CN116327687A - 一种刺激响应型可注射复合载药水凝胶及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于药物载体基础材料领域,公开了一种刺激响应型可注射复合载药水凝胶及其制备方法。复合载药水凝胶作为一种药物递送系统包括以氯化钙和海藻酸钠构成的三维网络可注射水凝胶为载体骨架,以分散于水凝胶基质中的聚合物聚苯胺纳米纤维和药物蛋白蜂毒肽为治疗体系两部分组成。本发明将纳米纤维和药物多肽分散在生物相容性优异的可注射水凝胶中,实现了药物长效释放、多种模式协同治疗的效果。
Description
技术领域
本发明属于药物载体基础材料领域,尤其涉及一种刺激响应型可注射复合载药水凝胶及其制备方法。
背景技术
现代癌症治疗手段包括手术治疗、放疗、化疗等,在疗程中长伴随着无法根治、毒副作用大、易转移易复发等问题,究其原因是这些治疗方法存在一定的局限性,无法特异性去除肿瘤。一些化疗药物如抗癌抗生素、免疫制剂等对癌症有着很好的抑制效果,但是单独使用的疗效不佳。为了达到理想的治疗效果,近年来肿瘤药物递送系统的构建研究在生物医学领域是一个热点。药物递送系统在药物控释、药物靶向、稳定性调节等方面存在优良的特性,在癌症治疗中,构建智能的药物递送系统输送药物,使其靶向定点释放,可以有效降低药物的毒副作用,发挥药物的最大价值。如此一来,既减少了对正常生物组织的损坏,又加强了对靶向区域的药物释放,因此药物递送系统的构建研究对人类认识治疗肿瘤具有很大意义。
水凝胶作为一种具有三维网络结构的高分子聚合物,已经成为药物递送系统的重要平台之一。水凝胶的制备方法简单,一般由聚合物链间的物理交联(温度敏感性凝胶、分子自组装凝胶)或化学交联(交联剂交联凝胶、辐射交联凝胶、光引发聚合凝胶)作用而形成,具有生物相容性好、载药能力强、药物控释效果佳等优点。可注射水凝胶作为水凝胶中的一员,其在生物医学中具有迷人的吸引力,除具备水凝胶的传统优点外,还具备可设计、可调控的特点,应用时对患体无明显创伤、操作简单,大大减小患者治疗的痛苦。
水凝胶的特异性释放药物通常是通过刺激响应实现的,刺激响应的实现主要包括体外刺激和体内刺激两方面,体外刺激主要利用外加刺激如外加磁场、光源、超声等方式实现药物的释放;体内刺激主要是利用肿瘤天然的微环境,肿瘤微环境作为癌细胞培养的土壤,对肿瘤的发生、生长有着重要的影响,与正常组织相比,肿瘤微环境表现出更低的酸性、高水平的ATP、活性氧和谷胱甘肽、过表达的酶和肿瘤区域乏氧等。
虽然现有技术中局部给药的方式虽能大大提高局部药物浓度,但同时单一给药方式,例如化疗,细胞易产生耐药性从而导致化疗失败。再如,近年来,干扰肿瘤微环境的治疗体系也逐渐被研究者所发现,在肿瘤微环境中,钙离子在肿瘤细胞的生长、增殖及凋亡中有着关键作用,由于自身的智能调节机制,钙离子含量在一定的范围内动态平衡,当施加药物其含量过高时,会严重影响细胞内钙含量稳态,实现“钙离子过载”,当过多的钙离子累计在细胞内时,会严重损坏线粒体的功能,产生细胞呼吸水平下降、ATP含量减小、线粒体膜电位降低等效应,进而会对肿瘤体系造成严重损伤。参见公开文献Zheng Pan et al.AMultichannel Ca2+Nanomodulator for Multilevel Mitochondrial Destruction-Mediated Cancer Therapy[J].Advanced Materials,2021,33(15):e2007426-e2007426.公开了一种基于钙离子过载体系的纳米平台,制备了聚乙二醇(PEG)功能化的具备酸性刺激响应的CaCO3纳米颗粒(PEGCaNMCUR+CDDP),后负载姜黄素(CUR)和顺铂(CDDP),CUR会抑细胞内Ca2+的外排,CDDP可以通过造成线粒体损伤以及线粒体结构和代谢异常诱导线粒体功能障碍。释放出的Ca2+积累在细胞质中,诱导线粒体膜电位降低,进而影响细胞呼吸,降低细胞内ATP含量的产生,促进细胞凋亡(Advanced Materials 2021,2007426),但是这种治疗是采取尾静脉注射的方法,需要在体内循环数天且易导致全身毒性发生。
发明内容
综上所述,确有必要设计构建一种新的刺激响应可注射复合水凝胶载药体系,实现基于钙离子过载、光热消融和化疗的肿瘤协同治疗。利用载药系统集多种治疗方式一体化的优势,并降低高剂量药物对机体产生损伤的问题。因此,针对现有技术中存在的上述问题,本发明提供了一种纳米纤维-可注射复合水凝胶载药体,该载药体系以可注射水凝胶为主体骨架,在水凝胶基质中包覆聚苯胺纳米纤维和亲水性多肽药物蜂毒肽,利用可注射水凝胶良好的生物相容性以及流动性,通过注射将药物直接输送在肿瘤部位,形成了多药协同治疗,一次注射长期作用的治疗效果。由于本发明所用材料都具有很好的生物相容性与低毒性,合成过程简单,本材料有望具有良好的生物应用前景。
本发明的技术方案如下所述:
第一方面,本发明提供一种刺激响应型可注射复合载药水凝胶,所述复合载药水凝胶由海藻酸钙水凝胶包载聚苯胺纳米纤维PANI NF、蜂毒肽构成,所述聚苯胺纳米纤维呈纤维状,长700-800nm、直径100-150nm;所述海藻酸钙水凝胶为由氯化钙溶液与海藻酸钠溶液按2:7的体积比混合成胶且两者混合前氯化钙CaCl2的配置浓度范围为2-100mM,海藻酸钠ALG的配置浓度范围为4-20mg/mL;成胶后所述蜂毒肽的包载浓度为50μg/mL,PANI NF的包裹浓度为0.6mg/mL。
优选的,所述聚苯胺纳米纤维是通过苯胺与过硫酸铵于高氯酸溶液中通过氧化聚合法制备而成。
本发明提供的所述刺激响应型可注射复合载药水凝胶在酸性条件下即可降解,所述可注射复合水凝胶的使用方法为:用注射器注射于患位,在肿瘤微酸环境的刺激下,可注射水凝胶逐渐降解,释放肿瘤治疗药物蜂毒肽和聚苯胺纳米纤维;包载的肿瘤治疗药物与海藻酸钙水凝胶降解后释放的钙离子协同作用,促进肿瘤的消亡,且所述刺激响应型可注射复合载药水凝胶降解后无生物毒性。
第二方面,本发明还提供了上述刺激响应型可注射复合载药水凝胶的制备方法,该方法包括以下步骤:
选取呈线性纤维状且长700-800nm、直径100-150nm范围内的聚苯胺纳米纤维;
用超纯水配制氯化钙溶液,配置的氯化钙溶液浓度范围为2-100mM,后加入聚苯胺纳米纤维,得第一混合液,第一混合液中聚苯胺纳米纤维的浓度为2.7mg/mL;
用超纯水配制含有蜂毒肽的海藻酸钠溶液;得第二混合液,第二混合液为含有64.5μg/mL蜂毒肽的4-20mg/mL的海藻酸钠溶液;
取第一混合液和第二混合液两者体积比为2:7,于涡轮震荡仪震荡充分混合,得所述的刺激响应纳米纤维-可注射复合水凝胶。
进一步的,所述氯化钙溶液的浓度优选为18mM;
优选的,所述聚苯胺纳米纤维是通过苯胺与过硫酸铵于高氯酸溶液中通过氧化聚合法制备而成,具体的,所述聚苯胺纳米纤维的制备方法为:将苯胺溶液、过硫酸铵固体分别加入到高氯酸溶液中,分别配制获得苯胺混合溶液和过硫酸铵混合溶液;将苯胺混合溶液、过硫酸铵混合溶液分别进行超声处理、磁力搅拌、然后将过硫酸铵混合溶液逐滴加入到苯胺混合溶液中,然后在冰水浴的条件下进行反应至少24h,后用乙醇、超纯水分别洗涤两次,再冻干后可得聚苯胺纳米纤维。进一步优选的,将苯胺溶液加入到高氯酸溶液中,是通过在1000转/分的磁力搅拌器下搅拌均匀后配置成苯胺混合溶液的;进一步优选的,所述苯胺与过硫酸铵物质的量之比为3:2;进一步优选的,所述磁力搅拌具体为210转/分的磁力搅拌器下搅拌。
发明原理:现有技术中钙离子过载是通过纳米碳酸钙等纳米药物通过静脉注射、经过血液循环才到达肿瘤区域发挥作用,易造成全身毒性;蜂毒肽单独作为抗癌药物使用时,其癌细胞活性抑制需依赖较高的浓度,同样会对机体产生较大的毒副作用,为了减少抗癌药物对正常细胞的毒副作用、实现肿瘤区域注射的局部治疗,本发明采用可注射水凝胶负载蜂毒肽、具有光热性能和类氧化酶性能的聚苯胺纳米纤维,并选择海藻酸钙水凝胶作为水凝胶载体,一方面考虑到海藻酸钙作为海藻酸盐体系的水凝胶,相较于其他水凝胶,生物相容性良好、降解速率快且具备酸性刺激响应、在肿瘤细胞的微环境下降解释放钙离子、蜂毒肽、具有正电性的聚苯胺纳米纤维;另一方面,海藻酸钙降解后,在癌细胞的细胞外液中不断释放的钙离子,形成钙离子过载;与此同时,蜂毒肽的破膜作用,使大粒径的聚苯胺能够快速涌入癌细胞,钙离子也能够快速的内流,损害肿瘤细胞的自我调节机制、改变肿瘤微环境、对癌细胞造成严重损伤,且进入癌细胞的聚苯胺在外加近红外光的照射下、其优良的光热性能进一步加速癌细胞的凋亡。
本发明具有如下效果:
1、本发明提供的刺激响应型可注射复合载药水凝胶的制备方法,先合成具有优异光热性能、类氧化酶的聚苯胺纳米纤维,再将其分散在氯化钙溶液中,后配制含有蜂毒肽的海藻酸钠溶液,两者根据离子交换作用制备海藻酸钙水凝胶;是由聚苯胺纳米纤维通过物理吸附作用吸附在氯化钙溶液中,进而与溶解有抗癌多肽药物蜂毒肽的海藻酸钠溶液形成可注射复合水凝胶,实现纳米纤维及多肽药物的均匀分散。
2、本发明提供的刺激响应型可注射复合载药水凝胶,这种载药体系致死机制包括蜂毒肽的破膜作用、钙离子过载效应及聚苯胺纳米纤维的光热消融效果所构成;可实现包含化疗、离子疗法、光热疗法多重治疗手段,利用可注射水凝胶的性质优点,解决了单一疗法的局限性,药物联合治疗,提高了治疗效果;
3、聚苯胺纳米纤维和蜂毒肽的封装效率较高,且可注射复合水凝胶的降解速率很快,在pH=6.0的PBS缓冲溶液中,12h的降解效率达到92.3%,蜂毒肽在48h累计释放50.1%,在168h累计释放72.8%,可以长时间给药。该载药系统在1064nm,1.0W/cm2的近红外光照射下,10min内可升到50.3℃,具有肿瘤区域穿透性强、光热性能好等特点。
4、本发明所运用的材料具有低毒性,生物相容性好的特点,制备合成过程简单,原材料成本低廉,非常有利于大规模的推广研究,在生物应用领域具有广阔的应用前景。
附图说明
图1为本发明所述的刺激响应型可注射复合载药水凝胶的制备及作用机理图;
图2a为实施例1中制备的聚苯胺纳米纤维的SEM图;
图2b为实施例1最终制备的产物即可注射复合水凝胶的SEM图;
图2c为实施例1最终制备的可注射复合水凝胶的成胶产品保存于玻璃容器中的照片;
图2d为实施例1最终制备的可注射复合水凝胶的可注射行为展示照片;
图3a为实施例1制备的可注射复合水凝胶的降解曲线图;
图3b为实施例1制备的可注射复合水凝胶中抗癌药物蜂毒肽的释放曲线;
图4为实施例1制备的可注射复合水凝胶的光热升温曲线;
图5为实施例1制备的可注射复合水凝胶的降低谷胱甘肽GSH效果图;
图6为实施例1制备的可注射复合载药水凝胶中的蜂毒肽与钙离子的协同效果;
图7为实施例1制备的可注射水凝胶作为药物载体的生物相容性MTT测试图;
图8为实施例1制备可注射复合水凝胶载药体系的细胞治疗效果图。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明作进一步详细描述。
如图1所示,本发明提供了一种刺激响应可注射复合载药水凝胶及其制备方法,以氯化钙和海藻酸钠溶液构成可注射水凝胶骨架结构,将蜂毒肽和聚苯胺纳米纤维包覆在水凝胶基质中。氯化钙和聚苯胺混合液与蜂毒肽和海藻酸钠混合液根据适宜比例形成三维网络水凝胶结构,用注射器注射于患位,在肿瘤微环境的刺激下,可注射水凝胶逐渐降解,释放蜂毒肽和聚苯胺纳米纤维,其中蜂毒肽具有破膜作用,进而促进细胞外液中的高浓度钙离子和聚苯胺进入细胞内,实现钙离子过载效应,诱导线粒体功能障碍,线粒体膜电位减低,抑制细胞内ATP水平,促进细胞凋亡,且在外加近红外光的作用下,聚苯胺优异的光热性能得以展现,肿瘤区域温度升高至50℃,加速肿瘤细胞死亡。
实施例1
本实施例1提供的一种刺激响应型可注射复合载药水凝胶的具体制备过程如下:
步骤S1,制备聚苯胺纳米纤维:取0.365ml浓度为0.1M的苯胺溶液于20ml的浓度为0.1M的高氯酸溶液中,在1000转/分的磁力搅拌器下搅拌均匀,配置成苯胺混合溶液;取0.609g过硫酸铵溶解于20ml的浓度为0.1M的高氯酸溶液,配置成过硫酸铵混合溶液;将苯胺混合溶液、过硫酸铵混合溶液分别进行超声处理5min、再分别于210转/分的磁力搅拌器下搅拌,然后将过硫酸铵混合溶液逐滴加入到苯胺混合溶液中,然后在冰水浴的条件下进行反应24h;反应完成后,在10000转/分的离心机作用下分离,并分别用20mL乙醇、超纯水洗涤,反复三次,得到纯化的聚合物纳米纤维;
步骤S2,制备可注射复合载药水凝胶:用超纯水配制浓度为18mM的氯化钙溶液,后加入2.7mg/mL的聚苯胺纳米纤维,配置获得第一混合液;用超纯水配制含有64.3μg/mL蜂毒肽的海藻酸钠溶液且所述海藻酸钠的浓度为4mg/mL,配置获得第二混合液;分别取100μL的第一混合液、350μL的第二混合液加入到2mL离心管中,于涡轮震荡仪充分混合,获得本实施例的产物即本发明所述刺激响应型可注射复合载药水凝胶。
图2a为实施例1中制备的聚苯胺纳米纤维的SEM图,可以看出制备的聚苯胺纳米纤维呈线性纤维状,且尺寸均一,单个聚苯胺纳米纤维的长度范围在700-800nm、直径在100-150nm。
图2b为实施例1最终制备的产物即可注射复合水凝胶的SEM图,从图可以看出可注射复合水凝胶呈现三维网状结构,水凝胶基质中包覆药物。
图2c为实施例1最终制备的可注射复合水凝胶的成胶产品保存于玻璃容器中的照片,水凝胶宏观形状良好;
图2d为实施例1最终制备的可注射复合水凝胶的可注射行为展示照片,从直径为0.45mm注射器中轻松注射呈现任意形状。所述可注射复合水凝胶可从直径小于等于0.45mm的注射器中注射出来,具有优异的可注射性质。
图3a为实施例1制备的可注射复合水凝胶分别在pH=7.4和pH=6.0两种PBS溶液下的降解情况,凝胶一经降解,便会释放其中的钙离子,因此凝胶的降解情况可根据外液中的钙离子的含量来表征,根据肿瘤微环境,设计了两种不同pH条件下的对比降解情况,其中当pH=7.4时,钙离子的释放是非常缓慢的,在6h和12h的累积释放率分别为11.2%、28.6%,这是由于凝胶内部有一小部分的钙离子并没有作为水凝胶骨架,而是和药物一样包覆在了水凝胶基质中,因此在溶液环境下,这一小部分钙离子会释放出来,12h之后钙离子的累积释放曲线趋平,因此水凝胶少量在pH=7.4的环境下降解,而当外部的PBS溶液pH=6.0时,水凝胶降解速率较快,在6h和12h的钙离子累积释放率为58.7%和97.6%,释放速率远远大于模拟体液环境,因此可注射复合水凝胶具有酸性pH刺激响应。
具体的,上述图3a中钙离子释放曲线的绘制和计算方法如下:先用钙离子试剂检测盒绘制了钙离子释放标准曲线;将分子量为3000D的透析袋预先在热水中浸泡20min,将配制好的可注射复合水凝胶900μL用注射器转移到透析袋中,后将透析袋放入含有7mL含有两种pH的缓冲溶液玻璃瓶中;玻璃瓶中放入适宜磁子,放在磁力搅拌器上以300转/分的速率搅拌溶液;实验开始后,分别在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12h时间点取出50μL透析溶液,并补充新的缓冲液,保持玻璃瓶内溶液体积不变;在酶标仪下测定透析溶液的紫外吸光度,带入到标准曲线方程即可计算释放速率。
图3b为实施例1制备的可注射复合水凝胶中抗癌药物蜂毒肽的释放曲线;同样的,设计了两种不同pH条件,测试可注射复合水凝胶具备的酸性刺激响应能否加快药物的释放,并且药物对正常组织最大化的减小其副作用。当pH=7.4时,蜂毒肽的释放是非常缓慢的,在24h和48h的累积释放率分别为23.1%和25.6%,由此可说明,前期释放稍快,而后释放缓慢,继续监测其释放曲线,发现蜂毒肽的释放趋平,168h的累积释放率为26.0%,考虑到实验误差影响,可判定蜂毒肽在模拟体液环境下释放缓慢,而当外部的PBS溶液pH=6.0时,由于水凝胶降解速率较快,在24h和48h的蜂毒肽累积释放率为38.1%和54.6%,继续监测,蜂毒肽的累积释放仍有增加,最终在168h释放至72.7%,实现了长时间给药、控释的效果。
具体的,上述蜂毒肽释放的曲线的绘制和计算方法如下:先配制0、2、4、6、8、10μg/mL的标准溶液,并在荧光光谱仪(280nm激发波长、356nm吸收波长)下测定对应的荧光强度,绘制蜂毒肽的标准曲线;将分子量为7000D的透析袋预先在热水中浸泡20min,将配制好的可注射复合水凝胶450μL用注射器转移到透析袋中,后将透析袋放入含有5mL含有两种pH的缓冲溶液玻璃瓶中;玻璃瓶中放入适宜磁子,放在摇床上以100转/分的速率搅拌溶液;分别在1、2、3、4、5、6、8、10、12、24、36、48、72、96、120、144、168h时间点取除1mL透析溶液,并补充相同条件下的新的缓冲液,保持玻璃瓶内溶液体积不变;在荧光光谱仪下测定透析溶液的荧光强度,带入到标准曲线方程即可计算释放速率。
图4为实施例1制备的可注射复合水凝胶的光热升温曲线,因为聚苯胺优异的光热性能,比较了掺杂不同浓度聚苯胺纳米纤维的可注射复合水凝胶的升温效果,在近红外光1064nm,1.0W/cm2的作用下,不掺杂聚苯胺纳米纤维的可注射复合水凝胶在10min内几乎不升温,而掺杂0、0.2、0.6、1.0mg/mL聚苯胺组分别升到46.1℃、50.3℃、52.5℃,展现出了很强的光热效果。
图5为实施例1制备的可注射复合水凝胶的降低谷胱甘肽GSH实验图,GSH的浓度跟肿瘤细胞内的浓度一致,为10mM。由于聚苯胺具备降低GSH的能力,对掺杂聚苯胺的可注射水凝胶进行了模拟降低GSH实验。分别制作含有0、0.6mg/mL聚苯胺的可注射水凝胶后吸取450μL凝胶于10mL玻璃瓶中,为了模拟肿瘤微环境处的生理环境,瓶中加入3mLpH=6.0的PBS缓冲溶液,后置于摇床以37℃、200rpm的转速震荡,分别于第1、2、3、4d取600μL上清液与600μL 10mM GSH溶液共混,并补齐等体积PBS缓冲溶液。共混2d后,取180μL混合液于1.5mL离心管,后加入314μLTris-HCl(pH=8.5)和6μLDTNB溶液,使用涡轮震荡仪混合均匀后,在离心机以10000r/min的转速离心10min后,取150μL上清液于96孔板中,在酶标仪下412nm波长处测紫外吸收值。当聚苯胺在可注射水凝胶中的浓度为0.6mg/mL时,在4-5天,可降低超过55%的GSH,显现出了良好的降低GSH性质。
图6为实施例1制备的可注射复合载药水凝胶中的蜂毒肽与钙离子的协同效果,实验采用4T1细胞,采用MTT测试方法。当孵育过程中只有蜂毒肽时,在2μg/mL时细胞的存活率超过85%,而当体系中掺杂和细胞外液相同浓度的钙离子时,细胞活性骤降至20%以下,可有效降低单独蜂毒肽治疗时的浓度,降低副作用。
图7为实施例1制备的可注射水凝胶作为药物载体的生物相容性测试结果,对于智能的载药系统来说,载体优异的生物相容性是至关重要的。为了测试不同凝胶含量的可注射水凝胶的生物相容性,采用MTT测试法实验。根据实验结果,凝胶分数再0.09wt%-1.42wt%区间范围内与Control组相比24h和48h细胞存活率均在95%以上,无明显毒性,生物相容性很好。
图8为实施例1制备可注射复合水凝胶载药体系的细胞治疗效果图,图中各组成分如表1所示。实验采取MTT测试法,设计了6个不同的治疗组别,其中,载药组别MP@HG+L具备光热Laser条件对肿瘤细胞的杀伤效果最强,与肿瘤细胞共孵育48h后80%以上的肿瘤细胞均被杀死;具体实验方法如下:制备6个组别材料,其中可注射水凝胶HG的成胶比例均和上述一致,聚苯胺纳米纤维PANI NF的浓度为0.6mg/mL,蜂毒肽Melittin的浓度为50μg/mL;取两个96孔板,分别设置6个组别,每组5个复孔。每孔加入150μL细胞悬液,在培养箱(37℃,5%CO2)培养24h;两个96孔板,每个组别分别加入50μL对应材料,于培养箱分别孵育24h,48h;孵育完成后,吸出上层混合液,每个孔分别加入50μL MTT(1×)溶液,于培养箱继续孵育4h;吸出上层MTT,每孔加入200μLDMSO溶液,于摇床(110转/分)反应15min;后在酶标仪490nm处测量吸光度,后与Control组对比计算。
表1
所有的测试结果表明,本发明所涉及的刺激响应型可注射复合载药水凝胶采用纳米纤维及抗癌多肽包裹进入水凝胶中的形式,极大改善了药物的载药量以及载药形式,并结合肿瘤微环境刺激响应特性,实现了药物的控释,协同治疗,提高了治疗效果,该方法的合成过程简便,材料无生物毒性,成本低廉,利于大规模推广研究。此外,对于研究药物递送系统材料的制备领域有着重要研究意义。
Claims (9)
1.一种刺激响应型可注射复合载药水凝胶,其特征在于:所述复合载药水凝胶由海藻酸钙水凝胶包载聚苯胺纳米纤维、蜂毒肽构成,所述聚苯胺纳米纤维呈纤维状,长700-800nm、直径100-150nm;所述海藻酸钙水凝胶为由氯化钙溶液与海藻酸钠溶液按2:7的体积比混合成胶且两者混合前氯化钙CaCl2的配置浓度范围为2-100mM,海藻酸钠ALG的配置浓度范围为4-20mg/mL;成胶后所述蜂毒肽的包载浓度为50μg/mL,聚苯胺纳米纤维的包裹浓度为0.6mg/mL。
2.根据权利要求1所述的一种刺激响应型可注射复合载药水凝胶,其特征在于:所述可注射复合水凝胶的使用方法为:用注射器注射于患位,在肿瘤微酸环境的刺激下,可注射水凝胶逐渐降解,释放蜂毒肽和聚苯胺纳米纤维。
3.根据权利要求1所述的一种刺激响应型可注射复合载药水凝胶,其特征在于:所述聚苯胺纳米纤维是通过苯胺与过硫酸铵于高氯酸溶液中通过氧化聚合法制备而成。
4.一种刺激响应型可注射复合载药水凝胶的制备方法,其特征在于:制备方法包括以下步骤:
选取呈线性纤维状且长700-800nm、直径100-150nm范围内的聚苯胺纳米纤维;
用超纯水配制氯化钙溶液,配置的氯化钙溶液浓度范围为2-100mM,后加入聚苯胺纳米纤维,得第一混合液,第一混合液中聚苯胺纳米纤维的浓度为2.7mg/mL;
用超纯水配制含有蜂毒肽的海藻酸钠溶液即第二混合液,第二混合液为含有64.5μg/mL蜂毒肽的4-20mg/mL的海藻酸钠溶液;
取第一混合液和第二混合液且第一混合液与第二混合液的体积比为2:7,于涡轮震荡仪震荡充分混合,得所述的刺激响应纳米纤维-可注射复合水凝胶。
5.根据权利要求4所述的一种刺激响应型可注射复合载药水凝胶的制备方法,其特征在于:所述氯化钙溶液的浓度为18mM。
6.根据权利要求4所述的一种刺激响应型可注射复合载药水凝胶的制备方法,其特征在于:所述聚苯胺纳米纤维的制备方法包括:将苯胺溶液、过硫酸铵固体分别加入到高氯酸溶液中,分别配制获得苯胺混合溶液和过硫酸铵混合溶液;将苯胺混合溶液、过硫酸铵混合溶液分别进行超声处理、磁力搅拌、然后将过硫酸铵混合溶液逐滴加入到苯胺混合溶液中,然后在冰水浴的条件下进行反应至少24h,后用乙醇、超纯水分别洗涤两次,再冻干后可得聚苯胺纳米纤维。
7.根据权利要求6所述的一种刺激响应型可注射复合载药水凝胶的制备方法,其特征在于:将苯胺溶液加入到高氯酸溶液中,是通过在1000转/分的磁力搅拌器下搅拌均匀后配置成苯胺混合溶液的。
8.根据权利要求6所述的一种刺激响应型可注射复合载药水凝胶的制备方法,其特征在于:所述苯胺与过硫酸铵物质的量之比为3:2。
9.根据权利要求6所述的一种刺激响应型可注射复合载药水凝胶的制备方法,其特征在于:所述磁力搅拌具体为210转/分的磁力搅拌器下搅拌。
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