CN115868615A - 一种利用茯苓菌发酵提升松花粉抗氧化活性的工艺 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种利用茯苓菌发酵提升松花粉抗氧化活性的工艺，该提取工艺具体包括以下步骤：制备松花粉培养基，将扩培好的茯苓接种到所述松花粉培养基中，发酵得到发酵产物。本发明所提供的方法能通过发酵提高松花粉中具有抗氧化活性的游离酚类等具有抗氧化活性的物质从而提升松花粉的抗氧化活性，提高了松花粉的利用价值和利用程度，为进一步开发功能性松花粉新产品提供理论和技术支撑。
Description
技术领域
本发明涉及一种利用茯苓菌发酵提升松花粉抗氧化活性的工艺，属于食品生物加工领域。
背景技术
松花粉是松科植物马尾松(Pinus massoniana Lamb.)、油松(Pinus tabuliformis Carr.)或同属数种植物的雄性生殖细胞，是我国药食同源花粉品种，富含很多植物源的活性物质，包括多酚、黄酮、甾醇等，越来越受到食品和医药行业的关注，具有广阔的开发应用前景。然而，松花粉中营养和活性成分的生物利用度不高，这一方面是由于细胞壁的存在，另一方面也是由于松花粉中含有大量的淀粉、纤维素、半纤维素、果胶和蛋白质等生物大分子物质，这些大分子往往与花粉中的小分子活性物质以结合状态存在，导致小分子活性物质难以被机体吸收利用。发酵法可利用微生物生长过程中分泌的各种蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶和糖苷酶等打开活性小分子与生物单分子的连接，提升其中小分子生物活性物质的水平，从而提升其相应的生物活性。
茯苓Poria cocos(Schw.)Wolf属担子菌门多孔菌目食用型真菌，是国家卫健委与中药管理局最早颁布的“既是食品又是药品的品种名单”中的一种。微生物发酵天然产物作为一种新型的加工工艺，反应条件温和、绿色环保，并在改变传统水提、醇提等工艺的同时利用其自身体系产生的酶对其内源化合物进行催化修饰或者转化，增强了天然产物保健功能。因此，本发明拟采用茯苓菌发酵松花粉，用于提升其中的小分子生物活性物质的水平，从而提升其抗氧化活性。
发明内容
根据以上现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种利用茯苓菌发酵提升松花粉抗氧化活性的工艺。
为实现以上目的，所采用的技术方案是：
一种利用茯苓菌发酵提升松花粉抗氧化活性的工艺，包括以下步骤：
(1)取破壁松花粉溶于柠檬酸缓冲液中，搅拌均匀，得到松花粉培养基；
(3)将松花粉培养基沸水浴加热至中心温度达到85℃，置于85℃水浴中保温30min，保温时间到后立即冰水降温至室温；
(4)将步骤(3)中的松花粉培养基的pH调整为5；
(5)向步骤(4)的松花粉培养基中加入茯苓，在26℃、120r/min条件下发酵1～10d，得发酵产物。
进一步，在所述步骤(1)和(3)之间还包括以下步骤：(2)向步骤(1)中的松花粉培养基中加入质量分数0.5～3％的葡萄糖。
进一步，步骤(5)所述茯苓为茯苓5.78。
进一步，步骤(1)所述柠檬酸缓冲液的浓度为0.1mol/L。
再进一步，步骤(1)用0.1mol/L柠檬酸缓冲液调节初始pH调整为4.3。
进一步，步骤(4)用0.2mol/L Na2HPO4溶液调节pH为5。
进一步，破壁松花粉：柠檬酸缓冲液+Na2HPO4溶液的重量比为1:20。
进一步，步骤(4)中所述Na2HPO4溶液的灭菌条件为121℃，20min。
进一步，所述步骤(5)中茯苓与松花粉培养基的体积比为1:10。
与现有技术相比，本发明的有益效果在于：
本发明公开了一种利用茯苓菌进行发酵提升松花粉中具有抗氧化活性的小分子水平及其抗氧化活性的新工艺，通过发酵使松花粉细胞内酶和活性物质释放出来，破坏小分子活性物质与大分子的结合，增加破壁松花粉的多酚得率，提升破壁松花粉的抗氧化能力，提高松花粉的营养价值和保健作用，增加产品的竞争力。
具体实施方式
以下结合实例对本发明进行描述，所举实例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。
实施例1
一种利用茯苓菌发酵提升松花粉抗氧化活性的工艺，步骤如下：
(1)取破壁松花粉溶于0.1mol/L柠檬酸缓冲液中，搅拌均匀，调节pH为4.3；
(2)向松花粉培养基中加入质量分数0.5％的葡萄糖；
(3)将松花粉培养基沸水浴加热至中心温度达到85℃，置于85℃水浴中保温30min，保温时间到后立即冰水降温至室温；
(4)将松花粉培养基的pH调整为5，所用缓冲液为0.2mol/L Na2HPO4；其中，松花粉与培养基的重量比为1:20；
(5)按接种量为10％的菌种比例接种茯苓5.78，在26℃、120r/min条件下发酵10d；
(6)发酵产物保存于-20℃；
(7)以未发酵的松花粉水提物为对照,实验结束后,测定并比较发酵前后的总酚含量和ABTS自由基清除能力。
本实施例中松花粉发酵液的总酚含量可达2.39mg/g，对照组为1.68mg/g；ABTS自由基清除能力40.84μmol/g，对照组为15.13μmol/g。发酵后的花粉总酚含量和抗氧化能力显著增加。
实施例2
一种利用茯苓菌发酵提升松花粉抗氧化活性的工艺，步骤如下：
(1)取破壁松花粉溶于0.1mol/L柠檬酸缓冲液中，搅拌均匀，调节pH为4.3；
(2)向松花粉培养基中加入质量分数1％的葡萄糖；
(3)将松花粉培养基沸水浴加热至中心温度达到85℃，置于85℃水浴中保温30min，保温时间到后立即冰水降温至室温；
(4)将松花粉培养基的pH调整为5，所用缓冲液为0.2mol/L Na2HPO4；其中，松花粉与培养基的重量比为1:20；
(5)按接种量为10％的菌种比例接种茯苓5.78，在26℃、120r/min条件下发酵5d；
(6)发酵产物保存于-20℃；
(7)以未发酵的松花粉水提物为对照,实验结束后,测定并比较发酵前后的总酚含量和ABTS自由基清除能力。
本实施例中松花粉发酵液的总酚含量可达2.29mg/g，对照组为1.68mg/g；ABTS自由基清除能力45.02μmol/g，对照组为15.13μmol/g。发酵后的花粉总酚含量和抗氧化能力显著增加。
实施例3
一种利用茯苓菌发酵提升松花粉抗氧化活性的工艺，步骤如下：
(1)取破壁松花粉溶于0.1mol/L柠檬酸缓冲液中，搅拌均匀，调节pH为4.3；
(2)向松花粉培养基中加入质量分数2％的葡萄糖；
(3)将松花粉培养基沸水浴加热至中心温度达到85℃，置于85℃水浴中保温30min，保温时间到后立即冰水降温至室温；
(4)将松花粉培养基的pH调整为5，所用缓冲液为0.2mol/L Na2HPO4；其中，松花粉与培养基的重量比为1:20；
(5)按接种量为10％的菌种比例接种茯苓5.78，在26℃、120r/min条件下发酵4d；
(6)发酵产物保存于-20℃；
(7)以未发酵的松花粉水提物为对照,实验结束后,测定并比较发酵前后的总酚含量和ABTS自由基清除能力。
本实施例中松花粉发酵液的总酚含量可达2.51mg/g，对照组为1.68mg/g；ABTS自由基清除能力45.39μmol/g，对照组为15.13μmol/g。发酵后的花粉总酚含量和抗氧化能力显著增加。
实施例4
一种利用茯苓菌发酵提升松花粉抗氧化活性的工艺，步骤如下：
(1)取破壁松花粉溶于0.1mol/L柠檬酸缓冲液中，搅拌均匀，调节pH为4.3；
(2)向松花粉培养基中加入质量分数3％的葡萄糖；
(3)将松花粉培养基沸水浴加热至中心温度达到85℃，置于85℃水浴中保温30min，保温时间到后立即冰水降温至室温；
(4)将松花粉培养基的pH调整为5，所用缓冲液为0.2mol/L Na2HPO4；其中，松花粉与培养基的重量比为1:20；
(5)按接种量为10％的菌种比例接种茯苓5.78在26℃、120r/min条件下发酵8d；
(6)发酵产物保存于-20℃；
(7)以未发酵的松花粉水提物为对照,实验结束后,测定并比较发酵前后的总酚含量和ABTS自由基清除能力。
本实施例中松花粉发酵液的总酚含量可达2.74mg/g，对照组为1.68mg/g；ABTS自由基清除能力47.01μmol/g，对照组为15.13μmol/g。发酵后的花粉总酚含量和抗氧化能力显著增加。
实施例5
一种利用茯苓菌发酵提升松花粉抗氧化活性的工艺，步骤如下：
(1)取破壁松花粉溶于0.1mol/L柠檬酸缓冲液中，搅拌均匀，调节pH为4.3；
(2)将松花粉培养基沸水浴加热至中心温度达到85℃，置于85℃水浴中保温30min，保温时间到后立即冰水降温至室温；
(3)将松花粉培养基的pH调整为5，所用缓冲液为0.2mol/L Na2HPO4；其中，松花粉与培养基的重量比为1:20；
(4)按接种量为10％的菌种比例接种茯苓5.78在26℃、120r/min条件下发酵7d；
(5)发酵产物保存于-20℃；
(6)以未发酵的松花粉水提物为对照,实验结束后,测定并比较发酵前后的总酚含量和ABTS自由基清除能力。
本实施例中松花粉发酵液的总酚含量可达2.39mg/g，对照组为1.68mg/g；ABTS自由基清除能力42.48μmol/g，对照组为15.13μmol/g。发酵后的花粉总酚含量和抗氧化能力显著增加。
以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (9)
1.一种利用茯苓菌发酵提升松花粉抗氧化活性的工艺，其特征在于，包括以下步骤：
(1)取破壁松花粉溶于柠檬酸缓冲液中，搅拌均匀，得到松花粉培养基；
(3)将松花粉培养基沸水浴加热至中心温度达到85℃，置于85℃水浴中保温30min，保温时间到后立即冰水降温至室温；
(4)将步骤(3)中的松花粉培养基的pH调整为5；
(5)向步骤(4)的松花粉培养基中加入茯苓，在26℃、120r/min条件下发酵1～10d，得发酵产物。
2.根据权利要求1所述的工艺，其特征在于，在所述步骤(1)和(3)之间还包括以下步骤：(2)向步骤(1)中的松花粉培养基中加入质量分数0.5～3％的葡萄糖。
3.根据权利要求1或2任一项所述的工艺，其特征在于，步骤(5)所述茯苓为茯苓5.78。
4.根据权利要求1或2任一项所述的工艺，其特征在于，步骤(1)所述柠檬酸缓冲液的浓度为0.1mol/L。
5.根据权利要求1或2任一项所述的工艺，其特征在于，步骤(1)用0.1mol/L柠檬酸缓冲液调节初始pH调整为4.3。
6.根据权利要求1或2任一项所述的工艺，其特征在于，步骤(4)用0.2mol/L Na2HPO4溶液调节pH为5。
7.根据权利要求1或2任一项所述的工艺，其特征在于，破壁松花粉：柠檬酸缓冲液+Na2HPO4溶液的重量比为1:20。
8.根据权利要求1或2任一项所述的工艺，其特征在于，步骤(4)中所述Na2HPO4溶液的灭菌条件为121℃，20min。
9.根据权利要求1或2任一项所述的工艺，其特征在于，所述步骤(5)中茯苓与松花粉培养基的体积比为1:10。
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2023
- 2023-01-10 CN CN202310030507.0A patent/CN115868615A/zh active Pending
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