CN116381214A - 一种光激化学发光检测试剂盒及其使用方法和应用 - Google Patents

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CN116381214A CN202211724049.2A CN202211724049A CN116381214A CN 116381214 A CN116381214 A CN 116381214A CN 202211724049 A CN202211724049 A CN 202211724049A CN 116381214 A CN116381214 A CN 116381214A
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Abstract

本发明涉及一种光激化学发光检测试剂盒及其使用方法和应用。所述光激化学发光检测试剂盒包括与PEG偶联的抗体；所述PEG选自PEG4～PEG24中的至少一种；优选地，所述PEG选自PEG10～PEG20中的至少一种。将所述光激化学发光检测试剂盒应用在光激化学发光平台上检测待测抗原时，在平台上的检测本底更低，比传统检测试剂区分度更高，检测灵敏度更高，试剂性能更加优越，在光激化学平台上的应用效果良好，前景较好。

Description

一种光激化学发光检测试剂盒及其使用方法和应用
本发明要求申请号CN 202111671497.6，申请日2021年12月31日，申请名称为“一种PEG修饰的抗体及其制备方法和应用”专利的优先权。
技术领域
本发明属于光激化学发光免疫检测技术领域，具体涉及一种光激化学发光检测试剂盒及其使用方法和应用。
背景技术
光激化学发光法是化学发光分析技术的常用方法之一，可用于研究生物分子间的相互作用。该技术整合了高分子微粒技术、有机合成、蛋白质化学及临床检测等相关领域的研究。它通过生物素和链霉亲和素的作用，使感光微粒和发光微粒在一定范围内结合，产生离子氧能量的传递，发出光信号，从而对待测样本进行检测。与传统的酶联免疫分析方法相比，它具有均相、灵敏度高和操作简便易于自动化等特点。因此，其应用前景十分广阔。
现有技术中，运用光激化学发光法检测某些项目(例如，传染病HBsAg项目)时，存在本底较高，灵敏度较低等缺陷。
因此，如何提高利用光激化学发光法检测某些项目的灵敏度以及降低本底信号，是亟待解决的问题。
发明内容
本发明针对现有技术中利用光激化学发光平台上检测有些项目时存在本底较高、灵敏度较低的问题，提供了一种光激化学发光检测试剂盒，该试剂盒中引入了PEG偶联的抗体，其能够降低非特异性吸附，并且具有优异的生物相容性等特点。将所述光激化学发光检测试剂盒应用在光激化学发光平台上时，能够显著的降低检测本底，提升检测灵敏度。
为此，本发明第一方面提供了一种光激化学发光检测试剂盒，其包括与PEG偶联的抗体；所述PEG选自PEG4～PEG24中的至少一种；优选地，所述PEG选自PEG10～PEG20中的至少一种。
在本发明的一些实施方式中，所述PEG选自PEG12。
在本发明的一些实施方式中，所述抗体与特异性结合配对成员中的一员结合；优选地，所述抗体经由PEG与特异性结合配对成员中的一员结合。
在本发明的一些实施方式中，所述抗体与PEG连接的特异性结合配对成员中的一员的摩尔比为1:(15～25)，优选为1:(18～22)。
在本发明的一些实施方式中，所述特异性配对结合成员选自抗体、抗体片段、配体、寡核苷酸、寡核苷酸结合蛋白、凝集素、半抗原、抗原、免疫球蛋白结合蛋白、抗生物素蛋白、亲和素或生物素组成的一对物质；优选地，所述特异性配对成员为生物素-亲和素；进一步优选地，所述特异性配对结合成员中的一员为生物素。
在本发明的一些实施方式中，所述PEG连接的特异性结合配对成员中的一员的试剂为生物素-PEG-NHS；优选为生物素-PEG12-NHS。
在本发明的一些实施方式中，所述抗体选自单克隆抗体、多克隆抗体、人工抗体或修饰的抗体；优选选自多克隆抗体和/或单克隆抗体；进一步优选为单克隆抗体。
在本发明的一些实施方式中，所述试剂盒还包括以下组分：
受体，其与能够与待测抗原特异性结合的另一抗体偶联，且能够与活性氧反应产生可检测的化学发光信号；和/或，
供体，其与特异性结合配对成员中的另一员结合，且能够在激发状态产生活性氧。
在本发明的另一些实施方式中，所述受体为通过功能基团填充于基质中形成填充有发光组合物的高分子微粒；和/或，
所述供体为通过功能基团被包被在基体上形成填充有感光化合物的高分子微粒。
在本发明的一些实施方式中，所述特异性结合配对成员中的另一员为亲和素。
在本发明的一些实施方式中，所述发光组合物包含有能够与活性氧发生反应的化学发光化合物。
在本发明的一些实施方式中，所述试剂盒具体包括：
组分a1，其包含与另一抗体结合的受体，所述另一抗体能够与待测抗原特异性结合；所述受体能够与活性氧反应产生可检测的化学发光信号；
组分b1，其包含与PEG连接的生物素偶联的抗体，所述抗体能够与待测抗原特异性结合；
组分c1，其包含与亲和素结合的供体；所述供体能够在激发状态产生活性氧。
本发明第二方面提供了一种制备如本发明第一方面所述的光激化学发光检测试剂盒的方法，其包括如下步骤：将待修饰的抗体与PEG连接的特异性结合配对成员中的一员混合后进行反应，获得与PEG偶联的抗体。
在本发明的一些实施方式中，所述待修饰的抗体与PEG连接的特异性结合配对成员中的一员的摩尔比为1:(15～25)，优选为1:(18～22)。
在本发明的一些实施方式中，所述PEG连接的特异性结合配对成员中的一员的试剂为生物素-PEG-NHS；优选为生物素-PEG12-NHS。
在本发明的一些实施方式中，所述方法具体包括如下步骤：将待修饰的抗体与生物素-PEG12-NHS按比例混合，于0～10℃，10～50rpm转速下反应8～16h。
本发明第三方面提供了一种如本发明第一方面所述的试剂盒或者第二方面所述的方法制备的试剂盒的使用方法，其包括如下步骤：
S1，将待测样本与包含与另一抗体结合的受体的试剂a、包含与PEG连接的生物素偶联的抗体的试剂b混合，获得混合液1；
S2，将混合液1与包含与亲和素结合的供体的试剂c混合，获得混合液2；
S3，利用能量或活性化合物处理混合液2，激发供体产生活性氧，受体与活性氧反应生成可检测的化学发光信号；
S4，分析所述化学发光信号情况，确定待测样本中是否存在待测抗原。
在本发明的一些实施方式中，所述待测抗原为亲水性抗原。
在本发明的一些实施方式中，步骤S3中，以600～700nm的红色激发光照射混合液2激发其发生化学发光。
在本发明的一些实施方式中，步骤S4中，记录所述发光信号值的检测波长为520～620nm。
在本发明的一些实施方式中，试剂混合后均可以根据需要进行温育。具体地，所述温育的温度可以是35～40℃，时间可以是10～20min。
在本发明的一些实施方式中，所述活性氧为单线态氧。
本发明第四方面提供了一种如本发明第一方面所述的试剂盒或者第二方面所述的方法制备的试剂盒或者第三方面所述的使用方法在光激化学发光检测待测抗原中的应用。
本发明的有益效果为：本发明提供了一种光激化学发光检测试剂盒，其在抗体的标记端引入了能够降低非特异性吸附，并且具有优异的生物相容性等特点的PEG链段。将所述光激化学发光检测试剂盒应用在光激化学发光平台上检测待测抗原时，在平台上的检测本底更低，比传统检测试剂区分度更高，检测灵敏度更高，试剂性能更加优越，在光激化学平台上的应用效果良好，前景较好。
具体实施方式
为使本发明容易理解，下面将详细说明本发明。但在详细描述本发明前，应当理解本发明不限于描述的具体实施方式。还应当理解，本文中使用的术语仅为了描述具体实施方式，而并不表示限制性的。
在提供了数值范围的情况下，应当理解所述范围的上限和下限和所述规定范围中的任何其他规定或居间数值之间的每个居间数值均涵盖在本发明内。这些较小范围的上限和下限可以独立包括在较小的范围中，并且也涵盖在本发明内，服从规定范围中任何明确排除的限度。在规定的范围包含一个或两个限度的情况下，排除那些包括的限度之任一或两者的范围也包含在本发明中。
除非另有定义，本文中使用的所有术语与本发明所属领域的普通技术人员的通常理解具有相同的意义。虽然与本文中描述的方法和材料类似或等同的任何方法和材料也可以在本发明的实施或测试中使用，但是现在描述了优选的方法和材料。
本发明第一方面所涉及的光激化学发光检测试剂盒，其包括与PEG偶联的抗体,所述PEG选自PEG4～PEG24中的至少一种。
在本发明的一些实施方式中，所述PEG选自PEG10～PEG20中的至少一种；优选为PEG12。
在本发明的另一些实施方式中，所述抗体与特异性结合配对成员中的一员结合；优选地，所述抗体经由PEG与特异性结合配对成员中的一员结合。
在本发明的另一些实施方式中，所述抗体与PEG连接的特异性结合配对成员中的一员的摩尔比为1:(15～25)，优选为1:(18～22)。
在本发明的一些具体实施方式中，所述抗体与PEG连接的特异性结合配对成员中的一员的摩尔比可以为1:15、1:16、1:17、1:18、1:19、1:20、1:21、1:22、1:23、1:24或1:25等。在本发明的一些优选的实施方式中，所述抗体与PEG连接的特异性结合配对成员中的一员的摩尔比为1:(18～22)。在本发明的一些更优选的实施方式中，所述抗体与PEG连接的特异性结合配对成员中的一员的摩尔比为1:20。
在本发明的另一些实施方式中，所述特异性配对结合成员选自抗体、抗体片段、配体、寡核苷酸、寡核苷酸结合蛋白、凝集素、半抗原、抗原、免疫球蛋白结合蛋白、抗生物素蛋白、亲和素或生物素组成的一对物质；优选地，所述特异性配对成员为生物素-亲和素；进一步优选地，所述特异性配对结合成员中的一员为生物素。
本发明，术语“特异性配对结合成员”是指能够相互特异性结合的一对物质。在本发明的一些实施方式中，所述特异性配对结合成员选自抗体、抗体片段、配体、寡核苷酸、寡核苷酸结合蛋白、凝集素、半抗原、抗原、免疫球蛋白结合蛋白、抗生物素蛋白、亲和素或生物素组成的一对物质；优选地，所述特异性配对成员为生物素-亲和素；进一步优选地，所述特异性配对结合成员中的一员为生物素。
本发明中，“生物素”(Biotin)，广泛存在于动植物组织中，其分子上有两个环状结构，分别为咪唑酮环和噻吩环，其中咪唑酮环是与链霉亲和素结合的主要部位。活化的生物素可以在蛋白质交联剂的介导下，与已知的几乎所有生物大分子偶联，包括蛋白质、核酸、多糖和脂类等。“亲和素”分子由4条相同的肽链组成，其中每条肽链都能结合一个生物素。因此每个抗原或抗体可同时偶联多个生物素分子，从而产生“触手效应”提高分析灵敏度。
在本发明的一些实施方式中，所述PEG连接的特异性结合配对成员中的一员的试剂为生物素-PEG-NHS；优选为生物素-PEG12-NHS。
本发明中，术语“PEG”为聚乙二醇(Polyethylene glycol)，化学式是HO(CH2CH2O)nH，无刺激性，味微苦，具有良好的水溶性，并与许多有机物组份有良好的相溶性。
在本发明的另一些实施方式中，所述抗体选自单克隆抗体、多克隆抗体、人工抗体或修饰的抗体；优选选自多克隆抗体和/或单克隆抗体；进一步优选为单克隆抗体。
本发明中，术语“抗体”以最广含义使用，包括任何同种型的抗体，保留对抗原的特异性结合的抗体片段，包括但不限于Fab、Fv、scFv、和Fd片段、嵌合抗体、人源化抗体、单链抗体、双特异性抗体、和包含抗体的抗原结合部分和非抗体蛋白的融合蛋白。在任何需要的情况下，抗体可以进一步与其它部分，诸如特异性结合配对成员，例如生物素或亲和素(生物素-亲和素特异性结合配对成员中的一员)等缀合。
在本发明的一些最优选的实施方式中，所述与PEG偶联的抗体为Biotin-PEG12-Ab。
在本发明的一些实施方式中，所述试剂盒还包括以下组分：
受体，其与能够与待测抗原特异性结合的另一抗体偶联，且能够与活性氧反应产生可检测的化学发光信号；和/或，
供体，其与特异性结合配对成员中的另一员结合，且能够在激发状态产生活性氧。
在本发明的另一些实施方式中，所述受体为通过功能基团填充于基质中形成填充有发光组合物的高分子微粒；和/或，
所述供体为通过功能基团被包被在基体上形成填充有感光化合物的高分子微粒。
本发明中，术语“受体”是指能够与活性氧(如，单线态氧)反应可以产生可检测信号的化合物。供体被能量或者活性化合物诱导激活并释放高能态的单线态氧，该高能态的单线态氧被近距离的受体俘获，从而传递能量以激活所述受体。在本发明的一些实施方式中，所述受体为受体微球，其通过功能基团填充于基质中形成填充有发光组合物的高分子微粒，所述发光组合物包含有能够与活性氧发生反应的化学发光化合物。所述受体微球又称之为受氧微球或者发光微球。
本发明中，术语“供体”是指通过能量或者活性化合物的激活后能够产生与受体反应的诸如单线态氧的活性中间体的敏化剂。供体可以是光活化的(如染料和芳香化合物)或者化学活化的(如酶、金属盐等)。在本发明的一些实施方式中，所述供体为供体微球，其通过功能基团被包被在基体上形成填充有感光化合物的高分子微粒，在光激发下能够产生单线态氧，此时感光微球也可以称为供氧微球或感光微球。所述供体微球表面可以有亲水性的醛基葡聚糖，内部填充有光敏剂。
在本发明的一些实施方式中，所述特异性结合配对成员中的另一员为亲和素。
在本发明的一些实施方式中，所述发光组合物包含有能够与活性氧发生反应的化学发光化合物。
在本发明的一些实施方式中，所述试剂盒具体包括：
组分a1，其包含与另一抗体结合的受体，所述另一抗体能够与待测抗原特异性结合；所述受体能够与活性氧反应产生可检测的化学发光信号；
组分b1，其包含与PEG连接的生物素偶联的抗体，所述抗体能够与待测抗原特异性结合；
组分c1，其包含与亲和素结合的供体；所述供体能够在激发状态产生活性氧。
本发明第二方面涉及一种制备如本发明第一方面所述的光激化学发光检测试剂盒的方法，其包括如下步骤：将待修饰的抗体与PEG连接的特异性结合配对成员中的一员混合后进行反应，获得与PEG偶联的抗体。
在本发明的一些实施方式中，所述待修饰的抗体与PEG连接的特异性结合配对成员中的一员的摩尔比为1:(15～25)。在本发明的一些具体实施方式中，所述待修饰的抗体与PEG连接的特异性结合配对成员中的一员的摩尔比可以为1:15、1:16、1:17、1:18、1:19、1:20、1:21、1:22、1:23、1:24或1:25等。在本发明的一些优选的实施方式中，所述待修饰的抗体与PEG连接的特异性结合配对成员中的一员的摩尔比为1:(18～22)。在本发明的一些更优选的实施方式中，所述待修饰的抗体与PEG连接的特异性结合配对成员中的一员的摩尔比为1:20。
在本发明的另一些实施方式中，所述PEG连接的特异性结合配对成员中的一员的试剂为生物素-PEG-NHS；优选为生物素-PEG12-NHS。
在本发明的一些实施方式中，所述反应的条件为：温度为0～10℃，时间为8～16小时，转速为10～50rpm。在本发明的一些优选的实施方式中，所述反应的条件为：温度为4℃，时间为过夜，转速为15rpm。
在本发明的另一些实施方式中，所述方法具体包括如下步骤：将待修饰的抗体与生物素-PEG12-NHS按比例混合，于0～10℃，10～50rpm转速下反应8～16h。
在本发明的一些具体实施方式中，所述光激化学发光检测试剂盒的制备方法具体包括如下步骤：
(1)将待修饰的的抗体使用0.1M NaHCO3(pH 8.5)的缓冲液透析两次，每次3h，获得透析后的抗体；
(2)取0.2mg透析后的抗体，加入0.1M NaHCO3(pH 8.5)的缓冲液，再加入Biotin-PEG12-NHS，反应浓度1mg/ml，4℃，15rpm，标记过夜，获得标记后的抗体(即，Biotin-PEG12-Ab)；
(3)将标记后的抗体透析至生物素标记透析缓冲液中，换液两次，取出，BCA法测浓度。
本发明第三方面提供了一种如本发明第一方面所述的试剂盒或者第二方面所述的方法制备的试剂盒的使用方法，其包括如下步骤：
S1，将待测样本与包含与另一抗体结合的受体的试剂a、包含与PEG连接的生物素偶联的抗体的试剂b混合，获得混合液1；
S2，将混合液1与包含与亲和素结合的供体的试剂c混合，获得混合液2；
S3，利用能量或活性化合物处理混合液2，激发供体产生活性氧，受体与活性氧反应生成可检测的化学发光信号；
S4，分析所述化学发光信号情况，确定待测样本中是否存在待测抗原。
在本发明的一些实施方式中，所述待测抗原为亲水性抗原。
本发明中，术语“抗原”(Ag)是指能够刺激机体产生免疫应答，并能与免疫应答产物抗体和致敏淋巴细胞在体内外结合，发生免疫效应的物质。抗原物质具备两个重要特性：免疫原性(immunogenicity)和免疫反应性(immunoreactivity)。免疫原性即指抗原诱导机体发生特异性免疫应答，产生抗体和/或致敏淋巴细胞的能力；免疫反应性是指能与相应的免疫效应物质(抗体或致敏淋巴细胞)在体内外发生特异性结合反应的能力。
由于PEG为亲水性物质，使用PEG修饰抗体后，抗体的构想可能改变，亲水性更强。因此若待测抗原为疏水性抗原，PEG修饰后的抗体与其具有排斥作用，不利于检测；若待测抗原为亲水性抗原，PEG修饰后的抗体与其吸附作用加强，更有利于检测。因此在本发明的一些实施方式中，所述待测抗原为亲水性抗原。
本发明中，术语“亲水性”指带有极性基团的分子，对水有较大的亲和能力，可以吸引水分子，或易溶解于水。术语“疏水性”又称为赠水性，是指非极性分子对水为亲和力的特性。
本发明中，术语“特异性结合”，是指两种物质之间的相互辨别和选择性结合反应，从立体结构角度上说就是相应的反应物之间构象的对应性。
在本发明的一些实施方式中，步骤S3中，以600～700nm的红色激发光照射混合液2激发其发生化学发光。
在本发明的一些实施方式中，步骤S4中，记录所述发光信号值的检测波长为520～620nm。
在本发明的一些实施方式中，试剂混合后均可以根据需要进行温育。具体地，所述温育的温度可以是35～40℃，时间可以是10～20min。
在本发明的一些实施方式中，所述活性氧为单线态氧。
本发明中，术语“活性氧”是指机体内或者自然环境中由氧组成，含氧并且性质活泼的物质的总称，主要为一种激发态的氧分子，包括氧的一电子还原产物超氧阴离子(O2·-)、二电子还原产物过氧化氢(H2O2)、三电子还原产物羟基自由基(·OH)以及一氧化氮和单线态氧(1O2)等。
本发明第四方面涉及一种如本发明第一方面所述的试剂盒或者第二方面所述的方法制备的试剂盒或者第三方面所述的使用方法在光激化学发光检测待测抗原中的应用。
实施例
为使本发明更加容易理解，下面将结合实施例来进一步详细说明本发明，这些实施例仅起说明性作用，并不局限于本发明的应用范围。本发明中所使用的原料或组分若无特殊说明均可以通过商业途径或常规方法制得。
下述实施例中采用的实验原料及设备如下：
实验原料：Biotin-PEG12-NHS、Biotin-LCLC-NHS、04sAb、0.1M NaHCO3、DC-FG-263sAb、发光试剂缓冲液、生物素试剂缓冲液等。
设备：4℃冰箱、旋转混匀仪
实施例1：Biotin-PEG12-04sAb的制备
(1)将待标记的04sAb使用0.1M NaHCO3(pH 8.5)的缓冲液透析两次，每次3h，获得透析后的04sAb；
(2)取0.2mg透析后的04sAb，加入0.1M NaHCO3(pH 8.5)的缓冲液，再加入Biotin-PEG12-NHS，反应浓度1mg/ml，4℃，15rpm，标记过夜，获得标记后的抗体(即，Biotin-PEG12-04sAb)；其中04sAb与加入的Biotin-PEG12-NHS的摩尔比为1:20；
(3)将标记后的抗体透析至生物素标记透析缓冲液中，换液两次，取出，BCA法测浓度。
对比例1：Biotin-LCLC-04sAb的制备
(1)将待标记的04sAb使用0.1M NaHCO3(pH 8.5)的缓冲液透析两次，每次3h，获得透析后的04sAb；
(2)取0.2mg透析后的04sAb，加入0.1M NaHCO3(pH 8.5)的缓冲液，再加入Biotin-LCLC-NHS，反应浓度1mg/ml，4℃，15rpm，标记过夜，获得标记后的抗体(即，Biotin-LCLC-04s Ab)；其中04sAb与加入的Biotin-LCLC-NHS的摩尔比为1:20；
(3)将标记后的抗体透析至生物素标记透析缓冲液中，换液两次，取出，BCA法测浓度。
实施例2
将实施例1和对比例1制备的抗体应用在HBsAg项目的校准品Cal1-Cal6的检测中。
本实施例提供的包括实施例1制备的抗体的试剂盒包括：
试剂1：与263sAb抗体结合的受体；
试剂2：与PEG连接的生物素偶联的04sAb抗体。
本实施例提供的包括对比例1制备的抗体的试剂盒包括：
试剂1：与263sAb抗体结合的受体；
试剂2：与生物素偶联的04sAb抗体。
试剂盒具体采用的试剂成分和反应模式见表1，检测结果见表2。
表1
Figure BDA0004029016280000111
表2
Figure BDA0004029016280000112
Figure BDA0004029016280000121
从表2可知，对照组为Biotin-LCLC-NHS标记的04sAb抗体，即Biotin-LCLC-04sAb(下同)，而实验组为Biotin-PEG12-04sAb(1:20)。根据表2分析可得，使用Biotin-PEG12-04sAb(1:20)后，校准品Cal2/Cal1的区分度由1.9提升到3.2，涨幅达到68.4％，效果显著；阴性本底由332降低到233，降幅达到42.5％，效果明显。因此光激化学发光检测试剂盒在光激化学平台上的应用效果良好，能够显著的降低检测本底，提升检测灵敏度。
应当注意的是，以上所述的实施例仅用于解释本发明，并不构成对本发明的任何限制。通过参照典型实施例对本发明进行了描述，但应当理解为其中所用的词语为描述性和解释性词汇，而不是限定性词汇。可以按规定在本发明权利要求的范围内对本发明作出修改，以及在不背离本发明的范围和精神内对本发明进行修订。尽管其中描述的本发明涉及特定的方法、材料和实施例，但是并不意味着本发明限于其中公开的特定例，相反，本发明可扩展至其他所有具有相同功能的方法和应用。

Claims (11)

1.一种光激化学发光检测试剂盒，其包括与PEG偶联的抗体；所述PEG选自PEG4～PEG24中的至少一种；优选地，所述PEG选自PEG10～PEG20中的至少一种。
2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述抗体与特异性结合配对成员中的一员结合；优选地，所述抗体经由PEG与特异性结合配对成员中的一员结合。
3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述抗体与PEG连接的特异性结合配对成员中的一员的摩尔比为1:(15～25)，优选为1:(18～22)。
4.根据权利要求2或3所述的试剂盒，其特征在于，所述特异性结合配对成员选自抗体、抗体片段、配体、寡核苷酸、寡核苷酸结合蛋白、凝集素、半抗原、抗原、免疫球蛋白结合蛋白、抗生物素蛋白、亲和素或生物素组成的一对能够相互特异性结合的物质；优选地，所述特异性结合配对成员为生物素-亲和素；进一步优选地，所述特异性结合配对成员中的一员为生物素。
5.根据权利要求2-4中任意一项所述的试剂盒，其特征在于，所述PEG连接的特异性结合配对成员中的一员的试剂为生物素-PEG-NHS；优选为生物素-PEG12-NHS。
6.根据权利要求1-5中任意一项所述的试剂盒，其特征在于，所述抗体选自单克隆抗体、多克隆抗体、人工抗体或修饰的抗体；优选选自多克隆抗体和/或单克隆抗体；进一步优选为单克隆抗体。
7.根据权利要求1-6中任意一项所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括以下组分：
受体，其与能够与待测抗原特异性结合的另一抗体偶联，且能够与活性氧反应产生可检测的化学发光信号；和/或，
供体，其与特异性结合配对成员中的另一员结合，且能够在激发状态产生活性氧；
优选地，所述特异性结合配对成员中的另一员为亲和素。
8.根据权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒具体包括：
组分a1，其包含与另一抗体结合的受体，所述另一抗体能够与待测抗原特异性结合；所述受体能够与活性氧反应产生可检测的化学发光信号；
组分b1，其包含与PEG连接的生物素偶联的抗体，所述抗体能够与待测抗原特异性结合；
组分c1，其包含与亲和素结合的供体；所述供体能够在激发状态产生活性氧。
9.一种如权利要求1-8中任意一项所述试剂盒的使用方法，其包括如下步骤：
S1，将待测样本与包含与另一抗体结合的受体的试剂a、包含与PEG连接的生物素偶联的抗体的试剂b混合，获得混合液1；
S2，将混合液1与包含与亲和素结合的供体的试剂c混合，获得混合液2；
S3，利用能量或活性化合物处理混合液2，激发供体产生活性氧，受体与活性氧反应生成可检测的化学发光信号；
S4，分析所述化学发光信号情况，确定待测样本中是否存在待测抗原。
10.根据权利要求9所述的使用方法，其特征在于，所述待测抗原为亲水性抗原。
11.一种如权利要求1-8中任意一项所述的试剂盒或者权利要求9或10所述的使用方法在光激化学发光检测待测抗原中的应用。
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