CN116217748A - 一种从桑黄子实体中提取多糖的方法 - Google Patents
一种从桑黄子实体中提取多糖的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN116217748A CN116217748A CN202310186157.7A CN202310186157A CN116217748A CN 116217748 A CN116217748 A CN 116217748A CN 202310186157 A CN202310186157 A CN 202310186157A CN 116217748 A CN116217748 A CN 116217748A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- phellinus linteus
- solution
- fruiting body
- polysaccharide
- linteus fruiting
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 241000001727 Tropicoporus linteus Species 0.000 title claims abstract description 141
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 title claims abstract description 135
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 title claims abstract description 135
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 title claims abstract description 126
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 45
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 78
- 238000002386 leaching Methods 0.000 claims abstract description 57
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims abstract description 38
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims abstract description 37
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 32
- ATRRKUHOCOJYRX-UHFFFAOYSA-N Ammonium bicarbonate Chemical compound [NH4+].OC([O-])=O ATRRKUHOCOJYRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 28
- 239000001099 ammonium carbonate Substances 0.000 claims abstract description 28
- 235000012501 ammonium carbonate Nutrition 0.000 claims abstract description 28
- AXCZMVOFGPJBDE-UHFFFAOYSA-L calcium dihydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[Ca+2] AXCZMVOFGPJBDE-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims abstract description 27
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 27
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims abstract description 19
- 239000002893 slag Substances 0.000 claims abstract description 13
- 239000013078 crystal Substances 0.000 claims abstract description 11
- 238000012869 ethanol precipitation Methods 0.000 claims abstract description 9
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims abstract description 5
- 239000000920 calcium hydroxide Substances 0.000 claims description 16
- 229910001861 calcium hydroxide Inorganic materials 0.000 claims description 16
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- 238000007710 freezing Methods 0.000 claims description 10
- 230000008014 freezing Effects 0.000 claims description 10
- 230000035939 shock Effects 0.000 claims description 9
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 8
- 238000004321 preservation Methods 0.000 claims description 8
- 230000006698 induction Effects 0.000 claims description 7
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 6
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 claims description 4
- 238000003303 reheating Methods 0.000 claims description 4
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 claims description 4
- 238000007789 sealing Methods 0.000 claims description 3
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 claims description 2
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 claims description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 2
- 238000009777 vacuum freeze-drying Methods 0.000 claims description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 abstract description 18
- 239000000049 pigment Substances 0.000 abstract description 12
- 238000002635 electroconvulsive therapy Methods 0.000 abstract 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 74
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 30
- 239000000047 product Substances 0.000 description 29
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 22
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 17
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 16
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 15
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 11
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 11
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 230000008569 process Effects 0.000 description 8
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 6
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 6
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 6
- OQUKIQWCVTZJAF-UHFFFAOYSA-N phenol;sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O.OC1=CC=CC=C1 OQUKIQWCVTZJAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000010025 steaming Methods 0.000 description 6
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 6
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 5
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 description 5
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 5
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 5
- 230000001603 reducing effect Effects 0.000 description 5
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 4
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 4
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 3
- 238000003809 water extraction Methods 0.000 description 3
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- 238000004042 decolorization Methods 0.000 description 2
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 2
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 2
- FFRBMBIXVSCUFS-UHFFFAOYSA-N 2,4-dinitro-1-naphthol Chemical group C1=CC=C2C(O)=C([N+]([O-])=O)C=C([N+]([O-])=O)C2=C1 FFRBMBIXVSCUFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 1
- 235000008708 Morus alba Nutrition 0.000 description 1
- 240000000249 Morus alba Species 0.000 description 1
- 241000222341 Polyporaceae Species 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 238000003912 environmental pollution Methods 0.000 description 1
- 238000002481 ethanol extraction Methods 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 230000004761 fibrosis Effects 0.000 description 1
- 239000003292 glue Substances 0.000 description 1
- 230000036737 immune function Effects 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 230000003859 lipid peroxidation Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000000874 microwave-assisted extraction Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
- C08B37/0003—General processes for their isolation or fractionation, e.g. purification or extraction from biomass
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Sustainable Development (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
本发明公开一种从桑黄子实体中提取多糖的方法，包括如下步骤：(1)在容器中加入碳酸铵和氢氧化钙溶液，然后将桑黄子实体粉末置于容器中所述溶液上方的承载网上，然后密闭容器进行加热。完成后加入盐酸加热。(2)取出桑黄子实体粉末进行冷冻‑热激处理，完成将得到的桑黄子实体加到乙醇液中加热浸提，完成后固体渣。(3)将所述固体渣热水浸提后脱色、脱蛋白、浓缩处理形成浓缩液，然后采用交变磁场对浓缩液处理，得到预处理浓缩液。然后在该预处理浓缩液中加入乙醇进行醇沉，完成后分离出析出的晶体产物、干燥，即得桑黄多糖产品。本发明提取多糖的方法不仅能够提高桑黄子实体中多糖的提取率，而且能够将多糖产品中色素含量，提高产品纯度。
Description
技术领域
本发明涉及桑黄多糖提取技术领域，具体涉及一种从桑黄子实体中提取多糖的方法。
背景技术
桑黄是多孔菌科真菌火木层孔菌的子实体，其外形呈蹄形或半球形，以附生在桑树上的最为珍贵，因此得名桑黄。桑黄中含有多种活性成分使其具有很好的药用价值，例如桑黄多糖中含有能刺激细胞产生免疫功能的多糖体，从而增强机体免疫力，除此之外，桑黄多糖还能够调节机体内糖代谢酶的活性、清除过剩自由基抗脂质过氧化，从而发挥降血糖作用。传统的桑黄多糖提取方法主要包括热水浸提法、稀酸提取法、稀碱提取法、微波辅助提取法等等，其中热水浸提法因成本低，对环境污染小等方面的优势而广泛应用。然而，桑黄子实体是经过多年生长形成，纤维化程度高，再加上细胞壁的保护作用，传统的热水浸提法对细胞内的桑黄多糖的提取率较低。另外，桑黄子实体颜色呈金黄、黄褐色或咖啡色等，其中含有大量色素，在提取过程中进入提取液中不利于后续多糖产品的纯化，导致得到的桑黄多糖产品纯度不高。
发明内容
鉴于此，本发明提供一种从桑黄子实体中提取多糖的方法，其不仅能够提高桑黄子实体中多糖的提取率，而且能够降低多糖产品中色素含量，提高产品纯度。为实现上述目的，本发明公开如下所述的技术方案。
一种从桑黄子实体中提取多糖的方法，包括的步骤如下：
(1)在容器中加入碳酸铵和氢氧化钙溶液，然后将桑黄子实体粉末置于容器中所述溶液上方的承载网上，然后密闭容器进行加热处理。完成后在容器中加入过量盐酸再次进行加热处理。
(2)上述(1)步骤完成后取出桑黄子实体粉末，将其先进行冷冻处理，然后利用微波在真空条件下热激，完成将得到的桑黄子实体加到浓度不小于95％的乙醇液中，然后在密闭条件下加热浸提，完成后进行固液分离，收集得到的固体渣，备用。
(3)将所述固体渣用热水浸提，完成后对得到的浸提液进行脱色、脱蛋白、浓缩处理形成浓缩液，然后采用交变磁场对所述浓缩液进行处理，得到预处理浓缩液。然后在该预处理浓缩液中加入乙醇进行醇沉，完成后分离出析出的晶体产物、干燥，即得桑黄多糖产品。
进一步地，步骤(1)中，所述溶液中碳酸铵和氢氧化钙的摩尔比为1：1～1.3，且所述溶液中碳酸铵质量分数为30～55％。所述桑黄子实体粉末与溶液比例为1g：30～40ml。
进一步地，步骤(1)中，所述加热温度为90～100℃，时间为35～50min。
进一步地，步骤(1)中，所述盐酸与氢氧化钙的摩尔比为2～2.3：1。
进一步地，步骤(1)中，所述再次加热的温度为95～110℃，时间为40～50min。
进一步地，步骤(2)中，所述冷冻处理的温度为零下20～30℃，并在该温度下保持10～20min。所述微波加热进行热激的温度为60～75℃，真空度为-0.2～-0.15MPa，并在该温度下保持5～10min。桑黄子实体细胞在步骤(1)的高温高湿条件下吸水充胀，经低温冷冻后水分结冰体积进一步膨胀，在真空热激作用下结冰气化后冲击桑黄子实体细胞壁使其破裂。
进一步地，步骤(2)中，所述桑黄子实体和乙醇液的比例为1g：40～55ml。可选地，所述加热浸提的温度为50～60℃，时间为1.0～1.5h。对破壁后的桑黄子实体先进行醇提，可大幅度提取出色素，降低后续提取桑黄多糖后产品中的色素含量。
进一步地，步骤(3)中，所述固体渣和热水比例为1g：50～80ml，热水浸提温度为70～85℃，浸提时间为2.5～4小时，通过热水浸提将桑黄固体渣中的多糖提取出来。
进一步地，步骤(3)中，在所述浸提液中加入脱色剂，并在加热条件下进行脱色。可选地，所述脱色剂包括活性炭、硅藻土等，添加量为1.5～2.2g/L，加热温度为40～50℃，保温时间为15～20min。
进一步地，步骤(3)中，所述浓缩液为浸提液体积的40～55％。可选地，通过加热蒸发的方式得到所述浓缩液，加热温度为70～85℃。
进一步地，步骤(3)中，所述交变磁场的频率为25～40Hz，磁感应强度为0.8～1.3T，处理时间为6～10分钟。
进一步地，步骤(3)中，所述乙醇体积为浓缩液体积的3～4.5倍，所述醇沉的方式为静置30～40min。桑黄多糖难以溶解在高浓度的乙醇中，通过醇沉使溶解在浓缩液中的桑黄多糖析出结晶。
进一步地，步骤(3)中，所述干燥的方式包括但不限于真空干燥、冻干等。
与现有技术相比，本发明至少具有以下方面的有益效果：
本发明首先采用碳酸铵和氢氧化钙溶液对桑黄子实体粉末在加热条件下处理，在该条件下所述碳酸铵和氢氧化钙反应形成的氨水形成碱性蒸汽对桑黄子实体粉末进行碱蒸处理。完成后当加入盐酸时，所述碳酸铵和氢氧化钙反应形成的碳酸钙溶解释放二氧化碳，在加热条件下形成酸性蒸汽对对桑黄子实体粉末进行酸蒸处理。通过上述的酸-碱蒸处理可有效降低细胞壁中纤维和胶层物质之间的结合力，降低细胞壁强度。同时，本发明利用上述的高温高湿环境使桑黄子实体细胞吸水充胀，将其经低温冷冻后水分结冰体积进一步膨胀，在真空热激作用下结冰气化后冲击桑黄子实体细胞壁使其破裂实现破壁处理。另外，本发明上述的处理工艺避免了桑黄子实体直接与水溶液接触，避免破壁处理过程中造成的桑黄多糖的流失。
再次，本发明对经过破壁处理后的桑黄子实体先用乙醇液加热浸提，而不是像传统工艺一样直接热水浸提。这是因为桑黄子实体中含有大量色素，直接热水浸提容易使色素进入浸提液中，为了去除这些色素需要加入更多的活性炭等脱色剂进行脱色，而活性炭这类脱色剂的强物理吸附作用不仅会吸附色素，也会吸附桑黄多糖造成目标产物的损耗，而且由于传统的热水浸提工艺对桑黄多糖的提取率本身较低，再加上脱色造成的多糖损耗，最终导致整体的提取率更低。而本发明利用桑黄多糖难溶于高浓度乙醇的特点先进行醇提，色素易溶于乙醇这种有机溶剂中，从而显著降低桑黄子实体中色素含量，热水浸提后得到的浸提液中的色素含量明显降低，所需的脱色剂含量也降低，从而降低了因脱色造成的桑黄多糖的损失。
再次，造成桑黄多糖提取率低的另一原因是由于醇沉后仍然有相当一部分桑黄多糖残留在浓缩液中。针对这一问题，本发明对热水浸提后得到的浓缩液利用交变磁场进行处理，能够有效提高所述醇沉步骤中桑黄多糖的析出。这是因为溶解在浸提液中的桑黄多糖分子被多个水分子包围且两者之间通过氢键结合，造成桑黄多糖分子不易碰撞接触而长大形核、结晶析出。而采用对上述特点的浸提液/浓缩液施加交变磁场进行处理时，磁场为桑黄多糖分子提供能量促使其振动而摆脱氢键和水分子的约束，并增加桑黄多糖分子之间接触碰撞、结晶析出的几率。当加入乙醇后，由于乙醇分子具有更强的与水分子结合的能力，再加上因磁场振动而造成桑黄多糖分子与水分子之间结合力的弱化，乙醇可快速夺取桑黄多糖分子上的水分子，使桑黄多糖分子更加快速、彻底地形核长大、结晶析出，提高了对浸提液/浓缩液中桑黄多糖的提取率。
具体实施方式
需要说明的是，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同，除非另行定义。本发明所使用的试剂或原料均可通过常规途径购买获得，如无特殊说明，本发明所使用的试剂或原料均按照本领域常规方式使用或者按照产品说明书使用。现结合具体实施例对本发明进一步说明。
实施例1
一种从桑黄子实体中提取多糖的方法，包括的步骤如下：
(1)在反应容器中加入碳酸铵和氢氧化钙溶液，其中碳酸铵质量分数为40％，所述碳酸铵和氢氧化钙的摩尔比为1：1.2。然后将桑黄子实体粉末置于反应容器中所述溶液上方的承载网上，且所述桑黄子实体粉末与溶液比例为1g：35ml。然后密闭容器加热至95℃保温40min。完成后按照盐酸与所述氢氧化钙的摩尔比为2.1：1的比例在所述反应容器中继续加入盐酸，然后密闭容器加热至100℃保温45min。
(2)所述保温完成后取出桑黄子实体粉末，将其先冷冻至零下25℃保持15min，然后利用微波在-0.15MPa的真空条件和70℃下热激8min。完成将得到的桑黄子实体和无水乙醇按照1g：45ml的比例加到反应容器中，密闭容器后加热到55℃保温浸提1.0h，完成后进行过滤，收集得到的固体渣，备用。
(3)将所述固体渣与清水按照1g：70ml的比例混合后加热至70℃浸提4小时，完成后进行过滤，收集液相即得浸提液。在所述浸提液按照2.0g/L的比例加入活性炭，并加热至45℃保温18min进行脱色处理，完成后滤除所述活性炭，在得到的脱色液中加入Sevage试剂(氯仿：正丁醇＝5：1，体积比)后震荡，然后静置，分层后收集上层清液，重复上述步骤对所述上层清液进行重复处理至中间层的变性蛋白层消失，收集上清液备用。
(4)将所述上清液在80℃加热浓缩至初始体积的50％，冷却至室温后对得到的浓缩液施加频率为30Hz，磁感应强度为1.0T的交变磁场处理8min，得到预处理浓缩液。然后在该预处理浓缩液中加入其体积4倍的无水乙醇搅拌后静置40min进行醇沉处理，完成后分离出析出的晶体产物，将其进行冻干，即得桑黄多糖产品，同时收集分离后液相。
采用硫酸-苯酚法对本实施例所述桑黄多糖产品中的多糖含量进行测试，结果为95.31％。同时测试步骤(4)所述液相中残留多糖含量，计算提取率，结果为94.57％。测试本实施例步骤(3)中所述浸提液的多糖含量并计算多糖得率((桑黄子实体粉末中理论多糖含量-浸提液中多糖含量)/桑黄子实体粉末中理论多糖含量)，结果为16.84％。测试本实施例步骤(3)中所述脱色液中的多糖含量，并计算多糖保留率((浸提液中多糖含量-脱色液中多糖含量)/浸提液中多糖含量)，结果为97.29％。
实施例2
一种从桑黄子实体中提取多糖的方法，包括的步骤如下：
(1)在反应容器中加入碳酸铵和氢氧化钙溶液，其中碳酸铵质量分数为30％，所述碳酸铵和氢氧化钙的摩尔比为1：1.0。然后将桑黄子实体粉末置于反应容器中所述溶液上方的承载网上，且所述桑黄子实体粉末与溶液比例为1g：40ml。然后密闭容器加热至100℃保温35min。完成后按照盐酸与所述氢氧化钙的摩尔比为2.3：1的比例在所述反应容器中继续加入盐酸，然后密闭容器加热至95℃保温50min。
(2)所述保温完成后取出桑黄子实体粉末，将其先冷冻至零下20℃保持20min，然后利用微波在-0.2MPa的真空条件和60℃下热激10min。完成将得到的桑黄子实体和无水乙醇按照1g：55ml的比例加到反应容器中，密闭容器后加热到60℃保温浸提1.0h，完成后进行过滤，收集得到的固体渣，备用。
(3)将所述固体渣与清水按照1g：50ml的比例混合后加热至80℃浸提3小时，完成后进行过滤，收集液相即得浸提液。在所述浸提液按照2.2g/L的比例加入硅藻土，并加热至50℃保温15min进行脱色处理，完成后滤除所述硅藻土，在得到的脱色液中加入Sevage试剂(氯仿：正丁醇＝5：1，体积比)后震荡，然后静置，分层后收集上层清液，重复上述步骤对所述上层清液进行重复处理至中间层的变性蛋白层消失，收集上清液备用。
(4)将所述上清液在85℃加热浓缩至初始体积的40％，冷却至室温后对得到的浓缩液施加频率为40Hz，磁感应强度为1.3T的交变磁场处理6min，得到预处理浓缩液。然后在该预处理浓缩液中加入其体积3倍的无水乙醇搅拌后静置35min进行醇沉处理，完成后分离出析出的晶体产物，将其进行冻干，即得桑黄多糖产品，同时收集分离后液相。
采用硫酸-苯酚法对本实施例所述桑黄多糖产品中的多糖含量进行测试，结果为93.88％。同时测试步骤(4)所述液相中残留多糖含量，计算提取率，结果为95.14％。测试本实施例步骤(3)中所述浸提液的多糖含量并计算多糖得率((桑黄子实体粉末中理论多糖含量-浸提液中多糖含量)/桑黄子实体粉末中理论多糖含量)，结果为17.69％。测试本实施例步骤(3)中所述脱色液中的多糖含量，并计算多糖保留率((浸提液中多糖含量-脱色液中多糖含量)/浸提液中多糖含量)，结果为96.62％。
实施例3
一种从桑黄子实体中提取多糖的方法，包括的步骤如下：
(1)在反应容器中加入碳酸铵和氢氧化钙溶液，其中碳酸铵质量分数为55％，所述碳酸铵和氢氧化钙的摩尔比为1：1.3。然后将桑黄子实体粉末置于反应容器中所述溶液上方的承载网上，且所述桑黄子实体粉末与溶液比例为1g：30ml。然后密闭容器加热至90℃保温50min。完成后按照盐酸与所述氢氧化钙的摩尔比为2.0：1的比例在所述反应容器中继续加入盐酸，然后密闭容器加热至110℃保温40min。
(2)所述保温完成后取出桑黄子实体粉末，将其先冷冻至零下30℃保持10min，然后利用微波在-0.15MPa的真空条件和75℃下热激5min。完成将得到的桑黄子实体和质量分数为95％的乙醇按照1g：40ml的比例加到反应容器中，密闭容器后加热到50℃保温浸提1.5h，完成后进行过滤，收集得到的固体渣，备用。
(3)将所述固体渣与清水按照1g：80ml的比例混合后加热至85℃浸提2.5小时，完成后进行过滤，收集液相即得浸提液。在所述浸提液按照1.5g/L的比例加入活性炭，并加热至40℃保温20min进行脱色处理，完成后滤除所述活性炭，在得到的脱色液中加入Sevage试剂(氯仿：正丁醇＝5：1，体积比)后震荡，然后静置，分层后收集上层清液，重复上述步骤对所述上层清液进行重复处理至中间层的变性蛋白层消失，收集上清液备用。
(4)将所述上清液在70℃加热浓缩至初始体积的55％，冷却至室温后对得到的浓缩液施加频率为25Hz，磁感应强度为0.8T的交变磁场处理10min，得到预处理浓缩液。然后在该预处理浓缩液中加入其体积4.5倍的无水乙醇搅拌后静置30min进行醇沉处理，完成后分离出析出的晶体产物，将其进行真空干燥，即得桑黄多糖产品，同时收集分离后液相。
采用硫酸-苯酚法对本实施例所述桑黄多糖产品中的多糖含量进行测试，结果为91.71％。同时测试步骤(4)所述液相中残留多糖含量，计算提取率，结果为95.92％。测试本实施例步骤(3)中所述浸提液的多糖含量并计算多糖得率((桑黄子实体粉末中理论多糖含量-浸提液中多糖含量)/桑黄子实体粉末中理论多糖含量)，结果为18.16％。测试本实施例步骤(3)中所述脱色液中的多糖含量，并计算多糖保留率((浸提液中多糖含量-脱色液中多糖含量)/浸提液中多糖含量)，结果为97.66％。
实施例4
一种从桑黄子实体中提取多糖的方法，包括的步骤如下：
(1)在反应容器中加入碳酸铵和氢氧化钙溶液，其中碳酸铵质量分数为40％，所述碳酸铵和氢氧化钙的摩尔比为1：1.2。然后将桑黄子实体粉末置于反应容器中所述溶液上方的承载网上，且所述桑黄子实体粉末与溶液比例为1g：35ml。然后密闭容器加热至95℃保温40min。完成后按照盐酸与所述氢氧化钙的摩尔比为2.1：1的比例在所述反应容器中继续加入盐酸，然后密闭容器加热至100℃保温45min。
(2)所述保温完成后取出桑黄子实体粉末，将其先冷冻至零下25℃保持15min，然后利用微波在-0.15MPa的真空条件和70℃下热激8min。完成将得到的桑黄子实体与清水按照1g：70ml的比例混合后加热至70℃浸提4小时，完成后进行过滤，收集液相即得浸提液。在所述浸提液按照2.0g/L的比例加入活性炭，并加热至45℃保温18min进行脱色处理，完成后滤除所述活性炭，在得到的脱色液中加入Sevage试剂(氯仿：正丁醇＝5：1，体积比)后震荡，然后静置，分层后收集上层清液，重复上述步骤对所述上层清液进行重复处理至中间层的变性蛋白层消失，收集上清液备用。
(3)将所述上清液在80℃加热浓缩至初始体积的50％，冷却至室温后对得到的浓缩液施加频率为30Hz，磁感应强度为1.0T的交变磁场处理8min，得到预处理浓缩液。然后在该预处理浓缩液中加入其体积4倍的无水乙醇搅拌后静置40min进行醇沉处理，完成后分离出析出的晶体产物，将其进行冻干，即得桑黄多糖产品。
采用硫酸-苯酚法对本实施例所述桑黄多糖产品中的多糖含量进行测试，结果为85.64％，可以看出，由于本实施例在热激完成后直接对桑黄子实体进行热水浸提，而没有先用乙醇进行处理，导致在采用同样的脱色处理工艺的情况下最终得到的桑黄多糖产品的纯度明显降低。
实施例5
一种从桑黄子实体中提取多糖的方法，步骤(1)～(3)同实施例2，区别在于：步骤(4)如下：将上清液在85℃加热浓缩至初始体积的40％，冷却至室温得到浓缩液，然后加入浓缩液体积3倍的无水乙醇搅拌后静置35min进行醇沉处理，完成后分离出析出的晶体产物，将其进行冻干，即得桑黄多糖产品，同时收集分离后液相。采用硫酸-苯酚法测试所述液相中残留多糖含量，计算提取率，结果为83.28％。可以看出，由于本实施例未采用磁场对所述浓缩液进行处理，导致醇沉步骤的多糖提取率明显降低。
实施例6
一种从桑黄子实体中提取多糖的方法，包括的步骤如下：
(1)将桑黄子实体粉末和质量分数为95％的乙醇按照1g：40ml的比例加到反应容器中，密闭容器后加热到50℃保温浸提1.5h，完成后进行过滤，收集得到的固体渣，备用。
(2)将所述固体渣与清水按照1g：80ml的比例混合后加热至85℃浸提2.5小时，完成后进行过滤，收集液相即得浸提液。在所述浸提液按照1.5g/L的比例加入活性炭，并加热至40℃保温20min进行脱色处理，完成后滤除所述活性炭，在得到的脱色液中加入Sevage试剂(氯仿：正丁醇＝5：1，体积比)后震荡，然后静置，分层后收集上层清液，重复上述步骤对所述上层清液进行重复处理至中间层的变性蛋白层消失，收集上清液备用。
(3)将所述上清液在70℃加热浓缩至初始体积的55％，冷却至室温后对得到的浓缩液施加频率为25Hz，磁感应强度为0.8T的交变磁场处理10min，得到预处理浓缩液。然后在该预处理浓缩液中加入其体积4.5倍的无水乙醇搅拌后静置30min进行醇沉处理，完成后分离出析出的晶体产物，将其进行真空干燥，即得桑黄多糖产品。
采用硫酸-苯酚法对本实施例所述桑黄多糖产品中的多糖含量进行测试，结果为87.69％。另外，测试本实施例步骤(2)中所述浸提液的多糖含量并计算多糖得率((桑黄子实体粉末中理论多糖含量-浸提液中多糖含量)/桑黄子实体粉末中理论多糖含量)，结果为5.37％。可以看出，由于本实施例在提取之前采用先碱蒸在酸蒸的处理工艺和冷冻热激工艺，导致桑黄子实体细胞壁未能得到有效破坏，因此多糖纯度和得率均明显下降。
实施例7
一种从桑黄子实体中提取多糖的方法，步骤(2)～(4)同实施例3，区别在于步骤(1)如下：在反应容器中加入碳酸铵和氢氧化钙溶液，其中碳酸铵质量分数为55％，所述碳酸铵和氢氧化钙的摩尔比为1：1.3。然后将桑黄子实体粉末直接加入所述溶液中，且所述桑黄子实体粉末与溶液比例为1g：30ml。然后密闭容器加热至90℃保温50min。完成后按照盐酸与所述氢氧化钙的摩尔比为2.0：1的比例在所述反应容器中继续加入盐酸，然后密闭容器加热至110℃保温40min。
测试本实施例步骤(3)中所得浸提液的多糖含量并计算多糖得率((桑黄子实体粉末中理论多糖含量-浸提液中多糖含量)/桑黄子实体粉末中理论多糖含量)，结果为8.22％。可以看出，由于本实施例直接将在液相中对所述桑黄子实体粉末进行处理，部分桑黄多糖溶解在了液相中，导致多糖得率明显降低。
实施例8
一种从桑黄子实体中提取多糖的方法，步骤(2)～(4)同实施例1，区别在于步骤(1)如下：在反应容器中加入碳酸铵和氢氧化钙溶液，其中碳酸铵质量分数为40％，所述碳酸铵和氢氧化钙的摩尔比为1：1.2。然后将桑黄子实体粉末置于反应容器中所述溶液上方的承载网上，且所述桑黄子实体粉末与溶液比例为1g：35ml。然后密闭容器加热至95℃保温40min。
测试本实施例步骤(3)中所得浸提液的多糖含量并计算多糖得率((桑黄子实体粉末中理论多糖含量-浸提液中多糖含量)/桑黄子实体粉末中理论多糖含量)，结果为10.07％。可以看出，由于本实施例对桑黄子实体粉末仅仅进行了碱蒸处理，未进行酸蒸处理，导致多糖得率明显降低。
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种从桑黄子实体中提取多糖的方法，其特征在于，包括步骤如下：
(1)在容器中加入碳酸铵和氢氧化钙溶液，然后将桑黄子实体粉末置于容器中所述溶液上方的承载网上，然后密闭容器进行加热处理；完成后在容器中加入过量盐酸再次进行加热处理；
(2)上述(1)步骤完成后取出桑黄子实体粉末，将其先进行冷冻处理，然后利用微波在真空条件下热激，完成将得到的桑黄子实体加到浓度不小于95％的乙醇液中，然后在密闭条件下加热浸提，完成后进行固液分离，收集得到的固体渣，备用；
(3)将所述固体渣用热水浸提，完成后对得到的浸提液进行脱色、脱蛋白、浓缩处理形成浓缩液，然后采用交变磁场对所述浓缩液进行处理，得到预处理浓缩液；然后在该预处理浓缩液中加入乙醇进行醇沉，完成后分离出析出的晶体产物、干燥，即得桑黄多糖产品。
2.根据权利要求1所述的从桑黄子实体中提取多糖的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述溶液中碳酸铵和氢氧化钙的摩尔比为1：1～1.3，且所述溶液中碳酸铵质量分数为30～55％；
优选地，所述桑黄子实体粉末与溶液比例为1g：30～40ml；
所述加热温度为90～100℃，时间为35～50min。
3.根据权利要求1所述的从桑黄子实体中提取多糖的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述盐酸与氢氧化钙的摩尔比为2～2.3：1；
优选地，所述再次加热的温度为95～110℃，时间为40～50min。
4.根据权利要求1所述的从桑黄子实体中提取多糖的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述冷冻处理的温度为零下20～30℃，并在该温度下保持10～20min；优选地，所述微波加热进行热激的温度为60～75℃，真空度为-0.2～-0.15MPa，并在该温度下保持5～10min。
5.根据权利要求1所述的从桑黄子实体中提取多糖的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述桑黄子实体和乙醇液的比例为1g：40～55ml；可选地，所述加热浸提的温度为50～60℃，时间为1.0～1.5h。
6.根据权利要求1所述的从桑黄子实体中提取多糖的方法，其特征在于，步骤(3)中，所述固体渣和热水比例为1g：50～80ml，热水浸提温度为70～85℃，浸提时间为2.5～4小时；
可选地，步骤(3)中，在所述浸提液中加入脱色剂，并在加热条件下进行脱色，所述加热温度为40～50℃，保温时间为15～20min；
可选地，所述脱色剂包括活性炭或硅藻土，其添加量为1.5～2.2g/L。
7.根据权利要求1所述的从桑黄子实体中提取多糖的方法，其特征在于，步骤(3)中，所述浓缩液为浸提液体积的40～55％；可选地，通过加热蒸发的方式得到所述浓缩液，加热温度为70～85℃。
8.根据权利要求1所述的从桑黄子实体中提取多糖的方法，其特征在于，步骤(3)中，所述交变磁场的频率为25～40Hz，磁感应强度为0.8～1.3T，处理时间为6～10分钟。
9.根据权利要求1-8任一项所述的从桑黄子实体中提取多糖的方法，其特征在于，步骤(3)中，所述乙醇体积为浓缩液体积的3～4.5倍，所述醇沉的方式为静置30～40min。
10.根据权利要求1-8任一项所述的从桑黄子实体中提取多糖的方法，其特征在于，步骤(3)中，所述干燥的方式包括真空干燥、冻干中的任一种。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202310186157.7A CN116217748B (zh) | 2023-03-01 | 2023-03-01 | 一种从桑黄子实体中提取多糖的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202310186157.7A CN116217748B (zh) | 2023-03-01 | 2023-03-01 | 一种从桑黄子实体中提取多糖的方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN116217748A true CN116217748A (zh) | 2023-06-06 |
| CN116217748B CN116217748B (zh) | 2024-05-14 |
Family
ID=86571025
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202310186157.7A Active CN116217748B (zh) | 2023-03-01 | 2023-03-01 | 一种从桑黄子实体中提取多糖的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN116217748B (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN116535536A (zh) * | 2023-06-14 | 2023-08-04 | 齐鲁工业大学(山东省科学院) | 一种桑黄多糖的提取方法 |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102092909A (zh) * | 2010-12-07 | 2011-06-15 | 天津大学 | 剩余污泥破壁溶胞方法与装置 |
| CN104910289A (zh) * | 2015-06-16 | 2015-09-16 | 江苏大学 | 一种连续制备桑黄菌丝体多糖的方法 |
| CN106674368A (zh) * | 2016-12-20 | 2017-05-17 | 上海健康医学院 | 一种桑黄子实体细胞壁活性粗多糖的制备方法 |
| CN108467437A (zh) * | 2018-06-29 | 2018-08-31 | 许昌元化生物科技有限公司 | 一种桑黄多糖的制备方法 |
| CN111925458A (zh) * | 2020-08-24 | 2020-11-13 | 浙江省农业科学院 | 一种桑黄多糖的高效制备方法 |
| CN114774493A (zh) * | 2022-04-25 | 2022-07-22 | 菏泽学院 | 一种桑黄活性物质多糖的提取及纯化方法 |
-
2023
- 2023-03-01 CN CN202310186157.7A patent/CN116217748B/zh active Active
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102092909A (zh) * | 2010-12-07 | 2011-06-15 | 天津大学 | 剩余污泥破壁溶胞方法与装置 |
| CN104910289A (zh) * | 2015-06-16 | 2015-09-16 | 江苏大学 | 一种连续制备桑黄菌丝体多糖的方法 |
| CN106674368A (zh) * | 2016-12-20 | 2017-05-17 | 上海健康医学院 | 一种桑黄子实体细胞壁活性粗多糖的制备方法 |
| CN108467437A (zh) * | 2018-06-29 | 2018-08-31 | 许昌元化生物科技有限公司 | 一种桑黄多糖的制备方法 |
| CN111925458A (zh) * | 2020-08-24 | 2020-11-13 | 浙江省农业科学院 | 一种桑黄多糖的高效制备方法 |
| CN114774493A (zh) * | 2022-04-25 | 2022-07-22 | 菏泽学院 | 一种桑黄活性物质多糖的提取及纯化方法 |
Non-Patent Citations (8)
| Title |
|---|
| TAFOLLA, R 等: "Treatment of waste activated sludge by steam explosion and alkaline acidogenesis", REVISTA MEXICANA DE INGENIERIA QUIMICA, vol. 21, no. 3, 28 November 2021 (2021-11-28), pages 1 - 10 * |
| 任晓丽 等: "破壁方法对雨生红球藻湿藻生物质中虾青素提取的影响", 中国食品学报, vol. 18, no. 12, 31 December 2018 (2018-12-31) * |
| 李心怡;叶晓非;马海乐;刘伟民;孙玲;孔娜;: "低强交变磁场促进灰树花液体发酵及其生物学窗效应研究", 食品与发酵工业, no. 08 * |
| 李心怡;叶晓非;马海乐;刘伟民;孙玲;孔娜;: "低强交变磁场促进灰树花液体发酵及其生物学窗效应研究", 食品与发酵工业, no. 08, 31 December 2017 (2017-12-31) * |
| 窦茜茜;丁建新;张东娜;王洪权;: "桑黄多糖提取工艺研究", 解放军药学学报, no. 06, 15 December 2007 (2007-12-15) * |
| 钱骅;陈斌;黄晓德;朱羽尧;赵伯涛;: "不同破壁技术对桑黄功能性成分提取率的影响", 食品科学, no. 10 * |
| 钱骅;陈斌;黄晓德;朱羽尧;赵伯涛;: "不同破壁技术对桑黄功能性成分提取率的影响", 食品科学, no. 10, 31 December 2016 (2016-12-31) * |
| 高梦祥;夏帆;朱朋涛;: "交变磁场对猴头菌生长及胞外多糖的影响", 农业机械学报, no. 02, 25 February 2009 (2009-02-25) * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN116535536A (zh) * | 2023-06-14 | 2023-08-04 | 齐鲁工业大学(山东省科学院) | 一种桑黄多糖的提取方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN116217748B (zh) | 2024-05-14 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN116217748B (zh) | 一种从桑黄子实体中提取多糖的方法 | |
| WO2020177420A1 (zh) | 一种蛹虫草中虫草多糖和虫草素的超声波复合酸性水提取方法 | |
| CN101402984A (zh) | 生物酶辅助提取菊粉的方法 | |
| CN107868805B (zh) | 一种通过乳酸菌发酵降解的龙眼多糖及其制备方法 | |
| CN110272506A (zh) | 一种桦褐孔菌多糖的提取方法 | |
| CN110684128A (zh) | 一种黄精多糖的提取精制方法 | |
| CN106349405A (zh) | 一种采用酶解超声从柚子皮中提取果胶的方法 | |
| CN114539333B (zh) | 一种唾液酸的循环生产工艺 | |
| CN112851727B (zh) | 獐牙菜苦苷的提取方法 | |
| CN116640171A (zh) | 一种从发酵液中提取氨基葡萄糖的方法 | |
| CN110423285A (zh) | 一种马齿笕提取多糖的环保方法 | |
| CN108753872B (zh) | 一种莲子多糖高收率的提取方法 | |
| CN114507262B (zh) | 一种聚唾液酸的水解工艺 | |
| CN105254773A (zh) | 一种抗肿瘤生物多糖的制备方法 | |
| CN108424472A (zh) | 灵芝活性多糖 | |
| CN109485559A (zh) | 一种从八角中提取莽草酸的方法 | |
| CN116462776A (zh) | 一种含钙桑黄多糖复合物的制备工艺 | |
| CN110105407B (zh) | 一种降解黑腐酸和棕腐酸用以制备黄腐酸的方法 | |
| CN102863470A (zh) | 蛋黄卵磷脂、脑磷脂、蛋黄油及低变性蛋白粉的联产方法 | |
| CN115340580A (zh) | 一种硫酸氨基葡萄糖氯化钠复盐的制备方法 | |
| CN106316784A (zh) | 一种用油茶壳制备木糖醇的方法 | |
| CN116162178B (zh) | 一种提高桑黄多糖提取率的工艺 | |
| JPS6434912A (en) | Preparation of liquor for bath additive from peel or squeezed residue of citrus fruit | |
| CN115043951B (zh) | 一种大球盖菇中多糖的提取方法及其应用 | |
| CN108715878A (zh) | 一种提取海参多肽的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |