CN115887767A - 一种非交联活性胶原基质颗粒及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种非交联活性胶原基质颗粒及其制备方法和应用，所述非交联活性胶原基质颗粒的制备方法包括取皮裁切、无害化处理、洗脱纯化、干燥、粉碎和灭菌，根据本发明的制备方法制得的非交联活性胶原基质颗粒的稳定性和均一性良好，同时，其可作为具有一定的生理活性作用的提取物的载体，提高植入微粒材料在局部的组织兼容性，还可作为局部抗菌修复的材料、抗菌止血的材料和修复细胞划痕的材料。

Description

一种非交联活性胶原基质颗粒及其制备方法和应用

技术领域

本发明涉及生物医学材料技术领域，具体涉及一种非交联活性胶原基质颗粒及其制备方法和应用。

背景技术

传统的胶原基质颗粒制备方法中的取皮工艺，存在着取皮不均一性的问题，导致基质材料在同一无害化处理过程产生的效果不均衡，会出现局部脱细胞或去抗原不彻底、局部无害化处理物质残留问题，从而导致后续洗脱难度加大，使得洗脱不彻底，对维护胶原基质的结构稳定性产生阻碍，从而影响胶原基质颗粒的释放效率和药物活性。

发明内容

为了克服现有技术的不足，本发明的第一个目的是提供一种非交联活性胶原基质颗粒的制备方法，本发明的第二个目的是提供涉及的所述非交联活性胶原基质颗粒，本发明的第三个目的是提供涉及的所述非交联活性胶原基质颗粒的应用。

为实现本发明的第一个目的，采用如下技术方案：

一种非交联活性胶原基质颗粒的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：

第一步：取皮裁切

获取动物的表皮并对其进行裁切，将裁切后的所述表皮放在消毒液内浸泡消毒10至30min，再用水清洗消毒后的所述表皮，将经清洗的所述表皮在-15至20℃的温度下反复冻融，并将经最后一次解冻的所述表皮放置在2至8℃的温度下预冷备用，得备用皮片；

第二步：无害化处理

将所述备用皮片放置在温度为20至28℃、转速为30至60rpm的处理液中振荡10至120min，得第一混合物；

向所述第一混合物内加入纯化水并在温度为15至28℃、转速为30至60rpm的条件下振荡4至12h，得第二混合物；

将所述第二混合物放入冷盐水中浸泡4至6h，得非交联活性胶原基质；

第三步：洗脱纯化

用低渗溶液和高渗溶液交替对所述非交联活性胶原基质进行洗脱处理，得脱细胞非交联活性胶原基质；

将所述脱细胞非交联活性胶原基质放置在0.85％氯化钠溶液中保持30min，再将所述脱细胞非交联活性胶原基质放置2至8℃的温度下保存；

第四步：干燥

将所述脱细胞非交联活性胶原基质放置在预冻液中浸泡10至60min，得预冻非交联活性胶原基质块，对所述预冻非交联活性胶原基质块进行裁切和断裂处理，得脱细胞非交联活性胶原基质块；

将所述脱细胞非交联活性胶原基质块进行低温冷冻干燥处理，得冻干非交联活性胶原基质块；

第五步：粉碎

将所述冻干非交联活性胶原基质块放置在液氮内处理10至30min，将经液氮处理后的所述冻干非交联活性胶原基质块放置在均质装置上处理，得非交联活性胶原基质颗粒；

第六步：灭菌

用γ射线或含有防腐剂的质量分数为0.9％的生理盐水溶液对所述非交联活性胶原基质颗粒进行灭菌处理。

在本发明中，动物的表皮材料来源于哺乳动物皮如猪和牛、海洋鱼类如罗非鱼、巴沙鱼、金鲳鱼皮、或贻贝、水母等软体水生动物的组织，动物的表皮的获取方法是通过改装的取皮机获得，其中取皮机包括制动模块、理料和备料模块、传输模块、厚度调整和固定模块、切削模块、测量模块和收集模块，进入取皮机的动物的表皮的厚度为20至45mm。

作为本发明所述的一种非交联活性胶原基质颗粒的制备方法的一个优选方案，所述消毒液为质量分数为5％的新洁尔灭或质量分数为0.5％的洗必泰溶液，由于刚裁切的动物表皮会存在细菌等微生物有害物质，因此需要对其进行消毒，在本发明中，选用5％的新洁尔灭或0.5％的洗必泰溶液对所述动物表皮进行消毒。

作为本发明所述的一种非交联活性胶原基质颗粒的制备方法的一个优选方案，所述备用皮片的厚度为0.5至1.5mm，更优选的所述备用皮片的厚度为0.6至0.8mm。

作为本发明所述的一种非交联活性胶原基质颗粒的制备方法的一个优选方案，所述处理液为离子型溶液或非离子型溶液，所述离子型溶液为Tris-HCl溶液、EDTA-甘油复合溶液或脱氧胆酸钠中的一种，所述非离子型溶液为Triton-100或酶中的一种或多种。

作为本发明所述的一种非交联活性胶原基质颗粒的制备方法的一个优选方案，所述第二混合物和所述冷盐水的添加配方为1kg的第二混合物中加入2至5L的冷盐水。

在本发明的第三步中，采用交替洗脱非交联活性胶原基质的处理方法，即先用低渗溶液对所述非交联活性胶原基质处理，再用高渗溶液对所述非交联活性胶原基质处理，重复操作几次，可强化材料脱细胞的效果，获得脱细胞非交联活性胶原基质。

作为本发明所述的一种非交联活性胶原基质颗粒的制备方法的一个优选方案，所述低渗溶液为质量分数为10mM、pH为7至8的Tris-HCl溶液或质量分数为0.3至0.45％的氯化钠溶液，所述高渗溶液为质量分数为1至20％的氯化钠溶液。

作为本发明所述的一种非交联活性胶原基质颗粒的制备方法的一个优选方案，所述预冻液包括质量分数为2.5至10％的葡聚糖或右旋糖苷、质量分数为1至10％的蔗糖、质量分数为7.5％的聚乙烯吡啶烷酮和质量分数为0.5至6％的Hank's溶液。

在本发明的第四步中，在干燥前将所述脱细胞非交联活性胶原基质先进行预冻液处理，其目的是为了更好地保护脱细胞非交联活性胶原基质结构的稳定性和均一性，对所述预冻非交联活性胶原基质块进行规则裁切和断裂处理，获得宽度为0.5至1cm、长度为1cm的条状脱细胞非交联活性胶原基质块，在获取所述脱细胞非交联活性胶原基质块后对其进行低温冷冻干燥，在本发明中，当所述低温条件为0℃以下时，可采用液态二氧化碳、液氮、液态氩、液态氦和其他类似非化学反应性制冷剂、惰性和无毒制冷剂，在本发明中，将所述脱细胞非交联活性胶原基质块放入密封袋内，进行低温冷冻干燥处理，其中密封袋为无菌纸包装袋，所述脱细胞非交联活性胶原基质块的低温冷冻条件为：货架温度为-70℃，冷凝器的最低温度为-85℃，其中①货架温度以-2.5℃/min的速率上升至-30℃至-35℃，保持10min，冻干箱压力为20-30Pa；②搁板温度以1.5℃/min的速率上升至-25℃至-20℃，并保持12至36h，冻干箱压力为20-30Pa；③以1.5℃/min的速率增加温度至货架温度-15℃，并保持120至240min，冻干箱压力为20-30Pa；④以1.5℃/min的速率升高温度至货架温度-5℃，保持120至240min，冻干箱压力为15-25Pa；⑤温度最终以1.5℃/min的速率上升至10℃的货架温度，保持120至200min，冻干箱压力为5-10Pa；⑥干燥后，取出冻干的基质材料，置于干燥的密闭包装袋，抽真空条件下热密封，以确保含水量低于12％。

在本发明的第五步中，需将经液氮处理后的所述冻干非交联活性胶原基质块放置在均质装置上处理形成粒径均一的规则颗粒物，所述规则颗粒物即为非交联活性胶原基质颗粒，其中所述均质装置为用液氮或干冰等惰性致冷剂进行降温控制的专用粉碎机或均质设备。

作为本发明所述的一种非交联活性胶原基质颗粒的制备方法的一个优选方案，所述γ射线的辐射剂量为7至25KGy，所述防腐剂为叠氮钠、尼泊金酯类、醇类或辛酰羟肟酸中的一种，所述醇类为丙二醇、丁二醇或己二醇中的一种或多种。

本发明的第二个目的是提供一种如所述制备方法制得的非交联活性胶原基质颗粒，所述非交联活性胶原基质颗粒的粒径为20至1500μm。

本发明的第三个目的是提供一种如所述制备方法制得的非交联活性胶原基质颗粒用于抗菌、止血或细胞软、硬组织的生物修复应用，其中，与非交联活性胶原基质颗粒配合使用起到抗菌作用的成分包括抗生素、抗菌肽和噬菌体。

在本发明中，非交联活性胶原基质颗粒可通过注射、喷涂、填充或组合的方式应用于受体部位，还可通过与羟基磷灰石、生物活性玻璃等无机材料形成复合混合颗粒，用于缺损部位的填充以诱导缺损的组织再生。

在本发明中，非交联活性胶原基质颗粒经再水化处理后，还可与不同分子量或类型的胶原蛋白肽、不同分子量和交联度的透明质酸钠、成纤维细胞生长因子、神经生长因子、干细胞因子、骨形态蛋白中的一种或其组合物，形成用于局部组织缺陷，如痤疮疤痕、外伤性或病理性疤痕、外伤或手术引起的组织缺损的填充和诱导再生剂，如真皮皱纹和真皮皱褶改善，或纠正真皮轮廓存在的不均匀和松弛现象。这种利用基质框架结构复合活性成分的方式，可加强注射后的持久性，增强酶降解的耐受性，并在材料植入原位形成纤维结构。

本发明的有益效果：

(1)本发明制备非交联活性胶原基质颗粒的方法简单、易于操作，制备原料易得，材料无害化处理更彻底，组织相容性好，使用更安全；

(2)本发明制得的非交联活性胶原基质颗粒的稳定性和均一性良好，能够有效保持材料的活性，且易于保存；

(3)本发明制得的非交联活性胶原基质颗粒可作为局部抗菌修复的材料、止血的材料和细胞或组织的生物修复用材料。

具体实施方式

以下将结合实施例对本发明的构思及产生的技术效果进行清楚、完整地描述，以充分地理解本发明的目的、特征和效果。显然，所描述的实施例只是本发明的一部分实施例，而不是全部实施例，基于本发明的实施例，本领域的技术人员在不付出创造性劳动的前提下所获得的其他实施例，均属于本发明保护的范围。

实施例1

按照实施例1的非交联活性胶原基质颗粒的制备方法包括以下步骤：

第一步：取皮裁切

获取牛的表皮并对其进行裁切，将裁切后的牛的表皮放在质量分数为5％的新洁尔灭内浸泡消毒30min，再用水清洗消毒后的牛的表皮，将经清洗的牛的表皮在-15至20℃的温度下反复冻融，并将经最后一次解冻的表皮放置在5℃的温度下预冷备用，得厚度为0.7mm的备用皮片；

第二步：无害化处理

将厚度为0.7mm的备用皮片放置在温度为25℃、转速为40rpm的处理液中振荡60min，得第一混合物，其中处理液为Tris-HCl溶液、EDTA-甘油复合溶液或脱氧胆酸钠中的一种；

向第一混合物内加入纯化水并在温度为20℃、转速为45rpm的条件下振荡8h，得第二混合物；

将第二混合物放入冷盐水中浸泡5h，得非交联活性胶原基质，其中第二混合物和冷盐水的添加配方为1kg的第二混合物配3L冷盐水；

第三步：洗脱纯化

用质量分数为10mM、pH为7的Tris-HCl低渗溶液和质量分数为10％的氯化钠高渗溶液交替对非交联活性胶原基质进行洗脱处理，得脱细胞非交联活性胶原基质；

将脱细胞非交联活性胶原基质放置在质量分数为0.85％的氯化钠溶液中保持30min，再将脱细胞非交联活性胶原基质放置5℃的温度下保存；

第四步：干燥

将脱细胞非交联活性胶原基质放置在包括质量分数为6％的葡聚糖、5％的蔗糖、7.5％的聚乙烯吡啶烷酮和4％的Hank's溶液的预冻液中浸泡30min，得预冻非交联活性胶原基质块，对预冻非交联活性胶原基质块进行裁切和断裂处理，得脱细胞非交联活性胶原基质块；

将脱细胞非交联活性胶原基质块进行低温冷冻干燥处理，得冻干非交联活性胶原基质块；

第五步：粉碎

将冻干非交联活性胶原基质块放置在液氮内处理20min，将经液氮处理后的冻干非交联活性胶原基质块放置在均质装置上处理，得粒径为20至1500μm的非交联活性胶原基质颗粒；

第六步：灭菌

用辐射剂量为16KGy的γ射线对非交联活性胶原基质颗粒进行灭菌处理。

实施例2

按照实施例2的非交联活性胶原基质颗粒的制备方法包括以下步骤：

第一步：取皮裁切

获取罗非鱼的表皮并对其进行裁切，将裁切后的罗非鱼的表皮放在质量分数为0.5％的洗必泰内浸泡消毒30min，再用水清洗消毒后的罗非鱼的表皮，将经清洗的罗非鱼的表皮在-15至20℃的温度下反复冻融，并将经最后一次解冻的表皮放置在2℃的温度下预冷备用，得厚度为0.6mm的备用皮片；

第二步：无害化处理

将厚度为0.6mm的备用皮片放置在温度为20℃、转速为30rpm的处理液中振荡20min，得第一混合物，其中，处理液为Triton-100或酶中的一种；

向第一混合物内加入纯化水并在温度为15℃、转速为35rpm的条件下振荡4h，得第二混合物；

将第二混合物放入冷盐水中浸泡4h，得非交联活性胶原基质，其中第二混合物和冷盐水的添加配方为1kg的第二混合物配2L冷盐水；

第三步：洗脱纯化

用质量分数为0.4％的氯化钠低渗溶液和质量分数为2％的氯化钠高渗溶液交替对非交联活性胶原基质进行洗脱处理，得脱细胞非交联活性胶原基质；

将脱细胞非交联活性胶原基质放置在质量分数为0.85％的氯化钠溶液中保持30min，再将脱细胞非交联活性胶原基质放置2℃的温度下保存；

第四步：干燥

将脱细胞非交联活性胶原基质放置在包括质量分数为2.5％的右旋糖苷、1％的蔗糖、7.5％的聚乙烯吡啶烷酮和0.5％的Hank's溶液的预冻液中浸泡30min，得预冻非交联活性胶原基质块，对预冻非交联活性胶原基质块进行裁切和断裂处理，得脱细胞非交联活性胶原基质块；

将脱细胞非交联活性胶原基质块进行低温冷冻干燥处理，得冻干非交联活性胶原基质块；

第五步：粉碎

将冻干非交联活性胶原基质块放置在液氮内处理10min，将经液氮处理后的冻干非交联活性胶原基质块放置在均质装置上处理，得粒径为20至1500μm的非交联活性胶原基质颗粒；

第六步：灭菌

用防腐剂对非交联活性胶原基质颗粒进行灭菌处理，其中防腐剂为叠氮钠、尼泊金酯类、丙二醇、丁二醇、己二醇和辛酰羟肟酸中的一种。

实施例3

按照实施例3的非交联活性胶原基质颗粒的制备方法包括以下步骤：

第一步：取皮裁切

获取贻贝的表皮并对其进行裁切，将裁切后的贻贝的表皮放在质量分数为5％的新洁尔灭内浸泡消毒10min，再用水清洗消毒后的贻贝的表皮，将经清洗的贻贝的表皮在-15至20℃的温度下反复冻融，并将经最后一次解冻的表皮放置在8℃的温度下预冷备用，得厚度为0.8mm的备用皮片；

第二步：无害化处理

将厚度为0.8mm的备用皮片放置在温度为28℃、转速为60rpm的处理液中振荡120min，得第一混合物，其中处理液为Triton-100和酶的混合液；

向第一混合物内加入纯化水并在温度为28℃、转速为60rpm的条件下振荡12h，得第二混合物；

将第二混合物放入冷盐水中浸泡6h，得非交联活性胶原基质，其中第二混合物和冷盐水的添加配方为1kg的第二混合物配5L冷盐水；

第三步：洗脱纯化

用质量分数为10mM、pH为8的Tris-HCl低渗溶液和质量分数为20％的氯化钠高渗溶液交替对非交联活性胶原基质进行洗脱处理，得脱细胞非交联活性胶原基质；

将脱细胞非交联活性胶原基质放置在质量分数为0.85％的氯化钠溶液中保持30min，再将脱细胞非交联活性胶原基质放置8℃的温度下保存；

第四步：干燥

将脱细胞非交联活性胶原基质放置在包括质量分数为10％的葡聚糖、10％的蔗糖、7.5％的聚乙烯吡啶烷酮和6％的Hank's溶液的预冻液中浸泡30min，得预冻非交联活性胶原基质块，对预冻非交联活性胶原基质块进行裁切和断裂处理，得脱细胞非交联活性胶原基质块；

将脱细胞非交联活性胶原基质块进行低温冷冻干燥处理，得冻干非交联活性胶原基质块；

第五步：粉碎

将冻干非交联活性胶原基质块放置在液氮内处理30min，将经液氮处理后的冻干非交联活性胶原基质块放置在均质装置上处理，得粒径为20至1500μm的非交联活性胶原基质颗粒；

第六步：灭菌

用辐射剂量为25KGy的γ射线对非交联活性胶原基质颗粒进行灭菌处理。

实施例4

非交联活性胶原基质胶原基质颗粒用于抗菌的应用

任取一份由实施例1至3的制备方法制得的非交联活性胶原基质颗粒，将其与抗生素、抗菌肽和噬菌体混合均匀，得复合基质抗菌材料干粉，其中，按重量百分比计，非交联活性胶原基质颗粒40至90％，抗生素、抗菌肽和噬菌体总计为0.001至10％，抗生素粉末可为庆大霉素、氧氟沙星或4％强力霉素；

使用背景：糖尿病足合并感染患者，全身经抗菌素治疗，局部清创、抗菌敷料引流，准备好伤口床，在伤口部位撒入负载抗菌药物的复合材料，其中伤口创面大小约(2-12)cm×(1-6)cm×(0.2-1)cm，伤口或伴随肌腱暴露也可使用；

使用方法：使用含本发明的非交联活性胶原基质颗粒的复合基质抗菌材料干粉约3-8次，每周1次，约2-9周创面即可恢复，使用结果见表1：

表1复合基质抗菌材料对创面的修复和材料变化情况结果表

从表1的结果可知，使用含本发明的非交联活性胶原基质颗粒的复合基质抗菌材料后创面无感染情况，说明具有抗菌性能。同时，创面的愈合情况良好，无局部和全身过敏反应等不适症状，复合基质抗菌材料可被创面吸收和利用，活性及生物相容性良好，因此，本发明的非交联活性胶原基质颗粒可应用于抗菌。

实施例5

非交联活性胶原基质颗粒用于止血的应用

任取一份由实施例1至3的制备方法制得的非交联活性胶原基质颗粒，将其与壳聚糖粉、凝血酶混合均匀，得复合基质止血材料干粉，其中，按重量百分比计，非交联活性胶原基质颗粒为40至70％、壳聚糖粉为5至30％、凝血酶为0.05至1.5％；

使用方法：取肝脏出血的新西兰雄兔6只，试验组施加5至10g复合基质止血材料，对照组采用纱布覆盖止血；对比试验组和对照组的出血量、止血时间，对比结果见表2：

表2复合基质止血和纱布覆盖止血效果对比结果表

从表2的结果可知，采用含本发明的非交联活性胶原基质颗粒的复合基质止血材料的止血范围、止血时间都优于传统的纱布覆盖止血的方式，且采用复合基质止血材料止血后的出血量明显低于纱布覆盖止血的出血量，因此，本发明的非交联活性胶原基质颗粒可应用于止血。

实施例6

胶原基质颗粒用于修复细胞划痕的应用

任取一份由实施例1至3的制备方法制得的非交联活性胶原基质颗粒，将其与0.9％生理盐水在温度为35至37℃、转速为35至80rpm的速度下振荡混合，得凝胶态基质，其中，非交联活性胶原基质颗粒为3至10g、0.9％生理盐水为30至50ml；

使用方法：将含有非交联活性胶原基质颗粒的凝胶态基质应用于细胞划痕试验，结果见表3：

表3凝胶态基质对细胞划痕的修复和各组相对面积大小(％)结果表

从表3的结果可知，凝胶态基质能够有效降低细胞划痕间的面积，促进成纤维细胞增殖和修复，因此，本发明的非交联活性胶原基质颗粒可应用于修复细胞划痕。

以上所述仅是本发明的实施方式，本发明的保护范围并不仅局限于上述实施例，凡属于本发明思路下的技术方案均属于本发明的保护范围。应当指出，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理前提下的若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种非交联活性胶原基质颗粒的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：

第一步：取皮裁切

取动物的表皮并对其进行裁切，将裁切后的所述表皮放在消毒液内浸泡消毒10至30min，再用水清洗消毒后的所述表皮，将经清洗的所述表皮在-15至20℃的温度下反复冻融，并将经最后一次解冻的所述表皮放置在2至8℃的温度下预冷备用，得备用皮片；

第二步：无害化处理

将所述备用皮片放置在温度为20至28℃、转速为30至60rpm的处理液中振荡10至120min，得第一混合物；

向所述第一混合物内加入纯化水并在温度为15至28℃、转速为30至60rpm的条件下振荡4至12h，得第二混合物；

将所述第二混合物放入冷盐水中浸泡4至6h，得非交联活性胶原基质；

第三步：洗脱纯化

用低渗溶液和高渗溶液交替对所述非交联活性胶原基质进行洗脱处理，得脱细胞非交联活性胶原基质；

将所述脱细胞非交联活性胶原基质放置在0.85％氯化钠溶液中保持30min，再将所述脱细胞非交联活性胶原基质放置2至8℃的温度下保存；

第四步：干燥

将所述脱细胞非交联活性胶原基质放置在预冻液中浸泡10至60min，得预冻非交联活性胶原基质块，对所述预冻非交联活性胶原基质块进行裁切和断裂处理，得脱细胞非交联活性胶原基质块；

将所述脱细胞非交联活性胶原基质块进行冷冻干燥处理，得冻干非交联活性胶原基质块；

第五步：粉碎

将所述冻干非交联活性胶原基质块放置在液氮内处理10至30min，将经液氮处理后的所述冻干非交联活性胶原基质块放置在均质装置上处理，得非交联活性胶原基质颗粒；

第六步：灭菌

用γ射线或含有防腐剂的质量分数为0.9％的生理盐水溶液对所述非交联活性胶原基质颗粒进行灭菌处理。

2.根据权利要求1所述的一种非交联活性胶原基质颗粒的制备方法，其特征在于，所述消毒液为质量分数为5％的新洁尔灭或质量分数为0.5％的洗必泰溶液。

3.根据权利要求2所述的一种非交联活性胶原基质颗粒的制备方法，其特征在于，所述备用皮片的厚度为0.5至1.5mm。

4.根据权利要求3所述的一种非交联活性胶原基质颗粒的制备方法，其特征在于，所述处理液为离子型溶液或非离子型溶液，所述离子型溶液为Tris-HCl溶液、EDTA-甘油复合溶液或脱氧胆酸钠中的一种，所述非离子型溶液为Triton-100或酶中的一种或多种。

5.根据权利要求1所述的一种非交联活性胶原基质颗粒的制备方法，其特征在于，所述第二混合物和所述冷盐水的添加配方为1kg的第二混合物中加入2至5L的冷盐水。

6.根据权利要求1所述的一种非交联活性胶原基质颗粒的制备方法，其特征在于，所述低渗溶液为质量分数为10mM、pH为7至8的Tris-HCl溶液或质量分数为0.3至0.45％的氯化钠溶液，所述高渗溶液为质量分数为1至20％的氯化钠溶液。

7.根据权利要求1所述的一种非交联活性胶原基质颗粒的制备方法，其特征在于，所述预冻液包括质量分数为2.5至10％的葡聚糖或右旋糖苷、质量分数为1至10％的蔗糖、质量分数为7.5％的聚乙烯吡啶烷酮和质量分数为0.5至6％的Hank^，s溶液。

8.根据权利要求1所述的一种非交联活性胶原基质颗粒的制备方法，其特征在于，所述γ射线的辐射剂量为7至25KGy，所述防腐剂为叠氮钠、尼泊金酯类、醇类或辛酰羟肟酸中的一种，所述醇类为丙二醇、丁二醇或己二醇中的一种或多种。

9.一种权利要求1-8任一项所述制备方法制得的非交联活性胶原基质颗粒，其特征在于，所述非交联活性胶原基质颗粒的粒径为20至1500μm。

10.一种权利要求1-8任一项所述制备方法制得的非交联活性胶原基质颗粒用于抗菌、止血或生物修复的应用。