体和呈纯的对映异构体的(5-(2-(2-(1H-吲唑-6-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-3-甲基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.02g，40.60μmol，28.57％产率)。
使用(Chiralpak IB(250*20mm，5mkm)；流动相：己烷-EtOH 90-10，流速：14mL/min)分离顺式异构体和反式异构体的混合物，以得到呈纯的对映异构体(反式)的(5-(2-(2-(1H-吲唑-6-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-3-甲基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.014g，28.42μmol，20.00％产率)。
E1于分析条件下(柱：OD-H，以己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min为流动相)的保留时间为29.09min且E2的保留时间为15.60min。
E1：LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值492.2；实测值493.2；Rt＝4.930min。
E2：LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值492.2；实测值493.2；Rt＝4.941min。
步骤7：2-(2-(1H-吲唑-6-基)-5-甲基哌啶-1-基)-N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺(化合物613和化合物636)的合成
将N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(1H-吲唑-6-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.014g，28.42μmol)和N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(1H-吲唑-6-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.02g，40.60μmol)溶解于二噁烷(2mL)和水(2mL)的混合物中，然后在100℃下搅拌12h。在真空中在55℃下浓缩反应混合物，以得到粗产物，其通过HPLC(0.1％FA/MeCN，5-95％ MeCN，6min，柱：Zorbax Eclips-plus C18 4.6*100mm，3.5mkm)进行纯化，以得到N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(1H-吲唑-6-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.001g，2.55μmol，8.97％产率)和N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-2-(1H-吲唑-6-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(0.001g，2.55μmol，6.28％产率)。
化合物613：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98(d,3H),1.07(m,1H),1.36(m,2H),1.86(m,2H),2.24(s,3H),2.28(m,2H),4.18(m,1H),5.68(m,2H),7.16(m,1H),7.48(m,2H),7.78(m,1H),8.03(m,2H),10.56(m,1H),13.02(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值392.2；实测值393.2；Rt＝3.623min。
化合物636：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.98(d,3H),1.07(m,1H),1.36(m,2H),1.86(m,2H),2.24(s,3H),2.28(m,2H),4.18(m,1H),5.68(m,2H),7.16(m,1H),7.48(m,2H),7.78(m,1H),8.03(m,2H),10.56(m,1H),13.02(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值392.2；实测值393.2；Rt＝3.599min。
实施例780.5-[[2-[(2R,5S)-2-(2-氰基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物664)的合成
步骤1：2-溴苯甲酰氯的合成
将2-溴苯甲酸(5g，24.87mmol)和草酰氯(4.74g，37.31mmol，3.24mL)悬浮于DCM(50mL)中。向其中分3批添加DMF(1.82g，24.87mmol，1.93mL)。将所得混合物在25℃下搅拌2h。当气体逸出停止时，在减压下浓缩所得澄清溶液。将残余物再溶解于己烷(150ml)中，过滤且在真空中蒸发，得到2-溴苯甲酰氯(5g，22.78mmol，91.60％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ7.44(m,2H),7.71(m,2H)。
GCMS:m/z：计算值217.0；实测值214.0；Rt＝7.52min。
步骤2：3-(2-溴苯甲酰基)-5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
在-78℃下，将双(三甲基甲硅烷基)酰胺化锂(3.20g，19.14mmol)逐滴添加到5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.94g，9.11mmol)于THF(50mL)中的预冷却溶液中。在添加完成之后，将其在同一温度下搅拌1h。此后，一次性添加2-溴苯甲酰氯(2g，9.11mmol)且移除冷却浴。将所得混合物缓慢升温至20℃且在此温度下搅拌1h。然后，将其用15％NaHSO4水溶液(50ml)淬灭且用乙酸乙酯(100ml)萃取。将有机层用20％ NaCl(2x50 ml)洗涤，经Na2SO4干燥且在减压下蒸发，以得到3-(2-溴苯甲酰基)-5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(3.5g，8.83mmol，96.92％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ0.85(d,3H),1.47(m,8H),1.80(m,1H),1.91(m,2H),3.13(m,1H),3.29(m,2H),3.72(m,1H),7.18(m,1H),7.25(m,1H),7.49(d,1H),7.72(d,1H)。
LCMS(ESI)：[M-tBu]+m/z：计算值339.1；实测值340.2；Rt＝1.519min。
步骤3：6-(2-溴苯基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶的合成
将3-(2-溴苯甲酰基)-5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(3.5g，8.83mmol)溶解于AcOH(26mL)中且分批添加36％重量/重量盐酸水溶液(20.93g，574.10mmol，26.17mL)(产生大量泡沫)。添加完成之后，将所得混合物在100℃下搅拌15h。然后，在减压下移除溶剂且将残余物分配于1N HCl(100ml)与DCM(200ml)之间。分离有机层且丢弃。将水层用10％NaOH碱化至pH 10且用DCM(2x100 ml)萃取。蒸发DCM溶液，将其经Na2SO4干燥且在减压下蒸发，以得到6-(2-溴苯基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶(1.2g，4.76mmol，53.88％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.91(d,3H),1.32(m,1H),1.65(m,1H),1.77(m,1H),2.39(m,2H),3.08(m,1H),3.75(m,1H),7.23(m,2H),7.35(m,1H),7.57(d,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值251.0；实测值252.2；Rt＝0.812min。
步骤4：2-(2-溴苯基)-5-甲基哌啶的合成
在0℃下，将硼氢化钠(360.10mg，9.52mmol，336.54μL)一次性添加到6-(2-溴苯基)-3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶(1.2g，4.76mmol)于MeOH(10mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物搅拌10h，然后在真空中蒸发。将残余物用水(20ml)稀释且用二氯甲烷(2*40ml)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发。使所获得的油状物经历，以得到2-(2-溴苯基)-5-甲基哌啶(0.8g，3.15mmol，66.14％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.80(d,3H),1.09(m,2H),1.51(m,1H),1.76(m,2H),2.23(m,1H),2.96(m,1H),3.28(m,1H),3.74(m,1H),7.12(dd,1H),7.33(dd,1H),7.50(d,1H),7.56(d,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值253.0；实测值254.0；Rt＝0.800min。
步骤5：5-[[2-[2-(2-溴苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺的合成
将DIPEA(610.20mg，4.72mmol，822.37μL)添加到相应2-(2-溴苯基)-5-甲基哌啶(0.3g，1.18mmol)和2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(246.88mg，1.01mmol，HCl)于DMF(5mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU(493.68mg，1.30mmol)。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC(Waters Sunfire C18 19*100 5mkm柱且以H2O-MeOH+NH3为洗脱液混合物)，以得到纯的5-[[2-[2-(2-溴苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.4g，898.25μmol，76.10％产率)。
LCMS(ESI)：[M+3H]+m/z：计算值444.1；实测值447.0；Rt＝1.261min。
步骤6：5-[[2-[(2R,5S)-2-(2-氰基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物664)的合成
将5-[[2-[2-(2-溴苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(40mg，89.83μmol)和氰化锌(21.10mg，179.65μmol，11.40μL)于DMF(5mL)中的悬浮液脱气且用Ar再填充三次。向此溶液中添加四(三苯基磷烷)钯(0)(10.38mg，8.98μmol)。将所得混合物脱气，用Ar再填充且在100℃下搅拌16h。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC(Waters Sunfire C18 19*100 5mkm柱且以H2O-MeCN为洗脱液混合物)，以得到纯的5-[[2-[(2R,5S)-2-(2-氰基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(3.5mg，8.94μmol，9.95％产率)。
1H NMR(DMSO-d6,600MHz):δ(ppm)0.93(m,4H),1.10(m,1H),1.86(m,2H),2.07(m,1H),3.77(m,2H),5.34(m,1H),7.46(m,1H),7.56(m,1H),7.61(m,1H),7.70(m,1H),7.84(m,1H),8.16(m,1H),8.49(m,1H),8.76(m,1H),8.86(m,1H),11.19(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值391.4；实测值392.4；Rt＝2.286min。
实施例781.5-[[2-[(2S,5R)-2-(2-甲氧基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物558)的合成
步骤1：N-[5-(2-甲氧基苯基)-2-甲基-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯的合成
在氩气气氛下，将1-溴-2-甲氧基苯(5g，26.73mmol，3.33mL)添加到THF(30mL)和镁(649.75mg，26.73mmol，373.42μL)的混合物中。向其中添加碘(67.85mg，267.33μmol)且将所得混合物加热至回流达1h。在-78℃下，将所得混合物冷却至室温且逐滴添加到5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(5.70g，26.73mmol)于THF(30mL)中的溶液中。使所得混合物升温至室温然后倒入NH4Cl水溶液中。将所得混合物用EtOAc(2x40 ml)萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经Na2SO4干燥且蒸发，以获得N-[5-(2-甲氧基苯基)-2-甲基-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯(7g，21.78mmol，81.47％产率)，其不经纯化即用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值221.2；实测值222.2；Rt＝1.364min。
步骤2：2-(2-甲氧基苯基)-5-甲基哌啶的合成
将N-[5-(2-甲氧基苯基)-2-甲基-5-氧代戊基]氨基甲酸叔丁酯(7g，21.78mmol)溶解于三氟乙酸(24.83g，217.79mmol，16.78mL)中且将所得混合物搅拌1h。向其中添加50％ NaOH水溶液，直到pH 11-12。将所得混合物用CH2Cl2(4x40l)萃取，将合并的有机层蒸发至干。将残余物再溶解于MeOH(50mL)中且添加硼氢化钠(823.96mg，21.78mmol，770.05μL)。将所得混合物在20℃下搅拌12h且蒸发。将50％NaOH水溶液添加到残余物中。将所得混合物用CH2Cl2(4x40 ml)萃取，将合并的有机层蒸发至干，以获得2-(2-甲氧基苯基)-5-甲基哌啶(3g，14.61mmol，67.10％产率)，其不经纯化即用于下一步骤中。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ1.10(d,3H),1.22(m,1H),1.48(m,2H),1.52(m,2H),1.76(m,2H),2.98(m,1H)3.75(s,3H),3.77(m,1H),6.88(m,2H),7.15(dd,1H),7.40(d,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值205.2；实测值206.2；Rt＝0.762min。
步骤3：5-[[2-[(2S,5R)-2-(2-甲氧基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物558)的合成
将2-(2-甲氧基苯基)-5-甲基哌啶(0.2g，974.21μmol)与HATU(407.46mg，1.07mmol)混合于DMF(4mL)中且将所得混合物在20℃下搅拌10min，随后添加2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(239.28mg，974.21μmol，HCl)。将所得混合物在20℃下搅拌12h。使所得溶液经历HPLC，以获得5-[[2-[(2S,5R)-2-(2-甲氧基苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.0874g，220.46μmol，22.63％产率)
HPLC条件：23％0.5-6.5min水-乙腈；流速：30ml/min；(装载泵4ml/min乙腈)；目标质量396；柱：SunFireC18 100x19mm 5um(L)
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.95-1.00(m,3H),1.07-1.38(m,1H),1.67-1.97(m,2H),1.98-2.04(m,1H),2.05-2.21(m,1H),3.14-3.20(m,0.4H),3.55-3.59(m,0.6H),3.60-3.92(m,4H),5.37-5.56(m,1H),6.83-7.03(m,2H),7.12-7.32(m,2H),7.52-7.64(m,1H),8.09-8.20(m,1H),8.36-8.51(m,1H),8.71-8.93(m,2H),10.70-11.33(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值396.2；实测值397.2；Rt＝2.608min。
实施例782.5-[[2-[(2R,5S)-2-(2-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物595)的合成
步骤1：6-(2-氟苯基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
在氩气气氛下，将(2-氟苯基)硼酸(1g，7.15mmol)、3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(2.71g，7.86mmol)和碳酸铯(6.99g，21.44mmol)混合于二噁烷(30mL)中。添加四(三苯基磷烷)钯(0)(99.8％(基于金属)，Pd 9％min)(247.76mg，214.41μmol)且将所得混合物加热至100℃达12h。将所得混合物冷却至室温且在真空中蒸发。将残余物分配于EtOAc(50ml)与水(50ml)之间。收集有机相，将其用盐水洗涤，经硫酸钠干燥且蒸发，以获得6-(2-氟苯基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(2.5g，粗品)，其不经纯化即用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M-tBu]+m/z：计算值235.0；实测值236.0；Rt＝1.359min。
步骤2：2-(2-氟苯基)-5-甲基哌啶的合成
将6-(2-氟苯基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(2.5g，8.58mmol)溶解于三氟乙酸(9.78g，85.80mmol，6.61mL)中且将所得混合物搅拌1h。向其中添加50％NaOH水溶液，直到pH 11-12。将所得混合物用CH2Cl2(4x40l)萃取，将合并的有机层蒸发至干。将残余物再溶解于MeOH(20mL)中且添加硼氢化钠(324.62mg，8.58mmol，303.38μL)。将所得混合物在20℃下搅拌12h且蒸发。将50％NaOH水溶液添加到残余物中。将所得混合物用CH2Cl2(4x40 ml)萃取，将合并的有机层蒸发至干，以获得2-(2-氟苯基)-5-甲基哌啶(1g，粗品)，其不经纯化即用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值193.2；实测值194.0；Rt＝0.698min。
步骤3：5-[[2-[(2R,5S)-2-(2-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物595)的合成
将2-(2-氟苯基)-5-甲基哌啶(0.2g，1.03mmol)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(254.19mg，1.03mmol，HCl)和三乙胺(261.80mg，2.59mmol，360.60μL)混合于DMF(5mL)中。在剧烈搅拌的情况下，向其中小批量添加HATU(432.84mg，1.14mmol)且将所得混合物在20℃下搅拌12h。使所得混合物经历HPLC，以获得5-[[2-[(2R,5S)-2-(2-氟苯基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.0709g，184.44μmol，17.82％产率)。
HPLC条件：
23％0.5-6.5min水-乙腈；流速30ml/min(装载泵4ml/min；乙腈)；目标质量384；柱SunFireC18 100x19mm 5um(R)
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.89-1.10(m,3H),1.14-1.46(m,1H),1.73-1.98(m,2H),1.99-2.24(m,1.7H),3.19-3.29(m,0.3H),3.57-4.06(m,2H),5.43-5.52(m,1H),7.03-7.25(m,2H),7.26-7.43(m,2H),7.54-7.69(m,1H),8.09-8.29(m,1H),8.33-8.59(m,1H),8.73-9.00(m,2H),10.71-11.46(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值384.2；实测值385.2；Rt＝2.588min。
实施例783.5-[[2-[(4S,4aR,8aR)-4-甲基-3,4,4a,5,6,7,8,8a-八氢-1H-异喹啉-2-基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物541)、5-[[2-[(4S,4aR,8aS)-4-甲基-3,4,4a,5,6,7,8,8a-八氢-1H-异喹啉-2-基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物543)和5-[[2-[(4S,4aS,8aS)-4-甲基-3,4,4a,5,6,7,8,8a-八氢-1H-异喹啉-2-基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物542)的合成
步骤1：4-甲基-1,2,3,4,4a,5,6,7,8,8a-十氢异喹啉的合成
将4-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉(1g，5.44mmol，HCl)溶解于MeOH(20mL)中且在高压力下氢化18h。在反应完成之后，过滤出催化剂。在减压下蒸发滤液，以得到4-甲基-1,2,3,4,4a,5,6,7,8,8a-十氢异喹啉(1.1g，粗品，HCl)，其不经纯化即用于下一步骤中。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.89(d,3H),1.65(m,11H),2.92(m,4H),9.03(m,1H)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值153.2；实测值154.2；Rt＝0.674min。
步骤2：5-[[2-[(4S,4aR,8aR)-4-甲基-3,4,4a,5,6,7,8,8a-八氢-1H-异喹啉-2-基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物541)、5-[[2-[(4S,4aR,8aS)-4-甲基-3,4,4a,5,6,7,8,8a-八氢-1H-异喹啉-2-基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物543)和5-[[2-[(4S,4aS,8aS)-4-甲基-3,4,4a,5,6,7,8,8a-八氢-1H-异喹啉-2-基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物542)的合成
在轻微加热下，将4-甲基-1,2,3,4,4a,5,6,7,8,8a-十氢异喹啉(0.2g，1.05mmol，HCl)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(220.49mg，1.05mmol)和HATU(521.07mg，1.37mmol)溶解于DMF(7mL)中。在剧烈搅拌和偶尔加热下，小批量添加DIPEA(408.73mg，3.16mmol，550.85μL)。在反应完成之后，通过HPLC(0.5-6.5min；水-乙腈；30ml/min；装载泵4ml/min乙腈；目标质量344；柱SunFire19*100mm)纯化混合物，以得到呈4种级分的5-[[2-[(4S,4aR,8aR)-4-甲基-3,4,4a,5,6,7,8,8a-八氢-1H-异喹啉-2-基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(50mg，145.18μmol，13.77％产率)。
化合物541：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.76-0.88(m,3H),1.10-1.35(m,3H),1.36-1.44(m,3H),1.44-1.62(m,2H),1.65-1.91(m,4H),2.82-3.00(m,1H),3.39-3.67(m,1H),3.94-4.27(m,1H),7.59(s,1H),8.15(s,1H),8.43-8.53(m,1H),8.75(s,1H),8.80-8.89(m,1H),11.08(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值344.2；实测值345.2；Rt＝2.938min。
化合物543：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.77-0.88(m,3H),1.19-1.36(m,5H),1.43-1.50(m,2H),1.59-1.72(m,2H),1.74-1.92(m,3H),2.72-3.06(m,1H),3.56-3.69(m,1H),3.96-4.10(m,1H),7.59(s,1H),8.14(s,1H),8.45-8.51(m,1H),8.74-8.78(m,1H),8.83-8.89(m,1H),11.05(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值344.2；实测值345.2；Rt＝2.901min。
化合物542：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.74-0.99(m,6H),1.11-1.24(m,3H),1.23-1.46(m,1H),1.46-1.62(m,1H),1.62-1.81(m,2H),1.88(t,1H),2.34-2.40(m,1H),2.78(t,1H),3.58-3.73(m,1H),4.15-4.31(m,1H),7.59(s,1H),8.15(s,1H),8.47(s,1H),8.75(s,1H),8.84(s,1H),11.08(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值344.2；实测值345.2；Rt＝3.014min。
实施例784.2-[(2S,5S)-2-(3-乙酰胺基环丁基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物562)的合成、2-[(2R,5R)-2-(3-乙酰胺基环丁基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物564)的合成和2-[(2R,5S)-2-(3-乙酰胺基环丁基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物563)的合成
步骤1：N-[3-(5-甲基-2-吡啶基)环丁基]氨基甲酸叔丁酯和N-[3-(5-甲基-2-吡啶基)环丁基]氨基甲酸叔丁酯的合成
向装备有铁氟龙涂布的磁性搅拌棒的玻璃小瓶中添加4,4'-二-叔丁基-2,2'-二吡啶基(232.43mg，866.01μmol)和NiCl2·DME(190.28mg，866.01μmol)和THF(10mL)。将小瓶加盖且用加热枪简单加热所得悬浮液，直到镍和配体完全溶解，得到浅绿色溶液。在真空下移除溶剂，以得到连接的镍络合物的微细涂层(颜色为淡绿色)。一旦干燥，即接连添加2-溴-5-甲基吡啶(2.98g，17.32mmol)(与溶剂一起添加液体芳基溴化物)、[3-(叔丁氧基羰基氨基)环丁基]-三氟硼氢化钾(4.8g，17.32mmol)、[Ir{dF(CF3)ppy}2(dtbpy)]PF6(485.79mg，433.01μmol)和碳酸铯(8.46g，25.98mmol)。将小瓶加盖，吹扫且抽真空四次。在惰性气氛下，引入二噁烷(80mL)。将含有所有试剂的小瓶用石蜡膜进一步密封且在距离两个26W荧光灯泡约4cm处搅拌5h。然后，通过约2cm*2cm圆柱形硅藻土塞过滤粗反应混合物，用EtOAc(10-20mL)洗涤。将所得溶液浓缩且通过柱色谱(Companion combiflash，220gSiO2，石油醚/MtBE，其中MtBE为10～50％，流速＝100mL/min,Rv＝11CV)纯化残余物。在SFC上(柱：Chiralpak IC(250*20mm，5mkm)；流动相：CO2-MeOH,90-10.流速：40mL/min；柱温：40℃；波长：215nm。保留时间(顺式)＝6.84min；保留时间(反式)＝8.89min)分离非对映异构体。获得呈白色固体的N-[3-(5-甲基-2-吡啶基)环丁基]氨基甲酸叔丁酯(414.64mg，1.58mmol，9.13％产率)和N-[3-(5-甲基-2-吡啶基)环丁基]氨基甲酸叔丁酯(622.9mg，2.37mmol，13.71％产率)。
顺式：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.39(s,9H),2.11(m,2H),2.24(s,3H),2.70(m,2H),3.16(m,1H),4.13(m,1H),4.96(m,1H),6.97(d,1H),7.33(d,1H),8.34(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值262.2；实测值263.2；Rt＝3.491min。
反式：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.39(s,9H),2.26(m,5H),2.61(m,2H),3.54(m,1H),4.29(m,1H),4.85(m,1H),7.05(d,1H),7.37(d,1H),8.34(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值262.2；实测值263.2；Rt＝3.482min。
步骤2：N-[3-(5-甲基-2-哌啶基)环丁基]氨基甲酸叔丁酯的合成
在三颈圆底烧瓶中向N-[3-(5-甲基-2-吡啶基)环丁基]氨基甲酸叔丁酯(622.9mg，2.37mmol)于MeOH(25mL)中的溶液中添加5R39型Pd(5％于C上)(0.05g)。将反应烧瓶抽真空且用分子氢(239.31mg，118.72mmol)回填且使混合物搅拌过夜。通过LCMS和HNMR监测反应进展。通过薄硅胶垫过滤，随后浓缩且在真空下干燥，得到呈黄色油状物的N-[3-(5-甲基-2-哌啶基)环丁基]氨基甲酸叔丁酯(0.54g，2.01mmol，84.74％产率)(非对映异构体的混合物)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ0.93(m,4H),1.44(s,9H),1.57(m,2H),1.79(m,2H),1.96(m,2H),2.17(m,4H),2.75(m,2H),3.08(m,1H),4.13(m,1H),4.79(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值268.2；实测值269.4；Rt＝1.995min。
步骤3：2-[2-[3-(叔丁氧基羰基氨基)环丁基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酸甲酯的合成
在0℃下，向N-[3-(5-甲基-2-哌啶基)环丁基]氨基甲酸叔丁酯(0.54g，2.01mmol)和三乙胺(244.31mg，2.41mmol，336.51μL)于DCM(25mL)中的溶液中添加2-氯-2-氧代乙酸甲酯(271.13mg，2.21mmol)。在室温下搅拌1h之后，将所得混合物过滤且蒸发至干，以得到呈黄色固体的2-[2-[3-(叔丁氧基羰基氨基)环丁基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酸甲酯(0.64g，粗品)，其不经进一步纯化即用于下一步骤中。
LCMS(ESI)：[M-tBu]+m/z：计算值298.2；实测值299.0；Rt＝1.256min。
步骤4：N-[5-[[2-[2-[3-(叔丁氧基羰基氨基)环丁基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的合成
向2-[2-[3-(叔丁氧基羰基氨基)环丁基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酸甲酯(0.64g，1.81mmol)于MeOH(25mL)中的溶液中添加氢氧化钠珠粒(79.44mg，1.99mmol，37.30μL)。搅拌所得混合物1h。然后，蒸发溶剂且将残余物与EtOH一起再蒸发。此后，将固体溶解于DMF(15mL)中且添加HATU(686.57mg，1.81mmol)，随后添加N-(5-氨基-3-甲基-2-吡啶基)氨基甲酸叔丁酯(403.15mg，1.81mmol)且将所得混合物搅拌12h。将所得混合物倒入到水中，用EtOAc萃取3次，将合并的有机物用水、盐水洗涤且蒸发。使残余物经历HPLC(40-65％2-7min；水-乙腈30ml/min；装载泵：乙腈；4ml/min；柱SunFire 19*100mm)。获得呈非对映异构体的混合物的N-[5-[[2-[2-[3-(叔丁氧基羰基氨基)环丁基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(490.7mg，899.26μmol，49.80％产率)。白色固体。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.00(d,3H),1.41(s,9H),1.49(s,9H),1.85(m,7H),2.29(s,3H),2.95(m,2H),4.18(m,1H),4.71(m,2H),5.27(m,1H),6.78(m,1H),8.10(s,1H),8.36(s,1H),9.39(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值545.3；实测值546.4；Rt＝3.718min。
步骤5：N-[5-[[2-[2-[3-(叔丁氧基羰基氨基)环丁基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的手性分离
进行两次连续纯化：第1次SFC。自P2的混合物中分离P1且获得P4。在此步骤中失去P3。IC(250*20，5mkm)，CO2-MeOH，70-30,40ml/min；流速＝15ml/min；第2次HPLC。自P4分离P2。IA-II(250*20，5mkm)，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，12ml/min
N-[5-[[2-[(2S,5S)-2-[3-(叔丁氧基羰基氨基)环丁基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(138.86mg，254.48μmol，28.30％产率)的RT＝12.854min(IC,CO2-MeOH，70-30，2.0ml/min)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值545.3；实测值546.2；Rt＝5.646min。
N-[5-[[2-[(2R,5R)-2-[3-(叔丁氧基羰基氨基)环丁基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(97.02mg，177.80μmol，19.77％产率)的RT＝32.773min(IA，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值545.3；实测值546.2；Rt＝5.631min。
N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-[3-(叔丁氧基羰基氨基)环丁基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(25.36mg，46.48μmol，5.17％产率)的RT＝9.201min(IA，己烷-IPA-MeOH，50-25-25，0.6ml/min)
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值545.3；实测值546.2；Rt 5.696＝min。
2-[(2S,5S)-2-(3-乙酰胺基环丁基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物562)的合成
向N-[5-[[2-[(2S,5S)-2-[3-(叔丁氧基羰基氨基)环丁基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(138.86mg，254.48μmol)于二噁烷(2mL)中的溶液中添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(46.39mg，1.27mmol，57.99μL)。搅拌所得混合物2小时。将反应混合物蒸发至干且悬浮于DCM(10mL)中且添加三乙胺(257.50mg，2.54mmol，354.69μL)。使反应混合物搅拌过夜。将所得混合物蒸发且使其经历HPLC(5-30 2-7min水-乙腈；流速：30ml/min；(装载泵4ml/min；乙腈)；柱：SunFireC18 100*19mm 5um(L))，以得到呈白色固体的2-[(2S,5S)-2-(3-乙酰胺基环丁基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(63.6mg，164.14μmol，64.50％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.88-0.96(m,3H),1.21-1.29(m,1H),1.33-1.42(m,1H),1.61-1.73(m,1H),1.73-1.78(m,3H),1.78-2.00(m,6H),2.00-2.05(m,3H),2.72-3.24(m,2H),3.33-3.87(m,1H),3.91-4.53(m,2H),5.54-5.65(m,2H),7.41-7.49(m,1H),7.93-8.01(m,1H),8.03-8.13(m,1H),10.20-10.36(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值387.2；实测值388.4；Rt＝1.334min。
2-[(2R,5R)-2-(3-乙酰胺基环丁基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物564)的合成
向N-[5-[[2-[(2R,5R)-2-[3-(叔丁氧基羰基氨基)环丁基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(97.02mg，177.80μmol)于二噁烷(2mL)中的溶液中添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(32.41mg，889.00μmol，40.52μL)且将所得混合物搅拌2h。将反应混合物蒸发至干且悬浮于DCM(10mL)中且添加三乙胺(179.92mg，1.78mmol，247.82μL)。使反应混合物搅拌过夜。将所得混合物蒸发且使其经历HPLC(5-30 2-7min水-乙腈；流速：30ml/min；(装载泵4ml/min；乙腈)；柱：SunFireC18 100*19mm 5um(L))，以得到呈白色固体的2-[(2R,5R)-2-(3-乙酰胺基环丁基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(42.6mg，109.94μmol，61.83％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ0.88-0.95(m,3H),1.20-1.27(m,1H),1.32-1.40(m,1H),1.61-1.72(m,1H),1.73-1.77(m,3H),1.78-1.98(m,6H),2.00-2.05(m,3H),2.70-3.20(m,2H),3.33-3.85(m,1H),3.91-4.53(m,2H),5.55-5.63(m,2H),7.41-7.49(m,1H),7.95-8.01(m,1H),8.05-8.11(m,1H),10.24-10.38(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值387.2；实测值388.4；Rt＝1.339min。
2-[(2R,5S)-2-(3-乙酰胺基环丁基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(化合物563)的合成
向N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-[3-(叔丁氧基羰基氨基)环丁基]-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(25.36mg，46.48μmol)于二噁烷(1mL)中的溶液中添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(8.47mg，232.38μmol，10.59μL)。搅拌所得混合物2小时。将反应混合物蒸发至干且悬浮于DCM(5mL)中且添加三乙胺(47.03mg，464.75μmol，64.78μL)。使反应混合物搅拌过夜。将所得混合物蒸发且使其经历HPLC(5-302-7min水-乙腈；流速：30ml/min；(装载泵4ml/min；乙腈)；柱：SunFireC18 100*19mm 5um(L))，以获得呈白色固体的2-[(2R,5S)-2-(3-乙酰胺基环丁基)-5-甲基-1-哌啶基]-N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-氧代乙酰胺(10mg，25.81μmol，55.53％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6+CCl4)δ0.80-0.93(m,3H),1.22-1.31(m,1H),1.45-1.64(m,4H),1.72-1.79(m,3H),1.83-2.02(m,4H),2.03-2.06(m,3H),2.08-2.30(m,1H),2.68-2.85(m,1H),3.40-3.87(m,1H),3.98-4.16(m,1H),4.24-4.59(m,1H),5.56-5.69(m,2H),7.42-7.60(m,1H),7.98-8.05(m,1H),8.06-8.15(m,1H),10.28-10.49(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M+H]+m/z：计算值387.2；实测值388.4；Rt＝1.621min。
实施例785.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(2-(6-氨基螺[3.3]庚-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物773)的合成
步骤1：外消旋-(2R,5S)-2-(6-羟基螺[3.3]庚-2-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
向6-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]螺[3.3]庚-2-醇(3.5g，16.72mmol)于THF(100mL)中的溶液中添加TEA(3.38g，33.44mmol，4.66mL)，随后添加二碳酸二-叔丁酯(3.65g，16.72mmol，3.84mL)。将反应混合物在25℃下搅拌13h且蒸发。将残余物溶解于水(150ml)中且用DCM(3*70ml)萃取。将有机萃取物用水和盐水洗涤，然后经Na2SO4干燥且蒸发，以得到呈黄色油状物的(2R,5S)-2-(2-羟基螺[3.3]庚-6-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.8g，粗品)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.86(d,3H),1.43(m,3H),1.51(s,9H),1.88(m,9H),2.26(m,1H),2.42(m,1H),2.62(m,1H),2.89(m,1H),3.65(m,1H),4.14(m,2H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值209.4；实测值210.2；Rt＝1.494min。
步骤2：外消旋-(2R,5S)-5-甲基-2-(6-((甲基磺酰基)氧基)螺[3.3]庚-2-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
向(2R,5S)-2-(2-羟基螺[3.3]庚-6-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.8g，15.51mmol)于DCM(150mL)中的溶液中添加TEA(2.35g，23.27mmol，3.24mL)，随后添加甲磺酰氯(1.25g，10.91mmol，844.59μL)。将反应混合物在25℃下搅拌12h。将反应混合物用水(3*100ml)洗涤。将有机萃取物用盐水洗涤，然后经Na2SO4干燥且蒸发，以得到呈黄色油状物的(2R,5S)-5-甲基-2-(2-甲基磺酰基氧基螺[3.3]庚-6-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(5.6g，粗品)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.93(d,3H),1.24(m,2H),1.43(s,9H),1.69(m,3H),1.93(m,2H),2.12(m,1H),2.26(m,2H),2.46(m,2H),2.54(m,2H),2.88(m,1H),2.94(s,3H),3.65(m,1H),4.05(m,1H),4.86(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值287.4；实测值288.2；Rt＝1.658min。
步骤3：外消旋-(2R,5S)-2-(6-叠氮基螺[3.3]庚-2-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
向(2R,5S)-5-甲基-2-(2-甲基磺酰基氧基螺[3.3]庚-6-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(3g，7.74mmol)于DMF(10mL)中的溶液中添加叠氮化钠(1.51g，23.22mmol，816.10μL)。将反应混合物在90℃下搅拌48h。将反应混合物用水(80ml)稀释且将产物用EtOAc(2*100ml)萃取。将合并的有机层用水(3*50ml)和盐水洗涤，经Na2SO4干燥。蒸发EtOAc，以得到粗品(2R,5S)-2-(2-叠氮基螺[3.3]庚-6-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(2g，5.98mmol，77.25％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.92(d,3H),1.25(m,2H),1.43(s,9H),1.75(m,5H),2.03(m,3H),2.22(m,1H),2.38(m,1H),2.65(m,1H),2.93(m,2H),3.68(m,2H),4.04(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值234.4；实测值235.2；Rt＝1.510min。
步骤4：外消旋-(2R,5S)-2-(6-叠氮基螺[3.3]庚-2-基)-5-甲基哌啶的合成
向(2S,5R)-2-(2-叠氮基螺[3.3]庚-6-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.8g，5.38mmol)于DCM(15mL)中的溶液中分批添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(1.96g，53.82mmol，2.45mL)。将混合物在25℃下搅拌12h。将反应混合物蒸发，以得到(2S,5R)-2-(2-叠氮基螺[3.3]庚-6-基)-5-甲基哌啶(0.8g，2.95mmol，54.89％产率，HCl)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值234.4；实测值235.2；Rt＝1.085min。
步骤5：外消旋-(5-(2-((2R,5S)-2-(6-叠氮基螺[3.3]庚-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-3-甲基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
向(2S,5R)-2-(2-叠氮基螺[3.3]庚-6-基)-5-甲基哌啶(0.80.g，2.95mmol，HCl)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(872.35mg，2.95mmol)和TEA(2.09g，20.68mmol，2.88mL)于DMF(3mL)中的溶液中分批添加HATU(1.24g，3.25mmol)。将混合物在25℃下搅拌2h。将反应混合物用水(50ml)稀释且将产物用EtOAc(3*25ml)萃取。将合并的有机层用水、盐水洗涤且经Na2SO4干燥。蒸发溶剂，以得到N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(2-叠氮基螺[3.3]庚-6-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(1.5g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值511.4；实测值512.2；Rt＝0.849min。
步骤6：外消旋-(5-(2-((2R,5S)-2-(6-氨基螺[3.3]庚-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-3-甲基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
将N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(2-叠氮基螺[3.3]庚-6-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(1.5g，2.93mmol)和干燥的487型钯(10％于碳上)(312.01mg，2.93mmol)于MeOH(50mL)中的混合物在氢气气氛、25℃下搅拌15h。过滤出催化剂，在真空中蒸发滤液。将残余物溶解于水(50ml)中且用DCM(2*50ml)萃取。将有机层用盐水(40ml)洗涤，经Na2SO4干燥，以得到N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(2-氨基螺[3.3]庚-6-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(1g，粗品)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.99(d,3H),2.26(m,2H),1.49(s,9H),1.85(m,18H),2.86(s,3H),4.54(m,1H),7.26(m,1H),8.02(m,1H),8.35(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值485.4；实测值486.2；Rt＝1.084min。
步骤7：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(2-(6-氨基螺[3.3]庚-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物773)的合成
向N-[5-[[2-[(2S,5R)-2-(2-氨基螺[3.3]庚-6-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.6g，1.24mmol)于DCM(10mL)中的搅拌溶液中添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(450.49mg，12.36mmol，563.11μL)。将反应混合物在25℃下搅拌12h。将溶剂蒸发。通过反相HPLC(30-65％0-5min H2O/MeOH 0.1％ NH4OH，流速：30ml/min(装载泵4ml/min MeOH)柱：YMC Triart C18 100x20 mm，5um)纯化残余物，以得到呈非对映异构体的混合物的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2S,5R)-2-(2-氨基螺[3.3]庚-6-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(28mg，72.63μmol，5.88％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.85-0.93(m,3H),1.19-1.32(m,2H),1.39-1.51(m,1H),1.51-1.60(m,2H),1.61-1.72(m,2H),1.73-1.84(m,3H),1.86-1.98(m,2H),1.98-2.01(m,3H),2.01-2.16(m,2H),2.20-2.30(m,1H),2.65-2.86(m,2H),2.97-3.13(m,1H),3.23-3.26(m,0.6H),3.67-3.73(m,0.4H),3.90-4.40(m,1H),5.56-5.62(m,2H),7.40-7.49(m,1H),7.94-8.04(m,1H),10.18-10.44(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值385.4；实测值386.2；Rt＝1.211min。
实施例786.6-(1-(2-((6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)氨基)-2-氧代乙酰基)-5-甲基哌啶-2-基)螺[3.3]庚-2-甲酰胺(化合物812)的合成
步骤1：外消旋-(2R,5S)-2-(6-氰基螺[3.3]庚-2-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
向(2R,5S)-5-甲基-2-(2-甲基磺酰基氧基螺[3.3]庚-6-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.5g，3.87mmol)于DMSO(7mL)中的溶液中添加氰化钾(756.17mg，11.61mmol)。将反应混合物在85℃下搅拌36h。将反应混合物用水(70ml)稀释且将产物用EtOAc(2*40ml)萃取。将合并的有机层用水(3*30ml)和盐水洗涤，经Na2SO4干燥。蒸发EtOAc，以得到粗品(2R,5S)-2-(6-氰基螺[3.3]庚-2-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1g，3.14mmol，81.13％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)0.91(d,3H),1.31(m,3H),1.42(s,9H),1.67(m,5H),1.96(m,1H),2.05(m,1H),2.30(m,4H),2.59(m,1H),2.86(m,1H),3.65(m,1H),4.08(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值218.4；实测值219.2；Rt＝1.606min。
步骤2：外消旋-(2R,5S)-2-(6-氨基甲酰基螺[3.3]庚-2-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
在60℃下，向(2R,5S)-2-(6-氰基螺[3.3]庚-2-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(900mg，2.83mmol)和99％无水碳酸钾(781.19mg，5.65mmol，341.13μL)于DMSO(6mL)中的搅拌溶液中逐滴添加35％过氧化氢(2.97g，87.32mmol，2.70mL)。将反应混合物在80℃下搅拌24h。将反应混合物用水(25ml)稀释且用EtOAc(3*25ml)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥。在真空中蒸发溶剂，以得到(2R,5S)-2-(2-氨基甲酰基螺[3.3]庚-6-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1g，粗品)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值236.4；实测值237.2；Rt＝1.407min。
步骤3：外消旋-6-((2R,5S)-5-甲基哌啶-2-基)螺[3.3]庚-2-甲酰胺的合成
向(2R,5S)-2-(2-氨基甲酰基螺[3.3]庚-6-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1g，2.97mmol)于DCM(10mL)中的搅拌溶液中添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(1.08g，29.72mmol，1.35mL)。将反应混合物在25℃下搅拌12h。将溶剂蒸发至干，以得到6-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]螺[3.3]庚-2-甲酰胺(0.7g，粗品，HCl)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.83(d,3H),1.23(m,2H),1.87(m,8H),2.14(m,2H),2.46(m,3H),2.73(m,2H),2.95(m,1H),5.45(m,2H),9.04(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值236.4；实测值237.2；Rt＝0.545min。
步骤4：外消旋-(5-(2-((2R,5S)-2-(6-氨基甲酰基螺[3.3]庚-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-3-甲基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
向6-[(2R,5S)-5-甲基-2-哌啶基]螺[3.3]庚-2-甲酰胺(0.7g，2.96mmol)、2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(874.56mg，2.96mmol)和TEA(2.10g，20.73mmol，2.89mL)于DMF(3mL)中的溶液中分批添加HATU(1.24g，3.26mmol)。将混合物在25℃下搅拌2h。将反应混合物用水(50ml)稀释且将产物用EtOAc(3*25ml)萃取。将合并的有机层用水、盐水洗涤且经Na2SO4干燥。蒸发溶剂，以得到N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(2-氨基甲酰基螺[3.3]庚-6-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(1g，粗品)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)0.98(d,3H),1.23(m,4H),1.47(s,9H),1.86(m,6H),2.02(m,2H),2.27(s,3H),2.85(m,4H),2.98(m,2H),3.27(m,1H),4.57(m,1H),6.73(m,1H),8.01(m,1H),8.32(m,1H),9.45(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值513.4；实测值514.2；Rt＝1.244min。
步骤5：6-(1-(2-((6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)氨基)-2-氧代乙酰基)-5-甲基哌啶-2-基)螺[3.3]庚-2-甲酰胺(化合物812)的合成
向N-[5-[[2-[(2R,5S)-2-(2-氨基甲酰基螺[3.3]庚-6-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]-3-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(1g，1.95mmol)于DCM(10mL)中的搅拌溶液中添加于二噁烷中的4.0M氯化氢溶液(709.87mg，19.47mmol，887.34μL)。将反应混合物在25℃下搅拌2h。将溶剂蒸发。通过反相HPLC(15-15-40％0-1-6min H2O/ACN/0.1％NH4OH，流速：30ml/min(装载泵4ml/min MeOH)目标质量413.52柱：YMC Triart C18 100x20mm，5um)纯化残余物，以得到6-[(2R,5S)-1-[2-[(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酰基]-5-甲基-2-哌啶基]螺[3.3]庚-2-甲酰胺(40mg，96.73μmol，4.97％产率)。也在HPLC上收集2种级分：第1级分：58mg(95％ LCMS)；第2级分：36mg(99％ LCMS)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.86-0.94(m,3H),1.20-1.32(m,2H),1.40-1.66(m,2H),1.68-1.84(m,4H),1.89-1.93(m,1H),1.94-2.00(m,2H),2.00-2.02(m,3H),2.03-2.13(m,2H),2.64-3.01(m,4H),3.63-3.98(m,1H),4.32-5.06(m,1H),5.55-5.66(m,2H),6.60-7.08(m,1H),7.39-7.50(m,1H),7.91-8.07(m,1H),10.24-10.43(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值413.4；实测值414.2；Rt＝1.746min。
实施例787.N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(螺[3.3]庚-2-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物692)的合成
步骤1：螺[3.3]庚烷-2-羰基氯的合成
将于亚硫酰氯(8.49g，71.34mmol)中的螺[3.3]庚烷-2-甲酸(1g，7.13mmol)在回流下搅拌12h。然后在真空中蒸发反应混合物，以得到螺[3.3]庚烷-2-羰基氯(0.9g，5.67mmol，79.53％产率)，其不经纯化即用于下一步骤中。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.73(m,2H),1.85(m,2H),1.97(m,2H),2.11(m,4H),2.86(m,1H)。
GCMS：计算值158.4；实测值158.2；Rt＝4.384min。
步骤2：5-甲基-2-氧代-3-(螺[3.3]庚烷-2-羰基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
在-78℃下，将双(三甲基甲硅烷基)酰胺化锂(2.09g，12.48mmol)逐滴添加5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.21g，5.67mmol)于THF(20mL)中的预冷却溶液中。在添加完成之后，将其在同一温度下搅拌1h。此后，一次性添加螺[3.3]庚烷-2-羰基氯(0.9g，5.67mmol)且移除冷却浴。将所得混合物缓慢升温至25℃且在此温度下搅拌1h。然后，将其用15％ NaHSO4水溶液(50ml)淬灭且用乙酸乙酯(100ml)萃取。将有机层用20％ NaCl水溶液(2x50 ml)洗涤，经Na2SO4干燥且在减压下蒸发，以得到5-甲基-2-氧代-3-(螺[3.3]庚-2-羰基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.6g，4.77mmol，84.07％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.91(d,3H),1.40(s,9H),1.53(m,1H),1.76(m,6H),1.95(m,4H),2.07(m,4H),3.04(m,1H),3.62(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M-Boc]+m/z：计算值235.4；实测值236.2；Rt＝1.570min。
步骤3：6-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)螺[3.3]庚-2-胺的合成
将5-甲基-2-氧代-3-(螺[3.3]庚-2-羰基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.6g，4.77mmol)溶解于AcOH(16mL)中且分批添加36％重量/重量盐酸水溶液(12.87g，352.97mmol，16.09mL)(产生大量泡沫)。添加完成之后，将所得混合物在100℃下搅拌15h。然后，在减压下移除溶剂且将残余物分配于1N HCl(100ml)与DCM(200ml)之间。分离有机层且丢弃。将水层用10％ NaOH碱化至pH 10且用DCM(2x100 ml)萃取。分离DCM溶液，经Na2SO4干燥且在减压下蒸发，得到3-甲基-6-螺[3.3]庚-2-基-2,3,4,5-四氢吡啶(0.2g，1.05mmol，21.92％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.84(d,3H),1.10(m,1H),1.45(m,1H),1.64(m,1H),1.76(m,4H),1.98(m,8H),2.73(m,1H),2.84(m,1H),3.56(d,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值191.4；实测值192.2；Rt＝0.872min。
步骤4：6-(5-甲基哌啶-2-基)螺[3.3]庚-2-胺的合成
在0℃下，将硼氢化钠(79.10mg，2.09mmol，73.93μL)一次性添加到3-甲基-6-螺[3.3]庚-2-基-2,3,4,5-四氢吡啶(0.2g，1.05mmol)于MeOH(5mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物搅拌15h，然后在真空中蒸发。将残余物用水(20ml)稀释且用二氯甲烷(2*40ml)萃取。将合并的有机萃取物经硫酸钠干燥且在真空中蒸发。使所获得的油状物经历，以得到5-甲基-2-螺[3.3]庚-2-基哌啶(0.16g，827.61μmol，79.17％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.75(d,3H),0.88(m,2H),1.33(m,1H),1.49(m,1H),1.65(m,3H),1.75(m,4H),1.94(m,6H),2.03(m,1H),2.11(m,1H),2.84(d,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值193.4；实测值194.2；Rt＝0.827min。
步骤5：(5-(2-(2-(6-氨基螺[3.3]庚-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)-3-甲基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
将DIPEA(320.89mg，2.48mmol，432.46μL)添加到相应5-甲基-2-螺[3.3]庚-2-基哌啶(0.16g，827.61μmol)和2-[[6-(叔丁氧基羰基氨基)-5-甲基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(244.39mg，827.61μmol)于DMF(5mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌5min，随后添加HATU(346.15mg，910.37μmol)。然后，将反应混合物在室温下搅拌过夜。在通过LCMS监测到反应完成之后，将所得悬浮液在减压下浓缩。使所获得的固体经历HPLC(Waters SunfireC18 20*100 5mkm柱且以H2O-MeCN为洗脱液混合物)，以得到纯的N-[3-甲基-5-[[2-(5-甲基-2-螺[3.3]庚-2-基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.22g，467.49μmol，56.49％产率)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值470.4；实测值471.2；Rt＝4.127min。
步骤6：N-(6-氨基-5-甲基吡啶-3-基)-2-(5-甲基-2-(螺[3.3]庚-2-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺(化合物692)的合成
将N-[3-甲基-5-[[2-(5-甲基-2-螺[3.3]庚-2-基-1-哌啶基)-2-氧代乙酰基]氨基]-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(0.22g，467.49μmol)溶解于二噁烷(2mL)和水(5mL)的混合物中。然后，将反应混合物在100℃下搅拌16h。在反应完成(通过LCMS监测)之后，在减压下浓缩所得悬浮液。使所获得的固体经历HPLC(Waters Sunfire C18 20*100 5mkm柱且以H2O-MeCN(45-60％)+FA为洗脱液混合物)，以得到纯的N-(6-氨基-5-甲基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-螺[3.3]庚-2-基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(101.7mg，274.50μmol，58.72％产率)。
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.90(d,3H),1.27(m,2H),1.78(m,13H),2.00(s,4H),2.69(m,1H),3.69(m,1H),4.09(m,1H),5.58(m,2H),7.44(d,1H),7.98(d,1H),10.29(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值370.4；实测值371.2；Rt＝2.890min。
实施例788.5-[[2-[(2S,6S)-2-甲基-6-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物561)的合成
步骤1：6-甲基-6'-(甲基氨基)-5,6-二氢-[2,3'-联吡啶]-1(4H)-甲酸叔丁酯的合成
将2-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(7g，20.27mmol)、[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]硼酸(4.20g，22.30mmol，HCl)和碳酸钠(6.45g，60.81mmol，2.55mL)一起混合于二噁烷(75mL)和水(25mL)的混合物中。将混合物抽真空且用氩气回填三次，且向其中添加[1,1'-双(联苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)与DCM的络合物(1.66g，2.03mmol)。将反应混合物在90℃下加热18h。将反应混合物冷却至室温且用水(50ml)稀释。将所得混合物用EtOAc(3*100ml)萃取且将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且蒸发。通过柱色谱纯化残余物，以获得2-甲基-6-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(3.98g，13.12mmol，64.72％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)1.17(s,9H),1.21(d,3H),1.67(m,1H),1.92(m,1H),2.22(m,2H),2.93(d,3H),4.61(bds,1H),4.72(m,1H),5.24(m,1H),6.36(d,1H),7.33(d,1H),8.03(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值303.2；实测值304.2；Rt＝1.071min。
步骤2：N,6-二甲基-3,4,5,6-四氢-[2,3'-联吡啶]-6'-胺的合成
将2-甲基-6-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(3.98g，13.12mmol)溶解于DCM(16mL)中且向其中添加TFA(16mL)。将所得混合物搅拌1h。将反应混合物小心倒入到K2CO3(35g)的溶液中且将所得混合物用DCM(2*100ml)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且蒸发，以获得N-甲基-5-(2-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)吡啶-2-胺(2.1g，10.33mmol，78.75％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)1.22(m,1H),1.30(d,3H),1.70(m,1H),1.87(m,2H),2.46(m,1H),2.57(m,1H),2.93(d,3H),3.64(m,1H),4.73(m,1H),6.38(d,1H),8.05(d,1H),8.43(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值203.2；实测值204.2；Rt＝0.557min。
步骤3：N-甲基-5-(6-甲基哌啶-2-基)吡啶-2-胺的合成
将N-甲基-5-(2-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)吡啶-2-胺(2.1g，10.33mmol)溶解于MeOH(30mL)中且分批添加硼氢化钠(1.17g，30.99mmol，1.10mL)。将所得混合物搅拌18h。将反应混合物在真空中浓缩且将水(30ml)添加到残余物中。将所得混合物用DCM(2*50ml)萃取且将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且蒸发，以获得N-甲基-5-(6-甲基-2-哌啶基)吡啶-2-胺(2.07g，10.09mmol，97.70％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.08(d,3H),1.16(m,1H),1.42(m,2H),1.63(m,3H),1.82(m,1H),2.76(m,1H),2.89(d,3H),3.51(m,1H),4.44(m,1H),6.35(d,1H),7.51(d,1H),8.01(s,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值205.2；实测值206.2；Rt＝0.265min。
步骤4：5-[[2-[(2S,6S)-2-甲基-6-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物561)的合成
将N-甲基-5-(6-甲基-2-哌啶基)吡啶-2-胺(0.25g，1.22mmol)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(299.10mg，1.22mmol，HCl)和TEA(1.23g，12.18mmol，1.70mL)一起混合于DMF(6mL)中且向其中添加HATU(694.53mg，1.83mmol)。将所得混合物搅拌18h。将反应混合物在真空中浓缩且通过HPLC(2-10min 40-60％水/MeCN(装载泵4mlMeCN)，柱：TRIART 100*20 5微米)纯化残余物，以获得5-[[2-[(2S,6S)-2-甲基-6-[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(0.0114g，28.76μmol，2.36％产率)和N-(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)-N'-甲基-N'-[5-(6-甲基-2-哌啶基)-2-吡啶基]草酰胺(23.60mg，59.53μmol，4.89％产率)。
化合物561：
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.31-1.36(m,3H),1.43-1.60(m,2H),1.62-1.75(m,2H),1.87-2.20(m,2H),2.55-2.75(m,3H),4.11-4.29(m,1H),4.82-5.19(m,1H),6.19-6.43(m,2H),7.22-7.34(m,1H),7.48-7.62(m,1H),7.80-7.94(m,1H),8.03-8.17(m,1H),8.20-8.52(m,1H),8.61-8.91(m,2H),10.42-11.31(m,1H)。
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值396.2；实测值397.2；Rt＝1.248min。
实施例789.5-(2-(5-甲基-2-(4,5,6,7-四氢-1H-吲唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)哌啶-3-甲酰胺(化合物755)的合成
步骤1：1-苯甲基-4,5,6,7-四氢-1H-吲唑-5-甲酸甲酯的合成
将4,5,6,7-四氢-1H-吲唑-5-甲酸甲酯(2g，11.10mmol)溶解于MeCN(30mL)中。向其中添加氯甲基苯(1.48g，11.65mmol，1.34mL)、碘化钠(166.36mg，1.11mmol，45.33μL)和碳酸钾(2.30g，16.65mmol，1.00mL)。将所得混合物在80℃下搅拌15h。然后，在减压下移除溶剂且将残余物用MTBE(50ml)稀释。过滤出不溶性固体且在真空中浓缩残余物，得到呈区域异构体的混合物的1-苯甲基-4,5,6,7-四氢吲唑-5-甲酸甲酯(2.95g，10.91mmol，98.33％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)1.89(m,1H),2.22(m,1H),2.72(m,3H),2.84(m,2H),3.71(s,3H),5.29(s,2H),7.09(s,1H),7.32(m,5H)。LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值270.2；实测值271.2；Rt＝1.150min。
步骤2：1-苯甲基-4,5,6,7-四氢-1H-吲唑-5-甲酸的合成
将氢氧化钠(654.72mg，16.37mmol，307.38μL)添加到1-苯甲基-4,5,6,7-四氢吲唑-5-甲酸甲酯(2.95g，10.91mmol)于MeOH(50mL)和水(5mL)中的溶液中。将所得混合物在50℃下搅拌5h。然后，在减压下蒸发甲醇且将残余物用水(40ml)稀释。通过脱脂棉垫过滤所得混浊溶液。将滤液用溶解于水(10ml)中的硫酸氢钠单水合物(2.34g，16.91mmol)酸化。过滤所获得的沉淀，用水洗涤且干燥，得到1-苯甲基-4,5,6,7-四氢吲唑-5-甲酸(2.31g，9.01mmol，82.59％产率)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ(ppm)1.71(m,1H),2.07(m,1H),2.62(m,5H),5.17(s,2H),7.08(s,1H),7.29(m,5H),12.18(bds,1H)。LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值256.2；实测值257.2；Rt＝1.106min。
步骤3：1-苯甲基-4,5,6,7-四氢-1H-吲唑-5-羰基氯的合成
将1-苯甲基-4,5,6,7-四氢吲唑-5-甲酸(2.31g，9.01mmol)溶解于亚硫酰氯(16.40g，137.85mmol，10mL)中。将所得混合物在74℃下搅拌2h。然后，将其在减压下浓缩且将残余物与苯(15ml)一起共同蒸发3次，得到1-苯甲基-4,5,6,7-四氢吲唑-5-羰基氯(3.1g，粗品，HCl)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)2.12(m,1H),2.40(m,1H),3.18(m,5H),5.77(s,2H),7.43(m,6H)。LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值274.2；实测值275.2；Rt＝1.100min。
步骤4：3-(1-苯甲基-3a,4,5,6,7,7a-六氢-1H-吲唑-5-羰基)-5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.03g，4.82mmol)溶解于THF(15mL)中且在氩气流下冷却至-70℃。向其中逐滴添加双(三甲基甲硅烷基)酰胺化锂(20％于THF/乙基苯))(16.13g，19.28mmol，18.12mL，20％纯度)。将所得溶液在此温度下搅拌40分钟，之后逐滴添加1-苯甲基-4,5,6,7-四氢吲唑-5-羰基氯(1.5g，4.82mmol，HCl)于THF(10mL)中的溶液。然后，移除冷却浴且将所得混合物在20℃下搅拌15h。此后，将其用5％ NaHSO4水溶液酸化至pH≈2-3且用乙酸乙酯(50ml)萃取。将有机层依次用水(40ml)和盐水(40ml)洗涤，经Na2SO4干燥且在减压下蒸发，得到3-(1-苯甲基-4,5,6,7-四氢吲唑-5-羰基)-5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.2g，粗品)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)1.02(d,3H),1.23(m,1H),1.52(s,9H),2.02(m,3H),2.17(m,1H),2.64(m,5H),3.05(m,2H),3.78(m,1H),5.21(s,2H),7.24(m,6H)。LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值451.2；实测值452.2；Rt＝1.732min。
步骤5：1-苯甲基-5-(5-甲基-3,4,5,6-四氢吡啶-2-基)-3a,4,5,6,7,7a-六氢-1H-吲唑的合成
将36％重量/重量盐酸水溶液(11.80g，116.51mmol，10.00mL，36％纯度)添加到3-(1-苯甲基-4,5,6,7-四氢吲唑-5-羰基)-5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.2g，4.87mmol)于乙酸(15mL)中的溶液中且将所得混合物在100℃下搅拌15h。然后，在减压下移除挥发物且将残余物溶解于水(60ml)中。通过脱脂棉垫过滤出一些不溶性焦油。将滤液用DCM(2x10 ml)萃取且丢弃有机层。然后，将水层用固体K2CO3碱化至pH≈10且用DCM(2x20ml)萃取。将有机层分离，经K2CO3干燥且在减压下浓缩，得到1-苯甲基-5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-4,5,6,7-四氢吲唑(760mg，2.47mmol，50.74％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)0.92(d,3H),1.23(m,1H),1.57(m,1H),1.73(m,2H),2.23(m,4H),2.67(m,3H),2.86(m,1H),3.01(m,1H),3.74(d,1H),5.18(s,2H),7.04(s,1H),7.29(m,5H)。LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值307.2；实测值308.2；Rt＝1.016min。
步骤6：1-苯甲基-5-(5-甲基哌啶-2-基)-3a,4,5,6,7,7a-六氢-1H-吲唑的合成
在15分钟期间将硼氢化钠(187.05mg，4.94mmol，174.81μL)分批添加1-苯甲基-5-(3-甲基-2,3,4,5-四氢吡啶-6-基)-4,5,6,7-四氢吲唑(760mg，2.47mmol)于MeOH(20mL)中的溶液中。将所得溶液在20℃下搅拌2h。然后，在减压下移除溶剂且将残余物分配于水(20ml)与DCM(30ml)之间。将有机层分离，经Na2SO4干燥且在真空中蒸发，得到1-苯甲基-5-(5-甲基-2-哌啶基)-4,5,6,7-四氢吲唑(750mg，2.42mmol，98.04％产率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ(ppm)0.83(d,3H),1.00(m,1H),1.22(m,2H),1.71(m,4H),1.83(m,2H),2.03(m,1H),2.37(m,3H),2.64(m,2H),3.06(d,1H),5.20(s,2H),7.08(s,1H),7.31(m,5H)。LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值309.2；实测值310.2；Rt＝0.895min。
步骤7：5-(2-(2-(1-苯甲基-3a,4,5,6,7,7a-六氢-1H-吲唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺的合成
将1-苯甲基-5-(5-甲基-2-哌啶基)-4,5,6,7-四氢吲唑(750mg，2.42mmol)、2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(595.30mg，2.42mmol，HCl)和TEA(735.76mg，7.27mmol，1.01mL)一起混合于DMF(10mL)中。将所获得的混合物简单加热至60-70℃，直到形成澄清溶液。在冷却至5-10℃之后，在5min期间分批添加HATU(1.01g，2.67mmol)。将所得溶液在20℃下搅拌15h。然后，将其用水(40ml)稀释且用乙酸乙酯(80ml)萃取。将有机层用水(2x30 ml)和盐水(30ml)洗涤，经Na2SO4干燥且在减压下蒸发。使残余物经历HPLC(柱：YMC Triart C18 100x20 mm，5um；60-60-80％0-1-6min 0.1％ NH3-MeOH，流速：30ml/min)，得到5-[[2-[2-(1-苯甲基-4,5,6,7-四氢吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(443mg，884.95μmol，36.51％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)0.75(m,1H),0.93(d,3H),1.13(m,1H),1.26(m,2H),1.66(m,2H),1.84(m,1H),1.94(m,3H),2.22(m,1H),2.64(m,2H),2.93(m,1H),3.61(m,1H),5.14(s,2H),7.18(m,5H),7.46(m,1H),7.61(m,1H),8.16(m,1H),8.45(m,1H),8.74(m,1H),8.87(m,1H),11.11(m,1H)。LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值500.2；实测值501.2；Rt＝2.371min。
步骤8：5-(2-(5-甲基-2-(4,5,6,7-四氢-1H-吲唑-5-基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)哌啶-3-甲酰胺(化合物755)的合成
将钯(5％于活性碳上)noblyst p1090(400mg，187.93μmol，5％纯度)添加到5-[[2-[2-(1-苯甲基-4,5,6,7-四氢吲唑-5-基)-5-甲基-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(443mg，884.95μmol)于MeOH(20mL)中的溶液中。将所得混合物在氢气气氛、40℃下搅拌6天(气球压力)且在10巴下搅拌48小时。然后，过滤出催化剂且将滤液在减压下浓缩。通过HPLC(柱：SunFireC18 100*19mm 5um；15-65％0-5min水-MeOH，流速30ml/min)纯化残余物，得到5-[[2-[(2S,5R)-2,5-二甲基-2-[(5R)-5-甲基-1,4,6,7-四氢吲唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(16mg，36.49μmol，4.12％产率)和5-[[2-[5-甲基-2-(4,5,6,7-四氢-1H-吲唑-5-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙酰基]氨基]哌啶-3-甲酰胺(49mg，117.64μmol，13.29％产率)。
化合物755：
LCMS(ESI)：[M]+m/z：计算值416.2；实测值417.2；Rt＝1.747min。
实施例790.5-[[2-氧代-2-[2-(2-氧代-1H-吡啶-4-基)-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物262)的合成
步骤1：6-(2-氧代-1H-吡啶-4-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
向4-溴-1H-吡啶-2-酮(180mg，1.03mmol)于二噁烷(35mL)/H2O(6mL)中的溶液中添加Pd(PPh3)4(35mg，30.3μmol)、K2CO3(402mg，2.91mmol)和6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(300mg，0.970mmol)。将悬浮液脱气且用氮气吹扫3次。将混合物在氮气、90℃下搅拌12小时。所得混合物通过添加水(10mL)来淬灭且用EtOAc(15mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩。通过快速色谱(12g二氧化硅快速柱，石油醚/EtOAc，其中EtOAc为0～100％，然后EtOAc/MeOH，其中MeOH为0～20％，流速：30mL/min)纯化残余物，以得到呈黄色固体的6-(2-氧代-1H-吡啶-4-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(60mg，粗品)。LCMS(ESI)[M+H]+m/z计算值277.2，实测值277.1。
步骤2：2-(2-氧代-1H-吡啶-4-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
在氮气下，向6-(2-氧代-1H-吡啶-4-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(50mg，0.181mmol)于MeOH(5mL)中的溶液中添加Pd/C(10mg，具有50重量％水的10重量％Pd)。将混合物脱气且用氮气吹扫3次。将混合物在氢气(在气球中，约15psi)、20℃下搅拌12小时。将所得混合物过滤且在减压下浓缩，以得到呈黄色固体的2-(2-氧代-1H-吡啶-4-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(50mg，粗品)，其不经进一步纯化即直接用于下一步骤中。
步骤3：4-(2-哌啶基)-1H-吡啶-2-酮的合成
向2-(2-氧代-1H-吡啶-4-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(50mg，0.180mmol)于DCM(5mL)中的溶液中添加TFA(0.5mL)。将混合物在20℃下搅拌2小时。将所得混合物在减压下浓缩，以得到呈黄色油状物的4-(2-哌啶基)-1H-吡啶-2-酮(50mg，粗品，TFA)，其不经进一步纯化即用于下一步骤中。
步骤4：2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸乙酯的合成
向5-氨基吡啶-3-甲酰胺(200mg，1.46mmol)、DIPEA(800μL，4.59mmol)于DCM(8mL)中的溶液中添加2-氯-2-氧代乙酸乙酯(300mg，2.20mmol)且将反应混合物在20℃下搅拌12小时。所得混合物通过添加水(10mL)来淬灭且用EtOAc(20mL*3)萃取。将合并的有机层用饱和NH4Cl水溶液(20mL)、盐水(50mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩。通过制备型TLC(二氧化硅，DCM/MeOH＝10:1，254nm)纯化残余物，以得到呈黄色固体的2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸乙酯(70mg，20.2％产率)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 9.04(d,J＝2.5Hz,1H),8.82(d,J＝2.0Hz,1H),8.67(t,J＝2.3Hz,1H),4.43(q,J＝7.3Hz,1H),1.43(t,J＝7.2Hz,2H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z计算值238.1，实测值238.2。
步骤5：2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸的合成
向2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸乙酯(60mg，0.253mmol)于THF(5mL)/H2O(1mL)中的溶液中添加LiOH-H2O(11mg，0.262mmol)。将混合物在20℃下搅拌30分钟。将所得混合物过滤，以得到黄色固体，将其溶解于4M HCl/EtOAc(15mL，60mmol)中，且将混合物在20℃下搅拌3小时。将所得混合物过滤，以得到呈黄色固体的2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(50mg，80.5％产率，HCl)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm11.25(s,1H),9.08(d,J＝2.5Hz,1H),8.87(d,J＝1.8Hz,1H),8.74(d,J＝2.0Hz,1H),8.27(br s,1H),7.73(br s,1H)。
步骤6：5-[[2-氧代-2-[2-(2-氧代-1H-吡啶-4-基)-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(化合物262)的合成
向2-[(5-氨基甲酰基-3-吡啶基)氨基]-2-氧代乙酸(38mg，0.155mmol，HCl)于DMF(2mL)中的混合物中添加HATU(80mg，0.210mmol)和DIPEA(300μL，1.72mmol)。将混合物在20℃下搅拌1小时。通过制备型HPLC(仪器：Gilson GX-281Liquid Handler，Gilson322泵，Gilson 156UV检测器；柱：3_Phenomenex Luna C18 75*30mm*3μm；流动相A：水(0.225％FA)；流动相B：MeCN；梯度：在8.5min内0％至25％ B，保持100％ B达1min；流速：25mL/min；柱温：30℃；波长：220nm，254nm)纯化所得混合物，以得到呈白色固体的5-[[2-氧代-2-[2-(2-氧代-1H-吡啶-4-基)-1-哌啶基]乙酰基]氨基]吡啶-3-甲酰胺(6.8mg，13.1％产率)。1HNMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.93-9.06(m,1H),8.79-8.85(m,1H),8.67(s,1H),8.62(s,1H),7.46-7.52(m,1H),6.54(s,1H),6.43-6.51(m,1H),5.66(br s,1H),5.45(br s,1H),4.49(br d,J＝11.3Hz,1H),4.02(br d,J＝14.6Hz,1H),3.17(br d,J＝14.6Hz,1H),2.43(br d,J＝13.3Hz,1H),1.94-2.09(m,1H),1.75(br d,J＝11.5Hz,3H),1.59(br s,1H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z计算值370.1，实测值370.3；HPLC：在254nm下为100％；外消旋物。
实施例791.N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1240)的合成
步骤1：(3S)-3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将(5S)-5-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(5g，23.4mmol)于THF(60mL)中的混合物密封且在真空下脱气且用N2吹扫三次，然后在-78℃下逐滴添加1M LiHMDS/THF(42.0mL，42.0mmol)，将混合物在-78℃下搅拌1.5小时，然后添加PhNTf2(13.0g，36.4mmol)于THF(20mL)中的溶液。将溶液在25℃下搅拌12小时。通过添加饱和NH4Cl水溶液(100mL)淬灭所得混合物且用EtOAc(200mL*3)萃取。将合并的有机层用饱和NH4Cl水溶液(100mL)、盐水(100mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩。通过快速色谱(80g二氧化硅快速柱，石油醚/EtOAc，其中EtOAc为0～1％，流速＝60mL/min，I2)纯化残余物，以得到呈无色油状物的(3S)-3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(7.3g，90.2％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值346.1，实测值290.0(Boc和t-Bu裂解质量)。
步骤2：5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噻唑的合成
将5-溴-1,3-苯并噻唑(5g，23.4mmol)、KOAc(1.3g，46.7mmol)、环戊基(二苯基)磷烷；二氯钯；铁(2g，2.73mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(13.5g，53.2mmol)和二噁烷(50mL)的混合物在100℃、N2下搅拌60h。所得混合物通过添加水(100mL)来淬灭且用EtOAc(100mL*3)萃取。将合并的有机层用饱和NH4Cl水溶液(100mL*2)、盐水(100mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩，以得到残余物，其通过快速色谱(80g二氧化硅快速柱，石油醚/EtOAc，其中EtOAc为0～10％，流速：30mL/min，254nm)进行纯化，以得到呈白色固体的5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噻唑(4.5g，73.8％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值262.1，实测值261.7。
步骤3：(3S)-6-(1,3-苯并噻唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的合成
将5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噻唑(4.5g，17.2mmol)、(3S)-3-甲基-6-(三氟甲基磺酰基氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(7.14g，20.7mmol)、Na2CO3(5.94g，56.0mmol)、环戊基(二苯基)磷烷；二氯甲烷；二氯钯；铁(1.44g，1.76mmol)、二噁烷(50mL)和H2O(20mL)的混合物在85℃下搅拌12小时。所得混合物通过添加水(100mL)来淬灭且用EtOAc(100mL*3)萃取。将合并的有机层用饱和NH4Cl水溶液(100mL*2)、盐水(100mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩，以得到残余物，其通过快速色谱(24g二氧化硅快速柱，石油醚/EtOAc，其中EtOAc为0～10％，流速：30mL/min，254nm)进行纯化，以得到呈黄色固体的(3S)-6-(1,3-苯并噻唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(4.2g，73.8％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值331.1，实测值331.2。
步骤4：(5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成将(3S)-6-(1,3-苯并噻唑-5-基)-3-甲基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(4.2g，12.7mmol)、TFA(10mL，0.130mol)于DCM(10mL)的混合物在20℃下搅拌2小时。在减压下浓缩混合物。将残余物用MeOH(20mL)溶解，然后在0℃下添加K2CO3(5.3g，38.4mmol)和NaBH4(420mg，11.1mmol)。将所得混合物在0℃下搅拌0.5小时。添加碳酸叔丁氧基羰基酯叔丁酯(7g，32.1mmol)和H2O(10mL)。将混合物在20℃下搅拌12小时。所得混合物通过添加水(100mL)来淬灭且用EtOAc(100mL*3)萃取。将合并的有机层用饱和NH4Cl水溶液(100mL*2)、盐水(100mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩，以得到残余物，其通过快速色谱(24g二氧化硅快速柱，石油醚/EtOAc，其中EtOAc为0～15％，流速：30mL/min，254nm)纯化残余物，以得到呈白色固体的(5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(4g，94.7％产率)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 9.25(s,1H),8.06(d,J＝8.3Hz,1H),7.94(s,1H),7.42(dd,J＝8.4,1.4Hz,1H),5.40(s,1H),3.77(br d,J＝13.6Hz,1H),3.13(dd,J＝13.6,3.8Hz,1H),2.10-2.29(m,2H),1.86-1.93(m,1H),1.75-1.84(m,1H),1.45(s,9H),1.32-1.42(m,1H),1.08(d,J＝6.8Hz,3H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值333.2，实测值333.1。
步骤5：(5S)-2-(2-溴-1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的合成
向(5S)-2-(1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(4g，12.0mmol)、t-BuONa(3.47g，36.1mmol)和DMF(30mL)的混合物中缓慢添加CBr4(4.42g，13.3mmol)。将混合物在20℃下搅拌1小时。所得混合物通过添加水(30mL)来淬灭且用EtOAc(100mL*3)萃取。将合并的有机层用饱和NH4Cl水溶液(30mL*2)、盐水(30mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩，以得到残余物，其通过快速色谱(40g二氧化硅快速柱，石油醚/EtOAc，其中EtOAc为0～20％，流速：30mL/min，254nm)进行纯化，以得到呈黄色固体的(5S)-2-(2-溴-1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.4g，48.5％产率)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 7.93(d,J＝8.5Hz,1H),7.81(s,1H),7.39(dd,J＝8.5,1.0Hz,1H),5.36(t,J＝4.8Hz,1H),3.76(br d,J＝13.6Hz,1H),3.11(dd,J＝13.6,3.8Hz,1H),2.06-2.27(m,2H),1.87(br dd,J＝6.4,2.9Hz,1H),1.70-1.84(m,1H),1.48(br d,J＝5.5Hz,1H),1.44(s,9H),1.07(d,J＝6.8Hz,3H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值413.1，实测值413.0。
步骤6：4-[5-[(5S)-1-叔丁氧基羰基-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-2-基]-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸苯甲酯的合成
向(5S)-2-(2-溴-1,3-苯并噻唑-5-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(300mg，0.729mmol)和4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸苯甲酯(375mg，1.09mmol)于EtOH(4mL)和H2O(1mL)中的混合物中添加Pd(PPh3)4(90mg，0.0779mmol)和K2CO3(300mg，2.17mmol)。将所得混合物在微波、95℃下搅拌1.5小时。所得混合物通过添加水(50mL)来淬灭且用EtOAc(100mL*3)萃取。将合并的有机层用饱和NH4Cl水溶液(50mL)、盐水(50mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩。通过快速色谱(12g二氧化硅快速柱，石油醚/EtOAc，其中EtOAc为0～30％，流速＝30mL/min，254nm)纯化残余物，以得到呈黄色固体的4-[5-[(5S)-1-叔丁氧基羰基-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-2-基]-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸苯甲酯(340mg，85.1％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值548.3，实测值548.3。
步骤7：4-[5-[(5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-2-基]-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸苯甲酯的合成
将4-[5-[(5S)-1-叔丁氧基羰基-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-2-基]-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸苯甲酯(290mg，0.529mmol)、MeOH(3mL)和4M HCl/MeOH(3mL，12.0mmol)的混合物在20℃下搅拌12小时。将所得混合物在减压下浓缩，以得到呈白色固体的4-[5-[(5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-2-基]-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸苯甲酯(250mg，粗品，HCl)。
步骤8：4-[5-[(5S)-1-[2-[[6-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-5-乙基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酰基]-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-2-基]-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸苯甲酯的合成
将4-[5-[(5S)-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-2-基]-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸苯甲酯(250mg，0.516mmol，HCl)、2-[[6-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-5-乙基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酸(230mg，0.562mmol)、HATU(240mg，0.631mmol)和DIPEA(0.45mL，2.58mmol)于DCM(6mL)中的混合物在20℃下搅拌2小时。所得混合物通过添加水(50mL)来淬灭且用DCM(50mL*3)萃取。将合并的有机层用饱和NH4Cl水溶液(50mL)、盐水(50mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤且在减压下浓缩。通过快速色谱(12g二氧化硅快速柱，石油醚/EtOAc，其中EtOAc为0～70％，流速＝30mL/min，254nm)纯化残余物，以得到呈黄色油状物的4-[5-[(5S)-1-[2-[[6-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-5-乙基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酰基]-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-2-基]-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸苯甲酯(300mg，69.2％产率)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.43-8.75(m,1H),8.22(br s,1H),7.95(br s,2H),7.34-7.52(m,6H),5.85(br s,1H),5.49(s,2H),5.20(br d,J＝14.3Hz,2H),3.66-3.86(m,3H),2.50-2.70(m,3H),2.35(br s,4H),1.96(br s,2H),1.51(br s,2H),1.36-1.41(m,18H),1.29(br s,3H),1.16(br d,J＝6.8Hz,3H)。
步骤9：4-[5-[(5S)-1-[2-[[6-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-5-乙基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酰基]-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-2-基]哌啶-1-甲酸苯甲酯的合成
将4-[5-[(5S)-1-[2-[[6-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-5-乙基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酰基]-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-2-基]-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸苯甲酯(200mg，0.238mmol)和Pd/C(50mg，具有50重量％水的10重量％Pd/C)于t-BuOH(6mL)中的混合物在50℃下在H2下(在气球中)搅拌12小时。将所得混合物过滤且在减压下浓缩，以得到粗产物，其通过快速色谱(12g二氧化硅快速柱，石油醚/EtOAc，其中EtOAc为0～70％，流速＝30mL/min，254nm)进行纯化，以得到呈黄色固体的4-[5-[(5S)-1-[2-[[6-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-5-乙基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酰基]-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-2-基]哌啶-1-甲酸苯甲酯(140mg，粗品)。LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值841.4，实测值841.4。
步骤10：N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(化合物1240)的合成
将4-[5-[(5S)-1-[2-[[6-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-5-乙基-3-吡啶基]氨基]-2-氧代乙酰基]-5-甲基-2-哌啶基]-1,3-苯并噻唑-2-基]哌啶-1-甲酸苯甲酯(140mg，0.166mmol)和TFA(5mL，64.9mmol)的混合物在20℃下搅拌12小时。在减压下浓缩混合物，以得到粗产物，其通过制备型HPLC(仪器：Gilson GX-281Liquid Handler，Gilson 322泵，Gilson 156UV检测器；柱：Welch Xtimate C18 150*25mm*5um；流动相A：具有0.225％ FA(v％)的H2O；流动相B：MeCN；梯度：在9.5min内10％至40％ B，保持100％ B达2min；流速：25mL/min；柱温：30℃；波长：220nm，254nm)进行纯化，以得到白色固体。通过制备型HPLC(仪器：Gilson GX-281Liquid Handler，Gilson 322泵，Gilson 156UV检测器；柱：PhenomenexGemini-NX 80*40mm*3um；流动相A：具有10mmol NH4HCO3的H2O(v％)；流动相B：MeCN；梯度：在7.8min内22％至57％ B，保持100％ B达1min；流速：25mL/min；柱温：30℃；波长：220nm、，254nm)进一步纯化固体，以得到呈白色固体的N-(6-氨基-5-乙基-3-吡啶基)-2-[(2R,5S)-5-甲基-2-[2-(4-哌啶基)-1,3-苯并噻唑-5-基]-1-哌啶基]-2-氧代乙酰胺(8mg，9.5％产率)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.11(br s,1H),7.93-8.02(m,2H),7.65(br s,1H),7.47(br s,1H),5.52-5.90(m,1H),3.74(br s,1H),3.42(br d,J＝13.1Hz,3H),3.10(brd,J＝12.8Hz,2H),2.51(br s,2H),2.33(br s,4H),1.87-2.10(m,5H),1.48(br s,1H),1.25-1.34(m,3H),1.15(br d,J＝7.0Hz,3H)；LCMS(ESI)[M+H]+m/z：计算值507.2，实测值507.3；HPLC：在254nm下为99.18％，在254nm下为100％；82.4％de。
实施例792.PRMT5协同测定
通过利用荧光异向性作为信号来测量固定浓度的C末端5'-TAMRA标记的肽自Prmt5的剂量依赖性位移，来平衡地评估在辅因子SAM或MTA不存在和存在下的PRMT5抑制剂功效和协同性。将两种肽用于这些研究：
Me0：Ac-SGRGKGGKGLGKGGAKRHRKV--K(5-TAMRA)--NH 2。
Me2：Ac-SGR(Sym Me2)GKGGKGLGKGGAKRHRKV--K(5-TA MRA)--NH2
使用肽Me0确定在辅因子不存在下和在作为辅因子的MTA存在下化合物的亲和力。使用肽Me2确定在作为辅因子的SAM存在下化合物的亲和力。
研究化合物和参考化合物：
●以10mM储备浓度开始，将研究化合物溶解于DMSO中
●参考化合物1：EPZ015666(GSK3235025)(SelleckChem，目录号S7748-5 mg，10mM于DMSO中)
●参考化合物2：(S)-2-(环丁基氨基)-N-(3-(8,9-二氢-[1,3]二氧杂环戊烯并[4,5-f]异喹啉-7(6H)-基)-2-羟基丙基)异烟酰胺(PRMT5抑制剂，10mM于DMSO中)
测定条件：
·研究化合物和参考化合物浓度：自125μM的3倍连续稀释
·每个测定板含有以上两种参考化合物
·每个孔中的DMSO浓度：1.25％ DMSO
·在3个测定条件下确定化合物IC50：
1.50μM辅因子SAM+25nM Me2+100nM PRMT5
2.50μM辅因子MTA+25nM Me0+25nM PRMT5
3.无辅因子+25nM Me0+100nM PRMT5
材料:
辅因子溶液的制备
·将SAM溶解于去离子蒸馏水中，制成32mM溶液，将其储存在-20℃下且在一个冷冻-解冻循环后丢弃。
·将MTA-溶解于去离子蒸馏水中，制成2.5mM储备溶液。在必要时使用轻微加热37℃达1分钟，以充分溶解。将溶液储存在-20℃下且在多个冷冻-解冻循环中使用。
板：
仪器配置：
仪器 应用
Echo(Labcyte#555) 化合物稀释
Perkin Elmer Envision，目录号2104 板读取器，FP TAMRA，Ex540/Em590
试剂制备：
在测定板中制备化合物稀释液：
·制备9μL于DMSO中的10mM化合物
·如表2详述，制备10点3倍稀释液，最高工作浓度为125μM。
·针对四个测定条件生成了4个化合物板副本
表2：
·来源板1的化合物浓度为10mM
·中间板1的化合物浓度为1.534mM，其通过将1.2μL 10mM化合物转移到6.576μLDMSO中来制备
·中间板2的化合物浓度为0.01905mM，其通过将15nL 0.1mM化合物转移到7.858μL DMSO中来制备
·将187.5nL DMSO分配在表3所示的测定板的第1、12、13和24列中以用于对照反应，将187.5nL化合物稀释液分配在第3至22列中。
表3：
·新鲜制备测定缓冲液：30mM二羟乙甘氨酸pH 8、0.003％Tween 20、1.5mM DTT和150mM NaCl
·制备四个测定样品：
·在冰上解冻PRMT5；在室温下解冻Me2、Me0、SAM和MTA。将肽储备液稀释至7μM于ddH2O中。
○SAM Me2测定样品：
-3X SAM(辅因子)：制备测定缓冲液中的150μM SAM(Cayman)。
-1.5X PRMT5/Me2(最大对照)：制备于测定缓冲液中的150nM PRMT5和37.5nMMe2。
-1.5X Me2(最小对照)：制备于测定缓冲液中的37.5nM Me2。
○Apo-Me0测定样品：
-3X无辅因子：仅制备测定缓冲液
-1.5X PRMT5/Me0(最大对照)：制备于测定缓冲液中的150nM PRMT5和37.5nMMe2。
-1.5X Me0(最小对照)：制备于测定缓冲液中的37.5nM Me2
○MTA-Me0测定样品：
-3X MTA(辅因子)：制备于测定缓冲液中的150μM MTA。
-1.5X PRMT5/Me0(最大对照)：制备于测定缓冲液中的37.5nM PRMT5和37.5nMMe0。
-1.5X Me0(最小对照)：制备于测定缓冲液中的37.5nM Me0。
测定程序：
·制备以上试剂
·通过16道电动移液器将5μL 3X辅因子溶液分配到所有列中的孔中
·将含有化合物的测定板在1000rpm下旋转60s
·通过16道电动移液器将10μL最小对照(肽)溶液分配到每个孔(第1和13列)
·通过16道电动移液器将10μL酶(1.5X酶/肽)溶液分配到每个孔(第2-12和14-24列)中
·将含有化合物的测定板在1000rpm下旋转60s，且在23℃下孵育30min
·针对其他三个测定条件重复程序且将所有板孵育30min
·在Envision仪器上读取测定板
数据分析
·将荧光偏振标准化以计算％抑制。
其中：
％抑制为在给定抑制剂浓度下的抑制百分比
i为在给定抑制剂浓度下的荧光异向性
P为由单独肽给出的异向性信号且表示最小信号
Prmt5_P为在DMSO存在下由Prmt5和肽复合物给出的异向性信号，表示最大荧光异向性信号
·％抑制数据使用4参数逻辑模型拟合。将最小值和最大值分别固定至0％和100％。报告IC50值。
·Ki可使用Cheng-Prussof方程由IC50计算：
·对于在SAM存在下进行的测定，在SAM存在下Me2肽对PRMT5的结合亲和力经确定为50nM，且肽浓度为25nM，因此IC50＝Ki×1.5
·对于在MTA存在下进行的测定，在MTA存在下Me0肽对PRMT5的结合亲和力被确定为2nM，且肽浓度为25nM，因此IC50＝Ki×13.5
设定：
·镜(条码682)
·滤波器(条码245)
·滤波器(条码246)
·滤波器(条码132)
此实施例的数据展示于表1第4-6列。
实施例793.细胞测定-SDMA细胞内西方方案
自Horizon Discovery(HZGHC004894c005)获得HAP1 MTAP-同基因型细胞系对且将其保持在于加湿的10％ CO2组织培养孵育器中的DMEM(ThermoFisher 11965)+10％ FBS(Gemini 100-500)中。SAM协同PRMT5抑制剂GSK3326595来源于SelleckChem且作为10mMDMSO储备液保持。将所有测试化合物作为10mM DMSO储备液保持。
在第0天，将MTAP完整或MTAP缺失细胞接种于384孔板中，且在加湿的5％ CO2组织培养孵育器中孵育16-24小时。在第1天，使用Tecan D300e数字分配器将测试化合物以限定浓度分配到每个孔中(n＝4)，且将DMSO的体积标准化至最高类别体积。每个板包括给予限定浓度GSK33226595作为板对照的孔。将化合物与细胞一起在加湿的5％ CO2组织培养孵育器中孵育24小时。
在第2天，将化合物处理的细胞用最终浓度4％甲醛固定。然后将细胞用1X PBS+0.1％ Triton X-100洗涤/透化，然后用5％山羊血清/1X TBS封闭。然后将固定的细胞与一级SDMA抗体混合物(Cell Signaling 13222)一起在4℃下孵育过夜。
在第3天，将细胞用1X PBS+0.1％ Triton X-100洗涤，然后在室温下与也含有DRAQ5的NIR荧光二级抗体混合物(LiCor926-32211和VWR 10761-508)一起孵育1小时。将细胞用1X PBS+0.1％ Triton X-100洗涤，然后再次用ddH20洗涤。然后使用NIR荧光成像器(LiCor Odyssey)对板进行成像。
对于数据分析，将SDMA信号标准化至DRAQ5信号。通过自用1μM GSK3326595处理的孔的信号确定测定背景，且将其自每个孔减去。将数据独立地呈MTAP完整和MTAP缺失细胞系的DMSO对照孔的％进行作图，且拟合至4参数逻辑(4-PL)希尔(Hill)方程，其中最大效应限制于0。使用GraphPad Prism或Dotmatics Studies 5.4中的预设IC50拟合程序作为定制数据分析方案的部分来进行拟合。
在此实验中获得的数据呈现于表1第7-9列。
实施例794.活力测定方案
自Horizon Discovery(HZGHC004894c005)获得HAP1 MTAP-同基因型细胞系对且将其保持在于加湿的5或10％ CO2组织培养孵育器中的DMEM(ThermoFisher 11965)+10％FBS(Gemini 100-500)中。将所有测试化合物作为10mM DMSO储备液保持。
在第0天，将MTAP完整和MTAP缺失细胞接种于96孔板中，且在加湿的5或10％ CO2组织培养孵育器中孵育16-24小时。在第1天，使用Tecan D300e数字分配器将测试化合物以限定浓度分配到每个孔中(n＝3)，且将DMSO的体积标准化至最高类别体积(0.2％)。将经化合物处理的板在加湿的5％或10％ CO2组织培养孵育器中孵育7天。
在第7天，自组织培养孵育器移出每个板且使其平衡至室温。然后将1/2体积CellTiter-Glo发光细胞活力测定(Luminescent Cell Viability Assay)试剂(PromegaG7572)添加到每个孔中，或自每个孔移出培养基且添加CellTiter-Glo 2.0细胞活力测定试剂(Promega G9241)于1XPBS中的1:3稀释液。在添加后十分钟，通过Envision板读取器检测发光信号。将数据独立地呈MTAP完整和MTAP缺失细胞系的DMSO对照孔的％进行作图，且拟合至4参数逻辑(4-PL)希尔方程，其中最大效应限制于0。使用GraphPad Prism或Dotmatics Studies 5.4中的预设IC50拟合程序作为定制数据分析方案的部分来进行拟合。
在此实验中获得的数据呈现于表1第10列中。
实施例795.组合活力测定方案
在MTAP缺失SW1573亲本细胞系中，通过重构MTAP基因表达或通过引入空白对照载体来生成SW1573 MTAP同基因型细胞系对。将细胞系在加湿的5％ CO2组织培养孵育器中保持在DMEM+10％ FBS中。将所有测试化合物作为10mM DMSO储备液保持。
在第0天，将MTAP完整和MTAP缺失细胞接种于384孔板中，且在加湿的5％ CO2组织培养孵育器中孵育16-24小时。在第1天，将测试化合物以限定浓度分配到每个孔中(n＝2)，且将DMSO的体积标准化至最高类别体积。将经化合物处理的板在加湿的5％ CO2组织培养孵育器中孵育7天。
在第7天，自组织培养孵育器移出每个板且使其平衡至室温。通过添加CellTiter-Glo试剂来评估相对活力，且使用4参数拟合非线性回归模型(GraphPad Prism)将数据呈各细胞系中各化合物的DMSO对照的％进行作图。根据HSA模型，通过Combenefit软件包(版本2.021)确定协同作用。
PRMT5抑制剂和MAT2A抑制剂表示MTAP缺失肿瘤中的潜在临床组合。
Marjon等人(Cell Reports 2016)和Kalev等人(Cancer Cell 2021)将MAT2A识别为MTAP缺失肿瘤中的治疗靶标。评估了MAT2A抑制剂与选择性靶向MTAP无效细胞中的PRMT5的抑制剂的组合是否将呈现合理的治疗策略。在MTAP无效SW1573癌细胞系中的7日活力测定中MAT2A抑制剂AG-270与示例MTAP无效选择性PRMT5抑制剂的组合证明细胞活力缺乏增强(图2)。
根据HSA模型，此组合作用为协同的，其中协同得分量化了过量的最高单一化合物反应(图3)。
PRMT5抑制剂和MAPK或KRASG12C抑制剂表示MTAP缺失KRAS突变肿瘤中的潜在临床组合。
MTAP缺失可与KRAS基因中的突变(例如KRASG12C)共同出现。存在靶向KRAS或MAPK途径的其他成员(例如MAPK3、MAPK1、MEK1和MEK2)的疗法。评估了这些抑制剂与选择性靶向MTAP无效细胞中的PRMT5的抑制剂的组合是否将呈现治疗策略。
在MTAP无效SW1573癌细胞系中的7日活力测定中KRASG12C抑制剂AMG-510与示例MTAP无效选择性PRMT5抑制剂的组合证明细胞活力缺乏增强(图4)。
在MTAP无效SW1573癌细胞系中的在7日活力测定中MAPK1/MAPK3抑制剂(由乌里替尼和SCH772984例示)与示例性MTAP无效选择性PRMT5抑制剂的组合证明细胞活力缺乏增强(图5)。
在MTAP-无效SW1573癌细胞系中的7日活力测定中MEK抑制剂(由曲美替尼例示)与示例性MTAP无效选择性PRMT5抑制剂的组合证明细胞活力缺乏增强(图6)。
其他实施方案
除非相反指示或另外由上下文清楚，否则在权利要求书中，冠词诸如“一个”、“一种”和“所述”可意指一者或多于一者。除非相反指示或另外由上下文清楚，否则在一组的一个或多个成员之间包括“或”的权利要求书或说明书认为满足组成员的一者、多于一者、或全部存在于给定产物或方法中、用于所述产品或方法中或另外与所述产物或方法相关。本发明包括仅所述组的一个成员存在于给定产物或方法中、用于所述产物或方法中或在其他方面与所述产物或方法相关的实施方案。本发明包括多于一个或全部组成员存在于给定产物或方法中、用于所述产物或方法中或在其他方面与所述产物或方法相关的实施方案。
此外，本发明涵盖将一或多项所列的权利要求的一个或多个限制、元素、条款和描述性术语并入至另一权利要求的所有变化、组合和排列。例如，任一附属于另一权利要求的权利要求可修改成包括一个或多个任一附属于相同基础权利要求的其他权利要求中存在的限制。在元素如列表例如在Markush组形式中呈现时，也揭示所述元素的每个子组，且可自所述组移除任何元素。应理解，一般而言，在本发明或本发明的方面被称为包含具体元素和/或特征的情况下，本发明的某些实施方案或本发明的方面由此类元素和/或特征组成或基本上由此类元素和/或特征组成。出于简化目的，所述实施方案未在本文中明文(inhaec verba)确切描述。也应注意，术语“包含(comprising)”和“含有(containing)”意欲为开放的且允许包含额外元素或步骤。在给出范围的情况下，包括端点。此外，除非相反指示或另外由上下文和本领域普通技术人员的理解清楚，否则表述为范围的值可假定为本发明的不同实施方案中在所说明的范围内的任何特定值或子范围，除非上下文另有明确说明，否则至所述范围的下限的十分之一单位。
本申请是指各种颁布的专利、公布的专利申请、杂志文章和其他出版物，其全部以引用的方式并入本文。如果任何所并入的参考文献与本说明书之间存在冲突，则以本说明书为准。另外，本发明的属于先前技术的任何具体实施方案可明确自任一个或多个权利要求中排除。因为此类实施方案似乎为本领域普通技术人员熟知的，所以即使本文未明确陈述排除也可排除它们。出于任何原因，无论是否与先前技术的存在相关，可自任一权利要求排除本发明的任何具体实施方案。
本领域技术人员将认识到或仅仅使用常规实验即能够探悉本文中描述的特定实施方案的许多等价物。本文所述的本发明实施方案的范围不意欲局限于上述说明书，而是如所附权利要求书所陈述。本领域普通技术人员将了解，可对此说明书作出各种改变和修改而不背离本发明的如以下权利要求书所限定的精神或范围。

Claims (114)

1.一种式(I)化合物或其药学上可接受的盐；
其中：
每个R1独立地选自H、-D、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C9环烷基、3-10元杂环基、杂环基烷基、杂芳基烷基、芳基烷基、环烷基烷基、-ORa1、-N(Ra1)2、-C(＝O)Ra1、-C(＝O)ORa1、-NRa1C(＝O)Ra1、-NRa1C(＝O)ORa1、-C(＝O)N(Ra1)2、-OC(＝O)N(Ra1)2、-S(＝O)Ra1、-S(＝O)2Ra1、-SRa1、-S(＝O)(＝NRa1)Ra1、-NRa1S(＝O)2Ra1和-S(＝O)2N(Ra1)2；
每个R2独立地选自卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C1-C6卤烷氧基、-C3-C9环烷基、3-10元杂环基、杂环基烷基、杂芳基烷基、芳基烷基、环烷基烷基、-ORa2、-N(Ra2)2、-C(＝O)Ra2、-C(＝O)ORa2、-NRa2C(＝O)Ra2、-NRa2C(＝O)ORa2、-C(＝O)N(Ra2)2、-C(＝O)N(ORa2)(Ra2)、-OC(＝O)N(Ra2)2、-S(＝O)Ra2、-S(＝O)2Ra2、-SRa2、-S(＝O)(＝NRa2)Ra2、-NRa2S(＝O)2Ra2和-S(＝O)2N(Ra2)2；
每个R3独立地选自H、-D、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C9环烷基、3-10元杂环基、杂环基烷基、杂芳基烷基、芳基烷基、环烷基烷基、-ORa3、-N(Ra3)2、-C(＝O)Ra3、-C(＝O)ORa3、-NRa3C(＝O)Ra3、-NRa3C(＝O)ORa3、-C(＝O)N(Ra3)2、-OC(＝O)N(Ra3)2、-S(＝O)Ra3、-S(＝O)2Ra3、-SRa3、-S(＝O)(＝NRa3)Ra3、-NRa3S(＝O)2Ra3和-S(＝O)2N(Ra3)2；
每个R4独立地选自H、-D、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C9环烷基、3-10元杂环基、杂环基烷基、杂芳基烷基、芳基烷基、环烷基烷基、-ORa4、-N(Ra4)2、-C(＝O)Ra4、-C(＝O)ORa4、-NRa4C(＝O)Ra4、-NRa4C(＝O)ORa4、-C(＝O)N(Ra4)2、-OC(＝O)N(Ra4)2、-S(＝O)Ra4、-S(＝O)2Ra4、-SRa4、-S(＝O)(＝NRa4)Ra4、-NRa4S(＝O)2Ra4和-S(＝O)2N(Ra4)2；
每个R6独立地不存在或选自H、-D、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C10碳环基、3-10元杂环基、杂环基烷基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基、杂芳基烷基、芳基烷基、环烷基烷基、-ORa6、-N(Ra6)2、-C(＝O)Ra6、-C(＝O)ORa6、-NRa6C(＝O)Ra6、-NRa6C(＝O)ORa6、-C(＝O)N(Ra6)2、-OC(＝O)N(Ra6)2、-S(＝O)Ra6、-S(＝O)2Ra6、-SRa6、-S(＝O)(＝NRa6)Ra6、-NRa6S(＝O)2Ra6和-S(＝O)2N(Ra6)2，其中每个烷基、碳环基、杂环基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷基任选地在任一可用位置被取代；
每个R7独立地不存在或选自H、-D、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6羟基烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C9环烷基、3-10元杂环基、5-6元单环杂芳基、杂环基烷基、杂芳基烷基、芳基烷基、环烷基烷基、-ORa7、-N(Ra7)2、-C(＝O)Ra7、-C(＝O)ORa7、-NRa7C(＝O)Ra7、-NRa7C(＝O)ORa7、-C(＝O)N(Ra7)2、-OC(＝O)N(Ra7)2、-S(＝O)Ra7、-S(＝O)2Ra7、-SRa7、-S(＝O)(＝NRa7)Ra7、-NRa7S(＝O)2Ra7和-S(＝O)2N(Ra7)2；
每个R8独立地选自H、-D、＝O、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C9环烷基、3-10元杂环基、杂环基烷基、杂芳基烷基、芳基烷基、环烷基烷基、-ORa8、-N(Ra8)2、-C(＝O)Ra8、-C(＝O)ORa8、-NRa8C(＝O)Ra8、-NRa8C(＝O)ORa8、-CH2C(＝O)N(Ra8)2-C(＝O)N(Ra8)2、-OC(＝O)N(Ra8)2、-CH2C(＝O)N(Ra8)2、-S(＝O)Ra8、-S(＝O)2Ra8、-SRa8、-S(＝O)(＝NRa8)Ra8、-NRa8S(＝O)2Ra8和-S(＝O)2N(Ra8)2，其中R8的两个实例连同它们所附接至的原子可一起形成3-10元环烷基或杂环基环(例如，连同结构I的哌啶环可以形成桥接、稠合或螺双环杂环的环)
每个Ra1、Ra2、Ra3、Ra4、Ra6、Ra7和Ra8独立地选自H、C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、C3-C9环烷基、3-7元杂环基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基、5-6元杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷基，其中每个烷基、环烷基、杂环基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷基任选地在任一可用位置被取代(例如，被R9的0、1、2或3个实例取代，其中每个R9独立地选自＝O、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C9环烷基、3-10元杂环基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基烷基、杂芳基烷基、-ORb、-N(Rb)2、-C(＝O)Rb、-C(＝O)ORb、-NRbC(＝O)Rb、-NRbC(＝O)ORb、-C(＝O)N(Rb)2、-OC(＝O)N(Rb)2、-S(＝O)Rb、-S(＝O)2Rb、-SRb、-S(＝O)(＝NRb)Rb、-NRbS(＝O)2Rb和-S(＝O)2N(Rb)2，其中每个Rb独立地选自H、-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-nBu、-tBu、-sec-Bu、-iso-Bu)和C3-C9环烷基(例如，环丙基、环丁基、环戊基、环己基)；且
n为0、1、2或3
前提条件为：
(i)当R1为H时，R2不为卤基、-OPr、-N(CH3)2或-CF3；
(ii)当R1为ORa1时，R2不为-ORa2；
(iii)当R1为H且R2为-CH3时，R8基团不可一起形成环且R6并非不存在或为H，且不为噻唑基、呋喃基或吡咯基；
(iv)当R2为Me时，R1不为任选地被取代的哌啶
(v)所述化合物不为：
A.5-(2-(5-甲基-2-(对甲苯基)哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺或其对映异构体或非对映异构体中的任一者；
B.2-(2-(4-(2H-四唑-5-基)苯基)-5-甲基哌啶-1-基)-N-(5,6-二甲基吡啶-3-基)-2-氧代乙酰胺或其对映异构体或非对映异构体中的任一者；
C.2-氰基-5-(2-(5-甲基-2-苯基哌啶-1-基)-2-氧代乙酰胺基)烟酰胺或其对映异构体或非对映异构体中的任一者。
2.如权利要求1所述的化合物，其中R6和R7不为H且呈反式相对构型。
3.如权利要求1所述的化合物，其中R6和R7不为H且呈顺式相对构型。
4.如权利要求1至3中任一项所述的化合物，其中表示为的部分选自：
5.如权利要求1、2和4中任一项所述的化合物，其中表示为的部分选自：
6.如权利要求1、3和4中任一项所述的化合物，其中表示为的部分选自：
7.如权利要求5所述的化合物，其中所述化合物具有式(Ia)
8.如权利要求5所述的化合物，其中所述化合物具有式(Ib)
9.如权利要求6所述的化合物，其中所述化合物具有式(Ic)
10.如权利要求6所述的化合物，其中所述化合物具有式(Id)
11.如权利要求1至10中任一项所述的化合物，其中每个R8独立地选自H、-D、＝O、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C9环烷基、3-10元杂环基、杂环基烷基、杂芳基烷基、芳基烷基、环烷基烷基、-ORa8、-N(Ra8)2、-C(＝O)Ra8、-C(＝O)ORa8、-NRa8C(＝O)Ra8、-NRa8C(＝O)ORa8、-CH2C(＝O)N(Ra8)2-C(＝O)N(Ra8)2、-OC(＝O)N(Ra8)2、-CH2C(＝O)N(Ra8)2、-S(＝O)Ra8、-S(＝O)2Ra8、-SRa8、-S(＝O)(＝NRa8)Ra8、-NRa8S(＝O)2Ra8和-S(＝O)2N(Ra8)2。
12.如权利要求1至11中任一项所述的化合物，其中R1选自H、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C9环烷基、3-10元杂环基、-ORa1、-N(Ra1)2、-C(＝O)Ra1、-C(＝O)ORa1、-NRa1C(＝O)Ra1、-NRa1C(＝O)ORa1、-C(＝O)N(Ra1)2和-OC(＝O)N(Ra1)2。
13.如权利要求1至12中任一项所述的化合物，其中R1选自H、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6卤烷基、-ORa1和-N(Ra1)2。
14.如权利要求1至13中任一项所述的化合物，其中R1选自H、-C1-C6烷基、-C1-C6卤烷基、-ORa1和-N(Ra1)2。
15.如权利要求1至14中任一项所述的化合物，其中每个Ra1独立地选自H、-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-nBu、-tBu、-sec-Bu、-iso-Bu)和-C1-C6卤烷基(例如，-CHF2、-CF3)。
16.如权利要求1至15中任一项所述的化合物，其中R1选自H、-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-nBu、-tBu、-sec-Bu、-iso-Bu)、-C1-C6卤烷基(例如，-CF3、-CHF2)、-OH、-O-(C1-C6烷基)(例如，-OMe、-OEt)、-O-(C1-C6卤烷基)(例如，-OCF3、-OCHF2)、-NH2、-NH-(C1-C6烷基)(例如，-NHMe)和-N-(C1-C6烷基)2(例如，NMe2)。
17.如权利要求1至16中任一项所述的化合物，其中R1选自H、-Me、-Et、-CHF2、-OMe、-OEt、-OCHF2、-OCF3、-OH和-NH2。
18.如权利要求1至16中任一项所述的化合物，其中R1选自H、-Et、-OMe、-OEt、-OCHF2、-OCF3和-OH。
19.如权利要求1至16中任一项所述的化合物，其中R1选自H和-OMe。
20.如权利要求1至16中任一项所述的化合物，其中R1为H。
21.如权利要求1至16中任一项所述的化合物，其中R1为-OMe。
22.如权利要求1至16中任一项所述的化合物，其中R1选自H、-Me、-CHF2和-NH2。
23.如权利要求1至16中任一项所述的化合物，其中R1选自-Me和-NH2。
24.如权利要求1至16中任一项所述的化合物，其中R1为-Me。
25.如权利要求1至16中任一项所述的化合物，其中R1为-NH2。
26.如权利要求1至25中任一项所述的化合物，其中R2选自卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C1-C6卤烷氧基、-C3-C9环烷基(例如，环丙基)、3-6元杂环基(例如，氧杂环丁烷基、四氢呋喃基)、-ORa2、-N(Ra2)2、-C(＝O)Ra2、-C(＝O)ORa2、-NRa2C(＝O)Ra2、-NRa2C(＝O)ORa2、-C(＝O)N(Ra2)2、-OC(＝O)N(Ra2)2。
27.如权利要求1至26中任一项所述的化合物，其中R2选自卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6卤烷基、-C1-C6卤烷氧基、-C3-C9环烷基(例如，环丙基)、3-6元杂环基(例如，氧杂环丁烷基、四氢呋喃基)、-ORa2、-N(Ra2)2、-C(＝O)Ra2、-C(＝O)N(ORa2)(Ra2)和-C(＝O)N(Ra2)2。
28.如权利要求1至27中任一项所述的化合物，其中R2选自卤基、-C1-C6烷基、-C1-C6卤烷基、-C1-C6卤烷氧基、-C3-C9环烷基(例如，环丙基)、3-6元杂环基(例如，氧杂环丁烷基、四氢呋喃基)、-ORa2、-C(＝O)N(ORa2)(Ra2)、-C(＝O)Ra2和-C(＝O)N(Ra2)2。
29.如权利要求1至28中任一项所述的化合物，其中R2选自卤基、-C1-C6烷基、-C3-C9环烷基(例如，环丙基)、-C1-C6卤烷氧基、3-6元杂环基(例如，氧杂环丁烷基、四氢呋喃基)、-C1-C6卤烷基、-ORa2和-C(＝O)N(Ra2)2。
30.如权利要求1至29中任一项所述的化合物，其中每个Ra2独立地选自H和-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-nBu、-tBu、-sec-Bu、-iso-Bu)。
31.如权利要求1至30中任一项所述的化合物，其中R2选自卤基(例如，-Cl)、-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-nBu、-tBu、-sec-Bu、-iso-Bu)、-C1-C6卤烷基(例如，-CF3、CHF2)、-C1-C6卤烷氧基(例如，-OCH2F、-OCF3)、-C3-C9环烷基(例如，环丙基)、3-6元杂环基(例如，氧杂环丁烷基、四氢呋喃基)、-C1-C6卤烷氧基(例如，-OCF3、-OCHF2)、-OMe、-C(＝O)H、-C(＝O)NHOH和-C(＝O)NH2。
32.如权利要求1至26中任一项所述的化合物，其中R2选自-Cl、-Me、-Et、-iPr、-CF3、-CHF2、-OCHF2、-OCF3、环丙基、氧杂环丁烷-3-基、四氢呋喃-3-基、-OMe、-C(＝O)H、-C(＝O)NHOH和-C(＝O)NH2。
33.如权利要求1至26中任一项所述的化合物，其中R2选自-C(＝O)NH2和-C(＝O)H。
34.如权利要求1至26中任一项所述的化合物，其中R2为-C(＝O)NH2。
35.如权利要求1至26中任一项所述的化合物，其中R2选自-Cl、-Me、-Et、-iPr、-CF3、-CHF2、-OCHF2、-OCF3、氧杂环丁烷-3-基、四氢呋喃-3-基和环丙基。
36.如权利要求1至35中任一项所述的化合物，其中R2选自环丙基、-Me和-Et。
37.如权利要求1至11中任一项所述的化合物，其中R1选自H、-OMe、-OEt、-OCF3、-OCHF2、-CHF2、-Me、-Et、-OH和-NH2，且R2选自-Cl、-Me、-Et、-iPr、-CF3、-CHF2、-OCHF2、-OCF3、环丙基、-C(＝O)NH2和-C(＝O)H，前提条件为当R2为-Me时，R1为NH2。
38.如权利要求1至11中任一项所述的化合物，其中R1选自H、-CHF2、-Me和-NH2，且R2选自-Cl、-Me、-Et、-CF3、-CHF2、-OCHF2和环丙基，前提条件为当R2为-Me时，R1为NH2。
39.如权利要求1至11中任一项所述的化合物，其中R1选自-NH2和-Me，且R2选自环丙基、-Me和-Et。
40.如权利要求39所述的化合物，其中R1为-NH2，且R2选自环丙基、-Me或-Et。
41.如权利要求1至37中任一项所述的化合物，其中R1选自H、-OMe、-OEt、-OCF3、-OCHF2、-Et和-OH，且R2选自-C(＝O)NH2和-C(＝O)H。
42.如权利要求41所述的化合物，其中R1选自H和-OMe且R2为-C(＝O)NH2。
43.如权利要求1至42中任一项所述的化合物，其中R3选自H、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C9环烷基、3-10元杂环基、-ORa3、-N(Ra3)2、-C(＝O)Ra3、-C(＝O)ORa3、-NRa3C(＝O)Ra3、-NRa3C(＝O)ORa3、-C(＝O)N(Ra3)2和-OC(＝O)N(Ra3)2。
44.如权利要求1至43中任一项所述的化合物，其中R3选自H、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6卤烷基和-N(Ra3)2。
45.如权利要求1至44中任一项所述的化合物，其中Ra3选自H和C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-nBu、-tBu、-sec-Bu、-iso-Bu)。
46.如权利要求1至45中任一项所述的化合物，其中R3选自-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-nBu、-tBu、-sec-Bu、-iso-Bu)、-OH、-O-(C1-C6烷基)(例如，-OMe)、-NH2、-NH-(C1-C6烷基)(例如，-NHMe)和-N-(C1-C6烷基)2(例如，NMe2)。
47.如权利要求1至46中任一项所述的化合物，其中R3选自H、-Me和-NH2。
48.如权利要求1至47中任一项所述的化合物，其中R3选自H和-Me。
49.如权利要求1至48中任一项所述的化合物，其中R3为-Me。
50.如权利要求1至49中任一项所述的化合物，其中R4选自H、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C9环烷基、3-10元杂环基、-ORa4、-N(Ra4)2、-C(＝O)Ra4、-C(＝O)ORa4、-NRa4C(＝O)Ra4、-NRa4C(＝O)ORa4、-C(＝O)N(Ra4)2和-OC(＝O)N(Ra4)2。
51.如权利要求1至50中任一项所述的化合物，其中R4选自H、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6卤烷基和-N(Ra4)2。
52.如权利要求1至51中任一项所述的化合物，其中每个Ra4独立地选自H和-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-nBu、-tBu、-sec-Bu、-iso-Bu)。
53.如权利要求1至52中任一项所述的化合物，其中R4选自-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-nBu、-tBu、-sec-Bu、-iso-Bu)、-OH、-O-(C1-C6烷基)(例如，-OMe)、-NH2、-NH-(C1-C6烷基)(例如，-NHMe)和-N-(C1-C6烷基)2(例如，NMe2)。
54.如权利要求1至53中任一项所述的化合物，其中R4为H。
55.如权利要求1至54中任一项所述的化合物，其中每个R6独立地选自-D、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C10碳环基、3-10元杂环基、杂环基烷基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基、杂芳基烷基、芳基烷基、环烷基烷基、-ORa6、-N(Ra6)2、-C(＝O)Ra6、-C(＝O)ORa6、-NRa6C(＝O)Ra6、-NRa6C(＝O)ORa6、-C(＝O)N(Ra6)2、-OC(＝O)N(Ra6)2、-S(＝O)Ra6、-S(＝O)2Ra6、-SRa6、-S(＝O)(＝NRa6)Ra6、-NRa6S(＝O)2Ra6和-S(＝O)2N(Ra6)2，其中每个烷基、碳环基、杂环基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷基任选地在任一可用位置被取代。
56.如权利要求1至54中任一项所述的化合物，其中每个R6独立地选自H、卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C10碳环基、3-10元杂环基、杂环基烷基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基、杂芳基烷基、芳基烷基、环烷基烷基、-ORa6、-N(Ra6)2、-C(＝O)Ra6、-C(＝O)ORa6、-NRa6C(＝O)Ra6、-NRa6C(＝O)ORa6、-C(＝O)N(Ra6)2、-OC(＝O)N(Ra6)2、-S(＝O)Ra6、-S(＝O)2Ra6、-SRa6、-S(＝O)(＝NRa6)Ra6、-NRa6S(＝O)2Ra6和-S(＝O)2N(Ra6)2，其中每个烷基、碳环基、杂环基、芳基、杂芳基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基烷基和杂芳基烷基在任一可用位置被R10的0、1、2或3个实例取代，其中：
每个R10独立地选自-D、＝O、-CN、卤基、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C9环烷基、3-10元杂环基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基烷氧基、-ORb10、-N(Rb10)2、-C(＝O)Rb10、-C(＝O)ORb10、-NRb10C(＝O)Rb10、-NRb10C(＝O)ORb10、-C(＝O)N(Rb10)2、-OC(＝O)Rb10、-OC(＝O)N(Rb10)2、-S(＝O)Rb10 、-S(＝O)2Rb10、-SRb10、-S(＝O)(＝NRb10)Rb10、-NRb10S(＝O)2Rb10和-S(＝O)2N(Rb10)2，其中R10的每个烷基、环烷基、杂烷基、杂环基、芳基、杂芳基、环烷基烷基、杂环基烷基、杂环基烷氧基、芳基烷基和杂芳基烷基任选地在任一可用位置被取代；且其中：
每个Rb10独立地为H；-C1-C6烷基；-C1-C6卤烷基；被＝O的0或1个实例取代的-C1-C6杂烷基；C3-C9环烷基；或被＝O、-Me或其组合的0或1个实例取代的3-10元杂环基。
57.如权利要求1至54中任一项所述的化合物，其中每个R6独立地选自卤基、-CN、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C10碳环基、3-10元杂环基、杂环基烷基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基、杂芳基烷基、芳基烷基、环烷基烷基、-ORa6、-N(Ra6)2、-C(＝O)Ra6、-C(＝O)ORa6、-NRa6C(＝O)Ra6、-NRa6C(＝O)ORa6、-C(＝O)N(Ra6)2、-OC(＝O)N(Ra6)2、-S(＝O)Ra6、-S(＝O)2Ra6、-SRa6、-S(＝O)(＝NRa6)Ra6、-NRa6S(＝O)2Ra6和-S(＝O)2N(Ra6)2，其中每个烷基、碳环基、杂环基、芳基、杂芳基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基烷基和杂芳基烷基在任一可用位置被R10的0、1、2或3个实例取代，其中：
每个R10独立地选自-D、＝O、-CN、卤基、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C9环烷基、3-10元杂环基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基烷氧基、-ORb10、-N(Rb10)2、-C(＝O)Rb10、-C(＝O)ORb10、-NRb10C(＝O)Rb10、-NRb10C(＝O)ORb10、-C(＝O)N(Rb10)2、-OC(＝O)Rb10、-OC(＝O)N(Rb10)2、-S(＝O)Rb10 、-S(＝O)2Rb10、-SRb10、-S(＝O)(＝NRb10)Rb10、-NRb10S(＝O)2Rb10和-S(＝O)2N(Rb10)2，其中R10的每个烷基、环烷基、杂烷基、杂环基、芳基、杂芳基、环烷基烷基、杂环基烷基、杂环基烷氧基、芳基烷基和杂芳基烷基任选地在任一可用位置被取代(例如，被-Me、-Et、-iPr、环丙基、氧杂环丁烷-3-基、-OH、＝O、-F、-OMe、-CH2CH2F、-CH2CHF2、-CH2CH2CF3、-C(＝O)Me、-N(Me)2、-CH2N(CH3)2、-CH2N(CH3)CH2CH3、-N(iPr)(Et)、-N(iPr)(Me)、-N(Et)2、-N(CH3)(Et)、-NHC(＝O)Me或其组合的0、1、2、3、4或5个实例取代)，且其中：
每个Rb10独立地为H；-C1-C6烷基；-C1-C6卤烷基；被＝O的0或1个实例取代的-C1-C6杂烷基；C3-C9环烷基；或被＝O、-Me或其组合的0或1个实例取代的3-10元杂环基。
58.如权利要求1至57中任一项所述的化合物，其中每个Ra6独立地选自H和-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-nBu、-tBu、-sec-Bu、-iso-Bu)。
59.如权利要求1至54中任一项所述的化合物，其中每个R6独立地选自H、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C10碳环基、3-10元杂环基、杂环基烷基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基、杂芳基烷基、芳基烷基和环烷基烷基，其中每个烷基、环烷基、杂环基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷基任选地在任一可用位置被取代。
60.如权利要求1至54中任一项所述的化合物，其中每个R6独立地选自-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C10碳环基、3-10元杂环基、杂环基烷基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基、杂芳基烷基、芳基烷基和环烷基烷基，其中每个烷基、环烷基、杂环基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷基任选地在任一可用位置被取代。
61.如权利要求1至54中任一项所述的化合物，其中每个R6独立地选自H、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C10碳环基、3-10元杂环基、杂环基烷基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基、杂芳基烷基、芳基烷基和环烷基烷基，其中每个烷基、环烷基、杂环基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷基在任一可用位置被R10的0、1、2或3个实例取代，其中：
每个R10独立地选自-D、＝O、-CN、卤基、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C9环烷基、3-10元杂环基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基、环烷基烷基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基烷氧基、杂环基烷基、-ORb10、-N(Rb10)2、-C(＝O)Rb10、-C(＝O)ORb10、-NRb10C(＝O)Rb10、-NRb10C(＝O)ORb10、-C(＝O)N(Rb10)2、-OC(＝O)Rb10、-OC(＝O)N(Rb10)2、-S(＝O)Rb10、-S(＝O)2Rb10、-SRb10、-S(＝O)(＝NRb10)Rb10、-NRb10S(＝O)2Rb10和-S(＝O)2N(Rb10)2，其中R10的每个烷基、环烷基、杂烷基、杂环基、芳基、杂芳基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基烷基和杂芳基烷基任选地被取代(例如，被-Me、-Et、-iPr、环丙基、氧杂环丁烷-3-基、-OH、＝O、-F、-OMe、-CH2CH2F、-CH2CHF2、-CH2CH2CF3、-C(＝O)Me、-N(Me)2、-CH2N(CH3)2、-CH2N(CH3)CH2CH3、-N(iPr)(Et)、-N(iPr)(Me)、-N(Et)2、-N(CH3)(Et)、-NHC(＝O)Me或其组合的0、1、2、3、4或5个实例取代)；且其中：
每个Rb10独立地选自H；-C1-C6烷基；-C1-C6卤烷基；被＝O的0或1个实例取代的-C1-C6杂烷基；C3-C9环烷基；和被＝O、-Me或其组合的0或1个实例取代的3-10元杂环基。
62.如权利要求1至54中任一项所述的化合物，其中每个R6独立地选自-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C10碳环基、3-10元杂环基、杂环基烷基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基、杂芳基烷基、芳基烷基和环烷基烷基，其中每个烷基、环烷基、杂环基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷基在任一可用位置被R10的0、1、2或3个实例取代，其中：
每个R10独立地选自-D、＝O、-CN、卤基、-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C1-C6卤烷基、-C3-C9环烷基、3-10元杂环基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基、环烷基烷基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基烷基、杂环基烷氧基、-ORb10、-N(Rb10)2、-C(＝O)Rb10、-C(＝O)ORb10、-NRb10C(＝O)Rb10、-NRb10C(＝O)ORb10、-C(＝O)N(Rb10)2、-OC(＝O)Rb10、-OC(＝O)N(Rb10)2、-S(＝O)Rb10 、-S(＝O)2Rb10、-SRb10、-S(＝O)(＝NRb10)Rb10、-NRb10S(＝O)2Rb10和-S(＝O)2N(Rb10)2，其中R10的每个烷基、环烷基、杂烷基、杂环基、杂环基烷氧基、芳基、杂芳基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基烷基和杂芳基烷基任选地被取代(例如，被-Me、-Et、-iPr、环丙基、氧杂环丁烷-3-基、-OH、＝O、-F、-OMe、-CH2CH2F、-CH2CHF2、-CH2CH2CF3、-C(＝O)Me、-N(Me)2、-CH2N(CH3)2、-CH2N(CH3)CH2CH3、-N(iPr)(Et)、-N(iPr)(Me)、-N(Et)2、-N(CH3)(Et)、-NHC(＝O)Me或其组合的0、1、2、3、4或5个实例取代))；且
每个Rb10独立地选自H；-C1-C6烷基；-C1-C6卤烷基；被＝O的0或1个实例取代的-C1-C6杂烷基；C3-C9环烷基；和被＝O、-Me或其组合的0或1个实例取代的3-10元杂环基。
63.如权利要求1至54中任一项所述的化合物，其中每个R6独立地选自H、-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-iBu、sec-Bu、-tBu)、-C3-C10单环或双环碳环基(例如，环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、双环[1.1.1]戊-基、4,5,6,7-四氢-1H-吲唑基、螺[3.3]庚基)、3-10元单环或双环杂环基(例如，氧杂环丁烷基、氮杂环庚烷基、哌啶基、吡咯烷基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、1,2-二氢吡啶基、吗啉基)、C6-C10单环或双环芳基(例如，苯基、萘基、1,2,3,4-四氢萘基、2,3-二氢-1H-茚基、1,2,3,4-四氢喹啉基、1,2-二氢喹啉基、1,2-二氢异喹啉基、1,2,3,4-四氢异喹啉基、色原烷基、吲哚啉基、异吲哚啉基、3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噁嗪基、2,3-二氢苯并呋喃基、苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基、2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑基)、5-6元单环杂芳基(例如，噻吩基、噻唑基、吡唑基、咪唑基、噁唑基、吡啶基、嘧啶基)、8-10元双环杂芳基(例如，苯并[d]异噻唑基、吲哚基、苯并呋喃基、1H-吲唑基、2H-吲唑基、苯并[b]噻吩基、喹啉基、1,5-萘啶基、1,2-二氢-1,5-萘啶基、1,2,3,4-四氢-1,8-萘啶基、异喹啉基、苯并[d]咪唑基、苯并[d]噻唑基、苯并[d]噁唑基、[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶基、咪唑并[1,2-a]吡啶基、咪唑并[1,5-a]吡啶基、1H-吡唑并[4,3-b]吡啶基)、1H-吡唑并[3,4-b]吡啶基、1H-噻吩并[2,3-c]吡唑基、1H-噻吩并[3,2-c]吡唑基、噻唑并[5,4-b]吡啶基)，其中每个烷基、碳环基、杂环基、芳基和杂芳基任选地被取代(例如，被R10的0、1、2或3个实例取代)。
64.如权利要求1至54中任一项所述的化合物，其中每个R6独立地选自-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-iBu、sec-Bu、-tBu)、-C3-C10单环或双环碳环基(例如，环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、双环[1.1.1]戊-基、4,5,6,7-四氢-1H-吲唑基、螺[3.3]庚基)、3-10元单环或双环杂环基(例如，氧杂环丁烷基、氮杂环庚烷基、哌啶基、吡咯烷基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、1,2-二氢吡啶基、吗啉基)、C6-C10单环或双环芳基(例如，苯基、萘基、1,2,3,4-四氢萘基、2,3-二氢-1H-茚基、1,2,3,4-四氢喹啉基、1,2-二氢喹啉基、1,2-二氢异喹啉基、1,2,3,4-四氢异喹啉基、色原烷基、吲哚啉基、异吲哚啉基、3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噁嗪基、2,3-二氢苯并呋喃基、苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基、2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑基)、5-6元单环杂芳基(例如，噻吩基、噻唑基、吡唑基、咪唑基、噁唑基、吡啶基、嘧啶基)、8-10元双环杂芳基(例如，苯并[d]异噻唑基、吲哚基、苯并呋喃基、1H-吲唑基、2H-吲唑基、苯并[b]噻吩基、喹啉基、1,5-萘啶基、1,2-二氢-1,5-萘啶基、1,2,3,4-四氢-1,8-萘啶基、异喹啉基、苯并[d]咪唑基、苯并[d]噻唑基、苯并[d]噁唑基、[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶基、咪唑并[1,2-a]吡啶基、咪唑并[1,5-a]吡啶基、1H-吡唑并[4,3-b]吡啶基)、1H-吡唑并[3,4-b]吡啶基、1H-噻吩并[2,3-c]吡唑基、1H-噻吩并[3,2-c]吡唑基、噻唑并[5,4-b]吡啶基)，其中每个烷基、碳环基、杂环基、芳基和杂芳基任选地被取代(例如，被R10的0、1、2或3个实例取代)。
65.如权利要求63所述的化合物，其中R6为8-10元双环杂芳基(例如吲哚基、苯并呋喃基、1H-吲唑基、2H-吲唑基、苯并[b]噻吩基、喹啉基、1,5-萘啶基、1,2-二氢-1,5-萘啶基、1,2,3,4-四氢-1,8-萘啶基、咪唑并[1,2-a]吡啶基、咪唑并[1,5-a]吡啶基、异喹啉基、苯并[d]咪唑基、苯并[d]噻唑基、苯并[d]异噻唑基、苯并[d]噁唑基、[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶基、咪唑并[1,2-a]吡啶基、1H-吡唑并[4,3-b]吡啶基)、1H-吡唑并[3,4-b]吡啶基、1H-噻吩并[2,3-c]吡唑基、1H-噻吩并[3,2-c]吡唑基、噻唑并[5,4-b]吡啶基、1,2,3,4-四氢-1,8-萘啶基)，其中所述双环杂芳基任选地被取代(例如，被R10的0、1、2或3个实例取代)。
66.如权利要求1至54中任一项所述的化合物，其中每个R6独立地选自H、-Me、-iPr、-iBu、sec-Bu、环丁基、环戊基、环己基、双环[1.1.1]戊烷-1-基、螺[3.3]庚-2-基、4,5,6,7-四氢-1H-吲唑-6-基、哌啶-4-基、哌啶-3-基、吡咯烷-3-基、1,2-二氢吡啶-4-基、苯基、萘-2-基、1,2,3,4-四氢喹啉-6-基、1,2,3,4-四氢萘-6-基、色原烷-6-基、1,5-萘啶-6-基、1,2,3,4-四氢-1,8-萘啶-6-基、2,3-二氢-1H-茚-5-基、吲哚啉-5-基、吲哚啉-4-基、2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基、2,3-二氢苯并呋喃-5-基、2,3-二氢苯并呋喃-6-基、苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基]、异吲哚啉-5-基、异吲哚啉-6-基、3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-7-基、1,2-二氢喹啉-6-基、1,2-二氢异喹啉-7-基、噻吩-2-基、噻吩-3-基、噻唑-2-基、噻唑-4-基、噻唑-5-基、吡唑-1-基、吡唑-5-基、吡唑-3-基、吡唑-4-基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基、嘧啶-5-基、吲哚-4-基、吲哚-5-基、苯并呋喃-5-基、苯并呋喃-6-基、1H吲唑-5-基、1H-吲唑-4-基、2H-吲唑-6-基、2H-吲唑-5-基、苯并[b]噻吩-3-基、苯并[b]噻吩-5-基、喹啉-6-基、喹啉-3-基、异喹啉-6-基、苯并[d]咪唑-5-基、1H-苯并[d]咪唑-4-基、苯并[d]噻唑-5-基、苯并[d]噻唑-6-基、苯并[d]噻唑-4-基、苯并[d]异噻唑-5-基、苯并[d]噁唑-4-基、苯并[d]噁唑-5-基、[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-6-基、咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基、咪唑并[1,2-a]吡啶-7-基、咪唑并[1,5-a]吡啶-6-基、吡唑并[4,3-b]吡啶-6-基、1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-基、1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-基、1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-5-基、1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-6-基、1H-噻吩并[2,3-c]吡唑-5-基、1H-噻吩并[3,2-c]吡唑-5-基、噻唑并[5,4-b]吡啶-6-基)，其各自任选地被取代(例如，被R10的0、1、2或3个实例取代)。
67.如权利要求1至54中任一项所述的化合物，其中每个R6独立地选自-Me、-iPr、-iBu、sec-Bu、环丁基、环戊基、环己基、双环[1.1.1]戊烷-1-基、螺[3.3]庚-2-基、4,5,6,7-四氢-1H-吲唑-6-基、哌啶-4-基、哌啶-3-基、吡咯烷-3-基、1,2-二氢吡啶-4-基、苯基、萘-2-基、1,2,3,4四氢喹啉-6-基、1,2,3,4-四氢萘-6-基、色原烷-6-基、1,5-萘啶-6-基、1,2,3,4-四氢-1,8-萘啶-6-基、2,3-二氢-1H-茚-5-基、吲哚啉-5-基、吲哚啉-4-基、2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基、2,3-二氢苯并呋喃-5-基、2,3-二氢苯并呋喃-6-基、苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基]、异吲哚啉-5-基、异吲哚啉-6-基、3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-7-基、1,2-二氢喹啉-6-基、1,2-二氢异喹啉-7-基、噻吩-2-基、噻吩-3-基、噻唑-2-基、噻唑-4-基、噻唑-5-基、吡唑-1-基、吡唑-5-基、吡唑-3-基、吡唑-4-基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基、嘧啶-5-基、吲哚-4-基、吲哚-5-基、苯并呋喃-5-基、苯并呋喃-6-基、1H吲唑-5-基、1H吲唑-4-基、2H-吲唑-6-基、2H-吲唑-5-基、苯并[b]噻吩-3-基、苯并[b]噻吩-5-基、喹啉-6-基、喹啉-3-基、异喹啉-6-基、苯并[d]咪唑-5-基、1H-苯并[d]咪唑-4-基、苯并[d]噻唑-5-基、苯并[d]噻唑-6-基、苯并[d]噻唑-4-基、苯并[d]异噻唑-5-基、苯并[d]噁唑-4-基、苯并[d]噁唑-5-基、[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-6-基、咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基、咪唑并[1,2-a]吡啶-7-基、咪唑并[1,5-a]吡啶-6-基、吡唑并[4,3-b]吡啶-6-基、1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-基、1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-基、1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-5-基、1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-6-基、1H-噻吩并[2,3-c]吡唑-5-基、1H-噻吩并[3,2-c]吡唑-5-基、噻唑并[5,4-b]吡啶-6-基)，其各自任选地被取代(例如，被R10的0、1、2或3个实例取代)。
68.如权利要求1至67中任一项所述的化合物，其中R6选自任选地被取代的苯基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基、嘧啶-5-基和苯基(例如，被R10的0、1、2或3个实例取代)。
69.如权利要求68所述的化合物，其中R6选自被R10的一个实例取代的苯基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基和嘧啶-5-基。
70.如权利要求68所述的化合物，其中R6选自：
71.如权利要求68所述的化合物，其中R6为
72.如权利要求1至67中任一项所述的化合物，其中R6为任选地被取代的苯基(例如，被R10的0、1、2或3个实例取代)。
73.如权利要求72所述的化合物，其中R6为
74.如权利要求1至67中任一项所述的化合物，其中R6选自任选地被取代的双环杂芳基(例如，被R10的0、1、2或3个实例取代)。
75.如权利要求74所述的化合物，其中R6选自任选地被取代的1H-吲唑-5-基、2H-吲唑-5-基、苯并[d]异噻唑-5-基、苯并[d]噻唑-5-基、苯并[b]噻吩-5-基、苯并[d]噁唑-4-基、苯并[d]噁唑-5-基、喹啉-7-基、1H-噻吩并[2,3-c]吡唑-5-基、咪唑并[1,2-a]吡啶-7-基和咪唑并[1,5-a]吡啶-6-基(例如，被R10的0、1、2或3个实例取代)。
76.如权利要求75所述的化合物，其中R6为
77.如权利要求76所述的化合物，其中R6为
78.如权利要求1至77中任一项所述的化合物，其中每个R10独立地选自-D、＝O、卤基(例如，F、Cl、Br)、-CN、-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-sec-Bu、-tBu、CH2(CH3)(iPr))、-C1-C6杂烷基(例如，-CH(CH3)(NMe2)、-CH2CH2N(Me)(氧杂环丁烷-3-基))、-CH2CH(CH3)(NMe2)、-CH2OH、-CH(OH)(CH3)、-C(OH)(CH3)2、-CH2NH2)、-C1-C6卤烷基(例如，-CHF2、-CH2CF3、-CF3)、-C3-C9环烷基(例如，环丙基、环丁基、环戊基、环己基)、3-10元杂环基(例如，四氢呋喃基、四氢吡喃基、氧杂环丁烷基、吗啉基、吡咯烷基、哌啶基、哌啶-2-酮基、哌嗪基、哌嗪-2-酮基、氮杂环丁烷基、十氢-1,6-萘啶基、2-氮杂螺[3.3]庚基、5-氧杂-2,8-二氮杂螺[3.5]壬基、8-氮杂双环[3.2.1]辛基、2-氮杂双环[2.2.2]辛基、3-氮杂双环[3.2.0]庚基、3-氮杂双环[3.1.1]庚基、3-氮杂双环[3.1.0]己基、2-氮杂双环[2.1.1]己基、1-氮杂双环[2.2.1]庚基、3-氮杂双环[3.2.0]庚基、2,9-二氮杂螺[5.5]十一烷基、双环[1.1.1]戊基、八氢环戊[c]吡咯基、十氢-1,6-萘啶基、八氢-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶基、十氢-2,7-萘啶基、2,9-二氮杂螺[5.5]十一烷基)、5-10元杂芳基(例如，吡啶基、咪唑并[1,2-a]吡啶基、咪唑基、吡唑基、噻唑基、噻吩基)、环烷基烷基(例如-CH2-环丙基)、杂环基烷基(例如，-CH2-吗啉基、-(CH2)2-吡咯烷基-(CH2)2-吡咯烷基-CH2-咪唑基、-CH2-吡唑基、-CH2-1,2,4-三唑基、-CH2-吗啉基、-(CH2)2-吗啉基)、杂环基烷氧基(例如，-O-(CH2)2-吡咯烷基、-O-CH2-哌啶基、-O-CH2-氧杂环丁烷基、-O-CH2-四氢呋喃基、-O-CH2-四氢吡喃基)、杂芳基烷基(例如，-CH2-三唑基、-CH2-咪唑基、-CH2-吡唑基)、-ORb10(例如，-OH、-OMe、OEt、-O-四氢呋喃基、-O-四氢吡喃-4-基、-OCF3、-OCHF2)、-N(Rb10)2、(例如，-NH2、-NHRb10、-NHMe、-NMe2、-NHCH2CF3、-NH-氧杂环丁烷-3-基、-NH-(N-Me-2-氧代吡咯烷-3-基)、-NRb10C(＝O)Rb10(例如，-NHC(＝O)Me)、-C(＝O)N(Rb10)2、(例如，-C(＝O)NH2、C(＝O)NHMe)、-OC(＝O)Rb10(例如，-OC(＝O)Me)、-S(＝O)Rb10(例如，-SO2Me)、-NRb10S(＝O)2Rb10(例如，NHSO2Me)和-S(＝O)2N(Rb10)2(例如，SO2NH2、SO2NHMe)，其中每个烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、环烷基烷基、杂环基烷基、芳基烷基和杂芳基烷基任选地被取代(例如，被-Me、-Et、-iPr、环丙基、氧杂环丁烷-3-基、-OH、＝O、-F、-OMe、-CH2CH2F、-CH2CHF2、-CH2CH2CF3、-C(＝O)Me、-N(Me)2、-CH2N(CH3)2、-CH2N(CH3)CH2CH3、-N(iPr)(Et)、-N(iPr)(Me)、-N(Et)2、-N(CH3)(Et)、-NHC(＝O)Me或其组合的0、1、2、3、4或5个实例取代)，且其中：
每个Rb10独立地选自H、-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-sec-Bu、-tBu)、-C1-C6卤烷基(例如，-CF3、-CHF2、-CH2CF3)、被＝O的0或1个实例取代的-C1-C6杂烷基(例如，-CH2CH2NMe2、-CH2C(＝O)NMe2、-CH(CH3)CH2NMe2、-CH(CH3)C(＝O)NMe2)、C3-C9环烷基和被＝O、-Me或其组合的0或1个实例取代的3-10元杂环基(例如四氢呋喃-3-基、四氢吡喃-4-基、氧杂环丁烷-3-基、N-Me-2-氧代吡咯烷-3-基、哌啶-4-基)。
79.如权利要求1至78中任一项所述的化合物，其中每个Rb10独立地选自H、-Me、-Et、-Pr、-iPr、-sec-Bu、-tBu、-CF3、-CHF2、-CH2CF3、-CH2CH2NMe2、-CH2C(＝O)NMe2、-CH(CH3)CH2NMe2、-CH(CH3)C(＝O)NMe2)、四氢呋喃-3-基、四氢吡喃-4-基、氧杂环丁烷-4-基、N-Me-2-氧代吡咯烷-3-基和哌啶-4-基。
80.如权利要求1至75中任一项所述的化合物，其中每个R10独立地选自由以下组成的组：-D、＝O、-OH、-F、-Cl、-Br、-CN、-Me、-Et、-Pr、-iPr、-sec-Bu、-tBu、-OMe、-OEt、-CHF2、-CH2CF3、-CF3、-OCF3、-OCHF2、-CH2OH、-CH(OH)(CH3)、-CH2OMe、-C(OH)(CH3)2、-CH2NH2、-CH(CH3)(NMe2)、-CH2CH(CH3)(NMe2)、-CH2(CH3)(iPr)、-NH2、-NHMe、-NHCH2CF3、-NMe2、环丙基、环丁基、环戊基、环己基、噻唑-2-基、噻唑-5-基、噻吩-2-基、四氢呋喃-3-基、四氢吡喃-4-基、氧杂环丁烷-3-基、吗啉-2-基、-CH2-吗啉-4-基、-(CH2)2-吗啉-4-基、咪唑-2-基、1H-吡唑-5-基、1H-咪唑-4-基、咪唑并[1,2-a]吡啶-7-基、吡咯烷-1-基、吡咯烷-3-基、哌啶-4-基、哌啶-3-基、哌啶-2-酮-4-基、哌嗪-4-基、哌嗪-4-基、哌嗪-2-酮-5-基、吡啶-4-基、吡啶-3-基、吡唑-1-基、吡唑-3-基、吡唑-4-基、吡唑-5-基、1H-吡唑-5-基、氮杂环丁烷-3-基、-(CH2)2-吡咯烷-1-基、-(CH2)2-吡咯烷-2-基、-CH2-咪唑-1-基、-CH2-吡唑-1-基、-CH2-1,2,4-三唑-1-基、-CH2-环丙基、-O(CH2)2NMe2、-O-四氢呋喃-3-基、-O-四氢吡喃-4-基、-O-(N-Me-2-氧代吡咯烷-3-基)、-O-(CH2)2-吡咯烷-2-基、-O-CH2-哌啶-4-基、-O-CH2-氧杂环丁烷-3-基-NCH3-CH2-哌啶-4-基、-NH-氧杂环丁烷-3-基、-NH-(N-Me-2-氧代吡咯烷-3-基)、十氢-1,6-萘啶-6-基、2-氮杂螺[3.3]庚-6-基、5-氧杂-2,8-二氮杂螺[3.5]壬-8-基、8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、2-氮杂双环[2.2.2]辛-4-基、3-氮杂双环[3.2.0]庚-6-基、3-氮杂双环[3.1.1]庚-1-基、3-氮杂双环[3.1.0]己-6-基、1-氮杂双环[2.2.1]庚-4-基、3-氮杂双环[3.2.0]庚-6-基、2-氮杂双环[2.1.1]己-4-基、2,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基、双环[1.1.1]戊烷-2-基、八氢环戊[c]吡咯-5-基、十氢-1,6-萘啶-6-基、八氢-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-5-基、十氢-2,7-萘啶-2-基、2,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-2-基、-NHC(＝O)Me、-NHCH2C(＝O)NMe2、-NHCH(CH3)C(＝O)NMe2、-C(＝O)NH2、C(＝O)NHMe、-OC(＝O)Me、-SO2Me、-NHSO2Me、-SO2NH2和-SO2NHMe，其中每个-OMe、-OEt、-Me、-Et、-Pr、-iPr、环丙基、环丁基、环戊基、环己基、四氢呋喃-3-基、氧杂环丁烷-3-基、吡咯烷-1-基、吡咯烷-3-基、哌啶-4-基、哌啶-3-基、哌啶-2-酮-4-基、哌嗪-4-基、吡唑-1-基、吡唑-3-基、吡唑-4-基、吡唑-5-基、噻唑-2-基、噻吩-2-基、-CH2-环丙基、-CH2-吗啉-4-基、-(CH2)2-吗啉-4-基、-吗啉-2-基、-(CH2)2-吡咯烷-1-基、-CH2-1,2,4-三唑-1-基、-CH2-咪唑-1-基、咪唑-2-基、-CH2-吡唑-1-基、-OCH2-哌啶-4-基、氮杂环丁烷-3-基、2-氮杂螺[3.3]庚-6-基、2-甲基-5-氧杂-2,8-二氮杂螺[3.5]壬-8-基、8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基和十氢-1,6-萘啶-6-基；且其中
每个R10可独立地被-Me、-Et、-iPr、环丙基、氧杂环丁烷-3-基、-OH、＝O、-F、-OMe、-CH2CH2F、-CH2CHF2、-CH2CH2CF3、-C(＝O)Me、-N(Me)2、-CH2N(CH3)2、-CH2N(CH3)CH2CH3、-N(iPr)(Et)、-N(iPr)(Me)、-N(Et)2、-N(CH3)(Et)、-NHC(＝O)Me或其组合的0、1、2、3、4或5个实例取代。
81.如权利要求1至67中任一项所述的化合物，其中R10为任选地被取代的3-6元单环杂环基或任选地被取代的6-10元双环杂环基。
82.如权利要求80所述的化合物，其中R10为-D、-Cl、-F、-Me、-CH2-OH、
83.如权利要求1至82中任一项所述的化合物，其中每个R7独立地选自H、卤基(例如，F、Cl)、-CN、-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-sec-Bu、-tBu)、5元杂芳基(例如，吡唑基)、-C1-C6卤烷基(例如，-CF3、-CHF2、-CH2CF3)、-C1-C6羟基烷基(例如，-CH2OH)、-C3-C9环烷基(例如，环丙基、环丁基、环戊基、环己基)、-ORa7(例如，-OH、-OMe、-OCHF2)、-N(Ra7)2和-C(＝O)N(Ra7)2(例如，-C(＝O)NH2、-C(＝O)NHMe)。
84.如权利要求1至82中任一项所述的化合物，其中每个Ra7独立地选自H和-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-nBu、-tBu、-sec-Bu、-iso-Bu)。
85.如权利要求1至84中任一项所述的化合物，其中每个R7独立地选自H和甲基。
86.如权利要求1至84中任一项所述的化合物，其中每个R7为H。
87.如权利要求1至84中任一项所述的化合物，其中每个R7为甲基。
88.如权利要求1至87中任一项所述的化合物，其中每个R8独立地选自H、-D、卤基(例如，-F、-Cl)、-CN、-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-sec-Bu、-tBu)、-C1-C6卤烷氧基(例如，-OCF3)、芳基烷基(例如，苯甲基)、-C(＝O)Ra8(例如，-C(＝O)Me、-C(＝O)Et、-C(＝O)Pr、-C(＝O)iPr)、-N(Ra8)2(例如，-NHMe、NH2、NMe2)、-NRa8C(＝O)Ra8(例如，-NHC(＝O)Me)、-CH2C(＝O)N(Ra8)2(例如，-CH2C(＝O)NH2)和-ORa8(例如，-OH、-OMe、-OiPr)。
89.如权利要求1至88中任一项所述的化合物，其中每个Ra8独立地选自H、-CF3和-C1-C6烷基(例如，-Me、-Et、-Pr、-iPr、-nBu、-tBu、-sec-Bu、-iso-Bu)。
90.如权利要求1至89中任一项所述的化合物，其中每个R8独立地选自H、-D、-F、-Me、-Et、-sec-Bu、-CN、-OMe、-OiPr、-OCF3、苯甲基、-NHC(＝O)Me、-NMe2、-CH2C(＝O)NH2、-C(＝O)iPr和-OH。
91.如权利要求1至89中任一项所述的化合物，其中每个R8独立地选自H、-D、-F、-Me、-Et和-CN。
92.如权利要求1至89中任一项所述的化合物，其中每个R8独立地选自H、-D、-F和-Me。
93.如权利要求1至92中任一项所述的化合物，其中n为0。
94.如权利要求1至92中任一项所述的化合物，其中n为1。
95.如权利要求1至92中任一项所述的化合物，其中n为2。
96.如权利要求1至92中任一项所述的化合物，其中n为3。
97.如权利要求1、12至92和95至96中任一项所述的化合物，其中表示为的部分选自：
98.如权利要求97所述的化合物，其中表示为的部分选自：
99.如权利要求97至98中任一项所述的化合物，其中n为2。
100.如权利要求97至98中任一项所述的化合物，其中每个R6和R7独立地选自H和-CH3。
101.如权利要求97至98中任一项所述的化合物，其中R6为H。
102.如权利要求97至98中任一项所述的化合物，其中R6为-CH3。
103.如权利要求97至101中任一项所述的化合物，其中R7为H。
104.如权利要求97至101中任一项所述的化合物，其中R7为-CH3。
105.如权利要求1至104中任一项所述的化合物，其中所述化合物选自表1。
106.一种药物组合物，其包含如权利要求1至105中任一项所述的化合物和药学上可接受的载剂。
107.如权利要求106所述的药物组合物，其还包含第二治疗剂。
108.一种治疗有需要的受试者的MTAP缺乏和/或MTA累积疾病的方法，其通过向所述受试者施用治疗有效量的如权利要求1至99中任一项所述的化合物或如权利要求100所述的药学上可接受的组合物来进行。
109.如权利要求108所述的方法，其中所述化合物或组合物与第二治疗剂组合施用。
110.一种治疗有需要的受试者的MTAP缺乏和/或MTA累积疾病的方法，其通过向所述受试者施用治疗有效量的如权利要求107所述的药学上可接受的组合物来进行。
111.如权利要求108至110中任一项所述的方法，其中所述疾病为增殖性疾病。
112.如权利要求111所述的方法，其中所述疾病为MTAP缺乏和/或MTA累积癌症。
113.如权利要求112所述的方法，其中所述癌症为神经胶质母细胞瘤、恶性外周神经鞘瘤(MPNST)、食道癌(例如，食道鳞状细胞癌或食道腺癌)、膀胱癌(例如，膀胱尿路上皮癌)、胰腺癌(例如，胰腺腺癌)、间皮瘤、黑色素瘤、非小细胞肺癌(NSCLC；例如，肺鳞状或肺腺癌)、星形细胞瘤、未分化多形性肉瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、白血病、头颈癌、胃腺癌、黏液性纤维肉瘤、胆管肉瘤、脑癌、胃癌、肾癌、乳腺癌、子宫内膜癌、尿路癌、肝癌、软组织癌、胸膜癌和大肠癌或肉瘤。
114.一种治疗有需要的受试者的癌症的方法，其包括以下步骤：
a)评估自所述受试者获得的测试样品中MTAP和/或MTA的水平，其中所述MTA水平可直接(例如，通过ELISA或LC-MS/MS)或间接(例如，通过SDMA修饰的蛋白质ELISA或IHC或通过RNA剪接)评估；
b)将所述测试样品与参考进行比较，其中所述测试样品中与所述参考相比的MTAP缺乏和/或MTA累积表明所述受试者的所述癌症将对使用PRMT5抑制剂的治疗性治疗有反应；和
c)向步骤b)中鉴别的所述受试者施用治疗有效量的如权利要求1至99中任一项所述的化合物或如权利要求100或101所述的组合物。
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