CN115501237B

CN115501237B - 齐墩果酸衍生物在制备抑菌药物中的应用

Info

Publication number: CN115501237B
Application number: CN202211323780.4A
Authority: CN
Inventors: 吴盼盼; 梁金丰; 张震; 李锦轩; 孙莹; 洪为谦; 李冬利; 徐学涛; 张焜
Original assignee: Wuyi University
Current assignee: Tianjin Qinxuan Information Technology Co ltd
Priority date: 2022-10-27
Filing date: 2022-10-27
Publication date: 2023-09-05
Anticipated expiration: 2042-10-27
Also published as: CN115501237A

Abstract

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种齐墩果酸衍生物在制备抑菌药物中的应用。所述齐墩果酸衍生物包括以下结构：

Description

齐墩果酸衍生物在制备抑菌药物中的应用

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种齐墩果酸衍生物在制备抑菌药物中的应用。

背景技术

菌引起的感染性疾病已经成为全球亟待解决的医疗卫生问题，它所带来的安全隐患现在已严重威胁到了人们的生命健康。从发现到应用于治疗，抗生素已经成为当今世界治疗感染性疾病中不可或缺的载体，人们对抗生素的依赖越来越强，也使得抗生素的使用存在大量滥用、误用的现象，导致越来越多菌株对许多抗生素产生了耐药性，增大了疾病治疗的困难。因此，开发新型抗生素用于治疗感染性疾病，并解决细菌耐药性的问题显得尤为重要。

齐墩果酸(OA)是一种具有多种生物活性和药用价值的五环三萜类化合物，在自然界中含量丰富，如丁香、女贞子、琵琶和三七中都含有大量的齐墩果酸。据研究表明，齐墩果酸具有抗糖尿病，降糖活性、抗菌、保肝解毒、抗肿瘤、抗病毒、消炎等众多的药理作用和生物活性，因此对齐墩果酸进行结构修饰与改造成为国内外学者研究的热点问题。

发明内容

针对现有技术存在的不足，本发明旨在提供一种齐墩果酸衍生物在制备抑菌药物中的应用。经试验证明，该齐墩果酸衍生物具有的抑菌效果较于其母体齐墩果酸有明显提高，同时对耐药菌也展现出了良好的抑制活性。

为了达到上述目的，本发明采用以下技术方案：一种齐墩果酸衍生物在制备抑菌药物中的应用，所述齐墩果酸衍生物包括以下结构：

其中R为苯环1～4位上的取代基，其各自独立为H或-COOH，R1为-COOH或-COOMe。

优选地，所述齐墩果酸衍生物包括以下结构：

优选地，所述齐墩果酸衍生物的制备方法如下：

其中R为苯环1～4位上的取代基，其各自独立为H或-COOH；

优选地，所述制备方法中的试剂和反应条件为：

a：以丙酮作为溶剂，在琼斯试剂的共同作用下，于0～5℃反应；

b：以乙酸为溶剂，加入苯肼盐酸盐，在115～120℃下反应12～15h；

c：以DMF为溶剂，加入碘甲烷、碳酸钾，使用氮气作为保护气，在室温反应12～15h。

优选地，所述齐墩果酸衍生物的浓度为2.5～10μM。

优选地，所述药物包括齐墩果酸衍生物和医学上可接受的药用辅料。

优选地，所述药物包括口服制剂。

优选地，所述口服制剂包括片剂、颗粒剂、散剂和胶囊剂。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

本发明提供了一种齐墩果酸衍生物在制备抑菌药物中的应用，通过抑菌圈测试、最小抑菌浓度测试、抑菌动力学实验证明了本发明的齐墩果酸衍生物具有良好的抑菌效果，同时发现部分齐墩果酸衍生物对耐药菌也具有一定的抑制活性，能够有效克服现有技术中存在的药物对耐药菌抑制效果较差等问题。

附图说明

图1为本发明齐墩果酸衍生物OA-a-1的¹H NMR谱图。

图2为本发明齐墩果酸衍生物OA-a-1的¹³C NMR谱图。

图3为本发明齐墩果酸衍生物OA-a-1的HRMS谱图。

图4为本发明齐墩果酸衍生物OA-a-2的¹H NMR谱图。

图5为本发明齐墩果酸衍生物OA-a-2的¹³C NMR谱图。

图6为本发明齐墩果酸衍生物OA-a-2的HRMS谱图。

图7为本发明齐墩果酸衍生物OA-a-3的¹H NMR谱图。

图8为本发明齐墩果酸衍生物OA-a-3的HRMS谱图。

图9为本发明齐墩果酸衍生物OA-a-4的¹H NMR谱图。

图10为本发明齐墩果酸衍生物OA-a-4的¹³C NMR谱图。

图11为本发明齐墩果酸衍生物OA-a-4的HRMS谱图。

图12为本发明齐墩果酸衍生物OA-b-1的¹H NMR谱图。

图13为本发明齐墩果酸衍生物OA-b-1的¹³C NMR谱图。

图14为本发明齐墩果酸衍生物OA-b-1的HRMS谱图。

图15为本发明齐墩果酸衍生物OA-b-2的¹H NMR谱图。

图16为本发明齐墩果酸衍生物OA-b-2的¹³C NMR谱图。

图17为本发明齐墩果酸衍生物OA-b-2的HRMS谱图。

图18为本发明实施例6细菌动力学生长曲线测试：OA-a-4对三种细菌的细菌动力学生长曲线(A，B和C)。

图19为本发明实施例6细菌动力学生长曲线测试：OA-b-1对三种细菌的细菌动力学生长曲线(D，E和F)。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例、对比例中，所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法，所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。

实施例1、齐墩果酸衍生物1的合成

首先称量200mg的纯度为98％以上的OA，将其加入至100mL的圆底烧瓶中，然后放置于含有冰浴装置的磁力搅拌器上，加入丙酮作为溶剂，OA溶解后，用胶头滴管向烧瓶内缓慢滴加琼斯试剂，此时，溶液的颜色会逐渐由黄色变为绿色，继续滴加，待溶液颜色不在变为绿色后，停止滴加。通过TLC板来验证反应是否完成，待完全反应后通过过滤除去有机相中的Cr₂O₃绿色沉淀，接着在45℃下减压旋蒸，除去有机相中的丙酮，然后使用去离子水和乙酸乙酯反复萃取3次，待除去有机项中的大部分水后，加入无水氯化钙，静置一段时间，待有机相中的水分完全被除去后，使用布氏漏斗进行过滤，收集滤液。最后通过柱色谱纯化，得到纯净的齐墩果酸衍生物1。

实施例2、齐墩果酸衍生物OA-a-1～4的合成

以齐墩果酸衍生物OA-a-1为例说明齐墩果酸衍生物OA-a-1～4的合成。

首先称量纯净的齐墩果酸衍生物1(200mg，0.44mmol)，将其加入至100mL的圆底烧瓶中。然后将其放置于磁力搅拌器上，加入10mL的乙酸作为溶剂，然后加入3-羧基苯肼盐酸盐(133.85mg，0.88mmol，2.0e.q.)，使用油浴加热至120℃，打开冷却水，反应15h后通过TLC来检测此反应是否完成。接着在60℃下减压旋蒸，除去有机相中的乙酸，然后使用去离子水和乙酸乙酯体系反复萃取直到除去有机项中的大部分水分，加入无水氯化钙，静置一段时间，待有机相中的水分完全被除去后，使用布氏漏斗进行过滤，收集滤液。最后通过柱色谱纯化，得到纯净的齐墩果酸衍生物OA-a-1。

齐墩果酸衍生物OA-a-1

((C₃₇H₄₉NO₄)白色粉末；石油醚：乙酸乙酯＝3:1(V:V)，R_f＝0.33；产率：30.59％。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ8.02(s,1H),7.74(dd,J＝7.6,1.1Hz,1H),7.46(dd,J＝7.9,1.1Hz,1H),7.10(t,J＝7.8Hz,1H),5.58(t,J＝3.5Hz,1H),3.18(d,J＝15.9Hz,1H),3.01(dd,J＝14.1,4.6Hz,1H),2.39(d,J＝16.0Hz,1H),2.17-1.99(m,3H),1.91(dtd,J＝18.3,13.7,4.3Hz,2H),1.82-1.74(m,2H),1.73-1.66(m,1H),1.66-1.55(m,2H),1.45-1.36(m,4H),1.33(d,J＝12.2Hz,5H),1.29(d,J＝3.8Hz,2H),1.23(s,3H),1.13(s,3H),1.01(s,3H),0.96(s,3H),0.88(s,3H),0.86(s,3H).¹³C NMR(151MHz,CDCl₃)δ185.35,174.56,143.94,142.71,137.29,126.54,123.75,123.51,122.04,119.78,115.37,107.58,52.05,46.96,46.59,45.20,42.35,41.97,39.66,39.44,37.82,33.98,33.75,33.18,32.47,32.13,30.83,30.80,27.83,25.74,23.79,23.72,22.89,22.74,19.66,16.64,16.41.HRMS(ESI-MS)m/z:[M-H]-calcd for C₃₇H₄₈NO₄:570.3859；found:570.3561。

齐墩果酸衍生物OA-a-2

(C₃₇H₄₉NO₄)；白色粉末；石油醚：乙酸乙酯＝3:1(V:V)，R_f＝0.41；产率：30.23％。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ8.27(d,J＝1.6Hz,1H),8.00(s,1H),7.86(dd,J＝8.5,1.6Hz,1H),7.28(d,J＝8.5Hz,1H),5.48-5.17(m,1H),2.94(dd,J＝14.1,4.6Hz,1H),2.79(d,J＝15.1Hz,1H),2.18(d,J＝15.2Hz,1H),2.09-1.97(m,2H),1.92-1.48(m,9H),1.47-1.38(m,2H),1.38-1.27(m,4H),1.27-1.21(m,2H),1.19(s,3H),1.15(s,4H),0.96(d,J＝25.5Hz,7H),0.85(d,J＝17.2Hz,6H).：¹³C NMR(151MHz,CDCl₃)δ185.03,173.64,143.13,142.49,139.39,128.07,123.08,123.01,122.02,119.73,110.00,108.52,53.11,46.69,46.36,45.59,41.76,41.44,39.46,38.05,36.42,34.00,33.82,33.18,32.44,32.09,30.80,30.75,27.70,25.89,23.63,23.35,23.22,22.74,19.32,16.58,15.54.HRMS(ESI-MS)m/z:[M-H]-calcd for C₃₇H₄₈NO₄:570.3859；found:570.3561。

齐墩果酸衍生物OA-a-3

(C₃₇H₄₉NO₄)；白色粉末；石油醚：乙酸乙酯＝3:1(V:V)，R_f＝0.35；产率：40.23％。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ11.26(s,1H),8.03(d,J＝1.4Hz,1H),7.67(dd,J＝8.2,1.6Hz,1H),7.51(d,J＝8.2Hz,1H),5.41(t,J＝3.7Hz,1H),2.98-2.90(m,1H),2.86(d,J＝15.0Hz,1H),2.28(d,J＝15.2Hz,1H),2.18-2.13(m,1H),2.12-2.04(m,1H),1.93(dd,J＝10.3,7.0Hz,1H),1.86-1.68(m,4H),1.62(dddd,J＝24.3,14.0,9.7,5.2Hz,4H),1.54-1.47(m,2H),1.44(d,J＝5.3Hz,4H),1.36(d,J＝11.6Hz,5H),1.29(s,3H),1.22(pd,J＝6.0,2.8Hz,1H),1.03(d,J＝2.7Hz,6H),1.01-0.93(m,7H).HRMS(ESI-MS)m/z:[M-H]-calcd for C₃₇H₄₈NO₄:570.3859；found:570.3561。

齐墩果酸衍生物OA-a-4

(C₃₇H₄₉NO₄)；白色粉末；石油醚：乙酸乙酯＝3:1(V:V)，R_f＝0.34；产率：50.42％。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ10.19(s,1H),7.78(dd,J＝7.5,1.2Hz,1H),7.74(dd,J＝7.8,1.1Hz,1H),7.16(t,J＝7.6Hz,1H),5.52-5.27(m,1H),2.93(dd,J＝13.9,4.7Hz,1H),2.87(d,J＝15.1Hz,1H),2.29(d,J＝15.2Hz,1H),2.21-2.04(m,3H),1.94(dd,J＝10.5,7.2Hz,1H),1.88-1.71(m,4H),1.70-1.55(m,3H),1.53-1.46(m,6H),1.40-1.35(m,5H),1.31-1.16(m,5H),1.06-0.99(m,9H),0.96(s,3H).¹³C NMR(151MHz,DMSO-d₆)δ169.21,144.64,143.33,136.42,130.08,123.88,123.71,122.60,118.67,113.60,106.80,54.08,46.71,46.63,46.50,42.49,41.91,41.04,38.45,37.21,34.85,34.30,33.77,33.02,32.83,31.35,31.00,28.21,26.38,24.30,23.89,23.63,23.20,19.82,17.60,16.32.HRMS(ESI-MS)m/z:[M-H]-calcd for C₃₇H₄₈NO₄:570.3859；found:570.3561。

实施例3、齐墩果酸衍生物OA-b-1～2的合成

以齐墩果酸衍生物OA-b-1的合成为例说明齐墩果酸衍生物OA-b-1～2的合成

首先称量纯净的齐墩果酸衍生物OA-a-1(200mg，0.37mmol)，放置于100mL的圆底烧瓶中，加入10mL的DMF作为溶剂，然后加入碘甲烷(47.74μL，0.74mmol，2.0e.q.)，加入碳酸钾(102.27mg，0.74mmol，2.0e.q.)作为催化剂，使用气球装满氮气作为保护气，插入烧瓶口内，在室温下反应15h。通过TLC来检测此反应是否完成，接着在45℃下减压旋蒸，除去有机相中的DMF，然后使用去离子水和乙酸乙酯体系反复萃取至少三次，加入无水氯化钙，静置一段时间，待有机相中的水分完全被除去后，使用布氏漏斗进行过滤，收集滤液。最后通过柱色谱纯化，得到纯净的齐墩果酸衍生物OA-b-1。

齐墩果酸衍生物OA-b-1

(C₃₈H₅₁NO₄)；白色粉末；石油醚：乙酸乙酯＝8:1(V:V),R_f＝0.39；产率：36.31％。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ8.12(d,J＝1.4Hz,1H),8.07(s,1H),7.83(dd,J＝8.3,1.4Hz,1H),7.46(d,J＝8.2Hz,1H),5.40(t,J＝3.7Hz,1H),3.65(s,3H),2.92(dd,J＝13.9,4.5Hz,1H),2.80(d,J＝15.0Hz,1H),2.22(d,J＝15.1Hz,1H),2.11(dd,J＝9.1,3.6Hz,2H),2.00(td,J＝15.2,14.7,4.6Hz,1H),1.84(t,J＝8.9Hz,1H),1.77-1.59(m,5H),1.55(ddt,J＝13.9,11.9,3.0Hz,3H),1.46-1.37(m,2H),1.33(d,J＝3.3Hz,4H),1.25(s,5H),1.19(s,3H),1.18-1.11(m,1H),0.95(d,J＝5.2Hz,6H),0.92(s,3H),0.83(s,3H).¹³C NMR(151MHz,CDCl₃)δ178.38,145.50,143.65,135.34,132.60,122.52,121.30,120.91,117.53,113.30,108.00,53.07,51.60,46.85,46.36,45.92,41.88,41.46,39.43,38.08,36.63,34.25,33.93,33.15,32.42,32.15,30.93,30.75,27.79,25.80,23.65,23.47,23.37,23.17,19.35,16.67,15.54.HRMS(ESI-MS)m/z:[M+Na]+calcd for C₃₈H₅₁NO₄Na:646.3479,found:646.3450。

齐墩果酸衍生物OA-b-2

(C₃₈H₅₁NO₄)；白色粉末；石油醚：乙酸乙酯＝8:1(V:V),R_f＝0.33；产率：68.12％。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ8.03(s,1H),7.76(dd,J＝7.6,1.0Hz,1H),7.50(dd,J＝8.0,1.0Hz,1H),7.14(t,J＝7.7Hz,1H),5.35(t,J＝3.6Hz,1H),3.63(s,3H),3.02(d,J＝16.0Hz,1H),2.89(dd,J＝13.7,4.6Hz,1H),2.44(d,J＝16.1Hz,1H),2.16-1.95(m,3H),1.86(dd,J＝10.6,7.1Hz,1H),1.74-1.36(m,11H),1.33(s,3H),1.31-1.24(m,5H),1.19(s,4H),0.93(s,3H),0.89(d,J＝5.8Hz,6H),0.81(s,3H).¹³C NMR(151MHz,CDCl₃)δ178.45,144.20,143.10,137.23,126.74,123.34,122.97,121.57,119.79,115.22,107.61,52.25,51.57,46.86,46.33,45.77,41.84,41.42,39.98,39.42,37.86,34.11,33.95,33.13,32.45,32.09,31.51,30.73,27.83,25.74,23.64,23.44,23.39,23.21,19.38,16.67,15.52.HRMS(ESI-MS)m/z:[M+Na]+calcd for C₃₈H₅₁NO₄Na:646.3479,found:646.3450。

实施例4、抑菌圈测试

通过滤纸片-琼脂扩散法测定齐墩果酸具衍生物的抑菌圈大小。首先，按配方配置固体培养基，加热融化，在其处于液体状态时倒出约40mL于120mm培养皿中，等待其冷却、凝固。然后，在培养皿中加入400μL浓度为1.5×10⁶CFU/mL的菌悬液并使用涂布器涂抹均匀。待菌悬液风干后，取直径为6.0mm的无菌滤纸片小心放置在固体培养基表面(每个培养基9个滤纸片，设3组实验)，轻压使滤纸片平整；用10μL移液枪移取5μL待测样品滴加在滤纸片上(尽量不要使液体流出滤纸片范围)，的DMSO作为阴性对照，加替沙星作为阳性对照，每组重复3次。待静置5～10min后，将培养皿倒置于37℃下培育12～18h后，取出培养皿，使用多功能菌落计数仪拍照并测量记录。以上步骤均需在生物安全柜内无菌条件下完成。

表1齐墩果酸衍生物抑菌圈测试

a：表明该化合物并未展现出明显的抑菌圈。

本实验选择了3种革兰仕阳性菌进行抑菌圈测试，活性结果如表1所示，部分齐墩果酸衍生物表现出了良好了抑菌活性，其抑菌圈直径最高可达10.5mm(OA-a-4对Staphylococcus aureus ATCC 6538的抑菌圈)，大约是其母体齐墩果酸的2倍(对Staphylococcus aureus ATCC6538的抑菌圈为6.3mm)，但是仍低于阳性对照药物加替沙星(对Staphylococcus aureus ATCC6538的抑菌圈为19.12mm)。通过对比其结构发现，在修饰C-2，C-3位后，在齐墩果酸的骨架上引入含有羧基的吲哚基团可以提升其抑菌活性。

实施例5、最小抑菌浓度测试

以96微孔板法测定最小抑菌浓度(MIC)。首先，将稀释得到的10个浓度的待测样品，按照浓度梯度分别移取5μL待测样品于96孔板中，再通过排枪加入195μL已经配制好的细菌浓度为1.5×10⁵CFU/mL的菌悬液，每个浓度重复四次。其中，第1～10列为待测样品的10个不同的浓度梯度，第11列加入5μL的DMSO和195μL的菌悬液培养基作为样品的阴性对照，第12列为加入5μL的加替沙星或万古霉素和195μL的菌悬液作为样品的阳性对照，A～D、E～H分别为两个样品，即一个96孔板可以进行2个待测样品的测定实验。加完样品后轻摇96微孔板使溶液混匀，盖上盖子并写上样品标记、日期及菌种类型，37℃下培养12～18h后。将微孔板取出，使用多功能菌落计数仪拍照，通过观察判断完全没有菌落生长和开始生长菌落时的临界孔位，再根据临界孔所对应的样品浓度换算得出其最小抑菌浓度，公式如下：

表2齐墩果酸衍生物最小抑菌浓度测试

a：“—”表示未测试；

本实验对抑菌圈实验中的三种革兰氏阳性菌，再加一种耐药菌对Methicillin-resistant Staphylococcus(MRSA)进行了最小抑菌浓度的测试，在抑菌圈筛选结果基础上，对含有羧基的齐墩果酸衍生测试了它们的最小抑菌浓度，同时测试了部分衍生物对耐药菌的抑制活性，实验结果如表2所示。通过与表1中的抑菌圈活性结果进行对比，可以看出两个实验活性结果基本吻合，活性最好的化合物为OA-a-4，其对三种非耐药的革兰氏阳性菌的MIC均为2.5μM，是其母体化合物齐墩果酸(MIC＝20μM)的8倍。部分含有羧基的齐墩果酸衍生物对耐药菌仍具有抑制活性，其中OA-a-4对MRSA的MIC可达4.0μM，OA-a-2的MIC可达8.0μM。

实施例6、抑菌动力学

根据最小抑菌浓度的测试结果，在OA-a和OA-b系列中选择活性最好化合物OA-a-4和OA-b-1进行抑菌动力学分析。具体实验操作如下，加入195μL配置好的细菌浓度为1.5×10⁵CFU/mL的菌悬液于96孔板中，接着加入5μL待测化合物OA-a-4和OA-b-1，每个化合物设置3个浓度(0.5×MIC、1×MIC、2×MIC)，每组实验重复三次。将96微孔板在37℃下孵育20h，并从第0h开始，每间隔2h使用多功能酶标仪测量一次600nm下的吸光度，以监测细菌的生长情况。使用Prism绘制，细菌生长-时间曲线图。

细菌生长-时间曲线图参见附图18～19。本实验选取活性良好的2个齐墩果酸衍生物OA-a-4和OA-b-1通过监测20个小时内，加入不同浓度(0.5MIC，1.0MIC，2MIC)待测化合物后细菌的存活率，绘制抑菌动力学曲线以探究细菌的生长模式。由图18～19可知，加入待测化合物后，细菌的生长和增殖都不同程度的得到了抑制。在0到2小时之间，细菌的存活率基本没有发生变化；在2到6小时内，细菌的存活率急剧下降；而在6到20小时内，低浓度(0.5倍MIC)状态下，随着时间的延长，细菌重新开始生长，而在高浓度(1.0MIC和2倍MIC)状态下，细菌始终无法生长。对比抑菌圈和最小抑菌浓度实验发现，抑菌动力学实验结果与前两者完全吻合，齐墩果酸衍生物的抑菌活性呈现出剂量依赖性。

从以上的实验结果可以得知，本发明通过滤纸片-琼脂扩散法，最小抑菌浓度测试以及抑菌动力学实验来探究6个齐墩果酸衍生物的抑菌活性大小。抑菌圈实验结果表明，部分化合物展现出了良好的抑菌效果(OA-a-4对Staphylococcus aureus ATCC 6538的抑菌圈为10.5mm)，其抑菌能力较于其母体齐墩果酸有明显提高(齐墩果酸对Staphylococcusaureus ATCC6538的抑菌圈为6.3mm)。MIC测试结果表明活性最好的衍生物为OA-a-4，其对三种非耐药的革兰氏阳性菌的MIC均为2.5μM，是其母体化合物齐墩果酸(MIC＝20μM)的8倍。其对耐药菌也展现出了良好的抑制活性，其对MRSA的MIC可达4.0μM。此外，动力学实验结果表明，在0到2小时之间，细菌的存活率基本维持不变；在2到6小时内，细菌的存活率急剧下降；而在6到20小时内，低浓度(0.5倍MIC)状态下，细菌重新开始生长，而在高浓度(MIC和2倍MIC)状态下，细菌始终无法生长，齐墩果酸衍生物的对革兰氏阳性菌的抑菌活性呈剂量依赖性，结论与最小抑菌浓度结果一致。

上述实施例仅例示性说明本发明的原理及其功效，而非用于限制本发明。任何熟悉此技术的人士皆可在不违背本发明的精神及范畴下，对上述实施例进行修饰或改变。因此，举凡所属技术领域中具有通常知识者在未脱离本发明所揭示的精神与技术思想下所完成的一切等效修饰或改变，仍应由本发明的权利要求所涵盖。

Claims

1.一种齐墩果酸衍生物作为唯一活性成分在制备抑菌药物中的应用，其特征在于，所述齐墩果酸衍生物选自以下结构：

、/>、、/>、/>。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述齐墩果酸衍生物的制备方法如下：

，其中R为苯环1~4位上的取代基，其各自独立为H或-COOH；

所述OA-a-1的结构如下：

。

3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述制备方法中的试剂和反应条件为：

a：以丙酮作为溶剂，在琼斯试剂的共同作用下，于0~5℃反应；

b：以乙酸为溶剂，加入苯肼盐酸盐，在115~120℃下反应12~15h；

c：以DMF为溶剂，加入碘甲烷、碳酸钾，使用氮气作为保护气，在室温反应12~15h。

4.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述齐墩果酸衍生物的浓度为2.5~10 μM。

5.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物包括齐墩果酸衍生物和医学上可接受的药用辅料。

6.如权利要求5所述的应用，其特征在于，所述药物包括口服制剂。

7.如权利要求6所述的应用，其特征在于，所述口服制剂包括片剂、颗粒剂、散剂和胶囊剂。