CN116322669A

CN116322669A - 治疗sars-cov-2、其它病毒性疾病和癌症的ohpp配制的氯硝柳胺

Info

Publication number: CN116322669A
Application number: CN202180064845.5A
Authority: CN
Inventors: Y·姚; J·J·张
Original assignee: Plant Selection Co ltd; Purdue Research Foundation
Current assignee: Plant Selection Co ltd; Purdue Research Foundation
Priority date: 2020-07-23
Filing date: 2021-07-23
Publication date: 2023-06-23
Also published as: WO2022020659A1; US20230293573A1

Abstract

本发明一般涉及药物制剂，其基本上增加氯硝柳胺或其药学上可接受的盐对于各种递送途径的生物利用度用于治疗目的。新近增强的制剂还基本上扩展了氯硝柳胺的潜在治疗应用。药物组合物及其使用方法在本公开内容的范围内。

Description

治疗SARS-COV-2、其它病毒性疾病和癌症的OHPP配制的氯硝柳胺

相关申请的交叉引用

本美国专利申请涉及以下并要求以下的优先权利益：于2020年7月23日提交的美国临时专利申请序列号63/055,415、以及于2021年4月29日提交的美国临时专利申请序列号63/181,612，所述美国临时专利申请的内容在此通过引用以其整体并入本公开内容内。

技术领域

本发明一般涉及药物制剂，其基本上增加氯硝柳胺或其药学上可接受的盐对于各种递送途径的生物利用度。新近增强的制剂还基本上扩展了氯硝柳胺的治疗应用。药物组合物及其使用方法在本公开内容的范围内。

背景技术

本节介绍了可以帮助促进本公开内容的更好理解的各方面。相应地，这些陈述应从这个角度来阅读，而不应理解为承认哪些是或不是现有技术。

氯硝柳胺是用于治疗绦虫侵染的商购可得的药品。然而，由于差溶解度，剂量较高，通常为1000至2000mg。最近以来，已发现氯硝柳胺具有作为抗病毒治疗的潜在益处。例如，在所有潜在的Covid-19治疗药物中，由于其证实的抑制SARS-CoV-2病毒的高(体外)功效及其作为FDA批准药物的状态(尽管目前已停止)，氯硝柳胺具有极大的潜力。然而，氯硝柳胺是差水溶性的，这阻碍了其在人体中的有效和一致的吸收。因此，需要目前可用的具有更高溶解度的氯硝柳胺制剂。

Phytoption的OHPP(辛烯基琥珀酸酯羟丙基植物糖原)使氯硝柳胺的溶解度增加至多于>5,000倍，这是先导商业增溶剂(HPMC-AS，

)的至少50倍。重要的是，OHPP配制的氯硝柳胺可以有效地释放到细胞中，以提供生物学功效。

更高和更一致的生物利用度是OHPP配制的氯硝柳胺的优点。氯硝柳胺是BCS II类药物(高渗透性、低溶解度)，并且因此改善氯硝柳胺吸收的最有效方法是增加其溶解度。因此，OHPP方法相对于目前的配制方法，能够基本上改善氯硝柳胺的生物利用度。

Jeon等人(2020)和Gassen等人(2020)的两项独立研究已显示了氯硝柳胺抑制SARS-CoV-2的强功效，分别报告了0.28μM(92ng/mL)和0.17μM(56ng/mL)的IC₅₀值。Schweizer等人(2018)的一项临床研究突出显示了当给予非增溶的氯硝柳胺的经口剂量时的两个问题：(1)阻止药物在患者中有效的血浆浓度的很大差异，以及(2)主要与GI道有关的副作用。这两个问题均被认为起因于试验中使用的氯硝柳胺的低溶解度。相比之下，纳米配制的氯硝柳胺的临床前评估(Lin等人，2016)显示了，可溶性氯硝柳胺不仅增加了经口生物利用度，而且对于小鼠在100mg/kg的经口剂量下压制了肿瘤生长，而无明显毒性；然而，它们的配制是非常复杂的，且对于大量制造或使用不可行。

还存在显示氯硝柳胺对其它病毒有效的其它出版物，所述其它病毒包括流感病毒、登革热病毒、寨卡病毒、SARS-CoV病毒、基孔肯雅病毒等。由于差溶解度的相同原因，关于氯硝柳胺作为针对这些病毒感染的潜在治疗的研究由于显著的生物利用度挑战而尚未进行。

基于这些数据，OHPP配制的氯硝柳胺可以达到氯硝柳胺的期望血浆浓度，伴随基本上增强的一致性和减少的药物剂量，以减轻副作用。这些因素可极大地改善基于氯硝柳胺的药剂的治疗窗口，以用于各种年龄、性别和健康状况的广泛范围的Covid-19患者，和治疗其它病毒性疾病。

到2021年4月21日，Covid-19大流行已在全球造成超过1.43亿人感染和超过300万人死亡(Worldometers)。在临床评估的治疗剂中，瑞德西韦已显示了前景，但具有有限的功效(Beigel等人，2020)，而羟氯喹的使用已引起了关注(Watson等人，2020)。随着世界经济的重新开放，存在关于开发具有大得多功效的替代治疗剂的巨大紧迫性。在所有潜在的药物候选物中，氯硝柳胺由于其几十年前已获得批准的FDA状态、以及其针对SARS-CoV-2的高体外效力而脱颖而出。

发明内容

在本公开内容的一些说明性实施方案中，提供了含有或包含辛烯基琥珀酸酯羟丙基植物糖原(OHPP)和氯硝柳胺的组合物。

在本公开内容的其它说明性实施方案中，提供了用于治疗病毒感染的方法，其包括向有此需要的患者施用有效量的包含OHPP和氯硝柳胺的组合物。

在本公开内容的又另外的说明性实施方案中，提供了用于预防病毒感染的方法，其包括向有此需要的患者施用有效量的包含OHPP和氯硝柳胺的组合物。

在本公开内容的再另外的方面，提供了用于治疗前列腺癌、乳腺癌、肺癌、卵巢癌或其它类型的癌症的方法，其包括向有此需要的患者施用有效量的包含OHPP和氯硝柳胺的组合物。

在本公开内容的进一步的方面，提供了包含OHPP和氯硝柳胺以及一种或多种另外的活性剂的组合物。

在本公开内容的又进一步的方面，提供了用于治疗病毒感染的方法，其包括向有此需要的患者施用有效量的包含OHPP和氯硝柳胺的组合物，并且进一步施用有效量的一种或多种另外的活性剂。

附图说明

图1描绘了氯硝柳胺的化学结构。

图2显示了氯硝柳胺与氯喹和瑞德西韦相比的IC₅₀，复制自Jeon等人(2020)。

图3证实了亚精胺、MK-2206和氯硝柳胺对SARS-CoV-2生长的浓度依赖性抑制，复制自Gassen等人(2020)。

图4描绘了生物药剂学分类系统(BCS)，其中氯硝柳胺是II类药物。

图5描绘了与OHPP纳米颗粒掺合的氯硝柳胺的示意图，改编自Xie和Yao等人(2018b)。

图6显示了单独的氯硝柳胺(左)和OHPP配制的氯硝柳胺(右)的分散体的比较，每种溶液含有在磷酸盐缓冲液中的2.5mg/mL氯硝柳胺(Xie和Yao(2018))。

图7展示了通过DMSO和OHPP增溶的氯硝柳胺的剂量-功效关系，虚线显示了针对前列腺癌细胞PC-3的IC50的估计。

图8显示了对于用不溶性氯硝柳胺(20或80mg/kg)或OHPP配制的氯硝柳胺(20mg/kg)进行管饲的小鼠，血浆中的氯硝柳胺浓度相对于时间和“曲线下面积(AUC)”。

图9显示了在感染后5天，hACE2转基因小鼠的肺病毒滴度。

图10描绘了本公开内容可靶向用于治疗有关疾病(顶行)的潜在途径(第一列)。

具体实施方式

尽管在本文的说明书中详细说明且描述了本公开内容的概念，但说明书中的结果应视为在特性方面是示例性的而不是限制性的；应理解，仅显示且描述了说明性实施方案，并且希望保护落入本公开内容的精神内的所有改变和修改。

如本文使用的，下述术语和短语应该具有下文阐述的含义。除非另有定义，否则本文使用的所有技术和科学术语都具有与本领域普通技术人员通常理解相同的含义。

在本公开内容中，术语“约”可以允许值或范围的一定程度的变化性，例如，在陈述的值或陈述的范围限制的10％内、5％内或1％内。在本公开内容中，术语“基本上”可以允许值或范围的一定程度的变化性，例如，在陈述的值或陈述的范围限制的90％内，95％、99％、99.5％、99.9％、99.99％或至少约99.999％或更多内。

在本文件中，术语“一个”、“一种”或“该/所述”用于包括一个/种或多于一个/种，除非上下文另有明确规定。除非另有说明，否则术语“或”用于指非排他性“或”。另外，应理解，本文采用且并未另外定义的措辞或术语仅用于描述而不是限制的目的。章节标题的任何使用预期帮助文件的阅读，而不应解释为限制。进一步地，与章节标题有关的信息可能出现在该特定章节之内或之外。此外，本文件中提及的所有出版物、专利和专利文件都通过引用以其整体并入本文，如同通过引用个别并入一样。在本文件与通过引用并入的那些文件之间的用法不一致的情况下，并入的参考文献中的用法应该被视为对本文件的用法的补充；对于不可调和的不一致，以本文件中的用法为准。

如本文使用的，术语“盐”和“药学上可接受的盐”指所公开化合物的衍生物，其中母体化合物通过制备其酸盐或碱盐进行修饰。药学上可接受的盐的实例包括但不限于碱性基团如胺的无机酸盐或有机酸盐；以及酸性基团如羧酸的碱式盐或有机盐。药学上可接受的盐包括例如由无毒无机酸或有机酸形成的母体化合物的常规无毒盐或季铵盐。例如，此类常规的无毒盐包括衍生自无机酸如盐酸、氢溴酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸和硝酸的那些盐；以及由有机酸制备的盐，所述有机酸如乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、双羟萘酸、马来酸、羟基马来酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水杨酸、对氨基苯磺酸、2-乙酰氧基苯甲酸、富马酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙烷二磺酸、草酸和羟乙磺酸等等。

药学上可接受的盐可以通过常规化学方法，从含有碱性或酸性部分的母体化合物进行合成。在一些情况下，此类盐可以通过使这些化合物的游离酸或碱形式与在水中或有机溶剂或两者的混合物中的化学计量的适当碱或酸反应进行制备；一般地，非水介质，如醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇或乙腈是优选的。合适盐的列表在Remington’sPharmaceuticalSciences，第17版，Mack Publishing Company，Easton，Pa.，1985中找到，所述参考文献的公开内容在此通过引用并入。

进一步地，在前述和下述实施方案的每一个中，应理解，化学式不仅包括且代表化合物的所有药学上可接受的盐，而且包括化合物化学式或其盐的任何和所有水合物和/或溶剂化物。应了解，某些官能团，例如羟基、氨基和类似基团，以化合物的各种物理形式与水和/或各种溶剂形成络合物和/或配位化合物。相应地，上文化学式应理解为包括且代表那些各种水合物和/或溶剂化物。在前述和下述实施方案的每一个中，还应理解，化学式包括且代表个别地以及以任何和所有可能的混合物两者的每种可能的异构体，例如立体异构体和几何异构体。在前述和下述实施方案的每一个中，还应理解，化学式包括且代表化合物的任何和所有结晶形式、部分结晶形式和非结晶形式和/或无定形形式。

术语“药学上可接受的载体”是领域公认的，并且指涉及携带或转运任何主题组合物或其组分的药学上可接受的材料、组合物或媒介物，例如液体或固体填料、稀释剂、赋形剂、溶剂或包封材料。每种载体必须在与主题组合物及其组分相容并且对患者无害的意义上是“可接受的”。可以充当药学上可接受的载体的材料的一些实例包括：(1)糖，例如乳糖、葡萄糖和蔗糖；(2)淀粉，例如玉米淀粉和马铃薯淀粉；(3)纤维素及其衍生物，例如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和乙酸纤维素；(4)粉状黄蓍胶；(5)麦芽；(6)明胶；(7)滑石；(8)赋形剂，例如可可脂和栓剂蜡；(9)油，例如花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油；(10)二醇，例如丙二醇；(11)多元醇，例如甘油、山梨糖醇、甘露糖醇和聚乙二醇；(12)酯，例如油酸乙酯和月桂酸乙酯；(13)琼脂；(14)缓冲剂，例如氢氧化镁和氢氧化铝；(15)海藻酸；(16)无热原水；(17)等渗盐水；(18)林格氏液；(19)乙醇；(20)磷酸盐缓冲溶液；以及(21)药物制剂中采用的其它无毒的相容物质。

如本文使用的，术语“施用”包括将本文所述的化合物和组合物引入患者的所有手段，包括但不限于经口(po)、静脉内(iv)、肌内(im)、皮下(sc)、经皮、吸入、颊、眼部、舌下、阴道、直肠等等。本文所述的化合物和组合物可以以单位剂型和/或制剂进行施用，所述单位剂型和/或制剂含有常规无毒的药学上可接受的载体、佐剂和媒介物。

用于经口施用的示例性形式包括片剂、胶囊、酏剂、糖浆剂等等。用于肠胃外施用的示例性途径包括静脉内、动脉内、腹膜内、硬膜外、尿道内、胸骨内、肌内和皮下，以及任何其它领域公认的肠胃外施用途径。

肠胃外施用的说明性手段包括针(包括微针)注射器、无针注射器和输注技术，以及本领域公认的任何其它肠胃外施用手段。肠胃外制剂通常是水溶液，其可能含有赋形剂，例如盐、碳水化合物和缓冲剂(优选以在约3至约9范围内的pH)，但是，对于一些应用，它们可能更合适地配制为无菌非水溶液或干燥形式，以与合适的媒介物如无菌、无热原水结合使用。例如，通过冻干在无菌条件下的肠胃外制剂制备，可以使用本领域技术人员众所周知的标准制药技术容易地完成。化合物的肠胃外施用说明性地以盐水溶液的形式或用掺入脂质体内的化合物来执行。在其中化合物本身并不足够可溶以被溶解的情况下，可以应用增溶剂如乙醇。

请求保护的组合的每种化合物的剂量取决于几个因素，其包括：施用方法、待治疗的状况、状况的严重程度、状况是待治疗还是待预防，以及待治疗个人的年龄、重量和健康。另外，关于特定患者的药物基因组学(基因型对治疗剂的药代动力学、药效学或功效概况的作用)信息可能影响所使用的剂量。

应理解，在本文所述的方法中，共施用或组合的个别组分可以通过任何合适的手段同时发生地、同时、序贯地、分开地或在单一药物制剂中进行施用。当共施用的化合物或组合物以分开的剂型进行施用时，关于每种化合物每天施用的剂量数目可以是相同或不同的。化合物或组合物可以经由相同或不同的施用途径进行施用。化合物或组合物可以根据同时或交替方案，在疗法的过程期间的相同或不同时间，并发地以分开或单一形式进行施用。

如本文使用的，术语“治疗有效量”指在组织系统、动物或人中引发生物或医学应答的活性化合物或药物试剂的量，所述生物或医学应答是研究人员、兽医、医生或其它临床医生所寻求的，其包括减轻正在治疗的疾病或病症的症状。在一个方面，治疗有效量是可以以适用于任何医学治疗的合理利益/风险比，治疗或减轻疾病或疾病症状的量。然而，应理解，本文所述的化合物和组合物的每日总用量可以由主治医师在合理的医学判断范围内决定。关于任何特定患者的具体治疗有效剂量水平将取决于各种因素，包括正在治疗的病症和病症的严重程度；所采用的具体化合物的活性；所采用的具体组合物；患者的年龄、体重、一般健康、性别和饮食；施用时间、施用途径和所采用的具体化合物的排泄率；治疗的持续时间；与所采用的具体化合物组合或同时地使用的药物；以及具有普通技能的研究人员、兽医、医生或其它临床医生众所周知的类似因素。

取决于施用途径，本文考虑了宽范围的容许剂量，包括落入约1μg/kg至约1g/kg范围内的剂量。剂量可以是单一的或分开的，并且可以根据广泛多种方案进行施用，所述方案包括q.d.(每天一次)、b.i.d.(每天两次)、t.i.d.(每天三次)，或者甚至每隔一天一次、一周一次、一个月一次、一个季度一次等等。在每个这些情况中，应理解本文所述的治疗有效量对应于施用的实例，或者可替代地对应于总的每天、每周、每月或每季度剂量，如通过给药方案所确定的。

除本文所述的说明性剂量和给药方案之外，应理解，本文所述的化合物的任何一种或混合物的有效量可以通过主治诊断医生或医师，通过使用已知技术和/或通过观察在类似情况下获得的结果进行确定。在确定有效量或剂量时，许多因素由主治诊断医生或医师加以考虑，所述因素包括但不限于哺乳动物(包括人)的物种，其大小、年龄和一般健康，所涉及的具体疾病或病症，疾病或病症的程度或牵涉程度或严重程度，个别患者的应答，所施用的特定化合物，施用模式，所施用制剂的生物利用度特性，所选择的剂量方案，合并用药的使用以及其它有关情况。

术语“患者”包括人和非人动物，例如伴侣动物(犬和猫等等)和家畜动物。家畜动物是为了食物生产而饲养的动物。待治疗的患者优选是哺乳动物，特别是人类。

本发明一般涉及可用于治疗各种类型的感染性疾病和癌症的化合物。用于治疗那些疾病的药物组合物和方法在本发明的范围内。

在一些说明性实施方案中，本公开内容涉及包含高度支化的葡聚糖和氯硝柳胺，或者其药学上可接受的盐、水合物和溶剂化物的组合物。

在一些说明性实施方案中，本公开内容涉及包含高度支化的葡聚糖和氯硝柳胺，或者其药学上可接受的盐、水合物和溶剂化物的组合物，其中所述组合物的氯硝柳胺的经口生物利用度是单独作为药物组合物的氯硝柳胺的经口生物利用度的至少2倍。

在一些说明性实施方案中，本公开内容涉及包含高度支化的葡聚糖和氯硝柳胺，或者其药学上可接受的盐、水合物和溶剂化物的组合物，其中所述组合物进一步包含一种或多种药学上可接受的赋形剂或稀释剂。

在一些说明性实施方案中，本公开内容涉及包含高度支化的葡聚糖和氯硝柳胺，或者其药学上可接受的盐、水合物和溶剂化物的组合物，其中所述组合物配制用于经口递送。

在一些说明性实施方案中，本公开内容涉及包含高度支化的葡聚糖和氯硝柳胺，或者其药学上可接受的盐、水合物和溶剂化物的组合物，其中所述组合物进一步包含一种或多种吸收促进剂，用于进一步改善氯硝柳胺的经口生物利用度。

在一些说明性实施方案中，本公开内容涉及包含高度支化的葡聚糖和氯硝柳胺，或者其药学上可接受的盐、水合物和溶剂化物的组合物，其中所述组合物是丸剂、片剂、胶囊、液体、凝胶或粉末。

在一些说明性实施方案中，本公开内容涉及包含高度支化的葡聚糖和氯硝柳胺，或者其药学上可接受的盐、水合物和溶剂化物的组合物，其中所述组合物用于吸入、鼻内、静脉内、肌内、皮下或皮内递送。

在一些说明性实施方案中，本公开内容涉及包含高度支化的葡聚糖和氯硝柳胺，或者其药学上可接受的盐、水合物和溶剂化物的组合物，其中所述高度支化的葡聚糖是辛烯基琥珀酸酯羟丙基植物糖原(OHPP)。

在一些说明性实施方案中，本公开内容涉及用于治疗病毒感染的方法，其包括向有此需要的患者施用有效量的如本文公开的组合物。

在一些说明性实施方案中，本公开内容涉及用于治疗病毒感染的方法，其包括向有此需要的患者施用有效量的如本文公开的组合物，其中所述病毒感染由选自以下的病毒引起：SARS-CoV-2、SARS-CoV、MERS-CoV、甲型流感、登革热病毒、寨卡病毒、埃博拉病毒、丙型肝炎病毒、日本脑炎病毒、人鼻病毒、基孔肯雅病毒、人腺病毒、EB病毒、其它流感、HIV、脊髓灰质炎病毒、其它病毒或其组合。

在一些其它说明性实施方案中，本公开内容涉及用于治疗癌症的方法，其包括向有此需要的患者施用有效量的如本文公开的组合物。

在一些其它说明性实施方案中，本公开内容涉及用于治疗癌症的方法，其包括向有此需要的患者施用有效量的如本文公开的组合物，其中所述癌症是前列腺癌、肾上腺皮质癌、乳腺癌、结肠癌、神经胶质瘤、头颈癌、白血病、肺癌、骨肉瘤、卵巢癌、前列腺癌、肾细胞癌或卵巢癌。

在一些其它说明性实施方案中，本公开内容涉及用于治疗癌症的方法，其包括向有此需要的患者施用有效量的如本文公开的组合物，其中所述患者是动物或人类。

在一些说明性实施方案中，本公开内容涉及用于治疗病毒感染的方法，其包括向有此需要的患者施用有效量的如本文公开的组合物，其中所述患者是人类或动物。

在一些说明性实施方案中，本公开内容涉及用于治疗病毒感染的方法，其包括向有此需要的患者施用有效量的如本文公开的组合物，其中所述病毒是SARS-CoV-2。

在一些说明性实施方案中，本公开内容涉及用于治疗病毒感染的方法，其包括向有此需要的患者施用有效量的如本文公开的组合物，其中所述病毒感染由选自以下的病毒引起：SARS-CoV-2、SARS-CoV、MERS-CoV、甲型流感、登革热病毒、寨卡病毒、埃博拉病毒、丙型肝炎病毒、日本脑炎病毒、人鼻病毒、基孔肯雅病毒、人腺病毒、EB病毒、其它流感、HIV、脊髓灰质炎病毒、其它病毒及其组合。

在一些其它说明性实施方案中，本公开内容涉及药物组合物，其包含如本文公开的组合物连同一种或多种另外的药物活性剂。

在一些其它说明性实施方案中，本公开内容涉及药物组合物，其包含如本文公开的组合物连同一种或多种另外的药物活性剂，其中所述一种或多种另外的药物活性剂是抗病毒剂、抗细菌剂、抗真菌剂和/或抗炎剂。

在一些其它说明性实施方案中，本公开内容涉及用于治疗病毒感染的方法，其包括向有此需要的患者施用有效量的如本文公开的组合物，连同有效量的一种或多种另外的药物活性剂。

在一些其它说明性实施方案中，本公开内容涉及用于治疗病毒感染的方法，其包括向有此需要的患者施用有效量的如本文公开的组合物，连同有效量的一种或多种另外的药物活性剂，其中所述一种或多种另外的活性剂是抗病毒剂、抗细菌剂、抗真菌剂和/或抗炎剂。

在一些其它说明性实施方案中，本公开内容涉及用于治疗癌症的方法，其包括向有此需要的患者施用有效量的如本文公开的组合物，连同有效量的一种或多种另外的药物活性剂。

在一些其它说明性实施方案中，本公开内容涉及用于治疗癌症的方法，其包括向有此需要的患者施用有效量的如本文公开的组合物，连同有效量的一种或多种另外的药物活性剂，其中所述一种或多种另外的活性剂是抗癌剂。

在一些其它说明性实施方案中，本公开内容涉及用于治疗感染性疾病的方法，其包括向有此需要的患者施用有效量的如本文公开的组合物，连同有效量的一种或多种另外的药物活性剂。

在一些其它说明性实施方案中，本公开内容涉及用于治疗感染性疾病的方法，其包括向有此需要的患者施用有效量的如本文公开的组合物。

在一些其它说明性实施方案中，本公开内容涉及用于治疗感染性疾病的方法，其包括向有此需要的患者施用有效量的如本文公开的组合物，其中所述感染是由结核病、炭疽、铜绿假单胞菌(pseudomonas aeruginosa)或金黄色葡萄球菌(staphylococcusaureus)引起的细菌感染，2型糖尿病，非酒精性脂肪肝病，动脉收缩，子宫内膜异位症，神经性疼痛，类风湿性关节炎，硬皮病样移植物抗宿主病或系统性硬化。

在一些其它说明性实施方案中，本公开内容涉及用于治疗疾病的方法，其包括向有此需要的患者施用有效量的如本文公开的组合物，其中所述疾病是由结核病、炭疽、铜绿假单胞菌或金黄色葡萄球菌引起的细菌感染，2型糖尿病，非酒精性脂肪肝病，动脉收缩，子宫内膜异位症，神经性疼痛，类风湿性关节炎，硬皮病样移植物抗宿主病或系统性硬化。

在一些其它说明性实施方案中，本公开内容涉及用于靶向多种信号传导途径和生物过程之一的方法，所述信号传导途径和生物过程包括但不限于氧化磷酸化的解偶联、Wnt、mTORC1、STAT3、NF-κB、Notch、AKT/ERK/Src、AR-V7、C-Fos、C-Jun、E2F1、c-Myc、mGluRs、代谢途径、ROS、线粒体、pH，所述方法包括向有此需要的患者施用有效量的如本文公开的组合物。

在一些说明性实施方案中，本公开内容涉及包含高度支化的葡聚糖和氯硝柳胺，或者其药学上可接受的盐、水合物和溶剂化物的组合物，其中所述高度支化的葡聚糖是辛烯基琥珀酸酯羟丙基植物糖原(OHPP)，并且其中OHPP和氯硝柳胺使用选自以下的方法掺合：喷雾干燥、喷雾冷却、挤出、热熔挤出、匀浆化、研磨例如喷射研磨、低温研磨、球磨和胶体研磨、真空干燥、转筒干燥、薄膜成型、表面涂布、打印、3D打印、多层成型、高强度共混、共结晶、剂型的个性化制造以及不同程序的组合。

氯硝柳胺是一种潜在的Covid-19治疗剂

在WHO的基本药物标准清单(Model List of Essential Medicines)中，氯硝柳胺(2’,5-二氯-4’-硝基水杨酰苯胺，图1)是用于治疗绦虫侵染的驱虫药(WHO，2019)。研究还已显示了，氯硝柳胺是针对各种人癌症的有希望的抗癌剂(Li等人，2014年)，以及针对广泛多种病毒感染的潜在的抗病毒剂，所述病毒感染例如SARS-CoV、MERS-CoV、ZIKV、JEV、EBV、EBOV、HRV、CHIKV、HAdV、HCV、登革热和人腺病毒(Xu等人，2020)。

在过去的几个月内，已发表了将氯硝柳胺与针对SARS-CoV-2的抗病毒功效相关的许多报告。其中，两项研究已独立地显示了在体外环境下，氯硝柳胺针对SARS-CoV-2的高功效。图2显示了Jeon等人(2020)在使用Vero细胞比较各种化合物的抗SARS-CoV-2功效方面的结果。氯硝柳胺的半数最大抑制浓度(IC₅₀)为0.28μM，远低于氯喹(7.28μM)和瑞德西韦(11.41μM)。同时，其为CC₅₀(50％细胞毒性浓度)/IC₅₀的比率的选择性指数(SI)对于氯硝柳胺为176.65，远高于氯喹(20.61)和瑞德西韦(2.19)，提示了氯硝柳胺作为Covid-19治疗剂的潜在很高的安全性水平。

图3显示了Gassen等人(2020)在比较氯硝柳胺与其它两种化合物(亚精胺和MK-2206)的抗SARS-CoV-2功效方面的结果。氯硝柳胺的IC₅₀为0.17μM，类似于Jeon等人(2020)报告的值(0.28μM)。因此，来自Jeon等人(2020)和Gassen等人(2020)的结果彼此良好地互相印证。

一般而言，氯硝柳胺是潜在的抗癌剂和针对广泛多种病毒的抗病毒剂，所述病毒包括冠状病毒(例如SARS、MERS)、流感、登革热等。特别地，氯硝柳胺已显示了针对SARS-CoV-2的强体外抗病毒功效。0.28μM(92ng/mL)和0.17μM(56ng/mL)的IC₅₀可以用作用于有效疗效的血浆浓度的初步目标。IC₉₀也可以用于设定关于血浆浓度的目标。基于图2，氯硝柳胺的IC₉₀为约0.7μM(229ng/mL)。这些数目(即56、92和229ng/mL)在我们的PK研究中用作基准，以评估氯硝柳胺制剂在血浆中达到治疗水平的潜力。

不溶性氯硝柳胺引起很大的血浆差异和局部副作用

由于其针对SARS-CoV的潜在功效，Chang等人(2006)使用大鼠作为模型动物研究了氯硝柳胺的药代动力学。在这项研究中，将氯硝柳胺溶解于溶剂混合物(3/15/82的DMSO/cremophor EL/水体积比，请注意该溶剂不能用于人，因为它含有DMSO)中。使用5mg/kg的单次经口剂量，并且氯硝柳胺显示了354±152ng/mL的最高血浆浓度(C_max)。该结果提示了可溶性氯硝柳胺能够提供高血浆浓度。然而，差异相当大，可能是由于如受到个别动物的不同GI道条件影响的氯硝柳胺的快速结晶。结晶的氯硝柳胺难以有效穿透肠上皮层。

Schweizer等人(2018)的I期临床研究提供了关于氯硝柳胺溶解度对其药代动力学和毒性的影响的有价值的见解。由于其差溶解度和经口生物利用度，氯硝柳胺以大剂量使用，即500或1000mg，每天三次(TID)和长时间(4周)。数据显示了：(1)最大血浆浓度达到相当高的水平(182ng/mL)，具有很大差异(对于500mg TID为35.7-182ng/mL，且对于1000mgTID为149-182mg/mL，伴随副作用)，(2)副作用主要与GI道相关，很可能是由于局部保留的大量氯硝柳胺。显然，需要显著减少血浆浓度的差异和副作用，以用于全身递送氯硝柳胺。

氯硝柳胺是BCS II类药物，因此需要增溶技术

如图4中所示，建立了生物药剂学分类系统(Biopharmaceutics ClassificationSystem)(BCS)来预测药物的吸收。基于溶解度和渗透性，药物可以分类为I类(高溶解度、高渗透性)、II类(低溶解度、高渗透性)、III类(高溶解度、低渗透性)和IV类(低溶解度、低渗透性)。

作为BCS II类药物，氯硝柳胺具有低溶解度和高渗透性(delMoral-Sanchez等人，2019)。取决于测量温度，氯硝柳胺的溶解度在磷酸盐缓冲液中为约0.3至1.14μg/mL(Xie和Yao，2018)，并且定义为“几乎不溶的”(delMoral-Sanchez等人，2019)。对于II类药物，增加其吸收的最有效方法是增加其溶解度。

可溶性氯硝柳胺改善了生物利用度，伴随低毒性

使用单毛细管电喷雾，Lin等人(2016)制备了氯硝柳胺的纳米悬浮液，用于增加的溶解度。向注射有肿瘤细胞的小鼠经口施用以100mg/kg的氯硝柳胺，每周5次且共2周。结果显示了肿瘤重量对于治疗组是显著减少的。同时，他们发现氯硝柳胺治疗的组显示了与对照组(未治疗的组)可比较的体重、营养水平(白蛋白)、肾功能、肌酸酐和肝功能。另外，来自重要器官(脑、肾、肠和肝)的组织的组织病理学分析揭示了在任一组中无损害。另外，在对照组和氯硝柳胺治疗的组之间不存在血细胞计数、血红蛋白和血小板计数的显著差异。

虽然显示了比常规氯硝柳胺制剂改善的生物利用度(25％)和低毒性，但电喷雾的氯硝柳胺的缺点在于其高度复杂的制备程序和无法扩大生产，以及在制备中使用有毒溶剂(乙腈和DMSO)。

治疗COVID-19的氯硝柳胺

COVID-19显示了肺血栓形成、频繁腹泻、炎症应答的异常激活以及与肺泡水肿一致的肺功能的快速恶化(Braga等人，2021)。COVID-19患者的肺含有具有异常形态和频繁多核化的受感染的肺细胞(Braga等人，2021)，并且合胞体的生成起因于在细胞质膜水平下的SARS-CoV-2刺突蛋白激活(Braga等人，2021)。使用超过3000种批准的药物，Braga等人(2021)执行了关于刺突驱动的合胞体的抑制剂的筛选，同时还集中于也保护免于病毒复制和相关致细胞病变性的药物。他们发现最有效的分子之一是氯硝柳胺，其通过压制TMEM16F/Anoctamin6的活性，显著减弱了刺突表达细胞中的钙振荡和膜电导，所述TMEM16F/Anoctamin6是负责细胞表面上的磷脂酰丝氨酸暴露的钙激活的离子通道和爬行酶(scramblase)(Braga等人，2021)。

详述

OHPP改善了氯硝柳胺的溶解度

OHPP改善了差水溶性的药物的溶解度，如用众多模型化合物如塞来昔布、紫杉醇、姜黄素和多西他赛所示的。氯硝柳胺用作模型是由于其用于重新定位为抗癌药物的潜力及其众所周知的增溶难度。这些结果在Xie和Yao(2018a、2018b、2019、2020)中报告，所述参考文献的内容通过引用并入本文。

图5显示了OHPP稳定且增溶氯硝柳胺的机制。单独的氯硝柳胺以具有极低溶解度的高度结晶形式存在(改编自Xie和Yao等人2018b)。OHPP是其核心由植物糖原制成的纳米颗粒，所述植物糖原是从特种玉米中分离的树枝状聚合物样淀粉类似物。在植物糖原的外表面处，存在两个功能层：(1)一层辛烯基琥珀酸酯，以提供与药物分子的疏水性相互作用并维持高溶解度，以及(2)一层羟丙基层，以通过氢键稳定无定形药物分子。通过功能层，OHPP不仅在固态下而且当在水中分散时也维持无定形药物分子的稳定性。换言之，OHPP配制的氯硝柳胺在固体(例如片剂形式的粉末)下是稳定的，并且一旦它分散在水中，氯硝柳胺仍是稳定的(没有快速结晶)，以提供足够的时间窗口(例如，许多小时)用于在GI道中的吸收。由于氯硝柳胺具有高渗透性，所以一旦它溶解，它就很容易被吸收。

图6比较了单独的氯硝柳胺和OHPP配制的氯硝柳胺的分散体。对于个别分散体，氯硝柳胺的总量为2.5mg/mL。单独的氯硝柳胺并不溶解并且显示了浓重的云和沉淀物。相比之下，OHPP配制的氯硝柳胺的分散体显示了高透明度，提示了高溶解度。事实上，OHPP配制的氯硝柳胺的溶解度为单独的氯硝柳胺的超过5,000多倍。另外，OHPP使氯硝柳胺增溶的能力是HPMCAS(由Ashland、Shin-Etsu Chemical和Dow Chemical供应的先导增溶剂)的50倍，并且是

(Xie和Yao，2018b)的300倍。

OHPP配制的氯硝柳胺具有高生物可及性

通过OHPP增溶的氯硝柳胺可以有效地释放。与DMSO和其它溶剂或技术不同，氯硝柳胺从OHPP中的释放是逐渐的，并且因此可以避免在吸收期间的重结晶。图7显示了通过DMSO或OHPP溶解的氯硝柳胺针对前列腺癌细胞(PC-3)的抑制功效。对于DMSO溶解的氯硝柳胺，IC₅₀为5.93μg/mL；对于OHPP溶解的氯硝柳胺，IC₅₀为0.68μg/mL。因此，OHPP在使氯硝柳胺能够提供生物效应(例如抗癌效应)方面比DMSO表现更好。DMSO辅助的增溶是在评估药物候选物的体外功效，例如评估药物的抗SARS-CoV-2效应方面的常规程序(Jeon等人，2020)。

OHPP配制的氯硝柳胺具有高生物利用度

图8.对于用不溶性氯硝柳胺(20或80mg/kg)或OHPP配制的氯硝柳胺(20mg/kg)进行管饲的小鼠，血浆中的氯硝柳胺浓度相对于时间和“曲线下面积(AUC)”。

通过OHPP增溶的氯硝柳胺具有比单独的常规氯硝柳胺高得多的生物利用度。上文的图8显示了对于用不溶性氯硝柳胺(20或80mg/kg)或OHPP配制的氯硝柳胺(20mg/kg)进行管饲的小鼠，血浆中的氯硝柳胺浓度相对于时间和“曲线下面积(AUC)”。每个数据点是3个重复小鼠的平均值，伴随作为标准差的误差条。数据指示了，与市场上可获得的不溶性氯硝柳胺相比，氯硝柳胺生物利用度使用OHPP制剂增加了4-9倍，远高于迄今为止的其它报告的值。OHPP增溶的氯硝柳胺还导致氯硝柳胺水平在血浆中的延长滞留，这对药物安全性和功效是高度有益的。

OHPP配制的氯硝柳胺针对SARS-CoV-2有效

图9显示了在感染后5天，hACE2转基因小鼠的肺病毒滴度。SARS-CoV-2攻击的hACE2转基因小鼠的研究在BSL-3实验室中进行。比较了感染后的四个不同的治疗组，包括用PBS治疗的对照组、用以100mg/kg的不溶性氯硝柳胺治疗的组、用以20mg/kg的OHPP增溶的氯硝柳胺治疗的组、以及用以10mg/kg的OHPP增溶的氯硝柳胺治疗的组，每天两次，共5天。圆圈显示了个别小鼠的肺病毒滴度值，条是个别治疗组的平均值。在7.5×10⁵PFU/mL下的虚线用于指示肺病毒滴度的水平，超过所述水平被认为已发生高肺病毒载量。数据显示了，OHPP增溶的氯硝柳胺预防或减少肺中的初始感染向高病毒载量的进展，而以5-10倍剂量水平的常规氯硝柳胺并未显示病毒载量减少的功效。

OHPP是具有树枝状聚合物样纳米结构的改性淀粉

OHPP是由Purdue和Phytoption使用植物糖原作为原材料共同开发的。植物糖原是从美国种植的特种玉米中分离的淀粉型葡聚糖。如图5中所示，植物糖原及其衍生物显示了树枝状聚合物样纳米结构，其提供了独特的功能性。为了生成OHPP，植物糖原用食品和制药行业中广泛使用的方法进行处理。由于植物糖原是一种淀粉类似物，因此OHPP是潜在地具有令人满意的安全性概况的改性淀粉。

氯硝柳胺是一种潜在的高效Covid-19治疗剂、抗癌药以及用于许多其它病毒性疾病的抗病毒治疗剂。然而，氯硝柳胺是BCS II类药物，具有低溶解度和高渗透性。当以大剂量和长时间使用时，不溶性氯硝柳胺导致血浆浓度的很大差异和GI道中的副作用。相比之下，可溶性氯硝柳胺显示了增加的生物利用度和低毒性。为了有效地和实际地增溶通过目前技术难以增溶的药物，OHPP使用基于植物的树枝状聚合物样淀粉材料进行开发。一般而言，OHPP配制的氯硝柳胺使溶解度增加到超过5000倍，并且实现了氯硝柳胺分子的有效释放，以提供生物学功效。随着其溶解度的实质增加，可显著减少氯硝柳胺的剂量，并且吸收可得到极大的增加，以实现在低毒性下的一致的抗病毒功效。使用癌细胞模型已显示了OHPP配制的氯硝柳胺的强体外生物可及性。

本公开内容的制剂还可以与其它抗病毒活性成分例如其它抗病毒剂组合。另外，本公开内容的方法包括还含有其它活性成分例如其它抗病毒剂、抗细菌剂或抗炎剂的治疗。

下述编号的实施方案是预期的且非限制性的：

条款1.一种组合物，其包含高度支化的葡聚糖和氯硝柳胺。

条款2.一种组合物，其包含高度支化的葡聚糖和氯硝柳胺，其中所述组合物的氯硝柳胺的经口生物利用度是单独的氯硝柳胺的经口生物利用度的至少2倍。

条款3.条款1-2的组合物，其进一步包含药学上可接受的赋形剂。

条款4.条款1-3的组合物，其以经口形式。

条款5.条款1-4的组合物，其中所述组合物是固体。

条款6.条款1-4的组合物，其中所述组合物是丸剂、片剂、胶囊、液体、凝胶或粉末。

条款7.条款1-3的组合物，其中所述组合物用于吸入、鼻内、静脉内、肌内、皮下或皮内递送。

条款8.条款1和2的组合物，其中所述高度支化的葡聚糖是辛烯基琥珀酸酯羟丙基植物糖原(OHPP)。

条款9.一种用于治疗病毒感染的方法，其包括向有此需要的患者施用有效量的条款1-7的组合物。

条款10.条款9的方法，其中所述病毒感染由选自以下的病毒引起：SARS-CoV-2、SARS-CoV、MERS-CoV、甲型流感、登革热病毒、寨卡病毒、埃博拉病毒、丙型肝炎病毒、日本脑炎病毒、人鼻病毒、基孔肯雅病毒、人腺病毒、EB病毒、其它流感、HIV、脊髓灰质炎病毒、其它病毒及其组合。

条款11.一种用于治疗癌症的方法，其包括向有此需要的患者施用有效量的条款1-7的组合物。

条款12.条款11的方法，其中所述癌症是前列腺癌、肾上腺皮质癌、乳腺癌、结肠癌、神经胶质瘤、头颈癌、白血病、肺癌、骨肉瘤、卵巢癌、前列腺癌、肾细胞癌或卵巢癌。

条款13.条款9-12的方法，其中所述患者是动物。

条款14.条款9-12的方法，其中所述患者是人。

条款15.条款9、13和14的方法，其中所述病毒是SARS-CoV-2。

条款16.一种预防患者中的病毒感染的方法，其包括向患者施用有效量的条款1-7的组合物的步骤。

条款17.条款16的方法，其中所述患者是人。

条款18.条款16-17的方法，其中所述病毒感染由选自以下的病毒引起：SARS-CoV-2、SARS-CoV、MERS-CoV、甲型流感、登革热病毒、寨卡病毒、埃博拉病毒、丙型肝炎病毒、日本脑炎病毒、人鼻病毒、基孔肯雅病毒、人腺病毒、EB病毒、其它流感、HIV、脊髓灰质炎病毒、其它病毒及其组合。

条款19.一种组合物，其包含条款1-7的组合物和一种或多种另外的活性剂。

条款20.条款19的组合物，其中所述一种或多种另外的活性剂是抗病毒剂、抗细菌剂、抗真菌剂和/或抗炎剂。

条款21.一种用于治疗病毒感染的方法，其包括向有此需要的患者施用有效量的条款1-7的组合物，并且进一步施用有效量的一种或多种另外的活性剂。

条款22.条款21的方法，其中所述一种或多种另外的活性剂是抗病毒剂、抗细菌剂、抗真菌剂和/或抗炎剂。

条款23.用于治疗癌症的方法，其包括向有此需要的患者施用有效量的条款1-7的组合物，并且进一步施用有效量的一种或多种另外的活性剂。

条款24.条款23的方法，其中所述一种或多种另外的活性剂是抗癌剂。

条款25.一种用于治疗疾病或病症的方法，其包括向有此需要的患者施用有效量的条款1-7的组合物，其中所述疾病或病症是由结核病、炭疽、铜绿假单胞菌或金黄色葡萄球菌引起的细菌感染，2型糖尿病，非酒精性脂肪肝病，动脉收缩，子宫内膜异位症，神经性疼痛，类风湿性关节炎，硬皮病样移植物抗宿主病或系统性硬化。

条款26.一种用于靶向下表中所示的多种信号传导途径和生物过程之一的方法，其包括向有此需要的患者施用有效量的条款1-7的组合物(关于更多细节，参见图10)。

条款27.条款1的组合物，其中所述高度支化的葡聚糖和氯硝柳胺使用选自以下的方法掺合：喷雾干燥、喷雾冷却、挤出、热熔挤出、匀浆化、研磨例如喷射研磨、低温研磨、球磨和胶体研磨、真空干燥、转筒干燥、薄膜成型、表面涂布、打印、3D打印、多层成型、高强度共混、共结晶、剂型的个性化制造及其组合。

实施例：OHPP配制的氯硝柳胺的制备

OHPP配制的氯硝柳胺可以以物理方法，通过将OHPP和氯硝柳胺组合进行制备。例如，将氯硝柳胺和OHPP溶解于乙醇中，并且进行喷雾干燥以收集固体。将3克氯硝柳胺和9.0g OHPP两者均溶解于600mL乙醇中，并且使用配备有氮气吹扫用于与有机溶剂一起使用的

微型喷雾干燥器B-290(/>

瑞士)，对溶液进行喷雾干燥。入口温度和出口温度分别为90℃和57-60℃。进料速率为6mL/分钟，伴随350L/h的氮气流速。使用/>

Inert Loop B-295，冷凝并收集来自出口的氮气中的溶剂。

氯硝柳胺和OHPP可以通过其它物理程序，伴随或不伴随喷雾干燥进行掺合。这些程序包括但不限于：(1)挤出，例如热熔挤出，(2)匀浆化，(3)喷射研磨，(4)低温研磨，(5)球磨，(6)真空干燥或转筒干燥，(7)薄膜成型或表面涂布，(8)打印，(9)3D打印，(10)多层成型，(11)喷雾冷却，(12)剂型的个性化制造，(13)高强度共混，(14)共结晶，和(15)不同程序的组合。

实施例：体内药代动力学研究

体内研究在Purdue Translational Pharmacology Facility处执行。雄性B6.Cg-Tg(K18-ACE)2Prlmn/J NCAR Non-carrier小鼠(8-10周)从Jackson Laboratories(BarHarbor ME)获得用于研究。根据按照方案1405001069Purdue University的机构指南，对动物进行分组饲养和处理。将动物保持在具有12小时光/暗周期的温度控制的环境中，并且随意接受标准饮食和水。

动物用不同剂量的氯硝柳胺进行经口给药：1)一组动物用80mg/kg的不溶性氯硝柳胺悬浮液进行给药，2)一组动物用20mg/kg的不溶性氯硝柳胺悬浮液进行给药，并且3)一组动物用20mg/kg的OHPP配制的氯硝柳胺溶液进行给药，并且在血液收集时，用异氟烷进行镇静并且经由心脏刺入进行放血。将血液置于EDTA管(Mini-Collect，Greiner Bio-One)内，并且以4500rpm离心10分钟。在处理后，血浆立即在干冰中冷冻并贮存于-80℃下直至分析时。

图8显示了对于用不溶性氯硝柳胺(20或80mg/kg)或OHPP配制的氯硝柳胺(20mg/kg)进行管饲的小鼠，血浆中的氯硝柳胺浓度相对于时间和“曲线下面积(AUC)”。每个数据点是3个重复小鼠的平均值，伴随作为标准差的误差条。

实施例：体内SARS-CoV-2攻击研究

动物实验方案由University of Chicago的机构动物护理和使用委员会(Institutional Animal Care and Use Committee)进行审查、批准且监督。所有感染都在Howard Taylor Ricketts Laboratory的动物生物安全3级防护实验室中进行。将小鼠饲养在具有HEPA过滤器的笼中。6-8周龄的雌性和雄性B6.Cg-Tg(K18-ACE2)2Prlmn/J(K18-hACE2)小鼠得自Jackson Laboratory。通过鼻内注射，用在20μl中的2×10⁴PFU的USA-WA1/2020SARS-CoV-2(2019-nCoV)，对动物进行攻击。在攻击之后，每12小时用PBS或氯硝柳胺药物治疗动物。在攻击后的第五天，将所有动物杀死并经受尸检，以取出肺。肺在2％ DMEM中进行匀浆化，以测量病毒滴度。

将病毒样品连续稀释10倍并用于感染VeroE6细胞的4个孔达1小时，去除接种物并加入温热的羧甲基纤维素/培养基并温育3天。去除覆盖培养基，并且使板在10％福尔马林中固定30分钟，并且用结晶紫染色1小时，随后对噬斑进行计数。在计数之后，对于原始样品计算每毫升的噬斑形成单位。

图9显示了在感染后5天，hACE2转基因小鼠的肺病毒滴度。比较了感染后的四个不同的治疗组，包括用PBS治疗的对照组、用以100mg/kg的不溶性氯硝柳胺治疗的组、用以20mg/kg的OHPP增溶的氯硝柳胺治疗的组、以及用以10mg/kg的OHPP增溶的氯硝柳胺治疗的组，每天两次，共5天。圆圈显示了个别小鼠的滴度值，条是个别治疗组的平均值。在7.5×10⁵PFU/mL下的虚线用于指示肺病毒滴度的水平，超过所述水平被认为已发生高肺病毒载量。

预言性实施例

作为一般方法，我们将进行用于经口使用的氯硝柳胺制剂的药代动力学和毒理学研究。制剂含有OHPP、氯硝柳胺，伴随或不伴随其它药学上可接受的赋形剂。

另外，我们将进行受感染动物的功效研究和/或人体试验。总体考虑是，通过增强的氯硝柳胺溶解度，OHPP配制的氯硝柳胺可以用于实现期望和一致的血浆浓度和治疗功效，伴随可接受的安全性概况。

预言性实施例1

病毒和细胞：SARS-CoV-2毒株NMC-nCoV02在补充有1％青霉素-链霉素(Gibco)和TPCK(甲苯磺酰基苯丙氨酰氯甲基酮)处理的胰蛋白酶(0.5g/ml；WorthingtonBiochemical，Lakewood，NJ)的达尔贝科改良伊格尔培养基(DMEM；Gibco，Grand Island，NY)中的Vero细胞中，在补充有5％ CO₂的37℃培养箱中繁殖72小时。繁殖的病毒作为用于动物研究的工作病毒原液贮存于-80℃下。50％组织培养感染剂量(TCID50)通过固定和结晶紫染色进行确定。

对照：没有感染的组用作对照(对照组)。

感染：在麻醉下，用10^5.8TCID₅₀/ml的NMC-nCoV02鼻内接种对于SARS-CoV-2呈血清反应阴性的3组雄性雪貂(8只/组)。

氯硝柳胺治疗：对于治疗，第1组(每天一次的剂量)的动物(8只/组)每天一次用以5mg/kg的OHPP配制的氯硝柳胺进行施用，并且第2组(每天两次的剂量)(8只/组)每天两次用以5mg/kg的相同制剂进行施用，全部通过经口管饲法进行，从感染后(dpi)1天开始并持续直到10dpi。对于对照组，将PBS施用于8只动物(PBS组)。

病理监测和测试：每日收集鼻洗液和粪便样本。使用在Vero细胞中的50％ TCID₅₀评价来确定鼻洗液和组织中的病毒滴度；使用定量实时PCR(qRT-PCR)测量粪便样本中的病毒滴度。简言之，使用TRIzol试剂(Thermo Fisher Scientific)或RNeasy试剂盒(Qiagen)提取总RNA，并且通过使用QuantiTect逆转录(Qiagen)的逆转录，用SARS-CoV-2特异性引物生成cDNA。qRT-PCR使用SYBR green supermix(Bio-Rad)和CFX96 Touch实时PCR检测系统(Bio-Rad)，利用基于刺突基因的SARS-CoV-2特异性引物组来执行，并且病毒RNA拷贝数计算为关于PBS组(受感染但未通过氯硝柳胺进行治疗)的比率。四只动物/组在5dpi时实施安乐死，而另外四只在12dpi时实施安乐死，并且收集鼻甲和肺以测量组织病毒滴度并检查肺组织病理学。

统计分析：进行统计分析，以评价关于体重减轻、温度和病毒滴度的值的显著性差异。

实施例2

动物：

●物种：仓鼠(叙利亚金)

●分组：6x2用于PK研究，4+8x3用于功效研究

●性别：全部雄性

药代动力学(PK)研究：

●两个剂量，每个剂量6只

●对于每只动物，收集4份血液样品

●对于每个剂量两个亚组，每个亚组(3只)贡献4个时间点。对于每个剂量总共8个时间点

●将血浆样品收集、冷冻贮存且针对氯硝柳胺定量进行分析

●PK数据用于限定用于功效研究的剂量

功效研究：

●四组：正常健康组(4只)；受感染/未治疗的组(8只)；以及两个受感染/氯硝柳胺治疗的组(8x2)

●健康组：全部(4只)在中点时处死用于肺分析

●受感染/未治疗的组：一半(4只)在中点时处死，一半(4只)在终点时处死

两个受感染/治疗的组：

●第1组：每天两次的剂量，管饲法，低剂量

●第2组：每天两次的剂量，管饲法，高剂量

●一半(4只)在中点时处死，一半(4只)在终点时处死

中点：允许最大肺症状(第5天)

终点：允许体重和温度恢复(第12天)

收集的数据：

●每天：体重、温度、鼻洗液和粪便-用于病毒载量分析

●中点：来自四组各自的4只-处死用于肺病毒载量和组织病理学分析

●终点：三个受感染的组各自的4只-处死用于肺病毒载量和组织病理学分析

PK研究提供了以下的关键信息：(1)达到期望的血浆浓度所需的剂量，(2)氯硝柳胺的生物利用度，以及(3)动力学参数(包括达到最大血浆浓度的时间)，用于受感染动物的功效研究。

实施例3

用升高的剂量进行初步的毒性和毒代动力学(TK)研究。下文是在Sprague Dawley大鼠中的OHPP配制的氯硝柳胺的重复剂量研究的研究设计。

表1：OHPP配制的氯硝柳胺在大鼠中的7天剂量范围发现研究。

实施例4

●在大鼠中具有2周可逆性的一个月重复剂量毒性和毒代动力学研究(GLP)

●体外细菌突变(Ames)测定

●体外人淋巴细胞测定

如上文突出显示的，病毒感染例如当前的COVID-19大流行病呈现了严重的健康威胁。虽然改善氯硝柳胺的溶解度的大部分努力已集中于肿瘤学靶，但存在提示氯硝柳胺可能直接靶向病毒的证据(Chen等人，2018，Lou等人，2011)。在寻找病毒感染中的宿主防御的潜在药剂时，氯硝柳胺在筛选上市药物的化学文库时一再脱颖而出，例如严重急性呼吸综合征冠状病毒(SARS-CoV)(Wu等人，2004)；基孔肯雅病毒(Wang等人，2016)；寨卡病毒(Xu等人，2016)。关于更多细节，参见Chen等人(2018)。作用机制可能涉及氯硝柳胺的质子载体活性及其充当质子载体的能力(Staples等人，2009)。因此，无论是通过已知病毒的体外筛选还是使用病毒模型，氯硝柳胺似乎都以适当的全身剂量提供抗病毒性质，其可在COVID-19患者的治疗中证明有益。

实施例5；临床开发计划

Phytoption计划启动1期临床试验，以评估NIC-OHPP-101(一种OHPP配制的氯硝柳胺)在轻度至中度COVID-19患者中的安全性和药代动力学(PK)。该试验以剂量递增方式招募6个患者/队列，总共5个队列。1a期临床试验中的起始剂量基于非临床毒理学和毒代动力学数据进行确定。在同一患者群体(轻度至中度COVID-19)中的1b期研究在更多患者中评价一个或多个1a期剂量。

研究群体：提议的研究群体是患有轻度至中度COVID-19的患者。限定这些群体的关键标准如下：呈现有下述症状的患者被定义为患有“轻度病”：

●温度升高

●干咳

●疲倦

●感觉有点喘不过气

●肌肉疼痛

●头痛

●咽喉痛

●腹泻

患有“中度病”的患者更喘不过气并且趋于具有增加的心率，特别是当他们四处走动时。除上文对轻度病定义的症状之外，中度病还包括：

●温度高于37.8℃(100.04°F)

●在适度运动(例如，走上楼)的过程中喘不过气

●因咳嗽的酸痛，但非疼痛

●更持久的咳嗽，每小时数次

●头痛

●疲倦和明显的嗜睡

●口干

目的和终点：该研究的目的是确定氯硝柳胺-OHPP的经口制剂对于轻度至中度COVID-19患者是否安全，并且评估各个剂量的NIC-OHPP-101的全身药代动力学。虽然主要终点评价NIC-OHPP-101的安全性和PK，但关键的次要终点测量在第7、14和28天时，对潜在的COVID-19感染的治疗作用。

主要目的是评估经口NIC-OHPP-101的安全性，并且确定用NIC-OHPP-101的治疗是否降低了COVID-19患者中的SARS-CoV-2病毒载量，如在第7天和第14天时使用口咽拭子或痰样品通过呼吸道病毒清除率的变化所确定的。该研究的关键次要目的是：住院治疗的累积发生率(在第14天时)；氧疗法、无创通气或有创通气的使用的累积发生率(在第14天时)。

该研究的其它目的是在第14天和第28天时的死亡率。

安全性目的：NIC-OHPP-101的安全性经由治疗出现的不良事件(TEAE)、临床实验室测试的变化、生命体征和身体检查的报告进行评价。

剂量合理性：作为抗蠕虫治疗，氯硝柳胺的当前剂量至多每天2克。这种高剂量仍导致体循环中的最小吸收。预料用公开内容的制剂增加的吸收允许控制水平的全身暴露和Covid-19的伴随治疗。计划的非临床研究将基于适当的安全界限提供在选择人体首次剂量方面的指导。1a期剂量递增的目标是对于1b期中的评估建立不多于2个剂量，以确定最低有效剂量。

剂量选择：起始剂量和剂量递增剂量基于GLP非临床毒理学研究进行确定。

治疗的持续时间：预料每天治疗的持续时间为7天，伴随总共28天的持续监测。

实施例6研究概要

方案概念

下文是关于药物之一的I期概要，它也适用于其它OHPP配制的氯硝柳胺药物。

NIC-OHPP-101 1期概要

发起者/公司名称：Phytoption LLC，调查产品名称：NIC-OHPP-101，活性成分名称：氯硝柳胺

研究中心：一个调查中心将参与

研究标题：1期随机化、双盲、对照研究，以评估NIC-OHPP-101在轻度至中度COVID-19患者中的安全性和功效。

患者数目：将招募大约60-90个患者。1a期：30个患者以5个递增剂量进行同等评估，1b期：以至多2个剂量水平的30个患者扩展

开发阶段：1

目的：

主要目的是：评估经口NIC-OHPP-101的安全性，并且确定用NIC-OHPP-101的治疗是否降低了COVID-19患者中的SARS-CoV-2病毒载量，如在第7天和第14天时使用口咽拭子样品通过呼吸道病毒清除率的变化所确定的。

该研究的关键次要目的是：住院治疗的累积发生率(在第14天时)；氧疗法、无创通气或有创通气的使用的累积发生率(在第14天时)

该研究的其它目的是：在第14天和第28天时的死亡率

研究设计和持续时间

用基于定量实时聚合酶链反应(q-rtPCR)的测定来筛选潜在的COVID-19患者。

1a期：证实轻度或中度感染体征的患者被招募到1a期研究内。六个患者被招募到五个递增剂量队列内，以缓慢评估NIC-OHPP-101的安全性，并且确定提供适当的安全性以及对病毒脱落的功效的两个潜在剂量。如果前六个患者到第7天并未证实任何临床上显著的不良作用，则将招募第二队列。在治疗的第7天时前一剂量队列的安全性评价之后，随后将招募另外的队列。所有队列中的患者将接受7天的给药，并且患者的最终监测在第28天时发生。

1b期：该临床试验的1a期部分确定至多2个剂量水平，以用于队列扩展的COVID-19患者中，以进一步评估NIC-OHPP-101的安全性和功效。在这个28天的时期中，将招募另外三十(30)个无症状、轻度或中度COVID-19感染患者/队列。除安全性之外，主要终点评价是到第7天和第14天的呼吸道口咽病毒载量的减少。该1b期临床试验中的所有患者在28天的过程内进行评估。

调查产品、剂量和施用模式：

NIC-OHPP-101含有用于经口递送的以胶囊形式的氯硝柳胺和辛烯基琥珀酸酯羟丙基植物糖原。氯硝柳胺/OHPP的比率为25:75，并且配制用于每天一次的给药。

研究群体：

关键纳入标准：年龄18岁及更大；关于口咽拭子呈阳性的SARS-Cov-2(q-rtPCR)测试；在招募时不需要住院治疗或氧疗法；具有生育潜力的女性和男性必须同意在研究进入之前、对于研究参与的持续时间以及对于疗法完成之后的7天，使用充分的避孕(激素或屏障节育方法；禁欲)。注意：如果女性在参与该研究时怀孕或怀疑自己怀孕，则她应该立即通知她的主治医师。具有生育潜力的女性应该使用高效的节育方法。这些是单独或以组合的避孕方法，当一致且正确地使用时，所述避孕方法导致低失败率(即，低于1％/年)；签署知情同意书文件的能力

关键排除标准：

呼吸衰竭、败血症、器官功能障碍/衰竭的证据；具有危险因素的中度疾病：在室内空气时的外周毛细血管氧饱和度(SpO2)>92％，伴随发展严重疾病的下述危险因素之一：a.年龄>60岁，b.服用用于高血压的药物治疗，c.确诊的糖尿病，d.已知的心脏病，e.肥胖(BMI>35kg/m2)，f.活动性恶性肿瘤，g.免疫压制(使用生物制剂或糖皮质激素>20mg/d泼尼松龙当量>2周)；怀孕或哺乳；对NIC-OHPP-101的任何组分的超敏反应

统计方法：使用描述性统计学来评估NIC-OHPP-101的安全性方面。

确定1b期队列中的病毒载量的统计学显著减少采用适当的统计检验。

我们预计OHPP配制的氯硝柳胺可以用于治疗或预防SARS-CoV、SARS-CoV-2、寨卡、MERS、登革热、流感、基孔肯雅病毒、HIV、埃博拉、脊髓灰质炎、或其它病毒；并且还治疗癌症，包括前列腺癌、肾上腺皮质癌、乳腺癌、结肠癌、神经胶质瘤、头颈癌、白血病、肺癌、骨肉瘤、卵巢癌、前列腺癌、肾细胞癌或卵巢癌；以及由结核病、炭疽、铜绿假单胞菌或金黄色葡萄球菌引起的细菌感染，或者疾病或病例如2型糖尿病、非酒精性脂肪肝病、动脉收缩、子宫内膜异位症、神经性疼痛、类风湿性关节炎、硬皮病样移植物抗宿主病或系统性硬化。还对于这些疾病用动物或患者进行类似的动物功效研究和/或临床试验。

由于OHPP配制的氯硝柳胺还可以制备成其它药物形式，例如吸入剂、鼻腔喷雾、乳膏、洗剂、注射剂等，我们将进行作为治疗性治疗以及用于针对病毒感染的预防用途的这些OHPP配制的氯硝柳胺剂型的药代动力学、功效和毒理学研究。施用途径包括但不限于经口途径，例如丸剂、片剂、胶囊、液体、粉末、薄膜、凝胶等，用于吸入或鼻内递送的粉末或液体，注射剂，包括但不限于静脉内、肌内、皮下或皮内递送。

除作为人药物之外，氯硝柳胺长期以来一直用于动物中，以治疗蠕虫。许多动物(包括食用动物和伴侣动物)都可以被病毒感染，所述病毒例如猪流感、禽流感、SARS-CoV-2、小反刍兽疫、蓝舌病、AHS(非洲马瘟)、AHSV(非洲马瘟病毒)、AIDS(获得性免疫缺陷综合征)、ASF(非洲猪瘟)、BSE(牛海绵状脑病)、BT(蓝舌病毒)、CMLV(骆驼痘病毒)、CSF(经典猪瘟)、CSFV(经典猪瘟病毒)、enJSRV(内源性JSRV相关逆转录病毒)、FMD(口蹄疫)、FMDV(口蹄疫病毒)、GTPV(山羊痘病毒)、HA(血凝素)、HIV(人免疫缺陷病毒)、HTLV(人T细胞白血病病毒)、JSRV(绵羊肺腺瘤逆转录病毒)、MVV(梅迪-维斯纳病病毒)、NDV(新城疫病毒)、OPA(绵羊肺腺癌)、RSV(劳斯肉瘤病毒)、SARS(严重急性呼吸综合征)、SARS-CoV(SARS-冠状病毒)、SPV(绵羊痘病毒)、TB(结核病)、VARV(天花病毒)等。OHPP配制的氯硝柳胺还可以是动物药物，以治疗上述疾病。

本领域的技术人员将认识到，可以对上文描述的具体实施进行众多修改。实施不应限于所述的特定限制。其它实施也可以是可能的。

尽管已在附图和前面的说明书中详细说明且描述了本发明，但它们应被视为在特性方面是说明性而不是限制性的，应理解，仅已显示且描述了某些实施方案，并且期望保护落入本发明的精神内的所有改变和修改。

预期本方法和组合物的范围由下述权利要求限定。然而，必须理解，本公开内容可以以不同于具体解释且说明的方式进行实践，而不脱离其精神或范围。本领域的技术人员应当理解，本文所述的实施方案的各种替代方案可以用于实践权利要求，而不脱离如下述权利要求中限定的精神和范围。

引用的参考文献

1.Beigel JH，Tomashek KM，Dodd LE等人(2020).Remdesivir for thetreatment of Covid-19-preliminary report.The New England Journal ofMedicine.https://www.nejm.org/doi/full/10.1056/NEJMoa2007764

2.Braga L，Ali H，Secco I，Chiavacci E，Neves G等人2021.Drugs thatinhibit TMEM16 proteins block SARS-CoV-2Spike-induced syncytia.Nature，https://doi.org/10.1038/s41586-021-03491-6.

3.Chang YW，Yeh TK，Lin KT等人(2006).Pharmacokinetics of anti-SARS-CoVagent niclosamide and its analogs in rats.Journal of Food and Drug Analysis，14:329-333.https://www.researchgate.net/profile/Chiung-Tong_Chen/publication/228738372_Pharmacokinetics_of_Anti-SARS-CoV_Agent_Niclosamide_and_Its_Analogs_in_Rats/links/00b7d51428aa7c d584000000.

4.Del Moral-Sanchez JM，Gonzalez-Alvarez I，Gonzalez-Alvarez M，NavarroA，Bermejo M(2019).Classification of WHO essential oral medicines for childrenapplying a provisional pediatric biopharmaceutics classificationsystem.Pharmaceutics，11:567.https://www.mdpi.com/1999-4923/11/11/567

5.Gassen NC，Papies J，Bajaj T等人(2020).Analysis of SARS-CoV-2-controlled autophagy reveals spermidine，MK-2206，and niclosamide as putativeantiviral therapeutics.bioRxiv preprint，https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2020.04.15.997254v1

6.Jeon S，Ko M，Lee J等人(2020).Identification of antiviral drugcandidates against SARS-CoV-2from FDA-approved drugs.Antimicrobial Agents andChemotherapy，https://aac.asm.org/content/early/2020/04/28/AAC.00819-20

7.Li Y，Li PK，Roberts MJ等人(2014).Multi-targeted therapy of cancer byniclosamide:A new application for an old drug.Cancer Letters，349:8-14.https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S0304383514002092？via％3Dihub

8.Lin CK，Bai MY，Hu TM等人(2016).Preclinical evaluation of ananoformulated antihelminthic，niclosamide，in ovarian cancer.Oncotarget，7:No.8.https://www.oncotarget.com/article/7113/text/

9.Schweizer MT，Haugk K，McKiernan JS等人(2018).A phase I study ofniclosamide in combination with enzalutamide in men with castration-resistantprostate cancer.PLOS ONE，https://journals.plos.org/plosone/article？id＝10.1371/journal.pone.0198389

10.Watson J等人(2020).对MR Mehra、SS Desai、F Ruschitzka和AN Patel，“Hydroxychloroquine or chloroquine with or without a macrolide for treatmentof COVID-19:a multinational registry analysis”.Lancet.2020年5月22日:S0140-6736(20)31180-6.doi:10.1016/S0140-6736(20)31180-6.PMID:32450107的作者，和对Richard Horton(The Lancet的编辑)的公开信.关于统计分析和数据完整性的担忧.https://zenodo.org/record/3864691#.XtV69i2ZMW8

11.World Health Organization(WHO).(2019).World Health OrganizationModel List of Essential Medicines，21st List，2019.https://apps.who.int/iris/bitstream/handle/10665/325771/WHO-MVP-EMP-IAU-2019.06-eng.pdf？ua＝1

12.Xie Y，Yao Y.(2018a).Octenylsuccinate hydroxypropyl phytoglycogen，adendrimer-like biopolymer，solubilizes poorly water-soluble activepharmaceutical ingredients，Carbohydrate Polymers，180:29-37

13.Xie Y，Yao Y.(2018b).Octenylsuccinate hydroxypropyl phytoglycogenenhances the solubility and in-vitro antitumor efficacy ofniclosamide.International Journal of Pharmaceutics，535:157-163

14.Xie Y，Yao Y.(2019).Incorporation with dendrimer-like biopolymerleads to improved soluble amount and in vitro anticancer efficacy ofpaclitaxel.Journal of Pharmaceutical Sciences，108:1984-1990

15.Ying Xie，Yuan Yao.(2020).Preparation and characterization of asolid dispersion containing curcumin and octenylsuccinate hydroxypropylphytoglycogen for improved curcumin solubility.European Journal ofPharmaceutical Sciences

16.Xu J，Shi PY，Li H，Zhou J.(2020).Broad spectrum antiviral agentniclosamide and its therapeutic potential.ACS Infectious Diseases，6:909-915.https://pubs.acs.org/doi/10.1021/acsinfecdis.0c00052。

Claims

1.一种组合物，其包含高度支化的葡聚糖和氯硝柳胺，或者其药学上可接受的盐、水合物和溶剂化物。

2.根据权利要求1的组合物，其中所述组合物的氯硝柳胺的经口生物利用度是单独作为药物组合物的氯硝柳胺的经口生物利用度的至少2倍。

3.权利要求1-2的组合物，其进一步包含一种或多种药学上可接受的赋形剂或稀释剂。

4.权利要求1-3的组合物，其中所述组合物配制用于经口递送。

5.权利要求1-2的组合物，其进一步包含一种或多种吸收促进剂，用于进一步改善氯硝柳胺的经口生物利用度。

6.权利要求1-5的组合物，其中所述组合物是丸剂、片剂、胶囊、液体、凝胶或粉末。

7.权利要求1-3的组合物，其中所述组合物用于吸入、鼻内、静脉内、肌内、皮下或皮内递送。

8.权利要求1和2的组合物，其中所述高度支化的葡聚糖是辛烯基琥珀酸酯羟丙基植物糖原(OHPP)。

9.一种用于治疗病毒感染的方法，其包括向有此需要的患者施用有效量的权利要求1-8的组合物。

10.权利要求9的方法，其中所述病毒感染由选自以下的病毒引起：SARS-CoV-2、SARS-CoV、MERS-CoV、甲型流感、登革热病毒、寨卡病毒、埃博拉病毒、丙型肝炎病毒、日本脑炎病毒、人鼻病毒、基孔肯雅病毒、人腺病毒、EB病毒、其它流感、HIV、脊髓灰质炎病毒、其它病毒或其组合。

11.一种用于治疗癌症的方法，其包括向有此需要的患者施用有效量的权利要求1-8的组合物。

12.权利要求11的方法，其中所述癌症是前列腺癌、肾上腺皮质癌、乳腺癌、结肠癌、神经胶质瘤、头颈癌、白血病、肺癌、骨肉瘤、卵巢癌、前列腺癌、肾细胞癌或卵巢癌。

13.权利要求9-12的方法，其中所述患者是动物。

14.权利要求9-12的方法，其中所述患者是人。

15.权利要求9的方法，其中所述病毒是SARS-CoV-2。

16.一种预防患者中的病毒感染的方法，其包括向患者施用有效量的权利要求1-8的组合物的步骤。

17.权利要求16的方法，其中所述患者是人或动物。

18.权利要求16-17的方法，其中所述病毒感染由选自以下的病毒引起：SARS-CoV-2、SARS-CoV、MERS-CoV、甲型流感、登革热病毒、寨卡病毒、埃博拉病毒、丙型肝炎病毒、日本脑炎病毒、人鼻病毒、基孔肯雅病毒、人腺病毒、EB病毒、其它流感、HIV、脊髓灰质炎病毒、其它病毒及其组合。

19.一种药物组合物，其包含权利要求1-8的组合物和一种或多种另外的药物活性剂。

20.权利要求19的组合物，其中所述一种或多种另外的药物活性剂是抗病毒剂、抗细菌剂、抗真菌剂和/或抗炎剂。

21.一种用于治疗病毒感染的方法，其包括向有此需要的患者施用有效量的权利要求1-8的组合物，连同有效量的一种或多种另外的药物活性剂。

22.权利要求21的方法，其中所述一种或多种另外的活性剂是抗病毒剂、抗细菌剂、抗真菌剂和/或抗炎剂。

23.用于治疗癌症的方法，其包括向有此需要的患者施用有效量的权利要求1-8的组合物，连同有效量的一种或多种另外的药物活性剂。

24.权利要求23的方法，其中所述一种或多种另外的活性剂是抗癌剂。

25.一种用于治疗疾病或病症的方法，其包括向有此需要的患者施用有效量的权利要求1-8的组合物，其中所述疾病或病症是由结核病、炭疽、铜绿假单胞菌或金黄色葡萄球菌引起的细菌感染，2型糖尿病，非酒精性脂肪肝病，动脉收缩，子宫内膜异位症，神经性疼痛，类风湿性关节炎，硬皮病样移植物抗宿主病或系统性硬化。

26.一种用于靶向多种信号传导途径和生物过程之一的方法，所述信号传导途径和生物过程包括但不限于氧化磷酸化的解偶联、Wnt、mTORC1、STAT3、NF-κB、Notch、AKT/ERK/Src、AR-V7、C-Fos、C-Jun、E2F1、c-Myc、mGluRs、代谢途径、ROS、线粒体、pH，所述方法包括向有此需要的患者施用有效量的权利要求1-8的组合物。

27.权利要求1-8的组合物，其中OHPP和氯硝柳胺使用选自以下的方法掺合：喷雾干燥、喷雾冷却、挤出、热熔挤出、匀浆化、研磨例如喷射研磨、低温研磨、球磨和胶体研磨、真空干燥、转筒干燥、薄膜成型、表面涂布、打印、3D打印、多层成型、高强度共混、共结晶、剂型的个性化制造以及不同程序的组合。