CN115583989B

CN115583989B - 一种靶向sstr2的化合物及其制备方法和应用

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Publication number: CN115583989B
Application number: CN202211576787.7A
Authority: CN
Inventors: 陈小元; 吴晓明; 徐鹏飞; 何田; 杨清宝
Original assignee: Yantai Lannacheng Biotechnology Co ltd
Current assignee: Yantai Lannacheng Biotechnology Co ltd
Priority date: 2022-12-09
Filing date: 2022-12-09
Publication date: 2023-02-28
Anticipated expiration: 2042-12-09
Also published as: CN115583989A

Abstract

本发明为一种靶向SSTR2的化合物及其制备方法和应用，涉及核医学与分子影像学领域。所述的靶向SSTR2的化合物结构如下式（I）所示，所述的可用放射性核素标记的靶向SSTR2的化合物结构如下式（II）所示。本发明还提供了由如式（II）所示的化合物标记了放射性核素得到的放射性核素标记的靶向SSTR2的化合物。本发明还提供了制备式（I）和式（II）所示化合物的方法以及它们在制备诊断和/或治疗以SSTR2过度表达为特征的疾病的药物中的应用。

（I）

（II）。

Description

一种靶向SSTR2的化合物及其制备方法和应用

技术领域

本发明涉及核医学与分子影像学领域，具体地涉及一种靶向SSTR2的化合物及其制备方法和应用。

背景技术

生长抑素受体（somatostatin receptor, SSTR）是一种糖蛋白，属于G蛋白偶联型受体，有SSTR1-SSTR5共5种亚型。SSTR通过调节腺苷酸环化酶（Adenylate Cyclase，AC）的活性影响胞内cAMP浓度，进而将外源信号传递至胞内。SSTR参与多种激素的分泌调节，且与肿瘤的生长和增殖等过程相关。研究人员已在多种肿瘤组织中发现SSTR高表达，其中以生长抑素受体2（SSTR2）表达为最多。SSTR2可参与生物体内的众多细胞信号传导通路，如GPCR下游信号和腺苷酸环化酶抑制途径，通过改变其结构来激活下游的信号分子，进而调控生命体的众多生理和病理反应过程。SSTR2在多种肿瘤细胞中频繁高表达，尤其是神经内分泌瘤。鉴于其在肿瘤中的广泛表达及重要作用，SSTR2已成为肿瘤显像和治疗的重要靶点。

近年来，肽受体放射性核素治疗（Peptide Receptor Radionuclide Therapy,PRRT）引起了广泛的关注。放射性核素标记的肽配体与肿瘤细胞高表达的受体特异性结合，将螯合的放射性核素运输到细胞内部或吸附在细胞表面，通过核素衰变释放出的α射线或β射线对肿瘤细胞造成损伤。Lutathera（177Lu-DOTA-TATE）是2018年首款获得FDA批准的靶向生长抑素受体2的PRRT，已在美国和欧洲多个国家用于治疗不能手术切除或转移性神经内分泌肿瘤。然而，由于其在血液中的快速清除（主要是通过肾清除），使得其进入到肿瘤组织的剂量大大减少，同时也增加了肾脏的毒性。

既往研究公开了一种长效生长抑素类似物177Lu-EB-TATE，在Lutathera的侧链引入与白蛋白具有高亲和性的偶氮染料（截短的EB），可以在体内与白蛋白可逆结合，以延长血液中的半衰期至9.47小时，比Lutathera提高约4倍。177Lu-EB-TATE以马来酰亚胺-硫醇形成硫代琥珀酰亚胺键作为偶联手段，该偶联具有高选择性、快速反应动力学和温和的反应条件等优点。但是，硫代琥珀酰亚胺键在生理条件下或存在游离硫醇的情况下容易通过逆迈克尔反应或硫醇交换反应而消除，导致体内稳定性较差。本领域公知，由于琥珀酰亚胺键断裂，靶向部分与核素螯合部分分离，无法实现核素的靶向递送能力。特别是对于长循环PRRT药物，由于较长的血液循环时间，需要更高的体内稳定性，以保证与肿瘤部位的高表达的受体充分结合。因此有必要改善EB-TATE的偶联键，提升体内稳定性、提高肿瘤摄取剂量，满足核素治疗和显像需求。

发明内容

鉴于上述背景，为了解决肽受体放射性核素治疗药物体内稳定性差的问题，本发明的首要目的在于：开发一种新的放射性核素标记的SSTR2靶向化合物，通过酰胺键偶联EB部分与TATE部分，提升体内稳定性、提高肿瘤摄取剂量。

本发明的另一个目的在于：提供制备所述的新化合物的方法，以简单高效的合成路线完成制备。

本发明的再一个目的在于：提供所述化合物在诊断或治疗以SSTR2过度表达为特征的疾病中的应用。

本发明的上述目的通过以下技术方案实现：

第一方面，本发明提供了一种结构如式（I）所示的可靶向SSTR2的化合物，其结构中同时包含SSTR2结合配体和截短型伊文思蓝，且所述的SSTR2结合配体与所述的截短型伊文思蓝之间通过含酰胺键的柔性连接臂连接；

（I）。

本发明还提供了一种可用放射性核素标记的靶向SSTR2的化合物，其结构中同时包含生SSTR2结合配体、截短型伊文思蓝、柔性连接臂及核素螯合结构，所述的化合物结构如下式（II）所示：

（II）

第二方面，本发明提供了一种放射性核素标记的靶向SSTR2的化合物，它是由本发明第一方面所述的结构如式（II）的化合物标记了放射性核素得到的。

本发明所述的方案中，所述的放射性核素可以选自发射α射线的同位素、发射β射线的同位素、发射γ射线的同位素、发射俄歇电子的同位素或发射X射线的同位素等，例如⁵¹Cr、⁶⁷Ga、⁶⁸Ga、¹¹¹In、^99mTc、¹⁸⁶Re、¹⁸⁸Re、¹³⁹La、¹⁴⁰La、¹⁷⁵Yb、¹⁵³Sm、¹⁶⁶Ho、⁸⁶Y、⁹⁰Y、¹⁴⁹Pm、¹⁶⁵Dy、¹⁶⁹Er、¹⁷⁷Lu、⁴⁷Sc、¹⁴²Pr、¹⁵⁹Gd、²¹²Bi、²¹³Bi、⁷²As、⁷²Se、⁹⁷Ru、¹⁰⁹Pd、¹⁰⁵Rh、^101mRh、¹¹⁹Sb、¹²⁸Ba、¹²³I、¹²⁴I、¹³¹I、¹⁹⁷Hg、²¹¹At、¹⁵¹Eu、¹⁵³Eu、¹⁶⁹Eu、²⁰¹Tl、²⁰³Pb、²¹²Pb、⁶⁴Cu、⁶⁷Cu、¹⁹⁸Au、²²⁵Ac、²²⁷Th、⁸⁹Zr或¹⁹⁹Ag中的任意一种；更优选的放射性核为¹⁷⁷Lu、²²⁵Ac、⁶⁸Ga、⁶⁴Cu、⁸⁹Zr、⁹⁰Y、^99mTc、¹⁸⁸Re或¹¹¹In。

第三方面，本发明提供一种制备第二方面所述的放射性核素标记的靶向生SSTR2的化合物的方法，本发明提供的制备方法包括：

①以10.05g的2-CTC树脂为起始原料，溶胀后加入10.78g的Fmoc-O-叔丁基-L-苏氨酸和11.17g的N,N-二异丙基乙胺，反应后，先用二氯甲烷淋洗，再用二氯甲烷、甲醇和N,N-二异丙基乙胺反应封端，依次用二氯甲烷、甲醇和N,N-二甲基甲酰胺洗涤，再加入20%哌啶的N,N-二甲基甲酰胺溶液100mL脱Fmoc基团，洗涤后加6.84g苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐、0.23g的1-羟基苯并三唑(HOBT)、10.55g的Fmoc-S-三苯甲基-L-半胱氨酸和2.37g的N,N-二异丙基乙胺，反应完后抽滤，依次用二氯甲烷、甲醇和N,N-二甲基甲酰胺洗涤，再加入20%哌啶N,N-二甲基甲酰胺溶液100mL脱Fmoc基团，洗涤后加6.84g 苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐、0.18g的1-羟基苯并三唑、7.17g的Fmoc-O-叔丁基-L-苏氨酸和2.37g的N,N-二异丙基乙胺，反应完后抽滤，依次用二氯甲烷、甲醇和N,N-二甲基甲酰胺洗涤，再加入20%哌啶N,N-二甲基甲酰胺溶液100mL脱Fmoc基团，洗涤后加6.84g苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐、0.18g的1-羟基苯并三唑、8.45g的Nε-(叔丁氧羰基)-Nα-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-L-赖氨酸和2.37g N,N-二异丙基乙胺，反应完后抽滤，依次用二氯甲烷、甲醇和N,N-二甲基甲酰胺洗涤，再加入20%哌啶N,N-二甲基甲酰胺溶液100mL脱Fmoc基团，洗涤后加6.84g 苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐、0.12g的1-羟基苯并三唑、9.48g的1-[(1,1-二甲基乙氧基)羰基]-N-[(9H-芴-9-甲氧基)羰基]-D-色氨酸和2.37g的N,N-二异丙基乙胺，反应完后抽滤，依次用二氯甲烷、甲醇和N,N-二甲基甲酰胺洗涤，再加入20%哌啶N,N-二甲基甲酰胺溶液100mL脱Fmoc基团，洗涤后加6.84g苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐、0.18g的1-羟基苯并三唑、 8.28g的Fmoc-O-叔丁基-L-酪氨酸和2.37g的N,N-二异丙基乙胺，反应完后抽滤，依次用二氯甲烷、甲醇和N,N-二甲基甲酰胺洗涤，再加入20%哌啶N,N-二甲基甲酰胺溶液100mL脱Fmoc基团，洗涤后加6.84g 苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐、0.23g的1-羟基苯并三唑、 10.55g的Fmoc-S-三苯甲基-L-半胱氨酸和2.37g的N,N-二异丙基乙胺，反应完后抽滤，依次用二氯甲烷、甲醇和N,N-二甲基甲酰胺洗涤，再加入20%哌啶N,N-二甲基甲酰胺溶液100mL脱Fmoc基团，洗涤后加6.84g 苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐、0.14g的1-羟基苯并三唑、6.97g的Fmoc-D-苯丙氨酸和2.37g N,N-二异丙基乙胺，反应完后抽滤，依次用二氯甲烷、甲醇和N,N-二甲基甲酰胺洗涤，加入200mL的N,N-二甲基甲酰胺，再加入8.44g碘、10mL甲醇和10mL的N,N-二甲基甲酰胺的混合液，脱-Trt保护并环化，用100mL的20%哌啶N,N-二甲基甲酰胺溶液脱Fmoc保护后，洗涤后加60mL的N,N-二甲基甲酰胺、3.42g的2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯、1.16g的N,N-二异丙基乙胺、7.43g的(S)-5-((4'-氨基-3,3'-二甲基-[1,1'-二苯基]-4-基)羰基)-1-(9H-芴-9-基)-3,11-二氧-2,14,17三氧代-4,10-二氮杂二十-20-酸，反应完后抽滤，依次用二氯甲烷、甲醇和N,N-二甲基甲酰胺洗涤，再加入20%哌啶N,N-二甲基甲酰胺溶液100mL脱Fmoc基团，洗涤后加60mL的N,N-二甲基甲酰胺溶液和8.44g的2,2',2''-(10-(2-((2,5-二氧代吡咯烷-1-基)氧基)-2-氧代乙基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7-三基)三乙酸三叔丁酯，反应完后抽滤，再用200mL的20%的六氟异丙醇的二氯甲烷溶液切割树脂，旋干后加入乙腈、水和2M的HCl溶液4.5mL，加25mL的N,N-二甲基甲酰胺溶解，降温，加入0.75g亚硝酸钠的水溶液，低温下加入3.38g的1-氨基-8-萘酚-2,4-二磺酸单钠盐和11.34g碳酸氢钠水溶液中，反应完毕旋干，制备分离纯化得到中间体，后将所得中间体加入95%的三氟乙酸水溶液脱保护，制备液相分离纯化得到目标产物，即本发明第一方面式（II）所示结构的化合物；

②将①所得的可被放射性核素标记的化合物与含放射性核素的化合物按照湿法标记方法或冻干法标记法反应，即可制备得到本发明第三方面所述的放射性核素标记的靶向SSTR2的化合物。

第四方面，本发明提供一种药物组合物，所述的药物组合物包含本发明第一方面所述的可用放射性核素标记的靶向SSTR2的化合物或本发明第二方面所述的放射性核素标记的靶向SSTR2的化合物，或它们在药学上可接受的水合物、溶剂化物或盐。

第五方面，本发明还提供本发明第一方面所述可用放射性核素标记的靶向SSTR2的化合物、本发明第二方面所述的放射性核素标记的靶向SSTR2的化合物或第四方面所述的药物组合物，在制备用于诊断或治疗动物或人类个体的以SSTR2过度表达为特征的疾病的药物中的应用。

本发明所述的应用中，所述的以SSTR2过度表达为特征的疾病包括但不限于：神经内分泌肿瘤、胃肠道肿瘤、肺癌、肝细胞癌、鼻咽癌、乳腺癌、胰腺癌、小肠癌、结肠癌、直肠癌、头颈癌、卵巢癌、食道癌、下咽癌、喉癌、骨髓瘤细胞、膀胱癌、胆管细胞癌、透明细胞肾癌、致癌性骨软化症、肉瘤、CUP(原发性未知癌)、胸腺癌、胶质瘤、神经胶质瘤、星形细胞瘤、子宫颈癌或前列腺癌。

与现有技术相比，本发明提供的所述SSTR2的靶向化合物具有更高的体内稳定性，结合其较长的血液循环时间，可表现出优异的代谢动力学、高肿瘤摄取和肿瘤滞留时间，有望应用于诊断或治疗以SSTR2过度表达为特征的疾病。

此外，本发明提供的制备所述靶向SSTR2的化合物的方法，采用固相合成和液相合成相结合的方法，反应路线简洁，操作简单，合成周期短，收率高，适合工业化放大生产。

附图说明

图1为本发明实施例1中TATE-EB-01的液相图。

图2为本发明实施例1中TATE-EB-01的质谱图。

图3为本发明中⁶⁸Ga标记的TATE-EB-01配合物注射后不同时间MicroPET成像结果及肿瘤与重要器官的摄取结果统计图。

图4为⁶⁸Ga标记的EB-TATE注射后不同时间MicroPET成像结果及肿瘤及重要器官的摄取结果统计图。

图5为¹⁷⁷Lu标记的TATE-EB-01配合物注射后不同时间SPECT显像结果及肿瘤与重要器官的摄取结果统计图。

图6为¹⁷⁷Lu-EB-TATE注射后不同时间SPECT显像结果及肿瘤与重要器官的摄取结果统计图。

具体实施方式

以下通过具体实施方式结合附图对本发明的技术方案进行进一步的说明和描述。

实施例1：化合物I-1的制备

按Fmoc固相合成策略合成中间体21：以10.05g的2-CTC树脂为起始原料，溶胀后加入10.78g的Fmoc-O-叔丁基-L-苏氨酸（Fmoc-Thr(tBu)-OH）和11.17g的N,N-二异丙基乙胺，反应后得到中间体1，用二氯甲烷淋洗，再用二氯甲烷、甲醇和N,N-二异丙基乙胺反应封端，依次用二氯甲烷、甲醇和N,N-二甲基甲酰胺洗涤，再加入20%哌啶的N,N-二甲基甲酰胺溶液100mL脱Fmoc基团得到中间体2，洗涤后加6.84g苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐、0.23g的1-羟基苯并三唑(HOBT)、10.55g的Fmoc-S-三苯甲基-L-半胱氨酸和2.37g 的N,N-二异丙基乙胺，反应完后抽滤得到中间体3，依次用二氯甲烷、甲醇和N,N-二甲基甲酰胺洗涤，再加入20%哌啶N,N-二甲基甲酰胺溶液100mL脱Fmoc基团得到中间体4，洗涤后加6.84g 苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐、0.18g的1-羟基苯并三唑、7.17g的Fmoc-O-叔丁基-L-苏氨酸和2.37g的N,N-二异丙基乙胺，反应完后抽滤得到中间体5，依次用二氯甲烷、甲醇和N,N-二甲基甲酰胺洗涤，再加入20%哌啶N,N-二甲基甲酰胺溶液100mL脱Fmoc基团得到中间体6，洗涤后加6.84g 苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐、0.18g的1-羟基苯并三唑、8.45g 的Nε-(叔丁氧羰基)-Nα-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-L-赖氨酸和2.37g N,N-二异丙基乙胺，反应完后抽滤得到中间体7，依次用二氯甲烷、甲醇和N,N-二甲基甲酰胺洗涤，再加入20%哌啶N,N-二甲基甲酰胺溶液100mL脱Fmoc基团得到中间体8，洗涤后加6.84g 苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐、0.12g的1-羟基苯并三唑、 9.48g的1-[(1,1-二甲基乙氧基)羰基]-N-[(9H-芴-9-甲氧基)羰基]-D-色氨酸和2.37g N,N-二异丙基乙胺，反应完后抽滤得到中间体9，依次用二氯甲烷、甲醇和N,N-二甲基甲酰胺洗涤，再加入20%哌啶N,N-二甲基甲酰胺溶液100mL脱Fmoc基团得到中间体10，洗涤后加6.84g 苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐、0.18g的1-羟基苯并三唑、8.28g的Fmoc-O-叔丁基-L-酪氨酸和2.37g的N,N-二异丙基乙胺，反应完后抽滤得到中间体11，依次用二氯甲烷、甲醇和N,N-二甲基甲酰胺洗涤，再加入20%哌啶N,N-二甲基甲酰胺溶液100mL脱Fmoc基团得到中间体12，洗涤后加6.84g 苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐、0.23g的1-羟基苯并三唑、 10.55g的Fmoc-S-三苯甲基-L-半胱氨酸和2.37g的N,N-二异丙基乙胺，反应完后抽滤得到中间体13，依次用二氯甲烷、甲醇和N,N-二甲基甲酰胺洗涤，再加入20%哌啶N,N-二甲基甲酰胺溶液100mL脱Fmoc基团得到中间体14，洗涤后加6.84g苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐、0.14g的1-羟基苯并三唑、6.97g的Fmoc-D-苯丙氨酸和2.37g的N,N-二异丙基乙胺，反应完后抽滤得到中间体15，依次用二氯甲烷、甲醇和N,N-二甲基甲酰胺洗涤，加入200mL的N,N-二甲基甲酰胺，再加入8.44g碘、10mL甲醇和10mL的N,N-二甲基甲酰胺的混合液，脱-Trt保护并环化得到中间体16，用100mL的20%哌啶N,N-二甲基甲酰胺溶液脱Fmoc保护后得到中间体17，洗涤后加60mL的N,N-二甲基甲酰胺、3.42g的2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯、1.16g的N,N-二异丙基乙胺、7.43g的(S)-5-((4'-氨基-3,3'-二甲基-[1,1'-二苯基]-4-基)羰基)-1-(9H-芴-9-基)-3,11-二氧-2,14,17三氧代-4,10-二氮杂二十-20-酸，反应完后抽滤得到中间体18，依次用二氯甲烷、甲醇和N,N-二甲基甲酰胺洗涤，再加入20%哌啶N,N-二甲基甲酰胺溶液100mL脱Fmoc基团得到中间体19，洗涤后加60mL的N,N-二甲基甲酰胺溶液、8.44g的2,2',2''-(10-(2-((2,5-二氧代吡咯烷-1-基)氧基)-2-氧代乙基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7-三基)三乙酸三叔丁酯，反应完后抽滤得到中间体20，再用200mL的20%的六氟异丙醇的二氯甲烷溶液切割树脂得到中间体20'（即从树脂切下的中间体20），旋干后加入乙腈、水和2M的HCl溶液4.5mL，加25mL的N,N-二甲基甲酰胺溶解，降温，加入0.75g亚硝酸钠的水溶液，低温下加入3.38g的1-氨基-8-萘酚-2,4-二磺酸单钠盐和11.34g碳酸氢钠水溶液中，反应完毕旋干，制备分离纯化得到中间体21，后将所得中间体21加入200mL的95%的三氟乙酸水溶液脱保护，制备液相分离纯化得到目标产物TATE-EB-01。图1为本实施例中TATE-EB-01的液相图。图2为本实施例中TATE-EB-01的质谱图。理论分子量[M+K-3H]^2-/2=1155.89235，实测分子量[M+K-3H]^2-/2=1155.88451。

上述步骤合成路线如下：

实施例2.放射性Ga-68标记的TATE-EB-01配合物（⁶⁸Ga-TATE-EB-01）的制备：

湿法：将约18.5~1850兆贝可（MBq）⁶⁸GaCl₃盐酸溶液（淋洗自锗镓发生器）加入到含0.5mL实施例1制备的化合物TATE-EB-01的醋酸-醋酸盐溶液(1.0g/L)的离心管中，置于95℃下反应20min。取一C18分离小柱，先用10mL无水乙醇缓慢淋洗，再用10mL水淋洗。用10mL水将标记液稀释后，上样到分离柱上，先用10mL水除去未标记的⁶⁸Ga 离子，再用0.3mL 10mM的HCl的乙醇溶液淋洗得到⁶⁸Ga标记的配合物。该淋洗液经生理盐水稀释，并经无菌过滤后即得⁶⁸Ga标记的TATE-EB-01配合物的注射液。

冻干法：将约18.5~1850兆贝可（MBq）⁶⁸GaCl₃盐酸溶液（淋洗自锗镓发生器）加入到含有化合物TATE-EB-01的冻干药盒中，混匀后95℃下反应20min。取一C18分离小柱，先用10mL无水乙醇缓慢淋洗，再用10mL水淋洗。用10mL水将标记液稀释后，上样到分离柱上，先用10mL水除去未标记的⁶⁸Ga离子，再用0.3mL 10mM的HCl的乙醇溶液淋洗得到配合物淋洗液。该淋洗液经生理盐水稀释，并经无菌过滤后即得⁶⁸Ga标记的TATE-EB-01配合物的注射液。

实施例3.放射性Lu-177标记TATE-EB-01配合物（¹⁷⁷Lu-TATE-EB-01）的制备：

配置pH=5.5的缓冲溶液：称取57.6毫克醋酸、189毫克龙胆酸和525毫克三水合醋酸钠，用48毫升纯水溶解，用氢氧化钠溶液调节pH=5.5。用200µL缓冲液(pH=5.5)充分溶解200 µg实施例1制备的化合物TATE-EB-01，然后加入5毫升缓冲液(pH=5.5)以及150mCi左右¹⁷⁷LuCl₃的盐酸溶液。混合物摇匀后80℃加热反应20min。反应结束后冷却至室温。该反应液经生理盐水稀释，并经无菌过滤后即得10 mCi/mL的¹⁷⁷Lu标记的TATE-EB-01配合物的注射液。

实验例分析及应用效果

1、⁶⁸Ga标记的TATE-EB-01配合物在荷瘤小鼠体内的MicroPET显像

按实施例2的方法制备⁶⁸Ga-TATE-EB-01，在AR42J荷瘤小鼠中，针对随机分组的小鼠，分别经尾静脉注射7.4 MBq的⁶⁸Ga-TATE-EB-01和⁶⁸Ga-EB-TATE，然后在异氟烷麻醉下，分别于给药后0~240 min进行MicroPET显像，结果见图3和4。图3和图4中的A部分分别显示了TATE-EB-01和EB-TATE的化合物结构，图3和图4的B部分分别为小鼠静脉注射⁶⁸Ga-TATE-EB-01和⁶⁸Ga-EB-TATE后不同时间的AR42J荷瘤小鼠（n=3）的MicroPET最大密度投影图像，图3和图4的C部分分别为小鼠静脉注射⁶⁸Ga-TATE-EB-01和⁶⁸Ga-EB-TATE后各器官或组织（血、肝、肾、肿瘤和肌肉）在不同时间点的摄取，每组中三个摄取量从左至右分别对应注射后0.5h、2h和4h。由图3和图4的B部分可见，在采集成像的时间点，肿瘤清晰可见，并且⁶⁸Ga-TATE-EB-01的肿瘤摄取高于⁶⁸Ga-EB-TATE的肿瘤摄取。如图3和图4中C部分所示，⁶⁸Ga-TATE-EB-01和⁶⁸Ga-EB-TATE于相同时间点在血液、肝脏、肾脏和肌肉的分布比较相似，但是在肿瘤中的摄取⁶⁸Ga-TATE-EB-01在所有时间点都明显高于⁶⁸Ga-EB-TATE。

按实施例3的方法制备¹⁷⁷Lu-TATE-EB-01，在AR42J荷瘤小鼠中，针对随机分组的小鼠，分别经尾静脉注射37 MBq的¹⁷⁷Lu-TATE-EB-01和¹⁷⁷Lu-EB-TATE（现有药物），然后在异氟烷麻醉下，分别于给药后1~96h进行SPECT显像，结果见图5和6。图5和图6的a）部分分别为¹⁷⁷Lu-TATE-EB-01和¹⁷⁷Lu-EB-TATE后不同时间的AR42J荷瘤小鼠的SPECT成像最大密度投影图像，可见看到，在采集成像的各时间点，两组肿瘤清晰可见，相比而言注射¹⁷⁷Lu-TATE-EB-01的小鼠各时间点的SPECT显像效果更佳。图5和图6的b）部分分别体现了小鼠静脉注射¹⁷⁷Lu-TATE-EB-01和¹⁷⁷Lu-EB-TATE后各器官或组织（血、肝、肾、肿瘤和肌肉）在不同时间点的摄取，每组中三个摄取量从左至右分别对应注射后1h、4h、12、24h、48h、72h和96h，可以看到两种药物于相同时间点在血液、肝脏、肾脏和肌肉的分布比较相似，但是在肿瘤中的摄取，¹⁷⁷Lu-TATE-EB-01在所有时间点都明显高于¹⁷⁷Lu-EB-TATE。另外，图5和图6的c）部分分别体现了小鼠静脉注射¹⁷⁷Lu-TATE-EB-01和¹⁷⁷Lu-EB-TATE后不同时间点的靶/非靶比值，可以看出，¹⁷⁷Lu-TATE-EB-01组的在各时间点的肿瘤与正常器官的比值也明显高于¹⁷⁷Lu-EB-TATE。例如在96h测试时间点，¹⁷⁷Lu-TATE-EB-01的肿瘤肌肉比值已超过120而¹⁷⁷Lu-EB-TATE组的肿瘤肌肉比值低于50。因此，无论是肿瘤绝对摄取还是靶/非靶比值，¹⁷⁷Lu-TATE-EB-01明显优于¹⁷⁷Lu-EB-TATE。综上所述，本发明所述靶向SSTR2的化合物及其放射性核素标记物，表现出优异的代谢动力学、高肿瘤摄取和肿瘤滞留时间，有望应用于诊断或治疗以述SSTR2过度表达为特征的疾病。

虽然，上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验，对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims

1.一种靶向SSTR2的化合物，其特征在于，其结构中同时包含SSTR2结合配体和截短型伊文思蓝，且所述的SSTR2结合配体与所述的截短型伊文思蓝之间通过含酰胺键的柔性连接臂连接；其结构如式（I）所示：

（I）。

2.一种可用放射性核素标记的靶向SSTR2的化合物，其特征在于，其结构中同时包含SSTR2结合配体、截短型伊文思蓝、柔性连接臂及核素螯合结构，所述的化合物结构如下式（II）所示：

（II）。

3.制备如权利要求2所述的可用放射性核素标记的靶向SSTR2的化合物的方法，利用Fmoc固相合成策略合成重氮化反应前体，最后通过一步重氮化反应得到目标产物，其特征在于，具体包括以下步骤：

以10.05g的2-CTC树脂为起始原料，溶胀后加入10.78g的Fmoc-O-叔丁基-L-苏氨酸和11.17g的N,N-二异丙基乙胺，反应后，先用二氯甲烷淋洗，再用二氯甲烷、甲醇和N,N-二异丙基乙胺反应封端，依次用二氯甲烷、甲醇和N,N-二甲基甲酰胺洗涤，再加入20%哌啶的N,N-二甲基甲酰胺溶液100mL脱Fmoc基团，洗涤后加6.84g苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐、0.23g的1-羟基苯并三唑、10.55g的Fmoc-S-三苯甲基-L-半胱氨酸和2.37g的N,N-二异丙基乙胺，反应完后抽滤，依次用二氯甲烷、甲醇和N,N-二甲基甲酰胺洗涤，再加入20%哌啶N,N-二甲基甲酰胺溶液100mL脱Fmoc基团，洗涤后加6.84g 苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐、0.18g的1-羟基苯并三唑、7.17g的Fmoc-O-叔丁基-L-苏氨酸和2.37g的N,N-二异丙基乙胺，反应完后抽滤，依次用二氯甲烷、甲醇和N,N-二甲基甲酰胺洗涤，再加入20%哌啶N,N-二甲基甲酰胺溶液100mL脱Fmoc基团，洗涤后加6.84g苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐、0.18g的1-羟基苯并三唑、8.45g的Nε-(叔丁氧羰基)-Nα-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-L-赖氨酸和2.37g的N,N-二异丙基乙胺，反应完后抽滤，依次用二氯甲烷、甲醇和N,N-二甲基甲酰胺洗涤，再加入20%哌啶N,N-二甲基甲酰胺溶液100mL脱Fmoc基团，洗涤后加6.84g 苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐、0.12g的1-羟基苯并三唑、9.48g的1-[(1,1-二甲基乙氧基)羰基]-N-[(9H-芴-9-甲氧基)羰基]-D-色氨酸和2.37g的N,N-二异丙基乙胺，反应完后抽滤，依次用二氯甲烷、甲醇和N,N-二甲基甲酰胺洗涤，再加入20%哌啶N,N-二甲基甲酰胺溶液100mL脱Fmoc基团，洗涤后加6.84g 苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐、0.18g的1-羟基苯并三唑、 8.28g的Fmoc-O-叔丁基-L-酪氨酸和2.37g的N,N-二异丙基乙胺，反应完后抽滤，依次用二氯甲烷、甲醇和N,N-二甲基甲酰胺洗涤，再加入20%哌啶N,N-二甲基甲酰胺溶液100mL脱Fmoc基团，洗涤后加6.84g苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐、0.23g的1-羟基苯并三唑、 10.55g的Fmoc-S-三苯甲基-L-半胱氨酸和2.37g的N,N-二异丙基乙胺，反应完后抽滤，依次用二氯甲烷、甲醇和N,N-二甲基甲酰胺洗涤，再加入20%哌啶N,N-二甲基甲酰胺溶液100mL脱Fmoc基团，洗涤后加6.84g 苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐、0.14g的1-羟基苯并三唑、6.97g的Fmoc-D-苯丙氨酸和2.37g N,N-二异丙基乙胺，反应完后抽滤，依次用二氯甲烷、甲醇和N,N-二甲基甲酰胺洗涤，加入200mL的N,N-二甲基甲酰胺，再加入8.44g碘、10mL甲醇和10mL的N,N-二甲基甲酰胺的混合液，脱-Trt保护并环化，用100mL的20%哌啶N,N-二甲基甲酰胺溶液脱Fmoc保护后，洗涤后加60mL的N,N-二甲基甲酰胺、3.42g的2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯、1.16g的N,N-二异丙基乙胺、7.43g的(S)-5-((4'-氨基-3,3'-二甲基-[1,1'-二苯基]-4-基)羰基)-1-(9H-芴-9-基)-3,11-二氧-2,14,17三氧代-4,10-二氮杂二十-20-酸，反应完后抽滤，依次用二氯甲烷、甲醇和N,N-二甲基甲酰胺洗涤，再加入20%哌啶N,N-二甲基甲酰胺溶液100mL脱Fmoc基团，洗涤后加60mL的N,N-二甲基甲酰胺溶液和8.44g的2,2',2''-(10-(2-((2,5-二氧代吡咯烷-1-基)氧基)-2-氧代乙基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7-三基)三乙酸三叔丁酯，反应完后抽滤，再用200mL的20%的六氟异丙醇的二氯甲烷溶液切割树脂，旋干后加入乙腈、水和2M的HCl溶液4.5mL，加25mL的N,N-二甲基甲酰胺溶解，降温，加入0.75g亚硝酸钠的水溶液，低温下加入3.38g的1-氨基-8-萘酚-2,4-二磺酸单钠盐和11.34g碳酸氢钠水溶液中，反应完毕旋干，制备分离纯化得到中间体，后将所得中间体加入95%的三氟乙酸水溶液脱保护，制备液相分离纯化得到目标产物。

4.一种放射性核素标记的靶向SSTR2的化合物，其特征在于，它是由权利要求2所述的结构如式（II）所示的化合物标记了放射性核素得到的。

5.如权利要求4所述的放射性核素标记的靶向SSTR2的化合物，其特征在于，所述的放射性核素选自发射α射线的同位素、发射β射线的同位素、发射γ射线的同位素、发射俄歇电子的同位素或发射X射线的同位素。

6.如权利要求4所述的放射性核素标记的靶向SSTR2的化合物，其特征在于，所述的放射性核素选自⁵¹Cr、⁶⁴Cu、⁶⁷Cu、⁶⁷Ga、⁶⁸Ga、⁸⁹Zr、¹¹¹In、^99mTc、¹⁸⁶Re、¹⁸⁸Re、¹³⁹La、¹⁴⁰La、¹⁷⁵Yb、¹⁵³Sm、¹⁶⁶Ho、⁸⁶Y、⁹⁰Y、¹⁴⁹Pm、¹⁶⁵Dy、¹⁶⁹Er、¹⁷⁷Lu、⁴⁷Sc、¹⁴²Pr、¹⁵⁹Gd、²¹²Bi、²¹³Bi、⁷²As、⁷²Se、⁹⁷Ru、¹⁰⁹Pd、¹⁰⁵Rh、^101mRh、¹¹⁹Sb、¹²⁸Ba、¹²³I、¹²⁴I、¹³¹I、¹⁹⁷Hg、²¹¹At、¹⁵¹Eu、¹⁵³Eu、¹⁶⁹Eu、²⁰¹Tl、²⁰³Pb、²¹²Pb、¹⁹⁸Au、²²⁵Ac、²²⁷Th或¹⁹⁹Ag中的任意一种。

7.如权利要求4所述的放射性核素标记的靶向SSTR2的化合物，其特征在于，所述的放射性核素选自¹⁷⁷Lu、²²⁵Ac、⁶⁸Ga、⁶⁴Cu、⁸⁹Zr、⁹⁰Y、^99mTc、¹⁸⁸Re或¹¹¹In。

8.制备如权利要求4-7任意一项所述的放射性核素标记的靶向SSTR2的化合物的方法，其特征在于，包括：将如权利要求2所述的可用放射性核素标记的靶向SSTR2的化合物与含放射性核素的化合物按照湿法标记方法或冻干法标记法反应，即可制备得到所述的放射性核素标记的靶向SSTR2的化合物。

9.一种药物组合物，其特征在于：包含权利要求1所述的靶向SSTR2的化合物、权利要求2所述的可用放射性核素标记的靶向SSTR2的化合物、权利要求4-7任意一项所述的放射性核素标记的靶向SSTR2的化合物、或它们在药学上可接受的水合物、溶剂化物或盐。

10.权利要求1所述的靶向SSTR2的化合物、权利要求2所述的可用放射性核素标记的靶向SSTR2的化合物、权利要求4所述的放射性核素标记的靶向SSTR2的化合物、或它们在药学上可接受的水合物、溶剂化物或盐、或权利要求9所述的药物组合物，在制备用于诊断或治疗动物或人类个体的以SSTR2过度表达为特征的疾病的药物中的应用；所述的以SSTR2过度表达为特征的疾病选自：神经内分泌肿瘤、胃肠道肿瘤、肺癌、肝细胞癌、胰腺癌、头颈癌、卵巢癌、食道癌、骨髓瘤、膀胱癌、透明细胞肾癌、致癌性骨软化症、肉瘤或子宫颈癌。

11.如权利要求10所述的应用，其特征在于：所述的神经内分泌肿瘤选自乳腺癌、胸腺癌、胶质瘤或前列腺癌。

12.如权利要求11所述的应用，其特征在于：所述的胶质瘤为神经胶质瘤。

13.如权利要求12所述的应用，其特征在于：所述的神经胶质瘤为星形细胞瘤。

14.如权利要求10所述的应用，其特征在于：所述的胃肠道肿瘤选自小肠癌、结肠癌、直肠癌或胆管细胞癌。

15.如权利要求10所述的应用，其特征在于：所述的头颈癌选自鼻咽癌、下咽癌或喉癌。