CN116478243B - 血吸虫来源肽在防治代谢性疾病中的应用 - Google Patents

血吸虫来源肽在防治代谢性疾病中的应用 Download PDF

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Abstract

本发明涉及生物医学领域，为血吸虫来源的两种肽具有改善宿主的脂肪性肝炎及抗肝纤维化的功能。这两种多肽分别为pL‑Sjhp‑24和pL‑Sjmucin4‑86，所述pL‑Sjhp‑24的氨基酸序列为SEQ ID NO.1，所述pL‑Sjmucin4‑86的氨基酸序列为SEQ ID NO.3，其可以通过日本血吸虫卵破碎后分离纯化，或通过基因工程的方法表达或化学合成方法获得。体外实验证实上述两种肽均可有效抑制高脂培养基诱导的小鼠肝细胞系FL83B和人肝细胞系LO2细胞内脂滴聚积；体内实验进一步证实上述肽可促使胆碱蛋氨酸缺乏饮食诱导的脂肪肝小鼠肝脏减少脂质积聚，能够改善炎症进而抑制肝纤维化的功效。本发明制备的两种血吸虫来源肽可用于非酒精性脂肪肝等代谢性疾病的预防治疗药物、保健品或食品添加物中的应用。

Description

血吸虫来源肽在防治代谢性疾病中的应用
技术领域
本发明涉及生物医学领域，主要是血吸虫来源的两种肽，具有改善宿主的脂肪性肝炎及抗肝纤维化的功能，可用于非酒精性脂肪肝等代谢性疾病的预防治疗领域的药物、保健品或食品添加物中的应用。
背景技术
寄生虫在进化过程中衍化出多种复杂的机制以逃避人体的免疫系统，使得其得以生存并拥有与宿主竞争营养的能力。寄生虫在慢性感染过程中与宿主的免疫和代谢系统不断处于精细调控状态，这种免疫代谢学的特性赋予寄生虫及其多肽组分具有治疗某些炎症和代谢紊乱的潜力。例如，丝虫排泄/分泌产物中的ES-62是一种具有抗炎作用的含磷酸胆碱糖蛋白，可使小鼠主动脉粥样硬化病变减少60％。
在过去的十年中，随着生活方式的快速转变，我国的非酒精性脂肪肝炎发病率显著上升。非酒精性脂肪肝炎已影响了2.4％～6.1％的中国人，预计在未来十年内，非酒精性脂肪肝炎发病率将增加56％，非酒精性脂肪肝已成为重要的公共卫生问题之一。非酒精性脂肪性肝病的持续发展会演变为非酒精性脂肪性肝炎，伴有晚期纤维化的非酒精性脂肪性肝炎会显著增加发展为肝硬化和肝细胞癌的风险。其他一些疾病，如肥胖、高血压和糖尿病，也会增加非酒精性脂肪肝炎的风险。
目前，肽类治疗药物主要应用于代谢疾病和肿瘤学等领域。药物肽的来源有多种途径，包括天然肽、基于肽库筛选的多肽、基于蛋白质功能区域的多肽以及基于分子设计和修饰的多肽。天然肽主要是在生物体内合成，由生物体细胞或组织分泌排泄的产物，通常具有强烈的生物活性。在代谢研究领域，肠道微生物和寄生虫亦受到关注，科研人员可从这些上述微生物或寄生虫的分泌蛋白、降解产物中筛选出新的肽，将其制备成具有疗效的药物应用至临床等领域。虫源性分子也可以作为关键调节剂发挥代谢和免疫调节功能，是值得探索开发的药物肽来源。
发明内容
基于虫源性分子具有重要的代谢调节、免疫调节等功能，本发明的目的是提供具有调控宿主的肝脂代谢功能的血吸虫来源肽，用于代谢性疾病的预防治疗药物、保健品或食品添加物中的开发。
为了实现上述目的，本发明具体采用如下技术方案：
本发明的第一个目的是提供一种多肽，所述多肽为pL-Sjhp-24或pL-Sjmucin4-86；
所述pL-Sjhp-24的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示：LPTSDDEKIDLLKS；
所述pL-Sjmucin4-86的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示：ISIPRQIDEDTNDD。
进一步的，编码所述pL-Sjhp-24的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示：
ctaccgacatcggatgatgagaagattgacttgttgaagagtc；
编码所述pL-Sjmucin4-86的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示：
atatcgattccaagacagatagatgaggatacaaacgatgac。
进一步的，所述pL-Sjhp-24或pL-Sjmucin4-86来源于日本血吸虫的虫卵。
进一步的，所述pL-Sjhp-24和pL-Sjmucin4-86为日本血吸虫卵通过细胞破碎分离纯化，或通过基因工程方法人工表达，或通过化学合成方法获得。
本发明的第二个目的是提供前述的多肽的制备方法，所述制备方法为将日本血吸虫卵通过细胞破碎分离纯化，或通过基因工程方法人工表达，或通过化学合成方法获得所述多肽pL-Sjhp-24或pL-Sjmucin4-86。
本发明的第三个目的是提供前述的多肽在代谢性疾病的预防治疗药物、保健品或食品添加物中的应用。
本发明的第四个目的是提供前述的多肽在制备治疗代谢性疾病药物中的应用。
本发明的第五个目的是提供前述的多肽在制备治疗非酒精性脂肪肝病和/或抗肝纤维化药物中的应用。
作为本申请的优选技术方案，上述药物中可以包括药学上可接受的载体，所述药学上可接受的载体选自填充剂、润湿剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂中的一种或多种。
作为本申请的优选技术方案，上述药物剂型包括口服制剂、注射制剂、经皮给药制剂或黏膜给药制剂。
作为本申请的优选技术方案，上述药物剂型包括滴剂、口服液、片剂、胶囊剂、颗粒剂、冲剂、膜剂、凝胶剂、散剂、乳剂、自乳化制剂、滴丸剂、栓剂、气雾剂、喷雾剂、粉雾剂、贴剂、贴膏剂、溶液剂、软膏剂或乳膏剂等。
本发明的第六个目的是提供前述的多肽在制备具有辅助降低血脂功能的保健品或食品添加物中的应用。
本发明的第七个目的是提供前述的多肽在制备具有对化学肝损伤有辅助保护功能的保健品或食品添加物中的应用。
有益效果
本发明提供的两种血吸虫来源的多肽在代谢性疾病的预防治疗的药物、保健品或食品添加物中的应用，具有如下有益效果：
(1)血吸虫来源的两种肽可通过日本血吸虫卵通过细胞破碎分离纯化，或通过基因工程方法人工表达，或通过化学合成等方法获得。
(2)pL-Sjhp-24和pL-Sjmucin4-86在制备代谢性疾病药物、具有辅助降低血脂功能的保健品或食品添加物中的应用。
(3)所述的多肽pL-Sjhp-24和pL-Sjmucin4-86在制备治疗非酒精性脂肪肝病药物、具有对化学肝损伤有辅助保护功能的保健品或食品添加物中的应用。
(4)体外实验证实本发明的血吸虫虫源性多肽pL-Sjhp-24和pL-Sjmucin4-86均可有效抑制高脂培养基诱导的小鼠肝细胞系FL83B和人肝细胞系LO2细胞内脂滴聚积；体内实验进一步证实上述肽可促使胆碱蛋氨酸缺乏饮食诱导的脂肪肝小鼠肝脏减少脂质积聚，能够改善炎症进而抑制肝纤维化的功效。
综上，本发明制备的两种血吸虫来源肽，可降低高脂诱导肝细胞脂质堆积，显著减轻肝脏的病变程度，辅助降低血脂功能，且无显著药物毒性和溶血活性，具有抑制肝细胞系上脂质聚集作用可用于非酒精性脂肪肝、高血脂等代谢性疾病的预防治疗药物、保健品或食品添加物中的应用。
附图说明
图1实施例1血吸虫虫源性多肽pL-Sjhp-24和pL-Sjmucin4-86均可促进肝细胞AMPK通路中磷酸化AMPK、磷酸化ACC的表达增加；其中，图1A为pL-Sjhp-24和pL-Sjmucin4-86处理小鼠肝细胞系FL83B，图1B为pL-Sjhp-24和pL-Sjmucin4-86处理人肝细胞系LO2。
图2实施例2虫卵来源多肽可体外调控肝细胞系脂代谢基因的表达；其中，图2A为小鼠肝细胞系FL83B的Prkaa1表达量，图2B为小鼠肝细胞系FL83B的ucp2表达量，图2C为小鼠肝细胞系FL83B的scd1表达量，图2D为人肝细胞系LO2的Prkaa1表达量，图2E为人肝细胞系LO2的ucp2表达量，图2F为人肝细胞系LO2的scd1表达量。
图3实施例3使用油红O染色法证明多肽pL-Sjhp-24和pL-Sjmucin4-86可抑制肝细胞系上脂滴聚积；其中，图3A为小鼠肝细胞系FL83B油红染色图，图3B为人肝细胞系LO2油红染色图。
图4实施例4使用CCK8法和溶血活性实验检测不同浓度多肽pL-Sjhp-24和pL-Sjmucin4-86处理下小鼠肝细胞系FL83B活力变化以评估多肽药物毒性；其中，图4A为小鼠肝细胞系FL83B溶血活性实验红细胞溶血率，图4B为小鼠肝细胞系FL83B CCK8细胞活性检测肝细胞活力。
图5实施例5肉眼观察证明多肽pL-Sjhp-24和pL-Sjmucin4-86可使非酒精性脂肪肝小鼠肝脏外观红润光滑。
图6实施例5使用油红O染色证明多肽pL-Sjhp-24和pL-Sjmucin4-86可使非酒精性脂肪肝小鼠肝脏脂质聚积显著减少。
图7实施例5使用苏木素伊红染色证明多肽pL-Sjhp-24和pL-Sjmucin4-86可使非酒精性脂肪肝小鼠肝脏坏死程度降低。
图8实施例5使用天狼星红染色证明多肽pL-Sjhp-24和pL-Sjmucin4-86可使非酒精性脂肪肝小鼠肝脏纤维化程度降低。
图9实施例5检测到多肽pL-Sjhp-24和pL-Sjmucin4-86治疗可使非酒精性脂肪肝小鼠肝脏促炎基因及纤维化相关基因表达降低，抑炎基因表达增高；其中，图9A为小鼠肝脏的IL-6表达量，图9B为小鼠肝脏的TNF-α表达量，图9C为小鼠肝脏的IL-10表达量，图9D为小鼠肝脏的α-SMA表达量。
图10实施例5使用血生化分析仪检测证明多肽pL-Sjhp-24和pL-Sjmucin4-86可改善非酒精性脂肪肝小鼠肝脏受损的脂质转运功能；其中，图10A为小鼠血清高密度脂蛋白含量，图10B为小鼠低密度脂蛋白含量。
具体实施方式
以下结合实施例来进一步解释本发明，但实施例并不对本发明做任何形式的限定。
应理解本发明中所述的术语仅仅是为描述特别的实施方式，并非用于限制本发明。另外，对于本发明中的数值范围，应理解为还具体公开了该范围的上限和下限之间的每个中间值。在任何陈述值或陈述范围内的中间值，以及任何其他陈述值或在所述范围内的中间值之间的每个较小的范围也包括在本发明内。这些较小范围的上限和下限可独立地包括或排除在范围内。
除非另有说明，否则本文使用的所有技术和科学术语具有本发明所述领域的常规技术人员通常理解的相同含义。虽然本发明仅描述了优选的方法和材料，但是在本发明的实施或测试中也可以使用与本文所述相似或等同的任何方法和材料。本说明书中提到的所有文献通过引用并入，用以公开和描述与所述文献相关的方法和/或材料。在与任何并入的文献冲突时，以本说明书的内容为准。
在不背离本发明的范围或精神的情况下，可对本发明说明书的具体实施方式做多种改进和变化，这对本领域技术人员而言是显而易见的。由本发明的说明书得到的其他实施方式对技术人员而言是显而易见得的。本发明说明书和实施例仅是示例性的。
关于本文中所使用的“包含”、“包括”、“具有”、“含有”等等，均为开放性的用语，即意指包含但不限于。
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的应用疗效进行清楚、完整地描述。
本发明中所述的日本血吸虫，其中文学名为日本裂体吸虫，拉丁学名为Schistosoma japonicum Katsurada，1904。
实施例1虫源性肽分子的获得
本发明前期已通过高效液相色谱分离法分离出日本血吸虫虫卵的多肽混合物，并进行质谱分析，从中选择了丰度较高的两个肽段进行研究，分别命名为pL-Sjhp-24和pL-Sjmucin4-86。
具体序列如下：
pL-Sjhp-24 Seq ID NO.1：LPTSDDEKIDLLKS；分子式C68H116O26N16，平均分子量1573.74g/mol，理论等电点pI3.96。
pL-Sjhp-24 Seq ID NO.2：ctaccgacatcggatgatgagaagattgacttgttgaagagtc。
pL-Sjmucin4-86 Seq ID NO.3：ISIPRQIDEDTNDD；分子式C66H107N19O29，平均分子量1630.65g/mol，理论等电点pI 3.36。
pL-Sjmucin4-86 Seq ID NO.4：atatcgattccaagacagatagatgaggatacaaacgatgac。
本发明提供了如上两条氨基酸序列，除特别说明外，本实施例及以下实施例中的肽链均委托生工生物工程(上海)股份有限公司通过化学合成获得，纯度＞95％。
本发明使用蛋白免疫印迹技术检测了pL-Sjhp-24和pL-Sjmucin4-86处理小鼠肝细胞系FL83B和人肝细胞系LO2后，AMPK信号通路中磷酸化AMPK(p-AMPK)、磷酸化ACC(p-ACC)的表达情况。
实验方法如下：
以10％FBS的DMEM普通培养基培养的未处理的小鼠肝细胞系FL83B或人肝细胞系LO2为正常对照组(Con)；
在10％FBS的DMEM培养基中添加200μM油酸，100μM棕榈酸，配制为高脂培养基，诱导肝细胞脂肪变模型,为OA+PA处理组；
在高脂培养基处理后以10μg/ml浓度的日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)刺激细胞，作为阳性对照组；
在高脂培养基处理后分别以10μg/ml浓度的pL-Sjhp-24、pL-Sjmucin4-86刺激细胞为pL-Sjhp-24组和pL-Sjmucin4-86组。
上述处理方法处理细胞后继续培养48h，收集细胞提取蛋白进行检测。
结果显示，高脂培养的OA+PA组的肝细胞p-AMPK、p-ACC表达量明显降低。
而pL-Sjhp-24、pL-Sjmucin4-86处理组均可促进肝细胞AMPK通路中p-AMPK、p-ACC的表达(图1A和1B)。
实施例2虫卵来源多肽体外调控肝细胞系脂代谢基因的表达
使用10μg/ml的pL-Sjhp-24、pL-Sjmucin4-86和SEA分别刺激以10％FBS的DMEM培养的小鼠肝细胞系FL83B和人肝细胞系LO2 48小时，QRT-PCR检测小鼠Prkab1和人Prkaa1的表达以及脂代谢基因ucp2、scd1的表达量变化。
QRT-PCR结果显示，经pL-Sjhp-24、pL-Sjmucin4-86刺激后，小鼠肝细胞系FL83B和人肝细胞系LO2上小鼠Prkab1和人Prkaa1表达量增高(图2A和2D)；脂肪酸氧化基因ucp2表达显著增多(图2B和2E)，而脂肪合成基因scd1表达降低(图2C和2F)，图2中所述Control为小鼠肝细胞系FL83B或人肝细胞系LO2。
实验表明，pL-Sjhp-24、pL-Sjmucin4-86可体外调控肝细胞系脂代谢基因的表达。
实施例3血吸虫来源肽对肝细胞系脂滴聚集的影响
以小鼠肝细胞系FL83B和人肝细胞系LO2为研究对象，以200μM油酸和100μM棕榈酸配制为高脂培养基，以及10μg/ml浓度血吸虫来源肽处理肝细胞系48小时，通过油红O染色检测，其可以通过与脂质结合呈现红色，进而评估其对高脂培养基引起的脂质堆积的影响。所述Control为未处理的小鼠肝细胞系FL83B或人肝细胞系LO2，OA+PA为培养基中添加油酸和棕榈酸处理。
处理方法同实施例1.
油红染色实验
①将新鲜组织转移至-80℃保存，包埋后进行冰冻切片；或细胞样本弃去细胞培养液，使用10％多聚甲醛固定10分钟。
②蒸馏水浸洗组织或者细胞三遍，再用60％异丙醇浸洗2分钟。
③油红O染色10分钟(置于37℃温箱)后，60％异丙醇脱色25秒，蒸馏水润洗一遍。
④苏木素复染7分钟；1％盐酸酒精分化1秒，使用返蓝液返蓝约2分钟；封片剂封片，盖上盖玻片。
油红染色实验证实pL-Sjhp-24、pL-Sjmucin4-86刺激组和SEA处理过的肝细胞系在脂滴沉积方面相一致，即多肽和SEA处理后产生的油滴数目均远远少于仅用高脂培养基培养的肝细胞系中的油滴数(图3)。其中，在小鼠肝细胞系FL83B上，pL-Sjmucin4-86效果更显著。在人肝细胞系LO2上，pL-Sjhp-24、pL-Sjmucin4-86降低脂滴聚积的作用均很强。油红染色实验证实多肽pL-Sjhp-24和pL-Sjmucin4-86可抑制肝细胞系上脂滴聚积。
实施例4血吸虫虫卵来源肽的安全性评价
在使用多肽治疗非酒精性脂肪肝炎小鼠之前，针对pL-Sjhp-24和pL-Sjmucin4-86，本发明设计了一段由相同数量氨基酸组成的无关肽(命名为Irrelevant peptide)。
无关肽的具体序列如下：
SEQ ID NO.5：DEPSTRDDIIIQDN；分子式C66H107N19O29，平均分子量1630.65g/mol，理论等电点pH 3.36。
本发明对pL-Sjhp-24、pL-Sjmucin4-86和无关肽进行了生物安全性检测，即红细胞溶血实验和利用CCK-8试剂盒检测虫卵来源肽刺激后的小鼠肝细胞系FL83B的活力。红细胞溶血实验(使用Triton-X100处理作为阳性组)和细胞活力检测实验中血吸虫虫卵来源肽的最小浓度为0.39μg/ml，最大浓度设置到100μg/ml，并在0.39-100μg/ml浓度范围内设置多个处理浓度。
溶血活性实验：
①制备无菌阿氏液，采集6周龄雄性C57BL/6小鼠血液与阿氏液1：1混合均匀，1000rpm离心5分钟，弃上清，将沉淀中的红细胞用灭菌生理盐水洗涤三次。将洗涤好的红细胞用生理盐水稀释成浓度为107-108的悬浮液。样品用生理盐水溶解到设置的各浓度，将上述稀释好的红细胞悬浮液与样品按1：1混合，37℃保温30分钟，结束后1000rpm离心5分钟，上清液于540nm测OD值。
②阴性对照为生理盐水，阳性对照使用1％TritonX-100，并在系统中设定阳性对照溶血活性为100％。
③计算：I％＝(AA-AB)/(AC-AB)*100。(I％：样品溶血活性，AA：样品组在540nm光吸收值，AB：阴性组540nm光吸收值，AC：阳性对照组540nm光吸收值)。
CCK8细胞活性检测实验：
①在96孔板中配制100μl的密度为1*104个/ml的细胞悬液，将培养板在37℃，5％CO2培养箱预培养24小时。
②按照设置的浓度梯度和时间，加药物进行处理。
③到达刺激时间后，向每孔加入10μl CCK8溶液；在培养箱内孵育1小时后，酶标仪测定450nm处吸光度。
④计算细胞活力。
溶血实验结果表明，pL-Sjhp-24、pL-Sjmucin4-86以及无关肽从0.39μg/ml至100μg/ml浓度区间内，其红细胞溶血率与阳性组(溶血率100％)均有显著性差异(图4A)。CCK8检测结果也显示，虫卵来源肽和无关肽刺激小鼠肝细胞系FL83B后，肝细胞活力均未发生显著性改变(图4B)。图4展示了红细胞溶血实验和CCK8检测显示血吸虫虫卵来源肽无论在高浓度100μg/ml还是低浓度0.39μg/ml下，与无关肽组相比，小鼠肝细胞系FL83B活力没有显著降低，说明本发明的血吸虫来源肽在0.39-100μg/ml浓度范围内无显著药物毒性。以上实验证明合成的三段多肽均无明显细胞毒性和溶血活性。
实施例5血吸虫虫卵来源肽可治疗小鼠非酒精性脂肪肝病
以雄性C57BL/6小鼠为研究对象，随机分为给予7周胆碱蛋氨酸缺乏饮食(MCD)构建的非酒精性脂肪肝小鼠模型组和给予7周正常饮食的对照组小鼠(ND)；其中，模型组小鼠和正常小鼠又各自分为5个小组，分别为溶剂PBS注射组(PBS)、无关肽注射组(Irrelevant)、pL-Sjhp-24注射组、pL-Sjmucin4-86注射组、利拉鲁肽注射组(Liraglutide，阳性对照组)，每组8只小鼠。于喂养第2周开始给予小鼠腹腔注射每组对应药物，注射剂量为0.8mg/kg/d，在造模第7周进行剖杀。肉眼观察新鲜肝脏外观，并且以苏木素伊红染色、油红O染色以及天狼星红染色观察肝脏脂滴聚积程度，评估血吸虫来源肽对非酒精性脂肪肝病的治疗作用。QRT-PCR检测小鼠肝脏中IL-6、TNF-α、IL-10及α-SMA表达情况。使用血生化仪检测小鼠血清中高密度脂蛋白以及低密度脂蛋白的含量。
油红O染色同上述实施例3。
苏木素伊红染色染色
①组织包埋为蜡块后，准备好包含组织的石蜡切片。
②使用二甲苯脱蜡两次，每次10分钟；使用100％、90％、80％、70％乙醇各5分钟，三蒸水冲洗三遍，每次5分钟。
③苏木素染色5分钟；5％乙酸分化1分钟，之后用流水冲洗；返蓝液进行返蓝。
④伊红染色1分钟，时刻观察染色情况；70％、80％、90％、100％乙醇各10s，再置于二甲苯中两次，每次5分钟，晾干后封片。
天狼星红染色
①组织进行石蜡切片；使用二甲苯脱蜡两次，每次10分钟。
②使用100％、90％、80％、70％乙醇各5分钟，三蒸水冲洗三遍，每次5分钟。
③天青石蓝染色5-10分钟；蒸馏水洗3次。
④天狼星红饱和苦味酸染液浓染15-30分钟；无水乙醇直接分化与脱水。
可以观察到，MCD诱导的脂肪肝小鼠经多肽治疗后可显著减轻小鼠肝脏的病变程度：观察新鲜小鼠肝脏外观，可见pL-Sjhp-24和pL-Sjmucin4-86治疗后的肝脏颜色更为红润，质感也更加光滑柔软，在外观上更为趋近普通饮食小鼠的肝脏(图5)。油红染色结果可见多肽干预组肝脏中脂滴大小以及数量明显更小、更少(图6)。而苏木素伊红染色结果可见多肽干预组小鼠肝脏组织空泡状结构减少，说明细胞内含有较少的脂滴(图7)。天狼星红染色也证明经多肽治疗后，小鼠肝脏纤维化程度均明显轻于无关肽组(图8)。多肽治疗组的小鼠肝脏中促炎基因TNF-α表达下降、抑炎基因IL-10表达量增加，同时纤维化相关基因α-SMA基因表达量也显著性下降(图9)，提示血吸虫虫卵来源肽pL-Sjhp-24、pL-Sjmucin4-86具有抑制非酒精性脂肪肝炎发展的作用。血生化检测分析出脂肪肝小鼠血清高密度脂蛋白在得到多肽治疗后一定程度的上升，即肝脏转运脂质的能力得到恢复，有助于发挥降低血脂的作用(图10)。
以上所述的实施例仅是对本发明的优选方式进行描述，并非对本发明的范围进行限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通技术人员对本发明的技术方案做出的各种变形和改进，均应落入本发明权利要求书确定的保护范围内。以上序列Seq IDNO.1-Seq IDNO.4的任意一种或多种的组合作为活性成分，通过添加其他药学上可接受的载体或赋形剂，可制备成不同剂型、载体的药物，还可以在其基础上拓展为保肝养肝的保健品。本领域技术人员在不脱离本发明保护范围的基础上，可进行必要的修饰，包括但不限于特定基团的保护/去保护，C端和/或N端和/或侧链的酰基化、烷基化、酰胺化、酯基化，以及其他特殊偶联或螯合修饰。优选在N端添加羧基，C端添加羟基或氨基进行修饰。
本发明制备的两种血吸虫来源肽可用于非酒精性脂肪肝等代谢性疾病的预防治疗药物、保健品或食品添加物中的应用，具有重要的临床价值或保健价值。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (3)

1.一种多肽，其特征在于，所述多肽为pL-Sjhp-24或pL-Sjmucin4-86；所述pL-Sjhp-24的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述pL-Sjmucin4-86的氨基酸序列如SEQ ID NO. 3所示。
2.权利要求1所述的多肽在制备治疗非酒精性脂肪肝病和/或抗肝纤维化药物中的应用。
3.权利要求1所述的多肽在制备具有辅助降低血脂功能的保健品或食品添加物中的应用。
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