CN115486360A - 一种新型脱毒人参果苗无糖高效生根培养及移栽方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及苗木繁育移栽技术领域,其目的在于提供了一种新型脱毒人参果苗无糖高效生根培养及移栽方法,包括以下步骤:先将培养瓶中培养的人参果脱毒苗转接到装有蛭石的无糖培养盒中,然后向无糖培养盒中通入CO2,自第3天开始每天给予光照12小时,并且每隔4天向无糖培养盒中加入50ml营养液,培养18~20天后,打开盒盖,在自然条件下进行炼苗,继续培养到23~25天后,移至小拱棚内进行培养7‑10天,最后移栽到空穴盘和育苗床上继续培养即可。本发明利用无糖培养盒中的蛭石作为生长载体,同时采用人工控制光和CO2浓度,定期浇灌营养液,优化了生长环境,有效缩短了人参果苗生根培养时间,减少微生物污染率,促进植株健壮生长,提高移栽成活率。
Description
技术领域
本发明属于苗木繁育移栽技术领域,具体涉及一种新型脱毒人参果苗无糖高效生根培养及移栽方法。
背景技术
人参果,属茄科类多年生双子叶草本植物,又称香瓜茄、南美香瓜茄、长寿果、艳果等;果实不仅可以作为水果,还能作为蔬菜食用,具有抗癌、抗衰老、降血压、降血糖、消炎、补钙、美容等功效,曾被医学界称之为“生命之火”和“抗癌之王”。人参果可开发成饮料、罐头、果冻、冻干人参果片等,应用前景广阔。在生产上,人参果的繁殖多采用扦插繁殖,然而长期的无性繁殖和不良的栽培环境使得人参果体内病毒迭代积累,导致果实品质退化,产量下降,田间病毒病发生比较严重,已成为人参果产业化发展的制约因素。人参果茎尖脱毒技术和组织培养工厂化育苗技术已成熟,推动了人参果种苗向大规模、优质高效、低成本和周年化生产发展,但是脱毒人参果组培苗生长弱和移栽成活率低严重影响着脱毒人参果产业化开发。
目前国内外脱毒育人参果苗生产方面,通常是在无菌的条件下,在培养瓶中以琼脂作为培养载体进行生长,但脱毒组培苗的光合能力弱,茎比较细且容易徒长,叶片较小,生根质量差,生产的苗木瘦弱,移栽驯化死苗现象严重。
通常采用的生根方法是:用量筒依次移取MS培养基母液A液100ml、B液10ml、C液10ml、D液10ml和0.05mg/L IBA溶液4ml,混匀后用蒸馏水或自来水定容至1000ml。取定溶液约1/3倒入小铝锅中加热,同时,加入蔗糖30g,琼脂条7g~9g,边加热边搅拌,旺火煮开,再用温火加热,直至琼脂全部融化。然后再将剩余的2/3加进去,摇匀即可。最后用0.1M的NaOH或HCl将溶液pH值调到5.8~6.0,趁热把培养基分装入培养瓶(φ7cm、h10cm),每瓶装30ml~35ml,盖上瓶盖。将分装好的培养基放入高压灭菌器内,压力0.11MPa~0.14MPa,温度120℃~126℃,灭菌20min,取出后待培养基凝固后即可使用。取试管苗,切成带腋芽的小茎段转接到生根培养基上,在光照12h以上、照度3000 1x以上、温度25±2℃的条件下,培养14~20天可形成根系发达的小植株。
通常采用的移栽方法是:将培养瓶移到自然光下照射2~3天,再打开瓶盖在空气湿度60%~100%条件下处理1~2天,然后从瓶中取出脱毒苗,用15~20℃温清水洗净根部粘连的琼脂培养基,移栽到盛有基质的穴盘中,压紧压实植株周围的基质,浇轻水1次,把穴盘放入有防虫设施的网室或温室内的小拱棚中,移栽后前3天要遮光,以后逐渐用散射光照射,当幼苗有新的生长时,逐渐加强光照,10天后,待幼苗成活后撤去小拱棚,30~35天后可以把穴盘苗移栽到日光温室中。这种移栽方法仅限于有糖培养微繁殖的组培苗,技术要求高、费工、费时、成本高,上述诸多不利因素严重制约着人参果产业的健康化发展。
发明内容
本发明的目的在于提供一种新型脱毒人参果苗无糖高效生根培养及移栽方法,以解决上述背景技术中提出的问题。
为了实现上述目的,本发明采用的技术方案是:
一种新型脱毒人参果苗无糖高效生根培养及移栽方法,包括以下步骤:
S1:将蛭石灭菌后装到无糖培养盒中,厚3~4cm,用无糖营养液将蛭石浇透,待用;
S2:把培养瓶中的人参果脱毒苗培养25~30天,剪成带两片叶的茎段,叶芽朝上转接到装有蛭石的无糖培养盒中,每盒移接100株苗,盖上盒盖并且用封口膜封闭盒盖与盒体间的缝隙;
S3:将无糖培养盒放入经过紫外线消毒的密闭房间的培养架上,向无糖培养盒内通入浓度为2600ppm的CO2,持续8h,间隔8h后继续通入CO2;
S4:培养期内前2天不进行光照,自第3天开始给予光照强度80umol/m2/s,第8天开始给予光照强度160umol/m2/s,每天光照12小时;
S5:每隔4天向无糖培养盒中加入50ml营养液作为营养补充;
S6:在无糖培养盒中培养18~20天后,打开盒盖,在光照强度80umol/m2/s的自然条件下进行炼苗;
S7:23~25天后,将无糖培养盒中苗移栽到装有基质的72孔穴盘中,放到小拱棚内,小拱棚上面覆盖遮阳网,将基质浇透水,保持恒温25℃培养,每天浇水1次;
S8:在小拱棚中培养7~10天后,移到育苗床上培养20~25天左右,即可成生产用苗。
所述步骤S1中蛭石灭菌前先按照45~60%含水率加水混合后,再装入布袋中高压蒸汽灭菌25min。
所述步骤S1中四个无糖培养盒为一组,四个无糖培养盒的穿板接头进气孔均通过软管与CO2分流器的四个出气头相连接,CO2分流器的进气口、过滤器和气泵一次通过软管相连接,所述气泵上连接有定时开关。
所述步骤S3中,培养架每层上放置有两组无糖培养盒,两组无糖培养盒上未连接气泵的一端用软管连接在一起。
所述步骤S5中营养液由三元复合肥和水按重量比1~3:100配制而成。
所述三元复合肥由重量比为385:147:302:166的磷酸二氢钾、硫酸钾、硝酸铵和尿素混合配置而成。
综上所述,由于采用了上述技术方案,本发明的有益效果是:
本发明建立人参果无糖高效生根培养及移栽方法,主要是利用无糖培养盒中的蛭石作为生长载体,不仅成本较低还能进行重复使用,同时通过外界动态通入CO2代替琼脂培养基中糖作为脱毒苗生长的碳源进行自养生长,并采用人工控制光和CO2浓度,定期浇灌营养液,优化了生长环境,提高了脱毒组培苗的自身光合能力和适应外界环境能力以及组培苗生根质量,减少微生物污染率,促进植株健壮生长,提高移栽成活率,有效缩短了7~10天的人参果苗生根培养时间,繁殖速度快,能够适用于批量生产,有效解决了现有人参果脱毒苗生长质量差,微生物污染严重以及移栽成活率低等问题。
附图说明
图1是本发明实施例脱毒人参果苗在无糖培养盒中的生长示意图。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚,下面将结合本发明实施例中的附图,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。通常在此处附图中描述和示出的本发明实施例的组件可以以各种不同的配置来布置和设计。
因此,以下对在附图中提供的本发明的实施例的详细描述并非旨在限制要求保护的本发明的范围,而是仅仅表示本发明的选定实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
实施例1
一种新型脱毒人参果苗无糖高效生根培养及移栽方法,包括以下步骤:
S1:无糖培养盒设备组装:通常组培架(120*60cm)上可放置8个无糖培养盒(21*27.5cm),4个无糖培养盒为一组,用24cm、31.5cm、43.5cm、55cm硅胶管各一根,一端分别连接四个无糖盒的穿板接头进气孔上,另一端分别连接CO2分流器的四个出气头上,再用两根15cm硅胶管,将CO2分流器进气口、过滤器和气泵出气口串接在一起,并在每个气泵上串联一个开关,两组无糖培养盒装置的未连接气泵一端用硅胶管连接在一起,然后在每行组培架同一端气泵开关前串联安装自动控制时间的开关,在前面再安装一个自动控制时间的微调开关,最后将自动控制小时开关接上插座,即可;
S2:蛭石灭菌及装盒:蛭石需先灭菌,灭菌前先按照45~60%含水率(根据蛭石颗粒大小确定)加水混合后,再装入布袋中高压蒸汽灭菌25min;将灭菌蛭石装到无糖盒,厚3~4cm,用蒸馏水将蛭石浇透,待用;
S3:脱毒瓶苗转接:把培养瓶中脱毒苗培养25~30天,剪成带两片叶的茎段,叶芽朝上转接到装有蛭石的无糖培养盒中,每盒移接100株苗,盖上盒盖并且用封口膜封闭盒盖与盒体间的缝隙;
S4:转接后放入经过紫外线消毒的密闭房间的培养架上,打开开关,开启培养盒的通气孔,向无糖培养盒内通入浓度为2600ppm的CO2,每次供CO28小时,间隔8小时后继续通入CO2;
S5:培养期内前2天不进行光照,自第3天开始给予光照强度80umol/m2/s,第8天开始给予光照强度160umol/m2/s,每天光照12小时;
S6:营养液配制:先配制1kg三元复合肥,用磷酸二氢钾385g+硫酸钾147g+硝酸铵302g+尿素166g混合均匀备用;再配制营养液,用配制好三元复合肥10g+水1000ml配制成营养液;每隔4天,及时向无糖培养盒中加入营养液50ml作为营养补充;
S7:无糖培养盒中培养18~20天后,打开盒盖,在光照强度80umol/m2/s的自然条件下进行炼苗。
S8:23~25天后,将无糖培养盒中苗移栽到装有基质的72孔穴盘中,放到小拱棚内,小拱棚上面覆盖遮阳网,将基质浇透水,保持恒温25℃培养,每天浇水1次;
S9:在小拱棚中培养7~10天后,移到育苗床上培养20~25天左右,即可成生产用苗。
实施例2
与实施例1的不同之处在于:实施例2中营养液由15g三元复合肥和1000ml水均匀混合而成。
实施例3
与实施例1的不同之处在于:实施例3中营养液由20g三元复合肥和1000ml水均匀混合而成。
实施例4
与实施例1的不同之处在于:实施例4中营养液由25g三元复合肥和1000ml水均匀混合而成。
实施例5
与实施例1的不同之处在于:实施例5中营养液由30g三元复合肥和1000ml水均匀混合而成。
对按照实施例1-5所述方法进行培养的人参果苗生长情况进行统计,每组实验重复三次,取平均值,获得以下数据。
表1不同浓度营养液浓度对组培苗生长的影响
由表1可以看出,实施例3-4中脱毒人参果苗的长势强,培养时间短,采用该种营养液配比能够显著提高人参果苗的生长速度。
Claims (6)
1.一种新型脱毒人参果苗无糖高效生根培养及移栽方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1:将蛭石灭菌后装到无糖培养盒,厚3~4cm,用无糖营养液将蛭石浇透,待用;
S2:把培养瓶中的人参果脱毒苗培养25~30天,剪成带两片叶的茎段,叶芽朝上转接到装有蛭石的无糖培养盒中,每盒移接100株苗,盖上盒盖并且用封口膜封闭盒盖与盒体间的缝隙;
S3:将无糖培养盒放入经过紫外线消毒的密闭房间的培养架上,向无糖培养盒内通入浓度为2600ppm的CO2,持续8h,间隔8h后继续通入CO2;
S4:培养期内前2天不进行光照,自第3天开始给予光照强度80umol/m2/s,第8天开始给予光照强度160umol/m2/s,每天光照12小时;
S5:每隔4天向无糖培养盒中加入50ml营养液作为营养补充;
S6:在无糖培养盒中培养18~20天后,打开盒盖,在光照强度80umol/m2/s的自然条件下进行炼苗;
S7:23~25天后,将无糖培养盒中的苗移栽到装有基质的72孔穴盘中,放到小拱棚内,小拱棚上面覆盖遮阳网,将基质浇透水,保持恒温25℃培养,每天浇水1次;
S8:在小拱棚中培养7~10天后,移到育苗床上培养20~25天左右,即可成生产用苗。
2.根据权利要求1所述的一种新型脱毒人参果苗无糖高效生根培养及移栽方法,其特征在于:所述步骤S1中蛭石灭菌前先按照45~60%含水率加水混合后,再装入布袋中高压蒸汽灭菌25min。
3.根据权利要求1所述的一种新型脱毒人参果苗无糖高效生根培养及移栽方法,其特征在于:所述步骤S1中四个无糖培养盒为一组,四个无糖培养盒的穿板接头进气孔均通过软管与CO2分流器的四个出气头相连接,CO2分流器的进气口、过滤器和气泵一次通过软管相连接,所述气泵上连接有定时开关。
4.根据权利要求3所述的一种新型脱毒人参果苗无糖高效生根培养及移栽方法,其特征在于:所述步骤S3中,培养架每层上放置有两组无糖培养盒,两组无糖培养盒上未连接气泵的一端用软管连接在一起。
5.根据权利要求1所述的一种新型脱毒人参果苗无糖高效生根培养及移栽方法,其特征在于:所述步骤S5中营养液由三元复合肥和水按重量比1~3:100配制而成。
6.根据权利要求5所述的一种新型脱毒人参果苗无糖高效生根培养及移栽方法,其特征在于:所述三元复合肥由重量比为385:147:302:166的磷酸二氢钾、硫酸钾、硝酸铵和尿素混合配置而成。
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