CN116472959A - 一种燕窝果种苗培育方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种燕窝果种苗培育方法，所述培育方法包括1)筛选嫁接种苗；2)将所述嫁接种苗进行嫁接，获取嫁接苗；3)从所述嫁接苗上采取茎段，无菌处理后，获取无菌外植体；4)对所述无菌外植体茎段进行增殖培养，筛选长势优良的种苗；5)对筛选后的种苗进行壮苗和生根培养；6)炼苗移栽等步骤。本发明提出的培育方法，通过采用灰色关联分析法对不同种苗的优良性状的特征指标，包括单果平均重量值、单果平均圆度值、果实平均色度值、果肉中心甜度值和产量值进行量化分析，筛选具有最佳性状的嫁接种苗，从性状优良的嫁接苗上采取茎段作为外植体进行组培，获取性状优良的种苗，可以保持原品种的优良特性，避免出现性状分离的问题。
Description
技术领域
本发明涉及燕窝果种苗培育技术领域，特别涉及一种燕窝果种苗培育方法。
背景技术
燕窝果又名麒麟果，是一种黄皮白肉的燕窝果，属仙人掌科，为蛇鞭柱属和量天尺属自然杂交产生的四倍体植株，兼具两属的部分特征，大多数专家更倾向其为量天尺属，原产地为哥伦比亚与厄瓜多尔。燕窝果成熟时间较长，但其单果重量可达500g，种子大而少，果肉半透明、细腻，籽外包裹着一层胶质，口感细腻丝滑，果实甜度在17～22度，富含维C和膳食纤维及铁元素，少量植物性蛋白及花青素，可食部分占总量的70％左右。作为潜力巨大的新兴水果，燕窝果具有丰富的营养和极高的经济价值，单果售价可达一般红皮红肉燕窝果的数十倍，其引入我国栽培的时间尚短，仅在我国海南、广西、云南等地区少量种植，加快燕窝果的种植，将有效助力乡村振兴。目前有关燕窝果的研究报告尚少，种苗稀缺，本地果的产量和质量与进口果相比尚有较大差距，一定程度上阻碍了其推广。加快燕窝果良种繁育研究步伐，创新种苗繁育方法，是推动燕窝果产业高效发展的关键。
目前生产上常采用扦插和嫁接育苗，但燕窝果因生根慢且茎段容易腐烂的原因，不建议采用扦插繁殖，嫁接和组培是解决燕窝果种苗稀缺的理想途径，许多学者对燕窝果的嫁接繁殖方法进行了更新优化。戴俊以红皮白肉燕窝果、三角柱、仙人掌为砧木，三个不同品种的燕窝果为接穗，采用靠接、平接、楔接三种方法进行试验，结果表明最合适的嫁接方法为楔接法，嫁接成活率可达57％，最适合做砧木的材料为三角柱。李家强等人以燕窝果上比较饱满的刺座芽作为接穗，以抗逆性好且茎段粗壮的“莞华白”燕窝果作为砧木，采用芽接法，将接穗插入砧木缺口，成活率能保持在95％以上，且一条茎蔓可嫁接多个刺座芽。采用芽接法嫁接，可以短时间内利用珍贵有限的茎段扩繁大量嫁接苗，是比较适合燕窝果嫁接的方法。
近年来，组织培养技术在燕窝果繁殖方面也取得了许多研究成果，实现了许多品种组培体系的建立与优化。李羽佳等接种燕窝果的种子，采用无菌萌发的方式获得嫩芽，再以萌发芽为外植体进行增殖扩繁试验，获得了较健康的生根苗，且增殖系数达4.6，建立了比较高效的组培体系。程志号等以麒麟果实生苗萌发的茎段为外植体，研究了外植体不同的切割方法和接种方法对刺座芽萌发的影响，筛选了刺座芽诱导及生根培养基。
以上两份研究报道中获得的组培苗来源均是实生苗，可能存在性状分离的问题，为保持原品种的优良特性，可以从性状优良的嫁接苗上采取茎段为外植体进行组培，从而获取性状优良的种苗，但现有培育方法中，没有明确的燕窝果优良性状的评价标准，技术人员多是通过经验法判定优良性状的特征，缺乏准确性。为此，我们提出一种燕窝果种苗培育方法。
发明内容
本发明的主要目的在于提供一种燕窝果种苗培育方法，通过采用灰色关联分析法对不同种苗的优良性状的特征指标，包括单果平均重量值、单果平均圆度值、果实平均色度值、果肉中心甜度值和产量值进行量化分析，筛选具有最佳性状的嫁接种苗，并从性状优良的嫁接苗上采取茎段作为外植体进行组培，可以有效解决背景技术中的问题。
为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：
一种燕窝果种苗培育方法，其特征在于：所述培育方法包括以下步骤：
1)筛选嫁接种苗；
2)将所述嫁接种苗进行嫁接，获取嫁接苗；
3)从所述嫁接苗上采取茎段，无菌处理后，获取无菌外植体；
4)对所述无菌外植体茎段进行增殖培养，筛选长势优良的种苗；
5)对筛选后的种苗进行壮苗和生根培养；
6)炼苗移栽；
所述步骤1)的具体步骤为：
a.确定优良性状的特征指标，包括单果平均重量值、单果平均圆度值、果实平均色度值、果肉中心甜度值和产量值，通过专业人员对各项所述特征指标进行赋值，取赋值数据为理想特征指标数值；
b.选取不同种苗，分别测量并计算各所述种苗的所述特征指标数值，获取各所述种苗的所述特征指标数值数据；
c.计算各所述种苗的所述特征指标数值与所述理想特征指标数值的关联系数，计算公式如下：
其中，Δmin＝mini(mink(|Eik-Fj|))；Δmax＝maxi(maxk(|Eik-Fj|))；Eik，Fj分别为所述特征指标数值和所述理想特征指标数值的标准化无量纲数值；mini(mink(·))为先取各所述种苗的单项所述特征指标数值中最小值，再取所有所述种苗该项所述特征指标数值最小值中的最小值操作；maxi(maxk(·))先取各所述种苗的单项所述特征指标数值中最大值，再取所有所述种苗该项所述特征指标数值最大值中的最大值操作；n为数据量；λ为系数，取值范围区间为(0,1)，通常取λ为0.5；
d.计算各所述种苗的所述特征指标数值与所述理想特征指标数值的关联度，获取各所述种苗的所述特征指标数值与所述理想特征指标数值的关联度值，计算公式如下：
e.根据关联分析原则，选取所述特征指标数值与所述理想特征指标数值的关联度数值最大的所述种苗作为嫁接种苗。
进一步的，所述步骤2)的具体操作流程为：选择无病健壮的台湾富贵红450燕窝果老熟枝条作为砧木，以所述嫁接种苗的枝条为接穗，以平切取芽和芽接方法完成嫁接，培育至接口完全愈合，获得嫁接苗。
进一步的，所述步骤3)的具体操作流程为：从所述嫁接苗上采取长约4cm的茎段，用70％乙醇浸泡1min后再用0.1％的HgCL2消毒处理5min，随后用无菌水漂洗干净，晾干后获得外植体。
进一步的，所述步骤4)的具体步骤为：将所述外植体茎段切为2cm高的三棱柱状，接种至添加含有浓度为0.5mg/L的NAA和1.0mg/L的TDZ溶液的MS培养基中，待刺座芽长出1～2cm后，将刺座芽切下转接到相同培养基中进行增殖。
进一步的，所述步骤5)的具体步骤为：待增殖芽长至3～4cm后，将长势良好的增殖芽从基部切下，接种于添加0.1g/L碳粉、0.5mg/L IBA、0.2mg/L IAA、1.0mg/LNAA的1/2MS培养基，培养温度26±2℃，光照强度2 000lx，每天光照12h，连续培养30d后筛选出长势优良的种苗。
进一步的，所述步骤6)的具体步骤为：选取上述根长3.0cm以上，且苗高2～3cm的长势优良的种苗，从培养室移至温室大棚中放置5d，打开瓶盖再放置5d，洗净根部培养基，移栽至河沙∶园土∶珍珠岩体积比为1∶1∶1混均基质的穴盘中，基质内混合少量有机复合肥，栽培30d后筛选出长势优良的成苗。
进一步的，所述标准化无量纲数值通过采用均值法或初值法获得。
进一步的，筛选后的燕窝果种苗在种植前需要施足有机肥料，以提高土壤的肥力；在种苗生长期间，也需要进行施肥管理，选择适量的有机肥料和化肥进行施肥，可以促进种苗的生长；在种苗生长期间需要保持土壤湿润，但要避免浇水过多，以免引发根部病害。同时，还要注意避免在高温的时候浇水，以免影响果树的生长。燕窝果生长期间需要及时进行整形修剪，剪除过密的枝叶和病虫害的枝条，以保持树体的通风和透光性，同时也可以促进果树的生长。
进一步的，燕窝果种苗在移栽前，需要选择肥沃、透气性好的土壤作为种植基质，并对种植基质进行消毒处理。在移栽时，需要将种苗的根系与土壤充分接触，以便种苗吸收水分和养分。在移栽后，需要对种苗进行管理，包括浇水、施肥、除草、修剪等。在管理过程中，需要注意控制好水分和养分的使用量，避免对种苗造成伤害；同时，要及时除草，保持土壤的通透性，避免病虫害的滋生。
进一步的，燕窝果种苗在生长期间容易遭受病虫害的侵袭，可以使用生物防治或者化学防治的方法及时进行防治。种苗在生长过程中需要补充各种营养素，以促进植株的生长和发育，可以在种苗生长期间适量补充微量元素，如铁、锌、铜等，以提高种苗的抗性和适应性。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：本发明提出的培育方法，通过采用灰色关联分析法对不同种苗的优良性状的特征指标，包括单果平均重量值、单果平均圆度值、果实平均色度值、果肉中心甜度值和产量值进行量化分析，筛选具有最佳性状的嫁接种苗，并从性状优良的嫁接苗上采取茎段作为外植体进行组培，从而获取性状优良的种苗，可以保持原品种的优良特性，避免出现性状分离的问题。
附图说明
图1为本发明一种燕窝果种苗培育方法的整体技术路线图；
图2为本发明一种燕窝果种苗培育方法的嫁接种苗的选取步骤技术路线结构示意图。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明作进一步的说明，其中，附图仅用于示例性说明，表示的仅是示意图，而非实物图，不能理解为对本发明的限制，为了更好地说明本发明的具体实施方式，附图某些部件会有省略、放大或缩小，并不代表实际产品的尺寸。
实施例1
如图1-2所示，一种燕窝果种苗培育方法，培育方法包括以下步骤：
1)筛选嫁接种苗
具体步骤为：
a.确定优良性状的特征指标，包括单果平均重量值、单果平均圆度值、果实平均色度值、果肉中心甜度值和产量值，通过专业人员对各项特征指标进行赋值，取赋值数据为理想特征指标数值；
b.选取不同种苗，分别测量并计算各种苗的特征指标数值，获取各种苗的特征指标数值数据；
c.计算各种苗的特征指标数值与理想特征指标数值的关联系数，计算公式如下：
其中，Δmin＝mini(mink(|Eik-Fj|))；Δmax＝maxi(maxk(|Eik-Fj|))；Eik，Fj分别为通过采用均值法或初值法获得的特征指标数值和理想特征指标数值的标准化无量纲数值；mini(mink(·))为先取各种苗的单项特征指标数值中最小值，再取所有种苗该项特征指标数值最小值中的最小值操作；maxi(maxk(·))先取各种苗的单项特征指标数值中最大值，再取所有种苗该项特征指标数值最大值中的最大值操作；n为数据量；λ为系数，取值范围区间为(0,1)，通常取λ为0.5；
d.计算各种苗的特征指标数值与理想特征指标数值的关联度，获取各种苗的特征指标数值与理想特征指标数值的关联度值，计算公式如下：
e.根据关联分析原则，选取特征指标数值与理想特征指标数值的关联度数值最大的种苗作为嫁接种苗。
2)将嫁接种苗进行嫁接，获取嫁接苗
具体操作流程为：选择无病健壮的台湾富贵红450燕窝果老熟枝条作为砧木，以嫁接种苗的枝条为接穗，以平切取芽和芽接方法完成嫁接，培育至接口完全愈合，获得嫁接苗，具体流程为：用火龙果专用剪芽剪刀剪去砧木的所有芽，并在砧木顶端平切入枝条叶肉组织3/4深度，宽度7.5cm，然后在切口末端垂直切一刀，去掉叶肉组织，露出一段长7.5cm的平整台阶状嫁接口，选取健壮、芽眼饱满的嫁接种苗老熟枝条作为接穗，用火龙果专用嫁接刀，选择两个芽的位置，平切入叶肉组织3/4深度，宽度7.5cm，然后两端垂直各切一刀，取出7.5cm长的双芽接穗，将双芽接穗对准砧木的台阶式嫁接口，轻轻按压至完全吻合，用透明胶布捆扎粘牢，即得到燕窝果嫁接苗，嫁接苗育苗过程中，使用1.8％复硝酚钠兑水稀释5000倍，浸泡嫁接苗基部3min后充分晾干，由于燕窝果系浅根系作物，嫁接苗基部插入土中的深度不可太深，否则根部容易腐烂，嫁接苗基部插入土中5cm即可，可在地面覆盖树叶、树皮或者干稻草等覆盖物，一方面可以保水、保湿和保肥，另一方面还可以预防杂草生长，嫁接苗所在的地面铺设厚度在5cm的商品化桉树皮覆盖半基质，嫁接苗生根后每隔15d左右，轮流浇灌氮磷钾比例22：8：10的高氮肥促进新芽萌发，浇灌氮磷钾比例为18：18：18的平衡肥促进新芽生长，浇灌氮磷钾比例为15-5-30的高钾肥促进新芽老熟。经过以上处理，大概45～60d，燕窝果接穗的芽萌发和生长，即表示嫁接成功。
3)从嫁接苗上采取茎段，无菌处理后，获取无菌外植体
具体操作流程为：从嫁接苗上采取长约4cm的茎段，用70％乙醇浸泡1min后再用0.1％的HgCL2消毒处理5min，随后用无菌水漂洗干净，晾干后获得外植体。
4)对无菌外植体茎段进行增殖培养，筛选长势优良的种苗
具体步骤为：将外植体茎段切为2cm高的三棱柱状，接种至添加含有浓度为0.5mg/L的NAA和1.0mg/L的TDZ溶液的MS培养基中，待刺座芽长出1～2cm后，将刺座芽切下转接到相同培养基中进行增殖。
5)对筛选后的种苗进行壮苗和生根培养
具体步骤为：待增殖芽长至3～4cm后，将长势良好的增殖芽从基部切下，接种于添加0.1g/L碳粉、0.5mg/L IBA、0.2mg/L IAA、1.0mg/LNAA的1/2MS培养基，培养温度26±2℃，光照强度2 000lx，每天光照12h，连续培养30d后筛选出长势优良的种苗。
6)炼苗移栽
具体步骤为：选取上述根长3.0cm以上，且苗高2～3cm的长势优良的种苗，从培养室移至温室大棚中放置5d，打开瓶盖再放置5d，洗净根部培养基，移栽至河沙∶园土∶珍珠岩体积比为1∶1∶1混均基质的穴盘中，基质内混合少量有机复合肥，栽培30d后筛选出长势优良的成苗。
通过上述方案，采用灰色关联分析法对不同种苗的优良性状的特征指标，包括单果平均重量值、单果平均圆度值、果实平均色度值、果肉中心甜度值和产量值进行量化分析，筛选具有最佳性状的嫁接种苗，并从性状优良的嫁接苗上采取茎段作为外植体进行组培，从而获取性状优良的种苗，可以保持原品种的优良特性，避免出现性状分离的问题。
以上显示和描述了本发明的基本原理和主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。
Claims (7)
1.一种燕窝果种苗培育方法，其特征在于：所述培育方法包括以下步骤：
1)筛选嫁接种苗；
2)将所述嫁接种苗进行嫁接，获取嫁接苗；
3)从所述嫁接苗上采取茎段，无菌处理后，获取无菌外植体；
4)对所述无菌外植体茎段进行增殖培养，筛选长势优良的种苗；
5)对筛选后的种苗进行壮苗和生根培养；
6)炼苗移栽；
所述步骤1)的具体步骤为：
a.确定优良性状的特征指标，包括单果平均重量值、单果平均圆度值、果实平均色度值、果肉中心甜度值和产量值，通过专业人员对各项所述特征指标进行赋值，取赋值数据为理想特征指标数值；
b.选取不同种苗，分别测量并计算各所述种苗的所述特征指标数值，获取各所述种苗的所述特征指标数值数据；
c.计算各所述种苗的所述特征指标数值与所述理想特征指标数值的关联系数，计算公式如下：
其中，Δmin＝mini(mink(|Eik-Fj|))；Δmax＝maxi(maxk(|Eik-Fj|))；Eik，Fj分别为所述特征指标数值和所述理想特征指标数值的标准化无量纲数值；mini(mink(·))为先取各所述种苗的单项所述特征指标数值中最小值，再取所有所述种苗该项所述特征指标数值最小值中的最小值操作；maxi(maxk(·))先取各所述种苗的单项所述特征指标数值中最大值，再取所有所述种苗该项所述特征指标数值最大值中的最大值操作；n为数据量；λ为系数，取值范围区间为(0,1)，通常取λ为0.5；
d.计算各所述种苗的所述特征指标数值与所述理想特征指标数值的关联度，获取各所述种苗的所述特征指标数值与所述理想特征指标数值的关联度值，计算公式如下：
e.根据关联分析原则，选取所述特征指标数值与所述理想特征指标数值的关联度数值最大的所述种苗作为嫁接种苗。
2.根据权利要求1所述的一种燕窝果种苗培育方法，其特征在于：所述步骤2)的具体操作流程为：选择无病健壮的台湾富贵红450燕窝果老熟枝条作为砧木，以所述嫁接种苗的枝条为接穗，以平切取芽和芽接方法完成嫁接，培育至接口完全愈合，获得嫁接苗。
3.根据权利要求1所述的一种燕窝果种苗培育方法，其特征在于：所述步骤3)的具体操作流程为：从所述嫁接苗上采取长约4cm的茎段，用70％乙醇浸泡1min后再用0.1％的HgCL2消毒处理5min，随后用无菌水漂洗干净，晾干后获得外植体。
4.根据权利要求1所述的一种燕窝果种苗培育方法，其特征在于：所述步骤4)的具体步骤为：将所述外植体茎段切为2cm高的三棱柱状，接种至添加含有浓度为0.5mg/L的NAA和1.0mg/L的TDZ溶液的MS培养基中，待刺座芽长出1～2cm后，将刺座芽切下转接到相同培养基中进行增殖。
5.根据权利要求1所述的一种燕窝果种苗培育方法，其特征在于：所述步骤5)的具体步骤为：待增殖芽长至3～4cm后，将长势良好的增殖芽从基部切下，接种于添加0.1g/L碳粉、0.5mg/L IBA、0.2mg/L IAA、1.0mg/LNAA的1/2MS培养基，培养温度26±2℃，光照强度2000lx，每天光照12h，连续培养30d后筛选出长势优良的种苗。
6.根据权利要求1所述的一种燕窝果种苗培育方法，其特征在于：所述步骤6)的具体步骤为：选取上述根长3.0cm以上，且苗高2～3cm的长势优良的种苗，从培养室移至温室大棚中放置5d，打开瓶盖再放置5d，洗净根部培养基，移栽至河沙∶园土∶珍珠岩体积比为1∶1∶1混均基质的穴盘中，基质内混合少量有机复合肥，栽培30d后筛选出长势优良的成苗。
7.根据权利要求1所述的一种燕窝果种苗培育方法，其特征在于：所述标准化无量纲数值通过采用均值法或初值法获得。
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