CN109258703B - 一种银杏酚酸-鼠李糖脂复合杀菌剂及其制备方法和应用 - Google Patents

一种银杏酚酸-鼠李糖脂复合杀菌剂及其制备方法和应用 Download PDF

Info

Publication number
CN109258703B
CN109258703B CN201811316473.7A CN201811316473A CN109258703B CN 109258703 B CN109258703 B CN 109258703B CN 201811316473 A CN201811316473 A CN 201811316473A CN 109258703 B CN109258703 B CN 109258703B
Authority
CN
China
Prior art keywords
ginkgolic acid
parts
rhamnolipid
extract
bactericide
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CN201811316473.7A
Other languages
English (en)
Other versions
CN109258703A (zh
Inventor
张素军
冷鹏
张祥胜
王军
杨加鑫
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Linyi University
Original Assignee
Linyi University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Linyi University filed Critical Linyi University
Priority to CN201811316473.7A priority Critical patent/CN109258703B/zh
Publication of CN109258703A publication Critical patent/CN109258703A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN109258703B publication Critical patent/CN109258703B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N65/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing material from algae, lichens, bryophyta, multi-cellular fungi or plants, or extracts thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N25/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators, characterised by their forms, or by their non-active ingredients or by their methods of application, e.g. seed treatment or sequential application; Substances for reducing the noxious effect of the active ingredients to organisms other than pests
    • A01N25/30—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators, characterised by their forms, or by their non-active ingredients or by their methods of application, e.g. seed treatment or sequential application; Substances for reducing the noxious effect of the active ingredients to organisms other than pests characterised by the surfactants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N37/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic compounds containing a carbon atom having three bonds to hetero atoms with at the most two bonds to halogen, e.g. carboxylic acids
    • A01N37/36—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic compounds containing a carbon atom having three bonds to hetero atoms with at the most two bonds to halogen, e.g. carboxylic acids containing at least one carboxylic group or a thio analogue, or a derivative thereof, and a singly bound oxygen or sulfur atom attached to the same carbon skeleton, this oxygen or sulfur atom not being a member of a carboxylic group or of a thio analogue, or of a derivative thereof, e.g. hydroxy-carboxylic acids
    • A01N37/38—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic compounds containing a carbon atom having three bonds to hetero atoms with at the most two bonds to halogen, e.g. carboxylic acids containing at least one carboxylic group or a thio analogue, or a derivative thereof, and a singly bound oxygen or sulfur atom attached to the same carbon skeleton, this oxygen or sulfur atom not being a member of a carboxylic group or of a thio analogue, or of a derivative thereof, e.g. hydroxy-carboxylic acids having at least one oxygen or sulfur atom attached to an aromatic ring system
    • A01N37/40—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic compounds containing a carbon atom having three bonds to hetero atoms with at the most two bonds to halogen, e.g. carboxylic acids containing at least one carboxylic group or a thio analogue, or a derivative thereof, and a singly bound oxygen or sulfur atom attached to the same carbon skeleton, this oxygen or sulfur atom not being a member of a carboxylic group or of a thio analogue, or of a derivative thereof, e.g. hydroxy-carboxylic acids having at least one oxygen or sulfur atom attached to an aromatic ring system having at least one carboxylic group or a thio analogue, or a derivative thereof, and one oxygen or sulfur atom attached to the same aromatic ring system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N61/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing substances of unknown or undetermined composition, e.g. substances characterised only by the mode of action
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N65/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing material from algae, lichens, bryophyta, multi-cellular fungi or plants, or extracts thereof
    • A01N65/08—Magnoliopsida [dicotyledons]

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • Agronomy & Crop Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Pest Control & Pesticides (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)

Abstract

本发明公开一种银杏酚酸‑鼠李糖脂复合杀菌剂及其制备方法和应用，属于农药技术领域。本发明是由以下重量份的原料制备而成：银杏酚酸提取物15‑25份、鼠李糖脂10‑15份、增效剂3‑5份、润湿剂1‑3份、分散剂1‑3份、防腐剂0.5‑1份、抗冻剂0.5‑0.8份和填料10‑15份。本发明采用膜技术和大孔吸附树脂相结合的方式分离纯化银杏酚酸，实现了银杏酚酸的高效提取。本发明添加鱼腥草和竹醋液作为增效剂，两者相互配合促进本发明杀菌剂发挥杀菌功效，同时竹醋还具有促进农作物种子发芽、生根、生长的作用，提高作物产量。本发明选用废弃的银杏叶废渣和外种皮作原料制备杀菌剂，减少了化学农药的使用，减轻环境污染。

Description

一种银杏酚酸-鼠李糖脂复合杀菌剂及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及农药技术领域，具体涉及一种银杏酚酸-鼠李糖脂复合杀菌剂及其制备方法和应用。
背景技术
我国银杏资源丰富，尤其是鲁南地区的银杏和银杏叶，因有效成分含量高而享誉国内外。银杏叶中的黄酮类和银杏内酯类物质对心、脑血管疾病具有显著疗效，银杏叶提取物在国内外市场上销量较大，因此国内外研究和开发的重点是黄酮和内酯的提取及应用。银杏酚酸也是银杏叶、果实和外种皮中不可忽略的重要成分，占银杏叶(干)的1～2％，占银杏外种皮(干)的3～5％，提取过黄酮和内酯的银杏叶废渣和废液中仍含有大量的银杏酚酸。由于对银杏酚酸认识不够，长期以来银杏酚酸作为有毒成分被丢弃。这些废弃的银杏外种皮长期露天堆放、自然腐烂降解，其中所含的酚酸等有毒成分随雨水而排入河沟，不但影响堆放场所周边环境，气味难闻，造成资源浪费，更重要的是对周围水域造成污染，毒死鱼虾，威胁到人畜饮用水的安全，破坏生态平衡。
随着国内外科学家对银杏叶提取物及其制剂的深入研究和国际上对银杏叶提取物中银杏酚酸含量的严格控制，促进了对银杏酚酸类物质的研究兴趣。研究表明：银杏酚酸具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤、抗过敏、抑菌、防治病虫害等作用，在化妆品、生物农药和医药方面潜在的应用价值。植物源农药作为生物合理性农药的一部分，其开发研究一直是新农药研究的热点课题之一。植物源农药来源于自然，能在自然界降解，一般不会污染环境及农产品。在环境和人体中积累毒性的可能性不大，对人和牲畜相对安全，对害虫天敌伤害小，具有低毒、低残留的特点，能够保持农产品的高品质。因此植物源农药具有广阔的市场。
目前有利用银杏酚酸制备杀虫杀菌剂的发明，例如CN201711376980.5、专利CN105145666A、专利CN105284955A等，但均存在着活性成分提取率不高、制备工艺复杂、成本高以及灭杀效果不理想等诸多不足之处。
因此，开发利用银杏酚酸来开发一种高效环保低成本的植物源杀菌剂很有必要。
发明内容
本发明目的在于克服现有技术中银杏活性成分提取率不高、杀菌效果不理想等缺陷，提供一种从银杏叶废渣、废液和外种皮中提取银杏酚酸，制备植物源杀菌剂。既省去化学合成过程，避免由此带来的污染，也可以充分利用丢弃的银杏叶废渣和外种皮，变废为宝，提高原料附加值。为实现所述目的，本发明所采用的技术方案是：
一种银杏酚酸-鼠李糖脂复合杀菌剂，是由以下重量份的原料制备而成：银杏酚酸提取物15-25份、鼠李糖脂10-15份、增效剂3-5份、润湿剂1-3份、分散剂1-3份、防腐剂0.5-1份、抗冻剂0.5-0.8份和填料10-15份；所述银杏酚酸提取物是通过以下方法提取而得：
(1)将银杏叶废渣和银杏外种皮干燥粉碎后，置于5倍重量95％的乙醇溶液中，于60℃下浸提6-12h，浸提后超声粉碎1-2h，然后用纱布粗滤，得到粗提液；
(2)将步骤(1)得到的粗提取液在室温下用超滤膜超滤，将经过超滤膜的、分子量小于30000的超滤液在室温下用纳滤膜过滤，截留分子量大于300，取分子量大于300的浓缩液备用；
(3)使用大孔树脂LSA-21装柱层析，柱规格为φ3.0×60cm，取步骤(2)所得浓缩液5ml上柱，使用20％和80％的乙醇溶液交替洗脱2次，流速2ml/min，得洗脱液，将其真空浓缩除去乙醇后得到银杏酚酸粗提物；
(4)将步骤(3)所得银杏酚酸粗提物溶解于50ml石油醚中，使用柱规格为φ3.0×60cm的硅胶柱纯化，使用体积比为80:20:3的石油醚、乙酸乙酯和冰醋酸为洗脱剂以流速2ml/min洗脱1-3次得到洗脱液，然后将洗脱液真空浓缩去除有机溶剂后冷冻干燥得到白色粉末，即为银杏酚酸提取物。
所述增效剂为鱼腥草提取液和竹醋液按照重量比1:2-5混合而成，所述鱼腥草提取液是通过以下方法制备得到：取鱼腥草400g，加适量蒸馏水煎煮三次，每次30min，合并滤液浓缩至1L，即为鱼腥草提取液；所述竹醋液ph为2-4；购自浙江丽水中林高科有限公司。
所述润湿剂为皂角粉、脂肪醇聚氧乙烯醚、烷基硫酸盐、脂肪醇乙氧基化物、烷基酚乙氧基化物中的一种；所述分散剂为木质素或者聚丙烯酸钠；所述填料为硅藻土、膨润土、高岭土中的一种；所述防腐剂为山梨酸盐、对羟基苯甲酸甲酯、双乙酸钠和乳酸钠中的一种；所述抗冻剂为乙二醇或者丙二醇。
本发明所述银杏酚酸-鼠李糖脂复合杀菌剂的制备方法，包括以下步骤：
(1)将银杏叶废渣和银杏外种皮干燥粉碎后，置于5倍重量95％的乙醇溶液中，于60℃下浸提6-12h，浸提后超声粉碎1-2h，然后用纱布粗滤，得到粗提液；
(2)将步骤(1)得到的粗提取液在室温下用超滤膜超滤，将经过超滤膜的、分子量小于30000的超滤液在室温下用纳滤膜过滤，截留分子量大于300，取分子量大于300的浓缩液备用；
(3)使用大孔树脂LSA-21装柱层析，柱规格为φ3.0×60cm，取步骤(2)所得浓缩液5ml上柱，使用20％和80％的乙醇溶液交替洗脱2次，流速2ml/min，得洗脱液，将其真空浓缩除去乙醇后得到银杏酚酸粗提物；
(4)将步骤(3)所得银杏酚酸粗提物溶解于50ml石油醚中，使用柱规格为φ3.0×60cm的硅胶柱纯化，使用体积比为80:20:3的石油醚、乙酸乙酯和冰醋酸为洗脱剂以流速2ml/min洗脱1-3次得到洗脱液，然后将洗脱液真空浓缩去除有机溶剂后冷冻干燥得到白色粉末，即为银杏酚酸提取物；
(5)称取鱼腥草400g，加适量蒸馏水煎煮三次，每次30min，合并滤液浓缩至1L，即为鱼腥草提取液；所述竹醋液PH为2-4，将鱼腥草提取液和竹醋液按重量比混合均匀，得增效剂；
(6)按配比称取填料和步骤(4)所得银杏提取物置于搅拌釜中搅拌混合均匀，然后气流粉碎，过筛，取10-20μm粉体；
(7)按配比称取鼠李糖脂溶解于20倍重量50％的乙醇溶液中，再加入配比量的润湿剂、分散剂、防腐剂、抗冻剂、步骤(5)所得增效剂和步骤(6)所得粉体，混合均匀即得到所述银杏酚酸-鼠李糖脂复合杀菌剂。
本发明所述的杀菌剂可用于防治各类作物的病害。
本发明所用的鼠李糖脂为市购成品，购自陕西亿康龙生物技术有限公司。
鼠李糖脂是由假单胞菌或伯克氏菌类产生的一种生物代谢性质的生物表面活性剂。同时也是一种研究时间最长、应用技术最为成熟的一种生物表面活性剂。它在土壤、水体和植物中都自然存在。它属于一种糖脂类的阴离子表面活性剂。鼠李糖脂作为生物型表面活性剂应用于农业生产，可刺激作物生长，辅助吸收营养、增加农药药效，且对人和动物无毒副作用。
有益效果：本发明从银杏废渣废液中提取银杏酚酸，与鼠李糖脂共同作为活性成分制备杀菌剂，实现其杀菌抑菌功效。
1、银杏酚酸属于植物源农药，植物源农药开发中的一个突出问题是，从植物中提取的有效成分的量有限，生产成本高。本发明采用膜技术和大孔吸附树脂相结合的方式分离纯化银杏酚酸，采用超滤进行纯化，去除色素、颗粒物、多糖和蛋白质等杂质，可以解决分离柱堵塞问题；用大孔吸附树脂分离，可以提高银杏酚酸的收率和纯度，实现了银杏酚酸的高效提取。鼠李糖脂作为环保绿色的生物表面活性剂，添加于杀菌剂中，在喷洒过程中，以疏水基通过色散力吸附在叶面蜡质层的表面，亲水基则伸入药剂中形成定向吸附膜取代了疏水的蜡质层，改善药剂在蜡质层的润湿状况，使杀菌剂充分铺展，促进银杏酚酸最大限度的被利用。同时对其它的农药残留物具备降解能力。
2、鱼腥草为一种具有杀菌抑菌效果的中草药，其活性成分，对各种微生物均有抑制作用。而竹醋液是竹材炭化、热解过程中产生的一种淡黄色液体，具有独特的烟熏香气。竹醋的组成成分复杂，主要成分是水(约占80％)，其次是有机酸、酚类、醇类等。竹醋中的有机成分能够帮助本发明银杏酚酸抑菌物质在植物体表及内部深入渗透，从而增强防治效果。两者相互配合共促进本发明杀菌剂发挥杀菌功效，同时竹醋还具有促进农作物种子发芽、生根、生长的作用，提高作物产量。
我国银杏资源丰富，本发明选用废弃的银杏叶废渣和外种皮作原料，充分利用其中的活性物质，减少了化学农药的使用，减轻环境污染，实现对银杏资源利用的最大化。本发明所得杀菌剂高效环保，且制备工艺简单易行，易于操作。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明的技术方案做进一步说明，但不限于此。
实施例1
一种银杏酚酸-鼠李糖脂复合杀菌剂，是由以下重量份的原料制备而成：银杏酚酸提取物15份、鼠李糖脂10份、增效剂3份、润湿剂1份、分散剂1份、防腐剂0.5份、抗冻剂0.5份和填料10份。
所述增效剂为鱼腥草提取液和竹醋液按照重量比1:2混合而成，所述鱼腥草提取液是通过以下方法制备得到：取鱼腥草400g，加适量蒸馏水煎煮三次，每次30min，合并滤液浓缩至1L，即为鱼腥草提取液；所述竹醋液ph为2-4；购自浙江丽水中林高科有限公司。
所述润湿剂为皂角粉；所述分散剂为木质素；所述填料为硅藻土；所述防腐剂为山梨酸盐，本实施例采用山梨酸钾，所述抗冻剂为乙二醇。
本发明所述银杏酚酸-鼠李糖脂复合杀菌剂的制备方法，包括以下步骤：
(1)将银杏叶废渣和银杏外种皮干燥粉碎后，置于5倍重量95％的乙醇溶液中，于60℃下浸提6h，浸提后超声粉碎1h，然后用纱布粗滤，得到粗提液；
(2)将步骤(1)得到的粗提取液在室温下用超滤膜超滤，将经过超滤膜的、分子量小于30000的超滤液在室温下用纳滤膜过滤，截留分子量大于300，取分子量大于300的浓缩液备用；
(3)使用大孔树脂LSA-21装柱层析，柱规格为φ3.0×60cm，取步骤(2)所得浓缩液5ml上柱，使用20％和80％的乙醇溶液交替洗脱2次，流速2ml/min，得洗脱液，将其真空浓缩除去乙醇后得到银杏酚酸粗提物；
(4)将步骤(3)所得银杏酚酸粗提物溶解于50ml石油醚中，使用柱规格为φ3.0×60cm的硅胶柱纯化，使用体积比为80:20:3的石油醚、乙酸乙酯和冰醋酸为洗脱剂以流速2ml/min洗脱1-3次得到洗脱液，然后将洗脱液真空浓缩去除有机溶剂后冷冻干燥得到白色粉末，即为银杏酚酸提取物；
(5)称取鱼腥草400g，加适量蒸馏水煎煮三次，每次30min，合并滤液浓缩至1L，即为鱼腥草提取液；所述竹醋液PH为2-4，将鱼腥草提取液和竹醋液按重量比混合均匀，得增效剂；
(6)按配比称取填料和步骤(4)所得银杏提取物置于搅拌釜中搅拌混合均匀，然后气流粉碎，过筛，取10-20μm粉体；
(7)按配比称取鼠李糖脂溶解于20倍重量50％的乙醇溶液中，再加入配比量的润湿剂、分散剂、防腐剂、抗冻剂、步骤(5)所得增效剂和步骤(6)所得粉体，混合均匀即得到所述银杏酚酸-鼠李糖脂复合杀菌剂。
本实施例所用的鼠李糖脂为市购成品，购自陕西亿康龙生物技术有限公司。
实施例2
一种银杏酚酸-鼠李糖脂复合杀菌剂，是由以下重量份的原料制备而成：银杏酚酸提取物20份、鼠李糖脂12份、增效剂4份、润湿剂2份、分散剂2份、防腐剂0.8份、抗冻剂0.6份和填料12份。
所述增效剂为鱼腥草提取液和竹醋液按照重量比1:3混合而成，所述鱼腥草提取液是通过以下方法制备得到：取鱼腥草400g，加适量蒸馏水煎煮三次，每次30min，合并滤液浓缩至1L，即为鱼腥草提取液；所述竹醋液ph为2-4；购自浙江丽水中林高科有限公司。
所述润湿剂为脂肪醇聚氧乙烯醚；所述分散剂为聚丙烯酸钠；所述填料为膨润土；所述防腐剂为对羟基苯甲酸甲酯，所述抗冻剂为丙二醇。
本发明所述银杏酚酸-鼠李糖脂复合杀菌剂的制备方法，包括以下步骤：
(1)将银杏叶废渣和银杏外种皮干燥粉碎后，置于5倍重量95％的乙醇溶液中，于60℃下浸提10h，浸提后超声粉碎1.5h，然后用纱布粗滤，得到粗提液；
(2)将步骤(1)得到的粗提取液在室温下用超滤膜超滤，将经过超滤膜的、分子量小于30000的超滤液在室温下用纳滤膜过滤，截留分子量大于300，取分子量大于300的浓缩液备用；
(3)使用大孔树脂LSA-21装柱层析，柱规格为φ3.0×60cm，取步骤(2)所得浓缩液5ml上柱，使用20％和80％的乙醇溶液交替洗脱2次，流速2ml/min，得洗脱液，将其真空浓缩除去乙醇后得到银杏酚酸粗提物；
(4)将步骤(3)所得银杏酚酸粗提物溶解于50ml石油醚中，使用柱规格为φ3.0×60cm的硅胶柱纯化，使用体积比为80:20:3的石油醚、乙酸乙酯和冰醋酸为洗脱剂以流速2ml/min洗脱1-3次得到洗脱液，然后将洗脱液真空浓缩去除有机溶剂后冷冻干燥得到白色粉末，即为银杏酚酸提取物；
(5)称取鱼腥草400g，加适量蒸馏水煎煮三次，每次30min，合并滤液浓缩至1L，即为鱼腥草提取液；所述竹醋液PH为2-4，将鱼腥草提取液和竹醋液按重量比混合均匀，得增效剂；
(6)按配比称取填料和步骤(4)所得银杏提取物置于搅拌釜中搅拌混合均匀，然后气流粉碎，过筛，取10-20μm粉体；
(7)按配比称取鼠李糖脂溶解于20倍重量50％的乙醇溶液中，再加入配比量的润湿剂、分散剂、防腐剂、抗冻剂、步骤(5)所得增效剂和步骤(6)所得粉体，混合均匀即得到所述银杏酚酸-鼠李糖脂复合杀菌剂。
本实施例所用的鼠李糖脂为市购成品，购自陕西亿康龙生物技术有限公司。
实施例3
一种银杏酚酸-鼠李糖脂复合杀菌剂，是由以下重量份的原料制备而成：银杏酚酸提取物25份、鼠李糖脂15份、增效剂5份、润湿剂3份、分散剂3份、防腐剂1份、抗冻剂0.8份和填料15份。
所述增效剂为鱼腥草提取液和竹醋液按照重量比1:5混合而成，所述鱼腥草提取液是通过以下方法制备得到：取鱼腥草400g，加适量蒸馏水煎煮三次，每次30min，合并滤液浓缩至1L，即为鱼腥草提取液；所述竹醋液ph为2-4；购自浙江丽水中林高科有限公司。
所述润湿剂为烷基硫酸盐；所述分散剂为木质素；所述填料为高岭土；所述防腐剂为双乙酸钠，所述抗冻剂为丙二醇。
本发明所述银杏酚酸-鼠李糖脂复合杀菌剂的制备方法，包括以下步骤：
(1)将银杏叶废渣和银杏外种皮干燥粉碎后，置于5倍重量95％的乙醇溶液中，于60℃下浸提6-12h，浸提后超声粉碎1-2h，然后用纱布粗滤，得到粗提液；
(2)将步骤(1)得到的粗提取液在室温下用超滤膜超滤，将经过超滤膜的、分子量小于30000的超滤液在室温下用纳滤膜过滤，截留分子量大于300，取分子量大于300的浓缩液备用；
(3)使用大孔树脂LSA-21装柱层析，柱规格为φ3.0×60cm，取步骤(2)所得浓缩液5ml上柱，使用20％和80％的乙醇溶液交替洗脱2次，流速2ml/min，得洗脱液，将其真空浓缩除去乙醇后得到银杏酚酸粗提物；
(4)将步骤(3)所得银杏酚酸粗提物溶解于50ml石油醚中，使用柱规格为φ3.0×60cm的硅胶柱纯化，使用体积比为80:20:3的石油醚、乙酸乙酯和冰醋酸为洗脱剂以流速2ml/min洗脱1-3次得到洗脱液，然后将洗脱液真空浓缩去除有机溶剂后冷冻干燥得到白色粉末，即为银杏酚酸提取物；
(5)称取鱼腥草400g，加适量蒸馏水煎煮三次，每次30min，合并滤液浓缩至1L，即为鱼腥草提取液；所述竹醋液PH为2-4，将鱼腥草提取液和竹醋液按重量比混合均匀，得增效剂；
(6)按配比称取填料和步骤(4)所得银杏提取物置于搅拌釜中搅拌混合均匀，然后气流粉碎，过筛，取10-20μm粉体；
(7)按配比称取鼠李糖脂溶解于20倍重量50％的乙醇溶液中，再加入配比量的润湿剂、分散剂、防腐剂、抗冻剂、步骤(5)所得增效剂和步骤(6)所得粉体，混合均匀即得到所述银杏酚酸-鼠李糖脂复合杀菌剂。
本发明所用的鼠李糖脂为市购成品，购自陕西亿康龙生物技术有限公司。
对比例1
本对比例原料配方及制备方法基本同实施例3，与之不同的是不包含银杏酚酸提取物的添加及其制备的部分。
对比例2
本对比例原料配方及制备方法基本同实施例3，与之不同的是不包含鼠李糖脂的添加。
对比例3
本对比例原料配方及制备方法基本同实施例3，与之不同的是不包含增效剂的添加及其制备的部分。
杀菌效果实验：
选取黑曲霉菌、金黄色葡萄球菌以及白色念珠菌作为验证菌剂，制备菌悬液进行验证试验。取各试验指标菌的纯培养分离的典型菌落接种营养肉汤经增菌培养，参照麦氏比浊法，配制含菌量在1×108cfu/L～5×108cfu/L的菌悬液，备用。
在无菌试管内加入菌悬液0.1ml与实施例1-3以及对比例1-3所得杀菌剂5ml，作用至设定时间，吸取0.1ml混合液置于营养琼脂培养基平板上涂布均匀。置于37℃培养后计数菌落数，计算平均杀灭率。试验重复3次。
评价指标：
存活率(％)＝1一杀菌率(％)。
协同系数(T/E)值＝各因子单独作用时细菌存活百分率之乘积/多因子共同作用实测细菌存活百分率(存活率为0时，按0.0001％计算)。T/E值为判断复合增效作用强弱的标准，T/E值小于1为拮抗作用，等于1为相加作用，大于1为协同作用，其值愈大，协同作用愈强。实验结果如下表所示：
表1杀菌效果实验数据
Figure GDA0001873692660000081
通过对比例1、2和实施例3，计算银杏酚酸和鼠李糖脂的T/E值，我们可以看出，其值均大于1，且时间越长，协同作用越明显。这是因为，鼠李糖脂作为生物型表面活性剂，其可促进植物源活性成分银杏酚酸更好的铺展与作用在菌体，促进其高效的发挥其杀菌功能。应用试验
试验地：山东省临沂市的某蔬菜种植基地作为试验田，采用随机区组设计，共设7个处理，分别为S1-S7，实验其对番茄、白菜病害的防治效果。
S1：实施例1所得杀菌剂，稀释倍数500后使用；
S2：实施例2所得杀菌剂，稀释倍数500倍使用；
S3：实施例3所得杀菌剂，稀释倍数500倍使用；
S4：对比例1所得杀菌剂，稀释倍数500倍使用；
S5：对比例2所得杀菌剂，稀释倍数500倍使用；
S6：对比例3所得杀菌剂，稀释倍数500倍使用；
S7为空白对照，施加同等重量的清水。
2015年至2017年连续3年在该试验田以露天种植方式进行白菜、番茄种植试验，7处理组，每处理组种植方法及种植密度均相同，其他田间管理各个处理组均相同，收获期统计产量和病株率，并统计整个生长周期病害发生情况。实验结果见表2：
表2白菜、番茄种植实验结果
Figure GDA0001873692660000091
从实验数据可以看出使用本发明实施例的试验组，其产量明显高于对比例和空白对照组，病株率控制于2％左右，大大减少番茄和白菜的病害率。究其原因，是由于本发明使用膜分离、树脂分离相结合的方式实现了银杏酚酸的高效提取，同时添加鼠李糖脂、鱼腥草和竹醋液等成分，促进银杏酚酸活性成分高效发挥抑菌杀菌作用。
需要说明的是，上述实施例仅仅是实现本发明的优选方式的部分实施例，而非全部实施例。显然，基于本发明的上述实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的其他所有实施例，都应当属于本发明保护的范围。

Claims (3)

1.一种银杏酚酸-鼠李糖脂复合杀菌剂，其特征在于，是由以下重量份的原料制备而成：银杏酚酸提取物15-25份、鼠李糖脂10-15份、增效剂3-5份、润湿剂1-3份、分散剂1-3份、防腐剂0.5-1份、抗冻剂0.5-0.8份和填料10-15份；所述银杏酚酸提取物是通过以下方法提取而得：
(1)将银杏叶废渣和银杏外种皮干燥粉碎后，置于5倍重量95％的乙醇溶液中，于60℃下浸提6-12h，浸提后超声粉碎1-2h，然后用纱布粗滤，得到粗提液；
(2)将步骤(1)得到的粗提取液在室温下用超滤膜超滤，将经过超滤膜的、分子量小于30000的超滤液在室温下用纳滤膜过滤，截留分子量大于300，取分子量大于300的浓缩液备用；
(3)使用大孔树脂LSA-21装柱层析，柱规格为φ3.0×60cm，取步骤(2)所得浓缩液5ml上柱，使用20％和80％的乙醇溶液交替洗脱2次，流速2ml/min，得洗脱液，将其真空浓缩除去乙醇后得到银杏酚酸粗提物；
(4)将步骤(3)所得银杏酚酸粗提物溶解于50ml石油醚中，使用柱规格为φ3.0×60cm的硅胶柱纯化，使用体积比为80:20:3的石油醚、乙酸乙酯和冰醋酸为洗脱剂以流速2ml/min洗脱1-3次得到洗脱液，然后将洗脱液真空浓缩去除有机溶剂后冷冻干燥得到白色粉末，即为银杏酚酸提取物；
所述增效剂为鱼腥草提取液和竹醋液按照重量比1:2-5混合而成，所述鱼腥草提取液是通过以下方法制备得到：称取鱼腥草400g，加适量蒸馏水煎煮三次，每次30min，合并滤液浓缩至1L，即为鱼腥草提取液；所述竹醋液PH为2-4。
2.根据权利要求1所述银杏酚酸-鼠李糖脂复合杀菌剂，其特征在于，所述润湿剂为皂角粉、脂肪醇聚氧乙烯醚、烷基硫酸盐、脂肪醇乙氧基化物、烷基酚乙氧基化物中的一种；所述分散剂为木质素或者聚丙烯酸钠；所述填料为硅藻土、膨润土、高岭土中的一种；所述防腐剂为山梨酸盐、对羟基苯甲酸甲酯、双乙酸钠和乳酸钠中的一种；所述抗冻剂为乙二醇或者丙二醇。
3.一种权利要求1-2任意一项所述银杏酚酸-鼠李糖脂复合杀菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将银杏叶废渣和银杏外种皮干燥粉碎后，置于5倍重量95％的乙醇溶液中，于60℃下浸提6-12h，浸提后超声粉碎1-2h，然后用纱布粗滤，得到粗提液；
(2)将步骤(1)得到的粗提取液在室温下用超滤膜超滤，将经过超滤膜的、分子量小于30000的超滤液在室温下用纳滤膜过滤，截留分子量大于300，取分子量大于300的浓缩液备用；
(3)使用大孔树脂LSA-21装柱层析，柱规格为φ3.0×60cm，取步骤(2)所得浓缩液5ml上柱，使用20％和80％的乙醇溶液交替洗脱2次，流速2ml/min，得洗脱液，将其真空浓缩除去乙醇后得到银杏酚酸粗提物；
(4)将步骤(3)所得银杏酚酸粗提物溶解于50ml石油醚中，使用柱规格为φ3.0×60cm的硅胶柱纯化，使用体积比为80:20:3的石油醚、乙酸乙酯和冰醋酸为洗脱剂以流速2ml/min洗脱1-3次得到洗脱液，然后将洗脱液真空浓缩去除有机溶剂后冷冻干燥得到白色粉末，即为银杏酚酸提取物；
(5)称取鱼腥草400g，加适量蒸馏水煎煮三次，每次30min，合并滤液浓缩至1L，即为鱼腥草提取液；所述竹醋液PH为2-4，将鱼腥草提取液和竹醋液按重量比混合均匀，得增效剂；
(6)按配比称取填料和步骤(4)所得银杏提取物置于搅拌釜中搅拌混合均匀，然后气流粉碎，过筛，取10-20μm粉体；
(7)按配比称取鼠李糖脂溶解于20倍重量50％的乙醇溶液中，再加入配比量的润湿剂、分散剂、防腐剂、抗冻剂、步骤(5)所得增效剂和步骤(6)所得粉体，混合均匀即得到所述银杏酚酸-鼠李糖脂复合杀菌剂。
CN201811316473.7A 2018-11-07 2018-11-07 一种银杏酚酸-鼠李糖脂复合杀菌剂及其制备方法和应用 Expired - Fee Related CN109258703B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201811316473.7A CN109258703B (zh) 2018-11-07 2018-11-07 一种银杏酚酸-鼠李糖脂复合杀菌剂及其制备方法和应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201811316473.7A CN109258703B (zh) 2018-11-07 2018-11-07 一种银杏酚酸-鼠李糖脂复合杀菌剂及其制备方法和应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN109258703A CN109258703A (zh) 2019-01-25
CN109258703B true CN109258703B (zh) 2021-01-26

Family

ID=65192414

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201811316473.7A Expired - Fee Related CN109258703B (zh) 2018-11-07 2018-11-07 一种银杏酚酸-鼠李糖脂复合杀菌剂及其制备方法和应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN109258703B (zh)

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110301717A (zh) * 2019-07-04 2019-10-08 邳州市尕星医药技术服务有限公司 一种基于防治足癣的鞋垫
CN110313679A (zh) * 2019-07-04 2019-10-11 邳州市尕星医药技术服务有限公司 一种丝瓜络药物布鞋
CN110419531A (zh) * 2019-08-19 2019-11-08 临沂大学 一种银杏酚酸可湿性粉剂
CN113170793B (zh) * 2021-04-28 2021-11-05 临沂市农业科学院 一种宁南霉素和银杏酚酸复合杀菌剂及其制备方法
CN115944691B (zh) * 2022-12-29 2024-06-04 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 竹醋和中药提取物的组合物在制备抗氧化产品中的应用
CN116059298B (zh) * 2022-12-29 2024-04-12 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 一种抑菌组合物及其应用

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101326921A (zh) * 2008-07-11 2008-12-24 广西大学 银杏酚酸微乳剂
CN103070167A (zh) * 2010-03-30 2013-05-01 湖州紫金生物科技有限公司 一种鼠李糖脂作为助剂的应用
CN104472555A (zh) * 2015-01-05 2015-04-01 临沂大学 一种含有银杏提取物下脚料的杀虫剂及其制备方法
CN106832045A (zh) * 2015-12-02 2017-06-13 中国科学院大连化学物理研究所 一种银杏外种皮同时提取果胶和酚酸类化合物的方法

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101326921A (zh) * 2008-07-11 2008-12-24 广西大学 银杏酚酸微乳剂
CN103070167A (zh) * 2010-03-30 2013-05-01 湖州紫金生物科技有限公司 一种鼠李糖脂作为助剂的应用
CN104472555A (zh) * 2015-01-05 2015-04-01 临沂大学 一种含有银杏提取物下脚料的杀虫剂及其制备方法
CN106832045A (zh) * 2015-12-02 2017-06-13 中国科学院大连化学物理研究所 一种银杏外种皮同时提取果胶和酚酸类化合物的方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN109258703A (zh) 2019-01-25

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN109258703B (zh) 一种银杏酚酸-鼠李糖脂复合杀菌剂及其制备方法和应用
CN102273715B (zh) 一种淡竹叶提取物天然食品防腐剂及其制备方法
CN107759401A (zh) 一种有机肥料及其制备方法
DE102007004500B4 (de) Verwendung einer einen Extrakt aus Sapindus beinhaltenden Formulierung zur Behandlung einer durch Pilze und/oder Oomyceten unterstützten oder verursachten Pflanzenerkrankung
CN102217661B (zh) 植物源杀菌剂及其制备方法和应用
CN107494713A (zh) 一种蔬菜水果保鲜剂及其制备方法
CN106478275A (zh) 一种防治烟草病害的复合农药及其制备方法
CN101897347A (zh) 一种植物源抑菌剂及其制备方法和应用
CN105407725B (zh) 选择性控制入侵种的组合物和方法
CN108077330A (zh) 防治油茶病虫害的生物农药及其制备方法
CN106332921B (zh) 一种植物源杀虫剂及其制备方法和应用
CN109287665B (zh) 一种银杏酚酸-阿维菌素复合杀虫剂及其制备方法
CN117136967A (zh) 一种可防治植物真菌病害的生物刺激素及其制备方法
CN104430636A (zh) 一种防治芦笋病虫害的组合物
CN110066200A (zh) 基于澳洲茶树精油加工剩余物的羊肚菌栽培基质及其制作方法
CN108935536A (zh) 一种抑制水华的天然药物及其制备方法
KR102509566B1 (ko) 식물의 약성과 유황 발효를 통해 얻어지는 미생물 및 이를 이용한 살균·살충·탈취제의 제조방법
CN109156478A (zh) 一种多元植物源防腐剂及其用途
CN106490048A (zh) 一种防治十字花科蔬菜病虫害的绿色农药及其制备方法
CN106818720A (zh) 一种天然来源的蜗牛驱杀水剂的制备方法
CN112608183A (zh) 生物中医药有机肥功能富养剂及其肥料和肥料制备方法
CN105542783A (zh) 一种利用食醋厂废液的腐植酸型无机保水剂及其制备方法
CN1275527C (zh) 植物源农药及其生产方法
CN103609603A (zh) 一种植物源杀虫剂及其制备方法
KR102558841B1 (ko) 친환경 잡초관리제 및 그 제조 방법

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20210126

Termination date: 20211107

CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee