CN115957332A - 透明质酸酶稳定的布瑞诺龙纳米晶及其制备方法与应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种透明质酸酶稳定的布瑞诺龙纳米晶及其制备方法与应用，包括透明质酸酶和布瑞诺龙，透明质酸酶为稳定剂，布瑞诺龙通过透明质酸酶的界面吸附稳定形成纳米晶；该纳米晶通过溶剂挥干法制备，透明质酸酶的加入可使布瑞诺龙在水溶液中以纳米形式存在，并避免结晶长大与沉淀。本发明将难溶药物布瑞诺龙在透明质酸酶的吸附稳定下制成纳米晶的形式，无需加入常规倍他环糊精钠等助溶剂，即可实现在注射液中的稳定分散溶解，这极大的避免了助溶剂对于人体的肾毒性，提高了制剂的生物安全性；同时，透明质酸酶能够使皮肤中的透明质酸低分子化，提高组织的通透性，促进药物吸收，为布瑞诺龙的注射给药提供一种新的皮下给药形式。

Description

透明质酸酶稳定的布瑞诺龙纳米晶及其制备方法与应用

技术领域

本发明涉及纳米材料和药物制剂技术领域，具体涉及一种透明质酸酶稳定的布瑞诺龙纳米晶及其制备方法与应用。

背景技术

产后抑郁症(postpartum depression，PPD)是女性产褥期可能会出现的严重精神综合征，临床表现为明显的情绪低落，对新生儿冷落及食欲减退、难以入睡、注意力不集中、严重乏力、行动不便和丧失自信等与抑郁相关症状，PPD不但会对母亲自身的身心健康产生显著影响，使之常危险地进行各种日常活动或照顾自己及新生婴儿，是孕产妇产后自杀的首要原因，PPD也会对儿童的认知、社会情感和健康产生长期影响。流行病学显示全球PPD患者有3亿例，发达国家抑郁症患病率为7％～40％，我国患病率为1.1％～52.1％，平均为14.7％，具有较高的发病率。

目前尚不清楚PPD的确切病理生理学，但在患有PPD的女性中，神经活性类固醇波动和减少可能因此使产妇易受到PPD的影响。别孕烯醇酮(Allopregnalone)为一种人体自然存在神经活性类固醇，由女性黄体酮激素代谢生成的产物，具有突触和突触外γ-氨基丁酸A型受体(GABAA受体)阳性变构调节活性，通过使GABAA受体钙通道更频繁、更长久地打开从而增强γ-氨基丁酸(GABA)这一人体内主要的抑制性神经递质在此类受体中的活性，进而抑制大脑神经元产生神经冲动的作用，有效地恢复PPD。

人工合成的别孕烯醇酮称为布瑞诺龙(Brexanolone)，通过促进阳性变构调节作用促使GABAA受体恢复调节作用，使GABAa受体水平和表达在产后逐渐恢复正常。布瑞诺龙治疗PPD的新机制尚不完全清楚，但可能与潜在的病理生理学直接相关，而与其他抗抑郁药物的药理作用完全不同。布瑞诺龙为降低产妇受PPD的影响发挥积极的作用。

2019年3月19日，FDA通过优先审评和突破性疗法程序批准了Sage生物制药公司研发的布瑞诺龙注射液上市，商品名

用于治疗成人产后抑郁症(PPD)。

成为首款获得批准的治疗PPD的新药其结构式如下：

布瑞诺龙为难溶性药物，口服生物利用度极低，Sage公司通过磺丁基醚β-环糊精的包合增溶作用将其制成静脉注射液。

为一种无菌、无色透明且不含防腐剂的溶液，每单剂量西林瓶中含有注射液20mL，其中每mL中含布瑞诺龙5mg、磺丁基醚β-环糊精250mg、一水柠檬酸0.265mg、二水柠檬酸钠2.57mg和注射用水。由于布瑞诺龙为难溶性，磺丁基醚β-环糊精作为助溶剂的用量达到了布瑞诺龙的5倍，而磺丁基醚β-环糊精价格较为昂贵，在静脉注射液中大量使用无疑极大的提高了布瑞诺龙注射液的成本。同时，环糊精类助溶材料会导致肝损伤和肾损伤，环糊精在肾小管浓缩并重吸收，会与细胞结构发生相互作用并从中提取胆固醇和其他脂质膜组分，并且环糊精类材料对血管有强烈的刺激性。虽然多种处方中包含磺丁基-β-环糊精的上市药物在临床研究中表明了可以减少正常人肾损伤的风险，但对于肾功能不全或低下者还是有着极大的风险，并且未完全解决血管的刺激性问题，在输入部位局部可能会出现红斑、外渗、疼痛及蜂窝组织炎。

静脉给药的布瑞诺龙注射液

静脉输注直接入血，偶尔有过度镇静或突然意识丧失的不良反应，因此FDA在其说明书中进行黑框警示，提醒患者必须住院给药，以保证能监测患者是否过度镇静和突然意识丧失。布瑞诺龙注射液

临床使用时有严格的要求，患者躺在病床上在监测下连续输注60个小时，在此期间无法和刚出生的孩子在一起，这对新成为母亲的女性来说，要如此长时间的用药且必须暂时离开自己刚出生的孩子，无论是在身体上还是心理上都是个极大的挑战。

的原研公司在专利CN201580060650、CN201680046705中公开了别孕烯醇酮(即布瑞诺龙)的静脉给药制剂，该发明的制剂也存在静脉给药前溶液配制和给药方案繁琐的问题。

皮下给药途径(SC)，可有效地结合了口服和其他肠外途径给药的优点，SC给药易于进行，对护理人员要求更少，它可以在不同的环境下输注液体或推注药物制剂。与静脉途径相比，SC途径中血栓形成和导管感染的风险较低。与IM途径不同，SC给药并不受抗凝治疗的禁忌。此外，SC途径对患者的活动能力几乎没有影响。然而，人体皮肤中大量存在一种被称为糖胺聚糖透明质酸的物质，其在真皮层下方形成一种高度水合的粘性凝胶样物质，可以限制水分及其它细胞外物质的扩散，同时作为润滑剂维持细胞结构和弹性方面发挥重要作用，但此种作用同时也阻碍了皮下(SC)大量液体的流动，限制了皮下给药的给药体积和速率，一般皮下注射给药量小于2mL，这极大限制了布瑞诺龙的给药方式的拓展。

鉴于现今全球唯一获准上市的治疗产后抑郁症的布瑞诺龙注射液

所存在的一些不足，临床上亟需开发一种生物安全性更高、成本更低且能实现皮下给药的布瑞诺龙的新制剂，大幅度缩短给药时间，为重性抑郁症(MDD)或产后抑郁症(PPD)提供更加安全和方便的治疗手段。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明提出了一种透明质酸酶稳定的布瑞诺龙纳米晶及其制备方法与应用，难溶性的布瑞诺龙通过透明质酸酶的界面吸附稳定，形成稳定的布瑞诺龙纳米晶，实现了布瑞诺龙以纳米晶形式的溶解分散；同时，透明质酸酶还能够催化真皮层中透明质酸的降解，暂时消除SC给药屏障，降低SC空间的粘度，从而实现布瑞诺龙的皮下给药。

为实现上述目的，本发明首先提供了一种透明质酸酶稳定的布瑞诺龙纳米晶，包括透明质酸酶和布瑞诺龙，所述透明质酸酶为稳定剂，所述布瑞诺龙溶解后加入所述透明质酸酶的溶液中，所述布瑞诺龙通过透明质酸酶的界面吸附稳定形成纳米晶分散液，所述纳米晶分散液进行冷冻干燥得到透明质酸酶稳定的布瑞诺龙纳米晶。

作为优选，以活性成分重量计算，所述纳米晶分散液中布瑞诺龙含量为0.5～3mg/mL、透明质酸酶含量为5～10mg/mL。

作为优选，所述布瑞诺龙纳米晶粒径为100～150nm，所述透明质酸酶为重组人透明质酸酶。

基于一个总的发明构思，本发明还提供一种透明质酸酶稳定的布瑞诺龙纳米晶的制备方法，包括以下步骤：

(1)将布瑞诺龙溶解于有机溶剂中，充分搅拌；

(2)将透明质酸酶溶解于水中，充分搅拌；

(3)在搅拌条件下，将(1)溶液逐滴加入至(2)溶液中，然后挥干有机溶剂，即得到布瑞诺龙纳米晶分散液；

(4)将(3)中得到的布瑞诺龙纳米晶分散液进行冷冻干燥，即得透明质酸酶稳定的布瑞诺龙纳米晶。

作为优选，所述有机溶剂为丙酮，所述布瑞诺龙溶液和透明质酸酶水溶液的混合比为1:1。

基于一个总的发明构思，本发明还提供了一种透明质酸酶稳定的布瑞诺龙纳米晶在制备治疗重性抑郁症(MDD)或产后抑郁症(PPD)布瑞诺龙皮下注射药物中的应用。

作为优选，所述布瑞诺龙皮下注射药物为冻干粉针剂或注射液。

作为优选，所述布瑞诺龙皮下注射药物包括所述布瑞诺龙纳米晶、缓冲剂、pH调节剂，所述布瑞诺龙纳米晶的含量为5～35mg/mL。

作为优选，所述缓冲剂为磷酸盐、醋酸盐、枸橼酸盐、乳酸盐、酒石酸盐或L-组氨酸盐酸盐中一种或多种，所述pH调节剂选自盐酸、氢氧化钠、枸橼酸、磷酸、乳酸、酒石酸中的一种或多种，所述pH调节剂调节体系最终的pH值为5.5±2.0。

作为优选，所述布瑞诺龙皮下注射药物的制备方法包括：

S1、将缓冲剂加入到注射用水中，充分搅拌使溶解；

S2、将所述布瑞诺龙纳米晶加入到步骤S1形成的体系中，搅拌或超声分散；

S3、用pH调节剂调节步骤S2形成的体系的pH值，过滤除菌；

S4、将步骤S4中过滤除菌后的料液进行无菌灌装得到注射液或进行冷冻干燥得无菌冻干粉针。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

1、本发明提供的透明质酸酶稳定的布瑞诺龙纳米晶，以透明质酸酶为稳定剂，透明质酸酶的加入可使布瑞诺龙在水溶液中稳定的以纳米颗粒形式存在，并避免结晶长大与沉淀，能够实现将难溶性的布瑞诺龙均匀分散，无需使用环糊精类助溶剂，将布瑞诺龙以纳米晶的形式分散后稳定性高，避免了环糊精类助溶剂可能带来的肾毒性问题，生物安全性得到了明显提高，尤其是针对肾功能不全患者，显著降低了其用药安全问题；同时，使用该透明质酸酶稳定的布瑞诺龙纳米晶来制备布瑞诺龙纳米晶注射液，相比于目前市场上的布瑞诺龙注射液

布瑞诺龙纳米晶注射液无需使用价格昂贵的磺丁基醚β-环糊精，显著降低了生产成本。

2、本发明提供的透明质酸酶稳定的布瑞诺龙纳米晶，使用了透明质酸酶为稳定剂，透明质酸的加入同时还可以催化酶解皮下(SC)富含的透明质酸(HA)，提高皮下组织的通透性，可以直接使用该布瑞诺龙纳米晶与缓冲剂、pH调节剂等制得布瑞诺龙的皮下注射液，其注射体积可以达到常规皮下注射体积的5～10倍，该布瑞诺龙的皮下注射液能够保证布瑞诺龙的治疗剂量，该皮下注射液注入皮下后形成药物储库，可以缓慢平稳地吸收入体循环，与已获批上市的布瑞诺龙静脉给药注射剂相比，该皮下注射液的生物利用度没有明显变化，避免了上市产品在临床使用时严格的使用限制(如必须住院在监测下连续给药60小时)，为布瑞诺龙的注射给药提供一种新的皮下给药形式，给药更加方便快捷。

3、本发明的布瑞诺龙纳米晶使用溶剂挥干法制备，制备方法简单可靠，制得的布瑞诺龙纳米晶粒径为100～150nm，既能很好的稳定分散不聚集，同时该粒径大小能较好的通过皮下组织的屏障而进入体内循环。

4、使用布瑞诺龙纳米晶制备布瑞诺龙皮下注射液，仅需使用常规注射用水、缓冲剂和pH调节剂即可，配方简单，制备过程简化，也可以进一步降低制剂成本。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为本发明实验例1中布瑞诺龙纳米晶的透射电镜图；

图2为本发明实验例1中检测获得的布瑞诺龙纳米晶的粒径图；

图3为本发明实验例2中布瑞诺龙纳米晶与布瑞诺龙的溶解效果图，其中图3A为布瑞诺龙直接溶解图，图3B为布瑞诺龙纳米晶溶解图；

图4为本发明实验例2中布瑞诺龙纳米晶放置后粒径变化趋势图；

图5为本发明实验例5中药时曲线图；

图6为本发明实验例6中动物皮下注射本发明的布瑞诺龙注射液后皮肤切片图，其中图6A为未给药动物的皮肤切片图，图6B为皮下注射给药后动物的皮肤切片图。

具体实施方式

为使本发明要解决的技术问题、技术方案和优点更加清楚，下面将结合附图及具体实施例进行详细描述。

以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。在不背离本发明精神和实质的情况下，对本发明方法、步骤或条件所作的修改或替换，均属于本发明的范围。

若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段；若未特别指明，实施例中所用试剂均为市售。

实施例1

布瑞诺龙纳米晶的制备

将重组人透明质酸酶溶解于纯水中配制10mg/mL的重组人透明质酸酶溶液；将布瑞诺龙溶解于丙酮溶液配制成3mg/mL的布瑞诺龙溶液，并在磁力搅拌下，将布瑞诺龙溶液逐滴滴加至重组人透明质酸酶的水溶液中，布瑞诺龙溶液与重组人透明质酸酶的最终混合体积比为1:1，将混合溶液常温挥干丙酮即得布瑞诺龙纳米晶分散液，将分散液进行冷冻干燥即得布瑞诺龙纳米晶。

实验例1

布瑞诺龙纳米晶的形态与粒径

形态：观察实施例1制得的布瑞诺龙纳米晶的形态，形态的检测方法：样品滴加在覆盖碳膜的400目铜网上，置于干燥箱中，待其自然干燥后置于透射电镜Titan G2-F20下观察，其结果如图1所示，布瑞诺龙纳米晶呈球形结构，粒径小于200nm。

粒径检测：检测布瑞诺龙纳米晶的粒径，测量方法为：取实施例1制得的布瑞诺龙纳米晶分散液置于Marlven Nano ZS仪器，采用动态光散射法检测粒径，测定池温度设定为25℃，每个样品平行操作3份，其结果如图2所示。从图2的结果可知：布瑞诺龙纳米晶的粒径约100～150nm，粒径均一，分散性好。

实验例2

布瑞诺龙纳米晶的溶解性与稳定性

将实施例1制得的布瑞诺龙纳米晶加水溶解分散，同时将布瑞诺龙直接与水混合作为对照，结果如图3所示，图3A为布瑞诺龙直接溶解图，图3B为布瑞诺龙纳米晶溶解图。由图3可知，当布瑞诺龙与水溶液混合后，布瑞诺龙不溶解，沉淀至溶液底部；而如果布瑞诺龙在透明质酸酶的稳定下以纳米晶的形式存在，则布瑞诺龙纳米晶可在水溶液中以纳米形式存在，且分散性和均一性良好。

将上述布瑞诺龙纳米晶的水溶液置于阴凉干燥处静置，在溶解后1h、1d、3d和5d分别检测溶液中布瑞诺龙纳米晶的粒径，结果如图4所示。由图4结果可知，在透明质酸酶的稳定下，布瑞诺龙纳米晶稳定性良好，放置粒径稳定，在透明质酸酶的作用下能够有效避免结晶长大与沉淀。

实施例2

1、布瑞诺龙皮下注射液的配方如表1所示。

表1布瑞诺龙皮下注射液的配方一

2、布瑞诺龙皮下注射液的制备方法，包括如下步骤：

(1)将5.88g枸橼酸钠加入到0.8L注射用水中，充分搅拌使溶解；

(2)将10g实施例1制得的布瑞诺龙纳米晶加入到步骤(1)形成的体系中，搅拌使溶解，补加注射用水至2L；

(3)加入枸橼酸调节体系pH值至5.6，过滤除菌。

(4)将过滤除菌后的料液进行无菌灌装得到布瑞诺龙皮下注射液。

实施例3

1、布瑞诺龙皮下注射液的配方如表2所示。

表2布瑞诺龙皮下注射液的配方二

2、布瑞诺龙注皮下射液的制备方法，包括如下步骤：

(1)将58.82g枸橼酸钠加入到配方量4L注射用水中，充分搅拌使溶解；

(2)将50g布瑞诺龙纳米晶加入到步骤(1)形成的体系中，搅拌使溶解，补加注射用水至10L，搅拌均匀；

(3)向步骤(2)的体系中枸橼酸调节体系pH值至4.5，过滤除菌。

(4)将过滤除菌后的料液进行无菌灌装得到布瑞诺龙皮下注射液。

实施例4

1、布瑞诺龙皮下注射用冻干粉针的配方如表3所示。

表3瑞诺龙注射用冻干粉针配方

2、布瑞诺龙皮下注射用冻干粉的制备方法，包括如下步骤：

(1)将8.824g枸橼酸钠加入到配方量400ml注射用水中，充分搅拌使溶解；

(2)将10g布瑞诺龙纳米晶加入到步骤(1)形成的体系中，超声使其溶解，补加注射用水至1L；

(3)向步骤(2)的体系中加入枸橼酸调节体系pH值至5.0，过滤除菌；

(4)将过滤除菌后的料液进行冷冻干燥，得冻干粉针。

实验例3

布瑞诺龙皮下注射剂稳定性的考察

本品长期贮藏条件为2～8℃，按照中国药典稳定性指导原则，加速试验条件为25℃。以性状、溶液pH值、不溶性微粒，有关物质和透明质酸酶活性为质量指标考察实施例中的产品在加速条件下放置6个月的稳定性情况，其中实施例4为冻干粉针产品，用0.9％氯化钠注射液复溶后使用。

其中透明质酸酶活性的测定方法参考文献《王晓玉，刘飞，张莉等。重组人透明质酸酶3种活性测定方法的比较[J].食品与药品，2011，13(1)：4》中的DNS法进行。

实施例2～实施例4中制得的布瑞诺龙皮下注射剂的稳定性情况分别如表4～表6所示。

表4实施例2产品在加速条件下稳定性情况

表5实施例3产品在加速条件下的稳定性情况

表6实施例4产品在加速条件下的稳定性情况

由表4～表6的结果可知，本发明制备的布瑞诺龙注射剂在加速25℃条件下放置6个月，其性状，pH值、不溶性微粒、有关物质及透明质酸酶活性等考察指标均无明显变化，说明制得的样品的稳定性良好。

实验例4

布瑞诺龙皮下注射剂药代动力学的考察

在哥廷根小型猪中分别静脉注射市售品布瑞诺龙注射液

和皮下注射实施例2中制得的布瑞诺龙注射剂样品，以考察二者在哥廷根小型猪体内的药代动力学情况。

健康成年雌性小型猪6只(体重28.8kg～30.3kg)，随机分为试验组和对照组，每组3只。采用两制剂单剂量两周期交叉给药试验设计，两周期之间的清洗期为5天。试验前禁食12h，禁食期间不禁水，对照组动物耳静脉注射布瑞诺龙注射液

给药速度2ml/min，试验组动物腹部皮下注射实施例1中的样品，给药速度2ml/min。分别于给药前和药后0.5、1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5、5.5、6、7、8、10、12、24、48小时自动物耳静脉采血1ml，置肝素钠抗凝管中混匀，12000rpm离心3min，取0.4ml血浆，加8μl 5％(v/v)三乙胺水溶液混匀，-20℃冻存待检。对照组和试验组的药时曲线如图5所示，两组的药代动力学数据如表7所示。

表7对照组和试验组药代动力学数据

由图5和表7的试验结果可知，两种给药途径的生物利用度(AUC)基本一致，但皮下给药的试验组C_max较静脉给药的对照组下降约30％，T_max由静脉给药时的0.521h后移至约4.524h。

两组动物均未见明显不良反应，试验组注射部位未见明显异常。

因此，布瑞诺龙的皮下给药途径可以成为其静脉给药的上市产品的良好替代。

实验例5

考察布瑞诺龙注射液皮下注射给药的情况

在哥廷根小型猪腹部皮下分别注射20mL实施例2中含透明质酸酶的布瑞诺龙注射液和20mL市售品布瑞诺龙注射液

结果显示，小型猪腹部皮下注射实施例1样品时，20ml注射液在5分钟左右即给药完毕，注射部位无任何异常反应，动物也无任何不适反应。

小型猪腹部皮下注射布瑞诺龙注射液

样品时，样品溶液难以注入皮下，5分钟推注入约5ml即无法再注入，注射部位肿胀，且动物因疼痛而躁动不安。

由此可见，采用透明质酸稳定的布瑞诺龙纳米晶制得的皮下注射液，其皮下给药的速度得到了极大的提升，皮下注射量可以达到20mL，而常规皮下注射量最高仅为2mL(不出现明显异常反应)；直接皮下注射市售品布瑞诺龙注射液

最大注射量为5mL，且出现明显的肿胀异常反应。本发明的布瑞诺龙纳米晶皮下注射液的注射量可以达到常规用量最大值的10倍，而且无任何不良反应，能够有效避免皮下给药的剂量限制。

实验例6

考察布瑞诺龙注射液皮下注射给药安全性

在哥廷根小型猪腹部皮下注射实施例2中含透明质酸酶的布瑞诺龙注射液，观察注射部位皮肤是否发生病理改变，并取注射部位附近未给药的皮肤作为观察对照，结果如图6所示。图6A为未给药动物的皮肤切片图，图6B为皮下注射给药后动物的皮肤切片图，结果显示：与未给药动物部位皮肤(图6A)相比，含透明质酸酶的布瑞诺龙注射液皮下给药后皮肤未发生改变，角质层完整，真皮网织层含大量弹性纤维，毛囊和皮脂腺正常(图6B)，说明本发明的布瑞诺龙注射液皮下给药无刺激性，不会引起给药部位皮肤的病理改变。

以上所述实施例，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明的技术范围内，根据本发明的技术方案及其构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围内。

Claims (10)

1.一种透明质酸酶稳定的布瑞诺龙纳米晶，其特征在于，包括透明质酸酶和布瑞诺龙，所述透明质酸酶为稳定剂，所述布瑞诺龙溶解后加入所述透明质酸酶的溶液中，所述布瑞诺龙通过透明质酸酶的界面吸附稳定形成纳米晶分散液，所述纳米晶分散液进行冷冻干燥得到透明质酸酶稳定的布瑞诺龙纳米晶。

2.根据权利要求1所述的透明质酸酶稳定的布瑞诺龙纳米晶，其特征在于，以活性成分重量计算，所述纳米晶分散液中布瑞诺龙含量为0.5～3mg/mL、透明质酸酶含量为5～10mg/mL。

3.根据权利要求1所述的透明质酸酶稳定的布瑞诺龙纳米晶，其特征在于，所述布瑞诺龙纳米晶粒径为100～150nm，所述透明质酸酶为重组人透明质酸酶。

4.一种如权利要求1～3任一项所述的透明质酸酶稳定的布瑞诺龙纳米晶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将布瑞诺龙溶解于有机溶剂中，充分搅拌；

(2)将透明质酸酶溶解于水中，充分搅拌；

(3)在搅拌条件下，将(1)溶液逐滴加入至(2)溶液中，然后挥干有机溶剂，即得到布瑞诺龙纳米晶分散液；

(4)将(3)中得到的布瑞诺龙纳米晶分散液进行冷冻干燥，即得透明质酸酶稳定的布瑞诺龙纳米晶。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述有机溶剂为丙酮，所述布瑞诺龙溶液和透明质酸酶水溶液的混合比为1:1。

6.一种如权利要求1～3任一项所述的透明质酸酶稳定的布瑞诺龙纳米晶或如权利要求4～5任一项制备方法制备的透明质酸酶稳定的布瑞诺龙纳米晶在制备治疗重性抑郁症(MDD)或产后抑郁症(PPD)布瑞诺龙皮下注射药物中的应用。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述布瑞诺龙皮下注射药物为冻干粉针剂或注射液。

8.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述布瑞诺龙皮下注射药物包括所述布瑞诺龙纳米晶、缓冲剂、pH调节剂，所述布瑞诺龙纳米晶的含量为5～35mg/mL。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述缓冲剂为磷酸盐、醋酸盐、枸橼酸盐、乳酸盐、酒石酸盐或L-组氨酸盐酸盐中一种或多种，所述pH调节剂选自盐酸、氢氧化钠、枸橼酸、磷酸、乳酸、酒石酸中的一种或多种，所述pH调节剂调节体系最终的pH值为5.5±2.0。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述布瑞诺龙皮下注射药物的制备方法包括：

S1、将缓冲剂加入到注射用水中，充分搅拌使溶解；

S2、将所述布瑞诺龙纳米晶加入到步骤S1形成的体系中，搅拌或超声分散；

S3、用pH调节剂调节步骤S2形成的体系的pH值，过滤除菌；

S4、将步骤S4中过滤除菌后的料液进行无菌灌装得到注射液或进行冷冻干燥得无菌冻干粉针。

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