CN115607493A

CN115607493A - 一种止痒舒缓组合物及其制备方法

Info

Publication number: CN115607493A
Application number: CN202211278979.XA
Authority: CN
Inventors: 赵伟
Original assignee: Guangzhou Jianeng Biological Technology Co ltd
Current assignee: Guangzhou Jianeng Biological Technology Co ltd
Priority date: 2022-10-19
Filing date: 2022-10-19
Publication date: 2023-01-17
Anticipated expiration: 2042-10-19
Also published as: CN115607493B

Abstract

本发明涉及护肤品领域，具体公开了一种止痒舒缓组合物及其制备方法，止痒舒缓组合物的制备方法，包括：1），将芍药、龙胆、胀果甘草、黄花蒿和乙醇混合，提取，过滤，浓缩，得第一提取物；2），加入水，搅拌至溶解，过大孔树脂柱上样；3），用水洗大孔树脂柱至无色，再用乙醇洗脱，浓缩，得第二提取物；4），膜过滤，膜的截留孔径为30nm，得第三提取物；5），膜过滤，膜的截留分子量为500D，得第四提取物；6），浓缩并干燥，然后用无水乙醇溶解，过中性氧化铝柱，将收集液浓缩并干燥，得复合提取物；7），将复合提取物、水、丁二醇混匀，过滤，得止痒舒缓组合物。本发明具有提高止痒舒缓效果的优点。

Description

一种止痒舒缓组合物及其制备方法

技术领域

本发明涉及护肤品领域，尤其是涉及一种止痒舒缓组合物及其制备方法。

背景技术

痒是一种引起机体产生抓挠欲望的不愉快感觉，在生理上具有自我保护作用，防止有害成分与身体进一步接触.从进化角度看，痒觉和痛觉一样，构成了个体生存所必需的第一道预警防线。普通人日常生活中的痒感主要是由致痒因子引起的感受性瘙痒:起源于皮肤,由于炎症、干燥及其他皮肤损伤引起,由C 类神经纤维传导,如疥疮、荨麻疹、昆虫叮咬反应及某些化学物质。

与痒感相关的主要介质与受体主要包括组胺与组胺受体、瞬时电压感受受体、白介素与白介素受体、蛋白激酶和蛋白酶激活受体、阿片类受体和大麻素受体，其中具有代表性的有组胺、TRPV1和IL-6。

组胺是一种重要的致痒物质，在外周，组胺主要由肥大细胞脱颗粒或者角质化细胞释放，作用于感觉神经末梢上分布的组胺受体，但是组胺受体并不是痒特异性受体，它除了参与痒觉形成，还参与炎症反应和有害刺激引起的行为反应。

TRPV1是一种非选择性阳离子通道蛋白，作为皮肤的伤害性感受器，可以被辣椒素(capsaicin)、花生酸类、组胺、ATP及各种神经营养因子激活.激活 TRPV1会导致动作电位产生及神经肽释放，而延长钙离子内流同样可以使初级传入神经元去极化，参与痒觉调节。

IL-6和IL-2均是致痒物质，过敏性皮炎患者白细胞裂解物中和皮肤斑贴试验阳性及结节性痒疹患者神经纤维上的IL-6的显著高于正常人，因此经常产生瘙痒的感觉，现有的产品中止痒舒缓的效果较为一般，难以满足患者所需，因此，还有改善空间。

发明内容

为了提高止痒舒缓的效果，本申请提供一种止痒舒缓组合物及其制备方法。

第一方面，本申请提供一种止痒舒缓组合物的制备方法，采用如下的技术方案：

一种止痒舒缓组合物的制备方法，包括以下步骤：

步骤1)，将芍药、龙胆、胀果甘草、黄花蒿和浓度为45％-65％的乙醇混合，外循环提取2-2.5h，放出料液，过滤，浓缩至浸膏，得第一提取物；

步骤2)，向第一提取物中加入水，搅拌至溶解，过大孔树脂柱上样；

步骤3)，用水洗大孔树脂柱至无色，再用浓度为30％-80％的乙醇洗脱，将洗脱液浓缩至无乙醇，得第二提取物；

步骤4)，将第二提取物通过膜过滤，膜的截留孔径为30nm，过滤压力为 2-4bar，过滤时，第二提取物温度保持≤75℃，补充水继续过滤至渗出液的量等于第二提取物的量，得第三提取物；

步骤5)，将第三提取物通过膜过滤，膜的截留分子量为500D-2000D，过滤压力为8-12bar，过滤时，第三提取物温度保持≤75℃，收集滤出液，得第四提取物；

步骤6)，将第四提取物浓缩并干燥，然后用无水乙醇溶解，过中性氧化铝柱，将收集液浓缩并干燥，得复合提取物；

步骤7)，将复合提取物、水、丁二醇混匀，过滤，得止痒舒缓组合物。

通过采用上述技术方案，通过柱吸附和膜过滤相配合，有效除去杂质，同时提取得到特定的活性成分，使得芍药、龙胆、胀果甘草、黄花蒿中特定的活性成分配合后，能根据痒感发生机制进行多靶点组合，从多条信号通路抑制痒感发生，有效减轻炎症反应，止痒舒缓的功效较佳。

通过步骤4)、步骤5)两次进行膜过滤，能有效出去杂质，使得产品稳定性好，颜色浅，而且采用的是物理方式，步骤安全简单，可工业化生产，具有较高的经济价值。

通过采用天然植物作为原料，生产过程中不会产生有害有毒物质，对环境较为友好。

通过将芍药、龙胆、胀果甘草、黄花蒿混合后同时提取，使得提取工艺得到简化，药材得以充分利用，而且混合后提取的提取效果较佳，并且能有效降低生产成本。

优选的，所述步骤1)中，芍药、龙胆、胀果甘草、黄花蒿的质量比例为 4-4.1：4-4.1：8-8.1：1-1.1。

通过采用上述技术方案，通过具体选择芍药、龙胆、胀果甘草、黄花蒿的配比，使得制得的止痒舒缓组合物中各种活性成分相互配合的效果较佳，从而更好地提高止痒舒缓的功效。

优选的，所述步骤1)中，浓度为45％-65％的乙醇的质量为芍药、龙胆、胀果甘草、黄花蒿总质量的20-22倍。

通过采用上述技术方案，通过具体选择乙醇的用量，使得提取效果较好，制得的止痒舒缓组合物的止痒舒缓功效进一步提高。

优选的，所述步骤2)中向第一提取物中加入的水的质量为第一提取物质量的5-6倍。

通过采用上述技术方案，通过具体选择水的用量，使得第一提取物更易于溶解，且减少水的浪费，保证生产质量的同时节约能源。

优选的，所述步骤3)中，用浓度为30％-80％的乙醇洗脱时，浓度为30％-80％的乙醇的质量为大孔树脂柱体积的5-6倍。

通过采用上述技术方案，通过具体选择乙醇的用量，洗脱较为彻底，洗脱效果较佳，减少有效物质损失，提取效果较佳，制得的止痒舒缓组合物的质量较佳。

优选的，所述步骤6)中，用无水乙醇溶解时，无水乙醇的质量为第四提取物干燥后的质量的15-16倍。

通过采用上述技术方案，通过具体选择无水乙醇的用量，保证稀释的效果，从而保证过中性氧化铝柱的效果，使制得的止痒舒缓组合物质量更佳，功效更好。

优选的，所述步骤6)中，过中性氧化铝柱，每次装柱量为第四提取物干燥后的质量的10倍。

通过采用上述技术方案，通过具体选择每次装柱量，使得过柱效果较佳，充分发挥中性氧化铝柱的功效，制得的止痒舒缓组合物的质量更佳，性能更好。

优选的，所述步骤7)中，过滤时通过0.45μm膜进行过滤。

通过采用上述技术方案，通过具体选择0.45μm的膜进行过滤，使得过滤的效果较佳，减少杂质，制得的止痒舒缓组合物质量更佳。

优选的，所述步骤7)中，复合提取物：水：丁二醇的质量比例为10：40： 50。

通过采用上述技术方案，通过具体选择复合提取物：水：丁二醇的比例使得制得的止痒舒缓组合物能更为稳定保存，并且在添加至护肤品中时，易于分散均匀，具有更好的使用功能。

第二方面，本申请提供一种止痒舒缓组合物，采用如下的技术方案：

一种止痒舒缓组合物，由上述的止痒舒缓组合物的制备方法制备所得。

通过采用上述技术方案，制得的止痒舒缓组合物具有较强的止痒舒缓功效，见效较快，有效减轻炎症反应，更好地满足患者所需。

综上所述，本申请具有以下有益效果：

1、由于本申请通过柱吸附和膜过滤相配合，有效除去杂质，同时提取得到特定的活性成分，使得芍药、龙胆、胀果甘草、黄花蒿中特定的活性成分配合后，能根据痒感发生机制进行多靶点组合，从多条信号通路抑制痒感发生，有效减轻炎症反应，止痒舒缓的功效较佳。

2、本申请中优选通过具体选择芍药、龙胆、胀果甘草、黄花蒿的配比，使得制得的止痒舒缓组合物中各种活性成分相互配合的效果较佳，从而更好地提高止痒舒缓的功效。

具体实施方式

以下结合实施例对本申请作进一步详细说明。

实施例1

一种止痒舒缓组合物的制备方法，包括以下步骤：

步骤1)，称量芍药根4kg、龙胆根4kg、胀果甘草8kg、黄花蒿1kg、浓度为65％的乙醇340kg，投入外循环提取设备中混合，70℃外循环提取2.5h，放出料液，200目筛网过滤，0.01Mpa下浓缩至浸膏，得第一提取物；

步骤2)，向第一提取物中加入水，水的质量为第一提取物质量的5倍，转速30r/min，搅拌10min，至完成溶解，然后过D101大孔树脂柱上样；

步骤3)，用水洗大孔树脂柱至无色，再用浓度为30％的乙醇洗脱，乙醇用量为大孔树脂柱体积5倍，然后将洗脱液在0.01Mpa下浓缩至无乙醇，得第二提取物；

步骤4)，将第二提取物通过膜过滤，膜的截留孔径为30nm，过滤压力为2bar，过滤时，第二提取物温度保持75℃，第二提取物全部过滤完后补充与第二提取物等量的水继续过滤至渗出液的量等于第二提取物的量，得第三提取物；

步骤5)，将第三提取物通过膜过滤，膜的截留分子量为500D，过滤压力为 8bar，过滤时，第三提取物温度保持75℃，收集滤出液，得第四提取物；

步骤6)，将第四提取物在0.01Mpa下浓缩，然后喷雾干燥，称量干燥物重量，然后用15倍干燥物质量无水乙醇溶解干燥物，然后过中性氧化铝柱，每次装柱量为干燥物的质量的10倍，将收集液在0.01Mpa下浓缩，然后喷雾干燥，得复合提取物；

步骤7)，将复合提取物、水、丁二醇以10：40：50的质量比例投入搅拌釜中，转速60r/min，搅拌5min，混匀，然后通过0.45μm膜进行过滤，灭菌，得止痒舒缓组合物。

实施例2

一种止痒舒缓组合物的制备方法，包括以下步骤：

步骤1)，称量芍药根4.1kg、龙胆根4.1kg、胀果甘草8.1kg、黄花蒿1.1kg、浓度为65％的乙醇382.8kg，投入外循环提取设备中混合，75℃外循环提取2h，放出料液，200目筛网过滤，0.01Mpa下浓缩至浸膏，得第一提取物17.4kg；

步骤2)，向第一提取物中加入水，水的质量为第一提取物质量的6倍，转速30r/min，搅拌10min，至完成溶解，然后过D101大孔树脂柱上样；

步骤3)，用水洗大孔树脂柱至无色，再用浓度为30％的乙醇洗脱，乙醇用量为大孔树脂柱体积6倍，然后将洗脱液在0.01Mpa下浓缩至无乙醇，得第二提取物；

步骤4)，将第二提取物通过膜过滤，膜的截留孔径为30nm，过滤压力为4bar，过滤时，第二提取物温度保持75℃，第二提取物全部过滤完后补充与第二提取物等量的水继续过滤至渗出液的量等于第二提取物的量，得第三提取物；

步骤5)，将第三提取物通过膜过滤，膜的截留分子量为500D，过滤压力为 12bar，过滤时，第三提取物温度保持75℃，收集滤出液，得第四提取物；

步骤6)，将第四提取物在0.01Mpa下浓缩，然后喷雾干燥，称量干燥物重量，然后用16倍干燥物质量无水乙醇溶解干燥物，然后过中性氧化铝柱，每次装柱量为干燥物的质量的10倍，将收集液在0.01Mpa下浓缩，然后喷雾干燥，得复合提取物；

实施例3

一种止痒舒缓组合物的制备方法，与实施例1相比区别仅在于：

步骤3)中，用于洗脱的乙醇的浓度为80％。

步骤5)中，将第三提取物通过膜过滤时，膜的截留分子量为2000D。

实施例4

步骤1)中，用于提取芍药根、龙胆根、胀果甘草、黄花蒿的乙醇的浓度为 45％

步骤3)中，用于洗脱的乙醇的浓度为60％。

步骤5)中，将第三提取物通过膜过滤时，膜的截留分子量为1000D。

对比例1

取消实施例1中的步骤4)、步骤5)，具体如下：

步骤1)，称量芍药根4kg、龙胆根4kg、胀果甘草8kg、黄花蒿1kg、浓度为65％的乙醇340kg，投入外循环提取设备中混合，70℃外循环提取2.5h，放出料液，200目筛网过滤，0.01Mpa下浓缩至浸膏，得第一提取物17kg；

步骤4)，将第二提取物在0.01Mpa下浓缩，然后喷雾干燥，称量干燥物重量，然后用15倍干燥物质量无水乙醇溶解干燥物，然后过中性氧化铝柱，每次装柱量为干燥物的质量的10倍，将收集液在0.01Mpa下浓缩，然后喷雾干燥，得复合提取物；

步骤5)，将复合提取物、水、丁二醇以10：40：50的质量比例投入搅拌釜中，转速60r/min，搅拌5min，混匀，然后通过0.45μm膜进行过滤，灭菌，得止痒舒缓组合物。

对比例2

取消实施例1中的步骤2)、步骤3)、步骤6)，具体如下：

步骤2)，将第一提取物通过膜过滤，膜的截留孔径为30nm，过滤压力为2bar，过滤时，第一提取物温度保持75℃，第一提取物全部过滤完后补充与第一提取物等量的水继续过滤至渗出液的量等于第一提取物的量，得第二提取物；

步骤3)，将第二提取物通过膜过滤，膜的截留分子量为500D，过滤压力为 8bar，过滤时，第二提取物温度保持75℃，收集滤出液，得第三提取物；

步骤4)，将第三提取物在0.01Mpa下浓缩，然后喷雾干燥，得复合提取物；

对比例3

步骤1)中，将芍药根4kg、龙胆根4kg、胀果甘草8kg、黄花蒿1kg替换成芍药根17kg。

对比例4

步骤1)中，将芍药根4kg、龙胆根4kg、胀果甘草8kg、黄花蒿1kg替换成龙胆根17kg。

对比例5

步骤1)中，将芍药根4kg、龙胆根4kg、胀果甘草8kg、黄花蒿1kg替换成胀果甘草17kg。

对比例6

步骤1)中，将芍药根4kg、龙胆根4kg、胀果甘草8kg、黄花蒿1kg替换成黄花蒿17kg。

实验1

透明质酸酶HAase活性抑制作用测试

实验原理：

透明质酸酶(HAase)是I型过敏反应的参与者，HAase具有将组胺从肥大细胞中释放出来的作用。HAase抑制实验作为研究抗过敏作用的一个指标，被广泛的采用。

本实验原理为HAase能够不加选择地水解透明质酸中的β-N-乙酰葡糖胺与 D-葡糖醛酸盐之间的1，4键，β-N-乙酰葡糖胺在碱性条件下与乙酰丙酮缩合生成生色原2-甲基-3-二乙酰吡咯衍生物，生色原与艾尔利希试剂对-二甲氨基苯甲醛在浓盐酸乙醇中生色。在酶抑制剂存在的情况下，反应体系的吸光度会下降，由此可根据公式计算样品对酶活性的抑制作用强弱。

方法：配制溶液：用冰乙酸稀释溶液和乙酸钠结晶水溶液配制pH5.6的醋酸缓冲液；用配制好的醋酸缓冲液作为溶剂配制HAase溶液和透明质酸钠溶液(两种溶液的最终工作浓度为1250u/mL和0.5mg/mL)；阳性对照药扑尔敏配制浓度0.1％；氯化钙溶液的浓度配制为0.25mmol/L；氢氧化钠溶液浓度配制为 0.4mol/L；碳酸钠溶液浓度配制为1.0mol/L，在50mL碳酸钠溶液中加入3.5 mL乙酰丙酮配制成乙酰丙酮溶液；最后称取0.8g对-二甲氨基苯甲醛溶于15mL 浓盐酸和15mL无水乙醇中配制成埃尔利希试剂。

采用HAase体外抑制试验法进行，取0.1mL氯化钙溶液和HAase溶液37℃ 保温培养20min；加入各实施例及对比例的止痒舒缓组合物0.5mL，继续37℃ 保温培养20min；加入0.5mL透明质酸钠溶液保温30min，常温放置5min；加入0.1mL0.4 mol/L NaOH溶液和0.5mL乙酰丙酮溶液，置沸水浴中加热15min 后立即用冰水冷却5min；加入埃尔利希试剂1.0mL并用3.0mL无水乙醇进行稀释，放置20min显色，用分光光度计测定其在560nm的吸光度值。

式中：A为对照溶液吸光度(用醋酸缓冲溶液代替样品溶液)。

B为对照空白溶液吸光度(用醋酸缓冲溶液代替样品溶液及酶液)。

C为试样溶液吸光度值。

D为试样空白溶液吸光度(用醋酸缓冲溶液代替酶液)。

具体检测数据详见表1。

表1.样品对HAase活性的抑制率

根据表1的数据对比可得：实施例1与对比例1-2相比，膜过滤和柱吸附工艺的配合可以显著提高活性物的功效，使得HAase活性抑制效果较佳，制得的止痒舒缓组合物具有更好的止痒舒缓功效；

而根据实施例1、3、4的数据对比可得，采用特定的工艺参数使得止痒舒缓组合物中活性物的功效更佳；

再根据实施例1与对比例3-6的数据对比可得，芍药、龙胆、胀果甘草、黄花蒿进行复配后，HAase活性抑制效果比单一采用芍药、龙胆、胀果甘草、黄花蒿任一一种时均有较大的提升，其中，对比例4的功效是最佳的，单独采用龙胆时HAase活性抑制率能达到31.84％±9.294，而当芍药、龙胆、胀果甘草、黄花蒿复配时，其他HAase活性抑制率较低的组分非但没有稀释龙胆的活性成分的HAase活性抑制率，反而能进一步提高HAase活性抑制率，证明各组分的活性成分之间形成了协同功效，从而使得复合物的HAase活性抑制率有显著提高。

实验2

TRPV1抑制实验

方法名称：基于角质形成细胞的辣椒素受体TRPV1的蛋白含量检测

原理：敏感性皮肤指皮肤在生理或病理条件下发生的一种高反应状态，主要发生于面部，TRPV1作为一种在周围神经系统中广泛分布的多相感受器，可以直接或间接被各种配体激活，引起细胞内Ca ²⁺升高，触发动作电位，TRPV1 与皮肤的灼热、疼痛都有密切关系。TRPV1为门控离子通道受体，也称为辣椒素受体，是一种热敏感受体，辣椒素等作用后通过激活TRPV1，进一步导致Ca²⁺内流，进而诱发神经反应，出现灼烧等感觉，因此抑制TRPV1蛋白含量可以达到舒缓的作用。待测物作用后TRPV1被抑制，可以说明待测物通过抑制TRPV1 达到舒缓的功效。

测试方法：

细胞接种：按1.8×105个孔的接种密度接种角质形成细胞至6孔板，培养箱37℃、浓度为5％的CO₂中孵育过夜。

配液：根据测试方案(表1)分别配制受试物工作液。

给药：根据表2测试方案，待6孔板中细胞铺板率达到40％-50％时，进行分组给药，每孔给药量为2mL，每组设3个复孔。给药完成后将6孔板放置在培养箱(37℃、5％CO₂)中孵育培养24h。

TRPV1检测：用4％的多聚甲醛进行固定处理，固定30min后，进行辣椒素受体TRPV1的免疫荧光检测，显微镜下拍照观察，采集图片并分析。

具体实验结果详见表3。

表2.测试方案

表3.TRPV1蛋白含量检测结果汇总

备注：用t-test方法进行统计分析时，与BC组相比，显著性以#表示， P-value0.05表示为#，P-value 0.01表示为##；与NC组相比，显著性以表示，P-value 0.05表示为*，P-value 0.01表示为**。

由以上的结果可以看出：

与BC组相比，NC组的TRPV1蛋白含量显著上升，说明本次测试刺激条件有效。

与NC组相比，PC组的TRPV1蛋白含量显著下降，说明本次阳性对照检测有效。

与NC组相比，实施例1-4样品的TRPV1蛋白含量显著下降。

根据实施例1和对比例3-6的数据对比，实施例1抑制效果明显优于对比例3-6，说明组合物在对TRPV1蛋白的拮抗作用优于单一组分。

根据实施例1和对比例1-2的数据对比，实施例1抑制效果明显优于对比例1-2，说明采用柱吸附和膜过滤复配的工艺能使得组合物在对TRPV1蛋白的拮抗作用显著提升。

实验3

IL-6抑制实验

原理：UVB可以诱导角质细胞产生IL-6，将样品作用于体外培养的角质形成细胞，并用UVB(20mJ/cm2)照射。培养24h后用ELISA法测定细胞上清液中 IL-6的浓度，观察样品能否抑制致痒因子IL-6的生成，对照品采用地塞米松。

具体检测结果详见表5。

表4.测试方案

表5.IL-6检测结果汇总

实验分组	样品名称	IL-6平均值(pg/ml)	P-value
				空白对照	/	-10.2±2.1	/
阴性对照	/	171.3±12.5	0.005##
				阳性对照	地塞米松	40.9±11.7	0.021*
实施例1	/	67.9±14.7	0.014*
				实施例2	/	67.6±14.8	0.014*
实施例3	/	70.1±12.8	0.013*
				实施例4	/	72.9±13.5	0.012*
对比例1	/	146.9±12.1	0.019*
				对比例2	/	153.1±14.4	0.017*
对比例3	/	169.9±13.7	NS
				对比例4	/	98.7±15.4	0.026*
对比例5	/	86.6±13.6	0.015*
				对比例6	/	80.9±12.9	0.018*

由以上的结果可以看出：

与BC组相比，NC组的IL-6显著上升，说明本次测试刺激条件有效。

与NC组相比，PC组的IL-6显著下降，说明本次阳性对照检测有效。

与NC组相比，实施例1-4、对比例4-6相比，IL-6显著下降。

根据实施例1与对比例4-6相比，组合物对IL-6的抑制作用优于单一组分，通过抑制IL-6的产生，减少痒感介质。

根据实施例1与对比例1-2相比，采用柱吸附与膜过滤的工艺配合，能使得组合物抑制IL-6的功效显著提升，具有更好的止痒舒缓的功效。

本具体实施例仅仅是对本申请的解释，其并不是对本申请的限制，本领域技术人员在阅读完本说明书后可以根据需要对本实施例做出没有创造性贡献的修改，但只要在本申请的权利要求范围内都受到专利法的保护。

Claims

1.一种止痒舒缓组合物的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

步骤1），将芍药、龙胆、胀果甘草、黄花蒿和浓度为45%-65%的乙醇混合，外循环提取2-2.5h，放出料液，过滤，浓缩至浸膏，得第一提取物；

步骤2），向第一提取物中加入水，搅拌至溶解，过大孔树脂柱上样；

步骤3），用水洗大孔树脂柱至无色，再用浓度为30%-80%的乙醇洗脱，将洗脱液浓缩至无乙醇，得第二提取物；

步骤4），将第二提取物通过膜过滤，膜的截留孔径为30nm，过滤压力为2-4bar，过滤时，第二提取物温度保持≤75℃，补充水继续过滤至渗出液的量等于第二提取物的量，得第三提取物；

步骤5），将第三提取物通过膜过滤，膜的截留分子量为500D-2000D，过滤压力为8-12bar，过滤时，第三提取物温度保持≤75℃，收集滤出液，得第四提取物；

步骤6），将第四提取物浓缩并干燥，然后用无水乙醇溶解，过中性氧化铝柱，将收集液浓缩并干燥，得复合提取物；

步骤7），将复合提取物、水、丁二醇混匀，过滤，得止痒舒缓组合物。

2.根据权利要求1所述的一种止痒舒缓组合物的制备方法，其特征在于：所述步骤1）中，芍药、龙胆、胀果甘草、黄花蒿的质量比例为4-4.1：4-4.1：8-8.1：1-1.1。

3.根据权利要求2所述的一种止痒舒缓组合物的制备方法，其特征在于：所述步骤1）中，浓度为45%-65%的乙醇的质量为芍药、龙胆、胀果甘草、黄花蒿总质量的20-22倍。

4.根据权利要求1所述的一种止痒舒缓组合物的制备方法，其特征在于：所述步骤2）中向第一提取物中加入的水的质量为第一提取物质量的5-6倍。

5.根据权利要求1所述的一种止痒舒缓组合物的制备方法，其特征在于：所述步骤3）中，用浓度为30%-80%的乙醇洗脱时，浓度为30%-80%的乙醇的质量为大孔树脂柱体积的5-6倍。

6.根据权利要求1所述的一种止痒舒缓组合物的制备方法，其特征在于：所述步骤6）中，用无水乙醇溶解时，无水乙醇的质量为第四提取物干燥后的质量的15-16倍。

7.根据权利要求6所述的一种止痒舒缓组合物的制备方法，其特征在于：所述步骤6）中，过中性氧化铝柱，每次装柱量为第四提取物干燥后的质量的10倍。

8.根据权利要求1所述的一种止痒舒缓组合物的制备方法，其特征在于：所述步骤7）中，过滤时通过0.45μm膜进行过滤。

9.根据权利要求8所述的一种止痒舒缓组合物的制备方法，其特征在于：所述步骤7）中，复合提取物：水：丁二醇的质量比例为10：40：50。

10.一种止痒舒缓组合物，其特征在于：由权利要求1-9任一所述的止痒舒缓组合物的制备方法制备所得。