CN116355912A - 提高玉米抗旱耐盐性的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及使用ZmRCP启动子和玉米ZmCOL3基因提高玉米抗旱或耐盐性的方法，属于基因工程领域。本发明通过试验表明，使用ZmRCP启动子驱动ZmCOL3基因可以在不影响开花时间的同时显著提高玉米抗旱或耐盐性。
Description
技术领域
本发明涉及使用ZmRCP启动子和玉米ZmCOL3基因提高玉米抗旱或耐盐性的方法，属于基因工程领域。
背景技术
含有CCT结构域的蛋白是植物特有的，与植物的光周期调控和花期早晚密切相关。玉米是我国主要粮食作物，玉米的CCT结构域基因报道较少，生物信息学预测显示CCT结构域基因家族成员数量大(已鉴定到53个)，基因组多样性复杂。因此仅有个别CCT基因的功能得到了鉴定，例如ZmCCT、ZmCOL3、ZmCOL14等，它们都和玉米开花期有关。另外，有研究表明，CCT基因会参与植物的多种生物过程，在功能上具有多效性，例如抗病性(Min JH,ChungJS,Lee KH,et al.The CONSTANS-like 4 transcription factor,AtCOL4,positivelyregulates abiotic stress tolerance through an abscisic acid-dependent mannerin Arabidopsis[J].J Integr Plant Biol,2015,57(3):313-324)。
ZmCOL3是玉米中的一个CCT基因，超表达ZmCOL3可以在长短日照条件下延迟玉米开花时间(Minliang Jin,Xiangguo Liu,Wei Jia,et al.ZmCOL3,a CCT gene repressesflowering in maize by interfering with the circadian clock and activatingexpression of ZmCCT[J].JIPB,2018,60(6):465-480)。此外，ZmCOL3还具有抗玉米茎腐病的功能(吉林省农业科学院.ZmCOL3基因及其蛋白在提高目标植物抗茎腐病中的应用：CN2018115213988[P].2019-04-05.)。ZmCOL3是否还具有其他功能还不知道。
近年来，干旱和土壤盐渍化等非生物胁迫已成为玉米减产的影响因素之一。玉米耐盐和抗旱机制十分复杂，在胁迫条件下，玉米植株通过多种适应性变化调控干旱和盐的耐受性，具体表现为气孔调节、植物激素调节、活性氧的清除、渗透调节和渗透保护和体内离子平衡等机制。遭受胁迫的玉米植株在分子水平上利用一些适应性机制，比如调控叶片的气孔开合、根系的吸水保水能力，来降低干旱和盐胁迫对细胞产生的破坏效应。所以，胁迫发生时叶片和根系等组织中特定蛋白质的累积或抑制以及许多基因转录本的上调或下调均有助于提高玉米的抗旱耐盐性。
本发明通过对玉米CCT基因的旱盐胁迫筛选，发现ZmCOL3基因具有调控玉米抗旱或耐盐性的新功能，能够用于调控玉米抗旱或耐盐性状，例如，超表达ZmCOL3基因可以提高玉米的抗旱或耐盐性。然而，ZmCOL3基因的组成型超量表达也造成了玉米开花延迟，从而延长了玉米的收获期。虽然还没有公开技术资料显示ZmCOL3基因调控玉米抗旱或耐盐性的具体机制(促进根发育还是调节气孔开放还是提高ROS含量等)，但为了解决这一问题，本发明尝试用根特异性启动子驱动ZmCOL3基因表达，并测试玉米植株的开花时间和抗旱耐盐性。最终发现，利用ZmRCP启动子驱动ZmCOL3可获得花期不变、抗旱和耐盐性均更强的玉米材料。
发明内容
本发明的目的在于提供一种提高玉米抗旱或耐盐性的方法。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
本发明提供基因ZmCOL3在调控玉米抗旱或耐盐性中的应用，其特征在于：所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
本发明还提供蛋白在调控玉米抗旱或耐盐性中的应用，其特征在于，所述蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
本发明还提供核酸在调控玉米抗旱或耐盐性中的应用，其特征在于，所述的核酸编码权利要求2中所述的蛋白；在一些实施方案中，上述的核酸序列如SEQ ID NO.3所示。
本发明还提供表达盒，其特征在于，所述表达盒含有玉米根特异启动子以及编码上述蛋白的核酸分子；在一些实施方案中，上述的玉米根特异启动子的核苷酸序列如SEQID NO.4所示；上述的核酸如权利要求3中所述；在一些实施方案中，上述表达盒还含有NOS终止子；在一些实施方案中，上述表达盒的序列如SEQ ID NO.5所示。
本发明还提供表达载体，其特征在于，所述的表达载体含有上述的表达盒。
本发明还提供宿主细胞，其特征在于，所述的宿主细胞包含上述的表达载体；在一些实施方案中，上述的宿主细胞为农杆菌细胞。
本发明还提供提高玉米抗旱或耐盐性的方法，其特征在于，用上述的表达载体或上述的宿主细胞转化玉米，得到转基因玉米；筛选开花期不变且抗旱或耐盐性提高的材料。
本发明还提供上述的表达盒、表达载体、宿主细胞和方法在不影响玉米开花期的同时提高玉米抗旱耐盐性中的应用。
与现有的技术相比，本发明的有益效果是：本发明发现了ZmCOL3基因具有调控玉米抗旱或耐盐性的新功能，能够用于调控玉米抗旱或耐盐性状。同时，利用ZmRCP启动子驱动ZmCOL3可获得花期不变，且抗旱和耐盐性均更强的玉米材料，更符合玉米品种的商业化目标。
附图说明
图1表达载体pXG071.014的物理图谱。各元件标注在图上。
具体实施方式
提供以下定义和方法用以更好地界定本申请以及在本申请实践中指导本领域普通技术人员。除非另作说明，术语按照相关领域普通技术人员的常规用法理解。本文所引用的所有专利文献、学术论文、行业标准及其他公开出版物等，其中的全部内容整体并入本文作为参考。
如本文所用，“玉米”是任何玉米植物并包括可以与玉米育种的所有植物品种，包括整株植物、植物细胞、植物器官、植物原生质体、植物可以从中再生的植物细胞组织培养物、植物愈伤组织、植物或植物部分中完整的植物细胞，所述植物部分例如胚、花粉、胚珠、种子、叶、花、枝、果实、茎杆、根、根尖、花药等。除非另有所指，核酸以5’至3’方向从左向右书写；氨基酸序列以氨基至羧基方向从左向右书写。氨基酸在本文可以用其通常所知的三字母符号或IUPAC-IUB生物化学命名委员会推荐的单字母符号来表示。同样地，可以用通常接受的单字母码表示核苷酸。数字范围包括限定该范围的数字。如本文所用，“核酸”包括涉及单链或双链形式的脱氧核糖核苷酸或核糖核苷酸多聚物，并且除非另有限制，包括具有天然核苷酸基本性质的已知类似物(例如，肽核酸)，所述类似物以与天然存在的核苷酸类似的方式与单链核酸杂交。如本文所用，术语“编码”或“所编码的”用于特定核酸的上下文时，指该核酸包含指导该核苷酸序列翻译成特定蛋白的必需信息。使用密码子表示编码蛋白的信息。如本文所用，涉及特定多核苷酸或其所编码的蛋白的“全长序列”指具有天然(非合成)内源序列的整个核酸序列或整个氨基酸序列。全长多核苷酸编码该特定蛋白的全长、催化活性形式。本文可互换地使用术语“多肽”、“多肽”和“蛋白”，以指氨基酸残基的多聚物。该术语用于氨基酸多聚物，其中一个或多个氨基酸残基是相应天然存在的氨基酸的人工化学类似物。该术语还用于天然存在的氨基酸多聚物。本文可互换地使用术语“残基”或“氨基酸残基”或“氨基酸”，以指被并入蛋白、多肽或肽(统称“蛋白”)的氨基酸。氨基酸可以是天然存在的氨基酸，并且除非另有限制，可以包括天然氨基酸的已知类似物，所述类似物可以与天然存在的氨基酸相似的方式起作用。
术语“性状”是指植物或特定的植物材料或细胞的生理、形态、生化或物理特性。在一些情况下，此特性对人眼是可见的，诸如种子或植株大小，或者可通过生物化学技术测量，诸如检测种子或叶的蛋白质、淀粉或油含量，或者通过观察代谢或生理过程，例如通过测量对水剥夺或特定盐或糖或氮浓度的耐受性，或者通过观察一个或多个基因的表达水平，或者通过农艺观察结果诸如渗透胁迫耐受性或收率。
“转基因”是指其基因组因异源核酸(诸如重组DNA构建体)的存在而发生改变的任何细胞、细胞系、愈伤组织、组织、植株部分或植株。本文所用的术语“转基因”包括那些最初的转基因事件以及从最初的转基因事件通过有性杂交或无性繁殖而产生的那些，并且不涵盖通过常规植物育种方法或通过自然发生的事件(诸如随机异花受精、非重组病毒感染、非重组细菌转化、非重组转座或自发突变)进行的基因组(染色体或染色体外)改变。
“植物”包括对整株植物、植物器官、植物组织、种子和植物细胞以及它们的子代的标引。植物细胞包括但不限于来自种子、悬浮培养物、胚芽、分生区域、愈伤组织、叶、根、苗、配子体、孢子体、花粉和小孢子的细胞。“子代”包含植物的任何后续世代。
在本申请中，将词语“包括”、“包含”或其变体应理解为除所描述的元素、数或步骤外，还包含其它元素、数或步骤。“受试植物”或“受试植物细胞”是指遗传改造已经生效的植物或植物细胞，或者如此改造的植物或细胞的子代细胞，该子代细胞包含所述改造。“对照”或“对照植物”或“对照植物细胞”提供用于测量受试植物或植物细胞表型改变的参考点。
阴性或对照植物可以包括，例如：(a)野生型植物或细胞，即与遗传改造起始材料具有相同基因型的植物或细胞，所述遗传改造产生受试植物或细胞；(b)与所述起始材料具有相同基因型但已用空构建体(即用对目的性状无已知效果的构建体，诸如包含标物基因的构建体)转化的植物或植物细胞；(c)是受试植物或植物细胞的非转化分离子的植物或植物细胞；(d)与所述受试植物或植物细胞在遗传上一致但未暴露于会诱导目的基因表达的条件或刺激物的植物或植物细胞；或(e)受试植物或植物细胞自身，其处于目的基因不被表达的条件下。
本领域技术人员会容易地认同，诸如位点特异性诱变和随机诱变、聚合酶链式反应方法和蛋白工程化技术的分子生物学领域的进步提供了广泛的适当的工具和操作步骤，以用于改造或者工程化农业上感兴趣的蛋白的氨基酸序列和潜在的基因序列。
在一些实施方案中，可以对本申请的核苷酸序列进行改变，以进行保守氨基酸替换。保守氨基酸替换的原则和实例在下文中进一步描述。在某些实施方案中，可以依照公开的单子叶密码子偏好性对本申请的核苷酸序列进行不改变氨基酸序列的替换，例如可以用单子叶植物偏好的密码子替换编码同一氨基酸序列的密码子，而不改变该核苷酸序列所编码的氨基酸序列。在一些实施方案中，以编码同一氨基酸序列的不同密码子替换本申请中的部分核苷酸序列，从而在改变核苷酸序列的同时不改变其编码的氨基酸序列。保守变体包括由于遗传密码子简并性而编码实施方案的蛋白中的一种的氨基酸序列的那些序列。在一些实施方案中，根据单子叶植物偏好密码子替换本申请中的部分核苷酸序列。本领域技术人员会认识到氨基酸添加和/或取代通常基于氨基酸侧链取代基的相对相似性，例如，所述取代基的疏水性、电荷、大小等等。具有各种前述所考虑性质的示例性氨基酸取代基团为本领域技术人员所公知，并且包括精氨酸与赖氨酸；谷氨酸和天门冬氨酸；丝氨酸和苏氨酸；谷氨酰胺和天冬酰胺；以及缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸。关于不影响目的蛋白生物学活性的适当氨基酸取代的指南可以在Dayhoff等人(1978)Atlas of Protein Sequence andStructure(蛋白序列和结构图集)(Natl.Biomed.Res.Found.,Washington,D.C)(通过引用并入本文)的模型中找到。可以进行诸如将一个氨基酸换作具有相似性质的另一个氨基酸的保守性取代。序列一致性的鉴定包括杂交技术。例如，将已知核苷酸序列的全部或部分用作与其它相应核苷酸序列选择性杂交的探针，所述其它相应核苷酸序列存在于来自所选生物体的已克隆基因组DNA片段或cDNA片段群(即基因组文库或cDNA文库)。所述杂交探针可以是基因组DNA片段、cDNA片段、RNA片段或其它寡核苷酸，并且可以用诸如32P的可检测基团或其它可检测标志物来标记。因而，例如，可以通过标记基于实施方案序列的合成寡核苷酸制备杂交探针。制备杂交探针和构建cDNA及基因组文库的方法通常为本领域已知。可以在严紧条件下进行所述序列的杂交。如本文所用，术语“严紧条件”或“严紧杂交条件”表示如下条件，即在该条件下，相对于与其它序列杂交，探针将以可检测的更大程度(例如，背景的至少2倍、5倍或10倍)与其靶序列杂交。严紧条件是序列依赖性的并且在不同环境中有所不同。通过控制杂交严紧性和/或控制清洗条件，可以鉴定与所述探针100％互补的靶序列(同源探针法)。可选择地，可以调节严紧条件，以允许一些序列错配，以便检测较低的相似度(异源探针法)。通常，探针长度少于约1000或500个核苷酸。通常，严紧条件是如下的条件，即在该条件中，盐浓度为pH 7.0至8.3下，少于约1.5M Na离子，通常约0.01M至1.0M Na离子浓度(或其它盐)，并且温度条件为：当用于短探针时(例如10到50个核苷酸)，至少约30℃；当用于长探针时(例如大于50个核苷酸)，至少约60℃。还可以通过添加诸如甲酰胺的去稳定剂来实现严紧条件。示例性的低严紧条件包括37℃下使用30％至35％的甲酰胺缓冲液、1M NaCl、1％SDS(十二烷基硫酸钠)杂交，50℃至55℃下在1×至2×SSC(20×SSC＝3.0MNaCl/0.3M柠檬酸三钠)中清洗。示例性的中度严紧条件包括37℃下在40％至45％甲酰胺、1.0M NaCl、1％SDS中杂交，55℃至60℃下在0.5×至1×SSC中清洗。示例性的高严紧条件包括37℃下在50％甲酰胺、1M NaCl、1％SDS中杂交，60℃至65℃下在0.1×SSC中最后清洗至少约20分钟。任选地，清洗缓冲液可以包含约0.1％至约1％SDS。杂交持续时间通常少于约24小时，通常为约4小时至约12小时。特异性通常依赖杂交后的清洗，关键因素在于最后清洗溶液的离子强度和温度。DNA-DNA杂合体的Tm(热力学熔点)可以近似自Meinkoth andWahl(1984)Anal.Biochem.138:267-284的公式：Tm＝81.5℃+16.6(logM)+0.41(％GC)-0.61(％甲酰胺)-500/L；其中M是一价阳离子的克分子浓度，％GC是DNA中鸟苷和胞嘧啶核苷酸的百分数，“甲酰胺％”是杂交溶液的甲酰胺百分数，而L是杂合体的碱基对长度。Tm是(确定的离子强度和pH下)50％的互补靶序列与完全匹配的探针杂交时的温度。通常将清洗至少进行至达到平衡，并且达到低的杂交背景水平，诸如进行2小时、1小时或30分钟。每1％的错配对应使Tm降低约1℃；因而，可以调节Tm、杂交和/或清洗条件，从而与所需一致性的序列杂交。例如，如果需要≥90％一致性的序列，可以将Tm降低10℃。通常，将严紧条件选择为比确定离子强度和pH下的特异序列及其互补序列的Tm低约5℃。然而，在非常严紧的条件下，可以在比所述Tm低4℃下进行杂交和/或清洗；在中度严紧条件下，可以在比所述Tm低6℃下进行杂交和/或清洗；在低严紧条件下，可以在比所述Tm低11℃下进行杂交和/或清洗。
在一些实施方案中，还包括核苷酸序列及其编码的氨基酸序列的片段。如本文所用，术语“片段”指实施方案的多核苷酸的核苷酸序列的一部分或者多肽的氨基酸序列的一部分。核苷酸序列的片段可以编码蛋白片段，所述蛋白片段保留天然或相应全长蛋白的生物学活性，并因而具有蛋白活性。突变体蛋白包括天然蛋白的生物活性片段，其包含保留天然蛋白生物学活性的连续氨基酸残基。一些实施方案还包括转化的植物细胞或转基因植物，其包含至少一种实施方案的核苷酸序列。在一些实施方案中，使用表达载体转化植物，所述表达载体包含至少一种实施方案的核苷酸序列以及与其可操作地连接的在植物细胞中驱动表达的启动子。转化的植物细胞和转基因植物表示基因组内包含异源多核苷酸的植物细胞或植物。一般来说，所述异源多核苷酸在转化的植物细胞或转基因植物的基因组内稳定地整合，以致将所述多核苷酸传递给后代。可以将所述异源多核苷酸单独地或作为表达载体的一部分整合进基因组。在一些实施方案中，本申请涉及的植物包括植物细胞、植物原生质体、可以再生出植物的植物细胞组织培养物、植物愈伤组织、植物团块和植物细胞，其为完整的植物或者植物的部分，诸如胚胎，花粉，胚珠，种子，叶，花，枝，果实，果仁，穗，穗轴，壳，秸秆，根，根尖，花药等等。本申请还包括源于本申请的转基因植物或其子代、并因而至少部分地包含本申请的核苷酸序列的植物细胞、原生质体、组织、愈伤组织、胚胎以及花、茎、果实、叶以及根。
在核酸扩增的情况下术语“扩增”是其中产生附加拷贝的选择核酸(或其转录形式)的任何过程。一般的扩增方法包括基于多种聚合酶的复制方法，包括聚合酶链反应(PCR)、连接酶介导的方法如连接酶链反应(LCR)以及基于RNA聚合酶的扩增(例如通过转录)方法。
以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。在不背离本发明精神和实质的情况下，对本发明方法、步骤或条件所作的修改或替换，均属于本申请的范围。若无特别指明，实施例按照常规实验条件，如Sambrook等人的分子克隆实验手册(SambrookJ&Russell D W,Molecular cloning:a laboratory manual,2001)，或按照制造厂商说明书建议的条件。若未特别指明，实施例中所用的化学试剂均为常规市售试剂，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。
实施例1玉米抗旱耐盐基因鉴定
本发明选择了玉米CCT基因ZmCOL3、ZmCOL14进行了旱盐胁迫鉴定(基因信息可参见：Minliang Jin,Xiangguo Liu,Wei Jia,et al.ZmCOL3,a CCT gene repressesflowering in maize by interfering with the circadian clock and activatingexpression of ZmCCT[J].JIPB,2018,60(6):465-480)，并选择玉米启动子p551(序列如SEQ ID NO.6所示)驱动上述基因表达，分别构建超表达载体，转化玉米自交系受体KN5585(植物新品种权申请号20191002444)，并对获得的转化苗进行抗旱和耐盐性筛选鉴定，具体方法如下：
耐盐鉴定：在长日照条件下于3叶1心期用200mmol/L NaCl进行盐胁迫处理。在盐胁迫14d后，调查玉米植株的株高和根系生长情况。
抗旱鉴定：在26℃暗培养条件下，将玉米种子置于湿润的脱脂棉上进行诱导发芽；玉米发芽后，选择芽势一致的种子栽种于装填了200g耕种层土壤(装盆前充分混匀烘干)的培养钵中；单独记录200g干燥土壤的饱和含水量，此后每天维持土壤含水量在饱和含水量的65％左右，其他培养条件为28℃/22℃(16h昼/8h夜)，光照强度250μmol/(m2·s)，相对湿度60％，培养至3叶1心期；保持光温周期不变，通过停止供水(对照仍维持土壤含水量在饱和含水量的65％左右)，进行模拟干旱胁迫。调查玉米植株和根系生长情况。
结果表明，在盐和旱的胁迫下，ZmCOL3-OE的株高和根系的平均增长量是显著高于对照和其他基因的超表达植株的(结果如表1所示)，表明ZmCOL3基因具有调控玉米植株抗旱和耐盐的功能，可以用于调控玉米抗旱或耐盐性状，例如，超表达ZmCOL3基因以提高玉米的抗旱或耐盐性。
表1超表达COL基因玉米旱盐胁迫后的株高和根系变化情况
结果以平均值±标准差表示。
实施例2 ZmCOL3超表达对玉米花期的影响
本发明进一步鉴定了ZmCOL3-OE玉米材料的开花期和产量。具体实施方式为：分别在短日照地区(海南省乐东黎族自治县吉林省农业科学院试验田)和长日照地区(吉林省公主岭市吉林省农业科学院试验田)调查ZmCOL3-OE和受体KN5585的抽雄、散粉和吐丝时间等花期性状以及穗长、穗重、穗行数和百粒重等产量性状。结果显示，ZmCOL3-OE比KN5585的抽雄、散粉、吐丝时间均延迟2-6天，差异显著。而部分产量性状高于受体，但平均产量的增幅并不明显。ZmCOL3基因的组成型超量表达造成了玉米开花延迟，会延长玉米的收获期，从而增加种植成本。
表2超表达ZmCOL3基因玉米花期和穗部性状
实施例3使用根特异性启动子驱动ZmCOL3基因表达
虽然还没有公开技术资料显示ZmCOL3基因调控玉米抗旱或耐盐性的具体机制(促进根发育还是调节气孔开放还是提高ROS含量等)，但为了解决这一问题，本发明尝试用根特异性启动子驱动ZmCOL3基因表达，并测试玉米植株的开花时间和抗旱耐盐性。
本发明选择了几种根特异启动子，包括ZmRCP、ZmMTL(序列如SEQ ID NO.7所示)，以及玉米超表达启动子p551(与实施例1中使用的相同)和ubi(序列如SEQ ID NO.8所示)。
将这些启动子序列人工合成后构建到pXG071表达载体上。其中含有ZmRCP启动子的载体图如图1所示。
将构建的根特异性表达载体通过农杆菌介导转化受体材料KN5585，获得转基因玉米植株，并对这些植株进行开花期、耐盐性和抗旱性的鉴定，鉴定方法参照实施例1和实施例2。
表3根特异性表达ZmCOL3基因玉米旱盐胁迫后的株高和根系变化情况及开花期调查
结果以平均值±标准差表示。
鉴定结果显示，在促进抗旱抗盐性上MTL启动子和RCP启动子具有更好的效果。在两者之间，MTL还要由于RCP。然而，从花期性状角度看，MTL启动子虽然抗性好，但是对花期的延迟也更作用也更大。因此，综合考虑，利用ZmRCP启动子驱动ZmCOL3可获得花期不变、抗旱和耐盐性均更强的玉米材料。
虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。
Claims (8)
1.基因ZmCOL3在调控玉米抗旱或耐盐性中的应用，其特征在于：所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.蛋白在调控玉米抗旱或耐盐性中的应用，其特征在于，所述蛋白的氨基酸序列如SEQID NO.2所示。
3.核酸在调控玉米抗旱或耐盐性中的应用，其特征在于，所述的核酸编码权利要求2中所述的蛋白；任选地，所述的核酸序列如SEQ ID NO.3所示。
4.表达盒，其特征在于，所述表达盒含有玉米根特异启动子以及编码权利要求2中所述蛋白的核酸分子；任选地，所述的玉米根特异启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示；所述的核酸如权利要求3中所述；任选地，所述表达盒还含有NOS终止子；任选地，所述表达盒的序列如SEQ ID NO.5所示。
5.表达载体，其特征在于，所述的表达载体含有权利要求4所述的表达盒。
6.宿主细胞，其特征在于，所述的宿主细胞包含权利要求5所述的表达载体；任选地，所述的宿主细胞为农杆菌细胞。
7.提高玉米抗旱或耐盐性的方法，其特征在于，用权利要求5所述的表达载体或权利要求6所述的宿主细胞转化玉米，得到转基因玉米；筛选开花期不变且抗旱或耐盐性提高的材料。
8.权利要求4-7所述的表达盒、表达载体、宿主细胞和方法在不影响玉米开花期的同时提高玉米抗旱耐盐性中的应用。
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