CN115581630A

CN115581630A - 醇质体溶液及其制备方法和应用、醇质体药妆品及其应用

Info

Publication number: CN115581630A
Application number: CN202211359870.9A
Authority: CN
Inventors: 张庆文; 王泽雨; 王瑞兵; 韦健文; 高泳诗
Original assignee: University of Macau
Current assignee: University of Macau
Priority date: 2022-11-02
Filing date: 2022-11-02
Publication date: 2023-01-10

Abstract

本发明公开了一种醇质体溶液及其制备方法和应用、醇质体药妆品及其应用，该醇质体溶液包括均匀混合的醇相和水相，醇相和水相的质量比为20～40:100，醇相包括卵磷脂、胆固醇以及醇溶剂，水相包括人参属植物原人参三醇型总皂苷和水。通过设置合理的醇、水相比例，使得醇质体溶液体系能够具有较佳的稳定性。添加醇成分，增加醇质体透皮递送的效率，增加药物的皮肤渗透性，对于提亮肌肤的美白效果明显。此外，醇质体系统安全无毒，美白效果良好，在物理学表征以及体内外生物学研究中均取得良好的评价效果。醇质体溶液及其药妆品的制备工艺简单、快速、条件温和和普适性强，可长时间保持稳定状态，有利于储存运输，实现商品化。

Description

醇质体溶液及其制备方法和应用、醇质体药妆品及其应用

技术领域

本发明涉及药妆品技术领域，具体而言，涉及一种醇质体溶液及其制备方法和应用、醇质体药妆品及其应用。

背景技术

黑色素对于保护人类皮肤免受辐射至关重要，但是黑色素的异常积聚会诱发色素沉着障碍，例如黄褐斑，雀斑，麻黄素和老年性小扁豆，由病理生理或环境因素触发的不良皮肤色素沉着，影响美观。尤其在亚洲主流审美文化中，一直以皮肤白皙为美。因此长期以来，一直有大量基于新型皮肤美白脱色产品的开发。然而，尽管已经开发了诸如氢醌，维生素C和其他植物药等皮肤美白剂。但是，化妆品潜在的不良活性，低稳定性，皮肤渗透性差以及严重的副作用仍然是尚未解决的问题。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种醇质体溶液及其制备方法和应用、醇质体药妆品及其应用，以改善上述技术问题。

本发明是这样实现的：

第一方面，本发明提供了一种醇质体溶液，其包括均匀混合的醇相和水相，醇相和水相的质量比为20～40:100，醇相包括卵磷脂、胆固醇以及醇溶剂，水相包括人参属植物原人参三醇型总皂苷和水。

第二方面，本发明还提供了上述醇质体溶液的制备方法，其包括：将上述醇相和上述水相均匀混合。

第三方面，本发明还提供了上述醇质体溶液在制备药妆品中的应用。

第四方面，本发明还提供了一种醇质体药妆品，其包括凝胶基质和上述醇质体溶液。

第五方面，本发明还提供了上述醇质体药妆品在皮肤美白中的应用。

本发明具有以下有益效果：一方面，通过醇相和水相分别溶解对应的成分，并且设置合理的比例，使得醇质体溶液体系能够具有较佳的稳定性。另一方面，添加醇成分，增加醇质体透皮递送的效率，增加药物的皮肤渗透性，对于提亮肌肤的美白效果明显。此外，醇质体系统安全无毒，美白效果良好，在物理学表征以及体内外生物学研究中均取得良好的评价效果。醇质体溶液及其药妆品的制备工艺简单、快速、条件温和普适性强，同时能长时间保持稳定状态，有利于储存运输，实现商品化。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。

图1为本发明试验例1的人参属植物原人参三醇型总皂苷高效液相色谱图；

图2为本发明试验例2的人参属植物原人参三醇型总皂苷醇质体粒径分布图；

图3为本发明试验例3中，人参属植物原人参三醇型总皂苷醇质体的透射电镜(TEM)检测结果图；

图4为本发明试验例4中，接受治疗两周后的C57小鼠背部照片；

图5为本发明试验例4中，接受治疗两周后的C57小鼠背部皮肤匀浆黑色素含量分析结果。

具体实施方式

为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。

本发明的一些实施方式提供了一种醇质体溶液，其包括均匀混合的醇相和水相，醇相和水相的质量比为20～40:100，醇相包括卵磷脂、胆固醇以及醇溶剂，水相包括人参属植物原人参三醇型总皂苷和水。

在皮肤美白应用领域，人参皂苷近年来已有突破，作为一种安全性较高的天然成分，越来越多的受到研究者的关注。然而，由于人参皂苷的亲水性，人参皂苷通过皮肤屏障的能力较弱。为了改善天然产物在皮肤吸收方向应用的局限性，本发明实施方式通过醇质体包载技术，增加美白产品进入真皮层的效率，提升美白效果。醇质体是一种理想的载体，它是由传统的脂质体优化而来，以更高的乙醇含量作为一种有效的渗透促进载体。在醇的作用下，醇质体具有更柔软、更有弹性的特性，可以很容易地穿透皮肤深层，这将使这种药物载体比传统脂质体更具优势。因此，人参属植物原人参三醇型总皂苷结合醇质体技术进行封装促进吸收，利用天然无毒的人参皂苷进行美白，同时使用醇质体提升透皮递送效率，实现安全高效皮肤美白制剂的开发。

需要说明的是，人参属植物原人参三醇型总皂苷为分离自人参、西洋参或者三七的人参属植物原人参三醇型总皂苷，或者由原人参三醇型皂苷单体化合物按比例混合而成的混合物。

具体地，一些实施方式中，人参属植物原人参三醇型总皂苷包括0wt％～40wt％的三七皂苷R1、10wt％～60wt％的人参皂苷Rg₁以及10wt％～40wt％的人参皂苷Re。

进一步地，示例性地，人参属植物原人参三醇型总皂苷包括40wt％的三七皂苷R1、30wt％的人参皂苷Rg₁以及20wt％的人参皂苷Re。

为了进一步提高醇质体溶液的稳定性，对醇相和水相中的物质比例进行优化，一些实施方式中，醇相中，卵磷脂和胆固醇的摩尔比为1～7：1，例如，1：1、2：1、3：1、4：1、5：1、6：1或7：1，优选4：1。卵磷脂在醇相中的浓度为0.5～20mg/mL，优选0.9～10mg/mL，更优选0.9mg/mL；水相中，人参属植物原人参三醇型总皂苷的浓度为1mg/mL～100mg/mL，优选5mg/mL～20mg/mL，更优选10mg/mL。

一些实施方式中，卵磷脂为大豆卵磷脂。大豆卵磷脂能够改善皮肤，使皮肤更为光滑，并且其还具有很强的乳化性，能够使得乳化液温度，能够加强与凝胶基质的结合，实现对皮肤更好的修复作用。

需要说明的是，其他一些实施方式中，卵磷脂还可以选自来源于蛋黄、鱼头、芝麻、蘑菇、山药和黑木耳、谷类、小鱼、动物肝脏、鳗鱼、赤腹蛇、眼镜蛇、红花籽油、玉米油和向日葵等动植物组织中卵磷脂。

一些实施方式中，醇溶剂为无水乙醇，水相中的溶剂水包括但不限于去离子水、蒸馏水、超纯水等。

本发明的一些实施方式还提供了上述醇质体溶液的制备方法，其包括：将上述醇相和上述水相均匀混合。

通过分别先形成醇相和水相，能够使得醇质体溶液中的活性成分能够充分溶解，混合均匀后其溶液体系更加稳定。一些实施方式中，醇相主要通过以下步骤制备得到：将卵磷脂和胆固醇溶于醇溶剂，超声混合均匀。水相主要通过以下步骤制备得到：将人参属植物原人参三醇型总皂苷溶于水，超声混合均匀。

一些实施方式中，将水相滴入醇相中进行混合，通过缓慢滴加的方式，其混合效果较佳，优选地，在滴入过程中，对醇相超声分散。

一些实施方式中，将40℃～60℃的所述水相滴入40℃～60℃的醇相中进行混合。例如，水相和醇相的温度均可为40℃、42℃、43℃、44℃、46℃、48℃、50℃、51℃、53℃、54℃、55℃、56℃、58℃或60℃等。

为了使得水相和醇相之间充分混合分散形成较为稳定的醇质体，一些实施方式中，滴加完水相后，持续超声分散30min～60min，优选60min。

进一步地，一些实施方式中，将混合均匀的水相和醇相的混合液通过脂质体挤出膜，脂质体挤出膜的规格为10～1000um。

本发明的一些实施方式还提供了一种用于制备药妆品的醇质体的制备方法，其具体包括：

S1、将大豆卵磷脂、胆固醇溶于无水乙醇，超声使其充分溶解并混合均匀，同时在40℃～60℃的水中密闭加热并维持温度。

S2、将人参属植物原人参三醇型总皂苷溶于水，超声使其充分溶解，同时在40℃～60℃的水中密闭加热维持温度。

S3、将上述水相在超声以及稳定温度下缓慢滴入乙醇相，在恒定温度下持续超声一定时间后，将混合液通过脂质体挤出膜(10～1000μm规格)，获得均一醇质体溶液。

本发明的一些实施方式还提供了上述醇质体溶液在制备药妆品中的应用。

本发明一些实施方式还提供了一种醇质体药妆品，其包括凝胶基质和上述任意实施方式的醇质体溶液。该醇质体药妆品的制备过程为：将凝胶基质以一定比例加入到上述醇质体溶液中，制成稳定无色透明均一的醇质体凝胶。

进一步地，一些实施方式中，凝胶基质为卡波姆凝胶。较佳的实施方式中，卡波姆凝胶在醇质体药妆品中的体积分数为50％～70％；优选50％。

本发明一些实施方式还提供了上述醇质体药妆品在皮肤美白中的应用。

以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。

实施例1

本实施例提供了一种醇质体溶液以及含有该醇质体溶液的药妆品的制备方法，其具体步骤为：

S1、制备人参属植物原人参三醇型总皂苷。按照以下比例步骤进行制备：10g三七粗粉，加入150mL纯水超声提取45分钟，过滤，滤渣加入100mL纯水，提取两次，各半小时。合并上述三次提取液，浓缩至100ml左右，上样至ODS柱(200gODS)，分别用15％，30％，50％乙腈洗脱，收集含原人参三醇型皂苷馏分，浓缩冷冻干燥得三七原人参三醇型总皂苷0.42g。

S2、将大豆卵磷脂溶于无水乙醇(0.9mg/mL)，加入胆固醇(摩尔比1:3)，超声使其充分溶解并混合均匀，得到乙醇相，同时在40摄氏度的水中密闭加热并维持温度。

S3、将人参属植物原人参三醇型总皂苷溶于水(50mg/mL)，超声使其充分溶解，得到水相，同时在40摄氏度的水中密闭加热维持温度。

S4、将上述水相在超声以及40摄氏度下缓慢滴入乙醇相，乙醇相与水相比例为20：100，持续超声30分钟后，将混合液通过脂质体挤出膜(220μm规格)，获得均一的醇质体溶液。

S5、将卡波姆凝胶以50％的比例加入上述醇质体溶液中，制成稳定无色透明均一的人参属植物原人参三醇型总皂苷醇质体药妆品。

实施例2

本实施例提供了一种醇质体溶液以及含有该醇质体溶液的药妆品的制备方法，其步骤S1同实施例1，其不同之处在于步骤S2-S5为：

S2、将大豆卵磷脂溶于无水乙醇(3mg/mL)，加入胆固醇(摩尔比1:4)，超声使其充分溶解并混合均匀，得到乙醇相，同时在45摄氏度的水中密闭加热并维持温度。

S3、将人参属植物原人参三醇型总皂苷溶于水(70mg/mL)，超声使其充分溶解，得到水相，同时在45摄氏度的水中密闭加热维持温度。

S4、将上述水相在超声以及45摄氏度下缓慢滴入乙醇相，乙醇相与水相比例为30：100，持续超声40分钟后，将混合液通过脂质体挤出膜(320μm规格)，获得均一的醇质体溶液。

实施例3

S2、将大豆卵磷脂溶于无水乙醇(10mg/mL)，加入胆固醇(摩尔比1:3)，超声使其充分溶解并混合均匀，得到乙醇相，同时在45摄氏度的水中密闭加热并维持温度。

S3、将人参属植物原人参三醇型总皂苷溶于水(100mg/mL)，超声使其充分溶解，得到水相，同时在45摄氏度的水中密闭加热维持温度。

S4、将上述水相在超声以及45摄氏度下缓慢滴入乙醇相，乙醇相与水相比例为40：100，持续超声40分钟后，将混合液通过脂质体挤出膜(320μm规格)，获得均一的醇质体溶液。

S5、将卡波姆凝胶以66％的比例加入上述醇质体溶液中，制成稳定无色透明均一的人参属植物原人参三醇型总皂苷醇质体药妆品。

实施例4

S2、将大豆卵磷脂溶于无水乙醇(5mg/mL)，加入胆固醇(摩尔比1:1)，超声使其充分溶解并混合均匀，得到乙醇相，同时在50摄氏度的水中密闭加热并维持温度。

S3、将人参属植物原人参三醇型总皂苷溶于水(30mg/mL)，超声使其充分溶解，得到水相，同时在50摄氏度的水中密闭加热维持温度。

S4、将上述水相在超声以及50摄氏度下缓慢滴入乙醇相，乙醇相与水相比例为40：100，持续超声60分钟后，将混合液通过脂质体挤出膜(200μm规格)，获得均一的醇质体溶液。

S5、将卡波姆凝胶以68％的比例加入上述醇质体溶液中，制成稳定无色透明均一的人参属植物原人参三醇型总皂苷醇质体药妆品。

实施例5

S2、将大豆卵磷脂溶于无水乙醇(3mg/mL)，加入胆固醇(摩尔比1:7)，超声使其充分溶解并混合均匀，得到乙醇相，同时在60摄氏度的水中密闭加热并维持温度。

S3、将人参属植物原人参三醇型总皂苷溶于水(100mg/mL)，超声使其充分溶解，得到水相，同时在60摄氏度的水中密闭加热维持温度。

S4、将上述水相在超声以及60摄氏度下缓慢滴入乙醇相，乙醇相与水相比例为50：100，持续超声40分钟后，将混合液通过脂质体挤出膜(250μm规格)，获得均一的醇质体溶液。

S5、将卡波姆凝胶以70％的比例加入上述醇质体溶液中，制成稳定无色透明均一的人参属植物原人参三醇型总皂苷醇质体药妆品。

试验例1

对实施例1的醇质体溶液包封率测定

(1)确定检测波长：采用高效液相色谱法

精密称取实施例1制备的人参属植物原人参三醇型总皂苷标准品100μg进样，测定峰面积。

(2)色谱条件

色谱柱为Zorbax ODS C18柱(250mm×4.6mm i.d.，5μm)，检测波长203nm，检测温度40℃，采用Agilent 1100系列高效液相色谱分析仪(Palo Alto,CA,USA)。温度为40℃。采用水(A)和乙腈(B)组成的二元梯度洗脱系统，采用以下梯度程序实现分离:0～30min，18～19％ B；30-40min，19-31％B，流速为1.5ml/min，进样量为10μL。

(3)方法专属性实验

精密移取人参属植物原人参三醇型总皂苷标准品适量10μL进样检测，记录峰面积。如附图1所示，人参属植物原人参三醇型总皂苷标准品在203nm处有三个特征吸收峰。

(4)包封率测定方法

采用超滤离心法分离游离药物来测定人参属植物原人参三醇型总皂苷醇质体溶液的包封率。

取制备好的三醇型人参皂苷醇质体溶液0.5mL，置于截留分子量为10000的超滤离心管中，10000rpm离心30分钟，去除外层滤管中液体测定其中人参属植物原人参三醇型总皂苷的药物含量，包封率计算公式如下：

EE％＝(1-W₁/W₀)×100％

其中EE％代表包封率，W₀为醇质体中总药物含量，W₁为醇质体中游离药物含量。

试验例2

醇质体粒径以及Zeta电位检测，使用纳米粒径仪(Malvern Zetamaster ZEM5002，Malvern，UK)，采用动态光散射(DLS)法测定醇质体的尺寸分布和Zeta电位。取实施例1制得的100mL醇质体溶液与400mL水混合，超声5分钟使其混合均匀，然后加入比色皿或电极槽中，再放入测试仪中测量粒径以及Zeta电势。每次实验均重复三次，结果见附图2，同时表1展示了90天内人参属植物原人参三醇型总皂苷醇质体的粒径变化以及Zeta电势变化。

表1

试验例3

醇质体形态检测，使用透射电子显微镜(TEM,JEOL 2100F，日本)在200kV的工作电压下观察醇质体形态。将醇质体溶液(10μL)滴在在微碳涂层网格上干燥。使用印迹法除去多余的溶液，并且在显微镜观察前用1％ PTA溶液对样品进行负染色，醇质体形态图结果见附图4。

试验例4

将上述实施例1中获得的人参属植物原人参三醇型总皂苷醇质体药妆品施加于C57小鼠背部，用于验证美白效果，以及醇质体剂型的皮肤渗透吸收效率。在实验中将所有动物保持在恒定的条件下(温度25±1℃)，并且可以自由摄取标准饮食和饮用水，所有实验程序均符合澳门大学关于实验动物伦理的准则。在大约5周龄的C57小鼠的背部通过UVB诱导色素沉着。连续两周，隔天将每只动物的背部暴露于UVB辐射，每次曝光的总UVB剂量为500mJ/cm²暴露面积约为1.5cm×1.5cm，实验中每组使用了5只动物。从最后光照的第二天开始，将动物分为不同组别，分别局部施用含有不同浓度人参属植物原人参三醇型总皂苷的醇质体药妆品，以及没有被醇质体包裹的自由人参属植物原人参三醇型总皂苷凝胶混合物，空白对照组为施用纯卡拉波姆凝胶的组别，连续两周每天一次进行背部涂抹给药。两周后进行皮肤活检，将所得皮肤进行匀浆，并测量不同组别皮肤中黑色素的含量。紫外线造模后小鼠的背部照片见附图4中的(1)，治疗两周后小鼠的背部照片见附图4中的(2)，背部皮肤匀浆中黑色素含量结果见附图5。

综上所述，本发明实施例的人参属植物原人参三醇型总皂苷醇质体药妆品稳定性良好，粒径较小，且包封率较高。醇质体系统安全无毒，美白效果良好，在物理学表征以及体内外生物学研究中均取得良好的评价效果。人参属植物原人参三醇型总皂苷醇质体的制备方法具有制备工艺简单、快速、条件温和普适性的优势，同时能长时间保持稳定状态，有利于储存运输，实现商品化。本发明通过添加乙醇成分，增加醇质体透皮递送的效率，增加药物的皮肤渗透性，对于提亮肌肤的美白效果明显。此外，还提供了一种人参属植物原人参三醇型总皂苷的高效透皮递送体系。

以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims

1.一种醇质体溶液，其特征在于，其包括均匀混合的醇相和水相，所述醇相和水相的质量比为20～40：100，所述醇相包括卵磷脂、胆固醇以及醇溶剂，所述水相包括人参属植物原人参三醇型总皂苷和水。

2.根据权利要求1所述的醇质体溶液，其特征在于，所述醇相中，所述卵磷脂和所述胆固醇的摩尔比为1～7：1，优选4：1；

和/或，所述卵磷脂在醇相中的浓度为0.5～20mg/mL，优选0.9～10mg/mL；

和/或，所述水相中，所述人参属植物原人参三醇型总皂苷的浓度为1mg/mL～100mg/mL，优选5mg/mL～20mg/mL，更优选10mg/mL。

3.根据权利要求1或2所述的醇质体溶液，其特征在于，所述人参属植物原人参三醇型总皂苷为分离自人参、西洋参或者三七的人参属植物原人参三醇型总皂苷，或者由原人参三醇型皂苷单体化合物按比例混合而成的混合物；

优选地，所述人参属植物原人参三醇型总皂苷包括0wt％～40wt％的三七皂苷R1、10wt％～60wt％的人参皂苷Rg₁以及10wt％～40wt％的人参皂苷Re；

更优选地，所述人参属植物原人参三醇型总皂苷包括40wt％的三七皂苷R1、30wt％的人参皂苷Rg₁以及20wt％的人参皂苷Re；

和/或，所述醇溶剂为无水乙醇。

4.根据权利要求1或2所述的醇质体溶液，其特征在于，所述卵磷脂包括大豆卵磷脂，蛋黄、鱼头、芝麻、蘑菇、山药和黑木耳、谷类、小鱼、动物肝脏、鳗鱼、赤腹蛇、眼镜蛇、红花籽油、玉米油和向日葵等动植物组织中卵磷脂或者其按比例混合而成的混合物；

优选地，所述卵磷脂为大豆卵磷脂；

5.如权利要求1～4任一项所述的醇质体溶液的制备方法，其特征在于，其包括：将所述醇相和所述水相均匀混合。

6.根据权利要求5所述的醇质体溶液的制备方法，其特征在于，将所述水相滴入醇相中进行混合，优选地，在滴入过程中，对所述醇相超声分散；

优选地，将40℃～60℃的所述水相滴入40℃～60℃的醇相中进行混合；

优选地，滴加完所述水相后，超声分散30min～60min，优选60min；

优选地，将混合均匀的所述水相和所述醇相的混合液通过脂质体挤出膜，所述脂质体挤出膜的规格为10～1000μm。

优选地，所述醇相主要通过以下步骤制备得到：将卵磷脂和胆固醇溶于醇溶剂，超声混合均匀；和/或，所述水相主要通过以下步骤制备得到：将所述人参属植物原人参三醇型总皂苷溶于水，超声混合均匀。

7.如权利要求1～4任一项所述的醇质体溶液在制备药妆品中的应用。

8.一种醇质体药妆品，其特征在于，其包括凝胶基质和如权利要求1～4任一项所述的醇质体溶液。

9.根据权利要求8所述的醇质体药妆品，其特征在于，所述凝胶基质为卡波姆凝胶，优选地，所述卡波姆凝胶在所述醇质体药妆品中的质量分数为50％～70％；优选50％。

10.如权利要求8或9所述的醇质体药妆品在皮肤美白中的应用。