CN115515654A

CN115515654A - 包含氧化纤维素的组合物

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Publication number: CN115515654A
Application number: CN202180033290.8A
Authority: CN
Inventors: E·伊兰; O·法因戈尔德; E·蒙蒂亚
Original assignee: Omrix Biopharmaceuticals Ltd
Current assignee: Omrix Biopharmaceuticals Ltd
Priority date: 2018-11-01
Filing date: 2021-05-03
Publication date: 2022-12-23
Also published as: IL262716A; US20200261492A1; EP4146294A1; CN112969481A; JP2023524137A; KR20210089694A; BR112021008297A2; EP3873548B1; JP2022509912A; EP4327840A2; WO2020089883A3; EP3873548A2; MX2021005146A; CA3117353A1; EP3873548C0; ES2967597T3; AU2019373895A1; CO2021005679A2; WO2020089883A2; US20200139021A1

Abstract

本发明公开了组合物，该组合物由呈粉末形式的氧化纤维素(OC)构成，其中OC的羧基含量为约9重量％至约18重量％。任选地，粉末呈聚集形式。还公开了组合物用于在存在出血的情况下防止组织粘连的用途。

Description

包含氧化纤维素的组合物

技术领域

本发明尤其涉及氧化纤维素粉末，以及使用该氧化纤维素粉末以用于在出血部位处防止粘连。

背景技术

在外科手术期间的各种情况下，治疗剂铺展在人体内，以防止外科手术后出血或粘连。现有药剂具有例如片剂难以置于微创外科手术(MIS)中的缺点。

在外科手术中，防止粘连和控制出血对于使失血最小化、减少手术后并发症和缩短手术室中外科手术的持续时间是至关重要和关键的。

对于用于控制出血和/或粘连的适当方法或产品的选择取决于许多因素，包括但不限于出血的严重程度、来源的解剖学定位和相邻关键结构的邻近程度、出血是离散来源的还是来自更广泛的表面区域、可见性、以及来源的精确识别和来源的接触性。

可商购获得几种产品以用于防止粘连形成。一些粘连屏障基于氧化纤维素(OC)诸如氧化再生纤维素(ORC)、改性糖和改性淀粉。

为了解决上述问题，已开发出用于防止粘连并控制过量出血的材料。局部可吸收止血剂(TAH)广泛用于外科应用中。TAH涵盖基于OC、明胶、胶原、甲壳质、脱乙酰壳多糖等的产品。为了改善止血性能，可将基于上述材料的支架与生物来源的凝血因子(诸如凝血酶和纤维蛋白原)组合。

由于其生物降解能力以及其杀菌和止血特性，基于OC的材料诸如ORC长期以来被用作局部止血剂。基于ORC的产品被用于多种外科手术中，包括：神经外科手术、腹部外科手术、心血管外科手术、胸外科手术、头颈外科手术、骨盆外科手术、妇科外科手术以及皮肤和皮下组织手术。用于基于OC材料形成各种类型的止血剂的若干方法是已知的，而无论止血剂被制成粉末、织造、非织造、针织和其他形式。目前使用的止血剂包括粉末或包含ORC的织物。

需要尤其是在出血部位和难以到达的区域中便于应用的改善形式和材料。

US9447196B2公开了一种用于溶解改性纤维素的方法，该方法包括使改性纤维素溶液与至少一种非溶剂接触以形成多个改性纤维素颗粒。

US9572907描述了含有聚合物膜层的植入式医疗装置，该聚合物膜层含有甘油和至少一种生物聚合物。

EP3258974描述了一种止血组合物，该止血组合物包含保水剂、粘结型抑尘剂、无机和有机止血剂。

US6627749公开了一种以高收率(75％-95％)和不同氧化水平(羧基含量<25.6％，w/w)制备氧化纤维素的受控化学方法，该氧化纤维素适于用作药物、化学品和生物大分子的固定基质或载体。

US20060008505公开了一种用于止血材料的递送系统，该递送系统包括生物粘合剂(尤其是果胶)和甘油增塑剂的自粘合带。

WO2013049049公开了一种防粘连织物，该防粘连织物具有第一可吸收氧化再生纤维素非织造织物和第二可吸收氧化再生纤维素织造或针织织物；以及防粘连织物，该防粘连织物用于在存在血液的情况下防止粘连。

INTERCEED(Johnson&Johnson Patient Care Inc.,New Brunswick,NJ)是一种可吸收的织物，其专门设计用于减少手术后粘连(FERTILITY AND STERILITY，第51卷，第6期，1989年6月，INTERCEED(TC7)Adhesion Barrier Study Group)。

发明内容

本发明尤其涉及组合物，该组合物包含呈粉末形式的氧化纤维素(OC)(例如氧化再生纤维素(ORC))，其中OC的羧基含量在约9重量％至约21重量％的范围内；以及使用其以用于在出血部位处防止粘连。

本发明尤其基于以下意外发现，即，即使在存在血液的情况下，呈粉末形式的氧化OC例如ORC也可有效防止粘连。OC的羧基含量可以等于或低于21重量％，例如至多18重量％。这一发现是令人惊讶的，因为先前报道INTERCEED在存在出血的情况下在防止粘连方面的有效性受限制。

在一个方面，提供了一种组合物，该组合物包含呈粉末形式的氧化纤维素(OC)，其中OC的羧基含量为约9重量％至约21重量％。在一些实施方案中，OC的羧基含量等于或低于18重量％。在一些实施方案中，组合物用作出血部位中的防粘连材料。在一些实施方案中，粉末呈聚集形式(即，呈一种或多种聚集体的形式)。在一些实施方案中，粉末包括经研磨的OC或ORC。

在一些实施方案中，粉末呈聚集形式，OC包括ORC，并且OC或ORC的羧基含量等于或低于18重量％。

在一些实施方案中，至少90％的粉末的粒度在10μm至2,000μm，任选地50μm至300μm的范围内。

在一些实施方案中，其任何实施方案中的组合物的特征在于与具有相同羧基含量或由相同羧基含量组成的OC织物相比，防粘连效能为至少120％。在一些实施方案中，粉末经γ辐照。

在一些实施方案中，OC包括呈压实粉末形式的ORC，任选地包括具有约1至约18的平均纵横比的颗粒。

在一些实施方案中，粉末具有1.75微米至116微米的平均粒度与约36微米的中值大小。在一些实施方案中，压实的ORC粉末是经辊压实加工的ORC粉末和/或经锤磨机加工的ORC粉末。在一些实施方案中，将ORC的聚集体(例如通过研磨制成)压实。

在一些实施方案中，组合物还包含添加剂，其中添加剂可以包括羧甲基纤维素(CMC)或其他多糖、钙盐、抗感染剂、止血促进剂、明胶、胶原或它们的组合。

在一些实施方案中，组合物呈微粒聚集体的形式，其中OC形成呈聚集体形式的互连的单独纤维素原纤维，该互连的单独纤维素原纤维具有至少0.6的球度、沿其最长轴线小于约500微米且大于约50微米的尺寸。在一些实施方案中，聚集体具有其中D15大于约80微米、D50为约140微米至250微米、D90小于约370微米、堆积密度大于0.45g/mL并且/或者球度(sh50)等于或大于0.7的大小分布特性。

在另一方面，提供了一种试剂盒，该试剂盒包括：a.容器，该容器容纳本发明在其任何实施方案中的组合物；b.施用装置，该施用装置用于将组合物施用于组织；以及c.任选地，使用说明。

在一些实施方案中，容器包括在施用装置中。

在另一方面，提供了一种用于防止组织粘连的方法，该方法包括将其任何实施方案中的所公开的组合物施用到出血组织中/上。在此方面的一些实施方案中，OC包括ORC。

所谓“防止组织粘连”意指涵盖防止组织内的组织粘连(已在该组织上施用组合物)或防止邻近组织的组织粘连，其中血液存在于这些组织中的一个或两个中。

在任何方面的一些实施方案中，ORC的羧基含量等于或低于18％。

在一些实施方案中，组合物还包含至少一种生物活性剂。在任何方面的一些实施方案中，至少一种生物活性剂为钙或包括钙。在任何方面的一些实施方案中，组合物还包含一种或多种赋形剂，该一种或多种赋形剂选自由以下项组成的组：氯化钠、甘露糖醇、白蛋白和乙酸钠。

在任何方面的一些实施方案中，OC粉末包括ORC粉末。

通常，粉末是细分状态的物质，诸如微粒物质。粉末可以是固体颗粒的松散集合或聚集体，通常但不排除小于1000微米。

可以用于制备粉末的可吸收氧化再生纤维素织物是针织的，并且包括但不限于购自Ethicon,Inc.,Somerville,NJ的分部Johnson&Johnson Wound Management的INTERCEED。

可吸收氧化再生纤维素非织造、织造或针织织物可用于制备粉末。此类织物例如在美国专利4,626,253、5,002,551和5,007,916中有所描述，这些专利的内容据此如同全文列出一样以引用方式并入本文。

在任何方面的一些实施方案中，为了实现防粘连，例如根据美国药典(USP)23-NF18，OC的羧基含量等于或低于18％。

在全文中，OC的羧基含量为重量％。

可通过向易于形成粘连的受试者施用化合物来实现防止。

在一些实施方案中，根据美国药典(USP)23-NF18，OC(或ORC)的羧基含量等于或高于9％并且等于或低于18％或低于21％。在一些实施方案中，根据美国药典(USP)23-NF18，OC(或ORC)的羧基含量等于或高于3％并且等于或低于18％或低于21％。

在一些实施方案中，根据美国药典(USP)23-NF18，OC(或ORC)的羧基含量等于或高于9％并且等于或低于18％。

在一些实施方案中，根据美国药典(USP)23-NF18，OC(或ORC)的羧基含量等于或高于12％并且等于或低于18％。

合适的ORC织物包括可吸收粘连屏障，诸如但不限于购自Ethicon,Inc.,Somerville,N.J.的INTERCEED可吸收粘连屏障。

在任何方面的一些实施方案中，织物是由有光人造丝纱线构造的经编特里科织物，其随后被氧化以包含能够有效地为织物提供生物降解能力的量的羧基或醛部分。可以通过使纤维素与二氧化氮在全氟化碳溶剂中的溶液反应而使织物被氧化，如F.Boardman等人在美国专利5,180,398中所述。在一个实施方案中，羧基含量(“氧化度”)在约9％至约21％(重量/重量)的范围内。在另一个实施方案中，羧基含量在约12％至约18％(重量/重量)的范围内。在另一个实施方案中，氧化再生纤维素氧化度在约9.5％至约10.5％(重量/重量)的范围内。在一些实施方案中，根据美国药典(USP)23-NF18，氧化度为约9％至约21％(重量/重量)。在一些实施方案中，根据美国药典(USP)23-NF18，氧化度为约9％至约18％(重量/重量)。

在任何方面的一些实施方案中，根据美国药典(USP)23-NF18，OC粉末的羧基含量等于或高于9％。在任何方面的一些实施方案中，根据美国药典(USP)23-NF18，OC粉末的羧基含量等于或高于9％并且等于或低于18％(重量/重量)。在任何方面的一些实施方案中，OC粉末的羧基含量等于或高于12％。在任何方面的一些实施方案中，根据美国药典(USP)23-NF18，OC粉末的羧基含量等于或高于12％并且等于或低于18％(重量/重量)。在一个实施方案中，羧基含量(氧化度)在约9％至约21％(重量/重量)的范围内。在另一个实施方案中，氧化度在约12％至约18％(重量/重量)的范围内。

在另一个实施方案中，氧化再生纤维素织造织物具有在约9.5％至约10.5％范围内的氧化度。在一些实施方案中，根据美国药典(USP)23-NF18，OC的羧基含量为约9％至约21％。

在任何方面的一些实施方案中，根据美国药典(USP)23-NF18，OC的羧基含量为约9％至约21％。在一些实施方案中，OC的羧基含量为约18％至约21％。

在任何方面的一些实施方案中，组合物用作防粘连材料。

在任何方面的一些实施方案中，其中OC的羧基含量为约18％至约21％的组合物用于防止出血部位例如软组织中的粘连。在任何方面的一些实施方案中，其中OC的羧基含量为约12％至约18％的组合物用于防止出血部位例如软组织中的粘连。可以通过在出血组织中例如伤口中或邻近出血组织施用其实施方案中的组合物来实现防粘连。

在任何方面的一些实施方案中，OC粉末的粒度介于10μm与2,000μm之间，任选地介于50μm与300μm之间。在一些实施方案中，粉末中OC的羧基含量为约12％至约21％。在一些实施方案中，粉末中OC的羧基含量为约18％至约21％。在一些实施方案中，粉末中OC的羧基含量为约12％至约18％。在一些实施方案中，OC的羧基含量为约12％至约21％，并且组合物在选自由以下项组成的组中的一个或多个温度值下不能流动：10℃、15℃、20℃、25℃、30℃、35℃、37℃和40℃。

在任何方面的一些实施方案中，组合物的总水含量低于约8％w/w。

在任何方面的一些实施方案中，全文公开的组合物是一种用于出血部位中的防粘连粉末，该防粘连粉末包括羧基含量等于低于18％(按重量计)(例如9％、10％、11％、12％、13％、14％、15％、16％、17％或18％，包括其间的任何值和范围)的OC，其特征在于与具有相似羧基含量或由相似羧基含量组成的OC织物相比，防粘连效能为至少120％或至少150％。在本文中，所谓相似的意指相同或±10％。在一些实施方案中，粉末是辐射粉末，例如γ辐射粉末。

在任何方面的一个实施方案中，用于出血部位中的防粘连粉末包括呈聚集形式的经研磨的OC(例如，ORC)。在一些实施方案中，根据美国药典(USP)23-NF18，用于出血部位中的具有聚集形式的经研磨的OC中的OC粉末的羧基含量等于或高于9％并且等于或低于18％(按重量计)。在一些实施方案中，根据美国药典(USP)23-NF18，用于出血部位中的具有聚集形式的经研磨的OC中的OC粉末的羧基含量等于或高于9％并且等于或低于18％(按重量计)。在一些实施方案中，根据美国药典(USP)23-NF18，用于出血部位中的具有聚集形式的经研磨的OC中的OC粉末的羧基含量等于或高于12％并且等于或低于18％(按重量计)。

术语“出血部位”还涵盖其中出血不一定源自该部位而是来自其他部位或来源的情况，诸如可以例如与其邻近的组织。因此，术语“在出血部位中”和“在存在血液的情况下”在全文可互换使用。

可吸收氧化再生纤维素非织造、织造或针织织物可用于制备粉末。

除非另有定义，否则本文所用的所有技术和/或科学术语均具有与本发明所属领域的普通技术人员通常理解的相同的含义。尽管类似于或等同于本文所述那些的方法和材料可用于本发明的实施方案的操作或试验，但下文描述的是示例性方法和材料。如发生矛盾，应以专利说明书及其定义为准。另外，材料、方法和示例仅为示例性的，而非旨在进行必需的限制。

附图说明

本文仅以举例的方式结合附图来描述本发明的一些实施方案。现在具体参考附图，需要强调的是，所示的细节是以举例的方式并且出于例示性讨论本发明的实施方案的目的。就这一点而言，结合附图进行的描述使本领域的技术人员明白如何实践本发明的实施方案。

图1呈现了示出用包含

ORC和甘油的组合物处理的大鼠盲肠磨损模型中的粘连强烈度的图。左至右：未处理、

粉末(被压制成小颗粒剂的经研磨/碾磨的ORC)，n＝6。

具体实施方式

本发明的目的是提供一种用作防粘连材料的包含例如氧化纤维素(OC)的组合物，该组合物可容易地施用于有需要的出血部位，尤其是在身体的难以到达的区域中。本发明的组合物的另一个优点是它们是可生物吸收的，因此可在外科手术后留下而不会引起任何副作用。

因此，本发明基于以下令人惊讶的发现，即，一定范围的氧化度下的OC粉末可以被施用于有需要的部位以便获得生物活性，诸如防粘连。

所谓“施用于有需要的部位”意指例如在该部位处(例如在组织的出血手术部位处)或与其邻近处局部施用组合物，以防止粘连。

参考图1，其示出了使用1-

织物、2-被压制成小颗粒剂的经研磨/碾磨的INTERCEED(INTERCEED粉末)在大鼠盲肠磨损模型中测试的防粘连比较。发现，INTERCEED粉末在出血部位处表现出优于INTERCEED片材或与之相当的防粘连活性。还值得注意的是，与INTERCEED织物相比，经γ辐射的INTERCEED聚集粉末表现出约135％的防粘连效能。

呈聚集体形式的INTERCEED粉末在本文中也称为：呈聚集形式的经研磨/碾磨的INTERCEED、被压制成小颗粒剂的经研磨/碾磨的INTERCEED、压实的INTERCEED粉末，以及以聚集体形式压实的INTERCEED。

呈聚集体形式的INTERCEED粉末可通过美国专利9,539,358的实施例中所述的方法生成。氧化再生纤维素(ORC)是可以代替

片材(Ethicon)使用的

片材(Ethicon)中的基体材料。呈聚集体形式的INTERCEED粉末可经受20千戈瑞-45千戈瑞的γ辐射(例如，通过Sorvan Radiation LTD技术)以提供无菌性。

如本文所用，并且除非另行指出，否则术语“按重量计”、“w/w”、“重量百分比”或“重量％”在本文中可互换使用，它们描述特定物质在相应混合物、溶液、制剂或组合物的总重量中的浓度。

如本文所用，术语“出血”是指血液从循环系统的任何组分外渗。因此“出血”涵盖与外科手术、创伤或其他形式的组织损伤有关的非期望、非受控且通常过多的出血以及患有出血性疾病的患者中的非期望的出血。

如本文所用，术语“粘连”或“组织粘连”是指通常不连接的组织的连接。例如，粘连可作为术后并发症发生。

如本文所用，术语“控制”、“防止”或“减少”(它们在本文中在组织粘连的上下文中可互换使用，包括其任何语法变化)表示完全或部分地防止组织粘连的形成，或者例如根据实施例部分中所述的根据Poehnert等人，2015,International Journal of MedicalSciences 12(1):1-6的粘连评估方案，粘连的严重程度降低。

所谓“室温左右”意指在10℃至40℃或15℃至37℃范围内的至少一个温度值，例如10℃、15℃、20℃、25℃、30℃、35℃、37℃或40℃，包括其间的任何值。

非限制性示例性粉末包括包含ORC纤维和/或颗粒剂(也称为“颗粒化ORC”)的固体颗粒。

如本文所用，所谓“均质”意指整体上均匀的组成和质地。

术语“氧化纤维素”(或“OC”)是指其中例如葡糖酐单元的碳6上的至少一些伯醇基团被氧化成羧酸并且任选地被官能化的纤维素衍生物。

可通过在纤维素上施加氧化剂来制备OC。氧化剂可选自但不限于氯、过氧化氢、过乙酸、二氧化氯、二氧化氮、过硫酸盐、高锰酸盐、重铬酸盐-硫酸、次氯酸、次卤酸盐、高碘酸盐、或它们的任何组合、和/或多种金属催化剂。根据氧化剂的性质和反应条件，作为原料纤维素的初始羟基基团的替代或补充，氧化纤维素还可包含羧酸、醛和/或酮基团。

用于本发明的组合物中的OC通常但非排他性地呈粉末的形式(也称为颗粒化OC、经研磨/碾磨的OC或呈聚集形式的经研磨/碾磨的OC)。经研磨/碾磨的OC可通过各种方法制备，包括由现有产品制备，并且此类产品的一些非限制性示例如下文所述。由于现有产品中的一些产品呈织物的形式，因此可通过碾磨或研磨织物以获得粉末来制备OC粉末。例如，经研磨的OC(或ORC)可以通过借助于研磨减小OC片材诸如

或

片材的大小来获得，如公开了制备包含ORC球磨粉末(BMP)的压实粉末的美国专利9,539,358中所述。

因此，在一些非限制性示例性实施方案中，在研磨之前，可将若干片4"×4"预修剪的非无菌INTERCEED织物(ETHICON,Inc.，批号7A8654)真空干燥24小时。可将6克样品与12个高密度ZrO₂球(直径为20mm；Glen Mills Inc.,Clifton,N.J.,USA)混合并密封在250mL碾磨罐中。可将罐夹到闩锁支架中，并且然后在研磨机(行星式球磨机PM100；Retsch,Inc.,Newtown,Pa.,USA)上进行平衡。研磨可以300rpm进行10分钟。然后可将经研磨的粉末在具有真空泵(LabCare America Pump PV-35)的真空炉(Fisher Scientific 280A型Isotemp真空炉)中于65℃干燥2.5小时。经研磨的粉末可最终储存在氮气箱中。可使用与上文类似的方法制备具有基于ORC的

可吸收止血剂的粉末。可使用通过配备有筛网1726-150的Fitz研磨机切碎的ORC来制备经辊压实的ORC粉末。可将切碎的ORC粉末进料到辊压机(WP 120x 40V，#900-0071，Alexanderwerk,Inc,PA)中并如美国专利9,539,358中所述压实。

此外或另选地，任选地使用例如如美国专利10,034,957中所述的干燥、研磨/碾磨和筛分的步骤，将包含纤维和任选的其他化合物的根据本发明的粉末组合物压实成聚集体的形式。所用的筛限定粉末的粒度。

因此，如美国专利10,034,957中所述，在研磨步骤之前，可以进行裁切和切割纤维素源材料从而形成片的步骤。研磨步骤可为两部分过程，其中第二部分在空气分级机中进行，其中第二部分可重复三次。通过此过程产生的中间细纤维可以具有其中D50小于约100微米并且D90小于约180微米的大小分布。中间细纤维可以加湿至水含量介于11.0重量％与20重量％之间。中间细纤维可为经辊压实的材料，并且然后可经受预破裂并且随后进行最终研磨的步骤。中间细纤维可以在至少130巴的辊压下压实。中间细纤维可以在至少26.0kN/cm的辊力下压实。所得材料可以是具有通过筛分方法沿其最长轴线75μm-300μm的尺寸的聚集体级分。在一些实施方案中，聚集体级分的特征在于大小分布，使得D15大于约80微米，D50为约140微米至250微米，并且D90小于约370微米。如全文所述，源材料可以选自ORC织物、ORC非织造织物、切碎的ORC材料或它们的组合。源材料还可包括选自但不限于羧甲基纤维素、钙盐、抗感染剂、胶凝剂、明胶、胶原或它们的组合的添加剂或活性剂。

在一些实施方案中，一种用于制造本发明止血聚集体的方法包括以下步骤：a)裁切和切割纤维素源材料；b)研磨来自步骤a)的所得材料；c)在空气分级机中的第二研磨步骤；d)加湿；e)辊压实；f)筛分；g)除湿或干燥；h)任选地定量添加到储存容器中或递送装置、初级包装和次级包装中；以及i)任选的灭菌。

可进行裁切和切割以将织物裁切并切割成大约1英寸×3英寸或2英寸×3英寸之间的适当大小的片，尽管还可使用更小的片。进行裁切和切割的主要操作是退绕织物辊、将织物裁切成条、将条切割成一定大小并将切割的片递送到第一研磨步骤中。许多切割和裁切机器是已知的并且可商购获得，诸如但不限于购自AZCO的AZCO型号FTW-1000。

在一些实施方案中，在第一研磨步骤中，将纤维素织物的加工片从裁切和切割步骤中产生的中间粗纤维转化为D90值小于452μm且D50值小于218μm的材料，同时对材料的颜色指数和水溶性含量具有最小影响。用于研磨的许多机器可商购获得，诸如但不限于由Fitzpatrick制造的型号DASO6和WJ-RS-D6A，它们是锤磨机型研磨机器，配备有497微米圆形筛和一组刀片，该组刀片将织物分解直到该织物通过筛以产生中间粗纤维素纤维。在示例性加工运行中，研磨速度可为约7000RPM；加工温度低于80℃；筛大小介于1534与9004之间；刀片数量为8(每个刀片2个叶轮)；刀片类型为225刀，冲击型刀片；刀片取向设置为“冲击”。来自第一研磨步骤的中间粗纤维可以受控速率进料到第二研磨机中并且通过两个由研磨筛分开的研磨室。材料可通过鼓风机被拉动穿过研磨室。可使中间粗纤维通过空气分级机设备三次进行加工以便获得所需大小。在第二研磨步骤结束时，可收集中间细纤维。

在示例性加工运行中，Quadro空气分级机F10可用于第二研磨步骤中，使用8400rpm的研磨速度、1800rpm的鼓风机速度、0.0018"的圆孔筛，并且通过3次。ORC中间细纤维也可通过球磨在一个步骤而不是如上所述的两个步骤(研磨步骤)中产生。在另选的球磨实施方案中，将50g预切割的ORC织物(2"×2")与12高密度氧化锆(二氧化锆ZrO₂，20mm直径；Glen Mills Inc.,Clifton,N.J.,USA)通过将球和样品置于500mL碾磨罐中进行球磨。可将罐夹到闩锁支架中，并且然后在行星式球磨机PM100；Retsch,Inc.,Newtown,Pa.,USA)上进行平衡。然后可以450rpm双向进行研磨20分钟。

在一些实施方案中，在研磨过程之后，对于后续加工(包括辊压实过程)，将所得纤维素中间细纤维加湿到介于约11％与约18％之间、或介于11％与约16％之间、或约12％至16％的水分含量。适用于加湿步骤的非限制性湿度室可作为Thermal Product Solutions的型号CEO-916-4-B-WF4-QS商购获得。室空气的加湿可通过水蒸气注入实现。可以利用25℃的典型稳态温度，而湿度水平可以在75％与85％之间循环，其中目标是例如85％的空气湿度。根据材料量和空气循环情况，湿度室内材料的加湿时间或停留时间范围可从几小时到几天。在典型循环中，对于布置在若干个托盘中并且暴露于85％的相对湿度的约3,000克的纤维素中间细纤维，材料可以具有12-13小时的停留时间，以及加湿后粉末的12％水分含量的目标；使用纤维素中间细纤维进料到压实步骤中，该纤维素中间细纤维具有大于16％的水分含量，诸如20重量％的水分含量；所得ORC中间细纤维可以在压实期间结块，表现出非常差的流动性，并且堵塞压机。因此，中间细纤维的高湿度可能不会导致合适的止血聚集体材料。相反，当中间细纤维素纤维的水分含量低于约8％时，止血聚集体的收率极低，有时为所需止血聚集体的约5％收率。然后可以将加湿的中间细ORC纤维压实并筛分以获得止血聚集体材料。辊压机可以压实进料，然后可以对进料进行预破裂、最终研磨并在筛选机中筛分，以获得所需的止血聚集体大小。

压实设备是已知的并且可商购获得。非限制性示例性压实单元是具有Retsch手动筛分AS200筛选机的Fitzpatrick Chilsonator IRR220-L1A和具有集成在M5A下的筛选机Sweco振动能量单元的Fitzpatrick Chilsonator CCS220/M3B&RV-M5A。压实加工可使用两个独立的子系统来进行，这些子系统由共同的电气系统进行约束。例如，第一子系统(辊压机：主单元)可以是Fitzpatrick Chilsonator CCS220辊压机和用于预破裂压实材料的M3B研磨机，而第二子系统(辊压机：次级研磨单元)可以是用于最终研磨的M5A研磨机，其具有用于分离的Sweco或Retch筛选机，以获得所需大小的聚集体。加湿的中间细纤维素纤维可以被进料到辊压机单元的料斗中，首先穿过主研磨单元，并且然后通过第二研磨单元继续进行。可以提供容器以捕获由主研磨单元产生的预破裂纤维素材料。然后可以将预破裂纤维素材料片进料到次级研磨单元中，该次级研磨单元利用筛网进行最终研磨和筛选。所得经研磨的纤维素材料可以使用筛网诸如本文所述的Sweco或Retch筛选机分离成细粒(<75μm)、目标粒(75μm-300μm)和过大粒(>300μm)。

可以利用除球磨之外生成高密度和低纵横比的压实的ORC粉末的其他方法。辊压是指通过辊磨机连续压实粉末。粉末可以通过进料螺杆递送以辊压并且通过压力和剪切力致密。辊压是用于各种行业，包括药物、矿物和化学工业的粉末附聚过程。较差流动性粉末混合物的辊压可能需要在两个相对旋转辊之间螺旋进给粉末。这些相对旋转辊然后可将粉末抽吸到压实区中并施用高压，从而形成压实粉末的条带。然后可以将通过两个相对旋转辊之间的压力压实成此类条带或带的粉末进一步研磨成低纵横比的颗粒剂。织造或非织造ORC材料或者切碎或经球磨的ORC材料可以进一步经辊压实以达到所需的低纵横比和高密度ORC颗粒。

锤磨机是可用于制备具有足够低纵横比和高振实密度的ORC颗粒的另一种方法。锤磨机通过冲击作用操作并且将粉碎大多数干燥、自由流动的材料。材料可以从顶部进料到锤磨机中，并且然后可以落入碾磨室中。材料可以接触高速旋转的一系列硬化钢锤。材料可以通过与这些锤重复接触、与碾磨室的壁接触和颗粒间接触来碾磨。材料可以保留在锤磨机碾磨室中，直到颗粒足够小，以通过穿过覆盖碾磨室的底部半部的穿孔筛逸出。

锤磨机可以基本上是含有在其上安装有锤的竖直或水平旋转轴或滚筒的钢筒。锤可以在交叉的末端上自由摆动，或固定到中心转子。转子可以在滚筒内部高速旋转，同时材料被进料到进料斗中。材料可以受到锤杆的冲击，并且由此可以通过所选大小的滚筒中的筛切碎和排出。锤磨机可以用作初级、次级或三级破碎机，即ORC可以从织造或非织造材料ORC源或者从切碎或经球磨的ORC材料中锤磨。切割(切碎)与球磨和其他压实/研磨过程之间的主要差异是没有在球磨和其他压实过程中使用的尖锐刀片的压碎机械冲击。由于不存在尖锐刀片，颗粒在颗粒形状、表面、振实密度等方面获得不同的特性，这些特性不同于切碎的(即，利用刀片研磨的)颗粒。

在示例性实施方案中，OC已被氧化以包含能够有效提供生物降解能力的量的羧基部分。

美国专利3,364,200公开了在Freon介质中使用氧化剂诸如四氧化二氮来制备羧酸氧化的纤维素。美国专利5,180,398公开了在全氟化碳溶剂中使用氧化剂诸如二氧化氮来制备羧酸氧化的纤维素。在通过任一方法氧化之后，可用溶剂诸如四氯化碳，之后用50％异丙醇(IPA)的水性溶液并且最后用99％ IPA彻底洗涤织物。在氧化之前，可将织物构造成期望的织造或非织造构造。

通常，与酸敏感物质相容的止血剂包括由生物相容性醛氧化多糖制备的织物基底。在此类示例性止血剂中，多糖包含一定量的醛部分，该醛部分能够有效地使得改性多糖可生物降解，这意味着多糖可被身体降解成可被身体吸收或可易于通过身体的组分。更具体地，生物降解的组分当被身体吸收时不会引起永久性的慢性异物反应，使得最终基本上不会在植入部位处保持永久痕量或残余的组分。

在本发明的某些实施方案中，OC包括由生物相容性、可生物降解的醛氧化再生纤维素制备的颗粒。在一些实施方案中，醛氧化再生纤维素是包含美国专利8,709,463中的结构II的重复单元的纤维素。在一些实施方案中，ORC用于制备尤其是在组织的出血部位处的防粘连材料。通常，再生纤维素因其相对仍未再生的纤维素具有较高的均匀度而为优选的。再生纤维素和如何制备再生氧化纤维素的详细描述示于例如美国专利3,364,200和美国专利5,180,398中。

因此，在一些实施方案中，OC包括ORC。呈聚集形式或可被碾磨或研磨的且因此可用于制备组合物的颗粒的基于OC的产品的示例包括但不限于

可吸收粘连屏障、

原装可吸收止血剂、

NU-

可吸收止血剂、

FIBRILLAR^TM可吸收止血剂、

SNoW^TM可吸收止血剂和

粉末可吸收止血剂、来自Gelita Medical BV,Amsterdam,The Netherlands的

可吸收纤维素手术敷料。

在一些实施方案中，OC源于植物来源。应当理解，虽然OC的常见来源是植物材料，但OC也可源于细菌来源。

在一些实施方案中，与本发明一起使用的纤维素不包括羧甲基纤维素(CMC)。

本发明的组合物可为非水性组合物，这是指组合物中的主要液体不是水，并且该组合物具有非常低的水含量，或根本不含水。

在一些实施方案中，该组合物的水含量低于约8％w/w。在一些实施方案中，该组合物的水含量低于约7％w/w。在一些实施方案中，该组合物的总水含量低于约6％、5％、4％、3％、2％、1％、0.5％、0.1％或0.01％w/w。在一些实施方案中，该组合物基本上不含水。在一些实施方案中，该组合物不包含水。

在一些实施方案中，该组合物还不包含溶剂。在一些实施方案中，该组合物还不包含有机溶剂，诸如乙醇。

在一些实施方案中，本发明的组合物包含呈粉末形式的OC(例如，经研磨的OC)。如上所述，可碾磨或研磨各种纤维素基材料以获得可用于制备本发明的组合物的粉末。

可研磨纤维素基材料例如纤维素基织物以获得具有如上所述的D90小于350μm并且D50小于167μm的大小分布的纤维。如果需要，可重复研磨步骤以获得D90小于177μm并且D50小于95μm的大小分布。

如本文所述，在一个实施方案中，用于制备组合物的纤维通过研磨纤维素源材料来制备；在研磨步骤之前，可通过裁切和切割纤维素源材料来形成材料片。在该实施方案中，研磨步骤可为两部分过程，其中第二部分在空气分级机中进行，其中第二部分可重复三次。因此，在空气分级机中第一次通过(次)之后，所得的“长纤维”可具有D90小于350μm并且D50小于167μm的大小分布。在空气分级机中3次通过(3次)后，所得的细ORC纤维可具有D90小于177μm并且D50小于95μm的大小分布。因此，在一个实施方案中，“长纤维”具有D90小于350μm并且D50小于167μm的大小分布

在本发明的一个实施方案中，组合物中的“细”或“短”纤维素基纤维具有D90小于177μm并且D50小于95μm的大小分布。

纤维素基材料可在研磨步骤之前、期间和/或之后与其他化合物混合或用其他化合物补充。

在一些实施方案中，所公开的聚集体由呈聚集体形式的多个互连的单独纤维素原纤维构成，该多个互连的单独纤维素原纤维具有至少0.5的球度、沿其最长轴线小于约500微米且大于约50微米的直径。聚集体可另选地表述为具有其中D15大于约80微米、D50为约140微米至250微米、D90小于约370微米、堆积密度大于0.45g/mL并且/或者球度(sh50)等于或大于0.70的大小分布特性。聚集体的特征可以在于当经受振动挑战时具有基本上无大小分布变化或最小大小分布变化，例如，通过D50测得的止血聚集体的大小分布特性不低于100微米。在一个实施方案中，大小分布变化由0.2巴下的QICPIC光学传感器表征。在另一个实施方案中，大小分布变化或最小大小分布变化基于在1.0巴真空下加工。在一些实施方案中，聚集体已经是经研磨、加湿、辊压实和干燥的纤维素材料。

术语“D15”、“D50”、“D70”和“D90”分别是指15％、50％、70％和90％(按数量或体积计)的颗粒具有小于或等于对应值的大小。

如本文所提供，在一些实施方案中，本发明的组合物由呈聚集体形式的OC制备。术语“聚集体”描述由组装的组分形成的颗粒。

如本文进一步提供，聚集体可任选地通过以下步骤中的一个步骤来制备：使粉末组合物加湿；压实，例如，通过辊压和/或重压粉末以形成聚集体；除湿；研磨；筛分聚集体；以及任选地将所得聚集体定量添加到储存容器中或递送装置中。

在一些实施方案中，OC的粒度介于10μm与2,000μm之间。在一些实施方案中，OC的粒度介于50μm与1,500μm之间、介于100μm与1,000μm之间、介于100μm与500μm之间、介于100μm与300μm之间、介于50μm与1,000μm之间、介于50μm与500μm之间或介于50μm与300μm之间。

如上所提供，在一些实施方案中，将OC(例如，ORC)粉末压实。压实的ORC粉末可以是经辊压实加工的ORC粉末或经锤磨机加工的ORC粉末。所公开的粉末可以具有至少0.45g/cm³的振实密度；和/或至少7.5cm/s的流动性；和/或1.75微米至116微米的平均粒度与36微米的中值大小。在一个实施方案中，所公开的粉末包括具有约1至约5的平均纵横比；至少0.67g/cm³的振实密度；和至少70cm/s的流动性的颗粒。

在一个实施方案中，被压实成高振实密度粉末的微粒具有在约0.35g/cm³至约1g/cm³或0.4g/cm³至0.9g/cm³，诸如0.42g/cm³至0.78g/cm³范围内的振实密度。具有特定纵横比的ORC的颗粒可以由ORC材料(诸如如上文利用球磨过程表征的ORC织物或非织造物)直接制成。如本文所述，粒度可以具有小于500微米(诸如小于300微米、200微米和小于100微米)的总体大小(最大尺寸)。

在另一个实施方案中，所公开的组合物呈包含上述止血材料和盐水溶液的糊剂的形式。糊剂在室温下可以具有大于10000Pa-s的粘度。

在另一个实施方案中，本发明是呈粉末形式的压实的ORC基材料，其具有约1至约18的纵横比。ORC基材料可以是切碎的ORC材料。在一个实施方案中，压实通过如上所述的球磨进行。在另一个实施方案中，如上所述，压实是通过辊压实或通过锤磨进行。

在另一个实施方案中，本发明涉及一种通过将其实施方案中例如如上所述的呈粉末形式的所公开的组合物施用到受试者的组织中的出血部位上和/或中来防止出血部位处粘连的方法。

由于本发明的粉末的高振实密度和低纵横比，所得ORC粉末可以糊剂或粉末形式用作出血部位处的防粘连材料，并且具有优异的止血特性以及良好的组织顺应性和流动性。另外，ORC材料可以与其他药剂和生物聚合物物理地结合以改善出血部位处的抗粘连特性。

低纵横比(1-20)颗粒可以包括构成粉末状材料的大部分颗粒，即超过50％，诸如超过80％或超过90％的颗粒。总体大小(最大尺寸)小于500微米(诸如小于300微米、200微米和小于100微米)的颗粒可以包括构成粉末状材料的大部分颗粒，即超过50％，诸如超过80％或超过90％的颗粒。

在本发明的另一个实施方案中，如上所述，由球磨过程产生的包括ORC的低纵横比和高振实密度颗粒的产品被示出为具有有效的防粘连特性。

出于本公开的目的，粉末的纵横比定义为包含粉末的颗粒的平均纵横比，其中颗粒的纵横比通过如在电子或光学显微镜下的适当放大率下可见的颗粒的最长尺寸(长度)除以颗粒的最短尺寸(宽度)的测量结果来确定。1的最低纵横比(AR)对应于圆形颗粒，其最长尺寸等于最短尺寸。约20的纵横比对应于长度为20倍直径的纤维颗粒。根据本发明的示例性纵横比为1至20，更具体地为约1.5至约17.5。

在一些实施方案中，具有羧基含量为约12％至约18％的OC的所公开的组合物可用作防粘连组合物，例如以用于防止在组织的出血部位处形成粘连。在一些实施方案中，其中OC的羧基含量为约12％至约18％的本发明的可流动组合物或不可流动组合物用作防粘连材料，以用于减少或防止组织的出血部位处的粘连。

在一些实施方案中，其中OC的羧基含量为约12％至约18％的所公开的组合物在选自由以下项组成的组中的一个或多个温度值下可流动：10℃、15℃、20℃、25℃、30℃、35℃、37℃和40℃。

颗粒的流动性是影响外科手术期间粉末部署的参数。在手术设置中可以优选高流动性，以便于部署。

堆积密度是未振实的粉末样品的质量与其体积(包括微粒间空隙体积的贡献)的比率。振实密度是通过机械振实粉末的容器获得的增加的粉末堆积密度的量度。振实密度似乎与流动性相关。高振实密度可优选便于部署和混合。为了本申请的目的，可以使用修改的USP 616方法测量振实密度，其中将一(1)克粉末引入到10mL的干燥刻度量筒中，并且用100个抽头手动振实大约2分钟。

粉末的压出力也是与外科手术期间粉末或糊剂的部署有关的重要参数。从注射器中排出液体并将液体抽吸到注射器中所需的努力分别被称为压出力和抽吸力。然而，压出力测量对于双注射器混合装置更为关键。在一些实施方案中，组合物能够通过施用装置。

双注射器混合装置通过组合最初分离的液体和固体载体，并且然后经由互连的出口在两个连接的注射器之间来回传递共混的内容物，产生基本上均匀的糊剂混合物。因此，用于从注射器分配糊剂的低压出力可能是优选的，以便于混合并且最终用于部署所得糊剂。期望的压出力可以小于1.51lbf。

如本文所述，在一些实施方案中，该组合物还可包含至少一种生物活性剂，并且可包含在该组合物中的非限制性生物活性剂包括钙，以及治疗剂，诸如抗生素、抗炎剂、生长因子或凝血因子。例如，该组合物还可包含纤维蛋白原或凝血酶。

在一些实施方案中，该组合物还可包含凝血酶。

在一些实施方案中，该组合物还包含钙。钙是凝血级联中的重要成分。因子XIII活化为因子XIIIa需要钙，该因子XIIIa交联并稳定纤维蛋白以生成不溶凝块。

与本发明一起使用的钙可呈氯化钙盐的形式。另选地，可使用其他盐，诸如乙酸钙和/或柠檬酸钙。在一些实施方案中，钙源为例如在40mM-60mM的范围内的氯化钙。

在一些实施方案中，该组合物可包含多于一种生物活性剂，例如钙和凝血酶。

如本文所用，“凝血酶”表示因凝血酶原(因子II)的蛋白水解裂解产生的活化酶。凝血酶可通过本领域已知的多种生产方法来产生，并且包括但不限于重组凝血酶和血浆源性凝血酶。

人凝血酶是由通过二硫键连接的两个多肽链构成的295个氨基酸的蛋白质。人和非人(例如，牛)凝血酶均可在本公开的范围内使用。

该组合物还可包含以下赋形剂中的一种或多种赋形剂，该赋形剂选自但不限于白蛋白、糖、糖衍生物、多元醇、乙酸盐、柠檬酸盐、氨基酸、聚乙二醇和氯化钠。

白蛋白可在0.05％至1％(w/v)的范围内或在0.5％至1％(w/w)的范围内。糖源可为蔗糖并且可例如处于约5g/l浓度。

在一些实施方案中，糖衍生物源包括葡糖酸。在一些实施方案中，多元醇源包括例如浓度为约2％(w/w)的甘露糖醇。在一些实施方案中，乙酸盐源是乙酸钠。在一些实施方案中，柠檬酸盐源可为柠檬酸钠。在一些实施方案中，氨基酸包括组氨酸。在一些实施方案中，聚乙二醇(PEG)源为PEG-3350并且可以例如以约0.03重量％的浓度存在。

“PEG 3350”表示平均分子量为3350道尔顿的PEG化合物。

因此，在一些实施方案中，本发明的组合物还包含一种或多种赋形剂，该一种或多种赋形剂选自由以下项组成的组：氯化钠、甘露糖醇、白蛋白和乙酸钠。

在一些实施方案中，组合物在室温附近的至少一个温度下，诸如在选自由以下项组成的组中的一个或多个温度值下不可流动：10℃、15℃、20℃、25℃、30℃、35℃、37℃和40℃。该组合物在下文中被称为“不可流动”或“不能流动”组合物。

如上文所指出的那样，OC的氧化度对于其功能特性诸如生物相容性和生物吸收性可能是重要的。存在包括各种OC氧化度的产品，诸如其中羧酸基团以氧化纤维素的18％-21％(按重量计)的浓度存在的外科止血剂。另一方面，具有较低浓度的羧酸基团(诸如12％-18％)的OC可具有优异的防粘连特性。

如本文相对于OC所用，术语“氧化水平”、“氧化度”、“羧基含量”和“羧化水平”是可互换的，并且可根据美国药典(USP)23-NF18测定。

因此，在一些实施方案中，OC的羧基含量为约12％-24％(w/w)。在一些实施方案中，OC的羧基含量为12％-23％(w/w)。在一些实施方案中，OC的羧基含量为12％-22％(w/w)。在一些实施方案中，OC的羧基含量为约12％至约21％(w/w)。

在一些实施方案中，OC的羧基含量为16％-24％(w/w)，并且组合物可用作止血剂。在一些实施方案中，OC的羧基含量为17％-23％。在一些实施方案中，OC的羧基含量为18％-22％(w/w)。在一些实施方案中，OC的羧基含量为约18％至约21％(w/w)。

在一些实施方案中，OC的羧基含量为约12％至约18％(w/w)。在一些实施方案中，OC的羧基含量为12％-17％(w/w)。在一些实施方案中，OC的羧基含量为12％-16％(w/w)。

在一些实施方案中，OC的羧基含量为约12％、13％、14％、15％、16％、17％、18％、19％、20％、21％、22％、23％或24％(w/w)，包括其间的任何值和范围。

具有羧基含量为约12％至约18％的OC的本发明组合物可用作防粘连组合物，以用于防止例如在组织的出血部位处形成粘连。在一些实施方案中，一种用于制备粉末的织物是由有光人造丝纱线构造的经编特里科织物，其随后被氧化以包含能够有效地为织物提供生物降解能力的量的羧基或醛部分。如上所述，可通过使纤维素与二氧化氮在全氟化碳溶剂中的溶液反应使织物被氧化，如F.Boardman等人在美国专利5,180,398中所述。

在一个实施方案中，羧基含量(氧化度)在约9％至约21％范围内的OC/ORC的粉末用于出血部位处的防粘连的方法中。在另一个实施方案中，羧基含量(氧化度)在约12％至约18％范围内的OC/ORC的粉末用于出血部位处的防粘连的方法中。在另一个实施方案中，羧基含量(氧化度)在约9.5％至约10.5％范围内的氧化再生纤维素用于出血部位处的防粘连的方法中。

在一些实施方案中，通过本领域已知的任何方法诸如热处理、辐射处理、过滤或化学处理(例如，γ辐射、使用例如0.22μm或更小的孔径的过滤、热灭菌和无菌区)进一步处理本发明的其实施方案中的组合物以获得低生物负载。

在一些实施方案中，该方法还包括向组合物中添加钙。在一些实施方案中，该方法还包括向组合物中添加至少一种生物活性剂。在一些实施方案中，该方法还包括向组合物中添加一种或多种赋形剂，该一种或多种赋形剂选自氯化钠、甘露糖醇、白蛋白和乙酸钠。

另外，在本发明的一个方面，提供了一种减少例如经历外科手术的患者的组织出血部位处的粘连的方法，该方法包括使上述实施方案中所公开的组合物与出血部位接触。因此，提供了一种用于防止组织粘连的方法，该方法包括将其实施方案中的所公开的组合物或ORC粉末施用到出血组织中/上。组织可以是软组织或例如骨组织。

如本文所用，术语“软组织”涉及未硬化或钙化的身体组织。该术语尤其涉及血管化的软组织，因此可能是出血的来源。此类组织的示例包括但不限于结缔组织(诸如肌腱、韧带、筋膜、皮肤、纤维组织、脂肪和滑膜)、肌肉和内部器官。一般来讲，软组织意在排除骨组织。

在该方法的一些实施方案中，OC的羧基含量为至少9重量％或更高，例如约9重量％至约21重量％或约12重量％至约21重量％。在该方法的一些实施方案中，OC的羧基含量等于或小于约18重量％，例如约18重量％。在该方法的一些实施方案中，OC的羧基含量为约9重量％至约18重量％或12重量％至约18重量％。在该方法的一些实施方案中，OC的羧基含量为约9重量％至约21重量％或12重量％至约21重量％。在方法或组合物的一些实施方案中，OC的羧基含量为至多约21重量％。

在一些实施方案中，组合物在选自由以下项组成的组中的一个或多个温度值下可流动：10℃、15℃、20℃、25℃、30℃、35℃、37℃和40℃。

在一些实施方案中，组合物在选自由以下项组成的组中的一个或多个温度值下不能流动：10℃、15℃、20℃、25℃、30℃、35℃、37℃和40℃。

在该方法的一些实施方案中，通过本领域已知的方法诸如热处理、辐射处理、过滤或化学处理(例如，γ辐射、使用0.22μm或更小的孔径的过滤、热灭菌和无菌区)处理组合物以获得低生物负载。

在该方法的任何方面的一些实施方案中，组合物还包含一种或多种赋形剂，该一种或多种赋形剂选自由以下项组成的组：氯化钠、甘露糖醇、白蛋白和乙酸钠。

另外，在本发明的一个方面，提供了一种减少例如经历外科手术的患者的组织和/或器官中的粘连形成的方法。该方法包括至少在手术部位和/或其附近施用或接触上述实施方案中所公开的组合物。

在另一方面，本发明提供了一种试剂盒，该试剂盒包括：a)容纳如上所述的本发明组合物的容器，b)用于将组合物施用于组织的施用装置，以及c)任选地使用说明。

在一些实施方案中，容器是施用装置的部件。

应当理解，组合物的稠度使得其可例如通过铺展或通过将组合物直接粘附到出血部位上来施用。因此，该组合物不需要进一步铺展到或施用于固体表面、物体或其他固体介质诸如带或膜上，以便呈施用于出血部位的适当形式。然而，可使用合适的施用装置诸如注射器，以便将组合物施用、铺展或粘附到出血部位上，从而易于触及和处理。

术语“包含”、“含”、“包括”、“含有”、“具有”及其变化形式是指“包括但不限于”。术语“由…组成”是指“包括并且限于”。术语“基本上由…组成”是指组合物、方法或结构可包含附加成分、步骤和/或部件，但前提条件是该附加成分、步骤和/或部件不在本质上改变受权利要求书保护的组合物、方法或结构的基本特征和新颖特征。

词语“示例性”在本文中用于指“用作示例、实例或例证”。被描述为“示例性”的任何实施方案不一定被理解为比其他实施方案优选或有利并且/或者不包括其他实施方案的特征。

词语“任选地”在本文中用于指“在一些实施方案中提供而在其他实施方案中不提供”。本发明的任何具体实施方案可包括多个“任选的”特征，除非此类特征有冲突。

如本文所用，除非上下文另有明确说明，否则单数形式“一个”、“一种”和“该”包括复数指代。例如，术语“一种化合物”或“至少一种化合物”可包括多种化合物(包括它们的混合物)。

在整个本申请中，本发明的各种实施方案可以范围格式呈现。应当理解，范围格式的描述仅仅是为了方便和简洁，并且不应被理解为是对本发明范围的固定限制。因此，范围的描述应被视为具有明确公开的所有可能子范围以及该范围内的各个数值。例如，范围诸如1至6的描述应被视为具有明确公开的子范围诸如1至3、1至4、1至5、2至4、2至6、3至6等，以及该范围内的各个数值，例如1、2、3、4、5和6。无论范围的宽度如何，这均适用。

每当本文指示数值范围时，其是指包括位于所指示范围内的任何列举的数字(分数或整数)。短语“范围是在”第一指示数字和第二指示数字之间以及“范围是从”第一指示数字“到”第二指示数字在本文中可互换使用，并且是指包括第一指示数字和第二指示数字以及其间的所有分数和整数。

如本文所用，术语“方法”是指用于完成给定任务的方式、手段、技术和程序，包括但不限于化学、药理学、生物学、生物化学和医学领域的从业者已知的或易于从已知的方式、手段、技术和程序开发的那些方式、手段、技术和程序。

如本文所用，术语“治疗”包括消除、基本上抑制、减缓或逆转病症的进展、基本上改善病症的临床或美学症状、或基本上阻止病症的临床或美学症状的出现。

在其中使用类似于“A、B和C中的至少一者等”的惯例的那些情况下，一般而言，此类结构意在具有本领域的技术人员将理解所述惯例的意义(例如，“具有A、B和C中的至少一者的组合物”将包括但不限于具有仅A、仅B、仅C、A和B一起、A和C一起、B和C一起、和/或A、B和C一起等的组合物)。本领域的技术人员还应当理解，实际上，无论在具体实施方式、权利要求还是附图中，呈现两个或更多个替代术语的转折性词语和/或短语应被理解为涵盖包括所述术语中的一者、所述术语中的任一个或这两个术语的可能性。例如，短语“A或B”将被理解为包括“A”或“B”或“A和B”的可能性。

应理解，为清晰起见，在独立实施方案的上下文中描述的本发明的某些特征，也可在单个实施方案中组合提供。相反地，为简明起见，在单个实施方案的上下文中描述的本发明的各种结构也可单独地或以任何合适的子组合形式提供，或如其所适当地提供于本发明的任何其他所述实施方案中。在各种实施方案的上下文中所述的某些特征不应视为那些实施方案的基本特征，除非实施方案在没有那些要素的情况下不起作用。

除非另外指明，否则所有数字诸如表示例如比率、重量、摩尔/摩尔、量、粘度、温度等的那些在所有情况下均应理解为被术语“约”修饰。因此，除非有相反的说明，否则在本说明书和所附权利要求中列出的数值参数均为近似值，这些近似值可根据本发明寻求获得的期望特性而变化多达±10％。

如上文所述以及如下文的权利要求部分所要求保护的本发明的各种实施方案和方面在以下实施例中得到实验支持。

实施例

现在参考以下实施例，这些实施例连同以上描述以非限制性方式示出了本发明的一些实施方案。

实施例1：大鼠盲肠磨损模型中出血部位处的防粘连功效

粘连是可引起慢性疼痛、不孕症的重大医学问题，并且与可导致死亡的肠梗阻相关。这些粘连中的许多粘连是由腹膜的外科创伤引起的。为了检测本发明的组合物减少出血部位处的粘连的能力，在动物模型中进行测试。所选模型是大鼠模型，其中包括盲肠磨损和腹部侧壁缺损。该模型在Poehnert等人，2015,International Journal of MedicalSciences 12(1):1-6中大致描述，但有一些微小改变。

材料和方法

测试组：

1.未处理(对照)；

2.INTERCEED组：将可商购获得的

片材(Ethicon)切割成待施用以覆盖盲肠的大小；

3.

粉末组呈聚集体的形式，并且通过美国专利10,034,957的实施例1中所述的方法生成，不同的是所用的基体材料为

片材(Ethicon)，而不是

片材(Ethicon)。呈聚集体形式的INTERCEED粉末在全文中也称为：呈聚集形式的经研磨/碾磨的INTERCEED、被压制成小颗粒剂的经研磨/碾磨的INTERCEED、压实的INTERCEED粉末、以聚集体形式压实的INTERCEED。

简而言之，已将

切割成1至2英寸宽的部分，然后将材料进料到刀片中，该刀片将织物切割成较小的片。然后通过两个连续的研磨过程(锤磨和空气分级机研磨)将切割的ORC织物片碾磨成中间ORC细纤维。然后将所得中间ORC细纤维加湿至如通过Ohaus卤素水分分析仪所测量的约11％至约16％，并且然后将其辊压实成较大的聚集体。以热重原理操作水分分析仪，其中水分分析仪确定样品的重量；然后通过整体式卤素干燥器单元使样品快速加热和水分蒸发。在干燥操作期间，仪器连续确定样品的重量并显示结果。

在完成干燥时，表格结果显示为水分含量百分比、固体百分比、回潮重量或百分比，特定地说，分析仪以四分钟斜率、90℃最大温度和以下设置测试介于0.5-1克之间的聚集体：测试ID-LOD；分布-标准；干燥温度-90℃；关闭-A60；结果-水分％；自定义-关；目标重量-无。

进行筛分以分离通过筛网筛分确定的75微米与300微米大小之间的目标颗粒。通过压实和筛分步骤之后的除湿或干燥过程去除出于压实的目的引入的过量水分，以便随后定量添加到施用器装置中。然后对样品进行装置包装和灭菌。在干燥结束时，在被定量添加到施用装置中之前的储存水分小于约2％，以在受控环境中实现小于6％的水分含量(根据相对湿度，通常25％-55％相对湿度，每500g样品水分增加0.3％/小时-0.6％/小时)，以定量添加到施用装置中。

总而言之，一种用于制造本发明止血聚集体的方法包括以下步骤：a)裁切和切割纤维素源材料；b)研磨来自步骤a)的所得材料；c)在空气分级机中的第二研磨步骤；d)加湿；e)辊压实；f)筛分；g)除湿或干燥；h)任选地定量添加到储存容器中或递送装置、初级包装和次级包装中；以及i)任选的灭菌。

将测试制品施用于(重复6次)大鼠盲肠磨损模型，如本文所述。

用于测试防粘连活性的体内大鼠盲肠磨损模型：简而言之，使用单次肌内注射80mg/kg盐酸氯胺酮(Fort Dodge Pty.Ltd.,Australia)和10mg/kg盐酸塞拉嗪(VMD,Belgium；由于对腹膜腔进行操作手术，因此麻醉在肌肉内而不是腹膜内施用)的混合物来施用动物麻醉。

在腹中线上与线重叠的皮肤上作出6cm的切口标记。剃刮腹侧皮肤，用碘伏溶液准备并切入。在手术结束时，使皮肤回缩并轻微凹陷以有利于缝合。随着肌肉壁暴露，沿着整个腹膜腔的线作出肌肉中的5cm切口。显现出右腹壁。去除1cm×2cm的腹膜层和肌肉的一部分。该缺损的内侧边缘位于中线切口外侧1cm处并且与其平行。监测腹壁缺损以观察出血。通过用外科手术刀刮削，使得在1cm×2cm区域上形成点状出血的均匀表面，从而在盲肠上产生相应的缺损。在磨损之前，将盲肠升高并定位成使得在闭合时盲肠将接触腹壁缺损以引起局部粘连。将两个表面风干10分钟。对于每个测试制品，用测试制品的薄层将一定量铺展在盲肠上以完全覆盖盲肠。“未处理”组保持不接触。在组分配和施用之后，盲肠和腹壁缺损在闭合之前保持在一起1分钟。以解剖学方式放回器官，并且将两根缝合线放置在缺损的每一端以保持器官接近。在处理期间，仔细地观察动物以移除对麻醉处理具有意料不到的响应的任何动物。

在该过程后，按0.5mg/kg体重至2.0mg/kg体重给予动物单剂量的酒石酸布托啡诺(Torbugestic)以减轻疼痛。每天监测动物，并且在观察到临床征象或行为变化的情况下，根据动物的活动，每四小时按需向动物皮下施用0.5mg/kg体重至2.0mg/kg体重的布托啡诺，以控制疼痛。在外科手术十四天后，通过CO₂窒息使动物安乐死。打开腹腔，并检查手术部位。由盲法观察者对粘连进行评级。

根据以下方案(Poehnert等人，2015,International journal of medicalsciences 12(1):1-6)评估各个腹部器官的粘连强度：0级-无粘连；1级-易于移除的膜状粘连；2级-可通过钝性分离移除；3级-需要锐性分离；4级-高度不可分离，难以区分不同组织的边缘。除了粘连强度之外，还使用尺子测量粘连覆盖率。粘连强烈度计算为粘连强度×粘连覆盖率(mm)。

如图1可见，与ORC织物(第2组)相比，INTERCEED粉末ORC(第3组)表现出约135％的防粘连效能。

尽管本发明已结合其具体实施方案进行了描述，但显然许多替代、修改和变型对于本领域中那些技术人员而言是显而易见的。因此，本文旨在涵盖落入所附权利要求书的实质和广义范围内的所有此类另选形式、修改和变型。

Claims

1.一种组合物，所述组合物包含呈粉末形式的氧化纤维素(OC)，其中所述OC的羧基含量为约9重量％至约21重量％。

2.根据权利要求1所述的组合物，其中所述OC包括氧化再生纤维素(ORC)。

3.根据权利要求1或2所述的组合物，所述组合物用作在存在血液的情况下的防粘连材料。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的组合物，其中所述粉末呈聚集形式。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的组合物，其中所述粉末包括经研磨的OC。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的组合物，其中至少90％的所述粉末的粒度在10μm至2,000μm的范围内。

7.根据权利要求6所述的组合物，其中至少90％的所述粉末的粒度在50μm至300μm的范围内。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的组合物，其中所述粉末经γ辐照。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的组合物，其特征在于与具有相同羧基含量的OC织物相比，防粘连效能为至少120％。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的组合物，其中所述OC包括呈压实粉末形式的ORC。

11.根据权利要求10所述的组合物，其中所述ORC粉末包括经辊压实加工的ORC粉末和/或经锤磨机加工的ORC粉末。

12.根据权利要求1至11中任一项所述的组合物，所述粉末具有1.75微米至116微米的平均粒度与36微米的中值大小。

13.根据权利要求1至12中任一项所述的组合物，所述组合物还包含添加剂，其中所述添加剂包括选自CMC或其他多糖、钙盐、抗感染剂、止血促进剂、明胶、胶原中的一个或多个成员。

14.根据权利要求1至13中任一项所述的组合物，其中所述粉末呈微粒聚集体的形式，所述微粒聚集体具有其中D15大于约80微米、D50为约140微米至250微米并且D90小于约370微米的大小分布特性。

15.根据权利要求1至14中任一项所述的组合物，其中所述粉末具有大于0.45g/mL的堆积密度。

16.根据权利要求1至15中任一项所述的组合物，其中所述粉末具有等于或大于0.7的球度(sh50)。

17.根据权利要求16所述的组合物，其中所述OC形成呈聚集体形式的互连的单独纤维素原纤维，所述互连的单独纤维素原纤维具有至少0.6的球度，以及沿其最长轴线小于约500微米且大于约50微米的尺寸。

18.根据权利要求1至17中任一项所述的组合物，其中所述OC的所述羧基含量等于或低于18％。

19.根据权利要求1至18中任一项所述的组合物，其中所述OC的所述羧基含量为至少12％。

20.一种试剂盒，所述试剂盒包括：

a.容器，所述容器容纳根据权利要求1至19中任一项所定义的组合物；

b.施用装置，所述施用装置用于将所述组合物施用于组织；以及

c.任选地，使用说明。

21.根据权利要求20所述的试剂盒，其中所述容器包括在所述施用装置中。

22.一种用于防止组织粘连的方法，所述方法包括在存在血液的情况下将组合物施用到组织中/上，所述组合物包含呈粉末形式的氧化纤维素(OC)，其中所述OC的羧基含量为约9重量％至约21重量％。

23.根据权利要求22所述的方法，其中所述OC包括ORC。

24.根据权利要求22或23所述的方法，其中所述OC的所述羧基含量等于或低于18％。