CN116056687A

CN116056687A - 含有mtor抑制剂的外用制剂

Info

Publication number: CN116056687A
Application number: CN202080100378.2A
Authority: CN
Inventors: 李守峰; 赵袆; 任乔林
Original assignee: Shanghai Aokeda Pharmaceutical Technology Co ltd
Current assignee: Shanghai Aokeda Pharmaceutical Technology Co ltd
Priority date: 2020-03-02
Filing date: 2020-06-23
Publication date: 2023-05-02
Also published as: EP4114357A1; US11813250B2; US20230100760A1; EP4114357A4; WO2021176263A1

Abstract

一种保质期更长的用于局部给药的mTOR抑制剂的制剂。该制剂包括一种mTOR抑制剂，一种能够溶解和稳定该抑制剂的溶剂。本文件还公开了该制剂用于治疗皮肤病变和其他外用疾病的用途。

Description

含有MTOR抑制剂的外用制剂

发明领域

本发明涉及一种新的mTOR抑制剂的配方和治疗皮肤病的方法。

背景

西罗莫司，又称雷帕霉素，是惠氏公司批准的

口服液和片剂的活性成分，通过与吸水链霉菌菌株发酵获得。西罗莫司是一种免疫抑制剂，适用于预防年龄≥13岁接受肾脏移植的患者的器官排斥。

依维莫司是一种半合成的大环内酯类免疫抑制剂，来源于西罗莫司。它是诺华公司批准的

口服片的活性成分。该产品用于治疗结节性硬化症综合症，包括TSC相关的室管膜下巨细胞性星形细胞瘤(SEGA)、TSC相关的血管肌脂肪瘤和TSC相关的淋巴管肌瘤病(LAM)，但它从未被批准为外用药。

西罗莫司和依维莫司水溶性差。它们很容易被氧化。它们通过对mTOR(哺乳动物类雷帕霉素靶蛋白)的作用，抑制IL-2和其他细胞因子受体依赖的信号转导机制，从而阻断T和B细胞的激活。作为mTOR的丝氨酸-苏氨酸激酶是PI3K-AKT通路的下游分子，牵涉到蛋白质合成和细胞周期控制。西罗莫司和依维莫司已被证明是各种人类癌症细胞系异种移植模型中肿瘤生长的抑制剂。在测试的异种移植模型中，p70 S6激酶(S6K，mTOR的下游激酶，参与蛋白质翻译)的下调与它们的抗肿瘤活性直接相关。

依维莫司的免疫抑制作用在体外试验中得到证实，依维莫司阻断了有丝分裂刺激的淋巴细胞增殖。在欧洲，依维莫司被用作器官移植患者的免疫抑制剂，以防止移植排斥反应。此外，在体外实验中，依维莫司对小鼠和人类破骨细胞的形成和活性表现出直接的抑制作用，在较小的程度上对成骨细胞的分化也有抑制作用。

面部血管纤维瘤是一种毁容性的面部病变，在多达80％的结节性硬化综合症(TSC)患者中存在。病变出现在幼儿期，在一些患者中，病变会融合并可能导致严重毁容。典型的面部血管纤维瘤刚出现时是红色至粉红色的丘疹/结节，表面光滑、发亮。它们通常(但不总是)是双侧对称的，分布在面部中央区域，特别是在鼻唇沟，蝴蝶状分布在脸颊和下巴上。

最近对结节性硬化症1(TSC1)和结节性硬化症2(TSC2)基因产品与mTOR之间复杂信号关系的阐明，导致了与mTOR抑制剂(如雷帕霉素和依维莫司)在TSC中的应用有关的研究剧增。大多数TSC患者都有TSC1或TSC2的突变，导致mTOR的组成性激活。因为该病的发病机制是mTOR过度活跃，所以mTOR抑制剂有可能治疗TSC患者的根本原因。

目前面部血管纤维瘤的治疗方案包括破坏性的方法，如磨皮、手术切除和激光治疗。有时可能需要全身麻醉可能，这取决于个人的症状和手术应对能力，特别是对于那些有严重学习障碍的TSC患者。虽然临床病例研究显示mTOR抑制剂对面部血管纤维瘤有治疗效果，但这些研究通常使用药片的研磨粉进行局部应用。

发明内容

本专利文件提供了mTOR抑制剂的外用制剂。该制剂能够渗透到表皮的浅层真皮，提供治疗有效剂量的活性成分。同时，活性成分在制剂中长期保持稳定，从而提供了一种方便的长期治疗选择。此外，本发明将极大地提高病人的依从性，减少医疗负担，因为皮损如果不及时治疗，可能会发展到住院甚至需要手术。

本专利文件还提供了西罗莫司或依维莫司的外用组合物或制剂。该制剂可以是软膏、乳膏、溶液和悬浮液。在一些实施例中，该制剂含有有效剂量的西罗莫司或依维莫司和皮肤病学载体。在一些实施例中，制剂中mTOR抑制剂的有效剂量为0.001％至2％(重量)。皮肤病学载体选自润肤剂、乳化剂、增稠剂、防腐剂、渗透促进剂、缓冲剂和溶剂。在一些实施例中，该制剂的润肤剂是白凡士林和矿物油，乳化剂是辛酰己基聚氧乙烯-8甘油酯，增稠剂是山萮酸甘油酯，溶剂是DMSO和碳酸丙烯酯。

本发明还提供了一种制备药用软膏配方的工艺，包括(a)将西罗莫司或依维莫司溶解在一种或多种溶剂中；(b)提供软膏基质；以及将步骤(a)的产物与步骤(b)的产物混合。

本发明还提供了一种治疗TSC相关皮肤病变(如面部血管纤维瘤)的方法。该方法包括每天一次、两次、三次、四次或按需将制剂局部应用于患病部位，以提供有针对性的、局部的、有效浓度的制剂。该药剂并非全身应用，因此减少了全身应用的典型副作用。

附图说明

图1显示了西罗莫司软膏中的西罗莫司、赛科-拉帕霉素和异构体C的HPLC色谱图。

具体实施方式

本发明提供了含有合适的有机溶剂的药物组合物或制剂，用于治疗剂的局部给药。该制剂可以是溶液、悬浮液、泡沫、喷雾、软膏、乳膏和气雾剂。与传统的口服给药途径相比，本发明所披露的外用制剂绕过了门静脉循环和肝脏首过代谢，大大减少了全身给药可能产生的副作用。此外，该制剂能有效地将活性成分输送到患病部位，并消除了口服时与胃肠道刺激有关的问题。此外，制剂中活性成分的稳定性可维持较长的时间。

虽然以下文本可以参考或举例说明治疗疾病或病症的制剂或方法的具体实施方案，但无意将实施例或方法的范围限制在这种特定的参考或举例中。本领域技术人员可根据实际情况和经济考虑做出各种修改，例如配方中的成分及其在溶剂中的比例以及应用该配方治疗疾病的有效剂量。

除非另有说明，本文条款中的“a”和“an”是指“一个或多个”或“至少一个”。也就是说，用不定冠词“a”或“an”提及本发明的任何元素或成分并不排除该元素或成分中存在一个以上的可能性。

本文使用的术语“大约”是指参考数字加或减该参考数字的10％。

本文使用的术语“受试者”包括人类和非人类动物。非人类动物包括所有脊椎动物，例如哺乳动物和非哺乳动物，如非人类灵长类动物、羊、狗、猫、牛、马、鸡、两栖动物和爬行动物，但优选哺乳动物，如非人类灵长类动物、羊、狗、猫、牛和马。优选对象包括需要增强免疫反应的人类患者。本方法特别适用于具有可通过增强免疫反应进行治疗的疾病的人类患者。

“治疗”或“疾病状态的治疗”包括：1)预防疾病状态，即在可能接触到疾病状态或对疾病状态有倾向性，但尚未出现或显示疾病状态症状的主体不出现疾病状态的临床症状；2)抑制疾病状态，即阻止疾病状态或其临床症状的发展；3)或缓解疾病状态，即使疾病状态或其临床症状暂时或永久消退。

本文使用的术语“有效剂量”是指将引起组织、系统、动物或人的生物或医学反应的制剂或药剂的量，该反应是由研究人员或临床医生等寻求的。此外，术语“治疗有效剂量”是指与未接受该剂量的相应受试者相比，能使疾病、功能失调或副作用的治疗、治愈、预防或改善，或减少疾病或紊乱的发展速度的任何剂量。该术语还包括在其范围内有效提高正常生理功能的剂量。具有本领域普通技能的人士可以利用常规方法轻易确定具体剂量。

本文使用的术语“制剂”或“组合物”包括以预定的数量或比例包含特定成分的产品，以及直接或间接地由特定数量的特定成分组合而成的任何产品。该术语与药物组合物有关，包括由活性成分和构成载体的惰性成分组成的产品，以及直接或间接由任何两种或多种成分的组合、复合或聚集，或由一种或多种成分的解离，或由一种或多种成分的其他类型的反应或相互作用产生的任何产品。一般来说，药物制剂或组合物的制备方法是将活性成分与液体载体或细小的固体载体或两者均匀且密切掺混，并接着(如有必要)将产物成型为所需型式来制备。在药物制剂或组合物中，活性成分的用量足以对疾病的过程或状况产生预期的效果。因此，本文所述的药物制剂或组合物包括通过混合本发明的化合物和药学上可接受的载体制成的任何制剂或组合物。

本文使用的术语“药学上可接受的载体”包括任何溶剂、分散介质、涂层、抗菌剂和抗真菌剂、等渗剂和吸收延迟剂，以及类似的生理上兼容的东西。一个“药学上可接受的载体”，在给受试者服用后，不会造成不良的生理影响。药物组合物中的载体必须是“可接受的”，也就是说，它与活性成分相容，并且能够稳定活性成分。可以用一种或多种增溶剂作为传递活性剂的药物载体。药学上可接受的载体的例子包括但不限于渗透剂、乳化剂、增稠剂、润肤剂、生物相容性载体、佐剂、添加剂和稀释剂，以得到可作为剂型的组合物。其他载体的例子包括胶体氧化硅、硬脂酸镁、纤维素和月桂醇硫酸钠。其他合适的药物载体和稀释剂，以及使用这些载体和稀释剂的药剂辅料，在雷明顿的Pharmaceutical Sciences中都有描述。优选的载体要适用于静脉注射、肌肉注射、皮下注射、肠外注射、脊髓或表皮给药(例如，注射或输液)。治疗性化合物可包括一种或多种药学上可接受的盐。

“药学上可接受的盐”是指活性成分的一种盐。该盐形式保留了母体化合物所需的生物活性，不会带来任何不良毒理学影响。药学上可接受的盐可以是无机酸盐、有机酸盐、或金属盐。

本专利文件还提供了一种用于局部输送治疗剂的制剂。该制剂一般包括大环内酯类免疫抑制剂或mTOR抑制剂(重量约为该制剂的0.01％至15％)以及溶剂(重量约为该制剂的1％至99％)。溶剂能够溶解大环内酯类免疫抑制剂，并且在2个月内制剂中降解的大环内酯类免疫抑制剂少于4％。该制剂可以是液体或半固体状态，保质期更长，克服了传统剂型暴露于溶剂时的不稳定性。非限制性大环内酯类免疫抑制剂包括他克莫司、吡美莫司、西罗莫司、阿糖胞苷、依维莫司以及其药学上可接受的盐。该制剂可以是溶液、泡沫、喷雾、凝胶、软膏、乳膏或气雾剂。

西罗莫司和依维莫司都是mTOR抑制剂，各自有三种形式的异构体：异构体A、B和C，异构体B是药物活性形式，在溶解状态下会转变为A或C。异构体C是指西罗莫司或依维莫司的氧烷异构体。赛科-拉帕霉素是另一种异构体和降解产物，可由西罗莫司的异构体B形成。

异构体B是西罗莫司最主要的异构体，包含一个分子内的kemiketal，形成一个六元环。异构体C可由异构体B形成，也含有一个分子内kemiketal，但有一个邻近的酮基，因此在其结构中形成一个七元环(oxepane)。西罗莫司异构体B和异构体C具有以下结构：

西罗莫司异构体B

西罗莫司异构体C

依维莫司的异构体B同样可以转化为异构体C。本文公开的制剂最大限度地减少西罗莫司或依维莫司转化为不良异构体(例如异构体A、C和赛科-拉帕霉素)，并在较长时间内保持药剂的治疗有效形式。在本文所述制剂的示例性实施例中，虽然不良异构体可能最初(第0小时)存在于制剂中，但在大约1周、2周、1个月、2个月、3个月、4个月、5个月、6个月、12个月、1年、2年或3年内，低于约0.1％、0.2％、0.3％、0.4％、0.5％、0.8％、1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、或10％的西罗莫司或依维莫司在可控制室温或2-8℃的冷藏条件下从异构体B转换为西罗莫司或依维莫司的异构体A、C或赛科-拉帕霉素。在一些实施例中，从0开始的约1周、或2周内，低于约0.1％、低于约0.15％、低于约0.2％、低于约0.4％、低于约0.5％、低于约0.8％、或低于约1％的西罗莫司从异构体B转化或降解为赛科-拉帕霉素。在一些实施例中，从0开始的约2周内，低于约0.2％、低于约0.4％、低于约0.5％、低于约0.6％、低于约0.8％、或低于约1％的西罗莫司异构体B转化为异构体C。在一些实施例中，从0开始的约4周内，低于约0.2％、低于约0.4％、低于约0.5％、低于约0.8％、低于约1％、低于约1.5％、低于约2％、低于约3％或低于约5％的西罗莫司异构体B转化为异构体C。

在目前公开的制剂或方法的其他例子中，在室温下或冷藏储存条件下(2-8℃)，异构体C或赛克-拉帕霉素的量在约5天、1周、2周、3周、4周、1个月、2个月、3个月、4个月、5个月、6个月、7个月、8个月、9个月、10个月、1年、2年或3年时间内低于西罗莫司或依维莫司总量约1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％。在一些实施方案中，在1小时、5小时、10小时、24小时、1周、2周、4周、2个月、6个月、12个月、1年、2年或3年的时间内，异构体C或赛克-拉帕霉素的量增加了低于0.1％、0.2％、0.5％、0.8％、1％、3％、5％、或10％。

在一些实施例中，该制剂可以是溶液、泡沫、喷雾、凝胶、软膏、乳膏或气雾剂。软膏通常是半固体，含有少量(例如低于5％)的水或不含水，但包括碳氢化合物、蜡或多元醇作为载体。乳膏是半固体，含有油包水或油包水乳剂或水性微晶分散体。凝胶是含有纤维素醚、Carbromer或其他聚合物的水或水-醇混合物的透明制剂。泡沫是由含有活性成分的液体或固体中的气体袋形成的物体，是用于局部的水基和非水基喷雾制剂。喷雾是细小的喷射型液体，比蒸汽更粗；通过将液体从雾化器的微小开口处与空气混合产生，适合局部应用。气雾剂是含有治疗性活性成分的加压剂型，在启动时释放出气体介质中的液体和/或固体材料的细小分散体。

外用制剂通常含有约0.01％至约15％(包括所有子范围)的mTOR抑制剂和皮肤学载体的重量。在一些实施例中，mTOR抑制剂在制剂中的重量为约0.01％至约10％、0.001％至约5％、0.001％至约2％、0.05％至约5％、0.05％至约3％、0.05％至约2％、0.05％至约1.5％、0.05％至约1％、0.1％至约5％、从0.1％至约2％、从0.1％至约1％、0.1％至约0.5％、0.3％至约2％、0.3％至约1％、0.3％至约0.8％、0.5％至约2％、0.5％至约1％、约0.05％至约1％、约0.1％至约1％、约0.1％至约0.8％、约0.1％至约0.6％、约0.1％至约0.5％、约0.2％至约0.5％、或约0.2％至约0.4％。在一些实施例中，mTOR抑制剂是西罗莫司或依维莫司。在进一步的示例性实施例中，该制剂含有重约0.01％、0.03％、0.05％、0.08％、0.1％、0.13％、0.15％、0.18％、0.2％、0.23％、0.25％、0.28％、0.3％、0.35％、0.4％、0.45％、0.5％、0.55％、0.6％、0.65％、0.7％、0.75％、0.8％、0.9％、1％、1.1％、1.2％、1.3％、1.4％、1.5％、1.6％、1.7％、1.8％、1.9％、2.0％的西罗莫司或依维莫司，其异构体B为唯一或主导形式。

组合物中溶剂的量可根据具体制剂和待治疗疾病等因素而变化。溶剂不仅起到溶解治疗剂(如西罗莫司或依维莫司)的作用(以便于配制)，还能保持治疗剂的储存稳定性。在一些实施例中，溶剂的存在范围(包括所有子范围)约为0.5％-50％。在一些实施例中，溶剂在制剂中的范围为约0.5％-20％、约1％到约10％、约1％到约8％、约1％到约5％、约1％到约3％、约2％到约10％、约2％到约8％、或约2％到约5％。在进一步的示例性实施例中，溶剂以约0.5％、1％、1.5％、2％、2.5％、5％、7.5％或10％的重量存在。溶剂包括但不限于N-甲基-2-吡咯烷酮(NMP)、二甲亚砜(DMSO)、丙二醇、碳酸丙烯酯、辛癸基聚氧乙烯-8甘油酯，以及上述两种或多种的任何组合。

mTOR抑制剂和溶剂之间的比例从约1:1到约1:100、约1:10到约1:100、约1:10到约1:80、约1:10到约1:50、约1:5到约1:20、约1:5到约1:15、约1:8到约1:25、约1:10到约1:25、约1:10至约1:15、约1:20到约1:25、或约1:10到约1:20。在一些更加示例性的实施例中，活性成分mTOR抑制剂和溶剂的比例为1:10、1:11、1:12、1:13、1:14、1:15、1:16、1:17、1:18、1:19、1:20、1:21、1:22、1:23、1:24和1:25。在一些实施例中，mTOR抑制剂是西罗莫司或依维莫司，各自以异构体B的形式作为活性成分。

在一些实施例中，制剂或溶剂含有低于5％、低于1％、低于0.5％、低于0.1％、低于0.05％、低于0.01％的水。在一些实施例中，制剂中的溶剂和水的比例超过5:1、8:1、10:1、15:1、20:1或30:1。在一些实施例中，西罗莫司或依维莫司和溶剂的比例为约1:5至1:25、1:8至1:20或约1:8至1:15。

在本文所述的外用制剂的一些实施例中，mTOR抑制剂是依维莫司的异构体B。在一些实施方案中，溶剂包括DMSO、NMP、二甲基异山梨醇(DMI)、丙二醇、甘油和碳酸丙烯酯中的1、2、3或更多。在一些实施例中，50％以上、60％以上、70％以上、80％以上、90％以上、95％以上的溶剂是NMP、DMSO、丙二醇和碳酸丙烯酯其中之一。在一些实施例中，溶剂基本上由DMSO和碳酸丙烯酯组成。在一些实施例中，溶剂基本上由DMSO和NMP组成。在一些实施例中，溶剂含有碳酸丙烯酯和DMSO的组合。在一些实施例中，溶剂含有NMP和DMSO的组合。在一些实施例中，70％以上、80％以上、90％以上、95％以上的溶剂是碳酸丙烯酯。在一些实施例中，50％以上、60％以上、70％以上、80％以上、85％以上、90％以上、95％以上或99％以上的溶剂是NMP。在一些实施例中，溶剂中DMSO和碳酸丙烯酯的比例(重量比)或DMSO和NMP的比例为约5:1到约1:20、约2:1到约1:10、约1:1到约1:20、约1:1到约1:15、约1:1到约1:10、约1:2到约1:10、约1:4到约1:10、约1:6到约1:10、约1:8到约1:10、或约1:7到约1:9。在一些更加示例性的实施例中，DMSO和碳酸丙烯酯之间或DMSO和NMP之间或DMSO和NMP与碳酸丙烯酯的组合在溶剂中的比例约为1:1、1:2、1:3、1:4、1:5、1:6、1:7、1:8、1:9、1:10、1:11、1:12、1:13、或1:15。

在本文描述的外用制剂的一些实施例中，mTOR抑制剂是西罗莫司的异构体B。在本文描述的外用制剂的一些实施例中，溶剂包括DMSO、丙二醇、NMP、二甲基异山梨醇(DMI)、丙二醇、甘油和碳酸丙烯的1、2、3或更多。在一些实施例中，50％以上、60％以上、70％以上、80％以上、90％以上、95％以上的溶剂是NMP、DMSO和碳酸丙烯酯其中之一。在一些实施例中，溶剂基本上由DMSO和碳酸丙烯酯组成。在一些实施例中，溶剂基本上由DMSO和NMP组成。在一些实施例中，溶剂含有碳酸丙烯酯和DMSO的组合。在一些实施例中，溶剂含有NMP和DMSO的组合。在一些实施例中，70％以上、80％以上、90％以上、95％以上的溶剂是碳酸丙烯酯。在一些实施例中，50％以上、60％以上、70％以上、80％以上、85％以上、90％以上、95％以上或99％以上的溶剂是NMP。在一些实施例中，50％以上、60％以上、70％以上、80％以上、85％以上、90％以上、95％以上或99％以上的溶剂是DMSO。在一些实施例中，溶剂中DMSO和碳酸丙烯酯的比例或DMSO和NMP的比例为约5:1到约1:20、约2:1到约1:10、约1:1到约1:20、约1:1到约1:15、约1:1到约1:10、约1:2到约1:10、约1:4到约1:10、约1:6到约1:10、约1:8到约1:10、或约1:7到约1:9。在一些更加示例性的实施例中，溶剂中DMSO和碳酸丙烯酯之间或DMSO和NMP之间的比例约为1:1、1:2、1:3、1:4、1:5、1:6、1:7、1:8、1:9、或1:10。

制剂可包含一种或多种药学或皮肤学上可接受的载体，包括表面活性剂、聚合增稠剂、润肤剂、乳化剂、缓冲剂、渗透增强剂和/或油性软膏基质。皮肤病学载体选自润肤剂、乳化剂、增稠剂、防腐剂、渗透促进剂、缓冲剂和溶剂。在一些实施例中，所述组合物的润肤剂是白凡士林。在一些实施例中，所述组合物的润肤剂是矿物油。在一些实施例中，所述组合物的润肤剂年龄是白凡士林和矿物油的组合。在一些实施例中，所述表面活性剂或乳化剂是PEG-8癸基或辛基聚氧乙烯-8甘油酯(Labrasol)。在一些实施例中，增稠剂是二乙烯基甘油酯(Compitrol 888ATO)，溶剂是DMSO和碳酸丙烯酯。

在一些实施方案中，该制剂含有表面活性剂，按制剂的重量计，范围为约0.1％至约10％，约1％至约10％，约2％至约8％，或约3％至约6％。在一些实施方案中，该表面活性剂是辛酰己基聚氧乙烯-8甘油酯。

在一些实施例中，制剂中含有增稠剂，在制剂中的重量范围为约0.1％至约10％、约1％至约10％、约1％至约8％、约1％至约5％、或约1％至约3％。在一些实施例中，二乙烯基甘油酯(Combitrol 888ATO)。

具有表面活性剂或乳化性能的聚合物的非限制性例子包括但不限于疏水性改性聚丙烯酸，其商品名称为PemulenTM TR-I和TR-2，由路博润公司生产；基于丙烯酰胺烷基磺酸和环状N-乙烯基甲酰胺的水溶性或遇水膨胀共聚物，其商品名称为

AVC，由科莱恩公司生产；基于丙烯酰胺基磺酸和疏水性改性甲基丙烯酸的水溶性或遇水膨胀共聚物，其商品名称为Aristo

HMB，由科莱恩公司生产；以及丙烯酰胺基磺酸的均聚物，其商品名称为Granthix APP，由Grant Industries,Inc.生产。另一类值得注意的聚合物乳化剂包括疏水改性、交联的阴离子丙烯酸共聚物，包括无规聚合物，但也可能以其他形式存在，如嵌段、星形、接枝等。在一个实施例中，疏水改性、交联的阴离子丙烯酸共聚物可由至少一种酸性单体和至少一种疏水的乙烯不饱和单体合成。合适的酸性单体包括那些可被碱中和的乙烯不饱和酸单体。合适的疏水性乙烯不饱和单体包括那些含有碳链长度至少约为3个碳原子的疏水链的单体。合适的润肤剂包括植物油、从动物获得的脂肪、从石油获得的半固体碳氢化合物等。油性软膏基料包括白软膏、黄软膏、十六烷基酯蜡、石蜡、石油脂、白石膏、白蜡、黄蜡等及其混合物。具有增稠特性的聚合物包括但不限于PEG-150二硬脂酸酯、PEG-7甘油椰油酸酯、PEG 200氢化甘油棕榈酸酯、PEG-120甲基葡萄糖二油酸酯、羧甲基聚合物、羧基乙烯基聚合物、丙烯酸酯、Clo-C3O烷基丙烯酸酯交联聚合物，以及其组合。

渗透增强剂增加皮肤的渗透性，以提高药物渗透到皮肤的速度。示例性的渗透增强剂包括但不限于挥发性有机溶剂(如乙醇)、非挥发性有机溶剂(酰胺，如吡咯烷酮；多元醇醚，如乙二醇醚；多元醇，如乙二醇；及其衍生物)以及类似物及其混合物。皮肤渗透增强剂还包括脂肪酸、脂肪酸酯、脂肪醇、萜烯、乙二醇和乙二醇酯、1,3-二氧戊环、含有至少12个碳原子的大环酮、噁唑烷酮和噁唑烷酮衍生物、烷基-2-(N,N-双取代氨基)-烷酸酯、(N,N-二取代的氨基)-烷醇烷酸盐及其混合物。

润肤剂包括但不限于矿物油、聚二甲基硅氧烷、甘油、棕榈酸异丙酯、丙二醇、石蜡、棕榈蜡、十六烷基醇、十六烷基酯蜡、鲸蜡醇、乳化蜡、水合羊毛脂、羊毛脂、羊毛脂醇、微晶蜡、石蜡、硬脂酸、硬脂醇、白蜡、黄蜡、角鲨烷及其任何组合。

在一些实施例中，表面活性剂是聚合物，其量在配方中的重量范围为约0.1％至约10％。在一些实施例中，增稠剂是聚合物，其用量为制剂重量的约0.1％-10％。在一些实施例中，软膏基质在配方中的重量范围为约20％-约90％。

在一些实施例中，软膏是外用制剂。在一些实施例中，该制剂含有约0.1％至约0.5％的西罗莫司的异构体B，约1％至约10％或约4％至约5％的溶剂(主要由DMSO和碳酸丙烯酯以约1:5至约1:10的比例组成(例如约1:8))，约1％至约10％(例如约5％)的表面活性剂(例如Labrasol)，约1％至约10％(例如约2％)的增稠剂(如Compritol 888ATO)，和约70％至约80％的软膏基料。

本专利文件还提供了制备上述配方的过程。开发这种外用制剂需要引入合适的溶剂和相关的加工方法来溶解和处理活性药物成分(API)。西罗莫司和依维莫司等原料药在这种溶剂中应具有很大的溶解度，以便于溶液的进一步制造。同时，处理方法可能不会对西罗莫司和依维莫司的稳定性产生任何影响，这样才能进一步实现质量、疗效和安全状况。该方法一般包括：

(a)将mOTR抑制剂溶解在溶剂中，形成溶液；且

(b)将该溶液与一种或多种药学上可接受的载体混合。

mOTR抑制剂、溶剂和药学上可接受的载体的范围和组成如上所述。

在一些实施例中，一种或多种药学上可接受的载体包括选自白软膏、黄软膏、十六烷基酯蜡、石蜡、凡士林、白乳胶、白蜡、黄蜡及其任何组合的软膏基质。在一些实施例中，一种或多种药学上可接受的载体被制备成单独的混合物或溶液，然后与mOTR抑制剂(如西罗莫司或依维莫司)的溶液混合。在一些实施例中，溶剂选自包括N-甲基-2-吡咯烷酮(NMP)、二甲亚砜(DMSO)、丙二醇、二甲基异山梨醇(DMI)、甘油和碳酸丙烯酯以及其任何组合。

用于溶解治疗剂(例如西罗莫司或依维莫司)的溶剂可以包含一种、两种、三种或更多的有机成分(例如DMSO、碳酸丙烯酯)。药剂也可以溶解在一种成分中，随后加入另一种成分。含有惰性载体或成分的溶液可升温加热。其用量或比例与上述配方中相同。

示范性实施例如下：

1.将活性成分溶解在溶剂中，得到溶液I(溶剂包含DMSO、NMP、碳酸丙烯酯或其任何组合，如DMSO和碳酸丙烯酯的组合或DMSO和NMP的组合，比例如上所述)；

2.将其余成分或载体加热到室温以上(如70℃至90℃，得到溶液II，再以转速400转/分搅拌10分钟。

3.保持相同的转速，让溶液II冷却到50-60℃，然后将溶液I加入到溶液II中，在50℃下保持相同转速10分钟。

4.将得到的溶液以300转/分的转速搅拌，冷却到室温(可选)。

5.将冷却后的溶液注入试管或瓶子中。

活性成分、溶剂和其他辅料如上所述。本发明还提供了根据本文所述方法制备的制剂。

本专利文件还提供了一种治疗皮肤病或病症的方法，如结节硬化复合症(TSC)相关的皮肤病变，特别是面部血管纤维瘤。局部给药应用面积大、易应用、动态化，治疗时无侵入性，因此与传统给药途径相比具备许多优势。首先，局部给药绕过了门静脉循环，从而绕过了肝脏首过代谢。第二，局部给药避免了全身吸收和代谢的变化问题。第三，局部给药有可能减少与口服有关的胃肠道刺激。此外，局部给药还避免了与肠外治疗有关的风险和患者的不依从性。鉴于潜在的疾病机制和使用雷帕霉素等mTOR抑制剂作为外用药的文献报道，本文公开的mTOR抑制剂的配方有望在治疗皮肤疾病或病症(如TSC相关的面部血管纤维瘤)方面提供卓越的临床效益。

该方法包括在待治疗的皮肤区域局部应用本文公开的制剂一次或两次，或按需每天应用，从而提供有针对性的、局部的、有效浓度的药剂。皮肤区域可以是受试者身体的任何部分，如面部、躯干和四肢。在一些实施例中，所述受试者是人。确切的剂量和给药频率可能取决于受试者的具体条件和药剂。本领域技术人员可根据本文所公开的配方和相关医学领域的现有知识(如面部血管纤维瘤的治疗)来确定合适的给药方案。该药剂并非全身应用，因此减少了全身应用的典型副作用。

可用本文公开的制剂治疗的局部疾病或病症包括但不限于血管纤维瘤、特应性皮炎、先天性白内障、前葡萄膜炎、酒渍、移植物抗宿主引起的口腔粘膜病、口腔扁平苔藓、皮肤T细胞淋巴瘤、非黑色素瘤性皮肤癌、Sturge-Weber综合症、多发性内分泌肿瘤1型(MEN1)、Birt-Hogg-Dubé综合征(BHDS)、克罗恩病、白癜风、外阴苔藓、春季角膜结膜炎、皮肤红斑狼疮、严重脂溢性皮炎、银屑病、过敏性结膜炎、结节性荨麻疹、溃疡性结肠炎、白癣、寻常型银屑病、慢性手部皮炎、卡波西氏肉瘤和血管瘤。

对于上述每种疾病或病症，本制剂可每天局部施用1次、2次、3次、4次或按需多次施用。或者，该组合物可根据具体情况每2、3、4天施用一次。施用该组合物的实际剂量和频率可取决于具体的疾病状况，并可由本领域普通技术人员(如皮肤科医生)确定，无需进行不当的实验。在示例性的实施方案中，西罗莫司或依维莫司可在上述组合物中以每天约0.01g至约10g的剂量给药。

实施例

以下实施例是为了使本领域技术人员能够实践本发明，只是对本发明的说明。这些例子不应理解为限制权利要求书中所定义的本发明的范围。

实施例1软膏-配方组合物I

本实施例评估了西罗莫司和依维莫司共同或单独在各种FDA批准的外用溶剂和辅助溶剂系统中的溶解性和稳定性，如二甘醇单乙醚(Gattefosse公司生产的

P)、N-甲基-2-吡咯烷酮(NMP)、二甲亚砜(DMSO)、乙醇、辛酰甲酰聚氧-8甘油酯(Gattefosse公司生产的

)和碳酸丙烯酯。

在Transcutol P中，西罗莫司的溶解度在室温和冷藏条件下都大于80mg/ml，依维莫司的溶解度在室温和冷藏条件下都大于100mg/ml。在NMP中，西罗莫司在室温和冷藏条件下的溶解度均大于100mg/ml，依维莫司在室温和冷藏条件下的溶解度均大于100mg/ml。在DMSO中，西罗莫司在室温下的溶解度大于100mg/ml，依维莫司在室温下的溶解度大于200mg/ml。DMSO的熔点为19℃(66℉；292K)，因此它在冷藏条件下会结冰。在碳酸丙烯酯中，西罗莫司的溶解度在室温和冷藏条件下均为30mg/ml左右，而依维莫司的溶解度在室温和冷藏条件下均大于100mg/ml。

表1.

本实施例的软膏组合物按以下方式制备：

1.将西罗莫司溶于DMSO和碳酸丙烯酯，形成溶液I；

2.在70℃至75℃下加热矿物油、白色凡士林和Compritol 888ATO，使其成为溶液，在400转/分的转速下搅拌10分钟，形成溶液II；

3.保持相同的转速，让溶液II冷却到50℃，然后将溶液I加入到溶液II中，在50℃下保持相同转速10分钟。

4.将所得溶液以300转/分的速度搅拌，使之冷却至室温；

5.将冷却后的溶液注入试管或瓶子中。

实施例2软膏-配方组合II

表2.

除了溶液I是溶解在DMSO中的依维莫司外，本实施例中制剂的制备方式与例1的组合物基本相同。

实施例3软膏-配方组合III

表3.

除了溶液I是溶解在碳酸丙烯酯中的依维莫司外，本实施例中制剂的制备方式与例1的组合物基本相同。

实施例4软膏-配方组合IV

表4.

本实施例中制剂的制备方式与例1的组合物基本相同。

实施例5软膏-配方组合V

表5.

本实施例中制剂的制备方式与例1的组合物基本相同。表中显示了在不同的时间点，异构体C在依维莫司总体量中的百分比。

实施例6依维莫司异构体C在不同溶剂的稳定性研究中的浓度(％)

表6.

实验研究了40℃下浓度为20mg/ml时依维莫司在Transcutol P、NMP、DMSO和碳酸丙酯中的稳定性，以及50℃下浓度为80mg/ml时依维莫司在Transcutol P、NMP、DMSO、乙醇、Labrasol和碳酸丙烯酯中的稳定性。DMSO和碳酸丙烯酯对西罗莫司有很好的稳定作用，可以一起或单独使用作为溶解剂。DMSO、NMP和碳酸丙烯酯对西罗莫司和依维莫司有稳定作用，可一起或单独作为溶解剂使用。

依维莫司在溶剂和助溶剂体系中的浓度为80mg/ml。所述溶液在50℃烘箱中储存，在时间0、1h、2h和4h时对样品进行评估。

表6中所有的溶剂或助溶剂体系均为依维莫司提供了相对稳定的环境，即使是在高温和高浓度下与表6中的溶剂相比也是如此。在DMSO、碳酸丙烯酯和NMP中，依维莫司异构体C的检测结果从0h到4h增加不到1.5％。

例7西罗莫司异构体C在不同溶剂中40℃下24小时的稳定性

表7.

西罗莫司在溶剂和助溶剂体系中的浓度为20mg/ml。溶液在40℃烘箱中保存，在0、1、4和24小时时用HPLC分析法对样品进行评估。表中显示了不同时间点西罗莫司异构体C在西罗莫司总体量中的百分比。

西罗莫司在溶剂NMP、DMSO和碳酸丙烯酯中很稳定。虽然在0时有少量的异构体C，但此后在NMP、DMSO和碳酸丙烯酯中不到1.5％的西罗莫司在24小时内转化为异构体C。

实施例8赛科-拉帕霉素在40℃下的各种溶剂中24小时

表8

N.D.未检出

赛科-拉帕霉素是西罗莫司的主要分解产物，Rapamycin(西罗莫司)的开环构象，在溶剂体系中也被定量。表8显示了溶剂和助溶剂体系中赛科-拉帕霉素的浓度。该表显示了在不同时间点赛科-拉帕霉素在西罗莫司总量中的百分比。在测试的样品中，赛科-拉帕霉素的初始浓度未检出。少于0.5％的西罗莫司在碳酸丙烯酯、DMSO和NMP中转化或降解为赛科-拉帕霉素。

DMSO和碳酸丙烯酯对西罗莫司表现出很好的稳定作用。然而，碳酸丙烯酯对西罗莫司的溶解度相对较低，而DMSO的凝固点相对较低，为19℃，这两种溶剂单独使用时不适合作为原料药溶剂。令人惊讶的是，在本文所述的配方中，由DMSO和碳酸丙烯酯组成的溶剂系统有效溶解了活性成分并保持了其稳定性。

实施例9通过评估异构体C和赛科-拉帕霉素浓度对稳定性的影响，优化西罗莫司软膏中DMSO和碳酸丙烯酯的比例

表9.

西罗莫司软膏制剂中碳酸丙烯酯和DMSO的比例得到了进一步评估，结果如表9所列。在最终配方中，DMSO和碳酸丙烯酯的比例为2.5％:2.5％；1.0％:4.0％；5.0％:5.0％和0.5％:4.0％(w/w)，将API溶解在上述溶剂系统中，在10周内不同条件下评价其稳定性。DMSO:碳酸丙烯酯比例为0.5％:4％的配方(0928-1和0928-2)显示出最佳的稳定性，在25℃/60％RH下储存10周，赛科-拉帕霉素小于0.5％，异构体C小于3％。西罗莫司软膏的HPLC色谱图显示了西罗莫司、塞科-拉帕霉素和异构体C的数量，如图1所示。

本领域技术人员可以理解本发明并不局限于已经特别展示和描述的内容。本发明的范围由后附的权利要求书界定。上述描述应理解为只代表了实施例的说明性例子。该描述并未试图详尽地列举所有可能的变化。替代实施例可能并未针对本发明的特定部分提出，可能是由所描述的部分的不同组合产生，或者其他未描述的替代实施例可能适用于某个部分，这不应视为对这些替代实施例的否定。可以理解的是，那些未描述的实施例中有许多是在以下权利要求的字面范围内，而其他则是等同的。

Claims

1.一种用于局部输送治疗剂的制剂，包括：

一种mTOR抑制剂，按重量计，在制剂中的含量约为0.01％至约5％，和

一种溶剂，按重量计，在配方中的含量约为1％-20％，

其中，溶剂能够溶解mTOR抑制剂，2个月内配方中少于4％的mTOR抑制剂降解或转化为不同的异构体。

2.根据权利要求1所述制剂，其中mTOR抑制剂选自西罗莫司、依维莫司、他克莫司、吡美莫司、阿糖胞苷和其药学上可接受的盐组成的组。

3.根据权利要求1所述制剂，其中mTOR抑制剂是西罗莫司。

4.根据权利要求1所述制剂，其中mTOR抑制剂的重量范围为约0.05％至约3％。

5.根据权利要求1所述制剂，其中溶剂的重量范围为约2％至约10％。

6.根据权利要求1所述制剂，其中溶剂选自N-甲基-2-吡咯烷酮(NMP)、二甲亚砜(DMSO)、二甲基异山梨醇(DMI)、丙二醇、甘油、碳酸丙烯酯及其任何组合。

7.根据权利要求6所述制剂，其中溶剂选自碳酸丙烯酯、DMSO及其任意组合组成的组。

8.根据权利要求6所述制剂，其中mTOR抑制剂是西罗莫司，并且其中mTOR抑制剂和溶剂的比例为约1:10至1:25。

9.根据权利要求1所述制剂，其中mTOR抑制剂是西罗莫司，其中溶剂包括DMSO和碳酸丙烯酯和NMP中的至少一种，条件是碳酸丙烯酯和NMP中的至少一种占溶剂重量的50％以上。

10.根据权利要求1所述制剂，其中mTOR抑制剂是西罗莫司，溶剂基本上由DMSO和碳酸丙烯酯组成。

11.根据权利要求10所述制剂，其中DMSO和碳酸丙烯酯的比例为约1:5至约1:10。

12.权利要求1所述制剂进一步包括一种或多种药学上可接受的载体，这些载体选自由表面活性剂、聚合增稠剂、润肤剂、乳化剂、缓冲剂、渗透增强剂和软膏基质组成的组。

13.根据权利要求12所述制剂，其中表面活性剂是一种聚合物，其用量为制剂重量的0.1％至10％。

14.根据权利要求12所述制剂，其中表面活性剂是辛酰己基聚氧乙烯-8甘油酯，其用量为制剂重量的1％到10％。

15.根据权利要求12所述制剂，其中增稠剂是聚合物，其用量为制剂重量的约0.1％到10％。

16.根据权利要求12所述制剂，其中增稠剂是甘油二酯，其用量为制剂重量的约1％到10％。

17.根据权利要求12所述制剂，其中软膏基质在制剂中的重量范围为约20％到约90％。

18.根据权利要求12所述制剂，其中润肤剂选自矿物油、聚二甲基硅氧烷、甘油、棕榈酸异丙酯、丙二醇、凡士林、棕榈蜡、鲸蜡醇、鲸蜡酯、乳化蜡、水合羊毛脂、羊毛脂、羊毛脂醇、微晶蜡、石蜡、硬脂酸、硬脂醇、白蜡、黄蜡、角鲨烷及其任何组合。

19.根据权利要求1所述制剂，该制剂可以是溶液、泡沫、喷雾、凝胶、软膏、乳膏或气雾剂。

20.根据权利要求1所述制剂，该制剂为软膏。

21.根据权利要求1所述制剂，其中mTOR抑制剂是西罗莫司，少于约5％的西罗莫司在约6个月内从异构体B转换为异构体C。

22.根据权利要求1所述制剂，其中mTOR抑制剂是西罗莫司，大约2周内少于2％的西罗莫司从异构体B转化为异构体C。

23.根据权利要求1所述制剂，其中mTOR抑制剂是西罗莫司，其中少于0.2％的西罗莫司在大约2周内降解为塞科-拉帕霉素。

24.一种治疗局部疾病的方法，包括将治疗有效量的权利要求1所述制剂施用于有需要的受试者的患病皮肤区域。

25.根据权利要求24所述方法，其中所述局部疾病选自：血管纤维瘤、特应性皮炎、先天性白内障、前葡萄膜炎、酒渍、移植物抗宿主引起的口腔粘膜病、口腔扁平苔藓、皮肤T细胞淋巴瘤、非黑色素瘤性皮肤癌、Sturge-Weber综合症、多发性内分泌肿瘤1型(MEN1)、Birt-Hogg-Dubé综合征(BHDS)、克罗恩病、白癜风、外阴苔藓、春季角膜结膜炎、皮肤红斑狼疮、严重脂溢性皮炎、银屑病、过敏性结膜炎、结节性荨麻疹、溃疡性结肠炎、白癣、寻常型银屑病、慢性手部皮炎、卡波西氏肉瘤和血管瘤。

26.根据权利要求24所述制剂，其中mTOR抑制剂是西罗莫司。

27.一种制备权利要求1所述制剂的方法，包括：

(a)将mTOR抑制剂溶解在溶剂中，形成溶液；且

(b)将该溶液与一种或多种药学上可接受的载体混合。

28.根据权利要求27所述方法，其中一种或多种药学上可接受的载体包括选自白软膏、黄软膏、十六烷基酯蜡、石蜡、凡士林、白乳胶、白蜡、黄蜡及其任何组合的软膏基质。

29.根据权利要求27所述方法，其中溶剂选自N-甲基-2-吡咯烷酮(NMP)、二甲亚砜(DMSO)、二甲基异山梨醇、丙二醇、碳酸丙烯酯及其任何组合。

30.根据权利要求27所述方法，其中溶剂包括DMSO和碳酸丙烯酯和NMP中的至少一种，条件是碳酸丙烯酯和NMP中的至少一种占溶剂重量的50％以上。

31.根据权利要求27所述方法，其中mTOR抑制剂是西罗莫司，溶剂基本上由DMSO和碳酸丙烯酯组成。

32.根据权利要求31所述方法，其中DMSO和碳酸丙烯酯的比例为约1:5至约1:10。