CN116286534A - 用于缓解高尿酸血症的植物乳植杆菌及其复合物和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一株用于缓解高尿酸血症的植物乳植杆菌及其复合物和应用，属于微生物技术领域。植物乳植杆菌保藏于中国典型培养物保藏中心，武汉，保藏日期为2022年10月19日，保藏编号为CCTCC NO：M20221596。复合物包括植物乳植杆菌BL‑17、0.01wt％的低聚半乳糖和0.01wt％的腺苷酸和余量的灭菌脱脂乳溶液。本发明的复合物能够有效缓解高尿酸血症大鼠血清中高尿酸水平，增加高尿酸血症大鼠尿液尿酸水平，降低高尿酸血症大鼠血清肌酐水平，降低高尿酸血症大鼠血清尿素氮水平，抑制高尿酸大鼠血清及肝脏的黄嘌呤氧化酶（XOD）活性，对高尿酸血症具有缓解作用。
Description
技术领域
本发明涉及一株用于缓解高尿酸血症的植物乳植杆菌及其复合物和应用，尤其涉及一种益生菌与益生元复合物缓解高尿酸血症的用途，属于微生物技术领域。
背景技术
尿酸是人类嘌呤的代谢终产物，已知血清尿酸水平升高会导致痛风和高尿酸血症。摄入富含嘌呤的食物与血清尿酸浓度升高有关。蔬菜等食物的核酸主要由腺嘌呤和鸟嘌呤组成，这些食物对高尿酸血症的发生几乎没有影响。相比之下，动物、鱼和一些虾的肉含有大量的次黄嘌呤，而这些食物的高摄入量与血清尿酸水平升高有关。可以通过减少肌苷和相关嘌呤化合物(例如次黄嘌呤和肌苷5’-单磷酸(IMP))而不是腺苷及其相关化合物的吸收来防止血清尿酸水平升高。
一种旨在减少食物来源嘌呤在肠道吸收的策略是吃低嘌呤的食物。另一个策略是吃降低血清尿酸水平的食物，就像别嘌呤醇等抑制肝脏黄嘌呤氧化酶(XOD)活性的药物一样。然而，减少嘌呤的食物的可口性明显变差，因为可口的食物通常含有高水平的嘌呤，如鲜味成分。因此，对于产品的设计不仅在低嘌呤水平上，也要在长期全营养的因素中，来考虑食物风味的影响。另外一种有效的策略是在食物组合中引入乳杆菌。例如，乳酸杆菌，产生乳酸作为碳水化合物发酵的主要代谢终产物。通过例如激活免疫反应，乳酸杆菌的口服摄入可能对宿主有有益的作用，随食物摄入的乳酸杆菌可能会在宿主的肠道中吸收嘌呤，从而减少宿主对嘌呤的吸收。但是，现有的乳杆菌存在治疗或缓解效果不显著的问题，需要与用于治疗或缓解高尿酸血症的药物联合服用。在针对高尿酸血症引起的疾病治疗过程中，常用的药物，例如苯溴马隆、别嘌呤醇的疗效会受到药物剂量和不耐受、药物之间的相互作用和毒副作用较高的限制，这些情况都使得降尿酸的治疗变得更加棘手。因此，研发出新型高效低毒的降尿酸药物对现代人高尿酸相关疾病的治疗至关重要。本发明将目光聚集于这几点有效影响高尿酸的因素上，设计出适宜的益生菌与益生元复合物，应用于缓解高尿酸血症。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是，提供一株用于缓解高尿酸血症的植物乳植杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)BL-17。
同时，本发明提供包含一株用于缓解高尿酸血症的植物乳植杆菌
(Lactiplantibacillus plantarum)BL-17的复合物。
同时，本发明提供一种上述复合物的制备方法。
同时，本发明提供一种上述复合物在制备预防和/或治疗缓解高尿酸血症药物中的应用。
同时，本发明提供一种上述复合物在制备预防和/或治疗痛风药物中的应用。
同时，本发明提供一株用于缓解高尿酸血症的植物乳植杆菌
(Lactiplantibacillus plantarum)BL-17在制备发酵食品中的应用。
为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案为：
一株用于缓解高尿酸血症的植物乳植杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)BL-17，植物乳植杆菌保藏于中国典型培养物保藏中心，武汉，保藏日期为2022年10月19日，保藏编号为CCTCC NO：M20221596。
包含一株用于缓解高尿酸血症的植物乳植杆菌(Lactiplantibacillusplantarum)BL-17的复合物，还包括0.01wt％的低聚半乳糖和0.01wt％的腺苷酸和余量的灭菌脱脂乳溶液，植物乳植杆菌BL-17的活菌含量≥1×106CFU/mL或≥1×106CFU/g。
复合物包括但不限于植物乳植杆菌BL-17的活菌株、干菌株、菌株代谢物或灭活的菌株。
复合物的制备方法，包括以下步骤：
步骤一，活化植物乳植杆菌BL-17：将植物乳植杆菌BL-17在MRS固体培养基(配方：蛋白胨5.0g，胰蛋白胨10.0g，乙酸钠5.0g，酵母提取物5.0g，葡萄糖20.0g，吐温-80 1.0g，硫酸锰0.25g，柠檬酸氢二铵2.0g，硫酸镁0.58g，磷酸氢二钾2.0g，牛肉膏5.0g，琼脂16.0g，用蒸馏水定容至1L，调节pH至5.8，121℃条件下灭菌15min)上进行平板划线，挑取单菌落进行革兰氏染色，显微镜下观察为单一菌落后，然后在MRS液体培养基(配方：蛋白胨5.0g，胰蛋白胨10.0g，乙酸钠5.0g，酵母提取物5.0g，葡萄糖20.0g，吐温-80 1.0g，硫酸锰0.25g，柠檬酸氢二铵2.0g，硫酸镁0.58g，磷酸氢二钾2.0g，牛肉膏5.0g，用蒸馏水定容至1L，调节pH至5.8，121℃条件下灭菌15min)中进行传代两次直至恢复其活力，最后将50％甘油和MRS液体培养基按2：3的体积比混合，-80℃储藏备用；
步骤二，冷冻保藏的植物乳植杆菌BL-17以4％接种量转接至5mL MRS液体培养基中，37℃培养20小时，并活化两代，取活化二代的植物乳植杆菌BL-17的MRS液体培养基于4℃，6000r/min，离心5min，收集菌体，并用无菌生理盐水清洗菌体2次，并重新收集菌泥为后续制备菌悬液备用；
步骤三，将菌泥重悬于100g/L的灭菌脱脂乳溶液中，并进行平板稀释涂布计数菌落，制成浓度为4.0×109CFU/mL的菌悬液；在菌悬液中加入低聚半乳糖和腺苷酸，使低聚半乳糖和腺苷酸含量各达到0.1mg/mL浓度。
复合物在制备预防和/或治疗缓解高尿酸血症药物中的应用。
复合物在制备预防和/或治疗痛风药物中的应用。
一株用于缓解高尿酸血症的植物乳植杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)BL-17在制备发酵食品中的应用。
植物乳植杆菌BL-17具有如下特性：通过革兰氏染色后，菌落形态呈圆形，具有略微起伏且不光滑的边缘。经革兰氏染色后为灰白色，属于典型的革兰氏阳性菌。该菌株的形态特征和典型乳杆菌的形态相符合。在37℃恒温厌氧条件下，在MRS培养基培养约12h到达对数末期。同时对模拟胃肠液具有较强耐受能力。
本发明具有以下有益效果：
1.本发明中益生菌为植物乳植杆菌BL-17，益生元为低聚半乳糖-腺苷酸。本发明的复合物能够有效缓解高尿酸血症大鼠血清中高尿酸水平，增加高尿酸血症大鼠尿液尿酸水平，降低高尿酸血症大鼠血清肌酐水平，降低高尿酸血症大鼠血清尿素氮水平，抑制高尿酸大鼠血清及肝脏的黄嘌呤氧化酶(XOD)活性，对高尿酸血症具有缓解作用；低聚半乳糖和和腺苷酸仅在一定程度上对上述指标产生轻微影响。而植物乳植杆菌与低聚半乳糖-腺苷酸复合物与植物乳植杆菌相比，能够在很大程度上提升单菌的缓解效果。同时，本发明中利用大鼠口服植物乳植杆菌BL-17与低聚半乳糖-腺苷酸复合物研究发现可有效减少大鼠肠道对这些嘌呤的吸收。本发明的植物乳植杆菌BL-17与低聚半乳糖-腺苷酸复合物可用于制备缓解高尿酸血症的功能性食品和药品，可作为高尿酸人群的日常保健用途。
2.本发明的复合物可有效减少大鼠肠道对嘌呤的吸收，从而起到预防和/或治疗缓解高尿酸血症、痛风的作用。
3.植物乳植杆菌BL-17、低聚半乳糖和腺苷酸复合物可将嘌呤核苷降解为嘌呤碱基，嘌呤碱基不容易被肠细胞吸收为核苷。口服复合物的大鼠可减少肠道对这些嘌呤的吸收。
本发明中，植物乳植杆菌BL-17、低聚半乳糖和腺苷酸复合物可将嘌呤核苷降解为嘌呤碱基，嘌呤碱基不容易被肠细胞吸收为核苷。植物乳植杆菌BL-17、低聚半乳糖和腺苷酸复合物也被证明在体外吸收外源性腺苷酸(腺苷5’-单磷酸)、腺苷和腺嘌呤，本发明证明了大鼠口服植物乳植杆菌BL-17、低聚半乳糖和腺苷酸复合物可减少大鼠肠道对这些嘌呤的吸收。
附图说明
图1是本发明的复合物对高尿酸血症大鼠血清尿酸的影响；
图2是本发明的复合物对高尿酸血症大鼠血清肌酐的影响；
图3是本发明的复合物对高尿酸血症大鼠血清尿素氮的影响；
图4是本发明的复合物对高尿酸血症大鼠尿液尿酸的影响；
图5是本发明的复合物对高尿酸血症大鼠血清和肝脏黄嘌呤氧化酶(XOD)活力的影响；
图6是本发明的复合物对大鼠肠道肌苷5’-单磷酸(IMP)吸收的影响；
图7是本发明的复合物对大鼠肠道肌苷吸收的影响；
图8是本发明的复合物对大鼠肠道次黄嘌呤吸收的影响。
具体实施方式
下面结合附图对本发明作更进一步的说明。
本发明中，植物乳植杆菌BL-17的拉丁名为Lactiplantibacillus plantarum BL-17，保藏于中国典型培养物保藏中心，武汉，保藏日期为2022年10月19日，保藏编号为CCTCCNO：M20221596。公众可以通过菌种保藏中心购买得到。
实施例1
植物乳植杆菌BL-17分离自甘肃省牧民制作的自然发酵牦牛酸奶。
一株用于缓解高尿酸血症的植物乳植杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)BL-17，植物乳植杆菌保藏于中国典型培养物保藏中心，武汉，保藏日期为2022年10月19日，保藏编号为CCTCC NO：M20221596。
包含一株用于缓解高尿酸血症的植物乳植杆菌(Lactiplantibacillusplantarum)BL-17的复合物，还包括0.01wt％的低聚半乳糖和0.01wt％的腺苷酸和余量的灭菌脱脂乳溶液，植物乳植杆菌BL-17的活菌含量≥1×106CFU/mL或≥1×106CFU/g。
复合物的制备方法，包括以下步骤：
步骤一，活化植物乳植杆菌BL-17：将植物乳植杆菌BL-17在MRS固体培养基(配方：蛋白胨5.0g，胰蛋白胨10.0g，乙酸钠5.0g，酵母提取物5.0g，葡萄糖20.0g，吐温-80 1.0g，硫酸锰0.25g，柠檬酸氢二铵2.0g，硫酸镁0.58g，磷酸氢二钾2.0g，牛肉膏5.0g，琼脂16.0g，用蒸馏水定容至1L，调节pH至5.8，121℃条件下灭菌15min)上进行平板划线，挑取单菌落进行革兰氏染色，显微镜下观察为单一菌落后，然后在MRS液体培养基(配方：蛋白胨5.0g，胰蛋白胨10.0g，乙酸钠5.0g，酵母提取物5.0g，葡萄糖20.0g，吐温-80 1.0g，硫酸锰0.25g，柠檬酸氢二铵2.0g，硫酸镁0.58g，磷酸氢二钾2.0g，牛肉膏5.0g，用蒸馏水定容至1L，调节pH至5.8，121℃条件下灭菌15min)中进行传代两次直至恢复其活力，最后将50％甘油和MRS液体培养基按2：3的体积比混合，-80℃储藏备用；
步骤二，冷冻保藏的植物乳植杆菌BL-17以4％接种量转接至5mLMRS液体培养基中，37℃培养20小时，并活化两代，取活化二代的植物乳植杆菌BL-17的MRS液体培养基于4℃，6000r/min，离心5min，收集菌体，并用无菌生理盐水清洗菌体2次，并重新收集菌泥为后续制备菌悬液备用；
步骤三，将菌泥重悬于100g/L的灭菌脱脂乳溶液中，并进行平板稀释涂布计数菌落，制成浓度为4.0×109CFU/mL的菌悬液；在菌悬液中加入低聚半乳糖和腺苷酸，使低聚半乳糖和腺苷酸含量各达到0.1mg/mL浓度。
复合物在制备预防和/或治疗缓解高尿酸血症药物中的应用。
复合物在制备预防和/或治疗痛风药物中的应用。
一株用于缓解高尿酸血症的植物乳植杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)BL-17在制备发酵食品中的应用。
1.实验动物及分组设计
动物实验分为三个阶段，分别为大鼠预备饲养与分组阶段(一周)、高尿酸血症建模阶段(一周)、分组治疗阶段(两周)，每个阶段具体实验内容如下：
阶段Ⅰ(大鼠预备饲养与实验分组)：
选取健康雄性SPF级(Specific Pathogen Free)7周龄Wistar雄性大鼠48只，体重(200±20)g。大鼠48只雄性大鼠大鼠饲养于动物房中，温度22℃，湿度10-60％，12小时明暗交替照明，由标准饲料喂养，适应性喂养1周，自由饮水。适应性喂养1周后，将实验动物随机分成6组，每组8只，分组如下：对照组(A组)、模型组(B组)、植物乳植杆菌BL-17组(C组)、低聚半乳糖-腺苷酸组(D组)、复合物组(E组)、别嘌呤醇干预组(阳性对照)(F组)。
阶段Ⅱ(高尿酸血症建模)：
第8d开始，对照组大鼠腹腔注射0.5％CMC-Na溶液，后皮下注射0.5％CMC-Na溶液(0.5％CMC-Na溶液的注射量与腹腔注射300.00mg/kg黄嘌呤CMC-Na溶液和皮下注射300.00mg/kg氧嗪酸钾CMC-Na溶液量等同)，除对照组外的5组大鼠腹腔注射300.00mg/kg黄嘌呤CMC-Na溶液(由0.5％的羧甲基纤维素钠(CMC-Na)水溶解制成)，再皮下注射300.00mg/kg氧嗪酸钾CMC-Na溶液(由0.5％的羧甲基纤维素钠(CMC-Na)水溶解制成)，建立高尿酸血症模型。
阶段Ⅲ(分组治疗阶段)：
第15d开始，各组大鼠灌胃相应药物1次/天。对照组与模型组灌胃给予10.00mL/kg生理盐水；植物乳植杆菌BL-17组大鼠给予1×109CFU/只的植物乳植杆菌BL-17的菌悬液；低聚半乳糖-腺苷酸组大鼠给予10mg/kg的低聚半乳糖和10mg/kg的腺苷酸，低聚半乳糖和腺苷酸由100g/L的灭菌脱脂乳溶液(市售商品)配制为各达到0.1mg/mL浓度的溶液，即灌胃10.00mL/kg上述溶液；复合物组给予1×109CFU/只的植物乳植杆菌BL-17与10mg/kg的低聚半乳糖-腺苷酸复合物，即灌胃10.00mL/kg上述复合物；别嘌呤醇干预组给予灌胃5mg/kg别嘌呤醇-CMC-Na溶液(由0.5％的羧甲基纤维素钠(CMC-Na)水溶解制成)，分组治疗持续14d。
实验末期收集大鼠新鲜粪便冻存于-80℃冰箱。试验结束时，大鼠禁食不禁水12h，腹腔注射0.1mL/10g戊巴比妥钠溶液麻醉后，各组大鼠于眼球静脉丛取血，之后脱颈处死大鼠，在冰台上摘取大鼠肝脏组织。血液样本3500r/min离心15分钟，取上清，-80℃冻存，用于血液指标分析。肝脏组织取出后迅速于预冷的生理盐水中漂洗去血，于液氮中速冻并转移于-80℃冻存，后续制成肝匀浆测定相关指标。
2.复合物降低高尿酸血症大鼠的血清尿酸、肌酐、尿素氮水平实验
吸取血液样本上清液于1.5mL离心管内，得血清样品，按照相应测试试剂盒提供的测定方法测定血清中尿酸、肌酐和尿素氮的含量。
复合物对大鼠血清尿酸水平的影响如图1，模型组(B组)的血清尿酸浓度为(424.33±6.03)μmol/L，与对照组(A组)相比显著升高(P<0.01)，提示氧嗪酸钾与黄嘌呤联合诱导的高尿酸血症模型效果良好。与模型组(B组)相比，植物乳植杆菌BL-17组(C组)、低聚半乳糖-腺苷酸组(D组)、复合物组(E组)、别嘌呤醇干预组(F组)大鼠血清尿酸浓度均下降。低聚半乳糖-腺苷酸组(D组)效果有限，植物乳植杆菌BL-17组(C组)与模型组(B组)具有显著差异，在一定程度上可以调节大鼠血清尿酸水平，而复合物组(E组)相较于模型组(B组)与植物乳植杆菌BL-17组(C组)显著降低，并且与别嘌呤醇干预组(F组)在实际意义上更为接近。与高尿酸血症模型组(B组)大鼠相比，植物乳植杆菌BL-17组(C组)使高尿酸血症大鼠的血清尿酸浓度降低40.85％。复合物组(E组)使高尿酸血症大鼠的血清尿酸浓度降低62.13％，其降低尿酸的作用与药物别嘌呤醇相近，可预防和减少高尿酸血症和痛风的发生。
血清肌酐水平用于评价肾小球滤过率，肾功能受损时血尿酸、肌酐水平会高于正常值。复合物对大鼠血清肌酐水平的影响如图2，与高尿酸血症模型大鼠相比，植物乳植杆菌BL-17组(C组)、低聚半乳糖-腺苷酸组(D组)、复合物组(E组)、别嘌呤醇干预组(F组)均降低了大鼠血清肌酐水平，复合物组(E组)使高尿酸血症大鼠的血清肌酐浓度降低34.31％，其降低肌酐的作用与药物别嘌呤醇相近，可预防和减少高尿酸血症和痛风的发生。
复合物对大鼠血清尿素氮水平的影响如图3，与其对血清肌酐的影响相似，与高尿酸血症模型大鼠相比，复合物组(E组)使高尿酸血症大鼠的血清尿素氮浓度降低44.88％，说明复合物组(E组)对血清尿素氮具有较强的清除作用。
3.复合物调节高尿酸血症大鼠的尿酸排泄量实验
收集的尿液加入10倍量的蒸馏水稀释，50℃加热使沉淀物溶解，2000r/min离心10min，吸取上清液，按尿酸测定试剂盒的测定方法测定尿液中尿酸水平。
复合物对大鼠尿液尿酸水平的影响如图4，除别嘌呤醇干预组(F组)外，相较于对照组(A组)，其他组的高尿酸血症大鼠尿液尿酸含量显著增高(P<0.01)。相较于模型组(B组)，别嘌呤醇干预组(F组)使尿液尿酸水平降至对照组(A组)水平，达到无病症大鼠尿液尿酸水平，植物乳植杆菌BL-17组(C组)和低聚半乳糖-腺苷酸组(D组)则在一定程度上降低了大鼠尿液尿酸水平，复合物组(E组)明显降低了大鼠尿液尿酸水平，接近别嘌呤醇干预组(F组)。
4.复合物降低高尿酸血症大鼠血清与肝组织黄嘌呤氧化酶活性的实验
将肝组织按照重量(mg)：体积(μL)＝1：9加入0.9％的生理盐水，冰水浴中机械匀浆，制成10％的匀浆液，3000r/min离心10min，取上清液，按照黄嘌呤氧化酶测试盒说明操作，酶比色法测定肝组织中黄嘌呤氧化酶含量。同时，血清黄嘌呤氧化酶活性也使用试剂盒检测。
黄嘌呤氧化酶是嘌呤代谢合成尿酸的关键酶，有效抑制黄嘌呤氧化酶的活性从而使得尿酸合成减少，从而发挥降尿酸作用，这是大多数物质发挥作用的原因。如图5A和图5B所示，与高尿酸血症大鼠相比，植物乳植杆菌BL-17组(C组)、低聚半乳糖-腺苷酸组(D组)、复合物组(E组)、别嘌呤醇干预组(F组)在不同程度上降低了高尿酸血症大鼠的血清和肝脏黄嘌呤氧化酶活性，特别是植物乳植杆菌BL-17组(C组)与复合物组(E组)能够将高尿酸血症大鼠的血清和肝脏黄嘌呤氧化酶活性分别降低49.10％、76.28％，使得高尿酸血症大鼠的血清和肝脏黄嘌呤氧化酶活力趋近正常，从而使大鼠体内尿酸合成减少，有利于高尿酸血症和痛风的预防和治疗。
肾作为尿酸排泄的主要调节器官，对尿酸的排泄发挥重要的作用，包括肾小球滤过、肾小管再吸收和分泌。报告指出，约90％高尿酸血症的主要原因是肾尿酸排泄不足所致。复合物组(E组)能显著降低尿酸血症大鼠血清尿酸、肌酐、尿素氮水平，减少尿液尿酸排泄，抑制血清与肝脏的黄嘌呤氧化酶(XOD)的活性，由此证实本发明对氧嗪酸钾和黄嘌呤诱导的高尿酸血症大鼠具有较好的降尿酸及肝肾保护作用。
5.本发明的复合物缓解高尿酸血症的机制研究
5.1.动物实验设计
雄性Wistar大鼠，8周龄，体重190-210克，饲养在动物实验室，环境条件受控，包括温度20-26℃，相对湿度40％-70％，光照/黑暗周期为12小时/12小时。所有的大鼠进行一周的正常饮食和自来水。根据体重分组，将其随机分为对照组(8只)、嘌呤组(8只)和嘌呤-复合物组(8只)，禁食16小时，对照组大鼠灌胃给予2mL生理盐水；嘌呤组大鼠灌胃10mL浓度为0.5wt％的14C-肌苷酸、14C-肌苷或14C-次黄嘌呤；嘌呤-复合物组大鼠口服10mL浓度为0.5wt％的14C-肌苷酸、14C-肌苷或14C-次黄嘌呤和2mL复合物。在0、15、30、45、60、90、120和180分钟从尾静脉收集所有大鼠的血液，收集血样(60μL)，并与等体积的2mg/mLNa2-乙EDTA混合。将样品加入闪烁液中，在液体闪烁计数器中测量放射性。
5.2.复合物减少大鼠肠道对嘌呤的吸收的实验
服用标记的嘌呤(14C-肌苷酸(即肌苷5’-单磷酸(IMP))、14C-肌苷(即inosine)或14C-次黄嘌呤(即hypoxanthine))与复合物在不同时间段，大鼠血液放射性嘌呤含量如图6、图7、图8。在给予14C-IMP与复合物后45、60、180分钟，大鼠血液中的放射性明显低于单独给予14C-IMP后的放射性。类似地，给予14C-肌苷与复合物的大鼠的血液在30、45、60、90、180分钟后均显示出明显低于单独给予14C-肌苷的大鼠的血液的放射性，并且给予14C-次黄嘌呤加复合物的大鼠的血液在15、30、45、60和90分钟后显示出明显低于单独给予14C-次黄嘌呤的大鼠的血液的放射性。
复合物中含有少量肌苷，植物乳植杆菌BL-17可以通过直接摄取复合物中的肌苷来减少大鼠对肌苷酸的吸收。肌苷观察到的结果可能是由于其被植物乳植杆菌BL-17结合，随后降解为次黄嘌呤，次黄嘌呤比肌苷吸收更少。次黄嘌呤观察到的结果可能是由于其被植物乳植杆菌BL-17吸收，以及其在肠道中的低水平吸收。由于核苷的降解和嘌呤被植物乳植杆菌BL-17吸收，导致肠对嘌呤的吸收减少。此外，核苷酸和核苷的有效性可能会降低，因为它们很容易被肠道吸收。而低聚半乳糖作为功能性低聚糖，能够作为植物乳植杆菌BL-17丰富的营养源，促进植物乳植杆菌BL-17的活性，增强其在机体的竞争性。复合物中的腺苷酸可促进植物乳植杆菌BL-17生长，进而促进吸收外源性腺苷酸，腺苷和腺嘌呤，减少大鼠肠道对这些嘌呤的吸收。植物乳植杆菌BL-17与低聚半乳糖-腺苷酸复合物减弱了肌苷和相关嘌呤以及腺苷和相关化合物的肠道吸收。减少食物来源嘌呤的肠道吸收对维持正常的血清尿酸水平很重要。植物乳植杆菌BL-17与低聚半乳糖-腺苷酸复合物可能有助于高血尿酸水平和高尿酸血症患者的健康。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出：对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (6)
1.一株用于缓解高尿酸血症的植物乳植杆菌（Lactiplantibacillus plantarum）BL-17，其特征在于，植物乳植杆菌保藏于中国典型培养物保藏中心，武汉，保藏日期为2022年10月19日，保藏编号为CCTCC NO：M20221596。
2.包含权利要求1所述的一株用于缓解高尿酸血症的植物乳植杆菌（Lactiplantibacillus plantarum）BL-17的复合物，其特征在于，还包括0.01wt％的低聚半乳糖和0.01wt％的腺苷酸和余量的灭菌脱脂乳溶液，植物乳植杆菌BL-17的活菌含量≥1×106CFU/mL或≥1×106CFU/g。
3.根据权利要求2所述的复合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤一，活化植物乳植杆菌BL-17：将植物乳植杆菌 BL-17 在MRS固体培养基上进行平板划线，挑取单菌落进行革兰氏染色，显微镜下观察为单一菌落后，然后在MRS液体培养基中进行传代两次直至恢复其活力，最后将50%甘油和MRS液体培养基按2：3的体积比混合，-80℃储藏备用；
步骤二，冷冻保藏的植物乳植杆菌 BL-17以4％接种量转接至5mL MRS液体培养基中，37℃培养20小时，并活化两代，取活化二代的植物乳植杆菌 BL-17的MRS液体培养基于4℃，6000r/min，离心5min，收集菌体，并用无菌生理盐水清洗菌体2次，并重新收集菌泥为后续制备菌悬液备用；
步骤三，将菌泥重悬于100g/L的灭菌脱脂乳溶液中，并进行平板稀释涂布计数菌落，制成浓度为4.0×109CFU/mL的菌悬液；在菌悬液中加入低聚半乳糖和腺苷酸，使低聚半乳糖和腺苷酸含量各达到0.1mg/mL浓度。
4.根据权利要求2所述的复合物在制备预防和/或治疗缓解高尿酸血症药物中的应用。
5.根据权利要求2所述的复合物在制备预防和/或治疗痛风药物中的应用。
6.根据权利要求1所述的一株用于缓解高尿酸血症的植物乳植杆菌（Lactiplantibacillus plantarum）BL-17在制备发酵食品中的应用。
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