CN103271837A - 生物活性化妆品配方及其制作方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种生物活性化妆品配方,其特征在于:包括细胞生长因子、HA和胶原蛋白。本发明提供的生物活性化妆品配方及其制作方法,专门针对敏感肌肤,在满足皮肤组织亲和性及皮肤安全性的基础上,以生物活性物质为重要原料,以不同细胞因子的组合配比,通过调节皮肤生理功能,改善皮肤组织新陈代谢,使皮肤光滑细腻,消除皱纹,抗表皮老化,增加弹性,复到最佳生理状态。
Description
技术领域
本发明涉及的一种生物活性化妆品配方及其制作方法,尤其涉及一种针对敏感肌肤的低刺激型生物活性化妆品配方及其制造方法。
背景技术
近年来,越来越多的人认为自己皮肤为敏感类型,迫切需要无添加、低刺激型化妆品。对于敏感肌肤的人来说,由于皮肤干燥而导致的角质层防御机能低下、刺激阈值低下以及角质层透过性上升等问题,会使得皮肤的过敏反应处于一种亢奋的状态。因此保湿以及皮肤防御机能的改善等护肤措施是很重要的。事实上,对于防御机能已经低下的皮肤来说,想要让其能从刺激中很快恢复,避免恶性循环是很不容易的一件事情。
国内化妆品的发展经历了两个阶段,第一阶段是以合成化学品为基础原料的普通化妆品,由于合成化学品本身工艺和纯度问题,容易引起皮肤问题,出现发红、过敏的现象。第二阶段是在第一阶段的基础上,减少或去除合成原料,选用天然原料,如各种动植物提取液等,一定程度上减少和缓解了原料对皮肤的刺激。天然原料安全性相对可靠,但由于动物或植物来源的异种蛋白质的存在,还是有潜在的致敏可能。同时,天然原料大多只能机械性保护皮肤,不具备调节皮肤生理功能的作用,而且其成分复杂,所以仍然不是理想的低刺激化妆品。
细胞因子是由一种以上的细胞产生,作用于局部的因子,由细胞分泌的调节细胞生长、分化、增殖的多肽小分子,它们不直接进入细胞内发挥作用,而是通过细胞因子受体介导,再经相应信号传导途径发挥其生物学效应。细胞因子可以促进细胞增殖生长,改善皮肤结构,延缓皮肤老化,并能防止皮肤毛囊发炎,促进伤口愈合,对于损伤皮肤提供彻底养护。目前常见应用化妆品领域的大多是单因子的使用,其中使用最多的是表皮生长因子(EGF)。细胞因子的作用不是孤立存在的,它们之间可通过合成、分泌的相互调节,受体表达的相互控制,生物学效应的相互影响而组成细胞因子网络(cytokine network)。因此如何更好的在化妆品领域内应用细胞因子,仍是一个长期摸索和探讨的问题。
发明内容
本发明的目的是:针对现有化妆品的不足,对原料,功能,肤感,效果等方面进行组合研究,在满足皮肤组织亲和性及皮肤安全性的基础上,以生物活性物质为重要原料,以不同细胞因子的组合配比,通过调节皮肤生理功能,改善皮肤组织新陈代谢,使皮肤光滑细腻,消除皱纹,抗表皮老化,增加弹性,复到最佳生理状态。
本发明采取的技术方案如下:
(1)一种生物活性化妆品配方,包括细胞生长因子、HA和胶原蛋白。
(2)根据(1)所述的生物活性化妆品配方,所述细胞生长因子为KGF、EGF、FGF和/或PDGF。
(3)根据(1)-(2)任一项所述的生物活性化妆品配方,所述KGF通过以下处理方式获得:
通过基因工程技术去除了内源性角质细胞生长因子N-端的前23个氨基酸,对第40位氨基酸进行定点突变改造,减少二硫键生物制品II类混乱错配和二聚体的形成;
将改构后的KGF蛋白基因融合在GST蛋白基因C端,通过在GST蛋白和KGF蛋白之间设计凝血酶识别和切割位点构建GST-KGF改构体融合表达体系,获得表达量达10—20%的GST-KGF改构体高效表达工程菌株。
(4)根据(1)-(3)任一项所述的生物活性化妆品配方,所述细胞生长因子的浓度为10-1000ppb;所述透明质酸的浓度为0.1%-1%;所述胶原蛋白为分子量为1000-3000道尔顿多肽,浓度为0.05%-0.5%。
(5)根据(1)-(4)任一项所述的生物活性化妆品配方,所述细胞生长因子为KGF、EGF和PDGF,具体配方如下:
原料名称 用量(质量百分比)
(6)根据(5)所述的生物活性化妆品配方,所述配方还包括防腐剂和香精;所述防腐剂的用量为0.05-0.15%,所述香精的用量为0-0.05%。
(7)根据(1)-(4)任一项所述的生物活性化妆品配方,所述细胞生长因子为KGF、EGF、bFGF和aFGF,具体配方如下:
原料名称 用量(质量百分比)
(8)根据(1)-(4)任一项所述的生物活性化妆品配方,所述细胞生长因子为KGF和EGF,具体配方如下:
原料名称 用量(质量百分比)
(9)根据(1)-(4)任一项所述的生物活性化妆品配方,所述细胞生长因子为KGF和EGF,具体配方如下:
原料名称 用量(质量百分比)
(10)一种生物活性化妆品的制作方法,将水项原料和油项原料分别溶解,分别加热至80℃,恒温搅拌至原料充分溶解,将水项和油项混合搅拌均匀,待温度低于45℃时加入低温原料搅匀,加入含细胞生长因子的稀释保护液搅匀,控制温度为30℃出料;所述水项原料为肝素钠、羟乙基纤维素和超纯水;所述油项原料为1,3-丁二醇和甘油;所述低温原料为香精和防腐剂;所述含稀释保护液包括KGF、EGF、PDGF、小分子/大分子HA和小分子胶原蛋白。
(11)一种生物活性化妆品的制作方法,将水项原料和油项原料分别溶解,分别加热至80℃,恒温搅拌至原料充分溶解,将水项和油项混合搅拌均匀,待温度低于45℃时加入低温原料搅匀,加入含细胞生长因子的稀释保护液搅匀,控制温度为30℃出料;所述水项原料为甘油、汉生胶、丙烯酸盐/碳10~30丙烯酸酯共聚物和超纯水;所述油项原料为异硬质醇(和)丁二醇椰油酯(和)、乙基纤维素、辛酸癸酸三甘油酯、肉豆蔻酸异丙酯和环甲基硅油;所述低温原料为2-溴-2-硝基丙烷-1,3-二醇,氯甲基异噻唑啉酮和甲基异噻唑啉酮;所述稀释保护液包括KGF、EGF、bFGF、aFGF、小分子/大分子HA和小分子胶原蛋白。
(12)一种生物活性化妆品的制作方法,将混合A项,加热到80℃;降温至40℃,加入B项;然后加入C项搅匀,控制30℃出料;
所述A项为:1,3-丙二醇、海藻糖、氨基酸混合物、糖基橘皮苷、汉生胶、普鲁兰糖、神经酰胺聚合物、甲基丙烯酰羟乙基磷酰胆碱-丁基甲基丙烯酸、去离子水;
所述B项为:羟苯甲酯;
所述C项为:KGF、EGF、小分子/大分子HA、小分子胶原蛋白。
(13)一种生物活性化妆品的制作方法,其特征在于:在搅拌下将汉生胶分散于水中,加热到80℃;
混合A项的所有成分并加热到80℃,在另一小烧杯中将卡波934分散到合成角鲨烷中;
将A项加入B项中,开均质8000rpm,将预制好的C项加入一起均质,均质3分钟后开始搅拌冷却降温;
在搅拌状态下,当温度降到45℃后依次加入D项的各成分,搅拌均匀;
加入E项搅匀,控制30℃出料;
所述A项为:聚甘油-6双硬脂酸酯、霍霍巴油、辛酸癸酸三甘油酯、硬脂酸甘油酯、聚二甲基硅氧烷、氢化棕榈仁油甘油酯(和)氢化棕榈油甘油酯、十六十八醇;
所述B项为:合成角鲨烷和卡波934
所述C项为:甘油、汉生胶、水
所述D项为:氢氧化钠、2-溴-2-硝基丙烷-1,3-二醇、氯甲基异噻唑啉酮、甲基异噻唑啉酮;
所述E项为:KGF、EGF、小分子/大分子HA、小分子胶原蛋白。
细胞因子包括有重组人角质细胞生长因子(recombinant human keratinocyte growthfactor,简称为KGF),人表皮生长因子(human epidermal growth factor,简称为EGF),重组人纤维生长因子(recombinant human fibroblast growth factor,rh-FGF),人血小板衍生生长因子(human plateletderived growth factor,简称为PDGF)。由于细胞因子的作用具有多效性、重叠性、协同性,因子多因子组合配比使用具有超越单因子使用的修复效果,能有效的恢复皮肤平衡。本发明针对敏感型肌肤,以KGF和EGF为核心因子,配比以其他因子,实现发明目的。
角质细胞生长因子(KGF)是在人类胚胎肺成纤维细胞培养基中首次发现的,由于仅对上皮细胞起作用,而对成纤维细胞及内皮细胞没有作用,故命名为角质细胞生长因子。KGF是本发明中的核心因子,能促进表皮与上皮细胞生长发育,恢复皮肤角质层健康,改善皮肤微环境,有效缓解肌肤敏感问题,促进皮肤恢复到最佳生理状态,使皮肤红润白嫩。良好的综合美容护肤效果和能与角质细胞表面特异受体相作用的特点,使其更优于其它细胞因子。
表皮生长因子(EGF)由53个氨基组成,其分子结构中有三个二硫键,决定着他的生物活性。在人体皮肤内,通过一系列磷酸化作用,增强糖酵解,调控基因表达和蛋白质的合成,促进上皮细胞和成纤维细胞的增殖,增强皮肤表皮细胞活力,延缓表皮细胞老化,是肌肤各组份保持最佳生理状态。已有的研究证实,EGF的缺失是导致皮肤衰老的重要原因。
纤维生长因子(FGF)又分为酸性成纤维细胞生长因子(acid fibroblast growth factor,简称为aFGF)和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,简称为bFGF)。由内皮细胞、平滑肌细胞、巨噬细胞分泌,作用是促进内皮细胞的游走和平滑肌细胞的增殖,促进新血管形成,修复损害的内皮细胞,促进成纤维细胞生长,分泌胶原蛋白和弹性蛋白。
血小板衍生生长因子(PDGF)是人体血小板中含的一种蛋白质生长因子,是低分子量促细胞分裂素,结合的PDGF是分子量为30KD的热稳定糖蛋白,是靠二硫键相连的A、B两条多肽链组合成的二聚体。PDGF是一种重要的促有丝分裂因子,可刺激成纤维细胞和神经胶质细胞、平滑肌细胞等多种细胞分裂增殖,促进纤维母细胞的生成,从而修复由于衰老和损伤造成的真皮层胶原纤维断裂与变形,促进真皮层生长与弹性提升,使皱纹自然长平。PDGF也可以促进皮下毛细血管形成,修复皮下血液微循环系统,为皮肤提供充足营养。皮肤衰老一个重要的原因就是皮下血管萎缩,从而导致皮肤供血不足,故细胞缺乏营养,致使皱纹的产生。
透明质酸(HA)是动物组织中的一种黏多糖,白色纤维状固体或粉末状颗粒,是理想的天然保湿因子可保留比自身重500倍~1000倍的水,其分子高度伸展并相互缠绕连接形成连续的网状结构,而水分则在此网络内通过极性键和氢键与HA分子相互结合,就像“海绵”一样,使水分不易流失。由于大分子透明质酸(分子量10000以上)透皮吸收特性差,仅是在皮肤表面形成保水层以发挥保湿作用,本发明中采用不同大小分子量透明质酸搭配使用,实现从里到外为皮肤保水的功能。其使用为大分子量(1×106)HA和小分子量(1×103)按质量1:1添加。
胶原蛋白广泛存在于动物骨、腱、软骨和皮肤及其它结缔组织中,是细胞外基质主要成分。胶原蛋白作为细胞生长的依附和支架物,能诱导上皮细胞等增殖、分化和移行,保护皮肤,提高皮肤的弹性。皮肤的表皮是一层非常致密的组织结构,只能让水、电解质及结构简单的小分子物质通过,而胶原蛋白的分子量大、结构复杂,皮肤是无法吸收。因此,在化妆品中直接加入胶原蛋白对皮肤产生美容功效是不可行的。本发明中采用的小分子量重组人胶原蛋白,是分子量为1000-3000道尔顿多肽,在保持胶原蛋白原有的生物活性同时,可以被皮肤吸收,吸收率达78%。
生长因子、HA和小分子量重组人胶原蛋白搭配使用在化妆品中,不仅具有普通化妆品的保湿,护肤功能,由于多因子的搭配使用,在改善皮肤生理特性,改善皮肤新城代谢和微环境的同时,可以促进皮肤结构中各层次细胞的增殖和分化,促进皮肤微血管生长,为细胞提供充足养分,恢复皮肤平衡,从而达到全面改善皮肤,恢复健康的目的。HA和胶原蛋白不仅可以协同促进生长因子发挥生物功能,同时也起到稳定因子的作用。本发明中生物活性物质均采用基因工程技术,得到纯度高,产量高的优质产品。而且,由于其人源性来源,也减少了异种蛋白可能带来的危害和致敏性。
以rhKGF为例,本发明创新地使用以下技术,以保证细胞因子的高纯度和高生物活性。
(1)创新性的通过基因工程技术去除了内源性角质细胞生长因子N-端的前23个氨基酸,对第40位氨基酸进行定点突变改造,减少二硫键生物制品II类混乱错配和二聚体的形成,提高了蛋白质的表达量及稳定性;
(2)将改构后的KGF蛋白基因融合在GST蛋白基因C端,通过在GST蛋白和KGF蛋白之间设计凝血酶识别和切割位点构建GST-KGF改构体融合表达体系,获得表达量达10~20%的GST-rh-KGF改构体高效表达工程菌株,实现稳定型KGF改构体的高效可溶表达;
(3)新的高密度发酵及纯化工艺,使KGF目的蛋白得率达500mg/L(系国内外报道中表达量最高指标)。稳定性差是制约KGF临床开发应用的难题,KGF在生产及保存过程中容易发生去折叠和聚集沉淀而造成活性降低。通过研究各种条件(发酵温度、pH、溶氧等)对菌体生长密度和GST-KGF改构体表达水平的影响;研究各种因素(包括菌体破碎条件、层析条件和酶切条件等)对目的蛋白的分离纯化效率、回收率和纯度的影响,获得高效表达的高密度发酵中试工艺和优化的分离纯化中试工艺和制剂工艺,使KGF实现大规模工业化生产成为了可能。
本发明提供的生物活性化妆品配方及其制作方法,专门针对敏感肌肤,在满足皮肤组织亲和性及皮肤安全性的基础上,以生物活性物质为重要原料,以不同细胞因子的组合配比,通过调节皮肤生理功能,改善皮肤组织新陈代谢,使皮肤光滑细腻,消除皱纹,抗表皮老化,增加弹性,复到最佳生理状态。
具体实施方式
实施例1:
一种生物活性化妆品配方,包括细胞生长因子、HA和胶原蛋白;所述细胞生长因子为KGF、EGF和PDGF,具体配方配方如下:
原料名称 | 用量(质量百分比) | 备注 |
甘油 | 2 | O |
1,3-丁二醇 | 3 | O |
肝素钠 | 0.05 | W |
小分子/大分子HA | 0.2 | LL |
香精、防腐剂 | 适量 | L |
羟乙基纤维素 | 0.3 | W |
小分子胶原蛋白 | 0.01 | LL |
KGF | 150-300ppb | LL |
EGF | 100-200ppb | LL |
PDGF | 50-100ppb | LL |
超纯水 | 至100 | W |
所述防腐剂的用量为0.05-0.15%,所述香精的用量为0-0.05%。
工艺:将水项原料(备注W)和油项原料(备注O)分别溶解,分别加热至80℃,恒温搅拌至原料充分溶解,将水项和油项混合搅拌均匀,待温度低于45℃时加入低温原料(备注L)搅匀,加入含生长因子的稀释保护液(备注LL)搅匀,控制30℃出料
实施例2:
一种生物活性化妆品配方,包括细胞生长因子、HA和胶原蛋白;所述细胞生长因子为KGF、EGF、bFGF和aFGF,具体配方配方如下:
工艺:将水项原料(备注W)和油项原料(备注O)分别溶解,分别加热至合适温度(80),恒温搅拌至原料充分溶解,均质3分钟,将水项和油项混合搅拌均匀,待温度低于45℃时加入低温原料(备注L)搅匀,加入含生长因子的稀释保护液(备注LL)搅匀,控制30℃出料。
实施例3:
一种生物活性化妆品配方,包括细胞生长因子、HA和胶原蛋白;所述细胞生长因子为KGF和EGF,具体配方配方如下:
工艺:
1、混合A项,加热到80℃;
2、降温至40度,加入B项;
3、加入C项搅匀,控制30℃出料。
实施例4:
一种生物活性化妆品配方,包括细胞生长因子、HA和胶原蛋白;所述细胞生长因子为KGF和EGF,具体配方配方如下:
工艺:
1、在搅拌下将汉生胶分散于水中,加热到80℃;
2、混合A项的所有成分并加热到80℃,在另一小烧杯中将卡波934分散到合成角鲨烷中;
3、将A项加入B项中,开均质8000rpm,将预制好的C项加入一起均质,均质3分钟后开始搅拌冷却降温;
4、在搅拌状态下,当温度降到45℃后依次加入D项的各成分,搅拌均匀;
5、加入E项搅匀,控制30℃出料。
以上实施例目的在于说明本发明,而非限制本发明的保护范围,所有由本发明简单变化而来的应用均落在本发明的保护范围内。
Claims (13)
1.一种生物活性化妆品配方,其特征在于:包括细胞生长因子、HA和胶原蛋白。
2.根据权利要求1所述的生物活性化妆品配方,其特征在于:所述细胞生长因子为KGF、EGF、FGF和/或PDGF。
3.根据权利要求2所述的生物活性化妆品配方,其特征在于:所述KGF通过以下处理方式获得:
通过基因工程技术去除了内源性角质细胞生长因子N-端的前23个氨基酸,对第40位氨基酸进行定点突变改造,减少二硫键生物制品II类混乱错配和二聚体的形成;
将改构后的KGF蛋白基因融合在GST蛋白基因C端,通过在GST蛋白和KGF蛋白之间设计凝血酶识别和切割位点构建GST-KGF改构体融合表达体系,获得表达量达10—20%的GST-KGF改构体高效表达工程菌株。
4.根据权利要求1-3任一项所述的生物活性化妆品配方,其特征在于:所述细胞生长因子的浓度为10-1000ppb;所述透明质酸的浓度为0.1%-1%;所述胶原蛋白为分子量为1000-3000道尔顿多肽,浓度为0.05%-0.5%。
6.根据权利要求5所述的生物活性化妆品配方,其特征在于:所述配方还包括防腐剂和香精;所述防腐剂的用量为0.05-0.15%,所述香精的用量为0-0.05%。
10.一种生物活性化妆品的制作方法,其特征在于:将水项原料和油项原料分别溶解,分别加热至80℃,恒温搅拌至原料充分溶解,将水项和油项混合搅拌均匀,待温度低于45℃时加入低温原料搅匀,加入含细胞生长因子的稀释保护液搅匀,控制温度为30℃出料;所述水项原料为肝素钠、羟乙基纤维素和超纯水;所述油项原料为1,3-丁二醇和甘油;所述低温原料为香精和防腐剂;所述含稀释保护液包括KGF、EGF、PDGF、小分子/大分子HA和小分子胶原蛋白。
11.一种生物活性化妆品的制作方法,其特征在于:将水项原料和油项原料分别溶解,分别加热至80℃,恒温搅拌至原料充分溶解,将水项和油项混合搅拌均匀,待温度低于45℃时加入低温原料搅匀,加入含细胞生长因子的稀释保护液搅匀,控制温度为30℃出料;所述水项原料为甘油、汉生胶、丙烯酸盐/碳10~30丙烯酸酯共聚物和超纯水;所述油项原料为异硬质醇(和)丁二醇椰油酯(和)、乙基纤维素、辛酸癸酸三甘油酯、肉豆蔻酸异丙酯和环甲基硅油;所述低温原料为2-溴-2-硝基丙烷-1,3-二醇,氯甲基异噻唑啉酮和甲基异噻唑啉酮;所述稀释保护液包括KGF、EGF、bFGF、aFGF、小分子/大分子HA和小分子胶原蛋白。
12.一种生物活性化妆品的制作方法,其特征在于:将混合A项,加热到80℃;降温至40℃,加入B项;然后加入C项搅匀,控制30℃出料;
所述A项为:1,3-丙二醇、海藻糖、氨基酸混合物、糖基橘皮苷、汉生胶、普鲁兰糖、神经酰胺聚合物、甲基丙烯酰羟乙基磷酰胆碱-丁基甲基丙烯酸、去离子水;
所述B项为:羟苯甲酯;
所述C项为:KGF、EGF、小分子/大分子HA、小分子胶原蛋白。
13.一种生物活性化妆品的制作方法,其特征在于:在搅拌下将汉生胶分散于水中,加热到80℃;
混合A项的所有成分并加热到80℃,在另一小烧杯中将卡波934分散到合成角鲨烷中;
将A项加入B项中,开均质8000rpm,将预制好的C项加入一起均质,均质3分钟后开始搅拌冷却降温;
在搅拌状态下,当温度降到45℃后依次加入D项的各成分,搅拌均匀;
加入E项搅匀,控制30℃出料;
所述A项为:聚甘油-6双硬脂酸酯、霍霍巴油、辛酸癸酸三甘油酯、硬脂酸甘油酯、聚二甲基硅氧烷、氢化棕榈仁油甘油酯(和)氢化棕榈油甘油酯、十六十八醇;
所述B项为:合成角鲨烷和卡波934
所述C项为:甘油、汉生胶、水
所述D项为:氢氧化钠、2-溴-2-硝基丙烷-1,3-二醇、氯甲基异噻唑啉酮、甲基异噻唑啉酮;
所述E项为:KGF、EGF、小分子/大分子HA、小分子胶原蛋白。
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