CN109258703A - 一种银杏酚酸-鼠李糖脂复合杀菌剂及其制备方法和应用 - Google Patents

一种银杏酚酸-鼠李糖脂复合杀菌剂及其制备方法和应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开一种银杏酚酸‑鼠李糖脂复合杀菌剂及其制备方法和应用,属于农药技术领域。本发明是由以下重量份的原料制备而成:银杏酚酸提取物15‑25份、鼠李糖脂10‑15份、增效剂3‑5份、润湿剂1‑3份、分散剂1‑3份、防腐剂0.5‑1份、抗冻剂0.5‑0.8份和填料10‑15份。本发明采用膜技术和大孔吸附树脂相结合的方式分离纯化银杏酚酸,实现了银杏酚酸的高效提取。本发明添加鱼腥草和竹醋液作为增效剂,两者相互配合促进本发明杀菌剂发挥杀菌功效,同时竹醋还具有促进农作物种子发芽、生根、生长的作用,提高作物产量。本发明选用废弃的银杏叶废渣和外种皮作原料制备杀菌剂,减少了化学农药的使用,减轻环境污染。

Description

一种银杏酚酸-鼠李糖脂复合杀菌剂及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及农药技术领域,具体涉及一种银杏酚酸-鼠李糖脂复合杀菌剂及其制备方法和 应用。
背景技术
我国银杏资源丰富,尤其是鲁南地区的银杏和银杏叶,因有效成分含量高而享誉国内外。 银杏叶中的黄酮类和银杏内酯类物质对心、脑血管疾病具有显著疗效,银杏叶提取物在国内 外市场上销量较大,因此国内外研究和开发的重点是黄酮和内酯的提取及应用。银杏酚酸也 是银杏叶、果实和外种皮中不可忽略的重要成分,占银杏叶(干)的1~2%,占银杏外种皮(干) 的3~5%,提取过黄酮和内酯的银杏叶废渣和废液中仍含有大量的银杏酚酸。由于对银杏酚酸 认识不够,长期以来银杏酚酸作为有毒成分被丢弃。这些废弃的银杏外种皮长期露天堆放、 自然腐烂降解,其中所含的酚酸等有毒成分随雨水而排入河沟,不但影响堆放场所周边环境, 气味难闻,造成资源浪费,更重要的是对周围水域造成污染,毒死鱼虾,威胁到人畜饮用水 的安全,破坏生态平衡。
随着国内外科学家对银杏叶提取物及其制剂的深入研究和国际上对银杏叶提取物中银杏 酚酸含量的严格控制,促进了对银杏酚酸类物质的研究兴趣。研究表明:银杏酚酸具有抗氧 化、抗炎、抗肿瘤、抗过敏、抑菌、防治病虫害等作用,在化妆品、生物农药和医药方面潜 在的应用价值。植物源农药作为生物合理性农药的一部分,其开发研究一直是新农药研究的 热点课题之一。植物源农药来源于自然,能在自然界降解,一般不会污染环境及农产品。在 环境和人体中积累毒性的可能性不大,对人和牲畜相对安全,对害虫天敌伤害小,具有低毒、 低残留的特点,能够保持农产品的高品质。因此植物源农药具有广阔的市场。
目前有利用银杏酚酸制备杀虫杀菌剂的发明,例如CN201711376980.5、专利CN105145666A、专利CN105284955A等,但均存在着活性成分提取率不高、制备工艺复杂、 成本高以及灭杀效果不理想等诸多不足之处。
因此,开发利用银杏酚酸来开发一种高效环保低成本的植物源杀菌剂很有必要。
发明内容
本发明目的在于克服现有技术中银杏活性成分提取率不高、杀菌效果不理想等缺陷,提 供一种从银杏叶废渣、废液和外种皮中提取银杏酚酸,制备植物源杀菌剂。既省去化学合成 过程,避免由此带来的污染,也可以充分利用丢弃的银杏叶废渣和外种皮,变废为宝,提高 原料附加值。为实现所述目的,本发明所采用的技术方案是:
一种银杏酚酸-鼠李糖脂复合杀菌剂,是由以下重量份的原料制备而成:银杏酚酸提取物15-25份、鼠李糖脂10-15份、增效剂3-5份、润湿剂1-3份、分散剂1-3份、防腐剂0.5-1份、 抗冻剂0.5-0.8份和填料10-15份;所述银杏酚酸提取物是通过以下方法提取而得:
(1)将银杏叶废渣和银杏外种皮干燥粉碎后,置于5倍重量95%的乙醇溶液中,于60℃ 下浸提6-12h,浸提后超声粉碎1-2h,然后用纱布粗滤,得到粗提液;
(2)将步骤(1)得到的粗提取液在室温下用超滤膜超滤,将经过超滤膜的、分子量小于30000的超滤液在室温下用纳滤膜过滤,截留分子量大于300,取分子量大于300的浓缩液备用;
(3)使用大孔树脂LSA-21装柱层析,柱规格为φ3.0×60cm,取步骤(2)所得浓缩液5ml上柱,使用20%和80%的乙醇溶液交替洗脱2次,流速2ml/min,得洗脱液,将其真 空浓缩除去乙醇后得到银杏酚酸粗提物;
(4)将步骤(3)所得银杏酚酸粗提物溶解于50ml石油醚中,使用柱规格为φ3.0×60cm 的硅胶柱纯化,使用体积比为80:20:3的石油醚、乙酸乙酯和冰醋酸为洗脱剂以流速2ml/min 洗脱1-3次得到洗脱液,然后将洗脱液真空浓缩去除有机溶剂后冷冻干燥得到白色粉末,即 为银杏酚酸提取物。
所述增效剂为鱼腥草提取液和竹醋液按照重量比1:2-5混合而成,所述鱼腥草提取液是通 过以下方法制备得到:取鱼腥草400g,加适量蒸馏水煎煮三次,每次30min,合并滤液浓 缩至1L,即为鱼腥草提取液;所述竹醋液ph为2-4;购自浙江丽水中林高科有限公司。
所述润湿剂为皂角粉、脂肪醇聚氧乙烯醚、烷基硫酸盐、脂肪醇乙氧基化物、烷基酚乙 氧基化物中的一种;所述分散剂为木质素或者聚丙烯酸钠;所述填料为硅藻土、膨润土、高 岭土中的一种;所述防腐剂为山梨酸盐、对羟基苯甲酸甲酯、双乙酸钠和乳酸钠中的一种; 所述抗冻剂为乙二醇或者丙二醇。
本发明所述银杏酚酸-鼠李糖脂复合杀菌剂的制备方法,包括以下步骤:
(1)将银杏叶废渣和银杏外种皮干燥粉碎后,置于5倍重量95%的乙醇溶液中,于60℃ 下浸提6-12h,浸提后超声粉碎1-2h,然后用纱布粗滤,得到粗提液;
(2)将步骤(1)得到的粗提取液在室温下用超滤膜超滤,将经过超滤膜的、分子量小于30000的超滤液在室温下用纳滤膜过滤,截留分子量大于300,取分子量大于300的浓缩液备用;
(3)使用大孔树脂LSA-21装柱层析,柱规格为φ3.0×60cm,取步骤(2)所得浓缩液5ml上柱,使用20%和80%的乙醇溶液交替洗脱2次,流速2ml/min,得洗脱液,将其真 空浓缩除去乙醇后得到银杏酚酸粗提物;
(4)将步骤(3)所得银杏酚酸粗提物溶解于50ml石油醚中,使用柱规格为φ3.0×60cm 的硅胶柱纯化,使用体积比为80:20:3的石油醚、乙酸乙酯和冰醋酸为洗脱剂以流速2ml/min 洗脱1-3次得到洗脱液,然后将洗脱液真空浓缩去除有机溶剂后冷冻干燥得到白色粉末,即 为银杏酚酸提取物;
(5)称取鱼腥草400g,加适量蒸馏水煎煮三次,每次30min,合并滤液浓缩至1L, 即为鱼腥草提取液;所述竹醋液PH为2-4,将鱼腥草提取液和竹醋液按重量比混合均匀,得 增效剂;
(6)按配比称取填料和步骤(4)所得银杏提取物置于搅拌釜中搅拌混合均匀,然后气流粉碎,过筛,取10-20μm粉体;
(7)按配比称取鼠李糖脂溶解于20倍重量50%的乙醇溶液中,再加入配比量的润湿剂、 分散剂、防腐剂、抗冻剂、步骤(5)所得增效剂和步骤(6)所得粉体,混合均匀即得到所 述银杏酚酸-鼠李糖脂复合杀菌剂。
本发明所述的杀菌剂可用于防治各类作物的病害。
本发明所用的鼠李糖脂为市购成品,购自陕西亿康龙生物技术有限公司。
鼠李糖脂是由假单胞菌或伯克氏菌类产生的一种生物代谢性质的生物表面活性剂。同时 也是一种研究时间最长、应用技术最为成熟的一种生物表面活性剂。它在土壤、水体和植物 中都自然存在。它属于一种糖脂类的阴离子表面活性剂。鼠李糖脂作为生物型表面活性剂应 用于农业生产,可刺激作物生长,辅助吸收营养、增加农药药效,且对人和动物无毒副作用。
有益效果:本发明从银杏废渣废液中提取银杏酚酸,与鼠李糖脂共同作为活性成分制备 杀菌剂,实现其杀菌抑菌功效。
1、银杏酚酸属于植物源农药,植物源农药开发中的一个突出问题是,从植物中提取的有效 成分的量有限,生产成本高。本发明采用膜技术和大孔吸附树脂相结合的方式分离纯化 银杏酚酸,采用超滤进行纯化,去除色素、颗粒物、多糖和蛋白质等杂质,可以解决分 离柱堵塞问题;用大孔吸附树脂分离,可以提高银杏酚酸的收率和纯度,实现了银杏酚酸的高效提取。鼠李糖脂作为环保绿色的生物表面活性剂,添加于杀菌剂中,在喷洒过 程中,以疏水基通过色散力吸附在叶面蜡质层的表面,亲水基则伸入药剂中形成定向吸 附膜取代了疏水的蜡质层,改善药剂在蜡质层的润湿状况,使杀菌剂充分铺展,促进银 杏酚酸最大限度的被利用。同时对其它的农药残留物具备降解能力。
2、鱼腥草为一种具有杀菌抑菌效果的中草药,其活性成分,对各种微生物均有抑制作用。 而竹醋液是竹材炭化、热解过程中产生的一种淡黄色液体,具有独特的烟熏香气。竹醋 的组成成分复杂,主要成分是水(约占80%),其次是有机酸、酚类、醇类等。竹醋中的有机成分能够帮助本发明银杏酚酸抑菌物质在植物体表及内部深入渗透,从而增强防治效果。两者相互配合共促进本发明杀菌剂发挥杀菌功效,同时竹醋还具有促进农作物种 子发芽、生根、生长的作用,提高作物产量。
我国银杏资源丰富,本发明选用废弃的银杏叶废渣和外种皮作原料,充分利用其中的活 性物质,减少了化学农药的使用,减轻环境污染,实现对银杏资源利用的最大化。本发明所 得杀菌剂高效环保,且制备工艺简单易行,易于操作。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明的技术方案做进一步说明,但不限于此。
实施例1
一种银杏酚酸-鼠李糖脂复合杀菌剂,是由以下重量份的原料制备而成:银杏酚酸提取物 15份、鼠李糖脂10份、增效剂3份、润湿剂1份、分散剂1份、防腐剂0.5份、抗冻剂0.5份和填料10份。
所述增效剂为鱼腥草提取液和竹醋液按照重量比1:2混合而成,所述鱼腥草提取液是通 过以下方法制备得到:取鱼腥草400g,加适量蒸馏水煎煮三次,每次30min,合并滤液浓 缩至1L,即为鱼腥草提取液;所述竹醋液ph为2-4;购自浙江丽水中林高科有限公司。
所述润湿剂为皂角粉;所述分散剂为木质素;所述填料为硅藻土;所述防腐剂为山梨酸 盐,本实施例采用山梨酸钾,所述抗冻剂为乙二醇。
本发明所述银杏酚酸-鼠李糖脂复合杀菌剂的制备方法,包括以下步骤:
(1)将银杏叶废渣和银杏外种皮干燥粉碎后,置于5倍重量95%的乙醇溶液中,于60℃ 下浸提6h,浸提后超声粉碎1h,然后用纱布粗滤,得到粗提液;
(2)将步骤(1)得到的粗提取液在室温下用超滤膜超滤,将经过超滤膜的、分子量小于30000的超滤液在室温下用纳滤膜过滤,截留分子量大于300,取分子量大于300的浓缩液备用;
(3)使用大孔树脂LSA-21装柱层析,柱规格为φ3.0×60cm,取步骤(2)所得浓缩液5ml上柱,使用20%和80%的乙醇溶液交替洗脱2次,流速2ml/min,得洗脱液,将其真 空浓缩除去乙醇后得到银杏酚酸粗提物;
(4)将步骤(3)所得银杏酚酸粗提物溶解于50ml石油醚中,使用柱规格为φ3.0×60cm 的硅胶柱纯化,使用体积比为80:20:3的石油醚、乙酸乙酯和冰醋酸为洗脱剂以流速2ml/min 洗脱1-3次得到洗脱液,然后将洗脱液真空浓缩去除有机溶剂后冷冻干燥得到白色粉末,即 为银杏酚酸提取物;
(5)称取鱼腥草400g,加适量蒸馏水煎煮三次,每次30min,合并滤液浓缩至1L, 即为鱼腥草提取液;所述竹醋液PH为2-4,将鱼腥草提取液和竹醋液按重量比混合均匀,得 增效剂;
(6)按配比称取填料和步骤(4)所得银杏提取物置于搅拌釜中搅拌混合均匀,然后气流粉碎,过筛,取10-20μm粉体;
(7)按配比称取鼠李糖脂溶解于20倍重量50%的乙醇溶液中,再加入配比量的润湿 剂、分散剂、防腐剂、抗冻剂、步骤(5)所得增效剂和步骤(6)所得粉体,混合均匀即得 到所述银杏酚酸-鼠李糖脂复合杀菌剂。
本实施例所用的鼠李糖脂为市购成品,购自陕西亿康龙生物技术有限公司。
实施例2
一种银杏酚酸-鼠李糖脂复合杀菌剂,是由以下重量份的原料制备而成:银杏酚酸提取物 20份、鼠李糖脂12份、增效剂4份、润湿剂2份、分散剂2份、防腐剂0.8份、抗冻剂0.6份和填料12份。
所述增效剂为鱼腥草提取液和竹醋液按照重量比1:3混合而成,所述鱼腥草提取液是通 过以下方法制备得到:取鱼腥草400g,加适量蒸馏水煎煮三次,每次30min,合并滤液浓 缩至1L,即为鱼腥草提取液;所述竹醋液ph为2-4;购自浙江丽水中林高科有限公司。
所述润湿剂为脂肪醇聚氧乙烯醚;所述分散剂为聚丙烯酸钠;所述填料为膨润土;所述 防腐剂为对羟基苯甲酸甲酯,所述抗冻剂为丙二醇。
本发明所述银杏酚酸-鼠李糖脂复合杀菌剂的制备方法,包括以下步骤:
(1)将银杏叶废渣和银杏外种皮干燥粉碎后,置于5倍重量95%的乙醇溶液中,于60℃ 下浸提10h,浸提后超声粉碎1.5h,然后用纱布粗滤,得到粗提液;
(2)将步骤(1)得到的粗提取液在室温下用超滤膜超滤,将经过超滤膜的、分子量小于30000的超滤液在室温下用纳滤膜过滤,截留分子量大于300,取分子量大于300的浓缩液备用;
(3)使用大孔树脂LSA-21装柱层析,柱规格为φ3.0×60cm,取步骤(2)所得浓缩液5ml上柱,使用20%和80%的乙醇溶液交替洗脱2次,流速2ml/min,得洗脱液,将其真 空浓缩除去乙醇后得到银杏酚酸粗提物;
(4)将步骤(3)所得银杏酚酸粗提物溶解于50ml石油醚中,使用柱规格为φ3.0×60cm 的硅胶柱纯化,使用体积比为80:20:3的石油醚、乙酸乙酯和冰醋酸为洗脱剂以流速2ml/min 洗脱1-3次得到洗脱液,然后将洗脱液真空浓缩去除有机溶剂后冷冻干燥得到白色粉末,即 为银杏酚酸提取物;
(5)称取鱼腥草400g,加适量蒸馏水煎煮三次,每次30min,合并滤液浓缩至1L, 即为鱼腥草提取液;所述竹醋液PH为2-4,将鱼腥草提取液和竹醋液按重量比混合均匀,得 增效剂;
(6)按配比称取填料和步骤(4)所得银杏提取物置于搅拌釜中搅拌混合均匀,然后气流粉碎,过筛,取10-20μm粉体;
(7)按配比称取鼠李糖脂溶解于20倍重量50%的乙醇溶液中,再加入配比量的润湿 剂、分散剂、防腐剂、抗冻剂、步骤(5)所得增效剂和步骤(6)所得粉体,混合均匀即得 到所述银杏酚酸-鼠李糖脂复合杀菌剂。
本实施例所用的鼠李糖脂为市购成品,购自陕西亿康龙生物技术有限公司。
实施例3
一种银杏酚酸-鼠李糖脂复合杀菌剂,是由以下重量份的原料制备而成:银杏酚酸提取物 25份、鼠李糖脂15份、增效剂5份、润湿剂3份、分散剂3份、防腐剂1份、抗冻剂0.8份和填料15份。
所述增效剂为鱼腥草提取液和竹醋液按照重量比1:5混合而成,所述鱼腥草提取液是通 过以下方法制备得到:取鱼腥草400g,加适量蒸馏水煎煮三次,每次30min,合并滤液浓 缩至1L,即为鱼腥草提取液;所述竹醋液ph为2-4;购自浙江丽水中林高科有限公司。
所述润湿剂为烷基硫酸盐;所述分散剂为木质素;所述填料为高岭土;所述防腐剂为双 乙酸钠,所述抗冻剂为丙二醇。
本发明所述银杏酚酸-鼠李糖脂复合杀菌剂的制备方法,包括以下步骤:
(1)将银杏叶废渣和银杏外种皮干燥粉碎后,置于5倍重量95%的乙醇溶液中,于60℃ 下浸提6-12h,浸提后超声粉碎1-2h,然后用纱布粗滤,得到粗提液;
(2)将步骤(1)得到的粗提取液在室温下用超滤膜超滤,将经过超滤膜的、分子量小于30000的超滤液在室温下用纳滤膜过滤,截留分子量大于300,取分子量大于300的浓缩液备用;
(3)使用大孔树脂LSA-21装柱层析,柱规格为φ3.0×60cm,取步骤(2)所得浓缩液5ml上柱,使用20%和80%的乙醇溶液交替洗脱2次,流速2ml/min,得洗脱液,将其真 空浓缩除去乙醇后得到银杏酚酸粗提物;
(4)将步骤(3)所得银杏酚酸粗提物溶解于50ml石油醚中,使用柱规格为φ3.0×60cm 的硅胶柱纯化,使用体积比为80:20:3的石油醚、乙酸乙酯和冰醋酸为洗脱剂以流速2ml/min 洗脱1-3次得到洗脱液,然后将洗脱液真空浓缩去除有机溶剂后冷冻干燥得到白色粉末,即 为银杏酚酸提取物;
(5)称取鱼腥草400g,加适量蒸馏水煎煮三次,每次30min,合并滤液浓缩至1L, 即为鱼腥草提取液;所述竹醋液PH为2-4,将鱼腥草提取液和竹醋液按重量比混合均匀,得 增效剂;
(6)按配比称取填料和步骤(4)所得银杏提取物置于搅拌釜中搅拌混合均匀,然后气流粉碎,过筛,取10-20μm粉体;
(7)按配比称取鼠李糖脂溶解于20倍重量50%的乙醇溶液中,再加入配比量的润湿 剂、分散剂、防腐剂、抗冻剂、步骤(5)所得增效剂和步骤(6)所得粉体,混合均匀即得 到所述银杏酚酸-鼠李糖脂复合杀菌剂。
本发明所用的鼠李糖脂为市购成品,购自陕西亿康龙生物技术有限公司。
对比例1
本对比例原料配方及制备方法基本同实施例3,与之不同的是不包含银杏酚酸提取物的 添加及其制备的部分。
对比例2
本对比例原料配方及制备方法基本同实施例3,与之不同的是不包含鼠李糖脂的添加。
对比例3
本对比例原料配方及制备方法基本同实施例3,与之不同的是不包含增效剂的添加及其 制备的部分。
杀菌效果实验:
选取黑曲霉菌、金黄色葡萄球菌以及白色念珠菌作为验证菌剂,制备菌悬液进行验证试 验。取各试验指标菌的纯培养分离的典型菌落接种营养肉汤经增菌培养,参照麦氏比浊法, 配制含菌量在1×108cfu/L~5×108cfu/L的菌悬液,备用。
在无菌试管内加入菌悬液0.1ml与实施例1-3以及对比例1-3所得杀菌剂5ml,作用至 设定时间,吸取0.1ml混合液置于营养琼脂培养基平板上涂布均匀。置于37℃培养后计数 菌落数,计算平均杀灭率。试验重复3次。
评价指标:
存活率(%)=1一杀菌率(%)。
协同系数(T/E)值=各因子单独作用时细菌存活百分率之乘积/多因子共同作用实测细 菌存活百分率(存活率为0时,按0.0001%计算)。T/E值为判断复合增效作用强弱的标准, T/E值小于1为拮抗作用,等于1为相加作用,大于1为协同作用,其值愈大,协同作用愈 强。实验结果如下表所示:
表1 杀菌效果实验数据
通过对比例1、2和实施例3,计算银杏酚酸和鼠李糖脂的T/E值,我们可以看出,其值 均大于1,且时间越长,协同作用越明显。这是因为,鼠李糖脂作为生物型表面活性剂,其可促进植物源活性成分银杏酚酸更好的铺展与作用在菌体,促进其高效的发挥其杀菌功能。 应用试验
试验地:山东省临沂市的某蔬菜种植基地作为试验田,采用随机区组设计,共设7个处 理,分别为S1-S7,实验其对番茄、白菜病害的防治效果。
S1:实施例1所得杀菌剂,稀释倍数500后使用;
S2:实施例2所得杀菌剂,稀释倍数500倍使用;
S3:实施例3所得杀菌剂,稀释倍数500倍使用;
S4:对比例1所得杀菌剂,稀释倍数500倍使用;
S5:对比例2所得杀菌剂,稀释倍数500倍使用;
S6:对比例3所得杀菌剂,稀释倍数500倍使用;
S7为空白对照,施加同等重量的清水。
2015年至2017年连续3年在该试验田以露天种植方式进行白菜、番茄种植试验,7处理 组,每处理组种植方法及种植密度均相同,其他田间管理各个处理组均相同,收获期统计产 量和病株率,并统计整个生长周期病害发生情况。实验结果见表2:
表2 白菜、番茄种植实验结果
从实验数据可以看出使用本发明实施例的试验组,其产量明显高于对比例和空白对照组, 病株率控制于2%左右,大大减少番茄和白菜的病害率。究其原因,是由于本发明使用膜分离、 树脂分离相结合的方式实现了银杏酚酸的高效提取,同时添加鼠李糖脂、鱼腥草和竹醋液等 成分,促进银杏酚酸活性成分高效发挥抑菌杀菌作用。
需要说明的是,上述实施例仅仅是实现本发明的优选方式的部分实施例,而非全部实施 例。显然,基于本发明的上述实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下 所获得的其他所有实施例,都应当属于本发明保护的范围。

Claims (4)

1.一种银杏酚酸-鼠李糖脂复合杀菌剂,其特征在于,是由以下重量份的原料制备而成:银杏酚酸提取物15-25份、鼠李糖脂10-15份、增效剂3-5份、润湿剂1-3份、分散剂1-3份、防腐剂0.5-1份、抗冻剂0.5-0.8份和填料10-15份;所述银杏酚酸提取物是通过以下方法提取而得:
(1)将银杏叶废渣和银杏外种皮干燥粉碎后,置于5倍重量95%的乙醇溶液中,于60℃下浸提6-12h,浸提后超声粉碎1-2h,然后用纱布粗滤,得到粗提液;
(2)将步骤(1)得到的粗提取液在室温下用超滤膜超滤,将经过超滤膜的、分子量小于30000的超滤液在室温下用纳滤膜过滤,截留分子量大于300,取分子量大于300的浓缩液备用;
(3)使用大孔树脂LSA-21装柱层析,柱规格为φ3.0×60cm,取步骤(2)所得浓缩液5ml上柱,使用20%和80%的乙醇溶液交替洗脱2次,流速2ml/min,得洗脱液,将其真空浓缩除去乙醇后得到银杏酚酸粗提物;
(4)将步骤(3)所得银杏酚酸粗提物溶解于50ml石油醚中,使用柱规格为φ3.0×60cm的硅胶柱纯化,使用体积比为80:20:3的石油醚、乙酸乙酯和冰醋酸为洗脱剂以流速2ml/min洗脱1-3次得到洗脱液,然后将洗脱液真空浓缩去除有机溶剂后冷冻干燥得到白色粉末,即为银杏酚酸提取物。
2.根据权利要求1所述银杏酚酸-鼠李糖脂复合杀菌剂,其特征在于,所述增效剂为鱼腥草提取液和竹醋液按照重量比1:2-5混合而成,所述鱼腥草提取液是通过以下方法制备得到:称取鱼腥草400g,加适量蒸馏水煎煮三次,每次30min,合并滤液浓缩至1L,即为鱼腥草提取液;所述竹醋液PH为2-4。
3.根据权利要求1所述银杏酚酸-鼠李糖脂复合杀菌剂,其特征在于,所述润湿剂为皂角粉、脂肪醇聚氧乙烯醚、烷基硫酸盐、脂肪醇乙氧基化物、烷基酚乙氧基化物中的一种;所述分散剂为木质素或者聚丙烯酸钠;所述填料为硅藻土、膨润土、高岭土中的一种;所述防腐剂为山梨酸盐、对羟基苯甲酸甲酯、双乙酸钠和乳酸钠中的一种;所述抗冻剂为乙二醇或者丙二醇。
4.一种权利要求1-3任意一项所述银杏酚酸-鼠李糖脂复合杀菌剂的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将银杏叶废渣和银杏外种皮干燥粉碎后,置于5倍重量95%的乙醇溶液中,于60℃下浸提6-12h,浸提后超声粉碎1-2h,然后用纱布粗滤,得到粗提液;
(2)将步骤(1)得到的粗提取液在室温下用超滤膜超滤,将经过超滤膜的、分子量小于30000的超滤液在室温下用纳滤膜过滤,截留分子量大于300,取分子量大于300的浓缩液备用;
(3)使用大孔树脂LSA-21装柱层析,柱规格为φ3.0×60cm,取步骤(2)所得浓缩液5ml上柱,使用20%和80%的乙醇溶液交替洗脱2次,流速2ml/min,得洗脱液,将其真空浓缩除去乙醇后得到银杏酚酸粗提物;
(4)将步骤(3)所得银杏酚酸粗提物溶解于50ml石油醚中,使用柱规格为φ3.0×60cm的硅胶柱纯化,使用体积比为80:20:3的石油醚、乙酸乙酯和冰醋酸为洗脱剂以流速2ml/min洗脱1-3次得到洗脱液,然后将洗脱液真空浓缩去除有机溶剂后冷冻干燥得到白色粉末,即为银杏酚酸提取物;
(5)称取鱼腥草400g,加适量蒸馏水煎煮三次,每次30min,合并滤液浓缩至1L,即为鱼腥草提取液;所述竹醋液PH为2-4,将鱼腥草提取液和竹醋液按重量比混合均匀,得增效剂;
(6)按配比称取填料和步骤(4)所得银杏提取物置于搅拌釜中搅拌混合均匀,然后气流粉碎,过筛,取10-20μm粉体;
(7)按配比称取鼠李糖脂溶解于20倍重量50%的乙醇溶液中,再加入配比量的润湿剂、分散剂、防腐剂、抗冻剂、步骤(5)所得增效剂和步骤(6)所得粉体,混合均匀即得到所述银杏酚酸-鼠李糖脂复合杀菌剂。
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Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110301717A (zh) * 2019-07-04 2019-10-08 邳州市尕星医药技术服务有限公司 一种基于防治足癣的鞋垫
CN110313679A (zh) * 2019-07-04 2019-10-11 邳州市尕星医药技术服务有限公司 一种丝瓜络药物布鞋
CN110419531A (zh) * 2019-08-19 2019-11-08 临沂大学 一种银杏酚酸可湿性粉剂
CN113170793A (zh) * 2021-04-28 2021-07-27 临沂市农业科学院 一种宁南霉素和银杏酚酸复合杀菌剂及其制备方法
CN115944691A (zh) * 2022-12-29 2023-04-11 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 竹醋和中药提取物的组合物在制备抗氧化产品中的应用
CN116059298A (zh) * 2022-12-29 2023-05-05 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 一种抑菌组合物及其应用

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101326921A (zh) * 2008-07-11 2008-12-24 广西大学 银杏酚酸微乳剂
CN103070167A (zh) * 2010-03-30 2013-05-01 湖州紫金生物科技有限公司 一种鼠李糖脂作为助剂的应用
CN104472555A (zh) * 2015-01-05 2015-04-01 临沂大学 一种含有银杏提取物下脚料的杀虫剂及其制备方法
CN106832045A (zh) * 2015-12-02 2017-06-13 中国科学院大连化学物理研究所 一种银杏外种皮同时提取果胶和酚酸类化合物的方法

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101326921A (zh) * 2008-07-11 2008-12-24 广西大学 银杏酚酸微乳剂
CN103070167A (zh) * 2010-03-30 2013-05-01 湖州紫金生物科技有限公司 一种鼠李糖脂作为助剂的应用
CN104472555A (zh) * 2015-01-05 2015-04-01 临沂大学 一种含有银杏提取物下脚料的杀虫剂及其制备方法
CN106832045A (zh) * 2015-12-02 2017-06-13 中国科学院大连化学物理研究所 一种银杏外种皮同时提取果胶和酚酸类化合物的方法

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110301717A (zh) * 2019-07-04 2019-10-08 邳州市尕星医药技术服务有限公司 一种基于防治足癣的鞋垫
CN110313679A (zh) * 2019-07-04 2019-10-11 邳州市尕星医药技术服务有限公司 一种丝瓜络药物布鞋
CN110419531A (zh) * 2019-08-19 2019-11-08 临沂大学 一种银杏酚酸可湿性粉剂
CN113170793A (zh) * 2021-04-28 2021-07-27 临沂市农业科学院 一种宁南霉素和银杏酚酸复合杀菌剂及其制备方法
CN115944691A (zh) * 2022-12-29 2023-04-11 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 竹醋和中药提取物的组合物在制备抗氧化产品中的应用
CN116059298A (zh) * 2022-12-29 2023-05-05 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 一种抑菌组合物及其应用
CN116059298B (zh) * 2022-12-29 2024-04-12 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 一种抑菌组合物及其应用

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