CN115868475B - 一种海洋动物标本保存液及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于动物标本保存技术领域，本发明提供了一种海洋动物标本保存液及其制备方法。本发明提供的海洋动物标本保存液，由包含如下重量份的原料制备得到：洋甘菊提取液30～40份，荷叶提取液25～35份，杜仲提取液25～35份，蒲公英提取液20～30份，乙醇20～30份，ε‑聚赖氨酸15～25份，抗坏血酸15～20份，冰醋酸15～20份，苯甲酸钠10～15份，亚硝酸钠8～13份，水100～150份。本发明提供的海洋动物标本保存液，各个组分配比合理，制备方法简单，各组分之间协同配合，绿色无污染，且无刺激性气味，有良好的杀菌防霉防腐效果，可有效地保持原海洋动物标本的形态结构和色泽，适合标本的长期保存。
Description
技术领域
本发明涉及动物标本保存技术领域，尤其涉及一种海洋动物标本保存液及其制备方法。
背景技术
海洋动物标本是研究海洋资源和生态方面的重要实验材料和实验对象，是海洋生物学、水产养殖学及其他相关学科教学、科研、科普等的基础，同时一件制作精美的生物标本也是一个有价值的工艺美术品，具有很高的观赏价值。以往的海洋动物标本都是采用福尔马林溶液保存。但福尔马林沸点低，在室温时极易挥发，散发出强烈的刺激性气味，会严重污染实验室环境，且福尔马林对人体的健康也存在极大的危害，若人体皮肤直接接触福尔马林时，可能会引发过敏反应、皮炎或是湿疹。为了避免福尔马林的危害，各种新型的动物标本保存液应运而生。但目前的动物标本保存液虽然可以避免福尔马林造成的环境污染及危害人体健康的问题，其依然存在组织易变形、固色效果差等缺陷，对海洋动物标本并不能起到很好的保存作用。因此，如何研制出一种简单高效的标本保存液，以提高对海洋动物标本的固形固色效果以及延长海洋动物标本的保存期限成为本领域技术人员亟待解决的问题。
发明内容
为克服现有技术中存在的上述缺陷，本发明提供了一种海洋动物标本保存液及其制备方法。
为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
本发明提供了一种海洋动物标本保存液，由包含如下重量份的原料制备得到：洋甘菊提取液30～40份，荷叶提取液25～35份，杜仲提取液25～35份，蒲公英提取液20～30份，乙醇20～30份，ε-聚赖氨酸15～25份，抗坏血酸15～20份，冰醋酸15～20份，苯甲酸钠10～15份，亚硝酸钠8～13份，水100～150份。
优选的，由包含如下重量份的原料制备得到：洋甘菊提取液33～47份，荷叶提取液28～32份，杜仲提取液28～32份，蒲公英提取液22～28份，乙醇22～28份，ε-聚赖氨酸18～22份，抗坏血酸16～18份，冰醋酸16～18份，苯甲酸钠12～14份，亚硝酸钠9～11份，水120～140份。
优选的，由包含如下重量份的原料制备得到：洋甘菊提取液35份，荷叶提取液30份，杜仲提取液30份，蒲公英提取液25份，乙醇25份，ε-聚赖氨酸20份，抗坏血酸17份，冰醋酸17份，苯甲酸钠13份，亚硝酸钠10份，水130份。
优选的，所述乙醇的体积分数为75～85％。
优选的，所述洋甘菊提取液、荷叶提取液、杜仲提取液、蒲公英提取液分别由洋甘菊、荷叶、杜仲、蒲公英经粉碎过筛和水提得到。
优选的，所述过筛的目数独立为150～200目。
优选的，所述水提的料液比独立为1g:10～15mL，水提的时间独立为2～3h，水提的温度独立为60～80℃，水提的次数独立为2～4次；所述水提在超声的条件下进行，所述超声的时间独立为20～30min，所述超声的功率独立为200～250W。
本发明还提供了上述一种海洋动物标本保存液的制备方法，包括如下步骤：
(1)将ε-聚赖氨酸、抗坏血酸、冰醋酸、苯甲酸钠、亚硝酸钠与乙醇混合，搅拌，得混合物；
(2)将所述混合物与洋甘菊提取液、荷叶提取液、杜仲提取液、蒲公英提取液、水混合，搅拌，得海洋动物标本保存液。
优选的，步骤(1)中所述搅拌的转速为150～250r/min，所述搅拌的时间为10～15min。
优选的，步骤(2)中所述搅拌的转速为150～250r/min，所述搅拌的时间为20～30min。
与现有技术相比，本发明的有益效果如下：
1、本发明在海洋动物标本保存液中添加了洋甘菊提取液、荷叶提取液、杜仲提取液和蒲公英提取液，上述四种组分作为天然植物药物提取物，不仅具有毒副作用小，安全无污染等优势，还具备优异的抗菌和抗氧化等性能，可有效避免海洋动物标本保存过程中有害菌的滋生。
2、本发明中的ε-聚赖氨酸是一种具有抑菌功效的多肽，将其与洋甘菊提取液、荷叶提取液、杜仲提取液、蒲公英提取液联用，可协同抑制海洋动物标本保存过程中有害菌的繁殖，并有效控制标本的腐败，对海洋动物标本有着良好的防腐和保鲜的效果。
3、本发明中的乙醇除了作为杀菌剂外，还具有较强的脱水作用，能脱除细胞表面的水分，使蛋白分子结构松解，并使蛋白质变性凝固，与苯甲酸钠、亚硝酸钠共同起到防腐作用；冰醋酸的加入可促进富含纤维的组织膨胀吗，减少乙醇对组织的高度收缩和硬化，从而使标本软化；抗坏血酸可起到良好的护色作用。
4、本发明提供的海洋动物标本保存液，各个组分配比合理，制备方法简单，各组分之间协同配合，绿色无污染，且无刺激性气味，有良好的杀菌防霉防腐效果，可有效地保持原海洋动物标本的形态结构和色泽，适合标本的长期保存。
具体实施方式
本发明提供了一种海洋动物标本保存液，由包含如下重量份的原料制备得到：洋甘菊提取液30～40份，荷叶提取液25～35份，杜仲提取液25～35份，蒲公英提取液20～30份，乙醇20～30份，ε-聚赖氨酸15～25份，抗坏血酸15～20份，冰醋酸15～20份，苯甲酸钠10～15份，亚硝酸钠8～13份，水100～150份。
在本发明中，所述的海洋动物标本保存液优选由包含如下重量份的原料制备得到：洋甘菊提取液33～47份，荷叶提取液28～32份，杜仲提取液28～32份，蒲公英提取液22～28份，乙醇22～28份，ε-聚赖氨酸18～22份，抗坏血酸16～18份，冰醋酸16～18份，苯甲酸钠12～14份，亚硝酸钠9～11份，水120～140份。
在本发明中，所述的海洋动物标本保存液进一步优选由包含如下重量份的原料制备得到：洋甘菊提取液35份，荷叶提取液30份，杜仲提取液30份，蒲公英提取液25份，乙醇25份，ε-聚赖氨酸20份，抗坏血酸17份，冰醋酸17份，苯甲酸钠13份，亚硝酸钠10份，水130份。
在本发明中，所述乙醇的体积分数优选为75～85％，进一步优选为78～82％，更进一步优选为80％。
在本发明中，所述洋甘菊提取液、荷叶提取液、杜仲提取液、蒲公英提取液分别优选由洋甘菊、荷叶、杜仲、蒲公英经粉碎过筛和水提得到。
在本发明中，所述过筛的目数独立优选为150～200目，进一步优选为170～190目，更进一步优选为180目。
在本发明中，所述水提的料液比独立优选为1g:10～15mL，进一步优选为1g:12～14mL，更进一步优选为1g:13mL；水提的时间独立优选为2～3h，进一步优选为2.2～2.8h，更进一步优选为2.5h；水提的温度独立优选为60～80℃，进一步优选为65～75℃，更进一步优选为70℃；水提的次数独立优选为2～4次，进一步优选为3次；所述水提优选在超声的条件下进行，所述超声的时间独立优选为20～30min，进一步优选为22～28min，更进一步优选为25min；所述超声的功率独立优选为200～250W，进一步优选为220～240W，更进一步优选为230W。
本发明还提供了上述一种海洋动物标本保存液的制备方法，包括如下步骤：
(1)将ε-聚赖氨酸、抗坏血酸、冰醋酸、苯甲酸钠、亚硝酸钠与乙醇混合，搅拌，得混合物；
(2)将所述混合物与洋甘菊提取液、荷叶提取液、杜仲提取液、蒲公英提取液、水混合，搅拌，得海洋动物标本保存液。
在本发明中，步骤(1)中所述搅拌的转速优选为150～250r/min，进一步优选为180～220r/min，更进一步优选为200r/min；所述搅拌的时间优选为10～15min，进一步优选为12～14min，更进一步优选为13min。
在本发明中，步骤(2)中所述搅拌的转速优选为150～250r/min，进一步优选为180～220r/min，更进一步优选为200r/min；所述搅拌的时间优选为20～30min，进一步优选为23～27min，更进一步优选为25min。
下面结合实施例对本发明提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。
以下实施例中的ε-聚赖氨酸购买自郑州富太化工产品有限公司；抗坏血酸购买自深圳乐芙生物科技有限公司；冰醋酸购买自扬州龙飞环保新材料有限公司；苯甲酸钠购买自江苏嘉仁化工有限公司；亚硝酸钠购买自河南永灿生物科技有限公司。
实施例1
一种海洋动物标本保存液的制备方法，包括如下步骤：
(1)分别将洋甘菊、荷叶、杜仲、蒲公英粉碎过150目筛，然后收集筛下组分分别进行水提，所述水提的料液比均为1g:10mL，水提的时间均为2h，水提的温度均为60℃，水提的次数均为2次；所述水提在超声的条件下进行，所述超声的时间均为20min，所述超声的功率均为200W，得洋甘菊提取液、荷叶提取液、杜仲提取液、蒲公英提取液；
(2)将15份ε-聚赖氨酸、15份抗坏血酸、15份冰醋酸、10份苯甲酸钠、8份亚硝酸钠与20份乙醇混合，于150r/min的转速下搅拌10min，得混合物；
(3)将所述混合物与30份洋甘菊提取液、25份荷叶提取液、25份杜仲提取液、20份蒲公英提取液、100份水混合，于150r/min的转速下搅拌20min，得海洋动物标本保存液。
实施例2
一种海洋动物标本保存液的制备方法，包括如下步骤：
(1)分别将洋甘菊、荷叶、杜仲、蒲公英粉碎过180目筛，然后收集筛下组分分别进行水提，所述水提的料液比均为1g:13mL，水提的时间均为2.5h，水提的温度均为70℃，水提的次数均为3次；所述水提在超声的条件下进行，所述超声的时间均为25min，所述超声的功率均为230W，得洋甘菊提取液、荷叶提取液、杜仲提取液、蒲公英提取液；
(2)将20份ε-聚赖氨酸、17份抗坏血酸、17份冰醋酸、13份苯甲酸钠、10份亚硝酸钠与25份乙醇混合，于200r/min的转速下搅拌13min，得混合物；
(3)将所述混合物与35份洋甘菊提取液、30份荷叶提取液、30份杜仲提取液、25份蒲公英提取液、130份水混合，于200r/min的转速下搅拌25min，得海洋动物标本保存液。
实施例3
一种海洋动物标本保存液的制备方法，包括如下步骤：
(1)分别将洋甘菊、荷叶、杜仲、蒲公英粉碎过200目筛，然后收集筛下组分分别进行水提，所述水提的料液比均为1g:15mL，水提的时间均为3h，水提的温度均为80℃，水提的次数均为4次；所述水提在超声的条件下进行，所述超声的时间均为30min，所述超声的功率均为250W，得洋甘菊提取液、荷叶提取液、杜仲提取液、蒲公英提取液；
(2)将25份ε-聚赖氨酸、20份抗坏血酸、20份冰醋酸、15份苯甲酸钠、13份亚硝酸钠与30份乙醇混合，于250r/min的转速下搅拌15min，得混合物；
(3)将所述混合物与40份洋甘菊提取液、35份荷叶提取液、35份杜仲提取液、30份蒲公英提取液、150份水混合，于250r/min的转速下搅拌30min，得海洋动物标本保存液。
对比例1
与实施例2的区别仅在于：不含有洋甘菊提取液、荷叶提取液、杜仲提取液、蒲公英提取液。
对比例2
与实施例2的区别仅在于：不含有ε-聚赖氨酸。
对比例3
与实施例2的区别仅在于：将洋甘菊提取液用量改为20份，将ε-聚赖氨酸用量改为35份。
实验例1
以实施例1～3和对比例1～3为例，研究不同海洋动物标本保存液的抑菌效果。
供试菌为：大肠杆菌(购买自北纳生物，编号为BNCC335834)、金黄色葡萄球菌(购买自北纳生物，编号为BNCC310011)、铜绿假单胞菌(购买自北纳生物，编号为BNCC185967)、链霉菌(购买自北纳生物，编号为BNCC337584)。
将实施例1～3和对比例1～3中的标本保存液分别用无菌水稀释5倍，制成相同浓度的悬浊液。检测不同标本保存液对上述供试菌的抑制效果。结果如表1所示。
表1不同海洋动物标本保存液的抑菌效果
由表1可知，与对比例1～3相比，本发明实施例1～3对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、链霉菌的抑菌效果更佳，尤其是实施例2，对各供试菌的抑菌率达到了100％。
实验例2
以实施例2和对比例1～3为例，研究不同标本保存液对海洋动物标本固形固色及保存期限的影响。
将4个青鱼标本分别置于实施例2和对比例1～3所得的标本保存液中，观察各标本的形态和色泽。结果如表2所示。
表2不同海洋动物标本保存液对青鱼标本形态和色泽的影响
由表2可知，与对比例1～3相比，采用本发明实施例2的标本保存液保存青鱼标本，可更好地维持青鱼标本的形态结构完整及保持其原有色泽。这表明，本发明提供的标本保存液更利于海洋动物标本的长期保存。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (7)
1.一种海洋动物标本保存液，其特征在于，由如下重量份的原料制备得到：洋甘菊提取液30～40份，荷叶提取液25～35份，杜仲提取液25～35份，蒲公英提取液20～30份，乙醇20～30份，ε-聚赖氨酸15～25份，抗坏血酸15～20份，冰醋酸15～20份，苯甲酸钠10～15份，亚硝酸钠8～13份，水100～150份；
所述洋甘菊提取液、荷叶提取液、杜仲提取液、蒲公英提取液分别由洋甘菊、荷叶、杜仲、蒲公英经粉碎过筛和水提得到；
所述过筛的目数独立为150～200目；
所述水提的料液比独立为1g:10～15mL，水提的时间独立为2～3h，水提的温度独立为60～80℃，水提的次数独立为2～4次；所述水提在超声的条件下进行，所述超声的时间独立为20～30min，所述超声的功率独立为200～250W。
2.根据权利要求1所述的一种海洋动物标本保存液，其特征在于，由如下重量份的原料制备得到：洋甘菊提取液33～47份，荷叶提取液28～32份，杜仲提取液28～32份，蒲公英提取液22～28份，乙醇22～28份，ε-聚赖氨酸18～22份，抗坏血酸16～18份，冰醋酸16～18份，苯甲酸钠12～14份，亚硝酸钠9～11份，水120～140份。
3.根据权利要求1所述的一种海洋动物标本保存液，其特征在于，由如下重量份的原料制备得到：洋甘菊提取液35份，荷叶提取液30份，杜仲提取液30份，蒲公英提取液25份，乙醇25份，ε-聚赖氨酸20份，抗坏血酸17份，冰醋酸17份，苯甲酸钠13份，亚硝酸钠10份，水130份。
4.根据权利要求1所述的一种海洋动物标本保存液，其特征在于，所述乙醇的体积分数为75～85％。
5.权利要求1～4任意一项所述的一种海洋动物标本保存液的制备方法，其特征在于，
包括如下步骤：
(1)将ε-聚赖氨酸、抗坏血酸、冰醋酸、苯甲酸钠、亚硝酸钠与乙醇混合，搅拌，得混合物；
(2)将所述混合物与洋甘菊提取液、荷叶提取液、杜仲提取液、蒲公英提取液、水混合，搅拌，得海洋动物标本保存液。
6.根据权利要求5所述的一种海洋动物标本保存液的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述搅拌的转速为150～250r/min，所述搅拌的时间为10～15min。
7.根据权利要求5所述的一种海洋动物标本保存液的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述搅拌的转速为150～250r/min，所述搅拌的时间为20～30min。
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