CN115413708B - 一种具有抗氧化功能的酸奶、制备方法及应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种具有抗氧化、抗衰老功能的酸奶，所述酸奶包括如下原料及重量份数：脱脂牛乳80～100份、中药提取物1～10份、天然植物胶1～5份、胶原蛋白肽1～10份、低聚糖1～10份、瑞士乳杆菌1～10份。本发明采用复合酶解技术，提高了黑果腺肋花楸提取物的提取效率，同时加入单宁酶，去除黑果腺肋花楸的苦涩口感。另外加入的天然植物胶与茶多酚单宁及黑果中单宁联合，形成单宁复合物，进一步去除单宁的苦涩口感。加入天然植物胶可以同时去除黑果腺肋花楸和茶多酚中苦涩味道，突出奶香气味，国内外首次采用。

Description

一种具有抗氧化功能的酸奶、制备方法及应用
技术领域
本发明属于食品技术领域，尤其是一种具有抗氧化、抗衰老功能的酸奶、制备方法及应用。
背景技术
黑果腺肋花楸黑果腺肋花楸 [Aronia melanocarpa （Michx.）Elliott]又被称不老莓或野樱莓，蔷薇科腺肋花楸属、多年生落叶灌木，原产于北美，广泛分布于美国中西部，在欧洲多个国家已有多年引种栽培历史。1990 年开始从朝鲜引进我国，大面积种植于辽宁省西北部半干旱地区。黑果腺肋花楸于 2018 年 9 月被国家卫生健康委员会列入新食品原料，果实含有黄酮、花青素、多酚和多糖等活性物质，具有抗氧化、抗炎、防衰老、降血糖、抗肿瘤、抗抑郁、治疗肥胖症、防止尿路感染等功效，在欧美地区广泛应用于医药和功能性食品行业。
黑果腺肋花楸多糖对三种益生菌生长的研究（《食品研究开发》2022年7月26日已收稿）中已报到黑果腺肋花楸多糖可显著促进嗜酸乳杆菌、鼠李糖乳杆菌和乳双歧杆菌的生长，可显著提高嗜酸乳杆菌、鼠李糖乳杆菌和乳双歧杆菌PH为1.5时胃液的耐受性，效果优于低聚果糖。
专利公开文献CN 110810513 A公布了一种双真菌共发酵黑果腺肋花楸酸奶干及其制备方法，主要是通过冠突散囊菌孢子悬液和海带翅孢壳真菌种子液对黑果腺肋花楸果浆发酵进行发酵，然后与液体酸奶混合，进行冷冻干燥，得冻干粉。Se-Hyung Kim等对加入黑果腺肋花楸粉后的酸奶进行了风味对比，黑果腺肋花楸粉仅为简单的果实冻干粉，未进行提取浓缩及发酵（Journal of Milk Science and BiotechnologyVolume 37, Issue 2.2019. PP 108-114）。Linh Nguyen等对添加黑果腺肋花楸果汁酸奶的品质特性及抗氧化活性进行了研究，黑果腺肋花楸果汁为果实直接榨汁，主要用于调味，也未进行提取及发酵（Preventive Nutrition and Food ScienceVolume 21, Issue 4. 2016. PP 330-337）。至今为止，黑果腺肋花楸主要用来制作果汁、果粉、果冻、果酒和牛奶等，但黑果腺肋花楸以提取物形式添加在酸奶中进行发酵的的酸奶产品尚未见报道。
奇亚籽（Chia seed）是薄荷类植物芡欧鼠尾草的种子，蛋白质含量高达16～26%，且富含多不饱和脂肪酸尤其是亚麻酸，同时具有更高的膳食纤维含量可达34%～42%。同时，奇亚籽也含有多种多酚和抗氧化成分，例如：咖啡酸、迷迭香酸、杨梅素和槲皮素等。奇亚籽及其衍生产物在食品、医疗、制药、营养保健以及动物饲料等领域具有广阔的应用前景。
奇亚籽胶的主要成分是一种阴离子杂多糖，由α-D-吡喃木糖、β-D-吡喃葡萄糖和4-O-甲基-D-吡喃葡萄糖醛酸组成，可降低人体胆固醇水平并有助于改善肠道功能。当奇亚籽浸没于水溶液时，其表皮细胞外细胞壁会释放出高粘度的奇亚籽胶溶液，这些黏液牢固地附着在种子上，提高了提取的困难程度。研究者们通过多种手段提取出奇亚籽胶，得率为5～15.5%。奇亚籽胶具有良好的吸水、保水和乳化等能力，因此，在食品领域应用广泛，但尚无纯奇亚籽胶应用于酸奶的制备。
专利公开文献CN 209631027 U公布了一种奇亚籽酸奶的配比实验装置，通过清洗机构，使得人们可以快速将清洗箱内奇亚籽排到搅拌机构上，避免搅拌机构上残留原料，影响下次实验的效果，方便人们清洗后进行多次实验。专利公开文献CN 1O4509588 A和CN104509589 B公布了一种天然稳定的酸奶及其制备方法，在酸奶中添加了奇亚籽粉，赋予酸奶营养价值及保持酸奶稳定性。以上专利仅对奇亚籽进行了简单粉碎处理，并未对奇亚籽胶进行制备纯化。
茶多酚是茶叶中多酚类物质的总称，包括黄烷醇类、花色素类、黄酮类和酚酸类等。茶多酚具有苦涩味道，是形成茶叶色香味的主要成份之一。研究表明，茶多酚等活性物质具解毒和抗辐射作用，能有效地阻止放射性物质侵入骨髓，被健康及医学界誉为“辐射克星”。
胶原蛋白肽主要通过位于小肠上皮细胞刷状缘膜的肽转运系统进行转运，主要由羟基脯氨酸和羟基赖氨酸组成，可通过主动转运、非耗能性Na+/H+交换转运系统和谷胱甘肽转运系统进入血循环，各种肽之间运转无竞争性或抑制性，因此胶原蛋白肽对人体适应性更强，营养价值更高。传统理论认为，氨基酸是唯一代谢途径，但研究表明，肽与氨基酸的吸收存在两种独立的运转机制。小肽具有吸收运转快，耗能低、不易饱和等特点；而氨基酸具有吸收慢、耗能高、载体易饱和的特点，从而限制了氨基酸在肠道中的吸收。胶原蛋白肽具有抗氧化，延缓皮肤衰老，促进伤口愈合，增强免疫力，改善学习记忆等多种功能，应用潜力巨大。
功能性低聚糖，包括低聚异麦芽糖、低聚果糖、低聚木糖等，因具有超强的双歧杆菌增殖功能而成为一类重要的益生元。将功能性低聚糖与酸奶有机结合，既保留了酸奶的营养价值和独特风味，同时强化了低聚糖的功能特性，非常适合忌糖人群食用。
天然乳制品中含有丰富的营养成分，包括免疫球蛋白，乳铁蛋白，以及多种免疫因子。这些营养成分影响免疫调节，调节肠道菌群，影响多种生理功能。传统酸奶是用益生菌发酵制成的乳制品，营养成分丰富，有助于人体健康。
氧化与衰老的关系。随着年龄增加，机体衰老，自由基也随之增多，机体清除能力下降， SOD、GSH-PX 酶等活性降低，机体自由基代谢失去平衡，自由基过多，自由基与不饱和脂肪酸结合产生 MDA 等有害化合物增多，引起机体衰老和以及产生多种慢性疾病。天然植物抗氧化剂的与各种酶发生作用，清除过剩的自由基，同时可以抑制各种氧自由基生成，从而延缓衰老及疾病的发生。通过调节肠道菌群，可提高机体的代谢功能，对人体的骨骼、血液循环及神经内分泌免疫系统和高级中枢等方面均有重要的调节作用，清除过剩氧化自由基，达到延缓衰老的目的。
氧化衰老与疾病的关系。研究证明，氧自由基过剩与疾病关系密切，如心血管疾病、消化系统疾病、免疫系统疾病、老年痴呆、糖尿病、肿瘤等。预防性进行抗氧化、抗衰老干预，可以预防多种疾病的发生及预后。
通过检索，尚未发现与本发明专利申请相关的专利公开文献。
发明内容
本发明目的在于克服现有技术的不足之处，提供一种具有抗氧化、抗衰老功能的酸奶、制备方法及应用。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：
一种具有抗氧化、抗衰老功能的酸奶，所述酸奶包括如下原料及重量份数：
脱脂牛乳80～100 份、中药提取物1～10份、天然植物胶1～5份、胶原蛋白肽1～10份、低聚糖1～10份、瑞士乳杆菌1～10份。
进一步地，所述酸奶包括如下原料及重量份数：脱脂牛乳90 份、中药提取物5份、天然植物胶3份、胶原蛋白肽10份、低聚糖10份，瑞士乳杆菌菌粉5份。
进一步地，所述中药提取物为黑果腺肋花楸提取物和茶多酚的组合物，黑果腺肋花楸提取物：茶多酚的重量比为1：1。
进一步地，所述中药提取物的制备步骤如下：
（1）选择紫黑色表皮、果肉软、无霉变且无机械损伤的黑果腺肋花楸鲜果或冻果；
（2）将步骤（1）中的黑果腺肋花楸鲜果或冻果投入沸水中热烫30～60s，捞出后立即浸入冷水中冷却，破碎处理后得黑果腺肋花楸果实原浆；
（3）向黑果腺肋花楸果实原浆中加入等重量份茶多酚，加入复合酶酶解、灭酶后过滤得果浆；
（4）采用60～80%乙醇超声提取，每次30～50min，得到中药提取物；
（5）40℃减压浓缩除去乙醇，然后-80℃真空冷冻干燥，得到冻干粉。
进一步地，所述步骤(3)中复合酶为单宁酶、果胶酶、蛋白酶中的一种或两种。
进一步地，所述天然植物胶的制备方法包括如下步骤：
（1）选取无病害、表面光滑、有大理石纹脉络线、无发霉气味的奇亚籽为原料；
（2）奇亚籽和针叶樱桃果经初步粉碎后，加入雪莲培养物高温杀菌灭酶；
（3）进行回流提取天然植物胶；
（4）提取液冷却后，离心8000rpm，10～20min后过滤掉碎渣，进行醇沉，乙醇浓度为70～80%，取沉淀进行真空冷冻干燥，并进行粉碎，得天然植物胶。
进一步地，所述低聚糖为低聚异麦芽糖：低聚果糖：低聚木糖中的两种或者三种组合物，低聚异麦芽糖：低聚果糖：低聚木糖的重量比为5～10：1～5：1～5；
或者，所述胶原蛋白肽含量为80～90%。
如上所述的酸奶的制备方法，包括如下步骤：
(1) 加入脱脂牛乳、中药提取物、天然植物胶、胶原蛋白肽、低聚糖，将混合物高压均质，然后在120℃～130℃温度下瞬时灭菌1～5秒；
(2) 接种瑞士乳杆菌，活性为106 -109 cfu/ml，以瑞士乳杆菌为活性成分；接种后发酵，发酵的温度为38℃～42℃，发酵时间为4h～6h，得到酸奶。
进一步地，所述方法还包括如下步骤：
将酸奶进行灌装，灌装后的酸奶在2～6℃进行冷藏后熟，得到酸奶成品。
如上所述的酸奶在作为和/或制备预防或治疗抗氧化、抗衰老疾病保健食品中的应用。
本发明取得的优点和积极效果为：
1、本发明采用复合酶解技术，提高了中药提取物的提取效率，同时加入单宁酶，去除黑果腺肋花楸及茶多酚的苦涩口感。另外加入的天然植物胶与茶多酚单宁及黑果中单宁联合，形成单宁复合物，进一步去除单宁的苦涩口感。加入天然植物胶可以同时去除黑果腺肋花楸和茶多酚中苦涩味道，突出奶香气味，国内外首次采用。
2、本发明采用热水回流提取天然植物胶，并加入酸奶，不仅可吸附酸奶中的茶多酚和黑果腺肋花楸剩余的单宁成分，并形成稳定的酸奶体系，增加酸奶黏稠度，效果远远好于单纯加入奇亚籽粉，为国际酸奶领域首创，
3、本发明制备的酸奶，还有利于预防和治疗氧化、衰老引起的相关疾病。本发明酸奶可有效清除羟自由基、DPPH 和ABTS 自由基，起到抗氧化作用；可降低小鼠皮肤组织中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶( GSH-Px) 活性和羟脯氨酸( HYP) 、丙二醛( MDA)含量，起到抗衰老作用。
4、本发明酸奶中的中药提取物、天然植物胶胶与牛奶共同发酵，制备得到酸奶，天然植物胶促进瑞士乳杆菌增殖，缩短发酵时间，同时保留产品中的花青素、茶多酚、膳食纤维和蛋白质的含量，起到改善胃肠道功能，抗氧化，抗衰老的效果。
附图说明
图1为本发明中中药提取物对瑞士乳杆菌在pH=1.5 模拟胃液存活率的影响图（1-3h）；
图2为本发明中中药提取物对瑞士乳杆菌在pH=6.8 模拟胃液存活率的影响图（1-8h）；
图3为本发明中小鼠6周SOD变化柱状图；
图4为本发明中小鼠6周MDA变化柱状图；
图5为本发明中小鼠6周GSH-Px变化柱状图；
图6为本发明中小鼠6周HYP变化柱状图。
实施方式
下面详细叙述本发明的实施例，需要说明的是，本实施例是叙述性的，不是限定性的，不能以此限定本发明的保护范围。
本发明中所使用的原料，如无特殊说明，均为常规的市售产品；本发明中所使用的方法，如无特殊说明，均为本领域的常规方法。
一种具有抗氧化、抗衰老功能的酸奶，所述酸奶包括如下原料及重量份数：
脱脂牛乳80～100 份、中药提取物1～10份、天然植物胶1～5份、胶原蛋白肽1～10份、低聚糖1～10份、瑞士乳杆菌1～10份。
较优地，所述酸奶包括如下原料及重量份数：脱脂牛乳90 份、中药提取物5份、天然植物胶3份、胶原蛋白肽10份、低聚糖10份，瑞士乳杆菌菌粉5份。
较优地，所述中药提取物为黑果腺肋花楸提取物和茶多酚的组合物，黑果腺肋花楸提取物：茶多酚的重量比为1：1。
较优地，所述中药提取物的制备步骤如下：
（1）选择紫黑色表皮、果肉软、无霉变且无机械损伤的黑果腺肋花楸鲜果或冻果；
（2）将步骤（1）中的黑果腺肋花楸鲜果或冻果投入沸水中热烫30～60s，捞出后立即浸入冷水中冷却，破碎处理后得黑果腺肋花楸果实原浆；
（3）向黑果腺肋花楸果实原浆中加入等重量份茶多酚，加入复合酶酶解、灭酶后过滤得果浆；
（4）采用60～80%乙醇超声提取，每次30～50min，得到中药提取物；
（5）40℃减压浓缩除去乙醇，然后-80℃真空冷冻干燥，得到冻干粉。
较优地，所述步骤(3)中复合酶为单宁酶、果胶酶、蛋白酶中的一种或两种。
较优地，所述天然植物胶的制备方法包括如下步骤：
（1）选取无病害、表面光滑、有大理石纹脉络线、无发霉气味的奇亚籽为原料；
（2）奇亚籽和针叶樱桃果经初步粉碎后，加入雪莲培养物高温杀菌灭酶；
（3）进行回流提取天然植物胶；
（4）提取液冷却后，离心8000rpm，10～20min后过滤掉碎渣，进行醇沉，乙醇浓度为70～80%，取沉淀进行真空冷冻干燥，并进行粉碎，得天然植物胶。
较优地，所述低聚糖为低聚异麦芽糖：低聚果糖：低聚木糖中的两种或者三种组合物，低聚异麦芽糖：低聚果糖：低聚木糖的重量比为5～10：1～5：1～5；
或者，所述胶原蛋白肽含量为80～90%。
如上所述的酸奶的制备方法，包括如下步骤：
(1) 加入脱脂牛乳、中药提取物、天然植物胶、胶原蛋白肽、低聚糖，将混合物高压均质，然后在120℃～130℃温度下瞬时灭菌1～5秒；
(2) 接种瑞士乳杆菌，活性为106 -109 cfu/ml，以瑞士乳杆菌为活性成分；接种后发酵，发酵的温度为38℃～42℃，发酵时间为4h～6h，得到酸奶。
较优地，所述方法还包括如下步骤：
将酸奶进行灌装，灌装后的酸奶在2～6℃进行冷藏后熟，得到酸奶成品。
如上所述的酸奶在作为和/或制备预防或治疗抗氧化、抗衰老疾病保健食品中的应用。
具体地，相关制备及检测实施例如下：
酸奶的工艺流程如下：酶解提取黑果腺肋花楸，高温回流水提奇亚籽胶，将脱脂牛乳、黑果腺肋花楸提取物、茶多酚、天然植物胶、胶原蛋白肽、低聚糖和瑞士乳杆菌菌粉，按照重量份配比混合，低温发酵，最后得酸奶。
下面具体描述本发明所述的酸奶的制备方法。
实施例1：酸奶制作。
一、中药提取物酶解提取的制备方法，包括如下步骤：
（1）选择紫黑色表皮、果肉软、无霉变且无机械损伤的黑果腺肋花楸鲜果或冻果；
（2）将步骤(1)中的黑果腺肋花楸鲜果或冻果投入沸水中热烫30s，捞出后立即浸入冷水中冷却，破碎处理后得黑果腺肋花楸果实原浆；
（3）黑果腺肋花楸果实原浆，加入等重量份茶多酚，加入复合酶酶解、灭酶后过滤得果浆；
（4）采用60%乙醇超声提取，每次50min，得到中药提取物；
(5)40℃减压浓缩除去乙醇，然后-80℃真空冷冻干燥，得到冻干粉。
二、天然植物胶的制备方法，包括如下步骤：
(1) 选取无病害、表面光滑、有大理石纹脉络线、无发霉气味的奇亚籽为原料；
(2) 奇亚籽和针叶樱桃果经初步粉碎后，加入雪莲培养物高温杀菌灭酶；
(3) 进行回流提取天然植物胶；
(4) 提取液冷却后，离心8000rpm，20min后过滤掉碎渣，进行醇沉，乙醇浓度80%，取沉淀进行真空冷冻干燥，并进行粉碎，得天然植物胶。
三、本发明酸奶的发酵方法，包括如下步骤：
(1) 加入脱脂牛乳80 份，中药提取物1份，天然植物胶1份，胶原蛋白肽1份，低聚糖1份，将混合物高压均质，然后在120℃温度下瞬时灭菌5秒；
(2) 接种瑞士乳杆菌，所述瑞士乳杆菌菌种的接种量为1份；接种后发酵，所述发酵的温度为38℃，发酵时间为6h；
上述份均为重量份。
实施例2：酸奶制作。
一、中药提取物酶解提取的制备方法，包括如下步骤：
(1) 选择紫黑色表皮、果肉稍软、无霉变且无机械损伤的黑果腺肋花楸鲜果或冻果；
（2）将步骤(1)中的黑果腺肋花楸鲜果或冻果投入沸水中热烫60s，捞出后立即浸入冷水中冷却，破碎处理后得黑果腺肋花楸果实原浆；
（3）黑果腺肋花楸果实原浆，加入等重量份茶多酚，加入复合酶酶解、灭酶后过滤得果浆；
（4）采用80%乙醇超声提取，每次30min，得到中药提取物；
（5）40℃减压浓缩除去乙醇，然后-80℃真空冷冻干燥，得到冻干粉。
二、天然植物胶的制备方法，包括如下步骤：
(1) 选取无病害、表面光滑、有大理石纹脉络线、无发霉气味的奇亚籽为原料；
(2) 奇亚籽和针叶樱桃果经初步粉碎后，加入雪莲培养物高温杀菌灭酶；
(3) 进行回流提取天然植物胶；
(4) 提取液冷却后，离心8000rpm，10min后过滤掉碎渣，进行醇沉，乙醇浓度75%，取沉淀进行真空冷冻干燥，并进行粉碎，得天然植物胶。
三、本发明酸奶的发酵方法，包括如下步骤：
(1) 加入脱脂牛乳90 份，中药提取物5份，天然植物胶3份，胶原蛋白肽5份，低聚5份，将混合物高压均质，然后在130℃温度下瞬时灭菌3秒；
(2) 接种瑞士乳杆菌，所述瑞士乳杆菌菌种的接种量为5份；接种后发酵，所述发酵的温度为42℃，发酵时间为4h；
上述份均为重量份。
实施例3：酸奶制作。
一、中药提取物酶解提取的制备方法，包括如下步骤：
（1）选择紫黑色表皮、果肉稍软、无霉变且无机械损伤的黑果腺肋花楸鲜果或冻果；
（2）将步骤(1)中的黑果腺肋花楸鲜果或冻果投入沸水中热烫45s，捞出后立即浸入冷水中冷却，破碎处理后得黑果腺肋花楸果实原浆；
（3）黑果腺肋花楸果实原浆，加入等重量份茶多酚，加入复合酶酶解、灭酶后过滤得果浆；
（4）采用70%乙醇超声提取，每次40min，得到中药提取物；
（5）40℃减压浓缩除去乙醇，然后-80℃真空冷冻干燥，得到冻干粉。
二、天然植物胶的制备方法，包括如下步骤：
(1) 选取无病害、表面光滑、有大理石纹脉络线、无发霉气味的奇亚籽为原料；
(2) 奇亚籽和针叶樱桃果经初步粉碎后，加入雪莲培养物高温杀菌灭酶；
(3) 进行回流提取天然植物胶；
(4) 提取液冷却后，离心8000rpm，15min后过滤掉碎渣，进行醇沉，乙醇浓度70%，取沉淀进行真空冷冻干燥，并进行粉碎，得天然植物胶。
三、本发明酸奶的发酵方法，包括如下步骤：
(1) 加入脱脂牛乳100 份，中药提取物10份，天然植物胶5份，胶原蛋白肽10份，低聚糖10份，将混合物高压均质，然后在125℃温度下瞬时灭菌4秒；
(2) 接种瑞士乳杆菌，所述瑞士乳杆菌菌种的接种量为10份；接种后发酵，所述发酵的温度为40℃，发酵时间为5h；
上述份均为重量份。
相关检测如下：
检测方法为：
活菌计数依据 GB 4789.35—2016《食品安全国家标准食品微生物学检验乳酸菌检验》中乳杆菌和嗜热链球菌计数方法，略作修改。
胃液检测方法参考WUERTH R, , et al.等研究方法（Protective effect ofmilk protein based microencapsulation on bacterial survival in simulatedgastric juice versus the murine gastrointestinal system[J]. Journal ofFunctional Foods,2015,15:116-125. ）
肠液检测方法参考RANADHEERA C S,等检测方法（Effect of dairy probioticcombinations on in vitro gastrointestinal tolerance, intestinal epithelialcell adhesion and cytokine secretion[J]. Journal of Functional Foods,2014,8:18-25. ）
1、添加中药提取物对瑞士乳杆菌对模拟胃液环境的耐受性评价
体外模拟胃液：将0.1mol/L磷酸钾缓冲液的pH值分别调至1.5，加入胃蛋白酶（10g/L），混合均匀后过0.22μm无菌膜，即可得到模拟胃液。
结果如图1所示，从图1中可以看出，当pH为1.5时，消化3h后，裸益生菌和添加低聚果糖瑞士乳杆菌的活菌数都降为0，但添加中药提取物组的瑞士乳杆菌活菌数仍然较高。消化3h后，瑞士乳杆菌存活率可达73.25%，与裸菌和添加低聚果糖相比（3h后，存活率为0），保护作用尤为显著。结果表明，当pH为1.5时，中药提取物显著提高了瑞士乳杆菌对模拟胃液的耐受性（p＜0.05）。这可能是余胞壁多糖的粘附作用有关，减少了菌体接触酸胁迫环境，进而减少了对H+的吸收；同时激活了谷氨酸脱氢酶的活力，从而提高了瑞士乳杆菌的抗胃酸能力。研究数据表明，中药提取物可显著提高酸奶中瑞士乳杆菌在胃液中的存活率，有助于益生菌增殖，增加抗氧化抗衰老保健作用。
2、益生菌肠液耐受性评价
添加中药提取物对瑞士乳杆菌对模拟胃液环境的耐受性评价：
体外模拟肠液：将0.1mol/L磷酸钾缓冲液的pH值调至6.8，加入胰酶（10g/L），猪胆盐（3g/L），混合均匀后过0.22μm无菌膜，即可得到模拟肠液。
结果如图2所示，从图2中可以看出，消化8小时后，裸菌和添加低聚果糖的瑞士乳杆菌，活菌存活率都有所降低，分别降低至50.22%和55.31%，低于中药提取物组瑞士乳杆菌的存活率74.24%。同时经过肠液2h消化后，添加中药提取物组瑞士乳杆菌增殖最快，存活率达到90.42%，这可能是由于部分瑞士乳杆菌粘附在多糖表面，短时间被多糖保护，但随着时间延长，4小时后，降低至80.56%，但是仍然高于裸菌的63.53%和低聚果糖的77.33%，说明经过长时间肠液作用，黑果多糖保护作用减弱，活菌数也随之减少。结果表明，中药提取物中的多糖可以显著提高瑞士乳杆菌在肠液中的耐受性（p＜0.05），这可能与多糖结构与谷氨酸脱氢酶的活力有关。对瑞士乳杆菌的保护和益生元促进增殖作用，明显优于低聚果糖。
3、保健功效评价
抗氧化功能：
实施例1-3号酸奶为测定样品，清除 DPPH 自由基能力测定：参照 Moure 等的方法。清除羟自由基能力测定参照Sun的方法。清除 ABTS·能力测定参照 Ozgen的方法。所有样品均平行测定3次，取平均值。
清除率计算公式：清除率（%）=A对照-（A样品-A样品对照）*100%/A对照
表1 实施例1-3酸奶体外抗氧化指标测定
由表1可知，本发明所述的功能酸奶，抗氧化能力得到显著提升，具有显著的抗氧化作用。
4、抗衰老功能
动物模型建立：SPF级Balb/c小鼠30只，雄性，体质量为18～20g，温度20～25℃，相对湿度(50±5)%，光照时间12 h /12 h环境下饲养。每日颈背部皮下注射 D-半乳糖1000mg/kg，建立小鼠亚急性衰老模型。造模的同时给药：①空白对照组（10只）：颈背部皮下注射生理盐水0.2 ml，同时灌服生理盐水 0. 1 ml/10 g（空白对照组注射和口服的都是生理盐水，作为对照。衰老模型组是一边造模，生理盐水。）。②衰老模型组（10只）：颈背部皮下注射D-半乳糖1000 mg/kg，同时灌服生理盐水0.1ml/10g。③酸奶组（10只）：每日颈背部皮下注射D-半乳糖1000 mg/kg，同时灌服酸奶40 mg·kg-1·d-1。无菌环境下进行6周后，小鼠断颈处死，取背部两肩胛部之间皮肤，面积为3cm×3 cm，皮肤组织匀浆处理。
小鼠皮肤组织中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶( GSH-Px) 活性和羟脯氨酸( HYP) 、丙二醛( MDA)含量变化。
小鼠皮肤组织SOD变化，见图3。小鼠皮肤组织MDA变化，见图4。小鼠皮肤组织GSH-Px变化，见图5。小鼠皮肤组织HYP变化，见图6。从图3至图6可以看出，本试验给小鼠颈部皮下连续注射D-半乳糖42d后，衰老模型组小鼠体内MDA活性比对照组小鼠显著升高，GSH-Px、SOD和HYP活性显著降低。因此，本试验所造衰老小鼠模型是成功的，并证明D-半乳糖能够诱导小鼠快速衰老。酸奶能显著降低小鼠机体的 MDA活性、显著提高小鼠机体GSH-Px 、SOD和HYP活性，具有显著的抗衰老作用。
5、本发明的协同效果
本发明中脱脂牛乳、中药提取物、天然植物胶添加量与采用复合酶、热水回流提取方法之间具有协同作用，具体如表2至表4所示。
（1）表2中对比例1-5的制备方法与实施例1相同，不同之处在于表格中的脱脂牛乳、中药提取物添加量、天然植物胶添加量与是否采用复合酶、热水回流提取方法。
表2 本发明的协同效果表
通过表2可知，天然植物胶重量份及水回流提取，对酸奶黏稠度影响较大；脱脂牛乳添加少，达发酵原料减少，失去平衡，无法充分发酵，奶香下降，中药提取物的酸涩感尤为显著。复合酶对酸涩感影响最大，说明单宁类物质在酶作用下去除最多。中药提取物对整个发酵过程，以及保健指标影响都较大，与其在发酵中对益生菌胃肠液耐受的作用关系较大。通过表2可知，本发明中当同时使用中药提取物、复合酶、天然植物胶、热水回流提取操作步骤制备酸奶时，所得酸奶的DPPH自由基清除作用明显要高于单一处理。尤其回流与否和中药提取物添加量对DPPH自由基清除作用影响较大。降低脱脂牛乳量对DPPH自由基清除作用影响相对较小。以上数据说明，实施例1效果优于对比例1-5，改变任何一个要求范围内条件，都将降低最终产品质量，因此，本发明中脱脂牛乳添加量，中药提取物添加量，天然植物胶添加量，复合酶，热水回流提取操作步骤之间具有协同效果，能够显著提升发酵后酸奶的品质。
（2）表3中的对比例6-10的制备方法与实施例2相同，不同之处在于表格中的脱脂牛乳、中药提取物添加量、天然植物胶添加量与是否采用复合酶、热水回流提取方法。
表3 本发明的协同效果表
通过表3可知，天然植物胶重量份、水回流提取以及大幅度加大脱脂牛乳重量份，对酸奶黏稠度影响较大；脱脂牛乳添加量过大，发酵平衡遭到破坏，无法充分发酵，奶香下降严重，中药提取物作用减弱，酸涩随之增强。在此实施例中，复合酶及水回流提取方法对酸涩感影响最大，说明单宁类物质在此两种作用下去除最多。中药提取物对整个发酵过程，以及保健指标影响都较大，与其在发酵中产生的重要作用有关，即对胃肠液耐受的作用。通过表3可知，本发明中当同时使用中药提取物、复合酶、天然植物胶、热水回流提取操作步骤制备酸奶时，所得酸奶的DPPH自由基清除作用明显要高于单一处理。尤其中药提取物添加量对DPPH自由基清除作用影响最大。降低脱脂牛乳量对DPPH自由基清除作用影响相对较小。其他因素对DPPH自由基清除作用也具有一定影响。以上数据说明，实施例1效果优于对比例6-10，改变任何一个要求范围内条件，都将降低最终产品质量，因此，本发明中脱脂牛乳添加量，中药提取物添加量，天然植物胶添加量，复合酶，热水回流提取操作步骤之间具有协同效果，能够显著提升发酵后酸奶的品质。
（3）表4中的对比例11-15的制备方法与实施例3相同，不同之处在于表格中的脱脂牛乳、中药提取物添加量、天然植物胶添加量与是否采用复合酶、热水回流提取方法。
表4 本发明的协同效果表
通过表4可知，天然植物胶重量份和水回流提取对酸奶黏稠度影响较大；对比例11中脱脂牛乳添加量低于最低添加量范围，且中药提取物为10重量份，过度发酵，奶香下降，酸涩感增强，黏稠度差。在此实施例3中，复合酶对酸涩感影响最大，说明单宁类物质在此作用下去除最多。中药提取物对整个发酵过程，以及DPPH自由基清除作用影响都较大，与其在发酵中产生的重要作用有关，即对胃肠液耐受的作用。通过表4可知，本发明中当同时使用中药提取物、复合酶、天然植物胶、热水回流提取操作步骤制备酸奶时，所得酸奶的DPPH自由基清除作用明显要高于单一处理。此实施例模式下，尤其水回流提取和天然植物胶添加量对DPPH自由基清除作用影响最大。降低脱脂牛乳量和增大中药提取物重量份对DPPH自由基清除作用影响相对较小。其他因素对DPPH自由基清除作用也具有一定影响。以上数据说明，实施例3效果优于对比例11-15，改变任何一个要求范围内条件，都将降低最终产品质量。因此，本发明中脱脂牛乳添加量，中药提取物添加量，天然植物胶添加量，复合酶，热水回流提取操作步骤之间具有协同效果，能够显著提升发酵后酸奶的品质。
尽管为说明目的公开了本发明的实施例，但是本领域的技术人员可以理解：在不脱离本发明及所附权利要求的精神和范围内，各种替换、变化和修改都是可能的，因此，本发明的范围不局限于实施例所公开的内容。

Claims (6)

1.一种具有抗氧化功能的酸奶，其特征在于：所述酸奶包括如下原料及重量份数：
脱脂牛乳80～100 份、中药提取物1～10份、天然植物胶1～5份、胶原蛋白肽1～10份、低聚糖1～10份、瑞士乳杆菌1～10份；
所述中药提取物为黑果腺肋花楸提取物和茶多酚的组合物，黑果腺肋花楸提取物：茶多酚的重量比为1：1；
所述中药提取物的制备步骤如下：
（1）选择紫黑色表皮、果肉软、无霉变且无机械损伤的黑果腺肋花楸鲜果或冻果；
（2）将步骤（1）中的黑果腺肋花楸鲜果或冻果投入沸水中热烫30～60s，捞出后立即浸入冷水中冷却，破碎处理后得黑果腺肋花楸果实原浆；
（3）向黑果腺肋花楸果实原浆中加入等重量份茶多酚，加入复合酶酶解、灭酶后过滤得果浆；
（4）采用60～80%乙醇超声提取，每次30～50min，得到中药提取物；
（5）40℃减压浓缩除去乙醇，然后-80℃真空冷冻干燥，得到冻干粉；
所述步骤(3)中复合酶为单宁酶、果胶酶、蛋白酶中的一种或两种；
所述天然植物胶的制备方法包括如下步骤：
（1）选取无病害、表面光滑、有大理石纹脉络线、无发霉气味的奇亚籽为原料；
（2）奇亚籽和针叶樱桃果经初步粉碎后，加入雪莲培养物高温杀菌灭酶；
（3）进行热水回流提取天然植物胶；
（4）提取液冷却后，离心8000rpm，10～20min后过滤掉碎渣，进行醇沉，乙醇浓度为70～80%，取沉淀进行真空冷冻干燥，并进行粉碎，得天然植物胶。
2.根据权利要求1所述的具有抗氧化功能的酸奶，其特征在于：所述酸奶包括如下原料及重量份数：脱脂牛乳90 份、中药提取物5份、天然植物胶3份、胶原蛋白肽10份、低聚糖10份，瑞士乳杆菌菌粉5份。
3.根据权利要求1所述的具有抗氧化功能的酸奶，其特征在于：所述低聚糖为低聚异麦芽糖、低聚果糖、低聚木糖中的两种或者三种组合物，低聚异麦芽糖：低聚果糖：低聚木糖的重量比为5～10：1～5：1～5。
4.如权利要求1至3任一项所述的酸奶的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：
(1) 加入脱脂牛乳、中药提取物、天然植物胶、胶原蛋白肽、低聚糖，将混合物高压均质，然后在120℃～130℃温度下瞬时灭菌1～5秒；
(2) 接种瑞士乳杆菌，活性为106 -109 cfu/ml，以瑞士乳杆菌为活性成分；接种后发酵，发酵的温度为38℃～42℃，发酵时间为4h～6h，得到酸奶。
5.根据权利要求4所述的酸奶的制备方法，其特征在于：所述方法还包括如下步骤：
将酸奶进行灌装，灌装后的酸奶在2～6℃进行冷藏后熟，得到酸奶成品。
6.如权利要求1至3任一项所述的酸奶在作为和/或制备抗氧化功能保健食品中的应用。
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