CN116158490A - 一种富含水苏糖提取物及地衣芽孢杆菌的饲料添加剂 - Google Patents
一种富含水苏糖提取物及地衣芽孢杆菌的饲料添加剂 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及饲料添加剂技术领域,且公开了一种富含水苏糖提取物及地衣芽孢杆菌的饲料添加剂。对水苏、地黄、银条粉碎得到混合干粉,再向其中加入乙醇,超声提取,得到滤液组分1和滤渣组分1,向装有滤渣的烧瓶中加入乙醇水溶液,加热、回流、旋蒸、浓缩、过滤得到滤液组分2,将滤液组分1和滤液组分2混合,得到高精度的水苏糖提取物。将水苏糖提取物、地衣芽孢杆菌、豆粕、粗蛋白等混合均匀,得到富含水苏糖提取物及地衣芽孢杆菌的饲料添加剂。本发明制备得到的饲料添加剂添加到饲料中对于肉鸡、仔猪、奶牛中具有预防和治疗肠道疾病,降低死亡率的作用。
Description
技术领域
本发明涉及饲料添加剂技术领域,具体为一种富含水苏糖提取物及地衣芽孢杆菌的饲料添加剂。
背景技术
水苏糖是一种功能性低聚糖,在肠道中被双歧杆菌吸收,快速增殖,刺消灭有害菌,降低肠道PH值,调节肠道中的菌群平衡,激肠道产生免疫细胞,促进胃肠蠕动,增强免疫能力,在医药中广泛应用。如文献《水苏糖对肉仔鸡消化器官发育及肠黏膜形态的影响》中研究不同添加量水苏糖对肉仔鸡消化器官发育及肠黏膜形态的影响。表明水苏糖的添加可不同程度地增加肉仔鸡消化器官的绝对质量和相对质量,对盲肠和结直肠的作用效果尤为明显。
地衣芽孢杆菌具是一种兼性厌氧微生物,具有菌体繁殖速度快、容易培养、抗逆性强、耐高温、耐酸碱、耐挤压、易储存等优点,常应用在畜牧养殖等方面。能促使机体产生抗菌活性物质、抑制致病菌的生长繁殖,杀灭病菌,以便调节肠道菌群平衡,提高动物消化功能、增强动物的免疫力、提高生产的性能等诸多功能,适用于由于细菌引起的肠道菌群失调以及肠道需要保健的家禽类动物,如鸡鸭鹅猪等动物。如文献《地衣芽孢杆菌对肉鸡生长性能、抗氧化指标和血液生化指标的影响》公开了探讨地衣芽孢杆菌对肉鸡生长性能、抗氧化指标和血液生化指标的影响,结果表明饲粮中添加地衣芽孢杆菌能提高肉鸡的生长性能和抗氧化机能,降低血液中尿酸和尿素氮含量提高血清总蛋白、白蛋白含量。
本发明制备的一种富含水苏糖提取物及地衣芽孢杆菌的饲料添加剂应用在动物饲料中能够预防和治疗肠道疾病、提高动物抵抗力、提高动物生存率。
发明内容
(一)解决的技术问题
针对现有技术的不足,本发明提供了一种预防和治疗肠道疾病、增强免疫能力的富含水苏糖提取物及地衣芽孢杆菌的饲料添加剂。
(二)技术方案
一种富含水苏糖提取物及地衣芽孢杆菌的饲料添加剂的制备方法,所述制备步骤为:
(1)先对水苏、地黄、银条进行清洗,干燥,利用粉碎机对其进行初次粉碎以便混合粗粉样品能够通过30-50目筛网筛,再利用行星式球磨机对混合粗粉进行球磨粉碎得到超微粉碎的混合干粉。
(2)取混合干粉加入到含有乙醇的烧瓶中,配置成乙醇提取溶液,进行超声提取,在8000-12000r/min的离心机中进行离心4-6min,分离、过滤,得到滤液组分1和滤渣组分1。
(3)将滤渣组分1置于烧瓶中内,再向其中加入浓度20-60%的乙醇水溶液,加热烧瓶至溶液沸腾,回流抽提4-8h,旋蒸浓缩,向得到的浓缩产物中加入甲醇,搅拌、溶解、过滤得到滤液组分2。
(4)将滤液组分1和滤液组分2混合,减压、浓缩,得到高精度的水苏糖提取物。
(5)将质量占比为0.1-2%的水苏糖提取物、0.01-0.03%姜黄素、0.02-0.1%的金银花、16-20%的豆粕、4-5%的棉粕、4-6%的面粉、0.2-0.4%的氯化钠、0.05-0.1%的赖氨酸、4-6%的磷酸氢钙、1-1.5%的石粉、0.5-0.8%的豆油、0.8-1%的复合预混料、0.01-0.5%的麸皮、0.1-0.12%的鱼粉、10-20%的粗蛋白,余量为玉米,混合均匀,再加入地衣芽孢杆菌,混合均匀,得到富含水苏糖提取物及地衣芽孢杆菌的饲料添加剂。
优选的,所述步骤(1)中水苏、地黄、银条的质量比为1:0.8-1.2:0.5-1.1。
优选的,所述步骤(2)中超声提取功率为100-300W,超声提取时间为30-60min,超声频率20-40kHz。
优选的,所述步骤(2)中乙醇提取溶液的质量浓度为10-35g/L。
优选的,所述步骤(5)中饲料添加剂中地衣芽孢杆菌的添加量为1×109CFU/kg~8×109CFU/kg。
优选的,所述步骤(5)中活化的地衣芽孢杆菌落的制备方法:在20-35℃下,从新鲜的平板上挑选地衣芽孢杆菌落,再将其画线接种在种子斜面培养中进行振荡培养5-10h,再离心、收集菌体,用液体培养基进行重悬8-12h,离心、稀释,再将其涂布于种子斜面培养基中,培养2-5天,得到活化的地衣芽孢杆菌落。
优选的,种子斜面培养基配方为:5-8g/L的蛋白胨,2-4g/L的牛肉提取物,1-3g/L的酵母抽提物,3-6g/L的NaCl,12-18g/L的琼脂。
优选的,液体培养基配方为:原生质体稳定液、质量浓度为0.1-0.15%的牛肉膏,0.12-0.2%的酵母膏,0.2-0.8%的胰蛋白胨,0.1-0.2%的葡萄糖,0.2-0.5%的NaCl、0.2-0.6%的磷酸氢二钠、0.1-0.3%的磷酸二氢钠。
(三)有益的技术效果
与现有技术相比,本发明具备以下有益技术效果:
一种富含水苏糖提取物及地衣芽孢杆菌的饲料添加剂的制备,首先利用行星式球磨机对水苏、地黄、银条进行球磨粉碎得到混合干粉,再将其加入到含有乙醇的烧瓶中,进行超声提取,得到滤液组分1和滤渣组分1,将滤渣组分1置于烧瓶中内,再向其中加入乙醇水溶液,加热、回流、旋蒸、浓缩、过滤得到滤液组分2,将滤液组分1和滤液组分2混合,减压、浓缩,得到高精度的水苏糖提取物。将水苏糖提取物、地衣芽孢杆菌、姜黄素、金银花、豆粕、粗蛋白等混合均匀,得到富含水苏糖提取物及地衣芽孢杆菌的饲料添加剂。水苏糖具有促进胃肠蠕动,增强免疫能力的作用。地衣芽孢杆菌能促使机体产生抗菌活性物质、抑制致病菌的生长繁殖,调节肠道菌群平衡,提高动物消化功能、增强动物的免疫力、提高生产的性能等诸多功能。本发明制备得到的饲料添加剂添加到饲料中对于肉鸡、仔猪、奶牛中具有预防和治疗肠道疾病,降低死亡率的作用。
具体实施方式
实施例1
(1)将50g的水苏、40g的地黄、35g的银条进行清洗,干燥,利用粉碎机对其进行初次粉碎以便混合粗粉样品能够通过40目筛网筛,再利用行星式球磨机对混合粗粉进行球磨粉碎得到超微粉碎的混合干粉。
(2)取混合干粉加入到含有乙醇的烧瓶中,配置成质量浓度为10g/L乙醇提取溶液,在超声提取功率为100W,超声频率为20kHz下进行超声提取30min,在8000r/min的离心机中进行离心4min,分离、过滤,得到滤液组分1和滤渣组分1。
(3)将滤渣组分1置于烧瓶中内,再向其中加入浓度40%的乙醇水溶液,加热烧瓶至溶液沸腾,回流抽提6h,旋蒸浓缩,向得到的浓缩产物中加入甲醇,搅拌、溶解、过滤得到滤液组分2。
(4)将滤液组分1和滤液组分2混合,减压、浓缩,得到高精度的水苏糖提取物。
(5)种子斜面培养基的配方为:6g/L的蛋白胨,3g/L的牛肉提取物,2g/L的酵母抽提物,4g/L的NaCl,16g/L的琼脂。
(6)液体培养基的配方为:原生质体稳定液、质量浓度为0.12%的牛肉膏,0.15%的酵母膏,0.5%的胰蛋白胨,0.15%的葡萄糖,0.3%的NaCl、0.4%的磷酸氢二钠、0.2%的磷酸二氢钠。
(7)在20℃下,从新鲜的平板上挑选地衣芽孢杆菌落,再将其画线接种在种子斜面培养中进行振荡培养5h,再离心、收集菌体,用液体培养基进行重悬8h,离心、稀释,再将其涂布于种子斜面培养基中,培养2天,得到活化的地衣芽孢杆菌落。
(8)将质量占比为0.15%的水苏糖提取物、0.02%姜黄素、0.08%的金银花、18%的豆粕、5%棉粕、4%的面粉、0.2%的氯化钠、0.1%的赖氨酸、6%的磷酸氢钙、1%的石粉、0.5%的豆油、0.8%的复合预混料、0.5%的麸皮、0.1%的鱼粉、20%的粗蛋白,余量为玉米,混合均匀,再加入添加量为8×109CFU/kg的地衣芽孢杆菌,混合均匀,得到富含水苏糖提取物及地衣芽孢杆菌的饲料添加剂。
实施例2
(1)将50g的水苏、50g的地黄、35g的银条进行清洗,干燥,利用粉碎机对其进行初次粉碎以便混合粗粉样品能够通过40目筛网筛,再利用行星式球磨机对混合粗粉进行球磨粉碎得到超微粉碎的混合干粉。
(2)取混合干粉加入到含有乙醇的烧瓶中,配置成质量浓度为10g/L乙醇提取溶液,在超声提取功率为200W,超声频率为30kHz下进行超声提取50min,在10000r/min的离心机中进行离心5min,分离、过滤,得到滤液组分1和滤渣组分1。
(3)将滤渣组分1置于烧瓶中内,再向其中加入浓度20%的乙醇水溶液,加热烧瓶至溶液沸腾,回流抽提4h,旋蒸浓缩,向得到的浓缩产物中加入甲醇,搅拌、溶解、过滤得到滤液组分2。
(4)将滤液组分1和滤液组分2混合,减压、浓缩,得到高精度的水苏糖提取物。
(5)种子斜面培养基的配方为:5g/L的蛋白胨,2g/L的牛肉提取物,1g/L的酵母抽提物,3g/L的NaCl,12g/L的琼脂。
(6)液体培养基的配方为:原生质体稳定液、质量浓度为0.12%的牛肉膏,0.18%的酵母膏,0.5%的胰蛋白胨,0.15%的葡萄糖,0.4%的NaCl、0.4%的磷酸氢二钠、0.2%的磷酸二氢钠。
(7)在30℃下,从新鲜的平板上挑选地衣芽孢杆菌落,再将其画线接种在种子斜面培养中进行振荡培养8h,再离心、收集菌体,用液体培养基进行重悬10h,离心、稀释,再将其涂布于种子斜面培养基中,培养3天,得到活化的地衣芽孢杆菌落。
(8)将质量占比为0.1%的水苏糖提取物、0.01%姜黄素、0.02%的金银花、16%的豆粕、4%棉粕、4%的面粉、0.2%的氯化钠、0.05%的赖氨酸、4%的磷酸氢钙、1%的石粉、0.5%的豆油、0.8%的复合预混料、0.01%的麸皮、0.1%的鱼粉、10%的粗蛋白,余量为玉米,混合均匀,再加入添加量为1×109CFU/kg的地衣芽孢杆菌,混合均匀,得到富含水苏糖提取物及地衣芽孢杆菌的饲料添加剂。
实施例3
(1)将50g的水苏、40g的地黄、25g的银条进行清洗,干燥,利用粉碎机对其进行初次粉碎以便混合粗粉样品能够通过30目筛网筛,再利用行星式球磨机对混合粗粉进行球磨粉碎得到超微粉碎的混合干粉。
(2)取混合干粉加入到含有乙醇的烧瓶中,配置成质量浓度为20g/L乙醇提取溶液,在超声提取功率为200W,超声频率为30kHz下进行超声提取50min,在10000r/min的离心机中进行离心5min,分离、过滤,得到滤液组分1和滤渣组分1。
(3)将滤渣组分1置于烧瓶中内,再向其中加入浓度60%的乙醇水溶液,加热烧瓶至溶液沸腾,回流抽提6h,旋蒸浓缩,向得到的浓缩产物中加入甲醇,搅拌、溶解、过滤得到滤液组分2。
(4)将滤液组分1和滤液组分2混合,减压、浓缩,得到高精度的水苏糖提取物。
(5)种子斜面培养基的配方为:8g/L的蛋白胨,4g/L的牛肉提取物,3g/L的酵母抽提物,6g/L的NaCl,18g/L的琼脂。
(6)液体培养基的配方为:原生质体稳定液、质量浓度为0.1%的牛肉膏,0.12%的酵母膏,0.2%的胰蛋白胨,0.1%的葡萄糖,0.2%的NaCl、0.2%的磷酸氢二钠、0.1%的磷酸二氢钠。
(7)在35℃下,从新鲜的平板上挑选地衣芽孢杆菌落,再将其画线接种在种子斜面培养中进行振荡培养10h,再离心、收集菌体,用液体培养基进行重悬12h,离心、稀释,再将其涂布于种子斜面培养基中,培养5天,得到活化的地衣芽孢杆菌落。
(8)将质量占比为1%的水苏糖提取物、0.02%姜黄素、0.08%的金银花、18%的豆粕、4.5%棉粕、5%的面粉、0.3%的氯化钠、0.08%的赖氨酸、5%的磷酸氢钙、1.2%的石粉、0.7%的豆油、0.9%的复合预混料、0.4%的麸皮、0.11%的鱼粉、15%的粗蛋白,余量为玉米,混合均匀,再加入添加量为6×109CFU/kg的地衣芽孢杆菌,混合均匀,得到富含水苏糖提取物及地衣芽孢杆菌的饲料添加剂。
实施例4
(1)将50g的水苏、50g的地黄、45g的银条进行清洗,干燥,利用粉碎机对其进行初次粉碎以便混合粗粉样品能够通过40目筛网筛,再利用行星式球磨机对混合粗粉进行球磨粉碎得到超微粉碎的混合干粉。
(2)取混合干粉加入到含有乙醇的烧瓶中,配置成质量浓度为35g/L乙醇提取溶液,在超声提取功率为200W,超声频率为20kHz下进行超声提取40min,在10000r/min的离心机中进行离心5min,分离、过滤,得到滤液组分1和滤渣组分1。
(3)将滤渣组分1置于烧瓶中内,再向其中加入浓度60%的乙醇水溶液,加热烧瓶至溶液沸腾,回流抽提8h,旋蒸浓缩,向得到的浓缩产物中加入甲醇,搅拌、溶解、过滤得到滤液组分2。
(4)将滤液组分1和滤液组分2混合,减压、浓缩,得到高精度的水苏糖提取物。
(5)种子斜面培养基的配方为:7g/L的蛋白胨,3g/L的牛肉提取物,2g/L的酵母抽提物,5g/L的NaCl,15g/L的琼脂。
(6)液体培养基的配方为:原生质体稳定液、质量浓度为0.12%的牛肉膏,0.18%的酵母膏,0.6%的胰蛋白胨,0.15%的葡萄糖,0.4%的NaCl、0.4%的磷酸氢二钠、0.2%的磷酸二氢钠。
(7)在25℃下,从新鲜的平板上挑选地衣芽孢杆菌落,再将其画线接种在种子斜面培养中进行振荡培养8h,再离心、收集菌体,用液体培养基进行重悬12h,离心、稀释,再将其涂布于种子斜面培养基中,培养2天,得到活化的地衣芽孢杆菌落。
(8)将质量占比为0.15%的水苏糖提取物、0.02%姜黄素、0.06%的金银花、18%的豆粕、4.5%棉粕、5%的面粉、0.3%的氯化钠、0.08%的赖氨酸、6%的磷酸氢钙、1.5%的石粉、0.5%的豆油、1%的复合预混料、0.4%的麸皮、0.1%的鱼粉、15%的粗蛋白,余量为玉米,混合均匀,再加入添加量为8×109CFU/kg的地衣芽孢杆菌,混合均匀,得到富含水苏糖提取物及地衣芽孢杆菌的饲料添加剂。
实施例5
(1)将50g的水苏、60g的地黄、55g的银条进行清洗,干燥,利用粉碎机对其进行初次粉碎以便混合粗粉样品能够通过50目筛网筛,再利用行星式球磨机对混合粗粉进行球磨粉碎得到超微粉碎的混合干粉。
(2)取混合干粉加入到含有乙醇的烧瓶中,配置成质量浓度为35g/L乙醇提取溶液,在超声提取功率为300W,超声频率为40kHz下进行超声提取60min,在12000r/min的离心机中进行离心6min,分离、过滤,得到滤液组分1和滤渣组分1。
(3)将滤渣组分1置于烧瓶中内,再向其中加入浓度40%的乙醇水溶液,加热烧瓶至溶液沸腾,回流抽提6h,旋蒸浓缩,向得到的浓缩产物中加入甲醇,搅拌、溶解、过滤得到滤液组分2。
(4)将滤液组分1和滤液组分2混合,减压、浓缩,得到高精度的水苏糖提取物。
(5)种子斜面培养基的配方为:6g/L的蛋白胨,3g/L的牛肉提取物,2g/L的酵母抽提物,4g/L的NaCl,16g/L的琼脂。
(6)液体培养基的配方为:原生质体稳定液、质量浓度为0.15%的牛肉膏,0.2%的酵母膏,0.8%的胰蛋白胨,0.2%的葡萄糖,0.5%的NaCl、0.6%的磷酸氢二钠、0.3%的磷酸二氢钠。
(7)在35℃下,从新鲜的平板上挑选地衣芽孢杆菌落,再将其画线接种在种子斜面培养中进行振荡培养5h,再离心、收集菌体,用液体培养基进行重悬15h,离心、稀释,再将其涂布于种子斜面培养基中,培养2天,得到活化的地衣芽孢杆菌落。
(8)将质量占比为2%的水苏糖提取物、0.03%姜黄素、0.1%的金银花、20%的豆粕、5%棉粕、6%的面粉、0.4%的氯化钠、0.1%的赖氨酸、6%的磷酸氢钙、1.5%的石粉、0.8%的豆油、1%的复合预混料、0.5%的麸皮、0.12%的鱼粉、20%的粗蛋白,余量为玉米,混合均匀,再加入添加量为8×109CFU/kg的地衣芽孢杆菌,混合均匀,得到富含水苏糖提取物及地衣芽孢杆菌的饲料添加剂。
对比例1
(1)将质量占比为20%的豆粕、5%的棉粕、5%的面粉、0.3%的氯化钠、0.08%的赖氨酸、5%的磷酸氢钙、1.2%的石粉、0.6%的豆油、0.9%的复合预混料、0.03%的麸皮、0.12%的鱼粉、20%的粗蛋白,余量为玉米,混合均匀,得到饲料添加剂。
生产性能指标测定:试验动物为健康无病、体况均匀的30日龄断奶仔猪。在实验第1天、第30天晨饲前给每个仔猪进行称重并记录。计算仔猪的增重和肉料比。平均日增重量(g)=(最终体重-始测体重)/30,料重比=总饲料消耗量/(最终体重-始测体重)。
实施例1的平均日增重和料重比最大,达到0.37kg/天和1.92%。
免疫功能指标测定:饲养结束时,停饲12h,用含有肝素钠的采血管通过前腔静脉采集血液10ml,离心,分离上层血清,-20℃保存。采用ELISA试剂盒测定各项免疫指标。
实施例1的白蛋白和血糖最多,达到23.9g/L和6.38mmol/L。实施例3的球蛋白最多,达到29.8g/L。实施例5的总蛋白最多,达到53.7g/L。
Claims (8)
1.一种富含水苏糖提取物及地衣芽孢杆菌的饲料添加剂的制备方法,其特征在于:所述制备步骤为:
(1)先对水苏、地黄、银条进行清洗,干燥,利用粉碎机对其进行初次粉碎以便混合粗粉样品能够通过30-50目筛网筛,再利用行星式球磨机对混合粗粉进行球磨粉碎得到超微粉碎的混合干粉;
(2)取混合干粉加入到含有乙醇的烧瓶中,配置成乙醇提取溶液,进行超声提取,在8000-12000r/min的离心机中进行离心4-6min,分离、过滤,得到滤液组分1和滤渣组分1;
(3)将滤渣组分1置于烧瓶中内,再向其中加入浓度20-60%的乙醇水溶液,加热烧瓶至溶液沸腾,回流抽提4-8h,旋蒸浓缩,向得到的浓缩产物中加入甲醇,搅拌、溶解、过滤得到滤液组分2;
(4)将滤液组分1和滤液组分2混合,减压、浓缩,得到高精度的水苏糖提取物;
(5)将质量占比为0.1-2%的水苏糖提取物、0.01-0.03%姜黄素、0.02-0.1%的金银花、16-20%的豆粕、4-5%的棉粕、4-6%的面粉、0.2-0.4%的氯化钠、0.05-0.1%的赖氨酸、4-6%的磷酸氢钙、1-1.5%的石粉、0.5-0.8%的豆油、0.8-1%的复合预混料、0.01-0.5%的麸皮、0.1-0.12%的鱼粉、10-20%的粗蛋白,余量为玉米,混合均匀,再加入地衣芽孢杆菌,混合均匀,得到富含水苏糖提取物及地衣芽孢杆菌的饲料添加剂。
2.根据权利要求1所述的富含水苏糖提取物及地衣芽孢杆菌的饲料添加剂的制备方法,其特征在于:所述步骤(1)中水苏、地黄、银条的质量比为1:0.8-1.2:0.5-1.1。
3.根据权利要求1所述的富含水苏糖提取物及地衣芽孢杆菌的饲料添加剂的制备方法,其特征在于:所述步骤(2)中超声提取功率为100-300W,超声提取时间为30-60min,超声频率20-40kHz。
4.根据权利要求1所述的富含水苏糖提取物及地衣芽孢杆菌的饲料添加剂的制备方法,其特征在于:所述步骤(2)中乙醇提取溶液的质量浓度为10-35g/L。
5.根据权利要求1所述的富含水苏糖提取物及地衣芽孢杆菌的饲料添加剂的制备方法,其特征在于:所述步骤(5)中饲料添加剂中地衣芽孢杆菌的添加量为1×109CFU/kg~8×109CFU/kg。
6.根据权利要求1所述的富含水苏糖提取物及地衣芽孢杆菌的饲料添加剂的制备方法,其特征在于:所述步骤(5)中活化的地衣芽孢杆菌落的制备方法:在20-35℃下,从新鲜的平板上挑选地衣芽孢杆菌落,再将其画线接种在种子斜面培养中进行振荡培养5-10h,再离心、收集菌体,用液体培养基进行重悬8-12h,离心、稀释,再将其涂布于种子斜面培养基中,培养2-5天,得到活化的地衣芽孢杆菌落。
7.根据权利要求6所述的富含水苏糖提取物及地衣芽孢杆菌的饲料添加剂的制备方法,其特征在于:种子斜面培养基配方为:5-8g/L的蛋白胨,2-4g/L的牛肉提取物,1-3g/L的酵母抽提物,3-6g/L的NaCl,12-18g/L的琼脂。
8.根据权利要求6所述的富含水苏糖提取物及地衣芽孢杆菌的饲料添加剂的制备方法,其特征在于:液体培养基配方为:原生质体稳定液、质量浓度为0.1-0.15%的牛肉膏,0.12-0.2%的酵母膏,0.2-0.8%的胰蛋白胨,0.1-0.2%的葡萄糖,0.2-0.5%的NaCl、0.2-0.6%的磷酸氢二钠、0.1-0.3%的磷酸二氢钠。
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