CN115561381A - 双黄升白口服液的鉴别方法 - Google Patents

双黄升白口服液的鉴别方法 Download PDF

Info

Publication number
CN115561381A
CN115561381A CN202211313621.6A CN202211313621A CN115561381A CN 115561381 A CN115561381 A CN 115561381A CN 202211313621 A CN202211313621 A CN 202211313621A CN 115561381 A CN115561381 A CN 115561381A
Authority
CN
China
Prior art keywords
solution
oral liquid
methanol
thin
solutions
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202211313621.6A
Other languages
English (en)
Inventor
秦雨程
季芳
阙瑞艳
王恒斌
施梦佳
王婷婷
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Changshu Leiyunshang Pharmaceutical Co Ltd
Original Assignee
Changshu Leiyunshang Pharmaceutical Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Changshu Leiyunshang Pharmaceutical Co Ltd filed Critical Changshu Leiyunshang Pharmaceutical Co Ltd
Priority to CN202211313621.6A priority Critical patent/CN115561381A/zh
Publication of CN115561381A publication Critical patent/CN115561381A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/90—Plate chromatography, e.g. thin layer or paper chromatography
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/90—Plate chromatography, e.g. thin layer or paper chromatography
    • G01N30/91—Application of the sample
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/90—Plate chromatography, e.g. thin layer or paper chromatography
    • G01N30/94—Development
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/90—Plate chromatography, e.g. thin layer or paper chromatography
    • G01N30/95—Detectors specially adapted therefor; Signal analysis

Landscapes

  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本发明涉及双黄升白口服液的鉴别方法，属于中药制剂质量控制技术领域。双黄升白口服液由以下列重量份的原料制成：黄芪450～550份、黄精或黄酒450～550份、女贞子或女贞酒200～300份、骨碎补或骨碎烫450～550份、天花粉450～550份、淫羊藿200～300份，0.5～2份甜菊素和75～85份木糖醇。建立了黄芪、女贞子、骨碎补、淫羊藿的薄层鉴别方法，经方法学研究，结果符合规定，并对十批样品进行了验证，该方法专属性强，重现性、耐用性好，可用于该中药制剂中的相应药味鉴别。

Description

双黄升白口服液的鉴别方法
技术领域
本发明中药制剂质量控制技术领域，具体涉及双黄升白口服液的鉴别方法。
背景技术
双黄升白为中药复方制剂，其主要功效为益气养阴、补肾生髓；治疗肿瘤放化疗骨髓抑制所引起的白细胞降低症，其剂型为口服液。处方中含有黄芪、黄精、女贞子、骨碎补、淫羊藿、天花粉及相关辅料。本品属于中药6.1类新药，为了控制该中药制剂质量，我们对该中药制剂进行了鉴别研究，建立了黄芪、女贞子、骨碎补、淫羊藿的薄层鉴别方法，经方法学研究，结果符合规定，并对十批样品进行了验证，方法稳定、可行。
发明内容
本发明的目的是提供双黄升白口服液的鉴别方法，建立了黄芪、女贞子、骨碎补、淫羊藿的薄层鉴别方法，该方法专属性强，重现性、耐用性好，可用于该中药制剂中的相应药味鉴别。
为了实现上述目的，本申请采用如下技术方案：
双黄升白口服液，以下列重量份的原料制成：黄芪450～550份、黄精或黄酒450～550份、女贞子或女贞酒200～300份、骨碎补或骨碎烫450～550份、天花粉450～550份、淫羊藿200～300份，0.5～2份甜菊素和75～85份木糖醇；其制备方法为：按重量百分比取黄芪、黄精或黄酒、女贞子或女贞酒、骨碎补或骨碎烫、天花粉、淫羊藿，加水煎煮，滤过、合并滤液，浓缩；加入乙醇，冷藏，滤过，滤液调pH，减压回收乙醇并浓缩，加水稀释，调pH，冷藏，滤过备用；再向其中加入加水溶解的甜菊素和木糖醇混合液，调节pH，加水搅匀，滤过，灌封，灭菌即得双黄升白口服。
优选的，以下列重量份的原料制成：黄芪500份、黄精或黄酒500份、女贞子或女贞酒250份、骨碎补或骨碎烫500份、天花粉500份、淫羊藿250份，1份甜菊素和80份木糖醇；其制备方法为：按重量百分比取黄芪、黄精或黄酒、女贞子或女贞酒、骨碎补或骨碎烫、天花粉、淫羊藿，加12倍量水煎煮3次，每次1.5小时，滤过，合并滤液并于60℃浓缩至相对密度1.12～1.18，加入乙醇使含醇量达到55％，于0℃～4℃冷藏48小时，滤过，滤液调pH至7.0，减压回收乙醇并于60℃浓缩至相对密度为1.30～1.40，加水稀释至900mL，调pH至4.5，于0℃～4℃冷藏48小时，滤过，取1g甜菊素和80g木糖醇加水溶解，加入滤液中混匀，调节pH至7.5～8.0，加水调整总量至1000mL，搅匀，滤过，灌封，100℃灭菌30min，即得双黄升白口服。
双黄升白口服液的鉴别方法，所述的鉴别方法包括如下鉴别方法的任一种、或者任两种、或者全部：
(1)所述双黄升白口服液中黄芪的鉴别方法，是以黄芪甲苷对照品为对照的薄层色谱鉴别方法，包括以下步骤：S1：供试品溶液的制备：取双黄升白口服液，加水饱和正丁醇振摇提取，合并正丁醇液，洗涤、蒸干，残渣加甲醇溶解，作为供试品溶液；S2：对照品溶液的制备：取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1mL含0.5～2mg的溶液，作为对照品溶液；S3：测定法：照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》2020年版四部通则0502)试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各2～7μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(11～16:5～9:1～4)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，样品日光下显相同的棕褐色斑点，紫外光灯(365nm)下显相同的橙黄色荧光斑点。
(2)所述双黄升白口服液中骨碎补的鉴别方法，是以柚皮苷对照品为对照的薄层色谱鉴别方法，包括以下步骤：S1：供试品溶液的制备：取双黄升白口服液8～12ml，加乙醚提取1～4次，每次13～26ml，弃去乙醚液；药液加乙酸乙酯提取1～4次，每次12～26ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇3～7ml使溶解，作为供试品溶液；S2：对照品溶液的制备：取柚皮苷对照品，加甲醇分别制成每1ml含0.7～1.4mg的溶液，作为对照品溶液；S3：测定法：照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》2020年版四部通则0502)试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各3～7μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲醇-丁酮-氯仿-水-甲酸(4～6∶4～8∶4～8∶0.5～1.5∶0.3～0.8)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同天蓝色的荧光斑点。
(3)所述双黄升白口服液中淫羊藿的鉴别方法，是以淫羊藿苷对照品为对照的薄层色谱鉴别方法，包括以下步骤：S1：供试品溶液的制备：取双黄升白口服液8～12ml，加乙醚提取1～4次，每次14～28ml，弃去乙醚液；药液加乙酸乙酯提取1～4次，每次15～24ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇3～7ml使溶解，作为供试品溶液；S2：对照品溶液的制备：取淫羊藿苷对照品，加甲醇分别制成每1ml含0.5～1.5mg的溶液，作为对照品溶液；S3：测定法：照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》2020年版四部通则0502)试验，吸取上述两种溶液各3～7μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(11～15∶3～9∶1～4)的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在110℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同棕黄色的斑点。
(4)所述双黄升白口服液中女贞子的鉴别方法，是以特女贞苷对照品为对照的薄层色谱鉴别方法，包括以下步骤：S1：供试品溶液的制备：取双黄升白口服液8～12ml，通过内径1.5cm、柱高为12cm的D101型大孔吸附树脂柱，以水85～115ml洗脱，弃去水液，再用20％乙醇40～60ml洗脱，弃去洗脱液，再用30％乙醇40～60ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加30％乙醇3～7ml使溶解，作为供试品溶液；S2：对照品溶液的制备：取特女贞苷对照品，加甲醇分别制成每1ml含0.5～1.4mg的溶液，作为对照品溶液；S3：测定法：照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》2020年版四部通则0502)试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各3～7μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(11～15∶5～9∶1～4)的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，将薄层板置碘缸中熏蒸，至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同黄色斑点。
优选的，双黄升白口服液的鉴别方法，所述的鉴别方法包括如下鉴别方法的任一种、或者任两种、或者全部：
(1)所述双黄升白口服液中黄芪的鉴别方法，是以黄芪甲苷对照品为对照的薄层色谱鉴别方法，包括以下步骤：S1：供试品溶液的制备：取8～12ml双黄升白口服液，加水饱和正丁醇振摇提取2～4次，每次35～55ml；合并正丁醇液，用氨试液充分洗涤1～3次，每次35～55ml；弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加4～6ml甲醇溶解，作为供试品溶液；S2：对照品溶液的制备：取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1mL含0.8～1.2mg的溶液，作为对照品溶液；S3：测定法：照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》2020年版四部通则0502)试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各3～6μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(12～15:6～8:1～3)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，样品日光下显相同的棕褐色斑点，紫外光灯(365nm)下显相同的橙黄色荧光斑点。
(2)所述双黄升白口服液中骨碎补的鉴别方法，是以柚皮苷对照品为对照的薄层色谱鉴别方法，包括以下步骤：S1：供试品溶液的制备：取双黄升白口服液9～11ml，加乙醚提取1～3次，每次15～25ml，弃去乙醚液；药液加乙酸乙酯提取1～3次，每次15～25ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇4～6ml使溶解，作为供试品溶液；S2：对照品溶液的制备：取柚皮苷对照品，加甲醇分别制成每1ml含0.8～1.2mg的溶液，作为对照品溶液；S3：测定法：照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》2020年版四部通则0502)试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各4-6μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲醇-丁酮-氯仿-水-甲酸(3～5∶5～7∶5～7∶0.8～1.2∶0.4～0.7)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同天蓝色的荧光斑点。
(3)所述双黄升白口服液中淫羊藿的鉴别方法，是以淫羊藿苷对照品为对照的薄层色谱鉴别方法，包括以下步骤：S1：供试品溶液的制备：取双黄升白口服液9～11ml，加乙醚提取1～3次，每次15～25ml，弃去乙醚液；药液加乙酸乙酯提取1～3次，每次18～22ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇4～6ml使溶解，作为供试品溶液；S2：对照品溶液的制备：取淫羊藿苷对照品，加甲醇分别制成每1ml含0.7～1.3mg的溶液，作为对照品溶液；S3：测定法：照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》2020年版四部通则0502)试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各4～6μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(12～14∶4～8∶1～3)的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在110℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同棕黄色的斑点。
(4)所述双黄升白口服液中女贞子的鉴别方法，是以特女贞苷对照品为对照的薄层色谱鉴别方法，包括以下步骤：S1：供试品溶液的制备：取双黄升白口服液9～11ml，通过内径1.5cm、柱高为12cm的D101型大孔吸附树脂柱，以水90～110ml洗脱，弃去水液，再用20％乙醇45～55ml洗脱，弃去洗脱液，再用30％乙醇45～55ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加30％乙醇4～6ml使溶解，作为供试品溶液；S2：对照品溶液的制备：取特女贞苷对照品，加甲醇分别制成每1ml含0.6～1.2mg的溶液，作为对照品溶液；S3：测定法：照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》2020年版四部通则0502)试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各4～6μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(12～14∶6～8∶1～3)的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，将薄层板置碘缸中熏蒸，至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同黄色斑点。
优选的，双黄升白口服液的鉴别方法，所述的鉴别方法包括如下鉴别方法的任一种、或者任两种、或者全部：
(1)所述双黄升白口服液中黄芪的鉴别方法，是以黄芪甲苷对照品为对照的薄层色谱鉴别方法，包括以下步骤：S1：取10ml双黄升白口服液，加水饱和正丁醇振摇提取3次，每次40ml；合并正丁醇液，再用氨试液充分洗涤2次，每次40ml；弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加5ml甲醇溶解，作为供试品溶液；S2：对照品溶液的制备：取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液；S3：测定法：照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》2020年版四部通则0502)试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(13:7:2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，样品日光下显相同的棕褐色斑点，紫外光灯(365nm)下显相同的橙黄色荧光斑点。
(2)所述双黄升白口服液中骨碎补的鉴别方法，是以柚皮苷对照品为对照的薄层色谱鉴别方法，包括以下步骤：S1：供试品溶液的制备：取双黄升白口服液10ml，加乙醚提取2次，每次20ml，弃去乙醚液；药液加乙酸乙酯提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液；S2：对照品溶液的制备：取柚皮苷对照品，加甲醇分别制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；S3：测定法：照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》2020年版四部通则0502)试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲醇-丁酮-氯仿-水-甲酸(4∶6∶6∶1∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同天蓝色的荧光斑点。
(3)所述双黄升白口服液中淫羊藿的鉴别方法，是以淫羊藿苷对照品为对照的薄层色谱鉴别方法，包括以下步骤：包括以下步骤：S1：供试品溶液的制备：取双黄升白口服液10ml，加乙醚提取2次，每次20ml，弃去乙醚液；药液加乙酸乙酯提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液；S2：对照品溶液的制备：取淫羊藿苷对照品，加甲醇分别制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；S3：测定法：照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》2020年版四部通则0502)试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(13∶7∶2)的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在110℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同棕黄色的斑点。
(4)所述双黄升白口服液中女贞子的鉴别方法，是以特女贞苷对照品为对照的薄层色谱鉴别方法，包括以下步骤：S1：供试品溶液的制备：取双黄升白口服液10ml，通过内径1.5cm、柱高为12cm的D101型大孔吸附树脂柱，以水100ml洗脱，弃去水液，再用20％乙醇50ml洗脱，弃去洗脱液，再用30％乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加30％乙醇5ml使溶解，作为供试品溶液；S2：对照品溶液的制备：取特女贞苷对照品，加甲醇分别制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；S3：测定法：照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》2020年版四部通则0502)试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各5μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(13∶7∶2)的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，将薄层板置碘缸中熏蒸，至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同黄色斑点。
有益效果：
本发明提供的双黄升口服液的鉴别方法，涉及制剂中四种药材的鉴别，有以下优点：
(1)黄芪的鉴别：是以黄芪中所含的化学成分黄芪甲苷为指标成分的鉴别。通过采用本发明所述的除杂提纯方法及选择合适比例试剂的薄层展开，由后续实施例1数据中可知取得了专属性强、重现性好、耐用性好地在双黄升白口服液中鉴别出黄芪的效果。
(2)骨碎补的鉴别：是以骨碎补中所含的化学成分柚皮苷为指标成分的鉴别。通过采用本发明所述的除杂除杂提纯方法及选择合适比例试剂的薄层展开，由后续实施例2数据中可知取得了专属性强、重现性好、耐用性好地在双黄升白口服液中鉴别出骨碎补的效果。
(3)淫羊藿的鉴别：是以淫羊藿所含的化学成分淫羊藿苷为指标成分的鉴别。通过采用本发明所述的除杂提纯方法及选择合适比例试剂的薄层展开，由后续实施例3数据中可知取得了专属性强、重现性好、耐用性好地在双黄升白口服液中鉴别出淫羊藿的效果。
(4)女贞子的鉴别：是以女贞子中所含的化学成分特女贞苷为指标成分的鉴别。通过采用本发明所述的除杂提纯方法及选择合适比例试剂的薄层展开，由后续实施例4数据中可知取得了取得了专属性强、重现性好、耐用性好地在双黄升白口服液中鉴别出女贞子的效果。
附图说明
附图是用来提供对本发明的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与下面的具体实施方式一起用于解释本发明，但并不构成对本发明的限制。
图1黄芪薄层色谱图(365nm荧光图)
图2黄芪薄层色谱图(日光图)
图3骨碎补薄层色谱图
图4淫羊藿薄层色谱图
图5女贞子薄层色谱图(碘缸显色)
图6女贞子薄层色谱图(荧光显色)
附图标记说明
1对照品；2样品1311011；3样品1311041；4样品1311061；5阴性；
具体实施方式
以下结合下述实施方式进一步说明本发明，下述实施方式仅用于说明本发明，而非限制本发明。
仪器与试药：
MS105DU、AL204电子天平(梅特勒公司)；ZF-20C暗箱式紫外分析仪(上海宝山顾村电光仪器厂)；KQ-100B型超声波清洗器(昆山超声仪器有限公司)；DHG-9070A型电热恒温鼓风干燥箱(上海精宏实验设备有限公司)。
黄芪甲苷由中国药品生物制品检定所提供(批号:110781-200613)，供含量测定用；特女贞苷由中国药品生物制品检定所提供(批号:111926-201203)，供含量测定用；淫羊藿苷由中国药品生物制品检定所提供(批号:110737-200415)，供含量测定用；柚皮苷由中国药品生物制品检定所提供(批号:110722-201111)，供含量测定用；D101型大孔树脂(南京南奥有限公司)；正丁醇、氨水、乙醚、乙酸乙酯、三氯甲烷、乙醇、甲醇等试剂(南京化学试剂有限公司)；薄层板(青岛海洋化工有限公司)。
取黄芪500g、黄精(酒)500g、女贞子(酒)250g、骨碎补(烫)500g、天花粉500g、淫羊藿250g，加12倍量水煎煮3次，每次1.5小时，滤过，合并滤液并浓缩至相对密度约为1.12～1.18(60℃)，加入乙醇使含醇量达到55％，冷藏(0℃～4℃)48小时，滤过，滤液调pH至7.0，减压回收乙醇并浓缩至相对密度为1.30～1.40(60℃)，加水稀释至900mL，调pH至4.5，冷藏(0℃～4℃)48小时，滤过，取1g甜菊素和80g木糖醇加水溶解，加入滤液中混匀，调节pH至7.5～8.0，加水调整总量至1000mL，搅匀，滤过，灌封，100℃灭菌30min，即得双黄升白口服。
实施例1
双黄升白口服液中黄芪的鉴别
供试品溶液的制备：取本品10ml，用水饱和正丁醇振摇提取3次，每次40ml，合并正丁醇液，用氨试液充分洗涤2次，每次40ml，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加5ml甲醇溶解，作为供试品溶液。
对照品溶液的制备：另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。
阴性对照溶液的制备：按供试品溶液制备方法，同法制得不含黄芪阴性对照溶液。
薄层层析：照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》2020年版四部通则0502)试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(13∶7∶2)的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。
结果：由图1和图2可以看出，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，样品日光下显相同的棕褐色斑点，紫外光灯(365nm)下显相同的橙黄色荧光斑点，而阴性无斑点。结果见表1。
表1双黄升白口服液黄芪鉴别试验结果
Figure BDA0003908079410000071
结论：经十批样品验证，该法鉴别制剂中黄芪专属性好，重现性好，阴性对照无干扰。
实施例2
双黄升白口服液中骨碎补的鉴别
供试品溶液的制备：取本品10ml，加乙醚提取2次，每次20ml，弃去乙醚液。药液加乙酸乙酯提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液。
对照品溶液的制备：另取柚皮苷对照品，加甲醇分别制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。
阴性对照溶液的制备：按供试品溶液制备方法，同法制得不含骨碎补阴性对照溶液。
薄层层析：照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》2020年版四部通则0502)试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲醇-丁酮-氯仿-水-甲酸(4∶6∶6∶1∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，置紫外光灯(365nm)下检视。
结果：由图3可以看出，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同天蓝色的荧光斑点，而阴性样品无此斑点。
结果见表2。
表2双黄升白口服液骨碎补鉴别试验结果
Figure BDA0003908079410000081
结论：经十批样品验证，该法鉴别制剂中骨碎补专属性好，重现性好，阴性对照无干扰。
实施例3
双黄升白口服液中淫羊藿的鉴别
供试品溶液的制备：取本品10ml，加乙醚提取2次，每次20ml，弃去乙醚液。药液加乙酸乙酯提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液。
对照品溶液的制备：另取淫羊藿苷对照品，加甲醇分别制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。
阴性对照溶液的制备：按供试品溶液制备方法，同法制得不含淫羊藿阴性对照溶液。
薄层层析：照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》2020年版四部通则0502)试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(13∶7∶2)的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在110℃加热至斑点显色清晰。
结果：由图4可以看出，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同棕黄色的斑点，而阴性无此斑点。
结果见表3
表3双黄升白口服液淫羊藿鉴别试验结果
Figure BDA0003908079410000091
结论：经十批样品验证，该法鉴别制剂中淫羊藿专属性好，重现性好，阴性对照无干扰。
实施例4
双黄升白口服液中女贞子的鉴别
供试品溶液的制备：取本品10ml，通过D101型大孔吸附树脂柱(内径1.5cm，柱高为12cm)，以水100ml洗脱，弃去水液，再用20％乙醇50ml洗脱，弃去洗脱液，继用30％乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加30％乙醇5ml使溶解，作为供试品溶液。
对照品溶液的制备：另取特女贞苷对照品，加甲醇分别制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。
阴性对照溶液的制备：按供试品溶液制备方法，同法制得不含女贞子阴性对照溶液。
薄层层析：照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》2020年版四部通则0502)试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(13∶7∶2)的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视，并将薄层板置碘缸中熏蒸。
结果：由图5和图6可以看出，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同褐色斑点，而阴性无此斑点。将薄层板置碘缸中熏蒸，至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同黄色斑点，而阴性无此斑点；综合比较发现采用碘缸显色更为清晰明显。
结果见表4。
表4双黄升白口服液女贞子鉴别试验结果
Figure BDA0003908079410000092
Figure BDA0003908079410000101
结论：经十批样品验证，该法鉴别制剂中女贞子的专属性好，重现性好，阴性对照无干扰。
以上所述仅为本发明的较佳实施方式，本发明的保护范围并不以上述实施方式为限，但凡本领域普通技术人员根据本发明所揭示内容所作的等效修饰或变化，皆应纳入权利要求书中记载的保护范围内。

Claims (9)

1.双黄升白口服液的鉴别方法，其特征在于，所述的鉴别方法包括如下鉴别方法的任一种、或者任两种、或者任三种或者全部：
(1)所述双黄升白口服液中黄芪的鉴别方法，是以黄芪甲苷对照品为对照的薄层色谱鉴别方法，包括以下步骤：S1：供试品溶液的制备：取双黄升白口服液，加水饱和正丁醇振摇提取，合并正丁醇液，洗涤、蒸干，残渣加甲醇溶解，作为供试品溶液；S2：对照品溶液的制备：取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.5～2mg的溶液，作为对照品溶液；S3：测定法：照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各2～7μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为11～16:5～9:1～4的三氯甲烷-甲醇-水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，样品日光下显相同的棕褐色斑点，在紫外光灯365nm下显相同的橙黄色荧光斑点。
(2)所述双黄升白口服液中骨碎补的鉴别方法，是以柚皮苷对照品为对照的薄层色谱鉴别方法，包括以下步骤：S1：供试品溶液的制备：取双黄升白口服液8～12ml，加乙醚提取1～4次，每次13～26ml，弃去乙醚液；药液加乙酸乙酯提取1～4次，每次12～26ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇3～7ml使溶解，作为供试品溶液；S2：对照品溶液的制备：取柚皮苷对照品，加甲醇分别制成每1ml含0.7～1.4mg的溶液，作为对照品溶液；S3：测定法：照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各3～7μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为4～6∶4～8∶4～8∶0.5～1.5∶0.3～0.8的甲醇-丁酮-氯仿-水-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，置紫外光灯，在波长365nm下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同天蓝色的荧光斑点。
(3)所述双黄升白口服液中淫羊藿的鉴别方法，是以淫羊藿苷对照品为对照的薄层色谱鉴别方法，包括以下步骤：S1：供试品溶液的制备：取双黄升白口服液8～12ml，加乙醚提取1～4次，每次14～28ml，弃去乙醚液；药液加乙酸乙酯提取1～4次，每次15～24ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇3～7ml使溶解，作为供试品溶液；S2：对照品溶液的制备：取淫羊藿苷对照品，加甲醇分别制成每1ml含0.5～1.5mg的溶液，作为对照品溶液；S3：测定法：照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各3～7μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为11～15∶3～9∶1～4的三氯甲烷-甲醇-水的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在110℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同棕黄色的斑点。
(4)所述双黄升白口服液中女贞子的鉴别方法，是以特女贞苷对照品为对照的薄层色谱鉴别方法，包括以下步骤：S1：供试品溶液的制备：取双黄升白口服液8～12ml，通过内径1.5cm、柱高为12cm的D101型大孔吸附树脂柱，以水85～115ml洗脱，弃去水液，再用20％乙醇40～60ml洗脱，弃去洗脱液，再用30％乙醇40～60ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加30％乙醇3～7ml使溶解，作为供试品溶液；S2：对照品溶液的制备：取特女贞苷对照品，加甲醇分别制成每1ml含0.5～1.4mg的溶液，作为对照品溶液；S3：测定法：照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各3～7μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以体积比为11～15∶5～9∶1～4的三氯甲烷-甲醇-水的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，将薄层板置碘缸中熏蒸，至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同黄色斑点。
2.根据权利要求1所述双黄升白口服液的鉴别方法，其特征在于，所述双黄升白口服液中黄芪的鉴别方法，包括以下步骤：S1：供试品溶液的制备：取8～12ml双黄升白口服液，加水饱和正丁醇振摇提取2～4次，每次35～55ml；合并正丁醇液，用氨试液充分洗涤1～3次，每次35～55ml；弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加4～6ml甲醇溶解，作为供试品溶液；S2：对照品溶液的制备：取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1mL含0.8～1.2mg的溶液，作为对照品溶液；S3：测定法：照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各3～6μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为12～15:6～8:1～3的三氯甲烷-甲醇-水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，样品日光下显相同的棕褐色斑点，在紫外光灯365nm下显相同的橙黄色荧光斑点。
3.根据权利要求2所述双黄升白口服液的鉴别方法，其特征在于，所述双黄升白口服液中黄芪的鉴别方法，包括以下步骤：S1：取10ml双黄升白口服液，加水饱和正丁醇振摇提取3次，每次40ml；合并正丁醇液，再用氨试液充分洗涤2次，每次40ml；弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加5ml甲醇溶解，作为供试品溶液；S2：对照品溶液的制备：取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液；S3：测定法：照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为13:7:2的三氯甲烷-甲醇-水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，样品日光下显相同的棕褐色斑点，在紫外光灯365nm下显相同的橙黄色荧光斑点。
4.根据权利要求1所述双黄升白口服液的鉴别方法，其特征在于，所述双黄升白口服液中骨碎补的鉴别方法，包括以下步骤：S1：供试品溶液的制备：取双黄升白口服液9～11ml，加乙醚提取1～3次，每次15～25ml，弃去乙醚液；药液加乙酸乙酯提取1～3次，每次15～25ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇4～6ml使溶解，作为供试品溶液；S2：对照品溶液的制备：取柚皮苷对照品，加甲醇分别制成每1ml含0.8～1.2mg的溶液，作为对照品溶液；S3：测定法：照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各4～6μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为3～5∶5～7∶5～7∶0.8～1.2∶0.4～0.7的甲醇-丁酮-氯仿-水-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同天蓝色的荧光斑点。
5.根据权利要求4所述双黄升白口服液的鉴别方法，其特征在于，所述双黄升白口服液中骨碎补的鉴别方法，包括以下步骤：S1：供试品溶液的制备：取双黄升白口服液10ml，加乙醚提取2次，每次20ml，弃去乙醚液；药液加乙酸乙酯提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液；S2：对照品溶液的制备：取柚皮苷对照品，加甲醇分别制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；S3：测定法：照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比4∶6∶6∶1∶0.5为甲醇-丁酮-氯仿-水-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同天蓝色的荧光斑点。
6.根据权利要求1所述双黄升白口服液的鉴别方法，其特征在于，所述双黄升白口服液中淫羊藿的鉴别方法，包括以下步骤：S1：供试品溶液的制备：取双黄升白口服液9～11ml，加乙醚提取1～3次，每次15～25ml，弃去乙醚液；药液加乙酸乙酯提取1～3次，每次18～22ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇4～6ml使溶解，作为供试品溶液；S2：对照品溶液的制备：取淫羊藿苷对照品，加甲醇分别制成每1ml含0.7～1.3mg的溶液，作为对照品溶液；S3：测定法：照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各4～6μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为12～14∶4～8∶1～3的三氯甲烷-甲醇-水的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在110℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同棕黄色的斑点。
7.根据权利要求6所述双黄升白口服液的鉴别方法，其特征在于，所述双黄升白口服液中淫羊藿的鉴别方法，包括以下步骤：S1：供试品溶液的制备：取双黄升白口服液10ml，加乙醚提取2次，每次20ml，弃去乙醚液；药液加乙酸乙酯提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液；S2：对照品溶液的制备：取淫羊藿苷对照品，加甲醇分别制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；S3：测定法：照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为13∶7∶2的三氯甲烷-甲醇-水的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在110℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同棕黄色的斑点。
8.根据权利要求1所述双黄升白口服液的鉴别方法，其特征在于，所述双黄升白口服液中女贞子的鉴别方法，包括以下步骤：S1：供试品溶液的制备：取双黄升白口服液9～11ml，通过内径1.5cm、柱高为12cm的D101型大孔吸附树脂柱，以水90～110ml洗脱，弃去水液，再用20％乙醇45～55ml洗脱，弃去洗脱液，再用30％乙醇45～55ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加30％乙醇4～6ml使溶解，作为供试品溶液；S2：对照品溶液的制备：取特女贞苷对照品，加甲醇分别制成每1ml含0.6～1.2mg的溶液，作为对照品溶液；S3：测定法：照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各4～6μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以体积比为的三氯甲烷-甲醇-水的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，将薄层板置碘缸中熏蒸，至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同黄色斑点。
9.根据权利要求8所述双黄升白口服液的鉴别方法，其特征在于，所述双黄升白口服液中女贞子的鉴别方法，包括以下步骤：S1：供试品溶液的制备：取双黄升白口服液10ml，通过内径1.5cm、柱高为12cm的D101型大孔吸附树脂柱，以水100ml洗脱，弃去水液，再用20％乙醇50ml洗脱，弃去洗脱液，再用30％乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加30％乙醇5ml使溶解，作为供试品溶液；S2：对照品溶液的制备：取特女贞苷对照品，加甲醇分别制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；S3：测定法：照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各5μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以体积比为13∶7∶2三氯甲烷-甲醇-水的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，将薄层板置碘缸中熏蒸，至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同黄色斑点。
CN202211313621.6A 2022-10-25 2022-10-25 双黄升白口服液的鉴别方法 Pending CN115561381A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202211313621.6A CN115561381A (zh) 2022-10-25 2022-10-25 双黄升白口服液的鉴别方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202211313621.6A CN115561381A (zh) 2022-10-25 2022-10-25 双黄升白口服液的鉴别方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN115561381A true CN115561381A (zh) 2023-01-03

Family

ID=84746127

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202211313621.6A Pending CN115561381A (zh) 2022-10-25 2022-10-25 双黄升白口服液的鉴别方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN115561381A (zh)

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN111044624B (zh) 中药制剂的质量检测方法
CN110320311B (zh) 一种杜仲壮骨丸的质量检测方法
CN113759034B (zh) 麦门冬汤物质基准的建立方法
CN100467015C (zh) 一种治疗肾气虚证的药物组合物及其制备方法
CN103344737A (zh) 一种治疗鼻窦炎的中药片剂的质量控制方法
CN108445139B (zh) 一种治疗滑膜炎的中药制剂的鉴别方法
CN116338073B (zh) 一种芪蛭益肾胶囊的薄层色谱检测方法
CN112485363A (zh) 强身酒中党参的鉴别方法
CN114942297B (zh) 用于桃红四物汤薄层鉴别方法的展开剂及薄层鉴别方法
CN100500193C (zh) 六味地黄汤提取物，其药物组合物及其医药用途
CN115561381A (zh) 双黄升白口服液的鉴别方法
CN112730724B (zh) 一种白前配方颗粒的薄层鉴别方法
CN112083097B (zh) 一种同时鉴别阿魏酸、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、橙皮苷的薄层鉴别方法
CN114432415A (zh) 一种旋覆代赭汤配方颗粒的制备工艺及其质量控制方法
CN114814069B (zh) 桂枝芍药知母汤全方9药味中8个药味的薄层鉴别方法
CN115166066B (zh) 芪珠升白口服液的质量评价方法
CN114689783B (zh) 一种苓桂术甘汤冻干粉快速薄层鉴别方法
CN111398471B (zh) 一种槐芩软膏的鉴别方法
CN111693641B (zh) 一种仁术健胃颗粒的薄层鉴别的方法
CN113295816B (zh) 一种颐和春制剂的薄层色谱检测方法
CN115508495B (zh) 一种桃红四物汤中燀桃仁的鉴别方法
CN101703728A (zh) 一种温胃舒胶囊的质量检测方法
CN114894952A (zh) 一种当归建中汤全方六药味的薄层鉴别方法
CN112858494A (zh) 黄芪建中丸质量标准及其检验方法
CN117517494A (zh) 一种中成药滇女金丸的质量控制检测方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination