CN116240007A - 一种生物酶降粘驱油剂的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种生物酶降粘驱油剂的制备方法，所述降粘驱油剂的制备是以总质量100计，将枯草芽孢杆菌发酵液30‑40g与草菇木聚糖酶5‑10g混合后，在30‑50℃，转速150‑200r/min条件下搅拌20min，加入助剂1‑3g、蒸馏水47‑64g，将温度升高至40‑60℃，相同转速下搅拌30min，静止20min，重复搅拌与静止步骤3次，得到均匀的生物酶降粘驱油剂。本发明的生物酶降粘驱油剂可解决含胶质、沥青质、蜡均较高的重质稠油难开采问题，降粘率比常规化学降粘剂提高5％。
Description
技术领域
本发明属于降粘驱油剂技术领域，尤其涉及一种生物酶降粘驱油剂的制备方法。
背景技术
随着石油开采量的逐年下降，对难以开采的重质稠油资源下功夫进行挖掘和开采成为当下迫切的需求。稠油由于其中所含的胶质、沥青质和蜡均较高，流动性差，使开采和运输都比较困难，同时稠油开采过程中，不可避免会造成沥青质析出而堵塞油层渗流孔道，从而使采收率较低，极大地影响产量。
目前，稠油开采的常规方法是加热和添加化学降粘剂，但对于超稠油处理效果有限，且随着国家对环保的要求日益严格，多数壬基酚类、辛基酚类降粘剂因不环保而不允许使用。
因此，需寻找绿色环保的稠油降粘剂，而生物类制剂凭借其环保、易降解、无污染等特性成为当今研究的热点。
在此背景下，选取大港油田采出沉积物中所含的枯草芽孢杆菌和植物草菇作为菌种，经微生物发酵技术制备出微生物蛋白酶和木聚糖酶，将二者与助剂搭配，形成生物酶制剂，具有稳定性好、对稠油乳化降粘性好的优点，能大幅提高采收率。
发明内容
为了解决上述技术问题，本发明提供一种生物酶降粘驱油剂的制备方法，所述降粘驱油剂的制备是以总质量100计，将枯草芽孢杆菌发酵液30-40g与草菇木聚糖酶5-10g混合后，在30-50℃，转速150-200r/min条件下搅拌20min，加入助剂1-3g、蒸馏水47-64g，将温度升高至40-60℃，相同转速下搅拌30min，静止20min，重复搅拌与静止步骤3次，得到均匀的生物酶降粘驱油剂。
进一步的，所述枯草芽孢杆菌发酵液的制备方法为：
步骤一：将枯草芽孢杆菌菌种试管接种于枯草芽孢杆菌种子培养基中振荡培养，在温度为35-37℃，振速为120r/min下培养15-30h，得种子液，将其溶解于100g蒸馏水中，搅拌均匀，调pH值为6-7，110-120℃下灭菌20mim；
步骤二：将种子液转移至枯草芽孢杆菌菌种发酵液培养基中，在温度为33-35℃，振速为150r/min下振荡培养30-40h，得到枯草芽孢杆菌发酵液，将其溶解于100g蒸馏水中，搅拌均匀，调pH值为7-8，110-120℃下灭菌20mim。
进一步的，所述枯草芽孢杆菌种子培养基配方为：葡萄糖1-3g，琼脂糖1.5-2.5g，蛋白胨0.5-1g，磷酸二氢钾0.1-0.3g，磷酸氢二钾0.4-0.6g，卡那霉素0.1-0.3g。
进一步的，所述枯草芽孢杆菌菌种发酵液培养基配方为：甘油5-8g，酵母膏0.5-1g，葡萄糖1-3g，异丙基硫代-β-D-半乳糖0.1-0.3g，磷酸二氢钾0.05-0.1g，磷酸氢二钾0.05-0.1g，氯化钙0.02-0.04g，氯化钠0.1-0.2g，碳酸氢铵0.01-0.02g。
进一步的，所述草菇木聚糖酶的制备方法为：
步骤一：将草菇菌种试管斜面接种于草菇菌种培养基中振荡培养，在温度为37-40℃，振速为130r/min下培养48-72h，得种子液，将其溶解于100g蒸馏水中,并搅拌均匀，控制pH值为6-6.5，110-120℃下灭菌15-20mim；
步骤二：将种子液转移至草菇菌种发酵液培养基中，在温度为35-37℃，振速为150r/min下振荡培养72-96h，得到草菇木聚糖酶发酵液，将其溶解于100g蒸馏水中，搅拌均匀，调pH值为7-8，110-120℃下灭菌20mim。
进一步的，所述草菇菌种培养基的配方为：羧甲基纤维素0.5-1g，木聚糖0.5-1g，胰蛋白胨0.2-0.6g，磷酸二氢钾0.1-0.3g，硫酸镁0.05-0.1g，微生物B1 0.01-0.02g。
进一步的，所述草菇菌种发酵液培养基的配方为：酵母膏0.4-0.8g，葡萄糖1-2g，柠檬酸二铵0.05-0.1g，磷酸二氢钾0.05-0.1g，氯化钠0.05-0.1g，硫酸铵0.05-0.1g，7水合氯化镁0.02-0.04g，柠檬酸钠0.01-0.02g，肌醇0.005-0.01g。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：
(1)、本发明的生物酶降粘驱油剂可解决含胶质、沥青质、蜡均较高的重质稠油难开采问题，降粘率比常规化学降粘剂提高5％。
(2)、本发明的生物酶降粘驱油剂具有较好的润湿性、乳化性和水溶性，可有效降级稠油粘度，同时对近井端解堵有一定效果，从而提高采收率。
(3)、本发明的生物酶降粘驱油剂具有环保、无毒、易降解的特点，对今后大规模推广具有重要意义。
附图说明
图1是本发明的实施例1与常规降粘剂的性能对比图；
图2是本发明的实施例2与常规降粘剂的性能对比图；
图3是本发明的实施例3与常规降粘剂的性能对比图；
图4是本发明的实施例4与常规降粘剂的性能对比图；
图5是本发明的实施例5与常规降粘剂的性能对比图；
图6是本发明的实施例6与常规降粘剂的性能对比图。
具体实施方式
以下结合附图对本发明做进一步描述：
实施例1：
一种生物酶降粘驱油剂的制备方法为：
以总质量100计，将枯草芽孢杆菌发酵液30-40g与草菇木聚糖酶5-10g混合后，在30-50℃，转速150-200r/min条件下搅拌20min，加入助剂1-3g，蒸馏水47-64g，将温度升高至40-60℃，相同转速下搅拌30min，静止20min，重复搅拌与静止步骤3次，得到均匀的生物酶降粘驱油剂。
其中枯草芽孢杆菌发酵液的制备方法为：
步骤一：将枯草芽孢杆菌菌种试管接种于枯草芽孢杆菌种子培养基中振荡培养，35-37℃，120r/min下培养15-30h，得种子液，枯草芽孢杆菌种子培养基配方为：葡萄糖1-3g，琼脂糖1.5-2.5g，蛋白胨0.5-1g，磷酸二氢钾0.1-0.3g，磷酸氢二钾0.4-0.6g，卡那霉素0.1-0.3g。将其溶解于100g蒸馏水中，搅拌均匀，调pH值为6-7，110-120℃下灭菌20mim；
步骤二：将种子液转移至枯草芽孢杆菌菌种发酵液培养基中，在33-35℃，150r/min下振荡培养30-40h，得到枯草芽孢杆菌发酵液，枯草芽孢杆菌菌种发酵液培养基配方为：甘油5-8g，酵母膏0.5-1g，葡萄糖1-3g，异丙基硫代-β-D-半乳糖0.1-0.3g，磷酸二氢钾0.05-0.1g，磷酸氢二钾0.05-0.1g，氯化钙0.02-0.04g，氯化钠0.1-0.2g，碳酸氢铵0.01-0.02g，将其溶解于100g蒸馏水中，搅拌均匀，调pH值为7-8，110-120℃下灭菌20mim。
其中草菇木聚糖酶发酵液的制备方法为：
步骤一：将草菇菌种试管斜面接种于草菇菌种培养基中振荡培养，在37-40℃，130r/min下培养48-72h，得种子液，草菇菌种培养基的配方为：羧甲基纤维素0.5-1g，木聚糖0.5-1g，胰蛋白胨0.2-0.6g，磷酸二氢钾0.1-0.3g，硫酸镁0.05-0.1g，微生物B1 0.01-0.02g。将其溶解于100g蒸馏水中,并搅拌均匀，控制pH值为6-6.5，110-120℃下灭菌15-20mim。
步骤二：将种子液转移至草菇菌种发酵液培养基中，在35-37℃，150r/min下振荡培养72-96h，得到草菇木聚糖酶发酵液。草菇菌种发酵液培养基配方为：酵母膏0.4-0.8g，葡萄糖1-2g，柠檬酸二铵0.05-0.1g，磷酸二氢钾0.05-0.1g，氯化钠0.05-0.1g，硫酸铵0.05-0.1g，7水合氯化镁0.02-0.04g，柠檬酸钠0.01-0.02g，肌醇0.005-0.01g，将其溶解于100g蒸馏水中，搅拌均匀，调pH值为7-8，110-120℃下灭菌20mim。
选取大港油田某区块的稠油，稠油的胶质、沥青质含量26.2％，含蜡8.5％作为评价介质，按照石油化工企标Q/BGBH 0017-2020评价50℃下降粘率，用量改为100ppm，同时用人造非均质岩心进行驱油实验，如附图1所示，与常规降粘剂进行性能对比，该产品在重质稠油中的降粘效果更明显。
实施例2：
一种生物酶降粘驱油剂的制备方法为：
以总质量100计，将枯草芽孢杆菌发酵液30g与草菇木聚糖酶6g混合后，在37℃，转速150r/min条件下搅拌20min，加入助剂1g，蒸馏水63g，将温度升高至50℃，相同转速下搅拌30min，静止20min，重复搅拌与静止步骤3次，得到均匀的生物酶降粘驱油剂。
其中枯草芽孢杆菌发酵液的制备方法为：
步骤一：将枯草芽孢杆菌菌种试管接种于枯草芽孢杆菌种子培养基中振荡培养，35℃，120r/min下培养30h，得种子液，枯草芽孢杆菌种子培养基配方为：葡萄糖3g，琼脂糖2.5g，蛋白胨1g，磷酸二氢钾0.3g，磷酸氢二钾0.6g，卡那霉素0.3g。将其溶解于100g蒸馏水中，搅拌均匀，调pH值为7，120℃下灭菌20mim。
步骤二：将种子液转移至枯草芽孢杆菌菌种发酵液培养基中，在33℃，150r/min下振荡培养40h，得到枯草芽孢杆菌发酵液，枯草芽孢杆菌菌种发酵液培养基配方为：甘油8g，酵母膏1g，葡萄糖3g，异丙基硫代-β-D-半乳糖0.3g，磷酸二氢钾0.1g，磷酸氢二钾0.1g，氯化钙0.04g，氯化钠0.2g，碳酸氢铵0.02g。将其溶解于100g蒸馏水中，搅拌均匀，调pH值为8，120℃下灭菌20mim。
其中草菇木聚糖酶发酵液的制备方法为：
步骤一：将草菇菌种试管斜面接种于草菇菌种培养基中振荡培养，在40℃，130r/min下培养72h，得种子液，草菇菌种培养基的配方为：羧甲基纤维素1g，木聚糖1g，胰蛋白胨0.6g，磷酸二氢钾0.3g，硫酸镁0.1g，微生物B1 0.02g，将其溶解于100g蒸馏水中,并搅拌均匀，控制pH值为6.5，120℃下灭菌15-20mim。
步骤二：将种子液转移至草菇菌种发酵液培养基中，在37℃，150r/min下振荡培养96h，得到草菇木聚糖酶发酵液，草菇菌种发酵液培养基配方为：酵母膏0.8g，葡萄糖2g，柠檬酸二铵0.1g，磷酸二氢钾0.1g，氯化钠0.1g，硫酸铵0.1g，7水合氯化镁0.04，柠檬酸钠0.02g，肌醇0.01g，将其溶解于100g蒸馏水中，搅拌均匀，调pH值为8，120℃下灭菌20mim。
选取大港油田某区块的稠油，稠油的胶质、沥青质含量26.2％，含蜡8.5％作为评价介质，按照石油化工企标Q/BGBH 0017-2020评价50℃下降粘率，用量改为100ppm，同时用人造非均质岩心进行驱油实验，如附图2所示，与常规降粘剂进行性能对比，该产品在重质稠油中的降粘效果更明显。
实施例3：
一种生物酶降粘驱油剂的制备方法为：
以总质量100计，将枯草芽孢杆菌发酵液40g与草菇木聚糖酶8g混合后，在35℃，转速150r/min条件下搅拌20min，加入助剂3g，蒸馏水59g，将温度升高至50℃，相同转速下搅拌30min，静止20min，重复搅拌与静止步骤3次，得到均匀的生物酶降粘驱油剂。
其中枯草芽孢杆菌发酵液的制备方法为：
步骤一：将枯草芽孢杆菌菌种试管接种于枯草芽孢杆菌种子培养基中振荡培养，35℃，120r/min下培养24h，得种子液，枯草芽孢杆菌种子培养基配方为：葡萄糖1g，琼脂糖1.5g，蛋白胨0.5g，磷酸二氢钾0.1g，磷酸氢二钾0.4g，卡那霉素0.1g。将其溶解于100g蒸馏水中，搅拌均匀，调pH值为6，110℃下灭菌20mim。
步骤二：将种子液转移至枯草芽孢杆菌菌种发酵液培养基中，在33℃，150r/min下振荡培养30h，得到枯草芽孢杆菌发酵液，枯草芽孢杆菌菌种发酵液培养基配方为：甘油5g，酵母膏0.5g，葡萄糖1g，异丙基硫代-β-D-半乳糖0.1g，磷酸二氢钾0.05g，磷酸氢二钾0.05g，氯化钙0.02g，氯化钠0.1g，碳酸氢铵0.01g，将其溶解于100g蒸馏水中，搅拌均匀，调pH值为7，110℃下灭菌20mim。
其中草菇木聚糖酶发酵液的制备方法为：
步骤一：将草菇菌种试管斜面接种于草菇菌种培养基中振荡培养，在37℃，130r/min下培养48h，得种子液，草菇菌种培养基的配方为：羧甲基纤维素0.5g，木聚糖0.5g，胰蛋白胨0.2g，磷酸二氢钾0.1g，硫酸镁0.05g，微生物B1 0.01g，将其溶解于100g蒸馏水中,并搅拌均匀，控制pH值为6，110℃下灭菌15-20mim。
步骤二：将种子液转移至草菇菌种发酵液培养基中，在35℃，150r/min下振荡培养72h，得到草菇木聚糖酶发酵液，草菇菌种发酵液培养基配方为：酵母膏0.4g，葡萄糖1g，柠檬酸二铵0.05g，磷酸二氢钾0.05g，氯化钠0.05g，硫酸铵0.05g，7水合氯化镁0.02g，柠檬酸钠0.01g，肌醇0.005g，将其溶解于100g蒸馏水中，搅拌均匀，调pH值为7，110℃下灭菌20mim。
选取大港油田某区块的稠油，稠油的胶质、沥青质含量26.2％，含蜡8.5％作为评价介质，按照石油化工企标Q/BGBH 0017-2020评价50℃下降粘率，用量改为100ppm，同时用人造非均质岩心进行驱油实验，如附图3所示，与常规降粘剂进行性能对比，该产品在重质稠油中的降粘效果更明显。
实施例4：
一种生物酶降粘驱油剂的制备方法为：
以总质量100计，将枯草芽孢杆菌发酵液40g与草菇木聚糖酶8g混合后，在37℃，转速150r/min条件下搅拌20min，加入助剂3g，蒸馏水59g，将温度升高至50℃，相同转速下搅拌30min，静止20min，重复搅拌与静止步骤3次，得到均匀的生物酶降粘驱油剂。
其中枯草芽孢杆菌发酵液的制备方法为：
步骤一：将枯草芽孢杆菌菌种试管接种于枯草芽孢杆菌种子培养基中振荡培养，35℃，120r/min下培养30h，得种子液，枯草芽孢杆菌种子培养基配方为：葡萄糖3g，琼脂糖2.5g，蛋白胨1g，磷酸二氢钾0.3g，磷酸氢二钾0.6g，卡那霉素0.3g。将其溶解于100g蒸馏水中，搅拌均匀，调pH值为7，120℃下灭菌20mim。
步骤二：将种子液转移至枯草芽孢杆菌菌种发酵液培养基中，在33℃，150r/min下振荡培养40h，得到枯草芽孢杆菌发酵液，枯草芽孢杆菌菌种发酵液培养基配方为：甘油8g，酵母膏1g，葡萄糖3g，异丙基硫代-β-D-半乳糖0.3g，磷酸二氢钾0.1g，磷酸氢二钾0.1g，氯化钙0.04g，氯化钠0.2g，碳酸氢铵0.02g，将其溶解于100g蒸馏水中，搅拌均匀，调pH值为8，120℃下灭菌20mim。
其中草菇木聚糖酶发酵液的制备方法为：
步骤一：将草菇菌种试管斜面接种于草菇菌种培养基中振荡培养，在40℃，130r/min下培养72h，得种子液，草菇菌种培养基的配方为：羧甲基纤维素1g，木聚糖1g，胰蛋白胨0.6g，磷酸二氢钾0.3g，硫酸镁0.1g，微生物B1 0.02g。将其溶解于100g蒸馏水中,并搅拌均匀，控制pH值为6.5，120℃下灭菌15-20mim。
步骤二：将种子液转移至草菇菌种发酵液培养基中，在37℃，150r/min下振荡培养96h，得到草菇木聚糖酶发酵液，草菇菌种发酵液培养基配方为：酵母膏0.8g，葡萄糖2g，柠檬酸二铵0.1g，磷酸二氢钾0.1g，氯化钠0.1g，硫酸铵0.1g，7水合氯化镁0.04，柠檬酸钠0.02g，肌醇0.01g，将其溶解于100g蒸馏水中，搅拌均匀，调pH值为8，120℃下灭菌20mim。
选取大港油田某区块的稠油，稠油的胶质、沥青质含量26.2％，含蜡8.5％作为评价介质，按照石油化工企标Q/BGBH 0017-2020评价50℃下降粘率，用量改为100ppm，同时用人造非均质岩心进行驱油实验，如附图4所示，与常规降粘剂进行性能对比，该产品在重质稠油中的降粘效果更明显。
实施例5：
一种生物酶降粘驱油剂的制备方法为：
以总质量100计，将枯草芽孢杆菌发酵液35g与草菇木聚糖酶5g混合后，在35℃，转速150r/min条件下搅拌20min，加入助剂2g，蒸馏水58g，将温度升高至50℃，相同转速下搅拌30min，静止20min，重复搅拌与静止步骤3次，得到均匀的生物酶降粘驱油剂。
其中枯草芽孢杆菌发酵液的制备方法为：
步骤一：将枯草芽孢杆菌菌种试管接种于枯草芽孢杆菌种子培养基中振荡培养，35℃，120r/min下培养24h，得种子液，枯草芽孢杆菌种子培养基配方为：葡萄糖1g，琼脂糖1.5g，蛋白胨0.5g，磷酸二氢钾0.1g，磷酸氢二钾0.4g，卡那霉素0.1g。将其溶解于100g蒸馏水中，搅拌均匀，调pH值为6，110℃下灭菌20mim。
步骤二：将种子液转移至枯草芽孢杆菌菌种发酵液培养基中，在33℃，150r/min下振荡培养30h，得到枯草芽孢杆菌发酵液，枯草芽孢杆菌菌种发酵液培养基配方为：甘油5g，酵母膏0.5g，葡萄糖1g，异丙基硫代-β-D-半乳糖0.1g，磷酸二氢钾0.05g，磷酸氢二钾0.05g，氯化钙0.02g，氯化钠0.1g，碳酸氢铵0.01g，将其溶解于100g蒸馏水中，搅拌均匀，调pH值为7，110℃下灭菌20mim。
其中草菇木聚糖酶发酵液的制备方法为：
步骤一：将草菇菌种试管斜面接种于草菇菌种培养基中振荡培养，在37℃，130r/min下培养48h，得种子液，草菇菌种培养基的配方为：羧甲基纤维素0.5g，木聚糖0.5g，胰蛋白胨0.2g，磷酸二氢钾0.1g，硫酸镁0.05g，微生物B1 0.01g。将其溶解于100g蒸馏水中,并搅拌均匀，控制pH值为6，110℃下灭菌15-20mim。
步骤二：将种子液转移至草菇菌种发酵液培养基中，在35℃，150r/min下振荡培养72h，得到草菇木聚糖酶发酵液，草菇菌种发酵液培养基配方为：酵母膏0.4g，葡萄糖1g，柠檬酸二铵0.05g，磷酸二氢钾0.05g，氯化钠0.05g，硫酸铵0.05g，7水合氯化镁0.02g，柠檬酸钠0.01g，肌醇0.005g。将其溶解于100g蒸馏水中，搅拌均匀，调pH值为7，110℃下灭菌20mim。
选取大港油田某区块的稠油，稠油的胶质、沥青质含量26.2％，含蜡8.5％作为评价介质，按照石油化工企标Q/BGBH 0017-2020评价50℃下降粘率，用量改为100ppm，同时用人造非均质岩心进行驱油实验，如附图5所示，与常规降粘剂进行性能对比，该产品在重质稠油中的降粘效果更明显。
实施例6：
一种生物酶降粘驱油剂的制备方法为：
以总质量100计，将枯草芽孢杆菌发酵液35g与草菇木聚糖酶5g混合后，在37℃，转速150r/min条件下搅拌20min，加入助剂2g，蒸馏水58g，将温度升高至50℃，相同转速下搅拌30min，静止20min，重复搅拌与静止步骤3次，得到均匀的生物酶降粘驱油剂。
其中枯草芽孢杆菌发酵液的制备方法为：
步骤一：将枯草芽孢杆菌菌种试管接种于枯草芽孢杆菌种子培养基中振荡培养，35℃，120r/min下培养30h，得种子液，枯草芽孢杆菌种子培养基配方为：葡萄糖3g，琼脂糖2.5g，蛋白胨1g，磷酸二氢钾0.3g，磷酸氢二钾0.6g，卡那霉素0.3g。将其溶解于100g蒸馏水中，搅拌均匀，调pH值为7，120℃下灭菌20mim。
步骤二：将种子液转移至枯草芽孢杆菌菌种发酵液培养基中，在33℃，150r/min下振荡培养40h，得到枯草芽孢杆菌发酵液，枯草芽孢杆菌菌种发酵液培养基配方为：甘油8g，酵母膏1g，葡萄糖3g，异丙基硫代-β-D-半乳糖0.3g，磷酸二氢钾0.1g，磷酸氢二钾0.1g，氯化钙0.04g，氯化钠0.2g，碳酸氢铵0.02g，将其溶解于100g蒸馏水中，搅拌均匀，调pH值为8，120℃下灭菌20mim。
其中草菇木聚糖酶发酵液的制备方法为：
步骤一：将草菇菌种试管斜面接种于草菇菌种培养基中振荡培养，在40℃，130r/min下培养72h，得种子液，草菇菌种培养基的配方为：羧甲基纤维素1g，木聚糖1g，胰蛋白胨0.6g，磷酸二氢钾0.3g，硫酸镁0.1g，微生物B1 0.02g，将其溶解于100g蒸馏水中,并搅拌均匀，控制pH值为6.5，120℃下灭菌15-20mim。
步骤二：将种子液转移至草菇菌种发酵液培养基中，在37℃，150r/min下振荡培养96h，得到草菇木聚糖酶发酵液.草菇菌种发酵液培养基配方为：酵母膏0.8g，葡萄糖2g，柠檬酸二铵0.1g，磷酸二氢钾0.1g，氯化钠0.1g，硫酸铵0.1g，7水合氯化镁0.04，柠檬酸钠0.02g，肌醇0.01g。将其溶解于100g蒸馏水中，搅拌均匀，调pH值为8，120℃下灭菌20mim。
选取大港油田某区块的稠油，稠油的胶质、沥青质含量26.2％，含蜡8.5％作为评价介质，按照石油化工企标Q/BGBH 0017-2020评价50℃下降粘率，用量改为100ppm，同时用人造非均质岩心进行驱油实验，如附图6所示，与常规降粘剂进行性能对比，该产品在重质稠油中的降粘效果更明显。
利用本发明所述的技术方案，或本领域的技术人员在本发明技术方案的启发下，设计出类似的技术方案，而达到上述技术效果的，均是落入本发明的保护范围。
Claims (7)
1.一种生物酶降粘驱油剂的制备方法，其特征在于，所述降粘驱油剂的制备是以总质量100计，将枯草芽孢杆菌发酵液30-40g与草菇木聚糖酶5-10g混合后，在30-50℃，转速150-200r/min条件下搅拌20min，加入助剂1-3g、蒸馏水47-64g，将温度升高至40-60℃，相同转速下搅拌30min，静止20min，重复搅拌与静止步骤3次，得到均匀的生物酶降粘驱油剂。
2.如权利要求1所述的一种生物酶降粘驱油剂的制备方法，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌发酵液的制备方法为：
步骤一：将枯草芽孢杆菌菌种试管接种于枯草芽孢杆菌种子培养基中振荡培养，在温度为35-37℃，振速为120r/min下培养15-30h，得种子液，将其溶解于100g蒸馏水中，搅拌均匀，调pH值为6-7，110-120℃下灭菌20mim；
步骤二：将种子液转移至枯草芽孢杆菌菌种发酵液培养基中，在温度为33-35℃，振速为150r/min下振荡培养30-40h，得到枯草芽孢杆菌发酵液，将其溶解于100g蒸馏水中，搅拌均匀，调pH值为7-8，110-120℃下灭菌20mim。
3.如权利要求2所述的一种生物酶降粘驱油剂的制备方法，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌种子培养基配方为：葡萄糖1-3g，琼脂糖1.5-2.5g，蛋白胨0.5-1g，磷酸二氢钾0.1-0.3g，磷酸氢二钾0.4-0.6g，卡那霉素0.1-0.3g。
4.如权利要求2所述的一种生物酶降粘驱油剂的制备方法，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌菌种发酵液培养基配方为：甘油5-8g，酵母膏0.5-1g，葡萄糖1-3g，异丙基硫代-β-D-半乳糖0.1-0.3g，磷酸二氢钾0.05-0.1g，磷酸氢二钾0.05-0.1g，氯化钙0.02-0.04g，氯化钠0.1-0.2g，碳酸氢铵0.01-0.02g。
5.如权利要求1所述的一种生物酶降粘驱油剂的制备方法，其特征在于，所述草菇木聚糖酶的制备方法为：
步骤一：将草菇菌种试管斜面接种于草菇菌种培养基中振荡培养，在温度为37-40℃，振速为130r/min下培养48-72h，得种子液，将其溶解于100g蒸馏水中,并搅拌均匀，控制pH值为6-6.5，110-120℃下灭菌15-20mim；
步骤二：将种子液转移至草菇菌种发酵液培养基中，在温度为35-37℃，振速为150r/min下振荡培养72-96h，得到草菇木聚糖酶发酵液，将其溶解于100g蒸馏水中，搅拌均匀，调pH值为7-8，110-120℃下灭菌20mim。
6.如权利要求5所述的一种生物酶降粘驱油剂的制备方法，其特征在于，所述草菇菌种培养基的配方为：羧甲基纤维素0.5-1g，木聚糖0.5-1g，胰蛋白胨0.2-0.6g，磷酸二氢钾0.1-0.3g，硫酸镁0.05-0.1g，微生物B1 0.01-0.02g。
7.如权利要求5所述的一种生物酶降粘驱油剂的制备方法，其特征在于，所述草菇菌种发酵液培养基的配方为：酵母膏0.4-0.8g，葡萄糖1-2g，柠檬酸二铵0.05-0.1g，磷酸二氢钾0.05-0.1g，氯化钠0.05-0.1g，硫酸铵0.05-0.1g，7水合氯化镁0.02-0.04g，柠檬酸钠0.01-0.02g，肌醇0.005-0.01g。
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| 胡沂淮, 罗楚平, 李迅, 刘俊, 陶飞: "以玉米芯木聚糖为碳源的草菇木聚糖酶的发酵条件", 食品与生物技术, vol. 23, no. 02, 30 March 2004 (2004-03-30), pages 94 - 97 * |
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