CN115919918A - 一种丝瓜醇沉提取物的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种丝瓜醇沉提取物的应用,涉及药物领域。本发明提供了一种丝瓜醇沉提取物在治疗口腔黏膜溃疡疾病中的应用,该丝瓜醇沉提取物为丝瓜榨汁后醇沉得到的提取物。该丝瓜醇沉提取物能够以单方制剂的形式,应用于治疗口腔黏膜溃疡疾病,且治疗效果较好。
Description
技术领域
本发明涉及药物领域,特别是涉及一种丝瓜醇沉提取物的应用。
背景技术
人口腔黏膜溃疡疾病以复发性阿弗他溃疡、创伤性溃疡、白塞病以及放射性口炎为常见,其临床上表现多为溃疡形成,也就是口腔黏膜上皮的局限性组织缺损、结缔组织暴露,其内富含神经血管,因此溃疡形成后往往疼痛异常,影响患者精神状态、饮食以及正常生活。口腔溃疡发病原因及致病机制尚不完全清楚,可能与人体免疫因素、环境因素、感染因素等有关。目前,临床上常用的治疗方法主要为抗菌疗法、抗炎疗法、免疫调节治疗、麻醉以及另类疗法等,但疗效均不显著。已有的用于治疗口腔黏膜溃疡的药物,多为复方制剂,制备过程较繁琐。
发明内容
针对上述问题,本发明提供一种丝瓜醇沉提取物在治疗口腔黏膜溃疡疾病中的应用,该丝瓜醇沉提取物能够以单方制剂的形式,应用于治疗口腔黏膜溃疡疾病,且治疗效果较好。
为了达到上述目的,本发明提供了一种丝瓜醇沉提取物在治疗口腔黏膜溃疡疾病中的应用,该丝瓜醇沉提取物为丝瓜榨汁后醇沉得到的提取物。
本发明人在研究过程中发现,过往用于治疗口腔黏膜溃疡疾病的药物多为复方制剂,制备过程较繁琐,前期研究发现,丝瓜富含三萜及皂苷类、黄酮和酚类、油脂和有机酸类以及蛋白质等多种化学成分,具有利尿消肿、抗炎镇痛、降糖降脂、抗氧化、免疫调节和抗癌等药理作用。本发明通过对苹果丝瓜全果榨汁后醇沉得到的提取物进行实验,发现其既有较好的抗菌活性,也具有较佳的抗炎活性。并且通过口腔溃疡动物模型实验和口腔溃疡人群试用调查则进一步显示,该丝瓜醇沉提取物对口腔溃疡具有显著的治疗作用。同时,本发明验证了单用丝瓜的醇沉提取物,即可治疗口腔溃疡。
本发明还提供了一种丝瓜醇沉提取物在制备用于治疗口腔黏膜溃疡疾病的药物中的应用,该丝瓜醇沉提取物为丝瓜榨汁后醇沉得到的提取物。
在其中一个实施例中,所述口腔黏膜溃疡疾病包括复发性阿弗他溃疡,创伤性溃疡,白塞病,或放射性口炎。
在其中一个实施例中,所述丝瓜醇沉提取物包括以下成分中的至少1种:三萜,皂苷,或黄酮。
在其中一个实施例中,所述药物包括药学上可接受的辅料和所述丝瓜醇沉提取物。
在其中一个实施例中,所述药物为口含片、糖丸或喷剂。
上述给药方式不仅依从性高,也有利于药用活性成分在口腔局部位置长时间滞留或维持较高的浓度,从而有利于发挥抗病作用。
在其中一个实施例中,所述应用包括外用或口服所述用于治疗口腔黏膜溃疡疾病的药物,所述丝瓜醇沉提取物的每千克体重用量为0.1-300mg。
本发明还提供了一种用于治疗口腔黏膜溃疡疾病的药物,该药物包括药学上可接受的辅料和丝瓜醇沉提取物,所述丝瓜醇沉提取物为丝瓜榨汁后醇沉得到的提取物。
在其中一个实施例中,所述辅料包括以下原料中的至少1种:赋形剂,润滑剂,抗氧剂,防腐剂,黏合剂,填充剂,或增稠剂。
在其中一个实施例中,所述药物的剂型为外用制剂或口服制剂。
本发明还提供一种丝瓜醇沉提取物的制备方法,该制备方法包括以下步骤:
制备丝瓜汁冻干粉:将丝瓜榨汁,进行丝瓜汁冷冻干燥72h,得到丝瓜汁冻干粉;
制备醇沉提取物冻干粉:将丝瓜汁冻干粉溶解于水,搅拌,静置2h,过滤,取滤液;采用体积分数为50%的乙醇溶液对所述滤液进行醇沉,所述醇沉的时间为12h,温度为25℃;取上清液,浓缩旋蒸,所述浓缩旋蒸的温度为45℃,转速为60rpm,真空度为0.09MPa;进行提取物冷冻干燥72h,即得。
采用上述制备方法,能够通过醇沉的方法将丝瓜中的有效成分提取出来,该制备方法整体安全、可靠,无有害于人体的成分参与。
与现有技术相比,本发明具有以下有益效果:
本发明提供一种丝瓜醇沉提取物在治疗口腔黏膜溃疡疾病中的应用,该丝瓜醇沉提取物能够以单方制剂的形式,应用于治疗口腔黏膜溃疡疾病,且治疗效果较好。该丝瓜醇沉提取物的制备方法能通过醇沉的方法将丝瓜中可用于治疗口腔黏膜溃疡疾病的有效成分提取出来,整体安全、可靠,无有害于人体的成分参与,制备简单、工序少,生产效率高。本发明的丝瓜醇沉提取物对口腔黏膜溃疡疾病具有显著的治疗效果,且取自食物丝瓜,无任何毒副作用,可长期安全使用,同时利用该丝瓜醇沉提取物制成的药物,便于患者用药,可采用多种剂型,例如口含片、硬糖、口腔喷剂,缓解症状,解决患者痛苦,疗效显著,费用低廉。
具体实施方式
为了便于理解本发明,下面将参照相关实施例对本发明进行更全面的描述。实施例中给出了本发明的较佳实施例。但是,本发明可以以许多不同的形式来实现,并不限于本文所描述的实施例。相反地,提供这些实施例的目的是使对本发明的公开内容的理解更加透彻全面。
除非另有定义,本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的,不是旨在于限制本发明。
本实施例所用试剂、材料、设备如无特殊说明,均为市售来源;试验方法如无特殊说明,均为本领域的常规试验方法。
实施例1
一种丝瓜醇沉提取物及其制备方法。
1、制备丝瓜汁冻干粉:取2000kg苹果丝瓜进行清洗,晾干水分,再进行破碎榨汁,将榨取的汁液进行冻干,72h后取出冻干粉称重得20kg,得率为1%,密封后放置于-20℃备用。
2、制备醇沉提取物冻干粉:取300g的丝瓜汁冻干粉,溶解于3000ml蒸馏水,充分搅拌后静置2h,过滤去掉滤渣,取滤液,采用体积分数为50%的乙醇溶液对该滤液,在室温(25℃)下醇沉12h,取上清液,将上清液进行浓缩旋蒸(温度为45℃,转速为60rpm,真空度为0.09MPa),得到浓缩液,再对浓缩液进行72h冻干,得到纯化后的醇沉提取物冻干粉119.4g,得率为39.8%。
实施例2
一种丝瓜醇沉提取物口含片。
将实施例1得到的丝瓜醇沉提取物冻干粉,粉碎后过100目筛,取5g,准备柠檬酸2g,蔗糖51g,淀粉60g,糊精80g,通过等量递加法混合均匀,过100目筛。以体积分数为60%的乙醇作粘合剂,过24目筛制粒。在70℃下干燥,每30min翻动1次以加快干燥速度,当手捏时,手感干脆,不粘手,用力捏即可捏碎时,干燥即可结束,再通过20目筛整粒。加润滑剂硬脂酸镁2g,总混。采用压片机,将混合好的原料压制成片,口含片的重量为0.6g,每片含丝瓜醇沉提取物冻干粉15mg。该口含片可用于治疗口腔黏膜溃疡疾病,上述丝瓜醇沉提取物冻干粉的每kg体重用量为0.1-300mg。
实施例3
一种丝瓜硬糖。
将120g的白砂糖、40g的淀粉糖浆与25ml的水导入锅中混匀,溶解后将温度控制在150-160℃内,糖液如细丝条状流下,不易断裂,即熬煮完成。把糖浆放置于室温中冷却至100℃左右,添加4g的实施例1制备得到的丝瓜醇沉提取物冻干粉、0.6g的柠檬酸,进行调和、翻拌,冷却至80℃,倒入模盘后待冷却成型,脱模后用糖果纸进行包装,即得丝瓜硬糖。本实施例的整个制备过程,温度需要高于25℃,相对湿度低于50%。
对比例1
一种口含片。
制备方法和实施例2基本相同,区别之处在于:采用淀粉代替实施例1的丝瓜醇沉提取物冻干粉。
实验例
1、抑菌试验。
(1)样品准备:以生理盐水溶解实施例1方法制备的丝瓜醇沉提取物冻干粉,并稀释成如下表所示3种浓度的丝瓜醇沉提取物水溶液,121℃高压灭菌10min,取各浓度丝瓜醇沉提取物水溶液0.5mL备用。
(2)菌液稀释:用无菌移液枪头取1mL扩培好的原菌液,放入盛有9mL的无菌生理盐水试管中,充分振摇,使菌分散均匀,得到1×10-1稀释液;取上述稀释液1mL同法稀释,得1×10-2稀释液,再同法依次稀释成1×10-3、1×10-4、1×10-5稀释液。
(3)实验组:取上述(2)所述的1×10-5稀释的菌液100μL,加入到上述(1)所述的各个浓度的0.5mL丝瓜醇沉提取物水溶液中,混匀。取上述菌与丝瓜醇沉提取物的混悬液100μL,置于4℃冰箱中静置24h后,均匀涂布在已灭菌的培养皿中的琼脂培养基表面,静置15min,再放在37℃恒温孵育箱中倒置培养24h。
(4)空白组:取上述(2)所述的1×10-5稀释的菌液100μL,加入到0.5mL的无菌生理盐水中,混匀,取100μL置于4℃冰箱中静置24h后,均匀涂布在已灭菌的培养皿中的琼脂培养基表面,静置15min,再放在37℃恒温孵育箱中倒置培养24h。
(5)抑菌率:抑菌率%=[(空白组菌落数-实验组菌落数)/空白组菌落数]×100%。
(6)结果:如表1所示,丝瓜醇沉提取物冻干粉在不同浓度均有一定的抑菌能力,且随着丝瓜醇沉提取物冻干粉浓度的增大,抑菌能力也随之增强。
丝瓜醇沉提取物冻干粉浓度 | 铜绿菌 | 金葡菌 | 白色念珠菌 |
0.003g/mL | 99.6±1.4% | 96.3±3.4% | 91.9±3.1% |
0.03g/mL | 100% | 99.6±3.1% | 98.7±3.8% |
0.3g/mL | 100% | 100% | 100% |
2、动物实验。
(1)动物:8周龄SPF级雄性SD大鼠,体重约180~220g,由广东医科大学实验动物中心提供,动物生产许可证号SCXK(粤)2018-0008。在室温20~25℃,相对湿度45%~65%,12h明暗交替条件下饲养,自由给予水与食物。
(2)药效学研究:取40只大鼠,每只大鼠以10%水合氯醛(3mL/kg)腹腔注射麻醉后固定于操作台上,采用无菌棉球干燥SD大鼠唇侧黏膜,并用无菌棉球隔湿,将3mm×3mm正方形滤纸片置于50%浓度冰醋酸中,5s后取出,立即放置于干燥后的唇侧黏膜上,维持30s后取下滤纸片,用含生理盐水无菌棉球蘸拭处理部位,去除残余醋酸。
冰醋酸烧48h后,将上述口腔溃疡模型大鼠随机分为4组,每组10只,即3个剂量组和1个空白对照组。3个剂量组分别为5mg/kg BW组、10mg/kg BW组、20mg/kg BW组,低、中、高剂量组取受试物实施例1制备得到的丝瓜醇沉提取物冻干粉,用蒸馏水分别配成0.5mg/mL、1mg/mL及2mg/mL的浓度。各组大鼠每日均按10mL/kg BW灌胃给药,空白对照组给予等量蒸馏水。
(3)检测指标:冰醋酸烧后48h,观察记录溃疡形成情况。各组大鼠持续治疗,至溃疡完全愈合,记录大鼠治疗天数,计算溃疡愈合时间,愈合标准为黏膜上皮重新完全覆盖溃疡凹陷。
(5)结果:唇侧黏膜冰醋酸烧48h后,所有大鼠均出现溃疡,表现为中央凹陷、假膜覆盖、溃疡边缘红肿、刺激疼痛反应强烈,呈规则圆形,直径约为5~6mm,提示造模成功。
低、中、高剂量丝瓜醇沉提取物冻干粉治疗组的口腔溃疡平均愈合时间均明显小于空白对照组,且剂量越高愈合时间越短,表明丝瓜醇沉提取物具有良好的治疗口腔溃疡效果。结果如表2所示。
组别 | 愈合时间(d) |
空白对照组 | 10.96±1.23 |
低剂量丝瓜醇沉提取物组 | <![CDATA[6.54±1.08<sup>3)</sup>]]> |
中剂量丝瓜醇沉提取物组 | <![CDATA[6.22±0.99<sup>3)</sup>]]> |
高剂量丝瓜醇沉提取物组 | <![CDATA[5.85±0.82<sup>3)</sup>]]> |
与空白对照组比较:1)为P<0.05,2)为P<0.01,3)为P<0.001
3、人群试用调查。
为检测实施例1得到的丝瓜醇沉提取物的实际使用效果,选取复发性口腔溃疡患者70例进行人群试用调查,年龄18~52岁,近1个月内未经任何药物治疗。
将上述复发性口腔溃疡患者70例随机分成2组,每组35人。具体分组如下:安慰剂组,口服对比例1中的口含片,每日早晚各5粒含服;丝瓜醇沉提取物组,口服实施例2中的片剂,每日早晚各5粒含服。上述两组患者均以7天为一个疗程,治疗两个疗程。
(1)疗效标准。
治疗无效:溃疡无变化,临床症状无变化,或有新发溃疡。
治疗有效:溃疡无疼痛感,溃疡面大部愈合,临床症状减少50%,未有新发溃疡。
治疗痊愈:溃疡无疼痛感,溃疡面愈合,临床症状消失,未有新发溃疡。
(2)统计学方法。
利用SPSS 12.0软件进行统计学分析,计数资料采用X2检验。P<0.05认为差异具有统计学意义。
(3)结果。
人群试用调查结果显示,丝瓜醇沉提取物可促进溃疡面愈合,缓解临床症状并减少新发溃疡,证明丝瓜醇沉提取物具有良好的治疗口腔溃疡效果。结果如下表所示。
表3含服丝瓜醇沉提取物对人口腔溃疡的治疗效果(n=35)
组别 | 有效率 | 痊愈率 |
安慰剂组 | 51.4%(18/35) | 25.7%(9/35) |
丝瓜醇沉提取物组 | <![CDATA[100%(35/35)<sup>3)</sup>]]> | <![CDATA[57.1%(20/35)<sup>3)</sup>]]> |
与安慰剂组比较:1)P<0.05,2)P<0.01,3)P<0.001
(4)部分典型病例。
病例1:刘某,男,24岁,口腔溃疡反复发作多年,疼痛难忍,含服本发明实施例2的丝瓜醇沉提取物口含片,每日早晚各5粒含服7天,痊愈。
病例2:陈某,男,22岁,口腔溃疡三个月,牙龈肿痛,服维生素C和维生素B2效果不佳。含服本发明实施例2的丝瓜醇沉提取物口含片,每日早晚各5粒含服5天,痊愈。
病例3:田某,女,43岁,口腔溃疡反复发作半年,同时伴有牙龈红肿、咽喉疼痛,使用西瓜霜喷剂可缓解症状,但不能治愈。含服本发明实施例2的丝瓜醇沉提取物口含片,每日早晚各5粒含服7天,痊愈。
以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合,为使描述简洁,未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述,然而,只要这些技术特征的组合不存在矛盾,都应当认为是本说明书记载的范围。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式,其描述较为具体和详细,但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是,对于本领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明构思的前提下,还可以做出若干变形和改进,这些都属于本发明的保护范围。因此,本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。
Claims (10)
1.一种丝瓜醇沉提取物在治疗口腔黏膜溃疡疾病中的应用,其特征在于,该丝瓜醇沉提取物为丝瓜榨汁后醇沉得到的提取物。
2.一种丝瓜醇沉提取物在制备用于治疗口腔黏膜溃疡疾病的药物中的应用,其特征在于,该丝瓜醇沉提取物为丝瓜榨汁后醇沉得到的提取物。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述口腔黏膜溃疡疾病包括复发性阿弗他溃疡,创伤性溃疡,白塞病,或放射性口炎。
4.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述丝瓜醇沉提取物包括以下成分中的至少1种:三萜,皂苷,或黄酮。
5.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述药物包括药学上可接受的辅料和所述丝瓜醇沉提取物。
6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述药物为口含片、糖丸或喷剂。
7.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述应用包括外用或口服所述用于治疗口腔黏膜溃疡疾病的药物,所述丝瓜醇沉提取物的每千克体重用量为0.1-300mg。
8.一种用于治疗口腔黏膜溃疡疾病的药物,其特征在于,该药物包括药学上可接受的辅料和丝瓜醇沉提取物,所述丝瓜醇沉提取物为丝瓜榨汁后醇沉得到的提取物。
9.根据权利要求8所述的药物,其特征在于,所述辅料包括以下原料中的至少1种:赋形剂,润滑剂,抗氧剂,防腐剂,黏合剂,填充剂,或增稠剂。
10.根据权利要求8所述的药物,其特征在于,所述药物的剂型为外用制剂或口服制剂。
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