CN115916146A - 白发抑制用组合物及其用途 - Google Patents

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崔允豪
李相和
申载永
金载润
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Abstract

本发明涉及具有优异的抑制白发产生的效果的白发抑制用组合物及其用途。本发明的白发抑制用组合物通过激活Wnt/β‑连环蛋白信号传导途径促进头发中黑色素的合成,从而具有显著优异的抑制、预防、改善、缓解、延迟或治疗白发(白毛症)的效果。

Description

白发抑制用组合物及其用途
技术领域
本发明涉及具有优异的抑制白发产生的效果的白发抑制用组合物及其用途。
背景技术
白发随着头皮老化的进行而产生。白发包括白毛症(灰发症,Canities)和头发灰化(头发变白,Hair Graying)。白发(白毛)根据其程度,使有白发的人看起来比实际年龄要老。头发的颜色变化可被认为是老化的信号,与年龄不符的白发的产生会对个人带来压力,对自尊心产生负面影响。因此,正在进行用于美容上改善白发的各种研究和开发。
即使为了改善白发而进行染发,随着头发的生长,白发也会持续生长,因此染发方法具有效果暂时的缺点。因此,上述染发方法还具有需要定期染发的缺点。另外,常规的氧化型染发剂有可能损伤头皮和皮肤。另外,黑豆或赤何首乌提取物等被用来改善白发,但缺点是效果不足以体感到。
白发产生的主要原因是黑素细胞干细胞(Melanocyte stem cell;MSC)的丢失或黑素细胞(Melanocyte)的生理活性降低。由此,由头发、眉毛或睫毛等的母毛中存在的黑素细胞生成的黑色素(Melanin)的量减少,因此进行头发的白化或灰白化。由黑素细胞生成的黑色素被传递到角质形成细胞(Keratinocyte)中,形成色素沉着的头发(Head hair)或体毛(Body hair)。此时,如果黑色素无法移动到角质形成细胞,则头发的色素会缺乏,从而产生白发。
呈现棕色和黑色的真黑色素(Umelanins)和呈现黄色和红色的类黑色素(Phenomelanins)的量和相对比例对头发和体毛的颜色产生很大的影响。并且已知,酪氨酸酶(Tyrosinase)、DHICA氧化酶(DHICA oxidase,TRP-1)和多巴色素互变异构酶(DOPAchrome tautomerase;TRP-2)的三种酶参与黑色素的生成,并且上述酶的活性会对黑色素的合成产生影响。在上述过程中,酪氨酸酶催化酪氨酸(Tyrosine)氧化成DOPA,并且DOPA氧化成多巴醌(dopaquinone)。称为L-多巴醌(L-Dopaquinone)或o-多巴醌的这种物质是黑色素的前体(precursor)。上述多巴醌在半胱氨酸(cysteine)存在的情况下自然环化(cyclization)成为多巴色素(dopachrome),其通过多巴色素互变异构酶(TRP-2)互变异构形成DHICA。TRP-1氧化上述DHICA,形成醌衍生物。
在上述酶中,酪氨酸酶和TRP-1在毛囊生长周期中的生长期(anagen)期间在毛球(hair bulb)和毛乳头(Dermal papilla)周围的黑素细胞中表达,而在退行期(catagen)和休止期(telogen)期间不表达。
如前所述,白发受黑素细胞和黑素细胞干细胞的影响。另外,如果黑色素细胞减少,则由此黑色素的生成逐渐减少,黑色素的传递减少。这种黑色素的减少在皮肤上还表现为色素性疾病。作为色素性疾病的代表性实例,有白斑症(vitiligo),而作为白斑症的原因之一,有黑素细胞的减少或破坏。而且,作为治疗这种白斑症的方法,Wnt/β-连环蛋白途径的激活被大量研究(Journal of Investigative Dermatology(2015)135,2921-2923)。另外,据报道,如果激活黑素细胞干细胞的Wnt信号传导机制,则头发和表皮黑素细胞(epidermal melanocyte)的色素生成会增加(Cell,Vol 145,Issue 6,10,(2011),941~955)(Medical Research Review(2016),Vol37,issue4,907~945)。
发明内容
技术课题
本发明要解决的课题是提供一种能够有效地抑制白发产生的白发抑制用组合物。
另外,本发明要解决的课题是提供一种上述组合物用于抑制白发产生的用途。
技术方案
本发明的发明人为了发掘能够有效地抑制包括上述白毛症在内的白发的物质,经过不懈的研究努力,其结果,发现了本发明的七叶皂苷(Escin)、27-脱氧升麻亭(27-Deoxyactein)、岩豆素(Lysionotin)、氯化两面针碱(Nitidine chloride)、羊毛甾醇(Lanosterol)、黄杞苷(Engeletin)、特女贞苷(Specnuezhenide)、白花前胡乙素(Praeruptorin B)、罗通酸(Rotunic acid)、胡麻属苷(Sesamoside)、远志皂苷D(Polygalacin D)、地肤子皂苷Ic(Momordin Ic)、氯化缬草素(Valechlorine)、款冬酮(Tussilagone)、杠柳毒苷(Periplocin)、重楼皂苷VII(Polyphyllin VII)或桔梗皂苷D2(Platycodin D2)激活Wnt/β-连环蛋白途径。另外,发现了上述物质具有增加B-16小鼠黑色素瘤细胞中黑色素合成的效果。本发明的发明人确认了当将具有优异的Wnt/β-连环蛋白途径激活效果的上述物质中的任一种以上施用(或涂布)于皮肤时,抑制或改善白发的效果显著优异,从而完成了本发明。
本发明提供一种白发抑制用组合物,其包含选自由七叶皂苷(Escin)、27-脱氧升麻亭(27-Deoxyactein)、岩豆素(Lysionotin)、氯化两面针碱(Nitidine chloride)、羊毛甾醇(Lanosterol)、黄杞苷(Engeletin)、特女贞苷(Specnuezhenide)、白花前胡乙素(Praeruptorin B)、罗通酸(Rotunic acid)、胡麻属苷(Sesamoside)、远志皂苷D(Polygalacin D)、地肤子皂苷Ic(Momordin Ic)、氯化缬草素(Valechlorine)、款冬酮(Tussilagone)、杠柳毒苷(Periplocin)、重楼皂苷VII(Polyphyllin VII)和桔梗皂苷D2(Platycodin D2)组成的组中的一种以上。上述白发抑制用组合物可以包含上述一种以上的物质作为有效成分。
在本发明中,白发的“抑制”可意味着抑制白发的产生量或产生频率,或者抑制由黑发向白发变化或老化的过程。在一个实施例中,白发的“抑制”可意味着通过激活Wnt/β-连环蛋白途径促进头发中黑色素的合成。在一个实施例中,本发明的白发抑制用组合物可以用于白发(白毛症)的抑制、预防、改善、缓解、延迟或治疗等的用途,并且还可以不受限制地用于任何用途,只要是用于改善白发的美容目的即可。上述“预防”可意味着通过施用本发明的组合物延迟白发的产生、生长或增殖进程的所有行为。上述“治疗”可意味着通过施用本发明的组合物抑制白发的生长和增殖来使白发或白毛症好转或有利地改变的所有行为。
在一个实施例中,本发明的白发抑制用组合物可以包含相对于组合物总重量的0.0001至50重量%、优选地0.001至10重量%的上述选自由七叶皂苷(Escin)、27-脱氧升麻亭(27-Deoxyactein)、岩豆素(Lysionotin)、氯化两面针碱(Nitidine chloride)、羊毛甾醇(Lanosterol)、黄杞苷(Engeletin)、特女贞苷(Specnuezhenide)、白花前胡乙素(Praeruptorin B)、罗通酸(Rotunic acid)、胡麻属苷(Sesamoside)、远志皂苷D(Polygalacin D)、地肤子皂苷Ic(Momordin Ic)、氯化缬草素(Valechlorine)、款冬酮(Tussilagone)、杠柳毒苷(Periplocin)、重楼皂苷VII(Polyphyllin VII)和桔梗皂苷D2(Platycodin D2)组成的组中的一种以上。当上述物质的含量小于0.0001重量%时,抑制白发的效果微弱,当超过50重量%时,剂型的稳定性降低,因此不优选。
在一个实施例中,本发明的白发抑制用组合物可以用作医药组合物、医药外品组合物或化妆料组合物。另外,本发明的白发抑制用组合物通常还可以剂型化成可施用于皮肤的任意形式。优选地,本发明的白发抑制用组合物可以剂型化成皮肤外用剂的形式。例如,上述皮肤外用剂剂型可以制备成可施用于皮肤的剂型,例如液状、霜状、膏状或固体状等。另外,本发明的白发抑制用组合物可以作为头发或头皮用组合物或产品提供,例如,可以通过添加常规添加剂制备成用于抑制白发的洗发水、滋补剂(tonic)、头发调理剂(hairconditioner)、发露(hair lotion)、凝胶、发膜、霜、精华液、粉、喷雾、油、皂、液体清洁剂、液体染发剂类型或气溶胶类型等的组合物,但不限于此。在下述本发明的制备例1或2中,将白发抑制用组合物制备成头发滋补剂或发露的剂型。
在一个实施例中,当本发明的白发抑制用组合物是液状时,作为载体成分,可以包含溶剂、溶剂化剂或乳浊化剂等。上述载体成分可以包括选自由例如水、醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1,3-丁基乙二醇油、甘油脂肪族酯、聚乙二醇或脱水山梨糖醇的脂肪酸酯等组成的组中的一种以上。上述醇可以使用通常使用的醇,优选地可以使用线型或分支型的C2-C4一元醇,更优选地可以使用乙醇或异丙醇,但不限于此。
在一个实施例中,当本发明的白发抑制用组合物的剂型是膏、霜或凝胶时,作为载体成分,可以使用动物性油、植物性油、蜡、石蜡、淀粉、黄芪胶、纤维素衍生物、聚乙二醇、硅酮、膨润土、二氧化硅、滑石或氧化锌等。另外,作为上述载体成分,可以使用醇。上述醇优选为异丙醇,但不限于此。
在一个实施例中,当本发明的白发抑制用组合物的剂型是粉或喷雾时,作为载体成分,可以包含乳糖、滑石、二氧化硅、氢氧化铝、硅酸钙或聚酰胺粉。当上述剂型是喷雾时,可以进一步包含推进剂,例如氯氟烃、丙烷/丁烷或二甲醚等。
在一个实施例中,本发明的白发抑制用组合物可以包含通常可用于皮肤外用剂的成分,例如,可以额外地包含选自由水、表面活性剂、保湿剂、低级醇、螯合剂、杀菌剂、抗氧化剂、防腐剂、色素和香料组成的组中的一种以上的添加剂。
在一个实施例中,本发明的白发抑制用组合物可以以直接涂布或喷洒于皮肤等的经皮给药方法使用。上述术语“给药”是指本发明的白发抑制用组合物通过任何适当的方法引入身体内。本发明的白发抑制用组合物的给药途径可以通过任何常规途径给药,只要能够到达靶组织即可。优选地,本发明的白发抑制用组合物可以经皮给药,更优选地可以局部涂布。本发明的白发抑制用组合物的施用次数可以根据处方、需要或目的而决定。
在一个实施例中,本发明的白发抑制用组合物的使用量可以根据年龄或病变的程度等的个体差异或剂型而适当地调节。另外,对于本发明的白发抑制用组合物,优选通常1天1次至数次将适量涂布于头皮,使用1周至数月。在本发明的实验例3中,将白发抑制用组合物(头发滋补剂)每周7次,使用6个月。从上述实验例3的结果来看,确认了与比较例的安慰剂(placebo)对照群相比,在使用上述头发滋补剂时表现出优异的抑制白发的效果。特别是在包含乙醇的剂型中,确认了更高的防止脱发及头发生长的效果。
在一个实施例中,本发明提供一种白发抑制用试剂盒,其包含上述白发抑制用组合物。在另一个方面中,上述试剂盒是指包含预防或治疗白发所需的组合物和附属品的套装。在另一个方面中,上述试剂盒中包含的附属品是为了预防或治疗白发而在本发明所属的技术领域中通常使用的工具或装置等。在另一个方面中,上述试剂盒可以进一步包含服药指示书,该服药指示书公开了选自由上述成分的给药量、给药途径、给药次数和适应症(白毛症)等组成的组中的任一种以上。
在一个实施例中,本发明提供一种抑制白发的方法,包括将白发抑制用组合物施用于对象体。在另一个方面中,上述对象体可以是需要抑制白发的人类。优选地,在上述方法中,上述白发抑制用组合物可以以有效量施用于对象体。上述“有效量”意味着足以抑制、延迟、改善或缓解白发,或者在白发的治疗或管理中提供治疗上或美容上的益处的有效成分的量。上述“有效量”还意味着无论是体外(in vitro)还是体内(in vivo)都足以抑制或减少白发产生的量。上述抑制白发的方法可以通过激活Wnt/β-连环蛋白信号传导途径促进头发中黑色素的合成,从而表现出抑制或改善白发的效果。
在一个实施例中,本发明提供一种用于抑制白发的用途,其特征在于,利用上述白发抑制用组合物。在一个实施例中,上述用途可以包括用于抑制或改善白发的所有用途,例如可以包括医药用途、化妆学用途或美容学用途等。在另一个方面中,上述用于抑制白发的用途可以通过激活Wnt/β-连环蛋白信号传导途径促进头发中黑色素的合成,从而表现出抑制或改善白发的效果。
在一个实施例中,本发明提供一种制备白发抑制用组合物的方法,该组合物包含选自由七叶皂苷(Escin)、27-脱氧升麻亭(27-Deoxyactein)、岩豆素(Lysionotin)、氯化两面针碱(Nitidine chloride)、羊毛甾醇(Lanosterol)、黄杞苷(Engeletin)、特女贞苷(Specnuezhenide)、白花前胡乙素(Praeruptorin B)、罗通酸(Rotunic acid)、胡麻属苷(Sesamoside)、远志皂苷D(Polygalacin D)、地肤子皂苷Ic(Momordin Ic)、氯化缬草素(Valechlorine)、款冬酮(Tussilagone)、杠柳毒苷(Periplocin)、重楼皂苷VII(Polyphyllin VII)和桔梗皂苷D2(Platycodin D2)组成的组中的一种以上。在上述制备方法中,白发抑制用组合物可以根据通常使用的化妆品、医药外品或医药品等的制备方法制备。
在一个实施例中,本发明的白发抑制用组合物可以包含选自由七叶皂苷(Escin)、27-脱氧升麻亭(27-Deoxyactein)、岩豆素(Lysionotin)、氯化两面针碱(Nitidinechloride)、羊毛甾醇(Lanosterol)、黄杞苷(Engeletin)、特女贞苷(Specnuezhenide)、白花前胡乙素(Praeruptorin B)、罗通酸(Rotunic acid)、胡麻属苷(Sesamoside)、远志皂苷D(Polygalacin D)、地肤子皂苷Ic(Momordin Ic)、氯化缬草素(Valechlorine)、款冬酮(Tussilagone)、杠柳毒苷(Periplocin)、重楼皂苷VII(Polyphyllin VII)和桔梗皂苷D2(Platycodin D2)组成的组中的两种以上。
在一个实施例中,在本发明的白发抑制用组合物中,记载的所有成分的含量优选不超过化妆品/食品/医药品/医药外品相关的各种规范中规定的最大使用值。
发明效果
本发明的白发抑制用组合物能够有效地抑制白发的产生。本发明的白发抑制用组合物通过激活Wnt/β-连环蛋白信号传导途径促进头发中黑色素的合成,从而具有显著优异的抑制、预防、改善、缓解、延迟或治疗白发(白毛症)的效果。
附图说明
图1是确认在B-16黑色素瘤细胞中因七叶皂苷而导致黑色素合成增加的实验结果。
图2是显示根据七叶皂苷及其含量的黑色素合成量增加的图。
具体实施方式
以下,为了便于理解本发明,将例举实施例等进行详细说明。但是,根据本发明的实施例可以变形为各种其他形式,并且本发明的范围不应被解释为限于下述实施例。本发明的实施例是为了向本领域的普通技术人员更加完整地说明本发明而提供的。
实验例1:Wnt/β-连环蛋白信号传导增加效果
在本实验中,为了确认Wnt/β-连环蛋白途径的激活,使用了TCF/LEF响应荧光素酶报告基因HEK293A(TCF/LEF Responsive Luciferase Reporter HEK293A)稳定细胞株(Wnt报告基因HEK293A细胞;WRHEK293A)。本稳定细胞株使用MEM(Corning,USA)和胎牛血清(Fetal bovine serum)(Gibco BRL,盖瑟斯堡,MD,USA)进行继代培养来维持。为了转录活性试验法,在96-孔板(well plate)中每孔接种3万个细胞后,在37℃的培养箱中培养24小时。并且如表1所示,分别处理了本发明的七叶皂苷、27-脱氧升麻亭、岩豆素、氯化两面针碱、羊毛甾醇、黄杞苷、特女贞苷、白花前胡乙素、罗通酸、胡麻属苷、远志皂苷D、地肤子皂苷Ic、氯化缬草素、款冬酮、杠柳毒苷、重楼皂苷VII和桔梗皂苷D2。之后培养24小时,然后使用荧光素酶分析系统(Luciferase assay system,Promega)进行报告分析。根据制造商的实验方法进行,利用维克多多壁酶标仪(Victor multiwall plate reader)(PerkinElmer,USA)测量发光(Luminescence)。为了确认物质处理引起的细胞毒性,并行测量了GFP的荧光(Fluorescence)表达作为内部对照群(internal control)。将发光酶的反应引起的发光值除以GFP荧光值,然后将未处理对照群的值设为100%,求出与此相比的处理群的值并用百分比(%)表示(表1)。
[表1]
Wnt/β-连环蛋白信号传导增加效果
Figure BDA0003960896530000081
实验例2:黑色素生成效果确认
在本实验中,将显示出Wnt信号传导增加效果的实验例1的化合物添加到源自小鼠的黑色素瘤细胞(B-16小鼠黑色素瘤细胞,B-16mouse melanoma cell)的培养液中,并测试细胞水平上的黑色素生成效果(Lotan R.,Lotan D.Cancer Res.40:3345-3350,1980)。实验前,对B-16黑色素瘤细胞进行毒性评价,选定没有毒性的浓度进行黑色素生成评价。B-16黑色素瘤细胞在包含10% FBS的DMEM(Gibco BRL,盖瑟斯堡,MD,USA)中进行继代培养。之后,接种于100mm细胞培养皿中以进行黑色素合成和提取,然后在汇合度(conflucency)为70%时处理化合物。上述化合物在培养液中以10μg/mL的浓度处理。使用黑色素细胞刺激激素(α-melanocyte stimulating hormone,α-MSH)作为对照群,将其添加到培养液中使其达到10nM,然后分别处理于B-16黑色素瘤细胞中,培养48小时。之后,对细胞进行胰蛋白酶(trypsin)处理,从培养容器中摘取,然后离心分离以提取黑色素。向摘取的细胞加入1mL氢氧化钠溶液(1N浓度)并煮沸10分钟以溶解黑色素。利用分光光度计,在400nM处测量吸光度(absorbance)以测量生成的黑色素的量。上述黑色素量利用根据黑色素的浓度的标准吸光度曲线(standard curve)以μg/mL为单位进行定量。将未处理对照群计算为100%,求出与此相比的处理群的值并用百分比(%)表示(表2)。
[表2]
黑色素合成
Figure BDA0003960896530000091
上述化合物中七叶皂苷的黑色素合成结果示于图1和图2。
实验例3:白发抑制用组合物1(头发滋补剂)的抑制白发产生的效果确认试验
制备了包含本发明的化合物中的七叶皂苷和27-脱氧升麻亭的白发抑制用组合物1(头发滋补剂)。使用上述组合物测试了人体头发的白发减少效果。以60名有白发的健康成人为对象,每组12人分成5组,将比较例1、实施例1、实施例1-2、实施例2或实施例2-2每周7次使用于头皮6个月。使用后,利用头皮检测仪毛发摄像图(Folliscopephototrichogram),评价了与组合物涂布前相比白发产生程度。对于实验结果,将涂布前设为100%,以与此相比的值示于表3。
[表3]
Figure BDA0003960896530000101
制备例1:白发抑制用组合物1(头发滋补剂)
将本发明的七叶皂苷、27-脱氧升麻亭、岩豆素、氯化两面针碱、羊毛甾醇、黄杞苷、特女贞苷、白花前胡乙素、罗通酸、胡麻属苷、远志皂苷D、地肤子皂苷Ic、氯化缬草素、款冬酮、杠柳毒苷、重楼皂苷VII或桔梗皂苷D2根据下表4所示的处方用常规方法制备头发滋补剂。
[表4]
Figure BDA0003960896530000102
制备例2:白发抑制用组合物2(发露)
将本发明的七叶皂苷、27-脱氧升麻亭、岩豆素、氯化两面针碱、羊毛甾醇、黄杞苷、特女贞苷、白花前胡乙素、罗通酸、胡麻属苷、远志皂苷D、地肤子皂苷Ic、氯化缬草素、款冬酮、杠柳毒苷、重楼皂苷VII或桔梗皂苷D2根据下表5所示的处方用常规方法制备发露。
[表5]
Figure BDA0003960896530000111

Claims (8)

1.一种白发抑制用组合物,其包含选自由七叶皂苷(Escin)、27-脱氧升麻亭(27-Deoxyactein)、岩豆素(Lysionotin)、氯化两面针碱(Nitidine chloride)、羊毛甾醇(Lanosterol)、黄杞苷(Engeletin)、特女贞苷(Specnuezhenide)、白花前胡乙素(Praeruptorin B)、罗通酸(Rotunic acid)、胡麻属苷(Sesamoside)、远志皂苷D(Polygalacin D)、地肤子皂苷Ic(Momordin Ic)、氯化缬草素(Valechlorine)、款冬酮(Tussilagone)、杠柳毒苷(Periplocin)、重楼皂苷VII(Polyphyllin VII)和桔梗皂苷D2(Platycodin D2)组成的组中的一种以上。
2.如权利要求1所述的白发抑制用组合物,其中,包含相对于组合物的总重量的0.0001至50重量%的所述选自由七叶皂苷(Escin)、27-脱氧升麻亭(27-Deoxyactein)、岩豆素(Lysionotin)、氯化两面针碱(Nitidine chloride)、羊毛甾醇(Lanosterol)、黄杞苷(Engeletin)、特女贞苷(Specnuezhenide)、白花前胡乙素(Praeruptorin B)、罗通酸(Rotunic acid)、胡麻属苷(Sesamoside)、远志皂苷D(Polygalacin D)、地肤子皂苷Ic(Momordin Ic)、氯化缬草素(Valechlorine)、款冬酮(Tussilagone)、杠柳毒苷(Periplocin)、重楼皂苷VII(Polyphyllin VII)和桔梗皂苷D2(Platycodin D2)组成的组中的一种以上。
3.如权利要求1所述的白发抑制用组合物,其中,所述白发抑制用组合物激活Wnt/β-连环蛋白信号传导系统。
4.如权利要求1所述的白发抑制用组合物,其中,所述白发抑制用组合物是医药组合物、医药外品组合物或化妆料组合物。
5.一种白发抑制用头发或头皮用产品,其包含权利要求1所述的白发抑制用组合物。
6.一种白发抑制用试剂盒,其包含权利要求1所述的白发抑制用组合物。
7.一种抑制白发的方法,包括将权利要求1所述的白发抑制用组合物施用于对象体。
8.一种权利要求1所述的白发抑制用组合物用于抑制白发的用途。
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