KR101383655B1 - 트리카르보닐 테크네슘-99ｍ 또는 레늄-188 표지 고리 알지디 유도체, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 신생혈관 관련 질환의 진단 또는 치료용 약학적 조성물 - Google Patents

트리카르보닐 테크네슘-99ｍ 또는 레늄-188 표지 고리 알지디 유도체, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 신생혈관 관련 질환의 진단 또는 치료용 약학적 조성물 Download PDF

Info

Publication number
KR101383655B1
KR101383655B1 KR1020110043544A KR20110043544A KR101383655B1 KR 101383655 B1 KR101383655 B1 KR 101383655B1 KR 1020110043544 A KR1020110043544 A KR 1020110043544A KR 20110043544 A KR20110043544 A KR 20110043544A KR 101383655 B1 KR101383655 B1 KR 101383655B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
tricarbonyl
aspartic acid
ring
glycine
formula
Prior art date
Application number
KR1020110043544A
Other languages
English (en)
Other versions
KR20110128732A (ko
Inventor
이병철
김상은
김지선
문병석
정재호
Original Assignee
주식회사 바이오이미징코리아
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 주식회사 바이오이미징코리아 filed Critical 주식회사 바이오이미징코리아
Priority to CN201180031236.6A priority Critical patent/CN102985413B/zh
Priority to JP2013512534A priority patent/JP5774687B2/ja
Priority to PCT/KR2011/003801 priority patent/WO2011149250A2/ko
Priority to US13/699,511 priority patent/US9439986B2/en
Priority to EP11786882.8A priority patent/EP2583966B1/en
Publication of KR20110128732A publication Critical patent/KR20110128732A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR101383655B1 publication Critical patent/KR101383655B1/ko

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
    • A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
    • A61K51/04—Organic compounds
    • A61K51/08—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins
    • A61K51/088—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins conjugates with carriers being peptides, polyamino acids or proteins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines having two or more nitrogen atoms in the same ring, e.g. oxadiazines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
    • A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
    • A61K51/04—Organic compounds
    • A61K51/08—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins
    • A61K51/082—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins the peptide being a RGD-containing peptide
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D273/00—Heterocyclic compounds containing rings having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D261/00 - C07D271/00
    • C07D273/02—Heterocyclic compounds containing rings having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D261/00 - C07D271/00 having two nitrogen atoms and only one oxygen atom
    • C07D273/06—Seven-membered rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D498/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D498/06—Peri-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D498/12—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D498/16—Peri-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/64—Cyclic peptides containing only normal peptide links
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/58—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances
    • G01N33/60—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances involving radioactive labelled substances

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Optics & Photonics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Nuclear Medicine (AREA)

Abstract

본 발명은 트리카르보닐 테크네슘-99m 또는 레늄-188 표지 고리 알지디 유도체, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 신생혈관 관련 질환의 진단 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것으로, 본 발명의 트리카르보닐 테크네슘-99m 또는 레늄-188 표지 고리 알지디 유도체는 종양에 의해 유도되는 신생혈관작용에서 활성화된 비트로넥틴(Vitronectin) 수용체라고도 불리는 αvβ3 인테그린에 서브나노몰(subnanomolar) 단위의 높은 친화도를 가지고, 암세포가 이식된 동물에서 트리카르보닐 테크네슘-99m 표지 고리 알지디 유도체 초기 섭취 후 높은 종양 영상을 반영하고 간과 장에서의 섭취율이 기존의 알려진 방사성동위원소 표지 고리 알지디 유도체에 비해 현저하게 낮아 선택적으로 αvβ3 인테그린이 활성화된 암세포에만 작용함을 알 수 있으며, 이와 같은 결과를 바탕으로 테크네슘-99m 표지에 사용된 동일 전구체를 사용한 치료 핵종인 레늄-188 표지 유도체의 경우 생리식염수만 주입한 종양 동물모델과는 달리 꼬리 정맥 주입 시 효과적인 종양의 성장 저해와 치료 효능을 나타내기 때문에 신생혈관 관련 질환의 진단 또는 치료용 의약품으로 유용하게 이용될 수 있다.

Description

트리카르보닐 테크네슘-99ｍ 또는 레늄-188 표지 고리 알지디 유도체, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 신생혈관 관련 질환의 진단 또는 치료용 약학적 조성물{Tricarbonyl Tc-99m or Re-188 labeled cyclic RGD derivatives or pharmaceutically acceptable salts thereof, preparation method thereof, and pharmaceutical composition for the diagnosis or treatment of angiogenesis-related disease containing the same as an active ingredient}
본 발명은 트리카르보닐 테크네슘-99m 또는 레늄-188 표지 고리 알지디 유도체, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 신생혈관 관련 질환의 진단 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다.
암의 완전 치유가 현대의학의 중요과제가 되는 시점에서 표적분자와 특이적으로 반응하는 방사성추적자를 이용하여 비침습적으로 암의 조기 진단 및 치료를 위하여 질병의 분자수준 변화 관찰이 가능한 핵의학적 진단 및 치료 기술의 중요성은 널리 알려져 있다.
기존의 양전자방출단층촬영(PET)용 방사성의약품인 [18F]-FDG(2-fluoro-2-deoxy-D-glucose)는 널리 체내 암 진단으로 널리 쓰이고는 있지만, 뇌종양의 진단이나, 염증과 종양과의 구별이 안 된다는 등의 단점이 있으며 또한 암의 신생혈관 생성 및 전이 증후에 대한 정보를 제공하기에는 한계성이 있다.
암의 신생혈관작용(angiogenesis)은 원발성(primary) 또는 전이성 종양에서 필수적이며, 암 조직은 신생혈관에 의한 영양분과 산소 공급이 없으면 1-2 mm3 이상 성장할 수 없다. 이렇듯 신생혈관작용이 일어나는 동안 원발성 암세포가 혈관 내로 유입되어 다른 장소로 이동하여 전이(metastasis) 암을 형성하게 된다. 따라서 신생혈관 영상 타깃은 모든 고형성 종양(solid tumor)에서 공통적으로 사용될 수 있다는 가능성을 지니고 있다. 치료 면에서는 기존의 항암화학요법은 암의 세포가 빠르게 성장하는 특징을 이용한 치료이기 때문에 세포주기가 빠른 골수 세포, 위장관계 세포 등 정상세포에 독성을 나타내는 반면에, 신생혈관작용 타깃 치료는 장기 투여에도 비교적 적은 부작용과 혈관세포가 치료의 대상이라는 점에서 내성을 나타낼 가능성이 적다.
암의 성장 메카니즘 과정으로서 신생혈관은 암 조직 근처의 혈관 내 αvβ3 인테그린(integrin)의 과다 분포를 시작으로 진행되어짐이 알려져 있다. 인테그린은 세포의 부착(adhesion)이나 이동 등에 관여하는 α 및 β 서브유닛(subunit)로 구성된 heterodimer 세포막 단백질로서 세포에 따라 여러 종류가 존재한다. 그 중 신생혈관에는 vitronectin 수용체라고도 불리는 αvβ3 종이 중요하며 평상의 혈관내피세포에는 발현이 없고 암에 의한 신생혈관작용이 활성화된 경우에만 발현한다. 이 인테그린과 상호작용하는 단백질에는 공통적으로 알지닌-글라이신-아스파르트산(Arg-Gly-Asp, RGD) 펩타이드 시퀀스가 존재하여 결합부위 역할을 한다. 이와 같은 화합물을 기반으로 αvβ3 인테그린 정상기능을 막는 보다 높은 결합친화도를 갖는 길항물질로써 고리형 펩타이드 구조인 고리 알지디(cyclic Arg-Gly-Asp, cRGD) 펩타이드 화합물이 있으며, 지금까지 많은 국내·외 연구기관을 통해 이 화합물에 다양한 방사성동위원소를 도입하여 암의 신생혈관 영상화 연구가 진행되어왔다.
다양한 고리 알지디 유도체에 사용된 방사성동위원소는 PET용 플루오린-18, 갈륨-68과 구리-64 등과, SPECT용으로 테크네슘-99m, 요오드-123, 인듐-111 등이 표지핵종으로 사용되었으며, 간 조직에서 배출을 빠르게 유도하기 위해 단당류를 부착시킴으로써 방사성추적자의 약물동태를 좋게 하거나, 더 높은 결합친화도를 갖게 하기 위해 두 개 또는 네 개의 고리 알지디를 부착한 방사성추적자가 연구되었다(참고논문: Haubner, R., Wester, H-J., Weber, W.A., Mang, C., Ziegler, S. I., Goodman, S. L., Senekowitsch-Schmidtke, R., Kessler, H., Schwaiger, M., Cancer Res., 2001, 61:1781-1785; Jeong, J.M., Hong, M.K., Chang, Y.S., Lee, Y.S., Kim, Y.J., Cheon, G.J., Lee, D.S., Chung, J.K., Lee, M.C., J. Nucl. Med., 2008, 49:830-836; Chen, W., Park, R., Tohme, M., Shahinian, A.H., Bading, J.R., Conti, P.S. Bioconjugate Chem., 2004, 15:41-49; Liu, S., Hsieh, W.Y., Kim, Y.S., Mohammel, S. I., Bioconjugate Chem., 2005, 16:1580-1588; Haubner, R., Wester, H-J., Reuning, U., Senekowitsch-Schmidtke, R., Diefenbach, B., Kessler, H., Stocklin G., Schwaiger, M., J. Nucl. Med., 1999, 40:1061-1071; Janssen, M., Oyen, W.J.G., Dijkgraaf, I., Massuger, L.F.A.G., Frielink, C., Edwards, D.S., Rajopadyhe, M., Boonstra, H., Corsten, F.H.M., Boerman, O.C., Cancer Res., 2002, 62:6146-6151; Wu, Y., Zhang, X., Xiong, Z., Cheng, Z., Fisher, D.R., Liu, S., Gambhir, S.S., Chen, X., J. Nucl. Med., 2005, 46:1707-1718.). 하지만, 다양한 방사성동위원소 표지 고리 알지디 유도체가 개발되었지만, 높은 간 섭취 및 장에서의 배출 속도가 느린 단점을 가지고 있어서 종양 조직 대 정상 조직간의 축적 비율이 낮아 진단 영상의 한계성을 갖고, 치료용 방사성동위원소 표지 방사성추적자의 경우 정상 조직에도 손상을 미치기 때문에 아직까지 임상적용 연구가 활발하지 못한 상황이다.
여러 가지 방사성동위원소 중에서 테크네슘-99m과 레늄-188은 모든 병원에서 단일광자방출전산화단층촬영술(Single Photon Emission Computed Tomography; SPECT) 스캐너와 발생기(generator)만 있으면 간단한 표지 방법과 분리공정을 통해 SPECT 영상을 통한 진단을 이행할 수 있어서 활용적, 실용적인 면에서 우수한 방사성동위원소이며 같은 전구체를 사용하여 치료 목적 하에 레늄을 선택하여 표지할 수 있는 장점을 지니고 있다.
하지만 기존의 테크네슘-99m과 레늄-188 표지 방법으로는 표지 포켓의 사이즈가 크고 낮은 체내 안정성 그리고 전구체 합성이 용이하지 않아서 효과적인 방사성 추적자를 개발하기에 많은 제한점을 가지고 있다. 이와는 달리 트리카르보닐 테크네슘-99m과 트리카르보닐 레늄-188은 전구체 합성이 용이하고, 표지 포켓이 작고 안정하며, 간단한 제조공정의 변화로 방사성추적자의 전하(charge)를 변화시킬 수 있다. 이와 더불어 체내에서 안정하고, 표지 된 방사성추적자가 체내 대사 시 갑상선에 모이지 않고 빠르게 체외로 배출됨으로써 상대적으로 좋은 영상을 제공하는 등 효율성이 큰 동위원소 추적자로서 중요시되고 있다. 이러한 트리카르보닐 테크네슘-99m 또는 트리카르보닐 레늄-188의 이용은 아직은 미미하지만, 새로운 방사성의약품 개발을 위하여 국내·외적으로 연구가 진행되고 있다.
이에 본 발명자들은 암의 신생혈관작용 유력 바이오마커인 αvβ3 인테그린 타깃 영상 및 치료용 의약품으로써 새로운 트리카르보닐 테크네슘-99m 또는 레늄-188 표지 고리 알지디 유도체를 합성하고, 다양한 생물학적 평가 결과를 통해 이들 트리카르보닐 테크네슘 또는 레늄 표지 알지디 유도체들이 우수한 신생혈관 관련 질환의 진단 및 치료가 가능한 물질임을 확인하고 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 목적은 신생혈관 관련 질환의 진단 또는 치료에 유용하게 사용될 수 있는 트리카르보닐 테크네슘-99m 또는 레늄-188 표지 고리 알지디 유도체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 제공하는데 있다.
본 발명의 다른 목적은 상기 트리카르보닐 테크네슘-99m 또는 레늄-188 표지 고리 알지디 유도체의 제조방법을 제공하는데 있다.
본 발명의 또 다른 목적은 상기 트리카르보닐 테크네슘-99m 또는 레늄-188 표지 고리 알지디 유도체의 전구체를 제공하는데 있다.
본 발명의 또 다른 목적은 상기 트리카르보닐 테크네슘 또는 레늄 표지 고리 알지디 유도체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 함유하는 신생혈관 관련 질환의 진단 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는데 있다.
상기 목적을 달성하기 위해, 본 발명은 하기 화학식 1의 트리카르보닐 테크네슘-99m 또는 레늄-188 표지 고리 알지디 유도체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 제공한다.
[화학식 1]
Figure 112011034240627-pat00001
(상기 화학식 1에서, M, R1, X 및 Y는 본 명세서에서 정의한 바와 같다)
또한, 본 발명은 트리카르보닐 테크네슘-99m 또는 레늄-188 표지 고리 알지디 유도체의 제조방법을 제공한다.
나아가, 본 발명은 상기 트리카르보닐 테크네슘-99m 또는 레늄-188 표지 고리 알지디 유도체의 전구체를 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 트리카르보닐 테크네슘-99m 또는 레늄-188 표지 고리 알지디 유도체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 함유하는 신생혈관 관련 질환의 진단 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명의 트리카르보닐 테크네슘-99m 또는 레늄-188 표지 고리 알지디 유도체는 종양에 의해 유도되는 신생혈관작용에서 활성화된 비트로넥틴(Vitronectin) 수용체라고도 불리는 αvβ3 인테그린에 서브나노몰(subnanomolar) 단위의 높은 친화도를 가지고, 암세포가 이식된 동물에서 트리카르보닐 테크네슘-99m 표지 고리 알지디 유도체 초기 섭취 후 높은 종양 영상을 반영하고 간과 장에서의 섭취율이 기존의 알려진 방사성동위원소 표지 고리 알지디 유도체에 비해 현저하게 낮아 선택적으로 αvβ3 인테그린이 활성화된 암세포에만 작용함을 알 수 있으며, 이와 같은 결과를 바탕으로 테크네슘-99m 표지에 사용된 동일 전구체를 사용한 치료 핵종인 레늄-188 표지 유도체의 경우 생리식염수만 주입한 종양 동물모델과는 달리 꼬리 정맥 주입 시 효과적인 종양의 성장 저해와 치료 효능을 나타내기 때문에 맞춤형 신생혈관 관련 질환의 진단 또는 치료용 의약품으로 유용하게 이용될 수 있다.
도 1은 본 발명의 일실시예에 따른 트리카르보닐 테크네슘-99m 표지 고리 알지디 유도체의 체내 종양 모델 마우스에서의 종양 섭취 및 장기별 배출 결과를 나타내는 그래프이다.
도 2는 본 발명의 다른 일실시예에 따른 트리카르보닐 테크네슘-99m 표지 고리 알지디 유도체의 체내 종양 모델 마우스에서의 종양 섭취 및 장기별 배출 결과를 나타내는 그래프이다.
도 3은 본 발명의 또 다른 일실시예에 따른 트리카르보닐 테크네슘-99m 표지 고리 알지디 유도체의 체내 종양 모델 마우스에서의 종양 섭취 및 장기별 배출 결과를 나타내는 그래프이다.
도 4는 본 발명의 일실시예에 따른 트리카르보닐 테크네슘-99m 표지 고리 알지디 유도체의 체내 종양모델 마우스에서의 SPECT 영상을 촬영한 사진이다.
도 5는 본 발명의 다른 일실시예에 따른 트리카르보닐 테크네슘-99m 표지 고리 알지디 유도체의 체내 종양모델 마우스에서의 SPECT 영상을 촬영한 사진이다.
도 6은 본 발명의 또 다른 일실시예에 따른 트리카르보닐 테크네슘-99m 표지 고리 알지디 유도체의 체내 종양모델 마우스에서의 SPECT 영상을 촬영한 사진이다.
도 7은 본 발명의 일실시예에 따른 트리카르보닐 테크네슘-99m 표지 고리 알지디 유도체의 체내 종양모델 마우스에서의 장기 섭취율 그래프 및 시간대 별 종양 대 간, 종양 대 신장 그리고 종양 대 정상세포 섭취율 그래프이다.
도 8은 본 발명의 일실시예에 따른 트리카르보닐 테크네슘-99m 표지 고리 알지디 유도체의 체내 종양 모델 마우스에서의 고리 알지디 유도체(cRGDyV) 주입 후 SPECT 영상을 촬영한 사진이다.
도 9는 본 발명의 일실시예에 따른 트리카르보닐 레늄-188 표지 고리 알지디 유도체의 모델 마우스의 종양 크기 및 체중에 미치는 영향을 나타내는 그래프이다.
도 10은 본 발명의 일실시예에 따른 트리카르보닐 레늄-188 표지 고리 알지디 유도체의 모델 마우스의 종양 크기 및 체중에 미치는 영향을 나타내는 SPECT 영상 및 관심 영역별 장기 섭취율 그래프이다.
도 11은 본 발명의 일실시예에 따른 트리카르보닐 레늄-188 표지 고리 알지디 유도체 주입 후, 모델 마우스의 종양 크기 및 트리카르보닐 테크네슘-99m 표지 고리 알지디 SPECT 영상 섭취율에 미치는 영향을 보여주고 있으며, 종양 조직 슬라이스를 CD-31 blood staining과 Q-dot-두개 알지디 유도체를 이용한 confocal microscopy이다.
이하, 본 발명을 상세하게 설명한다.
본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 트리카르보닐 테크네슘 또는 레늄 표지 고리 알지디 유도체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 제공한다.
Figure 112011034240627-pat00002
(상기 화학식 1에서,
M은 99mTc, 188Re 또는 185,187Re이고,
R1은 N, N(CH2CH2O)nCH2CH2CONH 또는 N(CH2CONH)nCH2CH2CONH이며,
X는 비결합,
Figure 112011034240627-pat00003
또는
Figure 112011034240627-pat00004
이고,
이때, A1 및 A2는 각각 아스파르트산, 라이신, 글루타민산, 타이로신, 시스테인, 트레오닌 및 세린으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 아미노산이고,
R2는 NH 또는 NH(Z)nCH2CH2CONH이고,
Z는 -CH2CH2O- 또는 -CH2CONH-이고,
n은 0 내지 8의 정수이고,
Y는
Figure 112011034240627-pat00005
이고,
이때 R3은 H 또는 OH이고,
R4는 -(CH2)m- 또는 -(CH2)m-COO-이고,
m은 1 내지 8의 정수이고,
상기 Y는 R1에 직접 결합되거나, X 중에서 R2에 결합된다)
바람직하게 상기 트리카르보닐 테크네슘 또는 레늄 표지 고리 알지디 유도체는 하기 화학식 1A 내지 화학식 1C로 나타내는 화합물의 군으로부터 선택될 수 있다.
[화학식 1A]
Figure 112011034240627-pat00006

[화학식 1B]
Figure 112011034240627-pat00007

[화학식 1C]
Figure 112011034240627-pat00008
(상기 화학식 1A 내지 1C에 있어서, 상기 M, R1, R2, R3, R4, A1 및 A2는 상기 화학식 1에서 정의한 바와 같다)
본 발명에 따른 상기 화학식 1로 표시되는 트리카르보닐 테크네슘 또는 레늄 표지 고리 알지디 유도체의 바람직한 예는 하기와 같다.
본 발명에 따른 상기 화학식 1로 표시되는 트리카르보닐 테크네슘-99m 또는 레늄-188 표지 고리 알지디 유도체의 바람직한 예는 하기와 같다.
1) 고리 {(트리카르보닐-[99 mTc]테크네슘-N-α-비스-하이드록시카르보닐메틸-라이신)-알지닌-글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌};
2) 고리 {(트리카르보닐-[188Re]레늄-N-α-비스-하이드록시카르보닐메틸-라이신)-알지닌-글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌};
3) 고리 {(트리카르보닐-[185,187Re]레늄-N-α-비스-하이드록시카르보닐메틸-라이신)-알지닌-글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌};
4) 고리 {(트리카르보닐-[99 mTc]테크네슘-N-α-비스-하이드록시카르보닐메틸-NH2(CH2CH2O)4CH2CH2CONH-라이신)-알지닌-글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌};
5) 고리 {(트리카르보닐-[188Re]레늄-N-α-비스-하이드록시카르보닐메틸-NH2(CH2CH2O)4CH2CH2CONH-라이신)-알지닌-글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌};
6) 고리 {(트리카르보닐-[185,187Re]레늄-N-α-비스-하이드록시카르보닐메틸-NH2(CH2CH2O)4CH2CH2CONH-라이신)-알지닌-글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌};
7) 고리 {(트리카르보닐-[99 mTc]테크네슘-N-α-비스-하이드록시카르보닐메틸-글라이신-CONH(CH2CH2O)4CH2CH2CONH-라이신)-알지닌-글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌};
8) 고리 {(트리카르보닐-[188Re]레늄-N-α-비스-하이드록시카르보닐메틸-글라이신-CONH(CH2CH2O)4CH2CH2CONH-라이신)-알지닌-글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌};
9) 고리 {(트리카르보닐-[185,187Re]레늄-N-α-비스-하이드록시카르보닐메틸-글라이신-CONH(CH2CH2O)4CH2CH2CONH-라이신)-알지닌-글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌};
10) (트리카르보닐-[99 mTc]테크네슘-N-α-비스-하이드록시카르보닐메틸-아스파르트산)-[고리(라이신-알지닌-글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌)]2;
11) (트리카르보닐-[188Re]레늄-N-α-비스-하이드록시카르보닐메틸-아스파르트산)-[고리(라이신-알지닌-글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌)]2;
12) (트리카르보닐-[185,187Re]레늄-N-α-비스-하이드록시카르보닐메틸-아스파르트산)-[고리(라이신-알지닌-글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌)]2;
13) {트리카르보닐-[99 mTc]테크네슘-N-α-비스-하이드록시카르보닐메틸-(폴리에틸렌글리콜)n-아스파르트산}-[고리(라이신-알지닌-글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌)]2, (n = 0-8);
14) {트리카르보닐-[188Re]레늄-N-α-비스-하이드록시카르보닐메틸-(폴리에틸렌글리콜)n-아스파르트산}-[고리(라이신-알지닌-글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌)]2, (n = 0-8);
15) {트리카르보닐-[185,187Re]레늄-N-α-비스-하이드록시카르보닐메틸-(폴리에틸렌글리콜)n-아스파르트산}-[고리(라이신-알지닌-글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌)]2, (n = 0-8);
16) {트리카르보닐-[99 mTc]테크네슘-N-α-비스-하이드록시카르보닐메틸-(폴리에틸렌글리콜)n-아스파르트산}-{(폴리에틸렌글리콜)n-[고리(라이신-알지닌-글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌)]}2, (n = 0-8);
17) {트리카르보닐-[188Re]레늄-N-α-비스-하이드록시카르보닐메틸-(폴리에틸렌글리콜)n-아스파르트산}-{(폴리에틸렌글리콜)n-[고리(라이신-알지닌-글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌)]}2, (n = 0-8);
18) {트리카르보닐-[185,187Re]레늄-N-α-비스-하이드록시카르보닐메틸-(폴리에틸렌글리콜)n-아스파르트산}-{(폴리에틸렌글리콜)n-[고리(라이신-알지닌-글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌)]}2, (n = 0-8);
19) (트리카르보닐-[99 mTc]테크네슘-N-α-비스-하이드록시카르보닐메틸-아스파르트산)-{아스파르트산-[고리(라이신-알지닌-글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌)]2}4;
20) (트리카르보닐-[188Re]레늄-N-α-비스-하이드록시카르보닐메틸-아스파르트산)-{아스파르트산-[고리(라이신-알지닌-글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌)]2}4;
21) (트리카르보닐-[185,187Re]레늄-N-α-비스-하이드록시카르보닐메틸-아스파르트산)-{아스파르트산-[고리(라이신-알지닌-글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌)]2}4;
22) {트리카르보닐-[99 mTc]테크네슘-N-α-비스-하이드록시카르보닐메틸-(폴리에틸렌글리콜)n-아스파르트산}-{아스파르트산-[고리(라이신-알지닌-글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌)]2}4, (n = 0-8);
23) {트리카르보닐-[188Re]레늄-N-α-비스-하이드록시카르보닐메틸-(폴리에틸렌글리콜)n-아스파르트산}-{아스파르트산-[고리(라이신-알지닌-글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌)]2}4, (n = 0-8);
24) {트리카르보닐-[185,187Re]레늄-N-α-비스-하이드록시카르보닐메틸-(폴리에틸렌글리콜)n-아스파르트산}-{아스파르트산-[고리(라이신-알지닌-글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌)]2}4, (n = 0-8);
25) {트리카르보닐-[99 mTc]테크네슘-N-α-비스-하이드록시카르보닐메틸-(폴리에틸렌글리콜)n-아스파르트산}-{아스파르트산-(폴리에틸렌글리콜)n-[고리(라이신-알지닌-글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌)]2}4, (n = 0-8);
26) {트리카르보닐-[188Re]레늄-N-α-비스-하이드록시카르보닐메틸-(폴리에틸렌글리콜)n-아스파르트산}-{아스파르트산-(폴리에틸렌글리콜)n-[고리(라이신-알지닌-글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌)]2}4, (n = 0-8); 및
27) {트리카르보닐-[185,187Re]레늄-N-α-비스-하이드록시카르보닐메틸-(폴리에틸렌글리콜)n-아스파르트산}-{아스파르트산-(폴리에틸렌글리콜)n-[고리(라이신-알지닌-글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌)]2}4, (n = 0-8).
본 발명에 따른 화학식 1의 고리 알지디 유도체는 알지디 고리를 1개 내지 4개 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 화학식 1로 표시되는 고리 알지디 유도체는 약학적으로 허용 가능한 염의 형태로 사용할 수 있다. 상기 염으로는 약학적으로나 생리학적으로 허용되는 다양한 유기산 또는 무기산에 의해 형성된 산부가염이 유용하다. 적합한 유기산으로는, 예를 들면 카르복실산, 포스폰산, 술폰산, 아세트산, 프로피온산, 옥탄산, 데칸산, 글리콜산, 락트산, 푸마르산, 숙신산, 아디프산, 말산, 타르타르산, 시트르산, 글루탐산, 아스파르트산, 말레산, 벤조산, 살리실산, 프탈산, 페닐아세트산, 벤젠술폰산, 2-나프탈렌술폰산, 메틸황산, 에틸황산, 도데실황산 등을 사용할 수 있고, 적합한 무기산으로는, 예를 들면 염산, 황산 또는 인산 등을 사용할 수 있다.
본 발명에 따른 상기 화학식 1로 표시되는 고리 알지디 유도체는 약학적으로 허용 가능한 염뿐만 아니라, 통상의 방법에 의해 제조될 수 있는 모든 염, 수화물 및 용매화물을 모두 포함할 수 있다.
또한, 본 발명은 상기 화학식 1의 고리 알지디 유도체를 제조하는 방법을 제공한다.
구체적으로, 본 발명에 따른 고리 알지디 유도체는 하기 반응식 1 및 반응식 2에 나타난 바와 같은 방법으로 제조될 수 있다.
제법 1
본 발명에 있어서, 방사성 동위원소인 트리카르보닐 테크네슘-99m 또는 트리카르보닐 레늄-188이 표지된 고리 알지디 유도체는 하기 반응식 1에 나타낸 바와 같이,
화학식 2의 전구체 화합물에 트리카르보닐 테크네슘-99m 또는 트리카르보닐 레늄-188를 반응시켜 화학식 1의 트리카르보닐 테크네슘-99m 또는 트리카르보닐 레늄-188이 표지된 고리 알지디 유도체를 제조하는 단계를 포함하는 방법으로 제조될 수 있다.
[반응식 1]
Figure 112011034240627-pat00009
(상기 반응식 1에서, M은 99 mTc 또는 188Re이고, R1, X 및 Y는 상기 화학식 1에서 정의한 바와 같다)
구체적으로, 상기 트리카르보닐 테크네슘-99m 또는 트리카르보닐 레늄-188 화합물(99mTc(CO)3(H2O)3 + 또는 188Re(CO)3(H2O)3 +)을 증류수 용매 0.5~5 mL로 희석하여 화학식 2의 전구체가 들어있는 반응용기에 넣고, 70~80 ℃에서 30분 또는 60분간 가열하여 반응시킴으로써 화학식 1의 트리카르보닐 테크네슘-99m 또는 트리카르보닐 레늄-188이 표지된 고리 알지디 유도체를 제조할 수 있다.
본 발명에 따른 상기 제법 1에 있어서, 상기 트리카르보닐 테크네슘-99m 또는 트리카르보닐 레늄-188 화합물은 종래 알려진 방법을 따라 합성할 수 있으며, 바람직하게는 하기 문헌에 의한 방법을 사용할 수 있다.
참고논문: Alberto, R., Schibli, R., Egli, A., Schubiger, A.P., Abram, U., Kaden, T.A., J. Am. Chem. Soc. 1998, 120:7987-7988; Alberto, R., Schibli, R., Schubiger, A.P., Abram, U., Pietzsch, H-P., Johannsen, B., J. Am. Chem. Soc. 1999, 121:6076-6077; Schibli, R., Netter, M., Scapozza, L., Birringer, M., Schelling, P., Dumas, C., Schoch, J., Schubiger, P.A., J. Organomet. Chem. 2003, 668:67-74; Schibli, R., Schwarzbach, R., Alberto, R., Ortner, K., Schmalle, H., Dumas, C., Egli, A., Schubiger, P.A. Bioconjuate Chem. 2002, 13:750-756.
제조된 트리카르보닐 테크네슘-99m 또는 트리카르보닐 레늄-188이 표지된 고리 알지디 유도체는 추가적으로, 상온에서 냉각시키고, tC18 Sep-Pak 카트리지 또는 고성능액체크로마토그래피(HPLC)를 수행하여 분리/정제할 수 있다.
제법 2
본 발명에 있어서, 비방사성 동위원소인 트리카르보닐 185,187Re가 도입된 고리 알지디 유도체는 하기 반응식 2에 나타낸 바와 같이,
화학식 2의 전구체에 (NEt4)2Re(CO)3Br3을 넣고 반응시켜 화학식 1a의 트리카르보닐 185,187Re가 도입된 고리 알지디 유도체를 제조하는 단계를 포함하는 방법으로 제조될 수 있다.
[반응식 2]
Figure 112011034240627-pat00010
(상기 반응식 2에서, R1, X 및 Y는 상기 화학식 1에서 정의한 바와 같고, 화학식 1a는 화학식 1에 포함된다)
구체적으로, 상기 시약 (NEt4)2Re(CO)3Br3을 증류수 용매 0.5~5 mL로 희석하여 화학식 2의 전구체가 들어있는 반응용기에 넣고, 70~80 ℃에서 55~65분간 가열하여 반응시킴으로써 화학식 1a의 트리카르보닐 185,187Re가 도입된 고리 알지디 유도체를 제조할 수 있다.
상기 화학식 1a의 트리카르보닐 185,187Re가 도입된 고리 알지디 유도체는 반응식 1의 트리카르보닐 테크네슘-99m 또는 트리카르보닐 레늄-188이 표지된 고리 알지디 유도체의 기준물질로서, 트리카르보닐 레늄-188이 표지된 고리 알지디 유도체와는 동일 물질이므로 고성능액체크로마토그래피에서 같은 머무름 값을 지니며, 트리카르보닐 테크네슘-99m이 표지된 고리 알지디 유도체와는 1-2분 정도의 머무름 값 차이를 보여준다.
제조된 185,187Re이 화합물 도입된 고리 알지디 유도체는 추가적으로, 상온에서 냉각시키고, tC18 Sep-Pak 카트리지 또는 고성능액체크로마토그래피(HPLC)를 수행하여 분리/정제할 수 있다.
나아가, 본 발명은 상기 화학식 1의 트리카르보닐 테크네슘-99m 또는 레늄-188 표지 고리 알지디 유도체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 함유하는 신생혈관 관련 질환의 진단 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 대상에게 상기 화학식 1의 트리카르보닐 테크네슘-99m 표지 고리 알지디 유도체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 진단학적으로 유효한 양으로 투여하는 단계를 포함하는 대상 내 신생혈관 관련 질환의 진단 방법을 제공한다.
또한, 본 발명은 대상에게 상기 화학식 1의 트리카르보닐 레늄-188 표지 고리 알지디 유도체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 치료학적으로 유효한 양으로 투여하는 단계를 포함하는 대상 내 신생혈관 관련 질환의 치료 방법을 제공한다.
본 발명에 따른 화학식 1의 고리 알지디 유도체는 아민과 두 개의 하이드록시카르보닐메틸기로 이루어진 표지 포켓에 트리카르보닐 테크네슘-99m, 트리카르보닐 레늄-188 또는 트리카르보닐 레늄 반응물이 결합하여 테크네슘-99m을 중심으로 세 개의 카르보닐, 아민, 두 개의 하이드록시기가 8면체 구조(octahedral structure)로 형성된 화합물이다.
상기 화학식 1의 고리 알지디 유도체는 1개, 2개 또는 4개의 고리 알지디를 구성할 수 있으며, 이중 두 개의 고리 알지디를 구성하는 경우, 종양에 의해 유발된 신생혈관작용 바이오마커인 αvβ3 인테그린에 보다 높은 결합친화도를 가지며, 고리 알지디와 표지그룹간의 링커(linker)인 아스파르트산에 다양한 폴리에틸렌글리콜 사슬을 도입하여 두 개의 고리 알지디가 동시에 두 개의 αvβ3 인테그린에 결합 가능한 구조(bivalent)를 형성함으로써 보다 높은 종양 영상을 반영할 수 있으며 이를 통한 치료 효과도 증진될 수 있다. 이와 같이 두 개의 고리 알지디를 구성하는 화합물은 종양이 이식된 쥐에서의 체내 분포 실험에서 혈관내피세포에서 트리카르보닐 테크네슘-99m 또는 트리카르보닐 레늄-188 고리 알지디 유도체에 포함되는 포켓그룹이 갖는 (-) 이온으로 인해 간과 대장에서 빠르게 배출됨으로써 종양 대비 정상 장기의 비율이 높은 결과를 얻었다.
또한, 본 발명에 따른 화학식 1의 고리 알지디 유도체는 4개의 고리 알지디를 구성하여 종양에 의해 유발된 신생혈관작용 바이오마커인 αvβ3 인테그린에 보다 높은 결합친화도를 가질 수 있으며, 고리 알지디와 표지그룹간의 링커(linker)인 아스파르트산에 다양한 폴리에틸렌글리콜 사슬을 도입하여 네 개의 고리 알지디가 동시에 여러 개의 αvβ3 인테그린에 결합 가능한 구조를 형성하여 높은 종양 영상을 반영할 수 있으며 이를 통한 치료 효과도 증진될 수 있다.
나아가, 4개의 고리 알지디를 구성하는 고리 알지디 유도체 또한 높은 αvβ3 인테그린 결합친화도와 혈관내피세포에서 트리카르보닐 테크네슘-99m 또는 트리카르보닐 레늄-188 고리 알지디 유도체에 포함되는 포켓그룹이 갖는 (-) 이온으로 인해 간과 대장에서 빠르게 배출될 수 있다.
따라서, 본 발명에 따른 화학식 1의 고리 알지디 유도체는 종양에 의해 유도되는 신생혈관작용에서 활성화된 비트로넥틴(Vitronectin) 수용체라고도 불리는 αvβ3 인테그린에 서브나노몰(subnanomolar) 단위의 높은 친화도를 가지고, 암세포가 이식된 동물에서 트리카르보닐 테크네슘-99m 표지 고리 알지디 유도체 초기 섭취 후 높은 종양 영상을 반영하고 간과 장에서의 섭취율이 기존의 알려진 방사성동위원소 표지 고리 알지디 유도체에 비해 현저하게 낮아 보다 좋은 영상을 제공하면서 선택적으로 αvβ3 인테그린이 활성화된 암세포에만 작용함을 알 수 있으며, 테크네슘-99m 표지에 사용된 동일 전구체를 사용한 치료 핵종인 레늄-188 표지 유도체의 경우 생리식염수만 주입한 종양 동물모델과는 달리 꼬리 정맥 주입 시 효과적인 종양의 성장 저해와 치료 효능을 나타내기 때문에 맞춤형 신생혈관 관련 질환 진단 또는 치료용 의약품으로 유용하게 이용될 수 있다.
이때, 진단은 상기 트리카르보닐 테크네슘-99m 표지 고리 알지디 유도체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 대상에게 정맥주사로 투여하고 단일광자방출전산화단층촬영으로 신생혈관 관련 질환을 진단하는 것이 바람직하며, 진단을 통해 암의 신생혈관 영상을 취득한 경우 동일 전구체가 사용된 트리카르보닐 레늄-188 표지 고리 알지디 유도체를 이용하여 맞춤형 치료를 수행할 수 있다.
본 발명에 있어서, 상기 신생혈관 관련 질환은 혈전증(brombosis), 심근 허혈(myocardial ischemia), 고형화 종양(solid tumor), 또는 전이암 등 αvβ3 인테그린(integrin)이 과다 분포되는 질환이 바람직하다.
본 발명의 상기 화학식 1의 고리 알지디 유도체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 임상 투여 시에 정맥주사로 투여하며, 인체에 대한 투여량은 환자의 나이, 몸무게, 성별, 투여형태, 건강상태 및 질환 정도에 따라 달라질 수 있으며, 몸무게가 70 Kg인 성인 환자를 기준으로 할 때, 일반적으로 진단의 경우 1 ~ 20 mCi/dose이며 바람직하게는 3~7 mCi/dose이며, 또한 의사 또는 약사의 판단에 따라 일정시간 간격으로 1일 1회 내지 수회로 분할 투여할 수도 있다. 더불어 치료의 경우 1~1000 mCi/dose이며 바람직하게는 1~500 mCi/dose이며, 또한 의사 또는 약사의 판단에 따라 일정시간 간격으로 1일 1회 내지 수회로 분할 투여할 수도 있다.
또한, 본 발명은 하기 화학식 2로 표시되는 트리카르보닐 테크네슘-99m 또는 레늄-188 표지를 위한 고리 알지디 유도체 전구체를 제공한다.
Figure 112011034240627-pat00011
(상기 화학식 2에 있어서, R1, X 및 Y는 상기 화학식 1에서 정의한 바와 같다)
바람직하게 상기 트리카르보닐 테크네슘-99m 또는 레늄-188 표지를 위한 고리 알지디 유도체의 전구체는 하기 화학식 2A 내지 화학식 2C로 나타내는 화합물의 군으로부터 선택될 수 있다.
[화학식 2A]
Figure 112011034240627-pat00012

[화학식 2B]
Figure 112011034240627-pat00013

[화학식 2C]
Figure 112011034240627-pat00014
(상기 화학식 2A 내지 2C에 있어서, 상기 M, R1, R2, R3, R4, A1 및 A2는 상기 화학식 1에서 정의한 바와 같다)
상기 트리카르보닐 테크네슘 또는 레늄 표지를 위한 고리 알지디 유도체의 전구체는 하기에서 설명되는 실시예를 통하여 제조될 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다.
이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기의 실시예는 본 발명의 내용이 하기의 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.
< 제조예 1> 본 발명에 따른 트리카르보닐 테크네슘-99m 또는 레늄-188 표지 고리 알지디 유도체의 전구체의 출발물질(3)의 제조
Figure 112011034240627-pat00015
본 발명에 따른 트리카르보닐 테크네슘-99m 또는 레늄-188 표지 고리 알지디 유도체의 전구체의 출발물질로 사용되는 상기 화학식 3의 화합물은 문헌(Haubner, R., Wester, H-J., Reuning, U., Senekowitsch-Schmidtke, R., Diefenbach, B., Kessler, H., Stocklin G., Schwaiger, M., J. Nucl. Med., 1999, 40:1061-1071)에 따라 합성하였다.
< 제조예 2> 벤질 1-아미노-3,6,9,12- 테트라옥사펜타데칸 -15- 오에이트(7)의 제조
Figure 112011034240627-pat00016

(단계 1)
1-(N-(t-부틸옥시카르보닐)-아미노)-3,6,9,12-테트라옥사펜타데카논산(1-(Boc-amino)-3,6,9,12-tetraoxapentadecanoic acid, 224 mg, 0.61 mmol, 5)을 아르곤 가스 하에서 아세토니트릴(5 mL)에 녹이고 세슘카보네이트(CsCO3, 596 mg, 1.83 mmol)와 벤질클로라이드(benzyl chloride, 211 ㎕, 1.83 mmol)를 가한 후 80 ℃ 하에서 30 분간 교반시켰다. 반응용기를 상온에서 냉각시키고 감압 하에 용매를 제거한 후 컬럼 크로마토그래피를 통해 분리하여 목적화합물(6)을 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.38-7.30 (m, 5H), 5.14 (s, 2H), 3.77 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 3.64-3.59 (m, 12H), 3.53 (t, J = 5.0 Hz, 2H), 3.30 (m, 2H), 2.65 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 1.44 (s, 9H).
(단계 2)
단계 1에서 얻은 화학식 6의 화합물(260 mg, 0.57 mmol)을 메틸렌클로라이드(10 mL)로 녹이고 0 ℃ 하에서 트리플루오로아세트산(TFA, 1 mL)을 가한 후 실온에서 1시간 교반시킨 후 포화된 소듐바이카보네이트(saturated NaHCO3, 25 mL)를 가하고 메틸렌클로라이드(100 mL × 3) 용액으로 추출한 후 유기용매 층을 감압 하에 제거하여 목적화합물인 벤질 1-아미노-3,6,9,12-테트라옥사펜타데칸-15-오에이트(7)를 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.53 (s, 5H), 5.14 (s, 2H), 3.78 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 3.65-3.62 (m, 12H), 3.58 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 2.93 (brs, 2H), 2.66 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.51 (brs, 2H).
< 제조예 3> 트리카르보닐 테크네슘-99m 또는 트리카르보닐 레늄-188 화합물( 99m Tc( CO) 3 (H 2 O) 3 + 또는 188 Re ( CO ) 3 (H 2 O) 3 + )의 제조
표지될 트리카르보닐 테크네슘-99m 또는 레늄-188 화합물은 문헌(Alberto, R., Schibli, R., Egli, A., Schubiger, A.P., Abram, U., Kaden, T.A., J. Am. Chem. Soc. 1998, 120:7987-7988; Alberto, R., Schibli, R., Schubiger, A.P., Abram, U., Pietzsch, H-P., Johannsen, B., J. Am. Chem. Soc. 1999, 121:6076-6077; Schibli, R., Netter, M., Scapozza, L., Birringer, M., Schelling, P., Dumas, C., Schoch, J., Schubiger, P.A., J. Organomet. Chem. 2003, 668:67-74; Schibli, R., Schwarzbach, R., Alberto, R., Ortner, K., Schmalle, H., Dumas, C., Egli, A., Schubiger, P.A. Bioconjuate Chem. 2002, 13:750-756)에 기재된 방법으로 수행하여 제조하였다.
< 실시예 1~5> 본 발명에 따른 트리카르보닐 테크네슘-99m 또는 레늄-188 표지 고리 알지디 유도체의 전구체의 제조
< 실시예 1> 고리 {( 트리카르보닐 -N-α- 비스 - 하이드록시카르보닐메틸 -라이신)- 알지닌 -글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌} (2a)의 제조
Figure 112011034240627-pat00017

(단계 1)
상기 제조예 1에서 제조된 화학식 3의 화합물(240 mg, 0.26 mmol)과 t-티부틸브로모아세테이트(t-butyl bromoacetate, 115 μL, 0.77 mmol)을 아세토니트릴(CH3CN, 5 mL)과 N,N'-다이아이소프로필에틸아민(Diisopropylethylamine, DIEA, 130 μL, 0.77 mmol)에 녹이고 50 ℃하에서 12시간 교반시켰다. 반응 후, 용매를 감압 하에 제거하고 얻어진 화합물은 유기용매인 메탄올과 다이클로오로메탄(10:90 = MeOH:CH2Cl2)용액으로 컬럼 크로마토그래피를 통해 분리하여 화학식 4의 화합물을 얻었다.
MALDI-TOF MS (M + Na+) = 1163.4
(단계 2)
상기 단계 1에서 제조된 화학식 4의 화합물을 TFA:Et3SiH:H2O(95:2.5:2.5, 10 mL)에 녹이고 상온에서 12 시간 반응시킨 후, 모든 용액을 감압 하에 거의 증발시킨 다음에 다이에틸에테르(diethyl ether)를 첨가해서 얻어진 고체를 여과하였다. 이렇게 얻어진 하얀색 고체를 충분히 에테르로 세척한 후 건조하여 화학식 2a의 화합물을 제조하였다.
MALDI-TOF MS (M + Na+) = 720.8
< 실시예 2> 고리 {( 트리카르보닐 -N-α- 비스 - 하이드록시카르보닐메틸 -글라이신- CONH ( CH 2 CH 2 O ) 4 CH 2 CH 2 CONH -라이신)- 알지닌 -글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌} (2b)의 제조
Figure 112011034240627-pat00018

(단계 1)
출발물질로서 화학식 3의 화합물 대신 화학식 8의 글라이신-메틸에스터-하이드로클로라이드를 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 1의 단계 1과 동일한 방법으로 수행하여 화학식 9의 화합물을 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3.71 (s, 3H), 3.64 (s, 2H), 3.53 (s, 4H), 1.44 (s, 18H).
(단계 2)
상기 단계 1에서 제조된 화학식 9의 화합물(550 mg, 1.73 mmol)을 메탄올(MeOH, 10 mL)에 녹인 후 1 M 리튬 하이드록사이드(1 M LiOH, 3.4 mL, 3.4 mmol)을 가하고 50 ℃ 하에서 1 시간 동안 교반시킨 후 1 N 염산(1 N HCl, 3.8 mL, 2.2 mmol)을 가하여 중화시키고 유기용매 층을 감압 하에 제거하여 화학식 10의 화합물을 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3.48 (s, 2H), 3.47 (s, 4H), 1.48 (s, 18H).
(단계 3)
상기 단계 2에서 제조된 화학식 10의 화합물(60 mg, 0.19 mmol)을 N-하이드록시벤조트리아졸(N-hydroxybenzotriazole, 51 mg, 0.38 mmol), O-벤조트리아졸- N,N,N',N'-테트라메틸-우로늄-헥사플루오로포스페이트(O-benzotriazole-N,N,N',N'-tetramethyl-uronium-hexafluorophosphate, 144 mg, 0.38 mmol)와 함께 아르곤 하에서 N,N'-디메틸포름아마이드(N,N'-dimethylformamide, 5 mL)에 녹이고 30분간 교반시킨 후, 상기 제조예 2에서 제조된 화학식 7의 화합물(47 mg, 0.13 mmol)과 N,N'-다이아이소프로필에틸아민(133 μL, 0.762 mmol)을 넣고 상온에서 16시간 교반시켰다. 감압하에 N,N'-디메틸포름아마이드를 제거한 후 컬럼 크로마토그래피를 통해 분리하여 목적 화합물(11)을 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.09 (brs), 7.34 (brs, 5H), 5.13 (s, 2H), 3.76-3.36 (m, 22H), 2.65-2.64 (m, 2H), 1.45 (s, 18H).
(단계 4)
반응용기에 10% 팔라듐 착콜(10% Pd/C, 34 mg, 0.032 mmol)을 질소 충진 하에 넣고 상기 단계 3에서 제조된 화학식 11의 화합물(70 mg, 0.11 mmol)을 메탄올(5 mL)에 녹여 반응용기에 가한 후에 반응용기 안을 수소 가스로 전환하여 상온에서 수소 가스 하에 16시간 동안 교반시켰다. 셀라이트(celite) 필터를 통해 팔라듐을 제거한 후 감압 하에 메탄올을 제거하여 목적화합물(12)을 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.02 (brs), 8.20 (brs), 3.75-3.70 (m, 2H), 3.63-3.56 (m, 14H), 3.52-3.47 (m, 2H), 3.38-3.36 (m, 2H), 2.57 (t, J = 6.0 Hz), 1.44 (s, 18H).
(단계 5)
반응물질로서 상기 단계 4에서 제조된 화학식 12의 화합물과 상기 제조예 1에서 제조된 화학식 3의 화합물을 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 2의 단계 5와 동일한 방법으로 수행하여 목적화합물(13)을 얻었다.
ESI MS (M + H+) = 1444.7
(단계 6)
출발물질로서 상기 단계 5에서 제조된 화학식 13의 화합물의 화합물을 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 1의 단계 2와 동일한 방법으로 수행하여 목적화합물(2b)을 얻었다.
ESI MS (M + H+) = 1024.5.
< 실시예 3> ( 트리카르보닐 -N-α- 비스 - 하이드록시카르보닐메틸 -아스파르트산)-[고리(라이신- 알지닌 -글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌)] 2 (2c)의 제조
Figure 112011034240627-pat00019
(단계 1)
출발물질로서 O,O'-다이벤질 아스파틱 엑시드 하이드로클로라이드를 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 1의 단계 1과 동일한 방법으로 수행하여 목적화합물(15)을 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.36-7.26 (m, 10 H), 5.14-5.06 (m, 4H), 3.99 (dd, J = 9.2, 5.2 Hz, 1H), 3.61-3.50 (m 4H), 2.94 (dd, J = 16.8, 9.6 Hz, 1H), 2.82 (dd, J = 16.4, 5.6 Hz, 1H), 1.42 (s, 18H).
(단계 2)
출발물질로서 상기 단계 1에서 제조된 화학식 15의 화합물을 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 2의 단계 2와 동일한 방법으로 수행하여 목적화합물(16)을 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.60 (brs, 2H), 3.90 (t, J = 6.6 Hz, 1H), 3.55-3.40 (m, 4H), 2.98 (dd, J = 16.4, 5.2 Hz, 1H), 2.66 (dd, J = 16.8, 7.6 Hz, 1H), 1.46 (s, 18H).
(단계 3)
출발물질로서 상기 단계 2에서 제조된 화학식 16의 화합물을 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 2의 단계 5와 동일한 방법으로 수행하여 목적화합물(17)을 얻었다.
MALDI-TOF MS (M + Na+) = 2171.06
(단계 4)
출발물질로서 상기 단계 3에서 제조된 화학식 17의 화합물을 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 1의 단계 2와 동일한 방법으로 수행하여 목적화합물(2c)을 얻었다.
ESI MS (M + H+) = 1420.5
< 실시예 4> { 트리카르보닐 -N-α- 비스 - 하이드록시카르보닐메틸 -아스파르트산}-{( 폴리에틸렌글리콜 )4-[고리(라이신- 알지닌 -글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌)]} 2 (2d)의 제조
Figure 112011034240627-pat00020

(단계 1)
출발물질로서 화학식 3의 화합물 대신 화학식 16의 화합물을 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 2의 단계 5와 동일한 방법으로 수행하여 화학식 18의 화합물을 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.46 (brt, 1H), 7.38-7.30 (m, 10H), 6.84 (brs, 1H), 5.13 (s, 4H), 3.87 (t, J = 6.4 Hz, 1H), 3.77 (t, J = 6.4 Hz, 4H), 3.63-3.61 (m, 24H), 3.57-3.53 (m 4H), 3.51-3.42 (m 6H), 3.31-3.27 (m, 2H), 2.81 (dd, J = 10.8, 6.4 Hz, 1H), 2.65 (t, J = 6.6 Hz, 4H), 2.38 (dd, J = 14.8, 6.4 Hz, 1H), 1.44 (s, 18H).
(단계 2)
출발물질로서 상기 단계 1에서 제조된 화학식 18의 화합물을 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 2의 단계 6과 동일한 방법으로 수행하여 화학식 19의 화합물을 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.57 (brt, 1H), 7.82 (brs, 1H), 5.13 (s, 4H), 3.92 (t, J = 6.6 Hz, 1H), 3.77-3.70 (m, 4H), 3.64-3.55 (m, 31H), 3.47-3.30 (m 2H), 3.34-3.29 (m 3H), 2.81 (dd, J = 22, 7.2 Hz, 1H), 2.59 (t, J = 12 Hz, 4H), 2.46 (dd, J = 20.4, 5.2 Hz, 1H), 1.45 (s, 18H).
(단계 3)
출발물질로서 상기 단계 2에서 제조된 화학식 19의 화합물과 상기 제조예 1에서 제조된 화학식 3의 화합물을 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 2의 단계 5와 동일한 방법으로 수행하여 화학식 20의 화합물을 얻었다.
MALDI-TOF MS (M + Na+) = 2665.87
(단계 4)
출발물질로서 상기 단계 3에서 제조된 화학식 20의 화합물을 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 1의 단계 2와 동일한 방법으로 수행하여 목적화합물(2d)을 얻었다.
MALDI-TOF MS (M + Na+) = 1914.65
< 실시예 5> { 트리카르보닐 -N-α- 비스 - 하이드록시카르보닐메틸 -( 폴리에틸렌글리콜 ) 4 -아스파르트산}-[고리(라이신- 알지닌 -글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌)] 2 (2e)의 제조
Figure 112011034240627-pat00021

(단계 1)
출발물질로서 상기 제조예 2에서 제조된 화학식 7의 화합물을 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 1의 단계 1과 동일한 방법으로 수행하여 화학식 21의 화합물을 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.37-7.34 (m, 5H), 5.14 (s, 4H), 3.77 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 3.63-3.58 (m, 14H), 3.49 (s 4H), 2.94 (t, J = 5.8 Hz 2H), 2.65 (t, J = 6.6 Hz 2H), 1.45 (s, 18H).
(단계 2)
출발물질로서 상기 단계 1에서 제조된 화학식 21의 화합물을 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 2의 단계 6과 동일한 방법으로 수행하여 화학식 22의 화합물을 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.97 (brs, 1H), 3.74 (t, J = 5.8 Hz, 2H), 3.64-3.60 (m, 14H), 3.50 (s, 4H), 2.95 (t, J = 5.0 Hz, 2H), 2.57 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 1.44 (s, 18H).
(단계 3)
출발물질로서 상기 단계 2에서 제조된 화학식 22의 화합물과 O,O'-다이벤질 아스파틱 엑시드 하이드로클로라이드를 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 2의 단계 5와 동일한 방법으로 수행하여 화학식 23의 화합물을 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.36-7.27 (m, 10H), 5.13 (d, J = 1.6 Hz, 2H), 5.06 (d, J = 0.8 Hz, 2H), 4.94-4.90 (m, 1H), 3.67 (t, J = 5.8 Hz, 2H), 3.64-3.55 (m, 14H), 3.47 (s, 4H), 3.06 (dd, J = 22, 4.8 Hz, 1H), 2.94-2.87 (m, 3H), 2.49 (td, J = 6.8, 2.0 Hz, 2H), 1.44 (s, 18H).
(단계 4)
출발물질로서 상기 단계 3에서 제조된 화학식 23의 화합물을 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 2의 단계 6과 동일한 방법으로 수행하여 화학식 24의 화합물을 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.49 (brs, 1H), 7.61 (brd, J = 4.4 Hz, 1H), 4.69 (brs, 1H), 3.68-3.41 (m, 20H), 2.99-2.94 (m, 3H), 2.78 (dd, J = 24, 7.2 Hz, 1H), 2.52 (brs, 1H), 1.45 (s, 18H).
(단계 5)
출발물질로서 상기 단계 4에서 제조된 화학식 24의 화합물과 상기 제조예 1에서 제조된 화학식 3의 화합물을 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 2의 단계 5와 동일한 방법으로 수행하여 화학식 25의 화합물을 얻었다.
MALDI-TOF MS (M + Na+) = 2418.70
(단계 6)
출발물질로서 상기 단계 5에서 제조된 화학식 25의 화합물을 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 1의 단계 2와 동일한 방법으로 수행하여 목적화합물(2e)을 얻었다.
MALDI-TOF MS (M + H+) = 1667.8
< 실시예 6> 고리{( 트리카르보닐 -[ 185,187 Re ]레늄-N-α- 비스 - 하이드록시카르보닐메틸 -라이신)- 알지닌 -글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌}의 제조
Figure 112011034240627-pat00022
상기 실시예 1에서 제조된 화학식 2a의 전구체 화합물(2.6 mg, 0.002 mmol)과 비스-(N-테트라에틸)-트리브로모트리카르보닐레늄(bis-(N-tetraethyl)-tribromo tricarbonyl rhenium, (NEt4)2ReBr3(CO)3, 1.6 mg, 0.0025 mmol)을 물:메탄올 (v/v=1/1, 1 mL)으로 녹여 1시간 20분 동안 교반시킨 후 질소가스를 이용하여 용매를 제거하고 물에 녹여 고성능액체크로마토그래피를 이용하여 목적화합물을 합성하였고, MALDI-TOF 질량분석을 이용하여 목적화합물의 질량을 분석하였다(MALDI-TOF MS (M + H+) = 990.85).
고성능액체크로마토그래피 분리 조건은 0.1% 트리플루오로아세트산이 포함된 아세토니트릴(20%)과 증류수(80%)를 이동상으로 하여 최종 30분 후에는 90:10 비율로 증가시키는 기울기 조건(gradient)으로 사용하고, 정지상으로는 C18 컬럼(YMC, 5 μm, 10 × 250 mm)을 사용하여 분당 2 mL로 이동상을 흘려 보내고 검출기(214 nm, UV)를 검출한 결과, 실시예 6의 목적화합물이 21.8 분에 검출되었다.
< 실시예 7> 고리 {( 트리카르보닐 -[ 185,187 Re ]레늄-N-α- 비스 - 하이드록시카르보닐메틸 -글라이신- CONH ( CH 2 CH 2 O ) 4 CH 2 CH 2 CONH -라이신)- 알지닌 -글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌}의 제조
Figure 112011034240627-pat00023
상기 실시예 1에서 제조된 화학식 2a의 전구체 화합물 대신 상기 실시예 2에서 제조된 화학식 2b의 전구체 화합물을 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 6과 동일한 방법으로 수행하여 목적화합물을 합성하고, MALDI-TOF 질량분석을 이용하여 목적화합물의 질량을 분석하였다(MALDI-TOF MS (M + H+) = 1293.4).
고성능액체크로마토그래피 분리 조건은 상기 실시예 6과 동일한 조건으로 분리하였으며 검출기(214 nm, UV)를 통해 실시예 7의 목적화합물이 21.6 분에 검출되었다.
< 실시예 8> ( 트리카르보닐 -[ 185,187 Re ]레늄-N-α- 비스 - 하이드록시카르보닐메틸 -아스파르트산)-[고리(라이신- 알지닌 -글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌)] 2 의 제조
Figure 112011034240627-pat00024
상기 실시예 1에서 제조된 화학식 2a의 전구체 화합물 대신 상기 실시예 3에서 제조된 화학식 2c의 전구체 화합물을 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 6과 동일한 방법으로 수행하여 목적화합물을 합성하고, ESI 질량분석을 이용하여 목적화합물의 질량을 분석하였다(ESI MS (M + H+) = 1688.5).
고성능액체크로마토그래피 분리 조건은 상기 실시예 6과 동일한 조건으로 분리하였으며 검출기(214 nm, UV)를 통해 실시예 8의 목적화합물이 19.2 분에 검출되었다.
< 실시예 9> ( 트리카르보닐 -[ 185,187 Re ]레늄-N-α- 비스 - 하이드록시카르보닐메틸 -글라이신- CONH ( CH 2 CH 2 O ) 4 CH 2 CH 2 CONH -라이신)-[고리(라이신- 알지닌 -글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌)] 2 의 제조
Figure 112011034240627-pat00025
상기 실시예 1에서 제조된 화학식 2a의 전구체 화합물 대신 상기 실시예 5에서 제조된 화학식 2e의 전구체 화합물을 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 6과 동일한 방법으로 수행하여 목적화합물을 합성하고, ESI 질량분석을 이용하여 목적화합물의 질량을 분석하였다(ESI MS (M + H+) = 2007.7).
고성능액체크로마토그래피 분리 조건은 상기 실시예 6과 동일한 조건으로 분리하였으며 검출기(214 nm, UV)를 통해 실시예 9의 목적화합물이 20.8 분에 검출되었다.
< 실시예 10> 고리{( 트리카르보닐 -[ 188 Re ]레늄-N-α- 비스 - 하이드록시카르보닐 메틸-라이신)- 알지닌 -글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌}의 제조
Figure 112011034240627-pat00026
암모늄보란(NH3-BH3 complex, 5 mg)을 고무 마개가 있는 10 mL 바이알에 넣고 CO 가스를 10 분간 불어 넣은 후 포스포릭 엑시드(H3PO4, 6 μL)와 188ReO4 - (10 mCi, 1 mL)를 넣고 반응 중 내부 압력을 완충하기 위해 빈 20 mL 주사기를 꽂고 60 ℃에서 15분간 교반했다. 반응이 끝나고 실온까지 식힌 후 100 mM PBS (200 μL)와 포화된 소듐바이카보네이트(50 μL)로 중화하여 레늄 트리카르보닐 화합물 [188Re(H2O)3(CO)3 +]을 합성했고 라디오-박막크로마토그래피(Radio-TLC)를 통하여 반응 화합물 합성을 확인했다.
얻어진 [188Re(H2O)3(CO)3 +]과 상기 실시예 1에서 제조된 화학식 2a의 전구체 화합물(0.5 mg)을 넣고 75 ℃에서 60분간 가열하고 얼음물에 담가 식힌 후 tC18 Sep-Pak 카트리지 분리를 통하여 정제하고 다시 고성능액체크로마토그래피에 주입하여 목적화합물을 정제했다.
고성능액체크로마토그래피 분리 조건은 상기 실시예 6과 동일한 조건으로 분리하였으며 검출기(gamma-ray, NaI)를 통해 실시예 10의 목적화합물이 21.8 분에 검출되었다. 이는 상기 실시예 6의 화합물의 검출기(UV 214 nm)에서의 머무름 시간과 일치하였다. 감쇠 보정된 방사화학적 수율은 50-60%이었으며, 방사화학적 순도는 97% 이상이다.
< 실시예 11> 고리{( 트리카르보닐 -[ 188 Re ]레늄-N-α- 비스 - 하이드록시카르보닐메틸 -글라이신- CONH ( CH 2 CH 2 O ) 4 CH 2 CH 2 CONH -라이신)- 알지닌 -글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌}의 제조
Figure 112011034240627-pat00027
상기 실시예 1에서 제조된 화학식 2a의 전구체 화합물 대신 상기 실시예 2에서 제조된 화학식 2b의 전구체 화합물을 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 10와 동일한 방법으로 수행하여 목적화합물을 제조하였다.
고성능액체크로마토그래피 분리 조건은 상기 실시예 6과 동일한 조건으로 분리하였으며 검출기(gamma-ray, NaI)를 통해 실시예 11의 목적화합물이 21.6 분에 검출되었다. 이는 상기 실시예 7의 화합물의 검출기(UV 214 nm)에서의 머무름 시간과 일치하였다. 감쇠 보정된 방사화학적 수율은 50-60%이었으며, 방사화학적 순도는 97% 이상이다.
< 실시예 12> ( 트리카르보닐 [ 188 Re ]레늄-N-α- 비스 - 하이드록시카르보닐메틸 -아스파르트산)-[고리(라이신- 알지닌 -글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌)] 2 의 제조
Figure 112011034240627-pat00028
상기 실시예 1에서 제조된 화학식 2a의 전구체 화합물 대신 상기 실시예 3에서 제조된 화학식 2c의 전구체 화합물을 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 10와 동일한 방법으로 수행하여 목적화합물을 제조하였다.
고성능액체크로마토그래피 분리 조건은 상기 실시예 6과 동일한 조건으로 분리하였으며 검출기(gamma-ray, NaI)를 통해 실시예 12의 목적화합물이 19.2 분에 검출되었다. 이는 상기 실시예 8의 화합물의 검출기(UV 214 nm)에서의 머무름 시간과 일치하였다. 감쇠 보정된 방사화학적 수율은 50-60%이었으며, 방사화학적 순도는 97% 이상이다.
상기 실시예 10 내지 12의 경우, 상기 실시예 6 내지 8의 화합물에 포함하는 비방사성동위원소 185,187Re이 방사성동위원소 188Re으로 바뀐 화합물로서, 분석방법으로는 질량분석으로 검증된 실시예 6, 7 및 8의 화합물들의 각각의 고성능 액체크로마토그래피에서의 머무름 시간(tR)과 실시예 10, 11 및 12의 화합물의 머무름 시간이 일치됨을 통해 실시예 10, 11 및 12에서 제조된 화합물이 레늄-188만 바뀐 화합물임을 증명하였다.
< 실시예 13> 고리{( 트리카르보닐 -[ 99 m Tc ]테크네슘-N-α- 비스 - 하이드록시카르보닐메틸 -라이신)- 알지닌 -글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌}의 제조
Figure 112011034240627-pat00029
소듐 카보네이트(Na2CO3, 4 mg), 소듐 보로하이드라이드(NaBH4, 5.5 mg) 및 소듐 L-타트레이트 디하이드레이트(sodium L-tartrate dehydrate, 5 mg)을 10 mL 고무 마개가 있는 바이알에 넣고 CO 가스를 10분간 넣어주었다. 여기에 발생기에서 얻은 99 mTcO4 -(10 mCi, 1 mL)를 주사기로 넣고 내부 압력을 완충하기 위해 빈 20 mL 주사기를 마개에 꼽았다. 바이알을 75 ℃에서 25분간 가열하였다. 이후, 상기 바이알을 얼음물에 담가 식힌 후, 100 mM PBS(phosphate buffer saline, 200 μL) 과 1 N 염산(1 N HCl, 180 μL)사용하여 중성화시켰다. 합성된 트리카르보닐 테크네슘-99m 화합물[99 mTc(H2O)3(CO)3 +]은 라디오-얇은막크로마토그래피(Radio-TLC)를 통하여 확인했다. 얻어진 [99mTc(H2O)3(CO)3 +]과 상기 실시예 1에서 제조된 화학식 2a의 전구체 화합물(0.5 mg)을 넣고 75 ℃에서 30분간 가열하고 얼음물에 담가 식힌 후 tC18 Sep-Pak 카트리지 분리를 통하여 정제하고 다시 고성능액체크로마토그래피에 주입하여 트리카르보닐 테크네슘-99m 화합물이 표지된 화합물을 제조하였다.
고성능액체크로마토그래피 분리 조건은 0.1% 트리플루오로아세트산이 포함된 아세토니트릴(20%)과 증류수(80%)를 이동상으로 하여 최종 30분 후에는 90:10 비율로 증가시키는 기울기 조건(gradient)으로 사용하고, 정지상으로는 C18 컬럼(YMC, 5 μm, 10 × 250 mm)을 사용하여 분당 2 mL로 이동상을 흘려 보내고 검출기(gammar ray, NaI)를 검출한 결과, 상기 실시예 13의 목적화합물이 20.6 분에 검출되었다. 이는 상기 실시예 6의 화합물의 검출기(UV 214 nm)에서의 머무름 시간 (21.8분)과 1분 차이가 난다. 감쇠 보정된 방사화학적 수율은 60-70%이었으며, 방사화학적 순도는 97% 이상이다.
< 실시예 14> 고리{( 트리카르보닐 -[ 99 m Tc ]테크네슘-N-α- 비스 - 하이드록시카르보닐메틸 -글라이신- CONH ( CH 2 CH 2 O ) 4 CH 2 CH 2 CONH -라이신)- 알지닌 -글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌}의 제조
Figure 112011034240627-pat00030
상기 실시예 1에서 제조된 화학식 2a의 전구체 화합물 대신 상기 실시예 2에서 제조된 화학식 2b의 전구체 화합물을 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 13과 동일한 방법으로 수행하여 목적화합물을 제조하였다.
고성능액체크로마토그래피 분리 조건은 상기 실시예 6과 동일한 조건으로 분리하였으며 검출기(gamma-ray, NaI)를 통해 실시예 14의 목적화합물이 21.4 분에 검출되었다. 이는 상기 실시예 7의 화합물의 검출기(UV 214 nm)에서의 머무름 시간(21.6분)과 0.2분 차이가 난다. 감쇠 보정된 방사화학적 수율은 60-70%이었으며, 방사화학적 순도는 97% 이상이다.
< 실시예 15> ( 트리카르보닐 -[ 99 m Tc ]테크네슘-N-α- 비스 - 하이드록시카르보닐메 틸-아스파르트산)-[고리(라이신- 알지닌 -글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌)] 2 의 제조
Figure 112011034240627-pat00031
상기 실시예 1에서 제조된 화학식 2a의 전구체 화합물 대신 상기 실시예 3에서 제조된 화학식 2c의 전구체 화합물을 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 13과 동일한 방법으로 수행하여 목적화합물을 제조하였다.
고성능액체크로마토그래피 분리 조건은 상기 실시예 6과 동일한 조건으로 분리하였으며 검출기(gamma-ray, NaI)를 통해 실시예 15의 목적화합물이 18.4 분에 검출되었다. 이는 상기 실시예 8의 화합물의 검출기(UV 214 nm)에서의 머무름 시간(19.2분)과 0.8분 차이가 난다. 감쇠 보정된 방사화학적 수율은 60-70%이었으며, 방사화학적 순도는 97% 이상이다.
<실시예 16> (트리카르보닐-[99 mTc]테크네슘-N-α-비스-하이드록시카르보닐메틸-글라이신-CONH(CH2CH2O)4CH2CH2CONH-라이신)-[고리(라이신-알지닌-글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌)]2의 제조
Figure 112011034240627-pat00032
상기 실시예 1에서 제조된 화학식 2a의 전구체 화합물 대신 상기 실시예 5에서 제조된 화학식 2e의 전구체 화합물을 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 13와 동일한 방법으로 수행하여 목적화합물을 제조하였다.
고성능액체크로마토그래피 분리 조건은 상기 실시예 6과 동일한 조건으로 분리하였으며 검출기(gamma-ray, NaI)를 통해 실시예 16의 목적화합물이 19.9분에 검출되었다. 이는 상기 실시예 9의 화합물의 검출기(UV 214 nm)에서의 머무름 시간(20.8분)과 0.9분 차이가 난다. 감쇠 보정된 방사화학적 수율은 50-70%이었으며, 방사화학적 순도는 97% 이상이다.
상기 실시예 13 내지 16의 화합물의 경우, 상기 실시예 6 내지 8의 화합물에서 포함하는 비방사성동위원소 185,187Re이 방사성동위원소 99 mTc으로 바뀐 화합물로서, 분석방법으로는 질량분석으로 검증된 실시예 6, 7 및 8의 화합물들의 각각의 고성능 액체크로마토그래피에서의 머무름 시간(tR)과 실시예 13, 14 및 16의 머무름 시간이 1분 안팎으로 차이 나면서 전구체 대부분이 높은 수율로 표지됨을 통해 상기 실시예 13 내지 16의 화합물이 테크네슘-99m만 바뀐 화합물임을 증명하였다 (테크네슘과 레늄은 주기율표상에서 같은 족은 금속이온으로써 전구체와 동일 반응성을 지니고 있다).
< 실험예 1> 트리카르보닐 테크네슘-99m 또는 레늄-188 표지 고리 알지디 유도체의 생물학적 활성 측정
<1-1> 결합친화력( IC 50 )값 측정
본 발명에 따른 트리카르보닐 테크네슘 또는 레늄 표지 고리 알지디 유도체의 신생혈관작용의 유력 바이오마커인 αvβ3 인테그린에 대한 결합 활성을 알아보기 위하여 다음과 같은 실험을 수행하였다.
αvβ3 인테그린이 과다발현된 것으로 알려진 인간 제대정맥내피세포(Human Umbilical Vein Endothelial Cell; HUVEC)를 소 태아 혈청(FBS), 하이드로코티손, 인간 섬유아세포 기본 성장인자(human fibroblast growth factor-basic; hFGF-B), 혈관내피성장인자(vascular endothelial growth factor; VEGF), R3-IGF-1, 아스코르브산, 인체상피성장인자(human epidermal growth factor; hEGF), GA-1000, 및 헤파린(heparin)이 포함된 내피세포 염기 담체-2(endothelial cell basal medium-2; EBM-2)에 37 ℃, 5% CO2 조건하에서 배양하였다. 1 × 106개의 HUVEC 세포를 eppendorf 튜브에 분주한 뒤 2 μCi의 트리카르보닐 테크네슘-99m 또는 레늄-188 표지 고리 알지디 유도체를 첨가하고, 동시에 0, 0.01, 0.05, 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 1, 3, 5 nM의 경쟁반응 기준 물질 고리 알지디(cRGDyV)를 각 튜브별로 첨가하여 37 ℃, 5% CO2 조건하에서 1 시간 동안 결합반응을 유도하였다. 반응이 끝난 HUVEC 세포를 100 mM 인산 완충 식염수(PBS)로 3회 수세한 뒤 감마카운터로 경쟁반응을 통해 특이적으로 결합한 트리카르보닐 테크네슘 또는 레늄 표지 고리 알지디 유도체의 방사능을 측정하였다. 측정된 방사에너지의 값과 경쟁반응을 유도한 기준 물질 고리 알지디의 농도별 값을 사용하여 비선형 회귀 곡선을 완성한 뒤 이를 바탕으로 IC50 값을 산출하였다. IC50 값을 산출은 시그마 플롯(sigma plot) 소프트웨어를 사용하였다.
상기 방법으로 본 발명의 화합물들의 αvβ3 인테그린과의 결합친화력(IC50)을 측정하고 그 결과를 하기 표 1에 나타내었다.
구분 IC50(nM)
실시예 10 1.4
실시예 12 0.5
실시예 13 1.6
실시예 14 1.2
실시예 15 0.4
실시예 16 0.5
표 1에 나타낸 바와 같이, 고리 알지디가 한 개 도입된 유도체인 실시예 13 및 실시예 10의 화합물은 각각 IC50 값이 1.6 nM, 1.4 nM을 나타내며, 동일 전구체에 방사성동위원소만 바뀐 경우에 αvβ3 인테그린과의 결합친화력에 차이가 없음을 보여주었다. 실시예 14의 경우 또한 PEG 연결그룹이 도입되었을때도 실시예 13와 10에 비해 큰 영향력이 없음을 확인하였다. 고리 알지디가 두 개 도입된 유도체인 실시예 15 및 실시예 12의 화합물은 서브 나노몰의 결합 수치인 0.4 nM과 0.5 nM을 나타내어 가장 우수한 결합친화력을 보여주었으며 이때도 마찬가지로 테크네슘-99m과 레늄-188이 같은 전구체에 도입 여부에 따른 결합친화력 차이는 없는 것으로 나타났으며 PEG 연결그룹이 도입된 실시예 16 경우도 실시예 12 및 15와 마찬가지로 결합친화력에는 별다른 영향이 없었다.
따라서, 본 발명에 따른 고리 알지디 유도체는 도입되는 고리 알지디가 많을수록 αvβ3 인테그린에 높은 결합친화력을 나타냄을 알 수 있다.
<1-2> 체내 종양 모델 마우스에서의 트리카르보닐 테크네슘-99m 표지 고리 알지디 유도체의 종양 섭취 및 장기별 배출 정도 평가
선천적 흉선 결손 생쥐(7 주령, BALB/c-nu Slc strain, 이하 누드마우스)를 사용하여 본 발명에서 얻어진 세 가지 트리카르보닐 테크네슘-99m 표지 고리 알지디 유도체(실시예 13-15)의 시간에 따른 종양 모델 마우스의 종양과 장기별 섭취 및 배출 정도를 실험하였다.
누드마우스의 종양형성은 human glioblastoma U87-MG 세포주 (1 × 106/100 μL in PBS)를 피하 주사한 뒤 약 2 주간의 성장기간을 거쳐 0.4 ~ 0.5 cc 크기의 종양형성 모델만을 선별하여 실험에 사용하였다.
이후, 실시예 13-15에서 제조된 화합물을 생리식염수에 녹여 각 마리당 100 μL (20 μCi)씩 꼬리정맥을 통하여 주사하였다. 체내 분포 시간대는 10, 30, 60, 120, 240 분으로 정했으며 개체 수는 각 시간대에 4-5 마리를 사용하였다. 각 시간대별로 마우스를 희생시켜 혈액, 종양 및 각 장기(간, 폐, 비장, 신장, 소장, 대장, 갑상선, 근육, 뇌)를 적출하여 각 장기의 무게(g) 및 감마카운터를 이용하여 약물의 장기 섭취율(radioactivity)을 측정했다. 각 장기의 약물 섭취율은 %ID/g (percent injected dose per gram) 단위로 계산하고 그 결과를 도 1-3에 나타내었다. %ID/g 값의 산출은 다음 하기 수학식 1에 의해 계산하였다.
Figure 112011034240627-pat00033
측정 결과를 하기 표 2-4로 나타내었다.
실시예 13의 화합물
조직 10분 30분 60분 120분
혈액 0.37±0.04 0.10±0.01 0.03±0.00 0.02±0.00
간 5.12±0.76 0.92±0.10 0.45±0.09 0.30±0.09
폐 1.72±0.86 0.54±0.14 0.27±0.07 0.40±0.46
비장 0.56±0.32 0.19±0.10 0.12±0.03 0.08±0.03
신장 1.65±0.48 0.50±0.09 0.23±0.02 0.13±0.01
소장 4.41±1.00 5.59±0.86 3.95±0.22 4.00±0.41
대장 0.55±0.37 0.31±0.06 0.53±0.81 0.11±0.01
갑상선 0.05±0.02 0.01±0.00 0.01±0.00 0.03±0.03
근육 0.56±0.27 0.16±0.04 0.08±0.07 0.05±0.02
뇌 0.04±0.01 0.02±0.00 0.01±0.01 0.03±0.02
종양 1.43±0.15 0.78±0.40 0.10±0.14 0.33±0.06
실시예 14의 화합물
조직 10분 30분 60분 120분 240분
혈액 1.43±0.23 0.66±0.09 0.35±0.06 0.17±0.02 0.11±0.01
간 5.30±0.95 2.62±0.28 1.41±0.21 0.98±0.15 0.64±0.08
폐 3.50±0.18 2.87±0.56 1.52±0.19 0.65±0.08 0.32±0.02
비장 2.31±0.36 1.45±0.18 0.77±0.07 0.47±0.10 0.20±0.02
신장 7.54±0.46 4.33±1.60 2.80±0.89 1.13±0.11 0.61±0.14
소장 17.60±2.20 15.56±2.89 4.97±2.13 2.77±0.96 0.37±0.17
대장 2.06±0.25 1.21±0.20 0.98±0.30 26.78±2.80 28.06±5.82
갑상선 0.20±0.04 0.12±0.03 0.08±0.02 0.03±0.00 0.01±0.00
근육 1.31±0.02 0.97±0.19 0.66±0.13 0.52±0.47 0.07±0.01
뇌 0.10±0.01 0.07±0.01 0.06±0.01 0.04±0.02 0.02±0.00
종양 5.43±0.50 4.27±1.15 3.35±1.23 2.63±0.74 1.41±0.24
실시예 15의 화합물
조직 10분 30분 60분 120분 240분
혈액 1.16±0.08 0.62±0.11 0.42±0.01 0.26±0.05 0.16±0.02
간 3.10±0.58 2.24±0.33 2.36±0.21 2.06±0.54 1.24±0.19
폐 4.34±0.69 3.34±0.80 3.55±0.26 2.19±0.35 1.33±0.09
비장 3.33±0.89 2.67±0.63 2.92±0.29 2.12±0.32 1.29±0.21
신장 11.47±1.36 10.85±1.71 12.09±1.62 10.12±2.82 7.14±0.85
소장 5.82±0.80 4.10±1.09 3.90±0.48 2.85±0.99 1.62±0.18
대장 4.42±0.85 3.93±0.57 4.08±0.53 2.63±0.84 1.54±0.20
갑상선 0.19±0.03 0.15±0.02 0.14±0.03 0.12±0.04 0.10±0.02
근육 1.48±0.21 1.49±0.44 2.23±1.44 1.11±0.43 0.64±0.07
뇌 0.13±0.02 0.10±0.02 0.10±0.01 0.08±0.01 0.06±0.01
종양 12.44±3.89 11.45±1.53 12.31±5.15 9.81±1.92 6.15±0.84
표 2-4와 도 1-3에서 나타낸 바와 같이, 실시예 13-15의 화합물의 시간별 종양 및 장기의 섭취 및 배출 정도를 살펴보면, 실시예 13의 화합물은 초기에 낮은 종양 섭취와 높은 간과 소장 섭취를 가지면 모든 장기에서 시간에 따른 빠르게 배출됨을 확인할 수 있었다. 약물 주사 후 10 분에 5 %ID/g을 상위하던 간 섭취율은 시간이 지남에 따라 빠르게 배출되어 2시간 후에는 0.3 %ID/g의 매우 낮은 섭취율을 보였다. 간에서 대사된 약물은 대부분 장을 통해 체외로 배출되는 것으로 확인 되었으며 주사 후 2 시간 까지도 4 %ID/g 수준을 유지하는 것으로 볼 때 활발한 장 배출이 진행되고 있음을 확인할 수 있다. 그 외 혈액을 포함한 뇌, 근육 조직에서의 특이적이 섭취율은 나타나지 않았고 갑상선의 섭취율 또한 0.01~0.05 %ID/g 수준을 유지하는 것으로 보아 생체 내에서 상기 약물의 안정성을 확인하였다. 종양의 섭취율은 주사 후 10분에 1.43 %ID/g 에서 2시간 후 0.33 %ID/g 으로 빠른 초기 섭취율을 보이는 반면 시간이 지남에 따라 점차적으로 그 섭취율이 감소되는 양상을 확인하였다.
고리 알지디의 라이신에 PEG 사슬을 연결하여 표지 포켓이 갖는 (-) 이온과 고리 알지디의 알지닌이 갖는 (+) 이온간의 상쇄 효과를 줄이기 위해 합성한 실시예 14의 화합물의 시간별 종양 및 장기의 섭취 및 배출 정도는 약물 주사 후 10 분에 5.3 %ID/g의 섭취율을 보였던 간의 경우 시간이 지남에 따라 빠르게 대사되어 주사 후 4 시간에는 0.64 %ID/g 매우 낮은 섭취율을 보였고, 간에서 대사된 약물은 대부분 장을 통하여 체외로 배출되는 것을 확인할 수 있었다. 주사 후 2 시간부터는 소장을 지난 약물의 대장 섭취율이 급격히 증가되는 것으로 볼 때 이 시기가 체외로의 배출이 시작되고 있는 시간임을 확인하였다. 소량의 약물은 신장에서의 여과과정을 통해 방광에 모였다가 소변으로 배출되는 것을 알 수 있었다. 혈액을 포함한 뇌, 근육 조직에서의 특이적이 섭취율은 나타나지 않았고 갑상선의 섭취율 또한 0.01~0.20 %ID/g 수준을 유지하는 것으로 보아 생체 내에서 상기 약물의 안정성을 확인하였다. 종양의 섭취율은 주사 후 10 분에 5.43 %ID/g으로 비교적 높은 수준을 보였고, 시간이 지나 대사가 진행됨에 따라 서서히 감소하여 상기 약물의 4 시간 째 섭취율은 1.41 %ID/g 값을 보였다.
두 개의 고리 알지디를 도입한 실시예 15의 화합물에서의 시간별 종양 및 장기의 섭취 및 배출 정도는 약물 주사 후 10 분에 3.1 %ID/g으로 매우 낮은 초기 간 섭취율을 보였고, 매우 빠른 간 대사 속도를 보여 4 시간 후에는 1 %ID/g 수준으로 급격히 감소하였다. 간에서 대사가 진행된 상기 약물은 매우 빠른 속도로 신장을 통해 소변으로 배출되고 있음을 확인할 수 있었고, 소변을 통한 체외 배출로 기인한 신장의 최대 섭취율은 주사 후 60 분 한때 12 %ID/g을 상위하였다. 소장과 대장을 포함한 상기 약물의 장을 통한 배출은 5 %ID/g대 미만으로 미비한 수준이었고, 투여된 대부분의 약물이 소변을 통해 체외로 배출되는 것을 확인하였다. 혈액을 포함한 뇌, 근육 조직에서의 특이적이 섭취율은 나타나지 않았고 갑상선의 섭취율 또한 0.1 %ID/g 수준을 지속적으로 유지하는 것으로 보아 생체 내에서 상기 약물의 안정성을 확인하였다. 초기 10 분 종양의 섭취율은 12.44 %ID/g 으로 매우 높고 빠른 약물의 종양 집적능력을 보였고, 주사 후 한 시간까지 그 섭취를 유지하였다. 이후 서서히 종양에서 약물이 빠져나가는 것을 확인할 수 있었으나 주사 후 4 시간 째에도 6 %ID/g을 상위하는 매우 높은 종양 섭취율을 확인하였다.
<1-3> 체내 종양 모델 마우스에서의 트리카르보닐 테크네슘-99m 고리 알지디 유도체의 SPECT 영상 평가
종양 모델 마우스의 제작은 상기 <1-2>와 동일한 방법으로 제작하였다. 종양 형성 마우스 모델을 사용하여 본 발명에 따른 실시예 13-15의 화합물(0.5~1 mCi)을 생리식염수 100 μL에 녹여서 꼬리 정맥으로 주사하고, 영상획득 시간 동안 동물모델의 마취는 2% 아이소플루오란 가스를 사용하였으며, 주사 시간부터 180 분 동안 마우스 영상을 소동물 전용 단일광자방출전산화단층촬영기(Bioscan, nanoSPECT/CT)를 통해 정지영상(static Imaging)을 획득하였다. 영상 프로토콜(protocol)은 다음과 같이 방사(emission)와 전송(transmission)을 반복했다.
[20 분 방사 + 전송] × 9회
상기 실시예 13-15의 화합물의 SPECT 영상을 도 4-6에 나타내었다.
실시예 13의 화합물의 경우 약물 주사 초기 10 분 후부터 종양에 섭취되었으며 약 1 시간까지 관찰이 가능하였다. 대부분의 약물이 간 대사를 거쳐 장으로 빠르게 배출되는 것을 확인할 수 있었고 일부 약물만이 신장을 통해 소변으로 배출되는 것을 알 수 있다.
실시예 14의 화합물의 경우 약물 주사 초기 10 분 후부터 종양의 높은 섭취율을 보였고 이는 약 3 시간까지 관찰이 가능하였다. 상기 실시예 13의 화합물과 유사하게 간 대사를 거쳐 장으로 빠르게 배출되는 것을 확인할 수 있었고 일부 약물만이 신장을 통해 소변으로 배출되는 것을 알 수 있다.
실시예 15의 화합물의 경우 약물 주사 초기 10 분 후부터 매우 높은 종양 섭취율을 보였으며 3 시간 이상 지속되는 것을 확인할 수 있었다. 실시예 13 및 14의 화합물과는 상이하게 간에서 대사된 약물을 대부분이 신장을 통해 소변으로 배출되는 것을 확인할 수 있다. 도 7에서는 종양을 기준으로 간, 신장, 근육의 상대적인 섭취비율을 그래프로 표시하였으며, 상기 결과를 통해 표 4의 실시예 15의 화합물의 종양 섭취 및 장기별 배출 정도 평가와 도 6에서의 실시예 15의 화합물의 SPECT 영상 평가 실험간의 동일성을 관찰할 수 있다.
<1-4> 체내 종양 모델 마우스에서의 경쟁반응 기준물질 고리 알지디 유도체( cRGDyV ) 주입 후트리카르보닐 테크네슘-99m 고리 알지디 유도체의 SPECT 영상 평가
고리 알지디 유도체의 특이적 종양 섭취를 확인하기 위하여 경쟁반응 기준물질 고리 알지디(cRGDyV)를 투여한 후 SPECT/CT 영상을 획득하였다. 기준물질로는 고리 알지디-타이로신-발린 유도체를 18 mg/Kg의 농도로 꼬리정맥 주사하였다. 기준물질 주사 후 10분 후에 테크네슘-99m가 표지된 실시예 15의 화합물(1 mCi/200 μL)를 꼬리정맥으로 주사하였다. 주사와 동시에 SPECT/CT 영상을 획득하였으며 그 조건은 하기와 같다.
영상획득 시간 동안 동물모델의 마취는 2% 아이소플루오란 가스를 사용하였으며 동물 모델의 종양크기는 0.4 cc였다. CT영상은 45 Kv, 178 μA의 조건하에서 4분 30초 동안 촬영하였으며, SPECT영상은 주사와 동시에 10분 간격으로 총 9회 (주사 후 90 분)획득하여 도 8에 나타내었다.
도 8에 나타낸 바와 같이, αvβ3 인테그린에 특이적 결합을 한다고 알려진 고리 알지디(cRGDyV)를 주입한 후 본 발명의 따른 실시예 15의 화합물의 SPECT 영상이 도 6의 실시예 15의 화합물의 영상 대비 종양 섭취가 25분에서 94%이상 감소됨을 통해 αvβ3 인테그린에 특이적 결합을 통한 종양 영상이 반영됨을 증빙하였다.
<1-5> 체내 종양 모델 마우스에서 트리카르보닐 레늄-188 표지 고리 알지디 유도체의 종양 성장 저해 및 치료 성능 평가
트리카르보닐 레늄-188 표지 고리 알지디 유도체의 종양성장 억제능력을 확인하고자 치료효과 실험을 수행하였다.
주 1회씩 4주 동안 총 4번의 레늄-188 표지 고리 알지디 유도체인 실시예 5를 주사하였다. 치료효과 판정 모델은 300 μCi의 적은 방사능 주사 그룹과 600 μCi의 많은 방사능 주사그룹으로 구분 지었으며, 같은 시점에 멸균생리식염수를 주사하는 대조군과 매일 100 μg의 고리 알지디(cRGDyV)를 복강으로 주사하는 비교군을 설정하였다. 실시예 11의 화합물과 멸균생리식염수의 주사는 꼬리정맥에 통해 투약하였다. 주 1회 CT영상을 획득하여 피하종양의 성장 정도 및 크기를 영상으로 측정하였고, 주 3회 버니어켈리퍼스를 사용한 종양의 실측 및 동물모델의 몸무게를 총 4주간 지속적으로 측정하여 그래프로 표시하고, 그 결과를 도 9에 나타내었다.
도 9에 나타낸 바와 같이, 초기 0.69, 0.7 cc의 종양크기를 보이던 멸균생리식염수 투여군과 고리알지디 투여군은 시간이 지남에 따라 종양의 성장속도가 급격히 증가되는 것을 확인하였다. 치료 2주째에는 각각 3.0, 3.9 cc까지 성장하였으며 3 주째에는 두 그룹 모두 8.0 cc까지 성장하였고, 치료 마지막 주에는 각각 13.0, 12,9 cc로 매우 빠른 종양의 성장을 보였다. 두 그룹간의 종양성장속도는 유의적 차이를 가지지 않았으며 몸무게 또한 초기 23 g에서 멸균생리식염수 투여군이 33 g, 고리알지디 투여군이 30 g으로 매우 큰 증가 폭을 보였다. 이는 기존 동물의 무게에서 종양이 급속도로 성장함에 따른 결과로 사료된다. 실시예 11의 300 μCi 투여군의 초기 종양은 0.23 cc크기에서 주 1회씩 4주간에 걸친 치료가 끝나는 시점에서 0.66 cc까지 종양의 성장을 확인하였다. 멸균생리식염수 투여군과 고리알지디 투여군에 비해 약 50% 정도의 종양성장 억제능력을 갖고 있음을 확인하였다. 방사에너지에 의한 몸무게의 변화는 치료 전 20 g에서 4주간의 치료 후 25 g으로 증가하였으나 실제 치료과정에서 동물의 무게는 감소하는 것으로 관찰되었고, 약 5 g 의 무게 증가는 성장한 종양의 무게로 사료된다. 보다 높은 방사에너지를 방출하는 600 μCi 투여군의 종양성장은 초기 0.3 cc에서 2주 째 0.3 cc, 3 주 째 0.7 cc 마지막 치료가 끝나는 시점에서는 1.4 cc로 매우 느린 종양성장속도를 보였고, 이는 멸균생리식염수 투여군과 고리알지디 투여군에 비해 약 90%, 낮은 방사에너지 치료군(300 μCi)에 비해 약 79% 정도의 종양성장 억제 능력을 보였다. 4회에 걸친 투여 약물의 높은 방사에너지로 기인한 동물의 몸무게 변화는 치료 전 19.9 g에서 점차적으로 감소하여 치료가 끝나는 시점의 무게는 17.09 g으로 약 14% 감소하였다. 이는 생명윤리심의위원회(IRB)가 제시하는 종양의 방사치료 전 후 몸무게 변화가 20%를 넘지 않아야 한다는 기준에서 종양 성장 억제를 보여주는 결과이다.
<1-6> 체내 종양 모델 마우스에서 트리카르보닐 레늄-188 표지 고리 알지디 유도체의 종양 성장 저해 및 치료 성능 평가 2
같은 종양 크기(0.3 cc)의 체내 종양모델 마우스 두 마리를 이용하여 레늄-188 표지 고리 알지디 유도체인 실시예 12의 화합물(600 μCi/200 μL)를 주사한 모델과 주사하지 않은 종양 모델을 3일 후에 실시예 15의 화합물을 이용하여 SPECT 영상 촬영한 결과를 도 10에 나타내었다.
주사 시간부터 60 분 동안 마우스 영상을 소동물 전용 단일광자방출전산화단층촬영기(Bioscan, nanoSPECT/CT)를 통해 정지영상(static Imaging)을 획득하였다. 영상 프로토콜 (protocol)은 다음과 같이 방사(emission)와 전송(transmission)을 반복했다.
[10 분 방사 + 전송] × 6회
실시예 12의 화합물 투여군과 정상 군간의 종양, 간, 신장, 근육의 상대적인 섭취비율을 그래프로 표시하여 도 10에 나타내었으며, 두 그룹간의 종양을 직접 제거한 뒤 종양주변의 혈관 분포를 사진으로 촬영하여 도 11에 나타내었다.
도 10 및 도 11에 나타낸 바와 같이, 초기 0.3 cc의 종양크기는 실험예 6을 주사한 모델에서는 0.35 cc로 자랐고, 투여하지 않은 모델은 0.65 cc의 종양크기를 보여주었으며, 종양의 SPECT 영상 비교를 위해 테크네슘 표지 고리 알지디 유도체인 실시예 15의 화합물을 주입하여 두 그룹간의 영상을 비교 시 종양에서의 섭취 비율이 실시예 12의 화합물을 투여한 군에서 59% 감소함을 확인할 수 있었다. 또한 두 그룹간의 종양사진에서 실시예 12의 화합물을 투여한 모델의 종양이 투여하지 않은 모델의 종양과는 다르게 주변 혈관분포가 확연히 적었으며, 종양을 둘러싼 혈관의 수도 급격히 줄었음을 확인하였으며 적출한 종양조직 슬라이스를 CD31 blood vessel staining 하였을 때도 실시예 12를 투여한 종양세포에서는 확연히 vessel이 관찰되지 못했다. 또한 종양조직 슬라이스에 Q-dot이 도입된 두 개 알지디 유도체를 이용한 αvβ3 인테그린 분포 평가 실험에서 도 11과 같이 실시예 12를 투여한 종양조직에서 대부분의 인테그린이 손상되어 있음을 확인할 수 있었다.
따라서, 본 발명에 따른 트리카르보닐 레늄-188 표지된 고리 알지디 유도체는 종양의 성장 저해 및 종양의 신생혈관작용 억제력이 우수하므로, 종양의 신생혈관작용으로부터 유발되는 질병의 치료에 유용하게 사용될 수 있다.
한편, 본 발명에 따른 상기 화합물은 목적에 따라 여러 형태로 제제화가 가능하다. 하기는 본 발명에 따른 상기 화합물을 활성성분으로 함유시킨 몇몇 제제화 방법을 예시한 것으로 본 발명이 이에 한정되는 것은 아니다.
< 제제예 > 주사제의 제조
본 발명의 화학식 1의 화합물 5 mCi
에탄올 100 ㎎
생리식염수 2000 ㎎
본 발명의 화학식 1의 화합물을 에탄올과 함께 증류수에 용해시키고 멸균 필터에 통과시켜 멸균바이알에 저장 후에, 통상의 방법에 따라 주사제를 제조하였다.

Claims (18)

  1. 하기 화학식 1로 표시되는 트리카르보닐 테크네슘-99m, 레늄-185,187 또는 레늄-188 표지 고리 알지디 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염:
    [화학식 1]
    Figure 112013099795489-pat00058

    (여기서, 상기 화학식 1은,
    [화학식 1A]
    Figure 112013099795489-pat00059

    (상기 화학식 1A에 있어서,
    M은 99mTc, 188Re 또는 185,187Re이고,
    R1은
    Figure 112013099795489-pat00060
    이며, 여기서 상기 n은 4 내지 8의 정수이고,
    R3은 -H 또는 -OH이며,
    R4는 -(CH2)m- 또는 -(CH2)m-COO-이고, 여기서 상기 m은 1 내지 8의 정수이다);

    [화학식 1B]
    Figure 112013099795489-pat00061

    (상기 화학식 1B에 있어서,
    M은 99mTc, 188Re 또는 185,187Re이고,
    R1은
    Figure 112013099795489-pat00062
    또는
    Figure 112013099795489-pat00063
    이며, 여기서 상기 n은 0 내지 8의 정수이고,
    A1은 아스파르트산, 라이신, 글루타민산, 타이로신, 시스테인, 트레오닌 및 세린으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 아미노산이고,
    R2는 -NH-이고,
    R3은 -H 또는 -OH이고,
    R4는 -(CH2)m- 또는 -(CH2)m-COO-이고, 여기서 상기 m은 1 내지 8의 정수이다); 및

    [화학식 1C]
    Figure 112013099795489-pat00064

    (상기 화학식 1C에 있어서,
    M은 99mTc, 188Re 또는 185,187Re이고,
    R1은
    Figure 112013099795489-pat00065
    또는
    Figure 112013099795489-pat00066
    이며, 여기서 상기 n은 0 내지 8의 정수이고,
    A1 및 A2는 각각 아스파르트산, 라이신, 글루타민산, 타이로신, 시스테인, 트레오닌 및 세린으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 아미노산이고,
    R2는 -NH-이고,
    R3은 -H 또는 -OH이고,
    R4는 -(CH2)m- 또는 -(CH2)m-COO-이고, 여기서 상기 m은 1 내지 8의 정수이다);
    으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나의 화학식으로 표시되는 화합물이다).
  2. 삭제
  3. 제1항에 있어서, 상기 트리카르보닐 테크네슘-99m, 레늄-185,187 또는 레늄-188 표지 고리 알지디 유도체는
    4) 고리 {(트리카르보닐-[99mTc]테크네슘-N-α-비스-하이드록시카르보닐메틸-NH2(CH2CH2O)4CH2CH2CONH-라이신)-알지닌-글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌};
    5) 고리 {(트리카르보닐-[188Re]레늄-N-α-비스-하이드록시카르보닐메틸-NH2(CH2CH2O)4CH2CH2CONH-라이신)-알지닌-글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌};
    6) 고리 {(트리카르보닐-[185,187Re]레늄-N-α-비스-하이드록시카르보닐메틸-NH2(CH2CH2O)4CH2CH2CONH-라이신)-알지닌-글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌};
    7) 고리 {(트리카르보닐-[99mTc]테크네슘-N-α-비스-하이드록시카르보닐메틸-글라이신-CONH(CH2CH2O)4CH2CH2CONH-라이신)-알지닌-글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌};
    8) 고리 {(트리카르보닐-[188Re]레늄-N-α-비스-하이드록시카르보닐메틸-글라이신-CONH(CH2CH2O)4CH2CH2CONH-라이신)-알지닌-글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌};
    9) 고리 {(트리카르보닐-[185,187Re]레늄-N-α-비스-하이드록시카르보닐메틸-글라이신-CONH(CH2CH2O)4CH2CH2CONH-라이신)-알지닌-글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌};
    10) (트리카르보닐-[99mTc]테크네슘-N-α-비스-하이드록시카르보닐메틸-아스파르트산)-[고리(라이신-알지닌-글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌)]2;
    11) (트리카르보닐-[188Re]레늄-N-α-비스-하이드록시카르보닐메틸-아스파르트산)-[고리(라이신-알지닌-글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌)]2;
    12) (트리카르보닐-[185,187Re]레늄-N-α-비스-하이드록시카르보닐메틸-아스파르트산)-[고리(라이신-알지닌-글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌)]2;
    13) {트리카르보닐-[99mTc]테크네슘-N-α-비스-하이드록시카르보닐메틸-(폴리에틸렌글리콜)n-아스파르트산}-[고리(라이신-알지닌-글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌)]2, (n = 0-8);
    14) {트리카르보닐-[188Re]레늄-N-α-비스-하이드록시카르보닐메틸-(폴리에틸렌글리콜)n-아스파르트산}-[고리(라이신-알지닌-글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌)]2, (n = 0-8);
    15) {트리카르보닐-[185,187Re]레늄-N-α-비스-하이드록시카르보닐메틸-(폴리에틸렌글리콜)n-아스파르트산}-[고리(라이신-알지닌-글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌)]2, (n = 0-8);
    16) {트리카르보닐-[99mTc]테크네슘-N-α-비스-하이드록시카르보닐메틸-(폴리에틸렌글리콜)n-아스파르트산}-{(폴리에틸렌글리콜)n-[고리(라이신-알지닌-글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌)]}2, (n = 0-8);
    17) {트리카르보닐-[188Re]레늄-N-α-비스-하이드록시카르보닐메틸-(폴리에틸렌글리콜)n-아스파르트산}-{(폴리에틸렌글리콜)n-[고리(라이신-알지닌-글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌)]}2, (n = 0-8);
    18) {트리카르보닐-[185,187Re]레늄-N-α-비스-하이드록시카르보닐메틸-(폴리에틸렌글리콜)n-아스파르트산}-{(폴리에틸렌글리콜)n-[고리(라이신-알지닌-글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌)]}2, (n = 0-8);
    19) (트리카르보닐-[99mTc]테크네슘-N-α-비스-하이드록시카르보닐메틸-아스파르트산)-{아스파르트산-[고리(라이신-알지닌-글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌)]2}4;
    20) (트리카르보닐-[188Re]레늄-N-α-비스-하이드록시카르보닐메틸-아스파르트산)-{아스파르트산-[고리(라이신-알지닌-글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌)]2}4;
    21) (트리카르보닐-[185,187Re]레늄-N-α-비스-하이드록시카르보닐메틸-아스파르트산)-{아스파르트산-[고리(라이신-알지닌-글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌)]2}4;
    22) {트리카르보닐-[99mTc]테크네슘-N-α-비스-하이드록시카르보닐메틸-(폴리에틸렌글리콜)n-아스파르트산}-{아스파르트산-[고리(라이신-알지닌-글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌)]2}4, (n = 0-8);
    23) {트리카르보닐-[188Re]레늄-N-α-비스-하이드록시카르보닐메틸-(폴리에틸렌글리콜)n-아스파르트산}-{아스파르트산-[고리(라이신-알지닌-글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌)]2}4, (n = 0-8);
    24) {트리카르보닐-[185,187Re]레늄-N-α-비스-하이드록시카르보닐메틸-(폴리에틸렌글리콜)n-아스파르트산}-{아스파르트산-[고리(라이신-알지닌-글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌)]2}4, (n = 0-8);
    25) {트리카르보닐-[99mTc]테크네슘-N-α-비스-하이드록시카르보닐메틸-(폴리에틸렌글리콜)n-아스파르트산}-{아스파르트산-(폴리에틸렌글리콜)n-[고리(라이신-알지닌-글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌)]2}4, (n = 0-8);
    26) {트리카르보닐-[188Re]레늄-N-α-비스-하이드록시카르보닐메틸-(폴리에틸렌글리콜)n-아스파르트산}-{아스파르트산-(폴리에틸렌글리콜)n-[고리(라이신-알지닌-글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌)]2}4, (n = 0-8); 및
    27) {트리카르보닐-[185,187Re]레늄-N-α-비스-하이드록시카르보닐메틸-(폴리에틸렌글리콜)n-아스파르트산}-{아스파르트산-(폴리에틸렌글리콜)n-[고리(라이신-알지닌-글라이신-아스파르트산-D-페닐알라닌)]2}4, (n = 0-8);으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 트리카르보닐 테크네슘-99m, 레늄-185,187 또는 레늄-188 표지 고리 알지디 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  4. 하기 반응식 1에 나타낸 바와 같이,
    화학식 2의 전구체 화합물에 트리카르보닐 테크네슘-99m 또는 트리카르보닐 레늄-188를 반응시켜 화학식 1의 트리카르보닐 테크네슘-99m 또는 트리카르보닐 레늄-188이 표지된 고리 알지디 유도체를 제조하는 단계를 포함하는 제1항의 트리카르보닐 테크네슘-99m 또는 레늄-188 표지 고리 알지디 유도체의 제조방법:
    [반응식 1]
    Figure 112013044402811-pat00067
    .
    (상기 반응식 1에서,
    M은 99mTc 또는 188Re이고,
    X는
    Figure 112013044402811-pat00068
    또는
    Figure 112013044402811-pat00069
    이고,
    Y는
    Figure 112013044402811-pat00070
    이고,
    A1, A2, R1, R2, R3 및 R4은 제1항의 화학식 1C에서 정의한 바와 같다).
  5. 제4항에 있어서, 상기 단계는 트리카르보닐 테크네슘-99m 또는 트리카르보닐 레늄-188를 증류수 용매 0.5~5 mL로 희석하여 화학식 2의 전구체가 들어있는 반응용기에 넣고, 70~80 ℃에서 30분 또는 60분간 가열하여 반응시킴으로써 화학식 1의 트리카르보닐 테크네슘-99m 또는 트리카르보닐 레늄-188이 표지된 고리 알지디 유도체를 제조하는 것을 특징으로 하는 제조방법.
  6. 하기 반응식 2에 나타낸 바와 같이,
    화학식 2의 전구체 화합물에 (NEt4)2Re(CO)3Br3을 넣고 반응시켜 화학식 1a의 트리카르보닐 185,187Re가 도입된 고리 알지디 유도체를 제조하는 단계를 포함하는 제1항의 트리카르보닐 레늄-185,187 표지 고리 알지디 유도체의 제조방법:
    [반응식 2]
    Figure 112013044402811-pat00071
    .
    (상기 반응식 2에서,
    X는
    Figure 112013044402811-pat00072
    또는
    Figure 112013044402811-pat00073
    이고,
    Y는
    Figure 112013044402811-pat00074
    이고,
    A1, A2, R1, R2, R3 및 R4은 제1항의 화학식 1C에서 정의한 바와 같고, 화학식 1a는 제1항의 화학식 1에 포함된다).
  7. 제6항에 있어서, 상기 단계는 시약 (NEt4)2Re(CO)3Br3을 증류수 용매 0.5~5 mL로 희석하여 화학식 2의 전구체가 들어있는 반응용기에 넣고, 70~80 ℃에서 55~65분간 가열하여 반응시킴으로써 화학식 1a의 트리카르보닐 185,187Re가 도입된 고리 알지디 유도체를 제조하는 것을 특징으로 하는 제조방법.
  8. 제1항의 트리카르보닐 테크네슘-99m 표지 고리 알지디 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 신생혈관(angiogenesis) 관련 질환의 진단용 약학적 조성물.
  9. 제8항에 있어서, 상기 조성물은 대상에게 정맥주사로 투여되여 단일광자방출전산화단층촬영에 의해 신생혈관 관련 질환을 진단하는 것을 특징으로 하는 진단용 약학적 조성물.
  10. 제8항에 있어서, 상기 신생혈관 관련 질환은 혈전증(brombosis), 심근 허혈(myocardial ischemia), 고형화 종양(solid tumor) 및 전이암으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 αvβ3 인테그린(integrin)이 과다 분포되는 질환인 것을 특징으로 하는 진단용 약학적 조성물.
  11. 제1항의 트리카르보닐 레늄-185,187 또는 레늄-188 표지 고리 알지디 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 신생혈관 관련 질환 치료용 약학적 조성물.
  12. 제11항에 있어서, 상기 조성물은 대상에게 정맥주사로 투여되는 것을 특징으로 하는 신생혈관 관련 질환 치료용 약학적 조성물.
  13. 제11항에 있어서, 상기 신생혈관 관련 질환은 혈전증(brombosis), 심근 허혈(myocardial ischemia), 고형화 종양(solid tumor) 및 전이암으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 αvβ3 인테그린(integrin)이 과다 분포되는 질환인 것을 특징으로 하는 신생혈관 관련 질환 치료용 약학적 조성물.
  14. 삭제
  15. 삭제
  16. 삭제
  17. 하기 화학식 2로 표시되는 테크네슘-99m, 레늄-185,187 또는 레늄-188 표지를 위한 고리 알지디 유도체의 전구체:
    [화학식 2]
    Figure 112013044402811-pat00075

    (여기서, 상기 화학식 2는,
    [화학식 2A]
    Figure 112013044402811-pat00076

    (상기 화학식 2A에서,
    상기 R1, R3 및 R4는 청구항 1항의 화학식 1A에서 정의한 바와 같다);

    [화학식 2B]
    Figure 112013044402811-pat00077

    (상기 화학식 2B에서,
    상기 A1, R1, R2, R3 및 R4는 청구항 1항의 화학식 1B에서 정의한 바와 같다); 및

    [화학식 2C]
    Figure 112013044402811-pat00078

    (상기 화학식 2C에서,
    상기 R1, R2, R3, R4, A1 및 A2는 제1항의 화학식 1C에서 정의한 바와 같다);
    으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나의 화학식으로 표시되는 화합물이다).
  18. 삭제
KR1020110043544A 2010-05-24 2011-05-09 트리카르보닐 테크네슘-99ｍ 또는 레늄-188 표지 고리 알지디 유도체, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 신생혈관 관련 질환의 진단 또는 치료용 약학적 조성물 KR101383655B1 (ko)

Priority Applications (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201180031236.6A CN102985413B (zh) 2010-05-24 2011-05-24 三羰基锝-99m或铼-188标记的环RGD衍生物、其制备方法和包含所述衍生物作为活性成分用于诊断或治疗血管发生相关疾病的药物组合物
JP2013512534A JP5774687B2 (ja) 2010-05-24 2011-05-24 トリカルボニルテクネシウム−９９ｍまたはレニウム−１８８標識サイクリックＲＧＤ誘導体、その製造方法及びそれを有効成分として含む新生血管関連疾患の診断または治療用薬学的組成物
PCT/KR2011/003801 WO2011149250A2 (ko) 2010-05-24 2011-05-24 트리카르보닐 테크네슘-99ｍ 또는 레늄-188 표지 고리 알지디 유도체, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 신생혈관 관련 질환의 진단 또는 치료용 약학적 조성물
US13/699,511 US9439986B2 (en) 2010-05-24 2011-05-24 Tricarbonyl technetium-99m, rhenium-185/187, or rhenium-188 labeled cyclic RGD derivatives and uses thereof
EP11786882.8A EP2583966B1 (en) 2010-05-24 2011-05-24 Tricarbonyl technetium-99m or rhenium-188 label ring rgd derivative, a preparation method thereof, and a pharmaceutical composition containing the derivative as an active ingredient for use in the diagnosis or treatment of angiogenesis-related diseases

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR20100048289 2010-05-24
KR1020100048289 2010-05-24

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20110128732A KR20110128732A (ko) 2011-11-30
KR101383655B1 true KR101383655B1 (ko) 2014-04-10

Family

ID=45396864

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020110043544A KR101383655B1 (ko) 2010-05-24 2011-05-09 트리카르보닐 테크네슘-99ｍ 또는 레늄-188 표지 고리 알지디 유도체, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 신생혈관 관련 질환의 진단 또는 치료용 약학적 조성물

Country Status (6)

Country Link
US (1) US9439986B2 (ko)
EP (1) EP2583966B1 (ko)
JP (1) JP5774687B2 (ko)
KR (1) KR101383655B1 (ko)
CN (1) CN102985413B (ko)
WO (1) WO2011149250A2 (ko)

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PT3050878T (pt) 2013-09-24 2021-12-02 Fujifilm Corp Novo composto contendo azoto ou seu sal, ou seu complexo de metal
CN107428755B (zh) 2015-03-25 2020-03-03 富士胶片株式会社 含氮化合物或其盐的制造方法以及它们的制造中间体
CN106474495B (zh) * 2016-11-21 2019-07-09 中国医学科学院阜外医院 含亚氨基二乙酸的99mTc标记的RGD多肽肿瘤诊断药物及其制备方法
KR102250737B1 (ko) * 2020-06-01 2021-05-11 주식회사 비아이케이테라퓨틱스 약물 전달과 내재화 효율이 강화된 약물복합체

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE602004024879D1 (de) * 2003-04-29 2010-02-11 Univ Zuerich AN EINEM BIOMOLEKÜL GEBUNDENEN N epsilon- UND/ODER N alpha DERIVATISIERTEM UND ORGANISCH-GESCHÜTZTEM L-HISTIDIN ZUR HOCH-EFFIZIENTER MARKIERUNG MIT (M(H2O)3(CO)3)+ MITTELS FAC KOORDINIERUNG
GB0421987D0 (en) * 2004-10-04 2004-11-03 Amersham Plc Novel technetium and rhenium complexes
CN101474415B (zh) * 2009-01-16 2011-09-28 北京大学 用于integrinαvβ3阳性肿瘤的RGD多肽放射性药物及其制备方法
KR101200049B1 (ko) * 2012-05-14 2012-11-13 한국원자력연구원 테크네튬-99엠 트리카보닐 표지 글리신 단량체 또는 올리고머 활용 생리활성분자를 이용한 프로브의 제조방법 및 이를 포함하는 영상제 조성물

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Bioorganic and Medicinal Chemistry, 15(24), 2007, pp.7755-7764 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN102985413A (zh) 2013-03-20
WO2011149250A3 (ko) 2012-03-22
US20130064766A1 (en) 2013-03-14
JP2013533852A (ja) 2013-08-29
WO2011149250A2 (ko) 2011-12-01
EP2583966B1 (en) 2016-08-10
JP5774687B2 (ja) 2015-09-09
EP2583966A2 (en) 2013-04-24
EP2583966A4 (en) 2013-11-13
US9439986B2 (en) 2016-09-13
KR20110128732A (ko) 2011-11-30
CN102985413B (zh) 2016-04-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP7036774B2 (ja) 前立腺特異的膜抗原（ｐｓｍａ）の標識インヒビター、前立腺癌の治療のための画像化剤および薬剤としてのその使用
KR101243016B1 (ko) 진단용 화합물
Chen et al. Integrin αβ3-targeted imaging of lung cancer
Fani et al. Comparative evaluation of linear and cyclic 99mTc-RGD peptides for targeting of integrins in tumor angiogenesis
Parry et al. MicroPET imaging of breast cancer using radiolabeled bombesin analogs targeting the gastrin-releasing peptide receptor
JP7396897B2 (ja) 画像化および抗腫瘍治療において有用な調整可能な薬物動態を有する三官能性構築物
EP3209336B1 (en) 18f-tagged inhibitors of prostate specific membrane antigen (psma), their use as imaging agents and pharmaceutical agents for the treatment of prostate cancer
US10201625B2 (en) Radiolabelled octreotate analogues as PET tracers
ES2961749T3 (es) Triazol marcado con 18F que contiene inhibidores de PSMA
CN117264012A (zh) 一种前列腺特异性膜抗原靶向化合物的应用
KR102233726B1 (ko) 전립선 특이적 막 항원（psma)의 18f-태그된 저해제 및 전립선암에 대한 조영제로서 이의 용도
AU2016352491B2 (en) Peptide thiourea derivative, radioisotope labeled compound containing same, and pharmaceutical composition containing same as active ingredient for treating or diagnosing prostate cancer
Lee et al. Synthesis and biological evaluation of RGD peptides with the 99m Tc/188 Re chelated iminodiacetate core: Highly enhanced uptake and excretion kinetics of theranostics against tumor angiogenesis
CN115260160B (zh) 一种靶向成纤维细胞活化蛋白fap的化合物及其制备方法和应用
KR101383655B1 (ko) 트리카르보닐 테크네슘-99ｍ 또는 레늄-188 표지 고리 알지디 유도체, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 신생혈관 관련 질환의 진단 또는 치료용 약학적 조성물
JP2023551741A (ja) 二重標的化化合物及びその調製方法と応用
WO2024099245A1 (zh) 一种rgd二聚体化合物及其制备方法和应用
CN115745903A (zh) 一种肽脲素衍生物、含其的药物组合物及其应用
CN115583989A (zh) 一种靶向sstr2的化合物及其制备方法和应用
CN116514735A (zh) 一种肽脲素衍生物、含其的药物组合物及其应用
Merrill et al. Synthesis and comparative evaluation of novel 64Cu-labeled high affinity cell-specific peptides for positron emission tomography imaging of tumor vasculature
TWI572363B (zh) 單光子發射型電腦斷層顯像放射性核種標記的ｒｇｄ環肽三聚體、其製備方法及偵測腫瘤的方法
KR101551232B1 (ko) Ｎ3ｓ1형의 새로운 킬레이터가 접합된 폴레이트 유도체, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 암 진단 또는 치료용 조성물
최지영 Development of novel cell-internalizing peptides using in vivo intermolecular conjugation as an avenue for enhancing the effect of anti-angiogenic therapy on tumors
TW202419460A (zh) 一種rgd二聚體化合物及其製備方法和應用

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
N231 Notification of change of applicant
E90F Notification of reason for final refusal
E701 Decision to grant or registration of patent right
GRNT Written decision to grant
FPAY Annual fee payment

Payment date: 20170208

Year of fee payment: 4

FPAY Annual fee payment

Payment date: 20180209

Year of fee payment: 5

FPAY Annual fee payment

Payment date: 20190211

Year of fee payment: 6

FPAY Annual fee payment

Payment date: 20200210

Year of fee payment: 7