CN116370347A - 抗炎组合物及其用途 - Google Patents
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Abstract
本申请提供一种抗炎组合物,其包括棕榈酰四肽‑7、乙酰化透明质酸或其盐,以及分子量小于50kDa的水解透明质酸或其盐,所述水解透明质酸或其盐与所述乙酰化透明质酸或其盐的质量比大于1:1。本申请的抗炎组合物不仅可以克服乙酰化透明质酸或其盐与棕榈酰四肽‑7之间的抗炎拮抗作用,而且相对于单独使用各组分,能够更好的抑制炎症因子的表达,具有抗炎的协同增效作用。
Description
技术领域
本申请属于化妆品技术领域,具体地,涉及一种抗炎组合物及其用途。
背景技术
近年来乙酰化透明质酸(简写为AcHA)被越来越多的地应用于护肤品配方中,因为乙酰化改性可以提高HA的生物利用度,并且产生额外生物学功效,比如降低MMP的表达,以及减缓ECM的分解。
棕榈酰四肽-7(简写为PT-7,氨基序列:Pal-Gly-Gln-Pro-Arg-OH)是一种由四个氨基酸以肽键链接,具有抑制炎症因子表达的功效。
发明内容
然而,本申请的发明人发现,当将AcHA与PT-7组合使用时,在抗炎功效上会出现严重的拮抗作用。针对这一问题,本申请提供一种抗炎组合物,其不仅可以克服AcHA与PT-7之间的拮抗作用,而且相对于单独使用各组分,能够更好的抑制炎症因子的表达,具有抗炎的协同增效作用。
具体来说,本申请涉及如下方面:
1.一种抗炎组合物,其包括棕榈酰四肽-7、乙酰化透明质酸或其盐、以及分子量小于50kDa的水解透明质酸或其盐,所述水解透明质酸或其盐与所述乙酰化透明质酸或其盐的质量比大于1:1。
2.根据项1所述的抗炎组合物,其中所述水解透明质酸或其盐与所述乙酰化透明质酸或其盐的质量比为1.5:1-100:1。
3.根据项1-2任一项所述的抗炎组合物,所述乙酰化透明质酸或其盐和所述水解透明质酸或其盐之和与棕榈酰四肽-7的质量比为1:10-10:1。
4.根据项3所述的抗炎组合物,所述乙酰化透明质酸或其盐和所述水解透明质酸或其盐之和与棕榈酰四肽-7的质量比为1:5-5:1。
5.根据项1-4中任一项所述的抗炎组合物,其中所述水解透明质酸或其盐的分子量为1000Da-20kDa。
6.项1-5所述的抗炎组合物在制备抗炎制品中的用途。
7.项1-5所述的抗炎组合物在制备化妆品中的用途。
8.分子量小于50kDa的水解透明质酸或其盐在降低乙酰化透明质酸或其盐与棕榈酰四肽-7之间拮抗作用中的用途。
9.根据项8所述的用途,其中所述水解透明质酸或其盐与所述乙酰化透明质酸或其盐的质量比大于1:1;
优选地,所述水解透明质酸或其盐与所述乙酰化透明质酸或其盐的质量比为1.5:1-100:1。
10.根据项8或9所述的用途,其中所述乙酰化透明质酸或其盐和所述水解透明质酸或其盐之和与棕榈酰四肽-7的质量比为1:10-10:1;
优选地,所述乙酰化透明质酸或其盐和所述水解透明质酸或其盐之和与棕榈酰四肽-7的质量比为1:5-5:1;
更优选地,所述水解透明质酸或其盐的分子量为1000Da-20kDa。
具体实施方式
下面结合实施例进一步说明本申请,应当理解,实施例仅用于进一步说明和阐释本申请,并非用于限制本申请。
除非另外定义,本说明书中有关技术的和科学的术语与本领域内的技术人员所通常理解的意思相同。虽然在实验或实际应用中可以应用与此间所述相似或相同的方法和材料,本文还是在下文中对材料和方法做了描述。在相冲突的情况下,以本说明书包括其中定义为准,另外,材料、方法和例子仅供说明,而不具限制性。以下结合具体实施例对本申请作进一步的说明,但不用来限制本申请的范围。
本申请提供一种抗炎组合物,其包括棕榈酰四肽-7、乙酰化透明质酸或其盐、以及分子量小于50kDa的水解透明质酸或其盐,所述水解透明质酸或其盐与所述乙酰化透明质酸或其盐的质量比大于1:1。
其中,水解透明质酸或其盐可以为例如49kDa、48kDa、47kDa、46kDa、45kDa、44kDa、43kDa、42kDa、41kDa、40kDa、39kDa、38kDa、37kDa、36kDa、35kDa、34kDa、33kDa、32kDa、31kDa、30kDa、29kDa、28kDa、27kDa、26kDa、25kDa、24kDa、23kDa、22kDa、21kDa、20kDa、19kDa、18kDa、17kDa、16kDa、15kDa、14kDa、13kDa、12kDa、11kDa、10kDa、9kDa、8kDa、7kDa、6kDa、5kDa、4kDa、3kDa、2kDa、1kDa等或这些数值之间的任何数值。
在一个具体的实施方式中,所述水解透明质酸或其盐的分子量为1000Da-20kDa。
在一个具体的实施方式中,所述水解透明质酸或其盐的分子量为1000Da-15kDa。
在本申请中所使用的乙酰化透明质酸或其盐可以为本领域已知的各种乙酰化透明质酸或其盐。例如,所述乙酰化透明质酸或其盐的分子量可以为10kDa-100kDa。
所述水解透明质酸或其盐与所述乙酰化透明质酸或其盐的质量比大于1:1,例如可以为1.1:1、1.5:1、2:1、3:1、4:1、5:1、6:1、7:1、8:1、9:1、10:1、11:1、12:1、13:1、14:1、15:1、20:1、25:1、30:1、35:1、40:1、45:1、50:1、55:1、60:1、65:1、70:1、75:1、80:1、85:1、90:1、95:1、100:1、110:1、120:1、130:1、140:1、150:1、160:1、170:1、180:1、190:1、200:1等或这些数值之间的任何数值。
在一个具体的实施方式中,所述水解透明质酸或其盐与所述乙酰化透明质酸或其盐的质量比为1.5:1-100:1。
在一个具体的实施方式中,所述水解透明质酸或其盐与所述乙酰化透明质酸或其盐的质量比为1.5:1-50:1。
在一个具体的实施方式中,所述乙酰化透明质酸或其盐和所述水解透明质酸或其盐之和与棕榈酰四肽-7的质量比为1:10-10:1,例如可以为1:10、2:10(1:5)、3:10、4:10(2:5)、5:10(1:2)、6:10(3:5)、7:10、8:10(4:5)、9:10、1:1、2:1、3:1、4:1、5:1、6:1、7:1、8:1、9:1、10:1等或这些数值之间的任何数值。
在一个具体的实施方式中,所述乙酰化透明质酸或其盐和所述水解透明质酸或其盐之和与棕榈酰四肽-7的质量比为1:5-5:1。
在一个具体的实施方式中,抗炎组合物包括棕榈酰四肽-7、乙酰化透明质酸或其盐、以及分子量小于50kDa的水解透明质酸或其盐,所述水解透明质酸或其盐与所述乙酰化透明质酸或其盐的质量比大于1:1。所述乙酰化透明质酸或其盐和所述水解透明质酸或其盐之和与棕榈酰四肽-7的质量比为1:10-10:1。
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在一个具体的实施方式中,抗炎组合物包括棕榈酰四肽-7、乙酰化透明质酸或其盐、以及分子量为3000Da的水解透明质酸或其盐,所述水解透明质酸或其盐与所述乙酰化透明质酸或其盐的质量比为5:1。所述乙酰化透明质酸或其盐和所述水解透明质酸或其盐之和与棕榈酰四肽-7的质量比为1:4。
在一个具体的实施方式中,抗炎组合物由棕榈酰四肽-7、乙酰化透明质酸或其盐,以及分子量小于50kDa的水解透明质酸或其盐组成,所述水解透明质酸或其盐与所述乙酰化透明质酸或其盐的质量比大于1:1。
在一个具体的实施方式中,抗炎组合物由棕榈酰四肽-7、乙酰化透明质酸或其盐,以及分子量小于50kDa的水解透明质酸或其盐组成,所述水解透明质酸或其盐与所述乙酰化透明质酸或其盐的质量比大于1:1。所述乙酰化透明质酸或其盐和所述水解透明质酸或其盐之和与棕榈酰四肽-7的质量比为1:10-10:1。
在一个具体的实施方式中,抗炎组合物由棕榈酰四肽-7、乙酰化透明质酸或其盐,以及分子量小于50kDa的水解透明质酸或其盐组成,所述水解透明质酸或其盐与乙酰化透明质酸或其盐的质量比为1.5:1-100:1。所述乙酰化透明质酸或其盐和所述水解透明质酸或其盐之和与棕榈酰四肽-7的质量比为1:10-10:1。
在一个具体的实施方式中,抗炎组合物由棕榈酰四肽-7、乙酰化透明质酸或其盐,以及分子量小于50kDa的水解透明质酸或其盐组成,所述水解透明质酸或其盐与乙酰化透明质酸或其盐的质量比为2:1-11:1。所述乙酰化透明质酸或其盐和所述水解透明质酸或其盐之和与棕榈酰四肽-7的质量比为1:5-5:1。
在一个具体的实施方式中,抗炎组合物由棕榈酰四肽-7、乙酰化透明质酸或其盐,以及分子量小于50kDa的水解透明质酸或其盐组成,所述水解透明质酸或其盐与乙酰化透明质酸或其盐的质量比为2:1。所述乙酰化透明质酸或其盐和所述水解透明质酸或其盐之和与棕榈酰四肽-7的质量比为4:1。
在一个具体的实施方式中,抗炎组合物由棕榈酰四肽-7、乙酰化透明质酸或其盐,以及分子量小于50kDa的水解透明质酸或其盐组成,所述水解透明质酸或其盐与乙酰化透明质酸或其盐的质量比为11:1。所述乙酰化透明质酸或其盐和所述水解透明质酸或其盐之和与棕榈酰四肽-7的质量比为4:1。
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在一个具体的实施方式中,抗炎组合物由棕榈酰四肽-7、乙酰化透明质酸或其盐,以及分子量小于50kDa的水解透明质酸或其盐组成,所述水解透明质酸或其盐与乙酰化透明质酸或其盐的质量比为5:1。所述乙酰化透明质酸或其盐和所述水解透明质酸或其盐之和与棕榈酰四肽-7的质量比为1:4。
本申请还提供上述的任意一种抗炎组合物在抗炎中的用途。
本申请还提供上述的任意一种抗炎组合物在制备抗炎制品中的用途。
本申请还提供上述的任意一种抗炎组合物在制备化妆品中的用途。
本申请还提供分子量小于50kDa的水解透明质酸或其盐在降低乙酰化透明质酸或其盐与棕榈酰四肽-7之间抗炎拮抗作用中的用途。
其中,具体的水解透明质酸或其盐的分子量,水解透明质酸或其盐与乙酰化透明质酸或其盐之间的质量比,以及所述乙酰化透明质酸或其盐和所述水解透明质酸或其盐之和与棕榈酰四肽-7之间的质量比如上针对抗炎组合物所述。
本申请的抗炎组合物,通过使用分子量小于50kDa的水解透明质酸或其盐,并控制水解透明质酸或其盐与乙酰化透明质酸或其盐的质量比大于1:1,使得可以克服AcHA与PT-7之间的抗炎拮抗作用,而且相对于单独使用各组分,能够更好的抑制炎症因子的表达,具有抗炎的协同增效作用。
实施例
本申请实施例所使用的原料和设备信息如表1和表2所示。
表1
表2
主要设备 | 厂家&型号 |
CO2培养箱 | Thermo,150I |
超净工作台 | 苏净安泰,SW-CJ-1F |
UVA照射仪 | 博溪生物 |
恒温箱 | 泰斯特 |
普通PCR仪 | 博日 |
荧光定量PCR仪 | BioRad,CFX-96 |
实施例1
称取PT-7、UMW-HA和AcHA溶解在培养基溶液中,得到组合物。组合物中PT-7的含量为30μg/ml,UMW-HA的含量为80μg/ml,AcHA的含量为40μg/ml。
其中,培养基溶液的按照如下配制:
DMEM原料液:89%
FBS胎牛血清原料液:10%
PS双抗原料液:1%。
实施例2
称取PT-7、UMW-HA和AcHA溶解在培养基溶液(与实施例1中的配制方法相同)中,得到组合物。组合物中PT-7的含量为30μg/ml,UMW-HA的含量为110μg/ml,AcHA的含量为10μg/ml。
实施例3
称取PT-7、UMW-HA-2和AcHA溶解在培养基溶液(与实施例1中的配制方法相同)中,得到组合物。组合物中PT-7的含量为30μg/ml,UMW-HA-2的含量为110μg/ml,AcHA的含量为10μg/ml。
实施例4
称取PT-7、UMW-HA-3和AcHA溶解在培养基溶液(与实施例1中的配制方法相同)中,得到组合物。组合物中PT-7的含量为30μg/ml,UMW-HA-3的含量为110μg/ml,AcHA的含量为10μg/ml。
实施例5
称取PT-7、UMW-HA和AcHA溶解在培养基溶液(与实施例1中的配制方法相同)中,得到组合物。组合物中PT-7的含量为120μg/ml,UMW-HA的含量为20μg/ml,AcHA的含量为10μg/ml。
实施例6
称取PT-7、UMW-HA和AcHA溶解在培养基溶液(与实施例1中的配制方法相同)中,得到组合物。组合物中PT-7的含量为120μg/ml,UMW-HA的含量为25μg/ml,AcHA的含量为5μg/ml。
实施例7
称取PT-7、UMW-HA和AcHA溶解在培养基溶液(与实施例1中的配制方法相同)中,得到组合物。组合物中PT-7的含量为135μg/ml,UMW-HA的含量为10μg/ml,AcHA的含量为5μg/ml。
对比例1
将PT-7溶解在培养基溶液(与实施例1中的配制方法相同)中,配制浓度为150g/ml的PT-7溶液。
对比例2
将UMW-HA溶解在培养基溶液(与实施例1中的配制方法相同)中,配制浓度为150g/ml的UMW-HA溶液。
对比例3
将LMW-HA溶解在培养基溶液(与实施例1中的配制方法相同)中,配制浓度为150g/ml的LMW-HA溶液。
对比例4
将AcHA溶解在培养基溶液(与实施例1中的配制方法相同)中,配制浓度为150g/ml的AcHA溶液。
对比例5
称取PT-7和AcHA溶解在培养基溶液(与实施例1中的配制方法相同)中,得到组合物。组合物中PT-7的含量为120μg/ml,AcHA的含量为30μg/ml。
对比例6
称取PT-7和AcHA溶解在培养基溶液(与实施例1中的配制方法相同)中,得到组合物。组合物中PT-7的含量为30μg/ml,AcHA的含量为120μg/ml。
对比例7
称取PT-7、LMW-HA和AcHA溶解在培养基溶液(与实施例1中的配制方法相同)中,得到组合物。组合物中PT-7的含量为30μg/ml,LMW-HA的含量为80μg/ml,AcHA的含量为40μg/ml。
对比例8
称取PT-7、LMW-HA和AcHA溶解在培养基溶液(与实施例1中的配制方法相同)中,得到组合物。组合物中PT-7的含量为120μg/ml,LMW-HA的含量为20μg/ml,AcHA的含量为10μg/ml。
对比例9
称取PT-7、UMW-HA和AcHA溶解在培养基溶液(与实施例1中的配制方法相同)中,得到组合物。组合物中PT-7的含量为30μg/ml,UMW-HA的含量为40μg/ml,AcHA的含量为80μg/ml。
对比例10
称取PT-7、UMW-HA和AcHA溶解在培养基溶液(与实施例1中的配制方法相同)中,得到组合物。组合物中PT-7的含量为30μg/ml,UMW-HA的含量为60μg/ml,AcHA的含量为60μg/ml。
试验例
将上述实施例和对比例制备得到的样品用于细胞,以进行IL-6表达测试。
1)细胞接种:按4×10 4个/孔的接种密度接种成纤维细胞至24孔板,培养箱(37℃、5%CO2)中孵育过夜。
2)给药:待24孔板中细胞铺板率达到40%~60%时,进行分组给药。其中上述实施例和对比例制备得到的样品作为受试物工作液。每孔加样2mL,每组设6个复孔。给药完成后将6孔板放置在培养箱(37℃、5%CO2)中培养24h。其中,空白对照组为不添加任何样品。
3)UVA辐照:根据试验分组,对需要UVA照射的组别进行30J/cm2的UVA辐照,置于培养箱(37℃、5% CO2)中继续培养24h。
4)收集细胞:培养24h后,收集细胞上清后,1mL/孔PBS清洗两次,每孔加入1mLRNAiso Plus,吹打裂解细胞后,收样。
5)基因表达检测:对成纤维细胞进行RNAiso Plus处理后收样,依据试剂盒说明书,开展RNA提取、反转录及荧光定量PCR操作,测定每孔Ct值。
6)结果统计分析:每组实验的结果为6个复孔的平均Ct值,将平均Ct值用2-△△Ct方法进行数据处理,结果以空白对照组为1.0进行归一化处理。
IL-6表达的检测结果,以及上述实施例和对比例中的具体组分含量如表3所示。
表3
Claims (10)
1.一种抗炎组合物,其包括棕榈酰四肽-7、乙酰化透明质酸或其盐、以及分子量小于50kDa的水解透明质酸或其盐,所述水解透明质酸或其盐与所述乙酰化透明质酸或其盐的质量比大于1:1。
2.根据权利要求1所述的抗炎组合物,其中所述水解透明质酸或其盐与所述乙酰化透明质酸或其盐的质量比为1.5:1-100:1。
3.根据权利要求1或2所述的抗炎组合物,所述乙酰化透明质酸或其盐和所述水解透明质酸或其盐之和与棕榈酰四肽-7的质量比为1:10-10:1。
4.根据权利要求3所述的抗炎组合物,所述乙酰化透明质酸或其盐和所述水解透明质酸或其盐之和与棕榈酰四肽-7的质量比为1:5-5:1。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的抗炎组合物,其中所述水解透明质酸或其盐的分子量为1000Da-20kDa。
6.权利要求1-5所述的抗炎组合物在制备抗炎制品中的用途。
7.权利要求1-5所述的抗炎组合物在制备化妆品中的用途。
8.分子量小于50kDa的水解透明质酸或其盐在降低乙酰化透明质酸或其盐与棕榈酰四肽-7之间抗炎拮抗作用中的用途。
9.根据权利要求8所述的用途,其中所述水解透明质酸或其盐与所述乙酰化透明质酸或其盐的质量比大于1:1;
优选地,所述水解透明质酸或其盐与所述乙酰化透明质酸或其盐的质量比为1.5:1-100:1。
10.根据权利要求8或9所述的用途,其中所述乙酰化透明质酸或其盐和所述水解透明质酸或其盐之和与棕榈酰四肽-7的质量比为1:10-10:1;
优选地,所述乙酰化透明质酸或其盐和所述水解透明质酸或其盐之和与棕榈酰四肽-7的质量比为1:5-5:1;
更优选地,所述水解透明质酸或其盐的分子量为1000Da-20kDa。
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