CN116530401A - 甘薯脱毒苗的移栽方法 - Google Patents

Abstract

本申请公开了一种甘薯脱毒苗的移栽方法，包括：获取甘薯苗，并对甘薯苗进行清洗和消毒；将甘薯苗放入显微镜下进行剥尖，以得到甘薯茎尖；将甘薯茎尖移入诱导培养皿中避光培养10‑20天，后移入分化培养皿中光下培养1‑2个月，后移入MS培养皿中培养1个月，以得到甘薯脱毒幼苗；将甘薯脱毒幼苗移入含有营养液的水培箱中，并水培处理1‑2天，以得到目标甘薯脱毒苗，营养液含有千分之一的生根粉和枯草芽孢杆菌；将目标甘薯脱毒苗移入含有千分之一的枯草芽孢杆菌的培养土中。由此，在土移之前先进行水培，加快了甘薯脱毒苗的发根速度，缩短了育苗的周期，同时，对发根后的甘薯脱毒苗进行土移，提高了甘薯脱毒苗移栽后的成活率。

Description

甘薯脱毒苗的移栽方法

技术领域

本申请涉及甘薯苗培育的技术领域，尤其涉及一种甘薯脱毒苗的移栽方法。

背景技术

甘薯属于块根作物，为无性繁殖作物，在日常生产过程中一般利用薯块进行育种繁殖，随着品种栽培年限的延长，容易积累病毒，从而减产，品质下降，造成甘薯品种种性退化，商品价值降低，对甘薯生产造成严重危害。

因甘薯植株的茎尖生长点不含病毒或所含病毒浓度较低，利用生物技术与脱毒培养的结合以达到有效去除甘薯体内病毒的目的，获得脱毒株系后在严格的无菌环境中再通过无性繁殖培育出大量的甘薯脱毒种苗，以提高甘薯的品质和产量。

相关技术中，在MS培养皿中培养1个月以上的甘薯脱毒幼苗即可进行土移，即将甘薯脱毒幼苗从MS培养皿中取出后，用温水把残留的培养基洗去后，移入培养土中进行培养。

然而，因甘薯脱毒苗在土壤中的发根速度较慢，造成甘薯脱毒苗的育苗周期较长，且直接土培的成活率较低。

发明内容

本申请旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。

为此，本申请的一个目的在于提出一种甘薯脱毒苗的移栽方法，在土移之前先进行水培，加快了甘薯脱毒苗的发根速度，缩短了育苗的周期，同时，对发根后的甘薯脱毒苗进行土移，提高了甘薯脱毒苗移栽后的成活率。

为实现上述目的，本申请第一方面实施例提出了一种甘薯脱毒苗的移栽方法，包括：获取甘薯苗，并对所述甘薯苗进行清洗和消毒；将所述甘薯苗放入显微镜下进行剥尖，以得到甘薯茎尖；将所述甘薯茎尖移入诱导培养皿中避光培养10-20天，后移入分化培养皿中光下培养1-2个月，后移入MS培养皿中培养1个月，以得到甘薯脱毒幼苗；将所述甘薯脱毒幼苗移入含有营养液的水培箱中，并水培处理1-2天，以得到目标甘薯脱毒苗，其中，所述营养液含有千分之一的生根粉和枯草芽孢杆菌；将所述目标甘薯脱毒苗移入含有千分之一的枯草芽孢杆菌的培养土中。

本申请实施例的甘薯脱毒苗的移栽方法，在土移之前先进行水培，加快了甘薯脱毒苗的发根速度，缩短了育苗的周期，同时，对发根后的甘薯脱毒苗进行土移，提高了甘薯脱毒苗移栽后的成活率。

另外，根据本申请上述提出的甘薯脱毒苗的移栽方法还可以具有如下附加的技术特征：

在本申请的一个实施例中，对所述甘薯苗进行清洗和消毒，包括：将所述甘薯苗依次通过洗洁精和清水清洗后移入超净台；将清洗后的所述甘薯苗放入75％的酒精溶液中进行第一次消毒；将第一次消毒后的所述甘薯苗放入含有千分之一的生汞溶液中进行第二次消毒。

在本申请的一个实施例中，所述诱导培养皿中含有诱导培养基，其中，所述诱导培养基由MS、蔗糖、琼脂和6-苄氨基嘌呤组成，且所述诱导培养基的PH处于5.6-5.8之间。

在本申请的一个实施例中，所述分化培养皿中含有分化培养基，其中，所述分化培养基由MS、蔗糖、琼脂、1-萘乙酸和6-苄氨基嘌呤组成。

在本申请的一个实施例中，所述MS培养皿中含有MS植物培养基。

在本申请的一个实施例中，所述培养土包括蛭石、珍珠岩和营养土，其中，所述蛭石、所述珍珠岩和所述营养土的质量比为1:1:1。

本申请附加的方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本申请的实践了解到。

附图说明

本申请上述的和/或附加的方面和优点从下面结合附图对实施例的描述中将变得明显和容易理解，其中：

图1为根据本申请一个实施例的甘薯脱毒苗的移栽方法的流程示意图；

图2为根据本申请一个实施例中对甘薯苗清洗和消毒的流程示意图。

具体实施方式

下面详细描述本申请的实施例，所述实施例的示例在附图中示出，其中自始至终相同或类似的标号表示相同或类似的元件或具有相同或类似功能的元件。下面通过参考附图描述的实施例是示例性的，旨在用于解释本申请，而不能理解为对本申请的限制。相反，本申请的实施例包括落入所附加权利要求书的精神和内涵范围内的所有变化、修改和等同物。

下面结合附图来描述本申请实施例的甘薯脱毒苗的移栽方法。

本申请实施例提供的甘薯脱毒苗的移栽方法，可应用于甘薯脱毒苗的培育室中，主要用于对甘薯脱毒苗进行培育和移栽，通过在土移之前先进行水培，加快了甘薯脱毒苗的发根速度，缩短了育苗的周期，同时，对发根后的甘薯脱毒苗进行土移，提高了甘薯脱毒苗移栽后的成活率。

如图1所示，本申请实施例的甘薯脱毒苗的移栽方法，可包括：

步骤101，获取甘薯苗，并对甘薯苗进行清洗和消毒。

在本申请实施例中，获取甘薯苗的方式可有多种，其中，可由相关人员从甘薯田地里剪取长度为3-4cm且含有顶牙的甘薯苗，并将甘薯苗依次使用洗洁精和清水清洗，以去除甘薯苗上的灰尘、泥土和虫卵等杂质，然后再对甘薯苗进行消毒处理，以去除甘薯苗上的微生物。

为了进一步清楚说明上述实施例，在本申请的一个实施例中，如图2所示，对甘薯苗进行清洗和消毒，可包括：

步骤201，将甘薯苗依次通过洗洁精和清水清洗后移入超净台。

具体地，将上述获取的甘薯苗先放入含有洗洁精的培养皿中进行清洗，后使用流水对甘薯苗进行反复冲洗，直至洗洁精无残留。

进一步地，该实施例中所描述的超净台能够为甘薯苗提供无菌环境，提高甘薯脱毒苗的成活率。

步骤202，将清洗后的甘薯苗放入75％的酒精溶液中进行第一次消毒。

需要说明的是，该实施例中所描述的第一次消毒，是将甘薯茎尖放入装有75％酒精溶液的玻璃瓶中消毒，期间反复摇晃玻璃瓶。

步骤203，将第一次消毒后的甘薯茎尖放入含有千分之一的生汞溶液中进行第二次消毒。

需要说明的是，该实施例中所描述的生汞溶液为氯化汞溶液，将经过第一次消毒后的甘薯茎尖放入装有千分之一生汞溶液的玻璃瓶中消毒四分钟，期间需要反复摇晃玻璃瓶，以对甘薯茎尖进行充分消毒，对甘薯茎尖进行消毒，能够去除甘薯茎尖上细菌和病毒，提高甘薯茎尖培育的存活率。

进一步地，上述实施例中所描述的千分之一生汞溶液可由相关人员配置而成，其配置方法为本领域常规技术手段，本申请中不再做过多赘述。

步骤102，将甘薯苗放入显微镜下进行剥尖，以得到甘薯茎尖。

在本申请的实施例中，该实施例中所描述的甘薯苗需要在超净台进行剥尖，对甘薯苗进行剥尖时，相关人员需要小心剥取茎尖外部较大的叶片和叶原基，并切下长度在0.3-0.5mm之间且带有1-2个叶原基的甘薯茎尖(也叫甘薯茎尖分生组织)，其中，叶原基发生于茎尖生长锥的侧面，一般由表面的几层细胞分裂形成最初的突起，接着向长、宽、厚三个方向生长，分裂分化能力较强，将来会发育成幼叶,从而能使甘薯茎尖较快速的生长。

需要说明的是，因甘薯茎尖不含有病毒或含有较少的病毒，利用甘薯茎尖培育甘薯苗，能够有效的去除甘薯苗内的病毒，以培育出无毒的甘薯苗，提高甘薯种植的品质和产量。

可以理解的是，超净台为供单人操作的通用型局部净化设备局部净化设备，气流形式为垂直层流与水平层流，它可造就局部高清洁度空气环境，在使用前，需要对其进行灭菌处理，即在使用前25-30分钟开启超净台上的紫外灯，开启时间为15-20分钟，以保证剥尖过程能够在无菌的环境中操作，以提高甘薯茎尖培养的成活率。

步骤103，将甘薯茎尖移入诱导培养皿中避光培养10-20天，后移入分化培养皿中光下培养1-2个月，后移入MS培养皿中培养1个月，以得到甘薯脱毒幼苗。

需要说明的是，该实施例中所描述甘薯茎尖经过避光培养10-20天和光下培养1-2个月后，能够长出绿叶，然后再移入MS培养皿中，之后每月可剪苗扩繁一次，移入新的MS培养皿中，以得到二代、三代等的甘薯脱毒幼苗。

进一步地，上述实施例中所描述的避光培养有利于甘薯茎尖切口的细胞脱分化从而形成大量愈伤组织，愈伤组织能够帮助切口愈合，同时还能够分化幼根和芽，从而能够加快育苗过程。

可以理解的是，该实施例中所描述的分化培养能够促进甘薯茎尖上的叶原基发育成幼叶，通过光照能够促进幼叶的生长和发育，增加幼叶生长所需要的养分和能量，同时，还能够刺激幼叶进行光合作用，增加光能转化效率，有利于幼叶的快速生长。

在本申请的实施例中，上述实施例中所描述的诱导培养皿、分化培养皿、MS培养皿和玻璃瓶等器械在使用前均经过灭菌处理，以杀灭器械等上微生物，其中，可将诱导培养皿、分化培养皿、MS培养皿和玻璃瓶等器械放入高压灭菌锅中进行灭菌，需要说明的是，高压灭菌锅是将待灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内，通过加热，使灭菌锅隔套间的水沸腾而产生蒸汽,待水蒸汽急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽，然后关闭排气阀，继续加热，此时由于蒸汽不能溢出，而增加了灭菌器内的压力，从而使沸点增高，得到高于100℃的温度，从而导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。

为了进一步清楚描述上述实施例，在本申请的一个实施例中，如图1所示，诱导培养皿中含有诱导培养基，其中，诱导培养基由MS、蔗糖、琼脂和6-苄氨基嘌呤组成，且诱导培养基的PH处于5.6-5.8之间。

需要说明的是，该实施例中所描述的诱导培养基可由相关人员进行配置，其中配置方法为：首先，相关人员在容器中加入500ml蒸馏水、MS干粉、蔗糖和琼脂，对蒸馏水加热并不停地搅拌直至各组分完全溶解，然后通过蒸馏水对其进行定容至1L，并加入经过灭菌处理后的6-苄氨基嘌呤1ml，其中，6-苄氨基嘌呤的浓度为2mg/L，最后通过酸碱调和剂调节其混合物的PH值处于5.6-5.8之间，即可得到诱导培养基。

具体地，该实施例中所描述的蔗糖能够促进细胞的分裂和生长，调节细胞的代谢和生理过程，提高培养成功的概率；琼脂作为凝固剂，能够将液体液体培养基转化为固体培养基，更加便于操作，且通气性好；6-苄氨基嘌呤为合成的细胞分裂素，能够增强植物生长发育反应，促使甘薯茎尖发芽，促进叶原基细胞延伸和分裂，加快幼叶的生长速度。

进一步地，上述实施例中所描述的MS为MS植物培养基，可由相关人员进行采购获得，其中，需要解释的是，该MS植物培养基是Murashige和Skoog于1962年为烟草细胞培养设计的，其特点是无机盐和离子浓度较高，是较稳定的离子平衡溶液，它的硝酸盐含量高，其养分的数量和比例合适，能满足植物细胞的营养和生理需要，因而适用范围比较广。

在本申请的实施例中，可通过酸碱调和剂对诱导培养基的PH进行调节，其中，酸碱调和剂可为1mol/L的盐酸或者1mol/L氢氧化钠。

为了进一步清楚描述上述实施例，在本申请的一个实施例中，如图1所示，分化培养皿中含有分化培养基，其中，分化培养基由MS、蔗糖、琼脂、1-萘乙酸和6-苄氨基嘌呤组成。

需要说明的是，该实施例中所描述的分化培养基可由相关人员进行配置，其中配置方法为：首先相关人员在容器中加入500ml蒸馏水、MS干粉、蔗糖和琼脂，对蒸馏水加热并不停地搅拌直至各组分完全溶解，然后通过蒸馏水对其进行定容至1L，后加入经过灭菌处理的1-萘乙酸100μl和6-苄氨基嘌呤5μl，其中，1-萘乙酸和6-苄氨基嘌呤的浓度均为2mg/L，即可得到分化培养基。

进一步地，上述实施例中所描述的1-萘乙酸能够刺激植物生长和生根。

在本申请的一个实施例中，如图1所示，MS培养皿中含有MS植物培养基。

需要说明的是，该实施例中描述的MS植物培养基可由相关人员从生物试剂公司购买获得，MS植物培养基为瓶装粉末，使用时将购买所得的MS干粉加入至蒸馏水中,然后加热至溶解，并搅拌均匀,冷却后即可使用。

步骤104，将甘薯脱毒幼苗移入含有营养液的水培箱中，并水培处理1-2天，以得到目标甘薯脱毒苗，其中，营养液含有千分之一的生根粉和枯草芽孢杆菌。

需要说明的是，在进行水培之前，可对甘薯脱毒幼苗进行炼苗，以使甘薯脱毒幼苗更加壮实，其中，炼苗方法为：相关人员打开MS培养皿的封口膜，第一天打开MS培养皿瓶盖1/3，第二天打开MS培养皿瓶盖的全部，从而使甘薯脱毒幼苗逐渐适应外界温度和环境，使甘薯脱毒幼苗更壮实，提高后期土移的成活率。

进一步地，该实施例中所描述的水培温度为30℃，在水培的过程中需要通过打氧泵不断地向水培箱内通入氧气，以提高甘薯脱毒幼苗的生根速率。

更进一步地，该实施例中所描述的水培箱包括箱体和箱盖，箱盖盖合在箱体的开口处，箱体上开设有多个定植孔，每个定植孔内可定植40-50株甘薯脱毒幼苗，且每个甘薯脱毒幼苗的长度为3-5cm。

可以理解的是，该实施例中所描述的生根粉和枯草芽孢杆菌可由相关人员购买获得。

步骤105，将目标甘薯脱毒苗移入含有千分之一的枯草芽孢杆菌的培养土中。

需要说明的是，该实施例中所描述的枯草芽孢杆菌能够产生能够抑制细菌、病毒、真菌和病原体的生长的抗生素类物质，从而确保甘薯脱毒苗的稳定生长。

为了进一步清楚描述上述实施例，在本申请的一个实施例中，如图1所示，培养土包括蛭石、珍珠岩和营养土，其中，蛭石、珍珠岩和营养土的质量比为1:1:1。

需要说明的是，该实施例中所描述的蛭石能够疏松土壤，且透气性好，吸水力强、温度变化小，有利于甘薯脱毒苗进行扎根；珍珠岩能够调节土壤板结，防止薯脱毒苗倒伏。

具体而言，对甘薯脱独苗进行培育和移栽时，首先，相关人员从甘薯田地里剪取长度为3-4cm且含有顶牙的多株甘薯苗，并将甘薯苗放入含有洗洁精的培养皿中进行清洗，后使用流水对甘薯苗反复冲洗，直至洗洁精无残留，然后将清洗干净的甘薯苗放入装有75％酒精溶液的玻璃瓶中进行第一次消毒后，再放入含有千分之一生汞溶液的玻璃瓶中进行第二次消毒，消毒期间不断摇晃玻璃瓶，以杀死甘薯苗上的微生物。

其次，相关人员开启超净台上的紫外灯，对超净台消毒15-20分钟后，将消毒后的甘薯苗移入超净台，并在显微镜下对甘薯苗进行剥尖，相关人员需要小心剥取茎尖外部较大的叶片和叶原基，并切下长度在0.3-0.5mm之间且带有1-2个叶原基的甘薯茎尖。

再次，相关人员通过镊子将切下的甘薯茎尖先移入装有诱导培养基的诱导培养皿中，避光培养10-20天，以使甘薯茎尖的切口快速愈合，后相关人员通过镊子将甘薯茎尖移入装有分化培养基的分化培养皿中光下培养1-2个月，以促进甘薯茎尖上的叶原基发育成幼叶，待甘薯茎尖上长出绿叶后，再移入装有MS培养基的MS培养皿中培养，以使绿叶长大、增多，之后每月可剪苗扩繁一次，后移入新的MS培养皿中，以得到二代、三代等的甘薯脱毒幼苗，每个培养皿上均需要贴上标签，备注培养时间以及品种，并及时记录，以方便后期统计成活率。

当甘薯脱毒幼苗在MS培养皿中培养1个月后，可对甘薯脱毒幼苗进行炼苗，炼苗之后，相关人员将甘薯脱毒幼苗从MS培养皿中取出，并用温水(35-40℃)把残留的培养基洗去，尽量避免伤到根系，然后定植入水培箱中进行水培1-2天。

最后，待甘薯脱毒幼苗在水培箱中长出新根后，即可移入含有千分之一的枯草芽孢杆菌的培养土中继续培养，在甘薯脱毒苗培育的过程中，通过增加水培加快了甘薯脱毒苗的发根速度，缩短了育苗的周期，同时，对发根后的甘薯脱毒苗进行土移，提高了甘薯脱毒苗移栽后的成活率。

综上，本申请实施例的甘薯脱毒苗的移栽方法，在土移之前先进行水培，加快了甘薯脱毒苗的发根速度，缩短了育苗的周期，同时，对发根后的甘薯脱毒苗进行土移，提高了甘薯脱毒苗移栽后的成活率。

在本说明书的描述中，术语“第一”、“第二”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此，限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括至少一个该特征。在本申请的描述中，“多个”的含义是至少两个，例如两个，三个等，除非另有明确具体的限定。

在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本申请的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不必须针对的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外，在不相互矛盾的情况下，本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结合和组合。

尽管上面已经示出和描述了本申请的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本申请的限制，本领域的普通技术人员在本申请的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变形。

Claims (6)

1.一种甘薯脱毒苗的移栽方法，其特征在于，包括：

获取甘薯苗，并对所述甘薯苗进行清洗和消毒；

将所述甘薯苗放入显微镜下进行剥尖，以得到甘薯茎尖；

将所述甘薯茎尖移入诱导培养皿中避光培养10-20天，后移入分化培养皿中光下培养1-2个月，后移入MS培养皿中培养1个月，以得到甘薯脱毒幼苗；

将所述甘薯脱毒幼苗移入含有营养液的水培箱中，并水培处理1-2天，以得到目标甘薯脱毒苗，其中，所述营养液含有千分之一的生根粉和枯草芽孢杆菌。

将所述目标甘薯脱毒苗移入含有千分之一的枯草芽孢杆菌的培养土中。

2.根据权利要求1所述的甘薯脱毒苗的移栽方法，其特征在于，对所述甘薯苗进行清洗和消毒，包括：

将所述甘薯苗依次通过洗洁精和清水清洗后移入超净台；

将清洗后的所述甘薯苗放入75％的酒精溶液中进行第一次消毒；

将第一次消毒后的所述甘薯苗放入含有千分之一的生汞溶液中进行第二次消毒。

3.根据权利要求1所述的甘薯脱毒苗的移栽方法，其特征在于，所述诱导培养皿中含有诱导培养基，其中，所述诱导培养基由MS、蔗糖、琼脂和6-苄氨基嘌呤组成，且所述诱导培养基的PH处于5.6-5.8之间。

4.根据权利要求1所述的甘薯脱毒苗的移栽方法，其特征在于，所述分化培养皿中含有分化培养基，其中，所述分化培养基由MS、蔗糖、琼脂、1-萘乙酸和6-苄氨基嘌呤组成。

5.根据权利要求1所述的甘薯脱毒苗的移栽方法，其特征在于，所述MS培养皿中含有MS植物培养基。

6.根据权利要求1所述的甘薯脱毒苗的移栽方法，其特征在于，所述培养土包括蛭石、珍珠岩和营养土，其中，所述蛭石、所述珍珠岩和所述营养土的质量比为1:1:1。