CN115490588B - 一种香榧籽油中多种不饱和脂肪酸的分离方法 - Google Patents
一种香榧籽油中多种不饱和脂肪酸的分离方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN115490588B CN115490588B CN202211133495.6A CN202211133495A CN115490588B CN 115490588 B CN115490588 B CN 115490588B CN 202211133495 A CN202211133495 A CN 202211133495A CN 115490588 B CN115490588 B CN 115490588B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- acid
- seed oil
- unsaturated fatty
- fatty acids
- torreya
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 title claims abstract description 29
- 235000021122 unsaturated fatty acids Nutrition 0.000 title claims abstract description 20
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 19
- 150000004670 unsaturated fatty acids Chemical class 0.000 title claims abstract description 19
- 241000488908 Torreya Species 0.000 title claims abstract description 17
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims abstract description 25
- 238000004185 countercurrent chromatography Methods 0.000 claims abstract description 17
- 240000000147 Torreya grandis Species 0.000 claims abstract description 15
- 235000016410 Torreya grandis Nutrition 0.000 claims abstract description 15
- WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N (E)-8-Octadecenoic acid Natural products CCCCCCCCCC=CCCCCCCC(O)=O WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 11
- LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 20:1omega9c fatty acid Natural products CCCCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 11
- QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 9-Heptadecensaeure Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 11
- 239000005642 Oleic acid Substances 0.000 claims abstract description 11
- ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N Oleic acid Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 11
- QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N isooleic acid Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCCC(O)=O QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 11
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N oleic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 claims abstract description 11
- XSXIVVZCUAHUJO-AVQMFFATSA-N (11e,14e)-icosa-11,14-dienoic acid Chemical compound CCCCC\C=C\C\C=C\CCCCCCCCCC(O)=O XSXIVVZCUAHUJO-AVQMFFATSA-N 0.000 claims abstract description 10
- 235000021297 Eicosadienoic acid Nutrition 0.000 claims abstract description 10
- RTIXKCRFFJGDFG-UHFFFAOYSA-N Chrysin Natural products C=1C(O)=CC(O)=C(C(C=2)=O)C=1OC=2C1=CC=CC=C1 RTIXKCRFFJGDFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 3
- FGUBFGWYEYFGRK-HNNXBMFYSA-N Pinocembrin Natural products Cc1cc(C)c2C(=O)C[C@H](Oc2c1)c3ccccc3 FGUBFGWYEYFGRK-HNNXBMFYSA-N 0.000 claims abstract description 3
- KCFYHBSOLOXZIF-UHFFFAOYSA-N dihydrochrysin Natural products COC1=C(O)C(OC)=CC(C2OC3=CC(O)=CC(O)=C3C(=O)C2)=C1 KCFYHBSOLOXZIF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 3
- URFCJEUYXNAHFI-ZDUSSCGKSA-N pinocembrin Chemical compound C1([C@@H]2CC(=O)C3=C(O)C=C(C=C3O2)O)=CC=CC=C1 URFCJEUYXNAHFI-ZDUSSCGKSA-N 0.000 claims abstract description 3
- IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N N-Heptane Chemical compound CCCCCCC IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 29
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 10
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 9
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 9
- 239000000376 reactant Substances 0.000 claims description 7
- OYHQOLUKZRVURQ-NTGFUMLPSA-N (9Z,12Z)-9,10,12,13-tetratritiooctadeca-9,12-dienoic acid Chemical compound C(CCCCCCC\C(=C(/C\C(=C(/CCCCC)\[3H])\[3H])\[3H])\[3H])(=O)O OYHQOLUKZRVURQ-NTGFUMLPSA-N 0.000 claims description 6
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 6
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 claims description 6
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 6
- 238000005086 pumping Methods 0.000 claims description 6
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 claims description 6
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 5
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 claims description 4
- OFBQJSOFQDEBGM-UHFFFAOYSA-N Pentane Chemical compound CCCCC OFBQJSOFQDEBGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 4
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 4
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 4
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 3
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 claims description 2
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 claims description 2
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 claims description 2
- 235000021313 oleic acid Nutrition 0.000 abstract description 9
- OYHQOLUKZRVURQ-HZJYTTRNSA-N Linoleic acid Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/CCCCCCCC(O)=O OYHQOLUKZRVURQ-HZJYTTRNSA-N 0.000 abstract description 5
- 235000020778 linoleic acid Nutrition 0.000 abstract description 5
- OYHQOLUKZRVURQ-IXWMQOLASA-N linoleic acid Natural products CCCCC\C=C/C\C=C\CCCCCCCC(O)=O OYHQOLUKZRVURQ-IXWMQOLASA-N 0.000 abstract description 5
- 238000000746 purification Methods 0.000 abstract description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 3
- 239000003513 alkali Substances 0.000 abstract description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 abstract description 2
- 230000020477 pH reduction Effects 0.000 abstract description 2
- 239000000287 crude extract Substances 0.000 abstract 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 15
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- OKKJLVBELUTLKV-VMNATFBRSA-N methanol-d1 Chemical compound [2H]OC OKKJLVBELUTLKV-VMNATFBRSA-N 0.000 description 8
- NYRISADACLJHMJ-UHFFFAOYSA-N pinosylvic acid Natural products OC(=O)C1=C(O)C=C(O)C=C1C=CC1=CC=CC=C1 NYRISADACLJHMJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 7
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 6
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 6
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 6
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 6
- HXQHFNIKBKZGRP-URPRIDOGSA-N (5Z,9Z,12Z)-octadecatrienoic acid Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/CC\C=C/CCCC(O)=O HXQHFNIKBKZGRP-URPRIDOGSA-N 0.000 description 5
- HXQHFNIKBKZGRP-UHFFFAOYSA-N Ranuncelin-saeure-methylester Natural products CCCCCC=CCC=CCCC=CCCCC(O)=O HXQHFNIKBKZGRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 5
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 5
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 4
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 4
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 4
- 238000002330 electrospray ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 239000004367 Lipase Substances 0.000 description 3
- 102000004882 Lipase Human genes 0.000 description 3
- 108090001060 Lipase Proteins 0.000 description 3
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 3
- 235000019421 lipase Nutrition 0.000 description 3
- -1 polymethylene Polymers 0.000 description 3
- HGXBRUKMWQGOIE-AFHBHXEDSA-N (+)-pinoresinol Chemical compound C1=C(O)C(OC)=CC([C@@H]2[C@@H]3[C@@H]([C@H](OC3)C=3C=C(OC)C(O)=CC=3)CO2)=C1 HGXBRUKMWQGOIE-AFHBHXEDSA-N 0.000 description 2
- 101100289061 Drosophila melanogaster lili gene Proteins 0.000 description 2
- FOIXSVOLVBLSDH-UHFFFAOYSA-N Silver ion Chemical compound [Ag+] FOIXSVOLVBLSDH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000006136 alcoholysis reaction Methods 0.000 description 2
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N hexadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- OHOPKHNWLCMLSW-UHFFFAOYSA-N pinoresinol Natural products C1=C(O)C(OC)=CC(C2C3C(C(OC3)C=3C=C(CO)C(O)=CC=3)CO2)=C1 OHOPKHNWLCMLSW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000007221 pinoresinol Nutrition 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 2
- 238000005809 transesterification reaction Methods 0.000 description 2
- BURBOJZOZGMMQF-UHFFFAOYSA-N xanthoxylol Natural products C1=C(O)C(OC)=CC=C1C1C(COC2C=3C=C4OCOC4=CC=3)C2CO1 BURBOJZOZGMMQF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PRHHYVQTPBEDFE-URZBRJKDSA-N (5Z,11Z,14Z)-icosatrienoic acid Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/CCCC\C=C/CCCC(O)=O PRHHYVQTPBEDFE-URZBRJKDSA-N 0.000 description 1
- SIZDUQQDBXJXLQ-UHFFFAOYSA-N 2-(3-acetyl-2,2-dimethylcyclobutyl)acetic acid Chemical compound CC(=O)C1CC(CC(O)=O)C1(C)C SIZDUQQDBXJXLQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 241000488899 Cephalotaxus Species 0.000 description 1
- 206010010774 Constipation Diseases 0.000 description 1
- 206010011224 Cough Diseases 0.000 description 1
- 206010019909 Hernia Diseases 0.000 description 1
- 206010062717 Increased upper airway secretion Diseases 0.000 description 1
- 208000015817 Infant Nutrition disease Diseases 0.000 description 1
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 241000207836 Olea <angiosperm> Species 0.000 description 1
- 235000021314 Palmitic acid Nutrition 0.000 description 1
- 235000008582 Pinus sylvestris Nutrition 0.000 description 1
- 241000218626 Pinus sylvestris Species 0.000 description 1
- 244000288644 Podocarpus falcatus Species 0.000 description 1
- 235000018792 Podocarpus falcatus Nutrition 0.000 description 1
- 206010036790 Productive cough Diseases 0.000 description 1
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 1
- 241001247821 Ziziphus Species 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 208000038016 acute inflammation Diseases 0.000 description 1
- 230000006022 acute inflammation Effects 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000010668 complexation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000007822 coupling agent Substances 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 201000006549 dyspepsia Diseases 0.000 description 1
- PRHHYVQTPBEDFE-UHFFFAOYSA-N eicosatrienoic acid Natural products CCCCCC=CCC=CCCCCC=CCCCC(O)=O PRHHYVQTPBEDFE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 description 1
- 239000003205 fragrance Substances 0.000 description 1
- 235000021588 free fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 239000004519 grease Substances 0.000 description 1
- 238000009499 grossing Methods 0.000 description 1
- 208000014617 hemorrhoid Diseases 0.000 description 1
- 239000000413 hydrolysate Substances 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 230000003020 moisturizing effect Effects 0.000 description 1
- WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N n-Pentadecanoic acid Natural products CCCCCCCCCCCCCCC(O)=O WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 1
- 230000005311 nuclear magnetism Effects 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 208000026435 phlegm Diseases 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 239000001839 pinus sylvestris Substances 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 150000004671 saturated fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 229910052709 silver Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004332 silver Substances 0.000 description 1
- QDRKDTQENPPHOJ-UHFFFAOYSA-N sodium ethoxide Chemical compound [Na+].CC[O-] QDRKDTQENPPHOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C51/00—Preparation of carboxylic acids or their salts, halides or anhydrides
- C07C51/09—Preparation of carboxylic acids or their salts, halides or anhydrides from carboxylic acid esters or lactones
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C51/00—Preparation of carboxylic acids or their salts, halides or anhydrides
- C07C51/42—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C51/00—Preparation of carboxylic acids or their salts, halides or anhydrides
- C07C51/42—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives
- C07C51/47—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives by solid-liquid treatment; by chemisorption
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C51/00—Preparation of carboxylic acids or their salts, halides or anhydrides
- C07C51/42—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives
- C07C51/48—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives by liquid-liquid treatment
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
- C11C—FATTY ACIDS FROM FATS, OILS OR WAXES; CANDLES; FATS, OILS OR FATTY ACIDS BY CHEMICAL MODIFICATION OF FATS, OILS, OR FATTY ACIDS OBTAINED THEREFROM
- C11C1/00—Preparation of fatty acids from fats, fatty oils, or waxes; Refining the fatty acids
- C11C1/02—Preparation of fatty acids from fats, fatty oils, or waxes; Refining the fatty acids from fats or fatty oils
- C11C1/025—Preparation of fatty acids from fats, fatty oils, or waxes; Refining the fatty acids from fats or fatty oils by saponification and release of fatty acids
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Fats And Perfumes (AREA)
Abstract
本发明公开了一种香榧籽油中多种不饱和脂肪酸的分离方法，所述分离方法解决了现有技术分离物单一及成本高的问题。所公开的方案采用碱溶液对样品进行水解，酸化后直接通过萃取获得粗提物，通过一次逆流色谱分离便实现了香榧籽油中金松酸、油酸、亚油酸以及二十碳二烯酸多种不饱和脂肪酸成分的分离纯化，有效地缩短了分离制备的时间；并且该方法不仅成本低，而且操作简单可靠，为香榧籽油中不饱和脂肪酸的开发利用提供了技术支撑，具有较好的应用价值。
Description
技术领域
本发明涉及香榧籽油中营养物的分离方法，具体涉及一种香榧籽油中多种高纯度不饱和脂肪酸的分离方法。
背景技术
香榧（Torreya grandis），又称赤果、玉山果、玉榧、野极子等，为红豆杉目、红豆杉科、榧树属常绿乔木，中国原产树种，是世界上稀有的经济树种，其果实外有坚硬的果皮包裹，大小如枣，核如橄榄，两头尖，呈椭圆形，成熟后果壳为黄褐色或紫褐色，种实为黄白色，富有油脂和特有的一种香气。香榧子不但营养丰富，它的功效和作用也非常多，是公认的天然的美颜食品和药材，经常食用有润泽肌肤、延缓衰老的作用；其次传统中医药学认为，香榧子具有消除疳积、润肺滑肠、化痰止咳之功能，并且适用于多种便秘、疝气、痔疮、消化不良、食积、咳痰症状。现代研究表明，香榧子提取物还具有抗氧化、抗急性炎性以及降血脂等的生理功能。
香榧籽油中不饱和脂肪酸含量最高可以达到90%左右，香榧籽油主要含有亚油酸（39.85%~46.15%）、油酸（22.68%~35.10%）、金松酸（9.13%~12.96%）、棕榈酸（7.34%~8.22%）、硬脂酸（2.64%~3.03%）等9种脂肪酸。其中金松酸具有抗炎、抗病毒、提高免疫力的效果，具有调节血脂、预防动脉粥样硬化、促进新陈代谢等多种生理活性。
现有针对香榧籽油中不饱和脂肪酸的纯化方法主要有脂肪酸选择性醇解结合尿素包合法、逆流色谱耦合银离子络合法等，并且相关的方法主要集中在金松酸的分离纯化方面，且成本高。例如：
CN109796328A用区域选择性脂肪酶TLIM或RMIM适度催化香榧籽油、乙醇酯交换反应，实现金松酸初步富集，然后尿素包合除去饱和脂肪酸与低饱和度不饱和脂肪酸后进一步纯化金松酸，该方法所用脂肪酶价格昂贵，生产成本高；另外，获得的产品的纯度在90%以上，纯度依然难以满足医药等行业的要求。
孟祥河等（参见，孟祥河,杨奇波,肖丹,夏朝盛,樊律廷,宋丽丽,吴家胜.香榧籽油金松酸的分离及其1,3-甘油二酯的制备研究[J].中国粮油学报,2020,35(07):72-78）采用酯交换反应结合尿素包合法，将香榧籽油中金松酸的含量提升到了60-73%，但产品的纯度较低。
孟祥河等（参见，Xianghe Meng,Dan Xiao,Qin Ye,Xiaohua Nie,Jiasheng Wu,Lili Song.Positional distribution of Δ5-olefinic acids in triacylglycerolsfrom Torreya grandis seed oil: Isolation and purification of sciadonic acid[J].Industrial Crops&Products,2020,143）又利用脂肪酶选择性醇解和尿素包合两步富集过程，将香榧籽油中金松酸的含量由9.95%提高到了80.14%，纯度得到了一定的提升，但脂肪酶的使用增加生产成本；另外，借助银离子色谱法对尿素包合富集产物进行分离，产品的纯度虽然可以高达99%，但成本同样高昂。
Hammann等（参见，Simon Hammann, Markus Schröder, Carolin Schmidt,Walter Vetter. Isolation of two Δ5 polymethylene interrupted fatty acidsfrom Podocarpus falcatus by countercurrent chromatography[J].Journal ofChromatography A,2015,1394）通过三步逆流色谱分离得到纯度为99％的金松酸，但使用的溶剂毒性较高，同时产品的回收率较低。
CN112679343A首先利用乙醇钠将香榧籽油中的金松酸转化成金松酸乙酯，然后选用银离子作为耦合剂，采用逆流色谱对其进行分离纯化,该方法所用的乙醇钠和银离子盐的价格都较高，生产成本巨大；另外，产品的纯度只有20-85%，纯度较低。
发明内容
针对现有技术的缺陷或不足，本发明提供了一种香榧籽油中多种高纯度不饱和脂肪酸的分离方法。
为此，本发明的分离方法包括以下步骤：
（1）将香榧籽油与碱性水溶液在40-80℃条件下回流反应，反应完成后用1 M盐酸或冰乙酸调整反应物pH值为3-5后，用有机溶剂萃取pH值为3-5的所述反应物，所得萃取液经浓缩得浓缩物；所述碱性水溶液为KOH水溶液或NaOH水溶液；
（2）所述浓缩物用上相和下相溶解后得样品溶液；庚烷、无水乙醇和水混合后静置分离上层液体和下层液体，其中上层液体为所述上相、下层液体为所述下相；
（3）所述样品溶液用逆流色谱分离得多种不饱和脂肪酸，逆流色谱分离的固定相为所述上相，流动相为所述下相；流动相的泵送速度为1-10 mL/min，检测波长为190-230nm，柱温为20-40℃；逆流色谱仪器转速为500-1500 rpm。
进一步，流动相的所述泵送速度为4 mL/min，所述检测波长为210 nm，所述柱温为30℃，所述仪器转速为1000 rpm，收集洗脱时间为115 min-220 min时间段的分离物得到多种不饱和脂肪酸。
进一步，分别收集洗脱时间为115-158 min、165-179 min、185-195 min、205-220min时间段的分离物得到亚油酸、金松酸、油酸和二十碳二烯酸。
可选地，在步骤（1）中，所述有机溶剂选用庚烷、戊烷、己烷、石油醚或者乙酸乙酯。
可选地，在步骤（2）中，所述庚烷、无水乙醇和水按体积比10:9:1混合。
可选地，在步骤（3）中，所述庚烷、无水乙醇和水混合液替换为庚烷、甲醇和水的混合液，己烷、甲醇和水混合液或者己烷、无水乙醇和水混合液。
本发明利用逆流色谱对香榧籽油水解产物进行分离，可以同时获得高纯度的金松酸、油酸、亚油酸以及二十碳二烯酸4种不饱和脂肪酸化合物。具体方案采用碱溶液对样品进行水解，酸化后直接通过萃取获得金松酸等脂肪酸的产物，通过一次逆流色谱分离便实现了香榧籽油中多种不饱和脂肪酸成分的分离纯化，有效地缩短了分离制备的时间；并且该方法不仅成本低，而且操作简单可靠，为香榧籽油中不饱和脂肪酸的开发利用提供了技术支撑，具有较好的应用价值。
附图说明
图1为实施例1分离的逆流色谱分离谱图；
图2为实施例1所得分离物的HPLC分析图；
图3为实施例2的逆流色谱分离图；
图4为实施例2分段产物的HPLC分析图。
具体实施方式
除非有特殊说明，本文中的术语或方法根据相关领域普通技术人员的认识理解或采用已有相关方法实现。
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本公开而不用于限制本公开的范围。
下述实施所用的逆流色谱仪为江阴逆流科技有限公司生产的OptiChrome-300PLUS型号高速逆流色谱仪。所用香榧籽油、试剂均为市售产品。
实施例1：
（1）将10 mL 0.5 M KOH水溶液和1 g香榧籽油（该香榧籽油中二十碳二烯酸、油酸、金松酸、亚油酸的含量分别约为7.3%、12.9%、17.5%、38.4%）加入反应容器中，70℃水浴回流反应2 h后得反应物；向反应物中加适量盐酸调节反应物pH至3左右后，加入正庚烷萃取三次（正庚烷共50 mL），合并萃取液，用旋转蒸发仪浓缩得浓缩物；
（2）将体积比为10:9:1的庚烷、无水乙醇和水混匀后静置分层并分离出上层液体和下层液体，分别为上相和下相；在500 mg的浓缩物中加入上相和下相溶液各5 mL，将样品充分溶解得样品溶液；
（3）以15 mL/min速度泵入上相溶液作为固定相，待固定相充满逆流色谱后，开启速度控制器，转速达到1000 rpm以后以4 mL/min的速度泵入下相，将样品溶液通过进样系统注入逆流色谱，开启紫外检测器，设定检测波长210 nm，温度为30℃。逆流色谱分离谱图如图1所示。
收集洗脱时间为115-220分钟的分离物，并对分离物进行HPLC检测和核磁检测。
HPLC分析的条件为：色谱柱为YMC-C18色谱柱（id 4.6×150 mm，5 μm）；以甲醇（A）和三氟乙酸（0.03%，v/v）溶液（B）为流动相进行梯度洗脱；所述梯度洗脱条件为0~15 min，80% -100% A，15~25 min，100% A；柱温为30℃；流速为0.8 mL/min；进样体积为5 µL；检测波长为210 nm。图2为实施例1分离的游离脂肪酸的HPLC分析谱图。
进一步对各分离物进行核磁共振检测分析，鉴定结果如下：
115-158 min时间段分离物：ESI-MS, m/z 599.35 [2M+K]+。1H-NMR(400MHz,MeOD) :5.37(m, 4H),2.78(t, 2H), 2.30(t, 2H), 2.06(m, 4H), 1.64(m, 2H),1.37(m, 14H), 0.90(m, 3H)。13C-NMR(100MHz, MeOD) />：178.20, 131.50， 131,04，129.25，129.20， 35.33， 32.82, 30.86, 30.62， 30.47， 30.40， 30.40， 28.35， 28.35，26.75， 26.29，23.79， 14.71。鉴定化合物为亚油酸。
165-179 min时间段分离物：ESI-MS, m/z 651.31 [2M+K]+。1H-NMR(400MHz,MeOD) : 5.34(m, 6H), 2.78(t, 2H), 2.30(t, 2H) ,2.06(m, 8H), 1.64(m, 2H),1.37(m, 2H), 1.31(m, 8H), 0.90(m, 3H) 13C-NMR(100MHz, MeOD) />：177.77,131.97, 131.15, 130.99, 130.02, 129.38, 129.24, 35.22, 34.56, 33.27, 30.82,30.82, 30.62, 30.46, 28.24, 27.76, 26.73, 26.3, 23.84, 14.63。鉴定化合物为金松酸。
185-195 min时间段分离物：ESI-MS, m/z 603.42 [2M+K]+。1H-NMR(400MHz,MeOD) : 5.34(m, 2H), 2.30(t, 2H) ,2.06(m, 4H), 1.64(m, 2H), 1.37(m, 2H),1.31(m, 18H), 0.90(m, 3H)。 13C-NMR(100MHz, MeOD) />：177.58, 130.80， 130.70，34.89， 33.00， 30.78， 30.73， 30.42， 30.39， 30.28， 30.25， 30.17， 30.13， 28.06，28.05， 26.03， 23.67， 14.39。鉴定化合物为油酸。
205-220 min时间段分离物：ESI-MS, m/z 655.31 [2M+K]+。1H-NMR(400MHz,MeOD) : 5.34(m, 4H), 2.78(t, 2H), 2.30(t, 2H) ,2.06(m, 6H), 1.64(m, 2H),1.31(m, 16H), 0.90(m, 3H) 13C-NMR(100MHz, MeOD)/>：177.63， 131.57， 130.68，130.49， 128.84， 34.85， 32.84， 32.46， 30.62， 30.53， 30.12, 30.05, 29.97，27.92， 27.80， 27.35， 26.32， 25.93， 23.41， 14.21。鉴定化合物为二十碳二烯酸。
实施例1的的分离结果如图1所示，在4 h内完成分离，经HPLC分析后合并，得到高纯度的亚油酸、金松酸、油酸、二十碳二烯酸产物，分离得到的亚油酸、金松酸、油酸、二十碳二烯酸质量分别为：39 mg、18 mg、13 mg、7 mg；并采用面积归一化的方法计算样品纯度，分离得到的亚油酸、金松酸、油酸、二十碳二烯酸的纯度分别为：98%、96%、94%、96%。
实施例2：
该实施例与实施例1不同的是，用体积比为5:5:9:1正庚烷、乙酸乙酯、甲醇和水溶剂体系替换庚烷、无水乙醇和水溶剂体系；收集70-80 min以及85-95 min段分离产物。
图3为实施例2逆流色谱分离图；图4为实施例2逆流分段产物HPLC分析图，从图中可以看出4种脂肪酸没有得到有效的分离，分离产物为几种脂肪酸的混合物。
Claims (4)
1.一种香榧籽油中多种不饱和脂肪酸的分离方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
（1）将香榧籽油与碱性水溶液在40-80℃条件下回流反应，反应完成后用1 M盐酸或冰乙酸调整反应物pH值为3-5后，用有机溶剂萃取pH值为3-5的所述反应物，所得萃取液经浓缩得浓缩物；所述碱性水溶液为KOH水溶液或NaOH水溶液；
（2）所述浓缩物用上相和下相溶解后得样品溶液；庚烷、无水乙醇和水混合后静置分离上层液体和下层液体，其中上层液体为所述上相、下层液体为所述下相，庚烷、无水乙醇和水按体积比10:9:1混合；
（3）所述样品溶液用逆流色谱分离得到亚油酸、金松酸、油酸和二十碳二烯酸，逆流色谱分离的固定相为所述上相，流动相为所述下相；流动相的泵送速度为1-10 mL/min，检测波长为190-230 nm，柱温为20-40℃；逆流色谱仪器转速为500-1500 rpm。
2. 如权利要求1所述的香榧籽油中多种不饱和脂肪酸的分离方法，其特征在于，流动相的所述泵送速度为4 mL/min，所述检测波长为210 nm，所述柱温为30℃，所述仪器转速为1000 rpm，收集洗脱时间为115 min-220 min时间段的分离物得到多种不饱和脂肪酸。
3. 如权利要求2所述的香榧籽油中多种不饱和脂肪酸的分离方法，其特征在于，分别收集洗脱时间为115-158 min、165-179 min、185-195 min、205-220 min时间段的分离物得到亚油酸、金松酸、油酸和二十碳二烯酸。
4.如权利要求1所述的香榧籽油中多种不饱和脂肪酸的分离方法，其特征在于，在步骤（1）中，所述有机溶剂选用庚烷、戊烷、己烷、石油醚或者乙酸乙酯。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202211133495.6A CN115490588B (zh) | 2022-09-18 | 2022-09-18 | 一种香榧籽油中多种不饱和脂肪酸的分离方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202211133495.6A CN115490588B (zh) | 2022-09-18 | 2022-09-18 | 一种香榧籽油中多种不饱和脂肪酸的分离方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN115490588A CN115490588A (zh) | 2022-12-20 |
| CN115490588B true CN115490588B (zh) | 2024-02-06 |
Family
ID=84471203
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202211133495.6A Active CN115490588B (zh) | 2022-09-18 | 2022-09-18 | 一种香榧籽油中多种不饱和脂肪酸的分离方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN115490588B (zh) |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104031013A (zh) * | 2014-06-17 | 2014-09-10 | 浙江工业大学 | 一种利用高速逆流色谱分离纯化制备丹酚酸b和迷迭香酸的方法 |
| CN109796328A (zh) * | 2019-03-14 | 2019-05-24 | 浙江工业大学 | 一种高纯度香榧籽油金松酸的分离方法 |
| CN110590545A (zh) * | 2019-09-11 | 2019-12-20 | 上海同田生物技术股份有限公司 | 一种完全分离油酸和亚油酸的方法 |
| CN112679343A (zh) * | 2020-12-11 | 2021-04-20 | 浙江工业大学 | 一种利用香榧籽油制备高纯度金松酸乙酯的方法 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20010008387A (ko) * | 2000-11-30 | 2001-02-05 | 이성권 | 결정화방법을 이용한 고순도 불포화지방산의 분리 정제 방법 |
-
2022
- 2022-09-18 CN CN202211133495.6A patent/CN115490588B/zh active Active
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104031013A (zh) * | 2014-06-17 | 2014-09-10 | 浙江工业大学 | 一种利用高速逆流色谱分离纯化制备丹酚酸b和迷迭香酸的方法 |
| CN109796328A (zh) * | 2019-03-14 | 2019-05-24 | 浙江工业大学 | 一种高纯度香榧籽油金松酸的分离方法 |
| CN110590545A (zh) * | 2019-09-11 | 2019-12-20 | 上海同田生物技术股份有限公司 | 一种完全分离油酸和亚油酸的方法 |
| CN112679343A (zh) * | 2020-12-11 | 2021-04-20 | 浙江工业大学 | 一种利用香榧籽油制备高纯度金松酸乙酯的方法 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 牛丽影 ; 吴晓琴 ; 张英 ; .香榧籽油的脂肪酸及不皂化物组成分析.中国粮油学报.2011,(06),52-55页. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN115490588A (zh) | 2022-12-20 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN105255579B (zh) | 一种牡丹籽油的提取方法 | |
| CN101139373B (zh) | 一种快速规模化提取和纯化亚麻木酚素的方法 | |
| CN101278743B (zh) | 一种从蚕蛹中提取不饱和脂肪酸的方法 | |
| CN111072449B (zh) | 一种以含谷维素的皂脚为原料制备天然阿魏酸的方法 | |
| CN102320953B (zh) | 用毛叶山桐子毛油制备天然α-亚麻酸的方法 | |
| CN101525558B (zh) | 蜂花粉中功能性多不饱和脂肪酸的制备工艺 | |
| CN101333203A (zh) | 落叶松中萃取二氢化槲皮素的方法 | |
| CN105111098A (zh) | 从玛咖中提取纯化玛咖酰胺单体化合物的方法 | |
| CN100344602C (zh) | 超临界co2连续萃取杜仲翅果仁中有效成份的工艺方法 | |
| CN102229593A (zh) | 毛叶山桐子毛油制备天然维生素e的方法 | |
| CN102579516A (zh) | 一种从大果沙棘果渣中分离纯化沙棘黄酮的方法 | |
| CN110903677A (zh) | 一种栀子黄色素与蓝色素同时制备的方法 | |
| CN115490588B (zh) | 一种香榧籽油中多种不饱和脂肪酸的分离方法 | |
| CN106360727B (zh) | 一种植物的综合利用方法 | |
| CN115010618B (zh) | 一种可降尿酸的金色酰胺醇酯分离纯化方法及其应用 | |
| CN108635408B (zh) | 一种桑叶提取物及其制备方法、应用与保健酒 | |
| CN101851221A (zh) | 一种从落叶松中制备二氢槲皮素的方法 | |
| CN106220480A (zh) | 罐组装动态逆流提取铁皮石斛中石斛酚的工艺 | |
| CN106810619A (zh) | 一种银杏外种皮果胶和聚戊烯醇提取方法 | |
| CN105193880A (zh) | 一种软枣猕猴桃黄酮的提取方法 | |
| WO2024055337A1 (zh) | 一种香榧籽油中多种高纯度不饱和脂肪酸的分离方法 | |
| CN1456559A (zh) | 提取大豆异黄酮的方法 | |
| CN113214233A (zh) | 一种从芒果核中提取纯化芒果苷的方法 | |
| CN112125946A (zh) | 一种从沙棘果油中分离纯化植物甾醇的方法 | |
| CN113582897A (zh) | 一种从西兰花种子中提取萝卜硫素的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |