CN115633675A - 一种用于低温长时间保存脂肪间充质干细胞的保存液 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种用于低温长时间保存脂肪间充质干细胞的保存液，具体地，本发明提供了一种细胞保存液，其包括组分：复方电解质、海藻糖；和20‑30(w/v)％人血清白蛋白。本发明的保存液可以用于在低温保存条件下保持临床产品中的细胞活率和增殖能力。

Description

一种用于低温长时间保存脂肪间充质干细胞的保存液
技术领域
本发明涉及生物技术领域，具体地，本发明涉及一种用于低温长时间保存脂肪间充质干细胞的保存液。
背景技术
脂肪间充质干细胞(简称MSCs)是从脂肪组织中分离得到的一种具有多向分化潜能的干细胞。有以下优点：取材相对容易、量大、免疫原性低，以及容易过伦理。是目前备受关注可在体外培养扩增一类具有多向分化潜能的成体干细胞，可分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、神经细胞以及肌肉细胞等多种组织细胞。
在临床中细胞产品制备与细胞运输需要合适的细胞保存液以确保MSCs在低温保存(2-8℃)过程中具有良好的生存能力和良好的治疗特性，这也是MSCs临床效果成功与否关键因素之一，而不好的细胞保存液直接引起细胞结构不可逆的损伤，直接导致细胞凋亡和坏死。
综上所述，本领域迫切需要开发一种能够有效保存脂肪间充质干细胞的保存液。
发明内容
本发明提供了一种能够有效保存脂肪间充质干细胞的保存液。
本发明的第一方面，提供了一种细胞保存液，其特征在于，包括占细胞保存液的总质量90-100wt％的选自下组的组分：
复方电解质；
海藻糖；和
20-30％(w/v)人血清白蛋白。
在另一优选例中，所述的组分占细胞保存液的总质量95-100wt％，较佳地98-100wt％。
在另一优选例中，所述的细胞保存液中，所述的海藻糖的浓度为15-25mmol。
在另一优选例中，所述的细胞保存液中，所述的海藻糖的浓度为0.5-1.0wt％。
在另一优选例中，所述的细胞保存液中，所述的海藻糖的浓度为18-22mmol。
在另一优选例中，所述的细胞保存液中，所述的人血清白蛋白的浓度为1-5wt％。
在另一优选例中，所述的细胞保存液中，所述的人血清白蛋白的浓度为2-4wt％。
在另一优选例中，所述的细胞保存液中，所述的人血清白蛋白的浓度为2.5-3.5wt％。
在另一优选例中，所述的细胞保存液包括选自下组的主要组份：0.5-1.0wt％海藻糖，1-5wt％人血清白蛋白(20-30％(w/v))，和余量的复方电解质；且所述的主要组份占细胞保存液的总质量90-100wt％。
在另一优选例中，所述的细胞保存液中，所述的复方电解质包括：
Na+：0.29～0.35wt％；
K+：0.017～0.021wt％；
Cl-：0.31～0.38wt％；
Mg2+：0.0032～0.0039wt％；
葡萄糖根：0.40～0.49wt％；
醋酸根：0.14～0.18wt％。
在另一优选例中，所述的细胞保存液的pH为6.5-7.5。
在另一优选例中，所述的细胞保存液的渗透压为290-320mosmol/kg。
本发明的第二方面，提供了一种细胞低温保存方法，所述方法包括步骤：
将细胞悬浮于如本发明第一方面所述的细胞保存液中，然后在低温下进行保存。
在另一优选例中，所述保存是指在2-8℃进行保存。
在另一优选例中，所述的保存时在2-8℃下进行保存
在另一优选例中，所述保存是指在3.5-4.5℃进行保存。
本发明的第三方面，提供了一种细胞注射剂，所述的细胞注射剂包括：如本发明第一方面所述的细胞保存液，和作为活性成分的细胞。
在另一优选例中，所述的细胞选自下组：脂肪间充质干细胞、免疫细胞，或其组合。
本发明的第四方面，提供了一种脂肪间充质干细胞库，所述的脂肪间充质干细胞库含有如本发明第一方面所述的细胞保存液。
应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。
附图说明
图1:细胞0h及放置24h的细胞形态；图中，A：0h的接种后第1天的细胞形态；B：0h的接种后第3天的细胞形态；C：放置冰箱24h的接种后第1天的细胞形态；D：放置冰箱24h的接种后第6天的细胞形态。
图2显示了细胞放置冰箱48h及72h的细胞形态。图2E：放置冰箱48h的接种后第1天的细胞形态；图2F：放置冰箱48h的接种后第7天的细胞形态；图2G：放置冰箱72h的接种后第1天的细胞形态；图2H：放置冰箱72h的接种后第11天的细胞形态。
图3：冰箱放置0h、24h、48h、72h后的细胞凋亡流式图。
图4：冰箱放置0h、24h、48h后的细胞表面标记测试结果。
图5：冰箱放置0h、24h、48h后的细胞流式图。
具体实施方式
本发明人经过长期而深入的研究，意外地发现，采用复方电解质加入20mmol海藻糖，与3％人血白蛋白共同配制细胞保存液的情况下，能有效保存细胞至72h，确保细胞达到70％以上，满足临床需求。基于上述发现，发明人完成了本发明。
低温细胞保存液
如本文所用，术语“低温细胞保存液”，指在细胞的一般低温保存条件(如2-8℃下)下保存的含有治疗活性细胞的制剂。
本发明的低温细胞保存液包括以下的主要组份，其中，所述的主要组份站细胞保存液的总质量的90-100wt％：
复方电解质；海藻糖；和20-30％(w/v)人血清白蛋白。
在另一优选例中，所述的细胞保存液中，所述的海藻糖的浓度为15-25mmol，更佳地为18-22mmol。
在另一优选例中，所述的细胞保存液中，所述的人血清白蛋白的浓度为1-5wt％，更佳地为2-4wt％。
在另一优选例中，所述的细胞保存液中，所述的复方电解质包括：
Na+：0.29～0.35wt％；
K+：0.017～0.021wt％；
Cl-：0.31～0.38wt％；
Mg2+：0.0032～0.0039wt％；
葡萄糖根：0.40～0.49wt％；
醋酸根：0.14～0.18wt％。
所述的细胞保存液为近中性的液相，例如所述的细胞保存液的pH可以为6.5-7.5，以便维持细胞的生长。
所述的细胞保存液的渗透压与细胞内渗透压保持一致，在一个优选例中，所述的细胞保存液的渗透压为290-320mosmol/kg。
低温保存的细胞制剂
本发明的冻存(冰冻)细胞制剂包括以下组分：
(1)作为活性成分的细胞；
(2)细胞保存液，所述的细胞保存液包括：复方电解质、海藻糖、和20-30％人血清白蛋白。
所述的细胞是可以用于细胞治疗的活性细胞，其种类没有特别的限制，本发明的优选实施例中，所述的细胞为脂肪间充质干细胞，或其组合。
本发明的细胞类型没有特别的限制，在另一优选例中，所述的细胞为选自下组的细胞：悬浮培养的细胞和贴壁培养的细胞。较佳地，所述的贴壁培养的细胞在制备所述的冻存制剂之前，预先进行消化悬浮。
所述的制剂中，所述的细胞密度范围没有特别的限制，例如可以是1×105-5×108/ml。
所述的细胞制剂可以在复苏后直接用于注射，而不需要分离细胞并重悬。
本发明的细胞低温保存液主要优点包括：
(1)保存液成分清晰，不含对细胞有害的成分；保存液成分比较简单，易控制，成本低；
(2)可以长时间保存脂肪干细胞，维持干细胞的活率；在低温可以储存细胞3天，维持细胞活率在80％以上，细胞活率降低较慢，较好保护细胞细胞表面marker、增殖能力，摆脱了因运输路程长地理空间的限制，满足干细胞大批量生产细胞悬液
(3)脂肪干细胞成活率高，增殖能力强。
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则百分比和份数按重量计算。
实施例1细胞保存液的制备和保存结果
A.细胞保存液的配制：
Figure BDA0003170035620000051
按照以上的配方配制200ml，取出10ml用于检测PH及渗透压
B.制备细胞悬液：
1.细胞复苏：取30ml保存液提前于37℃水浴锅中预热10min后，取1支冻存细胞进行细胞复苏，取300ul计数。
2.细胞离心：放置于已预冷的离心机中4℃，800～1000rpm,离心5～10分钟；
3.细胞洗涤：弃去上清，重悬细胞，加入30ml细胞保存液用于洗涤，按照上述细胞离心方式离心，再次弃去上层细胞上清，取300ul计数。
4.过滤：重悬底层沉淀，加保存液至30ml，100um滤器过滤去除大团的细胞块，取300ul计数。
5.计数：取50ul细胞悬液与solution 1 1:1混合，取Via1上样，选取“Viabilityand Cell Count-Aggregated Cells Assay”，再取一块新Via1吸取未加solution的原液，上样，读取细胞数。
6.细胞悬液定容：细胞过滤后，按照步骤2离心后，按照1.3*107/ml重悬。
C.低温保存后活细胞、坏死细胞数量和比率，及细胞活率测定：
测定低温储存0h、24h、48h、72h的细胞样品中，活细胞、坏死及凋亡占比以及细胞活率。
细胞发放装瓶定为0h，分别于0h、24h、48h，各组取60ul细胞，用洗涤液洗涤2次后，每组流式管中细胞加入5ul FITC Annexin V，在室温闭光15min，加入5ul的PropidiumIodide上流式检测。
D.低温保存后细胞纯度及细胞表面marker测定
细胞纯度：取3*105细胞，洗涤两次后，每个时间点每个样本加入CD45/CD31/CD34/CD90/CD105各1ul，于冰箱中孵育半小时左右，洗涤后加入7AAD后孵育10分钟，上机，确保上机细胞数量达2*104个细胞。
细胞表面marker：每个时间点取60ul细胞，用1％人血清白蛋白-DPBS洗涤液洗涤1次后，分装成3份，再次洗涤1次后，第1管加入HLA-DR-PE/CD14-FITC/CD45-APC各1ul，第2管CD73-PE/CD90-FITC/CD105-APC各1ul，第3管加PE/FITC/APC ios各1ul，4℃孵育40分钟，洗涤后加入7AAD后孵育10分钟，上机。
E.低温保存后细胞形态及细胞倍增时间测定
于相应试验点取6*105细胞于6ml CBMG培养基中，接种3孔，每孔2ml，分别在接种再培养后每天拍照，并于细胞融合率达90％时收集细胞。
倍增时间按照以下公式计算：
CDT＝(CT×ln2)/ln(Nf/Ni)，
CT：培养时间，Ni：起始接种细胞数，Nf培养后收集的细胞数。
实验结果:
1.细胞保存液的理化指标
表2：保存液配方PH及渗透压
Figure BDA0003170035620000071
2.细胞活率
表3：保存细胞的细胞活率变化
Figure BDA0003170035620000072
从表中看出细胞活率变化情况：0h细胞活率达90％以上，放置72h后细胞活率仍然维持在80％以上。
3.细胞形态检测
细胞形态如图1和2中所示。图1显示了细胞0h及放置24h的细胞形态。其中，注：A：0h的接种后第1天的细胞形态；B：0h的接种后第3天的细胞形态；C：放置冰箱24h的接种后第1天的细胞形态；C：放置冰箱24h的接种后第6天的细胞形态；从图中看出细胞在0h的细胞接种后贴壁高(A)，细胞在接种后第3天细胞融合率达90％(B)，放置冰箱24h后细胞贴壁少(C)，细胞在接种后第6天细胞融合率达100％(D)。
图2显示了细胞放置冰箱48h及72h的细胞形态。图2E中显示了放置冰箱48h的接种后第1天的细胞形态，图2F中显示了放置冰箱48h的接种后第7天的细胞形态。图2G中显示了放置冰箱72h的接种后第1天的细胞形态；图2H显示了放置冰箱72h的接种后第11天的细胞形态。从图中可以看出细胞放置48h及72h的细胞形态，放置48h后接种细胞(图2E)在接种后第7天，细胞融合率达90％以上(图2F)；放置72h细胞在接种后第11天细胞增殖，融合率达90％以上(图2H)。
4.细胞在冰箱放置0h、24h、48h、72h后的细胞凋亡情况
表4：冰箱放置0h、24h、48h、72h后的细胞凋亡情况
Figure BDA0003170035620000073
Figure BDA0003170035620000081
从上述表格中可以看出细胞在发放0h、24h、48h及72h后的细胞凋亡情况。在发放0h到放置72h之间，活细胞会随着细胞放置时间也会降低，坏死细胞增加，但是降低较慢。
5.细胞在冰箱放置0h、24h、48h后的细胞表面marker的变化
表5：冰箱放置0h、24h、48h后的细胞表面marker的变化
Figure BDA0003170035620000082
从表中看出，放置在冰箱不同时间点检测表面marker的阳性率>95％，阴性率<2％。
6.细胞在0h、24、48h各个保存液中细胞纯度
表7：细胞在各个保存液中细胞纯度CD45-/CD31/CD34/CD90/CD105/7AAD
Figure BDA0003170035620000083
从表中看出：细胞纯度占比在0h、24h、48h都大于99.9％。
7.细胞放置在冰箱0h、24h后，细胞培养的倍增时间
表8：细胞在发放培养的收获细胞数及倍增时间
Figure BDA0003170035620000084
从表中看出，在接种后，细胞具有很好的增殖能力。
结论
保持较好的细胞活率及细胞功能是临床细胞最大的挑战，也是每个公司所追求的，本实验复方电解质加入20mmol海藻糖与3％的人血清白蛋白，配制细胞保存液，按照细胞悬液制备标准操作规程发放细胞，放置在2-8℃冰箱保存细胞，分别在0h、24h、48h、72h取样，比较细胞在不同时间点细胞活率稳定性、细胞凋亡变化趋势、细胞表面marker、细胞形态及细胞增殖能力，有以下结果：
配制保存液PH在7.0左右，渗透压在290-320mosmol/kg左右；对于细胞疗法，FDA制定了细胞最低生存能力标准(通常设置为70％)，本次实验中细胞活率在放置72h后细胞活率大于80％，高于细胞活率标准，且细胞凋亡也很缓慢，方便生产，可用于临床上远距离的运输，在放置48h内细胞表面marker及在发放后干细胞占比纯度变化不大，各时间点均在99％以上。
综合所述：配制的保存液较好保存细胞，放置冰箱3天后，细胞活率>80％，细胞marker不受影响且有很好的增殖。
在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。

Claims (10)

1.一种细胞保存液，其特征在于，包括占细胞保存液的总质量90-100wt％的选自下组的组分：
复方电解质；
海藻糖；和
20-30％(w/v)人血清白蛋白。
2.如权利要求1所述的细胞保存液，其特征在于，所述的细胞保存液中，所述的海藻糖的浓度为15-25mmol。
3.如权利要求1所述的细胞保存液，其特征在于，所述的细胞保存液中，所述的人血清白蛋白的浓度为1-5wt％。
4.如权利要求1所述的细胞保存液，其特征在于，所述的细胞保存液中，所述的复方电解质包括：
Na+：0.29～0.35wt％；
K+：0.017～0.021wt％；
Cl-：0.31～0.38wt％；
Mg2+：0.0032～0.0039wt％；
葡萄糖根：0.40～0.49wt％；
醋酸根：0.14～0.18wt％。
5.如权利要求1所述的细胞保存液，其特征在于，所述的细胞保存液的pH为6.5-7.5。
6.如权利要求1所述的细胞保存液，其特征在于，所述的细胞保存液的渗透压为290-320mosmol/kg。
7.一种细胞低温保存方法，其特征在于，所述方法包括步骤：
将细胞悬浮于如权利要求1所述的细胞保存液中，然后在低温下进行保存。
8.一种细胞注射剂，其特征在于，所述的细胞注射剂包括：如权利要求1所述的细胞保存液，和作为活性成分的细胞。
9.如权利要求8所述的细胞注射剂，其特征在于，所述的细胞选自下组：脂肪间充质干细胞、免疫细胞，或其组合。
10.一种脂肪间充质干细胞库，其特征在于，所述的脂肪间充质干细胞库含有如权利要求1所述的细胞保存液。
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Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107912420A (zh) * 2017-10-27 2018-04-17 北京协科医药科技有限公司 一种细胞保存方法、保存液及保存液制备方法
CN109329271A (zh) * 2018-11-19 2019-02-15 成都清科生物科技有限公司 一种临床用间充质干细胞冷冻保存液及其制备方法
CN110882212A (zh) * 2018-08-15 2020-03-17 上海鸣大生物科技有限公司 一种临床注射用细胞制剂及其制备方法和应用
CN112841174A (zh) * 2021-01-28 2021-05-28 朱灏 一种用于人脐带间充质干细胞长期保存的冻存液

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102511471B (zh) * 2011-12-15 2013-08-28 成都清科生物科技有限公司 一种间充质干细胞冻存液及其制备方法
WO2016063208A1 (en) * 2014-10-20 2016-04-28 Stempeutics Research Pvt. Ltd. A cryopreservation composition and methods thereof
CN104857022A (zh) * 2015-05-21 2015-08-26 北京青藤谷禧干细胞科技研究院有限公司 一种间充质干细胞注射液、制备方法及其应用
CN109329270A (zh) * 2018-11-19 2019-02-15 成都清科生物科技有限公司 一种静脉回输用间充质干细胞保存液及其制备方法
CN109744227A (zh) * 2018-12-28 2019-05-14 广州益养生物科技有限公司 一种细胞冻存液及其应用

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107912420A (zh) * 2017-10-27 2018-04-17 北京协科医药科技有限公司 一种细胞保存方法、保存液及保存液制备方法
CN110882212A (zh) * 2018-08-15 2020-03-17 上海鸣大生物科技有限公司 一种临床注射用细胞制剂及其制备方法和应用
CN109329271A (zh) * 2018-11-19 2019-02-15 成都清科生物科技有限公司 一种临床用间充质干细胞冷冻保存液及其制备方法
CN112841174A (zh) * 2021-01-28 2021-05-28 朱灏 一种用于人脐带间充质干细胞长期保存的冻存液

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